PL222789B1

PL222789B1 - 4'-O-β-D-glukopiranozylo-1'', 2'', α,β-tetrahydroksantohumol K i sposób jego otrzymywania

Info

Publication number: PL222789B1
Application number: PL405699A
Authority: PL
Inventors: Jarosław Popłoński; Ewa Huszcza
Original assignee: Univ Przyrodniczy We Wrocławiu
Priority date: 2013-10-21
Filing date: 2013-10-21
Publication date: 2016-09-30
Also published as: PL405699A1

Description

Opis wynalazku

Przedmiotem wynalazku jest 4’-O-3-D-glukopiranozylo-1”,2”,a,3-tetrahydroksantohumol K, o wzorze 2, przedstawionym na rysunku oraz sposób jego otrzymywania.

Związek ten jest biologicznie czynny i może mieć zastosowanie w przemyśle spożywczym i farmaceutycznym.

Dotychczas, w literaturze nie jest znany 4’-O-3-D-glukopiranozylo-1”,2”,a,3-tetrahydroksantohumol K ani sposób jego wytwarzania.

Istotą wynalazku jest 4’-O-3-D-glukopiranozylo-1”,2”,a,3-tetrahydroksantohumol K.

Natomiast istotą sposobu otrzymywania tego związku jest to, że otrzymuje się go na drodze reakcji mikrobiologicznej transformacji substratu, którym jest 1”,2”,a,3-tetrahydroksantohumol K. Grzyby z gatunku Absidia coerulea, namnaża się w płynnym podłożu mikrobiologicznym, charakterystycznym dla grzybów, przy ciągłym mieszaniu reagentów, w temperaturze 12-40°C. Następnie do narośniętej hodowli dodaje się substrat i dalej prowadzi się proces, aż do całkowitego zużycia substratu. Po zakończeniu transformacji roztwór transformacyjny ekstrahuje się rozpuszczalnikami organicznymi niemieszającymi się z wodą, oddziela frakcję organiczną, osusza bezwodnym siarczanem magnezu, odparowuje rozpuszczalnik i tak otrzymany surowy produkt oczyszcza się za pomocą technik chromatograficznych.

Korzystnie jest, gdy proces namnażania drobnoustroju prowadzi się w temperaturze 30°C.

Postępując zgodnie z wynalazkiem, w wyniku działania układu enzymatycznego zawartego w żywych komórkach kultury Absidia coerulea, następuje reakcja glukozylacji substratu.

Zasadniczą zaletą wynalazku jest otrzymanie, w łagodnych warunkach, 4’-O-3-D-glukopiranozylo-1”,2”,a,3-tetrahydroksantohumolu K, o wzorze 2, jako głównego produktu reakcji w kulturze Absidia coerulea z wydajnością 50,46%.

Wynalazek jest bliżej objaśniony w przykładzie wykonania.

P r z y k ł a d 1. Do kolby o pojemności 300 cm , w której znajduje się 100 cm sterylnej po₃ żywki zawierającej 3 g glukozy i 1 g aminobaku na 1 dm³ wody destylowanej, wprowadza się grzyby

Absidia coerulea. Po 4 dniach wzrostu drobnoustrojów w temperaturze 30°C i przy ciągłym wstrząsa₃ niu, dodaje się 15 mg 1”,2”,a,3-tetrahydroksantohumol K, o wzorze 1, rozpuszczonego w 1 cm metanolu. Transformację prowadzi się przy ciągłym wstrząsaniu przez 8 dób. Następnie, uzyskany roztwór transformacyjny ekstrahuje się trzykrotnie octanem etylu, osusza bezwodnym siarczanem magnezu i odparowuje rozpuszczalnik. Otrzymuje się 28 mg surowego produktu, który oczyszcza się chromatograficznie, używając jako eluentu mieszaninę chloroform, metanol w stosunku objętościowym 9:1.

Po oczyszczeniu otrzymuje się 11 mg 4’-O-3-D-glukopiranozylo-1”,2”,a,3-tetrahydroksantohumolu K, o wzorze 2, z wydajnością 50,46%.

Uzyskany produkt charakteryzuje się następującymi danymi spektralnymi:

¹H NMR (600 MHz, aceton-da) δ: 1,25 (3H, s, H-5), 1,74 (2H, m, H-1”), 2,59 (1H, m, H-2”b), 2,75 (1H, m, H-2”a), 2,83 (2H, m, H-β), 2,91 (2H, m, H-a), 3,40 (1H, m, H-4”), 3,52 (1H, m, H-2'”), 3,52 (1H, m, H-5'”), 3,55 (1H, m, H-3'”), 3,67 (1H, m, H-6”'b), 3,72 (3H, s, C6’-OCH3), 3,93 (1H, m, H-6'”a), 4,99 (1H, m, H-1”'), 6,49 (1H, s, H-5'), 6,73 (2H, pd, J = 8,4 Hz, H-3, H-5), 7,05 (2H, pd, J = 8,4 Hz, H-2, H-6).

¹³C NMR (150 MHz, aceton-da) δ: 17,36 (C-2”), 26,29 (C-5”), 27,24 (C-4”), 29,64 (C-β), 32,54 (C-1”), 47,35 (C-a), 56,05 (C6'-OCH3), 62,78 (C-6'”), 71,57 (C-4'”), 74,66 (C-2'”), 75,46 (C-3”), 78,08 (C-3'”), 78,21 (C-5'”), 92,49 (C-5'), 101,95 (C-1'”), 104,44 (C-3'), 115,29 (C-1'), 115,93 (C-3, C-5), 130,03 (C-2, C-6), 133,26 (C-1), 152,37 (C-2'), 156,41 (C-4), 156,41 (C-6'), 157,65 (C-4'), 202,71 (C=O).

Claims

Zastrzeżenia patentowe

1.4'-O^-D-glukopiranozylo-1”,2”,a^-tetrahydroksantohumol K, o wzorze 2.
2. Sposób otrzymywania 4'-O^-D-glukopiranozylo-1”,2”,a^-tetrahydroksantohumolu K, znamienny tym, że związek ten otrzymuje sie na drodze reakcji mikrobiologicznej transformacji substratu, którym jest 1”,2”,a^-tetrahydroksantohumol K o wzorze 1, polegającej na tym, że grzyby z gatunku Absidia coerulea, namnaża się w płynnym podłożu mikrobiologicznym, charakterystycznym dla grzybów, przy ciągłym mieszaniu reagentów, w temperaturze 12-40°C, po czym do narośniętej

PL 222 789 B1 hodowli dodaje się substrat i dalej prowadzi się proces, aż do całkowitego zużycia substratu, po czym po zakończeniu transformacji roztwór transformacyjny ekstrahuje się rozpuszczalnikami organicznymi niemieszającymi się z wodą, oddziela frakcję organiczną, osusza bezwodnym siarczanem magnezu, odparowuje rozpuszczalnik i tak otrzymany surowy produkt oczyszcza się za pomocą technik chromatograficznych.
3. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że proces prowadzi się w temperaturze 30°C.