PT1294715E - Compostos do sal de ditosilato de quinazolina - Google Patents

Description

ΡΕ1294715 1 DESCRIÇÃO "COMPOSTOS DO SAL DE DITOSILATO DE QUINAZOLINA"

ÂMBITO DO INVENTO O presente invento refere-se a compostos de quinazolina, aos seus sais de ditosilato de anidrato e de hidrato, bem como à utilização e preparação dos mesmos. Em particular, o invento refere-se a sais de ditosilato de 4-quinazolinoaminas. Estes compostos são inibidores de várias cinases de tirosina de proteína (CTP's) da família erbB e consequentemente são úteis para o tratamento de doenças mediadas pela actividade aberrante de tais cinases.

ANTECEDENTES DA TÉCNICA ANTERIOR AO INVENTO

As CTP's catalisam a fosforilação dos resíduos específicos de tirosil em várias proteínas envolvidas na regulação do crescimento e diferenciação celular (A.F. Wilks, "Progress in Growth Factor Research", 1990, 2, 97-111; S.A. Courtneidge, Dev. Supp.I, 1993, 57-64; J.A. Cooper, Semin. Cell Biol., 1994, 5(6), 377-387; R.F. Paulson, Semin. Immunol., 1995, 7(4), 267-277; A.C. Chan, Curr. Opin. Immunol., 1996, 8(3), 394-401). A activação inapropriada e descontrolada de muitas CTP's, i.e. actividade aberrante da CTP, por exemplo por sobre-expressão ou mutação, mostrou resultar em crescimento celular descontrolado. 2 PE1294715 A actividade aberrante da cinase de tirosina de proteína (CTP) tem estado envolvida numa variedade de doenças, incluindo psoriase, artrite reumatóide, bronquite, bem como cancro. O desenvolvimento de tratamentos eficazes para tais doenças tem sido um desafio constante e evolutivo no campo médico. A família erbB das CTP's, que inclui c-erbB-2, EGFr e erbB-4, é um qrupo das CTP's que atraiu interesse como alvo terapêutico. Normalmente, de interesse especial é a função das CTP's da família erbB nas doenças hiperproliferativas, particularmente nas malignidades humanas. A actividade elevada de EGFr tem sido associada, por exemplo, aos cancros de células não-pequenas do pulmão, vesícula, cérebro e pescoço. Por outro lado, a actividade crescente da c-erbB-2 foi associada aos cancros da mama, dos ovários, gástrico e pancreático. Consequentemente, a inibição das CTP's da família erbB deve proporcionar um tratamento de doenças caracterizadas por actividade aberrante da CTP da família erbB. 0 papel biológico das CTP's da família erbB e o seu envolvimento em várias doenças são analisados, por exemplo, na patente Norte Americana 5.773.476; no Pedido de Patente Internacional WO 99/35146; M.C. Hung et al., Seminários de Oncologia, 26:4, Suppl. 12 (Agosto) 1999, 51-59; Ullrich et al, Cell, 61:203-212, 20 de Abril de 1990; Modjtahedi et al, Int'I. J. Of Oncology, 13:335-342, 1998; e J.R.Woodburn,

Pharmacol. Ther., 82: 2-3, 241-250, 1999.

O Pedido de Patente Internacional PCT/EP99/00048, depositado em 8 de Janeiro de 1999, e publicado como WO 3 ΡΕ1294715 99/35146 em 15 de Julho de 1999, analisa as CTP's, incluindo as CTP's da família erbB. Este pedido de patente publicado divulga compostos heteroaromáticos bicíclicos, incluindo N-{3-Cloro-4-[(3—fluorobenzil)oxi]-fenil}-6- [5-({[2-(metanosulfonil)etil]amino}metil)-2-fu-ril]-4-quina-zolinamina; (4- (3-Fluoro-benziloxi)-3-cloro-fenil)-(6-(2-((2-metanossulfonil-etilamino)-metil)-tiazol-4-il)quinazo-lin-4-il)-amina; e (4-(3-Fluoro-benziloxi)-3-bromofenil)-(6-(5-((metanossulfonil-etilamino)-metil)-fu-ran-2-il)-quinazolin-4-il)-amina, bem como aos seus sais de cloridrato. Estes compostos mostram actividade de inibição contra as CTP's da família erbB. Contudo, existem problemas com o sal de di-HCl, devido ao facto de absorver quantidades muito elevadas de água às humidades às quais possa estar exposto (por exemplo, 20-75% de humidade relativa (HR)), se utilizado num medicamento. Como resultado, a adequabilidade do composto como medicamento pode ser comprometida, a menos que sejam instituídos procedimentos de manuseamento e armazenagem especiais.

Os presentes inventores identificaram agora novos sais de ditosilato de 4-quinazolinoaminas, os quais são adequados como inibidores da CTP de família erbB. Estes sais de ditosilato possuem propriedades de absorção de humidade superiores às dos sais de di-HCl de 4-quinazolinoaminas divulgados na arte. Por outro lado, os compostos podem ser preparados na forma cristalina e por isso possuem uma maior estabilidade física. Isto é, os sais de ditosilato do presente invento absorvem muito 4 ΡΕ1294715 menores quantidades de água quando expostos a uma ampla gama de humidades e podem ser preparados numa forma cristalina estável fisicamente, aumentando assim a sua adequabilidade como medicamento.

DESCRIÇÃO DO INVENTO

De acordo com um primeiro aspecto do presente invento, proporciona-se um composto de fórmula (I), o 0 .S' m Y-

íí) ou as suas formas de anidrato ou hidrato, em que Ri é Cl ou Br; X é CH, N ou CF; e Het é tiazole ou furano.

De acordo com um segundo aspecto do presente invento, proporciona-se um composto de fórmula (II), 5 PE1294715

ou as suas formas de anidrato ou hidrato.

De acordo com um terceiro aspecto do presente invento, proporciona-se uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de fórmula (I) ou das suas formas de anidrato ou hidrato.

De acordo com um quarto aspecto do presente invento, proporciona-se uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de fórmula (II) ou das suas formas de anidrato ou hidrato.

De acordo com um quinto aspecto do presente invento, proporciona-se um composto de fórmula (I), ou uma sua forma de anidrato ou hidrato, para utilização em terapia.

De acordo com um sexto aspecto do presente invento, proporciona-se a utilização de um composto de 6 PE1294715 fórmula (I), ou das suas formas de anidrato ou hidrato, para a preparação de um medicamento para utilização no tratamento de uma doença caracterizada por actividade aberrante da CTP da família erbB.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS A figura 1 representa o padrão de difracção de raios-X de pó de anidrato de ditosilato de N-{3-Cloro-4-[ (3-fluorobenzil)oxi]fenil}-6-[5-({[2-(metanossulfonil)-etil]amino}metil)-2-furil]-4-quinazolinamina.

Figura 2 representa o padrão de difracção de raios-X de pó de monohidrato de ditosilato de N-{3-Cloro-4-[ (3-fluorobenzil)oxi]fenil}-6-[5-({[2-(metanossulfonil)-etil]amino}metil)-2-furil]-4-quinazolinamina. A Figura 3 (a) e (b) representa as curvas de absorção de água de (a) ditosilato de monohidrato de N-{3-Cloro-4-[(3-fluorobenzil)oxi]fenil}-6-[5-({[2-(metanossulfonil) etil]aminojmetil)-2-furil]-4-quinazolinamina e (b) sal de di-HCl de N-{3-Cloro-4-[(3-fluorobenzil)oxi]fenil}-6-[5-({[2-(metanossulfonil)etil]amino}metil)-2-furil]-4-quinazolinamina. A Figura 4 representa uma comparação das curvas de absorção de água dos sais de di-HCl e de ditosilato de monohidrato de N-{3-Cloro-4-[(3-fluorobenzil)oxi]fenil}-6-[5-({[2-(metanossulfonil)etil]amino}metil)-2-furil]-4-qui- 7 PE1294715 nazolinamina. A Figura 5 representa os padrões de difracção de raios-X de pó para as formas cristalinas anidrato e monohidrato de ditosilato de N-{3-Cloro-4-[(3-fluoroben-zil)oxi]fenil}-6-[5-({[2-(metanossulfonil)etil]amino}-me-til)-2-furil]-4-quinazolinamina antes e depois dos ensaios de estabilidade. 0 gráfico de cima mostra o padrão para as formas cristalinas puras. 0 gráfico do meio mostra os resultados inicial e ao fim de 1 dia para uma pasta com uma actividade de água equivalente a 7% de HR. O gráfico de baixo mostra os resultados inicial e ao fim de 1 dia para uma actividade de água equivalente a 15% de HR.

DESCRIÇÃO DETALHADA DO INVENTO

Como é aqui utilizado, o termo "quantidade eficaz" significa a quantidade de um medicamento ou de um agente farmacêutico que provoca a resposta biológica ou médica de um tecido, sistema, animal ou ser humano que é procurada, por exemplo, por um investigador ou clínico. Além do mais, o termo "quantidade terapeuticamente eficaz" significa qualquer quantidade que, comparada com a de um indivíduo correspondente que não tenha recebido tal quantidade, resulta em melhor tratamento, cura, prevenção, ou melhoria de uma doença, perturbação ou efeito secundário, ou numa diminuição da taxa de avanço de um doença ou perturbação. 0 termo também inclui dentro do seu âmbito quantidades eficazes para aumentar a função fisiológica normal. ΡΕ1294715

Como é aqui utilizado, o termo "alquilo" refere-se a um hidrocarboneto de cadeia linear ou ramificada com um a doze átomos de carbono. Exemplos de "alquilo", como é aqui utilizado, incluem, sem lhes estar limitado, metilo, etilo, isopropilo, n-propilo, n-butilo, n-pentilo, isobutilo, etc.

Entenda-se que os sequinttes modos de realização referem-se a compostos dentro do âmbito da fórmula (I) e fórmula (II), (III) ou (IV), como definido aqui, a menos que especificamente limitado pela definição de cada fórmula ou especificamente limitado de outra forma. Entenda-se também que os modos de realização do presente invento aqui descritos, incluindo utilizações, composições e processos de produção, embora descritos em relação aos compostos de fórmula (I), são aplicáveis aos compostos de fórmulas (II), (III) e (IV).

Como referido anteriormente, os compostos do presente invento incluem compostos de Fórmula (I) , ou as suas formas anidrato ou hidrato, em que Ri é Cl ou Br; X é CH, N ou CF; e Het é furano ou tiazole. A cadeia lateral CH3SO2CH2CH2NHCH2 dos compostos de fórmula (I) pode ser ligada a qualquer posição adequada do grupo Het. Igualmente, o grupo fenilo do núcleo quinazolina pode estar ligado a qualquer posição adequada do grupo Het. 9 ΡΕ1294715

De acordo com um modo de realização, Ri é Cl; X é CH; e Het é furano; de preferência um composto de Fórmula (II) ou as suas formas anidrato ou hidrato. 0 composto de fórmula (II) tem o nome químico de ditosilato de N-{3-Cloro-4-[(3-fluoroben-zil)oxi]fenil}-6-[5-({[2-(metanossulfonil)etil]amino}-me-til)-2-furil]-4-quinazolinamina.

De acordo com um modo de realização, o composto é a forma monohidrato do composto de fórmula II. De acordo com um modo de realização, a forma monohidrato tem um conteúdo de água de 1,5 a 3,0, de preferência 1,7 a 2,5, com maior preferência 1,8 a 2,2 por cento em peso.

De acordo com um outro modo de realização, o composto é a forma anidrato do composto de fórmula (II) .

De acordo com um modo de realização, a forma anidrato tem um conteúdo de água de menos do que 1,5, de preferência menor do que 1,0, com maior preferência menor do que 0,5 por cento em peso.

De acordo com um outro modo de realização, o composto é um composto de fórmula (II) caracterizado por um

padrão de difracção de raios-X de pó, incluindo os picos do Quadro I 10 ΡΕ1294715

Quad ro I Dois Teta (graus)* Espaçamento d (angstroms) CO 18 co 10 l-1 co o 4,9 18,9 4,7 21,0 4,2 22,3 4,0 * Com base na radiação Cu Ka. Ka2 foi removido antes da localização do pico

De acordo um outro modo de realização, o composto é um composto de fórmula (II) caracterizado por um padrão de difracção de raios-x de pó, incluindo os picos do Quadro II.

Quadro II

Dois Teta (graus)* Espaçamento d (angstroms) 6,6 13 8,3 10 11,5 7,7 18,1 4,9 21,1 4,2 * Com base na radiação Cu Ka. Ka2 foi removido antes da localização do pico

De acordo com um modo de realização alternativo, Ri é Cl; X é CH; e Het é tiazole; de preferência, um 11 ΡΕ1294715 composto de fórmula (III) e as suas formas anidrato ou hidrato.

ILoh í*a> 0 composto de fórmula (III) é o ditosilato de (4-(3-Fluoro-benziloxi)-3-clorofenil)-(6-(2-((2-metanossulfo- nil-etilamino) -metil) -tiazol· —4—il)quinazo-lin-41 -il)-amina. De acordo com um outro modo de realização alternativo, Ri é Br; X é CH; e Het é furano; de preferência, um composto de fórmula (IV) ou as suas formas anidrato ou hidrato.

12 PE1294715 0 composto de fórmula (IV) é o ditosilato de (4-(3-Fluoro-benziloxi)-3-bromofenil)-(6-(5-((2-metanossulfo-nil-etilamino)-metil)-furan-2-il)quinazo-lin-4-il)-amina.

Os compostos de fórmula (I), incluindo os compostos de fórmulas (II), (III) e (IV), incluem dentro do seu âmbito formas muito puras de anidrato e de hidrato, bem como misturas das formas de hidrato e anidrato. É também entendido que estes compostos incluem as formas cristalinas ou amorfas e misturas das formas cristalinas e amorfas.

Embora seja possível que, para utilização em terapia, quantidades terapeuticamente eficazes de um composto de fórmula (I), bem como as suas formas de anidrato ou de hidrato, possam ser administradas como químico em bruto, é possível apresentar o ingrediente activo como uma composição farmacêutica.

Assim, o invento proporciona ainda composições farmacêuticas, que incluem quantidades terapeuticametne eficazes de compostos de fórmula (I), ou das suas formas de anidrato ou hidrato, e um ou mais veículos, diluentes, ou excipientes farmacêuticamente aceitáveis; em que a composição é uma formulação adaptada para administração oral na forma de cápsulas, comprimidos, pós ou grânulos.

Os compostos de fórmula (I) ou as suas formas de anidrato ou hidrato, são como descritos anteriormente. 0(s) veículo (s), diluente(s) ou excipiente (s) devem ser 13 ΡΕ1294715 aceitáveis no sentido de serem compatíveis com os outros ingredientes da formulação e de não serem prejudiciais para o respectivo recipiente. Um processo adequado para a preparação de uma formulação farmacêutica inclui a mistura de um composto de fórmula (I), ou das suas formas de anidrato ou hidrato, com um ou mais veículos, diluentes ou excipientes farmacêuticamente aceitáveis.

Os compostos de fórmula (I) ou as suas formas de anidrato ou hidrato, podem ser formulados para administração por qualquer via, e a via apropriada dependerá da doença a tratar, bem como dos indivíduos a tratar. As formulações farmacêuticas adequadas incluem aquelas para administração oral, rectal, nasal, tópica (incluindo bocal, sub-lingual e transdérmica), vaginal ou parentérica (incluindo intramuscular, sub-cutânea, intravenosa e directamente contra o tecido afectado) ou numa forma adequada para administração por inalação ou por insuflação. As formulações podem, quando apropriado, apresentar-se convenientemente sob a forma de unidades de dosagem discretas e podem ser preparadas por qualquer um dos métodos bem conhecidos na arte da farmácia.

As formulações farmacêuticas adaptadas para administração oral podem-se apresentar como unidades discretas, tais como cápsulas ou comprimidos; pós ou grânulos; soluções ou suspensões em líquidos aquosos ou não aquosos; espumas ou "whips" comestíveis; ou emulsões líquidas de óleo-em-água ou emulsões líquidas água-em-óleo. 14 PE1294715

Por exemplo, para administração oral na forma de um comprimido ou cápsula, o componente de ingrediente activo pode ser combinado com um veiculo inerte oral farmacêuticamente aceitável não tóxico tal como etanol, glicerol, água, etc. Os pós são preparados por fragmentação do composto para uma dimensão fina adequada e mistura com um veículo farmacêutico fragmentado da mesma forma, tal como carboidrato comestível, como, por exemplo, amido ou manitol. Os agentes aromatizantes, preservativos, dispersantes e corantes podem também estar presentes.

As cápsulas são feitas por preparação de uma mistura em pó como descrito anteriormente, e enchimento de bainhas de gelatina. Agentes deslizantes e lubrificantes tais como sílica coloidal, talco, estearato de magnésio, estearato de cálcio ou polietileno glicol sólido podem ser adicionados à mistura em pó antes da operação de enchimento. Um agente desintegrante ou solubilizante, tal como agar-agar, carbonato de cálcio ou carbonato de sódio, pode também ser adicionado para melhorar a disponibilidade do medicamento quando a cápsula é ingerida.

Por outro lado, quando desejado ou necessário, agentes ligantes, lubrificantes, desintegrantes e corantes adequados podem também ser incorporados na mistura. Os ligantes adequados incluem amido, gelatina, açúcares naturais tais como glicose ou beta-lactose, adoçantes de milho, gomas naturais e sintéticas tais com acácia, tragacanto ou alginato de sódio, carboximetilcelulose, 15 ΡΕ1294715 polietileno glicol, ceras, etc. Os lubrificantes utilizados nestas formas de dosagem incluem oleato de sódio, estearato de sódio, estearato de magnésio, benzoato de sódio, acetato de sódio, cloreto de sódio, etc. Os desintegrantes incluem, sem limitação, amido, metil celulose, agar, bentonite, goma de xantano, etc. Os comprimidos são formulados, por exemplo, por preparação de uma mistura em pó, granulação ou peneiração, adição de um lubrificante e desintegrante e compressão em comprimidos. Uma mistura em pó é preparada por mistura do composto, adequadamente fragmentado, com um diluente ou base como descrito anteriormente, e facultativamente, com um ligante tal como carboximetilcelulse, um alginato, gelatina, ou polivinil pirrolidona, uma solução retardante tal como parafina, um acelerador de reabsorção tal como um sal quaternário e/ou um agente de absorção tal como bentonite, caulino ou fosfato de dicálcico. A mistura em pó pode ser granulada por humidificação com um ligante, tal como xarope, pasta de amido, mucilagem de acádia ou soluções de materiais celulósicos ou poliméricos, e ser forçada a passar através de um crivo. Como uma alternativa à granulação, a mistura em pó pode ser feita passar através de uma máquina de produção de comprimidos e o resultado são elementos formados imperfeitamente e partidos em grânulos. Os grânulos podem ser lubrificados para evitar agarramentos aos moldes formadores de comprimidos através da adição de ácido esteárico, sal de estearato, talco ou óleo mineral. A mistura lubrificante é então comprimida para se obterem comprimidos. Os compostos do presente invento podem também 16 ΡΕ1294715 ser combinados com um veículo inerte de livre escoamento e comprimidos para se obterem comprimidos directamente sem passar pelas etapas de granulação ou peneiração. Pode-se proporcionar um revestimento protector transparente ou opaco que consiste num revestimento impermeável de goma-laca, num revestimento de açúcar ou de material polimérico e num revestimento brilhante de cera. Podem-se adicionar tintas a estes revestimentos para distinguir as diferentes dosagens unitárias.

Podem-se preparar fluidos orais, tais como soluções, xaropes e elixires em formas unitárias de dosagem, de modo que uma determinada quantidade contenha uma quantidade pré-determinada do composto. Podem-se preparar xaropes por dissolução do composto numa solução aquosa aromatizada adequada, ao passo que os elixirres são preparados pela utilização de um veículo alcoólico não tóxico. As suspensões podem ser formuladas por dispersão do composto num veículo não tóxico. Também se podem adicionar solubilizantes e emulsionadores, tais como álcoois de isoestearilo etoxilados e éteres de sorbitol de polioxi etileno, preservativos, aditivos de aroma tais como óleo de hortelã-pimenta ou adoçantes naturais ou sacarina ou outros adoçantes artificiais, etc.

Quando apropriado, as formulações unitárias de dosagem para administração oral podem ser micro-encapsuladas. A formulação pode também ser preparada para prolongar ou suster a libertação como por exemplo por 17 ΡΕ1294715 revestimento ou embebimento do material em partículas em polímeros, ceras, etc.

Os compostos de fórmula (I), ou as suas formas de anidrato ou hidrato, podem também ser administradas na forma de sistemas de distribuição de liposoma, tais como pequenas vesículas unilamelares, grandes vesículas unilamelares e vesículas multilamelares. Os liposomas podem ser formados a partir de uma variedade de fosfolípidos, tais como colesterol, estearilamina ou fosfatidilcolinas.

Os compostos de fórmula (II) ou as suas formas de anidrato ou hidrato podem também ser administrados por utilização de anticorpos monoclonais como veículos individuais, aos quais as moléculas do composto estão ligadas. Os compostos podem também ser ligados a polímeros solúveis como veículos de droga alvo. Estes polímeros podem compreender polivinilpirrolidona, copolímero de pirano, polihidroxipropilmetacrilamidafenol, polihidroxi-etilaspartamidofenol, ou polietilenooxidepo-lilisina substituída por resíduos de palmitol. Por outro lado, os compostos podem ser ligados a uma classe de polímeros biodegradáveis úteis para se obter libertação controlada de um medicamento, por exemplo, ácido poliáctico, caprolactona de polepsilon, ácido polihidróxi butírico, poliortoésteres, poliacetais, polidihidropiranos, policianoacrilatos e copolímeros de blocos de hidrogeles de ligações cruzadas ou anfipáticos. 18 PE1294715

As formulações farmacêuticas adaptadas para administração transdérmica podem estar presentes como emplastros discretos destinados a permanecer em contacto com a epiderme do recipiente durante um período prolongado de tempo. Por exemplo, o ingrediente activo pode ser fornecido a partir do emplastro por iontoforese como descrito genericamente em Pharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986).

As formulações farmacêuticas adaptadas para administração tópica podem ser formuladas como pomadas, cremes, suspensões, loções, pós, soluções, pastas, geles, pulverizações, aerosois ou óleos.

Para tratamento dos olhos ou de outros tecidos externos, por exemplo boca e pele, as formulações são de preferência aplicadas como uma pomada ou creme tópico. Quando formulado como uma pomada, o ingrediente activo pode ser empregue com uma base de pomada parafínica ou miscível em água. Alternativamente, o ingrediente activo pode ser formulado num creme com uma base de creme de óleo-em-água ou com uma base de água-em-óleo.

As formulações farmacêuticas adaptadas para administrações tópicas aos olhos compreendem gotas de olhos, em que o ingrediente activo é dissolvido ou suspenso num veículo adequado, especialmente num solvente aquoso.

As formulações farmacêuticas adaptadas para 19 ΡΕ1294715 administrações tópicas à boca incluem rebuçados, pastilhas e lavagens bocais.

As formulações farmacêuticas adaptadas para administração supositórios rectal podem estar ou como clisteres. presentes como As formulações farmacêuticas adaptadas para administração nasal, em que o veiculo é um sólido, compreendem um pó grosso com uma granulometria que se situa por exemplo na gama de 20 a 500 mícrons, o qual é administrado por meio de uma fungadela, i.e. por inalação rápida, através da passagem nasal, a partir de um contentor que contém o pó, o qual é encostado ao nariz. As formulações adequadas em que o veiculo é um liquido, para administração como uma pulverização nasal ou como gotas nasais, compreendem soluções aquosas ou oleosas do ingrediente activo.

As formulações farmacêuticas adaptadas para administração por inalação compreendem pós em partículas ou névoas, os quais podem ser gerados por meio de vários tipos de aerosois, nebulizadores ou insufladores pressurizados de dose medida.

As formulações farmacêuticas adaptadas para administração vaginal podem ser apresentados como formulações para pessários, tampões, cremes, geles, pastas, espumas ou pulverizações. 20 PE1294715

As formulações farmacêuticas adaptadas para administração parentérica incluem soluções para injecção esterilizadas aquosas e não aquosas que podem conter anti-oxidantes, tampões, bacteriostatos e solutos que tornam a formulação isotónica com o sangue do recipiente pretendido; e as suspensões esterilizadas aquosas e não-aquosas, as quais podem incluir agentes de suspensão e agentes espessantes. As formulações podem estar presentes em contentores de dose unitária e multi-dose, por exemplo ampolas e frascos selados, e podem ser armazenadas no estado congelado-seco (liofilizado) que requer apenas a adição do veiculo liquido esterilizado, por exemplo água para injecção, imediatamente antes da utilização. Soluções e suspensões para injecção extemporâneas podem ser preparadas a partir de pós, grânulos e comprimdidos esterilizados.

Deve-se compreender que para além dos ingredientes particularmente mencionados anteriormente, as formulações podem incluir outros agentes convencionais na arte tendo em conta o tipo de formulação em questão, por exemplo, aquelas adequadas para administração oral podem compreender agentes aromatizantes. A actividade aberrante da CTP aqui referida é qualquer actividade da CTP da família erbB que se desvia da actividade normal da cinase de proteína da família erebB esperada num indivíduo mamífero particular. A actividade aberrante da CTP da família erbB pode tomar a forma de, por 21 ΡΕ1294715 exemplo, um aumento anormal da actividade, ou uma aberração no tempo e/ou controlo da actividade de CTP. Esta actividade aberrante pode resultar então, por exemplo, da sobre-expressão ou mutação da cinase de proteína levando a uma activação inapropriada ou descontrolada. Por outro lado, é também compreendido que a actividade indesejada da CTP pode residir numa fonte anormal, tal como uma malignidade. Isto é, o nível da actividade da CTP não tem que ser anormal para a actividade ser considerada aberrante, desde que ela derive de uma fonte anormal.

Os compostos de fórmula (I) ou as suas formas de anidrato ou hidrato, são inibidores de um ou mais das CTP's de família erbB e por isso possuem utilidade para o tratamento de doenças em mamíferos que se caracterizam por actividade aberrrante da CTP, em particular em seres humanos. De acordo com um modo de realização do presente invento, a doença tratada é caracterizada por pelo menos uma CTP de família erbB, seleccionada entre EGFr, c-erb-B2 e c-erb-B4, apresentar actividade aberrante. De acordo com um outro modo de realização, a doença tratada é caracterizada por pelo menos duas CTP's da família erbB, seleccionadas entre EGFr, c-erb-B2 e c-erb-B4, apresentarem actividade aberrante. De acordo com um outro modo de realização do método de tratamento, os compostos de fórmula (I) ou as suas formas de anidrato ou hidrato inibem pelo menos uma CTP da família erbB, seleccionada entre EGFr, c-erb-B2 e c-erb-B4. De acordo com outro modo de realização do método de tratamento, os compostos de fórmula (I) ou as 22 ΡΕ1294715 suas formas de anidrato ou hidrato inibem pelo menos duas CTP's da familia erbB seleccionada entre EGFr, c-erb-B2 e c-erb-B4 .

As doenças referidas podem ser quaisquer doenças que sejam caracterizadas por actividade aberrante da CTP. Como referido atrás, estas doenças incluem, sem lhes estar limitadas, o cancro e a psoriase. De acordo com um modo de realização, a doença é o cancro. De acordo com mais um modo de realização, o cancro é o cancro de células não pequenas do pulmão, da bexiga, da próstata, do cérebro, da cabeça e pescoço, da mama, dos ovários, gástrico, colo-rectal, ou pancreático. A quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de fórmula (I), ou das suas formas de anidrato ou hidrato, dependerá de uma série de factores que incluem, sem lhes estar limitados, a idade e o peso do mamífero, a doença precisa que requer tratamento e a sua gravidade, a natureza da formulação, e a via de administração, e finalmente estará ao critério do médico ou veterinário que esteja a tratar da situação. Normalmente, os compostos de fórmula (I) ou as suas formas de anidrato ou hidrato serão administradas para tratamento dentro da gama de 0,1 a 100 mg/kg de peso corporal do recipiente (mamífero) por dia e mais normalmente dentro da gama de 1 a 10 mg/kg de peso corporal por dia. As dosagens diariamente aceitáveis podem variar desde cerca de 0,1 a 1000 mg/dia, e de preferência desde cerca de 0,1 a cerca de 100 mg/dia. 23 PE1294715

Os compostos de fórmula (I) ou as suas formas de anidrato ou hidrato, descritas anteriormente, são úteis para terapia e preparação dos medicamentos para tratamento de uma doença num mamífero, a qual é caracterizada por actividade aberrante de pelo menos uma CTP da família erbB. De acordo com um modo de realização do presente invento, o medicamento preparado é útil para o tratamento de uma doença caracterizada por pelo menos uma CTP da família erbB, seleccionada entre EGFr, c-erb-B2 e c-erb-B4, apresentar actividade aberrante. De acordo com outro modo de realização, o medicamento preparado é útil para tratamento de uma doença caracterizada por pelo menos duas CTP's da família erbB, seleccionadas entre EGFr, c-erb-B2 e c-erb-B4, apresentarem actividade aberrante. De acordo com um modo de realização de utilização, os compostos de fórmula (I) ou as suas formas de anidrato ou hidrato, que são utilizadas para preparar um medicamento, inibem pelo menos uma CTP da família erbB, seleccionada entre EGFr, c-erb-B2 e c-erb-B4. Num outro modo de realização de utilização, os compostos de fórmula (I) ou as suas formas de anidrato ou hidrato, que são utilizados para preparar um medicamento, inibem pelo menos duas CTP's da família erbB seleccionadas entre EGFr, c-erb-B2 e c-erb-B4.

As doenças tratadas são as descritas anteriormente. A base livre e os sais de HC1 dos compostos de fórmulas (I), (II), (III) e (IV) podem ser preparados de 24 ΡΕ1294715 acordo com os procedimentos do Pedido de Patente Internacional N° PCT/EP99/00048, depositado em 8 de Janeiro de 1999, e publicado como WO 99/35146 em 15 de Julho de 1999, referido em cima. Um esquema de tais procedimentos é apresentado no Esquema A seguinte. As referências concretas a páginas referem-se à WO 99/35146. A base livre do composto de fórmula II é utilizada como exemplo do esquema geral.

Esquema A

Procedimento A - Reacção de uma amina com uma espécie biciclica que contém um anel 4-cloropirimidina (p. 55, linhas 21-33, p.69, linhas 30-34 e p. 74, linha 35 -p.75, linha 4) .

(p.60, linhas 15-16) (p. 64 65)

Procedimento B ~ Reacção do produto do Procedimento A com reagente de estanho de heteroarilo (p.55, linha 33 - p.56, linha 9) 25 PE1294715

{pJ6. IsfthiS 18'ΊΙ)

Procedimento C - Remoção de um grupo de protecçao de 1,3-dioxolan-2-ilo para libertar um aldeído (p.56, linhas 11-18)

Procedimento D - Reacção de um aldeído com uma amina por aminação redutora (p. 56, linhas 20-32; Exemplos 29 - p. 100, linhas 18-29)

O composto de fórmula (II), i.e., ditosilato de N-{ 3-Cloro-4-[(3-fluorobenzil)oxi]fenil}-6- [5— ({ [2 — (metanossulfonil)etil]aminojmetil)-2-furil]-4-quinazol-inamina foi preparado de duas formas distintas, uma forma de anidrato (Fórmula II' no Esquema B) e uma forma 26 ΡΕ1294715 monohidrato (Fórmula II" no Esquema B) . A relação entre estas formas é ilustrada no Esquema B seguinte. A forma de anidrato de ditosilato de N-{3-Cloro-4-[(3-fluoro-benzil)oxi]fenil}-6-[5-({[2-(metanossulfonil)etil]-amino}-metil)-2-furil]-4-quinazolinamina pode ser preparada por (a) reacção do sal de tosilato de 5-(4-[3-cloro-4-(3-fluorobenziloxi)-anilino]-6-quinazolinil)-furan-2-carbal-deído (fórmula B no Esquema B) com 2-(metilsulfona)etilamina em tetrahidrofurano na presença de diisopropil-etilamina seguida pela (b) introdução desta solução numa mistura pastosa de triacetoxiboroidreto de sódio em tetrahidrofurano à temperatura ambiente, (c) adição de hidróxido de sódio 5N para ajustar o pH de modo a ficar dentro da gama de 10-11, (d) separação da fase

orgânica de tetrahidrofurano, e depois (e) adição de hidrato de ácido para-toluenossulfónico à fase orgânica para proporcionar o anidrato de ditosilato. A interconversão no monohidrato e a reconversão no anidrato dos compostos do sal de ditosilato do invento é como referida no Esquema B. O sal de tosilato de 5— (4— [3— cloro-4-(3-fluorobenziloxi)-anilino]-6-quinazolinil)-furan-2-carbaldeido é preparado a partir do sal de HC1 do carbaldeido (Fórmula A do Esquema B) . A preparação de ditosilato de N-{3-Cloro-4-[(3-fluorobenzil)oxi]fenil}-6-[5-({[2-(metanossulfonil)etil]-amino]metil)-2-furil] -4-quinazolinamina e das suas formas de anidrato e hidrato é utilizada como exemplo. Como reconhecido pelos especialista na arte, outros compostos de fórmula I e as suas formas anidrato e hidrato podem ser preparados por 27 PE1294715 métodos similares.

Esquema B

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5Γ * Monohtórató ir- Anidro __ ágááv lá. 0 Composto A do Esquema B pode ser preparado por várias estratégias sintéticas, diferentes das estratégias referidas no Esquema A anterior, utilizando a ligação mediada pelo paládio(0) da quinazolina e os intermediários de furano substituídos. 28 PE1294715 0 Esquema C refere cinco estratégias de ligação mediadas pelo paládio (0), para sintetizar o composto A do Esquema B. A sintese (1), o método da arte anterior, envolve a utilização de ácido 5-formil-2-furilborónico comercialmente disponível na reacção de Suzuki. A Síntese (2) a (5) representa vários modos de realização do presente invento, os quais incluem: (2) produção de ácido 5-(dietoximetil)-2-furilburónico e a sua utilização in situ no furaldeido via protecção in situ da metade formilo com N, O-dimetilhidroxilamina, e a sua utilização in situ na ligação Suzuki; (4) produção de ácido 5-formil-2-furilburónico a partir de 5-bromo-2-furaldeido via protecção in situ da metade formilo com N, 0-dimetilhidroxilamina, e a sua utilização in situ na ligação Suzuki; e finalmente (5) a ligação Suzuki invertida do ácido 4-{3-cloro-4-[(3-fluorobenzil)oxi]anilino}-6-quina-zolinilborónico produzido in situ (preparado a partir de N-{3-cloro-4-[(3-fluorobenzil)oxi]fenil}-6-iodo-4-quinazolin-amina) com 5-bromo-2-furaldeido. 29 PE1294715

Esquema C V-í Γ

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As reacções do Esquema C são descritas a seguir com referência às fórmulas (C), (A) Ό ff ΡΕ1294715 30

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Em (1) do Esquema C, o ácido 5-formil-2-furilburónico comercialmente disponível, i.e., o composto de fórmula (A) em que R é -C (O) H e Z é -B(OH)2, (Frontier Scientific, Inc.; Logan UT), é submetido a ligação mediada por paládio(0) catalítico (Pure Appl. Chem. 1994, 66, 213; Synth. Commun. 1981, 11, 513) para formar o composto desejado de Fórmula (C) com altos rendimentos. Concretamente, um composto de fórmula (C) é feito por mistura de um composto de fórmula (B), em que L é iodo ou bromo, de preferência iodo, e U é um grupo orgânico como aqui descrito, com 1,0-1,5 equivalentes molares de ácido 5-formil-2-furilburónico, num solvente etéreo tal como, sem lhes estar limitado, éter dietílico, tetrahidrofurano, dioxano, éter dietílico de etileno glicol também conhecido como 1,2-dietoxietano e éter dimetílico de etileno glicol também conhecido como 1,2-dimetoxietano ou DME. Um catalisador de paládio é então adicionado a partir de uma lista que inclui acetato de paládio(II), cloreto de 31 ΡΕ1294715 paládio (II), paládio ou carbono, dicloro [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]paládio (II), tetracis(tri-fenilfosfina)paládio(0), tris(dibenzilidenoacetona)dipa-ládio(O), trans-diclorobis(trifenil fosfina)-paládio(II). O catalisador preferido é paládio sobre carvão. Esta reacção é então aquecida para uma temperatura entre 25°C e 120°C durante 1-24 horas e é depois arrefecida até à temperatura ambiente e é filtrada. A solução é então tratada com ácido mineral ou com um ácido orgânico, tal como monohidrato de ácido p-toluenossulfónico, e o composto de fórmula (C) é isolado com altos rendimentos na forma do seu sal de ácido mineral ou do seu sal de ácido p- toluenossulfónico.

Uma outra aproximação a um composto de fórmula (C) consiste na produção de uma solução em bruto de um composto de fórmula (A), em que Z é B(OH)2, e R é -C(Q) (T)W, em que Q e T são O-alquilo, em que alquilo é como definido aqui e é de preferência etilo, e W é hidrogénio, numa ligação de biarilo mediada por paládio (0) (ligação cruzada de Suzuki com ácidos burónicos produzidos in situ como descrito em J. Org. Chem. 1996, 61, 9556, e referências ai citadas) com um composto de fórmula (B), em que L é iodo ou bromo e U é um grupo orgânico, utilizando catálise heterogénea "ligand-less" com paládio sobre carvão. Esta utilização de paládio "ligand-less" é referida em Org. Lett.1999, 1, 965; Org. Process Res. Dev. 1999, 3, 248; e Tetrahedron Lett. 1994, 35, 3277. Um modo de realização preferido desta abordagem, parcialmente 32 PE1294715 descrita em (2) do Esquema C, proporciona (i) a geração in situ do litiato de furanilo, um composto de fórmula (A), em que Z é Li e R é -C (Q) (T)W, em que Q e T são O-alquilo, de preferência etóxi, e W é hidrogénio, (ii) a geração subsquente do ácido borónico correspondente, em que Z é B(OH)2 e R é -C(Q) (T)W, em que Q e T são O-alquilo, de preferência etóxi, e W é hidrogénio e (iii) a ligação de biarilo mediada por paládio(0) para construir o produto desejado de fórmula (C) . O processo utiliza solventes etéreos. Estes solventes etéreos podem incluir, sem lhes estar limitados, éter dietilico, tetrahidrofurano, dioxano, 1.2- dietoxietano e DME. O solvente preferido é o DME.

Este solvente preferido foi observado oferecer melhorias significativas em relação aos procedimentos publicados (Synth. Commun. 1998, 28, 1013) na formação de ácido 5- formil-2-furilborónico sintetizado a partir dietilacetal de 2-furaldeido. Um outro percursor adequado para o ácido 5-formil-2-furilborónico gerado in situ inclui 2-(2-furil)- 1.3- dioxalano. As vantagens deste processo incluem a desprotonação do composto de fórmula (A) , em que Z é hidrogénio e R é —C (Q) (T)W, em que Q e T são O-alquilo, de preferência etóxi, e w é hidrogénio, com alquil litios, de preferência n-butil litio, a temperaturas mais elevadas (-20°C em DME comparativamente com -40°C em tetrahidrofurano) . O tratamento subsquente do composto de fórmula (A), em que Z é Li e R é —C (Q) (T)W, em que Q e T são O-alquilo, de preferência etóxi, e W é hidrogénio, com borato de trialquilo, de preferência borato de tri-isopropilo em DME também proporcionou uma conversão mais 33 PE1294715 intensa no éster de borato do composto de fórmula (A) , em que Z é B(0-isopropil)3L1 e R é -C(Q)(T)W, em que Q e T são 0-alquilo, de preferência etóxi, e W é hidrogénio. Na preparação da ligação Suzuki subsquente, o éster de borato gerado in situ foi hidrolizado no ácido borónico do composto de fórmula (A), em que Z é B(0H)2 e R é -C (Q) (T)W, em que Q e T são 0-alquilo, de preferência etilo, e W é hidrogénio, por tratamento em primeiro lugar com ácido acético, seguido pela adição de água por essa específica ordem à temperatura ambiente. Foi também observado que as melhorias do processo, devido à utilização de DME em vez de tetrahidrofurano, estenderam-se à ligação de biarilo mediada por paládio(0) com 0 intermediário de ácido borónico para produzir 0 composto de fórmula (C) . Estas melhorias de processo incluem rendimentos mais consistentes, tempos de reacção mais curtos, e maiores perfis de pureza.

Os compostos de fórmula (C) podem também ser formados a partir de uma união de biarilo mediada por paládio(0) de ácido 5-formil-2-furilborónico, o composto de fórmula (A), em que Z é -B(OH)2, gerado in situ, com um composto de fórmula (B) , em que L é iodo ou bromo e U é um grupo orgânico (Ver (3) do Esquema C) . Este processo emprega uma protecção in situ da funcionalidade do aldeído como um litiato aminal, (Synlett 1992, 615), como na reacção de, por exemplo, 2-furaldeido com 0 anião de lítio de uma amina secundária escolhida entre morfolino, N,0-dimetilhidroxilamina, 1-metilpiperizina ou N^N^N2- 34 ΡΕ1294715 trimetil-1,2-etanodiamina. A amina preferida neste processo é N,O-dimetilhidroxilamina. A formação do litiato de amina é efectuada por tratamento da amina com um reagente de alquil litio, de preferência n-butil litio, num solvente etéreo, tal como tetrahidrofurano ou DME a baixa temperatura. A solução do anião de litio de amina é então misturada com 2-furaldeído para formar in situ o litiato aminal, um composto de fórmula (A), em que Z é hidrogénio, R é -C(Q)(T)W em que Q é NR'R", em que R' é O-alquilo, de preferência metóxi e R" é um alquilo como aqui definido, de preferência metilo ou R' e R" são independentemente alquilo como aqui definido; T é Ο-Li e W é H. Esta solução é então tratada com um equivalente molar adicional de um alquil litio, de preferência n-butil litio, a baixa temperatura para formar o litato de furanilo, um composto de fórmula (A), em que Z é Li e R é —C(Q)(T)W em que Q é NR'R", em que R' é O-alquilo, de preferência metóxi e R" é alquilo, de preferência metilo, ou R' e R" são independentemente alquilo como aqui definido; T é Ο-Li e W é H. Esta solução é então tratada a baixa temperatura com um trialquilborato, de preferência triisopilborato, para formar um composto de fórmula (A), em que Z é B(O-isopropil)3L1, R é —C (Q) (T)W, em que Q é NR'R", em que R' pode ser O-alquilo, de preferência metóxi e R" é um alquilo como aqui definido, de preferência metilo, ou R' e R" são independentemente alquilo como aqui definido; T é Ο-Li e W é hidrogénio, e é hidrolizada no ácido 5-formil-2-furilborónico em solução pela adição quer de um mineral quer de um ácido orgânico, tal como ácido acético. Este ácido 5-formil-2- 35 ΡΕ1294715 furilborónico gerado in situ é submetido a uma ligação de biarilo mediada por paládio(0) para formar um composto de fórmula (C). O processo, descrito no parágrafo precedente, para obter um composto de fórmula (C), pode também ser empregue quando se utilizam derivados de 2-furaldeido substituídos por um halogénio (Z é bromo ou iodo), de preferência 5-bromo-2-formilfurano. Isto é, um composto de fórmula (A) em que Z é bromo e R é -C(0)H (Ver (4) do Esquema C).

Alternativamente, uma outra estratégica de síntese de compostos de fórmula (C) pode ser construída a partir de uma ligação de biarilo mediada por paládio(0) de ácidos N-heteroaril borónicos, tais como um composto de fórmula (B), em que L é B(OH)2 e U é um grupo orgânico, com derivados de 5-halogénio-2-formilfurano, isto é um composto de fórmula (A) em que Z é bromo ou iodo e R é -C(0)H. (Ver (5) do Esquema C). Um processo para preparar um intermediário de ácido N-heteroaril borónico de fórmula (B) envolve o tratamento de um composto de fórmula (B), em que L é iodo e U é um grupo orgânico, com um reagente de haleto de alquil magnésio, de preferência brometo de etilmagnésio. A reacção é efectuada num solvente etéreo tal como tetrahidrofurano ou DME a baixa temperatura. Esta mistura é então tratada com um trialquilborato, de preferência borato de triisopropilo, seguido pela adição de um alquillítio, de preferência n-butillítio, ao mesmo tempo 36 ΡΕ1294715 que se mantém a reacção a baixa temperatura. Esta é então seguida pela adição de um ácido mineral ou ácido orgânico, de preferência ácido acético. Isto proporciona um intermediário de ácido N-heteroarilo borónico de fórmula (B), em que L é B(OH)2 e U é um grupo orgânico em solução. A este é então adicionado 5-halogénio-2-furaldeído (halogénio é bromo ou iodo), de preferência 5-bromo-2-furaldeído, um co-solvente tal como N,N-dimetilacetamida, uma base aquosa, tal como carbonato de sódio e um catalisador de paládio, tal como aduto de diclorometano de dicloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferrose]paládio(II). Esta solução é então aquecida até uma temperatura suficiente para proporcionar a conversão do composto desejado de fórmula (C) .

Uma estratégia sintética diferente para a construção de um composto de fórmula (C) consiste em utilizar uma reacção do tipo de Heck {Buli. Chem. Soc. Jpn. 1973, 46, 1220; Heterocycles 1990, 31, 1951; Synthesis 1984, 488; J. Org. Chem. 1985, 50, 5272) para ligar 2-furaldeído, um composto de fórmula (A) em que Z é hidrogénio e R é -C(0)H, de uma maneira regioselactiva com um intermediário de fórmula B, em que L é iodo ou bromo e U é um grupo orgânico. A arilação regioselectiva catalisada de paládio de 2-furaldeído, na posição-5 é inaudita na literatura química. Outros substitutos adequados para 2-furaldeído neste processo incluem dietilacetal de 2-furaldeído, 2-(2-furil)-1,3-dioxolano, ácido 2-furanóico e ésteres de ácido 2-furanóico tais como 2-furanoato de 37 ΡΕ1294715 metilo ou 2-furanoato de etilo. O processo para a síntese de um composto de fórmula (C) que emprega esta estratégia compreende a mistura de um solvente apropriado, tal como N,N-dimetilformamida, N-metilpirrolidinona, tolueno, dimetilacetamida, água, acetonitrilo ou suas misturas, de preferência N, N-dimetilformamida, com uma base de amina orgânica, tal como trietilamina e diisopropiletilamina ou uma base de carboxilato de metal alcalino, tal como carbonato de sódio, carbonato de potássio, carbonato de césio, carbonato de cálcio, acetato de sódio e acetato de potássio, de preferência acetato de potássio, e 2-furaldeído. Isto é então seguido pela adição de uma trialquil- ou triarilfosfina, tal como tri-o-tolilfosfina, trifenilfosfina, tri-terc-butilfosfina, tri-2-furilfosfina, triciclohexilfosfina, de preferência triciclohexilfosfina. Um catalisador de paládio é adicionado a partir de uma lista que inclui, mas que não lhes está limitado, acetato de paládio (II), cloreto de paládio(II), paládio sobre carvão, dicloro[1,1'-bis (difenilfosfino)ferroceno]paládio(II) , tetracis (trifenilfosfina) paládio(0), tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0), trans-diclorobis (trifenilfosfina)paládio(II), de preferência cloreto de paládio(II). Esta mistura é então aquecida e adiciona-se lentamente a solução de um composto de fórmula (B) , em que L é iodo ou bromo, de preferência bromo. A mistura de reacção é então aquecida durante 10-20 horas, altura em que a mistura de reacção é arrefecida até à temperatura ambiente e é filtrada. A adição de um ácido 38 ΡΕ1294715 mineral ou de um ácido orgânico, tal como ácido p-toluenosulfónico, proporciona um composto isolado de fórmula (C) na forma do seu sal.

[0073] Os exemplos seguintes destinam-se a ilustrar apenas e não pretendem limitar de qualquer modo o âmbito do invento. Os dados físicos apresentados para os compostos exemplificados são consistentes com a estrutura atribuída àqueles compostos.

EXEMPLOS

[0074] Como aqui utilizado, os símbolos e convenções utilizados nestes processos, esquemas e exemplos são consistentes com aqueles utilizados na literatura científica contemporânea, por exemplo, no Journaal of the American Chemical Society ou Journal of Biological Chemistry. As abreviaturas de duas letras ou de três letras correntes são geralmente utilizadas para designar resíduos de amino ácidos, que se assumem estar na configuração L, a menos que indicado de outro modo. A menos que indicado de outro modo, todos os materiais de partida foram obtidos a partir de fornecedores comerciais e utilizados sem purificação adicional. Concretamente, as seguintes abreviaturas podem ser utilizadas nos exemplos e ao longo da memória descritiva: g (grama); mg (miligrama); L (litro); mL (miligrama); PE1294715 pL (microlitro) ; M (molar); N (Normal); i.v. (intravenoso); MHz (megahertz); mmol (milimole); min (minuto); pf (ponto de fusão); Tr (tempo de retenção); THF (tereaidrofurano); EtOAc (acetato de etilo); DCM (diclorometano); DMF (N, W-dimetilformamida); TMSE (2-(trimetilsilil)etilo) TI PS (triisopropilsililo); CLAP (cromatografia líquida c 39 - psi (libra por polegada quadrada); mM (milimolar); kg (quilograma);

Hz (Hertz); mol (mole); TA (temperatura ambiente); h (hora) ; CCF (cromatografia de camada fina); RP (fase invertida); DMSO (dimetilsulfóxido); DME (1,2-dimetoxietano); DCE (dicloroetano); HOAc (ácido acético); ;TMS (trimetilsililo); TBS (t-butildimetilsililo) ; e alta pressão); A menos que indicado, todas as temperaturas são expressas em °C (graus Centígrados). Todas as reacções foram conduzidas sob uma atmosfera inerte à temperatura ambiente, a menos que indicado em contrário.

Os espectros de ^ RMN foram registados num instrumento Varian VXR-300, Varian Unity-300, Varian Unity-400 ou num General Electric QE-300. Os deslocamentos químicos são expressos em partes por milhão (ppm, unidades δ) . As constantes de ligação são em unidades de hertz (Hz) . Os padrões de separação descrevem multiplicidades aparentes e são designados como s (singleto), d (dupleto), 40 ΡΕ1294715 t (tripleto), q (quarteto), m (multipleto), br (amplo).

Os espectros de massa de baixa resolução (EM) foram registados num espectrómetro JOEL JMS-AX505HA, JOEL SX-102, ou SCIEX-APIiii; Os EM de alta resolução foram obtidos por utilização de um espectrómetro JOEL SX-102A. Todos os espectros de massa foram obtidos sob ionização por electropulverização (IEP), ionização quimica (IQ), impacto de electrões (IE) ou por bombardeamento de átomos rápidos (BAR). Os espectros de infravermelhos (IV) foram obtidos num espectrómetro Nicolet 510 FT-IR por utilização de uma célula de NaCl de 1 mm. Todas as reacções foram monitorizadas por cromatografia de camada fina sobre placas de silica gel da Merck (60F-254), visualizada com luz UV, ácido fosfomolibdico etanólico a 5% ou uma solução de p-anisaldeído. A cromatografia de coluna de relâmpago foi efectuada sobre silica gel (230-400 mesh, Merk). As rotações ópticas foram obtidas por utilização de um Polarimetro Perkin Elmer Model 241. Os pontos de fusão foram determinados por utilização de um aparelho Mel-Temp II e são não corrigidos.

Exemplo 1

Preparação de 5-(4-[3-cloro-4-(3-fluorobenziloxi)-anilino]-6-qulnazolinil)-furan-2-carbaldeido

Adicionou-se a um recipiente de reacção N-{3-cloro-4-[(3—fluorobenzil)oxi]fenil}-6-iodo-4-quinazolin- 41 PE1294715 amina (100 mg; 0,198 mmole), ácido 2-formilfuran-5-borónico (Frontier Scientific, 42 mg; 0,297 mmole), 10% de paládio sobre carvão activado (5 mg; 0,05 partes em peso), DME (2,0 mL) , MeOH (1,0 mL) e trietilamina (83 pL) . Após aquecimento a 50°C durante 14 h, uma CLAP indicou uma conversão completa de 98,5%. 1R RMN (d6-DMSO)5: 11,44(s, 1H), 9,38(s,2H), 9,11 (s,lH), 8,90 (s,lH), 8,39 (dd,lH, J= 8 e 4Hz), 7,89 (d, 1H, J = 12Hz), 7,84 (d, 1H, J = 4Hz) , 7.60 (dd, 1H, J = 8 e 4Hz) , 7, 47 - 7,42 (m, 2H) , 7,44 (AA'BB', 2H, JAB = 8Hz), 7,35 - 7,25, (m, 3H) , 7,24 (d, 1H, J = 4Hz), 7,16 (dt, 1H, J = 8 e 4Hz), 7,06 (AA'BB', 2H, Jab = 8Hz), 6,84 (d, 1H, J = 4Hz), 5,27 (s, 2H), 4,43 (s, 2H), 3.61 - 3,50 (m, 2H), 3, 47-3, 36 (m, 2H) , 3,09 (s, 3H) , 2,23 (s, 6H) .

Exemplo 2

Preparação de 5-(4-[3-cloro-4-(3-fluorobenziloxi)-anilino]~ 6-quinazolinil)-furan-2-carbaldeido (i) Preparação in situ do ácido 2-dietilacetal-furan-5-borónico

Um recipiente de reacção de 20 L carregado com 6,7 volumes de DME e 0,67 partes em peso, (740 g, 410 mL, 4,35 moles) de acetal de 2-furaldeido dietilo foi arrefecido até -40°C sob reacção/controlo dos conteúdos. Adicionou-se n-Butilítio, 1,32 partes em peso (2,5 M em hexanos, 1,45 Kg, 5,22 moles) durante cerca de 40 minutos 42 ΡΕ1294715 por utilização de uma bomba de dosagem ChemTech CP120 equipada com uma cabeça cerâmica. A temperatura interna subiu até -31°C. A mistura de reacção tornou-se muito escura, mas homogénea. Depois da adição estar completa, as linhas foram lavadas sob pressão, com cerca 0,17 volumes de hexano, directamente para dentro do recipiente de reacção. Quando a temperatura interna diminuiu até -40°C, a mistura de reacção foi agitada durante mais 2,5 h. Após 2,5 h, adicionaram-se 1,1 volumes (0,89 partes em peso, 982 g, 5,22 moles) de trisopopilborato através de uma bomba de doseamento durante 20 minutos. Observou-se uma ligeira hexotermia durante a primeira parte da adição, com um pico a cerca de -31°C. Utilizou-se mais 0,15 volumes de hexano para lavar as linhas de bombagem para dentro do tanque de reacção. Ao fim de 2 horas (com 30 minutos a -40°C), a temperatura da reacção foi elevada até 25°C durante 60 minutos. Quando a temperatura interna atingiu 25°C, removeu-se um aliquota de 1 mL para uma verificação do processo [Preparação da amostra: duas gotas da misturas da reacção foram diluídas em 1 mL de CH3CN e 100 pL de HC1 IN e foram submetidas a CL a 280 nM] . A relação de ácido borónico/2-furfural foi de 119:1. Nesta altura, adicionaram-se 0,29 volumes de ácido acético e a mistura de reacção foi agitada durante 30 minutos. Adicionou-se água, 0,36 volumes, após 30 minutos. Esta mistura de reacção foi utilizada directamente na etapa seguinte. (ii) Preparação de 4-metilbenzenesulfonato de 5-(4-[3-cloro-4-(3-fluorobenziloxi)-anilino]-6-quinazolinil)-furan- 43 ΡΕ1294715 2-carbaldeido por utilização de ácido 2-dietilacetal-5-borónico preparado in situ À mistura de reacção anterior adicionaram-se 3,4 volumes (3,7 L) de etanol durante um período de 5 minutos através de uma adição em vácuo. Adicionou-se trietilamina, 0,69 vol (760 mL, 5,45 moles) seguida por 1 parte em peso (1100 g, 2,18 moles) de N-{3-cloro-4-[(3-fluorobenzil)-oxi] fenil}-6-iodo-4-quinazolinamina e 3% em peso de 10% de Pd/C [Paládio, 10 % em peso (base seca) sobre carvão activado, 50% de Humidade de Água, Degussa Type E101 NE/W]. O reactor, no modo de controlo de reactor, foi ajustado para 62°C. Observou-se que a temperatura interna subiu até 58°C durante cerca de 2 horas. Após cerca de 14 horas, removeu-se um aliquota para uma verificação do processo [Preparação da amostra: 15 pL foram diluídos com 1 mL de MeOH e 250 pL de HCl IN e foram submetidos a CL Rápida a 220 nM]. Nesta altura, o reactor foi arrefecido até 25°C. A mistura da reacção escura foi transferida para um segundo reactor através de uma mangueira de transferência encamisada com aço inoxidável e revestida a teflon, e equipada exteriormente com um filtro em linha de 5,0 pm (Pall part n° Rlf050, lot n° FJ0807) e com outro filtro em linha de 0,45 pm (Meisner CLMF 0,4-662, lot n° 4087-R-#F). O primeiro reactor foi lavado com 0,5 volumes de DME e foi passado através de uma mangueira de transferência de modo a lavar os sólidos através de conjuntos filtrantes. O monohidrato de ácido p-toluenosulfónico, 1,55 partes em peso (1700 g, 8,72 moles), foi dissolvido em 2,27 volumes 44 ΡΕ1294715 de água desionizada e a solução foi adicionada à mistura de reacção durante 5 minutos. Após agitação a 25°C durante 1 hora, o produto foi recolhido num filtro cerâmico revestido com papel de filtragem média. 0 reactor e o bolo de filtragem foram lavados com 0,9 volumes de uma solução 1:1 de DME/água. Após secagem por sucção durante 4 horas, o bolo de filtragem amarelo foi transferido para duas bandejas de vidro e foi colocado no forno de secagem (50— 55°C) sob vácuo (45,72 cm (18 polegadas) de Hg) com drenagem do azoto. As duas bandejas de vidro foram retiradas do forno e foram deixadas arrefecer à temperatura ambiente e amostradas adequadamente. A produção isolada do composto do título foi de 1230 g (1,12 partes em peso, 87% teórico; 1410 g teórico) que se apresentou como um sólido amarelado. RMN (d6- DMSO)δ: 11 ,44(s, 1H) , 9,38 (sj r 2H) , 9,11 (s,lH) O 03 00 (s,lH) , 8,39 (dd , 1H, J = 8 e 4Hz), 7,89 (d, 1H, J = 12Hz), 7,84 (d, 1H, J = 4Hz) , 7, 60 (dd, 1H, , J = 8 e 4Hz) , 7,47 - 7,42 (m, 2H) , 7,44 (ΑΑ'ΒΒ', 2H, Jab = 8Hz) , 7,35 - 7,25 , (m, 3H), 7, 24 (d, 1H , J = 4Hz), 7,16 (dt, 1H, J = 8 e 4Hz) , 7,06 (ΑΑ'ΒΒ', 2H, Jab = 8Hz), co (d, 1H, J= 4Hz), 5,27 (s, 2H), 4,43 (s, 2H), 3,61-3,50 (m, 2H) , 3,47-3, 36 (m, 2H), 3,09 (s, 3H), 2,23 (s, 6H) .

Exemplo 3

Preparação de 5-(4-[3-cloro-4-(3-fluorobenziloxi)-anilino]-6-quinazolinil)-furan-2-carbaldeido por utilização de 2-furaldeido protegido in sítu 45 ΡΕ1294715 0 cloridrato de N,O-dimetilhidroxilamina (629 mg; 6,32 mmoles) foi suspenso em THF (10 mL; 40 Vol), e o frasco foi arrefecido até -40°C (banho de isopropanol controlado com Cryocool). O N-butilítio (solução de 2,5 M em hexanos; 5,3 mL; 13,2 mmoles) foi adicionado gota a gota ao mesmo tempo que a temperatura interna subiu até -12°C. Contudo, a mistura arrefeceu rapidamente até -40°C. Após 30 minutos a -40°C, o 2-furaldeido (481 pL; 5,74 mmoles) foi rapidamente adicionado à mistura, o que causou que a temperatura interna subisse até -28°C. Novamente, a temperatura caiu rapidamente até -40°C. Após 20 minutos a -40°C, o n-butilítio (solução de 2,5 M em hexanos; 2,8 mL; 6,89 mmoles) foi adicionada gota a gota, ao mesmo tempo que a temperatura interna foi mantida abaixo de -35°C. Durante o curso da adição, a mistura ficou amarela. Depois da adição estar completa, a mistura foi deixada em agitação a -40°C durante 1 hora. Adicionou-se triisopropilborato (2,0 mL; 8,62 mmoles) gota a gota, ao mesmo tempo que a temperatura interna foi mantida abaixo de -35°C. Depois da adição estar completa, o arrefecimento foi desligado. A CLAP indicou 83,7% do ácido borónico desejado, 6,2% do material de partida. Quando a temperatura interna atingiu -20°C, a mistura foi temperada pela adição de ácido acético (462 pL; 8,04 mmoles) e foi deixada aquecer à temperatura ambiente. O material foi passado directamente para a reacção de ligação de Susuki sem purificação ou isolamento.

Ao recipiente da reacção que continha o ácido borónico em bruto adicionou-se N, N-dimetilacetamida (13 46 ΡΕ1294715 mL) , 1,16 M de uma solução aquosa de Na2S03 (7,3 mL; 7,38 mmoles), N-{3-cloro-4-[(fluorobenril)oxi]fenil}-6-iodo-4- quinazolinamina (1,87 g; 3,69 mmoles) e aducto de diclorometano de dicloro [1,1'- bis(difenilfosfino)ferroceno]paládio (II) (15 mg; 0,0185 mmoles). Após adição da base, a temperatura interna subiu até cerca de 28°C. A mistura da reacção foi aquecida até 50°C (temperatura interna) num banho de óleo. A mistura da reacção foi filtrada através de uma almofada comprimida de Celite e os sólidos foram lavados com THF. A solução isolada foi então diluida com acetato de etilo e adicionou-se ácido clorídrico aquoso. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi neutralizada e diluída com acetato de etilo. As camadas foram separadas e a camada orgânica foi seca sob sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo para produzir o composto do título. Tempo de retenção da CL do composto do título: 4,9 minutos.

Exemplo 4

Preparação do cloridrato 5-(4-[3-cloro-4- (3- fluorobenziloxi)-anilino]-6-quinazolinil)-furan-2-carbal-deido por utilização de 5-bromo-2-furaldeido protegido in sítu O cloridrato de N, O-dimetilhidroxilamina (3,04 g; 30, 49 mmoles) foi suspenso em THF (40 mL) , e o frasco foi arrefecido até -78°C (banho de acetona-gelo seco) . O N-butilítio (solução de 2,5 M em hexanos; 24,4 mL; 60,98 47 ΡΕ1294715 mmoles) foi adicionado gota a gota a esta suspensão fria, o que a tornou homegénea. 0 banho de acetona/C02 foi substituído por um banho de água/gelo (0°C), e a mistura passou a amarelo pálido. Após agitação durante 15 minutos a 0°C, a solução foi arrefecida até -78°C, e adicionou-se 5-bromo-2-furaldeido (5,00 g dissolvidos em 10 mL de THF; 27,72 mmoles) gota a gota. Quinze minutos após a adição ter terminado, a mistura da reacção foi deixada aquecer até 0°C num banho de água/gelo, e quinze minutos mais tarde foi novamente arrefecida até -78°C. Dez minutos mais tarde, adicionou-se numa porção triisopropilborato (18,8 mL; 83,16 mmoles) à mistura fria, seguida pela adição gota a gota de n-butilitio (solução de 2,5 M em hexanos; 27,7 mL; 69,30 mmoles). Após 30 minutos a -78°C, adicionou-se ácido acético (6,5 mL; 102,6 mmoles) à mistura da reacção fria, a qual foi então deixada aquecer até à temperatura ambiente. O material foi passado directamente para a reacção de ligação de Susuki sem purificação e sem isolamento.

co em bruto N,N-dimetilacetamida (54 mL), água (11 mL), N-{3-cloro-4-[(fluorobenril)oxi]fenil}-6-iodo-4-quinazolinamina (10,78 g; 21,32 mmoles), Na2S03 (6,85 g; 63,97 mmoles), e aduto de diclorometano de dicloro[1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]paládio(II) (174 mg; 0,21 mmoles) para produzir uma mistura de reacção alaranjada. A mistura da reacção foi aquecida até 80°C, e não se observou qualquer mudança de cor. Após 28,5 horas de tempo de reacção total, a mistura de reacção foi deixada arrefecer até à temperatura ambiente. A mistura foi diluída com THF 48 PE1294715 (54 mL) , foi tratada com Carvão Activado Darco® G-60 a 100 mesh (696 mg), Hyflo Super Cel® (348 mg) e foi agitada à temperatura ambiente durante > 2 horas. Os precipitados foram removidos por filtração por sucção através de um funil fritado carregado com Hyflo Super Cel® e lavados com THF (5 x 22 mL) até o solvente THF não apresentar qualquer cor. O filtrado foi tratado com HC1 aquoso concentrado (7,1 mL; 85,3 mmoles) e água (80 mL) e foi deixado em agitação à temperatura ambiente durante 2 horas. O precipitado foi filtrado através de um funil fritado e foi lavado com 33% de isopropanol/água (54 mL), água (54 mL) e 33% de isopropanol/água (54 mL), e depois foi deixado secar ao ar durante 2 horas. O sólido castanho amarelado foi transferido para um secador de vácuo e foi deixado secar in vácuo durante a noite. A reacção produziu 9,01 g do composto do titulo (83% de rendimento) sob a forma de um pó beje acastanhado. O tempo de retenção da CL do composto do titulo: 4,9 minutos.

Exemplo 5

Preparação de 5-(4-[3-cloro-4-(3-fluorobenziloxi)~anilino]-6-quinazolinil)-furan-2-carbaldeido por utilização do ácido 4-{3-cloro-4-[(3-fluorobenzil)oxi]anilino}-6-quinazolinilborónico gerado in situ

N-{3-cloro-4-[(3-fluorobenzil)oxi]fenil}-6-iodo-4-quinazolimina (200 mg; 0,395 mmoles) foi dissolvida em THF (2,0 mL), proporcionando uma solução amarelada. A 49 PE1294715 mistura foi arrefecida até 0°C (banho de água/gelo) e depois foi tratada com brometo de etil-magnésio (solução de 1,0 M em THF; 475 pL; 0, 475 mmoles) para produzir uma solução amarela brilhante homogénea, que foi arrefecida até -78°C. Adicionou-se rapidamente triisopropilborato (373 pL; 1,582 mmoles), seguido pela adição de n-butilitio (solução de 2,5 M em hezanos; 395 pL; 0, 989 mmoles). Quando se verificou por CLAP que a reacção estava completa, adicionou-se ácido acético (84 pL; 1,463 mmoles) para temperar a reacção. À mistura amarela em bruto de ácido burónico em THF adicionou-se 5-bromo-2-buraldeido (107 mg; 0,593 mmoles), seguida por N,N-dimetilacetamida (2,0 mL), o que fez com que a mistura se tornasse homogénea, Na2CC>3 aquoso 1,016 N (1,2 mL; 1,185 mmoles) e finalmente aducto de diclorometano de dicloro[1,1'-bis(difenilfosfino)-ferroceno]paládio(II) (16 mg; 0,020 mmoles). A mistura foi aquecida a 80°C. Uma analise de CLAP após 15 horas indicou uma conversão clara de 95% no composto do titulo. O tempo de retenção da CL: 4,9 minutos.

Exemplo 6

Preparação regioselectiva de 4-metilbenzenosulfunato de 5-(4-[3-cloro-4-(3-fluorobenziloxi)-anilino]-6-quinazolinil)-furan-2-carbaldeido

Uma mistura de 2-furaldeido (6,7 mL; 69 mmoles), acetato de potássio (1,4 g, 14 mmoles) e cloreto de paládio (II) (61 mg, 0,35 mmoles) em 35 mL de DMF foi 50 ΡΕ1294715 desgaseificada durante 10 minutos por borbulhamento vigoroso de N2 na mistura, ao mesmo tempo que a mesma era agitada. A mistura catalítica foi subsequentemente aquecida até 110°C. Desgaseificou-se uma solução de N-{3-cloro-4-[ (3-fluorobenzil)oxi]fenil}-6-iodo-4-quinazolimina (3,5 g, 6,9 mmoles) em 55 mL de DMF de uma maneira similar e depois adicionou-se à mistura catalítica através de uma bomba de seringa durante 10 horas. Depois da adição estar completa, a temperatura de reacção foi mantida a 110°C durante mais 2 horas. Após arrefecimento até à temperatura ambiente, a mistura foi deitada em 125 mL de água. O precipitado foi recolhido num papel de filtro grosso e foi lavado com água (cerca de 7 mL) . O sólido foi redissolvido em DME quente (50°C). A esta solução adicionou-se (2,0 g; 10,5 mmoles) de monohidrato de ácido p-toluenosulfónico. A temperatura foi baixada até 35°C e a mistura foi agitada a esta temperatura durante a noite. Adicionou-se água (60 mL) para induzir mais precipitação. O produto foi recolhido num papel de filtro grosso e foi subsequentemente lavada com 30-40 mL de DME/água (1:1) . O bolo de filtragem foi seco a 50°C sob vácuo de câmara (house vacuum) durante a noite para proporcionar 2,5 g (55%) do composto do título. RMN (d6-DMSO)5: ll,44(s, 1H) , 9,38(s,2H), 9,11 (s,lH), 8,90 (s,1H), 8,39 (dd,1H, J = 8 e 4Hz), 7,89 (d, 1H, J = 12Hz), 7,84 (d, 1H, J = 4Hz), 7,60 (dd, 1H, J = 8 e 4Hz), 7,47 - 7,42 (m, 2H) , 7,44 (ΑΑ'ΒΒ', 2H, J*b = 8Hz) , 7,35 -7,25, (m, 3H), 7,24 (d, 1H, J = 4Hz) , 7,16 (dt, 1H, J = 8 e 4Hz), 7,06 (ΑΑ'ΒΒ', 2H, JAB = 8Hz) , 6,84 (d, 1H, J = 4Hz), 5,27 (s, 2H) , 4,43 (s, 2H) , 3,61-3,50 (m, 2H) , 3,47-3,36 51 PE1294715 (m, 2H), 3,09 (s, 3H), 2,23 (s, 6H).

Exemplo 7

Preparação de 4-metilbenzenosulfonato de 5-(4-[3-cloro-4-(3-fluorobenziloxi)-anilino]-6-quinazolinil)-furan-2-carbaldeido

Um frasco de fundo redondo de 3 tubuladuras e de 2 L de capacidade equipado com um agitador mecânico foi carregado com 74,95 g do sal HCl de 5-(4-[3-cloro-4-(3-fluorobenziloxi)anilino]-6-quinazolinil)furan-2-carbaldeido (preparado de acordo com o Processo C, página 56 da WO 99/35146; ver esquema A, Processo C anterior) e 749,5 mL de THF. A esta mistura pastosa adicionou-se 84,45 mL de NaOH 2M e os reagentes foram agitados durante 30 minutos. As camadas foram separadas e depois a camada orgânica foi lavada com 160 mL de H2O. A camada orgânica foi misturada com 3,75 g de Darco G60 e foi filtrada através de Celite. O filtrado foi recolhido e adicionado lentamente a 33,54 g de ácido de monohidrato do ácido toluenosulfónico com agitação rápida. Os sólidos precipitaram lentamente à temperatura ambiente. A mistura foi arrefecida até 0°C e foi agitada durante 10 minutos. A mistura foi filtrada e extraída a seco numa ensecadeira de borracha, e depois foi seca in vácuo a 50°C durante a noite. A poduçao de 4-metilbenzenosulfonato de 5-(4-[3-cloro-4-(3-fluorobenzil-oxi)-anilino]-6-quinazolinil)-furan-2-carbaldeido foi de 84,25 gramas (88,8%). 52 ΡΕ1294715

Exemplo 8

Preparação do anidrato do ditosílato de N-{3-cloro-4-[{3-fluorobenzil)oxi]fenil}-6-[5-({[2-(metanosulfonil)etil]-amino}metil)-2-furil]-4-quinazolinamina (forma de anidrato do composto de fórmula II)

Adicionou-se a um reactor de 20 L 13,3 vol de THF seguido por 0,62 partes em peso (2,93 moles) de NaBH(OAc)3. O reactor de 20L foi regulado para manter os conteúdos a 20°C. Carregou-se um segundo reactor de 20 L com 1 000 g, (1,55 moles) de 4-metilbenzenosulfonato de 5-(4-[3-cloro-4-(3-fluorobenziloxi)-anilino]-β-quinazolinil)furan-2-carbaldeido preparado pelo processo do exemplo 7 e 6,7 vol de THF. À solução de THF de 4-metilbenzenosulfonato de 5-(4-[3-cloro-4-(3-fluorobenziloxi)-anilino]-6-quinazolinil)-furan-2-carbaldeido adicionou-se 0,325 vol (1,86 moles) de diisopropiletilamina seguida por 0,32 partes em peso de 2-(metilsulfono) etilamina, (321g, 2,6 moles) e 0,15 vol de IPA. Após 1 hora, a solução de imina/THF preformada foi transferida por vácuo para a suspensão agitada de NaBH(OAc)3 no primeiro reactor de 20 L durante 10 minutos. Após 90 minutos, adicionaram-se 4 vol de NaOH 5N durante 40 minutos por meio de uma bomba. Essa solução foi deixada em agitação durante 15 minutos, após o que o agitador foi desligado e as camadas foram deixadas separar-se. A camada aquosa foi drenada do fundo do reactor e a camada orgânica foi transferida para esvaziar o reactor de 20L através de uma mangueira de transferência encamisada a aço inoxidável 53 PE1294715 e forrada com teflon equipada com um filtro em linha de 0,45 pm. A esta solução adicionaram-se 2 vol de uma solução de THF de 4 partes em peso (1180 g, 6,2 moles) de monohidrato de ácido de p-toluenosulfónico durante 5 minutos. Observou-se a formação de um precipitado amarelado a partir da solução e esta foi deixada em agitação à temperatura ambiente durante 12 horas. A reacção foi drenada do fundo do reactor e foi filtrada através de um filtro cerâmico forrado com papel. O bolo de filtragem amarelo foi lavado com um volume de uma solução de THF/água a 95:5 e foi deixada secar ao ar durante a noite. Após secagem por sucção durante 12 horas, o bolo de filtragem amarelo foi transferido para 2 bandejas de vidro e estas foram colocadas num forno de secagem (42°C) sob vácuo de câmara (house vacuum) (45, 72 cm (18') de Hg) com uma drenagem de azoto. Removeram-se as duas bandejas do forno e deixaram-se arrefecer até à temperatura ambiente, tendo-se procedido à sua análise. A produção do isolado de ditosilato (anidrato) de N-{3-cloro-4-[{3- fluorobenzil)oxi]fenil}-6-[5-({[2-(metanosulfonil)etil]-amino}metil)-2-furil]-quinazolinamina foi de 1 264 g (1,3 partes em peso, 88%; 1 443 g Teórico) de um sólido amarelo.

Aproximadamente 50 mg do produto foi transferido para um aparelho de humidade Volumétrico Karl Fisher (modelo DL35, Mettler, Hightstown, NJ), que foi operado de acordo com as instruções do fabricante. O conteúdo de água do anidrato foi determinado ser 0,31%.

Exemplo 9 54 ΡΕ1294715

Difracção de raios-X do Sal Ditosilato do Anldrato

Uma amostra do sal ditosilato do anidrato preparada de acordo com o exemplo foi colocada na forma de pó numa placa de base zero de silicio de um Difractómetro XDS2000 Scintag. A leitura de difracção de raios-X do pó da amostra foi obtida sob as seguintes condições.

Geometria: Θ/Θ

Referência da leitura: 0038018

Gerador ID3000 de Alta Voltagem Seifert, S/N 90 67 1422 Torre de tubo de raios-X: tipo Seifert V4, 60 kV max., 40 mA max.,

Tubo de difracção de raios-X: tubo do ânodo de cobre AEG FK-60-10, 60 kV max., 2 kW max.,

Foco normal (1 x 10 mm)

Detector de Estado Sólido Si (Li) arrefecido Scintag Peltier Modelo B3A,

Raio do Goniómetro: 250 mm Condições de operação: 45 kV 40 mA 0,02 graus 0,1 graus 20/min ΟΝ (1 rotação/seg)

Voltagem do tubo de raios-X Corrente do tubo de raios-X Condições de leitura:

Passo:

Modo de leitura continuo Velocidade de leitura: Rotação da amostra: 55 PE1294715 DS = 1 mm; SS(i) = 2 mm SS(d) = 5 mm; RS = 0,3 mm DS = fenda de divergência (raio incidente) SS (i) = ranhura de difusão (incidente) SS(d) = ranhura de difusão (difractado) RS = fenda de recepção

Os dados foram obtidos e analisados utilizando-se um software DMSNT v. 1.37 disponível na Scintag, Inc. A leitura de difracção de raios-X obtida é mostrado na figura 1.

Exemplo 10

Preparação do monohidrato do ditosilato de N-{3-cloro-4-[(3-fluorobenzil)oxí]fenil}-6-[5-({[2-(metanosulfonil)-etil]aminojmetil)-2-furil]-4-quinazolinamina (forma de monohidrato do composto de fórmula II)

Um reactor de 20L foi carregado com 1 parte em peso (930 g, 1,0 mole) do anidrato do ditosilato de N-{3-cloro-4-[(3-fluorobenzil)oxi]fenil}-6-[5-({[2-(metanosulfonil) etil]amino}metil)-2-furil]-4-quinazolinamina preparado por utilização do processo do exemplo 8. A este adicionaram-se 10 volumes de uma solução pré-misturada a 8:2 de THF:água desionizada e o reactor foi aquecido até 65°C. A dissolução completa foi observada a 50°C. A mistura de reacção transparente foi transferida para outro reactor de 20 L através de uma mangueira de transferência 56 ΡΕ1294715 encamisada a aço inoxidável que estava equipada em linha com uma cassete filtrante de 5,0 μιη. O reactor de 20 L vazio e a linha de filtraqem foram lavadas com 0,2 vol da solução pré-misturada a 8:2 de THFrágua desionizada. Utilizou-se mais um volume da solução pré-misturada a 8:2 de THF:água desionizada para lavar o material dentro da mistura de reacção. O reactor de 20 L foi aquecido até ~80°C. A temperatura de reacção foi então descida até 55°C durante 2 horas e depois até 45°C durante 10 horas. Após 10 horas, a temperatura foi ajustada para 25°C e a mistura de reacção foi deixada em agitação à temperatura ambiente durante 45 minutos. O precipitado amarelo foi drenado do fundo do reactor de 20L para um filtro cerâmico forrado com papel. O fluxo foi rápido e regular, e a velocidade de filtragem muito boa. O bolo de filtragem amarelo foi lavado com 0,6 volumes de uma solução pré-misturada a 8:2 de THF:água desionizada e o sólido amarelo foi seco ao ar durante 4 horas e colocado numa bandeja de vidro. A bandeja de vidro foi colocada num forno de vácuo sob vácuo de câmara (vacuum house) (~45,72 cm (18") de Hg) a 60°C com uma drenagem de azoto durante 2 dias. Após ser retirado do forno, o material foi analisado em conformidade. A produção foi de 743 gramas (0,8 partes em peso, 80%; 930 g teórico) como um sólido cristalino amarelo vivo.

Aproximadamente 50 mg do produto foram transferidos para um Aparelho de Humidade Volumétrico Karl Fisher (modelo DL35, Mettler, Hightstown, NJ) , que foi operado de acordo com as instruções do fabricante. O 57 PE1294715 conteúdo de água do monohidrato foi determinado ser 1,99%, o que está de acordo com o valor teórico de 1,92%.

Exemplo 11

Difracção de raios-X do Sal de Ditosilato do Monohidrato

Uma amostra do sal ditosilato do monohidrato preparada de acordo com o exemplo 10 foi aplicada no estado em pó sobre uma placa de base zero de silicio de um Difractómetro XDS2000 Scintag. A leitura de difracção de raios-X de pó da amostra foi obtida sob as seguintes condições.

Geometria: Θ/Θ

Referência da leitura: 0038018

Gerador ID3000 de Alta Voltagem Seifert, S/N 90 67 1422 Torre de tubo de raios-X: tipo Seifert V4, 60 kV max., 40 mA max.,

Tubo de difracção de raios-X: tubo do ânodo de cobre AEG FK-60-10, 60 kV max., 2 kW max.,

Foco normal (1 x 10 mm)

Detector de Estado Sólido Si(Li) arrefecido Scintag Peltier Modelo B3A,

Raio do Goniómetro: 250 mm Condições de operação:

45 kV

Voltagem do tubo de raios-X 58 ΡΕ1294715

40 mA

Corrente do tubo de raios-X

Condições de leitura:

Passo: 0,02 graus

Modo de leitura continuo

Velocidade de leitura:

Rotação da amostra: 0,25 graus 20/min ΟΝ (1 rotação/seg) DS = 1 mm; SS(i) = 2 mm SS(d) = 5 mm; RS = 0,3 mm DS = fenda de divergência (raio incidente) SS(i) = ranhura de difusão (incidente) SS (d) = ranhura de difusão (difractado) RS = fenda de recepção

Os dados foram obtidos e analisados utilizando-se um software DMSNT v. 1.37 disponível na Scintag, Inc. a leitura de difracção de raios-X obtida é mostrado na figura 2.

Exemplo 12

Preparação do ditosilato de (4-(3-fluoro-benziloxi)-3-bromofenil)-(6-(5-((2-metanosulfoniletilamino)-metil)-furan-2-il)quinazolin-4-il)-amina. (composto de fórmula IV) O sal de HC1 de 5-(4-[3-bromo-4-(3-fluoro-benziloxi) -anilino]-6-quinazolinil)-furan-2-carbaldeido (preparado de acordo com o Processo C, página 56 da WO 99/35146) foi convertido no sal tosilato de acordo com o 59 ΡΕ1294715 processo do exemplo 7. 0 produto tosilato de furan 2- carbaldeido resultante foi utilizado para preparar o ditosilato de (4-(3-fluoro-benziloxi)-3-bromofenil)-(6-(5-((2-metanosulfoniletilamino)-metil)-furan-2-il)quinazolin-4-il)-amina de acordo com o processo do exemplo 8.

Exemplo 13

Preparação do ditosilato de (4- (3-fluoro-benziloxi)-3-clorofenil)-(6-(2-((2-metanosulfoniletilamino)-metil)-tiazol-4-il)quinazolin-4-il)-amina. (composto de fórmula III) 0 sal HCl de (4-(3-fluoro-benziloxi)-3-cloro-fenil)-(6-(2-((2-metanosulfoniletilamino)-metil)-tiazol-4-il)quinazolin-4-il)-amina foi preparado de acordo com o processo F, páginas 57-59 da WO 99/35146 e foi depois convertido no sal ditosilato de (4-(3-fluoro-benziloxi)-3-clorofenil)-(6-(2-((2-metanosulfoniletilamino)-metil)-tiazol-4-il)quinazolin-4-il)-amina de acordo com o processo do exemplo 7.

Exemplo 14

Conversão do monohidrato do ditosilato de N-{3-cloro-4-[(3-fluorobenzil)oxí]feníl}-6-[5-({[2-(metanosulfonil)etil]-aminojmetil)-2-furil]-4-quinazolinamina no anidrato.

Aproximadamente 50 mg do monohidrato do 60 ΡΕ1294715 ditosilato de N-{3-cloro-4-[(3-fluorobenzil)oxi]fenil}-6-[5-({[2-(metanosulfonil)etil]amino}metil)-2-furil]-4-quina-zolinamina preparado de acordo com o processo do exemplo 10 foram pesados num frasco de 1 dram (1,77185 g), ao qual se adicionou 1 mL de MeOH ou 2-metoxietanol. A mistura pastosa foi agitada num banho de água a 25°C durante 4 dias, após o que o sólido foi separado por filtração e foi seco sob vácuo de câmara (house vaccum) a 40°C durante 1 dia. O padrão de difracção de raios-X do sólido seco do MeOH e 2-metoxietanol coincidiu com o do anidrato do ditosilato de N-{3-cloro-4-[(3-fluorobenzil)oxi]fenil}-6-[5-({[2-(metanosulfonil)etil]amino}metil)-2-furil]-4-quina-zolinamina.

Exemplo 15

Conversão do anidrato do ditosilato de N-{3-cloro-4-[ (3-fluorobenzil) oxi]fenil}-6-[5-({[2-(metanosulfonil)etil]-amino}metil)-2-furil]-4-quinazolinamina no monohidrato. A um frasco de fundo redondo de 3 tubuladuras de 1 L equipado com um agitador suspenso adicionaram-se 77,0 g (0,08 moles) de anidrato do ditosilato de N-{3-cloro-4-[(3-fluorobenzil)oxi]fenil} — 6—[5—({[2-(metanosulfonil)etil]-amino}metil)-2-furil]-4-quinazolinamina preparado de acordo com o processo do exemplo 12. Ao sólido amarelo adicionou-se água desionizada (10 volumes) e a mistura pastosa foi deixada em agitação à TA. Ao fim de uma hora, removeram-se pequenos aliquotas, filtraram-se através de papel num funil 61 ΡΕ1294715 de Buchner e secaram-se num forno de vácuo a 60°C durante 12 horas. Cada amostra foi submetida a análise de XRD [t=45 min, anidrato; t=2,5 hrs; anidrato; t=3,5 hrs, mistura de anidrato/monohidrato; t=>12 hrs, monohidrato]. A mistura pastosa da reacção foi deixada em repouso à temperatura ambiente durante 36 horas. O material amarelo vivo foi então filtrado através de papel num funil de Buchner e foi seco ao ar durante a noite. O material foi colocado num forno de secagem de vácuo a 55°C com uma drenagem de azoto durante 96 horas. As produções do isolado foram de 74 gramas (96% Teórico). Uma amostra foi submetida a XRD, o que indicou que era o monohidrato do ditosilato de N-{3-cloro-4-[(3-fluorobenzil)oxi]fenil}-6-[5-({[2-(metanosulfonil)etil]amino}metil)-2-furil]-4-quina-zolinamina.

Exemplo 16

Ensaio de absorção de humidade do sal monohidrato do ditosilato de N-{3-cloro-4-[(3-fluorobenzil)oxi]fenil}-6-[5-({[2-(metanosulfonil)etil]amino}metil)-2-furil]-4-quina-zolinamina.

Aproximadamente 12 mg do sal monohidrato do ditosilato de N-{3-cloro-4-[(3-fluorobenzil)oxi]fenil}-6-[5-({[2-(metanosulfonil)etil]aminojmetil)-2-furil]-4-quina-zolinamina preparado de acordo com o exemplo 10 foi pesado num recipiente de amostra de um aparelho de absorção de humidade (modelo SGA-100, feito pela VTI). A amostra foi 62 PE1294715 seca a 60°C sob uma corrente de azoto até que a perda de peso fosse inferior a 0,015% de peso ao fim de 5 minutos. A humidade relactiva (HR) foi então aumentada (absorção) para 5, 15, 25, 35, 45, 55, 65, 75, 85 e 95% - em cada etapa, o equilíbrio foi definido como uma alteração de peso de menos de 0,015% ao fim de 5 minutos. A humidade relativa foi então diminuída (desabsorção) para 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30 e 20% com a mesma condição de equilíbrio. A curva de absorção (eixo y: peso - % da alteração vs. eixo x: % HR) é apresentada na figura 3 (a).

Exemplo 17

Ensaio de absorção de humidade do sal de di-HCl de N-{3-cloro-4-[(3-fluorobenzil)oxi]fenil}-6-[5- ({[2- (metanosulfo-nil)etil]amino}metil)-2-furil]-4-quinazolinamina.

Aproximadamente 15 mg do sal de di-HCl de N-{3-cloro-4-[(3-fluorobenzil)oxi]fenil}-6-[5-({[2-(metanosul-fonil)etil]aminojmetil)-2-furil]-4-quinazolinamina foram pesados num recipiente de amostra de um aparelho de absorção de humidade (modelo SGA-100, feito pela VTI). A amostra foi seca a 60°C sob uma corrente de azoto até que a perda de peso fosse inferior a 0,015% de peso ao fim de 5 minutos. A humidade relactiva foi então aumentada (absorção) para 5, 15, 25, 35, 45, 55, 65, 75, 85 e 95% em cada etapa, o equilíbrio foi definido como uma alteração de peso de menos de 0,015% ao fim de 5 minutos. A humidade relativa foi então diminuída (desabsorção) para 63 PE1294715 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30 e 20% com a mesma condição de equilíbrio. A curva de absorção (eixo y: peso - % da alteração vs. eixo x: % HR) é apresentada na figura 3 (b) .

Exemplo 18

Estabilidade física relativa das formas cristalinas de anidrato e monohidrato de ditosilato de N-{3-Cloro-4-[(3-fluorobenzil)oxi]fenil}-6-[5-({[2- (metanos-sulfonil)etil]amino}metil)-2-furil]-4-quinazolinamina

Utilizou-se um método de equilíbrio de uma mistura pastosa para determinar a estabilidade física relativa das formas cristalinas de anidrato e monohidrato de ditosilato de N-{3-Cloro-4-[(3-fluorobenzil)oxi]fenil}-6-[5-({[2-(metanossulfonil)etil]amino}metil)-2-furil] -4-quinazolinamina. O método envolve a preparação de misturas pastosas orgânicas/aquosas de actividade de água conhecida que contêm misturas das formas de anidrato e monohidrato. As misturas pastosas foram equilibradas para a forma de energia livre mais baixa, a partir da qual a estabilidade física foi determinada como uma função da humidade realtiva.

As misturas de metanol (MeOH)/H20 foram preparadas por volume e a composição foi convertida na fracção molar (Xw) utilizando pesos moleculares e densidades à temperatura ambiente (0,787 g/mL para MeOH e 1,00 g/mL para H20) . A actividade da água (aw) foi 64 ΡΕ1294715 calculada a partir de: aw = 0,0056 + 1,398¾ - 0, 647rq + 0,153x\ + 0,0845x\ (Zhu, H., Yuen, C., Grant, DJ.W., 1996. Influência da actividade da água em misturas de solvente orgânico + água na natureza da fase de cristalização da droga. 1.Theophylline. Int. J. Pharm. 135, 151-160).

Ambas as formas cristalinas com uma relação de 1:1 foram adicionadas a frascos e reconstituídas com misturas de MeOH/ERO. Após mistura inical, removeu-se um aliquota e disponibilizou-se para análise por difracção por raios X de pó (modelo PADV, Scintag, Cupertino, CA) para assegurar que os picos de ambas as formas cristalinas eram detectáveis. As amostras foram agitadas e equilibradas a 25°C num banho de água.

Os resultados do Quadro III ilustram o padrão de conversão da forma cristalina como uma função da actividade da água calculada/HR. A taxa de transformação foi muito rápida, como observado por difracção de raios-X de pó (DRXp) , não mudando a partir do dia 1 para a frente. Os padrões de DRXp são apresentados na Fig. 5. O painel de topo mostra os resultados para as formas cristalinas puras do anidrato e do monohidrato. O painel do meio ilustra que a mistura 1:1 foi convertida no anidrato na fase líquida com um equivalente de actividade de água igual a 7% de HR. Da mesma forma, o painel de baixo mostra que o monohidrato 65 PE1294715 é a forma estável a um equivalente de actividade de água igual a 15% de HR. 0 sumário do Quadro III refere que, em geral, o monohidrato torna-se na forma estável termodinamicamente entre 7 e 15% de HR e permanece estável até 100% de HR.

Quadro III

Volume de Fracção Molar HR (%) Forma de água (%) de Água Equilíbrio 0 0,00 0 Anidrato 2 0,04 7 Anidrato 5 0,11 15 Monohidrato 10 0,20 26 Monohidrato 20 0,36 43 Monohidrato 40 0,60 66 Monohidrato 60 0,77 80 Monohidrato 80 0,90 91 Monohidrato 90 0,95 95 Monohidrato 100 1,00 100 Monohidrato

Dados Biológicos

Os compostos do presente invento foram ensaiados relativamente à actividade inibidora da cinase de tirosina da proteína da família erbB em ensaios de fosforilaçâo do substrato e ensaios de proliferação celular. 66 PE1294715

Ensaio de Fosforilação do Substrato Os ensaios de fosforilação do substrato utilizam construções recombinantes expressas do baculovirus dos domínios de c-erbB-2 e c-erbB-4 que são constitutivamente activos e de EGFr isolado a partir de membranas celulares A431 solubilizadas. 0 método mede a capacidade dos enzimas

isolados para catalisar a transferência do g-fosfato do ATP para os resíduos de tirosina num peptido sintético biotinilado (Biotin-GluGluGluGluTyrPheGluLeuVal). A fosforilação do substrato foi detectada a seguir a qualquer um dos seguintes dois processos: a) . c-erbB-2, c-erbB4 ou EGFr foram incubados durante 30 minutos, à temperatura ambiente, com MnCl2 a 10 mM, ATP a lOmM, peptido a 5 mM, e o composto de ensaio (diluído a partir de uma quantidade de reserva a 5 mM em DMSO, em que a concentração final de DMSO é de 2%) num tampão HEPES a 40 mM, pH 7,4. A reacção foi interrompida pela adição de EDTA (concentração final de 0,15 mM) e uma amostra foi transferida para uma placa de 96 recipientes revestidos com estreptavidina. A placa foi lavada e o nível de fosfotirosina sobre o peptido foi determinado por utilização de um anticorpo de antifosfotirosina referenciado por Europium e quantificado por meio de uma técnica de fluorescência que reduz com o tempo. b) . ErbB2 foi incubado durante 50 minutos à temperatura ambiente com MnC12 a 15 mM, ATP a 2 mM, 0,25 mCi [g“33P] ATP/recipiente, substrato de peptido a 67 ΡΕ1294715 5 mM, e o composto de ensaio (diluído a partir de uma quantidade de reserva a 10 mM em DMSO, em que a concentração final de DMSO é de 2%) em MOSP a 5 mM, pH 7,2. A reacção foi terminada pela adição de 200 ml de PBS contendo 2,5 mg/ml de pérolas de EPC revestidas com estreptavidina (Amersham Inc.), ATP a 50 mM, EDTA a 10 mM e 0,1% de TX-100. As placas de microtitulação foram seladas e as pérolas de EPC foram deixadas precipitar durante pelo menos seis horas. O sinal de EPC foi medido por utilização de um contador de cintilação da placa de 96 recipientes Packard Topcount (Packard Instrument Co., Meridien, CT).

Os compostos ensaiados foram os produtos dos Exemplos 8, 12 e 13, numa solução tamponada como indicado. Os resultados representativos são mostrados no Quadro IV no que respeita à inibição da cinase de tirosina de EGFR, erbB2 e erbB4. São também apresentadas as estruturas para a base livre dos sais dos Exemplos 8, 12 e 13. 68 PE1294715

Quadro IV

Exemplo # Estrutura EGFR ErbB2 ErbB4 8 „ rÀ-J0 +++ +++ ++ 13 0ojCip +++ +++ + 12 e.-, ?.{bã σ w +++ +++ +

Valores de CI5o Símbolo < 0,10 μΜ +++ 0,10-1,0 μΜ ++ 1,0-10,0 μΜ + > 10,0 μΜ - Não determinado ND

Ensaios celulares: Ensaio de Inibição do

Crescimento do Azul Metileno 69 ΡΕ1294715

Linhas de células de tumor do seio (BT474), da cabeça e pescoço (HN5) e gástrico (N87) e Fibrobastos de prepúcio humano (FPH) foram cultivados em DMEM de baixa glicose (Life Technologies 12320-032) contendo soro bovino fetal a 10% (SBF) a 37°C num incubador humidificado de 10% de CO2 e 90% de ar. A linha de células HB4a epiteliais mamárias humanas transformadas em SV40 foram transfectadas quer com H-ras cDNA humano (HB4a r4.2) quer com c-erbB2 cDNA humano (HB4a c5.2). Os clones HB4a foram cultivados em RPMI contendo SBF a 10%, insulina (5 pg/ml) , hidrocortisona (5 pg/ml), suplementada com o agente de selecção higromicina B (50 pg/ml). As células foram colhidas utilizando tripsina/EDTA, foram contadas utilizando um haemocitómetro, e colocadas em 100 ml dos meios apropriados, às seguintes densidades, numa placa de cultura de tecidos de 96 recipientes (Falcon 3075): BT474 10.000 células/recipiente, HN5 3.000 células/recipiente, N87 10.000 células/recipiente, HB4a c5.2 3.000 células/recipiente, HB4a r4.2 3.000 células/recipiente, FPH 2.500 células/recipiente. No dia seguinte, os compostos foram diluídos em DMEM contendo 100 mg/ml de gentamicina, a duas vezes a concentração final requerida, de soluções de reserva a 10 mM em DMSO. 100 ml/recipiente destas diluições foram adicionados aos recipientes de controlo. Os compostos diluídos em DMEM foram adicionados a todas as linhas de células, incluindo as linhas de células HB4a r4.2 e HB4a c5.2. A concentração final de DMSO em todos os recipientes foi de 0,3%. As células foram incubadas a 37°C, 10% de C02, durante 3 dias. O meio foi removido por 70 ΡΕ1294715 aspiração. A biomassa celular foi estimada por manchamento de células com 100 μΐ por recipiente de azul de metileno (Sigma M9140, 0,5% em etanol:água a 50:50), e incubação à temperatura ambiente durante pelo menos 30 minutos. O manchamento foi removido e as placas foram lavadas sob uma suave corrente de água, e foram secas ao ar. Para libertar o manchamento das células, adicionaram-se 100 μΐ de solução solubilizante (1% de N-lauroil de sarcosina, sal de Sódio, Sigma L5125, em PBS), e as placas foram agitadas suavemente durante cerca de 30 minutos. A densidade óptica a 620 nM foi medida num leitor de microplacas. A inibição em percentagem do crescimento celular foi calculado em relação aos recipientes de controlo tratados com veiculo. A concentração de composto que inibe 50% do crescimento celular (CI50) foi interpolada por utilização de regressão não linear (Levenberg-Marquardt) e da equação Y=Vmax*(l-(x/(K+x)))+Y2, em que "K" foi igual ao CI50. O quadro V ilustra a actividade inibidora de compostos do presente invento na forma de valores CI5o em μΜ contra uma gama de linhas celulares tumorais. Utilizando FPH como uma linha celular normal humana representativa, os valores da toxicidade são fornecidos como valores de CI50 em micromolar. Uma medida da selectividade entre linhas normais e tumorais é também proporcionada. 71 PE1294715

Quad ro V Exemplo # Células N87 Células BT474 Células HN5 CI50 em μΜ CI50 em μΜ CI50 em μΜ 8 +++ +++ +++ 12 +++ +++ +++ 13 +++ +++ +++

Valores de CI5o Símbolo < 5 μΜ +++ 5-25 μΜ ++ 25-50 μΜ + > 50 μΜ _ Não determinado ND

Lisboa, 4 de Maio de 2007

Claims (19)

1. PE1294715 1 REIVINDICAÇÕES 1. Composto de Fórmula (I) ,

   ou as suas formas de anidrato ou de hidrato, em que Ri é Cl ou Br; X é CH, N ou CF; e Het é tiazole ou furano.
2. 2. Composto de acordo com a reivindicação 1, o qual é o composto de Fórmula (II) 2 V.

   PE1294715 H‘\í! γ\λ a ou as suas formas de anidrato ou de hidrato.
3. 3. Composto de acordo com a reivindicação 2, em que o composto está na forma de anidrato.
4. 4. Composto de acordo com a reivindicação 2, em que o composto é caracterizado por um padrão de difracção de raios x de pó, que compreende os picos: Dois theta (graus) Espaçamento d (angstroms) 4,8 18 8,7 10 O co 1—1 4,9 18, 9 4,7 21,0 4,2 22,3 4,0
5. 5. Composto de acordo com a reivindicação 2, em 3 PE1294715 que o composto está na forma de monohidrato.
6. 6. Composto de acordo com a reivindicação 2, em que o composto é caracterizado por um padrão de difracção de raios x de pó, que compreende os picos: Dois theta (graus) Espaçamento d (angstroms) 6,6 13 8,3 10 11,5 7,7 18,1 4,9 21,1 4,2
7. 7. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto apresenta a Fórmula (III)

   (III) ou está nas suas formas de anidrato ou monohidrato. 4 PE1294715
8. 8. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto tem a Fórmula (IV) Hf. \l O

   ou está nas suas formas de anidrato ou monohidrato.
9. 9. Mistura das formas anidra e hidrato de um composto de Fórmula (I) como definido na reivindicação 1.
10. 10. Mistura de acordo com a reivindicação 9, em que o composto é um composto de Fórmula (II).
11. 11. Composição farmacêutica que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de fórmula (I) ou das suas formas anidrato ou hidrato, como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 8, ou de uma mistura como reivindicado na reivindicação 9 ou reivindicação 10, e um ou mais veículos, diluentes e excipientes farmaceuticamente aceitáveis; em que a 5 ΡΕ1294715 composição é uma formulação adaptada para administração oral apresentada na forma de cápsulas, comprimidos, pós ou grânulos.
12. 12. Composto de fórmula (I) ou as suas formas de anidrato ou hidrato como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 8, ou uma mistura como reivindicada na reivindicação 9 ou reivindicação 10, para utilização em terapia.
13. 13. Utilização de um composto de fórmula (I) ou as suas formas de anidrato ou hidrato como reivindicado em qualquer uma das reivindicações 1 a 8, ou uma mistura como reivindicada na reivindicação 9 ou reivindicação 10, para a preparação de um medicamento útil para o tratamento de uma doença caracterizada por uma actividade aberrante da CTP da familia erbB.
14. 14. Utilização de acordo com a reivindicação 13, em que a referida CTP da familia erbB é seleccionada entre EGFr, c-erb-B2 e c-erb-B4.
15. 15. Utilização de acordo com a reivindicação 13, em que pelo menos duas CTP's da familia erbB seleccionadas entre EGFr, c-erb-B2 e c-erb-B4 exibem actividade aberrante.
16. 16. Utilização de acordo com a reivindicação 13, em que pelo menos uma CTP da familia erbB seleccionada 6 ΡΕ1294715 entre o grupo que consiste em EGFr, c-erb-B2 e c-erb-B4 é inibida pelo composto.
17. 17. Utilização de acordo com a reivindicação 13, em que pelo menos duas CTP's da familia erbB seleccionadas entre o grupo que consiste em EGFr, c-erb-B2 e c-erb-B4 são inibidas pelo composto.
18. 18. Utilização de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 17, em que doença é o cancro ou a psoriase.
19. 19. Utilização de acordo com a reivindicação 18, em que a doença é o cancro. Lisboa, 4 de Maio de 2007