CN1246047C

CN1246047C - 含纤维蛋白原、凝血酶和醇的悬浮液及其涂敷载体的方法

Info

Publication number: CN1246047C
Application number: CNB02804097XA
Authority: CN
Inventors: 阿尔佛雷德·肖费勒
Original assignee: Nycomed Pharma AS
Current assignee: Takeda AS
Priority date: 2001-01-25
Filing date: 2002-01-25
Publication date: 2006-03-22
Anticipated expiration: 2022-01-25
Also published as: HU227987B1; CA2434964C; CA2434964A1; HUP0400768A3; IL157097A; EE200300349A; DE60203364D1; WO2002058749A8; BG66439B1; NO20033297D0; CZ20032198A3; CA2435159A1; NZ527166A; NO332462B1; IL157095A0; IS6885A; DE60203364T2; EE200300341A; JP2004520124A; KR100830294B1

Abstract

本发明涉及一种含有纤维蛋白原、凝血酶、醇和通过于乙醇中将纤维蛋白原与凝血酶而获得任意性的抑肽酶的悬浮液。该悬浮液含有具有Folk Ward平均直径为25-100μm的纤维蛋白原和凝血酶颗粒。该凝血酶可以是人体的、牛的或重组的凝血酶。纤维蛋白原可以是人体的或重组的纤维蛋白原。本发明公开了一种利用该悬浮液涂敷诸如胶原海绵载体的方法。所述涂层胶原载体可以用作一种即可使用的可吸收组合物，用于组织粘合、组织封口和止血，其中该载体利用固态固定的成分纤维蛋白胶，即纤维蛋白原和凝血酶来涂敷。

Description

含纤维蛋白原、凝血酶和醇的悬浮液及其涂敷载体的方法

发明领域

本发明涉及一种含有纤维蛋白原、凝血酶、醇和任意性的抑肽酶的悬浮液。本发明还涉及一种用于制备这类悬浮液的方法，和一种采用这类悬浮液涂敷载体的方法。所述载体可为一种胶原载体，如胶原海绵。本发明还涉及一种载体涂层的干燥方法，特别是采用本发明悬浮液涂敷的胶原载体，从而得到具有活性物质固态地固定到所述载体上的涂层胶原载体。

所述涂层胶原载体可以用作一种即可使用的可吸收组合物，用于组织粘合、组织封口和止血，它主要由一种涂敷有固态固定的成分纤维蛋白胶：纤维蛋白原和凝血酶的载体组成。这种固定组合物可以直接涂敷到例如伤口表面。在与血液、体液或生理盐水接触时，这种系统机制就会模仿阶式凝结的最后阶段，其中，凝血酶催化纤维蛋白原转化为纤维蛋白，并催化XIII因子的活化从而生成XIIIa。XIIIa因子一经形成，就可以通过共价交联稳定所述纤维蛋白凝块。

象一种两组分粘合剂一样，伤口表面和载体通过聚合作用被粘合在一起。在此过程中，它持续大约3-5分钟，本发明所述组合物优选是压在所述伤口区域之上。本发明所述组合物的成分在应用约4-6个月之后，因酶促而退化。

发明背景

商用纤维蛋白胶水，它们模仿所述阶式凝结的最后步骤，含有一种高度浓缩的纤维蛋白原溶液，在应用到所述存在的外科伤口之前与一种凝血酶溶液进行混合。这些混合物含有一种纤维蛋白溶解抑制剂，例如，抑酞酶或ε-氨基正己酸，以防止所述纤维蛋白凝块被纤维蛋白溶酶血纤维蛋白酶过早地溶解。这些两组分纤维蛋白胶水在许多外科手术中是有用的，但是，如果所述流血是严重情形时，在实现止血之前，它们就可能会被冲走。这种两组分纤维蛋白胶水还需要一些包括融化或溶解的预备步骤。因此，它们是相当不实用的且是难以起作用的，还需要经验才能成功地使用这些纤维蛋白胶水。

在最近十年来，大量的迹象表明，大量的纤维蛋白密封剂正成为外科手术中的备选方法。但是，在采用纤维蛋白胶水的大部分试验中，需要另外采用一种胶原棉网，以提高止血性能和粘合性能，说明它们存在着不足和被外科医生使用时存在着限制。

胶原自从上世纪六十年代就已经被用作止血试剂。胶原是所有哺乳动物中最为常见的结构蛋白。大约300kDa(原胶原)的单体蛋白质在特定位置进行共价交联。所述成熟蛋白质因而是不溶的，它形成具有高抗拉强度的特征原纤维。大量的胶原子类已经被分开，其中最为常见为胶原1，它是皮肤、腱、骨和角膜中主要胶原。胶原是一种纤维状蛋白质，由一种长度大约为290nm的三螺旋组成。这些三螺旋中的五个(原胶原分子)进行交错排列，形成一种直径大约为3.6nm的微纤维。这些微纤维具有极性和非极性片断，它们可以容易地进行纤维间和纤维内的相互作用。微纤维可以被包装到一个四角网格中，以形成具有直径约30nm的亚原纤维。这些亚原纤维接着可装配成胶原纤维，它是结缔组织的基本单位，它具有数百nm的直径，因而在光学显微镜下可以看到一个细线。

胶原可以用作一种用于密封伤口的材料，可能地与一种含有纤维蛋白胶水的涂料一起使用。纤维蛋白胶水，即纤维蛋白原、凝血酶和抑肽酶的组合物，许多年来已经成功地用于治疗粘合组织和神经和用于密封存在少量流血的表面。所述纤维蛋白胶水的一种缺点是，对于大量流血情形，所述胶水在纤维蛋白有效聚合发生之前，就常常被冲走。为了克服这个问题，外科医生开始用手涂敷所述液体纤维蛋白胶水到可吸收载体如胶原棉网之上。

尽管这些结合应用具有给人印象深刻的成功，但是，这种方法不能广泛地应用，这是由于它存在着一些缺点。其制备是相对麻烦的，所述方法需要经验和熟练技术人员，且所述制备方法对于紧急情况不是很有效，制备时间在10-15分钟之间。这些因素刺激着一种改进产品的开发，从而导致开发出一种覆盖有一种固体纤维蛋白原、固体凝血酶和固体抑肽酶涂层的固定组合物，如EP 0 059 265中所述。

在EP 0 059 265中所公开的胶原载体的作用，主要是载体作用，它可吸收所涂敷的凝结液并赋予机械稳定性。

已经开发生产出一种产品，其商标为TachoComb，它结合了纤维蛋白胶水的止血作用和作为载体胶原的优点。TachoComb是一种即可使用且易于适用固定的胶原药膏组合物，它涂敷有下述活性纤维蛋白胶水成分：人体纤维蛋白原、牛凝血酶和牛抑肽酶。

TachoComb自1990年早期就已经由Nycomed Pharma出售，并已经在欧洲的2500多病人中用于临床实验。所述产品还在日本临床应用于大量各种适应症如肝和肺切除术、胆道外科、脾脏、肾脏和胰的外科、ENT外科、妇科外科和血管外科，用于700多病人中。TachoComb已经发现是有效且安全的。

在进行的临床过程中，还没有与应用TachoComb有关的临床并发症的报导。

在W097/37694(Immuno France S.A.)的对比例4中，描述了采用一种胶原产品或TachoComb，当采用TachoComb时没有止血作用导致流血至死，与之形成对比，当使用一种WO97/37694制备的不含有凝血酶的胶原产品时，在5分钟内止血。

在W096/40033中，用于TachoComb中的牛凝血酶的缺点着重在于，使用牛或其它种类凝血酶可能会引起有害的病毒污染和可能的牛疾病传播，如牛海绵状脑炎。

US6,177,126B1公开了一种用于生产用于密封和治疗伤口的材料的装置和方法。所述装置含有一种容器，在其底部具有两个可以相对移动的穿孔板，从而可允许存在于所述容器中的悬浮液能够滴加入一种载体上，所述载体在所述容器底部移动经过所述容器。

发明概述

本发明的一个目的是提供一种改进的悬浮液，例如它适合用作一种胶原载体的涂层，其目的是提供一种即可使用的可吸收的用于组织粘合、组织封口和止血的组合物。本发明的另一个目的是提供一种用于制备这类悬浮液的方法。本发明的又一个目的是提供一种改进的涂敷一种载体如胶原载体的方法，是采用含有纤维蛋白原和凝血酶的悬浮液进行的。本发明的又一个目的是提供一种干燥涂敷到载体上的所述悬浮液的湿涂层的方法，其目的是保证所述涂层令人满意地固定到所述载体之上。本发明的又一个目的是提供一种具有一种纤维蛋白原和凝血酶涂层的涂层胶原海绵，所述涂层胶原海绵一旦与血液、体液或生理盐水接触，它就能有效地模拟所述阶式凝结的最后阶段。另外，本发明的一个目的是提供一种具有上述涂层的涂层胶原海绵，它具有充分固定到所述胶原海绵上的涂层，即当它在经受机械碰撞时具有令人满意的低涂层磨损。

在第一个方面，本发明提供了一种含有纤维蛋白原、凝血酶和醇的悬浮液，所述悬浮液是通过这样一种方法得到的，所述方法包括：

-提供一种纤维蛋白原和一种醇的纤维蛋白原混合物，

-提供一种凝血酶和一种醇的凝血酶混合物，

-混合所述纤维蛋白原混合物和所述凝血酶混合物，从而得到所述悬浮液，

-所述悬浮液含有纤维蛋白原和凝血酶颗粒，所述颗粒的FolkWard平均直径为25-100μm，如35-80μm，40-78μm，40-75μm，45-60μm，47-55μm，或60-100μm，60-80μm，65-75μm，优选是在+/-5μm之内，如在+/-4μm之内，如在+/-3.5μm之内，如在+/-2μm之内，如在+/-1.5μm之内，如在+/-1μm之内，如在+/-0.8μm之内，如在+/-0.6μm之内，如在+/-0.5μm之内。已经发现，这类悬浮液，当其被涂敷到一种载体如胶原载体上时，它在用于组织粘合、组织封口和止血的即可使用的可吸收组合物中是有效的。所述组合物任意性地含有抑肽酶，它可添加到所述纤维蛋白原混合物中作为一种浓缩的水溶液。核黄素也可作为着色剂加入，这样所述组合物当其涂敷到一种载体上并干燥时就可容易地被识别。

由于所述组合物的物理性质，尤其是在一种醇中相当大颗粒的沉降性能，所述悬浮液没有标准液体粘度量度是可行的。因此，一种用来提供粘度量度的备用方法已经被实行。所以，所述悬浮液可以具有这样的粘度，当其仅受重力影响时，可使得在25-75秒内有90-120ml的悬浮液流出一个具有下述特征的容器的底部孔口：

-一个内径为40-50mm且内高度为55-65mm的圆筒形部件，和

-一个高度为17-23mm的圆锥形底部部件，所述底部孔口位于所述圆锥形部件的下端，呈圆锥形孔道，其直径为2-3mm。

对于由钢材制成的容器来说，所述容器和所述孔口具有下述尺寸：

-所述圆筒形部件的内径：46mm

-所述圆筒形部件的内高度：60mm

-所述圆锥底部的内高度：20.5mm

-所述底部孔口的内径：2.6mm，

-连接到所述底部孔口通道的长度：9mm，或者

对于由塑料材料制成的容器来说，所述容器和所述孔口具有下述尺寸：

-所述圆筒形部件的内径：50mm

-所述圆筒形部件的内高度：41mm

-所述圆锥底部的内高度：24mm

-所述底部孔口的内径：2.5mm，

-连接到所述底部孔口通道的长度：小于5mm，

上述悬浮液的流出时间为25-60秒，如25-50秒，30-50秒，32-44秒，34-38秒。

在下述与本发明第二个方面所述方法有关所公开的悬浮液的参数和特征，也可适用于本发明第一个方面的所述悬浮液。

在第二个方面中，本发明提供了一种制备一种具有纤维蛋白原和凝血酶的悬浮液的方法，包括：

-提供一种纤维蛋白原和一种醇的纤维蛋白原混合物，

-提供一种凝血酶和一种醇的凝血酶混合物，

这样得到一种含有纤维蛋白原和凝血酶颗粒的悬浮液，所述颗粒的Folk Ward平均直径为25-100μm。在上述与本发明第一个方面所述悬浮液有关所公开的悬浮液的参数和特征，也可适用于本发明第二个方面的所述方法。

在提供所述纤维蛋白原混合物的步骤时，所述纤维蛋白原可以通过一种合适方法如筛分而进行预微粉化，从而得到具有Folk Ward平均直径为25-100μm的颗粒。所述微粉化纤维蛋白原，例如，可以被搅拌到所述醇中，以得到所述纤维蛋白原混合物。在提供所述混合物步骤时，所述纤维蛋白原也可直接在一种醇中进行均化，优选是在0-12℃之间的温度进行，如在2-8℃之间进行。所述温度在均化过程中可以降低。混合所述纤维蛋白原混合物和所述凝血酶的步骤，可以在搅拌所述悬浮液的同时进行，这样，所述搅拌也可在0-12℃之间的温度进行，如在2-8℃之间进行。

所述凝血酶可以包括人体凝血酶、牛凝血酶或重组凝血酶，而且所述纤维蛋白原可以包括人体纤维蛋白原或重组纤维蛋白原。所述醇可为一种有机醇，如甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇，如一种无水有机醇，一种无水乙醇、一种无水丙醇或一种无水异丙醇。人体纤维蛋白原可以一种固体冻干形式供应。

在第三个方面中，本发明提供了一种采用一种具有纤维蛋白原和凝血酶的悬浮液涂敷一种载体的方法，包括：

-提供一种纤维蛋白原和一种醇的纤维蛋白原混合物，

-提供一种凝血酶和一种醇的凝血酶混合物，

这样得到一种含有纤维蛋白原和凝血酶颗粒的悬浮液，所述颗粒的Folk Ward平均直径为25-100μm，

所述涂敷方法包括：

-在邻近所述载体位置提供所述含有纤维蛋白原、凝血酶和一种醇的悬浮液，

-将所述悬浮液涂敷到所述载体的涂层表面上。

所述载体可为一种胶原载体，如一种胶原海绵。所述胶原海绵可以满足至少一个和优选多个的下述标准：

-pH值在5.0-6.0之间，

-乳酸含量至多为5％，

-铵含量至多为0.5％，

-可溶蛋白含量至多为0.5％，以白蛋白计，

-硫酸盐灰分含量至多为1.0％，

-重金属含量至多为20ppm，

-微生物纯度至多为10³CFU/g，

-胶原含量为75-100％，

-密度为1-10mg/cm³，

-弹性模量范围为5-100N/cm²。

所述胶原海绵可由下述方法制备得到，包括以下步骤：

-制备一种胶原凝胶，

-混合空气到所述胶原凝胶中，得到一种胶原泡沫，

-干燥所述胶原泡沫，得到一种其中具有腔室的干燥载体块，

-从所述胶原海绵中，分离出部分具有腔室直径大于0.75mm但小于4mm或平均对角直径为3mm的部分。

在本文中，术语“腔直径”应该理解为在一个腔中最大的直线壁与壁间距离，即一个腔的最大对角直线距离。所述腔可为多边形状，如八角形。已经发现，大于0.75mm但小于4mm的腔直径或至多为3mm的腔直径，可以使得所述胶原海绵特别适合用于被一种含有纤维蛋白原和凝血酶的悬浮液所涂敷。还发现，由上述方法制备得到的涂层胶原海绵，是空气和液体密封的，在此意义上，一旦所述涂层胶原海绵被涂敷到一个伤口上，则它就不会允许空气或液体渗入到所述胶原海绵中。

所述涂敷悬浮液到所述载体上的步骤，可在室温0-12℃下进行，如1-10℃，如2-8℃。而且，所述涂敷悬浮液到所述载体上的步骤，也可在相对湿度为75-99％如85-95％的环境大气中进行。优选地，将0.08-0.12ml体积的悬浮液，涂敷到每cm²涂层表面的载体之上。为了保证最终涂层载体在其整个表面上的均匀功效，所述悬浮液优选是均匀分散在一个给定宽度的涂层表面上，使得单位面积所述涂层表面上的纤维蛋白原质量至多为25％，如至多为20％，如至多15％，如至多10％。

一个含有至少一个喷嘴的涂药器，可用来涂敷所述悬浮液到所述载体上，这样，在当所述载体与所述喷嘴相互作相对运动时，所述喷嘴涂药器迫使所述悬浮液流过所述喷嘴。所述涂药器可以包括或设置一个传送带、一个搅拌装置连接到一个泵或一个泵系统或其它供给装置上、和一种喷嘴或喷嘴系统(它能横断地例如以直角移动到所述传送带)。根据所述介质的具体性质，所述喷嘴和喷嘴系统可以具有不同形状和尺寸。所述喷嘴或喷嘴系统，可以经由管道连接到所述供给装置上。所述供给装置可以提升所述涂敷介质从所述搅拌装置到所述喷嘴系统中。在所述涂敷过程中，所述喷嘴系统可以横移过所述载体。在其待料位置，它可固定在所述传送带的一侧。所述涂敷过程可以通过一个挡光板感觉载体在所述传送带上的存在而起动，类似地，它可被一个挡光板信号所停止。这类涂药器具有一个相对小的死体积，而且它易于控制，包括易于清洁。而且，它具有在任意时间中断所述涂敷过程的能力，所以，它可适用于相对宽范围的粘度，而且它能得到均匀的涂层。

可选择地或附加地，一种具有多个单独出口的容器，也可用于涂敷所述悬浮液到所述载体上，这样，所述悬浮液就受迫从所述容器经过所述出口流到所述载体之上。后一种类型的涂药器，呈一种在其底部含有可移动板容器形式，公开在US6177126B1中，因此其全部内容按照引用并入本文中。由于US6177126B1具有更为均匀的分散，所以采用这些装置中的一种用于本发明的优选实施方式中。所述载体和所述涂药器，优选地可彼此相对在运送方向上进行移动，同时所述悬浮液被涂敷到所述载体上，这样，所述移动速率可能在0.025-0.05m/s之间，如0.03-0.04m/s。经过所述涂药器涂敷到所述载体上的悬浮液的流率，为400-600ml/min，如470-550ml/min，如495-505ml/min。

在第四个方面本发明涉及一种干燥一种涂敷到载体的涂层表面作为一种湿涂层的纤维蛋白原、凝血酶和一种醇的悬浮液的方法，所述方法包括使所述涂层载体经过低于1000mbar的压力，从而在所述载体上得到一种干燥的涂层表面，进而固定所述干燥涂层到所述涂层表面上。在所述干燥过程中，通过采用真空和使用所述真空，可以保持低温(2-10℃)和高的相对湿度(80-95％)，这样，所述载体特别是呈胶原形式如胶原海绵以及所述纤维蛋白原和凝血酶的结构和物理性质，就可以得到保持。

所述悬浮液可以通过下述步骤得到：

-提供一种纤维蛋白原和一种醇的纤维蛋白原混合物，

-提供一种凝血酶和一种醇的凝血酶混合物，

和所述载体可为一种胶原海绵，它业已经由包括以下步骤的方法制备得到：

-制备一种胶原凝胶，

-混合空气到所述胶原凝胶中，得到一种胶原泡沫，

-干燥所述胶原泡沫，得到一种其中具有腔室的干燥载体块，

和所述涂层可通过下述步骤涂敷到所述胶原海绵上：

-将所述悬浮液涂敷到所述载体的涂层表面上。

所述用于制备所述胶原海绵和用于制备所述悬浮液的方法，公开在上述与本发明第二个方面和第三个方面有关的方法中。

在干燥过程中，所述涂层载体要在0-12℃的温度如1-10℃，2-8℃，和/或在周围大气的75-99％如85-95％的相对湿度下经受所述压力。在干燥过程中，气流可流过所述涂层载体，从而将蒸汽输送远离所述涂层载体。

为了完成所述干燥，所述涂层载体优选是在所述条件下保持至少1小时的时间，如至少2小时，如至少4小时。

由于收缩，所述干燥涂层表面的面积小于所述湿涂层表面的面积。在本发明的方法中，所述干燥涂层表面的面积至少为所述湿涂层表面面积大小的75％，如至少80％。

当所述涂层载体在贮存时，为了保持所述活性成分的稳定，所述载体和所述干燥涂层表面一起，优选地，具有不超过12％重量的水分，如不超过8％重量。

与本发明其它方面有关所讨论的所有的所述悬浮液和所述胶原海绵的参数和特征，包括制备方法，也可适用于本发明的第四个方面所述方法。

在第五个方面，本发明涉及一种具有一种纤维蛋白原和凝血酶涂层的涂层胶原海绵，其中所述涂层胶原海绵是通过一种包括以下步骤的方法制备得到的：

-提供一种由包括下述步骤的方法得到的胶原海绵：

-制备一种胶原凝胶，

-混合空气到所述胶原凝胶中，得到一种胶原泡沫，

-干燥所述胶原泡沫，得到一种其中具有腔室的干燥载体块，

-从所述胶原海绵中，分离出部分具有腔室直径大于0.75mm但小于4mm或平均对角直径为3mm的部分，

-涂敷一种纤维蛋白原、凝血酶和一种醇的悬浮液到所述胶原海绵的一个涂层表面上，和

-使所述涂层载体经受低于1000mbar压力的步骤，从而在所述载体上得到一种干燥的涂层表面，并固定所述干燥涂层到所述涂层表面上，所述涂层胶原海绵具有至少一个下述性质：

-所述悬浮液均匀分散在所述涂层表面的一个给定宽度上，使得单位面积所述涂层表面的纤维蛋白原质量至多为25％，

-在所述涂层材料样品在一种Vibrofix混合器上以800-1200rpm频率摇晃2分钟时，所述涂层的磨损低于2.0mg/cm²。

当其应用于组织粘合、组织封口或止血时，所述悬浮液在所述涂层表面上的均匀分散，可以提高所述涂层表面的功效。所述涂层的低磨损，可以保证所述涂层胶原海绵能够被外科医生和/或被外科设备传送、抓取和其它处理，但不会损失所述干燥的悬浮液即所述涂层。所述纤维蛋白原配方可占所述涂层胶原海绵总重量的大约60-90％。所述配方通常含有约50-60％重量的下述物质：盐、氨基酸和白蛋白。纤维蛋白原单独通常占所述配方的40-50％。

优选地，所述悬浮液具有20-80mg/ml的水分，如24-32mg/ml。所述悬浮液的凝血酶含量可为20-40I.U./ml，如24-33I.U./ml。平均地，在涂层之后，在所述涂层表面上的所述凝血酶含量可为2-4I.U./cm²，如2.3-3.3I.U./cm²。在所述涂层表面的任意位置上，所述凝血酶含量不超过5I.U./cm²是受人欢迎的，或者，在所述涂层表面的任意位置，它不超过3.8I.U./cm²。

所述涂层载体的微生物纯度，优选地至多为4CFU/cm²，如至多2.25CFU/cm²。

在又一个独立的方面，本发明涉及上述提及的涂层胶原海绵在组织粘合、组织封口和止血的用途。

附图简要说明

图1-7描述了不同种涂层载体和用于涂敷它们的设备，如实施例VIII中所述。

图8为图示说明从制备一种悬浮液到包装涂层胶原海绵的一系列过程的流程图。

图9为用于获得所述悬浮液粘度量度的装置的示意图。

图10和11含有一个图示说明一种用于获得胶原海绵方法的流程图。

附加详细说明

本发明所述方法和产品的优选实施方式，将在下面进行描述，参见图8。

一种含有纤维蛋白原、凝血酶和醇的悬浮液，可以采用本发明所述用于制备一种悬浮液的方法制备得到，如下所述：

将纤维蛋白原在2-8℃的100％乙醇中进行均化，得到一种纤维蛋白原和醇的混合物，所述混合物占最终悬浮液体积的大约80％体积。接着，加入核黄素。所述混合物随后在一个密闭容器中进行搅拌，直到对其作进一步的处理。

人体或牛的凝血酶用水进行溶解以用于注射。所述溶液添加到35倍数量的0-8℃的100％乙醇中。将这样得到的凝血酶悬浮液在0-8℃进行均化80-100秒。

在所述纤维蛋白原和凝血酶混合物进行混合之前，向所述纤维蛋白原混合物中加入一种抑肽酶溶液和用于注射的水。接着，所述凝血酶混合物加入到所述纤维蛋白原混合物中。悬浮液的最终体积是通过添加在2-8℃的100％乙醇而制备得到的。

含有上述步骤的方法，在下文中称作“I组方法”。

作为一种替代方案，一种所述用来制备本发明含有纤维蛋白原、凝血酶和醇的悬浮液的方法，包括以下步骤：所述纤维蛋白原混合物，是通过在搅拌作用下添加颗粒尺寸为35-80μm Folk Ward平均直径预微粉化纤维蛋白原和核黄素到在2-8℃的94-97％乙醇中得到的。经此得到的核黄素和乙醇的混合物，占最终悬浮液体积的70-80％。所述纤维蛋白原混合物还在一个密闭容器中进行搅拌，直到对其作进一步的处理。

所述凝血酶混合物，是通过添加凝血酶到在-30℃的94-97％乙醇中而得到的。备用地，所述凝血酶混合物是通过溶解凝血酶在用于注射的水中，随后将所得到的凝血酶溶液缓慢地添加到17-35倍数量的-30℃的100％乙醇中而得到的。所述悬浮液进行均化80-100秒。

一种IKA的UltraTurrax设备可用作一种均化设备。

将所述凝血酶混合物添加到含有纤维蛋白原和核黄素的混合物中。加入一种在2-8℃的94-97％乙醇。

含有上述步骤的方法，在下文中称作“II组方法”。

上述的I组和II组方法，都可导致本发明的悬浮液，优选是具有下述特征：

-乙醇浓度：94-97％

-在图9左侧所示装置上测量得到的流出时间：31.5-48秒

-沉降性能：固体颗粒体积占总体积的百分比：

自起始后5分钟：大于85％

自起始后24小时：50-80％

-颗粒尺寸：35-80μm Folk Ward平均直径。

在本发明所述干燥方法的一种实施方式中，在对以胶原海绵形式的载体进行涂敷之前，胶原海绵条带在2-8℃和80-91％相对湿度条件下培养2-30小时。所述用于涂敷所述悬浮液到所述胶原海绵上的涂药器，如上所述。所述胶原海绵条带一旦涂敷之后，就在2-8℃和80-90％相对湿度条件下培养8-60分钟。所述涂层胶原条带，在一个真空干燥室内于2-8℃的气温和80-90％相对湿度条件下进行干燥。一路气流以1.2-40m³/h的空气流量，通过吸气阀流过所述胶原条带。根据大气压，施加30-60mbar的真空，即绝对压力大约为970mbar，所述涂层胶原条带干燥2-5小时。

所述悬浮液粘度的量度，是通过使用一种如图9所示的装置进行的，如上所述。如图9左侧所示装置，是由钢制成的，所述容器和所述底部孔口具有下述尺寸：

-所述圆筒形部件的内径：46mm

-所述圆筒形部件的内高度：60mm

-所述圆锥底部的内高度：20.5mm

-所述底部孔口的内径：2.6mm，

-连接到所述底部孔口通道的长度：9mm。

图9右侧所示装置，是由塑料材料制成的，所述容器和所述孔口具有下述尺寸：

-所述圆筒形部件的内径：50mm

-所述圆筒形部件的内高度：41mm

-所述圆锥底部的内高度：24mm

-所述底部孔口的内径：2.5mm，

-连接到所述底部孔口通道的长度：小于5mm。

纤维蛋白原原料

成分	总物质％
	总物质％			配方A	配方B	配方C
	人体纤维蛋白原	36-52	42-47	配方A	配方B	配方C	36-52
人体白蛋白	人体纤维蛋白原	36-52	42-47	16-24	20-24	16-24	36-52
人体白蛋白	总蛋白质	52-76	62-71	16-24	20-24	16-24	52-76
氯化钠	总蛋白质	52-76	62-71	8-14	0	8-14	52-76
氯化钠	柠檬酸三钠	2-4	1-3	8-14	0	8-14	2-4
精氨酸(盐酸)	柠檬酸三钠	2-4	1-3	15-26	15-21	15-26	2-4
精氨酸(盐酸)	氨基乙酸	0	6-9	15-26	15-21	15-26	1-2
组氨酸	氨基乙酸	0	6-9	0	3-5	0	1-2
组氨酸	蔗糖	0	0	0	3-5	0	1-2
残留水分	蔗糖	0	0	≤2	2-4	≤1.5	1-2

凝血酶原料

配方	活性(I.U./mg物质)	残余水分	附加物质添加剂
配方	活性(I.U./mg物质)	残余水分	附加物质添加剂	人体凝血酶A	360-540	≤3％	人体白蛋白，氯化钠，柠檬酸钠
牛凝血酶A	＞400	≤3％	牛白蛋白，氯化钠，柠檬酸钠	人体凝血酶A	360-540	≤3％	人体白蛋白，氯化钠，柠檬酸钠
牛凝血酶A	＞400	≤3％	牛白蛋白，氯化钠，柠檬酸钠	人体凝血酶B	7-10	≤3％	人体白蛋白，氯化钠，柠檬酸钠
人体凝血酶C	35-60	≤3％	人体白蛋白，氯化钠，乙酸钠，氨基乙酸	人体凝血酶B	7-10	≤3％	人体白蛋白，氯化钠，柠檬酸钠

下面的实施例I-VI将举例说明用于制备本发明具有一种纤维蛋白原和凝血酶涂层的涂层胶原海绵的各种不同步骤。所述步骤包括：制备本发明悬浮液的方法，得到如下所述的实施方式和本发明的悬浮液。而且，本发明所述用于涂敷的方法和本发明用于干燥的方法，也得到应用。

实施例I

在本实施例，所述悬浮液含有人体纤维蛋白原配方B和人体凝血酶配方B。

通过适用下述数量和参数，采用II组方法，得到最终悬浮液体积为3500ml：

纤维蛋白原混合物：

-2800ml乙醇(在2-8℃时为94％)

-492.5g人体纤维蛋白原配方B

-493.5mg核黄素

所述纤维蛋白原混合物2-8℃贮存20小时，同时进行搅拌。

凝血酶混合物：

-100ml乙醇(在-30℃时为100％)

-12.27g人体凝血酶配方B

所述凝血酶混合物在-30℃贮存18小时。

悬浮液：

-157ml凝血酶混合物添加到所述纤维蛋白原混合物中。

-将在2-8℃时为94％的乙醇加入到其中，使所述最终悬浮液体积为3500ml。

悬浮液特征：

1.乙醇浓度：94.3％

2.由图9左侧所示钢装置测量得到的流出时间：36.5秒

3.沉降性能：

a)在开始5分钟后沉降体积：98％的测试体积，

b)在开始24小时后沉降体积：64％的测试体积。

4.颗粒尺寸(Folk Ward平均直径)：56.4+/-1.3μm

呈胶原条带形式的载体，采用所述悬浮液进行涂敷。首先，将48个胶原海绵条带在一个冷却室中于下述条件下进行预培养：

-温度：5.2℃

-绝对湿度：4.8g水/kg空气

-培养时间：18.5小时。

采用如US6177126B1所示的涂药器，用所述悬浮液对所述胶原条带进行涂敷。

所述涂层胶原海绵条带按下述方法进行干燥：

所述涂层条带在温度为5.2℃和绝对湿度为4.8g水/kg空气的条件下培养15分钟。

所述涂层条带接着在一个真空干燥室中于下述干燥条件下进行干燥：

-空气条件：温度为5.2℃，绝对湿度为4.8g水/kg空气

-空气流过吸气阀的流量：23m³/小时

-真空：59mbar

-干燥时间：4小时。

当1×5cm²样品在Vibrofix混合器上以800-1200rpm频率摇晃2分钟时，在所述胶原海绵条带上所得到的涂层的磨损大约为0.2mg/cm²。

实施例II

在本实施例，所述悬浮液含有人体纤维蛋白原配方C和人体凝血酶配方C。

纤维蛋白原混合物：

-2252ml乙醇(在2-8℃时为94％)

-370.7g人体纤维蛋白原配方C

-493.5mg核黄素

所述纤维蛋白原混合物2-8℃贮存20小时，同时进行搅拌。

凝血酶混合物：

-188ml乙醇(在-30℃时为100％)

-12小瓶人体凝血酶配方C/12ml用于注射的水，

所述凝血酶混合物在-30℃贮存18小时。

悬浮液：

-164.5ml凝血酶混合物添加到所述纤维蛋白原混合物中。

悬浮液特征：

1.乙醇浓度：94.1％

2.由图9左侧所示钢装置测量得到的流出时间：32.8秒

3.沉降性能：

a)在开始5分钟后沉降体积：94％的测试体积，

b)在开始24小时后沉降体积：71％的测试体积。

4.颗粒尺寸(Folk Ward平均直径)：49.2+/-0.93μm。

-温度：4.8℃

-相对湿度：90.3％

-培养时间：22.25小时

所述涂层胶原海绵条带按下述方法进行干燥：所述涂层条带在温度为4.9℃和绝对湿度为4.8g水/kg空气的条件下培养13分钟。

-空气条件：温度为5.2℃，绝对湿度为4.9g水/kg空气

-空气流过吸气阀的流量：25m³/小时

-真空：60mbar

-干燥时间：4小时。

实施例III

在本实施例，所述悬浮液含有人体纤维蛋白原配方B和人体凝血酶配方B、和抑肽酶。

通过适用下述数量和参数，采用II组方法，得到最终悬浮液体积为1000ml：

纤维蛋白原混合物：

-820ml乙醇(在2-8℃时为100％)，39.4ml用于注射的水，

和10.6ml抑肽酶

-90.67g微粉化的人体纤维蛋白原配方C

-141mg核黄素

所述纤维蛋白原混合物2-8℃贮存20小时，同时进行搅拌。

凝血酶混合物：

-50ml乙醇(在-30℃时为100％)

-3.75g人体凝血酶配方B

所述凝血酶混合物在-30℃贮存16小时。

悬浮液：

将全部体积的凝血酶混合物添加到所述纤维蛋白原混合物中。

将在2-8℃时为100％的乙醇加入到其中，使所述最终悬浮液体积为1000ml。

悬浮液特征：

1.乙醇浓度：95％

2.由图9右侧所示塑料装置测量得到的流出时间：35秒

3.沉降性能：

a)在开始5分钟后沉降体积：89％的测试体积，

b)在开始24小时后沉降体积：76％的测试体积。

4.颗粒尺寸(Folk Ward平均直径)：74.4+/-3.5μm。

呈胶原条带形式的载体，采用所述悬浮液进行涂敷。首先，将16个胶原海绵条带在一个冷却室中于下述条件下进行预培养：

-温度：5.0℃

-相对湿度：85％

-培养时间：17小时

所述涂层胶原海绵条带按下述方法进行干燥：

所述涂层条带在温度为5℃和相对湿度为85％的条件下培养35分钟。

-空气条件：温度为5℃，相对湿度为85％

-空气流过吸气阀的流量：1.2m³/小时

-真空：35mbar

-干燥时间：4小时。

实施例IV

通过适用下述数量和参数，采用II组方法，得到最终悬浮液体积为780ml：

纤维蛋白原混合物：

-700ml乙醇(在2-8℃时为94％)

-84.42g人体纤维蛋白原配方C

-110mg核黄素

所述纤维蛋白原混合物2-8℃贮存20小时，同时进行搅拌。

凝血酶混合物：

-35ml乙醇(在-30℃时为100％)

-0.54g人体凝血酶配方C

所述凝血酶混合物在-30℃贮存16小时。

悬浮液：

-23.0ml凝血酶混合物添加到所述纤维蛋白原混合物中。

-将在2-8℃时为100％的乙醇加入到其中，使所述最终悬浮液体积为780ml。

悬浮液特征：

1.乙醇浓度：94％

2.由图9右侧所示塑料装置测量得到的流出时间：33.5秒

3.沉降性能：

a)在开始5分钟后沉降体积：92％的测试体积，

b)在开始24小时后沉降体积：72％的测试体积。

4.颗粒尺寸(Folk Ward平均直径)：60.5+/-0.5μm

呈胶原条带形式的载体，采用所述悬浮液进行涂敷。首先，将8个胶原海绵条带在一个冷却室中于下述条件下进行预培养：

-温度：6.0℃

-相对湿度：85％

-培养时间：18.5小时

所述涂层胶原海绵条带按下述方法进行干燥：

所述涂层条带在温度为5℃和相对湿度为85％的条件下培养45分钟。

-空气条件：温度为5℃，相对湿度为85％

-空气流过吸气阀的流量：1.2m³/小时

-真空：35mbar

-干燥时间：4小时

当1×5cm²样品在Vibrofix混合器上以800-1200rpm频率摇晃2分钟时，在所述胶原海绵条带上所得到的涂层的磨损大约为0.3mg/cm²。

实施例V

在本实施例，所述悬浮液含有人体纤维蛋白原配方A和人体凝血酶配方A。

通过适用下述数量和参数，采用I组方法，得到最终悬浮液体积为3120ml：

纤维蛋白原混合物：

-2540ml乙醇(在2-8℃时为100％)

-311.6g人体纤维蛋白原配方A

-440mg核黄素

所述纤维蛋白原混合物2-8℃贮存18小时，同时进行搅拌。

凝血酶混合物：

-210ml乙醇(在-30℃时为100％)

-229g人体凝血酶配方A

悬浮液：

-将用于注射的87.3ml水添加到所述纤维蛋白原混合物中。

将所述凝血酶混合物添加到所述纤维蛋白原混合物中。

将在2-8℃时为100％的乙醇加入到其中，达到最终的悬浮液体积。

悬浮液特征：

1.乙醇浓度：97％

2.由图9左侧所示钢装置测量得到的流出时间：40.8秒

3.沉降性能：

a)在开始5分钟后沉降体积：95.6％的测试体积，

b)在开始24小时后沉降体积：63.5％的测试体积。

4.颗粒尺寸(Folk Ward平均直径)：51.8+/-0.8μm

-温度：6.5℃

-相对湿度：90％

-培养时间：22.5小时

所述涂层胶原海绵条带按下述方法进行干燥：

所述涂层条带在温度为6.5℃和相对湿度为90％的条件下培养10分钟。

-空气条件：温度为6.5℃，相对湿度为90％

-空气流过吸气阀的流量：21m³/小时

-真空：58mbar

-干燥时间：4小时

当1×5cm²样品在Vibrofix混合器上以800-1200rpm频率摇晃2分钟时，在所述胶原海绵条带上所得到的涂层的磨损大约为0.1mg/cm²。

实施例VI

在本实施例，所述悬浮液含有人体纤维蛋白原配方A和牛凝血酶配方和抑肽酶。

通过适用下述数量和参数，采用I组方法，得到最终悬浮液体积为16720ml：

纤维蛋白原混合物：

-13600ml乙醇(在2-8℃时为100％)

-1750.5g人体纤维蛋白原配方A

-2361mg核黄素

所述纤维蛋白原混合物2-8℃贮存21小时，同时进行搅拌。

凝血酶混合物：

-420ml乙醇(在-30℃时为100％)

-1229g人体凝血酶配方A

悬浮液：

-将162.3ml抑肽酶溶液添加到所述纤维蛋白原混合物中。

-将用于注射的304.7ml水添加到所述纤维蛋白原混合物中。

-将所述凝血酶混合物添加到所述纤维蛋白原混合物中。

-将在2-8℃时为100％的乙醇加入到其中，达到最终的悬浮液体积。

悬浮液特征：

1.乙醇浓度：97％

2.在图9左侧所示钢装置上测量得到的流出时间：36.8秒

3.颗粒尺寸(Folk Ward平均直径)：58.6+/-0.6μm。

呈胶原条带形式的载体，采用所述悬浮液进行涂敷。首先，将288个胶原海绵条带在一个冷却室中于下述条件下进行预培养：

-温度：6.5℃

-相对湿度：89％

-培养时间：25小时

所述涂层胶原海绵条带按下述方法进行干燥：

所述涂层条带在温度为6.5℃和相对湿度为89％的条件下培养10分钟。

-空气条件：温度为6.5℃，相对湿度为89％

-空气流过吸气阀的流量：22.5m³小时

-真空：59mbar

-干燥时间：4小时。

实施例VII

在一种含有人体纤维蛋白原、牛凝血酶和抑肽酶的涂层胶原海绵中，在生产室的环境条件例如在2-8℃的7小时涂敷过程期间，对所述涂层悬浮液的稳定性进行研究。

在不同取样时间，对每种活性成分进行化验。所得结果如下述表I所示。

表I

	人体纤维蛋白原(mg/ml)	牛纤维蛋白原(I.U./ml)	抑肽酶(Ph.Eur.U./ml)
	人体纤维蛋白原(mg/ml)	牛纤维蛋白原(I.U./ml)	抑肽酶(Ph.Eur.U./ml)	涂敷开始时	50.0	21.8	0.59
4.5小时后	49.7	23.3	0.59	涂敷开始时	50.0	21.8	0.59
4.5小时后	49.7	23.3	0.59	7小时后(涂敷过程结束)	49.1	20.4	0.56

所述结果表明所有三种成分都是具有令人满意的稳定性。

实施例VIII

参考是针对图1-7作出的，所述各种不同图片表示：

图1
图1	1.1Opraskin：未涂层的/涂层的
1.2涂层的Opraskin：插入到内窥镜检查设备中	1.1Opraskin：未涂层的/涂层的
1.2涂层的Opraskin：插入到内窥镜检查设备中	1.3涂层的Opraskin：在插入到内窥镜检查设备中前展开。
图2	1.3涂层的Opraskin：在插入到内窥镜检查设备中前展开。
图2	2.1Willosponforte：未涂层的/涂层的
2.2涂层的Willosponforte：插入到内窥镜检查设备中	2.1Willosponforte：未涂层的/涂层的
2.2涂层的Willosponforte：插入到内窥镜检查设备中	2.3涂层的Willosponforte在插入到内窥镜检查设备中前展开。
图3	2.3涂层的Willosponforte在插入到内窥镜检查设备中前展开。
图3	3.1WillosponSpezial：未涂层的/涂层的
3.2涂层的WillosponSpezial：插入到内窥镜检查设备中	3.1WillosponSpezial：未涂层的/涂层的
3.2涂层的WillosponSpezial：插入到内窥镜检查设备中	3.3涂层的WillosponSpezial在插入到内窥镜检查设备中前展开。
图4	3.3涂层的WillosponSpezial在插入到内窥镜检查设备中前展开。
图4	4.1Ethisorb药膏：未涂层的/涂层的
4.2涂层的Ethisorb药膏：插入到内窥镜检查设备中	4.1Ethisorb药膏：未涂层的/涂层的
4.2涂层的Ethisorb药膏：插入到内窥镜检查设备中	4.3涂层的Ethisorb药膏在插入到内窥镜检查设备中前展开。
图5	4.3涂层的Ethisorb药膏在插入到内窥镜检查设备中前展开。
图5	5.1TabotampNU Knit：未涂层的/涂层的
5.2涂层的TabotampNU Knit：插入到内窥镜检查设备中	5.1TabotampNU Knit：未涂层的/涂层的
5.2涂层的TabotampNU Knit：插入到内窥镜检查设备中	5.3涂层的TabotampNU Knit：在插入到内窥镜检查设备中前展开。
图6	5.3涂层的TabotampNU Knit：在插入到内窥镜检查设备中前展开。
图6	6.1海绵Nycomed：未涂层的/涂层的[实验室样品]
6.2涂层的海绵Nycomed[实验室样品]：插入到内窥镜检查设备中	6.1海绵Nycomed：未涂层的/涂层的[实验室样品]
6.2涂层的海绵Nycomed[实验室样品]：插入到内窥镜检查设备中	6.3涂层的胶原海绵Nycomed[实验室样品]：在插入到内窥镜检查设备中前展开。
图7	6.3涂层的胶原海绵Nycomed[实验室样品]：在插入到内窥镜检查设备中前展开。
图7	内窥镜检查工具：Endodock
内窥镜检查工具：Endodock	内窥镜检查工具：Endodock
内窥镜检查工具：Endodock	内窥镜检查工具：Endodock

涂层Nycomed海绵(TachoComb S)与其它如TachoComb S同样涂层的载体产品的比较

所述层的粘合

步骤

1.不同载体的涂敷

商标	材料	由…制造/分布
商标	材料	由…制造/分布	Opraskin	胶原海绵	Lohmann，Postfach 2343，D56513 Neuwied
Willosponforte	胶原海绵(小牛)	Will-Pharma，Postbus 30，NL1160AA Zwanenburg	Opraskin	胶原海绵	Lohmann，Postfach 2343，D56513 Neuwied
Willosponforte	胶原海绵(小牛)	Will-Pharma，Postbus 30，NL1160AA Zwanenburg	WillosponSpezial	胶质海绵	Will-Pharma，Postbus 30，NL 1160AA Zwanenburg
Ethisorbe药膏	Polyglactin910/Polydioxanon	Johnson/Johnson(manufacturer)Ethicon，Robert-Koch-Str.1D-22851Norderstedt	WillosponSpezial	胶质海绵	Will-Pharma，Postbus 30，NL 1160AA Zwanenburg
Ethisorbe药膏	Polyglactin910/Polydioxanon		TabotampNU Knit	氧化再生纤维素	Johnson/Johnson(manufacturer)Ethicon，Robert-Koch-Str.1D-22851Norderstedt
胶原海绵Nycomed	马的胶原海绵	Nycomed AustriaSankt-Peter-Str.25A-4021LINZ	TabotampNU Knit	氧化再生纤维素

每个面积为2×4.5cm²的载体，用TachoComb S涂层悬浮液进行涂敷。涂层悬浮液的数量对应于TachoComb规格(5.5mg纤维蛋白原/cm²).对所述样品进行干燥。

2.对于每个涂层载体，制备一个1×4cm²的样品。

3.所述层的粘合作用是按下述方法进行测试的：

方法说明

装置

分析天平(测量精度+0.5mg)

带有固定装置的Vibrofix混合器

具有毫米刻度的标尺

秒表、解剖刀、带有塞子的内径为2cm试管

步骤

用来确定磨损的所述步骤和计算如上所述。

结果

载体	物质	磨损(mg/cm²)
载体	物质	磨损(mg/cm²)	Opraskin	冻干胶原	2,1
Willosponforte(3mm)	冻干胶原	1,2	Opraskin	冻干胶原	2,1
Willosponforte(3mm)	冻干胶原	1,2	WillosponSpezial(1mm)	胶质	2,1
Ethisorb药膏(ZVP609)	Polyglactin/dioxanon	14,3	WillosponSpezial(1mm)	胶质	2,1
Ethisorb药膏(ZVP609)	Polyglactin/dioxanon	14,3	TabotampNU Knit	氧化纤维素	9,2
胶原海绵Nycomed	胶原，泡沫状	0,15	TabotampNU Knit	氧化纤维素	9,2

评价

除Nycomed胶原海绵之外的所有载体在涂敷之后不是弹性的。

所述样品必须非常细心地进行切割。如果使用剪刀进行切割，则会有一些所述涂层植物可能会剥落，这是因为所述层自身是刚性的。Ethisorb药膏显示几乎根据与所述涂层材料没有关系。当摇晃一会之后，所有涂层都剥落得象一块“地毯”一样。

Nycomed胶原海绵与其它载体材料之间的差别，已经清楚地得到说明。

潮湿涂层载体的弹性

步骤

1.不同载体的涂敷

每个面积为2×4.5cm²的载体，用TachoComb S涂层悬浮液进行涂敷。涂层悬浮液的数量对应于TachoComb规格(5.5mg纤维蛋白原/cm²)。对所述样品进行干燥。

2.对于每个涂层载体，制备一个约5-7cm²的样品。

3.所述样品进行湿润，并放到一种固定在一种如下述标题“步骤”中详细描述的特定装置上的弹性橡胶薄片上。接着施加压力到所述橡胶薄片上，使之扩展。在经过二次扩展和放松之后，所述薄片进行第三次扩展。在其最大扩展点时测量其所述载体的面积。

方法说明

装置/化学品

蠕动泵(IKA PA-SF)

压力缓冲瓶(3个出口)

VDO压力计(0-250mbar)

玻璃漏斗(孔道1：30mm，孔道2：15mm)

硅树脂管道和夹子、橡胶手套(Semper med)、解剖刀、具有毫米刻度的标尺、剪刀

生理盐水

步骤

下述装置经由硅树脂管道空气密封地连接到所述压力缓冲瓶的三个出口之上：

a)蠕动泵

b)压力计

c)玻璃漏斗/孔道2

从橡胶手套上切割下一个约8×8cm²的双重薄片。该薄片空气密封地固定到所述玻璃漏斗/孔道1上。

使用解剖刀从所述涂层载体上切割下约5-7cm²的涂层面积。

测量所述样品的面积(起始面积)。所述样品的涂层用盐水进行湿润，并放在所述橡胶薄片之上。接着用手将它压放在所述橡胶薄片上约1分钟。

使用所述蠕动泵，所述橡胶薄片在约70mbar的压力下进行扩展。在放松所述橡胶薄片之后，重量进行二次。在第三次扩展时，在橡胶薄片扩展的最大位置测量所述涂层载体的面积(长度和宽度)。

计算：

“弹性”系数＝载体在第三扩展时的面积/样品的起始面积

结果

载体	物质	弹性系数
载体	物质	弹性系数	Opraskin	冻干胶原	1,78
Willosponforte(3mm)	冻干胶原	1,53	Opraskin	冻干胶原	1,78
Willosponforte(3mm)	冻干胶原	1,53	WillosponSpezial(1mm)	胶质	1,79
Ethisorb药膏(ZVP609)	Polyglactin/dioxanon	1,0	WillosponSpezial(1mm)	胶质	1,79
Ethisorb药膏(ZVP609)	Polyglactin/dioxanon	1,0	TabotampNU Knit	氧化纤维素	1,15
胶原海绵Nycomed	胶原，泡沫状	1,55	TabotampNU Knit	氧化纤维素	1,15

评价：

所述湿润胶原海绵Nycomed(TachoComb)的弹性，是所述产品的一个重要特征。弹性对于胸和腹部外科是非常重要的。在粘合之后，所述载体应该能够允许进行例如肺或肠的扩展和放松运动。特别地，Ethisorb表现出根本没有弹性。它立即从所述涂层上脱离下来。涂层WillosponSpezial和Opraskin在测试过程中表现出结构缺陷。

涂层载体在内窥镜检查外科中的使用

步骤：

1.不同载体的涂敷

采用TachoComb S涂层悬浮液，对每种载体涂敷2×4cm²的面积。

所述涂层悬浮液的数量对应于TachoComb规格(5.5mg纤维蛋白原/cm²)。干燥所述样品。

2.所述涂层载体样品用于内窥镜外科的处理和由于这种处理引起的涂层损失，采用一种数字光电装置记录下来。

方法说明

装置

内窥平台(Endodock)：内窥镜检查工具，设计用于在内窥镜检查外科中使用TachoComb(参见图7)。数字光电装置。

研究载体列表

载体	物质
载体	物质	Opraskin	冻干胶原
Willosponforte(3mm)	冻干胶原	Opraskin	冻干胶原
Willosponforte(3mm)	冻干胶原	WillosponSpezial(1mm)	胶质
Ethisorb药膏(ZVP609)	Polyglactin/dioxanon	WillosponSpezial(1mm)	胶质
Ethisorb药膏(ZVP609)	Polyglactin/dioxanon	TabotampNU Knit	氧化纤维素
胶原海绵Nycomed	胶原，泡沫状	TabotampNU Knit	氧化纤维素

步骤

自每种载体取得的图片系列：

1.图片：未涂层的和涂层的载体样品的记录

2.图片：所述涂层样品插入到所述内窥镜装置中(Endodock)。

所述样品必须用手压平才能使之围绕一个导向“栓”进行缠绕。接着所述样品细心地插入到直径为10mm的钢管中。

所述样品记录部分地插入到所述Endodock管中。

3.图片：仔细地推出所述样品。之后，展开所述样品。

由于这种处理而从所述载体上脱离的涂层，聚集在所述载体周围。记录在插入所述内窥镜装置之后的展开样品和由于这种处理引起的涂层损失。

评价：

在内窥镜外科中的TachoComb(涂层的马胶原海绵/Nycomed)是所述产品最为苛求的应用。TachoComb被插入到一种内窥镜装置中。这种装置的管道其直径通常为10-13mm。为了被插入到所述管道中，TachoComb要被压平并接着围绕一个导向“栓”进行缠绕，然后仔细地插入到所述管道中。因此，所述涂层与所述载体和在其自身内的连接，必须是很强的，而且，所述产品必须保持足够的弹性，使之在干燥条件下能够弯曲和被卷起。当运到所述外科位置时，TachoComb被仔细地从所述管道中推出来。接着，它必须展开并放置在所述伤口表面。这经常需要进行一些调节。因此，所述层与所述载体的粘合作用应该足够地强大以承受这种处理。

结果

结果可从附图1-6看出。涂层材料脱落物的评价如下所示：

Opraskin	30-40％
Opraskin	30-40％	Willosponforte(3mm)	60-70％
WillosponSpezial(1mm)	50％	Willosponforte(3mm)	60-70％
WillosponSpezial(1mm)	50％	Ethisorb药膏(ZVP609)	60-70％
TabotampNU Knit	95％	Ethisorb药膏(ZVP609)	60-70％
TabotampNU Knit	95％	胶原海绵Nycomed	＜5％

由于Ethisorb是一种非常刚性的载体，所述涂层的粘合作用是非常差的。因此，涂层的Ethisorb在这种研究过程中会损失几乎全部的涂层。对涂层的胶原海绵Nycomed相比，所有其它研究的载体具有一个有待涂敷的平坦表面。这样，所述涂层就象一张“平坦地毯”躺在所述载体上。这将会导致所述干燥涂层载体具有相当多的非弹性结构。弯曲或卷起经常会使所述涂层自身断裂。

在所述涂层载体插入到所述内窥镜装置和所述样品随后的展开之后，除了胶原海绵Nycomed之外，所有载体损失了相当数量的涂层，这样，留下有很大面积没有涂层材料。

Nycomed胶原海绵的结构和质地是TachoComb在干燥或湿润条件时弹性的基础。Nycomed胶原海绵是泡沫状的，在其内具有多边腔室。在所述表面上，这些腔室被切割成洞穴。这些洞穴使所述涂层表面变大。在涂敷过程中，所述涂层悬浮液均匀地分散到所述结构表面上。在干燥过程中，所述含有纤维蛋白原和凝血酶的溶液被固定到所述洞穴中。这样，TachoComb就可被切割为希望的尺寸，它可被插入到内窥镜装置中且仅有少量的涂层材料损失或者根本没有损失。

干燥TachoComb的高弹性，相对于所有其它研究的涂层载体来说，是一个很大的优点。

胶原海绵的制备

本发明中所述胶原海绵可由图10和11所图示的方法制备得到，如下所述：

业已发现，采用一种纤维蛋白胶水制剂的胶原海绵的成功涂敷，取决于所述胶原海绵的质地。因此，人们希望能够提供一种用于制备具有一定质地的胶原海绵的方法，特别是对于制备适合于用纤维蛋白胶水制剂涂敷的胶原海绵，从而得到一种用于治疗和密封伤口的材料。人们还希望能够提供一种用于制备较先有技术海绵具有改进物理性质的胶原海绵的方法，它具有改进的湿度、弹性、密度和弹性模量。人们还希望能够提供一种用于制备空气和流体密封的胶原海绵，在这意义上，一旦所述胶原海绵应用到一个伤口上，它就不会允许空气或液体渗入到所述胶原海绵之中。

因此，所述制备胶原海绵的方法，可包括以下步骤：

-制备一种胶原凝胶，

-混合空气到所述胶原凝胶中，得到一种胶原泡沫，

-干燥所述胶原泡沫，得到一种其中具有腔室的干燥载体块，

-从所述胶原海绵中，分离出部分具有腔室直径大于0.75mm但小于4mm或具有平均对角直径至多为3mm的部分。

在本文中，术语“腔直径”应该理解为在一个腔中最大的直线壁与壁间距离，即一个腔的最大对角直线距离。所述腔可为多边形状，如八边形。

已经发现，大于0.75mm但小于4mm的腔直径或至多为3mm的腔直径，可以使得所述胶原海绵特别适合用于被一种含有纤维蛋白原和凝血酶的悬浮液所涂敷。优选地，所述胶原凝胶具有的干燥质量范围为2-20mg干燥质量/g凝胶，如4-18mg，如5-13mg，如6-11mg/g凝胶。所述胶原凝胶的动力学粘度优选为2-20Ncm，如4-10Ncm，如6-8Ncm。所述胶原海绵优选具有的水分不大于20％，如10-15％，如约18％。所述胶原海绵的弹性模量优选范围为5-100N/cm²，如10-50N/cm²，所述海绵的密度优选为1-10mg/cm³，如2-7mg/cm³。

业已发现，由上述方法制备得到的胶原海绵，是空气和液体密封的，在此意义上，一旦所述涂层胶原海绵被涂敷到一个伤口上，则它就不会允许空气或液体渗入到所述胶原海绵中。液体被吸收在所述海绵之中。这种效果主要是由于下述事实达到的：所述混合空气到所述胶原凝胶步骤提供了这样一种胶原海绵，它是一种三维结构，具有被胶原材料壁所分隔开且基本全部密封的层叠腔室，与那些具有纤维结构的已知胶原海绵不同。

所述胶原凝胶可包括不同类型的材料，如源自哺乳动物、转基因的或重组来源的I型、II型或III型，但是所有其它类型的胶原也可采用。所述胶原可包括源自于选自由马腱、人腱和牛腱所组成的组中腱的原料。另外地或替代地，所述胶原凝胶包括重组胶原原料。

所述海绵分离部分的胶原含量，优选为所述海绵干燥质量的50-100％，如75-100％，如80-100％，如85-100％，如90-100％，如92-100％，如92-98％，如93-97％，如94-96％。

所述制备胶原凝胶步骤，优选包括以下步骤：

-将所述腱在-10℃至-30℃之间的温度进行贮存，并剥下所述腱，

-从所述腱中去除异种蛋白，

-降低所述腱中的微生物含量，

-使所述腱肿胀，

-均化所述肿胀的腱。

所述贮存、剥离、去除蛋白、降低微生物含量和肿胀步骤，目的是在于纯化，而所述均化步骤目的是在于得到呈一种凝胶形式的胶原。

所述降低微生物含量步骤，优选包括添加一种酸如一种有机酸，如乳酸到所述腱之中。而且，一种有机溶剂如一种醇如乙醇，优选寺也可添加到所述腱之中。此外，所述腱的肿胀步骤，优选地，包括添加乳酸至所述腱之中。所采用的乳酸为0.40-0.50％的乳酸，如0.45％的乳酸。

所述腱的肿胀步骤，可包括在4-25℃的温度贮存所述腱，如在10-20℃的温度，持续48-200小时，如100-200小时。

所述肿胀腱的均化步骤，优选是这样进行的，以保证得到胶原凝胶片断即纤维球状物的颗粒尺寸具有的直径为0.8-1.2cm，如大约1cm。而且，所述胶原凝胶的物理性质，优选地如上所述。举例来说，合适的性质，可通过借助于齿条式盘磨机或充分均化设备，对所述肿胀腱实施所述均化步骤而达到。

所述混合空气到所述胶原凝胶步骤，优选包括以下步骤：

-借助于一个混合器，将室内空气混合到所述凝胶中，形成一种胶原泡沫，

-将所述混合凝胶泡沫进料到一种分馏通道中，

-分离存在于所述分馏通道中的胶原凝胶和胶原泡沫。

从所述分馏通道中胶原泡沫分离出来的至少部分胶原凝胶，可引回到所述混合器中。在这种情形中，从所述分馏通道引回到所述混合器的胶原凝胶数量与引入到所述混合器中的新鲜胶原凝胶数量的比值，优选是在0.1-0.5之间。所述分离胶原凝胶和胶原泡沫步骤，优选包括以下步骤：

-分离出一部分选定的存在于所述分馏通道中的胶原泡沫，

-将所述选定部分的胶原泡沫引出所述分馏通道，用于对其进行干燥。

在所述方法的一种优选实施方式中，在所述分馏通道中保持15-40℃的温度，如20-25℃。

在混合空气到所述胶原凝胶之后，所述胶原泡沫可以进行均化2-4分钟的一段时间。

在所述干燥胶原泡沫步骤之前和在所述混合空气到所述胶原凝胶步骤之前，一种中和剂可以添加到所述胶原泡沫之中，且所述胶原泡沫优选是进行中和的，以便使所述pH为6.5-8.5的胶原泡沫，达到通常为2.5-3.5的pH。可以采用一种含氨溶液的中和剂，所述胶原泡沫优选是中和持续5-30小时，如10-20小时，如大约24小时。

在所述干燥胶原泡沫步骤之前，所述胶原泡沫，优选地以这样一种方式注入到一种干燥容器中，使得在填充时实质上没有空气被带入到所述泡沫中。

所述干燥步骤优选包括在15-60℃之间的温度，如20-40℃，进行干燥，持续50-200小时，如100-150小时，得到一种干燥的胶原海绵。所述干燥步骤可在略微低于大气压的压力中进行，如压力在700-900mbar之间，如大约800mbar。

由上述方法制得的胶原海绵，优选具有至少一个下述标准：

-pH值在5.0-6.0之间，

-乳酸含量至多为5％，

-铵含量至多为0.5％，

-可溶蛋白含量至多为0.5％，以白蛋白计，

-硫酸盐灰分含量至多为1.0％，

-重金属含量至多为20ppm，

-微生物纯度至少为10³CFU/g，

-胶原含量为75-100％，

-密度为1-10mg/cm³，如2-7mg/cm³，

-弹性模量范围为5-100N/cm²，如10-50N/cm²。

所述分离胶原海绵部分步骤，可包括：通过切割将所述胶原海绵分为多个部分。所得部分可成型为任意希望的形状，如圆锥形、圆柱形(包括具有环形横截面的圆柱形)、矩形、多角形、立方形和平坦薄片，或者，它们可通过一种适合的造粒方法等转变为粒状。

由上述可以明显地看出，所述胶原海绵可由下述方法制备得到，包括以下步骤：

-制备一种胶原凝胶，

-混合空气到所述胶原凝胶中，得到一种胶原泡沫，

-干燥所述胶原泡沫，得到一种其中具有腔室的干燥载体块，

-从所述胶原海绵块中，分离出具有下述性质的海绵部分：

-弹性模量范围为5-100N/cm²，

-密度范围为1-10mg/cm³，

其腔室直径大于0.75mm但小于4mm，或腔室直径平均至多为3mm。

Claims

1、一种含有纤维蛋白原、凝血酶和醇的悬浮液，所述悬浮液是通过一种包括下述步骤的方法制备得到的：

-提供一种纤维蛋白原和一种醇的纤维蛋白原混合物，

-提供一种凝血酶和一种醇的凝血酶混合物，

所述悬浮液含有纤维蛋白原和凝血酶颗粒，所述颗粒的FolkWard平均直径为25-100μm。

2、权利要求1所述悬浮液，其中所述颗粒的Folk Ward平均直径为35-80μm。

3、权利要求1或2所述悬浮液，其中所述悬浮液具有这样的粘度，当其仅受重力影响时，可使得在25-75秒内有90-120ml体积的悬浮液流出一个具有下述特征的容器的底部孔口：

-一个内径为40-50mm且内高度为55-65mm的圆筒形部件，和

4、权利要求3所述悬浮液，其中所述悬浮液体积是在30-50秒内流出所述底部孔口。

5、权利要求1任一所述悬浮液，还含有抑肽酶。

6、一种制备具有纤维蛋白原和凝血酶的悬浮液的方法，包括：

-提供一种纤维蛋白原和一种醇的纤维蛋白原混合物，

-提供一种凝血酶和一种醇的凝血酶混合物，

这样得到一种含有纤维蛋白原和凝血酶颗粒的悬浮液，所述颗粒的Folk Ward平均直径为25-100μm。

7、权利要求6所述方法，其中，在所述提供纤维蛋白原混合物步骤时，所述纤维蛋白原进行预微粉化处理，从而得到具有Folk Ward平均直径为25-100μm的颗粒。

8、权利要求6或7所述方法，其中所述预微粉化纤维蛋白原是被搅拌到所述醇中，以得到所述纤维蛋白原混合物。

9、权利要求6所述方法，其中，在所述提供所述混合物步骤时，对所述混合物进行均化。

10、权利要求9所述方法，其中所述混合物是在0-12℃之间的温度进行进行均化。

11、权利要求10所述方法，其中所述混合物是在2-8℃之间的温度进行均化。

12、权利要求11所述方法，其中所述温度在均化过程中是降低的。

13、权利要求6所述方法，其中，所述凝血酶包括至少下述中的一种：人体凝血酶、牛凝血酶和重组凝血酶。

14、权利要求6所述方法，其中所述纤维蛋白原包括至少下述中的一种：人体纤维蛋白原和重组纤维蛋白原。

15、权利要求6所述方法，其中所述悬浮液还含有抑肽酶。

16、权利要求6所述方法，其中所述醇为乙醇。

17、权利要求16所述方法，其中所述乙醇是一种无水乙醇。

18、权利要求6所述方法，其中，所述混合所述纤维蛋白原混合物和所述凝血酶的步骤，是在搅拌所述悬浮液的同时进行的。

19、权利要求18所述方法，其中，所述搅拌是在0-12℃之间的温度下进行的。

20、权利要求19所述方法，其中，所述搅拌是在2-8℃之间的温度下进行的。

21、一种用于采用一种含有纤维蛋白原和凝血酶的悬浮液涂敷一种载体的方法，包括：

-提供一种纤维蛋白原和一种醇的纤维蛋白原混合物，

-提供一种凝血酶和一种醇的凝血酶混合物，

所述涂敷方法包括：

-将所述悬浮液涂敷到所述载体的涂层表面上。

22、权利要求21所述方法，其中所述载体为一种胶原载体。

23、权利要求22所述方法，其中所述胶原海绵满足下述标准中的至少一个：

-pH值在5.0-6.0之间，

-乳酸含量至多为5％，

-铵含量至多为0.5％，

-可溶蛋白含量至多为0.5％，以白蛋白计，

-硫酸盐灰分含量至多为1.0％，

-重金属含量至多为20ppm，

-微生物纯度至多为10³CFU/g，

-胶原含量为75-100％，

-密度为1-10mg/cm³，

-弹性模量范围为5-100N/cm²。

24、权利要求22或23所述方法，其中所述载体为一种胶原海绵，而且，其中所述胶原海绵是由一种包括以下步骤的方法制备得到的：

制备一种胶原凝胶，

-混合空气到所述胶原凝胶中，得到一种胶原泡沫，

-干燥所述胶原泡沫，得到一种其中具有腔室的干燥载体块，

-从所述胶原海绵中，分离出部分具有腔室直径大于0.75mm但小于4mm、或具有平均对角直径为3mm腔室的海绵部分。

26、权利要求21所述方法，其中所述涂敷悬浮液到所述载体上的步骤，是在室温0-12℃下进行的。

26、权利要求25所述方法，其中所述涂敷悬浮液到所述载体上的步骤，是在室温1-10℃下进行的。

27、权利要求26所述方法，其中所述涂敷悬浮液到所述载体上的步骤，是在室温2-8℃下进行的。

28、权利要求21所述方法，其中所述涂敷悬浮液到所述载体上的步骤，是在相对湿度为75-99％的环境大气中进行的。

29、权利要求28所述方法，其中所述涂敷悬浮液到所述载体上的步骤，是在相对湿度为85-95％的环境大气中进行的。

30、权利要求21所述方法，其中，0.08-0.12ml体积的悬浮液被涂敷到每cm²涂层表面的载体之上。

31、权利要求21所述方法，其中所述悬浮液是均匀分散在涂层表面的一个给定宽度之上，使得单位面积所述涂层表面上的纤维蛋白原质量至多为25％。

32、权利要求21所述方法，其中，一种含有至少一个喷嘴的涂药器，是用来涂敷所述悬浮液到所述载体上，这样，在当所述载体与所述喷嘴相互作相对运动时，所述喷嘴涂药器迫使所述悬浮液流过所述喷嘴。

33、权利要求21所述方法，其中，一种含有一个具有多个单独出口的容器的涂药器，是用来涂敷所述悬浮液到所述载体上，而且，其中所述悬浮液是受迫从所述容器经过所述出口流到所述载体之上。

34、权利要求33所述方法，其中所述载体和所述涂药器，是彼此相对在运送方向上进行移动，同时所述悬浮液被涂敷到所述载体上。

35、权利要求34所述方法，其中，所述移动速率是在0.025-0.05m/s之间。

36、权利要求35所述方法，其中，所述移动速率是在0.03-0.04m/s之间。

37、权利要求33所述方法，其中，经过所述涂药器涂敷到所述载体上悬浮液的流率，为400-600ml/min。

38、权利要求37所述方法，其中，所述流率为470-550ml/min。

39、权利要求38所述方法，其中，所述流率为495-505ml/min。

40、一种干燥一种涂敷到载体的涂层表面作为一种湿涂层的纤维蛋白原、凝血酶和一种醇的悬浮液的方法，所述悬浮液含有纤维蛋白原和凝血酶颗粒，所述颗粒的Folk Ward平均直径为25-100μm，所述方法包括以下步骤：使所述涂层载体经过低于1000mbar的压力，从而在所述载体上得到一种干燥的涂层表面，进而固定所述干燥涂层到所述涂层表面上。

41、权利要求40所述方法，其中所述悬浮液是通过下述步骤得到：

-提供一种纤维蛋白原和一种醇的纤维蛋白原混合物，

-提供一种凝血酶和一种醇的凝血酶混合物，

而且，其中所述载体为一种胶原海绵，它业已经由包括以下步骤的方法制备得到：

-制备一种胶原凝胶，

-混合空气到所述胶原凝胶中，得到一种胶原泡沫，

-干燥所述胶原泡沫，得到一种其中具有腔室的干燥载体块，

-从所述胶原海绵块中，分离出部分具有腔室直径大于0.75mm但小于4mm、或具有平均对角直径为3mm腔室的海绵部分，

和其中所述涂层是通过下述步骤涂敷到所述胶原海绵上：

-将所述悬浮液涂敷到所述载体的涂层表面上。

42、权利要求40或41所述方法，其中所述涂层载体是在0-12℃的温度下经受所述压力。

43、权利要求42所述方法，其中所述涂层载体是在1-10℃的温度下经受所述压力。

44、权利要求43所述方法，其中所述涂层载体是在2-8℃的温度下经受所述压力。

45、权利要求40或41所述方法，其中所述涂层载体是在周围大气的75-99％的相对湿度下经受所述压力。

46、权利要求45所述方法，其中，所述涂层载体是在所述湿度下保持至少1小时的时间。

47、权利要求45任一所述方法，其中，所述涂层载体是在所述湿度下保持至少2小时的时间。

48、权利要求45所述方法，其中，所述涂层载体是在所述湿度下保持至少4小时的时间。

49、权利要求40或41所述方法，其中所述涂层载体是在周围大气的85-95％的相对湿度下经受所述压力。

50、权利要求40或41所述方法，其中，在干燥过程中，空气气流流过所述涂层载体。

51、权利要求40或41所述方法，其中，所述干燥涂层表面的面积至少为所述湿涂层表面面积大小的75％。

52、权利要求40或41所述方法，其中，所述干燥涂层表面的面积至少为所述湿涂层表面面积大小的80％。

53、权利要求40或41所述方法，其中，所述载体和所述干燥涂层表面，具有不超过12％重量的水分。

54、权利要求40或41所述方法，其中，所述载体和所述干燥涂层表面，具有不超过8％重量的水分。

55、权利要求40或41所述方法，其中，所述悬浮液还含有抑肽酶。

56、一种具有一种纤维蛋白原和凝血酶涂层的涂层胶原海绵，其中所述涂层胶原海绵是通过一种包括以下步骤的方法制备得到的：

-提供一种由包括下述步骤的方法得到的胶原海绵：

-制备一种胶原凝胶，

-混合空气到所述胶原凝胶中，得到一种胶原泡沫，

-干燥所述胶原泡沫，得到一种其中具有腔室的干燥载体块，

-从所述胶原海绵中，分离出部分具有腔室直径大于0.75mm但小于4mm、或具有平均对角直径为3mm腔室的海绵部分，

-涂敷一种纤维蛋白原、凝血酶和一种醇的悬浮液到所述胶原海绵的一个涂层表面上，所述悬浮液含有纤维蛋白原和凝血酶颗粒，所述颗粒的Folk Ward平均直径为25-100μm，和

57、权利要求56所述涂层胶原海绵，其中，所述悬浮液具有20-80mg/ml的水分。

58、权利要求56所述涂层胶原海绵，其中所述悬浮液具有24-32mg/ml的水分。

59、权利要求56-58任一所述涂层胶原海绵，其中所述悬浮液的凝血酶含量为20-40I.U./ml。

60、权利要求56所述涂层胶原海绵，其中所述悬浮液的凝血酶含量为24-33I.U./ml。

61、权利要求56所述涂层胶原海绵，其中，所述涂层表面上的所述凝血酶含量平均为2-4I.U./cm²。

62、权利要求56所述涂层胶原海绵，其中，所述涂层表面上的所述凝血酶含量平均为2.3-3.3I.U./cm²。

63、权利要求56所述涂层胶原海绵，其中，在所述涂层表面的任意位置上，所述凝血酶含量不超过5I.U./cm²。

64、权利要求56所述涂层胶原海绵，其中，在所述涂层表面的任意位置上，所述凝血酶含量不超过3.8I.U./cm²。

65、权利要求56所述涂层胶原海绵，其中，所述涂层载体的微生物纯度，至多为4CFU/cm²。

66、权利要求56所述涂层胶原海绵，其中，所述涂层载体的微生物纯度，至多为2.25CFU/cm²。

67、一种涂层胶原海绵用于组织粘合、组织封口和止血的用途，所述胶原海绵具有一种纤维蛋白原和凝血酶的涂层，其中，所述涂层胶原海绵是通过一种包括以下步骤的方法制备得到的：

-提供一种由包括下述步骤的方法得到的胶原海绵：

-制备一种胶原凝胶，

-混合空气到所述胶原凝胶中，得到一种胶原泡沫，

-干燥所述胶原泡沫，得到一种其中具有腔室的干燥载体块，