PL210084B1

PL210084B1 - Sposób wytwarzania 4'-O-e-D-glukozylo-2',4-dihydroksy-6'-metoksy-3'-prenylochalkonu

Info

Publication number: PL210084B1
Application number: PL385440A
Authority: PL
Inventors: Ewa Huszcza; Agnieszka Bartmańska; Tomasz Tronina
Original assignee: Univ Przyrodniczy We Wrocławiu
Priority date: 2008-06-16
Filing date: 2008-06-16
Publication date: 2011-12-30
Also published as: PL385440A1

Description

Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania 4'-e-0-D-glukozylo-2',4-dihydroksy-6'-metoksy-3'-prenylochalkonu, o wzorze 2 przedstawionym na rysunku.

Związek ten jest biologicznie czynny i może znaleźć zastosowanie w przemyśle spożywczym i farmaceutycznym.

Znana jest mikrobiologiczna metoda otrzymywania 4'-0-e-D-glukozylo-2',4-dihydroksy-6'-metoksy-3'-prenylochalkonu, na drodze transformacji ksantohumolu, przez grzyby Penicillium chrysogenum (Kim H.J., Lee I.S., 2006. Microbial metabolism of the prenylated chalcone xanthohumol. J. Nat. Prod., 69, ss. 1522-1524). W metodzie tej osiągnięto wydajność 5,5%.

Wynalazek dotyczy mikrobiologicznego sposobu wytwarzania 4'-0-e-D-glukozylo-2',4-dihydroksy-6'-metoksy-3'-prenylochalkonu, o wzorze 2, z substratu, którym jest ksantohumol.

Istota wynalazku polega na tym, że substrat poddaje się biotransformacji kulturą grzybów z gatunków Absidia coerulea albo Absidia glauca.

Korzystnie jest, gdy reakcję prowadzi się wodnymi kulturami grzybów, przy ciągłym mieszaniu reagentów, w temperaturze 285-313 K.

Postępując zgodnie z wynalazkami, w wyniku działania układów enzymatycznych zawartych w żywych komórkach kultur Absidia coerulea albo Absidia glauca, następują reakcje glukozydacji. Uzyskane w ten sposób identyczne produkty wydziela się z wodnych kultur, wspomnianych mikroorganizmów, znanymi sposobami, przez ekstrakcję octanem etylu.

Zasadniczą zaletą wynalazków jest otrzymanie, w łagodnych warunkach, 4'-0-e-D-glukozylo-2',4-dihydroksy-6'-metoksy-3'-prenylochalkonu, jako głównego produktu reakcji, z wydajnością od 18,3 do 24,2%.

Wynalazek jest bliżej objaśniony w przykładach wykonania.

P r z y k ł a d 1. Do kolby o pojemności 300 cm³, w które znajduje się 100 cm³ sterylnej pożywki zawierającej 3 g glukozy i 1 g aminobaku, wprowadza się grzyby Absidia coerulea. Po 2 dniach wzrostu drobnoustrojów, w temperaturze 303 K i przy ciągłym wstrząsaniu, dodaje się 30 mg ksantohumolu, o wzorze 1, rozpuszczonego w 1,5 cm³ acetonu. Transformację prowadzi się przy ciągłym wstrząsaniu przez około 9 dób. Następnie, uzyskany roztwór transformacyjny ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu, osusza siarczanem magnezu i odparowuje rozpuszczalnik. Otrzymuje się 80 mg surowego produktu, który oczyszcza się chromatograficznie, używając, jako eluentu mieszaniny chloroformmetanol w stosunku 6:1. Na tej drodze otrzymuje się 10,6 mg 4'-0-e-D-glukozylo-2',4-dihydroksy-6'-metoksy-3'-prenylochalkonu (wydajność 24,2%).

P r z y k ł a d 2. Postępuje się analogicznie tak jak w przykładzie 1, z tym że biotransormację substratu prowadzi się stosując grzyby Absidia glauca, przez około 7 dób. Otrzymuje się 48 mg surowego produktu, z którego, po oczyszczeniu chromatograficznym, uzyskuje się 8 mg 4'-0-e-D-glukozylo-2',4-dihydroksy-6'-metoksy-3'-prenylochalkonu (wydajność 18,3%).

Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi: ¹H NMR: δ = 14,21 (1H, s, 2'-OH); 10,13 (1H, s, 4-OH); 7,77 (1H, J = 15,5 Hz, Ha C=O); 7,72 (1H, d, J = 15,5 Hz, Hp C=O); 7,61 (2H, .J = 8,5 Hz, H-2, H-6); 6,86 (2H, d, J = 8,5 Hz, H-3, H-5); 6,42 (1H, 5, H-5'); 5,35 (1H, d, J = 4,6 Hz, 2'-OH); 5,19 (1H, m, H-2); 5,15 (1H, 3'-OH); 5,11 (1H, d, J = 4,9 Hz, 4'-OH); 5,01 (1H, t, J = 3,7 Hz, H-1'); 4,75 (1H, d, J = 5,4 Hz, 6'-OH); 3,94 (3H, s, C-6'-O-Me); 3,76 (1H, H-6'); 3,45 (1H, H-5'); 3,43 (1H, m, H-6'); 3,37 (1H, m, H-1); 3,36 (1H, m, H-3'); 3,33 (1H, m, H-2'); 3,13 (1H, m, H-1); 3,13 (1H, m, H-4'); 1,74 (3H, s, H-4); 1,61 (3H, H-5).

¹³C NMR: 5 = 193,0 (C=O); 163,6 (C-2'); 161,6 (C-4’); 160,9 (C-6’); 160,7 (C-4); 143,8 (C-β);

130.6 (C-3); 131,2 (C-2, C-6); 126,3 (C-1); 124,0 (C-α); 123,3 (C-2); 116,5 (C-3, C-5); 110,0 (C-3');

106.7 (C-1'); 100,6 (C-1'); 91,1 (C-5'); 78,0 (C-5'); 77,4 (C-3'); 73,8 (C-2'); 70,6 (C-4'); 61,4 (C-6'); 56,5 (C-6'-O-Me); 26,0 (C-5); 21,7 (C-1); 18,2 (C-4).

Claims

1. Sposób wytwarzania 4'-0-e-D-glukozylo-2',4-dihydroksy-6'-metoksy-3'-prenylochalkonu, o wzorze 2, na drodze mikrobiologicznej z substratu, którym jest ksantohumol, o wzorze 1, znamienny tym, że proces glukozydacji, prowadzi się kulturą grzybów z gatunku Absidia coerulea.

PL 210 084 B1

2. Sposób wytwarzania 4'-0-e-D-glukozylo-2',4-dihydroksy-6'-metoksy-3'-prenylochalkonu, o wzorze 2, na drodze mikrobiologicznej z substratu, którym jest ksantohumol, o wzorze 1, znamienny tym, że proces glukozydacji substratu prowadzi się kulturą grzybów z gatunku Absidia glauca.

3. Sposób według zastrz. 1 albo 2, znamienny tym, że proces glukozydacji prowadzi się wodną kulturą szczepu przy ciągłym wstrząsaniu.

4. Sposób według zastrz. 1 albo 2, znamienny tym, że proces glukozydacji prowadzi się w temperaturze 285-313 K.