PL226314B1 - 4’-O-β-D-4’ ’ ’-O-metylo -glukopiranozylo -1’ ’, 2’’,α, β-tetrahydroksantohumol K i sposób jego otrzymywania - Google Patents

Description

Opis wynalazku

Przedmiotem wynalazku jest nowy 4'-O^-D-4'”-metyloglukopiranozylo-1”,2”,a^-tetrahydroksantohumol K, o wzorze 2, przedstawionym na rysunku oraz sposób jego otrzymywania. Nazwa tego nowego związku wg IUPAC to 1-(5-O-3-D-(4'-O-metylo)-glukopiranozylo-7-metoksy-2,2-dimetylochroman-8-yl)-3-(4-hydroksyfenylo)-propan-1-on.

Związek ten jest biologicznie czynny, o właściwościach antyproliferacyjnych. Może znaleźć zastosowanie w przemyśle spożywczym i farmaceutycznym.

Dotychczas, w literaturze nie jest znany 4'-O^-D-4”’-metyloglukopiranozylo-1”,2”,a^-tetrahydroksantohumol K ani sposób jego wytwarzania.

Istotą wynalazku jest 4'-O^-D-4”’-metylo-glukopiranozylo-1”,2”,a^-tetrahydroksantohumol K.

Natomiast istotą sposobu otrzymywania tego związku jest to, że otrzymuje się go na drodze reakcji mikrobiologicznej transformacji substratu, jakim jest 1”,2”,a,3-tetrahydroksantohumol K. Grzyby z gatunku Beauveria bassiana, namnaża się w płynnym podłożu mikrobiologicznym, charakterystycznym dla grzybów, przy ciągłym mieszaniu reagentów, w temperaturze od 12 do 40°C. Następnie do narośniętej hodowli dodaje się substrat i dalej prowadzi się proces, aż do całkowitego zużycia substratu. Po zakończeniu transformacji roztwór transformacyjny ekstrahuje się rozpuszczalnikami organicznymi niemieszającymi się z wodą, oddziela frakcję organiczną, osusza bezwodnym siarczanem magnezu, odparowuje rozpuszczalnik i tak otrzymany surowy produkt oczyszcza się za pomocą technik chromatograficznych.

Korzystnie jest, gdy proces namnażania drobnoustroju prowadzi się w temperaturze 30°C.

Korzystnie również jest, gdy rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą jest octan etylu.

Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w żywych komórkach kultury gatunku Beauveria bassiana, następuje reakcja glikozylacji substratu.

Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymanie, w łagodnych warunkach, 4'-O^-D-4’”-O-metyloglukopiranozylo-1”,2”,a^-tetrahydroksantohumolu K, o wzorze 2, jako głównego produktu reakcji w kulturze gatunku Beauveria bassiana z wydajnością 26,8%.

Wynalazek jest bliżej objaśniony w przykładzie wykonania.

P r z y k ł a d 1. Do kolby o pojemności 300 cm³, w której znajduje się 100 cm³ sterylnej pożyw₃ ki zawierającej 3 g glukozy i 1 g aminobaku na 1 dm³ wody destylowanej, wprowadza się grzyby gatunku Beauveria bassiana. Po 4 dniach wzrostu drobnoustrojów w temperaturze 30°C i przy ciągłym wstrząsaniu, dodaje się 15 mg 1”,2”,a,3-tetrahydroksantohumolu K, o wzorze 1, rozpuszczonego w 1 cm³ metanolu (stężenie substratu 150 mg/L). Transformację prowadzi się przy ciągłym wstrząsaniu przez 8 dób. Następnie, uzyskany roztwór transformacyjny ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu, osusza bezwodnym siarczanem magnezu i odparowuje rozpuszczalnik. Otrzymuje się 28 mg surowego produktu, który oczyszcza się chromatograficznie, używając jako eluentu mieszaninę chloroform: metanol w stosunku objętościowym 9:1.

Po oczyszczeniu otrzymuje się 6 mg 4'-O^-D-4”’-O-metyloglukopiranozylo-1”,2”,a^-tetrahydroksantohumolu K, o wzorze 2, z wydajnością 26,8%.

Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi:

¹H NMR (600 MHz, aceton-^) δ: 1,25 (3H, s, H-5”), 1,26 (3H, s, H-4”), 1,75 (2H, m, H-2”), 2,58 (1H, m, H-1”b), 2,74 (1H, m, H-1”a), 2,82 (2H, m, H-β), 2,91 (2H, m, H-a), 3,14 (1H, m, H-4'”), 3,51 (1H, m, H-2'”), 3,51 (1H, m, H-3'”), 3,55 (3H, s, C4'”-OCH3), 3,62 (1H, m, H-5'”), 3,67 (1H, m, H-6'”b), 3,71 (3H, s, C6'-OCH3), 3,85 (1H, m, H-6'”a), 4,96 (1H, m, H-1”'), 6,46 (1H, s, H-5'), 6,73 (2H, m, J=8,5 Hz, H-3, H-5), 7,05 (2H, m, J = 8,5 Hz, H-2, H-6).

¹³C NMR (150 MHz, aceton-^) δ: 17,36 (C-1”), 26,30 (C-5”), 27,23 (C-4”), 29,63 (C-β), 32,53 (C-2”), 47,34 (C-a), 56,05 (C6'-OCH3), 60,55 (C4'”-OCH3), 62,29 (C-6'”), 74,91 (C-3'”), 75,45 (C-4”),

77,23 (C-2'”), 78,18 (C-5'”), 80,48 (C-4'”), 92,45 (C-5'), 101,68 (C-1”'), 104,45 (C-3'), 115,32 (C-1'),

115,92 (C-3, C-5), 130,02 (C-2, C-6), 133,24 (C-1), 152,37 (C-2'), 156,35 (C-4), 156,39 (C-6'), 157,58 (C-4'), 202,69 (C=O).

Claims (4)

1. 4'-O-3-D-4’”-0-metylo-glukopiranozylo-1 ”,2”,a,3-tetrahydroksantohumol K, o wzorze 2.

2. Sposób otrzymywania 4'-O-3-D-4”'-O-metylo-glukopiranozylo-1”,2”,a,3-tetrahydroksantohumolu K, znamienny tym, że związek ten otrzymuje się na drodze reakcji mikrobiologicznej transformacji substratu, którym jest 1”,2”,a,3-tetrahydroksantohumol K o wzorze 1, polegającej na tym, że grzyby z gatunku Beauveria bassiana, namnaża się w płynnym podłożu mikrobiologicznym, charakterystycznym dla grzybów, przy ciągłym mieszaniu reagentów, w temperaturze od 12 do 40°C, po czym do narośniętej hodowli dodaje się substrat i dalej prowadzi się proces, aż do całkowitego zużycia substratu, po czym po zakończeniu transformacji roztwór transformacyjny ekstrahuje się rozpuszczalnikami organicznymi niemieszającymi się z wodą, oddziela frakcję organiczną, osusza bezwodnym siarczanem magnezu, odparowuje rozpuszczalnik i tak otrzymany surowy produkt oczyszcza się za pomocą technik chromatograficznych.

3. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że proces namnażania drobnoustroju prowadzi się w temperaturze 30°C.

4. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że rozpuszczalnikiem organicznym niemieszającym się z wodą jest octan etylu.