RU2003136746A - Удаление плазмин(оген)а из белковых растворов - Google Patents

Claims (31)

1. Способ специфического удаления или выделения плазмин(оген)а или плазмина в присутствии фибриногена из смеси, содержащей плазмин(оген) или плазмин, в результате контакта смеси с ригидной аминокислотой, причем аминогруппа аминокислоты и карбоксильная группа аминокислоты находятся на расстоянии около 6-8 Ангстрем, предпочтительно около 7 Ангстрем, а ригидная аминокислота ковалентно связана с носителем через аминогруппу аминокислоты.

2. Способ по п.1, где смесь выбрана из группы, состоящей из жидкостей организма, таких как кровь, из фракций крови, криопреципитата, клеточных культур, экстрактов тканей животных, таких как легкие быка, бычий кишечник, или экстракты костей животных, желатина, бычьего сывороточного альбумина, а также несмешивающихся с водой животных жиров, таких как ланолин (РС-фосфатидилхолин).

3. Способ по п.1, где носитель является хроматографическим веществом.

4. Способ по п.1, где носитель связан с неподвижной аминокислотой, причем аминогруппа аминокислоты и карбоксильная группа аминокислоты находятся на расстоянии около 6-8 Ангстрем, предпочтительно около 7 Ангстрем.

5. Способ по п.3, где хроматографическое вещество является гидрофильным веществом, таким как агароза, целлюлоза, стекло с регулируемыми порами, силикагели, декстраны или органический синтетический полимер, такой как полимер на основе полиакриламидов-полистиролов.

6. Способ по п.3, где хроматографическое вещество является агарозой или сефарозой.

7. Способ по п.1, где хроматографическое вещество представляет собой корпускулярное вещество или монолитный блок-материал.

8. Способ по п.1, где ригидная аминокислота связана с носителем через линкер между носителем и транексамовой кислотой.

9. Способ по п.8, где линкер является бифункциональным линкером.

10. Способ по п.9, где бифункциональный линкер выбран из группы, состоящей из N-гидроксисукцинимида, DAPA, CNBr, эпокси, диаминопропиламина (DADPA), 1,6-диаминогексана, янтарной кислоты, 1,3-диамино-2-пропанола, этилендиамина (EDA), TNB, пиридилдисульфида, иодацетамида, активированного малеимидом носителя или их комбинаций.

11. Способ по п.1, где носитель модифицирован по фрагменту, который взаимодействует с первичными или вторичными аминогруппами.

12. Способ по п.1, где после контакта смеси с носителем, связанным с транексамовой кислотой, смесь инкубируют с носителем в течение периода времени, достаточного, чтобы связать плазминоген или плазмин, и элюируют нейтральным водным раствором, содержащим соли натрия, соли кальция, буферные соли.

13. Способ по п.1, при котором впоследствии, после контакта смеси, плазмин или плазмин(оген) элюируют водным раствором, содержащим достаточное количество лиганда, конкурирующего с плазмин(оген)ом за связывающие участки носителя, связанного с ригидной аминокислотой.

14. Способ по п.13, где лигандом является лизин.

15. Смесь, полученная из природных источников, которая по существу свободна от плазмин(оген)а.

16. Смесь по п.15, которая представляет собой производное крови, кровь или фракцию крови, криопреципитат.

17. Смесь по п.16, где производным крови является фактор свертывания крови, полученный из плазмы, или смесь факторов свертывания крови, альбумина, иммуноглобулина, фибриногена, фибронектина, α₁-антитрипсина, антитромбина III, фактора фон Виллебранда.

18. Фракция, содержащая плазмин(оген) и/или плазмин, полученная способом по одному или более из пп.1-14.

19. Носитель, ковалентно связанный с неподвижной аминокислотой, где аминогруппа аминокислоты и карбоксильная группа аминокислоты находятся на расстоянии около 6-8 Ангстрем, предпочтительно около 7 Ангстрем.

20. Носитель по п.19, где аминокислота выбрана из группы, состоящей из транексамовой кислоты и 4-аминометилбицикло-[2.2.2.]-октан-1-карбоновой кислоты.

21. Носитель по п.19 или 20, являющийся хроматографическим веществом.

22. Носитель по п.19, где хроматографическое вещество является гидрофильным веществом, таким как агароза, целлюлоза, стекло с регулируемыми порами, силикагели, декстраны или органический синтетический полимер, такой как полимер на основе полиакриламидов-полистиролов.

23. Носитель по п.19, где хроматографическое вещество является агарозой или сефарозой.

24. Носитель по п.19, где хроматографическое вещество является корпускулярным веществом или монолитным блок-материалом.

25. Носитель по п.19, где транексамовая кислота связана с носителем через линкер между носителем и транексамовой кислотой.

26. Носитель по п.25, где линкер является бифункциональным линкером.

27. Носитель по п.26, где бифункциональный линкер выбран из группы, состоящей из N-гидроксисукцинимида, DAPA, CNBr, эпокси, диаминопропиламина (DADPA), 1,6-диаминогексана, янтарной кислоты, 1,3-диамино-2-пропанола, этилендиамина (EDA), TNB, пиридилсульфида, иодацетамида, активированного малеимидом носителя или их комбинаций.

28. Носитель по п.19, модифицированный по фрагменту, который взаимодействует с первичными или вторичными аминогруппами.

29. Смесь, полученная из природных источников, которая по существу свободна от плазмин(оген)а и плазмина.

30. Смесь по п.29, где природным источником является кровь, производное крови или фракция крови, криопреципитат, клеточные культуры, экстракты тканей животных, такие как легкие быка, бычий кишечник, или экстракты костей животных, желатин, бычий сывороточный альбумин, а также несмешивающиеся с водой животные жиры, такие как ланолин (РС-фосфатидилхолин).

31. Смесь по п.30, где производное крови представляет собой, в частности, фактор свертывания крови, полученный из плазмы, или смесь факторов свертывания крови, таких как FVIII, FIX, фибриноген, фибронектин, α₁-антитрипсин, антитромбин III, фактор фон Виллебранда, альбумин, иммуноглобулин.