[go: up one dir, main page]

CN1669573A - 一种治疗心脑血管疾病的中药制剂及其制备方法 - Google Patents

一种治疗心脑血管疾病的中药制剂及其制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN1669573A
CN1669573A CNA2004100187584A CN200410018758A CN1669573A CN 1669573 A CN1669573 A CN 1669573A CN A2004100187584 A CNA2004100187584 A CN A2004100187584A CN 200410018758 A CN200410018758 A CN 200410018758A CN 1669573 A CN1669573 A CN 1669573A
Authority
CN
China
Prior art keywords
charge ratio
ion mass
fragment ion
compositions
glc
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CNA2004100187584A
Other languages
English (en)
Other versions
CN100450501C (zh
Inventor
程翼宇
张海江
叶正良
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Tasly Pharmaceutical Group Co Ltd
Original Assignee
Tianjin Tasly Pharmaceutical Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority to CNB2004100187584A priority Critical patent/CN100450501C/zh
Application filed by Tianjin Tasly Pharmaceutical Co Ltd filed Critical Tianjin Tasly Pharmaceutical Co Ltd
Priority to PL05729109T priority patent/PL1741439T3/pl
Priority to LTEP05729109.8T priority patent/LT1741439T/lt
Priority to AU2005221260A priority patent/AU2005221260B2/en
Priority to CA2559826A priority patent/CA2559826C/en
Priority to KR1020067021522A priority patent/KR20070027532A/ko
Priority to JP2007503177A priority patent/JP5567763B2/ja
Priority to NZ550335A priority patent/NZ550335A/en
Priority to EP05729109.8A priority patent/EP1741439B1/en
Priority to RU2006136529/15A priority patent/RU2359692C2/ru
Priority to UAA200610937A priority patent/UA88162C2/ru
Priority to AP2006003788A priority patent/AP2644A/xx
Priority to HUE05729109A priority patent/HUE036016T2/hu
Priority to PT57291098T priority patent/PT1741439T/pt
Priority to ES05729109.8T priority patent/ES2635869T3/es
Priority to PCT/CN2005/000333 priority patent/WO2005087242A1/zh
Priority to DK05729109.8T priority patent/DK1741439T3/en
Priority to MXPA06010597A priority patent/MXPA06010597A/es
Publication of CN1669573A publication Critical patent/CN1669573A/zh
Priority to US11/522,296 priority patent/US7396545B2/en
Priority to NO20064572A priority patent/NO345093B1/no
Priority to ZA200608606A priority patent/ZA200608606B/en
Application granted granted Critical
Publication of CN100450501C publication Critical patent/CN100450501C/zh
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/48—Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/045—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/25—Araliaceae (Ginseng family), e.g. ivy, aralia, schefflera or tetrapanax
    • A61K36/258—Panax (ginseng)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/53—Lamiaceae or Labiatae (Mint family), e.g. thyme, rosemary or lavender
    • A61K36/537—Salvia (sage)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/06—Antiarrhythmics

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)

Abstract

本发明公开一种治疗心脑血管疾病的中药制剂，它是将丹参、三七用碱液提取，醇沉，浓缩，加入其他药物和辅料制备而成；并用HPLC－MS和HPLC指纹图谱对其物理化学特征进行了较全面的表征。采用本发明的HPLC－MS和HPLC指纹图谱分析方法，可以得到丰富的生物活性成分的结构和相对含量信息，由此来表征本发明中药制剂中的主要代表组分丹参和三七的物理化学特征，优于现有技术的方法。

Description

一种治疗心脑血管疾病的中药制剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及药物，尤其指一种治疗心脑血管疾病的中药制剂。
背景技术
心脑血管疾病是严重危害人类的常见疾病。近年来，由于社会的发展，工作、生活、饮食结构及环境等的变化，心脑血管疾病呈上升趋势。中药虽然单一靶点的作用强度低于西药，但其多途径、多靶点、动态整体治疗、毒副作用小的特性则远非西药所能及，疗效确切的中成药的综合治疗效应要超过西药。治疗心脑血管疾病的中药制剂很多，例如复方丹参片、中药制剂、冠心丹参滴丸、心可舒片等。这些中药制剂(均含有丹参、三七)因其配方不同，或者配方比例不同，或者提取精制方法不同，或者剂型不同，治疗效果也有所差异。另外，由于未找到有效的质量检测方法来全面表征这些中药制剂的物理化学特征，目前仅用一两个成分例如丹参素或丹参酮IIA的含量来表征这些中药制剂中复杂的生物活性成分，实际上难以控制这些中药制剂的质量。因此，对中药制剂的提取精制方法、质量控制方法进行改进成为人们积极研究的课题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种更有效地治疗心脑血管疾病的中药制剂，并提供一种检测方法对其物理化学特征进行了较全面的表征。
本发明的另一目的在于提供一种上述中药制剂的制备方法。
本发明通过以下方案予以实施。
本发明的中药制剂的一种制备方法如下：
称取丹参、三七，加药材总量0.5％-4.0％的氢氧化钠或者碳酸氢钠或者碳酸钠或者氢氧化钾或者碳酸氢钾或者碳酸钾或者它们的混合物，加3-6倍量水，煎煮2-4次，过滤，滤液合并，浓缩，加高浓度乙醇(＞70％)至乙醇含量为65-70％，静置，分离上清液，回收乙醇，浓缩至药液相对密度为1.20-1.50(55-60℃)，得丹参三七浸膏。将丹参三七浸膏与冰片(或者降香油)混合，加入任何一种或一种以上药剂学上辅料如淀粉、糊精、乳糖、微晶纤维素、羟丙甲基纤维素、聚乙二醇、硬脂酸镁、微粉硅胶、木糖醇、乳糖醇、葡萄糖、甘氨酸、甘露醇、甘氨酸、甲基淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、交联聚乙烯吡咯烷酮等混合制成的各种剂型，例如，可制成注射剂、片剂、缓释片、滴丸、颗粒剂、粉针剂、胶囊剂、微粒剂、口腔崩解剂。
上述中药制剂的优选制备方法为：称取丹参、三七，加药材总量1.4％-1.9％的碳酸氢钠，煎煮二次，第一煎4-5倍量水2-3小时，第二次3-4倍量水1-2小时，过滤，滤液合并，浓缩至比重为1.16-1.20(80±5℃)时，加高浓度乙醇(＞70％)至乙醇含量为65-70％(20℃)，静置8-12小时以上，分离上清液，回收乙醇，浓缩至药液相对密度为1.32-1.40(55-60℃)，得丹参三七浸膏。将丹参三七浸膏与冰片(或者降香油)混合，加入以下一种或一种以上的辅料如淀粉、糊精、乳糖、微晶纤维素、羟丙甲基纤维素、聚乙二醇、硬脂酸镁、微粉硅胶、木糖醇、乳糖醇、葡萄糖、甘氨酸、甘露醇、甘氨酸、甲基淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、交联聚乙烯吡咯烷酮等制成片剂、滴丸、粉针剂、胶囊剂、颗粒剂、微粒剂、口腔崩解剂。
其中冰片为人工冰片或天然冰片，降香油为降香经蒸馏所得。
上述中药制剂的优选剂型为滴丸。
本发明的中药制剂具有如下理化参数：HPLC图谱中单峰面积占总峰面积的百分比超过2％的有8个峰，该8个峰的平均保留时间为6.04、9.9、16.89、17.84、20.31、23.74、27.73、31.02，其保留时间RSD％分别为0.31、0.25、0.61、0.7、0.96、0.76、0.5、1.18，其平均峰面积分别为1627.92、2575.54、366.89、381.4、186.08、555.35、281.91、1852.33，其峰面积RSD％分别为5.91、13.53、10.92、13.81、12.04、10.48、18.08、14.84，其单峰面积占总峰面积的百分比分别为19.6％-22.0％、28.5％-37.4％、4.2％-5.2％、4.2％-5.5％、2.1％-2.7％、6.4％-7.8％、3.0％-4.3％、20.2％-27.2％。
上述理化参数的检测条件如下：
(1)高效液相色谱条件。色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶为填料，流速1.000ml/min，检测波长280nm，洗脱条件：流动相A为0.02％的磷酸水溶液，流动相B为80％乙腈0.02％的磷酸水溶液，从0到8分钟，流动相A从90％均匀变化成78％，流动相B从10％均匀变化成22％；从8到15分钟，流动相A从78％均匀变化成74％，流动相B从22％均匀变化成26％；从15到55分钟，流动相A从74％均匀变化成48％，流动相B从26％均匀变化成52％。
(2)供试品溶液制备与测定。取中药制剂10粒，精密称定，置10ml容量瓶中，加蒸馏水超声15分钟，溶解，定容，离心或过滤，得到供试品溶液；精密吸取供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，即得高效液相图谱。
上述平均保留时间为6.04、9.9、16.89、17.84、20.31、23.74、27.73、31.02的8个峰，经标准品对照和质谱等分析，分别为丹参素、原儿茶醛、异紫草酸A、丹酚酸D、丹酚酸E、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A。见图1。
本发明的中药制剂具有如下理化参数：HPLC图谱中单峰面积占总峰面积的百分比超过2％的有13或14个峰，该14个峰的平均保留时间为10.87、12.12、20.34、20.86、23.29、24.48、29.00、41.21、42.94、44.16、45.68、47.88、68.21、69.43，其保留时间RSD％分别为0.45、0.34、0.23、0.16、0.25、0.28、0.62、0.25、0.21、0.21、0.23、0.25、0.13、0.12，其平均峰面积分别为506.92、2723.73、1684.49、231.84、565.78、309.39、345.32、436.06、665.38、472.84、947.39、1547.8、622.91、820.24，其峰面积RSD％分别为13.03、12.11、18.95、18.99、13.8、18.98、14.28、10.88、11.82、14.59、16.06、13.25、10.39、12.93，其单峰面积占总峰面积的百分比分别为3.7％-4.8％、20.2％-25.7％、11.5％-16.9％、1.6％-2.3％、4.1％-5.4％、2.1％-3.1％、2.5％-3.3％、3.3％-4.1％、4.9％-6.3％、3.4％-4.6％、6.7％-9.3％、11.3％-14.8％、4.7％-5.8％、6.0％-7.8％。
上述理化参数的检测条件如下：
1)高效液相色谱条件。色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶为填料，流速0.8ml·min-1，检测波长203nm；洗脱条件：流动相A为0.01％(V/V)冰醋酸水溶液，流动相B为含0.01％冰醋酸的乙腈溶液，从0到15分钟，流动相A从80％均匀变化成65％，流动相B从20％均匀变化成35％；从15到25分钟，流动相A65％和流动相B35％的浓度不变；从25到40分钟，流动相A从65％均匀变化成57％，流动相B从35％均匀变化成43％；从40到50分钟，流动相A57％和流动相B43％的浓度不变；从50到65分钟，流动相A从57％均匀变化成42％，流动相B从43％均匀变化成58％；从65到75分钟，流动相A从42％均匀变化成25％，流动相B从58％均匀变化成75％；
2)供试品溶液制备与测定。取中药制剂约1.0g，加入10ml 4％氨水，超声溶解，过滤，取5ml滤液过C-18小柱，20ml水洗，10％-30％甲醇氨水溶液冲洗，弃冲洗液，再水冲洗，弃水液，然后用甲醇洗脱，收集甲醇洗脱液于5ml容量瓶，定容，离心或过滤，得到供试品溶液；精密吸取供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，即得高效液相图谱。
上述平均保留时间为10.87、12.12、20.34、20.86、23.29、24.48、29.00、41.21、42.94、44.16、45.68、47.88、68.21、69.43的14个峰，经标准品对照和质谱等分析，分别为三七皂苷R1、人参皂苷Re和Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R2、人参皂苷Rh1、人参皂苷Rhliso.、人参皂苷Rd、三七皂苷R2-H2O、三七皂苷R2-H2O、人参皂苷Rg6或F4、人参皂苷Rk3或Rh4、人参皂苷Rh4或Rk3、人参皂苷Rk1或Rg5、人参皂苷Rg5或Rk1。见图2。
采用特定的HPLC-MS(液质联用)的方法检测本发明的中药制剂，证明其含有丹参素(Danshensu)、原儿茶醛(Protocatechualdehyde)、异紫草酸A(Isolithospermic acidA)、异紫草酸B(Isolithospermic acid B)、丹酚酸D(Salvianolic acid D)、丹酚酸E(Salvianolic acid E)、迷迭香酸(Rosmarinic acid)、丹酚酸B(Salvianolic acidB)、丹酚酸G(Salvianolic acid G)、丹酚酸A(Salvianolic acid A)、丹参酮I、丹参酮IIA、三七皂苷R1、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R2、三七皂苷R2 iso.、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rh1、人参皂苷Rh1 iso.(F1)、人参皂苷Rd、人参皂苷Rd iso.、人参皂苷Rf-H2O、三七皂苷R2-H2O、三七皂苷R2-H2O、人参皂苷Rg6/F4、人参皂苷Rk3/Rh4(Rk3)、人参皂苷Rk3/Rh4(Rh4)、人参皂苷20(R)Rg3、人参皂苷20(S)Rg3、人参皂苷Rk1/Rg5(Rk1)、人参皂苷Rk1/Rg5(Rg5)等成分。
                     1                                       2                                       3
Figure A20041001875800134
    
Figure A20041001875800135
     4                                     5                                     6
Figure A20041001875800137
                 7                                     8                                       9
Figure A200410018758001310
   
Figure A200410018758001311
   
Figure A200410018758001312
10                                     11
1.丹参素(Danshensu)  MW＝198
2.原儿茶醛(Protocatechualdehyde)  MW＝138
3.丹酚酸A(Salvianolic acid A)  MW＝494
4.丹酚酸B(Salvianolic acid B)  MW＝718
5.丹酚酸C(Salvianolic acid C)  MW＝492
6.丹酚酸D(Salvianolic acid D)  MW＝418
7.丹酚酸E(Salvianolic acid E)  MW＝718
8.丹酚酸G(Salvianolic acid G)  MW＝340
9.异紫草酸A(Isolithospermic acid A)  MW＝538
10.异紫草酸B(Isolithospermic acid B)  MW＝538
11.迷迭香酸(Rosmarinic acid)  MW＝360
Figure A20041001875800141
Figure A20041001875800142
Figure A20041001875800144
结构TypeA 人参皂甙Ginsenoside  R1  R2 分子量MW
人参皂甙Rb1 Glc-Glc  Glc-Glc  1108
人参皂甙Rd Glc-Glc  Glc  946
人参皂甙Rg3 Glc-Glc  H  784
人参皂甙F2 Glc  Glc  784
结构TypeB 人参皂甙Ginsenoside  R1  R2  R3 分子量MW
人参皂甙Re  H  Glc  O-Glc-Rham  946
人参皂甙Rf  H  H  O-Glc-Glc  800
人参皂甙Rg1  H  Glc  O-Glc  800
人参皂甙Rg2  H  H  O-Glc-Rham  784
人参皂甙Rh1  H  H  O-Glc  638
三七皂甙Notoginsenoside R2  H  H  O-Glc-Xyl  770
三七皂甙Notoginsenoside R1  H  Glc  O-Glc-Xyl  932
F1  H  Glc  OH  638
结构TypeC 人参皂甙Ginsenoside  R1  R2 分子量MW
人参皂甙Rg5  Glc-Glc-  H  766
人参皂甙Rh4  H  Glc-O-  620
人参皂甙F4 H  Rham-Glc-O- 766
结构TypeD 人参皂甙Ginsenoside R1  R2 分子量MW
人参皂甙Rg6 H  Rham-Glc-O- 766
人参皂甙Rk1 Glc-Glc  H 766
人参皂甙Rk3 H  Glc-O- 620
Glc＝β-D-glucose
Rham＝α-L-rhamnose
Xyl＝β-D-xylose
通过采用本发明特定的提取分析方法，以指纹图谱的方式比较全面的表征了本发明中药制剂中丹参和三七的物理化学特征，与仅用一两个成分来表征中药制剂中复杂的生物活性成分的现有技术比较，更加容易控制中药制剂的质量。
通过采用本发明特定的液质联用HPLC-MS分析方法，对本发明中药制剂的生物活性成分进行鉴定，共计鉴定了12种来自丹参的成分和21种来自三七的皂苷成分。对化合物的鉴定主要是基于对MSn数据的解析以及与文献数据的比较而进行。最终，通过与对照品比较，使大部分成分结构得到完全确认。由此可见，采用本发明特定的液质联用HPLC-MS分析方法，对本发明中药制剂进行化学成分分析，可以得到丰富的生物活性成分的结构信息，由此来表征本发明中药制剂中丹参和三七的物理化学特征，大大优于现有技术的方法。
通过以下试验证明了本发明中药制剂在治疗心脑血管方面的效果
1、本发明中药制剂对麻醉犬心肌缺血、心肌梗塞的影响
采用心外膜电图标测心肌缺血范围及程度，定量组织学(N-BT染色法)测定心肌梗塞范围，同时测定冠脉血流量、心肌耗氧量及血清CK、LDH和血浆ET、TXB2、6-Keto-PGF1a活性的变化，研究了本发明中药制剂消化道给药对试验性犬急性心肌缺血、心肌梗塞及相关指标的影响。
试验结果表明，本发明中药制剂具有明显改善犬急性心肌缺血和心肌梗塞的作用，减轻由心外膜电图标测的心肌缺血程度(∑-ST)(与生理盐水对照组比较P＜0.001)，明显减小经N-ST染色所显示的梗塞区(与生理盐水对照组比较P＜0.001)；显著增加缺血心脏的冠脉血流量(与生理盐水对照组比较P＜0.001)；抑制心肌缺血及心肌梗塞引起的血清乳酸脱氢酶(LDH)的释放(相对变化率明显低于生理盐水对照组P＜0.001)，并对肌酸磷酸激酶(CK)活性升高有一定抑制作用(相对变化率明显低于生理盐水对照组P＜0.05)；降低血浆ET水平(与生理盐水对照组比较P＜0.001)，降低TXB2水平(与生理盐水对照组比较P＜0.001，与中药制剂比较P＜0.05)，提高6-Keto-PGF1a/TXB2的比值(与生理盐水对照组比较P＜0.001，与中药制剂比较P＜0.05)。
2、本发明中药制剂对缺血再灌注所致心肌梗塞的影响
以大鼠心肌缺血再灌注损伤模型观察到，本发明中药制剂能够明显减轻心肌损伤程度，心肌梗塞面积缩小(与模型组比较P＜0.05～0.01)，梗塞区重量减轻(与模型组比较P＜0.05)；并能明显增加超氧化物歧化酶(SOD)活性(与模型组比较P＜0.01)。
3、本发明中药制剂对犬心脏血流动力学及心肌耗氧量的影响
试验观察到了本发明中药制剂对正常麻醉犬心脏血流动力学及心肌耗氧量的影响。结果显示，本发明中药制剂可明显增加冠脉血流量(与药前及生理盐水对照组比较P＜0.01～0.001)，扩张冠脉血管、增加冠状静脉窦血氧含量(与药前及生理盐水对照组比较P＜0.05～0.001)，降低心肌耗氧指数，改善心肌供血供氧，在不增加左室作功的情况下，增加心脏每博输出量和心输出量(与药前及生理盐水对照组比较P＜0.05～0.01)，调整心脏顺应性，对心脏血管系统起到调整和改善作用。
4、本发明中药制剂对家兔血小板凝集的影响
试验采用born氏比浊法，观察本发明中药制剂对家兔血小板聚集的影响。结果表明：连续7天灌胃给药，本发明中药制剂明显降低花生四烯酸(AA)(与蒸馏水对照组比较P＜0.05～0.01)和胶原诱导的家兔血小板凝聚率(与蒸馏水对照组比较P＜0.01)。提示本发明中药制剂具有抑制血小板凝聚的作用。
5、本发明中药制剂对大鼠体外血栓形成及血液黏度的影响
试验观察本发明中药制剂对大鼠体外血栓形成及血液黏度的影响。结果表明：连续7天灌胃给药，本发明中药制剂明显缩短血栓长度(与蒸馏水对照组比较P＜0.01)、明显减轻血栓湿重和干重(与蒸馏水对照组比较P＜0.05)；显著降低血浆黏度(与蒸馏水对照组比较P＜0.001)，并明显降低各切变率下的全血黏度(与蒸馏水对照组比较P＜0.05)。提示本发明中药制剂具有抑制血栓形成、降低血浆黏度和全血黏度的作用。
6、本发明中药制剂对家兔高脂血症及动脉粥样硬化的影响
通过给家兔喂饲高胆固醇饲料，建立实验性高脂血症及动脉硬化(AS)模型，观察本发明中药制剂对其影响及作用机制。结果表明：本发明中药制剂明显降低家兔血清TC、TG、LDL-C、VLDL-C浓度及TC/HDL-C比值(与高脂对照组比较P＜0.05～0.001)，明显升高家兔HDL-C浓度(与高脂对照组比较P＜0.05)，降低家兔主动脉TC含量(与高脂对照组比较P＜0.05)、降低肝脏TG含量(与高脂对照组比较P＜0.05)，降低肝脏MDA含量(与高脂对照组比较P＜0.001)亦均有明显降低作用，对肝脏SOD活性有明显升高作用(与高脂对照组比较P＜0.01)；此外，本发明中药制剂能明显减少主动脉斑块厚度及泡沫细胞形成量(与高脂对照组比较P＜0.05)，对主动脉斑块面积有减少趋势。提示本发明中药制剂具有调整血脂的作用，同时在一定程度上具有抗脂质过氧化及防治动脉硬化的作用。
7、本发明复方丹参粉针剂对大鼠局灶性脑缺血的影响
应用大鼠大脑中动脉血栓模型，测定了对MCAT大鼠脑梗塞范围的影响。结果表明，本发明复方丹参粉针剂具有明显的抗脑缺血作用。
附图说明
图1：本发明复方丹参滴丸中丹参成分指纹图谱，图中峰1为丹参素、峰2为原儿茶醛、峰3为异紫草酸A、峰4为丹酚酸D、峰5为丹酚酸E、峰6为迷迭香酸、峰7为丹酚酸B、峰8为丹酚酸A。
图2：本发明复方丹参滴丸中三七成分指纹图谱，图中峰1为三七皂苷R1、峰2为人参皂苷Re和Rg1、峰3为人参皂苷Rb1、峰4为三七皂苷R2、峰5为人参皂苷Rh1、峰6为人参皂苷Rh1iso.、峰7为人参皂苷Rd、峰8为三七皂苷R2-H2O、峰9为三七皂苷R2-H2O、峰10为人参皂苷Rg6或F4、峰11为人参皂苷Rk3或Rh4、峰12为人参皂苷Rh4或Rk3、峰13为人参皂苷Rk1或Rg5、峰14为人参皂苷Rg5或Rk1。
图3：本发明中药制剂的丹参水溶性成分HPLC谱图，图中峰1为丹参素、峰2为原儿茶醛、峰3为异紫草酸A、峰4为异紫草酸B、峰5为丹酚酸D、峰6为丹酚酸E、峰7为迷迭香酸、峰为8丹酚酸B、峰9为丹酚酸G、峰10为丹酚酸A。
图4：本发明中药制剂的丹参水溶性成分MS-TIC谱图。
图5：本发明中药制剂的丹参脂溶性成分的HPLC谱图，图中峰1为丹参酮I、峰2为丹参酮IIA。
图6：本发明中药制剂的丹参脂溶性成分的MS-TIC谱图。
图7.本发明中药制剂的三七成分的HPLC谱图，图中峰1为三七皂苷R1、峰2为人参皂苷Re和人参皂苷Rg1、峰3为人参皂苷Rb1、峰4为三七皂苷R2、峰5为三七皂苷R2 iso.、峰6为人参皂苷Rg2、峰7为人参皂苷Rh1、峰8为人参皂苷Rh1 iso.、峰9为人参皂苷Rd、峰10为人参皂苷Rd iso.、峰11为人参皂苷Rf-H2O、峰12为三七皂苷R2-H2O、峰13为三七皂苷R2-H2O、峰14为人参皂苷Rg6或F4、峰15为人参皂苷20R-Rg3、峰16为人参皂苷20S-Rg3、峰17为人参皂苷Rk1、峰18为人参皂苷Rg5、峰19为人参皂苷Rk3、峰20为人参皂苷Rh4。
图8.本发明中药制剂的三七成分的MS-TIC谱图。
具体实施方式
下面列举实施例进一步详细说明本发明，该实施例仅用于说明本发明而对本发明并没有限制。
实施例一(制备例)
称取丹参41.06g、三七8.03g，加药材总量1.8％的碳酸氢钠，煎煮二次，第一煎4倍量水2小时，第二次3倍量水1小时，过滤，滤液合并，浓缩至比重为1.19-1.20(75±1℃)时，加95％乙醇至乙醇含量为65％(20℃)，静置12小时，分离上清液，回收乙醇，浓缩至药液相对密度为1.37(55-60℃)，得丹参三七浸膏。取上述丹参三七浸膏和冰片0.46g，与聚乙二醇-6000 18g混和均匀，加热至温度85℃，化料80分钟后，移至罐温保持在86℃的滴丸机滴罐中。药液滴至8℃液体石蜡中，取出滴丸，除油，筛网选丸，即得。
实施例二(制备例)
称取丹参59.36g、三七6.38g，加药材总量1.0％的碳酸钾，煎煮二次，第一煎4倍量水2.5小时，第二次3倍量水1.5小时，过滤，滤液合并，浓缩至比重为1.19-1.20(75±1℃)时，加85％乙醇至乙醇含量为70％(20℃)，静置10小时，分离上清液，回收乙醇，浓缩至药液相对密度为1.35(55-60℃)，得丹参三七浸膏。取上述丹参三七浸膏和冰片0.34g，与聚乙二醇-6000 23g混和均匀，加热至温度89℃，化料100分钟后，移至罐温保持在85℃的滴丸机滴罐中。药液滴至8℃甲基硅油中，取出滴丸，除油，筛网选丸，即得。
实施例三(制备例)
称取丹参12.6g、三七56.15g，加药材总量1.0％的碳酸氢钾，煎煮二次，第一煎4倍量水2.5小时，第二次3倍量水1.5小时，过滤，滤液合并，浓缩至比重为1.19-1.20(75±1℃)时，加95％乙醇至乙醇含量为70％(20℃)，静置10小时，分离上清液，回收乙醇，浓缩至药液相对密度为1.35(55-60℃)，得丹参三七浸膏。取上述丹参三七浸膏和冰片0.34g，与聚乙二醇-6000 23g混和均匀，加热至温度89℃，化料100分钟后，移至罐温保持在85℃的滴丸机滴罐中。药液滴至8℃甲基硅油中，取出滴丸，除油，筛网选丸，即得。
实施例四(制备例)
称取丹参31.12g、三七9.21g，加药材总量0.5％的氢氧化钠，煎煮二次，第一煎4倍量水1.5小时，第二次3倍量水1.5小时，过滤，滤液合并，浓缩至比重为1.19-1.20(75±1℃)时，加浓度为88％左右乙醇至乙醇含量为66％(20℃)，静置10小时，分离上清液，回收乙醇，浓缩至药液相对密度为1.40(55-60℃)，得丹参三七浸膏。取上述丹参三七浸膏和冰片0.50g，甘露醇90g、依地酸钙钠15g和蒸馏水15ml，上述组分混匀后，冷冻干燥，制成粉针剂。
实施例五(制备例)
称取丹参116.35g、三七58.21g，加药材总量2.0％的碳酸氢钠，煎煮二次，第一煎4倍量水2小时，第二次3倍量水1.5小时，过滤，滤液合并，浓缩至比重为1.19-1.20(75±1℃)时，加浓度为88％左右乙醇至乙醇含量为66％(20℃)，静置10小时，分离上清液，回收乙醇，浓缩至药液相对密度为1.40(55-60℃)，得丹参三七浸膏。取上述丹参三七浸膏和降香油1.8g，与40g微晶纤维素混合均匀，加3％聚维酮乙醇溶液制软材，过18目筛制颗粒，60℃干燥35分钟，整粒，加入4g滑石粉，混匀，充于胶囊中，即得。
实施例六(制备例)
称取丹参丹参116.35g、三七58.21g，加药材总量2.0％的碳酸氢钠，煎煮二次，第一煎4倍量水2小时，第二次3倍量水1.5小时，过滤，滤液合并，浓缩至比重为1.19-1.20(75±1℃)时，加浓度为88％左右乙醇至乙醇含量为66％(20℃)，静置10小时，分离上清液，回收乙醇，浓缩至药液相对密度为1.40(55-60℃)，得丹参三七浸膏。取上述丹参三七浸膏和冰片0.9g，与微晶纤维素120g、羟丙甲基纤维素40g、木糖醇5g、硬脂酸镁2g混合均匀，压片，即得。
实施例七(制备例)
称取丹参丹参140.35g、三七36.42g，加药材总量2.5％的碳酸氢钠，煎煮二次，第一煎4倍量水2小时，第二次3倍量水1.5小时，过滤，滤液合并，浓缩至比重为1.19-1.20(75±1℃)时，加浓度为90％左右乙醇至乙醇含量为65％(20℃)，静置8小时，分离上清液，回收乙醇，浓缩至药液相对密度为1.35(55-60℃)，得丹参三七浸膏。取上述丹参三七浸膏和冰片1.0g，与46g微晶纤维素混合均匀，加3％聚维酮乙醇溶液制软材，过18目筛制颗粒，60℃干燥30分钟，整粒，加入4g滑石粉，混匀，压片，即得。
实施例八(有效成分检测例)
1、样品制备
(1)中药制剂中的丹参水溶性成分
分别准确称取实施例一中药滴丸、实施例二中药滴丸、实施例三中药滴丸、实施例四中药粉针剂、实施例五中药胶囊、实施例六中药口腔崩解片、实施例七中药片各148.4毫克，分别以6毫升水超声15分钟溶解，经0.45μm尼龙膜过滤后分别得到黄色溶液样品。
(2)中药制剂中的三七成分和丹参脂溶性成分
分别准确称取实施例一中药滴丸、实施例二中药滴丸、实施例三中药滴丸、实施例四中药粉针剂、实施例五中药胶囊、实施例六中药口腔崩解片、实施例七中药片各1003.8毫克，分别以10毫升4％氨水超声15分钟溶解，经0.45μm尼龙膜过滤后，滤液以Extract-CleanC18(Alltech Associates，Inc，U.S.)小柱进行预处理。样品上柱后，先以10ml水洗涤，再以2ml甲醇洗脱分别得黄色洗脱液为待测样品。
2、样品的分析
(1)仪器与试剂
Agilent Series-1100型液相色谱仪(Agilent)；G1315A型二极管阵列检测器；G1313A型自动进样器；G1316A型恒温箱；G1322A型脱气机及二元泵；HP Instrument色谱工作站。G2445A型1100系列LC-MSD/Trap质谱仪(Bruker)；离子化方式为电喷雾；Extract-CleanC18小柱(100mg/ml，Alltech Associates，Inc，U.S.)，乙腈为色谱纯试剂(TEDIA)，水为重蒸水，乙酸为分析纯。
(2)仪器测试条件
采用Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(5μm，4.6mm×25cm，Agilent，SN：USCL009296)进行HPLC分析，各样品的梯度洗脱方法及质谱检测条件如下：
①各实施例中药制剂中的丹参水溶性成分HPLC洗脱条件：
时间(分钟) 流动相A(％) 流动相B(％) 流动相A：冰乙酸∶水＝0.01∶100流动相B：冰乙酸∶乙腈＝0.01∶100流速：0.5毫升/分钟温度：30℃检测波长：多波长检测(显示波长280nm)
 0  95  5
 15  78.3  21.7
 33  78.3  21.7
 38  65  35
质谱分析条件：
HPLC-MS  HPLC-MSn
离子检测方式 负离子检测
干燥气流速Dry gas flow rate(L/min) 10  10
雾化气压力Nebulizerpressure(psi) 60  60
干燥气温度Dry temp.(℃) 350  350
毛细管压力Capillary voltage(v) 3500  3500
质量扫描范围Mass scan range(m/z) 100-1200  100-800
碰撞断裂振幅Fragment ampl.  1.5-3.0
②各实施例中药制剂中的三七成分HPLC洗脱条件：
时间(分钟) 流动相A(％) 流动相B(％) 流动相A：冰乙酸∶水＝0.01∶100流动相B：冰乙酸∶乙腈＝0.01∶100流速：0.8毫升/分钟温度：30℃检测波长：多波长检测(显示波长203nm)
 0  80  20
 15  65  35
 25  65  35
 40  57  43
 50  54  46
 65  42  58
 75  25  75
质谱分析条件：
HPLC-MS  HPLC-MSn
 离子检测方式 负离子检测
 Dry gas flow rate(L/min) 10  10
 Nebulizer pressure(psi) 60  60
 Dry temp.(℃) 350  350
 Capillary voltage(v) 3500  3500
 Mass scan range(m/z) 400-1500  400-1200
 Fragment ampl.  1.2-1.5
3、分析结果和谱峰鉴定
成分的鉴定工作分为以下两个方面：(1)采用对照品鉴定；(2)根据紫外吸收特性和MSn得到的离子碎片信息，结合文献资料进行鉴定；
4、鉴定结果如下：
(1)各实施例丹参制剂中的丹参水溶性成分。见附表1、附表2。见图3、图4。
                            附表1.HPLC-MS数据及鉴定结果
峰号Peak No. 保留时间Ret Time 准分子离子质峰质荷比[M-H] 成分Identity 最大吸收波长λmax
 1  12.73  197 丹参素(Danshensu) 280
 2  19.69  137 原儿茶醛(Protocatechualdehyde) 231，280，310
 3  22.99  537 异紫草酸A(Isolithospermic acid) 327
 4  23.83  537 异紫草酸B(Isolithospermic acid) 327
 5  24.89  417 丹酚酸D(Salvianolic acid D) 247，321
 6  26.7  717 丹酚酸E(Salvianolic acid E) 330
 7  28.51  359 迷迭香酸(Rosmarinic acid) 329
 8  31.93  717 丹酚酸B(Salvianolic acid B) 254，286，309
 9  34.86  339 丹酚酸G(Salvianolic acid G) 395
 10  44.64  493 丹酚酸A(Salvianolic acid A) 288
                                   附表2.HPLC-MSn数据
峰号PeakNo. 成分Identity 碎片离子质荷比Fragment ion m/z
 3 异紫草酸A 二级(537)：493[M-H-CO2]-，295[M-CO2-R-H2O]三级(295)：159，109
 4 异紫草酸B 二级(537)：493[M-H-CO2]-，295[M-CO2-R-H2O]三级(295)：159，109
 5 丹酚酸D 二级(417)：175[M-CO2-R-H2O]，373[M-H-CO2]-三级(175)：147，157，133
  6   丹酚酸E   二级(717)：519[M-R-H2O]，321[M-2R-2H2O]三级(519)：321[M-R-H2O]，339[M-R]三级(321)：279，293，249，223，185
  7   迷迭香酸   二级(359)：161[M-R-H2O]，179[M-R]，195
  8   丹酚酸B   二级(717)：519[M-R-H2O]，321[M-2R-2H2O]三级(519)：321[M-R-H2O]，339[M-R]四级(321)：279，293，249，233，185
  9   丹酚酸G   二级(339)：321[M-H-H2O]，295[M-H-CO2]三级(295)：279，267四级(279)：251
  10   丹酚酸A   二级(493)：295[M-R-H2O]三级(295)：159，109
从MSn结果看，第二和第三号峰具有与紫草酸很相似的结构，但是二者的紫外吸收情况却存在较大差异。紫草酸由于具有苯基苯骈二氢呋喃骨架而在253nm附近有较强吸收，第二和第三号峰则不具有这一吸收特性。与丹酚酸E相比，二者的紫外吸收情况基本一致。这表明，这两个化合物很可能与丹酚酸E具有相同的骨架，即羧二苯乙烯的骨架结构。由此推测它们的结构为前述成分结构图中异紫草酸A和异紫草酸B所示结构。这一结构尚未见过相关报道，因此暂命名为异紫草酸A和异紫草酸B。
(2)中药制剂中的丹参脂溶性成分。见附表3。见图5、图6。
                            附表3 HPLC-MS数据及鉴定结果
峰号Peak No. 保留时间Ret Time  准分子离子质峰质荷比m/z 成分Identity
 1  24.36  277[M+H]+，575[2M+Na]+ 丹参酮I
 2  34.85  295[M+H]+，611[2M+Na]+ 丹参酮IIA
(3)丹参滴丸中的三七成分。见附表4、附表5。见图7、图8。
                          附表4 HPLC-MS数据及鉴定结果
峰号Peak No. 保留时间RetTime 保留时间Ret Time 准分子离子质峰质荷比[M-H] 成分Identity
1  11.27  10.68  931 三七皂苷R1
2  12.38  12.38  945 人参皂苷Re
2  12.53  12.5  799 人参皂苷Rg1
3  20.81  21.95  1107 人参皂苷Rb1
4  21.25  22.52  769 三七皂苷R2
5  22.53  23.8  769 三七皂苷R2 iso.
6  22.85  24.07  783 人参皂苷Rg2
  7   23.77   25.02   637   人参皂苷Rh1
  8   25   26.25   637   人参皂苷Rh1 iso.(F1)
  9   30.05   31.05   945   人参皂苷Rd
  10   34.81   35.8   945   人参皂苷Rd iso.
  11   40.00   40.77   781   人参皂苷Rf-H2O
  12   41.57   42.04   751   三七皂苷R2-H2O
  13   43.72   43.72   751   三七皂苷R2-H2O
  14   44.89   44.89   765   人参皂苷Rg6/F4
  15   46.43   46.43   619   人参皂苷Rk3/Rh4(Rk3)
  16   48.68   48.68   619   人参皂苷Rk3/Rh4(Rh4)
  17   54.97   54.97   783   人参皂苷20(R)Rg3
  18   56.48   56.48   783   人参皂苷20(S)Rg3
  19   68.35   68.35   765   人参皂苷Rk1/Rg5(Rk1)
  20   69.53   69.53   765   人参皂苷Rk1/Rg5(Rg5)
                                     附表5.HPLC-MSn数据
保留时间Ret Time 成分Identity  准分子离子质峰质荷比m/z
 11.27 三七皂苷R1  799[M-H-Xyl]；637[M-H-Xyl-Glc]；475[M-H-Xyl-2Glc]
 12.38 人参皂苷Re  799[M-H-Rham]；783[M-H-Glc]；637[M-H-Rham-Glc]；475[M-H-Rham-2Glc]
 12.53 人参皂苷Rg1  637[M-H-Glc]；475[M-H-2Glc]
 20.81 人参皂苷Rb1  945[M-H-Glc]；783[M-H-2Glc]；621[M-H-3Glc]；459[M-H-4Glc]
 21.25 三七皂苷R2  637[M-H-Xyl]；475[M-H-Xyl-Glc]
 22.53 三七皂苷R2 iso.  637[M-H-Xyl]；475[M-H-Xyl-Glc]
 22.85 人参皂苷Rg2  637[M-H-Rham]；475[M-H-Rham-Glc]
 23.77 人参皂苷Rh1  475[M-H-Glc]
 25 人参皂苷Rh1 iso.(F1)  475[M-H-Glc]
 30.05 人参皂苷Rd  783[M-H-Glc]；621[M-H-2Glc]；459[M-H-3Glc]
 34.81 人参皂苷Rd iso.  783[M-H-Glc]；621[M-H-2Glc]；459[M-H-3Glc]
 40.00 人参皂苷Rf-H2O  619[M-H-Glc]；457[M-H-2Glc]
 41.57 三七皂苷R2-H2O  619[M-H-Xyl]
 43.72 三七皂苷R2-H2O  619[M-H-Xyl]
 44.89 人参皂苷Rg6/F4  619[M-H-Rham]；457[M-H-Rham-Glc]
 54.97 人参皂苷20(R)Rg3  621[M-H-Glc]；459[M-H-2Glc]
 56.48 人参皂苷20(S)Rg3  621[M-H-Glc]；459[M-H-2Glc]
 68.35 人参皂苷Rk1/Rg5(Rk1)  603[M-H-Glc]；441[M-H-2Glc]
 69.53 人参皂苷Rk1/Rg5(Rg5)  603[M-H-Glc]；441[M-H-2Glc]
通过以上研究，建立了中药制剂的提取和分析方法，包括：
(1)固相萃取方法富集丹参滴丸中丹参脂溶性成分和三七皂苷成分；
(2)各样品的HPLC-MS分析方法
共计鉴定了12种来自丹参的成分和21种来自三七的皂苷成分。其中通过与对照品比较，确认了4种丹参水溶性成分、2种丹参脂溶性成分和9种皂苷。其余化合物的鉴定则主要是基于对MSn数据的解析以及与文献数据的比较而进行的。
实施例九(中药制剂三七组分指纹图谱检测例)
1、仪器与试剂
仪器：采用Agilent 1100液相色谱，包括四元泵，在线脱气装置，自动进样器，DAD检测器，柱温箱，Chemstation工作站；BS210S电子天平(1/10-4g)(北京塞多利斯公司)、METTLER AE240电子天平(1/10-4g或1/10-5g)(梅特勒—托利多(上海)有限公司)、LD4-2离心机(4000r/min)(北京医用离心机厂)、数显恒温水浴锅(天津长风有限公司)、RE-52AA旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)、SHE-(III)循环水式真空泵(巩义英峪予华仪器厂)、KQ-250B超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)、HENGAO T&D过滤器(HENGGAOT&D)、合成纤维过滤膜(孔径0.45μm)(上海兴亚净化材料厂)；C18小柱(填料为C18H17液相色谱固定相，50~100目，天津化学试剂二厂出品。干法装柱600mg，柱内径1cm)。
试剂：乙腈(色谱纯，美国墨克公司)，醋酸(优级纯)，娃哈哈纯净水。
2、供试品制备
称取实施例一中各批次中药滴丸1.0g，溶于10ml 4％氨水，超声溶解，过0.45μm滤膜，取5ml滤液过C-18小柱(500mg填料)，20％甲醇氨水溶液15ml冲洗，弃冲洗液，再水15ml冲洗，弃水液，然后用甲醇洗脱，收集甲醇洗脱液于5ml容量瓶，定容，离心备用。平行2份，进样量20μl。
3、HPLC分析条件
Agilent SB-C18分析柱(4.6mm×250mm，Zorbax SB USCL010304)；流动相：A相为0.01％(V/V)冰醋酸水溶液，B相为含0.01％冰醋酸的乙腈溶液。流速0.8ml·min-1；检测波长203nm；柱温30℃。
梯度洗脱程序如下表：
Time     A：0.01％HAC-H2O(％)     B：0.01％HAC-CH3CN(％)
  0152540506575     80656557574225     20353543435875
4、检测结果(见附表6)
                 附表6  200批上述中药滴丸三七成分的检测结果
峰号 平均保留时间 保留时间RSD％ 平均峰面积 峰面积RSD％ 单峰占总峰面积的百分比 单峰占总峰面积的百分比范围
    1     10.87     0.45     506.92     13.03     4.27％     3.7％-4.8％
    2     12.12     0.34     2723.73     12.11     22.93％     20.2％-25.7％
    3     20.34     0.23     1684.49     18.95     14.18％     11.5％-16.9％
    4     20.86     0.16     231.84     18.99     1.95％     1.6％-2.3％
    5     23.29     0.25     565.78     13.8     4.76％     4.1％-5.4％
    6     24.48     0.28     309.39     18.98     2.60％     2.1％-3.1％
    7     29     0.62     345.32     14.28     2.91％     2.5％-3.3％
    8     41.21     0.25     436.06     10.88     3.67％     3.3％-4.1％
    9     42.94     0.21     665.38     11.82     5.60％     4.9％-6.3％
    10     44.16     0.21     472.84     14.59     3.98％     3.4％-4.6％
    11     45.68     0.23     947.39     16.06     7.97％     6.7％-9.3％
    12     47.88     0.25     1547.8     13.25     13.03％     11.3％-14.8％
    13     68.21     0.13     622.91     10.39     5.24％     4.7％-5.8％
    14     69.43     0.12     820.24     12.93     6.90％     6.0％-7.8％
注：峰1为三七皂苷R1、峰2为人参皂苷Re和Rg1、峰3为人参皂苷Rb1、峰4为三七皂苷R2、峰5为人参皂苷Rh1、峰6为人参皂苷Rh1iso.、峰7为人参皂苷Rd、峰8为三七皂苷R2-H2O、峰9为三七皂苷R2-H2O、峰10为人参皂苷Rg6或F4、峰11为人参皂苷Rk3或Rh4、峰12为人参皂苷Rh4或Rk3、峰13为人参皂苷Rk1或Rg5、峰14为人参皂苷Rg5或Rk1。见图2。
从附表6可看出14个峰的相对位置和面积比例(保留时间和峰面积)，其中单峰面积占总峰面积的百分比超过10％的有3个峰，13个峰的单峰面积占总峰面积的百分比全部超过2％，只有保留时间为20.86的峰4的单峰面积占总峰面积的百分比为1.6％-2.3％。
实施例十(中药制剂丹参组分指纹图谱检测例)
1、仪器与试剂
仪器：采用Agilent 1100液相色谱，包括四元泵，在线脱气装置，自动进样器，DAD检测器，柱温箱，Chemstation工作站；BS210S电子天平(1/10-4g)(北京塞多利斯公司)、METTLER AE240电子天平(1/10-4g或1/10-5g)(梅特勒—托利多(上海)有限公司)、LD4-2离心机(4000r/min)(北京医用离心机厂)、数显恒温水浴锅(天津长风有限公司)、RE-52AA旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)、SHE-(III)循环水式真空泵(巩义英峪予华仪器厂)、KQ-250B超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)、HENGAO T&D过滤器(HENGGAOT&D)、合成纤维过滤膜(孔径0.45μm)(上海兴亚净化材料厂)；
试剂：乙腈(色谱纯，美国墨克公司)，磷酸(优级纯)，娃哈哈纯净水。
2、供试品制备：
取实施例一各批次中药制剂10粒，精密称定，置10ml容量瓶中，加蒸馏水超声15min，溶解，定容，过滤，即为供试品。
3、HPLC分析条件
Agilent ZoRBAx SB-C18(4.6×250mm，5μm)色谱柱，流动相：A相为0.02％的磷酸水溶液；B相为80％乙腈0.02％的磷酸水溶液。流速1.000ml/min，检测波长280nm，柱温30℃，进样体积10μl。
色谱流动相洗脱梯度如下表：
保留时间     流动相A     流动相A
 0min8min15min55min     90％(v/v)78％74％48％     10％22％26％52％
4、检测结果(见附表7)
               附表7  200批上述中药滴丸丹参成分的检测结果
峰号 平均保留时间 保留时间RSD％ 平均峰面积 峰面积RSD％ 单峰占总峰面积的百分比 单峰占总峰面积的百分比范围
1 6.04 0.31 1627.92 5.91 20.80％ 19.6％-22.0％
2 9.9 0.25 2575.54 13.53 32.90％ 28.5％-37.4％
3 16.89 0.61 366.89 10.92 4.69％ 4.2％-5.2％
4 17.84 0.7 381.4 13.81 4.87％ 4.2％-5.5％
5 20.31 0.96 186.08 12.04 2.38％ 2.1％-2.7％
6 23.74 0.76 555.35 10.48 7.09％ 6.4％-7.8％
7 27.73 0.5 281.91 18.08 3.60％ 3.0％-4.3％
8 31.02 1.18 1852.33 14.84 23.66％ 20.2％-27.2％
注：峰1为丹参素、峰2为原儿茶醛、峰3为异紫草酸A、峰4为丹酚酸D、峰5为丹酚酸E、峰6为迷迭香酸、峰7为丹酚酸B、峰8为丹酚酸A。见图1。
从附表7可看出8个峰的相对位置和面积比例(保留时间和峰面积)，其中单峰面积占总峰面积的百分比超过10％的有3个峰，8个峰的单峰面积占总峰面积的百分比全部超过2％。

Claims (15)

1、一种治疗心脑血管疾病的中药制剂，其特征在于，它含有准分子离子质峰质荷比[M-H]-均为537的2个成分，该2个成分的二级碎片离子质荷比均为493[M-H-CO2]-，295[M-CO2-R-H2O]-，三级碎片离子质荷比均为159，109，最大吸收波长均为327nm；其质谱分析条件如下：
HPLC-MS条件：离子检测方式为负离子检测，干燥气流速10L/min，雾化气压力60psi，干燥气温度350℃，毛细管压力3500伏，质量即质荷比扫描范围100-1200；
HPLC-MSn条件：离子检测方式为负离子检测，干燥气流速10L/min，雾化气压力60psi，干燥气温度350℃，毛细管压力3500伏，质量即质荷比扫描范围100-800，碰撞断裂振幅1.5-3.0伏。
2、根据权利要求1所述的中药制剂，其特征在于，它含有异紫草酸A和异紫草酸B。
3、根据权利要求1所述的中药制剂，其特征在于，它含有准分子离子质峰质荷比[M-H]-为417，717，359，717，339，493的成分，所述[M-H]-为417成分的二级碎片离子质荷比为175[M-CO2-R-H2O]-，373[M-H-CO2]-，三级碎片离子质荷比为147，157，133；所述[M-H]-为717成分的二级碎片离子质荷比为519[M-R-H2O]-， 321[M-2R-2H2O]-，三级碎片离子质荷比为321[M-R-H2O]-，339[M-R]-，三级碎片离子质荷比为279，293，249，223，185；所述[M-H]-为359成分的二级碎片离子质荷比为161[M-R-H2O]-，179[M-R]-，195；所述[M-H]-为717成分的二级碎片离子质荷比为519[M-R-H2O]-，321[M-2R-2H2O]-，三级碎片离子质荷比为321[M-R-H2O]-，339[M-R]-，四级碎片离子质荷比为279，293，249，233，185；所述[M-H]-为339成分的二级碎片离子质荷比为321[M-H-H2O]-，295[M-H-CO2]-，三级碎片离子质荷比为279，267，四级碎片离子质荷比为251；所述[M-H]-为493成分的二级碎片离子质荷比为295[M-R-H2O]-，三级碎片离子质荷比为159，109；其质谱分析条件如下：
HPLC-MS条件：离子检测方式为负离子检测，干燥气流速10L/min，雾化气压力60psi，干燥气温度350℃，毛细管压力3500伏，质量即质荷比扫描范围100-1200；
HPLC-MSn条件：离子检测方式为负离子检测，干燥气流速10L/min，雾化气压力60psi，干燥气温度350℃，毛细管压力3500伏，质量即质荷比扫描范围100-800，碰撞断裂振幅1.5-3.0伏。
4、根据权利要求1所述的中药制剂，其特征在于，它含有准分子离子质峰质荷比[M-H]-为931、945、799、1107、769、769、783、637、637、945、945、781、751、751、765、783、783、765、765的成分，所述[M-H]-为931成分的碎片离子质荷比为799[M-H-Xyl]，637[M-H-Xyl-Glc]-，475[M-H-Xyl-2Glc]-；所述[M-H]-为945成分的碎片离子质荷比为799[M-H-Rham]-，783[M-H-Glc]-；637[M-H-Rham-Glc]-，475[M-H-Rham-2Glc]-；所述[M-H]-为799成分的碎片离子质荷比为637[M-H-Glc]-，475[M-H-2Glc]-；所述[M-H]-为1107成分的碎片离子质荷比为945[M-H-Glc]-，783[M-H-2Glc]-，621[M-H-3Glc]-，459[M-H-4Glc]-；所述[M-H]-为769成分的碎片离子质荷比为637[M-H-Xyl]-，475[M-H-Xyl-Glc]-；所述[M-H]-为769成分的碎片离子质荷比为637[M-H-Xyl]-，475[M-H-Xyl-Glc]-所述[M-H]-为783成分的碎片离子质荷比为637[M-H-Rham]-，475[M-H-Rham-Glc]-；所述[M-H]-为637成分的碎片离子质荷比为475[M-H-Glc]-；所述[M-H]-为637成分的碎片离子质荷比为475[M-H-Glc]-；所述[M-H]-为945成分的碎片离子质荷比为783[M-H-Glc]-，621[M-H-2Glc]-，459[M-H-3Glc]-；所述[M-H]-为945成分的碎片离子质荷比为783[M-H-Glc]-，621[M-H-2Glc]-，459[M-H-3Glc]-；所述[M-H]-为781成分的碎片离子质荷比为619[M-H-Glc]-，457[M-H-2Glc]-；所述[M-H]-为751成分的碎片离子质荷比为619[M-H-Xyl]-；所述[M-H]-为751成分的碎片离子质荷比为619[M-H-Xyl]-；所述[M-H]-为765成分的碎片离子质荷比为619[M-H-Rham]-，457[M-H-Rham-Glc]-；所述[M-H]-为783成分的碎片离子质荷比为621[M-H-Glc]-，459[M-H-2Glc]-；所述[M-H]-为783成分的碎片离子质荷比为621[M-H-Glc]-，459[M-H-2Glc]-；所述[M-H]-为765成分的碎片离子质荷比为603[M-H-Glc]-，441[M-H-2Glc]-；所述[M-H]-为765成分的碎片离子质荷比为603[M-H-Glc]-，441[M-H-2Glc]-；其质谱分析条件如下：
HPLC-MS条件：离子检测方式为负离子检测，干燥气流速10L/min，雾化气压力60psi，干燥气温度350℃，毛细管压力3500伏，质量即质荷比扫描范围400-1500；
HPLC-MSn条件：离子检测方式为负离子检测，干燥气流速10L/min，雾化气压力60psi，干燥气温度350℃，毛细管压力3500伏，质量即质荷比扫描范围4000-1200，碰撞断裂振幅1.2-1.5伏。
5、根据权利要求1所述的中药制剂，其特征在于，它含有准分子离子质峰质荷比[M-H]-为417，717，359，717，339，493的成分，所述[M-H]-为417成分的二级碎片离子质荷比为175[M-CO2-R-H2O]-，373[M-H-CO2]-，三级碎片离子质荷比为147，157，133；所述[M-H]-为717成分的二级碎片离子质荷比为519[M-R-H2O]-，321[M-2R-2H2O]-，三级碎片离子质荷比为321[M-R-H2O]-，339[M-R]-，三级碎片离子质荷比为279，293，249，223，185；所述[M-H]-为359成分的二级碎片离子质荷比为161[M-R-H2O]-，179[M-R]-，195；所述[M-H]-为717成分的二级碎片离子质荷比为519[M-R-H2O]-，321[M-2R-2H2O]-，三级碎片离子质荷比为321[M-R-H2O]-，339[M-R]-，四级碎片离子质荷比为279，293，249，233，185；所述[M-H]-为339成分的二级碎片离子质荷比为321[M-H-H2O]-，295[M-H-CO2]-，三级碎片离子质荷比为279，267，四级碎片离子质荷比为251；所述[M-H]-为493成分的二级碎片离子质荷比为295[M-R-H2O]-，三级碎片离子质荷比为159，109；其质谱分析条件如下：
HPLC-MS条件：离子检测方式为负离子检测，干燥气流速1OL/min，雾化气压力60psi，干燥气温度350℃，毛细管压力3500伏，质量即质荷比扫描范围100-1200；
HPLC-MSn条件：离子检测方式为负离子检测，干燥气流速1OL/min，雾化气压力60psi，干燥气温度350℃，毛细管压力3500伏，质量即质荷比扫描范围100-800，碰撞断裂振幅1.5-3.0伏；
它还含有准分子离子质峰质荷比[M-H]-为931、945、799、1107、769、769、783、637、637、945、945、781、751、751、765、783、783、765、765的成分，所述[M-H]-为931成分的碎片离子质荷比为799[M-H-Xyl]-，637[M-H-Xyl-Glc]-，475[M-H-Xyl-2Glc]-；所述[M-H]-为945成分的碎片离子质荷比为799[M-H-Rham]-，783[M-H-Glc]-；637[M-H-Rham-Glc]-，475[M-H-Rham-2Glc]-；所述[M-H]-为799成分的碎片离子质荷比为637[M-H-Glc]-，475[M-H-2Glc]-；所述[M-H]-为1107成分的碎片离子质荷比为945[M-H-Glc]-，783[M-H-2Glc]-，621[M-H-3Glc]-，459[M-H-4Glc]-；所述[M-H]-为769成分的碎片离子质荷比为637[M-H-Xyl]-，475[M-H-Xyl-Glc]-；所述[M-H]-为769成分的碎片离子质荷比为637[M-H-Xyl]-，475[M-H-Xyl-Glc]-；所述[M-H]-为783成分的碎片离子质荷比为637[M-H-Rham]-，475[M-H-Rham-Glc]-；所述[M-H]-为637成分的碎片离子质荷比为475[M-H-Glc]-；所述[M-H]-为637成分的碎片离子质荷比为475[M-H-Glc]-；所述[M-H]-为945成分的碎片离子质荷比为783[M-H-Glc]-，621[M-H-2Glc]-，459[M-H-3Glc]-；所述[M-H]-为945成分的碎片离子质荷比为783[M-H-Glc]-，621[M-H-2Glc]-，459[M-H-3Glc]-；所述[M-H]-为781成分的碎片离子质荷比为619[M-H-Glc]-，457[M-H-2Glc]-；所述[M-H]-为751成分的碎片离子质荷比为619[M-H-Xyl]-；所述[M-H]-为751成分的碎片离子质荷比为619[M-H-Xyl]-；所述[M-H]-为765成分的碎片离子质荷比为619[M-H-Rham]-，457[M-H-Rham-Glc]-；所述[M-H]-为783成分的碎片离子质荷比为621[M-H-Glc]-，459[M-H-2Glc]-；所述[M-H]-为783成分的碎片离子质荷比为621[M-H-Glc]-，459[M-H-2Glc]-；所述[M-H]-为765成分的碎片离子质荷比为603[M-H-Glc]-，441[M-H-2Glc]-；所述[M-H]-为765成分的碎片离子质荷比为603[M-H-Glc]-，441[M-H-2Glc]-；其质谱分析条件如下：
HPLC-MS条件：离子检测方式为负离子检测，干燥气流速10L/min，雾化气压力60psi，干燥气温度350℃，毛细管压力3500伏，质量即质荷比扫描范围400-1500；
HPLC-MSn条件：离子检测方式为负离子检测，干燥气流速10L/min，雾化气压力60psi，干燥气温度350℃，毛细管压力3500伏，质量即质荷比扫描范围4000-1200，碰撞断裂振幅1.2-1.5伏。
6、根据权利要求5所述的中药制剂，其特征在于，它含有丹酚酸D、丹酚酸E、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸G、丹酚酸A、丹参素、原儿茶醛、异紫草酸A、异紫草酸B、丹参酮I、丹参酮IIA、三七皂苷R1、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R2、三七皂苷R2 iso.、人参皂苷Rg2、人参皂苷Rh1、人参皂苷Rh1 iso.、人参皂苷Rd、人参皂苷Rd iso.、人参皂苷Rf-H2O、三七皂苷R2-H2O、三七皂苷R2-H2O、人参皂苷Rg6或F4、人参皂苷20R-Rg3、人参皂苷20S-Rg3、人参皂苷Rk1、人参皂苷Rg5、人参皂苷Rk3、人参皂苷Rh4。
7、根据权利要求1所述的中药制剂，其特征在于，它具有如下理化参数：HPLC图谱中单峰面积占总峰面积的百分比超过2％的有8个峰，该8个峰的平均保留时间为6.04、9.9、16.89、17.84、20.31、23.74、27.73、31.02，其保留时间RSD％分别为0.31、0.25、0.61、0.7、0.96、0.76、0.5、1.18，其平均峰面积分别为1627.92、2575.54、366.89、381.4、186.08、555.35、281.91、1852.33，其峰面积RSD％分别为5.91、13.53、10.92、13.81、12.04、10.48、18.08、14.84，其单峰面积占总峰面积的百分比分别为19.6％-22.0％、28.5％-37.4％、4.2％-5.2％、4.2％-5.5％、2.1％-2.7％、6.4％-7.8％、3.0％-4.3％、20.2％-27.2％；上述理化参数的检测条件如下：
高效液相色谱条件：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶为填料，流速1.000ml/min，检测波长280nm，洗脱条件：流动相A为0.02％的磷酸水溶液，流动相B为80％乙腈0.02％的磷酸水溶液，从0到8分钟，流动相A从90％均匀变化成78％，流动相B从10％均匀变化成22％；从8到15分钟，流动相A从78％均匀变化成74％，流动相B从22％均匀变化成26％；从15到55分钟，流动相A从74％均匀变化成48％，流动相B从26％均匀变化成52％；
供试品溶液制备与测定：取中药制剂10粒，精密称定，置10ml容量瓶中，加蒸馏水超声15分钟，溶解，定容，离心或过滤，得到供试品溶液；精密吸取供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，即得高效液相图谱。
8、根据权利要求1所述的中药制剂，其特征在于，它具有如下理化参数：HPLC图谱中单峰面积占总峰面积的百分比超过2％的有13或14个峰，该14个峰的平均保留时间为10.87、12.12、20.34、20.86、23.29、24.48、29.00、41.21、42.94、44.16、45.68、47.88、68.21、69.43，其保留时间RSD％分别为0.45、0.34、0.23、0.16、0.25、0.28、0.62、0.25、0.21、0.21、0.23、0.25、0.13、0.12，其平均峰面积分别为506.92、2723.73、1684.49、231.84、565.78、309.39、345.32、436.06、665.38、472.84、947.39、1547.8、622.91、820.24，其峰面积RSD％分别为13.03、12.11、18.95、18.99、13.8、18.98、14.28、10.88、11.82、14.59、16.06、13.25、10.39、12.93，其单峰面积占总峰面积的百分比分别为3.7％-4.8％、20.2％-25.7％、11.5％-16.9％、1.6％-2.3％、4.1％-5.4％、2.1％-3.1％、2.5％-3.3％、3.3％-4.1％、4.9％-6.3％、3.4％-4.6％、6.7％-9.3％、11.3％-14.8％、4.7％-5.8％、6.0％-7.8％；上述理化参数的检测条件如下：
高效液相色谱条件：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶为填料，流速0.8ml·min-1，检测波长203nm；洗脱条件：流动相A为0.01％(V/V)冰醋酸水溶液，流动相B为含0.01％冰醋酸的乙腈溶液，从0到15分钟，流动相A从80％均匀变化成65％，流动相B从20％均匀变化成35％；从15到25分钟，流动相A65％和流动相B35％的浓度不变；从25到40分钟，流动相A从65％均匀变化成57％，流动相B从35％均匀变化成43％；从40到50分钟，流动相A57％和流动相B43％的浓度不变；从50到65分钟，流动相A从57％均匀变化成42％，流动相B从43％均匀变化成58％；从65到75分钟，流动相A从42％均匀变化成25％，流动相B从58％均匀变化成75％；
供试品溶液制备与测定：取中药制剂约1.0g，加入10ml 4％氨水，超声溶解，过滤，取5ml滤液过C-18小柱，10％-30％甲醇氨水溶液冲洗，弃冲洗液，再水冲洗，弃水液，然后用甲醇洗脱，收集甲醇洗脱液于5ml容量瓶，定容，离心或过滤，得到供试品溶液；精密吸取供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，照高效液相色谱法测定，即得高效液相图谱。
9、根据权利要求7所述的中药制剂，其特征在于，所述平均保留时间为6.04、9.9、16.89、17.84、20.31、23.74、27.73、31.02的8个峰，分别为丹参素、原儿茶醛、异紫草酸A、丹酚酸D、丹酚酸E、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A。
10、根据权利要求8所述的中药制剂，其特征在于，所述平均保留时间为10.87、12.12、20.34、20.86、23.29、24.48、29.00、41.21、42.94、44.16、45.68、47.88、68.21、69.43的14个峰，分别为三七皂苷R1、人参皂苷Re和Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R2、人参皂苷Rh1、人参皂苷Rh1iso.、人参皂苷Rd、三七皂苷R2-H20、三七皂苷R2-H20、人参皂苷Rg6或F4、人参皂苷Rk3或Rh4、人参皂苷Rh4或Rk3、人参皂苷Rk1或Rg5、人参皂苷Rg5或Rk1。
11、根据权利要求所述1-8任一所述的中药制剂的制备方法，其特征在于，该方法为称取丹参、三七，加药材总量0.5％-4.0％的氢氧化钠或者碳酸氢钠或者碳酸钠或者氢氧化钾或者碳酸氢钾或者碳酸钾或者它们的混合物，加3-6倍量水，煎煮2-4次，过滤，滤液合并，浓缩，加浓度大于70％乙醇至乙醇含量为65-70％，静置，分离上清液，回收乙醇，浓缩至药液相对密度为1.20-1.50，得丹参三七浸膏；将丹参三七浸膏与冰片或者降香油混合，加入辅料制成制剂。
12、根据权利要求所述11所述的中药制剂的制备方法，其特征在于，所述方法为称取丹参、三七，加药材总量1.4％-1.9％的碳酸氢钠，煎煮二次，第一煎4-5倍量水2-3小时，第二次3-4倍量水1-2小时，过滤，滤液合并，浓缩至比重为1.16-1.20时，加浓度大于70％乙醇至乙醇含量为65-70％，静置8-12小时以上，分离上清液，回收乙醇，浓缩至药液相对密度为1.32-1.40，得丹参三七浸膏；将丹参三七浸膏与冰片或者降香油混合，加入辅料制成制剂。
13、根据权利要求所述11所述的中药制剂的制备方法，其特征在于，所述辅料为淀粉、糊精、乳糖、微晶纤维素、羟丙甲基纤维素、聚乙二醇、硬脂酸镁、微粉硅胶、木糖醇、乳糖醇、葡萄糖、甘氨酸、甘露醇、甘氨酸、甲基淀粉钠、交联羧甲基纤维素钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、水中的任何一种辅料或一种以上混合辅料；所述制剂为注射剂、片剂、缓释片、滴丸、颗粒剂、粉针剂、胶囊剂、微粒剂、口腔崩解剂。
14、根据权利要求所述13所述的中药制剂的制备方法，其特征在于，所述制剂为滴丸。
15、根据权利要求所述12所述的中药制剂的制备方法，其特征在于，所述方法为称取丹参、三七，加药材总量1.4％-1.9％的碳酸氢钠，煎煮二次，第一煎4-5倍量水2-3小时，第二次3-4倍量水1-2小时，过滤，滤液合并，浓缩至比重为1.16-1.20时，加浓度大于70％乙醇至乙醇含量为65-70％，静置8-12小时以上，分离上清液，回收乙醇，浓缩至药液相对密度为1.32-1.40，得丹参三七浸膏；将丹参三七浸膏与冰片或者降香油混合，加入辅料聚乙二醇-6000，混和均匀，加热化料，用滴丸机将药液滴至冷却液液体石蜡或甲基硅油中，取出滴丸，除油，选丸，即得。
CNB2004100187584A 2004-03-17 2004-03-17 一种治疗心脑血管疾病的中药制剂及其制备方法 Expired - Lifetime CN100450501C (zh)

Priority Applications (21)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB2004100187584A CN100450501C (zh) 2004-03-17 2004-03-17 一种治疗心脑血管疾病的中药制剂及其制备方法
PT57291098T PT1741439T (pt) 2004-03-17 2005-03-17 Preparação de medicina chinesa tradicional para doenças dos vasos sanguíneos cardiocerebrais e seu método de preparação
AU2005221260A AU2005221260B2 (en) 2004-03-17 2005-03-17 Traditional chinese medicine preparation for cardio-cerebral blood vessel diseases and its preparing method
CA2559826A CA2559826C (en) 2004-03-17 2005-03-17 Traditional chinese medicine preparation for cardio-cerebral blood vessel diseases and its preparing method
KR1020067021522A KR20070027532A (ko) 2004-03-17 2005-03-17 심장-뇌 혈관성 질환용 한약 조제물 및 그의 제조 방법
JP2007503177A JP5567763B2 (ja) 2004-03-17 2005-03-17 心臓−脳血管の疾病に対する伝統的中国医学の調合剤およびその製造方法
NZ550335A NZ550335A (en) 2004-03-17 2005-03-17 Traditional chinese medicine preparation for cardio-cerebral blood vessel diseases and its preparing method
EP05729109.8A EP1741439B1 (en) 2004-03-17 2005-03-17 Traditional chinese medicine preparation for cardio-cerebral blood vessel diseases and its preparing method
RU2006136529/15A RU2359692C2 (ru) 2004-03-17 2005-03-17 Лекарственный препарат для лечения заболеваний кардиоцеребральных кровеносных сосудов и способ его изготовления
LTEP05729109.8T LT1741439T (lt) 2004-03-17 2005-03-17 Tradicinis kiniečių vaistinis preparatas, skirtas gydyti širdies-smegenų kraujagyslių ligas, ir jo gavimo būdas
PL05729109T PL1741439T3 (pl) 2004-03-17 2005-03-17 Preparat tradycyjnej medycyny chińskiej na choroby naczyń krwionośnych sercowo-mózgowych i sposób jego otrzymywania
HUE05729109A HUE036016T2 (hu) 2004-03-17 2005-03-17 Tradicionális kínai gyógyszerkészítmény cardio-cerebrális véredény betegségek számára és elõállítási eljárása
PCT/CN2005/000333 WO2005087242A1 (en) 2004-03-17 2005-03-17 Traditional chinese medicine preparation for cardio-cerebral blood vessel diseases and its preparing method
AP2006003788A AP2644A (en) 2004-03-17 2005-03-17 Traditional chinese medicine preparation for cardiocerebral blood vessel diseases and its preparing method
ES05729109.8T ES2635869T3 (es) 2004-03-17 2005-03-17 Preparación de medicina tradicional china para enfermedades de vasos sanguíneos cardio-cerebrales y su método de preparación
DK05729109.8T DK1741439T3 (en) 2004-03-17 2005-03-17 TRADITIONAL CHINESE MEDICINE PREPARATION AGAINST CARDIO-CEREBRAL BLOOD CARE DISEASES AND METHOD OF PRODUCING THEREOF
MXPA06010597A MXPA06010597A (es) 2004-03-17 2005-03-17 Preparacion de medicina tradicional.
UAA200610937A UA88162C2 (ru) 2004-03-17 2005-03-17 ПРЕПАРАТ ТРАДИЦИОННОЙ КИТАЙСКОЙ МЕДИЦИНЫ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ СЕРДЕЧНО-СОСУДИСТЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ НА ОСНОВЕ ЭКСТРАКТОВ Salviae Miltiorrhizae И Radix Notoginseng И СПОСОБ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ
US11/522,296 US7396545B2 (en) 2004-03-17 2006-09-15 Preparation for cardio-cerebral blood vessel diseases and its preparing method
NO20064572A NO345093B1 (no) 2004-03-17 2006-10-10 Medisinsk preparat basert på ekstrakter av Radix Salviae Miltiorrhizae og Radix Notoginseng for anvendelse i behandling av kardiovaskulære- og cerebrovaskulære sykdommer, fremgangsmåte for framstilling derav og anvendelse derav
ZA200608606A ZA200608606B (en) 2004-03-17 2006-10-16 Traditional Chinese medicine preparation for cardio-cerebral blood vessel diseases and its preparing method

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB2004100187584A CN100450501C (zh) 2004-03-17 2004-03-17 一种治疗心脑血管疾病的中药制剂及其制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1669573A true CN1669573A (zh) 2005-09-21
CN100450501C CN100450501C (zh) 2009-01-14

Family

ID=34975326

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNB2004100187584A Expired - Lifetime CN100450501C (zh) 2004-03-17 2004-03-17 一种治疗心脑血管疾病的中药制剂及其制备方法

Country Status (21)

Country Link
US (1) US7396545B2 (zh)
EP (1) EP1741439B1 (zh)
JP (1) JP5567763B2 (zh)
KR (1) KR20070027532A (zh)
CN (1) CN100450501C (zh)
AP (1) AP2644A (zh)
AU (1) AU2005221260B2 (zh)
CA (1) CA2559826C (zh)
DK (1) DK1741439T3 (zh)
ES (1) ES2635869T3 (zh)
HU (1) HUE036016T2 (zh)
LT (1) LT1741439T (zh)
MX (1) MXPA06010597A (zh)
NO (1) NO345093B1 (zh)
NZ (1) NZ550335A (zh)
PL (1) PL1741439T3 (zh)
PT (1) PT1741439T (zh)
RU (1) RU2359692C2 (zh)
UA (1) UA88162C2 (zh)
WO (1) WO2005087242A1 (zh)
ZA (1) ZA200608606B (zh)

Cited By (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100360931C (zh) * 2005-11-02 2008-01-09 中国药科大学 一种丹参和三七制剂的质量控制方法
CN100392400C (zh) * 2005-11-01 2008-06-04 上海中医药大学 生物体液中丹酚酸b浓度测定样品的预处理方法
WO2008131648A1 (fr) * 2007-04-27 2008-11-06 Shanghai Sundise Chinese Medicine Technology Development Co., Ltd. Détection de danshensu de plasma sanguin et d'acide salvianolique b d'un extrait de plante éliminant l'hémostase
CN101244104B (zh) * 2008-03-24 2011-05-25 中国科学院长春应用化学研究所 一种增加人参总皂苷提取物中稀有皂苷含量的方法
US7989212B2 (en) 2007-04-27 2011-08-02 Shanghai Sundise Detection of blood plasma schizadrin B of dissipating blood stasis botanical
US8334110B2 (en) 2007-04-27 2012-12-18 Shanghai Sundise Chinese Medicine Technology Development Co., Ltd. Detection of blood plasma amygdalin of dissipating blood stasis botanical
CN103235050A (zh) * 2013-04-12 2013-08-07 黑龙江珍宝岛药业股份有限公司 三七总皂苷注射剂的质量控制方法
CN103424476A (zh) * 2012-05-25 2013-12-04 天津天士力之骄药业有限公司 同时测定丹参多酚酸中4种水溶性成分的方法
WO2015003662A1 (zh) * 2013-07-11 2015-01-15 天士力制药集团股份有限公司 一种中药组合物及其制剂和用途
WO2015003659A1 (zh) * 2013-07-11 2015-01-15 天士力制药集团股份有限公司 一种中药组合物及其制剂和用途
WO2015027891A1 (zh) * 2013-08-29 2015-03-05 天士力制药集团股份有限公司 一种新的丹酚酸化合物t、其制备方法和用途
US9161959B2 (en) 2007-04-29 2015-10-20 Shanghai Sundise Chinese Medicine Technology Development Co., Ltd Use of a vegetable drug composition in the manufacturing of pharmaceutical preparation for the treatment of portal hypertension caused by hepatocirrhosis
CN109633009A (zh) * 2018-12-28 2019-04-16 广西中医药大学 一种丹参及其提取物的质量控制方法
CN110907581A (zh) * 2019-12-23 2020-03-24 广州医药研究总院有限公司 复方丹参制剂七种成分血浆或组织浓度的质谱检测方法
US11013694B2 (en) 2013-07-11 2021-05-25 Tasly Pharmaceutical Group Co., Ltd. Formulation of a micro drop pill and the preparation method thereof

Families Citing this family (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8486464B2 (en) * 2000-12-22 2013-07-16 Tasly Pharmaceutical Group Co. Ltd. Herbal composition for angina pectoris, method to prepare same and uses thereof
US20050037094A1 (en) * 2003-07-31 2005-02-17 Xijun Yan Composition for heart disease, its active ingredients, method to prepare same and uses thereof
CN100392399C (zh) * 2005-12-28 2008-06-04 劲牌有限公司 用指纹图谱技术检测中国劲酒质量的方法
CN101524352A (zh) * 2008-03-04 2009-09-09 江苏先声药物研究有限公司 一种含有3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮的组合物
EP2415749B1 (en) * 2009-03-30 2016-05-04 Tasly Pharmaceutical Group Co., Ltd. New salvianolic acid compound l, preparation method and use thereof
CN102100739B (zh) * 2009-12-17 2013-12-25 天士力制药集团股份有限公司 一种含有丹参素和三七皂苷r1的中药组合物及其应用
CN102293823A (zh) 2010-06-28 2011-12-28 天津天士力制药股份有限公司 一种中药组合物在制备用于心肌梗死二级预防的药物中的应用
WO2012016549A1 (zh) * 2010-08-06 2012-02-09 天津天士力制药股份有限公司 丹参组合物在制备用于冠心病二级预防的药物中的用途
KR101445303B1 (ko) * 2011-06-30 2014-09-26 한국생명공학연구원 가공인삼의 원산지 또는 연령 판별용 표준 마커, 이의 확립방법 또는 이를 이용한 원산지 또는 연령 판별방법
CN102680626A (zh) * 2012-05-09 2012-09-19 正大青春宝药业有限公司 一种参麦注射液中特征性成分的定量检测方法
IN2014DN11265A (zh) 2012-07-05 2015-10-09 Eden Shield Ltd
EP2977051A4 (en) * 2013-03-01 2016-10-05 Kim S Korean Ginseng Co Ltd GINSENOSIDZUSAMMENSETZUNG
CN103245687B (zh) * 2013-05-07 2017-10-13 江苏省中医药研究院 一种丹参注射液的基于组分结构的质量控制检测方法
JP6372897B2 (ja) * 2013-08-29 2018-08-15 タスリー・ファーマシューティカル・グループ・カンパニー・リミテッドＴａｓｌｙ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｇｒｏｕｐ Ｃｏ．， Ｌｔｄ． 漢方薬組成物
RU2539133C1 (ru) * 2013-10-09 2015-01-10 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии" Иммунокорректирующее средство для терапии атеросклеротических заболеваний
KR101409848B1 (ko) * 2014-03-03 2014-06-19 한국생명공학연구원 가공인삼의 원산지 또는 연령 판별용 표준 마커, 이의 확립방법 또는 이를 이용한 원산지 또는 연령 판별방법
TWI535784B (zh) 2014-08-26 2016-06-01 財團法人工業技術研究院 剪切增稠配方、及包含其之複合材料
CN104374844A (zh) * 2014-11-13 2015-02-25 贵州信邦制药股份有限公司 丹参药材中水溶性成分的含量测定方法及其应用
CN104749280A (zh) * 2015-03-30 2015-07-01 神威药业集团有限公司 一种丹参注射液的质量控制方法
CN104749308A (zh) * 2015-03-30 2015-07-01 神威药业集团有限公司 一种丹参注射液的质量控制方法
CN106290677B (zh) * 2016-09-29 2018-01-02 国药集团冯了性（佛山）药业有限公司 冯了性风湿跌打药酒指纹图谱的建立方法及其指纹图谱
CN107315061B (zh) * 2017-06-15 2019-01-25 甘肃兰药药业有限公司 一种治疗妇女子宫出血的茜芷中药制剂的检测方法
CN110156863B (zh) * 2018-02-12 2022-12-13 吉林紫鑫参工堂生物科技有限公司 一种人参皂苷Rd自动控制分离纯化方法
CN109115904B (zh) * 2018-07-25 2021-02-02 山西广誉远国药有限公司 一种定坤丹uplc指纹图谱的构建方法及其应用
CN111289648B (zh) * 2020-03-09 2021-12-17 四川省中医药科学院 一种中药复方制剂指纹图谱的建立方法及其指纹图谱
CN112843041A (zh) * 2021-01-08 2021-05-28 中国人民解放军空军军医大学 迷迭香酸或其衍生物作为新型trpc1拮抗剂的药用制备及其应用
CN113004364A (zh) * 2021-03-25 2021-06-22 杭州天草科技有限公司 一种高纯度人参皂苷Re的制备方法
CN113820405A (zh) * 2021-08-10 2021-12-21 劲牌有限公司 一种石韦配方颗粒质量控制方法

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1072012C (zh) * 1999-06-30 2001-10-03 韩桂茹 丹参中丹参素及原儿茶醛的提取工艺
US8486464B2 (en) * 2000-12-22 2013-07-16 Tasly Pharmaceutical Group Co. Ltd. Herbal composition for angina pectoris, method to prepare same and uses thereof
HUP0303906A3 (en) * 2000-12-22 2005-05-30 Cardionat Inc Whitestone Herbal composition for angina pectoris, method to prepare same and uses thereof
FR2822701B1 (fr) * 2001-04-03 2005-03-18 Lvmh Rech Utilisation d'un extrait d'algue phaeodactylum comme agent cosmetique favorisant l'activite du proteasome des cellules de la peau et composition cosmetique le contenant
WO2002085398A1 (en) * 2001-04-19 2002-10-31 Taipei-Veterans General Hospital Lithospermic acid-containing composition
US6703053B2 (en) * 2001-10-24 2004-03-09 Tampa Bay Research Institute Anti-HSV agent for inhibiting replication of HSV-1 and HSV-2 and method of producing a substance having anti-HSV activity
JP3987733B2 (ja) * 2002-02-12 2007-10-10 共栄化学工業株式会社 線維芽細胞賦活剤及びこれを含む皮膚外用剤
CN1470255A (zh) * 2002-07-22 2004-01-28 王智民 自丹参三七中提取的制备物及其复方制备方法和医疗用途
CN100421683C (zh) * 2002-12-31 2008-10-01 北京采瑞医药有限公司 一种治疗心脑血管疾病的复方丹参微囊制剂及其制备方法
US20050037094A1 (en) * 2003-07-31 2005-02-17 Xijun Yan Composition for heart disease, its active ingredients, method to prepare same and uses thereof

Cited By (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN100392400C (zh) * 2005-11-01 2008-06-04 上海中医药大学 生物体液中丹酚酸b浓度测定样品的预处理方法
CN100360931C (zh) * 2005-11-02 2008-01-09 中国药科大学 一种丹参和三七制剂的质量控制方法
WO2008131648A1 (fr) * 2007-04-27 2008-11-06 Shanghai Sundise Chinese Medicine Technology Development Co., Ltd. Détection de danshensu de plasma sanguin et d'acide salvianolique b d'un extrait de plante éliminant l'hémostase
US7989212B2 (en) 2007-04-27 2011-08-02 Shanghai Sundise Detection of blood plasma schizadrin B of dissipating blood stasis botanical
US7993928B2 (en) 2007-04-27 2011-08-09 Shanghai Sundise Detection of blood plasma Danshensu and Salvianolic acid B dissipating blood stasis botanical
US8334110B2 (en) 2007-04-27 2012-12-18 Shanghai Sundise Chinese Medicine Technology Development Co., Ltd. Detection of blood plasma amygdalin of dissipating blood stasis botanical
US9161959B2 (en) 2007-04-29 2015-10-20 Shanghai Sundise Chinese Medicine Technology Development Co., Ltd Use of a vegetable drug composition in the manufacturing of pharmaceutical preparation for the treatment of portal hypertension caused by hepatocirrhosis
CN101244104B (zh) * 2008-03-24 2011-05-25 中国科学院长春应用化学研究所 一种增加人参总皂苷提取物中稀有皂苷含量的方法
CN103424476A (zh) * 2012-05-25 2013-12-04 天津天士力之骄药业有限公司 同时测定丹参多酚酸中4种水溶性成分的方法
CN103424476B (zh) * 2012-05-25 2016-08-17 天津天士力之骄药业有限公司 同时测定丹参多酚酸中4种水溶性成分的方法
CN103235050A (zh) * 2013-04-12 2013-08-07 黑龙江珍宝岛药业股份有限公司 三七总皂苷注射剂的质量控制方法
CN103235050B (zh) * 2013-04-12 2014-12-03 黑龙江珍宝岛药业股份有限公司 一种三七总皂苷注射剂的液相色谱检测方法
US11013694B2 (en) 2013-07-11 2021-05-25 Tasly Pharmaceutical Group Co., Ltd. Formulation of a micro drop pill and the preparation method thereof
USRE49050E1 (en) 2013-07-11 2022-04-26 Tasly Pharmaceutical Group Co., Ltd. Traditional Chinese medicine composition, and preparation and application thereof
WO2015003662A1 (zh) * 2013-07-11 2015-01-15 天士力制药集团股份有限公司 一种中药组合物及其制剂和用途
TWI621443B (zh) * 2013-07-11 2018-04-21 Tasly Pharmaceutical Group Co Ltd 中藥組合物及其用途、包含該中藥組合物之藥物製劑及複方丹參微滴丸劑、及該微滴丸劑的製備方法
US9987320B2 (en) 2013-07-11 2018-06-05 Tasly Pharmaceutical Group Co., Ltd. Traditional chinese medicine composition, and preparation and application thereof
US9999630B2 (en) 2013-07-11 2018-06-19 Tasly Pharmaceutical Group Co., Ltd. Traditional chinese medicine composition, and preparation and application thereof
TWI631956B (zh) * 2013-07-11 2018-08-11 大陸商天士力醫藥集團股份有限公司 中藥組合物及其用途、包含該中藥組合物之藥物製劑及複方丹參微滴丸劑、及該微滴丸劑的製備方法
WO2015003659A1 (zh) * 2013-07-11 2015-01-15 天士力制药集团股份有限公司 一种中药组合物及其制剂和用途
AU2014289766B2 (en) * 2013-07-11 2019-03-14 Tasly Pharmaceutical Group Co., Ltd. Traditional chinese medicine composition, and preparation and application thereof
USRE49035E1 (en) 2013-07-11 2022-04-19 Tasly Pharmaceutical Group Co., Ltd. Traditional Chinese medicine composition, and preparation and application thereof
EA034217B1 (ru) * 2013-07-11 2020-01-17 Тасли Фармасьютикал Груп Ко., Лтд. Композиция традиционной китайской медицины, фармацевтический препарат и капельная микропилюля из нее, способ получения капельной микропилюли и применение композиции
RU2668955C2 (ru) * 2013-08-29 2018-10-05 Тасли Фармасьютикал Груп Ко., Лтд. Новое соединение сальвианоловой кислоты т, способ его получения и его применение
US10626077B2 (en) 2013-08-29 2020-04-21 Tasly Pharmaceutical Group Co., Ltd. Salvianolic acid compound T, preparation method therefor, and use thereof
WO2015027891A1 (zh) * 2013-08-29 2015-03-05 天士力制药集团股份有限公司 一种新的丹酚酸化合物t、其制备方法和用途
CN109633009A (zh) * 2018-12-28 2019-04-16 广西中医药大学 一种丹参及其提取物的质量控制方法
CN110907581A (zh) * 2019-12-23 2020-03-24 广州医药研究总院有限公司 复方丹参制剂七种成分血浆或组织浓度的质谱检测方法
CN110907581B (zh) * 2019-12-23 2022-07-01 广州医药研究总院有限公司 复方丹参制剂七种成分血浆或组织浓度的质谱检测方法

Also Published As

Publication number Publication date
LT1741439T (lt) 2017-08-25
EP1741439B1 (en) 2017-05-31
ZA200608606B (en) 2008-06-25
AP2644A (en) 2013-04-17
RU2006136529A (ru) 2008-04-27
NO345093B1 (no) 2020-09-28
CN100450501C (zh) 2009-01-14
KR20070027532A (ko) 2007-03-09
NZ550335A (en) 2008-12-24
AU2005221260B2 (en) 2010-02-11
EP1741439A1 (en) 2007-01-10
US7396545B2 (en) 2008-07-08
CA2559826A1 (en) 2005-09-22
US20070071834A1 (en) 2007-03-29
ES2635869T3 (es) 2017-10-05
AU2005221260A1 (en) 2005-09-22
CA2559826C (en) 2015-10-06
JP2007529431A (ja) 2007-10-25
DK1741439T3 (en) 2017-08-07
PT1741439T (pt) 2017-08-23
AP2006003788A0 (en) 2006-10-31
HUE036016T2 (hu) 2018-06-28
PL1741439T3 (pl) 2017-10-31
MXPA06010597A (es) 2007-03-15
RU2359692C2 (ru) 2009-06-27
WO2005087242A1 (en) 2005-09-22
EP1741439A4 (en) 2009-08-12
JP5567763B2 (ja) 2014-08-06
UA88162C2 (ru) 2009-09-25
NO20064572L (no) 2006-12-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN1669573A (zh) 一种治疗心脑血管疾病的中药制剂及其制备方法
CN1754541A (zh) 甾体皂苷药物组合物及其制备方法和用途
CN1419124A (zh) 一种治疗心脑血管疾病的复方丹参制剂的质量控制方法
CN101032503A (zh) 治疗心血管疾病的中药有效成分组合物及质量控制方法
CN1267111C (zh) 一种治疗心脑血管疾病的复方丹参滴丸及其制备方法
CN1296063C (zh) 一种治疗心脑血管疾病的复方丹参制剂及其制备方法
CN1943569A (zh) 一种中药活性成分组合物及其制备方法和用途
CN1582952A (zh) 积雪草总苷在制备防治心、脑血管疾病药物中的用途
CN1257710C (zh) 一种丹参药材中有效部位的制剂及其制备方法
CN111920799B (zh) 一种苦乐果有效成分组合物及其制备方法和应用
CN1696144A (zh) 丙二酰基人参皂苷的制备工艺及其治疗糖尿病的药物用途
CN1319550C (zh) 用于治疗心血管疾病的中药制剂及其制备方法和质量控制方法
CN1616060A (zh) 一种活血化淤，行气止痛的中药滴丸制剂
CN1872199A (zh) 一种中药组合物及其制备方法
CN1319521C (zh) 一种治疗心脑血管疾病的复方丹参颗粒
CN1319519C (zh) 一种治疗心脑血管疾病的复方丹参喷雾剂
CN1309397C (zh) 一种治疗心脑血管疾病的复方丹参胶囊及其制备方法
CN1225270C (zh) 一种治疗动脉粥样硬化的药物及其制备方法
CN1422664A (zh) 一种治疗心脑血管疾病的复方丹参制剂及其制备方法
CN1817360A (zh) 一种治疗急、慢性充血性心力衰竭的药物组合物及制备方法和应用
CN100337654C (zh) 一种治疗心血管疾病的中药有效组分的组合物
CN1670524A (zh) 一种复方丹参滴丸指纹图谱的测定方法
CN1679870A (zh) 复方丹参滴丸质量控制方法
CN1275619C (zh) 一种治疗缺血性中风的药物组合物及其制备方法
CN1628684A (zh) 一种含三七二醇皂苷的药物组合物及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
C56 Change in the name or address of the patentee

Owner name: TASLY PHARMACEUTICAL GROUP CO., LTD.

Free format text: FORMER NAME: TIANJIN TASLY PHARMACEUTICAL CO., LTD.

CP01 Change in the name or title of a patent holder

Address after: 300402 Tianjin City, Beichen science and Technology Park of Beichen Xinyi Road Liaohe Road No. 1 white

Patentee after: TASLY PHARMACEUTICAL GROUP Co.,Ltd.

Address before: 300402 Tianjin City, Beichen science and Technology Park of Beichen Xinyi Road Liaohe Road No. 1 white

Patentee before: TIANJIN TASLY PHARMACEUTICAL Co.,Ltd.

CP01 Change in the name or title of a patent holder
CP01 Change in the name or title of a patent holder

Address after: 300402 Tianjin City, Beichen science and Technology Park of Beichen Xinyi Road Liaohe Road No. 1 white

Patentee after: TASLY PHARMACEUTICAL GROUP Co.,Ltd.

Address before: 300402 Tianjin City, Beichen science and Technology Park of Beichen Xinyi Road Liaohe Road No. 1 white

Patentee before: TASLY PHARMACEUTICAL GROUP Co.,Ltd.

CX01 Expiry of patent term
CX01 Expiry of patent term

Granted publication date: 20090114

DD01 Delivery of document by public notice
DD01 Delivery of document by public notice

Addressee: Li Xu

Document name: Notice of Termination of Patent Rights