SK284918B6 - Farmaceutický prostriedok obsahujúci prolipozómový prášok, jeho použitie a inhalačné zariadenie na jeho aplikáciu - Google Patents

Abstract

Je opísaný farmaceutický prostriedok obsahujúci prolipozómový prášok, ktorý obsahuje v jedinej fáze diskrétne častice biologicky účinnej zložky spolu s lipidom alebo v zmesi lipidov, ktoré majú teplotu fázového prechodu nižšiu ako 37 °C, a kryštalický a hydrofilný farmaceuticky prijateľný nosič.

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka farmaceutického prostriedku, obsahujúceho prolipozómový prášok, najmä na inhaláciu, a spôsobu jeho použitia.

Doterajší stav techniky

Lipozómy sú membránovité váčky, ktoré sa skladajú z radu koncentrických lipidových dvojvrstiev alternujúcich s hydrofilnými oddeleniami. Môžu byť tvorené z rôznych prírodných a syntetických lipidov, ako sú prírodné alebo syntetické fosfoglycerolipidy, sfingolipidy a digalaktozylglycerolipidy. Jedno z hlavných použití lipozómov bolo použitie ako nosiče na rôzne druhy farmaceutický účinných zložiek, aby zlepšili podávanie liekov a minimalizovali vedľajšie účinky niektorých liečení. Farmaceutický účinné zložky sa môžu inkorporovať do lipozómov buď enkapsuláciou do hydrofilných oddelení lipozómu (ak je účinná zložka rozpustná vo vode), alebo enkapsuláciou do lipidových dvojvrstiev, keď jc účinná zložka lipofiIná.

Jedným z hlavných problémov, ktoré sú spojené s farmaceutickými lipozomálnymi prostriedkami je dlhodobá stabilita. Vodné lipozómové disperzie majú obmedzenú stabilitu ako dôsledok agregácie, straty enkapsulovanej účinnej zložky do vonkajšej fázy, chemickej degradácie účinnej zložky alebo lipidového materiálu atď..

Tieto problémy sa môžu do veľkej miery prekonať, ak sa použije pevný prostriedok. Takýto pevný prostriedok môže obsahovať lipozómový prášok, t. j. vysušenú lipozómovú disperziu alebo prolipozómový prášok.

So spôsobom sušenia lipozómových disperzií je spojené riziko poškodenia lipozómových membrán. Aby sa minimalizovalo toto riziko, je nutné sušiť lipozómy v prítomnosti ochranných cukrov, ako je opísané v WO 86/01103.

US patent číslo 4,906.476 opisuje lipozómové prostriedky na aplikáciu steroidov inhaláciou. Opisuje sa možnosť aplikácie vysušených lipozómov vo forme aerosólového prášku s použitím vhodného zariadenia. Opísaná je tiež aplikácia striekaním zo samonosného rozprašovača s použitím hnacieho rozpúšťadla so suspendovanými lipozómami v prášku a striekaním vysušených častíc do pľúc pomocou hnacieho plynu.

Lipozómy samé osebe nie sú prítomné v prolipozómových práškoch, ale vytvoria sa, keď je prášok hydratovaný nad teplotou fázového prechodu lipidov. V porovnaní s vysušenými lipozómami majú preto prolipozómové prášky výhodu v tom, že riziko poškodenia lipozómových membrán pri dehydratácii je eliminované.

Prolipozómové prášky už boli opísané.

Napríklad US patent 4,311.712 opisuje lyofílizovanú potenciálnu lipozómovú zmes získanú rozpustením amfipatickej kvapaliny vytvárajúcej lipozóm a biologicky aktívnej zlúčeniny rozpustnej v lipidoch alebo viazanej na lipidy v organickom rozpúšťadle, ktorá zostáva tuhá počas lyofilizačného postupu a lyofilizáciou roztoku. Potenciálna lipozómová zmes sa môže skladovať a spracovať na vodný lipozómový prípravok, keď to bude žiaduce. Biologicky aktívna zlúčenina môže byť ľubovoľná zlúčenina, ktorá má biologicky zaujímavú vlastnosť.

WO 90/00389 opisuje lyofílizovanú potenciálnu lipozómovú zmes, obsahujúcu amfipatický lipid a cyklosporin alebo jeho derivát, na použitie na prípadnú lipozómovú aplikáciu cyklosporínu do buniek. Lyofilizovaná zmes sa rekonštituuje vo vodnom prostredí na lipozómy, ktoré enkap sulujú v podstate všetok cyklosporin prítomný v lyofilizovanej zmesi.

WO 92/11842 opisuje prelipozomálny prášok, ktorý tvorí suspenziu lipozómov obsahujúcu polyénové liečivo ako nystatin, keď je rekonštituovaný vodou alebo fyziologickým roztokom.

Predmetom všetkých uvedených patentov a prihlášok týkajúcich sa prolipozómových prostriedkov sú prostriedky, ktoré sa musia pred aplikáciou hydratovať.

EP 309464 opisuje prolipozómové práškové prostriedky, ktoré sa môžu inhalovať. Práškové prostriedky obsahujú pevné častice, v ktorých je biologicky účinná zložka v hrubej disperzii v lipide.

Podstata vynálezu

Teraz sa zistilo, že je výhodné pripraviť prášky, ktoré majú len jednu fázu pre prípad, že je žiaduca ich aplikácia inhaláciou. Preto cieľom vynálezu je poskytnúť farmaceutický prostriedok obsahujúci takýto prolipozómový prášok. Uvedený cieľ vynálezu sa dosahuje prolipozómovým práškom, ktorý obsahuje v jedinej fáze diskrétne častice lipofilnej biologicky účinnej zložky spolu s lipidom alebo so zmesou lipidov, ktoré majú teplotu fázového prechodu (T_c) nižšiu ako 37 °C.

Prášok je vhodný najmä na aplikáciu inhaláciou.

Prášok s jedinou fázou možno tiež opísať tak, že obsahuje homogénnu molekulovú zmes biologicky účinnej zložky a lipidu alebo zmesi lipidov s teplotou fázového prechodu nižšou ako 37 °C.

Z výrazov Jediná fáza“ a „homogénna molekulová zmes“ je zrejmé, že v prášku podľa vynálezu nie je žiadna samostatná kryštalická fáza či už účinnej zložky alebo lipidu.

Prášok s jednou fázou sa môže inhalovať priamo a in situ, napríklad do horných alebo dolných dýchacích ciest, vytvorí lipozómy, v ktorých je účinná zložka celkom inkorporovaná.

Všeobecne sa podľa vynálezu môže použiť ľubovoľný amfipatický lipid alebo zmes lipidov, o ktorých je známe, že sú vhodné na prípravu lipozómov známymi metódami. Lipid alebo zmes lipidov musia mať teplotu fázového prechodu nižšiu ako je telesná teplota (37 °C), aby produkt, ktorým je prolipozómový prášok, bol schopný hydratácic pri fyziologických podmienkach (t. j. aby bol schopný vytvoriť lipozómy v dýchacom ústrojenstve). Teploty fázového prechodu pre rôzne zmesi lipidov sa ľahko zistia použitím dobre známych metód, napríklad metód DSC - pozri napríklad J. Suurkuusk a spol., Biochemistry, zv. 15, č. 7, str. 1393 (1976). Všeobecne je každý prírodný alebo syntetický lipid, alebo zmes lipidov s teplotou fázového prechodu nižšou ako 37 °C použiteľný podľa vynálezu.

Ako príklady potenciálne použiteľných lipidov sa môžu vymenovať prírodné a syntetické fosfoglycerolipidy, sfingolipidy a digalaktozylglycerolipidy. Medzi prírodnými lipidmi sa môžu vymenovať sfingolipidy (SL) ako sfingomyelín (SM), ceramid a cerebrozid, galaktozylglycerolipidy ako digalaktozyldiacylglycerol (DGalDG), fosfoglycerolipidy ako fosfatidylcholín vaječného žĺtka (e-PC) a fosfatidylcholín sójových bôbov (s-PC), a lecitín vaječného žĺtka (e-lecitin) a lecitín sójových bôbov (s-lecitín). Zo syntetických lipidov sa môžu vymenovať dimyristoylfosfatídyicholín (DMPC), dipalmitoylfosfatídylcholín (DPPC), distearoylfosfatidylcholín (DSPC), dilaurylfosfatidylcholin (DLPC), l-myristoyl-2-palmitoylfosfatidylcholín (MPPC), l-palmitoyl-2-myristoylfosfatidylcholín (PMPC) a dioleo ylfosfatidylcholín. Zo zmesí lipidov sa môžu uviesť nasledujúce: SM/PC, SM/cholesterol, ePC/cholesterol, sPC/cholesterol, PC/PS/cholesterol, DMPC/DPPC, DMPG'DPPGCH, DMPG'CH, DPPC'DOPC, DPPC-DOPC/CH, DLPC/DPPC, DLPCDPPC/CH, DLPC7DMPC, DLCDMPGCII, DOPC/DSPC, DPSM/DMSM, e-lecitín/cholesterol. Navyše ku každému z uvedených sa môže pridať lipid iónového charakteru, ako napríklad dimyristoylfosfatidylglycerol (DMPG), difosfapalmitoylfosfatidylglycerol (DPPG), dimyristoylfosfatidovú kyselinu (DMPA), dipalmitoylfosfatidovú kyselinu (DPPA) alebo stearylamín (SA).

Zvlášť zaujímavé lipidy podľa vynálezu sú DPPC a/alebo DMPC. Prednosť sa dáva zmesi DPPC a DMPC obsahujúcej najmenej 10 % hmotnostných DMPC, napríklad 10 až 50 % DMPC. Hlavne je výhodná zmes DPPC a DMPC obsahujúca navyše najmenej jeden lipid iónového charakteru, ako je DMPG, DPPG, DMPA alebo SA, napríklad v množstve do 5 % hmotnostných. K iným výhodným zmesiam patri DPSM a DMSM, obsahujúca prípadne najmenej jeden lipid iónového charakteru a zmesi cholesterolu buď s e-lecitínom, ktoré prípadne obsahujú najmenej jeden lipid iónového charakteru a ktoré majú T_c menšiu ako 37 °C. Iné zmesi si môže odborník v odbore ľahko vybrať s odkazom na publikáciu Gregor Cevc, Phospholipids Handbook, Marcel Dekker, New York (1993), str. 427 až 435.

Účinná zložka má výhodne molekulárnu štruktúru, ktorá môže byť inkorporovaná do lipidových dvojvrstiev, čo napomôže enkapsulácii do lipozómov počas hydratácie. Takýmto príkladom je ester mastnej kyseliny s dlhým uhľovodíkovým reťazcom umožňujúcim pôsobiť ako hydrofóbne zakončenie.

Vhodné účinné zložky môže odborník v odbore ľahko identifikovať a môžu zahŕňať napríklad protizápalové a bronchorelaxačné liečivá, ako i antihistaminiká, inhibítory cyklooxygenázy, inhibítory syntézy leukotriénu, antogonistov leukotriénu, inhibítory fosfolipázy-A-2 (PLA2), antagonistov faktora agregácie doštičiek (PAF) a profylaktiká astmy. Antiarytmické liečivá, trankvilizéry, kardiálne glukozidy, hormóny, antihypertenzívne liečivá, antidiabetiká, antiparazitámc a antikanccróznc lieky, sedatíva, analgetiká, antibiotiká, antireumatické lieky, imunoterapeutiká, antifugálne lieky, antihypotenzívne lieky, vakcíny, protivírusové lieky, proteíny, peptidy a vitamíny môžu byť tiež zaujímavé.

Užitočné podľa vynálezu môžu byť tiež glukokortikosteroidy ako budesonid, dexamethason, bethamethason, fluocinolon, flumethason, triamcinoloacetonid, flunisolid, beklomethason a 16,16-acetály pregnánových derivátov a zlúčeniny od nich odvodené, a β-2 agonisty ako terbutalín, salmeterol, salbutamol, formoterol, fenoterol, klenbuterol, prokaterol, bitolterol a broxaterol. Účinnou zložkou môže byť tiež zmes farmaceutický účinných látok. Napríklad zmes glukokortikosteroidu s bronchodilatátorom ako je formoterol, salmeterol, terbutalín alebo salbutamol môže byť užitočná. Aby neboli žiadne pochybnosti o tom, na čo sa vzťahuje výraz účinná zložka, je potrebné uviesť, že tento pojem má zahŕňať tiež farmaceutický prijateľné estery, soli a hydráty uvedených zlúčenín.

Keď je účinná zložka steroid, je to výhodne ester steroidu.

Účinná zložka je výhodne steroid, výhodne steroid, ktorý jc esterifikovaný v polohe 21 mastnou kyselinou obsahujúcou najmenej 8, napríklad najmenej 10 alebo najmenej 12 atómov uhlíka. Mastná kyselina môže obsahovať napríklad až 24 atómov uhlíka, napríklad až 20 atómov uhlíka alebo až 18 atómov uhlíka. Výhodnejšie je účinná zložka steroid-21-palmitát, myristát, laurát, kaprát, kaprylát alebo sterát. Najvýhodnejšia účinná zložka podľa vynálezu je zlúčenina (22R)-16α, 17a-butylidéndioxy-6a,9a-difluór-1 ^-hydroxy-21-palmitoyloxypregn-4-én-3,20-dión, rofleponidpalmitát.

Ak je účinnou zložkou ester, musí byť hydrolyzovaný na účinnú základnú látku. Prolipozómový prášok s jednou fázou podľa vynálezu umožňuje neočakávane nutnú hydrolýzu in situ, kým estery v kryštalickom stave nebudú hydrolyzované.

Ak je žiaduca aplikácia inhaláciou, malo by sa čo najväčšie množstvo prolipozómového prášku skladať z častíc s priemerom menším ako 10 mikrometrov, napríklad 0,01 až 10 mikrometrov alebo 0,1 až 6 mikrometrov, napríklad 0,1 až 5 mikrometrov, alebo z aglomerátov týchto častíc. Výhodne najmenej 50 % prášku sa skladá z častíc v požadovanom rozsahu veľkosti. Napríklad najmenej 60 %, výhodne najmenej 70 %, výhodnejšie najmenej 80 % a najvýhodnejšie 90 % prášku sa skladá buď z častíc v požadovanom rozsahu veľkosti, alebo z aglomerátov uvedených častíc.

Prolipozómové prášky podľa vynálezu nemusia obsahovať žiadne iné ingrediencie. Ale farmaceutické prostriedky obsahujúce prášky podľa vynálezu môžu obsahovať tiež iné farmaceutický prijateľné prísady ako farmaceutický prijateľné adjuvanty, riedidlá a nosiče. Tieto sa môžu pridať k prolipozómovému prostriedku po prípadnom mikromletí alebo pred prípadným mikromletím s výhradou, že bolo rozpúšťadlo dokonale odstránené. Nosič je výhodne kryštalická, hydrofilná látka. Výhodným nosičom je kryštalický monohydrát laktózy. Ako iné vhodné nosiče sa môžu uviesť glukóza, fruktóza, galaktóza, trehalóza, sacharóza maltóza, rafinóza, maltitol, melezitóza, stachyóza, laktitol, palatinát, škrob, xylitol, manitol, myoinozitol a podobne a ich hydráty a aminokyseliny, napríklad alanín, glycín a betaín.

Množstvo prísad, ktoré sú prítomné v prostriedku sa môže pohybovať v širokých medziach. V niektorých prípadoch môže byť potrebné málo prísad alebo žiadne prísady, kým je často výhodné zriediť prášok prísadou, aby sa zlepšili vlastnosti prášku na použitie v inhalátore. V tomto prípade môže prostriedok obsahovať napríklad najmenej 50 %, napríklad najmenej 70 % alebo najmenej 80 % prísad, pričom zvyšok je prolipozómový prášok. Percento prísad môže tiež závisieť od sily biologickej účinnosti zlúčeniny a od optimálneho množstva prášku na inhaláciu.

V prípade, že je prítomná prísada, napríklad nosič, môže celý prostriedok tvoriť častice s rozmerom v rozsahu veľkosti respirovateľných častíc. Alebo môže nosič obsahovať väčšie častice, napríklad so stredným priemerom látky väčším ako 20 mikrometrov alebo môže obsahovať aglomeráty menších častíc, pričom aglomeráty majú stredný priemer látky napríklad väčší ako 20 mikrometrov, takže v každom prípade sa vytvorí usporiadaná zmes prolipozómu a nosiča.

Ďalším predmetom je spôsob výroby prolipozómového prášku podľa vynálezu, t. j. spôsob, ktorý poskytuje prolipozómový prášok v jedinej fáze.

Vynález teda tiež poskytuje spôsob výroby prolipozómového prášku na inhaláciu, ktorý spočíva v tom, že sa rozpustí lipid alebo zmes lipidov a lipofilnej biologicky účinnej zlúčeniny v rozpúšťadle, pričom lipid alebo zmes lipidov má teplotu fázového prechodu nižšiu ako 37 °C, získa sa kryštalická rozpúšťadlová základná hmota a jednofázový lipid vo svojom sklovitom stave zmrazením roztoku, pričom sa toto zmrazenie uskutočňuje pri teplote pod teplotou fázového prechodu lipidovej fázy, a odparí sa zmrazené rozpúšťadlo pri teplote fázového prechodu lipidovej fázy.

Zmrazenie roztoku rozpúšťadla sa môže uskutočniť obvyklými metódami, napríklad v obvyklom lyofilizátore. Môže sa napríklad naliať roztok lipidov a biologicky účinnej zložky na poličky lyofilizátora a znížiť teplotu, aby roztok zamrzol. Odparenie rozpúšťadla sa môže uskutočniť napríklad znížením tlaku v lyofílizačnej komore. Výsledný prášok sa môže zoškrabať z poličiek v komore a prípadne preosiať.

Lyofilizovaný prášok sa môže pripadne podrobiť ďalšiemu spracovaniu, aby sa získali častice v rozsahu veľkosti respirovateľných častíc. Napríklad sa lyofilizovaný prášok môže mikrozomlieť, napríklad s použitím dýzového mlyna, aby sa získali respirovateľné častice.

Zmrazenie roztoku biologicky účinnej zložky a lipidov sa uskutočňuje spôsobom, ktorý poskytuje jedinú lipidovú fázu v zmrznutom rozpúšťadlovom základe. Výroba jedinej lipidovej fázy sa reguluje finálnou teplotou a rýchlosťou mrznutia roztoku. Optimálna rýchlosť mrznutia ktoréhokoľvek partikulámeho roztoku bude niekde medzi časom nutným na kryštalizáciu príslušného rozpúšťadla a časom potrebným na kryštalizáciu lipidov a účinnej zložky a odborník v odbore ju môže stanoviť jednoducho metódou pokusov a omylov. Optimálna finálna teplota by mala byť 10 až 20 °C pod teplotou skleného prechodu lipidovej fázy. Na monitorovanie kryštalinity sa môže použiť napríklad rôntgenová metóda a na monitorovanie stupňa inkorporácie biologicky účinnej zložky do lipozómov po hydratácii sa môže použiť diferenčný skanovací kalorimeter.

Rozpúšťadlo musí mať schopnosť úplne rozpustiť lipidy a biologicky účinnú zložku, pretože je dôležité, aby všetky zložky boli v roztoku pred zmrazovaním, čim sa zabráni vyzrážaniu alebo oddeleniu fázy, čo spôsobuje vznik prášku s viac ako jednou fázou. Okrem toho, by rozpúšťadlo malo byť toxikologický prijateľné, malo by mať zodpovedajúcu teplotu mrznutia a výhodný vysoký tlak pár. Rozpúšťadlom môže byť napríklad organické rozpúšťadlo, napríklad alkohol alebo zmes vodných a organických rozpúšťadiel. Výhodným rozpúšťadlom na použitie podľa vynálezu je terciámy butanol.

Prášok môže byť prípadne aglomcrovaný do malých guľôčok, aby sa regulovala súdržnosť prášku. Guľôčky by výhodne nemali byť väčšie ako 1 mm v priemere. Guľôčky väčšie ako 1 mm v priemere by sa mali odstrániť preosiatim. Všetky aglomeráty by mali byť drobivé, aby sa ľahko deaglomerizovali napríklad v práškovom inhalátore.

Prolipozómový prášok podľa vynálezu je užitočný na lokálne alebo systémové liečenie ochorení a môže sa aplikovať napríklad cestou horného a dolného respiračného traktu vrátane nazálnej cesty. Predmetom vynálezu je tiež uvedený prolipozómový prášok na použitie v terapii, použitie prolipozómového prášku na výrobu liečiva na liečenie ochorení cestou respiračného traktu a spôsob liečenia pacienta, ktorý potrebuje liečenie, spočívajúci v tom, že sa tomuto pacientovi aplikuje terapeuticky účinné množstvo prolipozómového prášku podľa vynálezu.

Prolipozómový prášok podľa vynálezu sa môže napríklad použiť na liečenie zápalových ochorení respiračného traktu, napríklad astmy, nádchy, alveolitídy, bronchiolitídy a bronchitídy.

Aplikácia do respiračného traktu sa môže uskutočniť napríklad použitím inhalátora na suchý prášok alebo tlakového aerosólového inhalátora.

Vhodné práškové inhalátory sú dávkovacie inhalátory, napríklad inhalátory na jedinú dávku známe pod ochrannou známkou Monohaler^R a inhalátory na viac dávok, napríklad viacdávkový, dychom ovládaný inhalátor na suchý prášok známy pod ochrannou známkou Turbuhaler^R.

I keď je prolipozómový prášok podľa vynálezu určený najmä na aplikáciu, môže byť tiež obsiahnutý v prostriedkoch určených na iné formy aplikácie. Napríklad sa môžu pripraviť orálne, topické a injekčné prostriedky na použitie na liečenie zápalových ochorení kĺbov, napríklad artritídy, ochorení kože a ochorení čriev.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Účelom nasledujúcich príkladov vynálezu je ilustrovať vynález, ale neobmedzovať jeho rozsah.

Príklad 1

Rofleponidpalmitát (10 dielov), DPPC (63 dielov), DMPC (24 dielov) a NaDPPG (3 diely) sa rozpustili pri 80 °C v terciámom butanole (1300) dielov. Roztok sa nalial na poličky lyofilizátora ochladeného na -35 °C. Roztok dosiahol túto teplotu asi po 30 minútach, tlak v lyofilizátore sa potom znížil, aby sa vyvolala sublimácia rozpúšťadla. Zatiaľ čo sa rýchlosť sublimácie mohla nastaviť znížením tlaku a zvýšením teploty, nenechala sa teplota počas procesu presiahnuť -10 °C. V lyofilizácii sa pokračovalo, až sa všetko rozpúšťadlo odstránilo. Výsledný prášok sa zoškrabal z poličiek lyofilizátora a preosial sa.

Tento prášok sa mikromlel v mlyne so vzduchovými dýzami na častice prášku s veľkosťou menšou ako 5 pm. Mikromletý prášok sa zmiešal s monohydrátom laktózy (20 dielov prášku : 80 dielov monohydrátu laktózy) preosievacím procesom a zmes sa ďalej homogenizovala mikromletím pri nízkom tlaku v dýzovom mlyne.

Prášková zmes sa aglomerovala na guľôčky nie väčšie ako 1 mm s použitím štandardných techník. Väčšie guľôčky sa odstránili preosiatím. Aglomerovaný prášok sa naplnil do inhalátora na suchý prášok Turbuhaler^R.

Príklad 2

Postup z príkladu 1 sa zopakoval s časmi mrazenia 6 hodín, 17 hodín a 24 hodín.

Porovnávací príklad

Lipidy a účinná zložka z príkladu 1 sa jednoducho vzájomne zmiešajú za sucha. Výsledný prášok je multifázový systém obsahujúci oddelené častice účinnej zložky a lipidov.

Príklad 3

Postup z príkladu 1 sa zopakuje s použitím nasledujúcich lipidových zmesí s teplotou fázového prechodu pod 37 °C:

DPSM/DPSM e-lecitín/cholesterol s-lecitín/cholesterol

Príklad 4

Postup z príkladu 1 sa zopakuje s nasledujúcimi účinnými zložkami: roflepon id-21 -myri štát rofleponid-21-laurát rofleponid-21 -kaprát rofleponid-21 -kaprylát rofleponid-21 -stearát

Analýza prášku

Rontgenový difraktogram práškovej zmesi z príkladu 1 a 2 ukázal, že v prášku nebol prítomný žiadny kryštalický stav. Prášok z porovnávacieho príkladu obsahoval účinnú zložku v kryštalickom stave.

Inkorporácia účinnej zložky do lipozómov

Prolipozómové prášky z príkladov 1 a 2 sa hydratovali a stupeň inkorporácie účinnej zložky sa zmeral použitím metód diferenčnej skanovacej kalorimetrie (DSC). DSC ukázala, že účinná zložka je celkom inkorporovaná do lipozómov. DSC uskutočnená s práškom z porovnávacieho príkladu nepreukázala v podstate žiadnu inkorporáciu účinnej zložky do lipozómu.

Hydrolýza esteru

Skúmal sa stupeň hydrolýzy prolipozómového prášku z príkladu 1 a z porovnávacieho príkladu na účinnú zložku. Prolipozómové prášky z príkladov 1 a 2 a z porovnávacieho príkladu (50 μΜ esteru steroidu v každom prípade) sa hydratovali vodou a zohrievali sa 15 minút na 50 °C. Potom sa inkubovali pri 37 °C v prítomnosti lipázy pankreasu prasaťa (2 mg/ml) v pufri (lmM EDTA, 80 mM K.C1, 10 mM HEPES, pH 7,4) a periodicky sa podrobili pôsobeniu ultrazvuku na rôzne časové dĺžky až do 120 minút. Vzorky sa analyzovali kvapalinovou chromatografiou, aby sa zistilo, koľko esteru sa hydrolyzovalo na účinnú zložku. 94 % prolipozómového prášku z príkladu 1 sa hydrolyzovalo na účinnú zložku v porovnaní s iba 2 % prášku z porovnávacieho príkladu.

Farmakologické štúdie

Protiedémová účinnosť sa určila použitím Sefadexového modelu na krysách, ako opísali L. Källstrom a spol. v Agens and Actions 17(3/4) 355 (1985).

Vzorky práškov z príkladu 1 a z porovnávacieho príkladu sa suspendovali v studenom fyziologickom roztoku a aplikovali sa intratracheálnou injekciou do ľavej časti pľúc samcom krýs Sprague-Dawley. Po jednej hodine sa vyvolal zápalový proces intratracheálnym vpravením Sefadexových guľôčok (5 mg/kg) do ľavej i pravej časti pľúc. Po 20 hodinách sa kvantifikoval výsledný intersticiálny edém zistením hmotnosti pravej a ľavej časti pľúc. Za indikatívne pre farmakologický účinok prášku sa zobralo zníženie hmotnosti pľúc. Hmotnosť pľúc krýs, ktorým sa aplikoval prolipozómový prášok z príkladu 1, sa znížila 40-krát viac ako hmotnosť pľúc krýs, ktorým sa aplikoval prášok z porovnávacieho príkladu. To znamená, že účinnosť prolipozómového prášku podľa vynálezu bola 40 ku prášku z porovnávacieho príkladu.

Inhalačné štúdie

Psy rasy Bcaglc sa anestezovali, intubovali a vystavili pôsobeniu práškového aerosólu z prostriedku podľa príkladu 1 alebo podľa porovnávacieho príkladu. Aerosól sa vytvoril z práškovej tablety s použitím prístroja XVright Dust Feed pracujúceho s 1800 otáčkami za minútu. V priebehu inhalácie sa zaznamenali koncentrácie aerosólu (Casella 950 AMS), objem respiračného vzduchu, objem vdýchnutého respiračného vzduchu a frekvencia dychu. Stanovená inhalovaná dávka bola 25 pg rofleponidpalmitátu/kg telesnej hmotnosti. Po inhalácii sa odoberali pravidelné vzorky plazmy. Biologická dostupnosť sa vypočítala s koncentráciami rofleponidu v plazme po intravenóznej aplikácii. Biologická dostupnosť rofleponidu po aplikácii prášku z príkladu 1 bola blízka 100 %, zatiaľ čo biologická dostup nosť rofleponidu po aplikácii prášku z porovnávacieho príkladu nebola merateľná.

Claims (33)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúci sa t ý m , že obsahuje prolipozómový prášok, pričom tento prášok obsahuje v jedinej fáze diskrétne častice lipofilnej biologicky účinnej zložky spolu s lipidom alebo v zmesi lipidov, ktoré majú teplotu fázového prechodu pod 37 °C, a kryštalický a hydrofilný farmaceutický prijateľný nosič.
2. 2. Farmaceutický prostriedok podľa nároku (vyznačujúci sa tým, že prášok obsahuje jeden alebo niekoľko lipidov zvolených z prírodných a syntetických fosfoglycerolipidov, sfmgolipidov a digalaktozylglycerolipidov.
3. 3. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 alebo 2, vyznačujúci sa tým, že prášok obsahuje zmes lipidov zvolenú zo zmesí sfingomyelín/fosfatidylcholín, sfingomyelín/ cholesterol, fosfatidylcholin vaječného žítka/cholesterol, fosfatidylcholín sójových bôbov/cholesterol, fosfatidylcholín/fosfatidylserín/cholesterol, dimyristoylfosfatidylcholín/dipalmitoylfosfatidylcholín, dimyristoylfosfatidylcholín/dipalmitoylfosfatidylcholín/cholesterol, dimyristoylfosfatidylcholín/cholesterol, dipalmitoylfosfatidylcholín/dioleoylfosfatidylcholín, dipalmitoylfosfatidylcholín/dioleoylfosfatidylcholín/cholesterol, dilaurylfosfatidylcholín/dipalmitoylfosfatidylcholin, dilaurylfosfatidylcholín/dipalmitoylfosfatidylcholín/cholesterol, dilaurylfosfatidylcholín/dimyristoylfosfatidylcholín, dilaurylfosfatidylcholín/dimyristoylfosfatidylcholín/cholesterol a dioleoylfosfatidylcholín/distearoylfosfatidylcholin.
4. 4. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 3, vyznačujúci sa tým, že prášok obsahuje dipalmitoylfosfatidylcholín, dimyristoylfosfatidylcholín alebo zmes dipalmitoylfosfatidylcholínu a dimyristoylfosfatidylcholínu.
5. 5. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 4, v y značujúci sa tým, že obsahuje najmenej 10 % dimyristoylcholínu.
6. 6. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 5, vyznačujúci sa tým, že prášok obsahuje dodatočne lipid iónového charakteru.
7. 7. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 6, v y značujúci sa tým, že lipid iónového charakteru je zvolený z dimyristoylfosfatidylcholín, dimyristoylfosfatidovú kyselinu a stearylamín.
8. 8. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 7, vyznačujúci sa tým, že účinná zložka je zvolená zo skupiny zahŕňajúcej protizápalové lieky, bronchorelaxačné lieky, antihistaminiká, inhibítory cyklooxygenázy, antagonisty leukotriénu, inhibítory PLA2, antagonisty PAF a profylaktiká astmy.
9. 9. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 8, vyznačujúci sa tým, že účinná zložka je glukokortikosteroid.
10. 10. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 9, vyznačujúci sa tým, že účinná zložka je β-2 agonista.
11. 11. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 10, vyznačujúci sa tým, že účinná zložka je steroid, ktorý je esterifikovaný v polohe 21 mastnou kyselinou obsahujúcou najmenej 8 atómov uhlíka.
12. 12. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 11, vyznačujúci sa tým, že účinná zložka je steroid, ktorý je esterifikovaný v polohe 21 mastnou kyselinou obsahujúcou najmenej 10 atómov uhlíka.
13. 13. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 12, vyznačujúci sa tým, že účinná zložka je steroid, ktorý je esteriOkovaný v polohe 21 mastnou kyselinou obsahujúcou najmenej 12 atómov uhlíka.
14. 14. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 13, vyznačujúci sa tým, že účinná zložka je steroid-21 -palmitát.
15. 15. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 14, vyznačujúci sa tým, že účinná zložka je rofleponidpalmitát.
16. 16. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 15, vyznačujúci sa tým, že najmenej 50 % prášku obsahuje častice s priemerom menším ako 10 mikrometrov.
17. 17. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 16, vyznačujúci sa tým, že najmenej 60 % prášku obsahuje častice s priemerom menším ako 10 mikrometrov.
18. 18. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 17, vyznačujúci sa tým, že najmenej 70 % prášku obsahuje častice s priemerom menším ako 10 mikrometrov.
19. 19. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 18, vyznačujúci sa tým, že najmenej 80 % prášku obsahuje častice s priemerom menším ako 10 mikrometrov.
20. 20. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 19, vyznačujúci sa tým, že najmenej 90 % prášku obsahuje častice s priemerom menším ako 10 mikrometrov.
21. 21. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 16 až 20, vyznačujúci sa tým, že častice majú priemer 0,01 až 10 mikrometrov.
22. 22. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 16 až 20, vyznačujúci sa tým, že častice majú priemer 0,1 až 6 mikrometrov.
23. 23. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 16 až 20, vyznačujúci sa tým, že častice majú priemer 0,1 až 5 mikrometrov.
24. 24. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 23, vyznačujúci sa tým, že obsahuje aglomerované častice.
25. 25. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 24, vyznačujúci sa tým, že nosič je kryštalický monohydrát laktózy.
26. 26. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 24, vyznačujúci sa tým, že nosič je zvolený zo skupiny zahŕňajúcej glukózu, fruktózu, galaktózu, trehalózu, sacharózu maltózu, rafínózu, maltitol, melezitózu, stachyózu, laktitol, palatinát, škrob, xylitol, manitol, myoinozitol a ich hydráty, a aminokyseliny.
27. 27. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 26, vyznačujúci sa tým, že nosič obsahuje častice so stredným priemerom hmoty väčším ako 20 mikrometrov.
28. 28. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 26, vyznačujúci sa tým, že nosič obsahuje častice so stredným priemerom hmoty menším ako 10 mikrometrov alebo aglomeráty týchto častíc.
29. 29. Farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 28 na použitie v medicíne.
30. 30. Použitie farmaceutického prostriedku podľa nároku 1 až 28 na výrobu liečiva na liečenie ochorení cestou respiračného traktu.
31. 31. Inhalačné zariadenie na suchý prášok, vyznačujúce sa tým, že obsahuje farmaceutický prostriedok podľa nárokov 1 až 28.
32. 32. Inhalačné zariadenie na suchý prášok podľa nároku 31,vyznačujúce sa tým, že inhalátorom je inhalátor na jedinú dávku.
33. 33. Inhalačné zariadenie na suchý prášok podľa nároku 31, vyznačujúce sa tým, že inhalátorom je inhalátor na viacnásobné dávky.