DE69420754T2

DE69420754T2 - Verfahren zur Herstellung von Phenylgruppe enthaltende optisch-aktiven Alpha-Hydroxycarbonsäuren

Info

Publication number: DE69420754T2
Application number: DE69420754T
Authority: DE
Inventors: Takakazu Endo; Yoshihiro Hashimoto; Yuji Hirata; Koji Tamura
Original assignee: Mitsubishi Rayon Co Ltd
Current assignee: Mitsubishi Rayon Co Ltd
Priority date: 1993-02-03
Filing date: 1994-01-31
Publication date: 2000-01-13
Anticipated expiration: 2014-02-01
Also published as: DE69420754D1; EP0610048A3; US5580765A; EP0610048B1; EP0610048A2; SG50514A1; JPH06237789A; JP2720140B2

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft ein biologisches Verfahren zur Herstellung einer optisch aktiven α-Hydroxycarbonsäure, die eine Phenylgruppe aufweist. Insbesondere betrifft die Erfindung ein Verfahren zur Herstellung einer optisch aktiven α-Hydroxycarbonsäure mit einer Phenylgruppe gemäß der unten dargestellten Formel (I) durch die Einwirkung eines Mikroorganismus, der dazu befähigt ist, eine Nitrilgruppe eines razemischen α-Hydroxynitrils der unten dargestellten Formel (II) asymmetrisch zu hydrolysieren. Die optisch aktive α-Hydroxycarbonsäure der Formel (I) ist von industrieller Bedeutung als ein Ausgangsmaterial zur Synthese von Pharmazeutika und Agrochemikalien wie von Antibiotika oder Arzneimitteln, die eine Wirkung auf das sympathetische Nervensystem ausüben, und als ein Auflösungsreagens.
Bekannte Verfahren zur Herstellung einer optisch aktiven α- Hydroxycarbonsäure mit einer Phenylgruppe schließen die optische Auflösung und/oder Trennung von Razematen durch Kristallisation oder Chromatographie und asymmetrische Synthese durch organochemische Verfahren ein.
Diese Verfahren beinhalten im allgemeinen komplizierte Abläufe und Vorgehensweisen, wobei jedoch häufig nur geringe Ausbeuten eines Produkts erhältlich sind.
Zur Überwindung dieser Probleme sind biologische Verfahren unter Anwendung von Mikroorganismen vorgeschlagen worden. Beispielsweise ist vorgeschlagen worden, substituiertes oder unsubstituiertes Mandelonitril oder substituiertes oder unsubstituiertes Mandelamid durch die Einwirkung eines Mikroorganismus, der zum Genus Alcaligenes, Pseudomonas, Rhodopseudomonas, Corynebacterium, Acinetobacter, Bacillus, Mycobacterium, Rhodococcus oder Candida gehört, asymmetrisch zu hydrolysieren, um optisch aktive Mandelsäure oder Derivate davon zu erhalten, wie offenbart in EP 0 348 901 A (korrespondierend zu JP-A-2-84198 (der hier verwendete Begriff "JP-A" bedeutet eine "ungeprüfte veröffentlichte japanische Patentanmeldung")) und in Applied and Environmental Microbiology, Bd. 57,5. 3028-3032 (1991). Ebenfalls ist es bekannt, eine überwiegende Anteilsmenge von R(-)-Mandelsäure oder einem Derivat davon direkt aus razemischem Mandelonitril oder einem Derivat davon durch die Einwirkung eines Mikroorganismus zu erhalten, der zum Genus Pseudomonas, Alcaligenes, Acinetobacter, Caseobacter, Nocardia, Bacillus, Brevibacterium oder Aureobacterium gehört, wie offenbart in US 5 223 416 (korrespondierend zu JP-A-4-218385, JP-A-4-99495 und JP-A-4-99496).
Bezüglich dieser biologischen Verfahren würde das Auffinden eines neuen Mikroorganismus mit höhere Aktivität und höherer optischer Selektivität einen großen industriellen Vorteil darstellen und ergeben.
Die hier auftretenden Erfinder haben intensiv nach einem Mikroorganismus gesucht, der die Befähigung aufweist, eine optisch aktive cc-Hydroxycarbonsäure mit einer Phenylgruppe mit industriellen Vorteilen zu produzieren. Sie haben herausgefunden, daß ein neuer Mikroorganismus, der zum Genus Gordona gehört und aus dem Boden isoliert wird, wirksam ist.
Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahren zur überwiegenden Herstellung einer optisch aktiven α- Hydroxycarbonsäure, die eine Phenylgruppe aufweist, dargestellt durch die Formel (I):
worin X ein Wasserstoffatom, eine Hydroxylgruppe, eine Alkylgruppe mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen, eine Alkoxygruppe mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen, eine Thioalkylgruppe, ein Halogenatom, eine Phenyl-, Phenoxy-, Amino- oder eine Nitrogruppe darstellt, welche an die o-, m- oder p-Position gebunden sind, und n 0, 1 oder 2 darstellt,
wobei das Verfahren eine Stufe umfaßt, in der man einen Mikroorganismus, der dazu befähigt ist, eine Nitrilgruppe eines razemischen α-Hydroxynitrils der Formel (II):
worin X und n wie oben definiert sind,
wobei der genannte Mikroorganismus zum Genus Gordona oder behandelten Zellen davon gehört, mit einem razemischen α- Hydroxynitril der Formel (II) oder einer Mischung eines Aldehyds, der dem genannten Nitril entspricht, und von Blausäure in einem neutralen bis basischen wässrigen Medium zur Reaktion bringt.
Die vorliegende Erfindung beruht auf der Tatsache, daß das α- Hydroxynitril der Formel (II) in einem neutralen bis basischen wässrigen Medium bei einem Dissoziationsgleichgewicht zwischen dem α-Nitril und dem entsprechenden Aldehyd und Blausäure leicht razemisiert wird. Die Erfinder haben herausgefunden, daß das α-Hydroxynitril der Formel (II) direkt in eine optisch aktive α- Hydroxycarbonsäure mit einer Phenylgruppe der Formel (I) unter überwiegender Erzeugung der D-Form oder der L-Form überführt wird, indem man das oben genannte Razemisierungsreaktionssystem mit dem oben genannten Mikroorganismus kuppelt. Der hier verwendete Begriff "unter überwiegender Erzeugung" bedeutet, daß die D-Form oder die L- Form aus einer razemischen Verbindung in einer Ausbeute von 50 bis 100% erhalten wird, bezogen auf die Menge des Reaktionsteilnehmers gemäß Formel (II).
Der Mikroorganismus, der in der vorliegenden Erfindung verwendet wird, gehört zum Genus Gordona und ist dazu befähigt, eine Nitrilgruppe eines razemischen α- Hydroxynitrils der Formel (II) asymmetrisch zu hydrolysieren, um in hoher Konzentration eine optisch aktive α- Hydroxycarbonsäure mit einer Phenylgruppe der Formel (I) zu erzeugen und anzuhäufen.
Der Mikroorganismus schließt in typischer Weise Gordona terrae MA-1 ein, den die Erfinder aus dem Boden isoliert und beim National Institute of Bioscience & Human Technology(früher Fermentation Research Institute), Agency of Industrial Science & Technology, unter der Hinterlegungs- und Empfangsnummer FERM BP-4535 hinterlegt haben. Es werden nun die morphologischen und physiologischen Eigenschaften dieses Stammes beschrieben.
MA-1:
Gestalt: polymorpher Bazillus
Grams Färbung: +
Spore: -
Beweglichkeit: -
Oxidase: -
Katalase: +
Farbe der Kolonie: rosa bis orange
Stab-Coccus-Zyklus: +
Ausbreitung peripherer Zellen der Kolonie: beobachtet
Bildung aerialer Hypha: nicht beobachtet
Verhalten gegen Sauerstoff: aerob
Diaminosäure der Zellwand: meso-Diaminopimelinsäure
Glycolyl-Test: + (Glycolyl-Typ)
Zucker-Zusammensetzung der Zellwand:
Arabinose: +
Galactose: +
Vorliegen von Chinon: MK-9 (H&sub2;)
Adenin-Zersetzung: -
Tyrosin-Zersetzung: -
Harnstoff-Zersetzung: +
Verwertbare Substanzen:
Inosit: -
Maltose: -
Mannit: +
Rhamnose: +
Sorbit: +
Natrium-m-hydroxybenzoat: -
Natriumbenat: +
Natriumzitrat: +
Natriumlactat: +
Testosteron: +
Acetamid: -
Natriumpyruvat: +
Wachstum in der Gegenwart von 0,02% Natriumazid: +
Wachstum bei 10ºC: +
Wachstum bei 40ºC: +
Wachstum in der Gegenwart von 0,001% Kristall-Violett: +
Wachstum in der Gegenwart von 0,3% Phenylethanol: +
Wachstum in der Gegenwart von 5% NaCl: +
Wachtum in der Gegenwart von 7% NaCl: +
Die oben beschriebenen taxonomischen Eigenschaften wurden untersucht unter Bezug auf Bergey's Manual of Systematic Bacteriology (1986), J. Gen. Appl. Microbiol., Vol. 34, S. 341 bis 348 (1988) und auf Int. J. Syst. Bacteriol., Vol. 39, S. 371 (1989). Der MA-1-Stamm wurde identifiziert und gehört zu Gordona terrae. Spezifische Beispiele der Verbindungen der Formel (II), die als ein Substrat in der vorliegenden Erfindung verwendet werden können, schließen Mandelonitril,
2-Chlormandelonitril, 3-Chlormandelonitril,
4-Chlormandelonitril, 4-Hydroxymandelonitril,
4-Methylmandelonitril, 4-Methoxymandelonitril,
4-Methylthiomandelonitril, 4-Aminomandelonitril,
4-Nitromandelonitril, 3-Phenoxymandelonitril,
Phenyllactonitril, 4-Phenyl-α-hydroxybutyronitril,
3-(2-Methoxyphenyl)lactonitril,
3-(3-Methoxyphenyl)lactonitril,
3-(4-Methoxyphenyl)lactonitril, 4-(4-Fluorphenyl)-αhydroxybutyronitril, 4-(2-Chlorphenyl)-α-hydroxybutyronitril,
4-(4-Bromphenyl)-α-hydroxybutyronitril,
4-(2-Trifluormethylphenyl)-α-hydroxybutyronitril,
4-(3-Trifluormethylphenyl)-α-hydroxybutyronitril und
4-(2-Hydroxyphenyl)-α-hydroxybutyronitril ein.
Die Züchtung des Mikroorganismus wird in üblichen Medien durchgeführt, die assimilierbare Kohlenstoffquellen (z. B. Glycerin, Glucose, Saccharose, Malz-Extrakt, Lactose und Fructose), assimilierbare Stickstoffquellen (z. B. Casaminosäure, Fleisch-Extrakt und Hefe-Extrakt) und anorganische Nährstoffe enthalten, die für das Wachstum wesentlich sind (z. B. Magnesiumchlorid, Natriumsulfat, Calciumchlorid, Mangansulfat, Eisenchlorid und Zinksulfat).
Zum Erhalt einer gesteigerten Enzymaktivität wird ein Induziermittel für das Enzym dem Kulturmedium in der anfänglichen oder mittleren Stufe der Züchtung in einer solchen Konzentration zugefügt, die das Wachstum nicht wesentlich inhibiert. Geeignete Induziermittel für das Enzym schließen Nitrile (z. B. Cinnamonitril, Benzylcyanid, Isobutyronitril, β-Phenylpropionitril, Benzonitril, 2-, 3- oder 4-Cyanpyridin, 1-Cyclohexenylacetonitril, &epsi;-Caprolactam, γ-Butyronitril und o-Aminobenzonitril) und Amide (z. B. Isobutylamid, Phenylacetamid und 4-Pyridincarbonsäureamid) ein.
Die Züchtung wird aerob bei einem pH-Wert von 4 bis 10 und einer Temperatur von 5 bis 50ºC über eine Dauer von ca. 1 bis 7 Tagen durchgeführt, bis die Maximalaktivität erreicht ist.
Die asymmetrische Hydrolysereaktion kann durchgeführt werden, indem man mikrobielle Zellen, die aus der Kultur geerntet wurden, oder behandelte mikrobielle Zellen (z. B. getrocknete Zellen, gebrochene Zellen, ein rohes oder gereinigtes isoliertes Enzym, immobilisierte mikrobielle Zellen oder ein immobilisiertes Enzym) in einem wässrigen Medium (z. B. Wasser und Pufferlösung) suspendiert und ein razemisches α- Hydroxynitril der Formel (II) oder eine Mischung aus einem dem Nitril entsprechenden Aldehyd und Blausäure in Kontakt mit der Zellsuspension bringt. Das Reaktionssystem sollte fast neutral oder basisch gehalten werden, um das α- Hydroxynitril der Formel (II) zu razemisieren. D. h., der pH- Wert des Reaktionssystems sollte in einem Bereich von 4 bis 11 und vorzugsweise von 6,5 bis 10 gehalten werden.
Die Konzentration des Substrats des Reaktionssystems beträgt gewöhnlich 0,1 bis 10 und vorzugsweise 0,2 bis 5 Gew.-% des razemischen α-Hydroxynitrils der Formel (II), bezogen auf das gesamte Reaktionssystem, wobei sie schwanken kann, in Abhängigkeit von der Empfindlichkeit des Enzyms gegenüber dem dem razemischen α-Hydroxynitril der Formel (II) entsprechenden Aldehyd oder der Blausäure.
Zur Verringerung einer Enzym-Denaturierung durch den Aldehyd können Natriumsulfit, saures Natriumsulfit, Natriumdithionit, Kaliumsulfit, saures Kaliumsulfit, Kaliumdithionit, Ammoniumsulfit, saures Ammoniumsulfit und Ammoniumdithionit in einer Menge von 1 bis 1000 mM zugegeben werden.
Der Mikroorganismus wird gewöhnlich in einer Menge von 0,01 bis 5 Gew.-% auf Trockenbasis, bezogen auf das Substrat, eingesetzt. Die Reaktion wird gewöhnlich bei einer Temperatur von 0 bis 50 und vorzugsweise von 10 bis 30ºC 0,1 bis 100 h lang durchgeführt.
Das Reaktionsprodukt, d. h. eine optisch aktive α- Hydroxycarbonsäure der Formel (I), kann aus der Reaktionsmischung mit bekannten Verfahren isoliert werden. Beispielsweise können die mikrobiellen Zellen abzentrifugiert werden, und es können gegebenenfalls granulare Komponenten, Proteine und Polysaccharide durch Ultrafiltration oder dgl. beseitigt werden. Gegebenenfalls kann der Überstand mit Aktivkohle behandelt werden. Dann kann der Überstand unter vermindertem Druck konzentriert oder mit einem organischen Lösungsmittel unter sauren Bedingungen extrahiert werden, worauf wiederholte Umkristallisation aus Benzol usw. erfolgt, um einen hochreinen Kristall zu erhalten.
Durch die vorliegende Erfindung wird ein industriell anwendbares, ausgezeichnetes Verfahren zur Herstellung einer optisch aktiven α-Hydroxycarbonsäure mit einer Phenylgruppe der Formel (I) mit fast quantitativer Selektivität und hoher optischer Reinheit bereitgestellt.
Die vorliegende Erfindung wird nun detaillierter unter Bezug auf Beispiele noch weiter erläutert, sie sollte jedoch nicht auf diese eingeschränkt sein. Alle Prozentangaben sind auf das Gewicht bezogen, wenn nichts anderes angegeben ist.

Beispiel 1

Herstellung von L-3-Phenylmilchsäure

(1) Züchtung:

Gordona terrae MA-1 (FERM BP-4535) wurde aerob in einem Medium, das die folgende Zusammensetzung aufwies, unter Zugabe von 0,05% Benzylcyanid als ein Induziermittel bei 30ºC 72 h lang gezüchtet.

Medium-Zusammensetzung:

Glycerin 20 g
Hefe-Extrakt 3 g
primäres Kaliumphosphat 6,8 g
sekundäres Natriumphosphat 7,1 g
Natriumsulfat 2,8 g
Magnesiumchlorid 0,4 g
Calciumchlorid 0,04 g
Mangansulfat 0,03 g
Eisenchlorid 0,006 g
Zinksulfat 0,003 g
destilliertes Wasser 1000 ml
pH = 7, 5

(2) Asymmetrische Hydrolyse

Aus der Kultur geerntete mikrobielle Zellen wurden mit einer 50 mM Phosphorsäure-Pufferlösung (pH = 8,2) durch Zentrifugation gewaschen und in derselben Pufferlösung, enthaltend 10 mM Phenyllactonitril, mit einer solchen Zell- Konzentration suspendiert, um eine optische Dichte von 20 bei 630 nm (OD630) aufzuweisen. Die Zell-Suspension ließ man bei 30ºC 96 h lang unter Schütteln reagieren.
Nach Beendigung der Reaktion wurden die mikrobiellen Zellen abzentrifugiert. Die Gehaltsmenge der Phenylmilchsäure im Überstand wurde durch Flüssigchromatographie (Säule: Wakosil ® ODS 5C18; Träger-Lösung: 0,1 M Phosphorsäure: Acetonitrl - 3 : 1, gemäß Volumen; Monitor: 254 nm) bestimmt. Der Überstand wurde mit 6 N NaOH auf einen pH-Wert von 12 eingestellt und zweimal mit einer gleichen Menge Ethylacetat extrahiert, um jegliches unreagierte Phenyllactonitril zu entfernen. Die wässrige Schicht wurde mit Schwefelsäure auf einen pH-Wert von 1, 2 eingestellt und zweimal mit einer gleichen Menge Ethylacetat extrahiert. Der Extrakt würde in einem Verdampfer zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wurde in Wasser gelöst und an einer optischen Auflösungssäule (MCI-Gel CRS- 10W; Träger-Lösung: 2 mM CuSO&sub4; · 5H&sub2;O : Acetonitril = 85 : 15, gemäß Volumen) analysiert. Die erhaltenen Ergebnisse sind die folgenden:
3-Phenylmilchsäure:
Ausbeute: 6,5 mM (65%)
Optische Reinheit: 60% ee (L-Form)

Beispiel 2

Herstellung von L-3-Phenylmilchsäure

Mikrobielle Zellen, die in derselben Weise wie in Beispiel 1 geerntet worden waren, wurden in einer Phosphorsäure- Pufferlösung (pH = 8,2), enthaltend 10 mM Phenylaldehyd und 10 mM Kaliumcyanid, auf eine Zell-Konzentration von OD630 = 20 suspendiert. Die Zellsuspension ließ man bei 30ºC 96 h lang unter Schütteln reagieren.
Die Reaktionsmischung wurde in derselben Weise wie in Beispiel 1 aufgearbeitet. Der Phenylmilchsäure-Gehalt und seine optische Reinheit wurden in derselben Weise wie in Beispiel 1 bestimmt. Die Analyseergebnisse sind die folgenden:
3-Phenylmilchsäure:
Ausbeute: 7,5 mM (75%)
Optische Reinheit: 63% ee (L-Form)

Beispiel 3

Herstellung von L-4-Phenyl-α-hydroxybuttersäure

Mikrobielle Zellen, die in derselben Weise wie in Beispiel 1 geerntet worden waren, wurden in einer Phosphorsäure- Pufferlösung (pH = 8,2), enthaltend 10 mM 4-Phenyl-αhydroxybutyronitril, auf eine Konzentration von OD630 20 suspendiert. Die Zellsuspension ließ man bei 30ºC 96 h lang unter Schütteln reagieren. Ferner wurde dieselbe Reaktion in der Gegenwart von 100 mM Natriumsulfit zur Verringerung einer Enzym-Denaturierung durch den Aldehyd durchgeführt.
Die Reaktionsmischung wurde in derselben Weise wie in Beispiel 1 aufgearbeitet. Der 4-Phenyl-α-hydroxybüttersäure- Gehalt und die optische Reinheit wurden in derselben Weise wie in Beispiel 1 bestimmt. Die Analyseergebnisse sind in Tabelle 1 angegeben. Tabelle 1

Beispiel 4

Herstellung von D-Mandelsäure

Mikrobielle Zellen, die aus der Kultur in derselben Weise wie in Beispiel 1 geerntet worden waren, wurden in einer Phosphorsäure-Pufferlösung (pH = 8,2), enthaltend 10 mM Mandelonitril, auf eine Zell-Konzentration von OD&sub6;&sub3;&sub0; = 20 suspendiert. Die Zellsuspenson ließ man bei 30ºC 24 h lang unter Schütteln reagieren.
Die Reaktionsmischung wurde in derselben Weise wie in Beispiel 1 aufgearbeitet. Der Mandelsäure-Gehalt und die optische Reinheit wurden in derselben Weise wie in Beispiel 1 bestimmt. Die Analyseergebnisse sind die folgenden:
D-Mandelsäure:
Ausbeute: 9,8 mM (98%)
Optische Reinheit: 98% ee (D-Form)

Beispiel 5

Herstellung von D-Mandelsäure und Derivaten davon Mikrobielle Zellen, die aus der Kultur in derselben Weise wie in Beispiel 1 geerntet worden waren, wurden in einer Phosphorsäure-Pufferlösung (pH = 8,2), enthaltend jeweils die unten in Tabelle 2 angegebenen Substrate, suspendiert, um eine Zellsuspension herzustellen (OD&sub6;&sub3;&sub0; = 10-30). Die Zellsuspension ließ man bei 30ºC über die in Tabelle 2 angegebene Zeitdauer unter Schütteln reagieren. Nach der Reaktion wurden die mikrobiellen Zellen abzentrifugiert. Die Gehaltsmenge und optische Reinheit der Mandelsäure oder eines Mandelsäurederivats, welche sich im Überstand anhäuften, wurden in derselben Weise wie in Beispiel 1 bestimmt. Die erhaltenen Ergebnisse sind in Tabelle 2 angegeben. Tabelle 2

Claims

1. Verfahren zur überwiegenden Herstellung einer optisch aktiven α-Hydroxycarbonsäure mit einer Phenylgruppe der Formel (I)

worin X ein Wasserstoffatom, eine Hydroxylgruppe, eine Alkylgruppe mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen, eine Alkoxygruppe mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen, eine Thioalkylgruppe, ein Halogenatom, eine Phenyl-, Phenoxy-, Amino- oder eine Nitrogruppe, welche an die o-, m- oder p-Position gebunden sind, und n 0, 1 oder 2 darstellen,

wobei das Verfahren eine Stufe umfaßt, in der man einen Mikroorganismus, der dazu befähigt ist, eine Nitrilgruppe eines razemischen α-Hydroxynitrils der Formel (II):

worin X und n wie oben definiert sind,

wobei der genannte Mikroorganismus zum Genus Gordona oder behandelten Zellen davon gehört, mit einem razemischen α- Hydroxynitril der Formel (II) oder mit einer Mischung aus einem dem genannten Nitril entsprechenden Aldehyd und Blausäure in einem neutralen oder basischen wässrigen Medium zur Reaktion bringt.

2. Verfahren gemäß Anspruch 1, worin der genannte Mikroorganismus die Eigenschaften von Gordona terrae MA-1 (FERM BP-4535) aufweist.

3. Verfahren gemäß Anspruch 1, worin das α-Hydroxynitril ein Mitglied ist, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus Mandelonitril,

2-Chlormandelonitril, 3-Chlormandelonitril,

4-Chlormandelonitril, 4-Hydroxymandelonitril,

4-Methylmandelonitril, 4-Methoxymandelonitril,

4-Methylthiomandelonitril, 4-Aminomandelonitril,

4-Nitromandelonitril, 3-Phenoxymandelonitril,

Phenyllactonitril, 4-Phenyl-α-hydroxybutyronitril,

3-(2-Methoxyphenyl)lactonitril,

3-(3-Methoxyphenyl)lactonitril,

3-(4-Methoxyphenyl)lactonitril, 4-(4-Fluorphenyl)-α-hydroxybutyronitril, 4-(2-Chlorphenyl)-α-hydroxybutyronitril,

4-(4-Bromphenyl)-α-hydroxybutyronitril,

4-(2-Trifluormethylphenyl)-α-hydroxybutyronitril,

4-(3-Trifluormethylphenyl)-α-hydroxybutyronitril und

4-(2-Hydroxyphenyl)-α-hydroxybutyronitril.

4. Verfahren gemäß Anspruch 1, wobei die Reaktion in einem System, das einen pH-Wert von 4 bis 11 aufweist, erfolgt.

5. Verfahren gemäß Anspruch 1, wobei die Ausbeute der Verbindung gemäß Formel (I) in der Reaktion 50 bis 100% beträgt, bezogen auf die Menge des α- Hydroxynitrils der Formel (II).

6. Verfahren gemäß Anspruch 1, wobei die Reaktion in der Gegenwart eines Mitglieds, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus Natriumsulfit, saurem Natriumsulfit, Natriumdithionit, Kaliumsulfit, saurem Kaliumsulfit, Kaliumdithionit, Ammoniumsulfit, saurem Ammoniumsulfit und aus Ammoniumdithionit, in einer Menge von 1 bis 1000 mM erfolgt.