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JP6768045B2 - ワクチン接種とｐｄ−１経路の阻害との組み合わせ - Google Patents

ワクチン接種とｐｄ−１経路の阻害との組み合わせ Download PDF

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Description

発明の詳細な説明
本発明は、少なくとも１つの抗原をコードする少なくとも１つのオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）を含む少なくとも１つのＲＮＡを含むＲＮＡワクチンと、少なくとも１つのＰＤ−１経路阻害剤（好ましくは、ＰＤ−１レセプター、またはそのリガンドＰＤ−Ｌ１および／もしくはＰＤ−Ｌ２に対する阻害剤）と、を含むワクチン／阻害剤の組み合わせに関する。本発明は、さらに、そのような、ワクチン／阻害剤の組み合わせを含む、薬学的組成物およびパーツキットに関する。加えて、本発明は、特に、腫瘍もしくは癌疾患、または感染症の予防または処置のための、このようなワクチン／阻害剤の組み合わせ、このようなワクチン／阻害剤を含む薬学的組成物およびパーツキットの、医学的使用に関する。さらに、本発明は、ＰＤ−１経路阻害剤と組み合わせた治療における、ＲＮＡワクチンの使用、ならびに、ＲＮＡワクチンと組み合わせた治療における、ＰＤ−１経路阻害剤の使用に関する。
伝統的に、癌免疫治療は、抗腫瘍反応を誘引するために、ワクチン接種または適応免疫治療を介した免疫系の刺激に焦点が合わされていた。このアプローチは、腫瘍細胞は抗原性の標的を発現するが、腫瘍Ｔ細胞が十分に活性化されないという仮定に基づいていた。それゆえに、この問題を回避するために、鍵となるポジティブ共刺激性および先天性の免疫経路を刺激することによって、これらの抗原性の標的の認識を増強する試みが主に行われていた。
より最近には、腫瘍抗原が存在していても、免疫系は腫瘍抗原を認識せず、休止したままであることが、明らかになってきている。この所見は、抗腫瘍反応を制限するまたは阻止さえもする、特異的な抑制メカニズムが存在するという仮説を導く。この仮説は、ネガティブ調節Ｔ細胞表面分子が、活性化Ｔ細胞の活性を鈍らせるようにアップレギュレートされ、その結果、腫瘍細胞の効果的な殺傷を低下させることが、見出されることにより確認された。これらの抑制分子は、Ｔ細胞共刺激分子に対するその相同性に起因して、ネガティブ共刺激分子と称された。これらのタンパク質は、また、免疫チェックポイントプロテインとしても言及されており、初期の活性化シグナルの減衰、ポジティブ共刺激に対する競合、および抗原提示細胞の直接的抑制を含む、複数の経路において機能する（Bour-Jordan et al., 2011. Immunol Rev. 241(1):180-205; PMID: 21488898）。このタンパク質ファミリーの一員は、プログラム細胞死−1（ＰＤ−１）、ならびにそのリガンドＢ７−Ｈ１／ＰＤ−Ｌ１（ＣＤ２７４）およびＢ７−ＤＣ／ＰＤ−Ｌ２（ＣＤ２７３）である。
ＰＤ−１は、免疫活性と寛容との間のバランスの調節に関与する単球上と同様に、活性化Ｔ細胞およびＢ細胞上に発現する。ＰＤ−１の主な役割は、感染に対する免疫反応中に末梢におけるＴ細胞活性化を制限すること、および、自動免疫を制限することである。この調節の根拠は、ＰＤ−１リガンドＢ７−Ｈ１／ＰＤ−Ｌ１およびＢ７−ＤＣ／ＰＤ−Ｌ２が、様々な炎症性サイトカインに応答してアップレギュレートされること、および、炎症組織の活性化Ｔ細胞上のＰＤ−１に結合し、それにより免疫反応を制限できることである。ＰＤ−１遺伝子の欠失は、例えば、狼瘡様症候群のような、自己免疫合併症を引き起こす（Nishimura et al., 1999. Immunity 11(2):141-51; PMID: 10485649）。
さらに、Ｂ７−Ｈ１／ＰＤ−Ｌ１は、多くの異なるタイプの腫瘍において、頻繁にアップレギュレートされ、腫瘍湿潤リンパ球上のＰＤ−１に結合することによって、局所的な抗腫瘍Ｔ細胞反応を抑制することが見出された。例えば、ＰＤ−Ｌ１が頭部および頸部の扁平上皮癌において、腫瘍免疫忌避の役割を果たすことが示された（Dong et al., 2002. Nat Med. 8(8):793-800）。この著者は、通常はＢ７−Ｈ１／ＰＤ−Ｌ１ネガティブの腫瘍において、Ｂ７−Ｈ１／ＰＤ−Ｌ１を強制的に発現させることによって、その免疫異物除去を抑制し、抗体の遮断が抗腫瘍反応を修復することを示した。さらに、肺、卵巣および結腸の悪性腫瘍のような、多くのヒト腫瘍が、その正常組織のカウンターパートに対して、Ｂ７−Ｈ１／ＰＤ−Ｌ１をアップレギュレートすることが示された。要約すれば、これらの所見は、癌免疫治療のために、ＰＤ−１経路の遮断を用いることが提案されている（Zitvogel and Kroemer, 2012. Oncoimmunology 1, 1223-1125）。
これに関連して、US2010/0055102には、哺乳動物においてＴ細胞免疫反応を増強するためのＰＤ−１アンタゴニストの使用について記載されている。
近年、ＰＤ−１レセプターおよびそのリガンドＰＤ−Ｌ１に対する免疫チェックポイント阻害剤（ＩＣＩ）を用いた第１期臨床試験が報告されている。抗ＰＤ−１モノクローナル抗体ＢＭＳ−９３６５５８を用いた第１期第１相臨床試験は、治療不応期転移性固形癌の患者において実施された。臨床活性が、黒色腫、腎癌、結腸直腸癌および非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）の患者において観察された。ＰＤ−Ｌ１が、多くの癌において過剰発現し、予後不良に結びつきやすいことが示された。さらに、治療前生検におけるＰＤ−Ｌ１の腫瘍細胞表面発現は経路生物学と一致し、反応の可能性のあるバイオマーカーであることが、明らかになってきた（Brahmer et al., 2010. J Clin Oncol. 28(19):3167-75; PMID: 20516446）。
ＢＭＳ−９３６５５８を用いた他の臨床試験では、非小細胞肺癌、黒色腫、または腎細胞癌の患者の約４人に１人から５人に１人において、奏効が得られ、その使用を妨げる有害事象の側面は現れなかった。予備データは、腫瘍細胞におけるＰＤ−Ｌ１発現と奏効との関係を提案する（Topalian et al., 2012. N Engl J Med. 366(26):2443-54; PMID: 22658127）。
さらに、抗ＰＤ−Ｌ１抗体ＢＭＳ−９３６５５９を用いた第１相試験は、非小細胞肺癌、黒色腫および腎細胞癌を含む進行癌の患者において、腫瘍の持続的な緩解（奏効率６から１７％）と、疾患の長期的な安定性（２４週目における比率１２から４１％）と、を誘導した。特に、黒色腫患者５２人のうちの９人、腎細胞癌患者１７人のうちの２人、非小細胞肺癌患者４９人のうちの５人、卵巣癌患者１７人のうちの１人において、奏効（完全または部分奏効）を観察した（Brahmer et al. 2012. N Engl J Med. 366(26):2455-65; PMID: 22658128）。
それにもかかわらず、これらの実験において、いくつかの癌（例えば、肺癌および前立腺癌）では、ＰＤ−１経路チェックポイント阻害剤に対して相対的に低い反応しか見られなかった。さらに最近の研究においては、ＰＤ−１経路チェックポイント阻害剤との組み合わせが、前臨床モデルにおいて評価されている。
例えば、ＰＤ−１リガンドｓｉＲＮＡと標的抗原ｍＲＮＡとの組み合わせを用いた樹状細胞（ＤＣ）ワクチンを生成する実験が報告された。抗原ｍＲＮＡが搭載された、これらのＰＤ−Ｌ１サイレント樹状細胞は、移植癌患者からのｅｘ ｖｉｖｏの抗原特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞反応を促進した（Hobo et al. 2013. Cancer Immunol Immunother. 62(2):285-97; PMID: 22903385）。
同様に、Daiらは、抗ＰＤ−Ｌ１抗体を介したＰＤ−１／ＰＤ−１リガンド（ＰＤ−Ｌ）阻害シグナルの遮断と組み合わせた、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）−１Ｇａｇタンパク質をコードする、樹状細胞誘導レンチウイルスベクター（ＤＣＬＶ）系が、ＨＩＶ−１ Ｇａｇ特異的ＣＤ８＋免疫反応を向上させて、ＤＣＬＶ免疫性付与を生み出すことを示した（Dai et al. 2012. Mol Ther. 20(9):1800-9; PMID: 22588271）。
他の研究において、組み換えレンチベクター（ｒＬＶ）ワクチン接種とＰＤ−１およびＰＤ−Ｌ１遮断抗体との組み合わせが試験された。遮断抗体とｒＬＶワクチン接種との組み合わせは、腫瘍成長を遅らせるが、定着した腫瘍の完全な排除を誘引するに十分ではなかった（Sierro et al. 2011. Eur J Immunol.;41(8):2217-28; PMID: 21538347）。
さらに、WO2008/11344には、抗原または治療タンパク質をコードする、ＤＮＡベース組み換えアデノウイルスコンストラクト（ｒＡＡＶ）と、ＰＤ−１情報伝達の調節剤をコードする核酸、特に、ｓｉＲＮＡ、アンチセンスＲＮＡまたはＰＤ−１遺伝子特異的リボザイムとの組み合わせによる免疫反応の調節が開示されている。
これに関連して、可溶性ＰＤ−１タンパク質と抗原性タンパク質断片との融合もまた、研究されている（WO2012/062218）。
さらなる前臨床試験では、ＣＴＬＡ−４およびＰＤ−１ネガティブ共刺激レセプターの組み合わせ遮断薬が、適切なワクチンとの関係において、腫瘍排除の相乗作用レベルを引き起こすことを報告した（Curran et al., 2010. Proc Natl Acad Sci U S A 107(9):4275-80; PMID: 20160101）。Ｂ１６黒色腫細胞が予め埋め込まれたマウスに、ＧＭ−ＣＳＦ（Ｇｖａｘ）またはＦｌｔ３−リガンド（Ｆｖａｘ）の何れかを発現する放射線照射Ｂ１６黒色腫細胞と、ネガティブＴ細胞共刺激レセプター細胞傷害性Ｔリンパ球抗原（ＣＴＬＡ−４）、プログラム細胞死−１（ＰＤ−１）、およびそのリガンドＰＤ−Ｌ１の遮断抗体との組み合わせを、ワクチン接種した。Ｇｖａｘに関して、何れのシグナル共阻害レセプターの遮断薬も、また、何れの組み合わせも、２０％を超える生存率をもたらさなかった。Ｆｖａｘの使用により、ＰＤ−Ｌ１（生存率８％）、ＣＴＬＡ−４（生存率１０％）、またはＰＤ−１（生存率２５％）の何れかの遮断薬が、緩やかな治療効果を示した。しかしながら、ＣＴＬＡ−４とＰＤ−１との遮断薬の組み合わせのみが、マウスの５０％において腫瘍排除を誘導し、抗ＰＤ−Ｌ１抗体のさらなる追加が、その比率を６５％に引き上げた。要約すると、ＣＴＬＡ−４遮断薬とＰＤ−１遮断薬との組み合わせのみが、Ｂ１６黒色腫細胞ワクチン接種に関して、Ｂ１６黒色腫の排除の促進に顕著な効果を有する。シグナル阻害レセプター（ＰＤ−１またはＣＴＬＡ−４）の遮断は、遮断されていない経路のアップレギュレートを誘導する。それ故に、この研究は、複数のネガティブ共刺激レセプターの同時遮断が、腫瘍湿潤Ｔ細胞の有効化に要求され得ることを提案している。さらに、Ｂ１６黒色腫モデルに関するこれらの前臨床データに基づけば、その著者は、これらの因子の組み合わせは、腫瘍排除の促進に対して相乗作用の効果を有することを示しているが、臨床における複数の共阻害遮断抗体の組み合わせは十分に注意して進めるべきであることも述べている。
Mkrtichyaらは、さらに、抗ＰＤ−１抗体（ＣＴ−０１１）とシクロフォスファミド（ＣＰＭ）の少量投与によるＴｒｅｇ細胞消耗とを、腫瘍ワクチン（ＨＰＶ１６−Ｅ７ペプチドワクチン）と組み合わせて用いることによる、相乗作用の抗原特異的免疫反応を報告した。しかしながら、これらの３つの処理の組み合わせのみが、腫瘍の完全な退行をもたらしていた（Mkrtichya et al. 2011. Eur J Immunol. 41(10):2977-86; PMID: 21710477）。
腫瘍成長に対するＰＤ−Ｌ１阻害の効果を試験したさらなる報告は、抗ＰＤ−Ｌ１抗体と、さらに黒色腫ペプチド律動樹状細胞（ＤＣｓ）の全身投与とが、より多数の黒色腫ペプチド特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞をもたらすが、この組み合わせは、定着したＢ１６黒色腫の成長を遅らせるに十分ではなかったことを示した。さらに体への放射線照射が腫瘍成長を遅らせるが、腫瘍排除および処置マウスの長期生存を達成するために、抗原特異的ＣＤ８＋Ｔ細胞のさらなる適応免疫伝達が必要になった（Pilon-Thomas et al. 2010. J Immunol. 1;184(7):3442-9; PMID: 20194714）。
前臨床試験において、Fotin-Mleczekらは、ｍＲＮＡベースの腫瘍ワクチンと、Ｔ細胞情報伝達を弱めるＣＴＬＡ４レセプターに対する抗体との有益な組み合わせを示した（Fotin-Mleczek et al., 2012. J Gene Med. 14(6):428-39; PMID: 22262664）。
要約すると、免疫チェックポイント阻害剤の使用は、改善された癌免疫治療の有望なアプローチを象徴すると思われる。しかしながら、シグナルＩＣＩとワクチンとの組み合わせは、免疫治療の望ましい改善を誘導しない場合も多く、ＩＣＩ標的多重ネガティブ共刺激レセプターを組み合わせた臨床利用、または他の治療とＩＣＩとの組み合わせは、例えば、自己免疫疾患の誘導のような、臨床的な副作用を引き起こし得る。
それゆえに、本発明は、ＩＣＩに基づく治療の安全で効果的な手段を提供することを目的とし、特に、その治療は、ＰＤ−１経路阻害剤に基づくものであり、特に、その手段は、腫瘍、癌および／または感染症の治療のためのものである。
本発明の目的は、特許請求の範囲に記載された主題によって解決される。特に、本発明の目的は、ワクチン／阻害剤の組み合わせの規定によって解決され、このワクチン／阻害剤の組み合わせは、ワクチンとして、少なくとも１つの抗原をコードする少なくとも１つのオープンリーディングフレームを含む少なくとも１つのＲＮＡを含むＲＮＡワクチンと、阻害剤として、ＰＤ−１経路阻害剤（好ましくはＰＤ−１レセプターまたはそのリガンドＰＤ−Ｌ１および／またはＰＤ−Ｌ２に対する阻害剤）と、を含む。さらに、その目的は、ワクチン／阻害剤の組み合わせまたはそれぞれの構成要素を含む、薬学的組成物またはパーツキットによって解決される。さらに、その目的は、ＲＮＡワクチンとＩＣＩ（特に、腫瘍もしくは癌疾患、または感染症の治療方法において使用されるＰＤ−１経路阻害剤）との組み合わせによって解決される。
明確性および判読性の目的で、以下の定義を提供する。これらの定義において記載した技術的特徴点は何れも、本発明の各実施形態および全ての実施形態において読み取られ得る。追加の定義および説明は、これらの実施形態に関して特に提供され得る。
（免疫反応）
免疫反応は、典型的には、適応免疫系の特定の抗原への特異的反応（いわゆる特異的または適応免疫反応）、または、先天性免疫系の非特異的反応（いわゆる非特異的または先天性免疫反応）の何れかであり得る。本質的には、本発明は、適応免疫系の特異的反応（適応免疫反応）に関連する。しかしながら、この特異的反応は、追加の非特異的反応（先天性免疫反応）によって支持され得る。それゆえに、本発明はまた、効果的な適応免疫反応を呼び起こす、先天性および適応免疫系の同時刺激のための化合物、組成物または組み合わせに関する。
（免疫系）
免疫系は、生体を感染から保護し得る。病原体が、生体の物的障壁の通過に成功してその生体内に侵入した場合、先天性免疫系は、即座に、ただし非特異的な反応を提供する。病原体が、この先天的反応を回避した場合、脊椎動物は、適応免疫系という第２段階の防御システムを所有している。ここで、免疫系は、感染中に、病原体に対するその認識を向上させるために、その反応を適応させる。そして、この向上した反応は、免疫記憶の形式で病原体を排除した後も保持され、適応免疫系が、この病原体の攻撃を受けるたびに、より早くかつより強い攻撃をしかけることを可能にする。このように、免疫系は、先天性および適応免疫系の両方を含む。これらの２つの部分のそれぞれは、典型的には、いわゆる液性および細胞性の構成要素を含む。
（適応免疫反応）
適応免疫反応は、典型的には、免疫系の抗原特異的反応として理解されている。抗原は、特定の病原体または病原体感染細胞に応じた反応の生成を特異的に可能にする。これらのオーダーメイドされた反応に取りかかる可能性は、通常、体内の「記憶細胞」に維持される。病原体に１回以上感染するならば、これらの特異的記憶細胞は、それを即座に排除しようとする。これに関して、適応免疫反応の第１段階は、抗原特異的ナイーブＴ細胞または抗原提示細胞により抗原特異的免疫反応を誘導することが可能な他の免疫細胞の活性化である。この反応は、ナイーブＴ細胞が絶えず通過するリンパ系組織および臓器において起こる。抗原提示細胞として機能し得るこれらの細胞型は、樹状細胞、マクロファージおよびＢ細胞である。これらの細胞はそれぞれ、誘発された免疫反応において明確な機能を有する。樹状細胞は、ファゴサイト―シスおよびマクロピノサイトーシスにより抗原を提示し、例えば外部抗原に接触することによって、局部リンパ系組織に移動するために刺激され、そして、局部リンパ系組織において、成熟樹状細胞に分化し得る。マクロファージは、バクテリアのような特定の抗原を取り込み、感染因子または他の適切な刺激剤により誘導されることで、ＭＨＣ分子を発現する。レセプターを介した可溶性タンパク質抗原の結合および取り込みに関するＢ細胞の特異な才能は、また、Ｔ細胞の誘導に重要であり得る。ＭＨＣ分子は、典型的には、抗原のＴ細胞への提示を担う。その点で、ＭＨＣ分子における抗原の提示は、増殖と武装化エフェクターＴ細胞への分化とを誘導するＴ細胞の活性化を導く。エフェクターＴ細胞の最も重要な機能は、ＣＤ８＋細胞傷害性Ｔ細胞による感染細胞の殺傷およびＴｈ１細胞によるマクロファージの活性化により共に細胞性免疫を作り出すこと、ならびに、Ｔｈ２およびＴｈ１細胞の両方によりＢ細胞を活性化して抗体の他のクラスを生成し、液性免疫反応を促進することである。Ｔ細胞は、そのＴ細胞レセプターにより抗原を認識しており、直接抗原を認識したり結合したりしないが、例えば、いわゆるエピトープのように、例えば、病原体由来のタンパク質抗原の短いペプチド断片であって、他の細胞表面におけるＭＨＣ分子に結合されるものを、その代わりに認識する。
（適応免疫系）
適応免疫系は、本質的に、病原性の成長を排除または回避することに専念する。適応免疫系は、典型的には、特定の病原体を認識および記憶する（免疫性を生成する）能力、ならびに病原体が攻撃してくる度により強い攻撃を仕掛ける能力を有する脊椎動物免疫系を提供することによって、適応免疫反応を調節する。この系は、体細胞超変異（促進した体細胞変異の過程）およびＶ（Ｄ）Ｊ組み換え（抗原レセプター遺伝子断片の不可逆的遺伝子組み換え）の理由から、高度に適応性がある。このメカニズムは、少数の遺伝子により、膨大な数の異なる抗原レセプターを生成し、そのレセプターが個々のリンパ球それぞれにおいて、独自に発現することを可能にする。この遺伝子の再配列は、各細胞のＤＮＡにおける不可逆的な変化を導くので、長期的な特異免疫の鍵となるメモリーＢ細胞およびメモリーＴ細胞を含む、そのような細胞の子孫（オフスプリング）の全てが、同一のレセプター特異性をコードする遺伝子を継承するだろう。
（細胞性免疫／細胞性免疫反応）
細胞性免疫は、典型的には、マクロファージ、ナチュラルキラー細胞（ＮＫ）、抗原特異的細胞傷害性Ｔリンパ球の活性化、および、抗原に対する反応における種々のサイトカインの放出に関連する。より典型的には、細胞性免疫は、抗体に基づかず、免疫系の細胞の活性化に基づく。典型的には、細胞性免疫反応は、例えば、その表面に外部抗原のエピトープを提示する、樹状細胞または他の細胞のような特異免疫細胞のような細胞において、アポトーシスを誘導することが可能な抗原特異的細胞傷害性Ｔリンパ球を活性化すること等により、特徴づけられ得る。そのような細胞は、ウイルスもしくは細胞内バクテリアに感染し得、または、腫瘍抗原を提示する癌細胞であり得る。さらに、その特徴は、マクロファージおよびナチュラルキラー細胞の活性化であり得、これらの細胞が、病原体を破壊および種々のサイトカインを放出するように細胞を刺激することを可能にすることで、適応免疫反応および先天性免疫反応に関与する他の細胞の機能に影響を与える。
（液性免疫／液性免疫反応）
液性免疫は、典型的には、抗体生成、および任意で抗体生成に伴う付随的な過程に関する。液性免疫反応は、典型的には、例えば、Ｔｈ２の活性化およびサイトカインの生成、胚中心形成およびアイソタイプスイッチ、親和性成熟およびメモリー細胞生成により、特徴づけられ得る。液性免疫はまた、典型的には、病原体および毒性中和、伝統的な補体活性、ならびに、ファドサイトーシスのオプソニン上昇および病原体排除を含む、抗体のエフェクター機能に関連し得る。
（先天性免疫系）
先天性免疫系は、非特異的（または特異的でない）免疫系も知られており、典型的には、非特異的な手段で、他の生体による感染から宿主を防御する細胞およびメカニズムを含む。この系は、非特異的系の細胞が、一般的な方法において病原体を認識および反応し得るが、適応免疫系とは異なり、宿主の長期継続性の免疫または防御免疫を付与しない。先天性免疫系は、例えば、トール様レセプター（ＴＬＲ）のリガンドまたは他の補助基質により活性化され得、これらは、リポ多糖類、ＴＮＦ−アルファ、ＣＤ４０リガンド、または、サイトカイン、モノカイン、リンホカイン、インターロイキンもしくはケモカイン、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１１、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１４、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１７、ＩＬ−１８、ＩＬ−１９、ＩＬ−２０、ＩＬ−２１、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３、ＩＬ−２４、ＩＬ−２５、ＩＬ−２６、ＩＬ−２７、ＩＬ−２８、ＩＬ−２９、ＩＬ−３０、ＩＬ−３１、ＩＬ−３２、ＩＬ−３３、ＩＦＮ−アルファ、ＩＦＮ−ベータ、ＩＦＮ−ガンマ、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｇ−ＣＳＦ、Ｍ−ＣＳＦ、ＬＴ−ベータ、ＴＮＦ−アルファ、増殖因子およびｈＧＨ、ヒトトール様レセプターＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９もしくはＴＬＲ１０のリガンド、マウストール様レセプターＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、ＴＬＲ１０、ＴＬＲ１１、ＴＬＲ１２もしくはＴＬＲ１３のリガンド、ＮＯＤ様レセプターのリガンド、ＲＩＧ−Ｉ様レセプターのリガンド、免疫賦活性核酸、免疫賦活性ＲＮＡ（ｉｓＲＮＡ）、ＣｐＧ−ＤＮＡ、抗菌剤、または、抗ウイルス剤のようなものである。本発明に係るワクチン／阻害剤の組み合わせ、薬学的組成物、またはパーツキットは、上述した基質の１以上を含み得る。典型的には、先天性免疫系の反応には、サイトカインと称される特殊な化学メディエイターを含む化学因子の生成を介した感染部位への免疫細胞の補充；相補カスケードの活性化；臓器、組織、血液、リンパ液に存在する外部基質の、分化白血球細胞による同定および除去；適応免疫系の活性化；および／または感染因子に対する物的および化学的障壁としての作用、が含まれる。
（アジュバント／アジュバント成分）
広義のアジュバントまたはアジュバント成分は、典型的には、薬またはワクチンのような他の因子の効果を、例えば強調するように変化させ得る、薬理学的および／または免疫学的因子である。それは、広義に解釈され、かつ、広範囲の基質に関連する。典型的には、これらの基質は、抗原の免疫原性を向上させることができる。例えば、アジュバントは、先天性免疫系により認識され得、また、例えば、先天性免疫反応を誘導し得る。「アジュバント」は、典型的には、適応免疫反応を誘導しない。その程度において、「アジュバント」は抗原としてはみなされない。アジュバントの作用モードは、適応免疫反応を引き起こす、抗原が誘発させる効果から区別される。
（抗原）
「抗原」は、本発明に関して、典型的には、免疫系、好ましくは適応免疫系によって認識され得る基質に関し、また、例えば、適応免疫反応の一部として、抗体および／または抗原特異的Ｔ細胞の形成により、抗原特異的免疫反応を誘発することが可能である。典型的には、抗原は、ペプチドもしくはタンパク質であり得、または、ペプチドもしくはタンパク質を含み得、少なくとも１つのエピトープを含み、かつＭＨＣによりＴ細胞に提示され得る。本発明に関して、抗原は、提供されたＲＮＡ、好ましくは本明細書で規定されるｍＲＮＡの翻訳産物であり得る。これに関して、少なくとも１つのエピトープを含むペプチドおよびタンパク質の、断片、変異体および誘導体もまた、抗原として理解される。本発明に関して、本明細書で規定される腫瘍抗原および病原体抗原が、特に好ましい。
（エピトープ）
エピトープ（「抗原決定基」とも称される）は、Ｔ細胞エピトープおよびＢ細胞エピトープに分類され得る。本発明に関して、Ｔ細胞エピトープまたはそのタンパク質の一部は、好ましくは約６から約２０もしくはそれ以上のアミノ酸長を有する断片、例えば、長さ約８から約１０、例えば、８、９もしくは１０アミノ酸（またはさらに１１、もしくは１２アミノ酸）を好ましくは有するＭＨＣクラスＩ分子により処理および提示される断片、または、例えば、長さ約１３もしくはそれ以上のアミノ酸、例えば、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０もしくはそれ以上のアミノ酸を好ましくは有するＭＨＣクラスＩＩ分子により処理および提示される断片、を含み得、これらの断片は、アミノ酸配列の何れの部分からも選択され得る。これらの断片は、典型的には、ペプチド断片およびＭＨＣ分子からなる複合体の形式において、Ｔ細胞により認識され、例えば、典型的にはその天然の形式では認識されない。Ｂ細胞エピトープは、典型的には、本明細書で規定される（天然の）タンパク質またはペプチド抗原の外側表面に位置する断片であり、好ましくは、５から１５アミノ酸を含み、より好ましくは５から１２アミノ酸を含み、さらに好ましくは６から９アミノ酸を含み、例えば、その天然の形式で抗体に認識され得る。
タンパク質またはペプチドのこのようなエピトープは、さらに、このようなタンパク質またはペプチドの本明細書に記載した変異体の何れかから選択され得る。これに関して、抗原決定基は、本明細書で規定されるタンパク質またはペプチドのアミノ酸配列において不連続であり、本明細書で規定されるタンパク質またはペプチドの一部から構成された、構造または不連続エピトープであり得るが、三次元構造、または一本鎖ポリペプチドを構成する連続したもしくは線形のエピトープとして、共にもたらされる。
（ワクチン）
ワクチンは、典型的には、少なくとも１つの抗原、好ましくは免疫原を提供する、予防または治療材料であると理解される。「少なくとも１つの抗原を提供する」とは、例えば、ワクチンが、抗原を含む、または、ワクチンが、例えば抗原もしくは抗原を含む分子をコードする分子を含む、ことを意味する。例えば、ワクチンは、ＲＮＡ（例えば、ＲＮＡワクチン）のような核酸を含み得、このような核酸は、抗原を含むペプチドまたはタンパク質をコードする。抗原または免疫原は、ワクチン接種に適した何れの材料由来であってもよい。例えば、抗原または免疫原は、バクテリアもしくはウイルス粒子等のような病原体由来であってもよく、または、腫瘍もしくは癌性の腫瘍由来であってもよい。抗原または免疫原は、適応免疫反応を提供するために、体内の適応免疫系を刺激する。本発明に関して、ワクチンは、例えばＢ１６黒色腫細胞である癌細胞または樹状細胞のような細胞を、好ましくは含まない。さらに、本発明に関して、ワクチンは、好ましくは、ペプチド腫瘍抗原のようなペプチド抗原からならない。本発明に関して、ワクチンは、好ましくはＲＮＡワクチンである。
（ＲＮＡワクチン）
ＲＮＡワクチンは、少なくとも１つの抗原をコードする少なくとも１つのオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）を含む少なくとも１つのＲＮＡ分子を含むワクチンとして、本明細書で規定される。本発明に関して、ワクチンに含まれる少なくとも１つのＲＮＡ分子は、好ましくは単離されたＲＮＡ分子である。この少なくとも１つのＲＮＡは、好ましくは、ウイルスＲＮＡ、自己複製ＲＮＡ（レプリコン）であり、または最も好ましくは、ｍＲＮＡである。また、ＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡ分子が部分的にリボヌクレオチドからなり、かつ、部分的にデオキシリボヌクレオチドからなることを意味する、ＲＮＡ／ＤＮＡハイブリッドもここに含まれる。これに関して、ＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡは、少なくとも５０％がリボヌクレオチドからなり、より好ましくは少なくとも６０％、７０％、８０％、９０％、および最も好ましくは１００％がリボヌクレオチドからなる。これに関して、ＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡは、また、本明細書で規定されるウイルス粒子およびレプリコン粒子のように、複合体化されたＲＮＡまたはｍＲＮＡとして提供され得る。本発明に関して、ＲＮＡワクチンに含まれる少なくとも１つのＲＮＡは、例えばＢ１６黒色腫細胞である癌細胞または樹状細胞のような細胞に、好ましくは提示されない。さらに、特に好ましくは、本発明のＲＮＡワクチンは、レンチウイルスベクターを含まずもしくはこれからならず、特に、レンチウイルスベクターに対する樹状細胞ではなく、または、アデノウイルス／アデノ関連ベクター（（ｒ）ＡＡＶ ｖｅｃｔｏｒ）を含まずもしくはこれからならない。好ましくは、本発明のＲＮＡワクチンは、ＨＩＶワクチンではない。特に、本発明のＲＮＡワクチンは、１以上の抗原をコードするＡＡＶまたはレンチウイルスベクターを含まないことが好ましい。また、本発明のＲＮＡワクチンは、好ましくは、例えばＧａｇタンパク質であるＨＩＶ特異抗原をコードせず、特に、ＧａｇのようなＨＩＶ特異抗原をコードするレンチウイルスベクターではない。好ましくは、本発明のＲＮＡワクチンは、ＰＤ１タンパク質と抗原タンパク質との融合タンパク質、または、ＰＤ１タンパク質と免疫グロブリンもしくはその一部との融合タンパク質を含まず、かつ、そのようなＰＤ１融合タンパク質をコードしない。
（遺伝子ワクチン）
遺伝子ワクチンは、典型的には、抗原もしくは免疫原またはその断片をコードする核酸分子の投与によるワクチン接種として理解され得る。核酸分子は、患者の体または患者から単離した細胞に投与され得る。体のある細胞へのトランスフェクトまたは単離細胞へのトランスフェクトにおいて、抗原または免疫原はそれらの細胞において発現し得、その後、免疫系に提示され、例えば、抗原特異的免疫反応のような、適応免疫反応を誘引する。したがって、遺伝子ワクチンは、典型的に、以下の工程の少なくとも１つを含む：ａ）好ましくは本明細書で規定される（単離）ＲＮＡである核酸を、好ましくは患者である対象に投与、または、好ましくは患者である対象の単離細胞に投与し、通常、ｉｎ ｖｉｖｏまたはｉｎ ｖｉｔｒｏの何れかにおいて、対象の細胞のトランスフェクトをもたらす工程；ｂ）導入した核酸分子の転写および／または翻訳工程；および、任意でｃ）核酸が患者に直接投与されていない場合、好ましくは患者である対象に、単離されトランスフェクトされた細胞を再投与する工程。
（核酸）
用語核酸は、任意のＤＮＡまたはＲＮＡ分子を意味し、ポリヌクレオチドと同義で用いられる。さらに、本明細書で規定される核酸の修飾物または誘導体は、典型的に、用語「核酸」に明白に含まれる。例えば、ＰＮＡもまた、用語「核酸」に含まれる。
（モノシストロニックＲＮＡ）
モノシストロニックＲＮＡは、典型的に、ＲＮＡであり得、好ましくはｍＲＮＡであり、オープンリーディングフレームを１つのみ含む。これに関して、オープンリーディングフレームは、ペプチドまたはタンパク質に翻訳され得る、様々なヌクレオチドトリプレット（コドン）の配列である。
（バイシストロニック／マルチシストロニックＲＮＡ）
ＲＮＡは、好ましくはｍＲＮＡであり、典型的には、２つ（バイシストロニック）またはそれ以上（マルチシストロニック）のオープンリーディングフレームを有し得る。これに関して、オープンリーディングフレームは、ペプチドまたはタンパク質に翻訳され得る、様々なヌクレオチドトリプレット（コドン）の配列である。
（５’キャップ構造）
５’キャップは、典型的には、修飾されたヌクレオチドであり、特に、グアニンヌクレオチドであり、ＲＮＡ分子の５’末端に付加されている。好ましくは、５’キャップは、５’−５’三リン酸塩結合を用いて付加されている。
（ポリ（Ｃ）配列）
ポリ（Ｃ）配列は、典型的には、シトシンヌクレオチドの長い配列であり、約１０から約２００のシチジンヌクレオチドの配列、好ましくは約１０から約１００のシチジンヌクレオチドの配列、より好ましくは約１０から約７０シチジンヌクレオチドの配列、または、さらに好ましくは約２０から約５０もしくは約２０から約３０のシチジンヌクレオチドの配列である。ポリ（Ｃ）配列は、核酸に含まれるコード領域の３’に、好ましくは位置し得る。
（ポリ（Ａ）尾部）
ポリ（Ａ）尾部は、また、「３’ポリ（Ａ）尾部」とも称され、典型的には、約４００以下のアデノシンヌクレオチドの長い配列であり、例えば、約２５から約４００、好ましくは約５０から約４００、より好ましくは約５０から約３００、さらに好ましくは約５０から約２５０、最も好ましくは約６０から約２５０のアデノシンヌクレオチドの配列であり、好ましくはｍＲＮＡである核酸配列の３’末端に付加されている。ポリ（Ａ）尾部は、例えばｍＲＮＡである核酸に含まれるコード領域の３’に、好ましくは位置し得る。
（安定化核酸）
安定化核酸は、典型的には、ｉｎ ｖｉｖｏの分解（例えば、エキソヌクレアーゼまたはエンドヌクレアーゼによる分解）および／またはｅｘ ｖｉｖｏの分解（例えば、ワクチン投与前の製造工程による分解、例えば、投与のためのＲＮＡワクチン溶液の調製の過程における分解）に、本質的に耐え得る。特にｍＲＮＡである、ＲＮＡの安定化は、例えば、５’キャップ構造、ポリ（Ａ）尾部、ポリ（Ｃ）尾部、および／または任意の他のＵＴＲ修飾により、達成され得る。また、安定化核酸は、バックボーン修飾、糖修飾、および／または核酸のＧ／Ｃ含量の変更によっても、達成され得る。様々な他の方法が、本発明に関して想定される。
（核酸の修飾（修飾された核酸））
核酸分子、特にＲＮＡまたはｍＲＮＡの修飾には、バックボーン修飾、糖修飾または塩基修飾が含まれ得る。本発明に関連するバックボーン修飾は、核酸分子に含まれるヌクレオチドのバックボーンのリン酸塩が、化学的に修飾されるような修飾である。本発明に関連する糖修飾は、核酸のヌクレオチドの糖の化学的修飾である。さらに、本発明に関連する塩基修飾は、核酸分子のヌクレオチドの塩基成分の化学的修飾である。それゆえに、修飾された核酸は、また、ヌクレオチド類似体を含み得る核酸分子としても、本明細書で規定される。さらに、核酸分子の修飾は、脂質修飾を含み得る。このような、脂質修飾された核酸は、典型的には、本明細書で規定される核酸を含む。そのような脂質修飾された核酸分子は、典型的には、核酸分子に共有結合する少なくとも１つのリンカー、および、それぞれのリンカーに共有結合する少なくとも１つの脂質を、さらに含む。代替として、脂質修飾された核酸分子は、本明細書で規定される少なくとも１つの核酸分子と、この核酸分子に（リンカーを用いずに）共有結合する少なくとも１つの（二機能性の）脂質とを含む。三番目の代替案によれば、脂質修飾された核酸分子は、本明細書で規定される核酸分子と、核酸分子に共有結合する少なくとも１つのリンカーと、それぞれのリンカーに共有結合する少なくとも１つの脂質と、さらに、核酸分子に（リンカーを用いずに）共有結合する少なくとも１つの（二機能性の）脂質と、を含む。
核酸の修飾は、また、核酸分子（特に、本発明のワクチン／阻害剤の組み合わせにおける少なくとも１つの抗原をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡ）のコード領域のＧ／Ｃ含量の変更を含み得る。これに関連して、核酸分子のコード領域のＧ／Ｃ含量は、その特定の野生型コード配列（すなわち、修飾されていないＲＮＡ）のコード領域のＧ／Ｃ含量と比較して増加していることが特に好ましい。核酸配列のコードアミノ酸配列は、特定の野生型ｍＲＮＡのコードアミノ酸配列と比較して、好ましくは修飾されていない。核酸分子のＧ／Ｃ含量の変更は、特に核酸分子がｍＲＮＡまたはｍＲＮＡをコードする型である場合、翻訳される何れのｍＲＮＡ領域の配列がｍＲＮＡの効果的な翻訳に重要であるという事実に基づいている。それゆえに、様々なヌクレオチドの組成物および配列は重要である。特に、Ｇ（グアニン）／Ｃ（シトシン）含量が増加した配列は、Ａ（アデノシン）／Ｕ（ウラシル）が増加した配列よりも安定である。それゆえに、翻訳されたアミノ酸は維持される一方で、コード配列またはｍＲＮＡのコドンは、野生型のコード配列またはｍＲＮＡと比較して異なるように、含有するＧ／Ｃヌクレオチドの量を増加させる。いくつかのコドンは１つまたは同一のアミノ酸をコードするという事実（いわゆる、遺伝子コードの変質）に関して、安定性に最も優れたコドンを決定する（いわゆる、選択的コドン利用）ことができる。好ましくは、核酸分子のコード領域のＧ／Ｃ含量、特に、本発明のワクチン／阻害剤の組み合わせにおける少なくとも１つの抗原をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡのコード領域のＧ／Ｃ含量は、野生型ｍＲＮＡのコード領域のＧ／Ｃ含量と比較して、少なくとも７％、より好ましくは少なくとも１５％、特に好ましくは少なくとも２０％増加している。特定の実施形態によれば、本明細書で規定されるタンパク質もしくはペプチドまたはその断片をコードする領域、またはその変異体および／もしくは誘導体をコードする領域、または野生型ｍＲＮＡ配列もしくはコード配列の全配列における置換可能なコドンの、少なくとも５％、１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、より好ましくは少なくとも７０％、さらに好ましくは少なくとも８０％、および最も好ましくは少なくとも９０％、９５％またはさらに１００％を置換することによって、これらの配列のＧ／Ｃ含量を増加させる。これに関して、核酸分子、特に、本発明のワクチン／阻害剤の組み合わせにおける少なくとも１つの抗原をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡのＧ／Ｃ含量を、特にタンパク質をコードする領域において、野生型配列と比較して最大（すなわち、置換可能なコドンの１００％）に増加させることが特に好ましい。さらに、核酸の修飾は、特に本発明のワクチン／阻害剤の組み合わせにおける少なくとも１つの抗原をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡに関して、翻訳効率が細胞におけるｔＲＮＡの発生頻度の違いによっても決定されるという事実に基づく。細胞におけるｔＲＮＡの発生頻度、およびその細胞におけるコドン使用頻度は、細胞が由来する種に依存する。したがって、酵母細胞は、通常、ヒト細胞のような哺乳動物細胞とは異なるコドン使用頻度を示す。それゆえに、いわゆる「レアコドン」が核酸分子に存在する場合（それぞれの発現系に関して）、特に核酸がｍＲＮＡまたはｍＲＮＡをコードする型である場合、量を増やすために、対応する修飾された核酸分子は、比較的「頻出」するｔＲＮＡについてコードするコドンが存在する場合よりも、非常に低い程度に翻訳される。それゆえに、修飾された核酸のコード領域、特に本発明のワクチン／阻害剤の組み合わせにおける少なくとも１つの抗原をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡのコード領域は、細胞において比較的まれなｔＲＮＡをコードする野生型配列の少なくとも１つのコドンを、細胞において比較的頻出し、比較的まれなｔＲＮＡと同じアミノ酸を運ぶｔＲＮＡをコードするコドンに変更するというように、野生型ｍＲＮＡまたはコード配列の対応する領域と比較して、好ましくは修飾されている。この修飾により、核酸分子の配列、特に本発明のワクチン／阻害剤の組み合わせにおける少なくとも１つの抗原をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡの配列は、頻出して存在するｔＲＮＡが利用可能なコドンを挿入するように修飾されている。言い換えると、この修飾により、細胞において比較的まれなｔＲＮＡをコードする野生型配列の全てのコドンは、それぞれの場合において、細胞において比較的頻出し、比較的まれなｔＲＮＡと同じアミノ酸を運ぶｔＲＮＡをコードするコドンに交換可能である。このように修飾された核酸は、好ましくは、「コドン最適化核酸またはＲＮＡ」として本明細書で称する。どのｔＲＮＡが細胞において比較的頻出するか、および、反対に、どのｔＲＮＡが細胞において比較的まれかについては、当業者に公知である：例えば、Akashi, Curr. Opin. Genet. Dev. 2001, 11(6): 660-666を参照。タンパク質をコードする核酸配列、特に本発明において用いられるＲＮＡワクチンに含まれる少なくとも１つの抗原をコードする少なくとも１つのＲＮＡ配列は、ヒトコドン利用に関してコドン最適化されていることが特に好ましい。例えば、Ｇｌｙコドンのように、特定のアミノ酸のための最も頻出するｔＲＮＡに用いられるコドン、（ヒト）細胞において最も頻出するｔＲＮＡに用いられるコドンが、特に好ましい。これに関して、修飾された核酸分子、特に本発明のワクチン／阻害剤の組み合わせにおいて少なくとも１つの抗原をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡにおいて、その核酸分子のコード領域によりコードされるタンパク質のアミノ酸配列を変化させることがない「頻出」コドンと、一連のＧ／Ｃ含量の増加、特に最大化とが結びつくことが好ましいこの好ましい実施形態は、（修飾された）核酸、特に本発明のワクチン／阻害剤の組み合わせにおいて少なくとも１つの抗原をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡの、特に効率的な翻訳と安定化との実現を可能にする。
（核酸分子の誘導体）
核酸分子の誘導体は、上記で規定された修飾された核酸と同様に、本明細書で規定される。
（ヌクレオチド類似体）
ヌクレオチド類似体は、リン酸塩バックボーン修飾、糖修飾またはヌクレオベース修飾を含む、天然に生じるヌクレオチドに、構造的に類似した（類似体）ヌクレオチドである。
（ＵＴＲ修飾）
核酸分子、特に、コード核酸分子、特に本発明による少なくとも１つの抗原をコードした少なくとも１つのオープンリーディングフレームを含むＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡの型である場合の核酸分子は、少なくとも１つの修飾された５’および／または３’ＵＴＲ配列（ＵＴＲ修飾）を有することが好ましい。５’および／または３’非翻訳領域（ＵＴＲ）には、細胞質ゾルにおける核酸の半減期を延長する効果を有し得、かつ、コードされたタンパク質またはペプチドの翻訳を増加させ得る配列が含まれる。これらのＵＴＲ配列は、ウイルス、バクテリアおよび真核生物において天然に生じる配列と１００％の配列同一性を有し得るが、部分的または完全に合成されたものであってもよい。例えば、ヒトまたはアフリカツメガエルからの（アルファ）グロブリン遺伝子の非翻訳配列（ＵＴＲ）を、安定化核酸に用いることができる安定化配列の例として示し得る。安定化配列の他の例は、（アルファ）グロブリン、タイプ（Ｉ）コラーゲン、１５−リポキシゲナーゼ、またはチロシン水酸化酵素をコードする、非常に安定したＲＮＡの３’ＵＴＲに含まれる、一般式(C/U)CCANxCCC(U/A)PyxUC(C/U)CCを有する（Holcik et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1997, 94: 2410 to 2414を参照）。本発明に関して特に好ましくは、以下の配列 GCCCGaTGGG CCTCCCAACG GGCCCTCCTC CCCTCCTTGC ACCG（配列番号１）（下線を付したヌクレオチドは野生型に対する変異を示す）を含む（アルファ）グロブリンの変異したＵＴＲであり、ｍｕａｇとしてもまたここに記載される。このように導入されたＵＴＲ配列は、もちろん、独立してまたは互いに組み合わせて使用されることが可能であり、また、当業者に公知の他の修飾配列と組み合わせて使用され得る。
（ヒストンステムループ）
本発明に関して、ヒストンステムループ配列は、好ましくは、以下の式（Ｉ）または（ＩＩ）の少なくとも１つから選択される；
Figure 0006768045
ここで、ステム１またはステム２末端構成要素Ｎ１−６は、Ｎが１から６、好ましくは２から６、より好ましくは２から５、さらにこのましくは３から５、最も好ましくは４から５もしくは５の連続した配列であり、Ｎは、Ａ、Ｕ、Ｔ、ＧおよびＣから選択されるヌクレオチド、またはそのヌクレオチド類似体からそれぞれ独立して選択され；
ステム１［Ｎ０−２ＧＮ３−５］は、構成要素ステム２に逆相補的または部分的に逆相補的であり、５から７ヌクレオチドの間の連続した配列であり、
Ｎ０−２は、Ｎが０から２、好ましくは０から１、より好ましくは１の連続した配列であり、Ｎは、Ａ、Ｕ、Ｔ、ＧおよびＣから選択されるヌクレオチド、またはそのヌクレオチド類似体からそれぞれ独立して選択され、
Ｎ３−５は、Ｎが３から５、好ましくは４から５、より好ましくは４の連続した配列であり、Ｎは、Ａ、Ｕ、Ｔ、ＧおよびＣから選択されるヌクレオチド、またはそのヌクレオチド類似体からそれぞれ独立して選択され、
Ｇはグアノシンまたはその類似体であり、任意でシチジンまたはその類似体によって置換されていてもよく（ステム２におけるその相補ヌクレオチドシチジンがグアノシンに置換される場合）；
ループ配列［Ｎ０−４（Ｕ／Ｔ）Ｎ０−４］は、構成要素ステム１と構成要素ステム２との間に位置し、３から５ヌクレオチド、より好ましくは４ヌクレオチドの連続した配列であり、
各Ｎ０−４は、互いに独立して、Ｎが０から４、好ましくは１から３、より好ましくは１から２の連続した配列であり、Ｎは、Ａ、Ｕ、Ｔ、ＧおよびＣから選択されるヌクレオチド、またはそのヌクレオチド類似体からそれぞれ独立して選択され；
ステム２［Ｎ３−５ＣＮ０−２］は、構成要素ステム１に逆相補的または部分的に逆相補的であり、５から７ヌクレオチドの間の連続した配列であり、
Ｎ３−５は、Ｎが３から５、好ましくは４から５、より好ましくは４の連続した配列であり、Ｎは、Ａ、Ｕ、Ｔ、ＧおよびＣから選択されるヌクレオチド、またはそのヌクレオチド類似体からそれぞれ独立して選択され、
Ｎ０−２は、Ｎが０から２、好ましくは０から１、より好ましくは１の連続した配列であり、Ｎは、Ａ、Ｕ、Ｔ、ＧおよびＣから選択されるヌクレオチド、またはそのヌクレオチド類似体からそれぞれ独立して選択され、
Ｃはシチジンまたはその類似体であり、任意でグアノシンまたはその類似体によって置換されていてもよく（ステム１におけるその相補ヌクレオチドシチジンがシチジンに置換される場合）；
ここで、ステム１およびステム２は、互いに逆相補配列を形成する塩基対、または、互いに部分的に逆相補配列を形成する塩基対になり得、その塩基対は、ステム１とステム２との間に生じ得、例えば、ヌクレオチドＡおよびＵ／ＴもしくはＧおよびＣのワトソン−クリック塩基対、または、例えば、ゆらぎ塩基対、逆ワトソン−クリック塩基対、フーグスティーン塩基対、逆フーグスティーン塩基対のような非ワトソン−クリック塩基対であり、ここで、１つのステムにおける１以上の塩基が、他のステムの逆相補配列において相補的な塩基を有さないことに基づく、不完全塩基対が、ステム１とステム２との間に生じ得る。
（核酸合成）
本明細書で規定される本発明により用いられる核酸分子は、当業者に公知の任意の方法を用いて調製され得、このような合成方法には、例えば、固相法、ｉｎ ｖｉｖｏ増殖（例えば、ｉｎ ｖｉｖｏウイルス増殖）が含まれ、同様に、ｉｎ ｖｉｔｒｏ転写反応のようなｉｎ ｖｉｔｒｏの方法も含まれる。
核酸分子を調製するために、特に核酸がＲＮＡまたはｍＲＮＡの型である場合、対応するＤＮＡ分子は、例えばｉｎ ｖｉｔｏｒｏで転写され得る。このＤＮＡマトリクスは、好ましくは、例えばＴ７またはＳＰ６プロモーターのような、ｉｎ ｖｉｔｒｏ転写のための適切なプロモーターに続いて、例えばｍＲＮＡのような、調製される核酸分子をコードする所望のヌクレオチド配列と、ｉｎ ｖｉｔｏｒｏ転写の終了コドンとを含む。ＤＮＡ分子は、少なくとも１つの目的のＲＮＡのマトリクスを形成し、発酵性増殖により調製され得、その後、バクテリアにおいて複製され得るプラスミドの一部として単離され得る。本発明に適したものとして記載され得るプラスミドは、例えば、プラスミドpT7Ts（GenBank accession number U26404; Lai et al., Development 1995, 121: 2349 to 2360）、例えばpGEM-1（GenBank accession number X65300; from Promega）およびpSP64（GenBank accession number X65327）であるpGEM（登録商標）シリーズであり、また、Mezei and Storts, Purification of PCR Products, in: Griffin and Griffin (ed.), PCR Technology: Current Innovation, CRC Press, Boca Raton, FL, 2001を参照できる。
（ＲＮＡ）
ＲＮＡはリボ核酸の一般的な省略形である。ＲＮＡは、例えばヌクレオチドからなるポリマーである、核酸分子である。これらのヌクレオチドは、通常、アデノシンモノリン酸塩、ウリジンモノリン酸塩、グアノシンモノリン酸塩およびシチジンモノリン酸塩のモノマーであり、いわゆるバックボーンに沿って互いに連結される。バックボーンは、１つ目の糖（すなわちリボース）と２つ目のリン酸塩部分との、隣接するモノマー間のリン酸ジエステル結合により形成される。モノマーの特定の連続を、ＲＮＡ配列と称する。
（メッセンジャーＲＮＡ（ＲＮＡ））
真核細胞において、転写は、典型的には核またはミトコンドリア内において起こる。ｉｎ ｖｉｔｒｏにおいて、ＤＮＡの転写は、ｍＲＮＡと省略形で通常示される、いわゆるメッセンジャーＲＮＡにプロセッシングされるべき、いわゆる未成熟ＲＮＡを通常もたらす。未成熟ＲＮＡのプロセッシング（例えば、真核生物における）は、スプライシング、５’キャッピング、ポリアデニル化、核またはミトコンドリアからの輸送等のような、様々な異なる転写後修飾を含む。これらのプロセッシングをまとめて、ＲＮＡの成熟とも称する。成熟メッセンジャーＲＮＡは、通常、特定のペプチドまたはタンパク質のアミノ酸配列に翻訳され得るヌクレオチド配列を提供する。典型的には、成熟ｍＲＮＡは、５’キャップ、５’ＵＴＲ、オープンリーディングフレーム、３’ＵＴＲおよびポリ（Ａ）配列を含む。本発明に関して、ｍＲＮＡはまた、人工の分子（すなわち天然に生じない分子）であり得る。これは、本発明に関して、ｍＲＮＡが、例えば、５’ＵＴＲ、オープンリーディングフレーム、３’ＵＴＲおよびポリ（Ａ）配列の組み合わせ（天然において、この組み合わせでは存在しない）を含んでもよいことを意味する。
（レトロウイルス）
レトロウイルスは、逆転写酵素を用いて宿主細胞内で転写され、そのＲＮＡゲノムからＤＮＡを生成する、ＲＮＡウイルスである。そして、そのＤＮＡは、インテグラーゼ酵素により宿主ゲノムに組み込まれる。その後、ウイルスは宿主細胞のＤＮＡの一部として複製し、通常の転写および翻訳処理が行われ、ウイルスにより運ばれた遺伝子が発現する。レンチウイルスは、遺伝子治療の目的で頻繁に利用されていた。安全性の理由から、ふつうは、レンチウイルスベクターは、その複製を必要とする遺伝子を運搬しない。レンチウイルスを生成するために、一般的にはＨＥＫ２９３である、いわゆるパッケージング細胞株にいくつかのプラスミドをトランスフェクトする。通常、パッケージングプラスミドに関して、１以上のプラスミドは、キャプシドおよび逆転写酵素のようなウイルスタンパク質をコードする。他のプラスミドは、ベクターにより運搬される遺伝子材料を含む。それは、ウイルスに含めた一本鎖ＲＮＡウイルスゲノムを生成するために転写され、遺伝子治療の目的または遺伝子ワクチン接種のための、細胞の感染のために用いられる。
（ビリオン）
ウイルス粒子（ビリオンとして知られる）は、以下の２または３つの部分からなる：ｉ）ＤＮＡまたはＲＮＡの何れかにより産生された遺伝子材料（ウイルス遺伝子と、任意に置換された異種遺伝子）；ｉｉ）これらの遺伝子を保護するタンパク質外被；および、いくつかの場合において、ｉｉｉ）タンパク質外被が細胞外にあるときに、それを囲む脂質エンベロープ。
（自己複製ＲＮＡ（レプリコン））
自己複製ＲＮＡは、セムリキ森林熱ウイルス（ＳＦＶ）、シンドビスウイルス（ＳＩＮ）およびベネズエラウマ脳脊髄炎（ＶＥＥ）ウイルスから開発されたアルファウイルスに基づく運搬ベクターである。アルファウイルスは、目的の異種遺伝子をアルファウイルスの構造遺伝子に置換し得る、一本鎖ＲＮＡウイルスである。ｉｎ ｔｒａｎｓで構造遺伝子を提供することによって、レプリコンＲＮＡは、遺伝子治療の目的または遺伝子ワクチン接種に用いられ得るレプリコン粒子（ＲＰ）に含められる（例えば、Vander Veen et al., 2012. Alphavirus replicon vaccines. Animal Health Research Reviews 13(1):1-9を参照のこと）。宿主細胞に入ったのち、ゲノムウイルスＲＮＡは、初めに、ウイルスＲＮＡ増幅の開始に要求されるウイルス非構造タンパク質（ｎｓＰｓ）の翻訳のためのｍＲＮＡとして機能する。ＲＮＡレプリコンは、追加のゲノム長ＲＮＡの合成のためのテンプレート、および内部プロモーターからのプラス鎖サブゲノムＲＮＡの転写のためのテンプレートとして用いられる、全長マイナス鎖中間体の合成を介して生じる。そして、複製（および異種遺伝子の転写）を担う非構造タンパク質がそのようなレプリコン中にまだ存在するため、そのようなＲＮＡは、自己複製ＲＮＡとして考慮され得る。そのようなアルファウイルスベクターは、「レプリコン」と称される。
（レプリコン粒子）
レプリコン粒子は、以下の２または３つの部分からなる：ｉ）ＤＮＡまたはＲＮＡから作られた遺伝子材料（すなわちレプリコン）（ウイルスの遺伝子および任意に置換された異種遺伝子を含む）；ｉｉ）これらの遺伝子を保護するタンパク質外被；および、いくつかの場合において、ｉｉｉ）それらが細胞外にあるときに、タンパク質外被を囲む脂質エンベロープ。
（単離されたＲＮＡ）
本明細書において、単離されたＲＮＡは、細胞、放射線照射された細胞、または細胞溶解液の一部ではないＲＮＡとして規定される。単離されたＲＮＡは、細胞もしくは細胞溶解液から単離および／もしくは精製されて、またはｉｎ ｖｉｔｒｏの転写系から生成され得る。
本発明に関して、単離されたＲＮＡという用語は、ＲＮＡワクチンを含む細胞、放射線照射された細胞、もしくは細胞溶解液の一部ではない、またはＲＮＡワクチンのＲＮＡがトランスフェクトされた細胞の一部ではないＲＮＡとして、本明細書で規定される。言い換えれば「単離されたＲＮＡ」という用語は、（体外で）トランスフェクトまたは調整された、ＲＮＡワクチンとして使用される細胞、特に体外でトランスフェクトまたは調整された免疫細胞（樹状細胞（ＤＣ）等）、例えばＲＮＡワクチンとして使用されるＲＮＡをトランスフェクト／形質導入されたＤＣを除外する。さらに、単離されたＲＮＡという用語は、ＲＮＡワクチンとして使用される抗原をコードする少なくとも1つのＲＮＡを天然に含んでいる、細胞、放射線照射された細胞、または細胞溶解液に含まれる、ＲＮＡを除外する。したがって、本発明の組み合わせのＲＮＡワクチンは、ＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡを天然に含む、調整されたまたはトランスフェクトされた細胞を好ましくは含まず、特にトランスフェクトされていない、または調整されていない免疫細胞（例えば抗原提示細胞）、とりわけトランスフェクトされていない、または調整されていないＤＣ、放射線照射された細胞、または細胞溶解液を含まない。この実施形態によって、本発明において使用されるＲＮＡワクチンは、好ましくは細胞に基づくワクチンもしくはＤＣに基づくワクチンに対応しない、またはより典型的には、細胞に基づくワクチンに対応しない、もしくはさらに典型的に、本発明において使用されるＲＮＡワクチンは、好ましくは細胞を含まず、投与される本発明の組み合わせは、ＲＮＡワクチンをＲＮＡとして、より好ましくはｍＲＮＡとして、任意に担体および／または補助剤と結合して提供することが明確になる。単離されたＲＮＡという用語は、さらなる構成要素（例えば、ペプチド、タンパク質、担体等）と複合体化したＲＮＡ、粒子（レプリコン粒子またはウイルス粒子（ビリオン）等）内にパッケージされたＲＮＡ、および、ＲＮＡに加えてさらなる構成要素（例えばバッファー、安定化剤、ＲＮアーゼ阻害剤等）を含んでいてもよい溶液に含まれるＲＮＡも包含する。
（核酸分子の配列）
核酸分子の配列は、典型的には、そのヌクレオチドの特定の個々の順序（すなわち連続）であると理解される。
（タンパク質またはペプチドの配列）
タンパク質またはペプチドの配列は、典型的には、そのアミノ酸の順序（すなわち連続）であると理解される。
（配列の同一性）
２つ以上の配列が、同一の長さおよび順序のヌクレオチドまたはアミノ酸を示すのならば、それらは同一である。同一性のパーセンテージは、典型的には２つの配列の同一性の程度を表す。すなわち、同一性のパーセンテージは典型的には、参照配列の個々のヌクレオチドと、配列内の位置が対応しているヌクレオチドのパーセンテージを表す。同一性の決定のため、比較される配列は同一の長さ、すなわち比較される配列のうち最も長い配列を示すよう検討される。このことは、８つのヌクレオチドからなる第１の配列は、第１の配列を含む１０個のヌクレオチドからなる第２の配列に対し８０％同一であることを意味する。言い換えれば、本発明に関して、配列の同一性は、好ましくは２つ以上の配列において同一の位置にあり、同一の長さであるヌクレオチド配列のパーセンテージに関する。ギャップは多くの場合、配列比較における実際の位置に関わりなく、非同一の位置とみなされる。
（配列の断片）
配列の断片は多くの場合、例えば核酸配列またはアミノ酸配列の全長配列のより短い部分である。したがって、配列の断片は、典型的には対応する伸長配列、または全長配列内の対応する伸長配列と同一である。本発明に関して、好ましい配列の断片は、核酸またはアミノ酸等の構成要素の連続した伸長配列であって、断片の由来である分子内の構成要素の連続した伸長配列に対応しており、断片の由来である分子全体（すなわち全長）の少なくとも５％、好ましくは少なくとも２０％、より好ましくは少なくとも３０％、より好ましくは少なくとも４０％、より好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは少なくとも８０％を表す。それゆえ、例えばタンパク質またはペプチド抗原の断片は、好ましくは断片の由来であるタンパク質またはペプチド抗原内の構成要素の連続した伸長配列に対応しており、断片の由来であるタンパク質またはペプチド抗原全体（すなわち全長）の少なくとも５％、好ましくは少なくとも２０％、より好ましくは少なくとも３０％、より好ましくは少なくとも４０％、より好ましくは少なくとも５０％、より好ましくは少なくとも６０％、より好ましくは少なくとも７０％、より好ましくは少なくとも８０％を表す。特に、配列の断片は、機能的断片、すなわち断片の由来となる配列が満たす１つ以上の機能を満たしていることが好ましい。例えば、タンパク質またはペプチド抗原の断片は、好ましくは少なくとも１つの、断片の由来であるタンパク質またはペプチド抗原の抗原として機能する（例えば、少なくとも１つの抗原決定基に対し、特異的免疫反応をタンパク質またはペプチド抗原において誘導することができる）。
（タンパク質の断片）
タンパク質またはペプチドの「断片」、すなわちアミノ酸配列の断片は、この発明に関して、典型的には、本明細書に規定されるタンパク質またはペプチドの配列であって、アミノ酸配列（またはそれをコードする核酸分子）に関して、起源である（天然の）タンパク質（またはそれをコードする核酸分子）と比較してＮ末端において、Ｃ末端において、および／または内部において切断されている配列を含んでいてもよい。切断は、このようにアミノ酸レベルにおいて、または対応する核酸レベルの何れかにおいて生ずる。よって、本明細書に規定される断片に関して、配列の同一性は、好ましくは本明細書に規定されるタンパク質もしくはペプチド全体、またはタンパク質もしくはペプチドの全体の（翻訳領域の）核酸分子を参照してもよい。
同様に、核酸配列の「断片」は、この発明に関して、典型的に、本明細書に規定される核酸の配列であって、核酸分子に関して、起源である（天然の）核酸分子と比較して５’端、３’端、および／または内部において切断されている配列を含んでいてもよい。それゆえ、断片に関して、配列の同一性は、好ましくは本明細書に規定される核酸の全配列を参照してもよい。
（トランスフェクション）
「トランスフェクション」という用語は、細胞、好ましくは真核生物の細胞への、ＤＮＡまたはＲＮＡ（例えばｍＲＮＡ）等の核酸分子の導入を表す。本発明に関して、「トランスフェクション」という用語は、核酸分子、好ましくはＲＮＡ分子を、細胞、好ましくは哺乳類の細胞等の真核生物の細胞に導入するための、当業者に公知の任意の方法を包含する。これらの方法は、例えばエレクトロポレーション、リポフェクション（例えば陽イオン性脂質またはリポソームに基づくもの）、リン酸カルシウム沈殿法、ナノ粒子に基づくトランスフェクション、ウイルスに基づくトランスフェクション、または陽イオンポリマー、例えばＤＥＡＥデキストランまたはポリエチレンイミン等、に基づくトランスフェクションを包含する。
（担体）
本発明に関して、担体は、典型的には別の化合物（カーゴ）の輸送および／または複合化を容易にし得る。担体は、カーゴと共有結合で、または非共有結合で結合してもよい。担体は核酸（例えばＲＮＡまたはＤＮＡ）を標的細胞に輸送し得る。いくつかの実施形態において、担体は、本明細書で規定されるような、カチオン性もしくはポリカチオン性の化合物、またはポリマーの担体でもよい。本発明に関して、担体は、好ましくは核酸分子の担体に適している、例えば生理的に許容される脂質への溶解、核酸分子またはベクターの輸送および細胞内取り込みを仲介するのに適している。したがって、本発明に関して、担体は、核酸分子またはベクターの貯蔵および輸送に適した構成要素であり得る。担体は、例えばカチオン性もしくはポリカチオン性の担体、またはトランスフェクション剤もしくは複合体化剤として作用する化合物であり得る。特に好ましくは、本発明に関して、担体または担体ポリマーは、カチオン性またはポリカチオン性の化合物である。
（カチオン性またはポリカチオン性の化合物／成分）
「カチオン性またはポリカチオン性の化合物／成分」という用語は、典型的には、荷電された分子であって、典型的にはｐＨ１から９において、より好ましくはｐＨ９以下（例えば５から９）、ｐＨ８以下（例えば５から８）、ｐＨ７以下（例えば５から７）、最も好ましくは生理的ｐＨ、例えば７．３から７．４において、正の電荷（カチオン）を有している分子を指す。したがって、カチオン性またはポリカチオン性の化合物／成分は、正の電荷を有する任意の化合物またはポリマーでもよく、好ましくはカチオン性またはポリカチオン性のペプチドまたはタンパク質であって、生理的条件、好ましくはｉｎ ｖｉｖｏの生理的条件下において電荷を有するペプチドまたはタンパク質である。「カチオン性のペプチドまたはタンパク質」は、少なくとも１価の正の電荷を有するアミノ酸、または２価以上の正の電荷を有するアミノ酸、例えばＡｒｇ、Ｈｉｓ、ＬｙｓまたはＯｒｎから選択されるアミノ酸を含んでいてもよい。したがって、「ポリカチオン性」の化合物は、特定の条件下で１価以上の正の電荷を示す範囲内である。本発明に関して、カチオン性のペプチドまたはタンパク質は、負の電荷を有するアミノ酸よりも多い数の正の電荷を有するアミノ酸、例えばＡｒｇ、Ｈｉｓ、ＬｙｓまたはＯｒｎを含む。好ましい実施形態において、本発明に関するカチオン性のペプチドまたはタンパク質は、他の残基よりも多い数の正の電荷を有するアミノ酸、例えばＡｒｇ、Ｈｉｓ、ＬｙｓまたはＯｒｎを含む。「カチオン性またはポリカチオン性の化合物」という用語は、本発明に関して、好ましくはトランスフェクション剤または複合体化剤として使用され得る、特に本発明に係る核酸に使用され得る化合物を指す。
本発明に係るカチオン性またはポリカチオン性の化合物であって、これに関して特に好ましい剤は、プロタミン、ヌクレオリン、スペルミンもしくはスペルミジン、またはポリＬリシン（ＰＬＬ）、ポリアルギニン、塩基性ポリペプチド、膜透過性ペプチド（ＣＰＰ）（ＨＩＶ結合ペプチドが挙げられる）、ＨＩＶ−１ Ｔａｔ（ＨＩＶ）、Ｔａｔ由来ペプチド、ペネトラチン、ＶＰ２２由来もしくは類縁体ペプチド、ＨＳＶ ＶＰ２２（単純ヘルペス）、ＭＡＰ、ＫＡＬＡもしくはタンパク質導入領域（ＰＴＤｓ）、ＰｐＴ６２０、プロリンリッチペプチド、アルギニンリッチペプチド、リシンリッチペプチド、ＭＰＧペプチド、Ｐｅｐ−１、Ｌ−オリゴマー、カルシトニンペプチド、アンテナペディア由来ペプチド（特にショウジョウバエ アンテナペディア）、ｐＡｎｔｐ、ｐＩｓｌ、ＦＧＦ、ラクトフェリン、トランスポータン、ブフォリン−２、Ｂａｃ７１５−２４、ＳｙｎＢ、ＳｙｎＢ（１）、ｐＶＥＣ、ｈＣＴ由来ペプチド、ＳＡＰ、もしくはヒストン等を包含する他のカチオン性のペプチドもしくはタンパク質である。プロタミンが特に好ましい。
さらに、トランスフェクション剤または複合体化剤として使用されるカチオン性またはポリカチオン性のタンパク質またはペプチドは、以下の全体式（ＩＩＩ）を有する以下のタンパク質またはペプチドから選択されてもよい。
(Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x, （式（ＩＩＩ））
ここで、ｌ＋ｍ＋ｎ＋ｏ＋ｘ＝８〜１５であり、また、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、ＨｉｓおよびＯｒｎの全含量がオリゴペプチドの全体のアミノ酸の少なくとも５０％に相当する場合には、ｌ、ｍ、ｎまたはｏはそれぞれ独立に０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４または１５から選択される任意の数であり得；ＸａａはＡｒｇ、Ｌｙｓ、ＨｉｓおよびＯｒｎ以外の天然（天然に生じる）または非天然アミノ酸から選択される任意のアミノ酸であり得；Ｘａａの全含量がオリゴペプチドの全アミノ酸の５０％を超えない場合には、ｘは０、１、２、３または４から選択される任意の数であり得る。これに関して特に好ましいカチオン性のペプチドは、例えばＡｒｇ７、Ａｒｇ８、Ａｒｇ９、Ｈ３Ｒ９、Ｒ９Ｈ３、Ｈ３Ｒ９Ｈ３、ＹＳＳＲ９ＳＳＹ、（ＲＫＨ）４、Ｙ（ＲＫＨ）２Ｒ等である。
さらに、トランスフェクション剤または複合体化剤として使用され得る、好ましいカチオン性またはポリカチオン性の化合物は、カチオン性多糖類（キトサン等）、ポリブレン、カチオン性ポリマー（ポリエチレンイミン（ＰＥＩ）等）、ＤＯＴＭＡ：［１−（２，３−シオレイルオキシ）プロピル）］−Ｎ，Ｎ，Ｎ−トリメチルアンモニウム塩化物、ＤＭＲＩＥ、ジ−Ｃ１４−アミジン、ＤＯＴＩＭ、ＳＡＩＮＴ、ＤＣ−Ｃｈｏｌ、ＢＧＴＣ、ＣＴＡＰ、ＤＯＰＣ、ＤＯＤＡＰ、ＤＯＰＥ：ジオレイルリン酸エタノール−アミン、ＤＯＳＰＡ、ＤＯＤＡＢ、ＤＯＩＣ、ＤＭＥＰＣ、ＤＯＧＳ：ジオクタデシルアミドグリシルスペラミン、ＤＩＭＲＩ:ジミリスト−オキシプロピルジメチルヒドロキシエチルアンモニウム臭化物、ＤＯＴＡＰ:ジオレオイルオキシ−３−（トリメチルアンモニオ）プロパン、ＤＣ−６−１４:Ｏ，Ｏ−ジテトラデカノイル−Ｎ−（α−トリメチルアンモニオアセチル）ジエタノ−ルアミン塩化物、ＣＬＩＰ１:ｒａｃ−［（２,３−ジオクタデシルオキシプロピル）（２−ヒドロキシエチル）］−ジメチルアンモニウム塩化物、ＣＬＩＰ６:ｒａｃ−［２（２,３−ジヘキサデシルオキシプロピル−オキシメチルオキシ）エチル］トリメチルアンモニウム、ＣＬＩＰ９:ｒａｃ−［２（２,３−ジヘキサデシルオキシプロピル−オキシスシニルオキシ）エチル］−トリメチルアンモニウム、オリゴフェクタミン、リポフェクタミン（登録商標）等のカチオン性脂質、またはカチオン性もしくはポリカチオン性ポリマー、例えばβアミノ酸ポリマー等の修飾ポリアミノ酸、もしくは逆転ポリアミド、ＰＶＰ（ポリ（Ｎ−エチル−４−ビニルピリジニウム臭化物））等の修飾ポリエチレン、ｐＤＭＡＥＭＡ（ポリジメチルアミノエチルメチルアクリレ−ト）等の修飾アクリレ−ト、ｐＡＭＡＭ（ポリ（アミドアミン））等の修飾アミドアミン、ジアミンおよび１,４ブタンジオールジアクリレート−コ−５−アミノ−１−ペンタノ−ルポリマ−等の修飾ポリベ−タアミノエステル（ＰＢＡＥ）、ポリプロピルアミンデンドリマ−もしくはｐＡＭＡＭを基にしたデンドリマ−等のデンドリマ−、ＰＥＩ：ポリ（エチレンイミン）、ポリ（プロピレンイミン）等のポリイミン、ポリアリルアミン、シクロデキストリンに基づくポリマー、デキストランに基づくポリマー、キトサン等の糖骨格に基づくポリマー、ＰＭＯＸＡ−ＰＤＭＳコポリマー等のシラン骨格に基づくポリマー、１つ以上のカチオン性のブロック（例えば上記のカチオン性ポリマーから選択される）および１つ以上の親水性もしくは疎水性のブロック（例えばポリエチレングリコ−ル）の組み合わせからなるブロックポリマ−、を包含し得る。
（ポリマー担体）
ポリマー担体は、典型的には、ポリマーにより形成される担体である。トランスフェクション剤または複合体形成剤として使用される、本発明の観点におけるポリマー担体は、ジスルフィド架橋されたカチオン性成分によって形成されたポリマー担体であり得る。ジスルフィド架橋されたカチオン性成分は、互いに同一であってもよいし、異なっていてもよい。ポリマー担体は、さらなる成分を含むこともできる。また、ポリマー担体は、カチオン性のペプチド、タンパク質またはポリマーの混合物、および任意で本明細書で規定されるさらなる成分（本明細書に記載されるジスルフィド結合によって架橋される）を含むことが特に好ましい。
この観点において、カチオン性成分は、ジスルフィド架橋によってポリマー担体のための基礎を形成するが、典型的には、本目的に適した任意の適切なカチオン性またはポリカチオン性のペプチド、タンパク質またはポリマーから選択され、特には、本発明に従って規定される核酸を複合体化することによって好ましくは当該核酸を凝縮させることができる任意のカチオン性またはポリカチオン性のペプチド、タンパク質またはポリマーから選択される。カチオン性またはポリカチオン性のペプチド、タンパク質またはポリマーは、好ましくは直鎖状の分子であるが、分枝状のカチオン性またはポリカチオン性のペプチド、タンパク質またはポリマーが用いられてもよい。
カチオン性またはポリカチオン性のペプチド、タンパク質またはポリマーのジスルフィド架橋のそれぞれは、例えば本発明のワクチン／阻害剤の組み合わせにおける少なくとも１つの抗原またはアジュバント核酸をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡを、複合体化するために用いられ得るが、本明細書で言及されるポリマー担体のカチオン性成分としての少なくとも１つのさらなるカチオン性またはポリカチオン性のペプチド、タンパク質またはポリマーと縮合するとジスルフィド結合を形成することができる、少なくとも１つの−ＳＨ部分（最も好ましくは、少なくとも１つのシステイン残基、または−ＳＨ部分を呈す任意のさらなる化学基）を含む。
上記で規定したとおり、ポリマー担体は、例えば本発明のワクチン／阻害剤の組み合わせにおける少なくとも１つの抗原またはアジュバント核酸をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡを、複合体化するために用いられ得るが、ジスルフィド架橋されたカチオン性（またはポリカチオン性）成分によって形成され得る。
１つの第一の選択肢によれば、ポリマー担体の少なくとも１つのカチオン性（またはポリカチオン性）成分は、当該観点において用いられ得るが、カチオン性またはポリカチオン性のペプチドまたはタンパク質から選択され得る。そのようなカチオン性またはポリカチオン性のペプチドまたはタンパク質は、約３〜１００アミノ酸長、好ましくは約３〜５０アミノ酸長、より好ましくは約３〜２５アミノ酸長、例えば、約３〜１０、５〜１５、１０〜２０、または１５〜２０アミノ酸長を好ましくは示す。代わりに、または、追加的に、そのようなカチオン性またはポリカチオン性のペプチドまたはタンパク質は、約０．０１ｋＤａ〜約１００ｋＤａの分子量（約０．５ｋＤａ〜約１００ｋＤａの分子量、好ましくは約１０ｋＤａ〜約５０ｋＤａの分子量、さらにより好ましくは約１０ｋＤａ〜約３０ｋＤａの分子量が挙げられる）を示し得る。
ポリマー担体のカチオン性成分が、例えば本発明のワクチン／阻害剤の組み合わせにおける少なくとも１つの抗原またはアジュバント核酸をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡを、複合体化するために用いられ得るが、カチオン性またはポリカチオン性のペプチドまたはタンパク質を含む、特定の場合において、ポリマー担体が全体的にカチオン性またはポリカチオン性のペプチドまたはタンパク質から構成されるのであれば、ポリマー担体全体のカチオン性またはポリカチオン性のペプチドまたはタンパク質のカチオン特性は、そのカチオン性アミノ酸の含量によって決められ得る。好ましくは、カチオン性もしくはポリカチオン性のペプチドもしくはタンパク質における、またはポリマー担体全体（ポリマー担体が全体的にカチオン性またはポリカチオン性のペプチドまたはタンパク質から構成される場合）における、全てのアミノ酸（例えば、カチオン性アミノ酸、親油性アミノ酸、親水性アミノ酸、芳香族性アミノ酸およびさらなるアミノ酸）の含量を１００％とした場合、カチオン性もしくはポリカチオン性のペプチドもしくはタンパク質、および／または、ポリマー担体における、カチオン性アミノ酸の含量は、少なくとも１０％、２０％または３０％であり、好ましくは少なくとも４０％であり、より好ましくは少なくとも５０％、６０％または７０％であるが、また、少なくとも８０％、９０％、または、さらに９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくは１００％、最も好ましくは少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％もしくは１００％であり、あるいは、約１０％〜９０％の範囲内、より好ましくは約１５％〜７５％の範囲内、さらにより好ましくは約２０％〜５０％の範囲内（例えば、２０、３０、４０または５０％）であってもよく、あるいは、前述の値のうちの任意の２つによって形成される範囲内であってもよい。
好ましくは、ポリマー担体のそのようなカチオン性またはポリカチオン性のペプチドまたはタンパク質は、少なくとも１つの−ＳＨ部分を含む、または含むように追加的に修飾されているが、プロタミン、ヌクレオリン、スペルミンまたはスペルミジン、オリゴまたはポリＬ−リシン（ＰＬＬ）、塩基性ポリペプチド、オリゴまたはポリアルギニン、細胞透過性ペプチド（ＣＰＰ）、トランスポータンなどのキメラＣＰＰ、またはＭＰＧペプチド、ＨＩＶ結合ペプチド、Ｔａｔ、ＨＩＶ−１ Ｔａｔ（ＨＩＶ）、Ｔａｔ誘導ペプチド、ペネトラチンファミリーのメンバー、例えば、ペネトラチン、アンテナペディア誘導ペプチド（特にＤｒｏｓｏｐｈｉｌａ ａｎｔｅｎｎａｐｅｄｉａ由来）、ｐＡｎｔｐ、ｐＩｓｌなど、抗菌剤由来ＣＰＰ（ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ−ｄｅｒｉｖｅｄ ＣＰＰ）、例えば、ブフォリン（Ｂｕｆｏｒｉｎ）−２、Ｂａｃ７１５−２４、ＳｙｎＢ、ＳｙｎＢ（１）、ｐＶＥＣ、ｈＣＴ由来ペプチド、ＳＡＰ、ＭＡＰ、ＫＡＬＡ、ＰｐＴＧ２０、ロリゴメレ（Ｌｏｌｉｇｏｍｅｒｅ）、ＦＧＦ、ラクトフェリン、ヒストン、ＶＰ２２由来ペプチドまたはＶＰ２２類似体ペプチド、ペスチウイルスＥｒｎｓ、ＨＳＶ、ＶＰ２２（単純ヘルペス）、ＭＡＰ、ＫＡＬＡ、またはタンパク質トランスダクションドメイン（ＰＴＤ）、ＰｐＴ６２０、プロリンリッチペプチド、アルギニンリッチペプチド、リシンリッチペプチド、Ｐｅｐ−１、Ｌ−オリゴマー、カルシトニンペプチド等から選択されるが、それらに制限されない。
代わりに、または、追加的に、ポリマー担体のそのようなカチオン性またはポリカチオン性のペプチドまたはタンパク質は、少なくとも１つの−ＳＨ部分を含む、または含むように追加的に修飾されているが、以下の和の式（ＩＶ）を有する以下のカチオン性ペプチドから選択される（これに制限されない）：
{(Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x}; 式（ＩＶ）
ここで、ｌ＋ｍ＋ｎ＋ｏ＋ｘ＝３〜１００であり、ｌ、ｍ、ｎ、またはｏは互いに独立に、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１〜３０、３１〜４０、４１〜５０、５１〜６０、６１〜７０、７１〜８０、８１〜９０、および９１〜１００から選択される任意の数であり、ただし、Ａｒｇ（アルギニン）、Ｌｙｓ（リシン）、Ｈｉｓ（ヒスチジン）、およびＯｒｎ（オルニチン）の全含量は、オリゴペプチドの全アミノ酸の少なくとも１０％を占め；Ｘａａは、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、またはＯｒｎを除く天然の（＝天然に存在する）または非天然のアミノ酸から選択される任意のアミノ酸であり；ｘは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１〜３０、３１〜４０、４１〜５０、５１〜６０、６１〜７０、７１〜８０、８１〜９０から選択される任意の数であり、ただし、Ｘａａの全含量は、オリゴペプチドの全アミノ酸の９０％を超えない。アミノ酸Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｏｒｎ、およびＸａａの何れも、ペプチドの任意の場所に位置し得る。この観点において、７〜３０アミノ酸の範囲内のカチオン性のペプチドまたはタンパク質が特に好適である。この式のさらにより好適なペプチドは、オリゴアルギニン（例えば、Ａｒｇ７、Ａｒｇ８、Ａｒｇ９、Ａｒｇ１２、Ｈｉｓ３Ａｒｇ９、Ａｒｇ９Ｈｉｓ３、Ｈｉｓ３Ａｒｇ９Ｈｉｓ３、Ｈｉｓ６Ａｒｇ９Ｈｉｓ６、Ｈｉｓ３Ａｒｇ４Ｈｉｓ３、Ｈｉｓ６Ａｒｇ４Ｈｉｓ６、ＴｙｒＳｅｒ２Ａｒｇ９Ｓｅｒ２Ｔｙｒ、（ＡｒｇＬｙｓＨｉｓ）４、Ｔｙｒ（ＡｒｇＬｙｓＨｉｓ）２Ａｒｇなど）である。
さらなる特定の好適な一実施形態によれば、ポリマー担体のカチオン性またはポリカチオン性のペプチドまたはタンパク質は、上記に示した式{(Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x}（式（ＩＶ））によって規定され且つ少なくとも１つの−ＳＨ部分を含む、または含むようにさらに修飾されている場合、部分式（ＩＶａ）から選択されてもよい（これに制限されない）：
{(Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa’)x(Cys)y} 式（ＩＶａ）
ここで、（Ａｒｇ）ｌ；（Ｌｙｓ）ｍ；（Ｈｉｓ）ｎ；（Ｏｒｎ）ｏ；およびｘは、本明細書で規定したとおりであり、Ｘａａ’は、Ａｒｇ、Ｌｙｓ、Ｈｉｓ、Ｏｒｎ、またはＣｙｓを除く天然の（＝天然に存在する）または非天然のアミノ酸から選択される任意のアミノ酸であり、ｙは、０、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１〜３０、３１〜４０、４１〜５０、５１〜６０、６１〜７０、７１〜８０、および８１〜９０から選択される任意の数であり、ただし、Ａｒｇ（アルギニン）、Ｌｙｓ（リシン）、Ｈｉｓ（ヒスチジン）、およびＯｒｎ（オルニチン）の全含量は、オリゴペプチドの全アミノ酸の少なくとも１０％を占める）。
この実施形態は、ポリマー担体のカチオン性またはポリカチオン性のペプチドまたはタンパク質が、例えば、上記に示した経験式（Ａｒｇ）ｌ；（Ｌｙｓ）ｍ；（Ｈｉｓ）ｎ；（Ｏｒｎ）ｏ；（Ｘａａ）ｘ（式（ＩＶ））によって規定される場合に、上記意味において−ＳＨ部分として少なくとも１つのシステインを含み、またはこれらで修飾されており、その結果、カチオン性成分としてのカチオン性またはポリカチオン性ペプチドが、ポリマー担体の他の成分とジスルフィド結合を形成することができる少なくとも１つのシステインを担持する状況に適用してもよい。
別の特定の好適な実施形態によれば、ポリマー担体のカチオン性またはポリカチオン性のペプチドまたはタンパク質は、上記に示した式｛（Ａｒｇ）ｌ；（Ｌｙｓ）ｍ；（Ｈｉｓ）ｎ；（Ｏｒｎ）ｏ；（Ｘａａ）ｘ｝（式（ＩＶ））によって規定される場合に、部分式（ＩＶｂ）から選択されてもよい（これに制限されない）：
Cys1 {(Arg)l;(Lys)m;(His)n;(Orn)o;(Xaa)x} Cys2 式（ＩＶｂ）
ここで、経験式｛（（Ａｒｇ）ｌ；（Ｌｙｓ）ｍ；（Ｈｉｓ）ｎ；（Ｏｒｎ）ｏ；（Ｘａａ）ｘ｝（式（ＩＶ））は、本明細書で規定したとおりであり、（半経験的な）式（ＩＶ）によるアミノ酸配列のコアを形成し、Ｃｙｓ１およびＣｙｓ２は、（Ａｒｇ）ｌ；（Ｌｙｓ）ｍ；（Ｈｉｓ）ｎ；（Ｏｒｎ）ｏ；（Ｘａａ）ｘの近位または末端のシステインである。この実施形態は、ポリマー担体のカチオン性またはポリカチオン性のペプチドまたはタンパク質が、例えば、上記に示した経験式（Ａｒｇ）ｌ；（Ｌｙｓ）ｍ；（Ｈｉｓ）ｎ；（Ｏｒｎ）ｏ；（Ｘａａ）ｘ（式（ＩＶ））によって規定される場合に、上記意味において−ＳＨ部分として少なくとも２つのシステインで修飾されており、その結果、本発明のポリマー担体のカチオン性またはポリカチオン性ペプチドが、ポリマー担体の他の成分とジスルフィド結合を形成することができる少なくとも２つの（末端）システインを担持する状況に適用してもよい。
第２の選択肢によれば、ポリマー担体の少なくとも１つのカチオン性（またはポリカチオン性）成分は、例えば、この観点において適当な任意の（非ペプチド性）カチオン性またはポリカチオン性ポリマーから選択されてもよく、ただし、この（非ペプチド性）カチオン性またはポリカチオン性ポリマーは、少なくとも１つの−ＳＨ部分を呈し、または呈するように修飾されており、−ＳＨ部分は、カチオン性またはポリカチオン性ポリマーを本明細書で規定されるポリマー担体の別の成分と連結するジスルフィド結合を与える。したがって、本明細書で規定したのと同様に、ポリマー担体は、同じまたは異なるカチオン性またはポリカチオン性ポリマーを含んでもよい。
ポリマー担体のカチオン性成分が（非ペプチド性）カチオン性またはポリカチオン性ポリマーを含む特定の場合において、（非ペプチド性）カチオン性またはポリカチオン性ポリマーのカチオン特性は、カチオン性ポリマーの成分の全電荷と比較した場合のカチオン性電荷のその含量によって決定され得る。好ましくは、カチオン性ポリマー全体における全電荷（例えば、本明細書で規定される（生理的）ｐＨにおける正電荷および負電荷）の含量を１００％とすると、本明細書で規定される（生理的）ｐＨにおけるカチオン性ポリマー中のカチオン性電荷の含量は、少なくとも１０％、２０％、または３０％、好ましくは少なくとも４０％、より好ましくは少なくとも５０％、６０％、または７０％であるが、やはり好ましくは、少なくとも８０％、９０％、またはさらに９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％であり、最も好ましくは、少なくとも３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、もしくは１００％であり、または約１０％〜９０％の範囲内、より好ましくは約３０％〜１００％の範囲内、さらに好ましくは約５０％〜１００％の範囲内（例えば、５０、６０、７０、８０％、９０％、もしくは１００％）、または前述の値のうちの任意の２つによって形成される範囲内であってもよい。
好ましくは、ポリマー担体の（非ペプチド性）カチオン性成分は、典型的には、約０．１もしくは０．５ｋＤａ〜約１００ｋＤａ、好ましくは約１ｋＤａ〜約７５ｋＤａ、より好ましくは約５ｋＤａ〜約５０ｋＤａ、さらに好ましくは約５ｋＤａ〜約３０ｋＤａの分子量、または約１０ｋＤａ〜約５０ｋＤａ、さらに好ましくは約１０ｋＤａ〜約３０ｋＤａの分子量を呈する、カチオン性またはポリカチオン性ポリマーを表す。さらに、（非ペプチド性）カチオン性またはポリカチオン性ポリマーは、典型的には、少なくとも１つの−ＳＨ部分を呈し、これは、本明細書で規定されるポリマー担体の他のカチオン性成分または他の成分と縮合するとジスルフィド結合を形成することができる。
上記状況において、ポリマー担体の（非ペプチド性）カチオン性成分は、例えば本発明のワクチン／阻害剤の組み合わせにおける少なくとも１つの抗原またはアジュバント核酸をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡを、複合体化するために用いられ得るが、アクリレート、ｐＤＭＡＥＭＡ（ポリ（ジメチルアミノエチルメチルアクリレート））等の修飾アクリレート、キトサン、アジリジン、または２−エチル−２−オキサゾリン（オリゴエチレンイミン、もしくは修飾オリゴエチレンイミンを形成する）、オリゴβアミノエステルもしくはポリアミドアミンを形成するビスアクリレートとアミンとの反応によって得られるポリマー、または他のポリマー（ポリエステル、ポリカーボネート等）等から選択されてもよい。これらの（非ペプチド性）カチオン性またはポリカチオン性ポリマーの各分子は、典型的には、少なくとも１つの−ＳＨ部分を呈し、これらの少なくとも１つの−ＳＨ部分は、化学修飾（例えば、イミノチオラン、３−チオプロピオン酸を使用する）または−ＳＨ部分含有アミノ酸（システインもしくは任意のさらなる（修飾）アミノ酸等）の導入によって、（非ペプチド性）カチオン性またはポリカチオン性のポリマー中に導入されてもよい。そのような−ＳＨ部分は、好ましくは上記で既に規定したとおりである。
特に好適な実施形態によれば、さらなる成分は、ポリマー担体中に含まれていてもよいし、ポリマー担体の基礎を形成する異なる（短い）カチオン性もしくはポリカチオン性のペプチドもしくは（非ペプチド性）ポリマー、または本明細書で規定されるポリマー担体の生物物理学的／生化学的特性を改変するために用いられてもよいが、アミノ酸成分（ＡＡ）である。本発明によれば、アミノ酸成分（ＡＡ）は、好ましくは約１〜１００の範囲内の、好ましくは約１〜５０の範囲内の、より好ましくは１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４もしくは１５〜２０を含む数から選択される、または前述の値のうちの任意の２つによって形成される範囲から選択されてもよい、アミノ酸数を含む。この観点において、アミノ酸成分（ＡＡ）のアミノ酸は、互いに独立して選ばれ得る。例えば、ポリマー担体中に２つ以上の（ＡＡ）成分が存在する場合、これらは、互いに同じであってもよいし、異なっていてもよい。
アミノ酸成分（ＡＡ）は、−ＳＨ含有部分を含有してもよいし、−ＳＨ含有部分によって（例えば、末端に）配置されていてもよく、この−ＳＨ含有部分は、本明細書で規定されるポリマー担体中にジスルフィド結合を介してこの成分（ＡＡ）を導入することを可能にする。−ＳＨ含有部分がシステインを表す特定の場合において、アミノ酸成分（ＡＡ）は、−Ｃｙｓ−（ＡＡ）−Ｃｙｓ−と読むこともでき、ここで、Ｃｙｓは、システインを表し、ジスルフィド結合に必要な−ＳＨ部分を提供する。−ＳＨ含有部分は、カチオン性成分またはその成分の何れかについて上記に示した修飾または反応の何れかを用いて、アミノ酸成分（ＡＡ）中に導入されてもよい。
さらに、例えば、アミノ酸成分（ＡＡ）が２つのさらなる成分の間のリンカーとして（例えば、２つのカチオン性ポリマーの間のリンカーとして）用いられる場合、アミノ酸成分（ＡＡ）は、ジスルフィド結合を介して２つの機能性部に結合することを可能にするために、例えば式ＨＳ−（ＡＡ）−ＳＨによって表される形において、２つの−ＳＨ部分（または、さらに多く）が備わっていてもよい。
あるいは、アミノ酸成分（ＡＡ）は、ポリマー担体の他の成分について既に上述した他の機能性が備わっていてもよく、これは、アミノ酸成分（ＡＡ）がポリマー担体の何れかの成分と結合することを可能にする。
したがって、本発明によれば、ポリマー担体のアミノ酸成分（ＡＡ）は、ポリマー担体のさらなる成分と結合され得るが、これは、例えば本発明のワクチン／阻害剤における少なくとも１つの抗原またはアジュバント核酸をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡを、ジスルフィド結合を用いて、またはジスルフィド結合を用いずに、複合体化するために用いられ得る。
さらなる特に好ましい選択肢によれば、アミノ酸成分（ＡＡ）は、ポリマー担体（特に、上記に規定したポリマー担体中のカチオン性成分の含量）を改変するために用いられ得る。
本発明の観点において、アミノ酸成分（ＡＡ）は、以下の選択肢から選択されてもよい：芳香族アミノ酸成分、親水性の（好ましくは帯電していない極性の）アミノ酸成分、親油性アミノ酸成分、または弱塩基性アミノ酸成分。
さらなる選択肢によれば、アミノ酸成分（ＡＡ）は、シグナルペプチドまたはシグナル配列、局在化シグナルまたは配列、核局在化シグナルまたは配列（ＮＬＳ）、抗体、細胞透過性ペプチド（例えば、ＴＡＴ）等であってもよい。さらに、別の選択肢によれば、アミノ酸成分（ＡＡ）は、機能的なペプチドまたはタンパク質であってもよく、これは、それ相当にポリマー担体の機能性を調節し得る。アミノ酸成分（ＡＡ）としてのこのような機能的なペプチドまたはタンパク質は、本明細書で規定される（例えば、抗体として本明細書で規定される）任意のペプチドまたはタンパク質を含むことが好ましい。一選択肢によれば、このようなさらなる機能的なペプチドまたはタンパク質は、輸送のためのいわゆる細胞透過性ペプチド（ＣＰＰ）またはカチオン性ペプチドを含んでもよい。
最後の選択肢によれば、アミノ酸成分（ＡＡ）は、細胞内で任意の好都合な機能を実行することができる任意のペプチドまたはタンパク質からなってもよいし、当該ペプチドまたはタンパク質を含んでもよい。特に好適なのは、治療的に活性なタンパク質もしくはペプチドから、抗原（例えば、腫瘍抗原、病原性抗原（例えば、動物抗原、ウイルス抗原、原虫抗原、細菌性抗原）から、抗体から、免疫賦活性のタンパク質もしくはペプチドから、抗原特異的Ｔ細胞受容体から、または特定の（治療的）用途に適した任意の他のタンパク質もしくはペプチドから選択される、ペプチドまたはタンパク質である。特に好ましいのは、本発明のワクチン／阻害剤の組み合わせにおける少なくとも１つの抗原をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡによってコードされる抗原に由来するペプチドエピトープである。
ポリマー担体は、例えば本発明のワクチン／阻害剤の組み合わせにおける少なくとも１つの抗原またはアジュバント核酸をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡを、複合体化するために用いられ得るが、上述したカチオン性もしくはポリカチオン性のペプチド、タンパク質、もしくはポリマー、またはさらなる成分（例えば、（ＡＡ））のうちの少なくとも１つを含んでもよく、ここで上記選択肢の何れも、互いに組み合わせてもよく、また、これらの−ＳＨ部分を介した縮重合反応においてこれらを重合することによって形成されてもよい。
さらに、ポリマー担体は、一般式（Ｖ）によるポリマー担体分子から選択されてもよい：
Ｌ−Ｐ１−Ｓ−［Ｓ−Ｐ２−Ｓ］ｎ−S−Ｐ３−Ｌ 式（Ｖ）
ここで、Ｐ１およびＰ３は、互いに異なるかまたは同一であり、直鎖状または分枝状の親水性ポリマー鎖を表し、Ｐ１およびＰ３はそれぞれ、成分Ｐ２との縮合、あるいは、（ＡＡ）、（ＡＡ）ｘもしくは［（ＡＡ）ｘ］ｚ（そのような成分がＰ１とＰ２との間またはＰ３とＰ２との間のリンカーとして使用される場合）との縮合、および／または、さらなる成分（例えば、（ＡＡ）、（ＡＡ）ｘ、［（ＡＡ）ｘ］ｚまたはＬ）との縮合によって、ジスルフィド結合を形成することが可能な、少なくとも１つの−ＳＨ部分を呈し、上記直鎖状または分枝状の親水性ポリマー鎖は、互いに独立して、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、ポリ−Ｎ−（２−ヒドロキシプロピル）メタクリルアミド、ポリ−２−（メタクリロイルオキシ）エチルホスホリルコリン、ポリ（ヒドロキシアルキルＬ−アスパラギン）、ポリ（２−（メタクリロイルオキシ）エチルホスホリルコリン）、ヒドロキシエチルデンプン、またはポリ（ヒドロキシアルキルＬ−グルタミン）から選択され、上記親水性ポリマー鎖は、約１ｋＤａ〜約１００ｋＤａ、好ましくは約２ｋＤａ〜約２５ｋＤａ、より好ましくは約２ｋＤａ〜約１０ｋＤａ、例えば約５ｋＤａ〜約２５ｋＤａまたは５ｋＤａ〜約１０ｋＤａの分子量を示し；
Ｐ２は、好ましくは約３〜約１００アミノ酸長を有し、より好ましくは約３〜約５０アミノ酸長を有し、さらにより好ましくは約３〜約２５アミノ酸長、例えば、約３〜１０アミノ酸長、５〜１５アミノ酸長、１０〜２０アミノ酸長、または１５〜２５アミノ酸長、より好ましくは約５〜約２０アミノ酸長、さらにより好ましくは約１０〜約２０アミノ酸長を有する、カチオン性またはポリカチオン性のペプチドまたはタンパク質（例えば、ジスルフィド架橋されたカチオン性成分によって形成されたポリマー性担体に関して本明細書で規定されるような）であるか、または、
Ｐ２は、典型的には約０．５ｋＤａ〜約３０ｋＤａの分子量（約１ｋＤａ〜約２０ｋＤａ、さらに好ましくは約１．５ｋＤａ〜約１０ｋＤａの分子量を含む）を有するか、または、約０．５ｋＤａ〜約１００ｋＤａの分子量（約１０ｋＤａ〜約５０ｋＤａ、さらに好ましくは約１０ｋＤａ〜約３０ｋＤａの分子量を含む）を有する、カチオン性またはポリカチオン性のポリマー（例えば、ジスルフィド架橋されたカチオン性成分によって形成されたポリマー性担体に関して本明細書で規定されるような）であり、
各Ｐ２は、さらなる成分Ｐ２または成分Ｐ１および／もしくは成分Ｐ３との縮合、あるいは、さらなる成分（例えば、（ＡＡ）、（ＡＡ）ｘ、または［（ＡＡ）ｘ］ｚ）との縮合により、ジスルフィド結合を形成することが可能な、少なくとも２つの−ＳＨ部分を呈し；
−Ｓ−Ｓ−は、（可逆の）ジスルフィド結合（読み易くするために括弧は省略されている）であり、Ｓは、好ましくは、硫黄、または（可逆の）ジスルフィド結合を形成した−ＳＨ担持部分を表す。上記（可逆の）ジスルフィド結合は、好ましくは、成分Ｐ１および成分Ｐ２、成分Ｐ２および成分Ｐ２、もしくは成分Ｐ２および成分Ｐ３、または、任意で本明細書で規定されるさらなる成分（例えば、Ｌ、（ＡＡ）、（ＡＡ）ｘ、［（ＡＡ）ｘ］ｚ等）、の何れかの−ＳＨ部分の縮合によって形成される。上記−ＳＨ部分は、これらの成分の構造の一部であってもよいし、以下で規定する修飾によって付加されてもよい；
Ｌは、存在してもしなくてもよい任意のリガンドであり、互いに独立して、ＲＧＤ、トランスフェリン、葉酸、シグナルペプチドもしくはシグナル配列、局在化シグナルもしくは局在化配列、核酸局在化シグナルもしくは核酸局在化配列（ＮＬＳ）、抗体、細胞透過性ペプチド（例えば、ＴＡＴまたはＫＡＬＡ）、受容体のリガンド（例えば、サイトカイン、ホルモン、成長因子等）、小分子（例えば、マンノースもしくはガラクトース等の炭水化物、または合成リガンド）、小分子アゴニスト、受容体の阻害剤もしくはアンタゴニスト（例えば、ＲＧＤペプチド模倣薬類似体）、または本明細書に規定される任意のさらなるタンパク質から選択されてもよく；
ｎは、典型的には、約１〜５０の範囲、好ましくは約１、２もしくは３〜３０の範囲、より好ましくは約１、２、３、４もしくは５〜２５の範囲、約１、２、３、４もしくは５〜２０の範囲、約１、２、３、４もしくは５〜１５の範囲、または約１、２、３、４もしくは５〜１０の範囲（例えば、約４〜９、４〜１０、３〜２０、４〜２０、５〜２０もしくは１０〜２０の範囲、または、約３〜１５、４〜１５、５〜１５もしくは１０〜１５の範囲、または約６〜１１もしくは７〜１０の範囲を含む）から選択される整数である。最も好ましくは、ｎは、約１、２、３、４または５〜１０の範囲、より好ましくは約１、２、３もしくは４〜９の範囲、約１、２、３もしくは４〜８の範囲、または約１、２もしくは３〜７の範囲である。
親水性ポリマーＰ１およびＰ３はそれぞれ、典型的には、少なくとも１つの−ＳＨ部分を呈し、ここで、例えば２つ以上の−ＳＨ部分が含まれている場合には、上記少なくとも１つの−ＳＨ部分は、成分Ｐ２または成分（ＡＡ）もしくは成分（ＡＡ）ｘ（下記に規定されるＰ１とＰ２との間、またはＰ３とＰ２との間のリンカーとして使用される場合）との反応、および、任意でさらなる成分（例えば、Ｌ、および／または（ＡＡ）もしくは（ＡＡ）ｘ等）との反応によってジスルフィド結合を形成することが可能である。上記一般式（Ｖ）中の以下の部分式「Ｐ１−Ｓ−Ｓ−Ｐ２」および「Ｐ２−Ｓ−Ｓ−Ｐ３」（読み易くするために括弧は省略されている）（Ｓ、Ｐ１およびＰ３は何れも本明細書で規定されるとおりである）は、典型的には、親水性ポリマーＰ１およびＰ３の１つの−ＳＨ部分が、上記一般式（Ｖ）の成分Ｐ２の１つの−ＳＨ部分と縮合しており、これらの−ＳＨ部分の両方の硫黄が式（Ｖ）において本明細書で規定されるジスルフィド結合−Ｓ−Ｓ−を形成する場合を表している。これらの−ＳＨ部分は、典型的には、各々の親水性ポリマーＰ１およびＰ３によって（例えば、内部システイン、または−ＳＨ部分を担持する任意のさらなる（修飾）アミノ酸もしくはアミノ化合物を介して）提供される。したがって、部分式「Ｐ１−Ｓ−Ｓ−Ｐ２」および「Ｐ２−Ｓ−Ｓ−Ｐ３」はまた、−ＳＨ部分がシステインによって提供される場合には、「Ｐ１−Ｃｙｓ−Ｃｙｓ−Ｐ２」および「Ｐ２−Ｃｙｓ−Ｃｙｓ−Ｐ３」と記載されてもよく、ここで、Ｃｙｓ−Ｃｙｓの表現は、ペプチド結合ではなくジスルフィド結合を介して連結された２つのシステインを表す。この場合、これらの式における「−Ｓ−Ｓ−」の表現はまた、「−Ｓ−Ｃｙｓ」、「−Ｃｙｓ−Ｓ」または「−Ｃｙｓ−Ｃｙｓ−」と記載されてもよい。この観点において、「−Ｃｙｓ−Ｃｙｓ−」の表現は、ペプチド結合ではなく、それらの−ＳＨ部分を介してジスルフィド結合を形成する２つのシステインの結合を表す。したがって、「−Ｃｙｓ−Ｃｙｓ−」の表現はまた、概して、「−（Ｃｙｓ−Ｓ）−（Ｓ−Ｃｙｓ）−」として理解されてもよく、ここで、特定の場合には、Ｓはシステインの−ＳＨ部分の硫黄を指す。同様に、「−Ｓ−Ｃｙｓ」および「−Ｃｙｓ−Ｓ」の表現は、−ＳＨ含有部分とシステインとの間のジスルフィド結合を指し、これらは、「−Ｓ−（Ｓ−Ｃｙｓ）」および「−（Ｃｙｓ−Ｓ）−Ｓ」と記載されてもよい。あるいは、親水性ポリマーＰ１およびＰ３は、各々の親水性ポリマーＰ１およびＰ３が少なくとも１つのそのような−ＳＨ部分を担持するように、好ましくは−ＳＨ部分を担持する化合物との化学反応を介して、−ＳＨ部分で修飾されていてもよい。そのような−ＳＨ部分を担持する化合物は、例えば、（付加的な）システイン、またはＳＨ部分を担持する任意のさらなる（修飾）アミノ酸であってもよい。そのような化合物はまた、本明細書で規定される親水性ポリマーＰ１およびＰ３への−ＳＨ部分を含む、または導入させる任意の非アミノ化合物または非アミノ部分であってもよい。そのような非アミノ化合物は、例えば、３−チオプロピオン酸もしくはチオイモラン（ｔｈｉｏｉｍｏｌａｎｅ）の結合による、アミド形成（例えば、カルボン酸、スルホン酸、アミン等）による、マイケル付加（例えば、マレインイミド部分、α，β−不飽和カルボニル等）による、クリック化学（例えば、アジドまたはアルキン）による、アルケン／アルキンメタセシス（例えば、アルケンまたはアルキン）、イミンまたはヒドラゾン形成（アルデヒドまたはケトン、ヒドラジン、ヒドロキシルアミン、アミン）、錯体形成反応（アビジン、ビオチン、プロテインＧ）、またはＳｎ型置換反応をさせる成分（例えば、ハロゲン化アルカン、チオール、アルコール、アミン、ヒドラジド、スルホン酸エステル、オキシホスホニウム塩）またはさらなる成分の連結に利用できる他の化学的部分による、化合物の化学反応または結合を介して、本発明に係るポリマー担体の式（ＶＩ）の親水性ポリマーＰ１およびＰ３に連結されていてもよい。この観点において特に好ましいＰＥＧ誘導体は、α−メトキシ−ω−メルカプトポリ（エチレングリコール）である。それぞれの場合において、ＳＨ部分（例えば、システインまたは任意のさらなる（修飾）アミノ酸もしくは化合物のＳＨ部分）は、親水性ポリマーＰ１およびＰ３の任意の位置における末端または内部に存在していてもよい。本明細書で規定されるように、各々の親水性ポリマーＰ１およびＰ３は、典型的には、少なくとも１つの−ＳＨ部分（好ましくは１つの末端における）を呈するが、２つまたはそれ以上の−ＳＨ部分を含んでいてもよく、これらは、本明細書で規定されるさらなる成分（好ましくは、さらなる機能性ペプチドまたはタンパク質（例えば、リガンド、アミノ酸成分（ＡＡ）もしくは（ＡＡ）ｘ、抗体、細胞透過性ペプチドまたはエンハンサーペプチド（例えば、ＴＡＴ、ＫＡＬＡ）等））を追加で付加するために用いられてもよい。
本発明のポリマー担体の全体式（Ｖ）の観点において、好ましくは以下のように規定され得る：
Ｌ−Ｐ１−Ｓ−［Ｃｙｓ−Ｐ２−Ｃｙｓ］n−Ｓ−Ｐ３−Ｌ 式（ＶＩ）
ここで、Ｌ、Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３およびｎは、本明細書で規定されるものであり、Ｓは、硫黄であり、各Ｃｙｓは、ジスルフィド結合のための１つの−ＳＨ部分を提供する。
式（ＶまたはＶＩ）のポリマー担体中のアミノ酸成分（ＡＡ）または（ＡＡ）ｘ（例えば、ジスルフィド架橋されたカチオン性成分によって形成されたポリマー担体について上記で規定されるもの）はまた、混合された反復アミノ酸成分［（ＡＡ）ｘ］ｚとして存在してもよく、ここで、アミノ酸成分（ＡＡ）または（ＡＡ）ｘの数は、さらに整数ｚで規定される。この観点において、ｚは、約１〜３０の範囲、好ましくは約１〜１５の範囲、より好ましくは１〜１０または１〜５の範囲から選択されてもよく、さらにより好ましくは１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４もしくは１５から選択される数から選択されてもよいし、前述の値のうちの任意の２つによって形成される範囲から選択されてもよい。
特定の特に好ましい選択肢によれば、アミノ酸成分（ＡＡ）または（ＡＡ）ｘ（好ましくは、Ｓ−（ＡＡ）ｘ−Ｓまたは［Ｓ−（ＡＡ）ｘ−Ｓ］と記載される）は、成分Ｐ２（特に、上記式（Ｖ）のポリマー担体の反復成分［Ｓ−Ｐ２−Ｓ］ｎ中の成分Ｓ−Ｐ２−Ｓの内容物）を修飾するために用いられてもよい。これは、式（ＶＩ）に係るポリマー担体全体の観点において、例えば、以下の式（ＶＩａ）で表され得る：
L-P1-S-{[S-P2-S]a[S-(AA)x-S]b}-S-P3-L, 式（ＶＩａ）
ここで、ｘ、Ｓ、Ｌ、ＡＡ、Ｐ１、Ｐ２およびＰ３は、好ましくは本明細書で規定されるものである。上記式（ＶＩａ）において、単一成分［Ｓ−Ｐ２−Ｓ］および［Ｓ−（ＡＡ）ｘ−Ｓ］の何れが、部分式｛［Ｓ−Ｐ２−Ｓ］ａ［Ｓ−（ＡＡ）ｘ−Ｓ］ｂ｝においてどのような順番で存在してもよい。部分式｛［Ｓ−Ｐ２−Ｓ］ａ［Ｓ−（ＡＡ）ｘ−Ｓ］ｂ｝における単一成分［Ｓ−Ｐ２−Ｓ］および［Ｓ−（ＡＡ）ｘ−Ｓ］の数は、整数ａおよびｂによって決まり、ここでａ＋ｂ＝ｎである。ｎは、整数であり、式（Ｖ）についての上記のように規定される。
別の実施形態によれば、ポリマー担体は、例えば、上述のカチオン性またはポリカチオン性のペプチド、タンパク質、もしくはポリマー、またはさらなる成分（例えば（ＡＡ））の、例えば本発明のワクチン／阻害剤の組み合わせまたはその単一の成分における少なくとも１つの抗原またはアジュバント核酸をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡを、複合体化するために用いられ得るが、リガンド（好ましくは炭水化物、より好ましくは糖、さらにより好ましくはマンノース）でさらに修飾されていてもよい。
特定の一実施形態によれば、ポリマー担体全体は、第１段階における、（少なくとも１つの）上述のカチオン性またはポリカチオン性のペプチド、タンパク質もしくはポリマー、またはさらなる成分（例えば（ＡＡ））の、それらの−ＳＨ部分を介した縮重合、および、第２段階における、例えば本発明のワクチン／阻害剤の組み合わせにおける少なくとも１つの抗原またはアジュバント核酸をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡの、当該ポリマー担体への複合体化、によって形成されてもよい。ポリマー担体は、このように、多数の少なくとも１つまたはそれ以上の同一のまたは異なる上記で規定されるカチオン性またはポリカチオン性のペプチド、タンパク質もしくはポリマー、またはさらなる成分（例えば（ＡＡ））を含んでいてもよく、その数は、好ましくは上記の範囲によって決定される。
代替的な特定の一実施形態によれば、ポリマー担体は、例えば本発明のワクチン／阻害剤の組み合わせにおける少なくとも１つの抗原またはアジュバント核酸をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡを、複合体化するために用いられ得るが、少なくとも１つの上述のカチオン性またはポリカチオン性のペプチド、タンパク質もしくはポリマー、またはさらなる成分（例えば（ＡＡ））を、それらの−ＳＨ部分を介して縮重合させ、同時に例えば本発明のワクチン／阻害剤の組み合わせにおける少なくとも１つの抗原またはアジュバント核酸をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡを（その場で調製された）ポリマー担体に複合体化させることによって形成される。それゆえ、同様に、ポリマー担体は、ここで少なくとも１つまたはそれ以上の同一のまたは異なる上記で規定されるカチオン性またはポリカチオン性のペプチド、タンパク質もしくはポリマー、またはさらなる成分（例えば（ＡＡ））を含んでいてもよく、その数は、好ましくは上記の範囲によって決定される。
（Ｎ／Ｐ比）
Ｎ／Ｐ比は、カチオン性もしくはポリカチオン性の化合物のカチオン性（側鎖）成分のイオン電荷、または本明細書で規定される担体または複合体化剤として用いられるポリマー担体のイオン電荷の尺度である。特に、カチオン性成分のカチオン特性が（例えばアミノ酸側鎖の）窒素によって生じる場合、Ｎ／Ｐ比は、カチオン性またはポリカチオン性の化合物のカチオン性成分またはポリマー担体のカチオン性成分における（側鎖）窒素原子が正電荷に寄与し、核酸カーゴ（例えば、ＲＮＡワクチンまたはアジュバント核酸に含まれる少なくとも１つの抗原についてコードする少なくとも１つのＲＮＡ）のリン酸骨格のリン酸が負電荷に寄与するとみなして、ヌクレオチド骨格における塩基性窒素原子とリン酸残基との比を表す。概して、１つのリン酸は１つの負電荷を提供する（例えば、カーゴ核酸分子における１つのヌクレオチドは１つの負電荷を提供する）。これは、例えば、ＲＮＡが塩基の統計的分布を呈すると仮定すると、１μｇのＲＮＡが一般的に約３ｎｍｏｌのリン酸残基を含有することに基づいて計算され得る。さらに、１ｎｍｏｌのペプチドは、一般的に、分子量およびその（カチオン性）アミノ酸の数に応じて、約ｘ ｎｍｏｌの窒素残基を含有する。
（ゼータ電位）
「ゼータ電位」は、粒子の電気的表面電荷について広く用いられるパラメータである。それは、典型的には、電界を通じて荷電粒子を移動させることによって決定される。本発明の観点において、ゼータ電位は、粒子（例えば、カチオン性またはポリカチオン性の化合物および／またはポリマー担体を担体または複合体化剤として含み、ＲＮＡワクチンまたはアジュバント核酸の少なくとも１つの抗原についてコードする少なくとも１つのＲＮＡを核酸カーゴとして含む複合体の粒子）の電荷を特徴付けるのに好ましいパラメータである。それゆえ、本発明の観点において、粒子の電荷は、２５℃におけるＺｅｔａｓｉｚｅｒ Ｎａｎｏ装置（Ｍａｌｖｅｒｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｍａｌｖｅｒｎ、ＵＫ）および１７３°の散乱角を用いるレーザードップラー電気泳動法によりゼータ電位を決定することによって決定されるのが好ましい。所与の粒子の表面電荷は、用いられる基質（例えば、塩を含有する緩衝液）のイオン強度および溶液のｐＨにも依存する。したがって、電荷比（Ｎ／Ｐ）における所与の複合体の実際のゼータ電位は、注入に用いられる異なる緩衝液間でわずかに異なってもよい。測定のために、粒子（カチオン性またはポリカチオン性の化合物および／またはポリマー担体を担体または複合体化剤として含み、本発明に係るＲＮＡワクチンまたはアジュバント核酸の少なくとも１つの抗原についてコードする少なくとも１つのＲＮＡを核酸カーゴとして含む複合体等）は、乳酸リンゲル液中に懸濁されることが好ましい。特定の実施形態において、本発明は、そのゼータ電位によって評価される、所与の注入緩衝液の条件下（好ましくは、乳酸リンゲル液の条件下）での負に荷電した複合体の使用に関する。本発明に係る乳酸リンゲル液は、好ましくは、１３０ｍｍｏｌ／Ｌのナトリウムイオン、１０９ｍｍｏｌ／Ｌの塩化物イオン、２８ｍｍｏｌ／Ｌの乳酸塩、４ｍｍｏｌ／Ｌのカリウムイオンおよび１．５ｍｍｏｌ／Ｌのカルシウムイオンを含有する。ナトリウム、塩化物、カリウムおよび乳酸塩は、典型的には、ＮａＣｌ（塩化ナトリウム）、ＮａＣ３Ｈ５Ｏ３（乳酸ナトリウム）、ＣａＣｌ２（塩化カルシウム）、およびＫＣｌ（塩化カリウム）に由来する。乳酸リンゲル液のオスモル濃度は２７３ｍＯｓｍ／Ｌであり、ｐＨは６．５に調整される。
（免疫賦活性組成物）
本発明の観点において、免疫賦活性組成物は、典型的には、免疫応答を誘発することができる、または免疫応答を誘発することができる成分を誘導できる、少なくとも１つの成分を含む組成物であると理解され得る。そのような免疫応答は、好ましくは、先天性免疫応答、または適応および先天性免疫応答の組み合わせであり得る。好ましくは、本発明の観点における免疫賦活性組成物は、少なくとも１つの免疫賦活性／アジュバント核酸分子、より好ましくはＲＮＡ（例えば、ｍＲＮＡ分子）を含む。免疫賦活性組成物（ｍＲＮＡ等）は、適切な担体と結合していてもよい。それゆえ、免疫賦活性組成物は、ｍＲＮＡ／担体複合体を含んでもよい。さらに、免疫賦活性組成物は、アジュバントおよび／または免疫賦活性組成物（ｍＲＮＡ等）に適切なビヒクルを含んでもよい。
アジュバント核酸：アジュバント核酸は、本明細書で使用されるとき、好ましくはＴＬＲ受容体と結合することが知られている核酸から選択される。そのようなアジュバント核酸は、好ましくは先天性免疫応答を誘導する、（免疫賦活性）ＣｐＧ核酸、特にＣｐＧ−ＲＮＡまたはＣｐＧ−ＤＮＡの形態であり得る。本発明によって使用されるＣｐＧ−ＲＮＡまたはＣｐＧ−ＤＮＡは、一本鎖ＣｐＧ−ＤＮＡ（ｓｓ ＣｐＧ−ＤＮＡ）、二本鎖ＣｐＧ−ＤＮＡ（ｄｓＤＮＡ）、一本鎖ＣｐＧ−ＲＮＡ（ｓｓ ＣｐＧ−ＲＮＡ）、または二本鎖ＣｐＧ−ＲＮＡ（ｄｓ ＣｐＧ−ＲＮＡ）であり得る。本発明によって使用されるＣｐＧ核酸は、好ましくはＣｐＧ−ＲＮＡの形態、より好ましくは一本鎖ＣｐＧ−ＲＮＡ（ｓｓ ＣｐＧ−ＲＮＡ）の形態である。やはり好ましくは、このようなＣｐＧ核酸は、上述の長さを有する。好ましくは、ＣｐＧモチーフは、メチル化されていない。さらに、アジュバント核酸は、本明細書で使用されるとき、免疫賦活性ＲＮＡ（ｉｓＲＮＡ）（好ましくは、先天性免疫応答を誘発する）であり得る。
好ましくは、アジュバント核酸（好ましくは、免疫賦活性ＲＮＡ（ｉｓＲＮＡ））は、本明細書で使用されるとき、免疫賦活性であることが知られている任意に核酸配列を含んでいてもよく、例えば、好ましくはヒトファミリーメンバーＴＬＲ１〜ＴＬＲ１０またはマウスファミリーメンバーＴＬＲ１〜ＴＬＲ１３から選択され、より好ましくは（ヒト）ファミリーメンバーＴＬＲ１〜ＴＬＲ１０から選択され、さらにより好ましくはＴＬＲ７およびＴＬＲ８から選択されるＴＬＲのリガンド、ＲＮＡの細胞内受容体のリガンド（ＲＩＧ−ＩまたはＭＤＡ−５等）を表す、且つ／または、コードする核酸配列（例えば、Meylan, E., Tschopp, J. (2006). Toll-like receptors and RNA helicases: two parallel ways to trigger antiviral responses. Mol. Cell 22, 561-569を参照）、または任意の他の免疫賦活性ＲＮＡ配列が挙げられる。このようなアジュバント核酸は、１０００〜５０００、５００〜５０００、５〜５０００、または５〜１０００、５〜５００、５〜２５０、５〜１００、５〜５０、または５〜３０のヌクレオチドの長さを含み得る。
特に好ましい実施形態によれば、アジュバント核酸配列（特にｉｓＲＮＡ）は、本明細書で使用されるとき、式（ＶＩＩ）または（ＶＩＩＩ）の核酸からなるか、または当該核酸を含んでもよい：
ＧｌＸｍＧｎ （式（ＶＩＩ））
ここで、
Ｇは、グアノシン、ウラシル、またはグアノシンもしくはウラシルの類似体であり；
Ｘは、グアノシン、ウラシル、アデノシン、チミジン、シトシン、または上述のヌクレオチドの類似体であり；
ｌは、１〜４０の整数であり、
ここで、
ｌ＝１であるとき、Ｇはグアノシンまたはその類似体であり、
ｌ＞１であるとき、ヌクレオチドの少なくとも５０％は、グアノシンまたはその類似体であり；
ｍは、整数であり、少なくとも３であり、
ここで、
ｍ＝３であるとき、Ｘはウラシルまたはその類似体であり、
ｍ＞３であるとき、少なくとも３つ連続のウラシルまたはウラシルの類似体が存在し；
ｎは、１〜４０の整数であり、
ここで、
ｎ＝１であるとき、Ｇはグアノシンまたはその類似体であり、
ｎ＞１であるとき、ヌクレオチドの少なくとも５０％は、グアノシンまたはその類似体である。
ＣｌＸｍＣｎ （式（ＶＩＩＩ））
ここで、
Ｃは、シトシン、ウラシル、またはシトシンもしくはウラシルの類似体であり；
Ｘは、グアノシン、ウラシル、アデノシン、チミジン、シトシン、または上述のヌクレオチドの類似体であり；
ｌは、１〜４０の整数であり、
ここで、
ｌ＝１であるとき、Ｃはシトシンまたはその類似体であり、
ｌ＞１であるとき、ヌクレオチドの少なくとも５０％は、シトシンまたはその類似体であり；
ｍは、整数であり、少なくとも３であり、
ここで、
ｍ＝３であるとき、Ｘはウラシルまたはその類似体であり、
ｍ＞３であるとき、少なくとも３つ連続のウラシルまたはウラシルの類似体が存在し；
ｎは、１〜４０の整数であり、
ここで、
ｎ＝１であるとき、Ｃはシトシンまたはその類似体であり、
ｎ＞１であるとき、ヌクレオチドの少なくとも５０％は、シトシンまたはその類似体である。
アジュバント核酸配列（特にｉｓＲＮＡ）として用いられ得る式（ＶＩＩ）または（ＶＩＩＩ）の核酸は、約５〜１００（しかし、特定の実施形態について、１００ヌクレオチドより長い（例えば、最大２００ヌクレオチド）であってもよい）、５〜９０または５〜８０ヌクレオチドの典型的な長さ、好ましくは約５〜７０の長さ、より好ましくは約８〜６０の長さ、より好ましくは約１５〜６０ヌクレオチド、より好ましくは２０〜６０、最も好ましくは３０〜６０ヌクレオチドの長さを有する、比較的短い核酸分子であってもよい。式（ＶＩＩ）または（ＶＩＩＩ）の核酸が、例えば１００ヌクレオチドの最大長を有する場合、ｍは典型的には９８以下となる。式（Ｉ）の核酸におけるヌクレオチドＧの数は、ｌまたはｎによって決められる。ｌおよびｎは、互いに独立に、それぞれ１〜４０の整数であり、ここで、ｌまたはｎ＝１であるとき、Ｇはグアノシンまたはその類似体であり、ｌまたはｎ＞１であるとき、ヌクレオチドの少なくとも５０％は、グアノシンまたはその類似体である。例えば、何らの限定も暗示することなく、ｌまたはｎ＝４であるとき、ＧｌまたはＧｎは、例えば、ＧＵＧＵ、ＧＧＵＵ、ＵＧＵＧ、ＵＵＧＧ、ＧＵＵＧ、ＧＧＧＵ、ＧＧＵＧ、ＧＵＧＧ、ＵＧＧＧ、またはＧＧＧＧ等であり得、ｌまたはｎ＝５であるとき、ＧｌまたはＧｎは、例えば、ＧＧＧＵＵ、ＧＧＵＧＵ、ＧＵＧＧＵ、ＵＧＧＧＵ、ＵＧＧＵＧ、ＵＧＵＧＧ、ＵＵＧＧＧ、ＧＵＧＵＧ、ＧＧＧＧＵ、ＧＧＧＵＧ、ＧＧＵＧＧ、ＧＵＧＧＧ、ＵＧＧＧＧ、またはＧＧＧＧＧ等であり得る等である。本発明に係る式（ＶＩＩ）の核酸においてＸｍに隣接するヌクレオチドは、ウラシルでないことが好ましい。同様に、本発明に係る式（ＶＩＩＩ）の核酸におけるヌクレオチドＣの数は、ｌまたはｎによって決められる。ｌおよびｎは、互いに独立に、それぞれ１〜４０の整数であり、ここで、ｌまたはｎ＝１であるとき、Ｃはシトシンまたはその類似体であり、ｌまたはｎ＞１であるとき、ヌクレオチドの少なくとも５０％は、シトシンまたはその類似体である。例えば、何らの限定も暗示することなく、ｌまたはｎ＝４であるとき、ＣｌまたはＣｎは、例えば、ＣＵＣＵ、ＣＣＵＵ、ＵＣＵＣ、ＵＵＣＣ、ＣＵＵＣ、ＣＣＣＵ、ＣＣＵＣ、ＣＵＣＣ、ＵＣＣＣ、またはＣＣＣＣ等であり得、ｌまたはｎ＝５であるとき、ＣｌまたはＣｎは、例えば、ＣＣＣＵＵ、ＣＣＵＣＵ、ＣＵＣＣＵ、ＵＣＣＣＵ、ＵＣＣＵＣ、ＵＣＵＣＣ、ＵＵＣＣＣ、ＣＵＣＵＣ、ＣＣＣＣＵ、ＣＣＣＵＣ、ＣＣＵＣＣ、ＣＵＣＣＣ、ＵＣＣＣＣ、またはＣＣＣＣＣ等であり得る等である。本発明に係る式（ＶＩＩＩ）の核酸においてＸｍに隣接するヌクレオチドは、ウラシルでないことが好ましい。好ましくは、式（ＶＩＩ）について、ｌまたはｎ＞１であるとき、上記に規定されるように、ヌクレオチドの少なくとも６０％、７０％、８０％、９０％、またはさらには１００％が、グアノシンまたはその類似体である。フランキング配列Ｇ１および／またはＧｎ中の１００％までの残りのヌクレオチド（グアノシンがヌクレオチドの１００％未満を構成する場合）は、上記で規定されるように、ウラシルまたはその類似体である。やはり好ましくは、ｌおよびｎは、互いに独立に、それぞれ、２〜３０の整数、より好ましくは２〜２０の整数、さらにより好ましくは２〜１５の整数である。ｌまたはｎの下限は、必要であれば変更することができ、少なくとも１、好ましくは少なくとも２、より好ましくは少なくとも３、４、５、６、７、８、９、または１０である。この規定は、式（ＶＩＩＩ）にも対応して適用する。
さらなる特に好ましい実施形態によれば、アジュバント核酸配列（特にｉｓＲＮＡ）は、本明細書で使用されるとき、式（ＩＸ）または（Ｘ）の核酸からなるか、または当該核酸を含んでもよい：
（ＮｕＧｌＸｍＧｎＮｖ）ａ、 （式（ＩＸ））
ここで、
Ｇは、グアノシン（グアニン）、ウリジン（ウラシル）、またはグアノシン（グアニン）もしくはウリジン（ウラシル）の類似体、好ましくは、グアノシン（グアニン）またはその類似体であり；
Ｘは、グアノシン（グアニン）、ウリジン（ウラシル）、アデノシン（アデニン）、チミジン（チミン）、シチジン（シトシン）、またはこれらのヌクレオチド（ヌクレオシド）の類似体、好ましくは、ウリジン（ウラシル）またはその類似体であり；
Ｎは、約４〜５０、好ましくは約４〜４０、より好ましくは約４〜３０または４〜２０核酸の長さを有する核酸配列であり、各Ｎは、独立して、グアノシン（グアニン）、ウリジン（ウラシル）、アデノシン（アデニン）、チミジン（チミン）、シチジン（シトシン）、またはこれらのヌクレオチド（ヌクレオシド）の類似体から選択され；
ａは、１〜２０、好ましくは１〜１５、最も好ましくは１〜１０の整数であり；
ｌは、１〜４０の整数であり、
ここで、
ｌ＝１であるとき、Ｇはグアノシン（グアニン）またはその類似体であり、
ｌ＞１であるとき、これらのヌクレオチド（ヌクレオシド）の少なくとも５０％は、グアノシン（グアニン）またはその類似体であり；
ｍは、整数であり、少なくとも３であり、
ここで、
ｍ＝３であるとき、Ｘはウリジン（ウラシル）またはその類似体であり、
ｍ＞３であるとき、少なくとも３つ連続のウリジン（ウラシル）またはウリジン（ウラシル）の類似体が存在し；
ｎは、１〜４０の整数であり、
ここで、
ｎ＝１であるとき、Ｇはグアノシン（グアニン）またはその類似体であり、
ｎ＞１であるとき、これらのヌクレオチド（ヌクレオシド）の少なくとも５０％は、グアノシン（グアニン）またはその類似体であり；
ｕ、ｖは、互いに独立して、０〜５０の整数とすることができ、
好ましくは、ｕ＝０であるとき、ｖ≧１であり、または
ｖ＝０であるとき、ｕ≧１であり；
式（ＩＸ）の核酸分子は、少なくとも５０ヌクレオチド、好ましくは少なくとも１００ヌクレオチド、より好ましくは少なくとも１５０ヌクレオチド、さらにより好ましくは少なくとも２００ヌクレオチド、最も好ましくは少なくとも２５０ヌクレオチドの長さを有する。
（ＮｕＣｌＸｍＣｎＮｖ）ａ （式（Ｘ））
ここで、
Ｃは、シチジン（シトシン）、ウリジン（ウラシル）、またはシチジン（シトシン）もしくはウリジン（ウラシル）の類似体、好ましくは、シチジン（シトシン）またはその類似体であり；
Ｘは、グアノシン（グアニン）、ウリジン（ウラシル）、アデノシン（アデニン）、チミジン（チミン）、シチジン（シトシン）、または上述したヌクレオチド（ヌクレオシド）の類似体、好ましくは、ウリジン（ウラシル）またはその類似体であり；
Ｎは、互いに独立して、約４〜５０、好ましくは約４〜４０、より好ましくは約４〜３０または４〜２０核酸の長さを有する核酸配列であり、各Ｎは、独立して、グアノシン（グアニン）、ウリジン（ウラシル）、アデノシン（アデニン）、チミジン（チミン）、シチジン（シトシン）、またはこれらのヌクレオチド（ヌクレオシド）の類似体から選択され；
ａは、１〜２０、好ましくは１〜１５、最も好ましくは１〜１０の整数であり；
ｌは、１〜４０の整数であり、
ここで、
ｌ＝１であるとき、Ｃはシチジン（シトシン）またはその類似体であり、
ｌ＞１であるとき、これらのヌクレオチド（ヌクレオシド）の少なくとも５０％は、シチジン（シトシン）またはその類似体であり；
ｍは、整数であり、少なくとも３であり、
ここで、
ｍ＝３であるとき、Ｘはウリジン（ウラシル）またはその類似体であり、
ｍ＞３であるとき、少なくとも３つ連続のウリジン（ウラシル）またはウリジン（ウラシル）の類似体が存在し；
ｎは、１〜４０の整数であり、
ここで、
ｎ＝１であるとき、Ｃはシチジン（シトシン）またはその類似体であり、
ｎ＞１であるとき、これらのヌクレオチド（ヌクレオシド）の少なくとも５０％は、シチジン（シトシン）またはその類似体であり；
ｕ、ｖは、互いに独立して、０〜５０の整数とすることができ、
好ましくは、ｕ＝０であるとき、ｖ≧１であり、または
ｖ＝０であるとき、ｕ≧１であり；
本発明に係る式（Ｘ）の核酸分子は、少なくとも５０ヌクレオチド、好ましくは少なくとも１００ヌクレオチド、より好ましくは少なくとも１５０ヌクレオチド、さらにより好ましくは少なくとも２００ヌクレオチド、最も好ましくは少なくとも２５０ヌクレオチドの長さを有する。
式（ＶＩＩ）および（ＶＩＩＩ）において上記に与えた定義、例えば、要素Ｎ（すなわち、ＮｕおよびＮｖ）およびＸ（Ｘｍ）、特に上記に規定されたコア構造について、ならびに整数ａ、ｌ、ｍ、ｎ、ｕ、およびｖについて上記に与えた定義の何れも、対応して式（ＩＸ）および（Ｘ）の要素に同様に適用する。式（Ｘ）における末端要素ＮｕおよびＮｖの定義は、式（ＩＸ）におけるＮｕおよびＮｖについて上記に与えた定義と同一である。
（免疫賦活性ＲＮＡ）
本発明に関して、免疫賦活性ＲＮＡ（ｉｓＲＮＡ）は、概して先天性免疫反応を誘発し得るＲＮＡであり得る。上記ｉｓＲＮＡは、通常、オープンリーディングフレームを有さず、そのためペプチド抗原または免疫原を提供しないが、例えば特定の種類のトール様レセプター（ＴＬＲ）または他の好適なレセプターと結合することによって、先天性免疫反応を誘発する。しかし、オープンリーディングフレームを有していてペプチド／タンパク質をコードし得るｍＲＮＡも、もちろん先天性免疫反応を誘発することは可能であり、そのため免疫賦活性ＲＮＡになり得る。好ましくは、免疫賦活性ＲＮＡは、一本鎖、二本鎖または部分的に二本鎖ＲＮＡであり得、より好ましくは一本鎖ＲＮＡ、および／あるいは環状または直鎖状ＲＮＡであり得、より好ましくは直鎖状ＲＮＡであり得る。より好ましくは、免疫賦活性ＲＮＡは、（直鎖状）一本鎖ＲＮＡであり得る。さらにより好ましくは、免疫賦活性ＲＮＡは（長い）（直鎖状）（一本鎖）ノンコーディングＲＮＡであり得る。ｉｎ ｖｉｔｒｏで転写されたＲＮＡについての場合、これに関して特に好ましいのは、ｉｓＲＮＡがその５’末端で三リン酸を担持することである。免疫賦活性ＲＮＡは、本明細書で規定されたように、短いＲＮＡオリゴヌクレオチドとして生じ得る。本明細書で用いられる免疫賦活性ＲＮＡは、天然に見られるまたは合成的に調製されるＲＮＡ分子の任意のクラスからさらに選択され得、先天性免疫反応を誘発することが可能であり、抗原により誘発された適応免疫反応を支持し得る。さらに、本発明のワクチン／阻害剤の組み合わせの、さらなる化合物として用いられる免疫賦活性ＲＮＡ分子（のクラス）は、先天性免疫反応を誘発することが可能な、任意の他のＤＮＡを含み得る。例えば、このような免疫賦活性ＲＮＡは、リボソームＲＮＡ（ｒＲＮＡ）、トランスファーＲＮＡ（ｔＲＮＡ）、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）、およびウイルスＲＮＡ（ｖＲＮＡ）を含み得る。このような免疫賦活性ＲＮＡは、１０００〜５０００、５００〜５０００、５〜５０００、また５〜１０００、５〜５００、５〜２５０、５〜１００５０または５〜の３０の長さのヌクレオチドを含み得る。
（ｓｉＲＮＡ）
低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）は、特にＲＮＡ干渉の現象と関連して着目される。ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）のｉｎ ｖｉｔｒｏ技術は、遺伝子発現の配列特異的な抑制を誘発する二本鎖ＲＮＡ分子（ｄｓＲＮＡ）に基づいている（Zamore (2001) Nat. Struct. Biol. 9: 746-750; Sharp (2001) Genes Dev. 5:485-490: Hannon (2002) Nature 41: 244-251）。長いｄｓＲＮＡを用いた哺乳動物細胞のトランスフェクションにおいて、タンパク質キナーゼＲおよびＲｎａｓｅＬの活性は、例えばインターフェロン応答等の非特異的効果をもたらす（Stark et al. (1998) Annu. Rev. Biochem. 67: 227-264; He and Katze (2002) Viral Immunol. 15: 95-119）。非特異的効果は、３０ｂｐより小さいｓｉＲＮＡによっては誘引されないため、これらの非特異的効果は、短い、例えば２１〜２３ｍｅｒの、いわゆるｓｉＲＮＡ（低分子干渉ＲＮＡ）を用いた場合に回避することができる（Elbashir et al.(2001) Nature 411: 494-498）。
本発明に関して、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２に対するｓｉＲＮＡｓは、１７〜２９、好ましくは１９〜２５の長さを有する二本鎖ＲＮＡｓ（ｄｓＲＮＡｓ）であり得、コーディングまたはノンコーディングセクションの何れかに、好ましくはコーディングセクションにＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２をコードする、天然のｍＲＮＡ配列のセクションに対して、少なくとも９０％、より好ましくは９５％、特に１００％（のｄｓＲＮＡのヌクレオチドが）相補性を有する。このような天然のｍＲＮＡ配列のセクションは、本明細書において「標的配列」と称し、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２をコードする天然のｍＲＮＡの任意のセクションであり得る。９０％の相補性とは、ここに記載した、例えば２０ヌクレオチドの長さのｄｓＲＮＡが、標的配列の対応するセクションに相補性を示さない２つ以上のヌクレオチドを含まないことを意味する。本発明に従って用いられる二本鎖ｓｉＲＮＡの配列は、しかしながら、その基本構造において、標的配列のセクションに対して完全に相補性であることが好ましい。これに関して、複合体の核酸分子は、基本構造５'−（Ｎ１７−２９）−３'、好ましくは基本構造５'−（Ｎ１９−２５）−３'、より好ましくは基本構造５'−（Ｎ１９−２４）−３'、またはより好ましくは基本構造５'−（Ｎ２１−２３）−３'を有するｄｓＲＮＡであってもよく、ここで、各基本構造の各Ｎは、標的配列のセクションのヌクレオチドであり（好ましくは異なる）、好ましくは標的配列のセクションの連続する１７〜２９から選択され、その天然の順序で基本構造５'−（Ｎ１７−２９）−３'に存在する。原則として、標的配列において生じる１７〜２９、好ましくは１９〜２５の塩基対の長さを有するすべてのセクションは、本明細書で規定されたｄｓＲＮＡの調製のために利用することが可能である。同様に、ｓｉＲＮＡｓとして用いられるｄｓＲＮＡｓは、コーディング領域に位置しない、特に、標的配列の５'ノンコーディング領域に位置するｍＲＮＡを対象とすることも可能であり、そのため、例えば調節機能を有する標的配列の非コーディング領域を対象とすることも可能である。そのため、ｓｉＲＮＡとして用いられるｄｓＲＮＡの標的配列は、標的配列の翻訳領域および非翻訳領域、および／またはｍＲＮＡ配列の制御因子の領域に位置し得る。ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２に対するｓｉＲＮＡとして用いられるｄｓＲＮＡのための標的配列は、非翻訳配列と翻訳配列とが重複する領域にも位置することが可能であり、特に、標的配列は、ｍＲＮＡ配列のコーディング領域の開始トリプレットの少なくとも１ヌクレオチド上流を含み得る。
（オープンリーディングフレーム）
本発明に関して、オープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）は、概して、ペプチドまたはタンパク質に翻訳される、いくつかのヌクレオチドトリプレットの配列であり得る。オープンリーディングフレームは、その５’末端に、例えば、アミノ酸メチオニン（ＡＴＧまたはＡＵＧ）を通常コードする３つの連続するヌクレオチドの組み合わせである開始コドンと、多様な３つのヌクレオチドの長さを通常示す、その後ろの領域とを含む。ＯＲＦは、好ましくは停止コドン（例えばＴＡＡ、ＴＡＧ、ＴＧＡ）によって終了させられる。概して、これがオープンリーディングフレームの唯一の停止コドンである。そのため、本発明に関して、オープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）は、開始コドン（例えば、ＡＴＧまたはＡＵＧ）によって開始され、好ましくは停止コドン（例えばそれぞれＴＡＡ、ＴＧＡ、またはＴＡＧまたはＵＡＡ、ＵＡＧ、ＵＧＡ）によって終了する、好ましくは３で割り切れるヌクレオチド数からなるヌクレオチド配列である。オープンリーディングフレームは、単離され得る、あるいは、例えばベクターまたはｍＲＮＡのように、より長い核酸配列に組み込まれ得る。オープンリーディングフレームは、「タンパク質コード領域」または「コード領域」とも称され得る。
（ＩＲＥＳ（内部リボソームエントリー部位）配列）
ＩＲＥＳは、単独のリボソーム結合部位として機能することが可能であるが、本明細書で複数のタンパク質またはペプチドをコードすると規定したバイシストロニックＲＮＡまたはマルチシストロニックＲＮＡさえも提供するために使用することも可能であり、これらは互いに独立してリボソームによって翻訳される。本発明に従って用いられ得るＩＲＥＳ配列の例は、ピコルナウイルス（例えばＦＭＤＶ）、ペスチウイルス（ＣＦＦＶ）、ポリオウイルス（ＰＶ）、脳心筋炎ウイルス（ＥＣＭＶ）、口蹄病ウイルス（ＦＭＤＶ）、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）、典型的なブタコレラ（ＣＳＦＶ）、マウス白血病ウイルス（ＭＬＶ）、サル免疫不全ウイルス（ＳＩＶ）またはコオロギ麻痺ウイルス（ＣｒＰＶ）からの配列である。
（（タンパク質／ペプチド）抗原の断片または部分）
本発明に関して、（タンパク質／ペプチド）抗原の断片または部分は、概して（タンパク質／ペプチド）抗原のアミノ酸配列の連続した部分に対応するペプチドであると理解される。上記アミノ酸配列の連続した部分に対応するペプチドは、例えばＭＨＣクラスＩ分子により処理および提示される部分のように、好ましくは約６〜約２０またはそれ以上の長さのアミノ酸を有し、例えば、８、９、または１０（あるいはさらに１１、または１２のアミノ酸）のように、好ましくは約８〜約１０の長さのアミノ酸を有し、または、ＭＨＣクラスＩＩ分子により処理および提示される断片であり、例えば１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０またはさらにそれ以上のアミノ酸のように、好ましくは約１３またはそれ以上の長さのアミノ酸を有し、これらの断片はアミノ酸配列の任意の部分から選択され得る。これらの断片は、概して、ペプチド断片およびＭＨＣ分子からなる複合体の形態において、Ｔ細胞により認識され、たとえば、断片は、概して天然形態において認識されない。本明細書で規定された（タンパク質／ペプチド）抗原の断片または部分もまた、それらの（タンパク質／ペプチド）抗原のエピトープまたは機能部位を含み得る。本明細書で規定された（タンパク質／ペプチド）抗原の断片または部位は、好ましくはエピトープであるかエピトープを含み、または適応免疫応答を誘発する抗原性の特徴を有する。そのため、（タンパク質／ペプチド）抗原の断片は、それら（タンパク質／ペプチド）抗原の少なくとも１つのエピトープを含み得る。さらに、細胞外ドメイン、細胞内ドメインまたは膜貫通ドメイン等の（タンパク質／ペプチド）抗原のドメイン、および（タンパク質／ペプチド）抗原の短縮されたまたは切断された型も、（タンパク質／ペプチド）抗原の断片を含むことが理解され得る。
（タンパク質の変異体）
本発明に関して規定されるタンパク質またはペプチドの「変異体」は、１以上のアミノ酸の置換、挿入および／または欠失のような、１以上の変異において、元の配列と異なるアミノ酸配列を有するように生成され得る。好ましくは、これらの変異体は、全長ネイティブタンパク質と、例えば特異的抗原特性のような、生物学的機能または特異的活性が同一である。本発明に関して規定されるタンパク質またはペプチドの「変異体」は、変異していない生理学的配列のようなネイティブ配列に対して、保存的アミノ酸置換を含み得る。これらのアミノ酸配列は、それをコードするヌクレオチド配列と同様に、本明細書に規定される変異体の用語の下に特に収まる。同じクラスに由来するアミノ酸をそれぞれ交換する置換は、保存的置換と称される。特に、脂肪族側鎖、正または負の電荷を帯びた側鎖、側鎖またはアミノ酸中の芳香族基、例えば水酸基を有する側鎖のように水素結合に入り込める側鎖を有するアミノ酸がある。これらは、例えば、極性の側鎖を有するアミノ酸は、同様に極性の側鎖を有する他のアミノ酸により置換されることを意味しており、または、例えば疎水性の側鎖により特徴づけられるアミノ酸は、同様に疎水性の側鎖を有するアミノ酸により置換されることを意味している（例えば、スレオニン（セリン）によるセリン（スレオニン）またはイソロイシン（ロイシン）によるロイシン（イソロイシン）の置換）。挿入および置換は、特に、三次元構造を変更しない、または結合領域に影響しない位置の配列において、可能である。挿入または欠失による三次元構造の変更は、例えばＣＤスペクトル（円偏光二色性スペクトル）を用いて容易に決定することができる（Urry, 1985, Absorption, Circular Dichroism and ORD of Polypeptides, in: Modern Physical Methods in Biochemistry, Neuberger et al. (ed.), Elsevier, Amsterdam）。
さらに、本明細書に規定されるタンパク質またはペプチドの変異体は、核酸によりコードされ得、例えば、アミノ酸配列またはその少なくとも部分は、上記の意味の範囲内の１以上の変異において、元の配列と異ならないというように、タンパク質またはペプチドのそれぞれのアミノ酸配列を変化させることなく、核酸のヌクレオチドが遺伝子コードの変性により交換されたような配列を含んでもよい。
例えば、本明細書に規定される核酸またはアミノ酸配列であり、好ましくは本明細書に規定された高分子担体の核酸配列によりコードされたアミノ酸配列、またはアミノ酸配列自体である、２つの配列の同一性の比率を決定するために、配列を互いに続いて比較するように一直線にすることができる。それゆえに、例えば、１つ目の配列の位置は、２つ目の配列の対応する位置と比較され得る。１つ目の配列の位置が、２つ目の配列の位置において同様に同じ成分（残基）により占められている場合、２つの配列はこの位置において同一である。これが同様でない場合には、配列はこの位置において異なる。１つ目の配列と比較して、２つ目の配列に挿入が生じている場合には、１つ目の配列にギャップを挿入してさらに位置合わせしてもよい。１つ目の配列と比較して、２つ目の配列に欠失が生じている場合には、２つ目の配列にギャップを挿入してさらに位置合わせしてもよい。２つの配列の同一性の比率は、同一の位置の数を、１つの配列においてのみ占めるそれらの位置を含むすべての位置の数により割った関数である。２つの配列の同一性の比率は、数学的アルゴリズムを用いて決定することができる。使用可能な数学的アルゴリズムの好ましい例は、これに限定されないが、Karlin et al. (1993), PNAS USA, 90:5873-5877またはAltschul et al. (1997), Nucleic Acids Res., 25:3389-3402.のアルゴリズムである。そのようなアルゴリズムは、ＢＬＡＳＴプログラムに組み込まれる。特定の範囲において、本発明の配列と同一の配列は、このプログラムにより同一であると認められる。タンパク質またはペプチドの「変異体」は、そのようなタンパク質またはペプチドの１０、２０、３０、５０、７５または１００のアミノ酸の広がりの中で、好ましくは変異体の由来である全長配列の中で、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％または９９％のアミノ酸同一性を有し得る。同じように、核酸配列の「変異体」は、そのような核酸配列の１０、２０、３０、５０、７５または１００のヌクレオチドの広がりの中で、好ましくは変異体の由来である全長配列の中で、少なくとも７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％または９９％のヌクレオチド同一性を有し得る。
（タンパク質またはペプチドの誘導体）
ペプチドまたはタンパク質の誘導体は、典型的には、上述したペプチドまたはタンパク質のような他の分子由来の分子であると理解される。ペプチドまたはタンパク質の「誘導体」は、本発明において使用するペプチドまたはタンパク質を含む融合体も包含する。例えば、融合体は、例えばＦＬＡＧエピトープまたはＶ５エピトープである、エピトープのような標識を含む。たとえば、エピトープはＦＬＡＧエピトープである。そのようなタグは、例えば融合タンパク質の精製に有用である。
（治療的有効量）
本発明に関して、治療的有効量は、典型的には、例えば治療の状況において、免疫反応、発現したペプチドもしくはタンパク質の病理学的レベルの変化、または欠失した遺伝子産物の代替のような、薬学的効果を引き起こすのに十分な量であると理解される。
（ビヒクル）
ビヒクルは、典型的には、薬学的に活性な化合物のように、貯蔵、運搬および／または投与される化合物に適した材料であると理解される。例えば、ビヒクルは、貯蔵、運搬および／または投与される薬学的に活性な化合物に適した、生理的に許容される液体であり得る。
（ＰＤ−１経路）
ＰＤ−１経路のメンバーは、ＰＤ−１情報伝達に関与する全てのタンパク質である。一方で、これらのタンパク質は、例えば、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２のリガンドならびに情報伝達レセプターＰＤ−１のように、ＰＤ−１の上流のＰＤ−１情報伝達を引き起こすたんぱく質であり得る。他方で、これらのタンパク質は、ＰＤ−１レセプターの下流の情報伝達タンパク質であり得る。本発明に関して、特に好ましいＰＤ−１経路のメンバーは、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２である。
（ＰＤ−１経路阻害剤）
本発明に関して、ＰＤ−１経路阻害剤は、ＰＤ−１経路情報伝達、好ましくはＰＤ−１レセプターを介した情報伝達を阻害することが可能な化合物として、好ましくは規定される。それゆえに、ＰＤ−１経路阻害剤は、ＰＤ−１経路情報伝達を相殺することが可能な、ＰＤ−１経路の何れかのメンバーに対する何れかの阻害剤であり得る。これに関して、阻害剤は、ＰＤ−１経路の何れかのメンバーを標的とする、好ましくはＰＤ−１レセプター、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２に対する、本明細書に規定された拮抗抗体であってもよい。この拮抗抗体は、また、核酸によりコードされてもよい。このようなコードされた抗体は、「イントラ抗体」として称して本明細書に規定されてもよい。また、ＰＤ−１経路阻害剤は、ＰＤ−１レセプターの断片、またはＰＤ−１レセプターの活性化を阻害するＰＤ１リガンドであり得る。Ｂ７−１またはその断片は、同様に、ＰＤ１阻害リガンドとして作用し得る。さらに、ＰＤ−１経路阻害剤は、ｓｉＲＮＡ（低分子干渉ＲＮＡ）であってもよく、またはＰＤ−１経路のメンバー、好ましくはＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２に対するアンチセンスＲＮＡであってもよい。さらに、ＰＤ−１経路阻害剤は、ＰＤ−１に結合し得るが、例えばＰＤ−１およびＢ７−Ｈ１またはＢ７−ＤＬ相互作用を抑制することによって、ＰＤ−１情報伝達を阻害するアミノ酸配列を含むタンパク質（または、これをコードする核酸配列）であってもよい。さらに、ＰＤ−１経路阻害剤は、例えば、ＰＤ−１結合ペプチドまたは有機小分子のような、ＰＤ−１経路情報伝達を阻害し得る小分子阻害剤であってもよい。
（抗体）
抗体は、例えば、当業者に公知の、組み換え的に生成した抗体または天然に生じた抗体の何れか、特に、治療、診断または科学的目的に適した抗体、特にＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２に対する抗体のような、何れかの抗体から選択され得る。ここで、用語「抗体」は、その最も広い意味で用いられ、モノクローナル抗体およびポリクローナル抗体（アンタゴニスト、および阻害または中和抗体を含む）、ならびにポリエピトープ特異性を有する抗体種を特に対象とする。本発明によれば、「抗体」は、典型的に、当業者に公知の抗体（例えば、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＧ、ＩｇＡおよびＩｇＥ抗体）を含み、そのような抗体は、天然に生じる抗体、宿主生物において免疫作用により生成した抗体、天然に生じる抗体から単離および同定された抗体、または宿主生物において免疫作用により生成され、当業者に公知の分子生物学的方法により組み換え的に生成した抗体であり、同様に、キメラ抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、二重特異性抗体、例えば、細胞において発現し、任意で特定の細胞区分に位置するする抗体のようなイントラ抗体である。一般に、抗体は、共に可変領域と定常領域とを有する軽鎖および重鎖からなる。軽鎖は、Ｎ末端可変領域、ＶＬ、およびＣ末端定常領域から成る。一方、ＩｇＧ抗体の重鎖は、例えば、Ｎ末端可変領域、ＶＨ、ならびにＣＨ１、ＣＨ２およびＣＨ３の３つの定常領域を含む。単鎖抗体は、同様に本発明に用いられ得る。抗体は、上述したように、好ましくは全長抗体を含んでもよく、例えば、抗体は、全長重鎖および全長軽鎖から構成される。しかしながら、抗体断片、変異体または付加物のような、抗体誘導体は、また、本発明によるＰＤ−１経路阻害剤として用いられ得る。抗体断片は、上述した（全長）抗体のＦａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｃ、Ｆａｃｂ、ｐＦｃ’、ＦｄおよびＦｖ断片から選択され得る。一般的に、抗体断片は当業者に公知である。例えば、Ｆａｂ（「断片、抗原結合」）断片は、重鎖および軽鎖のそれぞれの１つの定常領域および１つの可変領域により構成される。２つの可変領域は、特定の抗原のエピトープに結合する。２つの鎖はジスルフィド結合を介して連結される。ｓｃＦｖ（「単鎖可変断片」）断片は、例えば、典型的には軽鎖および重鎖の可変領域からなる。領域は人工的結合により連結され、その結合は、一般的に、１５から２５のグリシン、プロリンおよび／またはセリン残基から構成されるペプチドのようなポリペプチド結合である。
（ポリクローナル抗体）
ポリクローナル抗体は、典型的には、例えば、ヤギ、ウシ、ブタ、イヌ、ネコ、ロバ、サル（monkey）、エイプ（ape）、マウス、ハムスターおよびウサギのような齧歯動物である、哺乳動物のような宿主生物に免疫性付与することにより生成される、特定の抗原もしくは免疫原またはタンパク質のエピトープに対する抗体の混合物を意味している。ポリクローナル抗体は、一般的には、同一ではなく、それゆえに、同じ抗原からの異なるエピトープまたは領域により、通常認識される。それゆえに、そのような場合、典型的には、異なる抗体の混合物（組成物）が用いられ、各抗体は、特定の抗原もしくは免疫原またはタンパク質のエピトープに対する抗体、特にＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２に対する抗体である。
（モノクローナル抗体）
用語「モノクローナル抗体」は、典型的には、実質的に同室の抗体の集団から得られる抗体にここでは関し、例えば、少量存在し得る天然に発生し得る変異体を除いては同一の抗体の集団に含まれる個々の抗体である。モノクローナル抗体は、単一の抗原部位に対して高度に特異的である。さらに、典型的には異なる決定基（エピトープ）に対する異なる抗体を含む、従来の（ポリクローナル）抗体の調製物とは対照的に、各モノクローナル抗体は、抗原における単一の決定基に対する。例えば、上記で規定したモノクローナル抗体は、Kohler and Milstein, Nature, 256:495 (1975)により最初に記載されたハイブリドーマ法により形成され手もよいし、または、例えば米国特許番号4,816,567に記載された組み換えＤＮＡ法により形成されてもよい。「モノクローナル抗体」は、また、McCafferty et al., Nature, 348:552-554 (1990)に例えば記載された技術を用いて生成されたファージライブラリーから単離されてもよい。Kohler and Milsteinによれば、目的の免疫原（抗原）を、マウスのような宿主に注入し、免疫原に反応して生成されたＢ細胞リンパ球を、期間後に回収する。そのＢ細胞を、マウスから得られたミエローマ細胞と混合し、Ｂ細胞とミエローマ細胞との融合を許容する培地中に導入して、ハイブリドーマを生成する。これらの融合細胞（ハイブリドーマ）を、その後、マイクロタイタープレートの分割されたウエルに載置し、モノクローナル抗体を生成するために成長させる。 このモノクローナル抗体を、どれが目的の抗原を検出するために適したものであるかを決定するために試験する。選択後のモノクローナル抗体を、細胞培地中で、またはマウスにハイブリドーマを注入することによって、成長させてもよい。本発明に関して、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２に対するモノクローナル抗体であることが特に好ましい。
（キメラ抗体）
キメラ抗体を、本発明によるＰＤ−１経路阻害剤として使用してもよく、このキメラ抗体は、好ましくは、上述した抗体の定常領域が、好ましくはヒト配列である、他の生物からの抗体の配列で置き換えられた抗体である。
（ヒト化抗体）
ヒト化（非ヒト）抗体を、本発明によるＰＤ−１経路阻害剤として使用してもよく、このヒト化抗体は、抗体の定常領域および可変領域（高度可変領域を除く）がヒト配列で置き換えられた抗体である。
（ヒト抗体）
ヒト抗体は、ヒトＩｇＧ遺伝子座のために遺伝子導入された、ヒト組織または免疫された非ヒト宿主生物から単離されてもよい。さらに、ヒト抗体は、ファージ提示の使用により提供され得る。
（二重特異性抗体）
本発明に関して、二重特異性抗体は、好ましくは、例えば、毒素、薬物、サイトカイン等のエフェクター分子を集める目的のために、２つの異なるＦａ／ｂ領域により、エフェクターと対応する標的との間のアダプターとして作用する抗体であり、ＣＴＬ、ＮＫ細胞、マクロファージ、顆粒球等のエフェクター細胞を標的する（再考のためにKontermann R.E., Acta Pharmacol. Sin, 2005, 26(1): 1-9を参照のこと）。本明細書に記載された二重特異性抗体は、概して、例えば、２つの異なる抗原、免疫原、エピトープ、薬物、細胞（または細胞上のレセプター）、または上述した他の分子（または構造）のように、２つの異なるＦａ／ｂ領域によって認識されるように構成される。二重特異性抗体は、本明細書において、抗体の抗原結合領域が２つの異なるエピトープに特異的であることを意味している。それゆえに、異なる抗原、免疫原またはエピトープ等が、任意で、２つの成分の直接的な相互作用を可能にするように、共に近接して持ち込まれ得る。例えば、エフェクター細胞と標的細胞とのように、異なる細胞が、二重特異性抗体を介して結合され得る。一方で可溶性抗原、および他方で、例えば腫瘍細胞である細胞の表面のＰＤ−１またはそのリガンドＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２のような抗原またはレセプターに結合する抗体またはその断片が、本発明に包含されるが、これに限定されない。
（細胞内抗体）
細胞内抗体（intrabody）は、上記の抗体であり得る。これらの抗体は、細胞内に発現される抗体であり、よって、これらの抗体は、コードされる抗体の発現に使用されるべき核酸によってコードされ得る。それゆえ、抗体をコードする核酸、好ましくは、上記のような抗体、特に、ＰＤ−１経路のメンバー（例えばＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２）に対する抗体が、本発明のＰＤ−１経路阻害剤として使用され得る。
第１の局面において、本発明の目的は、（ｉ）ワクチンとして、少なくとも１つの抗原をコードする少なくとも１つのオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）を含む少なくとも１つのＲＮＡを含むＲＮＡワクチン、および（ｉｉ）阻害剤として、少なくとも１つのＰＤ−１経路阻害剤を含む組成物、を含むワクチン／阻害剤の組合せによって解決される。
本発明の観点において、用語「ワクチン／阻害剤の組合せ」は、好ましくは、少なくとも１つの抗原をコードする少なくとも１つのオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）を含む少なくとも１つのＲＮＡを含むＲＮＡワクチンの存在と、少なくとも１つのＰＤ−１経路阻害剤を含む組成物の存在とが結合していることを意味する。よって、このワクチン／阻害剤の組合せは、これらの成分の全てを１つの同一の混合物中に含む１つの組成物として存在してもよく、パーツキットとして存在してもよく、キットの場合、異なる成分がパーツキットの異なる部分を形成する。本発明のワクチン／阻害剤の組合せは、好ましくは、少なくとも１つの抗原（好ましくは腫瘍抗原または病原性抗原）をコードする少なくとも１つのオープンリーディングフレームを含む少なくとも１つのＲＮＡを含むＲＮＡワクチンを第１成分として用いることによって、処置されるべき患者（好ましくは哺乳動物）において適応性の免疫応答を惹起することを可能にする。本発明のワクチン／阻害剤の組合せの阻害剤は、好ましくはＰＤ−１経路阻害剤であり、好ましくは、ＰＤ−１レセプターによって媒介されるシグナルトランスダクションを阻害または抑制することによってＰＤ−１経路シグナリングをアンタゴナイズし得る。よって、ワクチンおよび阻害剤の投与は、同時に起こっても時差的に起こってもよく、投与と同一部位であっても投与と異なる部位であってもよく、さらに後述される。このようなワクチン／阻害剤の組合せは、活性な免疫応答を誘導し得、これにより、例えば腫瘍増殖を妨げ、腫瘍退行を誘導する。よって、本発明のワクチン／阻害剤の組合せは、癌および病原体に感染した細胞に対する抗原特異的免疫応答を効果的に刺激するに適切である。より詳細には、本発明のワクチン／阻害剤の組合せは、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２の過剰発現に関連し得る腫瘍疾患および感染性疾患の処置に特に適切であり、このような腫瘍細胞および感染細胞に対する免疫応答をさらに改善する。
したがって、本発明は、ＲＮＡワクチンおよびＰＤ−１経路阻害剤の組合せが、先行技術から予期することができない程度に改善された生存を引き起こす、腫瘍増殖に対する極めて優れた阻害を示すという驚きの知見に基づいている。よって、例えば、腫瘍抗原のような特異的抗原をコードするＲＮＡワクチン（活性化ワクチン接種）と、ＰＤ−１経路のメンバー（特にＰＤ−１レセプターまたはそのリガンドであるＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２）に対する阻害剤との組合せ処置は、処置されるべき疾患の有害な影響（例えば、腫瘍の増殖速度）を強く低減し得る。この観点において、本発明者らは、驚くべきことに、腫瘍抗原をコードするＲＮＡを含むＲＮＡワクチンをＰＤ−１経路阻害剤と組み合わせた処置が、予期せぬ程度に腫瘍増殖を阻害し、その結果として、腫瘍をチャレンジされたマウスが、５０％完全応答の頻度で示される全身性の様式にて生存が改善された、ということを見出した。
第１成分として、本発明のワクチン／阻害剤組合せは、少なくとも１つの抗原（好ましくは腫瘍抗原または病原性抗原）をコードする少なくとも１つのオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）を含む少なくとも１つのＲＮＡを含むＲＮＡワクチンをワクチンとして含んでいる。
本発明に従えば、本発明のワクチン／阻害剤の組合せのＲＮＡワクチンは、好ましくは、本明細書中に規定されるような、少なくとも１つの抗原をコードする少なくとも１つのオープンリーディングフレームを含む少なくとも１つのＲＮＡを含んでいる。
少なくとも１つのＲＮＡまたはＲＮＡワクチンは、アミノ酸配列をコードするに好適な任意のＲＮＡ、好ましくはメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）より選択され得る。
しかし、他の型のＲＮＡも、本発明の教示を実行するにあたりその適用を同様に見出され得る。例えば、ＲＮＡは、レトロウイルスのＲＮＡのようなウイルス由来のＲＮＡであっても、本明細書中に規定されるような（例えばαウイルスに由来する）ＲＮＡレプリコンであってもよい。
特定の実施形態において、ＲＮＡウイルスの少なくとも１つのＲＮＡは、レンチウイルスベクターまたはアデノ随伴ウイルスベクターを含まず、そしてこれらのベクターからなることもない。
特定の実施形態において、ＲＮＡワクチンは、本明細書中に規定されるような単離されたＲＮＡを含むか、このようなＲＮＡからなる。
さらに、本発明のワクチン／阻害剤の組合せのＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡは、一本鎖ＲＮＡであっても二本鎖ＲＮＡ（２つの一本鎖ＲＮＡ（分子）の非共有結合に起因して単一のＲＮＡ（分子）としても認識され得るもの）であっても、部分的に二本鎖であるか部分的に一本鎖であるＲＮＡ（少なくとも部分的に自己相補性であるもの）であってもよい。これらの部分的に二本鎖であるＲＮＡまたは部分的に一本鎖であるＲＮＡの両方は、典型的には、より長いかより短い一本鎖ＲＮＡ分子によって形成されるか、長さがほぼ等しい２つの一本鎖ＲＮＡ分子によって形成される。ここで、１つの一本鎖ＲＮＡ分子は、他の一本鎖ＲＮＡ分子に部分的に相補的であり、よってその領域において二本鎖ＲＮＡ分子（すなわち、部分的に二本鎖であるか部分的に一本鎖であるＲＮＡ）を形成する。好ましくは、本発明のワクチン／阻害剤の組合せのＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡは、一本鎖ＲＮＡであり得る。さらに、本発明のワクチン／阻害剤の組合せのＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡは、環状ＲＮＡであっても線状ＲＮＡであってもよく、好ましくは線状ＲＮＡである。より好ましくは、本発明のワクチン／阻害剤の組合せのＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡは、（線状の）一本鎖ＲＮＡであり得る。
好ましくは、本発明のワクチン／阻害剤の組合せのＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡは、約５〜約２００００の長さのヌクレオチドまたは１００〜約２００００の長さのヌクレオチドを含み、好ましくは、約２５０〜約２００００ヌクレオチドであり、より好ましくは、約５００〜約１００００ヌクレオチドであり、なおさらに好ましくは約５００〜約５０００ヌクレオチドである。
本発明の第１の局面の特に好ましい実施形態において、少なくとも１つのオープンリーディングフレームを含むＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡは、少なくとも１つの腫瘍抗原をコードする。この観点から、腫瘍抗原は、好ましくは（腫瘍）細胞の表面上に位置される。腫瘍抗原はまた、正常細胞（例えば非腫瘍細胞）と比較して腫瘍細胞において過剰発現されるタンパク質より選択され得る。さらに、腫瘍抗原はまた、それ自体が変性されていないが推定の腫瘍と関連している細胞に発現される抗原を含む。腫瘍を供給する脈管またはその再形成と連結された抗原、特に新脈管形成と関連する抗原（例えばＶＥＧＦ、ｂＦＧＦ等のような増殖因子）がまた本明細書中で含まれる。腫瘍と関連する抗原はさらに、細胞または組織（典型的には、腫瘍を包埋するもの）からの抗原を含む。さらに、いくつかの物質（通常タンパク質またはペプチド）が、癌疾患に（知ってか知らずにか）罹患している患者に発現されており、そのような患者の体液中での濃度の増加が生じている。これらの物質はまた「腫瘍抗原」といわれるが、これらは、免疫応答を誘導する物質の厳格な意味での抗原ではない。腫瘍抗原のクラスは、さらに腫瘍特異的抗原（ＴＳＡ）および腫瘍関連抗原（ＴＡＡ）に分けられる。ＴＳＡは、腫瘍細胞によってのみ提示され、正常な「健康」細胞によって提示されない。これらは、典型的には、腫瘍特異的変異から生じる。ＴＡＡはより一般的であり、腫瘍細胞と健康細胞との両方によって通常提示される。これらの抗原が認識され、抗原提示細胞が細胞傷害性Ｔ細胞によって破壊され得る。さらに、腫瘍抗原はまた、腫瘍の表面上に、例えば変異したレセプターの形態で生じ得る。この場合、これらは、抗体によって認識され得る。
さらに、腫瘍関連抗原は、腫瘍特異的抗原として分類され得、メラノサイト特異的抗原、癌−精巣抗原、および腫瘍特異的抗原とも呼ばれる。癌−精巣抗原は、典型的には、広範な種々の腫瘍において活性化され得る、生殖系関連遺伝子のペプチドまたはタンパク質であると理解されている。ヒト癌−精巣抗原は、さらにＸ染色体上にコードされる光源（すなわちＣＴ−Ｘ抗原）とＸ染色体上にコードされない抗原（いわゆる非Ｘ−ＣＴ抗原）に再分類され得る。Ｘ染色体上にコードされる癌−精巣抗原は、例えば、黒色腫抗原遺伝子のファミリー（いわゆるＭＡＧＥファミリー）を含む。ＭＡＧＥファミリーの遺伝子は、共通のＭＡＧＥホモロジードメイン（ＭＨＤ）によって特徴付けられ得る。これらの抗原（すなわち、メラノサイト特異的抗原、癌−精巣抗原および腫瘍特異的抗原）の各々は、自己の細胞性免疫応答および体液性免疫応答を惹起し得る。したがって、本発明に使用されるＲＮＡワクチンに含まれるＲＮＡによってコードされる腫瘍抗原は、好ましくは、メラノサイト特異的抗原、癌−精巣抗原または腫瘍特異的抗原であり、好ましくは、ＣＴ−Ｘ抗原であり得、非ＣＴ−Ｘ抗原であり得、ＣＴ−Ｘ抗原の結合パートナーまたは非ＣＴ−Ｘ抗原の結合パートナーまたは腫瘍特異的抗原であり得、より好ましくは、ＣＴ−Ｘ抗原、非ＣＴ−Ｘ抗原の結合パートナーまたは腫瘍特異的抗原であり得る。
本発明に従う特に好ましい腫瘍抗原は、以下からなる群より選択される：５Ｔ４、７０７−ＡＰ、９Ｄ７、ＡＦＰ、ＡｌｂＺＩＰ ＨＰＧ１、α−５−β−１−インテグリン、α−５−β−６−インテグリン、α−アクチニン−４／ｍ、α−メチルアシル−補酵素Ａラセマーゼ、ＡＲＴ−４、ＡＲＴＣ１／ｍ、Ｂ７Ｈ４、ＢＡＧＥ−１、ＢＣＬ−２、ｂｃｒ／ａｂｌ、β−カテニン／ｍ、ＢＩＮＧ−４、ＢＲＣＡ１／ｍ、ＢＲＣＡ２／ｍ、ＣＡ １５−３／ＣＡ ２７−２９、ＣＡ １９−９、ＣＡ７２−４、ＣＡ１２５、カルレチクリン、ＣＡＭＥＬ、ＣＡＳＰ−８／ｍ、カゼプシンＢ、カゼプシンＬ、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２５、ＣＤＥ３０、ＣＤ３３、ＣＤ４、ＣＤ５２、ＣＤ５５、ＣＤ５６、ＣＤ８０、ＣＤＣ２７／ｍ、ＣＤＫ４／ｍ、ＣＤＫＮ２Ａ／ｍ、ＣＥＡ、ＣＬＣＡ２、ＣＭＬ２８、ＣＭＬ６６、ＣＯＡ−１／ｍ、コアクトシン様タンパク質、コラーゲンＸＸＩＩＩ、ＣＯＸ−２、ＣＴ−９／ＢＲＤ６、Ｃｔｅｎ、サイクリンＢ１、サイクリンＤ１、ｃｙｐ−Ｂ、ＣＹＰＢ１、ＤＡＭ−１０、ＤＡＭ−６、ＤＥＫ−ＣＡＮ、ＥＦＴＵＤ２／ｍ、ＥＧＦＲ、ＥＬＦ２／ｍ、ＥＭＭＰＲＩＮ、ＥｐＣａｍ、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｒｂＢ３、ＥＴＶ６−ＡＭＬ１、ＥＺＨ２、ＦＧＦ−５、ＦＮ、Ｆｒａｕ−１、Ｇ２５０、ＧＡＧＥ−１、ＧＡＧＥ−２、ＧＡＧＥ−３、ＧＡＧＥ−４、ＧＡＧＥ−５、ＧＡＧＥ−６、ＧＡＧＥ７ｂ、ＧＡＧＥ−８、ＧＤＥＰ、ＧｎＴ−Ｖ、ｇｐ１００、ＧＰＣ３、ＧＰＮＭＢ／ｍ、ＨＡＧＥ、ＨＡＳＴ−２、ｈｅｐｓｉｎ、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、ＨＥＲＶ−Ｋ−ＭＥＬ、ＨＬＡ−Ａ＊０２０１−Ｒ１７Ｉ、ＨＬＡ−Ａ１１／ｍ、ＨＬＡ−Ａ２／ｍ、ＨＮＥ、ホメオボックスＮＫＸ３．１、ＨＯＭ−ＴＥＳ−１４／ＳＣＰ−１、ＨＯＭ−ＴＥＳ−８５、ＨＰＶ−Ｅ６、ＨＰＶ−Ｅ７、ＨＳＰ７０−２Ｍ、ＨＳＴ−２、ｈＴＥＲＴ、ｉＣＥ、ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＬ−１３Ｒａ２、ＩＬ−２Ｒ、ＩＬ−５、未成熟ラミニンレセプター、カリクレイン−２、カリクレイン−４、Ｋｉ６７、ＫＩＡＡ０２０５、ＫＩＡＡ０２０５／ｍ、ＫＫ−ＬＣ−１、Ｋ−Ｒａｓ／ｍ、ＬＡＧＥ−Ａ１、ＬＤＬＲ−ＦＵＴ、ＭＡＧＥ−Ａ１、ＭＡＧＥ−Ａ２、ＭＡＧＥ−Ａ３、ＭＡＧＥ−Ａ４、ＭＡＧＥ−Ａ６、ＭＡＧＥ−Ａ９、ＭＡＧＥ−Ａ１０、ＭＡＧＥ−Ａ１２、ＭＡＧＥ−Ｂ１、ＭＡＧＥ−Ｂ２、ＭＡＧＥ−Ｂ３、ＭＡＧＥ−Ｂ４、ＭＡＧＥ−Ｂ５、ＭＡＧＥ−Ｂ６、ＭＡＧＥ−Ｂ１０、ＭＡＧＥ−Ｂ１６、ＭＡＧＥ−Ｂ１７、ＭＡＧＥ−Ｃ１、ＭＡＧＥ−Ｃ２、ＭＡＧＥ−Ｃ３、ＭＡＧＥ−Ｄ１、ＭＡＧＥ−Ｄ２、ＭＡＧＥ−Ｄ４、ＭＡＧＥ−Ｅ１、ＭＡＧＥ−Ｅ２、ＭＡＧＥ−Ｆ１、ＭＡＧＥ−Ｈ１、ＭＡＧＥＬ２、マンマグロブリンＡ、ＭＡＲＴ−１／メラン−Ａ、ＭＡＲＴ−２、ＭＡＲＴ−２／ｍ、マトリクスタンパク質２２、ＭＣ１Ｒ、Ｍ−ＣＳＦ、ＭＥ１／ｍ、メゾセリン、ＭＧ５０／ＰＸＤＮ、ＭＭＰ１１、ＭＮ／ＣＡ ＩＸ−抗原、ＭＲＰ−３、ＭＵＣ−１、ＭＵＣ−２、ＭＵＭ−１／ｍ、ＭＵＭ−２／ｍ、ＭＵＭ−３／ｍ、ミオシン クラスＩ／ｍ、ＮＡ８８−Ａ、Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ−Ｖ、Ｎｅｏ−ＰＡＰ、Ｎｅｏ−ＰＡＰ／ｍ、ＮＦＹＣ／ｍ、ＮＧＥＰ、ＮＭＰ２２、ＮＰＭ／ＡＬＫ、Ｎ−Ｒａｓ／ｍ、ＮＳＥ、ＮＹ−ＥＳＯ−Ｂ、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＯＡ１、ＯＦＡ−ｉＬＲＰ、ＯＧＴ、ＯＧＴ／ｍ、ＯＳ−９、ＯＳ−９／ｍ、オステオカルシン、オステオポンチン、ｐ１５、ｐ１９０ マイナー ｂｃｒ−ａｂｌ、ｐ５３、ｐ５３／ｍ、ＰＡＧＥ−４、ＰＡＩ−１、ＰＡＩ−２、ＰＡＰ、ＰＡＲＴ−１、ＰＡＴＥ、ＰＤＥＦ、Ｐｉｍ−１−Ｋｉｎａｓｅ、Ｐｉｎ−１、Ｐｍｌ／ＰＡＲα、ＰＯＴＥ、ＰＲＡＭＥ、ＰＲＤＸ５／ｍ、プロステイン、プロテイナーゼ−３、ＰＳＡ、ＰＳＣＡ、ＰＳＧＲ、ＰＳＭ、ＰＳＭＡ、ＰＴＰＲＫ／ｍ、ＲＡＧＥ−１、ＲＢＡＦ６００／ｍ、ＲＨＡＭＭ／ＣＤ１６８、ＲＵ１、ＲＵ２、Ｓ−１００、ＳＡＧＥ、ＳＡＲＴ−１、ＳＡＲＴ−２、ＳＡＲＴ−３、ＳＣＣ、ＳＩＲＴ２／ｍ、Ｓｐ１７、ＳＳＸ−１、ＳＳＸ−２／ＨＯＭ−ＭＥＬ−４０、ＳＳＸ−４、ＳＴＡＭＰ−１、ＳＴＥＡＰ−１、サービビン、サービビン−２Ｂ、ＳＹＴ−ＳＳＸ−１、ＳＹＴ−ＳＳＸ−２、ＴＡ−９０、ＴＡＧ−７２、ＴＡＲＰ、ＴＥＬ−ＡＭＬ１、ＴＧＦβ、ＴＧＦβＲＩＩ、ＴＧＭ−４、ＴＰＩ／ｍ、ＴＲＡＧ−３、ＴＲＧ、ＴＲＰ−１、ＴＲＰ−２／６ｂ、ＴＲＰ／ＩＮＴ２、ＴＲＰ−ｐ８、チロシナーゼ、ＵＰＡ、ＶＥＧＦＲ１、ＶＥＧＦＲ−２／ＦＬＫ−１、およびＷＴ１。このような腫瘍抗原は、好ましくは、ｐ５３、ＣＡ１２５、ＥＧＦＲ、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、ｈＴＥＲＴ、ＰＡＰ、ＭＡＧＥ−Ａ１、ＭＡＧＥ−Ａ３、メゾセリン、ＭＵＣ−１、ＧＰ１００、ＭＡＲＴ−１、チロシナーゼ、ＰＳＡ、ＰＳＣＡ、ＰＳＭＡ、ＳＴＥＡＰ−１、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦＲ１、ＶＥＧＦＲ２、Ｒａｓ、ＣＥＡおよびＷＴ１からなる群より選択され、より好ましくは、ＰＡＰ，ＭＡＧＥ−Ａ３，ＷＴ１およびＭＵＣ−１からなる群より選択される。このような抗原は、好ましくは以下のからなる群より選択され得る：ＭＡＧＥ−Ａ１（例えば、アクセッション番号Ｍ７７４８１に従うＭＡＧＥ−Ａ１）、ＭＡＧＥ−Ａ２、ＭＡＧＥ−Ａ３、ＭＡＧＥ−Ａ６（例えば、アクセッション番号ＮＭ＿００５３６３に従うＭＡＧＥ−Ａ６）、ＭＡＧＥ−Ｃ１、ＭＡＧＥ−Ｃ２、メランＡ（例えば、アクセッション番号ＮＭ＿００５５１１に従うメランＡ）、ＧＰ１００（例えば、アクセッション番号Ｍ７７３４８に従うＧＰ１００）、チロシナーゼ（例えば、アクセッション番号ＮＭ＿０００３７２に従うチロシナーゼ）、サービビン（ｓｕｒｖｉｖｉｎｇ）（例えば、アクセッション番号ＡＦ０７７３５０に従うサービビン）、ＣＥＡ（例えば、アクセッション番号ＮＭ＿００４３６３に従うＣＥＡ）、Ｈｅｒ−２／ｎｅｕ（例えば、アクセッション番号Ｍ１１７３０に従うＨｅｒ−２／ｎｅｕ）、ＷＴ１（例えば、アクセッション番号ＮＭ＿０００３７８に従うＷＴ１）、ＰＲＡＭＥ（例えば、アクセッション番号ＮＭ＿００６１１５に従うＰＲＡＭＥ）、ＥＧＦＲＩ（上皮増殖因子レセプター１）（例えば、アクセッション番号ＡＦ２８８７３８に従うＥＧＦＲＩ）、ＭＵＣ１、ムシン−１（例えば、アクセッション番号ＮＭ＿００２４５６に従うムシン−１）、ＳＥＣ６１Ｇ（例えば、アクセッション番号ＮＭ＿０１４３０２に従うＳＥＣ６１Ｇ）、ｈＴＥＲＴ（例えば、アクセッション番号ＮＭ＿１９８２５３に従うｈＴＥＲＴ）、５Ｔ４（例えば、アクセッション番号ＮＭ＿００６６７０に従う５Ｔ４）、ＴＲＰ−２（例えば、アクセッション番号ＮＭ＿００１９２２に従うＴＲＰ−２）、ＳＴＥＡＰ１（６回膜貫通型前立腺上皮抗原１）、ＰＳＣＡ、ＰＳＡ、ＰＳＭＡ等。
この観点において、本発明のワクチン／阻害剤の組合せのＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡは、ＰＣＡ、ＰＳＡ、ＰＳＭＡ、ＳＴＥＡＰおよび任意にＭＵＣ−１、またはその断片、改変体もしくは誘導体より選択される腫瘍抗原をコードすることが好ましい。
さらにより好ましい実施形態において、本発明のワクチン／阻害剤の組合せのＲＮＡワクチンは、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＭＡＧＥ−Ｃ１、ＭＡＧＥ−Ｃ２、サービビン、必要に応じて５Ｔ４、必要に応じてＭＵＣ−１、またはこれらの断片、改変体もしくは誘導体からなる群より選択される腫瘍抗原をコードする少なくとも１つのＲＮＡを含む。
さらに、腫瘍抗原はまた、癌または腫瘍疾患（特に、リンパ腫またはリンパ腫関連疾患）に関連するイディオタイプ抗原を含み得る。ここで、上記イディオタイプ抗原は、リンパ球の免疫グロブリンイディオタイプであるか、またはリンパ球のＴ細胞レセプターイディオタイプである。
本発明の第１の局面のさらにより好ましい実施形態において、ＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡは、少なくとも１つの病原性抗原をコードする少なくとも１つのオープンリーディングフレームを含む。病原性抗原は、感染性疾患に関連する病原体に由来するペプチド抗原またはタンパク質抗原であり、好ましくは、以下の抗原に由来する抗原より選択される：アシネトバクター−バウマニ、アナプラズマ属、アナプラズマ・ファゴサイトフィラム、ブラジル鉤虫、ズビニ鉤虫、溶血性アルカノバクテリア、回虫、アスペルギルス属、アストロウイルス科、バベシア属、炭疽菌、セレウス菌、バルトネラ・ヘンセラ菌、ＢＫウイルス、ブラストシスティス・ホミニス、ブラストミセス・ダーマチチジス、百日咳菌、ボレリア・バーグドルフェリ、ボレリア属、ボレリア種、ブルセラ菌属、マレー糸状虫、ブンヤウイルス科、バークホルデリア・セパシア、他のバークホルデリア種、鼻疽菌、類鼻疽菌、カリチウイルス科、カンピロバクター属、カンジダ・アルビカンス、カンジダ種、クラミジア・トラコマチス、肺炎クラミジア、オウム病クラミジア、ＣＪＤプリオン、肝吸虫、ボツリヌス菌、クロストリジウム・ディフィシール、ウェルシュ菌、クロストリジウム・パーフリンジェンス、クロストリジウム種、破傷風菌、コクシジオイデス種、コロナウイルス、ジフテリア菌、コクシエラ−バーネッティ、クリミアコンゴ出血熱ウイルス、クリプトコッカス・ネオフォルマンス、クリプトスポリジウム属、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、デング熱ウイルス（ＤＥＮ−１、ＤＥＮ−２、ＤＥＮ−３およびＤＥＮ−４）、二核アメーバ、エボラウイルス（ＥＢＯＶ）、エキノコックス属、エールリヒア・シャフェンシス、エールリヒア・エビンジ、エールリヒア属、赤痢アメーバ、腸球菌属、エンテロウイルス属、エンテロウイルス、主要コクサッキーＡウイルス、エンテロウイルス７１（ＥＶ７１）、表皮菌属種、エプスタインバーウイルス（ＥＢＶ）、大腸菌、Ｏ１５７：Ｈ７、Ｏ１１１、Ｏ１０４：Ｈ４、肝蛭、巨大肝蛭、ＦＦＩプリオン、フィラリアスーパーファミリー、フラビウイルス属、野兎病菌、フゾバクテリウム属、ゲオトリクム‐カンジドゥム、ランブル鞭毛虫、顎口虫類、ＧＳＳプリオン、グアナリトウイルス、軟性下疳菌、インフルエンザ菌、ヘリコバクターピロリ、ヘニパウイルス（ヘンドラウイルス・ニパウイルス）、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）、Ｄ型肝炎ウイルス、Ｅ型肝炎ウイルス、単純疱疹ウイルス１および２（ＨＳＶ−１およびＨＳＶ−２）、ヒストプラズマ・カプスラーツム、ＨＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス）、ホルテア・ウェルネッキイ、ヒトボカウイルス（ＨＢｏＶ）、ヒトヘルペスウイルス６（ＨＨＶ−６）およびヒトヘルペスウイルス７（ＨＨＶ−７）、ヒトメタニューモウイルス（ｈＭＰＶ）、ヒト乳頭腫ウイルス（ＨＰＶ）、ヒトパラインフルエンザウイルス（ＨＰＩＶ）、日本脳炎ウイルス、ＪＣウイルス、フニンウイルス、キンゲラ属キンガ、クレブシエラ属グラニュロマティス、クールー・プリオン、ラッサ熱ウイルス、レジオネラ・ニューモフィラ菌、リーシュマニア属、レプトスピラ菌属、リステリア菌、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス（ＬＣＭＶ）、マチュポウイルス、マラセジア種、マールブルグ病ウイルス、はしかウイルス、メタゴニムス属ヨコガワ、微胞子虫類門、伝染性軟属腫ウイルス（ＭＣＶ）、ムンプスウイルス、ライ菌、マイコバクテリウム・レプロマトーシス、ヒト結核菌、マイコバクテリウム・ウルセランス、肺炎マイコプラズマ、ネグレリア・フォーレリ、アメリカ鉤虫、淋菌、髄膜炎菌、ノカルジア・アステロイデス、ノカルジア属種、回旋糸状虫、ツツガムシ病リケッチア、オルソミクソウイルス科（インフルエンザ）、南アメリカ分芽菌、肺吸虫種、ウエステルマン肺吸虫、パーボウイルスＢ１９、パスツレラ属属、マラリア原虫属、ニューモシスチス肺炎菌、ポリオウイルス、狂犬病ウイルス、ＲＳウイルス（ＲＳＶ）、ライノウイルス属、ライノウイルス、痘瘡リケッチア、リケッチア属、発疹チフスリケッチア、ロッキー山紅斑熱リケッチア、リケッチア・チフス、リフトバレー熱ウイルス、ロタウイルス、風疹ウイルス、サビアウイルス、サルモネラ属、ビゼンダニ、ＳＡＲＳコロナウイルス、住血吸虫属、赤痢菌属、シンノンブレウイルス、ハンタウイルス属、スポロトリックス‐シェンキィ、ブドウ球菌属、ブドウ球菌属、ストレプトコッカス・アガラクティー、肺炎球菌、化膿レンサ球菌、糞線虫属宿便症、条虫属、有鉤条虫、ダニ媒介の脳炎ウイルス（ＴＢＥＶ）、イヌ回虫、ネコ回虫、トキソプラズマ−ゴンヂ、梅毒トレポネーマ、旋毛虫、膣トリコモナス、白癬菌種、鞭虫、トリパノソーマ・ブルセイ、クルーズトリパノソーマ、ウレアプラズマ・ウレアリチカム、水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、水痘帯状疱疹ウイルス（ＶＺＶ）、大痘瘡、小痘瘡、ｖＣＪＤプリオン、ベネズエラウマ脳炎ウイルス、コレラ菌、西ナイルウイルス、西部ウマ脳炎ウイルス、バンクロフト糸状虫、黄熱ウイルス、エルシニア・エンテロコリチカ、ペスト菌、ならびに仮性結核菌。
この観点において、インフルエンザウイルス、ＲＳウイルス（ＲＳＶ）、単純疱疹ウイルス（ＨＳＶ）、ヒト乳頭腫ウイルス（ＨＰＶ）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、マラリア原虫、黄色ブドウ球菌、デング熱ウイルス、クラミジア・トラコマチス、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、ヒト結核菌、狂犬病ウイルスおよび黄熱ウイルスより選択される抗原が特に好ましい。
本発明の第１の局面に従う、少なくとも１つの抗原をコードする少なくとも１つのオープンリーディングフレームを含むＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡは、モノシストロン性（ｃｉｓｔｒｏｎｉｃ）、ビシストロン性、またはマルチシストロン性のＲＮＡ（すなわち、１つ、２つまたはより多くのタンパク質またはペプチドのオープンリーディングフレームを含むＲＮＡ）として生じ得る。ビシストロン性またはマルチシストロン性のＲＮＡにおけるそのようなオープンリーディングフレームは、例えば、本明細書中に記載されているような少なくとも１つの内部リボソームエントリーサイト（ＩＲＥＳ）によって分けられてもよく、いくつかのタンパク質またはペプチドを含むポリペプチドの切断を誘導するシグナルペプチドによって分けられてもよい。
本発明のワクチン／阻害剤の組合せのＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡは、種々の手法によるＲＮＡの不安定化および（迅速な）分解を回避するために安定化され得る。このＲＮＡの不安定化は、典型的には、ＲＮＡ分解酵素「ＲＮａｓｅ（リボヌクレアーゼ）」に起因し、そのようなリボヌクレアーゼの夾雑が溶液中でのＲＮＡをしばしば完全に分解し得る。よって、細胞の細胞質におけるＲＮＡの天然の分解は、非常に精巧に調節されており、ＲＮａｓｅの夾雑は、そのような組成物の使用の前の特別な処置によって、特にジエチルピロカーボネート（ＤＥＰＣ）を用いて、通常除かれ得る。天然の分解の多くのメカニズムが、従来技術において知られており、よく利用されている。例えば、ターミナル構造はｍＲＮＡに特に重要である。例えば、天然に存在するｍＲＮＡの５’末端に、通常、いわゆるキャップ構造が存在する。これは、５’キャップ構造ともよばれる改変されたグアノシンヌクレオチドである。そして、天然に存在するｍＲＮＡの３’末端に、２００個以下のアデノシンヌクレオチドの配列が存在する。これは、いわゆるポリＡテールとよばれる。さらなる実施形態において、本発明のワクチン／阻害剤の組合せのＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡは、以下の構造エレメントの少なくとも１つを含む：５’−および／または３’−ＵＴＲ配列（好ましくは、５’−および／または３’−ＵＴＲ修飾）、５’キャップ構造、ポリ（Ｃ）配列、ポリＡテール、および／またはポリアデニル化シグナル（好ましくは本明細書中で規定されているもの）。
さらなる実施形態において、本発明のワクチン／阻害剤の組合せのＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡは、好ましくは、以下の構造エレメントの少なくとも２つを含む：５’−および／または３’ＵＴＲ配列（好ましくは、５’−および／または３’−ＵＴＲ修飾）（例えば、αグロブリン遺伝子の３’−ＵＴＲの変異配列（ｍｕａｇ））；ヒストン−ステム−ループ構造（好ましくは、３’非翻訳領域におけるヒストン−ステム−ループ）；５’−キャップ構造；ポリ（Ｃ）配列；ポリＡテール；あるいはポリアデニル化シグナル（例えば、上述した５’−キャップ構造およびヒストン−ステム−ループ、ならびに潜在的にはポリＡテール）。
この観点において、本発明のワクチン／阻害剤の組合せに含まれる少なくとも１つの抗原をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡは、以下の構造を５’から３’の向きへ有している：
（ａ）必要に応じて、ＵＴＲ修飾を含む５’−ＵＴＲ；
（ｂ）上に規定されるような抗原をコードするオープンリーディングフレーム；
（ｃ）ＵＴＲ修飾を含む３’−ＵＴＲ；
（ｄ）少なくとも１つのヒストンステムループ、必要に応じてヒストンステムループの３’下流エレメントはヒストンを含まない；
（ｅ）ポリ（Ａ）構造、または必要に応じてポリアデニル化シグナル；および
（ｆ）ポリ（Ｃ）配列。
別の好ましい実施形態において、本発明のワクチン／阻害剤の組合せにおける少なくとも１つの抗原をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡは、以下の構造を５’から３’の向きへ有している：
（ａ）必要に応じて、ＵＴＲ修飾を含む５’−ＵＴＲ；
（ｂ）上に規定されるような抗原をコードするオープンリーディングフレーム；
（ｃ）ＵＴＲ修飾を含む３’−ＵＴＲ；
（ｄ）ポリ（Ａ）配列；
（ｅ）ポリ（Ｃ）配列；および
（ｆ）少なくとも１つのヒストンステムループ。
例えば、（例えば、エキソヌクレアーゼまたはエンドヌクレアーゼによる）インビボ分解に対する耐性をさらに改善するために、本発明のワクチン／阻害剤の組合せにおける少なくとも１つの抗原をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡは、安定化された核酸として、例えば、本明細書中で規定されるような改変された核酸の形態で提供され得る。本発明のさらなる実施形態に従えば、本発明のワクチン／阻害剤の組合せにおける少なくとも１つの抗原をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡは、好ましくは骨格修飾、糖修飾および／または塩基修飾によって、より好ましくは、本明細書中で規定されるようなＧ／Ｃ含量の修飾によって安定化される。これらの修飾の全てが、抗原に翻訳されるべき、逆転写されるべき、または複製されるべきＲＮＡの機能を修復することなく、少なくとも１つのＲＮＡに導入され得る。
別の実施形態に従えば、本発明のワクチン／阻害剤の組合せにおける少なくとも１つの抗原をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡは、ｍＲＮＡの、好ましくはそのオープンリーディングフレームのＧ（グアノシン）／Ｃ（シトシン）の含量を改変することによって改変され、そして安定化され得る。
ここで、本発明のワクチン／阻害剤の組合せにおける少なくとも１つの抗原をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡのＧ／Ｃ含量は、その特定の野生型（すなわち、本明細書中に規定されるような未修飾のＲＮＡ）のオープンリーディングフレームのＧ／Ｃ含量と比較して特に増加されている。しかし、本発明のワクチン／阻害剤の組合せにおける少なくとも１つの抗原をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡのオープンリーディングフレームの、コードされるアミノ酸配列は、特に野生型オープンリーディングフレームの、コードされるアミノ酸配列と比較して特に改変されていない。
本発明のさらに好ましい実施形態において、本発明のワクチン／阻害剤の組合せにおける少なくとも１つの抗原をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡは、好ましくは、個々のアミノ酸のｔＲＮＡをより高頻度で生じさせるコドンによって、所定のアミノ酸の低頻度のｔＲＮＡについてのコドンを置換することによって、本明細書中に規定されるように翻訳について最適化（コドン最適化）される。
この観点において、本発明のワクチン／阻害剤の組合せにおける少なくとも１つの抗原をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡにおける、増加した、特に最大化した一連のＧ／Ｃ含有量を、上記ＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡに含まれるオープンリーディングフレームにコードされるアミノ酸配列を修飾することなく、「頻繁な」コドンと接続することが特に好ましい。
本発明の観点において、本発明のワクチン／阻害剤の組合せにおける少なくとも１つの抗原をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡは、当該分野で公知の任意の方法（合成法（例えば、固相合成）、ならびに、例えばウイルス様粒子またはレプリコン粒子の細胞内での産生のようなインビボ伸長、またはインビトロ転写反応のようなインビトロ法を含む。）を用いて調製され得る。レプリコン（例えばαウイルスゲノムに基づいて自己増幅するＲＮＡ）は、標準的な分子技術を用いて自己増幅するＲＮＡをコードするＤＮＡプラスミドを構築することによって産生され得る。線状化したＤＮＡが、例えば、Ｔ７ ＲＮＡポリメラーゼによってインビトロで転写され、生じたＲＮＡが、例えばエレクトロポレーションによって細胞へ導入される。レプリコン粒子産生は、パッケージング圧政において評価され得る。ここで、インビトロで転写されたレプリコンおよび不完全ヘルパーＲＮＡを細胞へ同時にトランスフェクトされる（Perri et al., 2003. J. Virol. 77(19):10394-403; 12970424）。
さらなる実施形態において、本発明のワクチン／阻害剤の組合せのＲＮＡワクチンは、本明細書中に規定されるような、複数の（すなわち１個よりも多い）、好ましくは２〜１０個、より好ましくは２〜５個、最も好ましくは２〜４個のＲＮＡ分子を含む。これらのＲＮＡワクチンは、１個よりも多いＲＮＡ分子を含み、好ましくは種々の腫瘍抗原または病原性抗原を含む種々のペプチドまたはタンパク質をコードする。
この観点において、本発明のワクチン／阻害剤の組合せのＲＮＡワクチンは、複数の（典型的には１個、２個、３個、４個、５個、６個または１０個よりも多い核酸（例えば２〜１０個の核酸、好ましくは２〜５個の核酸）を意味する。）ＲＮＡ分子を含み、特に、前立腺癌（ＰＣａ）の処置に使用するために、少なくとも、
（ａ）少なくとも１つのペプチドまたはタンパク質をコードするＲＮＡ分子を含み、ここで、コードされるペプチドまたはタンパク質は、腫瘍抗原ＰＳＡまたはその断片、改変体もしくは誘導体を含む；
（ｂ）少なくとも１つのペプチドまたはタンパク質をコードするＲＮＡ分子を含み、ここで、コードされるペプチドまたはタンパク質は、腫瘍抗原ＰＳＭＡまたはその断片、改変体もしくは誘導体を含む；
（ｃ）少なくとも１つのペプチドまたはタンパク質をコードするＲＮＡ分子を含み、ここで、コードされるペプチドまたはタンパク質は、腫瘍抗原ＰＳＣＡまたはその断片、改変体もしくは誘導体を含む；
（ｄ）少なくとも１つのペプチドまたはタンパク質をコードするＲＮＡ分子を含み、ここで、コードされるペプチドまたはタンパク質は、腫瘍抗原ＳＴＥＡＰ−１またはその断片、改変体もしくは誘導体を含む；
（ｅ）少なくとも１つのペプチドまたはタンパク質をコードするＲＮＡ分子を含み、ここで、コードされるペプチドまたはタンパク質は、腫瘍抗原ＭＵＣ−１またはその断片、改変体もしくは誘導体を含む。
さらに好ましい実施形態において、本発明のワクチン／阻害剤の組合せのＲＮＡワクチンは、複数の（典型的には１個、２個、３個、４個、５個、６個または１０個よりも多い核酸（例えば２〜１０個の核酸、好ましくは２〜５個の核酸）を意味する）ＲＮＡ分子を含み、特に、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）の処置に使用するために、少なくとも、
（ａ）少なくとも１つのペプチドまたはタンパク質をコードするＲＮＡ分子を含み、ここで、コードされるペプチドまたはタンパク質は、腫瘍抗原ＮＹ−ＥＳＯ−１またはその断片、改変体もしくは誘導体を含む；
（ｂ）少なくとも１つのペプチドまたはタンパク質をコードするＲＮＡ分子を含み、ここで、コードされるペプチドまたはタンパク質は、腫瘍抗原ＭＡＧＥ−Ｃ１またはその断片、改変体もしくは誘導体を含む；
（ｃ）少なくとも１つのペプチドまたはタンパク質をコードするＲＮＡ分子を含み、ここで、コードされるペプチドまたはタンパク質は、腫瘍抗原ＭＡＧＥ−Ｃ２またはその断片、改変体もしくは誘導体を含む；
（ｄ）少なくとも１つのペプチドまたはタンパク質をコードするＲＮＡ分子を含み、ここで、コードされるペプチドまたはタンパク質は、腫瘍抗原サービビンまたはその断片、改変体もしくは誘導体を含む；
（ｅ）少なくとも１つのペプチドまたはタンパク質をコードするＲＮＡ分子を含み、ここで、コードされるペプチドまたはタンパク質は、腫瘍抗原５Ｔ４またはその断片、改変体もしくは誘導体を含む；
（ｆ）少なくとも１つのペプチドまたはタンパク質をコードするＲＮＡ分子を含み、ここで、コードされるペプチドまたはタンパク質は、腫瘍抗原ＭＵＣ−１またはその断片、改変体もしくは誘導体を含む。
本発明の１つの実施形態に従えば、本発明のワクチン／阻害剤の組合せにおける少なくとも１つの抗原をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡは、少なくとも１つのＲＮＡのトランスフェクション効率および／または免疫賦活性特性を増加させるための任意のさらなるビヒクル、トランスフェクション剤または複合体化剤とあわせて用いられることなくむき出しで（ｎａｋｅｄ）投与され得る。
好ましい実施形態において、本発明のワクチン／阻害剤の組合せにおける少なくとも１つの抗原をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡは、カチオン性もしくはポリカチオン性の化合物とともに、および／または本明細書中に規定されるようなポリマー担体とともに、処方され得る。よって、本発明の特定の実施形態において、本発明のワクチン／阻害剤の組合せにおける少なくとも１つの抗原をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡは、カチオン性もしくはポリカチオン性の化合物または本明細書中に規定されるようなポリマー担体を伴うか、またはこれらと複合体化される。ＲＮＡのカチオン性もしくはポリカチオン性の化合物および／またはポリマー担体に対する重量比は、必要に応じて、約６：１（ｗ／ｗ）〜約０．２５：１（ｗ／ｗ）、より好ましくは約５：１（ｗ／ｗ）〜約０．５：１（ｗ／ｗ）、さらにより好ましくは約４：１（ｗ／ｗ）〜約１：１（ｗ／ｗ）、または約３：１（ｗ／ｗ）〜約１：１（ｗ／ｗ）の範囲から選択され、最も好ましくは約３：１（ｗ／ｗ）〜約２：１（ｗ／ｗ）の比である。また、Ｎ／Ｐ比は必要に応じて少なくとも０．１、０．２、０．３、０．４、０．５、０．７５、１、１．５または２である。好ましくは、Ｎ／Ｐ比は、約０．１、０．３、０．４、０．５、０．７５、１、１．５または２から２０までの範囲内であり、好ましくは約０．２（０．５または０．７５または１．０）〜１２の範囲内であり、さらに好ましくは約０．４（０．７５または１．０）〜１０の範囲内であり、なおさらに好ましくは約０．４（０．７５または１．０）〜５の範囲内である。最も好ましくは、Ｎ／Ｐ比は０．１と０．９との間の値である。
この観点において、担体または複合体化剤として使用されるカチオン性もしくはポリカチオン性の化合物および／またはポリマー担体と、本発明のワクチン／阻害剤の組合せにおける少なくとも１つの抗原をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡとは、インビトロ適用のために、少なくとも約１のＮ／Ｐ比、好ましくは約１〜２０の範囲のＮ／Ｐ比で提供される（例えば、この場合、患者から抽出された細胞がインビトロで本発明の薬学的組成物で処置されて、引き続いてその患者へ投与される）。
インビボ適用のために、Ｎ／Ｐ比は少なくとも０．１（０．２、０．３、０．４、０．５、０．６）であることが好ましく、好ましくは約０．１（０．２、０．３、０．４、０．５または０．６）〜１．５の範囲内である。さらにより好ましくは、Ｎ／Ｐ比は０．１（または０．２）〜０．９の範囲内であるか、０．５〜０．９の範囲内である。
Ｎ／Ｐ比は、得られる複合体（カチオン性もしくはポリカチオン性の化合物またはポリマー担体と、核酸カーゴ（例えば、ＲＮＡワクチンに含まれる少なくとも１つの抗原をコードする少なくとも１つのＲＮＡ）またはアジュバント核酸とからなる複合体）の表面電荷に著しく影響を与える。したがって、得られるポリマー担体カーゴ複合体は、インビトロ適用では正に帯電し、インビボ適用では負または中性に帯電していることが好ましい。得られるポリマー担体カーゴ複合体の表面電荷は、ゼータ電位として示すことができ、これは、Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ Ｎａｎｏ（Ｍａｌｖｅｒｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ、Ｍａｌｖｅｒｎ、ＵＫ）を使用してドップラー電気泳動法によって測定することができる。
本発明のワクチン／阻害剤の組合せにおける少なくとも１つの抗原をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡはまた、上記少なくとも１つのＲＮＡのトランスフェクション効率および／または免疫賦活性特性を向上させるために、ビヒクル、トランスフェクション剤または複合体化剤と結び付けられ得る。
この観点において、本発明のワクチン／阻害剤の組合せにおける少なくとも１つの抗原をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡは、カチオン性もしくはポリカチオン性の化合物および／またはポリマー担体（好ましくはカチオン性のタンパク質またはペプチド）と、少なくとも部分的に複合体化されていることが好ましい。「部分的」は、少なくとも１つのＲＮＡの一部がカチオン性化合物と複合体化し、ＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡの残余部分が本発明のワクチン／阻害剤の組合せに複合体化されていない形態（「フリーの」または「むき出しの」）で含まれていることを意味する。好ましくは、本発明のワクチン／阻害剤の組合せのＲＮＡワクチンにおける、複合体化されたＲＮＡと複合体化されていないＲＮＡとの比は、約５：１（ｗ／ｗ）〜約１：１０（ｗ／ｗ）の範囲内から選択され、好ましくは、約４：１（ｗ／ｗ）〜約１：８（ｗ／ｗ）の範囲内から、より好ましくは、約３：１（ｗ／ｗ）〜約１：５（ｗ／ｗ）（または約１：３（ｗ／ｗ））の範囲内から選択され、最も好ましくは、本発明のワクチン／阻害剤の組合せのＲＮＡワクチンにおける、複合体化されたＲＮＡとフリーのＲＮＡとの比は、約１：１（ｗ／ｗ）の値から選択される。
本発明のワクチン／阻害剤の組合せのＲＮＡワクチンにおける少なくとも１つの複合体化ＲＮＡは、少なくとも１つのＲＮＡをカチオン性もしくはポリカチオン性の化合物および／またはポリマー担体と、好ましくは本明細書中に記載されるように、安定な複合体を形成するための特定の比で、複合体化することによる第１の工程に従って好ましくは調製される。この観点において、フリーのカチオン性もしくはポリカチオン性の化合物またはポリマー担体が、ＲＮＡ複合体化の後の複合体化ＲＮＡの成分中に全く含まれないか、あるいは流通可能な（ｎｅｇｌｉｇｉｂｌｙ）程度に少量のみ含まれることが、非常に好ましい。よって、複合体化ＲＮＡの成分中のＲＮＡと、カチオン性もしくはポリカチオン性の化合物および／またはポリマー性の担体との比は、典型的には、ＲＮＡが完全に複合体化されており、カチオン性もしくはポリカチオン性の化合物またはポリマー担体が組成物中に全く含まれていないか、あるいは流通可能な程度に少量のみ含まれる、という範囲内で選択される。
好ましくは、少なくとも１つの抗原をコードする少なくとも１つのオープンリーディングフレームを含む少なくとも１つのＲＮＡ（例えばｍＲＮＡ）の、好ましくはカチオン性もしくはポリカチオン性の化合物または本明細書中に規定されるようなポリマー担体に対する比は、約６：１（ｗ／ｗ）〜約０．２５：１（ｗ／ｗ）、より好ましくは約５：１（ｗ／ｗ）〜約０．５：１（ｗ／ｗ）、さらにより好ましくは約４：１（ｗ／ｗ）〜約１：１（ｗ／ｗ）、または約３：１（ｗ／ｗ）〜約１：１（ｗ／ｗ）の範囲から選択され、最も好ましくは約３：１（ｗ／ｗ）〜約２：１（ｗ／ｗ）である。あるいは、複合体化したＲＮＡの成分における、ＲＮＡ（例えばｍＲＮＡ）の、好ましくはカチオン性もしくはポリカチオン性の化合物または本明細書中に規定されるようなポリマー担体に対する比はまた、複合体全体の窒素／ホスフェート比（Ｎ／Ｐ比）に基づいて算出され得る。本発明の観点において、好ましくはカチオン性もしくはポリカチオン性の化合物および／または本明細書中に規定されるようなポリマー担体 対 ＲＮＡについて、Ｎ／Ｐ比は、当該複合体において、好ましくは約０．１〜１０の範囲内であり、より好ましくは約０．３〜４の範囲内であり、さらに好ましくは約０．５〜２または０．７〜２の範囲内であり、最も好ましくは約０．７〜１．５、０．５〜１または０．７〜１の範囲内であり、複合体中のカチオン性もしくはポリカチオン性の化合物が、カチオン性もしくはポリカチオン性のタンパク質もしくはペプチド、および／または上に規定されるようなポリマー担体である限り、さらに最も好ましくは約０．３〜０．９または０．５〜０．９の範囲内である。この特定の実施形態において、複合体化ＲＮＡはまた用語「アジュバント成分」に包含される。
別の実施形態において、上に規定されるような本発明のワクチン／阻害剤の組合せのＲＮＡワクチンにおける少なくとも１つの抗原提供（ａｎｔｉｇｅｎ−ｐｒｏｖｉｄｉｎｇ）ＲＮＡは、アジュバントと一緒に処方され得る。このようなアジュバントは好ましくはさらなる核酸であり得、この核酸はさらなる抗原をコードしないが非特異的免疫応答（すなわち先天性免疫）を、先天性免疫系の任意の部位と相互作用することによって刺激し得る。非特異的な免疫応答を刺激するこのような核酸は、本明細書中において「アジュバント核酸」と称する。
この観点において、アジュバント核酸は、好ましくはオリゴポリヌクレオチドまたはポリヌクレオチドを含むか、オリゴポリヌクレオチドまたはポリヌクレオチドからなり、より好ましくは、アジュバント核酸はＲＮＡまたはＤＮＡを含むかＲＮＡまたはＤＮＡからなり、さらにより好ましくは、このようなアジュバント核酸は、カチオン性もしくはポリカチオン性の化合物および／または本明細書中に規定されるようなポリマー担体と複合体化しているＲＮＡまたはＤＮＡを含むか、このようなＲＮＡまたはＤＮＡからなる。必要に応じて、アジュバント核酸の、カチオン性もしくはポリカチオン性の化合物またはポリマー担体に対する比は、約６：１（ｗ／ｗ）〜約０．２５：１（ｗ／ｗ）、より好ましくは約５：１（ｗ／ｗ）〜約０．５：１（ｗ／ｗ）、さらにより好ましくは約４：１（ｗ／ｗ）〜約１：１（ｗ／ｗ）、または約３：１（ｗ／ｗ）〜約１：１（ｗ／ｗ）の範囲から選択され、最も好ましくは約３：１（ｗ／ｗ）〜約２：１（ｗ／ｗ）であり、必要に応じて、カチオン性もしくはポリカチオン性の化合物またはポリマー担体のアジュバント核酸に対する窒素／ホスフェート比は、約０．１〜１０の範囲内であり、より好ましくは約０．３〜４の範囲内であり、さらに好ましくは約０．７〜１または０．５〜１の範囲内であり、最も好ましくは約０．３〜０．９または０．５〜０．９の範囲内である。このような複合体化アジュバント核酸はまた、用語「アジュバント成分」に包含される。
ＩＦＮ−αの誘導が意図される特定の場合において、Ｎ／Ｐ比は少なくとも０．１（０．２、０．３、０．４、０．５または０．６）であるか０．１〜１の範囲であることが好ましく、より好ましくは、Ｎ／Ｐ比は０．１（または０．２）〜０．９の範囲内であるか、０．５〜０．９の範囲内である。さもなければ、ＴＮＦ−αの誘導が意図される場合、１〜２０のＮ／Ｐ比が特に好ましい。
換言すれば、本発明に従うワクチン／阻害剤の組合せのＲＮＡワクチンは、少なくとも１つの抗原をコードする少なくとも１つのＲＮＡ、および、アジュバント核酸と呼ばれるアジュバントとして作用するさらなる核酸を含み得る。もちろん、本発明のワクチン／阻害剤の組合せのＲＮＡワクチンは、唯一のアジュバント核酸を含むことに限定されず、いくつかの異なる核酸を含んでもよい。抗原をコードする核酸およびアジュバント核酸の両種の核酸が、互いに独立して、本明細書中に規定されるような担体と複合体化され得る。よって、少なくとも１つの抗原をコードするＲＮＡワクチンの少なくとも１つのＲＮＡまたはアジュバント核酸を複合体化するために使用されるカチオン性もしくはポリカチオン性の化合物および／またはポリマー担体は、本明細書中に規定されるような、任意のカチオン性もしくはポリカチオン性の化合物および／またはポリマー担体から選択され得る。
本発明のワクチン／阻害剤の組合せのＲＮＡワクチン（または本発明のワクチン／阻害剤の組合せ）が抗原提供ＲＮＡおよびさらなるアジュバント核酸を含む場合、そのようなワクチンの投与によって惹起される免疫応答は、適応免疫系および先天性免疫という免疫系の両方の部位の活性化を含む。
適切な適応免疫応答の実質的な要因は、種々のＴ細胞亜集団の刺激である。Ｔリンパ球は、典型的には、２つの亜集団、すなわち、Ｔヘルパー１細胞（以下、Ｔｈ１細胞）およびＴヘルパー２細胞（以下、Ｔｈ２細胞）に分けられ、これらとともに、免疫系は、細胞内の病原体および細胞外の病原体（例えば、抗原）を破壊することができる。したがって、Ｔｈ１細胞は、マクロファージおよび細胞傷害性Ｔ細胞の活性化による細胞性免疫応答を補助することによって細胞内の病原体の破壊を担う。他方で、Ｔｈ２細胞は、細胞外病原体の除去を担い、プラズマ細胞への変換のためのＢ細胞の刺激によって、および抗体（例えば、抗原に対する）の形成によって、体液性免疫応答を促す。２つのＴｈ細胞集団は、これらによって産生されるエフェクタータンパク質（サイトカイン）のパターンが異なる。
Ｔｈ１／Ｔｈ２比は、適応免疫応答の誘導および維持において非常に重要である。本発明に関連して、（適応）免疫応答のＴｈ１／Ｔｈ２比は、細胞応答（Ｔｈ１応答）への方向にシフトされることが好ましく、それによって、細胞性免疫応答が誘導される。この適応免疫系の応答の刺激は主に、光源を提供するＲＮＡの翻訳と、それによって生じた生物内のペプチド抗原またはタンパク質抗原の存在とによって引き起こされる。
適応免疫応答を支持し得、そしてＴｈ１応答へ向けてのシフトを誘導または支持し得る生得免疫系は、トール様受容体（ＴＬＲ）のリガンドによって活性化され得る。ＴＬＲは、病原体関連分子パターン（ＰＡＭＰ）を認識し、哺乳動物における先天性免疫において極めて重要な役割を果たす、高度に保存されたパターン認識受容体（ＰＲＲ）ポリペプチドのファミリーである。現在までに、ＴＬＲ１〜ＴＬＲ１３と称される、少なくとも１３個のファミリーメンバー（トール様受容体：ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、ＴＬＲ１０、ＴＬＲ１１、ＴＬＲ１２、またはＴＬＲ１３）が同定されている。さらに、いくつかの特定のＴＬＲリガンドが同定されている。例えば、非メチル化細菌性ＤＮＡおよびその合成類似体（ＣｐＧ ＤＮＡ）は、ＴＬＲ９のリガンドであることが見出された（Hemmi H et al. (2000) Nature 408:740-5; Bauer S et al. (2001) Proc Natl. Acad. Sci. USA 98, 9237-42）。さらに、ある特定のＴＬＲのリガンドは、ある特定の核酸分子を含み、ある特定のタイプのＲＮＡは、配列非依存様式または配列依存様式で免疫賦活性であり、これらの種々の免疫賦活性ＲＮＡは、例えば、ＴＬＲ３、ＴＬＲ７、もしくはＴＬＲ８、またはＲＩＧ−Ｉ、ＭＤＡ−５などの細胞内受容体を刺激することができることが報告されている。
本発明の観点において、先天性免疫系の活性化は、アジュバント核酸、好ましくは、本明細書中に規定されるような免疫賦活性ＲＮＡ（ｉｓＲＮＡ）によって引き起こされ得る。このようなアジュバント核酸は、本発明のワクチン／阻害剤の組合せに含まれ、好ましくは、ＲＮＡワクチンに含まれる。
これらに従えば、本発明のさらに好ましい実施形態において、本発明のワクチン／阻害剤の組合せのＲＮＡワクチンは、以下の（ａ）〜（ｃ）を含んで処方される：
（ａ）少なくとも１つの抗原をコードする少なくとも１つのオープンリーディングフレームを含む少なくとも１つのＲＮＡであって、好ましくは、モノシストロン性、ビシストロン性、またはマルチシストロン性のＲＮＡの形態で、必要に応じて安定化されており、必要に応じて、翻訳に最適化されており、および／または必要に応じてカチオン性もしくはポリカチオン性の化合物またはポリマー担体と複合体化されている、ＲＮＡ；
（ｂ）必要に応じて、少なくとも１つの抗原をコードする少なくとも１つのオープンリーディングフレームを含む少なくとも１つの上記ＲＮＡおよび／または少なくとも１つのアジュバント核酸を含むか、これらからなり、カチオン性もしくはポリカチオン性の化合物および／またはポリマー担体と複合体化されている、アジュバント成分；ならびに
（ｃ）必要に応じて、本明細書中に規定されるような薬学的に受容可能な担体。
この観点において、必要に応じて含まれるアジュバント成分は、抗原提供ＲＮＡ（例えば、少なくとも１つの抗原をコードするｍＲＮＡ）として本発明のワクチン／阻害剤の組合せのＲＮＡワクチンに含まれるものと同じＲＮＡを含むことが特に好ましい。
さらに、本発明のワクチン／阻害剤の組合せのＲＮＡワクチンは、ＲＮＡワクチンの成分の投与および取込みを容易にするためのさらなる成分を含み得る。そのようなさらなる成分は、適切な担体またはビヒクルであり得、あるいは、例えば、本明細書中で規定されるような任意の免疫応答を支持するためのさらなるアジュバントであり得る。
１つのさらなる実施形態に従えば、本発明のワクチン／阻害剤の組合せのＲＮＡワクチンの成分（例えば、少なくとも１つの抗原をコードする少なくとも１つのＲＮＡおよびアジュバント成分）は、同一または異なる組成物に一緒にまたは別々に処方され得る。
第２の成分として、本発明のワクチン／阻害剤の組合せは、ＰＤ−１シグナル経路の任意のメンバーを標的化（好ましくはＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２を標的化）するＰＤ−１経路阻害剤を含む組成物を阻害剤として含む。
Ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ Ｄｅａｔｈ−１（ＰＤ−１，ＰＤＣＤ１）は、Ｔ細胞レギュレーターの拡大されたＣＤ２８ファミリーに属するタイプＩの膜貫通型タンパク質である。ＰＤ−１は、ＣＤ２８ファミリーの他のメンバーのホモダイマー化に必要とされる膜近傍のシステイン残基を欠いている。構造解析および生化学的解析は、ＰＤ−１が溶液中および細胞表面上でモノマー化していることを示す（Okazaki and Honjo, 2007. Int Immunol. 19(7):813-24）。ＰＤ−１は、活性化したＴ細胞、Ｂ細胞および単球の上に発現される。ＰＤ＝１の広範な発言は、他のＣＤ２８ファミリーメンバーの発現がＴ細胞に限定されていることと対照的である。このことは、ＰＤ−１が、他のＣＤ２８ファミリーメンバーと比較して広範なスペクトルの免疫応答を調節することを示唆する。
ＰＤ−１は、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２の２つのリガンドの何れかと相互作用する際にタンパク質チロシンホスファターゼＳＨＰ−２を集めることによって抗原レセプターシグナルを負に調節する。
ＰＤ−Ｌ１（Ｂ７−Ｈ１，ＣＤ２７４）およびＰＤ−Ｌ２（Ｂ７−ＤＣ，ＣＤ２７３）は、ＩｇＣタイプおよびＩｇＶタイプの細胞外ドメインから構成されるタイプＩの膜貫通型糖タンパク質である。ＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２は、４０％のアミノ酸同一性を有し、ＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２のヒトおよびマウスのオルソログは、７０％のアミノ酸同一性を有する。ＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２は何れも、短い細胞質テールを有し、シグナル伝達についての公知のモチーフを有していない。このことは、これらのリガンドがＰＤ−１との相互作用の際のシグナルを伝達しないことを示唆する。
ＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−１の相互作用は、Ｔ細胞に対する重大な負の同時刺激シグナルを提供し、細胞死誘導因子として機能する。低濃度でのＰＤ−１およびＰＤ−Ｌ１の相互作用は、阻害シグナルの伝播を導き、抗原特異的ＣＤ８＋細胞の増殖を阻害する。高濃度では、この相互作用は、Ｔ細胞増殖を阻害せず複数のサイトカインの産生を低減させる。よって、ＰＤ−Ｌ１への結合は、抗原性刺激が弱い場合にＢ７−ＣＤ２８シグナルをアンタゴナイズし得、Ｔ細胞応答を下方制御する際の重要な役割を担う。
Ｔ細胞の活性化および増殖を阻害する際のＰＤ−１およびＰＤ−１リガンドの役割は、これらのタンパク質が炎症性疾患、癌疾患または感染性疾患の処置のための治療標的として機能し得ることを示唆した。所望の治療効果に依存して、ＰＤ−１経路の上方制御または下方制御が必要とされる。免疫系の上方制御は、癌および慢性の感染症の処置に特に必要とされる。これは、例えば、ＰＤ−１ブロックまたはＰＤ−１経路の阻害によって達成され得る。ＰＤ−１経路の阻害は、例えば、ＰＤ−１またはＰＤ−１リガンドに対する抗体によって達成され得る。この観点において、ＰＤ−１経路阻害剤は、ＰＤ−１シグナルによって生じるＴ細胞の機能不全を取り除いてＴ細胞機能（例えば、増殖、サイトカイン産生、標的細胞の殺傷）を修復または増強し得る。さらに、抗原刺激に応答性でないアネルギーＴ細胞が再度活性化され得る。
本発明の観点において、ＰＤ−１経路阻害剤は、特定の実施形態において以下であり得る：抗体、特に拮抗阻害抗体または核酸にコードされる抗体（細胞内抗体）、ｓｉＲＮＡ、アンチセンスＲＮＡ、ＰＤ−１に結合し得るがＰＤ−１シグナリングを妨げないアミノ酸配列を含むタンパク質（例えば、ＰＤ−Ｌ１またはＰＤ−Ｌ２の断片と免疫グロブリンのＦｃ領域との融合タンパク質）（または上記タンパク質をコードする核酸）、膜結合ＰＤ−１と、そのリガントであるＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２の結合について競合する可溶性タンパク質（または可溶性タンパク質をコードする核酸）、あるいはＰＤ−１経路シグナリングを阻害し得る低分子阻害剤。
したがって、本発明の好ましい実施形態において、ＰＤ−１経路阻害剤は、ＰＤ−１に対する抗体（または抗体をコードする核酸）であり、好ましくは、ＰＤ−１の細胞外ドメインに特異的に結合してＰＤ−１シグナリングを阻害する抗体である。好ましくは、そのような拮抗阻害抗体は、ＰＤ−１上のＰＤ−Ｌ１結合部位に近くに結合し、それにより、ＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１への結合を阻害する。
抗ＰＤ−１抗体であるＮｉｖｏｌｕｍａｂ（MDX-1106/BMS-936558/ONO-4538）、（Brahmer et al., 2010. J Clin Oncol. 28(19):3167-75; PMID: 20516446）；Ｐｉｄｉｌｉｚｕｍａｂ（CT-011）、（Berger et al., 2008. Clin Cancer Res. 14(10):3044-51; PMID: 18483370）；およびＭＫ−３４７５（SCH 900475）が特に好ましい。
さらに好ましい実施形態において、ＰＤ−１経路阻害剤は、ＰＤ−１リガンドに対する抗体（または抗体をコードする核酸）であり、好ましくは、ＰＤ−１リガンドまたはＰＤ−２リガンドの細胞外ドメインに特異的に結合する抗体である。好ましくは、このような抗体は、リガンド上のＰＤ−１結合部位またはＰＤ−２結合部位の近位に結合し、そしてこれらの部位を破壊し得る。
抗ＰＤ−Ｌ１抗体であるＭＤＸ−１１０５／ＢＭＳ−９３６５５９（Brahmer et al. 2012. N Engl J Med. 366(26):2455-65; PMID: 22658128）；ＭＰＤＬ３２８０Ａ／ＲＧ７４４６、またはＭＥＤＩ４７３６が特に好ましい。
さらに好ましい実施形態において、ＰＤ−１経路阻害剤は、ＰＤ−１に結合し得るがＰＤ−１経路シグナリングを妨げないアミノ酸配列を含むタンパク質であり、この観点において特に好ましくは、ＰＤ−Ｌ１リガンドまたはＰＤ−Ｌ２リガンドの断片の融合タンパク質である。
この観点において、特に好ましい実施形態は、ＰＤ−Ｌ１もしくはＰＤ−Ｌ２の細胞外ドメインまたはＰＤ−１に結合し得るその断片と、免疫グロブリンのＦｃ領域とを含む融合タンパク質である。このような融合タンパク質の例は、ＡＭＰ−２２４（マウスＩｇＧ２ａタンパク質の未改変Ｆｃ領域に融合させたマウスＰＤ−Ｌ２／Ｂ７−ＤＣ細胞外ドメイン；Mkrtichyan et al., 2012. J Immunol. 189(5):2338-47; PMID: 22837483）である。
本発明の観点において、ワクチンおよび阻害剤の投与は、同時であっても適宜時間差であってもよく、後にさらに詳述するように、同一部位での投与でも異なる部位での投与でもよい。
ＲＮＡワクチンおよびＰＤ−１経路阻害剤によって惹起される別々のメカニズムが互いにネガティブに影響しないことを確実にするために、ＰＤ−１経路阻害剤およびＲＮＡワクチンは、好ましくは適宜時間を空けて（時差的な様式で）すなわち連続的に投与される、および／または異なる投与部位で投与される。このことは、ＲＮＡワクチンがＰＤ−１経路阻害剤の前に、同時に、または引き続いて（あるいは逆に）投与され得ることを意味する。代替的に、または付加的に、ＲＮＡワクチンおよびＰＤ−１経路阻害剤は、異なる投与部位で、または同一の投与部位で、好ましくは、時差的な様式で投与され得る。特定の好ましい実施形態に従えば、ＲＮＡワクチンが先ず投与されて、ＰＤ−１経路阻害剤がＲＮＡワクチンに続いて投与される。この手順は、同時投与または単回投与であっても、ＰＤ−１経路の阻害によって免疫系が刺激される前に免疫細胞（例えば、抗原提示細胞およびＴ細胞）が抗原とすでに遭遇していることを確実にする。ここで、ＰＤ−１経路阻害剤は、ＲＮＡワクチンの前に投与されるべきであり、同一の、または少なくとも匹敵する結果を導き得る。
したがって、さらなる実施形態において、本発明のワクチン／阻害剤の組合せは、薬学的に受容可能な担体および／またはビヒクルをさらに含む。
そのような薬学的に受容可能な担体は、典型的には、液体ベースまたは非液体ベースの組成物を含み、この組成物は、本発明のワクチン／阻害剤の組合せの成分を含む。上記組成物が液体形態の場合、担体は、好ましくはパイロジェンフリーの水、生理食塩水または緩衝化された（水）溶液（例えばホスフェート、シトレート等の緩衝化溶液）である。注射液は、特定の参照媒体を参照した高張液、等張液または低張液であり得る。すなわち、緩衝液は、特定の参照媒体に対して高濃度、等濃度、低濃度の塩を含み得る。ここで、好ましくは、前述した塩のそのような濃度を使用され得、これは浸透圧または濃度による他の効果に起因して細胞に損傷を与えない。参照媒体は、例えば「インビボ」法にて生じる液体（例えば、血液、リンパ液、細胞質液、または他の体液）であるか、または、例えば「インビトロ」法にて参照媒体として使用され得る液体（例えば共通の緩衝液または液体）である。このような共通の緩衝液または液体は、当業者に公知である。乳酸リンゲル液は、液体ベースとして特に好ましい。
しかし、処置されるべき患者への投与に適した、１つ以上の、適合性の固体または液体の充填剤または希釈剤または封入化合物（ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｎｇ ｃｏｍｐｏｕｎｄ）は、本発明のワクチン／阻害剤の組合せのために同様に使用され得る。本明細書中にて使用される場合、用語「適合性」は、ワクチン／阻害剤の組合せのこれらの構成要素が、典型的な使用条件下で、ワクチン／阻害剤の組合せの薬学的な有効性を実質的に低減させる相互作用が全く生じない様式で、ＲＮＡワクチンおよび／またはＰＤ−１経路阻害剤と混合され得ることを意味する。
さらに、本発明のワクチン／阻害剤の組合せは、１つ以上のさらなるアジュバントを含み得る。このアジュバントは、特に、病原体関連分子パターン（ＰＡＭＰ）に結合することによって、先天性免疫系の免疫応答（すなわち、非特異的免疫応答）を開始させるかまたは増加させるに適切である。換言すると、投与された場合に、ＲＮＡワクチンは、好ましくは、必要に応じてその中に含まれているアジュバントに起因して先天性免疫応答を惹起する。いうまでもなく、アジュバントはまた、本発明のワクチン／阻害剤の組合せの、ＲＮＡワクチン以外の成分の一部であり得る。好ましくは、このようなアジュバントが当業者に知られておりかつ本ケースに適切である（すなわち、哺乳動物における先天性免疫応答の誘導を支持する）アジュバント（例えば、アジュバント核酸または上に規定されるようなアジュバント成分または以下に規定されるようなアジュバント）から選択され得る。
したがって、そのようなアジュバントもまた、当業者に知られておりかつ本ケースに適切である（すなわち、哺乳動物における先天性免疫応答の誘導を支持する、および／または本発明のワクチン／阻害剤の組合せの成分の貯蔵および送達に適切である）任意のアジュバントより選択され得る。貯蔵および送達に適切なアジュバントとして、上に規定されるようなカチオン性もしくはポリカチオン性の化合物が好ましい。あるいは、アジュバントは、以下からなる群より選択され得る：キトサン、ＴＤＭ、ＭＤＰ、ムラミルジペプチド、プルロニクス、ミョウバン溶液、水酸化アルミニウム、ＡＤＪＵＭＥＲＴＭ（ポリホスファゼン）；リン酸アルミニウムゲル；藻類由来グルカン；アルガムリン；水酸化アルミニウムゲル（ミョウバン）；タンパク質を高度に吸着した水酸化アルミニウムゲル；低粘度の水酸化アルミニウムゲル；ＡＦまたはＳＰＴ（スクアレン（５％）、Ｔｗｅｅｎ ８０（０．２％）、プルロニックＬ１２１（１．２５％）、リン酸緩衝化生理食塩水（ｐＨ ７．４）のエマルション）；ＡＶＲＩＤＩＮＥＴＭ（プロパンジアミン）；ＢＡＹ Ｒ１００５ＴＭ（Ｎ−（２−デオキシ−２−Ｌ−ロイシルアミノｂ−Ｄ−グルコピラノシル）−Ｎ−オクタデシル−ドデカノイル−アミドヒドロアセテート）；ＣＡＬＣＩＴＲＩＯＬＴＭ（１−α，２５−ジヒドロキシ−ビタミンＤ３）；リン酸カルシウムゲル；ＣＡＰＴＭ（リン酸カルシウムナノ粒子）；コレラハロ毒素、コレラ毒素Ａ１−プロテインＡ−Ｄ−断片融合タンパク質、コレラ毒素のサブユニットＢ；ＣＲＬ １００５（ブロックコポリマーＰ１２０５）；サイトカイン含有リポソーム；ＤＤＡ（ジメチルジオクタデシルアンモニウムブロミド）；ＤＨＥＡ（デヒドロエピアンドロステロン）；ＤＭＰＣ（ジミリストイルホスファチジルコリン）；ＤＭＰＧ（ジミリストイルホスファチジルグリセロール）；ＤＯＣ／ミョウバン複合体（デオキシコール酸ナトリウム塩）；フロイント完全アジュバント；フロイント不完全アジュバント；γイヌリン；Ｇｅｒｂｕアジュバント（（ｉ）Ｎ−アセチルグルコサミニル−（Ｐ１−４）−Ｎ−アセチルムラミル−Ｌ−アラニル−Ｄ３５グルタミン（ＧＭＤＰ）と、（ｉｉ）ジメチルジオクタデシルアンモニウムクロリド（ＤＤＡ）と、（ｉｉｉ）ｚｉｎｃ−Ｌ−プロリン塩複合体（ＺｎＰｒｏ−８）との混合物；ＧＭ−ＣＳＦ）；ＧＭＤＰ（Ｎ−アセチルグルコサミニル−（ｂ１−４）−Ｎ−アセチルムラミル−Ｌ４７アラニル−Ｄ−イソグルタミン）；ｉｍｉｑｕｉｍｏｄ（１−（２−メチルプロピル）−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−４−アミン）；ＩｍｍＴｈｅｒＴＭ（Ｎ−アセチルグルコサミニル−Ｎ−アセチルムラミル−Ｌ−Ａｌａ−Ｄ−イソＧｌｕ−Ｌ−Ａｌａ−グリセロールジパルミテート）；ＤＲＶｓ（脱水−再水和ビヒクルから調製したイムノリポソーム）；インターフェロンγ；インターロイキン−１β；インターロイキン−２；インターロイキン−７；インターロイキン−１２；ＩＳＣＯＭＳＴＭ；ＩＳＣＯＰＲＥＰ ７．０．３．ＴＭ；リポソーム；ＬＯＸＯＲＩＢＩＮＥＴＭ （７−アリル−８−オキソグアノシン）；ＬＴ ５経口アジュバント（Ｅ．ｃｏｌｉ不安定外毒素−プロトキシン）；任意の組成物のマイクロスフェアおよびマイクロ粒子；ＭＦ５９ＴＭ；（スクアレン水エマルション）；ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ ＩＳＡ ５１ＴＭ（精製したフロイント不完全アジュバント）；ＭＯＮＴＡＮＩＤＥ ＩＳＡ ７２０ＴＭ（代謝可能な油アジュバント）；ＭＰＬＴＭ（３−Ｑ−ｄｅｓａｃｙｌ−４’−モノホスフォリルリピドＡ）；ＭＴＰ−ＰＥおよびＭＴＰ−ＰＥリポソーム（（Ｎ−アセチル−Ｌ−アラニル−Ｄ−イソグルタミニル−Ｌ−アラニン−２−（１，２−ジパルミトイル−ｓｎ−グリセロ−３−（ヒドロキシホスフォリロキシ））−エチルアミド、一ナトリウム塩）；ＭＵＲＡＭＥＴＩＤＥＴＭ（Ｎａｃ−Ｍｕｒ−Ｌ−Ａｌａ−Ｄ−Ｇｌｎ−ＯＣＨ３）；ＭＵＲＡＰＡＬＭＩＴＩＮＥＴＭおよびＤＭＵＲＡＰＡＬＭＩＴＩＮＥＴＭ（Ｎａｃ−Ｍｕｒ−Ｌ−Ｔｈｒ−Ｄ−ｉｓｏＧＩｎ−ｓｎ−グリセロールジパルミトイル）；ＮＡＧＯ（ノイラミニダーゼ−ガラクトースオキシダーゼ）；任意の組成物のナノスフェアまたはナノ粒子；ＮＩＳＶｓ（非イオン性界面活性剤ビヒクル）；ＰＬＥＵＲＡＮＴＭ（ −グルカン）；ＰＬＧＡ、ＰＧＡおよびＰＬＡ（乳酸およびグリコール酸のホモポリマーおよびコポリマー；マイクロスフェア／ナノスフェア）；ＰＬＵＲＯＮＩＣ Ｌ１２１ＴＭ；ＰＭＭＡ（ポリメチルメタクリレート）；ＰＯＤＤＳＴＭ（プロテイノイドマイクロスフェア）；ポリエチレンカルバメート誘導体；ポリ−ｒＡ：ポリ−ｒＵ（ポリアデニル酸−ポリウリジル酸複合体）；ポリソルベート８０（Ｔｗｅｅｎ ８０）；プロテインコクレート（ｃｏｃｈｌｅａｔｅｓ）（Ａｖａｎｔｉ Ｐｏｌａｒ Ｌｉｐｉｄｓ，Ｉｎｃ．，Ａｌａｂａｓｔｅｒ，ＡＬ）；ＳＴＩＭＵＬＯＮＴＭ（ＱＳ−２１）；Ｑｕｉｌ−Ａ（Ｑｕｉｌ−Ａサポニン）；Ｓ−２８４６３（４−アミノ−ｏｔｅｃ−ジメチル−２−エトキシメチル−１Ｈ−イミダゾ［４，５−ｃ］キノリン−１−エタノール；ＳＡＦ−１ＴＭ（「Ｓｙｎｔｅｘアジュバント処方物」）；センダイプロテオリポソームおよびセンダイ含有脂質マトリクス；Ｓｐａｎ−８５（ソルビタントリオールエイト）；Ｓｐｅｃｏｌ（Ｍａｒｃｏｌ ５２、Ｓｐａｎ ８５およびＴｗｅｅｎ ８５のエマルション）；スクアレンまたはＲｏｂａｎｅ（Ｒ）（２，６，１０，１５，１９，２３−ヘキサメチルテトラコサンおよび２，６，１０，１５，１９，２３−ヘキサメチル−２，６，１０，１４，１８，２２−テトラコサヘキサン）；ステアリルチロシン（オクタデシルチロシン塩酸）；Ｔｈｅｒａｍｉｄ（Ｒ）（Ｎ−アセチルグルコサミニル−Ｎ−アセチルムラミル−Ｌ−Ａｌａ−Ｄ−イソＧｌｕ−Ｌ−Ａｌａジパルミトキシプロピルアミド）；Ｔｈｅｒｏｎｙｌ−ＭＤＰ（ＴｅｒｍｕｒｔｉｄｅＴＭまたは［ｔｈｒ １］−ＭＤＰ；Ｎ−アセチルムラミル−Ｌトレオニル−Ｄ−イソグルタミン）；Ｔｙ粒子（Ｔｙ−ＶＬＰｓまたはウイルス様粒子）；ウォルターリードリポソーム（水酸化アルミニウムに吸着されたリピドＡを含有するリポソーム）、およびＰａｍ３Ｃｙｓ（特にアルミニウム塩）を含むリポペプチド（例えば、Ａｄｊｕ−ｐｈｏｓ、Ａｌｈｙｄｒｏｇｅｌ、Ｒｅｈｙｄｒａｇｅｌ）；エマルション（ＣＦＡ、ＳＡＦ、ＩＦＡ、ＭＦ５９、Ｐｒｏｖａｘ、ＴｉｔｅｒＭａｘ、Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ、Ｖａｘｆｅｃｔｉｎを含む）；コポリマー（Ｏｐｔｉｖａｘ （ＣＲＬ１００５）、Ｌ１２１、Ｐｏｌｏａｘｍｅｒ４０１０等を含む）；リポソーム（Ｓｔｅａｌｔｈを含む）、コクレート（ＢＩＯＲＡＬを含む）；植物由来アジュバント（ＱＳ２１、Ｑｕｉｌ Ａ、Ｉｓｃｏｍａｔｒｉｘ、ＩＳＣＯＭを含む）；同時刺激のためのアジュバント（Ｔｏｍａｔｉｎｅを含む）、バイオポリマー（ＰＬＧ、ＰＭＭ、Ｉｎｕｌｉｎを含む）、微生物由来アジュバント（Ｒｏｍｕｒｔｉｄｅ、ＤＥＴＯＸ、ＭＰＬ、ＣＷＳ、マンノース、ＣｐＧ核酸配列、ＣｐＧ７９０９を含む）、ヒトＴＬＲ１〜１０のリガンド、マウスＴＬＲ１〜１３のリガンド、ＩＳＳ−１０１８、３５ ＩＣ３１、イミダゾキノリン、アンプリゲン、Ｒｉｂｉ５２９、ＩＭＯｘｉｎｅ、ＩＲＩＶｓ、ＶＬＰｓ、コレラ毒素、熱不安定毒素、Ｐａｍ３Ｃｙｓ、フラゲリン、ＧＰＩ鎖、ＬＮＦＰＩＩＩ／Ｌｅｗｉｓ Ｘ、抗菌ペプチド、ＵＣ−１Ｖ１５０、ＲＳＶ融合タンパク質、ｃｄｉＧＭＰ；ならびにＣＧＲＰニューロペプチドを含むアンタゴニストとして好適なアジュバント。
アジュバントは、好ましくは、Ｔｈ１免疫応答の誘導またはナイーブＴ細胞の成熟化を支持するアジュバント（例えば、ＧＭ−ＣＳＦ、ＩＬ−１２、ＩＦＮγ）、上に規定されるような任意のアジュバント核酸（好ましくは免疫賦活性ＲＮＡ、ＣｐＧ ＤＮＡ等）より選択される。
さらに好ましい実施形態において、本発明のワクチン／阻害剤の組合せは、抗原提供ＲＮＡおよびＰＤ−１経路阻害剤に加えて、以下からなる群より選択される成分をさらに含む：さらなる抗原またはさらなる抗原提供核酸；さらなる免疫療法剤；１つ以上の補助物質；ヒトトール様レセプターに対する結合アフィニティに起因して免疫賦活性であることが知られている任意のさらなる化合物；および／または、アジュバント化合物（好ましくは免疫賦活性ＲＮＡ（ｉｓＲＮＡ））。
したがって、別の好ましい実施形態において、本発明のワクチン／阻害剤の組合せは、以下からなる群より選択される、少なくとも１つのアジュバント、補助物質をさらに含む：リポ多糖、ＴＮＦ−α、ＣＤ４０リガンド、サイトカイン、モノカイン、リンホカイン、インターロイキンもしくはケモカイン、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−３、ＩＬ−４、ＩＬ−５、ＩＬ−６、ＩＬ−７、ＩＬ−８、ＩＬ−９、ＩＬ−１０、ＩＬ−１２、ＩＬ−１３、ＩＬ−１４、ＩＬ−１５、ＩＬ−１６、ＩＬ−１７、ＩＬ−１８、ＩＬ−１９、ＩＬ−２０、ＩＬ−２１、ＩＬ−２２、ＩＬ−２３、ＩＬ−２４、ＩＬ−２５、ＩＬ−２６、ＩＬ−２７、ＩＬ−２８、ＩＬ−２９、ＩＬ−３０、ＩＬ−３１、ＩＬ−３２、ＩＬ−３３、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ−β、ＩＦＮ−γ、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｇ−ＣＳＦ、Ｍ−ＣＳＦ、ＬＴ−β、ＴＮＦ−α、増殖因子、およびｈＧＨ、ヒトトール様レセプター（ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、ＴＬＲ１０）のリガンド、マウストール様レセプター（ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、ＴＬＲ１０、ＴＬＲ１１、ＴＬＲ１２またはＴＬＲ１３）のリガンド、ＮＯＤ様レセプターのリガンド、ＲＩＧ−Ｉ様レセプターのリガンド、アジュバント核酸、免疫賦活性ＲＮＡ（ｉｓＲＮＡ）、ＣｐＧ−ＤＮＡ、抗菌剤、または抗ウイルス剤。
本発明に従って規定されるようなワクチン／阻害剤の組合せは、さらなる添加物またはさらなる化合物をさらに含んでもよい。本発明のワクチン／阻害剤の組合せに（例えばＲＮＡワクチンおよび／またはＰＤ−１経路インビヒターを含む組成物に）含まれ得るさらなる添加物としては、乳化剤（例えば、Ｔｗｅｅｎ（登録商標）など）、潤滑剤（例えば、ラウリル硫酸ナトリウムなど）、着色料、味付加物質、薬学的担体、タブレット形成物質、安定化剤、抗酸化剤、保存料、ＲＮａｓｅ阻害剤および／または抗菌剤もしくは抗ウイルス剤が挙げられる。
本発明のワクチン／阻害剤の組合せは、典型的には、本発明のワクチン／阻害剤の組合せの成分を「安全かつ有効な量」で含んでいる。本明細書中で使用される場合、「安全かつ有効な量」は、少なくとも１つの抗原をコードする少なくとも１つのＲＮＡおよびＰＤ−１経路阻害剤の量であって、本明細書中にて規定される疾患または障害のポジティブな変化または予防を著しくもたらすに十分な量を意味する。同時に、「安全かつ有効な量」は、深刻な副作用を免れるほど十分に少なく、すなわち、利点とリスクとの間の理にかなった関係が許容される。これらの制限の決定は、通常、実用にかなった医学判断の範囲内にある。
本発明のワクチン／阻害剤の組合せは、経口的に、非経口的に、吸入スプレーによって、局所的に、直腸的に、経鼻的に、頬側に、経膣的に、または埋め込み容器によって投与され得る。本明細書において用いられる場合、用語「非経口的」は、皮下の、静脈内の、筋肉内の、関節内の、節内の、滑液内の、胸骨内の、髄腔内の、肝臓内の、病巣内の、脳内の、経皮内の、皮内の、肺内の、腹腔内の、心臓内の、動脈内の、および舌下の、注射または注入の技術を含む。好ましくは、ＲＮＡワクチンは、皮内または筋肉内の適用によって投与され、ＰＤ−１経路阻害剤は、好ましくは、筋肉内または腹腔内の注射によって投与され、抗体の形態にある場合、より好ましくは、静脈内注入によって投与される。
さらなる局面に従えば、本発明の目的は、ワクチンおよび阻害剤を含む薬学的組成物によって解決される。この薬学的組成物は、特に、少なくとも１つの抗原をコードする少なくとも１つのオープンリーディングフレームを含む少なくとも１つのＲＮＡを含むＲＮＡワクチンをワクチンとして、ＰＤ−１経路阻害剤を含む組成物を阻害剤として含み、両者は上に規定されるものであることが好ましい。同様に、薬学的組成物は、好ましくは、本発明のワクチン／阻害剤の組合せの成分について上に規定されるように処方され、投与される。このような薬学的組成物は、本発明のワクチン／阻害剤の組合せについて上に規定されるように、任意の成分をさらに含み得る。
したがって、本発明に従って規定されるようなＲＮＡワクチンおよびＰＤ−１経路阻害剤の組合せは、１つの組成物として（例えば、パーツキットとして）生じても、２つ以上の組成物として生じてもよい。ここで、異なる成分は、上記パーツキットの異なる部分を形成する。これらの種々の成分（例えばワクチンおよび阻害剤）は、薬学的組成物として処方されても、上に規定されるような組成物として処方されてもよい。好ましくは、キットの異なるパーツの各々が、異なる成分を含む（例えば、１つのパーツが本明細書中に規定されるようなＲＮＡワクチンを含み、さらなるパーツが本明細書中に記載れるようなＰＤ−１経路阻害剤を含む。）。
したがって、さらなる局面に従えば、本発明はまた、キット、特にパーツキットを提供する。このようなキット、特にパーツキットは、典型的には、少なくとも１つの抗原をコードする少なくとも１つのオープンリーディングフレームを含む少なくとも１つのＲＮＡを含むＲＮＡワクチン、および本明細書中に規定されるようなＰＤ−１経路阻害剤を、単独でか、または本明細書中に規定されるようなさらなる成分と組み合わせて、好ましくは、キットの異なるパーツに含む。本明細書中に規定されるような本発明のワクチン／阻害剤の組合せは、必要に応じて、本明細書中に規定されるようなさらなる成分（例えばさらなるアジュバント）と組み合わせて、キットの１つまたは種々のパーツに生じ得る。例として、例えば、キットの少なくとも１つのパーツが、本明細書中に規定されるような少なくとも１つの抗原をコードする少なくとも１つのＲＮＡを含むＲＮＡワクチンを含み、少なくとも１つのさらなるパーツが、本明細書中に規定されるようなＰＤ−１経路阻害剤を含む。キットまたはパーツキットは、本発明のワクチン／阻害剤の組合せの投与法および用量についての情報を記した技術説明書、本発明の薬学的組成物、またはその成分の何れかもしくはその一部をさらに含む。
本発明のワクチン／阻害剤の組合せ、本発明の薬学的組成物、またはＲＮＡワクチンおよびＰＤ−１経路阻害剤を含む本発明のキットのパーツは、ヒトのために使用され、そして獣医の医療目的に使用され、特に、ヒトの医療目的に使用され得る。
したがって、さらなる局面において、本発明は、本明細書中に規定されるようなＲＮＡワクチンおよびＰＤ−１経路阻害剤を含む、本発明のワクチン／阻害剤の組合せ、本発明の薬学的組成物、および本発明のパーツキットの第１の医学的使用に関する。したがって、本明細書中に規定されるようなＲＮＡワクチンおよびＰＤ−１経路阻害剤を含む、本発明のワクチン／阻害剤の組合せ、本発明の薬学的組成物、および本発明のパーツキットは、医薬として使用され得る。
別の局面に従えば、本発明は、本明細書中に規定されるようなＲＮＡワクチンおよびＰＤ−１経路阻害剤を含む、本発明のワクチン／阻害剤の組合せ、本発明の薬学的組成物、および本発明のキットのパーツの第２の医学的使用に関する。よって、本明細書中に規定されるようなＲＮＡワクチンおよびＰＤ−１経路阻害剤を含む、本発明のワクチン／阻害剤の組合せ、本発明の薬学的組成物、および本発明のキットのパーツは、種々の疾患、特に本明細書中に規定されるような癌および腫瘍疾患ならびに感染性疾患の、処置および／または寛解に使用され得る。
この観点において、腫瘍または腫瘍性疾患としては、好ましくは以下が挙げられる：黒色腫、悪性黒色腫、大腸癌、リンパ腫、肉腫、芽腫、腎癌、胃腸腫瘍、神経膠腫、前立腺腫瘍、膀胱癌、直腸腫瘍、胃癌、食道癌、膵癌、肝癌、乳癌（乳がん）、子宮癌、子宮頸癌、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、急性リンパ白血病（ＡＬＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、肝細胞癌、種々のウイルス誘発性腫瘍、パピローマウイルス誘発性癌腫（例えば子宮頸癌（子宮頸がん））、腺癌、ヘルペスウイルス誘導性腫瘍（例えばバーキットリンパ腫、ＥＢＶ誘発性Ｂ細胞リンパ腫）、Ｂ型肝炎ウイルス誘導性腫瘍（肝細胞癌腫）、ＨＴＬＶ−１誘導性またはＨＴＬＶ−２誘導性のリンパ腫、聴神経腫瘍、肺癌腫（肺癌、気管支癌）、小細胞肺癌、咽頭癌、肛門癌、神経膠芽腫、直腸癌、星状細胞腫、脳腫瘍、網膜芽細胞腫、基礎細胞癌、脳転移、髄芽腫、腟癌、膵癌、精巣癌、ホジキン症候群、髄膜腫、シュネーベルガー病、下垂体腫瘍、菌状息肉腫、カルチノイド類、神経水癌、棘細胞腫、バーキットリンパ腫、喉頭癌、腎臓癌、胸腺腫、コーパス癌、骨癌、非ＨＬ癌、尿道癌、ＣＵＰ症候群、頭／首腫瘍、乏突起神経膠腫、外陰癌、腸癌、大腸癌、食道癌（食道がん）、いぼ転移、小腸腫瘍、頭蓋咽頭腫、卵巣癌、生殖器腫瘍、卵巣癌（卵巣がん）、膵癌（膵がん）、子宮内膜癌、肝転移、ペニスのガン、舌癌、胆嚢癌、白血病、形質細胞腫、ふた腫瘍、および前立腺癌（前立腺腫瘍）。
特定の実施形態において、肺癌（例えば非小細胞肺癌または小細胞肺癌）または前立腺癌が特に好ましい。
この観点において、感染性疾患は、ウイルス性、細菌性または原虫性の感染性疾患を含む。このような感染性疾患は、典型的には以下からなる群より選択される（ウイルス性、細菌性または原虫性の）感染性疾患である：アシネトバクター感染症、アフリカ睡眠病（アフリカトリパノソーマ症）、ＡＩＤＳ（後天性免疫不全症候群）、アメーバ赤痢、アナプラズマ症、炭疽病、虫垂炎、アルカノバクテリウム・ヘモリティクム感染症、アルゼンチン出血熱、回虫症、アスペルギルス症、アストロウイルス感染症、足白癬、バベシア症、セレウス菌感染症、細菌性髄膜炎、細菌性肺炎、細菌性膣疾患（ＢＶ）、バクテロイデス属感染症、バランチジウム症、回虫感染症、住血吸虫症、ＢＫウイルス感染症、黒色砂毛症、ブラストシスティス・ホミニス感染症、ブラストミセス症、ボリビア出血熱、ボレリア属感染症（ボレリア症）、ボツリヌス中毒症（幼児性ボツリヌス菌中毒）、ウシ条虫、ブラジル出血熱、ブルセラ病、バークホルデリア感染症、ブルーリ潰瘍、カリシウイルス感染症（ノロウイルスおよびサポウイルス）、カンピロバクター感染症、カンジダ症（カンジダ症）、イヌ条虫感染症、ネコひっかき病、シャガス病（アメリカ・トリパノソーマ症）、軟性下疳、水痘、クラミジア感染症、クラミジア・トラコマチス感染症、クラミドフィラ肺炎感染症、コレラ、クロモブラストミコーシス、鼠径リンパ肉芽腫、肝吸虫症、クロストリジウム・ディフィシール感染症、コクシジオイデス症、風邪、コロラド・ダニ熱（ＣＴＦ）、一般的な風邪（急性ウイルス性鼻咽頭炎；急性感冒、尖圭コンジローマ、結膜炎、クロイツフェルト・ヤコブ病（ＣＪＤ）、クリミアコンゴ出血熱（ＣＣＨＦ）、クリプトコックス症、クリプトスポリジウム症、皮膚幼虫移行症（ＣＬＭ）、皮膚リーシュマニア症、シクロスポリア症、嚢虫症、サイトメガロウイルス感染症、デング熱、皮膚糸状菌症、二核アメーバ症、ジフテリア、裂頭条虫症、鼠径リンパ肉芽腫症、メジナ虫症、初夏髄膜脳炎（ＦＳＭＥ）、エボラ出血熱、包虫症、エールリヒア症、蟯虫症（蟯虫感染症）、エンテロコッカス感染症、エンテロウイルス感染症、流行性発疹チフス、喉頭蓋炎、エプスタインバーウイルス伝染性単核症、伝染性紅斑（第五病）、突発性発疹、肥大吸虫症、肝蛭症、致死性家族性不眠症（ＦＦＩ）、第五病、フィラリア症、魚中毒（シガテラ）、魚類条虫類、インフルエンザ、ウェルシュ菌による魚中毒、キツネ条虫、自由生活アメーバの感染症、フゾバクテリウム属感染症、ガス壊疽、ジオトリクム症、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー症候群（ＧＳＳ）、ジアルジア症、鼻疽、Ｇｎａｔｈｏｓｔｏｍｉａｓｉｓ、淋病、鼠径部肉芽腫（ドノバン症）、連鎖球菌で起こる感染症グループＡ、連鎖球菌で起こる感染症グループＢ、インフルエンザ菌感染症、口蹄疫（ＨＦＭＤ）、ハンタウイルス肺症候群（ＨＰＳ）、ヘリコバクターピロリ感染症、容血性尿毒症症候群（ＨＵＳ）、腎症候性出血熱（ＨＦＲＳ）、ヘニパ感染症、Ａ型肝炎、Ｂ型肝炎、Ｃ型肝炎、Ｄ型肝炎、Ｅ型肝炎、単純疱疹、単純疱疹Ｉ型、単純疱疹ＩＩ型、帯状疱疹、ヒストプラスマ症、中身のないいぼ、鉤虫感染症、ヒトボカウイルス感染症、ヒトエウィンギエールリヒア症、ヒト顆粒球アナプラズマ症、ヒトメタニューモウイルス感染症、ヒト単球エールリヒア症、ヒトパピローマウイルス感染症、ヒトパラインフルエンザウイルス感染症、条虫症、インフルエンザ、イソスポーラ症、日本脳炎、川崎病、角膜炎、キンゲラ・キンガ感染症、クールー病、ランブル鞭毛虫症（ジアルジア症）、Ｌａｓｓａ ｆｅｖｅｒ、レジオネラ症（レジオネラ病、ポンティアック熱）、リーシュマニア症、ハンセン病、レプトスピラ病、シラミ、リステリア症、ライム・ボレリア症、ライム病、リンパ管フィラリア症（象皮病）、リンパ球性脈絡髄膜炎、マラリア、マールブルク出血熱（ＭＨＦ）、マールブルグ病ウイルス、はしか、類鼻疽（ホイットモアの病気）、髄膜炎、髄膜炎菌性病気、横川吸虫症、微胞子虫症、ミニ条虫、流産（前立腺炎症）、伝染性軟属腫（ＭＣ）、単核細胞増加症、おたふく風邪、発疹熱（風土性発疹チフス）、菌腫、マイコプラズマ・ホミニス、マイコプラズマ肺炎、ハエウジ病、新生児おしめ／おしめ皮膚炎、結膜炎（新生児眼炎）、新生児敗血症（絨毛羊膜炎）、ノカルジア症、水癌、ノーウォークウイルス感染症、オンコセルカ症（糸状虫症）、骨髄炎、中耳炎、パラコクシジオイデス症（南米ブラストミセス症）、肺吸虫症、パラチフス、パスツレラ症、アタマジラミ寄生症（アタマジラミ）、コロモジラミ寄生症（コロモジラミ）、ケジラミ症（ケジラミ（Ｐｕｂｉｃ ｌｉｃｅ、Ｃｒａｂ ｌｉｃｅ））、骨盤内炎症性疾患（ＰＩＤ）、百日咳（百日ぜき）、ファイファー腺熱、ペスト、肺炎球菌性感染症、ニューモシスティス肺炎（ＰＣＰ）、肺炎、ポリオ（小児足の不自由）、灰白髄炎、ブタ条虫、プレボテラ感染症、原発性アメーバ髄膜脳炎（ＰＡＭ）、進行性多病巣性白質脳症、仮性クループ、オウム病、Ｑ熱、野兎病、狂犬病、鼠咬症、ライター症候群、ＲＳウイルス感染症（ＲＳＶ）、リノスポリジウム症、ライノウイルス属感染症、リケッチア感染症、リケッチア痘症、リフトバレー熱（ＲＶＦ）、ロッキー山斑点熱（ＲＭＳＦ）、Ｒｏｔａｖｉｒｕｓ感染症、風疹、サルモネラ菌パラチフス、サルモネラ属発疹チフス、サルモネラ症、ＳＡＲＳ（重症急性呼吸器症候群）、疥癬、猩紅熱、住血吸虫症（Ｂｉｌｈａｒｚｉｏｓｉｓ）、ツツガムシ病、敗血症、シゲラ症（細菌性赤痢）、帯状疱疹、天然痘（天然痘）、軟性下疳、スポロトリクム症、ブドウ球菌性食中毒、ブドウ球菌性感染症、糞線虫症、梅毒、条虫症、破傷風、三日熱、ダニ媒介性脳炎、白癬性毛瘡（毛嚢炎）、しらくも（頭部白癬）、体部白癬（身体の白癬）、股部白癬（頑癬）、手白癬（手の白癬）、黒癬、足部白癬（水虫）、爪白癬（爪真菌症）、なまず（粃糠疹）、トキソカラ症、（眼幼虫移行症（ＯＬＭ）、内臓幼虫移行症（ＶＬＭ））、トキソプラズマ症、旋毛虫症、トリコモナス症、鞭虫症（鞭虫感染症）、トリッパー、トリパノソーマ症（眠り病）、ツツガムシ病、結核、野兎病、発疹チフス、発疹チフス熱、ウレアプラズマ・ウレアリチカム感染症、膣炎（膣の炎症）、改変型クロイツフェルト・ヤコブ病（ｖＣＪＤ、ｎｖＣＪＤ）、ベネズエラウマ脳炎、ベネズエラ出血熱、ウイルス性肺炎、内臓リーシュマニア症、いぼ、西ナイル熱、西部ウマ脳炎、白色砂毛（白癬ブランカ）、百日せき、イースト真菌点、黄熱、偽結核エルシニア菌感染症、エルシニア症、および接合菌症。
ＰＤ−１経路の少なくとも１つのメンバー、好ましくは、ＰＤ−１レセプターならびに／またはそのリガンドであるＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２の過剰発現と関連する疾患、特に癌疾患または腫瘍疾患が特に好ましい。
この観点において、ＰＤ−Ｌ１の過剰発現と関連する黒色腫、膠芽細胞腫、ならびに脾臓、肺、乳房、結腸、卵巣および腎細胞の癌腫、尿路の癌、頭部および頚部の小細胞癌腫、ならびに肝細胞癌の処置が特に好ましい。ＰＤ−１経路の任意のメンバー、特にＰＤ−１またはＰＤ−Ｌ１の過剰発現と関連する非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）または小細胞肺癌の処置が、最も好ましい。
別の実施形態において、ＰＤ−１経路の少なくとも１つのメンバー、好ましくはＰＤ−１レセプターならびに／またはそのリガンドであるＰＤ−Ｌ１およびＰＤ−Ｌ２の発現がないかまたは低いことと関連した癌または腫瘍性疾患の処置が特に好ましい。この観点において、本発明のワクチン／阻害剤の組合せのＲＮＡワクチンは、処置されるべき患者におけるＰＤ−１経路の少なくとも１つのメンバー（例えば、ＰＤ−Ｌ１）の発現を誘導し得、その結果、ＰＤ−１阻害剤の治療活性を可能にする。
別の局面に従えば、本発明は、上に規定されるような少なくとも１つの抗原をコードする少なくとも１つのオープンリーディングフレームを含む少なくとも１つのＲＮＡを含むＲＮＡワクチンと組み合わせて治療に用いるための、例えば、本明細書中に規定されるような腫瘍および／もしくは癌疾患または感染性疾患を処置または予防する方法に使用するための、上に規定されるようなＰＤ−１経路阻害剤を提供する。
さらに別の局面に従えば、本発明は、例えば、本明細書中に規定されるような腫瘍および／もしくは癌疾患または感染性疾患を処置または予防する方法に使用するための、上に規定されるような少なくとも１つの抗原をコードする少なくとも１つのオープンリーディングフレームを含む少なくとも１つのＲＮＡを含むＲＮＡワクチンを提供する。
さらに、さらなる局面において、本発明は、細胞、組織または生物体をトランスフェクトおよび／または処置するための方法を提供し、これにより、本発明のワクチン／阻害剤の組合せを治療目的に適用または投与する。この観点において、典型的には、本発明のワクチン／阻害剤の組合せを調製した後に、本発明のワクチン／阻害剤の組合せは、好ましくは、細胞、組織または生物体に、好ましくは、本明細書中に規定されるような投与様式の何れかを用いて投与される。細胞をトランスフェクトおよび／または処置する方法は、インビトロ、インビボまたはエキソビボで行われ得る。
したがって、本発明はまた、上に規定されるようなＰＤ−１経路阻害剤を含む組成物と組み合わせて、治療的有効量の、上に規定されるような少なくとも１つの抗原をコードする少なくとも１つのオープンリーディングフレームを含む少なくとも１つのＲＮＡを含むＲＮＡワクチンを、それを必要とする対象に投与する工程を含んでいる治療方法を提供する。
好ましい実施形態において、上記方法は、単離された細胞のインビトロトランスフェクションを含む。よって、使用される細胞は、好ましくはヒト細胞または動物細胞であり、好ましくは初代培養細胞であり、これらの細胞は次いでヒトまたは動物へ再度移される。トランスフェクションの前に、これらの細胞は、典型的には、処置されるべき患者から単離され、そして培養される。
さらに好ましい実施形態において、治療方法は、単離された細胞のインビトロトランスフェクションを含まない。この場合、投与を必要とする対象に投与されるべき、上に規定されるようなＲＮＡワクチンは、ＲＮＡワクチンに含まれる少なくとも１つの抗原をコードする少なくとも１つのオープンリーディングフレームを含む少なくとも１つのＲＮＡを用いてトランスフェクトされた、単離された細胞を含まない。
本発明において、特に明記されていない場合、代替例および実施形態の種々の特徴は、互いに組み合わせてもよい。本発明の観点において、適用可能な場合には、用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、用語「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ）」で置換されてもよい。
〔図面の簡単な説明〕
以下に示されている図面は単なる例示に過ぎず、さらなる手段において本発明を説明するものとする。これらの図面は、本発明をそれらに限定すると解釈されてはならない。
図１：ＲＮＡワクチンは、抗ＰＤ−１抗体と相乗的に作用する。Ｃ５７ ＢＬ／６マウスに３×１０５の同一遺伝子型のＥ．Ｇ７−ＯＶＡ腫瘍細胞を０日目に皮下に投与し、その後、示された計画に従って、ＯＶＡ−ＲＮＡｃｔｉｖｅワクチン（３２μｇ）を、単独または抗ＰＤ−１抗体またはコントロールＩｇＧ（１００μｇ腹腔内）との組み合わせの何れかにおいて、処置した。
図２：異なる治療法で処置したＥ．Ｇ７−ＯＶＡ腫瘍を有するマウスの生存率。実施例２にしたがって、マウスをＯＶＡ−ＲＮＡｃｔｉｖｅワクチンまたは抗ＰＤ−１抗体を単独または組み合わせにおいて処置した。
図３：ＯＶＡ−ＲＮＡｃｔｉｖｅワクチンに含まれるGallus gallus オボアルブミンをコードするＲ１７１０の、Ｇ／Ｃ最適化ｍＲＮＡ配列。
〔実施例〕
以下に示されている実施例は単なる例示に過ぎず、さらなる手段において本発明を説明するものとする。これらの実施例は、本発明をそれらに限定すると解釈されてはならない。
［実施例１：ｍＲＮＡワクチンの調製］
（１．ＤＮＡおよびｍＲＮＡ構築物の調製）
本実施例のために、Gallus gallus オボアルブミンｍＲＮＡ（Ｒ１７１０）をコードするＤＮＡ配列を準備し、その後のインビトロ転写反応に用いた。
最初の準備に従って、上記したｍＲＮＡをコードするＤＮＡ配列を準備した。構築物を、α−グロビン−３’−ＵＴＲ（ｍｕａｇ(変異型α−グロビン−３’−ＵＴＲ））、一続きの６４アデノシン（ポリＡ配列）、一続きの３０シトシン（ポリＣ配列）、およびヒストンステムループ由来の安定化配列を伴う、安定化のためのＧＣ最適化配列を導入することによって、野生型のコード配列を改変することにより調製した。配列番号２（図３を参照のこと）において、対応するｍＲＮＡの配列が示されている。
（２．Ｉｎ ｖｉｔｒｏ転写）
実施例１に従って調製されたＤＮＡプラスミドそれぞれを、Ｔ７ポリメラーゼを用いてインビトロで転写した。次に、ｍＲＮＡをPureMessenger（登録商標）（CureVac、Tubingen、ドイツ）を用いて精製した。
（３．試薬）
複合体形成剤：プロタミン
（４．ワクチンの調製）
比率（１：２）（ｗ／ｗ）における、ｍＲＮＡへのプロタミンの添加によって、ｍＲＮＡＲ１７１０をプロタミンと複合体化した（アジュバント成分）。１０分間インキュベーション後、抗原提供ＲＮＡとして用いられる、同一の量の遊離ｍＲＮＡのＲ１７１０を添加した。
ＯＶＡ−ＲＮＡｃｔｉｖｅワクチン（Ｒ１７１０）：比率（２：１）（ｗ／ｗ）において、プロタミンと複合体化された、配列番号２に係るGallus gallus オボアルブミン（Ｒ１７１０）をコードするｍＲＮＡからなるアジュバント成分、および配列番号に係るGallus gallus オボアルブミン（Ｒ１７１０）をコードする抗原提供遊離ｍＲＮＡ（比率１：１；複合体化ＲＮＡ：遊離ＲＮＡ）を含んでいる。
［実施例２：抗ＰＤ−１抗体およびＲＮＡワクチンの組み合わせ］
０日目に、Ｃ５７ ＢＬ／６マウスに、マウスあたり３×１０５のＥ．Ｇ７−ＯＶＡ細胞（ＰＢＳ中の容積１００μｌ）を皮下移植した（右側腹部）。Ｅ．Ｇ７−ＯＶＡは、Gallus gallus オボアルブミン（ＯＶＡ）を安定的に発現するマウスＴ細胞リンパ腫細胞である。ＯＶＡｍＲＮＡＲ１７２０を含むＲＮＡワクチン（実施例１に係る）またはバッファーコントロールとしての乳酸リンゲル（ＲｉＬａ）による皮内ワクチン接種（３２μｇ／マウス／ワクチン接種日）、および抗ＰＤ−１／ＣＤ２７９モノクローナル抗体（１００μｇ腹膜内）または表１に係るアイソタイプのコントロールによる処置を４日目から開始し、７、１１、１４、１８および２１日目に繰り返した。動物に午前中に抗体注射を受けさせ、処置の間に最低４時間おいて、午後にワクチン注射した。
Figure 0006768045
抗ＰＤ−１／ＣＤ２７９抗体（クローンＲＭＰ１−１４、ラットＩｇＧ２ａ）およびアイソタイプのコントロール抗体（クローン２Ａ３、ラットＩｇＧ２ａ）をBioXCell（West Lebanon、NH、米国）から購入した。
腫瘍成長を、カリパスを用いて２つの寸法（長さおよび幅）において腫瘍のサイズを測定することによって監視した（４日目に開始する）。腫瘍容積を以下の式に従って算出した：
Figure 0006768045
結果を図１および図２に示す。
図１においてみられるように、単独またはコントロールＩｇＧとの組み合わせにおけるＯＶＡｍＲＮＡワクチン（ＯＶＡ−ＲＮＡｃｔｉｖｅＲ１７１０）は、バッファーを処置したコントロール群と比較しておよそ５日腫瘍成長が遅延した。抗ＰＤ−１抗体単独による処置は、単独でのワクチン接種に匹敵していたが、ＲＮＡワクチン／抗ＰＤ−１の組み合わせの同時適用は、腫瘍成長の有意な阻害を誘導し、相乗効果を示していた。線は平均腫瘍容積の拡張を示し、エラーバーはＳＥＭを示している。統計学的解析はボンフェローニポストテスト（Bonferroni posttest）による２次元配置分散分析（2 way-Anova）法に準拠した。
図２に見られるように、ＯＶＡｍＲＮＡワクチン（ＯＶＡ−ＲＮＡｃｔｉｖｅＲ１７１０）または抗ＰＤ−１抗体単独で、すでに生存に有意な効果を有していたが、ＲＮＡワクチン／抗ＰＤ−１の組み合わせの同時適用は５０％の生存（６個体の動物中の３個体）を導き、相乗的な効果を示していた。
Ｃ５７ ＢＬ／６マウスに３×１０５の同一遺伝子型のＥ．Ｇ７−ＯＶＡ腫瘍細胞を０日目に皮下に投与し、その後、示された計画に従って、ＯＶＡ−ＲＮＡｃｔｉｖｅワクチン（３２μｇ）を、単独または抗ＰＤ−１抗体またはコントロールＩｇＧ（１００μｇ腹腔内）との組み合わせの何れかにおいて処置した結果を示す図である。 異なる治療法で処置したＥ．Ｇ７−ＯＶＡ腫瘍を有するマウスの生存率を示す図である。 ＯＶＡ−ＲＮＡｃｔｉｖｅワクチンに含まれるGallus gallus オボアルブミンをコードするＲ１７１０の、Ｇ／Ｃ最適化ｍＲＮＡ配列を示す図である。

Claims (24)

  1. （ｉ）少なくとも１つのＲＮＡを含んでいるＲＮＡワクチンを、ワクチンとして、且つ （ｉｉ）ＰＤ−１経路阻害剤を含んでいる組成物を、阻害剤として、
    含んでいる、ワクチンと阻害剤とが組み合わされた組み合わせ物であって、
    上記少なくとも１つのＲＮＡは、少なくとも１つの腫瘍抗原をコードする少なくとも１つのオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）を含んでいるｍＲＮＡであり、
    上記ＰＤ−１経路阻害剤は、ＰＤ−Ｌ１に対する拮抗性抗体である、腫瘍もしくは癌疾患を予防または処置する方法における使用のための組み合わせ物。
  2. ＰＤ−Ｌ１に対する上記抗体は、ＭＤＸ−１１０５／ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＰＤＬ３２８０Ａ／ＲＧ７４４６またはＭＥＤＩ４７３６である、請求項１に記載の腫瘍もしくは癌疾患を予防または処置する方法における使用のための組み合わせ物。
  3. 上記ＲＮＡワクチンの上記少なくとも１つのＲＮＡは、単離されたＲＮＡである、請求項１または２に記載の腫瘍もしくは癌疾患を予防または処置する方法における使用のための組み合わせ物。
  4. 上記ＲＮＡワクチンの上記少なくとも１つのＲＮＡは、安定化されたＲＮＡである、請求項１〜３の何れか一項に記載の腫瘍もしくは癌疾患を予防または処置する方法における使用のための組み合わせ物。
  5. 上記ＲＮＡワクチンの上記少なくとも１つのＲＮＡは、少なくとも部分的にＧ／Ｃ改変されている、請求項１〜４の何れか一項に記載の腫瘍もしくは癌疾患を予防または処置する方法における使用のための組み合わせ物。
  6. 上記ＲＮＡワクチンの上記少なくとも１つのＲＮＡのＧ／Ｃ含量は、野生型のオープンリーディングフレームと比較して増加している、請求項５に記載の腫瘍もしくは癌疾患を予防または処置する方法における使用のための組み合わせ物。
  7. 上記ＲＮＡワクチンの上記少なくとも１つのＲＮＡは、コドン最適化領域を含んでいる、請求項１〜６の何れか一項に記載の腫瘍もしくは癌疾患を予防または処置する方法における使用のための組み合わせ物。
  8. 上記ＲＮＡワクチンの上記少なくとも１つのＲＮＡの上記少なくとも１つのオープンリーディングフレームは、コドン最適化されている、請求項１〜７の何れか一項に記載の腫瘍もしくは癌疾患を予防または処置する方法における使用のための組み合わせ物。
  9. 上記ＲＮＡワクチンの上記少なくとも１つのＲＮＡは、担体と複合体化されている、請求項１〜８の何れか一項に記載の腫瘍もしくは癌疾患を予防または処置する方法における使用のための組み合わせ物。
  10. 上記担体は、カチオン性もしくはポリカチオン性化合物またはポリマー担体である、請求項９に記載の腫瘍もしくは癌疾患を予防または処置する方法における使用のための組み合わせ物。
  11. 上記担体は、プロタミンである、請求項９または１０に記載の腫瘍もしくは癌疾患を予防または処置する方法における使用のための組み合わせ物。
  12. 上記腫瘍抗原は、５Ｔ４、７０７−ＡＰ、９Ｄ７、ＡＦＰ、ＡｌｂＺＩＰ ＨＰＧ１、α−５−β−１−インテグリン、α−５−β−６−インテグリン、α−アクチニン−４／ｍ、α−メチルアシル−補酵素Ａラセマーゼ、ＡＲＴ−４、ＡＲＴＣ１／ｍ、Ｂ７Ｈ４、ＢＡＧＥ−１、ＢＣＬ−２、ｂｃｒ／ａｂｌ、β−カテニン／ｍ、ＢＩＮＧ−４、ＢＲＣＡ１／ｍ、ＢＲＣＡ２／ｍ、ＣＡ １５−３／ＣＡ ２７−２９、ＣＡ １９−９、ＣＡ７２−４、ＣＡ１２５、カルレチクリン、ＣＡＭＥＬ、ＣＡＳＰ−８／ｍ、カゼプシンＢ、カゼプシンＬ、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２、ＣＤ２５、ＣＤＥ３０、ＣＤ３３、ＣＤ４、ＣＤ５２、ＣＤ５５、ＣＤ５６、ＣＤ８０、ＣＤＣ２７／ｍ、ＣＤＫ４／ｍ、ＣＤＫＮ２Ａ／ｍ、ＣＥＡ、ＣＬＣＡ２、ＣＭＬ２８、ＣＭＬ６６、ＣＯＡ−１／ｍ、コアクトシン様タンパク質、コラーゲンＸＸＩＩＩ、ＣＯＸ−２、ＣＴ−９／ＢＲＤ６、Ｃｔｅｎ、サイクリンＢ１、サイクリンＤ１、ｃｙｐ−Ｂ、ＣＹＰＢ１、ＤＡＭ−１０、ＤＡＭ−６、ＤＥＫ−ＣＡＮ、ＥＦＴＵＤ２／ｍ、ＥＧＦＲ、ＥＬＦ２／ｍ、ＥＭＭＰＲＩＮ、ＥｐＣａｍ、ＥｐｈＡ２、ＥｐｈＡ３、ＥｒｂＢ３、ＥＴＶ６−ＡＭＬ１、ＥＺＨ２、ＦＧＦ−５、ＦＮ、Ｆｒａｕ−１、Ｇ２５０、ＧＡＧＥ−１、ＧＡＧＥ−２、ＧＡＧＥ−３、ＧＡＧＥ−４、ＧＡＧＥ−５、ＧＡＧＥ−６、ＧＡＧＥ７ｂ、ＧＡＧＥ−８、ＧＤＥＰ、ＧｎＴ−Ｖ、ｇｐ１００、ＧＰＣ３、ＧＰＮＭＢ／ｍ、ＨＡＧＥ、ＨＡＳＴ−２、ｈｅｐｓｉｎ、Ｈｅｒ２／ｎｅｕ、ＨＥＲＶ−Ｋ−ＭＥＬ、ＨＬＡ−Ａ＊０２０１−Ｒ１７Ｉ、ＨＬＡ−Ａ１１／ｍ、ＨＬＡ−Ａ２／ｍ、ＨＮＥ、ホメオボックスＮＫＸ３．１、ＨＯＭ−ＴＥＳ−１４／ＳＣＰ−１、ＨＯＭ−ＴＥＳ−８５、ＨＰＶ−Ｅ６、ＨＰＶ−Ｅ７、ＨＳＰ７０−２Ｍ、ＨＳＴ−２、ｈＴＥＲＴ、ｉＣＥ、ＩＧＦ−１Ｒ、ＩＬ−１３Ｒａ２、ＩＬ−２Ｒ、ＩＬ−５、未成熟ラミニンレセプター、カリクレイン−２、カリクレイン−４、Ｋｉ６７、ＫＩＡＡ０２０５、ＫＩＡＡ０２０５／ｍ、ＫＫ−ＬＣ−１、Ｋ−Ｒａｓ／ｍ、ＬＡＧＥ−Ａ１、ＬＤＬＲ−ＦＵＴ、ＭＡＧＥ−Ａ１、ＭＡＧＥ−Ａ２、ＭＡＧＥ−Ａ３、ＭＡＧＥ−Ａ４、ＭＡＧＥ−Ａ６、ＭＡＧＥ−Ａ９、ＭＡＧＥ−Ａ１０、ＭＡＧＥ−Ａ１２、ＭＡＧＥ−Ｂ１、ＭＡＧＥ−Ｂ２、ＭＡＧＥ−Ｂ３、ＭＡＧＥ−Ｂ４、ＭＡＧＥ−Ｂ５、ＭＡＧＥ−Ｂ６、ＭＡＧＥ−Ｂ１０、ＭＡＧＥ−Ｂ１６、ＭＡＧＥ−Ｂ１７、ＭＡＧＥ−Ｃ１、ＭＡＧＥ−Ｃ２、ＭＡＧＥ−Ｃ３、ＭＡＧＥ−Ｄ１、ＭＡＧＥ−Ｄ２、ＭＡＧＥ−Ｄ４、ＭＡＧＥ−Ｅ１、ＭＡＧＥ−Ｅ２、ＭＡＧＥ−Ｆ１、ＭＡＧＥ−Ｈ１、ＭＡＧＥＬ２、マンマグロブリンＡ、ＭＡＲＴ−１／メラン−Ａ、ＭＡＲＴ−２、ＭＡＲＴ−２／ｍ、マトリクスタンパク質２２、ＭＣ１Ｒ、Ｍ−ＣＳＦ、ＭＥ１／ｍ、メゾセリン、ＭＧ５０／ＰＸＤＮ、ＭＭＰ１１、ＭＮ／ＣＡ ＩＸ−抗原、ＭＲＰ−３、ＭＵＣ−１、ＭＵＣ−２、ＭＵＭ−１／ｍ、ＭＵＭ−２／ｍ、ＭＵＭ−３／ｍ、ミオシン クラスＩ／ｍ、ＮＡ８８−Ａ、Ｎ−アセチルグルコサミニルトランスフェラーゼ−Ｖ、Ｎｅｏ−ＰＡＰ、Ｎｅｏ−ＰＡＰ／ｍ、ＮＦＹＣ／ｍ、ＮＧＥＰ、ＮＭＰ２２、ＮＰＭ／ＡＬＫ、Ｎ−Ｒａｓ／ｍ、ＮＳＥ、ＮＹ−ＥＳＯ−Ｂ、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＯＡ１、ＯＦＡ−ｉＬＲＰ、ＯＧＴ、ＯＧＴ／ｍ、ＯＳ−９、ＯＳ−９／ｍ、オステオカルシン、オステオポンチン、ｐ１５、ｐ１９０ マイナー ｂｃｒ−ａｂｌ、ｐ５３、ｐ５３／ｍ、ＰＡＧＥ−４、ＰＡＩ−１、ＰＡＩ−２、ＰＡＰ、ＰＡＲＴ−１、ＰＡＴＥ、ＰＤＥＦ、Ｐｉｍ−１−Ｋｉｎａｓｅ、Ｐｉｎ−１、Ｐｍｌ／ＰＡＲα、ＰＯＴＥ、ＰＲＡＭＥ、ＰＲＤＸ５／ｍ、プロステイン、プロテイナーゼ−３、ＰＳＡ、ＰＳＣＡ、ＰＳＧＲ、ＰＳＭ、ＰＳＭＡ、ＰＴＰＲＫ／ｍ、ＲＡＧＥ−１、ＲＢＡＦ６００／ｍ、ＲＨＡＭＭ／ＣＤ１６８、ＲＵ１、ＲＵ２、Ｓ−１００、ＳＡＧＥ、ＳＡＲＴ−１、ＳＡＲＴ−２、ＳＡＲＴ−３、ＳＣＣ、ＳＩＲＴ２／ｍ、Ｓｐ１７、ＳＳＸ−１、ＳＳＸ−２／ＨＯＭ−ＭＥＬ−４０、ＳＳＸ−４、ＳＴＡＭＰ−１、ＳＴＥＡＰ−１、サービビン、サービビン−２Ｂ、ＳＹＴ−ＳＳＸ−１、ＳＹＴ−ＳＳＸ−２、ＴＡ−９０、ＴＡＧ−７２、ＴＡＲＰ、ＴＥＬ−ＡＭＬ１、ＴＧＦβ、ＴＧＦβＲＩＩ、ＴＧＭ−４、ＴＰＩ／ｍ、ＴＲＡＧ−３、ＴＲＧ、ＴＲＰ−１、ＴＲＰ−２／６ｂ、ＴＲＰ／ＩＮＴ２、ＴＲＰ−ｐ８、チロシナーゼ、ＵＰＡ、ＶＥＧＦＲ１、ＶＥＧＦＲ−２／ＦＬＫ−１、およびＷＴ１からなる群より選択される、請求項１〜１１の何れか一項に記載の腫瘍もしくは癌疾患を予防または処置する方法における使用のための組み合わせ物。
  13. 上記ＲＮＡワクチンの上記少なくとも１つのＲＮＡは、ＰＣＡ、ＰＳＡ、ＰＳＭＡ、ＳＴＥＡＰおよびＭＵＣ−１、またはその断片、改変体もしくは誘導体より選択される腫瘍抗原をコードする、請求項１〜１２の何れか一項に記載の腫瘍もしくは癌疾患を予防または処置する方法における使用のための組み合わせ物。
  14. 上記ＲＮＡワクチンの上記少なくとも１つのＲＮＡは、ＮＹ−ＥＳＯ−１、ＭＡＧＥ−Ｃ１、ＭＡＧＥ−Ｃ２、サービビン、５Ｔ４およびＭＵＣ−１、またはこれらの断片、改変体もしくは誘導体からなる群より選択される腫瘍抗原をコードする、請求項１〜１３の何れか一項に記載の腫瘍もしくは癌疾患を予防または処置する方法における使用のための組み合わせ物。
  15. 上記ＲＮＡワクチンが、少なくとも、
    （ａ）少なくとも１つのペプチドまたはタンパク質をコードする（ここで、当該コードされるペプチドまたはタンパク質は、腫瘍抗原ＰＳＡまたはその断片、改変体もしくは誘導体を含む）ＲＮＡ分子；および
    （ｂ）少なくとも１つのペプチドまたはタンパク質をコードする（ここで、当該コードされるペプチドまたはタンパク質は、腫瘍抗原ＰＳＭＡまたはその断片、改変体もしくは誘導体を含む）ＲＮＡ分子；および
    （ｃ）少なくとも１つのペプチドまたはタンパク質をコードする（ここで、当該コードされるペプチドまたはタンパク質は、腫瘍抗原ＰＳＣＡまたはその断片、改変体もしくは誘導体を含む）ＲＮＡ分子；および
    （ｄ）少なくとも１つのペプチドまたはタンパク質をコードする（ここで、当該コードされるペプチドまたはタンパク質は、腫瘍抗原ＳＴＥＡＰ−１またはその断片、改変体もしくは誘導体を含む）ＲＮＡ分子；および
    （ｅ）少なくとも１つのペプチドまたはタンパク質をコードする（ここで、当該コードされるペプチドまたはタンパク質は、腫瘍抗原ＭＵＣ−１またはその断片、改変体もしくは誘導体を含む）ＲＮＡ分子；
    を含む、請求項１〜１２の何れか一項に記載の腫瘍もしくは癌疾患を予防または処置する方法における使用のための組み合わせ物。
  16. 上記ＲＮＡワクチンが、少なくとも、
    （ａ）少なくとも１つのペプチドまたはタンパク質をコードする（ここで、当該コードされるペプチドまたはタンパク質は、腫瘍抗原ＮＹ−ＥＳＯ−１またはその断片、改変体もしくは誘導体を含む）ＲＮＡ分子；および
    （ｂ）少なくとも１つのペプチドまたはタンパク質をコードする（ここで、当該コードされるペプチドまたはタンパク質は、腫瘍抗原ＭＡＧＥ−Ｃ１またはその断片、改変体もしくは誘導体を含む）ＲＮＡ分子；および
    （ｃ）少なくとも１つのペプチドまたはタンパク質をコードする（ここで、当該コードされるペプチドまたはタンパク質は、腫瘍抗原ＭＡＧＥ−Ｃ２またはその断片、改変体もしくは誘導体を含む）ＲＮＡ分子；および
    （ｄ）少なくとも１つのペプチドまたはタンパク質をコードする（ここで、当該コードされるペプチドまたはタンパク質は、腫瘍抗原サービビンまたはその断片、改変体もしくは誘導体を含む）ＲＮＡ分子；および
    （ｅ）少なくとも１つのペプチドまたはタンパク質をコードする（ここで、当該コードされるペプチドまたはタンパク質は、腫瘍抗原５Ｔ４またはその断片、改変体もしくは誘導体を含む）ＲＮＡ分子；および
    （ｆ）少なくとも１つのペプチドまたはタンパク質をコードする（ここで、当該コードされるペプチドまたはタンパク質は、腫瘍抗原ＭＵＣ−１またはその断片、改変体もしくは誘導体を含む）ＲＮＡ分子；
    を含む、請求項１〜１２の何れか一項に記載の腫瘍もしくは癌疾患を予防または処置する方法における使用のための組み合わせ物。
  17. 請求項１〜１６の何れか一項に記載の組み合わせ物を含んでいる、腫瘍もしくは癌疾患を予防または処置する方法における使用のための薬学的組成物。
  18. 請求項１〜１６の何れか一項に記載の組み合わせ物、または、請求項１７に記載の薬学的組成物を含んでいる、腫瘍もしくは癌疾患を予防または処置する方法における使用のためのパーツキット。
  19. 前立腺癌または非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）を予防または処置する方法における使用のための、請求項１〜１６の何れか一項に記載の組み合わせ物、請求項１７に記載の薬学的組成物、請求項１８に記載のパーツキット。
  20. 上記ＰＤ−１経路阻害剤および上記ＲＮＡワクチンは、それを必要とする患者に順次投与されるものである、請求項１９に記載の組み合わせ物またはパーツキット。
  21. 上記ＰＤ−１経路阻害剤および上記ＲＮＡワクチンは、それを必要とする対象に同時に投与されるものである、請求項１９に記載の組み合わせ物またはパーツキット。
  22. 上記阻害剤および上記ＲＮＡワクチンは、異なる投与経路を介して、それを必要とする対象に投与されるものである、請求項１９〜２１の何れか一項に記載の組み合わせ物またはパーツキット。
  23. 少なくとも１つの腫瘍抗原をコードする少なくとも１つのオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）を含んでいるｍＲＮＡである少なくとも１つのＲＮＡを含んでいるＲＮＡワクチンと組み合わせて、腫瘍もしくは癌疾患を予防または処置する方法において使用するための、ＰＤ−Ｌ１に対する拮抗性抗体であるＰＤ−１経路阻害剤を含む組成物。
  24. ＰＤ−Ｌ１に対する拮抗性抗体であるＰＤ−１経路阻害剤と組み合わせて、腫瘍もしくは癌疾患を予防または処置する方法において使用するための、少なくとも１つの腫瘍抗原をコードする少なくとも１つのオープンリーディングフレーム（ＯＲＦ）を含んでいるｍＲＮＡである少なくとも１つのＲＮＡを含んでいるＲＮＡワクチン。
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Families Citing this family (191)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2012019630A1 (en) 2010-08-13 2012-02-16 Curevac Gmbh Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded protein
WO2012116714A1 (en) 2011-03-02 2012-09-07 Curevac Gmbh Vaccination in elderly patients
US9464124B2 (en) 2011-09-12 2016-10-11 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
WO2013120499A1 (en) 2012-02-15 2013-08-22 Curevac Gmbh Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly (a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded pathogenic antigen
WO2013120497A1 (en) 2012-02-15 2013-08-22 Curevac Gmbh Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded therapeutic protein
KR102134056B1 (ko) 2013-02-22 2020-07-15 큐어백 아게 Ｐｄ―１ 경로의 억제 및 백신접종의 조합물
WO2015024669A1 (en) 2013-08-21 2015-02-26 Curevac Gmbh Combination vaccine
CN105451779A (zh) 2013-08-21 2016-03-30 库瑞瓦格股份公司 增加rna编码蛋白表达的方法
CN110195072A (zh) 2013-08-21 2019-09-03 库瑞瓦格股份公司 狂犬病疫苗
JP6896421B2 (ja) 2013-08-21 2021-06-30 キュアバック アーゲー 呼吸器合胞体ウイルス（ｒｓｖ）ワクチン
US10023626B2 (en) 2013-09-30 2018-07-17 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding immune modulating polypeptides
BR112016007255A2 (pt) 2013-10-03 2017-09-12 Moderna Therapeutics Inc polinucleotídeos que codificam receptor de lipoproteína de baixa densidade
ES2806575T3 (es) 2013-11-01 2021-02-18 Curevac Ag ARN modificado con propiedades inmunoestimuladoras disminuidas
LT3081576T (lt) 2013-12-12 2019-10-25 Shanghai hengrui pharmaceutical co ltd Pd-1 antikūnas, antigeną surišantis jo fragmentas ir jų medicininis pritaikomumas
AU2014375404C1 (en) 2013-12-30 2020-11-19 CureVac Manufacturing GmbH Methods for RNA analysis
JP6584414B2 (ja) 2013-12-30 2019-10-02 キュアバック アーゲー 人工核酸分子
US10835595B2 (en) 2014-01-06 2020-11-17 The Trustees Of The University Of Pennsylvania PD1 and PDL1 antibodies and vaccine combinations and use of same for immunotherapy
TWI680138B (zh) 2014-01-23 2019-12-21 美商再生元醫藥公司 抗ｐｄ-ｌ１之人類抗體
TWI681969B (zh) 2014-01-23 2020-01-11 美商再生元醫藥公司 針對ｐｄ-１的人類抗體
CA2974651A1 (en) 2014-01-24 2015-07-30 Children's Hospital Of Eastern Ontario Research Institute Inc. Smc combination therapy for the treatment of cancer
WO2015135558A1 (en) 2014-03-12 2015-09-17 Curevac Gmbh Combination of vaccination and ox40 agonists
US9394365B1 (en) 2014-03-12 2016-07-19 Yeda Research And Development Co., Ltd Reducing systemic regulatory T cell levels or activity for treatment of alzheimer's disease
US10618963B2 (en) 2014-03-12 2020-04-14 Yeda Research And Development Co. Ltd Reducing systemic regulatory T cell levels or activity for treatment of disease and injury of the CNS
NZ747418A (en) 2014-03-12 2023-05-26 Yeda Res & Dev Reducing systemic regulatory t cell levels or activity for treatment of disease and injury of the cns
US10519237B2 (en) 2014-03-12 2019-12-31 Yeda Research And Development Co. Ltd Reducing systemic regulatory T cell levels or activity for treatment of disease and injury of the CNS
WO2015149944A2 (en) 2014-04-01 2015-10-08 Curevac Gmbh Polymeric carrier cargo complex for use as an immunostimulating agent or as an adjuvant
FI3981437T3 (fi) 2014-04-23 2025-01-10 Modernatx Inc Nukleiinihapporokotteita
MX382298B (es) 2014-06-10 2025-03-12 Curevac Mfg Gmbh Métodos y medios para aumentar la producción de arn.
CN106795096B (zh) 2014-06-25 2020-05-29 爱康泰生治疗公司 用于递送核酸的新型脂质和脂质纳米颗粒制剂
EP4046656A1 (en) 2014-11-06 2022-08-24 HiberCell, Inc. Beta-glucan methods and compositions that affect the tumor microenvironment
EP3230458B1 (en) 2014-12-12 2020-02-19 CureVac AG Artificial nucleic acid molecules for improved protein expression
EP3268012A4 (en) * 2015-03-12 2018-10-31 Health Research, Inc. Enrichment of cd16+ monocytes to improve dendritic cell vaccine quality
EP4353257A3 (en) 2015-04-13 2024-08-07 CureVac Manufacturing GmbH Method for producing rna compositions
WO2016165831A1 (en) 2015-04-17 2016-10-20 Curevac Ag Lyophilization of rna
JP6912384B2 (ja) 2015-04-22 2021-08-04 キュアバック アーゲー 癌疾患の処置のための、ｒｎａ含有組成物
US20180303925A1 (en) 2015-04-27 2018-10-25 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Nucleoside-Modified RNA For Inducing an Adaptive Immune Response
SG11201708867UA (en) 2015-04-30 2017-11-29 Curevac Ag Immobilized poly(n)polymerase
DK3294885T3 (da) 2015-05-08 2020-08-10 Curevac Real Estate Gmbh Fremgangsmåde til at fremstille rna
RU2742993C2 (ru) 2015-05-15 2021-02-12 Куревак Аг РЕЖИМЫ ПРАЙМ-БУСТ, ВКЛЮЧАЮЩИЕ ВВЕДЕНИЕ ПО МЕНЬШЕЙ МЕРЕ ОДНОЙ КОНСТРУКЦИИ мРНК
SG11201708541QA (en) 2015-05-20 2017-12-28 Curevac Ag Dry powder composition comprising long-chain rna
SG11201708540VA (en) 2015-05-20 2017-12-28 Curevac Ag Dry powder composition comprising long-chain rna
WO2016189104A1 (en) * 2015-05-27 2016-12-01 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) New method to produce t cells
CN107873055B (zh) 2015-05-29 2021-09-17 库瑞瓦格房地产有限公司 包括至少一个切向流过滤步骤的产生和纯化rna的方法
WO2016193226A1 (en) 2015-05-29 2016-12-08 Curevac Ag Method for adding cap structures to rna using immobilized enzymes
DK3310379T3 (da) * 2015-06-18 2019-12-16 Vaximm Ag Vegfr-2-targeterende dna-vaccine til kombinationsterapi
HRP20240865T1 (hr) 2015-06-29 2024-10-11 Acuitas Therapeutics Inc. Lipidi i formulacije lipidnih nanočestica za isporuku nukleinskih kiselina
WO2017009376A1 (en) 2015-07-13 2017-01-19 Curevac Ag Method of producing rna from circular dna and corresponding template dna
US11364292B2 (en) 2015-07-21 2022-06-21 Modernatx, Inc. CHIKV RNA vaccines
US11007260B2 (en) 2015-07-21 2021-05-18 Modernatx, Inc. Infectious disease vaccines
WO2017031760A1 (zh) * 2015-08-27 2017-03-02 杨光华 干涉片段及其应用
WO2017031761A1 (zh) * 2015-08-27 2017-03-02 杨光华 干涉片段及其应用
ES2924739T3 (es) 2015-08-28 2022-10-10 Curevac Ag Moléculas de ácido nucleico artificiales
CN107949573B (zh) 2015-09-01 2022-05-03 艾吉纳斯公司 抗-pd-1抗体及其使用方法
SI3350157T1 (sl) 2015-09-17 2022-04-29 Modernatx, Inc. Sestave za doziranje terapevtskih sredstev v celice
EP3362576A1 (en) 2015-10-12 2018-08-22 CureVac AG Automated method for isolation, selection and/or detection of microorganisms or cells comprised in a solution
WO2017066781A1 (en) 2015-10-16 2017-04-20 Modernatx, Inc. Mrna cap analogs with modified phosphate linkage
WO2017066782A1 (en) 2015-10-16 2017-04-20 Modernatx, Inc. Hydrophobic mrna cap analogs
WO2017066789A1 (en) 2015-10-16 2017-04-20 Modernatx, Inc. Mrna cap analogs with modified sugar
JP2018530587A (ja) 2015-10-16 2018-10-18 モデルナティエックス インコーポレイテッドＭｏｄｅｒｎａＴＸ，Ｉｎｃ． ｍＲＮＡキャップ類似体およびｍＲＮＡキャッピングの方法
WO2017066791A1 (en) 2015-10-16 2017-04-20 Modernatx, Inc. Sugar substituted mrna cap analogs
WO2017070624A1 (en) 2015-10-22 2017-04-27 Modernatx, Inc. Tropical disease vaccines
TN2018000152A1 (en) 2015-10-22 2019-10-04 Modernatx Inc Nucleic acid vaccines for varicella zoster virus (vzv)
WO2017070616A2 (en) 2015-10-22 2017-04-27 Modernatx, Inc. Sexually transmitted disease vaccines
LT3368507T (lt) 2015-10-28 2023-03-10 Acuitas Therapeutics Inc. Nauji lipidai ir lipidų nanodalelių kompozicijos, skirtos nukleorūgščių tiekimui
WO2017081110A1 (en) 2015-11-09 2017-05-18 Curevac Ag Rotavirus vaccines
AU2016377681B2 (en) 2015-12-22 2021-05-13 Modernatx, Inc. Compounds and compositions for intracellular delivery of agents
EP3319622B1 (en) 2015-12-22 2020-02-12 CureVac AG Method for producing rna molecule compositions
FI3394103T3 (fi) 2015-12-22 2023-08-30 Regeneron Pharma Anti-PD-1-vasta-aineiden ja bispesifisten anti-CD20-/anti-CD3-vasta-aineiden yhdistelmä syövän hoitoon
WO2017109161A1 (en) 2015-12-23 2017-06-29 Curevac Ag Method of rna in vitro transcription using a buffer containing a dicarboxylic acid or tricarboxylic acid or a salt thereof
EP3416683A1 (en) 2016-02-17 2018-12-26 CureVac AG Zika virus vaccine
EP3423595A1 (en) 2016-03-03 2019-01-09 CureVac AG Rna analysis by total hydrolysis
CN105821040B (zh) * 2016-03-09 2018-12-14 李旭 联合免疫基因抑制高危型HPV表达的sgRNA、基因敲除载体及其应用
CN105999223B (zh) * 2016-04-26 2020-05-12 中国人民解放军第四军医大学 PDL1-IgGFc融合蛋白抑制重症疟疾发病的应用
WO2017186928A1 (en) 2016-04-29 2017-11-02 Curevac Ag Rna encoding an antibody
ES3017307T3 (en) 2016-05-04 2025-05-12 CureVac SE Nucleic acid molecules and uses thereof
WO2017191274A2 (en) 2016-05-04 2017-11-09 Curevac Ag Rna encoding a therapeutic protein
TWI822521B (zh) 2016-05-13 2023-11-11 美商再生元醫藥公司 藉由投予pd-1抑制劑治療皮膚癌之方法
SMT202300121T1 (it) 2016-05-18 2023-05-12 Modernatx Inc Polinucleotidi codificanti l'interleuchina-12 (il12) e loro usi
WO2017207814A1 (en) * 2016-06-02 2017-12-07 Ultimovacs As A vaccine in combination with an immune checkpoint inhibitor for use in treating cancer
JP7145579B2 (ja) 2016-06-09 2022-10-03 キュアバック アーゲー 核酸カーゴ用のハイブリッド担体
CA3027201A1 (en) 2016-06-14 2017-12-21 Modernatx, Inc. Stabilized formulations of lipid nanoparticles
US20190185568A1 (en) * 2016-08-15 2019-06-20 Fuso Pharmaceutical Industries, Ltd. Anti-pd-1 antibody
CA3034295A1 (en) * 2016-08-17 2018-02-22 Orbis Health Solutions Llc Tumor-targeting bead vectors and methods of using the same
CA3033788A1 (en) * 2016-08-17 2018-02-22 Factor Bioscience Inc. Nucleic acid products and methods of administration thereof
JP2019526556A (ja) 2016-08-19 2019-09-19 キュアバック アーゲー 癌治療用ｒｎａ
US10799555B2 (en) 2016-09-15 2020-10-13 Leidos, Inc. PD-1 peptide inhibitors
US10098950B2 (en) 2016-09-15 2018-10-16 Leidos, Inc. PD-1 Peptide Inhibitors
IL266194B2 (en) 2016-10-26 2023-09-01 Curevac Ag mRNA vaccines with lipid nanoparticles
WO2018085734A1 (en) * 2016-11-04 2018-05-11 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Bi-specific activators for tumor therapy
WO2018089540A1 (en) 2016-11-08 2018-05-17 Modernatx, Inc. Stabilized formulations of lipid nanoparticles
CN110167587A (zh) 2016-11-11 2019-08-23 摩登纳特斯有限公司 流感疫苗
US11279923B2 (en) 2016-11-28 2022-03-22 Curevac Ag Method for purifying RNA
WO2018102397A1 (en) 2016-11-29 2018-06-07 PureTech Health LLC Exosomes for delivery of therapeutic agents
CA3046082A1 (en) 2016-12-07 2018-06-14 Agenus Inc. Antibodies and methods of use thereof
CN110582304A (zh) 2016-12-08 2019-12-17 库尔维科公司 用于治疗或预防肝脏疾病的rna
US11103578B2 (en) 2016-12-08 2021-08-31 Modernatx, Inc. Respiratory virus nucleic acid vaccines
WO2018104540A1 (en) 2016-12-08 2018-06-14 Curevac Ag Rnas for wound healing
WO2018115507A2 (en) 2016-12-23 2018-06-28 Curevac Ag Henipavirus vaccine
EP3558354A1 (en) 2016-12-23 2019-10-30 CureVac AG Lassa virus vaccine
EP3558356A2 (en) 2016-12-23 2019-10-30 CureVac AG Mers coronavirus vaccine
US11241490B2 (en) 2017-01-11 2022-02-08 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Nucleoside-modified RNA for inducing an immune response against zika virus
US20190381157A1 (en) * 2017-01-29 2019-12-19 Zequn Tang Methods of immune modulation against foreign and/or auto antigens
US11815435B2 (en) 2017-02-24 2023-11-14 Hibercell, Inc. Beta glucan immunopharmacodynamics
MA47680A (fr) 2017-02-28 2020-01-08 Sanofi Sa Arn thérapeutique
WO2018170256A1 (en) 2017-03-15 2018-09-20 Modernatx, Inc. Herpes simplex virus vaccine
US11045540B2 (en) 2017-03-15 2021-06-29 Modernatx, Inc. Varicella zoster virus (VZV) vaccine
US11576961B2 (en) 2017-03-15 2023-02-14 Modernatx, Inc. Broad spectrum influenza virus vaccine
AU2018234692B2 (en) 2017-03-15 2022-06-02 Modernatx, Inc. Compounds and compositions for intracellular delivery of therapeutic agents
WO2018170336A1 (en) 2017-03-15 2018-09-20 Modernatx, Inc. Lipid nanoparticle formulation
EP3595713A4 (en) 2017-03-15 2021-01-13 ModernaTX, Inc. RESPIRATORY SYNCYTIAL VIRUS VACCINE
EP3595715A1 (en) * 2017-03-17 2020-01-22 CureVac AG Rna vaccine and immune checkpoint inhibitors for combined anticancer therapy
AU2018240515B2 (en) 2017-03-24 2024-07-25 CureVac SE Nucleic acids encoding CRISPR-associated proteins and uses thereof
JP7082110B2 (ja) * 2017-03-29 2022-06-07 テルモ株式会社 アジュバント組成物およびこれを含むワクチン組成物並びに薬剤キット
US11603407B2 (en) 2017-04-06 2023-03-14 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Stable antibody formulation
WO2018191657A1 (en) 2017-04-13 2018-10-18 Acuitas Therapeutics, Inc. Lipids for delivery of active agents
JP7464954B2 (ja) 2017-04-27 2024-04-10 ザ トラスティーズ オブ ザ ユニバーシティ オブ ペンシルバニア Ｃ型肝炎ウイルスに対するヌクレオシド修飾ｍＲＮＡ－脂質ナノ粒子系統ワクチン
CA3061612A1 (en) 2017-04-28 2018-11-01 Acuitas Therapeutics, Inc. Novel carbonyl lipids and lipid nanoparticle formulations for delivery of nucleic acids
EP3625363A1 (en) 2017-05-17 2020-03-25 CureVac Real Estate GmbH Method for determining at least one quality parameter of an rna sample
WO2018213731A1 (en) 2017-05-18 2018-11-22 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding tethered interleukin-12 (il12) polypeptides and uses thereof
AU2018273958B2 (en) 2017-05-25 2022-07-21 Leidos, Inc. PD-1 and CTLA-4 dual inhibitor peptides
WO2018232120A1 (en) 2017-06-14 2018-12-20 Modernatx, Inc. Compounds and compositions for intracellular delivery of agents
EP3638215A4 (en) 2017-06-15 2021-03-24 Modernatx, Inc. RNA FORMULATIONS
JP2020530980A (ja) 2017-07-04 2020-11-05 キュアバック アーゲー 新規核酸分子
WO2019036008A1 (en) 2017-08-16 2019-02-21 Acuitas Therapeutics, Inc. LIPIDS FOR USE IN LIPID NANOPARTICULAR FORMULATIONS
US11524932B2 (en) 2017-08-17 2022-12-13 Acuitas Therapeutics, Inc. Lipids for use in lipid nanoparticle formulations
US11542225B2 (en) 2017-08-17 2023-01-03 Acuitas Therapeutics, Inc. Lipids for use in lipid nanoparticle formulations
JP7461872B2 (ja) 2017-08-17 2024-04-04 アクイタス セラピューティクス インコーポレイテッド 脂質ナノ粒子製剤における使用のための脂質
US20200362382A1 (en) 2017-08-18 2020-11-19 Modernatx, Inc. Methods of preparing modified rna
US11602557B2 (en) 2017-08-22 2023-03-14 Cure Vac SE Bunyavirales vaccine
EP3675817A1 (en) 2017-08-31 2020-07-08 Modernatx, Inc. Methods of making lipid nanoparticles
US10653767B2 (en) 2017-09-14 2020-05-19 Modernatx, Inc. Zika virus MRNA vaccines
BR112020004351A2 (pt) 2017-10-19 2020-09-08 Curevac Ag moléculas de ácido nucleico artificial
CN111511924A (zh) 2017-11-08 2020-08-07 库瑞瓦格股份公司 Rna序列调整
WO2019115635A1 (en) 2017-12-13 2019-06-20 Curevac Ag Flavivirus vaccine
EP3728634A1 (en) 2017-12-21 2020-10-28 CureVac AG Linear double stranded dna coupled to a single support or a tag and methods for producing said linear double stranded dna
US11911453B2 (en) 2018-01-29 2024-02-27 Modernatx, Inc. RSV RNA vaccines
EP3758732B1 (en) 2018-02-27 2024-07-24 Leidos, Inc. Pd-1 peptide inhibitors
CA3091558A1 (en) 2018-04-17 2019-10-24 Curevac Ag Novel rsv rna molecules and compositions for vaccination
EP3836964A1 (en) * 2018-08-15 2021-06-23 University of Florida Research Foundation, Inc. Methods of sensitizing tumors to treatment with immune checkpoint inhibitors
JP7410135B2 (ja) 2018-09-19 2024-01-09 モデルナティエックス インコーポレイテッド 治療薬の細胞内送達のための化合物及び組成物
CN113271926A (zh) 2018-09-20 2021-08-17 摩登纳特斯有限公司 脂质纳米颗粒的制备及其施用方法
WO2020061426A2 (en) 2018-09-21 2020-03-26 Acuitas Therapeutics, Inc. Systems and methods for manufacturing lipid nanoparticles and liposomes
JP7496623B2 (ja) * 2019-01-04 2024-06-07 イーザアールエヌーエー イムノセラピーズ エンヴェー ｍＲＮＡワクチン
TWI852977B (zh) 2019-01-10 2024-08-21 美商健生生物科技公司 前列腺新抗原及其用途
WO2020160430A1 (en) 2019-01-31 2020-08-06 Modernatx, Inc. Vortex mixers and associated methods, systems, and apparatuses thereof
BR112021014845A2 (pt) 2019-01-31 2021-11-03 Modernatx Inc Métodos de preparação de nanopartículas lipídicas
US11351242B1 (en) 2019-02-12 2022-06-07 Modernatx, Inc. HMPV/hPIV3 mRNA vaccine composition
EP3938379A4 (en) 2019-03-15 2023-02-22 ModernaTX, Inc. Hiv rna vaccines
CN111743923B (zh) * 2019-03-27 2024-11-08 北京康万达医药科技有限公司 包含分离的重组溶瘤腺病毒和免疫细胞的治疗剂及其应用
EP3725370A1 (en) 2019-04-19 2020-10-21 ImmunoBrain Checkpoint, Inc. Modified anti-pd-l1 antibodies and methods and uses for treating a neurodegenerative disease
AU2020279371A1 (en) 2019-05-22 2021-12-23 Leidos, Inc. LAG 3 binding peptides
BR112022009598A2 (pt) 2019-11-18 2022-08-16 Janssen Biotech Inc Vacinas baseadas em calr e jak2 mutantes e uso dos mesmos
CN110777115B (zh) * 2019-11-21 2020-08-21 北京启辰生生物科技有限公司 用于促进辅助T细胞产生TNF-α细胞因子的工程化DC细胞及方法
US11241493B2 (en) 2020-02-04 2022-02-08 Curevac Ag Coronavirus vaccine
US12194089B2 (en) 2020-02-04 2025-01-14 CureVac SE Coronavirus vaccine
EP4132576A1 (en) 2020-04-09 2023-02-15 Suzhou Abogen Biosciences Co., Ltd. Nucleic acid vaccines for coronavirus
JP7681617B2 (ja) 2020-04-09 2025-05-22 スージョウ・アボジェン・バイオサイエンシズ・カンパニー・リミテッド 脂質ナノ粒子組成物
CN113521269A (zh) 2020-04-22 2021-10-22 生物技术Rna制药有限公司 冠状病毒疫苗
WO2021247789A1 (en) 2020-06-04 2021-12-09 Leidos, Inc. Immunomodulatory compounds
US11130787B2 (en) * 2020-06-11 2021-09-28 MBF Therapeutics, Inc. Alphaherpesvirus glycoprotein d-encoding nucleic acid constructs and methods
EP4164753A1 (en) 2020-06-30 2023-04-19 Suzhou Abogen Biosciences Co., Ltd. Lipid compounds and lipid nanoparticle compositions
WO2022009052A2 (en) 2020-07-06 2022-01-13 Janssen Biotech, Inc. Prostate neoantigens and their uses
KR20230051172A (ko) 2020-07-16 2023-04-17 아퀴타스 테라퓨틱스 인크. 지질 나노 입자에 사용하기 위한 양이온성 지질
EP4188947A2 (en) 2020-07-31 2023-06-07 Leidos, Inc. Lag3 binding peptides
JP2023537887A (ja) 2020-08-20 2023-09-06 スージョウ・アボジェン・バイオサイエンシズ・カンパニー・リミテッド 脂質化合物及び脂質ナノ粒子組成物
CN112089835B (zh) * 2020-09-17 2021-10-22 澳门科技大学 包含非编码rna分子和靶向肿瘤抗原的抗体的药物组合物
JP2023548662A (ja) 2020-10-12 2023-11-20 レイドス， インコーポレイテッド 免疫調節性ペプチド
US20240156946A1 (en) 2020-12-22 2024-05-16 CureVac SE Rna vaccine against sars-cov-2 variants
WO2022152141A2 (en) 2021-01-14 2022-07-21 Suzhou Abogen Biosciences Co., Ltd. Polymer conjugated lipid compounds and lipid nanoparticle compositions
WO2022152109A2 (en) 2021-01-14 2022-07-21 Suzhou Abogen Biosciences Co., Ltd. Lipid compounds and lipid nanoparticle compositions
WO2022247755A1 (en) 2021-05-24 2022-12-01 Suzhou Abogen Biosciences Co., Ltd. Lipid compounds and lipid nanoparticle compositions
JP2024533865A (ja) 2021-09-14 2024-09-12 レナゲード セラピューティクス マネージメント インコーポレイテッド 環状脂質及びその使用方法
JP2024534697A (ja) 2021-09-14 2024-09-20 レナゲード セラピューティクス マネージメント インコーポレイテッド 非環状脂質及びその使用方法
CN116064598B (zh) 2021-10-08 2024-03-12 苏州艾博生物科技有限公司 冠状病毒的核酸疫苗
CN118043306A (zh) 2021-10-08 2024-05-14 苏州艾博生物科技有限公司 脂质化合物和脂质纳米颗粒组合物
AR127312A1 (es) 2021-10-08 2024-01-10 Suzhou Abogen Biosciences Co Ltd Compuestos lipídicos ycomposiciones de nanopartículas lipídicas
US12186387B2 (en) 2021-11-29 2025-01-07 BioNTech SE Coronavirus vaccine
CA3242402A1 (en) 2021-12-16 2023-06-22 Acuitas Therapeutics, Inc. Lipids for use in lipid nanoparticle formulations
WO2023122752A1 (en) 2021-12-23 2023-06-29 Renagade Therapeutics Management Inc. Constrained lipids and methods of use thereof
AU2023251104A1 (en) 2022-04-07 2024-10-17 Renagade Therapeutics Management Inc. Cyclic lipids and lipid nanoparticles (lnp) for the delivery of nucleic acids or peptides for use in vaccinating against infectious agents
WO2024002985A1 (en) 2022-06-26 2024-01-04 BioNTech SE Coronavirus vaccine
CN119654141A (zh) 2022-08-18 2025-03-18 苏州艾博生物科技有限公司 脂质纳米颗粒的组合物
DE202023106198U1 (de) 2022-10-28 2024-03-21 CureVac SE Impfstoff auf Nukleinsäurebasis
CN115944722A (zh) * 2023-01-09 2023-04-11 浙江大学 一种抗肿瘤mRNA疫苗及其制备方法和应用
WO2024192277A2 (en) 2023-03-15 2024-09-19 Renagade Therapeutics Management Inc. Lipid nanoparticles comprising coding rna molecules for use in gene editing and as vaccines and therapeutic agents
WO2024192291A1 (en) 2023-03-15 2024-09-19 Renagade Therapeutics Management Inc. Delivery of gene editing systems and methods of use thereof
EP4470559A1 (en) * 2023-06-02 2024-12-04 Imgen-T-Srl Combination containing an mrna vaccine and an immune modulating mrna for improved immunogenicity and efficacy
WO2025049959A2 (en) 2023-09-01 2025-03-06 Renagade Therapeutics Management Inc. Gene editing systems, compositions, and methods for treatment of vexas syndrome
WO2025081042A1 (en) 2023-10-12 2025-04-17 Renagade Therapeutics Management Inc. Nickase-retron template-based precision editing system and methods of use
WO2025128871A2 (en) 2023-12-13 2025-06-19 Renagade Therapeutics Management Inc. Lipid nanoparticles comprising coding rna molecules for use in gene editing and as vaccines and therapeutic agents
CN117883410A (zh) * 2024-01-22 2024-04-16 华中科技大学同济医学院附属协和医院 包封有mRNA及Acod1基因si-RNA的脂质体纳米颗粒及其应用

Family Cites Families (143)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US6911537B2 (en) 1998-01-09 2005-06-28 The Salk Institute For Biological Studies Xenobiotic compound modulated expression systems and uses therefor
EP1997893A1 (en) 1998-02-24 2008-12-03 Sisters of Providence in Oregon Compositions containing an OX-40 receptor binding agent or a nucleic acid encoding the same and methods for enhancing antigen-specific immune response
JP2004529102A (ja) 2000-10-24 2004-09-24 イミュネックス・コーポレーション 併用療法を用いて、腫瘍を治療する方法
US7794710B2 (en) 2001-04-20 2010-09-14 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods of enhancing T cell responsiveness
ATE291925T1 (de) 2001-06-05 2005-04-15 Curevac Gmbh Stabilisierte mrna mit erhöhtem g/c-gehalt und optimierter codon usage für die gentherapie
DE10162480A1 (de) 2001-12-19 2003-08-07 Ingmar Hoerr Die Applikation von mRNA für den Einsatz als Therapeutikum gegen Tumorerkrankungen
SI2206517T1 (sl) * 2002-07-03 2023-12-29 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Imunopotencirni sestavki,ki obsegajo protitelesa proti PD-L1
DE10229872A1 (de) 2002-07-03 2004-01-29 Curevac Gmbh Immunstimulation durch chemisch modifizierte RNA
DE10335833A1 (de) 2003-08-05 2005-03-03 Curevac Gmbh Transfektion von Blutzellen mit mRNA zur Immunstimulation und Gentherapie
DE102004042546A1 (de) 2004-09-02 2006-03-09 Curevac Gmbh Kombinationstherapie zur Immunstimulation
CA2584562A1 (en) 2004-10-18 2006-04-27 Globeimmune, Inc. Yeast-based therapeutic for chronic hepatitis c infection
WO2006121810A2 (en) 2005-05-06 2006-11-16 Providence Health System Trimeric ox40-immunoglobulin fusion protein and methods of use
CN103059138B (zh) 2005-05-09 2015-10-28 小野药品工业株式会社 程序性死亡-1(pd-1)的人单克隆抗体及使用抗pd-1抗体来治疗癌症的方法
DE102005023170A1 (de) 2005-05-19 2006-11-23 Curevac Gmbh Optimierte Formulierung für mRNA
WO2006133396A2 (en) * 2005-06-08 2006-12-14 Dana-Farber Cancer Institute Methods and compositions for the treatment of persistent infections and cancer by inhibiting the programmed cell death 1 (pd-1) pathway
ME02260B (me) 2005-07-01 2016-02-29 Medarex Inc Humana monoklonska antitela za ligand programirane smrti 1 (pd-l1)
US20100076060A1 (en) 2005-09-15 2010-03-25 Duke University Aptamers as agonists
WO2008011344A2 (en) 2006-07-17 2008-01-24 Nationwide Children's Hospital Inc. Disruption of programmed death-1 (pd-1) ligands to adjuvant adeno-associated virus vector vaccines
DE102006035618A1 (de) 2006-07-31 2008-02-07 Curevac Gmbh Nukleinsäure der Formel (I): GlXmGn, insbesondere als immunstimulierendes Adjuvanz
JP2010507361A (ja) 2006-07-31 2010-03-11 キュアバック ゲーエムベーハー 具体的には免疫刺激剤／アジュバントとしての、一般式（Ｉ）：ＧｌＸｍＧｎ、または一般式（ＩＩ）：ＣｌＸｍＣｎで表される核酸
EP2061504A4 (en) 2006-09-20 2010-01-27 Univ Johns Hopkins COMBINATION THERAPY FOR CANCER AND INFECTION DISEASES WITH ANTI-B7-H1 ANTIBODIES
US10106619B2 (en) 2006-10-04 2018-10-23 La Jolla Institute For Allergy And Immunology Virus vaccination and treatment methods with OX40 agonist compositions
DE102006061015A1 (de) 2006-12-22 2008-06-26 Curevac Gmbh Verfahren zur Reinigung von RNA im präparativen Maßstab mittels HPLC
NZ626867A (en) * 2006-12-27 2014-09-26 Harvard College Compositions and methods for the treatment of infections and tumors
DE102007001370A1 (de) 2007-01-09 2008-07-10 Curevac Gmbh RNA-kodierte Antikörper
HRP20131167T1 (hr) * 2007-06-18 2014-01-03 Merck Sharp & Dohme B.V. Antitijela za humani receptor programirane smrti pd-1
WO2009030254A1 (en) 2007-09-04 2009-03-12 Curevac Gmbh Complexes of rna and cationic peptides for transfection and for immunostimulation
WO2009046738A1 (en) * 2007-10-09 2009-04-16 Curevac Gmbh Composition for treating lung cancer, particularly of non-small lung cancers (nsclc)
WO2009046739A1 (en) 2007-10-09 2009-04-16 Curevac Gmbh Composition for treating prostate cancer (pca)
KR101483715B1 (ko) 2008-01-31 2015-01-19 큐어백 게엠바하 면역증강제／애주번트인 화학식（ＮｕＧｌＸｍＧｎＮｖ）ａ를 포함하는 핵산 및 이의 유도체
WO2009114335A2 (en) 2008-03-12 2009-09-17 Merck & Co., Inc. Pd-1 binding proteins
AU2009288730B2 (en) * 2008-08-25 2013-06-20 Amplimmune, Inc. Compositions of PD-1 antagonists and methods of use
US8552154B2 (en) 2008-09-26 2013-10-08 Emory University Anti-PD-L1 antibodies and uses therefor
WO2010037408A1 (en) 2008-09-30 2010-04-08 Curevac Gmbh Composition comprising a complexed (m)rna and a naked mrna for providing or enhancing an immunostimulatory response in a mammal and uses thereof
DK2370593T3 (en) * 2008-11-28 2016-07-04 Univ Emory A method for determining the effect of PD-1 Antagonists
WO2010086743A2 (en) * 2009-02-02 2010-08-05 Chrontech Pharma Ab Compositions and methods that enhance an immune response
US8345509B2 (en) 2009-04-16 2013-01-01 Chevron U.S.A., Inc. System and method to create three-dimensional images of non-linear acoustic properties in a region remote from a borehole
US20110053829A1 (en) 2009-09-03 2011-03-03 Curevac Gmbh Disulfide-linked polyethyleneglycol/peptide conjugates for the transfection of nucleic acids
NZ628923A (en) 2009-11-24 2016-02-26 Medimmune Ltd Targeted binding agents against b7-h1
WO2011069529A1 (en) 2009-12-09 2011-06-16 Curevac Gmbh Mannose-containing solution for lyophilization, transfection and/or injection of nucleic acids
KR102017898B1 (ko) 2010-05-14 2019-09-04 더 제너럴 하스피톨 코포레이션 종양 특이적 신생항원을 확인하는 조성물 및 방법
SI2591114T1 (sl) 2010-07-06 2016-10-28 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Imunizacija velikih sesalcev z majhnimi odmerki RNA
WO2012006634A2 (en) * 2010-07-09 2012-01-12 The Board Of Trustees Of The University Of Illiniois Prostate specific antigen (psa) peptide therapy
EP2955230A1 (en) 2010-07-30 2015-12-16 CureVac AG Complexation of nucleic acids with disulfide-crosslinked cationic components for transfection and immunostimulation
WO2012019630A1 (en) 2010-08-13 2012-02-16 Curevac Gmbh Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded protein
WO2012062218A1 (en) 2010-11-11 2012-05-18 The University Of Hong Kong Soluble pd-1 variants, fusion constructs, and uses thereof
WO2012089225A1 (en) 2010-12-29 2012-07-05 Curevac Gmbh Combination of vaccination and inhibition of mhc class i restricted antigen presentation
WO2012116715A1 (en) 2011-03-02 2012-09-07 Curevac Gmbh Vaccination in newborns and infants
WO2012113413A1 (en) * 2011-02-21 2012-08-30 Curevac Gmbh Vaccine composition comprising complexed immunostimulatory nucleic acids and antigens packaged with disulfide-linked polyethyleneglycol/peptide conjugates
WO2012116714A1 (en) 2011-03-02 2012-09-07 Curevac Gmbh Vaccination in elderly patients
CN103957939A (zh) * 2011-09-19 2014-07-30 约翰霍普金斯大学 癌症免疫治疗
WO2013113326A1 (en) 2012-01-31 2013-08-08 Curevac Gmbh Pharmaceutical composition comprising a polymeric carrier cargo complex and at least one protein or peptide antigen
WO2013113325A1 (en) 2012-01-31 2013-08-08 Curevac Gmbh Negatively charged nucleic acid comprising complexes for immunostimulation
EP2623121A1 (en) 2012-01-31 2013-08-07 Bayer Innovation GmbH Pharmaceutical composition comprising a polymeric carrier cargo complex and an antigen
WO2013123242A1 (en) 2012-02-14 2013-08-22 Merial Limited Recombinant poxviral vectors expressing both rabies and ox40 proteins, and vaccines made therefrom
WO2013120499A1 (en) 2012-02-15 2013-08-22 Curevac Gmbh Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly (a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded pathogenic antigen
WO2013120497A1 (en) 2012-02-15 2013-08-22 Curevac Gmbh Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded therapeutic protein
WO2013120498A1 (en) 2012-02-15 2013-08-22 Curevac Gmbh Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded allergenic antigen or an autoimmune self-antigen
WO2013120500A1 (en) 2012-02-15 2013-08-22 Curevac Gmbh Nucleic acid comprising or coding for a histone stem-loop and a poly(a) sequence or a polyadenylation signal for increasing the expression of an encoded tumour antigen
WO2013143555A1 (en) 2012-03-26 2013-10-03 Biontech Ag Rna formulation for immunotherapy
DK3578659T3 (da) 2012-03-27 2024-02-05 CureVac SE Kunstige nukelinsyremolekyler til forbedret protein- eller peptidekspression
RU2651498C2 (ru) 2012-03-27 2018-04-19 Кьюрвак Аг Молекулы искусственной нуклеиновой кислоты
RU2660565C2 (ru) 2012-03-27 2018-07-06 Кьюрвак Аг Молекулы искусственной нуклеиновой кислоты, содержащие 5'utr гена top
EP2844282B1 (en) 2012-05-04 2019-06-12 Pfizer Inc Prostate-associated antigens and vaccine-based immunotherapy regimens
EP3498267A1 (en) 2012-05-25 2019-06-19 CureVac AG Reversible immobilization and/or controlled release of nucleic acid containing nanoparticles by (biodegradable) polymer coatings
CN104812244B (zh) 2012-09-17 2018-10-30 卡莱克汀医疗有限公司 增强癌症治疗中特异性免疫疗法的方法
KR102134056B1 (ko) 2013-02-22 2020-07-15 큐어백 아게 Ｐｄ―１ 경로의 억제 및 백신접종의 조합물
DK3292873T3 (da) 2013-02-22 2019-06-03 Curevac Ag Kombination af vaccination og hæmning af PD-1-vejen
UA120595C2 (uk) 2013-08-21 2020-01-10 Куревак Аг Композиція та вакцина для лікування недрібноклітинного раку легень
CN105451779A (zh) 2013-08-21 2016-03-30 库瑞瓦格股份公司 增加rna编码蛋白表达的方法
WO2015024669A1 (en) 2013-08-21 2015-02-26 Curevac Gmbh Combination vaccine
RU2016109938A (ru) 2013-08-21 2017-09-26 Куревак Аг Композиция и вакцина для лечения рака предстательной железы
CN110195072A (zh) 2013-08-21 2019-09-03 库瑞瓦格股份公司 狂犬病疫苗
JP6896421B2 (ja) 2013-08-21 2021-06-30 キュアバック アーゲー 呼吸器合胞体ウイルス（ｒｓｖ）ワクチン
WO2015048312A1 (en) 2013-09-26 2015-04-02 Costim Pharmaceuticals Inc. Methods for treating hematologic cancers
ES2806575T3 (es) 2013-11-01 2021-02-18 Curevac Ag ARN modificado con propiedades inmunoestimuladoras disminuidas
CA2927862C (en) 2013-12-30 2024-01-23 Curevac Ag Artificial nucleic acid molecules
AU2014375404C1 (en) 2013-12-30 2020-11-19 CureVac Manufacturing GmbH Methods for RNA analysis
JP6584414B2 (ja) 2013-12-30 2019-10-02 キュアバック アーゲー 人工核酸分子
WO2015135558A1 (en) 2014-03-12 2015-09-17 Curevac Gmbh Combination of vaccination and ox40 agonists
WO2015149944A2 (en) 2014-04-01 2015-10-08 Curevac Gmbh Polymeric carrier cargo complex for use as an immunostimulating agent or as an adjuvant
MX382298B (es) 2014-06-10 2025-03-12 Curevac Mfg Gmbh Métodos y medios para aumentar la producción de arn.
EP3230458B1 (en) 2014-12-12 2020-02-19 CureVac AG Artificial nucleic acid molecules for improved protein expression
CA2962849A1 (en) 2014-12-16 2016-06-23 Curevac Ag Ebolavirus and marburgvirus vaccines
RU2757675C2 (ru) 2014-12-30 2021-10-20 Куревак Аг Молекулы новых искусственных нуклеиновых кислот
EP4353257A3 (en) 2015-04-13 2024-08-07 CureVac Manufacturing GmbH Method for producing rna compositions
WO2016165831A1 (en) 2015-04-17 2016-10-20 Curevac Ag Lyophilization of rna
JP6912384B2 (ja) 2015-04-22 2021-08-04 キュアバック アーゲー 癌疾患の処置のための、ｒｎａ含有組成物
SG11201708681SA (en) 2015-04-30 2017-11-29 Curevac Ag Method for in vitro transcription using an immobilized restriction enzyme
SG11201708867UA (en) 2015-04-30 2017-11-29 Curevac Ag Immobilized poly(n)polymerase
DK3294885T3 (da) 2015-05-08 2020-08-10 Curevac Real Estate Gmbh Fremgangsmåde til at fremstille rna
RU2742993C2 (ru) 2015-05-15 2021-02-12 Куревак Аг РЕЖИМЫ ПРАЙМ-БУСТ, ВКЛЮЧАЮЩИЕ ВВЕДЕНИЕ ПО МЕНЬШЕЙ МЕРЕ ОДНОЙ КОНСТРУКЦИИ мРНК
SG11201708541QA (en) 2015-05-20 2017-12-28 Curevac Ag Dry powder composition comprising long-chain rna
SG11201708540VA (en) 2015-05-20 2017-12-28 Curevac Ag Dry powder composition comprising long-chain rna
CN107873055B (zh) 2015-05-29 2021-09-17 库瑞瓦格房地产有限公司 包括至少一个切向流过滤步骤的产生和纯化rna的方法
WO2016193226A1 (en) 2015-05-29 2016-12-08 Curevac Ag Method for adding cap structures to rna using immobilized enzymes
US20180296663A1 (en) 2015-06-17 2018-10-18 Curevac Ag Vaccine composition
WO2017001058A1 (en) 2015-07-01 2017-01-05 Curevac Ag Method for analysis of an rna molecule
WO2017009376A1 (en) 2015-07-13 2017-01-19 Curevac Ag Method of producing rna from circular dna and corresponding template dna
HK1256498A1 (zh) 2015-07-30 2019-09-27 Modernatx, Inc. 聚肽表位 rna
EP3331555A1 (en) 2015-08-05 2018-06-13 CureVac AG Epidermal mrna vaccine
EP3699288A1 (en) 2015-08-07 2020-08-26 CureVac AG Process for the in vivo production of rna in a host cell
DE22195354T1 (de) 2015-08-10 2023-05-25 CureVac Manufacturing GmbH Verfahren zur erhöhung der replikation eines zirkulären dna-moleküls
ES2924739T3 (es) 2015-08-28 2022-10-10 Curevac Ag Moléculas de ácido nucleico artificiales
EP3362576A1 (en) 2015-10-12 2018-08-22 CureVac AG Automated method for isolation, selection and/or detection of microorganisms or cells comprised in a solution
WO2017081110A1 (en) 2015-11-09 2017-05-18 Curevac Ag Rotavirus vaccines
EP3374504B1 (en) 2015-11-09 2025-03-19 CureVac SE Optimized nucleic acid molecules
WO2017108087A1 (en) 2015-12-21 2017-06-29 Curevac Ag Inlay for a culture plate and corresponding method for preparing a culture plate system with such inlay
EP3319622B1 (en) 2015-12-22 2020-02-12 CureVac AG Method for producing rna molecule compositions
WO2017109161A1 (en) 2015-12-23 2017-06-29 Curevac Ag Method of rna in vitro transcription using a buffer containing a dicarboxylic acid or tricarboxylic acid or a salt thereof
EP3414340B1 (en) 2016-02-12 2023-08-09 CureVac SE Method for analyzing rna
EP3417069A1 (en) 2016-02-15 2018-12-26 CureVac AG Method for analyzing by-products of rna in vitro transcription
EP3416683A1 (en) 2016-02-17 2018-12-26 CureVac AG Zika virus vaccine
EP3423595A1 (en) 2016-03-03 2019-01-09 CureVac AG Rna analysis by total hydrolysis
EP3433361A1 (en) 2016-03-24 2019-01-30 CureVac AG Immobilized inorganic pyrophosphatase (ppase)
EP3445392A1 (en) * 2016-04-22 2019-02-27 CureVac AG Rna encoding a tumor antigen
WO2017186928A1 (en) 2016-04-29 2017-11-02 Curevac Ag Rna encoding an antibody
EP3452086A1 (en) 2016-05-04 2019-03-13 CureVac AG Influenza mrna vaccines
US20180126003A1 (en) 2016-05-04 2018-05-10 Curevac Ag New targets for rna therapeutics
ES3017307T3 (en) 2016-05-04 2025-05-12 CureVac SE Nucleic acid molecules and uses thereof
WO2017191274A2 (en) 2016-05-04 2017-11-09 Curevac Ag Rna encoding a therapeutic protein
US20190194760A1 (en) 2016-05-25 2019-06-27 Curevac Ag Novel biomarkers
JP7145579B2 (ja) 2016-06-09 2022-10-03 キュアバック アーゲー 核酸カーゴ用のハイブリッド担体
EP3468608A1 (en) 2016-06-09 2019-04-17 CureVac AG Hybrid carriers for nucleic acid cargo
EP3468612A1 (en) 2016-06-09 2019-04-17 CureVac AG Hybrid carriers for nucleic acid cargo
EP3468609A1 (en) 2016-06-09 2019-04-17 CureVac AG Cationic carriers for nucleic acid delivery
JP2019526556A (ja) * 2016-08-19 2019-09-19 キュアバック アーゲー 癌治療用ｒｎａ
IL266194B2 (en) 2016-10-26 2023-09-01 Curevac Ag mRNA vaccines with lipid nanoparticles
US11279923B2 (en) 2016-11-28 2022-03-22 Curevac Ag Method for purifying RNA
WO2018104540A1 (en) 2016-12-08 2018-06-14 Curevac Ag Rnas for wound healing
CN110582304A (zh) 2016-12-08 2019-12-17 库尔维科公司 用于治疗或预防肝脏疾病的rna
WO2018115507A2 (en) 2016-12-23 2018-06-28 Curevac Ag Henipavirus vaccine
EP3558354A1 (en) 2016-12-23 2019-10-30 CureVac AG Lassa virus vaccine
EP3558356A2 (en) 2016-12-23 2019-10-30 CureVac AG Mers coronavirus vaccine
EP3595715A1 (en) * 2017-03-17 2020-01-22 CureVac AG Rna vaccine and immune checkpoint inhibitors for combined anticancer therapy
AU2018240515B2 (en) 2017-03-24 2024-07-25 CureVac SE Nucleic acids encoding CRISPR-associated proteins and uses thereof
EP3625363A1 (en) 2017-05-17 2020-03-25 CureVac Real Estate GmbH Method for determining at least one quality parameter of an rna sample
JP2020530980A (ja) * 2017-07-04 2020-11-05 キュアバック アーゲー 新規核酸分子
US11602557B2 (en) 2017-08-22 2023-03-14 Cure Vac SE Bunyavirales vaccine
BR112020004351A2 (pt) 2017-10-19 2020-09-08 Curevac Ag moléculas de ácido nucleico artificial
CN111511924A (zh) 2017-11-08 2020-08-07 库瑞瓦格股份公司 Rna序列调整
EP3728634A1 (en) 2017-12-21 2020-10-28 CureVac AG Linear double stranded dna coupled to a single support or a tag and methods for producing said linear double stranded dna

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KR102134056B1 (ko) 2020-07-15
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AU2018241156A1 (en) 2018-10-25
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WO2014127917A1 (en) 2014-08-28
SG11201506052PA (en) 2015-09-29
JP6456305B2 (ja) 2019-01-23
US9974845B2 (en) 2018-05-22
SG10201710472PA (en) 2018-02-27

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CN108064176A (zh) 用于治疗肿瘤疾病的含有rna的组合物

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