JPH1059997A - アミチアマイシンアミド誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【課題】 抗菌活性を有して水溶性であるアミチアマイ
シン誘導体を創製する。 【解決手段】 次の一般式（Ｉ） 〔式中、ｎは１〜６の整数であり、Ｒ¹ は水素原子、カ
ルボキシル基またはヒドロキシルメチル基であり、また
Ｒ² は式−ＣＯＯＲ³（但し、Ｒ³ は水素原子、低級ア
ルキル基またはベンジル基、あるいはハロゲンまたはヒ
ドロキシ基を置換基として有するベンジル基である）の
基であるか、または式−ＮＲ⁴Ｒ⁵（但し、Ｒ⁴ は水素原
子または低級アルキル基であり、Ｒ⁵ は水素原子または
低級アルキル基あるいは３−アミノプロピル基、３−
［２−（ｐ−クロロまたはブロモフェニル）エチル］ア
ミノプロピル基または３−（ｎ−ブチルアミノ）プロピ
ル基である）の基であるか、あるいはＲ² はメチル基、
ヒドロキシル基または式−ＮＨ−Ｃ(＝ＮＨ)−ＮＨ₂ の
グアニジノ基である〕で表されるアミチアマイシンのア
ミド誘導体、またはこれの製薬学的に許容できる塩。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は抗菌活性を有する新
規なアミチアマイシンアミド誘導体に関する。

【０００２】

【従来の技術】アミチアマイシン(Amythiamicin)Ａ、
Ｂ、ＣおよびＤは、アミコラトプシス(Amycolatopsis)
属に属するMI481-42F4菌株(FERM P-12739 として寄託）
の培養によって生産される抗菌性の抗生物質であり、水
に難溶性の環状ペプチドである(「ジャーナル・オブ・
アンチビオチックス」47巻、６号、 668〜 674頁（1994
年）、同10号、1145〜1159頁（1994年）および同48巻、
２号、182〜184頁（1995年）、参照）。アミチアマイシ
ンＡは、特開平５−310766号公報には抗生物質MI481-42
F4−Ａの名で記載される。このMI481-42F4−Ａ物質を希
塩酸、等中で分解して得られた抗菌活性物質として、抗
菌物質MI481-42F4−A1、−A2および−A3、またはこれら
の塩が特開平６−263784号公報に記載される。また、前
記のMI481-42F4−Ａ物質をメタノリシス等の分解にか
け、さらに所望ならばエステル化して得られた抗菌性物
質として、抗菌物質MI481-42F4−B1、−B2および−B3が
特開平７−215989号公報に記載される。MI481-42F4−A3
物質はアミチアマイシンＢ、MI481-42F4−A1物質はアミ
チアマイシンＣ、MI481-42F4−B1物質はアミチアマイシ
ンＤ、MI481-42F4−B2物質はアミチアマイシンＥにそれ
ぞれ相当する。

【０００３】アミチアマイシンＡ〜Ｅはすべて水に難溶
性の環状ペプチドであり、抗菌活性を有し、「アミチア
マイシン類」と総称される。アミチアマイシン類は、医
療用の抗菌剤として、特に薬剤耐性黄色ブドウ球菌（MR
SA）に有効な抗菌剤として有用であると期待されてい
る。しかし、アミチアマイシン類は、水に難溶であるた
めに、抗菌有効濃度でアミチアマイシン類を含有できる
抗菌剤組成物として製剤することが困難であった。すな
わち、アミチアマイシンはグラム陽性菌、特に高度に耐
性化したMRSAに対して優れた抗菌活性を示したが、水に
不溶性であって抗微生物剤として用いる場合に投与用法
に大きな制限があった。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】アミチアマイシンの優
れた抗菌活性を失うことなく水に可溶性であるアミチア
マイシン誘導体を創製することが望まれている。

【０００５】

【問題点を解決するための手段】本発明者らは前記した
ような問題点を解決すべく鋭意研究を重ねた。そのため
本発明者らはアミチアマイシンの種々な誘導体を合成し
た。アミチアマイシンＡの塩酸−メタノール分解で得ら
れたアミチアマイシンＤは次式 で示される物質である(前出の「ジャーナル・オブ・ア
ンチビオチックス」47巻、10号、1153〜1159頁)。

【０００６】さらに、アミチアマイシンＤを温和な反応
条件で常法でけん化すると、次式 で示されるアミチアマイシンＤ酸（遊離酸の形）が得ら
れることが認められた。本発明者らは、式（Ｂ）のアミ
チアマイシンＤ酸の41位の遊離カルボキシル基に対して
次の一般式（II） 〔式中、ｎは１〜６の整数であり、Ｒ¹ およびＲ² は後
記の意味を有する〕で示されるアミン誘導体を、通常ペ
プチド結合の生成のために用いられる縮合剤の存在下に
縮合すると、後記の一般式（Ｉ）で総括的に表わせる各
種の新規アミチアマイシンアミド誘導体を合成できるこ
とを認め、またこれら新規アミチアマイシンアミド誘導
体またはその塩が水溶性であり、しかもグラム陽性菌、
特にメシチリン耐性スタフィロコッカス・アウレウス
（MRSA)に対してすぐれた抗菌活性を有することを認め
た。これらの知見に基づいて、本発明が完成された。

【０００７】従って、本発明においては、次の一般式
（Ｉ） 〔式中、ｎは１〜６の整数であり、Ｒ¹ は水素原子、カ
ルボキシル基またはヒドロキシルメチル基であり、また
Ｒ² は式−ＣＯＯＲ³（但し、Ｒ³ は水素原子、低級ア
ルキル基またはベンジル基、あるいはハロゲンまたはヒ
ドロキシ基を置換基として有するベンジル基である）の
基であるか、または式−ＮＲ⁴Ｒ⁵（但し、Ｒ⁴ は水素原
子または低級アルキル基であり、Ｒ⁵ は水素原子または
低級アルキル基あるいは３−アミノプロピル基、３−
［２−（ｐ−クロロまたはブロモフェニル）エチル］ア
ミノプロピル基または３−（ｎ−ブチルアミノ）プロピ
ル基である）の基であるか、あるいはＲ² はメチル基、
ヒドロキシル基または式−ＮＨ−Ｃ(＝ＮＨ)−ＮＨ₂ の
グアニジノ基である〕で表されるアミチアマイシンのア
ミド誘導体、またはこれの製薬学的に許容できる塩が提
供される。

【０００８】一般式（Ｉ）の誘導体において、一般式
（Ｉ）で示されるｎは２〜５の整数であるのが好まし
い。また、Ｒ³ 、Ｒ⁴ またはＲ⁵ が低級アルキル基であ
る場合、低級アルキル基は炭素数１〜６のものであるこ
とができ、好ましくは１〜４のものであり、直鎖状また
は分岐鎖状である。低級アルキル基の好ましい例には、
メチル基、エチル基、ｎ−プロピル基、インプロピル
基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｎ−ペンチル基、ｎ
−ヘキシル基がある。

【０００９】一般式（Ｉ）の誘導体の製薬学的に許容で
きる塩は、該誘導体中にカルボキシル基がある場合に、
それのナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩および
マグネシウム塩であることができる。また、該誘導体が
アミノ基および（または）イミノ基を含む場合に、それ
と製薬学的に許容できる無機酸または有機酸、例えば塩
酸、硫酸、酢酸、プロピオン酸、メタンスルホン酸との
酸付加塩であることができる。

【００１０】本発明による一般式（Ｉ）の誘導体の製造
は、式（Ｂ）のアミチアマイシンＤ酸に対して、一般式
（II） 〔式中、ｎ、Ｒ¹ およびＲ² は一般式（Ｉ）で示したと
同じ意味をもつ〕のアミン誘導体、あるいはこれがカル
ボキシル基またはアミノ基またはグアニジノ基の如き官
能基を有する時には官能基を適当な保護基（例えばアミ
ノ保護基としてｔ−ブトキシカルボニル基、またカルボ
キシル保護基としてはジフェニルメチルエステル基が好
ましい）で保護してある式（II）のアミン誘導体の保護
体をアミド結合の形成をしながら縮合させることによっ
て行ないうる。この縮合反応は、ペプチドの合成に通常
用いられる縮合剤の存在下に行なうのが好ましい。さら
に、得られた縮合生成物からは、必要ならば保護基をペ
プチド化学で常用される脱保護反応にかけて脱離させる
ことができる。また、所望の場合には、縮合生成物を更
にけん化、アシル化、アルキル化などの修飾の反応にか
けることもできる。

【００１１】前記の縮合反応によって、アミド結合を形
成するために用いられる縮合剤としては、DCC、EDCなど
のカルボジイミド類、DPPA、DEPCなどの燐酸誘導体、Bo
p試薬、PyBop試薬などのフォスフォニウム塩、TBTU、HB
TU、TNTUなどのウロニウム塩を使用でき、またこれらと
HOBt、HOSu等を組み合わせて使用できる。溶媒としては
これらの試薬と原料のアミチアマイシンＤ酸を溶解でき
る溶媒であって、通常ペプチド合成に用いる溶媒を用い
ればよい。好ましくは溶媒はDMF、N-メチルピロリドン
などの非プロトン性極性溶媒が挙げられる。反応温度は
０℃〜70℃、反応時間は１時間〜48時間が適当に選ばれ
る。縮合反応の生成物は、ゲル濾過クロマトグラフィ
ー、シリカゲルクロマトグラフィー、逆相クロマトグラ
フィー等、通常用いられる方法にかけて紫外部吸収をモ
ニターすることにより単離することができる。また、残
留した保護基を有する反応生成物ではペプチド化学で通
常用いられる脱保護反応によって保護基を除去した後
に、上記精製法により生成物を単離および精製すること
ができる。

【００１２】次に、本発明による一般式（Ｉ）のアミド
誘導体の好適な具体例として本発明の化合物 No.１〜N
o.11をそれの製造例を示す後記の実施例番号と共に下記
の表１に要約して例示する。

【００１３】

【００１４】さらに、本発明による一般式（Ｉ）のアミ
ド誘導体の抗菌活性を説明する。一般式（Ｉ）のアミド
誘導体の具体例として、後記の実施例１〜11で製造され
た本発明の各化合物の各種細菌に対する最小発育阻止濃
度(MIC.)(μg/ml）を標準の倍数希釈法で測定した。使
用培地はミュラー・ヒントン寒天培地であり、培養温度
は37℃である。得られた結果を次の表２および表３に抗
菌スペクトルとして示す。

【００１５】

【００１６】

【００１７】

【００１８】

【００１９】

【００２０】

【発明実施の形態】実施例によって本発明の化合物の製
造例を具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例の
みに限定されるものではない。

【００２１】実施例１ アミチアマイシンＤ酸22.6mg、６−アミノカプロン酸メ
チルエステル塩酸塩13.4mg、Bop 試薬31.6mgおよび HOB
t 10mgを0.25mlのＮ−メチルピロリドンに溶解し、これ
にトリエチルアミン 0.012mlを加えて21時間室温で攪拌
して縮合反応を行なった。反応液にメタノール２mlを加
え、メタノールで充填したセファデックスLH20のカラム
に注ぎメタノールで展開した。紫外部吸収をモニターし
てアミチアマイシンの発色団をもつ分画を得た。その分
画から溶媒を減圧下蒸発させると粗物質54.1mgを得た。

【００２２】その粗物質を１mlのクロロフォルムに溶解
し、クロロフォルムで充填したワコーゲルＣ３００（12
ml）のカラムに注ぎ、クロロフォルム、メタノール２％
含有クロロフォルム、メタノール５％含有クロロフォル
ム、メタノール６％含有クロロフォルムで展開すると、
メタノール５％含有クロロフォルムからメタノール６％
含有クロロフォルムにかけて目的物質が溶出された。溶
媒を減圧下に蒸発させ表１に示す化合物 No.１の23.4mg
を得た。 紫外部吸収：アミチアマイシンＡに同じである。

【００２３】実施例２ 実施例１で得られた化合物 No.１の14mgをクロロフォル
ム 0.5mlに溶解し、メタノール 1.5mlを加える。１規定
NaOH水溶液 0.6mlを加え室温で90分攪拌した。反応の進
行は薄層クロマトグラフィー（シリカゲル、クロロフォ
ルム：メタノール、10：１、紫外線で検出）によってモ
ニターできた。

【００２４】反応終了後に、１規定塩酸 0.6mlを加え中
和し濃縮後、メタノールで充填したセファデックスLH20
のカラムに注ぎメタノールで展開した。紫外部吸収をモ
ニターしてアミチアマイシンの発色団をもつ分画を得
る。溶媒を減圧下に蒸発させ表１に示す化合物 No.２の
8.3mgを得た。 紫外部吸収：アミチアマイシンＡに同じである。

【００２５】実施例３ 実施例２で得られた化合物 No.２の 4.1mgをメタノール
１mlに溶解し、 0.1規定NaOH 0.036mlを加える。減圧で
蒸発乾固すると、ナトリウム塩が得られた。本物質（表
１の化合物 No.３）４mgは水 0.4mlに溶解すると清澄な
泡立ちやすい水溶液となった。

【００２６】実施例４ アミチアマイシンＤ酸10.3mgおよびビス（３−アミノプ
ロピル）メチルアミン0.2mlをＮ−メチルピロリドン 0.
6mlに溶解した溶液0.34mlと、Bop試薬 14.8mgと、HOBt
9.4mgとを0.09mlのＮ−メチルピロリドンに溶解した。
この溶液にトリエチルアミン 0.012mlを加えて19時間室
温で攪拌した。反応液にメタノール２mlを加え、メタノ
ールで充填したセファデックスLH20のカラムに注ぎメタ
ノールで展開した。紫外部吸収をモニターしてアミチア
マイシンの発色団をもつ分画を得た。その分画から溶媒
を減圧下に蒸発させると粗物質11.2mgを得た。これを再
びセファデックスLH20のクロマトグラフィーにて精製
し、紫外部吸収をモニターして目的物質を集めた。溶媒
を減圧下に蒸発させて表１に示した化合物 No.４の8.6m
gを得た。 質量分析（FAB＋):1145.2, 1144.2, 1087.2（Ｍ-(ＮＨ₂
-(ＣＨ₂)₃-)) 紫外部吸収：アミチアマイシンＡに同じである。

【００２７】実施例５ アミチアマイシンＤ酸11.2mgおよびトリメチレンジアミ
ン 0.2mlをＮ−メチルピロリドン 0.5mlに溶解した溶液
0.012ml と、 Bop試薬14.7mgと、HOBt 5.4mgとを0.06ml
のＮ−メチルピロリドンに溶解した。これにトリエチル
アミン0.0025mlを加えて20時間室温で攪拌した。反応液
にメタノール 0.2ml,10 ％塩化水素含有メタノール20滴
を加え、メタノールで充填したセファデックスLH20のカ
ラムに注ぎメタノールで展開した。紫外部吸収をモニタ
ーしてアミチアマイシンの発色団をもつ分画を得た。

【００２８】その分画から溶媒を減圧下に蒸発させ、残
さを50％メタノールに溶解、50％メタノールで充填した
ODS−シリカ３mlの小カラムに吸着させた。50％メタノ
ールで洗浄後メタノールで溶出した。紫外部吸収をモニ
ターして目的物質を集めた。溶媒を減圧下蒸発させ表１
に示した化合物 No.５の 8.6mgを得た。 質量分析（FAB＋）：1074.3, 1073.3 紫外部吸収：アミチアマイシンＡに同じである。

【００２９】実施例６ アミチアマイシンＤ酸10.6mg、および３−（３−アミノ
プロピルアミノ）プロピル−ｎ−ブチルアミン３塩酸塩
9.9mg、 Bop試薬13.9mg、HOBt 5.2mgとを0.13mlのＮ−
メチルピロリドンに溶解した。これにトリエチルアミン
0.015mlを加えて20時間室温で攪拌した。反応液にメタ
ノール 0.3ml、10％塩化水素含有メタノール 0.2mlを加
え、メタノールで充填したセファデックスLH20のカラム
に注ぎメタノールで展開した。紫外部吸収をモニターし
てアミチアマイシンの発色団をもつ分画を得た。

【００３０】その分画から溶媒を減圧下蒸発させ26.2mg
の粗物質を得た。50％メタノールに溶解、50％メタノー
ルで充填したODS−シリカ３mlの小カラムに吸着させ
た。50％メタノールで洗浄後メタノールで溶出した。紫
外部吸収をモニターして目的物質を集めた。溶媒を減圧
下蒸発させ表１に示した化合物 No.６の 7.0mgを得た。 質量分析（FAB＋）：1187.4, 1186.4 紫外部吸収：アミチアマイシンＡに同じである。

【００３１】実施例７ アミチアマイシンＤ酸11.5mg、Ｎ−（３−アミノプロピ
ル）−Ｎ−｛３−〔２−（ｐ−クロロフェニル）エチル
アミノ〕プロピル｝−メチルアミン３塩酸塩14.1mg、 B
op試薬16.0mgおよびHOBt 6.1mgを0.23mlのＮ−メチルピ
ロリドンに溶解した。その溶液に対してトリエチルアミ
ン 0.015mlを加えて19.5時間室温で攪拌した。反応液に
メタノール 0.3mlを加え、メタノールで充填したセファ
デックスLH20のカラムに注ぎメタノールで展開した。紫
外部吸収をモニターしてアミチアマイシンの発色団をも
つ分画を得た。

【００３２】その分画から溶媒を減圧下に蒸発させ、残
さを50％メタノールに溶解し、50％メタノールで充填し
たODS−シリカ 1.8mlの小カラムに吸着させた。50％メ
タノールで洗浄後、酢酸10％含有メタノールで溶出し
た。紫外部吸収をモニターして目的物質を集めた。溶媒
を減圧下に蒸発させ表１に示した化合物 No.７の 9.6mg
を得た。 質量分析（FAB＋）：1284.4, 1282.4 紫外部吸収：アミチアマイシンＡに同じである。

【００３３】実施例８ アミチアマイシンＤ酸20mgおよびHOBt13mgをＮ，Ｎ−ジ
メチルホルムアミド３mlに溶解し、これに１−エチル−
３−（３´−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド
塩酸塩（縮合剤）16.4mgを加えて30分間室温で攪拌し
た。次いで反応剤としてｎ−ブチルアミン12.4mgを加え
３時間室温で攪拌した。

【００３４】反応液をクロロホルム５mlで希釈し、水洗
後に無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下蒸発さ
せると粗物質を得た。これを１mlのクロロホルムに溶解
し、メタノール 6.6％含有クロロホルムで充填したワコ
ーゲルＣ２００（10ml）に注ぎ、メタノール 3.3％含有
クロロホルムで展開した。紫外部吸収をモニターしてア
ミチアマイシンの発色団をもつ分画を集め、溶媒を減圧
下蒸発させ目的物質として表１に示した化合物 No.８の
19.5mgを得た。 質量分析（FD）：1072（Ｍ⁺） 紫外部吸収：アミチアマイシンＡに同じである。

【００３５】実施例９ アミチアマイシンＤ酸29.8mg、HOBt22.4mgをＮ，Ｎ−ジ
メチルホルムアミド５mlに溶解し、これに１−エチル−
３−（３´−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド
塩酸塩（縮合剤）28.4mgを加えて30分間室温で攪拌し
た。次いで反応剤として３−ヒドロキシプロピルアミン
4.4mgを加え２時間室温で攪拌した。

【００３６】反応液を塩化メチレン10mlで希釈し、水洗
後に無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧下蒸発さ
せると粗物質を得た。これを１mlのクロロホルムに溶解
し、メタノール 3.3％含有クロロホルムで充填したワコ
ーゲルＣ３００（11ml）に注ぎ、メタノール 3.3％含有
クロロホルムで展開した。紫外部吸収をモニターしアミ
チアマイシンの発色団をもつ分画を集め、溶媒を減圧下
蒸発させ目的物質として表１の化合物 No.９の14.6mgを
得た。 質量分析（FD）：1074（Ｍ⁺） 紫外部吸収：アミチアマイシンＡに同じである。

【００３７】実施例10 アミチアマイシンＤ酸50mgおよびHOBt37.5mgをＮ，Ｎ−
ジメチルホルムアミド８mlに溶解し、これに１−エチル
−３−（３´−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミ
ド塩酸塩48mgを加えて30分間室温で攪拌した。次いで反
応剤としてＮ´，Ｎ''−ビス（ｔ−ブトキシカルボニ
ル）−Ｌ−アルギニンジフェニルメチルエステル53mgを
加え３時間室温で攪拌して縮合反応を行なった。反応液
を塩化メチレン20mlで希釈し、水洗後に無水硫酸ナトリ
ウムで乾燥し、溶媒を減圧下に蒸発させると粗物質を得
た。これを１mlのクロロホルムに溶解し、メタノール3.
3％含有クロロホルムで充填したワコーゲルＣ３００
（６ml）に注ぎ、メタノール 3.3％含有クロロホルムで
展開した。紫外部吸収をモニターしてアミチアマイシン
の発色団をもつ分画を集めて、溶媒を減圧下に蒸発させ
縮合生成物55.3mgを得た。

【００３８】これをアニソール 0.3mlに溶解し、氷冷下
トリフルオロ酢酸 0.7mlを加え、徐々に昇温して室温で
２時間攪拌した。これにより脱保護反応を行なった。反
応液にイソプロピルエーテル３mlを加え、沈殿物を濾取
し、イソプロピルエーテルで洗浄後に乾燥して目的物質
として表１の化合物 No.10の30.7mgを得た。 質量分析（FD）：1173（Ｍ⁺） 紫外部吸収：アミチアマイシンＡに同じである。

【００３９】実施例11 アミチアマイシンＤ酸23mgおよびHOBt17mgをＮ，Ｎ−ジ
メチルホルムアミド５mlに溶解し、これに１−エチル−
３−（３´−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド
塩酸塩18mgを加えて30分間室温で攪拌した。次いで反応
剤としてＮ´，Ｎ''−ビス（ｔ−ブトキシカルボニル）
−Ｌ−アルギノール24mgを加えて15時間室温で攪拌して
縮合反応を行なった。反応液をクロロホルム10mlで希釈
し、水洗後、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧
下に蒸発させると粗物質を得た。これを１mlのクロロホ
ルムに溶解し、メタノール５％含有クロロホルムで充填
したワコーゲルＣ２００（６ml）に注ぎ、メタノール５
％含有クロロホルムで展開した。紫外部吸収をモニター
してアミチアマイシンの発色団をもつ分画を集め、溶媒
を減圧下に蒸発させ縮合生成物15.4mgを得た。

【００４０】これをアニソール 0.5mlに溶解し、氷冷下
に5N−塩酸メタノール溶液３mlを加え、徐々に昇温して
室温で２時間攪拌した。これにより脱保護反応を行なっ
た。反応液を減圧下に濃縮し、飽和重曹水を加え生成す
る沈殿物を濾取し、酢酸エチルで洗浄後に乾燥して目的
物質として表１の化合物 No.11の10mgを得た。 質量分析（FD）：1159（Ｍ⁺） 紫外部吸収：アミチアマイシンＡに同じである。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 次の一般式（Ｉ） 〔式中、ｎは１〜６の整数であり、Ｒ¹ は水素原子、カ
   ルボキシル基またはヒドロキシルメチル基であり、また
   Ｒ² は式−ＣＯＯＲ³（但し、Ｒ³ は水素原子、低級ア
   ルキル基またはベンジル基、あるいはハロゲンまたはヒ
   ドロキシ基を置換基として有するベンジル基である）の
   基であるか、または式−ＮＲ⁴Ｒ⁵（但し、Ｒ⁴ は水素原
   子または低級アルキル基であり、Ｒ⁵ は水素原子または
   低級アルキル基あるいは３−アミノプロピル基、３−
   ［２−（ｐ−クロロまたはブロモフェニル）エチル］ア
   ミノプロピル基または３−（ｎ−ブチルアミノ）プロピ
   ル基である）の基であるか、あるいはＲ² はメチル基、
   ヒドロキシル基または式−ＮＨ−Ｃ(＝ＮＨ)−ＮＨ₂ の
   グアニジノ基である〕で表されるアミチアマイシンのア
   ミド誘導体、またはこれの製薬学的に許容できる塩。