DK2625197T3 - Smoothened-mutant og fremgangsmåder til anvendelse af samme - Google Patents

Claims (10)

1. Isoleret mutant SMO-protein, som omfatter en aminosyresekvens, som er mindst 95 % identisk med SEQ ID NO: 2, hvor aminosyresekvensen består af alanin (A) eller lysin (K) i aminosyreposition 518 af SEQ ID NO: 2, hvor mutationen overfører mindst delvis resistens af det muterede SMO-protein til GDC-0449.

2. Isoleret mutant SMO-protein ifølge krav 1, som omfatter aminosyresekvensen af SEQ ID NO: 2, hvor aminosyresekvensen består af alanin (A) eller lysin (K) i aminosyreposition 518 af SEQ ID NO: 2.

3. Isoleret nukleinsyremolekyle, der koder et mutant SMO-protein, som omfatter en aminosyresekvens, som er mindst 95 % identisk med SEQ ID NO: 1, hvor aminosyresekvensen består af alanin (A) eller lysin (K) i aminosyreposition 518, hvor mutationen overfører mindst delvis resistens af det muterede SMO-protein til GDC-0449.

4. Nukleinsyresonde, som omfatter en nukleotidsekvens, som er komplementær til en nukleinsyresekvens, som koder et muteret SMO-protein eller fragment deraf, som inkorporerer en mutation ved aminosyre 518 af SEQ ID NO: 2, hvilken mutation består af alanin (A) eller lysin (K) i aminosyreposition 518 af SEQ ID NO: 2, hvor nukleinsyresonden differentieret binder nukleinsyren, som koder det muterede SMO-protein over en nukleinsyre, der koder et SMO-protein af vildtypen, hvor mutationen overfører mindst delvis resistens af det muterede SMO-protein til GDC-0449; og hvor sonden har en længde på 10 til 50 nukleotider.

5. Antistof, som specifikt binder til det mutante SMO-protein ifølge et af kravene 1 eller 2, hvor epitopen af antistoffet er til stede i et mutant SMO, som har en aminosyre, som er en anden end glutaminsyre i position 518, hvor antistoffet ikke binder SMO af vildtypen som har en glutaminsyre i position 518.

6. Antistof ifølge krav 5, hvor antistoffet er et monoklonalt antistof, et kimæ-risk antistof, et humaniseret antistof, et enkeltkædet antistof eller et antigenbindende fragment deraf.

7. Antistof ifølge krav 5, hvor antistoffet er konjugeret til et cytotoksisk middel.

8. Antistof ifølge krav 5, hvor antistoffet inhiberer SMO-aktivitet.

9. Fremgangsmåde til identificering af en tumor i et menneske, som er mindst delvist resistent over for behandling med GDC-0449, omfattende bestemmelse af tilstedeværelsen af et muteret SMO-gen eller muteret SMO-protein i en prøve med tumoren, hvor mutationen resulterer i alanin (A) eller lysin (K) i aminosyreposition 518 af SEQ ID NO: 2, hvor tilstedeværelsen af det muterede SMO-gen eller muterede SMO-protein indikerer, at tumoren er mindst delvist resistent over for en behandling med et GDC-0449, hvor det muterede SMO-gen koder det muterede SMO-protein.

10. Fremgangsmåde til screening af forbindelser, som inhiberer signalering af det mutante SMO-protein ifølge et af kravene 1-2; omfattende: a) at bringe det mutante SMO i kontakt med en testforbindelse og detektere binding af forbindelsen til det mutante SMO, hvor binding af testforbindelsen til mutant SMO indikerer, at testforbindelsen er en inhibitor af mutant SMO, og/eller b) at bringe en celle, som eksprimerer det mutante SMO, i kontakt med en testforbindelse og detektere Gli-aktivitet i cellen, hvor tilstedeværelsen af Gli-aktivitet indikerer, at testforbindelsen ikke er en inhibitor af mutant SMO.