JP2012529482A - ２，３−ジヒドロ−１ｈ−インデン化合物および癌を治療するためのその使用 - Google Patents

Abstract

本明細書では、２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン化合物あるいは本化合物または本化合物を含む医薬組成物の製造方法が提供される。上記化合物はＩＡＰタンパク質を阻害し、様々な癌を治療するために使用することができる。

Description

優先権
本出願は、２００９年６月１２日に出願された米国仮特許出願第６１／１８６，５９４号の優先権を主張するものであり、その内容全体が参照により本明細書に組み込まれる。

本明細書では、２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン化合物、この化合物を含む医薬組成物およびその調製方法が提供される。上記化合物はＩＡＰタンパク質を阻害し、様々な癌を治療するために使用することができる。

アポトーシス阻害タンパク質（inhibitor of apoptosis protein＝ＩＡＰ）はバキュロウイルスで最初に同定され、そこでは、複製に関与し、感染細胞がアポトーシスを引き起こすことを防止する。続いて、複数種のＩＡＰが昆虫、線虫および脊椎動物で発見され、そこでは、発現に重要な役割を果たすメンバーもいるが、細胞周期の制御に関与するメンバーもいる。バキュロウイルスＩＡＰタンパク質中に存在する２つのモチーフが細胞性ＩＡＰで同定されている。バキュロウイルスＩＡＰ反復（ＢＩＲ）ドメインは約７０〜８０個のアミノ酸長であり、亜鉛結合モチーフを含む。ＢＩＲドメインの存在によって、タンパク質がＩＡＰファミリーのメンバーとして定義される。ＢＩＲドメインは、ＩＡＰ機能に関わるタンパク質間相互作用を容易にする。バキュロウイルスＩＡＰおよびいくつかの細胞性ＩＡＰに発見された第２のモチーフは、他のタンパク質に発見された亜鉛フィンガーの一種であるＲＩＮＧ(Really Interesting New Gene)フィンガーであり、ＩＡＰ中でＥ３ユビキチンリガーゼ活性を有する。ヒトゲノムは８種類のＩＡＰ、すなわちｃＩＡＰ１、ｃＩＡＰ２、ＸＩＡＰ、Ｔｓ−ＩＡＰ、Ｌｉｖｉｎ、サバイビン、ＮＡＩＰおよびＡｐｏｌｌｏｎまたはＢｒｕｃｅを含む(Hunter, A. M., E. C. LaCasse and R. G. Korneluk, 2007, The inhibitors of apoptosis (IAPs) as cancer targets（癌標的としてのアポトーシス阻害物質（ＩＡＰ））, Apoptosis, 12:1543-1568)。

ＸＩＡＰは、３つのＢＩＲドメイン（ＢＩＲ１、２および３）およびＲＩＮＧフィンガーを有する。ＸＩＡＰは、アポトーシス促進性プロテアーゼのカスパーゼファミリーのいくつかのメンバーの活性型に結合するその能力によってアポトーシスを直接阻害することができる。ＸＩＡＰのＢＩＲ３ドメインは、活性化されたカスパーゼ−９のＮ末端に結合して、活性にとって必須のカスパーゼ−９の二量体形成を阻害する。カスパーゼ−３およびカスパーゼ−７は、ＢＩＲ１およびＢＩＲ２ドメイン間のリンカー領域に結合して、カスパーゼ活性部位をブロックする(Riedl, S. J. and Y Shi, 2004, Molecular Mechanisms of Caspase Regulation During Apoptosis（アポトーシス中のカスパーゼ調整の分子機構）, Nat. Rev. Mol. Cell Biol., 5: 897-907)。

ｃＩＡＰ１およびｃＩＡＰ２は、２型腫瘍壊死因子−α受容体複合体［ＴＮＦＲ２］との相互作用によって最初に同定された(Rothe, M. et al. 1995, The TNFR2-TRAF Signaling Complex Contains Two Novel Proteins Related to Baculoviral Inhibitor of Apoptosis Proteins（ＴＮＦＲ２−ＴＲＡＦシグナル伝達複合体はバキュロウイルスアポトーシス阻害タンパク質に関連する２種類の新規なタンパク質を含む）, Cell, 83: 1243-1252)。ｃＩＡＰ１およびｃＩＡＰ２はどちらも、３つのＢＩＲドメイン（ＢＩＲ１、２および３）、ＲＩＮＧフィンガーおよびカスパーゼ動員ドメイン（ＣＡＲＤ）を含む。ｃＩＡＰ１はそのＢＩＲ１ドメインを介してＴＮＦＲ２複合体中のＴＲＡＦ１／２に結合する(Samuel, T., K. Welsh, T. Lober, S. H. Togo, J. M. Zapata and J. C. Reed, 2006, Distinct BIR Domains of cIAP1 Mediate Binding to and Ubiquitination of Tumor Necrosis Factor Receptor-associated Factor 2 and Second Mitochondrial Activator of Caspases（ｃＩＡＰ１の明確に区別できるＢＩＲドメインは、カスパーゼの腫瘍壊死因子受容体関連因子２および第２のミトコンドリア活性化因子に対する結合およびそれらのユビキチン化を媒介する）, J. Biol. Chem. 281: 1080-1090)。活性化されたＴＮＦＲ複合体では、ｃＩＡＰ１およびｃＩＡＰ２のＲＩＮＧドメインによるＲＩＰＫ１のユビキチン化は、ＴＮＦＲの下流のＴＡＫ１シグナル伝達を活性化させる際の重要な工程であり、それにより、生存促進性の標準的なＮＦ−ｋａｐｐａＢ経路が活性化しカスパーゼ−８阻害物質ＦＬＩＰが合成される(Varfolomeev E., et al. 2008 c-IAP1 and c-IAP2 are Critical Mediators of Tumor Necrosis Factor α (TNFα)-induced NF-kappaB Activation（ｃＩＡＰ１およびｃＩＡＰ２は、腫瘍壊死因子α（Tumor Necrosis Factor α＝ＴＮＦα）に誘発されるＮＦ−ｋａｐｐａＢ活性化の重要な媒介物である）, J. Biol. Chem., 283: 24295-24299)。また、ｃＩＡＰ１は、ＮＩＫのユビキチン化およびその後のプロテアソーム分解によって非標準的ＮＦ−ｋａｐｐａＢ経路を負に制御するように作用する。しかし、ＸＩＡＰのように、ｃＩＡＰ１およびｃＩＡＰ２は生体外でカスパーゼに結合することができ、それらの親和性は生理学的に関連していないと思われる(Eckelman, B. P. and G. S. Salvesen, 2006, The Human Anti-apoptotic Proteins cIAP1 and cIAP2 Bind but Do Not Inhibit Caspases（ヒト抗アポトーシスタンパク質ｃＩＡＰ１およびｃＩＡＰ２は結合するがカスパーゼを阻害しない）, J. Biol. Chem. 281: 3254-3260)。

ＢＩＲ２ならびにＸＩＡＰ、ｃＩＡＰ１およびｃＩＡＰ２の３つのドメインの細胞アンタゴニストは、Ｌｉｖｉｎの単一のＢＩＲドメインと共に、カスパーゼの第２のミトコンドリア活性化因子（second mitochondrial activator of caspases＝ＳＭＡＣ）と呼ばれている。ＳＭＡＣは、細胞質内で合成され、次いで、ミトコンドリア内に取り込まれ、そこで、そのＮ末端の５５個のアミノ酸がそのタンパク質の残部から切断される。ＤＮＡ損傷またはアポトーシスを引き起こす薬剤による処理によって生じ得るミトコンドリアの完全性の喪失と同時に、ミトコンドリアＳＭＡＣは細胞質に進入し、そこで、ＸＩＡＰ、ｃＩＡＰ１、ｃＩＡＰ２およびＬｉｖｉｎに結合する。ＳＭＡＣのこれらのＩＡＰへの結合は、Ｎ末端の４個のアミノ酸（ＡＶＰＩ）がＢＩＲ２および／またはｃＩＡＰ１、ｃＩＡＰ２、ＸＩＡＰの３つのドメインおよびＭＬ−ＩＡＰの単一のＢＩＲドメインに結合することで容易になる(Hunter et al.)。

ＳＭＡＣがＸＩＡＰに結合することで、ＸＩＡＰによるカスパーゼ−３、カスパーゼ−７およびカスパーゼ−９の阻害が防止されるため、この結合はアポトーシス促進性である。ＳＭＡＣがｃＩＡＰ１およびｃＩＡＰ２に結合することで、ｃＩＡＰ１およびｃＩＡＰ２の自己ユビキチン化およびプロテオゾーム媒介性分解が引き起こされる。ｃＩＡＰ１およびｃＩＡＰ２の喪失によって、標準的なＮＦ−ｋａｐｐａＢ経路によるＴＮＦＲの下流のシグナル伝達が阻害される。ＴＮＦ−αおよびＴＮＦＲの活性複合体が生ずる細胞では、それによって、ＴＲＡＤ、ＲＩＰＫ１およびプロカスパーゼ−８間の複合体の形成によるカスパーゼ−８の活性化も引き起こされる。標準的なＮＦ−ｋａｐｐａＢ経路の不活性化に起因する活性カスパーゼ−８の形成およびＦＬＩＰの非存在によって、これらの腫瘍細胞においてアポトーシスが引き起こされる。

構造的な研究によって、ＸＩＡＰのＢＩＲ３ドメインがＳＭＡＣのＮ末端の４個のアミノ酸、すなわちＡｌａ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｉｌｅ（ＡＶＰＩ）に結合することが分かった。生化学的な研究によって、ＡＶＰＩおよび関連するペプチドもｃＩＡＰ１、ｃＩＡＰ２およびＬｉｖｉｎのＢＩＲドメインに結合することが分かった。ＸＩＡＰ、ＭＬ−ＩＡＰ、ｃＩＡＰ１およびｃＩＡＰ２に結合するＡＶＰＩの細胞透過性小分子模倣体（ＳＭＡＣ模倣体）が形成された。しかし、これらのアポトーシス関連経路を利用する１種以上のＩＡＰを標的とする新規な化合物がなお必要とされている。

本明細書では式Ｉの化合物が提供される：

式Ｉの化合物では、
Ｒ１およびＲ２は独立に、ＨまたはＣ（１〜６）アルキルであり、
Ｒ３は、ＨまたはＣ（３〜８）シクロアルキルであり、
Ｒ４は、−ＯＣ（３〜１０）アルキルＯ−、−ＯＣ（３〜１０）アルケニルＯ−または−ＯＣ（３〜１０）アルキニルＯ−であり、
Ｒ５は、ＨまたはＣ（３〜８）シクロアルキルであり、
Ｒ６およびＲ７は独立に、ＨまたはＣ（１〜６）アルキルである。

本化合物の形態としては、上記化合物の医薬的に許容される塩などの塩、溶媒和物または水和物を挙げることができる。上記化合物は、医薬的に許容される担体、希釈剤または賦形剤をさらに含むことができる医薬組成物の一部とすることもできる。

本化合物および組成物はＩＡＰ活性を阻害することができるため、癌の治療などで使用することができる。従って、本化合物および組成物を薬として使用することができる。例えば、本化合物を、急性骨髄性白血病、膀胱癌、乳癌、結腸癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、非小細胞肺癌、卵巣癌、膵臓癌または前立腺癌を治療するために使用してもよい。

本明細書では式Ｉの化合物が提供される。

いくつかの化合物では、Ｒ１およびＲ２のうちの一方はＣ（１〜６）アルキルであり、Ｒ１およびＲ２のうちの他方はＨである。いくつかの化合物では、Ｒ１およびＲ２のうちの一方はメチルであり、Ｒ１およびＲ２のうちの他方はＨである。さらなる化合物では、Ｒ１およびＲ２はどちらもＨである。

いくつかの化合物では、Ｒ３はＣ（３〜８）シクロアルキル、例えばシクロヘキシルである。

これらおよび他の化合物の態様では、Ｒ４は、

である。他の態様では、Ｒ４は、

である。

これらおよび他の態様では、Ｒ５はＣ（３〜８）シクロアルキル、例えばシクロヘキシルである。

さらに他の態様では、Ｒ６およびＲ７のうちの一方はＣ（１〜６）アルキルであり、Ｒ６およびＲ７のうちの他方はＨである。なおらさなる態様では、Ｒ６およびＲ７のうちの一方はメチルであり、Ｒ６およびＲ７のうちの他方はＨである。他の態様ではＲ６およびＲ７はどちらもＨである。

いくつかの態様では、Ｒ１およびＲ２のうちの一方はＣ（１〜６）アルキルであり、Ｒ１およびＲ２のうちの他方はＨであり、Ｒ３はＣ（３〜８）シクロアルキルであり、Ｒ４は−ＯＣ（３〜１０）アルキニルＯ−であり、Ｒ５はＣ（３〜８）シクロアルキルであり、Ｒ６およびＲ７のうちの一方はＣ（１〜６）アルキルであり、Ｒ６およびＲ７のうちの他方はＨである。

他の態様では、Ｒ１およびＲ２のうちの一方はメチルであり、Ｒ１およびＲ２のうちの他方はＨであり、Ｒ３はシクロヘキシルであり、Ｒ４は、

であり、Ｒ５はシクロヘキシルであり、Ｒ６およびＲ７のうちの一方はメチルであり、Ｒ６およびＲ７のうちの他方はＨである。

式Ｉの具体的な化合物は、

または

である。

本化合物のいずれかの態様では、式Ｉの化合物は、下記式Ｉａに示す立体化学を有することができる：

本化合物のいずれかの他の態様では、式Ｉの化合物は、下記式Ｉｂに示す立体化学を有することができる：

本明細書に記載されている化合物の具体例は表１に示されている。当業者は、表１および実施例に示されている化合物を含む本明細書に記載されている化合物が遊離した非塩形態で生じ得ること、あるいは塩として生じ得ることを認識する。

当業者は、本明細書に記載されている化合物を二量体とみなすことができることを分かっているであろう。本明細書に記載されている二量体化合物は、同種二量体または異種二量体のどちらでもよい。同種二量体および異種二量体という用語は、２つの同一のサブユニットまたは２つの異なるサブユニットをそれぞれ含む二量体を表す。この２つのサブユニットは、リンカー部分、すなわちＲ４によって結合されており、ここでリンカー部分は、示した位置でサブユニットのそれぞれに共有結合されている。従って、上記化合物の同種二量体では、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３はＲ６、Ｒ７およびＲ５とそれぞれ同じであり、この場合リンカーはＲ４である。上記化合物の異種二量体では、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３のうちの１つ以上は、Ｒ６、Ｒ７およびＲ５とそれぞれ異なる。異種二量体では、Ｒ１、Ｒ２およびＲ３のうちの１つ、２つまたはすべてがＲ６、Ｒ７およびＲ５とそれぞれ異なり得る。

本明細書に記載されている化合物のすべての異性体（例えば、鏡像異性体、立体異性体、ジアステレオ異性体、エピマー、幾何異性体）単独ならびに式Ｉの化合物の完全または部分的にラセミ化またはエピマー化されたような任意の混合物（例えば、ラセミ混合物または光学活性混合物）が式Ｉの化合物の範囲に含まれる。（Ｒ）、（Ｓ）、エピマー、ジアステレオマー、シス、トランス、シン、アンチおよびそれらの混合物を含むこれらの形態のすべてが式Ｉの化合物に含まれる。本明細書に記載されている化合物は、水和形態、溶媒和形態、互変異性形態または双性イオン形態で存在してもよく、本化合物は、本化合物のこれらの任意の形態およびそれらの混合物を含む。式Ｉの化合物は、塩、例えば、医薬的に許容される塩として提供することができ、包接体の形態とすることもできる。

立体異性体の混合物、例えば、ジアステレオマーの混合物を、好適な分離法による公知の方法でそれらの対応する異性体に分離することができる。ジアステレオマーの混合物を、例えば、分別結晶、クロマトグラフィー、溶媒分配および同様の手法によってそれらの個々のジアステレオマーに分離することができる。この分離は、出発化合物、中間体化合物または化合物自体のうちのいずれかの１つの段階で行うことができる。鏡像異性体は、ジアステレオマー塩の形成、例えば、鏡像異性的に純粋なキラル酸との塩の形成によって、あるいはキラルクロマトグラフィー媒体を用いるクロマトグラフィー、例えば、ＨＰＬＣによって分離することができる。

具体的な態様では、式Ｉの化合物は、式Ｉの化合物の他の形態の存在または非存在下で、例えば式Ｉａまたは実施例に示す化合物の任意の形態の混合物とすることができる。上記化合物の混合物としては、ラセミ混合物または等モル混合物ならびにこれらの形態のうちの１つが他の異性体に対して富化されている本化合物の混合物（例えば、式Ｉａまたは実施例に示す化合物が主な異性体である３：２混合物）が挙げられる。さらなる態様では、式Ｉａまたは実施例に示す化合物の形態などの式Ｉの化合物の任意の形態は、モルまたは重量に基づいて式Ｉの化合物の混合物の約６０、７０、８０、８５、９０、９５、９７、９９、９９．５、９９．７、９９．９％以上を構成することができる。一態様では、本化合物の具体的な形態は、式Ｉの化合物の混合物の約９０％以上を構成することができる。さらなる態様では、本化合物の具体的な形態は、式Ｉの化合物の混合物の約９５％以上を構成することができる。なおさらなる態様では、本化合物の具体的な形態は、式Ｉの化合物の混合物の約９９％以上を構成することができる。

本明細書に記載されている化合物が互変異性現象を示し得ることが理解される。化学構造が可能な互変異性形態のうちの１つのみを表している場合もあるため、本発明が表された構造の任意の互変異性形態を包含することを理解されたい。

さらに、本明細書に記載されている化合物は、非溶媒和形態ならびに水、エタノールなどの医薬的に許容される溶媒を含む溶媒との溶媒和形態で存在することができる。一般に、溶媒和形態は、本発明の目的では、非溶媒和形態の均等物であるとみなされ、式Ｉの化合物の範囲に含まれる。本化合物は、包接体や薬物およびホストが化学量論または非化学量論量で存在することができる薬物−ホスト包接錯体などの錯体として存在することもできる。化学量論または非化学量論量で存在し得る２種以上の有機および／または無機成分を含む薬物の錯体が含まれる。得られた錯体はイオン化、部分イオン化または非イオン化されていてもよい。そのような錯体の概説については、J Pharm Sci, 64 (8), 1269-1288 by Haleblian (August 1975)を参照されたい。

本明細書に記載されている任意の態様を、本明細書に記載されている任意の他の好適な態様と組み合わせてさらなる態様を提供することができる。例えば、一態様が個々に、あるいはまとめてＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６などの可能な基について説明し、別の態様が可能なＲ７基について説明している場合、これらの態様を組み合わせて、可能なＲ７基と共にＲ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５、Ｒ６の可能な基などについて説明する一態様を提供することができることが理解される。

上記化合物に関して、および本出願および請求項全体にわたって、以下の用語は以下に定義する意味を有する。

「アルケニル」という用語は、２つの炭素原子間に存在する少なくとも１つ二重結合を含む、本明細書に記載されているアルキル基に関して記載されているような、直鎖および分岐鎖炭化水素を指す。アルケニル基は必要に応じて一価または二価とすることができる。例としては、特に、ビニル、−ＣＨ＝Ｃ（Ｈ）（ＣＨ_３）、−ＣＨ＝Ｃ（ＣＨ_３）_２、−Ｃ（ＣＨ_３）＝Ｃ（Ｈ）_２、−Ｃ（ＣＨ_３）＝Ｃ（Ｈ）（ＣＨ_３）、−Ｃ（ＣＨ_２ＣＨ_３）＝ＣＨ_２、−Ｃ（ＣＨ_２ＣＨ_３）＝ＣＨ−、ブタジエニル、ペンタジエニルおよびヘキサジエニルが挙げられる。

「アルキル」という用語は、ヘテロ原子を含まない飽和炭化水素鎖、例えばＣ（１〜６）鎖を指す。アルキル基は、必要に応じて一価または二価とすることができる。従って、この用語は、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチル、ノニル、デシル、ウンデシル、ドデシル、−ＣＨ_２ＣＨ_２−などの直鎖アルキル基を含む。この用語は、限定されるものではなく、例として挙げるが、−（ＣＨ_２）_６−、−ＣＨ（ＣＨ_３）_２、−ＣＨ（ＣＨ_３）（ＣＨ_２ＣＨ_３）、−ＣＨ（ＣＨ_２ＣＨ_３）_２、−Ｃ（ＣＨ_３）_３、−Ｃ（ＣＨ_２ＣＨ_３）_３、−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２、−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）（ＣＨ_２ＣＨ_３）、−ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_２ＣＨ_３）_２、−ＣＨ_２Ｃ（ＣＨ_３）_３、−ＣＨ_２Ｃ（ＣＨ_２ＣＨ_３）_３、−ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ（ＣＨ_３）（ＣＨ_２ＣＨ_３）、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）（ＣＨ_２ＣＨ_３）、−ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_２ＣＨ_３）_２、−ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（ＣＨ_３）、−ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃ（ＣＨ_２ＣＨ_３）_３、−ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ_２ＣＨ（ＣＨ_３）_２、−ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ（ＣＨ_３）_２、−ＣＨ（ＣＨ_２ＣＨ_３）ＣＨ（ＣＨ_３）ＣＨ（ＣＨ_３）（ＣＨ_２ＣＨ_３）などの分岐鎖も含む。この用語は、第一級アルキル基、第二級アルキル基および第三級アルキル基を含む。アルキル基は、親化合物中の１つ以上の炭素原子、酸素原子、窒素原子および／または硫黄原子に結合することができる。

「アルキニル」という用語は、２つの炭素原子間に存在する少なくとも１つの三重結合以外は本明細書に記載されているアルキル基に関して記載したような直鎖および分岐鎖炭化水素基を指す。アルキニル基は必要に応じて一価または二価とすることができる。例としては、特に、−Ｃ≡Ｃ（Ｈ）、−Ｃ≡Ｃ（ＣＨ_３）、−Ｃ≡Ｃ−、−Ｃ≡ＣＣＨ_２−、−Ｃ≡Ｃ（ＣＨ_２ＣＨ_３）、−Ｃ（Ｈ_２）Ｃ≡Ｃ（Ｈ）、−Ｃ（Ｈ）_２Ｃ≡Ｃ（ＣＨ_３）、−Ｃ（Ｈ）_２Ｃ≡Ｃ（ＣＨ_２ＣＨ_３）および−ＣＨ_２−Ｃ≡Ｃ−Ｃ≡Ｃ−ＣＨ_２−が挙げられる。

「シクロアルキル」という用語は、一般に３〜１２個の炭素原子を有する飽和環式炭化水素鎖を指し、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチルおよびシクロオクチルなどの環式アルキル基を含む。この用語は、限定されるものではないが、アダマンチル、ノルボルニルおよびビシクロ［２．２．２］オクチルなどの多環式アルキル基も含む。シクロアルキル基は、親化合物中の１つ以上の炭素原子、酸素原子、窒素原子および／または硫黄原子に結合することができる。

本明細書に使用されている「ＩＡＰ」または「ＩＡＰｓ」は、ｃＩＡＰ１、ｃＩＡＰ２、ＸＩＡＰ、Ｔｓ−ＩＡＰ、Ｌｉｖｉｎ、サバイビン、ＮＡＩＰおよびＡｐｏｌｌｏｎまたはＢｒｕｃｅを含む当該技術分野で認識されている１つ以上のアポトーシス阻害タンパク質を表す。

「医薬的に許容される」とは哺乳類での使用に適していることを意味する。医薬的に許容される塩としては、哺乳類での使用に適した無機塩基、有機塩基、無機酸、有機酸、または、塩基性または酸性のアミノ酸、との塩が挙げられる。無機塩基としては、ナトリウムまたはカリウムなどのアルカリ金属イオン、カルシウムおよびマグネシウムなどのアルカリ土類金属またはアルミニウムおよびアンモニウムが挙げられる。有機塩基としては、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ピリジン、ピコリン、エタノールアミン、ジエタノールアミンおよびトリエタノールアミンが挙げられる。無機酸としては、塩酸、ヒドロホウ酸、硝酸、硫酸およびリン酸が挙げられる。有機酸としては、例えば、ギ酸、酢酸、トリフルオロ酢酸、フマル酸、シュウ酸、酒石酸、マレイン酸、クエン酸、コハク酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸およびｐ−トルエンスルホン酸が挙げられる。塩基性アミノ酸としては、アルギニン、リシンおよびオルニチンが挙げられる。酸性アミノ酸としては、例えば、アスパラギン酸およびグルタミン酸が挙げられる。医薬的に許容される塩の例は、Berge, S.M. et al., “Pharmaceutical Salts, Journal of Pharmaceutical Science, 1977;66:1 19にも記載されている。

「塩」とは、本化合物の調製などの工業プロセスでの使用に適した塩および医薬的に許容される塩を含む化合物のすべての塩形態を指す。

「治療する」または「治療すること」とは、対象におけるＩＡＰに関連する不十分なアポトーシスに伴う病状の治療を意味する。従って、「治療する」または「治療すること」は、ＩＡＰに関連する不十分なアポトーシスに伴う疾患または病気を抑制すること、すなわち、その発症を阻止することおよび／またはＩＡＰに関連する不十分なアポトーシスに伴う疾患または病気を軽減すること、すなわち、病気またはそのあらゆる症状の退行または緩和を生じさせることを含む。ＩＡＰに関連する不十分なアポトーシスに伴う病状が癌である場合、「治療する」または「治療すること」は、癌細胞の死滅、増殖の抑制および／または転移の抑制による癌（例えば、癌のあらゆる症状）の緩和を含む。

本明細書に記載されている化合物は、生体外で得ることができる場合もあれば、例えば化合物のプロドラッグが投与される場合には生体内で生成することができる。

一般に、水素すなわちＨなどの特定の元素について言及する場合、その元素のすべての同位体を含むことが意図されている。例えば、Ｒ基が水素すなわちＨを含むように定義されている場合、Ｒ基は重水素および三重水素も含む。

本明細書に記載されている特定の化合物は、他の記載されている化合物を調製するための中間体としても有用であり、そのような中間体は本発明の範囲に含まれる。

具体的な化合物を、特に実施例および以下の表を参照しながら説明する。

１種以上の医薬的に許容される担体、賦形剤、結合剤、希釈剤などと共に、本明細書中の１種以上の化合物またはその医薬的に許容される塩もしくは互変異性体を含む医薬組成物も提供される。様々な病気または疾患を治療または寛解するために１種以上の本化合物の治療的有効用量を含むことができる医薬的に許容される組成物を使用することができる。治療的有効用量もしくは量とは、癌を治療するのに十分な本明細書に記載されている１種以上の化合物の量を指す。

本発明の医薬組成物は、特に、慣用の造粒、混合、溶解、カプセル化、凍結乾燥、乳化または研和プロセスなどの当該技術分野でよく知られている方法によって製造することができる。本組成物は、例えば、顆粒、粉末、錠剤、カプセル、シロップ、坐薬、注射剤、乳濁剤、エリキシル、懸濁剤または溶液の形態とすることができる。本組成物を、様々な投与経路、例えば、経口投与、局所投与、経粘膜投与、直腸内投与、膣内投与または皮下投与ならびにクモ膜下腔内、静脈内、筋肉内、腹膜内、鼻腔内、眼内もしくは心室内注射のために製剤化することができる。本化合物すなわち本発明の化合物は、全身ではなく局所に、例えば、持続性製剤としての注射または局所注射で投与することもできる。以下の剤形は一例として挙げるものであり、本発明を限定するものとして解釈されるべきではない。

経口、口内および舌下投与のために、粉末、懸濁剤、顆粒、錠剤、丸剤、カプセル、ジェルキャップおよびカプレットが固体剤形として許容される。例えば、１種以上の本発明の化合物またはその医薬的に許容される塩もしくは互変異性体を澱粉または他の添加剤などの少なくとも１種の添加剤または賦形剤と混合してこれらを調製することができる。好適な添加剤または賦形剤は、スクロース、ラクトース、セルロース糖、マンニトール、マルチトール、デキストラン、ソルビトール、澱粉、寒天、アルギン酸塩、キチン、キトサン、ペクチン、タラカントガム、アラビアゴム、ゼラチン、コラーゲン、カゼイン、アルブミン、合成もしくは半合成ポリマーまたはグリセリド類、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースおよび／またはポリビニルピロリドンである。場合により、経口剤形は、不活性希釈剤、ステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤、パラベンもしくはソルビン酸などの防腐剤、アスコルビン酸、トコフェロールもしくはシステインなどの抗酸化剤、崩壊剤、結合剤、増粘剤、緩衝剤、甘味料、着香料または芳香剤などの投与を助ける他の成分を含むことができる。さらに、識別のために染料または顔料を添加することができる。錠剤および丸剤は、当該技術分野で知られている好適なコーティング材でさらに処理することができる。

経口投与のための液体剤形は、医薬的に許容される乳濁剤、シロップ、エリキシル、懸濁剤、スラリーおよび溶液の形態とすることができ、水など不活性希釈剤を含むことができる。医薬組成物は、限定されるものではないが、油、水、アルコールおよびこれらの組み合わせなどの無菌液体を用いて液体懸濁剤もしくは溶液として調製することができる。経口もしくは非経口投与のために、医薬的に好適な界面活性剤、懸濁化剤、乳化剤を添加することができる。

上記のとおり、懸濁剤は油を含むことができる。そのような油としては、落花生油、胡麻油、綿実油、トウモロコシ油、オリーブ油および油の混合物が挙げられる。懸濁調製物は、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル、脂肪酸グリセリドおよびアセチル化脂肪酸グリセリドなどの脂肪酸のエステルも含むことができる。懸濁製剤は、限定されるものではないが、エタノール、イソプロピルアルコール、ヘキサデシルアルコール、グリセリンおよびプロピレングリコールなどのアルコール類を含むことができる。限定されるものではないが、ポリ（エチレングリコール）などのエーテル、鉱油およびワセリンなどの石油炭化水素および水も懸濁製剤に使用することができる。

提供される本化合物を、皮膚または粘膜に局所的に、すなわち経皮的にも投与することができる。典型的な局所製剤としては、ゲル、ヒドロゲル、ローション、溶液、クリーム、軟膏、散布剤、包帯、泡、フィルム、皮膚パッチ、ウェーハ、インプラント、スポンジ、繊維、帯具およびマイクロエマルジョンが挙げられる。また、リポソームを使用してもよい。典型的な担体としては、アルコール、水、鉱油、液体ワセリン、白色ワセリン、グリセリン、ポリエチレングリコールおよびプロピレングリコールが挙げられる。浸透促進剤を組み込んでもよい。

吸入もしくは経鼻投与のために、本医薬製剤は、適当な溶媒および、場合により、限定されるものではないが、安定化剤、抗菌剤、抗酸化剤、ｐＨ調整剤、界面活性剤、生物学的利用能調整剤およびこれらの組み合わせなどの他の化合物を含むスプレーまたはエアゾールとすることができる。エアロゾル製剤のための噴霧剤としては、圧搾空気、窒素、二酸化炭素または炭化水素系低沸点溶媒を挙げることができる。本化合物すなわち本発明の化合物は、噴霧器などからのエアゾールスプレー提示(presentation)の形態で好都合に送達される。

注射可能な剤形としては一般に、好適な分散剤または湿潤剤および懸濁化剤を用いて調製することができる水性懸濁剤または油性懸濁剤が挙げられる。注射可能な形態は、溶媒または希釈液で調製される溶液相または懸濁剤の形態とすることができる。許容される溶媒または媒体としては、滅菌水、リンガー液または等張水性食塩水が挙げられる。あるいは、無菌油を溶媒または懸濁化剤として用いることができる。一般に、無菌油すなわち脂肪酸は不揮発性であり、天然もしくは合成の油、脂肪酸、モノグリセリド、ジグリセリドまたはトリグリセリドが挙げられる。

注射のために、本医薬製剤は、上述したような適当な溶液による再構成に適した粉末とすることができる。これらの例としては、凍結乾燥、回転乾燥もしくはスプレー乾燥粉末、非晶質粉末、顆粒、沈殿物または微粒子が挙げられる。注射のために、本製剤は、場合により、安定化剤、βシクロデキストリンなどのシクロデキストリン、ｐＨ調整剤、界面活性剤、生物学的利用能調整剤およびこれらの組み合わせを含むことができる。本化合物を、ボーラス注射などによる注射または持続注入による非経口投与のために製剤化することができる。注射のための単位剤形は、アンプルまたは複数回投与容器の形態とすることができる。

直腸内もしくは膣内投与のために、本医薬製剤は、腸、Ｓ字結腸および／または直腸などで化合物を放出するための坐薬、膣座薬、軟膏、浣腸、錠剤またはクリームの形態とすることができる。１種以上の本発明の化合物または本化合物の医薬的に許容される塩もしくは互変異性体を、通常の貯蔵温度では固相で存在しかつ直腸などの体内で薬物を放出するのに適した温度では液相で存在する許容可能な媒体（例えば、カカオ脂またはポリエチレングリコール）と混合して肛門坐剤を調製する。軟ゼラチン型製剤および坐薬の調製で油を用いることもできる。水、食塩水、水性デキストロースおよび関連する糖溶液ならびにグリセリンを、ペクチン、カルボマー、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロースまたはカルボキシメチルセルロースなどの懸濁化剤も含むことができる懸濁製剤ならびに緩衝剤および防腐剤の調製で用いることができる。

上述した代表的な剤形の他に、医薬的に許容される賦形剤および担体は、一般に当業者に知られており、従って、本発明に含まれる。そのような賦形剤および担体は、例えば、「Remingtons Pharmaceutical Sciences（レミントン薬学）」Mack Pub. Co., New Jersey (1991)に記載されている。

本発明の製剤は、短時間作用性、高速放出性、長時間作用性および持続放出性であるように設計することができる。従って、本医薬製剤は、制御放出または徐放のためにも製剤化することができる。

本組成物は、例えば、ミセルもしくはリポソームまたはいくつかの他のカプセル化された形態を含むこともでき、長期の貯蔵および／または送達効果を得るために持続放出形態で投与することもできる。従って、本医薬製剤は、圧縮してペレットまたは円筒体にし、蓄積注射またはステントなどのインプラントとして筋肉内または皮下に埋め込むことができる。そのようなインプラントは、シリコーンおよび生分解性ポリマーなどの公知の材料を用いることができる。

本組成物は、投与方法に応じて、例えば約０．１重量％〜約９９重量％以上の活性物質を含むことができる。本組成物が用量単位を含む場合、各単位は、例えば約１〜約３０００ｍｇ以上の有効成分を含むことができる。成人のヒトの治療のために用いられる用量は、投与経路および投与頻度に応じて、例えば１日約１〜約３０００ｍｇの範囲とすることができる。

具体的な用量は、感染症の状態、対象の年齢、体重、全体的な健康状態、性別および食事、投与間隔、投与経路、排出率ならびに薬物の組み合わせに応じて調節することができる。有効量を含む上記剤形のいずれも日常の実験の範囲内であり、従って、本発明の範囲に十分に含まれる。

治療的有効用量もしくは量は、投与経路および剤形に応じて変えることができる。本発明のいくつかの組成物は、高い治療指数を示す製剤を提供することができる。治療指数は、ＬＤ_５０とＥＤ_５０との比として表すことができる有毒作用と治療効果との用量比である。ＬＤ_５０は集団の５０％に対して致死的な用量であり、ＥＤ_５０は集団の５０％に対して治療的に有効な用量である。ＬＤ_５０およびＥＤ_５０は、動物細胞培養または実験モデルにおいて標準的な医薬手順で決定することができる。

本発明の化合物は、ＩＡＰタンパク質のカスパーゼへの結合を阻害すると考えられている。本発明の化合物によって、阻害性ＩＡＰタンパク質−カスパーゼ複合体からカスパーゼが放出され、それによりカスパーゼ酵素活性が促進されるとも考えられる。さらに、本発明の化合物がＩＡＰタンパク質ｃＩＡＰ−１およびｃＩＡＰ−２に結合して、それらの分解を直接促進すると考えられる。ｃＩＡＰ−１およびｃＩＡＰ−２タンパク質の分解は、リガンドＴＲＡＩＬおよびＴＮＦαの受容体を含むＴＮＦ受容体スーパーファミリーの活性化に応答してアポトーシスを促進すると考えられる。従って、本発明の化合物は、細胞にアポトーシスを誘発するか、あるいはアポトーシス信号に対して細胞（特に癌細胞）を感作させるのに有用である。本発明の化合物は、ＩＡＰタンパク質を過剰発現する細胞でアポトーシスを誘発するのに有用である。より広く言えば、本化合物は、アポトーシスを誘発できなったすべての癌種の治療に使用することができる。そのような癌種の例としては、神経芽腫、腸癌（直腸癌、結腸癌、家族性大腸腺腫症および遺伝性非ポリープ性結腸直腸癌など）、食道癌、口唇癌、喉頭癌、下咽頭癌、舌癌、唾液腺癌、胃癌、腺癌、甲状腺髄様癌、甲状腺乳頭癌、腎癌、腎実質癌、卵巣癌、子宮頸癌、子宮体癌、子宮内膜癌、絨毛膜癌、膵臓癌、前立腺癌、精巣癌、乳癌、泌尿器癌、黒色腫、脳腫瘍（神経膠芽腫、星状細胞腫、髄膜腫、髄芽細胞腫および末梢神経外胚葉性腫瘍など）、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、バーキット・リンパ腫、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、成人Ｔ細胞白血病リンパ腫、肝細胞癌、胆嚢癌、気管支癌、小細胞肺癌、非小細胞肺癌、多発性骨髄腫、基底細胞腫、奇形腫、網膜芽細胞腫、脈絡膜黒色腫、精上皮腫、横紋筋肉腫、頭蓋咽頭腫、骨肉腫、軟骨肉腫、筋肉腫、脂肪肉腫、線維肉腫、ユーイング肉腫および形質細胞腫が挙げられる。

特に、本発明の化合物、組成物および方法は、膀胱癌、乳癌、結腸癌または卵巣癌などの固形腫瘍を含む癌の治療のために使用することができる。本発明の化合物、組成物および方法は、ＡＭＬ、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、非扁平上皮および扁平上皮型を含む非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、膵臓癌または前立腺癌の治療のためにも使用することができる。

別の態様は、１種以上の本化合物の非治療量または治療的有効用量のいずれかでＡＩＰタンパク質のカスパーゼへの結合を阻害する方法を提供する。そのような方法は生体内または生体外で行うことができる。生体外での接触は、様々な量または濃度で、選択した標的、組織または腫瘍に対する１種以上の本化合物の効力を決定するためのスクリーニングアッセイで行うことができる。１種以上の本化合物の治療的有効量との生体内での接触は、接触が行われる動物における試験または癌の治療で行うことができる。標的もしくは宿主動物に対する１種以上の本化合物の効果を決定または測定することもできる。

従って、一態様は、薬として使用される本明細書に記載されている化合物またはその医薬的に許容される塩を提供する。

一態様では、本発明は、本明細書に記載されている１種以上の化合物の有効量を対象に投与することを含む、哺乳類（例えば、ヒトもしくはヒト以外の哺乳類）などの対象における癌の治療方法を提供する。治療することができる好適な対象としては、家庭動物または野生動物、イヌやネコなどのペット、家畜（ウマ、ウシおよび他の反芻動物、ブタ、家禽、ウサギなど）、霊長類（例えば、アカゲザルおよびカニクイザル(cynomolgus)（カニクイザル(crab-eating monkey)またはオナガザルとしても知られている）などのサル、マーモセット、タマリン、チンパンジー、マカクザルなど）および齧歯類（ラット、マウス、スナネズミ、モルモットなど）が挙げられる。一態様では、本化合物を、医薬的に許容される形態で、場合により医薬的に許容される担体に入れて投与する。

包装材料に入れられた、提供される化合物を含む医薬組成物と、本明細書に記載されているように前記医薬組成物を癌の治療のために使用することができることを示すラベルまたは添付文書とを含む製品も提供される。

本明細書に記載されている化合物を、それ自体の単一の薬剤として、あるいは他の薬剤と組み合わせて、本明細書に記載されている方法に使用してもよい。１種以上のこれらの化合物によって、一組の遺伝子の突然変異によって生じ得る可能性のある癌耐性機構を阻止することもできる。例えば、本明細書に定義されている癌治療は、唯一の治療法として適用してもよく、あるいは本明細書に記載されている化合物に加えて、慣用の外科手術または放射線療法または化学療法を伴っていてもよい。そのような化学療法は、１種以上の以下の分類の抗腫瘍剤を含んでいてもよい：
（ｉ）アルキル化剤（例えば、シスプラチン、オキサリプラチン、カルボプラチン、シクロホスファミド、ナイトロジェンマスタード、メルファラン、クロラムブシル、ブスルファン、テモゾラミドおよびニトロソ尿素）、代謝拮抗剤（例えば、ゲムシタビン、および５−フルオロウラシルおよびテガフールなどのフルオロピリミジン、ラルチトレキセド、メトトレキサート、シトシンアラビノシドおよびヒドロキシ尿素などの葉酸代謝拮抗剤）、抗腫瘍抗生物質（例えば、アドリアマイシン、ブレオマイシン、ドキソルビシン、ダウノマイシン、エピルビシン、イダルビシン、マイトマイシンＣ、ダクチノマイシンおよびミトラマイシンなどのアントラサイクリン）、有糸分裂阻害剤（例えば、ビンクリスチン、ビンブラスチン、ビンデシンおよびビノレルビンなどのビンカアルカロイド；およびタキソールおよびタキソテールなどのタキソイド、およびポロキナーゼまたはキネシンモータータンパク質阻害剤）、およびトポイソメラーゼ阻害剤（例えば、エトポシドおよびテニポシドなどのエピポドフィロトキシン、アムサクリン、トポテカン、カンプトセシンおよびイリノテカン）などの、腫瘍内科学で使用される他の抗増殖剤／抗悪性腫瘍剤およびそれらの組み合わせ；
（ｉｉ）抗エストロゲン剤（例えば、タモキシフェン、フルベストラント、トレミフェン、ラロキシフェン、ドロロキシフェンおよびヨードキシフェン）、抗アンドロゲン剤（例えば、ビカルタミド、フルタミド、ニルタミドおよび酢酸シプロテロン）、ＬＨＲＨ拮抗薬またはＬＨＲＨ作用薬（例えば、ゴセレリン、リュープロレリンおよびブセレリン）、プロゲストゲン（例えば、酢酸メゲストロール）、アロマターゼ阻害薬（例えば、アナストロゾール、レトロゾール、ボラゾールおよびエクセメスタン）およびフィナステリドなどの５^＊−還元酵素阻害剤などの細胞増殖抑制剤；
（ｉｉｉ）抗浸潤剤［例えば、４−（６−クロロ−２，３−メチレンジオキシアニリノ）−７−［２−（４−メチルピペラジン−１−イル）エトキシ］−５−テトラヒドロピラン−４−イルオキシキナゾリン（ＡＺＤ０５３０；国際特許出願第ＷＯ０１／９４３４１号）、Ｎ−（２−クロロ−６−メチルフェニル）−２−｛６−［４−（２−ヒドロキシエチル）ピペラジン−１−イル］−２−メチルピリミジン−４−イルアミノ｝チアゾール−５−カルボキサミド（ダサチニブ、ＢＭＳ−３５４８２５； J. Med. Chem., 2004, 47, 6658-6661）およびボスチニブ（ＳＫＩ−６０６）などのｃ−Ｓｒｃキナーゼファミリー阻害剤、およびマリマスタットなどのメタロプロテイナーゼ阻害剤、ウロキナーゼプラスミノーゲン活性化因子受容体機能阻害剤すなわちヘパラナーゼに対する抗体、ＦＡＫすなわち接着斑キナーゼ阻害剤、ＭＥＴ受容体キナーゼもしくはＭＥＴリガンド肝細胞増殖因子阻害剤すなわちそれらに対する抗体；
（ｉｖ）増殖因子機能阻害剤：例えば、そのような阻害剤としては、増殖因子抗体および増殖因子受容体抗体（例えば、抗ｅｒｂＢ２抗体トラスツズマブ［ハーセプチン（Ｈｅｒｃｅｐｔｉｎ）（商標）］、抗ＥＧＦＲ抗体パニツムマブ、抗ｅｒｂＢ１抗体セツキシマブ［Ｅｒｂｉｔｕｘ、Ｃ２２５］およびStern et al. (Critical reviews in oncology/haematology（腫瘍学／血液学における重要なレビュー）, 2005, Vol. 54, pp11-29)によって開示されている任意の増殖因子もしくは増殖因子受容体抗体）が挙げられる；そのように阻害剤としては、チロシンキナーゼ阻害剤、例えば、上皮増殖因子ファミリー阻害剤（例えば、Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−７−メトキシ−６−（３−モルホリノプロポキシ）キナゾリン−４−アミン（ゲフィチニブ、ＺＤ１８３９）、Ｎ−（３−エチニルフェニル）−６，７−ビス（２−メトキシエトキシ）キナゾリン−４−アミン（エルロチニブ、ＯＳＩ７７４）および６−アクリルアミド−Ｎ−（３−クロロ−４−フルオロフェニル）−７−（３−モルホリノプロポキシ）−キナゾリン−４−アミン（ＣＩ１０３３）などのＥＧＦＲファミリーチロシンキナーゼ阻害剤、ラパチニブなどのｅｒｂＢ２チロシンキナーゼ阻害剤）、肝細胞増殖因子ファミリー阻害剤、インスリン増殖因子ファミリー阻害剤、イマチニブおよび／またはニロチニブ（ＡＭＮ１０７）などの血小板由来増殖因子ファミリー阻害剤、セリン／トレオニンキナーゼ阻害剤（例えば、ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤（例えば、ソラフェニブ（ＢＡＹ４３−９００６）、チピファルニブ（Ｒ７５７７７）およびロナファーニブ（ＳＣＨ６６３３６））などのＲａｓ／Ｒａｆシグナル伝達阻害剤）、ＭＥＫおよび／またはＡＫＴキナーゼによる細胞シグナル伝達阻害剤、ｃ−ｋｉｔ阻害剤、ａｂｌキナーゼ阻害剤、ＰＩ３キナーゼ阻害剤、Ｆｌｔ３キナーゼ阻害剤、ＣＳＦ−１Ｒキナーゼ阻害剤、ＩＧＦ受容体（インスリン様増殖因子）キナーゼ阻害剤、オーロラキナーゼ阻害剤（例えば、ＡＺＤ１１５２、ＰＨ７３９３５８、ＶＸ−６８０、ＭＬＮ８０５４、Ｒ７６３、ＭＰ２３５、ＭＰ５２９、ＶＸ−５２８およびＡＸ３９４５９）およびＣＤＫ２および／またはＣＤＫ４阻害剤などのサイクリン依存性キナーゼ阻害剤も挙げられる；
（ｖ）血管内皮増殖因子の効果を阻害するような血管新生阻害剤［例えば、抗血管内皮細胞増殖因子抗体ベバシズマブ（Ａｖａｓｔｉｎ（商標））および例えば、バンデタニブ（ＺＤ６４７４）、バタラニブ（ＰＴＫ７８７）、スニチニブ（ＳＵ１１２４８）、アキシチニブ（ＡＧ−０１３７３６）、パゾパニブ（ＧＷ７８６０３４）および４−（４−フルオロ−２−メチルインドール−５−イルオキシ）−６−メトキシ−７−（３−ピロリジン−１−イルプロポキシ）キナゾリン（ＡＺＤ２１７１；国際公開第ＷＯ００／４７２１２号内の実施例２４０）などのＶＥＧＦ受容体チロシンキナーゼ阻害剤、国際特許出願第ＷＯ９７／２２５９６号、第ＷＯ９７／３００３５号、第ＷＯ９７／３２８５６号および第ＷＯ９８／１３３５４号に開示されているような化合物および他の機構によって機能する化合物（例えば、リノミド、インテグリンαｖβ３機能阻害剤およびアンジオスタチン）］；
（ｖｉ）血管損傷剤(vascular damaging agent)（例えば、コンブレタスタチンＡ４および国際特許出願第ＷＯ９９／０２１６６号、第ＷＯ００／４０５２９号、第ＷＯ００／４１６６９号、第ＷＯ０１／９２２２４号、第ＷＯ０２／０４４３４号および第ＷＯ０２／０８２１３号に開示されている化合物）；
（ｖｉｉ）エンドセリン受容体拮抗薬（例えば、ジボテンタン（ＺＤ４０５４）またはアトラセンタン）；
（ｖｉｉｉ）例えば、上に挙げた標的を対象とするようなアンチセンス療法（ＩＳＩＳ２５０３（抗ｒａｓアンチセンス）またはオブリメルセンナトリウム（抗Ｂｃｌ−２アンチセンス）など）；
（ｉｘ）例えば、異常なｐ５３または異常なＢＲＣＡ１またはＢＲＣＡ２、ＧＤＥＰＴなどの異常な遺伝子を取り替えるための手法（遺伝子指向性酵素プロドラッグ療法）、シトシンデアミナーゼ、チミジンキナーゼまたは細菌ニトロレダクターゼ酵素を用いるような手法、および多剤耐性遺伝子療法などの化学療法または放射線療法に対する患者の耐性を増加させる手法などの遺伝子療法；
（ｘ）インターロイキン２、インターロイキン４または顆粒球マクロファージコロニー刺激因子などのサイトカインによる形質移入などの患者の腫瘍細胞の免疫原性を増加させるための生体外および生体内手法、Ｔ細胞アネルギーを減少させるための手法、サイトカインで形質移入された樹状細胞などの形質移入された免疫細胞を用いる手法、サイトカインで形質移入された腫瘍細胞株を用いる手法、抗イディオタイプ抗体を用いる手法、ＣＴＬＡ４抗体およびＣＤ１３７、ＰＤ−１またはＢ７−Ｈ１、Ｔｏｌｌ受容体作用薬を対象とした抗体などのＴ細胞強化のための手法などの免疫療法；
（ｘｉ）細胞死受容体４または細胞死受容体５に対する抗体または細胞死受容体４および細胞死受容体５の両方に結合する抗体などのアポトーシス促進法；
（ｘｉｉ）腫瘍壊死因子αおよび組み換え型ＴＲＡＩＬタンパク質または小分子またはＴＲＡＩＬタンパク質のタンパク質模倣体などのサイトカイン療法；
（ｘｉｉｉ）ロイコボリンなどの効力増強剤(efficacy enhancer)；および
（ｘｉｖ）放射線。

そのような併用治療は、治療薬の個々の成分の同時、順次または個別投与によって達成してもよい。そのような組み合わせ製品は、本明細書に記載されている用量範囲内の本明細書に記載されている化合物またはその医薬的に許容される塩と、典型的にはその承認されている用量範囲内の他の医薬的に活性な薬剤とを用いる。

この側面によれば、本明細書に記載されている化合物またはその医薬的に許容される塩と、上記（ｉ）〜（ｘｉｖ）に記載されている任意の１種以上の薬剤とを含む、癌の治療での使用に適した組み合わせが提供される。哺乳類（例えば、ヒト）における癌の治療に使用される薬の製造のために上記組み合わせを使用することができる。

当業者によって理解されるように、「組み合わせ」という用語は、これが同時、個別もしくは順次投与を指すことが理解されるように使用される。投与が順次または個別の場合、第２の成分の投与の遅れは、組み合わせの有益な効果を失うようなものであってはならない。

さらなる側面によれば、本明細書に記載されている化合物またはその医薬的に許容される塩を、上記（ｉ）〜（ｘｉｖ）に記載されている１種以上の薬剤を含む医薬組成物に医薬的に許容される希釈剤または担体と組み合わせて使用することができる。そのような医薬組成物を、例えば癌の治療でアポトーシスを誘発するのに使用することができる。

実験、手順、実施例および中間体に関する以下の説明は、本発明の態様を例示することを意図するものであり、決して本発明を限定することを意図するものではない。

以下、本発明を以下の非限定的な実施例によって示すが、ここでは、特に明記しない限り：
（ｉ）温度は摂氏（℃）で示し、特に明記しない限り、室温または周囲温度、すなわち１８〜２５の℃の範囲の温度で操作を行った；
（ｉｉ）無水硫酸ナトリウムで有機溶液を乾燥し、加熱浴を行いながら減圧下での回転蒸発器または遠心蒸発器（例えば、Ｇｅｎｅｖａｃ）を用いて、溶媒を蒸発させた；
（ｉｉｉ）一般に、反応の過程はＴＬＣまたはＬＣＭの後に行い、反応時間は例示のためにのみ示す；
（ｉｖ）最終生成物は、満足なプロトン核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルおよび／または質量スペクトルデータを有していた；
（ｖ）収率は例示のためにのみ示し、必ずしも入念なプロセスの開発によって得られる値ではなく、より多くの材料が必要とされる場合には調製を繰り返した；
（ｖｉ）ＮＭＲデータが示されている場合、ＮＭＲデータは、主要な診断プロトンのデルタ値の形態であり、内部標準としてのテトラメチルシラン（ＴＭＳ）に対する百万分率（ｐｐｍ）で示し、特に明記しない限り、溶媒として重水素化ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ−ｄ６）を用いて４００または３００ＭＨｚで、周囲温度〜１００℃の温度でスペクトルを測定した；
（ｖｉｉ）化学記号はそれらの通常の意味を有し、ＳＩ単位および記号を使用する；
（ｖｉｉｉ）溶媒比は、体積：体積（ｖ／ｖ）単位で示す；
（ｉｘ）逆相液体クロマトグラフィー（ＬＣ）を用いて試料を分離した場合に質量スペクトルが得られ、陽イオンおよび陰イオンのエレクトロスプレーイオン化（ＥＳＩ）質量分析（ＭＳ）によって検出し、ｍ／ｚ値を得て、一般に、親質量を示すイオンのみを報告し、特に明記しない限り、引用されている質量イオンは（ＭＨ）^＋である；
（ｘ）合成が先の実施例に記載されているものに類似していると記載されている場合、使用される量は、先の実施例で使用された量に相当するミリモル比である；
（ｘｉ）「Ｉｓｃｏ」とは、製造業者の説明書に従って使用される予め充填されたシリカゲルカートリッジを用いる順相フラッシュカラムクロマトグラフィーを指す；
（ｘｉｉ）「Ｇｉｌｓｏｎ」とは、逆相ＨＰＬＣを指す。移動相としては、水、ＣＨ_３ＣＮ、ＭｅＯＨおよびＴＨＦが挙げられる。調整剤としては、０．１％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）、０．１％ギ酸、０．２％ＮＨ_４ＯＨまたは１０ｍＭの酢酸アンモニウムが挙げられる。カラムとしては、XBridge C18 OBD（１９×１００ｍｍ、５μｍ）、Atlantis T3（１９×１００ｍｍ、５μｍ）が挙げられる。

中間体
中間体１：（１Ｓ，２Ｒ）−２−（プロパ−２−イニルオキシ）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−アミン

水素化ナトリウム（６０％鉱油分散物；９７７ｍｇ、２４．４ｍｍｏｌ）をヘキサンと混合して洗浄し、静置し、上澄みを注射器で除去した。次いで、テトラヒドロフラン（ＴＨＦ）（６０ｍＬ）を添加し、この懸濁液を０℃に冷却した。（１Ｓ，２Ｒ）−（−）−シス−１−アミノ−２−インダノール（Ａｌｄｒｉｃｈ社；３．００ｇ、２０．１１ｍｍｏｌ）を５分かけて数回に分けて添加した（ガスの発生が観察された）。得られた混合物を、水素の放出が止まるまで室温に温め、得られた濃厚懸濁液を７０℃まで加熱した。臭化プロパルギル（８０％のトルエン溶液；２．５０ｍＬ、２２．４ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液を２０分かけて滴下した。反応混合物を４５分間加熱還流した。反応をＨ_２Ｏで止め、酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）で抽出した。有機物を飽和ＮａＣｌで洗浄した後、固体のＮａ_２ＳＯ_４で乾燥した。溶媒を減圧下で除去した。粗製材料をさらに精製することなく使用した；ｍ／ｚ１８８。

中間体２：（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル ２−（（１Ｓ，２Ｒ）−２−（プロパ−２−イニルオキシ）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イルカルバモイル）ピロリジン−１−カルボキシラート

ＢＯＣ−Ｌ−プロリン（４．４６ｇ、２０．７２ｍｍｏｌ）および４−メチルモルホリン（２．５０ｍＬ、２２．７ｍｍｏｌ）のＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）溶液を０℃のクロロギ酸エチル（２．００ｍＬ、２０．９ｍｍｏｌ）で処理した。反応混合物を２０分間撹拌した後、（１Ｓ，２Ｒ）−２−（プロパ−２−イニルオキシ）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−アミン（中間体１、３．７６ｇ、２０．１ｍｍｏｌ）のＥｔＯＡｃ（３０ｍＬ）溶液を添加した。得られた混合物を室温に温め、一晩撹拌した。反応を水で止め、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機物を１規定ＨＣｌ、次いでＮａＨＣＯ_３（飽和）で洗浄した。溶媒を減圧下で除去した。粗製材料をヘキサン／ＥｔＯＡｃ（シリカカートリッジ）の勾配溶出を用いるＩｓｃｏシステムで精製して所望の生成物を得た。ＮＭＲ（ジメチルスルホキシド−ｄ６[DMSO-d6]）8.05 (d, J=8.34 Hz, 1 H), 7.19 - 7.28 (m, 4 H), 5.29 - 5.33 (m, 1 H), 4.31 - 4.36 (m, 1 H), 4.20 - 4.29 (m, 1 H), 4.15 - 4.18 (m, 2 H), 3.34 - 3.45 (m, 2 H), 3.21 - 3.34 (m, 2 H), 3.00 - 3.06 (m, 2 H), 2.02 - 2.16 (m, 1 H), 1.73 - 1.98 (m, 4 H), 1.32 (s, 9 H); m/z 385。

中間体３、代替物１：（Ｓ）−Ｎ−（（１Ｓ，２Ｒ）−２−（プロパ−２−イニルオキシ）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル）ピロリジン−２−カルボキサミド塩酸塩

（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル ２−（（１Ｓ，２Ｒ）−２−（プロパ−２−イニルオキシ）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イルカルバモイル）ピロリジン−１−カルボキシラート（中間体２、３．８６ｇ、１０．０４ｍｍｏｌ）を４規定ＨＣｌのジオキサン（１５．０ｍＬ）溶液で処理した。得られた溶液を室温で１時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去した。得られた生成物を一晩真空乾燥して、標記化合物を得た。NMR (DMSO-d6) 10.06 (bs, 1 H), 8.75 - 8.77 (m, 1 H), 8.51 - 8.60 (m, 1 H), 7.21 - 7.29 (m, 4 H), 5.35 - 5.39 (m, 1 H), 4.35 - 4.39 (m, 1 H), 4.23 - 4.29 (m, 1 H), 4.17 - 4.19 (m, 2 H), 3.42 - 3.48 (m, 1 H), 3.36 - 3.42 (m, 1 H), 3.25 - 3.33 (m, 1 H), 3.14 - 3.24 (m, 2 H), 2.97 - 3.11 (m, 2 H), 2.20 - 2.35 (m, 1 H), 1.82 - 2.02 (m, 4 H); m/z 285。

中間体３、代替物２：（２Ｓ）−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ）−２−プロパ−２−インオキシインダン−１−イル］ピロリジン−２−カルボキサミド

中間体１３（１３４１ｇ、３．４９モル）をジクロロメタン（ＤＣＭ）（４．５Ｌ）に溶解した。トリフルオロ酢酸（２．２５Ｌ、３０．２９モル）を１０分かけて添加し、得られた溶液を室温で２時間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発によって除去した。ジエチルエーテル（１１Ｌ）を残留物に添加し、混合物を１０℃以下で１時間撹拌した。得られた固体を濾過によって回収し、ジエチルエーテル（１Ｌ）で洗浄した後、減圧下３０℃で乾燥して、ＨＰＬＣにより９７．９％の純度を有する中間体１３を９３％の収率（１２９３ｇ）で固体として得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.01 (br. s., 1 H) 8.74 (d, 1 H) 7.21 - 7.29 (m, 4 H) 5.38 (dd, 1 H) 4.36 - 4.40 (m, 1 H) 4.26 - 4.29 (m, 1 H) 4.18 (d, 2 H) 3.45 (t, 1 H) 3.27 - 3.36 (m, 1 H) 3.17 - 3.27 (m, 1 H) 2.95 - 3.13 (m, 2 H) 2.23 - 2.36 (m, 1 H) 1.94 - 2.03 (m, 1 H) 1.85 - 1.94 (m, 2 H). m/z 285。

中間体４：（Ｓ）−１−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（（Ｓ）−２−（（１Ｓ，２Ｒ）−２−（プロパ−２−イニルオキシ）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イルカルバモイル）ピロリジン−１−イル）エチルアミノ）−１−オキソプロパン−２−イル（メチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル

（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（メチル）アミノ）プロパンアミド）−２−シクロヘキシル酢酸（中間体７、４３０ｍｇ、１．２６ｍｍｏｌ）、（Ｓ）−Ｎ−（（１Ｓ，２Ｒ）−２−（プロパ−２−イニルオキシ）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル）ピロリジン−２−カルボキサミド塩酸塩（中間体３、３９１ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）および４−メチルモルホリン（１５０μＬ、１．３６ｍｍｏｌ）のＥｔＯＡｃ（８．０ｍＬ）溶液を０℃で、４−（４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロリド（ＤＭＴＭＭ）（３７０ｍｇ、１．３４ｍｍｏｌ）で処理した。この溶液を室温に温め、一晩撹拌した。反応混合物をＨ_２Ｏで失活させ、ＥｔＯＡｃで抽出した。溶媒を減圧下で除去し、残留物をヘキサン／ＥｔＯＡｃ勾配（シリカカートリッジ）を用いるＩｓｃｏシステムで精製して、所望の生成物（４６９ｍｇ、６３％）を得た。NMR (DMSO-d6, 100℃) 7.58 - 7.63 (m, 1 H), 7.07 - 7.25 (m, 5 H), 5.32 - 5.35 (m, 1 H), 4.51 - 4.58 (m, 1 H), 4.45 - 4.47 (m, 1 H), 4.34 - 4.42 (m, 1 H), 4.14 - 4.24 (m, 2 H), 3.72 - 3.78 (m, 1 H), 3.54 - 3.63 (m, 1 H), 3.16 - 3.19 (m, 1 H), 3.04 - 3.05 (m, 2 H), 2.76 (s, 3 H), 1.97 - 2.09 (m, 3 H), 1.83 - 1.93 (m, 1 H), 1.58 - 1.78 (m, 7 H), 1.44 (s, 9 H), 1.25 (d, 4 H), 0.91 - 1.21 (m, 5 H); m/z 609。

中間体５：ｔｅｒｔ−ブチル （２Ｓ，２’Ｓ）−１，１’−（１Ｓ，１’Ｓ）−２，２’−（（２Ｓ，２’Ｓ）−２，２’−（１Ｓ，１’Ｓ，２Ｒ，２’Ｒ）−２，２’−（ヘキサ−２，４−ジイン−１，６−ジイルビス（オキシ））ビス（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２，１−ジイル）ビス（アザンジイル）ビス（オキソメチレン）ビス（ピロリジン−２，１−ジイル））ビス（１−シクロヘキシル−２−オキソエタン−２，１−ジイル）ビス（アザンジイル）ビス（１−オキソプロパン−２，１−ジイル）ビス（メチルカルバマート）

（Ｓ）−１−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（（Ｓ）−２−（（１Ｓ，２Ｒ）−２−（プロパ−２−イニルオキシ）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イルカルバモイル）ピロリジン−１−イル）エチルアミノ）−１−オキソプロパン−２−イル（メチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル（中間体４、３４０ｍｇ、０．５６ｍｍｏｌ）および酢酸銅（ＩＩ）（５０５ｍｇ、２．７８ｍｍｏｌ）のＭｅＣＮ（６．０ｍＬ）溶液を８０℃まで１時間加熱した。溶媒を減圧下で除去した後、Ｈ_２Ｏを添加した。得られた混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。溶媒を減圧下で除去し、残留物をヘキサン／ＥｔＯＡｃ勾配（シリカカートリッジ）を用いるＩｓｃｏシステムで精製して、所望の生成物（２４５ｍｇ、７２％）を得た。NMR (DMSO-d6, 100℃) 7.58 - 7.66 (m, 2 H), 7.15 - 7.28 (m, 8 H), 7.07 - 7.13 (m, 2 H), 5.30 - 5.37 (m, 2 H), 4.50 - 4.58 (m, 4 H), 4.43 - 4.49 (m, 2 H), 4.30 - 4.40 (m, 6 H), 3.70 - 3.78 (m, 2 H), 3.56 - 3.63 (m, 2 H), 2.99 - 3.10 (m, 4 H), 2.74 - 2.82 (m, 6 H), 1.98 - 2.09 (m, 6 H), 1.82 - 1.94 (m, 2 H), 1.56 - 1.78 (m, 12 H), 1.41 - 1.47 (m, 18 H), 1.23 - 1.26 (m, 6 H), 0.91 - 1.20 (m, 10 H); m/z 1216。

中間体６：（Ｓ）−メチル ２−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（メチル）アミノ）プロパンアミド）−２−シクロヘキシルアセタート

（Ｓ）−メチル−２−アミノシクロヘキシル酢酸塩酸塩（２．０７ｇ、０．１ｍｏｌ）および（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（メチル）アミノ）プロパン酸（２．０３ｇ、０．１ｍｏｌ）のＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）溶液を、窒素中で２−クロロ−４，６−ジメトキシ−１，３，５−トリアジン（ＣＤＭＴ）（１．８３ｇ、０．１１ｍｏｌ）で処理した。反応混合物を０℃に冷却し、Ｎ−メチルモルホリン（２．５ｇ、２．５ｍｏｌ）で処理した。反応混合物を室温に温め、１．５時間撹拌した。固体の沈殿物を濾過によって除去し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）ですすいだ。一緒にした有機物をＮａＨＣＯ_３（飽和）、次いで１０％クエン酸で洗浄した。有機物をＮａＣｌ（飽和）で洗浄した後、減圧下で除去して、所望の生成物（２．７ｇ、７６％の収率）を得た；ｍ／ｚ３５７。

中間体７：（Ｓ）−２−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（メチル）アミノ）プロパンアミド）−２−シクロヘキシル酢酸

（Ｓ）−メチル ２−（（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（メチル）アミノ）−プロパンアミド）−２−シクロヘキシルアセタート（中間体６、１．８ｇ、５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（３０ｍＬ）溶液を−５℃に冷却した。温度を−１７℃以下に維持しながら水酸化リチウム溶液（２７３ｍｇ、６．５ｍｍｏｌ）を添加した。全量添加後、混合物を室温に温め、１時間撹拌した。反応を２モルのクエン酸で止め、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を水で洗浄した後、ＭｇＳＯ_４（固体）で乾燥した。溶媒を減圧下で除去して、所望の生成物を得た；ｍ／ｚ３４１（Ｍ−Ｈ）。

中間体８：ｔｅｒｔ−ブチル （２Ｓ，２’Ｓ）−１，１’−（１Ｓ，１’Ｓ）−２，２’−（（２Ｓ，２’Ｓ）−２，２’−（１Ｓ，１’Ｓ，２Ｒ，２’Ｒ）−２，２’−（ヘキサン−１，６−ジイルビス（オキシ））ビス（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２，１−ジイル）ビス（アザンジイル）ビス（オキソメチレン）ビス（ピロリジン−２，１−ジイル））ビス（１−シクロヘキシル−２−オキソエタン−２，１−ジイル）ビス（アザンジイル）ビス（１−オキソプロパン−２，１−ジイル）ビス（メチルカルバマート）

ｔｅｒｔ−ブチル （２Ｓ，２’Ｓ）−１，１’−（１Ｓ，１’Ｓ）−２，２’−（（２Ｓ，２’Ｓ）−２，２’−（１Ｓ，１’Ｓ，２Ｒ，２’Ｒ）−２，２’−（ヘキサ−２，４−ジイン−１，６−ジイルビス（オキシ））ビス（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２，１−ジイル）ビス（アザンジイル）ビス（オキソメチレン）ビス（ピロリジン−２，１−ジイル））ビス（１−シクロヘキシル−２−オキソエタン−２，１−ジイル）ビス（アザンジイル）ビス（１−オキソプロパン−２，１−ジイル）ビス（メチルカルバマート）（中間体５、３２４ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）および１０％Ｐｄ／Ｃ（８８ｍｇ）のＭｅＯＨ（５ｍＬ）溶液を風船によって供給されたＨ_２で処理した。反応混合物を室温で４時間撹拌した後、セライトで濾過した。溶媒を減圧下で除去して、所望の生成物（２８４ｍｇ、８７％）を得た；ｍ／ｚ１２２３。

中間体９：（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（［^１３Ｃ，^２Ｈ_３］メチル）アミノ）プロパン酸

水素化ナトリウム（６０％鉱油分散物）（１３７４ｍｇ、３４．３５ｍｍｏｌ）を、窒素雰囲気下、０℃で、（Ｓ）−２−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルアミノ）プロパン酸（６５０ｍｇ、３．４４ｍｍｏｌ）およびヨードメタン−^１３Ｃ−ｄ_３（５０１４ｍｇ、３４．３５ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（無水、２８ｍＬ）撹拌溶液に数回に分けて添加した（ガスが激しく発生した）。混合物を室温に温め、２４時間撹拌した。水（７．５ｍＬ）、次いでＥｔＯＡｃ（５ｍＬ）を添加し、混合物を減圧下で濃縮した。残留物を水（１５０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（７５ｍＬ）で洗浄した。次いで、クエン酸（５％水溶液）で水相をｐＨ３．５に調整した後、ＥｔＯＡｃ（１００ｍＬ）で抽出した。有機相を飽和ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で洗浄し、固体のＭｇＳＯ_４で乾燥した後、濾過した。揮発物を減圧下で除去して、中間体９（６７１ｍｇ、９４％）を得た。¹H NMR (CDCl₃, 30℃) 8.56 (s, 1H), 4.99 - 4.19 (m, 1H), 1.48 - 1.42 (m, 9H), 1.42 - 1.39 (m, 3H); m/z (M-H)^- 206。

中間体１０：（Ｓ）−１−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（（Ｓ）−２−（（１Ｓ，２Ｒ）−２−（プロパ−２−イニルオキシ）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イルカルバモイル）ピロリジン−１−イル）エチルアミノ）−１−オキソプロパン−２−イル（［^１３Ｃ，^２Ｈ_３］メチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル

Ｎ−（（エチルイミノ）メチレン）−Ｎ’，Ｎ’−ジメチルプロパン−１，３−ジアミン塩酸塩（５９２ｍｇ、３．０９ｍｍｏｌ）を、窒素雰囲気下で（Ｓ）−１−（（Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシルアセチル）−Ｎ−（（１Ｓ，２Ｒ）−２−（プロパ−２−イニルオキシ）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル）ピロリジン−２−カルボキサミド（１１００ｍｇ、２．６０ｍｍｏｌ）、中間体９（５９７ｍｇ、２．８８ｍｍｏｌ）、１Ｈ−ベンゾ［ｄ］［１，２，３］トリアゾール−１−オール（４０７ｍｇ、３．０１ｍｍｏｌ）および４−メチルモルホリン（３３７μｌ、３．０６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（無水、８６５０μｌ）撹拌溶液に添加した。混合物を室温で２０時間撹拌させた後、ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）と水（４０ｍＬ）との間で分配した。水層をＥｔＯＡｃで抽出し（各回２０ｍＬで３回）、一緒にした有機物を１規定ＨＣｌ（２０ｍＬ）、半飽和ＮａＨＣＯ_３（２０ｍＬ）、水（２０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（２０ｍＬ）で洗浄した後、固体のＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過した。揮発物を減圧下で除去した。ＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）を添加し、揮発物を減圧下で再び除去して、中間体１０（１２５０ｍｇ、７９％）を得た。NMR (CDCl₃, 30℃) 7.24 - 7.11 (m, 5H), 6.60 (s, 1H), 5.49 - 5.40 (m, 1H), 4.72 - 4.56 (m, 2H), 4.56 - 4.49 (m, 1H), 4.48 - 4.43 (m, 1H), 4.26 - 4.16 (m, 2H), 3.84 - 3.73 (m, 1H), 3.66 - 3.58 (m, 1H), 3.12 - 2.98 (m, 2H), 2.47 - 2.36 (m, 2H), 2.24 - 2.05 (m, 1H), 2.06 - 1.86 (m, 2H), 1.63 - 1.52 (m, 6H), 1.46 (s, 9H), 1.32 - 1.26 (m, 3H), 1.14 - 0.81 (m, 5H); m/z 613。

中間体１１：ｔｅｒｔ−ブチル （２Ｓ，２’Ｓ）−１，１’−（１Ｓ，１’Ｓ）−２，２’−（（２Ｓ，２’Ｓ）−２，２’−（１Ｓ，１’Ｓ，２Ｒ，２’Ｒ）−２，２’−（ヘキサ−２，４−ジイン−１，６−ジイルビス（オキシ））ビス（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２，１−ジイル）ビス（アザンジイル）ビス（オキソメチレン）ビス（ピロリジン−２，１−ジイル））ビス（１−シクロヘキシル−２−オキソエタン−２，１−ジイル）ビス（アザンジイル）ビス（１−オキソプロパン−２，１−ジイル）ビス（［^１３Ｃ，^２Ｈ_３］メチルカルバマート）

塩化銅（Ｉ）（２１３ｍｇ、２．１５ｍｍｏｌ）を、中間体１０（１２００ｍｇ、１．９６ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルエタン−１，２−ジアミン（３２５μｌ、２．１５ｍｍｏｌ）のアセトン（４５７１μｌ）撹拌溶液に添加した。得られた懸濁液を脱気し、酸素で置換した（４回）後、酸素雰囲気下で２．５時間撹拌し続けた。混合物をＥｔＯＡｃ（６０ｍＬ）と水（５０ｍＬ）との間で分配し、水層をＥｔＯＡｃでさらに抽出した（各回５０ｍｌで２回）。一緒にした有機層をアンモニア水（２．５Ｍ、５０ｍＬ）、水（５０ｍＬ）および飽和ＮａＣｌ（５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥した（Ｎａ_２ＳＯ_４）。混合物を濾過し、揮発物を減圧下で除去した。ジエチルエーテル（２０ｍＬ）を添加し、揮発物を減圧下で再び除去して、中間体１１（１２１３ｍｇ、１００％）を得た。NMR (CDCl₃, 30℃) 7.23 - 7.11 (m, 10H), 6.59 (s, 2H), 5.49 - 5.38 (m, 2H), 4.76 - 4.55 (m, 4H), 4.55 - 4.48 (m, 2H), 4.48 - 4.39 (m, 2H), 4.35 - 4.23 (m, 4H), 3.86 - 3.73 (m, 2H), 3.68 - 3.57 (m, 2H), 3.09 - 3.01 (m, 4H), 2.48 - 2.35 (m, 2H), 2.24 - 2.06 (m, 2H), 2.01 - 1.84 (m, 4H), 1.68 - 1.56 (m, 12H), 1.46 (s, 18H), 1.28 (d, J = 7.1 Hz, 6H), 1.10 - 0.83 (m, 10H); m/z 1224。

中間体１２：（２Ｓ）−２−［［（１Ｓ，２Ｒ）−２−ヒドロキシインダン−１−イル］カルバモイル］ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

Ｂｏｃ−Ｌ−プロリン（１２２８ｇ、５．７０モル）をＥｔＯＡｃ（１３Ｌ）でスラリーにし、０℃に冷却した。４−メチルモルホリン（６５９ｍＬ、５．９９モル）を添加し、得られた溶液を０℃で１０分間撹拌した。温度を５℃以下に維持しながらクロロギ酸エチル（５７０ｍＬ、５．９７モル）を１時間かけて添加した。次いで、反応混合物を０〜５℃で３０分間撹拌した。１Ｓ，２Ｒ−１−アミノ−２−インダノール（８８５ｇ、５．９３モル）を３０分かけて添加し、混合物を一晩室温に温めた。反応混合物を１モルＨＣｌで洗浄した（各回６リットルで２回）。水層をＥｔＯＡｃ（５．５Ｌ）で抽出した。一緒にした有機抽出物を半飽和ＮａＨＣＯ_３（８Ｌ）および飽和ＮａＣｌ（５．５Ｌ）で洗浄し、硫酸ナトリウム（３００ｇ）で乾燥した。揮発物を減圧下で除去して白色の固体を得、それをＥｔＯＡｃ（７Ｌ）で、室温で３０分間スラリー化した。ヘプタン（１２Ｌ）を添加し、混合物を０〜５℃で１時間撹拌した。固体を濾過によって回収し、濾過ケーキをヘプタンで洗浄した（各回１リットルで２回）。濾過ケーキを空気乾燥して、ＨＰＬＣにより１００％（１Ｈ−ＮＭＲにより９５％超）の純度を有する中間体１２を、８３％の収率（１６４２ｇ）で白色の固体として得た。NMR: (DMSO-d6, 100℃) 7.30 - 7.37 (m., 1 H), 7.13 - 7.23 (m, 4 H), 5.18 (dd, 1 H), 4.62 (d, 1 H), 4.38 - 4.51 (m, 1 H), 4.28 (dd, 1 H), 3.38 (dd, 2 H), 3.08 (dd, 1 H), 2.83 - 2.92 (m, 1 H), 1.96 - 2.19 (m, 2 H), 1.72 - 1.96 (m, 2 H), 1.41 (s, 9 H). m/z 346。

中間体１３：（２Ｓ）−２−［［（１Ｓ，２Ｒ）−２−プロパ−２−インオキシインダン−１−イル］カルバモイル］ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

中間体１２（１６３２ｇ、４．７１モル）を無水ＤＭＦ（１０Ｌ）に溶解し、５℃以下に冷却した。臭化プロパルギル（６０６ｍｌの８０％トルエン溶液、５．６３モル）を１０分かけて添加した。粉砕したてのＫＯＨ（５４１．３ｇ、８．２０モル）を１０分かけて添加した。得られたスラリーを０〜５℃で２時間撹拌した。ＥｔＯＡｃ（５Ｌ）、次いで水（５Ｌ）を添加した。水（６Ｌ）およびＥｔＯＡｃ（１１Ｌ）を添加し、層を分離した。層をＥｔＯＡｃ（１０Ｌ）で抽出した。有機抽出物を水（各回２リットルで５回）および飽和ＮａＣｌ（各回３リットルで３回）で洗浄した後、固体のＮａ_２ＳＯ_４（５００ｇ）で乾燥し、濾過した。揮発物を減圧下で除去して黄色の油を得、それを静置するとすぐに凝固した。粗製生成物をＥｔＯＡｃ（２．７Ｌ）に溶解した後、ヘプタン（１１Ｌ）を添加した。混合物を氷浴で冷却すると、沈殿物が徐々に形成された。１時間撹拌した後、ヘプタン（４Ｌ）を添加し、固体を濾過によって回収した。固体をヘプタン（４Ｌ）で洗浄し、３０℃で減圧乾燥して、ＨＰＬＣにより９４．７％の純度を有する中間体１３を、７４％の収率（１３４９ｇ（溶媒含有量を補正）、２３％ヘプタンを含有）で得た。1H NMR (400 MHz, DMSO-d6, 100℃) 7.46 - 7.48 (m, 1 H) 7.16 - 7.29 (m, 4 H) 5.34 (dd, 1 H) 4.35 - 4.45 (m, 1 H) 4.27 - 4.30 (m, 1 H) 4.12 - 4.25 (m, 2 H) 3.30 - 3.46 (m, 2 H) 3.17 (t, 1 H) 3.06 (d, 2 H) 2.06 - 2.20 (m, 1 H) 1.94 - 2.06 (m, 1 H) 1.85 - 1.94 (m, 1 H) 1.73 - 1.85 (m, 1 H) 1.40 (s, 9 H). m/z 385。

中間体１４：Ｎ−［１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−［２−［（２−プロパ−２−インオキシインダン−１−イル）カルバモイル］ピロリジン−１−イル］エチル］カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル

中間体３の代替物２（１１８０ｇ、２．９６モル）からの材料、Ｂｏｃ−シクロヘキシルグリシン（８０１ｇ、３．１１モル）およびＨＯＢｔ水和物（５３０ｇ、３．４６モル）を無水ＤＭＦ（９．９Ｌ）に溶解し、０℃に冷却した。Ｎ−メチルモルホリン（３６５ｍＬ、３．３４モル）を３０分かけて添加し、混合物を０〜５℃で３０分間撹拌した。１−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣＩ）（６３６ｇ、３．３２モル）、次いで無水ＤＭＦ（１．１Ｌ）を添加した。反応混合物を室温に温め、一晩撹拌した。ＥｔＯＡｃ（７．４Ｌ）を添加し、溶液を水（１８Ｌ）で洗浄した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した（各回７．４リットルで２回）。有機抽出物を１モルＨＣｌ（７．８Ｌ）、半飽和炭酸水素ナトリウム溶液（６．８Ｌ）、水（各回６．７Ｌで２回）および飽和ＮａＣｌ（３．４Ｌ）で洗浄した。次いで、有機抽出物を硫酸ナトリウム（１Ｋｇ）で乾燥し、揮発物を減圧下で除去して、油（１６５３ｇ、ＨＰＬＣにより９１％の純度）を得た。粗製生成物を、１％メタノールのＤＣＭ溶液を溶出液として用いるシリカカラムクロマトグラフィー（２×１０Ｋｇ）で精製した。関連する画分の揮発物を減圧下で除去し、ＨＰＬＣにより９８．７％の純度を有する中間体１４を白色の泡状物（１２８２ｇ、８３％）として得た；ｍ／ｚ５２４。

中間体１５：（２Ｓ）−１−［（２Ｓ）−２−アミノ−２−シクロヘキシル−アセチル］−Ｎ−［（１Ｓ，２Ｒ）−２−プロパ−２−インオキシインダン−１−イル］ピロリジン−２−カルボキサミド

中間体１４（１２７３ｇ、２．４３モル）のＤＣＭ（３．１４Ｌ）溶液に、ＴＦＡ（１．５６４Ｌ、２１．０５モル）を３０分かけて滴下した。次いで、反応系を周囲温度で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮し、残留物をＤＣＭ（５．４６Ｌ）に再溶解し、飽和ＮａＨＣＯ_３（２．７３Ｌ）で洗浄した。水層をＤＣＭで抽出した（各回２．７３Ｌで２回）。一緒にした有機層を飽和ＮａＨＣＯ_３（２．７３Ｌ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥した。揮発物を減圧下で除去して、１０５０ｇの中間体１５を黄色のガム（約２０％のＤＣＭ、８２６ｇの活性含有量）として得た。ＨＰＬＣ分析は、生成物が９８．８％超の純度を有していることを示した；ｍ／ｚ４２４。

中間体１６：Ｎ−［（１Ｓ）−２−［［（１Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−［（２Ｓ）−２−［［（１Ｓ，２Ｒ）−２−プロパ−２−インオキシインダン−１−イル］カルバモイル］ピロリジン−１−イル］エチル］アミノ］−１−メチル−２−オキソ−エチル］−Ｎ−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル

中間体１５（７５５ｇ、１．７８モル）、Ｂｏｃ−ＮＭｅ−Ａｌａ−ＯＨ（４６５ｇ、２．２９モル）およびＨＯＢｔ水和物（３８２ｇ、２．５０モル）を、無水ＤＭＦ（５５７０ｍＬ）に溶解し、５℃に冷却した。Ｎ−メチルモルホリン（２６０ｍＬ、２．４４モル）を５℃未満で１５分かけて添加した。無水ＤＭＦ（６５０ｍＬ）を添加した。混合物を０〜５℃で１５分間撹拌した。ＥＤＣＩ（４６６ｇ、２．４３モル）を５℃未満で１５分かけて添加した。無水ＤＭＦ（６５０ｍＬ）を添加した。反応混合物を室温に温め、一晩撹拌した。ＥｔＯＡｃ（９２５０ｍＬ）を添加し、水（２１Ｌ）で洗浄した。次いで、水層をＥｔＯＡｃで抽出した（各回９リットルで３回）。一緒にした有機抽出物を１モルＨＣｌ（各回１１リットルで２回）、飽和ＮａＨＣＯ_３（各回４６２０ｍｌで２回）、水（各回５．３リットルで３回）および飽和ＮａＣｌ（４．６Ｌ）で洗浄した。一緒にした有機抽出物を硫酸ナトリウム（２００ｇ）で乾燥し、揮発物を減圧下で除去して、黄色のガムを得た。ＤＣＭを添加し（各回１リットルで２回および各回５リットルで２回）、揮発物を減圧下で除去した。ＨＰＬＣにより９４．０％および１Ｈ−ＮＭＲアッセイにより９９％の純度（溶媒含有量を補正）を有する中間体１６を、９７％の収率（１０５１ｇ）で黄色のガムとして単離した；ｍ／ｚ６０９。

中間体１７：Ｎ−［（１Ｓ）−２−［［（１Ｓ）−２−［（２Ｓ）−２−［［（１Ｓ，２Ｒ）−２−［６−［（１Ｓ，２Ｒ）−１−［［（２Ｓ）−１−［（２Ｓ）−２−［［（２Ｓ）−２−［ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（メチル）アミノ］プロパノイル］アミノ］−２−シクロヘキシル−アセチル］ピロリジン−２−カルボニル］アミノ］インダン−２−イル］オキシヘキサ−２，４−ジインオキシ］インダン−１−イル］カルバモイル］ピロリジン−１−イル］−１−シクロヘキシル−２−オキソ−エチル］アミノ］−１−メチル−２−オキソ−エチル］−Ｎ−メチル−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル

ＣｕＣｌ（１７９．９６ｇ、１．８１モル）を、空気雰囲気下で、中間体１６（１．００Ｋｇ、１．６４モル）のＤＣＭ（１．９４Ｌ）溶液に添加し、次いで、ＤＣＭ（３Ｌ）およびテトラメチルエチレンジアミン（１．９７モル、２９７ｍＬ）を添加した。一晩２０℃に維持した後、水（３．００Ｌ）を添加し、上層の水性部分を分離した。１０％アンモニア（３．００Ｌ）を添加し、上層の水性部分を分離した。１０％アンモニア（３．００Ｌ）を添加し、上層の水性部分を分離した。溶媒を減圧下で除去し、１０９０ｇの中間体１７を得た（７８％ｗ／ｗ、８５．１％の収率）；ｍ／ｚ１２１５。中間体１７を、３％ＭｅＯＨのメチル−ｔｅｒｔ−ブチルエーテル（ＭＴＢＥ）溶液を溶出液として用いるＨｉｐｅｒｓｅｐ（登録商標）クロマトグラフィーで精製した。４０４Ｌ中で８３７ｇを得、溶媒を減圧下で除去した。

中間体１８：（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル ２−（（１Ｓ，２Ｓ）−２−ヒドロキシ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イルカルバモイル）ピロリジン−１−カルボキシラート

（Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピロリジン−２−カルボン酸（２．８９ｇ、１３．４１ｍｍｏｌ）のＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ）混合溶液を、氷水浴で０℃に冷却した。この混合溶液に４−メチルモルホリン（１．４７４ｍＬ、１３．４１ｍｍｏｌ）を添加した後、カルボノクロリド酸エチル（１．２８２ｍＬ、１３．４１ｍｍｏｌ）を滴下した。反応混合物を０℃で３０分間撹拌した後、（１Ｓ，２Ｓ）−１−アミノ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２−オール（２．０ｇ、１３．４１ｍｍｏｌ）を添加した。次いで、得られた混合物を、撹拌しながら室温に一晩温めた。反応混合物を水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出した。次いで、有機物を１０％クエン酸、飽和ＮａＣｌおよび水性ＮａＨＣＯ_３で洗浄した。有機物を固体のＭｇＳＯ_４で乾燥し、揮発物を減圧下で除去して、中間体１８（４．５９ｇ、９９％）を得た。NMR (400 MHz, DMSO-d₆) 8.14 - 8.23 (m, 1 H), 7.10 - 7.22 (m, 4 H), 5.15 - 5.26 (m, 1 H), 4.92 - 5.04 (m, 1 H), 4.26 - 4.35 (m, 1 H), 4.23 (m, 1 H), 4.13 (m, 1 H), 3.35 - 3.43 (m, 1 H), 3.06 - 3.18 (m, 1 H), 2.69 (m, 1 H), 2.05 - 2.17 (m, 1 H), 1.71 - 1.97 (m, 3 H), 1.32 - 1.44 (m, 9 H); m/z 347。

中間体１９：（Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル ２−（（１Ｓ，２Ｓ）−２−（プロパ−２−イニルオキシ）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イルカルバモイル）ピロリジン−１−カルボキシラート

中間体１８（２．４９ｇ、７．１９ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（１６．８１ｍＬ）溶液を０℃に冷却した。この溶液に、３−ブロモプロパ−１−イン（８０重量％のトルエン溶液、１．１６２ｍＬ、１０．７８ｍｍｏｌ）を添加し、次いで粉末にしたＫＯＨ（０．８０７ｇ、１４．３８ｍｍｏｌ）を添加した。得られた混合物を０℃で６０分間撹拌した。次いで、混合物をＥｔＯＡｃおよび水で希釈した。水層をＥｔＯＡｃで抽出した。一緒にした有機物を飽和ＮａＣｌで洗浄し、固体のＭｇＳＯ_４で乾燥した。揮発物を減圧下で除去し、生成物をＩｓｃｏシステム（０〜１００％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン勾配）で精製して、中間体１９（１．３４ｇ、４９％）を得た；ｍ／ｚ３８５。

中間体２０：（Ｓ）−Ｎ−（（１Ｓ，２Ｓ）−２−（プロパ−２−イニルオキシ）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イル）ピロリジン−２−カルボキサミド

ＨＣｌ（４Ｍのジオキサン溶液、３０ｍＬ、１２０ｍｍｏｌ）を中間体１９（１．３４ｇ、３．４９ｍｍｏｌ）に添加した。反応溶液を室温で３０分間撹拌した。次いで、揮発物を減圧下で除去し、減圧下に４８時間置いた。次の工程で生成物を直接使用した。

中間体２１：（Ｓ）−１−（（Ｓ）−１−シクロヘキシル−２−オキソ−２−（（Ｓ）−２−（（１Ｓ，２Ｓ）−２−（プロパ−２−イニルオキシ）−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−１−イルカルバモイル）ピロリジン−１−イル）エチルアミノ）−１−オキソプロパン−２−イル（メチル）カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチル

中間体２０（０．９９２ｇ、３．４９ｍｍｏｌ）、中間体８（１．１９５ｇ、３．４９ｍｍｏｌ）のＥｔＯＡｃ（２３ｍＬ）および４−メチルモルホリン（０．３８４ｍＬ、３．４９ｍｍｏｌ）混合溶液を−２０℃に冷却した。−２０℃のこの混合溶液に、４−（４，６−ジメトキシ［１．３．５］トリアジン−２−イル）−４−メチルモルホリニウムクロリド水和物（１．０２４ｇ、３．７０ｍｍｏｌ）を添加し、１０分間撹拌した。次いで、混合物を室温に温め、一晩撹拌した。混合物を濾過し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。一緒にした濾液を、１０％クエン酸、飽和ＮａＨＣＯ_３および飽和ＮａＣｌで洗浄し、固体のＭｇＳＯ_４で乾燥した。揮発物を減圧下で除去した。生成物をＩＳＣＯシステム（０〜１００％ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）で精製して、中間体２１（１．４４ｇ、６８％）を得た；ｍ／ｚ６０９。

中間体２２：ｔｅｒｔ−ブチル （２Ｓ，２’Ｓ）−１，１’−（１Ｓ，１’Ｓ）−２，２’−（（２Ｓ，２’Ｓ）−２，２’−（１Ｓ，１’Ｓ，２Ｓ，２’Ｓ）−２，２’−（ヘキサ−２，４−ジイン−１，６−ジイルビス（オキシ））ビス（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２，１−ジイル）ビス（アザンジイル）ビス（オキソメチレン）ビス（ピロリジン−２，１−ジイル））ビス（１−シクロヘキシル−２−オキソエタン−２，１−ジイル）ビス（アザンジイル）ビス（１−オキソプロパン−２，１−ジイル）ビス（メチルカルバマート）

中間体２１（０．５０ｇ、０．８２ｍｍｏｌ）、酢酸銅（０．２２４ｇ、１．２３ｍｍｏｌ）およびピリジン（０．２６６ｍＬ、３．２９ｍｍｏｌ）のアセトニトリル（７．９５ｍＬ）混合溶液を８０℃で２時間加熱した。次いで、この混合溶液をＥｔＯＡｃで希釈し、水で洗浄した。水層をＥｔＯＡｃでさらに抽出した。一緒にした有機物を乾燥し、揮発物を減圧下で除去した。粗製生成物をＩＳＣＯシステム（０〜１０％ＭｅＯＨ／ＥｔＯＡｃ）で精製し、次いで、Ｇｉｌｓｏｎ社製ＨＰＬＣ（８０〜９５％ＭｅＣＮ／０．１％ＴＦＡを含む水、１４分間）で精製して、３４１ｍｇの生成物を得た。Ｇｉｌｓｏｎ社製ＨＰＬＣによる２回目の精製（７５〜９０％ＭｅＣＮ／０．１％ＴＦＡを含むＨ_２Ｏ、１５分間）によって、中間体２２（０．１１７ｇ、２３％）を得た；ｍ／ｚ１２１６。

実施例
実施例１ａ：ｔｅｒｔ−ブチル （２Ｓ，２’Ｓ）−１，１’−（１Ｓ，１’Ｓ）−２，２’−（（２Ｓ，２’Ｓ）−２，２’−（１Ｓ，１’Ｓ，２Ｒ，２’Ｒ）−２，２’−（ヘキサ−２，４−ジイン−１，６−ジイルビス（オキシ））ビス（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２，１−ジイル）ビス（アザンジイル）ビス（オキソメチレン）ビス（ピロリジン−２，１−ジイル））ビス（１−シクロヘキシル−２−オキソエタン−２，１−ジイル）ビス（アザンジイル）ビス（１−オキソプロパン−２，１−ジイル）ビス（メチルカルバマート）（中間体５、２３０ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）を４規定ＨＣｌ／ジオキサン（５．０ｍＬ）で処理し、得られた溶液を室温で１時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去した。粗製材料をＧｉｌｓｏｎ社製ＨＰＬＣ（Ｈ_２Ｏ／０．１％ＴＦＡ中の３０〜７５％ＭｅＣＮ／０．１％ＴＦＡ、１４分間）で精製した。一緒にした画分をＥｔＯＡｃと飽和ＮａＨＣＯ_３との間で分配した。一緒にした有機物をＮａＣｌ（飽和）で洗浄した後、Ｎａ_２ＳＯ_４（固体）で乾燥した。溶媒を減圧下で除去した。ＭｅＣＮ／Ｈ_２Ｏ溶液を添加した後、凍結乾燥して、化合物１を得た。NMR (DMSO-d6, 100℃) 7.55 - 7.66 (m, 4 H), 7.16 - 7.28 (m, 8 H), 5.32 - 5.38 (m, 2 H), 4.52 - 4.58 (m, 2 H), 4.44 - 4.51 (m, 2 H), 4.31 - 4.40 (m, 6 H), 3.72 - 3.82 (m, 2 H), 3.55 - 3.64 (m, 2 H), 3.03 - 3.07 (m, 4 H), 2.97 - 3.01 (m, 2 H), 2.25 (s, 6 H), 1.97 - 2.08 (m, 6 H), 1.85 - 1.93 (m, 2 H), 1.56 - 1.78 (m, 12 H), 0.97 - 1.23 (m, 16 H); m/z 1016。

実施例１ｂ：中間体１７（１２．３７ｇ、１０．１８ミリモル）およびｐ−トルエンスルホン酸水和物（４．２６ｇ、２２．３９ミリモル）のＥｔＯＨ（６１．８５ｍＬ）溶液を７０℃まで４時間加熱した。この溶液を冷却し、ＭＴＢＥ（１２５ｍＬ）に添加し、化合物１をビス４−メチルベンゼンスルホン酸（トシル酸）塩として溶液から沈殿させた。本化合物１（ビストシル酸塩）を減圧下で濾過し、ＭＴＢＥ（３７ｍＬ）で洗浄し、恒量（１１．７０ｇ、９７％ｗ／ｗ、８２％の収率）になるまでさらに真空乾燥した；ｍ／ｚ１０１５。

実施例１ｃ：化合物１の^１３ＣＤ_３標識型を以下のように調製した。ＨＣｌ（４Ｍ）のジオキサン（２４５２μｌ、９．８１ｍｍｏｌ）を、窒素雰囲気下で、中間体１１（１２００ｍｇ、０．９８ｍｍｏｌ）のメタノール（７１２μｌ）撹拌溶液に２時間かけて添加した。混合物を濃縮し、メタノール（１０ｍＬ）を粘着性の残留物に添加し、混合物を再び濃縮した。残留物を酢酸エチル（２０ｍＬ）と炭酸水素ナトリウム（２０ｍＬ、飽和水溶液）との間で分配し、３０分間激しく撹拌した。有機相を除去し、水相をさらなる酢酸エチル（各回２０ｍｌで２回）で抽出し、一緒にした有機相を水（２０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濾過した。混合物を蒸発乾固し、イソプロピルアルコール（７ｍＬ）に溶解した。安息香酸（２４０ｍｇ、１．９６ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を還流加熱して、透明な溶液を得た。次いで、混合物を室温に冷却し、沈殿物を濾過によって回収し、さらなるＩＰＡ（７ｍＬ）で洗浄し、減圧下、室温で乾燥して、化合物１ｃ（９４１ｍｇ、０．７４２ｍｍｏｌ、７６％）を得た。NMR (DMSO, 100℃) 7.99 - 7.91 (m, 4H), 7.68 - 7.51 (m, 6H), 7.51 - 7.45 (m, 4H), 7.28 - 7.14 (m, 8H), 5.40 - 5.28 (m, 2H), 4.61 - 4.51 (m, 2H), 4.51 - 4.42 (m, 2H), 4.40 - 4.27 (m, 6H), 3.84 - 3.69 (m, 2H), 3.65 - 3.55 (m, 2H), 3.12 - 2.94 (m, 8H), 2.12 - 1.96 (m, 6H), 1.94 - 1.80 (m, 2H), 1.79 - 1.55 (m, 12H), 1.24 - 0.94 (m, 16H); m/z 1024。

実施例２：以下に示す出発物質を用い、実施例１の手順によって、以下の化合物を調製した。

実施例３：ｔｅｒｔ−ブチル （２Ｓ，２’Ｓ）−１，１’−（１Ｓ，１’Ｓ）−２，２’−（（２Ｓ，２’Ｓ）−２，２’−（１Ｓ，１’Ｓ，２Ｒ，２’Ｒ）−２，２’−（ヘキサン−１，６−ジイルビス（オキシ））ビス（２，３−ジヒドロ−１Ｈ−インデン−２，１−ジイル）ビス（アザンジイル）ビス（オキソメチレン）ビス（ピロリジン−２，１−ジイル））ビス（１−シクロヘキシル−２−オキソエタン−２，１−ジイル）ビス（アザンジイル）ビス（１−オキソプロパン−２，１−ジイル）ビス（メチルカルバマート）（中間体８、２８４ｍｇ、０．２３ｍｍｏｌ）を４規定ＨＣｌ／ジオキサン（６．０ｍＬ）で処理し、得られた混合物を室温で１時間撹拌した。次いで、溶媒を減圧下で除去し、残留物をＭｅＯＨに溶解し、得られた溶液をセライト（登録商標）（珪藻土）プラグで濾過した。溶媒を減圧下で除去し、残留物をエーテルで粉砕した。最後に、エーテルを減圧下で除去して、化合物３（２５４ｍｇ、１００％）を得た。NMR (DMSO-d6, 100℃) 7.50 - 7.55 (m, 2 H), 7.14 - 7.26 (m, 8 H), 5.28 - 5.32 (m, 2 H), 4.54 - 4.60 (m, 2 H), 4.45 - 4.49 (m, 2 H), 4.17 - 4.21 (m, 2 H), 3.85 - 3.94 (m, 2 H), 3.70 - 3.79 (m, 2 H), 3.59 - 3.64 (m, 2 H), 3.43 - 3.47 (m, 4 H), 2.90 - 3.07 (m, 4 H), 2.51 (m, 6 H), 1.96 - 2.09 (m, 6 H), 1.84 - 1.93 (m, 2 H), 1.58 - 1.83 (m, 12 H), 1.47 - 1.55 (m, 4 H), 1.38 - 1.40 (m, 6 H), 1.28 - 1.33 (m, 4 H), 1.04 - 1.23 (m, 10 H); m/z = 1024。

実施例４：ＨＣｌ（４モルのジオキサン溶液、１０．０ｍＬ、４０．００ｍｍｏｌ）を中間体２２（０．１１７ｇ、０．１０ｍｍｏｌ）に添加した。反応溶液を室温で１時間撹拌した。この溶液を濃縮した後、残留物をＥｔＯＡｃで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３で洗浄した。水層をＥｔＯＡｃで２回抽出した。一緒にした有機層を固体のＭｇＳＯ_４で乾燥し、揮発物を減圧下で除去して、化合物４（０．０４０ｇ、４１％）を得た。NMR (DMSO-d₆) 7.96 (bs, 2 H), 7.60 (bs, 2 H), 7.13 - 7.25 (m, 8 H), 5.16 (m, 2 H), 4.38 - 4.50 (m, 8 H), 4.23 - 4.33 (m, 2 H), 3.74 - 3.81 (m, 2 H), 3.66 - 3.74 (m, 2 H), 3.59 - 3.65 (m, 2 H), 3.54 (m, 2 H), 3.30 (m, 2 H), 3.01 (m, 2 H), 2.83 (m, 2 H), 2.25 (s, 6 H), 1.84 - 2.15 (m, 8 H), 1.58 - 1.81 (m, 12 H), 0.98 - 1.30 (m, 16 H); m/z 1016。

生物学的アッセイ：蛍光偏光アッセイ
材料:cIAP1 Bir3ドメイン構築物(aa L250-G350)を、全長ｃＩＡＰ１クローン（ＮＣＢＩ参照配列：ＮＭ ００１１６６．３）から調製した。ＰＣＲを使用してＢｉｒ３断片を生成し、それを、ＢａｍＨＩ／ＸｈｏＩ断片としてｐＧＥＸ−６Ｐ−１ベクター（GE LifeSciences社）に挿入した。ＯＤ６００が０．６になるまで３７℃で増殖させた、アンピシリンを含む大腸菌ＢＬ２１（ＤＥ３）でタンパク質を調製した。タンパク質の発現を、１ｍＭのイソプロピルβ−Ｄ−１−チオガラクトピラノシド（ＩＰＴＧ）によって３．７５時間誘発した。

細胞を、１００ｍＭのＴｒｉｓ（ｐＨ７．５）、１５０ｍＭのＮａＣｌ、５ｍｍのジチオスレイトール（ＤＴＴ）、５０μＭの酢酸亜鉛（ＺｎＡｃ）、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）非含有Ｃｏｍｐｌｅｔｅプロテアーゼ阻害剤（Roche Applied Science社）、１００μｇ／ｍＬのリゾチームおよび０．５％Ｔｒｉｔｏｎ−Ｘ１００を含む緩衝液に超音波処理によって溶解した。超音波処理後、この混合物にＤＮＡ分解酵素を添加した。タンパク質を、グルタチオンセファロース４Ｂ樹脂（GE Lifesciences社）を用いて可溶性画分から精製した後、ＰＤ−１０カラム（GE Lifesciences社）で脱塩した。この後、ＳＥＣ２００樹脂（GE Lifesciences社）で精製した。最終的な貯蔵緩衝液は、２５ｍＭのＴｒｉｓ（ｐＨ７．５）、２００ｍＭのＮａＣｌ、５ｍＭのＤＴＴ、５０μＭのＺｎＡｃ、１０％グリセリンで構成されていた。

グルタチオン−Ｓ−トランスフェラーゼでタグ付けしたｃＩＡＰ１のＢｉｒ３ドメイン（Ｌ２５０−Ｇ３５０）を用いて蛍光偏光アッセイを行った。使用したトレーサーは、５−カルボキシフルオレセイン（ＡｂｕＲＰＦ−Ｋ−５ＦＡＭ）に結合させた合成ペプチドであった。

方法：ｃＩＡＰ１−Ｂｉｒ３（２０ｎｍ）の希釈液を、結合阻害剤の様々な希釈液を含むアッセイ緩衝液（最終濃度が２０ｍＭのＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．５）、１ｍＭのＤＴＴ、０．００５％Ｔｗｅｅｎ−２０および５０ｍＭのＮａＣｌ）に入れた２．５ｎｍの蛍光性ペプチドトレーサーに添加した。２０分間のインキュベーション後、Tecan Ultra Evolution（Tecan US社、ノースカロライナ州ダラム）によって試料を測定した。

蛍光偏光値を拮抗薬濃度の関数としてプロットし、ＩＣ_５０値を決定した。

本明細書に記載されている任意の態様を本明細書に記載されている任意の他の好適な態様と組み合わせて、さらなる態様を提供することができる。

本明細書に使用されているように、「１つ（ａ）」または「１つ（ａｎ）」という場合、「１つ以上」を意味する。全体をとおして、複数および単数は数を示すものではなく、言い換え可能なものとして扱われるものとする。

当業者によって理解されるように、あらゆる目的のために、特に説明を行う点で、本明細書に開示される全ての範囲は、あらゆる可能な部分的範囲およびそれらの部分的範囲の組み合わせならびに範囲（特に整数値）を構成する個々の値も包含する。記載されているどの範囲も、少なくとも２等分、３等分、４等分、５等分、１０等分などに分割される同じ範囲を十分に説明しかつ可能にするものとして容易に認めることができる。非限定的な例として、本明細書に述べられている各範囲を、下位３分の１、中位３分の１、上位３分の１などに容易に分割することができる。例えば、Ｃ（１〜６）という範囲は、Ｃ（２〜６）、Ｃ（３〜６）、Ｃ（３〜５）、Ｃ（４〜６）などの部分的範囲ならびにＣ１（メチル）、Ｃ２（エチル）、Ｃ３（プロピル）、Ｃ４（ブチル）、Ｃ５（ペンチル）およびＣ６（ヘキシル）を個々に含む。また、当業者によって理解されるように、「最大」、「少なくとも」、「〜よりも大きい」、「〜未満」、「〜を超える」および「〜以上」などの全ての用語は列挙されている数を含み、かつ上記のようにその後に部分的範囲に分割することができる範囲を指す。同じように、本明細書に開示されている全ての比は、より広い比に含まれる全ての部分的比も含む。

当業者であれば、構成要素が一般的な方法で、例えばマーカッシュ群に一緒に分類されている場合、本発明は、まとめて記載されている群全体だけではなく、個々に群の各構成要素および主群の全ての可能な小群も包含することも容易に分かるであろう。さらに、全ての目的のために、本発明は、主群だけではなく、１つ以上の群の構成要素が存在していない主群も包含する。本発明は、特許請求されている本発明における１つ以上の任意の群の構成要素の明示的な除外または請求権の放棄も意図している。

当業者によって理解されるように、成分の量や分子量または反応条件などの特性を表す数を含む全ての数は概算であり、「約」という用語によって全ての場合に修正されるものとして理解される。これらの値は、本発明の本教示を利用する当業者によって得ることが求められている所望の特性に応じて変えることができる。そのような値が、それらの各試験測定値において認められる標準偏差から必ず生じるばらつきを本質的に含むことも理解される。

本出願で「工程」という場合、便宜のためにのみ使用されており、本明細書に記載されている本発明を分類、定義または限定するものではない。

以上、開示されている態様および実施例を参照しながら具体的な態様について説明してきたが、これらの態様および実施例は単なる例示であって、本発明の範囲を限定するものではない。以下の特許請求の範囲に定義されているそのより広い側面では、本発明を逸脱せずに当該技術分野の通常の技術に従って変形および修正が可能である。

Claims (16)

1. 式Ｉの化合物：
   

   

   （式中、
   Ｒ１およびＲ２は独立に、ＨまたはＣ（１〜６）アルキルであり、
   Ｒ３は、ＨまたはＣ（３〜８）シクロアルキルであり、
   Ｒ４は、−ＯＣ（３〜１０）アルキルＯ−、−ＯＣ（３〜１０）アルケニルＯ−、または−ＯＣ（３〜１０）アルキニルＯ−であり、
   Ｒ５は、ＨまたはＣ（３〜８）シクロアルキルであり、
   Ｒ６およびＲ７は独立に、ＨまたはＣ（１〜６）アルキルである）
   またはその塩。
2. Ｒ１およびＲ２のうちの一方がＣ（１〜６）アルキルであり、かつＲ１およびＲ２のうちの他方がＨである、請求項１に記載の化合物またはその塩。
3. Ｒ１およびＲ２のうちの一方がメチルであり、かつＲ１およびＲ２のうちの他方がＨである、請求項１または２に記載の化合物またはその塩。
4. Ｒ３がシクロヘキシルである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
5. Ｒ４が、
   

   

   または
   

   

   ある、請求項１〜４のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
6. Ｒ５がシクロヘキシルである、請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
7. Ｒ６およびＲ７のうちの一方がＣ（１〜６）アルキルであり、かつＲ６およびＲ７のうちの他方がＨである、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
8. Ｒ６およびＲ７のうちの一方がメチルであり、かつＲ６およびＲ７のうちの他方がＨである、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
9. Ｒ１、Ｒ２およびＲ３がＲ６、Ｒ７およびＲ５とそれぞれ同じである、請求項１〜８のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
10. 式Ｉの化合物が以下：
    

    

    の構造を有する、請求項１〜９のいずれか１項に記載の化合物またはその塩。
11. 以下：
    

    

    

    または
    

    

    から選択される、請求項１に記載の化合物、またはその塩。
12. 請求項１〜１１のいずれか１項に記載の化合物の医薬的に許容される塩。
13. （ｉ）請求項１〜１１のいずれか１項に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩と、
    （ｉｉ）医薬的に許容される担体、希釈液または賦形剤と、
    を含む医薬組成物。
14. 薬として使用される請求項１〜１１のいずれか１項に記載の化合物またはその医薬的に許容される塩。
15. 請求項１〜１１のいずれか１項に記載の化合物、請求項１２に記載の医薬的に許容される塩、または請求項１３に記載の医薬組成物、の有効量を哺乳類に投与することを含む、哺乳類における癌の治療方法。
16. 前記癌が、急性骨髄性白血病、膀胱癌、乳癌、結腸癌、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、非小細胞肺癌、卵巣癌、膵臓癌および前立腺癌からなる群から選択される、請求項１５に記載の癌の治療方法。