TWI461424B

TWI461424B - 製備ｈｃｖ之巨環蛋白酶抑制劑的方法及中間體

Info

Publication number: TWI461424B
Application number: TW98144049A
Authority: TW
Inventors: Andras Horvath; Dominic John Ormerod; Dominique Paul Michel Depre; Veronioue Cerpentier
Original assignee: Ortho Mcneil Janssen Pharm
Priority date: 2008-12-23
Filing date: 2009-12-22
Publication date: 2014-11-21
Also published as: RU2011130895A; US20110257403A1; HK1164839A1; BRPI0923393B1; EP2382198B1; WO2010072742A1; RU2016120007A; AR074863A1; AU2009331530B2; TW201033205A; DK2382198T3; HRP20130906T1; AU2009331530A1; IL213246A; PT2382198E; JP5687631B2; KR101734507B1; US8927722B2; CN102264715A; MX2011006764A

Description

製備HCV之巨環蛋白酶抑制劑的方法及中間體

本發明係關於合成C型肝炎病毒(HCV)之巨環蛋白酶抑制劑的方法及中間體。

C型肝炎病毒(HCV)為慢性肝炎的主要原因，其可惡化為肝臟纖維化導致肝硬化(末期肝臟疾病)及HCC(肝細胞癌)，使其為肝臟移植之主要原因。目前，抗HCV治療係以(聚乙二醇化)干擾素α(IFN-α)與利巴韋林(Ribavirin)組合為主，其效力有限，副作用顯著且病患的耐受性差。因此促使更有效、方便及耐受較佳治療之研究。

HCV基因體之複製係由許多酵素所介導，尤其是HCV NS3絲胺酸蛋白酶及其相關的共因子NS4A。各種抑制此酵素之試劑已有描述。WO 05/073195揭示了具中間經取代的脯胺酸基團之直鏈及巨環NS3絲胺酸蛋白酶抑制劑，而WO 05/073216則揭露具中間環戊基基團者。其中，巨環衍生物因其宣稱的抗HCV活性及藥物動力學性質而受注目。

WO 2007/014926描述了包括具下文所示結構的(I)化合物之巨環環戊基及脯胺酸衍生物。式(I)化合物為非常有效的絲胺酸蛋白酶抑制劑且因其有利的藥物動力學性質而特別受矚目。因為該特性，此化合物已被選為開發抗HCV藥物之潛在候選化合物。因此對以大量製造此活性成份為主，而提供高產率及高純度產品之方法有此需要。WO 2008/092955描述了製備式(I)化合物之方法及中間體。

式(I)化合物可由中間體(VI)為起始物來製備，其中係將酯功能基水解，產生羧酸(V)，該羧酸繼而在醯胺形成反應中與環丙胺基酸(Va)偶合。藉由烯烴複分解反應，在適合的金屬催化劑例如亞基Ru-基質催化劑之存在下，將所生成的中間體(IV)環化。然後將所生成的巨環酯(III)水解為巨環酸(II)。將後者於醯胺形成反應中與磺醯胺(V)偶合，產生最終產物(I)。這些反應係概述於下列反應流程中。就此及下列反應流程或所呈現之個別化合物，R為C_1-4烷基，特而言之R為C_1-3烷基，更特而言之R為C_1-2烷基，或在一實施例中，R為乙基。R¹為C_1-4烷基，特而言之R¹為C_1-3烷基，更特而言之R¹為C_1-2烷基或R¹為甲基；或R¹為乙基。

中間體(VI)本身可使用WO 2008/092955所述之製程來製備，特別是由式(Xa)之羥基環戊基雙酯為起始物，或藉由(a)將式(Xa)之羥基環戊基雙酯與經噻唑基取代之喹啉醇(VII)於醚生成反應中反應，由此得到式(XII)之喹啉基氧基環戊基雙酯，其中該苯甲基酯基團，在喹啉基氧基環戊基雙酯(XII)之順式位置與醚基團相對，係選擇性地裂解成單羧酸(XI)，而該羧酸本身係在醯胺形成反應中與烯基胺偶合，由此得到所欲的式(VI)之最終產物；或(b)將式(Xa)之羥基環戊基雙酯選擇性轉化為單羧酸(IX)，而該羧酸繼而在醯胺形成反應中與烯基胺偶合，得到式(VIII)之羥基環戊基醯胺，而該羥基環戊基醯胺繼而與經噻唑基取代之喹啉醇(VII)反應，由此得到所欲的式(VI)之最終產物；如下列反應流程所概述：上列流程所示的方法中之各R¹係如上所述且較佳地R¹為甲基。Bn代表苯甲基。

式(I)化合物所存在的各種對掌中心及其前驅物在其對掌純度上之特定難題為必須是治療使用上可接受的產物。中間體(VI)具有三個對掌中心且得到此三種中心之正確的立體化學對任何以製備此化合物為目標之合成方法為一重大的挑戰。因此，製備(VI)之方法應產生可接受對掌純度之產物，而無需使用讓實質量不欲的立體異構物形式流失之複雜的純化製程。

WO 2008/092955描述了由4-酮基-環戊基-1,2-雙-羧酸(XVII)為起始物之中間體(Xa)的合成製程，藉由將酮功能基還原為醇，由此得到4-羥基-環戊基-1,2-雙-羧酸(XVI)，將其本身環化為雙環內酯(XV)，其中將雙環內酯(XV)中之羧酸基團以苯甲醇酯化，由此得到內酯苯甲基酯(XIV)。藉由轉酯反應，在C_1-4烷醇的存在下，將後者之內酯打開，由此產生式(X)之羥基環戊基雙酯，將其本身解析為鏡像異構物(Xa)和(Xb)；如下列反應流程所概述：

上列流程所示的方法中之各R¹係如上所述且較佳地R¹為甲基。

上述方法之缺點為其涉及將(X)之鏡像異構物以對掌管柱層析解析，其在大量製造上為難操作之複雜製程。

Honda等人，Tetrahedron Letters，第22冊編號28，第2679-2682頁，1981，描述了使用下列起始物之(+)-布雷菲德菌素A(brefeldin A)的合成：

Honda等人由dl-反式-4-酮基環戊烷-1,2-二羧酸2為起始物之合成，將其酯化為對應的甲基酯3，並以雷尼-Ni還原成醇4。將4部分水解成單羧酸並以苯甲基溴進行苯甲基化，得到主要的非對映立體異構物5，亦即羥基和苯甲基酯基團係在順位之非對映立體異構物。在Honda等人中，後者酯5及化合物(X)二者皆為外消旋物，但各為非對映立體異構物，更精確地為4號碳上帶有羥基基團之差向異構物。化合物(Xa)為從外消旋化合物(X)分離而得來的二種鏡像異構物之一。另一種鏡像異構物為化合物(Xb)。

WO 2005/073195描述了由3,4-雙(甲氧基羰基)環戊酮之鏡像異構物為起始物之純鏡像異構物雙環內酯(8b)的合成。該3,4-雙(甲氧基羰基)環戊酮係如Rosenquist等人之Acta Chemica Scandinavica 46(1992)1127-1129中所述來製備。將反式(3R,4R)-3,4-雙(甲氧基羰基)環戊酮異構物轉變為雙環內酯(8b)：

WO 2005/073195另外描述了內酯(8b)進一步修飾為第三丁酯，將內酯打開並與適合的加保護胺基酸，例如與(1R,2S)-1-胺基-2-乙烯基環丙羧酸乙酯偶合，其隨後產生：

式(I)化合物之建立必須涉及經由醚連接鏈將經噻唑基取代的喹啉基團導入環戊基環。Mitsunobu反應提供了製備芳香烷基醚(其中烷基醚係經活化並與酚反應)之引人注目的反應路徑。此外，Mitsunobu反應一般而言比O-芳基化反應(其需要另外的合成步驟)效率更高。在此溫和的反應中，係將烷基部份之立體化學反轉。該反應得到副產物，例如R’OOC-NH-NH-COOR’，其中R’為C_1-4烷基且特而言之為乙基或異丙基、其他含氮化合物及三苯基膦氧化物，其需要由所欲的最終產物中分離出。

本發明之方法有利的為其適合大量製造。可避免繁複的純化步驟，特別是層析。式(I)化合物之合成基本上係在其三個對掌中心建立具正確立體化學之環戊基基團。

本發明一方面係關於製備高產率及高純度(特別是對掌純度，適合大量工業應用)的中間體(VIII)之方法。

本發明之目標係提供製備高產率及高純度、具正確立體化學之環戊基中間體。特言之，本發明係關於製備恰可用於製備式(I)化合物製程之中間體。

在一方面，本發明係關於製備式(VIII)化合物之方法，其係由金雞納啶(cinchonidine)鹽(XXa)為起始物，將其於醯胺形成反應中與N-甲基-己烯胺(NMHA)(XIX)反應，產生雙環內酯醯胺(XVIII)，其中係將該內酯基團打開，產生所欲的產物(VIII)。這些反應係說明於下列流程中，其中R¹係如上所述。

在本發明另一方面係關於金雞納啶鹽(XXa)之製備，其係藉由非對映異構物鹽混合物(XX)解析將(XXa)進行選擇性結晶所製得。鹽(XX)繼而藉由形成外消旋雙環內酯羧酸(XV)之金雞納啶鹽而製得，如下列反應流程所概述：

又在另一方面，本發明係關於下式之金雞納啶鹽，

此鹽可用作製備中間體(VIII)之中間體，並因而亦可用於製備HCV抑制劑(I)。

本發明之合成製程提供得到正確環戊基基團之立體化學且並無使用對掌性層析之優點。已發現金雞納啶鹽(XXa)可以高對掌性純度選擇性結晶。

金雞納啶鹽(XXa)與NMHA(XIX)之反應為一醯胺形成反應，其包含將起始物與醯胺偶合劑於惰性反應溶劑中，視需要在鹼的存在下反應。可使用之溶劑包括鹵化烴類例如二氯甲烷(DCM)或氯仿，醚類例如四氫呋喃(THF)或2-甲基四氫呋喃(MeTHF)，醇類例如甲醇或乙醇，烴溶劑例如甲苯或二甲苯，偶極性非質子溶劑例如DMF、DMA、乙腈或其混合物。較佳地為二氯甲烷、MeTHF、甲醇、乙醇、甲苯或其混合物。醯胺偶合劑包括例如N-乙氧基羰基-2-乙氧基-1,2-二氫喹啉(EEDQ)、N-異丙氧基羰基-2-異丙氧基-1,2-二氫喹啉，特別是其鹽酸鹽(IIDQ)、N,N,N',N'-四甲基-O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)六氟磷酸(HATU)、苯并三唑-1-基-氧基-叁-吡咯啶基-六氟磷酸鏻(市售為PyBOP®)、1,1'-羰基二咪唑(CDI)、1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳醯亞胺(EDI或EDCI)以及其鹽酸鹽、雙環己基-碳醯亞胺(DCC)或1,3-二異丙基碳醯亞胺、O-苯并三唑-N,N,N’,N’-四甲基六氟磷酸(HBTU) 及其類似物。可添加催化劑，例如1-羥基苯并三唑(HOBt)或4-二甲基胺基吡啶(DMAP)。此反應通常係在鹼的存在下進行，特別是胺鹼，例如三級胺，如三乙胺、N-甲基嗎啉、N,N-二異丙基乙基胺(後者亦指惠尼氏鹼(Hünig’s base)、DIPEA或DIEA)。較佳地，不使用鹼。在一實施例中，此反應係在DCM或MeTHF與EEDQ中，視需要在反應結束時添加甲醇，於反應混合物之回流溫度下進行。

在另一替代的實施例中，該鹽(XXa)可分離為金雞納啶及雙環內酯，而雙環內酯可與NMHA在如上述之醯胺形成反應中反應。已發現金雞納啶鹽(XXa)本身可用於醯胺形成反應，且之後金雞納啶可於反應混合物的後續處理中容易地移除，例如將其以酸例如HCl處理，並以水相將副產物沖洗掉。

藉由以醇(其亦可作為溶劑)，特別是C_1-4烷醇例如甲醇或乙醇，在酸之存在下，進行轉酯化反應將所生成的雙環內酯醯胺(XVIII)之內酯功能基打開。可使用的酸有強有機酸例如磺酸，特別是甲磺酸。可添加溶劑例如醚，特別是THF或MeTHF；或烴溶劑例如甲苯或二甲苯。轉酯化反應產生了所用的醇之酯，例如當於甲醇中進行時，則形成甲酯。

金雞納啶鹽(XX)本身可藉由將外消旋雙環內酯羧酸(XV)以金雞納啶處理來製備。典型地，該外消旋鹽(XX)並無分離，但保持在溶液中，同時讓所欲的異構物(XXa)結晶。在一實施例中，係將金雞納啶懸浮液於稍高溫下加到(XV)之溶液中，及隨後讓溫度冷卻因而使所欲的鹽(XXa)結晶。進一步的純化可包括再結晶。適合溶解(XV)之溶劑包括酯溶劑例如乙酸乙酯，然而適合用於金雞納啶懸浮液之溶劑包括乙腈。在一實施例中，鹽形成係在約50至約70℃的溫度下完成，及將混合物冷卻至約室溫，例如在20至約25℃範圍的溫度，例如於約22℃。進一步的純化可以再結晶由適合的溶劑或溶劑混合物，特別是醇例如C_1-4烷醇，如異丙醇，或藉由於溶劑或溶劑混合物，如乙醇/水混合物，例如5%/95%(重量/重量)水/乙醇混合物中再形成漿液來完成。

鹽(XXa)可藉由結晶分離之發現，提供了得到高鏡像異構物純度之雙環內酯的簡潔方法。再結晶或再漿化讓此鹽進一步純化。如上述，(XXa)可用作合成另一中間體(XVIII)和(VIII)之中間體。(VIII)本身可轉變為中間體(VI)，一種製備式(I)化合物之重要的建構要素。

外消旋雙環內酯羧酸(XV)係如WO 2008/092955中所述及如上列說明製備(Xa)和(Xb)之流程中所概述來製備。特言之，(XV)係藉由將酮基環戊烷雙羧酸(XVII)還原成對應的羥基環戊烷雙羧酸(XVI)而製備，隨後將其藉由形成內酯轉變為(XV)。(XVIII)之酮基還原成羥基可在貴金屬催化劑之存在下，例如銠碳(Rh/C)或雷尼Ni，於惰性反應溶劑，例如水中，以氫來完成。所生成的羥基環戊烷雙羧酸(XVI)可轉變為鹽，例如三級胺鹽如三乙胺鹽。

經由(XVII)內酯形成之環化可藉由與氯甲酸酯，例如與氯甲酸乙酯或甲酯反應來完成。此反應係於惰性反應溶劑例如酮，特別是丙酮，或醚例如THF或MeTHF，或乙腈中來完成。可添加鹼，例如三級胺如三乙胺。

在一實施例中，本發明係關於式(XX)或(XXa)化合物作為製備式(I)化合物或其鹽類的中間體之用途。

在另一實施例中，本發係關於式(XX)或(XXa)化合物本身。這些化合物可為獨立形式或為溶液。特言之，式(XX)或(XXa)化合物係分離為固體形式。

將式(VIII)化合物進一步處理成式(I)之終產物係概述於上列反應流程中，及特言之係概述於WO 2008/092955中。此進一步的處理包括Mitsunobu反應，其係涉及將帶有羥基基團之環戊基碳的立體化學反轉。

式(VI)中間體可結晶，特言之係當與醇溶劑混合時，更特而言之係當與C_1-4烷醇混合時。式(VI)中間體之結晶能控制此化合物以及在後續製程步驟中由其衍生出的任何化合物之純度。特言之，此性質能製備更佳鏡像異構物純度之式(VI)中間體。

中間體(VI)之結晶作用不僅能移除產生這些化合物之Mitsunobu反應的副產物，亦可隨後以簡單的方法由其反應混合物中分離中間體(VI)。此分離可藉由改變溶劑，特別是添加醇性溶劑至由Mitsunobu反應所得來的反應混合物中容易地完成，無須操作任何另外的反應混合物或其任何組份。再者，因為中間體(VI)不溶於醇溶劑，而副產物可溶，由此可從反應混合物將中間體(VI)立即純化。

如前文和下文所用，除非另有說明，否則係應用下列定義。術語鹵基一般係指氟、氯、溴及碘。術語「C_1-4烷基」係定義為具有1至4個碳原子之直鏈或支鏈飽和烴基，例如甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、1-丁基、2-丁基、2-甲基-1-丙基、2-甲基-2-丙基。「C_1-3烷基」一般係指甲基、乙基、1-丙基及2-丙基。術語C_1-4烷醇係指衍生自C_1-4烷基基團之醇。

亦隨附於本文中，表示立體化學化合物之一般可接受慣例為下列：

-無立體鍵表示之化合物，例如化合物(XV)，為外消旋或未定義之立體異構中心構形。

-以立體鍵或描述符號「(±)」、「rel」或「rac」表示之化合物，為外消旋或立體化學為相對的。

-以立體鍵表示但無描述符號「(±)」、「rel」或「rac」之化合物係指非外消旋化合物(scalemic物質)或富含-鏡像，亦即立體化學為絕對的。

例如，在Honda等人中，參照標示「(±)」用於文章標題，係指描述以外消旋中間體之外消旋合成。然而上述的所有慣例並不一定可用於所有的刊行物中。

對掌純度係以鏡像異構物比例(e.r.)來表示。對於鹽類，該值係指非對映混合物中二種鏡像異構物之比例。參見實例中間體(XV)。

在特定的實施例中，當用於與數值相關時，術語「約」可忽略，而指其真正的值。在其他的實施例中，此術語可指該數值之+10%，或+5%，或+1%。

實例

下列實例係希望說明本發明且不應視為本發明範圍之限制。

實例1

於32.7克(0.19莫耳)中間體(XVII)(外消旋)之237.5毫升水懸浮液中，於氮氣壓下加入1.0毫升(0.019莫耳)50%重量/重量NaOH之水溶液。將混合物加熱至60℃並加入2.5莫耳Rh/C(5%重量/重量)。將反應燒瓶通入氫並於氫氣壓下攪拌，直到轉化完全。將溫的反應混合物以矽藻土(Celite)過濾。將濾餅以10毫升的水清洗二次。加入三乙胺(55.61毫升，0.40莫耳)並於30毫巴的壓力下蒸發80%的溶劑量。將反應燒瓶裝上填有2-甲基-四氫呋喃(100莫耳)之狄恩-史塔克分離器(Dean-Stark trap)。將2-甲基四氫呋喃加到反應混合物中，將其回流4小時以移除剩餘的水。於周圍壓力下移除80%的溶劑量。將混合物冷卻至50℃並加入丙酮(380毫升)。將混合物再冷卻至22℃並再次加入丙酮(760毫升)。將生成的懸浮液於氮氣壓下冷卻至-5℃並加入三乙胺(27.8毫升，20.24克，0.2莫耳)。然後逐滴加入氯甲酸乙酯(22.68 克，0.21莫耳)並將混合物於0℃攪拌3小時。讓反應混合物升溫至22℃並再攪拌12小時，然後以矽藻土過濾並以丙酮(100毫升)清洗此固體。將生成的(XV)之丙酮溶液用於下個實例以製備其金雞納啶鹽。

實例2：製備金雞納啶鹽(XXa)

方法1

於大氣壓力下蒸發約80%的溶劑量。加入乙酸乙酯(190毫升)並將有機溶液以HCl水溶液(2M,114毫升)清洗，得到(XV)之乙酸乙酯溶液。將(XV)之乙酸乙酯溶液於60℃加到金雞納啶(55.94克，0.19莫耳)之乙腈(760毫升)溶液。將生成的混合物於60℃攪拌10分鐘及然後冷卻至22℃並過濾。將固體以異丙醇(1500毫升)再結晶，乾燥後得到24.8克(29%產率)之白色固體。對掌純度：e.r.：89/11 H-NMR(DMSO-d6-400MHz),δ ppm 1.45-1.86(m,6 H),1.93-2.19(m,3H),2.32(br s,1H),2.56-2.80(m,2H),2.90-3.07(m,2 H),3.12-3.29(m,1H),3.30-3.52(m,1H),4.93-5.03(m,3H),5.52(d,J=5.6Hz,1H),5.80-5.89(m,1H),7.5(d,J=4.2Hz,1H),7.6(t,J=5.6Hz,1H),8.0(d,J=9.3Hz,1H),8.3(d,J=8.1Hz,1H),8.8(d,J=4.6Hz,1H),

方法2

於大氣壓力下蒸發約80%的溶劑量。加入乙酸乙酯(522毫升)並蒸發約50%的溶劑量。將剩餘物冷卻至22℃並加入乙酸乙酯(180毫升)。將生成的懸浮液過濾並將濾液加到金雞納啶(55.94克，0.19莫耳)之乙腈(760毫升)懸浮液中。將此混合物升溫至60℃，攪拌10分鐘，然後冷卻至22℃並過濾。將固體以異丙醇(1500毫升)再結晶，乾燥後得到24.8克(29%產率)之白色固體。對掌純度：e.r.：90/10

方法3

依照方法2之製程，但將金雞納啶(55.94克，0.19莫耳)之乙腈(760毫升)懸浮液換成金雞納啶(55.94克，0.19莫耳)之異丙醇(325毫升)和乙醇(325毫升)懸浮液，而得到24.8克(29%)的白色固體。對掌純度：e.r.：92/8。

(XXa)之化學純度以及e.r.可如下列三項製程中所述，藉由鹽類之再結晶或再漿化來增加。

將12克的粗(XXa)(化學純度：酸濕磨：96.2%，鹼濕磨102.2%；對掌純度：e.r.：78.7/21.3)溶於500毫升回流中的2-丙醇。讓混合物緩慢冷卻。若無自發性開始結晶，則將混合物於40℃加入(XXa)晶種，然後於此溫度下攪拌2小時。冷卻至室溫後，將混合物另再攪拌2小時，過濾並以50毫升的2-丙醇清洗，於50℃真空乾燥後得到5.51克的白色產物。化學純度：酸濕磨：99.6%，鹼濕磨98.4%；對掌純度：e.r.：88.1/11.9。

將5.3克具e.r.87.0/13.0之(XXa)及0.5克具e.r.：90.6/9.4 之(XXa)溶於160毫升含5重量%水之回流中的乙醇。讓此澄清的溶液緩慢冷卻。若無自發性開始結晶，則將混合物於45℃加入(XXa)晶種。冷卻至室溫後，將混合物另再攪拌14小時，過濾並以10毫升含5重量%水之乙醇清洗，於50℃真空乾燥後得到4.21克的白色產物。對掌純度：e.r.：96.5/3.5。

將25克具e.r.87.0/13.0之(XXa)及2.5克具e.r.：90.6/9.4之(XXa)的混合物於160毫升含5重量%水之乙醇中加熱回流。回流1小時後，讓漿液於2小時期間冷卻至室溫並另再攪拌14小時。然後將混合物過濾並以15毫升含5重量%水之乙醇清洗，於50℃真空乾燥後得到22.96克的白色產物。對掌純度：e.r.：97.6/2.4

實例3：製備(XVI)及其三乙胺鹽(XVIa)

(a)將344毫克(2毫莫耳)(XVII)及725毫克(4毫莫耳)四甲基氫氧化銨五水合物溶於2.5毫升甲醇及2.5毫升MeTHF之混合物中。將溶液於室溫及氫氣壓下，在82毫克5%重量比的銠碳作為催化劑之存在下，攪拌至隔夜。將催化劑濾出並以甲醇將濾液稀釋至100毫升的最終體積。LC分析顯示形成46.%(XVI)為其雙(四甲基銨)鹽，同時仍存有41%(XVII)為其雙(四甲基銨)鹽。

(b)於400克的6.6重量/重量%(XVI)之水溶液加入44.4 毫升三乙胺。於真空下蒸發330克的溶劑，然後將油狀殘餘物冷卻至50℃並加入51.5毫升丙酮，由此得到一懸浮液。將此懸浮液冷卻至室溫並再加入155毫升的丙酮。將懸浮液冷卻至5℃並於此溫度攪拌至隔夜。將固體過濾，以冷丙酮清洗及於70℃真空乾燥，得到15.05克(XVI)為其帶有不同量三乙胺之複合物(XVIa)為白色結晶粉末。產率：37%。就實例(XVI)，可得到其帶有1/3或帶有2個三乙胺之複合物。

其中x係介於1/3至3間，例如x為1/3；x為2。

(XVIa)之純化

(a)將2.00克粗(XVIa)懸浮於10.4毫升的丙酮中並將懸浮液回流之後使其冷卻至室溫。將固體過濾，以丙酮清洗並於50℃真空下乾燥，得到210毫克純(XVIa)為白色粉末。產率：35%。

(b)將2.00克粗(XVIa)懸浮於10.4毫升丁醇中並將懸浮液回流，之後使其冷卻至室溫。將固體過濾，以丙酮清洗並於50℃真空下乾燥，得到190毫克純(XVIa)為白色粉末。產率：14%。

實例4：製備(XVIII)

(a)將14.18克(31.5毫莫耳)(XXa)(e.r.：90/10)、3.92克(34.6毫莫耳)NMHA及8.56克(34.6毫莫耳)EEDQ懸浮於157毫升DCM並將生成的懸浮液回流至隔夜。加入47.2毫升的甲醇並延長回流至隔夜。然後將反應混合物於真空下濃縮並將殘餘物置於47毫升甲苯及79毫升1M HCl水溶液間分溶。將有機層連續以31.5毫升水、31.5毫升1M NaOH水溶液及31.5毫升水清洗，然後於真空下濃縮，得到11.93克粗(XVIII)(e.r.90/10)，無純化將其用於下個步驟。

(b)將2.50克(5.55毫莫耳)(XXa)、691毫克(6.10毫莫耳)NMHA及1.51克(6.10毫莫耳)EEDQ懸浮於28毫升THF並將此懸浮液回流2天。加入22毫升甲苯並蒸發28毫升的溶劑。冷卻至50-60℃後，加入19.4毫升1N HCl水溶液並將二層分離。將有機層以5.6毫升的水清洗，然後於真空下濃縮並將殘餘物以快速層析純化，得到910毫克(XVIII)。產率：65%。¹H NMR(CDCl₃,600MHz，有二種旋轉異構物存在，比例55/45)：ppm 1.26-1.38(m,2 H),1.43-1.60(m,2 H),2.01(m,2 H),2.07-2.21(m,4 H),2.86(s,3 H-次要旋轉異構物)，2.89-2.97(m,2 H),2.97(s,3 H-主要旋轉異構物)，3.21(ddd,1 H-次要旋轉異構物，J=14.7,9.1,5.8Hz),3.29(m,1 H-次要旋轉異構物)，3.31(t,2 H,J=7.6Hz-主要旋轉異構物)4.87-4.93(m,2 H)4.96(d,1 H,J=16.2Hz)5.71(m,1 H). ¹³C NMR(CDCl₃,150MHz，有二種旋轉異構物存在)：主要旋轉異構物：ppm 25.86,26.39,33.24,33.94,35.17,37.43,37.97,45.71,47.95,80.67,114.71,138.26,170.91,177.33-次要旋轉異構物：ppm 25.7,27.72,33.14,33.69,34.29,36.72,38.02,46.19,49.61,80.64,115.22,137.73,171.17,177.28.

(c)將17.85克(39.6毫莫耳)(XXa)(e.r.：97.6/2.4)、4.71克(41.6毫莫耳)及10.78克(43.6毫莫耳)N-乙氧基羰基-2-乙氧基-1,2-二氫喹啉(EEDQ)懸浮於198毫升MeTHF中。將懸浮液回流2天，然後冷卻至室溫。將固體物質濾出(大部分由金雞納啶組成)並以甲苯沖洗。於組合的濾液中加入40毫升水及7.14毫升濃HCl。將生成的二層分離並以20毫升的水清洗有機層，以硫酸鎂乾燥，過濾並於真空下濃縮。將殘餘物以矽膠層析來純化(溶離劑：乙酸乙酯-庚烷：65/35)，得到9.35克(XVIII)為油狀物。產率：68%。

實例5：製備(VIIIa)，其為其中R¹為甲基的式(VIII)之中間體

(a)將1.05克(4.2毫莫耳)(XVIII)溶於25毫升甲醇。加入0.014毫升(0.2毫莫耳)甲磺酸並將反應混合物於室溫攪拌三天。於真空下移除揮發物並將殘餘物再溶解於甲苯中-0.33M NaOH水溶液之混合物，各15毫升)。進行分層並將有機層以硫酸鎂乾燥及於真空下濃縮，得到330毫克粗(VIIIa)為油狀物(產率：28%)。

(b)將20.0克(44.4毫莫耳)(XXa)、5.53克(48.8毫莫耳)NMHA及12.08克(48.8毫莫耳)EEDQ懸浮於222毫升甲醇中。將混合物回流24小時，然後加入178毫升甲苯。蒸發250毫升的溶劑並將生成的懸浮液冷卻至30℃。加入155毫升1M HCl水溶液並將二層分離。以44毫升的甲苯萃取水層二次。將組合的有機層以硫酸鎂乾燥並過濾，得到122.78克的4.1重量/重量%(VIIIa)之甲苯溶液。產率：40%。

(c)將18.42克的4.1重量/重量%(VIIIa)之甲苯溶液於真空下濃縮並將殘餘物以快速層析純化(溶離劑：乙酸乙酯-DCM：15/85)，得到680毫克化學上純的(VIIIa)。

(d)將44.06克(97.8毫莫耳)(XXa)(e.r.：92.4/7.6)、12.18克(107.6毫莫耳)NMHA及26.60克(107.6毫莫耳)EEDQ懸浮於490毫升甲醇。將混合物回流至隔夜，然後加入391毫升甲苯並蒸發750毫升的溶劑。將156毫升的水及30.8毫升的濃HCl加到殘餘物中。將生成的二層分離並將水層以98毫升的甲苯萃取，然後以98毫升MeTHF萃取。將組合的有機層以硫酸鎂乾燥並過濾，得到384克3.6重量/重量%(VIIIa)之MeTHF-甲苯溶液。產率：50%。

(e)將19克(42.2毫莫耳)(XXa)(e.r.：93.4/6.6)、5.01克(44.3毫莫耳)NMHA及11.46克(46.4毫莫耳)EEDQ懸浮於210毫升THF中。將懸浮液回流至隔夜，然後冷卻至室溫。將固體濾出(大部分為金雞納啶)並以84毫升甲苯沖洗。於組合的濾液中加入42毫升水及7.6毫升濃HCl。將二層分離並將有機層以21毫升水清洗，以硫酸鎂乾燥，過濾及於真空下濃縮。將殘餘物再溶解於84毫升甲醇中，加入0.14毫升甲磺酸並將溶液於室溫下攪拌至隔夜，然後回流24h，之後冷卻至室溫。加入223毫克碳酸鈉並將混合物於室溫攪拌1小時。加入295毫升甲苯並蒸發160毫升溶劑，得到184.9克的5.3重量/重量%(VIIIa)之甲苯溶液。產率：82%。

(f)將19克(42.2毫莫耳)(XXa)(e.r.：93.4/6.6)、5.34克(47.2毫莫耳)NMHA及12.51克(50.5毫莫耳)EEDQ懸浮於210毫升甲苯中。將懸浮液回流2天，然後冷卻至室溫。定量分析顯示原處80%的(XVIII)產率。將固體物質濾出(大部分為金雞納啶)並以42毫升甲苯沖洗。於組合的濾液中加入42毫升水及7.6毫升濃HCl。將二層分離並將有機層以21毫升水清洗然後以21毫升鹽水清洗並蒸發206毫升溶劑濃縮。於濃縮液中加入84毫升甲醇及0.14毫升甲磺酸。將生成的溶液於室溫攪拌至隔夜。加入223毫克碳酸鈉並持續再攪拌1-2小時。加入295毫升甲苯並將生成的固體物質濾出。蒸發183毫升的溶劑，得到180.5克的2.7重量/重量%(VIIIa)之甲苯溶液。(VIIIa)之總產率：41%。

實例6：製備(VIa)，其為其中R¹為甲基的式(VI)之中間體

(a)將20.0克(44.4毫莫耳(XXa)(e.r.：90.1/9.9)、5.53克(48.8毫莫耳)NMHA及12.08克(48.8毫莫耳)EEDQ懸浮於222毫升甲醇中。將混合物回流24小時，然後加入178毫升甲苯。蒸餾出250毫升的溶劑並將生成的懸浮液冷卻至30℃。加入155毫升1M HCl水溶液並將二層分離。以44毫升的甲苯萃取水層二次。將合併的有機層以硫酸鎂乾燥並過濾，得到122.78克的4.1重量/重量%(VIIIa)之甲苯溶液。於98.22克的此溶液中加入11.17克(35.5毫莫耳)(VII)及9.78克(37.3毫莫耳)三苯基膦並將混合物冷卻至0℃。逐滴加入7.4毫克(37.3毫升)DIAD，然後將生成的反應混合物於0℃攪拌2小時，在此期間有沉澱出現。加入0.1毫升的乙酸並將沉澱濾出。將濾液於真空下濃縮並將殘餘物溶於71毫升沸騰的異丙醇。將溶液冷卻至0℃使(VIa)結晶。將固體過濾，以冷的異丙醇清洗並於真空下乾燥，得到6.32克(VIa)(e.r.：97.2/2.8)。來自(XXa)之產率：31%。

(b)於382.8克的3.6重量/重量%(48.6毫莫耳)(VIIIa)之MeTHF-甲苯溶液中加入18.53克(48.6毫莫耳)(VII)及19.7克(75.4毫莫耳)三苯基膦。蒸餾出118克的溶劑並將生成的殘餘物冷卻至0℃。逐滴加入14.9毫升(75.4毫莫耳)DIAD並將反應混合物於0℃攪拌2小時。將生成的固體沉澱大部份為三苯基膦氧化物)濾出並以冷的甲苯清洗。由合併的濾液中蒸發140克溶劑，然後加入97毫升1-丁醇及蒸發77克的溶劑。將混合物冷卻至80℃並加入97毫升的異丙醇及2.43克矽藻土。回流下攪拌數分鐘後，將混合物趁熱過濾並將生成的濾液冷卻至40℃。加入14毫克(VIa)作為晶種並將混合物冷卻至0℃。於0℃攪拌至隔夜後，加入48毫升的異丙醇並持續於0℃攪拌2小時。過濾將(VIa)分離出，以9.7毫升冷的異丙醇清洗並於70℃真空乾燥。得到第一部分8.77克(VIa)(產率：28%)。將母液於真空下濃縮並將殘餘物以快速層析經由矽膠純化，產生第二(VIa)收穫量(12.1克-產率：43%)。

(c)於58.9克(8.3毫莫耳)4重量/重量%(VIIIa)之甲苯溶液中，加入2.86克(9毫莫耳)(VII)及2.29克(10.2毫莫耳)三苯基膦。藉由蒸餾27毫升的溶劑將懸浮液乾燥，然後冷卻至0℃。逐滴加入8.7毫升(10.2毫莫耳)DIAD並將反應混合物於0℃攪拌1-2小時。將固體物質濾出並以4.2毫升甲苯沖洗。由組合的濾液蒸發27毫升溶劑。加入25毫升1-丁醇並蒸發25毫升的溶劑。將殘餘物冷卻至80℃，加入25毫升異丙醇及415毫克矽藻土，將懸浮液回流並趁熱過濾。將濾液冷卻至30℃及加入2.4毫克(VIa)作為晶種。將懸浮液冷卻至0℃並於此溫度攪拌至隔夜。將(VIa)濾出，以2.5毫升冷的異丙醇清洗並真空乾燥，由此得到24.3克白色粉末。產率：80%。

Claims

一種製備式(VIII)化合物之方法，其係於醯胺形成反應中由金雞納啶鹽(XXa)為起始物與N-甲基-己烯胺(NMHA)(XIX)反應，產生雙環內酯醯胺(XVIII)，其中係如下列流程所說明，將該內酯基團打開，產生所欲的產物(VIII)，其中R¹為C_1-4烷基：
如申請專利範圍第1項之方法，其中R¹為甲基。
如申請專利範圍第1項之方法，其中醯胺形成反應係在醯胺偶合劑之存在下於惰性反應溶劑中。
如申請專利範圍第2項之方法，其中醯胺形成反應係在醯胺偶合劑之存在下於惰性反應溶劑中。
如申請專利範圍第3項之方法，其該反應在鹼的存在下進行。
如申請專利範圍第4項之方法，其該反應在鹼的存在下進行。
如申請專利範圍第3至6項中任一項之方法，其中該溶劑包括鹵化烴類、醚類、醇類、烴溶劑、偶極性非質子溶劑或其混合物。
如申請專利範圍第7項之方法，其中該鹵化烴類為二氯甲烷(DCM)或氯仿，該醚類為四氫呋喃(THF)或2-甲基四氫呋喃(MeTHF)，該醇類為甲醇或乙醇，該烴溶劑為甲苯或二甲苯，該偶極性非質子溶劑為DMF、DMA、乙腈。
如申請專利範圍第3至6項中任一項之方法，其中該醯胺形成劑包括N-乙氧基羰基-2-乙氧基-1,2-二氫喹啉(EEDQ)、N-異丙氧基羰基-2-異丙氧基-1,2-二氫喹啉(IIDQ)、N,N,N',N'-四甲基-O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)六氟磷酸(HATU)、苯并三唑-1-基-氧基-叁-吡咯啶基-六氟磷酸鏻、CDI、1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳醯亞胺(EDCI)或其鹽酸鹽、雙環己基-碳醯亞胺(DCC)或1,3-二異丙基碳醯亞胺、O-苯并三唑-N,N,N’,N’-四甲基六氟磷酸(HBTU)試劑。
如申請專利範圍第9項之方法，其中該醯胺形成劑係在催化劑的存在下。
如申請專利範圍第10項之方法，其中該催化劑為1-羥基苯并三唑(HOBt)或4-二甲基胺基吡啶(DMAP)。
如申請專利範圍第5或6項之方法，其中該鹼為三級胺。
如申請專利範圍第12項之方法，其中該三級胺為三乙胺、N-甲基嗎啉、N,N-二異丙基乙基胺。
一種製備金雞納啶鹽(XXa)之方法，其係以結晶由外消旋鹽(XX)所製得：
如申請專利範圍第14項之方法，其中該外消旋鹽(XX)係藉由將雙環內酯羧酸(XV)與金雞納啶接觸所製得：
如申請專利範圍第15項之方法，其中係將金雞納啶之懸浮液於約50至約70℃的溫度下加到(XV)之溶液中，及隨後讓混合物冷卻因而使所欲的產物(XXa)結晶。
如申請專利範圍第15項之方法，其中(XV)係溶於選自酯溶劑之溶劑中，以及用於金雞納啶懸浮液之包括乙腈的溶劑中。
如申請專利範圍第17項之方法，其中該酯溶劑為乙酸乙酯。
如申請專利範圍第16或17項之方法，其中該鹽之形成係在約60℃的溫度下完成，並讓混合物冷卻至約室溫。
如申請專利範圍第19項之方法，其中該混合物冷卻至約20至約25℃範圍內的溫度。
如申請專利範圍第16或17項之方法，其中該鹽係以適合的溶劑或溶劑混合物再結晶；或藉由於溶劑或溶劑混合物中再漿化而進一步純化。
如申請專利範圍第21項之方法，其中該再結晶之溶劑為C_1-4烷醇，或再漿化之溶劑或溶劑混合物為乙醇/水混合物。
如申請專利範圍第22項之方法，其中該C_1-4烷醇為異丙醇，及/或乙醇/水混合物為5%/95%(重量/重量)之水/乙醇混合物。
一種下式之金雞納啶鹽，
一種如申請專利範圍第24項所定義之金雞納啶鹽(XXa)之用途，係作為製備如申請專利範圍第1項所定義之中間體(VIII)的中間體。
一種製備式(I)化合物之方法，該方法包含製備如申請專利範圍第1至13項中任一項所請求之式(VIII)化合物的方法，隨後轉化成式(I)化合物。
如申請專利範圍第26項之方法，其中式(I)化合物的轉化係如下：(i)將式(VIII)化合物與式(VII)化合物反應以形成式(VI)化合物， (ii)根據下方流程將式(VI)轉化成(I)：
一種製備如申請專利範圍第26項所定義之式(I)化合物的方法，該方法包含製備如申請專利範圍第14至23項中任一項所請求之式(XXa)化合物的方法，隨後轉化成式(I)化合物。
如申請專利範圍第28項之方法，其中式(XXa)化合物首先轉化成式(VIII)化合物，隨後經由申請專利範圍第1至13項中任一項所請求的方法。
如申請專利範圍第29項之方法，其中從式(VIII)化合物至式(I)化合物的轉化為申請專利範圍第27項所請求之方法。
一種如申請專利範圍第24項所定義之金雞納啶鹽(XXa)的用途，係作為製備如申請專利範圍第26項所定義之化合物(I)的中間體。