JP2009503073A - タンパク質キナーゼ阻害剤としての５−置換チアゾール−２−イルアミノ化合物および組成物 - Google Patents

Abstract

本発明は、式Ｉ
【化１】

で示される５−置換チアゾール−２−イルアミノ化合物、このような化合物を含む医薬組成物および異常なまたは脱制御されたキナーゼ活性と関連する疾患または障害、特にＡｂｌ、Ａｕｒｏｒａ−Ａ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、Ｂｍｘ、ＣＤＫ１／サイクリンＢ、ＣＨＫ２、Ｆｅｓ、ＦＧＦＲ３、Ｆｌｔ３、ＧＳＫ３β、ＪＮＫ１α１、Ｌｃｋ、ＭＫＫ４およびＴｒｋＢキナーゼの異常な活性化が関与する疾患または障害の処置または予防におけるこのような化合物の使用を提供する。

Description

関連出願の相互参照
本願は、２００５年８月２日出願の米国仮特許出願６０／７０４，９７６の優先権の利益を主張する。これらの出願の全部の記載は、引用により、それらの全体として、かつすべての目的に関して、本出願に包含される。

技術分野
本発明は、新規クラスの化合物、このような化合物を含む医薬組成物および異常なまたは脱制御されたキナーゼ活性と関連する疾患または障害、特にＡｂｌ、Ａｕｒｏｒａ−Ａ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、Ｂｍｘ、ＣＤＫ１／サイクリンＢ、ＣＨＫ２、Ｆｅｓ、ＦＧＦＲ３、Ｆｌｔ３、ＧＳＫ３β、ＪＮＫ１α１、Ｌｃｋ、ＭＫＫ４およびＴｒｋＢキナーゼの異常な活性化が関与する疾患または障害の処置または予防におけるこのような化合物の使用法を提供する。

背景技術
タンパク質キナーゼは、広範囲の細胞過程の制御ならびに細胞機能の制御の維持の中心的役割を有する、タンパク質の大きなファミリーを代表する。これらのキナーゼの部分的、非限定的リストは下記を含む：受容体チロシンキナーゼ、例えば、血小板由来増殖因子受容体キナーゼ（ＰＤＧＦ−Ｒ）、神経増殖因子受容体、ｔｒｋＢ、Ｍｅｔ、および繊維芽細胞増殖因子受容体、ＦＧＦＲ３；非受容体チロシンキナーゼ、例えば、Ａｂｌおよび融合キナーゼＢＣＲ−Ａｂｌ；ならびにセリン／スレオニンキナーゼ、例えばｂ−ＲＡＦ、ＳＧＫ、ＭＢＣＲ−Ａｂｌ、Ｌｃｋ、Ｃｓｋ、Ｆｅｓ、Ｂｍｘおよびｃ−ｓｒｃ；ならびにセリン／スレオニンキナーゼ例えば、ｂ−ＲＡＦ、ｃ−ＲＡＦ、ｓｇｋ、ＭＡＰキナーゼ（例えば、ＭＫＫ４、ＭＫＫ６、など）ならびにＳＡＰＫ２α、ＳＡＰＫ２βおよびＳＡＰＫ３。異常なキナーゼ活性は良性および悪性増殖性障害ならびに免疫系および神経系の不適切な活性化に由来する疾患を含む、多くの疾患状態で観察されている。

本発明の新規化合物は、１種またはそれ以上のタンパク質キナーゼを阻害し、故に、キナーゼ−関連疾患の処置に有用であると期待される。

発明の概要
第１の局面において、本発明は、式Ｉ：

［式中：
ｎは０、１、２および３から選択され；
ｍは０および１から選択され；
Ｒ_１はハロ、シアノ、ヒドロキシ、ニトロ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、ハロ−置換−Ｃ_１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ_１−６アルコキシ、−Ｓ（Ｏ）_０−２Ｒ_５、−ＮＲ_５Ｒ_５、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ_５Ｒ_６、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ_５Ｒ_６、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ_５ＸＯＲ_５、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ_５ＸＮＲ_５Ｒ_５、−ＯＲ_６、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_５、−ＮＲ_５Ｃ（Ｏ）Ｒ_６から選択され（ここで、各Ｒ_５は独立して水素およびＣ_１−６アルキルから選択され；そしてＲ_６はＣ_６−１０アリール−Ｃ_０−４アルキル、Ｃ_１−１０ヘテロアリール−Ｃ_０−４アルキル、Ｃ_３−１２シクロアルキル−Ｃ_０−４アルキルおよびＣ_３−８ヘテロシクロアルキル−Ｃ_０−４アルキルから選択されるか；またはｎが２のとき、２個の隣接するＲ_１ラジカルは両方が結合している原子と一緒に環Ａが所望により置換されていてもよいナフチル（例えば、下記表１の化合物５９）であるようなフェニルを形成し；
Ｒ_２は水素およびメチルであり；
Ｒ_３はハロであり；
Ｒ_４は水素、ハロゲンおよびＣ_１−６アルキルから選択されるか；またはＲ_３およびＲ_４はＲ_３およびＲ_４が結合している原子と一緒にフェニルを形成し；そしてフェニル環Ａは所望により３個までの＝Ｃ−基が＝Ｎ−で置換されていてもよい］
で示される化合物ならびにそれらのＮ−オキシド誘導体、プロドラッグ誘導体、保護された誘導体、個々の異性体および異性体の混合物；ならびにこのような化合物の薬学的に許容される塩および溶媒和物（例えば、水和物）を提供する。

第２の局面において、本発明は、式Ｉの化合物またはそれらのＮ−オキシド誘導体、個々の異性体および異性体の混合物；またはそれらの薬学的に許容される塩を１種またはそれ以上の適当な賦形剤と一緒に含む医薬組成物を提供する。

第３の局面において、本発明は、キナーゼ活性、特にＡｂｌ、Ａｕｒｏｒａ−Ａ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、Ｂｍｘ、ＣＤＫ１／サイクリンＢ、ＣＨＫ２、Ｆｅｓ、ＦＧＦＲ３、Ｆｌｔ３、ＧＳＫ３β、ＪＮＫ１α１、Ｌｃｋ、ＭＫＫ４および／またはＴｒｋＢ活性の阻害が疾患の病状および／または総体症状を予防、阻止または改善できる動物の疾患の処置法であって、治療有効量の式Ｉの化合物またはそれらのＮ−オキシド誘導体、個々の異性体および異性体の混合物またはそれらの薬学的に許容される塩を動物に投与すること含む方法を提供する。

第４の局面において、本発明は、キナーゼ活性、特にＡｂｌ、Ａｕｒｏｒａ−Ａ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、Ｂｍｘ、ＣＤＫ１／サイクリンＢ、ＣＨＫ２、Ｆｅｓ、ＦＧＦＲ３、Ｆｌｔ３、ＧＳＫ３β、ＪＮＫ１α１、Ｌｃｋ、ＭＫＫ４および／またはＴｒｋＢ活性が疾患の病状および／または総体症状に関与する動物の疾患を処置するための薬剤の製造における式Ｉの化合物の使用を提供する。

第５の局面において、本発明は、式Ｉの化合物ならびにそれらのＮ−オキシド誘導体、プロドラッグ誘導体、保護された誘導体、個々の異性体および異性体の混合物ならびにそれらの薬学的に許容される塩の製造法を提供する。

発明の詳細な説明
定義
基および他の基、例えばハロ置換アルキルおよびアルコキシの構造成分としての“アルキル”は、直鎖または分岐鎖であり得る。Ｃ_１−４−アルコキシはメトキシ、エトキシなどを含む。ハロ置換アルキルはトリフルオロメチル、ペンタフルオロエチルなどを含む。

“アリール”は６から１０個の環炭素原子を含む単環式または縮合二環式芳香環集合体を意味する。例えば、アリールはフェニルまたはナフチル、好ましくはフェニルであり得る。“アリーレン”はアリール基から生じる二価のラジカルを意味する。

“ヘテロアリール”は１個またはそれ以上の環員がヘテロ原子であるときの上記アリールを定義するとおりのものである。例えば、本出願において使用されているＣ_１−１０ヘテロアリールはピリジル、インドリル、インダゾリル、キノキサリニル、キノリニル、ベンゾフラニル、ベンゾピラニル、ベンゾチオピラニル、ベンゾ［１，３］ジオキソール、イミダゾリル、ベンゾ−イミダゾリル、ピリミジニル、フラニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピラゾリル、チエニルなどを含む。

“シクロアルキル”は示された環原子の数を含む飽和または部分的に不飽和、単環式、縮合二環式または架橋多環式環集合体を意味する。例えば、Ｃ_３−１０シクロアルキルはシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシルなどを含む。

“ヘテロシクロアルキル”は本明細書に定義のとおりのシクロアルキルであるが、ただし、示された１個またはそれ以上の環炭素は−Ｏ−、−Ｎ＝、−ＮＲ−、−Ｃ（Ｏ）−、−Ｓ−、−Ｓ（Ｏ）−または−Ｓ（Ｏ）_２−から選択される部分により置換されており、ここでＲは水素、Ｃ_１−４アルキルまたは窒素を保護する基である。例えば、本発明の化合物を記載するために本明細書で使用されるＣ_３−８ヘテロシクロアルキルはモルホリノ、ピロリジニル、ピロリジニル−２−オン、ピペラジニル、ピペリジニル、ピペリジニロン（piperidinylone）、１，４−ジオキサ−８−アザ−スピロ［４．５］デカ−８−イルなどを含む。

“ハロゲン”(またはハロ)は好ましくはクロロまたはフルオロを示すが、またブロモまたはヨードであり得る。

“キナーゼパネル”はＡｂｌ（ヒト）、Ａｂｌ（Ｔ３１５Ｉ）、ＪＡＫ２、ＪＡＫ３、ＡＬＫ、ＪＮＫ１α１、ＡＬＫ４、ＫＤＲ、Ａｕｒｏｒａ−Ａ、Ｌｃｋ、Ｂｌｋ、ＭＡＰＫ１、Ｂｍｘ、ＭＡＰＫＡＰ−Ｋ２、ＢＲＫ、ＭＥＫ１、ＣａＭＫＩＩ（ラット）、Ｍｅｔ、ＣＤＫ１／サイクリンＢ、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ＣＨＫ２、ＰＡＫ２、ＣＫ１、ＰＤＧＦＲα、ＣＫ２、ＰＤＫ１、ｃ−ｋｉｔ、Ｐｉｍ−２、ｃ−ＲＡＦ、ＰＫＡ（ｈ）、ＣＳＫ、ＰＫＢα、ｃＳｒｃ、ＰＫＣα、ＤＹＲＫ２、Ｐｌｋ３、ＥＧＦＲ、ＲＯＣＫ−Ｉ、Ｆｅｓ、Ｒｏｎ、ＦＧＦＲ３、Ｒｏｓ、Ｆｌｔ３、ＳＡＰＫ２α、Ｆｍｓ、ＳＧＫ、Ｆｙｎ、ＳＩＫ、ＧＳＫ３β、Ｓｙｋ、ＩＧＦ−１Ｒ、Ｔｉｅ−２、ＩＫＫβ、ＴｒＫＢ、ＩＲ、ＷＮＫ３、ＩＲＡＫ４、ＺＡＰ−７０、ＩＴＫ、ＡＭＰＫ（ラット）、ＬＩＭＫ１、Ｒｓｋ２、Ａｘｌ、ＬＫＢ１、ＳＡＰＫ２β、ＢｒＳＫ２、Ｌｙｎ（ｈ）、ＳＡＰＫ３、ＢＴＫ、ＭＡＰＫＡＰ−Ｋ３、ＳＡＰＫ４、ＣａＭＫＩＶ、ＭＡＲＫ１、Ｓｎｋ、ＣＤＫ２／サイクリンＡ、ＭＩＮＫ、ＳＲＰＫ１、ＣＤＫ３／サイクリンＥ、ＭＫＫ４（ｍ）、ＴＡＫ１、ＣＤＫ５／ｐ２５、ＭＫＫ６（ｈ）、ＴＢＫ１、ＣＤＫ６／サイクリンＤ３、ＭＬＣＫ、ＴｒｋＡ、ＣＤＫ７／サイクリンＨ／ＭＡＴ１、ＭＲＣＫβ、ＴＳＳＫ１、ＣＨＫ１、ＭＳＫ１、Ｙｅｓ、ＣＫ１ｄ、ＭＳＴ２、ＺＩＰＫ、ｃ−Ｋｉｔ（Ｄ８１６Ｖ）、ＭｕＳＫ、ＤＡＰＫ２、ＮＥＫ２、ＤＤＲ２、ＮＥＫ６、ＤＭＰＫ、ＰＡＫ４、ＤＲＡＫ１、ＰＡＲ−１Ｂα、ＥｐｈＡ１、ＰＤＧＦＲβ、ＥｐｈＡ２、Ｐｉｍ−１、ＥｐｈＡ５、ＰＫＢβ、ＥｐｈＢ２、ＰＫＣβＩ、ＥｐｈＢ４、ＰＫＣδ、ＦＧＦＲ１、ＰＫＣη、ＦＧＦＲ２、ＰＫＣθ、ＦＧＦＲ４、ＰＫＤ２、Ｆｇｒ、ＰＫＧ１β、Ｆｌｔ１、ＰＲＫ２、Ｈｃｋ、ＰＹＫ２、ＨＩＰＫ２、Ｒｅｔ、ＩＫＫα、ＲＩＰＫ２、ＩＲＲ、ＲＯＣＫ−ＩＩ（ヒト）、ＪＮＫ２α２、Ｒｓｅ、ＪＮＫ３、Ｒｓｋ１（ｈ）、ＰＩ３Ｋγ、ＰＩ３ＫδおよびＰＩ３−Ｋβを含むキナーゼのリストである。本発明の化合物はキナーゼパネル（野生型および／またはその変異）に対してスクリーニングされ、該パネルメンバーの少なくとも１つの活性を阻害する。

“ＢＣＲ−Ａｂｌの変異型”は野生型配列からの１個または複数のアミノ酸変化を意味する。ＢＣＲ−ＡＢＬの変異型は、タンパク質と阻害剤（例えば、Ｇｌｅｅｖｅｃ、など）との重要な接点を乱すこと、しばしば、不活性から活性状態へ、すなわちＢＣＲ−ＡＢＬとＧｌｅｅｖｅｃが結合できない構造への変化を誘導することにより作用する。臨床サンプルの分析から、耐性表現型と関連して見られる変異形のレパートリーは、ゆっくりであるが時間と共に容赦なく増加し続ける。変異は４つの主な領域に集中するようである。変異の第１の群（Ｇ２５０Ｅ、Ｑ２５２Ｒ、Ｙ２５３Ｆ／Ｈ、Ｅ２５５Ｋ／Ｖ）はＡＴＰに対するリン酸結合ループ（Ｐループとしても既知）を形成するアミノ酸を含む。第２の群（Ｖ２８９Ａ、Ｆ３１１Ｌ、Ｔ３１５Ｉ、Ｆ３１７Ｌ）はＧｌｅｅｖｅｃ結合部位において見いだすことができ、直接、水素結合またはファンデルワールス相互作用を介して阻害剤と相互作用できる。変異の第３の群（Ｍ３５１Ｔ、Ｅ３５５Ｇ）は触媒ドメインの近くに集中する。変異の第４の群（Ｈ３９６Ｒ／Ｐ）はキナーゼ活性化／非活性化を調節する分子スイッチである構造である活性ループに位置する。ＣＭＬおよびＡＬＬ患者で検出されるＧｌｅｅｖｅｃ耐性と関連のあるＢＣＲ−ＡＢＬ点変異は：Ｍ２２４Ｖ、Ｌ２４８Ｖ、Ｇ２５０Ｅ、Ｇ２５０Ｒ、Ｑ２５２Ｒ、Ｑ２５２Ｈ、Ｙ２５３Ｈ、Ｙ２５３Ｆ、Ｅ２５５Ｋ、Ｅ２５５Ｖ、Ｄ２７６Ｇ、Ｔ２７７Ａ、Ｖ２８９Ａ、Ｆ３１１Ｌ、Ｔ３１５Ｉ、Ｔ３１５Ｎ、Ｆ３１７Ｌ、Ｍ３４３Ｔ、Ｍ３１５Ｔ、Ｅ３５５Ｇ、Ｆ３５９Ｖ、Ｆ３５９Ａ、Ｖ３７９Ｉ、Ｆ３８２Ｌ、Ｌ３８７Ｍ、Ｌ３８７Ｆ、Ｈ３９６Ｐ、Ｈ３９６Ｒ、Ａ３９７Ｐ、Ｓ４１７Ｙ、Ｅ４５９Ｋ、およびＦ４８６Ｓ（一文字表記により示されるアミノ酸領域は、ＧｅｎＢａｎｋ配列、受入番号ＡＡＢ６０３９４に対するものであり、ＡＢＬ型１ａ；Martinelli et al., Haematologica/The Hematology Journal, 2005, April; 90-4に対応する）を含む。特に明記しない限り、Ｂｃｒ−Ａｂｌは本酵素の野生型および変異型を意味する。

“処置”、“処置し”および“処置する”は、疾患および／または附随する症状を軽減するまたは無くす方法を意味する。

好ましい態様の記載
融合タンパク質ＢＣＲ−ＡｂｌはＡｂｌ癌原遺伝子とＢｃｒ遺伝子を融合した相互転座の結果である。ＢＣＲ−ＡｂｌはＢ細胞を形質転換させ、細胞分裂活性を増加させる。この増加はアポトーシスに対する感度の減少、ならびにＣＭＬ前駆細胞の接着およびホーミングの変化をもたらす。本発明は、キナーゼ関連疾患、特にＡｂｌ、Ａｕｒｏｒａ−Ａ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、Ｂｍｘ、ＣＤＫ１／サイクリンＢ、ＣＨＫ２、Ｆｅｓ、ＦＧＦＲ３、Ｆｌｔ３、ＧＳＫ３β、ＪＮＫ１α１、Ｌｃｋ、ＭＫＫ４およびＴｒｋＢキナーゼ関連疾患の処置のための化合物、組成物ならびに方法を提供する。例えば、白血病およびＢＣＲ−Ａｂｌに関連する他の増殖疾患は野生型およびＢｃｒ−Ａｂｌの変異型の阻害を介して処置され得る。

ある態様において、式Ｉの化合物に関して、環Ａはフェニル、ピリジニルおよびナフチル（Ｒ_１の２個のラジカルが結合し、環Ａに融合したフェニル環を形成しているとき、ナフチルが創造される）から選択され；ｍは０であり；Ｒ_３はハロであり、そしてＲ_４は水素である。

別の態様において、Ｒ_１はメチル、ヒドロキシ、メトキシ、クロロ、フルオロ、ブロモ、カルボキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、メチル−スルファニル、トリフルオロメトキシ、トリフルオロメチル、メチル−カルボニル、エトキシ−カルボニル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ_６、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ_２）_２ＯＣＨ_３、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ＯＣＨ_３、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ_３）（ＣＨ_２）_２ＯＣＨ_３、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ_２）_２ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ_２）_２Ｎ（ＣＨ_３）_２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ_２）_２Ｎ（Ｃ_２Ｈ_５）_２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ_３、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ_６、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_３および−ＯＲ_６から選択される（ここで、Ｒ_６はフェニル、モルホリノ−エチル、ピリジニルおよびピロリジニル−エチルから選択される）。

本発明の好ましい化合物は（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−ｐ−トリル−アミン；４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−フェノール；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−（４−メトキシ−フェニル）−アミン；４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−安息香酸；４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−Ｎ−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−ベンズアミド；４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−Ｎ−（２−メトキシ−エチル）−ベンズアミド；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−［４−（１−メチルアミノ−ビニル）−フェニル］−アミン；３−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−安息香酸；Ｎ−［４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンズアミド；Ｎ−［４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−フェニル］−アセトアミド；３−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−Ｎ−（２−メトキシ−エチル）−ベンズアミド；３−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−Ｎ−メチル−ベンズアミド；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−［４−（ピリジン−４−イルオキシ）−フェニル］−アミン；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−（４−クロロ−フェニル）−アミン；ベンゾチアゾル−２−イル−（４−フルオロ−フェニル）−アミン；４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エチル）−ベンズアミド；４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−Ｎ−（２−ジメチルアミノ−エチル）−ベンズアミド；４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−Ｎ−（２−ジエチルアミノ−エチル）−ベンズアミド；Ｎ−（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−ベンズアミド；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−（３−フルオロ−フェニル）−アミン；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−アミン；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−（３−メトキシ−フェニル）−アミン；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−ｍ−トリル−アミン；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−ピリジン−２−イル−アミン；Ｎ−（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−ベンゼン−１，４−ジアミン；１−［４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−フェニル］−エタノン；４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−安息香酸エチルエステル；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−ピリジン−４−イル−アミン；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−ピリジン−３−イル−アミン；Ｎ−（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−ベンズアミド；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−アミン；３−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−安息香酸エチルエステル；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−フェニル−アミン；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−（２−メトキシ−フェニル）−アミン；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−（４−フルオロ−フェニル）−アミン；（５−クロロ−チアゾル−２−イル）−（４−フルオロ−フェニル）−アミン；（４−フルオロ−フェニル）−（５−ヨード−チアゾル−２−イル）−アミン；４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−ベンゾニトリル；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−ｏ−トリル−アミン；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−ナフタレン−１−イル−アミン；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−（２−フルオロ−フェニル）−アミン；３−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−ベンゾニトリル；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−（３−メチルスルファニル−フェニル）−アミン；（４−ブロモ−フェニル）−（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−アミン；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−（４−フェノキシ−フェニル）−アミン；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−（４−ニトロ−フェニル）−アミン；４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−Ｎ−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ベンズアミド；４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−Ｎ−（２−メトキシ−１−メチル−エチル）−ベンズアミド；および４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−Ｎ−（２−メトキシ−エチル）−Ｎ−メチル−ベンズアミドから選択される。

本発明のさらなる好ましい化合物は下記実施例および表１において記載されている。

薬理学および有用性
本発明の化合物は、キナーゼの活性を調節し、それ自体、キナーゼがその疾患の病状および／または総体症状に関与する疾患または障害の処置に有用である。本明細書に記載の化合物および組成物ならびに本明細書に記載の方法で有用である薬剤により阻害されるキナーゼの例は、限定しないが、Ａｂｌ、Ａｕｒｏｒａ−Ａ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ（野生型および変異型）、Ｂｍｘ、ＣＤＫ１／サイクリンＢ、ＣＨＫ２、Ｆｅｓ、ＦＧＦＲ３、Ｆｌｔ３、ＧＳＫ３β、ＪＮＫ１α１、Ｌｃｋ、ＭＫＫ４およびＴｒｋＢを含む。

アベルソンチロシンキナーゼ(すなわちＡｂｌ、ｃ−Ａｂｌ)は、細胞サイクルの制御、遺伝毒性ストレスに対する細胞応答、およびインテグリンシグナル伝達を介した細胞環境についての情報伝達に関与する。全体として、Ａｂｌタンパク質は、様々な細胞外および細胞内供給源からのシグナルを統合し、細胞サイクルおよびアポトーシスに関する決定に影響を与える、細胞性モジュールとして複雑な役割を果たしているように見える。アベルソンチロシンキナーゼは、脱制御されたチロシンキナーゼ活性を伴うキメラ融合体(オンコプロテイン)ＢＣＲ−Ａｂｌまたはｖ−Ａｂｌのようなサブタイプ誘導体を含む。ＢＣＲ−Ａｂｌは、９５％の慢性骨髄性(myelogenous)白血病(ＣＭＬ)および１０％の急性リンパ性白血病の病因において重要である。ＳＴＩ５７１(Gleevec)は発癌性ＢＣＲ−Ａｂｌチロシンキナーゼの阻害剤であり、慢性骨髄性(myeloid)白血病(ＣＭＬ)の処置に使用されている。しかしながら、ＣＭＬの急性転化期にある患者の幾分かは、ＢＣＲ−Ａｂｌキナーゼの変異により、ＳＴＩ−５７１に耐性である。２２を超える変異が今日までに報告されており、最も一般的なのはＧ２５０Ｅ、Ｅ２５５Ｖ、Ｔ３１５Ｉ、Ｆ３１７ＬおよびＭ３５１Ｔである。

本発明の化合物は、ａｂｌキナーゼ、とりわけｖ−ａｂｌキナーゼを阻害する。本発明の化合物はまた野生型ＢＣＲ−ＡｂｌキナーゼおよびＢＣＲ−Ａｂｌキナーゼの変異を阻害し、故に、白血病(とりわけアポトーシス作用の機構が見られるとき、とりわけ慢性骨髄性(myeloid)白血病および急性リンパ芽球性白血病)のようなＢｃｒ−ａｂｌ−陽性癌および腫瘍疾患の処置に適当であり、また、白血病性幹細胞のサブグループにおける効果を示し、ならびにこれらの細胞を、該細胞を摘出した後(例えば、骨髄摘出)インビトロで精製し、それらが癌細胞から浄化された後細胞を再移植する(例えば、精製骨髄細胞の再移植)可能性がある。

タンパク質キナーゼのあるファミリーは、Ｎｉｍａ関連キナーゼ（Ｎｅｋ）２、Ｐｏｌｏ様キナーゼ（Ｐｌｋ）１、およびＡｕｒｏｒａキナーゼのように、中心体および紡錘体機能の調節に関連している。Ａｕｒｏｒａキナーゼは、細胞分裂後に不適切な倍数性（ｉｐｌ）を示す変異体についての酵母スクリーニングにおいて最初に発見された。ショウジョウバエにおいて、Ａｕｒｏｒａキナーゼの変異体は中心体分離を阻害し、それにより単極紡錘体となることが見いだされた。哺乳類において、Ａｕｒｏｒａ Ａ、ＢおよびＣのＡｕｒｏｒａキナーゼの３種の既知の異性体がある。Ａｕｒｏｒａ ＡおよびＢは至るところに発現しているが、一方Ａｕｒｏｒａ Ｃは精巣において優勢的に発現することが示され、可能性のある役割が減数分裂であることを示唆する。Ａｕｒｏｒａ ＡはＳの後半およびＧ２の前半からＭ相にわたって中心体および紡錘体極に位置する。Ａｕｒｏｒａ ＡはＧ２／Ｍ移行で、Ａｕｒｏｒａ Ａを紡錘体に標的化させるＴＰＸ２に結合し、活性化される。Ａｕｒｏｒａ Ａは中心体成熟および紡錘体集合中のヒストンＨ３のセリン１０をリン酸化できる。Ａｕｒｏｒａ Ｂは有糸分裂中にセントロメアから紡錘体ミッドゾーン（midzone）に移動する染色体パッセンジャータンパク質である。Ａｕｒｏｒａ Ｂは後期の後半の中心紡錘体ならびに終期および細胞質分裂中は中心体に位置する。Ａｕｒｏｒａ Ｂは染色体凝縮および接着、両極染色体付着、紡錘体チェックポイントおよび染色体の分離を調節すると提案されている。Ａｕｒｏｒａ Ｃの重要性についてはほとんど未知であるが、Ａｕｒｏｒａ Ｂのいくつかの機能を補完することができる。

Ａｕｒｏｒａ Ａは、一般に乳癌および結腸癌において遺伝子増幅していることが見いだされている（タンパク質過剰発現も検出されている）領域の染色体２０ｑ１３に位置し、予後不良と関連する。Ａｕｒｏｒａ ＡおよびＢの両方が、細胞系（ＮＩＨ３Ｔ３またはＣＨＯ）を形質転換する能力を有し、次いでこれらの細胞系はマウスにおいて腫瘍を形成することができる。細胞サイクルおよび腫瘍発生におけるＡｕｒｏｒａキナーゼの役割は、該キナーゼを小分子治療の発達のための潜在的標的にさせた。例えば、Ａｕｒｏｒａ−Ａ活性は膀胱癌、乳癌、子宮頸癌、結腸直腸癌、胃癌、神経芽腫、卵巣癌および膵臓癌で増加する。

ニューロトロフィン受容体のｔｒｋファミリー（ｔｒｋＡ、ｔｒｋＢ、ｔｒｋＣ）は神経および非神経組織の生存、成長および分化を促進する。ＴｒｋＢタンパク質は小腸および大腸の神経内分泌型細胞、膵臓のα細胞、リンパ節および脾臓の単球およびマクロファージ、ならびに表皮の顆粒層において発現される（Shibayama and Koizumi, 1996）。ＴｒｋＢタンパク質の発現はＷｉｌｍｓ腫瘍および神経芽腫の好ましくない進行と関連している。さらにＴｋｒＢは癌前立腺細胞では発現されるが正常細胞では発現されない。ｔｒｋ受容体のシグナル経路下流はＳｈｃ、活性化Ｒａｓ、ＥＲＫ−１およびＥＲＫ−２遺伝子、ならびにＰＬＣ−γ変換経路を介するＭＡＰＫの活性化のカスケード含む（Sugimoto et al., 2001）。

Ｔｅｃファミリーキナーゼ、Ｂｍｘ、非受容体タンパク質−チロシンキナーゼは乳房上皮癌細胞の増殖を制御する。

繊維芽細胞増殖因子受容体３は骨増殖の負の調節効果および軟骨細胞増殖の阻害に働くことを示した。繊維芽細胞増殖因子受容体３の様々な変異体、および１つの変異、ＴＤII ＦＧＦＲ３によりもたらされる形成異常は、転写因子Ｓｔａｔｌを活性化する構成的チロシンキナーゼ活性を有し、細胞周期阻害剤の発現、増殖停止および異常な骨の発達をもたらす(Su et al., Nature, 1997, 386, 288-292)。ＦＧＦＲ３はまたしばしば多発性骨髄腫型癌において発現される。ＦＧＦＲ３活性の阻害剤は限定はしないが、リウマチ性関節炎（ＲＡ）、コラーゲンＩＩ関節炎、多発性硬化症（ＭＳ）、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、乾癬、若年型糖尿病、シューグレン病、甲状腺疾患、サルコイドーシス、自己免疫性ブドウ膜炎、炎症性腸疾患（クローンおよび潰瘍性大腸炎）、セリアック病および重症筋無力症を含むＴ細胞介在炎症性または自己免疫性疾患の処置において有用である。

ＬｃｋはＴ細胞シグナル伝達の役割を果たす。Ｌｃｋ遺伝子を欠いているマウスは胸腺細胞の発達に対して乏しい能力を有する。Ｔ細胞シグナル伝達の正の活性剤としてＬｃｋの機能はＬｃｋ阻害剤が自己免疫疾患、例えば、リウマチ性関節炎を処置するために有用であり得ることを示唆する。

他のＭＡＰＫと同様にＪＮＫは癌、トロンビン誘導血小板凝集、免疫不全疾患、自己免疫性疾患、細胞死、アレルギー、骨粗鬆症および心臓疾患に対する細胞応答を介在する役割を有することに関与している。ＪＮＫ経路の活性化と関連している治療対象は慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、リウマチ性関節炎、喘息、骨関節症、虚血、癌および神経変性疾患を含む。肝臓疾患または肝虚血の発症と関係があるＪＮＫ活性化に重要である結果として、本発明の化合物はまた様々な肝臓疾患の処置に有用であり得る。心臓血管疾患、例えば、心筋梗塞またはうっ血性心不全におけるＪＮＫの役割がまたＪＮＫが様々な型の心臓ストレスに対する肥大応答を介在することを示したとして報告されている。ＪＮＫカスケードはまたＩＬ−２プロモーターの活性化を含むＴ細胞活性化において役割を果たすことを立証されている。したがって、ＪＮＫの阻害剤は変化する異常な免疫応答において治療価値を有し得る。様々な癌のＪＮＫ活性化に対する役割がまた確立されており、癌におけるＪＮＫ阻害剤の利用可能性を示唆する。例えば、構造的に活性化ＪＮＫはＨＴＬＶ−１介在腫瘍形成と関連している［Oncogene 13:135-42 (1996)］。ＪＮＫはカポジ肉腫（ＫＳ）において役割を果たし得る。ＫＳ増殖に関与する他のサイトカイン、例えば、血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）、ＩＬ−６およびＴＮＦαの他の増殖効果はまたＪＮＫにより介在され得る。加えて、ｐ２１０ ＢＣＲ−ＡＢＬ形質転換細胞におけるｃ−ｊｕｎ遺伝子の調節はＪＮＫの活性に対応し、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）に対する処置におけるＪＮＫ阻害剤の役割を示唆する［Blood 92:2450-60 (1998)］。

マイトージェン−活性タンパク質キナーゼ（ＭＡＰＫ）は転写因子、翻訳因子および様々な細胞外シグナルに応答する他の標的分子を活性化する保存されたシグナル伝達経路のメンバーである。ＭＡＰＫはマイトージェン−活性化タンパク質キナーゼキナーゼ（ＭＫＫ）による配列Ｔｈｒ−Ｘ−Ｔｙｒを有する二重リン酸化モチーフでのリン酸化により活性化される。高等真核生物において、ＭＡＰＫシグナル伝達の生理学的役割は細胞的事象、例えば、増殖、腫瘍形成、発生および分化と相関があった。したがって、これらの経路を介して（特にＭＫＫ４およびＭＫＫ６を介して）シグナル伝達を調節する能力はＭＡＰＫシグナル伝達と関連するヒトの疾患、例えば、炎症性疾患、自己免疫性疾患および癌に対する処置および予防治療の発達をもたらすことができた。

ＳＡＰＫ（“ｊｕｎＮ末端キナーゼ”または“ＪＮＫ”とも呼ばれる）はｃ−ｊｕｎ転写因子の活性化およびｃ−ｊｕｎにより調節される遺伝子の発現をもたらすシグナル伝達経路における最後から２番目の段階を示すタンパク質キナーゼのファミリーである。特に、ｃ−ｊｕｎは遺伝毒性障害により損傷を受けたＤＮＡの修復と関連するタンパク質をコードする遺伝子の転写と関連している。細胞におけるＳＡＰＫ活性を阻害する薬剤はＤＮＡ修復を防止し、ＤＮＡ損傷を誘導することにより機能するそれらの癌治療モダリティに対して細胞を感受性にする。

ＣＨＫ２はセリン／スレオニンタンパク質キナーゼのチェックポイントキナーゼファミリーのメンバーであり、ＤＮＡ損傷、例えば、環境変異原および内在性反応酸素種により引き起こされる損傷の監視のために使用されるメカニズムに関連している。結果として、それは腫瘍抑制遺伝子と関連し、癌治療の標的である。

Ｆｅｓは様々なサイトカインシグナル伝達経路、ならびに骨髄細胞の分化に関連している非受容体タンパク質チロシンキナーゼである。Ｆｅｓはまた顆粒球分化機構の重要な要素である。

Ｆｌｔ３受容体チロシンキナーゼ活性は白血病および骨髄異形成症候群と関連している。約２５％のＡＭＬにおいて、白血病細胞は細胞表面に構造的に活性型の自己リン酸化（ｐ）ＦＬＴ３チロシンキナーゼを発現する。ｐ−ＦＬＴ３の活性は白血病細胞において増殖および生存に利点を与える。白血病細胞がｐ−ＦＬＴ３キナーゼ活性を表す急性白血病を有する患者は全体的に乏しい臨床結果を有する。ｐ−ＦＬＴ３キナーゼ活性の阻害は白血病細胞のアポトーシス（プログラム細胞死）を誘導する。

前記によって、本発明は、さらに、処置を必要とする対象における、上記のいずれかの疾患または障害を処置する方法であり、該対象に治療的有効量(下記“投与および医薬組成物”参照)の式Ｉの化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを含む、方法を提供する。上記の全ての使用に関して、必要な投与量は投与形態、処置すべき特定の状態および所望の効果に依存して変化する。

投与および医薬組成物：
一般に、本発明の化合物は単独でまたは１種もしくはそれ以上の治療剤との組合せのいずれかで当分野で既知の通常のおよび許容される形式のいずれかを介して、治療有効量を投与される。治療有効量は、疾患の重症度、対象の年齢および相対的な健康度、使用される化合物の有効性および他の要素に依存して広く変化し得る。一般に、満足な結果は体重あたり約０．０３から２．５ｍｇ／ｋｇの１日投与量で全身に得られることが示される。大型哺乳動物、例えばヒトにおいて指示される１日投与量は、例えば１日に４回までの分割用量でまたは遅延形で都合良く投与される約０．５ｍｇから約１００ｍｇの範囲である。経口投与のための適当な単位用量形は約１から５０ｍｇの活性成分を含む。

本発明の化合物は任意の慣用の経路、特に経腸的に、例えば経口的に、例えば錠剤形もしくはカプセル形で、または非経腸的に、例えば注射溶液形もしくは懸濁液形で、局所的に、例えばローション形、ゲル形、軟膏形もしくはクリーム形で、または経鼻形もしくは坐薬形で医薬組成物として投与できる。少なくとも１種の薬学的に許容される担体もしくは希釈剤と一緒に遊離形または薬学的に許容される塩形の本発明の化合物を含む医薬組成物を、混合、造粒または被覆方法による慣用の方法で製造できる。例えば、経口組成物は、活性成分とａ）希釈剤、例えば、ラクトース、デキストロース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、セルロースおよび／またはグリシン；ｂ）滑剤、例えば、シリカ、タルク、ステアリン酸、そのマグネシウムもしくはカルシウム塩および／またはポリエチレングリコール；錠剤のためにまたｃ）結合剤、例えば、ケイ酸マグネシウムアルミニウム、デンプンペースト、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウムおよび／またはポリビニルピロリドン；所望によりｄ）崩壊剤、例えば、デンプン、寒天、アルギン酸もしくはそのナトリウム塩または起沸性混合物；および／またはｅ）吸収剤、着色剤、香味剤および甘味剤を一緒に含む錠剤またはゼラチンカプセルであり得る。注射組成物は、等張水溶液または懸濁液であり得、そして座薬は脂肪エマルジョンまたは懸濁液から製造し得る。該組成物は滅菌し得そして／またはアジュバント、例えば保存剤、安定化剤、湿潤剤もしくは乳化剤、溶解促進剤、浸透圧を調節するための塩および／またはバッファーを含む。加えて、それらはまた、治療に有効な他の物質を含み得る。適当な経皮投与用製剤は有効量の本発明の化合物を担体と含む。担体は宿主の皮膚を介する輸送を助けるために、薬理学的に許容される吸収性溶媒を含み得る。例えば、経皮デバイスは裏当て部分、化合物と所望により担体を含む貯蔵部、所望により長時間にわたって制御されたおよびあらかじめ決められた速度で宿主の皮膚に化合物を送達するための速度制御バリア、および皮膚にデバイスを固定するための手段を含む、バンデージ形である。マトリックス経皮製剤もまた使用され得る。例えば、皮膚および眼への、適当な局所投与用製剤は、当分野で既知の好ましくは水溶液、軟膏、クリームまたはゲルである。このような製剤は、可溶化剤、安定化剤、等張増加剤、バッファーおよび保存剤を含み得る。

本発明の化合物は、治療有効量の１種またはそれ以上の治療剤との組合せ（薬学的組合せ剤）で投与され得る。例えばシクロスポリン、ラパマイシン、もしくはアスコマイシン、またはそれらの免疫抑制剤類似体、例えばシクロスポリンＡ（ＣｓＡ）、シクロスポリンＧ、ＦＫ−５０６、ラパマイシン、もしくは同等な化合物、コルチコステロイド、シクロホスファミド、アザチオプリン、メトトレキサート、ブレキナール、レフルノミド、ミゾルビン、ミコフェノール酸、ミコフェノール酸モフェチル、１５−デオキシスパガリン、免疫抑制性抗体、とりわけ白血球受容体に対するモノクローナル抗体、例えばＭＨＣ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ７、ＣＤ２５、ＣＤ２８、Ｂ７、ＣＤ４５、ＣＤ５８もしくはそれらのリガンド、または他の免疫調節化合物、例えばＣＴＬＡ４１ｇと一緒に使用されるとき、例えば、相乗効果が、他の免疫調節剤もしくは抗炎症剤と生じ得る。本発明の化合物が他の治療と一緒に投与されるとき、共投与される化合物の用量は、もちろん使用される共薬剤の型、使用される特定の薬剤、処置される状態などに依存して変化する。

本発明はまた、ａ）遊離形または薬学的に許容される塩形の本明細書に記載のとおりの本発明の化合物である第１の薬剤、およびｂ）少なくとも１つの共薬剤を含む薬学的組合せ剤、例えばキットを提供する。該キットはその投与のための指示書を含み得る。

本明細書で利用される“共投与”または“組合せ投与”などの用語は、個々の患者に選択された治療剤を投与することを含むことを意味し、そして必ずしも薬剤が同じ投与経路によりまたは同時に投与されない処置レジメンを含むことを意図する。

本明細書で使用される“薬学的組合せ剤”なる用語は、１種を超える活性成分の混合または組合せから生じる生産物を意味し、そして活性成分の固定された組合せ剤および固定されていない組合せ剤の両方を含む。“固定された組合せ剤”なる用語は、複数の活性成分、例えば式Ｉの化合物、および共薬剤両方が、単一の物または投与形で同時に患者に投与されることを意味する。“固定されていない組合せ剤”なる用語は、複数の活性成分、例えば式Ｉの化合物、および共薬剤両方が、同時に、共にまたは特定の時間制限なしに連続してのいずれかで、別々の物として投与することを意味し、このような投与は、治療有効量の２つの化合物を患者の体内に提供する。後者は、カクテル治療、例えば３つまたはそれ以上の活性成分の投与にも適用する。

本発明の化合物の製造方法
本発明はまた、本発明の化合物の製造方法を含む。記載されている反応において、反応性官能基、例えばヒドロキシ、アミノ、イミノ、チオまたはカルボキシ基を、これらが最終産物において望ましいとき、これらの望ましくない反応の参加を避けるために保護することが必要であり得る。慣用の保護基は、標準的技法にしたがって使用し得る、例えばT.W. Greene and P. G. M. Wuts in “Protective Groups in Organic Chemistry”, John Wiley and Sons, 1991参照。

式Ｉの化合物は下記反応スキームＩのとおりに行うことにより製造できる：
反応スキームＩ

式中、ｎ、ｍ、Ｒ_１、Ｒ_２およびＲ_４は発明の概要で定義のとおりである。今回Ｒ_３はＢｒであるが、使用される反応物質にしたがってＣｌまたはＩであり得る。式Ｉの化合物は適当な溶媒（例えば、ＡｃＯＨ、など）、および臭素の存在下で式２の化合物と反応させることにより合成できる。該反応は約０℃から約４０℃の温度範囲で行い、約１０時間以内に完全に終了し得る。

式Ｉの化合物の合成の詳細な例は下記実施例で見いだすことができる。

本発明の化合物のさらなる製造方法
本発明の化合物を、遊離塩基形の化合物を薬学的に許容される無機酸または有機酸と反応させることにより薬学的に許容される酸付加塩として製造できる。あるいは、本発明の化合物の薬学的に許容される塩基付加塩を、遊離塩基形の化合物を薬学的に許容される無機塩基または有機塩基と反応させることにより製造できる。

あるいは、塩形の本発明の化合物を出発物質または中間体の塩を使用して製造できる。

遊離酸形または遊離塩基形の本発明の化合物を、対応する塩基付加塩形または酸付加塩形、各々から製造できる。例えば酸付加塩形の本発明の化合物は、適当な塩基（例えば水酸化アンモニウム溶液、水酸化ナトリウムなど）と処理することにより対応する遊離塩基に変換できる。塩基付加塩形の本発明の化合物は、適当な酸（例えば塩酸など）と処理することにより対応する遊離酸に変換できる。

非酸化形の本発明の化合物を、適当な不活性有機溶媒（例えばアセトニトリル、エタノール、ジオキサン溶液など）中で、０から８０℃で還元剤（例えば硫黄、二酸化硫黄、トリフェニルホスフィン、水素化ホウ素リチウム、水素化ホウ素ナトリウム、三塩化リン、三臭化物など）と処理することにより本発明の化合物のＮ−オキシドから製造できる。

本発明の化合物のプロドラッグ誘導体を当業者に既知の方法で製造できる（例えばさらなる詳細のためにSaulnier et al., (1994), Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, p. 1985参照のこと）。例えば、適当なプロドラッグを本発明の非誘導化化合物を適当なカルバミル化剤（例えば、１，１−アシルオキシアルキルカルバノクロリデート、パラ−ニトロフェニルカーボネートなど）と反応させることにより製造できる。

本発明の化合物の保護された誘導体を当業者に既知の方法で製造できる。保護基の創造およびその除去に適用できる技術の詳細な説明はT. W. Greene, “Protecting Groups in Organic Chemistry”, 3^rd edition, John Wiley and Sons, Inc., 1999において見ることができる。

本発明の化合物を、本発明の工程中に溶媒和物（例えば水和物）として都合良く製造または形成できる。本発明の化合物の水和物を、有機溶媒、例えばジオキシン、テトラヒドロフランまたはメタノールを使用し、水性／有機溶媒混合物から再結晶することにより都合良く製造できる。

本発明の化合物を、化合物のラセミ混合物を光学的に活性な分割剤と反応させ、一組のジアステレオマー化合物を形成し、該ジアステレオマーを分離し、そして光学的に純粋なエナンチオマーを回収することにより、それらの個々の立体異性体として製造できる。エナンチオマーの分離は本発明の化合物の共有結合ジアステレオマー誘導体を使用して行い得るが、分離できる複合体が好ましい（例えば、結晶のジアステレオマー塩）。ジアステレオマーは異なる物理的性質（例えば、融点、沸点、溶解度、反応性など）を有し、そしてこれらの相違を利用して容易に分離できる。ジアステレオマーをクロマトグラフィー、または好ましくは溶解度の差異に基づく分割／分離技術により分割できる。次いで光学的に純粋なエナンチオマーを、ラセミ化をもたらさないであろう実用的手段により分割剤と一緒に回収する。ラセミ混合物から化合物の立体異性体の分離に適用できる技術のより詳細な説明はJean Jacques, Andre Collet, Samuel H. Wilen, “Enantiomers, Racemates and Resolutions”, John Wiley And Sons, Inc., 1981において見ることができる。

手短に言えば、式Ｉの化合物を下記の工程を含む方法により製造できる：
（ａ）反応スキームＩの工程；ならびに
（ｂ）所望により本発明の化合物の薬学的に許容される塩への変換；
（ｃ）所望により塩形の本発明の化合物の非塩形への変換；
（ｄ）所望により非酸化形の本発明の化合物の薬学的に許容されるＮ−オキシドへの変換；
（ｅ）所望によりＮ−オキシド形の本発明の化合物の非酸化形への変換；
（ｆ）所望により異性体の混合物からの本発明の化合物の個々の異性体への分離；
（ｇ）所望により本発明の非誘導化合物の薬学的に許容されるプロドラッグ誘導体への変換；および
（ｈ）所望により本発明の化合物のプロドラッグ誘導体のその非誘導形への変換。

出発物質の製造において特に記載のない限り、化合物は既知であるか、または当分野で既知の方法に準じてもしくは下記の実施例に記載のとおりに製造できる。

当業者は、上記変換は本発明の化合物の製造法の代表例のみであり、そして他の既知の方法を同様に使用できることを理解できよう。

本発明は、本発明による式Ｉの化合物の製造を説明する下記実施例により限定されることなくさらに例示される。

特記されない限り、物質は商業的供給者から得られ、精製せずに使用する。減圧下の溶媒除去は真空ポンプ（〜３ｍｍＨｇ）に連結したBuechiの回転蒸発器を使用する蒸留を意味する。固体として得られた生成物または高沸点油を真空下（〜１ｍｍＨｇ）で乾燥させる。

逆相高圧液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）は水−アセトニトリル（０．０３５％のＴＦＡ）を溶離剤として使用するＣ_１８カラム（Phenomenex）を有するVarian Chromatography System（ProStar Model 210）を使用して実施する。¹H NMRスペクトルをBruker XWIN-NMR（４００ＭＨｚまたは６００ＭＨｚ）で記録する。プロトン共鳴はテトラメチルシラン（ＴＭＳ）から下の領域の百万分の一（ｐｐｍ）で記録する。¹H NMRデータは多重度（ｓ（singlet）、ｄ（doublet）、ｔ（triplet）、ｑ（quartet）、quint quintet、sept septet、ｄｄ（doublet of doublets）、ｄｔ（doublet of triplet）、ｂｓ（broad singlet））、水素原子数およびヘルツでの結合定数として記録される。ＤＭＳＯ−ｄ_６、ＣＤ_３ＯＤで得られるスペクトルに対して、残りの水素原子（２．５０および３．３１ｐｐｍ各々）を基準として使用される。

分析的薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）は市販のシリカプレート（Ｍｅｒｃｋ ６０−Ｆ ２５４、厚さ０．２５ｍｍ）上で実施する；化合物はＵＶ光（２５４ｎｍ）により可視化される。フラッシュクロマトグラフィーはシリカゲル（Merck Kieselgel 60, 230-400メッシュ）を使用して実施する。

Ａｇｉｌｅｎｔ １１００シリーズ液体クロマトグラフ／質量選択検出器（ＬＣ／ＭＳＤ）は２５４ｎｍ、２２０ｎｍ波長、およびエレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）ポジティブモードを使用して反応の進行をモニタリングし、そして生成物の純度をチェックするために使用される。質量スペクトルはＥＳＩポジティブモードで得られる。

（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−アリール−アミンは、具体的に記していない限り、アリールチオウレアから２段階で合成される。典型的な製造法を下記に例示する。エタノール（３ｍｌ）中のアリールチオウレア（１．６７ｍｍｏｌ）および１，２−ジクロロ−１−エトキシ−エタン（０．２８６ｇ、２．００ｍｍｏｌ）の溶液を７５℃で１２時間密閉バイアル中で撹拌しながら加熱する。次いで、それを真空濃縮し、粗アリールチアゾル−２−イル−アミンを油状物または固体として得る。粗アリールチアゾル−２−イル−アミンをさらなる精製なしに次の段階で使用する。純粋なアリールチアゾル−２−イルアミンをエタノールからの再結晶により得ることができる。酢酸中の粗アリールチアゾル−２−イル−アミン（０．４２ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に酢酸中の臭素（０．４２ｍｍｏｌ）を加える。溶媒を真空除去後、反応物をさらに１時間室温で撹拌する。得られた残渣をＨＰＬＣ（Ｃ_１８カラム、０．０３５％のＴＦＡを有するＣＨ_３ＣＮ／Ｈ_２Ｏで溶出）により精製し、（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−アリール−アミンを固体として得る。

実施例１
（５−クロロ−チアゾル−２−イル）−（４−フルオロ−フェニル）−アミン

ＴＨＦ（５ｍＬ）中の（４−フルオロ−フェニル）−チアゾル−２−イル−アミン（６０ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）の溶液にＮ−クロロスクシンイミド（４２ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）を加える。反応物を溶媒を真空下で除去後、室温で２時間撹拌する。得られた残渣をＨＰＬＣ（Ｃ_１８カラム、０．０３５％のＴＦＡを有するＣＨ_３ＣＮ／Ｈ_２Ｏで溶出）により精製し、表題化合物をオフホワイト色の固体として得る：¹H NMR (DMSO-d₆) δ 7.15 (t, 2H, J = 8.8 Hz), 7.23 (s, 1H), 7.58 (dd, 2H, J₁ = 4.8 Hz, J₂ = 8.8 Hz), 10.31 (s, 1H); m/z [M⁺+1] 228.9。

実施例２
（４−フルオロ−フェニル）−（５−ヨード−チアゾル−２−イル）−アミン

ＴＨＦ（５ｍｌ）中の（４−フルオロ−フェニル）−チアゾル−２−イル−アミン（６０ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）の溶液にＮ−ヨードスクシンイミド（７０ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）を加える。反応物を溶媒を真空下で除去後、室温で２時間撹拌する。得られた残渣をＨＰＬＣ（Ｃ_１８カラム、０．０３５％のＴＦＡを有するＣＨ_３ＣＮ／Ｈ_２Ｏで溶出）により精製し、表題化合物をオフホワイト色の固体として得る：¹H NMR (DMSO-d₆) δ 7.14 (t, 2H, J = 8.8 Hz), 7.32(s, 1H), 7.58 (dd, 2H, J₁ = 4.8 Hz, J₂ = 8.8 Hz), 10.34 (s, 1H); m/z [M⁺+1] 320.9。

実施例３
（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−（４−フルオロ−フェニル）−メチル−アミン

ＤＭＦ（１ｍｌ）中の（４−フルオロ−フェニル）−チアゾル−２−イル−アミン（９７ｍｇ、０．５ｍｍｏｌ）の溶液を０℃に冷却し、ＮａＨ（鉱油中６０％分散、４０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を加える。得られた混合物を０℃で１０分間撹拌させ、ヨードメタン（１４２ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）を加える。室温で１２時間撹拌後、反応混合物を飽和水性ＮＨ_４Ｃｌ（１０ｍｌ）でクエンチし、酢酸エチル（１０ｍｌ×２）で抽出する。有機層を合わせ、水（１０ｍｌ）、飽和塩水（１０ｍｌ）で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させる。真空下で溶媒の除去後、得られた（４−フルオロ−フェニル）−メチル−チアゾル−２−イル−アミンを次いで標準臭素化法に付し、ＨＰＬＣ精製後、表題化合物をオフホワイト色の固体として得る：¹H NMR (DMSO-d₆) δ 3.39 (s, 3H), 7.26 (s, 1H), 7.31 (t, 2H, J = 8.8 Hz), 7.52 (dd, 2H, J₁ = 5.2 Hz, J₂ = 8.8 Hz); m/z [M⁺+1] 286.9。

実施例４
Ｎ−（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−ベンゼン−１，４−ジアミン

エタノール（５ｍｌ）中の（４−ニトロ−フェニル）−チアゾル−２−イル−アミン（６０ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）およびＳｎＣｌ_２・２Ｈ_２Ｏ（１８５ｍｇ、０．８ｍｍｏｌ）の溶液を７５℃で４時間加熱する。溶媒を真空下で除去し、飽和水性Ｎａ_２ＣＯ_３（５ｍＬ）および酢酸エチル（５ｍＬ）を加える。得られた混合物をセライトを介して濾過し、酢酸エチル層を分離し、乾燥させ、真空濃縮する。残渣をＨＰＬＣ（Ｃ_１８カラム、０．０３５％のＴＦＡを有するＣＨ_３ＣＮ／Ｈ_２Ｏで溶出）により精製し、表題化合物を固体として得る：¹H NMR (DMSO-d₆) δ 7.18 (d, 2H, J = 8.8 Hz), 7.31 (s, 1H), 7.59 (d, 2H, J = 8.8 Hz), 9.20 (bs, 2H), 10.41 (s, 1H); m/z [M⁺+1] 269.9。

実施例５
Ｎ−［４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンズアミド

（４−ニトロ−フェニル）−チアゾル−２−イル−アミン（２００ｍｇ）をＭｅＯＨ（３０ｍｌ）中に溶解させ、５０ｐｓｉでＰｄ／Ｃ（１０％、２５０ｍｇ）の存在下で１２時間で水素化する。触媒を濾取し、溶媒を除去し、Ｎ−チアゾル−２−イル−ベンゼン−１，４−ジアミン（０．１６ｇ、９２％）を得る。Ｎ−チアゾル−２−イル−ベンゼン−１，４−ジアミン（３０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を塩化ベンゾイル（２４ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）でＣＨ_２Ｃｌ_２（２ｍｌ）中のトリエチルアミン（３２ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）の存在下で２時間処理する。反応物を飽和水性Ｎａ_２ＣＯ_３（１０ｍｌ）でクエンチし、酢酸エチル（１０ｍｌ×２）で抽出する。酢酸エチル層を合わせ、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させる。溶媒の真空除去後、Ｎ−［４−（チアゾル−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンズアミドを得る。粗チアゾールを次いで標準臭素化法に付し、ＨＰＬＣ精製後、表題化合物を白色固体として得る：¹H NMR (DMSO-d₆) δ 7.29 (s, 1H), 7.48-7.60 (m, 5H), 7.71 (d, 2H, J = 7.2 Hz), 7.95 (d, 2H, J = 7.2 Hz), 10.18 (s, 1H), 10.29 (s, 1H); m/z [M⁺+1] 373.9。

実施例６
４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−安息香酸

ジオキサン−Ｈ_２Ｏ（１：１、２０ｍｌ）中の４−（チアゾル−２−イルアミノ）−安息香酸エチルエステル（０．１５ｇ、０．６０ｍｍｏｌ）およびＫＯＨ（０．１４ｇ、２．４ｍｍｏｌ）の溶液を室温で２４時間撹拌する。反応混合物を次いで塩酸でｐＨ＝４−５まで（ｐＨ紙でモニタリングする）酸性化する。得られた沈殿を濾過により回収し、４−（チアゾル−２−イルアミノ）−安息香酸をオフホワイト色固体として得る。４−（チアゾル−２−イルアミノ）−安息香酸を標準臭素化法に付し、表題化合物を得る：¹H NMR (DMSO-d₆) δ 7.39 (s, 1H), 7.65 (d, 2H, J = 8.8 Hz), 7.88 (d, 2H, J = 8.8 Hz), 10.71 (s, 1H), 12.56 (bs, 1H); m/z [M⁺+1] 298.9。

実施例７
４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−Ｎ−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−ベンズアミドＴＦＡ塩

ＤＭＦ（２ｍｌ）中の４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−安息香酸（２４、６０ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）、２−モルホリン−４−イル−エチルアミン（７８ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）、およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチル−アミン（７７ｍｇ、０．６ｍｍｏｌ）の溶液にＨＡＴＵ（９１ｍｇ、０．２４ｍｍｏｌ）を加える。得られた溶液を１時間室温で撹拌し、溶媒を真空下で除去する。残渣をＨＰＬＣ（Ｃ_１８カラム、０．０３５％のＴＦＡを有するＣＨ_３ＣＮ／Ｈ_２Ｏで溶出）により精製し、表題化合物をＴＦＡ塩として得る：¹H NMR (DMSO-d₆) δ 3.08-3.18 (m, 2H), 3.24-3.28 (m, 2H), 3.50-3.70 (m, 4H), 3.96-4.04 (m, 4H), 7.38 (s, 1H), 7.65 (d, 2H, J = 8.8 Hz), 7.83 (d, 2H, J = 8.8 Hz), 8.57 (t, 1H, J = 6.0 Hz), 9.54 (bs, 1H), 10.64 (s, 1H); m/z [M⁺+1] 411.0。

実施例８
Ｎ−（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−ベンズアミド

ＤＭＦ（５ｍｌ）中の２−アミノチアゾール（０．１０ｇ、１．０ｍｍｏｌ）、安息香酸（０．１５ｇ、１．２ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．３９ｇ、３．０ｍｍｏｌ）の溶液にＨＡＴＵ（０．４６ｇ、１．２ｍｍｏｌ）を加える。溶媒を真空下で除去後、反応混合物を室温で１時間撹拌する。飽和水性ＮＨ_４Ｃｌ（１０ｍｌ）を加え、混合物をＣＨ_２Ｃｌ_２（１０ｍｌ）で抽出する。ＣＨ_２Ｃｌ_２層を飽和水性ＮａＨＣＯ_３で洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させる。溶媒を真空下で除去し、得られた粗物質をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン−酢酸エチル）により精製し、Ｎ−チアゾル−２−イル−ベンズアミドを白色固体として得る。Ｎ−チアゾル−２−イル−ベンズアミドを標準臭素化法に付し、ＨＰＬＣ精製後、表題化合物を得る：¹H NMR (DMSO-d₆) δ 7.55 (t, 2H, J = 7.2 Hz), 7.65 (t, 1H, J = 7.2 Hz), 7.66 (s, 1H), 8.08 (d, 2H, J = 6.4 Hz), 12.82 (bs, 1H); m/z [M⁺+1] 282.9。

実施例９
１−（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−３−フェニル−ウレア

ＴＨＦ（１０ｍｌ）中の２−アミノチアゾール（０．１ｇ、１．０ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０．３９ｇ、３．０ｍｍｏｌ）の溶液にフェニルイソシアネート（０．１２ｇ、１．０ｍｍｏｌ）を加える。反応混合物を室温で２時間撹拌し、次いで飽和水性ＮＨ_４Ｃｌ（１０ｍｌ）を加える。混合物を酢酸エチル（１０ｍｌ×２）で抽出する。酢酸エチル層を合わせ、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させる。溶媒を真空蒸発させ、１−フェニル−３−チアゾル−２−イル−ウレアを白色固体として得る。１−フェニル−３−チアゾル−２−イル−ウレアを標準臭素化法に付し、ＨＰＬＣ精製後、表題化合物を得る。¹H NMR (DMSO-d₆) δ 7.05 (t, 1H, J = 8.0 Hz), 7.21 (t, 2H, J = 8.0 Hz), 7.43-7.48 (m, 3H), 8.92 (s, 1H), 10.71 (s, 1H); m/z [M⁺+1] 297.9。

実施例１０
（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−ピリジン−２−イル−アミン

トルエン（２５ｍｌ）中の２−クロロピリジン（０．３４ｇ、３．０ｍｍｏｌ）、２−アミノチアゾール（０．３１４ｇ、３．１ｍｍｏｌ）、Ｎａ_２ＣＯ_３（０．７６ｇ、７．２ｍｍｏｌ）、Ｐｄ_２（ｄｂａ）_３（０．２７５ｇ、０．３ｍｍｏｌ）およびＸａｎｔＰｈｏｓ（０．５２ｇ、０．９ｍｍｏｌ）、Ｈ_２Ｏ（５４ｍｇ、３．０ｍｍｏｌ）の溶液を１００℃で１２時間加熱する。反応混合物を濾過し、次いで真空濃縮する。残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ：ＮＨ_３（７Ｎ、ＭｅＯＨ中）＝２０：１：１で溶出）により精製し、ピリジン−２−イル−チアゾル−２−イル−アミンを得、これを次いで標準臭素化法に付し、ＨＰＬＣ精製後、表題化合物をオフホワイト色の固体として得る：¹H NMR (DMSO-d₆) δ 6.95 (t, 1H, J = 6.4 Hz), 7.03 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 7.44 (s, 1H), 7.73 (t, 1H, J = 6.4 Hz), 8.30 (d, 1H, J = 3.6 Hz), 11.51 (s, 1H); m/z [M⁺+1] 255.9。

実施例１１
（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−ピリジン−３−イル−アミン

３−ピリジルチオウレア（０．１５３ｇ、１．０ｍｍｏｌ）およびクロロ−アセトアルデヒド水溶液（５０％、０．１２７ｍｌ）をエタノール（３０ｍｌ）中に溶解させ、１６時間６０℃で撹拌する。溶媒を真空下で除去し、得られた残渣を標準臭素化法に付す。ＨＰＬＣ精製後、表題化合物をオフホワイト色固体として得る：¹H NMR (DMSO-d₆) δ 7.93 (s, 1H), 7.67 (dd, 1H, J₁ = 5.2 Hz, J₂ = 9.0 Hz), 8.28 (dd, 1H, J₁ = 2.4 Hz, J₂ = 9.0 Hz), 8.35 (d, 1H, J = 5.2 Hz), 8.99 (d, 1H, J = 2.0 Hz), 11.00 (s, 1H); m/z [M⁺+1] 255.9。

実施例に記載の方法を繰り返し、適当な出発物質を使用して、表１に示す通りの下記の式Ｉの化合物を得る。
表１

実施例６１
４−ブロモ−アミノチアゾールの製造

（４−フルオロ−フェニル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
ＴＨＦ（３０ｍｌ）中の４−フルオロ−フェニルアミン（１．１１ｇ、１０ｍｍｏｌ）の溶液に１ＮのＮａＯＨ水溶液（３０ｍｌ）を加える。それを氷浴を使用して０℃に冷却し、次いで（Ｂｏｃ）_２Ｏ（２．８ｇ、１２．８ｍｍｏｌ）を少しずつ加える。溶液を室温で１６時間撹拌し、ＥｔＯＡｃ（３０ｍｌ×２）で抽出する。有機層を合わせ、１ＮのＨＣｌ次いで飽和ＮａＨＣＯ_３で洗浄する。溶媒を真空下で除去し、残渣をカラムクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサンｓ−ＥｔＯＡｃ）により精製する。所望の産物をオフホワイト色固体として得る：¹H NMR (DMSO-d₆) δ 1.46 (s, 9H), 7.08 (t, 2H, J = 8.8 Hz), 7.42-7.48 (m, 2H), 9.37 (sb, 1H); m/z [M⁺+2-t-Bu] 156.0。

（４−ブロモ−チアゾル−２−イル）−（４−フルオロ−フェニル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル
ピリジン（４ｍｌ）中の（４−フルオロ−フェニル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２６０ｍｇ、１．２３ｍｍｏｌ）、２，４−ジブロモチアゾール（１００ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）、銅粉末（２６ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）、ＣｕＣｌ（４１ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）、およびＫＯＡｃ（４０ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）の混合物を１００℃で２時間加熱する。冷却した混合物をＥｔＯＡｃ（３０ｍｌ）で希釈し、Ｈ_２Ｏ（３０ｍｌ）で洗浄する。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、真空濃縮する。残渣をＨＰＬＣ（Ｃ_１８カラム、０．０３５％のＴＦＡを有するＣＨ_３ＣＮ／Ｈ_２Ｏで溶出）により精製し、表題化合物を固体として得る：¹H NMR (DMSO-d₆) δ 1.36 (s, 9H), 7.29 (t, 2H, J = 8.8 Hz), 7.37-7.43 (m, 3H); m/z [M⁺+2-t-Bu] 316.9。

（４−ブロモ−チアゾル−２−イル）−（４−フルオロ−フェニル）−アミン
塩化メチレン（５ｍｌ）中の（４−ブロモ−チアゾル−２−イル）−（４−フルオロ−フェニル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１０ｍｇ、０．０２７ｍｍｏｌ）の溶液にＴＦＡ（１ｍｌ）を加える。反応物を室温で２時間撹拌し、濃縮する。残渣をＨＰＬＣ（Ｃ_１８カラム、０．０３５％のＴＦＡを有するＣＨ_３ＣＮ／Ｈ_２Ｏで溶出）により精製し、表題化合物を固体として得る：¹H NMR (DMSO-d₆) δ 6.96 (s, 1H), 7.18 (t, 2H, J = 8.8 Hz), 7.55-7.59 (m, 2H), 10.50 (s, 1H); m/z [M⁺+1] 273.0。

アッセイ
本発明の化合物を、Ａｕｒｏｒａキナーゼを選択的に阻害する能力を測定するためにアッセイする。加えて、化合物をＡｂｌ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、Ｂｍｘ、ＣＤＫ１／サイクリンＢ、ＣＨＫ２、Ｆｅｓ、ＦＧＦＲ３、Ｆｌｔ３、ＧＳＫ３β、ＪＮＫ１α１、Ｌｃｋ、ＭＫＫ４およびＴｒｋＢキナーゼを阻害する能力を測定するためにアッセイする。

Ａｕｒｏｒａキナーゼ
キナーゼ活性は、ウェルあたりキナーゼ緩衝液（５０ｍＭのＯＰＳ ｐＨ７．０、１０ｍＭのＭｇＣｌ_２、１ｍＭのＤＴＴ）中の０．１μｇのキナーゼを使用して、３８４ウェルＰｒｏｘｉＰｌａｔｅで実施する。化合物を各ウェルに最終濃度１０μＭまで移し、そしてキナーゼ緩衝液は１μＭの^３３Ｐγ−ＡＴＰであるＡＴＰを含む。ＩＣ_５０を測定するため、最終濃度１０μＭのＡＴＰを使用する。プレートを１時間室温でインキュベートし、１ＭのＡＴＰ、１ｍＭのＥＤＴＡおよび５０ｍｇ／ｍｌのＳＰＡビーズ（Amersham/Pharmacia/GE health）との反応を終了させ、ＴｏｐＣｏｕｎｔでカウントする。キナーゼ活性の５０％以上の阻害を有する化合物をＩＣ_５０を測定するために再試験する。

細胞アッセイ：ヒストンＨ３のｓｅｒ１０のリン酸化：１２ウェルプレート中の５万個のＨｅＬａ細胞を１００ｎｇ／ｍｌのノコタゾールと２０時間処理し、化合物と１時間インキュベートする。細胞を２×サンプル緩衝液中に溶解させる。ウェルあたり１／３の細胞に等しい、全細胞抽出物のサンプルをＳＤＳ−ＰＡＧＥおよびヒストンＨ３の抗ホスホセリン１０（細胞シグナリング）とのウェスタンブロッティングに付し、リン酸化状態を測定する。

ＦＡＣＳ分析：ＨｅＬａを、様々な時間で化合物と処理する。細胞をトリプシン処理し、ＰＢＳで１回洗浄し、２０分間−２０℃で固定する。細胞をＰＢＳ中の１ｍＭのＥＤＴＡ、１００μｇ／ｍｌのＲＮａｓｅ中で再懸濁し、３０分間３７℃でインキュベートし、最終濃度１０μｇ／ｍｌのヨウ化プロピジウム（ＰＩ）を加える。細胞周期分布をＢｅｃｋｍａｎ ＦＡＣＳｃａｌｉｂｕｒ^ＴＭ（BD Biosciences）で測定し、ＦｌｏｗＪｏ^ＴＭ（Treestar）で分析する。

ハイスループットマイクロスコピー（ＨＴＭ）：あるいは、細胞周期分布を下記の通りの３８４ウェルプレートを画像化できる共焦点顕微鏡系を使用して定量する。４０００個のＨｅＬａ細胞を３８４ウェルプレートの各ウェルにおき、２４時間後、様々な濃度の化合物を加え、プレートを４％のパラホルムアルデヒドで固定し、ＤＡＰＩで染色する。各ウェルから像の自動収集を実施し、ＥＩＤＡＱ １００ハイスループットマイクロスコピー（ＨＴＭ）（Q3DM/Beckman Coulter）で分析する。

細胞増殖アッセイ：細胞を９６ウェルプレートにおき、化合物の連続希釈に付す。４８時間後、細胞の生存数を製造業者のプロトコールにしたがってＣｅｌｌＴｉｔｅｒ９６（登録商標）（Promega）を使用して測定する。

マイクロスコピー：Ｈｅｌａ細胞をカバースリップ上におき、２０時間後、様々な化合物処理に付す。化合物処理はカバースリップを２回ＰＢＳで洗浄し、４％のパラホルムアルデヒド中でそれらを３７℃で１０分間固定することにより終了する。カバースリップをＰＢＳ中で洗浄し、その後ブロッキング溶液（ＰＢＳに対して０．１％のｔｒｉｔｏｎ Ｘ−１００および５％のＢＳＡ）中で最低１時間インキュベートする。カバースリップを１時間１：３００の５％のＢＳＡであるブロッキング溶液中のヒストンＨ３の抗ホスホセリン１０で染色し、次いで１時間１：１０００のブロッキング溶液中の抗ウサギＣｙ３でインキュベーションする。いくつかの場合において、カバースリップをまたブロッキング溶液中のＦＩＴＣ標識抗−Ｂ−チューブリンで染色する。

細胞性ＢＣＲ−Ａｂｌ依存性増殖の阻害（ハイスループット法）
使用するマウス細胞系は、ＢＣＲ−Ａｂｌ ｃＤＮＡで形質転換した３２Ｄ造血前駆細胞系（３２Ｄ−ｐ２１０）である。これらの細胞を、ペニシリン５０μｇ／ｍＬ、ストレプトマイシン５０μｇ／ｍＬおよびＬ−グルタミン２００ｍＭを添加したＲＰＭＩ／１０％胎児ウシ血清（ＲＰＭＩ／ＦＣＳ）に維持する。形質転換されていない３２Ｄ細胞を、ＩＬ３の源として１５％のＷＥＨＩ馴化培地を添加して同様に維持する。

５０μｌの３２Ｄまたは３２Ｄ−ｐ２１０細胞懸濁液を５０００細胞／ウェルの密度でＧｒｅｉｎｅｒ３８４ウェルマイクロプレート（black）に播種する。５０ｎｌの試験化合物（ＤＭＳＯ貯蔵溶液中で１ｍＭ）をそれぞれのウェルに加える（ＳＴＩ５７１を陽性対照として包含する）。細胞を７２時間、３７℃、５％ＣＯ_２でインキュベートする。１０μｌの６０％Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ溶液（Tek diagnostics）をそれぞれのウェルに加え、細胞をさらに２４時間インキュベートする。蛍光強度（５３０ｎｍで励起、５８０ｎｍで放射）でＡｃｑｕｅｓｔ^ＴＭシステム（Molecular Devices）を使用して定量する。

細胞性ＢＣＲ−Ａｂｌ依存性増殖の阻害
３２Ｄ−ｐ２１０細胞を９６ウェルＴＣプレートに１５，０００細胞／ウェルの密度で播種する。５０μＬの試験化合物の２倍連続希釈（Ｃ_ｍａｘは４０μＭ）をそれぞれのウェルに添加する（ＳＴＩ５７１を陽性対照として包含する）。細胞を４８時間、３７℃、５％ＣＯ_２でインキュベート後、１５μＬのＭＴＴ（Ｐｒｏｍｅｇａ）をそれぞれのウェルに添加し、細胞をさらに５時間インキュベートする。５７０ｎｍの光学密度を分光測光により定量し、ＩＣ_５０値、５０％阻害に必要な化合物の濃度を用量応答曲線から決定する。

細胞サイクル分布に対する効果
３２Ｄおよび３２Ｄ−ｐ２１０細胞を６ウェルＴＣプレートに、５ｍｌの培地中２．５×１０^６細胞／ウェルで播種し、１または１０μＭの試験化合物を添加する（ＳＴＩ５７１を対照として包含する）。細胞を次いで２４時間または４８時間、３７℃、５％ＣＯ_２でインキュベートする。２ｍｌの細胞懸濁液をＰＢＳで洗浄し、７０％ＥｔＯＨに１時間固定し、ＰＢＳ／ＥＤＴＡ／ＲＮａｓｅ Ａで３０分処置する。ヨウ化プロピジウム（Ｃｆ＝１０μｇ／ｍｌ）を添加し、蛍光強度をＦＡＣＳｃａｌｉｂｕｒ^ＴＭシステム（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）でのフローサイトメトリーにより定量する。本発明の試験化合物は、３２Ｄ−ｐ２１０細胞に対してアポトーシス作用を証明するが、３２Ｄ親細胞ではアポトーシスを誘発しない。

細胞性ＢＣＲ−Ａｂｌ自己リン酸化に対する効果
ＢＣＲ−Ａｂｌ自己リン酸化を、ｃ−ａｂｌ特異的捕捉抗体および抗ホスホチロシン抗体を使用した、捕捉Ｅｌｉｓａで定量する。３２Ｄ−ｐ２１０細胞を９６ウェルＴＣプレートに、５０μＬの培地中２×１０^５細胞／ウェルで播種する。５０μＬの試験化合物の２倍連続希釈（Ｃ_ｍａｘは１０μＭ）をそれぞれのウェルに添加する（ＳＴＩ５７１を陽性対照として包含する）。細胞を、９０分、３７℃、５％ＣＯ_２でインキュベートする。次いで、細胞を１時間、氷上でプロテアーゼおよびホスファターゼ阻害剤を含む１５０μＬの融解緩衝液（５０ｍＭのＴｒｉｓ ＨＣｌ、ｐＨ７．４、１５０ｍＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＥＤＴＡ、１ｍＭのＥＧＴＡおよび１％ＮＰ−４０）で処理する。５０μＬの細胞融解物を、予め抗ａｂｌ特異的抗体でコーティングし、ブロックした９６ウェルｏｐｔｉｐｌａｔｅに添加する。プレートを、４時間、４℃でインキュベートする。ＴＢＳ−Ｔｗｅｅｎ ２０緩衝液で洗浄後、５０μＬのアルカリホスファターゼ結合抗ホスホチロシン抗体を添加し、プレートをさらに一晩４℃でインキュベートする。ＴＢＳ−Ｔｗｅｅｎ ２０緩衝液で洗浄後、９０μＬの発光基質を添加し、発光をＡｃｑｕｅｓｔ^ＴＭシステム（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）を使用して定量する。ＢＣＲ−Ａｂｌ発現細胞の増殖を阻害する本発明の試験化合物は、細胞性ＢＣＲ−Ａｂｌ自己リン酸化を用量依存的方法で阻害する。

Ｂｃｒ−ａｂｌの変異型を発現する細胞の増殖に対する効果
本発明の化合物を、ＢＣＲ−Ａｂｌの野生型または、ＳＴＩ５７１に対する耐性を付与するか感受性を低下させる変異型（Ｇ２５０Ｅ、Ｅ２５５Ｖ、Ｔ３１５Ｉ、Ｆ３１７Ｌ、Ｍ３５１Ｔ）のいずれかを発現するＢａ／Ｆ３細胞に対するそれらの抗増殖効果を試験する。変異体ＢＣＲ−Ａｂｌ発現細胞および非形質転換細胞に対するこれらの化合物の抗増殖性効果を、上記のとおり（ＩＬ３欠如培地中で）１０、３．３、１．１および０．３７μＭで試験した。非形質転換細胞に対して毒性がない化合物のＩＣ_５０値を、上記のとおりに得た用量応答曲線から決定した。

ＦＧＦＲ３（酵素アッセイ）
精製ＦＧＦＲ３（Ｕｐｓｔａｔｅ）でキナーゼ活性アッセイをキナーゼバッファー（３０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ ｐＨ７．５、１５ｍＭのＭｇＣｌ_２、４．５ｍＭのＭｎＣｌ_２、１５μＭのＮａ_３ＶＯ_４および５０μｇ／ｍＬのＢＳＡ）中の０．２５μｇ／ｍＬの酵素、および基質（５μｇ／ｍＬのビオチン−ポリ−ＥＹ（Ｇｌｕ、Ｔｙｒ）（ＣＩＳ−ＵＳ， Ｉｎｃ．）および３μＭのＡＴＰ）を含む最終容量１０μＬで行う。２つの溶液を作る：５μｌの第１の溶液はキナーゼバッファー中にＦＧＦＲ３酵素を含み、まず３８４フォーマットＰｒｏｘｉＰｌａｔｅ（登録商標）（Ｐｅｒｋｉｎ−Ｅｌｍｅｒ）に分配し、次いでＤＭＳＯ中に溶解させた５０ｎＬの化合物を加え、次いで５μｌの第２の溶液はキナーゼバッファー中に基質（ポリ−ＥＹ）およびＡＴＰを含み、それぞれのウェルに加えた。室温で１時間インキュベートして反応させ、３０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ ｐＨ７．５、０．５ＭのＫＦ、５０ｍＭのＥＴＤＡ、０．２ｍｇ／ｍＬのＢＳＡ、１５μｇ／ｍＬのストレプトアビジン−ＸＬ６６５（ＣＩＳ−ＵＳ， Ｉｎｃ．）および１５０ｎｇ／ｍＬのクリプタート結合抗ホスホチロシン抗体（ＣＩＳ−ＵＳ， Ｉｎｃ．）を含む１０μＬのＨＴＲＦ検出混合物の添加により停止する。ストレプトアビジン−ビオチン相互作用をするため室温で１時間インキュベーション後、時間分解蛍光シグナルはＡｎａｌｙｓｔ ＧＴ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ Ｃｏｒｐ．）で読む。ＩＣ_５０値は１２個の濃度（５０μＭから０．２８ｎＭの１：３希釈）でそれぞれの化合物の阻害％の線形回帰分析により計算する。このアッセイにおいて、本発明の化合物は１０ｎＭから２μＭの範囲のＩＣ_５０を有する。

ＦＧＦＲ３（細胞アッセイ）
本発明の化合物をＦＧＦＲ３細胞キナーゼ活性に依存している形質転換Ｂａ／Ｆ３−ＴＥＬ−ＦＧＦＲ３細胞増殖を阻害する能力に対して試験する。Ｂａ／Ｆ３−ＴＥＬ−ＦＧＦＲ３を培養培地として１０％の胎児ウシ血清を補ったＲＰＭＩ １６４０を含む懸濁液中に８００，０００細胞／ｍＬまで培養する。細胞を５０μＬの培養培地中に５０００細胞／ウェルで３８４ウェル形式のプレート中に分配する。本発明の化合物をジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）中に溶解し、希釈する。一般的に１０ｍＭから０．０５μＭの範囲の濃度勾配を作るため、１：３連続希釈で１２点をＤＭＳＯ中に作る。細胞を５０ｎＬの希釈化合物と加え、４８時間、細胞培養インキュベーター中でインキュベーションする。増殖している細胞により作られる還元環境をモニタリングするために使用できるＡｌａｍａｒＢｌｕｅ（登録商標）（TREK Diagnostic Systems）を最終濃度１０％で細胞に加える。３７℃で細胞培養インキュベーター内でさらに４時間インキュベーション後、還元ＡｌａｍａｒＢｌｕｅ（登録商標）（５３０ｎｍで励起、５８０ｎｍで放射）からの蛍光シグナルをＡｎａｌｙｓｔ ＧＴ（Molecular Devices Corp.）で定量化する。ＩＣ_５０値は１２個の濃度でそれぞれの化合物の阻害％の線形回帰分析により計算する。

ＦＬＴ３およびＰＤＧＦＲβ（細胞アッセイ）
ＦＬＴ３の細胞活性における本発明の化合物の効果を、Ｂａ／Ｆ３−ＴＥＬ−ＦＧＦＲ３を使用する代わりに、Ｂａ／Ｆ３−ＦＬＴ３−ＩＴＤを使用することを除いて上記ＦＧＦＲ３細胞活性と同一の方法を使用して実施する。

Ｕｐｓｔａｔｅ ＫｉｎａｓｅＰｒｏｆｉｌｅｒ^ＴＭ−放射酵素的フィルター結合アッセイ
本発明の化合物を、一連のキナーゼの個々のメンバーを阻害する能力についてアッセイする。化合物を、１０μＭの最終濃度でデュプリケートで、この一般的プロトコールに従い試験する。キナーゼ緩衝液組成物および基質は一連の“Ｕｐｓｔａｔｅ ＫｉｎａｓｅＰｒｏｆｉｌｅｒ^ＴＭ”を含んでいる異なるキナーゼに対して変化することを留意する。キナーゼ緩衝液（２．５μＬ、１０×−必要であればＭｎＣｌ_２含有）、キナーゼ緩衝液中の活性キナーゼ（０．００１−０．０１単位；２．５μＬ）、特異的またはポリ（Ｇｌｕ４−Ｔｙｒ）ペプチド（５−５００μＭまたは．０１ｍｇ／ｍｌ）およびキナーゼ緩衝液（５０μＭ；５μＬ）を、氷上でエッペンドルフで混合する。Ｍｇ／ＡＴＰミックス（１０μＬ；６７．５（または３３．７５）ｍＭのＭｇＣｌ_２、４５０（または２２５）μＭのＡＴＰおよび１μＣｉ／μｌ［γ−^３２Ｐ］−ＡＴＰ（３０００Ｃｉ／ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を約３０℃で約１０分インキュベートする。反応混合物を２ｃｍ×２ｃｍのＰ８１（ホスホセルロース、正に荷電したペプチド基質のため）またはＷｈａｔｍａｎ Ｎｏ．１（ポリ（Ｇｌｕ４−Ｔｙｒ）ペプチド基質のため）試験紙升目にスポット（２０μＬ）する。アッセイ升目を４回、それぞれ５分、０．７５％リン酸で、そして１回アセトンで５分洗浄する。アッセイ升目をシンチレーションバイアルに移し、５ｍｌシンチレーションカクテルを添加し、ペプチド基質への^３２Ｐ取り込み（ｃｐｍ）をＢｅｃｋｍａｎシンチレーションカウンターで計数する。それぞれの反応について阻害パーセントを計算する。

遊離形または薬学的に許容される塩形の式Ｉの化合物は、例えば、本出願に記載のインビトロ試験法により示される通り、価値のある薬理学的特性を示す。例えば、式Ｉの化合物は、好ましくは１×１０^−１０から１×１０^−５Ｍの範囲、好ましくは１μＭ未満、より好ましくは２５０ｎＭ未満、さらに好ましくは１００ｎＭ未満のＩＣ_５０を示す。１０μＭの濃度で式Ｉの化合物は、好ましくはＡｂｌ、Ａｕｒｏｒａ−Ａ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、Ｂｍｘ、ＣＤＫ１／サイクリンＢ、ＣＨＫ２、Ｆｅｓ、ＦＧＦＲ３、Ｆｌｔ３、ＧＳＫ３β、ＪＮＫ１α１、Ｌｃｋ、ＭＫＫ４およびＴｒｋＢキナーゼに対して５０％以上、好ましくは約８０％以上の阻害％を示す。

ここに記載の例および態様は、説明の目的のためのみであり、それに照らした様々な修飾または変化が当業者には示唆され、それらは本発明の精神および範囲の範囲内および添付の特許請求の範囲内に包含されることは理解されるべきである。本明細書で引用する全ての刊行物、特許および特許出願は全ての目的のために引用して本明細書に包含する。

Claims (8)

1. 式Ｉ：
   

   

   ［式中：
   ｎは０、１、２および３から選択され；
   ｍは０および１から選択され；
   Ｒ_１はハロ、シアノ、ヒドロキシ、ニトロ、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルコキシ、ハロ−置換−Ｃ_１−６アルキル、ハロ−置換−Ｃ_１−６アルコキシ、−Ｓ（Ｏ）_０−２Ｒ_５、−ＮＲ_５Ｒ_５、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ_５Ｒ_６、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ_５Ｒ_６、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ_５ＸＯＲ_５、−Ｃ（Ｏ）ＮＲ_５ＸＮＲ_５Ｒ_５、−ＯＲ_６、−Ｃ（Ｏ）ＯＲ_５、−ＮＲ_５Ｃ（Ｏ）Ｒ_６から選択され（ここで、各Ｒ_５は独立して水素およびＣ_１−６アルキルから選択され；そしてＲ_６はＣ_６−１０アリール−Ｃ_０−４アルキル、Ｃ_１−１０ヘテロアリール−Ｃ_０−４アルキル、Ｃ_３−１２シクロアルキル−Ｃ_０−４アルキルおよびＣ_３−８ヘテロシクロアルキル−Ｃ_０−４アルキルから選択されるか；またはｎが２のとき、２個の隣接するＲ_１ラジカルは両方が結合している原子と一緒にフェニルを形成し；
   Ｒ_２は水素およびメチルであり；
   Ｒ_３はハロであり；
   Ｒ_４は水素、ハロゲンおよびＣ_１−６アルキルから選択されるか；またはＲ_３およびＲ_４はＲ_３およびＲ_４が結合している原子と一緒にフェニルを形成し；そして環Ａは所望により３個までの＝Ｃ−基が＝Ｎ−で置換されていてもよい］
   で示される化合物ならびにその薬学的に許容される塩、水和物、溶媒和物および異性体。
2. Ａがフェニル、ピリジニルおよびナフチルから選択され；ｍが０であり；Ｒ_３がハロであり、そしてＲ_４が水素である、請求項１に記載の化合物。
3. Ｒ_１がメチル、ヒドロキシ、メトキシ、クロロ、フルオロ、ブロモ、カルボキシ、アミノ、シアノ、ニトロ、メチル−スルファニル、トリフルオロメトキシ、トリフルオロメチル、メチル−カルボニル、エトキシ−カルボニル、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ_６、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ_２）_２ＯＣＨ_３、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ＯＣＨ_３、−Ｃ（Ｏ）Ｎ（ＣＨ_３）（ＣＨ_２）_２ＯＣＨ_３、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ_２）_２ＯＨ、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ_２）_２Ｎ（ＣＨ_３）_２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨ（ＣＨ_２）_２Ｎ（Ｃ_２Ｈ_５）_２、−Ｃ（Ｏ）ＮＨＣＨ_３、−ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ_６、−ＮＨＣ（Ｏ）ＣＨ_３および−ＯＲ_６から選択される（ここでＲ_６はフェニル、モルホリノ−エチル、ピリジニルおよびピロリジニル−エチルから選択される）、請求項２に記載の化合物。
4. （５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−ｐ−トリル−アミン；４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−フェノール；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−（４−メトキシ−フェニル）−アミン；４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−安息香酸；４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−Ｎ−（２−モルホリン−４−イル−エチル）−ベンズアミド；４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−Ｎ−（２−メトキシ−エチル）−ベンズアミド；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−［４−（１−メチルアミノ−ビニル）−フェニル］−アミン；３−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−安息香酸；Ｎ−［４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−フェニル］−ベンズアミド；Ｎ−［４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−フェニル］−アセトアミド；３−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−Ｎ−（２−メトキシ−エチル）−ベンズアミド；３−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−Ｎ−メチル−ベンズアミド；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−［４−（ピリジン−４−イルオキシ）−フェニル］−アミン；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−（４−クロロ−フェニル）−アミン；ベンゾチアゾル−２−イル−（４−フルオロ−フェニル）−アミン；４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−Ｎ−（２−ヒドロキシ−エチル）−ベンズアミド；４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−Ｎ−（２−ジメチルアミノ−エチル）−ベンズアミド；４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−Ｎ−（２−ジエチルアミノ−エチル）−ベンズアミド；Ｎ−（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−ベンズアミド；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−（３−フルオロ−フェニル）−アミン；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−アミン；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−（３−メトキシ−フェニル）−アミン；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−ｍ−トリル−アミン；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−ピリジン−２−イル−アミン；Ｎ−（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−ベンゼン−１，４−ジアミン；１−［４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−フェニル］−エタノン；４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−安息香酸エチルエステル；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−ピリジン−４−イル−アミン；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−ピリジン−３−イル−アミン；Ｎ−（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−ベンズアミド；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−（４−トリフルオロメチル−フェニル）−アミン；３−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−安息香酸エチルエステル；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−フェニル−アミン；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−（２−メトキシ−フェニル）−アミン；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−（４−フルオロ−フェニル）−アミン；（５−クロロ−チアゾル−２−イル）−（４−フルオロ−フェニル）−アミン；（４−フルオロ−フェニル）−（５−ヨード−チアゾル−２−イル）−アミン；４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−ベンゾニトリル；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−ｏ−トリル−アミン；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−ナフタレン−１−イル−アミン；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−（２−フルオロ−フェニル）−アミン；３−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−ベンゾニトリル；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−（３−メチルスルファニル−フェニル）−アミン；（４−ブロモ−フェニル）−（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−アミン；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−（４−フェノキシ−フェニル）−アミン；（５−ブロモ−チアゾル−２−イル）−（４−ニトロ−フェニル）−アミン；４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−Ｎ−（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−ベンズアミド；４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−Ｎ−（２−メトキシ−１−メチル−エチル）−ベンズアミド；および４−（５−ブロモ−チアゾル−２−イルアミノ）−Ｎ−（２−メトキシ−エチル）−Ｎ−メチル−ベンズアミドから選択される請求項１に記載の化合物。
5. 治療有効量の請求項１に記載の化合物と一緒に薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
6. キナーゼ活性の阻害が疾患の病状および／または総体症状を予防、阻害または改善することができる動物の疾患を処置する方法であって、該動物に治療有効量の請求項１に記載の化合物を投与することを含む方法。
7. キナーゼがＡｂｌ、Ａｕｒｏｒａ−Ａ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、Ｂｍｘ、ＣＤＫ１／サイクリンＢ、ＣＨＫ２、Ｆｅｓ、ＦＧＦＲ３、Ｆｌｔ３、ＧＳＫ３β、ＪＮＫ１α１、Ｌｃｋ、ＭＫＫ４およびＴｒｋＢから選択される、請求項６に記載の方法。
8. Ａｂｌ、Ａｕｒｏｒａ−Ａ、Ｂｃｒ−Ａｂｌ、Ｂｍｘ、ＣＤＫ１／サイクリンＢ、ＣＨＫ２、Ｆｅｓ、ＦＧＦＲ３、Ｆｌｔ３、ＧＳＫ３β、ＪＮＫ１α１、Ｌｃｋ、ＭＫＫ４およびＴｒｋＢのキナーゼ活性が疾患の病状および／または総体症状に関与する動物の疾患を処置するための薬剤の製造における請求項１に記載の化合物の使用。