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CN105580844A - 生物控制剂和杀虫剂或杀真菌剂的组合物 - Google Patents

生物控制剂和杀虫剂或杀真菌剂的组合物 Download PDF

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Abstract

本发明通过组合农业上有效量的至少一种环保型生物控制剂和至少一种昆虫防治剂和/或杀真菌剂，提供了一种能改善整体植物的生长势和产量的组合物。本发明提供的组合物对植物寄生性线虫和真菌特别有效。本发明组合物在减少昆虫压力的同时，还可增强植物根系，并改善根际内生物控制剂的建立，从而增强其有效性。应用本发明的组合物可从整体上降低植物寄生性线虫或真菌导致的作物损失，而且这种降低效果远大于单独使用各组分所产生的预期效果。本发明还提供使用本发明组合物的方法。而且，根据本发明的组合物表现出杀虫、杀线虫、杀螨或杀真菌的协同活性。

Description

生物控制剂和杀虫剂或杀真菌剂的组合物
本申请是2009年4月7日提交的发明名称为“生物控制剂和杀虫剂或杀真菌剂的组合物”的第200980112470.4号发明专利申请的分案申请。
技术领域
本发明总体上涉及用于减少植物寄生性线虫和真菌造成的植物健康、生长势和产量总体损害和损失的组合物和方法。更为具体的是，本发明涉及含有至少一种农业上有益的生物控制剂和至少一种昆虫防治剂的组合物以及利用这些组合物处理植物和植物材料的方法。
背景技术
目前已知线虫实际上是寄生于各种环境(陆地、淡水、海洋)的显微无节蠕虫。在已知的80000多种线虫中，许多在农业上非常重要，尤其是那些被归为害虫的种。其中一种为侵害大范围的植物、灌木和作物的根结线虫。这些土壤线虫侵害新生成的根系而导致植物生长受到抑制、根部肿胀或者形成根瘤。被侵害的根部会裂开而使根部接触到其它微生物，例如细菌或真菌。随着环保型耕作方法的实施，如减耕或休耕，以及许多线虫物种对转基因水稻产生了抗性，与线虫相关的作物的损失似乎有上升的趋势。
使用化学杀线虫剂如土壤熏蒸剂或非熏蒸剂来对抗线虫的感染已有多年。此类杀线虫剂需要在种植前，将化学合成品重复撒播至地块中。由于其毒性，化学杀线虫剂已受到环境保护局(EPA)的严格监控，而且在某些情况下EPA会限制或禁止其使用。由于传统化学杀线虫剂如溴化甲烷和有机磷逐渐被淘汰，因此亟需开发出一种替代性的处理选择。
一种针对这种需求的尝试为利用生物控制剂如细菌、真菌、有益线虫和病毒。然而，从商业角度来看，目前此类努力大部分已被证实为无效。因此，对纯粹用生物处理法改善容易遭受线虫侵害的农业区内的植物活力和产量的总体效果存在一种推测。
WO2007/149817中公开了一种尝试改善生物控制剂的效力的方法。然而，WO2007/149817中公开的组合物和方法依赖于将至少一种生物控制剂和至少一种杀线虫剂例如阿维菌素联用，以尝试增强植物对抗虫害和病原菌的能力。由于生物杀线虫剂与化学杀线虫剂的作用机制不同，此种联用虽然可以改善整体的防治效果，但仍不能解决化学杀线虫剂成分毒性较高的问题。因此，亟需一种采用用环境友好的有益生物成分，使用后还能改善植物活力和产量而不需要使用较高毒性的传统化学杀线虫剂如阿维菌素的有效组合物和方法。
除了寄生性线虫导致的作物损失不断增加以外，还有许多损失可选择性地归结于病原性真菌疾病。除了改良现有的化学剂和开发新型有效化合物和化学剂组合物之外，发展和使用生物杀真菌剂正处于研究之中。
正如杀线虫细菌作为单剂产品通常不能完全有效，杀真菌细菌作为补充剂而非传统化学剂替代品更能发挥作用。美国专利5,215,747中公开了枯草芽孢杆菌(一种生物杀真菌剂)和化学杀真菌剂组成的组合物可增加免受植物病原性真菌危害的整体保护效果。
发明内容
在存在植物寄生性线虫和/或病原真菌造成疾病的压力之下，通过组合农业上有效量的至少一种生物控制剂和至少一种昆虫防治剂的组合物可从整体上改善植物的活力和产量。该生物控制剂可为农业上被证实有益的和理想地具有定殖植物根系的能力的至少一种产孢细菌。所述昆虫防治剂可为至少一种被证明具有增加植物根系重量的化学杀虫剂，不论其是否具有直接杀线虫或杀真菌的活性。本发明的组合物具有可配制成具有农业上可接受的货架寿命的单一、稳定的组合物或可在使用时进行组合的优点。
本发明组合物包括生物控制剂和昆虫防治剂、杀真菌剂、异黄酮或土壤接种剂中的一种或多种组分。
此外，由于生物控制剂和昆虫防治剂或杀真菌剂、异黄酮或土壤接种剂之间的相互协同作用，本发明的组合物在处理植物、植物部位或植物的繁殖材料中意外地呈现出极高的杀虫、杀线虫、杀螨或杀真菌的活性。
本发明也提供处理种子和/或植物的方法。该方法包括下述步骤：(a)提供含有效量的至少一种生物控制剂和至少一种昆虫防治剂的组合物；以及(b)将该组合物施用到植物上。可以任意期望的的方式来施用本发明组合物，例如种子包被、土壤浇灌和/或直接沟施和/或叶面喷施，以及在发芽前、发芽后或发芽前后施用。换言之，该组合物可施用于种子、植物或植物的果实或植物生长的土壤或适于植物生长的土壤。
上述的以及本发明的其它方面将在下述的详述和实施例中进行详细解释。
具体实施方式
已发现在线虫和真菌感染环境中，施用本发明组合物与单独施用生物控制剂或昆虫防治剂相比，可提供更高的植物活力和产量。至少部分本发明范围内的昆虫防治剂已表现出即使在没有昆虫危害的情况下，能增加根重从而在根际建立有益细菌，转而降低植物寄生性线虫或真菌所造成的作物活力和产量的整体损失。在处理植物和植物材料时，在物理混合这些成分的同时，在本发明的一个优选实施例中，本发明的组合物被配制成能为活生物控制剂如产孢细菌、根定殖细菌提供稳定环境的制剂。本发明组合物视所需的特性，可加入各种添加剂而配制成终制剂，该终制剂具有必要的物理和化学稳定性，能制成可商用的产品。
本发明组合物优选至少包含一种生物控制剂。本发明所述的生物控制剂指至少一种农业上有益的产孢细菌。所述至少一种产孢细菌优选为根定殖细菌(如根际细菌)。农业上有益指的是细菌具有为植物提供免受植物病原性真菌和/或例如隶属于线形动物门或袋形动物门的土壤生物伤害的保护能力。通过几丁质分解、蛋白质分解、胶原溶解或对这些土壤生物有害以及/或对微生物种群有害的其它活性可获得对抗植物寄生性线虫的保护作用。其它的保护作用可直接性的如产生对抗植物害虫的急性毒性化学物质或间接性的如诱导能够使植物防御其自身免受植物病原菌损害的系统性植物反应。具有这些杀线虫和杀真菌活性的合适细菌可包括B组成员。
B组：土壤芽孢杆菌、Bacillusaizawai、Bacillusalbolactis、解淀粉芽孢杆菌、坚强芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、Bacillusendoparasiticus,Bacillusendorhythmos、坚强芽孢杆菌、Bacilluskurstaki、栖乳芽孢杆菌、乳病芽孢杆菌、乳芽孢杆菌、侧孢芽孢杆菌、缓死芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、Bacillusmedusa、Bacillusmetiens、纳豆芽孢杆菌、Bacillusnigrificans、甲虫芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、Bacillussiamensis、球形芽孢杆菌、芽孢杆菌(Bacillusspp.)、枯草芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、Bacillusuniflagellatus，加上列举于“伯杰氏系统细菌学手册第一版(1986)”中分类的杆菌属中的一种或多种。
或者，B组还进一步包括蜡状芽孢杆菌。
在特别优选的实施例中，该杀线虫生物控制剂是至少一种公开于美国专利6,406,690中的坚强芽孢杆菌(B.firmus)CNCMI-1582孢子以及/或蜡状芽孢杆菌(B.cereus)CNCMI-1562孢子，该专利以参阅的方式全文并入于此。在其它优选的实施例中，农业上有益菌是至少一种解淀粉芽孢杆菌IN937a、至少一种名为GB34的短小芽孢杆菌。上述四种细菌，以及已知的其它农业上有益的产孢细菌、根定殖细菌的组合均在本发明的精神和范围内。
根据本发明的特别优选的实施例也指包含坚强芽孢杆菌菌株(B.firmus)CNCMI-1582孢子以及/或蜡状芽孢杆菌(B.cereus)CNCMI-1562孢子的突变株的组合物。特别优选地，这些突变株具有杀线虫、杀虫或促进植物生长的活性。最特别优选的是，这些突变株具有杀线虫活性。
组合物中，所述至少一种生物控制剂的用量可根据最终制剂以及应用的植物或植物种子大小和类型而定。组合物中，所述至少一种生物控制剂的用量优选为约占制剂总重量的2％～80％(w/w)。更为优选的是，组合物中，所述至少一种生物控制剂的用量约为占制剂总重量的5％～65％(w/w)，最优选为约占10％～60％(w/w)。
根据本发明的组合物还可进一步包含至少一种昆虫防治剂。在一个优选的实施例中，该昆虫防治剂可为任何杀虫化合物或具有杀虫活性但无直接杀线虫或杀真菌活性和对生物防治剂无有害活性的组合物，优选为还具有施用后可增加根系重量的附加能力。在另一个实施例中，所述组合物可含有至少一种具有杀线虫或杀真菌活性的其它化合物。此类组合物可被用于线虫种群数量极高，地理区域，或为对抗严重真菌病害提供附加的杀真菌活性。可利用附加的杀线虫或杀真菌防治剂分别或同时处理植物或植物材料。
根据本发明，合适的昆虫防治剂为下述的(I1)至(I22)组的化合物。
本说明书中通过其“通用名”来进行描述的活性成分已知来自于如“杀虫剂手册”第13版，2003年英国作物保护委员会以及网页http://www.alanwood.net/pesticides。
(I1)乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制剂，如
氨基甲酸酯，如棉铃威、涕灭威、涕灭砜威、除害威、灭害威、噁虫威、丙硫克百威、含杀威、蓄虫威、丁酮威、甲灭威、克百威、丁硫克百威、除线威、敌蝇威、乙硫苯威、仲丁威、苯硫威、伐虫咪、呋线威、异丙威、metam-钠、甲硫威、灭多威、速灭威、杀线威、抗蚜威、猛杀威、残杀威、硫双威、久效威、得杀威、灭除威和灭杀威；或
待核实有机磷，如乙酰甲胺磷、甲基吡唑磷、保棉磷(甲基、乙基)、乙基溴硫磷、甲基溴苯烯磷、脱甲基丁嘧啶磷(butathiofos)、硫线磷、三硫磷、氯氧磷、毒虫畏、氯甲磷、毒死蜱(甲基/乙基)，蝇毒磷，苯腈磷、杀螟磷、毒虫畏、甲基内吸磷、砜吸磷、氯乙亚胺磷、二嗪农、除线磷、敌敌畏/DDVP、百治磷、乐果，甲基毒死畏、蔬果磷、乙拌磷、苯硫磷，乙硫磷、灭克磷、乙氧嘧啶磷、氨磺磷、克线磷、杀螟硫磷，丰索磷、倍硫磷，吡氟硫磷(flupyrazofos)、地虫磷、安硫磷、丁苯硫磷、噻唑磷，庚烯磷、碘硫磷、异稻瘟净、氯唑磷、异丙硫磷、异丙基，O型水杨酸、异唑磷、马拉硫磷、灭蚜磷、虫螨畏、甲胺磷，杀扑磷，速灭磷，久效磷，二溴磷、氧化乐果，亚砜吸磷、对硫磷(甲基/乙基)，稻丰散、甲拌磷、伏杀磷、亚胺硫磷、磷胺、phosphocarb、辛硫磷、嘧啶磷(甲基/乙基)、丙溴磷、丙虫磷、巴胺磷、二氯丙磷、发硫磷、吡唑硫磷、哒嗪硫磷、哒硫磷、喹硫磷、硫线磷、治螟磷、硫丙磷、丁基嘧啶磷(tebupirimfos)、双硫磷、特丁硫磷、杀虫畏、甲基乙拌磷、三唑磷、敌百虫、蚜灭磷和imicyafos。
(I2)GABA-门控氯化物通道拮抗剂，如
有机氯，如毒杀芬、氯丹、硫丹、γ-六氯环己烷(HCH)、六氯环己烷、七氯、林丹与甲氧滴滴涕；或
苯基吡唑(fiproles)，如乙酰虫腈(acetoprole)、乙虫腈、氟虫腈、吡嗪氟虫腈(pyrafluprole)、吡啶氟虫腈(pyriprole)和甲烯氟虫腈(vaniliprole)。
(I3)钠通道调节剂/电压依赖性钠通道阻断剂，如
拟除虫菊酯，如氟丙菊酯、烯丙菊酯(右旋顺反式，右旋反式)、β-氟氯氰菊酯、联苯菊酯、生物烯丙菊酯、生物烯丙菊酯-苏式环戊基异构体、氟苄烯菊酯(bioethanomethrin)、生物氯菊酯、生物苄呋菊酯、二氯炔戊菊酯(chlovaporthrin)、顺式氯氰菊酯、顺式苄呋菊酯、顺式氯菊酯、功夫菊酯(clocythrin)、乙氰菊酯、氟氯氰菊酯、氯氟氰菊酯、氯氰菊酯(α-、β-、θ-、ξ-)、苯醚氰菊酯、溴氰菊酯、右旋烯炔菊酯(1R-异构体)、S-氰戊菊酯、醚菊酯、五氟苯菊酯、甲氰菊酯、氯吡氰菊酯、氰戊菊酯、溴氟菊酯、氟氰戊菊酯、三氟醚菊酯、氟氯苯菊酯、氟胺氰戊菊酯、苄螨醚(fubfenprox)、γ-氟氯氰菊酯、炔咪菊酯、噻嗯菊酯、λ-氟氯氰菊酯、甲氧苄氟菊酯、氯菊酯(顺式,转移)、苯醚菊酯(1R-反式异构体)、炔丙菊酯、丙氟菊酯、protrifenbute、pyresmethrin、苄氟菊酯、RU15525、氟硅菊酯、tau-氟胺氰戊菊酯、七氟菊酯、环戊烯丙菊酯、胺菊酯(-1R-异构体)、四溴菊酯、四氟苯菊酯、ZXI8901、除虫菊酯(除虫菊素)、eflusilanat；
滴滴涕(DDT)或甲氧滴滴涕。
(I4)烟碱能乙酰胆碱受体激动剂/拮抗剂，如
氯化烟碱类，如啶虫咪、噻虫胺、呋虫胺、吡虫啉、氯噻啉、烯啶虫胺、nithiazine、噻虫啉、噻虫嗪、AKD-1022、烟碱、杀虫磺、杀螟丹、杀虫双和杀虫环。
(I5)变构乙酰胆碱受体调节剂(激动剂)，如
多杀菌素，如多杀霉素和乙基多杀菌素。
(I6)氯通道激活剂，如
菌素/巨环内酯类，如阿维菌素、甲氨基阿维菌素、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐、伊维菌素、lepimectin和密灭汀；或
(I7)保幼激素类似物，如烯虫乙酯、烯虫炔酯、烯虫酯、保幼醚、烯虫硫酯、苯氧威、吡丙醚、苯虫醚。
(I8)具有未知或非特异性作用机制的活性成分，如
气体剂，如溴甲烷、三氯硝基甲烷和硫酰氟；
选择性拒食剂，如冰晶石、吡蚜酮、pyrifluquinazon和氟啶虫酰胺；或
螨类生长抑制剂，如四螨嗪、噻螨酮、土菌灵。
(I9)氧化磷酸化抑制剂，ATP干扰剂，如
丁醚脲；
有机锡化合物，如三唑锡、三环锡和苯丁锡；或
快螨特、三氯杀螨砜。
(I10)通过中断H质子梯度起作用的氧化磷酸化解偶联剂，如虫螨腈、乐杀螨、消螨通、消螨普、二硝甲酚(DNOC)。
(I11)昆虫肠膜的微生物干扰素，如苏云金芽孢杆菌(Bacillusthuringiensis)菌株；
(I12)几丁质生物合成抑制剂，如苯甲酰脲类，例如双三氧虫脲、氟啶脲、除虫脲、啶蜱脲、氟环脲、氟虫脲、氟铃脲、虱螨脲、氟酰脲、多氟脲、氟幼脲、氟苯脲或杀铃脲。
(I13)噻嗪酮。
(I14)脱皮干扰素，如灭蝇胺。
(I15)脱皮激素激动剂/干扰剂，如
双酰肼，如环虫酰肼、氯虫酰肼、甲氧虫酰肼、虫酰肼和呋喃虫酰肼(JS118)；或
印楝素。
(I16)章鱼胺能激动剂，如双甲咪。
(I17)III位电子传递抑制剂/II位电子传递抑制剂，如氟蚁腙；灭蚂蚁醌；嘧螨酯；或丁氟螨酯和cyenopyrafen。
(I18)电子传递抑制剂，如
属于METI杀螨剂的I位电子传递抑制剂，如喹螨醚、唑螨酯、嘧螨酯、哒螨灵、吡螨胺、唑虫酰胺和鱼藤酮；或
电压依赖型钠离子通道阻抑剂，如茚虫威和氰氟虫腙。
(I19)脂肪酸生物合成抑制剂，如季酮酸衍生物，例如螺螨酯和螺甲酯螨；或
吡咯酮酸衍生物，如螺虫乙酯。
(I20)未知作用机制的神经元抑制剂，如联苯肼酯。
(I21)利阿诺定受体效应剂，如二酰胺，例如氟苯虫酰胺，(R),(S)-3-N1-{2-甲基-4-[1,2,2,2-四氟-1-(三氟甲基)乙基]苯基}N2-(1-甲基-2-甲磺酰乙基)邻苯二甲酰胺、氯虫酰胺(Rynaxypyr)、或氰虫酰胺(Cyazypyr)。
具有未知作用机制的其它活性成分，如amidoflumet、benclothiaz、杀螨特、溴螨酯、噻嗪酮、杀螨猛、杀虫脒、乙酯杀螨醇、clothiazoben、cycloprene、三氯杀螨醇、环虫腈、fenoxacrim、fentrifanil、氟螨噻、咪虫胺、氟螨嗪、信铃酯、japonilure、噁虫酮、石油、油酸钾、三氟甲吡醚、氟虫胺、杀螨好、苯螨噻或verbutine；或下述已知化合物中的一种：
4-{[6-溴吡啶-3-基]甲基(2-氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自WO2007/115644)、4-{[(6-氟吡啶-3-基)甲基](2,2-二氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自WO2007/115644)、4-{[(2-氯-1,3-噻唑-5-基)甲基](2-氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115644)、4-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](2-氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115644)、4-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](2,2-二氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115644)、4-{[(6-氯-5-氟吡啶-3-基)甲基](甲基)胺基}}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115643)、4-{[(5,6-二氯吡啶-3-基)甲基](2-氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115646)、4-{[(6-氯-5-氟吡啶-3-基)甲基](环丙基)胺基}呋喃-2(5H)酮(已知来自WO2007/115643)、4-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](环丙基)胺基}呋喃-2(5H)酮(已知来自EP-A-0539588)、4-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](甲基)胺基}呋喃-2(5H)酮(已知来自EP-A-0539588)、[(6-氯吡啶-3-基)甲基](甲基)氧化-λ4-亚磺酰基氰胺(已知来自WO2007/149134)、[1-(6-氯吡啶-3-基)乙基](甲基)氧化-λ4-亚磺酰基氰胺(已知来自WO2007/149134)以及非对映异构体(A)和(B)
(已知来自WO2007/149134)、[(6-三氟甲基吡啶-3-基)甲基](甲基)氧化-λ4-亚磺酰基氰胺(已知来自WO2007/095229)、或[1-(6-三氟甲基吡啶-3-基)乙基](甲基)氧化-λ4-亚磺酰基氰胺(已知来自WO2007/149134)及其非对映异构体(C)和(D)，名为Sulfoxaflor
(同样已知来自WO2007/149134)。
本发明的组合物含有一种生物控制剂以及至少一种选自组(I1)至组(I22)的昆虫防治剂。
在一个优选的实施例中，本发明的组合物含有坚强芽孢杆菌(B.firmus)菌株CNCMI-1582孢子的一种生物控制剂以及至少一种选自组(I1)至组(I22)所列举的昆虫防治剂的杀真菌剂。
在另一个优选的实施例中，本发明组合物含有蜡状芽孢杆菌(B.cereus)菊株CNCMI-1562孢子的一种生物控制剂以及至少一种选自组(I1)至组(I22)所列举的昆虫防治剂的杀真菌剂。
在一个优选的实施例中，所述昆虫防治剂选自：噻虫胺、吡虫啉、噻虫啉、噻虫嗪、啶虫脒、甲硫威、硫双威、高效氟氯氰菊酯、氟氯氰菊酯、溴氰菊酯、七氟菊酯、茚虫威、多杀霉素、乙基多杀霉素、氟虫腈、乙虫腈、甲氨基阿维菌素苯甲酸酯盐、阿维菌素、螺螨酯、螺甲螨酯、螺虫乙酯、氟苯虫酰胺、(R),(S)-3-N1-{2-甲基-4-[1,2,2,2-四氟-1-(三氟甲基)乙基]苯基}N2-(1-甲基-2-甲磺酰乙基)邻苯二甲酰胺、氯虫酰胺(Rynaxypyr)、或氰虫酰胺(Cyazypyr)、sulfoxaflor、
在另一个优选的实施例中，该昆虫防治剂为四氟苯菊酯。
在另一个优选的实施例中，该昆虫防治剂选自下述组：4-{[(6-溴吡啶-3-基)]甲基(2-氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自2007/115644)、4-{[(6-氟吡啶-3-基)甲基](2,2-二氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自WO2007/115644)、4-{[(2-氯-1,3-噻唑-5-基)甲基](2-氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115644)、4-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](2-氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115644)、4-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](2,2-二氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115644)、4-{[(6-氯-5-氟吡啶-3-基)甲基](甲基)胺基}}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115643)、4-{[(5,6-二氯吡啶-3-基)甲基](2-氟乙基)胺基}}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115646)、4-{[(6-氯-5-氟吡啶-3-基)甲基](环丙基)胺基}呋喃-2(5H)酮(已知来自WO2007/115643)、4-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](环丙基)胺基}呋喃-2(5H)酮(已知来自EP-A-0539588)、4-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](甲基)胺基}呋喃-2(5H)酮(已知来自EP-A-0539588)。
特别优选的昆虫防治剂为噻虫胺、吡虫啉、噻虫啉、噻虫嗪和啶虫脒5。
更优选的昆虫防治剂为吡虫啉。
另一个更优选的昆虫防治剂噻虫啉。
另一个更优选的昆虫防治剂噻虫嗪。
另一个更优化的昆虫防治剂啶虫脒。
最优选的昆虫防治剂为噻虫胺。
美国专利6,753,296中进一步描述了新烟碱化合物除具有杀虫活性之外，还具有提高植物生长，包括根系发育的能力。
在另一个替代实施例中，本发明组合物任选包含被用于结合生物控制剂以及至少一种上述的非杀线虫昆虫防治剂的具有直接杀线虫活性的另外一种化合物。合适的杀线虫昆虫防治剂包括抗生素杀线虫剂，如阿维菌素；胺基甲酸酯杀线虫剂，如苯菌灵、克百威、丁硫克百威和除线威；胺基甲酸肟酯杀线虫剂，如棉铃威、涕灭威、涕灭砜威、杀线威；有机磷杀线虫剂，如diamidafos、苯线磷、丁硫环磷、磷胺、硫线磷、毒死蜱、除线磷、乐果、灭线磷、丰索磷、噻唑啉、速杀硫磷、isamidofos、氯唑磷、灭多威、甲拌磷、phosphocarb、特丁硫磷、禾草丹、虫线磷、三唑磷、imicyafos和四甲磷。其它适合的杀线虫昆虫控制剂包括乙酰虫腈(acetoprole)、benclothiaz、氯化苦、棉隆、二溴氯丙烷、二氯异丙醚、1,2-二氯丙烯、1,3-二氯丙烯、糠醛、甲基碘、威百亩(metam)、溴甲烷、甲基异硫氰酸甲酯和二甲苯酚。
本发明组合物中所述至少一种生物控制剂的用量可视最终制剂以及处理的植物或植物种子大小和类型而定。组合物中，该至少一种生物控制剂的用量优选为约占制剂总重量的1％～80％(w/w)。更为优选的是，组合物中，该至少一种生物控制剂的用量约为占制剂总重量的5％～60％(w/w)，最优选为10％～50％(w/w)。
生物控制剂与昆虫防治剂或杀昆虫剂的比例通常在100:1～1：100之间。较佳的比例为50:1～1:50之间。这些比例范围是根据生物控制剂的孢子制剂含有1011/g孢子设定的。若孢子制剂密度改变时，则根据上述所列举的比例范围改变其比例。100:1的比例是指100重量份的生物控制剂的孢子制剂对应1重量份的昆虫防治剂或杀真菌剂。
根据本发明的组合物还包括一或多种杀真菌剂。所述杀真菌剂可选自列表(F1)至(F14)：
(F1)核酸合成抑制剂，如苯霜灵、苯霜灵-M、乙嘧酚磺酸酯、clozylacon、二甲嘧酚、乙嘧酚、呋霜灵、噁霉灵、甲霜灵、甲霜灵-M、乙氧呋霜灵,噁霜灵和噁喹酸。
(F2)有丝分裂和细胞分裂抑制剂，如苯菌灵、多菌灵、chlorfenazole、乙霉威、噻唑菌胺、麦穗宁、戊菌隆、噻菌灵、硫菌灵、甲基硫菌灵和苯酰菌胺。
(F3)呼吸抑制剂，如作为CI呼吸抑制剂的二氟林；作为CII呼吸抑制剂的bixafen、啶酰菌胺、萎秀灵、甲呋酰胺、氟酰胺、氟吡菌酰胺、福拉比、拌种胺、isopyrazam(9R-component),isopyrazam(9S-component),灭锈胺、氧化萎锈灵、吡唑菌胺、噻呋酰胺；作为CIII呼吸抑制剂的吲唑磺菌胺、嘧菌酯、氰霜唑、嘧菌胺、烯肟菌胺、
唑菌酮、咪唑菌酮、氟嘧菌酯、醚菌酯、苯氧菌胺、肟醚菌胺、啶氧菌酯、吡唑醚菌酯、pyribencarb、肟菌酯。
(F4)可做为解偶联剂的化合物，如乐杀螨、消螨普、氟啶胺和meptyldinocap。
(F5)ATP生成抑制剂，如三苯基乙酸锡、三苯锡氯、毒菌锡和噻唑菌胺。
(F6)氨基酸和/或蛋白质生物合成抑制剂，如andoprim、杀稻瘟菌素-S、嘧菌环胺、春雷霉素、春雷霉素盐酸盐、嘧菌胺和嘧霉胺。
(F7)信号转导抑制剂，如拌种咯、咯菌腈和喹氧灵。
(F8)脂质和膜合成抑制剂，如联苯、乙菌利、敌瘟磷、土菌灵、iodocarb、异稻瘟净、异菌脲、稻瘟灵、腐霉利,霜霉威、霜霉威盐酸盐、吡菌磷、甲基立枯磷和乙菌烯核利。
(F9)麦角固醇合成抑制剂，如aldimorph,氧环唑、联苯三唑醇、糠菌唑、环丙唑醇、苄氯三唑醇、苯醚甲环唑、烯唑醇、M-烯唑醇、十二环吗啉、十二环吗啉醋酸盐、氟环唑、乙环唑、氯苯嘧啶醇、腈苯唑、环线菌胺、苯锈啶、丁苯吗啉、氟喹唑、呋嘧醇、氟硅唑、粉唑醇、呋菌唑、呋醚唑、己唑醇、抑霉唑,抑霉唑盐酸盐、亚唑胺、种菌唑、叶菌唑、腈菌唑、萘替芬、氟苯嘧啶醇、噁咪唑、多效唑、稻瘟酯、戊菌唑、哌丙灵、咪鲜胺、丙环唑、丙硫菌唑、稗草丹、啶斑肟、quinconazole、硅氟唑、螺环菌胺、戊唑醇、特比萘酚、四呋醚唑、三唑酮、三唑醇、十三吗啉、氟菌唑、嗪氨灵、灭菌唑、烯效唑、viniconazole和伏力康唑。
(F10)细胞壁合成抑制剂，如苯噻菌胺、烯酰吗啉、氟吗啉、缬霉威、双炔酰菌胺、多抗霉素、多氧霉素、硫菌威、井冈霉素和valiphenal。
(F11)黑色素生物合成抑制剂，如环丙酰亚胺、双氯氰菌胺、稻瘟酰胺、四氯苯酞、咯喹酮和三环唑。
(F12)能诱导宿主防御的化合物，如阿拉酸式苯-S-甲基、烯丙苯噻唑和噻酰菌胺。
(F13)具有多作用位点的化合物，像例如波尔多液、敌菌丹、克菌丹、百菌清、环烷酸铜、氧化铜、氯氧化铜；铜制剂如氢氧化铜、硫酸铜、苯氟磺胺、二氰蒽醌、多果定、多果定游离碱、福美铁、fluorofolpet、灭菌丹、双胍辛胺、双胍辛胺醋酸盐、双胍三辛烷、双胍三辛烷基苯磺酸盐、双胍辛胺乙酸盐、代森锰铜、代森锰锌、代森锰、代森联、代森联锌、喹啉铜、普罗帕脒、丙森锌、硫和硫制剂包括多硫化钙、福美双、甲苯氟磺胺、代森锌和福美锌。
(F14)其它化合物如2,3-二丁基-6-氯噻吩[2,3-d]吡啶-4(3H)-酮、(2Z)-3-胺基-2-氰基-3-苯丙基-2-烯酸乙酯、BYF14182：(N-[2-(1,3-二甲基丁基)苯基]-5-氟-1,3-二甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺)、N-{2-[1,1'-二(环丙基)-2-基]苯基}-3-(二氟甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺、3-(二氟甲基)-1-甲基-N-(3',4',5'-三氟二苯基-2-基-1H-吡唑-4-甲酰胺、3-(二氟甲基)-N-[4-氟-2-(1,1,2,3,3,3-六氟丙氧基)苯基]-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺、(2E)-2-(2-{[6-(3-氯-2-甲基苯氧基)-5-氟嘧啶-4-基]氧基}苯基)-2-(甲氧亚胺基)-N-甲基乙酰胺、(2E)-2-{2-[({[(2E,3E)-4-(2,6-二氯苯基)丁基-3-烯-2-亚基]胺基}氧基)甲基]苯基}-2-(甲氧亚胺基)-N-甲基乙酰胺、2-氯-N-(1,1,3-三甲基-2,3-二氢-1H-茚基-4-基)吡啶-3-甲酰胺、N-(3-乙基-3,5,5-三甲基环己基)-3-(甲酰胺基)-2-羟基苯甲酰胺、5-甲氧基-2-甲基-4-(2-{[({(1E)-1-[3-(三氟甲基)苯基]亚乙基}胺基)氧基]甲基}苯基)-2,4-二氢-3H-1,2,4-三唑-3-酮、(2E)-2-(甲氧亚胺基)-N-甲基-2-(2-{[({(1E)-1-[3-(三氟甲基)苯基]亚乙基}胺基)氧基]甲基}苯基)乙酰胺、(2E)-2-(甲氧亚胺基)-N-甲基-2-{2-[(E)-({1-[3-(三氟甲基)苯基]乙氧基}亚胺基)甲基]苯基}乙酰胺、(2E)-2-{2-[({[(1E)-1-(3-{[(E)-1-氟-2-苯乙烯基]氧基}苯基)亚乙基]胺基}氧基)甲基]苯基}-2-(甲氧亚胺基)-N-甲基乙酰胺,1-(4-氯苯基)-2-(1H-1,2,4-三唑-1-基)环庚醇、1-(2,2-二甲基-2,3-二氢-1H-茚-1-基)-1H-咪唑-5-甲酸甲酯、N-乙基-N-甲基-N'-{2-甲基-5-(三氟甲基)-4-[3-(三甲基甲硅烷基)丙氧基]苯基}亚胺基甲酰胺、N'-{5-(二氟甲基)-2-甲基-4-[3-(三甲基甲硅烷基)丙氧基]苯基}-N-乙基-N-甲基亚胺基甲酰胺、O-{1-[(4-甲氧基苯氧基)甲基]-2,2-二甲基丙基}1H-咪唑-1-硫代甲酸酯、N-[2-(4-{[3-(4-氯苯基)丙-2-炔-1-基]氧基}-3-甲氧苯基)乙基]-N2-(甲基磺酰基)缬胺酰胺、5-氯-7-(4-甲基哌啶-1-基)-6-(2,4,6-三氟苯基)[1,2,4]三唑[1,5-a]嘧啶、5-胺基-1,3,4-噻二唑-2-硫醇、三乙膦酸霜霉威、1-[(4-甲氧苯氧基)甲基]-2,2-二甲基丙基1H-咪唑-1-甲酸酯、1-甲基-N-[2-(1,1,2,2-四氟乙氧基)苯基]-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酰胺、2,3,5,6-四氯-4-(甲基磺酰基)吡啶、2-丁氧基-6-碘-3-丙基-4H-色烯-4-酮、2-苯基苯酚和盐、3-(二氟甲基)-1-甲基-N-[2-(1,1,2,2-四氟乙氧基)苯基]-1H-吡唑-4-甲酰胺、3,4,5-三氯吡啶-2,6-二腈、3-[5-(4-氯苯基)-2,3-二甲基异噁唑烷-3-基]吡啶、3-氯-5-(4-氯苯基)-4-(2,6-二氟苯基)-6-甲基哒嗪、4-(4-氯苯基)-5-(2,6-二氟苯基)-3,6-二甲基哒嗪、喹啉-8-醇、喹啉-8-醇硫酸盐(2:1)(盐)、5-甲基-6-辛基-3,7-二氢[1,2,4]噻唑[1,5-a]嘧啶-7-胺、5-乙基-6-辛基-3,7-二氯[1,2,4]噻唑[1,5-a]嘧啶-7-胺、苯噻硫氰、bethoxazin、巴西霉素、香芹酮、灭螨猛、地茂散、硫杂灵杀菌剂、环氟菌胺、霜脲氰、cyprosulfamide、棉隆、咪菌威、双氯酚、哒菌酮、氯硝胺、野燕枯、野燕枯甲基硫酸盐、二苯胺、ecomate、嘧菌腙、flumetover、氟吡菌胺、氟氯菌核利、磺菌胺、flutianil、三乙膦酸铝、三乙膦酸钙、三乙膦酸钠、六氯苯、irumamycin、异噻菌胺(isotianil)、磺菌威、甲基(2E)-2-{2-[({环丙基[(4-甲氧苯基)亚胺基]甲基}硫基)甲基]苯基}-3-甲氧基丙烯酸酯、甲基异硫氰酸酯、苯菌酮、(5-溴-2-甲氧基-4-甲基吡啶-3-基)(2,3,4-三甲氧基-6-甲基苯基)-甲酮、灭粉霉素、甲磺菌胺、N-(4-氯苄基)-3-[3-甲氧基-4-丙基-2-炔-1-基氧基)苯基]丙酰胺、N-[(4-氯苯基)(氰基)甲基]-3-[3-甲氧基-4-(丙-2-炔-1-基氧基)苯基]丙酰胺、N-[(5-溴-3-氯吡啶-2-基)甲基]-2,4-二氯吡啶-3-甲酰胺、N-[1-(5-溴-3-氯吡啶-2-基)乙基]-2,4-二氯吡啶-3-甲酰胺、N-[1-(5-溴-3-氯吡啶-2-基)乙基]-2-氟-4-碘吡啶-3-甲酰胺、N-{(Z)-[(环丙基甲氧基)亚胺基][6-(二氟甲氧基)-2,3-二氟苯基]甲基}-2-苯基乙酰胺、N-{(E)-[(环丙基甲氧基)亚胺基][6-(二氟甲氧基)-2,3-二氟苯基]甲基}-2-苯基乙酰胺、纳他霉素、二甲基二硫代胺基甲酸镍、酞菌酯、辛噻酮、oxamocarb、oxyfenthiin、五氯酚和盐、吩嗪-1-甲酸、苯醚菊酯、亚磷酸和其盐、霜霉威乙膦酸盐、propanosine-钠、丙氧喹啉、pyrrolnitrine、五氯硝基苯、S-丙基-2-烯-1-基5-胺基-2-(1-甲基乙基)-4-(2-甲基苯基)-3-氧代-2,3-二氢-1H-吡唑-1-硫代甲酸酯、叶枯酞、四氯硝基苯、咪唑嗪、水杨菌胺、5-氯-N'-苯基-N'-丙基-2-炔-1-基噻吩-2-磺酰肼和氰酸铵。
或者，根据本发明的组合物可包含一种生物控制剂和至少一种选自组(F1)至(F14)的杀真菌剂。
根据本发明的组合物可进一步包含一种生物控制剂，至少一种选自组(I1)至(I22)的昆虫防治剂和至少一种选自(F1)至(F14)的杀真菌剂。
在一个优选的实施例中，杀真菌剂选自下述物质：
嘧菌酯、啶酰菌胺、BYF14182:(N-[2-(1,3-二甲基丁基)苯基]-5-氟-1,3-二甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺),噻唑菌胺,萎锈灵、咪唑菌酮、咯菌腈、氟吡菌胺、氟嘧菌酯、氟喹唑、粉唑醇、种菌唑、异菌脲、异噻菌胺、精甲霜灵、甲霜灵、戊菌隆、咪鲜胺、丙硫菌唑、吡唑醚菌酯、嘧霉胺、硅噻菌胺、戊唑醇、福美双、甲苯氟磺胺、三唑醇、咪唑嗪、肟菌酯、杀铃脲、灭菌唑。
在一个优选的实施例中，杀真菌剂为N-{2-[1,1'-双(环丙基)-2-基]苯基}-3-(二氟甲基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺。
根据本发明，优选的组合物包含坚强芽孢杆菌(B.firmus)菌株CNCMI-1582孢子作为生物控制剂和至少一种选自组F1)至(F14)的杀真菌剂。
在另一个优选的实施例中，根据本发明的组合物包含蜡状芽孢杆菌(B.cereus)菌株CNCMI-1562孢子作为生物控制剂和至少一种选自组F1)至(F14)的杀真菌剂。
根据本发明，特别优选的组合物包含坚强芽孢杆菌(B.firmus)菌株CNCMI-1582孢子作为生物控制剂和至少一种选自下述的杀真菌剂：嘧菌酯、啶酰菌胺、BYF14182、噻唑菌胺,萎锈灵、咪唑菌酮、咯菌腈、氟吡菌胺、氟嘧菌酯、氟喹唑、粉唑醇、种菌唑、异菌脲、异噻菌胺、精甲霜灵、甲霜灵、戊菌隆、咪鲜胺、丙硫菌唑、吡唑醚菌酯、嘧霉胺、硅噻菌胺、戊唑醇、福美双、甲苯氟磺胺、三唑醇、咪唑嗪、肟菌酯、杀铃脲、灭菌唑。
根据本发明，最优选的杀真菌剂为：氟嘧菌酯、种菌唑、甲霜灵、精甲霜灵、丙硫菌唑、吡唑醚菌酯、肟菌酯、BYF14182、嘧菌酯。
包含一种生物控制剂和至少一种昆虫控制剂的优选的组合物为选自(C1)或(C2)或(C1-9)至(C1-10)的任意组合：
(C1)组合物，其中生物控制剂为坚强芽孢杆菌(B.firmus)菌株CNCMI-1582孢子，昆虫防治剂选自：噻虫胺、吡虫啉、噻虫啉、噻虫嗪、啶虫脒、甲硫威、硫双威、高效氟氯氰菊酯、氟氯氰菊酯、溴氰菊酯、七氟菊酯、茚虫威、多杀霉素、乙基多杀霉素、氟虫腈、乙虫腈、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐、阿维菌素、螺螨酯、螺甲螨酯、螺虫乙酯、氟苯虫酰胺、(R),(S)-3-氯-N1-{2-甲基-4-[1,2,2,2-四氟-1-(三氟甲基)乙基]苯基}N2-(1-甲基-2-甲磺酰乙基)邻苯二甲酰胺、氯虫酰胺(Rynaxypyr)、或氰虫酰胺(Cyazypyr)、sulfoxaflor、4-{[(6-溴吡啶-3-基)甲基](2-氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自2007/115644)、4-{[(6-氟吡啶-3-基)甲基](2,2-二氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自WO2007/115644)、4-{[(2-氯-1,3-噻唑-5-基)甲基](2-氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115644)、4-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](2-氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115644)、4-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](2,2-二氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115644)、4-{[(6-氯-5-氟吡啶-3-基)甲基](甲基)胺基}}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115643)、4-{[(5,6-二氯吡啶-3-基)甲基](2-氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115646)、4-{[(6-氯-5-氟吡啶-3-基)甲基](环丙基)胺基}呋喃-2(5H)酮(已知来自WO2007/115643)、4-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](环丙基)胺基}呋喃-2(5H)酮(已知来自EP-A-0539588)、4-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](甲基)胺基}呋喃-2(5H)酮(已知来自EP-A-0539588)、[(6-氯吡啶-3-基)甲基](甲基)氧化-λ4-亚磺酰基氰胺(已知来自WO2007/149134)、[1-(6-氯吡啶-3-基)乙基](甲基)氧化-λ4-亚磺酰基氰胺(已知来自WO2007/149134)以及非对映异构体(A)和(B)。
(C2)组合物，其中生物控制剂为坚强芽孢杆菌(B.firmus)菌株CNCMI-1582孢子，昆虫防治剂选自：噻虫胺、吡虫啉imidacloprid、噻虫啉、噻虫嗪、啶虫脒、甲硫威、硫双威、高效氟氯氰菊酯、氟氯氰菊酯、溴氰菊酯、七氟菊酯、茚虫威、多杀霉素、乙基多杀霉素、氟虫腈、乙虫腈、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐、阿维菌素、螺螨酯、螺甲螨酯、螺虫乙酯、氟苯虫酰胺、(R),(S)-3-氯-N1-{2-甲基-4-[1,2,2,2-四氟-1-(三氟甲基)乙基]苯基}N2-(1-甲基-2-甲磺酰乙基)邻苯二甲酰胺、氯虫酰胺(Rynaxypyr)、或氰虫酰胺(Cyazypyr)、sulfoxaflor、4-{[(6-溴吡啶-3-基)甲基](2-氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自2007/115644)、4-{[(6-氟吡啶-3-基)甲基](2,2-二氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自WO2007/115644)、4-{[(2-氯-1,3-噻唑-5-基)甲基](2-氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115644)、4-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](2-氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115644)、4-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](2,2-二氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115644)、4-{[(6-氯-5-氟吡啶-3-基)甲基](甲基)胺基}}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115643)、4-{[(5,6-二氯吡啶-3-基)甲基](2-氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115646)、4-{[(6-氯-5-氟吡啶-3-基)甲基](环丙基)胺基}呋喃-2(5H)酮(已知来自WO2007/115643)、4-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](环丙基)胺基}呋喃-2(5H)酮(已知来自EP-A-0539588)、4-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](甲基)胺基}呋喃-2(5H)酮(已知来自EP-A-0539588)、[(6-氯吡啶-3-基)甲基](甲基)氧化-λ4-亚磺酰基氰胺(已知来自WO2007/149134)、[1-(6-氯吡啶-3-基)乙基](甲基)氧化-λ4-亚磺酰基氰胺(已知来自WO2007/149134)以及非对映异构体(A)和(B)。
(C1-1)组合物，其中生物控制剂为坚强芽孢杆菌(B.firmus)菌株CNCMI-1582孢子，昆虫防治剂由噻虫胺组成。
(C1-2)组合物，其中生物控制剂为坚强芽孢杆菌(B.firmus)菌株CNCMI-1582孢子，昆虫防治剂由吡虫啉组成。
(C1-3)组合物，其中生物控制剂为坚强芽孢杆菌(B.firmus)菌株CNCMI-1582孢子，昆虫防治剂由噻虫胺和吡虫啉组成。
(C1-4)组合物，其中生物控制剂为坚强芽孢杆菌(B.firmus)菌株CNCMI-1582孢子，昆虫防治剂由噻虫胺和高效氟氯氰菊酯组成。
(C1-5)组合物，其中生物控制剂为坚强芽孢杆菌(B.firmus)菌株CNCMI-1582孢子，昆虫防治剂由噻虫嗪和七氟菊酯组成。
(C1-6)组合物，其中生物控制剂为坚强芽孢杆菌(B.firmus)菌株CNCMI-1582孢子，昆虫防治剂由噻虫胺和吡虫啉组成。
(C1-7)组合物，其中生物控制剂为坚强芽孢杆菌(B.firmus)菌株CNCMI-1582孢子，昆虫防治剂为由硫双威和吡虫啉组成或为硫双威和噻虫胺组成。
(C1-8)组合物，其中生物控制剂为坚强芽孢杆菌(B.firmus)菌株CNCMI-1582孢子，昆虫防治剂为由噻虫胺和氟虫腈组成或为氟虫腈和吡虫啉组成。
(C1-9)组合物，其中生物控制剂为坚强芽孢杆菌(B.firmus)菌株CNCMI-1582孢子，昆虫防治剂由以下组成：
a)氯虫酰胺和
b)吡虫啉或噻虫胺或噻虫嗪或噻虫啉或啶虫脒或烯啶虫胺或sulfoxaflor或选自下组的化合物：4-{[6-溴吡啶-3-基))甲基](2-氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自2007/115644)、4-{[(6-氟吡啶-3-基)甲基](2,2-二氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自WO2007/115644)、4-{[(2-氯-1,3-噻唑-5-基)甲基](2-氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115644)、4-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](2-氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115644)、4-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](2,2-二氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115644)、4-{[(6-氯-5-氟吡啶-3-基)甲基](甲基)胺基}}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115643)、4-{[(5,6-二氯吡啶-3-基)甲基](2-氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115646)、4-{[(6-氯-5-氟吡啶-3-基)甲基](环丙基)胺基}呋喃-2(5H)酮(已知来自WO2007/115643)、4-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](环丙基)胺基}呋喃-2(5H)酮(已知来自EP-A-0539588)、4-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](甲基)胺基}呋喃-2(5H)酮(已知来自EP-A-0539588)、[(6-氯吡啶-3-基)甲基](甲基)氧化-λ4-亚磺酰基氰胺(已知来自WO2007/149134)、[1-(6-氯吡啶-3-基)乙基](甲基)氧化-λ4-亚磺酰基氰胺(已知来自WO2007/149134)以及非对映异构体(A)和(B)。
(C1-10)组合物，其中生物控制剂为坚强芽孢杆菌(B.firmus)菌株CNCMI-1582孢子，昆虫防治剂由以下组成：
a)氰虫酰胺和
b)吡虫啉或噻虫胺或噻虫嗪或噻虫啉或啶虫脒或烯啶虫胺或sulfoxaflor或选自下组的化合物：4-{[6-溴吡啶-3-基)甲基](2-氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自2007/115644)、4-{[(6-氟吡啶-3-基)甲基](2,2-二氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自WO2007/115644)、4-{[(2-氯-1,3-噻唑-5-基)甲基](2-氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115644)、4-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](2-氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115644)、4-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](2,2-二氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115644)、4-{[(6-氯-5-氟吡啶-3-基)甲基](甲基)胺基}}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115643)、4-{[(5,6-二氯吡啶-3-基)甲基](2-氟乙基)胺基}呋喃-2(5H)-酮(已知来自于WO2007/115646)、4-{[(6-氯-5-氟吡啶-3-基)甲基](环丙基)胺基}呋喃-2(5H)酮(已知来自WO2007/115643)、4-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](环丙基)胺基}呋喃-2(5H)酮(已知来自EP-A-0539588)、4-{[(6-氯吡啶-3-基)甲基](甲基)胺基}呋喃-2(5H)酮(已知来自EP-A-0539588)、[(6-氯吡啶-3-基)甲基](甲基)氧化-λ4-亚磺酰基氰胺(已知来自WO2007/149134)、[1-(6-氯吡啶-3-基)乙基](甲基)氧化-λ4-亚磺酰基氰胺(已知来自WO2007/149134)以及非对映异构体(A)和(B)。
根据本发明的进一步实施例包含组合物，其中，在任意的组合物(C1)、(C2)、(C1-1)至(C1-10)中的生物控制剂，而非坚强芽孢杆菌(B.firmus)是B组的任意成员。
在进一步实施例中，本发明公开的组合物中可包括异黄酮。异黄酮是主要存在于大豆植物家族成员中的植物化合物。其基于简单的双酚环结构，在如Calsonetal.,1980,JournalofChromotography，198,193～197和美国专利7033621中有所描述，这些内容以参阅的方式并入于此。用于本发明成分的异黄酮示例包括，但不限于，金雀异黄酮、鹰嘴豆芽素A、10种芒柄花素、大豆黄酮.黄豆黄素、橙皮素、柚皮素、查尔酮、香豆素、Ambiol(2-甲基-4-[二甲基胺甲基]-5-氢-)、抗坏血酸盐和红车轴草素以及其盐和酯。优选的异黄酮为芒柄花素、橙皮素、柚皮素及其它们的盐、酯和混合物。
在一个优选的实施例中，异黄酮与组合物(C1)、(C2)、(C1-1)至(C1-10)混合。
特别优选的异黄酮为芒柄花素的盐或其游离酸。
在进一步的实施例中，本发明所公开的组合物还可包含接种剂，更为具体的是一种土壤接种剂。该接种剂的示例为根瘤菌属、假单胞菌属、固氮螺菌属、固氮菌属、链霉菌属、Burkholdia、农杆菌属、内生或外生泡囊丛枝菌根的细菌。
在一个优选的实施例中，接种剂与组合物(C1)、(C2)、(C1-1)至(C1-10)混合。
本发明还提供处理植物的方法，通过施用有效量的任何一种常规制剂至土壤(即浇灌)、或至部分植物(即浇透)或至播种前的种子(即种子包埋或拌种)。常规制剂包括溶液(SL)、乳化浓缩液(EC)、可湿性粉剂(WP)、悬浮剂(SC和FC)，可湿性粉剂(WP)，可溶性粉剂(SP)、粒剂(GR)、悬浮乳化浓缩液(SE)、浸润过活性化合物的天然或合成材料，以及极细控释胶囊。在一个具体实施例中，昆虫防治剂和生物控制剂调配成即用型制剂或使用时混合的粉末。在任一具体的实施例中，该粉末可于播种前或播种时拌入土壤中。在一个可选择地实施例中，生物控制剂或昆虫防治剂或其组合均为液体制剂，并可在处理时相互混合。本领域技术人员理解，可根据组合物的最终制剂以及被处理的植物或种子的大小确定组合物的有效用量。
根据最终制剂以及施用方法，本发明组合物还可加入一或多种合适的添加剂。本发明组合物可添加粘合剂如羧甲基纤维素以及粉末型、颗粒型或乳胶型天然或合成聚合物，如阿拉伯胶、几丁质、聚乙烯醇和聚醋酸乙酸酯及天然磷脂如脑磷脂和卵磷脂以及合成磷脂。
在一个优选的实施例中，所述组合物被配制成单一的稳定溶液或乳液或悬浮液。就溶液而言，将活性化合物(即昆虫防治剂)在加入生物控制剂前溶解于溶剂中。合适的液体溶剂包括石油基芳香族化合物，如二甲苯、甲苯或烷基萘；脂肪烃如环己烷或石蜡，如石油分馏物、矿物和植物油；醇如丁醇或甘醇及其醚和酯；酮如甲乙酮、甲基异丁基酮或环己酮；强极性溶剂例如二甲基甲酰胺和二甲亚砜。就乳液或悬浮液而言，液体介质为水。在一个具体的实施例中，将昆虫防治剂和生物控制剂分别悬浮于液体内，并在使用时混合。在悬浮液的优选实施例中，昆虫防治剂和生物控制剂被混合制成具有至少两年保质期的即用型制剂。所述液体组合物可在种子发芽前撒入沟内，或利用各种技术包括但不限于滴灌、喷灌、土壤灌注或土壤漫灌而使土壤直接接触根部。
可选择性地加入稳定剂和缓冲剂，包括碱金属和碱土金属盐、有机酸，如柠檬酸和抗坏血酸、无机酸，如盐酸或硫酸。还可加入生物灭杀剂包括甲醛或甲醛释放剂以及苯甲酸衍生物如对羟基苯甲酸。
在一个具体实施方案中，所述液体或固体组合物进一步含有能保护种子免受选择性除草剂有害效应的功能助剂如活性炭、养分(肥料)以及能改善发芽和产物品质或其组合的物质。
在一个较为优选的实施例中，本发明的组合物被配制成种子处理剂，该种子处理剂含有至少一种昆虫防治剂和至少一种生物控制剂。根据本发明，利用特别设计和制造的处理装置用来准确、安全和有效地将种子涂布上种子处理剂，通过混合、喷洒或其组合的常用方法将种子基本均匀的包埋上一或多层本发明所述的组合物。所述处理装置可使用多种包埋技术，如旋转包埋技术、滚筒式包埋技术、流态化床技术、喷动床技术、旋转喷雾技术或各种技术的组合。根据本发明所述的液体种子处理剂当移到通过喷雾模块时，可通过旋转“喷雾器”盘或喷嘴将该种子处理剂均匀地涂布于种子上。优选的是，将该种子再混合或滚动一段时间以获得附加的处理分布和干燥。该种子可在种子包埋前进行预处理或不进行预处理，目的是增加发芽和出土的一致性。在另一个具体的实施例中，将干粉剂添加到滚动的种子上，与种子混合直到分布均匀为止。
可通过批次或连续包埋步骤对种子进行包埋。在一个连续包埋的实施例中，连续流动设备能同时测定种子流和种子处理产品。滑动门、锥和喷嘴、种子轮或称重装置(带或分流器)可调节种子流。一旦测定出经过处理设备的种子流速，可校正种子处理的种子流速，从而当种子流经种子处理设备时可输送预定剂量至该种子。此外，可利用计算机系统监控涂布机输入的种子，因此可维持适当种子量的恒定流速。
在批次包埋实施例中，用批次处理设备称出预定量的种子并将该种子放入密封处理舱内或筒内，然后往里再加入对应量的种子处理剂。然后从处理舱内倒出这一批次，以准备下一批次的处理。利用电脑控制系统，可自动、连续重复地进行批次处理作业。
在任一实施例中，可通过一个程式化逻辑控制器操作该种子包埋机器，从而实现无人即可开启和停止各种设备。该系统的元件可通过多种渠道市售获得，如明尼苏达州Shakopee市的Gustafson设备公司。
可将各种添加剂加入到含有本发明组合物的种子处理剂中。可加入结合剂，优选为对被包埋的种子无毒副作用的天然或人工粘性聚合物。可使用任何一种着色剂，包括有机发色团，分为亚硝基、硝基；偶氮基，包括单偶氮、双偶氮或多偶氮；二苯甲烷；三芳基甲烷；氧杂蒽；次甲基；吖啶；噻唑；噻嗪；吲达胺；靛酚；吖嗪；噁嗪；蒽醌和酞菁染料。可被加入的其它化合物包括微量元素，如铁、锰、硼、铜、钴、钼和锌盐。可利用聚合物或其它除尘剂使处理剂存留在种子表面。
其它传统的种子处理添加剂包括但不限于包埋剂、湿润剂、缓冲剂和多糖。种子处理制剂可加入至少一种农业上可接受的载体，如水、固体或干粉末。干粉末可源自各种材料如碳酸钙、石膏、蛭石、滑石粉、腐殖土、活性炭以及各种磷化物。
在一个具体实施方案中，种子包埋组合物可包括至少一种填料，该填料为有机或无机，天然或人工合成的组分，其与活性成分结合后更便于种子包埋。所述填料优选为惰性固体，如粘土、天然或人工合成的硅酸盐、二氧化硅、树脂、石蜡、固体肥料(如铵盐)、天然土壤矿物质如高岭土、粘土、滑石粉、石灰、石英、硅镁土、蒙脱土、膨润土或硅藻土，或人工矿物，如氧化硅、氧化铝或硅酸盐，特别是硅酸铝或锰。
根据本发明，可处理发芽后形成易受线虫和/或病原真菌感染的任何植物的种子。合适的种子包括油菜作物、蔬菜、果实、树木、纤维作物、油料作物、块茎作物、咖啡、花卉、豆类蔬菜、谷物以及其它单子叶和双子叶植物。优选的可包埋的种子作物包括但不限于大豆、花生、烟草、草、小麦、大麦、黑麦、高粱、水稻、油菜、甜菜、向日葵、番茄、辣椒、菜豆、生菜、马铃薯、胡萝卜的种子。最优选的可用本发明组合物包埋的种子为棉花和玉米(甜玉米、大田玉米、籽用玉米或爆米花用玉米)。
通过将本发明的组合物与农业上有效量的至少一种环保的生物控制剂和至少一种昆虫防治剂组合，可意想不到地改善植物整体的活力和产量。这种意想不到的效果归功于生物控制剂的杀线虫和/或杀真菌的特性和昆虫防治剂增加根际重量的特性的组合。
本发明进一步的优点为，本发明制剂的杀线虫剂和/或杀真菌剂活性有协同增效作用，活性超过各自活性化合物之和。根据这种方法，可施用最适量的活性化合物。
本发明组合物的另一个优点为可特别适用于转基因种子，从而使该种子发育成的植物能表达直接对抗虫害和病原的蛋白。用本发明药剂处理此类种子，通过表达如杀虫蛋白，某些害虫和病原已能得到控制，此外，更意外地发现本发明药剂的辅助协同活性可进一步改善对虫害和病原侵害的保护有效性。
本发明的药剂适用于保护已被用于农业、温室、森林、花园或葡萄园内的各种类型的植物种子。特别合适的为玉米、花生、芥菜、油菜、罂粟、橄榄、椰子、可可、大豆、棉花、甜菜(糖用甜菜或饲用甜菜)、水稻、小麦、大麦、燕麦、黑麦、向日葵、甘蔗或烟草的种子。本发明的制剂也适用于处理前述的水果和蔬菜的种子。最为重要的是处理玉米、大豆、棉花、小麦、芥菜和油菜的种子。因此，如编号(1)的组合最适合处理玉米种子。
如前述，用本发明制剂处理转基因种子极具重要。与此有关的植物种子通常含有至少一种控制特定杀虫多肽表达的外源基因。该转基因种子内的外源基因可源自微生物如杆菌、根瘤菌、假单胞菌、沙雷氏菌、木霉菌、棒状杆菌、球囊菌、粘帚霉菌。本发明特别适合用于处理含有至少一种源自芽孢杆菌及其基因产物具有对抗欧洲玉米螟和/或西方玉米根虫活性的外源基因的转基因种子。最优选的外源基因源自苏云金芽孢杆菌(B.thuringiensis)。
令人感到意外地是，在化学昆虫防治剂存在的情况下，该细菌孢子不仅可保留其杀线虫和/或杀真菌活性，还具有增强植物根系定殖的能力。这种增强能力导致其杀线虫和/或杀真菌活性的扩增，因而，生长势得到改善，转而使产量得到提高。
下述非限制性实施例的描述将能更彰显本发明的优点。下述实施例仅为本发明优选的实施例。如下述实施例所述，根据本发明的组合物，通过组合农业上有效量的至少一种环保的生物控制剂和至少一种昆虫防治剂可意外地改善整体植物的生长势和产量。这些意想不到的效果归功于生物控制剂的杀线虫和/或杀真菌特性和昆虫防治剂的根际增强特性的组合。下述实施例中进一步说明，在化学昆虫防治剂存在的情况下，该细菌孢子令人意外得不仅可保留其杀线虫和/或杀真菌活性，还具有增强植物根系定殖的能力。这种增强能力导致其杀线虫和/或杀真菌活性的扩增，因而，生长势得到改善，转而使产量得到提高。
实施例1
设计试验证明某些细菌具有定殖根系的能力。在该特定的试验中，将未经处理的棉花种子和用坚强芽孢杆菌(B.firmus)(一种生物控制剂)处理过的棉花种子种植到经高温灭菌去除天然菌群的土壤中。三周后，收集幼苗。使用无菌水和拍击式均质机处理根系，收集根系细菌。
在含有多种细菌的所有样品中，只有种子经过处理的根系中分离出了坚强芽孢杆菌(B.firmus)。本实验表明，当坚强芽孢杆菌用作种子处理剂时，能在根际生长和繁殖。
实施例2
然后改变收获方式进行实施例1的试验。收获时，取种子经过处理的植物的一半根系，然后再用无菌水中漂洗30s，将全部根系直接置于胰蛋白大豆琼脂培养基上，而非均质机中。在种子未经处理的样本中仍然没有分离到B.firmus，而在种子经过处理的样品未漂洗根系中分离到了B.firmus，其与获得的优势细菌种类不一致。然而，经漂洗的根系中不仅分离到了B.firmus，而且证明了其为优势细菌种类。本实验证明当使用B.firmus作为种子处理剂时，其不仅能在根际生长和繁殖，事实上，还具有定殖根系的能力。还利用其它农业上的有益细菌进行类似的试验以证明根部的定殖作用。
为进一步证明分离自该试验的经漂洗根系的细菌与用于原始处理的菌种和菌株相同，进行500bp的DNA分析和RNA比对。测试结果表明，该收获的细菌不仅为相同菌种，还具有无与来自用于播种处理的细菌无法区分的RiboPrint图案。
实施例3
开展一项可证明通过使用新烟碱类杀虫剂可获得根系增强的试验。在此试验中，用杀真菌剂和三种常用新烟碱类杀虫剂中的一种处理棉花种子。这三种新烟碱类杀虫剂为：吡虫啉(商品名GAUCHO600375mgai/种子)；噻虫胺(商品名PONCHO600375mgai/种子)；噻虫嗪(商品名CRUISER34mgai/种子)。
表1
长度(cm) 表面积(cm2) 体积(cm3) T/F/C
CTRL 66.11b 11.66b 0.17b 47.53b
吡虫啉 92.56a 20.11a 0.35a 85.60a
噻虫胺 88.11a 16.77a 0.29a 93.93a
噻虫嗪 95.01a 17.43a 0.28a 77.17a
CTRL代表对照
种植50颗分别来自四种处理的种子。植物生长于室内、温控的人工气候箱的标准土壤上，未发现明显的疾病或昆虫压力。栽植28天收获幼苗并利用根部分析系统进行分析。其在发芽上无明显的差异。
表1中，通过平均各类别加括号的中数的10次重复分析每种处理40～45棵植物比较长度、表面积、体积和尖端/分支/交叉。基于最小显著差数(LSD)以及误差幅度为0.05，结果表明，虽然在类别和处理间具有差异，但与基础处理相比，在四个类别中，全部新烟碱类杀虫剂均能提供统计学上显著的生长反应，。
实施例4
接下来的试验用来证明通过结合生物杀线虫剂和非杀线虫新烟碱类杀虫剂可获得意想不到的杀线虫效果。用基础杀真菌包和生物杀线虫剂吡虫啉(商品名GAUCHO60062.5gmAI/100kg)，或其组合处理大豆种子(S2743-4RR品种)。然后将该种子种入标准土壤及感染大豆包囊线虫的土壤内。28天后收割植物(～50棵植物/处理/土壤类型)，并通过高度比较和WinRhio根部分析系统分析(长度、表面积、体积、尖端、分支和交叉(T/F/C))。
表2
1.)NI-新烟碱类杀虫剂；2.)NI(SCN)-新烟碱类杀线虫剂w/大豆包囊线虫；3.)BN-生物杀线虫剂；4.)BN(SCN-)-生物杀线虫剂w/大豆包囊线虫；5.)NI/BN-新烟碱类杀虫剂和生物杀线虫剂；6.)NI/BN(SCN)-新烟碱类杀虫剂和生物杀线虫剂w/大豆包囊线虫。
表2的最后一列是比较在大豆包囊线虫压力下，各处理组的平均差异百分比。单独使用上述新烟碱类杀虫剂处理的植物的地上部分和地下部分均造成发育迟滞以及53％的总平均降低。生物杀线虫剂呈现低于半数差异百分比的线虫控制效果，为23％。最佳的整体处理为生物杀线虫剂和杀虫剂的组合，在整体植物发育上只有8％的差异。
单独使用无直接杀线虫活性的杀虫剂似乎可影响及加强生物杀线虫剂的杀线虫活性。
实施例5
当分析产量数据时必须考虑许多因素，由于即使在同一地块，环境条件和有无不同的疾病/线虫/昆虫压力也会存在波动，比较研究比较难以进行。虽然存在可变性，通过足够大量的数据组也可表现出变化模式。
表3列举了来自10个田间试验的平均值，该田间试验用来比较化学杀真菌剂对照(基础处理)和基础处理与生物杀真菌剂、新烟碱类杀虫剂以及生物杀真菌剂和新烟碱类杀虫剂的组合。表3除了植物栽植于已知线虫感染的区域以及使用生物杀线虫剂替代生物杀真菌剂之外，还包括7个来自于类似试验方案的田间试验。17个田间试验包含2007年间两个试验方案的收集的全部数据的平均值。
表3
FC＝杀真菌剂对照；BF＝生物杀真菌剂；BN＝生物杀线虫剂；NI＝新烟碱类杀虫剂
利用计算协同作用的Golby公式的方程式(参考1964年4月11日S.R.Golby的论文“除草剂组合物的协同和拮抗反应的计算”，马里兰州，马里兰大学帕克学院，农学系马里兰农业试验中心，科学论文编号为A1271)，利用单独使用生物控制剂的产量增长率(P1)和单独使用新烟碱类杀虫剂的产量增长率(P2)来计算生物控制剂和新烟碱类杀虫剂组合的预期产量增长率(E)。
E＝P1+P2-(P1(P2)/100)
上述试验使用这一公式计算，该杀真菌试验中，组合处理的预期的增长率为1.99％(然而实际为3.93％)，杀线虫剂试验中，组合处理的预期增长率为4.95(然而实际为5.27％)。
已公开了本发明的主题，显而易见的是可根据本发明可作出许多的改良、取代和变化。应了解本发明除了特定具体实施例之外，可利用其它方式被执行。此类的改良、取代和变化仍属于本发明的范围内。当用于下述的权利要求时，冠词如“一”、“该”等对其后的主词而言均隐含单数或复数的意思。

Claims (12)

1.一种包含坚强芽孢杆菌(Bacillusfirmus)CNCMI-1582孢子和昆虫防治剂的组合物，其中所述昆虫防治剂选自噻虫胺；
其中
基于包含1011个/g孢子的孢子形成细菌的制剂，所述孢子形成细菌与所述昆虫防治剂的比例为100:1-1:100；
所述昆虫防治剂为基于整个制剂的1％w/w至约80％w/w。
2.如权利要求1所述的组合物，还包含一种杀真菌剂。
3.如权利要求2所述的组合物，其中，所述杀真菌剂选自：嘧菌酯、啶酰菌胺、BYF14182、多菌灵、萎锈灵、咪唑菌酮、咯菌腈、氟吡菌胺、氟嘧菌酯、氟喹唑、粉唑醇、种菌唑、异菌脲、异噻菌胺、精甲霜灵、甲霜灵、戊菌隆、咪鲜胺、丙硫菌唑、吡唑醚菌酯、嘧霉胺、硅噻菌胺、戊唑醇、福美双、甲苯氟磺胺、三唑醇、咪唑嗪、肟菌酯、杀铃脲、灭菌唑。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的组合物，还包括异黄酮和土壤接种剂。
5.根据权利要求1-4中任一项所述的组合物，还包括活性成分或生物控制剂。
6.一种处理方法，包括将权利要求1-5中任一项所述的组合物施用至种子、植物或植物生长的土壤或期望植物生长的土壤。
7.一种包含权利要求1-5中任一项所述组合物的种子处理制剂。
8.用于浸润或沟施的包含权利要求1-5中任一项所述组合物的喷雾制剂。
9.处理植物的方法，包括提供至少一种权利要求2-5中任一项所述的组合物并将该组合物施用至植物的步骤，所述组合物包含
a)基于整个制剂，1％w/w至约80％w/w的所述昆虫防治剂或所述杀真菌剂
b)基于包含1011个/g孢子的孢子形成细菌的制剂，所述孢子形成细菌与所述昆虫防治剂或杀真菌剂的比例为100:1-1:100。
10.如权利要求9所述的方法，其中将组合物施用至土壤、种子、果实和/或植物或植物的一部分。
11.如权利要求10所述的方法，其中，所述种子选自大豆、小麦、大麦、水稻、油菜、甜菜、番茄、架豆、胡萝卜、棉花和玉米种子。
12.如权利要求9所述的方法，其中将所述组合物在种子发芽之前施用至土壤和/或直接施用至与植物根部接触的土壤或期望植物生长的土壤。
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