SA517380700B1 - مركبات ترابطية rig-i جديدة وطرق إنتاجها - Google Patents
مركبات ترابطية rig-i جديدة وطرق إنتاجها Download PDFInfo
- Publication number
- SA517380700B1 SA517380700B1 SA517380700A SA517380700A SA517380700B1 SA 517380700 B1 SA517380700 B1 SA 517380700B1 SA 517380700 A SA517380700 A SA 517380700A SA 517380700 A SA517380700 A SA 517380700A SA 517380700 B1 SA517380700 B1 SA 517380700B1
- Authority
- SA
- Saudi Arabia
- Prior art keywords
- oligonucleotide
- group
- alkyl
- capture
- modified
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 42
- 239000003446 ligand Substances 0.000 title abstract description 10
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 claims description 118
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims description 31
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims description 31
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 30
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 29
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims description 27
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 24
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 21
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 claims description 20
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 18
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol group Chemical group [C@@H]1(CC[C@H]2[C@@H]3CC=C4C[C@@H](O)CC[C@]4(C)[C@H]3CC[C@]12C)[C@H](C)CCCC(C)C HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims description 17
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 15
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 15
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 claims description 12
- -1 alkynyl azide Chemical class 0.000 claims description 12
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 12
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 claims description 12
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 claims description 12
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 claims description 11
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 11
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 claims description 10
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 10
- 230000011987 methylation Effects 0.000 claims description 10
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 claims description 9
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 claims description 8
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 8
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 8
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 8
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 claims description 7
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims description 7
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims description 7
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 7
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 claims description 6
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 claims description 6
- 125000000304 alkynyl group Chemical group 0.000 claims description 6
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 claims description 6
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000011616 biotin Substances 0.000 claims description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 6
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 claims description 6
- 108091028664 Ribonucleotide Proteins 0.000 claims description 5
- 230000026030 halogenation Effects 0.000 claims description 5
- 238000005658 halogenation reaction Methods 0.000 claims description 5
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 claims description 5
- 239000002336 ribonucleotide Substances 0.000 claims description 5
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 claims description 5
- 101100277337 Arabidopsis thaliana DDM1 gene Proteins 0.000 claims description 4
- 238000001467 acupuncture Methods 0.000 claims description 4
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 4
- 150000005829 chemical entities Chemical class 0.000 claims description 4
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 claims description 4
- 101150113676 chr1 gene Proteins 0.000 claims description 4
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims description 4
- 101150009274 nhr-1 gene Proteins 0.000 claims description 4
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 claims description 4
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 claims description 4
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 4
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 3
- IVRMZWNICZWHMI-UHFFFAOYSA-N azide group Chemical group [N-]=[N+]=[N-] IVRMZWNICZWHMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 claims description 3
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- 125000005010 perfluoroalkyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- 229920000233 poly(alkylene oxides) Polymers 0.000 claims description 3
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 3
- 101100097467 Arabidopsis thaliana SYD gene Proteins 0.000 claims description 2
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 claims description 2
- 101100495925 Schizosaccharomyces pombe (strain 972 / ATCC 24843) chr3 gene Proteins 0.000 claims description 2
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 claims description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims description 2
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 claims description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 claims description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 claims description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 2
- SQVRNKJHWKZAKO-PFQGKNLYSA-N N-acetyl-beta-neuraminic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-PFQGKNLYSA-N 0.000 claims 4
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims 4
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims 4
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims 4
- 230000029936 alkylation Effects 0.000 claims 3
- 238000005804 alkylation reaction Methods 0.000 claims 3
- 208000001901 epithelial recurrent erosion dystrophy Diseases 0.000 claims 3
- AUTOLBMXDDTRRT-JGVFFNPUSA-N (4R,5S)-dethiobiotin Chemical compound C[C@@H]1NC(=O)N[C@@H]1CCCCCC(O)=O AUTOLBMXDDTRRT-JGVFFNPUSA-N 0.000 claims 2
- 125000006686 (C1-C24) alkyl group Chemical group 0.000 claims 2
- 101001036171 Paenibacillus lautus Endoglucanase A Proteins 0.000 claims 2
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 claims 2
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 claims 2
- 125000004400 (C1-C12) alkyl group Chemical group 0.000 claims 1
- 101150012579 ADSL gene Proteins 0.000 claims 1
- 241000258740 Abia Species 0.000 claims 1
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 102100020775 Adenylosuccinate lyase Human genes 0.000 claims 1
- 108700040193 Adenylosuccinate lyases Proteins 0.000 claims 1
- 241001093575 Alma Species 0.000 claims 1
- 108010039224 Amidophosphoribosyltransferase Proteins 0.000 claims 1
- 241000252073 Anguilliformes Species 0.000 claims 1
- 101100188552 Arabidopsis thaliana OCT3 gene Proteins 0.000 claims 1
- 235000016068 Berberis vulgaris Nutrition 0.000 claims 1
- 241000335053 Beta vulgaris Species 0.000 claims 1
- 101100086716 Caenorhabditis elegans ran-3 gene Proteins 0.000 claims 1
- 101710098119 Chaperonin GroEL 2 Proteins 0.000 claims 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims 1
- 244000089409 Erythrina poeppigiana Species 0.000 claims 1
- 244000287680 Garcinia dulcis Species 0.000 claims 1
- 244000301682 Heliotropium curassavicum Species 0.000 claims 1
- 235000015854 Heliotropium curassavicum Nutrition 0.000 claims 1
- 102100034184 Macrophage scavenger receptor types I and II Human genes 0.000 claims 1
- 101710134306 Macrophage scavenger receptor types I and II Proteins 0.000 claims 1
- 241000286819 Malo Species 0.000 claims 1
- 101000867030 Myxine glutinosa Homeobox protein engrailed-like B Proteins 0.000 claims 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 claims 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 claims 1
- 102000010292 Peptide Elongation Factor 1 Human genes 0.000 claims 1
- 108010077524 Peptide Elongation Factor 1 Proteins 0.000 claims 1
- 235000014676 Phragmites communis Nutrition 0.000 claims 1
- 241000269435 Rana <genus> Species 0.000 claims 1
- 235000009776 Rathbunia alamosensis Nutrition 0.000 claims 1
- 241000220317 Rosa Species 0.000 claims 1
- 229920001800 Shellac Polymers 0.000 claims 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 claims 1
- 125000002947 alkylene group Chemical group 0.000 claims 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 claims 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 claims 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 claims 1
- 210000005069 ears Anatomy 0.000 claims 1
- 238000005430 electron energy loss spectroscopy Methods 0.000 claims 1
- 238000000291 inelastic electron tunnelling spectroscopy Methods 0.000 claims 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 claims 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 claims 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 claims 1
- 239000003607 modifier Substances 0.000 claims 1
- 229910052754 neon Inorganic materials 0.000 claims 1
- GKAOGPIIYCISHV-UHFFFAOYSA-N neon atom Chemical compound [Ne] GKAOGPIIYCISHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 claims 1
- 230000001012 protector Effects 0.000 claims 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 claims 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 claims 1
- XOOUIPVCVHRTMJ-UHFFFAOYSA-L zinc stearate Chemical compound [Zn+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O XOOUIPVCVHRTMJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 abstract description 29
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 abstract description 27
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Chemical class Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 12
- 238000000746 purification Methods 0.000 abstract description 12
- 102100037435 Antiviral innate immune response receptor RIG-I Human genes 0.000 abstract description 7
- 101710127675 Antiviral innate immune response receptor RIG-I Proteins 0.000 abstract description 7
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 43
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 40
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 39
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 34
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 30
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 26
- UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N triphosphoric acid Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000002585 base Substances 0.000 description 17
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 16
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 14
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 13
- 235000011180 diphosphates Nutrition 0.000 description 13
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 13
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 13
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 13
- HWCKGOZZJDHMNC-UHFFFAOYSA-M tetraethylammonium bromide Chemical compound [Br-].CC[N+](CC)(CC)CC HWCKGOZZJDHMNC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 13
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-N diphosphoric acid Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(O)=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 10
- 238000009739 binding Methods 0.000 description 10
- 239000000047 product Substances 0.000 description 10
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 10
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 10
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 9
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 9
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 8
- 101001068640 Nicotiana tabacum Basic form of pathogenesis-related protein 1 Proteins 0.000 description 8
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 8
- 239000013583 drug formulation Substances 0.000 description 8
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 8
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 8
- WHTVZRBIWZFKQO-AWEZNQCLSA-N (S)-chloroquine Chemical compound ClC1=CC=C2C(N[C@@H](C)CCCN(CC)CC)=CC=NC2=C1 WHTVZRBIWZFKQO-AWEZNQCLSA-N 0.000 description 7
- 102100020932 Putative protein RIG Human genes 0.000 description 7
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 7
- 229960003677 chloroquine Drugs 0.000 description 7
- WHTVZRBIWZFKQO-UHFFFAOYSA-N chloroquine Natural products ClC1=CC=C2C(NC(C)CCCN(CC)CC)=CC=NC2=C1 WHTVZRBIWZFKQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- AZSFNUJOCKMOGB-UHFFFAOYSA-K cyclotriphosphate(3-) Chemical compound [O-]P1(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])(=O)O1 AZSFNUJOCKMOGB-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 7
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 7
- 125000002264 triphosphate group Chemical class [H]OP(=O)(O[H])OP(=O)(O[H])OP(=O)(O[H])O* 0.000 description 7
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N Methylamine Chemical compound NC BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000004721 Polyphenylene oxide Substances 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 6
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 229920000570 polyether Polymers 0.000 description 6
- FPGGTKZVZWFYPV-UHFFFAOYSA-M tetrabutylammonium fluoride Chemical compound [F-].CCCC[N+](CCCC)(CCCC)CCCC FPGGTKZVZWFYPV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 125000002704 decyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 5
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 4
- BVOITXUNGDUXRW-UHFFFAOYSA-N 2-chloro-1,3,2-benzodioxaphosphinin-4-one Chemical compound C1=CC=C2OP(Cl)OC(=O)C2=C1 BVOITXUNGDUXRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 4
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 4
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 4
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 4
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 238000010549 co-Evaporation Methods 0.000 description 4
- MWKFXSUHUHTGQN-UHFFFAOYSA-N decan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCO MWKFXSUHUHTGQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DIOQZVSQGTUSAI-UHFFFAOYSA-N decane Chemical compound CCCCCCCCCC DIOQZVSQGTUSAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 4
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 4
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 description 4
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 4
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 3
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 description 3
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N ammonia Natural products N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 3
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 3
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 3
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 3
- AFQIYTIJXGTIEY-UHFFFAOYSA-N hydrogen carbonate;triethylazanium Chemical compound OC(O)=O.CCN(CC)CC AFQIYTIJXGTIEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 3
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 3
- 238000001869 matrix assisted laser desorption--ionisation mass spectrum Methods 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 3
- 229920000724 poly(L-arginine) polymer Polymers 0.000 description 3
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 3
- 238000007142 ring opening reaction Methods 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 3
- MCTWTZJPVLRJOU-UHFFFAOYSA-N 1-methyl-1H-imidazole Chemical compound CN1C=CN=C1 MCTWTZJPVLRJOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PEHVGBZKEYRQSX-UHFFFAOYSA-N 7-deaza-adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1C=CN2 PEHVGBZKEYRQSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N Guanosine Chemical group C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 2
- 101000669402 Homo sapiens Toll-like receptor 7 Proteins 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 108060004795 Methyltransferase Proteins 0.000 description 2
- BVIAOQMSVZHOJM-UHFFFAOYSA-N N(6),N(6)-dimethyladenine Chemical compound CN(C)C1=NC=NC2=C1N=CN2 BVIAOQMSVZHOJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000026279 RNA modification Effects 0.000 description 2
- 108091081021 Sense strand Proteins 0.000 description 2
- 102100039390 Toll-like receptor 7 Human genes 0.000 description 2
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical compound O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 2
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 2
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 2
- RWGFKTVRMDUZSP-UHFFFAOYSA-N cumene Chemical compound CC(C)C1=CC=CC=C1 RWGFKTVRMDUZSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 2
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 description 2
- 150000004985 diamines Chemical class 0.000 description 2
- 150000002009 diols Chemical class 0.000 description 2
- 239000001177 diphosphate Substances 0.000 description 2
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J diphosphate(4-) Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 2
- 229940093499 ethyl acetate Drugs 0.000 description 2
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 2
- IKGLACJFEHSFNN-UHFFFAOYSA-N hydron;triethylazanium;trifluoride Chemical compound F.F.F.CCN(CC)CC IKGLACJFEHSFNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N hydroxyacetaldehyde Natural products OCC=O WGCNASOHLSPBMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 2
- 238000009830 intercalation Methods 0.000 description 2
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 238000000816 matrix-assisted laser desorption--ionisation Methods 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- UQDUPQYQJKYHQI-UHFFFAOYSA-N methyl laurate Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)OC UQDUPQYQJKYHQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000004712 monophosphates Chemical class 0.000 description 2
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 2
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 2
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 2
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 2
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 2
- 239000002342 ribonucleoside Substances 0.000 description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 2
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 2
- 238000011191 terminal modification Methods 0.000 description 2
- CIHOLLKRGTVIJN-UHFFFAOYSA-N tert‐butyl hydroperoxide Chemical compound CC(C)(C)OO CIHOLLKRGTVIJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IMFACGCPASFAPR-UHFFFAOYSA-N tributylamine Chemical class CCCCN(CCCC)CCCC IMFACGCPASFAPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FRXCPDXZCDMUGX-UHFFFAOYSA-N tridecane-1,1-diamine Chemical compound CCCCCCCCCCCCC(N)N FRXCPDXZCDMUGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000004169 (C1-C6) alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- XAVCIAWEOARHJO-UHFFFAOYSA-N 1,2,3-benzodioxaphosphinin-4-one Chemical compound C1=CC=C2C(=O)POOC2=C1 XAVCIAWEOARHJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OAYXUHPQHDHDDZ-UHFFFAOYSA-N 2-(2-butoxyethoxy)ethanol Chemical compound CCCCOCCOCCO OAYXUHPQHDHDDZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CRYCZDRIXVHNQB-UHFFFAOYSA-N 2-amino-8-bromo-3,7-dihydropurin-6-one Chemical compound N1C(N)=NC(=O)C2=C1N=C(Br)N2 CRYCZDRIXVHNQB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VDBAMVKTDUCLPZ-UHFFFAOYSA-N 2-chloro-4h-1,3,2$l^{5}-benzodioxaphosphinine 2-oxide Chemical compound C1=CC=C2OP(Cl)(=O)OCC2=C1 VDBAMVKTDUCLPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001731 2-cyanoethyl group Chemical group [H]C([H])(*)C([H])([H])C#N 0.000 description 1
- GHCZTIFQWKKGSB-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid;phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O GHCZTIFQWKKGSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000006321 2-propynyl amino group Chemical group [H]C#CC([H])([H])N([H])* 0.000 description 1
- DDFHBQSCUXNBSA-UHFFFAOYSA-N 5-(5-carboxythiophen-2-yl)thiophene-2-carboxylic acid Chemical compound S1C(C(=O)O)=CC=C1C1=CC=C(C(O)=O)S1 DDFHBQSCUXNBSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AYXZIZMZXAORLO-UFLZEWODSA-N 5-[(3as,4s,6ar)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoic acid;1-hydroxypyrrolidine-2,5-dione Chemical class ON1C(=O)CCC1=O.N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 AYXZIZMZXAORLO-UFLZEWODSA-N 0.000 description 1
- LQLQRFGHAALLLE-UHFFFAOYSA-N 5-bromouracil Chemical compound BrC1=CNC(=O)NC1=O LQLQRFGHAALLLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JXLJWVYXLXLEOY-UHFFFAOYSA-N 5-chloro-1,3,2-benzodioxaphosphinin-4-one Chemical compound O1POC(=O)C2=C1C=CC=C2Cl JXLJWVYXLXLEOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091027075 5S-rRNA precursor Proteins 0.000 description 1
- CKOMXBHMKXXTNW-UHFFFAOYSA-N 6-methyladenine Chemical compound CNC1=NC=NC2=C1N=CN2 CKOMXBHMKXXTNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LOSIULRWFAEMFL-UHFFFAOYSA-N 7-deazaguanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1CC=N2 LOSIULRWFAEMFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MSSXOMSJDRHRMC-UHFFFAOYSA-N 9H-purine-2,6-diamine Chemical compound NC1=NC(N)=C2NC=NC2=N1 MSSXOMSJDRHRMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000882 C2-C6 alkenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003601 C2-C6 alkynyl group Chemical group 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 101150105088 Dele1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000802894 Dendroaspis angusticeps Fasciculin-2 Proteins 0.000 description 1
- 101100234002 Drosophila melanogaster Shal gene Proteins 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150089023 FASLG gene Proteins 0.000 description 1
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M Fluoride anion Chemical compound [F-] KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 238000010934 O-alkylation reaction Methods 0.000 description 1
- XFPAAZBICAZHPO-UHFFFAOYSA-N OP(O)(=O)OP(=O)(O)OP(=O)(O)O.OP(O)(=O)OP(=O)(O)OP(=O)(O)O Chemical compound OP(O)(=O)OP(=O)(O)OP(=O)(O)O.OP(O)(=O)OP(=O)(O)OP(=O)(O)O XFPAAZBICAZHPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YMGWFZKTJHQTLC-UHFFFAOYSA-N OP(O)(O)=S.OP(O)(S)=S Chemical compound OP(O)(O)=S.OP(O)(S)=S YMGWFZKTJHQTLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001377010 Pila Species 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 108091030071 RNAI Proteins 0.000 description 1
- 235000015076 Shorea robusta Nutrition 0.000 description 1
- 244000166071 Shorea robusta Species 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N Thiophosphoric acid Chemical class OP(O)(S)=O RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000002689 Toll-like receptor Human genes 0.000 description 1
- 108020000411 Toll-like receptor Proteins 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- QNEPTKZEXBPDLF-JDTILAPWSA-N [(3s,8s,9s,10r,13r,14s,17r)-10,13-dimethyl-17-[(2r)-6-methylheptan-2-yl]-2,3,4,7,8,9,11,12,14,15,16,17-dodecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl] carbonochloridate Chemical compound C1C=C2C[C@@H](OC(Cl)=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 QNEPTKZEXBPDLF-JDTILAPWSA-N 0.000 description 1
- ZAKOWWREFLAJOT-ADUHFSDSSA-N [2,5,7,8-tetramethyl-2-[(4R,8R)-4,8,12-trimethyltridecyl]-3,4-dihydrochromen-6-yl] acetate Chemical group CC(=O)OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C ZAKOWWREFLAJOT-ADUHFSDSSA-N 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 238000007259 addition reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N adenyl group Chemical group N1=CN=C2N=CNC2=C1N GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012300 argon atmosphere Substances 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 230000003416 augmentation Effects 0.000 description 1
- 125000000852 azido group Chemical group *N=[N+]=[N-] 0.000 description 1
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 1
- GCSVCUMDOQKEMT-UHFFFAOYSA-N butan-1-amine;hydrofluoride Chemical compound [H+].[F-].CCCCN GCSVCUMDOQKEMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000001767 cationic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000004700 cellular uptake Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 description 1
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 230000037029 cross reaction Effects 0.000 description 1
- 150000001923 cyclic compounds Chemical class 0.000 description 1
- ZPWOOKQUDFIEIX-UHFFFAOYSA-N cyclooctyne Chemical compound C1CCCC#CCC1 ZPWOOKQUDFIEIX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000172 cytosol Anatomy 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 239000005549 deoxyribonucleoside Substances 0.000 description 1
- 238000009795 derivation Methods 0.000 description 1
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N diethylamine Chemical compound CCNCC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940028356 diethylene glycol monobutyl ether Drugs 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 238000007599 discharging Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- GHLKSLMMWAKNBM-UHFFFAOYSA-N dodecane-1,12-diol Chemical compound OCCCCCCCCCCCCO GHLKSLMMWAKNBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000890 drug combination Substances 0.000 description 1
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 1
- 239000012039 electrophile Substances 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002964 excitative effect Effects 0.000 description 1
- 230000005281 excited state Effects 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000001125 extrusion Methods 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 239000000834 fixative Substances 0.000 description 1
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000003349 gelling agent Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003827 glycol group Chemical group 0.000 description 1
- 239000012456 homogeneous solution Substances 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 description 1
- 125000001165 hydrophobic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000005965 immune activity Effects 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 238000012744 immunostaining Methods 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 229910001411 inorganic cation Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000000752 ionisation method Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 239000010985 leather Substances 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000001840 matrix-assisted laser desorption--ionisation time-of-flight mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002032 methanolic fraction Substances 0.000 description 1
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 1
- YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N methylphosphonic acid Chemical compound CP(O)(O)=O YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- ISRXMEYARGEVIU-UHFFFAOYSA-N n-methyl-n-propan-2-ylpropan-2-amine Chemical compound CC(C)N(C)C(C)C ISRXMEYARGEVIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001821 nucleic acid purification Methods 0.000 description 1
- 239000012038 nucleophile Substances 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 125000001477 organic nitrogen group Chemical group 0.000 description 1
- SJGALSBBFTYSBA-UHFFFAOYSA-N oxaziridine Chemical compound C1NO1 SJGALSBBFTYSBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- JCGNDDUYTRNOFT-UHFFFAOYSA-N oxolane-2,4-dione Chemical compound O=C1COC(=O)C1 JCGNDDUYTRNOFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 150000002972 pentoses Chemical class 0.000 description 1
- 210000004303 peritoneum Anatomy 0.000 description 1
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 150000004713 phosphodiesters Chemical class 0.000 description 1
- SWFDTFBWXCNRGN-UHFFFAOYSA-N phosphonato phosphate;tributylazanium Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O.CCCC[NH+](CCCC)CCCC.CCCC[NH+](CCCC)CCCC.CCCC[NH+](CCCC)CCCC.CCCC[NH+](CCCC)CCCC SWFDTFBWXCNRGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PTMHPRAIXMAOOB-UHFFFAOYSA-L phosphoramidate Chemical compound NP([O-])([O-])=O PTMHPRAIXMAOOB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 150000004040 pyrrolidinones Chemical class 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 125000000548 ribosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- IXGZXXBJSZISOO-UHFFFAOYSA-N s-(2-phenylacetyl)sulfanyl 2-phenylethanethioate Chemical compound C=1C=CC=CC=1CC(=O)SSC(=O)CC1=CC=CC=C1 IXGZXXBJSZISOO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000009919 sequestration Effects 0.000 description 1
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 1
- 238000004513 sizing Methods 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000010183 spectrum analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 125000001981 tert-butyldimethylsilyl group Chemical group [H]C([H])([H])[Si]([H])(C([H])([H])[H])[*]C(C([H])([H])[H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000041 toxicology testing Toxicity 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 229940035893 uracil Drugs 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
- C07H21/02—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids with ribosyl as saccharide radical
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
- A61K31/713—Double-stranded nucleic acids or oligonucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
- A61K9/0021—Intradermal administration, e.g. through microneedle arrays, needleless injectors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
- C07H1/02—Phosphorylation
- C07H1/04—Introducing polyphosphoric acid radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/111—General methods applicable to biologically active non-coding nucleic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
- C12N15/1137—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against enzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/117—Nucleic acids having immunomodulatory properties, e.g. containing CpG-motifs
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/10—Type of nucleic acid
- C12N2310/17—Immunomodulatory nucleic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/31—Chemical structure of the backbone
- C12N2310/315—Phosphorothioates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
- C12N2310/321—2'-O-R Modification
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/35—Nature of the modification
- C12N2310/351—Conjugate
- C12N2310/3513—Protein; Peptide
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/35—Nature of the modification
- C12N2310/351—Conjugate
- C12N2310/3515—Lipophilic moiety, e.g. cholesterol
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/35—Nature of the modification
- C12N2310/351—Conjugate
- C12N2310/3517—Marker; Tag
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/35—Nature of the modification
- C12N2310/352—Nature of the modification linked to the nucleic acid via a carbon atom
- C12N2310/3527—Other alkyl chain
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/35—Nature of the modification
- C12N2310/353—Nature of the modification linked to the nucleic acid via an atom other than carbon
- C12N2310/3533—Halogen
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2320/00—Applications; Uses
- C12N2320/30—Special therapeutic applications
- C12N2320/32—Special delivery means, e.g. tissue-specific
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Virology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Organic Insulating Materials (AREA)
- Electric Propulsion And Braking For Vehicles (AREA)
Abstract
يتعلق الاختراع الحالي باوليجونيكلوتيدات oligonucleotides معدلة مع تراي فوسفات triphosphate جديدة التي قد تعمل كمركبات ترابطية RIG-I جين قابل للحث inducible gene بحمض ريتانيلي retinoid acid الشكل I ، بالإضافة إلى طرق جديدة تتيح التخليق والتنقية بإنتاجية عالية ونقاء مناسبين للتطبيقات الدوائية. شكل 1.
Description
_ \ —_ جديدة وطرق إنتاجها RIG] مركبات ترابطية
Novel احونك Ligands and Methods for Producing Them الوصف الكامل خلفية الاختراع ان هذا الطلب عبارة عن طلب جزئي من الطلب رقم 016716609146 والذي تم ايداعه في المملكة العربية السعودية بتاريخ ١776/6/5 ه ؛ الموافق © .١٠٠/7/ يتعلق الاختراع الحالي أوليجو نيوكليوتيدات oligonucleotides معدلة مع تراي فوسفات triphosphate © جديدة قد تعمل كمركبات ترابطية (pa) RIG-T قابل للحث inducible gene ( الشكل retinoid acid il) بحمض بالإضافة إلى طرق جديدة تتيح التخليق والتنقية بإنتاجية عالية ونقاء مناسبين للتطبيقات الدوائية. إن 25-34 ,31 ,2009 RNAs aa Schlee et al., Immunity, (أحماض 5'-O-triphosphate تحمل جزءِ (blunt-ended) مزدوجة الجديلة ممسوحة (ribonucleic .416-١ helicase lL.) على واحدة من الجدائل التي تعمل كمثيرات فعالية للجهاز المناعي ٠ (dull هناك حاجة لتوفير طريقة بسيطة وفعالة لتحضير oligonucleotides معدلة مع triphosphate بإنتاجية عالية؛ مناسبة للتطبيقات الدوائية. يعرف جيدا في الفن اقتران مجموعات تراي فوسفات triphosphate أو مماثلاتها مع مجموعة Ludwig J. et al., J. Org. Chem., 1989, اكتشف .nucleosidic من مركبات 5'-OH من 5'-O-triphosphates محلول لتحضير triphosphorylation طريقة 54, 631-635 ١ 2-chloro-4H-1,3,2-benzodioxaphosphorin—4- ومماثلاته باستخدام nucleosides Gaur R.K. et al.,1992, Tetrahedron يصف .phosphitylating كعامل one Letters, 33, 3301-3304 استخدام الطريقة المذكورة على طور صلب لتخليق -2-0 methylribonucleoside 5'-O-triphosphates ومماثلاته 00-110. تكشف براءة الاختراع ٠ الأمريكية رقم 1900708 Yo عن تخليق طور صلب من nucleoside 5'-O-
د معدلة كمركبات مضادة فيروسيا محتملة وتكشف براءات الاختراع الأمريكية أرقام 7/215 155/770 و ١/1507 0لا عن مماثلات triphosphate من nucleosides مع تعديلات في السكرء قاعدة نيتروجينية (nucleobase) وفي كيان triphosphate يصف الطلب الدولي رقم 97/401849 طريقة لإنتاج RNA مغطى أو جزيئات ممائل RNA © حيث يتفاعل RNA أو oligonucleotide مثيل RNA مع عامل Ji phosphitylating -2 chloro-4H-1,3,2-benzodioxaphosphorin-4-one أو مشتق مستبدل مع حلقة من هذا. يتفاعل المركب الوسطي الناتج مع phosphate أو pyrophosphate أو ملح من ذلك؛ يتأكسد أو ينحل مائيا. يغطى triphosphorylated RNA i diosphorylated RNA أو ممائل RNA بالتفاعل مع m7G diphosphate «m7G triphosphate أو 076 monophosphate ٠ منشط أو ممائل. Cha الطلب الدولي (78 004/0600 مماثلات 019000000160006 مثيرة للمناعة تحتوي على أجزاء oOligophosphate معدلة وطرق تحضير هذه المركبات. هذه الطريقة تتضمن تخليق oligonucleotide على dla dla تفاعل النيكلوتيد (nucleotide) عند الطرف '5 من oligonucleotide مع عامل 00050010/18109_مثل 2-chloro-4H-1,3,2-benzodioxaphosphorin-4-one ١ في مذيب مناسب وفي وجود «sald تفاعل pyrophosphate z= Pphosphitylated oligonucleotide أو ممائل «pyrophosphate أكسدة oligonucleotide مع عامل أكسدة abl حماية oligonucleotide لإعطاء oligonucleotide معدل مع triphosphate أو ممائل triphosphate إن الارتحال الكهربي بهلام Polyacrylamide كما هو مستعمل في الطلب الدولي رقم 91/401590 يكون قابل للتطبيق فقط لعمليات فصل صغيرة النطاق. تكون قوة انحلال التحليل الكروماتوجرافي لتبادل .| الأيون لمنتجات | «5'-monophosphorylated 5'-triphosphorylated (5'-diphosphorylated من oligoribonucleotides أطول محدودة. إن شروط تغيير الطبيعة المطلوية تجعل الفصل Lage شاقة ) Sproat, 1999; Zlatev, 0؛ الطلب الدولي رقم ٠٠005/07007481 علاوة على هذاء تتلوث المنتجات عادة مع Yo ترتيبات
_ _ diphosphates 3 monophosphates yg 0-2 0-1 الخاصة بهم تتسبب في نقاء غير كافي. بتحديد حساسية البناءات الطرفية الدقيقة للمركبات الترابطية (RIGHT تكون طرق التنقية هذه غير مُثلى للتطبيقات الفارماكولوجية. هكذاء هناك dala كبيرة إلى triphosphorylated oligonucleotides جديدة ومماثلاتهاء © تحديدا لها انتقائية RIG] بالإضافة إلى طرق لتحضير هذه المركبات. الوصف العام للاختراع لذلك يتعلق الاختراع الحالي بمركبات S'-triphosphorylated oligonucleotides جديدة ومماثلاتها Al يمكن إنتاجها على نطاقات واسعة للاستخدام الإكلينيكي المحتمل بالإضافة إلى طريقة تحضير ملائمة لهذه 00001600065ا0. علاوة على Ja توصف تعديلات oligonucleotides ٠ التى (Sa تحافظ على و/أو تحسن اتتقائية 86-١ لأجل oligonucleotides أو تعزز ثباتهم الكيميائي. هكذاء؛ يتعلق جانب أول من الاختراع الحالي بمركب oligonucleotide معدل من الصيغة (I) Ys hE hs Z—Y——X—— 7 —W;— 7 — W;— 7 —W:—ON Vi Vv, V, حيث كل من VI] 1/3 و5 على حدة فى كل حالة ينتقى من 0؛ ¢Se 3S ١٠ كل من V2 4/ و6/ على حدة فى كل حالة ينتقى من (SR1 (SH (OR1 (OH ل «(NH2 علا N(R1)2 و «BH3-M+ W1 هو 0 أو 58 W2 هو NH (S (O أو «(NR2 3 5 وف ي CHHal «CH2 (NR2 (NH أو «C(Hal)2 TEN Y
El أو 62-6 acyl «C2-6 alkynyl <C2-6 alkenyl 61-6 alkyl من R33 42 (R1 ينتقى ‘ كل منهم يستبدل اختياريا » dy د de gana المرتبطة معهماء N أو حيث اثنين من 1+ قد يشكلان حلقة معا مع ذرة «(cation) هو كاتيون M+ أو O (NR3 (NH هو X 2
Hof يمثل ملحق التقاط Z يشمل ؛ oligonucleotide (fiw ON X رابطة أو وصلة تصل ملحق الالتقاط مع Jia Y كتل على الأقل لبناء نيكلوتيد أو مماثل نيكلوتيد. في سياق التطبيق الحالي على مركبات تشمل عدد وافرء "oligonucleotide يشتمل المصطلح على سبيل المثال ؛ كتل على الأقل لبناء نيكلوتيد أو مماثل نيكلوتيد. بصورة مفضلة؛ يشتمل ٠ كتلة بناء. قد تشتمل كتل بناء النيكلوتيد أو £4-Y Die ٠٠0١-١ على oligonucleotide متصلة بواسطة Nucleoside (fila أو nucleoside ممائل النيكلوتيد على وحدات فرعية الفرعية تتضمن وحدات nucleoside وصلات وحدة فرعية داخلية. إن وحدات فرعية و/أو مماثلات من ذلك؛ ribonucleoside وحدات «dae yd deoxyribonucleoside سكر و/أو قاعدة نيتروجينية. إضافياء قد تشتمل ae dae nucleoside تحديدا مماثلات ١ على تعديلات كتل بناء غير نيكلوتيدية و/أو تعديلات طرفية إضافية و/أو oligonucleotides تعديلات سلسلة جانبية. في الوحدات الفرعية المعدلة مع سكر المفضلة يستبدل 201 من الوحدة الفرعية (NHR (NH2 (SR (SH (lla (R (OR بواسطة مجموعة تنتقى من ribonucleoside وهالو هو ا 62-6 alkynyl أو 62-6 alkenyl 01-6 alkyl sa R cus «CN أو NR2 ٠ مع Die «ribose مفضلة إضافية؛ قد يستبدل Su أو ا. في وحدات فرعية معدلة مع Br (Cl قد يتحد تعديل السكر هذا مع arabinose Jie pentose على سبيل المثال «AT Sa 2- كما فى الوحدات الفرحية ode] كما هو موصوف 2-OH تعديلات ب
-؟- .fluoroarabinonucleoside أيضا تتضمن وحدات فرعية معدلة مع Su مفضلة إضافية Nucleosides محتبسة (LNA) (locked nucleosides) أو (UNA) 2' 3'-seco— nucleosides في كتل بناء NUCleosidic معدلة مع قاعدة نيتروجينية مفضلة؛ تستخدم قاعدة نيتروجينية غير معيارية؛ مثلا © غير طبيعية الوجود؛ بدلا من قاعدة نيتروجينية معيارية. إن الأمثلة على قواعد نيتروجينية غير معيارية هي uracils أو 5 معدلة عند الموضع © is الا2-300100(0100)-5 adenines ¢2,6-diaminopurine hypoxanthine ¢5-bromouracil 4 uracil أو معدلة عند الموضع «deazanucleosides ¢8-bromoguanine Mis (A مثلا 7-deazaguanine أو ¢7-deazaadenine ٠ أو قواعد نيتروجينية O-alkylated وقواعد نيتروجينية (N-alkylated مثلا (N6-methyladenine أو .N6,N6—-dimethyladenine إن مماثلات القاعدة النيتروجينية المناسبة الإضافية قد تنتقى من مماثلات قاعدة نيتروجينية .S—nitroindole (ic dele إن الوصلة داخل الوحدة الفرعية بين الوحدات الفرعية قد تكون وصلة phosphodiester أو Vo وصلة (dae مثالا «methylphosphonate (phosphorodithioate (phosphorothioate <boranophosphate (phosphoramidate أو وصلة معدلة أخرى معروفة للماهر في الفن. قد ينتقى oligonucleotide من ribonucleotides (deoxyribonucleotides ومماثلات .oligonucleotide قد Jai كيميائيا ribonucleotides (deoxyribonucleotides و/أو مماثلات oligonucleotide عند الوحدة الفرعية nucleoside و/أو ribose _من_المماثل؛ ribonucleotide (deoxyribonucleotide ٠ و/أو 0000106ا0. قد تشتمل مماثلات desoxyribonucleotides أو ribonucleotides على واحدة على الأقل من الوحدة الفرعية desoxyribonucleoside أو ribonucleoside ووحدة فرعية 70016051010 معدلة واحدة على الأقل و/أو وصلة داخل الوحدة الفرعية معدلة واحدة على الأقل؛ مثلا كما هو موصوف أعلاه. قد تتكون مماثلات Oligonucleotide بالكامل من الوحدات الفرعية 71616051016 المعدلة. ا
١ _ قد يكون Oligonucleotide جزيء فردي الجديلة أو جزيء مزدوج الجديلة. قد تشتمل oligonucleotides مزدوجة الجديلة على جدائل تكميلية بالكامل أو جزئيا. قد تكون الجزيئات مزدوجة الجديلة ممسوحة أو تشتمل على جزء متدلي واحد على الأقل؛ مثلا gia متدلي 5 أو '3. يفضل أن تقع الأجزاء المتدلية؛ إذا وجدت؛ عند الطرف البعيد من الجزيء (بالنسبة لمجموعة (triphosphate Jil [triphosphate © قد تشتمل oligonucleotides مزدوجة الجديلة على بناء على شكل دبوس Cus «jad يغلق المضاعف (duplex) بواسطة حلقة عند الطرف البعيد منها (بالنسبة لمجموعة (triphosphate Jil [triphosphate قد تشتمل الحلقة على JS بناء نيكلوتيد و/أو غير نيكلوتيد» على سبيل المثال كتل بناء تعتمد على diol مثل أجزاء glycol 606/إ610؛ متلا tri(ethylene)glycol أو propane- thexa(ethylene)glycol ٠ اونتك-1,3؛ ¢«dodecane-1,12-diol أو 3,12-dioxa—-7,8—dithiatetradecane—1,14- .diol فى تجسيد مفضل؛ تكون الجزيئات مزدوجة الجديلة ممسوحة؛ تحديدا عند الطرف الأدنى من ذلك (بالنسبة لمجموعة (fils [triphosphate 11816م11(0005). وسائل تنفيذ الاختراع Vo طبقا لتجسيد مفضل بصفة خاصة يكون oligonucleotide مزدوج الجديلة؛» حيث يكون لكل جديلة من الجديلة المزدوجة طول بمقدار ١9 نيكلوتيد على الأقل. يفضل بصفة خاصة 01000006 مزدوج الجديلة الممسوح بهذا الطول. طبقا لتجسيد مفضل إضافي يكون لكل جديلة من oligonucleotide طول بمقدار على الأقل ١9 إلى ov نيكلوتيد» ١9 إلى ٠١ ٠١ cans إلى YY cana Yo إلى YA نيكلوتيد؛ يفضل بصفة خاصة 77 إلى 76 نيكلوتيد. ٠ .قد يشتمل oligonucleotide هذا على تعديلات طرفية و/أو سلسلة جانبية إضافية؛ Mie كيانات مستهدفة تخص لخلية مرتبطة تساهميا dee قد تعزز تلك الكيانات الامتصاص الخلوي والامتصاص الخاص بالخلية وتتضمن؛ على سبيل المثال ليبيدات (lipids) فيتامينات (vitamins) هرمونات؛ ببتيدات (10865م68)؛ oligosaccharides ومماثلات لذلك. قد ترتبط
— A—
الكيانات المستهدفة مثلا مع كتل oly قواعد نيتروجينية أو غير nucleotidic معدلة بواسطة طرق
معروفة للماهر في الفن.
طبقا لتجسيد مفضل فإن التعديلات تعمل على إنشاء و/أو تعزيز انتقائية oligonucleotide تجاه
هدف محدد. فى تجسيد مفضل تحديدا Lan أو تعزز انتقائية RIG-I لأجل .oligonucleotide © توصف هنا بالتفصيل طرق لتحديد انتقائية 16-١ لأجل oligonucleotide محدد (انظر
. لأمثلة) و/أو تكون معروفة لما هر في الفن f
طبقا لتجسيد مفضل آخر تعمل التعديلات الكيميائية على الحفاظ على أو تعزيز الثبات الكيميائي
لأجل oligonucleotide يعرف الشخص الماهر فى الفن طرق تحديد الثبات الكيميائى لأجل
oligonucleotide محدد. توصف تلك الطرق؛ على سبيل المثال؛ فى الأمثلة.
٠ طبقا لتجسيد مفضل تنتقى التعديلات الكيميائية لأجل oligonucleotide على حدة من المجموعة المشتملة على هلجنة (809608000)؛ تحديدا هلجنة 4,58« 2'-O-alkylation تحديدا «2'-O-methylation و/أو تعديلات phosphorothioate للوصلات داخل النيكلوتيد. إن هلجنة F وتعديلات phosphorothioate تحديدا تزيد من ثبات «oligonucleotide بينما 2-0-0807 ينشئ أو يزيد انتقائية 16-١ لأجل oligonucleotide تكون
methylations ١٠ -2-0 قادرة أيضا على تعديل التولد المناعى لأجل RNA فى تجسيد مفضل فإن oligonucleotide يشتمل فقط على واحدة أو اثنتين من 2'-O-methylations لكل جديلة؛ يفضل أكثر 2'-O-methylation واحدة لكل جديلة. يفضل تحديدا استبدال +-2. عند الموضع '2 من ribose تستبدل مجموعة hydroxyl مع fluoro إن استبدالات 2'-F في RNAs تنتج تحديدا ثبات معزز ضد هضم nuclease
RIGHT قد يزيد استبدال 2-1000 تحديدا الإثارة المناعية المعتمدة على ¢ Ala) تجسيد ٠٠ للوصلات phosphorothioate عامة بتعديلات phosphorothioate تتعلق مركبات (lua داخل النيكلوتيد. التي لها تعديل عند النهاية phosphorothioate تفضل بصفة خاصة المركبات المعدلة مع تستبدل ذرة الأكسجين غير phosphorothioate أثناء تعديل oligonucleotide الطرفية من
ب
q — — المرتبطة من الفوسفات المجسر مع ذرة كبريت في هيكل الحمض النووي. إن هذا الاستبدال يخفض انشقاقية بواسطة nucleases عند هذا الموضع بدرجة كبيرة وينتج ثابت عالي لجديلة الحمض النووي . في تجسيد مفضل بصفة خاصة يوضح oligonucleotide طبقا للاختراع الحالي Fiala cmethylation © تحديدا «2'-O-methylation بالإضافة إلى تعديلات «phosphorothioate تحديدا عند النهاية الطرفية من oligonucleotide إن أنماط التحديد لأجل oligonucleotide تعتمد على ترتيب وطول oligonucleotide ويمكن تحديدها لكل oligonucleotide محدد. سوف يدرك الشخص الماهر في الفن جيدا كيفية shal هذا التحديد. ٠ كما هو مشروح بالفعل أعلاه؛ توصف بالتفصيل في التطبيق Jal طرق تحديد انتقائية 16-١ و/أو ثبات oligonucleotide محدد. يشتمل oligonucleotide من الصيغة (I) أو (IV) على مجموعة [triphosphate ممائل triphosphate فى هذه المجموعة؛ ينتقى كل من ١/3 VI و5/ا على حدة من 0؛ 5 و58. بصورة مفضلة؛ يكون V3 VI و5/ عبارة عن 0. ينتقى كل من V2 4/ و6/٠ في كل حالة Yo على حدة من SRI «SH (ORI OH ا 02لا .BH3 —M+ 3 N(R1)2 «NHR1 بصورة مفضلة»؛ يكون VO 43 V4 V2 عبارة عن OH .قد يكون Rl هو C2-6 1-6 alkyl C2-6 acyl «C2-6 alkynyl alkenyl أو مجموعة دائرية؛ مثلا مجموعة 03-8 ccyclo(hetero)alkyl مجموعة cyclo(hetero)alkenyl 03-8 مجموعة phenyl أو C5- heteroaryl 6« حيث تنتقى الذرات المغايرة من (N © و5. إضافة لهذاء قد يشكل اثنين من R1 ٠ حلقة؛ مثلا dala ذات o أو 1 أعضاء معا مع )8 N المرتبطة معهما. قد يشتمل 1+ La على بدائل مثل هالو مثلا ]» Br «Cl أو اء O(halo)C1-2 alkyl وفي Ala المجموعات الدائرية - ٠. 81001 -2 alkyl قد يكون M+ كاتيون غير عضوي أو عضوي 3 ie كاتيون فلز قلوي أو كاتيون أمونيوم أو أمين.
-١ «=
1 قد تكون © أو 5. بصورة مفضلة؛ يكون WI هو 0. W2 قد يكون NH SO أو 2. بصورة مفضلة؛ يكون W2 هو ©. 3//ا قد يكون (O ى CHHal 0112 (NR2 (NH أو .C(Hal)2 بصورة مفضلة؛ يكون W3 هو 0؛ CH2 أو .CF2 قد ينتقى R2 من مجموعات كما هو موصوف لأجل RT أعلاه. قد يكون Hal هو «Cl F +8 أو .١
2 طبقا لتجسيد مفضل بصفة خاصة يكون W2 W1 V6 V5 V4 V3 V2 V1 وذ//ا هم 0 يفضل أن ترتبط مجموعة triphosphate (ile. [triphosphate مع أطراف من Oligonucleotide بصورة مفضلة؛ ترتبط المجموعة مع أطراف '5 من «oligonucleotide تحديدا مع 5'-OH de gana من سكر الطرف 5 من ذلك.
٠ كما تحدد هناء 2 يمثل gale التقاط Hof يمكن تحديد ملحق الالتقاط Z وظيفيا بواسطة سلسلة من أمثلة معقولة كما هو متمثل أدناه. قد تتمثل القاعدة العامة في: Z يجب أن يتيح تنقية ملائمة ويجب أن يكون قابل للإزالة تحت شروط متوافقة مع متطلبات ثبات PPPRNA سوف يكون الشخص الماهر فى الفن قادرا على تحديد بدون حمل مفرط سواء كان الملحق المحدد يحقق التحديد الوظيفي أم لا. هكذاء يدرك الشخص الماهر في الفن ملحقات الالتقاط cells تحديدا فيما
Yo يتعلق بالأمثلة التفصيلية المعطاة فى التطبيق الحالى. طبقا لتجسيد مفضل ينتقى ملحق الالتقاط Z من متخلف أليفاتى طويل السلسلة؛ شريك من زوج ارتباط عالى الانجذابية غير تساهمى» حاصل كيميائى متفاعل © 4 (NHC2-C24alkyl يكون Q منتقى بصورة مفضلة من «H أحماض أمينية؛ مماثلات حمض أمينى» «C1-C24alkyl يفضل (C12-C24alkyl ببتيدات (peptides) وليبيدات. مع هذاء طبقا لتجسيد مفضل بصفة
.C10 alkyl أي «decyl هو Z خاصة يكون ٠ بصورة تساهمي Lin قادر على التفاعل gla هو Jad طبقا للاختراع Z يكون ملحق الالتقاط لالتقاط J مركبات تشمل ملحق Chat وغير تساهمية مع عامل كاشف للالتقاط تحت شروط تسمح التقاط. بصورة gale من أصناف أخرى؛ التى لا تحتوي على (I) oligonucleotide مثلا
ا
-١١- مفضلة؛ يكون العامل الكاشف للالتقاط هو عامل كاشف مثبت أو عامل كاشف قادر على أن يكون مثبت. alkyl تكون ملحقات الالتقاط المناسبة على سبيل المثال سلسلة طويلة؛ على سبيل المثال متخلفات أو متخلفات octadecyl أليفاتية 08-24؛ يفضل 013-24 يفضل أكثر 613-614 مثل ومشتقات من ذلك. مع هذاء طبقا trityl أو tocopheryl (cholesteryl (Jie ليبيدية/ محبة لليبيد © هو متخلف الا060. في هذه الحالة؛ يمكن التقاط وتنقية Z لتجسيد مفضل بصفة خاصة يكون الملحق على طور صلب بواسطة تحليل كروماتوجرافي طور معكوس triphosphate كيان (hydrophobic أو تحليل كروماتوجرافي بالتفاعل البيني الكاره للماء (RP-HPLC قياسي؛ مثلا كيان lead قد يكون ملحق الالتقاط .(HIC) interaction chromatography) 3- أو متخلف 4-(1H,1H,2H,2H-perfluorodecyl)benzyl مثلا «perfluoroalkyl ٠ على دعامة Jud oligo-triphosphate للالتقاط الخاص لأجل (perfluorooctyl)propyl .Fluorous Technologies, Inc. مثلما متاح تجاريا من Fluorous Affinity أول لزوج ارتباط عالي الانجذابية غير تساهمي؛ clips LEN) Gale قد يكون OAT في تجسيد الذي له انجذابية alas أو مولد hapten desthiobiotin مثل biotin مثل 51000؛ أو مماثل لتر/ جزيء جرامي أو أقل) مع العامل 1-٠١ سبيل المثال ثابت ارتباط بمقدار Je) عالية ٠ الكاشف للالتقاطء الذي يكون شربك تكميلي ثاني لزوج الارتباط العالي الانجذابية؛ مثلا أو جسم مضاد. avidin streptavidin في تجسيد آخر أيضاء قد يكون ملحق الالتقاط شريك أول لزوج ارتباط تساهمي؛ الذي قد يشكل رابطة تساهمية مع العامل الكاشف للالتقاط» التي قد تكون شريك تكميلي ثاني لزوج الارتباط التساهمي»؛ حيث قد تكون الرابطة التساهمية رابطة قابلة للانعكاس أو غير قابلة للانعكاس. في هذا ٠ أو azide مجموعة ie كيان كيميائي متفاعل 2 LEN) قد يكون مكون ملحق canal تتيح التفاعل التساهمي مع عامل كاشف للالتقاط يحتوي على مجموعة متفاعلة تكميلية؛ alkynyl (ما Husigen 3+2 على التوالي» في حالة تفاعل إضافة دائرية azido أو alkynyl مثلا جزء أو شكل متباين من ذلك CU(l) طقطقة (16806000-/10ا0)" الذي يكون محفز مع Jeli aw
— \ \ — يتم تنفيذه بدون أيونات Cu(l) من خلال إطلاق ضغط حلقة Cate في Mie مشتقات .(cyclooctyne إن مثال Z-Y-X الخاص فى هذه الحالة هو .propargylamino في تجسيد آخرء .قد يكون مكون ملحق LEN هو كيان كيميائي يحتوي على مجموعة محبة للنواة إضافية؛ على سبيل المثال مجموعة أمينية ثانية فى عامل كاشف © من نوع NH2-Y-XH قد يستخدم lad بعد نطاق واسع من العوامل الكاشفة > المحبة للإلكترونات المناسبة مثل الكوليسترول» 00100100011316 أو esters نشطة biotin N-hydroxy succinimide لإدخال المجموعة الملحقة بينما يرتبط oligonucleotide مع الطور الصلب بالتالي تتسع دائرة Je la الإلحاق . فى تجسيد مفضل يكون ملحق الالتقاط هو متخلف alkyl طويل السلسلة؛ كيان «perfluoroalkyl alkynyl of azide مجموعة ٠ ملحق التقاط ثاني عند موقع oligonucleotide قد يحمل ¢ Jal) في تجسيد إضافي من الاختراع مختلف؛ مثلا عند الطرف '3. يفضل انتقاء ملحق الالتقاط الأول والثانى بحيث يسمحان بالتنقية بواسطة طريقتين متعامدتين للتمكن من استعادة المادة عالية النقاء بصورة قصوى. على سبيل بينيا مع دعامة delim الالتقاط الأول مجموعة محبة للدهن؛ التي Gale المثال قد يكون الالتقاط الثاني هو 51000؛ الذي يتفاعل بينيا مع gale كروماتوجرافية مناسبة وقد يكون Vo
7 518. قد يتم إدخال ملحق الالتقاط الثاني بصورة تقليدية بإجراء التخليق باستخدام CPG (دعامة زجاجية مضبوطة ((controlled glass support) معدلة لتخليق .oligoribonucleotide Y يمثل رابطة كيميائية of وصلة؛ calkylene Mic تفضل وصلة (Cl-6-alkylene تفضل ٠ أكثر وصلة (C2-5-alkylene أو وصلة caralkylene تشمل اختياريا ذرات مغايرة أو مجموعات تحتوي على ذرة مغايرة 3 Jia ث. يي (NH وحن أو «C=S و/أو تشمل اختياريا روابط C=C أو .C=C طبقا لتجسيد مفضل بصفة خاصة يكون 1 هو رابطة. فى تجسيد مفضل آخر تكون الوصلة هى (polyalkylene oxide يفضل poly—C2-C6- calkylene oxide يفضل أكثر .poly-C2-C3-alkylene oxide قد يكون الرقم المتوسط
— \ —
للوزن الجزيئي للوصلة في حدود من 800-7٠0 جم/ جزيء جرامي؛ يفضل من 450-40 جم/
جزيء جرامي؛ يفضل أكثر من ٠ 4 وه [o> Y جزيء جرامي + قد تكون الوصلة -[
611201144-0-0 مع كون =n ١-١٠؛ يفضل =n ١-2اء يفضل أكثر 0=Y =n ويفضل
jx أيضا =n ©. قد يكون R4 هو H أو الا4اله-01-6. توضح تجسيدات مفضلة إضافية
0 لأجل 7 في الشكل ؛. في تجسيد مفضل يكون RA هو H
طبقا لتجسيد مفضل بصفة (ald
«O NH هو X
Y هو «—K=((CHR1)m-CH2-O)n-R- أو
(O—-(CHR3)M3-CH2)n1-(O-(CHR2)M2-CH2)n2-(O—-(CHR1)m1- 5«CH2)n3- ٠
ا هو 0 51 (NH
كل من aml am 002 و13 على حدة ١ إلى OY يفضل ١ إلى A يفضل أكثر ١ إلى 0
وبفضل أكثر أيضا ١ إلى 3.
كل من «nl in 02 و3 على حدة من صفر إلى Yo يفضل صفر إلى ٠ يفضل أكثر صفر ١ إلى ©؛ ويفضل أكثر أيضا صفر إلى ؛ و
02-6 2-6 alkenyl (C1-6 alkyl (H على حدة هو R33 R2 (Rl يكون كل من
C6-acyl alkynyl -62 أو مجموعة دائرية؛ كل agile يستبدل اختياريا و
هو C2- C6H-acyl »02-6 alkynyl 02-6 alkenyl 01-6 alkyl أو مجموعة
. 2 هو R يستبدل كل منها اختياريا. بصورة مفضلةء يكون oda pila هو 01 Hla R25 41 يكون dle طبقا لتجسيد مفضل بصفة خاصة مع كون 7 كما تحدد ٠
0 و2 n و3 هما .١ يمكن أخذ تجسيد مفضل إضافيا من شكل ؟.
ا
— ¢ \ — طبقا لتجسيد مفضل آخر بما أن 7 كما تحدد أعلاه؛ يكون R33, R2 (Rl هم n2 nly H و3٠ هم A طبقا لتجسيد مفضل يكون X هو K (NH هو Y 3 NH هو (CH2CH20)N مع كون ٠“ كما تحدد ceded حيث يستبدل Lilia) K مع ccholesterol-C(O)— الا أو مشتقات من ذلك. © طبقا لتجسيد مفضل بصفة خاصة لأجل oligonucleotide طبقا للصيغة (ا) يكون X هو NH
NHC2- 4 © «C10 أو لا يفضل C1-Cl2alkyl و2 هو iad) هو Y يكون Of «C1-C24alkyl حمض أمينى» cles أحماض أمينية؛ (H حيث ينتقى © من (C24alkyl
W1 V6 V5 V4 V3 V2 V1 ببتيدات وليبيدات؛ ويكون «C12-C24alkyl يفضل .0 و3//ا هم 2 ٠ طبقا لتجسيد مفضل dla) لأجل oligonucleotide من الصيغة (I) يكون X هو ١لا أو 0؛ يكون ١ هو رابطة؛ و2 هو decyl أو «H ويكون V6 V5 V4 V3 V2 V1] 1/لاء W2 و3//ا هم بصورة مفضلة 0. يتعلق جانب إضافي من الاختراع الحالي بتركيبة دوائية تشمل oligonucleotide معدل كما تحدد هنا . Vo قد تشتمل التركيبة الدوائية طبقا للاختراع Lilia) على مواد حاملة؛ مواد تخفيف؛ و/أو مواد مساعدة مقبولة دوائيا. إن المصطلح sale’ حاملة "(carrier) عند الاستخدام هنا يتضمن مواد حاملة؛ مواد مسوغة و/أو مواد مثبتة تكون غير سامة للخلية أو الكائن الثديي الخاضع له بالجرعات والتركيزات المستخدمة. غالبا ما تكون المواد الحاملة المقبولة فسيولوجيا Ble عن محاليل مثبتة الأس الهيدروجيني أو جسيمات شحمية. تتضمن أمثلة المواد الحاملة المقبولة فسيولوجيا مثبتات للأس ٠ الهيدروجيني مثل الفوسفات» citrate وأحماض عضوية أخرى (مع هذاء بالنسبة للصياغة من الاختراع الحالي» يفضل مثبت الأس الهيدروجيني فوسفات)؛ مضادات أكسدة تتضمن ascorbic lain ae 0 منخفضة الوزن الجزيئي (أقل من ٠١ dea متخلفات)؛ بروتينات Jie ألبومين مصل (serum albumin) جيلاتين أو جلوبيولينات مناعية ¢(immunoglobulins) بوليمرات محبة للماء (hydrophilic polymers) متل polyvinyl pyrrolidone أحماض
اج \ — dou مثل arginine asparagine (glutamine (glycine 4 عصتولا؛ «disaccharides «monosaccharides وكريوهيدراتات أخرى تتضمن Mannose « jsSsla أو cdextrins عوامل تهليم مثل (EDTA سكرء كحولات mannitol Jie أو sorbitol أيونات معاكسة تشكل ملح مثل الصوديوم ؛ و/أو منشطات سطح غير أيونية TWEEN (ic polyethylene ٠ أو polyethylene glycol طبقا لتجسيد مفضل بصفة خاصة يذاب المركب
من الاختراع في ماء مزال التأين معقم. يمكن إعطاء هذه التركيبة و/أو الصياغة طبقا للاختراع إلى كائن بحاجة dg) تحديدا مريض (sel بجرعة كافية لمعالجة الحالات الخاصة بوسائل مناسبة. على سبيل المثال؛ قد تصاغ التركيبة و/أو الصياغة طبقا للاختراع كتركيبة دوائية مع مواد حاملة؛ مواد مخففة و/أو مواد
٠ مساعدة مقبولة دوائيا. قد تتحدد الفعالية والسمية العلاجية طبقا لبروتوكولات قياسية. قد تعطى التركيبة الدوائية جهازياء Die في الغشاء البريتوني؛ في العضل؛ أو في الوريد أو موضعيا مثلا في الأنفء تحت الجلدء فى الأدمة أو داخل القراب. سوف تعتمد جرعة التركيبة و/أو الصياغة المعطاة؛ بالطبع؛ على الكائن المراد معالجته وعلى حالته Jie وزن الكائن» عمر الكائن ونوع وحدة المرض أو الإصابة المراد معالجتهاء أسلوب الإعطاء وحكم الطبيب المعالج.
VO فى تجسيد مفضل تعطى التركيبة الدوائية فى الأدمة. يفضل بصفة خاصة إعطاء التركيبة داخل الجلد من خلال التوشيم؛ الوخز بالإبر الميكرونية و/أو اللصوقات دقيقة الإبرة. يفضل إذابة المركب طبقا للاختراع Mall ويخفف إلى التركيز المرغوب في ماء معقم مزال التأين (ماء (A ثم يطبق على جلد محلوق معقم مع ethanol باستخدام أداة ماصة؛ ثم يتم وشمه على الجلد.
٠ لاللتوشيم» على سبيل المثال» تحقن التركيبة الدوائية المعتمدة على ماء طبقا للاختراع في الأدمة في cals) باستخدام أداة وشم (dub) مزودة pb متعددة (فردية الاستخدام)» طرف إبرة مستدق (مثلا 4- إبرء طرف مستدق فردي الاستخدام). يكون إجراء التوشيم النموذجي كما يلي: بعد نقل التركيبة الدوائية المعتمدة على ماء بواسطة ماصة على الجلد المحلوق المنظف مع ا601800؛ يتم إدخالها في الطرف المستدق لإبرة آلة الوشم
ب yi ١0-٠٠١٠ سبيل المثال» loo lta بوضع طرف الإبرة المستدق الحالي (يعمل عند سرعة هرتز) برفق على قمة قطيرة التركيبة الدوائية المعتمدة على الماء. بمجرد ٠٠١ هرتزء تحديدا امتزاز قطيرة التركيبة الدوائية المعتمدة على الماء بالكامل في طرف الإبرة المستدق الحالي؛ call ويالتالي بقائها بين الإبر الحالية؛ يتحرك الطرف المستدق الحالي برفق جيئة وذهابا على بالضبط مع الجلد. باستخدام هذه 99٠0 بإمساك طرف الإبرة المستدق المملوءة الحالي بزاوية © -5*6 الطريقة» يتم وشم التركيبة الدوائية المعتمدة على الماء بالكامل في الجلد. لمقدار على Al ١5-٠١ من التركيبة الدوائية المعتمدة على ماء فإن هذا يستغرق Aly Saad مساحة جلد بمقدار 4-7 سنتيمتر مريع. إن المنفعة من هذه المعالجة التي تفوق حقن بلعة في الجلد فردي قياسي؛ تتمثل في حقن التركيبة الدوائية المعتمدة على الماء بالتساوي على مساحة
٠ كبيرة من الجلد؛ وبصورة أكثر تساويا وبتقسيم أكثر دقة على النسيج المستهدف: باستخدام طرف مستدق لتسعة إبرة عند ٠٠١ هرتز لمدة ٠١ ثواني» تتضمن هذه الطريقة 90060 حقنة daly الأدمة منتشرة بالتساوي في الجلد المعالج. بالطبع؛ قد ينحرف الشخص الماهر في الفن عن ويعدل الإجراء؛ اعتمادا على المريض أو oa الجسم المراد معالجته. قد يجرى إجراء الوخز بالإبر بصورة مماثلة تقريبا لإجراء الوشم. مع هذاء
Ve مع الوخز بالإبر يستبدل الطرف المستدق لإبرة الوشم بطرف مستدق لإبر دقيقة؛ مما يضمن إعطاء داخل الأدمة أكثر سطحية. Jaw التركيبة الدوائية المعتمدة على ole مبدئيا على جلد محلوق منظف مع ethanol ثم تعطى داخل الجلد باستخدام الطرف المستدق الميكروني؛ بالتمائل مع إجراء الوشم. لا تحتاج جرعة الوخز الميكروني لامتزاز مسبق للتركيبة الدوائية بين إبر الوخز الميكروني.
٠ بصورة إضافية؛ يكون من المتصور أنه يمكن استخدام رقع الإبر الدقيقة المغلفة مع؛ أو المخفية بطريقة «gyal التركيبة الدوائية للتوصيل عبر الأدمة/ داخل الأدمة. يكون لهذا ميزة أن التوصيل داخل الأدمة للتركيبة الدوائية يمكن إجراؤه بأمان بواسطة المتلقي/ المتلقية بذاتهم بدون الحاجة لزيارة المشفى و/أو تدخل التوشيم/ الوخز بالإبر من قبل الطبيب المختص. إن هذا يضفي مرونة بدرجة كبيرة على برامج المعالجة؛ متيحا أنظمة معالجة عالية الخصوصية؛ ألم منخفض مصاحب
Yo للمعالجة؛ وتكلفة معالجة منخفضة. (Sa أن تتكون تلك اللصوقات_من؛ لكن بدون تحديد؛
ق١
لصوقات إبرة دقيقة مذابة أو غير مذابة لتوصيل بلعة عبر f لأدمة في أوقات محددة أو بصورة مستمرة من التركيبة الدوائية. يتعلق جانب آخر من الاختراع all بطريقة لتحضير oligonucleotide طبقا لأي من عناصر الحماية ١-5١ء المشتملة على الخطوات التالية: © (أ) تفاعل مركب من الصيغة )118( pz Ws رلا we Pw, p 1 دولا ياه يي ايح كن la | 1 1 5 ON, W3 (W2 (W1 V6 V4 VS V3 V1 Cua كما تحدد code) حيث يحمى ON بواسطة مجموعة حماية واحدة على الأقل؛ مع عامل أكسدة للحصول على مركب من الصيغة (اا): داهم رلا ولا رالا _ ~ ا > = VZV WON 6 ٠ Cua 1لا ذلك ذلك ON, W3 W2 W1 V6 V4 V2 كما تحدد code) حيث يحمى ON بواسطة مجموعة حماية واحدة على الأقل» (ب) تفاعل مركب من الصيغة (0اا) مع عامل ملحق التقاط من الصيغة )1( Z-Y-XH 0 ١١ حيث ZX ولا كما تحدد أعلاه » حيث يكون بصورة مفضلة O للحصول على منتج Je la يشمل oligonucleotide من الصيغة (ا)؛ و (ج) إزالة حماية مجموعة حماية ON واحدة على الأقل؛ و TEENY
— \ A— توصيل منتج التفاعل من الخطوة )2( مع عامل كاشف للالتقاط قادر على التفاعل بينيا مع (3) (ا) من أصناف oligonucleotide ملحق الالتقاط» حيث يجرى الاتصال تحت شروط تتيح فصل أخرى تحتوي على منتج التفاعل المذكور. .0 هو X يفضل بصفة خاصة تجسيد؛ حيث يكون على مجموعة حماية واحدة على الأقل. ON oligonucleotide خلال الطريقة المخترعة يشتمل © يستهدف استخدام المجموعات الحامية طبقا للاختراع تحديدا عند حماية مجموعات المطبق. يعرف الشخص الماهر فى الفن oligonucleotide من ribose الوحدة الفرعية 2-0 أي من مجموعات الحماية تكون مناسبة للتخليق» خاصة الشخص العامل في مجال تخليق من الوحدة الفرعية 110056 من 2'-OH النيكلوتيد. تفضل المجموعات الحامية عند الموقع ribose في تجسيد مفضل من الاختراع الحالي عند الموضع '2 من وحدة oligonucleotide ٠ fluoride - تستخدم مجموعات حامية قابلة للتغير فى تجسيد مفضل .2--0-10١/ أو 2'-O-TBDMS تفضل بصفة خاصة المجموعات الحامية . 1801/5 تحديدا يتم تطبيق المجموعات الحامية 0؛ التي لها ثبات ارتباط 2-7-2-0 محسن؛ قد = X تحديدا خلال تخليق المركبات مع 2'-0OH يؤدي طيف واسع من شروط إزالة الحماية إلى انشقاق المجموعات الحامية ٠ إن كل العوامل الكاشفة لإزالة الحماية المعروفة تكون مناسبة لاتشقاق المجموعة الحامية تحديداء قد تطبق العوامل الكاشفة التالية: ..! 5 قطبي؛ cule اختياريا في اتحاد مع triethylamine—trihydrofluoride 0 ومذيب قطبي؛ triethylamine-trihydrofluoride trialklylamine (ب) من قواعد النيتروجين العضوية؛ hydrofluoride ومواد مجمعة أخرى من pyridine-HF (2) ٠ «ammonium fluoride (د) «tetra—n—butyl-ammonium fluoride (ه) TEN Y
-؟١- tetraalkyl-ammonium fluorides 4 ctetramethyl-ammonium fluoride (5) أخرى واتحادات من ذلك. يفضل إجراء الخطوة (ج) تحت شروط لا تتسبب في انحلال جزءِ triphosphate مثلا كما هو موصوف بالتفصيل أدناه. © تشتمل الخطوة 0 من طريقة الاختراع على تفاعل أصناف cyclic ©)/(-0)/(-)١( من الصيغة )118( مع عامل مؤكسد. قد نحصل على المركب من الصيغة )118( طبقا للطرق القياسية كما هو موصوف بواسطة 1992 diel (Ludwig et al, 1989, supra and Gaur et al., أي بتفاعل مجموعة OH الطرفية '5 من oligonucleotide مع عامل phosphitylating ثلاثني dali مثلا «as 2-chloro-4H-1,3,2-benzodioxaphosphorin-4-one شروط Vo مناسبة؛ Ne وجود قاعدة pyridine) أو (diisopropylmethylamine في مذيب مناسب dioxane (is أو «dichloromethane وتفاعل لاحق مع (W3=0) pyrophosphate أو pyrophosphate معدل W3) يختلف عن ©؛ مثلا NH (CCI2 (CH2 أو 072). بصورة مفضلة؛ يستخدم ملح tri-n—butylammonium من pyrophosphate أى pyrophosphate المعدل في Yay (DMF يتأكسد المركب (lla) الوسطي (/2)7-(1/1)© cyclic الناتج تحت ٠ شروط الامائية؛ مثلا مع بيروكسيد؛ مثل cumene «-butyl hydroperoxide .(10—-camphorsulfonyl)oxaziridine hydroperoxide بطريقة edly يمكن أيضا استخدام «(V2=S) phenylacetyldisulfide أىو معقد borane-diisopropylethylamine «(V2=BH3) لإعطاء ممائل cyclic 5'-triphosphate triphosphate المقابل من الصيغة (IIb) يشار في هذا السياق أيضا إلى الطلب الدولي رقم 96/401949 أو الطلب الدولي رقم ٠٠١/0781 Yo المندمجة محتوياتهم هنا كمرجع. قد تجرى خطوة التفاعل (أ) مع oligonucleotide في محلول أو مع oligonucleotide مرتبط مع طور صلب؛ die راتنج أو زجاج عضوي؛ مثل .CPG قد يشتمل Lil) oligonucleotide على مجموعات حماية؛ مثلا مجموعات حماية سكر أو قاعدة نيتروجينية معروفة جيدا للشخص الماهر. عن الأمثلة المفضلة على مجموعات الحماية هي 2-cyanoethyl لأجل nucleoside phosphodiester Yo الداخلي «tert-butyldimethylsilyl (phosphorothioate i TEN Y
_ \ «= ribose 2'- المجموعة bis(acetoxyethoxy)methyl أو triisopropylsilyloxymethyl dsobutyryl (acetyl (phenoxyacetyl 4-t-butylphenoxyacetyl hydroxyl من قواعد نيتروجينية. بصورة مفضلة أكثرء تجرى €Xocyclic amino لمجموعات benzoyl مرتبط مع طور صلب. oligonucleotide مع (i) الخطوة
© طبقا للخطوة (ب) من طريقة pia) يتفاعل المركب (IIb) مع عامل gale التقاط من الصيغة )11(: Z=Y=XH(III) X Cua هو مجموعة تنتقى من N R3 ¢ N H ¢ 0 ويكون X ولا كما تحدد ٠. sel يحدد R3 كما هو موصوف أعلاه R1 Jay .
٠ تحديداء في حالة كون X هو O يمكن استخدام عامل ذو حب للنواة محدود decanol (fic لفتح الحلقة (انظر شكل ١ الخطوة 4). يمكن إجراء هذه الخطوة عند درجة حرارة الغرفة؛ مثلا EA Baal ساعة؛ ويتاح تحول cyclotriphosphate إلى triphosphate y-ester المرغوب. طبقا للخطوة )=( تنشق مجموعات الحماية .ON أثناء الخطوة (ج)؛ على سبيل المثال؛ فإن العوامل الكاشف AY الحماية (أ) و(ب) المحددة أعلاه
Vo قد تليها حالة dll حماية مع © = X خلال فترة Yr دقيقة إلى ١8١8 دقيقة؛ يفضل أكثر ٠١ دقيقة إلى حوالى You دقيقة؛ تحديدا حوالى ٠“ دقيقة؛ عند -1٠١ لا"مثوية؛ تحديدا حوالى ° AT إذا كان X= NH تستثنى تلك التفاعلات نتيجة لثبات الارتباط المختلف أو يمكن إجرائها فقط تحت معايير تفاعل feud بدرجة كبيرة؛ متلا خلال ٠ © ساعة عند درجة حرارة الغرفة. تشتمل الخطوة (د) من طريقة الاختراع الحالي على اتصال منتج التفاعل من الخطوة (ب)؛ مع
٠ | عامل كاشف للالتقاط قادر على التفاعل Lin مع ملحق الالتقاط Z تحت شروط تتيح فصل ملحق الالتقاط المحتوي على (I) oligonucleotide من أصناف أخرى موجودة في منتج التفاعل. قبل الخطوة (د)؛ ينشق (I) oligonucleotide المرتبط مع الطور الصلب من الطور الصلب وتزال حمايته»؛ أي تزال مجموعات الحماية Wa أو بصورة كاملة. يثبت بصورة مفضلة العامل الكاشف
للإلتقاط على دعامة مناسبة؛ Mie دعامة كروماتوجرافية. لتوفير فصل لملحق الالتقاط المحتوي على oligonucleotide )1( من أصناف تحتوي على gale عدم التقاط تنشق منتجات التفاعل من الخطوة (ب) من الطور الصلب وتزال حمايتها 3 إذا كان ضروريا وتخضع لإجراء فصل 3 يفضل إجراء فصل كروماتوجرافي اعتمادا على التفاعل البيني لملحق الالتقاط 2 مع العامل © الكاشف للالتقاط. أثناء خطوة الفصل؛ قد يزداد نقاء oligonucleotide (ا)؛ الذي يكون dale في حدود ©7-.797 للمادة الخام اعتمادا على طول وتعقيد الترتيب» إلى JAY JAY JAY JA (Jat 7950 أو أكثر. لدراسات السمية يكون النقاء بنسبة > 7/85 مطلوياء حيث فى محاولات إكلينيكية متأخرة المرحلة يجب أن يكون النقاء في حدود 795-956 على الأقل. هكذاء يوفر الاختراع الحالي طريقة للحصول على نقاء ppPRNA عالي كما هو مطلوب للمحاولات الإكلينيكية ٠١ الأدمية. فى الخطوة (د)؛ يفضل انتقاء ale الالتقاط والعامل الكاشف للالتقاط القادر على التفاعل بينيا معه من )١( مجموعة كارهة للماء أو fluorinated ومادة كروماتوجرافية مع انجذابية للمجموعات الكارهة للماء أو fluorinated مثلا sh sale معكوس أو دعامة انجذابية (Y) ¢fluorous شريك أول لزوج ارتباط عالي الانجذابية غير تساهمي وشريك تكميلي ثاني لزوج ارتباط عالي الانجذابية ٠ غير تساهمي»؛ (©) شربك أول من زوج ارتباط تساهمي وشريك تكميلي ثاني من زوج ارتباط atl حيث يكون الشريك الأول والثانى من روابط تساهمية. يتحدد ملحق الالتقاط وظيفيا أدناه بسلسلة من الأمثلة المقبولة. قد تكون القاعدة العامة: يجب أن يتيح Z تنقية ملائمة؛ ويجب أن يكون قابل للإزالة تحت شروط متوافقة مع متطلبات ثبات .pPPPRNA ٠ بصورة إضافية؛ قد تشتمل الطريقة إضافيا على الخطوة )2( إزالة Gale الالتقاط للحصول على oligonucleotide من الصيغة (IV) طبقا لتجسيد مفضل؛ نظرا لأن X=0 نحصل على مركب من الصيغة (IV)a أو (IV)b ل
— \ \ — hE hy 0 HO— P —W;— P —W;— P —W—ON Ve Vv, Vv, (IVa) أو ل Ye hE HY ——0—— P —W;— P — W;— P —W:—ON Vs Vv, Vv, (IVb) ونظرا لأن X=NH نحصل على مركب من الصيغة 8(/!): لل ls hE HO— P —W;— P —W;— P —W—ON Vg Vv, A (Vay © يجب أن تتوافق الخطوة )2( مع متطلبات ثبات المنتج النهائي triphosphate ومع متطلبات ثبات الرابطة داخل ribonucleotide .قد تشتمل على انشقاق بواسطة شروط حمضية معتدلة حيث يكون X هو (NH انشقاق مع أيونات فضة عندما يكون X هو 5؛ انشقاق بواسطة thiol مثل dithiothreitol يؤدي إلى عزل 11116806 Laie يحتوي Y-X-P على -5- .5-CH2-CH2-O-P ٠ فى تجسيدات إضافية Ji أو لا يُزال gale الالتقاط 2 بالكامل. فى تلك التجسيدات قد يكون oligonucleotide الملحق له منفعة؛ مثلا منفعة كعامل دوائى. فى تلك التجسيدات»؛ يجب انتقاء العامل الكاشف 2-١7-1701 من مجموعة فرعية من متخلفات Z التي تتوافق وظيفيا مع المتطلبات البنائية لحساس ا-6!. على سبيل المثال. 2 = decyl- ١٠ الا0018060» Y = وصلة X=NH أو يعرف اتحاد O بتحقيقه لهذه المتطلبات. تكون oligonucleotides المعدلة مع [triphosphate مماثل triphosphate المنتجة طبقا للاختراع الحالي مناسبة تحديدا للتطبيقات الدوائية نتيجة لنقائها العالي. في تجسيد مفضل بصفة خاصة؛ يكون (I) oligonucleotide أو (IV) عبارة عن منشط .4١6-١ helicase يتم الكشف ب
— \ _ عن أمثلة خاصة لمنشطات RIGHT مناسبة فى Schlee وآخرين» 04 (Yo أعلاه؛ المندمجة شرح مختصر للرسومات ١ JSG يوضح نظرة شاملة تخطيطية لطريقة تخليق مشتقات oligonucleotide triphosphate .ester | شكل ¥ يوضح تحليل ESI-LC/MS y RP-HPLC لتخليق ؛ ١ وحدة decyl-O-pppRNA (ترتيب (5’-GACGCUGACCCUGAAGUUCAUCUU RNA 0 هيئات RP-HPLC من أ) خليط تفاعل خام يحتوي على 4/8 7 decyl-O-pppRNA (زمن الاستبقاء = ١٠6 دقيقة) ٠ ب) decyl-O-pppRNA نقي العمود: ٠١ (You Xx 5,١ Hamilton PRP—1 ميكرومتر المستوى المتدرج: صفر- A ١٠١ (ب) في Yoo = 0 (dad) YA مللي EC جرامي 8 1؛ (ب) = 780 Ak ٠٠١ methanol جزيئي TEAB ap (ب) هيئة ESI-MS لأجل decyl-O-pppRNA نقي مسجل باستخدام RP-LC/MS (الوزن ٠ الجزيئي المحسوب: VAAY الموجود: (VATA شكل ؟ يوضح تنقية RP-HPLC لمقياس شبه تحضيرية لتفاعل مقياس ١ ميكروجزيء جرامي من :decyl-O-pppRNA إلحاق Decyl يتيح فصل فعال للمنتج المرغوب (كسر (FV من المنتجات الجانبية غير الملحقة متضمنا ترتيبات فشل التخليق » OH-RNA غبر IS phosphorylated الطول وى pppRNA غير مشتق. ٠ العمود: Yoo x ١ Hamilton PRP-1 مم؛ ٠١ ميكرومتر المستوى المتدرج: صفر يار (ب) في ٠ دقيفة 0 = You مللي EC جرامي
— ¢ \ — 18 ؛ (ب) = 780 ميثانول ٠٠١ methanol مللي جزيئي جرامي TEAB شكل ؛: تجسيدات مفضلة بصفة خاصة لأجل 7. شكل ro فحص لمواضع انحلال 27-0-0061/181005 لإدخال انتقائية RIG-1 شكل +: Methylations تجعل ا-416| المضاعف خاص ونشط بدرجة Ale © شكل phosphorothioates :v طرفية تزيد التولد lid) للمضاعف الانتقائي. شكل 8: استبدالات 27-1100000 منتقاة تزيد احتمالية تنشيط RIG للمضاعف. شكل 4: نمط التعديل المتعدد لأجل OH ds—RNA OH-GFP2 يؤدي إلى تحسين قوي لاحتمالية تنشيط RIG] شكل :٠١ تعزيز التولد المناعى بواسطة تعديلات أساسية يكون قابلا للتحويل إلى مضاعف riphosphorylated ٠ :١١ JSG يوضح نظرة شاملة تخطيطية لطريقة الاختراع باستخدام diethylenglycolmonobutylether كمثال لأجل alkylpolyethylenglycols كعامل كاشف لفتح حلقة محبة للنواة. :١١ (Ka تنقية HPLC -40 من خليط تفاعل خام يحتوي على 45 7 C4-DEG-pppRNA VO (ذروة عند AE ملليلتر حجم متدرج) 5 75 PPPRNA (ذروة عند 7,5 ملليلتر)؛ العمود: ٠١ cae Yoo XY Hamilton PRP-1 ميكرومتر؛ معدل التدفق ؟ ملليلتر/ الدقيقة. المستوى المتدرج: TA) (ب) في ٠ © دقيقة؛ (أ) = 0,١ جزيئي جرامي sTEAB (ب) = 280 ١,١ (Methanol جزيئى جرامى .TEAB شكل 13: أطياف MALDI-TOF تقابل C4-DEG-pppRNA بعد dis © ا10. تلاحظ Yo ذروة الكتلة الصحيحة عند m/z 977,3 (أ). شكل VE يوضح برنامج تخليق PPPRNA باستخدام ملحق مركب polyether محب للدهن. ب
"١7ه شكل Vo يوضح تنقية HPLC وبيانات MALDI المتعلقة بالشكل ١4 (ترتيب tRNA نانان ناخ لالاومذة نا00 م نا + -:3) () تنقية RP-HPLC لأجل:
C11-CONH-CH2CH2CH2-(0-CH2CH2)2-0-CH2CH2CH2-NHpppRNA © العمود: You 401 Hamilton PRP-1 مم؛ ٠١ ميكرومتر المستوى المتدرج: صفر- 7/0 (ب) في ٠٠ دقيقة؛ (أ) = ٠٠١ مللي جزيئي جرامي TEAB (ب) = ٠٠١ 0081800 ZA. مللي جزيئي جرامي 1-8. (ب) أطياف MALDI المسجلة من خليط التفاعل الخام بعد إزالة الملح توضح وجود
C11-CONH-CH2CH2CH2-(0-CH2CH2)2-0-CH2CH2CH2NHpppRNA (AYVEA (الوزن الجزيئي الجرامي ٠ (ج) أطياف MALDI لمنتج التحلل المائي بأس هيدروجيني = VA من
C11-CONH-CH2CH2CH2-(0-CH2CH2)2-0-CH2CH2CH2NHpppRNA المنقى (الوزن الجزيئي AVAYY,T شكل V1 يوضح البرنامج التخليقي لأجل pPPRNA ملحق مع cholesteryl مع انشقاق اختياري Ve لأجل pppRNA المقابل. شكل ١١7 يوضح تنقية وتحليل pppRNA ملحق مع cholesteryl (ترتيب :RNA :(5’~GACGCUGACCCUGAAGUUCAUCUU (f) تنقية RP-HPLC لأجل: Cholesteryl -CONH-CH2CH2-(O-CH2CH2)2-NH-ppp-RNA ميكرومتر ٠١ مم؛ You x £,) Hamilton PRP-1 العمود: ٠ TEN Y
المستوى المتدرج: صفر- مم (ب) فى ٠ دقائق؛ مم (ب) لمدة 9 دقائق؛ 71..-٠ 8 فى
vv دقيقة؛ (أ) = A ov جزيئي جرامي 18588 (ب) = 740 Ak ov methanol جزيئي
.TEAB جرامى
Cholesteryl -CONH-CH2CH2-(O-CH2CH2)2- لأجل RP-HPLC (ب) تحليل
ه NH-ppp-RNA نقى.
العمود: You x 54.1 Hamilton PRP-1 مم؛ ٠١ ميكرومتر
المستوى المتدرج: صفر- YAR (ب) فى YA دقيفة ARE (ب) لمدة دقائق؛ 0 = Ow مللى
جزيئي جرامي 18/88 (ب) = 798 ov methanol مللي is جرامي TEAB
Cholesteryl -CONH-CH2CH2-(O-CH2CH2)2-NH- لأجل MALDI أطياف (=) النقى. ppp—-RNA ٠
ذروة YAYY,Y) pppRNA دالتون) نتيجة لانشقاق PN أثناء عملية التأين.
الوصف التفصيلي:
5’-Decyl-O-triphosphate RNA تحضير :١ مثال
كما هو موضح في النظرة الشاملة (شكل )١ فإن عملية تخليق decyl-O-friphosphate RNA Vo تتضمن خطوات التخليق التالية:
5’-Decyl-O-triphosphate RNA )-١
يجفف STOH-RNA المحمي بالكامل؛ المرتبط بدعامة ١( ميكروجزيء جرامي) لمدة ١ ساعات
Jabal داخل عمود تخليق ويغسل على التوالي مع VY) ALY dioxane [pyridine حجم/
حجم؛ ؛ ملليلتر). تحت جو Argon يحقن ١ جزيئي جرامي محلول محضر طازجا من -2 ٠٠١( ls dioxane & chloro-4H-1,3,2-benzodioxaphosphorin-4-one ٠٠
ميكرولتر» ٠٠١ ميكروجزيئي جرامي) في دورق يحتوي على ؟ ملليلتر من dioxane /pyridine
لامائي VY) حجم/ حجم). يسحب 5٠ مللي جزيئي جرامي من محلول phosphitylating
لا" الناتج في عمود التخليق ويتحرك ببطء جيئة وذهابا خلال زمن تفاعل بمقدار Vo دقيقة. فيما بعد؛ يحضر محلول tetra(tri-n—-butylammonium) pyrophosphate بخلط v0 جزيئي جرامي من محلول bis(tri-n—-butylammonium) pyrophosphate في «jill ١( DMF 8# le جزيئي جرامي) و11-0-0/1810106 ١ ily Se YYA) مللي جزيء جرامي). يتم دفع © محلول pyrophosphate خلال العمود ويعد قذف وتفريغ العامل الكاشف phosphitylating الفائض من العمود يدفع محلول pyrophosphate المتبقي جيئة وذهابا باستخدام محقنين. بعد ٠ دقائق يغسل العمود مع ALY acetonitrile (؟ ملليلتر). يذاب 0,0 Gia جرامي من محلول tert-butyl hydroperoxide في Yo +) decane ميكرولتر) في acetonitrile لامائي Y) ملليلتر) ويتصل مع دعامة التخليق. بعد ١١ دقيقة يغسل العمود مع SLY acetonitrile )1 Yo مليلتر). على التوالي» يدفع محلول متجانس من Vo alg See Yio) N-methylimidazole مللي جزيء جرامي)» You) trimn—butylamine ميكرولتر» ٠,١ مللي جزيء جرامي) و-0 decyl alcohol (؟ Ale V+, «lille جزيء جرامي) بصورة متكررة Lua وذهابا خلال العمود ويترك ليتفاعل لمدة $A ساعة لتحويل cyclotriphosphate إلى .decyl-O-triphosphate يغسل العمود مع acetonitrile لامائي ١( ١ ملليلتر) ويعالج مع 0,١ جزيئي جرامي من «TEAB) triethylammonium bicarbonate ¥ ملليلتر) لمدة ٠١0 دقيقة لتحلل cyclotriphosphate غير المتفاعل (bile مع تجنب الاشتقاق غير الخاص أثناء إجراء إزالة الحماية التالي. بعد خطوة غسل إضافية مع acetonitrile لامائي )9 ملليلتر) تجفف دعامة التخليق في تيار من argon 1-0( إزالة الحماية والتنقية ٠ يتصل 5’—decyl-O-triphosphate oligonucleotide مع محلول pana طازجا من Tie methylamine مائي وأمونيا مائية مركزة V3) AMA) حجم/ حجم؛ Y ملليلتر) باستخدام محقنين. بعد زمن انشقاق بمقدار To دقيقة ينقل المحلول إلى قارورة ذات غطاء ملولب نظيفة وتشطف الدعامة مع ١( AMA ملليلتر). يسخن المحلول المتحد والمادة المغسولة لمدة ٠١ دقائق عند 45°10 بعد التبريد على ثلج يتبخر المحلول حتى الجفاف وتجفف المادة المتخلفة بالتبخير Yo المشترك مع ethanol مطلق. لإزالة مجموعات (Ka 27-0-1801/5 Lila استخدام المعالجة
_ \ A— triphosphate فقد كبير لجزء (on (TEA.3HF) triethylamine trihydrofiuoride مع فى محلول محضر طازجا decyl-O-triphosphate oligonucleotide المعدل. تعاد إذاية «TEA.3HF [TEA NMP) TEA.3HF [triethylamine /N-methylpyrrolidone من بطريقة . Cie المحلول عند © ا ”"مثوية لمدة BT) ميكرولتر) Yyo حجم/ حجم؛ "1
Tew حجم/ حجم؛ AER ) DMSO فى TEA.3HF هه بديلة؛ يمكن استخدام إزالة حماية محلول من المزال الحماية بالكامل من decyl-O-triphosphate oligonucleotide ميكرولتر). يترسب المحب decyl بواسطة ©ا10ا. إن ملحق aug محلول إزالة الحماية باستخدام ا0-501800 من الشوائب التي لا تحتوي على الملحق بواسطة decyl-O-triphosphate للدهن يتيح فصل مم Yo. x VY PRP- 1 على عمود Je tal) تحليل كروماتوجرافي طور معكوس . يطبق منتج أ ويفصل في مستوى متدرج خطي من صفر إلى Yeo " من مثبت f لأس الهيدروجيني (ب) في On دقيقة بمعدل تدفق © مليلتر/ الدقيقة. يكون مثبت الأس الهيدروجيني (أ) ٠٠١ مللي جزيئي جرامي TEAB ومثبت الأس الهيدروجيني (ب) ٠٠١ مللي جزيئي جرامي 1588 في 780 .methanol تجمع كسور mill تتبخر Jing منها الملح بالتبخير المشترك المتكرر مع .methanol تذاب المادة المتخلفة في ماء وتتحول إلى شكل الصوديوم بواسطة ترسيب ethanol NO في وجود nT جزيئي جرامي من كلوريد الصوديوم. مثتال ؟ تحضير 5'-pppRNA gamma 2-(2-Butoxyethoxy)ethyl-ester (C4-DEG-pppRNA) تتضح في شكل ١١ نظرة شامل لبرنامج Je Lal) الموصوف في مثال ؟. 2-chloro-4H-1,3,2- جزيء جرامي) من dh ١( يذاب 707 مجم :١ خطوة ٠ جاف فى قارورة ذات غشاء dioxane ملليلتر من ١ فى benzodioxaphosphorin—-4-one argon ملليلتر تحت جو ٠١ سعة
—v4— والمغسول titrylated المحمي بالكامل المزال RNA خطوة ؟: يجفف عمود التخليق المحتوي على ساعة. تغسل مكونات العمود جيدا بالسحب المتكرر ١١ بالشفط لمدة acetonitrile جيدا مع argon (حجم/ حجم) في جو ٠:7 لامائي؛ dioxane وقذف ؟ ملليلتر من محلول 70176/ا0/ ٠٠١ حجم/ حجم ثم 1:7 dioxane [pyridine خطوة ؟: يضاف في قارورة أولا 7 ملليلتر من 2-chloro-4H-1,3,2-benzodioxaphosphorin— جزيئي جرامي ١ ميكرولتر من محلول © جاف لإعطاء 560 مللي جزيئي جرامي من العامل الكاشف dioxane .في 4-6 في «2-chloro-4H-1,3,2-benzodioxaphosphorin—2-one مثلا «phosphitylating (حجم/ حجم). يتجانس المحلول بالرج برفق. يبدا التفاعل مع سحب ٠:7 (pyridine [dioxane خلال عمود التخليق 2-chloro—-4H-1,3,2-benzodioxaphosphorin-4-one محلول من القارورة. ٠ وقذف المحلول المحتوي على da sd cad نإف dela ou من عمود التخليق؛ للسماح 2-chloro-4H-1,3,2-benzodioxaphosphorin-4-one دقيقة عادة 7٠ المدعم بالطور الصلب. إن التفاعل لمدة RNA بالاتصال الكامل والخلط الجيد مع المرتبط مع الدعامة في oligomer يعطي تفاعل قريب من الكمي لمجموعة 5-011 الحرة من نطاق صافي. ؛6-”7١ Vo المحتوي على عامل dioxane/pyridine دقيقة يتم قذف محلول Vo بعد التفاعل لمدة if خطوة ملليلتر من ١ حاقن جديد مع خليط مدوم من Slay الفائض في حاوية نفايات؛ 9 09 مللي ١( ميكرولتر YYA 5 جاف DMF في (Bu3NH)2 pyrophosphate جزيئي جرامي +0 جزيء جامي) من ل8١803 جاف لإعطاء 6,5 جزيئي جرامي محلول هذا المحلول خلال العمود بذلك يستبدل محلول adn 4(ل8030). pyrophosphate | ٠ يضمن التحول الكمي للمركب pyrophosphate إن الفائض الكبير من .dioxane/pyridine
P(II=P(V) cyclic anhydride lla الوسطي إلى مفاعل Stary (PPI وفائض DMF لإزالة CH3CN خطوة 0 يغسل العمود مع ؟ ملليلتر من جاف. CH3CN العمود مع ا
=« اذ
خطوة 27 يذاب ٠7060 ميكرولتر من t-BUOOH (محلول 0,0 جزيئي جرامي في «decane (Sigma-Aldrich في Y ملليلتر من 0013017 لامائي لإعطاء ١,١ جزيئي جرامي تقريبا من محلول متجانس. تتصل دعامة التخليق مع هذا المحلول Vo sad دقيقة للحصول على ا P(V) cyclic anhydride المؤكسد.
© خطوة 7: يغسل العمود مع ؟ ملليلتر من CH3CN الجاف لإزالة فائض البيروكسيد ويملاً مع CH3CN جاف. A sshd يتصل ؟ ملليلتر من 2-(2-Butoxyethoxy)ethanol (Diethylene glycol monobutyl ether) جاف يحتوي على Aga ١,١ جرامي من N-methylimidazole و١٠ جزيئي جرامي tri-n-butylamine مع الدعامة في العمود. يجب أن يكون زمن اتصال CPG
٠ مع الكحول على الأقل $A ساعة عند درجة حرارة الغرفة. خطوة 4: يغسل العمود جيدا مع 9 ملليلتر 86610010716؛ ثم يتصل العمود مع ؟ ملليلتر من TEAB ,+ جزيئي جرامي ¢(triethylammonium bicarbonate) محلول في ماء لمدة ساعة واحدة لحل cyclotriphosphate غير المتفاعل مائيا. خطوة :٠١ مرحلة أولى لإزالة الحماية: يمرر ١ ملليلتر من محلول إزالة الحماية methylamine)
٠١ خلال الدعامة مرتين- (AMA عامل كاشف aaa حجم/ 1:١ مائي 460 7/ أمونيا مائية مركزة Vo المحلول إلى قارورة جديدة. تغسل الدعامة مع نفس حجم Jab دقيقة 7٠ مرات. بعد الاتصال لمدة ٠١ وتتحد المواد المغسولة. يسخن المحلول المتحد والمواد المغسولة لمدة AMA إزالة الحماية دقائق عند 15"مثوية. بعد التبريد على ثلج؛ يركز المحلول إلى حجم 00 ميكرولتر؛ ثم يتبخر حتى الجفاف.
٠ خطوة :١١ إزالة مجموعات الحماية :2'-O-TBDMS تجفف المادة المتخلفة بإضافة والتبخير المشترك لأجل 060 ميكرولتر من als EtOH يضاف ١ مليلتر من TBAF ١ (tetra—n-butylammonium fluoride) جزيئي جرامي جاف في (THF يحكم الإغلاق جيدا وتوضع على رجاج لمدة ١١ ساعة. يخمد التفاعل مع ١ ملليلتر من TEAB ١ (triethylammonium bicarbonate) جزيئي جرامي مائي معقم؛ ويزال الملح منه على
ب
— \ اذ عمود NAPTM-25 (تنقية حمض نووي) باستخدام ماء معقم كمادة تصفية. قد يكون الترشيح خلال مرشح بمقاس ؟ ميكرومتر معقم ضروريا عند هذه الخطوة. يتم توحيد وتبخير الكسور الممتصة بالأشعة فوق البنفسجية إلى حجم بمقدار ١5١ ميكرولتر؛ يضاف ٠٠١ ملليلتر من ١ جزيئي جرامي TEAB بأس هيدرورجيني A ويخزن المحلول المجمد عند Augie om حتى يمكن هه إجراء تنقية HPLC
خطوة :١7 تنقية tHPLC يحمل منتج التفاعل من خليط تفاعل بمقياس ١ ميكروجزيء جرامي من الخطوة ١١ في عمود Yo x ١ PRP-1 مم (Hamilton) تجرى التنقية باستخدام مثبت oo الهيدروجيني متدرج خطي (ب) من صفر إلى 780 في ٠٠ دقيقة بمعدل تدفق ؟ ملليلتر/ الدقيقة. يكون مثبت الأس الهيدروجيني )1( هو ٠٠١ مللي جزيئي جرامي TEAB ومثبت الأس
٠٠١ الهيدروجينى (ب) هو ٠٠١ مللى جزيثي جرامى TEAB فى [methanol ماء YA حجم/ حجم. يوضح في شكل ؟ مثال نموذجي den! 24-016. يكون اتحاد 4 ملحقات alkyl ذرة ومتخلف diethyleneglycl كافيا لفصل خط قاعدة قريب من JppPRNA يتحد الكسر المقابل للذروة عند 54 مليلترء يتبخر على مبخر دوار ويزال الملح بواسطة تبخيرات مشتركة متعددة مع methanol جاف.
Ju Ye ؟ اشتقاق pppRNA باستخدام ملحقات مركب polyether محب للدهن مع polyether amines محبة للدهن مسبقة التشكل مثال :V استعمال polyether amines محبة للدهن من البناء 27-١١ لتوتيد ZYNHpppRNA الجزء (أ): تحضير واسع النطاق اقتصادي لأجل polyether amine محب للدهن
٠ يمكن إجراء هذا الإجراء بدون تحليل كروماتوجرافي عمود وميضي ويكون قابل للتطبيق عامة لتخليق monoamides من diamines قابلة للذويان فى الماء methyl esters من carboxylic acids محبة للدهن.
py (VE شكل FSH) N-Lauryl-4,7,10-trioxa-1,13~tridecanediamine تخليق مللي جزيء جرامي) ٠٠١ oll £Y,A) 4,7,10-trioxa-1,13-tridecanediamine يذاب مللي Yo ملليلترء 4 Y) Lauric acid methyl ester يضاف .Methanol ملليلتر YY,0 في جزيء جرامي) ببطء مع التقليب ويحفظ الدورق المغلق عند درجة حرارة الغرفة لمدة © أيام. يزال ملليلتر ٠٠١ خليط التفاعل على مبخر دوار وتذاب المادة المتخلفة في 0 Methanol © .Ethylacetate ملليلتر) ثم بواسطة كلوريد صوديوم مركز ١٠١ XY) بالاستخلاص مع ماء diamine يزال فائض - وبتبلور الزيت المتخلف عند الاستقرار عند ethylacetate ملليلتر). يتبخر طور ٠٠١ XY)
N-Lauryl 4,7,10-110*+8-1,13- مللي جزيء جرامي) من ١ V) جم TA لإعطاء ةيوئم*٠ نقي. tridecanediamine ٠ مع -لا CPG مرتبط مع RNA cyclotriphosphate (ب): تفاعلات فتح حلق على oll
Lauryl-4,7,10-trioxa—1,13-tridecanediamine =) طبقا للخطوات (V¢ شكل of (مركب CPG المرتبط مع RNA cyclotriphosphate يخلق ثابت الطور RNA cyclotriphosphate في المثال السابق ؟. يجرى تفاعل فتح الحلقة من ١
N-Lauryl-4,7,10-trioxa-1,13- مع 0,08 جزيئي جرامي من محلول all ٠ لمدة ؟ CPG مع acetonitrile محلول Jaw .acetonitrile 68م في جاف ويغمر acetonitrile ملليلتر من ٠١ ساعات عند درجة حرارة الغرفة؛. تغسل الدعامة مع الإضافية بدقة طبقا HPLC مع 85900. يجرى الانشقاق من الدعامة؛ إزالة الحماية ومعالجة lls إن .))(١١ (شكل Methanol 7978 من مثال 7. يصفى المنتج © عند تركيز ١7-٠١ للخطوات AYVEA التحليل الطيفي 101ا8//ا لخليط التفاعل يؤكد بناء المركب © (وزن جزيئي جرامي ٠ .))ب(١١ دالتون» شكل المقابل: يذاب triphosphate oligonucleotide اختيارياء قد يزال ملحق التنقية للحصول على tor في )١4 مستبدل مع ال81ا-0 (مركب ©؛ شكل gamma 80010 نانوجزيء جرامي ٠ بأس هيدروجيني 7,8 في أنبوب ةيامحلا AY الهيدروجيني OY مثبت ge ميكرولتر
اا Y dau Eppendorf ملليلتر وسخن الأنبوب المغلق بإحكام عند Agel لمدة Vo دقيقة. تنتج تلك الشروط انشقاق oS لرابطة 005000180010816 من المركب ©؛ بدون ern Dail triphosphate يبرد خليط التفاعل على ثلج 5 VE ميكرولتر من محلول NaCl © جزيئي جرامي معقم ويضاف ٠,١ ملليلتر من ethanol مطلق. تجمع المادة المترسبة بالطرد المركزي؛ تغسل مع cay. ethanol © تجفف على (Speed Vac تذاب في ماء معقم وتخزن مجمدة edie *مثئوية. التحليل الطيفي 101 ا8//ا يؤكد الوزن الجزيئي المتوقع لمنتج PPPRNA (الوزن الجزيئي 7877 دالتون» شكل ١٠١ (ج)). مثال ؛ أسلوب على عمود لاشتقاق PPPRNA مع ملحقات مركب polyether محب للدهن Vo مثال ؛ هو chal من خطوتين يستعمل اشتقاق على عمود لأجل HYNHpppRNA oligonucleotide المثبت لتوليد ZYNHpppRNA تحضير triphosphate RNA ملحق مع Cholesteryl «ChI-CONH-CH2CH2-(O-CH2CH2)2-NH-ppp-RNA) مركب ef شكل (V1 إن اقتران ملحق cholesteryl محب (pall مع triphosphate RNA يتيح الفصل Ve الفعال لمنتج 8ل4ا000 الملحق من شوائب غير ملحقة بواسطة RP-HPLC تتضح في شكل 1 نظرة شاملة لبرنامج التفاعل لتحضير triphosphate RNA ملحق مع .cholesteryl فى خطوة أولى تتحول رابطة الدعامة المحمية بالكامل 5011-8018 إلى المركب الوسطى cyclic triphosphate (مركب ؛ شكل (VT كما هو موصوف في الخطوات ١ -١ من المثال ل Yo على التوالي؛ يغسل العمود مع acetonitrile لامائي )¥ ملليلتر). يذاب ١76 ميكرولتر من 2,2°—(ethylenedioxy)diethylamine (مركب ١ شكل 01 A VY جزيء جرامي) في V) ALY acetonitrile ملليلتر) ويتصل المحلول مع الدعامة في العمود. بعد ؟ دقائق يغسل العمود مع acetonitrile لامائي (؟ ملليلتر) و dichloromethane لامائي ١( ملليلتر). ب
و على التوالي؛ يعالج triphosphate المعدل مع amino (أي مركب oF شكل )٠١ مع محلول مخلوط مسبقا من cholesteryl chloroformate (71 مجم؛ Av ميكروجزيء جرامي)» N,N-diisopropylethylamine (1,4 ميكرولتر؛ 6؛ ميكروجزيء جرامي) 4-dimethylaminopyridine 4 (5,1 مجم» 560 ميكروجزيء جرامي) في dichloromethane © لامائي )0 ملليلتر) لمدة Vo دقيقة. يغسل العمود مع ALY dichloromethane (؟ ملليلتر) T) SLY acetonitrile ملليلتر) ويجفف في تيار من argon للانشقاق من الدعامة وإزالة dled يتصل oligonucleotide المشتق مع محلول محضر طازجا من methylamine مائي وأمونيا مائية مركز Vi) AMA) حجم/ حجم؛ ؟ ملليلتر) باستخدام محقنين. بعد الانشقاق لمدة 7٠ دقيقة ينقل المحلول إلى قارورة ذات غطاء ملولب؛ يسخن لمدة ٠١ دقائق عند 125 "مثوية ٠ وبتبخر حتى الجفاف. تجفف المادة المتخلفة بالتبخير المشترك مع ethanol مطلق وتعالج مع ١ جزيئي جرامي tetra—n—butylammonium fluoride في 1115 ١( ملليلتر» ١ مللي جزيء جرامي) مع الرج لمدة ١١6 ساعة. بعد إزالة الملح على عمود NAP-25 ينقى triphosphate oligonucleotide الملحق مع cholesteryl المزال الحماية بالكامل بواسطة HPLC باستخدام عمود طور معكوس cae You x £,) (Hamilton PRP=1) الشكل .))(١١7 يصفى المركب ؛ Vo عند تركيز methanol بنسبة 790 big البناء المتوقع بواسطة تحليل MALDI (الوزن الجزيئي ATY 7 دالتون» الشكل ٠١7 (ج)). اختيارياء يزال محلق cholesteryl بواسطة التحلل Ald) بحمض عند أس هيدروجيني VA عند ٠مثوية للحصول على triphosphate oligonucleotide المقابل (مركب co شكل )١١ باتباع نفس الإجراء كما هو موصوف في مثال 3. Yo مثال to إدخال تنظيمي لأجل 2'-O-methylations ينتج مضاعف RNA انتقائي RIG-I قد توجد قائمة بالاختصارات ومعانيها في نهاية نص التطبيق. إن الجسم الممتلك RNA يتميز بمجموعة من التعديلات التي قد يكون لها تأثير على وظائف tRNAs) RNA وكخطللةا»). هكذا تكون 2'-O-methylations 508 على تعديل التولد المناعي لأجل CRNA لا يجب أن يشتمل المركب الترابطي RIGHT الانتقائي على أكثر من ا
اه 2'-O-methylation واحد لكل جديلة. تدخل تلك الخصائص في مضاعف RNA باتحاد جدائل إحساس ومضادة للإحساس methylated بصورة مناسبة. فحص مواقع انحلال 2'-O-methylations لتقديم انتقائية RIG-I (شكل 2). dol الإحساس () والمضادة للإحساس (ب) من OH-GFP2 يجرى .فحص © 18100/ا27-0-00861 كامل. يعدل كل موضع بصورة فردية بواسطة 2’=O-methylation ويستخدم لإثارة ١-6ا؛ 11/47 أو TLR لإثارة RIG] تعاق خلايا أحادية الخلية لدم طرفي (PBMCs) (peripheral blood mononuclear cells) مع Chloroquine وتثار بالحقن الدهني للمضاعف. يقاس IFNa لمدة ٠١ ساعة بعد الإثارة بواسطة ELISA لأجل TLR7 TLRS تفحص فقط جديلة فردية ذات dha لتحديد قدرتها المثيرة وتفحص على PBMCs غبر ٠ معاقة. ينقل dels الجين من العائل للجدائل الفردية بواسطة تعقيد poly-L-Arginine ويعد ٠١ ساعة من نقل حامل الجين إلى العائل لأجل 1147 يقاس تنشيط 17118 لأجل TLRS يقاس تنشيط IL12p70 بواسطة (ELISA يتم الحث بنسبة 7٠09 مع GFP2 لجديلة الإحساس التي تقابل 70/85 بيكوجرام/ ملليلتر IFNa لأجل 16-١ 7775/8 بيكوجرامي/ ملليلتر لأجل TLR7 و7١8١ بيكوجرام/ ملليلتر IL12p70 لأجل 118. إن تضاد الإحساس بنسبة 79٠٠0 لأجل GFP2 ٠ يقابل 47 77 بيكوجرام/ ملليلتر IFNa لأجل YAY) 16-١ بيكوجرام/ ملليلتر IFNa لأجل 11147 و8١ بيكوجرام/ ملليلتر 112070 لأجل 1148. يعطى ملخص لتأثير إدخال 27-0-0800 المعتمد على الموقع في شكل جدول (شكل 2). تُعادل التأثيرات مع الجديلة غير المعدلة كمرجع. أبيض - لا يوجد تغيرء أصفر = انخفاض للإثارة المناعية» أحمر - لا توجد إثارة مناعية» أخضر = إثارة مناعية زائدة. ٠ علاوة على dia يمكن أن يتضح أن methylations معينة تجعل المضاعف 16-١ خاص ونشط بدرجة عالية. شكل +: () تتحد Methylations خاملة لتنشيط 16-١ في الجديلة المضادة للإحساس ويستخدم المضاعف الناتج لإثارة PBMCs معاقة مع chloroquine عند تركيز +A ميك روجرام/ ملليلتر. يقاس IFNa بواسطة ELISA بعد ٠١ ساعة من الإثارة. إن 7٠٠8 من OH-GFP2 Yo يتشابه مع 779 بيكوجرام/ ملليلتر 8ل-1.. (ب) تهجن اتحادات مختلفة من ا
#١ .في جديلة الإحساس والجديلة المضادة للإحساس وتستخدم لإثارة 2°-O-methylations إليها حامل الجين من العائل مع Jang Chloroquine تتم إعاقتهم مع RIG-1 لإثارة .PBMCs غير معاقة مع مضاعفات معقدة PBMCs لأجل 1147 و1188 تستخدم (Lipofectamine لأجل IFNa تقابل 4801 بيكوجرام/ ملليلتر IVT=2 لأجل 71٠0 إن .poly-L-Arginine مع لأجل 1147 و الالا IFNa بيكوجرام/ ملليلتر ١975 عند 9.25 تقابل 721٠00 RIG-I ©
SEM + و(ب) يوضحان متوسط )( of .1188 لأجل ١12070 بيكوجرام/ ملليلتر لثلاثة مانحين. (standard error of the mean)
RNA بإقحام تعديلات تثبت RIG-T مثال 6: زيادة تنشيط قصيرة في جسم؛ حيث تثبط تكوين بروتين خاص dSRNA يتم إقحام كسور siRNA أثناء علاج في الخلايا المستهدفة. تتمثل مشكل هذا الشكل من العلاج في عدم الثبات الكبير للمضاعفات 0٠ داخلية فى nucleases 3 خارجية nucleases بسهولة بواسطة RNA Jan قد SIRNA المصل أثناء النقل إلى الخلية المستهدفة. خارجي المنشاً المستخدم لأغراض علاجية في RNA قد يكون من المحتمل انحلال جزء كبير من المصل والعصارة الخلوية للكائن المعطى له. تأثير إيجابي على النشاط المناعي للمضاعف وأن اتحاد 5'-PTO يمكن أن يتضح أن لكل تعديل Vo الإحساس والجديلة المضادة للإحساس يؤدي إلى زيادة قصوى في النشاط das في 50 اعتبار استخدام هذه (Ka 515؛ شكل 7١(ب)). لذلك 010/853 PTO مقابل 515/853( نفعى. 16-١ الأساسى فى المركبات الترابطية الانتقائية RNA التعديلات لأجل من التولد المناعي لمضاعف u3 5'-phosphorothioates تحديدا» يمكن أن يتضح أن اتتقائى. Ye
VA وتثار مع مضاعفات عند تركيز بمقدار Chloroquine مع PBMCs تعاق )( iV شكل من ARK إن ELISA بواسطة IFNa ساعة من الإثارة يقاس ٠ ميكروجرام/ ملليلتر. بعد وتستخدم Leal) تقابل 117/8 بيكوجرام/ ملليلتر .8ل-7ا. (ب) تعاير المضاعفات المشار 2 حامل الجين من العائل للمضاعفات Jeng Chloroquine مع PBMCs لإثارة ١-6ا4ا. تعاق ب
— 7 اذ باستخدام Lipofectamine بعد Yo ساعة من الإثارة يتحدد 1-118 في المادة الطافية بواسطة ELISA إن 7٠٠0٠ من ٠ نانوجزيئي dha 30-6702 تقابل ٠6044 بيكوجرام/ ملليلتر 8 !. توضح النتائج متوسط + dan) SEM مانحين. في تطوير SIRNAS العلاجية يتم حل مشكلة ثبات المصل بواسطة نوع آخر من التعديل: إذا تم © دمج استبدالات 2-7000 في (RNA تكون RNAs الناتجة أكثر استقرارا dually لهضم 006 . مع هذاء يلاحظ أنه في حالة الإثارة المناعية المعتمدة على 16-١ فإن استبدال -'2 fluoro يمكنه تنشيط الإثارة المناعية. تحديداء يمكن أن يتضح أن a3 5'-phosphorothioates من التولد المناعي لمضاعف انتقائى. Yo مع هذاء طبقا للاختراع الحالي وجد أن استبدالات 2-111030 المنتقاة تزيد تنشيط 16-١ المحتمل لجديلة الإحساس (أ) والجديلة المضادة للإحساس (ب) من المضاعف يعدل كل موضع باستبدال 27-000 بصورة فردية (شكل (A تستخدم المضاعفات الناتجة لإثارة PBMCs عند تركيز بمقدار 6,8 ميكروجرام/ ملليلتر. لتقييم تنشيط RIG] تعاق Jang PBMCs إليها dels الجين Veo من العائل بواسطة (Lipofectamine لإثارة TLRT و1148 تستخدم PBMCs غير معاقة ويتقل إليها dela الجين من العائل مع مضاعفات معقدة مع .poly-L-Arginine بعد الإثارة Yo sad ساعة تقاس cytokines بواسطة (ELISA إن 7٠٠00 لأجل GFP2 فى جديلة الإحساس تشبه 4097 7 بيكوجرام/ ملليلتر IFNa لأجل YYAY (RIG-T بيكوجرام/ ملليلتر لأجل 117 و940١ بيكوجرام/ ملليلتر لأجل TLRS للجديلة المضادة للإحساس GFP2 79٠٠0 ٠ تقابل 4817 بيكوجرام/ ملليلتر IFNa لأجل 16-١ 41951 بيكوجرام/ ملليلتر IFNa لأجل 117 و497١ بيكوجرام/ ملليلتر IL12p70 لأجل 1148. يوضح متوسط + SEM لأربعة مانحين. ا
A — اذ هكذاء يكون من الهام جدا إيجاد مضاعف نشط قدر الإمكان يمكنه تعويض فقد RNA بواسطة نشاطه القوي. فى الفقرة السابقة وصفت إمكانية تحديد تعديلات RNA بواسطة ارتباطات PTO انتقائية واستبدالات «2'-fluoro التي تؤدي إلى زيادة نشاط المضاعف. مثال :١7 اتحاد كل التعديلات مما ينتج مركب ترابطي ]!6-١ مولد للمناعة بقوة الاختبار ما إذا كانت ارتباطات PTO أو استبدالات 2-0000 يمكن أن تتحد مع 2-0-5 لزيادة الانتقائية؛ فإنها تتحد فى مضاعف خطوة بخطوة. تعاق PBMCs مع Chloroquine وتستخدم لإثارة ١-6ا4ا. تستخدم المضاعفات المعدلة بصورة متباينة اعتمادا على OH-GFP2 وبقاس تنشيط ا-816 عند Yo ساعة بعد الإثارة بواسطة ELISA على IFNa (شكل 9). إن المضاعفات المعدلة بصورة متعددة إما أن تقارن مع OH- ٠ 5-020 0 أو 30-62 triphosphorylated (ب). إن 7٠٠١ من 4 IVT تقابل 7١١١٠ بيكوجرام/ ملليلتر من 8178ا. يوضح متوسط + SEM لمانحين. تضاف 515/853 methylations 2-0 .إلى oll RNA OH-GFP2 أولا «OH-GFP2 01/61155/01/61385( شكل (ha ثم تقارن مع تعديل 5'-PTO في جدائل الإحساس والجدائل المضادة للإحساس 57 PTO 011-6702؛ شكل 4()). على التوالي؛ يتحد ٠ كلا النوعين من التعديل مع مضاعف «OH-GFP2oMet15/oMet3 PTO) شكل 9()). في النهاية؛ يتولد مضاعف يشتمل Lilia) على ثلاثة استبدالات 2-111030 عند المواضع ١ و ؟؟ في dls الإحساس. وعند الموضع ١“ في dal المضادة للإحساس «OH-GFP20oMet15/3-F23/13-PTO) شكل 4()). إن المعايرة المقارنة للجدائل مزدوجة RNA هذه توضح أن Oligo OH-GFP20Met15/3-F23/13-PTO المتعدد التعديل يفوق ٠٠ بدرجة كبيرة bli مضاعفات أخرى. لتقييم نشاطه بصورة أفضل»؛ يعاير المضاعف وبقارن مع مضاعف triphosphate غير المعدل الخاص به (شكل 9(ب)). وجد أن إقحام تعديل يجعل من الممكن تغيير oligonucleotide بحيث يقارن نشاطه المناعي مع ذلك الخاص بمكافئ triphosphate الخاص به 3P-GFP2) شكل 1 (ب)). مثال iA تكون العناصر قابلة للتحويل إلى نظام 3P-dsRNA ا
q — اذ يجرى تطوير كامل للمركب الترابطى RIG] Say) على مستوى OH للترتيب .GFP2 على الرغم من إمكانية زيادة النشاط بشكل كبير بواسطة تعديلات مناسبة؛ فإن triphosphorylation من مركب ترابطي قد يزيد من نشاطه إضافيا. حتى الآن لم يتضح سواء أن التعديلات ومواضعها الخاصة يمكنها فقط التحول إلى نظام -35 .GFP2 ٠ لإيجاد إجابة على هذا التساؤل تنتج مضاعفات؛ التي لها جميعا التعديل الذي يزيد النشاط/ 2-0 xe methylation القاعدة Yo فى جديلة الإحساس؛ استبدال 2'-fluoro عند القاعدة ١ و7 واثنين من ارتباطات PTO عند الطرف '5 و3 (282F) شكل .)٠١ في الجديلة المضادة للإحساس يتحد methylation 2-0 عند القاعدة ؟؛ استبدال 2'—fluoro عند القاعدة VY واثنين Ve من ارتباطات ©5-01. لتجنب توقف اثنين من ارتباطات 5'-PTO عند جديلة الإحساس بقريها من ©0100050081؛ تنتج جديلة إحساس متعددة التعديل بدون 5-0105 إضافيا (152؛ شكل (Ve للتمكن من تقدير الزيادة في النشاط بواسطة driphosphorylation تنتج المضاعفات مع -'5 OH) 5'-triphosphate 5 hydroxyl مقابل 3P شكل )٠١ وتقارن مع بعضها البعض بمعايرة ١٠ الإثارة على PBMCs شكل Glas (7) :٠١ مضاعفات متعددة التعديل مع (sug ©081م1100050. تجرى معايرة للجرعة على PBMCs معاقة مع Chloroquine بعد Yo ساعة من الإثارة يقاس التنشيط بواسطة ELISA على 018-ا. يوضح متوسط + SEM لأربعة مانحين. (ب) اعتمادا على منحنيات المعايرة تحسب قيم ECS0 البيولوجية. Yo لقد وجد أن مضاعفات OH متعددة التعديل» بغض النظر عن وجود واحد أو اثنين من أطراف PTO يمكن أن تصل إلى حدود نشاط الشكل غير المعدل من OH-GFP2 OH-GFP2 «OH Multi 2527 «OH Multi 1S2F) _شكل (Ve إن إضافة -5 triphosphate الإضافية عند جديلة الإحساس تنتج زيادة إضافية في النشاط بواسطة العامل © مقارنة مع معقدات 3P-Multi 2527 3P-Multi 1S2F) hydroxyl شكل .)٠١ ب
=« _ كنتيجة يلاحظ أن التأثيرات التي تزيد النشاط للتعديلات المتنوعة يمكن اتحادها مع triphosphorylation من oligonucleotide وتظهر تأثيرها الموجب أيضا هناك. بالزيادة الكبيرة للمضاعف الأصلى OH-GFP2 على صعيد WEY) sabill (2'-O methylation) في النشاط بتثبيت التعديلات (ارتباطات PTO واستبدالات (2'-fluoro © والانجذابية إلى جيب الارتباط o(triphosphate) يصبح من الممكن تحديد مركب ترابطي Jad 46-١ انتقائي -(3P-Multi 1S2F) في النهاية؛ يمكن تطوير 30-0588 الذي يزداد فيه النشاط المثير للمناعة إلى أقصى حد بالإقحام الخاص للتعديلات. إن هذه الزيادة في التولد المناعى تجعل من الممكن الإبقاء على جرعة الدواء عند مستوى أدنىء ولتعويض ell في RNA الناتج في الفترة الواقعة بين تطبيق الدواء ٠ حتى دخوله إلى الخلية. RNA oligonucleotide GFP2s GmACGCUGACCCUGAAGUUCAUCUU 0161 C UGCGACUGGGACUUCAAGUAGAA GFP2s GAMCGCUGACCCUGAAGUUCAUCUU oMet2 CU GCGACUGGGACUUCAAGUAGAA Nm=2' -OCH3 GFP2s GACGCUGACCCUGAAGUUCAUCUmMU oMet23 CUGCGACUGGGACUUCAAGUAGA A GFP2s GACGCUGACCCUGAAGUUCAUCUUM ENVY oMet24 CUGCGACUGGGACUUCAAGUAGA A
GFP2as G ACGCUGACCCUGAAGUUCAUCUU oMetl
CmUGCGACUGGGACUUCAAGUAGAA
Nm=2' _OCH3
GFP2as GA CGCUGACCCUGAAGUUCAUCUU oMet?2
CUMGCGACUGGGACUUCAAGUAGAA
GFP2as GACGCUGACCCUGAAGUUCAUCU U oMet23
CUGCGACUGGGACUUCAAGUAGAMA
GFP2as GACGCUGACCCUGAAGUUCAUCUU oMet24
CUGCGACUGGGACUUCAAGUAGAAM
OH- G AC G CUGAC C ناو GAAGUUCA UCUU | Nm=2' دمعي -003
CmUGMCMGACUGMGMGMAMCUUCAAGUMAGAA multi m oMet
20/51 GACGCUGACCCU GAAGUUCAMUCUU | Nm=2' 2 ~OCH3
CUGCGACUGGGAMCUUCAAGUAGAA s20/as] GACGCUGACCCUGAAGUUC AmUCUU | Nm=2' 9 ~OCH3
CUGCGACUGGGACUUCAAGMUAGAA s15/asl GACGCUGACCCU GAAMGUUCAUCUU | ددصلا 2 ~OCH3
CUGCGACUGGGAMCUU CAAGUAGAA s15/asl GACGCUGACCCUGAAMGUUC AUCUU | ددصلا 9 ~OCH3
CUGCGACUGGGACUU CAAGMUAGAA
$20/as3 GAC GCUGACCCUGAAGUUCAMUCUU | دولا ~OCH3 CUGMCGACUGGGACUUCAAGU AGAA s15/as3 GAC Nm=2'-
GCUGACCCUGAAMGUUCAUCUU | OCH3
CUGMCGACUGGGACUU
CAAGUAGAA
9,2 GACmGCUGACCCU Nm=2'-
GAAGUUCAUCUU | OCH3
CUG
CGACUGGGAMCUUCAAGUAGAA s3/as19 GACMGCUGACCCUGAAGUUC
TEV Y
AUCUU OCH3
CUG
CGACUGGGACUUCAAGMUAGAA
زوع | GFACGCUGACCCUGAAGUUCAUCUU
C UGCGACUGGGACUUCAAGUAGAA
Fs2 | GAFCGCUGACCCUGAAGUUCAUCUU
CU GCGACUGGGACUUCAAGUAGAA
- ١ j ] - ١ j
Fs23 | GACGCUGACCCUGAAGUUCAUCUFU
CUGCGACUGGGACUUCAAGUAGA A
Fs24 | GACGCUGACCCUGAAGUUCAUCUUF
CUGCGACUGGGACUUCAAGUAGAA
Fasl | 6 ACGCUGACCCUGAAGUUCAUCUU
CFUGCGACUGGGACUUCAAGUAGAA
ENVY
— ¢ ¢ —
Fas2 | GA CGCUGACCCUGAAGUUCAUCUU
CUFGCGACUGGGACUUCAAGUAGAA
- ١ j ] - ١ j
Fas23 | GACGCUGACCCUGAAGUUCAUCU U
CUGCGACUGGGACUUCAAGUAGAFA
Fas24 | GACGCUGACCCUGAAGUUCAUCUU
CUGCGACUGGGACUUCAAGUAGAAF
3P-GFP2 ppp-
GACGCUGACCCUGAAGUUCAUCUU
CUGCGACUGGGACUUCAAGUAGAA s15/as3 PTO | GAC GCUGACCCUGAAMGUUCAUC U | * = PTO
U
Nm=2'-
CUGmMCGACUGGGACUU OCH3
CAAGUAG*A*A 515 PTO/as3 G*A*C| * = PTO
GCUGACCCUGAAmMGUUCAUCUU
Nm=2'-
C U GmCGACUGGGACUU OCH3
TEN Y
_ اج 515 3 G*A*C | * = PTO
PTO GCUGACCCUGAAMGUUCAUC نا نا
Nm=2'-
C را GmCGACUGGGACUU OCH3
CAAGUAG*A*A
OH-GFP2 | G*A*CGCUGACCCUGAAGUUCAUC U | * = PTO
PTO 5' uU
C را GCGACUGGGACUUCAAGUAG*A*A OH-GFP2 G*A*C| * = PTO
GCUGACCCUGAAMGUUCAUC نا نا
OMet]5/oMet3 Nm=2'-
PTO | C را GmCGACUGGGACUU OCH3
CAAGUAG*A*A
OH-GFP2 GACGCUGACCCUG | NF = 2'-
AAGUUCAUCUFU F
F23s/13as
CUGCGACUGGGACFUUCAAGUAGA
A
OH- | G*A*C GCUGFACCCUG | NF = 2'-
GFP2oMet15/3 AAMGUUCAUC UF نا F
F23/13 PTO | C را GmCGAC UGGGACFUU | * =PTO
CAAGUAG*A *A
Nm=2'-
EY Y
_ h —_ 3P-GFP2 | ppp—-GAC GCUGFACCCUG | NF = 2'- 1S2F AAMGUUCAUC*U *U F
CUGMCGAC UGGGACFUU | * = PTO
CAAGUAG*A *A
Nm=2'-
OCH3
OH-GFP2 | GAC GCUGFACCCUG | NF = 2'- 1S2F AAMGUUCAUC*UF *U F
CUGMCGAC UGGGACFUU | * = PTO
CAAGUAG*A *A
Nm=2'-
OCH3 3P-GFP2 | ppp-G*A*C GCUGFACCCUG | NF = 2'- 282F AAMGUUCAUC*UF *U F
C نا GmMmCGAC UGGGACFUU| * =PTO
CAAGUAG*A *A
Nm=2'-
OCH3
OH-GFP2 | G*A*C GCUGFACCCUG | NF = 2'- 282F AAMGUUCAUC*UF *U F
C را GmCGAC UGGGACFUU | ١ * =PTO
CAAGUAG*A *A
Nm=2'-
OCH3
TEN Y
Claims (1)
- tA عناصر الحماية (1) معدل له الصيغة oligonucleotide أوليجو نيوكليوتيد -١ ال I Lolo (0 على حدة في كل حالة يُنتقى من المجموعة المكونة من V5 1/3/1 حيث كل من و56؛ ORI OH و6/اعلى حدة في كل حالة يُنتقى من المجموعة المكونة من V4 V2 كل من 0 « BH3-M+ 5 N(R1)2 (NHR1 (NH2 اا ل «SH S هو عبارة عن © أو 1 (NR2 و NH 5 0 يتم اختياره من المجموعة المكونة من 2 «C(Hal)2 أى CHHal (CH2 (NR2 (NH يتم اختياره من المجموعة المكونة من و ي 3 ألكنيل 62-6 «alkyl ألكيل 61-6 (H ينتقى 41 2 و3 من المجموعة المكونة من ٠ أو مجموعة دائرية؛ كل منهم يُستبدل acyl أسيل 62-6 calkynyl ألكينيل C2-6 « alkenyl اختيارياء المرتبطة معهماء N أو حيث اثنين من 1+ قد يشكلان حلقة معا مع ذرة ؛ cation هو كاتيون +M و 5؛ © (NR3 (NH #ل يتم اختياره من المجموعة المكونة من Vo الالتقاط من المجموعة المكونة من راسب أليفاتي Gale يتم اختيار Cus التقاطء Gale يمثل 2 (tNHC2-C24 alkyl ألكيل 4 © ¢ long-chain aliphatic residue طويل السلسلة شربك أول من زوج salkynyl أو ألكينيل azide ؛ مجموعة أزيد perfluoroalkyl بيرفلوروألكيل « desthiobiotin ؛ ديس ثاي بيوتين biotin غير تساهمية يتم اختيارها من البيوتين dha) يحتوي على مجموعة أمينية chemical ؛ وكيان كيميائي antigen ؛ مولد ضد hapten هبيتين Ys ؛ ومجموعة Cholesterol كولسترول (NH2-Y-XH في كاشف كيميائي من نوع 406 amino ؛ وحيث يتم اختيار © من المجموعة المكونة من أحماض chloroformiate كلوروفورميات اأمينية amino acids « ألكيل «C1-C24 alkyl وشكل تفضيلى ألكيل «C12-C24 alkyl ببتيدات peptides ؛ ودهون lipids ؛ تمثل رابطة أو رابط يصل ملحق الالتقاط = X و ON تمثل أوليجو نيوكليوتيد oligonucleotide يشتمل على الأقل على ؛ كتل بناء نيوكليوتيد Nucleotide © أو مناظر نيوكليوتيد nucleotide analogue . "- أوليجو نيوكليوتيد oligonucleotide المعدل وفقا لعنصر الحماية ١ حيث يكون V2 V1 V3 لاك ذلا W3, W2 (W1 V6 هم عبارة عن 0. Vo ؟- أوليجو نوكيلوتيد oligonucleotide المعدل وفقا لعنصر الحماية ١ حيث تكون Y إما رابطة أو واصل يتم اختياره من مجموعة ألكيلينات alkylenes » أرألكيلينات aralkylenes « وأكسيدات بولى ألكيلين .polyalkylene oxides ¢— أوليجو نيوكليوتيد oligonucleotide المعدل Wy لعنصر الحماية ١ حيث يتم اختيار Z Vo من المجموعة المكونة من راسب أليفاتى طويل السلسلة Q « long-chain aliphatic residue و ألكيل (NHC2-C2 alkyl وحيث يتم اختيار © من المجموعة المكونة من أحماض أمينية amino acids » مناظرات الأحماض الأمينية amino acids « ألكيل «C1-C24 alkyl ببتيدات peptides ودهون lipids . ٠ | #- أوليجو نيوكليوتيد oligonucleotide المعدل وفقا لعنصر الحماية Gas) يتم اختيار أوليجو نيوكليوتيد (oligonucleotide المجموعة المكونة من ديسوكسى رببونيوكليوتيد desoxyribonucleotide أحادي الجديلة single-stranded أو مزدوج الجديلة double- 0" رنبونيوكليوتيد ribonucleotide ومناظرات أوليجونيوكليوتيد oligonucleotide « ll تكون غير معدلة أو معدلة كيميائيا عند نيوكليوسيد nucleoside و/أو الريبوز ribose Yo الخاص ب ديسوكسي رببونيوكليوتيد desoxyribonucleotide « رببونيوكليوتيد ribonucleotide » أو مناظر أوليجوتيوكليوتيد oligonucleotide . لمه 1— أوليجونيوكليوتيد oligonucleotide المعدل Bg لعنصر الحماية ١؛ يشتمل على تعديلات كيميائية تحافظء أو تشكل؛ء أو تحسن dsl و/أو الاستقرار الكيمائي ل أوليجونيوكليوتيد oligonucleotide . 7- أوليجونيوكليوتيد oligonucleotide المعدل Bg لعنصر الحماية ١؛ يشتمل على تعديلاتكيميائية يتم اختيارها بشكل مشتقل من المجموعة المكونة من الهلجنة ash « halogenation calkylation 2'-O- وتعديل فوسفوروثيوات phosphorothioate واحد على الأقل بين روابط بين نيوكليوتيدات internukleotid .—A ٠ أوليجونيوكليوتيد oligonucleotide المعدل وفقا لعنصر الحماية ٠ حيث X هو عبارة عن اال أو 0؛ Y هو عبارة عن —K—(CHR1)M-CH2-O)n-R أو ~(O~(CHR3)m3-CH2)n1~(O~(CHR2)m2-CH2)n2~(O~(CHR1)m1- CH2)n3~(NH 51 O »ا عبارة عن ٠ كل على حدة؛ ١١ إلى ١ عبارة عن m3 2 im] im كل على حدة؛ ٠١ عبارة عن صفر إلى 03 02 01 01-6؛ alkyl ألكيل (H يتم اختيارها كل على حدة من المجموعة المكونة من 43 (R2 1 ومجموعة حلقية؛ C2- 66 acyl 02-6؛ أسيل alkynyl 62-6؛ ألكينيل alkenyl الكنيل٠ كل منها مستبدل أو غير مستبدل؛ و R يتم اختيارها من مجموعة تتكون من ألكيل 61-6 alkyl ألكنيل «C2-6 alkenyl ألكينيل alkynyl 02-6؛ أسيل C6 acyl -62 ومجموعة حلقية؛ كل منها مستبدل أو غير مستبدل. - أوليجونيوكليوتيد oligonucleotide المعدل وفقا لعنصر الحماية Cua AYo أ) 1+ و2 هما عبارة عن ا و 1-صفرء ١-02 و1-03 أول— \ جم ب) R3;R2 (RI هم عبارة عن 5H كل من inl 72 و13 يساوي .١ -٠ أوليجوتيوكليوتيد oligonucleotide المعدل وفقا لعنصر الحماية ٠ حيث X © عبارة عن اال أو 0؛Ble Y عن رابطة؛ وZ عبارة عن ملحق التقاط يتم اختياره من المجموعة المكونة من C1-C12 ألكيل «alkyl © وNHC2-C24 ألكيل Cua alkyl يتم اختيار © من المجموعة المكونة من +؛أحماض أمينيةpeptides ببتيدات 61-024 amino acid حمض أمينى <i ¢ amino acids ؛و lipids أ ودهونتكون 1/ا V6 V5 V4 V3 V2 1//اء 2//ا و3//ا عبارة عن 0.-١١ أوليجونيوكليوتيد oligonucleotide المعدل ag لعنصر الحماية ١ حيثX عبارة عن 0؛ ١ ل عبارة عن رابطة؛ وsH عبارة عن Zتكون 1/ا V6 V5 V4 V3 V2 1//اء 2//ا و3//ا عبارة عن 0.)— تركيبة صيدلانية تشتمل على أوليجونيوكليوتيد Wy oligonucleotide لعنصر الحماية ١ Yo في مزيج مع حامل carrier ؛ مخفف diluent ؛ و/أو مساعد مقبول صيدلانيا.-١ التركيبة الصيدلانية وفقا لعنصر الحماية Gus OY يكون الحامل carrier ؛ المخففdiluent و/أو المساعد المقبول صيدلانيا مناسبا لحقن الأدمية.بلجن 6- التركيبة الصيدلانية Wy لعنصر الحماية Cus OY يكون الحامل carrier ؛ المخفف diluent و/أو المساعد المقبول صيدلانيا مناسبا للحقن الأدمية من خلال adsl) وخز الإبر. microneedle patches أو لصقات الإبر الدقيقة (dada -١١ ٠ طريقة لتحضير أوليجونيوكليوتيد oligonucleotide وفقا لعنصر الحماية of تشتمل على تفاعل مركب له الصيغة(8!ا١): Vamos 8 م we | :لا vi يمري ا يط Ha حيث يتم اختيار كل من V5 5 V3 VI على حدة من المجموعة المكونة من 0؛ 5 و58؛ كل من 4/ا 53 V6 على حدة يتم اختيارهم من المجموعة المكونة من «SR1 «SH (ORI (OH N(R1)2 (NHR1 (NH2 (FV. و BH3-M+ « 1 هو عبارة عن © أو S 2 يتم اختياره من المجموعة المكونة من 0 5 NH و (NR2 3 يتم اختياره من المجموعة المكونة من و ي CHHal (CH2 (NR2 (NH أى «C(Hal)2 يُنتقى 41 R2 من المجموعة المكونة من (H 61-6 ألكيل» 62-6 ألكنيل C2—¢ alkenyl 6 Vo ألكينيل الا07/0ال8» 62-6 أسيل acyl أو مجموعة حلقية؛ كل منهم يُستبدل أو لا يستبدل؛ أو حيث اثنين من 1+ قد يشكلان حلقة معا مع ذرة N المرتبطة معهماء +M هو كاتيون cation ؛ ON تمثل أوليجونيوكليوتيد oligonucleotide يشتمل على الأقل على ؛ كتل بناء نيوكليوتيد أو مناظر نيوكليوتيد Nucleotide analogue ؛ حيث تكون ON محمية بمجموعة حماية واحدة ٠ على الأقل؛ مع عامل أكسدة للحصول على مركب له الصيغة(0ا): اAd — جم Van AL pa Wo Ws Ve Mo | | AE EN a Od I i h ل er . Wy WY حيث 1لا W3 W2 0/1 V6 V4 V2 V5 V3 كما حددت فى عنصر الحماية ١؛ وحيث يتم اختيار ١/2 من مجموعة تتكون من 0 5؛ ON Cua Se محمية de gana حماية واحدة على «JN (ب) تفاعل مركب له الصيغة (11D) مع عامل ale التقاط له الصيغة(!اا)؛ {IY بل - 2-7 }~[ X يتم اختيارها من مجموعة تتكون من «(NR3 ¢ NH 0 و5؛ 27 تعبر عن عامل ملحق الالتقاط» و 7 تعبر عن رابطة أو واصل يصل ملحق الالتقاط = X ٠ للحصول على منتج تفاعل يشمل أوليجونيوكليوتيد oligonucleotide له الصيغة (ا)؛ We Wy 1% ١ م لي لا | ٍْ XH, rT we — WL, — ON هج We Wa Ws i (ج) إزالة حماية مجموعة ON Liles الواحدة على الأقل؛ و (د) توصيل منتج التفاعل من الخطوة (ب) مع عامل كاشف للالتقاط قادر على التفاعل بينيا مع ملحق (LEN حيث يجرى التوصيل وفق ظروف تتيح فصل أوليجونيوكليوتيد oligonucleotide ٠ له الصيغة )1( من أصناف أخرى تحتوي على منتج التفاعل المذكور؛ وحيث يتم اختيار ملحق الالتقاط من المجموعة المكونة من راسب lel طويل السلسلة long— Q ¢ chain aliphatic residue ألكيل ¢NHC2-C24 alkyl بيرفلوروالكيل TEN Y— جم perfluoroalkyl ؛ de sens أزيد azide أو ألكينيل salkynyl شريك أول من زوج رابطة غير تساهمية يتم اختيارها من البيوتين biotin ؛ ديس ثاي بيوتين 065101051010 ؛ هبيتين hapten ؛ مولد ضد antigen ؛ وكيان كيميائي chemical يحتوي على مجموعة أمينية amino ثانية في كاشف كيميائي من نوع 201--112-7ل؛ كولسترول Cholesterol ؛ ومجموعة كلوروفورميات chloroformiate © ؛ وحيث يتم اختيار © من المجموعة المكونة من أحماض أمينية amino acids ؛ ألكيل alkyl «C1-C24 ويشكل تفضيلى ألكيل 612-6024 alkyl ببتيدات peptides ؛ ودهون lipids ؛ وحيث يكون كاشف ١ لالتقاط عبارة عن sale كروموتوغرافية مع انجذاب للمجموعات الكارهة للماء أو المفلورة fluorinated شريك ثان لشربك رابط تكميلي للزوج الرابط Je الانجذاب والذي ٠ يكون ستريبتافيدين streptavidin أفيدين 87/010 ؛ أو جسم مضاد؛ أو مجموعة azide wil أو ألكينيل .alkynyl 7- الطريقة وفقا لعنصر الحماية Vo تشتمل AIX على (ه) إزالة ملحق الالتقاط من أجل الحصول على أوليجو نيوكليوتيد oligonucleotide ؛ وحين Vo تكون O = X يتم الحصول على مركب له الصيغة (IVa) أو (IVD) Ve V, / HO—P—W;—P—W;—P—W;—ON (Va) ولا 7 7 أو ts hE Yi ير لم وري حورل سو بم (IVb) ولا Ve Va وحين تكون NH = X يتم الحصول على مركب له الصيغة (IVa) hE hE Yi HO—P—W;—P—W;—P—W;—ON Vs Va Ve (Va) ٠٠ TEN Y0 هى X Cus ٠9 الطريقة وفقا لعنصر الحماية -١ حيث يشتمل أرألكيلين oF المعدل وفقا لعنصر الحماية oligonucleotide أوليجونيوكليوتيد -٠8 أو محتوية على ذرات غير heteroatoms على مجموعات ذرات غير متجانسة aralkylenes متجانسة. © يكون Cua 0 لعنصر الحماية Wy المعدل oligonucleotide أوليجونيوكليوتيد -4 مزدوج الجديلة وكل جديلة من الجديلة المزدوجة لها طول oligonucleotide أوليجونيوكليوتيد على الأقل. nucleotides نيوكليوتيد Y4 ٠١ حيث تكون FY المعدل وفقا لعنصر الحماية oligonucleotide أوليجونيوكليوتيد - ٠ . oligonucleotide ل أوليجونيوكليوتيد 16-١ التعديلات الكيميائية مرتبطة بانتقائية حيث الهلجنة V المعدل وفقا لعنصر الحماية oligonucleotide أوليجونيوكليوتيد -7١ هى alkylation 2-0 alkylation والألكلة F halogenation هى هلجنة halogenation Yo .2'-0 methylation مثيلة هى عبارة Z Cua ٠١ المعدل وفقا لعنصر الحماية oligonucleotide أوليجونيوكليوتيد — YY alkyl أو ©؛ وحيث © عبارة عن 012-024 ألكيل C10 عنY. (1) معدل له الصيغة oligonucleotide أوليجونيوكليوتيد — YY Va ولأ ¥y EE ا #الج Xe يمري Ya We Ws 0 و5/ا على حدة من المجموعة المكونة من 0؛ 5 و568؛ /3 V1 حيث يتم اختيار كل من لكل من V4 و6/اعلى حدة يتم اختيارهم من المجموعة المكونة من «SR1 SH (OR1 (OH N(R1)2 (NHR1 (NH2 (F و BH3-M+ « 1 هو عبارة عن © أو S 2 يتم اختياره من المجموعة المكونة من NH 5 (O و (NR2 © 0/3 يتم اختياره من المجموعة المكونة من ف ي CHHal (CH2 (NR2 (NH أى «C(Hal)2يُتتقى 41 R2 من المجموعة المكونة من (H 61-6 ألكيل «alkyl 62-6 ألكنيل alkenyl « 62-6 ألكينيل alkynyl 62-6 أسيل acyl أو مجموعة حلقية؛كل منهم يُستبدل أو لا يستبدل؛ أو حيث اثنين من 1+ قد يشكلان حلقة معا مع ذرة N المرتبطة معهماء +M هو كاتيون cation ؛XY يتم اختياره من المجموعة المكونة من O (NR3 (NH و 5؛ 2 يمثل Gale التقاطء Cus يتم اختيار Gale الالتقاط من المجموعة المكونة من راسب أليفاتي طويل السلسلة long-chain aliphatic residue ¢ © 4 ألكيل (tNHC2-C24 alkyl بيرفلوروألكيل perfluoroalkyl ؛ مجموعة أزيد azide أو ألكينيل salkynyl شربك أول من زوج dha) غير تساهمية يتم اختيارها من البيوتين biotin ؛ ديس ثاي بيوتين desthiobiotin «Vo هبيتين hapten ؛ مولد ضد antigen ؛ وكيان كيميائي chemical يحتوي على مجموعة أمينية amino 406 في كاشف كيميائي من نوع (NH2-Y-XH كولسترول Cholesterol ؛ ومجموعة كلوروفورميات chloroformiate ؛ وحيث يتم اختيار © من المجموعة المكونة من أحماض أمينية amino acids « ألكيل 01-024 calkyl وبشكل تفضيلي ألكيل «C12-C24 alkyl ببتيدات peptides ؛ ودهون lipids ؛YY تمثل رابطة أو رابط يصل gale الالتقاط ب »ل و ON تمثل أوليجو نيوكليوتيد oligonucleotide يشتمل على الأقل على ؛ كتل بناء نيوكليوتيد أو مناظر نيوكليوتيد nucleotide analogue « يستخدم في تصنيع دواء لتحفيز الجهاز المناعي immune system لمريض.-Y¢ Yo أوليجونيوكليوتيد oligonucleotide المعدل وفقا لعنصر الحماية (YY حيث ash الدواء المذكور بتحفيز بشكل انتقائي مسار الإشارة 6-1 .االاج —Yo أوليجونيوكليوتيد oligonucleotide المعدل وفقا لعنصر الحماية (VY حيث يتم إعطاء الدواء بالحقن داخل الصفاق administered intraperitoneally ¢ بالحقن العضلى intramuscularly « بالحقن الوريدي intravenously « عن طريق intranasally cay! « تحت الجلد subcutaneously « بالحقن الأدمى dntradermally أو عبر النفق الفقري.ntrathecally © ¥1— أوليجونيوكليوتيد oligonucleotide المعدل وفقا لعنصر الحماية (YO حيث يتم إعطاء الدواء بالحقن الأدمي intradermally عبر التوشيم أو الوخز بالإبر الدقيقة. Vo 77- أوليجونيوكليوتيد oligonucleotide المعدل وفقا لعنصر الحماية YY حيث يكون -61© 4 ألكيل alkyl المذكور هو 612-624 ألكيل alkylA —_ جم #8 8 الس ل 8 0 WER = ee 5 #8 3 o الم JF iy xs fool 0 . 0 EY #8 دي + 8 x a S&F 4 ERE {2 I 2 3 ERS {ed 8 ل RN نم Rr 3 محتسي 0 ال 8 > ST يي ب $B 3 3 qtE>. IO) Ha fat : Fret, a ¥ 3 ٍْ ل ام oA 2 8 ال ل Boo, LUN لي TEE 5 Tv YR oy vr 2 £3: at 08 a § 0 cod x = x Ey EN 5 م 9 x RY 0 ما ل 5 ا ل ب ا WR, gad ny ot Ne 8 i" : 3 EE 8 == x De £3 2 poe = EY Bei: a oi 1 0 ba : 8 ا يي ال 2 3 SEEN 3 ا 8 1 ال Sw TE el a UE Eien, i Ral Ng Th " hk: : iF = a Be” g RE Pe i x 5 43 Bon B Re و ب N 2% al 1 Be ) bs = be he] 3 3 Ey 0 ل ا 3 AY TAR oben aR |g N & 5 ; RB Y fet = ب 8 2 3 3 ha) 3 ERTS Fi 6 8 1 ا وج ل ا انين لاحو 3 iv 8 : = 4 Sud, Cha SE So. dy ا الح 3 اا * غلا ا ا ١ م _ ERE ا 4 "م الحا اا ااي wh لاني ا ارط 5 Cl جد اي 5 الخ x Bree md mW 5 Ed 0 1 Fass zon I Ea # EE WW SN : : ل يا ايا حي ا يج الجا ا الت لح BR Saw DF 5 = a ¥ بت اا RE TER Ti ماي ae Ol £4 Era ال م 6 1 ES Te wi ا" y ju اتاج ؟q —_ جم AER a ed Raa 5 امتساهى Sally ib 3 fag 0 : H 1 1 إ ا 7 vd oH ل BS : ريف Salil Jat Wg ¥ 1 : y * He HY Als Rang لمتشا بالعتنياسش LEI RE Taf [#1 7 3 مجم SEE 7 اج يت ا وتوا توا ات ااا اا صكر Sg 1: 3ح ha * 5 3 EK) EIT شكل ؟ أ ل ag 1 : Ford [ wg i RG | i ا Tayi " ا ا ا د الم اله د ل د ا ا نت ذختت شكل ؟ ب ) = TEN Y_ h «= 4 3 ow a : i § HL 2 ين ين 1 S eA pas Ea we ee 3 i §$1. Fis wt ¥ NOT —— =i RAN 3 PRR NANA NAAN NAN beim : Ea امس = | 5 J &y = : 4 2 حا لجال مخ اجاج حت لا حي ال لض ا مح ااا ل اجا AAR اال اا وياد 1 = ’ a wo > x 0 33 8 8 . 8, h = ل ge am bs 8 Foy a ا {GC وك ". Ha > ل ان ملب ً 4 = ~Q—{{C Hy Im GH; ~0},~C Hy و مه 72 =O {{CHR اند غنات ناد كنا مح {CH FR و > In “CH CH —O— (CHa) CH=CH; - O)y~CH,~ CH, = QQ CHR Jy CHa > “رات Oy CH CH + شكل لGER al Me قي Se Loy 1 1 الخال 8 0 لاج وا has $i 8 م« انظ ان او 2 1 rt i NEN \ REN 8 ا neon RL NEL | 111 0 : ا EIA ny الا 3 : | الما JE a. i 0 } 0 N . ُ 0 0 احا 5 3 TERT N 3 8 XN NEE 1 را wad NER & 8 N RR NN 1 N 3 ERA 5ه rata Re Ba RAB Re AN BR Tay J : 0 ب 1 1 بح الا vod 1 الاج Pod ا 1 ابا gl y : : 1 ..8§ أي op pp TLRRZLY INEE 4s < : 0 وي لطي )0 مم == N 3 c = 3 ا MAREN SANNA SR NN NNER LR وخر a Pe ودر ا يا اضر ايد Gs E BE HE TURN IN SRNR RRNARY ا 2 a EEE EN FOE EE SE EY EYEE EE EE EE EET NSN SES EASES STEERER ايم ا ااي 3 RANA ONE ICNE CERES BEET TERRE أ اب 1ن I. 9 د aed 4 oa WU as uh WD wl Ah عي يف3 و1 ومح حت ل لق مه ار بف لكاي له بذ A الح رط اج علد لاس ل لك 1 اه حا ددا يجا يا أن مي يجيا اذا REL en وى قر وض ضر جا إن و و اجا م را ره n قات قرت كاي UGH ضما ف م قثن حت جنينة ped الت تتا meee _— TT NTF TTY NIE اج و اا ممم SI NER ae de EN N NE H FN cde d faa 28 : EEN GC [ERS 1h لاتب NNR مامد اا اج : مالي i SO od [a N\ اي [ag ge ! LF Lae الا ا 1 ١ حا جم ا aicigie Na Pd a A RRR a { a yd ا 000 1 3 NESE NEUE I EN I I Sen pi ال الع ل نا ل ا الا EE ا CBE SIA لج ا لما SSR IE ب" Ea NEE أ ااا اا الا ألا Ede ad § SEE !ا ا* لسع ا الح اإجوا ا مبم اشوا Vow om de bm bl Ea ا نت ا ا od ا ا ا ا اذا اند ادا الا أن اا انا اا ا & & شكل Pe(FLT GFP alan جنيلةمضادة 3 pany ب EARS H 4 oF i ; Ny EV 4 لضأ كاج ونوا 1 . v دبا FE 1 ٍ 3 0 اا انط \ $< Ly] y § hia Lene ® TE ١ 8 Nad J AS 8 SED NL x ERE انر 00 0 اا H TY os Uo fl J نمو i H i td “ TERT ا ره عاو id in PAI 0" i 3d Cry ERT 33 +Né §% Td 3 he H 3 NN الخ ا YR i {rv ee الي IE ذا 1 اكيم EEE RE EERE EE EE EEE Ty 4 { 1 ات : 1 i اط يع 0 IETS ا ot لجرا الك BL Eg] : : 3 x Los RE CCA EE FN EEE OE EE I لوق اااي 0 لد MEANY © = و ا لاا ا 1 ال لي ه.ا ل سكل NNN RNR NR a BON ERR امت سي LENE LEE SNR IRANI ا ل ا اد ا ب == prof اج تاج دان AR Lc LN داج نا وات يي 3 لايجا EE ل اا ا ل اع ارد ادا ار ERIE ERE EEE FE FES SR ا = EE A RE eT EE وكيك اي Srrasasene dB RMR ERE HN لخد ا HE حا جلا حر Be Sh Le جنا RE I جا و BT نا يه قا Se نا AT BA fe LE RL TORT EL RR DAR REC RCA CET تع Loan Siu lida = ا حت ا NET TN ie CNN Gia leisicivivlol a ا Nl Erb mp oA j= SAE RAR Rl \\ ال وا ا ا ل ا ele ly Ba Contre با ع لماج الايد اما Jn malo Lak Sa قاط EA SEAN a EP fa Vio dee binant د ES es HUME ع ab ode SES Shoes HRS HER LRM EEG 0 ارا oN bt Sl i ل SE جو سد إلا إل اس اا نت ا oF WEG اج ألا أجل [ لأا ما اج ار و الم الل ار حدر رس زعا Ped اعم احا fe EA RR قا الاج i = 0 7 شك ا نا8 £5 0 i 0 الج ا : Fa § won TE 0 pre RR] SS CUR مر 3 i لا 2 ابا اح 8 ٍ اليم fo د Prd ا جيم م 3 Phe mm ; N E NS 1 8 FEE 3 ¥ Tg.ET 1 ما ال اا 8 ا MR 8 0 ا ~ اله Xs E fo on : : 0 bo No Fag Se I XB 3 N 8 1 i aii SR Rm BR i Bir SE ih, ei Ri vy i 1 3 i se rei Ne: § de i ES N ¥ 8 oY i LR ا 5 po 8 NN ل تج Fo 8 NN i Line RN N 8 ¢ Sale ال ب NEESER ¥ bad aN 8 الاج الم ¥ ب 8 aN OR MW ب" 8 N N 8 8 i NY EX: NY OR OB 8 NN nN 4 Ny OR NOES جيم i NS SS اا لق ROSE يي +5 لل ا اكد لاح ادا اا a : ال : خخ Lit SR ا الا اليد اجات جهن تعبات اين ار اك ا ا ا ل ل لالت ءءء > لق ات ا fA oy iF = iF = fn AE NE ا جحي وحن اليد الم الا 7 RRR) دن ناه لي لد تحت احج انعم الجر aE اجو وا de TR : wr I | I i | 1 I ao : ١ RE : اا اا ا احج = RE WN AA 0 FR RNR : RR Wah x TE RNR RN N oi Ena J ois a ESS SE اح 8: a NI a FN iS > Eh 2 : yw § BY 3 : Le 3 1 <8 3 LF 8 ا NF hi] ba 3 43 x yi Ea مخ ا 2 5 لفل x Eo 3 Ed ® 5 reاج أ — NESE SAE PE & 3% عي Be NNN RN TY ¥ الاي ER Ny a es 3 الم RRR: By Pb COS aa nnn ECE لعي RRR RR a Se 7 = = 8 الل ل م م PR Sy pe) م freee SRR ْ اا < لمش ؤت 77 وح الج ارج لد ججح ب aR ا hs ¥ 8 اج سس Sy Sa] لا د EEE ER SN : و FO A A 0 0 > 5 د © ال : a ey 0 3 EI لمعا EE LT $3 NEE 33 EEE ty 1 NE: 1 > + اح“ وا لل a i NE 1 ل EL NS ad الأ إ FR A Ey EN BEARS RE EE 1 الس اي ال Te > EEE FR ATTN hs] SE > . ] 8 ات اع جح 58 وج ا 8 i د الع Ww 8 ES NON Ww ا EE % Soa ME 1 ak ال ال : ees w x & 8 1 1 + حا pe RE ا a A 0 SRN لاا TU متت حت ا مات مات مات حتت مت حال a ES : : kd + = 3 * fo N = oe a -~ 3 188 : : ا : PS wc : i د إن ْ رض لضو Yo : : لحان 1 i 1 ب وا الي جح i & ل Ly te 3 5: 5 8 J المع ل y : Yi الال لس ل 8 ا | أ ل اج جر ال og ين ا 1 : دا 5 د بحم N : HE ا ا نات يي ْ ل x > « دا : : Ay ae : id &® 48 ب ا : RR pa لاا الا ا OR الا الى ال RR ا جر RN و مجر اليج ا ل ريا ضرا اا الخ ل ال 8 ا اليا لاا ذخ هد اخ EAE: TH كد ايك FE لجالج SES OTN aR wa ل ل الع ا كد الى ا ال 8 م ل لاد i RE EP الع FOB WR “LF RE SEE NEED EE HE R 8 الل RE) : : 1 kd 1 : 8 : i i 8 #3 if ل اق لله ال La ]34م 15 J SHR :4 45 الج ب Wo io_ h أ _ ا § $m 8 ال RN ERY يرت 55 الم 0 3 SERIE =H SEER SEEN OPN : : a SEE 8 و5 ا الا 3 3 Bo TAT #8 و 8# ا wd i Fe = —— ال ged ® BY CN Ris 4 : ام 4 دج Na £184 FEES الاي الي a 2 . » : 8 pa SESE يج 8 “HN. AN rd ل ; JR ناح 8 eS يت الج 3 ) SAS “= الا ا EN الات ااي TISY 3 8 ا اا اس ay i يحتج 3 3 Foo IN ا oR 5 Sm 153 § «TR gs iil 2 ¥ LA «TE tn يدي 4 3 J ui 8 و لات الدج > يدج اللكت-( . لص ٍ ٍ H 1 ادج 8 SS 55 ذخ os EE 885 بي اا سبي ل£ a. 1 = النة 183 8 ضوح بد المي ال 1 مج ا i i | em EASES الس لمم IR: دي Al Sh ادي propped 0 = ل 1 ل ل 32 ل £5 Se اح جهن ٍ يب SER 4 ب ناا تالضع اموي ممصي الل ا ay Ea or DERE 3 جح 88 on] reed wo ps {254 w=£3 . He . 1A شكل ENVY_ h 7 _ ا wi مشي م بي I seg 1 TEE SR SEs wo 8 ال لاك i i 2 ¥ ed snd متتو لات لاس د الجا ا اي J an ERNE GSR -at م اب abe a _— SRN EE سس - CER يني : 1 ل cd 8 3 »ا £ ree 3 1 : حا TEES 8 +E an ised ri RN ا JE : N 1 ل i TERA so SENN FE ا +8 ed SRN wR IE ERR N i ال TENG iS % EE IE = em Fim y a FEE 5 = he ءا ® ا amy ا ee SRN يلق المت + Eo\ a. Eo 88 مس ا ey 3 : جا المت 0 ثم الل الي جا ال سيا ا نت لي ال ا اد لا ان 1 الي SR SS wT ب ed i BE ErSN. 8 oN ات N 5 8 : LR ل انسيسة Deny cd nd on ASS ويح ارا اح ش88 مجو م ا 3 : N 1 i i § يج سح ieee: جد سحت حت ا So) JETER. RRs ® x * 3 wp pe اد اد x REE اال 3 Be omer oes IR ape ae aed “Ry نجي الل لجل اح 0000 Ps {edi لوو {Td 2b Ce NE تسبي wes اي hed Ded Na SR eS ا = > = = Sy = 8 : bg ا ب A شكلGi Es co es 3 E33 8 FE I 8 : 8 33 Rd FRY 3 i 33 800 د RT ا 1 د Fo اق | bi 7 ER 85 ¥ rR A Ha K BUR 2% x ES To J Ih wn ب Ww de fC SR SE 3 اللخ wy Se Sig ال WX اوح WY RF on نب سا : 81 ا ا Wy ; OW oH {FA wed م WN lot a8) Eo ب Eo = = pd ¥ EOS ؟ج SH © si mo SHE لاخ a bk 0 5 5 AYR AEE SN ا Jk £ Xx REX ال اح ليا يي يا يب Ra II I¥ In EELS << ة Esra ا ا ب ف SE Tae B ERE اللاي © i 8 ؤ 8 ١ حي RES = يبن ES ES ب peTS. Ss EX 3 * 3 x 8 ا 3 > = 42 TF 0" 2:1 ERE 3 i TE 138 8 1 Ni 3 8 ا : ا B RN iN 8 4 > BN $3 EN £8 EI 8 8 8 8 ا SERNA 8 EN 8 wa “LERNER - NR 8 8 5 NR RNR 8 BN 88 & مجر 1 NN BN 8 8 1 * 5 Na 3 5 8 N 8 ا INNS NEY EN 8 33 q 53 NEA RNY 18 8 8 0 ا NEY 8 88 3 5 8 8 EX # oY YEE RN 0 1 i بلا NY الوا لخ 8 8 8 0 ال NaN ND 8 8 8 R 8 كيرا من ا RR ENN NN 8 2 5 ES pa 8 NEY NINE NN 8 2 ب 18 a FAN RNY NX 8 2 3 EN p = NUNS NINE NN 8 2 EX 18 3 A NINE NN 8 EX +3 oc 8 ARR YAN RAN 8 51 5 23:5 اي = NN RIN NN 8 2 ب bi 8 = NR RIN NN 8 2 ب 1 3 8 NERY NEN NN 8 EX 55 3 = TN RIN NN 8 2 ب £3 Sn 8 NERY NAN NN 8 EX £3 RS 8 RINE NERNEY NN 8 EX 58 ذا Y aR NN NNN SN 8 2 3 ES ER 8 1: ا NR 8 23 EX 55 : BR NAN NNN NY 8 8 RR BRE 8 الخ NEN ANN be 8 IN 5 0 اا VEE ؟] نا 5 لخي ال HY 8 8 8 EN م RRR DENY NAY 8 8 5 £3 م SERIES DENY ENN 3:3 0 85 1 BR ال ERR 8 N 5 N BR ERED RAEN ا NN N 5 N BR REN RAEN ERY 8 N 5 N بالج م ANAENY ENR 8 8 5 NE م ERED IRANENY ENN ENE 8 5 EXE 8 ERED الم ENN NN 4 5 EN AR الا NERY NENA NN 4 8 NE * = ب المي 2 ENN RNS 8 EX £3 ب المي ع 2 SNR Rey 3 EX EN 88 5 5 RY 225 2 EX #3 « ب اليج ع 2 SN TNR 8 + EX EN 8 8 بالج 8 EN X 8 5 22 SANENE ل الج ل oN 5 #3 $3 = RNR ا 5 ب 2 EX Ey ا ب ال ع NR Nod EX EN 88 ب الم 8 NN EN NS i #3 2 NEN RENT AREA BN NE CR EN B ل NN NN An NE 0 « RB 8 + = BERNE ERNE EN RENE 8 pt 3 EE FENN af NN اللا SN a NE 3 ol ~ he = EE ie So ا 3 ب" يب i #8 a i RE VE 38 8 الج * ا ١ 3 ARH Sia ١ > ب امج ل ال Sona الخ اا 8 LF ع زم ري مضي لي ال § 8 : ju &. RB, 3 NR 5 IR-؟؟- Io ع ييا OR اا يض يط يح ا 8 اذ{gp قاف By | : ٍ = ا الي EY —EE & ) 3 48 5ج ا 1 NE a 18 ا اليا uN 5 : ; ٍْ :ْ 5 لتب : ل EET LE AaS 3 3 &seedy 8| حب مطi كفيس 0 - 8 8-- , ; 1 ll سا ا : x : 1 ep BATRA ب لكشولا ا > N 0 0 ا hE Tay, A 0 o د لس ا 3 “Rg i جيب سي . تا اس eR i 8 الات ل TO . fra * الا اا ا N = 3 ١ 7 ~ 1 ب 8 k ب ع Re a م > a ® د ل الا Bc om BORG oN xX } Ly ااي د لس مجر 3 سل 0 اكة <> ا اا ةا SO) RNG Bok} Sy Ni wl Lo yo ا ا A 3 تيع RR, EY 5 8 ge = فى ا لذ 1 + 0 تيم LE N 4 4 ena 1 w Bos Bow \ 8 . ب > 3 N + الخ oF HF we ig RE ل تك WE : َي ب ب 5 8 : نحن 0 bl \ ف 3 ةد لآ انةا ا 3g “8 : 1 S ¥ ؟ 4 + + oh ee ) i = * : > ا ey ال I oe) 1 بايذ ENA ju ES 8 0 1 TEN Yووو ا ozddmeay سل موديية ب SADE متت مويي rst مضيو TET pred} | 1 BY 8 ga Jo 3 0 . ا ol N A iF 8 ra) * ~X وب رضن أ GRO {ng ET ا طرخ . oo شكل 1٠١ ب TEENYلل s EF ١ عقا oF oF FE اي اي NE OSE NE 9 | ا 7 ا The ha CE ES i 3 : BS N ْ: ie 1a SAE ia | Ei 3 8 8 1 Se NN a X 8 jo I © © 0 & ال-«2| 0ن ص i 0 oo oN 5 ب £4 Fog 1 4 27 B a4 : EC] ng MN طخ hE ef 1 oe a 5 Ee 5 He He 3% 5 2 3 2 5 x 5 5 = 8 مي عد fa 5 £3 88 شكل و TEENYا 2 R 2 3 Bisa Aa 5 8 :ْ 0 ا i ~ #2 > 58 a3 2 Fong, 8 ا Bl. تج EN الم = ا ae بج ل ee اال vhs 3 ha > roid Nie £5 3 : . اا an a rn NEY LB :5 ا ادا ا اا اعلا Gir ry AR اماد حيجن ا الس be 2 we ل ROTH SI 7 : Bal DR, RE ANG حت“ S&T : “Fe i oF CI % : ا لهاك we © sa 0 ا ١ a “> ا 5 pe : ا pox - 8 0 0 Rog RJR ب = 4 1 Boy WF - = 8 8 TL = 5 & EN Rh rd Bowie RB Po 8 oy 3 الجر ااا . Ry SR = ER 2 مح ل 8 5 SESE nd = ا EE es : 5 J ا ا ire ad Sl = Be pel د ا NN by 5 9 = Ey a fe eg fe مسج 3 RS 8 by 8 نا كج ا ال ا اي ال ا ب مدت مش ب ا جا PE ب لبي امح vod & RY . BERS bod - Le] الال لمات 7 8 Boa Tugel > el 9 ب ode & بج he 2 oo + : 3 BE 58 ) KS a “8 لي § 5 الهج SN & x o 4 a wr = % 0 3 + 5 0 Es % 8 3g = بخ 8 5 اله ا ا Ed x ps & i 3 % Coad £3 CE bi es x $y Aon ا ؟~ om ) 8 3 م ro Kahr EE 0 م nN tN FY SY 4 dy اج اي & pos د * 4 aa > المي R AA لاخ o N RAR R سس ها EL, ! 8 Ne on IS ل حجني ل 8 © UTTERANCES لوده ta الل مم ااا لا yo i A nis t ne, 8 2: 4 i * مي aa يلا a na nn nn nn اللا ل nn nn nn لل nn ne i x x 3 : EB = 6 ى م ا 0 م ين شخ لم Ei 3 ¥ شكل_ Vv م pox VE La ORR i be Ew زأية $e ب تا لي 1 مام 58 ال & i ل اا 1اد ملستت مح ول LAA RTE +§ , i ]* لا 2 اوت تت السييس جا“ 0 EY i b 0 & اشق ا١/7 1- = 2 =f 3 “= & . al 5 i ا 0 ب R 3 = a ابيا 3 : eg ب اي 0 ض I PRS (PR ; Ri ET م لل يج ل 2 oF i” 3 o ا & Hegel امم امن = 0 a 0 ا 0 ٍ Yow tom { LTT ee = TR 3 1) 8 0 ¥ 0 8 0 : 3 8 o£ { 0 0 ey 3 ل % 0 ا ل = w ¢ ¢ — ١ رز x A Sod peed + 0 0 & P= 3 g 5 Se & BE PEL اا إن ارلا ني ااال & % 3 & Xx £ د 0 ا : & 1 & & RE RT 0 ¥ 8 لي كزا IS اج x ¥ EN i Jed td o 3 fy 3 8 = : 3 8 > i 8 i 8 الا hoy 48 م ou 3 8 NE ii FE SR FEA I {i © 2 pd eS ا ول 8 لي by 5 and H am Hy i الت TRE TTT 00 2 0 3 a ERE SENN CPP 3 i 83 8 0 0 “1 8 H NN 8 : > oy EG ا :7 8 : ل NUN GU ا 8 53 1 ب 8 : 8 : 0 kN - wl H : 3 ا ELL i ا مم 1 الح ا 3 : 2 ES S, 3 , 3 \ he £3 1 0 0 ب 8 ب 8 2 RS 7 الال 1 ا 8 ال احا اساي ES 8 : 3 i = ب pO a : w 8 8 شكل byeإٍْ ا SN bd Nn AS ; ب 2 11 8 3 ايا جوج 803 3 3 ا الي 3 02 N 0 اا i Ey ن ا i Thame = ¥ : 3 " ل FE ا مل ١ 3 As 3 5 E + = an sn heey + 4 Ee a. me م Yo oo ale } : il ¥ x te = * التو * rr i Eg a Fad a Hane dy Y 0 i § Fee 38 FR ade « 3 1 “ 0 ل asa = مج 3 & لالض ا 0 8 3 § & E32 3 de & BR 0 HN wg £3 He Fe on : ا § & pon cremains, § . Fe ا ا po الب }= Fle ade: 3 ال 3 2 E 3 EN TE tn § 3 الام 0 x 85 3H . ب ححا ب ا 2 3EN. يشا WEE at © 8 ٍ حم5, 3 a 8 ٍ 3 =~ = 3 ie = 8 = 5 2 3 rp ا اس > 8 ا ل Jr اي 3 1 ES 1 3 1 3 ا + - § pL pa 8 1 : - ¥ zie شكل_ A «= i : ب" PLS Ey a mer NE nT ad عب REAHA . N N LE] ¥ > oy A البو NAT amped x So8. oi ا A 0". foie Ha eatin Sop SH 5 ٍ 4 اي SE REN : INE الفا OW i y a 1 0 راذا ' يي لحي ا الا اما ضرق ال سسا ee ا ل ب 3000 لتم ENE BE اح fe ieee 4] CHO PURE § ا اللا ens BPN ماس CNR ا لي صا سا da ل LE CA 2 doled"م 8 اجالع خا لج peel Samy 8 RO, الام ااي 5 allay 1 و ES : الالال J : Tew § : ص88 3 0 1 : 4 33 N 33 I 1 Fre i of 3 3% 3 3 : N 3 \ Pod $1 : Ad Na RR ااا ا يت ا ا لمة ليا 0 الاي Ne ¥ Ty gs Fon ا. eee or =~ Gag Bla اتات dan oi EE Sh واج RE 3 اال تح : Ser BN : 8 hyN0. 8 a + 0 8 NS “8 >“ ER § Toad N 1 : Ry : NS 3 “8 3 8 | 3 EN i جد + ا 5 Ny 1 8 Yi \ Pi . 0 اضر الس مج لح ل ا مد TE ل ———— TY 8 5 <3 No أ <7 stn مار 2 Ve ra Ta Yoo alls 0" Lad oa Be i. TW Se Bo gene 0 اع XE i عا ل ا i Ao > Yad Ra Tk ER $e en wR 4 0 اي 4 EN vf 0 hi N م sina 3 i ¥ ¥A . اودارا % د ُ ْ: 1 ٍِ 3 3 N i ad 81 : : 3 8 SPIRE TR TORR. Eg a EA 3 TE - 3 Mi ToT IN 5 a ® = م x ~~ i 3 WEL 8 Ce = نا = we a 2 = بن م ow - لعج 4 ليع of . RECESS Law as wa wr WOES 0+ اشحمدة سريان هذه البراءة عشرون سنة من تاريخ إيداع الطلب وذلك بشرط تسديد المقابل المالي السنوي للبراءة وعدم بطلانها أو سقوطها لمخالفتها لأي من أحكام نظام براءات الاختراع والتصميمات التخطيطية للدارات المتكاملة والأصناف النباتية والنماذج الصناعية أو لائحته التنفيذية صادرة عن مدينة الملك عبدالعزيز للعلوم والتقنية ؛ مكتب البراءات السعودي ص ب TAT الرياض 57؟؟١١ ¢ المملكة العربية السعودية بريد الكتروني: patents @kacst.edu.sa
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP12186444.1A EP2712870A1 (en) | 2012-09-27 | 2012-09-27 | Novel RIG-I ligands and methods for producing them |
| PCT/EP2013/070117 WO2014049079A1 (en) | 2012-09-27 | 2013-09-26 | Novel rig-i ligands and methods for producing them |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SA517380700B1 true SA517380700B1 (ar) | 2019-04-04 |
Family
ID=46940404
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SA515360190A SA515360190B1 (ar) | 2012-09-27 | 2015-03-25 | مركبات ترابطية rig-i جديدة وطرق إنتاجها |
| SA517380700A SA517380700B1 (ar) | 2012-09-27 | 2015-03-25 | مركبات ترابطية rig-i جديدة وطرق إنتاجها |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SA515360190A SA515360190B1 (ar) | 2012-09-27 | 2015-03-25 | مركبات ترابطية rig-i جديدة وطرق إنتاجها |
Country Status (32)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US10059943B2 (ar) |
| EP (5) | EP2712870A1 (ar) |
| JP (1) | JP6313768B2 (ar) |
| KR (1) | KR102182479B1 (ar) |
| CN (2) | CN104703996B (ar) |
| AU (2) | AU2013322620C1 (ar) |
| BR (2) | BR112015006874B1 (ar) |
| CA (1) | CA2885564C (ar) |
| CL (1) | CL2015000752A1 (ar) |
| CY (1) | CY1120660T1 (ar) |
| DK (1) | DK2903997T3 (ar) |
| EA (2) | EA028707B1 (ar) |
| ES (1) | ES2679373T3 (ar) |
| HK (1) | HK1214602A1 (ar) |
| HR (1) | HRP20181114T1 (ar) |
| HU (1) | HUE038811T2 (ar) |
| IL (1) | IL237794B (ar) |
| LT (1) | LT2903997T (ar) |
| MX (1) | MX2015003787A (ar) |
| NZ (2) | NZ736108A (ar) |
| PH (1) | PH12015500644A1 (ar) |
| PL (1) | PL2903997T3 (ar) |
| PT (1) | PT2903997T (ar) |
| RS (1) | RS57609B1 (ar) |
| SA (2) | SA515360190B1 (ar) |
| SG (3) | SG10201702028YA (ar) |
| SI (1) | SI2903997T1 (ar) |
| TN (1) | TN2015000104A1 (ar) |
| TR (1) | TR201810231T4 (ar) |
| UA (1) | UA117565C2 (ar) |
| WO (1) | WO2014049079A1 (ar) |
| ZA (1) | ZA201501718B (ar) |
Families Citing this family (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DK2056845T3 (da) | 2006-08-08 | 2017-11-27 | Rheinische Friedrich-Wilhelms-Universität Bonn | Struktur og anvendelse af 5'-phosphat-oligonukleotider |
| US9738680B2 (en) | 2008-05-21 | 2017-08-22 | Rheinische Friedrich-Wilhelms-Universität Bonn | 5′ triphosphate oligonucleotide with blunt end and uses thereof |
| EP2508530A1 (en) | 2011-03-28 | 2012-10-10 | Rheinische Friedrich-Wilhelms-Universität Bonn | Purification of triphosphorylated oligonucleotides using capture tags |
| EP2712870A1 (en) | 2012-09-27 | 2014-04-02 | Rheinische Friedrich-Wilhelms-Universität Bonn | Novel RIG-I ligands and methods for producing them |
| WO2014169049A1 (en) * | 2013-04-09 | 2014-10-16 | Duke University | 2' fluoro-modified rnas as immunostimulators |
| DE102015008536A1 (de) | 2015-07-02 | 2017-01-05 | Rheinische Friedrich-Wilhelms-Universität Bonn | Diskontinuierliche Oligonukleotid-Liganden |
| US11382966B2 (en) | 2017-03-24 | 2022-07-12 | Rigontec Gmbh | Method for designing RIG-I ligands |
| CA3059101A1 (en) | 2017-04-03 | 2018-10-11 | Duke University | Compositions and methods for differential induction of cell death and interferon expression |
| US10907161B2 (en) | 2018-04-19 | 2021-02-02 | Checkmate Pharmaceuticals, Inc. | Synthetic RIG-I-like receptor agonists |
| EP3781687A4 (en) | 2018-04-20 | 2022-02-09 | Merck Sharp & Dohme Corp. | NEW SUBSTITUTE RIG-I AGONISTS: COMPOSITIONS AND ASSOCIATED METHODS |
| SG11202010910QA (en) | 2018-05-07 | 2020-12-30 | Alnylam Pharmaceuticals Inc | Extrahepatic delivery |
| KR102373488B1 (ko) * | 2019-02-22 | 2022-03-14 | 주식회사 레모넥스 | 면역활성 또는 암의 예방 또는 치료용 의약 조성물 |
| WO2020260547A1 (en) | 2019-06-27 | 2020-12-30 | Rigontec Gmbh | Design method for optimized rig-i ligands |
| IL309662A (en) | 2021-07-02 | 2024-02-01 | Univ Yale | Compositions and methods for treating cancer |
| AU2022340804A1 (en) | 2021-08-31 | 2024-03-21 | Gennao Bio, Inc. | Compositions and methods for treating cancers |
| KR20240168484A (ko) | 2022-03-03 | 2024-11-29 | 예일 유니버시티 | 인간화 3e10 항체, 변이체, 및 항원 결합 단편 |
| WO2025088117A1 (en) * | 2023-10-25 | 2025-05-01 | Rheinische Friedrich-Wilhelms-Universität Bonn | Ribonucleic acid construct capable of inducing an immune response, as well as pharmaceutical composition and kit comprising same |
Family Cites Families (220)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3534017A (en) | 1967-03-14 | 1970-10-13 | Kyowa Hakko Kogyo Kk | Process for the preparation of nucleoside-5'-diphosphates and triphosphates and mono- and oligo-nucleotidyl-nucleoside-5'-diphosphates and triphosphates |
| US4210746A (en) | 1978-08-10 | 1980-07-01 | National Research Development Corporation | Nucleotide inhibitor of protein synthesis |
| US4285605A (en) | 1979-07-02 | 1981-08-25 | International Business Machines Corporation | Escapement mechanism and backspace mechanism for a moving paper carriage typewriter having dual pitch capability |
| FR2471785A1 (fr) | 1979-12-21 | 1981-06-26 | Fabre Sa Pierre | Preparations immunostimulantes a base d'arn ribosomaux et procede de preparation des arn |
| DE3023787A1 (de) | 1980-06-25 | 1982-01-21 | Studiengesellschaft Kohle mbH, 4330 Mülheim | Verfahren zur erhoehung der inkorporation und der expression von genetischem material in die kerne von intakten zellen mit hilfe von liposomen |
| EP0081099A3 (en) | 1981-12-04 | 1983-08-10 | Sloan-Kettering Institute For Cancer Research | Capped oligonucleotide anti-viral agents |
| US4522811A (en) | 1982-07-08 | 1985-06-11 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Serial injection of muramyldipeptides and liposomes enhances the anti-infective activity of muramyldipeptides |
| US5194428A (en) | 1986-05-23 | 1993-03-16 | Worcester Foundation For Experimental Biology | Inhibition of influenza virus replication by oligonucleotide phosphorothioates |
| US5264423A (en) | 1987-03-25 | 1993-11-23 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Inhibitors for replication of retroviruses and for the expression of oncogene products |
| AU636573B2 (en) | 1988-02-26 | 1993-05-06 | Worcester Foundation For Biomedical Research, Inc. | Inhibition of htlv-iii by exogenous oligonucleotides |
| JP2976436B2 (ja) | 1988-04-27 | 1999-11-10 | 味の素株式会社 | 新規オリゴリボヌクレオチド誘導体及び抗ウイルス剤への使用 |
| DE68927417T2 (de) | 1988-04-27 | 1997-03-20 | Isis Pharmaceutical Inc | Oligoribonukleotid-Derivate und ihre Anwendung als antivirale Mittel |
| DE3907562A1 (de) | 1989-03-09 | 1990-09-13 | Bayer Ag | Antisense-oligonukleotide zur inhibierung der transaktivatorzielsequenz (tar) und der synthese des transaktivatorproteins (tat) aus hiv-1 und deren verwendung |
| JPH04507402A (ja) | 1989-05-18 | 1992-12-24 | マイクロプローブ・コーポレーション | 架橋オリゴヌクレオチド |
| US5134066A (en) | 1989-08-29 | 1992-07-28 | Monsanto Company | Improved probes using nucleosides containing 3-dezauracil analogs |
| CA2044593C (en) | 1989-11-03 | 2004-04-20 | Kenneth L. Brigham | Method of in vivo delivery of functioning foreign genes |
| US5149797A (en) | 1990-02-15 | 1992-09-22 | The Worcester Foundation For Experimental Biology | Method of site-specific alteration of rna and production of encoded polypeptides |
| AU7662091A (en) | 1990-03-21 | 1991-10-21 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Reagents and methods for modulating gene expression through rna mimicry |
| US5292875A (en) | 1990-04-20 | 1994-03-08 | Lynx Therapeutics, Inc. | Method of synthesizing sulfurized oligonucleotide analogs |
| US5166195A (en) | 1990-05-11 | 1992-11-24 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Antisense inhibitors of the human immunodeficiency virus phosphorothioate oligonucleotides |
| IL99069A (en) | 1990-08-09 | 1998-08-16 | Genta Inc | Methyphosphonate oligonucleotides associated with psoralen |
| US5580767A (en) | 1990-08-14 | 1996-12-03 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Inhibition of influenza viruses by antisense oligonucleotides |
| US5271941A (en) | 1990-11-02 | 1993-12-21 | Cho Chung Yoon S | Antisense oligonucleotides of human regulatory subunit RI.sub.α of cAMP-dependent protein kinases |
| DE4110085A1 (de) | 1991-03-27 | 1992-10-01 | Boehringer Ingelheim Int | 2'-o-alkyl-oligoribonukleotide, verfahren zu deren herstellung und deren verwendung als antisense-oligonukleotide |
| WO1992017484A1 (en) | 1991-03-27 | 1992-10-15 | Research Corporation Technologies, Inc. | Single-stranded circular oligonucleotides |
| US5646267A (en) | 1991-08-05 | 1997-07-08 | Polish Academy Of Sciences | Method of making oligonucleotides and oligonucleotide analogs using phospholanes and enantiomerically resolved phospholane analogues |
| US7119184B2 (en) | 1991-08-12 | 2006-10-10 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotides having A-DNA form and B-DNA form conformational geometry |
| US6369209B1 (en) | 1999-05-03 | 2002-04-09 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotides having A-DNA form and B-DNA form conformational geometry |
| CA2121144C (en) | 1991-10-15 | 2001-07-31 | Phillip Dan Cook | Oligonucleotides having chiral phosphorus linkages |
| NZ244820A (en) | 1991-10-25 | 1994-01-26 | Isis Pharmaceuticals Inc | Oligonucleotide inhibitor of epstein-barr virus. |
| FR2685346B1 (fr) | 1991-12-18 | 1994-02-11 | Cis Bio International | Procede de preparation d'arn double-brin, et ses applications. |
| US5644048A (en) | 1992-01-10 | 1997-07-01 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Process for preparing phosphorothioate oligonucleotides |
| CA2135646A1 (en) | 1992-05-11 | 1993-11-25 | Kenneth G. Draper | Method and reagent for inhibiting viral replication |
| US5606049A (en) | 1992-06-03 | 1997-02-25 | Genta Incorporated | Method of preparing 2'-O-methyl cytidine monomers useful in oligomer synthesis |
| CA2140428C (en) | 1992-07-23 | 2003-07-08 | Daniel Peter Claude Mcgee | Novel 2'-o-alkyl nucleosides and phosphoramidites processes for the preparation and uses thereof |
| US6346614B1 (en) | 1992-07-23 | 2002-02-12 | Hybridon, Inc. | Hybrid oligonucleotide phosphorothioates |
| TW244371B (ar) | 1992-07-23 | 1995-04-01 | Tri Clover Inc | |
| US5652355A (en) | 1992-07-23 | 1997-07-29 | Worcester Foundation For Experimental Biology | Hybrid oligonucleotide phosphorothioates |
| IL108206A0 (en) | 1993-01-06 | 1994-04-12 | Univ Johns Hopkins | Oligomers having improved stability at acid ph |
| AU6165494A (en) | 1993-01-25 | 1994-08-15 | Hybridon, Inc. | Oligonucleotide alkylphosphonates and alkylphosphonothioates |
| EP0695306A1 (en) | 1993-04-19 | 1996-02-07 | Gilead Sciences, Inc. | Enhanced triple-helix and double-helix formation with oligomers containing modified purines |
| FR2705099B1 (fr) | 1993-05-12 | 1995-08-04 | Centre Nat Rech Scient | Oligonucléotides phosphorothioates triesters et procédé de préparation. |
| KR960704034A (ko) | 1993-07-19 | 1996-08-31 | 다니엘 엘. 캐시앙 | 단백질 생산, 세포 증식 및(또는) 전염병 병원균의 증식에 대한 올리고뉴클레오티드 저해의 향상법(Enhancement of Oligonucleotide Inhibition of Protein Production, Cell Proliferation, and/or Multiplication of Infectious Disease Pathogens) |
| JPH0799976A (ja) | 1993-09-30 | 1995-04-18 | Takeda Chem Ind Ltd | 修飾オリゴヌクレオチド |
| US5801235A (en) | 1994-05-25 | 1998-09-01 | Hybridon, Inc. | Oligonucleotides with anti-cytomegalovirus activity |
| AU2591495A (en) | 1994-05-27 | 1995-12-21 | Hybridon, Inc. | Use of oligonucleotide phosphorothioate for depleting complement and for reducing blood pressure |
| US5866699A (en) | 1994-07-18 | 1999-02-02 | Hybridon, Inc. | Oligonucleotides with anti-MDR-1 gene activity |
| CA2199464A1 (en) | 1994-09-07 | 1996-03-14 | Radhakrishnan Iyer | Oligonucleotide prodrugs |
| US5591721A (en) | 1994-10-25 | 1997-01-07 | Hybridon, Inc. | Method of down-regulating gene expression |
| JPH08154687A (ja) | 1994-12-12 | 1996-06-18 | Yamanouchi Pharmaceut Co Ltd | アンチセンスオリゴヌクレオチド及び抗ウイルス剤 |
| WO1996018736A2 (en) | 1994-12-13 | 1996-06-20 | Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. | Method and reagent for treatment of arthritic conditions, induction of graft tolerance and reversal of immune responses |
| CN1175281A (zh) | 1994-12-22 | 1998-03-04 | 海布里登公司 | 立体特异性硫代磷酸寡核苷酸的合成 |
| US6111095A (en) | 1995-06-07 | 2000-08-29 | Merck & Co., Inc. | Capped synthetic RNA, analogs, and aptamers |
| GB9511720D0 (en) | 1995-06-09 | 1995-08-02 | Isis Innovation | Oligonucleotide phosphorylation method and products |
| US20040234999A1 (en) | 1996-04-02 | 2004-11-25 | Farrar Gwenyth Jane | Genetic suppression and replacement |
| US6127535A (en) | 1997-11-05 | 2000-10-03 | Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. | Nucleoside triphosphates and their incorporation into oligonucleotides |
| EP1626086A2 (en) | 1998-04-20 | 2006-02-15 | Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. | Double-stranded nucleic acid molecules with novel chemical compositions capable of modulating gene expression |
| EP1493818A3 (en) | 1998-04-29 | 2006-02-15 | Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. | Nucleoside triphosphates and their incorporation into ribozymes |
| AU751480B2 (en) | 1998-04-29 | 2002-08-15 | Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. | Nucleoside triphosphates and their incorporation into ribozymes |
| US6562798B1 (en) | 1998-06-05 | 2003-05-13 | Dynavax Technologies Corp. | Immunostimulatory oligonucleotides with modified bases and methods of use thereof |
| US6344323B1 (en) | 1998-09-16 | 2002-02-05 | Vitagenix, Inc. | Compositions and methods for inhibiting cox-2 expression and treating cox-2 associated disorders by using cox-2 antisense oligonucleotides |
| CA2403243A1 (en) | 1999-08-31 | 2001-03-08 | Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. | Nucleic acid based modulators of gene expression |
| NZ517928A (en) | 1999-09-27 | 2004-09-24 | Coley Pharm Gmbh | Methods related to immunostimulatory nucleic acid-induced interferon |
| US20020028784A1 (en) | 2000-03-10 | 2002-03-07 | Nest Gary Van | Methods of preventing and treating viral infections using immunomodulatory polynucleotide sequences |
| DE10013600A1 (de) | 2000-03-18 | 2002-01-10 | Aventis Res & Tech Gmbh & Co | Reaktive Monomere für die Oligonucleotid- und Polynucleotidsynthese, modifizierte Oligonucleotide und Polynucleotiden und ein Verfahren zu deren Herstellung |
| US6686461B1 (en) | 2000-03-22 | 2004-02-03 | Solulink Bioscience, Inc. | Triphosphate oligonucleotide modification reagents and uses thereof |
| US20030077609A1 (en) | 2001-03-25 | 2003-04-24 | Jakobsen Mogens Havsteen | Modified oligonucleotides and uses thereof |
| WO2003008432A1 (en) | 2001-07-16 | 2003-01-30 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Process for the preparation of alpha modified nucleoside triphosphates and compounds therefrom |
| WO2003012052A2 (en) | 2001-07-30 | 2003-02-13 | The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Specific inhibition of gene expression by small double stranded rnas |
| FR2832154B1 (fr) | 2001-11-09 | 2007-03-16 | Centre Nat Rech Scient | Oligonucleotides inhibiteurs et leur utilisation pour reprimer specifiquement un gene |
| US20030203868A1 (en) | 2002-02-06 | 2003-10-30 | Bushman Frederic D. | Inhibition of pathogen replication by RNA interference |
| WO2003072757A2 (en) | 2002-02-28 | 2003-09-04 | Biota, Inc. | Nucleotide mimics and their prodrugs |
| JP2005526778A (ja) | 2002-03-15 | 2005-09-08 | アストラル，インコーポレイテッド | 免疫調節性非コードｒｎａモチーフを用いて抗体及び主要組織適合性クラスｉ拘束性又はクラスｉｉ拘束性ｔ細胞の応答を開始或いは増強させるための組成物及び方法 |
| WO2003086280A2 (en) | 2002-04-04 | 2003-10-23 | Coley Pharmaceutical Gmbh | Immunostimulatory g,u-containing oligoribonucleotides |
| EP1495120B1 (en) | 2002-04-18 | 2012-10-10 | Acuity Pharmaceuticals, Inc | Means and methods for the specific modulation of target genes in the eye |
| CA2484079A1 (en) | 2002-04-26 | 2003-11-06 | National Institute Of Advanced Industrial Science And Technology | Expression systems for stem-loop rna molecule having rnai effect |
| CA2388049A1 (en) | 2002-05-30 | 2003-11-30 | Immunotech S.A. | Immunostimulatory oligonucleotides and uses thereof |
| DE60328214D1 (de) | 2002-08-12 | 2009-08-13 | New England Biolabs Inc | Verfahren und zusammensetzungen in verbindung mit gen-silencing |
| US7109316B2 (en) | 2002-08-23 | 2006-09-19 | Ce Healthcare Bio-Sciences Corp. | Oligonucleotide tagged nucleoside triphosphates (OTNTPs) for genetic analysis |
| CA2501065A1 (en) | 2002-09-04 | 2004-03-18 | Johnson & Johnson Research Pty Ltd | Methods using dsdna to mediate rna interference (rnai) |
| WO2004024063A2 (en) | 2002-09-11 | 2004-03-25 | Genentech, Inc. | Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor |
| EP2213738B1 (en) | 2002-11-14 | 2012-10-10 | Dharmacon, Inc. | siRNA molecules targeting Bcl-2 |
| US7250496B2 (en) | 2002-11-14 | 2007-07-31 | Rosetta Genomics Ltd. | Bioinformatically detectable group of novel regulatory genes and uses thereof |
| US20130130231A1 (en) | 2002-11-26 | 2013-05-23 | Isaac Bentwich | Bioinformatically detectable group of novel viral regulatory genes and uses thereof |
| US7217807B2 (en) | 2002-11-26 | 2007-05-15 | Rosetta Genomics Ltd | Bioinformatically detectable group of novel HIV regulatory genes and uses thereof |
| US7696334B1 (en) | 2002-12-05 | 2010-04-13 | Rosetta Genomics, Ltd. | Bioinformatically detectable human herpesvirus 5 regulatory gene |
| ATE401575T1 (de) | 2003-01-06 | 2008-08-15 | Wyeth Corp | Zusammensetzungen und verfahren zur diagnose und behandlung von kolonkrebs |
| WO2004074441A2 (en) | 2003-02-19 | 2004-09-02 | Government Of The United States Of America Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services | Amplification or overexpression of mll septin-like fusion (msf) and septin9 and methods related thereto |
| CN1176937C (zh) | 2003-02-21 | 2004-11-24 | 复旦大学附属中山医院 | 一种双链rna及其用途 |
| US20040261149A1 (en) | 2003-02-24 | 2004-12-23 | Fauquet Claude M. | siRNA-mediated inhibition of gene expression in plant cells |
| AU2004220459B2 (en) | 2003-03-12 | 2010-08-05 | Vasgene Therapeutics, Inc. | Polypeptide compounds for inhibiting angiogenesis and tumor growth |
| US7381410B2 (en) | 2003-03-12 | 2008-06-03 | Vasgene Therapeutics, Inc. | Polypeptide compounds for inhibiting angiogenesis and tumor growth |
| EP1606406B2 (en) | 2003-03-21 | 2013-11-27 | Santaris Pharma A/S | SHORT INTERFERING RNA (siRNA) ANALOGUES |
| WO2004085623A2 (en) | 2003-03-24 | 2004-10-07 | University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education | A compact synthetic expression vector comprising double-stranded dna molecules and methods of use thereof |
| US8969543B2 (en) | 2003-04-03 | 2015-03-03 | Bioneer Corporation | SiRNA-hydrophilic polymer conjugates for intracellular delivery of siRNA and method thereof |
| US20050042641A1 (en) | 2003-05-27 | 2005-02-24 | Cold Spring Harbor Laboratory | In vivo high throughput selection of RNAi probes |
| EP1633871A4 (en) | 2003-06-03 | 2010-02-17 | Benitec Australia Ltd | DOUBLE-STRUCTURED NUCLEIC ACID |
| WO2004108921A1 (ja) | 2003-06-06 | 2004-12-16 | Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. | 核酸導入法 |
| JP4874801B2 (ja) | 2003-06-11 | 2012-02-15 | イデラ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | 安定化免疫調節オリゴヌクレオチド |
| FR2857013B1 (fr) | 2003-07-02 | 2005-09-30 | Commissariat Energie Atomique | Petits arn interferents specifiques des sous-unites alpha, alpha prime et beta de la proteine kinase ck2 et leurs applications |
| US8034619B2 (en) | 2003-12-19 | 2011-10-11 | University Of Cincinnati | Polyamides for nucleic acid delivery |
| CA2555145A1 (en) | 2004-02-06 | 2005-08-25 | Wyeth | Diagnosis and therapeutics for cancer |
| US20050182005A1 (en) | 2004-02-13 | 2005-08-18 | Tuschl Thomas H. | Anti-microRNA oligonucleotide molecules |
| US20070265220A1 (en) | 2004-03-15 | 2007-11-15 | City Of Hope | Methods and compositions for the specific inhibition of gene expression by double-stranded RNA |
| EP2514758B2 (en) | 2004-03-15 | 2021-06-23 | City of Hope | Methods and compositions for the specific inhibition of gene expression by double-stranded RNA |
| US20060035815A1 (en) | 2004-05-04 | 2006-02-16 | Nastech Pharmaceutical Company Inc. | Pharmaceutical compositions for delivery of ribonucleic acid to a cell |
| WO2005117991A2 (en) | 2004-05-04 | 2005-12-15 | Nastech Pharmaceutical Company Inc. | Compositions and methods for enhancing delivery of nucleic acids into cells and for modifying expression of target genes in cells |
| WO2005108573A2 (en) | 2004-05-12 | 2005-11-17 | MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. | Method to induce rnai in prokaryotic organisms |
| US7807815B2 (en) | 2004-07-02 | 2010-10-05 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Compositions comprising immunostimulatory siRNA molecules and DLinDMA or DLenDMA |
| WO2006016574A1 (ja) | 2004-08-12 | 2006-02-16 | Kumamoto University | ＲＮＡｉを利用した抗腫瘍剤 |
| ATE505540T1 (de) | 2004-11-16 | 2011-04-15 | Qiagen Gmbh | Genabschaltung (gene silencing) durch hybride sens-dna und antisens-rna konstrukte, gekoppelt an ein peptid zur erleichterten aufnahme in zellen |
| AU2005313883B2 (en) | 2004-12-09 | 2011-03-31 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for inducing an immune response in a mammal and methods of avoiding an immune response to oligonucleotide agents such as short interfering RNAs |
| AU2006203892B2 (en) | 2005-01-07 | 2011-03-24 | State Of Oregon Acting By And Through The State Board Of Higher Education On Behalf Of Oregon State University | Method to trigger RNA interference |
| WO2006078646A2 (en) | 2005-01-18 | 2006-07-27 | Caltagirone Gaetano T | A class of supramolecular drug molecules and methods of identification and use thereof |
| US20060178334A1 (en) | 2005-02-04 | 2006-08-10 | City Of Hope | Double-stranded and single-stranded RNA molecules with 5 ' triphosphates and their use for inducing interferon |
| JP4972538B2 (ja) | 2005-02-07 | 2012-07-11 | 武田薬品工業株式会社 | 神経変性疾患の予防・治療剤 |
| JP4645234B2 (ja) | 2005-03-03 | 2011-03-09 | 和光純薬工業株式会社 | 架橋剤、それを用いた架橋方法、遺伝子発現調節方法および遺伝子機能調査方法 |
| ATE541928T1 (de) | 2005-03-31 | 2012-02-15 | Calando Pharmaceuticals Inc | Inhibitoren der untereinheit 2 der ribonukleotidreduktase und ihre verwendungen |
| US7893244B2 (en) | 2005-04-12 | 2011-02-22 | Intradigm Corporation | Composition and methods of RNAi therapeutics for treatment of cancer and other neovascularization diseases |
| BRPI0610499A2 (pt) | 2005-04-12 | 2010-06-22 | Intradigm Corp | moléculas de ácido nucléico , composições e usos das referidas moléculas |
| US20070066521A1 (en) | 2005-04-13 | 2007-03-22 | Fauquet Claude M | Short RNA-binding proteins |
| WO2006119643A1 (en) | 2005-05-12 | 2006-11-16 | Replicor Inc. | Anti-ocular angiogenesis molecules and their uses |
| WO2006122409A1 (en) | 2005-05-16 | 2006-11-23 | Replicor Inc. | Antimicrobial molecules and their uses |
| US8802640B2 (en) | 2005-06-01 | 2014-08-12 | Polyplus-Transfection Sa | Oligonucleotides for RNA interference and biological applications thereof |
| WO2006130949A1 (en) | 2005-06-08 | 2006-12-14 | Replicor Inc. | Anti amyloid-related disease molecules and their uses |
| CA2614531C (en) | 2005-07-07 | 2015-06-16 | Avraham Hochberg | Nucleic acid agents for downregulating h19, and methods of using same |
| CN101287835A (zh) | 2005-08-17 | 2008-10-15 | 株式会社百奥尼 | 用于siRNA细胞内输送的siRNA-亲水性聚合物结合物及其方法 |
| AU2006287481A1 (en) | 2005-09-08 | 2007-03-15 | Mdrna, Inc. | Pharmaceutical compositions for delivery of ribonucleic acid to a cell |
| EP1764107A1 (en) | 2005-09-14 | 2007-03-21 | Gunther Hartmann | Compositions comprising immunostimulatory RNA oligonucleotides and methods for producing said RNA oligonucleotides |
| US8076068B2 (en) | 2005-09-14 | 2011-12-13 | Gunther Hartmann | Method for determining immunostimulatory activity of RNA oligonucleotides |
| WO2007107304A2 (en) | 2006-03-17 | 2007-09-27 | Novosom Ag | An efficient method for loading amphoteric liposomes with nucleic acid active substances |
| WO2007038788A2 (en) | 2005-09-29 | 2007-04-05 | The Cleveland Clinic Foundation | Small interfering rnas as non-specific drugs |
| CA2628300C (en) | 2005-11-02 | 2018-04-17 | Protiva Biotherapeutics, Inc. | Modified sirna molecules and uses thereof |
| DK2641970T3 (en) | 2005-11-17 | 2015-02-02 | Univ Texas | Modulation of gene expression by oligomers targeted to chromosomal DNA |
| CA2903764A1 (en) | 2005-12-12 | 2007-06-21 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | Micrornas that regulate muscle cell proliferation and differentiation |
| US8058252B2 (en) | 2005-12-30 | 2011-11-15 | Institut Gustave Roussy | Use of inhibitors of scinderin and/or ephrin-A1 for treating tumors |
| JP5761911B2 (ja) | 2006-04-07 | 2015-08-12 | イデラ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッドＩｄｅｒａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ． | Ｔｌｒ７およびｔｌｒ８に対する安定化免疫調節ｒｎａ（ｓｉｍｒａ）化合物 |
| EP2032714B1 (en) | 2006-06-01 | 2011-03-16 | TriLink BioTechnologies | Chemically modified oligonucleotide primers for nucleic acid amplification |
| US20080091005A1 (en) | 2006-07-20 | 2008-04-17 | Visigen Biotechnologies, Inc. | Modified nucleotides, methods for making and using same |
| JP2010507361A (ja) | 2006-07-31 | 2010-03-11 | キュアバック ゲーエムベーハー | 具体的には免疫刺激剤／アジュバントとしての、一般式（Ｉ）：ＧｌＸｍＧｎ、または一般式（ＩＩ）：ＣｌＸｍＣｎで表される核酸 |
| DK2056845T3 (da) | 2006-08-08 | 2017-11-27 | Rheinische Friedrich-Wilhelms-Universität Bonn | Struktur og anvendelse af 5'-phosphat-oligonukleotider |
| EP2069500B1 (en) | 2006-10-04 | 2014-09-24 | Centre National De La Recherche Scientifique (Cnrs) | Compositions comprising a sirna and lipidic 4,5-disubstituted 2-deoxystreptamine ring aminoglycoside derivatives and uses thereof |
| EP2338499A1 (en) | 2006-10-10 | 2011-06-29 | Gunther Hartmann | 5' triphosphate oligonucleotide induces anti-viral response |
| WO2008045576A2 (en) | 2006-10-12 | 2008-04-17 | Yijia Liu | Compositions and methods of rnai therapeutics for treatment of cancer and other neovascularization diseases |
| CN101190944A (zh) | 2006-12-01 | 2008-06-04 | 北京诺赛基因组研究中心有限公司 | 人类新细胞因子及其用途 |
| US20130005028A1 (en) | 2006-12-21 | 2013-01-03 | Smith Larry R | Activation of RIG-I Pathway |
| JP2010512786A (ja) | 2006-12-21 | 2010-04-30 | イントラダイム コーポレイション | ガンを処置するための抑制性ポリヌクレオチドの組成物および方法 |
| US7858772B2 (en) | 2006-12-22 | 2010-12-28 | Roche Molecular Systems, Inc. | Compounds and methods for synthesis and purification of oligonucleotides |
| EP2111450A2 (en) | 2007-01-16 | 2009-10-28 | Yissum Research Development Company of the Hebrew University of Jerusalem | Nucleic acid constructs and methods for specific silencing of h19 |
| US9249423B2 (en) | 2007-02-02 | 2016-02-02 | Yale University | Method of de-differentiating and re-differentiating somatic cells using RNA |
| WO2008099396A1 (en) | 2007-02-15 | 2008-08-21 | Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem | Use of h19-silencing nucleic acid agents for treating restenosis |
| JPWO2008102728A1 (ja) | 2007-02-19 | 2010-05-27 | 国立大学法人京都大学 | 核酸導入用導電性基板および核酸導入方法 |
| MY173854A (en) | 2007-03-13 | 2020-02-25 | Malaysian Palm Oil Board | Expression regulatory elements |
| AU2008236566A1 (en) | 2007-04-09 | 2008-10-16 | Chimeros, Inc. | Self-assembling nanoparticle drug delivery system |
| CN101088565A (zh) | 2007-04-17 | 2007-12-19 | 华东师范大学 | miRNA－34a的用途 |
| CN101289486B (zh) * | 2007-04-18 | 2012-05-30 | 上海吉凯基因化学技术有限公司 | 一种合成rna单体的方法 |
| WO2008134593A1 (en) | 2007-04-25 | 2008-11-06 | President And Fellows Of Harvard College | Molecular circuits |
| CN101889086B (zh) | 2007-05-01 | 2014-07-02 | 桑塔里斯制药公司 | Tnf超家族受体的剪接转换寡聚物，以及它们治疗疾病的用途 |
| AU2008262478C1 (en) | 2007-05-29 | 2014-06-19 | Aldevron, L.L.C. | Vectors and methods for genetic immunization |
| EP2178896A1 (en) | 2007-07-31 | 2010-04-28 | The Johns Hopkins University | Polypeptide-nucleic acid conjugate for immunoprophylaxis or immunotherapy for neoplastic or infectious disorders |
| US8367815B2 (en) | 2007-08-28 | 2013-02-05 | California Institute Of Technology | Modular polynucleotides for ligand-controlled regulatory systems |
| WO2009038707A2 (en) | 2007-09-17 | 2009-03-26 | Ludwig Institute For Cancer Research , Ltd. | Cancer-testis gene silencing agents and uses thereof |
| WO2009046541A1 (en) | 2007-10-11 | 2009-04-16 | University Health Network | MODULATION OF SIRPα - CD47 INTERACTION FOR INCREASING HUMAN HEMATOPOIETIC STEM CELL ENGRAFTMENT AND COMPOUNDS THEREFOR |
| CA2702039A1 (en) | 2007-10-12 | 2009-04-23 | Intradigm Corporation | Therapeutic sirna molecules for reducing vegfr1 expression in vitro and in vivo |
| DE102007052114B4 (de) | 2007-10-30 | 2011-01-05 | T2Cure Gmbh | Verfahren zur Modulation der Funktion, des Wachstums oder der Differenzierung einer Zelle |
| BRPI0819193A2 (pt) | 2007-11-05 | 2017-05-23 | Baltic Tech Dev Ltd | uso de oligonucleotídeos com bases modificadas na hibridização de ácidos nucleicos. |
| JP5753382B2 (ja) * | 2007-11-06 | 2015-07-22 | アディウティーダ ファーマシューティカルズ ゲーエムベーハー | 修飾されたオリゴリン酸基を含有する免疫賦活オリゴリボヌクレオチドアナログ |
| USRE46873E1 (en) | 2007-11-06 | 2018-05-29 | Sirnaomics, Inc. | Multi-targeted RNAi therapeutics for scarless wound healing of skin |
| US8575121B2 (en) | 2007-11-12 | 2013-11-05 | The United States of America as represented by the Secetary of the Department of Health and Human Services | Therapeutic applications of p53 isoforms in regenerative medicine, aging and cancer |
| CA2706994C (en) | 2007-11-29 | 2013-03-12 | Alepor Gmbh & Co. Kg | Use of eph-b4 and ephrin-a1 for predicting negative physiological response to the treatment with erythropoietin |
| US8357501B2 (en) | 2007-11-29 | 2013-01-22 | Molecular Health Gmbh | Tissue protective erythropoietin receptor (NEPOR) and methods of use |
| GB0725321D0 (en) | 2007-12-31 | 2008-02-06 | Syntaxin Ltd | Delivery vehicles |
| KR101483715B1 (ko) | 2008-01-31 | 2015-01-19 | 큐어백 게엠바하 | 면역증강제／애주번트인 화학식（ＮｕＧｌＸｍＧｎＮｖ）ａ를 포함하는 핵산 및 이의 유도체 |
| US9738680B2 (en) * | 2008-05-21 | 2017-08-22 | Rheinische Friedrich-Wilhelms-Universität Bonn | 5′ triphosphate oligonucleotide with blunt end and uses thereof |
| DK2518150T3 (en) | 2008-05-21 | 2015-12-07 | Univ Bonn | 5'Trip phosphate triphosphate oligonucleotide and uses thereof |
| CA2635187A1 (en) | 2008-06-05 | 2009-12-05 | The Royal Institution For The Advancement Of Learning/Mcgill University | Oligonucleotide duplexes and uses thereof |
| US20110152352A1 (en) | 2008-06-10 | 2011-06-23 | Tufts University | Smad proteins control drosha-mediated mirna maturation |
| CN101632833B (zh) | 2008-07-25 | 2013-11-06 | 上海市计划生育科学研究所 | 一种前列腺癌相关的基因及其用途 |
| CA2735860A1 (en) * | 2008-09-02 | 2010-03-11 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Synthetic methods and derivatives of triphosphate oligonucleotides |
| WO2011028218A1 (en) * | 2009-09-02 | 2011-03-10 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Process for triphosphate oligonucleotide synthesis |
| WO2010042742A2 (en) | 2008-10-08 | 2010-04-15 | Chimeros Inc. | Chimeric therapeutics, compositions, and methods for using same |
| WO2010042755A2 (en) | 2008-10-08 | 2010-04-15 | Chimeros Inc. | Chimeric therapeutics, compositions, and methods for using same |
| WO2010042751A2 (en) | 2008-10-08 | 2010-04-15 | Chimeros Inc. | Chimeric therapeutics, compositions, and methods for using same |
| WO2010042749A2 (en) | 2008-10-08 | 2010-04-15 | Chimeros Inc. | Chimeric therapeutics, compositions, and methods for using same |
| EP2363467B1 (en) | 2008-10-23 | 2015-12-16 | The University of Tokyo | Method for inhibiting function of micro-rna |
| WO2010062502A1 (en) | 2008-11-03 | 2010-06-03 | University Of Utah Research Foundation | Carriers for the delivery of nucleic acids to cells and methods of use thereof |
| WO2010099161A1 (en) | 2009-02-26 | 2010-09-02 | The Ohio State University Research Foundation | Micrornas in never-smokers and related materials and methods |
| WO2010118263A1 (en) | 2009-04-08 | 2010-10-14 | University Of Massachusetts | Single-nucleotide polymorphism (snp) targeting therapies for the treatment of huntington's disease |
| WO2010120874A2 (en) | 2009-04-14 | 2010-10-21 | Chimeros, Inc. | Chimeric therapeutics, compositions, and methods for using same |
| US20100323018A1 (en) | 2009-06-17 | 2010-12-23 | Massachusetts Institute Of Technology | Branched DNA/RNA monomers and uses thereof |
| ATE554749T1 (de) | 2009-07-09 | 2012-05-15 | Marina Biotech Inc | Nachahmung von lipoproteinstrukturen |
| WO2011008857A1 (en) | 2009-07-14 | 2011-01-20 | Northeastern University | SiRNA PHOSPHOLIPID CONJUGATE |
| JP2013500265A (ja) | 2009-07-23 | 2013-01-07 | ザ トラスティーズ オブ プリンストン ユニバーシティ | 抗ウイルス剤として用いられるｍＴＯＲキナーゼ阻害剤 |
| WO2011028128A1 (en) * | 2009-09-01 | 2011-03-10 | Askim Frukt- Og Bærpresseri As | Method to prevent oxidation of components in oil, and method to reduce the use of ethoxyquin to prevent oxidation of components in oil |
| EP2327783A1 (en) | 2009-11-27 | 2011-06-01 | Universitätsklinikum Freiburg | Pharmaceutical composition comprising miRNA-100 and its use in the modulation of blood vessel growth |
| DE202009015670U1 (de) | 2009-11-30 | 2011-04-14 | Mcairlaid's Vliesstoffe Gmbh & Co. Kg | Absorptionskörper zur Auflage auf Wunden |
| US20110247091A1 (en) | 2010-03-26 | 2011-10-06 | The Governors Of The University Of Alberta | Transgenic Cells and Chickens Expressing RIG-I |
| WO2011133559A2 (en) | 2010-04-19 | 2011-10-27 | University Of Georgia Research Foundation, Inc. | Alpha tubulin acetyltransferase |
| CN102985546A (zh) | 2010-05-04 | 2013-03-20 | 圣诺制药公司 | TGF-beta和Cox-2抑制剂的联合及其治疗应用的方法 |
| EP2385120A1 (en) | 2010-05-04 | 2011-11-09 | Justus-Liebig- Universitat Giessen | Use of anti-miRNA antisense oligonucleotides for the treatment of pulmonary hypertension |
| CN101974529B (zh) | 2010-09-21 | 2013-04-03 | 南京大学（苏州）高新技术研究院 | 含自由三磷酸基团的TGF-β特异性siRNA及其应用 |
| WO2012056440A1 (en) | 2010-10-28 | 2012-05-03 | Nanodoc Ltd. | COMPOSITIONS AND METHODS FOR ACTIVATING EXPRESSION BY A SPECIFIC ENDOGENOUS miRNA |
| WO2012056441A1 (en) | 2010-10-28 | 2012-05-03 | Nanodoc Ltd. | Compositions and methods for specific cleavage of exogenous rna in a cell |
| CN102475892A (zh) | 2010-11-22 | 2012-05-30 | 大连创达技术交易市场有限公司 | 作为制备抗癌药物的反义miRNA-210的用途 |
| WO2012091523A2 (en) | 2010-12-30 | 2012-07-05 | Samyang Biopharmaceuticals Corporation | Carrier for negatively charged drugs comprising a cationic lipid and a preparation method thereof |
| US8461224B2 (en) | 2011-03-04 | 2013-06-11 | National Health Research Institutes | Single monomer derived linear-like copolymer comprising polyethylenimine and poly(ethylene glycol) for nucleic acid delivery |
| US20140212503A1 (en) | 2011-03-17 | 2014-07-31 | Hyukjin Lee | Delivery system |
| EP2508530A1 (en) * | 2011-03-28 | 2012-10-10 | Rheinische Friedrich-Wilhelms-Universität Bonn | Purification of triphosphorylated oligonucleotides using capture tags |
| US20150024488A1 (en) | 2011-07-04 | 2015-01-22 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Nucleic acid complex |
| EP2551354A1 (en) | 2011-07-25 | 2013-01-30 | Universität Heidelberg | Functionalization of RNA oligonucleotides |
| US20130189367A1 (en) | 2011-07-29 | 2013-07-25 | University Of Washington Through Its Center For Commercialization | Nanovectors for targeted gene silencing and cytotoxic effect in cancer cells |
| US9579394B2 (en) | 2011-08-08 | 2017-02-28 | Universitaet Regensburg | Polyanion nanocomplexes for therapeutic applications |
| WO2013053481A1 (de) | 2011-10-11 | 2013-04-18 | Secutech International Pte. Ltd. | Dimethylsulfoxid als lösungsmittel für nukleinsäuren |
| WO2013053480A1 (de) | 2011-10-11 | 2013-04-18 | Secutech International Pte. Ltd. | Zusammensetzung zur einbringung von nukleinsäuren in zellen |
| EP2773760B2 (en) | 2011-10-31 | 2020-11-04 | RiboxX GmbH | Double-stranded rna for immunostimulation |
| WO2013075140A1 (en) | 2011-11-17 | 2013-05-23 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services | Auto -recognizing therapeutic rna/dna chimeric nanoparticles (np) |
| JP2015518475A (ja) | 2012-04-10 | 2015-07-02 | インサーム（インスティテュ ナシオナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラルシェルシェ メディカル）Ｉｎｓｅｒｍ（Ｉｎｓｔｉｔｕｔ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｄｅｌａ Ｓａｎｔｅ Ｅｔｄｅ Ｌａ Ｒｅｃｈｅｒｃｈｅ Ｍｅｄｉｃａｌｅ） | 非アルコール性脂肪性肝炎の治療方法 |
| US20130302252A1 (en) | 2012-05-11 | 2013-11-14 | University Of Washington Through Its Center For Commercialization | Polyarginine-coated magnetic nanovector and methods of use thereof |
| EP2712870A1 (en) * | 2012-09-27 | 2014-04-02 | Rheinische Friedrich-Wilhelms-Universität Bonn | Novel RIG-I ligands and methods for producing them |
| WO2014124433A1 (en) | 2013-02-11 | 2014-08-14 | Oregon Health & Science University | 5'-triphosphate oligoribonucleotides |
-
2012
- 2012-09-27 EP EP12186444.1A patent/EP2712870A1/en not_active Ceased
-
2013
- 2013-09-26 RS RS20180766A patent/RS57609B1/sr unknown
- 2013-09-26 ES ES13774100T patent/ES2679373T3/es active Active
- 2013-09-26 US US14/431,859 patent/US10059943B2/en active Active
- 2013-09-26 PT PT137741005T patent/PT2903997T/pt unknown
- 2013-09-26 KR KR1020157011011A patent/KR102182479B1/ko active Active
- 2013-09-26 SG SG10201702028YA patent/SG10201702028YA/en unknown
- 2013-09-26 UA UAA201502834A patent/UA117565C2/uk unknown
- 2013-09-26 MX MX2015003787A patent/MX2015003787A/es active IP Right Grant
- 2013-09-26 HU HUE13774100A patent/HUE038811T2/hu unknown
- 2013-09-26 SI SI201331104T patent/SI2903997T1/sl unknown
- 2013-09-26 SG SG11201501961PA patent/SG11201501961PA/en unknown
- 2013-09-26 EP EP21205543.8A patent/EP4008722A1/en active Pending
- 2013-09-26 PL PL13774100T patent/PL2903997T3/pl unknown
- 2013-09-26 EP EP13774100.5A patent/EP2903997B1/en active Active
- 2013-09-26 AU AU2013322620A patent/AU2013322620C1/en active Active
- 2013-09-26 HR HRP20181114TT patent/HRP20181114T1/hr unknown
- 2013-09-26 SG SG10201912308SA patent/SG10201912308SA/en unknown
- 2013-09-26 EA EA201590629A patent/EA028707B1/ru unknown
- 2013-09-26 DK DK13774100.5T patent/DK2903997T3/en active
- 2013-09-26 LT LTEP13774100.5T patent/LT2903997T/lt unknown
- 2013-09-26 WO PCT/EP2013/070117 patent/WO2014049079A1/en active Application Filing
- 2013-09-26 CA CA2885564A patent/CA2885564C/en active Active
- 2013-09-26 EA EA201790916A patent/EA034605B1/ru unknown
- 2013-09-26 EP EP18175970.5A patent/EP3398956B1/en active Active
- 2013-09-26 NZ NZ736108A patent/NZ736108A/en unknown
- 2013-09-26 TR TR2018/10231T patent/TR201810231T4/tr unknown
- 2013-09-26 CN CN201380050517.5A patent/CN104703996B/zh active Active
- 2013-09-26 CN CN201610649060.5A patent/CN106279300B/zh active Active
- 2013-09-26 NZ NZ706443A patent/NZ706443A/en unknown
- 2013-09-26 BR BR112015006874-0A patent/BR112015006874B1/pt active IP Right Grant
- 2013-09-26 EP EP15001513.9A patent/EP2963050A1/en not_active Withdrawn
- 2013-09-26 BR BR122019023887-1A patent/BR122019023887B1/pt active IP Right Grant
- 2013-09-26 JP JP2015533587A patent/JP6313768B2/ja active Active
-
2015
- 2015-03-12 ZA ZA2015/01718A patent/ZA201501718B/en unknown
- 2015-03-16 IL IL237794A patent/IL237794B/en active IP Right Grant
- 2015-03-18 TN TNP2015000104A patent/TN2015000104A1/fr unknown
- 2015-03-23 PH PH12015500644A patent/PH12015500644A1/en unknown
- 2015-03-25 SA SA515360190A patent/SA515360190B1/ar unknown
- 2015-03-25 SA SA517380700A patent/SA517380700B1/ar unknown
- 2015-03-25 CL CL2015000752A patent/CL2015000752A1/es unknown
- 2015-03-27 US US14/670,678 patent/US10072262B2/en active Active
-
2016
- 2016-03-03 HK HK16102455.6A patent/HK1214602A1/en unknown
-
2017
- 2017-08-08 AU AU2017213455A patent/AU2017213455B2/en active Active
-
2018
- 2018-05-02 US US15/969,077 patent/US11142763B2/en active Active
- 2018-07-11 CY CY181100723T patent/CY1120660T1/el unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SA517380700B1 (ar) | مركبات ترابطية rig-i جديدة وطرق إنتاجها | |
| US9896689B2 (en) | Purification of triphosphorylated oligonucleotides using capture tags | |
| HK1209128B (en) | Novel rig-i ligands and methods for producing them | |
| WO2024249680A2 (en) | Hepatic Delivery Platforms For Multimeric RNAi Agent Conjugates and Methods of Use Thereof | |
| CN119285688A (zh) | 修饰的核苷酸单体及其用途 |