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JP6255344B2 - サッカロピンデヒドロゲナーゼ遺伝子を阻害することによって真菌類及び卵菌類を防除するためのＲＮＡｉ - Google Patents

サッカロピンデヒドロゲナーゼ遺伝子を阻害することによって真菌類及び卵菌類を防除するためのＲＮＡｉ Download PDF

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Description

本発明は、ＲＮＡ干渉を使用して、１種類以上の生物学的機能を阻害することによる、特に、リシン生合成に関するα−アミノアジピン酸経路に関与している真菌類サッカロピンデヒドロゲナーゼ遺伝子及びその卵菌類ホモログを阻害することによる、植物病原体及び有害生物（特に、真菌類又は卵菌類）の防除に関する。
本発明は、真菌類標的遺伝子又は卵菌類標的遺伝子のＲＮＡ干渉を使用する、上記防除のための方法及び組成物を提供する。本発明は、さらにまた、そのような真菌類又は卵菌類に対して耐性を示すトランスジェニック植物を産生させる方法並びにトランスジェニック植物及びそれから生成される種子も対象とする。
本発明に関連して使用される技術は、ＲＮＡ干渉、即ち、ＲＮＡｉである。
小さな二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）の形成を誘発することが可能な標的遺伝子に相同な配列を生物体内において発現させることによって、特に、その遺伝子を無効にすること及びその結果として生じる表現型を観察することが可能となる（Ｘｉａｏ ｅｔ ａｌ．， ２００３）。
ｄｓＲＮＡは、そのｄｓＲＮＡと同一である領域においてのみ、相同ＲＮＡの特異的な分解を誘発する（Ｚａｍｏｒｅ ｅｔ ａｌ．， ２０００；Ｔａｎｇ ｅｔ ａｌ．， ２００３）。ｄｓＲＮＡは、二本鎖配列（ここで、該二本鎖配列は、一般に、センス鎖とアンチセンス鎖を含んでいる少なくとも１９の塩基対（ｂｐ）からなる）を含んでいるＲＮＡ分子である。そのようなｄｓＲＮＡ分子は、２本の相補的ＲＮＡ鎖の間の相補性の程度が極めて大きいことも特徴とする。ｄｓＲＮは、一般に１８〜２５ヌクレオチド（ｓｉＲＮＡ）からなるＲＮＡフラグメントに分解され、標的ＲＮＡ上の切断部位は、一様に、１８〜２５ヌクレオチドの間隔で隔てられている。その結果生じた小さなｓｉＲＮＡは、標的ＲＮＡに対して極めて高度な同一性を示す；しかしながら、それにもかかわらず、そのｓｉＲＮＡと標的ＲＮＡの対応する部分の間の３〜４ヌクレオチドのミスマッチによって、当該システムが機能可能となる（Ｔａｎｇ ｅｔ ａｌ．， ２００３）。かくして、１８〜２５ヌクレオチドからなるこれらのフラグメントが標的を認識するためのＲＮＡガイドを構成するということが示唆された（Ｚａｍｏｒｅ ｅｔ ａｌ．， ２０００）。これらの小さなＲＮＡは、細胞溶解の前にｄｓＲＮＡでトランスフェクトされたキイロショウジョウバエ（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ ｍｅｌａｎｏｇａｓｔｅｒ）のＳｃｈｎｅｉｄｅｒ−２細胞から調製された抽出物の中でも検出されたの（Ｈａｍｍｏｎｄ ｅｔ ａｌ．， ２０００）。ｍＲＮＡの切断における１８〜２５ヌクレオチドからなるフラグメントのガイドの役割は、ｄｓＲＮＡから単離された１９〜２５ヌクレオチドからなるこれらのフラグメントがｍＲＮＡの分解に関与し得るという観察結果によって支持される（Ｚａｍｏｒｅ ｅｔ ａｌ．， ２０００）。大きな相同ＲＮＡ分子も、ＰＴＧＳ現象を受ける植物組織の中において蓄積する（Ｐｏｓｔ Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ Ｇｅｎｅ Ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ， Ｈａｍｉｌｔｏｎ ａｎｄ Ｂａｕｌｃｏｍｅ， １９９９）。これらの小さなＲＮＡは、３種の異なったレベルのおいて遺伝子発現を調節することができる：
・ 転写（転写遺伝子サイレンシングに関するＴＧＳ）；
・ メッセンジャーＲＮＡの分解（転写後遺伝子サイレンシングに関するＰＴＧＳ）；
・ ｍｉＲＮＡ経路；
・ 翻訳。
メッセンジャーＲＮＡの分解を含む調節は、全ての真核生物において存在しているように見えるが、転写レベルにおける調節は、哺乳動物、植物、ショウジョウバエ及びＣ．エレガンス（Ｃ．ｅｌｅｇａｎｓ）においてのみ記載されている。翻訳の調節に関しては、それは、、Ｃ．エレガンス（Ｃ．ｅｌｅｇａｎｓ）及びショウジョウバエにおいて特徴付けされており、そして、哺乳動物においても存在しているように見え（Ｈａｎｎｏｎ， ２００２）、及び、植物においても存在しているように見える（Ｒｕｉｚ Ｆｅｒｒｅｒ ａｎｄ Ｖｏｉｎｎｅｔ， ２００９）。該文献においては、この現象について言及する場合、研究対象生物に応じて、ＲＮＡｉ、ＰＴＧＳ、コサプレッション又はクエリング（ｑｕｅｌｌｉｎｇ）（真菌用に備えられた）について説明されている。
ＲＮＡｉは、特に、二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）が線虫カエノラブディティス・エレガンス（Ｃａｅｎｏｒｈａｂｄｉｔｉｓ ｅｌｅｇａｎｓ）の体内に注入された場合に有効であるということが分かった（Ｆｉｒｅ ｅｔ ａｌ． １９９８；Ｍｏｎｔｇｏｍｅｒｙ ｅｔ ａｌ．， １９９８；ＷＯ ９９／３２６１９）。昆虫標的遺伝子に対応する小さな二本鎖ＲＮＡを発現する細菌を昆虫に与えた場合、その昆虫標的遺伝子の発現の阻害も観察された（ＷＯ ０１／３７６５４）。
最近になって、ヒト乳頭腫ウイルス（ＨＰＶ）の感染に関与していると考えられている遺伝子のうちの少なくとも一部分に実質的に相補的なｄｓＲＮＡを製薬上許容される担体と一緒に含んでいる医薬組成物が該ＨＰＶ感染を治療することが開示された（ＷＯ ２００９／０２４７６０７）。
内因性標的遺伝子のサイレンシングを誘発させるために（Ｈａｍｉｌｔｏｎ ｅｔ ａｌ．， １９９８；ＷＯ ９９／１５６８２）、ＲＮＡウイルス遺伝子に対して実質的な同一性を有しているｄｓＲＮＡを発現する導入遺伝子を用いて該ＲＮＡウイルスに対する抵抗性を誘発させるために（Ｗａｔｅｒｈｏｕｓｅ ｅｔ ａｌ．， １９９８；Ｐａｎｄｏｌｆｉｎｉ ｅｔ ａｌ．， ２００３；ＷＯ ９８／３６０８３；ＷＯ ９９／１５６８２；ＵＳ ５，１７５，１０２）、さらに、線虫類に対する抵抗性を誘発させるために（Ｃｈｕａｎｇ ａｎｄ Ｍｅｙｅｒｏｗｉｔｚ， ２０００；ＷＯ ０１／９６５８４）、又は、細菌アグロバクテリウム（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）に対する抵抗性を誘発させるために（ＷＯ ００／２６３４６；Ｅｓｃｏｂａｒ ｅｔ ａｌ．， ２００１）、植物においてｄｓＲＮＡの導入を実施した。最近になって、真菌類の増殖又はその病原性にとって不可欠である真菌遺伝子に対して実質的な同一性を有するｄｓＲＮＡを発現している植物がその真菌に対する抵抗性を誘発し得るということが示された（ＷＯ ０５／０７１０９１）。
それにもかかわらず、その時以来、植物病原性菌類に対するＲＮＡｉが介在する抵抗性又は耐性〔ここで、二本鎖（ｄｓＲＮＡ）分子又は小さな干渉性（ｓｉＲＮＡ）分子が植物体内で発言されている、あるいは、二本鎖（ｄｓＲＮＡ）分子又は小さな干渉性（ｓｉＲＮＡ）分子が外部組成物の一部分として種子、植物若しくは植物の果実に施用されているか又は植物が成育しているか若しくは成育するのが望ましい土壌若しくは不活性物質に施用されている〕に関する予備的な結果は殆どなく、また、商業的な例は全くない。
とりわけ、１つの難点は、標的遺伝子をｄｓＲＮＡ又はｓｉＲＮＡで阻害することによってそのｄｓＲＮＡ若しくはｓｉＲＮＡを発現している植物又はそのｄｓＲＮＡ若しくはｓｉＲＮＡを含んでいる組成物が施用される植物に対してに悪影響を及ぼすことなく商業的な使用に適したレベルにまで良好なレベルの真菌類耐性を誘発させるような、適切な標的遺伝子を見いだすことである。
Ｓｔａｒｋｅｌ Ｃ．は、自身のＰｈ．Ｄ．学位論文［“Ｈｏｓｔ ｉｎｄｕｃｅｄ ｇｅｎｅ ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ − ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ ｏｆ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ａｇａｉｎｓｔ Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ ｂｅｔｉｃｏｌａ ｉｎ ｓｕｇａｒ ｂｅｅｔ （Ｂ．ｖｕｌｇａｒｉｓ Ｌ．） ａｎｄ ａｇａｉｎｓｔ Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ ｉｎ ｗｈｅａｔ（Ｔ．ａｅｓｔｉｖｕｍ Ｌ．） ａｎｄ ｍａｉｚｅ （Ｚ．ｍａｙｓ Ｌ．）”；この学位論文は、２０１１年６月にその正しさが立証された］において、リシン生合成経路における必須遺伝子であるホモアコニターゼ遺伝子を標的とするサイレンシング構築物でコムギを形質転換することによってフサリウム・グラミネアルム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ）の増殖を阻害することを試みた。それにもかかわらず、トランスジェニックコムギ植物を生成させることはできなかった。さらに、ホモアコニターゼ遺伝子のサイレンシングを誘発させ得るようにデザインされた構築物を用いてフサリウム・グラミネアルム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ）を形質転換させることによってフサリウム・グラミネアルム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ）体内のホモアコニターゼ遺伝子を欠失又はサイレンシングさせる試みも、不成功に終わった。
国際特許出願公開第９９／３２６１９号 国際特許出願公開第０１／３７６５４号 国際特許出願公開第２００９／０２４７６０７号 国際特許出願公開第９９／１５６８２号 国際特許出願公開第９８／３６０８３号 国際特許出願公開第９９／１５６８２号 米国特許第５，１７５，１０２号 国際特許出願公開第０１／９６５８４号 国際特許出願公開第００／２６３４６号 国際特許出願公開第０５／０７１０９１号
Ｘｉａｏ ｅｔ ａｌ．， ２００３ Ｚａｍｏｒｅ ｅｔ ａｌ．， ２０００ Ｔａｎｇ ｅｔ ａｌ．， ２００３ Ｈａｍｍｏｎｄ ｅｔ ａｌ．， ２０００ Ｐｏｓｔ Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ Ｇｅｎｅ Ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ， Ｈａｍｉｌｔｏｎ ａｎｄ Ｂａｕｌｃｏｍｅ， １９９９ Ｈａｎｎｏｎ， ２００２ Ｒｕｉｚ Ｆｅｒｒｅｒ ａｎｄ Ｖｏｉｎｎｅｔ， ２００９ Ｆｉｒｅ ｅｔ ａｌ． １９９８；Ｍｏｎｔｇｏｍｅｒｙ ｅｔ ａｌ．， １９９８ Ｈａｍｉｌｔｏｎ ｅｔ ａｌ．， １９９８ Ｗａｔｅｒｈｏｕｓｅ ｅｔ ａｌ．， １９９８ Ｐａｎｄｏｌｆｉｎｉ ｅｔ ａｌ．， ２００３ Ｃｈｕａｎｇ ａｎｄ Ｍｅｙｅｒｏｗｉｔｚ， ２０００ Ｅｓｃｏｂａｒ ｅｔ ａｌ．， ２００１ "Ｈｏｓｔ ｉｎｄｕｃｅｄ ｇｅｎｅ ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ − ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｉｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔ ｏｆ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ａｇａｉｎｓｔ Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ ｂｅｔｉｃｏｌａ ｉｎ ｓｕｇａｒ ｂｅｅｔ （Ｂ．ｖｕｌｇａｒｉｓ Ｌ．） ａｎｄ ａｇａｉｎｓｔ Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ ｉｎ ｗｈｅａｔ（Ｔ．ａｅｓｔｉｖｕｍ Ｌ．） ａｎｄ ｍａｉｚｅ （Ｚ．ｍａｙｓ Ｌ．）"
本発明者らは、驚くべきことに、真菌類又は卵菌類のサッカロピンデヒドロゲナーゼ遺伝子（これは、α−アミノアジピン酸（ＡＡＡ）経路に関与している）をＲＮＡｉ法によって阻害することにより、感染、増殖、発達、繁殖及び／又は病原性が停止し、最終的には当該微生物が死に至るということを実証した。
ＲＮＡｉ技術に関するこの新しい標的は、ＡＡＡ経路が高等菌類を包含する一部の植物病原体において特異的に見られるが植物やヒトや動物では見られないるということを考慮すると、特に適している。
タンパク質を構成する一般的な２０種類のアミノ酸の中で、Ｌ−リシンは、植物と高等菌において異なる生合成経路を有することが知られている唯一のものである。植物及び細菌においては、Ｌ−リシンは、ジアミノピメリン酸（ＤＡＰ）経路を介して得られる。高等菌及びユーグレナ属においては、Ｌ−リシンは、α−アミノアジピン酸（ＡＡＡ）経路を介して得られる。サッカロピンデヒドロゲナーゼ、ホモシトレートシンターゼ、ホモアコニターゼ、ホモイソシトレートデヒドロゲナーゼ、α−アミノアジピン酸アミノトランスフェラーゼ、α−アミノアジピン酸レダクターゼ及びサッカロピンレダクターゼは、Ｌ−リシンを生合成するためのα−アミノアジピン酸経路に関与している酵素である。
これらの異なった２種類の経路（ＤＡＰ経路、及び、ＡＡＡ経路）に関与する酵素は、全て、共通ではない（Ｘｕ ｅｔ ａｌ．， ２００６， Ｂｈａｔｔａｃｈａｒｊｅｅ， Ｊ． Ｋ．， １９８５；Ｂｈａｔｔａｃｈａｒｊｅｅ， Ｊ． Ｋ．， １９９２；Ｖｏｇｅｌ， Ｈ． Ｊ．， １９６５）。例として、真菌のサッカロピンデヒドロゲナーゼは、植物由来のリシン−ケトグルタレート（ときには、「サッカロピンデヒドロゲナーゼ」とも称される）がリシン異化作用に関与している場合、リシン生合成に関与している（Ｈｏｕｍａｒｄ ｅｔ ａｌ．， ２００７）。ヒト及び動物の場合は、Ｌ−リシンは、食物中のタンパク質からのみ得ることが可能な必須アミノ酸である。さらに、真菌のＡＡＡ経路に関与する酵素は、リシン合成に特有のものである（Ｕｍｂａｒｇａｒ， Ｈ． Ｅ．， １９７８；Ｂｈａｔｔａｃｈａｒｊｅｅ， Ｊ． Ｋ．， １９９２）。
高等菌において特異的なα−アミノアジピン酸（ＡＡＡ）経路（これは、植物には存在せず、ヒト又は動物にも存在していない）の存在は、当該ＡＡＡ経路に関与する酵素が植物病原体（特に、菌類病原体）を防除するための特に魅力的な標的であるとの考えに至る。
興味深いことには、リシンは卵菌類においてはジアミノピメリン酸経路を介して合成されると報告されている（Ｂｏｒｎ ａｎｄ Ｂｌａｎｃｈａｒｄ， １９９９）が、卵菌類においてＡＡＡ経路の真菌遺伝子に相同する遺伝子が見いだされた。このことは、卵菌類には両方の経路が存在している可能性があるということを示し得る。本発明者らは、卵菌サッカロピンデヒドロゲナーゼ遺伝子に対するｄｓＲＮＡはその卵菌類の増殖を実質的に低減させるということ、及び、卵菌サッカロピンデヒドロゲナーゼ遺伝子に対するｄｓＲＮＡを発現する植物は当該卵菌類による感染に対して感染されにくいということを示した。
リシン生合成に関するＡＡＡ経路の存在は、例えば、サッカロミセス・セレビシアエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）において（Ｂｒｏｑｕｉｓｔ， Ｈ． Ｐ．， １９７１， Ｂｈａｔｔａｃｈａｒｊｅｅ， Ｊ． Ｋ．， １９９２）、ヒト病原性真菌カンジダ・アルビカンス（ ｆｕｎｇｉ Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）において（Ｇａｒｒａｄ， Ｒ． Ｃ． ａｎｄ Ｂｈａｔｔａｃｈａｒｊｅｅ， Ｊ． Ｋ．， １９９２）、及び、植物病原体マグナポルテ・グリデア（Ｍａｇｎａｐｏｒｔｈｅ ｇｒｉｓｅａ）において（Ｕｍｂａｒｇａｒ， Ｈ． Ｅ．， １９７８）、実証され、及び、研究されてきた。ＡＡＡ経路に関与するサッカロピンデヒドロゲナーゼ酵素は、集中的に研究され、及び、種々の生物において比較されてきた。そして、それらの技術的特徴（例えば、それらのヌクレオチド及びアミノ酸配列、反応速度論、基質特異性、機能、３Ｄ−構造、並びに、それらを精製する方法及び特徴付ける方法）は、当業者にはよく知られている（以下のものを参照されたい：Ｘｕ ｅｔ ａｌ．， ２００１（この内容は、参照により本明細書に組み入れる））。種々の真菌又は卵菌に由来する多くの種類の遺伝子並びにそれらの配列データは、検索可能な公開データベース（例えば、ｇｅｎＢａｎｋ）において開示されており、そして、利用可能である。
Ｒａｎｄａｌｌ，Ｔ．Ａ．ら（２００５）は、卵菌フィトフトラ・インフェスタンス（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｉｎｆｅｓｔａｎｓ）に由来するＡＡＡ経路の遺伝子のリスト（それらの受託番号によって確認される）を公表しており、それらの配列データ（該配列データは、参照により本明細書に組み入れる）は、検索可能な公開データベースにおいて利用可能である（Ｒａｎｄａｌｌ， Ｔ．Ａ．， ２００５， ＭＰＭＩ， １８， ２２９−２４３；特に、第２３９頁表８を参照されたい）。
サッカロピンデヒドロゲナーゼメッセンジャーＲＮＡを標的とするｄｓＲＮＡの存在下におけるフィトフトラ・インフェスタンス（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｉｎｆｅｓｔａｎｓ）の増殖の阻害の測定値を示す図である。 ｑＲＴ−ＰＣＲによるサッカロピンデヒドロゲナーゼｍＲＮＡレベルの分析を示す図である。
一実施形態において、本発明は、
（ｉ）真菌遺伝子又は卵菌遺伝子の少なくとも１８の連続するヌクレオチドと実質的に同一である配列を含んでいる第１鎖；及び、
（ｉｉ）前記第１鎖と実質的に相補的である配列を含んでいる第２鎖；
を含んでいるｄｓＲＮＡ分子を提供し、ここで、前記真菌遺伝子又は卵菌遺伝子は、サッカロピンデヒドロゲナーゼ遺伝子である。
本明細書中で使用される場合、「ＲＮＡｉ」又は「ＲＮＡ干渉」は、二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）が介在する、配列特異的遺伝子をサイレンシングさせる方法を示している。本明細書中で使用される場合、「ｄｓＲＮＡ」又は「ｄｓＲＮＡ分子」は、部分的に又は完全に二本鎖であるＲＮＡを示している。二本鎖ＲＮＡは、「小さな又は短い干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）」、短い干渉核酸（ｓｉＮＡ）、短い干渉ＲＮＡ、マイクロ−ＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、環状干渉ＲＮＡ（ｃｉｒｃｕｌａｒ ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ ＲＮＡ）（ｃｉＲＮＡ）、短いヘアピンＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）などとも称される。
本明細書中で使用される場合、ＲＮＡ配列とＤＮＡ配列を比較した場合にチミンがウラシルで置き換えられていることを考慮して、ｄｓＲＮＡに対して適用される用語「実質的に同一である」又は「本質的に相同する」は、ｄｓＲＮＡのうちの１本の鎖のヌクレオチド配列が、標的遺伝子の１８以上の連続するヌクレオチドと少なくとも約８０％、少なくとも８５％同一であること、さらに好ましくは、標的遺伝子の１８以上の連続するヌクレオチドと少なくとも約９０％同一であること、及び、最も好ましくは、標的遺伝子の１８以上の連続するヌクレオチドと少なくとも約９５％、９６％、９７％、９８％若しくは９９％同一であるか又は完全に同一であることを意味する。１８以上のヌクレオチドは、標的遺伝子の一部分を意味し、ここで、該一部分は、少なくとも約１８、２０、２１、２２、２３、２４、２５、５０、１００、２００、３００、４００、５００、１０００、１５００若しくは２０００の連続する塩基又は標的遺伝子の最大で全長までである。
本明細書中で使用される場合、「相補的」ポリヌクレオチドは、標準的なワトソン−クリックの相補性規則に従って塩基対合し得るポリヌクレオチドである。特に、プリンは、ピリミジンと塩基対合して、ＤＮＡの場合には、シトシンと対合するグアニン（Ｇ：Ｃ）及びチミンと対合するアデニン（Ａ：Ｔ）の組合せを形成し、又は、ＲＮＡの場合には、シトシンと対合するグアニン（Ｇ：Ｃ）及びウラシルと対合するアデニン（Ａ：Ｕ）の組合せを形成する。２つのポリヌクレオチドのそれぞれが他方に対して実質的に相補的である少なくとも１つの領域を有していることを条件の下では、その２つのポリヌクレオチドが、たとえそれらが互いに完全には相補的でなくても、互いにハイブリダイズし得るということは理解される。本明細書中で使用される場合、用語「実質的に相補的」は、２つの核酸配列がそれらのヌクレオチドの少なくとも８０％にわたって相補的であることを意味する。好ましくは、その２つの核酸配列は、それらのヌクレオチドの少なくとも８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％若しくはそれ以上にわたって相補的であり、又は、それらのヌクレオチドの全てにおいて相補的である。あるいは、「実質的に相補的」は、２つの核酸配列が高緊縮条件下においてハイブリダイズすることが可能であることを意味する。本明細書中で使用される場合、用語「実質的に同一」又は「・・・に対応する」は、２つの核酸配列が少なくとも８０％の配列同一性を有していることを意味する。好ましくは、その２つの核酸配列は、少なくとも８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％又は１００％の配列同一性を有している。
同様に、本明細書中で使用される場合、用語「核酸」及び「ポリヌクレオチド」は、直鎖又は分枝鎖で１本鎖又は２本鎖であるＲＮＡ又はＤＮＡ又はそれらのハイブリッドを示している。該用語は、ＲＮＡ／ＤＮＡハイブリッドも包含している。ｄｓＲＮＡを合成的に生成させる場合、イノシン、５−メチルシトシン、６−メチルアデニン、ヒポキサンチンなどのあまり一般的ではない塩基も、アンチセンス、ｄｓＲＮＡ及びリボザイム対合に使用することができる。例えば、ウリジンとシチジンのＣ−５プロピン類似体を含んでいるポリヌクレオチドは、高い親和性でＲＮＡに結合するということ及び遺伝子発現の強力なアンチセンス阻害物質であるということが示された。リン酸ジエステル骨格、ロックド核酸又はＲＮＡのリボース糖基の２’−ヒドロキシへの修飾のような、別の修飾も実施し得る。
本発明によれば、第１鎖と第２鎖は同一のサイズを有し得る。あるいは、第１鎖のサイズは、第２鎖のサイズよりも大きくてもよい。例として、第１鎖のサイズは第２鎖のサイズよりも約２００ヌクレオチド大きいことが可能である。本発明の別の態様においては、第２鎖のサイズは、第１鎖のサイズよりも大きい。
本発明によれば、ｄｓＲＮＡ分子は、真菌サッカロピンデヒドロゲナーゼ遺伝子又は卵菌サッカロピンデヒドロゲナーゼ遺伝子の少なくとも１８の連続するヌクレオチドと実質的に同一である配列を含んでいる第１鎖を含んでいる。
特定の実施形態において、本発明は、
（ｉ）真菌遺伝子又は卵菌遺伝子の少なくとも１８の連続するヌクレオチドと実質的に同一である配列を含んでいる第１鎖；及び、
（ｉｉ）前記第１鎖と実質的に相補的である配列を含んでいる第２鎖；
を含んでいるｄｓＲＮＡ分子を提供し、ここで、前記真菌遺伝子又は卵菌遺伝子は、以下のものからなるリストから選択される：
（ａ） 以下の配列識別番号に示されている配列を含んでいるポリヌクレオチド：１、３、５、７、９、１１、１３、１５、１７、１９、２１、２３、２５、２７、２９、３１、３３、３５、３７、３９、４１、４３；
（ｂ） 以下の配列識別番号に示されている配列を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド：２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４；
（ｃ） 以下の配列識別番号に示されている配列を有するポリヌクレオチドと少なくとも７０％（好ましくは、少なくとも８０％、さらに好ましくは、少なくとも９０％、一層さらに好ましくは、少なくとも９５％）の配列同一性を有するポリヌクレオチド：１、３、５、７、９、１１、１３、１５、１７、１９、２１、２３、２５、２７、２９、３１、３３、３５、３７、３９、４１、４３；
（ｄ） 以下の配列識別番号に示されている配列を有するポリペプチドと少なくとも７０％（好ましくは、少なくとも８０％、さらに好ましくは、少なくとも９０％、一層さらに好ましくは、少なくとも９５％）の配列同一性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド：２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４：
（ｅ） 以下の配列識別番号に示されている配列を有するポリヌクレオチドと緊縮条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチド：１、３、５、７、９、１１、１３、１５、１７、１９、２１、２３、２５、２７、２９、３１、３３、３５、３７、３９、４１、４３；
及び、
（ｆ） 以下の配列識別番号に示されている配列を有するポリペプチドと少なくとも７０％の配列同一性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチドと緊縮条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチド：２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４。
本発明によれば、用語「同一性」は、百分率で表された、別のタンパク質／核酸のアミノ酸／ヌクレオチドと一致するアミノ酸／ヌクレオチドの数を意味するものと理解される。同一性は、好ましくは、本明細書中に開示されている「Ｓｅｑ．ＩＤ」をコンピュータープログラムを用いて別のタンパク質／核酸と比較することによって決定する。互いに比較される配列が異なった長さを有している場合、長い方の配列と共通している短い方の配列を有しているアミノ酸の数が同一性の百分率比（ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ ｑｕｏｔｉｅｎｔ）を決定するように、同一性を決定する。好ましくは、同一性は、よく知られていて且つ一般に公開されているコンピュータープログラム「ＣｌｕｓｔａｌＷ」（Ｔｈｏｍｐｓｏｎ ｅｔ ａｌ．， １９９４）を用いて決定する。「ＣｌｕｓｔａｌＷ」は、「ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｅｂｉ．ａｃ．ｕｋ／ｔｏｏｌｓ／ｃｌｕｓｔａｌＷ２／ｉｎｄｅｘ．ｈｔｍｌ．」において公に利用可能な状態にされている。
本発明によるタンパク質と別のタンパク質の間の同一性を決定するために、好ましくは、「ＣｌｕｓｔａｌＷ」コンピュータープログラムのバージョン２．１を使用する。その際、以下のパラメーターを設定しなければならない：
ＫＴＵＰＬＥ＝１、ＴＯＰＤＩＡＧ＝５、ＷＩＮＤＯＷ＝５、ＰＡＩＲＧＡＰ＝３、ＧＡＰＯＰＥＮ＝１０、ＧＡＰＥＸＴＥＮＤ＝０．０５、ＧＡＰＤＩＳＴ＝８、ＭＡＸＤＩＶ＝４０、ＭＡＴＲＩＸ＝ＧＯＮＮＥＴ、ＥＮＤＧＡＰＳ（ＯＦＦ）、ＮＯＰＧＡＰ、ＮＯＨＧＡＰ。
例えば本発明による核酸分子のヌクレオチド配列と別の核酸分子のヌクレオチド配列の間の同一性を決定するために、好ましくは、「ＣｌｕｓｔａｌＷ」コンピュータープログラムのバージョン２．１を使用する。その際、以下のパラメーターを設定しなければならない：
ＫＴＵＰＬＥ＝２、ＴＯＰＤＩＡＧＳ＝４、ＰＡＩＲＧＡＰ＝５、ＤＮＡＭＡＴＲＩＸ：ＩＵＢ、ＧＡＰＯＰＥＮ＝１０、ＧＡＰＥＸＴ＝５、ＭＡＸＤＩＶ＝４０、ＴＲＡＮＳＩＴＩＯＮＳ：負荷無（ｕｎｗｅｉｇｈｔｅｄ）。
本発明によれば、用語「緊縮条件下でハイブリダイズする」は、バックグラウンドノイズよりも有意に大きなレベルで参照核酸配列とハイブリダイズするポリヌクレオチド又は核酸配列を示している。バックグラウンドノイズは、存在している別のＤＮＡ配列（特に、ｃＤＮＡライブラリー中に存在している別のｃＤＮＡ）のハイブリダイゼーションに関連し得る。選択的にハイブリダイズすることが可能な配列と本発明による上記配列ＩＤによって定義される配列の間の相互作用によって生成されるシグナルのレベルは、バックグラウンドノイズを生じる別のＤＮＡ配列の相互作用によって生成されるシグナルのレベルよりも、一般に、１０倍大きく、好ましくは、１００倍大きい。相互作用のレベルは、例えば、プローブを３２Ｐのような放射性元素で標識することによって測定することができる。選択的なハイブリダイゼーションは、一般に、培地に関して極めて厳密な条件（例えば、約５０℃−６０℃で、０．０３Ｍ ＮａＣｌ及び０．０３Ｍ クエン酸ナトリウム）を用いることによって得られる。該ハイブリダイゼーションは、もちろん、最先端の通常の方法（特に、「Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．， ２００１、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ， ｔｈｉｒｄ ｅｄｉｔｉｏｎ」）に従って実施することも可能である。
本発明の特定の実施形態において、ｄｓＲＮＡ分子は、植物病原体（特に、真菌類又は卵菌類）に施用される、及び／又は、保護対象の植物若しくは作物に施用される。従って、本発明は、有効で且つ植物に対して毒性を示さない量の本明細書中で定義されているｄｓＲＮＡ分子を含んでいる組成物にも関する。
本発明によるｄｓＲＮＡ分子は、インビトロ転写を用いて古典的な化学的合成によって作ることができるか、又は、動物細胞、細菌、酵母菌若しくは植物のような生物の中で異種発現によって生成させることができる（Ａａｌｔｏ Ａ．Ｐ． ｅｔ ａｌ， ２００７ ＲＮＡ． １３（３）：４２２−９．）。
従って、本発明は、本明細書中で定義されているｄｓＲＮＡ分子を産生する微生物に関する。
本発明は、さらにまた、少なくとも１のＤＮＡ配列を含み、さらに、５’位と場合により３’位に異種調節要素を含んでいる遺伝子構築物にも関し、ここで、該遺伝子構築物は、該ＤＮＡ配列が本明細書中で定義されているｄｓＲＮＡ分子を形成し得ることを特徴とする。
本発明は、さらにまた、クローニングベクター及び／又は発現ベクターにも関し、ここで、該クローニングベクター及び／又は発現ベクターは、本明細書中で定義されている少なくとも１の遺伝子構築物を含んでいることを特徴とする。
「有効で且つ植物に対して毒性を示さない量」という表現は、作物上に存在しているか又はおそらく出現するであろう病原体を防除又は駆除するのに充分で、且つ、該作物について植物毒性の感知可能などのような症状も引き起こすことのない、本発明組成物の量を意味する。そのような量は、防除対象の病原体、作物の種類、気候条件、及び、本発明の組成物に含まれている化合物に応じて、広い範囲内で変動し得る。そのような量は、当業者が実行可能な範囲内にある体系的な圃場試験により決定することが可能である。
かくして、本発明により、活性成分としての有効量の本明細書中で定義されているｄｓＲＮＡ分子並びに農業上許容される支持体、担体、増量剤及び／又は界面活性剤を含んでいる組成物が提供される。
本発明によれば、用語「支持体（ｓｕｐｐｏｒｔ）」は、式（Ｉ）で表される活性化合物と組み合わせて又は関連させて、特に植物の一部分に対して、より容易に施用できるようにする、天然又は合成の有機化合物又は無機化合物を意味する。このような支持体は、従って、一般に不活性であり、また、農業上許容されるものであるべきである。支持体は、固体であることができるし、又は、液体であることもできる。適切な支持体の例としては、クレー、天然又は合成のシリケート、シリカ、樹脂、蝋、固形肥料、水、アルコール（特に、ブタノール）、有機溶媒、鉱油及び植物油、並びに、それらの誘導体などを挙げることができる。このような支持体の混合物を使用することもできる。
本発明の組成物には、さらにまた、付加的な成分、例えば、限定するものではないが、界面活性剤、保護コロイド、粘着剤、増粘剤、揺変剤、浸透剤、安定化剤、金属イオン封鎖剤などを含ませることもできる。さらに一般的には、該活性化合物は、通常の製剤技術に従う固体又は液体の任意の添加剤と組み合わせることが可能である。
一般に、本発明の組成物には、０．０５〜９９重量％の活性化合物、好ましくは、１０〜７０重量％の活性化合物を含有させることができる。
本発明の組成物は、エアゾールディスペンサー、カプセル懸濁液剤、冷煙霧濃厚剤（ｃｏｌｄ ｆｏｇｇｉｎｇ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅ）、散粉性粉剤、乳剤、水中油型エマルション剤、油中水型エマルション剤、カプセル化粒剤、細粒剤、種子処理用フロアブル剤、ガス剤（加圧下）、ガス生成剤（ｇａｓ ｇｅｎｅｒａｔｉｎｇ ｐｒｏｄｕｃｔ）、粒剤、温煙霧濃厚剤（ｈｏｔ ｆｏｇｇｉｎｇ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅ）、大型粒剤、微粒剤、油分散性粉剤、油混和性フロアブル剤、油混和性液剤、ペースト剤、植物用棒状剤（ｐｌａｎｔ ｒｏｄｌｅｔ）、乾燥種子処理用粉剤、農薬粉衣種子、可溶性濃厚剤（ｓｏｌｕｂｌｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅ）、可溶性粉剤、種子処理用溶液剤、懸濁製剤（フロアブル剤）、微量散布用液剤（ｕｌｔｒａ ｌｏｗ ｖｏｌｕｍｅ （ＵＬＶ） ｌｉｑｕｉｄ）、微量散布用懸濁液剤（ｕｌｔｒａ ｌｏｗ ｖｏｌｕｍｅ （ＵＬＶ） ｓｕｓｐｅｎｓｉｏｎ）、顆粒水和剤、水分散性錠剤、スラリー処理用水和剤、水溶性顆粒剤、水溶性錠剤、種子処理用水溶性粉剤及び水和剤などのような、さまざまな形態で使用することが可能である。これらの組成物には、処理対象の植物又は種子に対して噴霧装置又は散粉装置のような適切な装置を用いて施用される状態にある組成物のみではなく、作物に対して施用する前に希釈することが必要な商業的な濃厚組成物も包含される。
本発明による化合物は、さらにまた、殺菌剤、除草剤、殺虫剤、殺線虫剤、殺ダニ剤、軟体動物駆除剤、抵抗性誘発物質、薬害軽減剤、シグナル化合物、生物学的薬剤、フェロモン活性物質又は生物学的活性を有する別の化合物などのような１種類以上の植物薬的（ｐｈｙｔｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ）化合物又は植物成長促進性化合物と混合させることもできる。そのようにして得られた混合物は、拡大された活性スペクトルを有する。別の殺菌剤化合物との混合物が特に有利である。
本発明の特定に実施形態において、ｄｓＲＮＡは、保護対象の植物体内に導入されるか、又は、保護対象の植物体内で生成される。植物体内に導入された後、又は、植物体内で生成された後、該ｄｓＲＮＡは、比較的小さなフラグメント（ｓｉＲＮＡ）にさらに加工されることができ、及び、その後、その植物全体に分配され得る。あるいは、該ｄｓＲＮＡは、組織内で、一時的な方法で、空間的な方法で又は誘発可能な方法でｄｓＲＮＡを発現させる調節要素又はプロモーターを用いて、植物体内に導入されるか、又は、植物体内で生成され、そして、ＲＮＡｉ加工機構を含んでいる植物細胞によって比較的小さなフラグメントにさらに加工され得る。
本発明は、従って、植物細胞の内部で本発明のｄｓＲＮＡを生成させることが可能な遺伝子構築物又はキメラ遺伝子に関する。該遺伝子構築物又はキメラ遺伝子は、少なくとも１のＤＮＡ配列を含み、さらに、５’位と場合により３’位に植物体内で機能し得る異種調節要素を含んでおり、ここで、該遺伝子構築物又はキメラ遺伝子は、該ＤＮＡ配列が当該植物体内で一度発現された本明細書中で定義されているｄｓＲＮＡ分子を形成し得ることを特徴とする。
特定の実施形態において、該遺伝子構築物又はキメラ遺伝子は、
・ 植物細胞内で機能性を有するプロモーター調節配列（これは、以下のＤＮＡ配列に作動可能に連結されている）；
・ 転写されたときに、センス配列及び少なくとも部分的に相補的であるアンチセンス配列を少なくとも含んでいるＲＮＡ分子を生成させるＤＮＡ配列〔ここで、該センス配列は、標的遺伝子（即ち、本発明の意味においては、サッカロピンデヒドロゲナーゼ遺伝子）の少なくとも１８の連続するヌクレオチドと実質的に同一である配列を含んでおり、及び、該アンチセンス配列は、該センス配列に実質的に相補的である配列を含んでいる〕；
及び、
・ 場合により、ターミネーター調節配列；
を含んでいる。
上記実施形態において、本発明によるＤＮＡ配列は、より特定的に、２つの特徴を有し得る；第１に、それは、２つのヌクレオチド配列（ここで、該２つのヌクレオチド配列は、標的遺伝子と相同性を全く示さないイントロン又はスペーサーヌクレオチド配列で隔てられているセンス及びアンチセンスである）を含んでいる。センス配向及びアンチセンス配向でクローン化された配列は、病原体体内におけるその発現を阻害することが意図されている配列である。このＤＮＡ配列の転写は、かくして、センス／スペーサー−イントロン／アンチセンス構築物に対応する大きな１本鎖ＲＮＡを生成させる。この長いＲＮＡ転写産物は、ＲＴ−ＰＣＲによって検出することができる。該センス配列とアンチセンス配列は相同するので、それらは対合し、そして、それらを隔てているスペーサー又はイントロンは、折りたたみのためのループの役割を果たす。ｄｓＲＮＡは、その後、相同する領域の全体にわたって得られる。該ｄｓＲＮＡは、次に、「ＤＩＣＥＲ」と称される酵素複合体によって特異的に分解される。そのｄｓＲＮＡの分解によって、１９〜２５塩基のサイズを有する小さな２本鎖ＲＮＡであるｓｉＲＮＡ（図中の「ｓｉＲＮＡ」）が形成される。それらは、従って、標的遺伝子から誘導された転写ＲＮＡと対合することによってＲＮＡサイレンシング機構酵素的機構を介して分解するｓｉＲＮＡである。
第２の態様において、該ＤＮＡ配列は、サイズが異なった２つのヌクレオチド配列（ここで、該２つのヌクレオチド配列は、センス及びアンチセンスである）、他方のヌクレオチド配列とは相同性を全く示さないヌクレオチド配列の当該部分に対応するループ構造を含んでいる。センス配向でクローン化されたヌクレオチド配列は、その発現を阻害することが意図されている標的遺伝子の配列と本質的に相同する。該アンチセンスヌクレオチド配列は、当該標的遺伝子の配列の相補鎖と本質的に相同する。かくして、このＤＮＡ配列の転写は、該センス／アンチセンス構築物に対応する長い１本鎖ＲＮＡを生成させる。この長いＲＮＡ転写産物は、ＲＴ−ＰＣＲによって検出することができる。相同のセンス／アンチセンス配列は、対合する。ｄｓＲＮＡは、その後、相同する領域の全体にわたって得られる。該ｄｓＲＮＡは、次に、「ＤＩＣＥＲ」と称される酵素複合体によって特異的に分解される。そのｄｓＲＮＡの分解によって、１８〜２５塩基のサイズを有する小さな２本鎖ＲＮＡであるｓｉＲＮＡ（図中の「ｓｉＲＮＡ」）が形成される。それらは、従って、標的ＲＮＡと対合することによってＲＮＡサイレンシング機構植物の酵素的機構を介して分解するｓｉＲＮＡである。
別の特定の実施形態において、該遺伝子構築物は、
・ 植物細胞内で機能性を有する２つのプロモーター調節配列（ここで、第１のプロモーター調節配列は、転写されたときにセンス配列を少なくとも含んでいるＲＮＡ分子を生成させるＤＮＡ配列に作動可能に連結されており、及び、第２のプロモーター調節配列は、転写されたときに該センス配列と部分的に相補的であるアンチセンス配列を少なくとも含んでいるＲＮＡ分子を生成させるＤＮＡ配列に作動可能に連結されており、ここで、該センス配列は、標的遺伝子の少なくとも１８の連続するヌクレオチドと実質的に同一である配列を含んでいる）；
及び、
・ 場合により、ターミネーター調節配列；
を含んでいる。
この特定の実施形態において、該遺伝子構築物は、２つのキメラ遺伝子として構成されることができ、ここで、一方のキメラ遺伝子は、転写されたときに少なくともセンス配列（ここで、該センス配列は、標的遺伝子の少なくとも１８の連続するヌクレオチドと実質的に同一である）と場合によりターミネーター調節配列を含んでいるＲＮＡ分子を生成させる第１のＤＮＡ配列に作動可能に連結されている第１のプロモーター調節配列を含んでおり、及び、第２のキメラ遺伝子は、転写されたときに少なくともアンチセンス配列（ここで、該アンチセンス配列は、該センス配列と部分的に相補的である）と場合によりターミネーター調節配列を含んでいるＲＮＡ分子を生成させる第２のＤＮＡ配列に作動可能に連結されている第２のプロモーター調節配列を含んでいる。
これらの２つのキメラ遺伝子は、該ｄｓＲＮＡを形成させるための２つのＲＮＡ１本鎖のハイブリダイゼーションを好適なものとする（ｆａｖｏｒｉｚｅ）ために、好ましくは、植物細胞の中に共同して導入するが、それは、必ずしも必要ではない。。
あるいは、該遺伝子構築物は、
・ 第１のプロモーター（これは、以下の２本鎖ＤＮＡ配列に作動可能に連結されている）；
・ ２本鎖ＤＮＡ配列〔ここで、一方の鎖は、該第１のプロモーターの制御下で転写されたときに、少なくともセンス配列（ここで、該センス配列は、標的遺伝子の少なくとも１８の連続するヌクレオチドと実質的に同一である）と場合によりターミネーター調節配列を含んでいるＲＮＡ分子を生成させ、及び、第２鎖は、該第２のプロモーターの制御下で転写されたときに、少なくともアンチセンス配列（ここで、該アンチセンス配列は、該センス配列と部分的に相補的である）と場合によりターミネーター調節配列を含んでいるＲＮＡ分子を生成させる〕；
及び、
・ 第２のプロモーター（これは、該第１のプロモーターと反対方向にある）；
を含んでいる構築物として構成され得る。
第１のプロモーター調節配列と第２のプロモーター調節配列は、異なっていても又は同一でもよく、好ましくは、異なっている。
本発明は、さらにまた、植物を形質転換するためのクローニングベクター及び／又は発現ベクターにも関し、ここで、該クローニングベクター及び／又は発現ベクターは、本明細書中で定義されている少なくとも１のキメラ遺伝子又は遺伝子構築物を含んでいることを特徴とする。
本発明は、さらにまた、本明細書中で定義されている本発明のｄｓＲＮＡ分子を含んでいるトランスジェニック植物細胞にも関する。
本発明は、従って、本明細書中で定義されている本発明の遺伝子構築物又はキメラ遺伝子を含んでいるトランスジェニック植物細胞に関する。
本発明の特定の実施形態において、該トランスジェニック植物細胞は、ダイズ植物細胞、ナタネ植物細胞、イネ植物細胞又はジャガイモ植物細胞である。
本発明は、さらにまた、本発明によるトランスジェニック植物細胞を含んでいるトランスジェニック植物、トランスジェニック種子又はそれらの一部分にも関する。
本発明の特定の実施形態において、該トランスジェニック植物、トランスジェニック種子又はそれらの一部分は、ダイズ植物、ナタネ植物、イネ植物若しくはジャガイモ植物又はそれらの一部分である。
本発明によれば、表現「キメラ遺伝子」又は「発現カセット」は、転写の方向に互いに機能的に連結されている、植物体内で機能する調節プロモーター配列、タンパク質をコードする配列又はＲＮＡ鎖及び場合により植物細胞内で機能するターミネーターを含んでいる、ヌクレオチド配列を意味することが意図されている。
用語「キメラ遺伝子」又は「発現カセット」は、一般に、特定の要素が天然の遺伝子の中には存在していないが、その特定の要素が天然の遺伝子の中に存在している要素と置換されているか又は加えられている遺伝子を意味することが意図されている。
本発明によれば、用語「キメラ遺伝子」又は「発現カセット」は、遺伝子の全ての要素が天然の遺伝子の中に存在している場合にも対応し得るか、又は、用語「遺伝子」は、キメラ遺伝子に対応し得る。
表現「キメラ遺伝子」又は「発現カセット」は、さらにまた、タンパク質をコードする配列又はＲＮＡ鎖が、プロモーターに直接的には連結していないが、例えば、同じプロモーターの制御下にある幾つかのコード配列を含んでいる多シストロン性構築物の一部分である場合にも対応し得る。その場合、該プロモーターの制御下にある各コード配列は、「キメラ遺伝子」又はあ「発現カセット」としてデザインされる。
本発明によれば、表現「互いに機能的に連結されている」は、基本的なキメラ遺伝子の該要素が、それらの機能が協調されて、コード配列の発現を可能とするように、互いに連結されているということを意味する。例として、プロモーターは、それがコード配列を確実に発現させることが可能である場合、そのコード配列に機能的に連結されている。本発明によるキメラ遺伝子の構築及びそれのさまざまな要素のアセンブリーは、当業者にはよく知られている技術〔特に、以下のものに記載されている技術：「Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ． （２００１， Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ： Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ （ｔｈｉｒｄ ｅｄｉｔｉｏｎ）， Ｎｏｌａｎ Ｃ． ｅｄ．， Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ： Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ）」〕を用いて実施することができる。該キメラ遺伝子を構成する調節要素の選択は、本質的に、植物に依存し、及び、その調節要素がその中で機能しなければならない細胞の種類に依存し、当業者は、所与の植物の中で機能する調節要素を選択することができる。
本発明によれば、用語「プロモーター調節配列」は、植物体内で天然に発現される遺伝子の任意のプロモーター調節配列、特に、植物の葉の中で特に発現されるプロモーター、例えば、細菌由来、ウイルス由来若しくは植物由来の構成型と称されるプロモーター又は光依存性と称されるプロモーター（例えば、植物リブロース−ビスカルボキシラーゼ／オキシゲナーゼ（ＲｕＢｉｓＣＯ）小サブユニット遺伝子のプロモーター）又は使用することが可能な任意の適切な既知プロモーターなどを意味することが意図されている。植物由来のプロモーターの中で、特許出願ＥＰ ０５０７６９８に記載されているヒストンプロモーター又はイネアクチンプロモーター（ＵＳ ５，６４１，８７６）を挙げることができる。植物ウイルス遺伝子のプロモーターの中で、カリフラワーモザイクウイルス（ＣａＭＶ １９Ｓ 又は ３５Ｓ）のプロモーター又はキャッサバ葉脈モザイクウイルス（ＣｓＶＭＶ：ＷＯ ９７／４８８１９）のプロモーター又はサーコウイルスプロモーター（ＡＵ ６８９３１１）を挙げることができる。植物の特定の領域又は組織に対して特異的なプロモーター調節配列を使用することも可能であり、さらに特定的には、種子特異的プロモーター（Ｄａｔｌａ， Ｒ． ｅｔ ａｌ．， １９９７， Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ａｎｎ． Ｒｅｖ．， ３， ２６９−２９６）、とりわけ、ナピンプロモーター（ＥＰ ２５５３７８）、ファセオリンプロモーター、グルテニンプロモーター、ヘリアンチニンプロモーター（ＷＯ ９２／１７５８０）、アルブミンプロモーター（ＷＯ ９８／４５４６０）及びオレオシンプロモーター（ＷＯ ９８／４５４６１）を使用することができる。誘導性プロモーターを使用することも可能であり、それは、有利には、フェニルアラニンアンモニアリアーゼ（ＰＡＬ）のプロモーター、ＨＭＧ−ＣｏＡレダクターゼ（ＨＭＧ）のプロモーター、キチナーゼのプロモーター、グルカナーゼのプロモーター、プロテイナーゼ阻害物質（ＰＩ）のプロモーター、ＰＲ１ファミリーの遺伝子のプロモーター、ノパリンシンターゼ（ｎｏｓ）のプロモーター若しくはｖｓｐＢ遺伝子のプロモーター（ＵＳ ５６７０３４９）、ＨＭＧ２プロモーター（ＵＳ ５６７０３４９）、リンゴβ−ガラクトシダーゼ（ＡＢＧ１）プロモーター又はリンゴアミノシクロプロパンカルボキシレートシンターゼ（ＡＣＣシンターゼ）プロモーター（ＷＯ ９８／４５４４５）から選択され得る。
用語「ターミネーター調節配列」は、植物細胞内又は植物体内で機能する任意の配列を意味することが意図されており、そして、細菌由来（例えば、アグロバクテリウム・ツメファシエンス（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）のｎｏｓターミネーター又はｏｃｓターミネーター）であっても、又は、ウイルス由来（例えば、ＣａＭＶ ３５Ｓターミネーター）であっても、又は、植物由来（例えば、特許出願ＥＰ ０６３３３１７に記載されているヒストンターミネーター）であっても、ポリアデニル化配列も包含する。
本発明による構築物を組み込んだ形質転換細胞及び／又は形質転換植物を確認するための選択段階は、本発明の構築物の中に存在している選択遺伝子又は細胞若しくは植物の形質転換に使用されたプラスミド（これは、該構築物を含んでいる）の中に存在している選択遺伝子の存在に基づいて、実施することができる。該選択遺伝子は、転写の方向に機能的に連結された以下の要素を含んでいるキメラ遺伝子の形態にあり得る：植物細胞内で機能するプロモーター調節配列、選択マーカーをコードする配列、及び、植物細胞内で機能するターミネーター調節配列。
使用することが可能な選択マーカーの中で、抗生物質に対する抵抗性に関する遺伝子を含んでいるマーカー、例えば、ヒグロマイシンホスホトランスフェラーゼ遺伝子（Ｇｒｉｔｚ ｅｔ ａｌ．， １９８３， Ｇｅｎｅ ２５：１７９−１８８）のマーカー、カナマイシンに対する抵抗性を誘発させるネオマイシンホスホトランスフェラーゼ ＩＩ 遺伝子（Ｗｉｒｔｚ ｅｔ ａｌ．， １９８７， ＤＮＡ， ６（３）：２４５−２５３）のマーカー又はアミノグリコシド３”−アデニルトランスフェラーゼ遺伝子のマーカーなどを挙げることができるが、さらに、除草剤に対する耐性に関する遺伝子〔例えば、ビアラホスに対する耐性に関するｂａｒ遺伝子（Ｗｈｉｔｅ ｅｔ ａｌ．， ＮＡＲ １８：１０６２， １９９０）、グリホセートに対する耐性に関するＥＰＳＰＳ遺伝子（ＵＳ ５，１８８，６４２）又はイソオキサゾール系に対する耐性に関するＨＰＰＤ遺伝子（ＷＯ ９６／３８５６７）〕を含んでいるマーカーなども挙げることができる。さらにまた、容易に確認することが可能な酵素（例えば、ＧＵＳ酵素）をコードする遺伝子、ＧＦＰタンパク質又は色素若しくは形質転換細胞内で色素の産生を調節する酵素をコードする遺伝子なども挙げることができる。そのような選択マーカー遺伝子は、特に、以下の特許出願に記載されている：ＷＯ ９１／０２０７１、ＷＯ ９５／０６１２８、ＷＯ ９６／３８５６７、及び、ＷＯ ９７／０４１０３。
本発明は、さらに、真菌サッカロピンデヒドロゲナーゼ遺伝子又は卵菌サッカロピンデヒドロゲナーゼ遺伝子を阻害するｄｓＲＮＡを発現することが可能なトランスジェニック植物細胞又はトランスジェニック植物を生成させる方法にも関し、ここで、該方法は、植物細胞を本発明によるキメラ遺伝子又は遺伝子構築物を用いて形質転換させる段階を含んでいる。
該方法は、さらに、形質転換された植物細胞を選択する段階も含み得る。
本発明の特定の実施形態において、本発明は、真菌サッカロピンデヒドロゲナーゼ遺伝子又は卵菌サッカロピンデヒドロゲナーゼ遺伝子を阻害するｄｓＲＮＡを発現することが可能なトランスジェニック植物細胞又はトランスジェニック植物を生成させる方法に関し、ここで、該方法は、植物細胞を本発明によるキメラ遺伝子又は遺伝子構築物を用いて形質転換させる段階を含んでおり、及び、該植物細胞は、ダイズ植物細胞、ナタネ植物細胞、イネ植物細胞若しくはジャガイモ植物細胞であり、又は、該植物は、ダイズ植物、ナタネ植物、イネ植物若しくはジャガイモ植物である。
本発明は、さらにまた、形質転換された植物若しくはその一部分、並びに、再生された上記植物を栽培する及び／又は交雑させることによって誘導される植物若しくはその一部分、並びに、形質転換された植物の種子にも関する。
本発明は、さらにまた、本発明の植物、その一部分又は種子から得られる最終生成物（例えば、粗びき粉、油、繊維など）にも関する。
本発明による細胞又は植物を得るために、当業者は、多くの既知形質転換方法のうちの１つを使用することができる。
それらの方法のうちの１つでは、形質転換させる宿主生物の細胞又は組織をポリエチレングリコール（ＰＥＧ）及び本発明のベクターと接触させる（Ｃｈａｎｇ ａｎｄ Ｃｏｈｅｎ， １９７９， Ｍｏｌ． Ｇｅｎ． Ｇｅｎｅｔ． １６８（１）， １１１−１１５； Ｍｅｒｃｅｎｉｅｒ ａｎｄ Ｃｈａｓｓｙ， １９８８， Ｂｉｏｃｈｉｍｉｅ ７０（４）， ５０３−５１７）。エレクトロポレーションは、もう１つの方法であり、この方法では、形質転換させる細胞又は組織及び本発明のベクターを電場に付す（Ａｎｄｒｅａｓｏｎ ａｎｄ Ｅｖａｎｓ， １９８８， Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ６（７）， ６５０−６６０； Ｓｈｉｇｅｋａｗａ ａｎｄ Ｄｏｗｅｒ， １９８９， Ａｕｓｔ． Ｊ． Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ． ３（１）， ５６−６２）。別の方法では、該ベクターをマイクロインジェクション法によって細胞又は組織に直接注入する（Ｇｏｒｄｏｎ ａｎｄ Ｒｕｄｄｌｅ， １９８５， Ｇｅｎｅ ３３（２）， １２１−１３６）。有利には、「微粒子銃（ｂｉｏｌｉｓｔｉｃ）」法を使用し得る。その方法では、その表面に本発明のベクターが吸着されている微粒子を細胞又は組織に照射する（Ｂｒｕｃｅ ｅｔ ａｌ．， １９８９， Ｐｒｏｃ． Ｎａｔｌ． Ａｃａｄ． Ｓｃｉ． ＵＳＡ ８６（２４）， ９６９２−９６９６； Ｋｌｅｉｎ ｅｔ ａｌ．， １９９２， Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０（３）， ２８６−２９１； 米国特許第４，９４５，０５０号）。好ましくは、植物の細胞又は組織の形質転換は、アグロバクテリウム（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属の細菌を使用して実施することができ、好ましくは、当該植物の細胞又は組織にアグロバクテリウム・ツメファシエンス（Ａ．ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）を感染させることによって実施することができる（Ｋｎｏｐｆ， １９７９， Ｓｕｂｃｅｌｌ． Ｂｉｏｃｈｅｍ． ６， １４３−１７３； Ｓｈａｗ ｅｔ ａｌ．， １９８３， Ｇｅｎｅ ２３（３）：３１５−３３０）、又は、アグロバクテリウム・リゾゲネス（Ａ．ｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ）を感染させることによって実施することができる（Ｂｅｖａｎ ａｎｄ Ｃｈｉｌｔｏｎ， １９８２， Ａｎｎｕ． Ｒｅｖ． Ｇｅｎｅｔ． １６：３５７−３８４； Ｔｅｐｆｅｒ ａｎｄ Ｃａｓｓｅ−Ｄｅｌｂａｒｔ， １９８７， Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． Ｓｃｉ． ４（１）， ２４−２８）。好ましくは、アグロバクテリウム・ツメファシエンス（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）を用いた植物の細胞又は組織の形質転換は、Ｈｉｅｉら（１９９４， Ｐｌａｎｔ Ｊ． ６（２）：２７１−２８２）によって記載されたプロトコルに従って実施する。当業者は、形質転換させる宿主生物の種類に応じて適切な方法を選択するであろう。
本発明による植物は、上記で定義されている形質転換植物細胞を含んでいる。特に、該形質転換植物は、上記形質転換植物細胞を再生させることによって得ることができる。該再生は、当該種の種類に応じて、任意の適切な方法によって達成される。
本発明は、さらにまた、それらの植物の部分及びそれらの植物の子孫も包含する。用語「それらの植物の部分」は、地上部であろうと又は地下部であろうと、それらの植物の任意の器官を意味することが意図されている。地上部の器官は、茎、葉及び雄性生殖器官と雌性生殖器官を含んでいる花である。地下部の器官は、主に、根であるが、それらは、塊茎でもあり得る。用語「子孫」は、これらの互いの植物の再生から誘導される胚を含んでいる種子を主に意味することが意図されている。拡大解釈すれば、用語「子孫」は、本発明による形質転換植物の間の交雑から誘導される新しい世代のそれぞれにおいて形成される全ての種子にも適用される。子孫及び種子は、さらにまた、当該形質転換植物の栄養繁殖によってによっても得ることができる。本発明による種子は、殺菌活性、除草活性、殺虫活性、殺線虫活性、殺細菌活性又は殺ウイルス活性から選択される活性を有する少なくとも１種類の活性製品を含んでいる農薬組成物でコーティングすることができる。
本発明は、さらに、植物病原体（特に、真菌又は卵菌）を防除する方法にも関し、ここで該方法は、当該病原体に本明細書中で定義されている本発明のｄｓＲＮＡ分子を与えることを含む。
本発明の特定に実施形態において、該方法は、植物病原体（特に、真菌又は卵菌）に本明細書中で定義されている本発明のｄｓＲＮＡ又は該ｄｓＲＮＡを含んでいる組成物を与えることを含む該植物病原体を防除する方法に関し、ここで、該植物病原体は、マグナポルテ・グリセア（Ｍａｇｎａｐｏｒｔｈｅ ｇｒｉｓｅａ）、フィトフトラ・インフェスタンス（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｉｎｆｅｓｔａｎｓ）、スクレロチニア・スクレロチオルム（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ）又はファコプソラ・パキリジ（Ｐｈａｋｏｐｓｏｒａ ｐａｃｈｙｒｈｉｚｉ）である。
本発明の特定に実施形態において、該方法は、植物病原体（特に、真菌又は卵菌）に本明細書中で定義されている本発明のｄｓＲＮＡ分子又は該ｄｓＲＮＡを含んでいる組成物を与えることを含む該植物病原体を防除する方法に関し、ここで、該植物は、ダイズ植物、ナタネ植物、イネ植物又はジャガイモ植物である。
本発明は、さらに、植物、作物又は種子の病原体（特に、真菌又は卵菌）を防除する方法にも関し、ここで該方法は、栽培学的に有効で且つ植物に対して実質的に毒性を示さない量の本発明によるｄｓＲＮＡ分子又は本発明による組成物を、種子、植物若しくは植物の果実に対して、又は、植物がそこで成育しているか若しくは植物がそこで成育するのが望ましい土壌若しくは不活性底土〔例えば、無機底土（例えば、砂、ロックウール、グラスウール；発泡鉱物、例えば、パーライト、バーミキュライト、ゼオライト又は発泡クレー）、軽石、火砕性の物質若しくは材料、合成有機底土（例えば、ポリウレタン）、有機底土（例えば、泥炭、堆肥、木製廃棄物、例えば、コイア、木材繊維若しくは木材チップ、樹皮）、又は、液体底質（例えば、浮遊水耕システム、Ｎｕｔｒｉｅｎｔ Ｆｉｌｍ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ、Ａｅｒｏｐｏｎｉｃｓ）〕に対して、種子処理として、茎葉施用として、茎施用（ｓｔｅｍ ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ）として、灌注若しくは滴下施用〔化学溶液灌水（ｃｈｅｍｉｇａｔｉｏｎ）〕として施用することを特徴とする。
本発明は、従って、植物病原体（特に、真菌又は卵菌）を防除する方法に関し、ここで該方法は、有効量の本発明のｄｓＲＮＡ分子又は本発明の組成物を植物がそこで成育しているか若しくは成育することが可能な土壌、植物の葉及び／若しくは果実又は植物の種子に施用することを特徴とする。
本発明の特定に実施形態において、本発明は、植物病原体（特に、真菌又は卵菌）を防除する方法に関し、ここで、該方法は、有効量の本発明のｄｓＲＮＡ分子又は本発明の組成物を植物がそこで成育しているか若しくは成育することが可能な土壌、植物の葉及び／若しくは果実又は植物の種子に施用することを特徴とし、その際、該植物病原体は、マグナポルテ・グリセア（Ｍａｇｎａｐｏｒｔｈｅ ｇｒｉｓｅａ）、フィトフトラ・インフェスタンス（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｉｎｆｅｓｔａｎｓ）、スクレロチニア・スクレロチオルム（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ）又はファコプソラ・パキリジ（Ｐｈａｋｏｐｓｏｒａ ｐａｃｈｙｒｈｉｚｉ）である。
本発明の特定に実施形態において、本発明は、植物病原体（特に、真菌又は卵菌）を防除する方法に関し、ここで該方法は、有効量の本発明のｄｓＲＮＡ分子又は本発明の組成物を植物がそこで成育しているか若しくは成育することが可能な土壌、植物の葉及び／若しくは果実又は植物の種子に施用することを特徴とし、その際、該植物は、ダイズ植物、ナタネ植物、イネ植物又はジャガイモ植物である。
表現「処理対象の植物に施用する」は、本発明の目的のためには、
・ 該組成物のうちの１種類を含んでいる液体を当該植物の地上部に噴霧すること；
・ 散粉すること、粒剤又は粉剤を土壌中に混和すること、当該植物の周囲に噴霧すること、及び、樹木の場合には、注入すること又は塗りつけること；
・ 該組成物のうちの１種類を含んでいる植物保護混合物を用いて当該植物の種子にコーティング又はフィルムコーティングを施すこと；
などのさまざまな処理方法を用いて、本発明の対象である殺有害生物剤組成物を施用することが可能であるということを意味するものと理解される。
本発明の方法は、治療方法、予防方法又は根絶する方法のいずれかであり得る。
この方法において、使用する組成物は、本発明による２種類以上の活性化合物を混合させることによって予め調製することができる。
上記方法の代替的な方法では、２種類又は３種類の活性成分（Ａ）又は（Ｂ）のうちの１種類をそれぞれが含んでいる別個の組成物の複合的な（Ａ）／（Ｂ）の効果を示すように、化合物（Ａ）及び化合物（Ｂ）を同時に、順次に又は別々に施用することも可能である。
本発明による処理方法において通常施用される活性ｄｓＲＮＡ化合物の薬量は、一般に、また、有利には、
・ 茎葉処理では、０．０００１〜１０，０００ｇ／ｈａ、好ましくは、０，０００１〜１０００ｇ／ｈａ、さらに好ましくは、０．００１〜３００ｇ／ｈａである；灌注又は滴下施用の場合、特に、ロックウール又はパーライトなどの不活性底土を用いる限り、該薬量は低減させることも可能である；
・ 種子処理では、種子１００ｋｇ当たり０．０００１〜２００ｇ、好ましくは、種子１００ｋｇ当たり０．００１〜１５０ｇである；
・ 土壌処理では、０．０００１〜１０，０００ｇ／ｈａ、好ましくは、０．００１〜５，０００ｇ／ｈａである。
本発明のｄｓＲＮＡを別の植物薬的活性化合物又は植物成長促進性化合物と混合させる場合、該植物薬的化合物又は植物成長促進性化合物は、通常施用される薬量で使用することができる。
該植物薬的化合物又は植物成長促進性化合物は、殺菌剤、除草剤、殺虫剤、殺線虫剤、殺ダニ剤、軟体動物駆除剤、抵抗性誘発物質、薬害軽減剤又はシグナル化合物であり得る。
本発明による処理方法において通常施用される植物薬的活性化合物の薬量は、茎葉処理では、一般に、及び、有利には、１０〜８００ｇ／ｈａ、好ましくは、５０〜３００ｇ／ｈａである。施用される活性物質の該薬量は、種子処理の場合には、一般に、及び、有利には、種子１００ｋｇ当たり２〜２００ｇ、好ましくは、種子１００ｋｇ当たり３〜１５０ｇである。
本明細書中に示されている薬量は、本発明の方法を例証するための例として与えられている。当業者は、特に処理対象の植物又は作物の種類に応じて、該施用薬量を適合させる方法を理解するであろう。
特定の条件下、例えば、処理又は防除の対象の病原体（植物病原性真菌又は卵菌）の種類に応じて、より少ない薬量で充分な保護を提供できる場合がある。特定の気候条件、抵抗性、又は、別の要因、例えば、病原体の種類若しくは侵襲の程度（例えば、上記病原体による植物の侵襲の程度）などによって、組み合わせられた活性成分のより多い薬量が必要となる場合がある。最適な薬量は、通常、幾つかの要因、例えば、処理対象の病原体の種類、侵襲されている植物若しくは植物材料の種類若しくは成育の程度、植生の密度、又は、施用方法などに依存する。
限定するものではないが、本発明による殺有害生物剤組成物又は組合せで処理される作物は、例えば、ブドウの木、穀類、野菜類、ムラサキウマゴヤシ、ダイズ、市場向け園芸作物、芝、木材、木又は園芸植物などである。
本発明による処理方法は、さらにまた、塊茎又は根茎のような繁殖器官（ｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎ ｍａｔｅｒｉａｌ）を処理するのにも有用であり得、さらには、種子、実生又は移植実生（ｓｅｅｄｌｉｎｇｓ ｐｒｉｃｋｉｎｇ ｏｕｔ）及び植物又は移植植物（ｐｌａｎｔｓ ｐｒｉｃｋｉｎｇ ｏｕｔ）を処理するのにも有用であり得る。この処理方法は、根を処理するのにも有用であり得る。本発明による処理方法は、関係している植物の樹幹、茎又は柄、葉、花及び果実のような植物の地上部、並びに、真菌感染（例えば、干し草のような貯蔵に起因する感染）に感染しやすい概して全ての材料物質を処理するのにも有用であり得る。
本発明は、さらに、植物病原体（特に、真菌又は卵菌）を防除する方法にも関し、ここで、該方法は、該植物病原体の宿主植物に本発明の形質転換植物細胞を与えることを含む。
本発明は、さらに、植物病原体（特に、真菌又は卵菌）を防除する方法にも関し、ここで、該方法は、該植物病原体の宿主植物に本明細書中で定義されているｄｓＲＮＡを含んでいる形質転換植物細胞を与えることを含む。
本発明は、さらに、植物病原体（特に、真菌又は卵菌）を防除する方法にも関し、ここで、該方法は、該植物を本発明による遺伝子構築物を用いて形質転換させることを含む。
本発明は、さらに、植物病原体（特に、真菌又は卵菌）を防除する方法にも関し、ここで、該方法は、以下の：
（ｉ） 植物細胞を本発明によるキメラ遺伝子を用いて形質転換させる段階；
（ｉｉ） そのように形質転換された細胞を該構築物の転写を可能とする条件下に置く段階；
（ｉｉｉ） 該細胞を該病原体と接触させる段階；
を含んでいる。
本発明の特定の実施形態において、本発明による方法は、マグナポルテ・グリセア（Ｍａｇｎａｐｏｒｔｈｅ ｇｒｉｓｅａ）、フィトフトラ・インフェスタンス（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｉｎｆｅｓｔａｎｓ）、スクレロチニア・スクレロチオルム（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ）又はファコプソラ・パキリジ（Ｐｈａｋｏｐｓｏｒａ ｐａｃｈｙｒｈｉｚｉ）から選択される植物病原体を防除することである。
本発明の特定の実施形態において、本発明による方法は、植物病原体を防除することであり、その際、当該植物は、ダイズ植物、ナタネ植物、イネ植物又はジャガイモ植物である。
本発明は、さらに、植物病原体（特に、真菌又は卵菌）のサッカロピンデヒドロゲナーゼ遺伝子の発現を阻害する方法にも関し、ここで、該方法は、以下の：
（ｉ） 植物細胞を本発明によるキメラ遺伝子を用いて形質転換させる段階；
（ｉｉ） そのように形質転換された細胞を該構築物の転写を可能とする条件下に置く段階；
（ｉｉｉ） 該細胞を該病原体と接触させる段階；
を含んでいる。
本発明の特定の実施形態において、本発明による該方法は、真菌サッカロピンデヒドロゲナーゼ遺伝子又は卵菌サッカロピンデヒドロゲナーゼ遺伝子を阻害することであり、その際、当該真菌又は卵菌は、マグナポルテ・グリセア（Ｍａｇｎａｐｏｒｔｈｅ ｇｒｉｓｅａ）、フィトフトラ・インフェスタンス（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｉｎｆｅｓｔａｎｓ）、スクレロチニア・スクレロチオルム（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ）又はファコプソラ・パキリジ（Ｐｈａｋｏｐｓｏｒａ ｐａｃｈｙｒｈｉｚｉ）である。
本発明の特定の実施形態において、本発明による方法は、真菌サッカロピンデヒドロゲナーゼ遺伝子又は卵菌サッカロピンデヒドロゲナーゼ遺伝子を阻害し、ここで、該方法は、以下の：
（ｉ） 植物細胞を本発明によるキメラ遺伝子を用いて形質転換させる段階；
（ｉｉ） そのように形質転換された細胞を該構築物の転写を可能とする条件下に置く段階；
（ｉｉｉ） 該細胞を該病原体と接触させる段階；
を含んでおり、その際、当該植物は、ダイズ植物、ナタネ植物、イネ植物又はジャガイモ植物である。
本発明に従って、全ての植物及び植物の部分を処理することができる。植物は、望ましい及び望ましくない野生植物、栽培品種並びに植物変種（植物変種又は植物育種家の権利によって保護されても又は保護されなくても）のような全ての植物及び植物群を意味する。栽培品種及び植物変種は、慣習的な繁殖方法及び育種方法（これらは、１種類以上の生物工学的方法によって、例えば、倍加半数体、プロトプラスト融合、ランダム突然変異誘発及び定方向突然変異誘発、分子標識若しくは遺伝標識又は生物工学法及び遺伝子工学法などを使用して、補助することができるか又は補うことができる）によって得られる植物であることができる。植物の部分は、植物の地上及び地下の全ての部分及び全ての器官、例えば、枝条、葉、花及び根などを意味し、ここで、例えば、葉、針状葉、茎、枝、花、子実体、果実及び種子、並びに、根、球茎及び根茎などを挙げることができる。作物並びに栄養繁殖器官及び生殖繁殖器官（ｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ ａｎｄ ｇｅｎｅｒａｔｉｖｅ ｐｒｏｐａｇａｔｉｎｇ ｍａｔｅｒｉａｌ）、例えば、挿木（ｃｕｔｔｉｎｇ）、球茎、根茎、匍匐茎及び種子なども、植物の部分に属する。
本発明の方法で保護することが可能な植物の中で、以下のものを挙げることができる：主要農作物、例えば、トウモロコシ、ダイズ、ワタ、アブラナ属油料種子（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｏｉｌｓｅｅｄｓ）、例えば、セイヨウアブラナ（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｎａｐｕｓ）（例えば、カノラ）、カブ（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｒａｐａ）、カラシナ（Ｂ．ｊｕｎｃｅａ）（例えば、マスタード）及びアビシニアガラシ（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｃａｒｉｎａｔａ）、イネ、コムギ、テンサイ、サトウキビ、エンバク、ライムギ、オオムギ、アワ、ライコムギ、アマ、ブドウの木、並びに、種々の植物学的分類群に属するさまざまな果実及び野菜、例えば、バラ科各種（Ｒｏｓａｃｅａｅ ｓｐ．）（例えば、仁果（ｐｉｐ ｆｒｕｉｔ）、例えば、リンゴ及びナシ、さらに、核果、例えば、アンズ、サクラ、アーモンド及びモモ、液果（ｂｅｒｒｙ ｆｒｕｉｔｓ）、例えば、イチゴ）、リベシオイダエ科各種（Ｒｉｂｅｓｉｏｉｄａｅ ｓｐ．）、クルミ科各種（Ｊｕｇｌａｎｄａｃｅａｅ ｓｐ．）、カバノキ科各種（Ｂｅｔｕｌａｃｅａｅ ｓｐ．）、ウルシ科各種（Ａｎａｃａｒｄｉａｃｅａｅ ｓｐ．）、ブナ科各種（Ｆａｇａｃｅａｅ ｓｐ．）、クワ科各種（Ｍｏｒａｃｅａｅ ｓｐ．）、モクセイ科各種（Ｏｌｅａｃｅａｅ ｓｐ．）、マタタビ科各種（Ａｃｔｉｎｉｄａｃｅａｅ ｓｐ．）、クスノキ科各種（Ｌａｕｒａｃｅａｅ ｓｐ．）、バショウ科各種（Ｍｕｓａｃｅａｅ ｓｐ．）（例えば、バナナの木及びバナナ園（ｂａｎａｎａ ｔｒｅｅｓ ａｎｄ ｐｌａｎｔｉｎｇｓ））、アカネ科各種（Ｒｕｂｉａｃｅａｅ ｓｐ．）（例えば、コーヒー）、ツバキ科各種（Ｔｈｅａｃｅａｅ ｓｐ．）、アオギリ科各種（Ｓｔｅｒｃｕｌｉｃｅａｅ ｓｐ．）、ミカン科各種（Ｒｕｔａｃｅａｅ ｓｐ．）（例えば、レモン、オレンジ及びグレープフルーツ）；ナス科各種（Ｓｏｌａｎａｃｅａｅ ｓｐ．）（例えば、トマト、ジャガイモ、トウガラシ、ナス）、ユリ科各種（Ｌｉｌｉａｃｅａｅ ｓｐ．）、キク科各種（Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉａｅ ｓｐ．）（例えば、レタス、チョウセンアザミ及びチコリー（これは、ルートチコリー（ｒｏｏｔ ｃｈｉｃｏｒｙ）、エンダイブ又はキクニガナを包含する））、セリ科各種（Ｕｍｂｅｌｌｉｆｅｒａｅ ｓｐ．）（例えば、ニンジン、パセリ、セロリ及びセルリアック）、ウリ科各種（Ｃｕｃｕｒｂｉｔａｃｅａｅ ｓｐ．）（例えば、キュウリ（これは、ピックルキュウリ（ｐｉｃｋｌｉｎｇ ｃｕｃｕｍｂｅｒ）を包含する）、カボチャ、スイカ、ヒョウタン及びメロン）、ネギ科各種（Ａｌｌｉａｃｅａｅ ｓｐ．）（例えば、タマネギ及びリーキ）、アブラナ科各種（Ｃｒｕｃｉｆｅｒａｅ ｓｐ．）（例えば、白キャベツ、赤キャベツ、ブロッコリー、カリフラワー、芽キャベツ、タイサイ、コールラビ、ラディッシュ、セイヨウワサビ、コショウソウ、ハクサイ）、マメ科各種（Ｌｅｇｕｍｉｎｏｓａｅ ｓｐ．）（例えば、ラッカセイ、エンドウ及びインゲンマメ（例えば、クライミングビーン（ｃｌｉｍｂｉｎｇ ｂｅａｎｓ）及びソラマメ））、アカザ科各種（Ｃｈｅｎｏｐｏｄｉａｃｅａｅ ｓｐ．）（例えば、フダンソウ（ｍａｎｇｏｌｄ）、フダンソウ（ｓｐｉｎａｃｈ ｂｅｅｔ）、ホウレンソウ、ビートルート）、アオイ科（Ｍａｌｖａｃｅａｅ）（例えば、オクラ）、クサスギカズラ科（Ａｓｐａｒａｇａｃｅａｅ）（例えば、アスパラガス）；園芸作物及び森林作物（ｆｏｒｅｓｔ ｃｒｏｐｓ）；観賞植物；及び、これら作物の遺伝子組み換えが行われた相同物。
本発明による処理方法は、遺伝子組換え生物（ＧＭＯ）、例えば、植物又は種子などの処理において使用することができる。遺伝子組換え植物（又は、トランスジェニック植物）は、異種遺伝子がゲノムに安定的に組み込まれている植物である。表現「異種遺伝子」は、本質的に、供給されたか又は当該植物の外部で構築された遺伝子であって、核のゲノム、葉緑体のゲノム又はミトコンドリアのゲノムの中に導入されたときに、興味深いタンパク質若しくはポリペプチドを発現することにより、又は、その植物内に存在している別の１つ若しくは複数の遺伝子をダウンレギュレート若しくはサイレンシングすることにより、当該形質転換された植物に新しい又は改善された作物学的特性又は別の特性を付与する遺伝子を意味する〔例えば、アンチセンス技術、コサプレッション技術又はＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）技術などを使用する〕。ゲノム内に位置している異種遺伝子は、導入遺伝子とも称される。植物ゲノム内におけるその特異的な位置によって定義される導入遺伝子は、形質転換又は遺伝子導入イベントと称される。
植物種又は植物品種、それらの生育場所及び生育条件（土壌、気候、生育期、養分（ｄｉｅｔ））に応じて、本発明の処理により、相加効果を超える効果（「相乗効果」）も生じ得る。かくして、例えば、本発明により使用し得る活性化合物及び組成物の施用量の低減及び／又は活性スペクトルの拡大及び／又は活性の増強、植物の生育の向上、高温又は低温に対する耐性の向上、渇水又は水中若しくは土壌中に含まれる塩分に対する耐性の向上、開花能力の向上、収穫の容易性の向上、促進された成熟、収穫量の増加、果実の大きさの増大、植物の高さの増大、葉の緑色の向上、より早い開花、収穫された生産物の品質の向上及び／又は栄養価の増加、果実内の糖度の上昇、収穫された生産物の貯蔵安定性の向上及び／又は加工性の向上などが可能であり、これらは、実際に予期された効果を超えるものである。
特定の施用量において、本発明による活性化合物組合せは、植物において強化効果（ｓｔｒｅｎｇｔｈｅｎｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔ）も示し得る。従って、本発明の活性化合物組合せは、望ましくない微生物類による攻撃に対して植物の防御システムを動員させるのにも適している。これは、適切な場合には、本発明による組合せの例えば菌類に対する強化された活性の理由のうちの１つであり得る。本発明に関連して、植物を強化する（抵抗性を誘導する）物質は、処理された植物が、その後で望ましくない微生物類を接種されたときに、それらの微生物類に対して実質的な程度の抵抗性を示すように、植物の防御システムを刺激することができる物質又は物質の組合せを意味するものと理解される。この場合、望ましくない微生物類は、植物病原性の菌類、細菌類及びウイルス類を意味するものと理解される。従って、処理後特定の期間、上記病原体による攻撃から植物を保護するために、本発明の物質を用いることができる。保護が達成される期間は、植物が該活性化合物で処理されてから、一般に、１〜１０日間、好ましくは、１〜７日間である。
上記で既に述べたように、本発明に従って、全ての植物及びそれらの部分を処理することができる。好ましい実施形態では、野生の植物種及び植物品種、又は、交雑若しくはプロトプラスト融合のような慣習的な生物学的育種法により得られた植物種及び植物品種、並びに、それらの部分を処理する。好ましいさらなる実施形態では、適切な場合には慣習的な方法と組み合わせた遺伝子工学的方法により得られたトランスジェニック植物及び植物品種（遺伝子組換え生物）及びそれらの部分を処理する。用語「部分（ｐａｒｔｓ）」又は「植物の部分（ｐａｒｔｓ ｏｆ ｐｌａｎｔｓ）」又は「植物の部分（ｐｌａｎｔ ｐａｒｔｓ）」については、既に上記で説明した。さらに好ましくは、市販されているか又は使用されている植物品種の植物を、本発明に従って処理する。植物品種は、慣習的な育種又は突然変異誘発又は組換えＤＮＡ技術によって得られた、新しい特性（「形質」）を有する植物を意味するものと理解される。これらは、品種、変種、生物型又は遺伝子型であることができる。
本発明による処理方法は、遺伝子組換え生物（ＧＭＯ）（例えば、植物又は種子）の処理において使用することができる。遺伝子組換え植物（又は、トランスジェニック植物）は、異種遺伝子がゲノムに安定的に組み込まれている植物である。表現「異種遺伝子」は、本質的に、供給されたか又は当該植物の外部で構築された遺伝子であって、核のゲノム、葉緑体のゲノム又はミトコンドリアのゲノムの中に導入されたときに、興味深いタンパク質若しくはポリペプチドを発現することにより、又は、その植物内に存在している別の１つ若しくは複数の遺伝子をダウンレギュレート若しくはサイレンシングすることにより、当該形質転換された植物に新しい又は改善された作物学的特性又は別の特性を付与する遺伝子を意味する〔例えば、アンチセンス技術、コサプレッション技術、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）技術又はミクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）技術などを使用する〕。ゲノム内に位置している異種遺伝子は、導入遺伝子とも称される。植物ゲノム内におけるその特異的な位置によって定義される導入遺伝子は、形質転換又は遺伝子導入イベントと称される。
植物種又は植物品種、それらの生育場所及び生育条件（土壌、気候、生育期、養分（ｄｉｅｔ））に応じて、本発明の処理により、相加効果を超える効果（「相乗効果」）も生じ得る。かくして、例えば、本発明により使用し得る活性化合物及び組成物の施用量の低減及び／又は活性スペクトルの拡大及び／又は活性の増強、植物の生育の向上、高温又は低温に対する耐性の向上、渇水又は水中若しくは土壌中に含まれる塩分に対する耐性の向上、開花能力の向上、収穫の容易性の向上、促進された成熟、収穫量の増加、果実の大きさの増大、植物の高さの増大、葉の緑色の向上、より早い開花、収穫された生産物の品質の向上及び／又は栄養価の増加、果実内の糖度の上昇、収穫された生産物の貯蔵安定性の向上及び／又は加工性の向上などが可能であり、これらは、実際に予期された効果を超えるものである。
特定の施用量において、本発明による活性化合物組合せは、植物において強化効果（ｓｔｒｅｎｇｔｈｅｎｉｎｇ ｅｆｆｅｃｔ）も示し得る。従って、本発明による活性化合物組合せは、望ましくない微生物類による攻撃に対して植物の防御システムを動員させるのにも適している。これは、適切な場合には、本発明による組合せの例えば菌類に対する強化された活性の理由のうちの１つであり得る。本発明に関連して、植物を強化する（抵抗性を誘導する）物質は、処理された植物が、その後で望ましくない微生物類を接種されたときに、それらの微生物類に対して実質的な程度の抵抗性を示すように、植物の防御システムを刺激することができる物質又は物質の組合せを意味するものと理解される。この場合、望ましくない微生物類は、植物病原性の菌類、細菌類及びウイルス類を意味するものと理解される。従って、処理後特定の期間、上記病原体による攻撃から植物を保護するために、本発明による物質を用いることができる。保護が達成される期間は、植物が該活性化合物で処理されてから、一般に、１〜１０日間、好ましくは、１〜７日間に及ぶ。
本発明に従って処理するのが好ましい植物及び植物品種は、特に有利で有益な形質を植物に付与する遺伝物質を有している全ての植物（育種によって得られたものであろうと、及び／又は、生物工学的方法によって得られたものであろうと）を包含する。
本発明に従って処理するのが同様に好ましい植物及び植物品種は、１以上の生物的ストレスに対して抵抗性を示す。即ち、そのような植物は、害虫及び有害微生物に対して、例えば、線虫類、昆虫類、ダニ類、植物病原性の菌類、細菌類、ウイルス類及び／又はウイロイド類などに対して、良好な防御を示す。
線虫抵抗性植物又は昆虫抵抗性植物の例は、例えば、以下のものに記載されている：米国特許出願第１１／７６５，４９１号、米国特許出願第１１／７６５，４９４号、米国特許出願第１０／９２６，８１９号、米国特許出願第１０／７８２，０２０号、米国特許出願第１２／０３２，４７９号、米国特許出願第１０／７８３，４１７号、米国特許出願第１０／７８２，０９６号、米国特許出願第１１／６５７，９６４号、米国特許出願第１２／１９２，９０４号、米国特許出願第１１／３９６，８０８号、米国特許出願第１２／１６６，２５３号、米国特許出願第１２／１６６，２３９号、米国特許出願第１２／１６６，１２４号、米国特許出願第１２／１６６，２０９号、米国特許出願第１１／７６２，８８６号、米国特許出願第１２／３６４，３３５号、米国特許出願第１１／７６３，９４７号、米国特許出願第１２／２５２，４５３号、米国特許出願第１２／２０９，３５４号、米国特許出願第１２／４９１，３９６号、米国特許出願第１２／４９７，２２１号、米国特許出願第１２／６４４，６３２号、米国特許出願第１２／６４６，００４号、米国特許出願第１２／７０１，０５８号、米国特許出願第１２／７１８，０５９号、米国特許出願第１２／７２１，５９５号、米国特許出願第１２／６３８，５９１号。
本発明に従って同様に処理し得る植物及び植物品種は、１以上の非生物的ストレスに対して抵抗性を示す植物である。非生物的なストレス状態としては、例えば、渇水、低温に晒されること、熱に晒されること、浸透ストレス、湛水、土壌中の塩分濃度の上昇、より多くの鉱物に晒されること、オゾンに晒されること、強い光に晒されること、利用可能な窒素養分が限られていること、利用可能なリン養分が限られていること、日陰回避などを挙げることができる。
本発明に従って同様に処理し得る植物及び植物品種は、増大した収量特性を特徴とする植物である。そのような植物における増大した収量は、例えば、改善された植物の生理機能、生長及び発育、例えば、水の利用効率、水の保持効率、改善された窒素の利用性、強化された炭素同化作用、改善された光合成、上昇した発芽効率及び促進された成熟などの結果であり得る。収量は、さらに、改善された植物の構成（ａｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ）によっても影響され得る（ストレス条件下及び非ストレス条件下）。そのような改善された植物の構成としては、限定するものではないが、早咲き、ハイブリッド種子産生のための開花制御、実生の活力、植物の寸法、節間の数及び距離、根の成長、種子の寸法、果実の寸法、莢の寸法、莢又は穂の数、１つの莢又は穂当たりの種子の数、種子の体積、強化された種子充填、低減された種子分散、低減された莢の裂開及び耐倒伏性などがある。収量についてのさらなる形質としては、種子の組成、例えば、炭水化物含有量、タンパク質含有量、油含有量及び油の組成、栄養価、抗栄養化合物の低減、改善された加工性並びに向上した貯蔵安定性などがある。
本発明に従って処理し得る植物は、雑種強勢（これは、結果として、一般に、増加した収量、向上した活力、向上した健康状態並びに生物的及び非生物的ストレスに対する向上した抵抗性をもたらす）の特性を既に呈しているハイブリッド植物である。そのような植物は、典型的には、雄性不稔交配母体近交系（ｉｎｂｒｅｄ ｍａｌｅ−ｓｔｅｒｉｌｅ ｐａｒｅｎｔ ｌｉｎｅ）（雌性親）を別の雄性稔性交配母体近交系（ｉｎｂｒｅｄ ｍａｌｅ−ｆｅｒｔｉｌｅ ｐａｒｅｎｔ ｌｉｎｅ）（雄性親）と交雑させることによって作られる。ハイブリッド種子は、典型的には、雄性不稔植物から収穫され、そして、栽培者に販売される。雄性不稔植物は、場合により（例えば、トウモロコシにおいて）、雄穂を除去することによって〔即ち、雄性繁殖器官（又は雄花）を機械的に除去することによって〕、作ることができる。しかしながら、より典型的には、雄性不稔性は、植物ゲノム内の遺伝的決定基の結果である。その場合、及び、特に種子がハイブリッド植物から収穫される所望の生産物である場合、典型的には、該ハイブリッド植物において雄性稔性を確実に完全に回復させることは有用である。これは、雄性不稔性に関与する遺伝的決定基を含んでいるハイブリッド植物において雄性稔性を回復させることが可能な適切な稔性回復遺伝子を雄性親が有していることを確実なものとすることによって達成することができる。雄性不稔性に関する遺伝的決定基は、細胞質内に存在し得る。細胞質雄性不稔（ＣＭＳ）の例は、例えば、アブラナ属各種（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｓｐｅｃｉｅｓ）に関して記述された（ＷＯ ９２／０５２５１、ＷＯ ９５／０９９１０、ＷＯ ９８／２７８０６、ＷＯ ０５／００２３２４、ＷＯ ０６／０２１９７２、及び、ＵＳ ６，２２９，０７２）。しかしながら、雄性不稔性に関する遺伝的決定基は、核ゲノム内にも存在し得る。雄性不稔性植物は、遺伝子工学などの植物バイオテクノロジー法によっても得ることができる。雄性不稔性植物を得る特に有用な方法は、ＷＯ ８９／１０３９６に記載されており、ここでは、例えば、バルナーゼなどのリボヌクレアーゼを雄ずい内のタペータム細胞において選択的に発現させる。次いで、タペータム細胞内においてバルスターなどのリボヌクレアーゼインヒビターを発現させることによって、稔性を回復させることができる（例えば、ＷＯ ９１／０２０６９）。
本発明に従って処理し得る植物又は植物品種（遺伝子工学などの植物バイオテクノロジー法によって得られたもの）は、除草剤耐性植物、即ち、１種類以上の所与の除草剤に対して耐性にされた植物である。そのような植物は、遺伝的形質転換によって得ることができるか、又は、当該除草剤耐性を付与する突然変異を含んでいる植物を選抜することによって得ることができる。
除草剤抵抗性植物は、例えば、グリホセート耐性植物、即ち、除草剤グリホセート又はその塩に対して耐性にされた植物である。植物は、種々の方法によって、グリホセートに対して耐性にすることができる。例えば、グリホセート耐性植物は、酵素５−エノールピルビルシキミ酸−３−リン酸シンターゼ（ＥＰＳＰＳ）をコードする遺伝子で植物を形質転換させることによって得ることができる。そのようなＥＰＳＰＳ遺伝子の例は、以下のものである：細菌サルモネラ・チフィムリウム（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ）のＡｒｏＡ遺伝子（突然変異ＣＴ７）（Ｓｃｉｅｎｃｅ １９８３， ２２１， ３７０−３７１）、細菌アグロバクテリウム属各種（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｐ．）のＣＰ４遺伝子（Ｃｕｒｒ． Ｔｏｐｉｃｓ Ｐｌａｎｔ Ｐｈｙｓｉｏｌ． １９９２， ７， １３９−１４５）、ペチュニアのＥＰＳＰＳをコードする遺伝子（Ｓｃｉｅｎｃｅ １９８６， ２３３， ４７８−４８１）、トマトのＥＰＳＰＳをコードする遺伝子（Ｊ． Ｂｉｏｌ． Ｃｈｅｍ． １９８８， ２６３， ４２８０−４２８９）又はオヒシバ属（Ｅｌｅｕｓｉｎｅ）のＥＰＳＰＳをコードする遺伝子（ＷＯ ０１／６６７０４）。それは、例えばＥＰ ０８３７９４４、ＷＯ ００／６６７４６、ＷＯ ００／６６７４７又はＷＯ ０２／２６９９５などに記述されているように、突然変異ＥＰＳＰＳであることも可能である。グリホセート耐性植物は、さらにまた、ＵＳ ５，７７６，７６０及びＵＳ ５，４６３，１７５に記述されているように、グリホセートオキシドレダクターゼ酵素をコードする遺伝子を発現させることによって得ることもできる。グリホセート耐性植物は、さらにまた、例えばＷＯ ０２／０３６７８２、ＷＯ ０３／０９２３６０、ＷＯ ２００５／０１２５１５及びＷＯ ２００７／０２４７８２などに記述されているように、グリホセートアセチルトランスフェラーゼ酵素をコードする遺伝子を発現させることによって得ることもできる。グリホセート耐性植物は、さらにまた、例えばＷＯ ０１／０２４６１５又はＷＯ ０３／０１３２２６などに記述されているように、上記遺伝子の自然発生突然変異を含んでいる植物を選抜することによって得ることもできる。グリホセート耐性を付与するＥＰＳＰＳ遺伝子を発現する植物は、例えば、米国特許出願第１１／５１７，９９１号、米国特許出願第１０／７３９，６１０号、米国特許出願第１２／１３９，４０８号、米国特許出願第１２／３５２，５３２号、米国特許出願第１１／３１２，８６６号、米国特許出願第１１／３１５，６７８号、米国特許出願第１２／４２１，２９２号、米国特許出願第１１／４００，５９８号、米国特許出願第１１／６５１，７５２号、米国特許出願第１１／６８１，２８５号、米国特許出願第１１／６０５，８２４号、米国特許出願第１２／４６８，２０５号、米国特許出願第１１／７６０，５７０号、米国特許出願第１１／７６２，５２６号、米国特許出願第１１／７６９，３２７号、米国特許出願第１１／７６９，２５５号、米国特許出願第１１／９４３８０１号又は米国特許出願第１２／３６２，７７４号などに記載されている。グリホセート耐性を付与する別の遺伝子（例えば、デカルボキシラーゼ遺伝子）を含んでいる植物は、例えば、米国特許出願第１１／５８８，８１１号、米国特許出願第１１／１８５，３４２号、米国特許出願第１２／３６４，７２４号、米国特許出願第１１／１８５，５６０号又は米国特許出願第１２／４２３，９２６号などに記載されている。
別の除草剤抵抗性植物は、例えば、酵素グルタミンシンターゼを阻害する除草剤（例えば、ビアラホス、ホスフィノトリシン又はグルホシネート）に対して耐性にされている植物である。そのような植物は、当該除草剤を解毒する酵素を発現させるか、又は、阻害に対して抵抗性を示す突然変異グルタミンシンターゼ酵素を発現させることによって、得ることができる（例えば、米国特許出願第１１／７６０，６０２号に記載されている）。そのような有効な一解毒酵素は、ホスフィノトリシンアセチルトランスフェラーゼをコードする酵素である（例えば、ストレプトマイセス属各種（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｓｐｅｃｉｅｓ）に由来するｂａｒタンパク質又はｐａｔタンパク質）。外因性のホスフィノトリシンアセチルトランスフェラーゼを発現する植物は、例えば、米国特許第５，５６１，２３６号、米国特許第５，６４８，４７７号、米国特許第５，６４６，０２４号、米国特許第５，２７３，８９４号、米国特許第５，６３７，４８９号、米国特許第５，２７６，２６８号、米国特許第５，７３９，０８２号、米国特許第５，９０８，８１０号及び米国特許第７，１１２，６６５号などに記述されている。
さらなる除草剤耐性植物は、さらにまた、酵素ヒドロキシフェニルピルビン酸ジオキシゲナーゼ（ＨＰＰＤ）を阻害する除草剤に対して耐性にされている植物である。ＨＰＰＤは、パラ−ヒドロキシフェニルピルベート（ＨＰＰ）がホモゲンチセートに変換される反応を触媒する酵素である。ＨＰＰＤ阻害薬に対して耐性を示す植物は、ＷＯ ９６／３８５６７、ＷＯ ９９／２４５８５、ＷＯ ９９／２４５８６、ＷＯ ０９／１４４０７９、ＷＯ ０２／０４６３８７又はＵＳ ６，７６８，０４４に記述されているように、自然発生抵抗性ＨＰＰＤ酵素をコードする遺伝子を用いて、又は、突然変異ＨＰＰＤ酵素若しくはキメラＨＰＰＤ酵素をコードする遺伝子を用いて、形質転換させることができる。ＨＰＰＤ阻害薬に対する耐性は、さらにまた、ＨＰＰＤ阻害薬による天然ＨＰＰＤ酵素の阻害にもかかわらずホモゲンチセートを形成させることが可能な特定の酵素をコードする遺伝子を用いて植物を形質転換させることによっても得ることができる。そのような植物及び遺伝子は、ＷＯ ９９／３４００８及びＷＯ ０２／３６７８７に記述されている。ＨＰＰＤ阻害薬に対する植物の耐性は、さらにまた、ＷＯ ０４／０２４９２８に記述されているように、ＨＰＰＤ耐性酵素をコードする遺伝子に加えてプレフェナートデスヒドロゲナーゼ（ＰＤＨ）活性を有する酵素をコードする遺伝子を用いて植物を形質転換させることによって改善することもできる。さらに、植物は、ＷＯ ２００７／１０３５６７及びＷＯ ２００８／１５０４７３に記載されているように、そのゲノムの中にＨＰＰＤ阻害薬を代謝又は分解することが可能な酵素（例えば、ＣＹＰ４５０酵素）をコードする遺伝子を加えることによって、ＨＰＰＤ阻害薬除草剤に対してさらに耐性にすることができる。
さらに別の除草剤抵抗性植物は、アセトラクテートシンターゼ（ＡＬＳ）阻害薬に対して耐性にされている植物である。既知ＡＬＳ阻害薬としては、例えば、スルホニル尿素系除草剤、イミダゾリノン系除草剤、トリアゾロピリミジン系除草剤、ピリミジニルオキシ（チオ）ベンゾエート系除草剤、及び／又は、スルホニルアミノカルボニルトリアゾリノン系除草剤などがある。ＡＬＳ酵素（「アセトヒドロキシ酸シンターゼ（ＡＨＡＳ）」としても知られている）における種々の突然変異体は、例えば「Ｔｒａｎｅｌ ａｎｄ Ｗｒｉｇｈｔ（Ｗｅｅｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ ２００２， ５０， ７００−７１２）」などに記述され、さらに、米国特許第５，６０５，０１１号、米国特許第５，３７８，８２４号、米国特許第５，１４１，８７０号及び米国特許第５，０１３，６５９号などにも記述されているように、種々の除草剤及び除草剤の群に対する耐性を付与することが知られている。スルホニル尿素耐性植物及びイミダゾリノン耐性植物の作製については、米国特許第５，６０５，０１１号、米国特許第５，０１３，６５９号、米国特許第５，１４１，８７０号、米国特許第５，７６７，３６１号、米国特許第５，７３１，１８０号、米国特許第５，３０４，７３２号、米国特許第４，７６１，３７３号、米国特許第５，３３１，１０７号、米国特許第５，９２８，９３７号及び米国特許第５，３７８，８２４号並びにＷＯ ９６／３３２７０に記述されている。別のイミダゾリノン耐性植物についても、例えば、ＷＯ ２００４／０４００１２、ＷＯ ２００４／１０６５２９、ＷＯ ２００５／０２０６７３、ＷＯ ２００５／０９３０９３、ＷＯ ２００６／００７３７３、ＷＯ ２００６／０１５３７６、ＷＯ ２００６／０２４３５１及びＷＯ ２００６／０６０６３４などに記述されている。さらなるスルホニル尿素耐性植物及びイミダゾリノン耐性植物は、さらにまた、例えば、ＷＯ ２００７／０２４７８２及び米国特許出願第６１／２８８９５８号などにも記述されている。
イミダゾリノン及び／又はスルホニル尿素に対して耐性を示す別の植物は、例えば、ダイズに関してはＵＳ ５，０８４，０８２に記述されているように、イネに関してはＷＯ ９７／４１２１８に記述されているように、テンサイに関してはＵＳ ５，７７３，７０２及びＷＯ ９９／０５７９６５に記述されているように、レタスに関してはＵＳ ５，１９８，５９９に記述されているように、又は、ヒマワリに関してはＷＯ ０１／０６５９２２に記述されているように、誘導された突然変異誘発、当該除草剤の存在下での細胞培養における選抜又は突然変異育種によって得ることができる。
本発明に従って同様に処理し得る植物又は植物品種（遺伝子工学などの植物バイオテクノロジー法によって得られたもの）は、昆虫抵抗性トランスジェニック植物、即ち、特定の標的昆虫による攻撃に対して抵抗性にされた植物である。そのような植物は、遺伝的形質転換によって得ることができるか、又は、そのような昆虫抵抗性を付与する突然変異を含んでいる植物を選抜することによって得ることができる。
本明細書中で使用されている場合、「昆虫抵抗性トランスジェニック植物」には、以下のものをコードするコード配列を含んでいる少なくとも１の導入遺伝子を含んでいる任意の植物が包含される：
（１） バシルス・ツリンギエンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）に由来する殺虫性結晶タンパク質又はその殺虫活性を示す一部分、例えば、クリックモアら「Ｃｒｉｃｋｍｏｒｅ ｅｔ ａｌ． （１９９８， Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ Ｒｅｖｉｅｗｓ， ６２：８０７−８１３」によって記載され、クリックモアら「Ｃｒｉｃｋｍｏｒｅ ｅｔ ａｌ． （２００５）」によって、オンライン「ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｌｉｆｅｓｃｉ．ｓｕｓｓｅｘ．ａｃ．ｕｋ／Ｈｏｍｅ／Ｎｅｉｌ＿Ｃｒｉｃｋｍｏｒｅ／Ｂｔ／」上で「バシルス・ツリンギエンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）毒素命名法」において更新された殺虫性結晶タンパク質又はその殺虫活性を示す一部分、例えば、Ｃｒｙタンパク質類（Ｃｒｙ１Ａｂ、Ｃｒｙ１Ａｃ、Ｃｒｙ１Ｂ、Ｃｒｙ１Ｃ、Ｃｒｙ１Ｄ、Ｃｒｙ１Ｆ、Ｃｒｙ２Ａｂ、Ｃｒｙ３Ａａ、又は、Ｃｒｙ３Ｂｂ）のタンパク質若しくはその殺虫活性を示す一部分（例えば、ＥＰ−Ａ １９９９１４１、及び、ＷＯ ２００７／１０７３０２）、又は、例えば米国特許出願第１２／２４９，０１６に記載されている合成遺伝子によってコードされているタンパク質；又は、
（２） バシルス・ツリンギエンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）に由来する第２の別の結晶タンパク質又はその一部分の存在下において殺虫活性を示す、バシルス・ツリンギエンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）に由来する結晶タンパク質又はその一部分、例えば、Ｃｒｙ３４結晶タンパク質とＣｒｙ３５結晶タンパク質で構成されているバイナリートキシン（Ｎａｔ． Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ． ２００１， １９， ６６８−７２； Ａｐｐｌｉｅｄ Ｅｎｖｉｒｏｎｍ． Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ． ２００６， ７１， １７６５−１７７４）、又は、Ｃｒｙ１Ａ若しくはＣｒｙ１Ｆタンパク質とＣｒｙ２Ａａ若しくはＣｒｙ２Ａｂ若しくはＣｒｙ２Ａｅタンパク質で構成されているバイナリートキシン（米国特許出願第１２／２１４，０２２号、及び、ＥＰ−Ａ ２３００６１８）；又は、
（３） バシルス・ツリンギエンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）に由来する種々の殺虫性結晶タンパク質の一部分を含んでいる殺虫性ハイブリッドタンパク質、例えば、上記（１）のタンパク質のハイブリッド、又は、上記（２）のタンパク質のハイブリッド、例えば、トウモロコシイベントＭＯＮ８９０３４で産生されるＣｒｙ１Ａ．１０５タンパク質（ＷＯ ２００７／０２７７７７）；又は、
（４） 上記（１）〜（３）のいずれか１つのタンパク質において、標的昆虫種に対するさらに強い殺虫活性を得るために、及び／又は、影響を受ける標的昆虫種の範囲を拡大するために、及び／又は、クローニング若しくは形質転換に際してコード化ＤＮＡ中に導入された変化に起因して、幾つかのアミノ酸（特に、１〜１０のアミノ酸）が別のアミノ酸で置き換えられていているもの、例えば、トウモロコシイベントＭＯＮ８６３若しくはＭＯＮ８８０１７におけるＣｒｙ３Ｂｂ１タンパク質又はトウモロコシイベントＭＩＲ６０４におけるＣｒｙ３Ａタンパク質；又は、
（５） バシルス・ツリンギエンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）又はバシルス・セレウス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ）に由来する殺虫性分泌タンパク質又はその殺虫活性を示す一部分、例えば、「ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｌｉｆｅｓｃｉ．ｓｕｓｓｅｘ．ａｃ．ｕｋ／ｈｏｍｅ／Ｎｅｉｌ＿Ｃｒｉｃｋｍｏｒｅ／Ｂｔ／ｖｉｐ．ｈｔｍｌ」において挙げられている栄養生長期殺虫性タンパク質（ｖｅｇｅｔａｔｉｖｅ ｉｎｓｅｃｔｉｃｉｄａｌ ｐｒｏｔｅｉｎ）（ＶＩＰ）、例えば、ＶＩＰ３Ａａタンパク質類のタンパク質；又は、
（６） バシルス・ツリンギエンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）又はバシルス・セレウス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ）に由来する第２の分泌タンパク質の存在下において殺虫活性を示す、バシルス・ツリンギエンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）又はバシルス・セレウス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ）に由来する分泌タンパク質、例えば、ＶＩＰ１Ａタンパク質とＶＩＰ２Ａタンパク質で構成されているバイナリートキシン（ＷＯ ９４／２１７９５）；又は、
（７） バシルス・ツリンギエンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）又はバシルス・セレウス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ）に由来する種々の分泌タンパク質の一部分を含んでいる殺虫性ハイブリッドタンパク質、例えば、上記（１）のタンパク質のハイブリッド、又は、上記（２）のタンパク質のハイブリッド；又は、
（８） 上記（５）〜（７）のいずれか１つのタンパク質において、標的昆虫種に対するさらに強い殺虫活性を得るために、及び／又は、影響を受ける標的昆虫種の範囲を拡大するために、及び／又は、クローニング若しくは形質転換に際してコード化ＤＮＡ中に導入された変化（それでも、まだ、殺虫性タンパク質をコードしている）に起因して、幾つかのアミノ酸（特に、１〜１０のアミノ酸）が別のアミノ酸で置き換えられていているもの、例えば、ワタイベントＣＯＴ１０２におけるＶＩＰ３Ａａタンパク質；又は、
（９） バシルス・ツリンギエンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）に由来する結晶タンパク質の存在下において殺虫活性を示す、バシルス・ツリンギエンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）又はバシルス・セレウス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ）に由来する分泌タンパク質、例えば、ＶＩＰ３とＣｒｙ１Ａ若しくはＣｒｙ１Ｆで構成されているバイナリートキシン（米国特許出願第６１／１２６０８３号、及び、米国特許出願第６１／１９５０１９号）、又は、ＶＩＰ３タンパク質とＣｒｙ２Ａａタンパク質若しくはＣｒｙ２Ａｂタンパク質若しくはＣｒｙ２Ａｅタンパク質で構成されているバイナリートキシン（米国特許出願第１２／２１４，０２２号、及び、ＥＰ−Ａ ２３００６１８）；又は、
（１０） 上記（９）のタンパク質において、標的昆虫種に対するさらに強い殺虫活性を得るために、及び／又は、影響を受ける標的昆虫種の範囲を拡大するために、及び／又は、クローニング若しくは形質転換に際してコード化ＤＮＡ中に導入された変化（それでも、まだ、殺虫性タンパク質をコードしている）に起因して、幾つかのアミノ酸（特に、１〜１０のアミノ酸）が別のアミノ酸で置き換えられていているもの。
もちろん、「昆虫抵抗性トランスジェニック植物」は、本明細書中で使用されている場合、上記クラス（１）〜（１０）のいずれか１つのタンパク質をコードする遺伝子の組合せを含んでいる任意の植物も包含する。一実施形態では、異なった標的昆虫種に対して異なったタンパク質を使用した場合に影響を受ける標的昆虫種の範囲を拡大するために、又は、同一の標的昆虫種に対して殺虫活性を示すが作用機序は異なっている（例えば、当該昆虫体内の異なった受容体結合部位に結合する）異なったタンパク質を用いることによって当該植物に対する昆虫の抵抗性の発達を遅延させるために、昆虫抵抗性植物は、上記クラス（１）〜（１０）のいずれか１つのタンパク質をコードする２つ以上の導入遺伝子を含んでいる。
「昆虫抵抗性トランスジェニック植物」は、本明細書中で使用されている場合、さらに、例えばＷＯ ２００７／０８０１２６、ＷＯ ２００６／１２９２０４、ＷＯ ２００７／０７４４０５、ＷＯ ２００７／０８０１２７及びＷＯ ２００７／０３５６５０などに記述されているような、植物の害虫に摂取されたときにその害虫の成長を阻害する二本鎖ＲＮＡを発現時に産生する配列を含んでいる少なくとも１の導入遺伝子を含んでいる任意の植物も包含する。
本発明に従って同様に処理し得る植物又は植物品種（遺伝子工学などの植物バイオテクノロジー法によって得られたもの）は、非生物的ストレスに対して耐性を示す。そのような植物は、遺伝的形質転換によって得ることができるか、又は、そのようなストレス抵抗性を付与する突然変異を含んでいる植物を選抜することによって得ることができる。特に有用なストレス耐性植物としては、以下のものなどがある：
（１） 植物細胞内又は植物内におけるポリ（ＡＤＰ−リボース）ポリメラーゼ（ＰＡＲＰ）遺伝子の発現及び／又は活性を低減させることが可能な導入遺伝子を含んでいる植物（ＷＯ ００／０４１７３、ＷＯ ／２００６／０４５６３３、ＥＰ−Ａ １８０７５１９又はＥＰ−Ａ ２０１８４３１に記述されている）；
（２） 植物又は植物細胞のＰＡＲＧコード化遺伝子の発現及び／又は活性を低減させることが可能なストレス耐性を強化する導入遺伝子を含んでいる植物（例えば、ＷＯ ２００４／０９０１４０などに記述されている）；
（３） ニコチンアミダーゼ、ニコチン酸ホスホリボシルトランスフェラーゼ、ニコチン酸モノヌクレオチドアデニルトランスフェラーゼ、ニコチンアミドアデニンジヌクレオチドシンテターゼ又はニコチンアミドホスホリボシルトランスフェラーゼを包含するニコチンアミドアデニンジヌクレオチドサルベージ合成経路の植物機能性酵素（ｐｌａｎｔ−ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｅｎｚｙｍｅ）をコードするストレス耐性を強化する導入遺伝子を含んでいる植物（例えば、ＥＰ−Ａ １７９４３０６、ＷＯ ２００６／１３３８２７、ＷＯ ２００７／１０７３２６、ＥＰ−Ａ １９９９２６３又はＷＯ ２００７／１０７３２６などに記述されている）。
本発明に従って同様に処理し得る植物又は植物品種（遺伝子工学などの植物バイオテクノロジー法によって得られたもの）は、収穫された生産物の改変された量、品質及び／若しくは貯蔵安定性、並びに／又は、収穫された生産物の特定の成分の改変された特性を示す。例えば：
（１） 野生型の植物細胞又は植物において合成された澱粉と比較して、その物理化学的特性〔特に、アミロース含有量若しくはアミロース／アミロペクチン比、枝分かれ度、平均鎖長、側鎖分布、粘性挙動、ゲル化強度（ｇｅｌｌｉｎｇ ｓｔｒｅｎｇｔｈ）、澱粉粒径及び／又は澱粉粒子形態〕が変えられていて、特定の用途により適した変性澱粉を合成するトランスジェニック植物。変性澱粉を合成する該トランスジェニック植物は、例えば、ＥＰ−Ａ ０５７１４２７、ＷＯ ９５／０４８２６、ＥＰ−Ａ ０７１９３３８、ＷＯ ９６／１５２４８、ＷＯ ９６／１９５８１、ＷＯ ９６／２７６７４、ＷＯ ９７／１１１８８、ＷＯ ９７／２６３６２、ＷＯ ９７／３２９８５、ＷＯ ９７／４２３２８、ＷＯ ９７／４４４７２、ＷＯ ９７／４５５４５、ＷＯ ９８／２７２１２、ＷＯ ９８／４０５０３、ＷＯ ９９／５８６８８、ＷＯ ９９／５８６９０、ＷＯ ９９／５８６５４、ＷＯ ００／０８１８４、ＷＯ ００／０８１８５、ＷＯ ００／０８１７５、ＷＯ ００／２８０５２、ＷＯ ００／７７２２９、ＷＯ ０１／１２７８２、ＷＯ ０１／１２８２６、ＷＯ ０２／１０１０５９、ＷＯ ０３／０７１８６０、ＷＯ ０４／０５６９９９、ＷＯ ０５／０３０９４２、ＷＯ ２００５／０３０９４１、ＷＯ ２００５／０９５６３２、ＷＯ ２００５／０９５６１７、ＷＯ ２００５／０９５６１９、ＷＯ ２００５／０９５６１８、ＷＯ ２００５／１２３９２７、ＷＯ ２００６／０１８３１９、ＷＯ ２００６／１０３１０７、ＷＯ ２００６／１０８７０２、ＷＯ ２００７／００９８２３、ＷＯ ００／２２１４０、ＷＯ ２００６／０６３８６２、ＷＯ ２００６／０７２６０３、ＷＯ ０２／０３４９２３、ＷＯ ２００８／０１７５１８、ＷＯ ２００８／０８０６３０、ＷＯ ２００８／０８０６３１、ＥＰ ０７０９０００７．１、ＷＯ ２００８／０９０００８、ＷＯ ０１／１４５６９、ＷＯ ０２／７９４１０、ＷＯ ０３／３３５４０、ＷＯ ２００４／０７８９８３、ＷＯ ０１／１９９７５、ＷＯ ９５／２６４０７、ＷＯ ９６／３４９６８、ＷＯ ９８／２０１４５、ＷＯ ９９／１２９５０、ＷＯ ９９／６６０５０、ＷＯ ９９／５３０７２、ＵＳ ６，７３４，３４１、ＷＯ ００／１１１９２、ＷＯ ９８／２２６０４、ＷＯ ９８／３２３２６、ＷＯ ０１／９８５０９、ＷＯ ０１／９８５０９、ＷＯ ２００５／００２３５９、ＵＳ ５，８２４，７９０、ＵＳ ６，０１３，８６１、ＷＯ ９４／０４６９３、ＷＯ ９４／０９１４４、ＷＯ ９４／１１５２０、ＷＯ ９５／３５０２６、ＷＯ ９７／２０９３６、ＷＯ ２０１０／０１２７９６、ＷＯ ２０１０／００３７０１に開示されている；
（２） 非澱粉炭水化物ポリマーを合成するか又は遺伝子組換えがなされていない野生型植物と比較して改変された特性を有する非澱粉炭水化物ポリマーを合成するトランスジェニック植物。その例は、ポリフルクトース（特に、イヌリン型及びレバン型のポリフルクトース）を産生する植物（ＥＰ−Ａ ０６６３９５６、ＷＯ ９６／０１９０４、ＷＯ ９６／２１０２３、ＷＯ ９８／３９４６０及びＷＯ ９９／２４５９３に開示されている）、α−１，４−グルカン類を産生する植物（ＷＯ ９５／３１５５３、ＵＳ ２００２０３１８２６、ＵＳ ６，２８４，４７９、ＵＳ ５，７１２，１０７、ＷＯ ９７／４７８０６、ＷＯ ９７／４７８０７、ＷＯ ９７／４７８０８及びＷＯ ００／１４２４９に開示されている）、α−１，６−分枝 α−１，４−グルカン類を産生する植物（ＷＯ ００／７３４２２に開示されている）、及び、アルテルナンを産生する植物（ＷＯ ００／４７７２７、ＷＯ ００／７３４２２、ＥＰ ０６０７７３０１．７、ＵＳ ５，９０８，９７５及びＥＰ−Ａ ０７２８２１３などに開示されている）である；
（３） ヒアルロナンを産生するトランスジェニック植物（例えば、ＷＯ ２００６／０３２５３８、ＷＯ ２００７／０３９３１４、ＷＯ ２００７／０３９３１５、ＷＯ ２００７／０３９３１６、ＪＰ−Ａ ２００６−３０４７７９及びＷＯ ２００５／０１２５２９などに開示されている）。
（４） トランスジェニック植物又はハイブリッド植物、例えば、「可溶性固形物高含有量」、「低辛味」（ＬＰ）及び／又は「長期保存」（ＬＳ）などの特性を有するタマネギ（米国特許出願第１２／０２０，３６０号及び米国特許出願第６１／０５４，０２６号に記述されている）。
本発明に従って同様に処理し得る植物又は植物品種（遺伝子工学などの植物バイオテクノロジー法によって得ることができるもの）は、改変された繊維特性を有する植物（例えば、ワタ植物）である。そのよう植物は、遺伝的形質転換によって得ることができるか、又は、そのような改変された繊維特性を付与する突然変異を含んでいる植物を選抜することによって得ることができる。そのような植物としては、以下のものなどがある：
（ａ） 改変された形態のセルロースシンターゼ遺伝子を含んでいる植物（例えば、ワタ植物）（ＷＯ ９８／００５４９に記述されている）；
（ｂ） 改変された形態のｒｓｗ２相同核酸又はｒｓｗ３相同核酸を含んでいる植物（例えば、ワタ植物）（ＷＯ ２００４／０５３２１９に記述されている）；
（ｃ） スクロースリン酸シンターゼの発現が増大している植物（例えば、ワタ植物）（ＷＯ ０１／１７３３３に記述されている）；
（ｄ） スクロースシンターゼの発現が増大している植物（例えば、ワタ植物）（ＷＯ ０２／４５４８５に記述されている）；
（ｅ） 繊維細胞に基づいた原形質連絡のゲーティングのタイミングが（例えば、繊維選択的β−１，３−グルカナーゼのダウンレギュレーションを介して）改変されている植物（例えば、ワタ植物）（ＷＯ ２００５／０１７１５７に記述されているか、又は、ＷＯ ２００９／１４３９９５に記述されている）；
（ｆ） 反応性が（例えば、ｎｏｄＣを包含するＮ−アセチルグルコサミントランスフェラーゼ遺伝子の発現及びキチンシンターゼ遺伝子の発現を介して）改変されている繊維を有する植物（例えば、ワタ植物）（ＷＯ ２００６／１３６３５１に記述されている）。
本発明に従って同様に処理し得る植物又は植物品種（遺伝子工学などの植物バイオテクノロジー法によって得ることができるもの）は、改変されたオイルプロフィール特性を有する植物（例えば、ナタネ植物又は関連するアブラナ属植物）である。そのよう植物は、遺伝的形質転換によって得ることができるか、又は、そのような改変されたオイル特性を付与する突然変異を含んでいる植物を選抜することによって得ることができる。そのような植物としては、以下のものなどがある：
（ａ） オレイン酸含有量が高いオイルを産生する植物（例えば、ナタネ植物）（例えば、ＵＳ ５，９６９，１６９、ＵＳ ５，８４０，９４６、ＵＳ ６，３２３，３９２又はＵＳ ６，０６３，９４７などに記載されている）；
（ｂ） リノレン酸含有量が低いオイルを産生する植物（例えば、ナタネ植物）（ＵＳ ６，２７０，８２８、ＵＳ ６，１６９，１９０又はＵＳ ５，９６５，７５５に記載されている）；
（ｃ） 飽和脂肪酸のレベルが低いオイルを産生する植物（例えば、ナタネ植物）（例えば、ＵＳ ５，４３４，２８３又は米国特許出願第１２／６６８３０３号などに記載されている）。
本発明に従って同様に処理し得る植物又は植物品種（遺伝子工学などの植物バイオテクノロジー法によって得ることができるもの）は、改変された種子脱粒特性を有する植物（例えば、ナタネ植物又は関連するアブラナ属植物）である。そのよう植物は、遺伝的形質転換によって得ることができるか、又は、そのような改変された種子脱粒特性を付与する突然変異を含んでいる植物を選抜することによって得ることができる。そのような植物としては、種子の脱粒が遅延されているか又は低減されている植物（例えば、ナタネ植物）などがある（米国特許出願第６１／１３５，２３０号、ＷＯ ２００９／０６８３１３及びＷＯ ２０１０／００６７３２に記述されている）。
本発明に従って同様に処理し得る植物又は植物品種（遺伝子工学などの植物バイオテクノロジー法によって得ることができるもの）は、翻訳後タンパク質修飾パターンが改変されている植物（例えば、タバコ植物）である（例えば、ＷＯ ２０１０／１２１８１８及びＷＯ ２０１０／１４５８４６に記載されている）。
本発明に従って処理し得る特に有用なトランスジェニック植物は、アメリカ合衆国内における規制除外（ｎｏｎ−ｒｅｇｕｌａｔｅｄ ｓｔａｔｕｓ）についてのアメリカ合衆国農務省（ＵＳＤＡ）の動植物検疫局（ＡＰＨＩＳ）に対する申請の対象である（ここで、そのような申請は、許可されているか又は審理中である）、形質転換イベント又は形質転換イベントの組合せを含んでいる植物である。いつ何時でも、この情報は、ＡＰＨＩＳ（４７００ Ｒｉｖｅｒ Ｒｏａｄ， Ｒｉｖｅｒｄａｌｅ， ＭＤ ２０７３７，ＵＳＡ）から、例えば、そのインターネットサイト（ＵＲＬ ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ａｐｈｉｓ．ｕｓｄａ．ｇｏｖ／ｂｒｓ／ｎｏｔ＿ｒｅｇ．ｈｔｍｌ）において、容易に入手することができる。本出願の出願日においてＡＰＨＩＳが審理中であるか又はＡＰＨＩＳによって許可された規制除外に対する申請は、下記情報を含んでいる申請であった：
− 申請： 当該申請の識別番号。形質転換イベントについての技術的な記述は、ＡＰＨＩＳから（例えば、ＡＰＨＩＳのウェブサイトにおいて、該申請番号を参照することによって）入手可能な個々の申請書類の中に見いだすことができる。それらの記述は、参照によって本明細書中に組み入れる。
− 申請の拡張： 拡張が請求されている、先の申請についての言及。
− 会社： 当該申請を提出している事業体の名称。
− 規制物： 関連する植物種。
− トランスジェニック表現型： 形質転換イベントによって植物に付与された形質。
− 形質転換イベント又はライン： 規制除外が請求されている１つ又は複数のイベント（場合により、ラインとも称される）の名称。
− ＡＰＨＩＳ文書： ＡＰＨＩＳに請求することが可能な、申請に関してＡＰＨＩＳによって刊行されている種々の文書。
単一の形質転換イベント又は形質転換イベントの組合せを含んでいる特に有用なさらなる植物は、例えば、国又は地域のさまざまな規制機関によるデータベースに記載されている〔例えば、「ｈｔｔｐ：／／ｇｍｏｉｎｆｏ．ｊｒｃ．ｉｔ／ｇｍｐ＿ｂｒｏｗｓｅ．ａｓｐｘ」及び「ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ａｇｂｉｏｓ．ｃｏｍ／ｄｂａｓｅ．ｐｈｐ」を参照されたい〕。
本発明に従って処理し得る特に有用なトランスジェニック植物は、下記のものを包含する、形質転換イベント又は形質転換イベントの組合せを含んでいて例えば国又は地域のさまざまな規制機関によるデータベースに記載されている植物である：イベント１１４３−１４Ａ（ワタ、昆虫防除、寄託されていない、ＷＯ２００６／１２８５６９に記載されている）；イベント１１４３−５１Ｂ（ワタ、昆虫防除、寄託されていない、ＷＯ２００６／１２８５７０に記載されている）；イベント１４４５（ワタ、除草剤耐性、寄託されていない、ＵＳ−Ａ ２００２−１２０９６４又はＷＯ０２／０３４９４６に記載されている）；イベント１７０５３（イネ、除草剤耐性、ＰＴＡ−９８４３として寄託されている、ＷＯ２０１０／１１７７３７に記載されている）；イベント１７３１４（イネ、除草剤耐性、ＰＴＡ−９８４４として寄託されている、ＷＯ２０１０／１１７７３５に記載されている）；イベント２８１−２４−２３６（ワタ、昆虫防除−除草剤耐性、ＰＴＡ−６２３３として寄託されている、ＷＯ２００５／１０３２６６又はＵＳ−Ａ ２００５−２１６９６９に記載されている）；イベント３００６−２１０−２３（ワタ、昆虫防除−除草剤耐性、ＰＴＡ−６２３３として寄託されている、ＵＳ−Ａ ２００７−１４３８７６又はＷＯ２００５／１０３２６６に記載されている）；イベント３２７２（トウモロコシ、品質形質、ＰＴＡ−９９７２として寄託されている、ＷＯ２００６／０９８９５２又はＵＳ−Ａ ２００６−２３０４７３に記載されている）；イベント４０４１６（トウモロコシ、昆虫防除−除草剤耐性、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−１１５０８として寄託されている、ＷＯ２０１１／０７５５９３に記載されている）；イベント４３Ａ４７（トウモロコシ、昆虫防除−除草剤耐性、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−１１５０９として寄託されている、ＷＯ２０１１／０７５５９５に記載されている）；イベント５３０７（トウモロコシ、昆虫防除、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−９５６１として寄託されている、ＷＯ２０１０／０７７８１６に記載されている）；イベントＡＳＲ−３６８（ベントグラス、除草剤耐性、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−４８１６として寄託されている、ＵＳ−Ａ ２００６−１６２００７又はＷＯ２００４／０５３０６２に記載されている）；イベントＢ１６（トウモロコシ、除草剤耐性、寄託されていない、ＵＳ−Ａ ２００３−１２６６３４に記載されている）；イベントＢＰＳ−ＣＶ１２７−９（ダイズ、除草剤耐性、ＮＣＩＭＢ Ｎｏ．４１６０３として寄託されている、ＷＯ２０１０／０８０８２９に記載されている）；イベントＣＥ４３−６７Ｂ（ワタ、昆虫防除、ＤＳＭ ＡＣＣ２７２４として寄託されている、ＵＳ−Ａ ２００９−２１７４２３又はＷＯ２００６／１２８５７３に記載されている）；イベントＣＥ４４−６９Ｄ（ワタ、昆虫防除、寄託されていない、ＵＳ−Ａ ２０１０−００２４０７７に記載されている）；イベントＣＥ４４−６９Ｄ（ワタ、昆虫防除、寄託されていない、ＷＯ２００６／１２８５７１に記載されている）；イベントＣＥ４６−０２Ａ（ワタ、昆虫防除、寄託されていない、ＷＯ２００６／１２８５７２に記載されている）；イベントＣＯＴ１０２（ワタ、昆虫防除、寄託されていない、ＵＳ−Ａ ２００６−１３０１７５又はＷＯ２００４／０３９９８６に記載されている）；イベントＣＯＴ２０２（ワタ、昆虫防除、寄託されていない、ＵＳ−Ａ ２００７−０６７８６８又はＷＯ２００５／０５４４７９に記載されている）；イベントＣＯＴ２０３（ワタ、昆虫防除、寄託されていない、ＷＯ２００５／０５４４８０に記載されている）；イベントＤＡＳ４０２７８（トウモロコシ、除草剤耐性、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−１０２４４として寄託されている、ＷＯ２０１１／０２２４６９に記載されている）；イベントＤＡＳ−５９１２２−７（トウモロコシ、昆虫防除−除草剤耐性、ＡＴＣＣ ＰＴＡ １１３８４として寄託されている、ＵＳ−Ａ ２００６−０７０１３９に記載されている）；イベントＤＡＳ−５９１３２（トウモロコシ、昆虫防除−除草剤耐性、寄託されていない、ＷＯ２００９／１００１８８に記載されている）；イベントＤＡＳ６８４１６（ダイズ、除草剤耐性、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−１０４４２として寄託されている、ＷＯ２０１１／０６６３８４又はＷＯ２０１１／０６６３６０に記載されている）；イベントＤＰ−０９８１４０−６（トウモロコシ、除草剤耐性、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−８２９６として寄託されている、ＵＳ−Ａ ２００９−１３７３９５又はＷＯ２００８／１１２０１９に記載されている）；イベントＤＰ−３０５４２３−１（ダイズ、品質形質、寄託されていない、ＵＳ−Ａ ２００８−３１２０８２又はＷＯ２００８／０５４７４７に記載されている）；イベントＤＰ−３２１３８−１（トウモロコシ、ハイブリダイゼーション系、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−９１５８として寄託されている、ＵＳ−Ａ ２００９−０２１０９７０又はＷＯ２００９／１０３０４９に記載されている）；イベントＤＰ−３５６０４３−５（ダイズ、除草剤耐性、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−８２８７として寄託されている、ＵＳ−Ａ ２０１０−０１８４０７９又はＷＯ２００８／００２８７２に記載されている）；イベントＥＥ−１（ナス、昆虫防除、寄託されていない、ＷＯ２００７／０９１２７７に記載されている）；イベントＦＩ１１７（トウモロコシ、除草剤耐性、ＡＴＣＣ ２０９０３１として寄託されている、ＵＳ−Ａ ２００６−０５９５８１又はＷＯ９８／０４４１４０に記載されている）；イベントＧＡ２１（トウモロコシ、除草剤耐性、ＡＴＣＣ ２０９０３３として寄託されている、ＵＳ−Ａ ２００５−０８６７１９又はＷＯ１９９８／０４４１４０に記載されている）；イベントＧＧ２５（トウモロコシ、除草剤耐性、ＡＴＣＣ ２０９０３２として寄託されている、ＵＳ−Ａ ２００５−１８８４３４又はＷＯ９８／０４４１４０に記載されている）；イベントＧＨＢ１１９（ワタ、昆虫防除−除草剤耐性、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−８３９８として寄託されている、ＷＯ２００８／１５１７８０に記載されている）；イベントＧＨＢ６１４（ワタ、除草剤耐性、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−６８７８として寄託されている、ＵＳ−Ａ ２０１０−０５０２８２又はＷＯ２００７／０１７１８６に記載されている）；イベントＧＪ１１（トウモロコシ、除草剤耐性、ＡＴＣＣ ２０９０３０として寄託されている、ＵＳ−Ａ ２００５−１８８４３４又はＷＯ９８／０４４１４０に記載されている）；イベントＧＭ ＲＺ１３（テンサイ、ウイルス抵抗性、ＮＣＩＭＢ−４１６０１として寄託されている、ＷＯ２０１０／０７６２１２に記載されている）；イベントＨ７−１（テンサイ、除草剤耐性、ＮＣＩＭＢ ４１１５８又はＮＣＩＭＢ ４１１５９として寄託されている、ＵＳ−Ａ ２００４−１７２６６９又はＷＯ２００４／０７４４９２に記載されている）；イベントＪＯＰＬＩＮ１（コムギ、耐病性、寄託されていない、ＵＳ−Ａ ２００８−０６４０３２に記載されている）；イベントＬＬ２７（ダイズ、除草剤耐性、ＮＣＩＭＢ４１６５８として寄託されている、ＷＯ２００６／１０８６７４又はＵＳ−Ａ ２００８−３２０６１６に記載されている）；イベントＬＬ５５（ダイズ、除草剤耐性、ＮＣＩＭＢ ４１６６０として寄託されている、ＷＯ２００６／１０８６７５又はＵＳ−Ａ ２００８−１９６１２７に記載されている）；イベントＬＬワタ２５（ワタ、除草剤耐性、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−３３４３として寄託されている、ＷＯ０３／０１３２２４又はＵＳ−Ａ ２００３−０９７６８７に記載されている）；イベントＬＬＲＩＣＥ０６（イネ、除草剤耐性、ＡＴＣＣ−２３３５２として寄託されている、ＵＳ ６，４６８，７４７又はＷＯ００／０２６３４５に記載されている）；イベントＬＬＲＩＣＥ６０１（イネ、除草剤耐性、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−２６００として寄託されている、ＵＳ−Ａ ２００８−２２８９０６０又はＷＯ００／０２６３５６に記載されている）；イベントＬＹ０３８（トウモロコシ、品質形質、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−５６２３として寄託されている、ＵＳ−Ａ ２００７−０２８３２２又はＷＯ２００５／０６１７２０に記載されている）；イベントＭＩＲ１６２（トウモロコシ、昆虫防除、ＰＴＡ−８１６６として寄託されている、ＵＳ−Ａ ２００９−３００７８４又はＷＯ２００７／１４２８４０に記載されている）；イベントＭＩＲ６０４（トウモロコシ、昆虫防除、寄託されていない、ＵＳ−Ａ ２００８−１６７４５６又はＷＯ２００５／１０３３０１に記載されている）；イベントＭＯＮ１５９８５（ワタ、昆虫防除、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−２５１６として寄託されている、ＵＳ−Ａ ２００４−２５０３１７又はＷＯ０２／１００１６３に記載されている）；イベントＭＯＮ８１０（トウモロコシ、昆虫防除、寄託されていない、ＵＳ−Ａ ２００２−１０２５８２に記載されている）；イベントＭＯＮ８６３（トウモロコシ、昆虫防除、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−２６０５として寄託されている、ＷＯ２００４／０１１６０１又はＵＳ−Ａ ２００６−０９５９８６に記載されている）；イベントＭＯＮ８７４２７（トウモロコシ、授粉制御、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−７８９９として寄託されている、ＷＯ２０１１／０６２９０４に記載されている）；イベントＭＯＮ８７４６０（トウモロコシ、ストレス耐性、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−８９１０として寄託されている、ＷＯ２００９／１１１２６３又はＵＳ−Ａ ２０１１−０１３８５０４に記載されている）；イベントＭＯＮ８７７０１（ダイズ、昆虫防除、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−８１９４として寄託されている、ＵＳ−Ａ ２００９−１３００７１又はＷＯ２００９／０６４６５２に記載されている）；イベントＭＯＮ８７７０５（ダイズ、品質形質−除草剤耐性、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−９２４１として寄託されている、ＵＳ−Ａ ２０１０−００８０８８７又はＷＯ２０１０／０３７０１６に記載されている）；イベントＭＯＮ８７７０８（ダイズ、除草剤耐性、ＡＴＣＣ ＰＴＡ９６７０として寄託されている、ＷＯ２０１１／０３４７０４に記載されている）；イベントＭＯＮ８７７５４（ダイズ、品質形質、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−９３８５として寄託されている、ＷＯ２０１０／０２４９７６に記載されている）；イベントＭＯＮ８７７６９（ダイズ、品質形質、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−８９１１として寄託されている、ＵＳ−Ａ ２０１１−００６７１４１又はＷＯ２００９／１０２８７３に記載されている）；イベントＭＯＮ８８０１７（トウモロコシ、昆虫防除−除草剤耐性、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−５５８２として寄託されている、ＵＳ−Ａ ２００８−０２８４８２又はＷＯ２００５／０５９１０３に記載されている）；イベントＭＯＮ８８９１３（ワタ、除草剤耐性、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−４８５４として寄託されている、ＷＯ２００４／０７２２３５又はＵＳ−Ａ ２００６−０５９５９０に記載されている）；イベントＭＯＮ８９０３４（トウモロコシ、昆虫防除、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−７４５５として寄託されている、ＷＯ２００７／１４０２５６又はＵＳ−Ａ ２００８−２６０９３２に記載されている）；イベントＭＯＮ８９７８８（ダイズ、除草剤耐性、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−６７０８として寄託されている、ＵＳ−Ａ ２００６−２８２９１５又はＷＯ２００６／１３０４３６に記載されている）；イベントＭＳ１１（ナタネ、授粉制御−除草剤耐性、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−８５０又はＰＴＡ−２４８５として寄託されている、ＷＯ０１／０３１０４２に記載されている）；イベントＭＳ８（ナタネ、授粉制御−除草剤耐性、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−７３０として寄託されている、ＷＯ０１／０４１５５８又はＵＳ−Ａ ２００３−１８８３４７に記載されている）；イベントＮＫ６０３（トウモロコシ、除草剤耐性、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−２４７８として寄託されている、ＵＳ−Ａ ２００７−２９２８５４に記載されている）；イベントＰＥ−７（イネ、昆虫防除、寄託されていない、ＷＯ２００８／１１４２８２に記載されている）；イベントＲＦ３（ナタネ、授粉制御−除草剤耐性、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−７３０として寄託されている
、ＷＯ０１／０４１５５８又はＵＳ−Ａ ２００３−１８８３４７に記載されている）；イベントＲＴ７３（ナタネ、除草剤耐性、寄託されていない、ＷＯ０２／０３６８３１又はＵＳ−Ａ ２００８−０７０２６０に記載されている）；イベントＴ２２７−１（テンサイ、除草剤耐性、寄託されていない、ＷＯ０２／４４４０７又はＵＳ−Ａ ２００９−２６５８１７に記載されている）；イベントＴ２５（トウモロコシ、除草剤耐性、寄託されていない、ＵＳ−Ａ ２００１−０２９０１４又はＷＯ０１／０５１６５４に記載されている）；イベントＴ３０４−４０（ワタ、昆虫防除−除草剤耐性、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−８１７１として寄託されている、ＵＳ−Ａ ２０１０−０７７５０１又はＷＯ２００８／１２２４０６に記載されている）；イベントＴ３４２−１４２（ワタ、昆虫防除、寄託されていない、ＷＯ２００６／１２８５６８に記載されている）；イベントＴＣ１５０７（トウモロコシ、昆虫防除−除草剤耐性、寄託されていない、ＵＳ−Ａ ２００５−０３９２２６又はＷＯ２００４／０９９４４７に記載されている）；イベントＶＩＰ１０３４（トウモロコシ、昆虫防除−除草剤耐性、ＡＴＣＣ ＰＴＡ−３９２５として寄託されている、ＷＯ０３／０５２０７３に記載されている）、イベント３２３１６（トウモロコシ、昆虫防除−除草剤耐性、ＰＴＡ−１１５０７として寄託されている、ＷＯ２０１１／０８４６３２に記載されている）、イベント４１１４（トウモロコシ、昆虫防除−除草剤耐性、ＰＴＡ−１１５０６として寄託されている、ＷＯ２０１１／０８４６２１に記載されている）。
本発明の組成物は、材木の表面又は内部で発生するであろう菌類病に対しても使用することができる。用語「材木（ｔｉｍｂｅｒ）」は、全ての種類の木材、そのような木材を建築用に加工した全てのタイプのもの、例えば、ソリッドウッド、高密度木材、積層木材及び合板などを意味する。本発明による材木の処理方法は、主に、本発明の１種類以上の化合物又は本発明の組成物を接触させることにより行う。これには、例えば、直接的な塗布、噴霧、浸漬、注入、又は、別の適切な任意の方法が包含される。
本発明の方法で防除することが可能な植物又は作物の病害の中で、以下のものを挙げることができる：
・ うどんこ病（ｐｏｗｄｅｒｙ ｍｉｌｄｅｗ ｄｉｓｅａｓｅ）、例えば、
ブルメリア（Ｂｌｕｍｅｒｉａ）病、例えば、ブルメリア・グラミニス（Ｂｌｕｍｅｒｉａ ｇｒａｍｉｎｉｓ）に起因するもの；
ポドスファエラ（Ｐｏｄｏｓｐｈａｅｒａ）病、例えば、ポドスファエラ・レウコトリカ（Ｐｏｄｏｓｐｈａｅｒａ ｌｅｕｃｏｔｒｉｃｈａ）に起因するもの；
スファエロテカ（Ｓｐｈａｅｒｏｔｈｅｃａ）病、例えば、スファエロテカ・フリギネア（Ｓｐｈａｅｒｏｔｈｅｃａ ｆｕｌｉｇｉｎｅａ）に起因するもの；
ウンシヌラ（Ｕｎｃｉｎｕｌａ）病、例えば、ウンシヌラ・ネカトル（Ｕｎｃｉｎｕｌａ ｎｅｃａｔｏｒ）に起因するもの；
・ さび病（ｒｕｓｔ ｄｉｓｅａｓｅ）、例えば、
ギムノスポランギウム（Ｇｙｍｎｏｓｐｏｒａｎｇｉｕｍ）病、例えば、ギムノスポランギウム・サビナエ（Ｇｙｍｎｏｓｐｏｒａｎｇｉｕｍ ｓａｂｉｎａｅ）に起因するもの；
ヘミレイア（Ｈｅｍｉｌｅｉａ）病、例えば、ヘミレイア・バスタトリクス（Ｈｅｍｉｌｅｉａ ｖａｓｔａｔｒｉｘ）に起因するもの；
ファコプソラ（Ｐｈａｋｏｐｓｏｒａ）病、例えば、ファコプソラ・パキリジ（Ｐｈａｋｏｐｓｏｒａ ｐａｃｈｙｒｈｉｚｉ）又はファコプソラ・メイボミアエ（Ｐｈａｋｏｐｓｏｒａ ｍｅｉｂｏｍｉａｅ）に起因するもの；
プッシニア（Ｐｕｃｃｉｎｉａ）病、例えば、プッシニア・レコンジテ（Ｐｕｃｃｉｎｉａ ｒｅｃｏｎｄｉｔｅ）、プッシニア・グラミニス（Ｐｕｃｃｉｎｉａ ｇｒａｍｉｎｉｓ）又はプッシニア・ストリイホルミス（Ｐｕｃｃｉｎｉａ ｓｔｒｉｉｆｏｒｍｉｓ）に起因するもの；
ウロミセス（Ｕｒｏｍｙｃｅｓ）病、例えば、ウロミセス・アペンジクラツス（Ｕｒｏｍｙｃｅｓ ａｐｐｅｎｄｉｃｕｌａｔｕｓ）に起因するもの；
・ 卵菌類による病害（Ｏｏｍｙｃｅｔｅ ｄｉｓｅａｓｅ）、例えば、
アルブゴ（Ａｌｂｕｇｏ）病、例えば、アルブゴ・カンジダ（Ａｌｂｕｇｏ ｃａｎｄｉｄａ）に起因するもの；
ブレミア（Ｂｒｅｍｉａ）病、例えば、ブレミア・ラクツカエ（Ｂｒｅｍｉａ ｌａｃｔｕｃａｅ）に起因するもの；
ペロノスポラ（Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ）病、例えば、ペロノスポラ・ピシ（Ｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ ｐｉｓｉ）又はペロノスポラ・ブラシカエ（Ｐ． ｂｒａｓｓｉｃａｅ）に起因するもの；
フィトフトラ（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ）病、例えば、フィトフトラ・インフェスタンス（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｉｎｆｅｓｔａｎｓ）に起因するもの；
プラスモパラ（Ｐｌａｓｍｏｐａｒａ）病、例えば、プラスモパラ・ビチコラ（Ｐｌａｓｍｏｐａｒａ ｖｉｔｉｃｏｌａ）に起因するもの；
プセウドペロノスポラ（Ｐｓｅｕｄｏｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ）病、例えば、プセウドペロノスポラ・フムリ（Ｐｓｅｕｄｏｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ ｈｕｍｕｌｉ）又はプセウドペロノスポラ・クベンシス（Ｐｓｅｕｄｏｐｅｒｏｎｏｓｐｏｒａ ｃｕｂｅｎｓｉｓ）に起因するもの；
ピシウム（Ｐｙｔｈｉｕｍ）病、例えば、ピシウム・ウルチムム（Ｐｙｔｈｉｕｍ ｕｌｔｉｍｕｍ）に起因するもの；
・ 葉斑点性、葉汚斑性及び葉枯れ性の病害（ｌｅａｆｓｐｏｔ， ｌｅａｆ ｂｌｏｔｃｈ ａｎｄ ｌｅａｆ ｂｌｉｇｈｔ ｄｉｓｅａｓｅ）、例えば、
アルテルナリア（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）病、例えば、アルテルナリア・ソラニ（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ｓｏｌａｎｉ）に起因するもの；
セルコスポラ（Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ）病、例えば、セルコスポラ・ベチコラ（Ｃｅｒｃｏｓｐｏｒａ ｂｅｔｉｃｏｌａ）に起因するもの；
クラジオスポルム（Ｃｌａｄｉｏｓｐｏｒｕｍ）病、例えば、クラジオスポリウム・ククメリヌム（Ｃｌａｄｉｏｓｐｏｒｉｕｍ ｃｕｃｕｍｅｒｉｎｕｍ）に起因するもの；
コクリオボルス（Ｃｏｃｈｌｉｏｂｏｌｕｓ）病、例えば、コクリオボルス・サチブス（Ｃｏｃｈｌｉｏｂｏｌｕｓ ｓａｔｉｖｕｓ）（分生子形態：Ｄｒｅｃｈｓｌｅｒａ、異名：Ｈｅｌｍｉｎｔｈｏｓｐｏｒｉｕｍ）又はコクリオボルス・ミヤベアヌス（Ｃｏｃｈｌｉｏｂｏｌｕｓ ｍｉｙａｂｅａｎｕｓ）に起因するもの；
コレトトリクム（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ）病、例えば、コレトトリクム・リンデムタニウム（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ ｌｉｎｄｅｍｕｔｈａｎｉｕｍ）に起因するもの；
シクロコニウム（Ｃｙｃｌｏｃｏｎｉｕｍ）病、例えば、シクロコニウム・オレアギヌム（Ｃｙｃｌｏｃｏｎｉｕｍ ｏｌｅａｇｉｎｕｍ）に起因するもの；
ジアポルテ（Ｄｉａｐｏｒｔｈｅ）病、例えば、ジアポルテ・シトリ（Ｄｉａｐｏｒｔｈｅ ｃｉｔｒｉ）に起因するもの；
エルシノエ（Ｅｌｓｉｎｏｅ）病、例えば、エルシノエ・ファウセッチイ（Ｅｌｓｉｎｏｅ ｆａｗｃｅｔｔｉｉ）に起因するもの；
グロエオスポリウム（Ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｕｍ）病、例えば、グロエオスポリウム・ラエチコロル（Ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｕｍ ｌａｅｔｉｃｏｌｏｒ）に起因するもの；
グロメレラ（Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａ）病、例えば、グロメレラ・シングラタ（Ｇｌｏｍｅｒｅｌｌａ ｃｉｎｇｕｌａｔａ）に起因するもの；
グイグナルジア（Ｇｕｉｇｎａｒｄｉａ）病、例えば、グイグナルジア・ビドウェリ（Ｇｕｉｇｎａｒｄｉａ ｂｉｄｗｅｌｌｉ）に起因するもの；
レプトスファエリア（Ｌｅｐｔｏｓｐｈａｅｒｉａ）病、例えば、レプトスファエリア・マクランス（Ｌｅｐｔｏｓｐｈａｅｒｉａ ｍａｃｕｌａｎｓ）、レプトスファエリア・ノドルム（Ｌｅｐｔｏｓｐｈａｅｉａ ｎｏｄｏｒｕｍ）に起因するもの；
マグナポルテ（Ｍａｇｎａｐｏｒｔｈｅ）病、例えば、マグナポルテ・グリセア（Ｍａｇｎａｐｏｒｔｈｅ ｇｒｉｓｅａ）に起因するもの；
ミコスファエレラ（Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ）病、例えば、ミコスファエレラ・グラミニコラ（Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ ｇｒａｍｉｎｉｃｏｌａ）、ミコスファエレラ・アラキジコラ（Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ ａｒａｃｈｉｄｉｃｏｌａ）、ミコスファエレラ・フィジエンシス（Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ ｆｉｊｉｅｎｓｉｓ）に起因するもの；
ファエオスファエリア（Ｐｈａｅｏｓｐｈａｅｒｉａ）病、例えば、ファエオスファエリア・ノドルム（Ｐｈａｅｏｓｐｈａｅｒｉａ ｎｏｄｏｒｕｍ）に起因するもの；
ピレノホラ（Ｐｙｒｅｎｏｐｈｏｒａ）病、例えば、ピレノホラ・テレス（Ｐｙｒｅｎｏｐｈｏｒａ ｔｅｒｅｓ）又はピレノホラ・トリチシ・レペンチス（Ｐｙｒｅｎｏｐｈｏｒａ ｔｒｉｔｉｃｉ ｒｅｐｅｎｔｉｓ）に起因するもの；
ラムラリア（Ｒａｍｕｌａｒｉａ）病、例えば、ラムラリア・コロ−シグニ（Ｒａｍｕｌａｒｉａ ｃｏｌｌｏ−ｃｙｇｎｉ）又はラムラリア・アレオラ（Ｒａｍｕｌａｒｉａ ａｒｅｏｌａ）に起因するもの；
リンコスポリウム（Ｒｈｙｎｃｈｏｓｐｏｒｉｕｍ）病、例えば、リンコスポリウム・セカリス（Ｒｈｙｎｃｈｏｓｐｏｒｉｕｍ ｓｅｃａｌｉｓ）に起因するもの；
セプトリア（Ｓｅｐｔｏｒｉａ）病、例えば、セプトリア・アピイ（Ｓｅｐｔｏｒｉａ ａｐｉｉ）又はセプトリア・リコペルシシ（Ｓｅｐｔｏｒｉａ ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｉ）に起因するもの；
チフラ（Ｔｙｐｈｕｌａ）病、例えば、チフラ・インカルナタ（Ｔｙｐｈｕｌａ ｉｎｃａｒｎａｔａ）に起因するもの；
ベンツリア（Ｖｅｎｔｕｒｉａ）病、例えば、ベンツリア・イナエクアリス（Ｖｅｎｔｕｒｉａ ｉｎａｅｑｕａｌｉｓ）に起因するもの；
・ 根、葉鞘及び茎の病害（ｒｏｏｔ， ｓｈｅａｔｈ ａｎｄ ｓｔｅｍ ｄｉｓｅａｓｅ）、例えば、
コルチシウム（Ｃｏｒｔｉｃｉｕｍ）病、例えば、コルチシウム・グラミネアルム（Ｃｏｒｔｉｃｉｕｍ ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ）に起因するもの；
フサリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）病、例えば、フサリウム・オキシスポルム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）に起因するもの；
ガエウマンノミセス（Ｇａｅｕｍａｎｎｏｍｙｃｅｓ）病、例えば、ガエウマンノミセス・グラミニス（Ｇａｅｕｍａｎｎｏｍｙｃｅｓ ｇｒａｍｉｎｉｓ）に起因するもの；
リゾクトニア（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ）病、例えば、リゾクトニア・ソラニ（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｓｏｌａｎｉ）に起因するもの；
サロクラジウム（Ｓａｒｏｃｌａｄｉｕｍ）病、例えば、サロクラジウム・オリザエ（Ｓａｒｏｃｌａｄｉｕｍ ｏｒｙｚａｅ）に起因するもの；
スクレロチウム（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｕｍ）病、例えば、スクレロチウム・オリザエ（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｕｍ ｏｒｙｚａｅ）に起因するもの；
タペシア（Ｔａｐｅｓｉａ）病、例えば、タペシア・アクホルミス（Ｔａｐｅｓｉａ ａｃｕｆｏｒｍｉｓ）に起因するもの；
チエラビオプシス（Ｔｈｉｅｌａｖｉｏｐｓｉｓ）病、例えば、チエラビオプシス・バシコラ（Ｔｈｉｅｌａｖｉｏｐｓｉｓ ｂａｓｉｃｏｌａ）に起因するもの；
・ 穂の病害（ｅａｒ ａｎｄ ｐａｎｉｃｌｅ ｄｉｓｅａｓｅ）、例えば、
アルテルナリア（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）病、例えば、アルテルナリア属種（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ｓｐｐ．）に起因するもの；
アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）病、例えば、アスペルギルス・フラブス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｌａｖｕｓ）に起因するもの；
クラドスポリウム（Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ）病、例えば、クラドスポリウム属種（Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ ｓｐｐ．）に起因するもの；
クラビセプス（Ｃｌａｖｉｃｅｐｓ）病、例えば、クラビセプス・プルプレア（Ｃｌａｖｉｃｅｐｓ ｐｕｒｐｕｒｅａ）に起因するもの；
フサリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）病、例えば、フサリウム・クルモルム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｃｕｌｍｏｒｕｍ）に起因するもの；
ジベレラ（Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ）病、例えば、ジベレラ・ゼアエ（Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ ｚｅａｅ）に起因するもの；
モノグラフェラ（Ｍｏｎｏｇｒａｐｈｅｌｌａ）病、例えば、モノグラフェラ・ニバリス（Ｍｏｎｏｇｒａｐｈｅｌｌａ ｎｉｖａｌｉｓ）に起因するもの；
・ 黒穂病（ｓｍｕｔ ａｎｄ ｂｕｎｔ ｄｉｓｅａｓｅ）、例えば、
スファセロテカ（Ｓｐｈａｃｅｌｏｔｈｅｃａ）病、例えば、スファセロテカ・レイリアナ（Ｓｐｈａｃｅｌｏｔｈｅｃａ ｒｅｉｌｉａｎａ）に起因するもの；
チレチア（Ｔｉｌｌｅｔｉａ）病、例えば、チレチア・カリエス（Ｔｉｌｌｅｔｉａ ｃａｒｉｅｓ）に起因するもの；
ウロシスチス（Ｕｒｏｃｙｓｔｉｓ）病、例えば、ウロシスチス・オクルタ（Ｕｒｏｃｙｓｔｉｓ ｏｃｃｕｌｔａ）に起因するもの；
ウスチラゴ（Ｕｓｔｉｌａｇｏ）病、例えば、ウスチラゴ・ヌダ（Ｕｓｔｉｌａｇｏ ｎｕｄａ）に起因するもの；
・ 果実の腐敗性及び黴性の病害（ｆｒｕｉｔ ｒｏｔ ａｎｄ ｍｏｕｌｄ ｄｉｓｅａｓｅ）、例えば、
アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）病、例えば、アスペルギルス・フラブス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｌａｖｕｓ）に起因するもの；
ボトリチス（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ）病、例えば、ボトリチス・シネレア（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ）に起因するもの；
ペニシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）病、例えば、ペニシリウム・エキスパンスム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｅｘｐａｎｓｕｍ）に起因するもの；
リゾプス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ）病、例えば、リゾプス・ストロニフェル（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ｓｔｏｌｏｎｉｆｅｒ）に起因するもの；
スクレロチニア（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ）病、例えば、スクレロチニア・スクレロチオルム（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ）に起因するもの；
ベルチシリウム（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｉｕｍ）病、例えば、ベルチシリウム・アルボアトルム（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｉｕｍ ａｌｂｏａｔｒｕｍ）に起因するもの；
・ 種子及び土壌が媒介する腐朽性、黴性、萎凋性、腐敗性及び苗立ち枯れ性の病害（ｓｅｅｄ ａｎｄ ｓｏｉｌｂｏｒｎｅ ｄｅｃａｙ， ｍｏｕｌｄ， ｗｉｌｔ， ｒｏｔ ａｎｄ ｄａｍｐｉｎｇ−ｏｆｆ ｄｉｓｅａｓｅ）、
アルテルナリア（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ）病、例えば、アルテルナリア・ブラシシコラ（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａ ｂｒａｓｓｉｃｉｃｏｌａ）に起因するもの；
アファノミセス（Ａｐｈａｎｏｍｙｃｅｓ）病、例えば、アファノミセス・エウテイケス（Ａｐｈａｎｏｍｙｃｅｓ ｅｕｔｅｉｃｈｅｓ）に起因するもの；
アスコキタ（Ａｓｃｏｃｈｙｔａ）病、例えば、アスコキタ・レンチス（Ａｓｃｏｃｈｙｔａ ｌｅｎｔｉｓ）に起因するもの；
アスペルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ）病、例えば、アスペルギルス・フラブス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｌａｖｕｓ）に起因するもの；
クラドスポリウム（Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ）病、例えば、クラドスポリウム・ヘルバルム（Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍ ｈｅｒｂａｒｕｍ）に起因するもの；
コクリオボルス（Ｃｏｃｈｌｉｏｂｏｌｕｓ）病、例えば、コクリオボルス・サチブス（Ｃｏｃｈｌｉｏｂｏｌｕｓ ｓａｔｉｖｕｓ）（分生子形態：Ｄｒｅｃｈｓｌｅｒａ、Ｂｉｐｏｌａｒｉｓ 異名：Ｈｅｌｍｉｎｔｈｏｓｐｏｒｉｕｍ）に起因するもの；
コレトトリクム（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ）病、例えば、コレトトリクム・ココデス（Ｃｏｌｌｅｔｏｔｒｉｃｈｕｍ ｃｏｃｃｏｄｅｓ）に起因するもの；
フサリウム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）病、例えば、フサリウム・クルモルム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｃｕｌｍｏｒｕｍ）に起因するもの；
ジベレラ（Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ）病、例えば、ジベレラ・ゼアエ（Ｇｉｂｂｅｒｅｌｌａ ｚｅａｅ）に起因するもの；
マクロホミナ（Ｍａｃｒｏｐｈｏｍｉｎａ）病、例えば、マクロホミナ・ファセオリナ（Ｍａｃｒｏｐｈｏｍｉｎａ ｐｈａｓｅｏｌｉｎａ）に起因するもの；
モノグラフェラ（Ｍｏｎｏｇｒａｐｈｅｌｌａ）病、例えば、モノグラフェラ・ニバリス（Ｍｏｎｏｇｒａｐｈｅｌｌａ ｎｉｖａｌｉｓ）に起因するもの；
ペニシリウム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）病、例えば、ペニシリウム・エキスパンスム（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ ｅｘｐａｎｓｕｍ）に起因するもの；
ホマ（Ｐｈｏｍａ）病、例えば、ホマ・リンガム（Ｐｈｏｍａ ｌｉｎｇａｍ）に起因するもの；
ホモプシス（Ｐｈｏｍｏｐｓｉｓ）病、例えば、ホモプシス・ソジャエ（Ｐｈｏｍｏｐｓｉｓ ｓｏｊａｅ）に起因するもの；
フィトフトラ（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ）病、例えば、フィトフトラ・カクトルム（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｃａｃｔｏｒｕｍ）に起因するもの；
ピレノホラ（Ｐｙｒｅｎｏｐｈｏｒａ）病、例えば、ピレノホラ・グラミネア（Ｐｙｒｅｎｏｐｈｏｒａ ｇｒａｍｉｎｅａ）に起因するもの；
ピリクラリア（Ｐｙｒｉｃｕｌａｒｉａ）病、例えば、ピリクラリア・オリザエ（Ｐｙｒｉｃｕｌａｒｉａ ｏｒｙｚａｅ）に起因するもの；
ピシウム（Ｐｙｔｈｉｕｍ）病、例えば、ピシウム・ウルチムム（Ｐｙｔｈｉｕｍ ｕｌｔｉｍｕｍ）に起因するもの；
リゾクトニア（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ）病、例えば、リゾクトニア・ソラニ（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｓｏｌａｎｉ）に起因するもの；
リゾプス（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ）病、例えば、リゾプス・オリザエ（Ｒｈｉｚｏｐｕｓ ｏｒｙｚａｅ）に起因するもの；
スクレロチウム（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｕｍ）病、例えば、スクレロチウム・ロルフシイ（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｕｍ ｒｏｌｆｓｉｉ）に起因するもの；
セプトリア（Ｓｅｐｔｏｒｉａ）病、例えば、セプトリア・ノドルム（Ｓｅｐｔｏｒｉａ ｎｏｄｏｒｕｍ）に起因するもの；
チフラ（Ｔｙｐｈｕｌａ）病、例えば、チフラ・インカルナタ（Ｔｙｐｈｕｌａ ｉｎｃａｒｎａｔａ）に起因するもの；
ベルチシリウム（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ）病、例えば、ベルチシリウム・ダーリアエ（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｄａｈｌｉａｅ）に起因するもの；
・ 腐乱性病害、開花病及び枯れ込み性病害（ｃａｎｋｅｒ， ｂｒｏｏｍ ａｎｄ ｄｉｅｂａｃｋ ｄｉｓｅａｓｅ）、例えば、
ネクトリア（Ｎｅｃｔｒｉａ）病、例えば、ネクトリア・ガリゲナ（Ｎｅｃｔｒｉａ ｇａｌｌｉｇｅｎａ）に起因するもの；
・ 枯損性病害（ｂｌｉｇｈｔ ｄｉｓｅａｓｅ）、例えば、
モニリニア（Ｍｏｎｉｌｉｎｉａ）病、例えば、モニリニア・ラキサ（Ｍｏｎｉｌｉｎｉａ ｌａｘａ）に起因するもの；
・ 葉水泡性病害又は縮葉病（ｌｅａｆ ｂｌｉｓｔｅｒ ｏｒ ｌｅａｆ ｃｕｒｌ ｄｉｓｅａｓｅ）、例えば、
エキソバシジウム（Ｅｘｏｂａｓｉｄｉｕｍ）病、例えば、エキソバシジウム・ベキサンス（Ｅｘｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｖｅｘａｎｓ）に起因するもの；
タフリナ（Ｔａｐｈｒｉｎａ）病、例えば、タフリナ・デホルマンス（Ｔａｐｈｒｉｎａ ｄｅｆｏｒｍａｎｓ）に起因するもの；
・ 木本植物の衰退性病害（ｄｅｃｌｉｎｅ ｄｉｓｅａｓｅ ｏｆ ｗｏｏｄｅｎ ｐｌａｎｔ）、例えば、
エスカ（Ｅｓｃａ）病、例えば、ファエオモニエラ・クラミドスポラ（Ｐｈａｅｏｍｏｎｉｅｌｌａ ｃｌａｍｙｄｏｓｐｏｒａ）に起因するもの；
ユーティパダイバック病（Ｅｕｔｙｐａ ｄｙｅｂａｃｋ）、例えば、ユーティパ・ラタ（Ｅｕｔｙｐａ ｌａｔａ）に起因するもの；
ガノデルマ（Ｇａｎｏｄｅｒｍａ）病、例えば、ガノデルマ・ボニネンセ（Ｇａｎｏｄｅｒｍａ ｂｏｎｉｎｅｎｓｅ）に起因するもの；
リギドポルス（Ｒｉｇｉｄｏｐｏｒｕｓ）病、例えば、リギドポルス・リグノスス（Ｒｉｇｉｄｏｐｏｒｕｓ ｌｉｇｎｏｓｕｓ）に起因するもの；
・ 花及び種子の病害、例えば、
ボトリチス（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ）病、例えば、ボトリチス・シネレア（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ）に起因するもの；
・ 塊茎の病害、例えば、
リゾクトニア（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ）病、例えば、リゾクトニア・ソラニ（Ｒｈｉｚｏｃｔｏｎｉａ ｓｏｌａｎｉ）に起因するもの；
ヘルミントスポリウム（Ｈｅｌｍｉｎｔｈｏｓｐｏｒｉｕｍ）病、例えば、ヘルミントスポリウム・ソラニ（Ｈｅｌｍｉｎｔｈｏｓｐｏｒｉｕｍ ｓｏｌａｎｉ）に起因するもの；
・ 根瘤病（ｃｌｕｂ ｒｏｏｔ ｄｉｓｅａｓｅｓ）、例えば、
プラスモジオホラ（Ｐｌａｓｍｏｄｉｏｐｈｏｒａ）病、例えば、プラスモジオホラ・ブラシカエ（Ｐｌａｍｏｄｉｏｐｈｏｒａ ｂｒａｓｓｉｃａｅ）に起因するもの；
・ 例えば以下のものなどの細菌性微生物に起因する病害：
キサントモナス属各種（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ ｓｐｅｃｉｅｓ）、例えば、キサントモナス・カムペストリス ｐｖ．オリザエ（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ ｐｖ． ｏｒｙｚａｅ）；
シュードモナス属各種（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｐｅｃｉｅｓ）、例えば、シュードモナス・シリンガエ ｐｖ．ラクリマンス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｙｒｉｎｇａｅ ｐｖ． ｌａｃｈｒｙｍａｎｓ）；
エルウィニア属各種（Ｅｒｗｉｎｉａ ｓｐｅｃｉｅｓ）、例えば、エルウィニア・アミロボラ（Ｅｒｗｉｎｉａ ａｍｙｌｏｖｏｒａ）。
配列のリスト：
配列識別番号１： アスペルギルス・クラバツス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｃｌａｖａｔｕｓ）に由来するサッカロピンデヒドロゲナーゼ（ＬＹＳ１）；
配列識別番号２： 上記核酸配列によってコードされるタンパク質；
配列識別番号３： アスペルギルス・フミガツス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｆｕｍｉｇａｔｕｓ）に由来するサッカロピンデヒドロゲナーゼ（ＬＹＳ１）；
配列識別番号４： 上記核酸配列によってコードされるタンパク質；
配列識別番号５： ボトリチス・シネレア（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ）に由来するサッカロピンデヒドロゲナーゼ（ＬＹＳ１）；
配列識別番号６： 上記核酸配列によってコードされるタンパク質；
配列識別番号７： フサリウム・グラミネアルム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ）に由来するサッカロピンデヒドロゲナーゼ（ＬＹＳ１）；
配列識別番号８： 上記核酸配列によってコードされるタンパク質；
配列識別番号９： フサリウム・オキシスポルム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｏｘｙｓｐｏｒｕｍ）に由来するサッカロピンデヒドロゲナーゼ（ＬＹＳ１）；
配列識別番号１０： 上記核酸配列によってコードされるタンパク質；
配列識別番号１１： フサリウム・ベルチシロイデス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｏｉｄｅｓ）に由来するサッカロピンデヒドロゲナーゼ（ＬＹＳ１）；
配列識別番号１２： 上記核酸配列によってコードされるタンパク質；
配列識別番号１３： フサリウム・ベルチシロイデス（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｏｉｄｅｓ）に由来するサッカロピンデヒドロゲナーゼ（ＬＹＳ１）；
配列識別番号１４： 上記核酸配列によってコードされるタンパク質；
配列識別番号１５： ミコスファエレラ・フィジエンシス（Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ ｆｉｊｉｅｎｓｉｓ）に由来するサッカロピンデヒドロゲナーゼ（ＬＹＳ１）；
配列識別番号１６： 上記核酸配列によってコードされるポリペプチド；
配列識別番号１７： マグナポルテ・グリセア（Ｍａｇｎａｐｏｒｔｈｅ ｇｒｉｓｅａ）に由来するサッカロピンデヒドロゲナーゼ（ＬＹＳ１）；
配列識別番号１８： 上記核酸配列によってコードされるタンパク質；
配列識別番号１９： モノリオフトラ・ペルニシオサ（Ｍｏｎｏｌｉｏｐｈｔｈｏｒａ ｐｅｒｎｉｃｉｏｓａ）に由来するサッカロピンデヒドロゲナーゼ（ＬＹＳ１）；
配列識別番号２０： 上記核酸配列によってコードされるタンパク質；
配列識別番号２１： プッシニア・グラミニス（Ｐｕｃｃｉｎｉａ ｇｒａｍｉｎｉｓ）に由来するサッカロピンデヒドロゲナーゼ（ＬＹＳ１）；
配列識別番号２２： 上記核酸配列によってコードされるタンパク質；
配列識別番号２３： フィトフトラ・インフェスタンス（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｉｎｆｅｓｔａｎｓ）に由来するサッカロピンデヒドロゲナーゼ（ＬＹＳ１）；
配列識別番号２４： 上記核酸配列によってコードされるタンパク質；
配列識別番号２５： フィトフトラ・ラモルム（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｒａｍｏｒｕｍ）に由来するサッカロピンデヒドロゲナーゼ（ＬＹＳ１）；
配列識別番号２６： 上記核酸配列によってコードされるタンパク質；
配列識別番号２７： フィトフトラ・ソジャエ（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｓｏｊａｅ）に由来するサッカロピンデヒドロゲナーゼ（ＬＹＳ１）；
配列識別番号２８： 上記核酸配列によってコードされるタンパク質；
配列識別番号２９： ピレノホラ・トリチシ−レペンチス（Ｐｙｒｅｎｏｐｈｏｒａ ｔｒｉｔｉｃｉ−ｒｅｐｅｎｔｉｓ）に由来するサッカロピンデヒドロゲナーゼ（ＬＹＳ１）；
配列識別番号３０： 上記核酸配列によってコードされるタンパク質；
配列識別番号３１： スクレロチニア・スクレロチオルム（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ）に由来するサッカロピンデヒドロゲナーゼ（ＬＹＳ１）；
配列識別番号３２： 上記核酸配列によってコードされるタンパク質；
配列識別番号３３： トリコデルマ・レエセイ（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ ｒｅｅｓｅｉ）に由来するサッカロピンデヒドロゲナーゼ（ＬＹＳ１）；
配列識別番号３４： 上記核酸配列によってコードされるタンパク質；
配列識別番号３５： ウスチラゴ・マイジス（Ｕｓｔｉｌａｇｏ ｍａｙｄｉｓ）に由来するサッカロピンデヒドロゲナーゼ（ＬＹＳ１）；
配列識別番号３６： 上記核酸配列によってコードされるタンパク質；
配列識別番号３７： ベルチシリウム・アルボ−アトルム（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ａｌｂｏ−ａｔｒｕｍ）に由来するサッカロピンデヒドロゲナーゼ（ＬＹＳ１）；
配列識別番号３８： 上記核酸配列によってコードされるタンパク質；
配列識別番号３９： ミコスファエレラ・グラミニコラ（Ｍｙｃｏｓｐｈａｅｒｅｌｌａ ｇｒａｍｉｎｉｃｏｌａ）に由来するサッカロピンデヒドロゲナーゼ（ＬＹＳ１）；
配列識別番号４０： 上記核酸配列によってコードされるタンパク質；
配列識別番号４１： フサリウム・モニリホルム（Ｆｕｓａｒｉｕｍ ｍｏｎｉｌｉｆｏｒｍ）に由来するサッカロピンデヒドロゲナーゼ（ＬＹＳ１）；
配列識別番号４２： 上記核酸配列によってコードされるタンパク質；
配列識別番号４３： クラビセプス・プルプレア（Ｃｌａｖｉｃｅｐｓ ｐｕｒｐｕｒｅａ）に由来するサッカロピンデヒドロゲナーゼ（ＬＹＳ１）；
配列識別番号４４： 上記核酸配列によってコードされるタンパク質；
配列識別番号４５： プライマー ＳＡＣｄｈ＿Ｐｉ＿Ｔ７＿Ｆ；
配列識別番号４６： プライマー ＳＡＣｄｈ＿Ｐｉ＿Ｔ７＿Ｒ；
配列識別番号４７： プライマー Ａｃｔｉｎ ｆｏｒｗａｒｄ；
配列識別番号４８： プライマー Ａｃｔｉｎ ｒｅｖｅｒｓｅ；
配列識別番号４９： プライマー β−Ｔｕｂ ｆｏｒｗａｒｄ；
配列識別番号５０： プライマー β−Ｔｕｂ ｒｅｖｅｒｓｅ；
配列識別番号５１： プライマー ＳＡＣｄｈ ｆｏｒｗａｒｄ；
配列識別番号５２： プライマー ＳＡＣｄｈ ｒｅｖｅｒｓｅ；
配列識別番号５３： プライマー ｐＢＩＮＢ３３−１；
配列識別番号５４： プライマー ｐＢＩＮＢ３３−２；
配列識別番号５５： プライマー ＳａｃｄｈＰＩ Ｒ；
配列識別番号５６： プライマー ＳａｃｄｈＰＩ Ｆ；
配列識別番号５７： プライマー ＬＹＳ１ Ｐｏｔ １１７−Ｆ；
配列識別番号５８： プライマー ＬＹＳ１ Ｐｏｔ １１７−Ｒ。
本発明のさまざまな態様は、以下の実験的な実施例を用いて、より充分に理解されるであろう。
以下に記載されている全ての方法及び操作は、例として与えられており、同様の結果を達成するために利用可能なさまざまな方法の中で選択されたものに対応する。この選択は、結果の質に対して影響を及ぼすことはなく、従って、当業者は、同様の結果を達成するために、任意の適切な方法を使用することができる。特に、及び、実施例において別途明記されていない限り、使用された全ての組換えＤＮＡ技術は、「Ｓａｍｂｒｏｏｋ ａｎｄ Ｒｕｓｓｅｌ （２００１， Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｃｌｏｎｉｎｇ： Ａ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｍａｎｕａｌ， Ｔｈｉｒｄ ｅｄｉｔｉｏｎ， Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ， ＮＹ）」、「Ａｕｓｕｂｅｌ ｅｔ ａｌ． （１９９４， Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ， Ｃｕｒｒｅｎｔ ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ， ＵＳＡ， Ｖｏｌｕｍｅｓ １ ａｎｄ ２）」及び「Ｂｒｏｗｎ （１９９８， Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ＬａｂＦａｘ， Ｓｅｃｏｎｄ ｅｄｉｔｉｏｎ， Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ， ＵＫ）」に記載されている標準的なプロトコルに従って実施されている。植物分子生物学に関する標準的な材料及び方法は、「Ｃｒｏｙ Ｒ．Ｄ．Ｄ． （１９９３， Ｐｌａｎｔ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ＬａｂＦａｘ， ＢＩＯＳ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ Ｌｔｄ （ＵＫ）」及び「Ｃｒｏｙ Ｒ．Ｄ．Ｄ． Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ （ＵＫ）」に記載されている。ＰＣＲ（ポリメラーゼ連鎖反応）に関する標準的な材料及び方法についても、「Ｄｉｅｆｆｅｎｂａｃｈ ａｎｄ Ｄｖｅｋｓｌｅｒ （１９９５， ＰＣＲ Ｐｒｉｍｅｒ： Ａ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｍａｎｕａｌ， Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ， ＮＹ）」及び「ＭｃＰｈｅｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ． （２０００， ＰＣＲ−Ｂａｓｉｃｓ： Ｆｒｏｍ ｂａｃｋｇｒｏｕｎｄ ｔｏ ｂｅｎｃｈ， Ｆｉｒｓｔ ｅｄｉｔｉｏｎ， Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｖｅｒｌａｇ， Ｇｅｒｍａｎｙ）」に記載されている。
参照文献目録：
Figure 0006255344
Figure 0006255344
実施例１： マグナポルテ・グリセア（Ｍａｇｎａｐｏｒｔｈｅ ｇｒｉｓｅａ）のインビトロ培養
アッセイは、モンペリエにあるＣＩＲＡＤ（Ｃｅｎｔｒｅ ｄｅ ｃｏｏｐｅｒａｔｉｏｎ ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌｅ ｅｎ ｒｅｃｈｅｒｃｈｅ ａｇｒｏｎｏｍｉｑｕｅ ｐｏｕｒ ｌｅ ｄｅｖｅｌｏｐｐｅｍｅｎｔ）の植物病理学研究室のコレクションに由来するマグナポルテ・グリセア（Ｍａｇｎａｐｏｒｔｈｅ ｇｒｉｓｅａ）野生型系統Ｐ１．２を用いて実施した。培養に関する条件、コメ−寒天培地の組成、維持管理及び胞子形成、並びに、プロトプラストの調製に関しては、「Ｓｉｌｕｅ ｅｔ ａｌ． （１９９８）」に記載されている。
実施例２： サッカロピンデヒドロゲナーゼを標的とするｄｓＲＮＡを用いたマグナポルテ・グリセア（Ｍａｇｎａｐｏｒｔｈｅ ｇｒｉｓｅａ）のトランスフェクション及び増殖阻害の測定
マグナポルテ・グリセア（Ｍａｇｎａｐｏｒｔｈｅ ｇｒｉｓｅａ）サッカロピンデヒドロゲナーゼ（ＳＡＣｄｈ）遺伝子配列Ｌｙｓ−１（ＭＧＧ＿０１３５９．６：１４２６ｂｐ）は、「Ｂｒｏａｄ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ」（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｂｒｏａｄｉｎｓｔｉｔｕｔｅ．ｏｒｇ／）から入手した。ヌクレオチド（３０１〜６２６）を含んでいる約３２５ｂｐの領域をｄｓＲＮＡに対して選択し、「Ｇｅｎｅａｒｔ ｃｏｍｐａｎｙ」によって合成し、プラスミドにクローン化した。
トランスフェクションのために、ＭＥＧＡｓｃｒｉｐｔ ＲＮＡｉキット（Ａｍｂｉｏｎ）を製造元の指示に従って使用して、マグナポルテ・グリセア（Ｍａｇｎａｐｏｒｔｈｅ ｇｒｉｓｅａ）に由来するサッカロピンデヒドロゲナーゼのｄｓＲＮＡを生成させた。種々の量（２００μｇ〜２μｇのｄｓＲＮＡ）をトランスフェクション剤Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎ ＲＮＡｉ ｍａｘ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）で製造元の指示に従って処理した。リポフェクタミン−ｄｓＲＮＡ複合体を、ＴＢ３培地（Ｖｉｌｌａｌｂａ ｅｔ ａｌ．， ２００８）を含んでいるマイクロタイタープレートの中の２．５×１０６のマグナポルテ・グリセア（Ｍａｇｎａｐｏｒｔｈｅ ｇｒｉｓｅａ）プロトプラストに添加し、その増殖を、Ｉｎｆｉｎｉｔｅ Ｍ１０００（Ｔｅｃａｎ）マイクロプレートリーダーを用いて６００ｎｍのＯＤで５〜７日間モニターした。
サッカロピンデヒドロゲナーゼのｄｓＲＮＡで処理されたマグナポルテ・グリセア（Ｍａｇｎａｐｏｒｔｈｅ ｇｒｉｓｅａ）プロトプラストの増殖を無処理対照と比較し、それを、何回かの時点でモニターし、増殖における有意な相違が示された。
実施例３： フィトフトラ・インフェスタンス（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｉｎｆｅｓｔａｎｓ）のインビトロ培養及び遊走子の調製
フィトフトラ・インフェスタンス（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｉｎｆｅｓｔａｎｓ）系統ＰＴ７８を、暗所で、９ｃｍのペトリ皿の中のエンドウマメ寒天培地（１２５ｇ／Ｌの茹でて粉砕したエンドウマメ、２０ｇ／Ｌの寒天、１００ｍｇ／Ｌのカルベニシリン）の上で、２１℃でインビトロ培養した。１５日毎に、新しい培地に菌糸体の４つの５ｍｍ立方体プラグを用いて接種した。
遊走子を放出させるために、１２ｍＬの氷冷水を１０日間経過した培養物の上に注ぎ、その培養物を４℃に２時間置いた。次いで、当該菌糸体を乱す（ｄｗａｓｔｕｒｂｉｎｇ）ことなくその上清を集め、１００μｍ篩で濾過して、菌糸の断片を除去した。その遊走子を氷の上に置き、血球計算器を用いて計数した。
実施例４： サッカロピンデヒドロゲナーゼを標的とするｄｓＲＮＡを用いたフィトフトラ・インフェスタンス（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｉｎｆｅｓｔａｎｓ）のトランスフェクション及び増殖阻害の測定
フィトフトラ・インフェスタンス（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｉｎｆｅｓｔａｎｓ）サッカロピンデヒドロゲナーゼ遺伝子配列Ｌｙｓ−１（ＰＩＴＧ＿０３５３０：３０２０ｂｐ）は、「Ｂｒｏａｄ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ」のフィトフトラ・インフェスタンス（Ｐ．ｉｎｆｅｓｔａｎｓ）データベースから入手した。ヌクレオチド（２２５１〜２７５０）を含んでいる、ＢＬＯＣＫｉｔ ＲＮＡｉ ｄｅｓｉｇｎｅｒ ソフトウェア（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）に従って最良のｓｉＲＮＡを提供する領域約５００ｂｐを、「Ｇｅｎｅａｒｔ ｃｏｍｐａｎｙ」によって合成し、プラスミド０９２０３５７＿ＳａｃＤＨ＿Ｐｉ＿ｐＭＡにクローン化した。
ｄｓＲＮＡの合成は、Ｍｅｇａｓｃｒｉｐｔ ＲＮＡｉキット（Ａｍｂｉｏｎ）を製造元のプロトコルに従って使用し、及び、プラスミド０９２０３５７＿ＳａｃＤＨ＿Ｐｉ＿ｐＭＡから増幅させたＰＣＲ産物をテンプレートとして使用して、実施した。使用した正方向プライマーは、「ＳＡＣｄｈ＿Ｐｉ＿Ｔ７＿Ｆ：５’ ＴＡＡＴＡＣＧＡＣＴＣＡＣＴＡＴＡＧＧＧＴＴＧＣＡＧＧＡＧＡＧＣＧＣＡＧＡＡＡＧＣ」であり、逆方向プライマーは、「ＳＡＣｄｈ＿Ｐｉ＿Ｔ７＿Ｒ：ＴＡＡＴＡＣＧＡＣＴＣＡＣＴＡＴＡＧＧＧＴＣＡＧＴＴＧＧＡＧＴＣＣＧＣＧＴＧＧＴＧＴ」であった。
次いで、ｄｓＲＮＡを、１００％エタノールと酢酸ナトリウム（３Ｍ、ｐＨ５．２）を用いて沈澱させ、７０％エタノールで２回洗浄し、得られたペレットをＲＮａｓｅを含んでいない水の中に再度懸濁させた。
Ｖ８培地（５％のＶ８ジュース（Ｃａｍｐｂｅｌｌ Ｆｏｏｄｓ Ｂｅｌｇｉｕｍ）、ｐＨ５）及び適切な量のｄｓＲＮＡ及び１０μＬのリポフェクタミンＲＮＡｉ ｍａｘ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を最終体積２００μＬで順次添加することにより、４８ウェルプレートの中でトランスフェクション混合物を調製した。そのトランスフェクション混合物を、室温で１５分間インキュベートした。
遊走子をＶ８培地中で希釈して、５×１０４遊走子／ｍＬの濃度とした。次いで、８００μＬのその遊走子溶液を該プレートの各ウェルに加えた。遊走子の最終濃度は、４×１０５遊走子／ｍＬであった。
３種類の対照を各プレートに加えた：Ｖ８培地、Ｖ８培地＋遊走子、Ｖ８培地＋遊走子＋リポフェクタミン。それらのプレートを、暗所で、２１℃でインキュベートした。
当該真菌が増殖した後、８日間にわたり、プレートリーダー（Ｉｎｆｉｎｉｔｅ １０００、Ｔｅｃａｎ）で６２０ｎｍにおける吸光度を測定した。以下の式を用いて、増殖阻害の割合（％）を計算した：１００−（ＯＤｄｓＲＮＡ×１００／ＯＤ対照 リポフェクタミン）。当該真菌の増殖は、図１に示されているように、サッカロピンデヒドロゲナーゼに対するｄｓＲＮＡの存在下で、濃度依存的に低減された（それぞれ、１００ｎＭ、及び、２００ｎＭ）。
実施例５： フィトフトラ・インフェスタンス（Ｐ．ｉｎｆｅｓｔａｎｓ）サッカロピンデヒドロゲナーゼメッセンジャーＲＮＡの定量的ＰＣＲ分析：
ｃＤＮＡの合成及びリアルタイムＲＴ−ＰＣＲに対して充分な量のＲＮＡを生成させるために、４８ウェルプレートの幾つかのウェルを被験ｄｓＲＮＡの１濃度に対してプールした：７２時間時点に対して１０ウェル、９６時間時点に対して６ウェル、１２０時間時点に対して３ウェル。
ｄｓＲＮＡで処理してから、７２時間、９６時間及び１２０時間経過した後、菌糸体を集めた。そのサンプルを遠心分離して、培地を除去した。そのサンプルを液体窒素の中で凍結させ、次いで、一晩凍結乾燥させた。
ＲＮＡ抽出の前に、菌糸体を摩砕した。ＲＮｅａｓｙ Ｐｌａｎｔ ミニキット（Ｑｉａｇｅｎ）を製造元のプロトコルに従って使用して、全ＲＮＡを抽出した。ＲＮＡサンプルのＤＮＡ混入は、ＤＮａｓｅ消化（ＤＮＡ非含有、Ａｍｂｉｏｎ）によって除去した。当該ＲＮＡの完全性について、２１００ Ｂｉｏａｎａｌｙｚｅｒ（ＲＮＡ ６０００ ナノキット、Ａｇｉｌｅｎｔ）上で、製造元によって供給されているプロトコルに従って、試験した。キット「Ｔｈｅｒｍｏｓｃｒｉｐｔ ＲＴ−ＰＣＲ システム（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）」を製造元のプロトコルに従って使用し、オリゴｄＴプライミングによって、２μｇの全ＲＮＡからｃＤＮＡを合成した。そのｃＤＮＡを、１００％ＥｔＯＨと酢酸ナトリウム（３Ｍ、ｐＨ５．２）を用いて沈澱させ、７０％ＥｔＯＨで２回洗浄し、得られたペレットをＲＮａｓｅを含んでいない１０μＬの水の中に再度懸濁させた。そのｃＤＮＡを、ｑＰＣＲ試験用に、１００倍希釈した。Ｐｒｉｍｅｒ Ｅｘｐｒｅｓｓ ３ ソフトウェア（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を用いて、プライマー対を各遺伝子配列に対してデザインした。リアルタイムＲＴ−ＰＣＲは、Ｐｏｗｅｒ ＳＹＢＲ ｇｒｅｅｎ ＰＣＲ マスターミックス（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を有している７９００ Ｒｅａｌ Ｔｉｍｅ ＰＣＲ システム（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）で、製造元のプロトコルに従って、実施した。Ｑ−ＰＣＲは、以下のように実施した：１０分間９５℃、１５秒間９５℃で４５サイクル、及び、１分間６０℃、その後、解離段階、１５秒間９５℃、１分間６０℃、及び、１５秒間９５℃。
アクチン遺伝子及びβ−ツブリン遺伝子を、内因性対照として使用した。遺伝子の相対的発現は、２ΔΔＣｔ法を用いて計算した。図２は、サッカロピンデヒドロゲナーゼメッセンジャーＲＮＡのレベルが有意に低減されていることを示しており、この低減は、増殖の阻害と相関関係を有する。
Figure 0006255344
 実施例６： フィトフトラ・インフェスタンス（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｉｎｆｅｓｔａｎｓ）サッカロピンデヒドロゲナーゼ遺伝子を含んでいる形質転換ベクターの構築
（ａ） 植物発現ベクターＩＲ ４７−７１の調製
プラスミドｐＢｉｎＡＲは、以下のように構築された、バイナリーベクタープラスミドｐＢｉｎ１９（Ｂｅｖａｎ， １９８４）の誘導体である： カリフラワーモザイクウイルスの３５Ｓプロモーターのヌクレオチド（６９０９−７４３７）を含んでいる長さ５２９ｂｐのフラグメントをプラスミドｐＤＨ５１（Ｐｉｅｔｒｚａｋ ｅｔ ａｌ， １９８６）からＥｃｏＲ ＩＫｐｎ Ｉ フラグメントとして単離し、ｐＵＣ１８のポリリンカーのＥｃｏＲ Ｉ制限部位とＫｐｎ Ｉ制限部位の間に結紮した。このようにして、プラスミドｐＵＣ１８−３５Ｓを形成させた。制限酵素Ｈｉｎｄ ＩＩＩ及び制限酵素Ｐｖｕ ＩＩを使用して、ＴｉプラスミドｐＴｉＡＣＨδ（Ｇｉｅｌｅｎ ｅｔ ａｌ， １９８４）のＴ−ＤＮＡのオクトピンシンターゼ遺伝子（遺伝子３）（ヌクレオチド（１１７４９−１１９３９））のポリアデニル化シグナル（３’末端）を含んでいる長さ１９２ｂｐのフラグメントを、プラスミドｐＡＧＶ４０（Ｈｅｒｒｅｒａ−Ｅｓｔｒｅｌｌａ ｅｔ ａｌ， １９８３）から単離した。Ｓｐｈ ＩリンカーをＰｖｕ Ｉｌ制限部位に加えた後、該フラグメントをｐＵＣ１８−３５ＳのＳｐｈ Ｉ制限部位とＨｉｎｄ ＩＩＩ制限部位の間に結紮した。これにより、ｐＡ７が得られた。ここで、３５ＳプロモーターとＯｃｓターミネーターを含んでいるポリリンカー全体を、ＥｃｏＲ ＩとＨｉｎｄ ＩＩＩを用いて除去し、適切に切断されたベクターｐＢｉｎ１９の中に結紮した。これにより、植物発現ベクターｐＢｉｎＡＲが得られた（Ｈｏｆｇｅｎ ａｎｄ Ｗｉｌｌｍｉｔｚｅｒ， １９９０）。
ジャガイモ（Ｓｏｌａｎｕｍ ｔｕｂｅｒｏｓｕｍ）に由来するパタチン遺伝子Ｂ３３のプロモーター（Ｒｏｃｈａ−Ｓｏｓａ ｅｔ ａｌ．， １９８９）を、Ｄｒａ Ｉフラグメント（ヌクレオチド−１５１２−＋１４）として、Ｓｓｆ ｌで切断されたベクターｐＵＣ１９（その末端は、Ｔ４−ＤＮＡポリメラーゼを用いて平滑にされている）の中に結紮した。これにより、プラスミドｐＵＣ１９−Ｂ３３が得られた。このプラスミドから、Ｂ３３プロモーターをＥｃｏＲ ＩとＳｍａ Ｉを用いて除去し、適切に制限されたベクターｐＢｉｎＡＲの中に結紮した。これにより、植物発現ベクターｐＢｉｎＢ３３が得られた。さらなるクローン化段階を促進するために、ＭＣＳ（Ｍｕｌｔｉｐｌｅ Ｃｌｏｎｉｎｇ Ｓｉｔｅ）を延長した。この目的を達するために、２つの相補的オリゴヌクレオチドを合成し、９５℃で５分間加熱し、室温までゆっくりと冷却して良好に固化させ（アニーリング）、ｐＢｉｎＢ３３のＳａｌ Ｉ制限部位とＫｐｎ Ｉ制限部位にクローン化した。この目的に使用したオリゴヌクレオチドは、以下の配列を有していた：
ｐＢＩＮＢ３３−１： ５’−ＴＣＧ ＡＣＡ ＧＧＣ ＣＴＧ ＧＡＴ ＣＣＴ ＴＡＡ ＴＴＡ ＡＡＣ ＴＡＧ ＴＣＴ ＣＧＡ ＧＧＡ ＧＣＴ ＣＧＧ ＴＡＣ−３’；
ｐＢＩＮＢ３３−２： ５’−ＣＧＡ ＧＣＴ ＣＣＴ ＣＧＡ ＧＡＣ ＴＡＧ ＴＴＴ ＡＡＴ ＴＡＡ ＧＧＡ ＴＣＣ ＡＧＧ ＣＣＴ Ｇ−３’。
得られたプラスミドは、ＩＲ ４７−７１と命名した。
（ｂ） フィトフトラ・インフェスタンス（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｉｎｆｅｓｔａｎｓ）サッカロピンデヒドロゲナーゼ遺伝子に関する核酸配列を含んでいる植物発現ベクターｐＥＰＡ２４８及び植物発現ベクターｐＥＰＡ２６２の調製
サッカロピンデヒドロゲナーゼ配列（ＰＩＴＧ＿０３５３０：３０２０ｂｐ）は、フィトフトラ・インフェスタンス（Ｐ．ｉｎｆｅｓｔａｎｓ） ＯＲＦ Ｐｒｏｔ Ｖ１データベースから入手した。ＢＬＯＣＫｉｔ ＲＮＡｉ ｄｅｓｉｇｎｅｒ ソフトウェア（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）に従って最良のｓｉＲＮＡを提供する領域約５００ｂｐを、「Ｇｅｎｅａｒｔ ｃｏｍｐａｎｙ」によって合成した。
プライマーＳａｃｄｈＰＩ Ｒ（５’−ａｇａｇｇｔａｃｃａａｇｃｔｔｇｃｇｔａｇｃｔｇｇ−３’）とプライマーＳａｃｄｈＰＩ Ｆ（５’−ｔａｔｃｔｃｇａｇｔｃｔａｇａｃａａｃｇｃｃａｔｔｇｇｔｔａｃ−３’）を用いて、この配列ＤＮＡから３００ｂｐフラグメントをＰＣＲによって増幅した。その増幅されたフラグメントをｐＣＲＩＩ−Ｔｏｐｏ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）にクローン化して、プラスミドｐＥＰＡ２５０を得た。Ｗｅｓｌｅｙ ｅｔ ａｌ．（２００１）に従って、興味深い該配列をｐＨａｎｎｉｂａｌベクターにクローン化して、プラスミドｐＥＰＡ２４１を得た。次いで、ｄｓＲＮＡ発現カセットを異なったバイナリー（植物発現）ベクターｐＡＲＴ２７（Ｇｌｅａｖｅ ＡＰ， ＰＭＢ ２０， （１９９２）， １２０３−１２０７）及びバイナリー（植物発現）ベクターＩＲ ４７の中にサブクローン化して、それぞれ、植物発現ベクターｐＥＰＡ２４８及び植物発現ベクターｐＥＰＡ２６２を生成させた。
ジャガイモ植物をさらに形質転換させるために、ベクターｐＥＰＡ２４８及びベクターｐＥＰＡ２６２を、エレクトロポレーション（Ｒｏｃｈａ−Ｓｏｓａ ｅｔ ａｌ．（１９８９））によって、それぞれ、ＧＶ３１０１アグロバクテリア細胞及びＣ５８Ｃ１ＲＩＦ（ｐＧＶ２２６０）アグロバクテリア細胞の中に導入した。
実施例７： スクレロチニア・スクレロチオルム（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ）サッカロピンデヒドロゲナーゼ遺伝子Ｌｙｓ１を標的とする形質転換ベクターの構築
スクレロチニア・スクレロチオルム（Ｓ．ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ）Ｌｙｓ１コード配列の３５１ｂｐの領域（サッカロピンデヒドロゲナーゼ ＳＳ１Ｇ＿０６１６６．１）を「Ｇｅｎｅａｒｔ ｃｏｍｐａｎｙ（ｐＥＰＡ２９３）」によって合成し、ｐＨａｎｎｉｂａｌベクター（Ｗｅｓｌｅｙ ｅｔ ａｌ．， ２００１）への２段階クローン化を実施するようにデザインされた内部（ＸｂａＩ、ＨｉｎｄＩＩＩ）制限部位及び外部（ＸｈｏＩ、ＫｐｎＩ）制限部位によってフランキングさせた。その中間体プラスミドは、ｐＨａｎｎｉｂａｌ ＰｄＫイントロンによって隔てられ且つカリフラワーモザイクウイルス（ＣａＭＶ）３５ＳプロモーターとＯＣＳターミネーターによって調節されるＬｙｓ１遺伝子フラグメントの２つの逆方向コピーを有していた。
次いで、そのＤＮＡカセット全体をＮｏｔＩを用いて切除し、ｐＡＲＴ２７バイナリーベクター（Ｇｌｅａｖｅ，１９９２）に挿入して、カナマイシン抵抗性に基づく植物選択カセット（Ｎｏｓプロモーターとターミネーターによって調節されるｎｐｔＩＩ遺伝子）を有する最終プラスミドｐＥＰＡ３０７を得た。
同様のＮｏｔＩカセットを、さらに、ダイズの形質転換に使用するために、ＨＰＰＤ阻害薬抵抗性に基づく植物選択マーカーを有するバイナリーベクター（ｐＦＣＯ３１）にも挿入した。その後、その最終プラスミドは、右側の境界と左側の境界の間に本発明者らのカセット挿入物及びＨＰＰＤ遺伝子（これは、ＣｓＶＭＶプロモーター、クロロプラストシグナルペプチド配列及び３’Ｎｏｓターミネーターによって調節される）を含んでいるＴ−ＤＮＡで、植物を形質転換させることができる。
実施例８： ファコプソラ・パキリジ（Ｐｈａｋｏｐｓｏｒａ ｐａｃｈｉｒｉｚｉ）サッカロピンデヒドロゲナーゼ遺伝子Ｌｙｓ１を標的とする形質転換ベクターの構築
ファコプソラ・パキリジ（Ｐｈａｋｏｐｓｏｒａ ｐａｃｈｉｒｉｚｉ）Ｌｙｓ１ Ｅ．Ｓ．Ｔ．（サッカロピンデヒドロゲナーゼ ＰＨＡＰＣ＿ＥＨ２４７３２６．１）の３６４ｂｐ領域を「Ｇｅｎｅａｒｔ ｃｏｍｐａｎｙ（ｐＣＥＤ４２）」によって合成し、ｐＨａｎｎｉｂａｌベクター（Ｗｅｓｌｅｙ ｅｔ ａｌ．， ２００１）への２段階クローン化を実施するようにデザインされた内部（ＸｂａＩ、ＨｉｎｄＩＩＩ）制限部位及び外部（ＸｈｏＩ、ＫｐｎＩ）制限部位によってフランキングさせた。その中間体プラスミドは、ｐＨａｎｎｉｂａｌ ＰｄＫイントロンによって隔てられ且つカリフラワーモザイクウイルス（ＣａＭＶ）３５ＳプロモーターとＯＣＳターミネーターによって調節されるＬｙｓ１遺伝子フラグメントの２つの逆方向コピーを有していた。
次いで、そのＤＮＡカセット全体をＮｏｔＩを用いて切除し、ｐＡＲＴ２７バイナリーベクター（Ｇｌｅａｖｅ， １９９２）に挿入して、カナマイシン抵抗性に基づく植物選択カセット（Ｎｏｓプロモーターとターミネーターによって調節されるｎｐｔＩＩ遺伝子）を有する最終プラスミドｐＣＥＤ４５を得た。
同様のＮｏｔＩカセットを、さらに、ダイズの形質転換に使用するために、ＨＰＰＤ阻害薬抵抗性に基づく植物選択マーカーを有するバイナリーベクター（ｐＦＣＯ３１）にも挿入した。その後、その最終プラスミド（ｐＣＥＤ８７）は、右側の境界と左側の境界の間に本発明者らのカセット挿入物及びＨＰＰＤ遺伝子（これは、ＣｓＶＭＶプロモーター、クロロプラストシグナルペプチド配列及び３’Ｎｏｓターミネーターによって調節される）を含んでいるＴ−ＤＮＡで、植物を形質転換させることができる。
実施例９： ヘアピンサッカロピンデヒドロゲナーゼ構築物ｐＥＰＡ２６２をコードする核酸分子を含んでいる植物発現ベクターを用いたジャガイモ植物の形質転換
Ｒｏｃｈａ−Ｓｏｓａら（１９８９）によって記載されているように、ジャガイモ（Ｓｏｌａｎｕｍ ｔｕｂｅｒｏｓｕｍ）に由来するパタチン遺伝子Ｂ３３のプロモーターの制御下にサッカロピンデヒドロゲナーゼに対するコーディング核酸配列を含んでいる植物発現ベクターｐＥＰＡ２６２を使用し、アグロバクテリウム（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）を介してジャガイモ植物を形質転換させた。プラスミドｐＥＰＡ２６２を用いて形質転換されたトランスジェニックジャガイモ植物は、「５３７ ＥＳ」と命名した。
標準的なＰＣＲ法（Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．）を用いて「５３７ ＥＳ」のイベントの分子解析を実施することで、以下のプライマーを使用してサッカロピンデヒドロゲナーゼに対する核酸配列の存在を検出した： プライマーＳａｃＤＨ ＰＩ Ｆ：５’−ＴＡＴＣＴＣＧＡＧＴＣＴＡＧＡＣＡＡＣＧＣＣＡＴＴＧＧＴＴＡＣ−３’、及び、プライマーＳａｃＤＨ ＰＩ Ｒ：５’−ＡＧＡＧＧＴＡＣＣＡＡＧＣＴＴＧＣＧＴＡＧＣＴＧＧ−３’。さらなる選択は、ノーザンブロッティング法によって、又は、種々のイベントの選択をもたらすＲＴ−Ｑ ＰＣＲを介したサッカロピンデヒドロゲナーゼに対する核酸配列の発現解析によって、達成した。この目的のために使用したオリゴヌクレオチドは、以下の配列を有していた： ＬＹＳ１＿Ｐｏｔ １１７−Ｆ：５’−ＴＣＡ ＡＴＡ ＧＡＡ ＧＣＧ ＡＡＣ ＧＣＧ ＴＡＡ Ａ−３’、及び、ＬＹＳ１＿Ｐｏｔ １１７−Ｒ：５’−ＧＴＴ ＣＧＧ ＧＡＴ ＣＴＧ ＣＴＣ ＧＡＴ ＧＴ−３’。
実施例１０： アグロバクテリウム（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）が介在するアラビドプシス・タリアナ（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ）の形質転換
ｐＡＲＴ２７から誘導されたプラスミドを、エレクトロポレーションによって、アグロバクテリウム・ツメファシエンス（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）系統ＬＢＡ４４０４（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｅｌｅｃｔｒｏｍａｘ）に導入した。次いで、得られた細菌系統を、Ｃｌｏｕｇｈ ＆ Ｂｅｎｔ（ＰｌａｎｔＪ １９９８）によって記載されているように、アラビドプシス・タリアナ（Ａ．ｔｈａｌｉａｎａ）Ｃｏｌ−０又はシロイヌナズナ（Ｗａｓｓｉｌｅｓｋｉｊａ）植物のフローラルディップフィルトレーション（ｆｌｏｒａｌ ｄｉｐ ｉｎｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ）法に使用した。
実施例１１： アグロバクテリウム（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）が介在するダイズ（Ｇｌｙｃｉｎｅ ｍａｘ）の形質転換
ｐＦＣＯ３１から誘導されたプラスミドを、エレクトロポレーションによって、アグロバクテリウム・ツメファシエンス（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）系統ＬＢＡ４４０４（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｅｌｅｃｔｒｏｍａｘ）に導入した。次いで、得られた細菌系統を、以下に記載されているように、ダイズの形質転換に使用した。
ダイズ種子を塩素ガス（Ｃｌ２）で２４時間滅菌する。次いで、室温で、暗所において、種子をペトリ皿の中に置き、無菌脱イオン水の中に２０時間浸してから、接種する。適切な抗生物質を含んでいる２００ｍＬのＹＥＰ（５ｇ／Ｌ 酵母エキス、１０ｇ／Ｌ ペプトン、５ｇ／Ｌ ＮａＣｌ２、 ｐＨ７．０まで）の中でアグロバクテリウム・ツメファシエンス（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）を２００ｒｐｍで撹拌しながら２８℃で一晩培養増殖させたものを、４℃で１５分間、４０００ｒｐｍで遠心分離する。得られたペレットを４０〜５０ｍＬの感染培地の中に再懸濁させて、最終ＯＤ６００ｎｍを０．６〜１とし、氷上で貯蔵する。浸漬された種子を、無菌条件下で、＃１５外科用メスの刃を用いて切断して、子葉を分離し、それらに付いている初生葉を除去する。各子葉を接種用の外植片として維持する。約１００の外植片を調製し、その後、アグロバクテリウム（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）接種源の中で時々撹拌しながら３０分間、一緒に接種する。共培養は、４枚の濾紙（Ｗｈａｔｍａｎ（登録商標）グレード１）と４ｍＬの共培養培地（１／１０×Ｂ５ 主要塩類、１／１０×Ｂ５ 少量の塩類、２．８ｍｇ／Ｌ 第一鉄、３．８ｍｇ／Ｌ ＮａＥＤＴＡ、３０ｇ／Ｌ スクロース、３．９ｇ／Ｌ ＭＥＳ（ｐＨ５．４）、濾過滅菌された１×Ｂ５ ビタミン類、ＧＡ３（０．２５ｍｇ／Ｌ）、ＢＡＰ（１．６７ｍｇ／Ｌ）、システイン（４００ｍｇ／Ｌ）、ジチオトレイトール（１５４．２ｍｇ／Ｌ）、及び、２００μＭ アセトシリンゴン）を含んでいる古典的なペトリ皿の中で実施する。外植片を、葉の（平らな）表側を下にして共培養プレートの上に置き（プレート１枚当たり９個）、１枚の鉛直のひも状のテープ（Ｌｅｕｃｏｐｏｒｅ（登録商標））で密閉し、１８：６の光周期の中で２４℃で５日間さらにインキュベートする。共培養の終わりに、その外植片を、苗条開始培地（Ｓｈｏｏｔ Ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ Ｍｅｄｉｕｍ）（１×Ｂ５ 主要塩類、１×Ｂ５ 少量塩類、２８ｍｇ／Ｌ 第一鉄、３８ｍｇ／Ｌ ＮａＥＤＴＡ、３０ｇ／Ｌ スクロース、０．５６ｇ／Ｌ ＭＥＳ、及び、８ｇ／Ｌ 寒天（ｐＨ５．６）、濾過滅菌された１×Ｂ５ ビタミン類、ＢＡＰ（１．６７ｍｇ／Ｌ）、チメンチン（５０ｍｇ／Ｌ）、セフォタキシム（５０ｍｇ／Ｌ）、バンコマイシン（５０ｍｇ／Ｌ）、及び、テンボトリオン（０．１ｍｇ／Ｌ））の上に４５°傾けた状態で置き（プレート１枚当たり６個）、子葉の節の部分が培地の中に上向きに埋め込まれるようにする。苗条開始（Ｓｈｏｏｔ Ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ）段階は、１ヶ月間継続する（２４℃ １６／８ 光周期）。さらに１ヶ月間経過した後、緑色の苗条を有する外植片を、苗条伸長培地（Ｓｈｏｏｔ Ｅｌｏｎｇａｔｉｏｎ Ｍｅｄｉｕｍ）（１×ＭＳ／Ｂ５ 培地：これは、以下のもので修正されている：１ｍｇ／Ｌ ゼアチンリボシド（ＺＲ）、０．１ｍｇ／Ｌ ＩＡＡ、０．５ｍｇ／Ｌ ＧＡ３、３％ スクロース、１００ｍｇ／Ｌ ピログルタミン酸、５０ｍｇ／Ｌ アスパラギン、０．５６ｇ／Ｌ ＭＥＳ（ｐＨ５．６、０．８％寒天で固化されている）、チカルシリン（５０ｍｇ／Ｌ）、セフォタキシム（５０ｍｇ／Ｌ）、及び、バンコマイシン（５０ｍｇ／Ｌ））の上に移し、２週間毎に新しいものに移し替える。草丈が２ｃｍを超えた小植物を定着培地（Ｒｏｏｔｉｎｇ ｍｅｄｉｕｍ）に移す。小植物を切断し、１８０ｍＬ容垂直プラスチック製容器の中の定着培地（１／２ ＭＳ 主要塩類、少量塩類、及び、ビタミン類 Ｂ５、１５ｇ／Ｌ スクロース、１ｍｇ／Ｌ ＩＢＡ、８ｇ／Ｌ Ｎｏｂｌｅ寒天、ｐＨ５．７）の上に置く。
根が充分に形成されて、頂部が強靱であれば、植物を温室内の土壌に移植し、環境に順応させるために、３６℃の加熱ベッドの上で５日間緑色のプラスチック製箱で覆う。１０日間環境順応させた後、その植物を加熱ベッドのない大きなポットに移す。
実施例１２： アジアダイズさび病（Ａｓｉａｎ Ｓｏｙｂｅａｎ Ｒｕｓｔ）（ファコプソラ・パキリジ（Ｐｈａｋｏｐｓｏｒａ ｐａｃｈｙｒｈｉｚｉ））アッセイ
ファコプソラ・パキリジ（Ｐｈａｋｏｐｓｏｒａ ｐａｃｈｉｒｉｚｉ）Ｌｙｓ１に対するｄｓＲＮＡを発現するダイズ植物を、温室の中の７．５ｃｍポットで成育させた（２８．５℃、湿度５０％、１４時間明期）。恒温器の中で、植物に分生子懸濁液（５０ｍＬ；１０〜１５×１０４胞子／ｍＬ［胞子は、接種源としての役目を果たす人為的に感染させたダイズ植物から得た］；５５ｃｍ×３４ｃｍ×５ｃｍの寸法を有するトレイ１つ当たり、１５のポットを含んでいる）を噴霧した。その懸濁液は、０．０３３％のＴｗｅｅｎ２０を含んでいる。均一に確実に接種するためには、多方向噴霧が必要である。次いで、植物を、極めて高い湿度（９０％から飽和まで）のもと、約２５℃（昼間）及び約２０℃（夜間）で、４日間インキュベートする。この期間が経過した後、植物を標準的な成育条件に戻す。アジアダイズさび病の発生について、一定の間隔で評価して、病害の発生及び症状の重症度に関する動力学を追跡する。アジアダイズさび病を用いた全ての実験は、Ｌ２安全レベル培養チャンバー又はＨＣＢ要件に従う恒温器の中で実施する。
実施例１３： スクレロチニア・スクレロチオルム（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ）アッセイ
野生型スクレロチニア・スクレロチオルム（Ｓ．ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ）分離株１９８０真菌及びｐａｃ１突然変異株（Ｒｏｌｌｉｎｓ，２００３）真菌の発生について、全植物アッセイ（ｗｈｏｌｅ ｐｌａｎｔ ａｓｓａｙ）で調査した。スクレロチニア・スクレロチオルム（Ｓ．ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ）は、ジャガイモデキストロース寒天（ＰＤＡ、ジャガイモ ２００ｇ／Ｌ、グルコース ２０ｇ／Ｌ、寒天 １８ｇ／Ｌ）の上で４℃で貯蔵した。当該真菌は、ＰＤＡを含んでいるペトリ皿の中で、菌糸体のプラグを中心に置くことによって培養し、２１℃の静的条件下に４日間維持した。４週齢のシロイヌナズナ（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ）の野生型及びトランスジェニック植物に、植物の中心の真菌コロニーの活発に増殖している縁から切り取った直径１２ｍｍの寒天−菌糸体プラグを用いて接種した。接種された植物は、生育箱の中で、蛍光白色光を用いた３４ｍｍｏｌ ｍ−２ｓ−１の光度を有する明期１２時間の下、相対湿度１００％で２１℃に維持し、１２時間毎にモニターして、真菌の発生について観察した。病徴は、感染した葉の数並びに病斑の長さ及び幅によってモニターした。

Claims (18)

  1. （ｉ）真菌サッカロピンデヒドロゲナーゼ遺伝子又は卵菌サッカロピンデヒドロゲナーゼ遺伝子の少なくとも１８の連続するヌクレオチドと実質的に同一である配列を含んでいる第１鎖；及び、
    （ｉｉ）前記第１鎖と実質的に相補的である配列を含んでいる第２鎖；
    を含むｄｓＲＮＡ分子、
    を含む、植物病原体の防除のための組成物。
  2. 前記真菌遺伝子又は卵菌遺伝子が、サッカロピンデヒドロゲナーゼ活性を有するポリペプチドをコードし、かつ以下のものからなる群から選択される、請求項１に記載の組成物：
    （ａ） 以下の配列識別番号に示されている配列を含んでいるポリヌクレオチド：１、３、５、７、９、１１、１３、１５、１７、１９、２１、２３、２５、２７、２９、３１、３３、３５、３７、３９、４１、４３；
    （ｂ） 以下の配列識別番号に示されている配列を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド：２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４；
    （ｃ） 以下の配列識別番号に示されている配列を有するポリヌクレオチドと少なくとも９０％の配列同一性を有するポリヌクレオチド：１、３、５、７、９、１１、１３、１５、１７、１９、２１、２３、２５、２７、２９、３１、３３、３５、３７、３９、４１、４３；
    （ｄ） 以下の配列識別番号に示されている配列を有するポリペプチドと少なくとも９０％の配列同一性を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチド：２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４：
    （ｅ） 以下の配列識別番号に示されている配列を有するポリヌクレオチドと緊縮条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチド：１、３、５、７、９、１１、１３、１５、１７、１９、２１、２３、２５、２７、２９、３１、３３、３５、３７、３９、４１、４３；及び、
    （ｆ） 以下の配列識別番号に示されている配列を有するポリペプチドをコードするポリヌクレオチドと緊縮条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチド：２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２、４４。
  3. 前記（ｃ）のポリヌクレオチドが、配列識別番号１、３、５、７、９、１１、１３、１５、１７、１９、２１、２３、２５、２７、２９、３１、３３、３５、３７、３９、４１又は４３に示されている配列を有するポリヌクレオチドと少なくとも９５％の配列同一性を有する、請求項２に記載の組成物。
  4. 前記（ｄ）のポリヌクレオチドが、配列識別番号２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０、４２又は４４に示されている配列を有するポリペプチドと少なくとも９５％の配列同一性を有するポリペプチドをコードする、請求項２又は３に記載の組成物。
  5. 農業上許容される支持体、担体、増量剤及び／又は界面活性剤をさらに含んでいることを特徴とする、請求項１〜４のいずれか１項に記載の組成物。
  6. 植物薬的化合物又は植物成長促進性化合物をさらに含んでいる、請求項１〜５のいずれか１項に記載の組成物。
  7. 少なくとも１のＤＮＡ配列を含み、さらに、５’位と場合により３’位に異種調節要素を含んでいる遺伝子構築物であって、該ＤＮＡ配列が請求項１〜４のいずれか１項に定義されたｄｓＲＮＡ分子を形成し得ることを特徴とする前記遺伝子構築物を含む、植物細胞を形質転換するための組成物。
  8. 前記遺伝子構築物がクローニングベクター及び／又は発現ベクターに含まれていることを特徴とする、請求項７に記載の組成物。
  9. 少なくとも請求項１〜４のいずれか１項に定義されたｄｓＲＮＡ分子を発現することが可能な、トランスジェニック植物細胞。
  10. 請求項９に記載のトランスジェニック植物細胞を含んでいる、トランスジェニック植物、トランスジェニック種子又はそれらの一部分。
  11. 前記植物がダイズ植物、ナタネ植物、イネ植物又はジャガイモ植物である、請求項９に記載のトランスジェニック植物細胞又は請求項１０に記載のトランスジェニック植物、トランスジェニック種子若しくはそれらの一部分。
  12. 真菌サッカロピンデヒドロゲナーゼ遺伝子又は卵菌サッカロピンデヒドロゲナーゼ遺伝子を阻害するｄｓＲＮＡを発現することが可能なトランスジェニック植物細胞を生成させる方法であって、植物細胞を、少なくとも１のＤＮＡ配列を含み、さらに、５’位と場合により３’位に異種調節要素を含んでいる遺伝子構築物であって、該ＤＮＡ配列が請求項１〜４のいずれか１項に定義されたｄｓＲＮＡ分子を形成し得ることを特徴とする前記遺伝子構築物を用いて形質転換させる段階を含んでいる、前記方法。
  13. 植物病原体（特に、真菌又は卵菌）を防除する方法であって、該病原体に請求項１〜６のいずれか１項に記載の組成物を与えることを含む、前記方法。
  14. 植物病原体（特に、真菌又は卵菌）を防除する方法であって、請求項１〜６のいずれか１項に記載の組成物を植物がそこで成育しているか若しくは成育することが可能な土壌、植物の葉及び／若しくは果実又は植物の種子に施用することを特徴とする、前記方法。
  15. 植物病原体（特に、真菌又は卵菌）を防除する方法であって、該植物病原体の宿主植物に請求項９に記載の形質転換植物細胞を与えることを含む、前記方法。
  16. 植物病原体の遺伝子の発現を阻害する方法であって、以下の：
    （ｉ） 植物細胞を、少なくとも１のＤＮＡ配列を含み、さらに、５’位と場合により３’位に異種調節要素を含んでいる遺伝子構築物であって、該ＤＮＡ配列が請求項１〜４のいずれか１項に定義されたｄｓＲＮＡ分子を形成し得ることを特徴とする前記遺伝子構築物を用いて形質転換させる段階；
    （ｉｉ） そのように形質転換された細胞を該構築物の転写を可能とする条件下に置く段階；
    （ｉｉｉ） 該細胞を該植物病原体と接触させる段階；
    を含んでいる、前記方法。
  17. 前記植物病原体が、マグナポルテ・グリセア（Ｍａｇｎａｐｏｒｔｈｅ ｇｒｉｓｅａ）、フィトフトラ・インフェスタンス（Ｐｈｙｔｏｐｈｔｈｏｒａ ｉｎｆｅｓｔａｎｓ）、スクレロチニア・スクレロチオルム（Ｓｃｌｅｒｏｔｉｎｉａ ｓｃｌｅｒｏｔｉｏｒｕｍ）又はファコプソラ・パキリジ（Ｐｈａｋｏｐｓｏｒａ ｐａｃｈｙｒｈｉｚｉ）である、請求項１２〜１６のいずれか１項に記載の方法。
  18. 前記植物が、ダイズ植物、ナタネ植物、イネ植物又はジャガイモ植物である、請求項１２〜１７のいずれか１項に記載の方法。
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