TW410226B - Rapamycin derivatives - Google Patents

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經濟部智慧財產局貝工消费合作社印製 410226 A7 , _B7___ 五、發明說明（） 本發明係Μ於拉巴徽素衍生物’其製造方法，用作 製藥以及含有拉巴徽素衍生物的藥學組成。 已知拉巴徽素乃由濕鍵徽菌（Streptomyces hygroscopicus ) 所產生的一種属於内脂環徽素 macrolides的抗生素，具有如化學式A所示之结構：

參閱如 McAlpine, J.B·， e t a 1. , J.

Antibiotics (1991) 44: 688; Schreiber, S.L., et a 1 , , J . As . Cheat. Soc. (1991) 113: 7433; US Patent No. 3 , 9 2 9 , 9 9 2 (有許多拉巴微素的命名系統 被提出。為埋免混淆，當特定之拉巴嫌素衍生物在此被 命名時，其命名的原則乃Μ拉巴徽素為參考物，Μ化學 式Α之命名原則加Μ命名）。拉巴徽素為一極有软的 免疫抑制物且已被證實具有抗癌及抗黴菌的活性。然而 ' -3 _ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） »^1 I 1.1 m n n t n i I— t * u u I n n n t] ^l-OJ* It tf n It —1 1— ( I (請先閱讀背面之注意事項再本頁) 五、發明說明（ Α7 Β7 ，它在製藥上的應用卻受限於其非常低且多變的生物有 效價值。此外*拉巴徽素不可溶且欠缺安定性，使得其 很難被配方製成穩定的蓋倫製劑。 已知有許多的拉巴黴素衍生物。某些在4Q-氧原 子上取代的拉巴激素被描述於| 例如， 美國專利案 5, 2 5 8 , 3 8 9及 W0 94/09010 (氧-烷基拉巴撤素）； Ϊ0 9 2 / 0 5 1 7 9 (碳酸酯類），美國專利案 5,118，&&7 (醢胺酯），美國專利案5，U8,678 (胺基甲酯）， 美國專利案 5,100,883 (氟化酯類）* 美國專利案 5, 151 ,413 (縮醛），Μ及美國専利案5，12〇,842 ( 砂酯）中。 --------------裝I{請先^讀背面.之注意事項、^^本頁)_ IJ· 現今很驚異的發現某些新種類的拉巴徽素衍生物具 有較拉巴徽素更有效的蕖學性質，且展現出更大的安定 度。 經濟部智慧財產局貝工消费合作社印製 依據本發明，提供了具化學式I之物質 本紙張尺度適用中國國家標準<CNS>A4規格（210 X 297公* ) 410226 A7 B7

苄基， Rz 乃選自化學式II或化學式III中：

--------------農---^----丨訂---------線 • - (請先閱讀背面之注意事項再w本頁) 經濟部智慧財產局員工消费合作社印製 化學式11 化學式111 其中 R3乃選自氫原子，烷基，烯基，炔基，芳香基’ 硫烷基，芳香烷基*羥基芳香烷基，芳香羥基，羥基烷 基，二羥基烷基，羥基烷氧烷基，羥基烷芳香烷基’二 羥基烷芳香烷基，烷氧烷基，烷羰氧烷基’氨基焼基， 烷氨烷基，烷氧羰氨烷基，烷羰氨烷基，芳香磺氨烷基 ，烯丙基，二羥基烷烯丙基，二氧戊烷烯丙基，碳烷氧 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 410226 A7 _B7 五、發明說明（） 烷基與烷矽基； R4是氫原子，甲基或與R3形成含2至6假 碳原子之烯烴基；

Rs是R60-CH2-，其中Rs乃選自氫原子，烷 基，烯基，炔基，芳香基*烷羰基*芳香羰基，雑環芳 香羰基*羥基烷羰基，氨基烷羰基，甲醯基，疏烷基| 芳香烷基*羥基芳香烷基，羥基芳香基，羥基烷基，二 羥基烷基*羥基烷氧烷基，羥基烷基芳香烷基•二羥基 烷基芳香烷基，烷氧烷基，烷羰氧烷基，氨基烷基*烷 氨基烷基，烷氧羰基氨烷基|烷羰基氨烷基，芳香磺氨 基烷基•烯丙基•二羥基烷烯丙基，二氧戊烷烯丙基和 碳烷氧烷基； R 7 C0-，其中R 7乃選自氫原子》烷基*羥基 ，烷氧基，芳番氧基，氨基，烷氨基，氨基酸之殘基， 或H 雙取代之氨基酸其中之取代基（a)乃選自 烷基|芳香基或芳香烷基或（b)乃選自具雜環结構 的分子；Re NCH-，其中Rb乃選自烷基，芳香基 ，氨基，烷氨基，芳香氨基*羥基，烷氧基或芳香磺氧 基；-0-CH-0-;或有取代之二氧.甲基； Y乃選自氧 原子，（氫原子，羥基），和（氫原子，〇ίί9)其中 -6 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -------------裝，----r----訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再本頁) 經濟部智慧財產局員工消f合作社印製 410226 A7 __B7___五、發明說明（） R 9乃選自含1至4個碳原子之烷基，烷羰基，芳香 羰基*雑環芳香羰基*羥基烷羰基*氨基烷羰基，甲醢 基或芳香基；且 X乃選自羥基或氫原子； 其中“烷”或“烷基”係指含 1至1 〇個碳原子 或許含一個氧原子鍵结之脂肪族取代基，而“芳香”或 “芳香基”係指含單環，或雜環或有取代基，含4至 14個碳原子之芳香族取代基， 前題必須是當X為羥基， 卩4為烷基且R2 為具 化學式II之物質的殘基，而R3 為氫原子以外之原子 〇 任何上述之“烷”或“烷基”之基團均可為具支鐽 •直鏈或環狀；最好是含1至10個碳原子或許含一 個氧原子鍵结之脂肪族取代基，更好是中間鍵結沒有被 氧原子鍵结打斷。 上述“芳香”或“芳香基”之範例或取代基可包括 例如苯基，苄基，甲苯基，at啶基和其它類似 的基_。 ，7 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ---：----------裝----：-----訂---------線 {請先閱讀背面之注意事項再4?^本頁) ^10226 A7 B7 五、發明說明（） (請先閱讀背面之注意事項再W本頁) 當Ri為氯苄基或烧氧苄基時，取代基的位 置最好為鄰位。 當R·? C0-為N，N-雙取代之胺甲醢基時，它可 為例如N-甲基-N-(2-吡啶-2-基-乙基）-胺甲 醢基’（4-甲基-六氫吡畊-卜基）-羰基或（嗎啉 -4-基）-羰基。 當 Rs為二氧甲基時，它可為例如〇,〇_(亞烴基）_ 二氧甲炔 *例如其中兩個氧原子均接在f透基上。 在化學式I之物質中，無論是單獨擁有或以任何組合 或次組合的形式存在下，最好是具下列特點： 經濟部智慧財產局員工消费合作社印製 1· X為氫原子且Ri是含3至10個碳原子之 烷炔或含3至10個碳原子之羥基烷炔基，較好是含 3至10個碳原子之烷-2- 炔基或含3至10個碳原 子之羥基烷-2-炔基，更好是含3至6個碳原子之 烷-2-炔基； 2. X為氫原子且R1是含1至10個碳原子之烷 基，或含3至10涸碳原子之烷2-烯基，或含3至 -8 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 經濟部智慧財產局具工消费合作社印製 4lG^〇6 A7 _B7__ 五、發明說明（） 10個碳原子之羥基烷-2-烯基，或含3至10個碳 原子之烷-2-炔基，或含3至10個碳原子之羥基烷 -2-炔基或含1至10個碳原子之烷氧基或含1至 個碳原子之烷基，較好是含1至6個碳原子烷基或含 3至10個碳原子之烷-2- 炔基’更好是含1至4 個碳原子之烷基，最好是甲基； 3. 含3至10個碳原子之烷玦基，當Ri是 2- 丙炔基或戊-2-炔基，最好是戊-2-炔基； 4. Υ是氧原子， （氫’羥基）或（氫，含1 至4個碳原子之烷氧基），較好是氧原子； 5. Rz 為具化學式 U之物質的殘基； 6. 在所有具化學式II之物質的殘基中， R3為 氫原子*含1至6個碳原子之羥基烷基•羥基含 1至6個碳原子之焼氧基-含1至6個碳原子之烷 基，（含1至6個碳原子之烷基）-羰基-氨基 -含1至6個碳原子之烷基，含1至&個碳原子之 烷氧基-含1至6個碳原子之烷氧基或氨-含1 至6個碳原子之烷基•較好是氳原子，羥基乙基，羥 基丙基，羥基乙氧基乙基，甲氧乙基或乙釀氨乙基·，特 -9- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210x 297公楚) (請先閱讀背面之注意事項再We本頁) 灯· -線- A7 410226 ________ 五、發明說明（） 别是氫原子當X為氫原子或當X為羥基時且Ri是烷 炔 ； 7. 具化學式II之物質的殘基中；1U 是甲基。 8. R 2是具化學式Hi之物質的殘基之—*其中 R 5是R60CH2 ， R6乃選自氫原子，含1至S個 碳原子之烷基，含3至6個碳原子之烷-2-烯基， 含3至6個碳原子之烷-炔基，芳香基*含1至6 涸碳原子之烷羰基，芳香羰基，含1至6個碳原子之 羥基烷基，含1至6個碳原子之烷氧基-含1至S 個碳原子之烷基或含1至6個碳原子之氨基烷基；R 7 C0-其中R7乃選自氫原子，羥基，含1至6個 碳原子之烷氧基，氨基，含1至6個碳原子之烷氨基 ，氨基酸中的殘基或Ν,ίί-雙取代之氨基，其中取代基 U)乃遴自含1至6個碳原子之烷基或芳香基或（b )乃選自具雜環结構的分子； Rs NCH-，其中R8 乃壤自烷基，芳香基，氨基，烷氨基，芳香氨基，羥基 ，烷氧基或芳香磺氨基；-0-CH-0-;或有取代之二氧 甲基； 較適宜之化合物為具化學式la之化合物 -10- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格(210 X 297公釐) (請先閱讀背面之注意事項再f本頁) 訂·. 線- 經濟部智慧財產局具工消費合作社印製 五、發明說明（ A7 B7

其中， Rz及Y之定義如上述，較好是具 有如上述第1及第3至8點中任一顯著的特點；及 具化學式I b之化合物 經濟部智慧財產局員工消费合作社印製

b I 其中Ri ， R2及 Y之定義如上述，較好是具 有如上述第2至第8黏中任一顯著的特點。特別適合 的化合物包括 -11- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ----------------------- 訂--------- (請先閱讀背面之注意事項再本頁) 經濟部智慈財產局員工消費合作社印製 410226 A7 ________B7_ 五、發明說明（） (i ) 32-去氧-拉巴撤素； (ii) 16-氧-五-2-炔基-32-去氧-拉巴 黴素； (i i i) 16- 氣-五-2 -炔基 -32-去氧-4Q-氧 -(2-羥基-乙基）_拉巴徽素； (iv) 16-氧-五-2-快基_32(S)-二氣-拉巴 徽素； (v) 16-氣-五-2 -块基-3 2 ( S )-二氲 -40-氧-(2-羥基乙基）_拉巴徽素； (vi) 32 (S)-二氫-40-氧-(2-甲氧基）乙 基-拉巴激素； (vii) 32(S)-二氦-40-氧-(2-經基乙基）-拉巴徽素。 化學式 I之化合物可有異構物因此會有進一步 之異構物存在。因此本發明之化合物包括具化學式I 之化合物，Μ及化學式I’之個別的異構物

本紙張尺度適用中國國家標準<CNS)A4規格（210 X 297公釐） Γ — ll·^----------裝——-r----訂---------線--------.---l·-------------- I) (請先閱讀背面之注意事項再本頁) ί .-: 410226 A7 B7五、發明說明（） 其中， Rz ， Y及 X之定義如上述，Μ及 由此衍生出之異構混合物。 個別異構物可以此領域中眾所熟知的方法加Κ分開 0 本發明也提供了一個製造此類化學式I之化合物 物的方法，此方法包括 (a)製造一X為氫原子之化學式I之化合物， 將具化學式 IVa之化合物第32位置上的羰基堪 原 經濟部智慧財產局員工消f合作社印製

I 3 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公；Ϊ )

«α V rII ----------裝——1----訂---------線--------------------------- I (諳先閱讀背面之注意事項再w：本頁) { _ _ A7 B7_ 五、發明說明（） 其中， R2及Y之定義如上述，Μ具有保 護基或不具保護基的形式存在且在須要時可將保護基除 去；或 (b)製造一X為羥基之化學式I之化合物，將 如上述定義的具化學式 IVa之化合物第32位置上的 羰基加Μ選擇性立體化的堪原；或 (c>將一 I 為烷基之化學式 I之化合物加 Μ轉換成Ri 為不是烷基之化學式I之化合物。 在步驟（a)中，化學式IVa之化合物最好Μ保護 形式存在*即其可包含在不會參與反應之官能基上的保 護基，如當R 2為化學式II之化合物的殘基時，第 28位罝上和第40位置上的的羥基或者是當R 2為化學式 ΙΪΙ之化合物的殘基時第33位置上的的羥基。 經濟部智慧財產局貝工消费合作社印製 將 U)堪原成化學式I之32-去氧化合物可以下 列兩步驟進行： (i) 藉著將最好是以保護形式存在的具化學式IVa 之化合物與氫化物反應，例如*二異丁基氫化鋁或最好 -14- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公芨） 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 ------_ 五、發明說明（） 是三-三级-丁氧基氫化鋁，Μ生成相對之32-二氫 化合物。也可使用在此領域中眾所皆知其它用來還原酮 基的方法與試劑，來製造相對之32-二氫化合物。它們 包括，例如，氫化反應，以金羼摧化劑還原，Μ金屬氫 化物還原，如 Conprehensive Organic Transformations, R. C. Larock, VCH Publishers Inc., Sew York, 1989, pp 527-535, sections 7.1.1-7.1.4 M 及 Comprehensive Organic Transformations , R. C . Larock, VCH Publishers Inc., New York, 1989, pp 540-547, sections 7,1.15 中所述之非對稱性還原嗣基的方法。在（i)之反應步嫌 後接著進行 (ii)將32-二氫化合物轉化成32-鹵化-衍生 物》例如，32-溴或（較好是>32-碘-衍生物| 再藉由氳化物將其遢原成為所欲的 32- 去氣-衍生物且其中必須將所得到的化合物之保護基移去。也 可用其它用來還原鹵化物的試劑，包括例如，低價鍵的 金屬（例如，鋰*納*鎂及鋅）和金靨氫化物（筮化鋁 ，氫化砸•砂焼，氫化铜）（參閲 Conprehensive Organic Transformations, R. C. Larock, VCH Publishers Inc., New York, 1 989 , pp 18-20, sections 15.1-15.2 )。或者*可MS或可提供氫之物 -15- 本紙張尺度適用中园國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ------------裝---訂--------•線 (請先閲讀背面之泫意事項乓"寫本頁) _k_____________!/ A7 41〇22β B7_ 五、發明說明（） 質（例如，甲酸或其鹽類）在適當之金羼摧化劑下（例 如，雷尼氏線 Raney-nickel ，金屬鉑或鉑之複合物， 铑或釕之複合物）將鹵化物适原原（參閱Conipretiensive Organic Transformations, R. C. Larock, VCH Publishers Inc., New York, 1989， pp 20-24， sections 1.5.3 )。再者，也可用已知的方法將醇類轉 化成相對之去氧化合物。這些方法包括*例如，直接遨 原或K中間物之磷酸化合物*磺化物，硫代碳酸鹽，硫 代胺基甲酸鹽或黃原酸鹽進行堪原反應，如 Coeiprehensi ve Organic T r ans f o r i a t i ons , R . C . larock, VCH Publishers Inc., New York, 1989, pp 27-31， sections 1.9.1，1.9.4 中所述。 適宜用來保護羥基的基團及方法，它們的生成及除 去為此領域中眾所皆知的，參閲Protective Groups in Organic synthesis, second e d . T . W. Green and P.G.M. Wuts, John Wiley &Sons, New York, 1991, Chapter 2及此所列出的參考文獻。較缠宜用來保護羥 基的基團為，例如，三有機性矽基團如，三（含1至 6個碳原子）烷矽基（例如· 三甲基矽基，三乙基矽 基），三異丙基矽基，異丙基二甲基矽基，t- 丁基 二甲基矽基*三芳香矽基（如，三苯基矽基）或三芳香 烷矽基（如，三苄基矽基）。保護基的去除可在弱 -16- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公芨） ,---r ^----------裳--------訂---------線 (請先Μ讀背面之注意事項再ί本頁) 經濟部智慧財產肩員工消f合作社印製 Ί 410226 A7 B7 五、發明說明（) 酸性的情況下進行。 堪原步驟（i)在低溫下即可進行，例如，-1 〇 C 至-8 0 TC下。 在步驟（ii)中32- 去氧化合物可以選擇性的W 具保護基的型式出現*最好是將32U)-非鏡像立體異 構物轉化成酯類> 較好是磺酸酯類， 例如， 進行 甲確酸 酷1甲苯確酸 酯，nosylate 或 tfiflate 的反應，接著K適宜之鹵素取代，如，碘化納或溴化納 ，四丁基氨碘或四丁基氨溴*較好是在有鹼存在的情況 下，如，胺。可依已知之分離技術將 32(R)-非鏡像立 體異構物由混合物中加以分開•如色S層析法。 可以將32- 鹵化物還原之適當的氫化物包括例如 ，有自由基的氫化物如三丁基錫氫化物或 tris -(三 甲基矽）-矽烷。還原反應也可在有或沒有自由基起始 物存在的情況下進行，例如，2,2’-偶氮雙異丁腈或較 好是 Et3 B ，在溫度0 1C至 80X：下進行。 在遢原步驟（i)或（ii)之後·如果須要的話， 可加入氣化劑如乙酸網，以選擇性的將可能會發生的不 想要的S原反應*例如•第九位置上，再氧化成簾 -1卜 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS>A4規格（210 X 297公釐） --------------裝--- (請先聞讀背面之注意事項耳-乂^-本頁) 訂. •線 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 410226 B7_ 五、發明說明（) 基。 (請先閱讀背面之注意事項再ί本頁) 或者，也可K已知的方法將32-二氫衍生物直接 轉化成鹵化物，例如，使用三苯基膦與N-溴-或N-碘-琥珀醢亞胺，四溴化碳或四碘化碳· 1,2-二漠四 氯乙烷，2,4, 5-三溴-或-三碘咪唑*碘，二碘乙 烷，或亞磺醢溴或甲基三苯氧基膦酸碘。 可藉甲苯磺酸腙（tosylhydrozone)的形成K及硼烧 的處理，例如，兒荼酚硼烷 （catecholborane)，或在 適當之還原步驟後，例如K雷尼氐鎳或一種氫化物如三 丁基錫氫化物，將位置32之羰基運原成32-去氧衍生 物。也可使用其它已知的方法將_基轉化成相對之烷類 :此種方法包括例如*直接堪原（參閲 Comprehensive Organic Transformations, R.C· Larock, VCH Publishers Inc., New York, 1 989 , pp. 3 5- 3 7, section 1.12.1 )或與踪 (hydrazones)反應（ 經濟部智慧財產局員工消费合作社印製

Conprehensive Organic Transforiations, R. C. Larock, VCH Publishers Inc., New York, 1989, PP . 3 7 - 38 , s e c t i οn 1 . 1 2 . 2 )並藉硫及® ( s e 1 en i um) 衍生物的形成來進行堪原反應。 還原步嫌（b)中化學式I之32U)-二氫化合物 -18- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 410226 A7 B7 五、發明說明（ 之反應只在選擇性的情況下進行。最好是添加較明顯偏 向邐原32(S)之還原劑，例如，三乙基硼化氫納。反應 可在低溫下例如， _5Gt：至-80C下，於一惰性的溶 劑中，例如*四氫呋哺，二乙醚，甘酵二甲醚（glyrae)， 二甘醇二甲醚（diglyme)或甲基四級丁基醚中進行。可 以已知的方法將3 2 ( S )- 二氫化合物由低量的3 2 ( β)-二氮化合物中加Μ分離，例如，管柱色層層析法，逆相 色層層析法。 在須要時*可在還原反應進行前將 28位置或者 40位置上的羥基加Μ保護 > 並在還原反應進行後將保 護基去除，例如，如上述。遢原步驟（b)最好是在沒 有羥基保護基的倩況下進行。 請 先· 閱 讀 背 Φ 之 >ί 意 事 項 Ά 寫-裝 頁 訂 經濟部智慧財產局貝工消費合作社印製 K已知的方法進行轉換步驟（c)。例如，化學式I 之化合物•其中R1為垸基，較好是甲基，可與化學式 Rx-OH之化合物反應，其中Rx為炔基或羥基炔基，Μ 合成R1為炔基或羥基炔基之化學式I之化合物。反懕 可在酸性情況下於靥質子惰性的溶劑中進行，例如•二 氯甲焼，甲苯，乙腈 （acetonitrile)或四fi呋喃。 在32位置之還原反應* 特別是還原步驟（b)的 進行是在化學式IVa之化合物上，其中R1已有所須要 -19- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS>A4規格（210 X 297公釐） 線 經濟部智慧財產局負工消费合作社印製 A7 __________B7_ 五、發明說明（） 的顯著性，即Ri為炔基|因此避免須在還原反應後所作 的轉化過程。作為起始物質之Μ其中 Ri為炔基或羥基 炔基之具化學式IVa之化合物’係Μ如上所逑的化學式 Rx-OH之化合物來製備。 用做反應起始物之化合物可K類似於已知的方法加 Μ 製備，例如，如 USP 5， 258， 389, WO 94/09010, W0 95/16631，USP 5, 120,842及其它專利案中所階露者。 本發明以下列範例加以閫述。所有的反應溫度均為 C。使用之簡寫如下： THF = 四氫呋哨 TES = 三乙基矽基

實例1 : 3 2 -去氧拉巴徽素 U i =甲基； R 2 =化學式 II之化合物，其中R3 =氫及R4 = 甲基； 1:氫 γ =氧）在内含 26, 1 g ( 22 _ 85 Biiioi ) 28, 4 0 - 雙-氧-三乙基矽基-拉巴徽素 28,40-bis-O-TES-rapamycin ， 2 6 0 m 1 四 S 肤哺的携 捽冰溶液（-78 )中加入 5 0 . 3 b 1 ( 5 0 · 3 Bimo 1)溶 於四氫呋喃之 1M 的氫化三-三趿丁氧基鋁鋰 (Lithiua-tri-t.-butoxyaluainu 丨 hydride)溶液。鑲所 得溶液於 2小時內回溫至-15 t! «之後以冰浴取代原 _ 2 0 - 本紙張尺度適用中囷國家標準（CNS)A4規格（210 x 297公釐） ----^----------裝----J----訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再本頁) 經濟部智慧財產局員工消费合作社印製 〇22β Α7 — Β7 五、發明說明（） 有的冷卻浴，使溫度回到〇 t，並在此溫度下遒縝攪拌 1小時。將反應混合液倒入内含750 ml乙酸乙酯和400 ml、之冰撺樣酸中並上下搖動。將水相分離並以冰 的乙酸乙酯萃取2次。將有機層中融液合併並Μ 2N冰 搏樣酸溶液，水，飽合的碳酸氫納溶液清洙，再Μ飽合 的盏水清洗2次，之後以無水碳酸納進行乾燥，在減壓 的情況下過濾並濃缅。將内含 32(R)- 二Μ -28，40-雙-氧-三乙基矽基-拉巴徽素和32 (R) 9,32-雙 - 二氫-28 , 4 0 -雙-氧-三乙基矽基-拉巴徽素之 混合物溶於260 «1之甲酵中。將溶液冷卻至〇 並Μ 6.85g ( 34 . 21 bboI)之醋酸銅處理。撹拌 1小時後， 以甲基三级丁基醚將所得懸浮液稀釋胼Μ水及飽合鹽水 清洗2次。以無水硫酸納將合併之有機液加Μ乾悚，在 減壓的情況下過漶並濃縮。殘餘物以矽膠管柱色層層析 法（60:40已烷/甲基三级丁基醚）加以純化以得純 的 32 (R)-二氫 - 2 8,4 0 -雙-氧-三乙基矽基-拉 巴徽素之白色固體。 1氫核磁共振光譜（三氯氘化碳* CDC1 3 ) 4:1 之旋轉異構體（rotaeers)混合物*括號中的化學位移 係指最微量之 rotaraer δ 0.72 (1 fi * dd * -38ax) ， 1.63 (1.60) (3 氫，s ，碳 17-甲基） ， 1.66 ( 1 _ 69> (3 氫，s ，碳 29-甲基），l ·” -21- 本紙張尺度適用令囷國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） --------------裝-------1訂'-------線 ‘(請先^讀背面之注意事項耳-乂^-本頁)_ 五、發明說明（） A7 B7 經濟部智慧財產局貝工消費合作社印製 1.81 (氫 -33)， 2 .46(1 氫 ’ ® ，氫 -31)- 2.82 (2.9: D (1 氫， 9 氫-2 5) ’ 2.91( 1氫，m > g -39) < 3 .13(3 氫 , S ，碳 16-甲氧基）， 3.26 (3 氫，s ，碳 27- 甲氧 基 )’ 3.41 (1氫， m * 氫 - -40). 3.43 (3 氫， η ，39)， 3.62(1 氫， « ， 氫-32)， 3.75(3. 57) (1 S， d ·氫- 27)- 4.10 (1氫 > 田 · 氫 -28) 9 4‘81 (1 M， b r 〇 ad > s * 碳10 -羥基 ) ，5 · 05 (1 氫-d ，氫-34)， 5.27 d ， Μ - 30} ，5 .36 (1氫， d ，氫- 2), 5.69 (1 氫，dd > % -22) ’ 6.03(5-96)(1 氫， d ， Μ -18)- 6 . 1 5 (1 氫， dd .氫 -21)， 6.33 (1 氫* dd *氫 -20} * 6 . 40 (1 氫， dd •氫 -19) HS (FAB， L i I d a t r i X) ffl/z 1 150 ( [μ + Li3+) { 相對 強度 100) 在內含 20.69 g (18 .10 UMBO 1 ) 32 (R}~ 二氫 -28, 40- 雙- 氧 -三乙基 矽基-拉 巴嫌素和 7.55 ml 之三乙 胺， 200 ml二氮 甲烷的攪拌冰溶液 (-15 V ) 中加入 2.10 ml (27 . 02 aB〇l)的甲烷磺酸氛溶液 。將: 混合物 攪拌 20 分鐘< '之 後以乙酸乙酯稀釋並加入 飽合 的碳酸 氩納溶 液< >將有 檄相與水相分 離並以乙 酸乙 酯萃 取水相 3次< _以 飽合的碳 酸篦納溶液及鹽水清洗有 機相 2次， 之後以無 水硫酸納 進行乾煉1 •在滅壓的情況 -22* 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公t) .----：----------裝-----r----訂 i I---- —線 <請先閱讀背面之注意事項再本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明說明（） 下過濾並濃縮。殘餘物Μ管柱色層層析法（8Q:2G已院 / 乙酸乙酯）加Μ純化K得純的32(R)-二氫-32-氧 -mesy卜28,40-雙-氧-三乙基矽基-拉巴徽素之白 色固體，但在平常的反應步驟中|未遝純化之粗產物通 常立即用於下一反應步驟中。 1氫核磁共振光譜（三氯氘化碳， CDC1 3 ) 5 0.77 (1 氫，dd ，氫-38ax) ， 1.67 (3 氫，s 碳 17-甲基 ）， 1.72 (3氫，s ，碳 29-甲基） ，2·77 (1 氫，Μ ，氫-25) ， 2,92 (1 氫，m ， 氫-39) . 3.03 (3 氫， s ，碳 16，甲氧基）， 3.17 (3 氫，s ，碳 27-甲氧基），3·21 (3 氫· π ，碳 39-甲氧基）， 3.42 (1 氫，m ，氫-40) * 3.45 (3氫.s ，亞硫酸甲烷基），3.91(1氫 1 d · S -27) 4.10 (1 氫， m ，氫-28)， 4.72 (1 氫，m ，氫-32) ， 4.94 U 氫， s ，碳 10-羥基），5. 12(1 氫，m ，氫-34) ， 5.25(1 氫， d * 氫-30) ， 5.43 (1 氫· d ,氫-2)， 5.88 (1 Μ ， dd ，氫-22) ， 6.03 (1 氫，d ，氫 -18) ， 6.18 (1 氫，dd ，氫-21) ， 6.37 (1 氫 ，d d *M - 2 0 ) * 6 . 4 4 ( 1 S * dd ，想-19) MS (FAB, Lil matrix) n/z 1228 ( [M + Li ] +)(相 對強度68) ，1132 UM-亞硫酸甲烷）+ l〗+ (相對強 -2 3- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -------------裂--------訂--------*線 (請先S讀背面之注意事項"乂^·本頁)， --------- ------ Mr 410226 A7 B7 五、發明說明（） 度 100 ) 2 2.3 5 g (1 8 · 30 mmo1)之 32 ( R)-二氫-32-氧 -11^87卜2 8 , 4 0 -雙-氧-三乙基矽基-拉巴徽素 (32 (R) - dihydro-32-0-inesyl-28, 40-bis-0-TES-rapamycin) 2 7 . 5 0 g (183.33 mmol)之碘化钠和 6.3 ·1 (3 6 6 & )之二異丙基乙基氨（d i i s o p r o p y 1 e t h y 1 a m i n e) 於400 al之THF中加熱回流 6小時，之後令其冷卻 回溫至室溫。所得之混合物Μ乙酸乙酯稀釋並以38.4¾ 之亞碕酸納處理。將液和有機相加Μ分離。K飽合的碳 酸氫納溶液清洗有機相3次及飽和鹽水清洗1次*之 後Μ無水硫酸納進行乾燥，在減Μ的情況下過漶並濃縮 。殘餘物Μ矽膠管柱色層層析法（83:17已烷/乙酸 乙酷）加Μ純化Μ得肫的 32(S)- 去氧 -32- 碘 -2δ,40-雙-氧-三乙基矽基-拉巴徽素。 --------------裝·！ (請先M讀背面之注意事項咩.>^-本頁) 訂· 線· 經濟部智慧財產局員工消f合作社印製 A7 410226 B7 -------- 五、發明說明（) 3.43(3.41) (3 氣， m ’細 39-甲氧基），377 (3.91) (1 氫，d ，氫-27) ， 4.2i (4.25) (1 g ，m ，氫-28) * 4_51 (1 Μ， s ，碳 ι 〇-經基） ，5.45 (5.48) (1 氫 * d ，氫-30) ， 5.60 (5·79) (1 氫，dd ,氫-22) ， 6.02 (5.85) (1 M ，d ，氣-18) M S ( F A B , L i I in a t r i X ) κι / z 1 2 6 0 ( [ μ + L i ] + )(相對 強度100) 在内含 16.79 g ( 13.19 ) 3 2 (s)-去氧 -32-碘-28 雙-氧-三乙基矽基-拉巴涵素 190 ml甲苯溶液的攪拌冰溶液（〇 Ό)中加入7 ml ( 26. 38 Β·ο1)的三丁基錫Μ化物溶液·接著加入1.3 nl溶於已烷中之1Μ的三乙基砸烷溶液。將混合物攪拌 30分鐘，之後以飽合的筑化氨溶液使反懕终止。將有櫬 相與水相分《並以乙酸乙酯萃取水相2次。Μ水、飽合 的碳酸氫納溶液、水及飽和鹽水淸洗有捆相3次*之後 Μ無水硫酸納進行乾埭，在減壓的情況下過濾並澹緬。 殘餘物Μ管柱色層層析法（7 5:2 5已烷/甲基三级丁 基醚）加以純化Κ得純的 32(R)- 去氧-28,40-雙-氧-三乙基矽基-拉巴徽素之白色固體。 -25- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） --------------裳--- (請先閱讀背面之注♦?事項年乂^-本頁)‘ 訂- 經濟部智慧財產局貝工消费合作社印製 ^0226 ^0226 經濟部智慧財產局員工消费合作社印製 五'發明說明（） 1 氫核磁共振光譜（三氯氘化碳， CDC13 ) 2.5:1之旋轉|痛繾混合物·括號中的化學位移係指最 撤虽之爽科策格德δ 0.73 (1氫* dd ，氬-38ax) - 1.62 (3 氫，s ，碳 Π-甲基），1.68 (1.72) (3 氫，s ，碳 29-甲基）， 2_77 (2,91) (1 氫，m ，氫-25) ， 2.31 (1 氫，IB ，氫-39) ， 3.15(3 氫，s ，碳 16-甲氧基）， 3.27 (3 . 25) (3 氫， s ，碳 27-甲氧基），3.43 (3_45) (3 氫， s ， 碳 39-甲氧基）* 3.70 (3.67) (1 氫， d ，氫 -27) · 4. 11 (4 .07) (1 氫，d ，氫-28) ， 4.57 (1 氫， broad ， s ，碳 10-羥基）， 4.87 (4.67) {1氫，d ，氫-34) ， 5 . 19 (5_08) (1 氫， d ，氫-3Q) ， 5.32 (1 氫，d ，氫-2) ， 5.60 ( (1 氫，（H ，氫-22) ， 6.01 (5 · 92) (1 氫，d ， 氫-18) ， 6·17 (1 氫，dd ，氫-21) ， 6.30 ( 1 氫，dd 1 氫-20) ， 6.40 (iS^dd * 氣-19) MS (FAB, Lil matrix) i/z 1134 ([M + Li ] + )( 栢對強度100) 在内含 10.37 g ( 9.52 mmol ) 32-去氧 -28，40- 雙- 氧-三乙基矽基-拉巴級素 (3 2 - d e ο X y - 2 8，4 0 - b i s - 0 - T E S 漏 r a p a m y c i η ). 8 5 m 1 甲酵 -26- 本紙張尺度適用中國囷家標準（CNS)A4規格（210 X 297公楚） --------------裝-------1訂·-------—線 (請先閜讀背面之注意事項"i^本頁) 經濟部智结財產局具工消費合作社印製 410226 A7 B7 五、發明說明（）

的攪拌冰溶液（-1 5 )中一滴滴加入3 . 5 El 1 、 2 N 的硫酸溶液。接著將反應物溫度提高到0 C並攪拌1 小時，之後Μ乙酸乙酯稀適並Μ飽合的碳酸氫納溶液使 反應終止。將有機相與水相分離並Μ三分之乙酸乙酯萃 取水相。Κ飽合的碳酸氫納溶液和鹽水清洗有機相 3 次，之後Μ無水硫酸納進行乾燥，在減壓的情況下過濾 並濃縮。將殘餘物溶於二乙醚中Κ得所要的32-去氧 -拉巴徽素晶體（無色結晶固體）。 1氫核磁共振光譜（三氯氘化碳，CDG1 3 ) 3:1 之级轉1旄龍混合物，括號中的化學位移係指最微量之 δ 0.70 (1 氫，dd ，氫-38ax) ， 1.14 和 1·32 (氫-32) ， 1.56 (氫-33 ) ， 1.65(1.62) (3 氫，s ，碳 17-甲基），1.68 (1.70) (3 氫， S ，碳 29-甲基）， 2,31 (2 氫，1Β ，氫-23 和 氬-31) * 2.82 (2 · 95) (1 氫， m ，氫-25)， 2·95 (1 氫，B ，氫-39) ， 3.14 (3氫， s ，碳 16-甲氧基）’ 3.32 (3氫* s ，碳27-甲氣基） • 3_38 (1 氫，in ，氫-40) ， 3 . 43 (3 . 41) (3 氫 ， s，碳 16-甲氧基 ）， 3.61(1氫， d，氫 -27) · 4.12 (1 氫，d ，氫-28} ， 4.80 (4 . 71) (1 氫，d ，氫-34) ， 5·22 (1 氫，d ， Μ -30) -5.31 (1 氫· d ，氫-2) ， 5.56 (1 氫，dd ， -27- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ------------*裝-------訂·--------線 (請先閱讀背面之注意事項号4"·本頁' 經濟部智慧財產局員工消t合作社印製 ^10226 a? Β7 五、發明說明（） 氫-22) ， 5.95 (5·87) (1 氫， d ，氫-18) * 6·16 (1 氫，dd * 氫-21) ， 6.36 (1氫，dd ，氬 -20) ， 6·41 (1 氫，dd * 氫-19) MS (FAB, Lil matrix) m/z 9 0 6 ( [Μ + Lί] +)(相對 強度100) 實例2 : 16-五-2炔氧基-32 (S)-二氫拉巴 徽素（R!=五-2-炔基；ϋ2 =具化學式II之 物質其中R3 :氫 R4 =甲基：X=羥基；Y=氧 ) 在内含 9 7 0 eg ( 1 . 06 amol ) 3 2 { S )-二氫拉巴 徽素及 1 .39通1 (15.00 nmol)之 2- 五炔-卜醇 (2-pentyn-l-〇l) * 2 0 n 1亞甲基氯的攪拌冰溶液（ 0 C)中加入 0.50 ml (6.50 mmol) 之三氟醋酸 trifluoroacetic acid溶液。在 D ΊΟ下播拌 3小時 並加入飽合的碳酸氫纳溶液來终止反應。將水及有機栢 分離並Κ三份乙酸乙酯進行萃取。將有機層中溶液合併 並Μ飽合的鹽水清洗·之後以無水碲酸納進行乾燥，在 減壓的情況下通漶並濃締。將粗混合物Κ矽膠管柱色層 層析法（20:80已烷/乙酸乙酿）加Μ純化*再以逆 相高效液態層析法（RP18 ， 81:19甲酵-水）Μ得 婢的白色固賊。 -28- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -----------ί裝--------訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項殍填寫本頁). ^10226 A7 B7 五、發明說明（） 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1 氫 核磁共振光 譜 (三氯氘 化碳， CDC 13 ) 2 . 5:1 之旋轉異構 體混合 物， 括號中的化學位 移偽 指最 微 量之 旋轉異構體 δ 0 . 7 1 (1 氫 > dd ，氫 -38a X) > 1 . 13 ( 105) (3 氫， t ，戊 -2 -炔 - 1-醛 CH 3 CH Z CCCH z 0 )， 1 .67 )(3 氫 ， s * 17- 甲基） t 1 . 69 (3 氫，s ， 29 -甲 基 )，2 .2 1 ( 2 氫 i qt » 戊 -2- 炔 - 1- 醛 CH 3 CH 2 CCCH 2 〇 ) 2 . 96(1 氫， 0! , 氫 -39)， 3 .33(3 .37 ) (3氫， s 9 碳27- 甲氧基 )· 3 .4 1 (3 . 39) (3 氫， s * 39- 甲 氧基 ) ，3.78 (1 氫 ，dt ， 戊-2 -炔 -1 - 醛 CH 3 CH 2 CCCH 2 0 ) 1 4 . 0 (1 氫， d t ， 戊- 2- 炔 -1 -醛 CH 3 CH 2 CCCH z 0 )- 5.52 (5.7 1) (1 氫 1 dd *氫 -2 2 )， 5 . 98(5.83} (1氫 • d » 氫 -18) » 6.15(1 氫 1 m , 氫 -21)， 6.30(1 氫 i dd ，氫— 20) . 6 .40 (1 氫， dd ，氫 -19) MS (FAB, Li I η a t r i X ) l/ Z 974 ([ Μ + LU + ) 簧 例 3 ： 1 6- 五 -2炔氧 基 -32 (S)- 二氳 拉巴 黴 素（ 另 一反應途徑 ) 拉巴 徽素與2- 戊炔 -1- 酵 >1 類 似實 例 2中的步驟 反應Μ得1 6-五 -2炔 氧基 - 拉 巴微素。 -2 9- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ---------------------訂 *------- (請先防讀背面之注意事項辱""本頁) 經濟部智慈財產局貝工消费合作社印製 ^10226 A7 __B7_ 五、發明說明（） 在内含 17.50 g ( 18.1 mmol ) 16- 去甲氧基 -16-2- 炔氧基-拉巴激素，180 ml四氪呋喃的攬拌 冰溶液（-77 Ό)中加入 21.7 ml (21.7 mmol) 1H 溶 於四氫咲哺之三乙基棚氫化納 triethylborohydride溶 液。在-77 t下携拌1小時後加入10Ϊ的擰攆酸溶液 來終止反懕。譆混合物回溫至室溫並將大部分的四氫呋 喃以減壓蒸發法除去。以乙酸乙酯對所得之溶液進行萃 取2次。將有機層中溶液合併並Μ無水硫酸鈉進行乾燥 ，茌減壓的情況下過濾並濃縮。在溶劑完全被蒸發後， 將粗混合物於矽膠管柱中Μ已烷 /丙铜7/3做色層層 析。終產物再Μ高效液態層析法（RP-18 ， 76:24甲 酵-水）純化Μ得纯的白色固體。 其光譜資料與以其它方法所得之產物的光譜資料相 同。 實例4 : 32 (S)-二氫-40-氧-(2-甲氧基） 乙基-拉巴黴素（Ri =甲基；Rz =具化學式II 之物質其中 R3 =2_甲氧基-乙基且R4 =甲基： X=羥基；Y=氧） 在内含 2.170 g ( 2·00 mmol ) 40-氧-(2- 甲氧基）乙基-28-氧-三乙基矽基-拉巴徽素， -30- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ---------------------訂·-------線 (請先Μ·讀背面之注意事項耳本頁) »_____» — _____1--1…=» _| I 〆 A7 41〇226 B7 _ 五、發明說明（) 20 mi四氫呋喃的攪拌冰溶液（0 C)中一滴滴加人 4.4 ml (4.4 mmol)溶於四氫呋喃之 L-Selectride 溶 液。將所得之黃色液體在G C下授拌3小時並加入2 nl的甲酵溶液以除去過量之氫化物並終止反應。加人 羅撤勒氏之盥溶液 （Rochelle’s salt solution) °讓 混合物回溫至室溫並繼續撹拌15分鐘。將水及有機相 分離並以1N冰的氳氣酸*飽合的鹽水，1N的飽合碳 酸篚鈉及飽合的鹽水清洗。以甲基三級丁基醚對水相的 清洗液進行再萃取。將有機相合併•之後以無水硫酸納 進行乾燥*在減壓的情況下過滹並濃縮Μ得含有32(S)-二氫-40-氧-(2-甲氧基）乙基-拉巴徽素之32S 及32R的異構混合物。 將上述所得之粗混合物溶於2Q ml之乙苄2中 並冷卻至0 C。於所得溶疲中加入 2·1之氫氟酸與 吡啶之混合液。攪拌1小時並加入1Ν之碳酸Μ納溶液 。將混合物Κ甲基三鈒丁基醚萃取3次。M If)的館合 碳酸氫納溶液及睢和锂水清洗有櫬相*之後Μ無水硫酸 納進行乾煉，在減壓的情況下過逋並濃猫。殘餘物Μ逆 相高效曆液態管柱色層層析法（RP-18, 5 a, 50:50-100:0乙臃-水60分鐘）加以婢化* Μ得純的 32(S卜二氫-40-氧-(2-甲氧基）乙基-拉巴徽素 和 32 (R)-二氫 -40-氧 -(2-甲氧基）乙基-拉巴 -31- 本紙張尺度適用中國國家棉準（CNS)A4規格（210 x297公a ) ：---'·----------裝-----：---"—訂 --------線 {請先閱讀背面之注意事項再^^<本頁) 經濟部智慧財產局貝工消费合作社印製 410226 A7 B7 五、發明說明（ 徽素之副產物 3 2 ( S ) 氫-40-氧-(2- 甲氧基）乙基 巴徽素：1氫核磁共振光譜（三氯氘化碳，C D C 1 3 ) 2 : 1之r 〇 t a ni e r s混合物，括號中的化學位移係指最微 量之 I· 〇 t amer δ 0 · 7 7 (1 氣， dd ， S - 3 8ax ) < 1.67 ( 6 氫 2 ‘ 50 (1 氫 -25) ， 3 S ， 碳 17-甲基和碳 29-甲基 ）， ，氫-31) ， 3 _1 (1 氫， ® ，氫 .1 2 ( 2 氫 氫 -39和氫 -40) 請 先· 閱 讀 背 面 之 注 意 事 項 再 I 1 ΐ裝 頁 3.14(3.15) (3 氫，s ，甲氧基），3.28(1 氫， m ，氫-32) ， 3.36 (3 · 34) (3 氳，s ，甲氧基） ， 3.39 (3·38) (3 氫， s ，甲氧基 ）， 3_48 (3.46) (3 氫 * s ，甲氧基），3.55 和 3·75 (4 氫，2m， 0 CH 2 CH 2 0) ， 3.84(1 氫，m， 氫-14) ， 4 12 (4.16) ( 1 氫， d ，氫-28)， 4.73) 訂 線 經濟部智慧財產局貝工消費合作社印製 MS (FAB, Lil matrix) ι/ζ 980 ([Η + Li]+) 基 實例 5 : (32S)-二氫 -40-氧 -(2-羥基）乙 - 拉巴黴素 ((32S)-dihydro-40-0-(2-hydroxy)ethyl-rapamycin)

(R 甲基； 具化學式II之物質其中 -32- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱） 410226 A7 32S) B7 五、發明說明（） 3 = ，C Η 2 C Η 2 0 Η 且 R 4 =甲基： X:羥基； 氧） 使用適當之起始物並依照實例 4中所述的製造方 法，可得標題中的化合物。 氫-40-氧-(2- 羥基）乙基-拉巴 徽素*· 1氫核磁共振光譜（三氯氘化碳， CDC〗3 ) 1 · 7 : 1之温合物•括號中的化學位移係指最 微量之 δ 〇_76 (1 氫 * dd * 氫-38ax)， 2.5(1 氫，m，氫-31). 3.10(1 氫， B，氫 -39) ， 3_13 (3 . 14) (3 氣，s ，碳 16-甲氧基） ，3.20 (1 氫，b ，氫-40} ， 3.28 (1 fi » m ， Μ - 3 2 ) - 3 . 3 6 ( 3 38) (3 氫，s ，碳 2 7 -甲氧基 )，3.45 (3.43> (3.41) (3 氫，s ，碳 39-甲氧 基），3.50 (1 氫，d ，氳-27) ， 3.58 和 3.7 (4 氫，m ， 0CH 2 CH 2 〇) ， 4.12 (4.16) (1 氫， d，氫-28) ， 5.06 (1 氫， η ，氮-34)， 5 . 60 (1氫，dd ，氫-22) ， 5.99 (1 氫，d ，氫 -19) MS (FAB, Lil matrix) m/z 966 ([h + Li]+)( 栢對強度100) -33*· 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 χ 297公* ) --^-----------震--------訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再〃 4本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 410226 _B7_ 五、發明說明（〉 實例 6 : 16-五 -2炔氧基 -32-去氧-拉巴 徽素（Ri二五-2-炔基；R2 =具化學式 Π之 物質其中r3 =氫[14 =甲基：X=氫；Y=氧） 使用適當之起始物並依照實例1,2或3中所述的 製造方法，可得標題中的化合物。 1氫核磁共振光譜（三氡氘化碳， CDC1 3 ) 5 0 . 70 (1 氫， dd ，氫 -38a X) 9 1.2 3 i :3 氫 i t s CH 3 CH Z CCCH 2 0) > 2 . 2 1 (2 氫 t d dq * CH 3 CH z CCCH 2 〇) f 2 . 78 (1 氫， m » 氫 -2 5} 1 2 . 94 (1氫， 1H 1 氫 -39) » 3.31 i [3 氫 9 s » 碳 27 -甲氧基） 9 3.4 2 (3 氫 1 s ♦ 碳 39- 甲 氧 基 )· 3 .82 (1 氫， d · 氫 -27)- i . 78 (1 氫 * ddd » CH 3 CH 2 CCCH 2 〇) 9 4 . 02 (1 氪， ddd 9 CH 3 CH 2 CCCH 2 0) t 4 • 12 (1 氫 d * 氫 -28) » 4.79 (1 氫， m t 氫 -34) ( j . 20 (1 氫 ， d "s - 3 0 ) t 5.28 (1 氫 t b: road d i m - 2) 1 5 . 50 (1氫- dd ，氫 -2 2) t 5 .97 a 氫 • d 1 氫 -18) * 6.14 (1 氫， dd > m 21) * 6 .3 0 (1 氬 1 dd ， 氫 - 20) p 6 ..38 ( 1氫， dd 1 氫 - 19) -34- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） -------------襄|-----訂---------線 <靖先"讀背面之注意事項再."本頁) _κ、 ---- ------ 經濟部智慧財產局員工消费合作社印製 A7 B7 410226 五、發明說明（ MS {FAB, Lil matrix) βι/ζ 958 ([H + Li] + ) ( 相對強度100) 具化學式I的物質表現出藥學活性 作藥學組成。 因此其可用 特別是，如下列體內或體外的測試結果顯示I具化 學式I的物質有免疫抑制及抵抗细胞增生的活性： 請 先 閲· 讀 背 Sb 之 注 意 事 項 f 裝 1 . 混合淋巴细胞反應 （MLR) 混合淋巴细胞反應最初乃是為了使移殖姐镟能互相 連接而發展出的一項技術、以評怙可能的器官捐贈者與 接受者之間組锄的相容性，亦是目前所建立之體外免疫 反應系統中最完備的糸统之一。一棰鼠科動物之混合淋 巴细胞模型系統，如T. Meo在“免疫方法”一書L. Lefkovits and B . Pernis, Eds., Acade頂ic Press, N.Y. pp. 2 2 7 - 2 3 9 ( 1 9 7 9 )中所描述的· 被用來示範具 化學式I的物質其免疫抑制效果。由Balb/c老鼠（ 雌鼠* 8至10通大）«內所得之胰臓细胞（2 X 10 5 /well)與由CBA老鼠（雌鼠， 8至10週大） 體内所得經 0.5 X 10 β ( 2 0 0 0 rads)劑量之放射線 照射過或經抗癌藥 C (mitomycin C)處理過之胰臟细 -35- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 訂 經濟部智慧財產局員工消费合作社印製 A7 410226 B7__ 五、發明說明（） (請先W讀背面之注意事項再本頁) 胞在微計數盤中一起培育5天。經放射線照射過的细 胞會對Balb/c老鼠胰臟细胞引發增生的反應，此反應 可藉由能被併入DNA之標示前驅物而加以測定。由於 引起剌激的细胞已經經輻射照射（或經抗癌藥 c (mitomycin C)處理），因此不#和Balb/c老鼠陕臟 细胞一樣有增生的反應但能保有其本身之抗原力。在各 稀釋濃度下測定具化學式 I的物宵抑制Balb/c老鼠 胰臟细胞增生的效果並計算達到 50¾ 抑制時之濃度 (1C 5 〇 )。將測試樣品的抑制能力與拉巴徽素相較 並Μ柜對之1C 5 〇來表不（例如*測試樣品之IC s 〇 /拉巴徽素之IC50)。 结果顯示實例1和2中 的物質其相對之ic so分別是〇·3和0.08 。 2. 白色球間素-6 (IL-6)所引發之细胞增生（U-6 PR0L) 絰濟部智慈財產局員工消t合作社印製 Μ須要白色球間素 -6 (IL-6)之老鼠融合细胞株 •來評估化學式I的物質*其干援與生長因子相關之细 胞內訊息傳璉機轉的能力。反應在具有 96孔洞之微計 數盤中進行。以5 Q G 0细胞/孔洞之密度在沒有血清的 狀況下培育细胞（如 M,H_ Schreier and R. less in IfflBiunological Methods, I. lefkovits and B.

Pernis, Eds., Acaderaic Press 1981, Vol. II, pp. 2 6 3- 27 5 中所逑），每《升添加lngJK基因重姐褽造 -36- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） A7 B7 五 經濟部智慧財產局員Η消f合作社印製 、發明說明（ 出的白色球間素-6 (IL-6)。在有或沒有測試物存在下 ’經 66 小時之培育後，Μ每一孔洞1 w Ci (3-H)-胸苷之劑量追蹤檷示细胞6小時，之後收取细胞Μ液態 營光閃爍法計數。被併入DNA之（3-Η)-胸苷随著细胞 數目的增加而增加因此可作為測定细胞增生的方法之一 。將測試物濃度作一糸列的稀釋Μ得到達到抑制细胞增 生 5 0¾時之濃度（I C s 〇 ) °將測試樣品的抑制能力 與拉巴徽素相較並Μ相對之 1C 5 0來表示（例如，測 試樣品之ICS。 /拉巴徽素之ICS0)。结果顯示 實例1和2中的物質其相對之1C 5 0分別是0,2和 0.09 〇 3. Macrophilin 结合分析（HBA) 拉巴黴素以及和其结構類似之免疫抑制物， FK- 50 6 · 已知在體外均會與 ttacrophilin-12 (又名 FK- 5 0 6之结合蛋白或稱FKBP-12 )結合，此種结合被 認為與這類物質之免疫抑制活性相關。如競爭性結合反 應之结果所示* 化學式 I 之物質也畲與 aacrophilin-12作緊密的结合。在此分析中，將連結 在牛血清蛋白之FK-5D6塗佈在微ft計數盤上。在有或 無測試物質存在下鑲已經生物素（b i 〇 U η)檷示之基因 重組人類 aacrophilin-12 ( biotin-MAP )與被固定 之 FK-506 结合。濟洗後（移去非特異性结合之 -37- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 丨— 1----------裝--------訂· - - (請先閲讀背面之注意事項再本頁) 410226 A7 經濟部智慧財產局員工消费合作社印製 __ B7 _五、發明說明（） niacrophilin ) 在清洗和添加對 ~ 硝基85酸苯 (p-n i t rophenyl phosphate)作為受質後， 藉與一 streptavidin -驗性磷酸酶共軛物 (s t r e p t a v i d i η - a 1 k a 1 i n e p h 〇 s p h a t a s e c ο n j u g a t e )共 同培育M評估經結合的b i o t - M A P童。所得结果M波長 405 Ι1Π1之吸光值表示。測試物與Mot-MAP结合後會 造成biot-MAP與固定之FK-506的結合量降低，因此 在405 na之吸光值也因而降低。將測試物濃度作一糸 列的稀釋Μ得到達到抑制 b i 〇 t - M A Ρ與固定之F Κ - 5 0 S 的结合量 50¾時之濃度 （1C 5 〇 )。 以自由態 FK-506之IC s 〇為禰準，將測試樣品的抑制能力與 其相較，並以相對之IC so來表示（例如，測試樣品 之1C 5 〇 /自由態 FK-506之 1C 5 0 )。 结果顯 示實例 1 ， 2和 5中的物質其相對之IC5〇分別 是 1， 2.8 和 2.5。 4 . 區域性移殖與宿主之排斥反應（GvH) 具化學式 I 之物質，其在體內的效用可M —如 Ford et al., TRANSPLANTATION 1 0 ( 1 9 7 0 ) 2 58 中所 述之動物棋型系統加以評估° 將由 6 遇大 Wistar/Furth (WF)雌鼠所得之胰臓细胞（1 X 1〇7 ) ，在第 0 天由左後脚經皮下注射入重約 l〇〇g 之 -38- ---1----------裝---------I---訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再f本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 410226 A7 經濟部智慧財產局8工消費合作社印製 B7 _五、發明說明（） (F344 XWF)F1雌鼠體内。連缅注射4天並在第7天 時取出其膝後窩淋巴结並稱重。將兩者淋巴結重量上的 差異作為評估此反應之參數。 5. 老鼠腎臟移殖之反應 將由 DA(RTla)或 Brown-Norway (BlO(RTln)品 種之老鼠體内所得的一個腎臟，以尾對尾的血管吻和術 ，移殖到已經腎切除手術之老鼠（Lewis RT1U的單側 (左側）腎血管上。輸尿管血管吻和術亦採尾對尾的方 式。在移殖當日即開始治療並連讀治療14天。移殖後 的第7天再將對側的腎切除，使接受移殖之老鼠僅依 賴移殖的一個腎。將接受移殖的存活情形作為移殖功能 的一個考量參數。 6. 在老鼠趙内實驗性的引發過敏性腦脊薄炎（EAE) 具化學式I之物質，其對在老鼠通内引發的實驗 性過敏性腦脊髄炎 （EAE)的效用，可Μ如Levine & Wenk, AHER J PATH 47 (1965) 61; McFarlin et al., J. IMMUNOL 113 (1974) 712; Borel, TRANSPLANT. & CLIN. IMMUNOL 13 ( 1981) 3 .中所述的方法加M測量 。實驗性過敏性腦脊髓炎（EAE)是廣為大眾接受的一 -39- -------------- 裝!'----訂 ---------線 (請先閱讀背面之注意事項再本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 410226 A7 經濟部暫慧財產局貝工消費合作社印製 B7____五、發明說明（） 種多重硬化的模型。在W i s t a r的雄鼠後腳中注射由牛 脊越液及完整的Freund氐佐劑所組成的混合物。通常 在16天内便會發展出疾病的症兆（尾部和雙腳麻痺） 。計錄受感染的動物數目Μ及發病的時間。 7. 由Freund氏佐劑所引發的關節炎（Freund ’ s Adjuvant Arthritis) 對抗在老鼠體内所引發的實驗性關節炎的效用，可 K 如 Winter & Nuss, ARTHRITIS & RHEUMATISM 9 ( 1 9 6 6) 3 94 ; Biliiighaffl & Davies, HANDBOOK 0 F EXPERIMENTAL PHARMACOL (Vane & Ferreira Eds, Springer-Ver1 ag, Berlin) 5 0 / 1 1 ( 1 9 7 9 ) 1 0 8 - 1 4 4. 中所述的方法加M評估。在 OFA和 Wistar老鼠（雌 或雄鼠*重約150 g )尾巴的基部或後腳注人0.1 ml 內含Q.6 tag經親液化及熱殺菌處理的包皮垢分枝桿菌 (Mycobacteriua saegnatis)。在闞節炎的發展模型中 *在注入佐劑（1-18天）的當天便立即展開治療；在 已建立之關節炎的横型中，治療則在已有很明顯的發炎 狀況時（第14-20天）才開始治療，通常是第 14 天。在實驗終了時以微彎腳規（》icro-caliper)測量 Μ節腫脹的情形。與控制組相較，能減輕腫脹（一鈒或 二級）50¾之口服劑最ing/Kg為其EDS 〇 。 -40- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐) ~ ；---^-'---------裝------J----訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再參\本頁) A7 410226 一 __B7___ 五、發明說明（） 8. 抗癌性及多重抗藥性（MDR) 具化學式I之物質，其抗癌的活性Μ及其藉由滅 輕多重抗藥活性來提高抗癌槩劑作用的效果顯示如下， 例如，藉施打一抗癌藥劑*如秋水仙素c ο 1 c h i c i n e或 etoposide *在有或無須測試的貝化學式I之物質存 在下*或是儘施打具化學式I之物質，到具有多重抗 槩活性的细胞及對藥敏感的细胞或具有多重抗藥活性的 動钧及有對藥敏感的睡瘤或感染動物體内。此種體外測 試乃在任何一棰具有適當抗藥性的细胞株及控制組细胞 株（母细胞）中進行· 细胞株的獲得如Lingetal., J, Cell. Physiol. 83， 103-116 (1974) and

Bech-Hansen et a 1. , J. Cell. Physiol. 88 , 2 3 - 3 2 (1376)中所描述的。所選定的特別细胞株C HR (亞株 為C5S3.2 )具有多重抗槩性（例如，抗秋水仙素）， 其母株則對 AUX B1非常敏感（亞株為 AB1 S11 )。 在體内之抗癌性及多重抗槩性的活性顯示如下·例如， 在老鼠體内注射具有多重抗槩性及對藥敏感之癌细胞。 艾爾利克腹水腫瘤（EA)亞株對DR ， VC ， AM ， ET ， TE或CC具有抗性，此腫梅细胞的生成乃藉著 如 Slater e t a 1., J. Clin. Invest, 70, 1131 (1982)中所述之方法，連鑛性的將艾爾利克腹水腫垴 -4 1- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ---；----------裝---------訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再垆t本頁) 經濟部智楚財產局具工消t合作社印製 410226 A7 經濟部智慧財產局貝工消t合作社印製 B7____五、發明說明（） 细胞轉移至BALB/C老鼠賭内。同樣的结果也可將具化 學式I之物質用於類似的設計横型中而獲得，例如， 體外，或使用經感染的動物作為測試動物，所用感染包 括具多重抗槩性及對藥敏感之病毒株，對抗生素（如* 盤尼西林）有抗性的及敏感性的细菌菌株，對抗撖菌病 有抗性的及敏感性的激菌菌株K及對藥有抗性之原蟲’ 如，瘧原蟲，自然存在之鐮狀瘧原蟲亞株，表現出所須 之化學療效，對抗瘧疾藥的抗性。 9. 促使巨噬细胞無效的因子（Hip}和與（Mip)類似 之因子的抑制效果 此外，具化學式I之物質會與許多種類，结構上 類似 macrophilin ， 能促使巨嗤细胞無效的因子 (m a c r 〇 p h Ei g e i n f e c t i v i t y ρ 〇 t e n t i a t 〇 r )和與 M i p 類 似之因子结合並抑制其活性。促使巨噬细胞無效的因子 (Hip) 和與Mip類似之因子乃是由許多病原菌所製造 的有致病力的因子，包括那些披衣菌屬 （Chlamidia) ，例如，砂眼披衣菌（Chlamidia trachosiatis);奈 瑟菌屬 （Neisseria) ， 例如， 腦膜炎奈瑟菌 (Keisseria meningitidis):和軍團菌屬（.Legionella) ，例如，Legionella pneunophilia ，· Μ 及羼立克次級 (Rickettsiales)目中的寄生菌。這些因子在细胞内感 -4 2 ~ •----_----------裝-------1 1 訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（2】0 X 297公釐） 410226 A7 B7 五、發明說明（ 染中扮演了極重要的角色。化學式I之物質在減低這些 會製造促使巨噬细胞無效的因子 （Mip)和與Mip類似 因子之能力，可藉病原菌在有或無内脂環徽素存在的狀 況下，其在细胞培養中感染细胞的能力來加以證實*例 如，使用如 Lundemose, et al.， Mol. Microbiol. (1993) 7: 777中所描述的方法進行。 10. 慢性的移殖排斥反懕 請 先 閱 讀 背 面 之 注 意 事 項 再 頁 經濟部智慧財產局員工消费合作社印製 雄 DA (RTla) 老鼠的赘臟Μ正位移殖到另一雄 Lewis (RTU)的老鼠體内。共計有24隻動物接受移 殖手術。所有動物自移殖之日起*均Μ 7.5 iiig/Kg/day 劑量的免疫抑制劑 A (cyclosporine A)處理14天.， Μ防止急性的细胞排斥現象。位於對側的努並未切除。 每一實驗組内含6隻老鼠，均Μ相當劑量的化學式I 之物質或安慰劑加Μ處理。在移殖後的第 53至64天 ，接受移殖之動物ίΒ鯛Μ化學式I之物質或安慰劑額外 處理 69至72天。在移殖後的第14天，在接受移殖 動物之腎臟作灌注（將移殖的轚臟與對測的飪臓相比較 )Μ核磁共振影像（KRI )來評估移殖的憤形。在移殖 後的第 53至64天及實驗終止時，均須再里複此一測 量。之後將動物解剖。测定移殖排斥·之參考參數如 MRI 數值，移殖腎臓之相對灌注速率Κ及移殖哿臓的细胞排 4 3 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公茇） 410226 沿 B7 經濟部智慧財產局員工消费合作社印製 五、發明說明（） 斥現像和血管變化在組缃學上的數值並作統計分析。使 用化學式 I 之物質，例如，實例1或2中之物質， 〇 . 5至2 . 5 mg/ K g在此種老鼠腎臟移殖模型糸統能減輕 所有上述之移殖排斥現像數值。 11 · 血管成形術 在第 0天時實施如 Powell et al . (1983)所述 之氣球導管插入術。在異氟烷寂醉下，將一個Fogarty 2F導管藉由外端套管及氣脹器（滯留體積約為10 w 1 )插入左側頸動脈中。將吹脹的氣球沿著頸動脈的長度 往回拉三次，最後兩次並輕微扭轉Μ達到將血管内皮细 胞完全除去的目的。之後將導管移除，在動脈外端綁上 结紮線Κ防止溁血並譲動物休養康復。 以2姐12隻RoRo老鼠（400 g ，約24週大 )作研究：一為控制組另一實驗組則須接受受测物試驗 。在所有老鼠的處理进程*實驗步驟及分析上均採随機 取樣。 在實施氣球手術的前 3 (-3天）天開始直到實 驗结束亦即氣球手術後第14天（+14天）為止*將 受測物以口服方式注人動物骽内。將老鼠養在個別的灌 -44* <請先閱讀背面之注意事項再f本頁) 本紙張尺度適用令國國家標準（CNS)A4規格（210x297公釐) 經濟部智慧財產局員工消费合作社印製 410226 A7 _ B7_____五、發明說明（） 子裡並允許其自由進食及飲水。將老鼠Μ異氟烷麻醉* 將一灌注導管插入左心室並固定在主動脈弓上’並將一 抽吸套管安於右心室上。在 150 mniHg的壓力下實施灌 注，開始的1分鐘灌注液為G.1M之磷酸婊衝生理食鹽 水溶液（PBS, PH 7.4)，陲後的15分鐘則是含有 2.5¾戊二醛的磷酸媛衝溶液（PH 7.4)。在套管尖端 之灌注壓為 150 araHg (在動脈其灌注壓則約為100 KfflHg ，此壓力之決定乃於前置實驗中將套管接在壓力計 上所測得之值）。之後將頸動脈切出，與周圍組嫌分離 後於 4 t：下作隔夜浸泡，浸泡液為内含 Ί% 蔗耱之 0 . 1Μ 臭砷基酸鹽媛衝液（cacodylate buffer )。隔 天將頸動脈在室溫下於内含0.055；高錳酸鉀之0.1M臭 砷基酸盥緩衝液中搖動培育1小時。之後於圼梯狀濃度 的酒精中將姐撖脫水； 75¾ 之酒精 10分鐘2次， 855：之酒精10分鐘2次，95¾之酒精10分鐘3次 及100%之酒精i〇分鐘3次。將脫水後的頸動脈依製 造商建議的程序包埋於 Technovit 7100中。由於已知 氧氣會抑制物體之硬化作用，因此將其置於除濕箱及氣 氣體中隔夜使包埋的溶液有充分的時間進行聚合反應。 Μ硬金屬刀片於旋轉切片機上將每一頸動脈之中間 部位切下約 1 至 α 厚的切片並Μ基姆沙（ Giense )染色2分鐮。Κ此製備每一頸動脈約5片 -4 5 _ ^紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210x 297公釐) ~~ (請先閱讀背面之注意事項再本頁) 410226 A7 經濟部智慧財產局員工消费合作社印製 B7_五、發明說明（） 的切片，分別為血管中層，新血管内膜和血管腔，Μ影 像分析系统（HCID，Toronto, Canada )作組孅形態 上的評估。在此分析結果中，化學式I之物質*例 如，實例1或2中之物質，每天 0.5至2.5 ng/Kg 的劑量能抑制肌肉内膜细胞增生的現像。 化學式I之物質在偵測是否有與 macropfiilin 結合物存在時或其量上也非常有效，例如，在分析或有 篩選目的之競爭性分析中。因此*在另一具體化實例中 ，本發明所提供化學式I之物質可作為一種篩選工 具來決定測試溶液中是否有會與 nacrophilin结合物 質的存在，例如，血液，血清，或須篩選之測試液。較 好是* 將化學式I之物質固定在微量計数盤上並使 其在有或無測試溶液存在下與macrophilin-12 (FKBP-12)結合。或者，將FKBP-12固定在微量計数 盤上並使其在有或無測試溶液存在下與已經標示之化 學式I之物質结合，例如，螢光，酵素或放射性物質 標示，如，其中R1含有檷示基團之化學式I之物 質。將計數盤加K沖洗後測量结合的橘示物含量。在测 試液中與nacrophilin 结合物質之量的與结合之標示 物最成反比。Μ已知濃度會與aacrophilin结合的物 質作出一條结合曲線，來作定量分析。 -46- (請先閱讀背面之注意事項再本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 經濟部智慧財產局員工消费合作社印製 410226 Δ7 _____B7 五、發明說明（） 化學式I之物質在下列情況下非常有用： a) 冶療和預防急性或慢性器官或組織之移殖排斥 ，亦即，對接受移殖如心臟，肺臟|心-肺移殖，肝 騰，腎臟，胰臟，皮庙或角膜移殖者之治療。它們也是 預防區域性移殖與宿主之排斥反應疾病之指標，例如在 费髓移殖之後。 b) 治療和預防因移殖引起的血管病變，例如*動 脈硬化。 c) 治療和預防因平滑肌细胞之增生和遷移而導致 的血管增厚，血管姐塞，阻塞性冠狀動脈血管硬化，再 狭窄。 d) 治療和預防自體免疫疾病及發炎的情況，特別 是發炎狀況之病原包括一種自醱兔疫組成如關節炎例如 類風濕性關節炎，進行性慢性關節炎（arthritis chronic pr ogr edient e )和變形性關節炎（ar t hr i t i s deforeans))及風濕性疾病。可使用具化學式I之物 質的某些特定之自賭免疫疾病包括*血液的自體免疫異 常（包括例如*溶血性貧血，再生成形不全的貧血•純 粹紅血球貧血及自發性血小板減少性貧血 （idiopathic thrombocytopenia )) ·系统性紅斑性狼瘡，多软骨症 ，硬皮症*維爾氐向芽腫病（W e g e n e r g r a n u 1 a m a t 〇 s i s ) ，皮肌炎·慢性活性肝炎*重症肌無力 （ayasthenia -4 7 _ 本紙張尺度適用中因國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） '--r----------裝--------訂·!------線 (請先閱讀背面之注意事項再Γ〈本頁) 經濟部智慧財產局貝工消费合作杜印製 410226 a7 ____B7五、發明說明（) gravis)，牛皮癣，史蒂夫強森式症候群（Steve-Johnson s y n d I* ο π e )，自發性斯普魯（i d i 〇 p a t h i c s p r u e )，自體 免疫發炎性腸炎（包括例如，潰瘍性结腸炎及克隆式病（ Crohn's disease ))內分泌性眼病，革瑞渥Η氏病 (Graves disea sarcoidosis)，多重硬化症，初级騰汁 性硬變 （p r i m a ry b i 11 i a r y c i r r h 〇 s i s ) * 青年型糖尿 病（糖尿病型I) •葡萄膜炎（前葉及後葉）*乾 性角膜结膜炎和春季结膜炎，肺間質孅維樣變性，牛皮 癬性醑節炎>血管性腎炎（有或無蹵病症狀，例如，包 括自發性蹵症候群或最少聚變化）Μ及青年型皮膚炎。 e >治療和預防氣喘 。 f) 治療多重抗槩性（MDR)。化學式I之物質能 抑制P-醣蛋白（PgP)的作用，此為與多重抗槩性有 關之胞膜上的運送傳遞分子。多重抗藥性對癌症及愛滋 患者是一個很嚴重的問題，由於P-醣蛋白（PgP )會 將藥效運送出细胞外使得傳統的化學療法對這類患者已 無法發生作用。因此化學式I之物質能提高在治療和 控制多重抗藥性•例如多重抗藥性癌或多重抗藥性愛滋 病*時所用化學療法槩劑之藥效。 g) 治療细胞增生之異常，例如，腥梅*超增生之皮 It異常及與其類似的病症。 h) 治療撖菌感染。 -*48* (請先閱讀背面之注意事項再本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210x297公釐） 410226 A7 B7 經濟部智蕙財產局貝工消费合作社印製 發明說明（） i) 治療及預防發炎，特別是加強類固酵之作用。 j) 治療及預防感染，特別是會製造促使巨噬细胞無 效的因子（Hip)和與Mip類似因子之能力的病原菌之 感染。 當然上述之劑量可視須要憤形而有所改變，例如， 視所須治療的情況（例如疾病的彤式或抗藥性的性質） •所要達到的效果及_品使用方式而定。一般來說，無 論K何種口眼方式均可得令人滿意的效果，使用劑量由 0·05至5或高達10 mg/Kg/day ，亦即，每次服用由 〇 . 1至 2或高達7 , 5ag/llg/day ， 或每天 2至4次 之個別劑量，或不經消化道的服用方式 > 例如，藉由靜 脈滴管或灌注之靜脈注射，使甩劑量由 0.01至2.5 或高達5 mg/Kg/day * 例如，每次眼用由 0.05或 0.1至1.0 ng/Kg/day 。 適合病患服用之每日劑虽一 般而言在口服500 Bg左右，亦即口服在5至100 mg *或靜脈注射在0.5至125或高達250 mg之範画內 ，亦即靜脈注射在2.5至50 ag範圍》 或者更適宜的是，先經由血液含量決定出最逋合患 者之劑量，亦即，藉由放射性免疫測定法RIA來決定 。因此可調整患者之劑董经由放射性免疫測定使患者血 液内含最保持在 50 或高於 150 至500或1000 -49- 本紙張尺度適用中國國家棵準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） ---*---------- » --- ----訂--------- (請先閱讀背面之注意事項再f本頁) 經濟部智慧財產局貝工消费合作社印製 410226 at _ B7 五、發明說明（） ng/ral的範園’亦卽*類似現行環孢g (Cicl〇sp〇rin) 免疫抑制療法所用之劑最。 化學式1之物霣可單獨使用作為活性成分或與 其它藥劑合併使用。例如，免疫抑制反應的應用，如治 療及預防宿主移植疾病，移植排斥，或自體免疫疾病， 具化學式I之物質可與環孢徽素A (Cylosporin A), 環孢徽素 G (Cylosporin G) ， FK-506 ，及其它類似 物；皮腎上腺類固酵；環磷醢胺；硫唑嘿呤 (azathioprine) ，•胺基甲基酸（methotrexate); brequinar ! leflunoside ,* nizoribine ; laycophenolic acid ; lycophenolate mof et i 1 ;免疫 抑制單株抗體，如，淋巴细胞受髖之簞株抗體，例如， MHC ， CD2 ， CD3 · CD4 ， CD7 ， CD25 ， CTLA4 * B7 ， CD45 ，或CB58或它們的剌激物；或其它免 疫抑制化合物。對抗發炎之應用而言，化學式I之物質 可與抗發炎之藥物合併使用，如皮腎上腺類固醇。對抗 感染之應用而言*化學式I之物質可與其它可抗感染之 藥物合併使用，如抗病毒之藥劑或抗生素。 化學式I之物質可K任何傳統途徑施用，特別是經 消化道的形式*如口服，例如可以喝的溶液•蕖綻或膠 嚢形式；或是不經消化道的形式*例如可注射的溶液或 -50- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱） Μ--'------I--裝 Γ---·----訂---------線 (請先閱讀背面之注意事項再本頁) 41〇226 A7 B7 i、發明說明（） 懸浮液。適合口眼之劑量簞位含，由 1至50 mg之化 學式 I之物質，通常為i至lOfflg 。含有化學式I 之物質的藥學組成可Μ傳統的技術製造，亦即’从類似 如ΕΡΑ 0 041 795專利案中所述含有拉巴徽素之藥學組 成的製備方法加Μ製備。 最好是藥學組成中含有化學式I之物質及一載體溶 液，此載體溶液含一親水性相*及一親油性相和一表面 劑。可Μ乳化液或未塘縮前之徹乳化液的形式存在。此 種乳化疲或未濃縮前之撤乳化液階露於UK 2 2 7 8 7 8 0 A 專利案中。較好是，親油栢重為載體溶液的 10至85¾ ;表面劑重為載體溶液的 5至80X ;親水相重為載體 溶液的10至5G5；。化學式I之物質的重較好是瘅重 的 2至 15% 。 -------------裝-----訂----I--丨線 (請先：背面之注意事項再A ^本頁)_ 微 之 前 縮 濃 未 由含 i 內 有液 含溶 中體 成載 組此 學， 蕖液 之溶 合19 通載 別之 特成 僩組 1 液 化 乳 經濟部智慧財產局員工消费合作社印製

物 產 之 後 應 反 烷 乙 氧 環 與 油 麻 篦 1 X 酸 油。 或油 酸菜 油蔬 亞的 含化 包基 要烷 主化 物氧 產聚 化 I 酯或 轉酯 之油 油甘 甘酸 與三 油及 菜雙 蒱， I 單 酵 乙 丙 酵 和 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）

Claims (1)

1. 410226 A8B8C8D8 申請專利範® 公告衣i 一種具化學式I之化合物

   先 Μ 讀 背 面 之 ;主 意 事 項 再I Γ 本ι· 頁 l· 其中 R t是C t _4烷基或C3 -s炔基 R2是化學式II之基團： I 1 訂 I 1

   經濟部智慧財產局員工消费合作社印製 化學式11 其中 R 3乃選自氫原子’羥基c C i ^ 4院基； 烷基或C 烷氧基 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 410226 A8B8C8D8 申請專利範® 公告衣i 一種具化學式I之化合物

   先 Μ 讀 背 面 之 ;主 意 事 項 再I Γ 本ι· 頁 l· 其中 R t是C t _4烷基或C3 -s炔基 R2是化學式II之基團： I 1 訂 I 1

   經濟部智慧財產局員工消费合作社印製 化學式11 其中 R 3乃選自氫原子’羥基c C i ^ 4院基； 烷基或C 烷氧基 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） J 4 A8B8C8D8 力、申請專利範圍 U 是甲基； Ϋ是氣原子； .X是羥基或置原子； 當X為羥基時， 非為h _4焼基。 2. 根據申請專利範圍第1項之化合物’其係為16*五 -2 -炔氧基-3 2 ( S )-二氮-拉巴徽素或1 6 _五_ 2 -炔 氧基-32(S)-二氫-4G-縝-(2·羥基乙基）_拉巴徽 素。 3. 根據申請專利範圃第1項之化合物’其係為32-去氧-拉巴徽素或16-五-2-炔氧基-32-去氣…拉 巴徽素。 4. 一種用於預防或治療急性或慢性移植排斥、血管 阻塞、自體兔疫疾病、發炎情況及氣嚙之B藥姐成物， 其包含作為活性成分之如申請專利範圍第1至3項中任一 項之化合物· K及S藥上可接受的稀釋劑或載蹬。 5. 如申請專利範圍第4項之B槩組成物，其偽與含有 其它免疫抑制劑或免疫調節藥的S藥組成物一同使用。 本紙張尺度適用中0國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局貝工消费合作社印製 ---訂- --------"5^! ---------------------1 I