ES2285484T3

ES2285484T3 - Mejora de la integridad de la barrera intestinal.

Info

Publication number: ES2285484T3
Application number: ES04748674T
Authority: ES
Inventors: Eric Alexander Van Tol; Linette Eustachia Maria Willemsen; Marleen Antoinette Koetsier; Christopher Beermann; Bernd Stahl
Original assignee: Nutricia NV
Current assignee: Nutricia NV
Priority date: 2004-06-22
Filing date: 2004-06-22
Publication date: 2007-11-16
Anticipated expiration: 2024-06-22
Also published as: ATE429155T1; UA81875C2; US8252769B2; PL2100520T3; EP1815755B1; CN100589712C; RU2402240C2; EP2100520A2; WO2005122790A1; JP4903695B2; CA2570205C; PL1815755T3; SI1815755T1; ES2431363T3; AU2004320743A1; PT1815755E; DK1672987T3; ES2323988T3; US20130053340A1; DE602004020813D1

Abstract

Uso de ácidos grasos poliinsaturados para la producción de una composición para el uso en un método para estimular la integridad de la barrera intestinal, comprendiendo dicho método la administración a un mamífero de una composición que comprende: a. ácido eicosapentaenoico (AEP), ácido docosahexaenoico (ADH) y ácido araquidónico (AA), donde el contenido de ácido graso poliinsaturado de cadena larga con 20 y 22 átomos de carbono no supera el 15% en peso del contenido total de grasa; y b. al menos dos oligosacáridos diferentes (OL1 y OL2), donde los dos oligosacáridos diferentes tienen una homología en unidades de monosa por debajo del 90%.

Description

Mejora de la integridad de la barrera intestinal.

Campo de la invención

La presente invención se refiere a un método para mejorar la integridad de la barrera intestinal y a una composición adecuada para el uso en tal método.

Antecedentes de la invención

El epitelio gastrointestinal funciona normalmente como una barrera selectiva que permite la absorción de nutrientes, electrolitos y agua y que previene la exposición a antígenos dietéticos y microbianos, incluidos alérgenos alimentarios. El epitelio gastrointestinal limita el paso de antígenos a la circulación sistémica, los cuales pueden causar reacciones inflamatorias, por ejemplo, reacciones alérgicas. Puesto que la incidencia de alergia, particularmente alergia alimenticia, está aumentando, muchos grupos de investigación buscan curas (preventivas) para estas dolencias.

La EP1272058 describe una composición que contiene oligosacáridos indigeribles para la mejora de la unión estrecha para reducir la permeabilidad intestinal y la reducción de la reacción alérgica. La composición puede comprender AGPCL (ácidos grasos poliinsaturados de cadena larga).

La EP745001 describe una combinación de oligosacáridos indigeribles y ácidos grasos n-3 y n-6 para el tratamiento de colitis ulcerosa.

Usami et al (Clinical Nutrition 2001, 20(4): 351-359) describen el efecto del ácido eicosapentaenoico (AEP) sobre la permeabilidad de la unión estrecha en células monocapa intestinales. Según ellos, se descubrió que el AEP aumenta la permeabilidad, indicando que el AEP no es adecuado para mejorar la integridad de la barrera intestinal.

Las formulaciones de la técnica anterior no son óptimamente adecuadas para mejorar la integridad de la barrera.

Resumen de la invención

La presente invención proporciona una combinación de ácidos grasos poliinsaturados de cadena larga seleccionados (AGPCL) y oligosacáridos seleccionados. La combinación presente de AGPCL y oligosacáridos mejora eficazmente la integridad de la barrera, mejorando sinérgicamente la permeabilidad intestinal y la producción de moco, y es particularmente adecuada para mejorar la integridad de la barrera en niños humanos.

Sorprendentemente, se descubrió que los AGPCL seleccionados reducen eficazmente la permeabilidad paracelular epitelial. A diferencia de lo que han informado Usami et al (Clinical Nutrition 2001, 20(4): 351-359), los inventores presentes descubrieron que los ácidos grasos poliinsaturados C18 Y C20, en particular el ácido eicosapentaenoico (AEP), el ácido docosahexaenoico (ADH) y el ácido araquidónico (AA), son capaces de reducir eficazmente la permeabilidad de la unión estrecha intestinal.

Además de los AGPCL, la composición presente contiene oligosacáridos. Los oligosacáridos seleccionados mejoran la integridad de la barrera estimulando la producción del moco, lo que resulta en un grosor de la capa de moco aumentado. Se cree que este efecto es provocado por los efectos de los oligosacáridos diferentes sobre la producción de ácidos grasos de cadena corta (AGCC). Por lo tanto, cuando es administrada enteralmente a un mamífero, la combinación presente de AGPCL y los oligosacáridos indigeribles mejoran sinérgicamente la integridad de la barrera y/o reducen sinérgicamente la permeabilidad intestinal mediante la reducción simultánea de la permeabilidad de la unión estrecha y la estimulación de la producción de moco.

En otro aspecto, la composición presente mejora la calidad de la capa de moco intestinal. La capa de moco comprende mucinas. Las mucinas son glicoproteínas de masa molecular elevada que son sintetizadas y segregadas por células caliciformes. Éstas forman una capa similar al gel sobre la superficie mucosa, mejorando de esta forma la integridad de la barrera. La capa del moco comprende diferentes tipos de mucinas, por ejemplo, mucinas ácidas, neutras y sulfonadas. Se cree que una heterogeneidad aumentada de la capa de moco mejora la funcionalidad de la barrera.

La composición presente comprende preferiblemente al menos dos oligosacáridos diferentes, los cuales influyen en la arquitectura mucosa e influyen ventajosamente en la heterogeneidad de la mucina en la capa de moco, bien directamente, bien cambiando la flora intestinal. Se cree que cada oligosacárido seleccionado diferente tiene un efecto diferente sobre la cantidad y la calidad del moco. Asimismo, los dos oligosacáridos diferentes también son capaces de estimular la calidad del moco como se refleja por el grado de sulfatación a través de su estimulación sinérgica de la producción de AGCC. Sorprendentemente, se descubrió por los inventores presentes que una mezcla de dos oligosacáridos diferentes según la presente invención estimula sinérgicamente la producción de acetato. También se descubrió por los inventores presentes que la producción de moco es dependiente de la producción de acetato.

La composición presente es mejorada además preferiblemente previendo oligosacáridos tanto de cadena larga como de cadena corta. El suministro de diferentes longitudes de cadena resulta en la estimulación de la producción de moco en diferentes partes del íleon y el colon. Los oligosacáridos de cadena corta (normalmente con un grado de polimerización (GP) de 2,3,4 ó 5) estimulan la producción de mucina en el colon proximal y/o íleon distal, mientras que se cree que los oligosacáridos con longitudes de cadena más largas (preferiblemente con un grado de polimerización (GP) de más de 5 hasta 60) estimulan la producción de mucina en las partes más distales del colon.

Se pueden conseguir incluso otras mejoras previendo los al menos dos oligosacáridos diferentes tanto como oligosacáridos de cadena corta como de cadena larga. Estas formas de realización preferidas contribuyen todas a la integridad de barrera más mejorada por el íleon y/o el colon.

Además, sorprendentemente se descubrió que el AEP, el ADH y el AA son capaces de reducir los efectos nocivos de la interleuquina 4 (IL-4) sobre la permeabilidad intestinal. La IL-4 es una citoquina que es segregada en cantidades aumentadas por células T mucosas en ciertos pacientes e induce permeabilidad intestinal. Por lo tanto, la presente invención también proporciona un método para el tratamiento y/o prevención de enfermedades donde la concentración de IL-4 intestinal es aumentada, tales como alergia, en particular la dermatitis atópica.

Descripción detallada de la invención

La presente invención se refiere a una composición nutricional que comprende:

a) AEP, ADH y AA, donde el contenido de ácido graso poliinsaturado de cadena larga con 20 y 22 átomos de carbono no supera el 15% en peso del contenido total de grasa; y

b) al menos dos oligosacáridos diferentes, donde los dos oligosacáridos diferentes tienen una homología en unidades de monosa por debajo del 90%.

Esta composición puede ser usada ventajosamente en un método para estimular la integridad de la barrera intestinal, comprendiendo dicho método la administración de dicha composición a un mamífero.

Ácidos grasos poliinsaturados

Sorprendentemente, los inventores presentes descubrieron que el ácido eicosapentaenoico (AEP, n-3), el ácido docosahexaenoico (ADH, n-3) y el ácido araquidónico (AA, n-6) reducen eficazmente la permeabilidad de la unión estrecha intestinal. Por lo tanto, la composición presente, la cual es especialmente adecuada para mejorar la integridad de la barrera intestinal, comprende AEP, ADH y AA.

Los inventores presentes descubrieron que la concentración menor de AGPCL era eficaz en la reducción de la permeabilidad de la unión estrecha (ver ejemplos vs. Usami et al). Por lo tanto, el contenido de AGPCL con 20 y 22 átomos de carbono en la composición presente, preferiblemente no supera el 15% en peso del contenido total de grasa, preferiblemente no supera el 10% en peso, incluso más preferiblemente no supera el 5% en peso del contenido total de grasa. Preferiblemente, la composición presente comprende al menos el 0'1% en peso, preferiblemente al menos el 0'25% en peso, más preferiblemente al menos el 0'5% en peso, incluso más preferiblemente al menos el 0'75% en peso de AGPCL con 20 y 22 átomos de carbono del contenido total de grasa. Por la misma razón, el contenido de AEP preferiblemente no supera el 1% en peso, pero es preferiblemente al menos el 0'05% en peso, más preferiblemente al menos el 01% en peso de la grasa total. El contenido de ADH preferiblemente no supera el 5% en peso, más preferiblemente no supera el 1% en peso, pero es al menos el 0'1% en peso de la grasa total. Puesto que se descubrió que el AA es especialmente eficaz en la reducción de la permeabilidad de la unión estrecha, la composición presente comprende cantidades relativamente altas, preferiblemente al menos el 0'1% en peso, incluso más preferiblemente al menos el 0'25% en peso, de la manera más preferible al menos el 0'5% en peso de la grasa total. El contenido de AA preferiblemente no supera el 5% en peso, más preferiblemente no supera el 1% en peso de la grasa total. En la presente composición enteral que contiene AA, de manera ventajosa se añaden AEP Y ADH para equilibrar la acción de AA, por ejemplo, reducir la acción proinflamatoria potencial de los metabolitos del AA. Los metabolitos en exceso del AA pueden provocar inflamación. Por lo tanto, la composición presente comprende preferiblemente AA, AEP y ADH, donde la relación del peso AA/ADH preferiblemente está por encima de 0'25, preferiblemente por encima de 0'5, incluso más preferiblemente por encima de 1. La relación está preferiblemente por debajo de 25. La relación del peso AA/AEP está preferiblemente entre 1 y 100, más preferiblemente entre 5 y 20.

La composición presente comprende preferiblemente entre el 5 y el 75% en peso de ácidos grasos poliinsaturados basados en la grasa total, preferiblemente entre el 10 y el 50% en peso.

Si la composición presente se usa como fórmula para niños (por ejemplo, un método para alimentar a un niño, comprendiendo dicho método la administración de la composición presente a un niño), el contenido de AGPCL, en particular el AGPCL con 20 y 22 átomos de carbono, preferiblemente no supera el 3% en peso del contenido total de grasa, como es deseable para imitar la leche humana tan exactamente como sea posible. Por la misma razón, el contenido de AGPCL omega-3 preferiblemente no supera el 1% en peso del contenido total de grasa; el contenido de AGPCL omega-6 preferiblemente no supera el 2% en peso del contenido total de grasa; el contenido de AA (omega-6) está preferiblemente por debajo del 1% en peso del contenido total de grasa; y/o la relación del peso AEP/ADH es preferiblemente 1 o menos, más preferiblemente por debajo de 0'5.

El AGPCL con 20 y 22 átomos de carbono pueden preverse como ácidos grasos libres, en forma triglicérida, en forma fosfolípida, o como una mezcla de uno de más de los de arriba. La composición presente preferiblemente comprende al menos uno de AA y ADH en forma fosfolípida.

La composición nutricional presente preferiblemente prevé también ácido graso omega-9 (n-9) (preferiblemente ácido oleico; 18: 1), para proporcionar nutrición suficiente. Preferiblemente la composición presente prevé al menos el 15% en peso de ácido graso n-9 basado en el peso de los ácidos grasos totales, más preferiblemente al menos el 25% en peso. El contenido de ácidos grasos n-9 es preferiblemente por debajo del 80% en peso.

Oligosacáridos

Oligosacáridos adecuados según la invención son sacáridos que tengan un grado de polimerización (GP) de al menos 2 unidades de monosa, los cuales no son o sólo son digeridos parcialmente en el intestino por la acción de ácidos o enzimas digestivas presentes en el tracto digestivo superior humano (intestino delgado y estómago), pero los cuales son fermentables por la flora intestinal humana. El término unidades de monosa se refiere a unidades que tienen una estructura de anillo cerrado, preferiblemente hexosa, por ejemplo, las formas piranosa o furanosa. El grado de polimerización del oligosacárido está normalmente por debajo de 60 unidades de monosa, preferiblemente por debajo de 40, incluso más preferiblemente por debajo de 20.

La composición presente comprende al menos dos oligosacáridos diferentes, donde los oligosacáridos tienen una homología en unidades de monosa por debajo de aproximadamente el 90%, preferiblemente por debajo del 50%, incluso más preferiblemente por debajo del 25%, incluso más preferiblemente por debajo del 5%. El término "homología" como se usa en la presente invención es el acumulado del porcentaje de las mismas unidades de monosa en los diferentes oligosacáridos. Por ejemplo, el oligosacárido 1 (OL1) tiene la estructura fruc-fruct-glu-gal, y por ello comprende fruc al 50%; gal al 25% y glu al 25%. El oligosacárido 2 (OL2) tiene la estructura fruc-fruc-glu, y por ello comprende fruc al 66%, glu al 33%. Los diferentes oligosacáridos diferentes tienen por lo tanto una homología del 75% (fruc al 50% + glu al 25%).

En una forma de realización preferida, la composición presente comprende galactooligosacáridos y al menos uno seleccionado del grupo compuesto de fructooligosacáridos e inulina.

Cada uno de los oligosacáridos presentes comprende preferiblemente al menos el 66%, más preferiblemente al menos el 90% de unidades de monosa seleccionadas del grupo compuesto por la manosa, la arabinosa, la fructosa, la fucosa, la ramnosa, la galactosa, la \beta-D-galactopiranosa, la ribosa, la glucosa, la xilosa, el ácido urónico y derivados de los mismos, calculado sobre el número total de unidades de monosa contenidas en el mismo.

Según otra forma de realización, al menos uno de los oligosacáridos de la composición presente es seleccionado del grupo compuesto por los fructanos, los fructooligosacáridos, los galactooligosacáridos de dextrinas indigeribles (incluidos los transgalactooligosacáridos), los xilooligosacáridos, los arabinooligosacáridos, los glucooligosacáridos, los manooligosacáridos, los fucooligosacáridos, los oligosacáridos acidicos (ver abajo, por ejemplo, oligosacáridos del ácido urónico tales como hidrolizado de pectina) y mezclas de los mismos. Preferiblemente, la composición presente comprende al menos uno, preferiblemente al menos dos, de los oligosacáridos seleccionados del grupo compuesto por los fructooligosacáridos o la inulina, los galactooligosacáridos e hidrolizado de pectina.

Para buena cantidad y calidad de moco, la composición presente comprende preferiblemente al menos un oligosacárido, el cual comprende al menos galactosa o fructosa al 66% como unidad de monosa. En una forma de realización preferida, la composición comprende al menos un oligosacárido que comprende al menos galactosa al 66% como unidad de monosa y al menos un oligosacárido que comprende al menos fructosa al 66% como unidad de monosa. En una forma de realización especialmente preferida, la composición presente comprende galactooligosacáridos y un oligosacárido seleccionado del grupo compuesto por fructooligosacáridos e inulina. Los fructooligosacáridos estimulan la producción de sulfomucina en el colon distal de ratas asociadas a la flora humana (Kleessen et al, (2003) Brit J Nutr 89:597-606) y los galactooligosacáridos estimulan la producción de mucina ácida (Meslin et al, Brit. J.Nutr (1993), 69: 903-912)).

Para mejorar más el grosor de la capa de moco por toda el área del colon, al menos el 10% en peso de los oligosacáridos en la composición presente tiene un GP de 2 a 5 (es decir, 2, 3, 4 y/o 5) y al menos el 5% en peso tiene un GP de 10 a 60. Preferiblemente al menos el 50% en peso, más preferiblemente al menos el 75% en peso de los oligosacáridos tienen un GP de 2 a 9 (es decir, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8; y/o 9), porque se cree que trabajan por todo el íleon y partes proximales y medias del colon y porque el porcentaje del peso de oligosacáridos que necesita ser incorporado a la composición para alcanzar el efecto deseado se reduce.

Preferiblemente las relaciones del peso:

a. (oligosacáridos con GP 2 a 5): (oligosacáridos con GP 6, 7, 8 y/o 9) > 1; y

b. (oligosacáridos con GP 10 a 60): (oligosacáridos con GP 6, 7, 8 y/o 9) > 1 están ambos por encima de 1.

Preferiblemente ambas relaciones del peso están por encima de 2, incluso más preferiblemente por encima de 5.

Para mejorar incluso más el grosor y la calidad de la capa de moco por toda el área del colon, preferiblemente cada uno de los al menos dos oligosacáridos diferentes están previstos en diferentes longitudes de cadena, preferiblemente al menos el 10% en peso de cada oligosacárido basado en el peso total del oligosacárido respectivo tiene un GP de 2 a 5 (es decir, 2, 3, 4 y/o 5) y al menos el 5% en peso tiene un GP entre 10 y 60. Preferiblemente al menos el 50% en peso, más preferiblemente al menos el 75% en peso del oligosacárido basado en el peso total de esos oligosacáridos tiene un GP entre 2 y 10, porque se cree que éstos trabajan por todo el íleon y partes proximales y medias del colon.

Oligosacáridos acídicos

Para mejorar más la integridad de la barrera, la composición presente incluye preferiblemente oligosacáridos acídicos con un GP entre 2 y 60. El término oligosacárido ácido se refiere a oligosacáridos que comprenden al menos un grupo acídico seleccionado del grupo compuesto por el ácido N-acetilneuramínico, el ácido N-glicoloilneuramínico, el ácido carboxílico libre o esterificado, el grupo del ácido sulfúrico y el grupo del ácido fosfórico. El oligosacárido acídico comprende preferiblemente unidades de ácido urónico (es decir, polímero de ácido urónico), más preferiblemente unidades de ácido galacturónico. El oligosacárido ácido puede ser un carbohidrato homogéneo o heterogéneo. Ejemplos adecuados son hidrolizados de pectina y/o alginato. En el tracto intestinal, los polímeros de ácido urónico son hidrolizados a monómeros de ácido urónico, los cuales estimulan la producción de acetato intestinal, el cual a su vez estimula la secreción de moco intestinal (Barcelo et al., Gut 2000; 46:218-224).

Preferiblemente, el oligosacárido ácido tiene la estructura I de abajo, donde la hexosa terminal (izquierda) preferiblemente comprende un enlace doble. Las unidades de hexosa que no sean la(s) unidad(es) de hexosa terminal(es) son preferiblemente unidades de ácido urónico, incluso más preferiblemente unidades de ácido galacturónico. Los grupos del ácido carboxílico sobre estas unidades pueden ser libres o esterificados (parcialmente), y preferiblemente al menos el 10% está metilado (ver abajo).

Estructura I

Oligosacárido de ácido polimérico

1

donde:

R es seleccionado preferiblemente del grupo compuesto del grupo hidrógeno, hidroxi o ácido, preferiblemente hidroxi; y

al menos uno seleccionado del grupo compuesto por R2, R3, R4 y R5 representa el ácido N-acetilneuramínico, el ácido N-glicoloilneuramínico, el ácido carboxílico libre o esterificado, el grupo del ácido sulfúrico y el grupo del ácido fosfórico, y el resto de R2, R3, R4 y R5 representando el hidroxi y/o hidrógeno. Preferiblemente, uno seleccionado del grupo compuesto por R2, R3, R4 y R5 representa el ácido N-acetilneuraminico, el ácido N-glicoloilneuramínico, el ácido carboxílico libre o esterificado, el grupo del ácido sulfúrico o grupo del ácido fosfórico, y el resto representando el hidroxi y/o hidrógeno.

Incluso más preferiblemente, uno seleccionado del grupo compuesto por R2, R3, R4 y R5 representa ácido carboxílico libre o esterificado y el resto de R2, R3, R4, y R5 representando hidroxi y/o hidrógeno; y

n es un número entero y se refiere a un número de unidades de hexosa (ver también Grado de Polimerización, abajo), las cuales pueden ser cualquier unidad de hexosa. De manera adecuada, n es un número entero entre 1-5000. Preferiblemente, la(s) unidad(es) de hexosa es una unidad de ácido urónico.

De la manera más preferible, R1, R2 y R3 representan hidroxi, R4 representa hidrógeno, R5 representa ácido carboxílico, n es cualquier número entre 1 y 250, preferiblemente entre 1 y 10 y la unidad de hexosa es ácido galacturónico.

La detección, medición y análisis de los oligosacáridos ácidos preferidos como son usados en el método presente son dados en solicitud de patente anterior de solicitantes relativa a oligosacáridos ácidos, es decir, WO 0/160378.

Para la mejora de la estimulación del grosor de la capa de moco por toda el área del colon, la composición presente comprende preferiblemente al menos el 10% en peso de oligosacáridos ácidos con un GP de 2 a 5 (es decir, 2, 3, 4 y/o 5) y al menos el 5% en peso de oligosacáridos ácidos con un GP entre 10 y 60, estando dicho % en peso basado en el peso total de los oligosacáridos.

Los oligosacáridos ácidos usados en la invención son preparados preferiblemente a partir de pectina, pectato, alginato, condroitina, ácidos hialurónicos, heparina, heparano, carbohidratos bacterianos, sialoglicanos, fucoidano, fucooligosacáridos o carragenina, más preferiblemente a partir de pectina y/o alginato.

Contenido de oligosacárido

Cuando está en forma líquida lista para suministrar, la composición presente comprende preferiblemente de 0'1 a 100 gramos de oligosacárido indigerible por litro, más preferiblemente entre 0'5 y 50 gramos por litro incluso más preferiblemente entre 1 y 25 gramos por litro. Un contenido demasiado elevado de oligosacáridos puede provocar incomodidad debido a fermentación excesiva, mientras que un contenido muy bajo puede resultar en una capa de moco insuficiente.

La relación del peso de los al menos dos oligosacáridos diferentes está preferiblemente entre 1 y 10, más preferiblemente entre 1 y 5. Estas relaciones del peso estimulan la producción de mucina de diferentes tipos en lugares diferentes en el intestino óptimamente.

El oligosacárido está incluido preferiblemente en la composición presente según la invención en una cantidad que supere el 0'1% en peso, que supere preferiblemente el 0'2% en peso, más preferiblemente que supere el 0'5% en peso, e incluso más preferiblemente que supere el 1% en peso basado en el peso en seco total de la composición. La composición presente tiene preferiblemente un contenido de oligosacárido por debajo del 20% en peso, más preferiblemente por debajo del 10% en peso, incluso más preferiblemente por debajo del 5% en peso.

La adición de nucleótidos y/o nucleosidas a la presente invención mejora más la función de la barrera mucosa del intestino, en especial puesto que inhibe y/o reduce la incidencia de translocación bacteriana y disminuye la lesión intestinal. Por lo tanto, la composición presente también comprende preferiblemente entre 1 y 500 mg. de nucleosidas y/o nucleótidos por 100 gramos de la fórmula seca, incluso más preferiblemente entre 5 y 100 mg.

Aplicación

La composición presente puede ser usada ventajosamente en un método para mejorar la integridad de la barrera en mamíferos, en particular humanos. La composición presente también puede ser usada ventajosamente en un método para el tratamiento o prevención de enfermedades asociadas a la integridad de barrera reducida, comprendiendo dicho método la administración a un mamífero de la composición presente. La composición presente es administrada preferiblemente oralmente.

Para los enfermos y los niños, la composición presente es combinada preferiblemente con nutrición completa, incluidos proteína, carbohidrato y grasa. La composición presente es administrada ventajosamente a niños con la edad entre 0 y 2 años. La composición puede ser administrada a pacientes que padecen una integridad de barrera perjudicada y a pacientes saludables. La composición presente es usada ventajosamente en un método para proveer los requisitos nutricionales de un niño prematuro (un niño nacido antes de 37 semanas de gestación).

La composición presente también puede usarse ventajosamente en un método para el tratamiento y/o la prevención de daño intestinal mediante la administración de la composición presente antes de o después de un tratamiento médico que pueda causar daño intestinal. Tal tratamiento médico puede por ejemplo ser tratamiento de cirugía o de medicina enteral (por ejemplo, antibiótico, analgésico, AINE, agentes quimioterapéuticos, etc.).

La composición presente también puede ser usada ventajosamente para tratar o prevenir enfermedades donde la ruptura de la barrera intestinal subyace al desarrollo del curso de la enfermedad, por ejemplo, en un método para el tratamiento o prevención de enfermedades inflamatorias crónicas, en particular la enfermedad inflamatoria del intestino (EII), el síndrome del intestino irritable (SII), la enfermedad celiaca, pancreatitis, hepatitis, artritis o diabetes. Asimismo, la invención puede ser usada en un método para suministrar nutrición a pacientes que han sido sometidos o que están siendo sometidos a cirugía abdominal y pacientes que experimenten disfunción postoperativa del intestino y/o pacientes malnutridos.

En otra forma de realización de la invención, la composición presente es administrada ventajosamente a pacientes que padecen síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA) y/o o pacientes que están infectados con el virus de inmunodeficiencia humana (VIH), por ejemplo, en un método para el tratamiento de SIDA y/o infección de VIH. Dicho método comprende la administración oral de la composición presente, preferiblemente combinada con nutrientes seleccionados del grupo compuesto de carbohidrato, proteína y grasa.

Además, la invención puede también ser usada para tratar o prevenir complicaciones que resulten de integridad de barrera reducida, en particular en un método para el tratamiento y/o prevención de diarrea, en particular diarrea en niños. Debido a la incidencia reducida en la diarrea en niños, la composición presente también puede ser usada ventajosamente para reducir las rozaduras producidas por el pañal.

La administración de la composición presente reduce el paso de antígenos dietéticos y microbianos, en particular alérgenos alimentarios, desde el lumen intestinal a la circulación mucosa o sistémica, y por lo tanto puede ser usada ventajosamente en un método para el tratamiento o prevención de alergia y/o reacción alérgica, en particular en un método para el tratamiento o prevención de alergia alimenticia, por ejemplo, reacción alérgica que resulte de la ingestión de producto alimenticio.

También fue descubierto por los presentes inventores que AEP, ADH y/o AA son capaces de reducir los efectos de IL-4 sobre la permeabilidad intestinal. Por lo tanto, un aspecto de la presente invención prevé un método para el tratamiento y/o prevención de enfermedades donde la concentración de IL-4 intestinal es aumentada (por ejemplo, enfermedades alérgicas), comprendiendo dicho método la administración de un AGPCL preferiblemente seleccionado del grupo compuesto por el AEP, ADH y AA, preferiblemente combinado con los oligosacáridos seleccionados presentes. Por lo tanto, la composición presente también puede ser usada ventajosamente en un método para el tratamiento de dermatitis atópica.

Puesto que la función de barrera de recién nacidos no ha sido desarrollada por completo, la composición presente puede ser administrada ventajosamente a niños pequeños, es decir, niños con la edad entre 0 y 6 meses. La composición puede ser administrada al niño en la forma de una fórmula para niños sin leche humana o mezclada con leche humana. Por lo tanto, la presente invención también provee una alimentación de fórmula que comprende leche humana y la composición presente. Las composiciones que incluyen leche humana y la composición presente son especialmente adecuadas para alimentar a niños prematuros.

La composición presente está prevista preferiblemente como un polvo envasado o fórmula envasada lista para suministrar. Para prevenir el deterioro del producto, el tamaño del envasado de la fórmula lista para suministrar preferiblemente no supera una porción, por ejemplo, preferiblemente no supera los 500 ml; y el tamaño del envasado de la composición presente en forma en polvo preferiblemente no supera las 250 porciones. Tamaños de envasado adecuados para el polvo son 2.000 gramos o menos, preferiblemente por 1.000 gramos o menos.

Los productos envasados provistos de etiquetas que dirigen explícita o implícitamente al consumidor hacia el uso de dicho producto conforme a uno o más de los objetivos de arriba o de abajo, son comprendidos por la presente invención. Tales etiquetas pueden por ejemplo hacer referencia al presente método para prevenir reacción alérgica a alérgenos alimentarios mediante la inclusión de expresiones como "sensibilidad alimentaria reducida", "mejora de la tolerabilidad intestinal", "tolerancia alimenticia mejorada" o expresiones similares. De forma similar, se puede hacer referencia al método presente para tratar y/o prevenir alergia mediante la incorporación de terminología equivalente a "resistencia mejorada" o "sensibilidad reducida".

Fórmulas

Se descubrió que la composición presente puede ser aplicada ventajosamente en alimento, tal como alimento de bebé y alimento clínico. Tal alimento comprende preferiblemente lípido, proteína y carbohidrato y es administrado preferiblemente en forma líquida. El término "alimento líquido" como es usado en la presente invención incluye alimento seco (por ejemplo, polvos), los cuales están acompañados de instrucciones para mezclar dicha mezcla de alimento seco con un líquido adecuado (por ejemplo, agua).

Por lo tanto, la presente invención también se refiere a una composición nutricional que preferiblemente comprende entre el 5 y el 50% en de lípido, entre el 5 y el 50% en de proteína, entre el 15 y el 90% en de carbohidrato y la combinación presente de oligosacáridos y AGPCL. Preferiblemente, la composición nutricional presente contiene entre el 10 y el 30% en de lípido, entre el 7'5 y el 40% en de proteína y entre el 25 y el 75% en de carbohidrato (% en es la abreviatura para el porcentaje de energía y representa la cantidad relativa, cada constituyente contribuye al valor calórico total de la preparación).

Preferiblemente se usa una combinación de lípidos vegetales y al menos un aceite seleccionado del grupo compuesto por aceite de pescado y aceite vegetal omega-3, de algas o bacteriano.

Las proteínas usadas en la preparación nutricional son preferiblemente seleccionadas del grupo de proteínas animales no humanas (tales como proteínas lácteas, proteínas de carne y proteínas de huevo), proteínas vegetales (tales como proteína de soja, proteína de trigo, proteína de arroz, y proteína de guisante), aminoácidos libres y mezclas de las mismas. La fuente de nitrógeno derivado de la leche de vaca, en particular proteínas de proteína de leche de vaca tales como la caseína y las proteínas de lactosuero son especialmente preferidas.

Una fuente de carbohidrato digerible puede ser añadida a la fórmula nutricional. Preferiblemente, proporciona aproximadamente el 40% a aproximadamente el 80% de la energía de la composición nutricional. Puede usarse cualquier (fuente de) carbohidratos adecuada, por ejemplo, sucrosa, lactosa, glucosa, fructosa, sólidos de jarabe de maíz, y maltodextrinas, y mezclas de los mismos.

La composición presente es usada preferiblemente como fórmula para niños y contiene preferiblemente del 7'5 al 12'5% energía de proteína; del 40 al 55% energía de carbohidratos; y del 35 al 50% energía de grasa. Puesto que la composición presente es usada de manera adecuada para reducir la reacción alérgica en un niño, la proteína de la fórmula para niños es seleccionada preferiblemente del grupo compuesto de proteína láctea hidrolizada (por ejemplo, caseína hidrolizada o proteína de lactosuero hidrolizada), proteína vegetal y/o aminoácidos. El uso de estas proteínas redujo más las reacciones alérgicas del niño.

Las irregularidades en la deposición (por ejemplo, deposiciones duras, volumen de deposición insuficiente, diarrea) es un gran problema en muchos bebés e individuos enfermos que reciben alimentos líquidos. Se descubrió que los problemas en la deposición pueden ser reducidos mediante la administración de los oligosacáridos presentes en alimento líquido que tengan una osmolalidad entre 50 y 500 mOsm/kg, más preferiblemente entre 100 y 400 mOsm/kg.

En vista de lo de arriba, también es importante que el alimento líquido no tenga una densidad calórica excesiva, no obstante todavía proporciona calorías suficientes para alimentar al individuo. Por lo tanto, el alimento líquido tiene preferiblemente una densidad calórica entre 0'1 y 2'5 kcal/ml, incluso más preferiblemente una densidad calórica de entre 0'S y 1'5 kcal/ml, de la forma más preferible entre 0'6 y 0'8 kcal/ml.

Ejemplos Ejemplo 1 Efecto de AGPCL sobre la integridad de la barrera

Se cultivaron monocapas (MC) de líneas celulares epiteliales intestinales T84 (Colección Americana de Cultivos Tipo, American Type Culture Collection (ATTC), Manassas, EEUU) sobre filtros transwell (Corning, Costar BV, Países Bajos) permitiendo tanto el muestreo mucoso y seroso como la estimulación de células epiteliales intestinales humanas. Dos semanas después de la confluencia, las monocapas fueron incubadas en el compartimento luminal con ácidos grasos poliinsaturados AA (ácido araquidónico; ácido 5, 8, 11, 14-eicosatetraenoico), ADH (ácido cis-4, 7, 10, 13, 16, 19 docosahexaenoico), AEP (ácido eicosapentaenoico) o ácido (palma) palmítico de control (C 16:0) (Sigma, St. Louis, EEUU). El último procedimiento fue elegido para imitar la ruta de administración in vivo de los compuestos dietéticos. Se incubaron células con AA, ADH, AEP, o ácido palmítico durante 0, 24, 48 y 72 horas en concentraciones diferentes (10 \muM y 100 \muM). Se realizaron experimentos para evaluar la integridad de la barrera basal. La función de la barrera epitelial fue determinada mediante la medición de la resistencia transepitelial (RTE, \Omega cm^{2}) fue medida mediante metro de voltio-ohmio epitelial (EVOM; World Precision Instruments, Alemania), y la permeabilidad para dextrano-FITC de 4 kDa (marcador de la permeabilidad paracelular, Sigma, EEUU). La resistencia (la permeabilidad epitelial para dextrano-FITC de 4 kDa fue determinada como sigue. Antes de los flujos de dextrano, el medio fue refrescado con medio de cultivo sin fenol rojo durante una hora, seguido de la adición de 5 \mul (reserva 100 mg/ml) de dextrano-FITC de 4 kDa al compartimento lumenal. Después de 30 minutos de incubación, se recogieron 100 \mul de muestra del compartimento seroso y la señal fluorescente fue medida en longitud de onda de excitación de 485 nm y de emisión 520 nm (FLUOstar Galaxy®, BMG Labtechnologies, EEUU). Los flujos de dextrano-FITC fueron calcu-
lados como pmol de dextrano-FITC/cm^{2}/h. Se realizaron análisis estadísticos usando el ANOVA (SPSS versión 10).

En la tabla 1 se dan los resultados del efecto de ácidos grasos (100 \muM) sobre la integridad de la barrera espontánea tras 72 horas de incubación. La tabla 1 muestra que los AGPCL AA, AEP y ADH reducen el flujo molecular y mejoran la resistencia epitelial. Por el contrario, los experimentos de control muestran que el ácido palmítico tiene los efectos contrarios, es decir, compromete la integridad de la barrera. Estos resultados son indicativos para el uso ventajoso de AEP, ADH y AA, y en particular AA en la composición según la presente invención y para el uso en un método según la presente invención, por ejemplo, en un método para mejorar la integridad de la barrera. Este resultado sirve de más apoyo para los efectos sinérgicos de la combinación presente de ácidos grasos y oligosacáridos indigeribles.

La figura 1 muestra los efectos dependientes del tiempo y la dosis (10 \muM y 100 \muM) de varios ácidos grasos (ácido palmítico, ADH, AGL, y AA) sobre la integridad de la barrera basal (RTE). La figura 1 muestra que los AGPCL AA, ADH, y AGL, mejoran la integridad de la barrera epitelial como se refleja mediante la resistencia aumentada (RTE). Estos resultados son indicativos para el uso ventajoso de AEP, ADH, AGL y AA, en particular AA, en la composición según la presente invención y para el uso en un método según la presente invención, es decir, en un método para mejorar la integridad de la barrera. Estos resultados sirven de más apoyo a los efectos sinérgicos de la combinación presente de ácidos grasos y oligosacáridos indigeribles.

TABLA 1

100

Ejemplo 2 Efecto de AGPCL sobre la ruptura de la barrera mediada por IL-4

Se cultivaron monocapas (MC) de líneas celulares epiteliales intestinales T84 (ATCC, EEUU) sobre filtros transwell (Corning, Costar BV, Países Bajos) permitiendo tanto el muestreo mucoso y seroso como la estimulación de células epiteliales intestinales humanas. Dos semanas después de la confluencia, las monocapas fueron incubadas en la presencia de IL-4 (2 ng/ml, compartimento seroso, Sigma, EEUU) con o sin ácidos grasos poliinsaturados AA, ADH, AGL, AEP o ácido palmítico de control (10 \muM o 100 \muM, compartimento mucoso, Sigma, St. Louis, EEUU). Se preincubaron células con AA, ADH, AEP, o ácido palmítico durante 48 horas antes de la incubación de IL-4. La coincubación de AGP y ácido palmítico con IL-4 fue continuada durante otras 48 horas; mientras que el medio de cultivo y los aditivos fueron cambiados cada 24 horas. La función de barrera epitelial fue determinada mediante la medición de la resistencia transepitelial (RTE) y la permeabilidad como se describe en el ejemplo 1. Se llevó a cabo evaluación estadística como se describe en el ejemplo 1.

Los resultados del efecto de AA, ADH, AEP y ácido palmítico (100 \muM) sobre la ruptura de barrera mediada por IL-4 se dan en la tabla 2. La tabla 2 muestra que los AGPCL AA, ADH y AEP inhiben el flujo aumentado causado por IL-4. Por el contrario, el ácido palmítico tenía un efecto perjudicial y disminuyó la ruptura de la barrera en comparación con el control. Estos resultados son indicativos para el uso ventajoso de AA, ADH, y AEP en formulaciones de nutrición clínica y de niños para prevenir o reducir la ruptura de barrera mediada por IL-4, por ejemplo, como sucede en la alergia a la leche de vaca o a alimentos. Este resultado apoya más los efectos sinérgicos de la presente combinación de ácidos grasos y oligosacáridos indigeribles.

La figura 2 da los efectos protectores dependientes del tiempo y la dosis (10 \muM y 100 \muM) de varios ácidos grasos (ácido palmítico, ADH, AGL y AA) sobre la destrucción de barrera mediada por IL-4 (flujo). La figura 2 muestra que el AA, el ADH y el AGL protegen contra la ruptura de barrera mediada por IL-4 como se refleja por el flujo de dextrano de 4 kD disminuido. Estos resultados son indicativos para el uso ventajoso del AA, el ADH y el AGL en formulaciones de nutrición clínica y de niños para prevenir o reducir la ruptura de barrera mediada por IL-4, por ejemplo, como sucede en la alergia a la leche de vaca o a alimentos. Estos resultados apoyan más los efectos sinérgicos de la combinación presente de ácidos grasos y oligosacáridos indigeribles.

TABLA 2

2

Ejemplo 3 Efecto de oligosacáridos sobre la producción de acetato

Se obtuvieron microorganismos de heces frescas de bebés alimentados con biberón. El material fecal fresco de bebés de entre 1 y 4 meses de edad fue reunido y colocado en un medio conservante en el intervalo de 2 horas. Como sustrato se usaron prebióticos (TOS; mezcla de TOS/inulina (HP) en una proporción 9/1 (p/p); inulina; mezcla de oligofructosa (OS) linulina en una proporción 1/1 (p/p), o ninguno (blanco). Los transgalactooligosacáridos (TOS) fueron obtenidos de Vivinal GOS, Borculo Domo Ingredients, Zwolle, Países Bajos y comprende como oligosacáridos indigeribles: disacáridos al 33% en peso, trisacáridos al 39% en peso, tetrasacáridos al 18% en peso, pentasacáridos al 7% en peso y hexa, hepta y octasacáridos al 3% en peso. Los ingredientes alimenticios activos de Orafti de inulina (HP), Tienen, Bélgica, es decir, Raftiline HP®, con un GP medio de 23.Medios: medio McBain & MacFarlane: 3'0 g/l de agua de peptona tamponada, 2'5 g/l de extracto de levadura. 0'8 g/l de mucina (bordes en cepillo), 3'0 g/l de triptona, 0'4 g/l de L-cisteína-HCl, 0'05 g/l de sales de la bilis, 2'6 g/l de K_{2}HPO_{4}.3H_{2}O, 0'2 g/l de NaHCO_{3}, 4'5 g/l de NaCl, 0'5 g/l de MgSO_{4}.7H_{2}O, 0'228 g/l de CaCl_{2}, 0'005 g/l de FeSO_{4}.7H_{2}O. Se llenan botellas Scott de 500 ml con el medio y se esterilizan 15 minutos a 121ºC. Medio tamponado: 2'6 g/l de K_{2}HPO_{4}.3H_{2}, 0'2 g/l de NaHCO_{3}, 4'5 g/l de NaCl, 0'5 g/l de MgSO_{4}.7H_{2}O, 0'228 g/l de CaC_{12}, 0'005 g/l de FeSO_{4}.7H_{2}O. Se ajusta en pH 6.3 \pm 0.1 con K_{2}HPO_{4} o NaHCO_{3}. Se llenan botellas Scott de 500 ml con el medio y se esterilizan 15 minutos a 121ºC. Medio conservante: 20'0 g/l de peptona tamponada, 0'5 g/l de L-cisteína-HCI, 0'5 g/l de tioglicolato sódico, 1 pastilla de resazurina por litro, se ajusta en pH 6.7 \pm 0.1 con 1 M de NaOH o HCl. Se hierve en microondas. Las botellas de suero fueron llenadas con 25 ml de medio y esterilizadas durante 15 minutos a 121ºC.

Se mezclaron muestras fecales frescas con medio conservante y almacenadas durante varias horas a 4ºC. La solución conservada de heces fue centrifugada a 13.000 rpm durante 15 minutos, el sobrenadante fue extraído y las heces fueron mezcladas con medio McBain & MacFarlane en una relación del peso de 1:5. De esta suspensión fecal, 3 ml fueron combinados con 85 mg de glucosa o prebiótico o sin adición (blanco) en una botella y fueron bien mezclados. Se retiró una muestra t=0 (0'5 ml). Se llevan 2'5 ml de la suspensión resultante a un tubo de diálisis en una botella de 60 ml llenada con 60 ml del medio tamponado. La botella fue cerrada bien e incubada a 37°C. Se tomaron muestras del tubo de diálisis (02 ml) o tampón de diálisis (1'0 ml) con una jeringa hipodérmica tras 3, 24, y 48 horas e inmediatamente fueron puestas sobre hielo para detener la fermentación. El experimento se efectuó usando las muestras siguientes:

1) 85 mg de TOS

2) 85 mg de inulina

3) 85 mg de TOS/inulina en una proporción de 9/1 (p/p) y

4) 85 mg de OS/inulina en una proporción de 1/1 (p/p).

Se cuantificaron AGCC (acetato, propionato, butirato) usando un cromatógrafo de gas Varian 3800 (GC) (Varian Inc., Walnut Creek, EEUU) equipado con un detector de ionización de llama. Se inyectaron 0'5 \mul de la muestra a 80ºC en la columna (Stabilwax, 15 x 0'53 mm, grosor de película 1'00 \mum, Restek Co., EEUU) usando helio como gas portador (3'0 lb/pulg^{2}). Después de la inyección de la muestra, el horno fue calentado a 160ºC a una velocidad de 16ºC/min, seguido por el calentamiento a 220ºC a una velocidad de 20ºC/min y finalmente mantenido a 220ºC durante 1'5 minutos. La temperatura del inyector y detector fue 200ºC. Se usó ácido 2-etilbitírico como estándar interno.

La figura 3 representa el perfil de AGCC absoluto (figura 3A) y relativo (figura 3B) resultantes de fermentar los diferentes oligosacáridos. La figura 3A muestra que una mezcla de dos oligosacáridos diferentes (TOS/inulina), donde los dos oligosacáridos diferentes tienen una homología en unidades de monosa por debajo de 90 y una longitud de cadena diferente resulta en una cantidad de AGCC aumentada significativa y sinérgicamente (en particular, acetato) por gramo de fibra que componentes simples. La figura 3B muestra que la adición de una combinación de TOS/inulina favoreció una proporción más elevada del acetato beneficioso (B). La producción de acetato in vivo se traduce en producción de moco mejorada mediante células caliciformes y una medida para el grosor de la capa de moco intestinal (ver el ejemplo 4). Estos resultados son indicativos para el uso ventajoso de la composición presente.

Ejemplo 4 Efectos de AGCC sobre la producción de moco

Se cultivaron monocapas de células T84 epiteliales intestinales (ATCC, EEUU) en 24 ó 96 placas de cultivos tisulares de pocillos (Corning B.V.). Fueron incubadas T84 con los ácidos grasos de cadena corta acetato, proprionato y butirato, (AGCC, Merck, EEUU) durante 24 horas en un intervalo de concentración de 0'025-4'0 mM. Se recogieron los sobrenadantes y/o células y se determinó la expresión de MUC-2 (mucina). Se usó una técnica dotblot para determinar la expresión de MUC-2 en los cultivos celulares, puesto que las mucinas son glicoproteínas extremadamente grandes (por encima de 500 a), lo cual las hace difíciles de manejar en técnicas de transferencia western. El método fue validado usando suero preinmunológico (T84 coloreada negativa), células de control negativo CCD-18Co (ATCC, EEUU) y albúmina de suero bovino (ASB). Se coleccionaron muestras celulares en Laemmli (tampón de aislamiento de proteínas) y se llevó a cabo la determinación de proteínas usando un ensayo de microproteínas (Biorad, EEUU) según el protocolo de fabricantes. Se puntearon muestras (0'3-0'7-1'0 \mug/2 \mul) sobre membranas de nitrocelulosa (Schleicher & Schuell, Alemania). Las membranas fueron bloqueadas en TBST/Protivar al 5% (Nutricia, Países Bajos) seguido de 1 hora de incubación con anticuerpo anti MUC-2 (gentilmente donado por el Dr. Einerhand, Erasmus University, Rotterdam, Países Bajos). Después del lavado, se incubaron manchas con HRP de cabra anticonejo (Santacruz Biotechnology, EEUU) y para la detección de sustrato se usó ECL (Roche Diagnostics, Países Bajos). La densitometría se realizó usando el Lumi-Imager (Boehringer Mannheim B.V., Países Bajos) y la señal se expresó en unidades de iluminación (BLU, unidad de retroiluminación). Las BLU también fueron expresadas con respecto a incubaciones de control (% de BLU). Para comparar el efecto estimulador del AGCC sobre la expresión de MUC-2, se dedujeron niveles basales de expresión de MUC-2. La figura 4 muestra los efectos diferenciales del AGCC (acetato, proprionato, butirato) sobre la expresión de MUC-2 en células intestinales epiteliales (MC T84) y cocultivos celulares epitelial mesenquimales (CC T84). La figura 2 también muestra que el acetato es más potente en la estimulación de la expresión de MUC-2 (producción de moco) que en comparación con el propionato y butirato. Por lo tanto, la combinación presente de oligosacáridos (la cual fue mostrada para aumentar la producción de acetato (ver el ejemplo 3)) es particularmente útil para estimular la producción de moco y puede ser usada de manera ventajosa en un método para estimular la integridad de la barrera.

Ejemplo 5 Fórmula láctea de niños

Ingredientes (por litro), energía 672 Kcal; proteína 15 g; lactosuero: proporción de caseína 60:40; grasa 36 g; carbohidrato 72 g; vitamina A 750 RE; carotídeos naturales mezclados 400 IU; vitamina D 10'6 mcg; vitamina F 7'4 mg; vitamina K 67'0 mcg; vitamina B. sub. 1 (tiamina) 1.000 mcg; vitamina B. sub. 2 (riboflavina) 1.500 mcg; vitamina B. sub. 6 (piridoxina) 600 mcg; vitamina B. sub 12 (cianocobalamina) 2'0 mcg; niacina 9'0 mcg; ácido fólico 80 mcg; ácido pantoténico 3.000 mcg; biotina 90 mcg; vitamina C (ácido ascórbico) 90 mcg; colina 100 mg; inositol 33 mg; calcio 460 Mg; fósforo 333 Mg; magnesio 64 Mg; hierro 8'0 Mg; zinc 6'0 Mg; manganeso 50 mcg; cobre 560 mcg; yodo 100 mcg; sodio 160 mg; potasio 650 mg; cloruro 433 mg y selenio 14 mcg; donde el contenido de grasa incluye 3 gramos de aceite de pescado y 3 gramos de aceite de ácido araquidónico al 40% (DSM Food Specialties, Delft, Países Bajos); comprendiendo además 4 gramos de transgalactooligosacáridos Elix'or^{TM} (Borculo Domo Ingredients, Países Bajos) y 4 gramos de Raftiline^{TM} (Orafti Active Food Ingredients, Bélgica).

Claims

1. Uso de ácidos grasos poliinsaturados para la producción de una composición para el uso en un método para estimular la integridad de la barrera intestinal, comprendiendo dicho método la administración a un mamífero de una composición que comprende:

a. ácido eicosapentaenoico (AEP), ácido docosahexaenoico (ADH) y ácido araquidónico (AA), donde el contenido de ácido graso poliinsaturado de cadena larga con 20 y 22 átomos de carbono no supera el 15% en peso del contenido total de grasa; y

b. al menos dos oligosacáridos diferentes (OL1 y OL2), donde los dos oligosacáridos diferentes tienen una homología en unidades de monosa por debajo del 90%.

2. Composición nutricional que comprende:

a. AEP, ADH y AA, donde el contenido de ácido graso poliinsaturado de cadena larga con 20 y 22 átomos de carbono no supera el 15% en peso del contenido de grasa total,

b. al menos dos oligosacáridos diferentes (OL1 y OL2), donde los dos oligosacáridos diferentes tienen una homología en unidades de monosa por debajo del 90%,

c. oligosacáridos acídicos con un GP entre 2 y 60, donde los oligosacáridos acídicos comprenden al menos un grupo acidico seleccionado del grupo compuesto por el ácido N-acetilneuramínico. El ácido N-glicoloilneuramínico, el ácido carboxílico libre o esterificado, el grupo del ácido sulfúrico y el grupo del ácido fosfórico, y opcionalmente

d. entre 1 y 500 mg de nucleosidas y/o nucleótidos por 100 gramos de fórmula seca.

3. Composición según la reivindicación 2, comprendiendo galactooligosacárido y un fructano seleccionados del grupo compuesto por los fructooligosacáridos, la inulina y mezclas de los mismos.

4. Composición según la reivindicación 2 ó 3, donde al menos el 10% en peso del oligosacárido tiene un grado de polimerización (GP) de 2 a 5 y al menos el 5% en peso tiene un GP de entre 10 y 60.

5. Composición según cualquiera unas reivindicaciones 2-4, comprendiendo además un oligosacárido acídico, preferiblemente un polímero del ácido urónico con un GP entre 2 y 60.

6. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 2-5, comprendiendo del 7'5 al 12'5% energía de proteína; del 40 al 55% energía de carbohidratos; y del 35 al 50% energía de grasa, donde dicha proteína comprende un elemento seleccionado del grupo compuesto por proteína láctea hidrolizada, proteína vegetal y/o aminoácidos.

7. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 2-6, teniendo dicha composición un contenido calórico de 0'6 a 0'8 kcal/ml; una osmolalidad de 50 a 500 mOsm/kg; y una viscosidad por debajo de 50 mPas.

8. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 2-7, adecuada para alimentar a un niño, donde:

a. el contenido de ácido graso poliinsaturado de cadena larga está por debajo del 3% en peso del contenido de grasa total;

b. el ácido graso poliinsaturado de cadena larga omega-3 está por debajo del 1% en peso del contenido total de grasa;

c. el ácido graso poliinsaturado de cadena larga omega-6 está por debajo del 2% en peso del contenido total de grasa;

d. el contenido de AA está por debajo del 1% en peso del contenido total de grasa; y

e. la proporción AEP/ADH es 1 o está por debajo.

9. Composición según cualquiera de las reivindicaciones 2-8, para el uso como medicamento.

10. Uso de una composición según cualquiera de las reivindicaciones 2-8 para la producción de una composición para la administración a un niño con la edad entre 0 y 2 años.

11. Uso de una composición según cualquiera de las reivindicaciones 2-8 para la producción de un medicamento para el uso en un método para el tratamiento o prevención de alergia, comprendiendo dicho método la administración a un mamífero de la composición según cualquiera de las reivindicaciones 2-8.

12. Uso de una composición según cualquiera de las reivindicaciones 2-8 para la producción de un medicamento para el uso en un método para el tratamiento o prevención de diarrea, comprendiendo dicho método la administración a un mamífero de la composición según cualquiera de las reivindicaciones 2-8.

13. Uso de una composición que comprende AEP, ADH y AA, donde el contenido de ácido graso poliinsaturado de cadena larga con 20 y 22 átomos de carbono no supera el 15% en peso del contenido de grasa total y al menos dos oligosacáridos diferentes (OL1 y OL2), donde los dos oligosacáridos diferentes tienen una homología en unidades de monosa por debajo del 90%, para la producción de una composición para

a. proveer los requisitos nutricionales de un niño prematuro:

b. el tratamiento o prevención de enfermedades inflamatorias crónicas, en particular la enfermedad inflamatoria del intestino, la enfermedad celiaca de la enfermedad del intestino irritable, pancreatitis, hepatitis, artritis o diabetes;

c. suministrar nutrición a pacientes que han sido sometidos a cirugía abdominal y pacientes que experimentan disfunción postoperatoria del intestino y/o pacientes malnutridos:

d. la administración a pacientes que padecen el síndrome de inmunodeficiencia adquirida y/o pacientes que están infectados con el virus de inmunodeficiencia humana;

e. el tratamiento o la prevención de complicaciones que resultan de integridad de barrera reducida, en particular la prevención de diarrea;

f. el tratamiento o la prevención de alergia; o

g. el tratamiento y/o la prevención de enfermedades donde es aumentada la concentración de IL-4 intestinal.