CZ288145B6

CZ288145B6 - Pharmaceutical aerosol preparation, process of its preparation and use

Info

Publication number: CZ288145B6
Application number: CZ19971945A
Authority: CZ
Inventors: Kjell Backstroem; Magnus Dahlback; Ann Johansson; Goeran Kallstrand; Elisabet Lindqvist
Original assignee: Astra Ab
Priority date: 1994-12-22
Filing date: 1995-12-19
Publication date: 2001-05-16
Also published as: FI972657L; BR9510501A; PL320824A1; AR002013A1; IS1810B; EE9700137A; FI972657A0; EP0797431B1; NO972781D0; PT797431E; IL116458A0; JPH10510827A; NZ298167A; EP1180365A2; CA2206736C; DK0797431T3; FI119413B; CZ194597A3; WO1996019197A1; PL182560B1

Description

Farmaceutický aerosolový prostředek, způsob jeho výroby a jeho použití

Oblast techniky

Vynález se týká léčivých prostředků obsahujících léčebně užitečné peptidy a proteiny pro inhalaci z aerosolového inhalátoru.

Dosavadní stav techniky

Řada léčiv se aplikuje ve formě aerosolových prostředků ústy nebo nosem. Jeden široce používaný způsob aplikace takového aerosolového prostředku spočívá v tom, že se připraví suspenzní prostředek léčiva ve formě jemně rozemletého prášku v zkapalněném plynu známém jako hnací plyn. Normálně se pro aplikaci těchto prostředků pacientovi používá tlakový inhalátor na odměřené dávky neboli pMDI (pressurised metered dose inhaler). Obvykle se přidávají povrchově účinná činidla, aby se napomohlo dispergování léčiva v hnacím plynu a zabránilo se agregaci mikromletých částic léčiva.

Donedávna se používalo freonů jako hnacích plynů pro všechny farmaceutické aerosolové prostředky. Typickými povrchově aktivními dispergačními činidly používanými v prostředcích s freony byly například sorbitantrioleát, oleová kyselina, lecithiny a ethanol. Protože freony měly podíl na rozrušení ozonové vrstvy, objevila se nová generace hnacích plynů, aby je nahradila.

Za nejslibnější nové hnací plyny jsou považovány hydrofluoralkany (HFA), jako například 1,1,1,2-tetrafluorethan (P134a), 1,1,1,2,3,3,3-haptafluorpropan (P227) a 1,1-difluorethan (P152a). Jsou přijatelné nejen s hlediska ochrany životního prostředí, ale vyznačují se také nízkou toxicitou a tenzemi par vyhovujícími pro použití v aerosolech. Avšak povrchově aktivní činidla normálně používaná s freonovými aerosolovými prostředky nejsou zvláště vhodné pro použití s novou generací hnacích plynů a proto byla v posledních letech navržena řada alternativních povrchově aktivních činidel pro použití specificky s hnacími plyny HFA, mezi nimi polyothoxylovaná povrchově aktivní činidla a fluorovaná povrchově aktivní činidla.

Léčiva na bázi peptidů obvykle nepatřila mezi léčiva, která se aplikují z aerosolových prostředků, i když byly navrženy různé aerosolové prostředky. Například US patent číslo 5 284 656 popisuje prostředek s faktorem stimulujícím kolonii granulocytů (G-SCF) sestávající z jemně rozemletého prášku obsahujícího G-SCF suspendovaného v hnacím plynu pomocí povrchově aktivního činidla jako je trioleát sorbitanu, sojový lecithin nebo olejová kyselina. US patent číslo 5 364 838 popisuje inzulínový prostředek, ve kterém je suchý práškový inzulín suspendován v hnacím plynu o nízké teplotě varu s pomocnou látkou jako je kyselina olejová.

Podstata vynálezu

Nyní bylo neočekávaně zjištěno, že různé látky, které zvyšují absorpci polypeptidů v dýchacím ústrojí jsou také zvláště vhodné jako povrchově aktivní činidla pro použití s hydrofluoralkanovými hnacími plyny.

Předmětem vynálezu je tedy farmaceutický aerosolový prostředek obsahující a) hydrofluoralkanový hnací plyn, b) farmaceuticky účinný polypeptid dispergovatelný v hnacím plynu s c) alespoň jedno povrchově aktivní činidlo, vybrané ze skupiny zahrnující mastné kyseliny obsahující 8 až 16 atomů uhlíku a jejich soli, soli žlučových kyselin, fosfolipidy a alkylsacharidy, přičemž povrchově aktivní činidlo zvyšuje systémovou absorpci polypeptidu ve spodní části dýchacího ústrojí.

-1CZ 288145 B6

Povrchově aktivní činidla používaná podle vynálezu jsou neočekávaně vhodná pro použití s hydrofluoralkanovými hnacími plyny. V důsledku své schopnosti zvyšovat absorbci polypeptidu mají svojí funkci, která způsobuje, že jsou zvláště užitečná pro použití v polypeptidových aerosolových prostředcích podle vynálezu.

Z mastných kyselin a jejich solí jsou výhodné mastné kyseliny obsahující 8 až 16 atomů uhlíku. Jako příklady výhodných solí mastných kyselin je možno jmenovat sodné, draselné a lysinové soli kyseliny kaprylové obsahující 8 atomů uhlíku, kyseliny kaprinové absorbující 10 atomů uhlíku, kyseliny laurové obsahující 12 atomů uhlíku a kyseliny myristové obsahující 14 atomů 10 uhlíku. Protože povaha protiiontu nemá zvláštní důležitost, jsou potenciálně použitelné libovolné soli mastných kyselin. Zejména výhodnou solí mastné kyseliny je sodná sůl kyseliny kaprinové.

Vhodné soli žlučových kyselin jsou například soli cholové kyselin, chenodeoxycholové kyseliny, glykocholové kyseliny, taurocholové kyseliny, glykodenodeoxycholové kyseliny, taurocheno15 deoxycholové kyseliny, deoxycholové kyseliny, glykodeoxycholové kyseliny, taurodeoxycholové kyseliny, lithocholové kyseliny a ursodeoxycholové kyseliny.

Ze solí žlučových kyselin jsou výhodné soli trihydroxyžlučových kyselin. Výhodnější jsou soli cholové, glykocholové a taurocholové kyseliny, zejména jejich sodné a draselné soli. Nejvýhod20 nější sůl žlučové kyseliny je taurocholat sodný.

Jako vhodné fosfolipidy je možno jmenovat například fosfolipidy s jediným řetězcem, například lysofosfosfatidylcholin, lysofosfatidylglycerol, lysofosfatidylethanolamin, lysofosfatidylinositol a lysofosfatidylserin, nebo fosfolipidy s dvojím řetězcem, například diacylfosfatidylcholiny, 25 diacylfosfatidylglyceroly, diacylfosfatidylethanolaminy, diacylfosfatidylinositoly a diacylfosfatidylseriny.

Z fosfolipidů se dává přednost diacylfosfatidylglycerolům a diacylfosfatidylcholinům, například dioktanoylfosfatidylglycerolu a dioktanoylfosfatidylcholinu.

Vhodnými alkylsacharidy mohou být například alkylglukosidy nebo alkylmaltosidy, jako například decylglukosid a dodecylmaltosid.

Nej výhodnějšími povrchově aktivními činidly jsou soli žlučových kyselin.

Hnací plyn může sestávat například z jednoho nebo několika sloučenin ze skupiny zahrnující 1,1,1,2-tetrafluorethan (P134a), 1,1,1,2,3,3,3-heptafluorpropan (P227) a 1,1-difluorethan (PÍ 52a), popřípadě s přísadou jednoho nebo několika jiných hnacích plynů. S výhodou je hnací plyn tvořen plynem PÍ34a nebo P227 nebo směsí PÍ34a a P227, například směsí PÍ34a a P227 40 o stejné hustotě jako má účinný polypeptid.

Polypeptid může být léčebně nebo diagnosticky užitečný peptid nebo protein o malé nebo střední velikosti, tj. až asi do molekulové hmotnosti 40 000, pro kterou je žádoucí systémové podávání. Mechanismy zlepšené absorpce polypeptidu podle vynálezu jsou všeobecně použitelné a měly by 45 se týkat všech polypeptidů, i když stupeň, do kterého se jejich absorpce zlepší, se může měnit podle molekulové hmotnosti a fyzikálně chemických vlastností polypeptidu a podle příslušného povrchově aktivního činidla, které se použije. Očekává se, že při způsobu podle vynálezu budou nej užitečnější polypeptidy o molekulové hmotnosti do 30 000, jako například polypeptidy o molekulové hmotnosti do 25 000 nebo do 20 000 a zejména do 15 000 nebo do 10 000.

Polypeptidem je s výhodou peptidový hormon jako například inzulín, glukagon, C-peptid inzulínu, vasopresin, desmopresin, kortikotropin (ACTH), hormon uvolňující kortikotropin (CRH), hormon uvolňující gonadotropin (GnRH), agonisté a antagonisté hormonu uvolňujícího gonadotropin, gonatrofm (luteinizační hormon neboli LHRH), kalcitonin, parathyroidní hormon 55 (PTH), bioaktivní fragmenty PTH jako PTH(34) a PTH (38), růstový hormon (GH) (například

-2CZ 288145 B6 lidský růstový hormon (hGH)), hormon uvolňující růstový hormon (GHRH), somatostatin,oxytocin, atriální natriuretický faktor (ANF), hormon uvolňující thyrotropin (TRH), deoxyribonukleáza (DNase), prolaktin a hormon stimulující folikul (FSH) a analogy kteréhokoliv ze shora uvedených polypeptidů.

Jiné polypeptidy přicházejí v úvahu zahrnují růstové faktory, interleukiny, polypeptidové vakcíny, enzymy, endorfmy, glykoproteiny, lipoproteiny a polypeptidy obsažené v krevní koagulační kaskádě, které mají systémový farmakologický účinek. Předpokládá se, že většina, ne-li všechny polypeptidy o malé nebo střední velikosti mohou být účinně podávány ve způsobech podle vynálezu.

Výhodným polypeptidem je inzulín.

Kromě léčiva, hnacího plynu a povrchově aktivního činidla mohou prostředky podle vynálezu obsahovat malé množství ethanolu (obvykle do 5 %, ale popřípadě až do 20 % hmotnostních). Ethanol je obvykle obsažen v aerosolových prostředcích, protože může zlepšit funkci odměřovacího ventilu a v některých případech také stabilitu disperze.

Prostředek může samozřejmě obsahovat podle potřeby další přísady včetně jiných farmaceuticky účinných činidel, adjuvantů, nosičů, chuťových přísad, pufrů, antioxidantů, chemických stabilizátorů a podobně. Jako příklady vhodných přísad je možno jmenovat například laktózu, glukózu, fruktózu, galaktózu, trehalózu, sacharózu, maltózu, rafinózu, maltitol, melezitózu, stachyózu, laktitol, palatinit, škrob, xylitol, mannitol, myoinositol a podobně a jejich hydráty, a aminokyseliny, například alanin, glycin a betain, a peptidy a proteiny, například albumin.

Výhodným nosičem je melezitóza.

Prostředek podle vynálezu je zvláště výhodný vzhledem ke dvojí funkci příslušných použitých povrchově aktivních činidel. Povrchově aktivní činidla použitá podle vynálezu jsou nejen překvapivě schopná vytvořit jemné disperze v nové generaci hnacích plynů, nýbrž, což je velmi důležité, také zvýšit absorpci polypeptidu. Prostředky podle vynálezu jsou stabilní a biologická dostupnost polypeptidů je vysoká, při dobré reprodukovatelnosti.

Povrchově aktivní činidla použitá podle vynálezu jsou schopna zvýšit absorpci polypeptidu například (1) zvýšením paracelulámí permeability polypeptidu vyvoláním strukturálních změn v těsných spojeních mezi epitheliálními buňkami, (2) zvýšením transcelulámí permeability polypeptidu interakcí s proteinovými nebo lipidovými složkami membrány, nebo jejich extrakcí, (3) interakcí mezi promotorem a polypeptidem, což zvyšuje rozpustnost polypeptidu ve vodném roztoku. Ktomu může dojít zamezením tvorby polypeptidových agregátů (dimerů, trimerů, hexamerů) nebo solubilizaci polypeptidových molekul v micelách promotoru, (4) zvýšením viskozity nebo rozpuštěním hlenové bariéry, která pokrývá alveoly a průdušky, čímž se odkryje epitheliální povrch a umožní se přímá absorpce polypeptidu, (5) zvýšením aktivity inhibitorů proteázy v plicích, čímž se zvýší stabilita polypeptidu a zvýší se jeho absorpce.

Povrchově aktivní činidla mohou účinkovat pouze jediným shora uvedeným mechanismem nebo dvěma nebo více mechanismy. Povrchově aktivní činidlo působící více mechanismy

-3'1 pravděpodobněji zvýší účinnou absorpci polypeptidu než činidlo používající jen jeden nebo dva mechanismy.

Výrazem „zvyšuje absorpci“ se rozumí, že množství polypeptidu absorbovaného do systémové cirkulace v přítomnosti povrchově aktivního činidla je vyšší než v jeho nepřítomnosti.

Povrchově aktivní činidlo je s výhodou podle vynálezu přítomno v hmotnostním poměru povrchově aktivní činidlo : polypeptid = 1 : 10 až 1 : 0,2, s výhodou 1 : 4 až 1 : 1, výhodněji 1 : 4 až 1 : 2,5. Výhodná koncentrace polypeptidu v prostředcích podle vynálezu je 0,1 mg/ml až 25 mg/ml.

Co možná nejvíce polypeptidu je tvořeno částicemi o průměru menších nežli 10 mikrometrů, například 0,01 až 10 mikrometrů nebo 0,1 až 6 mikrometrů, například 0,1 až 5 mikrometrů. S výhodou nejméně 50 % hmotn. polypeptidu je tvořeno částicemi v žádoucím rozmezí velikosti. Například nejméně 60 % hmotn., s výhodou nejméně 70 % hmotn., výhodněji nejméně 80 % hmotn. a nej výhodněji nejméně 90 % hmotn. polypeptidu je tvořeno částicemi v žádoucím rozmezí velikosti.

Proto by polypeptid pro použití podle vynálezu měl být před začleněním do prostředků zpracován, aby se získaly částice v žádoucím rozmezí velikosti. Například může být polypeptid mikromlet, například ve vhodném mlýnu, jako je tryskový mlýn. Nebo mohou být částice v žádoucím rozmezí částic získány například sušením rozprašováním nebo metodami řízené krystalizace, například krystalizaci s použitím superkritických tekutin.

Povrchově aktivní činidlo pro použití podle vynálezu s výhodou také sestává z částic v žádaném rozmezí velikosti. Polypeptid a povrchově aktivní činidlo se mohou účelně smíchat ve vodném pufru a vysušit na pevný prášek, který se pak popřípadě mikromele. Mikromletý prášek se pak může přidat při teplotě pod -15 °C k části hnacího plynu (a popřípadě ethanolu). Po přimíšení léčiva se může přidat zbývající povrchově aktivní činidlo a hnací plyn a popřípadě ethanol a suspenze se naplní do vhodných nádob.

Polypeptidový aerosolový prostředek podle vynálezu je užitečný pro lokální nebo systémovou léčbu nemocí a může být aplikován například cestou horních nebo dolních dýchacích cest, včetně nasální cesty. Předmětem vynálezu je také použití polypeptidového aerosolového prostředku při výrobě léčiva pro léčbu nemocí cestou dýchacího ústrojí.

Nemoci, které mohou být léčeny polypeptidovým aerosolovým prostředkem podle vynálezu jsou kterékoliv z těch, které mohou být léčeny v každém případě příslušným polypeptidem, například prostředky obsahující inzulín podle vynálezu mohou být použity například k léčbě diabetů, prostředky obsahující kortikotropin mohou být například použity k léčbě zánětlivých nemocí, prostředky obsahující GnRH mohou být použity například pro léčbu mužské neplodnosti. Indikace pro všechny uvedené polypeptidy jsou dobře známé. Polypeptidové aerosolové prostředky podle vynálezu mohou být též použity v profylaxi.

Příklady provedení vynálezu

Následující příklady mají za účel vynález ilustrovat, ale nikoliv omezovat.

Byly připraveny inzulínové prostředky v PÍ34 nebo/a P227 s různými povrchově aktivními činidly za účelem posouzení kvality vytvořených suspenzí. V následujících příkladech je kvalita suspenze hodnocena jako „přijatelná“ nebo „dobrá“. Přijatelná suspenze se vyznačuje jedním nebo více z následujících znaků, kterými jsou: pomalé usazování nebo dělení, snadná redisperze, malá flokulace a nepřítomnost krystalizace nebo morfologických změn, tak, že disperze je dostatečně stabilní, aby poskytla stejnoměrné dávkování. Dobrá disperze je ještě stabilnější.

-4CZ 288145 B6

Příklad 1

Metoda

Inzulín (25 až dílů, viz níže) se přidal do kádinky s vodou a rozpustil se. Přidalo se povrchově aktivní činidlo (65 až 75 dílů, viz níže), rozpustilo se a pH se upravilo na hodnotu 7,4. Roztok se zkoncentroval odpařením vody. Získaný pevný koláč se rozdrtil, prosel a mikromlel v tryskovém mlýnu. 40 nebo 50 mg prášku se vneslo do skleněné lahve povlečené plastickou hmotou. Láhev se ochladila přibližně na -40 °C směsí suchého ledu a isopropanolu a přidalo se 10 ml P134a ochlazeného přibližně na -40 °C. Láhev se uzavře odměřovacím ventilem a třepala se prudce přibližně 30 vteřin. Příklady lg až ln se dodatečně zpracovaly v ultrazvukové lázni po dobu asi 10 minut.

Výsledky

Příklad č.	Povrchově aktivní činidlo	Poměr povrchově aktivní činidlo: inzulín	Suspenze
la	kaprát sodný	25	75	dobrá
lb	kaprát draselný	27	73	dobrá
lc	kaprát lysinu	35	65	dobrá
ld	myristát sodný	30	70	dobrá
le	laurát sodný	25	75	dobrá
lf	kaprylát sodný	25	75	dobrá
lg	taurocholát sodný	25	75	dobrá
lh	dioktanoylfosfatidylglycerol	25	75	dobrá
ij	dodecylmaltosid	25	75	dobrá
lk	lysopalmitoylfosfatidylglycerol	25	75	přijatelná
lm	lysopalmitoylfosfatidylcholin	25	75	přijatelná
ln	dioktanoylfosfatidylcholin	25	75	dobrá

Příklad 2

Kaprát sodný (25 dílů) a inzulín (75 dílů) se odděleně mikromlely a pak se za sucha smíchaly, 40 mg této směsi se vneslo do skleněné lahve opatřené povlakem plastické hmoty. Tato láhev se ochladila přibližně na -40 °C směsí suchého sněhu a isopropanolu a přidalo se 10 ml PÍ34 ochlazeného přibližně na -40 °C směsí suchého sněhu a isopropanolu a přidalo se 10 ml PÍ34 ochlazeného přibližně na -40 °C. Láhev se uzavřela dávkovacím ventilem a pak se asi 30 sekund intenzivně třepala. Vytvořila se dobrá suspenze.

Příklad 3

Metoda

Inzulín (25 až 35 dílů, viz níže) se vnesl do kádinky s vodou, rozpustí se a pH se upravilo na hodnotu 7,4. Roztok se zkoncentroval odpařením vody. Získaný pevný koláč se rozdrtil, prosel a jemně se rozemlel v tryskovém mlýnu. 40 nebo 50 mg prášku se vneslo do skleněné lahve opatřené povlakem z plastické hmoty. Láhev se ochladila přibližně na -40 °C směsí suchého ledu a isopropanolu a přidalo se 10 ml P227 ochlazeného přibližně na -40 °C. Láhev se uzavřela dávkovacím ventilem a třepala se intenzivně si 30 sekund. Příklady 3g až 3n byly dodatečně zpracovány asi 10 minut v ultrazvukové lázni.

-5CZ 288145 B6

Výsledky

Příklad č.	Povrchově aktivní činidlo	Poměr povrchově aktivní činidlo: inzulín	Suspenze
3a	kaprát sodný	25	75	dobrá
3b	kaprát draselný	27	73	dobrá
3c	kaprát lysinu	35	65	dobrá
3d	myristát sodný	30	70	dobrá
3e	laurát sodný	25	75	dobrá
3f	kaprylát sodný	25	75	dobrá
3g	taurocholát sodný	25	75	dobrá
3h	dioktanoylfosfatidylglycerol	25	75	dobrá
3j	dodecylmaltosid	25	75	dobrá
3k	lysopalmitoylfosfatidylglycerol	25	75	přijatelná
3m	lysopalmitoylfosfatidylcholin	25	75	přijatelná
3n	dioktanoylfosfatidylcholin	25	75	dobrá

Příklad 4

Mikromleté prostředky obsahující DNase, povrchově aktivní prostředek (taurocholát sodný nebo dioktanoylfosfatidyl glycerol) a melezitózu (poměr DNase : povrchově aktivní prostředek: melezitóza = 1 : 0,33 : 98,67, celková hmotnost 50 mg), se vnesly do skleněné lahve opatřené io povrchem z plastické hmoty, ochlazené přibližně na -40 °C. Přidal se ochlazený hnací plyn 134a nebo hnací plyn 227 (přibližně -40 °C, přibližně 10 ml), lahve se uzavřely dávkovacím ventilem a zpracovaly přibližně 10 minut v ultrazvukové lázni.

Připravily se stejné prostředky, ke kterým se přidalo 5 % hmotnostních ethanolu před zpraco15 váním v ultrazvukové lázni.

Kvalita vytvořených suspenzí byla stanovena ihned a po skladování po dobu 20 hodin při teplotě místnosti. Ve všech případech byly pozorovány dobré suspenze.

Příklad 5

Kaprát sodný a inzulín byly odděleně mikromlety a pak smíchány za sucha. Poměr kaprátu sodného k inzulínu byl 25 : 75. 80 mg této směsi se vneslo do aerosolové lahvičky. Aerosolová 25 lahvička se ochladila přibližně na -40 °C směsí suchého ledu a isopropanolu a přidalo se 10 ml PÍ34a ochlazeného přibližně na -40 °C. Aerosolová lahvička se uzavřela 50 μΐ dávkovacím ventilem a pak se zpracovala několik minut v ultrazvukové lázni.

Velikost částic inzulínu v aerosolu aplikovaném z nádobky byla změřena pomocí přístroje 30 ,Andersen“ při 28,3 1/min. Podíl jemných částic (menších než 6 pm) činil 41 % dodané dávky.

Měření velikosti částic bylo zopakováno po skladování po dobu dvou měsíců při teplotě místnosti a nebylo pozorováno žádné zhoršení. Podíl jemných částic činil 46 %.

Příklad 6 aerosolových jednotek obsahujících inzulín a taurocholát sodný v poměru 75 : 25 (8 mg/ml) bylo připraveno následovně: Látky byly odváženy v kádince. Kádinka byla ochlazena přibližně na -40 °C směsí oxidu uhličitého a isopropanolu. Přidal se hnací plyn (PÍ34a, přibližně -40 °C), směs se míchala několik minut pomocí míchačky ultraturrax, pak se nalila do nádoby pro zpracování a přidal se další hnací plyn (PÍ34, přibližně -40 °C). Celkový objem byl 500 ml.

-6CZ 288145 B6

Prostředek se míchal pomocí míchačky ultraturrax a naplnil se do dávkovačích inhalátorů o objemu 10 ml. Inhalátory se uzavřely dávkovacími ventily.

Aerosoly se skladovaly za různých podmínek:

°C, za sucha po dobu 2, 8 a 13 týdnů °C, 30% relativní vlhkost po dobu 11 týdnů

Byla vyhodnocena kvalita suspenzí. Ve všech případech byly pozorovány dobré suspenze.

Kromě toho byla vyhodnocena stabilita inzulínu měřením koncentrace degradačních produktů desamidoinzulinu a jiných nečistot příbuzných s inzulínem za použití standardních chromatografických technik. Ve všech případech byla hladina nečistot v přijatelných mezích (méně než 5 % desamidoinzulinu a méně než 3 % jiných nečistot příbuzných s inzulínem).

Příklad 7

Tlakový inhalátor na odměřované dávky naplněný prostředkem z příkladu 5 se uvedl do činnosti a uvolněný aerosol se zachytil v odděleném prostoru. Tímto prostorem se vedl vzduchový proud (8 1/min) do aplikačního systému, kterému byl vystaven každý z pěti psů po dobu pěti minut. Vzorek inhalované dávky byl 1 j. inzulinu/kg. Biologická dostupnost byla stanovena pórováním křivky plazmy po inhalaci a křivky plazmy po intravenózní injekci z dřívějších studií. Biologická dostupnost byla 66 % léčiva dosahujícího plíce.

Příklad 8

Tlakové inhalátory na odměřování dávek byly naplněny prostředkem z příkladu 6 nebo odpovídajícím prostředkem bez promotoru. Každý inhalátor byl uveden do činnosti a vypuštěný aerosol byl shromážděn v odděleném prostoru. Tímto prostorem byl veden proud vzduchu (8 1/min) do aplikačního systému, kterému byl vystaven každý z pěti psů po dobu dvou minut. Vzorek inhalované dávky činil 1 j. inzulinu/kg. Byly odebrány vzorky krve před dávkováním a v různých časových intervalech až do 245 minut po začátku dávkování. Koncentrace inzulínu v plazmě byla zjištěna radioimunologickým stanovením.

Z prostředků bez promotoru byl inzulín absorbován obvykle relativně pomalu, přičemž k pikům v hladinách inzulínu v plazmě docházelo u některých zvířat mezi 50 a 100 minutami po aplikaci. U jiných zvířat docházelo k pikům v hladinách inzulínu v plazmě mezi 10 a 20 minutami po aplikaci.

Z prostředků podle vynálezu bylo dosaženo píku v hladině inzulínu v plazmě u všech zvířat do 10 minut po aplikaci, následovaného jiným pikem kolem 25 minut u všech zvířat.

Všeobecně rychlejší absorbce inzulínu z prostředků podle vynálezu je bližší přirozené křivce inzulínu v plazmě po jídle u zdravých lidí. Kromě toho nedostatek odchylek u zvířat naznačuje, že se žádoucí hladina absorpce inzulínu dosahuje snadněji a spolehlivěji použitím prostředků podle vynálezu.

Claims

1. Farmaceutický aerosolový prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje

a) hydrofluoralkanový hnací plyn, b) farmaceuticky účinný polypeptid dispergovatelný v hnacím plynu a c) alespoň jedno povrchově aktivní činidlo, vybrané ze skupiny zahrnující mastné kyseliny obsahující 8 až 16 atomů uhlíku a jejich soli, soli žlučových kyselin, fosfolipidy a alkylsacharidy, přičemž povrchově aktivní činidlo zvyšuje systémovou absorpci polypeptidu ve spodní části dýchacího ústrojí.

2. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároku 1, vyznačující se tím, že povrchově aktivní činidlo nebo činidla jsou vybrána ze skupiny zahrnující mastné kyseliny obsahující 8 až 16 atomů uhlíku.

3. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároku 2, vyznačující se tím, že sůl nebo soli mastných kyselin jsou vybrány ze skupiny zahrnující sodné, draselné a lysinové soli kyseliny kaprylové, kyseliny kaprinové, kyseliny laurové a kyseliny myristové.

4. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároku 1, vyznačující se tím, že povrchově aktivní činidlo nebo činidla jsou vybrána ze skupiny zahrnující soli trihydroxyžlučových kyselin.

5. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároku 4, vyznačující se tím, že sůl nebo soli žlučových kyselin jsou vybrány ze skupiny zahrnující soli kyseliny cholové, kyseliny glykocholové a kyseliny taurocholové.

6. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároku 5, vyznačující se tím, že sůl nebo soli žlučových kyselin jsou vybrány ze skupiny zahrnující sodné a draselné soli cholové kyseliny, glykocholové kyseliny a taurocholové kyseliny.

7. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároku 6, vyznačující se tím, že sůl žlučové kyseliny je taurocholát sodný.

8. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároku 1, vyznačující se tím, že povrchově aktivní činidlo nebo činidla jsou vybrána ze skupiny zahrnující fosfolipidy s jediným řetězcem.

9. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároku 8, vyznačující se tím, že fosfolipid nebo fosfolipidy s jediným řetězcem jsou vybrány ze skupiny zahrnující lysofosfatidylcholiny, lysofosfatidylglyceroly, lysofosfatidylethanolaminy, lysofosfatidylinositoly a lysofosfatidylseriny.

10. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároku 1, vyznačující se tím, že povrchově aktivní činidlo nebo činidla jsou vybrána ze skupiny zahrnující fosfolipidy s dvojím řetězcem.

11. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároku 10, vyznačující se tím, že fosfolipid nebo fosfolipidy s dvojím řetězcem jsou vybrány ze skupiny zahrnující diacylfosfatidylcholiny, diacylfosfatidylglyceroly, diacylfosfatidylethanolaminy, diacylfosfatidylinositoly a diacylfosfatidylseriny.

-8CZ 288145 B6

12. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároku 10, vyznačující se tím, že fosfolipid nebo fosfolipidy s dvojím řetězcem jsou vybrány ze skupiny zahrnující dioktanoylfosfatidylglycerol a dioktanoylfosfatidylcholin.

13. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároku 1, vyznačující se tím, že povrchově aktivní činidlo nebo činidla jsou vybrána z alkylglukosidů a alkylmaltosidů.

14. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároku 13, vyznačující se tím, že alkylglukosidem je decylglukosid a alkylmaltosidem je dodecylmaltosid.

15. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároků lažl4, vyznačující se tím, že hnacím plynem je 1,1,1,2-tetrafluorethan, 1,1,1,2,3,3,3-heptafluorpropan nebo 1,1-difluorethan.

16. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároku 15, vyznačující se tím, že hnacím plynem je 1,1,1,2-tetrafluorethan a 1,1,1,2,3,3,3-heptafluorpropan.

17. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároku 15 nebo 16, vyznačující se tím, že hnacím plynem je směs 1,1,1,2-tetrafluorethanu a 1,1,1,2,3,3,3-heptafluorpropanu (P227) o stejné hustotě jako má farmaceuticky účinný polypeptid.

18. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároků lažl7, vyznačující se tím, že polypeptid má molekulovou hmotnost až do 40 000.

19. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároku 18, vyznačující se tím, že polypeptid má molekulovou hmotnost až do 30 000.

20. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároku 19, vyznačující se tím, že polypeptid má molekulovou hmotnost až do 25 000.

21. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároků laž20, vyznačující se tím, že polypeptid má molekulovou hmotnost až do 20 000.

22. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároků laž21, vyznačující se tím, že polypeptid má molekulovou hmotnost až do 15 000.

23. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároků laž22, vyznačující se tím, že polypeptid má molekulovou hmotnost až do 10 000.

24. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároků laž23, vyznačující se tím, že polypeptid je peptidový hormon.

25. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároků lažl7, vyznačující se tím, že polypeptid je zvolen ze skupiny zahrnující inzulín, glukagon, C-peptid inzulínu, vasopresin, desmopresin, kortikotropin, tedy ACTH, hormon uvolňující kortikotropin, tedy CRH, hormon uvolňující gonadotropin, tedy GnRH, agonisty a antagonisty hormonu uvolňujícího gonadotropin, gonatrofin, tedy luteinizační hormon neboli LHRH, kalcitonin, parathyroidní hormon, tedy PTH, bioaktivní fragmenty PTH, růstový hormon, tedy GH, hormon uvolňující růstový hormon, tedy GHRH, somatostatin, oxytocin, atriální natriuretický faktor, tedy ANF, hormon uvolňující thyrotropin, tedy TRH, deoxyribonukleázu, tedy DNasu, prolaktin a hormon stimulující folikul, tedy FSH, a jejich analogy.

26. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároku 25, vyznačující se tím, že polypeptid je inzulín.

-9l

27. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároků 1 až 26, vyznačující se tím, že obsahuje ethanol v množství až do 20 % hmotnostních hnacího plynu a povrchově aktivního činidla.

28. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároků laž27, vyznačující se tím, že obsahuje ethanol v množství až do 5 % hmotnostních hnacího plynu a povrchově aktivního činidla.

29. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároků laž28, vyznačující se tím, že obsahuje farmaceuticky přijatelné přísady zvolené zadjuvantů, nosičů, chuťových přísad, pufrů, antioxidantů a chemických stabilizátorů.

30. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároku 29, vyznačující se tím, že přísada je zvolena ze skupiny zahrnující laktózu, glukózu, fruktózu, galaktózu, trehalózu, sacharózu, maltózu, rafinózu, maltitol, melezitózu, stachyózu, laktitol, palatinit, škrob, xylitol, mannitol, myoinositol, jejich hydráty, alanin, glycin a betain a albumen.

31. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároku 30, vyznačující se tím, že nosičem je melezitóza.

32. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároků laž31, vyznačující se tím, že povrchově aktivní činidlo je přítomno v hmotnostním poměru povrchově aktivní činidlo : polypeptid v rozmezí 1 : 10 až 1: 0,2.

33. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároku 32, vyznačující se tím, že povrchově aktivní činidlo je přítomno v hmotnostním poměru povrchově aktivní činidlo : polypeptid v rozmezí 1 : 4 až 1 : 1.

34. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároků laž33, vyznačující se tím, že polypeptid obsahuje částice, které mají průměr 0,01 až 10 mikrometrů.

35. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároku 34, vyznačující se tím, že polypeptid obsahuje částice, které mají průměr 0,1 až 6 mikrometrů.

36. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároku 34, vyznačující se tím, že polypeptid obsahuje částice, které mají průměr 0,1 až 5 mikrometrů.

37. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároků laž33, vyznačující se tím, že nejméně 50 % hmotnostních polypeptidu je tvořeno částicemi v rozmezí velikosti definovaném v libovolném z nároků 34 až 36.

38. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároků laž33, vyznačující se tím, že nejméně 60 % hmotnostních polypeptidu je tvořeno částicemi v rozmezí velikosti definovaném v libovolném z nároků 34 až 36.

39. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároků laž33, vyznačující se tím, že nejméně 70 % hmotnostních polypeptidu je tvořeno částicemi v rozmezí velikosti definovaném v libovolném z nároků 34 až 36.

40. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároků laž33, vyznačující se tím, že nejméně 80 % hmotnostních polypeptidu je tvořeno částicemi v rozmezí velikosti definovaném v libovolném z nároků 34 až 36.

-10CZ 288145 B6

41. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároků laž33, vyznačuj ící se tím, že nejméně 90 % hmotnostních polypeptidu je tvořeno částicemi v rozmezí velikosti definovaném v libovolném z nároků 34 až 36.

42. Farmaceutický aerosolový prostředek podle nároků laž41, vyznačující se tím, že koncentrace polypeptidu je 0,1 mg/ml až 25 mg/ml prostředku.

43. Způsob výroby farmaceutického aerosolového prostředku podle nároků 1 až 42, vyznačující se tím, že sestává z následujících stupňů: míšení polypeptidu a povrchově aktivního činidla ve vodném pufru, vysušení na pevný prášek, popřípadě mikromletí pevného prášku, míšení popřípadě mikromletého prášku, hnacího plynu a popřípadě ethanolu při teplotě pod -15 °C a přidání dalšího hnacího plynu a popřípadě ethanolu.

44. Použití farmaceutického aerosolového prostředku podle nároků 1 až 42 pro výrobu léčiva k léčbě nemocí cestou dýchacího ústrojí.