JPH06504768A - 抗生物質ｇｅ２２７０因子のアミド類 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 抗生物＠ＧＥ２２７０因子のアミド類 本発明は、下記の式Ｉ Ｒは水素、 ヒドロキシメチル、または メトキシメチルを表し、 Ｒ１は水素、または メチルを表し、 Ｙは式 ％式％ （ＣＩ　Ｃ４）アルキルアミノ−（ＣＩ　Ｃ４）アルキル、またはジー（ＣＩ　 Ｃ４）アルキルアミノ−（ＣＩ　Ｃ４）アルキルを表し、Ｒ３は水素、 カルボキシ、スルホ、ホスホノ、場合により低級アルコキシカルボニルもしくは ベンジルオキシカルボニル基で保護されていてもよいアミノ、アルキル部分が任 意にカルボキシ基で置換されていてもよい（ＣＩ　Ｃ４）アルキルアミノ、ジー （ＣＩ　Ｃ４）アルキルアミノ、ヒドロキシ、ハロ、アルキル部分が任意にカル ボキシ基で置換されていてもよい（Ｃ，−Ｃ，）アルコキシ、（ＣＩ　Ｃ４）ア ルコキシカルボニル、メルカプト、（ＣＩ　Ｃ４）アルキルチオ（ここでアルキ ル部分は場合によりカルボキシ基で置換されていてもよい）、場合によりカルボ キシ、スルホ、ヒドロキシ、ハロおよびメルカプトからなる群から選択された１ −３個の置換基で置換されていてもよいフェニル、カルバミル、（ＣＩ　Ｃ６） アルキルカルバミル（ここでアルキル部分は場合によりカルボキシ、アミノ、（ ＣＩ　Ｃ４）アルキルアミノおよびジー（ＣＩ　Ｃ４）アルキルアミノから選択 される１もしくは２個の置換基で置換されていてもよい）、ジー（ＣＩ　Ｃ４） アルキルカルバミル（ここでアルキル部分は隣接窒素原子と一緒になって場合に より環炭素の１個の上でカルボキシもしくはカルバミル基で置換されていてもよ くそして場合によりＯＳＳおよびＮから選択される池のへテロ基を含有していて もよい飽和５−７員の複素環式環を表すこともできる）、ベンジルアミノ（ここ でフェニル基は１−３個のヒドロキシ基、不飽和であっても、部分的に飽和され ていてもまたは全体に飽和されていてもよくそしてＮ、Ｓおよび０から選択され る１−３個の別のへテロ原子を含有していてもよい窒素含有５−６員の複素環式 環（ここで環の炭素の１個は場合により基カルボキシ、スルホ、カルボキン（Ｃ Ｉ　Ｃ４）アルキルおよびスルホ（ＣＩ　Ｃ４）アルキルを有していてもよくそ して環窒素原子は場合により（ＣＩ−Ｃ４）アルキル、カルボキシ（ＣＩ　Ｃ４ ）アルキル、スルホ（Ｃ！　Ｃ４）アルキルおよびベンジルにより置換されてい てもよい）で置換されていてもよい） から選択される１−３個の置換基を有する直鎖状もしくは分枝鎖状の（ＣＩ　Ｃ ｌ４）アルキル、 場合によりカルボキシまたはスルホ置換されていてもよい（Ｃ３−ＣＩｌ）アル ケニル、 ■−デオキシー１−グルジチル、 ２−デオキシ−２−グルコシル、 窒素原子が場合により（ＣＩ　Ｃ４）アルキルまたはベンジルにより置換されて いてもよくそして環骨格の１または２個の炭素が（ＣＩ−Ｃ４）アルキル、カル ボキシおよびスルホから選択される置換基を有していてもよい完全に飽和されて いる５−７員の窒素含有複素環式を表すか、或いは Ｒ２およびＲ３が隣接窒素原子と一緒になって場合によりＯｌＳおよびＮから選 択される他のへテロ原子を含有していてもよくそして場合により環炭素上に（Ｃ Ｉ　Ｃ４）アルキル、ベンジル、カルボキシ、スルホ、カルボキシ（ＣＩ　Ｃ４ ）アルキル、およびスルホ（ＣＩ　Ｃ４）アルキルから選択される１もしくは２ 個の置換基を有していてもよい完全に飽和されている５−７員の複素環式環を表 し、Ｒ４は 水素、 メチル、または ヒドロキシメチル を表し、 但し条件として、Ｒ４が水素またはヒドロキシメチルである時には、同時にＲは メトキシメチルでありモしてＲ１はメチルである］を有する抗生物質ＧＥ２２７ ０のアミド誘導体類並びにそれらの薬学的付加塩類に関するものである。

本発明はまた、対応する式（ＩＩ） Ｗはカルボン酸官能基またはそれの活性化されたエステルである］の出発化合物 からの本発明の化合物の製造方法をも包含する。

抗生物質ＧＥ２２７０は、プラノビスボアーｏセア（Ｐｌａｎｏｂｉｓｐｏｒａ 　ｒ。

５ｅａ）ＡＴＣＣ５３７７３の試料を培養するかまたはそれの変異体もしくは互 変異性体を製造し、そして希望する抗生物質を菌糸体および／または発行ブロス から単離することにより、製造されている。プラノビスボア・ロセアＡＴＣＣ５ ３７７３は土壌試料から単離されそして１９８８年６月１４日に米国、メリーラ ンド州、ＭＤ２０８５２、ロックヴイル、バークレーン・ドライブ、１２３０１ 、アメリカン・タイプ・カルチャー・コレクション（ＡＴＣＣ）でブダペスト条 約の規定のもと供託された。

菌株は受け入れ番号ＡＴＣＣ５３７７３と指定された。

抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａは抗生物質ＧＥ２２７０複合体の主要成分である。

抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａおよびプラノビスポア・ロセアＡＴＣＣ５３７７３ はヨーロッパ特許出願公告番号３５９０６２中に記されている。

最近の研究は、抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａが下記の一般式ＩＩＩにより表すこ とができることを示している。

抗生物質ＧＥ２２７０Ａを選択的な加水分解条件下で処理する時には、抗生物質 ＧＥ２２７０因子Ａ１、Ａ、およびＡ３と称されているある種の誘導体類が得ら れる。該因子Ａ７、Ａ２およびＡ３並びにそれらを製造するための加水分解方法 はヨーロッパ特許出願公告番号４０６７４５および米国特許出願番号５４７，６ ４７中に記されている。

一般的には、上記の加水分解条件は緩衝されたまたは緩衝されていない水性酸媒 体と極性有機溶媒との混合物の使用を含んでいる。反応温度は例えば使用される 酸の強度および濃度の如き要素に依存して変動し、そして一般的には一１０℃〜 ９０℃の間である。反応時間も例えば温度、酸強度およびそれの濃度の如き要素 に依存して相当変動し、一般的にはそれは２．３分から５．６時間に変動するこ とができる。

一般的には、比較的穏やかな加水分解条件、例えば比較的短い反応時間および比 較的低い温度または比較的低い酸強度もしくは濃度、が使用される時には、抗生 物質ＧＥ２２７０因子ＡＩが通常得られるが、比較的強い加水分解条件では抗生 物質ＧＥ２２７０因子Ａ２が生成する。抗生物１ｔＧＥ２２７０因子Ａ、を得る ためには、さらに苛酷な加水分解条件が必要である。

抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａ２およびＡ、を本発明の化合物の製造用の出発物質 として直接使用することができるが、抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａ１は本発明の 化合物の直接的製造用の出発物質としては適していない。しかし、それを以下で さらに説明されている如く該出発物質の先駆体として使用することができる。

抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａ２および因子Ａ３は、それぞれ分子の上部にエステ ルおよびカルボキシ官能基を有することにより、特徴づけられている。特に、抗 生物質ＧＥ２２７０因子Ａ２および因子Ａ３は上記で定義されている式ＩＩによ り表すことができ、ここでＷはＣ０ＯＨ（抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａｓ）また はエステル部分（抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａ２） Ｒはメトキシメチルであり、 Ｒ，はメチルであり、そして Ｒ１はメチルである。

因子Ａ３が好適なものであるが、抗生物質ＧＥ２２７０Ａｚおよび因子Ａ、の両 者（並びにそれらの混合物）を本発明の化合物の製造用の出発物質として使用す ることができる。因子Ａ！は活性化されたエステルとして直接使用することがで き、または（ヨーロッパ特許出願公告番号４０６７４５および米国特許出願番号 ５４７．６４７中に記されている如くして）上記の如き苛酷な加水分解条件によ りもしくは希釈されたアルカリを用いる加水分解により因子Ａ、に転化させるこ とができる。

他の少量成分類をプラノビスポラ・ロセアＡＴＣＣ５３７７３または抗生物質Ｇ Ｅ２２７０生産性変異体もしくはそれの互変異性体の培養物から単離できること が最近見いだされている（ヨーロッパ特許出願公告番号４５１４８６および米国 特許出願番号６６５．６１２）。特に、それらは菌糸体中および培養された微生 物の発酵ブロス中で見いだされている。

抗生物質ＧＥ２２７０の該少量成分類を菌糸体から回収するための好適な１稈は 、濾過または遠心された菌糸体を水−混和性有機溶媒で抽出し、抽出物を濃縮し そして粗製抗生物質を任意に沈澱剤を添加しての沈澱により、水−不混和性有機 溶媒を用いる水性残渣の抽出によりもしくは吸着クロマトグラフィーおよびその 後の希望する生成物の吸収マトリックスからの溶離により回収することを包括し ている。

他の少量成分（因子Ｃ２，）を上記と同じプラノビスボラ・ロセアＡＴＣＣ５３ ７７３の培養物から単離できることが最近見いだされている（ヨーロッパ特許出 願番号９１１１４６６７．８）。

抗生物質ＧＥ２２７０Ｃｔ−の物理化学的特性は下記の如（である：Ａ）パーキ ン・エルマー・モデル３２０分光計で記録された紫外線吸収スペクトルは下記の 最大吸収を示す。

溶媒　紫外線最大（ｎｍ） ０．１Ｍ　ＩＣ＋　２４５−２５０　（肩部）０．１Ｍ　ＫＯＨ２４５−２５０ （肩部）燐酸塩緩衝液ｐＨ７，３８２４５−２５０（肩部）メタノール　２４５ −２５０　（肩部）抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｃ２，の’Ｈ−ＮＭＲスペクトル をプルカー分光計を用いて２５０ＭＨｚにおいて記録した。内部標準（０，００ ｐｐｍ）としてＴＭＳを使用するＤＭＳＯｄｓ（ヘキサシュートロジメチルスル ホキシド）中での抗生物質のスペクトルは下記の信号群［δ、ｐｐｍＳｍ］を示 す（ｓ＝−重線、ｄ＝二重線、ｔ＝三重線、ｍ＝多重線、ｐｙ＝ピリジン、Ｔｚ ＝チアゾール）。

９、０３．　ｄ、（ＮＨ）　；　８．７０．　ｄ、（２ＮＨ類）；８．６０．ｓ 、８．５４．ｓ。

８．２９．ｓ、および７．３８．ｓ、（Ｔｚ　ＣＨ類）；８．４８．ｍ、（グリ シンＮＨ）　；　８．４３．　ｄ、および８．２７．ｄ、（Ｐｙ　ＣＨ類）；７ ．３５−７．２０、ｍ、（芳香族ＣＨ類および第一級アミドＮＨ）；６．９８． ｓ（第一級アミドＮＨ）；　６．０４．ｄ、（ＯＨ）；　５．８０．ｔ（ＯＨ） ；　５．３５−５．１５゜ｍ、（ａｃＨ類）　；　５．０４．ｍ、（フェニルセ リンβＣＨ）；４．９８．ｓ［ＣＨｚ（ＯＣＨ５）］；　４．８７．ｄ、［Ｃ） （２（ＯＨ）］；　４．８１．ｍおよび４．５６．ｍ、（オキサゾリンＣＨｚ） 　；　４．３５　３．７５．ｍ、（グリシンのＣＨＩおよびプロリンアミドＣＨ 類）　；　３．３９．　ｓ、（ＯＣＨｓ）　：　２．７１゜ｍ、および１．３０ ．ｍ、（アスパルギンのＣＨｘ）　：　２．４８．　ｄ、（Ｎ−メチルアスバル ギンのＮＣ）Ｉｇ）；２．２２　１．８０．ｍ、（イソプロピルＣＩおよびプロ リンアミドＣＨ類）；０．８８および０．８４．ｄ、（バリンＣＨ３類）。

Ｃ）下記の逆相ＨＰ　Ｌ　Ｃシステムを用いて分析される時には、抗生物質ＧＥ ２２７０因子Ｃ３，は１２，６分の保持時間（Ｒυおよび０．７６の抗生物質Ｇ Ｅ２２７０因子Ａに関する保持時間（Ｒ，１６，６分）を示す二カラム：ベーカ ーポンド”Ｃ８（５μｍ）４．６Ｘ２５０ｍｍ　（ベーカーボンド８は米国０８ ８６５、ニューシャーシー州、フィリスブルグ、Ｊ。

Ｔ、ベーカー・リサーチ・プロダクトにより供給される逆相オクチルシリルシリ カゲルＨＰ　Ｌ　Ｃカラム用の商標である）流速・１．８ｍｌ／分 相Ａ：Ｃ１１３ＣＮ：テトラヒドロフラ：／：　４０ｍＭ　）ＩＣＯＯＮ）Ｒ４ ０：４０：２０ 相Ｂ　：　ＣＨ３ＣＮ：テトラヒドロフラン＋　４０ｍＭ　ｌＩＣ０ＯＮＨ４１ ０：１０：８０ Ｄ）抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｃ２ｍの主要ＦＡＢ−ＭＳピークは１３０６ダル トンであった。これはプロトン化された分子イオンの最も低い同位体に大体対応 していた。クラトスＭＳ−５０二重焦点質量分光計の上で８ｋＶ促進電圧および サドルフィールド原子銃をＸｅ気体（源イオンゲージ上で示された２Ｘ１０−’ ）ル圧力）と共に用いて６ｋＶ電圧および１ｍＭ電流において分析を行った。Ｆ ＡＢ−ＭＳ分析用の抗生物質を０゜１Ｍ酢酸を含有しているチオグリセロールマ トリックスと混合した。

抗生物質ＧＥ２２７０の該少量成分類の一部（すなわち、因子Ｂ、、Ｂ２、ＣＩ 、Ｃｔ、Ｃ２ｓ、Ｂ７、Ｂ２およびＥ）は上記の一般式ＩＩにより表すことがで き、ここで Ｗは部分： を表し、 Ｒはそれぞれ、ＧＥ２２７０因子Ｃ１およびり、に関しては水素、因子Ｂ、に関 してはメチル、因子り、およびＥに関してはヒドロキシメチル、そして因子Ｂ１ 、Ｃ！およびＣ２，に関してはメトキシメチルを表し、Ｒ，はＧＥ２２７０因子 Ｂ、、Ｄ、およびＥに関しては水素、そしてＧＥ２２７０因子Ｂ２、Ｃ１、Ｃ２ 、Ｃ２，およびＤ！に関してはメチルを表し、そして Ｒ１はＧＥ２２７０因子Ｃ２に関しては水素、ＧＥ２２７０因子Ｂ７、Ｂ７、Ｃ １、Ｄｌ、Ｂ２およびＥに関してはメチル、そして因子Ｃｐｓに関してヒドロキ シメチルを表す。

抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａから抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａ、およびＡ３を製 造するための以上で略記されており（そしてヨーロッパ特許出願公告番号４０６ ７４５および米国特許出願番号５４７．６４７中に記されている）のと同じ加水 分解方法により抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｄ１、Ｂ２およびＥまたはそれらの混 合物を処理する時には、置換基Ｒ１Ｒ，およびＲ４は変更させないまま以上で引 用されている共通部分Ｗがカルボキシ部分に加水分解される。

従って、Ｗがカルボキシまたは活性化されたエステル官能基であり、Ｒが水素、 ヒドロキシメチルまたはメトキシメチルであり、Ｒ，が水素またはメチルであり 、そしてＲ４が水素、メチルまたはヒドロキシメチルであり、但し条件として、 Ｒ４が水素またはヒドロキシメチルである時にはＲがメトキシメチルでありそし てＲ１がメチルである式ＩＩの誘導体類を、本発明の出発物質として使用するこ とができる。他の微生物と同様にＧＥ２２７０生産性菌株の特性を変異にかけた 。例えば、菌株の人工的変異体および互変異性体は例えば紫外線、Ｘ線、高周波 、放射線の如き種々の既知の変異原、および例えば亜硝酸、Ｎ−メチル−Ｎ’− ニトロ−Ｎ−ニトロソ−グアニジンの如き化学物質、および他の多くのものを用 いる処理により得られる。プラノビスポラ属の種に属しておりそして抗生物質Ｇ Ｅ２２７０を生産する全ての天然および人工的変異体並びに互変異性体は、本発 明の目的用には、菌株プラノビスポラ・ロセアＡＴＣＣ５３７７３と同等である とみなされる。

単独でまたは他の置換基と組み合わされてここで使用されている「アルキル」と いう語には直鎖および分枝鎖状の両者の炭化水素基が包含され、より特に、ｒ（ ＣＩ　Ｃｌ４）アルキル」は炭素数が１−１４の直鎖もしくは分枝鎖状の脂肪族 炭化水素鎖、例えばメチル、エチル、プロピル、１−メチルエチル、ブチル、１ −メチルプロピル、１．１−ジメチルエチル、ペンチル、１−メチルブチル、２ −メチルブチル、１−ヘキシル、２−ヘキシル、３−ヘキシル、３．３−ジメチ ル−１−ブチル、４−メチル−１−ペンチルおよび３−メチル−１−ペンチル、 ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、トリデシルおよ びテトラデシルを表し、同様にｒ（ＣＩ　Ｃａ）アルキル」は炭素数が１−４の 直鎖もしくは分枝鎖状の脂肪族炭化水素鎖、例えば以上で例示されている炭素数 が１−４のアルキル、を表す。

上記の如く、ｒ（ＣＩ　Ｃｌ４）アルキル」部分は１−３個の置換基を有するこ とができる。

「ハロ」という語は、フルオロ、クロロ、ブロモおよびアイオドから選択される ハロゲン原子を表す。

ここで使用されているｒ（Ｃ３−Ｃｓ）アルケニル」という語は炭素数が３−６ の二重結合を有するアルキレン基を意味し、それはプロペニル、３−ブテニル、 ２−ブテニル、２−メチルプロペニル、２−ペンテニル、３−へキセニルなどを 包括しており、それらは任意にカルボキシまたはスルホ基で置換されていてもよ い。

本発明に従うｒＮ、Ｓおよび０から選択された１−３個の別のへテロ原子を含有 していてもよい窒素含有５−６員の複素環式環」という表示には、不飽和の、部 分的に飽和されたおよび完全に飽和された環系、例えばピリジン、ピリミジン、 ピラジン、ピロリジン、ピペリジン、ピペラジン、オキサゾール、オキサゾリン 、オキサゾリジン、ピラゾリン、ピラゾリジン、チアゾリジン、モルホリン、チ オモルホリン、ピロール、ピロリン、イミダゾール、イミダゾリジン、チアジア ゾール、オキサジアゾールおよびテトラゾール、が包含される。

該「窒素含有５−６員の複素環式環」においては、１−３１１１の環炭素は任意 に基カルボキシ、スルホ、カルボキシ（ＣＩ　Ｃｓ＞アルキルおよびスルホ（Ｃ Ｉ　Ｃ４）アルキルを有していてもよく、そして環窒素原子は任意に（ＣＩ　Ｃ ４）アルキル −０４）アルキル、およびベンジルにより置換されていてもよい。

「窒素原子が任意に（ＣＩ　Ｃ４）アルキルまたはベンジルにより置換されてい てもよい完全に飽和された５−７貝の窒素含有複素環式環」という表示は、任意 に（ＣＩ　Ｃ４）アルキルまたはベンジルにより置換されていてもよく、ここで 炭素骨格は任意に（ＣＩ　０４）アルキル、カルボキシおよびスルホから選択さ れる１もしくは２個の置換基を有していてもよい窒素原子を含有している完全に 飽和された５−７員の複素環を同定している。該複素環式環は残基 Ｎ の窒素部分と、当該窒素部分と複素環式残基の炭素原子の間の結合により、結合 されている。該基の例は、■ーメチルー４ーピロリジニル、３−ビベリジニル、 １−エチル−４−ピペリジニル、■ーベンジルー２。

６−シメチルー４−ピペリジニル、および４−カルボキシ−１−メチル−２−ピ ペリジニルである。

Ｒ２およびＲ４が隣接窒素原子と一緒になって［任意に。、ＳおよびＮから選択 される別のへテロ原子を含有していてもよい完全に飽和された５−７員の複素環 式環」を表す時には、この表示には例えば下記の複素環式基：ピロリジン、モル ホリノ、ピペリジノ、ピペラジノ、チオモルホリノ、ピラゾリジノ、１．３−オ キサゾリンノ、１，３−チアシリジノおよびヘキサヒドロアゼピへが包含される 。別のへテロ原子がＮである時には、それは任意に（ＣＩ　Ｃ４）アルキル、ベ ンジル、カルボキシ、カルボキシ（ＣＩ　Ｃ４）アルキル、スルホおよびスルホ （Ｃ　、　−　Ｃ　４）アルキルから選択される置換基を有していてもよい。

［１−デオキシ−１−グルジチルＪという語は、Ｙがグルカミンがら誘導される 基である式（１）の化合物、すなわち１−アミノ−１−デオキシグルコール、を 同定している。「２−デオキシ−２−グルコシル」という語は、Ｙがグルコサミ ンがら誘導される基である式（１）の化合物、すなわち２−アミノ−２−デオキ シグルコース、を同定している。

本発明の好適群の化合物類は、Ｒがメトキシメチルを表し、Ｒ，およびＲ４がメ チル基を表し、そして他の置換基が以上で定義されている如くである、式■の化 合物類により代表される。

本発明の他の好適群の化合物類は、Ｒがメトキシメチルを表し、Ｒ。

およびＲ４がメチル基を表し、モしてＹが式％式％ Ｒ２が水素でありモしてＲ，が以上で定義されている如くである、式■の化合物 類である。

本発明の他の好適群の化合物類は、Ｒがメトキシメチルであり、Ｒ。

およびＲ４がメチル基を表し、そしてＹが天然アミノ酸、例えばグリシン、オル ニチン、セリン、アスバルチン酸、チロシン、ロイシン、フェニルアラニン、メ チオニン、プロリン、スレオニン、リシン、または合成ジペプチド、例えばグリ シルリシン、セリールブロリン、グリシルプロリンアミド、チロシルプロリンア ミド、スレオニルプロリンアミド、ロイシルプロリンアミド、から誘導されるア ミノ部分である、式■の化合物類により代表される。

本発明の他の好適群の化合物類は、Ｒがメトキシメチルであり、Ｒ。

およびＲ４がメチルであり、Ｙが基ＮＲ，Ｒ３であり、ここでＲ２が水素であり そしてＲ３がＣＯＯＨ，ＳＯｓＨおよびＰＯ３Ｈ２から構成される装置換された 好適には炭素数が３−１２の、より好適には３−７の、線状アルキル鎖である、 式■の化合物を包括している。

最も好適な化合物は、Ｒがメトキシメチルであり、Ｒ，およびＲ４がメチルであ り、Ｙが基ＮＲ，Ｒ８であり、ここでＲ７が水素でありそしてＲ８がＣＨ！　Ｃ Ｈｔ　ＣＨ＊　Ｃ）ｒ　ｔ　ＣＨ２ＣＯＯＨである、式■により代表される。

本発明の他の好適群の化合物類は、Ｒが水素、ヒドロキシメチルまたはメトキシ メチルを表し、Ｒ１が水素またはメチル基を表し、Ｒ１が水素、メチルまたはヒ ドロキシメチル基を表し、モしてＹが式％式％ Ｒ２が水素でありそしてＲ３が以上で定義されている如くである、式Ｉの化合物 類である。

本発明の池の好適群の化合物類は、Ｒが水素、ヒドロキシメチルまたはメトキシ メチルであり、Ｒ１が水素またはメチル基を表し、Ｒ４が水素、メチルまたはヒ ドロキシメチルであり、但し条件として、Ｒ４が水素またはヒドロキシメチルで ある時には、ＲがメトキシメチルでありそしてＲ７がメチルであり、そしてＹが 天然アミノ酸、例えばグリシン、オルニチン、セリン、アスパルチン酸、チロシ ン、ロイシン、フェニルアラニン、メチオニン、プロリン、スレオニン、リシン 、または合成ジペプチド、例えばグリシルリシン、セリールブロリン、グリシル プロリンアミド、チロシルプロリンアミド、スレオニルプロリンアミド、ロイシ ルプロリンアミド、から誘導されるアミノ部分である、式■の化合物類により代 表される。

他の好適群の化合物類には、Ｒが水素、ヒドロキシメチルまたはメトキシメチル であり、Ｒ，が水素またはメチルであり、Ｒ４が水素、メチルまたはヒドロキシ メチルであり、但し条件として、Ｒ４が水素またはヒドロキシメチルである時に は、ＲがメトキシメチルでありモしてＲ８がメチルであり、Ｙが基ＮＲ，Ｒ８で あり、ここでＲ１が水素でありそしてＲ３がＣ０ＯＨ，５Ｏ３Ｈおよびｐｏｓｉ −ｔｔから構成される装置換された好適には炭素数が３−１２の、より好適には ３−７の、線状アルキル鎖である、式１の化合物類が包含される。

最後の好適群の化合物類は、Ｒが水素、ヒドロキシメチルまたはメトキシメチル であり、Ｒ３が水素またはメチルであり、Ｒ４が以上で定義されている如くであ り、モしてＹが基Ｎ　Ｒｔ　Ｒｓであり、ここでＲ１が水素でありそしてＲ３が ＣＨ，ＣＩｈＣＨ２ＣＨＩＣＨＩ　Ｃ０ＯＨである、式■により代表される。

本発明の化合物類の代表的な例には、Ｒ，Ｒ，、Ｒ４およびＹが以上で定義され ている如くであり、そして Ｎ が下記のものを表すものである。

ＮＨ２ −ＮＨ（４Ｈ９ −ＮＨ（ＣＨ２）ｒＰＯ３Ｈ１ −ＮＨ（Ｒ２（ＯＯＨ −ＮＨ−ＣＨ２（ＯＮＨ３ ここでｎは２．３または４である 一ＮＨ（ＣＨ２）ｎ−ＮＲ２ −ＮＨ（（）１２）ｒｌ−ＮＨ（Ｈｚ −ＮＨ−（ＣＨｘ）ｎ−Ｎ（ＣＨｄ２ −ＮＨイＣＨ２）ｙｌ−Ｎ（ＣｚＨｓ）ｚ・Ｈ園ロー。−Ｎ（（Ｈｌ）（Ｃ２Ｈ りここでｎは２．３．４．５．６．７または８である−ＮＨ−（Ｃ）（２）、− ＮＨ−（ＣＨ２）ｆｆｒｃＯＯＨ−ＮＨ（ＣＨ２）、−ＮＨ（ＣＨ２）、、−５ ＯＩＨ−ＮＨ（ＣＨ２）ｎ−０４ＣＨ２）ｍ−ＣＯＯＨ−ＮＨ（ＣＨ２）ｎ−Ｑ （ＣＨ２）、、−５ｏ）１４−ＮＨ４ＣＨｄｎ−５４ＣＨｚ）＠ｙｌ−ＣＯＯＨ 、ＮＨ（０４ｄ、−５−（ＣＨ２）ｒｒ％−５ｏ、Ｈ−ＮＨ−（ＣＨ２）、−Ｃ ＨＩＩ　（Ｈ−（（Ｈ２）、、−ＣＯＯＨ本発明の化合物類は一般的工程に従い 塩類を生成することができる。

特に、基−Ｎ　Ｒｔ　Ｒａが他のアミン官能基を含有している式■の化合物類が 酸付加塩類を生成する。

さらに、−ＮＲ，Ｒ，部分中に酸官能基を含有している本発明の化合物類も塩基 付加塩類を生成することができる。

一般的には、酸および塩基性官能基を含有している本発明の化合物類は内填類を 生成することができる。本発明の範囲に関しては、「内填類」は「非−塩」形の 定義により包括されている。

本発明の化合物類の好適な付加塩類は、薬学的に許容可能な酸および／または塩 基付加塩類である。

「薬学的に許容可能な酸および／または塩基付加塩類」という語は実際には、生 物学的、製造および調合の観点から薬学的実施法並びに動物成長促進における使 用と相容性である酸類および／または塩基類との塩類が包含される。

式■の化合物類の代表的なそして適切な酸付加塩類には、有機および無機の両者 の酸類、例えば塩酸、臭化水素酸、硫酸、燐酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、トリ クロロ酢酸、琥珀酸、クエン酸、アスコルビン酸、乳酸、マレイン酸、フマル酸 、パルミチン酸、コリン酸、パモン酸、粘液酸、グルタミン酸、樟脳酸、グルタ ル酸、グリコール酸、フタル酸、酒石酸、ラウリン酸、ステアリン酸、サリチル 酸、メタンスルホン酸、ドデシルスルホン酸（ニストール酸）、ベンゼンスルホ ン酸、ソルビン酸、ピクリン酸、安息香酸、桂皮酸および同様な酸類、との標準 的反応により製造される塩類が包含される。

これらの塩基類の代表例は、アルカリ金属またはアルカリ土類金属水酸化物、例 えば水酸化ナトリウム、カリウム、およびカルシウム、アンモニア、並びに有機 脂肪族、脂環式または芳香族アミン類、例えばメチルアミン、ジメチルアミン、 トリメチルアミン、２−アミノ−２−ヒドロキシメチル−１，３−プロパンジオ ール（ＴＲＩＳ）、ピコリン、並びに塩基性アミノ酸類、例えばリシン、オルニ チン、アルギニンおよびヒスチジン、である。

本発明の遊離アミノまたは非−塩化合物類から対応する付加塩類への変換、およ びその逆、すなわち本発明の化合物の付加塩から非−塩または遊離アミノ形への 変換、は通常の技術的手段内でありそして本発明により包括されるものである。

例えば、非−塩形を水性溶媒中に溶解させそしてわずかなモル過剰の選択された 酸または塩基を添加することにより式Ｉの化合物を対応する酸または塩基付加塩 に変換させることができる。生じた溶液または懸濁液を次に親液性化して希望す る塩を回収する。親液性化の代わりに、ある場合には、有機溶媒を用いる抽出、 分離された有機相の少量とする濃縮および非−溶媒の添加による沈澱により最終 的な塩を回収することができる。

非−溶媒形が可溶性である有機溶媒の中で最終的塩が不溶性である場合には、そ れを化学量論的量またはわずかにモル過剰量の選択された酸もしくは塩基の添加 後の非−塩形の有機溶液からの濾過により回収する。

非−塩形は水性溶媒中に溶解されている対応する酸または塩基から製造すること ができ、それを次に中和して非−塩形を遊離する。これを次に例えば有機溶媒を 用いる抽出により回収するか、または選択された酸もしくは塩基を添加しそして 上記の如く処理することにより他の塩基もしくは酸付加塩に変換させる。

中和後に脱塩が必要な時には、一般的な脱塩工程を使用することができる。

例えば、調節された多孔性ポリデキストラン樹脂（例えばセファデックスＬＨ２ ０）またはシラン処理されたシリカゲル上でのカラムクロマトグラフィーが一般 的に使用される。望ましくない塩類を水溶液を用いて溶離した後に、希望する生 成物を水と極性もしくは非極性有機溶媒ととの混合物の線状勾配または段階的勾 配、例えば５０　：　５０から約１００％アセトニトリル、のアセトニトリル／ 水、を用いて溶離する。

当技術で既知である如く、薬学的に許容可能な酸類（塩基類）または薬学的に許 容可能でない酸類（塩基類）との塩生成を一般的な精製技術として使用すること ができる。生成および単離後に、式■の化合物の塩形を対応する非−塩または薬 学的に許容可能な塩に変換させることができる。

ある場合には、式■の化合物の酸付加塩は水および親水性溶媒中でさらに可溶性 でありそして増加された化学的安定性を有している。

しかしながら、式Ｉの化合物類およびそれらの塩類の性質の同様性という観点て は、式Ｉの化合物類の生物学的活性を取り扱う時に本出願において言及されてい ることはそれらの薬学的に許容可能な塩類にも適用され、そして逆もそうである 。

それらの性質に関しては、本発明の化合物類は人間または動物処置用の薬品の製 造における活性成分として使用することができる。

特に、式Ｉの抗生物質ＧＥ２２７０化合物類のアミド誘導体類は主としてグラム 陽性バクテリア並びにダラム陽性およびグラム陰性嫌気性菌類に対する抗微生物 剤である。

本発明の化合物を製造するための一般的工程は、不活性有機溶媒中でのそしてＷ がカルボキシである時には縮合剤の存在下での、式（ＩＩ）Ｗはカルボキシまた は活性化されたエステル官能基を表し、Ｒは水素、ヒドロキシメチルまたはメト キシメチルを表し、Ｒ１は水素またはメチルを表し、 Ｒ４は水素、メチルまたはヒドロキシメチルを表し、但し条件として、Ｒ４が水 素またはヒドロキシメチルを表す時には、同時にＲはメトキシメチルでありモし てＲ７がメチルである］を有する適当な抗生物質ＧＥ２２７０化合物と式ＨＮＲ ２Ｒ３ ［式中、 Ｒ３およびＲ３は上記と同じ意味を有する］の選択されたアミンとの反応により 、表される。

本発明の化合物類を製造するためのアミド化の実施においては、時には、アミド 化反応には含まれないが反応条件に敏感となるかまたは反応工程に悪影響を与え て例えば望ましくない副生物を生じる反応物の官能基を保護することが簡便であ る。

さらに、アミノ酸がアミド化の工程を妨害するかもしれない他の反応性官能基、 例えばアミノ、カルボキシまたはメトキシ基、も含有している時には、これらを 例えばＥ、グロス（Ｇｒｏｓｓ）およびＪ、マイエンホファー（Ｍｅｉｎｈｏｆ ｅｒ）、［ザ・ペプチズ（Ｔｈｅ　Ｐｅｐｔｉｄｅｓ）Ｊ　、３巻、アカデミツ ク・プレス、ニューヨーク、１９８１およびＭ、ボダンズキ−（Ｂｏｄａｎｓｚ ｋｙ）およびＡ、ポダンズキー、［ペプチド合成の実施（Ｔｈｅ　Ｐｒａｃｔｉ ｃｅ　ｏｆ　Ｐｅｐｔｉｄｅ　５ｙｎｔｈｅｓｉｓ）Ｊ　、スプリンゲルーフエ ルラグ、ベルリン、ハイデルベルグ、１９８４の如き参考文献中に記されている ようなそれ自体は当技術で既知の方法により保護する。これらの保護基はアミド 化反応が起きる条件下で安定性でなければならず、そして新たに形成されたアミ ド結合または分子の池の部分に影響を与えずに反応の終了時に容易に除去可能で なければならない。

アミノ官能基を保護するために本発明の方法で有利に使用することができるＮ− 保護基の代表例は、下記のオキシカルボニル基：１．１−ジメチルプロビニルー オキシ力ルポニル、ｔ−ブチルオキシカルボニル、ビニルオキシカルボニル、ア リールオキシカルボニル、シンナミルオキシカルボニル、ベンジルオキシカルボ ニル、ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル−３−１４−ジメトキシ−６−ニト ロベンジルオキシカルボニル、２．４−ジクロロベンジルオキシカルボニル、５ −ベンズイソキサゾリルメチルオキシカルボニル、９−アントラニルメチルオキ シカルボニル、ジフェニルメチルオキシカルボニル、イソニコチニルオキシカル ボニル、ジフェニルメチルオキシカルボニル、イソニコチニルオキシカルボニル 、Ｓ−ベンジルオキシカルボニル、などにより特徴づけられているカルバメート 生成性試薬である。

反応性カルボン酸官能基用に適している保護は、例えば、エステル官能基の生成 によるものである。

当技術の専門家は、この開示を基にして、保護しようとするアミンＨＮＲ，Ｒ３ の官能基、それらの保護の方法および最終的化合物を遊離するために必要な適当 な保護基除去反応を決めることができる。

専門家に認識されている如く、個々の保護基の最終的選択は希望する特定アミド 誘導体の特性に依存している。実際には、最終的化合物のこのアミド官能基は保 護基（類）除去の条件下で安定性でなければならない。

種々の保護基除去の条件が知られているため、専門家は適当な保護基を選択する ことができる。

縮合反応用に有用な不活性有機溶媒は、反応工程を好ましくな（妨害せず且つ抗 生物質出発物質を少なくとも部分的に溶解させることができる溶媒である。

該不活性溶媒の例は、有機アミド類、グリコール類およびポリオール類のエーテ ル類、ホスホルアミド類、スルホキシド類である。不活性溶媒の好適例は、ジメ チルホルムアミド、ジメトキシエタン、ヘキサメチルホスホルアミド、ジメチル スルホキシド、ジオキサン、およびそれらの混合物である。

時には、水が反応条件と相容性である。

Ｗがカルボキシである時の本発明の方法における縮合剤は、有機化合物中でのそ して特にペプチド合成におけるアミド結合の生成用に適しているものである。

縮合剤の代表的なそして好適な例は、（ＣＩ　Ｃ４）アルキル、フェニルまたは 複素環式ホスホルアジデート類、例えばジフェニルホスホルアジデート（ＤＰＰ Ａ）　、ジエチル−ホスホルアジデート、ジ（４−ニトロフェニル）ホスホルア ジデート、ジモルホリルーホスホルアジデートおよびジフェニルホスホルクロリ デート、またはベンゾトリアシリ−１−ルーオキシ−トリピロリジノホスホニウ ムへキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ）、である。好適な縮合剤は、ジフ ェニルホスホルアジデート（ＤＰＰＡ）である。

本発明の方法では、アミン反応物ＨＮＲ２Ｒ３は通常はわずかにモル過剰量で使 用される。

一般的には、１〜２倍モル過剰量が使用され、１．２〜１．５倍モル過剰量が好 適である。

アミド化を進行させるためには、アミンＨＮＲ，Ｒ３が抗生物質出発物質のカル ボキン官能基との塩を生成できることが必要である。アミンＨＮＲ２Ｒ３が鎖環 を選択された反応媒体中で生成するのに充分なほど強くない場合には、塩−生成 性塩基を反応混合物に抗生物質出発物質と少なくとも等分子量で加えることが必 要である。

該塩−生成性塩基類の例は、第三級有機脂肪族または脂環式アミン類、例えばト リメチルアミン、トリエチルアミン、Ｎ−メチルピロリジン、または複素環式塩 基類、例えばピコリン、などである。

縮合剤は一般的には例えば抗生物質ＧＥ２２７０出発化合物の１．１−１．５倍 、そして好適には１．２倍、の如きわずかなモル過剰量で使用される。

さらに、アミン反応物ＨＮＲ，Ｒ３を一般的には反応媒体中に対応する酸付加塩 、例えば塩酸塩、として加えることもできる。この場合には、少なくとも２倍モ ル割合のそして好適には２−３倍モル過剰量の、ＨＮ　Ｒｚ　Ｒｓをそれの塩類 から遊離させることができる強塩基が使用される。この場合にも、適当な塩基は 以上で例示されている如き第三級有機脂肪族または脂環式アミンである。実際に 、少なくともある場合には、塩が対応する遊離アミンより安定性が大きい時には 、その後にその場で上記の塩基類を用いて除去されるアミンＨＮＲ２Ｒ３の使用 が非常に好適である。

反応温度は個々の出発物質および反応条件に依存して相当変えることができる。

一般的には、反応を０−２０℃の間の温度において実施することが好適である。

反応時間も他の反応要素に依存して相当変えることができる。一般的には、縮合 反応は約５−２４時間で完了する。

いずれの場合にも、反応工程は当技術で既知の方法に従いＴＬＣによりまたは好 適にはＨＰＬＣにより監視される。

これらの検定の結果に基づき、当技術の専門家は反応工程を評価しそして反応を 停止し且つ反応物質を例えば溶媒を用いる抽出、非−溶媒などの添加による沈澱 、並びにそれと組み合わされるカラムクロマトグラフィーによる分離および精製 を含むそれ自体は既知である技術に従い処理することができる。

前記の如く、ＨＮ　Ｒｘ　Ｒｓの保護が必要である時には、保護された最終的化 合物を次にそれ自体は既知でありそして主として含まれている保護基に依存する 工程に従い保護基除去を行う。

活性化されたエステルをＧＥ２２７０出発物質として使用する時には、該エステ ルはエステル化されたアルコールが分子の他の部分を改変させないような反応条 件下でアミンＨＮＲ，Ｒ，により容易に交換および置換できるような遊離基を供 するものである。アミン反応物は一般的には活性化されたエステルよりモル過剰 量で上記の溶媒および低級アルカノール類から選択される溶媒の中で使用される 。反応温度は一般的には０℃−１００℃の間の範囲である。活性化されたエステ ルの例には、低級アルキル部分が任意にシアノおよびニトロにより置換されてい てもよい低級アルキルエステル類、ハロおよびニトロ基により置換されたフェニ ルエステル類並びにＧＥ２２７０因子Ａ２中に含まれているエステル部分が包含 される。

多くの場合に本発明の化合物を１種より多い方法で製造できることおよび本発明 の化合物をそれ自体は既知である反応により他のものに変換できることが証され ている。

例えば、ＨＮ　Ｒ２Ｒｓアミンがカルボキシまたはエステル官能基を含有してお り、それらをさらに対応するアミド誘導体に転化させることができる時には、最 初に該アミンを選択されたＧＥ２２７０出発物質と縮合させそして次にカルボキ シまたはエステル官能基を適当なアミンとの反特表十６−５０４７６８　（ｊ３ ） 応によりアミドに転化させることにより、希望する式■の化合物を製造すること ができる。

下表は、本発明の代表的な化合物類（表■）およびそれらの製造方法（詳細には 実験部分に記されている）、出発物質および反応収率（表ＩＩ）を示している。

特表十６−５０４７６８　（１７′′＞ＩＩ　Ｐ　Ｌ　Ｃ分析 下表（表ＩＩＩ）は、本発明の化合物類の代表例のＲ，を報告しているものであ る。

分析は、１０μｍループ・インジェクターおよび２５４ｎｍにおけるパリアン２ ０５０可変性波長検出器が備えられているパリアン・モデル５０００ＬＣポンプ を用いて行われた。

Ｐ−８（５μｍ）およびその後のカラムＬｉＣｈｒｏＣａｒｔ１２５−４ＬｉＣ ｈｒｏｓｐｈｅｒ１００ＲＰ−８（５μｍ）溶離剤・八　〇、　０５Ｍ水性Ｉ　 Ｃ００Ｎ　Ｈ４Ｂ　ＣＨ，ＣＮ 流速：０．７ｍｌ／分 方法Ｂ・Ａ中のＢのイソクラティック４０％流速　０．７ｍ　Ｉ　７分 方法ＣＡ中のＢのイソクラティック３８％流速：０．５ｍｌ／分 方法Ｄ：Δ中のＢのイソクラティック３０％流速：０．７ｍｌ／分 方法Ｅ・Ａ中のＢのイソクラティック３８９６流速：０．７ｍｌ／分 ５５％への勾配 時間（分）　Ａ中の％Ｂ 流速：０．７ｍ１／分 Ｒ広９：下記のプログラムに従う２５分にわたるＡ中のＢの３８から５５％への 勾配 時間（分）　Ａ中の％Ｂ 流速・０．７ｍ１／分 一７床１１　：　Ａ中のＢのイソクラティック５５％流速＋　０．７ｍｌ／分 ｈａｇ：Ａ中のＢのイソクラティック６０％流速：０．７ｍｌ／分 ＪＩＩユニＡ中のＢのイソクラティック４８％流速：０．７ｍｌ／分 々徒￥二下記のプログラムに従う勾配 時間（分）　％Ａ　％Ｂ　％Ｃ 流速＋０．７ｍｌ／分 にコ相対的保持時間： 表■（続き） 分析 に＝　相対的保持時間 表■（続き） １１ＰＬＣ分析 に３相対的保持時間１ 実験部分 表ＩＶ−Ｎ、　Ｍ、　Ｒ。

’Ｈ−ＮＭＲスペクトルはＤＭＳＯｄｓ（ヘキサシュートロジメチルスルホキシ ド）中でＴＭＳを内部標準（０，００ｐｐｍ）［δ、１）Ｉ）　ｍ　ｓｍ）とし て使用して２５０ＭＨｚおよび／または５００ＭＩ（ｚにおいてブルーカー分光 計を用いて記録された（ｓｍ−重線、ｂｒ　ｓｍ広い一重線、ｄ＝二重線、ｄｄ ＝二重線の二重線、ｔ＝三重線、ｍ＝多重線）。

表Ｖ−１，Ｒ。

赤外線スペクトル（ＩＲ）はパーキン・エルマー・モデル５８０分光写真計を用 いてヌジョール・ムルで記録された。

表ｖｒ−ｕ、ｖ。

紫外線吸収スペクトルはバ、−キン・エルマー・モデル３２０分光計を用いて記 録された。

当技術の専門家には、下記の表ＩＶ、　ＶおよびＶＩ中に示されているデータは 得られたピークの全ての値を表しておらず単一物質を同定するために認められる ピークの値だけを表しているということが、明白となるであろう。

それらの性質に関しては、本発明の化合物を人間または動物処置用の薬品製造に おける活性成分として使用することができる。

特に、式■の抗生物質ＧＥ２２７０化合物のアミド誘導体は主としてグラム陽性 バクテリア並びにダラム陽性およびグラム陰性嫌気性菌類に対する抗微生物剤で ある。

本発明の抗生物質の主な処置指示は従って、感染症に対して感受性である微生物 の存在に関連する感染症の治療である。

「処置」という語は、予防、治療および看護も包括するものである。

この処置を受ける患者は、霊長類、特に人間、を含む必要とする全ての動物、並 びに例えば馬、牛、豚および羊の如き他の哺乳動物類、並びに一般的に家禽類お よび愛玩動物類である。

本発明の化合物はそのままでまたは薬学的に許容可能な担体と混合して投与する ことができ、そして他の抗微生物剤と一緒に投与することもできる。組み合わせ 療法には従って、最初に投与されるものの治療効果がその後の投与時に完全に消 失していないような方法での活性化合物類の連続的、同時および別個投与が包含 される。

好適な薬学的調合物は、無傷のもしくは損傷された皮膚または粘膜上での局所的 適用に適している調合物により代表される。そのような調合物の例は、粉末、軟 膏、クリームおよびローションである。これらの調合物中の賦形薬は、一般的な 薬学的に許容可能な賦形薬、例えば油状軟膏基質（例えば、セチルエステルワッ クス、オレイン酸、オリーブ油、パラフィン、精油、澱粉グリセライド）、吸収 剤軟膏基質（例えば、無水ラノリン、親水性鉱油）、乳剤軟膏基質（例えば、セ チルアルコール、モノステアリン酸グリセリル、ラノリン、ステアリン酸）、水 溶性軟膏基質（例えば、グリコールエーテル類、並びにポリエチレングリコール 類、ポリ（オキシ−１，２−エタンジイル）−アルファーヒドローオメガーヒド ロキシーオクタデカノエート、ポリソルベート、およびポリエチレングリコール モノ−ステアレート類を含むそれらの誘導体類）である。

これらの調合物は例えば防腐剤の如き他の既知の賦形薬を含有することができ、 そしてそれらは当技術で知られておりそして例えばレミントンの薬学的科学（Ｒ ｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　５ｃｉｅｎｃｅｓ）、 第１７版、１９８５、マッグ・パブリッシング・カンパニー中に報告されている 如くして製造される。

本発明の化合物は当技術でそれ自体は既知である工程に従い非経口的投与に適し ている調合物に調合することができる。例えば、本発明の化合物をポリプロピレ ングリコールまたはジメチルアセトアミドおよび表面活性剤、例えばポリオキシ エチレンソルビタンモノ−オレエートまたはポリエトキシル化されたヒマシ油、 を用いて調合する。

非経口的投与用に好適な調合物には下記の賦形薬が包含される：クレモフォル” ＥＬ（ポリオキシ３５ヒマシ油ＵＳＰ／ＮＦ）２０％、プロピレンクリコール５ −１０％。

好適には、この調合物は本発明の抗生物質に対して感受性である微生物を含む感 染症の処置における静脈内投与用に使用される。

静脈内投与用に使用される適当な調合物の例は下記のものである：化合物番号１ ９　１００ｍｇ プロピレングリコール　１ｍｌ 注射用の水　５ｍｌにするのに充分な量燐酸塩緩衝液ｐＨ８−８，５ 胃腸管中での偽膜大腸炎または嫌気性菌の存在に起因する他の疾病の処置におい ては、有効投与量の本発明の化合物は例えばカプセルまたは水性懸濁液の如き適 当な薬学的形で経口的に投与することができる。

活性成分の投与量は、患者の型、年令および症状、投与用に選択される個々の活 性成分および調合物、投与スケジュールなどを含む多くの要素に依存している。

一般的には、１単位投与形当たりに有効な抗微生物投与量が使用される。これら の投与形の例えば１日当たり２−６回の繰り返し適用が一般的に好適である。有 効投与量は一般的に０．５−５０ｍｇ／ｋｇの体重７日の範囲である。

好適な局部的調合物は１％−１０％の本発明の化合物を含有している軟膏である 。

いずれにしても、処方する医師がある症状のある聴者に関する最適投与量を決め ることができるであろう。

人間および動物の処置における薬品としての使用の他に、本発明の化合物は動物 成長促進剤として使用することもできる。

この目的用には、本発明の化合物は適当な飼料中で経口的に投与される。使用さ れる正確な濃度は、通常量の飼料が消費される時に成長促進剤有効量で活性剤を 供するのに必要なものである。

本発明の活性化合物の動物飼料に対する添加は好適には、活性化合物を有効量で 含有している適当な飼料予備混合物を製造しそしてこの予備混合物を完全定量で 加えることにより、行われる。

一方、活性成分を含有している濃縮中間生成物または飼料補充物を飼料中に配合 することもできる。そのような飼料予備混合物および完全定量を製造しそして投 与することができる方法は、参考文献（例えば「適用される動物栄養（＾ｐｐｌ ｉｅｄ　Ａｎｆｍａｌ　Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ）Ｊ　、Ｗ、■フリートマン・アン ド・カンパニー、サンフランシスコ、米国、１９６９、または［家畜飼料および 飼育（Ｌｉｖｅｓｔｏｃｋ　Ｆｅｅｄｓ　ａｎｄ　Ｆｅｅｄｉｎｇ月、０アンド Ｂブツクス、コルヴアリス、オレゴン、米国、１９７７）中に記されている。

下記の実施例は本発明をさらに説明するものでありそしてそれを何ら限定しよう とするものではない。

本発明の実施例 工ＮＡ−ＧＥ２２７０因子Ａ３出発物質と選択されたアミンとの反応実施例１： 化合物番号１５．２９．３０．３２．３３の製造１ミリモルのＧＥ２２７０因子 Ａｓ（ヨーロッパ特許出願公告番号４０６７４５中に記されている如くして製造 された）の１０ｍ１のジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）中の撹拌されている溶液 に、１．２ミリモルの選択されたアミン、１．４ミリモルのトリエチルアミン（ ＴＥＡ）および１．２ミリモルのジ−フェニルホスホルアジデート（ＤＤＰＡ） を０℃において加えた。（選択されたアミンの塩（塩化物、ｐ−１−ルエンスル ホン酸塩など）を使用する場合には、２倍量のＴＥＡを使用すべきである）。温 度を自然に室温に上昇させ、そして撹拌を約４時間続けた。

反応混合物を次にＩＮ水性１１ＣＩで約ｐ　Ｈ３まで酸性化し、そして次に水で 希釈して生成物の沈澱を完了させた。湿っている固体を空気中で乾燥し、そして 次にシリカゲル６０　（２３０−４００メツシユＡ　Ｓ　ＴＭ−メルク）上でク ロロホルム中３−５％メタノールを用いて溶離するフラッシュクロマトグラフィ ーにより精製した。標記化合物を含有している留分を一緒に貯蔵しそして溶媒を 蒸発させた。固体をエチルエーテルと共に粉砕して、標記化合物を微細粉末状で 生成した。

工ｆｆ１Ａ１−ＧＥ２２７０因子Ａ３出発物質と全てが保護されている別の反応 性官能基（類）を含有している選択されたアミンとの反応、およびその後の保護 基（類）の保護基除去 実施例２： 化合物番号３４．３６の製造 反応は実質的に実施例１中の如くして行われた。反応生成物をフラッシュクロマ トグラフィーにより精製した後に、１ミリモルの得られた固体を７ｍｌの冷たい トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）で処理した。懸濁液を溶液が得られるまで２．３分 間撹拌し、そしてＴＦＡを「真空中で」冷時に蒸発させた。痕跡量のＴＦＡを依 然として含有しているゴム状生成物を次にエチルエーテルで処理すると、標記化 合物がトリフルオロ酢酸塩として微細粉末の形状で得られた。

実施例３： 化合物番号１．３−１０，１８−２１．３９の製造反応は実質的に実施例１中の 如くして行われた。反応生成物をフラッシュクロマトグラフィーにより精製した 後に、１ミリモルの得られた固体を２０ｍ１のジオキサン中に溶解させ、そして １．２ｍｌのＩＮ水性Ｎａ０１１を撹拌下で室温において加えた。５時間後に、 溶液をＩＮ水性ＨＣ１でｐＩＩ２となるまで酸性化し、そして水で希釈して標記 化合物の沈澱を完了さ也それを濾別しそして自然に空気中で乾燥して、標記化合 物を微細粉末として生成した。

実施例４： 化合物番号２の製造 反応は実質的に実施例３中の如くして行われた。エステル官能基の加水分解を行 いそして化合物を自然に空気中で乾燥した後に、１ミリモルの得られた固体を２ ０ｍ１のＴＥＡ中に溶解させ、そしてＹ、キソ（Ｋｉｓｏ）他、ケミカル・アン ド・ファーマシューティカル・プリテン（ＣｈｅＩｌ、　Ｐｈａｒｍ、　Ｂｕｌ ｌ、）、２８．６７３．１９８０により記されている如く５０ミリモルのチオア ニソールを撹拌下で室温において加えた。３．５時間後に、ＴＦＡを「真空中で 」冷時に蒸発させ、モして残渣を最少量のクロロホルム中１％メタノールの中に 加えた。エチルエーテルの添加が標記化合物の沈澱を誘発させ、それを濾過し、 それより大量のエチルエーテルで洗浄し、そして「真空中で」乾燥して、標記化 合物のトリフルオロ酢酸塩を微細粉末として生成した。

実施例４ｂｊｓ・ 化合物番号３７の製造 反応は実質的に実施例１中の如くして行われた。出発物質が反応混合物から消え た後に、水を加え、そして得られた沈澱を濾別し、追加の水で洗浄し、そして空 気中で自然に乾燥させた。次に粗製物質を３ｍｌの７１１Ｆ中に溶解させそして １０％水性ＨＣＩの存在下で室温において一夜撹拌した。水で希釈して生成物の 沈澱を完了させ、それを濾別し、そして空気中で自然に乾燥させた。固体を次に シリカゲル６０　（２３０−４００メッシュＡＳＴＭ−メルク）上でクロロホル ム中２−４％メタノールを用いて溶離するフラッシュクロマトグラフィーにより 精製した。

標記化合物を含有している留分を一緒に貯蔵しそして溶媒を蒸発させて、薄黄色 の粉末を生成した。

ＩＪ！Ｂ−ＧＥ２２７０因子Ａ、出因子質と保護されていない酸部分を含有して いる選択されたアミンとの反応 実施例５ 化合物番号１９．２２−２８．４０，４１の製造１．１ミリモルのＤＰＰＡを０ ℃において１ミリモルのＧＥ２２７０・因子Ａ３および１．５ミリモルのＴＥＡ の１０ｍ１のＤＭＦ中の撹拌されている溶液に加えた。温度を自然に室温に上昇 させ、そして撹拌をさらに４．５時間にわたり続けた。１．５ミリモルの選択さ れたアミンおよび２ミリモルのＴＥＡを次に溶液に室温において加え、そして撹 拌を同じ温度においてさらに５時間続けた。（選択されたアミンが１個より多い 酸官能基を含有している場合には、ＴＥＡの量を調節してアミノ基を含まないよ うにした）。反応混合物を次にＩＮ水性ＨＣＩで約ｐＨ２となるまで酸性化し、 そして次に水で希釈して生成物の沈澱を完了させた。

湿った固体を空気中で乾燥し、そして次にシリカゲル６０　（２３０−４００メ ツシュＡＳＴＭ−メルク）上でクロロホルム中５−１０％メタノ　−ルを用いて 溶離するフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。

標記化合物を含有している留分を一緒に貯蔵しそして溶媒を蒸発させた。

固体をエチルエーテルと共に粉砕して、標記化合物を微細粉末として生成した。

工ｆｌＢ１−ＧＥ２２７０因子Δ３出発物質と保護されていない酸基（類）の池 に全てが種々に保護されている反応性官能基（類）を含有している選択されたア ミンとの反応、並びにその後の保護基（類）の除去化合物番号１１．１２の製造 反応は実質的に実施例５中の如くして行われた。反応生成物をフラッシュクロマ トグラフィーにより精製した後に、１ミリモルの得られた固体を２０ｍ１のＴＦ Ａ中に溶解させそして５０ミリモルのチオアニソールを撹拌下で室温において加 えた。３．５時間後に、ＴＦＡを「真空中で」冷時に蒸発させ、そして残渣を最 少量のクロロホルム中１％メタノールの中に加えた。エチルエーテルの添加が標 記化合物の沈澱を誘発させ、それを濾過し、それより大量のエチルエーテルで洗 浄し、そして「真空中で」乾燥して、標記化合物のトリフルオロ酢酸塩を微細粉 末として生成した。

工程Ｃ−出発物質としてのＧＥ２２７０因子Ａ３の選択されたアミド誘導体と選 択された試薬との反応 実施例７ それぞれ化合物番号１．５．１０．６からの化合物番号１４．１５．１６．１７ の製造 １ミリモルのＧＥ２２７０因子Ａ、（前記の実施例中に記されている如（して製 造された）の１０ｍ１のＤＭＦ中の撹拌されている溶液に、１．２ミリモルの選 択されたアミン、１．４ミリモルのＴＥＡおよび１゜２ミリモルのＤＰＰＡを０ ℃において加えた。（選択されたアミンの塩（塩化物、ｐ−）ルエンスルホン酸 塩など）を使用する場合には、２倍量のＴＥＡを使用すべきである）。温度を自 然に室温に上昇させ、そして撹拌を約４時間続けた。反応混合物を次にＩＮ水性 １１ＣＩで約ｐＨ３となるまで酸性化し、そして次に水で希釈して生成物の沈澱 を完了させた。湿っている固体を空気中で乾燥し、そして次にシリカゲル６０（ ２３０−４００メツシュＡＳＴＭ−メルク）上でクロロホルム中３−５％メタノ ールを用いて溶離するフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。標記化合 物を含有している留分を一緒に貯蔵しそして溶媒を蒸発させた。固体をエチルエ ーテルと共に粉砕して、標記化合物を微細粉末状で生成した。

工程Ｃ１−出発物質としてのＧＥ２２７０因子Ａ３の選択されたアミド誘導体と 全てが保護されている別の反応性官能基（類）を含有している選択された試薬と の反応、並びにその後の保護基（類）の除去実施例８： 反応は実質的に実施例７中の如くして行われた。反応生成物をフラッシュクロマ トグラフィーにより精製した後に、１ミリモルの得られた固体を２０ｍ１のジオ キサン中に溶解させそして１．２ミリのＩＮ水性Ｎａ１ｌ（を撹拌下で室温にお いて加えた。５時間後に、溶液をＩＮ水性１１Ｃ１でｐ）１２に酸性化し、そし て水で希釈して、標記化合物の沈澱を完了させ、それを濾別し、そして空気中で 自然に乾燥して、標記化合物を微細粉末として生成した。

実施例９： 化合物番号３６からの化合物番号３１の製造１ミリモルのＧＥ２２７０因子Ａ、 の適当なアミド誘導体（前記実施例中に記されている如くして製造された）の１ ０ｍ１の１０％メタノール性クロロホルム中の撹拌されている溶液に、１．２ミ リモルのＴＥＡおよび１，１ミリモルの選択された試薬（表　参照）を室温にお いて加えた。２０分後に、溶媒を「真空中で」蒸発させ、モして残渣を５％水性 Ｎａ、Ｃｏ３で処理した。得られた固体を濾別し、それより大量の５％Ｎａ、Ｃ Ｏ３および水で洗浄し、そして最後に１０ｍ１のメタノール中に再溶解させた。

この溶液に、Ｑ、５ミリの水および０．１ミリモルのｐ−トルエンスルホン酸を 加え、そして反応混合物を室温において一夜撹拌した。溶液を次に真空下で少量 （約２ｍ１）に減らし、そして水を加えて標記化合物を沈澱させ、それは空気中 での乾燥後に微細粉末として得化合物番号３７からの化合物番号３８の製造０． ２３ミリモルのＧＥ２２７０因子Ａ３の適当なアミド誘導体（前記実施例中に記 されている如くして製造された）の４０ｍ１のエタノール中の撹拌されている溶 液に、９．２ミリモルの酢酸、９．２ミリモルの酢酸ナトリウムおよび０．５０ ６ミリモルの選択された試薬（表ＩＩ参照）を室温において加えた。２時間後に 、０．４６ミリモルのＮａＢＨ４（フル力）を加え、そして撹拌を同じ温度にお いて一夜続けた。溶媒を蒸発させて粗製物質を与え、それを１０ｍ１のｌＮＨＣ ｌで洗浄し、濾過し、そして空気中で自然に乾燥した。次に固体をシリカゲル６ ０　（２３０−４００メツシュＡＳＴＭ−メルク）上でジクロロメタン中０−１ ０％メタノールを用いて溶離するフラッシュクロマトグラフィーにより精製した 。標記化合物のメチルエステルを含有している留分を一緒に貯蔵しそして溶媒を 蒸発させて固体を与え、それを２ミリのジオキサン中に再溶解させそして１．２ モル過剰のｌＮＮａＯＨで室温において処理した。溶媒を蒸発させて固体を与え 、それを酢酸エチル：メタノールの１：１混合物を用いる粉砕によりさらに精製 して、標記化合物を微細粉末状で生成した。

ＩＰＭＤ−ＧＥ２２７０因子Ａ２出発物質と選択されたアミンとの反応化合物番 号３５の製造 １ミリモルのＧＥ２２７０因子Ａｔ（ヨーロッパ特許出願公告番号４０６７４５ 中に記されている如くして製造された）を１０ｍ１のメタノール性アンモニアの 飽和溶液中に溶解させた。溶液を室温において自然に３日間そのままにし、そし て次に「真空中で」蒸発させた。残渣を２ミリのメタノール中に加え、そして標 記化合物を水で沈澱させ、濾別し、そして空気中で自然に乾燥させた。エチルエ ーテルと共に粉砕して、標記化合物を微細粉末として生成した。

化合物番号１９のアルギニン塩の製造 ３ｇの化合物番号１９（２，４２ミリモル）の１８０ｍ１のジオキサン中懸濁液 に、４２３ｍｇのＬ−アルギニン（２，４２ミリモル）の１２０ｍ１の水中溶液 を撹拌下で加え、そして非透明溶液を親液性化して希望する塩を回収した。

工［Ｆ−ＧＥ２２７０成分Ｃ２ｍ出発物質（すなわち、Ｒがメトキシメチルであ り、Ｒ，がメチルであり、Ｒ４がヒドロキシメチルであり、そしてＷがＣ０ＯＨ である式ＩＩの化合物）と全てが保護されている別の反応性官能基（類）を含有 している選択されたアミンとの反応、並びにその後の保護基（類）の除去 実施例１２： 化合物番号４２の製造 反応は因子Ａ３の代わりにＧＥ２２７０成分Ｃ９出発物質を用いて実施例３中に 記されている如くして実施された。

↓ＦＩＧ一工程Ｆ中に記されている如きＧＥ２２７０成分Ｃｕｍ出発物質と保護 されていない酸部分を含有している選択されたアミンとの反応実施例１３： 化合物番号４２の製造 反応は因子Ａ３の代わりにＧＥ２２７０成分Ｃ１出発物質を用いて実施例５中に 記されている如くして実施された。

↓［１（−ＧＥ２２７０成分Ｄ１出発物質（すなわち、ＲおよびＲ７が水素であ り、Ｒ４がメチルであり、モしてＷがＣＯＯＨである式ＩＩの化合物）と全てが 保護されている別の反応性官能基（類）を含有している選択されたアミンとの反 応、並びにその後の保護基（類）の除去実施例１４： 化合物番号４３の製造 反応は因子Ａ３の代わりにＧＥ２２７０成分り、出発物質を用いて実施例３中に 記されている如くして実施された。

ｌＮｌ−一工程ＩＩ中に記されている如きＧＥ２２７０成分Ｄ１出発物質と保護 されていない酸部分を含有している選択されたアミンとの反応実施例１５： 化合物番号４３の製造 反応は因子Ａ３の代わりにＧＥ２２７０成分Ｄ１出発物質を用いて実施例５中に 記されている如（して実施された。

↓ｕＪ−ＧＥ２２７０成分Ｄ２出発物質（すなわち、Ｒがヒドロキシメチルであ り、Ｒ，およびＲ１がメチルであり、そしてＷがＣ００ＩＩである式ＩＩの化合 物）と全てが保護されている別の反応性官能基（類）を含有している選択された アミンとの反応、並びにその後の保護基（類）の除去 実施例１６： 化合物番号４４の製造 反応は因子Ａ３の代わりにＧＥ２２７０成分Ｄ２出発物質を用いて実施例３中に 記されている如くして実施された。

ＩｆｌＫ−工程Ｊ中に記されている如きＧＥ２２７０成分Ｄ２出発物質と保護さ れていない酸部分を含有している選択されたアミンとの反応実施例１７： 化合物番号４４の製造 反応は因子Ａ３の代わりにＧＥ２２７０成分り、出発物質を用いて実施例５中に 記されている如くして実施された。

工程μ−抗生物質ＧＥ２２７０　（、出発物質）の少量成分類（Ｃ２１、Ｄ５、 Ｄ２およびＥ）の混合物と全てが保護されている別の反応性官能基（類）を含有 している選択されたアミンとの反応、並びにその後の保護基（類）反応は因子Ａ ３の代わりに抗生物＠ＧＥ２２７０出発物質の少量成分類（Ｃ２，、Ｄ９、Ｄ２ およびＥ）の混合物並びに６−アミノカプロン酸メチル塩酸塩（フル力）を用い て実施例３中に記されている如くして実施された。Ｒ，（分）はＨＰＬＣ分析部 分中に報告されているＨＰＬＣ方法Ｍ方法台される。

Ｙ　＝　Ｎ　ＨＣＨ！　ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＩ　（２Ｃ００ＣＨｓ　テある時 ニハ、Ｒ，（分）はそれぞれＧＥ２２７０因子Ｃ２＋に関しては４３．４３、Ｇ Ｅ２２７０因子り、に関しては３９．４２、ＧＥ２２７０Ｄ２に関しては４２． ２９およびＧＥ２２７０因子Ｅには関して３７．４１であった。

Ｙ＝　Ｎｌ（Ｃ）１ｔ（ｊ［２ｃ）Ｉ２ＣＨｚＣＨｚＣＯＯＩ−１である時には 、Ｒ。

（分）はそれぞれＧＥ２２７０因子Ｃ２ｍに関しては１７．２３、ＧＥ２２７０ 因子Ｄ１に関しては１５．７６、Ｇ　Ｅ　２２７０　Ｄ　２に関しては１６゜６ ４およびＧＥ２２７０因子Ｅに関しては１５．１３であった。

工程Ｍ−抗生物質ＧＥ２２７０出発物質の少量成分類（Ｃ２，、Ｄｌ、Ｄ２およ びＥ）の選択された混合物と保護されていない酸部分を含有している選択された アミンとの反応 実施例１９： 反応は因子Ａ３の代わりに抗生物質ＧＥ２２７０出発物質の少量成分類（Ｃ２， 、Ｄｌ、Ｄ２およびＥ）の選択された混合物並びに６−アミノカプロン酸（フル 力）を用いて実施例５中に記されている如くして実施された。

Ｒ，（分）はＩ（Ｐ　Ｌ　Ｃ分析部分中に報告されているＩ（Ｐ　Ｌ　Ｃ方法Ｍ に照合され、そしてそれぞれＧＥ２２７０因子Ｃ２，に関しては１７．２３、Ｇ Ｅ２２７０因子り、に関しては１５．１３、およびＧＥ２２７０Ｅに関しては１ ５１３てあった。

出発物質類の製造 ■、下記の出発物質類はフル力（スイス、ブックス、フル力・ケミカーバイオケ ミカ）から購入されたニ ゲリシンエチルエステル塩酸塩、 Ｌ−スレオニンメチルエステル塩酸塩、Ｌ−チロシンメチルエステル塩酸塩、 Ｌ−フェニルアラニンメチルエステル塩酸塩、Ｌ−メチオニンメチルエステル塩 酸塩、Ｌ−プロリンメチルエステル塩酸塩、 Ｌ−スレオニンメチルエステル塩酸塩、Ｎα−Ｃｂｚ−Ｌ−リンノ、 ４−アミノ酪酸メチル塩酸塩、 ６−アミノカプロン酸メチル塩酸塩、 ６−アミノカプロン酸、 ４−（メチルアミノ）安息香酸、 ピペリジン−４−カルボン酸、 Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、 Ｄ（＋）−グルコサミン塩酸塩、 ２−ジメチルアミノエチルアミン、 アミノアセトアルデヒドジメチルアセタール、β−アラニンエチルエステル塩酸 塩。

２、下記の出発物質類はシグマ（米国、セントルイス、シグマ・バイオケミカル ズ・オーガニック・コンパウンダ）から購入された二Ｎδ−Ｃｂｚ−Ｌ−リシン 、 Ｌ−アスバルチン酸ジメチルエステル塩酸塩。

３、下記の出発物質類はアルドリッヒ（イタリー、ミラノ、アルドリッヒ・カタ ロゴ・プロドッチ・ジ・シミ力・フネ）から購入された：Ｌ−プロリンアミド、 タウリン、 ３−アミノ−１−プロパンスルホン酸、３−アミノプロピルホスホン酸、 ４−アミノ−１−ベンジルピペリジン。

４、抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａ、Ｂ＋、Ｂ２、Ｃ０、Ｃ７、Ｃ３１、Ｄｌ、Ｄ ｌ、およびＥを製造するためのＧＥ２２７０の生産プラノビスボラ−ｏセア（Ｐ ｌａｎｏｂｉｓｐｏｒａ　ｒｏｓｅａ）　Ａ　Ｔ　ＣＣ５３７７３の培養物をオ ートミール寒天スラント上で２週間にわたり２８−３０℃において成長させ、そ して次に１００ｍ１の下記組成：澱粉　２０ｇ／ｌ ポリペプトン　５ｇ／ｌ 酵母抽出物　３ｇ／ｌ 牛肉抽出物　２ｇ／ｌ 大豆ひきわり　２ｇ／ｌ 炭酸カルシウム　１ｇ／ｌ 蒸留水　１００ｍ１とするのに充分な量（殺菌前にｐＨ７，０に調節されている ）の種媒体を含有している５００ｍ１のフラスコに接種するために使用した。

フラスコを回転シェーカー（２００ｒｐｍ）上で２８−３０℃におＬｌて９２時 間にわたり培養した。得られた培養物を次に４１Ｊ・ソトルの同一媒体を含有し ているジャー発酵器に接種するために使用し、そして培養物を２８−３０℃にお いて４８時間にわたり撹拌しながら培養し、そして通気した（毎分１容量当たり 約１標準リツトル）。

得られたブロスを５０リツトルの下記の生産媒体：澱粉　２０ｇ／Ｉ ペプトン　２．５　ｇ／　１ 加水分解されたカゼイン　２．５　ｇ／　１酵母抽出物　３ｇ／ｌ 牛肉抽出物　２ｇ／ｌ 大豆ひきわり　２ｇ／ｌ 炭酸カルシウム　１ｇ／ｌ 蒸留水　充分量 （殺菌前にｐＨ７，０に調節されている）を含有している発酵器に移し、モして ２８−３０℃において約７２時間培養した。

抗生物質生産を、最少ダビス媒体上で成長させたＢ、スブチリス（Ｂ、　５ｕｂ ｔｉｌｉｓ）Ａ　Ｔ　ＣＣ６６３３を用いるペーパーディスク寒天検定により監 視した。３５℃における一夜の培養後に抑制部分を評価した。

４ａ）抗生物質ＧＥ２２７０の回収 上記で得られた発酵物質（５０リツトル）を回収し、そしてフィルター助剤（ク ラルセル）の存在下で濾過にかけた。

抗生物質ＧＥ２２７０は主として菌糸体の中で見られるが、それの一部員である が濾液から回収することもできる。

濾液を約ｐｌ−１７，０に調節し、そして酢酸エチル（５０リツトル）で抽出し た。有機相を遠心により分離し、そして減圧下で濃縮して少量にした。得られた 油状残渣を石油エーテルで処理して粗製抗生物質ＧＥ２２７０を沈澱させ、それ を濾過により集めそして乾燥した。４１５ｍｇの粗製抗生物質ＧＥ２２７０複合 体が得られた。

菌糸体を２０リツトルのメタノールで２回抽出し、そしてプールした抽出物を減 圧下で濃縮して水性残渣を与え、それを酢酸エチルで２回抽出した。粗製抗生物 質ＧＥ２２７０　（６，０６ｇ）を石油エーテルの添加により濃縮された有機相 から沈澱させた。

４ｂ）抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａの単離上記の工程に従い菌糸体から得られた 粗製物（３ｇ）をテトラヒドロフラン中に溶解させ、そして減圧下でシリカゲル （２３０−４００メツシユ）の存在下で濃縮した。得られた固体残渣を集め、そ して塩化メチレン（ＣＨ２Ｃ１２）中で製造されている３００ｇのシリカゲル（ ２３０−４００メツシユ）を含有しているクロマトグラフィーカラムにかけた。

カラムを最初に塩化メチレン（２リツトル）を用いてそして次に連続的に下記の 比＋９８／２．９６／４．９４／６．９２／８．９０／１０および８８／１２（ 容量／容量）の塩化メチレンとメタノールとの１．５リットル混合物を用いて展 開させた。

留分を集め、ＴＬＣ，ＨＰＬＣまたは微生物学的にＢ、スブチリスに対して分析 し、そしてそれらの抗生物質含有量に従いプールした。

抗生物１ＧＥ２２７０Ａを含有しているプールされた留分を減圧下で濃縮して油 状残渣を与え、それをテトラヒドロフランを用いて溶解させせた。

この溶液から、抗生物質残渣を因子Ａ　（６００ｍｇ）を石油エーテルの添加に より沈澱させた。

４ｂｉｓ）抗生物質ＧＥ２２７０の少量成分類の混合物ｐ岸！少量成分類Ｃ２ｓ 、ＤＩ、Ｂ２およびＥに特に富んでいる代表的混合物を各単独成分の分析試料と のＩＩ　Ｐ　Ｌ　Ｃ比較により制定した。

Ｒ，（分）はＨＰ　Ｌ　Ｃ分析部分中に報告されているＨＰＬＣ方法Ｍに照合さ れており、そしてＧＥ２２７０因子Ｃｐｍに関しては２０．５５であり、ＧＥ２ ２７０因子ＤＩに関しては１７．４３であり、ＧＥ２２７０因子Ｄ２に関しては １８．１７であり、そしてＧＥ２２７０因子Ｅに関しては１６．６１であった。

この留分を減圧下で濃縮して油状残渣を生成し、それをテトラヒドロフラン中に 再溶解させ、そして石油エーテルを用いて白色がかった粉末として沈澱させた。

抗生物質ＧＥ２２７０因子ＤＩ、Ｄ！およびＥを分離しそして得られた粗製混合 物からヌクレオシル″″０１８（オクタデシルシラン基で官能化されたシリカゲ ル）（５μｍ）が充填されておりそして相Ａ：（ｊ１３ｃＮ：テトラヒド口フラ ン：　４０ｍＭ　）ＩＣＯＯＮＨ４（４０：　４０：２０）；相Ｂ　：　Ｃ１， １３ＣＮ　：テトラヒドロフラン：４０ｍＭＨＣＯＯＮＨ４（１０：　１０　： 　８０）の混合物を用いて溶離する２５０ｘｌＱｍｍカラムを使用する調整ＨＰ ＬＣにより精製した。抗生物質混合物（６ｍｇ）を３ｍｌの相Ｂおよび１ｍｌの 相Ａの中に溶解させ、そして１４ｍ１／分の流速で相ＡおよびＢの２６　：　７ ４混合物を用いて溶離するＨ　Ｐ　Ｌ　Ｃカラムの中に注入した。溶離した留分 を２５４ｎｍにおける紫外線吸収特性に従い集めた。均質含有量を有するその後 のクロマトグラフィー実験の留分をプールしそして減圧下で濃縮してＣＨ３ＣＮ を除去した。残存溶液はベーパーディスク検定によりスタフィロコッカス−アウ レウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　ａｕｒｅｕｓ）ツアー（Ｔｏｏｒ）　 Ｌ　１６５に対する抗バクテリア活性を示していた。これらの溶液を少な（とも ３回親液性化して、ｌＩＣ０ＯＮＩＩ４緩衝液残渣をＨＰＬＣ相から完全に除去 した。

収量は下記の如くであった：抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｅ、１１ｍｇ；抗生物質 ＧＥ２２７０因子り７．１２ｍｇ　；抗生物’［ＧＥ２２７０因子Ｄ２．１０ｍ ｇ０ ６回の繰り返し発酵からの粗製ＧＥ２２７０因子の調合物をプールし、そして１ ２リツトルのｃｏ２ｃ　Ｉ　２　：メタノール（９３：　７）中に溶解させた。

不溶性物質を濾過により除去し、そして抗生物質複合体を含有している溶液をＣ Ｉ、ＣＩ、：メタノール（９３：　７）中で平衡化されている１３ｋｇ　（２３ ０−４００メツシユ）シリカゲルカラムに適用した。

抗生物質ＧＥ２２７０囚子Ｃｔ−をＣ１１２Ｃ１、：メタノール（９３ニア）を 用いて溶離することによりカラムから溶離した。本発明の抗生物質を含有してい る留分（ＨＰＬＣ分析）をプールし、減圧下で濃縮し、そして乾燥して、他の少 量因子との混合物中で２３．５ｇの抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｃ１を生成した。

この調合物の一部（５，５ｇ）を塩化メチレン（ＣＩｔＣＩ　２）中で平衡化さ れた４００ｇのシリカゲル（２３０−４００メツシユ）を含有しているカラム上 でのフラッシュクロマトグラフィーにより再び精製した。

カラムを最初に塩化メチレン（１す・ソトル）を用いてそして次に連続的に下記 の比（容量／容量）：９６／４　（３リツトル）　、９４／６　（１す・ントル ）　、９２／８　（２リツトル）、９０／１０（６す・ソトル）および８８／１ ２（４リツトル）の塩化メチレン／メタノールの一連の混合物を用いて展開させ た。

主として抗生物１［ＧＥ２２７０Ｃｔ−を含有している留分をプールし、そして 濃縮した。抗生物質調合物（６４６ｍｇ）を石油エーテルの添加で沈澱させた。

４ｅ）純粋な抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｃ２，の単離上として抗生物質ＧＥ２２ ７０因子Ｃ２，を含有している精製された混合物を上記の調合物からの調整ＨＰ ＬＣによりさらに精製した。

上記の抗生物質の調合物の一部（１０ｍｇ）を１ｍｌの相Ａ（ＣＨｓＣＮ：　テ トラヒドロ７ラン：　４０ｍＭ　ＨＣＯＯＮＨ４４０：４０：２０）および１ｍ ｌの相Ｂ　（ＣＨｓＣＮ：テトラヒド口フラン：４０ｍＭ　ＨＣＯＯＮ）ｆ４１ ０　：　１０　：　８０）の中に溶解させ、そして４０％相Ａおよび６０％相Ｂ の混合物を用いて平衡化されている７μｍのヌクレオシル″Ｃｌ８（オクタデシ ルシラン基で官能化されたシリカゲル）が充填されているＨＰＬＣ２５０Ｘ２０ ｍｍハイバールカラム（Ｅ、メルク、ダルムスタートＦ、　Ｒ，、ドイツ）の中 に注入した。カラムを１５ｍ１／分の流速で相Ａの４０％から５０％への２２分 間の線状勾配を用いて溶離した。純粋な本発明の抗生物質を含有している１０回 の連続的クロマトグラフィー実験の留分をプールし、そして減圧下で濃縮してＣ Ｈ３ＣＮを除去した。抗生物質ＧＥ２２７０因子Ｃ７，が水から沈澱した。沈澱 を遠心により集め、蒸留水で２回洗浄し、そして真空下で乾燥して６６ｍｇの純 粋な抗生物質を生成した。

５、抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａ２の製造抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａ（上記の 如くして製造された）（８６ｍｇ）を１７ｍ１の９５％エタノールおよび１．７ ｍｌの酢酸の中に溶解させた。６０℃における２４時間にわたる培養後に、生じ た溶液を０゜１Ｍ離散ナトリウム緩衝液ｐＨ７，５（１００ｍｌ）で希釈しそし て１Ｍ水酸化ナトリウムを用いてｐＨ７，５に調節した。エタノールを減圧下で の蒸発により除去し、そして水性残渣を酢酸エチル（１００ｍｌ）で２回抽出し た。有機相を減圧下で濃縮して固体残渣を得て、それをテトラヒドロフランを用 いて溶解させそして次に石油エーテルの添加により沈澱させた。抗生物質ＧＥ２ ２７０因子Ａ！　（６２ｍｇ）が少量の抗生物＠ＧＥ２２７０因子ＡおよびＡ、 と共に得られた。純粋な抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａ２が下記の如き調整ＨＰＬ Ｃにより得られた。

１０ｍｇの上記粗製生成物をテトラヒドロフラン中に溶解さ氷水で溶解度限度ま で希釈し、そして次にスタクロマ８によるヌクレオシル″Ｃｌ８（５マイクロメ ートル）逆相シリカゲルが充填されてもするカラム（２５０Ｘ２０ｍｍ）の中に 注入し、相Ａ中の相Ｂの６４％から９３％への線状勾配を用いて２０分間にわた り約１５ｍ１／分の流速で溶離した。

この系では、相Ａは１８ｍＭ燐酸ナトリウムｐＨ７，２およびアセトニトリルの ９０　：　１０　（容量／容量）混合物であり、相ＢはＩｇｍＭ燐酸ナトＩＪ’ ７ムｐＨ７，２およびアセトニトリルの４０：６０（容量／容量）混合物であっ た。５回の連続的実験の留分を集め、そして３３０ｎｍｊこおいて紫外線で監視 した。紫外線溶離特性の主要ピークに対応する実質的量の抗生物質ＧＥ２２７０ 因子Ａ２を含有している留分をプールし、そして減圧下で濃縮して水相にし、そ れを酢酸エチルで２回抽出した。

この有機層を次に蒸留水で洗浄して残存無機塩類を除去しそして濃縮して固体残 渣を沈澱さ也それを次にテトラヒドロフラン中に溶解させそして石油エーテルを 用いて再び沈澱させて、純粋な抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａｓ（４５ｍｇ）を得 り。

ヨーロッパ特許出願公告番号４０６７４５中には、抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａ ２を抗生物質ＧＥ２２７０因子の主要反応生成物として製造するための池の変法 が記載されている。

６、抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａ３の製造抗生物＠ＧＥ２２７０因子Ａ２を１時 間にわたり室温において０．５Ｍ炭酸ナトリウムの中で培養した。反応混合物を 次に冷水で希釈し、そして塩酸を用いてｐＨ６，５にした。中和された溶液は抗 生物質ＧＥ２２７０因子八３を主要反応生成物として含有していた。この抗生物 質を水相から酢酸エチルを用いて抽出し、そして次に石油エーテルの添加により 濃縮された有機相から沈澱させた。

純粋な抗生物’ＩＧＥ２２７０Ａｓが以下に記されている如くしてカラムクロマ トグラフィーにより得られた。

１．５グラムの粗製ＧＥ２２７０を６Ｑｍｌのメタノールおよびジクロロメタン のｌ／１（容量／容量）混合物の中に溶解させ、そして減圧下での溶媒の蒸発に よりシリカゲル（７５−２３０メツシユ）上に吸着させた。固体残渣を次にジク ロロメタンで平衡化されているシリカゲル（７５−２３０メツシユ）カラム（床 高さ４０ｃｍ）の頂部の上においた。次にカラムをメタノールのジクロロメタン 中混合物を順序：１）２％メタノール（４５０ｍｌ）；２）５％メタノール（５ ００ｍｌ）；３）１０％メタノール（６００ｍｌ）；４）１５％メタノール（５ ００ｍｌ）；５）２０％メタノール（５００ｍｌ）：６）３０％メタノール（２ ５０ｍｌ）を用いて溶離した。

留分を集めそしてＴＬＣおよびＢ、スブチリスＡＴＣＣ６６３３に関して微生物 学的検定により監視した。ＧＥ２２７０因子Ａ、は通常では約１５−２０％メタ ノールを含有している溶離液中に存在していた。

希望する生成物を含有している留分をプールしそして減圧下で濃縮した。残渣に 石油エーテルを添加すると、抗生物質ＧＥ２２７０因子Ａ３が沈澱した（８５４ ｍｇの純粋な生成物）。

上記の項５および６に記されているのと同じ工程を実質的に繰り返したが因子へ の代わりに抗生物質ＧＥ２２７０の単独因子であるり３、Ｄ２、ＥおよびＣ２ｍ から出発して、ＷがＣ０ＯＨまたは活性化されたエステルであり、Ｒが水素また はＣＴＩ、０１１であり、ＲｏがＣ１１３または水素であり、モしてＲ４がヒド ロキシメチルまたはメチルである式ＩＩＩの適当な出発物質を得た。

７ａ）、抗生物質ＧＥ２２７０の少量成分類（Ｃ２，、Ｄ６、Ｄ２およびＥ）の 混合物からの適当な出発物質の製造 上記の項５および６に記されているのと同じ工程を実質的に繰り返したがだんど （因子Ａの代わりに抗生物質ＧＥ２２７０の少量成分類（Ｃ２１、Ｄ７、Ｄ２お よびＥ）から出発して、ＷがＣＯ０１１または活性化されたエステルであり、Ｒ ，Ｒ，およびＲ４がそれぞれＣｐｍに関してはメトキシメチル、メチルおよびヒ ドロキシメチルであり、Ｄ、に関しては水素、水素およびメチルであり、Ｄ２に 関してはヒドロキシメチル、メチルおよびメチルであり、モしてＥに関してはヒ ドロキシメチル、水素およびメチルである式ＩＩＩの適当な出発物質を得た。

Ｒ，（分）は）ＩＰＬＣ分析部分中に報告されているＨ　Ｐ　Ｌ　Ｃ方法Ｍを照 合されている。

Ｗが活性化されたエステルである時には、Ｒ，（分）はそれぞれＧＥ２２７０因 子ｃ、、因子間して１ｉ２２．５１であり、Ｇ　Ｅ　２２７０因子Ｄ＋ｌ：関し ては１９．８０であり、Ｇ　Ｅ　２２７０因子Ｄｔ１．：関シテハ２０．４１で あり、そしてＧＥ２２７０Ｅに関しては１８．９２であった。

ＷがＣ００Ｈである時には、Ｒ、（分）　ハ＋レソｔｔＧ　Ｅ　２２７０因子Ｃ ２，ニ関しテｌ；ｔ　１２．９９テあり、ＧＥ２２７０因子出に関しては１０゜ ３８であり、ＧＥ２２７０因子Ｄ！に関しては１１．０８Ｔあり、そしてＧＥ２ ２７０Ｅに関しては９．０３であった。

８、グリシル−Ｎε−Ｃｂｚ−Ｌ−リシントリフルオロ酢酸塩の製造４．８ｍｌ のＤＰＰＡ　（２２ミリモル）を０℃において３．５ｇのＢＯＣ−グリシン（フ ル力）（２０ミリモル）および７．２８ｇのＮｇ−Ｃｂｚ−Ｌ−リシンメチルエ ステル塩酸塩（フル力）（２２ミリモル）の５０ｍ１の乾燥ＤＭＦ中の良く撹拌 されている溶液に加えた。この溶液に、５．８ｍｌのＴＥＡ　（４２ミリモル） の５０ｍ１の乾燥ＤＭＦ中溶液溶液℃において１０−１５分間の期間にわたり添 加した。撹拌を０℃において２時間そして室温において一夜続けた。反応混合物 を２５０ｍ１のトルエンおよび５００ｍ１の酢酸エチルで希釈し、そしてＩＮ水 性ＩＣＩ　（ｘ３）　、水、Ｎａ１ｌＣＯｓの飽和溶液および食塩水で洗浄した 。Ｎ　ａ　ｚ　Ｓ　Ｏａ上での乾燥および溶媒の蒸発で、９．７ｇの濃い油が生 成し、それは結晶化の試みに抗した。この油のＮＭＲはＢＯＣ−グリシル−Ｎμ −Ｃｂｚ−Ｌ−リシンメチルエステルの構造と完全に一致した。

油を２００ｍ１のアセトン／ジオキサン１：１中に溶解させ、そして２２ｍ１の ＩＮ水性Ｎａ１ｌ（を３０分間の期間にわたり０℃において撹拌下で加えた。次 に反応物を室温で４５分間撹拌し、３００ｍ１の冷水で希釈し、２５ｍ１のＩＮ 水性ＨＣｆを用いて酸性化し、そしてクロロホルム（×３）および酢酸エチル（ ×３）で抽出した。Ｎａ、ＳＯ４上で　１の乾燥および溶媒の蒸発で、９．４ｇ のゴムが生成味それは結晶化の試みに抗した。このゴムのＮＭＲはＢＯＣ−グリ シル−Ｎε−Ｃｂｚ−Ｌ−リシンの構造と完全に一致した。

ゴム状化合物を２０ｍ１の冷たいトリフルオロ酢酸（Ｔ　Ｆ　Ａ）で処理した。

反応混合物を室温で全ての化合物が溶液状になるまで撹拌した。

溶液を真空下で冷時に少量に減らし、そして次にエチルエーテルを加えて標記化 合物の沈澱を誘発させた。９．６ｇのグリシル−Ｎε−Ｃｂｚ−Ｌ−リジントリ フルオロ酢酸塩が白色粉末として得られた。ＮＭＲは構造と完全に一致した。

９　Ｌ−チロシル−プロリンアミドの製造０．４８ｍ１のＤＰＰＡ　（２ミリモ ル）を０℃において５３８ｍｇのＢＯＣ−Ｌ−チロシン（フル力）（２ミリモル ）　、２２８．３ｍｇのし一プロリンアミド（アルドリッヒ）（２ミリモル）お よび１６８ｍｇのＮａＨＣＯｓの５ｍｌの乾燥ＤＭＦ中の良く撹拌されている溶 液に加えた。反応物を室温において２４時間撹拌し、そして次に５０ｍ１の水で 希釈し、そしてクロロホルム（×３）で抽出した。有機相を水で洗浄し、Ｎａ、 Ｓｏ、上で乾燥し、そして溶媒を蒸発させて油を生成し、それをシリカゲル６０ 　（２３０−４００メツシュＡＳＴＭ−メルク）上でのヘキサン／アセトン２； １を用いて溶離するフラッシュクロマトグラフィーにより精製した。４２０ｍｇ のＢＯＣ−Ｌ−チロシル−Ｌ−プロリンアミドがこの方法で白色固体として得ら れた。ＮＭＲは構造と完全に一致した。

得られた固体を６ｍｌの酢酸エチル中に溶解させ、そして４８時間にわたり室温 において４ｍｌの３Ｎ水性ＩＣ＋の存在下で撹拌した。反応混合物を次に真空下 で蒸発乾固し、そしてエタノール中に再溶解された残渣をエチルエーテルを用い て沈澱させた。３０２ｍｇのＬ−チロシル−Ｌ−プロリンアミドが白色粉末とし て得られた。ＮＭＲは構造と完全４０ミリモルの選択されたアミノ酸（フル力） および１５．２ｇのｐ−トルエンスルホン酸−水塩（フル力）（８０ミリモル） の２００ｍ１のメタノール中溶液を一夜還流させた。溶媒を次に真空中で濃縮し 、モして残渣をエチルエーテル中に再溶解させた。短時間後に標記化合物が定量 的に結晶化した。両者の化合物類のＮＭＲはそれらの構造と完全に３．４８ｇの ５−アミノ−１−ペンタノール（フル力）（３３，７ミリモル）および５．０ｇ の無水フタル酸（フル力）（３３，７ミリモル）を１８０℃において一緒に融解 させた。この温度をもはや水が現れなくなるまで９０分間にわたり保った。反応 物を自然に室温に冷却し、そして油状混合物をシリカゲル６０　（２３０−４０ ０メツシュＡＳＴＭメルク）上でクロロホルム中２％メタノールを用いて溶離す るクロマトグラフィーにかけた。５．９ｇの純粋な油が得られた。ＮＭＲは構造 と完全に一致した。

５．９ｇの油状中間生成物（２５ミリモル）に１．（３ｍｌのＰＢｒｓ（１７ミ リモル）を一部分ずつ加えて、発熱反応を調節した。反応混合物を１００℃に１ ．５時間にわたり加熱し、そして次に砕氷の中に注いだ。

分離した固体物質を濾過しそして空気中で一夜自然に乾燥した。６．６ｇの純粋 なブロモ中間生成物が得られた。物質は予期された分子量と一致した。

５００ｍｇの純粋なブロモ中間生成物（１，６９ミリモル）および１４０ｍｇの 亜燐酸トリエチル（フル力＞　（０，８４ミリモル）を−緒に１５０℃に約１時 間にわたり加熱した。他の三部分の１４０ｍｇの亜燐酸トリエチルを次に３０分 間隔て同一温度で加えた。全ての出発物質が消えた時に、過剰の亜燐酸トリエチ ルを蒸留除去味そして粗製物質をシリカゲル６０　（２３０−４００メツシュＡ ＳＴＭメルク）上でジクロロメタン中２％メタノールを用いて溶離するクロマト グラフィーにかけた。４６８ｍｇの濃い油が得られた。ＮＭＲで構造を確認した 。

４６８ｍｇのホスホン酸ジエチル中間生成物を３ｍｌのヒドラジンのメタノール 中０．２Ｍ溶液で一夜処理した。沈澱したフタルホドリジドを濾別しそして残存 溶液を真空中で蒸発乾固した。残渣をＩＮ水性ＨＣＩの中に加え、そして溶液を 酢酸エチルで洗浄し、Ｎａ０１ｌを用いて塩基性とし、モしてｎ−ブタノールで ５．６回抽出した。ブタノール相をＮ　ａ　２　Ｓ　０４上で乾燥しそして蒸発 乾固して１７５ｍｇの濃い油を生成し、それのＮＭＲは予期された生成物と一致 した。

１７５ｍｇの５−アミノペンチルホスホン酸ジエチルを２０時間にわたり０．６ ｍｌの濃１１Ｃ＋の中で還流させた。酸溶液を次に真空中でのｎ−ブタノールの 存在下での共沸蒸留により蒸発乾固した。得られたガラス状の油のＮＭＲにより 、それが５−アミノペンチルホスポン酸であることが確認された。

１２、５−（５−アミノペンチル）テトラゾールの製造１０ｍ１の６−アミノカ プロニトリル（フル力）（８０ミリモル）および１３．３ｍｌのＴＥＡ　（９６ ミリモル）の８０ｍ１のテトラヒドロフラン中溶液に、１２．４８ｍ１のクロロ 蟻酸ベンジル（フル力）（８８ミリモル）を０℃において撹拌下で滴々添加した 。撹拌を室温において２時間続け、そして溶媒を真空中で蒸発させた。残渣を酢 酸エチル中に溶解させ、ＩＮ水性ＨＣＩ、水で洗浄し、そして次にＮ　ａ　ｚ　 Ｓ　ＯＪ上で乾燥し、そして溶媒を蒸発させて、１９．６　ｇのシロップを生成 し、それのＮＭＲは構造と一致した。

４０ｍ１の１−メチル−２−ピロリドン中の１ｇの保護された６−アミノカプロ ニトリル（４，０６ミリモル）をアルゴン下で７９３ｍｇのナトリウムアジド（ １２，２ミリモル）および８３４ｍｇのトリエチルアミン塩酸塩（６，１ミリモ ル）の存在下で１５０℃に加熱した。４時間後に、反応混合物を１２０ｍ１の水 で希釈し、そして次に１０％水性ＨＣＩを用いてｐＨ１となるまで注意深く酸性 化した（注意：アゾチドリン酸が生成した）。溶液を酢酸エチルで抽出し、有機 相を１０％水性ＮａＯＨ（Ｘ２）で再抽出し、そして塩基性溶液をエチルエーテ ルで洗浄し、濃ｌｌＣｌで酸性化し、そして酢酸エチル（×３）で抽出した。乾 燥および有機相の蒸発によりシロップが生成し、それをメタノール／水から結晶 化させた。２６０ｍｇの微細粉末が得られた。ＮＭＲおよび質量により構造が確 認された。

２５０ｍｇのＮ−保護されたアミノテトラゾール（０，８６ミリモル）を室温に おいて５ｍｌのチオアニソール（４３，２５ミリモル）および１７．５ｍｌのト リフルオロ酢酸で３時間処理した。トリフルオロ酢酸を真空中で冷時に濃縮し、 そしてエチルエーテルを加えて標記化合物をそれのトリフルオロ酢酸塩として沈 澱させた。ＮＭＲおよび質量により構造が確認された。

４．６２ｇの３．４−ジヒドロキシ安息香酸（フル力）（３０ミリモル）の４０ ｍ１のメタノール中溶液を０．３２５ｍ１の濃Ｈ２ＳＯ４の存在下で２４時間に わたり還流させた。溶液を室温に冷却した後に、少量の固体Ｎａ１ｌＣＯ３を加 え、そして溶媒を真空中で濃縮した。残渣を酢酸エチル中に加え、水で洗浄し、 Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥し、そして溶媒を蒸発させるとシロップが生成し、それを 酢酸エチル／ヘキサンから結晶化させた。３．５３　ｇの白色結晶が得られた。

９．１ｍｌのジヒドロピラン（フル力）（０，１モル）および２５０ｍｇのｐ− トルエンスルホンピリジニウム（１ミリモル）を室温において、１．６８ｇの３ ，４−ジヒド、ロキシ安息香酸メチル（１０ミリモル）の４ｍｌの酢酸エチルお よび２５ｍ１のジクロロメタン中の撹拌されている溶液に加えた。４時間後に、 反応混合物をＮａ１ＩＣＯ３の飽和溶液で洗浄し、Ｎ　ａ　２　Ｓ　Ｏ４上で乾 燥し、そして蒸発乾固して、３３６ｇの油を得て、それをさらに精製せずに次の 段階で使用した。

前の反応からの粗製物を４０ｍ１のアセトン中に溶解させ、そしてこの撹拌され ている溶液に２０ｍ１の水、２．７６ｇのに２ＣＯ３（２０ミリモル）および１ ０ｍ１のＩＮ水性Ｎａ０Ｈ（１０ミリモル）を加え、そして撹拌を室温で７時間 続けた。アセトンを真空中で蒸発させ、そして残存している水相を酢酸エチルで 洗浄した。水相を等量のクロロポルムを含有しているＥ、フラスコに移し、０℃ に冷却し、そして激しく撹拌しながら５０ｍ１のＩＮ水性ＨＣＩを用いて酸性化 した。水相を次にクロロホルムで３回以上抽出し、そして−緒にした有機層を０ ．２％蟻酸アンモニウムで洗浄し、Ｎ　ａ　２　Ｓ　０４上で乾燥し、そして蒸 発乾固するとシロップが生成し、それはへキサン添加後に結晶化した。２．３４ ｇの白色固体が得られた。ＮＭＲは構造と一致した。

３３３ｍｇの２−チアゾリン−２−チオール（フル力）　（２，８ミリモル）、 ５７７ｍｇのＮ、　Ｎ’−ジシクロへキンル力ルポジイミド（フル力）　（２， ８ミリモル）および３５ｍｇの４−ジメチルアミノ−ピリジンをその順序で０℃ において、６４４ｍｇの安息香酸中間生成物（２ミリモル）の１４ｍ１の酢酸エ チル／ジクロロメタン５：２中の撹拌されている溶液に加えた。撹拌を室温で一 夜続け、沈澱したジシクロヘキシル尿素を濾別し、そして黄色溶液を真空中で蒸 発させると黄色部が生成し、それをシリカゲル６０　（２３０−４００メッシュ ＡＳＴＭ−メルク）上でヘキサン中２５％アセトンから溶離するフラッシュクロ マトグラフィーにより精製した。７００ｍｇの黄色結晶がアセトン／ヘキサンか ら得られた。ＮＭＲおよびＩＲにより、該化合物が標記化合物であることが確認 された。

１９、７２　ｇ（７）ＢＯＣ−ＯＮ　（フルＦ’Ｊ　ッヒ）　（８０ミリモ／ｌ ／）（７）６０ｍｌのガス抜きされたテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中溶液を１ 時間の期間にわたりアルゴン下で、５．８ｇのスペルミジン（アルドリッヒ）（ ４０ミリモル）の４０ｍ１のガス抜きされたＴ）ＩＦ中の０℃に冷却されている 撹拌されている溶液に滴々添加した。残渣をエチルエーテル中に加え、ＩＮ水性 ＮａＯＨ（Ｉ４）および水（Ｉ４）で洗浄し、Ｎ　ａ　２　Ｓ　０４上で乾燥し 、そして溶媒を真空中で濃縮して少量とした。エチルエーテルの添加後に、１１ ｇの白色粉末が沈澱した。ＮＭＲにより、それが標記化合物であることが確認さ れた。

４．２ｇのＢＯＣ−ＯＮ　（アルドリッヒ）（１７，２ミリモル）を室温におい て、１０ｍ１のジオキサン、１０ｍ１の水および３．３ｍｌのトリエチルアミン の混合物中に溶解されている２ｇのフマル酸３−アミノプロピオンニトリル（ア ルドリッヒ）（１５，６ミリモル）の撹拌されている溶液に加えた。３時間後に 、反応混合物をさらに水で希釈し、そしてジクロロメタン（Ｉ３）で抽出した。

−緒にした有機層をＩＮ水性Ｎａ０Ｈ（Ｉ３）および水（Ｉ３）で洗浄し、Ｎ　 ａ　２　Ｓ　Ｏｓ上で乾燥し、そして蒸発乾固した。残存油をエチルエーテル中 に加え、そしてヘキサンを用いて沈澱させて、２．２ｇの白色粉末を生成した。

７ｍｌのＩＮエタノール性Ｎａ０）１中の１ｇのＮ−ＢＯＣ−保護された中間生 成物（５，９ミリモル）を４０ｐｓ　ｉにおいて１３０ｍｇのラネーニッケル（ 水中５０％スラリー、ｐ　Ｈ＞　９　）　（アルドリッヒ）の存在下で４０時間 にわたり水素化した。ラネーニッケルを濾別しそして溶媒を蒸発乾固した。残渣 を酢酸エチル中に加え、そしてＩＮ水性Ｎａ０）１で洗浄し、Ｎ　ａ　２　Ｓ　 ０４上で乾燥し、そして溶媒を真空中で除去して、９５０ｍｇの無色油を生成し 、それを放置すると固化した。ＮＭＲにより、それが標記化合物であることが確 認された。

０．５ｇのシステアミン（フル力＞　（６，４８ミリモル）の５ｍｌのＣＨ，Ｃ １，中溶液に、５ｍｌのＣＨ，ＣＩ２中の１．４ｇの二次酸ジーターシャリｍ− ブチル（アルドリッヒ＞　（６，４８ミリモル）を室温において撹拌しながら加 えた。３０分後に、有機溶媒を蒸発させ、そして粗製物質を５ｍｌの無水エタノ ール中に溶解させた。エタノール溶液に、２．７ｍｌのＴＥＡ（１９，１ミリモ ル）および１．０７ｍ１の３−ブロモプロピオン酸メチル（フル力）（９，５７ ミリモル）をその順序で加えた。反応を約３０分間で完了させた。エタノールを 真空中で除去し、そして１５ｍ１のクロロホルムにより置換した。有機相を次に 水で洗浄し、Ｎ　ａ　、Ｓ　Ｏ，上で無水化し、そして溶媒を蒸発させて油を生 成し、それを最後に０℃において５分間にわたり１ｍｌのトリフルオロ酢酸で処 理した。蒸発乾固して、２７０ｍｇの薄黄色の油を与えた。ＮＭＲおよびＩＲに より、それが標記化合物であることが確認された。

１７．６−アミノ−２（Ｅ）−ヘキセン酸の製造２ｍｌの４−アミノ−ブチルア ルデヒドジエチルアセクール（フル力）（１１，６ミリモル）および３．６ｍｌ のＴＥＡ　（２５，６ミリモル）の５ｍｌのＣｌｌ２ＣＩ　２中の撹拌されてい る溶液に、１．５ｍｌの塩化ベンゾイル（フル力）（１２，９ミリモル）の５ｍ ｌの（ｊ１２ｃｌｔ中溶液を室温において３０分間にわたり加えた。１時間後に 、反応物をさらにＩＱｍｌのＣＨ２Ｃｌ２で希釈し、水で洗浄し、そして有機相 をＮ　ａ　！Ｓ　０４上で乾燥し、そして量を２０ｍ１に調節した。新しい溶液 をアルゴン下で１．５ｍｌのＴＥＡ　（１１，５ミリモル）、１０．２ｇの二次 酸ジーターシャリｍ−ブチル（アルドリッヒ）（４６，８ミリモル）および１． ４ｇの４−ジメチルアミノピリジン（フル力）（１１，５ミリモル）の存在下で 室温において自然に反応させた。溶媒を除去すると褐色部が得られ、それをシリ カゲル６０　（２３０−４００メツシュＡＳＴＭ−メルク）上でｎ−ヘキサン中 ２０％酢酸エチルから溶離するフラッシュクロマトグラフィーにより精製して、 １．６ｇのＮ、Ｎ保護基除去された４−アミノブチルアルデヒドジエチルアセク ールを無色の油として生成した。ＮＭＲにより構造が確認された。

得られた油を次に５ｍｌのＴＨＦ中に溶解させ、そして室温において３時間にわ たり５ｍｌのｌＮＨＣｌで処理した。Ｔｌ（Ｆを真空中で除去しそして残存溶液 をクロロホルム（２ｍＩ　Ｉ３）で洗浄した。有機相を次にＮａ２ＣＯ，の溶液 、水で洗浄し、ＮａｔＳＯ４上で乾燥し、そして蒸発乾固して油を生成し、それ をさらに精製せずに次の段階で使用した。

１６０ｍｇの６０％ＮａＨ（４ミリモル）の５ｍｌの乾燥ＴＨＦＨＦ中成濁液℃ においてアルゴン下で、０．８３７ｍ１のトリエチルホスホノアセテート（フル 力）　（４，３ミリモル）を加えた。３０分後に、前で得られたアルデヒド（１ ，１７ｇ）（４，０２ミリモル）の乾燥ＴＨＦ（２ｍｌ）溶液を加え、そして温 度を自然に室温に上昇させた。反応物を一夜撹拌し、そして次にさらに５０ｍｇ の６０％Ｎ　ａ　ＩＩを０℃において加えた。室温におけるさらに２時間の後に 、反応混合物を希ＨＣＩ（ＩＱｍｌ）で処理し、そして酢酸エチル（５ｍＩ　Ｉ ３）で抽出した。−緒にした有機相を水で洗浄し、Ｎ　ａ　２Ｓ　Ｏ，上で乾燥 し、そして蒸発乾固した。粗製物質をシリカゲル６０　（２３０−４００メツシ ュＡＳＴＭ−メルク）上でｎ−ヘキサン中１５％酢酸エチルから溶離するフラッ シュクロマトグラフィーにより精製して、７６５ｍｇのシロップを生成した。

ＮＭＲにより、それがＥ配置に二重結合を有する予期された生成物であることが 確認された（Ｊ＝１６Ｈｚ）。

６．１５ｍ１のＩＮ　ＬｉＯＨ（６，１５ミリモル）を、７３９ｍｇの前で得ら れた不飽和エステル（２，０５ミリモル）の１０ｍ１のＴ）ＩＦ中温溶液撹拌し ながら室温において加えた。出発物質が消えた時に、反応混合物を真空中で３０ ℃（浴温）において濃縮した。水溶液をｌＮＨＣｌを用いて酸性化しそして次に 酢酸エチルで抽出した。−緒にした有機相をＮ　ａ　ｚ　Ｓ　０４上で抽出し、 濾過し、そして溶媒を蒸発させて油を生成し、それは真空下で放置すると固化し た。ＮＭＲおよびＭＳにより、それが５−Ｎ−ＢＯＣ−アミノ−２（Ｅ）−ヘキ セン酸であることが確認された。

標記化合物を得るためのＮ−ＢＯＣ保護の除去は純粋なトリフルオロ酢酸の中で ０℃において適当なＧＥ２２７０出発物質との結合の直前に行われた。

１８．３−（２−アミノエトキシ）プロパン酸トリフルオロ酢酸の製造１ｇのＮ −ＢＯＣ−エタノールアミン（６，２２ミリモル）［エタノールアミン（フル力 ）から古典的方法に従い製造された］の１０ｍ１の乾燥ＴＨＦ中の撹拌されてい る溶液に一７８℃において、３．８８ｍ　ｌのブチルリチウム（フル力）（６， ２２ミリモル）の１．６Ｍ溶液をアルゴン下で加えた。３０分後に、１．３ｇの ３−ブロモプロパン酸ｔ−ブチル［３−ブロモプロパン酸（フル力）から古典的 方法に従い製造されたＪを加え、温度を自然に室温に上昇させ、そして生じた混 合物をその湿度において２０時間にわたり撹拌した。水で希釈した後に、反応混 合物をｎ−へキサン（５ｍＩ　Ｘ２）で抽出した。溶媒を除去して粗製物質を与 え、それをシリカゲル６０　（２３０−４００メツシュＡＳＴＭ−メルク）上で ｎ−へキサン中２０％酢酸エチルから溶離するフラッシュクロマトグラフィーに より精製して、１．４３　ｇの油を生成した。ＮＭＲにより、それが結合された 化合物であることが確認された。

適当なＧＥ２２７０出発物質への添加の直前にそれをトリフルオロ酢酸中で約５ 分間にわたり室温で撹拌することにより、結合された化合物の全体的な保護基除 去を行った。真空中でのトリフルオロ酢酸の除去により標記化合物が生成した。

フロントページの続き （５１）　Ｉｎｔ、　Ｃ１，５識別記号　庁内整理番号Ｃｌ２Ｐ　２１１０４　 ８２１４−４８（Ｃ１２Ｐ　１７／１８ Ｃ１２Ｒ１：０１） （Ｃｌ３Ｆ　２１１０４ Ｃ１２Ｒ１：０１） （７２）発明者　セルバ、　エンリコ イタリー国パビア・２７０２７グロペロカイロリ・ピアディピットリ第１５ Ｉ

Claims (16)

【特許請求の範囲】
1. １．下記の式Ｉ ▲数式、化学式、表等があります▼Ｉ ［式中、 Ｒは水素、 ヒドロキシメチル、または メトキシメチルを表し、 Ｒ１は水素、または メチルを表し、 Ｙは式 ▲数式、化学式、表等があります▼ の基を表し、ここで Ｒ２は水素、 （Ｃ１−Ｃ４）アルキル、 アミノ（Ｃ２−Ｃ４）アルキル、 （Ｃ１−Ｃ４）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、またはジ−（Ｃ１− Ｃ４）アルキルアミノ−（Ｃ１−Ｃ４）アルキルを表し、Ｒ３は水素、 カルボキシ、スルホ、ホスホノ、場合により低級アルコキシカルボニルもしくは ベンジルオキシカルボニル基で保護されていてもよいアミノ、アルキル部分が場 合によりカルボキシ基で置換されていてもよい（Ｃ１−Ｃ４）アルキルアミノ、 ジ−（Ｃ１−Ｃ４）アルキルアミノ、ヒドロキシ、ハロ、アルキル部分が場合に よりカルボキシ基で置換されていてもよい（Ｃ１−Ｃ４）アルコキシ、（Ｃ１− Ｃ４）アルコキシカルボニル、メルカプト、（Ｃ１−Ｃ４）アルキルチオ（ここ でアルキル部分は場合によりカルボキシ基で置換されていてもよい）、場合によ りカルボキシ、スルホ、ヒドロキシ、ハロおよびメルカプトからなる群から選択 された１−３個の置換基で置換されていてもよいフェニル、カルバミル、（Ｃ１ −Ｃ６）アルキルカルバミル（ここでアルキル部分は場合によりカルボキシ、ア ミノ、（Ｃ１−Ｃ４）アルキルアミノおよびジ−（Ｃ１−Ｃ４）アルキルアミノ から選択される１もしくは２個の置換基で置換されていてもよい）、ジ−（Ｃ１ −Ｃ４）アルキルカルバミル（ここでアルキル部分は隣接窒素原子と一緒になっ て場合により環炭素の１個の上でカルボキシもしくはカルバミル基で置換されて いてもよくそして場合によりＯ、ＳおよびＮから選択される他のヘテロ基を含有 していてもよい飽和５−７員の複素環式環を表すこともできる）、ベンジルアミ ノ（ここでフェニル基は１−３個のヒドロキシ基、不飽和であっても、部分的に 飽和されていてもまたは全体に飽和されていてもよくそしてＮ、ＳおよびＯから 選択される１−３個の別のヘテロ原子を含有していてもよい窒素含有５−６員の 複素環式環（ここで環の炭素の１個は場合により基カルボキシ、スルホ、カルボ キシ（Ｃ１−Ｃ４）アルキルおよびスルホ（Ｃ１−Ｃ４）アルキルを有していて もよくそして環窒素原子は場合により（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、カルボキシ（Ｃ １−Ｃ４）アルキル、スルホ（Ｃ１−Ｃ４）アルキルおよびベンジルにより置換 されていてもよい）で置換されていてもよい） から選択される１−３個の置換基を有する直鎖状もしくは分枝鎖状の（Ｃ１−Ｃ １４）アルキル、 場合によりカルボキシまたはスルホ置換されていてもよい（Ｃ３−Ｃ６）アルケ ニル、 １−デオキシ−１−グルシチル、 ２−デオキシ−２−クルコシル、 窒素原子が場合により（Ｃ１−Ｃ４）アルキルまたはベンジルにより置換されて いてもよくそして環骨格の１または２個の炭素が（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、カル ボキシおよびスルホから選択される置換基を有していてもよい完全に飽和されて いる５−７員の窒素含有複素環式環 を表すか、或いは Ｒ２およびＲ３が隣接窒素原子と一緒になって場合によりＯ、ＳおよびＮから選 択される他のヘテロ原子を含有していてもよくそして場合により環炭素上に（Ｃ １−Ｃ４）アルキル、ベンジル、カルボキシ、スルホ、カルボキシ（Ｃ１−Ｃ４ ）アルキル、およびスルホ（Ｃ１−Ｃ４）アルキルから選択される１もしくは２ 個の置換基を有していてもよい完全に飽和されている５−７員の複素環式環を表 し、Ｒ４は 水素、 メチル、または ヒドロキシメチル を表し、 但し条件として、Ｒ４が水素またはヒドロキシメチルである時には、同時にＲは メトキシメチルでありそしてＲ１はメチルである］を有する抗生物質ＧＥ２２７ ０のアミド誘導体並びにそれの薬学的付加塩類。
2. ２．Ｒがメトキシメチルを表し、そして他の置換基が請求の範囲第１項に記載の とおりである請求の範囲第１項に記載の化合物。
3. ３．Ｒがメトキシメチルを表し、Ｒ１およびＲ４がメチルであり、そしてＹが式 ▲数式、化学式、表等があります▼ の基を表し、ここで Ｒ２が水素でありそしてＲ３が請求の範囲第１項に記載のとおりである請求の範 囲第１項に記載の化合物。
4. ４．Ｒがメトキシメチルであり、Ｒ１およびＲ４がメチル基であり、そしてＹが 天然アミノ酸、例えばグリシン、オルニチン、セリン、アスバルチン酸、チロシ ン、ロイシン、フェニルアラニン、メチオニン、プロリン、スレオニン、リシン 、または合成ジペプチド、例えばグリシルリシン、セリールプロリン、グリシル プロリンアミド、チロシルプロリンアミド、スレオニルプロリンアミド、ロイシ ルプロリンアミド、から誘導されるアミノ部分である請求の範囲第１項に記載の 化合物。
5. ５．Ｒがメトキシメチルであり、Ｒ１およびＲ４がメチルであり、Ｙが基ＮＲ２ Ｒ３であり、ここでＲ２が水素でありそしてＲ３がＣＯＯＨ、ＳＯ３ＨおよびＰ Ｏ３Ｈ２から選択される基で置換された好適には炭素数が３−１２の、より好適 には３−７の線状アルキル鎖である請求の範囲第１項に記載の化合物。
6. ６．Ｒがメトキシメチルであり、Ｒ１およびＲ４がメチルであり、Ｙが基ＮＲ２ Ｒ３であり、ここでＲ２が水素でありそしてＲ３がＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２Ｃ Ｈ２−ＣＯＯＨである請求の範囲第１項に記載の化合物。
7. ７．Ｒが水素、ヒドロキシメチルまたはメトキシメチルを表し、Ｒ１が水素また はメチルを表し、Ｒ４が水素、メチルまたはヒドロキシメチルを表し、そしてＹ が式 ▲数式、化学式、表等があります▼ の基を表し、ここで Ｒ２が水素でありそしてＲ３が請求の範囲第１項に記載のとおりである請求の範 囲第１項に記載の化合物。
8. ８．Ｙが天然アミノ酸、例えばグリシン、オルニチン、セリン、アスバルチン酸 、チロシン、ロイシン、フェニルアラニン、メチオニン、プロリン、スレオニン 、リシン、または合成ジペプチド、例えばグリシルリシン、セリールプロリン、 グリシルプロリンアミド、チロシルプロリンアミド、スレオニルプロリンアミド 、ロイシルプロリンアミド、から誘導されるアミノ部分である請求の範囲第７項 に記載の化合物。
9. ９．Ｒが水素、ヒドロキシメチルまたはメトキシメチルであり、Ｒ１が水素また はメチルであり、Ｒ４が水素、メチルまたはヒドロキシメチルであり、そしてＹ が基ＮＲ２Ｒ３であり、ここでＲ２が水素でありそしてＲ３がＣＯＯＨ、ＳＯ３ ＨおよびＰＯ３Ｈ２から選択される基で置換された好適には炭素数が３−１２の 、より好適には３−７の線状アルキル鎖である請求の範囲第１項に記載の化合物 。
10. １０．Ｒが水素、ヒドロキシメチルまたはメトキシメチルであり、Ｒ１が水素ま たはメチルであり、Ｒ４が水素、メチルまたはヒドロキシメチルであり、そして Ｙが基ＮＲ２Ｒ３であり、ここでＲ２が水素でありそしてＲ３がＣＨ２ＣＨ２Ｃ Ｈ２ＣＨ２ＣＨ２−ＣＯＯＨである請求の範囲第１項に記載の化合物。
11. １１．式ＩＩ： ▲数式、化学式、表等があります▼ＩＩ［式中、 Ｗはカルボキシまたは活性化されたエステル官能基を表し、Ｒは水素、ヒドロキ シメチルまたはメトキシメチルを表し、Ｒ１は水素またはメチルを表し、 Ｒ４は水素、メチルまたはヒドロキシメチルを表し、但し条件として、Ｒ４が水 素またはヒドロキシメチルを表す時には、同時にＲはメトキシメチルでありそし てＲ１がメチルである］を有する抗生物質ＧＥ２２７０化合物を、不活性有機溶 媒中でそしてＷがカルボキシである時には縮合剤の存在下で、式ＨＮＲ２Ｒ３ ［式中、 Ｒ２よびＲ３は請求の範囲第１項に記載したと同じ意味を有する］の選択された アミンと反応させることを含んでなる請求の範囲第１項に記載の化合物の製造方 法。
12. １２．縮合剤が（Ｃ１−Ｃ４）アルキル、フェニルまたは複素環式ホスホルアジ デート類、例えばジフェニルホスホルアジデート（ＤＰＰＡ）、ジエチル−ホス ホルアジデート、ジ（４−ニトロフェニル）ホスホルアジデート、ジモルホリル −ホスホルアジデートおよびジフェニルホスホルクロリデート、から選択される 請求の範囲第１１項に記載の方法。
13. １３．アミン試薬ＨＮＲ２Ｒ３が抗生物質出発物質に関して１−２倍のモル過剰 量で使用される請求の範囲第１１および１２項に記載の方法。
14. １４．薬品として使用するための請求の範囲第１−１０項のいずれかに記載の化 合物。
15. １５．活性成分としての請求の範囲第１−１０項のいずれかに記載の化合物を薬 学的に許容可能な担体と混合して含有する薬学的組成物。
16. １６．抗生物質としての使用のための薬品を製造するための請求の範囲第１−１ ０項のいずれかに記載の化合物の使用。