HU225062B1

HU225062B1 - Tetrahydrofuran derivatives with antifungal- effect, pharmaceutical compositions containing them and process for their preparation

Info

Publication number: HU225062B1
Application number: HU9601709A
Authority: HU
Inventors: Yi-Tsung Liu; Anil K Saksena; Viyyoor M Girijavallabhan; Raymond G Lovey; Ashit K Ganguly; Haiyan Wang; Russell E Pike; Frank Bennett
Original assignee: Schering Corp
Priority date: 1993-12-21
Filing date: 1994-12-20
Publication date: 2006-05-29
Also published as: ZA9410142B; PT736030E; ATE204875T1; NO2006002I2; NO316173B1; JP2834889B2; NO2006002I1; NO962616D0; PL315169A1; CA2179396A1; FI962577A0; CZ180596A3; TW377349B; EP0736030B1; EP0736030A1; CZ294823B6; NL300219I2; JPH09500658A; MY130217A; FI962577L

Description

A találmány a (III) általános képletű vegyületekre, ahol R₅ jelentése (a)-(n) képletű csoport, és a (IV) általános képletű vegyületekre, ahol R_g jelentése -*CH(C₂H₅)‘CH(OH)CH₃ vagy -‘CH(CH₃)*CH(OH)CH₃képletű csoport, valamint sztereoizomereikre, és gyó-

gyászatilag elfogadható észtereikre, étereikre és sóikra vonatkozik.

A találmány tárgyát képezi továbbá a vegyületek előállítási eljárása és az ezeket hatóanyagként tartalmazó gombaellenes gyógyszerkészítmények.

A leírás terjedelme 50 oldal (ezen belül 19 lap ábra)

HU 225 062 Β1

A találmány gombaellenes hatású tetrahidrofuránszármazékokra, közelebbről gombaellenes hatású, szubsztituált [(2R)-cisz]-4-{4-[4-{4-[{2-(2,4-difluor-fenil)2-[(1 H-1,2,4-triazol-1-il)-metil]-4-tetrahidrofuril)-metoxi]-fenil}-1-piperazinil]-fenil}-2,4-dihidro-2-(4-5 szénatomos hidroxi-szubsztituált-alkil)-3-oxo-3H-1,2,4-triazol-származékokra, ezek gyógyszerészetileg elfogadható észtereire, étereire és sóira, az előbbi vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítményekre, továbbá gombás fertőzéseknek gazdaszervezetekben, köztük meleg vérü állatokban, különösen emberekben ilyen gombaellenes hatású tetrahidrofuránszármazékokkal végzett kezelési és/vagy megelőzési eljárásaira vonatkozik.

A WO 89/04829 számon közzétett nemzetközi szabadalmi bejelentés és az 5 039 676 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás olyan (A) általános képletű, gombaellenes hatású vegyületek (±)-ciszés (±)-transz-izomereit ismerteti, amelyek képletében X jelentése fluor- vagy klóratom; Z jelentése rövid szénláncú alkilcsoport, 2-8 szénatomos alkanoilcsoport vagy 2-(rövid szénláncú alkil)-3-oxo-1,2,4-triazol-4-ilcsoporttal szubsztituált fenilcsoport. Ilyen vegyület például a (+)-cisz- és a (+)-transz-1-{4-[{2-(2,4-difluor-fenil)-2-[(1 H-1,2,4-triazol-1 -il)-metil]-4-tetrahidrofuril}-metoxi]-fenil}-4-izopropil-piperazin. Ugyanakkor azonban a WO 89/04829 számon közzétett nemzetközi szabadalmi bejelentésben nem ismertetik a jelen találmány szerinti vegyületeket.

Az 539 938 számú európai közrebocsátási iratban antifungális hatású [(2R)-cisz]-4-{4-[4-{4-[{2-(2,4-dihalogé n-fe n il )-2-[(1 H-1,2,4-triazol-1 -il)-metil]-4-tetrahidrofuril}-metoxi]-fenil)-1-piperazinil]-fenil}-2,4-dihidro-2-(1-10 szénatomos alkil)-3-oxo-3H-1,2,4-triazolszármazékokat írnak le. A jelen találmány szerinti vegyületeket azonban az 539 938 számú európai közrebocsátási iratban nem ismertetik.

A 4 791 111 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban antimikrobiális hatóanyagokként felhasználható (+)-cisz-4-{4-[4-{4-[{2-(2,4-diklórfenil)-2-[(1 H-1,2,4-triazol-1 -il)-metil]-1,3-dioxolán-4il}-metoxi]-feni l}-1 -piperazin il]-fenil)-2,4-dih idro-2(2-hidroxi-1-metil-propil)-3-oxo-3H-1,2,4-triazol-származékokat írnak le. A 4 791 111 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban azonban nem ismertetik a jelen találmány szerinti vegyületeket.

Jelentős igény van olyan, széles spektrumú gombaellenes szerekre, amelyek nagyobb oldékonysággal, valamint a szisztémás gombafertőzések, különösen az Aspergillus, Candida, Cryptococcus és az opportunisztikus fertőzések kezelése szempontjából előnyös aktivitási profillal rendelkeznek.

A jelen találmány (lll) általános képletű vegyületekre, ezek észtereire és étereire, valamint gyógyszerészetileg elfogadható sóira vonatkozik, amelyek képletében

R₅ jelentése (a), (b), (c), (d), (e), (f), (g), (h), (i), (j), (k), (I), (m) vagy (n) képletű csoport.

A találmány továbbá kiterjed a (IV) általános képletű vegyületekre - amelyek képletében

R₉ jelentése -*CH(C₂H₅)*CH(OR₆)CH₃ vagy

-*CH(CH₃)*CH(OR₆)CH₃ általános képletű csoport, amelyben

R₆ jelentése hidrogénatom, poliéter-észter-, foszfát-észter-, szulfát-észter-, heterociklusos észter-, alkanoát-észter-, alkenoát-észter-, aminosav-észter- vagy sav-észter-csoport és gyógyszerészetileg elfogadható sóikra.

A jelen leírásban alkalmazott „hidroxiszubsztituált 4-5 szénatomos alkilcsoport” kifejezés -*CH(C₂H₅)*CH(OH)CH₃, -*CH(C₂H₅)CH₂CH₂OH, -(CH₂)₂*CH(OH)C₂H₅, -*CH(CH₃)*CH(OH)CH₃ vagy -*CH(C₂H₅)CH₂OH képletű csoportot jelent, ahol a csillaggal (*) jelzett szénatomok mindegyike R vagy S abszolút konfigurációjú.

A jelen leírásban alkalmazott „gyógyszerészetileg elfogadható étercsoport” kifejezés jelentése egyenes vagy elágazó láncú, 1-20 szénatomos, előnyösen 1-8 szénatomos, még előnyösebben 1-6 szénatomos alkoxicsoport, vagy -O-(CHR₇)_n-Ar általános képletű aril-oxi- vagy aril-(1-6 szénatomos alkoxi)-csoport, amelyek képletében

R₇ jelentése egyenes vagy elágazó láncú 1-6 szénatomos alkilcsoport;

n értéke 0, 1, 2, 3, 4, 5 vagy 6, előnyösen 1,2 vagy 3; és

Ar jelentése adott esetben halogénatommal, különösen klór- és fluoratommal, nitro-, ciano- és/vagy trihalogén-metil-csoporttal, különösen trifluor-metil-csoporttal szubsztituált fenilcsoport.

Legelőnyösebben az étercsoport kifejezés metoxiés benzil-oxi-csoportot jelent.

A jelen leírásban alkalmazott „észtercsoport” kifejezés jelentése poliéter-észter-csoport, foszfát-észter-csoport, heterociklusos észtercsoport, alkanoát- és alkenoát-észter-csoport, amino-alkanoát-észter-csoport, sav-észter-csoport vagy szulfát-észter-csoport.

A jelen leírásban alkalmazott „poliéter-észter-csoport” kifejezés olyan (o) általános képletű csoportokra vonatkozik, amelyek képletében

R₇ jelentése a fentiekben meghatározott;

s értéke 1, 2, 3, 4, 5 vagy 6, előnyösen 1, 2 vagy 3, még előnyösebben 1;

t értéke 1, 2, 3, 4, 5 vagy 6, előnyösen 1, 2 vagy 3, még előnyösebben 2 vagy 3; és

R₈ jelentése azonos R₇ jelentésével vagy (p) általános képletű csoport, amelyben R₇ és s jelentése a fentiekben megadott, R₈ előnyösen metil-, etil-, karboxi-metil- vagy (metoxi-karbonil)-metil-csoport.

Az alkalmas poliéter-észter-csoportok jellegzetes példái közé tartozik a -COCH₂OCH₂CH₂OCH₃, -COCH₂O(CH₂CH₂O)₂CH₃ és a -COCH₂O(CH₂CH₂O)₃CH₃ képletű csoport.

A jelen leírásban alkalmazott „foszfát-észter-csoport” kifejezés olyan (q) általános képletű csoportokra vonatkozik, amelyek képletében

R₇ jelentése a fentiekben meghatározott, előnyösen hidrogénatom;

z értéke q vagy 1;

n értéke 0, 1,2, 3, 4, 5 vagy 6;

HU 225 062 Β1 m értéke 0 vagy 1; és

W jelentése hidrogénatom, 2-hidroxi-fenil-csoport vagy ArCH₂ általános képletű csoport, amelyben Ar jelentése a fentiekben meghatározott.

Az alkalmas foszfátsav- és foszfát-észter-csoportok jellegzetes példái közé tartozik a -P(=O)(OCH₂C₆H₅)₂, a -P(=O)(OH)₂ képletű csoport, a (2-hidroxi-fenoxi)-foszfonil-csoport, az (r) általános képletű csoport (amelyben n értéke 1, 2, 3 vagy 4) és az (s) képletű csoport, valamint ezek gyógyszerészetileg elfogadható sói.

A jelen leírásban alkalmazott „heterociklusos észtercsoport” kifejezés olyan (t) általános képletű csoportokra vonatkozik, amelyek képletében

R₇ jelentése a fentiekben meghatározott;

w értéke 1,2,3,4 vagy 5, előnyösen 1,2 vagy 3; q értéke 3 vagy 4; és

Y jelentése -(CHR₇)- általános képletű csoport, oxigénatom, iminocsoport, -(NR₇)- általános képletű csoport, tio-, szulfinil- vagy szulfonilcsoport.

Az alkalmas heterociklusos észtercsoportok jellegzetes példái közé tartoznak a következők: piperidino-acetil-, (1-piperazinilj-acetil-, tiomorfolino-acetil-, (1-oxo-4-tiomorfolinil)-acetil-, (4-metil-1 -piperazinilj-acetil-, morfolino-acetil-, (1,1 -dioxo-4-tiomorfolinil)acetil- és (1 -pirrolidinilj-acetil-csoport.

A jelen leírásban alkalmazott „alkanoát- és alkenoát-észter-csoport” kifejezés adott esetben hidroxicsoporttal vagy étercsoporttal szubsztituált, egyenes vagy elágazó láncú alkanoát- vagy alkenoátcsoportokra, illetve az ilyen alkanoát- és alkenoátcsoportok keverékeire vonatkozik.

Az alkanoát-észter-csoportok előnyös példái közé tartoznak az acetátcsoporttól a dekanoátcsoportig, különösen az acetátcsoporttól a valerátcsoportig terjedő alkanoátcsoportok. A hidroxicsoporttal szubsztituált alkanoát-észter-csoportok előnyös példái közé tartoznak a hidroxicsoporttal egyszeresen szubsztituált 1-8 szénatomos alkanoátcsoportok, különösen a glikolát- és a laktátcsoport. Az alkenoát-észter-csoportok előnyösen 10-20 szénatomos, még előnyösebben 14-18 szénatomos alkenoátcsoportok, amilyen például a 7-cisz-hexadecenoát-csoport.

A jelen leírásban alkalmazott „amino-alkanoát-észter-csoport” kifejezés természetes és mesterséges aminosavak savmaradékaira, előnyösen olyan aminosavak savmaradékaira vonatkozik, amelyekben az aminocsoportokat szokásos, a szakember számára jól ismert védőcsoportok, például fenil-acetoxi-csoportok védik.

A jelen leírásban alkalmazott „sav-észter-csoport” kifejezés olyan (u) általános képletű csoportokra vonatkozik, amelyek képletében

R₇ jelentése a fentiekben meghatározott; és k értéke 1,2, 3, 4, 5, 6, 7 vagy 8.

Az alkalmas sav-észter-csoportok jellegzetes példái közé tartoznak az oxálsavból, malonsavból, borostyánkősavból, glutársavból és adipinsavból, valamint az elágazó láncú dikarbonsavakból, például a metil-malonsavból képezett csoportok.

A jelen leírásban alkalmazott „étercsoport kifejezés 1-6 szénatomos alkoxi-, aril-oxi- vagy aril-(1—6 szénatomos alkoxij-csoportokra vonatkozik. Ezeket a csoportokat a jól ismert Williamson-féle éterszintézissel állíthatjuk elő. Az alkalmas étercsoportok jellegzetes példái közé tartozik a metoxi- és a benzil-oxi-csoport.

A találmány szerinti vegyületek, valamint észtereik és étereik a különféle in vitro vizsgálatokban széles spektrumú gombaellenes aktivitást mutatnak Candida, egyéb élesztő-, dermatophyta, Aspergillus és opportunisztikus gombákkal szemben. A nagyszámú gombával szembeni in vitro antifungális aktivitási vizsgálatokat szokásos agarhígításos módszerekkel, Sabouraud-féle dextrózoldat (Sabouraud dextrose broth, SDB) médiumban hajtottuk végre. A minimális gátlási koncentrációkat (Minimál Inhibitory Concentration, MIC) a vizsgálat 24., 48. és 72. órájában mértük.

A megfelelő állatfajokban, például egérben, patkányban vagy nyúlban mutatott in vivő aktivitás alapján az „opportunisztikus gombák” kifejezés - egyebek mellett - a következő gombafajokra vonatkozik: Cryptococcus, Histoplasma, Blastomyces, Coccidioides, Fusarium, Mucor, Paracoccidioides, Fonsecaea, Wangiella, Sporothrix, Pneumocystis, Trichosporon. A találmány szerinti vegyületek várhatóan aktivitást mutatnak a baktériumok, protozoák, Gram-pozitívak, Gram-negatívak, anaerobok, Legionella, Borrelia, Mycoplasma, Treponema, Gardneralla, Trichomonas és a Trypanosoma számos genusával és speciesével szemben.

A (III) általános képletű vegyületek, amelyekben R₅jelentése hidroxicsoporttal szubsztituált 4-5 szénatomos alkilcsoport, az Aspergillus niger, flavus, fumigatus és terreus 37 speciesével szemben SDB-ben a következő in vitro gombaellenes aktivitásokat mutatták: a MIC mértani középértéke >0,05 és <1,53 pg/ml; az MFC mértani középértéke >0,27 és <4,24 pg/ml.

Az olyan, előnyös (III) általános képletű vegyületek, amelyek R₅ jelentése hidroxicsoporttal szubsztituált 5 szénatomos alkilcsoport, (1) különféle in vitro vizsgálatokban 48 óra és 78 óra után mérve, a MIC és MFC mértani középértékek alapján fluconazole-lal Összehasonlítva kiváló gombaellenes aktivitást mutattak a következőkkel szemben: C. albicans (N=26), C. krusei (N=26), C. glabrata (N=9), C. tropicalis (N=4), C. stellatoidea (N=1), C. neoformans (N=3), valamint a dermatophyta T. rubrum, T. menta és T. tonsurans (N=6); és (2) kiváló gombaellenes aktivitást mutattak a következő in vivő modellekben: más azolokkal, például itraconazole-lal összehasonlítva egy pulmonalis immungyengített egérmodellben (PO-1XDX4D) Aspergillus flavusszal és fumigatusszal (négy törzzsel) szemben, valamint más azolokkal, például fluconazole-lal összehasonlítva normál- és immungyengített egerekben (PO-1XDX4D) egy Candida albicans (négy törzs) szisztémás modellben.

Egy egér Aspergillus tüdőfertőzéses modellben összehasonlítottuk azol típusú gombaellenes hatóanyagok, például a fluconazole és a találmány szerinti vegyületek in vivő orális antifungális aktivitását, amelynek során a következő helyen ismertetett eljárást alkal3

HU 225 062 Β1 máztuk: Dávid Loebenberg et al., Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 36, 498-501 (1992). Az Aspergillus flavus tüdőmodellt a 0 539 938 számú európai közrebocsátási iratban ismertetik.

Az előnyös (III) általános képletű vegyületek az As- 5 pergillus 37 speciesével szemben SDB-ben kiváló in vitro gombaellenes aktivitásokat mutattak: a találmány szerinti vegyületek MIC mértani középértéke >0,05 és <1,53 pg/ml, ugyanakkor a fluconazole MIC mértani középértéke >32 pg/ml; és a találmány szerinti vegyületek MFC mértani középértéke >0,89 pg/ml és <3,78 pg/ml, szemben a fluconazole >32 pg/ml MFC mértani középértékével.

Az alábbi Q, R és S táblázatok adatai alapján megállapítható, hogy a vizsgálatokban alkalmazott három előnyös (III) általános képletű vegyület lényegesen jobb in vitro gombaellenes hatással rendelkezik, mint a fluconazole. A Q táblázat a gombaellenes aktivitást a három előnyös (III) általános képletű vegyület esetén a különféle gombatörzsek százalékos arányaként mutatja be legfeljebb 1 pg/ml MIC-érték mellett (összehasonlító anyag: fluconazole). Az R táblázat a gombaellenes aktivitást ugyanazoknak a törzseknek a legfeljebb 1 pg/ml MFC melletti százalékos arányaként adja meg. Az S táblázat a három előnyös (III) általános képletű vegyületnek a Q és R táblázatban felsorolt organizmusokkal szembeni in vitro MIC₉₀ értékeit mutatja be.

A legelőnyösebb (III) általános képletű vegyület az, amelynek képletében R₅ jelentése (b) képletű csoport. Ez a vegyület metil-cellulóz-készítmény formájában és orális úton történő beadást követően egerekben, patkányokban, kutyákban és majmokban kifejezetten nagyobb szérumkoncentrációkat biztosít, mint a hasonló szerkezetű azolok, ugyanakkor az orális beadást követően jó szöveti eloszlást és nagyon hosszú szérum felezési időt mutat. Az előbbiekben megadott legelőnyösebb (III) általános képletű vegyület in vivő patkánymodellben nem indukálja a májban lévő különféle citokróm P-450 hatóanyag-metabolizáló enzimeket.

Q táblázat

Néhány (III) általános képletű vegyület in vitro antifungális aktivitása

		A törzsek százalékos aránya legfeljebb 1 pg/ml MIC mellett
	r₅	(c)¹	(b)2	(d)³	FLZ⁴
Organizmus	Törzsek száma
Aspergillus	37	100	100	100	0
Candida albicans	26	100	100	100	100
Candida kursei	16	100	100	100	100
Candida tropicalis és stellatoidea	5	100	100	100	100
Candida glabrata	9	22	22	33	0
Cryptocuccus neoformans	3	100	100	100	0
Dermatophyták	6	100	100	100	100

a (III) általános képletben R₅ jelentése ¹: (c)=(c) képletű csoport ²: (b)=(b) képletű csoport ³: (d)=(d) képletű csoport ⁴: FLZ=fluconazole

R táblázat

		A törzsek százalékos aránya legfeljebb 1 (ig/ml MFC mellett
	r₅	(c)¹	(b)²	(d)³	FLZ⁴
Organizmus	Törzsek száma
Aspergillus	37	50	62	89	0
Candida albicans	26	100	100	100	100
Candida kursei	16	88	94	100	0
Candida tropicalis és stellatoidea	5	100	100	100	100
Candida glabrata	9	22	22	22	0

HU 225 062 Β1

R táblázat (folytatás)

		A törzsek százalékos aránya legfeljebb 1 pg/ml MFC mellett
	r₆	(c)¹	(b)²	(d)³	FLZ⁴
Organizmus	Törzsek száma
Cryptocuccus neoformans	3	100	100	100	0
Dermatophyták	6	67	83	100	0

S táblázat

		MIC₉₀ (pg/ml)
	r₅	(c)¹	(b)²	(d)³	FLZ⁴
Organizmus	Törzsek száma
Aspergillus	37	0,122	0,096	0,112	29,9
Candida albicans	26	0,274	0,174	0,139	0,887
Candida kursei	16	0,058	0,014	0,12	29,9
Candida tropicalis és stellatoidea	5	0,117	0,117	0,354	0,917
Candida glabrata	9	28,8	17,1	28,8	29,3
Cryptocuccus neoformans	3	0,05	0,007	0,101	25,9
Dermatophyták	6	0,165	0,101	0,707	29,4

Az alábbi táblázatokban bemutatjuk, hogy a talál- vo tesztekben mind normál-, mind immungyengített mány szerinti, hidroxicsoporttal szubsztituált alkilláncot egerekben számos gomba speciesszel szemben, mint hordozó vegyületek lényegesen jobb és szélesebb 40 a hidroxilcsoportot nem tartalmazó, csak alkilláncot körű gombaellenes aktivitást mutatnak in vitro és in vi- hordozó, EP 0539938 számú iratból ismert vegyületek.

1. táblázat

In vitro összehasonlító adatok MIC mértani középérték (pg/ml)

Organizmus	Vegyület
Ha¹	llb²	18. példa³	19. példa⁴
Candida sp. (11 )^a	0,01	0,01	0,004	0,003
Aspergillus (4)^b	0,35	0,35	0,18	0,5
Trichophyton (5)^c	0,13	0,19	0,04	0,06

^aEMEM-ben vizsgálva: C. albicans (8), C. tropicalis (2), C. stellatoidea (1) ^bSDB-ben vizsgálva: A. flavus (2), A. fumigatus (1), A. niger (1) ^cSDB-ben vizsgálva: T. mentagrophytes (2), T. rubrum (1), T. tonsurans (2) (Dermatophytes) ¹ EP 0539938 irat 23. példa szerinti vegyület (Ha) ² EP 0539938 irat 24. példa szerinti vegyület (llb) ³ találmány szerinti vegyület ⁴ találmány szerinti vegyület

HU 225 062 Β1

Az in vivő orális gombaellenes tesztet az EP 0539938 irat 33. példája szerint végeztük. Hordozó: polietilénglikol (PEG-200) SCH-ra 50 002, 50 001, metil-cellulóz (0,4%), amely 0,5% poliszorbát 80-at és 0,9% NaCI-ot tartalmaz SCH-ra 56 984. Beadás: per 5 os, naponta 4 napon keresztül, kezdve a fertőzés után órával. Megadjuk a túlélést és CFU (GM)-et 4 nappal a fertőzés után. CFU (GM): az egerek veséjében talált kolóniaképző egységek (Colony Forming Units) logaritmusának mértani közepe a fent említett 33. példa szerint meghatározva.

2. táblázat

In vivő orális gombaellenes aktivitás Candida albicans C43 (5*10⁶ CFU/egér) fertőzéssel szemben normál CF1 egerekben

Dózis (mg/kg)	Túlélés (%) (4 nap)	CFU mértani közép/vese (log₁₀)
llb¹	lla²	18. példa³	llb¹	lla²	18. példa³
50	100	90	-	4,99	5,62	-
40	-	-	100	-	-	4,14
25	100	80	-	5,14	5,90	-
20	-	-	100	-	-	3,99
10	40	50	100	7,41	6,78	4,82
5	-	-	100	-	-	5,20
1	30	10	60	7,88	8,57	7,09
0	0	0	10	9,00	9,00	8,88

¹ EP 0539938 irat 24. példa szerinti vegyület (llb) ² EP 0539938 irat 23. példa szerinti vegyület (Ha) ³ találmány szerinti vegyület (18. példa)

Az 1. és 2. táblázatból látható, hogy a találmány 30 nyegesen jobb antifungális aktivitást mutat, mint az szerinti hidroxi-butil-szubsztituált 18. és 19. példa sze- EP 0539938 iratból ismert butilszubsztituált lla és llb rinti vegyület mind in vitro, mind in vivő tesztekben lé- vegyületek.

3. táblázat

In vitro összehasonlító adatok MIC mértani középérték (pg/ml)

Organizmus	Vegyület
llc¹	26. példa²	25. példa³
C. albicans (26)	0,053	0,014	0,022
C. krusei (16)	0,46	0,044	<0,036
Candida sp.(5)^a	0,082	<0,015	<0,017
C. neoformans (3)	0,079	0,02	<0,016
Aspergillus (37)^b	0,32	<0,077	0,090
Trichophyton (6)^c	0,35	0,099	0,07

^aC. tropicalis (4), C. stellatoidea (1) ^bA. flavus (11), A. fumigatus (17), A. niger(5), A. terreus (4) ^cDermatophytes: T. mentagrophytes (2), T. rubrum (2), T. tonsurans (2) ¹ EP 0539938 irat 3. igénypont szerinti vegyület (llc) ² találmány szerinti vegyület (26. példa) ³ találmány szerinti vegyület (25. példa)

A további összehasonlító in vivő teszteket az EP 0 539 938 számú irat 31., 32., 33., 34., 35. vagy 36. példájában leírtak szerint végeztük. Ezek eredményeit az alábbi táblázatokban foglaljuk össze, megadva a táblázatok alatt a felhasznált hordozókat.

HU 225 062 Β1

4. táblázat

Dózis (mg/kg)	Túlélés (%) (4 nap)	CFU mértani közép/vese (log₁₀)
llc¹	26. példa²	25. példa³	llc¹	26. példa²	25. példa³
50	100	100	100	3,90	3,52	3,60
25	60	100	100	5,75	4,11	3,81
10	50	90	100	6,25	4,38	3,52
5	30	40	60	7,53	7,00	5,92
0	11	11	11	8,81	8,81	8,81

Hordozó: polietilénglikol 200 (PEG-200)

Beadás: per os, egyszer naponta 4 napig, kezdve 4 órával a fertőzés után ¹ EP 0539938 irat 3. igénypont szerinti vegyület (llc) ² találmány szerinti vegyület (26. példa) ³ találmány szerinti vegyület (25. példa)

5. táblázat

In vivő orális gombaellenes aktivitás Candida albicans C84 (5χ10⁶ CFU/egér) fertőzéssel szemben normál CF1 egerekben

Dózis (mg/kg)	Túlélés (%) (8 nap)
llc¹	26. példa²	25. példa³
40	100	100	100
25	80	100	100
10	90	100	100
5	50	60	70
0	10	10	10

Hordozó: (hidroxi-propil)-p-ciklodextrin

6. táblázat

Dózis (mg/kg)	Túlélés (%) (4 nap)	CFU mértani közép/vese (log₁₀)
llc¹	25. példa²	llc²	25. példa²
40	100	100	3,98	3,83
20	100	100	3,99	4,31
10	80	100	6,92	4,58
5	60	100	6,75	4,83
1	20	60	8,72	7,47
0	10	10	8,88	8,88

Hordozó: metil-cellulóz (0,4 t/tf% vízben), amely 0,5% poliszorbát 80-at és 0,9% NaCI-ot tartalmaz Beadás: po., napi 1 x 4 napig, kezdve 4 órával a fertőzés után ¹ EP 0539938 irat 3. igénypont szerinti vegyület (llc) ² találmány szerinti vegyület (25. példa)

HU 225 062 Β1

7. táblázat

In vivő orális gombaellenes aktivitás Candida albicans C43 (5χ10⁶ CFU/egér) fertőzéssel szemben 500 rád gamma-besugárzással immungyengített CF1 egerekben

Dózis (mg/kg)	Túlélés (%) (4 nap)	CFU mértani közép/vese (log₁₀)
llc¹	25. példa²	llc²	25. példa²
50	100	100	4,11	3,09
25	89	100	4,01	4,22
10	60	88	5,35	4,20
5	-	67		5,40
2,5	-	60		6,70
0	0	0	9,00	9,00

8. táblázat

In vivő orális gombaellenes aktivitás Candida albicans C65 (5^X10⁶ CFU/egér) fertőzéssel szemben 500 rád gamma-besugárzással immungyengített CF1 egerekben

Dózis (mg/kg)	Túlélés (%) (4 nap)	CFU mértani közép/vese (log₁₀)
llc¹	25. példa²	llc²	25. példa²
25	100	100	3,53	3,68
10	80	90	4,57	4,08
2,5	50	90	5,84	4,42
0,63	-	60	-	5,86
0	10	10	8,76	8,76

Hordozó: metil-cellulóz (0,4 t/tf% vízben), amely 0,5% poliszorbát 80-at és 0,9% NaCI-ot tartalmaz Beadás: po., napi 1^χ 4 napig, kezdve 4 órával a fertőzés után ¹ EP 0539938 irat 3. igénypont szerinti vegyület (llc) ² találmány szerinti vegyület (25. példa)

9. táblázat

In vivő orális gombaellenes aktivitás Candida albicans C72 (5χ10⁶ CFU/egér) fertőzéssel szemben 500 rád gamma-besugárzással immungyengített CF1 egerekben

Dózis (mg/kg)	Túlélés (%) (4 nap)	CFU mértani közép/vese (log₁₀)
llc¹	25. példa²	llc²	25. példa²
25	90	100	6,3	5,69
10	89	100	4,99	6,07
2,5	50	90	6,83	4,88
0,63	-	50	-	6,89
0	0	0	9,00	9,00

Hordozó: metil-cellulóz (0,4 t/tf% vízben), amely 0,5% poliszorbát 80-at és 0,9% NaCI-ot tartalmaz Beadás: po., napi 1x4 napig, kezdve 4 órával a fertőzés után ¹ EP 0539938 irat 3. igénypont szerinti vegyület (llc) ² találmány szerinti vegyület (25. példa)

HU 225 062 Β1

Claims

A vegyületek in vivő orális gombaellenes hatását továbbá összehasonlítottuk tüdőfertőzéses tesztben, kortizon-acetáttal immungyengített egerekben, ahol különböző Aspergillus törzsek spóráit használtuk az inhalációval történő fertőzéshez. A tesztet az EP 0539938 számú irat 31. példájában leírtak szerint kiviteleztük. Az eredményeket az alábbi 10-12. táblázatokban foglaljuk össze.

10. táblázat

In vivő orális gombaellenes aktivitás Aspergillus flavus ND83 tüdőfertőzéssel szemben kortizon-acetáttal immungyengített CF1 egerekben

Dózis (mg/kg) Túlélés (%) (9 nap) llc¹ 26. példa² 25. példa³ 50 90 90 80 25 60 100 90 10 30 90 80 5 - 70 60 0 10 10 10

Hordozó: polietilénglikol 200 (PEG-200)

Beadás: per os, egyszer naponta 4 napig, kezdve 24 órával a fertőzés után ¹ EP 0539938 irat 3. igénypont szerinti vegyület (llc) ² találmány szerinti vegyület (26. példa) ³ találmány szerinti vegyület (25. példa)

11. táblázat

In vivő orális gombaellenes aktivitás Aspergillus flavus tüdőfertőzéssel szemben kortizon-acetáttal immungyengített CF1 egerekben

Dózis (mg/kg) Túlélés (%) (9 nap) Aspergillus flavus ND83 Túlélés (%) (7 nap) Aspergillus fumigatus ND164 llc¹ 25. példa² llc² 25. példa² 20 60 100 0 40 10 10 50 0 20 5 0 10 0 10 2,5 0 10 0 0 0 0 0 0 0

Hordozó: metil-cellulóz (0,4 t/tf% vízben), amely 0,5% poliszorbát 80-at és 0,9% NaCI-ot tartalmaz Beadás: po„ napi 1« 4 napig, kezdve 24 órával a fertőzés után ¹ EP 0539938 irat 3. igénypont szerinti vegyület (llc) ² találmány szerinti vegyület (25. példa)

12. táblázat

In vivő orális gombaellenes aktivitás Aspergillus flavus ND168 tüdőfertőzéssel szemben kortizon-acetáttal immungyengített CF1 egerekben

Dózis (mg/kg) Túlélés (%) (9 nap) llc¹ 25. példa² 40 90 90 20 40 90 10 0 40

HU 225 062 Β1

12. táblázat (folytatás)

Dózis (mg/kg) Túlélés (%) (9 nap) llc¹ 25. példa² 5 0 0 0 0 0

Hordozó: metil-cellulóz (0,4 t/tf% vízben), amely 0,5% poliszorbát 80-at és 0,9% NaCI-ot tartalmaz Beadás: po., napi 1 * 4 napig, kezdve 24 órával a fertőzés után ¹ EP 0539938 irat 3. igénypont szerinti vegyület (llc) ² találmány szerinti vegyület (25. példa)

A 3-5. és 10. táblázatból látható, hogy a találmány szerinti hidroxi-pentil-szubsztituált 25. és 26. példa szerinti vegyület in vitro és in vivő tesztekben lényegesen jobb antifungális aktivitást mutat, mint az EP 0539938 20 iratból ismert pentilszubsztituált llc vegyület mind normál-, mind immungyengített egerekben. A 6-9. és 11-12. táblázatokból látható, hogy a 25. példa szerinti vegyület kiemelkedően hatékonyabb gombaellenes szer a túlélés és a fungális veseterhelés alapján normál- és 25 immungyengített egerekben, mint az ismert llc vegyület.

A (IV) általános képletű vegyületek előnyös észterei és éterei orális vagy parenterális, például intravénás beadás után ugyancsak kiváló in vivő gombaellenes hatást mutatnak a gombák széles körével szemben egerekben, patkányokban, kutyákban és majmokban. A (IV) általános képletű vegyületek előnyös észterei és éterei közé tartoznak azok a származékok, amelyek képletében R₉ az alábbi csoportokat jelenti:

Rg

Rg (R) CH3 ^ΙΗ,“·’χ (sr>^0\ /-°

CH3 p—och₂c₆h₅och₂c₆h₅

M+ 861,4 (S)z—ch₃

M+ 758,3

M+805

M+ 841

M⁺ g05 M⁺ 826

HU 225 062 Β1 (S) y— CH3 'isr>—ο ch₃ (S)/—ch₃

CH₃ II k^-O o