PT1230243E - Policicloalquilpurinas como antagonistas dos receptores da adenosina - Google Patents

Description

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DESCRIÇÃO

"POLICICLOALQUILPURINAS COMO ANTAGONISTAS DOS RECEPTORES DA ADENOSINA"

REFERÊNCIA CRUZADA COM PEDIDOS RELACIONADOS

Este pedido reivindica a prioridade do Pedido Provisório U.S. No de Série 60/165.191, depositado em 12 de Novembro de 1999.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO A invenção refere-se aos antagonistas dos receptores da adenosina e aos métodos de preparar e usar os mesmos no tratamento de doenças. A adenosina é um mensageiro intracelular e extracelular gerado por todas as células no corpo. É também gerada extracelularmente por conversão enzimática. A adenosina liga-se e activa sete receptores ligados à proteína G de transmembrana, induzindo uma variedade de respostas fisiológicas. A adenosina propriamente dita, as substâncias que mimetizam as acções da adenosina (agonistas) e as substâncias que antagonizam as suas acções têm aplicações clínicas importantes. Os receptores da adenosina são divididos em quatro subtipos conhecidos 2 ΡΕ1230243 (i.e., Ai, A2a, A2b, e A3) . Estes subtipos induzem efeitos únicos e algumas vezes opostos. A activação do receptor da adenosina Alr por exemplo, induz um aumento na resistência vascular renal, enquanto que a activação do receptor para adenosina A2a induz uma diminuição na resistência vascular renal.

Na maioria dos sistemas de órgãos, os períodos de tensão metabólica resultam em aumentos significativos na concentração de adenosina no tecido. O coração, por exemplo, produz e liberta a adenosina para mediar as respostas adaptativas à tensão, tais como as reduções na frequência cardíaca e a vasodilatação coronária. Igualmente, as concentrações de adenosina nos rins aumentam em resposta à hipoxia, à tensão metabólica e a muitas substâncias nefrotóxicas. Os rins também produzem adenosina de forma constitutiva. Os rins ajustam a quantidade de adenosina produzida de forma constitutiva a fim de regular a filtração glomerular e a reabsorção de electrólitos. Com relação ao controlo da filtração glomerular, a activação dos receptores Ai conduz à constrição das arteríolas aferentes, enquanto que a activação dos receptores A2a resulta na dilatação das arteríolas eferentes. A activação de receptores A2a pode também exercer efeitos vaso-dilatadores sobre a arteríola aferente. Globalmente, o efeito da activação destes receptores das adenosinas glomerulares é reduzir a taxa de filtração glomerular. Além disto, os receptores da adenosina Ai estão localizados no túbulo proximal e nos locais tubulares distais. A activação 3 ΡΕ1230243 destes receptores estimula a reabsorção de sódio do lúmen tubular. Desse modo, o bloqueio dos efeitos da adenosina sobre estes receptores produzirá uma elevação da taxa de filtração glomerular e um aumento da excreção de sódio.

As publicações EP-A-0 415 456, EP-A-0 501 379, EP-A-0 541 120, EP-A-0 556 778, EP-A-0 560 354, WO 94/16702 A, DE 198 16 857 A, WO 98/57645 A, US-A-5 525 607, WO 98/57644 A, WO 94/03456 A, EP-A-0 619 316, US-A-5 290 782, J. MED. CHEM., Vol. 35, No. 5, 1992, páginas 924-930 (XP002160035), PATENT AB-STRACTS OF JAPAN Vol. 017, No. 200, 20 de Abril de 1993 (1993-04-20) & JP 04 346986 A, DE 38 43 117 A, DE 40 19 892 A revelam todas compostos que diferem dos compostos da presente invenção no facto de os grupos biciclico, triciclico e pentaciclico, referidos nas definições de R3, serem diferentes.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO A invenção tem por base a descoberta de que os compostos de Fórmula I são inibidores, inesperada e altamente potentes e selectivos de subtipos particulares de receptores da adenosina. Os antagonistas da adenosina podem ser úteis na prevenção e/ou no tratamento de diversas doenças, incluindo perturbações cardíacas e pertubações circulatórias, perturbações degenerativas do sistema nervoso central, perturbações respiratórias, e muitas doenças para as quais o tratamento diurético é indicado. Numa forma de realização, a invenção concretiza-se num composto de fórmula I: 4 ΡΕ1230243

Na fórmula I, Ri e R2 podem, independentemente, ser: a) hidrogénio; b) alquilo, alquenilo de não menos do que 3 carbonos, ou alquinilo de não menos do que 3 carbonos (por exemplo, onde o alquilo, o alquenilo, ou o alquinilo podem ser não substituídos ou podem ser funcionalizados com um ou mais substituintes seleccionados de hidroxi, alcoxi, amino, alquilamino, dialquilamino, heterociclilo, acilamino, alquilsulfonilamina, e heterociclilcarbonilomino; ou c) arilo ou arilo substituído; R3 é seleccionado a partir do grupo constituído por:

* onde R3 é igualmente não substituído ou funcionalizado com um ou mais substituintes seleccionados a partir do grupo constituído por hidroxi, R5-, e Rs-alquenilo; ΡΕ1230243 5 Λ

e onde R3 é igualmente não substituído ou funcionalizado com um ou mais substituintes seleccionados a partir do grupo consituído por hidroxi, R5-alquilo, -R5, R5-alquenilo, alcoxicarbonilo, alcoxicarbonilalquilo, alcoxi-carbonilal-quenilo, hidroxialquilo, aldeído, alcoxialquilo, R5-alcoxi, fosfato, R5-alquilcarbamoílo, e R5-alquil(alquil)carba-moílo;

e onde R3 é igualmente não substituído ou funcionalizado com um ou mais substituintes seleccionados a partir do grupo consituído por R5-alquilo, -R5, R5-alquenilo, alcoxicarbonilo, alcoxicarboniloalquenilo, hidroxialquilo, aldeído, e hidroxilo;

e onde R3 é é igualmente não substituído ou funcionalizado com um ou mais substituintes seleccionados a partir do grupo consituído por R5-alquilo, -R5, R5-alquenilo, R5-al-coxi, alcoxi-carbonilo, alcoxicarboniloalquenilo, hidroxialquilo, aldeído, e hidroxilo; ΡΕ1230243 6

Ο e onde R3 é é igualmente não substituído ou funcionalizado com um ou mais substituintes seleccionados a partir do grupo constituído por hidroxilo, R5-alcoxi, R5-alquenilo, alcoxi-carbonilo, e carbonilo; R4 é seleccionado a a partir do grupo constituído por hidrogénio, C4-4-alquilo, Ci-4-alquilo-CC>2H, ou fenilo; onde os grupos Ci-4-alquilo, Ci-4-alquilo-C02H, e fenilo podem ser não substituídos ou podem ser funcionalizados com um, dois, três, ou mais substituintes, tais como halogénio, -OH, -OMe, -nh2, -NO2, e benzilo, ou benzilo funcionalizado com um, dois, três, ou mais substituintes, tais como halogénio, -OH, -OMe, -NH2, e -N02; R5 é seleccionado a a partir do grupo constituído por -CH2COOH, -C(CF3)2OH, -C0NHNHS02CF3, CONHOR4, -CONHSO2R4, -C0NHS02NHR4, -C (0H)R4P03H2, -NHCOCF3, NHCONHSO2R4, -NHPO3H2, -NHS02R4, -NHS02NHC0R4, -0P03H2, -OSO3H, -PO (OH) R4, -PO3H2, -S03H, -S02NHR4, -S03NHC0R4, -S03NHC0NHC02R4, e OS seguintes:

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Xi e Χ2 são independentemente seleccionados a partir do grupo constituído por (O) e (S). Z é seleccionado a partir do grupo constituído por uma ligação simples, -O-, -(CH2)i_3-, -0(CH2)i-2-, CH2OCH2-, -(CH2)i-20-, -CH=CHCH2-, -CH=CH-, ou -CH2CH=CH-; e R.6 é seleccionado a partir do grupo constituído por hidrogénio, alquilo, acilo, alquilsulfonilo, aralquilo, aralquilo substituído, alquilo substituído, e hetero- ciclilo. R.6 é preferivelmente hidrogénio. No entanto, quando R6 for metilo ou um outro substituinte que não seja o hidrogénio, os compostos podem ser altamente selectivos para a inibição dos receptores da adenosina A2a.

Em certas formas de realização, Ri e R2 podem ser grupos alquilo iguais ou diferentes (por exemplo, um ou ambos podem ser n-propilo) . R3 pode ser aralquilo substituído com -OH, -OMe, ou -halogénio; -metilo; ou 3-hidroxipropilo, e Z pode ser uma ligação simples.

Em algumas formas de realização, R3 pode ser: ΡΕ1230243 e pode ser não substituído ou pode ser funcionalizado com um ou mais (i.e., 1, 2, 3, ou mais) substituintes, tais como hidroxi, R5-ou R5-alquenilo. Assim, o composto pode ser, por exemplo, ácido 5-(2, 6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[3.2.1]octano-l-carbo-xílico; o 8-(4-hidroxi-biciclo[3.2.1]oct-l-il)-1,3-dipro-pil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona; ou ácido 5-(2,6-dioxo-1,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo-[3.2.1]octano-2-carboxílico.

Em outras formas de realização, R3 pode ser:

A

e pode ser não substituído ou pode ser funcionalizado com um ou mais substituintes, tais como hidroxi, Rs-alquilo, -R5, R5~alquenilo, alcoxicarbonilo, alcoxicarbonilalquilo, alcoxicarbonilalquenilo, hidroxialquilo, aldeído, alcoxial-quilo, R5-alcoxi, fosfato, R5-alquilcarbamoílo, e R5-alquil-(alquil)carbamoílo. Assim, 0 composto pode ser, por exemplo, o 8-(4-hidroxi-biciclo[2.2.2]oct-l-il)-1,3-dipropil-3, 7-di-hidro-purino-2,6-diona; ácido 4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo-[2.2.2]octano-l-carboxílico; o 4-(2,6-Dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo [2.2.2]octano-1-carbaldeído; o éster de metilo do ácido 4-(2,6-dioxo-l,3- 9 ΡΕ1230243 dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]— octano-l-carboxílico; o éster de metilo do ácido 3-[4-(2,6-dioxo-1,3-dipropil-2,3, 6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-acrílico, o éster de metilo do ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il] propiónico; ácido 3—[4 — (2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-acrílico; ácido 3-[4-(2,6-dioxo- 1.3- dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo- [2.2.2] oct-l-il]-propiónico; ácido 4-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]-oct-l-il]butírico; o éster de mono-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipro-pil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-1-ilo] de ácido fosfórico; ácido {[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6, 7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-1-carbonil]-metilamina}-acético; ácido {[4-(2,6-dioxo-l, 3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]-octano-l-carbonil]-amino}-acético; ácido 3-[4-(2,6-dioxo- 1.3- dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo- [2.2.2] oct-l-ilóxi]propiónico; o éster de metilo do ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-ilóxi]-propiónico; o éster de terc-butilo de ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)biciclo[2.2.2]oct-l-ilóxi]-propiónico; ou ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-2-metil-propiónico.

Noutra forma de realização, R3 pode ser: 10 ΡΕ1230243

e pode ser não substituído ou pode ser funcionalizado com um ou mais substituintes, tais como R5-alquilo, -R5, R5- alquenilo, alcoxicarbonilo, alcoxicarbonilalquenilo, hi-droxialquilo, aldeído, e hidroxi. Assim, o composto pode ser, por exemplo, ácido 6-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)cubano-3-carboxílico; o 8 —(6— hidroximetil-cuban-3-il)-1,3-dipropil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona; ou ácido 3-[6-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-cuban-3-il]-acrílico.

Em mais outra forma de realização, R3 pode ser:

e pode ser não substituído ou pode ser funcionalizado com um ou mais substituintes, tais como R5-alquilo, -R5, R5- alquenilo, Rs-alcoxi, alcoxicarbonilo, alcoxicarbonilalquenilo, hidroxialquilo, aldeído, e hidroxi. Assim, por exemplo, o composto pode ser ácido [5-(2,6-dioxo-l,3-di-propil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[3.2.2]— non-l-iloxi]-acético; a 8-(5-hidroxi-biciclo[3.2.2]non-1-il)-1,3-dipropil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona; ou ácido 5(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[3.2.2]nonano-l-carboxílico. ΡΕ1230243 11

Noutra forma de realização, R3 pode ser:

e pode ser não substituído ou pode ser funcionalizado com um ou mais substituintes, tais como hidroxi, R5-alcoxi, Rs-alquenilo, alcoxicarbonilo, e carbonilo. Assim, por exemplo, o composto pode ser a 8-(4-hidroxi-7-metil-2,6-dioxa-biciclo[3.3.1]non-l-il)-1,3-dipropil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona; ou ácido [1- (2,β-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-7-metil-2,6-dioxa-biciclo [3.3.1]non-4-iloxi]-acético. O composto pode estar, por exemplo, numa forma de um composto aquiral, um racemato, um composto opticamente activo, um diastereoisómero puro, uma mistura de dias-tereoisómeros, ou um sal de adição farmacologicamente aceitável.

Os compostos desta invenção podem também ser modificados por adição de funcionalidades apropriadas para aumentar as propriedades biológicas selectivas. Tais modificações são conhecidas na técnica e incluem aquelas que aumentam a penetração biológica num dado sistema biológico (por exemplo, sangue, sistema linfático, sistema nervoso central), aumentam a disponibilidade oral, aumentam a solubilidade para permitir a administração por injecção, alteram o metabolismo, e/ou alteram a velocidade de 12 ΡΕ1230243 excreção. Os exemplos destas modificações incluem, porém não lhe estão limitados, a esterificação com polietileno glicóis, derivação com substituintes ou pivolatos de ácido gordo, conversão em carbamatos, hidroxilação de anéis aromáticos, e substituição de heteroátomos em anéis aromáticos . A invenção também compreende uma composição de medicamento incluindo quaisquer dos compostos acima mencionados, sozinha ou numa combinação, juntamente com um excipiente adequado. A invenção também compreende o uso de um composto de acordo com a invenção para a preparação de uma composição farmacêutica para o tratamento um paciente sofrendo de uma doença caracterizada por uma elevada concentração de adenosina e/ou sensibilidade aumentada à adenosina e/ou elevado número de receptores da adenosina ou a eficiência de ligação. 0 tratamento inclui o passo de administrar ao paciente uma quantidade de qualquer um dos compostos acima descritos que seja eficaz como um antagonista do receptor de adenosina. A doença pode ser, por exemplo, um distúrbio cardíaco e circulatório, um distúrbio degenerativo do sistema nervoso central, um distúrbio respiratório, uma doença para a qual seja indicado um tratamento diurético, hipertensão, doença de Parkinson, depressão, dano traumático ao cérebro, déficite neurológico pós acidente vascular cerebral, depressão respiratória, trauma neonatal do cérebro, dislexia, hiperactividade, fibrose cística, ascite cirrótica, apnéia neonatal, insuficiência renal, diabetes, asma, uma doença edematosa, insuficiência cardíaca congestiva, ou disfunção renal (por 13 ΡΕ1230243 exemplo, disfunção associada com o uso de diurético em insuficiência cardíaca congestiva, ou toxicidade renal devida a tratamento com agentes quimioterapêuticos). A invenção também compreende um método de preparar xantinas 8-substituídas. O método inclui os Passos de obter uma N7,C8 di-hidroxantina (por exemplo, o composto 10 na figura 1), proteger a posição N7 da xantina (por exemplo, como um éter de THP ou BOM); desprotonar a posição C8 com base forte (tal como a lítio diisopropilamida ou o n-butil-lítio) para gerar um anião; capturar o anião com um composto carboxilo, carbonilo, aldeído, ou cetona; e desproteger a posição N7 protegida para obter uma xantina 8-substituída.

Conforme usado aqui, um grupo "alquilo" é um grupo de hidrocarboneto alifático saturado. Um grupo alquilo pode ser linear ou ramificado, e pode ter, por exemplo, de 1 a 6 átomos de carbono numa cadeia. Os exemplos de grupos alquilo de cadeia linear incluem, porém não lhe estão limitados, etilo e butilo. Os exemplos de grupos alquilo ramificados incluem, porém não lhe estão limitados, isopropilo e terc-butilo.

Um grupo "alquenilo" é um grupo carbonado alifático que tem pelo menos uma ligação dupla. Um grupo alquenilo pode ser linear ou ramificado e pode ter, por exemplo, de 3 a 6 átomos de carbono numa cadeia e 1 ou 2 ligações duplas. Os exemplos de grupos alquenilo incluem, porém não lhe estão limitados, alilo e isoprenilo. 14 ΡΕ1230243

Um grupo "alquinilo" é um grupo carbonado alifático que tem pelo menos uma ligação tripla. Um grupo alquinilo pode ser linear ou ramificado, e pode ter, por exemplo, de 3 a 6 átomos de carbono numa cadeia e 1 ou 2 ligações triplas. Os exemplos de grupos alquinilo incluem, porém não lhe estão limitados, propargilo e butinilo.

Um grupo "arilo" é um grupo fenilo ou naftilo, ou um derivado do mesmo. Um grupo "arilo substituído" é um grupo arilo que é substituído com um ou mais substituintes, tais como alquilo, alcoxi, amino, nitro, carboxi, carbo-alcoxi, ciano, alquilamino, dialquilamino, halo, hidroxi, hidroxialquilo, mercaptilo, alquilmercaptilo, tri-haloal-quilo, carboxialquilo, sulfóxi, ou carbamoílo.

Um grupo "aralquilo" é um grupo alquilo que é substituído com um grupo arilo. Um exemplo de um grupo aralquilo é o benzilo.

Um grupo "cicloalquilo" é um anel alifático de, por exemplo, 3 a 8 átomos de carbono. Os exemplos de grupos cicloalquilo incluem o ciclopropilo e o ciclo-hexilo.

Um grupo "acilo " é um grupo alquilo-C(=0) linear ou ramificado ou um grupo formilo. Os exemplos de grupos acilo incluem os grupos alcanoílo (por exemplo, tendo de 1 a 6 átomos de carbono no grupo alquilo). 0 acetilo e o pivaloílo são exemplos de grupos acilo. Os grupos acilo podem ser substituídos ou não substituídos. 15 ΡΕ1230243

Um grupo "carbamoílo" é um grupo tendo a estrutura H2N-CO2-. "Alquilcarbamoílo" e "dialquilcar-bamoílo" referem-se aos grupos carbamoílo em que o azoto tem um ou dois grupos alquilo ligados em substituição dos hidrogénios, respectivamente. Por analogia, os grupos "arilcarbamoílo" e "arilolquilcarbamoílo" incluem um grupo arilo em substituição de um dos hidrogénios e, no último caso, um grupo alquilo em substituição do segundo hidrogénio.

Um grupo "carboxilo" é um grupo -COOH.

Um grupo "alcoxi" é um grupo alquilo-O-, em que o "alquilo" é como anteriormente descrito.

Um grupo "alcoxialquilo" é um grupo alquilo como anteriormente descrito, com um hidrogénio substituído por um grupo alcoxi, como anteriormente descrito.

Um grupo "halogénio" ou "halo" é 0 flúor, 0 cloro, o bromo ou o iodo.

Um grupo "heterociclilo" é uma estrutura de anel com 5 a cerca de 10 elementos, em que um ou mais dos átomos no anel é um elemento diferente do carbono, por exemplo, N, 0, S. Um grupo heterociclilo pode ser aromático ou não-aromático, í.e., pode ser saturado, ou pode ser parcial ou completamente insaturado. Os exemplos de grupos hetero- 16 ΡΕ1230243 ciclilo incluem o piridilo, o imidazolilo, o furanilo, o tienilo, o tiazolilo, o tetra-hidrofuranilo, o tetra-hidropiranilo, o morfolinilo, o tiomorfolinilo, o indolilo, o indolinilo, o isoindolinilo, o piperidinilo, o pirimi-dinilo, o piperazinilo, o isoxazolilo, o isoxazolidinilo, o tetrazolilo, e o benzimidazolilo.

Um grupo "heterociclilo substituído" é um grupo heterociclilo em que um ou mais hidrogénios são substituídos por substituintes tais como o alcoxi, o alquilamino, o dialquilamino, o carbalcoxi, o carbamoílo, o ciano, o halo, o tri-halometilo, o hidroxi, a carbonilo, o tiocarbonilo, o hidroxialquilo ou o nitro.

Uma "hidroxialquilo" significa um grupo alquilo substituído por um grupo hidroxi.

Um grupo "sulfamoílo" tem a estrutura -S(0)2NH2. "Alquilsulfamoílo" e "dialquilsulfamoílo" referem-se aos grupos sulfamoílo em que o azoto tem um ou dois grupos alquilo ligados em substituição dos hidrogénios, respec-tivamente. Por analogia, os grupos "arilsulfamoílo" e "arilolquilsulfamoílo" incluem um grupo arilo em substituição de um dos hidrogénios e, no último caso, um grupo alquilo em substituição do segundo hidrogénio.

Um "antagonista" é uma molécula que se liga a um receptor sem activar o receptor. Este compete com o ligante endógeno por este sítio de ligação e, assim, reduz a capacidade do ligante endógeno de estimular o receptor. 17 ΡΕ1230243

No contexto da presente invenção, um "antagonista selectivo" é um antagonista que se liga a um subtipo especifico de receptor para adenosina com maior afinidade do que aos outros subtipos. Os antagonistas da invenção podem, por exemplo, ter alta afinidade pelos receptores Ai ou pelos receptores A2a e serem selectivos, tendo (a) afinidade de ligação nanomolar por um destes dois subtipos e (b) pelo menos 10 vezes, mais preferivelmente 50 vezes, e mais preferivelmente ainda pelo menos 100 vezes, maior afinidade por um subtipo do que pelo outro. A invenção proporciona diversas vantagens. Os compostos são facilmente manufacturados a partir de materiais de partida facilmente disponíveis, num número de passos relativamente pequeno. Os compostos têm diversas regiões variáveis, permitindo a optimização sistemática. Como antagonistas específicos, os compostos têm ampla utilidade medicinal. Visto que os compostos são antagonistas altamente potentes e específicos, estes podem (1) ser usados em baixas doses para minimizar a probabilidade de efeitos colaterais e (2) ser incorporados em diversas formas de dosagem, incluindo, porém não lhe estando limitadas, pílulas, comprimidos, cápsulas, aerossóis, supositórios, formulações líquidas para ingestão ou injecção, suplementos dietéticos, ou preparações tópicas. Além das aplicações médicas, o composto antagonista pode ser usado no tratamento de animais de criação e de estimação. 18 ΡΕ1230243 A não ser que de outra forma definidos, todos os termos técnicos e científicos usados aqui têm o mesmo significado conforme comummente entendido por um versado na técnica à qual pertence esta invenção. Embora métodos e materiais similares ou equivalentes àqueles descritos aqui possam ser usados na prática ou teste da presente invenção, métodos e materiais adequados são descritos abaixo. Todas as publicações, pedidos de patente, patentes, e outras referências mencionadas aqui são incorporadas por referência em sua totalidade. Ademais, os materiais, os métodos, e os exemplos são ilustrativos somente e não pretendem ser limitativos. Outras características e vantagens da invenção serão aparentes a partir da descrição detalhada que se segue, e a partir das reivindicações.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS A figura 1 é uma série de ilustrações dos compostos da invenção. A figura 2 é uma representação esquemática da síntese dos compostos da invenção. A figura 3 é uma representação esquemática de uma rota alternativa da síntese dos compostos da invenção. A figura 4 é uma representação esquemática da transformação do composto (VII) na olefina (XII) correspondente, através de um álcool (X). 19 ΡΕ1230243 A figura 5 é uma representação esquemática de mais uma outra rota da síntese dos compostos da invenção. A figura 6 é uma representação esquemática da síntese do composto (XXI) que é o material de partida usado na reacção mostrada na figura 3. A figura 7 é uma representação esquemática de uma rota alternativa da síntese do composto (XXI). A figura 8 é uma representação esquemática da síntese de diversos compostos da invenção.

DESCRIÇÃO DAS FORMAS DE REALIZAÇÃO PREFERIDAS

Em geral, a invenção compreende antagonistas altamente potentes e selectivos do receptor de adenosina Ai. Os antagonistas selectivos do receptor da adenosina A2a são também divulgados. Síntese dos Compostos Antagonistas da Adenosina

Os compostos da invenção podem ser preparados por diversos métodos conhecidos. Dois métodos gerais são descritos aqui. Cada um deles emprega um material de partida comum, o 5,6-diaminouracilo dissubstituído em 1,3 (composto (VI)), como mostrado nos dois esquemas abaixo. Os 5,6-diaminouracilos dissubstituídos em 1,3 podem ser preparados por tratamento da ureia substituída simétrica ou não simetricamente correspondente com ácido cianoacético, 20 ΡΕ1230243 seguido por ni-trosação e redução (ver, por exemplo, J. Org. Chem. 16, 1879, 1951; Can. J. Chem. 46, 3413, 1968, incorporados aqui por referência). As xantinas não simetricamente substituídas podem ser obtidas pelo método de Mueller (J. Med. Chem. 36, 3341, 1993, incorporado aqui por referência) . Neste método, o β-aminouracilo é mono-alquilado especificamente no N3 do uracilo sob condições de Vorbruggen. Alternativamente, a posição NI ou N3 não substituída pode ser funcionalizada (por exemplo, por alquilação) no último passo da síntese.

No primeiro método geral, o 5,6-diaminouracilo dissubstituído em 1,3 (composto (VI)) pode primeiramente sofrer uma reacção de fecho do anel para produzir um intermediário de xantina, que está não substituído na posição 8. Este intermediário, por sua vez, pode ligar-se com um composto precursor da porção de Z-R3 para produzir as xantinas substituídas em 8 desejadas. Com referência ao esquema 1 abaixo, o material de partida 5,6-diaminouracilo dissubstituído em 1,3 (í.e., o composto (VI)) primeiramente reage com o HC(OEt)3 para sofrer uma reacção de fecho do anel, para produzir um intermediário da xantina que está não substituído na posição 8 (í.e., o composto (A)). Este intermediário, após ser protegido por um grupo protector de amino (por exemplo, com THP ou BOM na posição do N7) , sofre adicionalmente uma reacção de ligação, na presença de uma base forte (por exemplo, o n-butil-lítio (nBuLi) ou a lítio di-isopropil-amida (LDA)), com um composto precursor da porção de Z-R3 (por exemplo, um aldeído ou uma cetona) para produzir um álcool (í.e., o composto (C)) . O grupo 21 ΡΕ1230243 hidroxilo do álcool pode então ser reagido para converter o álcool numa amina, num mercaptano, num éter, numa lactona (por exemplo, o composto (E)), ou noutro composto funci-onalizado, por métodos bastante conhecidos para aqueles versados na técnica. A protecção de N7 pode então ser removida para obter um produto desprotegido (í.e., o composto (F)), o qual pode ser adicionalmente funciona-lizado para produzir os compostos desta invenção. Ver, por exemplo, os Exemplos 1-6, 51, e 52.

Esquema 1

No segundo método geral, os compostos da invenção 22 ΡΕ1230243 podem ser preparados por reacção do material de partida, um 5,β-diaminouracilo dissubstituido em 1,3, com um composto precursor da porção de Z-R3 (por exemplo, os aldeídos ou os ácidos carboxílicos ou os cloretos de ácidos carboxílicos), para formar um intermediário de uracilo 6-amida substituído, o qual, por sua vez, pode sofrer uma reacção de fecho do anel para produzir um composto de xantina desejado. Com referência ao esquema 2 abaixo, o material de partida 5,6-diaminouracilo dissubstituido em 1,3 (i.e., o composto (VI)) primeiramente liga-se com um composto precursor substituído com dicarboxilo/éster da porção de z-R3, HOOC-Z-R3-COORa (i.e., o composto (G) ; Ra representa H, C1-5 alquilo, ou benzilo, o anel fenilo sendo opcionalmente substituído com 1-3 substituintes seleccionados do grupo constituído por halo, hidroxilo, ou C1-3 alcoxi), para produzir um intermediário de uracilo 6-amida substituído (i.e., 0 composto (H)) por reacções que são bastante conhecidas para um versado na técnica (por exemplo, empregando reagentes de ligação, tais como 0 hexafluo-

rofosfato de benzotriazol-l-iloxitris(dimetilamina)-fosfónio (BOP), 0 hexafluorofosfato de O-benzo-triazol-1-il-N, N, IW, IW-tetrametilurónio (HBTU) , ou o hexafluorofosfa-to de O-(7-azabenzotriazol-l-il)-N,N, Ν', N'-tetrametilurónio (HATU). Os exemplos de composto (G) incluem 0 monometil-éster de ácido biciclo[3.2.1]octano-1,5-dicarboxílico e o monoetil-éster de ácido biciclo[2.2.2]octano-1,4-dicarbo-xílico. Ver, por exemplo, os Exemplos 8 e 13. O intermediário de uracilo pode então sofrer uma reacção de fecho do anel sob condições básicas (por exemplo, por emprego de KOH 23 ΡΕ1230243 e álcool isopropílico), para produzir um composto de xantina (í.e., o composto (J)), o qual pode sofrer funcio-nalização adicional para produzir os diversos compostos da invenção.

Esquema 2

Os aldeídos, as cetonas, os ácidos carboxílicos e os cloretos de ácidos carboxílicos desejados estão comercialmente disponíveis (por exemplo, a partir da Aldrich Chemical Co., Inc., Milwaukee, Wisc.) ou podem ser facilmente preparados a partir de materiais comercialmente disponíveis, por métodos de síntese bastante conhecidos. Tais métodos ese incluem, porém não lhe estão limitados, reações de oxidação, redução, hidrólise, alquilação e homologação de Wittig. Quanto às referências com relação à preparação dos ácidos bicicloalcano carboxílicos da invenção (por exemplo, o composto (III), o qual é um exemplo de composto (G)), ver, por exemplo, Aust. J. Chem. 38, 1705, 1985; Aust J. Chem. 39, 2061, 1986; J. 24 ΡΕ1230243

Am. Chem. Soc. 75, 637, 1953; J. Am. Chem. Soc. 86, 5183, 1964; J. Am. Chem. Soc. 102, 6862, 1980; J. Org. Chem. 46, 4795, 1981; e J. Org. Chem. 60, 6873, 1995.

Num caso, quando o composto (G) for ácido biciclo[2.2.2]octano-1,4-dicarboxílico ou os seus ésteres correspondentes (em que Z é uma ligação simples e R3 é biciclo[2.2.2]octilo), existem diversos métodos diferentes para a sua preparação. Com referência à figura 2, o material de partida (í.e., o composto (I)) é um l-COORa-4-COORb-ciclo-hexano, em que cada um de Ra e Rb, independentemente, representa H, C1-5 alquilo, ou benzilo, o anel fenilo sendo opcionalmente substituído com 1-3 substi-tuintes seleccionados do grupo constituído por halo, hidroxilo, ou C1-3 alcoxi. De preferência, Ra e Rb são idênticos e representam metilo ou etilo. Três rotas sintéticas diferentes são ilustradas na Figura 2 para a transformação do composto (I) no composto (III) (um exemplo do composto (G)). A rota (1) í.e., passos (A) e (B)) envolve a transformação do composto (I) composto contendo cloroetilo (II) correspondente, o qual, por sua vez, sofre uma reacção de fecho do anel para formar o ácido/éster de 1,4-biciclo[2.2.2]octano (III). Ver os Exemplos 79 e 80. A rota (2) também envolve o composto (II), o qual é transformado no composto (III) através de um outro intermediário, o composto (XXV), o derivado do composto (I) contendo iodoetilo. Ver os Exemplos 101 e 102. A rota (3) (í.e., o passo (TT)) envolve a transformação do composto (I) no ácido/éster de 1, 4-biciclo[2.2.2]octano (III), sem 25 ΡΕ1230243 isolar os intermediários, i.e., o composto (II). Ver o Exemplo 110.

Para preparar o composto (II), o composto material de partida (I) é tratado com cerca de 1 a cerca de 1,5 equivalentes de uma base forte. As bases fortes que podem ser empregadas nesta reacção incluem a litio diisopropilamida (LDA) e o litio isopropilcicloexilamida, sendo a LDA a base preferida. Os solventes típicos para esta reacção incluem o tetra-hidrofurano (THF), o dimetoxietano, a dioxano, e o éter terc-butil-metílico, sendo o THF o solvente preferido. Esta reacção deve ser efectuada numa gama de temperaturas de cerca de -100°C a cerca de -60°C. A mistura reaccional é então tratada com cerca de 1 a cerca de 1,5 equivalentes de bromocloroetano, na presença de pelo menos quatro equivalentes de um reagente, tal como a 1,1,3,3-tetrametilureia (TMU), a 1,3-dimetil-3,4,5,6-tetra-hidro-2(1H) pirimidinona (DMPU), 15- coroa-5, e 12-coroa-4, sendo a TMU preferida. Esta reacção pode ser conduzida em solventes tais como o THF, o dimetoxietano, a dioxano, ou o éter terc-butil-metílico (sendo o THF o solvente preferido) e a uma temperatura variando de cerca de -80°C a cerca de 0°C. A reacção de fecho do anel pode ser efectuada por tratamento primeiramente do composto (II) com cerca de quatro equivalentes de hexilmetil-fosforamida (HMPA), que é então seguido por tratamento com uma base forte, tal como o n-butil-lítio e a diisopropil-amina (DIEA). 26 ΡΕ1230243

Retornando à rota (2) , o intermediário contendo cloroetilo (II) pode ser tratado com iodeto para formar o intermediário contendo iodoetilo desejado (XXV). Os exemplos de iodeto que podem ser empregados nesta reacção incluem o iodeto de sódio, o iodeto de potássio, o iodeto de litio, ou o iodeto de tetrabutilamónio, sendo o Nal o iodeto preferido. A reacção de fecho do anel é então conduzida na presença de uma base forte adequada, tal como a LDA ou a litio isopropilcicloexilamida (sendo a LDA a base preferida), e reagentes tais como a TMU ou a DMPU. Os solventes tipicos para uso nesta reacção incluem o THF, o dimetoxietano, o dioxano, ou o éter terc-butil-metílico (sendo o THF preferido). Esta reacção deve ser conduzida numa temperatura variando de cerca de -80°C a cerca de 25°C.

Com referência à rota (3) , em que o composto material de partida (I) é convertido directamente no composto (III) , o composto (I) é primeiramente tratado com cerca de 1 a cerca de 1,5 equivalentes de uma base forte, tal como a LDA ou a litio isopropilciclo-hexilamida (sendo a LDA a base preferida), num solvente adequado, tal como o THF, o dimetoxietano, a dioxano, o éter terc-butil-metílico (sendo o THF o solvente preferido). A temperatura da reacção deve variar de cerca de -100°C a cerca de -60°C. A mistura reaccional resultante é então tratada com menos do que um equivalente de bromocloroetano, na presença de pelo menos quatro equivalentes de HMPA, a uma temperatura variando de cerca de -80°C a cerca de 25°C. A mistura 27 ΡΕ1230243 reaccional resultante é adicionalmente contactada com cerca de 1 a cerca de 1,5 equivalentes de uma base forte, tal como a LDA ou a lítio isopropilciclo-hexilamida (sendo a LDA a base preferida), e pelo menos quatro equivalentes de HMPA, num solvente adequado, tal como o THF, o dimetoxietano, o dioxano, ou o éter terc-butil-metilico (sendo o THF o solvente preferido). Esta reacção deve ser conduzida numa temperatura variando de cerca de -100°C a cerca de -60°C. Observe que não é necessário o isolamento dos intermediários na rota (3).

Existem muitos métodos para funcionalizar adicionalmente o composto (J), o qual contém um ácido carboxilico ou éster ligado à porção de R3. Por exemplo, o composto (J) pode ser convertido no derivado de ácido acrilico correspondente. Um modo consiste em primeiramente hidrolisar o grupo éster do composto (J) (desde que Ra não seja H) , para produzir o ácido carboxilico correspondente, reduzir o ácido carboxilico para o álcool correspondente, oxidar o álcool para o aldeído correspondente, e então efectuar uma reacção de Wadsworth-Horner-Emmons ou Witting para formar o derivado de ácido acrílico correspondente. Ver, por exemplo, os Exemplos 5, 6, 15, 16, e 17. O composto (J) pode também ser transformado directamente em seu álcool correspondente (ver, por exemplo, o Exemplo 4). Uma variação diferente é transformar o composto (J) directamente no aldeído correspondente. Uma variação adicional é transformar um composto (J) contendo éster no ácido carbo-xílico correspondente, e então directamente no aldeído. 28 ΡΕ1230243

Alternativamente, pode-se funcionalizar o composto precursor da porção de Z-R3 antes de ligar à xantina 1,3-dissubstituída-8-não-substituída no esquema 1 ou ao 5,6-diaminouracilo dissubstituído em 1,3 no esquema 2. Para além disso, os compostos desta invenção podem ser preparados sobre suporte sólido (por exemplo, resina de Wang). Ver o Exemplo 36. A figura 3 divulga um processo alternativo para preparar o composto (XIV), começando com o composto (IV). O processo ilustrado na figura 2 emprega química similar ao ilustrado na figura 2, porém primeiramente prepara-se a cadeia lateral do ácido propiónico sobre a porção biciclo[2.2.2]octilo e então adiciona-se a porção de uracilo 1,3-dissubstituído, seguido por ciclização para resultar o composto (XIV) desejado. Em relação ao composto (XX), R3 e R4 devem ser quimicamente diferentes quanto à sua reactividade (por exemplo, metilo e benzilo). A figura 4 divulga um processo alternativo para a transformação do composto (VII) no álcool (X) correspondente e a transformação subsequente do álcool (X) na olefina (XII). Os passos (F') até (H) são o fecho do anel, seguido por saponificação do éster (VIII) em ácido (IX), seguida por redução ao álcool (X), ver os Exemplos 84, 85, e 86. Alternativamente, o composto (VII) pode sofrer reacções de redução (Passo (Y), ver o Exemplo 103) e ciclização para produzir o composto (X) (passo (Z) , ver, por exemplo, o Exemplo 84a) . Um modo alternativo envolve a 29 ΡΕ1230243 saponificaçâo e a ciclização do composto (VII) para produzir o composto (IX) (passos (Y1) e (Z')). Estas reacções são bastante conhecidas para aqueles versados na técnica. Ver, por exemplo, os Exemplos 85a e 84a. Os passos (I) até (DD) divulgam processos alternativos para a transformação do álcool (X) na olefina correspondente (XII). Especi-ficamente, os passos (J), (AA) e (CC) (ver os Exemplos 89, 104, e 105) são modos alternativos de transformar o aldeído de um carbono do composto (XI) na porção contendo ácido acrílico/éster por meios conhecidos para aqueles versados na técnica.

Com referência à figura 5, os compostos (XXIX) e (XXX) foram anteriormente descritos na literatura (Grob, C.A., Rich, R. Helv. Chim. Acta. 1979, 62, 2802; Ahmed, S.A., Hickmott, P.W. J. Chem. Soc. Perkin Trans. I, 1979, 2180) (i.e., os passos (EE) e (FF)). O composto (XXX) pode ser convertido no composto (XXXI) por métodos bem conhecidos. Por exemplo, o composto (XXX) pode ser reduzido directamente por meio de uma redução de Wolff-Kishner ou Clemmenson. Alternativamente, a funcionalidade cetona do composto (XXX) pode primeiramente ser convertida num derivado de ditiocetal, tal como, por exemplo, um 1,3-ditiano, 1,3-ditiolano ou 1,3-dialquiltiocetal. Este intermediário seria, por sua vez, dessulfurizado por Ni Raney. As manipulações deste tipo do grupo funcional são comuns e são conhecidas para um versado na técnica. Os dois passos seguintes, i.e., os passos (GG) e (HH), representam os exemplos de ligação de um 5, diaminouracilo 30 ΡΕ1230243 dissubstituído em 1,3 com um ácido carboxilico, seguida por fecho do anel mediado por base. No Passo (II), o hidroxilo terciário é convertido no brometo, iodeto ou trifluo-rometanossulfonato correspondente por exposição ao PBR3, TMSBr, TMSI, Kl e H3PO4, ou anidrido trifluorometanos-sulfónico, na presença de uma base não nucleofilica. O composto (XXXV) então seria formado por tratamento de (XXXIV) com um catalisador derivado de um sal de paládio (Pd(OAc)3, PdCl2, Pd (O2CCF3) , etc.) e um ligando de fosfina (PPH3, P(o-tolil)3, etc), seguido por tratamento com uma olefina (tal como o acrilato de metilo, o propiolato de metilo, etc.). A hidrogenação do composto (XXXV), seguida por conversão do éster no ácido correspondente, proporcionaria o composto (XIV). Alternativamente, o éster poderia primeiramente ser convertido no ácido e a hidrogenação então efectuada para também gerar (XIV). A figura 6 divulga um processo para preparar ácido (composto (XXI)), o qual é o material de partida para a figura 3. No passo (LL), o tratamento do composto (XXXI) com o anidrido trifluorometanossulfónico, na presença de uma base, tal como a piridina, proporciona XXXVI (Rg = OTf) . O passo seguinte, i.e., o passo (MM), envolve o tratamento do composto (XXXVI) (Rg = OTf) com um catalisador derivado de um sal de paládio (Pd(OAc)2, PdCl2, Pd(02CCF3)2, etc.) e um ligando de fosfina (PPH3, P(o-tolil)3, etc.), que é então seguido por exposição a uma olefina (acrilato de metilo, propiolato de metilo, etc.) para proporcionar o composto (XXXVII) (em que M = -C=C ou 31 ΡΕ1230243 -CH=CH-) . No passo (NN) , o composto (XXXVII) sofre hidro-genação com paládio sobre carbono, sob uma atmosfera de hidrogénio, para produzir o composto (XXI).

Retornando à figura 7, o composto (X) pode ser convertido no composto (XL) contendo um grupo de partida (LG), tal como, por exemplo, halo (Cl, Br, ou I), mesilato, nosilato, tosilato, e trifluorometanossulfonato. O grupo de partida (LG) pode então ser removido por um éster malónico, tal como, por exemplo, o malonato de dimetilo, na presença de uma base, tal como, por exemplo, o metóxido. O grupo de partida (LG) poderia também ser removido por ácido de Meldrum, na presença de uma base, tal como o metóxido. A conversão dos ésteres ou do anidrido cíclico, no caso do ácido de Meldrum, nos ácidos correspondentes, seguida por descarboxilação, proporciona o composto (XXXV). A figura 8 divulga uma visão detalhada dos métodos sintéticos que podem ser empregados para produzir os diversos compostos da invenção. No Passo 1, o tratamento do composto 7-1 (Z = Br, I ou OTf, e R=H, tetra-hidropiran-2-il-ou 1-pirrolidinilmetil) com um catalisador derivado de um sal de paládio (Pd(OAc)2, PdCl2, Pd(02CCF3)2, etc.) e um ligando de fosfina (PPH3, P(o-tolil)3, etc.) é seguido por exposição ao composto 7-2 (X = Li, ZnCl, MgBr, SnBu3, B(OH)2 e R' C02H, C02Me, C02Et, C=CC02Me, C=CC02Et, CH=CHC02Me, CH=CHC02Et, CH2CH2C02Me, CH2CH2C02Et) para proporcionar o composto 7-3 (R = H, tetra-hidropiran-2-ilo ou 1-pirrolidinilmetilo e R'=C02H, C02Me, C02Et, C=CC02Me, 32 ΡΕ1230243 C=CC02Et, CH=CHC02Me, CH=CHC02Et, CH2CH2C02Me, CH2CH2C02Et) . Quando R = tetra-hidropiran-2-ilo ou 1-pirrolidinilmetilo, o tratamento com ácido (TFA, PPTS, HC1, etc.) proporciona o composto 7-3, onde R =HNa Passo 2, o tratamento do composto 7-2 (Z = Br, I, ou OTf, e R' = C02H, C02Me, C02Et, C=CC02Me, C=CC02Et, CH=CHC02Me, CH=CHC02Et, CH2CH2C02Me, CH2CH2C02Et) com um catalisador derivado de um sal de paládio (Pd(0Ac)2, PdCl2, Pd(02CCF3)2r etc.) e um ligando de fosfina (PPH3, P(o-tolil)3, etc.) é seguido por exposição ao composto 7-1 (X = Li, ZnCl, MgBr, SnBu3, B(OH)2 e R = tetra-hidropiran-2-il- ou 1-pirrolidinilmetil) para proporcionar o composto 7-3 (R = tetra-hidropiran-2-ilo ou 1-pirrolidinilmetilo e R' = C02H, C02Me, C02Et, OCC02Me, C=CC02Et, CH=CHC02Me, CH=CHC02Et, CH2CH2C02Me, CH2CH2C02Et) . Quando R = tetra-hidropiran-2-il- ou 1-pirrolidinilmetil, o tratamento com ácido (TFA, PPTS, HC1, etc.) proporciona o composto 7-3, onde R = Η. O passo 3 divulga uma reacçâo de ligação mediada por HATU da porção de diamino-uracilo com ácido biciclo[2.2.2]octano o qual foi descrito acima). No passo 4, o tratamento do composto 7-4 (X = Cl, Br, I) com um catalisador derivado de um sal de paládio (Pd(OAc)2, PdCl2, Pd(02CCF3)2, etc.) e um ligando de fosfina (PPH3, P(o-tolil)3, etc.) é seguido por exposição a uma olefina (acrilato de metilo, propiolato de metilo, álcool alilico, etc.), para proporcionar o composto 7-5 (R1 = C=CC02Me, C=CC02Et, CH=CHC02Me, CH=CHC02Et, CH2CH2CHO, etc.). O passo 5 divulga uma ciclização promovida por base do uracilo 7-5 até uma xantina do tipo 7-3 (que foi descrita acima). Similarmente, a ciclização promovida com base no uracilo 7-4 33 ΡΕ1230243 até uma xantina do tipo 7-6 no passo 6 foi descrita acima. No passo 7, o tratamento do composto 7-6 (X = Cl, Br, I, OTf) com um catalisador derivado de um sal de paládio (Pd(OAc)2, PdCl2, Pd(02CCF3)2, etc.) e um ligando de fosfina (PPH3, P(o-tolil)3, etc.) é seguido por exposição a uma olefina (acrilato de metilo, propiolato de metilo, álcool alilico, etc.) para proporcionar o composto 7-3 (R = H, R' = C=CC02Me, C=CC02Et, CH=CHC02Me, CH=CHC02Et, CH2CH2CHO, etc.). 0 passo 8 divulga a oxidação do grupo aldeído terminal no composto 7-3 (R = H, R' = CH2CH2CHO) , a qual é efectuada por processos padrões (a. NaCl02, NaH2P04, 2-metil-2-buteno; b. NalCq; etc.).

DEFINIÇÕES

Todas as temperaturas estão em graus Celsius (°C) . TLC refere-se à cromatografia em camada fina. HPLC refere-se à cromatografia líquida de alta pressão. HMPA refere-se à hexilmetilfosforamida. THF refere-se ao tetra-hidrofurano. THP refere-se à tetra-hidropiranilo. 34 ΡΕ1230243 DMSO refere-se ao sulfóxido de dimetilo. DMF refere-se à dimetilformamida. DDQ refere-se à 2,3-dicloro-5,6-diciano-l, 4- benzoquinona. DBU refere-se ao 1,8-diazabiciclo[5,4, 0]undec-7- eno. DBN refere-se ao 1,5-diazabiciclo[4,3,0]non-5- eno. DMAC refere-se à dimetilacetamida. LDA refere-se a diisopropilamideto de lítio. p-TSA refere-se ao mono-hidrato de ácido p-toluenossulfónico. NBS refere-se à N-bromossuccinimida. NCS refere-se à N-clorossuccinimida. TEA refere-se à trietilamina. BOC refere-se ao carbamato de terc-butilo ou ao terc-butoxicarbonilo. 35 ΡΕ1230243

Base de Hunig refere-se à diisopropiletilamina, [ (CH3)2CH]2-N-CH2CH3. DMAP refere-se à dimetilaminapiridina, (CH3)2N-piridin-l-ilo. TFA refere-se a ácido trifluoracético, CF3-COOH. CDI refere-se ao 1,1'-carbonildiimidazole. DIBAL refere-se ao hidreto de diisobutil- alumínio. THAM refere-se ao tris(hidroximetil)aminometano. TMS refere-se ao trimetilsililo. 15-coroa-5 refere-se ao 1,4,7,10,13-pentaoxa-ciclopentadecano. 12-coroa 4 refere-se ao 1,4,7,10-tetraoxaci- clododecano. DMPU refere-se à 1,3-dimetil-3,4,5,6-tetra-hidro-2(1H)-pirimidi nona. TMU refere-se à 1,1,3,3-tetrametilureia.

Solução salina refere-se a uma solução aquosa de cloreto de sódio saturada. 36 ΡΕ1230243

Cromatografia (cromatografia em coluna e de vaporização) refere-se à purificação/separação dos compostos expressos como (suporte, eluente). Entende-se que as fracções apropriadas são reunidas e concentradas para dar o(s) composto(s) desej ado(s). IV refere-se à espectroscopia de infravermelho. FTIR refere-se à espectroscopia de infravermelho por transformada de Fourier. ATR refere-se à reflectância total atenuada. UV refere-se à espectroscopia de ultravioleta. RMN refere-se à espectroscopia de ressonância magnética nuclear (protão) , os deslocamentos químicos são descritos em ppm (d) campo abaixo a partir do tetrame-tilsilano. psi refere-se a libras por polegada quadrada de pressão.

[a] D25 refere-se ao ângulo de rotação da luz polarizada plana (rotação óptica específica) a 25° com a linha D de sódio (589A). EM refere-se à espectrometria de massa expressa 37 ΡΕ1230243 como unidade de m/e, m/z ou massa/carga. [M+H]+ refere-se ao ião positivo de um átomo de origem mais um átomo de hidrogénio. EI refere-se ao impacto de electões. Cl refere- se à ionização quimica. FAB refere-se ao bombardeamento rápido de átomos. A expressão "farmaceuticamente aceitável(is)" refere-se àquelas propriedades e/ou substâncias que são aceitáveis para o paciente de um ponto de vista farma-cológico/toxicológico e à quimica farmacêutica de manufactura de um ponto de vista fisico/quimico em relação à composição, formulação, estabilidade, aceitação pelo paciente e biodisponibilidade.

Os sais de aniões farmaceuticamente aceitáveis incluem os sais dos seguintes ácidos metanossulfónico, clorídrico, bromidrico, sulfúrico, fosfórico, nítrico, benzóico, cítrico, tartárico, fumárico, maléico, CH3-(CH2)n-COOH, onde n é 0 até 4, HOOC- (CH2) n-C00H, onde n é como definido acima.

Quando forem usados pares de solventes, as razões entre solventes usados estão em volume/volume (v/v).

Quando for usada a solubilidade de um sólido num solvente, a razão do sólido para o solvente é peso/volume (p/v).

Ra é H, Ci-5 alquilo, benzilo, onde o anel fenilo 38 ΡΕ1230243 é opcionalmente substituído com um a três halo, hidroxilo, ou Ci-3 alcoxi.

Rb é H, Ci-5 alquilo, benzilo, onde o anel fenilo é opcionalmente substituído com um a três halo, hidroxilo, ou Ci-3 alcoxi. Quando Ra e Rb estiverem ambos presentes na mesma molécula, podem ser iguais ou diferentes.

Rc é H, Ci-5 alquilo, benzilo, onde o anel fenilo é opcionalmente substituído com um a três halo, hidroxilo, ou Ci-3 alcoxi. Quando Ra e Rc estiverem ambos presentes na mesma molécula, podem ser iguais ou diferentes.

Rd é H, Ci-5, benzilo, onde o anel fenilo é opcionalmente substituído com um a três halo, hidroxilo, ou Ci-3 alcoxi. Quando Rc e Rd estiverem na mesma molécula, tal como no composto (XX), devem ser diferentes. Quando Ra e Rd estiverem ambos presentes na mesma molécula, devem ser diferentes.

Re é H, Ci-5 alquilo, benzilo, onde o anel é opcionalmente substituído com um a três halo, hidroxilo, ou Ci-3 alcoxi. Quando Rb e R5 estiverem ambos presentes na mesma molécula, devem ser diferentes.

Rf é - (CH2)n-CO-OR' e -CH=CH-CO-OR', onde n é 0, 1, ou 2 e R' é H ou C1-3 alquilo.

Rg é halo ou triflato. 39 ΡΕ1230243 M é -CH2-CH2-0u -CH=CH-.

Tf refere-se à trifluorometilsulfonilo, -SO2-CF3. LG refere-se ao "Grupo de Partida" e é -O-SO2-fenilo-N02, -OSO2-CH3, -0-S02-fenilo-CH3, ou -0-S02-CF3.

Usos dos Compostos Antagonistas de Adenosina A activação dos receptores da adenosina faz surgir muitas respostas fisiológicas, incluindo as reduções no fluxo sanguíneo renal, as reduções na velocidade de filtração glomerular, e os aumentos na reabsorção de sódio no rim. A activação dos receptores da adenosina reduz a frequência cardíaca, reduz a velocidade de condução, e reduz a contractibilidade. Estes e os outros efeitos da activação dos receptores da adenosina noutros órgãos são processos reguladores normais. Contudo, estes efeitos tornam-se patológicos em muitos estados de doença. Assim, os antagonistas de adenosina têm aplicação extensiva tanto na prevenção como no tratamento da doença. As doenças que podem ser prevenidas e/ou tratadas com os antagonistas dos receptores da adenosina incluem quaisquer doenças (a) marcadas pela presença de um nível anormal de adenosina e/ou (b) requerendo para tratamento a inibição ou a estimulação da produção e/ou da libertação de adenosina. Tais doenças incluem, porém não lhe estão limitadas, insuficiência cardíaca congestiva, ressuscitação cardiopul- 40 ΡΕ1230243 monar, choque hemorrágico, e outros distúrbios cardíacos e circulatórios; distúrbios degenerativos do sistema nervoso central; distúrbios respiratórios (por exemplo, asma bronquíca, doenças alérgicas do pulmão), e muitas doenças para as quais seja indicado o tratamento diurético (por exemplo, insuficiência renal aguda e crónica, insuficiência renal, hipertensão). As doenças degenerativas, tais como a doença de Parkinson, a depressão, o dano traumático ao cérebro, a deficiência neurológica após o acidente vascular cerebral, o trauma neonatal do cérebro, a dislexia, a hiperactividade, e a fibrose cística, todas têm estado ligadas à actividade do receptor de adenosina. As outras doenças nas quais o tratamento com os antagonistas dos receptores de adenosina podem ter utilidade terapêutica incluem a ascite cirrótica, a apnéia neonatal, a insuficiência renal associada com terapia diurética tradicional, a diabetes, e a asma.

Adicionalmente, os requerentes descobriram que a administração dos antagonistas dos receptores de adenosina Ai altamente selectivos e potentes, por exemplo, pode fazer surgir uma resposta diurética quando administrados sozinhos ou pode potencializar a resposta diurética aos diuréticos tradicionais. Além disso, a administração dos antagonistas dos receptores da adenosina com os diuréticos tradicionais atenua a redução da taxa de filtração glomerular induzida pelos diuréticos tradicionais. O tratamento é aplicável, por exemplo, em doenças edematosas, tais como a insuficiência cardíaca congestiva e a ascite. 41 ΡΕ1230243

Administração dos Compostos Antagonistas de Adenosina

Os compostos podem ser administrados a um animal (por exemplo, um mamífero, tal como um ser humano, primata não-humano, cavalo, cão, vaca, porco, ovelha, cabra, gato, ratinho, rato, porquinho-da-índia, coelho, hamster, gerbo, doninha, lagarto, réptil, ou ave). Os compostos podem ser administrados de qualquer maneira adequada para a administração dos compostos farmacêuticos, incluindo, porém não lhe estando limitados, pílulas, comprimidos, cápsulas, aerossóis, supositórios, formulações líquidas para a ingestão ou a injecção ou para uso como colírios ou gotas para o ouvido, suplementos dietéticos, e preparações tópicas. Os compostos podem ser administrados de forma oral, intranasal, transdérmica, intradérmica, vaginal, intra-aural, intra-ocular, bucal, rectal, transmucosa, ou por inalação, implantação (por exemplo, de forma cirúrgica) , ou administração intravenosa.

Opcionalmente, os compostos podem ser administrados em conjunção com uma composição farmacêutica não modificadora da adenosina (por exemplo, em combinação com um diurético não modificador de adenosina, como descrito, por exemplo, no pedido copendente PCT/US99/08879, depositado em 23 de Abril de 1999, incorporado aqui por referência em sua totalidade). A invenção será adicionalmente descrita nos 42 ΡΕ1230243 exemplos que se seguem, os quais não limitam o escopo da invenção descrito nas reivindicações.

EXEMPLOS

Exemplo 1 8-(3-Oxo-2-oxa-biciclo[2.2.2]oct-l-il)-1,3-dipropil-3, 7-di-hidro- purino-2,6-diona A 1,3-dipropil-7-(tetra-hidropiran-2-il)-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona (3,0 g, 9,37 mmol) foi dissolvida em 100 ml de THF anidro e arrefecida até 78°C. O nBuLi (2,5 M em hexanos, 4,70 ml) foi adicionado, seguido pelo éster de etilo de ácido 4-oxo-ciclo-hexanocarboxílico (9,37 mmoles, 1,5 ml) e a mistura reaccional foi lentamente aquecida até à t.a. e agitada à t.a. durante a noite. No dia seguinte, a reacção foi arrefecida bruscamente com NH4C1 aq. sat. A reacção foi diluida com água e extraida com EtOAc. A camada orgânica foi seca e concentrada sob pressão reduzida. A purificação por cromatografia (hex/EtOAc a 2:1) proporcionou 1,30 g do derivado de álcool desejado.

Este produto (290 mg, 0,592 mmol) foi dissolvido em 3 ml de THF e uma solução aq. de LiOH (2M, 0,60 ml) foi adicionada. A mistura de reacção foi agitada à t.a. por 18 h. Foi então arrefecida bruscamente com ácido citrico aq. a 10 % e extraida com EtOAc. A camada orgânica foi seca (Na2S04) e concentrada. 43 ΡΕ1230243 O ácido resultante foi dissolvido em anidrido acético (3 ml) e refluxado por 1 h. Foi então arrefecida até à t.a. e concentrado. 0 resíduo resultante foi dissolvido em EtOAc e lavado com NaHCCb aq. sat., salmoura, seco (Na2S04) , e concentrado. A purificação por cromatografia (EtOAc/hex a 2:1) proporcionou o composto do título. EM (ES+) 361.

Exemplo 2 8-(2-Oxa-biciclo[2.2.2]oct-l-il)-1,3-dipropil-3,7-di-hidro-purina 2,6-diona 0 éster de etilo de ácido 4-[2,6-dioxo-l,3-dipropil-7-(tetra-hidropiran-2-il)-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il]-4-hidroxi-ciclo-hexanocarboxílico (Exemplo 1) (270 mg, 0,551 mmol) foi dissolvido em 4 ml de THF anidro, e o LiBH4 (solução a 2,0 M em THF, 0,55 ml) foi adicionado. A mistura reaccional foi agitada à t.a. durante a noite. No dia seguinte, a reacção foi arrefecida bruscamente com ácido cítrico aq. a 10% e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi concentrada sob pressão reduzida e o produto bruto resultante foi purificado por cromatografia (hex/EtOAc a 1:1). O diol puro (90 mg, 0,201 mmol) foi dissolvido em CH2CI2 (5 ml) e a EtsN (1,2 eq) foi adicionada. Isto foi então seguido por adição de MsCl (1.1 eq) . A reacção foi 44 ΡΕ1230243 agitada à t.a. por lhe então arrefida bruscamente com NH4CI aq. sat. e extraída com CH2CI2. A camada orgânica foi seca (Na2S04) e concentrada. O resíduo resultante foi dissolvido em THF (2 ml) e HC1 IN (1 ml) . A mistura reaccional foi agitada à t.a. por 12 h e diluída com H2O e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi seca (Na2S04) e concentrada sob pressão reduzida. A purificação por HPLC usando CH3CN aq. proporcionou o composto do título. EM(ES+) 347 .

Exemplo 3 Éster de 1-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-2-oxa-biciclo[2.2.2]oct-4-ilmetilo do ácido acético O éster de etilo de ácido 4-oxo-ciclo-hexano-carboxílico foi convertido no derivado cetal correspondente de acordo com um procedimento estabelecido (Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, Third Edition). Este derivado cetal (1,0 g, 4,67 mmol) foi dissolvido em THF anidro (15 ml). Num frasco separado, a 2,2,6,6-tetrametilpiperidina (1,2 ml, 1,5 eq) foi dissolvida em THF (30 ml) e arrefecida até -78°C e o nBuLi (2,80 ml, solução a 2,5 M em hexanos, 1,5 eq) foi adicionado. Após 15 min, a solução de cetal foi adicionada e a mistura reaccional foi agitada a -78°C por 1 h. O cloroformato de metilo (0,72 ml, 2 eq) foi adicionado e a mistura de reacção foi aquecida até a t.a. A reacção foi arrefecida bruscamente com NH4C1 45 ΡΕ1230243 aq. sat. e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi seca (Na2S04) e concentrada sob pressão reduzida. A purificação por cromatografia (hex/EtOAc a 2:1) proporcionou o intermediário diéster.

Este diéster (8,0 g, 29,4 mmol) foi dissolvido em Et20 seco (500 ml) e arrefecido até 0°C. O LiAlH4 (2,2 g, 2 eq) foi adicionado em pequenas porções durante um período de 15 min. A mistura reaccional foi agitada a 0°C por 15 min e então aquecida até à t.a. e agitada por 1 h. Foi então arrefecida até 0°C e cuidadosamente arrefecida bruscamente com NaOH aq. a 5% (10 ml) . A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado para proporcionar 3,30 g de intermediário diol.

Este diol (1,60 g, 7,9 mmol) foi dissolvido em piridina (10 ml) e o TsCl (3,3 g, 2,2 eq) foi adicionado. A mistura reaccional foi agitada à t.a. por 18 h. Ela foi então diluída com EtOAc e lavada com ácido cítrico aq. a 10%. A camada orgânica foi seca (Na2S04) e concentrada para proporcionar o derivado de ditosilato.

Este material foi dissolvido em THF (60 ml) e HC1 a 1 N (30 ml). A mistura reaccional foi agitada sob refluxo por 1 h. A mistura reaccional foi arrefecida até à t.a. e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi seca (Na2S04) e concentrada sob pressão reduzida. A purificação por cromatografia (hex/EtOAc a 1:1) proporcionou 2,0 g do derivado de ditosilato de 4,4bis-hidroximetil-ciclo-hexanona. 46 ΡΕ1230243 A 1,3-dipropil-7-(tetra-hidro-piran-2-il)-3, 7-di-hidro-purino-2,6-diona (5,30 g, 16,5 mmol) foi dissolvida em THF anidro (250 ml) e arrefecida até 78°C. O nBuLi (2,5 M em hexanos, 6,60 ml, 1 eq) foi adicionado, seguido pelo derivado de ditosilato de 4,4-bis-hidroximetil-ciclo-hexanona (7,7 g, 1 eq.) e a mistura reaccional foi lentamente aquecida até à t.a. e agitada à t.a. durante a noite. No dia seguinte, a reacção foi arrefecida bruscamente com NH4C1 sat. aq. A reacção foi diluída com água e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi seca e concentrada sob pressão reduzida. A purificação por cromatografia (hex/EtOAc a 2:1) proporcionou 10,4 g do derivado ditosilato xantina.

Este intermediário (9,0 g) foi dissolvido em THF seco (200 ml) e o NaOH em pó (9,0 g) foi adicionado. A mistura reaccional foi agitada sob refluxo por 24 h. Foi então arrefecida até à t.a. e diluída com H2O e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi seca (Na2S04) e concentrada sob pressão reduzida. A purificação por cromatografia (hex/EtOAc a 2:1) proporcionou 5,6 g do derivado mono-tosilato.

Este derivado monotosilato (4,0 g, 6,5 mmol) foi dissolvido em DMSO (70 ml) . O NaOAc (9 g) foi adicionado e a mistura reaccional foi agitada a 70-80°C por 2 dias. A mistura reaccional foi resfriada até à t.a. e diluída com H2O e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi seca 47 ΡΕ1230243 (Na2SC>4) e concentrada. A purificação por cromatografia (hex/EtOAc a 2:1) proporcionou 800 mg do composto do titulo. EM (ES+) 419.

Exemplo 4 8-(4-Hidroximetil-2-oxa-biciclo[2.2.2]oct-l-il)-1,3-dipropil-3,7-di-hidro-purino-2, 6-diona O éster de 1-(2, β-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-2-oxa-biciclo[2.2.2]oct-4-ilme-tilo do ácido acético foi preparado conforme descrito no Exemplo 3. Este derivado acetato (120 mg, 0,287 mmol) foi dissolvido em MeOH (5 ml) . O K2CO3 (200 mg, 5 eq) foi adicionado como uma solução em 5 ml de H2O. A mistura reaccional foi agitada à t.a. por 2 h. A mistura reaccional foi diluida com H20 e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi seca (Na2S04) e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi purificado por HPLC preparativa usando o CH3CN aq. para proporcionar o composto do título. EM (ES+) 377.

Exemplo 5 Ácido 1-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-pu-rin-8-il)2-oxabiciclo-[2.2.2]octano-4-carboxílico O éster de 1-(2, β-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-2-oxa-biciclo[2.2.2] oct-4-ilmetilo do ácido acético foi preparado conforme descrito 48 ΡΕ1230243 no Exemplo 3. Este derivado acetato (400 mg) foi dissolvido em 3 ml de CH2CI2 e 3 ml de di-hidropirano. O PPTS (10 mg) foi adicionado e a mistura reaccional foi agitada à T.A. por 18 h. A mistura reaccional foi diluída com CH2CI2 e lavada com NaHC03, ácido cítrico aq. a 5 % e salmoura. A camada orgânica foi seca (Na2S04) e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo resultante foi dissolvido em 10 ml de MeOH e o K2CO3 (450 mg) foi adicionado como uma solução em 10 ml de H2O. A mistura reaccional resultante foi agitada à t.a. por 18 h. Foi então diluída com H2O e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi seca (Na2S04) e concentrada para proporcionar 0 derivado de álcool, a 8-(4-hidroxi-metil-2-oxabiciclo[2.2.2]oct-4-il)-1,3-dipropil-7-(tetra-hidro-piran-2-il)-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona.

Este material (320 mg, 0,7 mmol) foi dissolvido em 8 ml de DMF. O PDC (1,0 g, 4 eq) foi adicionado e a mistura reaccional foi agitada à t.a. por 18 h. A mistura reaccional foi diluída com 3 ml de ácido cítrico aq. a 10% e 20 ml de H20 e rapidamente extraída com EtOAc. A camada orgânica foi seca (Na2S04) e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em 10 ml de H2O e 20 ml de CH3CN, juntamente com 1 ml de TFA. A mistura reaccional foi agitada à t.a. por 18 h. A mistura reaccional foi concentrada. O resíduo resultante foi purificado por HPLC preparativa usando CH3CN aq. para proporcionar o composto do título. EM (ES+) 391. 49 ΡΕ1230243

Exemplo 6 Ácido 3-[1-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin_8-il)-2-oxa-biciclo-[2.2.2]oct-4-il]-acrílico A 8-(4-hidroximetil-2-oxa-biciclo[2.2.2]oct-4-il)-1,3-dipropil-7(tetra-hidro-piran-2-il)-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona foi sintetizada de acordo com o procedimento delineado no EXEMPLO 4. Este derivado álcool (140 mg, 0,3 mmol) foi dissolvido em 5 ml de CH2CI2 juntamente com o reagente de Dess-Martin (Lancaster, 155 mg, 1,2 eq) . A mistura reaccional foi agitada à t.a. por 1 h. A mistura reaccional foi diluída com sulfito de sódio aq. (1 M) e extraída com CH2CI2. A camada orgânica foi seca (Na2S04) e concentrada sob pressão reduzida para proporcionar o intermediário aldeído.

Este material foi imediatamente dissolvido em 4 ml de THF anidro. Num frasco separado, 0 fosfonoacetato de trimetilo (60pL, 1,2 eq) foi dissolvido em 3 ml de THF anidro e arrefecido até 0°C e o KHDMS (0,5 M em PhMe, 730yL) foi adicionado. Esta mistura foi agitada a 0°C por 10 min e então adicionada à solução do aldeído. A mistura reaccional foi agitada à t.a. por 3 h e então arrefecida bruscamente com NH4C1 aq. sat. e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi seca (Na2S04) e concentrada. O resíduo resultante foi dissolvido em 4 ml de THF e 4 ml de H20 contendo LiOH (4 eq.) e agitado à t.a. por 18 h. A mistura 50 ΡΕ1230243 reaccional foi diluída com ácido cítrico aq. e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi seca (Na2S04> e concentrada. A purificação por HPLC preparativa usando CH3CN aq. proporcionou o composto do título. EM (ES+) 417.

Exemplo 7 Ácido 3-[1-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-2-oxa-biciclo-[2.2.2]oct-4-il]-propiónico Ácido 3-[1-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-2-oxa-biciclo-[2.2.2]oct-4-il]-acrílico foi dissolvido em 50 ml de MeOH. Pd a 10% sobre C (10 mg) foi adicionado e a mistura reaccional foi hidrogenada à T.A. sob 379, 21 kPa (55 psi) de H2 por 30 min. A mistura reaccional foi filtrada através de uma almofada de Celite e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para proporcionar o composto do título. EM (ES+) 419.

Exemplo 8 Ácido 5-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[3.2.1]octano-l-carboxílico A uma solução de éster de monometilo do ácido biciclo[3.2.1]octano-1,5-dicarboxílico (Delia, E.W.; Tsana-ktisides, J. Aust. J. Chem. 1985, 38, 1705; Delia, E.W.; Tsanaktsidis, J. Aust. J. Chem. 1986, 39, 2061); (5,94 mmoles, 1,26 g), HATU (5,94 mmol, 2,26 g), e cloridrato de 5,6-diamino-l,3-dipropil-lH-pirimidino-2,4-diona (Daly, 51 ΡΕ1230243 J.W. e col., J. Med. Chem., 1985, 28 (4), 487) (5,94 mmol, 1,56 g) em DMF (25 ml) foi adicionada a iPí^NEt (17,82 mmol, 3,1 ml). A reacção foi agitada durante a noite à t.a. Foi concentrada na bomba para remover a DMF. O residuo foi dissolvido em EtOAc e lavado com HC1 IN, NaHC03 a 5%, e salmoura, e seco (MgS04) . A filtração e a evaporação seguidas por cromatografia de coluna flash, eluindo com EtOAc/hexanos a 3:1, proporcionaram o produto (0,7 g, 28%) como um óleo. EM (ES+) 443,1 (M+Na, 100%), 421,4 (M+H, 10%) .

Uma solução de éster de etilo de ácido 5— (6— amino-2,4-dioxol,3-dipropil-l,2,3,4-tetra-hidro-pirimidin-5-ilcarbamoil)-biciclo[3.2.1]octano-l-carboxilico (0,238 mmol, 0,10 g) em 20% de NaOH (2,0 ml) e MeOH (10,0 ml) foi agitada e refluxada 5 h. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente e então concentrada para remover o MeOH. A solução aquosa foi acidificada (pH 2-3) com HCl conc. e então extraída com EtOAc. Os extractos de EtOAc combinados foram lavados com H2O e salmoura, e secos (MgS04) . A filtração e a evaporação seguidas por HPLC de fase inversa proporcionaram o produto (0,039 g, 42%) como um sólido. EM (ES+) 389,12 (M+H, 100%)

Exemplo 9 8-(4-hidroxi-2,6-dioxa-triciclo[3.3.1.03,7]non-l-il)-1,3-dipropil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona

Uma solução de LDA foi preparada a -78°C por 52 ΡΕ1230243 adição de n-BuLi (1,8 M em hexanos, 1,7 ml) a uma solução de 1PR2NH (3,61 mmoles, 0,506 ml) em THF (25 ml). Após a adição, a LDA foi envelhecida a -78°C por 45 min. Foi-lhe adicionada lentamente, a -78°C, uma solução de 1,3-dipropil-7- (tetra-hidropiran-2-il)-3,7-di-hidropurino-2,6-diona (Exemplo 52) (2,78 mmol, 0,89 g) em THF (35 ml). Após agitar mais lha -78°C, uma solução de 8-oxa-bici-clo [3.2.1]oct-6-en-3-ona (Mann, J e col., J. Chem. Soc. Perkin Trans I 1992, 787) (2,78 mmol, 0,345 g) em THF (5 ml) foi adicionada. A reacção foi agitada durante a noite, com aquecimento até à temperatura ambiente. Foi arrefecida bruscamente por adição de NH4C1 saturado e extraida com EtOAc. Os extractos orgânicos combinados foram lavados com NH4CI saturado, H20 e salmoura, e secos (MgS04) . A filtração e a evaporação seguidas por cromatografia de coluna flash, eluindo com um gradiente de EtO-Ac/CH2Cl2, deram o produto ligado (0,55 g, 45%). EM (ESP+, 60V): 445,07 (M+H, 35%), 361,06 (48), 343, 05 (100%) . A uma solução de 8-(3-hidroxi-8-oxa-biciclo-[3.2.1]oct-6-en-3-il)-1,3-dipropil-7-(tetra-hidropiran-2-il)-3,7-di-hidropurino-2,6-diona (preparada como descrito acima) (0,225 mmol, 0,10 g) em iPrOH (2 ml) e H20 (1 ml) foi adicionada a MMPP (80%, 0,45 mmol, 0,223 g) numa porção. Após 5d à temperatura ambiente, a reacção foi arrefecida bruscamente por adição de Na2S203 aq. sat. e concentrada para remover o iPrOH. O resíduo aquoso foi dividido entre o EtOAc e o NaHC03 sat. Os extractos 53 ΡΕ1230243 orgânicos foram lavados com H2O e salmoura, e secos (MgS04) · A filtração e a evaporação proporcionaram o produto (0,093 g, 90%) como uma espuma. 13C RMN (75 MHz, CDCI3) : 11, 50, 11, 63, 21,55, 21,61, 21,72, 23,00, 25,01, 32,17, 37,96, 40,42, 43,52, 45,19, 54,46, 54,62, 70,46, 70,79, 71,51, 71,64, 86,09, 107,18, 147,34, 151,21, 155,19, 157,82.

A uma solução de 8-(4-hidroxi-2,6-dioxa-trici-clo [3.3.1. O3'7] non-l-il) -1,3-dipropil-7- (tetra-hidro-piran-2-il)-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona (0,065 mmol, 0,030 g) em THF/MeOH 1:1 (6 ml) foi adicionado HC1 IN (3 gotas). A reacção foi agitada à temperatura ambiente 4 h e então concentrada até a secura. O resíduo foi purificado por HPLC de fase inversa, proporcionando o produto (0,0094 g, 38%). 3H RMN (400 MHz, dH-DMSO): 0,80-0,89 (m, 6H), 1,48-1,56 (m, 2H), 1,60-1, 70 (m, 2H) , 1,9-2,09 (m, 2H) , 2,2-2,25 (m, 1H), 3,78-3,82 (m, 2H) , 3,89-3,91 (m, 2H), 3,99 (s, 1H), 4,21 (br s, 1H) , 4,51 (br s,l H) , 4,80 (m, 1H) .

Exemplo 10 8-(5-Hidroximetil-biciclo[3.2.1]oct-l-il)-1,3-dipropil-3,7-di-hidropurino-2,6-diona A uma solução de éster de metilo do ácido 5-(6-amino-2,4-dioxol,3-dipropil-l,2,3,4-tetra-hidro-pirimidin-5-ilcarbamoil)-biciclo[3.2.1]octano-l-carboxílico (prepa- 54 ΡΕ1230243 rado como descrito para o Exemplo 8) (0,714 mmol, 0,30 g) foi adicionado o LiBH4(2M em THF, 0,54 ml). Após agitação durante a noite à temperatura ambiente e então ao refluxo 90 min., a reacção foi arrefecida bruscamente à temperatura ambiente por adição de HC1 IN, diluída com H20 e extraída com EtOAc. Os orgânicos combinados foram lavados com NaHCOs, H20, e salmoura, e secos (MgS04) . A filtração e a evaporação proporcionaram o produto (0,20 g, 71%) como um óleo. EM (ES+) 415,15 (M+Na, 100%), 393,5 (M+H, 48%).

Uma solução de (6-amino-2,4-dioxo-l,3-dipropil-1,2,3,4-tetra-hidro-pirimidin-5-il)-amida de ácido 5-hidro-ximetil-biciclo[3.2.1]octano-l-carboxílico (0,51 mmol, 0,20 g) em 20% de NaOH (2,0 ml) e MeOH (10,0 ml) foi agitada e refluxada durante a noite. A reacção foi arrefecida até a temperatura ambiente e então concentrada para remover o MeOH. O aquoso foi acidificado (pH 2-3) com HC1 conc. e então extraído com EtOAc. Os extractos de EtOAc combinados foram lavados com NaHC03 saturado, H20 e salmoura, e secos (MgS04) . A filtração e a evaporação seguidas por croma-tografia de vaporização eluindo com Et0Ac/CH2Cl2 a 3:2 deram o composto do título (0,077 g, 40%) como um óleo. 13C RMN (100 MHz, CDC13) : 11,53 (q) , 11,74 (q) , 20,26 (t) , 21,71 (t), 31,62 (t), 34,15 (t) , 37,29 (t) , 43, 49 (s) , 45, 54 (t), 45, 67 (t) , 46,14 (t) , 46, 90 (t) , 70,51 (t) , 71,11 (s), 107,03 (s), 149,25 (s), 151,54 (s), 155,88 (s), 162,58 (s). 55 ΡΕ1230243

Exemplo 11 Ácido [1-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-pu-rin-8-il)-2,6-dioxa-triciclo-[3.3.1.O3,7]non-4-iloxi]-acético A uma solução de 8- (4-hidroxi-2,6-dioxa-trici-clo[3.3.1.O3'7]non-lil)-1,3-dipropil-7-(tetra-hidro-piran-2-il)-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona (Exemplo 9) (0,065 mmol, 0,030 g) em THF (2 ml) foi adicionado o NaH (dispersão a 60%, 0,068 mmol, 0,0027 g) numa porção. A reacção foi agitada à temperatura ambiente 1 h, e então o bromoacetato de terc-butilo (0,068 mmol, 10 pL) foi adicionado. Após 3d, a reacção foi arrefecida bruscamente com NH4CI saturado e extraida com EtOAc (3X). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura e secos (MgSCu) . A filtração e a evaporação produziram o produto (0,059 g) contaminado com bromoacetato de terc-butilo. EM (ES+) 575,15 (M+H).

Uma solução de éster de terc-butilo de ácido {1-[2, 6-dioxo-l,3-dipropil-7-(tetra-hidropiran-2-il)-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il]-2,6-dioxa-triciclo[3.3.1.03'7]-non-4-iloxi}-acético (0,10 mmol, 0,059 g) em CH2CI2 (1 ml) foi tratada com TFA (1 ml) e agitada à temperatura ambiente durante a noite. A reacção foi concentrada até à secura e o resíduo purificado por HPLC de fase inversa para dar o produto (0,0036 g, 8%). EM (ES+) 435, 13 (M+H). 56 ΡΕ1230243

Exemplo 12 Ácido [5-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-pu-rin-8-il)-biciclo-[3.2.1]oct-l-il]-acrílico A uma solução de ácido 5-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6, 7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[3.2.1]octano-1-carboxílico (Exemplo 8) (1,29 mmol, 0,50 g) , HATU (1,29 mmol, 0,49 g), e cloridrato de N, O-dimetil-hidroxilamina (1,29 mmol, 0,126 g) em DMF (12 ml) foi adicionada a iPR2NEt (3,86 mmol, 0,67 ml). A reacção foi agitada durante a noite à t.a. Foi concentrada na bomba para remover a DMF. O resíduo foi dissolvido em EtOAc e lavado com HC1 IN, NaHC03 sat., e salmoura, e seco (MgS04) . A filtração e a evaporação deram o produto (0,791 g) contaminado com DMF. EM (ES+) 432,13 (M+H) A uma solução de metoxi-metil-amida de ácido 5-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[3.2.1]octano-l-carboxílico (0,232 mmol, 0,100 g) em THF (3 ml), a -78°C, foi adicionada uma solução de LiAlH4 (1M em THF, 0,52 ml) . Após a adição, a reacção foi agitada a -78°C, 30 min, então a 0°C, 30 min. A reacção foi arrefecida brusca e cuidadosamente pela adição sequencial de H20 (20 pL) , 20% de NaOH (20 pL) e H20 (40 pL) . A suspensão foi agitada rapidamente durante a noite, então filtrada através de Celite, enxaguando o frasco e o bolo generosamente com THF. A evaporação seguida por cromatografia de vaporização, eluindo com 5% de THF/CH2C12, 57 ΡΕ1230243 deu o produto (0,048 g, 56%) como um óleo. EM (ES+) : 373, 17 (M+H). A uma solução de fosfonoacetato de trimetilo (0,310 mmol, 0,056 g) em THF (4 ml), a 0°C, foi adicionada uma solução de KHMDS (0,5 M em PhMe, 0,6 ml). Após agitar 45 min, uma solução de 5-(2, 6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[3.2.1]octano-l-carbal-deído (0,129 mmol, 0,048 g) em THF (2 ml) foi adicionada lentamente. Após agitar durante a noite à temperatura ambiente, a reacção foi arrefecida bruscamente com NH4C1 saturado e extraída com EtOAc. Os orgânicos combinados foram lavados com NaHC03 saturado, salmoura, e secos (MgS04) . A filtração e a evaporação produziram o produto (0,119 g) contaminado com fosfonoacetato de trimetilo em excesso. EM (ES+) 429, 16 (M+H).

Uma solução de éster de metilo do ácido [5-(2,6-dioxo-1,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo- [3.2.1]oct-l-il]-acrílico (0,129 mmol, 0,055 g) em THF (4 ml) foi tratada à temperatura ambiente com LiOH IN (1,1 ml) . A reacção foi aquecida durante a noite ao refluxo. A reacção foi arrefecida até à temperatura ambiente, diluída com H2O, acidificada com HC1 conc. (pH 2-3) e extraída com EtOAc. Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura e secos (MgS04) . A filtração e a evaporação seguidas por HPLC de fase inversa deram o produto puro (0,010 g, 19%) . EM (ES+) 397,24 (M+H-OH, 100%); EM (ES~) 413,01 (M-H, 100%). 58 ΡΕ1230243

Exemplo 13 Ácido 4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-pu-rin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carboxílico A uma mistura agitada de 2,00 g (8,84 mmoles) de éster de monoetilo de ácido biciclo[2.2.2]octano-1,4-dicarboxílico, 2,60 g (9,89 mmoles) de cloridrato de 5,6-diamino-1,3-dipropil-lH-pirimidino-2,4-diona, 5,32 ml (38,1 mmol) de NEt3, e 30 ml de acetonitrilo anidro foram adicionados 3,76 g (9,89 mmol) de HATU. A solução reaccional foi agitada à t.a. por 1 h. A mistura reaccional foi concentrada in vacuo e combinada com 40 ml de EtOAc e 40 ml de 10% de ácido cítrico. A camada aquosa foi separada e lavada duas vezes com porções de 40 ml de EtOAc. As fracções orgânicas combinadas foram lavadas com porções de 20-ml de NaHC03 sat. e salmoura e concentradas in vacuo. O sólido resultante foi combinado, num frasco de fundo redondo de 200-ml equipado com um condensador, com uma mistura de 35 ml de i-PrOH e 35 ml de KOH 1 N (35 mmol) e aquecido até ao refluxo. Após aquecer por 1 hora, a solução reaccional foi concentrada in vacuo, retomada em 40 ml de água, e lavada duas vezes com porções de 30-ml de CH2CI2. A camada aquosa foi acidificada com HC1 conc. e o precipitado resultante recolhido por filtração com sucção para dar 3,00 g (rendimento de 87%) de um sólido não totalmente branco. (MH+ = 389,25) 59 ΡΕ1230243

Os compostos que se seguem foram feitos num modo análogo.

Exemplo 13a: 8-(4-hidroxi-biciclo[2.2.2]oct-l-il)-1,3- dipropil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona, (MH+ = 361,15)

Exemplo 13b: 8-(4-Pentil-biciclo[2.2.2]oct-l-il)-1,3- dipropil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona, (MH+ = 415,19)

Exemplo 13c: Ácido 5-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro- lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]nonano-l-carboxilico, (MH+ = 403,30)

Exemplo 13d: Éster de metilo do ácido [4-(2, 6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]— oct-l-il]-carbâmico, (MH+ = 418,15)

Exemplo 13e: 8-(4-Bromo-biciclo[2.2.2]oct-l-il)-1,3-dipro- pil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona, (MNa+ = 425,22)

Exemplo 13f: 8-(1-Aza-biciclo[2.2.2]oct-4-il)-1,3-dipropil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona, (MH+ = 346,31)

As alquilações em N-3 dos monopropil-uracilos precursores foram efectuados por procedimentos da literatura (Muller, C. E.; Geis, U.; Hipp, J.; Schober, U. ; Frobenius, W.; Pawlowski, M.; Suzuki, F.; Sandoval-Ramirez, J. J. Med. Chem. 1997, 40, 4396-4405) sobre o 5,6-diamino-1-propil uracilo protegido com BOC, com remoção subsequente de BOC a partir de HC1 4N em dioxano. O protocolo de 60 ΡΕ1230243 ligação-ciclização acima descrito foi então empregado para fazer os derivados da xantina.

Exemplo 13g: 3-(2-Metoxi-etil)-8-(4-pentil-biciclo[2.2.2]- oct-l-il)-l-propil-3,7-di-hidro-purino-2, 6-diona, (MH+ = 431,64)

Exemplo 13h: Ácido 4-[3-(2-metoxi-etil)-2,6-dioxo-l-propil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il]-biciclo[2.2.2]octano-1-carboxílico, (MH+ = 405,63)

Exemplo 13i: 3-[2-(4-Metoxi-fenil)-etil]-8-(4-pentil-bici clo [2.2.2]octl-il)-l-propil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona, (MH+ = 507,30)

Exemplo 13j: Ácido 4-{3-[2-(4-metoxi-fenil)etil]-2,6-dioxo-l-propil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il}-biciclo[2.2.2]-octano-l-carboxílico, (MH+ = 481,2)

Exemplo 13k: 3-Metil-8-(4-pentil-biciclo[2.2.2]oct-l-il)-1-propil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona, (MH+ = 387,21)

Exemplo 131: Ácido 4-[3-(4-metoxi-fenil)-2,6-dioxo-l-pro-pil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il]-biciclo[2.2.2]octa-no-l-carboxílico, (MH+ = 5 453,4)

Exemplo 13m: Ácido 4-[2,6-Dioxo-l,3-bis-(3,3,3-trifluoro-propil)-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il]-biciclo[2.2.2]— octano-l-carboxílico, (MH+ = 496,98) 61 ΡΕ1230243

Exemplo 13n: Éster de metilo do ácido 4-[2,6-Dioxo-l,3-bis-(3,3,3-trifluoropropil)-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il]-biciclo[2.2.2]octano-l-carboxílico, (MH+ = 511,3)

Exemplo 13o: Ácido 3-[4-(6-oxo-l,3-dipropil-2-tioxo-2,3, 6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-propiónico, (MH+ = 432,98) a partir de 5,6-diamino-l,3-dipropil-2-tioxo-2,3-di-hidro-lH-pirimidin-4-ona, preparada por um procedimento da literatura (Jacobson, K. A.; Kiriasis, L.; Barone, S.; Bradbury, B. A.; Kammula, U.; Campagne, M.; Secunda, S.; Daly, J. W.; Neumeyer, J. L.; Pfleiderer, W. J. Med. Chem . 1989, 32, 1873-1879) .

Exemplo 13p: Ácido 4-(6-oxo-l,3-dipropil-2-tioxo-2,3,6, 7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carbo-xílico, (MH+ = 405,04) a partir de 5,6-diamino-l,3-dipro-pil-2-tioxo-2,3-di-hidro-lH-pirimidin-4-ona, preparada por um procedimento da literatura (Jacobson, K. A.; Kiriasis, L.; Barone, S.; Bradbury, B. A.; Kammula, U.; Campagne, M.; Secunda, S.; Daly, J. W.; Neumeyer, J. L.; Pfleiderer, W. J. Med. Chem. 1989, 32, 1873-1879) .

Exemplo 14 Éster de metilo do ácido 4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carbo-xílico Ácido 4- (2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3, 6, 7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carboxilico 62 ΡΕ1230243 (Exemplo 13) (1,50 g, 3,86 mmol) foi combinado com 60 ml de MeOH, e 10 gotas de H2SO4 conc. A solução de reacção foi levada ao refluxo até que o consumo do material de partida cessasse. O NaHC03 sat. foi então adicionado até pH neutro e a mistura de reacção foi concentrada in vacuo. O resíduo foi retomado em EtOAc e lavado com NaHC03 sat., salmoura, e seco sobre Na2S04. A solução de EtOAc foi concentrada in vacuo para dar 1,51 g (rendimento de 97%) de um sólido branco (MH+ = 403,13)

Exemplo 15 8-(4-Hidroximetil-biciclo[2.2.2]oct-l-il)-1,3-dipropil-3,7-di-hidropurino-2,6-diona O éster de metilo do ácido 4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]— octano-l-carboxílico (Exemplo 14) (l,40g, 3,48 mmol) foi combinado com LiBH4 (0,379 g, 17,4 mmol), MeOH (0,141 ml, 3,48 mmol), e 100 ml de THF e a mistura resultante foi levada ao refluxo por 18 h. Após arrefecida até à t.a., 50 ml de HC1 a 1M foram adicionados e a mistura concentrada in vacuo. O resíduo foi dissolvido em EtOAc e lavado com HC1 a 1M, NaHC03 sat., salmoura, e seco sobre Na2S04. A solução de EtOAc foi concentrada in vacuo para dar 1,15 g (rendimento de 88%) de um sólido branco. (MH+ = 375,50) 63 ΡΕ1230243

Exemplo 16 4-(2,6-Dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carbaldeído A uma solução de 0,092 g (0,246 mmol) de 8— (4 — hidroximetil-biciclo[2.2.2]oct-l-il)-1,3-dipropil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona (Exemplo 15) em 5 ml de CH2CI2 foi adicionado 0,125 g (0,295 mmol) de periodinano de Dess-Martin. A mistura reaccional foi agitada à t.a. até que a oxidação estivesse completa. A solução reaccional foi filtrada através de um tampão de alumina básica, lavada com NaHC03 sat., salmoura, e seca sobre Na2S04. A solução de CH2C12 foi concentrada in vacuo para dar 0,057 g (rendimento de 62%) de um sólido não totalmente branco (MH+ = 373,30).

Exemplo 17 Ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-acrílico O fosfonoacetato de trimetilo (0,0,161 g, 0,886 mmol) foi dissolvido em 12 ml de tolueno e arrefecido até entre 0-5°C. O KHMDS (0,5 M em tolueno) (3,54 ml) foi adicionado, gota a gota, ao mesmo tempo agitando durante 5 min. Após uns 30 min adicionais a 0-5°C, 0,300 g (0,805 mmol) do Exemplo 16: 4-(2,6-Dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7- tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carbal- 64 ΡΕ1230243 deído foi adicionado e a reacção foi deixada aquecer até a t.a. e foi agitada por 16 h. A mistura reaccional foi concentrada in vacuo. Dissolveu-se o material bruto em 25 ml de MeOH e 10 ml de água adicionou-se 0,150 g de LiOH e agitou-se à t.a. durante a noite. Concentrou-se in vacuo e dissolveu-se novamente a mistura reaccional em 15 ml de água. Extraiu-se a camada de água três vezes com porções de 20 ml de EtOAc, acidificou-se com HCl conc., e recolheu-se o precipitado por filtração com sucção para dar 0,190 g (rendimento de 57%) do produto de ácido (trans)acrílico. (MH+ = 415,08)

Exemplo 18 Ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-propiónico Ácido 3- [4- (2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3, 6, 7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-acrílico (Exemplo 17) (0,050 g) foi dissolvido em 5 ml de MeOH e combinado com 0,005 g de Pd a 10%/C. O vaso de reacção foi purgado três vezes com N2 e então colocado sob um balão de gás H2. Após 2 h, a mistura reaccional foi filtrada e concentrada para dar 0,037 g (rendimento de 74%) de um sólido branco. (MH+ = 417,30)

Exemplo 18a: Ácido 3-[4-(2, 6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-2-metil-propiónico, foi feito num modo análogo. (MH+ = 431,36) 65 ΡΕ1230243

Exemplo 19 Ácido {[4-(2, 6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carbonil]-metil-amino}-acético A uma mistura agitada de 0,100 g (0,257 mmol) de ácido 4- (2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carboxilico (Exemplo 13), 0,039 g (0,257 mmol) de cloridrato de sarcosina, 0,143 ml (1,03 mmmol) de NEt3, e 2 ml de acetonitrilo anidro foi adicionado 0,103 g (0,270 mmol) de HATU. A solução reacci-onal foi agitada à t.a. por 16 h. A mistura reaccional foi concentrada in vacuo e combinada com 10 ml de EtOAc e 10 ml de 10% de ácido cítrico. A camada aquosa foi separada e lavada duas vezes com porções de 10 ml de EtOAc. As fracções orgânicas combinadas foram lavadas com porções de 10 ml de NaHC03 sat. e salmoura e concentradas in vacuo. O sólido resultante foi dissolvido numa mistura de 5 ml de MeOH e 5 ml de NaOH 1 N e agitado por 16 h. A solução de reacção foi concentrada in vacuo, retomada em 10 ml de água, e lavada duas vezes com porções de 10- ml de CH2CI2. A camada aquosa foi acidificada com HCl conc. e o precipitado resultante recolhido por filtração com sucção para dar 0,094 g (rendimento de 77%) de um sólido não totalmente branco. (MH+ = 460,18) 66 ΡΕ1230243

Os compostos que se seguem foram preparados num modo análogo:

Exemplo 19a: (2-Dimetilamina-etil)-amida de ácido 4-(2,6-dioxo-1,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carboxílico, (MH+ = 459,17)

Exemplo 19b: Éster de metilo do ácido {[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]-octano-l-carbonil]amino}-acético, (MH+ = 460,3)

Exemplo 19c: Éster de metilo do ácido 3-{[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]-octano-l-carbonil]amino}-propiónico, (MH+ = 389,3)

Exemplo 19d: Ácido {[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carbo-nil]-aminoj-acético, (MH+ = 446,06)

Exemplo 19e: Ácido 1-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carbo-nil]-piperidina-4-carboxílico, 1H RMN (400 MHz, CDCI3) : δ = 0,84 (t, 3H) , 0,085 (t, 3H) , 1,50-1, 68 (m, 6H) , 1,841,92 (m, 14H) , 2,44 (m, 1H) , 2,86 (m, 2H) , 3,78 (t, 2H) , 3,91 (t, 2H), 4,15 (m,2H).

Exemplo 19f: 8-(4-Dimetilaminometil-biciclo[2.2.2]oct-1- il)-1,330 dipropil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona, (MH+ = 402,08) 67 ΡΕ1230243

Exemplo 19g: 8-{4-[(2-Dimetilamino-etilamino)-metil]-bici- clo [2.2.2]oct-l-il}-l,3-dipropil-3,7-di-hidro-purino-2, 6-diona, (MH+ = 445,24)

Exemplo 19h: (2-Amino-etil)-amida de ácido 4-(2,6-dioxo-1,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo-[2.2.2]octano-l-carboxílico, (MH+ = 431,06)

Exemplo 20 8-(4-Amino-biciclo[2.2.2]oct-l-il)-1,3-dipropil-3,7-di-hidropurino-2,6-diona O éster de metilo do ácido [4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]— oct-l-il]-carbâmico (Exemplo 13d) (8,3 g, 20 mmoles) foi refluxado em 40 ml de HC1 conc. por 3 h. A mistura de reacção foi concentrada em vácuo até um resíduo sólido, o qual foi triturado em acetonitrilo para proporcionar 5,8 g (77%) como um sólido branco (MH+ = 360,02)

Exemplo 21 Ácido 2-(R)-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-1H- purin-8-il)-biciclo-[2.2.2]oct-l-iloxi]-propiónico A 8-(4-amino-biciclo[2.2.2]oct-l-il)-l,3-dipro-pil-3,7-di-hidro-purina-2,6-diona (Exemplo 20) (0,100 g, 68 ΡΕ1230243 0,279 mmol) foi combinada com 1,5 ml de lactato de (R)-metilo e 0,075 ml de nitrito de isoamilo. A mistura foi aquecida até 60°C por 2 h e arrefecida até à t.a. A mistura reaccional foi concentrada in vácuo e o resíduo foi agitado com 8 ml de uma solução a 50% de MeOH e 0,050 g de LiOH durante a noite. A mistura reaccional foi concentrada in vacuo, retomada em 8 ml de água, o pH da solução foi ajustado para 10 e a mistura extraída duas vezes com porções de 6 ml de CH2CI2. A camada aquosa foi acidificada com HC1 conc. e o precipitado resultante recolhido por filtração com sucção para dar 0,024 g (rendimento de 20%). (MH+ = 433,08)

Os compostos que se seguem foram preparados num modo análogo.

Exemplo 21a: Ácido 2-(S)-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3, 6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-iloxi]-propiónico, (MH+ = 433,10)

Exemplo 21b: 8-(4-Isopropóxi-biciclo[2.2.2]oct-l-il)-1,3- dipropi-13,7-di-hidro-purino-2,6-diona, (MH+ = 403,13)

Exemplo 21c: 8-(4-Aliloxi-biciclo[2.2.2]oct-l-il)-1,3-di- propil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona, (MH+ = 401,11)

Exemplo 21d: Ácido [4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-te-tra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-iloxi]-acético, (MH+ = 419,08) 69 ΡΕ1230243

Exemplo 21e: 1,3-Dipropil-8-[4-(2,2,2-trifluoro-l-trifluo- rometil-etóxi)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-3,7-di-hidro-purino- 2.6- diona, (MH+ = 511,00)

Exemplo 21f: Ácido 2-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-iloxi]-2-metil-propiónico, (MH+ = 447,17)

Exemplo 21g: Ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-iloxi]-propiónico, (MH+ = 433,6)

Exemplo 21h: Ácido 3-(R)-[4-(2,6-dioxo-l, 3-dipropil-2,3, 6.7- tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-iloxi]-butírico, (MH+ = 447,34)

Exemplo 21i: Ácido 3-(S)-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3, 6.7- tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-iloxi]-butírico, (MH+ = 447,34)

Exemplo 21j: Ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-iloxi]-metil-propiónico, MH+ = 447,32)

Exemplo 21k: Ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-iloxi]-2(R)-metil-propiónico, MH+ = 447,33) 70 ΡΕ1230243

Exemplo 211: Ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-iloxi]-2,2-dimetil-propiónico, (MH+ = 461,32)

Exemplo 21m: Ácido [5-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-te-tra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]non-l-iloxi] -acético, (MH+ = 433,3)

Exemplo 21n: Ácido 3-[4-(2, 6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-iloxi]-2,2-dimetil-propiónico, ΧΗ RMN (400 MHz, CDCI3) :δ = 0,86 (t, 6H) , 1,15 (m, 6H) , 1,45 (m, 6H), 1,58 (td, 2H) , 1,67 (td, 2H) , 1,84 (m, 6H) , 3,32 (s, 2H), 3,38 (s, 2H), 3,90 (t, 2H) , 3,98 (t, 2H) . Exemplo 21o: Ácido 3-[5-(2 ,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3, 6,7- tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[3.2.2]non-l-iloxi]-propiónico, (MH+ = 447,32)

Exemplo 21p: Ácido 2-(R)-[5-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3, 6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[3.2.2]non-l-iloxi]-propiónico, (MH+ = 447,26)

Exemplo 22 8-(4-Fenóxi-biciclo[2.2.2]oct-l-il)-1,3-dipropil-3,7-di-hidropurino-2,6-diona A uma solução de 60 mg de 8-(4-hidroxi-bici- 71 ΡΕ1230243 cio[2.2.2]oct-l-il)-1,3-dipropil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona (Exemplo 13a) (0,167 mmol) em CH2CI2 (2 ml) foram adicionados 27 pL de piridina e a mistura reaccional arrefecida até 0°C. A esta foram adicionados 40pL de anidrido triflico (0,24 mmol) em CH2CI2 (1 ml). Manteve-se a 10°C durante a noite. A mistura de reacção foi diluída com CH2C12 (5 ml) e lavada com HC1 IN gelado, NaHC03 sat. e salmoura. Secou-se sobre sulfato de sódio e concentrou-se in vacuo para proporcionar um óleo amarelo. O triflato bruto foi dissolvido em 1,4-dioxano (3 ml) e 100 mg de fenol (1,08 mmol) foram adicionados, seguidos por aquecimento a 80°C durante a noite. A mistura reaccional foi concentrada e o resíduo retomado em acetato de etilo (10 ml), lavado com KOH IN (5 ml), NaHC03 sat. (5 ml), HCl IN (5 ml) e salmoura. A camada orgânica foi seca sobre NaS04 e concentrada in vacuo até um óleo incolor, o qual foi purificado por cromatografia de coluna (Si02, hexanos/EtOAc a 1:1) para proporcionar 11 mg do composto do título como um sólido branco (MH+ = 437,29). Os compostos que se seguem foram preparados num modo análogo após a saponificação do éster de metilo.

Exemplo 22a: Ácido [4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-te-tra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-ilsulfanil]-acético, (MH+ = 435,35)

Exemplo 22b: Ácido {[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-te-tra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-metil-amino}-acético, (MH+ = 432,31) 72 ΡΕ1230243

Exemplo 22c: Ácido [4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-te-tra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-sulfonil]-acético, (MH+ = 467,31)

Exemplo 23 Éster de 4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-ilo de ácido metanossul-fónico A uma solução de 50 mg de 8-(4-hidroxi-bici-clo[2.2.2]oct-l-il)1,3-dipropil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona (Exemplo 13a) (0,14 mmol) em CH2C12 (5 ml) foram adicionados 20pL de Et2N e a mistura reaccional arrefecida num banho de gelo. A esta foram adicionados 20 ml de cloreto de metanossulfonilo (0,26 mmol) e a mistura reaccional mantida a 10°C durante a noite. A mistura reaccional foi concentrada in vacuo e o resíduo retomado em EtOAc e lavado 2X com HC1 diluído (5 ml). A camada orgânica foi seca sobre NaSCU e concentrada. O resíduo foi triturado em acetonitrilo para proporcionar 36 mg (59%) de sólido branco puro (MH+ = 439, 4) .

Exemplo 24 Éster 4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-ilo de ácido tolueno-4-sulfónico 73 ΡΕ1230243 A uma solução de 100 mg de 8-(4-hidroxi-bici-clo [2.2.2]oct-l-il)-1,3-dipropil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona (Exemplo 13a) (0,28 mmol) em CH2CI2 (10 ml) foram adicionados 40pL de Et3N e a mistura reaccional arrefecida num banho de gelo. A esta foram adicionados 100 mg de cloreto de p-toluenossulfonilo (0,52 mmol) e a reacção mantida a 10°C durante a noite. A mistura reaccional foi concentrada in vácuo e o resíduo retomado em EtOAc e lavado 2X com HC1 diluído (10 ml) . A camada orgânica foi seca sobre NaS04 e concentrada. O resíduo foi triturado em acetonitrilo para proporcionar 78 mg (54%) de sólido branco puro (MH+ = 515,10).

Exemplo 25 N-[4-(2,6-Dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-metanossulfonamida A 100 mg de solução de 8-(4-Amino-biciclo-[2.2.2]oct-l-il)-l,3 dipropil-3,7-di-hidro-purino-2,6-di-na (Exemplo 20) (0,28 mmol) em 2 ml de piridina resfriada num banho de gelo/água foram adicionados 22 pL de cloreto de metanossulfonilo (0,28 mmol), 30% de término após 24 h a 10 °C. Duas alíquotas mais (22 pL e 50 pL) de cloreto de metanossulfonilo foram adicionadas para levar a reacção até o término. A mistura reaccional foi concentrada em vácuo para proporcionar um óleo amarelo, o qual foi retomado em EtOAc (10 ml) e lavado duas vezes com NaHC03 sat. (5 ml), 74 ΡΕ1230243 uma vez com HC1 a 0,5N e uma vez com salmoura. A camada orgânica foi seca sobre NaSC>4 e concentrada até um óleo. Cristalizou-se a partir de acetonitrilo para proporcionar 27 mg (22%) como um sólido branco (MH+ = 438,08). Os compostos que se seguem foram preparados num modo análogo:

Exemplo 25a: Ácido 3-[4-(2,β-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-ilsulfa-moil]-benzenossulfónico, (MH+ = 579,95)

Exemplo 25b: Ácido [4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-te-tra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-ilsulfamoil]-acético, (MH+ = 482,27)

Exemplo 25c: Éster de metilo do ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,35 dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]— oct-l-ilsulfamoil]-tiofen02-carboxílico, (MH+ = 564,19)

Exemplo 25d: Ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-ilsulfamoil] -tiofeno-2-carboxilico, (MH+ = 550,20)

Exemplo 25e: N-[4-(2, 6-Dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-ilmetil]-metanos-sulfonamida, (MH+ = 388,32)

Exemplo 25f: Éster de metilo do ácido 3-{[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]-oct-l-ilmetil]-sulfamoil} tiofeno-2-carboxílico, (MH+ 578,3) 75 ΡΕ1230243

Exemplo 25g: Ácido 3-{[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-ilmetil]-sulfamoil}-tiofeno-2-carboxilico, (MH+ = 564,24)

Exemplo 25h: Ácido [4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-te-tra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-ilcarbamoil]-metanossulfónico, (MH+ = 480,13)

Exemplo 26 1,3-Dipropil-8-{4-[(tiofen-2-ilmetil)-amino]-biciclo- [2.2.2] oct-l-il}-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona A uma solução de 100 mg de 8-(4-Amino-biciclo- [2.2.2] oct-l-il)-1,3-dipropil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona (Exemplo 20) (0,28 mmol) e 37 mg de tiofeno-2-carboxaldeído (0,33 mmol) em CH2CI2 (5 ml) foram adicionados 5 gotas de ácido acético glacial e 100 mg de triacetoxiboro-hidlinear de sódio (0,47 mmol). A conversão completa ocorre durante 24 h à t.a. A mistura de reacção foi arrefecida bruscamente com 2 ml de etanol e 2 ml de HC1 a 2N e então concentrada in vacuo para proporcionar um óleo incolor, o qual foi purificado a partir de acetonitrilo anidro para dar 50,8 mg (40%) como um sólido branco (MH+ = 456,29). Os compostos que se seguem foram preparados num modo análogo:

Exemplo 26a: Ácido {[4-(2, 6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-ilmetil]-aminoj-acético, (MH+ = 432,32) 76 ΡΕ1230243

Exemplo 26b: 8-{4-[(lH-Imidazol-2-ilmetil)-amino]-biciclo-[2.2.2]octl-il}-l,3-dipropil-3,7-di-hidro-purino-2, 6-diona, (MH+ = 440,09)

Exemplo 26c: Ácido [4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-te-tra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-ilamino]-acético, (MH+ = 418,15)

Exemplo 26d: 8-{4-[(Furan-2-ilmetil)-amino]-biciclo[2.2.2]-oct-l-il}-l,3-dipropil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona, (MH+ = 440,30)

Exemplo 26e: 1,3-Dipropil-8-(4-{[(tiofen-2-ilmetil)-amino]-metil}-biciclo[2.2.2]oct-l-il)-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona, (MH+ = 470,31)

Exemplo 26f: 8- (4 — {[(3H-Imidazol-4-ilmetil)-amino]-metil}- biciclo[2.2.2]oct-l-il)-1,3-dipropil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona, (MH+ = 454,35)

Exemplo 26g: Ácido 4-{[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-ilamino]-metil}-benzóico, (MH+ = 494,34)

Exemplo 26h: Ácido 4-({[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-ilmetil]-amino}-metil)-benzóico, (MH+ = 508,31) 77 ΡΕ1230243

Exemplo 26i: 1,3-Dipropil-8-(4-{[(piridin-4-ilmetil)-ami- no]-metil}-biciclo[2.2.2]oct-l-il)-3,7-di-hidro-purino-2,6- diona, (MH+ = 465,33)

Exemplo 2 6j: 8-(4 —{[(Furan-2-ilmetil)-amino]-metil]-bici- clo [2.2.2] oct-l-il)-1,3-dipropil-3,7-di-hidro-purino-2, 6-diona, (MH+ 454,33)

Exemplo 2 6 k: Ácido 5-{[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-ilamino]-metil}-furan-2-sulfónico, (MH+ = 520,26)

Exemplo 261: 8-(4-Ciclopentilamino-biciclo[2.2.2]oct-l-il)-1,3-dipropil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona, (MH+ = 428,38)

Exemplo 26m: 8-(4-Ciclopentilaminometil-biciclo[2.2.2]oct- l-il)-1, 3-dipropil-3, 7-di-hidro-purino-2, 6-diona, (MH+ = 442,56)

Exemplo 26n: 8-{4-[(1-Metil-butilamina)-metil]-biciclo- [2.2.2]oct-lil}-1,3-dipropil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona, (MH+ = 444,60)

Exemplo 27 Ácido 4-[3-(4-hidroxi-fenil)-2,6-dioxo-l-propil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il]-biciclo[2.2.2]octano-l-carbo-xílico 78 ΡΕ1230243 A uma solução de 10 mg de 4-[3-(4-metoxi-fenil)-2,6-dioxo-l-propil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il]-biciclo[2.2.2]octano-l-carboxílico (Exemplo 131) (0,022 mmol) em CH2CI2 (2 ml), arrefecido num banho de gelo seco/acetona, foi adicionado 1 ml de tribrometo de boro a 1M (1 mmol) em CH2CI2. A mistura reaccional foi deixada ir até à t.a.. e foi mantida por 2 h. Após este tempo, a mistura reaccional foi arrefecida em gelo seco e arrefecida bruscamente com MeOH. O produto bruto foi isolado após concentração in vacuo e recristalizado a partir de acetonitrilo para proporcionar 10 mg de um sólido branco (MH+ = 439,09) .

Os compostos que se seguem foram preparados num modo similar.

Exemplo 27a: Ácido 4-{3-[2-(4-hidroxi-fenil)-etil]-2,6-di-oxo-l-propil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il}-biciclo-[2.2.2]octano-l-carboxílico, (MH+ = 467,4)

Exemplo 27b: Ácido 4-[3-(2-hidroxi-etil)-2,6-dioxo-l-pro-pil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il]-biciclo[2.2.2]octano-l-carboxílico, (MH+ = 391,12)

Exemplo 27c: Ácido 4-[3-(4-hidroxi-fenil)-2,6-dioxo-l-pro-pil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il]-biciclo[2.2.2]octano-l-carboxílico, (MH+ = 439,09) 79 ΡΕ1230243

Exemplo 27d: Ácido 3-(4-{3-[2-(4-hidroxi-fenil)-etil]-2,6-dioxo-l-propil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il}-biciclo-[2.2.2]oct-l-il)-propiónico, (MH+ = 20 495,12)

Exemplo 27e: 8-(4-hidroxi-biciclo[2.2.2]oct-l-il)-3-[2-(4- hidroxifenil)-etil]-l-propil-3,7-di-hidro-purino-2, 6-diona, (MH+ = 439,14)

Exemplo 28 Ácido 4-{3-[2-(4-hidroxi-3-iodo-fenil)-etil]-2,6-dioxo-l-propil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il}-biciclo[2.2.2]-octano-l-carboxílico A uma solução de 50 mg de ácido 4—{3— [2— (4 — hidroxi-fenil)-etil]-2,6-dioxo-l-propil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il}-biciclo[2.2.2]octano-lcarboxílico (Exemplo 27a) (0,107 mmol) em água (10 ml) contendo 1 eq. de NaOH IN (110pL) foi adicionada, à t.a., uma solução de 30 mg de iodo (0,107 mmol) em etanol (1 ml). A mistura reaccional foi concentrada in vacuo e o produto bruto purificado por cromatografia preparativa para proporcionar 12 mg (20%) do produto desejado (MH+ = 592,89).

Os compostos que se seguem foram preparados num modo similar.

Exemplo 28a: Ácido 4-{3-[2-(4-hidroxi-3, 5-diiodo-fenil)-etil]-2, 6-dioxo-l-propil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il}-biciclo[2.2.2]octano-l-carboxilico, (MH+ = 718,50) 80 ΡΕ1230243

Exemplo 28b: Ácido 3- (4 — {3— [2- (4-hidroxi-3-iodo-fenil)-etil]-2, 6-dioxo-l-propil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il}-biciclo[2.2.2]oct-l-il)-propiónico, (MH+ = 621,08)

Exemplo 29

Amida de ácido 4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carboxílico A uma solução de 200 mg de ácido 4-(2,6-dioxo-1,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo-[2.2.2]octano-l-carboxílico (Exemplo 13) (0,515 mmol) em 5 ml de DMF foram adicionados 235 mg de HATU (0,618 mmol) e 0,4 ml de N,N-diisopropiletil amina. Deixa-se agitar à t.a. por 30 min. Adicionaram-se 2,1 ml de NH3 a 0,5 M em dioxano (1,03 mmol), gota a gota, durante 5 min. Deixa-se agitar durante a noite, adicionou-se 0,5 eq. de NH3 a 0,5M em dioxano (0,5 ml). Adicionou-se o EtOAc e o NaOH IN até o pH = 9 e lavou-se com 10% de ácido cítrico, NaHC03 sat. e salmoura. Secou-se sobre NaSC>4 e concentrou-se in vacuo para proporcionar 80,9 mg (40%) de produto puro (MH+ = 388,34) .

Exemplo 30 8-(4-Aminometil-biciclo[2.2.2]oct-l-il)-1,3-dipropil-3, 7-di-hidropurino-2,6-diona A uma solução de 50 mg de: amida de ácido 4-(2,6- 81 ΡΕ1230243 dioxo-1,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carboxílico (Exemplo 29) (0,129 mmol) em THF (10 ml) foi adicionado, gota a gota, à t.a., 0,28 ml de complexo de borano a 1M-THF (0,284 mmol) e lentamente levou-se até ao refluxo após a adição estar completa. Refluiu-se durante 3,5 h, arrefecendo-se e temperando-se com 10 ml de metanol e levando-se ao refluxo. Concentrou-se in vacuo e o residuo absorvido em HCl IN e lavado duas vezes com CH2CI2. Ajustou-se o pH ~ 8 e lavou-se duas vezes com EtOAc, secou-se sobre NaS04 e concentrou-se in vacuo para proporcionar 30,2 mg (63%) de amina (MH+ = 374,31).

Exemplo 31 Ácido 5-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-pu-rin-8-il)-biciclo[3.2.1]octano-l-carboxilico

Usando o procedimento descrito nas referências, Kraus, W., e col. Liebigs Ann. Chem. 1981, 10, 1826, e Kraus, W., e col. Tetrahedron Lett. 1978, 445; Filippini, M.-H. e col. J. Org. Chem. 1995, 60, 6872, o éster de etilo de ácido 4-oxo-biciclo[3.2.1]octano-l-carboxilico (6,17 mmoles, 1,21 g) foi convertido no éster de etilo de ácido 4-metoximetileno-biciclo [3.2.1]octano-l-carboxilico. A cromatografia de vaporização, eluindo com 10% de éter dietilico/hexanos, proporcionou o produto puro (0,96 g, 69%) como um liquido (mistura de isómeros E/Z) . 13C RMN (100 MHz, CDCI3) : 14,31 (q) , 19,15 (t) , 22,97 (t) , 23,61 82 ΡΕ1230243 (t), 23,91 (t), 29,97 (t), 31,13 (t), 32,04 (t), 32,36 (t), 34,61 (t), 34,85 (d), 35,81 (t) , 43,18 (t) , 43, 63 (t) , 50,47 (s), 50,77 (s) , 59, 63 (q) , 59, 69 (t) , 121,04 (s) , 121,44 (s), 137,18 (d), 138,16 (d), 177,60 (s), 177,63 (s).

Usando o procedimento descrito no Exemplo 50, o éster de etilo de ácido 4-metoximetileno-biciclo[3.2.1]octano-1-carboxílico (3,84 mmol, 0,86 g) foi convertido no éster de etilo de ácido 4-formil-biciclo[3.2.1]octano-l-carboxilico (0,81 g, 100%). TLC (sílica, visualização em 20% de Et20/ hexanos, 20% de PMA/EtOH) Rf (composto do título) = 0,29. A uma solução gelada de éster de etilo de ácido 4-formil-biciclo [ 3 . 2 . 1] octano-l-carboxílico (3,85 mmol, 0,81 g) foi adicionado lentamente o reagente de Jones (2,7 M, 1,43 mL). A reacção foi agitada na temperatura do gelo 20 min, então arrefecida bruscamente por adição de iPrOH, diluída com H20 e extraída com Et20 (3X). Os extractos orgânicos combinados foram lavados com H20 (2X), salmoura (IX), e secos (MgS04) . A filtração e a evaporação proporcionaram o éster de 1-etilo de ácido biciclo[3.2.1]octano-1,4-dicarboxílico viscoso, oleoso (0,76 g, 87%), como uma mistura de ácidos axial e equatorial . 13C RMN (100 MHz, CDC13) : 14,16 (q), 19,86 (t), 21, 07 (t) , 25, 98 (t), 29,20 (t) , 31,52 (t), 31,87 (t), 32,27 (t) , 33,39 (t), 37,80 (d), 38,07 (t), 38,10 (d), 42,06 (t) , 44,80 (d) , 45,78 (d) , 49,38 (s), 49, 60 (s), 60,31 (t), 60,36 (t), 177, 08 (s), 180,01 (s) . A 0°C, uma solução de DCC (0,5 M em CH2C12, 5,5 ml) foi adicionada a uma solução de éster de 1-etilo de ácido biciclo[3.2.1]octano-1,4-dicarboxílico (2,52 mmol, 83 ΡΕ1230243 0,57 g) , t-BuOH (7,56 mmol, 0,56 g) e DMAP (2,02 mmol, 0,247 g) em CH2CI2 (15 ml). Após agitar durante a noite à t.a., a reacção foi filtrada para remover os sólidos e o filtrado foi lavado com 5% de ácido cítrico, NaHC03 saturado, e seco (MgS04) . A filtração e a evaporação produziram o produto (0,71 g, 100%) como um óleo. EM (ES+) 225,24 (M+H-tBu).

Uma solução de éster de 1-etilo de éster de 4-terc-butilo de ácido biciclo[3.2.1]octano-1,4-dicarboxílico (2,52 mmol, 0,71 g) em THF (12ml) foi tratada com LiOH IN (12,6 ml) e agitada à temperatura ambiente 3 d. A reacção foi concentrada para remover o THF e o resíduo aquoso extraído com Et20 para remover as impurezas neutras. A fase aquosa foi acidificada (pH 2-3) a 0°C com HC1 IN e então rapidamente extraída com EtOAc. Os orgânicos combinados foram lavados com H20, salmoura, e secos (MgS04) . A filtração e a evaporação produziram o produto (0,48 g, 75%) .

Usando o procedimento descrito no Exemplo 8, o éster de 4 terc-butilo de ácido biciclo[3.2.1]octano-1,4-dicarboxílico (1,89 mmoles, 0,48 g) foi feito reagir com o cloridrato de 5,6-diamino-l,3-dipropil-lH-pirimidino-2, 4-diona (1,89 mmol, 0,597 g) para dar o produto (0,81 g, 93%). EM (ES+): 463,14 (M+H).

Usando 0 procedimento descrito no Exemplo 8, 0 éster de ácido terc-butilo 5-(6-amino-2,4-dioxo-l, 3-dipropil-1,2,3,4-tetra-hidro-pirimidin-5-ilcarbamoil)- 84 ΡΕ1230243 biciclo[3.2.1]octano-2-carboxílico (1,75 mmol, 0,81 g) foi convertido no produto (0,501 g, 70%).

Uma solução de éster de terc-butilo de ácido 5-(2,β-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[3.2.1]octano-2-carboxilico (1,13 mmol, 0,501 g) em CH2CI2 (5 ml) foi tratada com TFA (5 ml) . Após agitar durante a noite à t.a., a reacção foi concentrada até à secura. HPLC de fase inversa para proporcionar a separação dos isómeros de ácidos equatorial (primeira banda, 0,010 g) e axial (segunda banda, 0,010 g) . HPLC (10% a 90% de MeCN (0,1 % de TFA)/ H20 (0,1 % de TFA), coluna YMC 120 A/S5 ODS-AM, 100 mm x 4,6 mm, 1,5 ml/min: Rd (equatorial) = 6,49 min; RT (axial) = 6,75.

Exemplo 32 Ácido 3-[5-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[3.2.1]oct-l-il]-propiónico

Uma suspensão de éster de metilo do ácido 3— [5— (2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo- [3.2.1]oct-l-il]-acrílico (Exemplo 12) (0,58 mmol, 0,25 g) e 10% Pd/C (50% de H20, 0,029 mmol, 0,062 g) em MeOH (20 ml) foi hidrogenada a (40 psi), durante a noite. A reacção completada foi filtrada através de Celite, enxaguando com MeOH. A evaporação proporcionou o produto desejado (0,196 g, 79%) como um óleo. EM (ES+) 431,18 (M+H) 85 ΡΕ1230243

Uma solução de éster de metilo do ácido 3-[5-(2,β-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo-[3.2.1]oct-l-il]-propiónico (0,456 mmol, 0,196 g) em THF (10 ml) foi tratada com 20% de NaOH (2 ml) e agitada durante a noite à t.a. A reacção foi concentrada para remover o THF. O resíduo aquoso foi acidificado (pH 2-3) com HC1 conc. e o iPrOH foi adicionado até a homogeneidade. A solução foi concentrada sobre o rotovap até que os sólidos começassem a separar-se. Após lh de arrefecimento em gelo, os sólidos precipitados foram recolhidos por filtração a vácuo, enxaguados com um pouco de H20 e precipitados com Et20. Os sólidos foram secos sobre o filtro para proporcionar o produto desejado (0,061 g, 32%). 13c RMN (100 MHz, CDC13) : 1 1,11 (q) , 11 ,26 (q), 20, r 04 (t) , 21, 25 (t), 21,31 (t) , 29, 51 (s) , 33, 97 (t) , 35, 15 (s) , 36, 16 (t), 36,39 (t) , 43, 32 (t), 43, 41 (t) , 45, 38 (t) , 49, 18 (t), 106,01 (s), 149, r 40 (s) , 150, 90 (s), 156, ,30 (s) , 161 ,56 (s), 178,54 (s) .

Exemplo 33 Ácido (1RS,2R, 5SR)-{[5-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-te-tra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[3.2.1]octano-l-carbonil]-amino}-fenilacético

Usando o procedimento descrito no Exemplo 8, ácido 5-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[3.2.1]octano-lcarboxílico (Exemplo 8) (0,052 mmol, 0,020 g) e o cloridrato de éster de metilo de 86 ΡΕ1230243 (R)-fenilglicina (0,064 mmol, 0,013 g) foram reagidos para produzir o composto do titulo (0,0134 g, 48%) como uma mistura de diastereoisómeros. EM (ES+) 536,36 (M+H).

Uma solução de éster de metilo do ácido (1RS,2R, 5SR)-{[5-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo-[3.2.1]octano-lcarbonil]-amino}-fenil-acético (0,022 mmol, 0,012 g) em THF (2 ml) foi tratada com LiOH IN (0,22 ml) por 3d. O THF foi removido sobre o rotovap, o resíduo aquoso acidificado (pH 2) com HCl IN e extraído com EtOAc. Os orgânicos combinados foram lavados com H20, salmoura e secos (MgS04) . A filtração e a evaporação, seguidas por purificação através de HPLC de fase inversa, proporcionam o produto desejado (0,0055 g, 48%) como uma mistura de diastereoisómeros. HPLC (10% a 90% de MeCN (0,1 % de TFA)/ H20 (0,1 % de TFA), coluna YMC 120 A/S-5 ODS-AM, 100 mm x 4,6 mm, 1,5 ml/min: Rd = 6,88 min. O composto que se segue foi preparado num modo análogo:

Exemplo 33a: Ácido (IRS,2S,5SR)-{[5-(2,6-dioxo-l,3-dipro-pil-2,3, 6, 7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo-[3.2.1]octa-no-l-carbonil]-amino]-fenilacético

Exemplo 34 8-(4-hidroxi-biciclo[3.2.1]oct-l-il)-1,3-dipropil-3,7-di-hidropurino-2,6-diona

Usando o método descrito no Exemplo 8, ácido 4- 87 ΡΕ1230243 hidroxi-biciclo[3.2.1]octano-l-carboxílico (Kraus, W., e col., Liebigs Ann. Chem., 1981, 10, 1826) (0,50 mmol, 0,085 g) foi feito reagir com o cloridrato de 5,6-diamino-l,3-dipropil-lH-pirimidino-2,4-diona (0,50 mmol, 0,132 g) para proporcionar o produto desejado (0,081 g, 44%). Usando o método descrito no Exemplo 8, a (6-amino-2,4-dioxo-l,3-dipropil-1,2,3,4-tetra-hidro-pirimidin-5-il)-amida de ácido 4-hidroxi-biciclo[3.2.1]octano-l-carboxílico (0,21 mmol, 0,081 g) foi convertida no produto desejado. EM (ES+) 361,36 (M+H).

Exemplo 35 Ácido 3-[4-(2, 6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-2-oxa-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-propiónico O brometo de vinilmagnésio (1,0 M em THF, 100 ml) foi arrefecido até 0°C e o derivado de ditosilato de 4,4-bis-hidroxi concentrado sob pressão reduzida. A purificação por cromatografia (hex/EtOAc a 1:1) proporcionou 5,0 g do álcool intermediário.

Este material (5,0 g) foi dissolvido em 200 ml de anidra DME e foram adicionados 730 mg de NaH (3 eq) . A mistura reaccional foi agitada sob refluxo por 18 h. Esta foi então arrefecida até a t.a. e temperada com NH4C1 aq sat e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi seca (Na4S04) e concentrada para proporcionar 3,30 g do intermediário de monotosilato. 88 ΡΕ1230243

Este monotosilato (4,40 g, 13,7 mmoles) foi dissolvido em 20 ml de DMSO e o NaOAc.3 H2O (18,0 g, 10 eq) foi adicionado. A mistura de reacção foi agitada a 60°C por 2 dias. Foi então diluida com H2O e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi lavada com H2O, seca (Na2S04) e concentrada para proporcionar 2,60 g do derivado de acetato, o éster de l-vinil-2-oxa-biciclo[2.2.2]oct-4-ilmetilo do ácido acético.

Este acetato (2,60 g, 12,4 mmol) foi dissolvido em 40 ml de MeOH e o K2CO3 (8,5 g, 5 eq) foi adicionado como uma solução em 50 ml de H20. A mistura reaccional foi agitada à t.a. por 3 h. Esta foi então concentrada e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi seca (Na2S04) e concentrada. A purificação por cromatografia (EtOAc/hex a 2:1) proporcionou 1,20 g do derivado de álcool, o (1-vinil-2-oxa-biciclo[2.2.2]oct-4-il)-metanol.

Este material (1,20 g, 7,14 mmol) foi dissolvido em 20 ml de acetona e arrefecido até 10°C. O Cr03 (2,1 g, 3 eq) foi adicionado como uma solução em 10 ml de H2SO4 a 1,5 N (aq). A mistura reaccional foi agitada a 10°C por 15 min e aquecida até à t.a. e agitada por 45 min. Foi então diluída com H20 e extraída com EtOAc. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com H20 e então extraídas com KOH aq diluído. A camada aquosa foi acidificada até pH 1 com HC1 conc. e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi seca (Na2S04) e concentrada para proporcionar 920 mg do derivado 89 ΡΕ1230243 de ácido carboxílico, ácido l-vinil-2-oxa-biciclo[2.2.2]-octano-4-carboxílico.

Este material foi tratado com 5,6-diamino-l,3-dipropil-lH-pirimidino-2,4-diona no mesmo modo como ante- riormente, para obter o derivado de xantina correspondente, a 1,3-dipropil-8-(l-vinil-2-oxa-biciclo[2.2.2]oct-4-il)-3, 7-di-hidro-purino-2,6-diona. A 1,3-dipropil-8-(l-vinil-2-oxa-biciclo[2.2.2]— oct-4-il)-3,7-di-hidropurino-2,6-diona (400 mg, 1,08 mmol) foi suspensa em 8 ml de dioxano e 1 ml de uma solução a 2,5% de OsC>4 em t-BuOH foi adicionado, seguido por 3 ml de H2O. Após 10 min, o NalCg foi adicionado e a mistura reaccional foi agitada à t.a. por 3 h. Esta foi então diluída com H20 e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi seca (Na2S04) e concentrada para proporcionar o intermediário de aldeído, o 4-(2,β-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-2-oxa-biciclo[2.2.2]octano-1-carbaldeído.

Este material foi dissolvido em 8 ml de THF e o (trifenilfosforanilina)acetato de metilo (720 mg, 2 eq) foi adicionado. A mistura reaccional foi agitada à t.a. por 18 h. O LiOH (155 mg, 6 eq) foi adicionado como uma solução em 8 ml de H20 e a mistura reaccional resultante foi agitada à t.a. por 4h. A reacção foi então extraída com EtOAc. A camada orgânica foi seca (Na2S04) e concentrada para proporcionar 250 mg do derivado de acrilato, o ácido 3-[4- 90 ΡΕ1230243 (2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-2-oxa-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-acrílico.

Este material foi dissolvido em 25 ml de THF a 95% e H20 a 5%. O Pd/C (80 mg) foi adicionado a 10% e a mistura reaccional foi hidrogenada sob 344,74 kPa (50 psi) de H2 por 3 h. A mistura reaccional foi filtrada através de um recheio de Celite e o filtrado foi concentrado. A purificação por HPLC preparativa usando CH3CN aq proporcionou o composto do título. EM (ES+) 419.

Exemplo 36 Ácido 4-Aminometil-benzilamida 3-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-adamantano-l-carboxílico

Passo 1: À resina de Wang (10 g, da Advanced ChemTech, substituição 0,7 mmol/g) em 100 ml de THF seco foi adicionado o CDI (10 g) e a resina foi agitada durante a noite. No dia seguinte, a resina foi filtrada e lavada com THF (3 X 100 ml) e seca.

Passo 2: A resina (2,5 g cada, 1,75 mmol) do passo 1 foi tratada com oito diaminas diferentes (8,75 mmol, 5 eq) em THF (25 ml) . Para este exemplo, foi usada a 4-Aminometil-benzilamina. Após agitar durante a noite, a resina foi

lavada com THF (3 X 25 ml), MeOH (3 X 25 ml), CH2C12 (3 X 25ml), MeOH (3 X 25 ml) e seca. 91 ΡΕ1230243

Passo 3: Ácido adamantano-1,3-dicarboxílico (3,5g) foi retomado em DMF (20 ml), foi adicionado DIC (1,36 ml) agitando-se por 1 h. O anidrido resultante foi adicionado à resina do Passo 2. A resina foi agitada durante a noite. No dia seguinte, a resina foi filtrada, lavada com DMF (3X25 ml), CH2CI2 (3X25 ml) MeOH (3X25 ml) e seca.

Passo 4: O 1,3 dipropil-5,6-diaminouracilo.HCl foi ligado à resina do passo 3 usando PyBOP, N-metil morfolina em DMF durante a noite. A resina foi lavada com DMF (3X25 ml), CH2CI2 (3X25 ml) MeOH (3X25ml) e seca.

Passo 5: À resina do passo 4 foram adicionados 2 ml de solução de KOH (7,5 g de KOH em 200 ml de água: MeOH: THF a 10:90:100, 10 eq) e aqueceu-se a 60°C durante a noite. No dia seguinte, após arrefecimento até a t.a., a resina foi lavada com MeOH (3X2ml), THF (3x2ml), CH2CI2 (3X2ml) e seca. A resina foi clivada usando TFA: CH2CI2 a 1:1 (2 ml) por lh. A resina foi filtrada e lavada com CH2CI2. O solvente combinado foi removido por Speed Vac. O resíduo foi dissolvido em CH3CN:água a 1:1 (2 ml) e liofilizado. Os produtos foram caracterizados por LCMS. Massa (ES+ 533).

Exemplo 37 Ácido 3-Aminometil-benzilamida 3-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-adamantano-l-carboxílico

Seguiu-se o procedimento do Exemplo 36. A 3- 92 ΡΕ1230243 aminometil-benzilamina foi usada no Passo 2. Massa ( (ES+ 533) .

Exemplo 38 Ácido (3-Amino-propil)amida 3-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3, 6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-adamantano-l-carboxílico

Seguiu-se o procedimento do Exemplo 36. O 1,3-diaminopropano foi usado no Passo 2. Massa ((ES+ 471).

Exemplo 39 Ácido {3-[4-(3-Amino-propil)-piperazin-l-il]-propil}-amida 3-(2,β-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-adamantano-l-carboxílico

Seguiu-se o procedimento do Exemplo 36. A 3-[4-(3-aminopropil)-piperazin-l-il]-propilomina foi usada no Passo 2. Massa ( (ES+ 599).

Exemplo 40 Ácido [4-(4-Amino-cicloexilmetil)-cicloexil]-amida 3-(2,6-dioxo-1,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-adamantano-l-carboxílico

Seguiu-se o procedimento do Exemplo 36. A 4,4'-metilenobis(cicloexilamina) foi usada no Passo 2. Massa ((ES+ 607) . 93 ΡΕ1230243

Exemplo 41 Ácido (4-Amino-cicloexil)-amida 3-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6, 7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-adamantano-l-carboxílico

Seguiu-se o procedimento do Exemplo 36. A ciclo-hexano-1,420 diamina foi usada no Passo 2. Massa ((ES+ 511) .

Exemplo 42 8-[3-(Piperazina-l-carbonil)-adamantan-l-il]-1,3-dipropil-3,7-di-hidro-purino-2, 6-diona

Seguiu-se o procedimento do Exemplo 36. A piperazina foi usada no Passo 2. Massa ((ES+ 483).

Exemplo 43

Amida de ácido 3-(2, 6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-adamantano-l-carboxílico

Seguiu-se o procedimento do Passo 3 do Exemplo 36. A resina de Rink foi usada em vez da resina de wang. Massa (ES+ 414). 94 ΡΕ1230243

Exemplo 44 Ácido 3-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-adamantano-l-carboxílico O anidrido simétrico, preparado a partir do ácido adamantano 1,3-dicarboxilico usando DIC em DMF, foi ligado ao 1,3 dipropil-5,6-diaminouracilo.HC1. 0 produto foi ciclizado usando KOH em isopropanol/água. Massa (ES+ 415)

Exemplo 45 8-(3-Hidroximetil-adamantan-l-il)-1,3-dipropil-3,7-di-hidropurino-2,6-diona

Seguiu-se o procedimento do Exemplo 46. Massa (ES+ 401)

Exemplo 46 Ácido 5-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[3.3.l]nonano-l-carboxilico O éster de monometilo do ácido biciclo[3.3.1]-nonano-1,5-dicarboxílico (900 mg) foi retomado em CH2CI2 (25 ml), o cloreto de oxalilo (417 μΐ) e 2 gotas de DMF foram adicionados e agitou-se à t.a. por 2 h. Após duas 95 ΡΕ1230243 horas, o solvente foi removido por rotavap. 0 resíduo foi absorvido em 20ml de CH2CÍ2. O diamino-uracilo.HCl (1,25 g) e a diisopropiletilamina (1,7 ml) foram adicionados e agitados à t.a. durante a noite. No dia seguinte, a mistura reaccional foi diluída com água, extraída com CH2CI2, lavada com salmoura, seca sobre Na2S04, e concentrada. O produto bruto foi absorvido em isopropanol:água (2:1, 100 ml) e o KOH (890 mg) foi adicionado e refluxou-se durante a noite. No dia seguinte, após arrefecimento até à t.a., o solvente foi removido por rotavap, diluído com água, acidificado com HC1 IN. O precipitado formado foi filtrado e seco. Rendimento de 900 mg. Massa (ES+ 403)

Exemplo 47 8-(5-Hidroximetil-biciclo[3.3.1]non-l-il)-1,3-dipropil-3,7di-hidro-purino-2,6-diona Ácido 5- (2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[3.3.1]nonano-l-carboxílico (700 mg) foi absorvido em THF (25 ml). O BH3.THF (1M, 3,5 ml) foi adicionado e agitado à t.a. durante a noite. No dia seguinte, a reacção foi arrefecida bruscamente com MeOH. O solvente foi removido por rotavap. Dilui-se com água e extraiu-se com acetato de etilo, lavou-se com água, salmoura, secou-se sobre Na2S04 e concentrou-se. Rendimento de 690 mg. Massa (ES+ 389) . 96 ΡΕ1230243

Exemplo 48 8-{5-[(2-Dimetilamina-etilamina)-metil]-biciclo[3.3.1]non-l-il}-l,3-dipropil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona

Passo 1: 8-(5-hidroximetil-biciclo[3.3.1]non-l-il)-1, 3-di- propil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona (690 mg) foi absorvida em 50 ml de DMSO. Piridina.S03 (844 mg) e trietilamina (1,6 ml) foram adicionados e agitados durante a noite. Uma quantidade adicional de Piridina.S03 (844) foi adicionada e agitou-se durante a noite. A mistura reaccional foi diluída com acetato de etilo (100 ml) e lavada com HC1 IN, água, salmoura, e seca sobre Na2S04. Após a concentração, o produto bruto foi levado para o Passo seguinte, sem purificação.

Passo 2: 5-(2,6-Dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-

purin-8-il)-biciclo[3.3.1]nonano-l-carbaldeído (40 mg) absorvido em 5 ml de CH2CI2. A Nl,Nl-dimetil-etano-l,2-diamina (40 mg), o Na(OAc)3BH (100 mg), 2 gotas de Ácido acético foram adicionados e agitados à t.a. durante a noite. No dia seguinte, a mistura reaccional foi diluída com acetato de etilo, lavada com NAHCO3 sat., salmoura e seca sobre MgS04. O solvente foi removido sob pressão reduzida. O produto bruto foi purificado por HPLC

Preparativa. Massa (ES+ 459). 97 ΡΕ1230243

Exemplo 49 Ácido 3-[5-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[3.3.1]non-l-il]-acrílico 0 5-(2,6-Dioxo-l, 3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro- lH-purin-8-il)-biciclo[3.3.1]nonano-l-carbaldeído (355 mg) foi absorvido em THF (25 ml) . 0 éster de metilo do ácido trifenil- -fosfanilideno)-acético (614 mg) foi adicionado e refluxado durante a noite. No dia seguinte, outros 460 mg de éster de metilo de ácido trifenil- -fosfanilideno)-acético foram adicionados e refluxados por 24 h. Esfriou-se até a t.a., o LiOH (210 mg), a água (2 ml), o MeOH (5 ml) foram adicionados e agitados à t.a. durante a noite. O solvente foi removido sob pressão reduzida. Dilui-se com água (25 ml), extraiu-se com acetato de etilo (3X25ml). A camada aquosa foi acidificada com HC1 a 1 N e extraída com acetato de etilo (3 X 50 ml), seca sobre Na2S04 e concentrada. Rendimento de 254 mg. Massa (ES+ 429).

Exemplo 50 Ácido 3-[5-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[3.3.1]non-l-il]-propiónico

Ácido 3-[5-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8il)-biciclo[3.3.1]non-l-il]-acrílico (150 mg) foi hidrogenado na presença de 10% dePd/C em THF:MeOH (2:1, 5 ml), a 413,69 kPa (60 psi), durante a noite. O 98 ΡΕ1230243 catalisador foi filtrado através de celite e o solvente foi concentrado. O sólido foi purificado por cristalização a partir de éter. Rendimento de 105 mg. Massa (ES+ 431) .

Exemplo 51 Ácido 5-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-9-oxa-biciclo[3.3.1]nonano-2-carboxílico

Passo 1: A 1,3-dipropil-7-pirrolidin-l-ilmetil-3,7-di- hidro-purino-2,6-diona (638 mg) foi absorvida em THF seco (10 ml), a -78°C. 0 nBuLi (0,88ml, 2,5M em hexano) foi adicionado lentamente. A mistura reaccional tornou-se laranja e agitou-se por 30 min a -78°C. A ciclooct-4-enona (298 mg) foi dissolvida em 3 ml de THF seco, adicionada à mistura de reação. Agitou-se a -78°C por 30 min, lentamente aqueceu-se até a t.a. e agitou-se por 2 h. A mistura reaccional foi arrefecida bruscamente com NH4CI sat e extraida com acetato de etilo (3 X 50ml). A camada orgânica combinada foi lavada com HC1 IN, água, e salmoura. Secou-se sobre Na2SC>4 anidro e concentrou-se. O produto bruto foi purificado sobre coluna de silica, eluido com acetato de etilo: hexano (1:1). Massa (ES+ 361).

Passo 2: 8-(l-hidroxi-ciclooct-4-enil)-1,3-dipropil-3, 7-di-hidropurino-2,6-diona (180 mg, do Passo 1) foi absorvida em seco MeOH (15 ml) à t.a.. O monóxido de carbono foi borbulhado através da solução. O PdCl2 (9 mg), seguido pelo CuCl2 (201 mg), foi adicionado. O CO foi borbulhado por 99 ΡΕ1230243 4 h, à t.a. A mistura reaccional tornou-se clara após 3 h. Após 4 h, o MeOH foi removido sob pressão reduzida. Dilui-se com água, extraiu-se com acetato de etilo. A camada de acetato de etilo foi lavada com água, salmoura e seca sobre Na2S04. Após a concentração, o produto bruto foi purificado por cromatografia em sílica-gel, eluindo com acetato de etilo:hexano (1:1). Rendimento de 120 mg. Massa (ES+ 419).

Passo 3: O éster de metilo do ácido 5-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-9-oxa-biciclo-[3.3.1]nonano-2-carboxílico (50 mg, do passo 2) foi absorvido em MeOH (5 ml). O LiOH (15 mg) foi adicionado e agitou-se à t.a. durante a noite. No dia seguinte, o MeOH foi removido sob pressão reduzida, diluído com água e extraído com acetato de etilo. A camada aquosa foi acidificada com HC1 IN, extraída com acetato de etilo (3 X 25 ml). A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura, e seca sobre Na2S04. A concentração do solvente deu um sólido branco, o qual foi purificado por cristalização a partir de éter. Massa (ES+ 405)

Exemplo 52 8-(5-hidroxi-9-oxa-biciclo[3.3.l]non-l-il)-1,3-dipropil-3,7di-hidro-purino-2,6-diona A 1,3-dipropil-7-pirrolidin-l-ilmetil-3, 7-di-hidro-purino-2,6-diona (638 mg) foi tomada em THF seco (10 ml) a -78 C. O nBuLi (0,88 ml, 2,5M em hexano) foi adiei- 100 ΡΕ1230243 onado lentamente. A mistura reaccional tornou-se laranja e agitou-se por 30 min a -78°C. A ciclosoctano-1,5-diona (280 mg) foi dissolvida em 3 ml de THF seco, adicionada à mistura de reacção. Agitou-se a 78°C por 30 min, lentamente aqueceu-se até à t.a. e agitou-se durante a noite. A mistura reaccional foi bruscamente arrefecida com NH4C1 sat e extraída com acetato de etilo (3X50ml). A camada orgânica combinada foi lavada com HCl IN, água, e salmoura. Secou-se sobre Na2S04 anidro e concentrou-se. O produto bruto foi purificado sobre coluna de sílica, eluído com acetato de etilo:hexano (1:1). Massa (ES+ 377).

Exemplo 53 Ácido 5-(2, 6-dioxo-l, 3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-8-oxa-biciclo[3.2.1]octano-2-carboxílico

Passo 1: Seguiu-se o mesmo procedimento do passo 1 do

Exemplo 51. A cicloept-4-enona foi usada em vez da ciclo-oct-4-enona. Massa (ES+ 347)

Passo 2: A 8-(l-hidroxi-cicloept-4-enil)-1,3-dipropil-3,7-di-hidropurino-2,6-diona (50 mg) foi absorvida em 10 ml de MeOH à t.a. O monóxido de carbono foi borbulhado através do MeOH por 10 min. O PdCl2 (25 mg), o CuCl2 (58 mg) foram adicionados e o CO foi borbulhado por 3 h. Agitou-se à t.a. durante a noite. Dilui-se com MeOH, água e 0 precipitado formado foi filtrado através de celite. O MeOH foi removido por rotavap, o resíduo foi extraído com acetato de etilo. A 101 ΡΕ1230243 camada de acetato de etilo foi lavada com água, salmoura, e seca sobre Na2SC>4. Após concentração, o produto bruto foi absorvido em MeOH (5 ml), água (1 ml). O LiOH (25 mg) foi adicionado e agitado à t.a. durante a noite. No dia seguinte, o MeOH foi removido por rotavap, o resíduo foi absorvido em água (20 ml) e extraído com acetato de etilo (2X25ml). A camada aquosa foi acidificada com HC1 IN, extraída com acetato de etilo (2 X 50). A camada de acetato de etilo foi lavada com salmoura e seca. Após a concentração, o produto foi dissolvido em éter e filtrado através de um recheio de sílica-gel. A concentração resultou em 30 mg do produto. Massa (ES+ 391)

Exemplo 54 Éster de mono-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hi-dro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-ilo] de ácido fosfórico A 8-(4-hidroxi-biciclo[2.2.2]oct-l-il)-1,3-di-propil-3,7-di-hidro-purina2,6-diona (Exemplo 13a) (180 mg, 0,5 mmol) foi dissolvida numa mistura de 1H -tetrazol (350 mg, 5 mmol) em 10 ml de acetonitrilo seco e 10 ml de cloreto de metileno seco. À temperatura ambiente, o dietilfosforamidito de dibenzilo (476 mg, 1,5 mmol) foi adicionado, sob azoto, e a mistura foi agitada por 2 h. Então, uma solução a 70% de hidroperóxido de terc-butilo (1 ml) foi adicionada e a mistura foi agitada por 1 h. a 0°C, 15 ml de NaHSC>3 a 10% foram adicionados e a mistura foi 102 ΡΕ1230243 agitada por outros 15 minutos. A mistura foi então extraída três vezes com CH2CI2 e a camada orgânica foi lavada com água. A evaporação do solvente produziu o éster de 4-(2,6-dioxo-1,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il) -biciclo[2.2.2]oct-l-ilo de éster de dibenzilo de ácido fosfórico como um óleo amarelo, o qual foi purificado por cromatografia de coluna. O éster de 4-(2,6-dioxo-l,3-dipro-pil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-ilo de éster de dibenzilo de ácido fosfórico contido nas fracções foi combinado e concentrado em vácuo para obter 280 mg de produto. EM (M+l) 621. O éster de 4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purino-8il)-biciclo[2.2.2]oct-l-ilo de éster de dibenzilo de ácido fosfórico foi dissolvido numa mistura de 15 ml de metanol e 10 ml de THF, o Pd/C (10%, 50 mg) foi adicionado à mistura. A hidrogenação ocorreu a 344,74 kPa (50 psi) por 8 h. O Pd/C foi filtrado fora e o solvente foi evaporado. O resíduo foi recristalizado numa mistura de metanol e acetato de etilo para obter 190 mg do produto do título (rendimento de 86%) . EM (M+l, 441)

Exemplo 55 Éster de 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-propioniloximetilo do ácido 4-cloro-2[(furan-2-ilmetil)-amino]-5-sulf amoil-benzóico

Uma mistura de ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipro- 103 ΡΕ1230243 pil-2,3,6,7tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-1-il]-propiónico (208 mg, 0,5 mmol), bicarbonato de sódio (168 mg, 2 mmol), e hidrogenossulfato de tetra-n butilamónio (17 mg, 0,05 mmol), em água (5 ml) e diclo-rometano (5 ml), foi agitada vigorosamente a 0°C. Após 10 min, uma solução de clorossulfato de clorometilo em diclorometano (1 ml) foi adicionada à mistura reaccional e deixou-se até à temperatura ambiente e continuou-se a agitar vigorosamente. Após algumas horas, a camada orgânica foi separada e lavada com salmoura. Os extractos orgânicos foram secos sobre sulfato de sódio. Após o solvente ser removido em vácuo, o resíduo foi purificado por croma-tografia de coluna sobre S1O2, usando etilo/hexano (1:5) como um eluente, para dar (200 mg, rendimento de 86%) o éster de clorometilo do ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il] -propiónico. EM (M+l 465) A uma solução de ácido 4-cloro-2-[(furan-2-ilmetil)-amino]-5-sulfamoil-benzóico (142,5 mg, 0,43 mmol) em DMF (3 ml) foi adicionada a trietilamina (10 mg, 0,95 mmol), e a mistura foi agitada por 1 h. O éster de clorometilo acima obtido (200 mg, 0,43 mmol) e o Nal (130 mg, 0,86 mmol) foram adicionados à mistura de reacção. A reacção foi deixada prosseguir à temperatura ambiente, durante a noite. A mistura reaccional foi concentrada sob vácuo. O resíduo foi dividido entre o acetato de eti-lo/água. A camada orgânica foi concentrada e foi purificada sob cromatografia de coluna para obter o composto do título 104 ΡΕ1230243 (190 mg, rendimento de 58%) como um sólido branco. EM(M+1 759)

Exemplo 56

Trifluoroacetato de l-carboxi-3-{3-[4-(2,6-dioxo-l,3- dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo- [2.2.2]oct-l-il]-propioniloximetoxicarboniloj-propil-amónio

Seguiu-se o procedimento para preparação do Exemplo 54, o éster de 5-{3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-propioniloximetilo} de éster de 1-terc-butilo de ácido 2-terc-butoxicarbonilomino-pentanodióico foi feito por utilização de éster de 1-terc-butilo de ácido 2-terc-butoxicarbonilomino-pentanodióico, éster de clorometilo do ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropilo-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-propiónico, trietilamina, e Nal em DMF. Desprotegendo em CH2CI2/TFA (50/50) à temperatura ambiente por 8 h, purificou-se em HPLC prep. para obter o composto do titulo como um sal de TFA. (rendimento de 20%). EM (M+l 576)

Exemplo 57

Trifluoroacetato de l-carboxi-3-(N'-{3-[4-(2,6-dioxo-l,3-diprpil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]-oct-l-il]-propionilj-hidrazinocarbonil)-propil-amónio A uma mistura de ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipro- 105 ΡΕ1230243 pil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-1-il]-propiónico (208 mg, 0,5 mmol) (Exemplo 18) (208 mg, 0,5 mmol) em THF (15 ml) foram adicionados a N-metilmorfolina (56 mg, 0,55 mmol) e o cloroformato de isobutilo (75 mg, 0,55 mmol), e a mistura foi agitada por 1 h. O éster de terc-butilo de ácido hidrazinocarboxílico (100 mg, 0,75 mmol) foi adicionado à mistura de reacção. A reacçâo foi deixada prosseguir por 2h. A mistura reaccional foi lavada com NaHCCb, NaHS04, e salmoura, respectivamente. O THF foi livrado sob vácuo, e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna, seguida por desprotecção sobre (CH2CI2/TFA) para obter a hidrazida de ácido 3-[4-(2,6 dioxo-1,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-propiónico como um sal de TFA. EM(M+l, 431). O sal de TFA acima obtido foi basificado por trietilamina, usando o mesmo procedimento com anidrido misto, que o acima mencionado, reagindo com o éster de 1-terc-butilo de ácido 2-terc-butoxicarbonilomino-pentano-dióico, seguido por cromatografia de coluna, desprotecção em CH2CI2/TFA, HPLC prep., para obter o composto do título como sal de TFA. EM(M+l 559)

Exemplo 58 Ácido [3-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purino-815 ilmetil)-adamantan-l-il]-acético

Seguiu-se o mesmo procedimento que o do Exemplo 106 ΡΕ1230243 45, usando ácido (3-metoxicarbonilmetil-adamantan-l-il)-acético em vez do éster de monometilo do ácido biciclo-[3.3.1]nonano-1,5-dicarboxílico. Massa (ES+ 443)

Exemplo 59 Ácido 4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-cubano-l-carboxílico. A uma solução de éster de metilo do ácido 4 — (6— amino-2,4-dioxo-l,3-dipropil-l,2,3,4-tetra-hidro-pirimi-dino-5-ilcarbamoil)-cubano-l-carboxílico (400 mg, 0,966 mmol) em MeOH (20 ml) foram adicionados 4 ml de uma solução aq. a 20% de NaOH e a mistura turva resultante foi aquecida ao refluxo durante a noite (12 h). A mistura reaccional gelada foi concentrada in vacuo, diluída com diversos pedaços pequenos de gelo e acidificada pela adição, gota a gota, de HC1 concentrado. O precipitado branco resultante foi recolhido, seco, e lavado com éter para dar um sólido branco (280 mg, 76%). ΧΗ RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,05 (coincidente t, 6H) , 1,70 (m, 2H) , 1,83 (m, 2H) , 3,99 (m, 2H) , 4,08 (m, 2H) , 4,27 (m, 3H) , 4,38 (m, 3H) . EM: 383 (MH+) .

Exemplo 60 8-(l-Hidroximetil-cubano-4-il)-1,3-dipropil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona. A uma suspensão agitada de ácido 4-(2,6-dioxo- 107 ΡΕ1230243 1,3-dipropil- 2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-cubano-1-carboxílico (100 mg, 0,261 mmol) e HATU (1,1 eq, 0,288 mmol, 110 mg) em 6 ml de MeCN foi adicionada a base de Hunig (1,1 eq, 0,288 mmol, 37 mg), pura, por seringa. A mistura heterogénea resultante foi agitada por 3 h e o NaBH4 (2,0 eq, 0,522 mmol, 20mg) foi adicionado numa porção. A mistura foi agitada por umas 2h adicionais, arrefecida com o auxilio de um banho de gelo e acidificada pela adição, gota a gota, de HC1 concentrado. O precipitado amarelo claro resultante foi recolhido, seco, e suspenso novamente em MeCN. Após agitar durante a noite, o material foi recolhido e seco para proporcionar um pó não totalmente branco (50 mg, 52%) . EM: 369 (MH+) .

Exemplo 61 Ácido 4-(7-benzilo-2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra- hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carboxílico. A uma solução agitada de éster de metilo do ácido 4-[(6-amino-2,4-dioxo-l,3-dipropil-l,2,3,4-tetra-hidro-pirimidino-5-il)-benzil-carbamoil]-biciclo[2.2.2]octano-1-carboxilico (430 mg, 0,843 mmol) em i-PrOH (20 ml) foi adicionado o KOH a 2 N (4,0 eq, 3,37 mmol, 1,7 ml) e a mistura resultante foi aquecida ao refluxo por 26 h. A mistura reaccional gelada foi concentrada em vácuo para dar um resíduo semi-sólido, que foi diluído com água e extraído com CHCI3. A fase aquosa foi acidificada com HC1 concentrado para proporcionar um precipitado branco, que foi recolhido e seco (381 mg, 915). EM: 479 (MH+) . 108 ΡΕ1230243

Exemplo 62 4-(2,6-Dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carbaldeído-oxima A uma solução agitada de 4-(2,6-dioxo-l,3-dipro-pil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octa-no-l-carbaldeído (1,6 g, 4,3 mmol) em MeOH (30 ml) foi adicionado o cloridrato de hidroxilamina (1,2 eq, 5,16 mmol, 356 mg) e uma solução de NaOAc (tri-hidrato, 1,5 eq, 6,45 mmol, 890 mg) em água (10 ml). A mistura resultante foi agitada à t.a. durante a noite. A mistura foi concentrada in vacuo e o resíduo sólido foi suspenso em água (15 ml), recolhido, lavado com água e seco para proporcionar um pó branco (1,4 g, 84%). Este método foi também usado na preparação de:

Exemplo 62a: [4-(2,6-Dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,9-tetra- hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-acetaldeído oxima. EM: 404 (MH+) .

Exemplo 63 3-[4-(2,6-Dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-acrilonitrilo. A uma suspensão agitada de 4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]- 109 ΡΕ1230243 octano-l-carbaldeído (535 mg, 1,44 mmol) e cloreto de (cianometil)trifenilfosfónio (1,2 eq, 1,73 mmol, 582 mg) 15 em THF (30 ml), a 0°C, foi adicionado o KHMDS (0,5 M em tolueno, 2,2 eq, 3,16 mmol, 6,3 ml). A mistura resultante foi agitada por 1,5 h nesta temperatura, então aquecida a 55°C por 5h. A mistura reaccional gelada foi dividida entre o EtOAc (10 ml) e uma solução aquosa saturada de NH4C1 (20 ml) e a fase aquosa foi extraída com EtOAc (20 ml) . As fases orgânicas combinadas foram lavadas com uma solução aquosa saturada de NaCl (2 x 20 ml), seca (MgS04) , filtrada e evaporada para dar um resíduo sólido, que foi purificado por cromatografia radial (placa de 2mm) usando 5% de MeOH em CH2CI2 como eluente, para proporcionar 425 mg (75%) de uma espuma frágil (mistura de isómeros cis/trans) . EM: 396 (MH+) .

Este método foi empregado na síntese de:

Exemplo 63a: Éster de dietilo de ácido {2-[ 4-(2,6-dioxo-1,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo [2.2.2]oct-l-il]-vinil}-fosfónico. EM: 507 (MH+)

Exemplo 64 3-[4-(2,6-Dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-propionitrilo.

Uma solução de 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3, 6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]- 110 ΡΕ1230243 acrilonitrilo (110 mg, 0,278 mmol) em MeOH (20 ml) e CH2CI2 (5 ml) foi hidrogenada usando Pd sobre carbono (10% molar) e um balão de hidrogénio afixado a um adaptador de válvula reguladora de 3-direcções/vidro esmerilhado. Após agitar durante a noite, a mistura foi desgaseificada, filtrada através de Celite e concentrada in vacuo para dar uma espuma frágil (100 mg, 90%) . 1H RMN (400 MHz, CDCI3) ; δ 0,93 (tripletes coincidentes, 6H), 1,53 (m, 6H), 1,57 (t, 2H), 1,67 (m, 2H), 1,77 (m, 2H) , 2,00 (m, 6H) , 2,24 (t, 2H) , 3,99 (t, 2H), 4,05 (t, 2H), 12,17 (s,lH).

Os seguintes compostos foram preparados num modo análogo:

Exemplo 64a: éster de metilo do ácido 4-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo- [2.2.2] oct-l-il]-butírico, EM: 445(MH+).

Exemplo 64b: Éster de dietilo de ácido {2-[4-(2,6-Dioxo-1,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo- [2.2.2] oct-l-il]-etil]-fosfónico, EM: 509 (MH+) .

Exemplo 65 4-(2,6-Dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,9-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carbonitrilo A uma suspensão agitada de 4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,9-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]- 111 ΡΕ1230243 octano-l-carbaldeído-oxima (400 mg, 1,03 mmol) em CHCI3 (20 ml), resfriada com o auxílio de um banho de gelo, foi adicionado o POCI3 (puro, 1,5 eq, 237 mg) e a mistura resultante foi deixada atingir a temperatura ambiente durante a noite (17 h). A mistura de reacção foi vertida em água, as fases foram separadas e a fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de NaHCC>3, seca sobre Na2S04, filtrada e concentrada in vacuo para dar uma espuma frágil, branca (360 mg, 95%). EM: 370 (MH+) .

Exemplo 66 [4-(2,6-Dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,9-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-acetaldeído. A uma suspensão agitada de cloreto de metoxi-metil-trifenilfosfónio (1,1 g, 3,2 mmol) em THF (60 ml), a -78°C, foi adicionada uma solução de KHMDS (0,5 M em tolueno, 10 ml, 5 mmol). A mistura amarela resultante foi agitada nesta temperatura por 1,5 h e uma solução de 4-(2, 6-dioxo-l, 3-dipropil-2,3,6, 9-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carbaldeído (373 mg, 1,0 mmol) em THF (12 ml) foi adicionada durante um período de 20 minutos. A mistura foi mantida a -78°C por 6 h e deixada atingir a temperatura ambiente durante a noite (12 h) . A mistura de reacção foi dividida entre o NH4C1 aquoso saturado (100 ml) e 0 EtOAc (100 ml) e a fase aquosa foi extraída com o EtOAc (50 ml). Os extractos orgânicos combinados foram lavados com NaCl aquoso saturado (100 ml), 112 ΡΕ1230243 concentrados em vácuo, dissolvidos novamente em THF e concentrados até um volume de aprox. 20ml. À solução foi adicionado um volume igual de HC1 a 1 N e a mistura foi agitada durante a noite. A mistura foi diluída com EtOAc (20 ml), a fase aquosa foi separada e extraída com EtOAc (10 ml). As fases orgânicas combinadas foram então lavadas com NaCl aquoso saturado (2 x, 25 ml), secas (MgS04), filtradas e concentradas em vácuo. O óleo laranja resultante foi purificado em bateladas por cromatografia radial (placa de 2 mm) usando 3% de MeOH e 3% de THF em CH2C12 como eluente. As fracções contendo o produto foram combinadas e concentradas para proporcionar 290 mg (75%) de um sólido branco. EM: 387 (MH+) .

Exemplo 67 Ácido [4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,9-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-acético A uma solução de [4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil- 2,3,6,9-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-acetaldeído (170 mg, 0,440 mmol) em t-BuOH (10 ml) e 2-metil-2-buteno (10 eq, 4,4 mmol, 470 pL), resfriada com o auxílio de um banho de gelo, foi adicionado o NaC102 (1,5 eq, 0,66 mmol). A solução amarela resultante foi deixada atingir a temperatura ambiente durante um período de 14 h, então concentrada em vácuo. O resíduo oleoso resultante foi dividido entre a água (10 ml) e o CH2C12 (10 ml) . A fase aquosa foi acidificada pela adição, gota a gota, de HC1 113 ΡΕ1230243 concentrado e o precipitado resultante foi recolhido, lavado com água e seco para proporcionar 105 mg (59%) como um pó branco. 1E RMN (400 MHz, CDC13); d 0,91 (t, 3H), 0,93 (t, 3H) , 1,63 (m, 2H), 1,77 (m, 2H, parcialmente obscuro), 1,82 (m, 6H), 2,01 (m, 6H) , 2,32 (s, 2H) , 3,95 (m, 2H) , 4,07 (m, 2H), 12,74 (s, 1H).

Exemplo 68 Éster de monoetilo de ácido [2-[4-(2, 6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-etil}-fosfónico.

Dissolveu-se o éster de dietilo de ácido {2 — [4 — (2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-etil}-fosfónico (30 mg, 59 pmol) em NaOH IN (4 ml) e aqueceu-se a solução a 80°C por 3h. A mistura foi deixada resfriar até a t.a. e acidificou-se lentamente com HCl concentrado. O precipitado resultante foi recolhido e seco (22 mg, 79%). 1H RMN (400 MHz, CDC13) ; δ 0,93 (tripletes coincidentes, 6H), 1,31 (t, 3H) , 1,48 (m, 8H) , 1,70 (br m, 6H), 1,95 (m, 6H), 3,95 (t, 2H), 4,07 (t, 2H) , 12,2 (br s, 1H) .

Exemplo 69 8-[4-(3-hidroxi-propil)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-1,3-dipropil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona A uma solução de ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3- 114 ΡΕ1230243 dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]— oct-l-il]-propiónico (417 mg, 1,0 mmol) em THF (25 ml), resfriada até 0°C com o auxilio de um banho de gelo, foi adicionado o BH3 (1,0 M em THF, 3,0 mmol). A mistura resultante foi deixada atingir a temperatura ambiente e agitada por um período de 60 h. Seguindo a adição de MeOH (10 ml), a mistura foi concentrada in vacuo para proporcionar um sólido branco, que foi dissolvido em MeOH (20 ml), agitado a t.a. por 2 h e evaporado até a secura em vácuo. O sólido branco resultante foi recristalizado a partir de EtOAc para proporcionar 345 mg (86%) de um pó branco. EM: 403 (MH+) .

Este método foi também usado para preparar:

Exemplo 69a: 8-[4-(2-hidroxi-etil)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-1,3-dipropil-3,9-di-hidro-purino-2,6-diona. EM: 389 (MH+) .

Exemplo 70 3-[4-(2,6-Dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-propionamida. A uma solução de ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-di-propil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]— oct-l-il]-propiónico (510 mg, 1,22 mmol) e HATU (1,1 eq, 1,34 mmol, 511 mg) em DMF (10 ml) foi adicionada a base de Hunig (1,3 eq, 1,60 mmol, 205 mg). Após a suspensão resultante ter sido agitada por 1 h, amónia em excesso (0,5 M em dioxano, 4,0 ml) foi adicionada e a mistura foi agitada 115 ΡΕ1230243 durante a noite (14 h) . O solvente foi removido in vacuo e o residuo resultante foi dividido entre o CH2CI2 (10 ml) e o HC1 a IN (10 ml) , com o auxilio de 2 ml de MeOH para ajudar na transferência e aperfeiçoar a solubilidade. A fase aquosa foi extraida com CH2CI2 (2 x lOml), as fases orgânicas combinadas foram lavadas com HC1 a IN (2 x lOml), secas (MgS04) , filtradas e evaporadas in vacuo para dar um sólido não totalmente branco (455 mg, 90%). EM: 416 (MH+) .

Este método foi empregado na síntese dos seguintes compostos:

Exemplo 70a: 3-[4-(2,6-Dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra- hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-N-(lH-tetra-zol-5-il)-propionamida, EM: 484(MH+) ;

Exemplo 70b: N-(2-Ciano-etil)-3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-propionamida, EM: 469 (MH+);

Exemplo 70c: Éster de metilo do ácido 2-{[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carbonil]-amino}-3-hidroxi-butírico, EM: 504 (MH+) ;

Exemplo 70d: Éster de metilo do ácido 2-{[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]-octano-l-carbonil]amino}-3-hidroxi-propiónico, EM: 480 (MH+) . 116 ΡΕ1230243

Exemplo 71 Ácido {2-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-etil}-fosfónico. A uma solução de éster de dietilo de ácido {2— [4 — (2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo [2.2.2]oct-l-il]-etil}-fosfónico (30 mg, 59 pmol) em CH2C12 (8 ml) foi adicionado o TMSBr (excesso) e a mistura resultante foi agitada à t.a. durante a noite. TMSBr adicional foi adicionado e a reacção foi aquecida a 55°C por 6 h. O solvente foi removido in vacuo para dar um sólido laranja, cuja cor foi descorada após trituração com água. O material foi recolhido, lavado com água e seco (20 mg, 77%) . EM: 453 (MH+) .

Exemplo 72 3-(5-{2-[4-(2,6-Dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-etil}-tetrazol-l-il)-propionitrilo.

Uma solução de N-(2-ciano-etil)-3-[4-(2,6-dioxo-1,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo-[2.2.2]oct-l-il]-propionamida (500 mg, 1,06 mmol, 1.0 eq) , PH3P (2.0 eq, 2,13 mmol, 560 mg), TMSN3 (2,0 eq, 2,13 mmol, 245 mg), e DEAD (2,0 eq, 2,13 mmol, 371 mg) em THF (10 ml) foi agitada à t.a. por 24 h. O vaso de reacção foi recar- 117 ΡΕ1230243 regado com a mistura de reagentes (2,0 eq, 2,13 mmol) e a agitação foi continuada por umas 24 h adicionais. A reacção foi resfriada bruscamente pela adição de uma solução aquosa a 5% de (NH4) 2Ce (NO3) 6 e extraída com EtOAc. Os extractos orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre MgS04, filtrados e evaporados in vacuo para proporcionar um óleo laranja viscoso. Uma porção do material foi purificada por LC preparativa para proporcionar 20 mg de material puro. EM: 494 (MH+) .

Exemplo 73 1,3-Dipropil-8-{4-[2-(lH-tetrazol-5-il)-etil]-biciclo-[2.2.2]oct-l-il}-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona A uma solução de 3-(5-{2-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipro-pil-2,3, 6, 7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il] -etilo}-tetrazol-l-il)-propionitrilo (150 mg, 0,30 mmol) em THF (20 ml) foram adicionados 3 ml de NaOH IN. A mistura resultante foi agitada à t.a. por 8 h, concentrada in vacuo e extraída com CH2CI2 (2 x 10 ml) . A fase aquosa foi acidificada pela adição cuidadosa de HC1 concentrado e o precipitado resultante foi recolhido, lavado com água e seco para proporcionar 55 mg (41%) de um pó branco. EM: 441 (MH+) .

Este método foi também empregado na síntese de: 118 ΡΕ1230243

Exemplo 73a: 1,3-Dipropil-8-[4-(lH-tetrazol-5-il)-biciclo-[2.2.2]oct-l-il]-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona. EM: 413 (MH+) .

Exemplo 74 Ácido 4-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-butírico.

Uma solução de éster de metilo do ácido 4-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo [2.2.2]oct-l-il]-butírico (45 mg, 100 pmol) em THF (4 ml) foi tratada com LiOH 1 M (2 ml) e a solução turva resultante foi agitada à t.a. durante a noite. A solução foi concentrada in vacuo, diluída com água (2 ml) e acidificada pela adição, gota a gota, de HC1 concentrado. O precipitado resultante foi recolhido, lavado com água e seco para proporcionar um pó branco (35 mg, 81 %). EM: 431 (MH+) .

Este método foi empregado na síntese dos seguintes compostos:

Exemplo 74a: Ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-cuban-l-il]-acrílico, EM: 409 (MH+) ;

Exemplo 74b: Ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,9-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-4,5-di-hidro-isoxazole-5-carboxílico, EM: 458 (MH+) ; 119 ΡΕ1230243

Exemplo 74c: Ácido 3-[4-(2, 6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,9-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il] -isoxazole-5-carboxílico, EM: 456 (MH+) ;

Exemplo 74d: Ácido 2-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,9-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il] -tiazole-4-carboxílico, EM: 472 (MH+) ;

Exemplo 74e: Ácido 2—{2—[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6, 9-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-etil}-tiazole-4-carboxílico, EM: 500 (MH+) ;

Exemplo 74f: Ácido 4-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,9-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-but-2-enóico, EM: 429 (MH+) ;

Exemplo 74g: Ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,9-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-ilmetil]-isoxazole-5-carboxilico, EM: 470 (MH+) ;

Exemplo 75 8-[4-(5-Hidroximetil-isoxazol-3-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il] -1,3-dipropil-3,9-di-hidro-purino-2,6-diona

Uma solução de 4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6, 9-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carbal-deído-oxima (87 mg, 0,22 mmol) e N-cloro-succinimida (1,2 120 ΡΕ1230243 eq, 0,27 mmol, 36 mg) em DMF (6 ml) foi aquecida num banho de óleo a 60°C por 1,5 h. O frasco de reacção foi removido do banho e deixado resfriar até à t.a. e o álcool propargilico (2,0 eq, 0,44 mmol, 25 mg) foi adicionado. O frasco foi restituído para o banho de óleo, a Et3N (2,0 eq, 0,44 mmol, 44 mg) foi adicionada durante um período de 15 minutos e a mistura resultante foi aquecida a 60°C por 3,5 h. A mistura reaccional gelada foi evaporada in vacuo para proporcionar um resíduo sólido, que foi purificado por cromatografia radial (placa de 2mm) usando um gradiente de 2-10% de MeOH em CH2CI2 como eluente. As fracções contendo o produto foram combinadas e concentradas para proporcionar 31 mg (26%) de um sólido branco. EM: 442 (MH+) .

Os compostos que se seguem foram preparados num modo análogo:

Exemplo 75a: Éster de metilo do ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,9-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]— oct-l-il]-4,5-di-hidroisoxazole-5-carboxílico, EM: 472 (MH+) ;

Exemplo 75b: Éster de metilo do ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,9-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]— oct-l-il]-isoxazole-5-carboxílico, EM: 470 (MH+);

Exemplo 75c: 8-{4-[5-(4-Metoxi-fenil)-isoxazol-3-il]-bici clo [2.2.2]oct-l-il}-l,3-dipropil-3,9-di-hidro-purino-2,6-diona, EM: 518 (MH+) ; 121 ΡΕ1230243

Exemplo 75d: Éster de metilo do ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,9-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]-oct-l-ilmetil]-isoxazole-5-carboxílico, EM: 484 (MH+) .

Exemplo 76 3-[4-(2, 6-Dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)- biciclo[2.2.2]oct-l-il]-tiopropionamida.

Uma suspensão de P4S10 (23 mg, 53 ymol) e Na2C03 (4 mg, 53 pmol) em THF (4ml) foi agitada vigorosamente por 20 min e a 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3, 6, 7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-propionamida (20 mg, 45 pmol) foi adicionada. A solução amarela clara resultante foi agitada à t.a. por lh, evaporada até a secura e seca in vacuo durante a noite. O material bruto foi purificado por cromatografia radial (placa de 1 mm), usando 2-5% de MeOH em CH2CI2 como eluente, para proporcionar um sólido branco (11 mg, 55%). EM: 432 (MH+) .

Este método foi empregado na síntese do seguinte composto:

Exemplo 76a: Amida de ácido 4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo [2.2.2]octano-1-carbotióico, EM: 404 (MH+) . 122 ΡΕ1230243

Exemplo 77 1,3-Dipropil-8-(4-vinil-biciclo[2.2.2]oct-l-il)-3,9-di-hidro-purino-2,6-diona. A uma suspensão agitada de cloreto de metil-trifenilfosfónio (1,07 g, 3,0 mmol) em THF (20 ml), a 0°C, foi adicionado o n-BuLi (1,4 M em hexano, 2,14 ml, 3,0 mmol). A mistura resultante castanho-avermelhada foi agitada nesta temperatura por 0,5 h e então à t.a. por 0,5 h. Uma solução de 4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,9-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carbal-deído (372 mg, 1,0 mmol) em THF (10 ml) foi adicionada durante um período de 20 minutos e a mistura resultante foi agitada durante a noite (12 h) . A mistura reaccional foi dividida entre o NH4C1 aquoso saturado (20 ml) e o EtOAc (20 ml) e a fase aquosa foi extraída com o EtOAc (20 ml) . Os extractos orgânicos combinados foram lavados com NaCl aquoso saturado (50 ml), secos (MgS04), filtrados e evaporados in vácuo para proporcionar um óleo, que foi purificado por cromatografia radial (placa de 2 mm) usando um gradiente de 0-5% de MeOH em CH2CI2 como eluente. As frac-ções contendo o produto foram combinadas e concentradas para proporcionar 140 mg (38%) de um sólido branco. EM: 371 (MH+) . ΡΕ1230243 123

Exemplo 78 Éster de etilo de ácido 2-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-tiazole-4-carboxílico. a suspensão de amida de ácido 4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]— octano-l-carbotióico (20 mg, 50 pmol) e KHCO3 (8,0 eq, 400 pmol) em THF (5 ml) foi agitada vigorosamente por 5 min e o bromopiruvato de etilo (29 mg, 150 pmol) foi adicionado puro, por seringa. A solução amarela clara resultante foi agitada à t.a. por 1 h, resfriada até 0°C com o auxilio de um banho de gelo e tratada sequencialmente com piridina (8,0 eq, 400 pmol) e (F3CC0)20 (4,0 eq, 42mg, 200 pmol) . A solução vermelha forte resultante foi concentrada in vacuo e extraída com CH2CI2 (2 x 10 ml) . As fases orgânicas combinadas foram lavadas com HC1 a 2 N, secas (Na2S04) , filtradas e concentradas in vacuo. A solução foi purificada por cromatografia radial (placa de 1 mm) usando 2-5% de MeOH em CH2C12 como eluente, para proporcionar um sólido branco (22 mg, 88%). EM: 500 (MH+) .

Exemplo 79 Éster de dimetilo do ácido cis/trans-l-(2-cloroetil)-ciclo-hexano-1,4-dicarboxílico (II) a mistura de n-butil-lítio (1,6 M em hexano, 124 ΡΕ1230243 0,275 mol) é adicionada durante 25 minutos a uma mistura agitada de diisopropilomina (0,3 mui, 42 ml) em THF seco (200 ml), arrefecida até -78°C, sob azoto. A mistura resultante é agitada a -78°C por 30 min. À mistura é adicionada a TMU (1,675 mol, 200 ml) durante 20 min. A esta mistura de LDA e TMU é adicionado o ciclo-hexanodicar-oxilato de 1,4-dimetilo (1, 0,25 mol, 45 ml) durante 10 min. Após agitar uns 40 min adicionais, o bromocloroetano (0,30 mol, 25 ml) é adicionado durante 10 min. A mistura resultante é agitada a -78°C por 30 min, o banho gelado é então retirado e a reacção é agitada durante a noite, com um aquecimento até 20-25°C. Ácido clorídrico (3N, 200ml) é então adicionado e rapidamente agitado por 10 min. O THF é removido sob pressão reduzida e o resíduo aquoso resultante é extraído com hexanos (3 x 200 ml). Os extractos orgânicos combinados são lavados com ácido clorídrico (3N, 2 x 200 ml), água (1 x 100 ml), bicarbonato de sódio saturado (2 x 100 ml) e solução salina (1 x 100 ml) e secos sobre sulfato de magnésio. A filtração por sucção e a concentração sob pressão reduzida dão o composto do título.

Exemplo 80 Éster de dimetilo do ácido biciclo[2.2.2]octano-l,4-dicarboxílico (III) n-Butil-lítio (2,5 M em hexano, 313 mmol) é lentamente adicionado a uma mistura agitada de diisopropilomina (50 ml, 357 mmol) em 5 THF seco (450 ml), res- 125 ΡΕ1230243 friada até -30°C, sob azoto. A mistura é agitada por 30 min a -30°C e arrefecida até -78°C. Num frasco separado, uma mistura de éster de dimetilo do ácido cis/trans-1-(2-cloroetil)-ciclo-hexano-1,4dicarboxílico (II, Exemplo 79, 80 g, 303 mmol) em THF (1100 ml) e HMPA (225 ml, 1280 mmol) é preparada sob uma atmosfera de azoto e resfriada até -78°C, com agitação. A solução de LDA é então adicionada através de uma linha de transferência, durante 1 hora. A mistura resultante é agitada a -78°C por 1 hora mais e aquecida até 20-25°C durante duas horas e agitada por outros 30 min. Então, diluição saturada com 500 ml de água e extracção com hexano (3 x 350 ml). Os extractos de hexano combinados são lavados com solução salina, secos sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados. O produto bruto é cristalizado a partir de hexano para dar o composto do titulo.

Exemplo 81 Éster de monometilo do ácido biciclo-[2.2.2]octano-l,420 dicarboxílico (IV)

Uma mistura de éster de dimetilo do ácido bici-clo[2.2.2]octano-1,4-dicarboxílico (III, Exemplo 80, 20,4 g, 89,5 mmol), octahidrato de hidróxido de bário (14 g, 44,7 mmol) em metanol (160 ml) e água (40 ml) é agitada a 20-25°C por 18 horas. A mistura é diluída com água (600 ml) e extraída com hexano (150 ml x 2) . A mistura aquosa é acidificada (ácido clorídrico a 6 N) até pH = 1-2 e 126 ΡΕ1230243 extraída com clorofórmio (150 ml x 2) . Os extractos de clorofórmio combinados são concentrados. O resíduo é dissolvido em tolueno, filtrado e concentrado para dar o composto do título, pf = 169-173°C.

Exemplo 82 Éster de metilo do ácido 4-clorocarbonilbiciclo[2.2.2]-octano-l-carboxílico (V) O éster de monometilo do ácido biciclo-[2.2.2]octano-1,4-dicarboxílico (IV, Exemplo 81, 1 peso) é dissolvido em diclorometano (6,25 vol) e a dimetilformamida (0,025 vol) é adicionada. Concomitantemente, o cloreto de oxalilo (0,5125 vol) é dissolvido em diclorometano (0,625 vol) e a mistura resultante é adicionada à mistura contendo o éster de monometilo de ácido biciclo-[2.2.2]octano-1, 4-dicarboxílico (IV) entre 12 a 17°C, tomando cuidado com a evolução de gás. A mistura é agitada entre 15 a 25° por 2 a 4 horas, o que é monitorizado por (TLC; diclorometano/me-tanol: 9/1, verde de bromocresol para visualização). O solvente é removido sob pressão reduzida a 40 a 45°, o diclorometano (5 vol) é adicionado, agitado por 5 a 15 min e removido sob pressão reduzida de 40 a 45°. O processo é repetido por adição de diclorometano (5 vol), agitado por 5 a 15 min e removido sob pressão reduzida entre 40 a 45°. A acetonitrilo (6,25 vol) é então adicionada para dar o composto do título em solução. 127 ΡΕ1230243

Exemplo 83a Éster de metilo do ácido 4-(6-amino-2,4-dioxo-l,3-dipropil-1,2,3,4-tetra-hidropirimidino-5-il-carbamoil)biciclo-[2.2.2]octano-l-carboxílico (VII) O cloridrato de diaminodipropiluracilo (VI, 1,36 peso) é suspenso em acetonitrilo (12,5 vol), arrefecido até 0 a 5°C, e a trietilamina (2,46 vol) é adicionada entre 0 a 10°C. A mistura é então arrefecida até 0 a 5°C. Uma mistura de éster de metilo do ácido 4-clorocarbonilbiciclo[2.2.2]-octano-lcarboxílico (V, Exemplo 82) em acetonitrilo é adicionada à mistura de diaminodipropiluracilo, entre 0 a 20°C. A mistura reaccional é então aquecida até 15 a 25°C e agitada por 15 a 20 horas, em cujo tempo todo o éster de metilo de ácido 4-clorocarbonilbiciclo[2.2.2]octano-l-carboxílico (V) é consumido (TLC; diclorometano/metanol, 9/1; verde de bromocresol para visualização). A mistura reaccional é diluída com água (3,12 vol) e concentrada sob pressão reduzida a 40 a 45°C (18 a 20 vol de solvente são removidos). O concentrado é extraído com acetato de etilo (3x6 vol) e os orgânicos combinados são lavados sequencialmente com ácido cítrico (10%, 3 x 3,12 vol), ácido clorídrico (1M, 2,5 vol), água (3,12 vol), bicarbonato de sódio saturado (3,12 vol) e solução salina (3,12 vol). A mistura é seca sobre sulfato de magnésio (0,75 peso) por 5 a 15 min, filtrada, lavada com acetato de etilo (1 vol) e o 128 ΡΕ1230243 solvente removido sob pressão reduzida a 40 a 45°C para dar o composto do titulo.

Exemplo 83b Éster de metilo do ácido 4-(6-amino-2,4-dioxo-l,3-dipropil-1,2,3,4-tetra-hidro-pirimidino-5-il-carbamoil)-biciclo-[2.2.2]octano-l-carboxílico (VII, Passo E) O éster de metilo do ácido 4-clorocarbonilbici-clo[2.2.2]octano-l-carboxílico (V, Exemplo 82, 0,562 kg) é dissolvido em diclorometano (3,55 1) e a dimetilformamida (0,014 1) é adicionada. Concomitantemente, o cloreto de oxalilo (0,291 1) é dissolvido em diclorometano (0,355 1) e a mistura resultante é adicionada à mistura de éster de metilo do ácido 4-clorocarbonilbiciclo[2.2.2]octano-1-carboxílico (V, Exemplo 82), entre 12 a 17°C. A mistura é agitada a 15 a 25°C por 2 horas, em cujo tempo todo o éster de metilo do ácido 4-clorocarbonilbiciclo[2.2.2]octano-1-carboxílico (V, Exemplo 82) é consumido (TLC; diclorometa-no/metanol, 9/1; visualização com verde de bromocresol). O solvente é removido sob pressão reduzida a 40 a 45°, o diclorometano (0,355 1) é adicionado, agitado por 5 a 15 min e removido sob pressão reduzida a 40 a 45°C. O processo é repetido por adição de diclorometano (2,83 1), agitação por 5 a 15 min e concentração in vácuo a 40 a 45°C. O acetonitrilo (3,54 1) é então adicionado (mistura A). Num frasco separado, o cloridrado de diaminodipropiluracilo 129 ΡΕ1230243 (VI, 0,772 kg) é suspenso em acetonitrilo (7,09 1) , arrefecido até 0 a 5°C e a trietilamina (1,40 1) é adicionada entre 0 a 10°C (mistura B) . A mistura é então arrefecida até 0 a 5°C. A mistura A é adicionada à mistura B entre 0 a 20°C. A mistura de reacção é aquecida até 15 a 25°C e agitada por 16 horas, em cuja ocasião todo o cloreto de ácido é consumido (TLC; diclorometano/metanol, 9/1; visualização com verde de bromocresol). A mistura reac-cional é diluída com água (1,77 1) e concentrada sob pressão reduzida a 40 a 45°C. O concentrado é extraído com acetato de etilo (3 x 3,41 1) e os orgânicos combinados são lavados sequencialmente com ácido cítrico (10%, 3 x 1,77 1) , ácido clorídrico (1 M, 1,42 1), água (1,77 1), bicarbonato de sódio saturado (1,77 1) e solução salina saturada (1,77 1). A mistura é seca sobre sulfato de magnésio (0,426 kg) por 5 a 15 min, filtrada, lavada com acetato de etilo (0,568 1) e o solvente evaporado sob pressão reduzida, a 40 a 45°C, para dar o composto do título.

Exemplo 84a Éster de metilo do ácido 4-(2,β-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carbo-xílico (VIII) O éster de metilo do ácido 4-(6-amino-2,4-dioxo-1,3-dipropil-l,2,3,4-tetra-hidropirimidino-5-il-carbamoil)-biciclo [2.2.2]octano-l-carboxílico (VII, Exemplo 83a, 1 130 ΡΕ1230243 peso) e o isopropanol (4,76 vol) são misturados e agitados sob azoto. O hidróxido de potássio (2M, 4,76 vol) é adicionado. O composto do titulo é formado, porém não isolado.

Exemplo 85a Ácido 4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-pu-rin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carboxílico (IX) O éster de metilo do ácido 4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]— octano-l-carboxílico (VIII, Exemplo 84a), no meio de hidróxido de potássio, é aquecido ao refluxo por 2 a 3 h até estar completo, como medido por RMN. A mistura é então arrefecida até 10 a 25°C. A água (11,16 vol) é adicionada, seguida por tolueno (1,25 vol) e os conteúdos são agitados vigorosamente por 5 a 15 minutos. As camadas são separadas. O tolueno (1,25 vol) é adicionado à camada aquosa e a mistura é agitada vigorosamente por 5 a 15 minutos. As camadas são separadas. O tolueno (1,25 vol) é adicionado à camada aquosa, agitado vigorosamente por 5 a 15 minutos e as camadas são separadas. A fase aquosa é então arrefecida até entre 0 e 10°C e acidificada com ácido clorídrico concentrado (0,74 vol), mantendo a temperatura abaixo de 10°C. A mistura é agitada entre 0 e 10°C por 60 a 90 minutos. O sólido é recolhido por filtração e seco sob pressão reduzida para dar o composto do título. 131 ΡΕ1230243

Exemplos 84b e 85b Ácido 4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-pu-rin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carboxílico (VIII, IX, Passos F e 6) O éster de metilo do ácido 4-(6-amino-2,4-dioxo-1,3-dipropil-l,2,3,4-tetra-hidro-pirimidino-5-ilcarbamoil)-biciclo[2.2.2]octano-l-carboxílico (VII, Exemplo 83b, 0,760 kg) e o isopropanol (3,62 1) são combinados. A mistura é agitada sob azoto e o hidróxido de potássio (2 M, 3,62 1) é adicionado. Os conteúdos são aquecidos ao refluxo por 3 h (teste quanto ao término da reacção por RMN). A mistura é então deixada arrefecer até 10 a 25°C. A água (8,48 1) é adicionada, seguida por tolueno (0,95 1) e os conteúdos são agitados vigorosamente por 5 a 15 minutos. As camadas são separadas. A extracção com tolueno (0,95 1) é efectuada adicionalmente por duas vezes. A fase aquosa é então arrefecida até entre 0 e 10°C e acidificada com ácido clorídrico concentrado (0,562 1). A mistura é agitada entre 0 e 10°C por 60 minutos. O produto sólido é recolhido por filtração e seco sob pressão reduzida a 50 a 60°C, para dar o composto do titulo.

Exemplo 86a 8-(4-Hidroximetilbiciclo[2.2.2]oct-l-il)-1,3-dipropil-3,7-di-hidropurino-2,6-diona (X, Passo H) Ácido 4- (2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3, 6, 7-tetra- 132 ΡΕ1230243 hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carboxílico (IX, Exemplo 85a, 1 peso) e o tetra-hidrofurano (11 vol) são misturados sob azoto. 0 complexo de borano.tetra-hidrofurano (1 M) em THF (5,1 vol) é adicionado numa taxa tal, de modo a manter a temperatura interna entre 10 a 20°. A mistura é agitada a 10 a 20° por 17 a 20 horas, até que todo ácido (X) seja consumido (TLC; diclorometano/metanol, 9/1, visualização com uv, então permanganato de 25 potássio). O metanol (4,2 vol) é adicionado à reacção, antes do aquecimento ao refluxo por 45 a 75 min. A reacção é arrefecida até entre 15 e 40° e o solvente removido por pressão reduzida a 40 a 45°. O resíduo é dividido entre o acetato de etilo (16,6 vol) e ácido clorídrico (1 M, 2,5 vol) e a camada aquosa é removida com qualquer material sólido não dissolvido. Esta mistura é clarificada e a fase orgânica residual a partir da filtração da camada aquosa/mistura de sólidos é combinada com a maior parte da fase orgânica. O hidrogenocarbonato de sódio saturado (2,5 vol) é adicionado e as camadas separadas, retendo quaisquer sólidos com a fase aquosa. Esta fase aquosa/mistura de sólidos é filtrada e a fase orgânica residual a partir destes líquidos-mãe é combinada com a maior parte da fase orgânica. As fases orgânicas combinadas são lavadas com solução salina (2,5 vol), as camadas são separadas e qualquer sólido residual é retido com a fase aquosa. A fase aquosa/mistura de sólidos é filtrada e qualquer orgânico nos líquidos-mãe a partir da filtração é combinado com a maior parte da fase orgânica, seco com sulfato de magnésio (0,5 peso) por 5 a 15 min, filtrado, lavado com acetato de 133 ΡΕ1230243 etilo (1 vol) e o solvente removido sob pressão reduzida a 40 a 45° para dar o composto do titulo.

Exemplo 86b 8-(4-Hidroximetil-biciclo[2.2.2]oct-l-il)-1,3-dipropil-3,7di-hidropurino-2,6-diona (X, Passo H) Ácido 4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carboxilico (IX, Exemplo 85b, 0,82 kg) e o tetra-hidrofurano (9,02 1) são misturados sob azoto e o complexo de borano.tetra-hidrofurano (1 M) em THF (4,18 vol) é adicionado numa taxa tal, de modo a manter a temperatura interna entre 10 a 20°. A mistura reaccional é agitada a 10 a 20° por 17 horas, até que todo o material de partida seja consumido (TLC; diclorometano/metanol, 9/1, visualização com UV, então permanganato de potássio) . O metanol (3,44 1) é adicionado à mistura de reacção, e a mistura é aquecida ao refluxo por 1 h. A reacção é arrefecida até entre 15 e 40° e o solvente removido por pressão reduzida a 40 a 45°. O resíduo é dividido entre o acetato de etilo (13,61 1) e ácido clorídrico (1 M, 2,23 1) e a camada aquosa é removida com qualquer material sólido não dissolvido. A mistura é clarificada e a fase orgânica residual a partir da filtração da camada aquosa/mistura de sólidos é combinada com a maior parte da camada orgânica. O hidrogenocarbonato de sódio saturado (2,23 1) é adicionado e as camadas

separadas, retendo quaisquer sólidos com a fase aquosa. A 134 ΡΕ1230243 fase aquosa/mistura de sólidos é filtrada e a fase orgânica residual a partir destes liquidos-mãe é combinada com a maior parte da camada orgânica. As camadas orgânicas combinadas são lavadas com solução salina saturada (2,23 1), as camadas são separadas e os sólidos residuais são retidos com a fase aquosa. A camada aquosa/mistura de sólidos é filtrada e os orgânicos nos liquidos-mãe a partir da filtração são combinados com a maior parte da camada orgânica, secos com sulfato de magnésio (0,41 kg), filtrados, lavados com acetato de etilo (0,82 1) e o solvente removido sob pressão reduzida a 40 a 45° para dar o composto do titulo.

Exemplo 87a 4- (2,6-Dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carbaldeído (XI) A 8-(4-hidroximetilbiciclo[2.2.2]oct-l-il)-1,3-dipropil-3,7-di-hidropurino-2,6-diona (X, Exemplo 86a, 1 peso) e o sulfóxido de dimetilo (4 vol) são misturados e agitados sob azoto; a mistura é agitada por 5 a 15 min e a trietilamina (2,42 vol) é adicionada. Uma mistura de complexo de trióxido de enxofre piridina (1,275 peso) em sulfóxido de dimetilo (6 vol) é adicionada, mantendo a temperatura interna abaixo de 30°. A temperatura é ajustada para 14 a 20° e a mistura reaccional é então agitada a 14 a 20° por 16 a 20 horas, até estar completa por RMN. Se houver qualquer álcool de partida restando, o complexo de 135 ΡΕ1230243 trióxido de enxofre piridina (0,15 peso) é adicionado e a reacção agitada por 2 a 3 horas adicionais, entre 14 a 20°. O acetato de etilo (20 vol) e ácido clorídrico (1 M, 10 vol) são adicionados à mistura reaccional e agitados vigorosamente por 5 a 15 min. As fases são separadas e a fase orgânica é lavada com ácido clorídrico (1M, 10 vol.). As fases são separadas e a fase orgânica é novamente lavada com ácido clorídrico (1 M, 10 vol). As fases são separadas e a fase orgânica é lavada com solução salina (5 vol), seca sobre sulfato de magnésio (0,5 peso) por 5 a 10 min e filtrada. A torta de filtro é lavada com acetato de etilo (1 vol) . O solvente é removido sob pressão reduzida a 40 a 45° para dar o composto do título.

Exemplo 87b 4-(2,6-Dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carbaldeído (XI, Passo I) A 8-(4-hidroximetil-biciclo[2.2.2]oct-l-il)-l,3-dipropil-3,7-di-hidropurino-2,6-diona (X, Exemplo 8, 0,440 kg) e o sulfóxido de dimetilo (1,76 1) são misturados sob azoto, agitados por 5 a 15 min e a trietilamina (1,065 1) é adicionada. Uma mistura de complexo de trióxido de enxofre piridina (0,561 kg) em sulfóxido de dimetilo (2,64 1) é adicionada, mantendo a temperatura interna abaixo de 30°. A temperatura interna é ajustada para 14 a 20° e a mistura reaccional é agitada a 14 a 20° por 20 horas. O acetato de etilo (8,80 1) e ácido clorídrico (1 M, 4,40 1) são 136 ΡΕ1230243 adicionados à reacção e a mistura é agitada vigorosamente por 15 min. As fases são separadas e a camada orgânica é lavada duas vezes mais com ácido clorídrico (1 M, 4,40 1) . A camada orgânica é então lavada com solução salina (2,20 1), seca sobre sulfato de magnésio (0,223 kg) por 10 min, filtrada e a torta de filtro é lavada com acetato de etilo (0,440 1). O solvente é evaporado sob pressão reduzida a 40 a 45° para dar o composto do titulo.

Exemplo 88 Éster de metilo do ácido cis/trans-3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]-oct-l-il]acrílico (XII) O 4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carbaldeído (XI, Exemplo 87a, 1 peso) e o tetra-hidrofurano (16,5 vol) são misturados sob azoto e o (trifenilfosforanilideno) acetato de metilo (1,85 peso) é adicionado. A mistura reaccional é aquecida até 65 a 75°C e a mistura reaccional agitada nesta temperatura até que o aldeído de partida tenha sido consumido, conforme determinado por RMN. A mistura é arrefecida até 35 a 40°C e uma solução de hidróxido de lítio (0,45 peso) em água (16,5 vol) é adicionada. A mistura é aquecida até ao refluxo e a mistura agitada ao refluxo até que a hidrólise do éster esteja completa (conforme determinada por RMN, tempo de reacção típico de 3 a 6 horas). A mistura de reacção é arrefecida até 35 a 40° 137 ΡΕ1230243 e o solvente orgânico removido in vacuo a 40 a 45°. O acetato de etilo (10 vol) e a água (6 vol) são adicionados ao residuo aquoso e a mistura é vigorosamente agitada por 5 a 15 min. As fases são separadas e a fase aquosa é lavada com acetato de etilo (2 x 10 vol) . A fase aquosa é filtrada. O filtrado é arrefecido até 0 a 5o e acidificado até pH = 1 com ácido clorídrico concentrado (0,90 vol). A mistura é agitada a 0 a 5o por 45 a 75 min. A pasta fluida resultante é filtrada e o recheio do filtro lavado com água (1 vol) . O sólido é seco in vacuo a 45 a 55° por 16 a 24 horas, para dar o composto do título.

Exemplo 89 Ácido 3-[4-(2,β-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-acrílico (XIII, Passos J e K) O 4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carbaldeído (XI, Exemplo 97b, 0,300 kg) e o tetra-hidrofurano (4,95 1) são misturados sob uma atmosfera de azoto e o (trifenilfos-foranilideno) acetato de metilo (0,555 kg) é adicionado. A mistura reaccional é aquecida até 65 a 75° e a mistura reaccional agitada nesta temperatura até que o aldeído de partida seja consumido (17 horas). A mistura é arrefecida até 35 a 40° e uma mistura de hidróxido de sódio (0,132 kg) em água (4,95 1) é adicionada. A mistura é aquecida até ao refluxo e agitada até que a hidrólise do éster esteja 138 ΡΕ1230243 completa (3 horas). A mistura reaccional é arrefecida até 35 a 40° e o solvente orgânico removido in vacuo a 40 a 45°. O acetato de etilo (3,00 1) e a água (1,80 1) são adicionados ao resíduo aquoso e a mistura é vigorosamente agitada por 15 min. As camadas são separadas e a camada aquosa é lavada com acetato de etilo (2 x 3,00 1). A camada aquosa é filtrada, o filtrado é arrefecido até 0 a 5o e acidificado até pH = 1 com ácido clorídrico concentrado (0,270 1). A mistura é agitada a 0 a 5o por 1 hora. A pasta fluida resultante é filtrada e o recheio do filtro lavado com água (0,300 1) . O sólido é seco in vacuo a 45 a 55° por 24 horas, até o composto do título.

Exemplo 90 Ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]propiónico (XIV) Ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-acrílico (XIII, Exemplo 89, 1,934 kg), o tetra-hidrofurano (11,875 1), a água (0,625 1) e o carvão vegetal activado (0,100 kg) são misturados e agitados a 16 a 25° por 30 minutos e então filtrados. A torta de filtro é lavada com THF (0,500 1). Um frasco separado é carregado com paládio sobre carbono (10%, 0,130 kg) e a mistura de tetra-hidrofurano/água filtrada do material de partida. O frasco é colocado sob pressão reduzida e purgado com azoto. A pressão reduzida/purgada com azoto é repetida duas vezes. O frasco e os conteúdos 139 ΡΕ1230243 são colocados sob pressão reduzida e purgados duas vezes com hidrogénio. A mistura é vigorosamente agitada sob uma atmosfera de hidrogénio, a 20°C, por 3 horas. O vaso de reacção é evacuado e purgado com azoto três vezes. Os conteúdos são filtrados através de celite (0,500 kg) e a torta de filtro lavada com tetra-hidrofurano (2 x 0,500 1) . O solvente é removido sob pressão reduzida a 40 a 45°. O acetonitrilo aquoso (50%, 7,540 1) é adicionado ao residuo e a pasta fluida é envelhecida a 15 a 25°, com agitação, por 3 horas. A pasta fluida é arrefecida até entre 0 e 5o e filtrada. A torta de filtro é lavada com acetonitrilo aquoso (50%, 1,93 1), transferida para bandejas de secagem e seca a 50 a 60°, sob pressão reduzida, por 24 horas, para dar o composto do titulo.

Exemplo 91 Éster de metilo do ácido 4-hidroximetilbiciclo[2.2.2]-octano-1- carboxílico (XVI, Passo M) A 4-metil morfolina (15 ml, 136 mmol) e o cloroformato de isobutilo (15,0 ml, 123 mmol) são sucessivamente adicionados ao éster de monometilo do ácido biciclo[2.2.2]octano-1,4-dicarboxílico (IV) em DME (165 ml), arrefecido até -7°C.

Após cerca de 2 minutos, a mistura reaccional é filtrada e o sólido enxaguado com DME. Os filtrados combinados são transferidos para um frasco de fundo redondo 140 ΡΕ1230243 de dois litros e arrefecidos até -5°C. Uma solução aquosa de boro-hidlinear de sódio (7,02 g, 185 mmol), em 75 ml de água, é adicionada durante cerca de 1 minuto (CUIDADO: grande evolução de gás). Após 10 minutos, a mistura reaccional é diluida com água (100 ml) e extraida com acetato de etilo (3 x 250 ml). As camadas orgânicas combinadas são lavadas com solução salina (150 ml x 3), secas sobre sulfato de sódio anidro e concentradas para dar o composto do titulo.

Exemplo 92 Ácido 4-hidroximetilbiciclo[2.2.2]octano-l-carboxílico (XVII, Passo N) O hidróxido de litio (2 N, 250 ml) é adicionado a uma mistura de éster de metilo do ácido 4-hidroximetilbiciclo [2.2.2]octano-l-carboxílico (XVI, Exemplo 91) numa mistura de THF (50 ml) e metanol (75 ml) . A mistura de reacção resultante é agitada a 20-25° por 16 h, e então concentrada. O resíduo é diluído com água (30 ml) e lavado com cloreto de metileno (100 ml) e acetato de etilo (100 ml). A camada aquosa é acidificada com ácido clorídrico concentrado pH cerca de 0 e extraída com acetato de etilo (3 x 250 ml). As camadas de acetato de etilo são combinadas e lavadas com solução salina (3 x 50 ml), secas sobre sulfato de sódio anidro e concentradas para dar o composto do título, RMN (400 MHz, CDCl3)ô 3,09, 1,72 e 1,29. ΡΕ1230243 141

Exemplo 93 Éster de benzilo de ácido 4-hidroximetilbiciclo[2.2.2]-octanol-carboxílico (XVIII, Passo O) Ácido 4-hidroximetilbiciclo[2.2.2]octano-l-car-boxílico (XVII, Exemplo 14, 24,8 g, 135 mmol) é dissolvido em DMF (950 ml). O carbonato de potássio anidro (25 g, 181 mmol) é adicionado lentamente à solução. O brometo de benzilo (22 g, 12,94 mmol) é então adicionado. A mistura reaccional é aquecida a 80° por 16 h. À mistura reaccional é adicionada a água (150 ml) e concentrada para dar um óleo, o qual foi dissolvido em acetato de etilo/hexano (5/1, 500 ml) . A mistura é lavada com solução salina (2 x 200 ml), seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada para dar o composto do titulo, RMN (400 MHz, CDC13)ô 7,39, 5,11, 3,28, 1,84 e 1,41.

Exemplo 94 Éster de benzilo de ácido 4-formilbiciclo[2.2.2]octano-l-carboxílico (XIX, Passo P) O cloreto de oxalilo (C0C1)2 (16,5 ml, 188 mmol) em cloreto de metileno (150 ml) é arrefecido para -63°. O DMSO (18 ml, 362 mmol) é então adicionado, gota a gota. A mistura resultante é agitada por 30 minutos e então uma mistura de éster de benzilo de ácido 4-hidroximetilbiciclo-[2.2.2]octano-l-carboxílico (XVIII, Exemplo 93, 34,5 g, 125 142 ΡΕ1230243 mmol) em cloreto de metileno (100 ml) é adicionada durante 15 minutos. Após outros 30 minutos, a trietiletilamina (70 ml, 502 mmol) em cloreto de metileno (30 ml) é adicionada durante 25 minutos. (Cuidado Extra: reacção extremamente exotérmica quando o primeiro equivalente da trietilamina for adicionado.) A mistura reaccional é então agitada por outros 45 minutos e o banho de arrefecimento é removido e deixado aquecer até 20-25°. A água (50 ml) é adicionada e a camada orgânica é separada, seca sobre sulfato de sódio anidro e concentrada para dar o composto do titulo, RMN (400 MHz, CDC13) δ 9,51, 7,32, 5,11, 1,88 e 1,64.

Exemplo 95 Éster de benzilo de ácido cis/trans-4-(2-metoxicarbonil-vinil)biciclo[2.2.2]octano-l-carboxílico (XX, Passo Q)

O (trifenilfosforanilideno)acetato de metilo (60,2 g, 173 mmol) é adicionado a uma solução agitada de éster de benzilo de ácido 4-formilbiciclo[2.2.2]octano-l-carboxílico (XIX, Exemplo 94, 33, 5 g, 123,2 mmol) em THF (550 ml) . Esta mistura é então aquecida suavemente até o refluxo por 16 h. A mistura reaccional é arrefecida para 20-25° e a esta é adicionado 0 cloreto de amónio saturado (75 ml) e agitou-se por 10 minutos. O acetato de etilo (250 ml) e os hexanos isoméricos (300 ml) são adicionados e agitados por 10 minutos. A mistura resultante é filtrada através de um tampão de sílica-gel (850 g) com uma camada fina de celite sobre o topo. O sólido é lavado com acetato 143 ΡΕ1230243 de etilo/hexano (1/1, 250 ml). Os filtrados são combinados e concentrados para dar o composto do título, RMN (400 MHz, CDC13) δ 7,24, 6, 81, 5, 59, 5, 01, 3,63, 1,81 e 1,48.

Exemplo 96 Ácido 4-(2-metoxicarboniletil)biciclo[2.2.2]octano-l-car-boxílico (XXI, Passo R) O éster de benzilo de ácido 4-(2-metoxicarbonilo-vinil)biciclo[2.2.2]octano-l-carboxílico (XX, Exemplo 95, 35 g, 106,6 mmol) é dissolvido em álcool etílico/água (9/1, 300 ml) e é colocado num frasco de pressão de Porter. O paládio sobre carbono (10%, 5 g) é adicionado e a mistura é hidrogenada (448,16 kPa (65 psi) ) por 48 h. A mistura reaccional é filtrada através de um tampão de celite e os filtrados combinados foram concentrados para dar o composto do título, RMN (400 MHz, CDC13) δ 3,58, 2,18, 1,74, 1,44 e 1,38.

Exemplo 97 Éster de metilo do ácido 3-(4-clorocarbonilbiciclo[2.2.2]-oct-l-il) propiónico (XXII, Passo S) O cloreto de oxalilo (794 mg, 6,25 mmol) em cloreto de metileno (5 ml), mais uma gota de DMF, é lentamente adicionado a uma mistura de ácido 4-(2-metoxicarboniletil)-biciclo[2.2.2]octano-l-carboxílico (XXI, Exemplo 96, 1,2 g, 144 ΡΕ1230243 5 mmol) em cloreto de metileno (20 ml) . A mistura de reacção é agitada por 2 h e concentrada para dar o composto do titulo, RMN (400 MHz, CDC13) δ 3,66, 2,29, 1,95, 1,54 e 1,46.

Exemplo 98 Éster de metilo do ácido 3-[4-(6-amino-2,4-dioxo-l,3-dipropil-1,2,3,4-tetra-hidropirimidino-5-il-carbamoil)bi-ciclo[2.2.2]oct-l-il]propiónico (XXIII, Passo T) A uma suspensão de cloridrato de 5,6-diamino-l,3-dipropil uracilo (1,45 g, 5,5 mmol) em cloreto de metileno (15 ml) é adicionada lentamente à trietilamina (2,6 ml, 18,7 mmol), a -10°, num banho de gelo, e a esta é adicionada uma mistura de éster de metilo do ácido 3— (4 — clorocarbonil-biciclo[2.2.2]oct-l-il)-propiónico (XXII,

Exemplo 97, 1,3 g, 5 mmol) também em cloreto de metileno (5 ml), durante um período de 10 minutos. A reacção é então aquecida até 20-25° e a agitação é continuada por outras 16 h. A água (2 ml) é adicionada à mistura de reacção, a qual é então concentrada. O concentrado é dissolvido em acetato de etilo (20 ml) e é lavado com ácido cítrico (5% de ácido cítrico, 2 x 10 ml), solução salina (10 ml), seco sobre sulfato de sódio anidro e concentrado para dar o composto do título, RMN (400 MHz, CDC13) δ 7,40, 5, 46, 3,81, 3, 59, 2,21, 1,88, 1,67, 1,62, 1,52, 1,46, 0,99 e 0,92. 145 ΡΕ1230243

Exemplo 99 Éster de metilo do ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6, 7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)biciclo[2.2.2]oct-l-il]propiónico (xxiv, Passo U)

Ver o Exemplo 100; o éster de metilo do ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)biciclo[2.2.2]oct-l-il]propiónico (XXIV) é produzido in situ e convertido em ácido livre no Exemplo 100 como parte de um procedimento num recipiente.

Exemplo 100 Ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]propiónico (XIV, Passo V) 0 éster de metilo do ácido 3-[4-(6-amino-2,4-dioxo-1,3-dipropil-l,2,3,4-tetra-hidropirimidin-5-ilcarba-moil)biciclo[2.2.2]oct-l-il]propiónico (XXIII, Exemplo 98, 1,95 g, 4,35 mmol) é dissolvido em 2-propanol (15 ml) e o hidróxido de potássio (2N, 15 ml) é adicionado. A mistura resultante é aquecida ligeiramente até ao refluxo por uma hora e então é arrefecida até 20-25°C. A água (15 ml) é adicionada e a mistura é lavada com cloreto de metileno (3 x 15 ml). A camada aquosa é acidificada até pH cerca de 2 com ácido clorídrico concentrado. O precipitado é recolhido por filtração e seco num forno a vácuo por 16 h, para dar o 146 ΡΕ1230243 composto do título, a análise por HPLC mostrou que a pureza era > 96%.

Exemplo 101 Éster de dimetilo do ácido cis/trans-l-(2-iodoetil)-ciclo-hexano-1,4-dicarboxílico (XXV)

Uma mistura de éster de dimetilo do ácido cis/trans-1- (2-cloroetil)-ciclo-hexano-1,4-dicarboxílico (II Exemplo 79, 8,1 mmol, 2,12 g) , iodeto de sódio (8,88 mmol, 1,33 g) e THF (20 ml) são agitados e refluxados 6 h. A mistura é arrefecida até 20-25°, diluída com hexanos (50 ml) e lavada com água (2 x 25 ml) . As lavagens aquosas combinadas são extraídas com hexanos (1 x 25 ml) . Os extractos orgânicos combinados são lavados com água (25 ml) , à qual tinham sido adicionadas algumas gotas de solução saturada de Na2S204 e solução salina (1 x 25 ml), e secos sobre sulfato de magnésio. A filtração por sucção e a concentração sob pressão reduzida dão ao composto do título, CMR (CDCls) δ 1,99, 25,71, 25,80, 33,09, 42,00, 44,03, 46,09, 52,19, 52,7, 67,72, 175,25 e 175,64.

Exemplo 102 Éster de dimetilo do ácido biciclo[2.2.2]octano-1,4-dicarboxílico (III) A uma mistura de éster de dimetilo do ácido 147 ΡΕ1230243 cis/trans-1-(2-iodoetil)-ciclo-hexano-1,4-dicarboxílico (XXV, Exemplo 101, 2,14 g, 6,04 mmol) em THF (20 ml) e TMU (2,9 ml, 24,16 mmol) é adicionada, a -78°, uma solução de LDA (a partir de 1,02 ml de diisopropilomina e 4,16 ml de n-butil-lítio a 1,6 M) em THF (9 ml). A reacção é agitada com aquecimento gradual até 20-25°. Ácido clorídrico (3N, 20 ml) é adicionado e rapidamente agitado 10 min. O THF é removido sob pressão reduzida e o resíduo aquoso resultante é extraído com hexanos (2 x 20 ml) . Os extractos orgânicos combinados são lavados com ácido clorídrico (3N, 2 x 20 ml), água (1 x 10 ml),bicarbonato de sódio saturado (2 x 10 ml) e solução salina (1 x 10 ml) e secos sobre sulfato de magnésio. A filtração por sucção e a concentração sob pressão reduzida dão ao composto do título, RMN (CDCI3) δ 1,78 e 3,6; CMR (CDC13) δ 27,99, 39, 98, 53,12 e 177, 62.

Exemplo 103 4-(Hidroximetil-biciclo[2.2.2]oct-l-il)-1,3-dipropil-2,6-purino-diona (XXVI, Passos Y e Z) O éster de metilo do ácido 4-(6-amino-2,4-dioxo-1,3-dipropil-l,2,3,4-tetra-hidro-pirimidino-5-ilcarbamoil)-biciclo[2.2.2]octano-l-carboxílico (VII, Exemplo 83, 0,500 g) é dissolvido em THF (10 ml) e colocado sob azoto. A 25°C, o boro-hidrato de lítio (0,052 g) é adicionado e a mistura é agitada ao refluxo por 2 horas. O solvente é removido sob pressão reduzida. Ao produto bruto são adicionados o hidróxido de potássio (1 M, 3,57 ml) e o 148 ΡΕ1230243 isopropanol (4 ml) . A mistura é levada ao refluxo por 1 hora, para dar o composto do título.

Exemplo 104 Ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-acrílico (XII, Passos AA e BB) 4- (2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carbaldeído (XI, Exemplo 9, 0,490 g, 1,32 mmol) é adicionado a uma mistura de ácido malónico (0,275 g, 2,64 mmol), piridina (2 ml), e pipe-ridina (1 gota) . A mistura é aquecida até 100° por 16 horas. Quatro equivalentes adicionais de ácido malónico são adicionados e o aquecimento continuado por outras 16 horas até cessar o consumo de aldeído, para dar o composto do título.

Exemplo 105 Éster de etilo de ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6, 7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-acrílico (XXVIII, Passos CC e DD) O éster de etilo de ácido cis/trans-3-[4-(2,6-dioxo-1, 3-dipropil-2,3, 6, 7-tetra-hidro-lií-purin-8-il) -biciclo[2.2.2]oct-l-il]acrílico (XII) é obtido por reacção de aldol entre o aldeído (XI) (1 equivalente) e o acetato 149 ΡΕ1230243 de etilo(4,7 equivalentes), na presença de uma base forte, tal como o etóxido de sódio (1,2 equivalente).

Exemplo 106 Éster de 4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-ilmetilo do ácido metanos-sul fónico (XL) A uma mistura de 8-(4-hidroximetilbiciclo[2.2.2]-oct-l-il)-1,3-dipropil-3,7-di-hidropurino-2,6-diona (X,

Exemplo 86) em piridina, a 0o, é adicionado o cloreto de metanossulfonilo (1,2 equivalente) em piridina. A mistura é agitada a 0o até a conversão completa ser atingida e então o solvente é removido sob pressão reduzida.

Exemplo 107 Éster de dimetilo do ácido 2-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-ilmetil]-malónico (XLI) O éster de 4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purino-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-ilmetilo do ácido metanossulfónico (XL, Exemplo 106) é reagido com o anião de malonato de dimetilo (formado a partir da reacção de 1 equivalente de malonato de dimetilo com 1,25 equivalente de hidreto de sódio ou base similar em THF), a 20-25°, dando o composto do titulo. 150 ΡΕ1230243

Exemplo 108 Éster de metilo do ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-propiónico (xxxv) A hidrólise do éster de dimetilo do ácido 2-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-ilmetil]malónico (XLI, Exemplo 107) com o hidróxido, em temperatura elevada, dá o composto do titulo.

Exemplo 109 Éster de dimetilo do ácido biciclo[2.2.2]octano-l,4-dicar-boxílico (III)

Uma mistura de éster de dimetilo do ácido cis/trans-1-(2-cloroetil)-ciclo-hexano-1,4-dicarboxílico (I, 7,63 mmol, 2,00 g), iodeto de sódio (8,39 mmol, 1,26 g) e THF (20 ml) são agitados e refluxados 6 h. A mistura é arrefecida até 20-25°, a TMU (30,52 mmol, 3,65 ml) é adicionada e a mistura arrefecida até -78°C. À mistura gelada é adicionada uma solução de LDA (a partir de 1,28 ml de diisopropilomina e 5,25 ml de n-butillitio a 1,6 M) em THF (11 ml). A reacção é agitada com aquecimento gradual até 20-25°C. Ácido clorídrico (3N, 20 ml) é adicionado e rapidamente agitado 10 min. O THF é removido sob pressão 151 ΡΕ1230243 reduzida e o resíduo aquoso resultante é extraído com hexanos (2 x 20 ml) . Os extractos orgânicos combinados são lavados com ácido clorídrico (3N, 2 x 20 ml), água (1 x 10 ml) , bicarbonato de sódio saturado (2 x 10 ml) e solução salina (1 x 10 ml), e secos sobre sulfato de magnésio. A filtração com sucção e a concentração sob pressão reduzida dão o composto do título.

Exemplo 110 Éster de dimetilo do ácido biciclo[2.2.2]octano-1,4-dicarboxílico (III, Passo TT) A uma solução agitada de diisopropilomina (84,5 ml, 600 mmol) em THF (anidro, 700 ml), arrefecida até -30°C, sob azoto, é adicionado o n-butil-lítio (2,5 M em hexano, 220 ml, 550 mmol) por uma seringa. A mistura é agitada por 30 min, a -30°C, e então arrefecida até -78°C. A HM-PA (360 ml, 4 equivalentes, 2 mol) é adicionada por uma seringa e uma diluição de ciclo-hexano-1,4- dicarboxilato de dimetilo (100 g, 500 mmol) em THF (anidro, 100 ml) é subsequentemente adicionada por uma seringa. A mistura é agitada por uns 40 min adicionais. Então, o 1-bromo-2-cloroetano (41,5 ml, 500 mmol) é adicionado e a mistura agitada a -78°C por uns 20 min adicionais. O banho frio é removido e a agitação é continuada por 1 h. A mistura reaccional é de novo arrefecida para -78° e uma mistura de HMPA (360 ml, 4 eq, 2 mol) em THF (600 ml) é adicionada. Por cânula, a LDA recentemente preparada (200 152 ΡΕ1230243 ml de n-butil-lítio, 25 M em hexano, 500 mmol são adicionados à diisopropilomina (78 ml, 556 mmol) em THF (anidro, 700 ml)) é transferida para a mistura de reacção, a -78°. A mistura reaccional é agitada a -78° por 1,33 h, seguido por remoção do banho de arrefecimento e agitação adicional por 5-6 h. A mistura é arrefecida bruscamente com cloreto de amónio aquoso saturado (400 ml) e concentrada sob pressão reduzida, a 35°, para remover o THF. O resíduo é diluído com água (800 ml) e extraído com hexano (3 x 600 ml). Os extractos combinados são lavados com solução salina (700 ml) e secos sobre sulfato de sódio. Usando uma temperatura do banho de 35°, os solventes são removidos sob pressão reduzida para dar um resíduo. O resíduo é agitado com o hexano (50 ml), a 20-25°C, por 0,5 h. A suspensão resultante é arrefecida até 0o por 2 h e filtrada para dar o composto do título.

Exemplo 111

Metodologia de Ensaio

Foram preparados cento e oitenta e quatro derivados de xantina, tendo as estruturas indicadas na figura 2. Para alguns destes compostos, os valores de Ki para os receptores da adenosina Ai de ratos e humanos e para os receptores da adenosina A2S humanos foram determinados de acordo com o protocolo de ensaio de ligação que se segue. A razão de A2a/Ai foi também calculada. 153 ΡΕ1230243

Materiais A adenosinadesaminase e o HEPES foram adquiridos à Sigma (St. Louis, MO). O meio de cultura de células F-12 de Ham e o soro fetal de bovino foram adquiridos da GIBCO Life Technologies (Gaithersburg, MD). O antibiótico G-418, as placas de cultura Falcon 150 mM e as placas de cultura com 12 poços Costar foram adquiridos à Fisher (Pittsburgh, PA). O [3H]CPX foi adquirido à DuPont-New England Nuclear Research Products (Boston, MA) . A mistura de antibióticos penicilina/estreptomicina foi adquirida à Mediatech (Washington, DC). A composição da solução de Hank tamponada com HEPES era: 130 mM de NaCl, 5,0 mM de Cl, 1,5 mM de CaCl2, 0,41 mM de MgS04, 0,49 mM de Na2HP04, 0,44 mM de KH2PC>4, 5,6 mM de dextrose, e 5 mM de HEPES (pH 7,4).

Preparação das Membranas

Receptor A± de Rato: As membranas foram preparadas a partir do córtex cerebral de rato, isolado de ratos que recentemente tinham sofrido eutanásia. Os tecidos foram homogeneizados em tampão A (10 mM de EDTA, 10 mM de Na-HEPES, pH 7,4) suplementado com inibidores de protease (10 pg/ml de benzamidina, 100 μΜ de PMSF, e 2 pg/ml cada de aprotinina, pepstatina e leupeptina), e centrifugados a 20.000xg durante 20 min. As pelotas foram suspensas novamente e lavados duas vezes com tampão HE (10 mM de Na-HEPES, 1 mM de EDTA, pH 7,4, mais inibidores de protease). Os pelotas finais foram suspensos novamente em tampão HE, 154 ΡΕ1230243 suplementado com 10% (p/v) de sacarose e inibidores de protease, e congeladas em alíquotas a -80°C. As concentrações de proteínas foram medidas usando o estojo ("kit") de ensaio de proteína BCA (Pierce).

Receptores Aí Humanos: O cDNA de receptor da adenosina Ai foi obtido por RT-PCR e subclonado em pcDNA3.1 (Invitrogen) . A transfecção estável de células de CHO-K1 foi efectuada usando LIPOFECTAMINE-PLUS (GIBCO-BRL) e as colónias foram seleccionadas em 1 mg/ml de G418, e examinadas usando ensaios de ligação com radioligandos. Para as preparações das membranas, as células de CHO-K1 crescendo como monocamadas em meio completo (F12 + 10% de FCS + 1 mg/ml de G418) foram lavadas em PBS e recolhidas em tampão A suplementado com inibidores de proteases. As células foram homogeneizadas, centrifugadas, e lavadas duas vezes com tampão HE, conforme descrito acima. As pelotas finais foram armazenadas em alíquotas a -80°C.

Ensaios de ligação com radioligandos

As membranas (50 pg de proteína da membrana para os AlARs de ratos, e 25 pg de proteína da membrana de CHO-K1 para os AlARs de seres humanos), os radioligandos e concentrações variadas de ligandos de competição foram incubados em triplicado em 0,1 ml de tampão HE mais 2 unidades/ml de adenosinadesaminase, por 2,5 h, a 21°C. O radioligando [3H]DPCPX (112 Ci/mmol da NEN, concentração 155 ΡΕ1230243 final: 1 nM) foi usado para os ensaios de ligação com competição nos AiARs. A ligação não especifica foi medida na presença de 10 μΜ de BG9719. Os ensaios de ligação foram terminados por filtração sobre filtros de fibra de vidro GF/C da Whatman, usando um colector de células BRANDEL. Os filtros foram enxaguados três vezes com 3-4 ml de Tris-HCl 10 mM gelado, pH 7,4, e MgCl2 5 mM, a 4°C. O papel de filtro foi transferido para um frasco pequeno, e 3 ml da mistura de cintilação ScintiVersell (Fisher) foram adicionados. A radioactividade foi contada num contador β da Wallac.

Análise dos dados de ligação

Para as Determinações de Ki: Os dados de ligação com competição foram adaptados a um modelo de ligação num único local e plotados usando Prizm GraphPad. A equação de Cheng-Prusoff Ki = IC50/ (1+ [I] /KD) foi usada para calcular os valores de Ki a partir dos valores de IC50, onde Ki é a constante de afinidade para o ligando de competição, [I] é a concentração do radioligando livre, e KD é a constante de afinidade para 0 radioligando.

Para a % de Ligação: Para os ensaios de ligação de um ponto, os dados foram apresentados como a % da ligação especifica total a 1 μΜ de composto de competição: % do total = 100* (Ligação especifica com 1 μΜ de composto de competição/ ligação especifica total). 156 ΡΕ1230243

Resultados

Todos os compostos testados exibiram valores de Ki para Ai de ratos entre 0,6 e 433,8 nM, valores de Ki para Ai humanos entre 1,6 e 1000 nM, e valores de Ki para A2a humanos entre 132 e 49930 nM. Todos os compostos tinham razões de A2a/Ai maiores do que 10, maior do que 20, muito maiores do que 50, e alguns maior do que 100. Pelo menos um composto teve uma razão de A2a/Ai maior do que 1000.

Exemplo 112

Metodologia de Ensaio Alternativa

Materiais

Ver o Exemplo 111.

Cultura de Células

As células de CHO, expressando estavelmente o AiAdoR humano recombinante (células de CHOiAiAdoR), foram preparadas conforme descrito (Kollias-Barker et al., J. Pharma. Exp. Ther. 281(2), 761, 1997) e cultivadas como as células de CHO:Wild. As células de CHO foram cultivadas em monocamadas sobre placas plásticas, em meio F-12 de Ham suplementado com 10% de soro bovino fetal, 100 U de penicilina G e 100 pg de estreptomicina, numa atmosfera 157 ΡΕ1230243 humidificada de 5% de CC>2/95% de ar, a 37°C. A densidade dos locais de ligação ao [3H]CPX nas células de CHO era 26 ±2 (n = 4) fmol/mg de proteina. As células foram subcultivadas duas vezes por semana após a separação, usando 1 mM de EDTA em solução de Hank tamponada com HEPES sem Ca2+-Mg2+. Três clones diferentes das células de CHO:AiAdoR foram usados para as experiências, e todos os resultados foram confirmados com as células a partir de dois ou três clones. A densidade dos AiAdoRs nestas células foi 4000-8000 fmol/mg de proteina, como determinada por ensaio de ligação especifica ao [3H]CPX.

Ligação ao Radioligando

As células de CHO, desenvolvidas sobre placas de cultura de 150 mm, foram enxaguadas com solução de Hank tamponada com HEPES, então removidas com um raspador de células e homogeneizadas em Tris-HCl 50 mM gelado, pH 7,4. As membranas das células foram pelotizadas por centrifugação do homogeneizado de células, a 48.000 X g, por 15 min. A pelota da membrana foi novamente lavada duas vezes por ressuspensão em tampão novo e centrifugação. A pelota final foi suspensa novamente num pequeno volume de Tris-HCl, 50 mM, pH 7,4, e armazenado em alíquotas de 1 ml, a -80°C, até ser usado para os ensaios.

Para determinar a densidade dos AiAdoRs nas membranas de células de CHO, alíquotas de 100 μΐ das membranas (5 pg de proteína) foram incubadas por 2 horas, a 158 ΡΕ1230243 25°C, com 0,15-20 nM de [3H]CPX e adenosinadesaminase (2 U/ml) em 100 μΐ de Tris-HCl 50 mM, pH 7,4. As incubações foram terminadas por diluição com 4 ml de tampão de Tris-HCl 50 mM gelado e recolha imediata das membranas sobre filtros de fibra de vidro (Schleicher e Schuell, Keene, NH) por filtração a vácuo (Brandel, Gaithersburg, MD). Os filtros foram lavados rapidamente três vezes com tampão gelado para remover o radioligando não ligado. Os discos de filtro contendo o radioligando ligado às membranas capturadas foram colocados em 4 ml de Scintiverse BD (Fisher), e a radioactividade foi quantificada usando um contador de cintilação liquida. Para determinar a ligação não especifica do [3H]CPX, as membranas foram incubadas como acima descrito e o CPT a 10 μΜ foi adicionado ao tampão de incubação. A ligação não especifica foi definida como o [3H] CPX ligado na presença de 10 μΜ de CPT. A ligação especifica do radioligante ao AiAdoR foi determinada por subtracção da ligação não especifica da ligação total. Verificou-se que a ligação não especifica aumentava linearmente com um aumento da concentração de [3H]CPX. Foram feitos ensaios em triplicado em cada concentração testada de [3H]CPX.

Para determinar as afinidades dos antagonistas dos AiAdoRs pelo AiAdoR recombinante humano expresso em células de CHO, foi medida a ligação de 2 nM [3H]CPX na presença de concentrações crescentes de antagonista. As aliquotas de membranas de células de CHO (100 μΐ: 5 pg de proteína), o [3H]CPX, o antagonista (0,1 nM -100 mM) , e a 159 ΡΕ1230243 adenosinadesaminase (2U/ml) foram incubados por 3 horas, a -25° C, em 200 μΐ de tampão Tris-HCl 50 mM (pH 7,4). Os ensaios foram terminados conforme acima descrito.

Análise dos Dados

Os parâmetros de ligação (i.e., Bmax, Kd, IC50, Kd, e coeficientes de Hill) foram determinados usando o programa de análise da ligação ao radioligando LIGAND 4.0 (Elsevier-Biosoft).

Outras Formas de realização

Deve ser entendido que, embora a invenção tenha sido descrita em conjunção com a sua descrição detalhada, a descrição precedente destina-se a ilustrar e não a limitar o âmbito da invenção, a qual é definida pelo âmbito das reivindicações em anexo. Outros aspectos, vantagens, e modificações estão dentro do âmbito das reivindicações que se seguem.

Lisboa, 2 de Junho de 2009

Claims (7)

1. ΡΕ1230243 1 REIVINDICAÇÕES 1. Composto compreendendo a fórmula:

   em que Ri e R2 são independentemente seleccionados a partir do grupo constituído por: a) hidrogénio; b) alquilo, alquenilo de não menos do que 3 carbonos, ou alquinilo de não menos do que 3 carbonos; em que o referido alquilo, alquenilo, ou alquinilo é não substituído ou funcionalizado com um ou mais substituintes seleccionados do grupo constituído por hidroxi, alcoxi, amino, alquilamino, dialquilamino, heterociclilo, acila-mino, alquilsulfonilamina, e heterociclilcarbonilamino; e c) arilo ou arilo substituído; R3 é seleccionado a partir do grupo constituído por: 2 ΡΕ1230243 k

   onde R3 é igualmente não substituído ou funcionalizado com um ou mais substituintes seleccionados a partir do grupo constituído por hidroxi, R5-, e R5-alquenilo;

   e onde R3 é igualmente não substituído ou funcionalizado com um ou mais substituintes seleccionados a partir do grupo consituído por hidroxi, R5-alquilo, -R5, R5-alquenilo, alcoxicarbonilo, alcoxicarbonilalquilo, alcoxi-carbonilal-quenilo, hidroxialquilo, aldeído, alcoxialquilo, R5-alcoxi, fosfato, R5-alquilcarbamoílo, e R5-alquil(alquil)carbamoí- lo;

   e onde R3 é igualmente não substituído ou funcionalizado com um ou mais substituintes seleccionados a partir do grupo consituído por R5-alquilo, -R5, R5-alquenilo, alcoxicarbonilo, alcoxicarboniloalquenilo, hidroxialquilo, aldeído, e hidroxilo; 3 ΡΕ1230243

   e onde R3 é é igualmente não substituído ou funcionalizado com um ou mais substituintes seleccionados a partir do grupo consituído por R5-alquilo, -R5, R5-alquenilo, R5-alcoxi, alcoxi-carbonilo, alcoxicarboniloalquenilo, hidro-xialquilo, aldeído, e hidroxilo;

   e onde R3 é é igualmente não substituído ou funcionalizado com um ou mais substituintes seleccionados a partir do grupo consituído por hidroxilo, Rs-alcoxi, Rs-alquenilo, alcoxi-carbonilo, e carbonilo; R4 é seleccionado a partir do grupo constituído por hidrogénio, Ci_4alquilo, Ci_4-alquilo-C02H, e fenilo, em que os grupos Ci_4-alquilo, Ci-4alquilo-C02H, e fenilo são não substituídos ou funcionalizados com um a três substituintes seleccionados do grupo constituído por halogénio, -OH, -OMe, -NH2, N02, benzilo, e benzilo funcionalizada com um a três substituintes seleccionados do grupo constituído por halogénio, -OH, -OMe, -NH2, e N02; R5 é seleccionado a partir do grupo constituído por -CH2COOH, -C(CF3)20H, -C0NHNHS02CF3, -CONHOR4, -C0NHS02R4, 4 ΡΕ1230243 -CONHSO2NHR4, -c (OH) R4PO3H2, -NHCOCF3, -NHCONHSO2R4, -NHPO3H2, -NHSO2R4, -NHSO2NHCOR4, -OPO3H2, -OSO3H, -PO(OH)R4, -PO3H2, -SO3H, -SO2NHR4, -SO3NHCOR4, -SO3NHCONHCO2R4, e os seguintes:

   Xi e X2 são independentemente seleccionados a partir do grupo constituído por O e S; Z é seleccionado a partir do grupo constituído por uma ligação simples, O-, -(CH2)i-3-, -0(CH2)i-2-r -CH2OCH2-, - (CH2) i_20-, -CH=CHCH2, -CH=CH-, e -CH2CH=CH-; e R6 é seleccionado a partir do grupo constituído por hidrogénio, alquilo, acilo, alquilsulfonilo, aralquilo, aralquilo substituído, alquilo substituído, e heterociclilo.
2. 2. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto está numa forma seleccionada do grupo constituído por um composto aquiral, num racemato, num composto opticamente ativo, num diastereoisómero puro, numa mistura de diastereoisómeros, e num sal de adição farmacologicamente aceitável. 5 ΡΕ1230243
3. 3. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que Ri e R2 são cada um grupos alquilo.
4. 4. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que Ri e R2 são cada um n-propilo.
5. 5. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que Ri é n-propilo e R3 é seleccionado a partir do grupo constituído por aralquilo substituído com -OH, -OMe, ou -halogénio; metilo; e 3-hidroxipropilo.
6. 6. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que Z é uma ligação simples.

   7. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é ácido 5-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[3.2.1]octano-l-carbo-xílico.

   8. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é 8-(4-hidroxi-biciclo[3.2.1]oct-l-il)-1,3-dipropil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona.

   9. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é ácido 5-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3, 6, 7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[3.2.1]octano-2-carboxi-lico. 6 ΡΕ1230243

   10. Composto de acordo com a reivindicação 7, em que o composto é 8-(4-hidroxi-biciclo[2.2.2]oct-l-il)-1,3-dipropil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona.

   11. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é ácido 4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2, 3, 6, 7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carboxí-lico.

   12. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é 4-(2,6-Dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carbaldeído.

   13. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é o éster de metilo do ácido 4-(2,6-dioxo-1,3-dipropil-2,3,6,7tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo-[2.2.2]octano-l-carboxílico.

   14. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é o éster de metilo do ácido 3-[4-(2,6- dioxo-1,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo [2.2.2]oct-l-il]-acrílico.

   15. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é o éster de metilo do ácido 3-[4-(2,6- dioxo-1,3-dipropil-2,3,6,7tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo [2.2.2]oct-l-il]-propiónico. 7 ΡΕ1230243

   16. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3, 6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-acrílico.

   17. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é ácido 3-[4-(2,β-dioxo-l,3-dipropil-2,3, 6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]- propiónico.

   18. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é ácido 4-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3, 6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-butírico.

   19. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é o éster de mono-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipro-pil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-1-ilo] de ácido fosfórico.

   20. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é ácido {[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carbo-nil]-metil-amino}-acético.

   21. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é ácido {[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]octano-l-carbo-nil]-amino}-acético. ΡΕ1230243

   22. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-te-tra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-iloxi]-propiónico.

   23. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é ácido 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3, 6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-iloxi]-propiónico.

   24. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é o éster de terc-butilo de ácido 3-[4-(2,6-dioxo-1,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-iloxi]-propiónico.

   25. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é 3-[4-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-te-tra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[2.2.2]oct-l-il]-2-meti1-propiónico.

   26. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é ácido 6-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-cubano-3-carboxilico.

   27. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é 8-(6-Hidroximetil-cubano-3-il)-1,3-dipro-pil-3, 7-di-hidro-purino-2,6-diona. 9 ΡΕ1230243

   28. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é ácido 3-[6-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3, 6, 7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-cubano-3-il]-acrílico.

   29. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é ácido [5-(2, 6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[3.2.2]non-l-iloxi]-acético.

   30. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é 8-(5-hidroxi-biciclo[3.2.2]non-l-il)-1,3-dipropil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona.

   31. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é ácido 5-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2, 3, 6, 7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-biciclo[3.2.2]nonano-l-carbo-xílico.

   32. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é 8-(4-hidroxi-7-metil-2,6-dioxa-biciclo-[3.3.1]non-l-il)-1,3-dipropil-3,7-di-hidro-purino-2,6-diona.

   33. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que o composto é ácido [1-(2,6-dioxo-l,3-dipropil-2,3,6,7-tetra-hidro-lH-purin-8-il)-7-metil-2,6-dioxa-biciclo[3.3.1]non-4-iloxi]-acético. 10 ΡΕ1230243

   34. Composição de medicamento que compreende um composto como definido na reivindicação 1 juntamente com um excipiente adequado.

   35. Utilização de uma quantidade eficaz de antagonismo à adenosina de um composto como definido na reivindicação 1, para a preparação de uma composição farmacêutica para o tratamento de um paciente sofrendo de uma condição caracterizada por uma elevada concentração de adenosina e/ou sensibilidade aumentada à adenosina.

   36. Utilização da reivindicação 35, em que a condição é seleccionada do grupo constituído por distúrbios cardíacos e circulatórios, distúrbios degenerativos do sistema nervoso central, distúrbios respiratórios, doenças para as quais seja indicado tratamento diurético, doença de Parkinson, depressão, dano traumático ao cérebro, deficiência neurológica após acidente vascular cerebral, depressão respiratória, trauma do cérebro neonatal, disle-xia, hiperactividade, fibrose cística, ascite cirrótica, apnéia neonatal, insuficiência renal, diabetes, asma, e condições edematosas.

   37. Utlização da reivindicação 35, em que a condição é a insuficiência cardíaca congestiva ou a disfunção renal.

   38. Método de preparar xantinas substituídas em 8 que compreende os passos de: 11 ΡΕ1230243 a) obter uma N7,C8-di-hidroxantina; b) proteger a posição N7 da xantina; c) desprotonar a posição C8 com base forte para gerar um anião; d) capturar o anião com um composto de carboxilo, carbonilo, aldeído, ou cetona; e e) desproteger a posição N7 protegida para obter uma xantina substituída em 8. Lisboa, 2 de Junho de 2009 ΡΕ1230243 1/19 FKS,1

   9 PE1230243 2/19 t Oié

   PE1230243 3/19 FtG. 1

   PE1230243 4/19 FIG. ΐ

   PE1230243 5/19 FIG. 1

   ΡΕ1230243 6/19 FKS.1

   PE1230243 7/19 FJS. 1

   PE1230243 8/19 FIG,

   PE1230243 9/19 F\G. t

   ΡΕ1230243 10/19

   ΡΕ1230243 11/19 Rb' HG. 2

   m Passo fTT) Exemple 110 t—». ftfcOoc coor, Exemplo V— 102 Passo C{C) Exemplo 81 If hooC”4^7-“C00êb ííV> Passo (D) , fExemplo S2

   Passo (£) Exemplo 83 <VÍ) r*'h'^Vn%HC( O^N^NMj %

   ΡΕ1230243 12/19 F1G. 2 (cont) Passo (FJ Exemplo 84a

   Passo (i) Exemplo 87

   Passo jLj Exemplo S0 COOHmm

   iΡΕ1230243 13/19 HOOC COORi * m Passo p) Exemplo 51

   OOR, (XVI) I Passo {N} Exemplo 32

   (XXII) HOH2C™k^>“COOH ^ (XVÍ1) |Passo {O} j Exemplo 33 Passo ÇT) Exemple 38 HOH2C

   CCORfi Passo (P) Exemplo 34 (XVIII)

   COOR4 (XIX) Passo (Q) Exemplo 95 X* ^CODR r Re d W ]T N*'' v 0 *2 ? m* R* 2 Passo (Uj Exemplo 39 (XXÍÍ1) rj > %Vv- fr\r -coor4 I JL>“~ xf^n^n R* (XXIV) Passo (V) Exemplo 100 COORe (XX) Passo jR) Exemplo 3€

   €OOH ΡΕ1230243 14/19 PíG.4

   Passo {V} m

   Rfiãoé s reacítvo ^sso p> COOM «.-Xs·9 * v-“r* hcoor (An-^n «í mn Passo jG’) Exesnpto flõ 5τεΡ(Ώ R„ &

   eoow ίίΠΓ,χ (W Passo ξΗ$ EsempSo S6

   Passo f!} ExempSo 87 ΡΕ1230243 15/19 FIG, 4 (cont.) Passo |1{ ExetnpSo 87

   ΡΕ1230243 16/19 Fia ι

   (XXXíV)

   CKXXO

   Passo· {HHj

   ΡΕ1230243 17/19

   ΡΕ1230243 18/19 77

   (XXXV) ΡΕ1230243 19/19 ,8 vT^t Pr * L R " H,
7. * 7-2 7-1 j if °' or Ό Z”H, Li.Br, ít QTf, ZnCl, MgBr, SnSug, B(OH)2 Rl s COjM©, CH2CH2C02Me X = U,CÍ,8U OliZnCi Mg8r, OH

   Passo 5 Passo 7 7-3 fe passo 8 para o caso 7-3 ©n^e X-CHaCHaCHO) 1 ΡΕ1230243 REFERÊNCIAS CITADAS NA DESCRIÇÃO Esta lista de referências citadas pelo requerente é apenas para conveniência do leitor. A mesma não faz parte do documento da patente Europeia. Ainda que tenha sido tomado o devido cuidado ao compilar as referências, podem não estar excluídos erros ou omissões e ο IEP declina quaisquer responsabilidades a esse respeito. Documentos de patentes citadas na Descrição US 552560? A; WQ 9857644 A WQ 3403456 A EP 0613316 A US 5290782 A JP 4346986 A DE 3843117 A DE 4019892 A US 8888879 W US 16519199 P EP 8415453 A EP 8501379 A EP 0541120 A EP 0556778 A EP 8560354 A WQ 9415702 A DE 19816557 A WO 9857S45· A Literatura que não é de patentes citada na Descrição J. MED. CHEM.. 1993. voi 35 (5). 924-93G [0Ô85] PATENT ABSTRAGTS OFJAPAN, 20 AM 1833, ...4 017 J. Org. Ghem., 1951, vol IS, 1879 Canil Chem.. 1968, voi.46, 3413 MUELLER. J. Med Chem., 1893. voí. 36,3341 Attsi J. Ckem.y 1985, vol 38,1705 Aasí J. Cts-v; 19B6, vol. 39, 2061 J. Am. Ckem. Soo, 1953, voi. 75,637 J. Am. Chem. Soo, 1964. vol. 86, 5183 J. Am. Chem. Soe., ÍS83. voi. 102.68S2 J. Org. Chem., 1381. vol. 46, 4795 J. Org. Chem., 1595. vot. 68, €673 GROB, CA; RiCH, R. Heiv. Cftsw.Atís, 1973.. vol. 62,2802 AHMED, SA; HiCKMOTT, P.W. J. Chem. Soe. Perim Tmns. ?, 1973. 2180 GREENE, Pfotedsve Grsyps in Organsc Synfteas DELLA, E.W.; TSANAKTSIQiS, J.Así. J Chsm., 1S®5, yoí. 38,1705 DELLA, E.W.; T5ÂNAKTS1DSS, J, Ausl J. Chem., 1966, voi. 39, 20S1 DALY, J.W. et ai. J.MedChem.. 1985, vol. 28 (4). * MMR, J. et aí. J. Chem. Soe. PeiÈm Tmos 1, 1:992, 787 * MiíLLER, C. E.; GE*S, 0.: HiPP.J.: SCHOBERT, 0.;FROSEimtS, W.PAWLOWSKi. M.; SUZUKI. F.; SANDOVÂL-RAMiREZ, <1. J. Med Chem.. 1397, ¥Ql 40.4396-4405 * JACOB5G14, K. A.; KIRtASiS. t.; BARONE, S.; BRADBURY, B. A.: ;. CAMPAGNE, M.; SECUNDA, S.; DALY, J. W.; NEUMEYER, j. L. ; PFLEtOERER, W. J. Med Chem., 1989. vsl. 32, 1873-1879 - JACOBSOR, K. A.; KiRfASIS, L.: BARONE, S.; BRADBURY, B. A.: KAMMULA, U.; CAMPAGNE, M. : SECUNDA, S.; DALY. J. W.: NEUMEYER. J. L.; PFLEIDERER, W, J. Med. Chem., 1389, voi. 32, 1873-1879 * KRÂUS, W. esal. Ue'hvfiÂnfí.Ghem., 1981, voi. 10, 1826 * KRAUS, W. et aí, Telra!m!roi> LeU„ 1978. 445 * FiUPPSNLM.-H, et aí. J Org. Chsm.. 1995, vd. 66, 6872 * KOLLÍAS-8ARKER et aí. J. Pharma. Εκρ. Ther., 1397, voi. 261 (2). 761