CN105287692A - 两粤黄檀提取物及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种两粤黄檀提取物，是采用乙酸乙酯回流提取两粤黄檀的茎部得到的提取物。本发明公开了两粤黄檀提取物的制备方法，将两粤黄檀取其茎部粉碎得粉末，将所述粉末用乙酸乙酯于80℃下回流提取2-4次，每次2-3h，合并回流提取的滤液得提取液，去除所述提取液中的乙酸乙酯，干燥后即得两粤黄檀提取物。本发明公开了两粤黄檀提取物在制备抗炎和抗菌的药物制剂上的应用。本发明的两粤黄檀提取物在抗炎和抗菌上具有明显的效果，可以替代其他易致敏药物在抗炎抗菌上的应用，从而提供一个新途径。
Description
技术领域
本发明涉及一种两粤黄檀提取物及其制备方法和应用。
背景技术
炎症(inflammation)是指具有血管系统的活体组织，对各种致炎因子引起损伤所发生的以防御反应为主的病理过程。基本病理变化为变质、渗出和增生。
许多中草药、天然药对细菌有抑制杀灭作用，其抗炎作用日益受到重视。壮药两粤黄檀DalbergiabenthamiPrain，又名：蕉藤麻，两粤檀，藤本，生于疏林和灌木丛中，分布在广西、广东、海南等地，药用部位为茎，又名藤春CaulisDalbergiabenthami，可用于通经活血，主治跌打损伤、筋骨疼痛和气滞血瘀所致月经不调等症状，在民间主要用于抗风湿及跌打损伤外用药，但对其药理活性的开发利用尚缺乏科学依据，极大地影响了两粤黄檀的开发和临床上的应用，目前尚未有关于两粤黄檀提取物在抗炎和抗菌上的应用说明。
发明内容
本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。
本发明还有一个目的是提供一种两粤黄檀提取物，通过乙酸乙酯回流提取其茎部后干燥获得，本发明的两粤黄檀提取物具有明显的抗炎和抗菌作用。
为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种两粤黄檀提取物，是采用乙酸乙酯回流提取两粤黄檀的茎部得到的提取物。
一种两粤黄檀提取物的制备方法，将两粤黄檀取其茎部粉碎得粉末，将所述粉末用乙酸乙酯于80℃下回流提取2-4次，每次2-3h，合并回流提取的滤液得提取液，去除所述提取液中的乙酸乙酯，干燥后即得两粤黄檀提取物。
优选的是，所述的两粤黄檀提取物的制备方法，将所述粉末用乙酸乙酯回流提取3次，每次2.5h。
优选的是，所述的两粤黄檀提取物的制备方法，所述干燥为真空干燥，干燥温度低于5℃。
优选的是，所述的两粤黄檀提取物的制备方法，每次回流提取时，乙酸乙酯的用量为待提取物重量的5-10倍。
一种两粤黄檀提取物的应用，所述两粤黄檀提取物在制备抗炎和抗菌的药物制剂上的应用。
优选的是，所述的两粤黄檀提取物的应用，所述药物制剂包括有效量的两粤黄檀提取物和药学上可接受的辅料组成。
优选的是，所述的两粤黄檀提取物的应用，所述药物制剂为油剂、软膏剂、乳膏剂、糊剂或膏药剂。
本发明至少包括以下有益效果：两粤黄檀提取物制备方法简单，获取容易，对于抗炎和抗菌具有显著作用，对应用于其他产品中增强抗炎和抗菌效果有广阔的市场情景，可代替青霉素和黄连素在药物上的应用，可适用于对青霉素或黄连素过敏的使用者，从而弥补消费者因过敏而无法使用抗炎和抗菌的部分药物提供一个新途径。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
需要说明的是，下述实施方案中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。
原料来源：两粤黄檀，经鉴定为豆科黄檀属植物(DalbergiabenthamiPrain)。
一种两粤黄檀提取物，是采用乙酸乙酯回流提取两粤黄檀的茎部得到的提取物。
实施例1：
一种两粤黄檀提取物的制备方法，将两粤黄檀取其茎部，自然晾干，粉碎得粉末，将所述粉末用乙酸乙酯于80℃下回流提取2次，每次2h，合并回流提取的滤液得提取液，去除所述提取液中的乙酸乙酯，干燥后即得两粤黄檀提取物，其中，每次提取使用的乙酸乙酯的用量为待提取物重量的5倍。
实施例2：
一种两粤黄檀提取物的制备方法，将两粤黄檀取其茎部，自然晾干，粉碎得粉末，将所述粉末用乙酸乙酯于80℃下回流提取3次，每次2.5h，合并回流提取的滤液得提取液，去除所述提取液中的乙酸乙酯，干燥后即得两粤黄檀提取物。其中，每次提取使用的乙酸乙酯的用量为待提取物重量的8倍。
实施例3：
一种两粤黄檀提取物的制备方法，将两粤黄檀取其茎部，自然晾干，粉碎得粉末，将所述粉末用乙酸乙酯于80℃下回流提取4次，每次3h，合并回流提取的滤液得提取液，去除所述提取液中的乙酸乙酯，干燥后即得两粤黄檀提取物。其中，每次提取使用的乙酸乙酯的用量为待提取物重量的10倍。
实施例4：
将两粤黄檀茎部阴干，粉碎后称取50g，用400mL乙酸乙酯80℃下回流3次，每次3h，合并三次滤液，将滤液置旋转蒸发仪中减压蒸馏，回收溶剂，残留物低温真空干燥至干，得两粤黄檀茎部位乙酸乙酯浸膏(EAE)，即本发明所述的两粤黄檀提取物，得率一般为2.0％-2.8％。
实施例5：
将实施例4的两粤黄檀提取物粉碎过200目筛，取适量油相基质、稠度调节剂和乳化剂在75℃左右加热熔融制备油相，取适量保湿剂、稳定剂和水混合后置于容器中在70-75℃加热，混匀后得水相，将油相与水相混合后，超声混匀，在50-60℃下一边加入两粤黄檀提取物，一边搅拌，冷却即得油剂、软膏剂、乳膏剂、糊剂或膏药剂等不同剂型的制剂。具体剂型以适用于的产品需要为主，其中一般每毫升液体制剂或每克膏体制剂中两粤黄檀提取物含量约在20-200mg，根据适用产品的类型不同控制两粤黄檀提取物的含量，例如面部使用，则应遵循少量多次的原则。
其中，油相基质包括但不限于硬脂酸、石蜡、蜂蜡、高级醇等，稠度调节剂包括但不限于凡士林、液体石蜡、植物油等，乳化剂包括但不限于皂类乳化剂、聚氧乙烯醚的衍生物；保湿剂包括但不限于甘油、山梨醇、丙二醇等；稳定剂可以优先使用但不限于乙二胺四醋酸二钠。
为了进一步说明本发明的两粤黄檀提取物在抗炎和抑菌上的作用，本发明通过建立小鼠耳壳肿胀的急性炎症模型从体外首次评价两粤黄檀提取物的抗炎活性，并采用滤纸片扩散法和试管法(MIC)对两粤黄檀提取物的抗菌活性进行了研究。
1.有效提取物体外抗炎作用研究
(1)二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验
标准体重昆明小鼠40只随机分为四组(空白组、两粤黄檀大剂量、两粤黄檀中剂量、两粤黄檀小剂量)。小鼠左侧耳壳前后两面均匀涂抹二甲苯致炎，0.04ml/只。造模成功后，在小鼠左耳炎症部位分别涂，小鼠右耳不做任何处理。4小时后脱臼处死动物，立即沿耳廓基线剪下双耳，用直径8mm打孔器取相同部位耳片，在万分之一分析天平上称重，按右耳片重量减左耳片重量为肿胀度，将致炎一侧耳片重量减去对照一侧耳片重量即为肿胀度，观察用药前后肿胀度变化。
耳肿胀度＝涂药后耳重量-涂药前耳重量
(2)数据处理：SPSS13.0方差齐性检验。
表1为涂药后4h后测得的两粤黄檀提取物对小鼠耳肿胀的影响，可以看出，随着两粤黄檀提取物剂量增加，抑肿率显著增加，说明本发明的两粤黄檀提取物的抗炎效果显著，坚持使用1日3次，抗炎效果更佳。
表1两粤黄檀提取物对小鼠耳肿胀的影响
2.两粤黄檀提取物体外抗菌活性研究
(1)菌液制备：将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、枯草芽孢杆菌、伤寒杆菌五种菌种分别于MH琼脂平板上分区划线，37℃培养24h；接种环分别挑取各个菌种的单个菌落接种于MH肉汤中，于37℃培养24h；用麦氏比浊法调整五种菌的浓度，最终浓度为1.5×106CFU/mol。
(2)滤纸片扩散法：取0.1ml的菌悬液用无菌涂布棒均匀涂布于平板培养基(约15mL)，将灭菌后直径9mm的滤纸圆片在药液(浓度250μg/mL)中浸泡20min后取出，等距离贴于平板上，每皿放4片，每菌种做3个平皿。以无菌水为空白对照，青霉素为革兰氏阳性细菌的阳性对照，黄连素作为革兰氏阴性菌的阳性对照。两粤黄檀提取物对五种菌的抑菌效果见表2。
表2两粤黄檀提取物对五种菌的抑菌效果
注：“----”表示未测定。
由表2可知，两粤黄檀提取物对枯草芽孢杆菌有明显的抑制效果，抑菌圈大小为12mm，对金黄色葡萄球菌有明显的抑制效果，抑菌圈大小为13mm。
(3)试管法(MIC)：如表3，测定采用试管二倍稀释法进行最小抑菌浓度测定，取无菌试管9支，第1管加入含药肉汤1mL作为阴性对照，药物浓度为400mg/mL，第2-8管中加入含药液的肉汤各1mL，其中药物浓度依次作二倍梯度稀释，第9管加入不含药液的肉汤作为阳性对照；然后在第1-8管各加入50ul培养8h的供试菌液，充分摇匀后，于37℃培养24h，观察结果。这里的供试菌液为金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的菌液，其中，这两种菌的浓度均为1.5×106CFU/mol。
表3最小抑菌浓度测定试验
针对上述实验，本发明的申请人得出两粤黄檀提取物对枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度分别为100和50mg/mL。
为了进一步说明本发明的两粤黄檀提取物的疗效，列举一些病例：
典型病例：
1)张先生，50岁，风湿性关节炎，关节红肿，走路疼痛，涂抹采用本发明的两粤黄檀提取物制备的外用乳膏(其中，每1g外用乳膏中两粤黄檀提取物的含量为50mg)，1日3次，使用7天，红肿症状减弱，再坚持使用7天，走路疼痛缓解，2个月后访问，疼痛明显减轻，坚持使用本发明的外用乳膏8个月后，再回访，走路基本无异样，与常人无异，坚持使用12个月后，疼痛消失，坚持使用18个月后再回访，病情并无反复。
2)简女士，30岁，使用某化妆品致面部过敏，泛红、发炎、起斑疹，使用本发明的两粤黄檀提取物制备的油剂涂抹(其中，每1mL油剂中两粤黄檀提取物的含量为20mg)，每日3次，使用3天后过敏症状缓和，明显减轻，继续使用4天后，斑疹消失，炎症退去。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的实施例。
Claims (8)
1.一种两粤黄檀提取物，其特征在于，是采用乙酸乙酯回流提取两粤黄檀的茎部得到的提取物。
2.一种如权利要求1所述的两粤黄檀提取物的制备方法，其特征在于，将两粤黄檀取其茎部粉碎得粉末，将所述粉末用乙酸乙酯于80℃下回流提取2-4次，每次2-3h，合并回流提取的滤液得提取液，去除所述提取液中的乙酸乙酯，干燥后即得两粤黄檀提取物。
3.如权利要求2所述的两粤黄檀提取物的制备方法，其特征在于，将所述粉末用乙酸乙酯回流提取3次，每次2.5h。
4.如权利要求2所述的两粤黄檀提取物的制备方法，其特征在于，所述干燥为真空干燥，干燥温度低于5℃。
5.如权利要求2所述的两粤黄檀提取物的制备方法，其特征在于，每次回流提取时，乙酸乙酯的用量为待提取物重量的5-10倍。
6.一种如权利要求1所述的两粤黄檀提取物和如权利要求2-5中任意一项所制备的两粤黄檀提取物的应用，其特征在于，所述两粤黄檀提取物在制备抗炎和抗菌的药物制剂上的应用。
7.如权利要求6所述的两粤黄檀提取物的应用，其特征在于，所述药物制剂包括有效量的两粤黄檀提取物和药学上可接受的辅料组成。
8.如权利要求7所述的两粤黄檀提取物的应用，其特征在于，所述药物制剂为油剂、软膏剂、乳膏剂、糊剂或膏药剂。
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