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DE3852539T2 - Ribozyme. - Google Patents

Ribozyme.

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DE3852539T2
DE3852539T2 DE3852539T DE3852539T DE3852539T2 DE 3852539 T2 DE3852539 T2 DE 3852539T2 DE 3852539 T DE3852539 T DE 3852539T DE 3852539 T DE3852539 T DE 3852539T DE 3852539 T2 DE3852539 T2 DE 3852539T2
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DE
Germany
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rna
compound
ribozyme
sequence
ribonucleotides
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Fiona Helen Cameron
Wayne Lyle Gerlach
James Phillip Haseloff
Philip Anthony Jennings
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Gene Shears Pty Ltd
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Gene Shears Pty Ltd
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Claims (24)

1. Verbindung der Formel:
worin bedeuten:
jeder Rest X ein Ribonucleotid,' das gleich oder verschieden sein kann;
jeder Rest (X)n und (X)n, ein Oligoribonucleotid, das (a) mit einer zu spaltenden RNA-Targetsequenz zu hybridisieren vermag und
(b) durch eine gegebene Sequenz definiert ist, die natürlicherweise nicht an die Sequenzen A-A-A-G-C- bzw. X-C-U-G-A- kovalent gebunden vorkommt, wobei eine derartige RNA-Targetsequenz nicht in der Verbindung vorhanden ist;
jeder der Indices n und n' eine ganze Zahl, die die Zahl der Ribonucleotide in dem Oligonucleotid definiert, wobei gilt, daß die Summe n + n' ausreicht, um zu gewährleisten, daß die Verbindung mit der RNA-Targetsequenz durch Basenpaarung stabil wechselwirkt;
jeder * eine Basenpaarung zwischen den Ribonucleotiden, die auf beiden Seiten hiervon angeordnet sind;
jede durchgezogene Linie eine chemische Bindung, die kovalente Bindungen zwischen den Ribonucleotiden, die auf beiden Seiten hiervon angeordnet sind, liefert;
a eine ganze Zahl, die eine Zahl von Ribonucleotiden definiert, wobei gilt, daß a 0 oder 1 sein kann und im Falle von a = Q der 5' von (X)a angeordnete Rest A an den 3' von (X)a angeordneten Rest G gebunden ist;
jeder der Indices in und in eine ganze Zahl größer oder gleich i;
jede der gestrichelten Linien unabhängig voneinander entweder eine chemische Bindung, die kovalente Bindungen zwischen den Ribonucleotiden, die auf beiden Seiten hiervon angeordnet sind, liefert, oder die Abwesenheit irgendeiner derartigen chemischen Bindung, und
(X)b ein Oligoribonucleotid, das anwesend oder abwesend sein kann, wobei gilt, daß b für eine ganze Zahl größer oder gleich 2 steht, wenn (X)b vorhanden ist.
2. Verbindung der Formel
worin bedeuten:
jeder Rest X ein Ribonucleotid, das gleich oder verschieden sein kann;
jeder der Reste (X)n-1 und (X)n ein Oligoribonucleotid, das (a) mit einer zu spaltenden RNA-Targetsequenz zu hybridisieren vermag und (b) durch eine gegebene Sequenz definiert ist, die natürlicherweise nicht an die Sequenzen C-A-A-A-G-C bzw. X-C-U-G-A- kovalent gebunden vorkommt, wobei eine derartige RNA-Targetsequenz nicht in der Verbindung vorhanden ist;
jeder der Indices n und n' eine ganze Zahl, die die Zahl der Ribonucleotide in dem Oligonucleotid definiert, wobei gilt, daß die Summe n + n ausreicht, um zu gewährleisten, daß die Verbindung mit der RNA-Targetsequenz durch Basenpaarung stabil wechselwirkt;
jeder * eine Basenpaarung zwischen den Ribonucleotiden, die auf beiden Seiten hiervon angeordnet sind;
jede durchgezogene Linie eine chemische Bindung, die kovalente Bindungen zwischen den Ribonucleotiden, die auf beiden Seiten hiervon angeordnet sind, liefert;
a eine ganze Zahl, die eine Zahl von Ribonucleotiden definiert, wobei gilt, daß a 0 oder 1 sein kann und im Falle von a = 0 der 5' von (X)a angeordnete Rest A an den 3' von angeordneten Rest G gebunden ist;
jeder der Indices in und in' eine ganze Zahl größer oder gleich 1;
jede der gestrichelten Linien unabhängig voneinander entweder eine chemische Bindung, die kovalente Bindungen zwischen den Ribonucleotiden, die auf beiden Seiten hiervon angeordnet sind, liefert, oder die Abwesenheit irgendeiner derartigen chemischen Bindung, und
(X)b ein Oligoribonucleotid, das anwesend oder abwesend sein kann, wobei gilt, daß b für eine ganze Zahl größer oder gleich 2 steht, wenn (X)b vorhanden ist.
3. Verbindung der Formel:
worin bedeuten:
jeder Rest X ein Ribonucleotid, das gleich oder verschieden sein kann;
jeder der Reste (X)n-1 und (X)n, ein Oligoribonucleotid, das (a) mit einer zu spaltenden RNA-Targetsequenz zu hybridisieren vermag und (b) durch eine gegebene Sequenz definiert ist, die natürlicherweise nicht an die Sequenzen C-A-A-A-G-C- bzw. X-C-U-G-A- kovalent gebunden vorkommt, wobei eine derartige RNA-Targetsequenz nicht in der Verbindung vorhanden ist;
jeder der Indices n und n' eine ganze Zahl, die die Zahl der Ribonucleotide in dem Oligonucleotid definiert, wobei gilt, daß die Summe n + n' ausreicht, um zu gewährleisten, daß die Verbindung mit der RNA-Targetsequenz durch Basenpaarung stabil wechselwirkt;
jeder * eine Basenpaarung zwischen den Ribonucleotiden, die auf beiden Seiten hiervon angeordnet sind;
jede durchgezogene Linie eine chemische Bindung, die kovalente Bindungen zwischen den Ribonucleotiden, die auf beiden Seiten hiervon angeordnet sind, liefert;
jeder der Indices m und m' eine ganze Zahl größer oder gleich 1;
jede der gestrichelten Linien unabhängig voneinander entweder eine chemische Bindung, die kovalente Bindungen zwischen den Ribonucleotiden, die auf beiden Seiten hiervon angeordnet sind, liefert, oder die Abwesenheit irgendeiner derartigen chemischen Bindung, und
(X)b ein Oligoribonucleotid, das anwesend oder abwesend sein kann, wobei gilt, daß b für eine ganze Zahl größer oder gleich 2 steht, wenn (X)b vorhanden ist.
4. Verbindung nach einem der Ansprüche 1, 2 oder 3, wobei die Summe von n + n' größer oder gleich 14 ist.
5. Verbindung nach einem der Ansprüche 1, 2, 3 oder 4, wobei jeder der Indices n und n' größer als 6 ist.
6. Verbindung der Formel:
worin Q für eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1, 2, 3, 4 oder 5 steht, jeder Rest Y ein Ribonucleotid, das gleich oder verschieden sein kann, bedeutet, jeder Index r und s eine ganze Zahl, die größer oder gleich O sein kann, darstellt und z einer ganzen Zahl größer oder gleich 1 entspricht.
7. Verbindung nach einem der Ansprüche 1, 2, 3, 4, 5 oder 6, wobei die zu spaltende RNA-Targetsequenz aus einer viralen RNA-Sequenz besteht.
8. Zubereitung, umfassend die Verbindung nach einem der Ansprüche 1, 2, 3, 4, 5, 6 oder 7 in Verbindung mit einem pharmazeutisch, veterinärmedizinisch oder landwirtschaftlich akzeptablen Träger.
9. Verfahren zur Herstellung der Verbindung nach einem der Ansprüche 1, 2, 3, 4, 5, 6 oder 7, umfassend die folgenden Stufen:
(a) Ligieren einer der Verbindung entsprechenden Nucleotidsequenz in einen Transfervektor aus DNA, RNA oder einer Kombination hiervon;
(b) Transkribieren der Nucleotidsequenz der Stufe (a) mit einer RNA-Polymerase und
(c) Gewinnen der Verbindung.
10. Transfervektor aus RNA oder DNA oder einer Kombination hiervon mit einer Nucleotidsequenz, die bei Transkription die Verbindung nach einem der Ansprüche 1, 2, 3, 4, 5, 6 oder 7 liefert.
11. Zubereitung, umfassend den Transfervektor von Anspruch 10 in Verbindung mit einem pharmazeutisch, veterinärmedizinisch oder landwirtschaftlich akzeptablen Träger.
12. Prokaryontische oder eukaryontische Zelle mit einer Nucleotidsequenz, die bei Transkription die Verbindung nach einem der Ansprüche 1, 2, 3, 4, 5, 6 oder 7 liefert oder diese Verbindung ist.
13. Eukaryontische Zelle nach Anspruch 12.
14. Pflanzen- oder Tierzelle nach Anspruch 13.
15. Pflanze, die die Pflanzenzelle nach Anspruch 14 umfaßt
16. Verfahren zur Inaktivierung einer Target-RNA in einer Zelle durch In-Berührung-Bringen der Target-RNA in der Zelle mit der Verbindung nach einem der Ansprüche 1, 2, 3, 4, 5, 6 oder 7, wobei die Verbindung durch Basenpaarung mit der Sequenz der Target-RNA unter Bedingungen derart zu wechselwirken vermag, daß die Verbindung durch Basenpaarung mit der Target-RNA stabil wechselwirkt und die Target-RNA gespalten wird.
17. Verfahren nach Anspruch 16, wobei die Target-RNA aus einem für die Zelle endogenen Gentranskript besteht.
18. Verfahren nach Anspruch 16, wobei die Target-RNA aus einem für die Zelle exogenen Gentranskript besteht.
19. Verfahren nach einem der Ansprüche 16, 17 oder 18, wobei die Zelle eine prokaryontische oder eukaryontische Zelle ist.
20. Verfahren nach Anspruch 19, wobei die Zelle eine Pflanzen- oder Tierzelle ist.
21. Verfahren nach Anspruch 20, wobei die Pflanzenzelle Teil einer Pflanze ist.
22. Verwendung der Verbindung nach einem der Ansprüche 1, 2, 3, 4, 5, 6 oder 7 oder des Transfervektors nach Anspruch 10 bei der Herstellung eines Medikaments zur Behandlung einer mit einer Target-RNA in Verbindung stehenden Erkrankung bei Mensch oder Tier.
23. Verwendung der Verbindung nach einem der Ansprüche 1, 2, 3, 4, 5, 6 oder 7 oder des Transfervektors nach Anspruch 10 bei der Herstellung einer Zubereitung zur Inaktivierung einer Target-RNA in Pflanzen.
24. Verwendung der Verbindung nach Anspruch 7 oder eines Transfervektors, der bei Transkription eine derartige Verbindung liefert, bei der Herstellung eines Medikaments zur Behandlung einer Viruserkrankung bei Mensch oder Tier.
DE3852539T 1987-12-15 1988-12-14 Ribozyme. Expired - Lifetime DE3852539T3 (de)

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