JPH05211882A - トレハロースの製造法 - Google Patents
トレハロースの製造法Info
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- JPH05211882A JPH05211882A JP4026841A JP2684192A JPH05211882A JP H05211882 A JPH05211882 A JP H05211882A JP 4026841 A JP4026841 A JP 4026841A JP 2684192 A JP2684192 A JP 2684192A JP H05211882 A JPH05211882 A JP H05211882A
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 ブレビバクテリウム属、コリネバクテリウム
属、ミクロバクテリウム属またはアルスロバクター属に
属し、トレハロース生産能を有する微生物をシュクロー
スまたはマルトースを主炭素源とする液体培地で培養
し、培養液中に生成蓄積したトレハロースを採取するこ
とを特徴とするトレハロースの製造法。 【効果】 本発明の方法により、トレハロースを安価か
つ効率的に工業生産することができる。
属、ミクロバクテリウム属またはアルスロバクター属に
属し、トレハロース生産能を有する微生物をシュクロー
スまたはマルトースを主炭素源とする液体培地で培養
し、培養液中に生成蓄積したトレハロースを採取するこ
とを特徴とするトレハロースの製造法。 【効果】 本発明の方法により、トレハロースを安価か
つ効率的に工業生産することができる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はトレハロースの製造法に
関するものである。トレハロースは、医薬品及び食品分
野において、細胞活性保持剤、耐寒性剤、不凍性剤等と
しての利用が期待されている。
関するものである。トレハロースは、医薬品及び食品分
野において、細胞活性保持剤、耐寒性剤、不凍性剤等と
しての利用が期待されている。
【０００２】
【従来の技術】従来、トレハロースの製造法としては、
イワヒバ、乾燥酵母等の天然物から抽出する方法、ｎ−
アルカン類を炭素源としてアルスロバクター属に属する
微生物を培養して生産する方法（Ａｇｒｉｃ．Ｂｉｏ
ｌ．Ｃｈｅｍ．、第３３巻、１９０〜１９５頁、１９６
９年）、ノカルディア属に属する微生物を使用する方法
（特開昭５０−１５４４８５号公報）等が知られてい
る。しかし、これらの方法はいずれもトレハロースを工
業的に大量生産するにはコスト及び効率面で適した方法
ではなかった。
イワヒバ、乾燥酵母等の天然物から抽出する方法、ｎ−
アルカン類を炭素源としてアルスロバクター属に属する
微生物を培養して生産する方法（Ａｇｒｉｃ．Ｂｉｏ
ｌ．Ｃｈｅｍ．、第３３巻、１９０〜１９５頁、１９６
９年）、ノカルディア属に属する微生物を使用する方法
（特開昭５０−１５４４８５号公報）等が知られてい
る。しかし、これらの方法はいずれもトレハロースを工
業的に大量生産するにはコスト及び効率面で適した方法
ではなかった。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、工業
的に大量生産可能な安価かつ効率的なトレハロースの製
造法を提供することである。
的に大量生産可能な安価かつ効率的なトレハロースの製
造法を提供することである。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、工業的に
大量生産可能な安価かつ効率的なトレハロースの製造法
を開発するために鋭意研究を重ねた結果、従来よりＬ−
グルタミン酸や各種アミノ酸の生産菌として知られてい
るブレビバクテリウム属、コリネバクテリウム属、ミク
ロバクテリウム属またはアルスロバクター属に属する微
生物をシュクロースまたはマルトースを主炭素源とする
液体培地で培養することにより、培養液中に著量のトレ
ハロースが生成蓄積されること、また、液体培地の浸透
圧を１６７１ないし３９７４ｍｍｏｌ／ｋｇの範囲に設
定することによりトレハロースの蓄積量が顕著に向上す
ることを見い出し、本発明を完成するに至った。
大量生産可能な安価かつ効率的なトレハロースの製造法
を開発するために鋭意研究を重ねた結果、従来よりＬ−
グルタミン酸や各種アミノ酸の生産菌として知られてい
るブレビバクテリウム属、コリネバクテリウム属、ミク
ロバクテリウム属またはアルスロバクター属に属する微
生物をシュクロースまたはマルトースを主炭素源とする
液体培地で培養することにより、培養液中に著量のトレ
ハロースが生成蓄積されること、また、液体培地の浸透
圧を１６７１ないし３９７４ｍｍｏｌ／ｋｇの範囲に設
定することによりトレハロースの蓄積量が顕著に向上す
ることを見い出し、本発明を完成するに至った。
【０００５】すなわち、本発明は、ブレビバクテリウム
属、コリネバクテリウム属、ミクロバクテリウム属また
はアルスロバクター属に属し、トレハロース生産能を有
する微生物をシュクロースまたはマルトースを主炭素源
とする液体培地で培養し、培養液中に生成蓄積したトレ
ハロースを採取することを特徴とするトレハロースの製
造法を提供するものである。さらに、本発明は、ブレビ
バクテリウム属、コリネバクテリウム属、ミクロバクテ
リウム属またはアルスロバクター属に属し、トレハロー
ス生産能を有する微生物をシュクロースまたはマルトー
スを主炭素源とし浸透圧が１６７１ないし３９７４ｍｍ
ｏｌ／ｋｇである液体培地で培養し、培養液中に生成蓄
積したトレハロースを採取することを特徴とするトレハ
ロースの製造法を提供するものである。
属、コリネバクテリウム属、ミクロバクテリウム属また
はアルスロバクター属に属し、トレハロース生産能を有
する微生物をシュクロースまたはマルトースを主炭素源
とする液体培地で培養し、培養液中に生成蓄積したトレ
ハロースを採取することを特徴とするトレハロースの製
造法を提供するものである。さらに、本発明は、ブレビ
バクテリウム属、コリネバクテリウム属、ミクロバクテ
リウム属またはアルスロバクター属に属し、トレハロー
ス生産能を有する微生物をシュクロースまたはマルトー
スを主炭素源とし浸透圧が１６７１ないし３９７４ｍｍ
ｏｌ／ｋｇである液体培地で培養し、培養液中に生成蓄
積したトレハロースを採取することを特徴とするトレハ
ロースの製造法を提供するものである。
【０００６】本発明に使用する微生物は、ブレビバクテ
リウム属、コリネバクテリウム属、ミクロバクテリウム
属またはアルスロバクター属に属し、トレハロース生産
能を有する微生物であればいずれの菌株でも使用できる
が、具体的に例示すると以下の菌株が挙げられる。 ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタム ＡＴＣＣ
１３８６９ ブレビバクテリウム・フラバム ＡＴＣＣ１４０６７ ブレビバクテリウム・ディバリカタム ＡＴＣＣ２１６
４２ コリネバクテリウム・グルタミカム ＡＴＣＣ１３０３
２ コリネバクテリウム・アセトアシドフィラム ＡＴＣＣ
１３８７０ コリネバクテリウム・リリウム ＡＴＣＣ１５９９０ アルスロバクター・シトレウス ＡＴＣＣ１１６２４ アルスロバクター・スルフレイス ＡＴＣＣ１５１７０ ミクロバクテリウム・アンモニアフィラム ＡＴＣＣ１
５３５４
リウム属、コリネバクテリウム属、ミクロバクテリウム
属またはアルスロバクター属に属し、トレハロース生産
能を有する微生物であればいずれの菌株でも使用できる
が、具体的に例示すると以下の菌株が挙げられる。 ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタム ＡＴＣＣ
１３８６９ ブレビバクテリウム・フラバム ＡＴＣＣ１４０６７ ブレビバクテリウム・ディバリカタム ＡＴＣＣ２１６
４２ コリネバクテリウム・グルタミカム ＡＴＣＣ１３０３
２ コリネバクテリウム・アセトアシドフィラム ＡＴＣＣ
１３８７０ コリネバクテリウム・リリウム ＡＴＣＣ１５９９０ アルスロバクター・シトレウス ＡＴＣＣ１１６２４ アルスロバクター・スルフレイス ＡＴＣＣ１５１７０ ミクロバクテリウム・アンモニアフィラム ＡＴＣＣ１
５３５４
【０００７】さらには、これらの菌株の変異処理等を施
すことによりトレハロース生産能を向上させた変異株も
使用することができる。
すことによりトレハロース生産能を向上させた変異株も
使用することができる。
【０００８】本発明において重要なことは、これらの菌
株を用いてトレハロースを生産するに際し、シュクロー
スまたはマルトース主炭素源とする液体培地を用いて培
養を行うことである。通常アミノ酸等の発酵の原料とし
てはグルコースがしばしば用いられるが、本発明のトレ
ハロースの製造法においては、上記の如き菌株をシュク
ロースまたはマルトースを主炭素源して培養することに
より、グルコースを主炭素源とした場合に比べて著しく
高い蓄積量でトレハロースを生産することができる。シ
ュクロースを主炭素源とする場合には、当然のことなが
ら、甜菜糖蜜（ビートモラセス）等のシュクロース高含
有物を用いてもよい。また、液体培地の浸透圧を１６７
１ないし３９７４ｍｍｏｌ／ｋｇの範囲に設定すること
によりトレハロースの蓄積量が顕著に向上し、さらに好
ましい結果が得られる。
株を用いてトレハロースを生産するに際し、シュクロー
スまたはマルトース主炭素源とする液体培地を用いて培
養を行うことである。通常アミノ酸等の発酵の原料とし
てはグルコースがしばしば用いられるが、本発明のトレ
ハロースの製造法においては、上記の如き菌株をシュク
ロースまたはマルトースを主炭素源して培養することに
より、グルコースを主炭素源とした場合に比べて著しく
高い蓄積量でトレハロースを生産することができる。シ
ュクロースを主炭素源とする場合には、当然のことなが
ら、甜菜糖蜜（ビートモラセス）等のシュクロース高含
有物を用いてもよい。また、液体培地の浸透圧を１６７
１ないし３９７４ｍｍｏｌ／ｋｇの範囲に設定すること
によりトレハロースの蓄積量が顕著に向上し、さらに好
ましい結果が得られる。
【０００９】炭素源以外の液体培地中の成分としては、
窒素源、無機塩類及び有機微量栄養素等が適宜用いられ
る。窒素源としては、アンモニウム塩、アンモニア水、
尿素の他コーン・スティープ・リカー、蛋白質加水分解
物、アミノ酸混合物等が用いられる。無機塩類として
は、リン酸塩、マグネシウム塩等が用いられ、有機微量
栄養素としては、サイアミン、ビオチン等が適量使用さ
れる。また、ペニシリン等の抗生物質やポリオキシソル
ビタンモノパルミテート等の界面活性剤を培養開始時も
しくは培養途中に培地に添加することにより、トレハロ
ースの蓄積量が向上する場合がある。
窒素源、無機塩類及び有機微量栄養素等が適宜用いられ
る。窒素源としては、アンモニウム塩、アンモニア水、
尿素の他コーン・スティープ・リカー、蛋白質加水分解
物、アミノ酸混合物等が用いられる。無機塩類として
は、リン酸塩、マグネシウム塩等が用いられ、有機微量
栄養素としては、サイアミン、ビオチン等が適量使用さ
れる。また、ペニシリン等の抗生物質やポリオキシソル
ビタンモノパルミテート等の界面活性剤を培養開始時も
しくは培養途中に培地に添加することにより、トレハロ
ースの蓄積量が向上する場合がある。
【００１０】液体培地の浸透圧を１６７１ないし３９７
４ｍｍｏｌ／ｋｇの範囲に設定する方法は特に限定され
ないが、例えば、塩化カリウム、塩化ナトリウム、塩化
アンモニウム、硫酸カリウム、硫酸ナトリウム等の塩類
を培地に０．５ないし７％程度添加する方法がある。
４ｍｍｏｌ／ｋｇの範囲に設定する方法は特に限定され
ないが、例えば、塩化カリウム、塩化ナトリウム、塩化
アンモニウム、硫酸カリウム、硫酸ナトリウム等の塩類
を培地に０．５ないし７％程度添加する方法がある。
【００１１】培養は好気的条件下で行うのがよく、培養
温度は２０〜４５℃、培養液のｐＨは５．０〜１０．０
に制御するのがよく、ｐＨの調整には無機あるいは有機
の酸性もしくはアルカリ性物質、さらには尿素、炭酸カ
ルシウム、アンモニアガス等を使用することができる。
温度は２０〜４５℃、培養液のｐＨは５．０〜１０．０
に制御するのがよく、ｐＨの調整には無機あるいは有機
の酸性もしくはアルカリ性物質、さらには尿素、炭酸カ
ルシウム、アンモニアガス等を使用することができる。
【００１２】培養終了後の培養液からのトレハロースの
採取は、イオン交換樹脂法、クロマト樹脂法、エタノー
ルによる晶析法その他の公知の方法を組合せることによ
り行うことができる。
採取は、イオン交換樹脂法、クロマト樹脂法、エタノー
ルによる晶析法その他の公知の方法を組合せることによ
り行うことができる。
【００１３】
【実施例】次に、実施例により本発明をさらに詳細に説
明する。なお、トレハロースの定量は、高速液体クロマ
トグラフィー（使用カラム：ＹＭＣ社製ＰＡ−０３−Ｓ
−５）により行った。
明する。なお、トレハロースの定量は、高速液体クロマ
トグラフィー（使用カラム：ＹＭＣ社製ＰＡ−０３−Ｓ
−５）により行った。
【００１４】実施例１ 表１に示す各種糖類を炭素源として１０％含有し、硫酸
アンモニウム２％、ＫＨ2ＰＯ4０．１％、ＭｇＳＯ4・
７Ｈ2Ｏ０．１％、サイアミン塩酸塩２００μｇ／ｌ、
ビオチン５μｇ／ｌ、大豆分解濃縮液（全窒素として）
０．０３６％、ＦｅＳＯ4・７Ｈ2Ｏ０．００１％、Ｍｎ
ＳＯ4・４Ｈ2Ｏ０．００１％（ｐＨ７．０）から成る液
体培地を調製し、その２０ｍｌずつを５００ｍｌ容振盪
フラスコに分注し、１１５℃、１０分間加熱殺菌した。
この培地に乾熱殺菌した炭酸カルシウムを５０％添加し
た後、あらかじめブイヨン寒天斜面培地にて３０℃、２
４時間培養したブレビバクテリウム・ラクトフェルメン
タム ＡＴＣＣ１３８６９、ブレビバクテリウム・フラ
バム ＡＴＣＣ１４０６７またはコリネバクテリウム・
リリウム ＡＴＣＣ１５９９０の菌体を一白金耳接種
し、往復振盪培養機により３１．５℃で培養を行った。
４８時間で培養を終了し、培養液中に蓄積したトレハロ
ースの量を測定した。
アンモニウム２％、ＫＨ2ＰＯ4０．１％、ＭｇＳＯ4・
７Ｈ2Ｏ０．１％、サイアミン塩酸塩２００μｇ／ｌ、
ビオチン５μｇ／ｌ、大豆分解濃縮液（全窒素として）
０．０３６％、ＦｅＳＯ4・７Ｈ2Ｏ０．００１％、Ｍｎ
ＳＯ4・４Ｈ2Ｏ０．００１％（ｐＨ７．０）から成る液
体培地を調製し、その２０ｍｌずつを５００ｍｌ容振盪
フラスコに分注し、１１５℃、１０分間加熱殺菌した。
この培地に乾熱殺菌した炭酸カルシウムを５０％添加し
た後、あらかじめブイヨン寒天斜面培地にて３０℃、２
４時間培養したブレビバクテリウム・ラクトフェルメン
タム ＡＴＣＣ１３８６９、ブレビバクテリウム・フラ
バム ＡＴＣＣ１４０６７またはコリネバクテリウム・
リリウム ＡＴＣＣ１５９９０の菌体を一白金耳接種
し、往復振盪培養機により３１．５℃で培養を行った。
４８時間で培養を終了し、培養液中に蓄積したトレハロ
ースの量を測定した。
【００１５】
【表１】
【００１６】表１の結果の通り、いずれの微生物を用い
た場合もシュクロースまたはグルコースを主炭素源とす
る培地で培養することにより、培養液中に著量のトレハ
ロースが生成蓄積された。
た場合もシュクロースまたはグルコースを主炭素源とす
る培地で培養することにより、培養液中に著量のトレハ
ロースが生成蓄積された。
【００１７】実施例２ 表２に示す各種糖類を炭素源として１０％含有し、硫酸
アンモニウム２％、ＫＨ2ＰＯ4０．１％、ＭｇＳＯ4・
７Ｈ2Ｏ０．１％、サイアミン塩酸塩１００μｇ／ｌ、
ビオチン１００μｇ／ｌ、大豆分解濃縮液（全窒素とし
て）０．０３６％、ＦｅＳＯ4・７Ｈ2Ｏ０．００１％、
ＭｎＳＯ4・４Ｈ2Ｏ０．００１％（ｐＨ７．０）から成
る液体培地を調製し、その２０ｍｌずつを５００ｍｌ容
振盪フラスコに分注し、１１５℃、１０分間加熱殺菌し
た。この培地に乾熱殺菌した炭酸カルシウムを５０％添
加した後、あらかじめブイヨン寒天斜面培地にて３０
℃、２４時間培養したミクロバクテリウム・アンモニア
フィラム ＡＴＣＣ１５３５４またはアルスロバクター
・スルフレウス ＡＴＣＣ１５１７０の菌体を一白金耳
接種し、往復振盪培養機により３１．５℃で培養を行っ
た。培養開始後、培養液の２６倍希釈液の５６２ｎｍに
おける吸光度が０．６に達した時点でポリオキシソルビ
タンモノパルミテートを０．４％の濃度となるように添
加して培養を続けた。４８時間で培養を終了し、培養液
中に蓄積したトレハロースの量を測定した。結果を表２
に示す。
アンモニウム２％、ＫＨ2ＰＯ4０．１％、ＭｇＳＯ4・
７Ｈ2Ｏ０．１％、サイアミン塩酸塩１００μｇ／ｌ、
ビオチン１００μｇ／ｌ、大豆分解濃縮液（全窒素とし
て）０．０３６％、ＦｅＳＯ4・７Ｈ2Ｏ０．００１％、
ＭｎＳＯ4・４Ｈ2Ｏ０．００１％（ｐＨ７．０）から成
る液体培地を調製し、その２０ｍｌずつを５００ｍｌ容
振盪フラスコに分注し、１１５℃、１０分間加熱殺菌し
た。この培地に乾熱殺菌した炭酸カルシウムを５０％添
加した後、あらかじめブイヨン寒天斜面培地にて３０
℃、２４時間培養したミクロバクテリウム・アンモニア
フィラム ＡＴＣＣ１５３５４またはアルスロバクター
・スルフレウス ＡＴＣＣ１５１７０の菌体を一白金耳
接種し、往復振盪培養機により３１．５℃で培養を行っ
た。培養開始後、培養液の２６倍希釈液の５６２ｎｍに
おける吸光度が０．６に達した時点でポリオキシソルビ
タンモノパルミテートを０．４％の濃度となるように添
加して培養を続けた。４８時間で培養を終了し、培養液
中に蓄積したトレハロースの量を測定した。結果を表２
に示す。
【００１８】
【表２】
【００１９】表２の結果の通り、いずれの微生物を用い
た場合もシュクロースまたはグルコースを主炭素源とす
る培地で培養することにより、培養液中に著量のトレハ
ロースが生成蓄積された。
た場合もシュクロースまたはグルコースを主炭素源とす
る培地で培養することにより、培養液中に著量のトレハ
ロースが生成蓄積された。
【００２０】実施例３ グルコース４％、尿素０．５％、ＫＨ2ＰＯ4０．１％、
ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ０．０４％、サイアミン塩酸塩３０
０μｇ／ｌ、ビオチン３００μｇ／ｌ、大豆分解濃縮液
（全窒素として）０．１％、ＦｅＳＯ4・７Ｈ2Ｏ０．０
０１％、ＭｎＳＯ4・４Ｈ2Ｏ０．００１％（ｐＨ６．
５）から成る液体培地を調製し、その２０ｍｌずつを５
００ｍｌ容振盪フラスコに分注し、１１０℃、１０分間
加熱殺菌した。この培地にあらかじめブイヨン寒天斜面
培地にて３１．５℃、４８時間培養した表３〜表８に示
す各微生物の菌体を一白金耳接種し、往復振盪培養機に
より３１．５℃で２４時間培養を行い、種培養液を調製
した。
ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ０．０４％、サイアミン塩酸塩３０
０μｇ／ｌ、ビオチン３００μｇ／ｌ、大豆分解濃縮液
（全窒素として）０．１％、ＦｅＳＯ4・７Ｈ2Ｏ０．０
０１％、ＭｎＳＯ4・４Ｈ2Ｏ０．００１％（ｐＨ６．
５）から成る液体培地を調製し、その２０ｍｌずつを５
００ｍｌ容振盪フラスコに分注し、１１０℃、１０分間
加熱殺菌した。この培地にあらかじめブイヨン寒天斜面
培地にて３１．５℃、４８時間培養した表３〜表８に示
す各微生物の菌体を一白金耳接種し、往復振盪培養機に
より３１．５℃で２４時間培養を行い、種培養液を調製
した。
【００２１】
【表３】
【００２２】
【表４】
【００２３】
【表５】
【００２４】
【表６】
【００２５】
【表７】
【００２６】
【表８】
【００２７】シュクロース１５％、ＫＨ2ＰＯ4０．１
％、ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ０．１％、サイアミン塩酸塩３
００μｇ／ｌ、ビオチン３００μｇ／ｌ、大豆分解濃縮
液（全窒素として）０．０５％、ＦｅＳＯ4・７Ｈ2Ｏ
０．００１％、ＭｎＳＯ4・４Ｈ2Ｏ０．００１％から成
る培地（ｐＨ７．３）に表３〜表８に示す各種塩類を各
濃度添加した液体培地を１ｌ容ジャーファーメンターに
分注し、１２０℃、２０分加熱殺菌後、上記種培養液１
５ｍｌを接種し、３１．５℃、通気量１／２ｖｖｍ、攪
拌速度７００ｒｐｍにて培養を開始した。なお、培養開
始時の培地の浸透圧をＷｅｓｃｏｒ社製５１００Ｃ−Ｖ
ａｐｏｒ Ｐｒｅｓｓｕｒｅ Ｏｓｍｏｍｅｔｅｒによ
り測定した。培養中はアンモニアガスでｐＨ７．３に制
御した。培養開始後、培養液の２６倍希釈液の５６２ｎ
ｍにおける濁度が０．６０に達した時点でポリオキシソ
ルビタンモノパルミテートを０．４％の濃度となるよう
に添加してさらに培養を続け、培養液中のシュクロース
が消費された時点で培養を終了した。
％、ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ０．１％、サイアミン塩酸塩３
００μｇ／ｌ、ビオチン３００μｇ／ｌ、大豆分解濃縮
液（全窒素として）０．０５％、ＦｅＳＯ4・７Ｈ2Ｏ
０．００１％、ＭｎＳＯ4・４Ｈ2Ｏ０．００１％から成
る培地（ｐＨ７．３）に表３〜表８に示す各種塩類を各
濃度添加した液体培地を１ｌ容ジャーファーメンターに
分注し、１２０℃、２０分加熱殺菌後、上記種培養液１
５ｍｌを接種し、３１．５℃、通気量１／２ｖｖｍ、攪
拌速度７００ｒｐｍにて培養を開始した。なお、培養開
始時の培地の浸透圧をＷｅｓｃｏｒ社製５１００Ｃ−Ｖ
ａｐｏｒ Ｐｒｅｓｓｕｒｅ Ｏｓｍｏｍｅｔｅｒによ
り測定した。培養中はアンモニアガスでｐＨ７．３に制
御した。培養開始後、培養液の２６倍希釈液の５６２ｎ
ｍにおける濁度が０．６０に達した時点でポリオキシソ
ルビタンモノパルミテートを０．４％の濃度となるよう
に添加してさらに培養を続け、培養液中のシュクロース
が消費された時点で培養を終了した。
【００２８】培地の浸透圧及び培養液中に蓄積したトレ
ハロースの量を測定した結果から、塩類を添加すること
により浸透圧を１６７１ないし３９７４ｍｍｏｌ／ｋｇ
の範囲に設定した培地で培養することにより、トレハロ
ースの蓄積量が顕著に向上することは明らかである。
ハロースの量を測定した結果から、塩類を添加すること
により浸透圧を１６７１ないし３９７４ｍｍｏｌ／ｋｇ
の範囲に設定した培地で培養することにより、トレハロ
ースの蓄積量が顕著に向上することは明らかである。
【００２９】実施例５ ブレビバクテリウム・ラクトフェルメンタム ＡＴＣＣ
１３８６９を用い、シュクロースを炭素源として実施例
１と同様に培養を行った。得られた培養液１ｌを除菌
し、アニオン交換樹脂Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲ−４Ｂ
及びカチオン交換樹脂Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲ−１２
０で処理し、活性炭で脱色した。ついで、この脱色液を
約２５ｍｌまで濃縮した後、エタノール７５ｍｌを添加
し５℃に冷却保持することにより、純度９９％のトレハ
ロースの結晶８．５ｇを得た。
１３８６９を用い、シュクロースを炭素源として実施例
１と同様に培養を行った。得られた培養液１ｌを除菌
し、アニオン交換樹脂Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲ−４Ｂ
及びカチオン交換樹脂Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ ＩＲ−１２
０で処理し、活性炭で脱色した。ついで、この脱色液を
約２５ｍｌまで濃縮した後、エタノール７５ｍｌを添加
し５℃に冷却保持することにより、純度９９％のトレハ
ロースの結晶８．５ｇを得た。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 (Ｃ１２Ｐ 19/12 Ｃ１２Ｒ 1:01） (Ｃ１２Ｐ 19/12 Ｃ１２Ｒ 1:06） (72)発明者 小谷 卓也 神奈川県川崎市川崎区鈴木町１−１ 味の 素株式会社川崎工場内
Claims (2)
- 【請求項１】 ブレビバクテリウム属、コリネバクテリ
ウム属、ミクロバクテリウム属またはアルスロバクター
属に属し、トレハロース生産能を有する微生物をシュク
ロースまたはマルトースを主炭素源とする液体培地で培
養し、培養液中に生成蓄積したトレハロースを採取する
ことを特徴とするトレハロースの製造法。 - 【請求項２】 液体培地の浸透圧が１６７１ないし３９
７４ｍｍｏｌ／ｋｇである請求項１記載のトレハロース
の製造法。
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| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4026841A JPH05211882A (ja) | 1991-12-11 | 1992-02-13 | トレハロースの製造法 |
| EP92120861A EP0555540A1 (en) | 1991-12-11 | 1992-12-07 | Method of producing trehalose |
| US07/989,385 US5484714A (en) | 1991-12-11 | 1992-12-11 | Method of producing trehalose by microorganisms which can produce tremalose with sucrose or maltose as main carbon source |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3-327494 | 1991-12-11 | ||
| JP32749491 | 1991-12-11 | ||
| JP4026841A JPH05211882A (ja) | 1991-12-11 | 1992-02-13 | トレハロースの製造法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05211882A true JPH05211882A (ja) | 1993-08-24 |
Family
ID=26364681
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4026841A Pending JPH05211882A (ja) | 1991-12-11 | 1992-02-13 | トレハロースの製造法 |
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| Country | Link |
|---|---|
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| EP (1) | EP0555540A1 (ja) |
| JP (1) | JPH05211882A (ja) |
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| EP0688501A1 (en) | 1994-05-31 | 1995-12-27 | Ajinomoto Co., Inc. | Method for producing bread |
| EP0707062A1 (en) | 1994-09-16 | 1996-04-17 | Nihon Shokuhin Kako Co., Ltd. | Maltose phosphorylase, trehalose phosphorylase, plesiomonas strain and preparation process of trehalose |
| US5529927A (en) * | 1993-12-28 | 1996-06-25 | San-Ei Gen F.F.I., Inc. | "Alga species lobsphaera TM-33 (ATCC 75630) which is useful for preparing trehalase" |
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| JP2002300899A (ja) * | 2001-02-02 | 2002-10-15 | Kao Corp | グルコース−１−リン酸の製造法 |
| JP2008054688A (ja) * | 1996-09-13 | 2008-03-13 | Bayer Ag | アカルボースの製造のためのオスモル濃度制御発酵方法 |
| JP2008208144A (ja) * | 1992-12-28 | 2008-09-11 | Hayashibara Biochem Lab Inc | 非還元性糖質生成酵素とその製造方法並びに用途 |
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| JPH06319578A (ja) * | 1993-03-18 | 1994-11-22 | Takeda Chem Ind Ltd | トレハロースの製造法 |
| JP3559585B2 (ja) * | 1993-06-03 | 2004-09-02 | 株式会社林原生物化学研究所 | トレハロース遊離酵素とその製造方法並びに用途 |
| JP3633648B2 (ja) * | 1993-07-20 | 2005-03-30 | 株式会社林原生物化学研究所 | マルトース・トレハロース変換酵素とその製造方法並びに用途 |
| CN100347183C (zh) * | 1993-09-30 | 2007-11-07 | 株式会社林原生物化学研究所 | 非还原性糖类生成酶及其制备和应用 |
| DE69510116T2 (de) * | 1994-02-23 | 1999-11-18 | Kabushiki Kaisha Hayashibara Seibutsu Kagaku Kenkyujo, Okayama | Nicht reduzierendes Saccharid bildendes Enzym, dieses kodierende DNA, und deren Herstellungen und Verwendungen |
| EP0671470B9 (en) * | 1994-03-07 | 2004-11-03 | Kabushiki Kaisha Hayashibara Seibutsu Kagaku Kenkyujo | Trehalose releasing enzyme, DNA encoding therefor, their preparation and uses |
| US5908767A (en) * | 1994-06-02 | 1999-06-01 | Kabushiki Kaisha Hayashibara Seibutsu Kagaku Kenkyujo | Non-reducing saccharide and its production and use |
| JP3662972B2 (ja) * | 1994-06-27 | 2005-06-22 | 株式会社林原生物化学研究所 | 非還元性糖質とその製造方法並びに用途 |
| DE69529026T2 (de) * | 1994-07-19 | 2003-07-17 | Kabushiki Kaisha Hayashibara Seibutsu Kagaku Kenkyujo, Okayama | Trehalose, ihre Herstellung und ihre Verwendung |
| EP0794259B1 (en) * | 1996-03-04 | 2004-10-06 | Kabushiki Kaisha Hayashibara Seibutsu Kagaku Kenkyujo | Process for producing a saccharide composition containing trehalulose. |
| US5858735A (en) * | 1997-10-16 | 1999-01-12 | Development Center For Biotechnology | Process for producing trehalose |
| CN109735466A (zh) * | 2019-01-25 | 2019-05-10 | 江苏大学 | 一种促进低温、低氧环境植物生长的微生物制剂及其制备方法 |
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| GB1185123A (en) * | 1967-05-15 | 1970-03-18 | Kyowa Hakko Kogyo Kk | Fermentation Processes Utilizing Gaseous Hydrocarbons |
| JPS50154485A (ja) * | 1974-05-31 | 1975-12-12 | ||
| JPS58216695A (ja) * | 1982-06-07 | 1983-12-16 | Otsuka Shokuhin Kogyo Kk | トレハロ−スの製造方法 |
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| JPH03160995A (ja) * | 1989-11-21 | 1991-07-10 | Meito Sangyo Kk | トレハルロースの製造法 |
| JPH03180172A (ja) * | 1989-12-08 | 1991-08-06 | Mitsui Sugar Co Ltd | パラチノースおよびトレハルロースの製造法 |
| US5229276A (en) * | 1990-10-31 | 1993-07-20 | Mitsui Sugar Co., Ltd. | Process for preparing trehalulose and isomaltulose |
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-
1992
- 1992-02-13 JP JP4026841A patent/JPH05211882A/ja active Pending
- 1992-12-07 EP EP92120861A patent/EP0555540A1/en not_active Withdrawn
- 1992-12-11 US US07/989,385 patent/US5484714A/en not_active Expired - Fee Related
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Also Published As
| Publication number | Publication date |
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| EP0555540A1 (en) | 1993-08-18 |
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