EA019961B1

EA019961B1 - Антагонисты киназы

Info

Publication number: EA019961B1
Application number: EA200870410A
Authority: EA
Inventors: Кеван М. Шокат; Захарий А. Найт; Бет Эпсел
Original assignee: Дзе Риджентс Оф Дзе Юниверсити Оф Калифорния
Priority date: 2006-04-04
Filing date: 2007-04-04
Publication date: 2014-07-30
Also published as: PL2004654T3; IL239403A0; US20110301144A1; EP2557080A1; CA2647391C; JP2009532476A; JP5597391B2; CA2909277A1; DK2004654T3; EP2015752A4; WO2008127226A2; CA2647391A1; AU2007233302B2; EP2004654A2; US20080032960A1; WO2007114926A2; JP2009532507A; EP2551270A3; US20140288096A1; HK1123294A1

Abstract

Изобретение относится к новым соединениям формулы (I)где Rи Rимеют значения, указанные в формуле изобретения, фармацевтической композиции на их основе. Соединения формулы (I) являются антагонистами РI3-киназы, РI3-киназы и тирозинкиназы и полезны для лечения заболеваний, опосредуемых активностью РI3-киназы или активностью РI3-киназы и активностью тирозинкиназы, таких как нарушение резорбции костей, аномальное воспаление, аутоиммунное заболевание, тромбоз, астма или рак.

Description

(57) Изобретение относится к новым соединениям формулы (I)

ΝΗ₂ р2

N (И ^,Ν \ к¹ где К¹ и К² имеют значения, указанные в формуле изобретения, фармацевтической композиции на их основе. Соединения формулы (I) являются антагонистами Р13-киназы, Р13-киназы и тирозинкиназы и полезны для лечения заболеваний, опосредуемых активностью Р13-киназы или активностью Р13-киназы и активностью тирозинкиназы, таких как нарушение резорбции костей, аномальное воспаление, аутоиммунное заболевание, тромбоз, астма или рак.

Уровень техники изобретения

Фосфоинозитид-3-киназы (ΡΙ3-Κ) катализируют синтез вторичных мессенджеров фосфатидилинозита (ΡΙ): ΡΙ(3)Ρ, Ρ^3, 4)Р2 и Ρ^3, 4, 6)Ρ3 (ΡΙΡ3) (Ргитаи е! а1., 1998). В этой связи указанные три липида регулируют различные физиологические процессы, включая рост, выживание, дифференциацию и хемотаксис клеток (Ка18О е! а1., 2001). Семейство ΡΙ3-Κ включает 15 киназ с различными субстратными специфичностями, картинами экспрессии и способами регуляции (Ка18О е! а1., 2001). ΡΙ3-Κ (ρ110α, ρ110β, р1105 и ρ110γ) класса I активируются тирозинкиназами или связанными с С-белком рецепторами для генерации ΡΙΡ3, который далее вовлекает в процесс эффекторы, такие как путь Λ1<1/ΡΟΚ1. киназы семейства Тес и ГТФазы семейства В1о. ΡΙ3-Κ классов II и III играют ключевую роль во внутриклеточной направленной миграции посредством синтеза ΡΙ(3)Ρ и ΡΙ(3, 4)Ρ2. ΡΙΚΚ являются протеинкиназами, которые регулируют рост клеток (тТОВС1) или проводят мониторинг геномной целостности (АТМ, АТВ, ДНК-ΡΚ и Ь8т§-1).

Важность указанных ферментов в другой патофизиологии сделало семейство ΡΙ3-Κ фокусом большого интереса в качестве нового класса мишеней лекарственных средств (^агй е! а1., 2003). Данный интерес был подогрет последним открытием, что ρ110α часто мутирует в первичных опухолях (8атие1§ е! а1., 2004), и доказательством, что липидфосфатаза ΡΤΕΝ, ингибитор сигнальной ΡΙ3-Κ, обычно инактивируется супрессором опухоли (Сап!1еу апй №е1, 1999). Усилия направлены на разработку ингибиторов ΡΙ3-Κ в виде малых молекул для лечения воспалительных и аутоиммунных заболеваний (р1105, ρ110γ и тТОВ), тромбоза φ110β), вирусной инфекции (ΡΙΚΚ) и рака (ρ110α, тТОВ и др.). Недавно описаны первые селективные ингибиторы указанных ферментов (ί’αιηρδ е! а1., 2005; СопййГГе е! а1., 2005; Тюкюп е! а1., 2005; Κπφΐιΐ е! а1., 2004; Ьаи е! а1., 2005; 8ай1и е! а1., 2003).

Протеинкиназы, протеинсерин/треонинкиназы и липидкиназы являются различными классами белков, которые играют критические роли в регуляции и пролиферации клеточной активности. Малые молекулы, которые ингибируют указанные классы белков, обладают потенциалом для нарушения дисфункциональных/патологических путей в двух разных точках. Известно, что, например, передача сигнала посредством рецепторов тирозинкиназ дезрегулируется в нескольких типах раковых заболеваний. Этот путь передачи сигнала включает белки последующих событий, такие как ΡI3-киназа. Известно, что передача сигнала посредством серин/треонинпротеинкиназы тТОВ (известной также в качестве мишени рапамицина млекопитающих) регулирует рост клеток, пролиферацию клеток, подвижность клеток, выживание клеток, синтез и транскрипцию белков. Нарушение пути тТОВ подразумевается как содействующий фактор для различных процессов заболеваний людей, особенно различных типов рака. Ингибитор, который блокирует активность протеинтирозинкиназы и ΡI3-киназы, тТОВ и ΡI3-киназы или тТОВ, протеинтирозинкиназы и ΡI3-киназы, обладает потенциалом для остановки аберрантной передачи сигнала на двух или трех различных уровнях. Сдвоенное или утроенное ингибирование малой молекулой может повысить активность лекарственного средства, повышая, тем самым, терапевтический потенциал соединения.

Настоящее изобретение удовлетворяет эти и другие потребности в данной области предоставлением нового класса антагонистов ΡI3-киназы, антагонистов ΡI3-киназы и тирозинкиназы, антагонистов ΡΙ3киназы и тТОВ и антагонистов ΡI3-киназы, тТОВ и тирозинкиназы.

Краткая сущность изобретения

Обнаружено, что соединения, описанные здесь, являются сильнодействующими антагонистами ΡΙ3киназы, ΡI3-киназы и тирозинкиназы, ΡI3Κ-киназы и тТОВ или ΡI3-киназы, тТОВ и тирозинкиназы.

В одном аспекте настоящее изобретение относится к соединениям формулы (Ι)

где В¹ представляет собой водород, В³-замещенный или незамещенный С1-С₈-алкил, незамещенный С₅-С₇-циклоалкил или незамещенный 5-7-членный гетероциклоалкил;

В² представляет собой В⁴-замещенный гетероарил, который имеет 2-3 конденсированных кольца, которые содержат 1-4 гетероатома, выбранных из Ν, О и 8;

В³ представляет собой галоген, -ΟΝ, -ОВ⁵, -8(О)_пВ⁶, -ΝΗ № -С(О)В⁹, ^В¹⁰-С(О)В^П,

-NВ¹²-С(О)-ОВ¹³, -С(О^В¹⁴В¹⁵, -№В¹⁶8(О)2В¹⁷, В¹⁹-замещенный или незамещенный С1-С8-алкил, В¹⁹замещенный или незамещенный 2-8-членный гетероалкил, В¹⁹-замещенный или незамещенный С5-С7-циклоалкил или В¹⁹-замещенный или незамещенный 5-7-членный гетероциклоалкил, где п равен целому числу от 0 до 2;

В представляет собой галоген, -ОВ или -ΝΡ В ;

В⁵, В⁶, В⁷, В⁸, В⁹, В¹⁰, В¹¹, В¹², В¹³, В¹⁴, В¹⁵, В¹⁶ и В¹⁷ представляют собой независимо водород, В³⁵-замещенный или незамещенный С1-С8-алкил, В³⁵-замещенный или незамещенный 2-8-членный гетероалкил, незамещенный С5-С₇ циклоалкил, В³⁵-замещенный или незамещенный 5-7-членный гетероцик- 1 019961 лоалкил;

Я¹⁹ и Я³⁵ независимо представляют собой водород, галоген, незамещенный С|-С₈-алкил. незамещенный 2-8-членный гетероалкил, незамещенный С₅-С₇-циклоалкил, незамещенный 5-7-членный гетероциклоалкил;

ЭГ) ээ эт

Я , Я и Я независимо представляют собой водород.

В следующем аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы (I) и фармацевтически приемлемый эксципиент.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I) в способе лечения заболевания, опосредуемого активностью Р13-киназы или активностью Р13-киназы и активностью тирозинкиназы, у человека или животного.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения заболевания, опосредуемого активностью Р13-киназы, активностью Р13-киназы и активностью тирозинкиназы, у субъекта, нуждающегося в таком лечении. Способ включает введение субъекту терапевтически эффективного количества соединения настоящего изобретения (т.е. антагонистов, связывающих карман аффинности Р13-киназы, или антагониста формулы (I)).

В следующем аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения нарушения резорбции костей, аномального воспаления, аутоиммунного заболевания, тромбоза, астмы или рака у субъекта, нуждающегося в таком лечении, причем указанный способ включает введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества соединения формулы (I).

В другом аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I) для получения лекарственного средства для лечения заболевания, опосредуемого активностью РВ-киназы, или заболевания, опосредуемого активностью РВ-киназы и активностью тирозинкиназы.

В следующем аспекте настоящее изобретение относится к применению соединения формулы (I) для получения лекарственного средства для лечения резорбции костей, аномального воспаления, аутоиммунного заболевания, тромбоза, астмы или рака.

Краткое описание графических материалов

На фиг. 1 иллюстрируются структуры репрезентативных соединений из одиннадцати хемотипов ингибиторов РВ-К.

На фиг. 2 иллюстрируются структуры изоформ-селективных ингибиторов РК-К:

А - структура АТФ в активном сайте р110у, где выделены различные области АТФ-связывающего кармана;

В - согласование всех описанных сокристаллических структур РВ-К-ингибитор. Ме! 804 принимает ир-конформацию во всех структурах, за исключением РГК-39;

С - структуры или модели изоформ-селективных ингибиторов РВ-К, связанных с ρ110γ;

Ό - структуры или модели полимишеневых ингибиторов РВ-К, связанных с ρ110γ.

На фиг. 3 иллюстрируется зондирование селективности и кармана аффинности РВ-киназы:

А - структура РК-39, связанного с ρ110γ, предполагает модель для связывания ГС87114. РП<-293 и РГК-294 являются пиразолопиримидиновыми аналогами ^87114. РГК-294 вдвигает м-фенол в карман аффинности, и это соединение является более сильнодействующим против РГ3-К класса I;

В - (слева) отношение величин Κ'₅₀ ингибиторов для мутантного р1105 и р1105 дикого типа и р110а/многомишеневых ингибиторов; (центр) кривые зависимости от дозы для связывания двух ингибиторов р1105 для дикого типа: М752I и М752У р1105; (справа) модели, предполагающие влияние мутаций М752I и М752У в р1105 на связывание различных классов ингибиторов.

Фиг. 4. Структуры дополнительных ингибиторов РГ3-К и неактивных аналогов.

Фиг. 5. Величины Κ'₅₀ (мкМ) для выбранных ингибиторов РГ3-К против липидкиназ.

Фиг. 6. Ингибирование протеинкиназ ингибиторами РГ3-К. Величины представляют собой % активности, оставшейся в присутствии 10 мкМ ингибитора. Величины являются средней величиной трех измерений. Величины Κ',Τ, указываются (при необходимости) в скобках (мкМ).

На фиг. 7 указывается последовательность киназы р1105 человека.

На фиг. 8 указывается последовательность киназы ρ110γ человека.

На фиг. 9 указывается последовательность киназы ρ110α человека.

На фиг. 10 указывается последовательность киназы р110 β человека.

- 2 019961

Подробное описание изобретения

I. Определения.

Применяемые в контексте аббревиатуры имеют их общепринятые значения в химической и биологической областях.

Когда группы-заместители указываются их общепринятыми химическими формулами, написанными слева направо, они в равной степени включают химически идентичные заместители, которые могут быть результатом написания структуры справа налево, например -СН₂О- является эквивалентным -ОСН₂-.

Термин алкил, отдельно или как часть другого заместителя, означает, если не оговорено особо, имеющий прямую (т.е. неразветвленную) или разветвленную цепь углеводородный радикал или циклический углеводородный радикал или их комбинацию, причем радикал или комбинация таких радикалов могут быть полностью насыщенными, моно- или полиненасыщенными, могут включать двух- и поливалентные радикалы и имеет указанное число атомов углерода (т.е. С1-Сю означает от 1 до 10 атомов углерода). Примеры насыщенных углеводородных радикалов включают, но не ограничиваются перечисленным, такие группы, как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, трет-бутил, изобутил, втор-бутил, циклогексил, (циклогексил)метил, циклопропилметил, гомологи и изомеры, например, н-пентила, н-гексила, н-гептила, н-октила и т.п. Ненасыщенной алкильной группой является группа, имеющая одну или несколько двойных или тройных связей. Примеры ненасыщенных алкильных групп включают, но не ограничиваются перечисленным, винил, 2-пропенил, кротил, 2-изопентенил, 2-(бутадиенил), 2,4-пентадиенил, 3-(1,4-пентадиенил), этинил, 1- и 3-пропинил, 3-бутинил и высшие гомологи и изомеры.

Термин алкилен, отдельно или как часть другого заместителя, означает двухвалентный радикал, образованный из алкила, примерами которого являются, но без ограничения перечисленным, -СН₂СН₂СН₂СН₂-, -СН₂СН=СНСН₂-, -СН₂С ССН₂-. -СН₂СН₂СН(СН₂СН₂СН₃)СН₂-. Обычно алкильная (или алкиленовая) группа имеет от 1 до 24 атомов углерода, причем в настоящем изобретении предпочтигельными являются такие группы, имеющие 10 или меньше атомов углерода. Низший алкил или низший алкилен представляет собой алкильную или алкиленовую группу с более короткой цепью, обычно имеющей 8 или меньше атомов углерода.

Термин гетероалкил, отдельно или в комбинации с другим термином, означает, если не оговорено особо, стабильный, имеющий неразветвленную или разветвленную цепь углеводородный радикал или циклический углеводородный радикал (или их комбинацию), состоящий по меньшей мере из одного атома углерода и по меньшей мере одного гетероатома, выбранного из группы, состоящей из О, Ν, Р, 81 и 8, где атомы азота, фосфора и серы могут быть необязательно окислены и гетероатом азота может быть необязательно кватернизован. Г етероатом(ы) О, Ν, Р и 8 и 81 может быть расположен в любом внутреннем положении гетероалкильной группы или в положении, в котором алкильная группа присоединена к остальной части молекулы. Примеры его включают, но не ограничиваются перечисленным, -СН2-СН2-О-СН₃, -СН2-СН2^-СН₃, -СН2-СН2-ЖСН₃)-СН₃, -СН2-8-СН2-СН₃, -СН2-СН2-8(О)-СН₃, -СН2-СН2-8(О)2-СН₃, -СН=СН-О-СН₃, -81(СН₃)₃, -СН-СН Ν-ОСН;. -СН=СН-^СН₃)-СН₃, -О-СН₃, -О-СН₂-СН₃ и -ΟΝ. До двух или трех гетероатомов могут быть расположены последовательно, например, как в -СН₂-NН-ОСН₃ и -СН₂-О-81(СН₃)₃. Аналогично этому, термин гетероалкилен, отдельно или в качестве части другого заместителя, означает двухвалентный радикал, образованный из гетероалкила, примерами которого являются, но без ограничения указанным, -СН₂-СН₂-8-СН₂-СН₂- и -СН₂-8-СН₂-СН₂-NН-СН₂-. В гетероалкиленовых группах гетероатомы могут также занимать одно или оба концевых положения цепи (например, алкиленоксо, алкилендиоксо, алкиленамино, алкилендиамино и т.п.). Далее, для алкиленовых и гетероалкиленовых связывающих групп ориентация такой связывающей группы не определяется направлением, в котором написана формула связывающей группы. Например, формула -С(О)ОК' представляет собой как -С(О)ОК'-, так и К'ОС(О)-. Как описано выше, гетероалкильные группы, применяемые здесь, включают такие группы, которые присоединены к остальной части молекулы через гетероатом, такие как С(О)К', -Ο(Θ)ΝΚ', -ΝΚ'Κ, -ОК', -8К' и/или -8О₂К'. Когда указывается гетероалкил с последующими перечислениями определенных гетероалкильных групп, таких как ΝΚ'Κ или т.п., должно быть понятно, что термины гетероалкил и -ΝΚ'Κ не являются излишними или взаимно исключающими. Скорее, определенные гетероалкильные группы перечисляют для внесения ясности. Таким образом, термин гетероалкил не следует интерпретировать здесь как исключающий определенные гетероалкильные группы, такие как -ΝΚ'Κ или т.п.

Термины циклоалкил и гетероциклоалкил, отдельно или в комбинации с другим термином, представляют собой, если не оговорено особо, циклические варианты алкила и гетероалкила соответственно. Кроме того, в гетероциклоалкиле гетероатом может занимать положение, у которого гетероцикл присоединен к остальной части молекулы. Примеры циклоалкила включают, но не ограничиваются перечисленным, циклопентил, циклогексил, 1-циклогексенил, 3-циклогексенил, циклогептил и т.п. Примеры гетероциклоалкила включают, но не ограничиваются перечисленным, 1-(1,2,5,6-тетрагидропиридил),

1-пиперидинил, 2-пиперидинил, 3-пиперидинил, 4-морфолинил, 3-морфолинил, тетрагидрофуран-2-ил, тетрагидрофуран-3-ил, тетрагидротиен-2-ил, тетрагидротиен-3-ил, 1-пиперазинил, 2-пиперазинил и т.п.

- 3 019961

Термины циклоалкилен и гетероциклоалкилен относятся к двухвалентным производным циклоалкила и гетероциклоалкила соответственно.

Термин галоген, отдельно или как часть другого заместителя, означает, если не указано особо, атом фтора, хлора, брома или йода. Кроме того, имеется в виду, что такие термины, как галогеналкил, включают моногалогеналкил и полигалогеналкил. Например, имеется в виду, что термин галоген(С₁-С₄)алкил включает, но не ограничивается перечисленным, трифторметил, 2,2,2-трифторэтил, 4-хлорбутил, 3-бромпропил и т.п.

Термин арил означает, если не оговорено особо, полиненасыщенный, ароматический углеводородный заместитель, который может иметь одно или несколько колец (предпочтительно 1-3 кольца), которые конденсированы вместе (например, нафтил) или соединены ковалентно. Термин гетероарил относится к арильным группам (или кольцам), которые содержат от 1 до 4 гетероатомов (в каждом отдельном кольце в случае нескольких колец), выбранных из Ν, О и 8, где атомы азота и серы необязательно окислены и атом(ы) азота необязательно кватернизованы. Г етероарильная группа может быть присоединена к остальной части молекулы через атом углерода или гетероатом. Неограничивающие примеры арильных и гетероарильных групп включают фенил, 1-нафтил, 2-нафтил, 4-бифенил, 1-пирролил,

2-пирролил, 3-пирролил, 3-пиразолил, 2-имидазолил, 4-имидазолил, пиразинил, 2-оксазолил, 4-оксазолил, 2-фенил-4-оксазолил, 5-оксазолил, 3-изоксазолил, 4-изоксазолил, 5-изоксазолил,

2- тиазолил, 4-тиазолил, 5-тиазолил, 2-фурил, 3-фурил, 2-тиенил, 3-тиенил, 2-пиридил, 3-пиридил, 4-пиридил, 2-пиримидил, 4-пиримидил, 5-бензотиазолил, пуринил, 2-бензимидазолил, 5-индолил, 1-изохинолил, 6-изохинолил, 2-хиноксалинил, 5-хиноксалинил, 3-хинолил и 6-хинолил. Таким образом, термин гетероарил включает структуры с конденсированными кольцами, в которых по меньшей мере одно кольцо включает по меньшей мере две двойные связи. Заместители для каждой из указанных выше арильных и гетероарильных циклических систем выбраны из группы приемлемых заместителей, описанных ниже. Термины арилен и гетероарилен относятся к двухвалентным радикалам арила и гетероарила соответственно.

Для краткости, термин арил при применении в комбинации с другими терминами (например, арилоксо, арилтиоксо, арилалкил) включает как арильные, так и гетероарильные кольца, которые имеют значения, указанные выше. Таким образом, имеется в виду, что термин арилалкил включает такие радикалы, в которых арильная группа присоединена к алкильной группе (например, бензил, фенетил, пиридилметил и т.п.), в том числе таким алкильным группам, у которых атом углерода (например, метиленовой группы) заменен, например, атомом кислорода (например, феноксиметил, 2-пиридилоксиметил,

3- (1-нафтилокси)пропил и т.п.). Однако имеется в виду, что термин галогенарил, применяемый здесь, включает только арилы, замещенные одним или несколькими атомами галогена.

Когда гетероалкил, гетероциклоалкил или гетероарил включает определенное число членов (например, 3-7-членный), термин член относится к атому углерода или гетероатому.

Применяемый здесь термин оксо означает атом кислорода, который связан с атомом углерода двойной связью.

Имеется в виду, что каждый из указанных выше терминов (например, алкил, гетероалкил, циклоалкил, гетероциклоалкил, арил, гетероарил, а также их двухвалентные радикальные производные) включает как замещенные, так и незамещенные формы указанного радикала. Предпочтительные заместители для каждого типа радикала представлены ниже.

Заместителями для алкильных, гетероалкильных, циклоалкильных, гетероциклоалкильных одновалентных и двухвалентных радикалов (в том числе таких радикалов, часто называемых алкилен, алкенил, гетероалкилен, гетероалкенил, алкинил, циклоалкил, гетероциклоалкил, циклоалкенил и гетероциклоалкенил) могут быть одна или несколько групп, выбранных, но без ограничения перечисленным, из -ОН', =О, =ΝΚ', =Ν-ΟΚ', -ΝΚΉ, -8Н', -галогена, -81Н'НН', -ОС(О)Н', -С(О)Н', -СО₂Н', -С(ОЖ'К, -00(0)ΝΚ'Κ, -МКС(О)Н', -МН'-С(О)МКН', -МНС(О)ОН', -ΝΚ-ΟΝΚΉ)=ΝΚ', -8(О)Н', -8(О)₂Н', -8(Ό)₂ΝΚ'Κ. -МН8О₂Н', -СИ и -ЫО₂, причем число таких заместителей составляет от 0 до (2т'+1), где т' равно общему числу атомов углерода в таком радикале. Н', Н, Н' и Н, каждый предпочтительно независимо, представляют собой водород, замещенную или незамещенную гетероалкильную, замещенную или незамещенную циклоалкильную, замещенную или незамещенную гетероциклоалкильную, замещенную или незамещенную арильную (например, арил, замещенный 1-3 атомами галогена), замещенную или незамещенную алкильную группу, алкокси- или тиоалкоксигруппу или арилалкильную группу.

Имеется в виду, что применяемый здесь термин гетероатом или гетероатом кольца включает атом кислорода (О), азота (Ν), серы (8), фосфора (Р) и кремния (81).

Соединения настоящего изобретения могут существовать в виде солей. Настоящее изобретение включает такие соли. Примеры приемлемых форм солей включают гидрохлориды, гидробромиды, сульфаты, метансульфонаты, нитраты, малеаты, ацетаты, цитраты, фумараты, тартраты (например, (+)-тартраты, (-)-тартраты или их смеси, включая рацемические смеси), сукцинаты, бензоаты и соли с аминокислотами, такими как глутаминовая кислота. Такие соли можно получить методами, хорошо известными специалисту в данной области. Включены также основно-аддитивные соли, такие как соль натрия, калия, кальция, аммония, органического амина или магния, или аналогичная соль. Когда соедине

- 4 019961 ния настоящего изобретения содержат относительно основные функциональные группы, кислотноаддитивные соли можно получить контактированием нейтральной формы таких соединений с достаточным количеством требуемой кислоты либо без растворителя, либо в подходящем инертном растворителе. Примеры приемлемых кислотно-аддитивных солей включают соли, полученные из неорганических кислот, подобных хлористо-водородной, бромисто-водородной, азотной, угольной, моногидроугольной, фосфорной, моногидрофосфорной, дигидрофосфорной, серной, моногидросерной, йодисто-водородной или фосфористой кислотам и т.п., а также соли, полученные из органических кислот, подобных уксусной, пропионовой, изомасляной, малеиновой, малоновой, бензойной, янтарной, субериновой, фумаровой, молочной, миндальной, фталевой, бензолсульфоновой, п-толуолсульфоновой, лимонной, винной, метансульфоновой кислотам и т.п. Включены также соли аминокислот, такие как аргинат и т.п., и соли органических кислот, подобных глюкуроновым или галактуроновым кислотам и т.п. Некоторые особые соединения настоящего изобретения содержат как основную, так и кислотную функциональные группы, которые позволяют соединениям превратиться либо в основно-, либо в кислотно-аддитивные соли.

Нейтральные формы соединений предпочтительно получают контактированием соли с основанием или кислотой и выделением родительского соединения общепринятым способом. Родительская форма соединения отличается от различных форм ее солей некоторыми физическими свойствами, такими как растворимость в полярных растворителях.

Некоторые соединения настоящего изобретения могут существовать в несольватированных формах, а также сольватированных формах, в том числе в гидратированных формах. В общем, сольватированные формы являются эквивалентными несольватированным формам и включены в объем настоящего изобретения. Некоторые соединения настоящего изобретения могут существовать во многих кристаллических или аморфных формах. В общем, все физические формы являются эквивалентными для применений, рассматриваемых настоящим изобретением, и предполагается, что они входят в объем настоящего изобретения.

Некоторые соединения настоящего изобретения имеют асимметричные атомы углерода (оптические или хиральные центры) или двойные связи; энантиомеры, рацематы, диастереомеры, таутомеры, геометрические изомеры, стереоизомерные формы, которые можно указать в терминах абсолютной стереохимии как (В)- или (8)- или как (Ό)- или (Ь)-изомеры для аминокислот, и индивидуальные изомеры включены в объем настоящего изобретения. Соединения настоящего изобретения не включают соединения, которые, как известно в данной области, являются слишком нестабильными для синтеза и/или выделения. Имеется в виду, что настоящее изобретение включает соединения в рацемических и оптически чистых формах. Оптически активные (В)- и (8)- или (Ό)- и (Ь)-изомеры можно получить с применением хиральных синтонов или хиральных реагентов или разделением на изомеры с применением общепринятых методик. Когда описанные здесь соединения содержат олефиновые связи или другие центры геометрической асимметрии, и если не оговорено особо, предполагается, что соединения включают Е- и Ζ-геометрические изомеры.

Термин таутомер, применяемый здесь, относится к одному из двух или более структурных изомеров, которые существуют в равновесии и которые легко превращаются из одной изомерной формы в другую.

Специалисту в данной области должно быть очевидно, что некоторые соединения данного изобретения могут существовать в таутомерных формах, причем все такие таутомерные формы соединений входят в объем изобретения.

Имеется в виду, если не оговорено особо, что структуры, указанные в данном тексте, включают все стереохимические формы структуры; т.е. К- и 8-конфигурации для каждого асимметричного центра. Следовательно, в объем изобретения входят индивидуальные стереохимические изомеры, а также энантиомерные и диастереомерные смеси настоящего изобретения.

Имеется в виду, если не оговорено особо, что структуры, указанные в данном тексте, включают соединения, которые отличаются только присутствием одного или нескольких атомов, обогащенных изотопом. Например, соединения, имеющие данные структуры, за исключением замены атома водорода дейтерием или тритием или замены атома углерода ¹³С- или ''С-обогащенным атомом углерода, входят в объем настоящего изобретения.

Соединения настоящего изобретения могут также содержать неприродные пропорции атомных изотопов у одного или нескольких атомов, которые составляют такие соединения. Например, соединения могут быть радиомечеными радиоактивными изотопами, такими как, например, тритий (³Н), йод-125 (¹²⁵1) или углерод-14 (¹⁴С). Все изотопные варианты соединений настоящего изобретения, независимо от того, являются ли они радиоактивными или нет, включены в объем настоящего изобретения.

Имеется в виду, что термин фармацевтически приемлемые соли включает соли активных соединений, которые получают с относительно нетоксичными кислотами или основаниями, в зависимости от конкретных групп-заместителей, обнаруженных на описанных здесь соединениях. Когда соединения настоящего изобретения содержат относительно кислотные функциональные группы, основно-аддитивные соли можно получить контактированием нейтральной формы таких соединений с достаточным количеством требуемого основания либо без растворителя, либо в подходящем инертном растворителе. Приме

- 5 019961 ры фармацевтически приемлемых основно-аддитивных солей включают соль натрия, калия, кальция, аммония, органического амина или магния или аналогичную соль. Когда соединения настоящего изобретения содержат относительно основные функциональные группы, кислотно-аддитивные соли можно получить контактированием нейтральной формы таких соединений с достаточным количеством требуемой кислоты либо без растворителя, либо в подходящем инертном растворителе. Примеры фармацевтически приемлемых кислотно-аддитивных солей включают соли, полученные из неорганических кислот, подобных хлористо-водородной, бромисто-водородной, азотной, угольной, моногидроугольной, фосфорной, моногидрофосфорной, дигидрофосфорной, серной, моногидросерной, йодисто-водородной или фосфористой кислотам и т.п., а также соли, полученные из относительно нетоксичных органических кислот, подобных уксусной, пропионовой, изомасляной, малеиновой, малоновой, бензойной, янтарной, субериновой, фумаровой, молочной, миндальной, фталевой, бензолсульфоновой, п-толуолсульфоновой, лимонной, винной, метансульфоновой кислотам и т.п. Включены также соли аминокислот, такие как аргинат и т.п., и соли органических кислот, подобных глюкуроновым или галактуроновым кислотам и т.п. (см., например, Вегде с1 а1, Рйагтасеийса1 8а11к, 1оигпа1 о£ Рйагтасеийса1 8е1еисе, 1977, 66, 1-19). Некоторые особые соединения настоящего изобретения содержат как основные, так и кислотные функциональные группы, которые позволяют соединениям превращаться либо в основно-, либо в кислотно-аддитивные соли.

Помимо форм солей, настоящее изобретение предлагает соединения, которые находятся в форме пролекарства.

Пролекарствами описанных здесь соединений являются такие соединения, которые легко подвергаются химическим превращениям в физиологических условиях с образованием соединений настоящего изобретения. Кроме того, пролекарства можно превратить в соединения настоящего изобретения химическими или биохимическими методами в ех νίνο окружающей среде. Например, пролекарства можно медленно превратить в соединения настоящего изобретения при помещении в резервуар из чрескожного пластыря с подходящим ферментом или химическим реагентом.

Описание соединений настоящего изобретения ограничивается принципами химического связывания, известными специалисту в данной области. Соответственно этому, когда группа может быть замещена одним или несколькими из ряда заместителей, такие замещения выбраны так, чтобы подчиняться принципам химического связывания и образовывать соединения, которые по своей природе не являются нестабильными и/или, как должно быть известно среднему специалисту в данной области, возможно, являются нестабильными в условиях окружающей среды, таких как водные, нейтральные условия и различные известные физиологические условия. Например, гетероциклоалкил или гетероарил присоединен к остальной части молекулы через гетероатом кольца согласно принципам химического связывания, известным специалисту в данной области, что тем самым, по существу, предотвращает применение нестабильных соединений.

Термин лечение относится к любым показателям успеха при лечении или уменьшении интенсивности симптомов повреждения, патологии или состояния, в том числе любому объективному или субъективному параметру такого ослабления; ремиссии; уменьшению симптомов или доведению повреждения, патологии или состояния до степени, более переносимой пациентом; снижению скорости дегенерации или хронического прогрессирующего заболевания; достижению менее изнуряющей конечной точки дегенерации; улучшению физического или психического самочувствия пациента. Лечение или уменьшение симптомов может быть основано на объективных или субъективных параметрах, включающих результаты объективного обследования, нейропсихиатрического освидетельствования и/или психиатрической экспертизы. Например, некоторые способы, представленные здесь, успешно лечат рак снижением заболеваемости раком и/или индуцированием ремиссии рака.

Эффективное количество является количеством, достаточным для содействия лечению, профилактике или уменьшению интенсивности симптома или симптомов заболевания. Эффективное количество можно также называть терапевтически эффективным количеством. Уменьшение интенсивности симптома или симптомов (и грамматические эквиваленты данной фразы) означает снижение тяжести или частоты появления симптома(ов) или устранение симптома(ов). Профилактически эффективным количеством лекарственного средства является количество лекарственного средства, которое при введении субъекту будет оказывать предполагаемое профилактическое действие, например профилактику или задержку начала (или повторного появления) заболевания или уменьшение вероятности начала (или повторного появления) заболевания или его симптомов. Полное профилактическое действие необязательно достигается введением одной дозы и может иметь место только после введения ряда доз. Таким образом, профилактически эффективное количество можно ввести одним или несколькими введениями. Фраза снижающее активность количество, применяемая в данном контексте, относится к количеству антагониста, требуемого для снижения активности фермента, по сравнению с отсутствием антагониста. Фраза количество, нарушающее функцию, применяемая в данном контексте, относится к количеству антагониста, требуемого для нарушения функции остеокласта или лейкоцита, по сравнению с отсутствием антагониста.

- 6 019961

Применяемый в данном контексте термин антагонист или соединение настоящего изобретения относится к соединению формулы (I) или антагонисту, связывающему карман аффинности Р13-киназы (например, пиразолопиримидиновому антагонисту, связывающему карман аффинности Р13-киназы, или пирролопиримидиновому антагонисту, связывающему карман аффинности Р13-киназы).

II. Антагонисты киназы.

В одном аспекте настоящее изобретение относится к новым антагонистам киназы. Антагонистами киназы может быть антагонист, связывающий карман аффинности Р13-киназы (например, пиразолопиримидиновый антагонист, связывающий карман аффинности Р13-киназы, или пирролопиримидиновый антагонист, связывающий карман аффинности Р13-киназы), или соединение формулы (I). Антагонистами, связывающими карман аффинности РВ-киназы настоящего изобретения, являются соединения, содержащие остаток, связывающий карман аффинности РВ-киназы.

Пиразолопиримидиновыми антагонистами настоящего изобретения, связывающими карман аффинности РВ-киназы, являются замещенные пиразолопиримидиновые соединения, содержащие остаток, связывающий карман аффинности РВ-киназы. Подобным же образом, пирролопиримидиновыми антагонистами настоящего изобретения, связывающими карман аффинности РВ-киназы, являются замещенные пирролопиримидиновые соединения, содержащие остаток, связывающий карман аффинности Р^ киназы.

Остатком, связывающим карман аффинности РВ-киназы, является заместитель, который при контактировании с киназой ρ110α, ρ110β, ρ110γ или р1105 заполняет пространство в кармане аффинности соответствующей РВ-киназы. В некоторых вариантах осуществления остаток, связывающий карман аффинности РВ-киназы, заменяет по меньшей мере одну молекулу воды в кармане аффинности Р^киназы. Остаток, связывающий карман аффинности РВ-киназы, может также взаимодействовать с одной или несколькими аминокислотами, которые образуют часть кармана аффинности РВ-киназы. Описание кармана аффинности РВ-киназы и способов определения, заполняет ли заместитель пространство в кармане аффинности РВ-киназы, приводится ниже.

В одном варианте осуществления изобретения антагонист киназы настоящего изобретения имеет формулу

N

N Д *¹ (I) где К¹ представляет собой водород, К³-замещенный или незамещенный С_гС₈-алкил, незамещенный С₅-С₇-циклоалкил или незамещенный 5-7-членный гетероциклоалкил;

К² представляет собой К⁴-замещенный гетероарил, который имеет 2-3 конденсированных кольца, которые содержат 1-4 гетероатома, выбранных из Ν, О и 8;

К³ представляет собой галоген, <Ν, -ОК⁵, -8(О)_ПК⁶, -ΝΚ⁷Κ⁸, -С(О)К⁹, -КК¹⁰-С(О)К^П,

-№К¹²-С(О)-ОК¹³, -С(О^К¹⁴К¹⁵, -№К¹⁶8(О)2К¹⁷, К¹⁹-замещенный или незамещенный СгС₈-алкил, К¹⁹-замещенный или незамещенный 2-8-членный гетероалкил, К¹⁹-замещенный или незамещенный С₅-С₇-циклоалкил или К¹⁹-замещенный или незамещенный 5-7-членный гетероциклоалкил, где η равен целому числу от 0 до 2;

К⁴ представляет собой галоген, -ОК²⁰ или -ΝΚ²²Κ²³;

К⁵, К⁶, К⁷, К⁸, К⁹, К¹⁰, К¹¹, К¹², К¹³, К¹⁴, К¹⁵, К¹⁶ и К¹⁷ представляют собой независимо водород, К³⁵-замещенный или незамещенный С₁-С₈-алкил, К³⁵-замещенный или незамещенный 2-8-членный гетероалкил, незамещенный С5-С7-циклоалкил, К³⁵-замещенный или незамещенный 5-7-членный гетероцик лоалкил;

К¹⁹ и К³⁵ независимо представляют собой водород, галоген, незамещенный С₁-С₈-алкил, незамещенный 2-8-членный гетероалкил, незамещенный С5-С7-циклоалкил, незамещенный 5-7-членный гете

роциклоалкил;

К²⁰, К²² и К²³ независимо представляют собой водород.

В некоторых вариантах осуществления К² представляет собой νν¹

I—( νν²-νν³ (Ш), где ^¹, ^², ^³ и ^⁴ независимо представляют собой =СН-, =СК⁴- или =Ν- и кольцо А представляет собой частично или полностью ненасыщенное 6- или 7-членное кольцо.

В некоторых вариантах осуществления К⁵, К⁶, К⁷, К⁸, К⁹, К¹⁰, К¹¹, К¹², К¹³, К¹⁴, К¹⁵, К¹⁶ и К¹⁷ представляют собой независимо водород, незамещенный С₁-С₈-алкил, незамещенный 2-8-членный гетероалкил, незамещенный С5-С7-циклоалкил или незамещенный 5-7-членный гетероциклоалкил.

В некоторых вариантах осуществления К¹ представляет собой К³-замещенный или незамещенный С₁-С₈-алкил или незамещенный 5-7-членный гетероциклоалкил.

- 7 019961

В некоторых вариантах осуществления В¹ представляет собой В³-замещенный или незамещенный С1-С₈-алкил.

В некоторых вариантах осуществления В¹ представляет собой В³-замещенный или незамещенный С₁-С₄-алкил.

В других вариантах осуществления описанных выше соединений В¹ представляет собой метил или незамещенный разветвленный С₃-С₆-алкил.

В дополнительных вариантах осуществления описанных выше соединений В¹ представляет собой изопропил.

В других вариантах осуществления В³ представляет собой В¹⁹-замещенный или незамещенный С1-С8-алкил или В¹⁹-замещенный или незамещенный С5-С--циклоалкил.

В одном из вариантов осуществления В¹⁹ представляет собой незамещенный С₁-С₈-алкил или незамещенный С₅-С--циклоалкил.

В другом из вариантов осуществления В¹⁹ представляет собой незамещенный С1-С4-алкил или незамещенный циклопентил.

В других вариантах осуществления описанных выше соединений В² представляет собой В⁴-замещенный или незамещенный индолил, В⁴-замещенный или незамещенный бензоксадиазолил, В⁴-замещенный или незамещенный бензодиоксолил, В⁴-замещенный или незамещенный бензодиоксанил, В⁴-замещенный или незамещенный тианафтанил, В⁴-замещенный или незамещенный пирролопиридинил, В⁴-замещенный или незамещенный индазолил, В⁴-замещенный или незамещенный тетрагидронафталинил, В⁴-замещенный или незамещенный хинолинил, В⁴-замещенный или незамещенный хиноксалинил, В⁴-замещенный или незамещенный пиридопиразинил, В⁴-замещенный или незамещенный хиназолинонил, В⁴-замещенный или незамещенный хроменонил, В⁴-замещенный или незамещенный бензоизоксазолил, В⁴-замещенный или незамещенный имидазопиридинил, В⁴-замещенный или незамещенный бензофуранил или В⁴-замещенный или незамещенный бензотиофенил.

В одном из вариантов осуществления В² представляет собой В⁴-замещенный индолил.

В другом варианте осуществления В² представляет собой 5-гидроксииндол-2-ил и В¹ представляет собой изопропил.

В другом варианте осуществления соединения формулы (I) включают некоторые из соединений, перечисленных в табл. 1.

III. Карман аффинности Р13-киназы.

Применяемый здесь термин карман аффинности РК-киназы относится к полости в ρ110α, ρ110β, ρ110γ и р1105, соответствующей слегка затемненной области, показанной на фиг. 2Ά-2Ό, названной карманом аффинности. Фиг. 2Ά-2Ό иллюстрируют компьютерную модель кристаллической структуры ρ110γ. В ρ110γ поверхность кармана аффинности РК-киназы связана, по меньшей мере частично, с боковой цепью К833, Ό964, [879 и Ό841 (нумерацию аминокислот ρ110γ см. на фиг. 8). Поверхность соответствующей полости в р1105 связана, по меньшей мере частично, с боковой цепью К779, Ό911, Ш25 и Ό787 (нумерацию аминокислот р1105 см. на фиг. 7). Соответствующая полость в ρ110α связана, по меньшей мере частично, с боковыми цепями К802, Ό933, Ш48 и Ό810 (нумерацию аминокислот р110а см. на фиг. 9). Соответствующая полость в р110Ц связана, по меньшей мере частично, с боковыми цепями К805, Ό937, Ш51 и Ό813 (нумерацию аминокислот ρ110β см. на фиг. 10). Карман аффинности РКкиназы является недоступным для АТФ.

Карман аффинности РК-киназы р1105 может быть назван здесь карманом аффинности р1105. Подобным же образом, карман аффинности РК-киназы ρ110γ может быть назван здесь карманом аффинности ρ110γ. Карман аффинности РК-киназы включает лизин 779, который согласно компьютерным моделям образует водородную связь с атомом азота пиридина РГК-90 и атомом кислорода фенола РI 103 (фиг. 2Ό), оба из которых являются ингибиторами р1105. На основании указанных результатов компьютерного моделирования был разработан новый антагонист, основанный на химической структуре РГК-39 и Ю87114, как подробно указано ниже.

Как показано на фиг. 2С, РГК-39 не содержит остаток, связывающий карман РК-киназы. И, как показано на фиг. 3Ά, Ю87114 сохраняет контакты с Е880 и У882 в ΆΤΦ-связывающей области ρ110δ, но также обнаруживает отсутствие остатка, связывающего карман РК-киназы. Встраивание м-фенола (остаток, связывающий карман РК-киназы) у С3 пиразолопиримидина Ю87114 делает доступным карман аффинности РК-киназы (фиг. 3Ά), что приводит к 60-кратному повышению активности ингибирования р1108.

Как описано выше, остаток, связывающий карман РК-киназы, представляет собой заместитель, который при контактировании с ρ110α, ρ110β, ρ110γ или р1105 заполняет пространство в кармане связывания соответствующей РК-киназы. Например, остатком, связывающим карман аффинности РК-киназы, является заместитель, который при контактировании с р1105 заполняет пространство в кармане аффинности ρ110α. Подобным же образом, остатком, связывающим карман аффинности ρ110α, является заместитель, который при контактировании с ρ110α заполняет пространство в кармане аффинности ρ110α.

- 8 019961

В некоторых вариантах осуществления остаток, связывающий карман Р13-киназы, дополнительно взаимодействует (например, связывается) с аминокислотой, которая образует часть кармана связывания Р13-киназы. В некоторых родственных вариантах осуществления взаимодействием является взаимодействие с образованием водородных связей, ван-дер-ваальсовых связей, ионных связей, ковалентных связей (например, дисульфидной связи) или гидрофобное взаимодействие.

IV. Определение заполнения пространства в кармане аффинности Р13-киназы.

Для определения того, заполняет ли остаток, связывающий карман аффинности Р13-киназ, пространство в кармане аффинности Р13-киназы, применяют методики компьютерного моделирования. Исследуемый антагонист, связывающий карман аффинности Р13-киназ (т.е. испытуемое соединение), вставляют в компьютерное изображение ρ110γ. Компьютерное изображение ρ110γ получают из сольватированной сокристаллической структуры киназы ρ110γ человека, связанной с Р1К-39. Для получения изображения можно применять РуМОЬ Мо1еси1аг ОгарЫез 8у§!ет. Пример представлен на фиг. 3А, где 1С87114 и Р1К-294 встроены в компьютерное изображение киназы р110у, полученное из сокристалла р110у-Р1К-39. См. КпхдЫ, е! а1., Се11. 125: 733-745 (2006).

Компьютерные модели обычно анализируют для предотвращения любых больших стерических затруднений и удовлетворения требований в отношении образования ключевых водородных связей между испытуемым антагонистом, связывающим карман аффинности Р13-киназы, и белком ρ110γ (например, ν882 и М804). В некоторых вариантах осуществления проводят вычисления минимизации энергии для оптимизации энергии связывания. С применением таких методик специалист в данной области может легко определить, включает ли испытуемый антагонист, связывающий карман аффинности Р13-киназы, остаток, связывающий карман аффинности Р13-киназы, который заполняет пространство в кармане аффинности Р13-киназы.

В некоторых вариантах осуществления испытуемый антагонист, связывающий карман аффинности Р13-киназы, анализируют для определения, образуется ли по меньшей мере одна связь (например, водородная связь) между испытуемым антагонистом, связывающим карман аффинности Р13-киназы, и аминокислотой, которая образует часть кармана аффинности Р13-киназы. Применением методики компьютерного моделирования, описываемой выше, определяют расстояние между одной или несколькими аминокислотами, которые образуют часть кармана аффинности Р13-киназы, и потенциальной контактной точкой на остатке, связывающем карман аффинности Р13-киназы. На основании этого расстояния специалист в данной области может определить, образуется ли по меньшей мере одна связь между одной или несколькими аминокислотами, которые образуют часть кармана аффинности Р13-киназы, и остатком, связывающим карман аффинности Р13-киназы.

V. Общие синтезы.

Соединения изобретения синтезируют подходящим сочетанием в общем хорошо известных синтетических способов. Методики, применимые при синтезе соединений изобретения, являются как легко очевидными, так и доступными специалистам в данной области. Ниже предложено обсуждение для иллюстрации некоторых из различных способов, доступных для применения при сборке соединений изобретения. Однако предполагается, что обсуждение не определяет пределы реакций или последовательности реакций, которые являются применимыми при получении соединений настоящего изобретения.

Схема I

По указанной выше схеме I йодирование пиразоло- или пирролопиримидина выполняют с применением подходящего реагента йодирования, такого как Ν-йодсукцинамид. Введение подходящего заместителя в 1-положение можно выполнить посредством замены галогена бромированным заместителем (например, замещенным или незамещенным алкилбромидом). Катализируемое палладием перекрестное сочетание между органобороновой кислотой и йодгалогенидом (т.е. сочетание Сузуки) затем применяют для введения заместителя в 3-положение. Новые разработки катализатора и способа значительно расширили возможные применения сочетания Сузуки, так что диапазон исходных реагентов реакции не ограничивается арильными реагентами. Вместо бороновых кислот можно применять трифторбораты калия и органобораны или боронатные эфиры. В качестве реагентов сочетания можно также применять некоторые псевдогалогениды (например, трифлаты (трифторметилсульфонаты)). Дополнительную информацию относительно сочетания Сузуки можно найти, например, в Кибо е! а1., Апреле. СЪет. 1п!. Еб. 45: 1282-1284 (2006); К1гсЪйо££ е! а1., 1. Ат. СЪет. 8ос., 124: 13662-13663 (2002); №и е! а1., 1. Огд. СЪет., 68: 670-673 (2003) апб Мо1апбег е! а1., 1. Огд. СЪет., 67: 8424-8429 (2002).

- 9 019961

VI. Способы.

Соединения настоящего изобретения способны уменьшать каталитическую активность Р13-киназы (например, ρΐΐθα-киназы).

Способ включает стадию контактирования Р13-киназы с уменьшающим активность количеством соединения настоящего изобретения (т.е. антагониста, связывающего карман аффинности Р13-киназы, или соединения формулы (I)). В некоторых вариантах осуществления антагонист способен уменьшить каталитическую активность тирозинкиназы. В некоторых вариантах осуществления антагонистом является связывающий карман аффинности Р13-киназы пиразолопиримидиновый антагонист или связывающий карман аффинности Р13-киназы пирролопиримидиновый антагонист.

В некоторых вариантах осуществления антагонист является специфичным для ρ110α относительно действия антагониста против р1105, ρ110β и/или р110у. В некоторых вариантах осуществления 1С₅₀ для ρ110α по меньшей мере в 1,5, 2,0, 3,0, 4,0, 5,0, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 200, 500 или 1000 раз ниже, чем 1С₅₀ против р1105, ρ110β и/или р110у. В других вариантах осуществления 1С₅₀ антагониста против ρ110α меньше чем 100, 50, 40, 30, 20, 10, 5, 1, 0,5, 0,1 мкМ, 50, 10, 1, 0,5, 0,1 нМ, 50, 10 или 1 пМ.

В некоторых вариантах осуществления антагонист является специфичным для ρ110α относительно действия антагониста против рецепторной тирозинкиназы инсулина. В некоторых вариантах осуществления 1С₅₀ для ρ110α по меньшей мере в 1,5, 2,0, 3,0, 4,0, 5,0, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 200, 500 или 1000 раз меньше, чем 1С₅₀ против рецепторной тирозинкиназы инсулина. В других вариантах осуществления 1С₅₀ антагониста против ρ110α меньше чем 100, 50, 40, 30, 20, 10, 5, 1, 0,5, 0,1 мкМ, 50, 10, 1, 0,5, 0,1 нМ, 50, 10 или 1 пМ.

В некоторых вариантах осуществления антагонист снижает или способен снизить каталитическую активность тирозинкиназы. В некоторых вариантах осуществления 1С₅₀ антагониста против тирозинкиназы меньше чем 100, 50, 40, 30, 20, 10, 5, 1, 0,5, 0,1 мкМ, 50, 10, 1, 0,5, 0,1 нМ, 50, 10 или 1 пМ. Некоторые тирозинкиназы включают, например, ДНК-зависимую тирозинкиназу, ДНК-зависимую тирозинкиназу (номер доступа в РиЬтеб-белки) (РРАЫ) ААА79184), тирозинкиназу АЫ (САА52387), Всг-АЫ, киназу кроветворных клеток (РРАЫ СА119695), 8тс (РРАЫ САА24495), рецептор-2 васкулярного эндотелиального фактора роста (РРАЫ АВВ82619), рецептор-2 васкулярного эндотелиального фактора роста (РРАЫ АВВ82619), рецептор эпидермального фактора роста (РРАЫ АС43241), рецептор В4 ЕРН (РРАЫ ЕАЬ23820), рецептор фактора стволовых клеток (РРАЫ ААЕ22141), рецептор ΤΙΕ-2 тирозинпротеинкиназы (РРАЫ С02858). относящаяся к Гпъ тирозинкиназа 3 (РРАЫ Ж 004110), рецептор альфа тромбоцитарного фактора роста (РРАЫ Ж 990080), КЕТ (РРАЫ САА73131) и их функциональные мутанты. В некоторых вариантах осуществления тирозинкиназой является АЬ1, Всг-АЬ1, ЕСЕК или Е11-3.

В некоторых вариантах осуществления антагонист снижает или способен снизить каталитическую активность тТОК (РРАЫ АА117167). В некоторых вариантах осуществления 1С₅₀ антагониста против тТОК меньше чем 100, 50, 40, 30, 20, 10, 5, 1, 0,5, 0,1 мкМ, 50, 10, 1, 0,5, 0,1 нМ, 50, 10 или 1 пМ.

В некоторых вариантах осуществления антагонист снижает или способен снизить каталитическую активность тТОК и р110а при 1С₅₀ меньше чем 100, 50, 40, 30, 20, 10, 5, 1, 0,5, 0,1 мкМ, 50, 10, 1, 0,5, 0,1 нМ, 50, 10 или 1 пМ. В других вариантах осуществления антагонист снижает или способен снизить каталитическую активность тирозинкиназы и р110а при 1С₅₀ меньше чем 100, 50, 40, 30, 20, 10, 5, 1, 0,5, 0,1 мкМ, 50, 10, 1, 0,5, 0,1 нМ, 50, 10 или 1 пМ. В других вариантах осуществления антагонист снижает или способен снизить каталитическую активность тирозинкиназы, тТОК и р110а при 1С₅₀ меньше чем 100, 50, 40, 30, 20, 10, 5, 1, 0,5, 0,1 мкМ, 50, 10, 1, 0,5, 0,1 нМ, 50, 10 или 1 пМ.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способу лечения заболевания, опосредуемого активностью Р13-киназы, активностью Р13-киназы и активностью тирозинкиназы, у субъекта, нуждающегося в таком лечении. Способ включает введение субъекту терапевтически эффективного количества антагониста. Антагонистом является антагонист, связывающий карман аффинности Р13-киназы, соединение формулы (I). Заболеванием может быть также нарушение резорбции костей, аномальное воспаление, аутоиммунное заболевание, тромбоз или астма. Заболевание может быть также типа рака или метастазов рака, в том числе, например, лейкоз, карциномы и саркомы, такие как рак головного мозга, молочной железы, шейки матки, толстой кишки, головы и шеи, печени, почек, легких, немелкоклеточный рак легких, меланома, мезотелиома, рак яичников, саркома, рак желудка, матки и медуллобластома. Дополнительные примеры включают болезнь Ходжкина, неходжкинскую лимфому, множественную миелому, нейробластому, рак яичников, рабдомиосаркому, первичный тромбоцитоз, первичную макроглобулинемию, первичные опухоли головного мозга, рак, злокачественную панкреатическую инсуланому, злокачественный карциноид, рак мочевого пузыря, предзлокачественные повреждения кожи, тестикулярный рак, лимфомы, рак щитовидной железы, нейробластому, рак пищевода, рак мочеполового тракта, злокачественную гиперкальциемию, внутриматочный рак, адренальный кортикальный рак, новообразования эндокринного и экзокринного отделов поджелудочной железы и рак простаты. В некоторых вариантах осуществления заболевание выбрано из рака печени, рака толстой кишки, рака молочной железы, меланомы, острого миелоидного лейкоза, хронического миелоидного лейкоза или немелкоклеточного рака легких.

- 10 019961

VII. Фармацевтические препараты.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы (I) в смеси с фармацевтически приемлемым эксципиентом. Специалисту в данной области должно быть понятно, что фармацевтические композиции включают фармацевтически приемлемые соли антагонистов Р13-киназы настоящего изобретения, описанные выше.

При терапевтических и/или диагностических применениях соединения изобретения можно вводить в состав фармацевтических препаратов для различных методов введения, включая системное и местное или локализованное введение. Методики и препараты в общем можно найти в публикации КетшдЩп: ТНе 8с1епсе аиб Ргасбсе о£ РНагшасу (20‘^ь еб.) ЫрртеоИ. ХУППапъ & ХУПкиъ (2000).

Соединения согласно изобретению являются эффективными в пределах широкого диапазона доз. Например, при лечении взрослых людей примерами доз, которые можно применять, являются дозы 0,011000, 0,5-100, 1-50 и 5-40 мг/день. Наиболее предпочтительной дозой является 10-30 мг/день. Точная доза будет зависеть от пути введения, формы, в которой соединение вводят, подвергаемого лечению субъекта, массы тела подвергаемого лечению субъекта и предпочтения и опыта штатного врача больницы.

Фармацевтически приемлемые соли обычно хорошо известны среднему специалисту в данной области и могут включать в качестве примера, например, но без ограничения перечисленным, ацетат, бензолсульфонат, безилат, бензоат, бикарбонат, битартрат, бромид, эдетат кальция, карнсилат, карбонат, цитрат, эдетат, эдисилат, эстолат, эзилат, фумарат, глюцептат, глюконат, глутамат, гликоллиларсанилат, гексилрезорцинат, гидрабамин, гидробромид, гидрохлорид, гидроксинафтоат, йодид, изетионат, лактат, лактобионат, малат, малеат, манделат, мезилат, мукат, напсилат, нитрат, памоат (эмбонат), пантотенат, фосфат/дифосфат, полигалактуронат, салицилат, стеарат, субацетат, сукцинат, сульфат, таннат, тартрат или теоклат. Другие фармацевтически приемлемые соли можно найти, например, в публикации Кештфоп: ТНе §с1епсе апб Ргасбсе о£ РНагшасу (20* еб.) Ырршсоб, ^ййашк & ХУбкНъ (2000). Предпочтительные фармацевтически приемлемые соли включают, например, ацетат, бензоат, бромид, карбонат, цитрат, глюконат, гидробромид, гидрохлорид, малеат, мезилат, напсилат, памоат (эмбонат), фосфат, салицилат, сукцинат, сульфат или тартрат.

В зависимости от подвергаемых лечению определенных состояний такие агенты можно изготовить в составе жидких или твердых дозированных форм и вводить системно или локально. Агенты можно доставить, например, в форме с длительным по времени или замедленным высвобождением, которая известна специалисту в данной области. Методики изготовления и введения можно найти в публикации Кеттфоп: ТНе §с1епсе апб Ргасбсе о£ РНагшасу (20‘^ь еб.) Ырртсой, ХУППапъ & ХУПкиъ (2000). Подходящие пути могут включать оральный, буккальный путь, ингаляцию спрея, сублингвальный, ректальный, чрескожный, вагинальный путь, путь через слизистую оболочку, назальное или кишечное введение; парентеральную доставку, в том числе внутримышечные, подкожные, интрамедуллярные инъекции, а также внутриоболочечные, прямые внутрижелудочковые, внутривенные, внутрисуставные, внутригрудинные, внутрипеченочные инъекции, инъекции внутрь повреждения, внутричерепные, внутрибрюшинные, интраназальные или внутриглазные инъекции или другие методы доставки.

Для инъекции агенты изобретения можно изготовить в составе препарата и разбавить в водных растворах, таких как физиологически совместимые буферы, такие как раствор Ханка, раствор Рингера или физиологический солевой буфер. В препарате для такого введения через слизистую оболочку применяют агенты, усиливающие проникновение, подходящие для преодоления барьера. Такие агенты, усиливающие проникновение, в общем известны в данной области.

Применение фармацевтически приемлемых инертных носителей для изготовления препаратов соединений, описанных здесь для практического применения изобретения, в виде доз, подходящих для системного введения, входит в объем изобретения. При правильном выборе носителя и подходящей практике изготовления композиции настоящего изобретения, особенно композиции, изготовленные в виде растворов, можно вводить парентерально, например внутривенной инъекцией. Соединения можно легко изготовить в составе фармацевтических препаратов с применением фармацевтически приемлемых носителей, хорошо известных в данной области, и в дозах, подходящих для орального введения. Такие носители позволяют изготовлять соединения изобретения в составе препаратов в виде таблеток, пилюль, капсул, жидкостей, гелей, сиропов, взвесей, суспензий и т.п. для орального приема подвергаемым лечению субъектом (например, пациентом).

Для назальной или ингаляционной доставки агенты изобретения можно также изготовлять в составе препаратов методами, известными специалисту в данной области, и такие препараты могут включать, например, но без ограничения перечисленным, растворяющие, разбавляющие или диспергирующие вещества, такие как физиологический раствор, консерванты, такие как бензиловый спирт, промоторы абсорбции и фторуглероды.

Фармацевтические композиции, подходящие для применения в настоящем изобретении, включают композиции, в которых активные ингредиенты содержатся в количестве, эффективном для достижения предполагаемой цели. Определение эффективных количеств находится полностью в пределах компетенции специалиста в данной области, особенно в свете предложенного здесь подробного описания.

- 11 019961

Помимо активных ингредиентов, эти фармацевтические композиции могут содержать подходящие фармацевтически приемлемые носители, включающие эксципиенты и вспомогательные вещества, которые облегчают процесс изготовления препаратов из активных соединений, которые можно применять для фармацевтических целей. Препараты, изготовленные для орального введения, могут быть в форме таблеток, драже, капсул или растворов.

Фармацевтические препараты для орального применения можно получить смешиванием активных соединений с твердыми эксципиентами, необязательно размалыванием образовавшейся смеси и обработкой смеси гранул, если нужно, после добавления подходящих вспомогательных веществ с получением сердцевин таблеток или драже. Подходящими эксципиентами в особенности являются наполнители, такие как сахара, в том числе лактоза, сахароза, маннит или сорбит; препараты целлюлозы, например маисовый крахмал, пшеничный крахмал, рисовый крахмал, картофельный крахмал, желатин, трагакантовая камедь, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, натриевая соль карбоксиметилцеллюлозы (СМС) и/или поливинилпирролидон (РУР: повидон). При необходимости, можно добавить дезинтегрирующие агенты, такие как сшитый поливинилпирролидон, агар или альгиновая кислота или ее соль, такая как альгинат натрия.

Сердцевины драже покрывают подходящими оболочками. Для этой цели можно применять концентрированные растворы сахара, которые могут необязательно содержать аравийскую камедь, тальк, поливинилпирролидон, гель карбопола, полиэтиленгликоль (ПЭГ) и/или диоксид титана, растворы лака и подходящие органические растворители или смеси растворителей. Для идентификации или характеризации различных комбинаций доз активного соединения к покрытиям таблеток или драже можно добавлять красители или пигменты.

Фармацевтические препараты, которые можно применять орально, включают капсулы пуш-фит, изготовленные из желатина, а также мягкие, герметизированные капсулы, изготовленные из желатина и пластификатора, такого как глицерин или сорбит. Капсулы пуш-фит могут содержать активные ингредиенты в смеси с наполнителем, таким как лактоза, связывающими веществами, такими как крахмалы, и/или лубрикантами, такими как тальк или стеарат магния и, необязательно, стабилизаторами. В мягких капсулах активные соединения могут быть растворены или суспендированы в подходящих жидкостях, таких как жирные масла, жидкий парафин или жидкие полиэтиленгликоли (ПЭГ). Кроме этого, могут быть добавлены стабилизаторы.

В зависимости от конкретного состояния или патологического состояния, которое лечат или предотвращают, вместе с ингибиторами данного изобретения можно вводить дополнительные терапевтические агенты, которые обычно вводят для лечения или профилактики такого состояния. Например, с ингибиторами данного изобретения можно комбинировать химиотерапевтические агенты или другие антипролиферативные агенты для лечения пролиферативных заболеваний и рака. Примеры известных химиотерапевтических агентов включают, но не ограничиваются перечисленным, адриамицин, дексаметазон, винкристин, циклофосфамид, фторурацил, топотекан, таксол, интерфероны и производные платины.

Другие примеры агентов, которые также можно комбинировать с ингибиторами данного изобретения, включают, без ограничения, противовоспалительные агенты, такие как кортикостероиды, блокаторы ΤΝΕ, ГЬ-1 ЯА, азатиоприн, циклофосфамид и сульфазалазин; иммуномодулирующие и иммуносупрессивные агенты, такие как циклоспорин, такролимус, рапамицин, микофенолят мофетил, интерфероны, кортикостероиды, циклофосфамид, азатиоприн и сульфазалазин; нейротрофические факторы, такие как ингибиторы ацетилхолинэстеразы, ингибиторы МАО, интерфероны, противосудорожные средства, блокаторы ионных каналов, рилузол и агенты против паркинсонизма; агенты для лечения сердечнососудистого заболевания, такие как бета-блокаторы, ингибиторы АСЕ, диуретики, нитраты, блокаторы кальциевых каналов и статины; агенты для лечения заболевания печени, такие как кортикостероиды, холестериламин, интерфероны и противовирусные агенты; агенты для лечения болезни крови, такие как кортикостероиды, антилейкемические агенты и факторы роста; агенты для лечения диабета, такие как инсулин, аналоги инсулина, ингибиторы альфа-глюкозидазы, бигуаниды и сенсибилизаторы инсулина, и агенты для лечения иммунологической недостаточности, такие как гамма-глобулин.

Указанные дополнительные агенты можно вводить отдельно от композиции изобретения как часть схемы приема нескольких лекарственных средств. В альтернативном случае эти агенты могут быть частью одной дозированной формы, смешанной с ингибитором в одной композиции.

Настоящее изобретение не ограничивается в объеме указанными в качестве примеров вариантами осуществления, которые представлены для иллюстрации отдельных аспектов изобретения. В действительности, специалисту в данной области на основании предшествующего описания станут очевидными различные модификации изобретения, помимо описанных здесь модификаций. Предполагается, что такие модификации находятся в пределах изобретения. Кроме того, любой один или несколько других признаков любого варианта осуществления изобретения можно сочетать с любым одним или несколькими другими признаками любого другого варианта осуществления изобретения, не выходя за пределы объема изобретения. Например, описанные выше антагонисты РО-киназы настоящего изобретения в равной мере являются применимыми для описанных здесь способов лечения и способов ингибирования киназ. Ссылки, цитированные на всем протяжении данного описания, являются примерами уровня знаний в

- 12 019961 данной области и тем самым включаются здесь посредством ссылки во всей их полноте для всех целей, независимо от того, были ли они ранее, в частности, включены или нет.

VIII. Примеры.

Имеется в виду, что нижеследующие примеры иллюстрируют некоторые варианты осуществления изобретения, но не ограничивают объем изобретения.

Общие способы.

Все применяемые химикаты, реагенты и растворители были приобретены коммерческим образом, их применяли как таковые (без дополнительной очистки). 6Н₂О относится к деионизированной воде. Выпаривание растворителей проводили на роторном испарителе при пониженном давлении. Соединения очищали высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЭЖХ), элюируя смесью 50:50:0,1 бН₂О-МеС№трифторуксусная кислота, если не указано иначе. Анализ продуктов проводили на приборе жидкостной хроматограф-масс-спектрометр (ЖХ-МС) с применением раствора МеСЫ-0,1% муравьиная кислота (изменяемые отношения) в качестве элюента.

А. Выбранные методики реакций.

Синтез 1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (ВА18).

Раствор 250 мл формамида и 3-амино-4-пиразолкарбонитрила (25 г, 0,231 моль) нагревают до 180°С на протяжении ночи в атмосфере аргона. Реакционную смесь охлаждают и добавляют 400 мл 6Н₂О. Образовавшееся твердое вещество отделяют фильтрованием и промывают холодной 6Н₂О. Белый твердый осадок собирают и сушат в вакууме на протяжении ночи, получая при этом ВА18 (39 г, выход 100%).

ΕδΙ-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 136,1, найдено 136,1.

Синтез 3-йод-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (ВА19).

Раствор 3Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (10 г, 0,074 моль) и Ν-йодсукцинамида (25 г, 0,111 моль) в ДМФА (80 мл) нагревают до 80°С на протяжении ночи в атмосфере аргона. Образовавшееся твердое вещество отделяют фильтрованием и промывают холодным Е1ОН. Продукт сушат в вакууме на протяжении ночи, получая при этом ВА19 (24 г, выход 100%).

ΕδΙ-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 262,0, найдено 262,0.

Синтез 3 -йод-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-ά] пиримидин-4 -амина (ВА12).

Раствор 3-йод-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (2 г, 0,0077 моль) и К₂СО₃ (4,2 г, 0,031 моль) в ДМФА (50 мл) нагревают до 80°С в атмосфере аргона. Шприцем добавляют изопропилбромид (1,0 г, 0,0084 моль). Реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в атмосфере аргона в течение 2 ч. Твердый К₂СО₃ удаляют фильтрованием. Растворитель частично удаляют в вакууме. Добавляют цитрат натрия (50 мл) и реакционную смесь экстрагируют ЕЮАс. Органические фазы концентрируют в вакууме и очищают с применением колоночной хроматографии на силикагеле [МеОН-СН₂С1₂, 5:95], получая при этом ВА12 (1,68 г, выход 72%).

ΕδΙ-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 304,0, найдено 304,1.

Общая методика реакции сочетания Сузуки. Получение конечных продуктов (см. табл. 1 для названий и структур конечных продуктов).

3-Иод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амин (40 мг, 0,13 ммоль, 1 экв.) растворяют в ЭМЕ (12 мл). Бороновую кислоту (1,1 экв.) растворяют в ЕЮН (3,3 мл) и добавляют к реакционной смеси. К реакционной смеси добавляют Рб(РРй₃)₄ (30 мг, 0,026 ммоль, 0,2 экв.) и насыщенный №ьС'О₃(1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона и кипятят с обратным холодильником в течение 8 ч. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным ΝαΟΊ и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют и растворитель удаляют. Образовавшееся твердое вещество (или масло) растворяют в смеси 50:50:0,1 бН₂О-МеС№трифторуксусная кислота и очищают ВЭЖХ. Идентичность очищенного продукта (варьирующиеся выходы) подтверждают ЖХ-МС.

Синтез 4-(4-амино-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-3-ил)бензолсульфонамида (ВА14).

Раствор пинаконового эфира бензолсульфонамид-4-бороновой кислоты (23 мг, 0,08 ммоль) в ЕЮН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (20 мг, 0,07 ммоль) в ИМЕ (12 мл). Добавляют Рб(РРй₃)₄ (16 мг, 0,014 ммоль) и насыщенный №ьС’О₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА14 (2,2 мг, выход 10%).

ΕδI-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 333,1, найдено 333,1.

Синтез 1-изопропил-3-(3-метокси-4-метилфенил)-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (ВА15).

Раствор 2-метокси-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенола (19 мг, 0,08 ммоль) в ЕЮН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (20 мг, 0,07 ммоль) в ИМЕ (12 мл). Добавляют Рб(РРй₃)₄ (16 мг, 0,014 ммоль) и насыщенный №ьС’О₃, (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА15 (4,3 мг, выход 20%).

- 13 019961

Е8ВМС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 300,1, найдено 300,2.

Синтез 6-(4-амино-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-3-ил)нафталин-2-ола (ВА17).

Раствор 6-гидроксинафталин-2-ил-2-бороновой кислоты (15 мг, 0,08 ммоль) в Е!ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (20 мг, 0,07 ммоль) в ΌΜΕ (12 мл). Добавляют Ρ^ΡΡ1₃)₄ (16 мг, 0,014 ммоль) и насыщенный №ьСО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТРА), получая при этом ВА15 (4,8 мг, выход 23%).

Е8ВМС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 320,1, найдено 320,1.

Синтез трет-бутил-4-(4-амино-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-й]пиримидин-3 -ил)-2метоксифенилкарбамата (ВА20).

Раствор 4-№Вос-амино-3-метоксибензолбороновой кислоты (48 мг, 0,18 ммоль) в Е!ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (50 мг, 0,18 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Ρ^ΡΡ1₃)₄ (40 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный №ьСО₃, (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0, 1% ТРА), получая при этом ВА20.

Е8ВМС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 399,2, найдено 399,1.

Синтез 3 -(4-амино-3 -метоксифенил)-1-изопропил-1Н-пиразоло [3,4-й]пиримидин-4-амина (ВА20й).

Раствор трет-бутил-4-(4-амино-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-й]пиримидин-3 -ил)-2метоксифенилкарбамата (ВА20) (20 мг, 0,05 ммоль) в СН₂С1₂, ТРА, 8(СН₂)₂, Н₂О (45:45:5:5) (1 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 15 мин. Добавляют NаНСО₃ (2 мл) до тех пор, пока реакционная смесь не станет щелочной. Реакционную смесь экстрагируют Н2О и СН2С12. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТРА), получая при этом ВА20й.

Синтез 5 -(4-амино-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-й]пиримидин-3 -ил)пиридин-2-карбонитрила (ВА21).

Раствор пинаконового эфира 2-цианопиридин-5-бороновой кислоты (18 мг, 0,08 ммоль) в Е!ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (20 мг, 0,07 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Ρй(ΡΡй₃)₄ (16 мг, 0,014 ммоль) и насыщенный №ьСО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТРА), получая при этом ВА21 (2,5 мг, выход 14%).

Е8ВМС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 280,1, найдено 280,1.

Синтез 3 -(3 -(бензилокси)-5-фторфенил)-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-й]пиримидин-4-амина.

Раствор (3-бензилокси-5-фторфенил)бороновой кислоты (29 мг, 5,80 ммоль) в Е!ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (20 мг, 0,07 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Ρ^ΡΡ1₃)₄ (16 мг, 0,014 ммоль) и насыщенный №ьСО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТРА), получая при этом ВА22 (15,6 мг, выход 60%).

Е8ВМС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 378,1, найдено 378,0.

Синтез 3 -(4-амино-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-й]пиримидин-3 -ил)-5-фторфенола (ВА22).

Раствор 3-(3-бензилокси-5-фторфенил)-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (15 мг, 0,04 ммоль) в МеОН (0,9 мл) промывают струей аргона. Осторожно добавляют Ρй на активированном угле (10 мл) при выдерживании реакционной смеси в атмосфере аргона. Реакционную смесь промывают струей газообразного Н2 и оставляют в атмосфере Н2 на ночь при комнатной температуре. Реакционную смесь фильтруют через целит и промывают МеОН, получая при этом ВА22 (15 мг, выход 100%).

Е8ВМС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 288,1, найдено 288,1.

Синтез 1 -изопропил-3 -(3,4-диметоксифенил)-1Н-пиразоло [3,4-й]пиримидин-4-амина (ВА23).

Раствор 3,4-диметоксифенилбороновой кислоты (24 мг, 0,13 ммоль) в Е!ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (20 мг, 0,07 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Ρ^ΡΡ1₃)₄ (16 мг, 0,014 ммоль) и насыщенный №ьСО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТРА), получая при этом ВА23 (13,1 мг, выход 60%).

Е8ВМС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 314,0, найдено 314,1.

Синтез (3 -(4-амино-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-й]пиримидин-3 -ил)фенил)метанола (ВА26).

Раствор (3-гидроксиметилфенил)бороновой кислоты (24 мг, 0,13 ммоль) в Е!ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (20 мг, 0,07 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Ρ^ΡΡ1₃)₄ (16 мг, 0,014 ммоль) и насыщенный №ьСО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагрева

- 14 019961 ют до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным ЫаС1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕЛ), получая при этом ВА26 (8,4 мг, выход 42%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 283,1, найдено 284,2.

Синтез 3-(4-амино-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-3-ил)-Ы-(4,5-дигидротиазол-2ил)бензамида (ВА30).

Раствор [3-((4,5-дигидротиазол-2-ил)карбамоил)фенил]бороновой кислоты (19 мг, 0,08 ммоль) в Е!ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (20 мг, 0,07 ммоль) в ΌΜΕ (12 мл). Добавляют Ρά(ΡΡΗ₃)₄ (16 мг, 0,014 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным ЫаС1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА30 (17,8 мг, выход 67%).

Синтез 1-(4-(4-амино-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-3-ил)фенил)этанона (ВА31).

Раствор 4-ацетилфенилбороновой кислоты (12,7 мг, 0,08 ммоль) в Е!ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (20 мг, 0,07 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Ρά(ΡΡΗ₃)₄ (16 мг, 0,014 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным ЫаС1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА31 (12,9 мг, выход 62%).

Синтез (3 -(4-амино-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-3 -ил)фенил)метанола (ВА32).

Раствор (4-аминокарбонил-3-хлорфенил)бороновой кислоты (16 мг, 0,08 ммоль) в ЕЮН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (20 мг, 0,07 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Ρά(ΡΡΗ₃)₄ (16 мг, 0,014 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА32 (9,7 мг, выход 42%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 331,1, найдено 331,1.

Синтез 5-(4-амино-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-3 -ил)-3 -метилтиофен-2карбальдегида (ВА34).

Раствор 5-формил-3-метилтиофен-2-бороновой кислоты (26 мг, 0,14 ммоль) в ЕЮН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (40 мг, 0,13 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Ρά(ΡΡΗ₃)₄ (16 мг, 0,014 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным ЫаС1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА34 (14,7 мг, выход 38%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 302,1, найдено 302,0.

Синтез 5-(4-амино-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-3 -ил)фуран-3 -карбальдегида (ВА35).

Раствор 4-формилфуран-2-бороновой кислоты (20 мг, 0,14 ммоль) в ЕЮН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (40 мг, 0,13 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Ρά(ΡΡΗ₃)₄ (16 мг, 0,014 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА35 (13,5 мг, выход 39%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 272,1, найдено 272,1.

Синтез Ы-[3-(4-амино-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-3-ил)фенил]метансульфонамида (ВА38).

Раствор 3-метансульфониламинофенилбороновой кислоты (32 мг, 0,15 ммоль) в Е!ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (40 мг, 0,13 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Ρά(ΡΡΗ₃)₄ (16 мг, 0,014 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА38 (24,3 мг, выход 54%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 347,1, найдено 347,0.

Синтез 3 -(4-амино-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-3 -ил)бензонитрила (ВА3 9).

Раствор 3-цианофенилбороновой кислоты (23 мг, 0,15 ммоль) в Е!ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (40 мг, 0,13 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Ρά(ΡΡΗ₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным ЫаС1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА39 (14,9 мг, выход 41%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 279,1, найдено 279,0.

- 15 019961

Синтез Ы-[4-(4-амино-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-3-ил)фенил]метансульфонамида (ВА40).

Раствор 4-метансульфониламинофенилбороновой кислоты (24 мг, 0,11 ммоль) в Е1ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (30 мг, 0,10 ммоль) в ΌΜΕ (12 мл). Добавляют Рб(РРй₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным ЫаС1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА40 (0,9 мг, выход 3%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 347,1, найдено 347,0.

Синтез 3 -(4-амино-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-3 -ил)бензолсульфонамида (ВА41).

Раствор пинаконового эфира бензолсульфонамид-3-бороновой кислоты (31 мг, 0,11 ммоль) в Е1ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (30 мг, 0,10 ммоль) в ΌΜΕ (12 мл). Добавляют Рб(РРй₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА41 (9,2 мг, выход 28%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 333,1, найдено 333,0.

Синтез 2-(4-амино-1-изопропил-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-3 -ил)бензо [Ь]тиофен-5 карбальдегида (ВА42).

Раствор пинаконового эфира 5-формилбензо[Ь]тиофен-2-бороновой кислоты (31 мг, 0,11 ммоль) в Е1ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (30 мг, 0,10 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Рб(РРй₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным ЫаС1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА42 (15,2 мг, выход 45%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 338,1, найдено 338,0.

Синтез 5-(4-амино-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-3-ил)-1Н-индол-3-карбальдегида (ВА43).

Раствор пинаконового эфира Ы-Вос-3-формил-5-индолбороновой кислоты (40 мг, 0,11 ммоль) в Е1ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (30 мг, 0,10 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Рб(РРй₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным ЫаС1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА). После очистки продукт гидролизуют ТЕА для удаления Вос, получая при этом ВА43.

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 321,1, найдено 321,0.

Синтез 3 -(бензо [с] [ 1,2,5]оксадиазол-6-ил)-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-4-амина (ВА44).

Раствор бензо[с][1,2,5]оксадиазол-5-бороновой кислоты (18 мг, 0,11 ммоль) в Е1ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (30 мг, 0,10 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Рб(РРй₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным ЫаС1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА44.

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 296,1, найдено 296,1.

Синтез 2-(4-(4-амино-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-3-ил)фенил)ацетонитрила (ВА45).

Раствор (4-цианометилфенил)бороновой кислоты (18 мг, 0,11 ммоль) в Е1ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (30 мг, 0,10 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Рб(РРй₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным ЫаС1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА45.

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 293,1, найдено 293,1.

Синтез 2-(3 -(4-амино-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-3 -ил)фенил)ацетонитрила (ВА46).

Раствор (3-цианометилфенил)бороновой кислоты (18 мг, 0,11 ммоль) в Е1ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (30 мг, 0,10 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Рб(РРй₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют

- 16 019961 насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕЛ), получая при этом ВА46.

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 293,1, найдено 293,1.

Синтез 1-изопропил-3-(4-метоксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (ВА48).

Раствор (4-метоксифенил)бороновой кислоты (17 мг, 0,11 ммоль) в Е(ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (30 мг, 0,10 ммоль) в ΌΜΕ (12 мл). Добавляют Рй(РРй₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТРА), получая при этом ВА48 (4,5 мг, выход 16%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 284,1, найдено 284,1.

Синтез 1-изопропил-3-(3-метоксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (ВА49).

Раствор 3-метоксифенилбороновой кислоты (17 мг, 0,11 ммоль) в Е(ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (30 мг, 0,10 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Рй(РРй₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным ЫаС1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТРА), получая при этом ВА49.

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 284,1, найдено 284,0.

Синтез 1-изопропил-3-(пиридин-3-ил)-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (ВА52).

Раствор 3-пиридинилбороновой кислоты (15 мг, 0,14 ммоль) в Е(ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (40 мг, 0,13 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Рй(РРй₃)₄ (15 мг, 0,015 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О), получая при этом вА52.

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 255,1, найдено 255,0.

Синтез 1 -изопропил-3 -(пиримидин-5 -ил) -1Н-пиразоло [3,4-й] пиримидин-4-амина (ВА53).

Раствор 5-пиримидинилбороновой кислоты (15 мг, 0,14 ммоль) в Е(ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (40 мг, 0,13 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Рй(РРй₃)₄ (15 мг, 0,015 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О), получая при этом ВА53.

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 256,1, найдено 256,1.

Синтез 3 -(2,3-дигидробензо [Ь] [ 1,4]диоксин-6-ил)-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-й]пиримидин-4амина (ВА54).

Раствор 2,3-дигидро-1,4-бензодиоксин-6-илбороновой кислоты (26 мг, 0,14 ммоль) в Е(ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (40 мг, 0,13 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Рй(РРй₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТРА), получая при этом ВА54 (6 мг, выход 15%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 312,1, найдено 312,0.

Синтез 1-(3-4-амино-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-3-ил)фенилэтанона (ВА55).

Раствор 3-ацетилфенилбороновой кислоты (23 мг, 0,14 ммоль) в Е(ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (40 мг, 0,13 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Рй(РРй₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТРА), получая при этом ВА55 (7 мг, выход 18%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 296,1, найдено 296,1.

Синтез 4-(4-амино-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-й]пиримидин-3 -ил)фенола (ВА56).

Раствор 4-гидроксифенилбороновой кислоты (30 мг, 0,14 ммоль) в Е(ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (40 мг, 0,13 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Рй(РРй₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТРА), получая при этом ВА56 (12 мг, выход 32%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 270,1, найдено 270,1.

- 17 019961

Синтез двойных ингибиторов РВ-К/тирозинкиназы.

Раствор 250 мл формамида и 3-амино-4-пиразолкарбонитрила (25 г, 0,231 моль) нагревают до 180°С на протяжении ночи в атмосфере аргона. Реакционную смесь охлаждают и добавляют 400 мл БН₂О. Образовавшееся твердое вещество отделяют фильтрованием и промывают холодной БН₂О. Осадок белого твердого вещества собирают и сушат в вакууме на протяжении ночи, получая при этом ВА18 (39 г, выход 100%).

Е8ЕМС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 136,1, найдено 136,1.

Раствор 3Н-пиразоло[3,4-Б]пиримидин-4-амина (10 г, 0,074 моль) и Ν-йодсукцинамида (25 г, 0,111 моль) в ДМФА (80 мл) нагревают до 80°С на протяжении ночи в атмосфере аргона. Образовавшееся твердое вещество отделяют фильтрованием и промывают холодным ЕЮН. Продукт сушат в вакууме на протяжении ночи, получая при этом ВА19 (24 г, выход 100%).

Е8ЕМС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 262,0, найдено 262,0.

Е8ЕМС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 304,0, найдено 304,1.

Раствор пинаконового эфира бензолсульфонамид-4-бороновой кислоты (23 мг, 0,08 ммоль) в ЕЮН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-Б]пиримидин-4-амина (20 мг, 0,07 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют РБ(РРй₃)₄ (16 мг, 0,014 ммоль) и насыщенный №ьСО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСИ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА14 (2,2 мг, выход 10%).

Е8ЕМС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 333,1, найдено 333,1.

Раствор 2-метокси-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенола (19 мг, 0,08 ммоль) в ЕЮН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-Б]пиримидин-4-амина (20 мг, 0,07 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют РБ(РРй₃)₄ (16 мг, 0,014 ммоль) и насыщенный №ьСО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСИ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА15 (4,3 мг, выход 20%).

Е8ЕМС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 300,1, найдено 300,2.

Синтез 6-(4-амино-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-Б]пиримидин-3-ил)нафталин-2-ола (ВА17).

Раствор 6-гидроксинафталин-2-ил-2-бороновой кислоты (15 мг, 0,08 ммоль) в ЕЮН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-Б]пиримидин-4-амина (20 мг, 0,07 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют РБ(РРй₃)₄ (16 мг, 0,014 ммоль) и насыщенный №ьСО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСИ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА15 (4,8 мг, выход 23%).

Е8ЕМС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 320,1, найдено 320,1.

Синтез трет-бутил-4-(4-амино-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-Б]пиримидин-3 -ил)-2метоксифенилкарбамата (ВА20).

Раствор 4-Ы-Вос-амино-3-метоксибензолбороновой кислоты (48 мг, 0,18 ммоль) в ЕЮН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-Б]пиримидин-4-амина (50 мг, 0,18 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют РБ(РРй₃)₄ (40 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный №ьСО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСИ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА20.

Е8ЕМС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 399,2, найдено 399,1.

Синтез 3 -(4-амино-3 -метоксифенил)-1-изопропил-1Н-пиразоло [3,4-Б]пиримидин-4-амина (ВА20Б).

Раствор трет-бутил-4-(4-амино-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-Б]пиримидин-3 -ил)-2метоксифенилкарбамата (ВА20) (20 мг, 0,05 ммоль) в СН₂С1₂, ТЕА, §(СН₂)₂, Н₂О (45:45:5:5) (1 мл) перемешивают при комнатной температуре в течение 15 мин. Добавляют NаНСО₃ (2 мл) до тех пор, пока ре

- 18 019961 акционная смесь не станет щелочной. Реакционную смесь экстрагируют Н₂О и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТРА), получая при этом ВА20б.

Синтез 2-амино-5-(4-амино-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-3-ил)фенола (ВА20бб). ВА20 (трет-бутил-4-(4-амино-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-3-ил)-2-метоксифенилкарбамат, 7 мг, 0,018 ммоль) растворяют в СН₂С1₂ (2,5 мл) и перемешивают в атмосфере аргона при комнатной температуре. Медленно шприцем добавляют ВВг₃ (0,500 мл). Реакционную смесь перемешивают на протяжении ночи в атмосфере аргона при комнатной температуре. ВВг₃ удаляют в вакууме и оставшееся твердое вещество очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТРА), получая при этом ВА20бб.

Синтез 5 -(4-амино-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-3 -ил)пиридин-2-карбонитрила (ВА21).

Раствор пинаконового эфира 2-цианопиридин-5-бороновой кислоты (18 мг, 0,08 ммоль) в Е!ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (20 мг, 0,07 ммоль) в ΌΜΕ (12 мл). Добавляют Рб(РРЪ₃)₄ (16 мг, 0,014 ммоль) и насыщенный №ьСО₃, (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТРА), получая при этом ВА21 (2,5 мг, выход 14%).

ΕΞΙ-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 280,1, найдено 280,1.

Синтез 3 -(3 -(бензилокси)-5-фторфенил)-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-4-амина.

Раствор (3-бензилокси-5-фторфенил)бороновой кислоты (29 мг, 5,80 ммоль) в Е!ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (20 мг, 0,07 ммоль) в ΌΜΕ (12 мл). Добавляют Рб(РРЪ₃)₄ (16 мг, 0,014 ммоль) и насыщенный №1₃СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным Ν;·ιΟΊ и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТРА), получая при этом ВА22 (15,6 мг, выход 60%).

ΕΞΙ-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 378,1, найдено 378,0.

Синтез 3 -(4-амино-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-3 -ил)-5-фторфенола (ВА22).

Раствор 3 -(3 -(бензилокси)-5-фторфенил)-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-4-амина (15 мг, 0,04 ммоль) в МеОН (0,9 мл) промывают струей аргона. Осторожно добавляют Рб на активированном угле (10 мл) при выдерживании реакционной смеси в атмосфере аргона. Реакционную смесь промывают струей газообразного Н2 и выдерживают в атмосфере Н2 на протяжении ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь фильтруют через целит и промывают МеОН, получая при этом ВА22 (15 мг, выход 100%).

ΕΞΙ-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 288,1, найдено 288,1.

Синтез 1 -изопропил-3 -(3,4-диметоксифенил)-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-4-амина (ВА23).

Раствор 3,4-диметоксифенилбороновой кислоты (24 мг, 0,13 ммоль) в Ε!ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (20 мг, 0,07 ммоль) в ЭМБ (12 мл). Добавляют Рб(РРЪ₃)₄ (16 мг, 0,014 ммоль) и насыщенный №1₃СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТРА), получая при этом ВА23 (13,1 мг, выход 60%).

ΕΞΙ-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 314,0, найдено 314,1.

Синтез трет-бутил-2-(4-амино-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-3-ил)-5-(бензилокси)1Н-индол-1-карбоксилата (ВА24).

Раствор 5-бензилокси-1-Вос-индол-2-бороновой кислоты (303 мг, 0,83 ммоль) в Ε!ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (100 мг, 0,33 ммоль) в ЭМВ (12 мл). Добавляют Рб(РРЪ₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный №1₃СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным Ν;·ιΟΊ и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают колоночной хроматографией на силикагеле ^ЮАс-гексаны, 5:95], получая при этом ВА24.

ΕΞΙ-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 499,2, найдено 499,2.

Синтез 2-(4-амино-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-3 -ил)-1Н-индол-5-ола (ВА24бб).

ВА24 (3-(4-фтор-3-метоксифенил)-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амин, 30 мг, 0,10 ммоль) растворяют в растворе муравьиной кислоты (4,5 мл, 10 экв.) и НС1 (0,45 мл, 1 экв.). Реакционную смесь нагревают и перемешивают в течение 1 ч в атмосфере аргона. Реакционную смесь затем концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТРА), получая при этом ВА24бб.

ΕΞΙ-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 309,1, найдено 309,1.

Синтез (3 -(4-амино-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-3 -ил)фенил)метанола (ВА26).

Раствор (3-гидроксиметилфенил)бороновой кислоты (24 мг, 0,13 ммоль) в Ε!ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (20 мг, 0,07 ммоль) в ОМШ (12 мл).

- 19 019961

Добавляют Рй(РРй₃)₄ (16 мг, 0,014 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным ЫаС1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕЛ), получая при этом ВА26 (8,4 мг, выход 42%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 283,1, найдено 284,2.

Синтез 3-(4-амино-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-3-ил)-Л-(4,5-дигидротиазол-2ил)бензамида (ВА30).

Раствор [3-((4,5-дигидротиазол-2-ил)карбамоил)фенил]бороновой кислоты (19 мг, 0,08 ммоль) в Е1ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (20 мг, 0,07 ммоль) в ΌΜΕ (12 мл). Добавляют Рй(РРй₃)₄ (16 мг, 0,014 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным ЫаС1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА30 (17,8 мг, выход 67%).

Синтез 1-(4-(4-амино-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-3-ил)фенил)этанона (ВА31).

Раствор 4-ацетилфенилбороновой кислоты (12,7 мг, 0,08 ммоль) в Е1ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (20 мг, 0,07 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Рй(РРй₃)₄ (16 мг, 0,014 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА31 (12,9 мг, выход 62%).

Синтез (3 -(4-амино-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-й]пиримидин-3 -ил)фенил)метанола (ВА32).

Раствор (4-аминокарбонил-3-хлорфенил)бороновой кислоты (16 мг, 0,08 ммоль) в ЕЮН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (20 мг, 0,07 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Рй(РРй₃)₄ (16 мг, 0,014 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА32 (9,7 мг, выход 42%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 331,1, найдено 331,1.

Синтез 5-(4-амино-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-й]пиримидин-3 -ил)-3 -метилтиофен-2карбальдегида (ВА34).

Раствор 5-формил-3-метилтиофен-2-бороновой кислоты (26 мг, 0,14 ммоль) в ЕЮН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (40 мг, 0,13 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Рй(РРй₃)₄ (16 мг, 0,014 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным ЫаС1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА34 (14,7 мг, выход 38%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 302,1, найдено 302,0.

Синтез 5-(4-амино-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-й]пиримидин-3 -ил)фуран-3 -карбальдегида (ВА35).

Раствор 4-формилфуран-2-бороновой кислоты (20 мг, 0,14 ммоль) в ЕЮН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (40 мг, 0,13 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Рй(РРй₃)₄ (16 мг, 0,014 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА35 (13,5 мг, выход 39%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 272,1, найдено 272,1.

Раствор 3-метансульфониламинофенилбороновой кислоты (32 мг, 0,15 ммоль) в ЕЮН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (40 мг, 0,13 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Рй(РРй₃)₄ (16 мг, 0,014 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА38 (24,3 мг, выход 54%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 347,1, найдено 347,0.

Синтез 3 -(4-амино-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-й]пиримидин-3 -ил)бензонитрила (ВА3 9).

Раствор 3-цианофенилбороновой кислоты (23 мг, 0,15 ммоль) в ЕЮН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (40 мг, 0,13 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Рй(РРй₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным ЫаС1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА39 (14,9 мг, выход 41%).

- 20 019961

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 279,1, найдено 279,0.

Синтез N-[4-(4-амино-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-ά]пиримидин-3-ил)фенил]метансульфонамида (ВА40).

Раствор 4-метансульфониламинофенилбороновой кислоты (24 мг, 0,11 ммоль) в ЕЮН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (30 мг, 0,10 ммоль) в ΌΜΕ (12 мл). Добавляют Ρά(ΡΡΗ₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный №ьС’О₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №101 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА40 (0,9 мг, выход 3%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 347,1, найдено 347,0.

Раствор пинаконового эфира бензолсульфонамид-3-бороновой кислоты (31 мг, 0,11 ммоль) в ЕЮН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (30 мг, 0,10 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Ρά(ΡΡΗ₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный №-ьС.’О₃, (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА41 (9,2 мг, выход 28%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 333,1, найдено 333,0.

Раствор пинаконового эфира 5-формилбензо[Ь]тиофен-2-бороновой кислоты (31 мг, 0,11 ммоль) в ЕЮН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (30 мг, 0,10 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Ρά(ΡΡΗ₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный №-ьС.’О₃, (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА42 (15,2 мг, выход 45%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 338,1, найдено 338,0.

Раствор пинаконового эфира №Вос-3-формил-5-индолбороновой кислоты (40 мг, 0,11 ммоль) в ЕЮН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (30 мг, 0,10 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Ρά(ΡΡΗ₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный №1₃С’О₃ (1/9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТЕА). После очистки продукт гидролизуют ТЕА для удаления Вос, получая при этом ВА43.

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 321,1, найдено 321,0.

Раствор бензо[с][1,2,5]оксадиазол-5-бороновой кислоты (18 мг, 0,11 ммоль) в ЕЮН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (30 мг, 0,10 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Ρά(ΡΡΗ₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный №1₃С'О₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА44.

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 296,1, найдено 296,1.

Синтез 2-(4-(4-амино-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-3-ил)фенил)ацетонитрила (ВА45).

Раствор (4-цианометилфенил)бороновой кислоты (18 мг, 0,11 ммоль) в ЕЮН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (30 мг, 0,10 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Ρά(ΡΡ1ι₃).·ι (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный №1₃С'О₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА45.

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 293,1, найдено 293,1.

Раствор (3-цианометилфенил)бороновой кислоты (18 мг, 0,11 ммоль) в ЕЮН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (30 мг, 0,10 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Ρά(ΡΡΗ₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный №1₃С'О₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают

- 21 019961 до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №101 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕЛ), получая при этом ВА46.

ЕШ-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 293,1, найдено 293,1.

Синтез 1-изопропил-3-(4-метоксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-6]пиримидин-4-амина (ВА48).

Раствор (4-метоксифенил)бороновой кислоты (17 мг, 0,11 ммоль) в Е!ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-6]пиримидин-4-амина (30 мг, 0,10 ммоль) в ΌΜΕ (12 мл). Добавляют Р6(РРй₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным ЫаС1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА48 (4,5 мг, выход 16%).

ЕШ-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 284,1, найдено 284,1.

Синтез 1-изопропил-3-(3-метоксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-6]пиримидин-4-амина (ВА49).

Раствор 3-метоксифенилбороновой кислоты (17 мг, 0,11 ммоль) в Е!ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-6]пиримидин-4-амина (30 мг, 0,10 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Р6(РРй₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА49.

ЕШ-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 284,1, найдено 284,0.

Синтез 1-изопропил-3-(пиридин-3-ил)-1Н-пиразоло[3,4-6]пиримидин-4-амина (ВА52).

Раствор 3-пиридинилбороновой кислоты (15 мг, 0,14 ммоль) в Е!ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-6]пиримидин-4-амина (40 мг, 0,13 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Р6(РРй₃)₄ (15 мг, 0,015 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О), получая при этом ВА52.

ЕШ-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 255,1, найдено 255,0.

Синтез 1 -изопропил-3 -(пиримидин-5 -ил) -1Н-пиразоло [3,4-6] пиримидин-4-амина (ВА53).

Раствор 5-пиримидинилбороновой кислоты (15 мг, 0,14 ммоль) в Е!ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-6]пиримидин-4-амина (40 мг, 0,13 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Р6(РРй₃)₄ (15 мг, 0,015 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О), получая при этом ВА53.

ЕШ-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 256,1, найдено 256,1.

Синтез 3 -(2,3-дигидробензо [Ь] [ 1,4]диоксин-6-ил)-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-6]пиримидин-4амина (ВА54).

Раствор 2,3-дигидро-1,4-бензодиоксин-6-илбороновой кислоты (26 мг, 0,14 ммоль) в Е!ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-6]пиримидин-4-амина (40 мг, 0,13 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Р6(РРй₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА54 (6 мг, выход 15%).

ЕШ-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 312,1, найдено 312,0.

Синтез 1 -(3 -(4-амино-1-изопропил-1Н-пиразоло [3,4-6]пиримидин-3 -ил)фенил)этанона (ВА55).

Раствор 3-ацетилфенилбороновой кислоты (23 мг, 0,14 ммоль) в Е!ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-6]пиримидин-4-амина (40 мг, 0,13 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Р6(РРй₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА55 (7 мг, выход 18%).

ЕШ-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 296,1, найдено 296,1.

Синтез 4-(4-амино-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-6]пиримидин-3 -ил)фенола (ВА56).

Раствор 4-гидроксифенилбороновой кислоты (30 мг, 0,14 ммоль) в Е!ОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-6]пиримидин-4-амина (40 мг, 0,13 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Р6(РРй₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА56 (12 мг, выход 32%).

ЕШ-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 270,1, найдено 270,1.

- 22 019961

Синтез 4-(4-амино-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-6]пиримидин-3-ил)-2-фторфенола (ВА59).

Раствор 3-фтор-4-гидроксифенилбороновой кислоты (103 мг, 0,66 ммоль) в ЕЮН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (100 мг, 0,33 ммоль) в ЭМЕ (12 мл). Добавляют Рб(РРй₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный №ьСО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают с применением колоночной хроматографией на силикагеле с обращенной фазой [МеОН-СН₂С1₂, 2:98], получая при этом ВА59 (26 мг, выход 27%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 288, найдено 288.

Синтез 4-(4-амино-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-3 -ил)-3 -метилфенола (ВА60).

Раствор 4-гидрокси-2-метилфенилбороновой кислоты (110 мг, 0,66 ммоль) в ЕЧОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (100 мг, 0,33 ммоль) в ΌΜΕ (12 мл). Добавляют Рб(РРй₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный №ьСО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают колоночной хроматографией на силикагеле [МеОН-СН₂С1₂, 2:98], получая при этом ВА60 (42 мг, выход 22%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 284, найдено 284.

Синтез 3 -(4-фтор-3 -метоксифенил)-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-6] пиримидин-4 -амина (ВА62).

Раствор 4-фтор-3-метоксифенилбороновой кислоты (61 мг, 0,36 ммоль) в ЕЧОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-6]пиримидин-4-амина (90 мг, 0,30 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Р6(РРй₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный №ьСО₃, (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают колоночной хроматографией на силикагеле [МеОН-СН₂С1₂, 2:98], получая при этом ВА62 (40 мг, выход 44%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 302, найдено 302.

Синтез 5-(4-амино-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-6]пиримидин-3-ил)-2-фторфенола (ВА626).

Раствор ВА62 3 -(4-фтор-3 -метоксифенил)-1-изопропил-1Н-пиразоло [3,4-6]пиримидин-4-амина, 30 мг, 0,10 ммоль) растворяют в СН₂С1₂ (5 мл) и перемешивают в атмосфере аргона. Медленно, при перемешивании, шприцем добавляют ВВг₃ (500 мкл, 0,5 моль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 ч, затем концентрируют в вакууме и очищают с применением колоночной хроматографии на силикагеле [МеОН-СН₂С1₂, 2:98], получая при этом ВА626 (23 мг, выход 44%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 288,1, найдено 288,1.

Синтез 3-(2,5-дифтор-4-метоксифенил)-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-6]пиримидин-4-амина (ВА63).

Раствор 2,5-дифтор-4-метоксифенилбороновой кислоты (84 мг, 0,45 ммоль) в ЕЮН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-6]пиримидин-4-амина (54 мг, 0,18 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Р6(РРй₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный №ьСО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают колоночной хроматографией на силикагеле [МеОН-СН₂С1₂, 2:98], получая при этом ВА63 (50 мг, выход 17%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 320,1, найдено 320,0.

Синтез 4-(4-амино-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-6]пиримидин-3-ил)-2,5-дифторфенола (ВА93).

3-(2,5-Дифтор-4-метоксифенил)-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-6]пиримидин-4-амин (ВА63) (20 мг, 0,06 ммоль) растворяют в СН₂С1₂ (2 мл) и медленно шприцем при перемешивании добавляют ВВг₃(0,630 мл, 0,63 моль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре на протяжении ночи, затем концентрируют в вакууме и очищают с применением ОФ-ВЭЖХ [МеС№Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА93 (6,7 мг, выход 35%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 306,1, найдено 306,0.

Синтез 1 -изопропил-3 -(3,4,5-триметоксифенил)-1Н-пиразоло [3,4-6]пиримидин-3 -ил)-4-амина (ВА64).

Раствор 3,4,5-триметоксифенилбороновой кислоты (123 мг, 0,58 ммоль) в ЕЧОН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-6]пиримидин-4-амина (70 мг, 0,23 ммоль) в ЭМЕ (12 мл). Добавляют Р6(РРй₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный №ьСО₃, (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают колоночной хроматографией на силикагеле [МеОН-СН₂С1₂, 2:98], получая при этом ВА64 (70 мг, выход 89%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 344,1, найдено 344,0.

- 23 019961

Синтез 1 -изопропил-3 -(2,3-диметоксифенил)-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-4-амина (ВА65).

Раствор 2,3-диметоксифенилбороновой кислоты (105 мг, 0,58 ммоль) в ЕЮН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (70 мг, 0,23 ммоль) в ΌΜΕ (12 мл). Добавляют Рб(РРй₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный №₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным ΝαΟΙ и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают колоночной хроматографией на силикагеле [МеОН-СН₂С1₂, 2:98], получая при этом ВА65 (63 мг, выход 88%).

Е8ЕМС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 314,1, найдено 314,1.

Синтез 1 -изопропил-3 -(2,4-диметоксипиримидин-5-ил)-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-4-амина (ВА66).

Раствор 2,4-диметоксипиримидин-5-илбороновой кислоты (106 мг, 0,58 ммоль) в ЕЮН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (70 мг, 0,23 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Рб(РРй₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный №ьСО₃, (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают колоночной хроматографией на силикагеле [МеОН-СН₂С1₂, 2:98], получая при этом ВА66.

Е8ЕМС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 316,1, найдено 316,0.

Синтез 1 -циклопентил-3 -(3 -фтор-5-метоксифенил)-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-4-амина (ВА79).

3-Фтор-5-метоксибензойную кислоту (5 г, 0,029 моль) перемешивают в СН₂С1₂ (50 мл) при 0°С в атмосфере аргона. Добавляют ДМФА (9 капель, каталитическое количество) с последующим добавлением оксалилхлорида (12,7 мл, 0,147 моль). Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры, затем перемешивают в атмосфере аргона в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрируют в вакууме, получая при этом 3-фтор-5-метоксибензоилхлорид (ВА67).

Раствор малононитрила (2,87 г, 0,044 моль) в сухом ТГФ (50 мл) перемешивают при 0°С в атмосфере аргона. К раствору в виде кусочков добавляют NаΗ в парафиновом масле (4,64 г, 0,116 моль). 3-Фтор5-метоксибензоилхлорид (ВА67, 0,029 моль) растворяют в 50 мл сухого ТГФ и раствор медленно добавляют к реакционной смеси. Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры и перемешивают в атмосфере аргона в течение 24 ч. Медленно добавляют 1н. НС1 (200 мл), затем реакционную смесь экстрагируют ЕЮАс. Органические фазы объединяют, сушат над сульфатом магния, затем концентрируют в вакууме, получая при этом 2-((3-фтор-5-метоксифенил)(метокси)метилен)малононитрил (ВА69).

2- ((3-Фтор-5-метоксифенил)(метокси)метилен)малононитрил (ВА69, 0,029 моль) перемешивают при ЕЮН (20 мл) при комнатной температуре в атмосфере аргона. Добавляют гидразин (1,4 мл, 29 ммоль) и реакционную смесь оставляют для перемешивания в течение 90 мин. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и сушат с применением вакуумного насоса на протяжении ночи, получая при этом промежуточный 5-амино-3-(3-фтор-5-метоксифенил)-1Н-пиразол-4-карбонитрил (ВА73). Добавляют формамид (20 мл) и реакционную смесь нагревают до 180°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. Реакционную смесь охлаждают и добавляют 6Н₂О (40 мл), вызывая осаждение белого твердого вещества из раствора. Осадок собирают и промывают 6Н₂О. Твердое вещество сушат и очищают колоночной хроматографией на силикагеле [МеОН-СН₂С1₂, 10:90], получая при этом 3-(3-фтор-5-метоксифенил)-1Нпиразоло [3,4-б]пиримидин-4-амин (ВА75).

3- (3-Фтор-5-метоксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амин (ВА75, 100 мг, 0,386 ммоль) растворяют в ДМФА (10 мл). Добавляют К₂СО₃ (250 мг, 1,54 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в атмосфере аргона. Шприцем добавляют йодциклопентан (0,134 мл, 1,16 ммоль) и реакционную смесь перемешивают в течение 2 ч. Твердый К2СО3 удаляют фильтрованием. Растворитель частично удаляют в вакууме. Добавляют цитрат натрия и реакционную смесь экстрагируют ЕЮАс. Органические фазы концентрируют в вакууме и очищают с применением ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА79.

Синтез 1 -циклопентил-3 -(3 -фтор-5-метоксифенил)-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-4-амина (ВА796).

-Циклопентил-3 -(3 -фтор-5-метоксифенил)-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-4-амин (ВА79,

0,386 ммоль) растворяют в СН₂С1₂ (2 мл). Медленно при перемешивании шприцем добавляют ВВг₃ (4 мл, 4 моль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч, затем концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА79 (69 мг, выход 57%).

Синтез 1-циклопентил-3-йод-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (ВА80).

Раствор 3-йод-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (400 мг, 1,53 ммоль) и К₂СО₃ (1 г, 6 ммоль) в ДМФА (5 мл) перемешивают при комнатной температуре в атмосфере аргона. Шприцем добавляют йодциклопентан (1,0 г, 0,0084 моль). Реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в атмосфере аргона в течение 2 ч. Твердый К2СО3 удаляют фильтрованием. Растворитель частично удаляют в вакууме. Добавляют цитрат натрия (50 мл) и реакционную смесь экстрагируют ЕЮАс. Органические фазы концентрируют в вакууме и очищают с применением колоночной хроматографии на силикагеле

- 24 019961 [МеОН-СН₂С1₂, 5:95], получая при этом ВА80 (300 мг, выход 60%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 330,0, найдено 330,0.

Синтез 1 -(3 -(4-амино-1-изопропил-1Н-пиразоло [3,4-а]пиримидин-3 -ил)фенил)этанона (ВА81,

ВА81а и ВА81аа).

Раствор трет-бутил-2-метокси-4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)фенилкарбамата (200 мг, 0,76 ммоль) в ЕЮН (3,3 мл) добавляют к раствору 1-циклопентил-3-йод-1Н-пиразоло[3,4а]пиримидин-4-амина (ВА80, 100 мг, 0,30 ммоль) в ΌΜΕ (12 мл). Добавляют Ра(РРй₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный №ьСО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают с применением колоночной хроматографии на силикагеле [МеОН-СН₂С1₂, 5:95], получая при этом ВА81. ВА81 растворяют в смеси 50:50 СН₂С1₂:ТЕА и перемешивают в течение 1 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и очищают с применением ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА81а. ВА81а растворяют в СН₂С1₂ (2 мл) и медленно шприцем при перемешивании добавляют ВВг₃ (4 мл, 4 моль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч, затем концентрируют в вакууме и очищают с применением ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА81аа.

Синтез 3-(3-бром-5-метоксифенил)-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-а]пиримидин-4-амина (ВА85).

Раствор 2-(3-бром-5-метоксифенил)-4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолана (137 мг, 0,43 ммоль) в ЕЮН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-а]пиримидин-4-амина (65 мг, 0,216 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Ра(РРй₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным ЫаС1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА85 (28 мг, выход 36%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 362,1, найдено 362,0.

Синтез 3 -(4-амино-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-а]пиримидин-3 -ил)-5-бромфенола (ВА87).

3-(3-Бром-5-метоксифенил)-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-а]пиримидин-4-амин (ВА85, 0,1 ммоль) растворяют в СН₂С1₂ (1 мл) и при перемешивании медленно шприцем добавляют ВВг₃ (1 мл, 1 моль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 35 мин, затем концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА87 (10,7 мг, выход 31%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 348,0, найдено 348,0.

Синтез трет-бутил-5-(4-амино-1-изопропил-1Н-пиразоло [3,4-а]пиримидин-3 -ил)-1Н-индол-1 карбоксилата (ВА86).

Раствор трет-бутил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-индол-1-карбоксилата (212 мг, 0,61 ммоль) в ЕЮН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4а]пиримидин-4-амина (75 мг, 0,25 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Ра(РРй₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным ЫаС1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ: Н₂О), получая при этом ВА86 (9,3 мг, выход 9%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 362,1, найдено 362,0.

Синтез 3-(1Н-индол-5-ил)-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-а]пиримидин-4-амина (ВА89). трет-Бутил-5-(4-амино-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-а]пиримидин-3-ил)-1Н-индол-1-карбоксилат (ВА86, 9 мг, 0,022 ммоль) растворяют в смеси 50:50 СН₂С1₂:ТЕА и перемешивают в течение 1 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и очищают с применением ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА89 (4,8 мг, выход 75%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 293,1, найдено 293,0.

Синтез трет-бутил-5-(4-амино-1-циклопентил-1Н-пиразоло [3,4-а]пиримидин-3 -ил)-1Н-индол-1 карбоксилата (ВА88).

Раствор трет-бутил-5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-индол-1-карбоксилата (130 мг, 0,38 ммоль) в ЕЮН (3,3 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4а]пиримидин-4-амина (50 мг, 0,15 ммоль) в ОМЕ (12 мл). Добавляют Ра(РРй₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (1,9 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным ЫаС1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О), получая при этом ВА88.

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ вычислено 419,2, найдено 419,1.

Синтез 3-(1Н-индол-5-ил)-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-а]пиримидин-4-амина (ВА94). трет-Бутил-5-(4-амино-1-циклопентил-1Н-пиразоло [3,4-а]пиримидин-3 -ил)-1Н-индол-1 карбоксилат (ВА88) растворяют в смеси 50:50 СН₂С1₂:ТЕА и перемешивают в течение 1 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и очищают с применением ОФ-ВЭЖХ

- 25 019961 (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕЛ), получая при этом ВА89 (6,3 мг).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 319,1, найдено 319,2.

Синтез 1 -циклопентил-3 -(3,4-диметоксифенил)-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-4-амина (ВА90).

Раствор 3,4-диметоксифенилбороновой кислоты (41 мг, 0,23 ммоль) в ЕЮН (1,65 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (30 мг, 0,09 ммоль) в ЭМЕ (6 мл). Добавляют Рб(РРН₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (0,95 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным ЫаС1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О), получая при этом ВА90 (8,4 мг, выход 28%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 340,2, найдено 340,1.

Синтез 3-(1Н-индол-4-ил)-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (ВА91).

Раствор 1Н-индол-4-ил-4-бороновой кислоты (40 мг, 0,25 ммоль) в ЕЮН (1,65 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (30 мг, 0,1 ммоль) в ЭМЕ (6 мл). Добавляют Рб(РРН₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (0,95 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА91 (14,6 мг, выход 50%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 293,1, найдено 293,1.

Синтез 1-циклопентил-3-(1Н-индол-4-ил)-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (ВА92).

Раствор 1Н-индол-4-ил-4-бороновой кислоты (30 мг, 0,19 ммоль) в ЕЮН (1,65 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (25 мг, 0,076 ммоль) в ЭМЕ (6 мл). Добавляют Рб(РРН₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (0,95 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №1С1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА92 (23 мг, выход 95%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 319,2, найдено 319,1.

Синтез 3 -(2,3-дигидробензофуран-5-ил)-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-4-амина (ВА95).

Раствор 2,3-дигидро-1-бензофуран-5-илбороновой кислоты (38 мг, 0,23 ммоль) в ЕЮН (1,65 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (30 мг, 0,1 ммоль) в ЭМЕ (6 мл). Добавляют Рб(РРН₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (0,95 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным ЫаС1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА95 (15,7 мг, выход 59%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 296,1, найдено 296,1.

Синтез 3 -(бензофуран-5 -ил)-1-изопропил-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-4-амина (ВА96).

Раствор 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1-бензофурана (56 мг, 0,23 ммоль) в ЕЮН (1,65 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (30 мг, 0,1 ммоль) в ЭМЕ (6 мл). Добавляют Рб(РРН₃)₄ (30 мг, 0,03 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (0,95 мл) и реакционную смесь нагревают до 80°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным ЫаС1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА96 (19 мг, выход 72%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 296,1, найдено 296,1.

Синтез 5-(4-амино-1-циклопентил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-3-ил)-2-этоксифенола (ВА98).

1-Циклопентил-3-(4-этокси-3-метоксифенил)-1Н-пиразо[3,4-б]пиримидин-4-амин (ΖΚ359, 25 мг, 0,071 ммоль) растворяют в СН₂С1₂ (5 мл) и перемешивают при -10°С в атмосфере аргона. Спустя 30 мин реакционную смесь нагревают до 0°С и перемешивают в течение 2,5 ч. Реакционную смесь перемешивают в течение дополнительных 4 ч при комнатной температуре, затем концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА98 (3 мг, выход 13%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 340,1, найдено 340,1.

Синтез 2-(4-(4-амино-1-изопропил-1Н-пиразо[3,4-б]пиримидин-3-ил)-2метоксифениламино)пропан-1-ола (ВА99).

3-(4-Амино-3-метоксифенил)-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амин (ВА20б) (30 мг, 0,10 ммоль) растворяют в ДМФА (0,400 мл). Добавляют К₂СО₃ (55 мг, 0,4 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при 70°С. Добавляют 3-бром-1-пропанол (0,050 мл, 0,6 ммоль) и реакционную смесь перемешивают на протяжении ночи. Твердый К₂СО₃ удаляют фильтрованием. Растворитель частично удаляют в вакууме. Добавляют цитрат натрия (50 мл) и реакционную смесь экстрагируют насыщенным №С1 и СН₂С1₂. Органические фазы концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА99 (8,4 мг, выход 24%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 357,2, найдено 357,1.

- 26 019961

Синтез 3-йод-1-метил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (ВА109).

Раствор 3-йод-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (2 г, 7,69 ммоль) и К₂СО₃ (4,25 г, 30,8 ммоль) в ДМФА (5 мл) перемешивают при комнатной температуре в атмосфере аргона. Шприцем добавляют йодметан (1,17 мл, 7,69 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в атмосфере аргона при комнатной температуре в течение 2 ч. Твердый К₂СО₃ удаляют фильтрованием. Растворитель частично удаляют в вакууме. Добавляют цитрат натрия (50 мл) и реакционную смесь экстрагируют Е1ОАс. Органические фазы концентрируют в вакууме и очищают с применением колоночной хроматографии на силикагеле [МеОН-СН₂С1₂, 5:95], получая при этом ВА109 (212 мг, выход 10%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 275,9, найдено 275,9.

Общая синтетическая схема для ВА102, ВА105-108, ВА110, ВА118, ВА128-ВА135, ВА137, ВА139140, ВА143, ВА147, ВА149-ВА152, ВА156, ВА158, ВА160-ВА162. Раствор бороновой кислоты (2,5 экв.) в Е1ОН (1,65 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (ВА12, 1 экв.) в ΌΜΕ (6 мл). Добавляют Рб(РРй₃)₄ (15 мг, 0,15 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (0,95 мл) и реакционную смесь нагревают до 90°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным №101 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом требуемые продукты. Продукты анализируют ЖХ-МС.

Общая синтетическая схема для ВА112, ВА115, ВА121, ВА122, ВА124, ВА136, ВА138, ВА141 и ВА144. Раствор бороновой кислоты (2,5 экв.) в Е1ОН (1,65 мл) добавляют к раствору 1-циклопентил-3йод-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (ВА80, 1 экв.) в ОМЕ (6 мл). Добавляют Рб(РРй₃)₄ (15 мг, 0,15 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃ (0,95 мл) и реакционную смесь нагревают до 90°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным ЫаС1 и СН2С12. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1 % ТЕА), получая при этом требуемые продукты. Продукты анализируют ЖХ-МС.

Общая синтетическая схема для ВА111, ВА114, Ва116, ВА117, ВА119 и ВА120. Раствор бороновой кислоты (2,5 экв.) в Е1ОН (1,65 мл) добавляют к раствору 3-йод-1-метил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-

4-амина (ВА109, 1 экв.) в ОМЕ (6 мл). Добавляют Рб(РРй₃)₄ (15 мг, 0,15 ммоль) и насыщенный Ыа₂СО₃(0,95 мл) и реакционную смесь нагревают до 90°С в атмосфере аргона на протяжении ночи. После охлаждения реакционную смесь экстрагируют насыщенным ЫаС1 и СН₂С1₂. Органические фазы объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ: Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом требуемые продукты. Продукты анализируют ЖХ-МС.

Синтез 6-(4-амино-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-3-ил)хинолин-2-амина (ВА146).

3- (2-Хлорхинолин-6-ил)-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амин (ВА130, 50 мг, 0,15 ммоль), ацетамид (174 мг, 3,0 ммоль) и К2СО3 (104 мг, 0,75 ммоль) смешивают и нагревают до 200°С в атмосфере аргона в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждают, затем экстрагируют Н2О и СН2С12. Органические слои объединяют, концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА146 (22 мг, выход 46%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 320,2, найдено 320,4.

Синтез 3 -(3 -амино-1Н-индазол-6-ил)-1-изопропил-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-4-амина (ВА154).

4- (4-Амино-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-3-ил)-2-фторбензонитрил (ВА150, 20 мг, 0,07 ммоль) растворяют в н-ВиОН (2 мл). Добавляют моногидрат гидразина (0,400 мл) и реакционную смесь нагревают до 110°С в атмосфере аргона и оставляют для перемешивания на протяжении ночи. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА154 (15 мг, выход 70%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 309,2, найдено 309,4.

Синтез 4-(4-амино-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-3-ил)-2-гидроксибензонитрила (ВА1552).

4- (4-Амино-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-3-ил)-2-фторбензонитрил (ВА150, 25 мг, 0,1 ммоль) растворяют в ДМФА (1 мл). Добавляют 1-ВиОК (24 мг, 0,21 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре на протяжении ночи. Реакционную смесь затем нагревают до 150°С в течение 24 ч. Реакционную смесь затем концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА1552 (21 мг, выход 89%).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 295,1, найдено 295,4.

Синтез 3 -(3 -аминобензо [б]изоксазол-5-ил)-1 -изопропил-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-4-амино (ВА1572) и 5-(4-амино-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-3-ил)-2-гидроксибензонитрила (ВА1573).

5- (4-Амино-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-3-ил)-2-фторбензонитрил (ВА151, 20 мг, 0,07 ммоль) растворяют в ДМФА (1 мл). Добавляют 1-ВиОК (24 мг, 0,21 ммоль) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре на протяжении ночи. Реакционную смесь затем нагревают до 150°С в течение 24 ч. Реакционную смесь затем концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеСЫ:Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом

ВА1572 (7 мг): Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 295,1, найдено 295,4 и

- 27 019961

ВА1573 (8 мг): ΕδI-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 310,1, найдено 310,4.

Синтез 3-(3-амино-1Н-индазол-6-ил)-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (ВА159).

4-(4-Амино-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-3-ил)-2,6-дифторбензальдегид (ВА149, 20 мг, 0,063 ммоль) растворяют в н-ВиОН (1 мл). Добавляют моногидрат гидразина (0,400 мл) и реакционную смесь нагревают до 110°С в атмосфере аргона и оставляют для перемешивания в течение 2,5 ч. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ВА159 (15 мг, выход 77%).

ΕδI-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 312,1, найдено 312,4.

Синтез 4-хлор-7-метил-5-(нафталин-2-ил)-7Н-пирроло[2,3-й]пиримидина (ΖΚ102).

Раствор 4-хлор-5-йод-7-метил-7Н-пирроло[2,3-й]пиримидина (19 мг, 0,065 ммоль), нафталин-2-ил-

2- бороновой кислоты (12,2 мг, 0,071 ммоль), №1₃С’О₃ (68,9 мг, 0,65 ммоль) и РйС1₂ (άρρί) (26,5 мг, 0,00325 ммоль) в ТГФ (3 мл) нагревают для кипячения с обратным холодильником в атмосфере аргона в течение ночи. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ΖΚ102 (2 мг, выход 26%).

ΕδI-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 294,1, найдено 294,3.

Синтез 4-хлор-7-метил-5-(3-бифенил)-7Н-пирроло[2,3-й]пиримидина (ΖΚ103).

Раствор 4-хлор-5-йод-7-метил-7Н-пирроло[2,3-й]пиримидина (10 мг, 0,034 ммоль),

3- бифенилбороновой кислоты (7,4 мг, 0,038 ммоль), №ьС’О₃ (36,1 мг, 0,34 ммоль) и РйС1₂ (άρρί) (1,4 мг, 0,0017 ммоль) в ТГФ (10 мл) нагревают для кипячения с обратным холодильником в атмосфере аргона в течение ночи. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ΖΚ103 (3 мг, выход 28%).

ΕδI-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 320,1, найдено 320,0.

Синтез 3-(4-трет-бутилфенил)-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (ΖΚ125).

1-трет-Бутил-3-(4-трет-бутилфенил)-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амин растворяют в растворе муравьиной кислоты (1 мл) и концентрированной НС1 (0,1 мл) и нагревают для кипячения с обратным холодильником в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТЕА), получая при этом ΖΚ125 (количественный выход).

ΕδI-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 268,2, найдено 268,4.

Синтез 3-(3-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (ΖΚ126).

1-трет-Бутил-3-(3-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амин (50 мг, 0,16 ммоль) растворяют в растворе муравьиной кислоты (5 мл) и концентрированной НС1 (0,1 мл) и нагревают для кипячения с обратным холодильником в течение 2,5 ч. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТЕА).

ΕδI-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 304,1, найдено 304,3.

Синтез 3-м-толил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (ΖΚ127).

1-трет-Бутил-3-м-толил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амин (23 мг, 0,1 ммоль) растворяют в растворе муравьиной кислоты (1 мл) и концентрированной НС1 (0,3 мл) и нагревают для кипячения с обратным холодильником в течение 2,5 ч. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТЕА).

ΕδI-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 226,1, найдено 226,3.

Синтез 3-(3-нитрофенил)-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (ΖΚ128).

1-трет-Бутил-3-(3-нитрофенил)-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амин (23 мг, 0,055 ммоль) растворяют в растворе муравьиной кислоты (5 мл) и концентрированной НС1 (0,1 мл) и нагревают для кипячения с обратным холодильником в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТЕА).

ΕδI-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 257,1, найдено 257,3.

Синтез 3-(бензо[й][1,3]диоксол-6-ил)-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (ΖΚ129).

-трет-Бутил-3 -(бензо [ά] [ 1,3]диоксол-6-ил)-1Н-пиразоло [3,4-й]пиримидин-4-амин (21 мг,

0,082 ммоль) растворяют в растворе муравьиной кислоты (1 мл) и концентрированной НС1 (0,2 мл) и нагревают для кипячения с обратным холодильником в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТЕА).

ΕδI-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 256,1, найдено 256,3.

Синтез 3-(4-нитрофенил)-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (ΖΚ130).

1-трет-Бутил-3-(4-нитрофенил)-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амин (21 мг, 0,082 ммоль) растворяют в растворе муравьиной кислоты (2 мл) и концентрированной НС1 (0,2 мл) и нагревают для кипячения с обратным холодильником в течение 30 мин. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТЕА).

ΕδI-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 257,1, найдено 257,3.

Синтез 3-(3-(2,6-дихлорбензилокси)фенил)-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (ΖΚ131).

-трет-Бутил-3 -(3 -(2,6-дихорбензилокси)фенил)-1Н-пиразоло [3,4-й]пиримидин-4-амин (19,5 мг, 0,05 ммоль) растворяют в растворе муравьиной кислоты (2 мл) и концентрированной НС1 (0,2 мл) и нагревают для кипячения с обратным холодильником в течение 30 мин. Реакционную смесь концентриру

- 28 019961 ют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТРА).

Е8ГМС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 386,1, найдено 386,2.

Синтез 3-(2,3-диметилфенил)-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (ΖΚ132).

1-трет-Бутил-3-(2,3-диметилфенил)-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амин (34 мг, 0,14 ммоль) растворяют в растворе муравьиной кислоты (2 мл) и концентрированной НС1 (0,2 мл) и нагревают для кипячения с обратным холодильником в течение 30 мин. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТРА).

Е8ГМС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 240,1, найдено 240,4.

Синтез 2-(4-амино-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-3-ил)фенола (ΖΚ133).

1-трет-Бутил-2-(4-амино-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-3-ил)фенол (5 мг, 0,014 ммоль) растворяют в растворе муравьиной кислоты (2 мл) и концентрированной НС1 (0,2 мл) и нагревают для кипячения с обратным холодильником в течение 30 мин. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТРА).

Е8ГМС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 228,1, найдено 228,3.

Синтез 3-о-толил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (ΖΚ134).

1-трет-Бутил-3-о-толил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амин растворяют в растворе муравьиной кислоты (2 мл) и концентрированной НС1 (0,2 мл) и нагревают для кипячения с обратным холодильником в течение 30 мин. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТРА).

Е8ГМС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 226,1, найдено 226,3.

Синтез 3-(3-аминофенил)-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (ΖΚ135).

1-трет-Бутил-3-(3-аминофенил)-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амин растворяют в растворе муравьиной кислоты (2 мл) и концентрированной НС1 (0,2 мл) и нагревают для кипячения с обратным холодильником в течение 30 мин. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТРА).

Е8ГМС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 227,1, найдено 227,3.

Синтез 3-(3-(бензилокси)фенил)-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (ΖΚ136).

1-трет-Бутил-3-(3-(бензилокси)фенил)-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амин (19 мг, 0,052 ммоль) растворяют в растворе муравьиной кислоты (1 мл) и концентрированной НС1 (0,1 мл) и нагревают для кипячения с обратным холодильником в течение 30 мин. Реакция дает смесь ΖΚ136 и 3-(4-амино-1Нпиразоло[3,4-й]пиримидин-3-ил)фенола (ΖΚ138). Реакционную смесь концентрируют в вакууме и продукты очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТРА).

ΖΚ136: Е8ГМС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 318,1, найдено 318,3.

ΖΚ138: Е8ГМС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 228,1, найдено 228,3.

Синтез 3-(4-аминофенил)-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (ΖΚ137).

1-трет-Бутил-3-(4-аминофенил)-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амин (9 мг, 0,032 ммоль) растворяют в растворе муравьиной кислоты (1 мл) и концентрированной НС1 (0,2 мл) и нагревают для кипячения с обратным холодильником. Реакционной смеси дают возможность реагировать 30 мин, затем концентрируют в вакууме и продукты очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТРА).

Е8ГМС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 227,1, найдено 227,3.

Синтез 3-(1,2,3,4-тетрагидронафталин-2-ил)-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (ΖΚ139).

-трет-Бутил-3 -(1,2,3,4-тетрагидронафталин-2-ил)-1Н-пиразоло [3,4-й]пиримидин-4-амин (9 мг, 0,029 ммоль) растворяют в растворе муравьиной кислоты (1 мл) и концентрированной НС1 (0,1 мл) и нагревают для кипячения с обратным холодильником. Реакционной смеси дают возможность реагировать 30 мин, затем концентрируют в вакууме и продукты очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТРА).

Е8ГМС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 266,1, найдено 266,4.

Синтез 5-йод-7-метил-7Н-пирроло[2,3-й]пиримидин-4-амина (ΖΚ140).

4-Хлор-5-йод-7-метил-7Н-пирроло[2,3-й]пиримидин (90 мг, 0,31 ммоль) растворяют в растворе 7н. NНз/ΜеОН и нагревают в герметизированной трубке при 110°С на протяжении ночи. Реакционную смесь концентрируют в вакууме, получая при этом коричневое/не совсем белое твердое вещество.

Синтез 3-п-толил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (ΖΚ141).

1-трет-Бутил-3-п-толил-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амин растворяют в растворе муравьиной кислоты (1 мл) и концентрированной НС1 (0,1 мл) и нагревают для кипячения с обратным холодильником. Реакционной смеси дают возможность реагировать 30 мин, затем концентрируют в вакууме и продукты очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТРА).

Е8ГМС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 226,1, найдено 226,3.

Синтез 3-(4-бифенил)-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амина (ΖΚ142).

1-трет-Бутил-3-(4-бифенил)-1Н-пиразоло[3,4-й]пиримидин-4-амин (22 мг, 0,066 ммоль) растворяют в растворе муравьиной кислоты (1 мл) и концентрированной НС1 (0,1 мл) и нагревают для кипячения с обратным холодильником. Реакционной смеси дают возможность реагировать 30 мин, затем концентрируют в вакууме и продукты очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТРА).

Е8ГМС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 288,1, найдено 288,3.

- 29 019961

Синтез 3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (2К143).

1- трет-Бутил-3-(4-феноксифенил)-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амин (19 мг, 54,1 ммоль) растворяют в растворе муравьиной кислоты (1 мл) и концентрированной НС1 (0,1 мл) и нагревают для кипячения с обратным холодильником. Реакционной смеси дают возможность реагировать 30 мин, затем концентрируют в вакууме и продукты очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТРА).

ΕΞΙ-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 304,1, найдено 304,3.

Синтез 1-бензил-3-(нафталин-2-ил)-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (2К147).

3-(Нафталин-2-ил)-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амин (110 мг, 0,42 ммоль) растворяют в ДМФА (2 мл) и добавляют К₂СО₃ (220 мг, 1,6 ммоль) и бензилбромид (71,8 мг, 0,42 ммоль). Реакционную смесь нагревают до 60°С на протяжении ночи, затем охлаждают до комнатной температуры и выливают в воду (30 мл). Осадок собирают фильтрованием и затем очищают далее хроматографией на силикагеле (5% МеОН/СН2С12), получая при этом белое твердое вещество.

Синтез 5-(4-(бензилокси)фенил)-7-метил-7Н-пирроло[2,3-б]пиримидин-4-амина (2К150).

Раствор 5-йод-7-метил-7Н-пирроло[2,3-б]пиримидин-4-амина (5 мг, 0,018 ммоль),

4-(бензилокси)фенилбороновой кислоты (21 мг, 0,091 ммоль), К₂СО₃ (19,3 мг, 0,091 ммоль) и Рб(РРЪ₃)₄(12,5 мг, 0,011 ммоль) в ДМФА (3 мл) нагревают до 60°С в атмосфере аргона. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТРА).

ΕΞΙ-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 331,1, найдено 331,3.

Синтез 5-(3-бифенил)-7-метил-7Н-пирроло[2,3-б]пиримидин-4-амина (2К151).

Раствор 5-йод-7-метил-7Н-пирроло[2,3-б]-пиримидин-4-амин (5 мг, 0,018 ммоль), 3-бифенилбороновой кислоты (18 мг, 0,091 ммоль), К₃РО₄ (19,3 мг, 0,091 ммоль) и Рб(РРЪ₃)₄ (12,5 мг, 0,011 ммоль) в ДМФА (3 мл) нагревают до 60°С в атмосфере аргона. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТРА).

ΕΞΙ-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 301,1, найдено 301,3.

Синтез 5-(бензо[Ь]тиофен-2-ил)-7-метил-7Н-пирроло[2,3-б]пиримидин-4-амина (2К152).

Раствор 5-йод-7-метил-7Н-пирроло[2,3-б]пиримидин-4-амина (5 мг, 0,018 ммоль), бензо[Ь]тиофен-

2-ил-2-бороновой кислоты (16 мг, 0,091 ммоль), К₃РО₄ (19,3 мг, 0,091 ммоль) и Рб(РРЪ₃)₄ (12,5 мг, 0,011 ммоль) в ДМФА (3 мл) нагревают до 60°С в атмосфере аргона. Реакционную смесь концентрируют в вакууме и очищают ОФ-ВЭЖХ (МеС№Н₂О:0,1% ТРА).

ΕΞΙ-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 281,1, найдено 281,3.

Синтез 3-(нафталин-2-ил)-1-фенетил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (2К155).

2- (Метокси(нафталин-6-ил)метилен)малононитрил (100 мг, 0,43 ммоль) и гидрохлорид фенетилгидразина (58,5 мг, 0,43 ммоль) растворяют в Ε!ОН (3 мл) и ТΕА (60 мкл, 0,43 ммоль) и раствор нагревают для кипячения с обратным холодильником в течение 1 ч. Продукт экстрагируют диэтиловым простым эфиром и концентрируют в вакууме. Данный концентрат затем растворяют в формамиде (10 мл) и нагревают до 160-180°С на протяжении ночи. На следующий день реакционную смесь охлаждают, выливают в воду и осажденный продукт собирают фильтрованием.

ΕΞΙ-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 366,2, найдено 366,2.

Синтез 1 -изопропил-3 -(нафталин-2-ил)-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-4-амина (ΖΕ156).

2- (Метокси(нафталин-6-ил)метилен)малононитрил (100 мг, 0,43 ммоль) и гидрохлорид изопропилгидразина (47,3 мг, 0,43 ммоль) растворяют в Ε!ОН (3 мл) и ТΕА (1 экв.) и раствор нагревают для кипячения с обратным холодильником в течение 1 ч. Продукт экстрагируют диэтиловым простым эфиром и концентрируют в вакууме. Данный концентрат затем растворяют в формамиде (10 мл) и нагревают до 160-180°С на протяжении ночи. На следующий день реакционную смесь охлаждают, выливают в воду и осажденный продукт собирают фильтрованием.

ΕΞΙ-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 304,2, найдено 304,2.

Синтез 1 -этил-3 -(нафталин-2-ил)-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-4-амина (ΖΕ157).

3- (Нафталин-2-ил)-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амин (100 мг, 0,42 ммоль) растворяют в ДМФА (3 мл) и добавляют К₂СО₃ (220 мг, 1,6 ммоль) и этилйодид (37 мкл, 0,46 ммоль). Реакционную смесь нагревают до 60°С на протяжении ночи, затем охлаждают до комнатной температуры и выливают в воду (30 мл). Осадок собирают фильтрованием.

ΕΞΙ-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 290,1, найдено 290,2.

Синтез 1 -циклопентил-3 -(нафталин-2-ил)-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-4-амина (ΖΕ158).

3-(Нафталин-2-ил)-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амин (100 мг, 0,42 ммоль) растворяют в ДМФА (3 мл) и добавляют К₂СО₃ (220 мг, 1,6 ммоль) и циклопентилбромид (49,5 мкл, 0,46 ммоль). Реакционную смесь нагревают до 60°С на протяжении ночи, затем охлаждают до комнатной температуры и выливают в воду (30 мл). Осадок собирают фильтрованием.

ΕΞΙ-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 330,2, найдено 330,2.

Синтез 1 -аллил-3 -(нафталин-2-ил)-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-4-амина (ΖΕ159).

3-(Нафталин-2-ил)-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амин (50 мг, 0,21 ммоль) растворяют в ДМФА (1,5 мл) и добавляют К₂СО₃ (110 мг, 0,8 ммоль) и аллилйодид (23 мкл, 0,25 ммоль). Реакционную смесь нагревают до 60°С на протяжении ночи, затем охлаждают до комнатной температуры и выливают в воду

- 30 019961 (30 мл). Осадок собирают фильтрованием.

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 302,1, найдено 302,2.

Синтез 2-(4-амино-3-(нафталин-2-ил)-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-1-ил)ацетамида (ΖΚ162).

3-(Нафталин-2-ил)-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амин (50 мг, 0,21 ммоль) растворяют в ДМФА (1,5 мл) и добавляют К₂СО₃ (110 мг, 0,8 ммоль) и йодацетамид (46 мг, 0,25 ммоль). Реакционную смесь нагревают до 60°С на протяжении ночи, затем охлаждают до комнатной температуры и выливают в воду (30 мл). Осадок собирают фильтрованием.

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 319,1, найдено 319,2.

Синтез 1-(циклопропилметил)-3-(нафталин-2-ил)-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (ΖΚ165).

3-(Нафталин-2-ил)-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амин (50 мг, 0,21 ммоль) растворяют в ДМФА (1,5 мл) и добавляют К₂СО₃ (110 мг, 0,8 ммоль) и циклопропилметилбромид (22 мкл, 0,25 ммоль). Реакционную смесь нагревают до 60°С на протяжении ночи, затем охлаждают до комнатной температуры и выливают в воду (30 мл). Осадок собирают фильтрованием.

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 316,2, найдено 316,2.

Синтез 1-изопентил-3-(нафталин-2-ил)-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (ΖΚ161).

3-(Нафталин-2-ил)-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амин (50 мг, 0,21 ммоль) растворяют в ДМФА (1,5 мл) и добавляют К₂СО₃ (110 мг, 0,8 ммоль) и изобутилбромид. Реакционную смесь нагревают до 60°С на протяжении ночи, затем охлаждают до комнатной температуры и выливают в воду (30 мл). Осадок собирают фильтрованием.

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 332,2, найдено 332,3.

Синтез 3 -(нафталин-2-ил)-1-((Е)-3 -фенилпроп-1 -енил)-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-4-амина (ΖΚ167).

3-(Нафталин-2-ил)-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амин (50 мг, 0,21 ммоль) растворяют в ДМФА (1,5 мл) и добавляют К₂СО₃ (110 мг, 0,8 ммоль) и 1-((Е)-3-бромпроп-1-енил)бензол. Реакционную смесь нагревают до 60°С на протяжении ночи, затем охлаждают до комнатной температуры и выливают в воду (30 мл). Осадок собирают фильтрованием.

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 378,2, найдено 378,2.

Синтез 3-(нафталин-2-ил)-1-(проп-2-инил)-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (ΖΚ168).

3-(Нафталин-2-ил)-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амин (50 мг, 0,21 ммоль) растворяют в ДМФА (1,5 мл) и добавляют 1<₂СО₃ (110 мг, 0,8 ммоль) и пропаргилбромид. Реакционную смесь нагревают до 60°С на протяжении ночи, затем охлаждают до комнатной температуры и выливают в воду (30 мл). Осадок собирают фильтрованием.

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 300,1, найдено 300,2.

Синтез 3-этокси-4-метоксибензоилхлорида (ΖΚ299).

3-Этокси-4-метоксибензойную кислоту (5 г, 25,5 ммоль) добавляют к раствору СН2С12 (40 мл) и бензола (20 мл) в высушенной пламенем круглодонной колбе на 150 мл. Добавляют безводный ДМФА (9 капель) и раствор охлаждают на льду. По каплям добавляют оксалилхлорид и реакционной смеси затем дают возможность нагреться до комнатной температуры. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 90 мин, затем концентрируют в вакууме, получая при этом не совсем белое твердое вещество. Твердое вещество помещают в линию высокого вакуума на 2 ч и затем применяют на следующей стадии без дополнительной характеризации.

Синтез 2-((3-этокси-4-метоксифенил)(гидрокси)метилен)малононитрила (ΖΚ301).

№1Н (2,2 г, 56 ммоль, 60% дисперсия в парафиновом масле) добавляют к раствору малононитрила (1,85 г, 28 ммоль) в ТГФ (30 мл) на льду. 3-Этокси-4-метоксибензоилхлорид (25,5 ммоль) растворяют в ТГФ (50 мл) и по каплям шприцем при 0°С добавляют первый раствор. Лед затем убирают и реакционной смеси дают возможность реагировать при комнатной температуре в течение 60 мин. Добавляют 1н. НС1 (100 мл) и раствор экстрагируют три раза ЕЮАс. Органическую фазу сушат Мд8О₄, фильтруют и концентрируют в вакууме, получая при этом оранжевое твердое вещество, которое применяют на следующей стадии без дополнительной характеризации.

Синтез 2-((3-этокси-4-метоксифенил)(метокси)метилен)малононитрила (ΖΚ302).

2-((3-Этокси-4-метоксифенил)(гидрокси)метилен)малононитрил (25,5 ммоль) и бикарбонат натрия (17 г, 204 ммоль) смешивают в растворе 1,4-диоксана (48 мл) и воды (8 мл). Медленно добавляют диметилсульфат (17 мл, 178 ммоль) и реакционную смесь нагревают до 80-90°С в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, добавляют воду и водную фазу экстрагируют три раза ЕЮАс (200 мл). Органические фазы объединяют, сушат Мд8О₄ и фильтруют, получая при этом красное масло. Масло очищают хроматографией на силикагеле (10% ЕЮАс/гексаны, К~0,1), получая при этом белое твердое вещество (3,59 г, выход 54,5% после трех стадий).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 259,1, найдено 259,0.

Синтез 5-амино-3-(3-этокси-4-метоксифенил)-1-изопропил-1Н-пиразол-4-карбонитрила (ΖΚ303).

2-((3-Этокси-4-метоксифенил)(метокси)метилен)малононитрил (200 мг, 0,78 ммоль), гидрохлорид изопропилгидразина (86 мг, 0,78 ммоль) и триэтиламин (0,10 мл, 0,78 ммоль) смешивают в этаноле (5 мл) и нагревают для кипячения с обратным холодильником в течение 90 мин. Реакционную смесь затем ох

- 31 019961 лаждают до комнатной температуры, добавляют воду и водную фазу экстрагируют три раза ЕЮАс. Органическую фазу концентрируют и переносят на следующую стадию без дополнительной характеризации.

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 301,1, найдено 301,0.

Синтез 3-(3-этокси-4-метоксифенил)-1-изопропил-1Н-пиразоло[3,4-б]пиримидин-4-амина (ΖΚ305).

5-Амино-3-(3-этокси-4-метоксифенил)-1-изопропил-1Н-пиразол-4-карбонитрил растворяют в формамиде (20 мл) и нагревают до 180°С на протяжении ночи. На следующий день реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, добавляют воду и осадок собирают фильтрованием. Осадок затем растворяют в смеси СН2С12/МеОН и раствор пропускают через слой силикагеля. Продукт затем лиофилизируют из бензола, получая при этом не совсем белое твердое вещество (48 мг, выход 19% после двух стадий).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 328,2, найдено 328,0.

Синтез 5-амино-3 -(3 -этокси-4-метоксифенил)-1 -(2-гидроксиэтил)-1Н-пиразол-4-карбонитрила (ΖΚ304).

2-((3-Этокси-4-метоксифенил)(метокси)метилен)малононитрил (200 мг, 0,78 ммоль), 2-гидроксиэтилгидразин (0,056 мл, 0,78 ммоль) и триэтиламин (0,10 мл 0,78 ммоль) смешивают в этаноле (5 мл) и нагревают для кипячения с обратным холодильником в течение 90 мин. Реакционную смесь затем охлаждают до комнатной температуры, добавляют воду и водную фазу экстрагируют три раза ЕЮАс, СН₂С1₂ и СНС1₃. Органическую фазу концентрируют и переносят на следующую стадию без дополнительной характеризации.

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 303,1, найдено 303,0.

2-(4-Амино-3 -(3 -этокси-4-метоксифенил)-1Н-пиразоло [3,4-б]пиримидин-1 -ил)этанол (ΖΚ306).

5-Амино-3-(3-этокси-4-метоксифенил)-1-(2-гидроксиэтил)-1Н-пиразол-4-карбонитрил растворяют в формамиде (20 мл) и нагревают до 180°С на протяжении ночи. На следующий день реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, добавляют воду и осадок собирают фильтрованием. Осадок затем растворяют в смеси СН₂С1₂/МеОН и раствор пропускают через слой силикагеля. Продукт затем лиофилизируют из бензола, получая при этом коричневое твердое вещество (6,4 мг, выход 2,5% после двух стадий).

Е81-МС (М+Н)⁺ т/ζ: вычислено 330,1, найдено 330,0.

В. Исследования структур.

Изучены кристаллические структуры рНОу, отдельно и в комплексе с АТФ или панспецифическими ингибиторами, такими как БУ294002 и вортманнин (№а1кег е1 а1., 2000; №а1кег е1 а1., 1999). Чтобы исследовать, как связываются сильнодействующие и селективные ингибиторы, определили кристаллические структуры ингибиторов Р13-К трех хемотипов, связанных с ρ110γ, при разрешении 2,5-2,6 А: хиназолинпурин-Р1К-39, имидазопиридин-Р1К-90 и фенилтиазол-Р1К-93 (фиг. 2).

На основании этих сокристаллических структур и консервативной модели арилморфинового фармакофора были созданы структурные модели для трех дополнительных хемотипов, связанных с ρ110γ: пиридинилфуранопиримидина Р1-103; морфолинохромона Р1К-108 и морфолинопиранона КИ-55933 (фиг. 2). Построение моделей для этих ингибиторов проводили согласно наблюдению, что каждое соединение содержит ключевой арилморфолиновый фармакофор, обнаруженный в БУ294002.

Р1К-39 является изохинолинпурином, который ингибирует р1105 при средних наномолярных концентрациях, ρ110γ и р110в, при концентрациях в ~100 раз больше и не обнаруживает активность против любого другого члена семейства Р13-К, в том числе ρ110α, при концентрациях до 100 мкМ (фиг. 5). Биохимическая селективность этого соединения достигается вследствие необычного метода связывания, обнаруженного в его сокристаллической структуре с ρ110γ (фиг. 2С). Только меркаптопуриновый остаток Р1К-39 осуществляет контактирование во внутренней части АТФ-связывающего кармана, и эта система колец поворачивается на ~110° и изгибается на ~35° из плоскости относительно аденина АТФ. При такой ориентации она образует водородные связи с амидами основной цепи Уа1 882 и С1н 880 (тем самым рекапитулируя водородные связи, образованные N1 и N6 аденина).

В противоположность структурам других ингибиторов Р13-К, Р1К-39 не доступен для более глубокого кармана во внутренней части активного сайта (фиг. 2С, слабо затемненная область, обозначенная как карман аффинности). Вместо этого арилизохинолиновый остаток Р1К-39 простирается до входа в АТФ-связывающий карман (фиг. 2В). В этой области киназа размещает ингибитор, подвергаясь конформационной перегруппировке, в которой Ме1 804 смещается от положения наверху, в котором он образует верхний предел АТФ-связывающего кармана, до положения внизу, в котором он упаковывается против изохинолинового остатка. Влияние этого перемещения, которое является необычным для структуры Р1К-39 (фиг. 2В), должно создавать новый гидрофобный карман между Ме1 804 и Трэ 812 при входе в АТФ-связывающий сайт. Этот карман с индуцированной пригодностью закрывает площадь поверхности ингибитора ~180 А², доступную для растворителя, позволяя Р1К-39 достичь наномолярной аффинности, несмотря на ограниченные контакты внутри центра активного сайта.

- 32 019961

Определили сокристаллические структуры соединений РЖ-90 и РЖ-93, связанных с р110γ. Как РЖ-90, так и РЖ-93 образуют водородную связь с атомом водорода амида основной цепи Уа1 882 (фиг. 2Ό), т.е. происходит взаимодействие, сохраняемое у всех известных ингибиторов Р03-К (^а1кег е! а1., 2000). Помимо указанной водородной связи, РГК-93 образует вторую водородную связь с карбонилом основной цепи Уа1 882 и третью связь между его сульфонамидной частью и боковой цепью Акр 964. РК93 является одним из наиболее полярных ингибиторов в наборе авторов изобретения (с1о§Р=1,69), и эти протяженные полярные взаимодействия могут компенсировать его ограниченную гидрофобную площадь поверхности.

РЖ-90 связывается методом, аналогичным РЖ-93, хотя это более крупное соединение индуцирует более экстенсивные гидрофобные взаимодействия, закрывая площадь поверхности 327 А², доступную для растворителя. Для достижения этого РЖ-90 вставляет свое пиридиновое кольцо в более глубокую полость, которая частично доступна для РЖ-93, но не занята АТФ (фиг. 2Ό, слабо затемненный круг). В этой области кольцо пиридина РЖ-90 помещается таким образом, что образуется водородная связь с Ьук 833, и авторами изобретения обнаружено, что замена атома азота этого пиридина атомом углерода приводит к 100-кратной потере в аффинности (РЖ-95, фиг. 4). РЫ03, третий многомишеневый ингибитор РКЖ, вставляет фенол в тот же самый карман на основе модели арилморфолинового фармакофора (фиг. 2Ό).

Два структурных признака отличают эти сильнодействующие многомишеневые ингибиторы от более селективных соединений набора данного изобретения. Во-первых, эти соединения принимают плоскую конформацию в АТФ-связывающем кармане, тогда как очень селективные ингибиторы выступают из плоскости, занимаемой АТФ (фиг. 2). Во-вторых, большинство сильнодействующих ингибиторов входит в более глубокий карман связывания, который является недоступным для АТФ (фиг. 2А). Большая часть поверхности этого кармана аффинности приходится на боковую цепь Не 879.

Меркаптопурин в структуре РЖ-39 заменяли аденином, получая при этом модель Ю87114 (фиг. 3А). Такое замещение обеспечивало присутствие аденина ГС87114 с подходящей ориентацией для образования таких же водородных связей, как у меркаптопурина РЖ-39, даже хотя эти системы двух колец повернуты относительно друг друга на 110°.

В отличие от других хемотипов ингибиторов, РЖ-39 не использует карман аффинности РВ-киназы (фиг. 2С). Пиразолопиримидиновый аналог Ю87114 (РЖ-293), а также новый аналог, содержащий мфенол (РЖ-294, фиг. 3А), затем испытывали на ингибирование РВ-К класса I. РЖ-294 был в 60 раз более сильнодействующим, чем РЖ-293 (фиг. 3А).

Структура РЖ-39, связанная с р110γ, обнаруживает конформационную перегруппировку Ме! 804, которая создает индуцированный карман, и авторы изобретения выдвинули гипотезу, что это конформационная перегруппировка лежит в основе селективности РЖ-39 в отношении р1105. Предсказанием такой модели является тот факт, что мутация Ме! 804 должна нарушать связывание р1105-селективных ингибиторов (которые являются доступными для индуцированного кармана), но не действует на другие классы ингибиторов (которые не являются доступными для этого кармана). Моделирование подсказывает, что мутация Ме! 804 в β-разветвленную аминокислоту (такую как валин или изолейцин) должна ограничить карман, образованный перегруппировкой такого остатка (фиг. 3В, справа). Поэтому авторы изобретения провели мутацию соответствующего остатка в р1105 (Ме! 752) в валин или изолейцин и экспрессировали и очистили эти киназы и испытывали их на восприимчивость к ингибиторам Р03-К (фиг. 3В). Авторы изобретения обнаружили, что Μ752I и М752У р1105 являются резистентными к р1105-селективным ингибиторам РЖ-39 и ^87114, но сохраняют восприимчивость к р110а/многомишеневым ингибиторам РЖ-90, РЖ-93 и Р^103. Эта хемотип-специфическая резистентность подтверждает необычную роль Ме! 752 в открытии кармана с индуцируемой селективностью.

Моделирование антагонистов проводили с применением РуМОЬ Мо1еси1аг СгарЫск 8ук!ет. Все кристаллические структуры ρ110γ (РОВ шифруется в скобках), включающие связанные формы Аро (1Е8У), АТФ (1Е8Х), вортманнина (1Е7И), БУ294002 (1Е7У), кварцетина (1Е8^), мирицетина (1Е90) и стауроспорина (1Е82), РЖ-90, РЖ-93 и РЖ-39, были структурно выровнены с применением функции выравнивания РуМОЬ. Модели для ингибиторов РЖ-108, КИ-55933 и Р^103 были построены наверху арилморфолиновой структуры БУ294002 (1Е7У) с применением функции построения фрагмента РуМОЬ. Модель для ингибирования Ю87114 аналогично построили наверху арилизохинолиновой структуры РЖ39.

Модель для Р^103 встроили в белковую структуру ρ110γ, связанную с РЖ-90, поскольку структура РЖ-90 содержит увеличенный карман аффинности, который необходимо приспосабливать для фенольной части РЖ-103 (структура РЖ-90 ρ110γ в противном случае не проявляет какие-либо конформационные отличия в арилморфолинсвязывающей области от ЬУ294002-связанной структуры ρ110γ). Модели РЖ-108, КИ-55933 и Ю87114 встроили в белковую структуру р110·/, связанную с РЖ-39, поскольку эти ингибиторы имеют большие группы, которые выступают из адениновой плоскости, и, вероятно, используют необычный, образованный Ме! 804 внизу подходящий карман. Во всех моделях ингибиторов выбор белковой структуры и метода связывания ингибитора основан на экстенсивном биохимическом 8АЯ,

- 33 019961 а также геометрии ингибитора. Белковые структуры и модели ингибиторов не были минимизированы для оптимизации энергии связывания, но были приняты меры для предотвращения любых больших стерических затруднений и выполнения условий для образования водородных связей.

С. Анализ р110а/р85а, р110в/р85а, р1105/р85а и ρ110γ.

Р13-К класса I были либо куплены (р110а/р85а, р110в/р85а, р1105/р85а у ирк£а£е и ρ110γ у 81дта), либо экспрессированы, как ранее описано (КшдЫ е1 а1., 2004). Величины 1С₅₀ измеряли либо стандартным анализом ТСХ для определения активности липидкиназы (описано ниже), либо высокопроизводительным анализом захвата мембран. Реакции киназ проводили приготовлением реакционной смеси, содержащей киназу, ингибитор (конечная концентрация 2% ДМСО), буфер (25 мМ НЕРЕ8, рН 7,4, 10 мМ МдС1₂) и свежеобработанный ультразвуком фосфатидилинозит (100 мкг/мл). Реакции инициировали добавлением АТФ, содержащего 10 мкКи γ-³²Р-АТФ, до конечной концентрации 10 или 100 мкМ, как показано на фиг. 5, и давали возможность реакционной смеси реагировать в течение 5 мин при комнатной температуре. Для анализов ТСХ реакции затем останавливали добавлением 105 мкл 1н. НС1 с последующим добавлением 160 мкл смеси СНС13:МеОН (1:1). Двухфазную смесь интенсивно перемешивали, быстро центрифугировали и органическую фазу переносили в новую пробирку с применением пипетки с кончиком для загрузки геля, предварительно покрытой СНС13. Данный экстракт наносили пятнами на пластинки ТСХ и проявляли в течение 3-4 ч раствором 65:35 н-пропанол:1 М уксусная кислота. Пластинки ТСХ затем сушили, подвергали скринингу фосфорвизуализатором (8ΐοηη, Атегкйат) и проводили количественные измерения. Для каждого соединения активность киназы измеряли при 10-12 концентрациях ингибитора, представляющих собой двукратные разведения от самой высокой испытуемой концентрации (обычно 200 мкМ). Для соединений, проявляющих значительную активность, определения 1С₅₀ повторяли от двух до четырех раз, и указанная величина представляет собой среднюю величину этих независимых измерений.

Результаты приведены в табл. 2.

Ό. Анализ АЬ1.

Ингибиторы (конечная концентрация: 10 мкМ) испытывали в трех повторах против рекомбинантного полноразмерного фермента АЬ1 или АЬ1 (Т3151) (ирк1а£е) анализом с применением смеси, содержащей 25 мМ НЕРЕ8, рН 7,4, 10 мМ МдС1₂, 200 мкМ АТФ (2,5 мкКи γ-³²Р-АТФ) и 0,5 мг/мл В8А. В качестве фосфоакцептора применяли оптимизированный пептидный субстрат ЕА1УААРРАККК для АЬ1 (200 мкМ). Реакции останавливали нанесением пятен на пластины из фосфоцеллюлозы, которые были промыты 0,5% фосфорной кислотой (приблизительно 6 раз, 5-10 мин каждый раз). Пластины сушили и перенесенную радиоактивность количественно определяли фосфорвизуализацией.

Результаты приведены в табл. 3.

Е. Анализ Нск.

Нск: ингибиторы (конечная концентрация: 10 мкМ) испытывали в трех повторах против рекомбинантного полноразмерного фермента Нск анализом с применением смеси, содержащей 25 мМ НЕРЕ8, рН 7,4, 10 мМ МдС1₂, 200 мкМ АТФ (2,5 мкКи γ-³²Р-АТФ) и 0,5 мг/мл В8А. В качестве фосфоакцептора применяли пептидный субстрат Е1УСЕРККК для киназы семейства 8гс (200 мкМ). Реакции останавливали нанесением пятен на пластины из фосфоцеллюлозы, которые были промыты 0,5% фосфорной кислотой (приблизительно 6 раз, 5-10 мин каждый раз). Пластины сушили и перенесенную радиоактивность количественно определяли фосфорвизуализацией.

Результаты приведены в табл. 3.

Р. Анализ рецептора инсулина (ΙΚ).

Ингибиторы (конечная концентрация: 10 мкМ) испытывали в трех повторах против домена рекомбинантной рецепторной киназы инсулина (ирк£а£е) анализом с применением смеси, содержащей 25 мМ НЕРЕ8, рН 7,4, 10 мМ МдС1₂, 200 мкМ АТФ (2,5 мкКи γ-^Р-АТФ) и 0,5 мг/мл В8А. В качестве субстрата применяли поли-Е-Υ (81дта; 2 мг/мл). Реакции останавливали нанесением пятен на пластины из нитроцеллюлозы, которые были промыты смесью 1 М ЫаС1/1% фосфорная кислота (приблизительно 6 раз,

5-10 мин каждый раз). Пластины сушили и перенесенную радиоактивность количественно определяли фосфорвизуализацией.

Результаты приведены в табл. 4.

С. Анализ 8гс.

8гс, 8гс (Т3381): ингибиторы (конечная концентрация: 10 мкМ) испытывали в трех повторах против рекомбинантного полноразмерного фермента 8гс или 8гс (Т3381) анализом с применением смеси, содержащей 25 мМ НЕРЕ8, рН 7,4, 10 мМ МдС1₂, 200 мкМ АТФ (2,5 мкКи γ-^Р-АТФ) и 0,5 мг/мл В8А. В качестве фосфоакцептора применяли оптимизированный пептидный субстрат ЕШСЕЕККК для киназ семейства 8гс (200 мкМ). Реакции останавливали нанесением пятен на пластины фосфоцеллюлозы, которые были промыты 0,5% фосфорной кислотой (приблизительно 6 раз, 5-10 мин каждый раз). Пластины сушили и перенесенную радиоактивность количественно определяли фосфорвизуализацией.

Результаты приведены в табл. 3.

- 34 019961

H. Анализ ДНК-РК (ДНКК).

ДНК-РК купили у Рготеда и анализировали с применением системы анализа ДНК-РК (Рготеда) согласно инструкциям изготовителя.

Результаты приведены в табл. 2.

I. Анализ тТОК.

Ингибиторы (конечная концентрация: 50-0,003 мкМ) испытывали против рекомбинантного фермента тТОК Цпуйгодеп) анализом с применением смеси, содержащей 50 мМ НЕРЕ8, рН 7,5, 1 мМ ЕОТА, 10 мМ МдС1₂, 2,5 мМ, 0,01% Твин, 10 мкМ АТФ (2,5 мкКи ц-³²Р-АТФ) и 3 мкг/мл В8А. В качестве субстрата применяли крысиный рекомбинантный РНА8-1/4ЕВР1 (Са1ЫосБет; 2 мг/мл). Реакции останавливали нанесением пятен на пластины из нитроцеллюлозы, которые были промыты смесью 1 М №С1/1% фосфорная кислота (приблизительно 6 раз, 5-10 мин каждый раз). Пластины сушили и перенесенную радиоактивность количественно определяли фосфорвизуализацией.

Результаты приведены в табл. 4.

1. Рецептор фактора васкулярного эндотелиального роста.

Рецептор фактора васкулярного эндотелиального роста 2 (КОК): ингибиторы (конечные концентрации 50-0,003 мкМ) испытывали против домена рекомбинантной рецепторной киназы КОК Цпуйгодеп) анализом с применением смеси, содержащей 25 мМ НЕРЕ8, рН 7,4, 10 мМ МдС1₂, 0,1% ВМЕ, 10 мкМ АТФ (2,5 мкКи ц-³²Р-АТФ) и 3 мкг/мл В8А. В качестве субстрата применяли поли-Е-Υ (81дта; 2 мг/мл). Реакции останавливали нанесением пятен на пластины из нитроцеллюлозы, которые были промыты смесью 1 М №С1/1% фосфорная кислота (приблизительно 6 раз, 5-10 мин каждый раз). Пластины сушили и перенесенную радиоактивность количественно определяли фосфорвизуализацией.

Результаты приведены в табл. 3.

К. Анализ рецептора эфрина В4 (ЕрБВ4).

Ингибиторы (конечные концентрации 50-0,003 мкМ) испытывали против домена рекомбинантной рецепторной киназы эфрин В4 Цпуйгодеп) анализом с применением смеси, содержащей 25 мМ НЕРЕ8, рН 7,4, 10 мМ МдС1₂, 0,1% ВМЕ, 10 мкМ АТФ (2,5 мкКи ц-³²Р-АТФ) и 3 мкг/мл В8А. В качестве субстрата применяли поли-Е-Υ (81дта; 2 мг/мл). Реакции останавливали нанесением пятен на пластины из нитроцеллюлозы, которые были промыты смесью 1 М №С1/1% фосфорная кислота (приблизительно 6 раз, 5-10 мин каждый раз). Пластины сушили и перенесенную радиоактивность количественно определяли фосфорвизуализацией.

Результаты приведены в табл. 3.

Ь. Анализ рецептора фактора эпидермального роста (ЕСЕК).

Ингибиторы (конечные концентрации 50-0,003 мкМ) испытывали против рекомбинантного домена рецепторной киназы ЕСЕ Цпуйгодеп) анализом с применением смеси, содержащей 25 мМ НЕРЕ8, рН 7,4, 10 мМ МдС1₂, 0,1% ВМЕ, 10 мкМ АТФ (2,5 мкКи ц-³²Р-АТФ) и 3 мкг/мл В8А. В качестве субстрата применяли поли-Е-Υ (81дта; 2 мг/мл). Реакции останавливали нанесением пятен на пластины из нитроцеллюлозы, которые были промыты смесью 1 М №С1/1% фосфорная кислота (приблизительно 6 раз, 5-10 мин каждый раз). Пластины сушили и перенесенную радиоактивность количественно определяли фосфорвизуализацией.

Результаты приведены в табл. 3.

М. Анализ ШТ.

Ингибиторы (конечные концентрации 50-0,003 мкМ) испытывали против домена рекомбинантной киназы ШТ Цпуйгодеп) анализом с применением смеси, содержащей 25 мМ НЕРЕ8, рН 7,4, 10 мМ МдС1₂, 1 мМ ОТТ, 10 мкМ АТФ (2,5 мкКи ц-³²Р-АТФ) и 3 мкг/мл В8А. В качестве субстрата применяли поли-Е-Υ (81дта; 2 мг/мл). Реакции останавливали нанесением пятен на пластины из нитроцеллюлозы, которые были промыты смесью 1 М №С1/1% фосфорная кислота (приблизительно 6 раз, 5-10 мин каждый раз). Пластины сушили и перенесенную радиоактивность количественно определяли фосфорвизуализацией.

Результаты приведены в табл. 4.

Ν. Анализ КЕТ.

Ингибиторы (конечные концентрации 50-0,003 мкМ) испытывали против домена рекомбинантной киназы КЕТ Цпуйгодеп) анализом с применением смеси, содержащей 25 мМ НЕРЕ8, рН 7,4, 10 мМ МдС1₂, 2,5 мМ ОТТ, 10 мкМ АТФ (2,5 мкКи ц-³²Р-АТФ) и 3 мкг/мл В8А. В качестве фосфоакцептора применяли оптимизированный пептидный субстрат ЕАТУААРЕАККК для АЫ (200 мкМ). Реакции останавливали нанесением пятен на пластины из фосфоцеллюлозы, которые были промыты 0,5% фосфорной кислотой (приблизительно 6 раз, 5-10 мин каждый раз). Пластины сушили и перенесенную радиоактивность количественно определяли фосфорвизуализацией.

Результаты приведены в табл. 4.

О. Анализ рецептора фактора роста, полученного из тромбоцитов (РОСЕК).

Ингибиторы (конечные концентрации 50-0,003 мкМ) испытывали против домена рекомбинантной рецепторной киназы РОС Цпуйгодеп) анализом с применением смеси, содержащей 25 мМ НЕРЕ8, рН

- 35 019961

7,4, 10 мМ МдС1₂, 2,5 мМ ОТТ, 10 мкМ АТФ (2,5 мкКи ц-³²Р-АТФ) и 3 мкг/мл В8А. В качестве фосфоакцептора применяли оптимизированный пептидный субстрат для АЫ ЕАГУААРЕАККК (200 мкМ). Реакции останавливали нанесением пятен на пластины из фосфоцеллюлозы, которые были промыты 0,5% фосфорной кислотой (приблизительно 6 раз, 5-10 мин каждый раз). Пластины сушили и перенесенную радиоактивность количественно определяли фосфорвизуализацией.

Результаты приведены в табл. 4.

Анализ, имеющий отношение к ЕМ8 тирозинкиназы 3 (ЕЬТ-3).

Ингибиторы (конечные концентрации 50-0,003 мкМ) испытывали против домена рекомбинантной киназы ЕЬТ-3 (Гпуйгодеп) анализом с применением смеси, содержащей 25 мМ НЕРЕ8, рН 7,4, 10 мМ МдС1₂, 2,5 мМ ЬТТ, 10 мкМ АТФ (2,5 мкКи ц-³²Р-АТФ) и 3 мкг/мл В8А. В качестве фосфоакцептора применяли оптимизированный пептидный субстрат для АЫ ЕЛГУАЛРЕАККК (200 мкМ). Реакции останавливали нанесением пятен на пластины из фосфоцеллюлозы, которые были промыты 0,5% фосфорной кислотой (приблизительно 6 раз, 5-10 мин каждый раз). Пластины сушили и перенесенную радиоактивность количественно определяли фосфорвизуализацией.

Результаты приведены в табл. 4.

0. Анализ рецепторной тирозинкиназы ТЕК (ТГЕ2).

Ингибиторы (конечные концентрации 50-0,003 мкМ) испытывали против домена рекомбинантной киназы ТГЕ2 (Гпуйгодеп) анализом с применением смеси, содержащей 25 мМ НЕРЕ8, рН 7,4, 10 мМ МдС1₂, 2 мМ ЬТТ, 10 мкМ АТФ (2,5 мкКи ц-³²Р-АТФ) и 3 мкг/мл В8А. В качестве субстрата применяли поли-Е-Υ (81§та; 2 мг/мл). Реакции останавливали нанесением пятен на пластины из нитроцеллюлозы, которые были промыты смесью 1 М №1С1/1% фосфорная кислота (приблизительно 6 раз, 5-10 мин каждый раз). Пластины сушили и перенесенную радиоактивность количественно определяли фосфорвизуализацией.

Результаты приведены в табл. 4.

В. Результаты.

В табл. 1 указанные соединения имеют формулу

где В¹ и В² имеют значения, указанные в табл. 1;

X представляет собой =Ν-, за исключением указанных случаев; В³⁶ представляет собой -ΝΉ₂, за исключением указанных случаев.

- 36 019961

Таблица 1

Соед.	Н1	К2	Соед.	Н1	К2
КВ167	-н	О	ВА46	А
ΖΚ141	-н	,Ме	ВА45	У	ре
К384		_уМе Р	ВА39	'г
ΖΚ127	-н		ВА150	А	^Ν^Ρ
ΖΚ134	-н	Р Ме	ВА151	^уг	А
ΖΚ132	-н	Ме	ВА21	'Г	Р“
ΖΚ125	-н .	х^	ВА52	у	О х^
ВА56		.он Р	ВА53		&
ΖΚ138	-н	/Асн	ВА31	У
К8287	х = сн	_λΟθΗ	ВА152	^уг
К5288	к³⁶ Ν-метил		ВА149

- 37 019961

Соед.	Κ1	№>	Соед.	Н1	К2
К5284	У	А-	ВА32	У	У”
ВА60	У	.он Ме	ВА55	У	Ру
ΖΚ318	-н	Ме А»	ВА35	У	рЛ
ΖΚ320	-н	Ме р~^он	ВА34	У	Ун 5у-Ме
ΖΚ333	-Ме	ме Р~он	ВА38	У	А^“
ΖΚ323	У	Ме р~°^н	ВА40	У	р
ΖΚ327		Ме Р-он	ВА41	У	А*° ^Л ЫНг
ВА776	У	Р°н Р	ВА14	У	V
ВА786	Ъ	Р-°н Р	ВА12	У	-I
ВА22	У	у	• ВАЗО	У	ггл У
ВА798	Ъ	у	ΖΚ149	-н

- 38 019961

- 39 019961

Соед.	ΚΙ	К2	Соед.	К1	К2
ΖΚ471	ι	50-°^Н	ΖΚ157
ΖΚ461			ΖΚ159		рэ
ΖΚ413	*Цн		ΖΚ158	^уг	рО
ΖΚ379	Ъ		К863		рО
ΖΚ421	Ъ-	ί^^0Η	ΖΚ158	ъ	рэ
ΖΚ403	Ън		ΖΚ147	х-О
ΖΚ405	ъ*	0~^он	ΖΚ155	о	рО
ΖΚ432	ъ	^~^т	ΖΚ162	ΝΙ-4>	рэ
ΖΚ434	ъ	0~^он	ΖΚ165
ΖΚ465	ъ	0~^он	ΖΚ161
ΖΚ377	0 ΗΝ—Ζ	0~^он	ΖΚ167		рр
ΖΚ399		ί^^ΟΗ	ΖΚ168

- 40 019961

К2

ОН

- 41 019961

Соед.		Я2	Соед.	Я1	Κ2
ΖΚ389		τ»	ΒΑ139	Τ'
ΖΚ369			ΒΑ158	Τ'	χχχ ο
ΖΚ385	Т	τ»	ΒΑ140	Τ'
ΖΚ391	Τ Η	τ»	ΒΑ141	ъ	ζΑΑ
ВА155 2	Τ'	ΟΝ ОН Л	ΒΑ146	^уг
ВА157 2	Τ'	.он	ΒΑ142	Τ'
ВА59	Τ'	.ОН ί^~^ρ	ΒΑ145	Τ'	Ά ⁷⁴ ο^^ΝΗ Τγ
ВА83	Τ'	ОМе 'XX	ΒΑ147	Τ'	νη₂
ВА93	Τ'	.он -χχ	ΒΑ148	-Ме	χΑ
ВА49	Τ'	η. η^Ζ^ΟΜβ	ΒΑ143	Τ'	*· ο

- 42 019961

- 43 019961

Соед.	Я1	Н2	Соед.	К1	К2
ΖΚ485	у	.ОМе <х ^^А-ОМе	ВА138	ъ	0/
ΖΚ495		ОМе	ВА160	У	См ⁴νη₂
ΖΚ496		.ОМе	ВА157 3	У	у,
ΖΚ494	у	Л^А-ОМе А	ВА154	У	ΝΗ₂ У
ВА90	ъ	ОМе Р-».	ВА110	У	А
ΖΚ341	-н	_.ОЕ1 ^С^-ОМе	ВА115	Ъ	А
ΖΚ343	У	.ОЕ1 гх А^А-ОМв	ВА159	У	У
ΖΚ361	г	..οει _%О^ОМе	ВА119	-Ме	А
ΖΚ359	Ъ	№ Α^ΑΌΜβ	ВА107	У	_ХСУ^Н
ΖΚ362	ь	.ОЕ1 гх _хкА0Ме	ВА124	ъ	ро
ВА64	У	МеО \ .ОМе νΧ Α^/ΟΜθ	ВА161	У	ср Л
ВА65	У	6Х АА^ОМе ОМе	ВА162	ъ	со

- 44 019961

Соед.	Η1	В2	Соед.	Κ1	К2
ΖΚ305	У	ОМе у.	ΒΑ24άά	У	7-/^ϋΗ X
ΖΚ306		ОМе у.	ΒΑ43	У
ВА66	У	Ν^/^ΟΜθ>τγ^ΝОМе	ΒΑ91	У	ру
ВА48	У	X	ΒΑ92	ъ
ΖΚ133	-Η	Р он	ΒΑ86	У
ΒΑ20όά	X	^/^ΝΗ2	ΒΑ88	Ъ	У
ВА20П	У	____ζΝΗ2	ΒΑ96	У	У
ВА20	У	ус	ΒΑ97	ъ	У
ВА99	У	й^он	ΒΑ44	У	У
ΒΑ81όΰ	Ъ	_/^ΝΗ ₂ 70-°¹⁴	ΒΑ156	У
ΒΑ81ά	ъ		ΒΑ95	У	У
ΖΚ137	-н	Ρ	ΖΚ129	Ме х=сн	У
ΖΚ135	-н		ΒΑ54	У	у
ΖΚ130	-н	Ρ	ΖΚ152	-Ме Х=СН
ΖΚ128	-Н		ΒΑ42	У	н з^р^⁰
ΒΑ26	У	СХ-

- 45 019961

Таблица 2

Соед.	110α	110β	1105	110γ	ОРК	Соед.	110α	110β	110δ	110γ	ОРК
К3167	++	4·	++	++	++	ВА46	++	++	+++	++	+++
ΖΚ141	++	++	++	++	+++	ВА45	++	+	++	++	++
К384	++	+	++	+	+++	ВА39	++		+++	++	++
ΖΚ127	++	++	++	++	+++	ВА150	++	+	++	++	++
ΖΚ134	++	+	++	++	+++	ВА151	++	+	++	++	++
ΖΚ132	++	++	++	++	+++	ВА21	++	++	++		++
ΖΚ125	++	+	++	++	+++	ВА52	++	++	++	++	++
ВА56	+++	+++	+++	+++	+++	ВА53	++	+	+	+	++
ΖΚ138	++	++	++'	++	+++	ВА31	4-4-	++	+++	+++	++
К8287	++	++	++	++	++	ВА152	++	++	+++	++	+++
К8288		+	+	+	+++	ВА149	4-4-	++	++	++	+
К5284	+++	++	+++	++	+++	ВА32	++	++	+++		+++
ВА60	++	++	+++	++	+++	ВА55	++	++	+++	++	++
ΖΚ318	++	+	++	++	++	ВА35	++		+++	+++	+++
ΖΚ320	++	++	+++	+++	++	ВА34	++	++	+++	++	+++
ΖΚ333	+++	++	+++	+++	+++	ВА38	4-4·		+++	+++	+++
ΖΚ323	+++	. ++	+++	+++	+++	ВА40	++		++	++	+++
ΖΚ327	+++	++	+++	+++	+++	ВА41	++	++	+++	+++	+++
ВА77Й	++	++	+++	++	++	ВА14	++	++	+++	++	+++
ВА78Й	++	++	+++	++	+++	ВА12	++	++	+++	++	++
ВА22	+++	+++	+++	+++	+++	ВАЗО	++	++	+++	+++	+++
ВА79Й	+++	+++	+++	+++	+++	ΖΚ149	+	++	++	++	+
ВА85	++	++	++	++	+++	ΖΚ126	++	+	++	+	++
ВА87	+++	+++	+++	+++	+++	ΖΚ143	+	+	+	+	+
ΖΚ502	++	++	+++	4+	+++	ΖΚ150	++	+	+	+	++
ΖΚ489	+++	+++	+++	+++	+++	ΖΚ136	++	+	+	++	+++
ΖΚ487	+++	+++	+++	+++	+++	ΖΚ131	4-	+	+	+	+
гк491	+++	+++	+++	+++	++	ΖΚ151	+	+	+	+	+++
ΖΙ<493	+++	+++	+++	+++	+++	ΖΚ142	+	+	+	+	' +
ВА62Й	+++	+++	+++	+++	++	ΖΚ139	+	+	+	++	++
ΖΚ450	++	++	++	+++	+	К3207	++	+	+++	+++	+++
ΖΚ454	++	++	++	+++	+++	К8208	++	++	++	+++	+++
ΖΚ469	+++	+++	++	+++	+++	ΖΚ102	+	+	+	. +	+++
ΖΚ471	+++	+++	+++	+++	++	ΖΚ157			+++		+++
ΖΚ461	+++	++	+++	++	4-+	ΖΚ159	++	++	++	++	+++
ΖΚ413	++	+++	+++	+++	+++	ΖΚ156	++	++	++	++	+++
ΖΚ379	+++	++	+++	+++	+++	К863	+	+	+	+	+++
ΖΚ421	+++	++	+++	+++	+++	ΖΚ158	4-4-	++	++	++	+++
ΖΚ403	++	+++	+++	+++	++	ΖΚ147	+	++	++	++	++
ΖΚ405	++	++	+++	++	+++	ΖΚ155	++	++	++	++	+++
ΖΚ432	+++	++	+++	+++	+++	ΖΚ162	++	+	++	++	+++
ΖΚ434	+++	+++	+++	+++	+++	ΖΚ165	++	+	++	++	+++
ΖΚ465	+++	+	+++	+++	+++	ΖΚ161	++	+	++	++	++
ΖΚ377	++	++	++	++	+++	ΖΚ167			++		++
ΖΚ399	++	++	+++	++	+++	ΖΚ168			++		+++
ΖΚ401	++	+	++	+	+++	ВА116	+	++	++	++	+++
ВА62	+++	++	+++	+++	+++	ВА17	+++	++	+++	++	+++
ΖΚ358	+++	++	+++	+++	+++	ВА134	++	+	++	+	++
ΖΚ452	++	++	++	+++	+++	ВА105	++	++	+++	++	+++
ΖΚ456	+++	++	4-+	+++	+++	ВА122	++	++	+++	++	+++
ΖΚ463	+++	++	+++	+++	+++	ВА111	+++	++	+++	+++	+++
ΖΚ371	+++	+++	+++	+++	+++	ВА102	+++	+++	+++	+++	+++
ΖΚ409	+++	+++	+++	4-4-4-	4-4-4-	ВА112	4-4-+	++	+++	+++	+++
ΖΚ428	+++	+++	+++	+++	+++	ВА118	+++	++	+++	+++	+++

- 46 019961

Соед.	110α	110β	110δ	110γ	ϋΡΚ	Соед.	110α	110β	110δ	110γ	σρκ
ΖΚ430	+++	+++	+++	+++	+++	ΒΑ130	+++	++	+++	+++	+++
ΖΚ387	++	++	++	++	+++	ΒΑ132	+++	+++	+++	+++	+++
ΖΚ389	++	+++	+++	++	+++	ΒΑ139	++	++	+++	+	++
ΖΚ369	++	+	++	++	++	ΒΑ158	+++	+++	+++	+++	+++
ΖΚ385	++	++	+++	++	+++	ΒΑ140	+	++	+	+	++
ΖΚ391	++	++	+++	++	+++	ΒΑ141	+	+	+	+	+
ВА155 2	+++	+++	+++	+++	+++	ΒΑ146	+++	+++	+++	+++	+++
ВА157 2	+++	+++	+++	+++	+++	ΒΑ142	+++	++	++	+++	+++
ВА59	+++	++	+++	+++	+++	ΒΑ145	++	++	++	++	++
ВА63		++		+++	+++	ΒΑ147	++	++	++	++	++
ВА93	+++	++	+++	+++	+++	ΒΑ148	. ++	++	++	++	+++
ВА49	++	+	++	++	++	ΒΑ143	++	++	++	++	+++
ВА15	+++	++	+++	+++	+++	ΒΑ144	+++	++	+++	+++	+++
ΖΚ321	+++	++	+++	+++	+++	ΒΑ129	++	+	++	+	++
ΖΚ337	+++	+++	+++	+++	+++	ΒΑ131	+++	++	+++	+++	+++
ΖΚ347	+++	+++	+++	+++	+++	ΒΑ133	+++	+++	+++	+++	+++
ΖΚ325	+++	+++	+++	+++	+++	ΒΑ120	+++	++	+++	+++	+++
ΖΚ349	+++	+++	+++	+++	+++	ΒΑ108	+++	++	+++	++	+++
ΖΚ423	+++	+++	+++	+++	+++	ΒΑ121	+++	++	+++	++	+++
ΖΚ411	++	+++	+++	+++	+++	ΒΑ89	+++	++	+++	+++	+++
ΖΚ407	• ++	+++	+++	++	++	ΒΑ94	+++	++	+++	+++	+++
ВА98	+++	+++	+++	+++	+++	ΒΑ135	+++	+++	+++	+++	+++
31	++	+	++	+	+	ΒΑ136	+++	++	+++	++	+++
ВА23	+++	+++	+++	+++	+++	ΒΑ137	+++	+++	+++	+++	+++
ΖΚ485	+++	+++	+++	++	++	ΒΑ138	+++	++	+++	+++	+++
ΖΚ495	+++	++	+++	++	+++	ΒΑ160	++	++	+++	+++	+++
ΖΚ496	++	++	+++	++	+++	ΒΑ157 3	+++	++	+++	+++	+++
ΖΚ494	+++	+++	+++	+++	+++	ΒΑ154	+++	+++	+++	+++	+++
ВА90	+++	+++	+++	+++	+++	ΒΑ110	+++	++	+++	+++	+++
ΖΚ341	++	++	+++	+++	++	ΒΑ115	+++	++	+++	+++	+++
ΖΚ343	+++	++	+++	++	+++	ΒΑ159	+++	+++	+++	+++	++
ΖΚ361	++	++	+++	+++	+++	ΒΑ119	++	++	+++	++	+++
ΖΚ359	+++	+++	+++	+++	+++	ΒΑ107	++	++	+++	++	+++
ΖΚ362	+++	+++	+++	+++	++	ΒΑ124	++	++	+++	++	+++
ВА64	+	+	++	+	++	ΒΑ161	+	+	+	+	+++
ВА65	+	+	++	+	++	ΒΑ162	++	++	++	++	+++
ΖΚ305	+++	+++	+++	+++	+++	ΒΑ24άεΙ	++	++	+++	++	+++
ΖΚ306	++	+	++	++	++	ΒΑ43	+++		+++	+++	+++
ВА66	++	++	+++	++	+++	ΒΑ91	++	++	++	++	+++
ВА48	++		+++	++	+++	ΒΑ92	++	++	+++	++	+++
ΖΚ133	+	+	+	++	++	ΒΑ86	++	++	++	+++	+++
ΒΑ20ΰά	++	++	++	++	+++	ΒΑ88	+	+	++	+++	+++
ΒΑ20ά	++	++	+++	+++	+++	ΒΑ96	++	+	+++	+++	+++
ВА20	++		++	++	++	ΒΑ97	++	++	+++	+++	+++
ВА99	++	+	++	+	++	ΒΑ44	++	+++	++	++	++
ΒΑ81όΰ	+++	++	+++	+++	+	ΒΑ156	++	++	. ++	++	+++
ΒΑ81ά	+++	++	+++	+++	+++	ΒΑ95	++	++	+++	+++	.+++
ΖΚ137	++	+	++	++	+++	ΖΚ129	++	++	++	++	+++
ΖΚ135	++	+	+	++	++	ΒΑ54	++	++	++	++	+++
ΖΚ130	+	+	+	+	+	ΖΚ152	++	++	++	++	+++
ΖΚ128	++	+	++	++	++	ΒΑ42	++	++	++	++	+++
ВА26	++	++	+++	+++	++	ΡΙΚ294	++	+++	+++	+++	++
81111248	++	+	++	++	+	1гез5а	+	+	+	+	+
ΒΑΥ43- 9006	++	+	+	+	+	ΡΙΚ103	+++	+++	+++	+++	+++
Оа8аНп\|Ь	++	+	++	+	++	ΡΙΚ90	+++	+++	+++	+++	+++

- 47 019961

Таблица 3

Соед.	АЫ	Нек	Зге	Зге (Т/1)	УЕОРН	ΕΘΕΚ	ЕрЬВ4
К584	+++	+++	+++	++	+++	+++	+++
ВА56	++	+++	+++	. ⁺⁺	++	+++	++
К3284	+++	+++	+++	++	+++	+++	+++
ВА60	++	+++	+++	+++	++	+	++
ΖΚ318	++	++	+++	++	+		4-4-
ΖΚ320	+++	+++	+++	++	+++	++	++
ΖΚ333	+++	+++	+++	++	+++	++	++
ΖΚ323	+++	+++	+++	+++	+++	+++	+++
ΖΚ327	+++	+++	+++	++	+++	++	++
ВА776	+++	+++	+++	++	++	++	+++
ΒΑ78ά	+++	+++	+++	++	+++	++	++
ВА22	+++	+++	+++	++	+++	+++	4-4-4-
ВА796	+++	+++	+++	++	+++	+++	+++
ВА85	4-4-	+++	+++	++	++	++	++
ВА87	+++	+++	+++	+++	+++	+++	+++
ΖΚ502	+++	+++	+++	++	++		+
ΖΚ489	+++	+++	+++	+	++	+	++
ΖΚ487	4-4-4-	+++	+++	++	+++	+++	+++
гк491	+++	+++	+++	++	+++	+++	+++
Ζ4493	+++	+++	+++	++	+++	+++	+++
ΒΑ62ΰ	+++	+++	+++	+++	+++	++	+++
ΖΚ450	+++	+++	+++	+	++	+	++
ΖΚ454	+++	++	+++	+	++	++	+
ΖΚ469	+++	+++	+++	+	+4-	++	4-4-
ΖΚ471	+++	+++	+++	+	++	++	+
ΖΚ461	+++	+++	+++	+	+++	++	++
ΖΚ413	+++	+++	+++	+	++	++
ΖΚ379	+++	+++	+++	++	+++	+++	+++
ΖΚ421	+++	+++	+++	+++	+++	+++	+++
ΖΚ403	+++	+++	+++	++	+++	++	+++
ΖΚ405	+++	+++	+++	++	++	++	+
ΖΚ432	+++	+++	+++	++	+++	++	+++
ΖΚ434	+++	+++	+++	++	+++	++	+++
ΖΚ465	+++	+++	+++	+	+++	+++	+++
ΖΚ377	4·+	++	+++	+	4-4-	+	4-
ΖΚ399	+++	+++	+++	+	+	+	++
ΖΚ401	+++	+++	+++	+	+	4-	4-
ВА62	+++	+++	+++	+	+	++	+++
ΖΚ358	+++	+++	+++	++	+++	+++	+++
ΖΚ452	+++	+++	+++	++	+++	++	++
ΖΚ456	+++	+++	+++	+	++	++	++
ΖΚ463	+++	+++	+++	++	+++	++	++
ΖΚ371	4-4· 4-	4-4·+	+++	++	+++	4-4-4-	+++
ΖΚ409	4-4-4-	+++	+++	++	+++	++	+++
ΖΚ428	+++	+++	+·++	++	+++	++	+++
ΖΚ430	4-4-4-	+++	+++	++	+++	++	+++
ΖΚ387	+++	+++	+++	4-	++	4-4-	++
ΖΚ389	+++	+++	+++	++	4*4-4·	++	+++
ΖΚ369	++	++	+++	+	++	++	+
ΖΚ385	++	+++	+++	+	++	+	++
ΖΚ391	++	+++	+++	+	++	++	++
ВА155 2	++	+++	+++	++	++	++	++
ВА157 2	++	++	++	++	++	++	++

- 48 019961

Соед.	АЫ	Нек	Зге	зге (Τ/Ι)	УЕСЕК	ЕСЕК	ЕрЬВ4
ВА59	+++	+++	+++	+++	++	++	+++
ВА63	++	+++	+++	++	++	++	++
ВА93	++	+++	+++	++	++	++	++
ВА49	++	+++	+++	++	+	++	+++
ВА15	++	+++	+++	++	+	+++	++
ΖΚ321	+++	+++	+++	++	++	+	++
ΖΚ337	+++	+++	+++			+	++
ΖΚ347	+++	+++	+++	++	+++	++	++
ΖΚ325	+++	+++	+++	++	+++	++	+++
ΖΚ349	+++	+++	+++	+++	+++	+++	+++
ΖΚ423	+++	+++	+++	++	+++	+++	+++
ΖΚ411	++	++	+++	+	++	++	++
ΖΚ407	++	+++	+++	+	+++	++	+
ВА98	+++	+++	+++	++	+++	+++	++
δ1·	+++	+	++	+	+	+	+
ВА23	++	++	+++	++	+	++	++
ΖΚ485	++	+++	+++	+	+	++	++
ΖΚ495	++	+++	++	++	+	++	++
ΖΚ496	++	++	++	++	++	++	++
ΖΚ494	+++	+++	+++	++	++	++	++
ВА90	++	+++	+++	++	++	++	++
ΖΚ341	++	++	+	+	+	+	+
ΖΚ343	++	+++	+++	+	++	++	++
ΖΚ361	++	++	++	+	+	++	+
ΖΚ359	+++	+++	+++	++	++	++	+++
ΖΚ362	++	+++	+++	+	+	++	+
ВА64	+++	+++	+++	++	+	++	+++
ВА65	++	+++	+++	++	++	++	++
ΖΚ305	++	++	++	++	+	+	++
ΖΚ306	+	++	++	++	++	++	+
ВА66	++	++	++	+		+	++
ВА48	++	+++	+++	++	++	++	++
ΒΑ20άά	+++	+++	+++	++	++	++	++
ΒΑ200	+++	+++	+++	++	++	++	++
ΒΑ20	+++	+++	+++	+++	++	+++	+
ΒΑ99	++	+++	+++	++	+++	++	++
ΒΑ81ΰά	+++	+++	+++	++	+++	+++	+++
ΒΑ81ά	+++	+++	+++	++	+++	+++	+++
ΒΑ26	++	++	+++	++	+	+	+
ΒΑ46	++	++	++	+	++	++	++
ΒΑ45	++	+++	+++	++	++	++	+
ΒΑ39	++	++	++	++	++	+	++
ΒΑ150	++	++	++	+	++	+	++
ΒΑ151	++	++	++	+	+	++	++
ΒΑ21	++	++	++	+	+	+	+
ΒΑ52	++	++	++	+	+	+	+
ΒΑ53	++	++	++	+	+	+	+
ΒΑ31	++	++	++	+	+	++	+
ΒΑ152	+++	+++	+++	+	++	++	++
ΒΑ149	++	+++	+++	++	++	++	++
ΒΑ32	++	++	++	+	+	+	++
ΒΑ55	++	++	++	+	+	++	++
ΒΑ35	++	++	++	++	++	++	++
ΒΑ34	++	++	++	++	++	++	++
ΒΑ38	++	++	++	++	+	+	+
ΒΑ40	++	++	++	++	++	++	+

- 49 019961

Соед.	АЫ	Нек	8гс	8гс (Т/1)	УЕбРК	ЕОГР	ЕрЬВ4
ВА41	++	+4-	++	++	++	+	++
6А14	++	++	++	++	+	+	++
ВА12	++	++	++	++	++	++	++
ВАЗО	++	++	++	++	++	+++
К8208	++	+++	++	++	++	+++	++
ВА116	++	+++	++		+++	++	++
ВА17	+++	+++	+++	+++	+++	+++	+++
ВА134	++	++	++	++	+	+	++
ВА105	++	+++	++	++	++	++	++
ВА122	++♦·	+++	+++	++	++	+++	+++
ВАШ	+	+	++	++	++	++	++
ВА102	+++	+++	+++	++	+++	+++	+++
ВА112	++	+++	+++	++	++	++	++
ВА118	++	++	+	++	++	+
ВА130	++	+++	++	++	+++	+	++
ВА132	++	+++	++	+	++	++	++
ВА139	++	++	++	+	++	++	+
ВА158	+++	+++	+++	++	++	++	++
ВА140	++	++	++	++	+	++	++
ВА141	+	++	+	+	+	++	+
ВА146	++	++	++	+	++	++	++
ВА142	++	++	+++	+	++	++	++
ВА145	+	++	++	+	+	+	++
ВА147	++	++	++	+	++	+	++
ВА148	+	++	++	+	+	++	+
ВА143	++	++	++	++	+	++	++
ВА144	++	++	+++	+	++	+	++
ВА129	++	+	+++	+	++	++	++
ВА131	++	++	11	+	++	+	++
ВА133	++	++	+++	+	+	++	++
ВА120	+++	+++	+++	++	+++	++	++
ВА108	+++	+++	+++	+++	+++	+++	+++
ВА121	+++	+++	+++	+++	+++	+++	+++
ВА89	+++	+++	+++	+++	+++	+++	+++
ВА94	+++	+++	+++	+++	+++	+++	+++
ВА135	+++	+++	+++	++	+++	+++	+
ВА136	+++	+++	+++	++	+++		++
ВА137	+++	+++	+++	+++	+++	++	++
ВА138	+++	+++	+++	+++	+++	+++	++
ВА160	+++	+++	+++	++	++	+++	++
ВА157 3	++	+++	+++	++	+	++	++
ВА154	+++	+++	+++	++	++	++	++
ВА110	+++	+++	+++	++	+++	++	++
ВА115	+++	+++	+++	+++	+++	+++
ВА159	+++	++ +	+++	++	+++	++	++
ВА119	++	+++	+++	++	++	++	++
ВА107	+++	+++	+++	++	+++	+++	+++
ВА124	+++	+++	+++	+++	+++	+++	+++¹
ВА161	++	+	++	+	+	++	+
ВА162	++	++	++	+	+	++	++
ВА2466	++	++	++	++	++	++	++
ВА43	++	+++	++	++	++	++	++
ВА91	++	++	+++	++	++	++	++
ВА92	++	+++	+++	++	++	++	++
ВА86	+++	+++	+++	+++	+++	+++	+++
ВА88	+++	+++	+++	+++	+++	+++	+++
ВА96	+++	+++	+++	++	++	+++	+++
ВА97	+++	+++	+++	++	++	+++	+++
ВА44	++	++	++	++	+	++	+
ВА156	++	++	++	++	++	+++	++
ВА95	++	+++	++	+	+	++	++
ВА54	++	++	+++	++	++	++	++
ВА42	+	++	++	++	++	+	++
31111248	+++	+++	+++	+++	+++	++	+
ΒΑΥ439006	+++	+++	+++	+++	+++	+	++
ОазаНгнЬ				++	+	+++
1ге55а	++	++·+	+++	++	++		++
ΡΙΚ103	+	+	+	+	+	+	+
ΡΙΚ90	+	+	+	+	+	+	+
Р1К294	++	+	++	+	+	+	+

- 50 019961

Таблица 4

Соединение	сЮТ	Т\|’е2	РЬТЗ	ΡϋΟΡΚ	КЕТ	ΙΚ	тТОК
ΖΚ358	+++	++	+++	+++	+++	++	+++
ΖΚ487	+++	+++	+++	+++	+++	+	+++
ΖΚ349	+++	+++	+++	++4	+++	++	+++
ΖΚ494	+++	++	++	+++	+++	+	+++
ВА102	+++	+++	+++	+++	+++	4-
ВА121	+++	+++	+++	+++		++	+++
К384	+++			+++	+++		++
81Л1248	+++	++	+++	+++	+++	++	+
ΒΑΥ43-9006	+++	+++	+	+++	4—	++
ОазаЧ\|П\|Ь	+++	++	+++	+++	++	+	+
1газза	+	++	++ +	+++	++		+

В приведенных табл. 2-4 +++ означает 1С₅₀ меньше чем 1 мкМ; ++ означает 1С₅₀ от 1 до 50 мкМ и + означает 1С₅₀ больше чем 50 мкМ.

IX. Ссылки.

А1а1то, Р.З., Ктдк!, /.А., апб 8кока!, К.М. (2005). Тагдебпд 1ке да!екеерег гез1бие ΐη ркозркотозШбе 3-ктазез. Вюогд. Меб. Скет. 13, 2825-2836.

Азапо, Т., Капба, А., Ка!адт, Н., \а\уапо, М., ОдШага, Т., 1пика1, К., Апа1, М., ЕикизЫта, Υ., ΥηζηΚΕ Υ., К1киск1, М., е! а1. (2000). Р110Ъе!а ΐδ ир-геди1а!еб билпд б1ккегеп!1а!юп ок 3Т3-1.1 се11з апб соп!йЪи!ез !о !ке Ыдк1у тзи1т-гезропз1уе д1исозе !гапзрог! асйуйу. к Вю1. Скет. 275, 17671-17676.

В1, Л., ОкаЪе, I., Ветагб, Ώ.6., апб \иззЬаит, К.Л. (2002). Еаг1у етЪгуотс 1екка11ку ΐη т1се беЛс1еп! ΐη !ке р110Ъе!а са!а1уйс зиЪит! ок Р13-ктазе. Матт Оепоте. 13, 169-172.

В1, Л., ОкаЪе, I., Ветагб, Ώ.6., Аупзкау-Вопз, А., апб \иззЬаит, К.Л. (1999). РгоЪкегаЙуе бекес! апб етЪгуотс 1е!ка11!у т тке кототудоиз ког а бе1е!кп т !ке р110а1рка зиЪит! а1рка ок ркозркотозкбе 3-ктазе. б. Вю1. Скет. 274, 10963-10968.

Вгасктапп, 8.М., иек1, К., Епде1тап, 6.А., Какп, К.С., апб Сап!1еу, Л.С. (2005). РкозркотозШбе 3-ктазе са!а1уЛс зиЪит! бе1е!кп апб геди1а!огу зиЪит! бе1е!кп кауе оррозйе еккес!з оп тзиЪп зепз111У11у т тке. Мо1. Се11. Вю1. 25, 1596-1607.

Сатрз, М., Киск1е, Т., Л, Н., Агб1ззопе, V., Кт!е1еп, Е., 8кау, б., Ееггапб1, С., СкаЪег!, С., ОПЪегоп, С., Егапсоп, В., е! а1. (2005). В1оскабе ок РККдатта зирргеззез рт! тЛаттакоп апб батаде т тоизе тобе1з ок гкеита!о1б аг!кп!1з. Ν! Меб.

Сап!1еу, Л.С., апб Зеек В.О. (1999). \е\у тз1дк!з т!о !итог зирргеззкп: РТΕN зирргеззез !итог когта!кп Ъу гез!гаттд !ке ркозркотозкбе 3-ктазе/АКТ ра!куау. Ргос. ^Л. Асаб. 8ск и8А. 96, 4240-4245.

СопбЪкке, А.М., 1)ауц1зоп, К., Апбегзоп, К.Е., Е11зоп, С.Э., СгаЪЪе, Т., Оккепкаид, К., VапкаезеЪгоеск, В., Тигпег, М., АеЪЪ, Л., Аутапп, М.Р., е! а1. (2005). 8едиепЛа1 асЛуаЛоп ок с1азз Ш апб с1азз ЕА. РКК 1з 1трог!ап! ког !ке рптеб гезрка!огу Ъигз! ок китап Ъи! по! типпе пеи!горк11з. В1ооб 106, 1432-1440.

Эотт, б., апб Аа!егЛе1б, М.1). (1997). изтд з!гис!иге !о беЛпе !ке 1'ипс(1оп ок ркозркотозкбе 3-ктазе катбу тетЪегз. ЕЕВ8 Ле!!. 410, 91-95.

Еепд, б., Рагк, б., Сгоп, Р., Незз, Ώ., апб Нетттдз, В.А. (2004). ШепПЛсаЛоп ок а РКВ/Ак! кубгоркоЪк то!1к 8ег-473 ктазе аз 1)\А-с1ерепс1еп1 рго!ет ктазе. б. Вю1. Скет. 279, 41189-41196.

Егитап, О.А., Меуегз, К.Е., апб Сап!1еу, Л.С. (1998). Ркозркотозкбе ктазез. Аппи Кеу. Вюскет. 67, 481-507.

Натпд!оп, Л.8., Етб1ау, О.М., апб ЛатЪ, К.Е. (2005). Кез!гаттд РКК: тТОК з1дпа11тд доез Ъаск !о !ке тетЪгапе. Тгепбз Вюскет. 8ск 30, 35-42.

Нккзоп, I., 2као, Υ., Кккагбзоп, С.6., Огееп, 8.6., МагЛп, КМ., Огг, А.Л, Кеарег, Р.М., баскзоп, 8.Р., СигЛп, Ν.6., апб 8т1!к, О.С (2004). к1еп1Ика1юп апб ска^ас!е^^ζа!^оп ок а поуе1 апб зресШс 1пк1Ъ1!ог ок !ке а!ах1а-!е1апд1ес!аз1а ти!а!еб ктазе АТМ. Сапсег Кез. 64, 9152-9159.

баскзоп, 8.Р., 8скоепуае1бег, 8.М., Оопса1уез, I., NезЪ^!!, А.8., Υар, С.Л., \\'пд11Ь С.Е., Кепске, V., Апбегзоп, К.Е., Оорке1бе, 8.М., Υμ^ Υ., е! а1. (2005). РК-ктазе р110Ъе!а: а пе\у !агде! ког ап!1!кготЪо!к !кегару. Ν!. Меб. 11, 507-514.

Ка!зо, К., Оккепкаид, К., Актаб1, К., \\'1Ше, 8., Т1ттз, б., апб Аа!егЛе1б, М.О. (2001). Се11и1аг кипсЛоп ок ркозркотозкбе 3-ктазез: 1тр1ка!кпз ког беуе1ортеп!, котеоз!аз1з, апб сапсег. Аппи Кеу. Се11. Эеу. В1о1. 17, 615-675.

Ктдк!, Ζ.Λ., СЫапд, О.О., А1а1то, Р.6., Кепзк1, О.М., Но, С.В., Соап, К., АЪгакат, К.Т., апб 8кока!, К.М. (2004). Локогт-зресхЛс ркозркотозкбе 3-ктазе тЪ1Ъ1!огз кгот ап агу1тогрко1те зсакко1б. Вюогд. Меб. Скет. 12, 4749-4759.

Ктдк!, Ζ.Λ., апб 8кока!, К.М. (2005). Ееа!игез ок зе1ес!1уе ктазе тЪ1Ъ1!огз. Скет. Вю1. 12, 621-637.

Лаи, А., 8утЪапк, К.М., Актеб, Р.8., Тау1ог, О.Л., баскзоп, 8.Р., 8т1!к, О.С., апб О'Соппог, М.б. (2005). 8ирргеззюп ок Нб^б ткесйоп Ъу а зта11 то1еси1е тЪ1Ъ1!ог ок !ке АТМ ктазе. Ν!. Се11. Вюб. 7, 493500.

Лио, б., Е1е1б, 8.6., Лее, 6.Υ., Епде1тап, 6.А., апб Сап!1еу, Л.С. (2005). Тке р85 геди1а!огу зиЪит! ок ркозркотозШбе 3-ктазе боуп-геди1а!ез ПК8-1 з1дпа1тд У1а !ке когтакоп ок а зедиез!га!юп сотр1ех. б. Се11. Вюб. 170, 455-464.

- 51 019961

Майкикийап, ТгаГпу, Е.А., Хиопд, КН., Айатк, ГА., Тепеуск, Ь.Р., Тау1ог, 8.8., апй 8о\уайкШ, ГМ. (1994). сАМР-Эерепйеп1 Рго£ет-Ктаке - Сгук£а11одгарЫс Гпк1дк£к 1п(о 8иЬк(га(е Кесодтйоп апй Ркокрко(гапкГег. Рго£ет 8с1епсе. 3, 176-187.

Райпссо, Е., Хойе, А., ВагЬепк, Ь., 8е1уе(е11а, С., МаГГе1, А., Вгапсассю, М., Магепдо, 8., Кикко, С., Аζζο1^пο, О., КуЬа1Шп, 8.Ό., е( а1. (2004). Р13датта тойи1а£ек (ке сагй1ас гекропке (о скготс ргеккиге оуег1оай Ьу й1кйпс£ Шпаке-йерепйеп( апй -тйерепйеп( еГГес(к. Се11. 118, 375-387.

Репд, У., ХУоойк, К.С., Веат1кк, Н., Υе, К., Ьеек-МШег, 8.Р., Ьаут, М.Р., апй ВейГогй, 1.8. (2005). Оейаепсу т (ке са£а1уйс киЬипк оГ ОКА-йерепйеп( рго£ет Шпаке саикек йотеп-геди1айоп оГ АТМ. Сапсег Кек. 65, 1670-1677.

Кийегтап, Ν.Ε., Каре11ег, К., ХУкке, М.Р., апй Сапйеу, Ь.С. (1990). Асйуайоп оГ ркокркаййу1шокйо1 3-к1паке Ьу ткийп. Ргос. Νη(1. Асай. 8сГ И8А. 87, 1411-1415.

8айки, С., Мактоукку, В., Ьюк, К., 8отее11, С.С., апй 8(аип(оп, Э.Е. (2003). Еккепйа1 го1е оГ ркокркотоккгйе 3-Шпаке йека ш пеийоркй йкесйопа1 тоуетеп(. 1. 1ттипо1. 170, 2647-2654.

8атие1к, У., Уапд, Ζ., ВагйеШ, А., 8йктап, К., Р(ак, 1., 8ζаЬο, 8., Уап, Н., Сахйаг, А., Ротее11, 8.М., К1ддтк, С.к, е( а1. (2004). Н1дк Ггес.|иепсу оГ тиШйопк оГ (ке Р1К3СА депе ш китап сапсегк. 8с1епсе. 304, 554.

8ск1пй1ег, Т., Вогптапп, У., РеШсепа, Р., МШег, У.Т., С1агккоп, В., апй Кшгуап, 1. (2000). 8£гис£ига1 тескашкт Гог 8Т1-571 шШЫйоп оГ аЬе1коп (угокте Шпаке. 8с1епсе. 289, 1938-1942.

8сШпй1ег, Т., 81скег1, Р., Р1со, А., Са/1(, А., Ьеуй/Ш, А., апй Кипуаи, 1. (1999). Сгук£а1 к(гис(иге оГНск т сотр1ех тейк а 8гс Гатйу-ке1есйуе (угокте Шпаке 1пк1Ьйог. Мо1. Се11. 3, 639-648.

8скт1й, А.С., Вугпе, КГО., Уйаг, К., апй ХУокско1кШ, К. (2004). В1крегохоуапайшт сотроипйк аге ро(еп( РТЕК тЫЬйогк. РЕВ8 Ьей. 566, 35-38.

ИеШ, К., Ргитап, Э.А., ΥЬа11е, С.М., Ракккаиег, М., К1ет, 1., Акапо, Т., СапЙеу, Ь.С., апй Какп, С.К. (2003). Роккгуе апй педайуе го1ек оГр85 а1рка апй р85 Ье(а геди1а£огу киЬипкк оГркокркотоккгйе 3-Шпаке т тки1т Цдпайпд. 1. Вю1. Скет. 278, 48453-48466.

ИеШ, К., ΥЬа11е, С.М., Вгасктапп, 8.М., У1сеп(, Ό., Уай, 1.М., Какп, С.К., апй Сапйеу, Ь.С. (2002). 1псгеакей ткикп кепкйгуйу т иксе 1асШпд р85Ье(а киЬипк оГркокркотоккгйе 3-Шпаке. Ргос. Хай. Асай. 8ск И8А. 99, 419-424.

УапкаекеЬгоеск, В., А11, К., Вйапсю, А., Сеегтд, В., апй Роикак, Ь.С (2005). 81дпаШпд Ьу Р13К 1коГогтк: ткщк(к Ггот депе-1агде£ей тисе. Тгепйк Вюскет. 8ск 30, 194-204.

Ушгедга, ГС., Майте/, К., Мойкаккап, Р., Ьока, ЬН., Рагайа СоЬо, С., ЬоЬо, У.Г, Ьициего, С.Г., А1уа1га-Уа1кпа, Ь., Катоп у Са)а1, 8., Ко)ак, ГМ., апй 8апскеζ-Р^^еΐο, К. (2005). Ри11 асйуайоп оГ РКВ/АШ т гекропке (о ткикп ог ютхтд гай1айоп 1к тей1а£ей £кгоидк АТМ. 1. Вю1. Скет. 280, 4029-4036.

ХУа1кег, Е.Н., Расо1й, М.Е., Репкк, О., 8(еркепк, Ь., Натек1пк, Р.Т., Уутапп, М.Р., апй ХУПНатк, К.Ь. (2000). 8(гис(ига1 йе(егттап(к оГ ркокркотокШйе 3-Шпаке шкгЬйюп Ьу теойтаптп, ЬУ294002, диегсейп, тупсейп, апй кШигокрогте. Мо1. Се11. 6, 909-919.

ХУа1кег, Е.Н., Репкк, О., Кгей, С., 8£еркепк, Ь., апй Уйкатк, К.Ь. (1999). 8(гис(ига1 тыдШк 1п(о ркокркотоккгйе 3-Шпаке са£а1ук1к апй ЦдпаШпд. Кайне. 402, 313-320.

Уагй, 8., 8о(кюк, У., Ьотейеп, 1., Вгисе, I., апй Ртап, Р. (2003). Ткегареикс ро£епйа1 оГ ркокркотоккгйе 3-Шпаке тЫЬйогк. Скет. Вю1. 10, 207-213.

Уай, А., Коске, 8., ХУе(хкег, К., ЬаГГагдие, М., Топкк, К., Мауеих, Р., Скар, Н., апй Каупа1, Р. (2002). А Гипсйоп Гог ркокркотоккгйе 3-Шпаке Ье(а йр1й ргойис£к т соиркпд Ье(а датта (о Как асйуайоп т гекропке (о 1укоркокркайй1с ас1й. 1. Вю1. Скет. 277, 21167-21178.

Уи, 1., Ζкапд, У., Мс11гоу, 1., КогйогГ-№ко1ю, Т., Огг, С.А., апй Васкег, ГМ. (1998). Кеди1айоп оГ (ке р85/р110 ркокркаййу1токйо1 3'-Шпаке: к(аЫ1|/а(1оп апй ткгЬйгоп оГ (ке р110а1рка са£а1уйс киЬипк Ьу (ке р85 геди1а£огу киЬипк. Мо1. Се11. Вю1. 18, 1379-1387.

А1т1гап£е, Ь., Мидпашг, А., Эе Тота, К., СатЬа, А., апй Мигтапп, У. (1970). 11тйа/о1е Ьепуайуек. ГУ. 8уп(кек1к апй Ркагтасо1од1са1 Асйуйу оГ Охудепа£ей Ьепуайуек оГ 1т1йахо|1,2-а|рупйте. 1оигпа1 оГ Мей1ста1 СкетМгу. 13, 1048-1051.

Агткйопд, У.У., КН., С., апй Катаде, К. (1975). А пете Ьготтайпд геадепй 2сагЬохуе£ку11пркепу1ркокркопгит регЬготгйе. Те(гакейгоп Ьейегк. 6, 373-376.

Ва(етап, А., В1теу, Е., ЬигЬт, К., Еййу, 8.К., Нотее, К.Ь., апй 8оппкаттег, Е.Ь. (2000). Тке РГат рго£ет ГатШек йа(аЬаке. Кис1е1с. Ас1йк Кек. 28, 263-266.

Шст(о, Е., Ьоетейк, К., 8скт1й£, А., Ьт, 8., Киедд, М.А., На11, А., апй На11, М.К (2004). Маттакап ТОК сотр1ех 2 соп(го1к (ке асйп су(окке1е(оп апй 1к гаратуст ткепккгуе. Νη(. Се11. Вю1. 6, 1122-1128.

1оШГГе, Г.Т. (2002). Ргтс1ра1 сотропеп! апа1ук1к, 2пй ей. (Кете Уогк: 8ргтдег).

КгадЫ, Ζ.Ά., СЫапд, С.С., А1а1то, Р.Ь, КепкШ, О.М., Но, С.В., Соап, К., АЬгакат, К.Т., апй 8кока£, К.М. (2004). ГкоГогт-кресШс ркокркотокШйе 3-Шпаке 1пк1Ьйогк Ггот ап агу1тогрко1те ксаГГо1й. Вюогд. Мей. Скет. 12, 4749-4759.

Ьаккктапап, к, Е1тепйогГ, 18., апй Оζсап, 8. (2003). Апа1ук1к оГ ткиНп-китикПей д1исоке ир(аке т й1ГГегепйа£ей 3Т3-Ь1 ай|росу(ек. Ме(койк Мо1. Мей. 83, 97-103.

ЬотЬагйто, ГС. (1965). Ргерагайоп апй пете геасйопк оГ 1т1йа7о[1,2-а]руг1й1пек. 1оигпа1 оГ Огдашс

- 52 019961

СЬет181гу. 30, 2403-2407.

МаШ^огкз (2004). 81а11811С8 Тоо1Ьох: Рог изе \νί11ι МАТЬАВ. Цзег'з Сшёе, Vе^8^оη 5. ί.Ίιηρ1(3Γ 7: Рип^а! Сотρоηеη1 Апа1у81з: МаРтогкз.

МЬазке, 8.В., апб Агдаёе, Ы.Р. (2004). Ке§юзе1ес11уе ^и^ηаζо1^ηоηе-ά^^ес1еά ог1Ьо ШЫайоп оГ ^и^паζо1^поу1^и^по1^пе: ρ^ас1^са1 зупШеыз оГ па1ига11у осситпд Нитап Ι)ΝΛ ^о^тега^е I ρо^8оη 1ио1опт А апб 1ио1отп8 В апб Е. I. Огд. СЬет. 69, 4563-4566.

Могпз, I., ^1зкка, Э.С., апё Еапд, Υ. (1994). А сускаекуёгайоп гои1е 1о 2-аттосНготопе8. 8уп1Ье11с СоттитсаНопз. 24, 849-858.

8егитап, Ь.А., Аидег, К.К., апё Сап11еу, Ь.С. (1991). МепНйсаНоп апё с]иап11Г1саИоп оГ ρо1уρко8ρко^по8^1^άе8 ρ^оάисеά т ^е8ρоп8е 1о ρ^^ΐ^ην^ цго\\1Ь Гас1ог зйтикНоп. МеШоёз Е^уто1. 198, 78-87.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединение, выбранное из соединений, имеющих следующую формулу:

где К¹ представляет собой водород, К³-замещенный или незамещенный С₁-С₈-алкил, незамещенный С₅-С₇-циклоалкил или незамещенный 5-7-членный гетероциклоалкил;

К² представляет собой К⁴-замещенный гетероарил, который имеет 2-3 конденсированных кольца, которые содержат 1-4 гетероатома, выбранных из Ν, О и 8;

К³ представляет собой галоген, -СЫ, -ОК⁵, -8(О)_пК⁶, -ЫК⁷К⁸, -С(О)К⁹, -ЫК¹⁰-С(О)К¹¹,

-ЫК¹²-С(О)-ОК¹³, -С(О)ЫК¹⁴К¹⁵, -ЫК¹⁶8(О)2К¹⁷, К¹⁹-замещенный или незамещенный С1-С₈-алкил, К¹⁹-замещенный или незамещенный 2-8-членный гетероалкил, К¹⁹-замещенный или незамещенный С5-С7-циклоалкил или К¹⁹-замещенный или незамещенный 5-7-членный гетероциклоалкил, где п равен целому числу от 0 до 2;

4 20 22 23

К представляет собой галоген, -ОК или -ЫК К ;

К⁵, К⁶, К⁷, К⁸, К⁹, К¹⁰, К¹¹, К¹², К¹³, К¹⁴, К¹⁵, К¹⁶ и К¹⁷ представляют собой независимо водород, К³⁵-замещенный или незамещенный С1-С8-алкил, К³⁵-замещенный или незамещенный 2-8-членный гетероалкил, незамещенный С5-С₇-циклоалкил, К³⁵-замещенный или незамещенный 5-7-членный гетероцик лоалкил;

К¹⁹ и К³⁵ независимо представляют собой водород, галоген, незамещенный С₁-С₈-алкил, незамещенный 2-8-членный гетероалкил, незамещенный С₅-С₇-циклоалкил, незамещенный 5-7-членный гете роциклоалкил;

К²⁰, К²² и К²³ независимо представляют собой водород.
2. Соединение по п.1, в котором К² представляет собой νν²-νν³ (Ш), где ЭД⁴, Шу 0 и Ш'¹ независимо представляют собой =СН-, =СК⁴- или =Ν- и кольцо А представляет собой частично или полностью ненасыщенное 6- или 7-членное кольцо.
3. Соединение по любому из пп.1, 2, где К⁵, К⁶, К⁷, К⁸, К⁹, К¹⁰, К¹¹, К¹², К¹³, К¹⁴, К¹⁵, К¹⁶ и К¹⁷ представляют собой независимо водород, незамещенный С₁-С₈-алкил, незамещенный 2-8-членный гетероалкил, незамещенный С5-С7-циклоалкил или незамещенный 5-7-членный гетероциклоалкил.
4. Соединение по любому из пп.1-3, где К¹ представляет собой К³-замещенный или незамещенный С₁-С₈-алкил или незамещенный 5-7-членный гетероциклоалкил.
5. Соединение по любому из пп.1-4, где К¹ представляет собой К³-замещенный или незамещенный С₁-С₈-алкил.
6. Соединение по любому из пп.1-5, где К¹ представляет собой К³-замещенный или незамещенный С1-С4-алкил.
7. Соединение по любому из пп.1-5, где К¹ представляет собой метил или незамещенный разветвленный С3-С6-алкил.
8. Соединение по любому из пп.1-7, где К¹ представляет собой изопропил.
9. Соединение по любому из пп.1, 2, где К³ представляет собой К¹⁹-замещенный или незамещенный С1-С8-алкил или К¹⁹-замещенный или незамещенный С5-С₇-циклоалкил.
10. Соединение по любому из пп.1-9, где К¹⁹ представляет собой незамещенный С₁-С₈-алкил или незамещенный С5-С7-циклоалкил.
11. Соединение по любому из пп.1-10, где К¹⁹ представляет собой незамещенный С₁-С₄-алкил или

- 53 019961 незамещенный циклопентил.
12. Соединение по п.1, где К² представляет собой К⁴-замещенный или незамещенный индолил, К⁴-замещенный или незамещенный бензоксадиазолил, К⁴-замещенный или незамещенный бензодиоксолил, К⁴-замещенный или незамещенный бензодиоксанил, К⁴-замещенный или незамещенный тианафтанил, К⁴-замещенный или незамещенный пирролопиридинил, К⁴-замещенный или незамещенный индазолил, К⁴-замещенный или незамещенный тетрагидронафталинил, К⁴-замещенный или незамещенный хинолинил, К⁴-замещенный или незамещенный хиноксалинил, К⁴-замещенный или незамещенный пиридопиразинил, К⁴-замещенный или незамещенный хиназолинонил, К⁴-замещенный или незамещенный хроменонил, К⁴-замещенный или незамещенный бензоизоксазолил, К⁴-замещенный или незамещенный имидазопиридинил, К⁴-замещенный или незамещенный бензофуранил или К⁴-замещенный или незамещенный бензотиофенил.
13. Соединение по п.12, где К² представляет собой К⁴-замещенный индолил.
14. Соединение по п.12, где К² представляет собой 5-гидроксииндол-2-ил и В¹ представляет собой изопропил.
15. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение по любому из пп.1-14 и фармацевтически приемлемый эксципиент.
16. Применение соединения по любому из пп.1-14 для лечения заболевания, опосредуемого активностью ΡI3-киназы или активностью ΡI3-киназы и активностью тирозинкиназы, у человека или животного.
17. Способ лечения заболевания, опосредуемого активностью ΡI3-киназы или активностью ΡΙ3киназы и активностью тирозинкиназы, у субъекта, нуждающегося в таком лечении, причем указанный способ включает введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп.1-14.
18. Способ лечения нарушения резорбции костей, аномального воспаления, аутоиммунного заболевания, тромбоза, астмы или рака у субъекта, нуждающегося в таком лечении, причем указанный способ включает введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп.1-14.
19. Способ по п.18, где рак выбирают из группы, включающей метастазы рака; лейкоз; карциномы; саркомы; рак головного мозга, шейки матки, головы и шеи, почек, легких, меланому, мезотелиому, рак желудка или матки; медуллобластому, болезнь Ходжкина, неходжкинскую лимфому, множественную миелому, рак яичников, рабдомиосаркому, первичный тромбоцитоз, первичную макроглобулинемию, первичные опухоли головного мозга, злокачественную панкреатическую инсуланому, злокачественный карциноид, рак мочевого пузыря, предзлокачественные повреждения кожи, тестикулярный рак, лимфомы, рак щитовидной железы, нейробластому, рак пищевода, рак мочеполового тракта, злокачественную гиперкальциемию, внутриматочный рак, адренальный кортикальный рак, новообразования эндокринного и экзокринного отделов поджелудочной железы, рак простаты, рак печени, рак толстой кишки, рак молочной железы, острый миелоидный лейкоз, хронический миелоидный лейкоз или немелкоклеточный рак легких.
20. Применение соединения по любому из пп.1-14 для получения лекарственного средства для лечения заболевания, опосредуемого активностью ΡI3-киназы, или заболевания, опосредуемого активностью ΡI3-киназы и активностью тирозинкиназы.
21. Применение соединения по любому из пп.1-14 для получения лекарственного средства для лечения резорбции костей, аномального воспаления, аутоиммунного заболевания, тромбоза, астмы или рака.
22. Применение по п.21, где рак выбирают из группы, включающей метастазы рака; лейкоз; карциномы; саркомы; рак головного мозга, шейки матки, головы и шеи, почек, легких, меланому, мезотелиому, рак желудка или матки; медуллобластому, болезнь Ходжкина, неходжкинскую лимфому, множественную миелому, рак яичников, рабдомиосаркому, первичный тромбоцитоз, первичную макроглобулинемию, первичные опухоли головного мозга, злокачественную панкреатическую инсуланому, злокачественный карциноид, рак мочевого пузыря, предзлокачественные повреждения кожи, тестикулярный рак, лимфомы, рак щитовидной железы, нейробластому, рак пищевода, рак мочеполового тракта, злокачественную гиперкальциемию, внутриматочный рак, адренальный кортикальный рак, новообразования эндокринного и экзокринного отделов поджелудочной железы, рак простаты, рак печени, рак толстой кишки, рак молочной железы, острый миелоидный лейкоз, хронический миелоидный лейкоз или немелкоклеточный рак легких.