BG60593B1

BG60593B1 - О-метилни производни на азитромицин а, метод за тяхното получаване и приложението им като фармацевтични препарати

Info

Publication number: BG60593B1
Application number: BG94837A
Authority: BG
Inventors: Gabrijela Kobrehel; Slobodan Djokic; Gorjana Lazarevski
Original assignee: Pliva Farmaceutska,Kemijska,Prehrambena I Kozmetickaindustrija, Dionicko Drustvo
Priority date: 1990-07-18
Filing date: 1991-07-17
Publication date: 1995-09-29
Also published as: CZ280640B6; GR3018330T3; CN1029738C; HU9202619D0; RU2045533C1; HRP920491A2; HUT59935A; HU9802439D0; PL166379B1; US5250518A; CA2046956C; ES2081397T3; DE69114198T2; JP2657132B2; CA2046956A1; HRP920491B1; EP0467331B1; CS219591A3; HU221803B1; SI9011409A

Abstract

0-метилните производни на азитромицин а са биологично активни вещества и се използват за лечение наинфекциозни заболявания при хора и животни. Имат обща формула, в която r1 и r2 означават бензилоксикарбонил, водород или метил; r3 до r4 означават водород или метил. Съединенията имат изразена активност спрямо грамположителни и грамотрицателни микроорганизми, по-силна от тази на азитромицина.

Description

(54) О-МЕТИЛНИ ПРОИЗВОДНИ НА АЗИТРОМИЦИН А, МЕТОД ЗА ТЯХНОТО ПОЛУЧАВАНЕ И ПРИЛОЖЕНИЕТО ИМ КАТО ФАРМАЦЕВТИЧНИ ПРЕПАРАТИ

Изобретението се отнася до полусинтетични макролидни антибиотици, по-специално до О-метилни производни на азитромицин А и до техните фармацевтично приемливи присъединителни соли, до метод и междинни съединения за тяхното получаване и до приложението им за приготвяне на фармацевтични препарати, по-специално антимикробни средства.

Известно е, че еритромицин А е макролиден антибиотик, чиято структура се характеризира с 14-членен агликонов пръстен, който има кетогрупа в положение С-9 /1/, като същият досега е бил водещ макролиден антибиотик при лечение на инфекции при човека. Но в кисела среда този антибиотик лесно се превръща в анхидроеритромицин, който неактивен С-6/С-12 метаболит със спирокетална структура /2/. Известно е също така, че спироциклизацията на еритромицин А се инхибира успешно чрез химическо превръщане на С9 /S/ и С-9 /R/ кетони до получаването на С-9 оксими /3/ или до С-9 /R/ амини /4/ или чрез елиминиране на С-9 кетона при разширяване на агликоновия пръстен /5/. Това Бекманово прегрупиране на еритромицин А оксима, последвано от редукция на получения иминоетер /6/, води до получаване на 11-аза10-деоксо-10-дихидроеритромицин А /9-деоксо-9а-аза-9а-хомоеритромицин А/, който е първият 15-членен макролиден антибиотик от азалидните серии. При метилиране на нововъведената вторична аминогрупа в агликоновия пръстен с формалдехид в присъствието на мравчена киселина чрез модифицирания метод на Eschweiler - ClarK /7/, или при предварителна защита на аминогрупите с помощта на средства за превръщане в съответните N-оксиди, последвано от алкилиране и редукция на получените N-оксиди /8/ е получен Nметил-11 -аза-10-деоксо-10-дихидроеритромицин А /9-деоксо-9а-аза-9а-метил-9а хомоеритромицин А/ /9/, който е изследван клинично под името азитромицин. В сравнение със средните антибиотици азитромицинът проявява, в допълнение на подобрената устойчивост в кисела среда, също и подобрена in vitro актив ност спрямо грамотрицателни микроорганизми и значително по-високи концентрации в тъканите и дори се изследва възможността за еднократно дозиране на ден /10/.

Известно е, че С-6/С-12 спиро - циклизацията на еритромицин А се инхибира успешно с О-метилиране на хидроксигрупата при С-6 мястото на агликоновия пръстен /11/. Взаимодействието на еритромицин А с бензил хлорформиат, последвано от метилиране на полученото 2'-0,3'-М-бис-/бензилоксикарбонилно/-производно, при елиминиране на защитните групи при положение 2'- и 3'-, както Nметилирането на 3'-метиламиногрупата при редуктивни условия, води до получаването в допълнение на 6-О-метил-еритромицин А, също и на значително количество от 11-О-метил, и от 6,11-ди-О-метил-еритромицин А /12/. Повисока специфичност се постига чрез предварително оксимиране на С-9 кетоните и О-метилиране на съответните заместени или незаместени бензилоксиимино производни /13/.6О-метил-еритромицин А е изпитван клинично също под името на клеритромицин. В сравнение с еритромицин А клеритромицинът проявява подобрена in vitro активност спрямо грамположителни микроорганизми /14/.

Задачата на изобретението е да се създаде метод за получаване на нови О-метилни производни на азитромицин А, както и на техните присъединителни соли с фармацевтично приемливи киселини, които да проявяват биологична активност.

Методът съгласно изобретението за получаване на О-метилните производни на азитромицин А със следната обща формула I

о в която при la R[ и R, са еднакви и означават бензилоксикарбонилна група, R, означава метил и R₄ и R, са еднакви и означават водород; при 1б R, и R₂ са еднакви и означават бензилоксикарбонилна група, R, и R₄ са еднакви и означават метална група и R₅ означа ва водород; при 1в R_t и R₂ са еднакви и означават бензилоксикарбонилна група R₃ и R₃ са еднакви и означават водород, R₄ означава метил; при Ir R_t и R₂ са еднакви и означават бензилоксикарбонилна група, R₃, R₄ и R_s са еднакви и означават метил; при 1д Rj и R₂ са еднакви, както и R₄ и R-₅ и означават водород и R₃ означава метил; при Ie R_p R₂ и R₃ са еднакви и означават водород, a R₃ и R₄ са еднакви и означават метил; при 1ж R_p R₂, R₃ и R₅ са еднакви и означават водород, a R₄ означава метил; при 1з R₍ и R₂ са еднакви и означават водород, R₃, R₄ и Rj са еднакви и означават метил; при 1и R_p R₄ и R₃ са еднакви и означават водород, R₂ и R₃ са еднакви и означават метил; при Ik R₁ и R_s са еднакви и означават водород, R₂, R₃ и R₄ са еднакви и означават метил; при 1л R_p R₃ и R_s са еднакви и означават водород, R₂ и R₄ са еднакви и означават метил; при 1м R_; означава водород, а R₂, R₃, R₄ и Rj са еднакви и означават метил, както и на техните фармацевтично приемливи присъединителни соли с киселини, се състои в това, че азитромицин или неговият дихидрат /15/ със следната обща формула II

в която при Па R₍ означава водород и R₂ означава метил, взаимодейства с бензил хлорформиат в присъствието на излишък от подходяща база, например натриев бикарбонат, в инертен спрямо реакцията разтворител, например бензол, при температура от 25° до 60°С, в продължение на 3 до 24 h, в зависимост от реакционната температура, последвано от О-метилиране на хидроксигрупите в положение С-6 и С-11 и при С-4” на новия, неописан в литературата междинен продукт 2'-0,3'-Ь1-бис-/бензилоксикарбонил/-Ь1диметил-азитромицин А от общата формула И, в която при Пб R и Rj са еднакви и означават бензилоксикарбонилна група, се превръща с 1-18 моларен излишък от подходящо метилиращо средство, например метилйодид, диметилсулфат, метилметансулфат или метил р-толуолсулфонат, в присъствието на подходяща база, например натриев хидрид, воден калиев хидроксид или натриев хидроксид, в подходящ разтворител, например диметилсулфоксид или Ν,Ν-диметилформамид или смеси от тях, инертни при реакцията, разтворители, например тетрахидрофуран, ацетонитрил, етилацетат, 1,2-диметоксиетан, при температура от 0°С до стайна, в продължение на 3 до 30 h, в смес от О-метил-2'-0,3'-М-бис-/бензилоксикарбонил/-М-диметил-азитромицин А от общата формула I, в която при la Rj и R₂ са еднакви и означават бензилоксикарбонил, R₄и R_s са еднакви и означават водород и R₃ означава метил; при 1б Rj и R₂ са еднакви и означават бензилоксикарбонил, R₃ и R₄ са еднакви и означават метил и R₃ означава водород; при 1в R, и R₂ са еднакви и означават бензилоксикарбонил, R₃ и R₃ са еднакви и означават водород и R₄ означава метил и при 1г R, и R₂ са еднакви и означава бензилоксикарбонил, R₃, R₄ и R₃ са еднакви и означават метил, които по желание се подлагат на А / разделяне върху колона със силикагел/силикагел 60, МегсК Co., 70-230 меша/ със система от разтворители дихлорметан/метанол/амониев хидроксид /при съотношение 90:9:0,5/ до получаването на хроматографски хомогенно съединение /1а/ с R_f 0,660, /16/ с R, 0,811, /1в/ с R, 0,843 и /1г/ с R, 0,881, които впоследствие се подлагат на отцепване на защитните бензилоксикарбонилни групи в положение 2’- и 3'- чрез хидрогенолиза в разтвор на нисш алкохол, например метанол или етанол, в присъствието на катализатор, например паладий/въглен или черен паладий във водородна атмосфера при налягане 1-20 bar, при разбъркване на реакционната смес в продължение на 2-10 h, при стайна температура, до получаването на, след филтруване на катализатора и изолиране на продукта чрез обичайните рН-градиентни екстракционни методи /рН 5,0 и pH 9,0/ из вода с подходящ хидрофобен разтворител, например хлороформ, дихлорметан, етилацетат и др., на О-метилN-диметил-азитромицин А производните от общата формула I, в която при 1д R_p R₂, R₄ и R₃са еднакви и означават водород и R₃ означава метил; при le R_p R₂, R₃ са еднакви и означават водород и Rj и R₄ са еднакви и означават метил; при 1ж R_p R₂, R₃ и R₃ са еднакви и означават водород и R₄ означава метил; и при

1з R₁ и R₂ са еднакви и означават водород и R₃, R₄ и R, са еднакви и означават метил, които след това се подлагат на редуктивно N-метилиране на 3'-метиламиногрупата с 1-3 еквивалента формалдехид /37 % / в присъствието на равно или двукратно количество мравчена киселина /98-100 %/ или друг източник на водород, в инертен спрямо реакцията разтворител, избран измежду халогенираните въглеводороди, например хлороформ, нисши алкохоли, например метанол или етанол, нисши кетони, например ацетон, при температурата на кипене на реакционната смес в продължение на 2 до 8 h, до получаването след изолиране на продукта чрез обичайните рНградиентни екстракционни методи /рН от 5,0 до pH 9,0/ на 0-метил-азитромицин А производни от общата формула I, в която при 1и R_pR₄ и R₃ са еднакви и означават водород, R₂ и R₃ са еднакви и означават метил; при Ik R_p R_sозначават водород и R₂, Rj и R₄ са еднакви и означават метил; при 1л R_p R, и R, са еднакви и означават водород и Rj и R₄ означават метил и при 1м R] означава водород и R₂, R₃, R₄ и R, са еднакви и означават метил или В /елиминиране на защитните бензилоксикарбонилни групи в положение 2’- и 3'- чрез хидрогенолиза /както е описано по-горе в подточка А/ до получаването на смес от 6-О-метил- /1д/, 6,11ди-О-метил /1е/, 11-О-метил /1ж/ и 6,11,4”три-О-метил-М-диметил-азитромицин А /1з/, които се подлагат на редуктивно N-метилиране с формалдехид /37 %/ в присъствието на мравчена киселина /98-100 %/ или някой друг източник на водород, както е описано по-горе в подточка А /до получаването на смес от 60-метил /1и/, 6,11-ди-О-метил /1к/, 11-О-метил /1л/ и 6,11,4”-три-О-метил-азитромицин А /11/, които се подлагат на разделяне върху силикагел със система от разтворители дихлорметан/метанол/амониев хидроксид при съотношение 90/9/0,5 % до получаването на хроматографски еднородни % ТСХ, същата разтворителна система О-метилни производни на азитромицин А /1и/ с R, 0,346, /1к/ с R_f 0,393, /1л/ с R, 0,428 и /1м/ с R, 0,456.

Фармацевтично приемливите, присъединителни соли с киселини на съединенията от общата формула I се получават чрез взаимодействие на О-метилните производни на азитромицин А от общата формула 1 с поне еквимоларно количество от съответната неорганична или органична киселина, избрана от групата на солна, йодна, сярна, фосфорна, оцетна киселина, пропионова киселина, трифлуороцетна киселина, малеинова киселина, лимонена киселина, етил янтарна киселина, янтарна киселина, метансулфонова киселина, бензолсулфонова киселина, р-толуолсулфонова киселина, лаурилсулфонова киселина и други подобни в инертен спрямо реакцията разтворител. Присъединителните соли се изолират чрез филтруване, ако са неразтворими в използваната система от разтворители или чрез утаяване с помощта на вещества, в които са неразтворими и най-вече чрез лиофилизация.

О-метилните производни на азитромицин А с общи формули /1и/-/П/ и техните фармацевтично приемливи присъединителни соли с киселини имат висока антимикробна активност. Първоначалната in vitro антибактериална активност на 6-О-метил-азитромицин А /1и/ се определя с тестове върху серия от грамположителни и грамотрицателни бактерии и клинични изолати в сравнение с активността на еритромицин А. Изследването се осъществява с метода на “разреждане в туба”. При проучването се използват двадесет и четири часови култури в “мозъчно-сърдечен бульон” на стандартни видове и пресни изолати от клинични проби. Получените резултати се изразяват под формата на минимална инхибираща концентрация /МИК/ или бактерицидна концентрация /МБК/ в mg/ml и са представени в таблици 1 и 2, на които се вижда, че 6-О-метил-азитромицин А има в известна степен подобрена активност спрямо изследваните видове в сравнение с еритромицин А. В таблица 3 са представени резултатите от in vitro тестовете на 6-О-метил /1и/, 6,11-ди-О-метил /1к/, 11-О-метил /1л/ и 6,11,4”-три-О-метил-азитромицин А /1м/ в сравнение с азитромицина. Минималните инхибиращи концентрации /МИК в mg/ml/ определени върху серия от стандартни бактериални видове сочат, че 6-О-метил-азитромицин А /1и/ е двукратно по-активен при Bacillus subtilis NCTC 8241 и Sarcina lutea ATCC 9341 и четири пъти по-активен при Micrococcus flavus ATCC 6538 Р в сравнение с азитромицина. Значително по-висока активност проявява и 11-0-метил-азитромицин А /1л/. Повечето от изследваните бактериални видове са 2 до 4 пъти по-чувствителни в сравнение със сродните антибиотици.

Съединенията, получени по метода съгласно изобретението, като съединения с формули /1и/-/1м/, както и техните фармацевтично приемливи присъединителни соли с киселини могат да се използват като терапевтични средства при лечение на хора и животни в случаи на инфекциозни заболявания, причинени от грамположителни бактерии, микоп лазми или патогенни бактерии, които са чувствителни спрямо съединенията с формули / 1и/-/1м/. Така съединенията с формули /1и//1м/ и техните фармацевтично приемливи при5 съединителни соли с киселини могат да се въвеждат орално или парентерално, например под формата на s. с. или i. m. инжекции, таблетки, капсули, прахове и други подобни, приготвени в съответствие с обичайната фармацевтич10 на практика.

Таблица 1

Антибактериална активност in vitro на 6-О-метил-азитромицин А /1и/ в сравнение с еритромицин А

Тестови организми	Еритромицин A	б-0-метил-азитромицин A
МИК	МБК	МИК	МБК	/1и/
Staphilococcus aureus ATCC 6538-P	0,2	0,8	0,2	0,4
Sarcina lutea ATCC 9341	0,2	0,4	0,1	0,2
Streptococcus faecalis ATCC 8043	0,2	0,8	0,2	0,4
Escherichia coli ATCC 10536	50	50	1,6	3,2
Klebsiella pneumoniae NCTC 10499	50	50	12,5	50
Pseudomonas aeruginosa NCTC 10490	50	50	50	50

Субстрат мозъчно-сърдечен бульон

Инкубиране 24 h при температура 37°С МИК-минимална инхибираща концентрация в mg/ml МБК-минимална бактерицидна концентрация mg/ml

Таблица 2

Антибактериална активност in vitro на 6-О-метил-азитромицин А /1и/ в сравнение с еритромицин А спрямо клинични изолати

Тестови организми

Еритромицин А МИК МБК

6-О-метил-азитромицин А

МИК МБК /1и/

Staphilococcus aureus

10099

Staphilococcus

Saprophiticus

3947

Streptococcus faecalis

10390

Staphilococcus aureus 10097

0,1	0,2	0,05	0,1
0,4	0,8	0,4	0,8
0,8	3,1	0,8	3,1
0,1	0,4	0,05	0,4

Streptococcus pneumoniae

4050	0,1	0.4	0,025	0,1
Haemophilus influenzae
4028	0,05	0,2	0,05	0,2

Субстрат мозъчно-сърдечен бульон

Инкубиране 24 h при температура 37°С

МИК-минимална инхибираща концентрация mg/ml МБК-минимална бактерицидна концентрация mg/ml

Таблица 3

Антибактериална активност in vitro на новите О-метил-азитромицин А производни в сравнение с азитромицина

Тестови видове МИК mg/ml /Па/ /1и/ / 1к/ /1л/ /1м/

Micrococcus flavus
ATCC 6538-P Corinebacterium xerosis	1,56	0,39	1,56	0,2	3,125
NCTC 9755 Staphilococcus aureus	6,25	12,5	12,5	1,56	25,0
ATCC 10240 Bacillus subtilis	0,39	0,79	0,78	0,1	3,125
NCTC 8241 Bacillus pumilus	0,39	0,2	0,78	0,1	3,125
NCTC 8241 Bacillus cereus	0,2	0,2	0,78	0,05	3,125
NCTC 10320 Sarcina lutea	0,39	0,78	1,56	0,1	3,125
ATCC 9341 Staphilococcus epidermidis	0,05	0,0125	0,05	0,0125	0,05
ATCC 12228 Staphilococcus faecalis	0,1	0,1	1,56	0,1	3,125
ATCC 8043 Pseudomonas aeruginosa	0,05	0,05	0,78	0,05	0,78
NCTC 10490 Escherichia coli	100,0	100,0	100,0	25,0	200,0
ATCC 10536 Субстрат мозъчно-сърдечен бульон	0,78	3,125	6,25	0,78	6,25

Инкубиране 24 до 48 h при температура 37°С Инокулум 10⁵ - 10⁶ cfu/ml

Изобретението се илюстрира по-добре със следните примери.

Пример 1. 2'-0,3'-М-бис-/бензилоксикарбонил/-М-диметил-азитромицин А /Пб/.

Метод А. Натриев бикарбонат /48 g/ се прибавя към разтвор на азитромицин дихидрат /30 g; 0,038 mol/ в 140 ml сух бензол, след което реакционната смес се нагрява при разбъркване до температура 55 - 60°С, след което към сместа се прибавят на капки в продължение на 1 h 75 ml /89,63 g; 0,53 mol/ бензилхлорформиат. Реакционната смес се разбърква при тази температура в продължение на 3 h и се оставя да престои в продължение на 1 нощ при стайна температура. Бензолната суспензия се екстрахира 3 пъти със 150 mg 0,25 N солна киселина, бензолният разтвор се суши над калциев двухлорид, филтрува се и се изпарява при понижено налягане до получаването на гъсто масло. Полученият остатък се прибавя на капки при внимателно разбъркване към 500 ml охладен петролеев етер, получената суспензия се разбърква при охлаждане в продължение на 4 h, получената утайка се филтрува, промива се с петролеев етер и се суши до получаване на 27,5 g /71,6 %/ от посочения в заглавието продукт, който след прекристализация из етер/петролеев етер има т.т. 148 - 154°C.EI-MS m/s 1003 /М+/; ТСХ, дихлорметан/метанол/амониев хидроксид /90/ 9/0,5/ R_f 0,704; ИЧ /инфрачервен спектър/ / хлороформ/ 3510, 3350, 2960, 1740, 1690, 1450, 1380, 1330, 1290, 1255, 1160, 1115, 1050, 995 см¹; *Н ЯМР /деутериран хлороформ/ /ЗН, 9a-NCH3/; 2,844, 2,802 /ЗН, 3'-NCH3/; 3,397 /ЗН,3-ОСН3/; ¹³С ЯМР /деутериран хлороформ/ - 177,260 /С-1/, 100,115 /С-Г/, 95,149 /С-1'7, 75,028 /С-6/, 74,607 /С-12/, 69,415 /С-10/, 36,964 /9a-NCH3/ и 26,016 /С-8/ ррм /части на милион/.

Метод Б. При разбъркване се прибавя натриев бикарбонат /22 g/ към разтвор на бензилхлорформиат /30 ml; 0,21 mol/ в 50 ml сух бензол, след това постепенно в продължение на 3 h се прибавят 15 g /0,019 mol/ азитромицин. В момента на прибавянето на около 3/4 от общото количество азитромицин се прибавя допълнително количество от 15 ml /0,106 mol/ бензил хлорформиат. Реакционната смес се разбърква в продължение на 24 h при стайна температура, филтрува се, след което филтратът се екстрахира със 150 ml 0,25 N солна киселина, суши се над магнезиев сулфат и след филтруване се изпарява при понижено налягане. При прибавяне на петролеев етер суровият 2'-0,3'-М-бис-/бензилоксикарбонил/-М-диметил-азитромицин А се утаява. Получената утайка се филтрува и веднага се суспендира при разбъркване в 50 ml студен етер. Получената суспензия се разбърква при стайна температура в продължение на 1 h, утайката се филтрува и суши до получаването на 8,67 g /43,09 %/ хомогенен продукт / ТСХ/ с идентични физико-химични характеристики на тези, цитирани в метод А.

Пример 2. О-метилиране на 2'-0,З-Ибис-/ бензилоксикарбонил/^-диметил-азитромицин А /1а/, /1б/, /1в/ и /1д/.

Метод А. Метилйодид /6 ml; 0,106 mol/ се прибавя към разтвор на продукта, получен в пример 1, /6 g; 0,006 mol/ в 64 ml диметилсулфоксид и тетрахидрофуран /1 : 1/, се прибавя още метилйодид /6,6 ml; 0,106 mol/ и след това в продължение на 4 h, при стайна температура се прибавят приблизително /2,4 g; 0,06 mol/ натриев хидрид /55 - 60 %/ в масло. Реакционната суспензия се разбърква в продължение на още 5 h, оставя се да престои 1 нощ, излива се в наситен разтвор на готварска сол /100 ml/ и се екстрахира двукратно със 100 ml етилацетат. Събраните органични екстракти се промиват 3 пъти с наситен разтвор на готварска сол, сушат се над калиев карбонат, изпаряват се и се получава 6,35 g суров продукт, който се подлага на хидриране в съответствие на метода, описан в пример 9 или по желание на пречистване чрез хроматография върху силикагел в колона /силикагел 60, MercK Co., 70 - 230 меша/, при използване на система от разтворителите дихлорметан/метанол/амониев хидроксид /90 : 9 : 0,5/. От 1,5 g суров продукт, получен по-горе, след концентриране и изпаряване на фракциите с R_f /ТСХ с идентична разтворителна система/ се получават 0,12 g хроматографски чист 2'-0,3'-М-бис-/бензилоксикарбонил/-Ь1-диметил-6,11-4”-три-О-метил-азитромицин А /1г/ със следните характеристики. Ή ЯМР /деутериран хлороформ/ - 2,246 /ЗН, 9a-NCH₃/; 2,831, 2,798 /ЗН, 3’-NCH₃/; 3,367 ЗН, 3ОСН₃/; 3,305 /ЗН, 6-ОМе/; 3,465 /ЗН, 4”ОСН₃/ и 3,485 /ЗН, N-OCH₃/ ррм; ^,3С ЯМР / деутериран хлороформ/ - 176,975 /С-1/; 69,920 /С-9/; 35,967 /9a-NCH₃/; 79,1 /С-6/;

52,8 /6-ОСН₃/; 89,0 /С-11/; 62,0 /11-ОСН/; 87,357 /С-4'7; 61,131 /4”-ОСН₃/; 49,176 и 49,526 /3-ОСН₃/; 36,457 /3'-NCH₃/ ррм.

При събиране и изпаряване на фракции с R_f 0,843 се получават 0,32 g от хроматографски чист 2'-0,3'-1Ч-бис-/бензилоксикарбонил/11-О-метил-азитромицин А /1в/ със следните характеристики, EI-MS m/s 1016 /М+/; ^!Н ЯМР /деутериран хлороформ/ 2,239 /ЗН, 9a-NCH₃/ ; 2,805, 2,847 /ЗН, 3'-NCH3/; 3,374 /ЗН, 3ОСН7 и 3,573 /ЗН, 11-ОСН₃/ ррм.

При изпаряване на фракциите с R_f 0,811 се получава 0,316 g 2'-0,3'-Ь1-бис-/бензилоксикарбонил/-N-диметил-б, 11 -ди-О-метилазитромицин А /16/ със следните характеристики - ИЧ /инфрачервен спектър/ /хлороформ/ - 3570, 3490, 1740, 1455, 1380, 1295, 1200, 1260, 1160, 1120, 1095, 1055, 1005, 990, 980 см¹; ‘Н ЯМР /деутериран хлороформ/ 2292 /ЗН, 9a-NCH3/; 2,838 и 2,795 /ЗН, 3'NCH3/; 3,380 /6Н, 6-ОСН3/ и 3”-ОСН3/ и 3,488 /ЗН, 11-ОСН3/ ррм; ¹³С ЯМР /деутериран хлороформ/ - 177,939 /С-1/·, 69,471 /С9/; 35,271 /9a-NCH3/; 88,994 /С-11/, 52,892 /6-ОСН₃/; 61,09 /11-ОСН₃/; 36,851 /3'-NCH₃/ и 49,549, 49,154 /3-ОСН₃/ ррм.

При концентриране и изпаряване на фракциите с R_f 0,661 се получават 0,384 g 2'0,3’-М-бис-/бензилоксикарбонил/-М-диметил6-О-метил-азитромицин А /1а/ със следните характеристики. EI-MS m/s 1016 /М+/; ИЧ / хлороформ/ - 3570, 3500, 2960, 2920, 1740, 1690, 1450,1380, 1325, 1290, 1255, 1200, 1160, 1120, 1050, 995 см¹; Ή ЯМР /деутериран хлороформ/ 2,288 /ЗН, 9a-NCH3/; 2,805 и 2,847 /ЗН, 3'-NCH3/; 3,380 /6Н, 6-ОСН3 и 3”-ОСН3/ ррм. ^,3С ЯМР /деутериран хлороформ/ 177,764 /С-1/; 69,850 /С-9/; 34,851 /9аNCH3/; 78,106 /С-6/; 74,661 /С-11/; 73,873 / С-12/ и 52,822 /6-ОСН₃/ ррм.

Метод Б. Към разтвор на продукта, получен в пример 1 /6 g/ в 60 ml диметилсулфоксид и тетрахидрофуран /1 : 1 / се прибавят при разбъркване, постепенно в продължение на 2 h при температура от 0 до 5°С метилйодид /3 ml/ и 2,1 g натриев хидрид /55 - 60 %/ . Реакционната смес се разбърква в продължение на 1 h при температура 0 - 5°С, след което суспензията се излива в наситен разтвор на натриев хлорид и се екстрахира с етилацетат. Органичните екстракти се промиват с наситен разтвор на натриев хлорид, сушат се над ка лиев карбонат и се изпаряват до сухо при понижено налягане. Полученият продукт /2 g/ се подлага на пречистване чрез колонна хроматография върху силикагел, при използване на система от разтворителите - дихлорметан/ метанол/амониев хидроксид /99 : 9 : 1,5/ до получаването на 0,89 g 6-О-метилното производно /1а/; 0,11 g от 6,11-ди-О-метилното производно /1б/ и 0,48 g от 11-О-метилното производно /1в/.

Метод В. Метилйодид /6 ml/ се прибавя към разтвор на продукта, получен в пример 1 /6 g/ в 60 ml Ν,Ν-диметилформамид, след което при разбъркване, постепенно в продължение на 2 h при стайна температура се прибавят 2,4 g натриев хидрид /55 - 60 %/. След това реакционната смес се разбърква в продължение на 2 h при стайна температура и се оставя да престои в продължение на 1 нощ. След изолиране на продукта по описания в метод А начин се получават 4,5 /4 g смес/ от 6,11-ди-О-метилното производно / 16/ и 6,11,4”-три-О-метилното производно / 1г/. Тази смес се подлага на хидрогенолиза в метанол /60 ml/ в присъствието на натриев ацетат/оцетна киселина /буфер с pH 5/ и паладий/въглен /2 g; 5 %-ен/ като катализатор в съответствие с методиката, описана по-долу в пример 3.

След изолиране на продукта и изпаряване на разтворителя при pH 9 се изолира смес /2,33 g/ от 6,11-ди-О-метил-М-диметилазитромицин А /1е/ с R_f 0,220 и 6,11,4'’-триО-метил-1Ч-диметил-азитромицин А /1з/ с R_f0,263, която смес при разделяне чрез колонна хроматография върху силикагел в система от разтворителите дихлорметан/метанол/амониев хидроксид /90 : 9 : 1/ дава хроматографски еднородни продукти /1е/ и /1з/.

Пример 3. 6-О-метил-Ь1-диметил-азитромицин А /1е/. 2,0 g /0,002 mol/ 2'-0,3'-Nбис-/бензилоксикарбонил/-6-О-метил-азитромицин А /1а/ се разтваря в 30 ml етанол. Към разтвора се прибавят 10 ml вода, която съдържа 0,185 ml оцетна киселина и 0,3 g натриев ацетат /рН 5/ и 0,7 g паладий/въглен /10 %ен/. Реакционната смес се разбърква под налягане от водород /10 bar/ в продължение на 10 h, след което катализаторът се филтрува и сместа се изпарява до сухо. Полученият остатък се разтваря в хлороформ /30 ml/, прибавя се вода /30 ml/, pH на сместа се нагласява чрез прибавянето на 1 N солна киселина до 5,0, след което слоевете се разделят и водният слой се екстрахира двукратно с хлороформ / всеки път с по 15 ml/.

Към реакционната смес се прибавят 30 5 ml хлороформ, pH се нагласява на 9,0, като към нея при разбъркване се прибавя 2 N разтвор на натриев хидроксид, след което слоевете се отделят, водният слой пак се промива двукратно с хлороформ /всеки път с по 15 ml/ 10 . Събраните органични екстракти /рН 9,0/ се сушат над калиев карбонат, филтруват се и се изпаряват до получаването на 1,03 g /70 %/ от посочения в наименованието на примера продукт със следните характеристики. EI-MS 15 m/s 748; TCX-R, 0,182; ИЧ /хлороформ/ 3670, 3500, 2960,1725,1460, 1375, 1345, 1320, 1280, 1260, 1165, 1120,1085, 1045, 1010, 900 см¹; ‘Н ЯМР /деутериран хлороформ/ - 2,278 /ЗН, 9a-NCH₃/; 2,406 /ЗН, 3'-NCH₃/; 3,312 / 20 ЗН, 3-ОСН₃/; 3,384 /ЗН, 6-ОСН₃/ ррм.

Пример 4. 6,11-ди-О-метил-М-диметилазитромицин А /1е/.

В съответствие с описания в пример 3 метод от 0,165 g /0,16 mol/ 2'-0,3'-М-бис-/бен- 25 зилоксикарбонил/-1Ч-диметил-6,11-ди-О-азитромицин А /1б/ при хидриране с паладий/въглен /10 %-ен/ в етанол в присъствието на буфер от натриев ацетат/оцетна киселина / pH 5,0/ се получават 0,093 g /76,2 %/ хрома- 30 тографски еднороден продукт, посочен в наименованието на примера, с т.т. 95 - 98°С; EIMS m/s 762; ТСХ - R_f 0,331; Ή ЯМР /деутериран хлороформ/ - 2,265 /ЗН, 9а-СН₃/; 2,422 /ЗН, 3'-NCH₃/; 3,312 /ЗН, 3-ОСН₃/; 3,374 / 35 ЗН, 6-ОСН₃/ и 3,521 /ЗН, 11-ОСН₃/ ррм. ¹³С ЯМР /деутериран хлороформ/ - 177,7 /С-1/;

65,9 /9a-NCH₃/; 79,3 /С-6/; 88,9 /С-11/; 52,7 /6-ОСН₃/; 62,0 /11-ОСН₃/; 33,1 /3'-NCH₃/ и 49,7 /3”-ОСН₃/ ррм. 40

Пример 5. 11-О-метил-1Ч-диметил-азитромицин А /1ж/.

По описания в пример 3 метод от 0,250 g /0,246 mol/ 2'-0,3'-19-бис-/бензилоксикарбонил/-N-диметил-11 -О-метил-азитромицин А / 45 1в/ чрез хидриране с паладий/въглен /10 %ен/ в метанол в присъствието на буфер от натриев ацетат/оцетна киселина /pH 5,0/ се получават 0,168 g /89,5 %/ 11-О-метил-М-диметил-азитромицин А /1ж/ със следните 50 характеристики.

ТСХ - R_f 0,244; ИЧ /деутериран хлороформ/ - 3500, 2970, 2940, 1736, 1460, 1380, 1165 см¹. ‘Н ЯМР /деутериран хлороформ/ 2,44 /ЗН, 9a-NCH3/; 2,458 /ЗН, 3’-NCH3/ ;3,336 /ЗН, 3”-ОСН3/; 3,590 /ЗН, 11-ОСН3/ ррм /части на милион/; ^|3С ЯМР /деутериран хлороформ/ - 177,6 /С-1/; 70,7 /С-9/; 35,8 / 9a-NCH3/, 74,4 /С-6/; 85,0 /С-11/; 62,7 /11ОСН₃/; 36,7 /3'-NCH₃/ и 49,4 /3”-ОСН₃/ ррм /части на милион/.

Пример 6. 6-О-метил-азитромицин А / 1и/.

Метод А. Към разтвор на 0,78 g /0,00104 mol/ 6-О-метил-1Ч-диметил-азитромицин А / 1д/ в хлороформ /50 ml/ се прибавят 0,085 ml /0,00113 mol/ формалдехид /37 %-ен/ и 0,078 ml /0,00203 mol/ мравчена киселина /98 - 100 %-на/. Реакционната смес се разбърква при кипене на обратен хладник в продължение на 8 h, след което се охлажда до стайна температура и се излива в 50 ml вода. pH на реакционната смес се нагласява на 5,0 чрез прибавяне на 1 N разтвор на солна киселина, слоевете се разделят и водният слой се екстрахира двукратно с хлороформ /всеки път по 20 ml/. Към водната порция се прибавя хлороформ /20 ml/ и pH на сместа се нагласява на 9,0 чрез прибавяне на 2 N разтвор на натриев хидроксид при разбъркване, след което слоевете се разделят и водният слой отново се екстрахира двукратно с хлороформ /всеки път с по 20 ml/ . Събраните хлороформени извлеци /рН 9,0/ се сушат над калиев карбонат, филтруват се и се изпаряват до получаването на 0,495 g /62,74 % / от посочения в наименованието на примера продукт. По желание последният се пречиства чрез хроматографиране в колона със силикагел при използване на система от разтворителите дихлорметан/метанол/амониев хидроксид /90 : 9 : 1/ до получаването на хроматографски еднороден продукт с формула / 1и/ с т.т. 103 - 109°С; El/MS m/s 762; ТСХ R₍ 0,346; ИЧ /калиев бромид/ 3500, 2980, 2940, 1740, 1462, 1385, 1330,1280,1260, 1170, 1112, 1059, 1018, 1055 см¹. Ή ЯМР /деутериран хлороформ/ - 2,300 /ЗН, 9a-NCH3/; 2,316 / 6Н, 3'-N-/CH3/2; 3,333 /ЗН, 3”-ОСН3/; 3,384 /ЗН, 6-ОСН3/ ррм /части на милион/. ¹³С ЯМР /деутериран хлороформ/ - 177,540 /С-1/; 68,850 /С-9/; 36,8 /9a-NCH3/; 79,2 /С-6/; 52,822 /6-ОСН₃/; 61,627 /С-10/; 40,350 /3’N-/CH₃/₂; 49,350 /3”-ОСН₃/ ррм.

Биологична активност -1 mg съдържа 754 mg азитромицин.

Метод Б. Към разтвор на 0,5 g /0,668 mmol/ 6-О-метил-М-диметилазитромицин А в ацетон /30 ml/ се прибавят 0,128 ml/ 1,71 mmol формалдехид /37 %-ен/ и 0,118 ml /3,06 mmol/ мравчена киселина /98 - 100 %-на/, след което реакционната смес се кипи при разбъркване, на обратен хладник в продължение на 2 h. Реакционната смес се охлажда до стайна температура и ацетонът се изпарява до получаването на гъст сироп, към който се прибавя 20 ml вода и продуктът се изолира с градиентна екстракция с метиленхлорид по описания в метод А начин. Добив 0,46 g /90,3 %/.

Пример 7. 6,11-ди-О-метил-азитромицин А /1к/.

В съответствие с методиката, описана в пример 6, от 0,49 g /6,43 mmol/ 6,11-ди-Ометил-М-диметил-азитромицин А /1е/ чрез редуктивно N-метилиране с формалдехид /37 %ен/; 0,083 ml в присъствието на мравчена киселина /98 - 100 %-на/ се получават 0,46 g / 92,3 % / от посочения в наименованието на примера продукт със следните характеристики. EIMS m/s 776 /М +/; ТСХ - R, 0,391. Ή ЯМР / деутериран хлороформ/ - 2,295 /ЗН, 9a-NCH₃/ ; 2,316 /6Н, 3'-N-/CH₃/₂; 3,321 /ЗН, 3”-ОСН₃/ ; 3,38 /ЗН, 6-ОСН₃/ и 3,524 /ЗН, 11-ОСН₃/ ррм; ¹³С ЯМР /деутериран хлороформ/ - 177,40 /С-1/; 68,237 /С-9/; 36,739 /9a-NCH₃/; 88,112 /С-11/; 52,653 /6-ОСН₃/ и 61,852 /11-ОСН₃/ ррм.

Пример 8. 11-О-метил-азитромицин А / 1и/.

В съответствие с методиката, описана в пример 6, от 0,32 g /0,43 mmol/ 11-О-метилN-диметил-азитромицин А /Пж/ чрез редуктивно метилиране с формалдехид /37 %-ен/ в присъствието на мравчена киселина /98-100 %-на/ се получават 0,238 g /72,44 %/ от посочения в наименованието 11-О-метил азитромицин /1и/ със следните характеристики. EIMS m/s 762 /М +/; ТСХ - R_f 0,428; ИЧ /калиев бромид/ - 3510, 2975, 2940, 1738, 1460, 1350, 1165, 1054 см¹. Ή ЯМР /деутериран хлороформ/ - 2,246 /ЗН, 9a-NCH₃/, 2,307 /6Н, 3'N/CH₃/₂/, 3,352 /ЗН, 3”-ОСН₃/ и 3,591 /ЗН, 11-ОСН₃/ ррм.

Пример 9. 6-О-метил-азитромицин А / 1и/, 6,11-ди-О-метил-азитромицин А /1к/, 11О-метил-азитромицин А /1л/ и 6,11,4”-три-О метил-азитромицин А /1м/.

1. Към разтвор на 2,16 g от суровия продукт, получен в пример 2, в 30 ml етанол, се прибавят 10 ml вода, съдържаща 0,185 ml оцетна киселина и 0,3 g натриев ацетат и 0,7 g паладий/въглен /10 %-ен/, след което реакционната смес се подлага на хидриране по описания в пример 3 начин. При pH 9,0 се получават 0,98 g смес от 6-О-метил /1д/; 6,11ди-О-метил /1е/; 11-О-метил /1ж/ и 6,11,4три-О-метил-1Ч-диметил-азитромицин А /1з/

2. 0,98 g от получената по-горе в подточка 1 смес се разтварят в хлороформ /50 ml/, след което към разтвора се прибавят 0,106 ml формалдехид /37 %-ен/ и 0,096 ml мравчена киселина /98 - 100 %-на/, след което сместа се подлага на N-метилиране по описания в пример 6 начин. При pH 9,0 се изолират 0,537 g смес, която се подлага на хроматографиране в колона със силикагел /силикагел 60, MercK Co., 70 - 230 меша/ при използване на система от разтворителите дихлорметан/метанол/амониев хидроксид /90 : 9 : 1,5/ до получаване на 0,238 g от хроматографски еднороден /1и/ с R₍ 0,346; 0,065 g от /1к/ с R_f 0,391; 0,105 g от /1л/ с R, 0,428 и 0,094 g от /1м/ с R₍ 0,456.

Пример 10. 6,11,4'’-три-О-метил-М-диметил-азитромицин А /1з/.

В съответствие с методиката, описана в пример 3, от 3,35 g /3,21 mmol/ 2', 0,3'-N-6hc / бензилоксикарбонил/-1Ч-диметил-6,11,4три-О-метил-азитромицин А /1г/ чрез хидриране с паладий/въглен /10 %-ен, 1 g/ в етанол /50 ml/ в присъствието на буфер от натриев ацетат/оцетна киселина /рН 5,0/ се получават 1,41 g /56,7 %/ от посочения в наименованието продукт, който по желание се подлага на хроматография в колона със силикагел при използване на система от разтворителите - дихлорметан/метанол/амониев хидроксид /90 : 9 : 0,5/ до получаването на хроматографски еднороден продукт с формула /1з/ със следните характеристики. EI-MS m/s 775; ТСХ - R₍ 0,263; Ή ЯМР /деутериран хлороформ/ - 2,262 /ЗН, 9a-NCH₃/, 2,393 /ЗН, 3'-NCH₃/, 3,308 /6Н, 3-ОСН₃ и 6ОСН₃/, 3,475 /4-ОСН₃/ и 3,521 /11-ОСН₃/ ррм; ¹³С ЯМР /деутериран хлороформ/ - 175,0 /С-1/, 64,8 /С-9/, 79,8 /С-6/, 50,6 /6-ОСН₃/ ,86,1 /С-11/, 59,1 /11-ОСН₃/, 87,7 /С-4/и

60,9 /4”-ОСН₃/ ррм.

Пример 11. 6,11,4”-три-О-метил-азитромицин А /1м/.

В съответствие с методиката, описана в пример 6, от 1,2 g /1,55 mmol/ 6,11,4’’-три-Ометил-1Ч-диметил-азитромицин А /1з/, 0,131 ml формалдехид /37 %-ен, 1,71 mmol/ и 0,121 ml /3,15 mmol/ мравчена киселина /98 - 100 %-на/ се получават 0,75 g /64,4 %/ от посочения в наименованието на примера продукт. Последният има следните характеристики - EIM/S m/s 789; ТСХ - R_f 0,456. Ή ЯМР /деутериран хлороформ/ - 2,216 /ЗН, 9a-NCH₃/, 2,311 /6Н, 3'-N-/CH₃/₂/, 3,321 /ЗН, 3”-ОСН₃/ , 3,302 /6-ОСН₃/, 3,482 /4”-ОСН₃/ и 3,521 / 11-ОСН₃/ ррм. ¹³С ЯМР /деутериран хлороформ/ - 177,859 /С-1/, 68,6 /С-9/, 36,8 /9аNCH₃/, 80,7 /С-6/, 51,0 /6-ОСН₃/, 89,0 /С11/, 62,0 /11-ОСН₃/, 87,3 /С-4”/ и 61,3 /4’’ОСН₃/ ррм.

Claims

Патентни претенции

1. О-метилни производни на азитромицин А с обща формула I в която la R₍ = Rj = СО₂СН₂С₆Н₃, R₃ = СН₃, R₄ = Rj = Η

16 Rj = Rj = СО₂СН₂С₆Н₅, R₃ = R„ = CH₃, R_S = H

1b R₁ = R₂ = СО₂СН₂С₆Н₅, R₃ = Rj = H, R₄= CH₃

Ir R, = R₂ = CO₂CH₂C₆H₃, R₃ = R₄ = R₅ = CH₃

1д Rj = R₂ = R₄ = R_s = H, R₃ = CH₃Ie Rj = R₂ = R₅ = H, R₃ = R₄ = CH₃1ж R, = Rj = ίζ = R₃ = H, R₄ = CH₃1з R₁ - Rj = H, Rj = R₄ = R₃ = CH₃1и Rj « R₄ = R₃ = H, Rj = R₃ = CH₃Ik R, = R₃ = H, Rj = R₃ = R₄ = CH₃

1л R₁ = R₃ = R₅ = H, R₂ = R₄ = CH₃Im R, - H, R₂ = R₃ = R₄ = R₅ = CH₃и техните фармацевтично приемливи присъединени соли с неорганични и органични киселини.

2. Съединение съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че R[ и Rj са еднакви и означават бензилоксикарбонилна група, Rj е метил, докато R₄ и R₃ означават водород.

3. Съединение съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че R, и R₂ са еднакви и означават бензилоксикарбонилна група, R₃ и R₄ са метил, докато R₅ означава водород.

4. Съединение съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че R_t и R₂ са еднакви и означават бензилоксикарбонилна група, Rj и Rj са водород, докато R₄ означава метил.

5. Съединение съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че R_t и Rj са еднакви и означават бензилоксикарбонилна група, докато Rj, R₄ и Rj са метил.

6. Съединение съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че R_p R₂, R₄ и R₃ са еднакви и означават водород, докато Rj означава метил.

7. Съединение съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че R_p Rj и R_s са еднакви и означават водород, докато Rj и R₄означават метил.

8. Съединение съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че R_p R₂, R₃ и R_s са еднакви и означават водород, докато R₄ означава метил.

9. Съединение съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че R₃ и Rj са еднакви и означават водород, докато R₃, R₄ и R₅означават метил.

10. Съединение съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че R_p R₄ и R₃ са еднакви и означават водород, докато Rj и R₃означават метил.

11. Съединение съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че R₃ и R_s са еднакви и означават водород, докато R₂, Rj и R₄означават метил.

12. Съединение съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че R_p R₃ и R_s са еднакви и означават водород, докато Rj и R₄означават метил.

13. Съединение съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че R_t означава водород, докато R₂, R₃, R₄ и R₃ са еднакви и означават метил.

14 Съединение с формула II в която (lib) R, = R₂ = СО₂СН₂С₆Н₅.

15. Метод за получаване на съединения съгласно претенция 1 със следната обща формула I.

сн, \--Г“· в която при /1а/ Rj и R₂ са еднакви и означават бензилоксикарбонил, R₃ означава метил и R₄ и Rj са еднакви и означават водород; при /16/ R, и R₂ са еднакви и означават бензилоксикарбонил, R₃ и R₄ са еднакви и означават метил и R₅ означава водород; при /1в/ R, и R₂ са еднакви и означават бензилоксикарбонил, R₃ и R₅ са еднакви и означават водород и R₄ означава метил; при /1г/ R, и R₂ са еднакви и означават бензилоксикарбонил, R₃, R₄ и R₅ са еднакви и означават метил; при /1д/ R_p R₂, R₄ и R_s са еднакви и означават метил и R₃ означава метил; при /1е/ R_p R₂ и R₅ са еднакви и означават водород и Rj и R₄ са еднакви и означават метил; при /1ж/ R_p R₂, R₃ и R₃ са еднакви и означават водород и R₄ означава метил; при /1з/ R, и 1Ц са еднакви и означават водород и R₃, R₄ и R₅ са еднакви и означават метил; при /1и/ R_pR₄ и R_s са еднакви и означават водород и R₂ и Rj са еднакви и означават метил; при /1к/ R, и R₅ са еднакви и означават водород и R₂, R₃ и

R₄ са еднакви и означават метил; при /1л/ R_pR₃ и R₅ са еднакви и означават водород и R₂ и R₄ са еднакви и означават метил; при /1м/ R, означава водород и R₂, R₃, R₄ и R_; са еднакви и означават метил и техните фармацевтично приемливи присъединителни соли с киселини, характеризиращ се с това, че азитромицин или неговият дихидрат със следната обща формула II в която при /Па/ Rj означава водород и R₂ означава метил, взаимодейства с бензил хлорформиат в присъствието на излишък от подходяща база, например натриев бикарбонат, в инертен спрямо реакцията разтворител, при температура в границите от 25°С до 60°С, в продължение на 3 до 24 h, последвано от О-метилиране на хидрокси групите в положение С-6-, С-11 и С-4” на междинния продукт 2'-0,3'-М-бис-/бензилоксикарбонил-1Ч-диметил-еритромицин А от общата формула II, в която при /Пб/ Rj и R₂ са еднакви и означават бензилоксикарбонил, с 1 до 18 моларен излишък на подходящо метилиращо средство като метилйодид, диметилсулфат, метилметансулфонат или метил-р-толуолсулфонат, в присъствието на подходяща база, например натриев хидрид, воден разтвор на калиев хидроксид или на натриев хидроксид, в подходящ разтворител, като диметилсулфоксид или Ν,Ν-диметилформамид или техни смеси с инертен спрямо реакцията разтворител като тетрахидрофуран, ацетонитрил, етилацетат, 1,2-диметоксиетан, при температура от 0°С до стайна температура в продължение на 3 до 30 h до получаването на смес от 0-метил-2'-0,3'-М-бис-/бензилоксикарбонил/-Ь1-диметил-азитромицин А от общата формула 1, в която при /1а/ R, и R₂ са еднакви и означават бензилоксикарбонил, Rj означава метил и R₄ и R_s са еднакви и озна чават водород; при /16/ R] и R₂ са еднакви и означават бензилоксикарбонил, R₃ и R₄ са еднакви и означават метил и R₅ означава водород; при /1в/ R₁ и R₂ са еднакви и означават бензилоксикарбонил, R₃ и R₃ са еднакви и означават водород и R₄ означава метил и при / 1г/ R₁ и R₂ са еднакви и означават бензилоксикарбонил, R₃, R₄ и R₃ са еднакви и означават метил, която смес по желание се подлага на А/ разделяне върху колона със силикагел до получаването на хроматографски еднородни съединения от /1а/ до /1г/, които след това се подлагат на отстраняване на защитната група в положение 2'- и 3'- чрез хидриране в разтвор на нисши алкохоли като метанол или етанол в присъствието на катализатор като паладий/въглен или черен паладий, в атмосфера на водород при налягане от 1 до 20 bar при разбъркване на реакционната смес в продължение на 2 до 10 h при стайна температура до получаването на О-метил-М-диметил-азитромицин А производните от общата формула I, в която при /1д/ R_p R_p R₄ и R₅ са еднакви и означават водород и R₃ означава метил; при /1е/ R_p R₂ и R_s са еднакви и означават водород и R₃ и R₄ са еднакви и означават метил; при /1ж/ R_p Rj, R₃ и R_s са еднакви и означават водород и R₄ означава метил и при /1з/ Rj и Rj са еднакви и означават водород R₃, R₄ и Rj са еднакви и означават метил, които след това се подлагат на редуктивно Nметилиране на 3'-метиламиногрупата с 1 до 3 еквивалента формалдехид /37 %-ен/ или друг източник на водород, в инертен спрямо реакцията разтворител, избран между халогенирани въглеводороди като хлороформ, или нисши алкохоли като метанол или етанол, нисши кетони като ацетон, при температурата на кипене на реакционната смес на обратен хладник в продължение на 2 до 8 h, в присъствие на еквивалентно или двукратно количество мравчена киселина /98-100 %-на/, до получаването на О-метилазитромицин А производните от общата формула I, в която при /1и/ R_p R₄ и R₅ са еднакви или означават водород и R₂ и R₃ са еднакви и означават метил; при / 1к/ Rj и Rj са еднакви и означават водород и

R₂, R₃ и R₄ са еднакви и означават метил; при /1л/ R_p R₃ и R₃ са еднакви и означават водород и R₂ и R₄ са еднакви и означават метил и при /1м/ R, означава водород и R_p R₃, R₄ и R₃$ са еднакви и означават метил или Б/ отстраняване на защитната бензилоксикарбонилна група в положение 2 - и 3'- чрез хидриране по описани в подточка А/ начин до получаване на смес от О-метил-азитромицин А производни от общата формула /I/, в която при /1и/ Ю R,, R₄ и R_; са еднакви и означават водород и

R₂ и R₃ са еднакви и означават метил; при / Ik/ R] и Rj са еднакви и означават водород и R₂, R₃ и R₄ са еднакви и означават метил; при /1л/ R_p R₃ и R₃ са еднакви и означават водород и R₂ и R₄ са еднакви и означават метил и при /1м/ R, означава водород и Rj, R₃ R₄ и R_sса еднакви и означават метил, които се подлагат на разделяне в колона със силикагел до получаването на хроматографски еднородни Ометилните производни на азитромицин А от / 1и/ до /1м/, които по желание се подлагат на взаимодействие с поне един еквивалент от неорганична или органична киселина до получаването на техните фармацевтично приемливи присъединителни соли.