KR100919905B1

KR100919905B1 - 단백질 키나제 억제제로서의 화합물 및 조성물

Info

Publication number: KR100919905B1
Application number: KR1020077017155A
Authority: KR
Inventors: 태보 심; 나타나엘 쉬안더 그레이; 현수 이; 이 류; 핑다 런; 수리 유; 충 장; 창 딩; 샤 왕; 쑹춘 장; 파멜라 에이. 알바
Original assignee: 아이알엠 엘엘씨
Priority date: 2005-01-26
Filing date: 2006-01-19
Publication date: 2009-10-06
Anticipated expiration: 2026-01-19
Also published as: CN101106990A; AU2006209183A1; AR052887A1; AU2006209183B2; CN101106990B; WO2006081172A3; CA2593803A1; EP1841431A4; WO2006081172A2; RU2368602C2; PE20060877A1; GT200600028A; RU2007132262A; MX2007008973A; US20090105250A1; JP2008528585A; EP1841431A2; KR20070095978A; TW200637547A; BRPI0607307A2

Abstract

본 발명은 신규 부류의 화합물, 상기 화합물을 포함하는 제약 조성물 및 비정상적 또는 탈조절된 키나제 활성과 연관된 질환 또는 장애, 특히 Abl, Bcr-Abl, FGFR3, PDGFRβ 및 b-Raf 키나제의 비정상적 활성화를 수반하는 질환 또는 장애의 치료 또는 예방을 위한 상기 화합물의 사용 방법을 제공한다.

Abl, Bcr-Abl, FGFR3, PDGFRβ, Flt3, b-Raf, 키나제 활성, 아벨슨 티로신 키나제, 백혈병

Description

단백질 키나제 억제제로서의 화합물 및 조성물 {COMPOUNDS AND COMPOSITIONS AS PROTEIN KINASE INHIBITORS}

관련 출원과의 상호참조

본 출원은 2005년 1월 25일에 출원된 미국 가특허출원 제60/647,606호에 대하여 우선권의 이익을 주장한다. 상기 출원의 모든 개시사항은 그 전체로 모든 목적을 위해 본원에 참고로 포함된다.

본 발명은 신규 부류의 화합물, 상기 화합물을 포함하는 제약 조성물 및 비정상적 또는 탈조절된 키나제 활성과 연관된 질환 또는 장애, 특히 Abl, Bcr-Abl, FGFR3, PDGFRβ, Flt3 및 b-Raf 키나제의 비정상적 활성화를 수반하는 질환 또는 장애를 치료 또는 예방하기 위한 상기 화합물의 사용 방법을 제공한다.

단백질 키나제는 다양한 세포 과정의 조절 및 세포 기능에 대한 조절 유지에 중요한 역할을 하는 단백질의 광범위한 족을 나타낸다. 이러한 키나제들의 부분적이고 비제한적인 목록에는 다음이 포함된다: 수용체 티로신 키나제, 예컨대 혈소판-유래 성장 인자 수용체 키나제 (PDGF-R) 및 섬유모세포 성장 인자 수용체, FGFR3; 비-수용체 티로신 키나제, 예컨대 Abl 및 융합 키나제 BCR-Abl; 및 세린/트레오닌 키나제, 예컨대 b-RAF, SGK, MAP 키나제 (예를 들어, MKK4, MKK6 등) 및 SAPK2α 와 SAPK2β. 이상 키나제 활성은 양성 및 악성 증식성 장애뿐만 아니라 면역계 및 신경계의 부적절한 활성화에 기인한 질환을 비롯한 다수의 질환 상태에서 관측되어 왔다.

본 발명의 신규 화합물은 하나 이상의 단백질 키나제의 활성을 억제하며, 따라서 키나제-연관 질환의 치료에 유용할 것으로 예상된다.

발명의 개요

제1 국면에서, 본 발명은 하기 화학식 I의 화합물, 및 그의 N-옥시드 유도체, 프로드러그 유도체, 보호된 유도체, 개별 이성질체 및 이성질체 혼합물; 및 상기 화합물의 제약상 허용가능한 염 및 용매화물 (예를 들어 수화물)을 제공한다:

식 중:

n은 0, 1, 2, 3 및 4로부터 선택되고;

R₁은 수소, C₁ _- ₆알킬, C₆ _- ₁₀아릴-C₀ _- ₄알킬, C₅ _- ₁₀헤테로아릴-C₀ _- ₄알킬, C₃ _- ₁₂시클로알킬-C₀ _- ₄알킬, C₃ _- ₈헤테로시클로알킬-C₀ _- ₄알킬 및 -XNR₇R₈으로부터 선택되고;

여기서 R₁의 임의의 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬 또는 헤테로시클로알킬은 할로, C₁ _- ₆알킬, 할로-치환-C₁ _- ₆알킬, C₁ _- ₆알콕시, 할로-치환-C₁ _- ₆알콕시, C₁ _- ₆알킬티오, 할로-치환-C₁ _- ₆알킬티오, -XNR₇R₈, -XNR₇XNR₇R₈, -XNR₇R₉, C₆ _- ₁₀아릴-C₀ _- ₄알킬, C₅ _- ₁₀헤테로아릴-C₀ _- ₄알킬, C₃ _- ₁₂시클로알킬-C₀ _- ₄알킬 및 C₃ _- ₈헤테로시클로알킬-C₀ _- ₄알킬로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 3 개의 라디칼로 임의로 치환되고; 여기서 R₁에서의 임의의 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬 또는 헤테로시클로알킬 치환기는 할로, C₁ _- ₆알킬, 할로-치환-C₁ _- ₆알킬, 히드록시-치환-C₁ _- ₆알킬, C₁ _- ₆알콕시 및 할로-치환-C₁ _- ₆알콕시로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 3 개의 라디칼로 임의로 치환될 수 있으며; 여기서 R₁의 임의의 알킬은 O로 치환되는 메틸렌을 가질 수 있고;

여기서 각 X는 결합 및 C₁ _- ₆알킬렌으로부터 독립적으로 선택되고; R₇ 및 R₈은 수소 및 C₁ _- ₆알킬로부터 독립적으로 선택되고; 여기서 R₇ 및 R₈의 임의의 메틸렌은 O로 치환될 수 있으며; 여기서 R₉은 C₆ _- ₁₀아릴-C₀ _- ₄알킬, C₅ _- ₁₀헤테로아릴-C₀ _- ₄알킬, C_3-12시클로알킬-C₀ _- ₄알킬 및 C₃ _- ₈헤테로시클로알킬-C₀ _- ₄알킬로부터 선택되고;

R₂는 수소 및 C₁ _- ₆알킬로부터 선택되고;

R₃는 수소 및 C₁ _- ₆알킬로부터 선택되고;

R₄는 할로, C₁ _- ₆알킬, 할로-치환-C₁ _- ₆알킬, C₁ _- ₆알콕시, 할로-치환-C₁ _- ₆알콕시, C_1-6알킬티오 및 할로-치환-C₁ _- ₆알킬티오로부터 선택되고;

R₁₅은 -NR₅Y(O)R₆ 및 -N(O)NR₅R₆로부터 선택되고; 여기서

Y는 C, S, S(O), P 및 P(O)로부터 선택되고;

R₅는 수소 및 C₁ _- ₆알킬로부터 선택되고;

R₆는 C₆ _- ₁₀아릴, C₅ _- ₁₀헤테로아릴, C₃ _- ₁₂시클로알킬 및 C₃ _- ₈헤테로시클로알킬로부터 선택되고; 여기서 R₆의 상기 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬 또는 헤테로시클로알킬은 할로, C₁ _- ₆알킬, 할로-치환-C₁ _- ₆알킬, C₁ _- ₆알콕시, 할로-치환-C₁ _- ₆알콕시, C₁ _- ₆알킬티오, 할로-치환-C₁ _- ₆알킬티오, C₆ _- ₁₀아릴-C₀ _- ₄알킬, C₅ _- ₁₀헤테로아릴-C₀ _- ₄알킬, C₃ _-12시클로알킬-C₀ _- ₄알킬, C₃ _- ₈헤테로시클로알킬-C₀ _- ₄알콕시 및 C₃ _- ₈헤테로시클로알킬-C₀ _- ₄알킬로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 3 개의 치환기로 임의로 치환되고; 여기서 R₆에서의 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬 또는 헤테로시클로알킬 치환기는 히드록시, 할로, C_1-6알킬, 할로-치환-C₁ _- ₆알킬, 히드록시-치환-C₁ _- ₆알킬, C₁ _- ₆알콕시 및 할로-치환-C_1-6알콕시로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 3 개의 라디칼로 임의로 추가 치환될 수 있다.

제2 국면에서, 본 발명은 화학식 I의 화합물 또는 그의 N-옥시드 유도체, 개별 이성질체 및 이성질체 혼합물; 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 하나 이상의 적합한 부형제와의 혼합물로 포함하는 제약 조성물을 제공한다.

제3 국면에서, 본 발명은 치료 유효량의 화학식 I의 화합물 또는 그의 N-옥 시드 유도체, 개별 이성질체 및 이성질체 혼합물, 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 동물에게 투여하는 것을 포함하는, 키나제 활성, 특히 Abl, Bcr-Abl, FGFR3, PDGFRβ 및 b-Raf 활성의 억제가 질환의 병리상태 및/또는 증상을 예방, 억제 또는 완화시킬 수 있는 동물에서의 질환의 치료 방법을 제공한다.

제4 국면에서, 본 발명은 키나제 활성, 특히 Abl, Bcr-Abl, FGFR3, PDGFRβ, Flt3 및 b-Raf 활성이 질환의 병리상태 및/또는 증상의 원인이 되는 동물에서의 질환의 치료를 위한 의약 제조에서의 화학식 I의 화합물의 용도를 제공한다.

제5 국면에서, 본 발명은 화학식 I의 화합물 및 그의 N-옥시드 유도체, 프로드러그 유도체, 보호된 유도체, 개별 이성질체 및 이성질체 혼합물, 및 그의 제약상 허용가능한 염의 제조 방법을 제공한다.

정의

"알킬"은 하나의 기로서, 그리고 다른 기, 예를 들어 할로-치환-알킬 및 알콕시의 구조적 요소로서 직쇄 또는 분지쇄일 수 있다. C₁ _-4-알콕시로는 메톡시, 에톡시 등이 포함된다. 할로-치환 알킬로는 트리플루오로메틸, 펜타플루오로에틸 등이 포함된다.

"아릴"은 6 내지 10 개의 고리 탄소 원자를 포함하는 단환식 또는 융합 이환식 방향족 고리단을 의미한다. 예를 들어, 아릴은 페닐 또는 나프틸, 바람직하게는 페닐일 수 있다. "아릴렌"은 아릴기로부터 유도된 2가 라디칼을 의미한다.

"헤테로아릴"은 상기 아릴에 대하여 정의한 바와 같은데, 여기서 고리 구성원 중 하나 이상은 헤테로원자이다. 예를 들어 헤테로아릴로는 피리딜, 인돌릴, 인다졸릴, 퀴녹사졸릴, 퀴놀리닐, 벤조푸라닐, 벤조피라닐, 벤조티오피라닐, 벤조[1,3]디옥솔, 이미다졸릴, 벤조-이미다졸릴, 피리미디닐, 푸라닐, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 피라졸릴, 티에닐 등이 포함된다.

"시클로알킬"은 지정 개수의 고리 원자를 포함하는 포화 또는 부분적 불포화, 단환식, 융합 이환식 또는 가교 다환식 고리단을 의미한다. 예를 들어, C₃ _-10시클로알킬로는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실 등이 포함된다.

"헤테로시클로알킬"은 본 출원에서 정의한 바와 같은 시클로알킬을 의미하지만, 단, 지정된 고리 탄소 중 하나 이상이 -O-, -N=, -NR-, -C(O)-, -S-, -S(O)- 또는 -S(O)₂- (여기서 R은 수소, C₁ _- ₄알킬 또는 질소 보호기임)로부터 선택되는 잔기로 치환된다. 예를 들어, 본 발명의 화합물을 기술하기 위해서 본 출원에서 사용되는 바와 같은 C₃ _- ₈헤테로시클로알킬로는 모르폴리노, 피롤리디닐, 피롤리디닐-2-온, 피페라지닐, 피페리디닐, 피페리디닐론, 1,4-디옥사-8-아자-스피로[4.5]데스-8-일 등이 포함된다.

"할로겐" (또는 할로)은 바람직하게는 클로로 또는 플루오로를 나타내지만, 브로모 또는 요오도일 수도 있다.

"키나제 패널"은 Abl(인간), Abl(T315I), JAK2, JAK3, ALK, JNK1α1, ALK4, KDR, Aurora-A, Lck, Blk, MAPK1, Bmx, MAPKAP-K2, BRK, MEK1, CaMKII(래트), Met, CDK1/cyclinB, p70S6K, CHK2, PAK2, CK1, PDGFRα, CK2, PDK1, c-kit, Pim-2, c-RAF, PKA(h), CSK, PKBα, cSrc, PKCα, DYRK2, Plk3, EGFR, ROCK-I, Fes, Ron, FGFR3, Ros, Flt3, SAPK2α, Fms, SGK, Fyn, SIK, GSK3β, Syk, IGF-1R, Tie-2, IKKβ, TrKB, IR, WNK3, IRAK4, ZAP-70, ITK, AMPK(래트), LIMK1, Rsk2, Axl, LKB1, SAPK2β, BrSK2, Lyn (h), SAPK3, BTK, MAPKAP-K3, SAPK4, CaMKIV, MARK1, Snk, CDK2/cyclinA, MINK, SRPK1, CDK3/cyclinE, MKK4(m), TAK1, CDK5/p25, MKK6(h), TBK1, CDK6/cyclinD3, MLCK, TrkA, CDK7/cyclinH/MAT1, MRCKβ, TSSK1, CHK1, MSK1, Yes, CK1d, MST2, ZIPK, c-Kit (D816V), MuSK, DAPK2, NEK2, DDR2, NEK6, DMPK, PAK4, DRAK1, PAR-1Bα, EphA1, PDGFRβ, EphA2, Pim-1, EphA5, PKBβ, EphB2, PKCβI, EphB4, PKCδ, FGFR1, PKC

, FGFR2, PKCθ, FGFR4, PKD2, Fgr, PKG1β, Flt1, PRK2, Hck, PYK2, HIPK2, Ret, IKKα, RIPK2, IRR, ROCK-II(인간), JNK2α2, Rse, JNK3, Rsk1(h), PI3 Kγ, PI3 Kδ 및 PI3-Kβ를 포함하는 키나제 목록이다. 본 발명의 화합물은 상기 키나제 패널 (야생형 및/또는 그의 돌연변이)에 대하여 스크리닝되고, 상기 패널 구성원 중 하나 이상의 활성을 억제한다.

"BCR-Abl의 돌연변이형"은 야생형 서열로부터의 단일 또는 복수의 아미노산 변이를 의미한다. BCR-ABL에서의 돌연변이는 단백질과 억제제 (예를 들어, 글리벡(Gleevec) 등) 사이의 중요한 접촉점을 분열시킴으로써, 더욱 빈번하게는, 비활성에서 활성 상태, 즉, BCR-ABL과 글리벡이 결합할 수 없는 구조로의 전환을 유도함으로써 작용한다. 임상 표본의 분석으로부터, 내성 표현형과 관련하여 발견되는 돌연변이 레퍼토리는 천천히, 그러나 엄연히 시간이 흐르면서 증가해 왔다. 돌연변이는 4개의 주요 영역에 클러스터링하는 것으로 보인다. 돌연변이 제1 군 (G250E, Q252R, Y253F/H, E255K/V)은 ATP에 대한 인산염-결합 루프 (P-루프로도 알려짐)를 형성하는 아미노산을 포함한다. 제2 군 (V289A, F311L, T315I, F317L)은 글리벡 결합 부위에서 발견될 수 있으며, 수소 결합 또는 반데르발스 상호작용을 통해 억제제와 직접 상호작용한다. 돌연변이 제3 군 (M351T, E355G)은 촉매 도메인에 아주 근접하여 클러스터링한다. 돌연변이 제4 군 (H396R/P)은 그 구조가 키나제 활성화/불활성화를 조절하는 분자 스위치인 활성화 고리에 위치한다. CML 및 ALL 환자에서 탐지되는 글리벡 내성과 연관된 BCR-ABL 점 돌연변이로는 다음이 포함된다: M224V, L248V, G250E, G250R, Q252R, Q252H, Y253H, Y253F, E255K, E255V, D276G, T277A, V289A, F311L, T315I, T315N, F317L, M343T, M315T, E355G, F359V, F359A, V379I, F382L, L387M, L387F, H396P, H396R, A397P, S417Y, E459K, 및 F486S (1문자 코드로 나타내는 아미노산 위치는 진뱅크(GenBank) 서열, 수탁 번호 AAB60394에서의 위치이며, ABL 타입 1a에 대응함; 문헌 [Martinelli et al., Haematologica/The Hematology Journal, 2005, April; 90-4]). 본 발명에서 달리 명시하지 않는 한, Bcr-Abl은 상기 효소의 야생형 및 돌연변이형을 지칭한다.

"치료"는 질환 및/또는 그에 수반되는 증상을 완화 또는 경감시키는 방법을 지칭한다.

바람직한 실시양태의 기술

본 발명은 키나제 관련 질환, 특히 Abl, Bcr-Abl, FGFR3, PDGFRβ, Flt3 및 b-Raf 키나제 관련 질환의 치료를 위한 화합물, 조성물 및 방법을 제공한다. 예를 들어, 백혈병 및 BCR-Abl과 관련된 기타 증식 장애는 Bcr-Abl의 야생형 및 돌연변이형의 억제를 통해서 치료할 수 있다.

한 실시양태에서, 화학식 I의 화합물과 관련하여 화학식 Ia의 화합물이 있다:

식 중:

m은 0 및 1로부터 선택되고;

여기서 R₁의 임의의 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬 또는 헤테로시클로알킬은 C_1-6알킬, -XNR₇R₈, -XNR₇XNR₇R₈, -XNR₇R₉, C₅ _- ₁₀헤테로아릴-C₀ _- ₄알킬 및 C₃ _- ₈헤테로시클로알킬-C₀ _- ₄알킬로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 3 개의 라디칼로 임의로 치환되고; 여기서 R₁에서의 임의의 헤테로아릴 또는 헤테로시클로알킬 치환기는 C₁ _- ₆알킬 및 히드록시-치환-C₁ _- ₆알킬로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 3 개의 라디칼로 임의로 치환될 수 있고; 여기서 R₁의 임의의 알킬은 O로 치환되는 메틸렌을 가질 수 있고;

여기서 각 X는 결합 및 C₁ _- ₆알킬렌으로부터 독립적으로 선택되고; R₇ 및 R₈은 수소 및 C₁ _- ₆알킬로부터 독립적으로 선택되고; 여기서 R₇ 및 R₈의 임의의 메틸렌은 O로 치환될 수 있고; 여기서 R₉은 C₃ _- ₁₂시클로알킬-C₀ _- ₄알킬이고;

R₂는 수소 및 C₁ _- ₆알킬로부터 선택되고;

R₃는 수소 및 C₁ _- ₆알킬로부터 선택되고;

R₄는 할로, C₁ _- ₆알킬, 할로-치환-C₁ _- ₆알킬, C₁ _- ₆알콕시 및 할로-치환-C₁ _- ₆알콕시로부터 선택되고;

L은 -NR₅C(O)- 및 -C(O)NR₅-로부터 선택되고;

R₅는 수소 및 C₁ _- ₆알킬로부터 선택되고;

R₁₀은 할로-치환-C₁ _- ₆알킬이고;

R₁₁은 수소, 할로, C₅ _- ₁₀헤테로아릴 및 C₃ _- ₈헤테로시클로알킬로부터 선택되고; 여기서 R₁₁에서의 헤테로아릴 또는 헤테로시클로알킬 치환기는 히드록시 및 C₁ _- ₆알킬로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 3 개의 라디칼로 임의로 치환될 수 있다.

또다른 실시양태에서, R₁은 수소, 메틸, 이소프로필, 이미다졸릴-프로필, 피페라지닐-프로필, 피리디닐, 디에틸-아미노-프로필, 히드록시-에틸, 피리미디닐, 모르폴리노-프로필, 페닐, 시클로프로필, 모르폴리노-에틸, 벤질 및 모르폴리노로부터 선택되고; 여기서 R₁의 임의의 피리디닐, 이미다졸릴, 피페라지닐 또는 피리미디닐은 메틸, 메틸-아미노, 디메틸-아미노-메틸, 시클로프로필-아미노, 히드록시-에틸-아미노, 디에틸-아미노-프로필-아미노, 피롤리디닐-메틸, 모르폴리노, 모르폴리노-메틸, 피페라지닐 메틸 및 피페라지닐로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 3 개의 라디칼로 임의로 치환되고; 여기서 R₁의 임의의 모르폴리노 및 피페라지닐 치환기는 메틸, 히드록시-에틸 및 에틸로부터 선택되는 라디칼로 임의로 추가 치환되고; R₂, R₃ 및 R₅는 각각 수소이고; R₄는 메틸이다.

또다른 실시양태에서, m은 0 및 1로부터 선택되고; R₁₀은 트리플루오로메틸이고; R₁₁은 할로; 모르폴리노-메틸; 메틸, 에틸 또는 히드록시에틸로 임의로 치환되는 피페라지닐; 메틸 또는 에틸로 임의로 치환되는 피페라지닐-메틸; 메틸로 임의로 치환되는 이미다졸릴; 피롤리디닐-메톡시; 및 히드록시로 임의로 치환되는 피페리디닐로부터 선택된다.

본 발명의 바람직한 화합물은 2-(3-디에틸아미노프로필아미노)-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-{6-[4-(2-히드록시에틸)-피페라진-1-일]-2-메틸피리미딘-4-일아미노}-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-(2-히드록시-에틸아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸 -벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-{6-[4-(2-히드록시-에틸)-피페라진-1-일]-2-메틸-피리미딘-4-일아미노}-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-(3-모르폴린-4-일-프로필아미노)-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-(3-디에틸아미노-프로필아미노)-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-페닐아미노-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-(2-히드록시-에틸아미노)-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드; 2-(3-디에틸아미노-프로필아미노)-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드; 2-(3-모르폴린-4-일-프로필아미노)-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드; 2-[6-(4-에틸-피페라진-1-일)-2-메틸-피리미딘-4-일아미노]-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-(6-시클로프로필아미노-2-메틸-피리미딘-4-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-[6-(2-히드록시-에틸아미노)-2-메틸-피리미딘-4-일아미노]-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-[6-(3-디에틸아미노-프로필아미노)-2-메틸-피리미딘-4-일아미노]-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-(2-메틸-6-모르폴린-4-일-피리미딘-4-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메 틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-(2-히드록시-에틸아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-히드록시-피페리딘-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-히드록시-피페리딘-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-(2-모르폴린-4-일-에틸아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-히드록시-피페리딘-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-(2-히드록시-에틸아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-벤질아미노-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-(2-모르폴린-4-일-에틸아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-[6-(2-히드록시-에틸아미노)-2-메틸-피리미딘-4-일아미노]-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-(6-시클로프로필아미노-2-메틸-피리미딘-4-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-(2-메틸-6-모르폴린-4-일-피리미딘-4-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-[6-(4-에틸-피페라진-1-일)-2-메틸-피리미딘-4-일아미노]-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조 일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-[6-(3-디에틸아미노-프로필아미노)-2-메틸-피리미딘-4-일아미노]-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-(2-메틸-6-메틸아미노-피리미딘-4-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-[6-(2-히드록시-에틸아미노)-2-메틸-피리미딘-4-일아미노]-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드; 2-(6-시클로프로필아미노-2-메틸-피리미딘-4-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드; 2-(2-메틸-6-모르폴린-4-일-피리미딘-4-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드; 2-[6-(4-에틸-피페라진-1-일)-2-메틸-피리미딘-4-일아미노]-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드; 2-[6-(3-디에틸아미노-프로필아미노)-2-메틸-피리미딘-4-일아미노]-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 {5-[4-(4-에틸-피페라진-1-일메틸)-3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-메틸아미노-티아졸-5-카르복실산 {5-[4-(4-에틸-피페라진-1-일메틸)-3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-아미노-티아졸-5-카르복실산 {5-[4-(4-에틸-피페라진-1-일메틸)-3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)- 티아졸-5-카르복실산 {5-[4-(4-에틸-피페라진-1-일메틸)-3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(4-모르폴린-4-일메틸-3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일)-페닐]-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(4-피페라진-1-일메틸-3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일)-페닐]-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[4-(4-메틸-피페라진-1-일메틸)-3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일]-페닐}-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1-일)-5-트리플루오로메틸-페닐카르바모일]-페닐}-아미드; 2-메틸아미노-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[4-(4-메틸-피페라진-1-일메틸)-3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일]-페닐}-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(4-피페라진-1-일메틸-3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일)-페닐]-아미드; 2-메틸아미노-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(4-피페라진-1-일메틸-3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일)-페닐]-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(4-모르폴린-4-일메틸-3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일)-페닐]-아미드; 2-메틸아미노-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(4-모르폴린-4-일메틸-3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일)-페닐]-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 (5-{[1-tert-부틸-5-(4-메틸-피페라진-1-일메틸)-1H-피라졸-3-카르보닐]-아미노}-2-메틸-페닐)-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드; 2-메틸아미노-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1- 일)-5-트리플루오로메틸-페닐카르바모일]-페닐}-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[4-(4-메틸-피페라진-1-일메틸)-3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일]-페닐}-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 {5-[4-(4-에틸-피페라진-1-일메틸)-3-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 (5-{3-[4-(2-히드록시-에틸)-피페라진-1-일]-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노}-2-메틸-페닐)-아미드; 2-(2-모르폴린-4-일-에틸아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[(5-tert-부틸-티오펜-2-카르보닐)-아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[(5-tert-부틸-티오펜-2-카르보닐)-아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[(5-tert-부틸-2-메틸-2H-피라졸-3-카르보닐)-아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-{5-[4-(2-히드록시-에틸)-피페라진-1-일]-피리딘-2-일아미노}-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 (5-{3-[4-(2-히드록시-에틸)-피페라진-1-일]-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노}-2-메틸-페닐)-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일)-페 닐]-아미드; 2-(피리딘-3-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일)-페닐]-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일)-페닐]-아미드; 2-(3-이미다졸-1-일-프로필아미노)-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일)-페닐]-아미드; 2-(2-모르폴린-4-일-에틸아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[(5-tert-부틸-2-메틸-2H-피라졸-3-카르보닐)-아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 [5-(4-클로로-3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-2-메틸-페닐]-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[(1-tert-부틸-5-메틸-1H-피라졸-3-카르보닐)-아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(피롤리딘-2-일메톡시)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드; 2-(6-메틸-피리딘-3-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일)-페닐]-아미드; 2-(2-모르폴린-4-일-에틸아미노)-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일)-페닐]-아미드; 2-이소프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일)-페닐]-아미드; 2-[3-(4-메틸-피페라진-1-일)-프로필아미노]-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일)-페닐]-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카 르복실산 [2-메틸-5-(4-피페라진-1-일메틸-3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[4-(4-에틸-피페라진-1-일메틸)-3-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(4-모르폴린-4-일메틸-3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-{6-[4-(2-히드록시-에틸)-피페라진-1-일]-2-메틸-피리미딘-4-일아미노}-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-[6-(4-메틸-피페라진-1-일)-피리미딘-4-일아미노]-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-{6-[4-(2-히드록시-에틸)-피페라진-1-일]-피리미딘-4-일아미노}-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-[2-메틸-6-(4-메틸-피페라진-1-일)-피리미딘-4-일아미노]-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 및 2-{4-[4-(2-히드록시-에틸)-피페라진-1-일]-피리딘-2-일아미노}-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드로부터 선택된다.

약리 및 효용

본 발명의 화합물은 키나제 활성을 조절하며, 그로 인하여, 키나제가 질환의 병리상태 및/또는 증상의 원인이 되는 질환 또는 장애의 치료에 유용하다. 본원에 기재한 화합물 및 조성물에 의해서 억제되고, 본원에 기재한 방법이 유용한 키나제의 예로는 Abl, Bcr-Abl, FGFR3, PDGFRβ, Flt3 및 b-Raf 키나제가 포함되지만, 여기에 한정되지는 않는다.

아벨슨 티로신 키나제 (즉, Abl, c-Abl)는 세포 주기의 조절, 유전자 독성 스트레스에 대한 세포 반응, 및 인테그린 신호전달을 통한 세포 환경에 관한 정보의 전달에 관여한다. 전체적으로, Abl 단백질은 다양한 세포 외 및 세포 내 출처로부터의 신호를 통합하고, 세포 주기 및 세포자멸사에 관한 결정에 영향을 미치는 세포 모듈로서의 복잡한 역할을 수행하는 것으로 보인다. 아벨슨 티로신 키나제는 아형 유도체, 예컨대 조절되지 않은 티로신 키나제 활성을 가지는 키메라 융합체 (발암단백질) BCR-Abl, 또는 v-Abl을 포함한다. BCR-Abl은 만성 골수성 백혈병 (CML)의 95% 및 급성 림프성 백혈병의 10%의 발병에 결정적이다. STI-571 (글리벡)은 발암성 BCR-Abl 티로신 키나제의 억제제이고, 만성 골수성 백혈병 (CML)의 치료에 사용된다. 그러나, CML의 모구성 발증 단계에 있는 일부 환자는 BCR-Abl 키나제에서의 돌연변이 때문에 STI-571에 내성이 있다. 현재까지 22종이 넘는 돌연변이가 보고되었으며, 그 중 G250E, E255V, T315I, F317L 및 M351T가 가장 흔하다.

본 발명의 화합물은 abl 키나제, 특히 v-abl 키나제를 억제한다. 본 발명의 화합물은 또한 야생형 BCR-Abl 키나제 및 BCR-Abl 키나제의 돌연변이도 억제하므로, Bcr-abl-양성 암 및 종양 질환, 예컨대 백혈병 (주로, 특히 세포자멸 기작 작용이 발견되는 만성 골수성 백혈병 및 급성 림프성 백혈병)의 치료에 적합하며, 또한 백혈병 줄기 세포의 아군에 대한 효과뿐만 아니라, 상기 세포를 제거 (예를 들어, 골수 제거)한 후, 시험관 내에서 이들 세포를 정제하고, 이들 세포로부터 암세포를 제거한 뒤의 재이식 (예를 들어, 정제된 골수 세포의 재이식) 잠재성을 보여 준다.

PDGF (혈소판-유래 성장 인자)는 정상적인 성장뿐만 아니라, 예컨대 발암현상 및 혈관의 평활근 세포의 질환, 예를 들어 죽상동맥경화증 및 혈전증에서 보여지는 병리학적 세포 증식 양자 모두에 중요한 역할을 하는 아주 흔히 분포된 성장 인자이다. 본 발명의 화합물은 PDGF 수용체 (PDGFR) 활성을 억제할 수 있으므로, 종양 질환, 예컨대 신경아교종, 육종, 전립선 종양, 및 결장, 유방 및 난소 종양의 치료에 적합하다.

본 발명의 화합물은 예를 들어, 소세포 폐암에서 종양-억제 물질로서 뿐만 아니라, 비-악성 증식성 장애, 예컨대 죽상동맥경화증, 혈전증, 건선, 경피증 및 섬유증의 치료, 뿐만 아니라, 예를 들어 화학요법제, 예컨대 5-플루오로우라실의 혈액독성 효과에 대항하는 줄기 세포의 보호, 및 천식에서의 작용제로서 사용될 수 있다. 본 발명의 화합물은 특히 PDGF 수용체 키나제의 억제에 반응하는 질환의 치료에 사용할 수 있다.

본 발명의 화합물은 이식, 예를 들어 동종 이식의 결과로 발생하는 장애, 특히 조직 거부반응, 예컨대, 특히 폐색성 기관지염 (OB), 즉 동종 폐 이식물의 만성 거부반응의 치료에 유효한 효과를 나타낸다. OB를 나타내지 않는 환자와 달리, OB를 가진 환자들은 종종 기관지 폐포액 중 상승된 PDGF 농도를 나타낸다.

본 발명의 화합물은 또한 혈관 평활근 세포 이동 및 증식 (여기서는 PDGF 및 PDGF-R 역시 종종 일익을 담당함)과 연관된 질환, 예컨대 재협착 및 죽상동맥경화증에도 효과적이다. 본 발명의 화합물을 투여하고, 또한 생체내의 물리적 손상에 따르는 혈관 내막의 비후에 대한 그의 효과를 조사함으로써, 시험관내 및 생체내 혈관 평활근 세포의 증식 또는 이동에 대한 이러한 효과 및 그로부터의 결과를 입증할 수 있다.

특정의 비정상적 증식 상태는 raf 발현과 연관되어 있다고 여겨지므로, raf 발현의 억제에 반응할 것으로 여겨진다. 비정상적으로 높은 수준의 raf 단백질 발현 또한 변형 및 비정상적 세포 증식과 연관되어 있다. 이러한 비정상적 증식 상태는 또한 raf 발현 억제에 반응할 것으로 여겨진다. 예를 들어, c-raf 단백질의 발현은, 모든 폐 암종 세포주의 60%가 현저하게 높은 수준의 c-raf mRNA 및 단백질을 발현한다고 보고되었기 때문에, 비정상적 세포 증식에 일익을 담당할 것으로 여겨진다. 비정상적 증식 상태의 추가의 예는, 과증식성 장애, 예컨대 암, 종양, 과다형성, 폐 섬유증, 혈관신생, 건선, 죽상동맥경화증 및 혈관에서의 평활근 세포 증식, 예컨대 협착증 또는 혈관성형술 후의 재협착이다. raf가 관여하는 세포성 신호전달 경로는 또한 예를 들어 조직 이식편 거부 반응, 내독소 쇼크 및 사구체 신염과 같은 T-세포 증식 (T-세포 활성화 및 성장)을 특징으로 하는 염증성 장애와 연관되어 있다.

Flt3는 Ⅲ형 수용체 티로신 키나제 (RTK) 과의 일원이다. Flt3 (fms-유사 티로신 키나제)는 FLk-2 (태아 간 키나제 2)로도 알려져 있다. Flt3 유전자의 이상 발현은 급성 골수성 백혈병 (AML), 삼계열 골수형성이상증을 수반한 AML (AML/TMDS), 급성 림프모세포성 백혈병 (ALL), 및 골수형성이상 증후군 (MDS)을 비롯한 성인 및 아동 백혈병 양자 모두에서 보고된 바 있다. Flt3 수용체 돌연변이 의 활성화는 급성 골수성 백혈병 (AML) 환자의 약 35%에서 발견되었으며, 불량한 예후와 연관된다. 가장 흔한 돌연변이는 막 근처 도메인 내의 인-프레임 중복(in-frame duplication)을 포함하며, 환자 중 추가로 5-10%는 아스파라긴 835에 점 돌연변이가 있다. 이들 돌연변이는 양자 모두 Flt3의 티로신 키나제 활성의 구조적 활성화와 연관되어 있으며, 리간드 부재하에 증식 및 생육성(viability) 신호를 야기한다. 돌연변이형 수용체를 발현하는 환자들은 치유 가능성이 감소한 것으로 나타났다. 이와 같이, 인간 백혈병 및 골수형성이상 증후군에서의 과활성화된 (돌연변이된) Flt3 키나제 활성의 역할에 대한 증거가 축적되어 있다. 이에 고무되어 본 출원인은 현행 약물 요법이 거의 효용을 제공하지 않는 환자에, 그리고 현재 이용가능한 약물 요법 및/또는 줄기 세포 이식 요법에 이미 실패한 환자에 대하여 시도가능한 치료법으로서 Flt3 수용체의 신규 억제제를 구하였다.

백혈병은 일반적으로 골수, 림프절, 비장, 또는 혈액 및 면역계의 기타 장기에서 미성숙 조혈 세포의 DNA에 대한 후천적 (유전적이 아님) 유전자 손상에 기인한다. 그 효과는 다음과 같다: 세포의 성장을 가속화시켜 세포 성숙을 차단하여, 정상 혈구로서의 기능을 하지 않는 "백혈병 모세포"라고 칭하는 세포를 축적시키고; 정상 골수 세포를 생성하지 못하여 적혈구 결핍 (빈혈), 혈소판 결핍 및 정상 백혈구 결핍에 이르게 함. 모세포는 보통은 골수에서 생성되고, 보통 성숙 혈구로 발생하는데, 이는 전체 골수 세포의 약 1 퍼센트를 차지한다. 백혈병에서는, 모세포가 적당히 성숙하여 골수에 축적되지 않는다. 급성 골수성 백혈병 (AML)에서는 이들을 골수모세포라고 칭하지만, 급성 림프성 백혈병 (ALL)에서는, 그들은 림프모 세포로 알려져 있다. 또다른 백혈병은 혼합-계열 백혈병 (MLL)이다.

"삼계열 골수형성이상증을 수반한 AML (AML/TMDS)"이라는 용어는 급성 백혈병을 수반하는 이상조혈상태, 유도 화학요법에 대한 반응 불량, 및 순수 골수형성이상 증후군의 재발 경향을 특징으로 하는 드문 형태의 백혈병이다.

"골수형성이상 증후군 (MDS)"이라는 용어는 골수의 정상적 기능이 정지되어 건강한 혈구의 개수가 부족해지는 일군의 혈액 장애와 관련된다. 한 가지 유형의 혈구가 다수 생성되는 백혈병에 비하여, MDS에서는 다소 때때로 모든 유형의 혈구가 영향을 받는다. 미국에서는 매년 10,000 가지 이상의 새로운 케이스가 발생한다. MDS로 진단받은 환자 중 삼분의 일까지가 나아가 급성 골수성 백혈병으로 발전하게 된다. 이런 이유로, 상기의 질환을 때때로 전백혈병이라 칭한다. 골수형성이상 증후군은 때때로 골수이형성증 골수혈구형성불량 또는 희돌기교모세포성 백혈병이라고도 칭한다. MDS는, 골수에 다수의 모세포가 잔존할 경우, 아급성 백혈병이라고도 칭한다.

골수형성이상 증후군은, 백혈병과 마찬가지로, 골수 내 단일 세포의 DNA에 대한 유전자 손상으로 인하여 생긴다. MDS 환자에게는 염색체에 특정 이상이 있다. 이러한 이상은 전위라고 칭하고, 이는 하나의 염색체 중 일부가 절단되고 다른 염색체의 절단부에 연결될 때 발생한다. 급성 골수성 백혈병에서 동일한 결손이 빈번하게 발견된다. 그러나, MDS는, 환자의 혈구 모두가 비정상적이고, 전부 동일한 손상 줄기 세포로부터 유래하므로, 백혈병과는 다르다. 백혈병 환자에서, 골수는 질환에 걸린 혈구 및 건강한 혈구의 혼합물을 포함한다.

AML 및 진행성 골수형성이상 증후군은 현재 고용량의 세포독성 화학요법 약물, 예컨대 시토신 아라비노시드 및 다우노루비신으로 치료한다. 이런 유형의 치료는 환자 중 약 70%로 하여금 혈액학적으로 진정되도록 유도한다. 그러나, 장기간에 걸친 화학요법의 투여에도 불구하고, 진정된 환자 중 절반 초과가 나중에 재발한다. 초기에 진정되지 못하거나, 진정된 이후에 재발한 환자의 거의 전부가 결국에는 백혈병으로 인하여 사망한다. 골수 이식은 그 과정을 거친 환자 중 50-60%까지를 치유할 수 있지만, 모든 AML 또는 MDS 환자 중 약 삼분의 일만이 이식물 수령 적격이다. 표준 요법으로 진정되지 못한 환자, 나중에 재발한 환자, 및 줄기 세포 이식 비적격인 환자를 치료하기 위해서 신규하고도 효과적인 약물이 절박하게 필요하다. 나아가, 효과적인 신규의 약물은, 그것이 모든 환자에게 있어서 유도 화학요법을 향상시킬 것이라는 합리적인 기대를 가지고 표준 요법에 부가할 수 있을 것이다.

FGFR3는 4 개의 상이한 유전자로 암호화되는 구조적으로 관련된 티로신 키나제 수용체과의 일부이다. FGFR3 유전자의 여러 도메인에서의 특정 점 돌연변이는 수용체의 구조적 활성화에 이르게 하며, 상염색체 우성 골격 장애, 다발성 골수종, 및 대다수의 방광 및 자궁경부 암과 연관된다 (문헌 [Cappellen, et al, Nature, vol.23]). 마우스 FGFR3 유전자에 위치한 돌연변이의 활성화 및 활성화된 FGFR3의 마우스에서의 성장판 연골에 대한 표적화는 왜소증을 일으킨다. 본 발상과 유사하게, 마우스에서 표적화된 FGFR3 분열은 긴 뼈 및 척추를 과도성장시킨다. 또한, 다발성 골수종 세포 중 20-25%는 FGFR3에 대하여 50-100kb 중심립 위치의 4p16에 절단점이 있는 t(4;14)(p16.3;q32.3) 염색체 전위를 포함한다. 다발성 골수종에서 드물게는, 골격 장애에서 이미 보았던 FGFR3의 돌연변이 활성화가 발견되며, 이것은 항상 이러한 염색체 전위를 수반한다. 최근, FGFR3 미스센스 체세포 돌연변이 (R248C, S249C, G372C, 및 K652E)가 대다수의 방광암 세포 및 일부 자궁경부암 세포에서 확인되었으며, 이들은 사실상 신생아 시기에 치사하는 왜소증 형태인 치사성 이형성증을 야기하는 배 활성화 돌연변이와 동일하다. 본 발명의 화합물은 현행 치료법보다 더욱 효과적이므로 다발성 골수종에, 삶을 바꾸게 되는 방광절제술을 피함으로써 방광암에, 그리고 장래의 출산력을 보존하기를 바라는 환자에 있어서 자궁경부암에 치료적 효용을 갖는다.

상기에 따르면, 본 발명은 치료 유효량 (하기 "투여 및 제약 조성물" 참고)의 화학식 I의 화합물 또는 그의 제약상 허용가능한 염을 앞서 기재한 임의의 질환 또는 장애의 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상체에서의 상기 질환 또는 장애의 예방 또는 치료 방법을 추가로 제공한다. 상기한 임의의 용도에 있어서, 필요한 투약량은 투여 방식, 치료할 특정 상태 및 원하는 효과에 따라 달라질 것이다.

투여 및 제약 조성물

일반적으로, 본 발명의 화합물은 당업계에 공지된 통상의 허용가능한 임의의 방식을 통해서, 단독으로 또는 하나 이상의 치료제와 함께 치료 유효량으로 투여될 것이다. 치료 유효량은 질환의 중증도, 대상체의 연령 및 상대적인 건강상태, 사용하는 화합물의 효능 및 기타 요소에 따라 광범위하게 바뀔 수 있다. 일반적으 로, 약 0.03 내지 2.5 ㎎/체중 ㎏의 일일 투약량에서 전신적으로 만족스러운 결과가 수득되는 것으로 나타난다. 대형 포유류, 예를 들어 인간에서, 일일 투약 지시량은 약 0.5 ㎎ 내지 약 100 ㎎ 범위이며, 편의상 예를 들어 일일 4 회 이하의 분할 용량으로 또는 서방형으로 투여된다. 경구 투여에 적합한 단위 투약형은 약 1 내지 50 ㎎의 활성 성분을 포함한다.

본 발명의 화합물은 임의의 통상적인 경로, 특히 장관으로, 예를 들어 경구로, 예를 들어 정제 또는 캡슐제의 형태로, 또는 비경구로, 예를 들어 주사가능한 용액제 또는 현탁액제의 형태로, 국소적으로, 예를 들어 로션, 겔, 연고 또는 크림의 형태로, 또는 비강제 또는 좌제 형태로 제약 조성물로서 투여될 수 있다. 본 발명의 화합물을 유리 형태 또는 제약상 허용가능한 염 형태로 하나 이상의 제약상 허용가능한 담체 또는 희석제와 함께 포함하는 제약 조성물은 혼합, 과립화 또는 코팅법에 의하여 통상의 방법으로 제조될 수 있다. 예를 들어, 경구 조성물은 활성 성분과 함께 a) 희석제, 예를 들어, 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 만니톨, 소르비톨, 셀룰로오스 및/또는 글리신; b) 윤활제, 예를 들어, 실리카, 탈크, 스테아르산, 그의 마그네슘 또는 칼슘 염 및/또는 폴리에틸렌글리콜; 정제에 있어서는 또한 c) 결합제, 예를 들어, 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 전분 페이스트, 젤라틴, 트라가칸트, 메틸셀룰로오스, 소듐 카르복시메틸셀룰로오스 및/또는 폴리비닐피롤리돈; 경우에 따라 d) 붕해제, 예를 들어, 전분, 아가, 알긴산 또는 그의 나트륨 염, 또는 발포 혼합물; 및/또는 e) 흡수제, 착색제, 향료 및 감미료를 포함하는 정제 또는 젤라틴 캡슐제일 수 있다. 주사가능한 조성물은 등장성 수용액제 또는 수성 현탁액제일 수 있고, 좌제는 지방 에멀션 또는 현탁액제로부터 제조할 수 있다. 조성물은 멸균되고/되거나 보조제, 예컨대 보존제, 안정화제, 습윤화제 또는 유화제, 용액 촉진제, 삼투압 조절용 염 및/또는 완충제를 포함할 수 있다. 또한, 치료적 가치가 있는 기타 물질도 포함할 수 있다. 경피적 적용에 적합한 제형은 본 발명의 화합물의 유효량과 담체를 포함한다. 담체는 숙주의 피부를 통과하는데 도움이 되는 약리학적으로 허용가능한 흡수성 용매를 포함할 수 있다. 예를 들어, 경피적 장치는 지지재, 화합물을 임의로는 담체와 함께 포함하는 저장고, 임의로는 상기 화합물을 숙주의 피부에 조절된 소정의 속도로 장기간에 걸쳐 전달하기 위한 속도 조절 배리어, 및 피부에 장치를 고정하는 수단을 포함하는 붕대 형태이다. 매트릭스 경피 제형 또한 사용할 수 있다. 예를 들어 피부 및 안구에 대한 국소 적용에 적합한 제형은 바람직하게는 당업계에 주지된 수용액제, 연고, 크림 또는 겔이다. 이러한 것들은 가용화제, 안정화제, 삼투성 증강제, 완충제 및 보존제를 포함할 수 있다.

본 발명의 화합물은 치료 유효량으로 하나 이상의 치료제와 함께 (제약 조합물) 투여될 수 있다. 예를 들어, 다른 면역조절성 또는 항-염증성 물질과의 경우, 예를 들어 시클로스포린, 라파마이신 또는 아스코마이신, 또는 그의 면역억제적 유사체, 예를 들어, 시클로스포린 A (CsA), 시클로스포린 G, FK-506, 라파마이신, 또는 그에 상응하는 화합물, 코르티코스테로이드, 시클로포스파미드, 아자티오프린, 메토트렉세이트, 브레퀴나르, 레플루노미드, 미조리빈, 마이코페놀산, 마이코페놀레이트 모페틸, 15-데옥시스페르구알린, 면역억제성 항체, 특히 백혈구 수용체, 예 를 들어, MHC, CD2, CD3, CD4, CD7, CD25, CD28, B7, CD45, CD58 또는 그들의 리간드에 대한 모노클로날 항체, 또는 예컨대 CTLA41g와 같은 기타 면역조절성 화합물과 함께 사용할 때 상승 효과가 발생할 수 있다. 본 발명의 화합물이 다른 요법과 함께 투여되는 경우, 병용-투여되는 화합물의 투약량은 이용하는 병용-약물의 유형, 이용하는 특정 약물, 치료할 상태 등에 따라 물론 달라질 것이다.

본 발명은 또한 제약 조합물, 예를 들어 a) 본원에 개시한 바와 같은 본 발명의 화합물의 유리 형태 또는 제약상 허용가능한 염 형태인 제1제; 및 b) 하나 이상의 병용제를 포함하는 키트를 제공한다. 상기 키트는 투여를 위한 지시사항을 포함할 수 있다.

본원에서 사용되는 바와 같은 "병용-투여" 또는 "조합 투여" 등의 용어는 선택한 치료제의 단일 환자에 대한 투여를 포괄함을 의미하며, 약제들이 반드시 동일한 투여 경로로, 또는 동시에 투여되는 치료 처방을 포함하려는 의도는 아니다.

본원에서 사용되는 바와 같은 "제약 조합물"이라는 용어는 하나를 초과하는 활성 성분을 혼합 또는 조합하여 생성한 산물을 의미하며, 활성 성분들의 고정적 및 비-고정적 조합물 양자 모두를 포함한다. "고정적 조합물"이라는 용어는 활성 성분, 예를 들어 화학식 I의 화합물 및 병용제가 양자 모두 단일체 또는 단일 투약량의 형태로 환자에게 동시에 투여됨을 의미한다. "비-고정적 조합물"은 활성 성분, 예를 들어 화학식 I의 화합물 및 병용제가 양자 모두 별개체로서, 일제히, 동시에 또는 특정의 시간 제한 없이 순차적으로 환자에게 투여됨을 의미하며, 여기서 이와 같은 투여는 환자의 체내에 치료적으로 유효한 수준의 두 화합물을 제공한다. 후자는 칵테일 요법, 예를 들어 3종 이상의 활성 성분의 투여에도 적용된다.

본 발명의 화합물의 제조 방법

본 발명은 또한 본 발명의 화합물의 제조 방법을 포함한다. 기재하는 반응에서, 최종 생성물에 반응성 관능기, 예를 들어 히드록시, 아미노, 이미노, 티오 또는 카르복시기를 원할 경우, 그들이 원치않는 반응에 참여하지 않도록 하기 위해서 그들을 보호하는 것이 필요할 수 있다. 통상의 보호기를 표준 실무에 따라 사용할 수 있으며, 예를 들어 문헌 [T. W. Greene and P. G. M. Wuts in "Protective Groups in Organic Chemistry", John Wiley and Sons, 1991]를 참고한다.

하기의 반응식 I에서와 같이 진행하여 화학식 I의 화합물을 제조할 수 있다:

식 중, n, R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ 및 R₆는 발명의 개요에 정의되어 있다. 화학식 I의 화합물은 적합한 용매 (예를 들어, 1,3-디메틸-2-이미다졸리돈 등)의 존재 하에 화학식 2의 화합물을 화학식 3의 화합물과 반응시켜 제조할 수 있다. 반응은 약 50℃ 내지 약 120℃ 범위의 온도에서 진행되며, 완료되기까지는 12시간까지 걸 릴 수 있다.

화학식 I의 화합물의 상세한 합성예는 아래 실시예에서 찾을 수 있다.

본 발명 화합물의 추가적 제조 방법

본 발명의 화합물은 상기 화합물의 유리 염기 형태를 제약상 허용가능한 무기 또는 유기 산과 반응시켜, 제약상 허용가능한 산 부가염으로서 제조할 수 있다. 다르게는, 본 발명의 화합물의 제약상 허용가능한 염기 부가염은 상기 화합물의 유리산 형태를 제약상 허용가능한 무기 또는 유기 염기와 반응시켜 제조할 수 있다.

다르게는, 본 발명의 화합물의 염 형태는 출발 물질 또는 중간체의 염을 사용하여 제조할 수 있다.

본 발명의 화합물의 유리산 또는 유리 염기 형태는 상응하는 염기 부가염 또는 산 부가염 형태로부터 각각 제조할 수 있다. 예를 들어, 산 부가염 형태의 본 발명의 화합물은 적합한 염기 (예를 들어, 수산화암모늄 용액, 수산화나트륨 등)로 처리하여 상응하는 유리 염기로 전환할 수 있다. 염기 부가염 형태의 본 발명의 화합물은 적합한 산 (예를 들어, 염산 등)으로 처리하여 상응하는 유리산으로 전환할 수 있다.

산화되지 않은 형태의 본 발명의 화합물은 적합한 비활성 유기 용매 (예를 들어, 아세토니트릴, 에탄올, 수성 디옥산 등) 중에서 0 내지 80℃에서 본 발명의 화합물의 N-옥시드을 환원제 (예를 들어, 황, 이산화황, 트리페닐 포스핀, 리튬 보로히드라이드, 소듐 보로히드라이드, 포스포러스 트리클로라이드, 트리브로마이드 등)로 처리하여 제조할 수 있다.

본 발명의 화합물의 프로드러그 유도체는 당업자에게 공지된 방법 (예를 들어, 추가의 상세사항은 문헌 [Saulnier et al., (1994), Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, p. 1985] 참고)으로 제조할 수 있다. 예를 들어, 적당한 프로드러그는 유도되지 않은 본 발명의 화합물을 적합한 카르바밀화제 (예를 들어, 1,1-아실옥시알킬카르바노클로리데이트, 파라-니트로페닐 카보네이트 등)와 반응시켜 제조할 수 있다.

본 발명의 화합물의 보호된 유도체는 당업자에게 공지된 방법으로 제조할 수 있다. 보호기의 생성 및 그들의 제거에 적용가능한 기술에 대한 상세한 설명은 문헌 [T. W. Greene, "Protecting Groups in Organic Chemistry", 3^rd edition, John Wiley and Sons, Inc., 1999]에서 찾을 수 있다.

본 발명의 화합물은 편리하게는 본 발명의 방법 도중 용매화물 (예를 들어, 수화물)로서 제조 또는 형성될 수 있다. 본 발명의 화합물의 수화물은 편리하게는 디옥신, 테트라히드로푸란 또는 메탄올과 같은 유기 용매를 사용하여, 수성/유기 용매 혼합물로부터의 재결정화에 의하여 제조할 수 있다.

본 발명의 화합물은 상기 화합물의 라세미 혼합물을 광학 활성 분해제와 반응시켜 부분입체이성질체 화합물 쌍을 형성하고, 부분입체이성질체들을 분리하고, 광학적으로 순수한 거울상이성질체를 회수하여, 그들의 개별 입체이성질체로서 제조할 수 있다. 거울상이성질체의 분해는 본 발명의 화합물의 공유 부분입체이성질 유도체를 사용하여 수행할 수 있지만, 분리가능한 복합체가 바람직하다 (예를 들 어, 결정성 부분입체이성질 염). 부분입체이성질체는 구별되는 물성 (예를 들어, 융점, 비점, 용해도, 반응성 등)을 가지며, 이러한 차이점을 이용하여 쉽게 분리할 수 있다. 부분입체이성질체는 크로마토그래피에 의하여, 또는 바람직하게는 용해도 차이에 기초하는 분리/분해 기술에 의하여 분리될 수 있다. 이어서 라세미화를 일으키지 않는 임의의 실무적 방법에 의해서 광학적으로 순수한 거울상이성질체를 분해제와 함께 회수한다. 화합물의 라세미 혼합물로부터의 입체이성질체의 분해에 적용가능한 기술에 대한 더욱 상세한 설명은 문헌 [Jean Jacques, Andre Collet, Samuel H. Wilen, "Enantiomers, Racemates and Resolutions", John Wiley And Sons, Inc., 1981]에서 찾을 수 있다.

요약하면, 화학식 I의 화합물은 하기를 포함하는 방법에 의하여 제조할 수 있다:

(a) 반응식 I의 단계; 및

(b) 임의로는 본 발명의 화합물을 제약상 허용가능한 염으로 전환하는 단계;

(c) 임의로는 본 발명의 화합물의 염 형태를 염이 아닌 형태로 전환하는 단계;

(d) 임의로는 본 발명의 화합물의 산화되지 않은 형태를 제약상 허용가능한 N-옥시드로 전환하는 단계;

(e) 임의로는 본 발명의 화합물의 N-옥시드 형태를 그의 산화되지 않은 형태로 전환하는 단계;

(f) 임의로는 본 발명의 화합물의 이성질체 혼합물로부터 개별 이성질체를 분해하는 단계;

(g) 임의로는 유도되지 않은 본 발명의 화합물을 제약상 허용가능한 프로드러그 유도체로 전환하는 단계; 및

(h) 임의로는 본 발명의 화합물의 프로드러그 유도체를 유도되지 않은 형태로 전환하는 단계.

출발 물질의 제조를 특별히 기재하지 않는 한, 상기 화합물은 공지되어 있거나, 당업계에 공지된 방법에 유사하게, 또는 하기 실시예에 개시하는 바와 같이 제조할 수 있다.

당업자는 상기 변형이 본 발명의 화합물의 제조 방법에 대한 예일 뿐, 주지된 기타의 방법도 유사하게 사용될 수 있음을 인식하게 된다.

본 발명에 따른 화학식 I의 화합물의 제조를 예시하는 하기 실시예로 본 발명을 추가로 예시하지만, 여기에 한정하지는 않는다.

실시예 1

2-(3- 디에틸아미노프로필아미노 )-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조 일아미노 )-페닐]-아미드

0℃에서 4-메틸-3-니트로아닐린 (1.00 g, 6.57 m㏖) 및 트리에틸아민 (1.10 ㎖, 7.89 m㏖)의 교반 용액에 3-트리플루오로메틸벤조일 클로라이드 (4.90 g, 31.0 m㏖)를 첨가하고, 혼합물을 1시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 중탄산나트륨 포화 수용액으로 세척하였다. 유기층을 MgSO₄로 건조시키고, 감압 농축시켜 조 생성물을 얻었다. 조 생성물을 MeOH에 용해시키고, 그 용액에 10% Pd/C를 첨가하였다. 반응 혼합물을 수소 하에 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 플레이트로 여과하고, 여과액을 감압 하에 농축시켜 N-(3-아미노-4-메틸페닐)-3-트리플루오로메틸-벤즈아미드를 암회색 고체로서 얻었다.

DMF 중 N-(4-메틸-3-니트로페닐)-3-트리플루오로메틸벤즈아미드 (250 ㎎, 0.85 m㏖), 2-브로모티아졸-5-카르복실산 (177 ㎎, 0.85 m㏖), 및 디이소프로필에틸-아민 (0.59 ㎖, 3.4 m㏖) 교반 용액에 O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N, N' , N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (355 ㎎, 0.93 m㏖)를 첨가하고, 혼합물을 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 10% 티오황산나트륨 수용액으로 세척하였다. 유기층을 MgSO₄로 건조시키고, 감압 농축시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하여 2-브로모티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드를 갈색을 띤 고체로서 얻었다.

2-브로모티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸벤조일-아미노)-페닐]-아미드 (25 ㎎, 52 μmol)를 3-(디에틸아미노)-프로필아민에 용해시키고, 혼합물을 4시간 동안 80℃에서 교반하였다. 조 생성물을 DMSO (1 ㎖)로 희석 하고, 정제용 HPLC로 정제하여 2-(3-디에틸아미노프로필아미노)-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드를 TFA 염 형태로 얻었다: ¹H NMR 400 MHz (DMSO-d ₆ ) δ 9.67 (s, 1H), 9.43 (br, 1H), 8.35 (t, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.26 (d, 1H), 7.96 (d, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.58 (d, 1H), 7.25 (d, 1H), 3.35 (q, 2H), 2.89 (m, 6H), 2.19 (s, 3H), 1.93 (m, 2H), 1.20 (t, 6H); MS m/z 534.4(M + 1).

실시예 2

2-{6-[4-(2- 히드록시에틸 )-피페라진-1-일]-2- 메틸피리미딘 -4- 일아미노 }-티아졸-5- 카르복실산 [2- 메틸 -5-(3- 트리플루오로메틸벤조일아미노 )- 페닐 ]-아미드

0℃에서 DMF 중 메틸 2-아미노티아졸-5-카르복실레이트 (4.90 g, 31.0 m㏖) 및 NaH (광유 중 60% 분산액, 1.36 g, 34.1 m㏖) 현탁액에 DMF 중 4,6-디클로로-2-메틸-피리미딘 (5.05 g, 31.0 m㏖)을 첨가하고, 혼합물을 2시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 10% 티오황산나트륨 수용액으로 세척하였다. 유기층을 MgSO₄로 건조시키고, 감압 농축시켰다. 조 생성물을 MeOH로부터 결정화하여 메틸 2-(6-클로로-2-메틸-피리미딘-4-일아미노)-티아졸-5-카르복실레이 트를 백색 고체로서 얻었다.

MeOH 중 메틸 2-(6-클로로-2-메틸-피리미딘-4-일아미노)-티아졸-5-카르복실레이트 (3.97 g, 14.0 m㏖) 교반 용액에 4 N NaOH (15 ㎖)를 첨가하고, 혼합물을 12시간 동안 60℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 1 N HCl로 중화시키고, 생성된 침전물을 여과하고, MeOH로 세척하여 2-(6-클로로-2-메틸-피리미딘-4-일아미노)-티아졸-5-카르복실산을 백색 고체로서 얻었다.

DMF 중 2-(6-클로로-2-메틸-피리미딘-4-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 (230 ㎎, 0.85 m㏖), N-(3-아미노-4-메틸-페닐)-3-트리플루오로메틸벤즈아미드 (250 ㎎, 0.85 m㏖), 및 디이소프로필에틸아민 (0.59 ㎖, 3.4 m㏖) 용액에 O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (355 ㎎, 0.93 m㏖)를 첨가하고, 혼합물을 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 10% 티오황산나트륨 수용액으로 세척하였다. 유기층을 MgSO₄로 건조시키고, 감압 농축시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하여 2-(6-클로로-2-메틸-피리미딘-4-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드를 백색 고체로서 얻었다.

1,3-디메틸-2-이미다졸리디논 (0.2 ㎖) 중 2-(6-클로로-2-메틸-피리미딘-4-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드 (25 ㎎, 46 μmol) 교반 용액에 1,3-디메틸-2-이미다졸리디논 (0.2 ㎖) 중 과량의 2-피페라진-1-일-에탄올 (100 ㎎)을 첨가하고, 혼합물을 4시간 동안 60 ℃에서 교반하였다. 조 생성물을 DMSO (1 ㎖)로 희석하고, 정제용 HPLC로 정제하여 2-{6-[4-(2-히드록시에틸)-피페라진-1-일]-2-메틸피리미딘-4-일아미노}-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸벤조일아미노)-페닐]-아미드를 TFA 염 형태로 얻었다: ¹H NMR 400 MHz (MeOH-d₄) δ 8.26 (s, 1H), 8.20 (d, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.90 (d, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.74 (t, 1H), 7.55 (d, 1H), 7.31 (d, 1H), 6.20 (br, 1H), 3.93 (dd, 2H), 3.50 (br, 8H), 3.35 (dd, 2H), 2.53 (s, 3H), 2.31 (s, 3H); MS m/z 641.5(M + 1).

실시예 3

2-(2-히드록시-에틸아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1- 일 )-5-트리플루오로메틸-벤조 일아미노 ]-2-메틸-페닐}-아미드

DMF 중 4-메틸-3-니트로아닐린 (259 ㎎, 1.7 m㏖), 3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조산 (514 ㎎, 1.7 m㏖), 및 디이소프로필에틸-아민 (1.19 ㎖, 6.8 m㏖) 교반 용액에 O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N, N' , N' -테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (710 ㎎, 1.9 m㏖)를 첨가하고, 혼합물을 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 10% 티오황산나트륨 수용액으로 세척하였다. 유기층을 MgSO₄로 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 조 생성물을 얻었다. 조 생성물을 MeOH에 용해시키고, 그 용액에 10% Pd/C를 첨가하였다. 반응 혼합물을 수소 하에 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트 플레이트로 여과하고, 여과액을 감압 하에 농축시켜 N-(3-아미노-4-메틸페닐)-3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸벤즈아미드를 얻었다.

DMF 중 N-(3-아미노-4-메틸페닐)-3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸벤즈아미드 (345 ㎎, 0.85 m㏖), 2-브로모티아졸-5-카르복실산 (177 ㎎, 0.85 m㏖), 및 디이소프로필에틸-아민 (0.59 ㎖, 3.4 m㏖) 교반 용액에 O-(7-아자벤조트리아졸-1-일)-N,N, N' , N' -테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트 (355 ㎎, 0.93 m㏖)를 첨가하고, 혼합물을 12시간 동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 10% 티오황산나트륨 수용액으로 세척하였다. 유기층을 MgSO₄로 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 조 생성물을 정제용 HPLC로 정제하여 2-브로모티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸벤조일아미노]-2-메틸페닐}-아미드를 갈색을 띤 고체로서 얻었다.

2-브로모티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸벤조일아미노]-2-메틸페닐}-아미드 (25 ㎎, 42 μmol)를 에탄올아민에 용해시키고, 혼합물을 4시간 동안 80℃에서 교반하였다. 조 생성물을 DMSO (1 ㎖)로 희석하고, 정제용 HPLC로 정제하여 2-(2-히드록시-에틸아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아 미드를 TFA 염 형태로 얻었다: ¹H NMR 400 MHz (MeOH-d₄) δ 7.87 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.51 (d, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.24 (d, 1H), 4.50 (br, 2H), 3.72 (m, 2H), 3.68 (br, 2H), 3.45 (m, 2H), 3.22 (br, 6H), 2.23 (s, 3H), 1.38 (t, 3H); MS m/z 577.5(M + 1).

적당한 출발 물질을 사용하여, 상기 실시예에 기재한 절차를 반복함으로써, 표 1에서 확인되는 바와 같이, 하기의 화학식 I의 화합물을 수득하였다.

검정

본 발명의 화합물을, 모 BaF3 세포에 비하여 BCR-Abl을 발현하는 Ba/F3 세포 (Ba/F3-p210)의 세포 증식을 선택적으로 억제하는 그들의 능력을 측정하기 위하여 검정하였다. 이러한 BCR-Abl 형질전환 세포의 증식을 선택적으로 억제하는 화합물을 야생형 또는 글리벡 내성 환자에서 발견되는 Bcr-abl의 돌연변이형 (돌연변이 G250E, E255V, T315I, F317L 및 M351T)을 발현하는 Ba/F3 세포에 대한 항증식 활성에 대하여 시험하였다.

또한, 상기 화합물을, Abl, Bcr-Abl, FGFR3, PDGFRβ, Flt3 및 b-Raf 키나제를 억제하는 그들의 능력을 측정하기 위하여 검정하였다.

세포성 BCR - Abl 의존성 증식의 억제 ( 고효율법 )

사용한 뮤린 세포주는 BCR-Abl cDNA로 형질전환한 Ba/F3 뮤린 전구-B 세포주이다 (Ba/F3-p210). 이 세포를 페니실린 50 ㎍/㎖, 스트렙토마이신 50 ㎍/㎖ 및 L-글루타민 200 mM로 보충한 RPMI/10% 송아지 태아 혈청 (RPMI/FCS) 중 유지하였다. 형질전환하지 않은 Ba/F3 Ba/F3 세포는, 뮤린 재조합체 IL3를 첨가하여 유사하게 유지하였다.

세포성 BCR - Abl 의존성 증식의 억제

Ba/F3-p210 세포를 웰 당 15,000 개 세포의 밀도로 96 웰 TC 플레이트에 플레이팅하였다. 시험 화합물 (C_max는 ~10 μM)의 2배 순차 희석액 50 ㎕를 각 웰에 첨가하였다 (STI571은 양성 대조군으로서 포함됨). 세포를 37℃, 5% CO₂에서 48시간 동안 인큐베이션한 후, MTT (프로메가(Promega)) 15 ㎕를 각 웰에 첨가하고, 세포를 추가로 5시간 동안 인큐베이션하였다. 570 ㎚에서의 광학 밀도를 분광광도계로 정량화하고, 용량 반응 곡선으로부터, 50% 억제에 필요한 화합물의 농도인 IC₅₀ 값을 결정하였다.

세포 주기 분포에 대한 효과

Ba/F3 및 Ba/F3-p210 세포를 6 웰 TC 플레이트에, 배지 5 ㎖ 중 웰 당 2.5×10⁶ 개 세포로 플레이팅하고, 1 또는 10 μM의 시험 화합물을 첨가하였다 (STI571은 대조군으로서 포함됨). 이어서 세포를 37℃, 5% CO₂에서 24 또는 48시간 동안 인큐베이션하였다. 세포 현탁액 2 ㎖를 PBS로 세척하고, 70% EtOH로 1시간 동안 고정시키고, PBS/EDTA/RNase A로 30분 동안 처리하였다. 요오드화프로피듐 (Cf = 10 ㎍/㎖)을 첨가하고, 형광 강도를 팩스칼리버(FACScalibur)(등록상표) 시스템 (비디 바이오사이언시즈(BD Biosciences))에서 유세포 분석법으로 정량화하였다. 본 발명의 시험 화합물은 Ba/F3-p210 세포에 대한 세포자멸 효과는 나타내었으나, Ba/F3 모세포에서는 세포자멸사를 유도하지 않았다.

세포성 BCR - Abl 자가인산화에 대한 효과

BCR-Abl 자가인산화를 c-abl 특이적 포획 항체 및 항포스포티로신 항체를 사용하여 포획 엘리자(Elisa)로 정량화하였다. Ba/F3-p210 세포를 96 웰 TC 플레이트에 배지 50 ㎕ 중 웰 당 2×10⁵ 개 세포로 플레이팅하였다. 시험 화합물 (C_max는 10 μM)의 2배 순차 희석액 50 ㎕를 각 웰에 첨가하였다 (STI571은 양성 대조군으로 포함됨). 세포를 37℃, 5% CO₂에서 90분 동안 인큐베이션하였다. 이어서 세포를 얼음에서 프로테아제 및 포스파타제 억제제를 포함하는 용해 완충액 (50 mM Tris-HCl, pH 7.4, 150 mM NaCl, 5 mM EDTA, 1 mM EGTA 및 1% NP-40) 150 ㎕로 처리하였다. 세포 용해물 50 ㎕를 항-abl 특이적 항체로 미리 코팅시키고 블로킹한 96 웰 광학플레이트에 첨가하였다. 플레이트를 4℃에서 4시간 동안 인큐베이션하였다. TBS-트윈(Tween) 20 완충액으로 세척한 후, 알칼리-포스파타제 접합된 항-포스포티로신 항체 50 ㎕를 첨가하고, 플레이트를 밤새 4℃에서 추가로 인큐베이션하였다. TBS-트윈 20 완충액으로 세척한 후, 발광성 기질 90 ㎕를 첨가하고, 발광을 액퀘스트(Acquest)(등록상표) 시스템 (몰리큘러 디바이시즈(Molecular Devices))을 사용하여 정량화하였다. BCR-Abl 발현 세포의 증식을 억제하는 본 발명의 시험 화합물은 세포성 BCR-Abl 자가인산화를 용량-의존적 방식으로 억제하였다.

Bcr - abl 의 돌연변이형을 발현하는 세포의 증식에 대한 효과

본 발명의 화합물을 야생형 또는 STI571에 대하여 내성이 부여되거나 민감성이 감소된 BCR-Abl의 돌연변이형 (G250E, E255V, T315I, F317L, M351T)을 발현하는 Ba/F3 세포에 대한 그들의 항증식 효과에 대하여 시험하였다. 돌연변이-BCR-Abl 발현 세포 및 비-형질전환 세포에 대한 이들 화합물의 항증식 효과를 앞서 기재한 바와 같이 시험하였다. 형질전환하지 않은 세포에 대하여 독성이 없는 상기 화합물의 IC₅₀ 값을 앞서 기재한 바와 같이 수득한 용량 반응 곡선으로부터 결정하였다.

FGFR3 (효소 검정)

정제된 FGFR3 (업스테이트(Upstate))를 이용한 키나제 활성 검정을 키나제 완충액 (30 mM Tris-HCl pH 7.5, 15 mM MgCl₂, 4.5 mM MnCl₂, 15 μM Na₃V0₄ 및 50 ㎍/㎖ BSA) 및 기질 (5 ㎍/㎖ 비오틴-폴리-EY(Glu, Tyr) (시아이에스-유에스, 인코퍼레이티드(CIS-US, Inc.)) 및 3 μM ATP) 중 효소 0.25 ㎍/㎖를 포함하는 최종 부피 10 ㎕ 중 실시하였다. 두 가지 용액을 제조하였다: 키나제 완충액 중 FGFR3 효소를 포함하는 제1 용액 5 ㎕를 먼저 384-포맷 프록시플레이트(ProxiPlate)(등록상표) (퍼킨-엘머(Perkin-Elmer))에 분산시킨 후, DMSO에 용해시킨 화합물 50 nL를 첨가하고, 이어서 키나제 완충액 중 기질 (폴리-EY) 및 ATP를 포함하는 제2 용액 5 ㎕를 각 웰에 첨가하였다. 반응을 실온에서 1시간 동안 인큐베이션하고, 30 mM Tris-HCl pH 7.5, 0.5 M KF, 50 mM ETDA, 0.2 ㎎/㎖ BSA, 15 ㎍/㎖ 스트렙트아비딘-XL665 (시아이에스-유에스, 인코퍼레이티드) 및 150 ng/㎖ 크립테이트 접합된 항-포스포티로신 항체 (시아이에스-유에스, 인코퍼레이티드)를 포함하는 HTRF 검출 혼합물 10 ㎕를 첨가하여 중지시켰다. 실온에서 1시간 인큐베이션하여 스트렙트아비딘-비오틴이 상호작용하도록 둔 후, 애널리스트 지티(Analyst GT) (몰리큘러 디바이시즈 코퍼레이션(Molecular Devices Corp.))로 시분해 형광 신호를 판독하였다. 12 가지 농도 (50 μM 내지 0.28 nM의 1:3 희석)에서 각 화합물의 억제 백분율을 선형 회귀 분석하여 IC₅₀ 값을 계산하였다. 이 검정에서, 본 발명의 화합물의 IC₅₀ 값은 10 nM 내지 2 μM 범위였다.

FGFR3 (세포 검정)

본 발명의 화합물을, FGFR3 세포 키나제 활성에 의존적인, 형질전환 Ba/F3-TEL-FGFR3 세포 증식을 억제하는 그들의 능력에 대하여 시험하였다. Ba/F3-TEL-FGFR3를 배양 배지로서 10% 소 태아 혈청을 보충한 RPMI 1640을 이용하여, 현탁액 중 800,000 개까지의 세포/㎖로 배양하였다. 세포를 384-웰 포맷 플레이트에 50 ㎕ 배양 배지 중 5000 개 세포/웰로 분산시켰다. 본 발명의 화합물을 디메틸술폭시드 (DMSO)에 용해 및 희석시켰다. 12 가지 1:3 순차 희석액을 DMSO에 넣어 전형적으로 10 mM 내지 0.05 μM 범위의 농도 구배를 생성하였다. 세포에 희석 화합물 50 nL를 첨가하고, 세포 배양 인큐베이터에서 48시간 동안 인큐베이션하였다. 증식하는 세포에 의해 생기는 환원 환경을 모니터링하는데 사용할 수 있는 알라마르블루(AlamarBlue)(등록상표) (트렉 디아그노스틱 시스템즈(TREK Diagnostic Systems))를 세포에 최종 농도 10%로 첨가하였다. 37℃ 세포 배양 인큐베이터에서 추가로 4시간 인큐베이션한 후, 환원된 알라마르블루 (530 ㎚에서 여기, 580 ㎚에서 방출)로부터의 형광 신호를 애널리스트 지티 (몰리큘러 디바이시즈 코퍼레이션)로 정량화하였다. 12 가지 농도에서의 각 화합물의 억제 백분율을 선형 회귀 분석하여 IC₅₀ 값을 계산하였다.

FLT3 및 PDGFR β (세포 검정)

FLT3 및 PDGFRβ의 세포 활성에 대한 본 발명의 화합물의 효과를, Ba/F3-TEL-FGFR3 대신 Ba/F3-FLT3-ITD 및 Ba/F3-Tel-PDGFRβ를 각각 사용한 것을 제외하고는, FGFR3 세포 활성에 대하여 앞서 기재한 바와 동일한 방법을 사용하여 수행하였다.

b- Raf - 효소 검정

본 발명의 화합물을 b-Raf의 활성을 억제하는 그들의 능력에 대하여 시험하였다. 상기 검정은 벽이 검고 바닥이 투명한 384-웰 맥시소프(MaxiSorp) 플레이트 (눈크(NUNC))에서 수행하였다. 기질인 IκBα를 DPBS에 희석 (1:750)시키고, 15 ㎕를 각 웰에 첨가하였다. 플레이트를 4℃에서 밤새 인큐베이션하고, 엠블라(EMBLA) 플레이트 세척기를 사용하여 TBST (25 mM Tris, pH 8.0, 150 mM NaCl 및 0.05% 트윈-20)로 3 회 세척하였다. 플레이트를 수퍼블록(Superblock) (15 ㎕/웰)으로 3시간 동안 실온에서 블로킹하고, TBST로 3 회 세척하고, 두드려서 건조시켰다. 20 μM ATP (10 ㎕)를 포함하는 검정 완충액에 이어서 100 nl 또는 500 nl의 화합물을 각 웰에 첨가하였다. B-Raf를 검정 완충액에 희석 (1 ㎕를 25 ㎕에)시키고, 희석시킨 b-Raf 10 ㎕를 각 웰에 첨가하였다 (0.4 ㎍/웰). 플레이트를 실온에서 2.5시간 동안 인큐베이션하였다. 플레이트를 TBST로 6 회 세척하여 키나제 반응을 중지시켰다. 포스프-IκBα (Ser32/36) 항체를 수퍼블록에 희석 (1:10,000)시키고, 15 ㎕를 각 웰에 첨가하였다. 플레이트를 4℃에서 밤새 인큐베이션하고, TBST로 6 회 세척하였다. AP-접합시킨 염소-항-마우스 IgG를 수퍼블록에 희석 (1:1,500)시키고, 15 ㎕를 각 웰에 첨가하였다. 플레이트를 실온에서 1시간 동안 인큐베이션하고, TBST로 6 회 세척하였다. 형광 아토포스 에이피(Attophos AP) 기질 (프로메가) 15 ㎕를 각 웰에 첨가하고, 플레이트를 실온에서 15분 동안 인큐베이션하였다. 형광 강도 프로그램(Fluorescence Intensity Program)을 사용하여 액퀘스트 또는 애널리스트 지티로 플레이트를 판독하였다 (여기 455 ㎚, 방출 580 ㎚).

b- Raf - 세포 검정

본 발명의 화합물을 MEK의 인산화를 억제하는 그들의 능력에 대하여 A375 세포에서 시험하였다. A375 세포주 (ATCC)는 인간 흑색종 환자로부터 유래한 것이고, B-Raf 유전자에 V599E 돌연변이가 있다. B-Raf의 돌연변이로 인하여 인산화되는 MEK의 수치가 상승한다. 반융합 내지 융합 A375 세포를 혈청이 없는 배지 중 37℃에서 2시간 동안 상기 화합물과 인큐베이션하였다. 이어서 세포를 냉 PBS로 1 회 세척하고, 1% 트리톤(Triton) X100을 포함하는 용해 완충액으로 용해시켰다. 원심분리 후, 상청액을 SDS-PAGE에 적용한 후, 니트로셀룰로오스 막으로 옮겼다. 이어서 항-포스포-MEK 항체 (ser217/221) (셀 시그널링(Cell Signaling))를 이용하여 상기 막을 웨스턴 블라팅(western blotting)에 적용하였다. 인산화된 MEK의 양은 니트로셀룰로오스 막에서의 포스포-MEK 밴드의 밀도로 모니터링하였다.

업스테이트 키나제프로파일러 ( Upstate KinaseProfiler )(등록상표) - 방사능-효소 필터 결합 검정

본 발명의 화합물을 키나제 패널의 개별 구성원을 억제하는 그들의 능력에 대하여 평가하였다. 다음의 일반적인 프로토콜에 따라, 최종 농도 10 μM에서 화합물을 이중으로 시험하였다. 키나제 완충액 조성물 및 기질은 "업스테이트 키나제프로파일러" 패널에 포함된 여러 키나제마다 다르다는 것을 주의한다. 키나제 완충액 (2.5 ㎕, 1O× - 필요한 경우 MnCl₂ 포함), 활성 키나제 (0.001-0.01 유닛; 2.5 ㎕), 키나제 완충액 중 특정 또는 폴리(Glu4-Tyr) 펩티드 (5-500 μM 또는 0.01 ㎎/㎖) 및 키나제 완충액 (50 μM; 5 ㎕)을 얼음에서 에펜도르프 내에서 혼합하였다. Mg/ATP 믹스 (10 ㎕; 67.5 (또는 33.75) mM MgCl₂, 450 (또는 225) μM ATP 및 1 μCi/㎕[γ-³²P]-ATP (3000 Ci/m㏖))를 첨가하고, 반응물을 약 30℃에서 약 10분 동안 인큐베이션하였다. 2 ㎝ × 2 ㎝ P81 (포스포셀룰로오스, 양성 전하를 띠는 펩티드 기질용) 또는 와트먼 1 호(Whatman No.1) (폴리(Glu4-Tyr)펩티드 기질용) 페이퍼 스퀘어 위에 반응 혼합물을 스포팅 (20 ㎕)하였다. 검정용 스퀘어를 0.75% 인산으로 각 5분씩 4 회 세척하고, 아세톤으로 5분 동안 1 회 세척하였다. 검정용 스퀘어를 섬광 바이알로 옮기고, 섬광 칵테일 5 ㎖를 첨가하고, 펩티드 기질에 대한 ³²P 혼입 (cpm)을 베크먼(Beckman) 섬광 계수기로 정량화하였다. 억제 백분율을 각 반응에 대하여 계산하였다.

유리 형태 또는 제약상 허용가능한 염 형태의 화학식 I의 화합물은, 예를 들어, 본 출원에 기재한 시험관 내 시험에 의해 나타낸 바와 같은 유용한 약리학적 특성을 나타낸다. 예를 들어, 화학식 I의 화합물은 바람직하게는 하기의 하나 이상의 키나제: Abl, Bcr-Abl, FGFR3, PDGFRβ, b-Raf, 및 Flt-3에 대하여 1×10^-10 내지 1×10^-5 M 범위, 바람직하게는 150 nM 미만의 IC₅₀을 나타내었다. 예를 들어:

(i) 2-[6-(4-에틸-피페라진-1-일)-2-메틸-피리미딘-4-일아미노]-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드 (실시예 8)는 야생형, G250E, E255V, T315I, F317L 및 M351T Bcr-abl에 대한 IC₅₀이 각각 5 nM, 2.29 nM, 12 nM, 1.27 μM, 5 nM 및 5 nM이고;

(ⅱ) 2-[6-(4-에틸-피페라진-1-일)-2-메틸-피리미딘-4-일아미노]-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드 (실시예 29)는 야생형 및 T315I Bcr-Abl에 대한 IC₅₀이 각각 8 nM 및 570 nM이고;

(ⅲ) 2-(2-메틸-6-모르폴린-4-일-피리미딘-4-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드 (실시예 28)는 PDGFRβ에 대한 IC₅₀이 5 nM이고;

(ⅳ) 2-[6-(2-히드록시-에틸아미노)-2-메틸-피리미딘-4-일아미노]-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드 (화합물 5)는 Flt-3에 대한 IC₅₀이 41 nM이다.

화학식 I의 화합물은, 10 μM의 농도에서, 바람직하게는 하기의 하나 이상의 키나제: Abl, Bcr-Abl, FGFR3, PDGFRβ, b-Raf, 및 Flt-3에 대하여 50% 초과, 바람직하게는 약 70%를 초과하는 억제 백분율을 나타내었다.

본원에 기재한 실시예 및 실시양태는 단지 예시를 위한 것이며, 그것으로 미루어보아 다양한 변경 및 변화가 당업자에게 제안될 것이고, 그것이 본 출원의 취지 및 범위 그리고 첨부한 청구의 범위의 범주 내에 속하게 될 것임은 물론이다. 본원에서 언급한 모든 공보, 특허, 및 특허 출원은 모든 목적을 위해 본원에 참고로 포함된다.

Claims

삭제
하기 화학식 Ia의 화합물, 또는 그의 제약상 허용가능한 염, 수화물 또는 이성질체.

[화학식 Ia]

식 중:

m은 0 및 1로부터 선택되고;

R₁은 수소, 메틸, 이소프로필, 이미다졸릴-프로필, 피페라지닐-프로필, 피리디닐, 디에틸-아미노-프로필, 히드록시-에틸, 피리미디닐, 모르폴리노-프로필, 페닐, 시클로프로필, 모르폴리노-에틸, 벤질 및 모르폴리노로부터 선택되고; 여기서 R₁의 피리디닐, 이미다졸릴, 피페라지닐 또는 피리미디닐은 메틸, 메틸-아미노, 디메틸-아미노-메틸, 시클로프로필-아미노, 히드록시-에틸-아미노, 디에틸-아미노-프로필-아미노, 피롤리디닐-메틸, 모르폴리노, 모르폴리노-메틸, 피페라지닐 메틸 및 피페라지닐로부터 독립적으로 선택되는 1 내지 3 개의 라디칼로 치환될 수 있으며; 여기서 R₁의 모르폴리노 및 피페라지닐 치환기는 메틸, 히드록시-에틸 및 에틸로부터 선택되는 라디칼로 추가로 치환될 수 있고;

R₂는 수소이고;

R₃는 수소이고;

R₄는 메틸이고;

L은 -NR₅C(O)- 및 -C(O)NR₅-로부터 선택되고;

R₅는 수소이고;

R₁₀은 트리플루오로메틸이고;

R₁₁은 할로; 모르폴리노-메틸; 메틸, 에틸 또는 히드록시에틸로 치환될 수 있는 피페라지닐; 메틸 또는 에틸로 치환될 수 있는 피페라지닐-메틸; 메틸로 치환될 수 있는 이미다졸릴; 피롤리디닐-메톡시; 및 히드록시로 치환될 수 있는 피페리디닐로부터 선택된다.
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제2항에 있어서, 2-(3-디에틸아미노프로필아미노)-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-{6-[4-(2-히드록시에틸)-피페라진-1-일]-2-메틸피리미딘-4-일아미노}-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-(2-히드록시-에틸아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-{6-[4-(2-히드록시-에틸)-피페라진-1-일]-2-메틸-피리미딘-4-일아미노}-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-(3-모르폴린-4-일-프로필아미노)-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-(3-디에틸아미노-프로필아미노)-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-페닐아미노-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-(2-히드록시-에틸아미노)-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드; 2-(3-디에틸아미노-프로필아미노)-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드; 2-(3-모르폴린-4-일-프로필아미노)-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드; 2-[6-(4-에틸-피페라진-1-일)-2-메틸-피리미딘-4-일아미노]-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-(6-시클로프로필아미노-2-메틸-피리미딘-4-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-[6-(2-히드록시-에틸아미노)-2-메틸-피리미딘-4-일아미노]-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-[6-(3-디에틸아미노-프로필아미노)-2-메틸-피리미딘-4-일아미노]-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-(2-메틸-6-모르폴린-4-일-피리미딘-4-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-(2-히드록시-에틸아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-히드록시-피페리딘-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-히드록시-피페리딘-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-(2-모르폴린-4-일-에틸아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-히드록시-피페리딘-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-(2-히드록시-에틸아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-벤질아미노-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-(2-모르폴린-4-일-에틸아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-[6-(2-히드록시-에틸아미노)-2-메틸-피리미딘-4-일아미노]-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-(6-시클로프로필아미노-2-메틸-피리미딘-4-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-(2-메틸-6-모르폴린-4-일-피리미딘-4-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-[6-(4-에틸-피페라진-1-일)-2-메틸-피리미딘-4-일아미노]-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-[6-(3-디에틸아미노-프로필아미노)-2-메틸-피리미딘-4-일아미노]-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-(2-메틸-6-메틸아미노-피리미딘-4-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-[6-(2-히드록시-에틸아미노)-2-메틸-피리미딘-4-일아미노]-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드; 2-(6-시클로프로필아미노-2-메틸-피리미딘-4-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드; 2-(2-메틸-6-모르폴린-4-일-피리미딘-4-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드; 2-[6-(4-에틸-피페라진-1-일)-2-메틸-피리미딘-4-일아미노]-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드; 2-[6-(3-디에틸아미노-프로필아미노)-2-메틸-피리미딘-4-일아미노]-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 {5-[4-(4-에틸-피페라진-1-일메틸)-3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-메틸아미노-티아졸-5-카르복실산 {5-[4-(4-에틸-피페라진-1-일메틸)-3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-아미노-티아졸-5-카르복실산 {5-[4-(4-에틸-피페라진-1-일메틸)-3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[4-(4-에틸-피페라진-1-일메틸)-3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(4-모르폴린-4-일메틸-3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일)-페닐]-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(4-피페라진-1-일메틸-3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일)-페닐]-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[4-(4-메틸-피페라진-1-일메틸)-3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일]-페닐}-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1-일)-5-트리플루오로메틸-페닐카르바모일]-페닐}-아미드; 2-메틸아미노-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[4-(4-메틸-피페라진-1-일메틸)-3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일]-페닐}-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(4-피페라진-1-일메틸-3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일)-페닐]-아미드; 2-메틸아미노-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(4-피페라진-1-일메틸-3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일)-페닐]-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(4-모르폴린-4-일메틸-3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일)-페닐]-아미드; 2-메틸아미노-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(4-모르폴린-4-일메틸-3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일)-페닐]-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 (5-{[1-tert-부틸-5-(4-메틸-피페라진-1-일메틸)-1H-피라졸-3-카르보닐]-아미노}-2-메틸-페닐)-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드; 2-메틸아미노-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1-일)-5-트리플루오로메틸-페닐카르바모일]-페닐}-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[4-(4-메틸-피페라진-1-일메틸)-3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일]-페닐}-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 {5-[4-(4-에틸-피페라진-1-일메틸)-3-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 (5-{3-[4-(2-히드록시-에틸)-피페라진-1-일]-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노}-2-메틸-페닐)-아미드; 2-(2-모르폴린-4-일-에틸아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[(5-tert-부틸-티오펜-2-카르보닐)-아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[(5-tert-부틸-티오펜-2-카르보닐)-아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[(5-tert-부틸-2-메틸-2H-피라졸-3-카르보닐)-아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-{5-[4-(2-히드록시-에틸)-피페라진-1-일]-피리딘-2-일아미노}-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 (5-{3-[4-(2-히드록시-에틸)-피페라진-1-일]-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노}-2-메틸-페닐)-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[3-(4-에틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일)-페닐]-아미드; 2-(피리딘-3-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일)-페닐]-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일)-페닐]-아미드; 2-(3-이미다졸-1-일-프로필아미노)-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일)-페닐]-아미드; 2-(2-모르폴린-4-일-에틸아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[(5-tert-부틸-2-메틸-2H-피라졸-3-카르보닐)-아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 [5-(4-클로로-3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-2-메틸-페닐]-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[(1-tert-부틸-5-메틸-1H-피라졸-3-카르보닐)-아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(피롤리딘-2-일메톡시)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-피페라진-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드; 2-(6-메틸-피리딘-3-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일)-페닐]-아미드; 2-(2-모르폴린-4-일-에틸아미노)-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일)-페닐]-아미드; 2-이소프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일)-페닐]-아미드; 2-[3-(4-메틸-피페라진-1-일)-프로필아미노]-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-페닐카르바모일)-페닐]-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(4-피페라진-1-일메틸-3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-(피리딘-2-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {5-[4-(4-에틸-피페라진-1-일메틸)-3-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-2-메틸-페닐}-아미드; 2-시클로프로필아미노-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(4-모르폴린-4-일메틸-3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-{6-[4-(2-히드록시-에틸)-피페라진-1-일]-2-메틸-피리미딘-4-일아미노}-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-[6-(4-메틸-피페라진-1-일)-피리미딘-4-일아미노]-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-{6-[4-(2-히드록시-에틸)-피페라진-1-일]-피리미딘-4-일아미노}-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 2-[2-메틸-6-(4-메틸-피페라진-1-일)-피리미딘-4-일아미노]-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드; 및 2-{4-[4-(2-히드록시-에틸)-피페라진-1-일]-피리딘-2-일아미노}-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드로부터 선택되는 화합물.
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2-[6-(4-에틸-피페라진-1-일)-2-메틸-피리미딘-4-일아미노]-티아졸-5-카르복실산 [2-메틸-5-(3-트리플루오로메틸-벤조일아미노)-페닐]-아미드, 2-[6-(4-에틸-피페라진-1-일)-2-메틸-피리미딘-4-일아미노]-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드, 2-(2-메틸-6-모르폴린-4-일-피리미딘-4-일아미노)-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드, 또는 2-[6-(2-히드록시-에틸아미노)-2-메틸-피리미딘-4-일아미노]-티아졸-5-카르복실산 {2-메틸-5-[3-(4-메틸-이미다졸-1-일)-5-트리플루오로메틸-벤조일아미노]-페닐}-아미드를 제약상 허용가능한 부형제와 함께 포함하는, 만성 골수성 백혈병의 치료를 위한 제약 조성물.
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