TWI356064B

TWI356064B - Antibodies that bind interleukin-4 receptor

Info

Publication number: TWI356064B
Application number: TW093133677A
Authority: TW
Inventors: Paul J Carter; Hongxing Zhou
Original assignee: Immunex Corp
Priority date: 2003-11-07
Filing date: 2004-11-04
Publication date: 2012-01-11
Also published as: NZ547588A; US7872113B2; AU2004290017B2; ES2383809T3; US20100203590A1; ATE548388T1; AU2004290017A1; EA200600869A1; EA011302B1; JP4931597B2; MA28418B1; US20070274996A1; UA93653C2; WO2005047331A3; JP2007534306A; KR20060111464A; GEP20104991B; ECSP066526A; TNSN06128A1; CN1886426A

Description

1356064 九、發明說明： ' % 相關申請案 ·

本案基於2003年11月7曰申請之美國暫時申請案 V 60/518,166號請求優先權。【發明所屬之技術領域】本發明係關於與IL-4受體結合之抗體，該抗體之片段、 · 突變體及衍生物，編碼該抗體、片段、突變體及衍生物之核酸，以及製造及使用該抗體、片段、突變體及衍生物之方法。治療由介白素-4引起之病症之方法包含將IL_4受體 _ 結合性抗體、該IL-4受體結合性抗體之IL_4受體結合性片段、突變體及衍生物投與罹患該病症之病人。本發明提供之特別抗體包括人類單株抗體。某些此等抗體可同時抑制 IL-4-誘生及IL-13誘生之生物活性。【先前技術】介白素-4(IL-4)，先前被稱為b細胞刺激因子或BSF-1，原先係以其回應低濃度針對表面免疫球蛋白之抗體而刺激 B細胞增生之能力來定特徵。現已證明IL_4具有遠較先前 · 發現者廣泛之生物活性範圍，包括T細胞、肥大細胞 '顆粒球、成巨核細胞及紅血球之生長共刺激。此外，IL_4刺激數種IL-2-及IL-3-依存性細胞系之增生，包括第π類主要組織相容性複合物分子在休止B細胞上之表現，以及藉由經刺激之B細胞增加IgE及IgGl異構型（isotype)之分泌。IL- ^ 4與TH2-型免疫回應有關，為TH2細胞分泌之細胞激素之 i 97211.doc 鼠及人類IL-4已被鑑定及定特徵，包括IL-4 cDNAs之選殖以及核苷酸及所編碼之胺基酸序列之決定。參見Yokota et al., 1986, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 83:5894 ； Noma et al·，1986, Nature 319:640 ； Grabstein et al., 1986 ; J. Exp. Med. 163:1405 ;以及美國專利第5,017,691號。 IL-4與特的定細胞表面受體結合，致使生物信號傳導至細胞，諸如各種免疫作用細胞。IL-4受體以及DNA及胺基酸序列資料被揭示於Mosley et al·，1989, Cell 59:335-48(鼠 IL-4R) ; Idzerda et al·，1990，J. Exp. Med. 171:861-73(人類 IL-4R)以及美國專利第5,599,905號。在此等刊物中之IL-4 受體有時被稱為IL-4Ra。曾報告其他蛋白質與一些細胞類型上之IL-4Roc締合，以及為多亞單位IL-4受體複合物之成份。該亞單位之一為IL-2ΙΙγ，亦稱為IL-2RYc。有關IL-4R複合物之討論請參見Sato et al., 1994, Current Opinion in Cell Biology, 6 ： 174-79 o 亦曾報告IL-4Roc為某些多亞單元IL-13受體複合物之成份。見 Zurawski et al.，1995, J· Biol. Chem. 270:13869 ; de Vries, 1998，J. Allergy Clin. Immunol. 102:165 ;以及 Callard et al·，1996，Immunology Today, 17:108。 IL-4涉及許多異常，其之例子為過敏及氣喘。【發明内容】本發明提供一種關於新穎IL-4R拮抗劑，尤其是會與IL-4Roc結合之抗體及抗體衍生物之方法及組合物。一方面，本發明提供一抗體，其中輕鏈可變區域 97211.doc (domain)包含一與序列編號：4不同之胺基酸序列，該不同處僅為：具有至少一個選自S28T、S30N、S30G、S31N、 S32D、S32N、A52T、S54Y、T57P、T57S、G93D、 S94H、S94R、P96A、P97G及T99M所成組群中之胺基酸取代，以及視情況可具有一或多個選自E1D、L4M、 S7T、G9A、K40R、F50Y、S68F、S77T、V86I、K105R、 V106L及E107D所成組群中之胺基酸取代；及/或重鏈可變區域包含一與序列編號：16不同之胺基酸序列，該不同處僅為：具有至少一個選自N58S、Y101W、F102Y、 D103T、D103N、D103P、Y104H、Y104N、Y104W 及 Y104R所成組群中之胺基酸取代，以及視情況可具有一或多個選自Q6E、H13Q、G24A、R86S及M90T所成組群中之胺基酸取代；其中該抗體會與IL_4受體α結合》在一具體例中，輕鏈CDR1包含選自序列編號：6之殘基24-35、序列編號：8之殘基24-35、序列編號：10之殘基24-35、序列編號：12之殘基24-35及序列編號：14之殘基24-35所成組群中之序列；輕鏈CDR2包含選自序列編號：4之殘基51-57、序列編號：6之殘基51-57、序列編號：10之殘基51-57 及序列編號：12之殘基5 1 -5 7所成組群中之序列；輕鏈 CDR3包含選自序列編號：4之殘基90-99、序列編號：6之殘基90-99、序列編號：8之殘基90-99及序列編號：14之殘基90-99所成組群中之序列；重鏈CDR1包含序列編號：16 之殘基31-35之序列；重鏈CDR2包含選自序列編號：16之殘基50-65及序列編號：18之殘基50-65所成組群中之序 97211.doc 1356064 列；及/或重鏈CDR3包含選自序列編號：16之殘基98- ^ 104、序列編號：18之殘基98-104、序列編號：20之殘基 ^ 98-104、序列编號：22之殘基98-104、序列編號：24之殘基98-104、序列編號：26之殘基98-104、序列編號：30之殘基98-104及序列編號：34之殘基98-104所成組群中之序列。在另一具體例中，輕鏈FR1包含選自序列編號：4之殘基卜23、序列編號：1〇之殘基1-23、序列編號：12之殘基 1-23及序列編號：14之殘基1-23所成組群中之序列；輕鏈籲 FR2包含選自序列編號：4之殘基36-50及序列編號：14之殘基36-50所成組群中之序列；輕鏈FR3包含選自序列編號：4之殘基58-89、序列編號：10之殘基58-89及序列編號：12之殘基58-89所成組群中之序列；輕鏈FR4包含選自序列編號：4之殘基100-109、序列編號：8之殘基100-109 及序列編號：12之殘基100-109所成組群中之序列；重鏈 FR1包含選自序列編號：16之殘基1-30及序列編號：42之殘基1-30所成組群中之序列；重鏈FR2包含序列編號：16 φ 之殘基1-30之序列；重鏈FR3包含選自序列編號：16之殘基66-97、序列編號：18之殘基66-97及序列編號：42之殘基66-97所成組群中之序列；及/或重鏈FR4包含序列編號：16之殘基105-115之序列。另一方面，本發明提供一抗體，其包含：一輕鏈可變區域，該區域包含與選自序列編號：4、6、8、10、12及14 h 所成組群中之序列具有至少80%同一性之序列，限制條件 * 為該輕鏈可變區域不包含序列編號：4，及/或一重鏈可變 97211.doc 1356064 區域，該區域包含與選自序列編號：^、18、2〇、22、 24、26、28、3〇、32、34、36、38、4〇、42、44、46、 48 5〇 52 54' 56、58、60及62所成組群中之序列具有至少80%同一性之序列，限制條件為該重鏈可變區域不包含序列編號：16之序列，其中該抗體可與IL 4受體α結合。在一具體例中，該輕鏈可變區域包含與選自序列編號.4、6、8、1〇、12及14所成組群中之序列具有至少 85%同一性之序列，及/或該重鏈可變區域包含與選自序列編號：16、18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、 38、40、42、44、46、48、50、52、54、56、58、60及62 所成組群中之序列具有至少85〇/〇同一性之序列。在另一具體例中’該輕鏈可變區域包含與選自序列編號：4、6、 8、10、12及14所成組群中之序列具有至少9〇%同一性之序列’及/或該重鏈可變區域包含與選自序列編號：16、 18、20、22、24、26、28、30、32 ' 34、36、38、40、 42、44、46、48、50、52、54、56、58、60及 62所成組群中之序列具有至少90%同一性之序列。在另一具體例中，該輕鏈可變區域包含與選自序列編號：4、6、8、1〇、12 及14所成組群中之序列具有至少95%同一性之序列，及/或該重鏈可變區域包含與選自序列編號：16、18、20、22、 24、26、28、30、32、34、36、38、40 ' 42、44、46、 48、50、52、54、56、58、60及62所成組群中之序列具有至少95%同一性之序列。在另一具體例中，該輕鏈可變區域包含選自序列編號.4、6、8' 10、12及14所成組群中 97211.doc •10. 1356064 之序列；及/或該重鏈可變區域包含選自序列編號：16、 18、20 ' 22 ' 24、26 ' 28、30、32、34、36 ' 38、40、 42、44、46、48、50、52、54、56、58、60 及 62 所成組群中之序列。另一方面’本發明提供一抗體，其中輕鏈可變區域包含選自序列編號：4、6、8、10、12及14所成組群中之序列之至少15個連續胺基酸所成之序列，限制條件為該輕鏈可變區域不包含序列編號：4之序列，及/或其中重鏈可變區域包含選自序列編號：16、18、20、22、24、26、28、 30、32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、 54、56、58、60及62所成組群申之序列之至少15個連續胺基酸所成之序列，限制條件為該重鏈可變區域不包含序列編號：16之序列；其中該抗體可與IL-4受體α結合。在一具體例中，輕鏈可變區域包含選自序列編號：4、6、8、 10、12及14所成組群中之序列之至少20個連續胺基酸所成之序列’及/或重鏈可變區域包含選自序列編號：16、 18、20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、 42、44、46、48、50、52 ' 54、56、58、60及 62所成組群中之序列之至少20個連續胺基酸所成之序列。在另一具體例中，輕鏈可變區域包含選自序列編號：4、6、8、1〇、 12及14所成組群中之序列之至少25個連續胺基酸所成之序列’及/或重鏈可變區域包含選自序列編號：16、18、 20、22、24、26、28、30 ' 32、34、36、38、40、42、 44、46、48、50、52、54、56、58、60及62所成組群中之 97211.doc • U · 1356064 序列之至少25個連續胺基酸所成之序列。在另一具體例中’輕鏈可變區域包含選自序列编號：4、6、8、1〇、12 及14所成組群令之序列之至少35個連續胺基酸所成之序列，及/或重鏈可變區域包含選自序列編號：16、18、 20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、 44、46、48、50、52、54、56、58、60及 62所成組群中之序列之至少35個連續胺基酸所成之序列。在另一具體例中’輕鏈可變區域包含選自序列編號：4、6、8、1〇、12 及14所成組群中之序列之至少5〇個連續胺基酸所成之序列，及/或重鏈可變區域包含選自序列編號：16、18、 20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、 44、46、48、50、52、54、56、58、60及 62所成組群中之序列之至少50個連續胺基酸所成之序列。在另一具體例中，輕鏈可變區域包含選自序列編號：4、6、8、1〇、12 及14所成組群中之序列之至少75個連續胺基酸所成之序列’及/或重鏈可變區域包含選自序列編號：16' 18、 20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、42、 44、46、48、50、52、54、56、58、60及 62所成組群中之序列之至少75個連續胺基酸所成之序列。在另一具體例中，輕鏈可變區域包含選自序列編號：4、6、8、1〇、12 及14所成組群中之序列之至少1〇〇個連續胺基酸所成之序列，及/或重鏈可變區域包含選自序列編號：16、18、 20、22、24、26 ' 28、30、32、34、36、38、40、42、 44、46、48、50、52、54、56、58、60及 62所成組群中之 97211.doc 12· Ϊ356064 序列之至少100個連續胺基酸所成之序列。另一方面，本發明提供一抗體，其包含：輕鏈可變區域’該輕鏈可變區域包含與選自序列編號：3、5、7、9、 11及1 3所成組群中之核苷酸序列至少有8〇%同一性之核苦酸序列所編碼之胺基酸序列，及/或重鏈可變區域，該重鏈可變區域包含與選自序列編號：15、17、19、21、23、 25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、47、 49、51、53、55、57、59及61所成組群中之核苷酸序列至少有80%同一性之核苷酸序列所編碼之胺基酸序列，限制條件為該抗體不同時包含序列編號：4之輕鏈可變區域序列與序列編號：16之重鏈可變區域序列，以及其中該抗體可與IL-4受體α結合。在另一具體例中，該輕鏈可變區域包含與選自序列編號：3、5、7、9、11及13所成組群中之核苷酸序列至少有85%同一性之核苷酸序列所編碼之胺基酸序列，及/或該重鏈可變區域包含與選自序列編號： 15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、 39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59及 61 戶斤成組群中之核苷酸序列至少有85%同一性之核苷酸序列所編碼之胺基酸序列。在另一具體例中，該輕鍵可變區域包含與選自序列編號：3、5、7、9、11及13所成組群中之核苷酸序列至少有90%同一性之核苷酸序列所編碼之胺基酸序列，及/或該重鏈可變區域包含與選自序列編號：1 5、 17、19、21、23、25、27、29、31 ' 33、35、37、39、 41、43、45、47、49、51、53、55、57、59及 61所成組群 97211.doc -13- l356〇64 中之核苷酸序列至少有90%同一性之核苷酸序列所編碼之胺基酸序列。在另一具體例中，該輕鏈可變區域包含與選自序列編號：3、5、7、9、11及13所成組群中之核苷酸序列至少有95%同一性之核苷酸序列所編碼之胺基酸序列，及/或該重鏈可變區域包含與選自序列編號：15、17、 19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、 43、45、47、49、5 1、53、55、57、59及 6 1 戶斤成組群令之核苷酸序列至少有95%同一性之核苷酸序列所編碼之胺基酸序列。在另一具體例中，該輕鏈可變區域包含與選自序列編號：3、5、7、9、11及13所成組群中之核苷酸序列至少有98%同一性之核苷酸序列所編碼之胺基酸序列，及/或該重鏈可變區域包含與選自序列編號：15、17、19、21、 23、25、27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、 47、49、51、53、55、57、59及61所成組群中之核苷酸序列至少有98%同一性之核苷酸序列所編碼之胺基酸序列。在另一具體例中，該輕鏈可變區域包含選自序列編號： 3、5、7、9、11及1 3所成組群中之核苷酸序列所編碼之胺基酸序列’及/或該重鏈可變區域包含與選自序列編號： 15、17、19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、 39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59 及 61 所成組群中之核苷酸序列所編碼之胺基酸序列。另一方面，本發明提供一抗體，其包含輕鏈可變區域，該輕鏈可變區域包含於中度嚴苛條件下，可與選自序列編號：3、5、7、9、11及13所成組群中選出之核苷酸序列之 97211.doc -14· 補體雜交之核苷酸序列所編碼之胺基酸序列，及/或重鏈可變區域，該重鏈可變區域包含於中度嚴苛條件下，可與選自序列編號：15、17、19、21、23、25、27、29、31、 33、35、37、39、41、43、45、47、49、51、53、55、 57、59及61所成組群中選出之核苷酸序列之補體雜交之核苷酸序列所編碼之胺基酸序列，限制條件為該抗體不同時包含序列編號.4之輕鏈可變區域及序列編號：16之重鏈可變區域，以及其中該抗體可與可與IL-4受體α結合。在一具體例中，該輕鏈可變區域包含於嚴苛條件下，可與選自序列編號：3、5、7、9、11及13所成組群中選出之核苦酸序列之補體雜交之核苷酸序列所編碼之胺基酸序列，及 /或該重鍵可變區域包含於嚴苛條件下，可與選自序列編 ^： : 15 、 17 、 19 、 21 、 23 、 25 、 27 、 29 ' 31 、 33 ' 35 、 37 、 39、 41 、 43 、 45 、 47 、 49 、 51 、 53 、 55 、 57 、 59及61 所成組群中選出之核苷酸序列之補體雜交之核普酸序列所編碼之胺基酸序列。另一方面，本發明提供一單離抗體’其中該抗體之輕鏈可變區域包含選自序列編號：6、8、1〇、12及14所成組群中之胺基酸序列以及該抗體可與IL-4受體α結合。另一方面’本發明係提供一單離抗體，其中該抗體之重鏈可變區域包含選自序列編號：16、18、20、22、24、 26、28、30、32 ' 34、36、38、40、42 ' 44、46、48、 50、52、54、56、58、60及62所成組群中之序列之胺基酸，以及該抗體可與IL-4受體a結合。 972ll.doc -15- 1356064 本發明之另一態樣係提供一抗體，其係選自L2H1、 L3H1、L4H1、L5H1、L1H2、L1H3、L1H4、L1H5、 L1H6、L1H7、L1H8、L1H9、L1H10、L1HU、L2H4、 L2H12、L2H13、L2H14、L6H1、L2H2、L2H3、L2H6、 L2H7、L2H8、L2H9、L2H10及 L2H11。另一方面，本發明提供一種人類、人類化或嵌合抗體。另一方面’本發明提供一種單株抗體。 > 另一方面，本發明提供一種抗體，其選自igD、igE、 •IgM、IgGl、lgG2、IgG3、IgG4及在絞鏈區具有至少一突變（該突變能減少重鏈内部形成二硫鍵之傾向）UgG4所組成之族群。方面，本發明提供一種包含本發明抗體之IL4受結合部分之單離多狀。在一具體例中，該多狀包含㈣ F(ab，)2、㈣、雙功能抗體、三功能抗體或四功能抗體。另一方面，本發明提供一明抗體之輕鏈之核苷酸序列之多肽。種單離核酸，其包含編碼本發 ’本發明抗體之重鍵或本發明另一方面，體。另一方面另一方面，胞。另一方面因轉移細胞。本發明提供一種包含本發明之單離核酸之載 ’該載體為表現載體。本發明提供—種包含本發明核酸之單離細 ’該細胞為融合瘤。另一方面，該細胞為基 η

>7 THJ a&供包含本發明抗體之細胞。在-具體例中’ s亥細胞為融合瘤。 ^另一具體例中，該細胞為基因 97211.doc •16- 1356064 轉移細胞。另一方面，本發明提供一種包含本發明多肽之細胞。在一具體例中，該細胞為基因轉移細胞。另一方面，本發明提供一種製造本發明抗體之方法，其包含培育含有编碼該抗體之輕鏈之核酸及編碼該抗體之重鏈之核酸之細胞，其之培育條件係能使該細胞表現該輕鏈及該重鏈以及使該輕鏈及該重鏈組合成該抗體者；然後自該細胞單離該抗體。在一具體例中，該細胞為融合瘤。在另一具體例中，該細胞為基因轉移細胞。另一方面，本發明提供一種抑制IL_4受體之方法，其包含將表現IL-4受體α之細胞與本發明之抗體或本發明之多肽於能讓該抗體或該多肽與該IL_4受體α結合之條件下接觸。在一具體例中’該細胞為人類細胞。在另一具體例中，該人類細胞在人類中。在另一方面’本發明提供一種治療病人之病症之方法，其包含將本發明之抗體或本發明之多肽以治療該病症有效之量投與該病人。在一具體例中，該病症為發炎病症或癌性病症。在另一具體例中，該發炎或癌性病症為免疫病症。在另一具體例中，該病症為氣喘、敗血性關節炎、疱疹樣皮膚樣、慢性體質特異性蓴麻疹、潰瘍性結腸炎、硬皮症、肥厚性疤痕、輝普耳氏症（whipple，s Disease、良性前列腺肥大症、有IL_4受體參與之肺異常、有il_4受體_ 媒"之表皮障壁損傷參與之病症、有化_4受體參與之消化系充異¥ '對於藥物之過敏反應、川崎症、鐮刀細胞疾 9721l.doc 1356064 病、喬格-史特勞斯徵候群（Churg_Strausssyndr〇me)、格雷氏疾病（Graves disease) '子癇前症、修格連氏徵候群 (Sjogren's syndrome)、自體免疫淋巴增生性徵候群、自體免疫溶血性貧血、巴端特氏食道症（B繼心esQphagus)、自體免疫葡萄膜炎、肺結核、纖維囊腫、過敏性肺支氣管真菌症、慢性阻塞性肺疾病、博來黴素（Me〇mycin)引起之肺病變及纖維症、放射線引起之肺纖維化、肺泡蛋白質症' 成人呼吸窘迫徵候群、類肉瘤病、IgE過高徵候群、體質特異性嗜伊紅性白血球徵候群、自體免疫性起皰症、哥甲型天跑瘡、大跑性類天跑瘡、重症肌無力、慢性倦免徵候群或腎病。另一方面，本發明提供一種醫藥組合物，其包含本發明之抗體或本發明之多肽以及賦形劑、稀釋劑或緩衝劑。【實施方式】本發明提供與抗-IL-4受體（IL-4R)相關之組合物及方法’包括治療某些由IL-4R媒介之病症之方法以及在活體中抑制介白素-4(IL-4)及介白素-13(IL-13)之生物活性之方法。本發明之組合物包括，例如，抗-IL-4R抗體、多肽、聚核苷酸、包含或表現抗體之細胞、本發明之多肽或聚核苦酸，以及醫藥組合物，其之例子列於下文。聚核苷酸及多肽序列用標準一-或三-字母簡寫表示。除非另有指示，多肽序列在左端具有其之胺基終端以及在右端具有其之羧基終端，以及單股核酸序列及雙股核酸序列之上股（top strand)在左端具有其之5，-終端，在右端具有其 972U.doc • 18 * 1356064 之3’-終端？特定之多肽或聚核苷酸亦可藉由解說其與參 η 照序列如何不同而加以說明。舉例言之，片語「與序列編號：4不同處為S28T之多肽」係指除了在序列編號：4之位置28之絲胺酸殘基以蘇胺酸殘基取代之外，其餘皆與序列編號：4相同之多肽序列。特定輕鏈及重鏈可變區之聚核苷酸及多肽序列被分別示於圖2及圖3中’在圖中’其被標記成’例如，li(輕鏈可變區1")及H1(重鏈可變區1)等。包含圖3所示輕鏈及重鏈之抗體藉由輕鏈之名字與重鏈之名字之組合來表示β舉例言 _ 之，『L4H7』表示包含L4之輕鏈可變序列及Η7之重鏈可變序列之抗體。「輕鏈可變區域（或區）」、「重鏈可變區域（或區）」、「CDR1、2及3」以及「FR1、2、3及4」依照Kabat等人在 Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5thEd., US Dept, of Health and Human Services, PHS, NIH, NIH Publication no. 91-3242，1991 中所述界定。 · 二核苷酸或二多肽序列之「同一性百分率」藉由使用 GAP 電腦程式（GCG Wisconsin Package，version 10.3 (Accelrys，San Diego，CA)之一部分）及使用其之預設參數 (default parameter)，比較此等序列而決定。生物分子（例如多肽、抗體或核酸）若大體不含其他生物分子、細胞殘渣及其他在標準實驗室規程中使用之物質， ★ 則稱之為「被單離」或「實質被純化」。實質純化多肽、 . 抗體及核酸之方法在本技藝中為眾所週知。 97211.doc -19· 1356064 術語「肽」、「多肽」及「蛋白質」在本文中可交互使 · 用，以及係指二或多個胺基酸殘基彼此藉由肽鍵結合而成之分子。術語「聚核苷酸」、「寡聚核苷酸」及「核酸」在本文中可父互使用，以及包括DNA分子（例如cdna或基因組

DNA)、RNA分子（例如mRNA)、用核苷酸類似物（例如肽核酸及非天然產之核苷酸類似物）製成之Dna或RNA之類似物以及其之雜合物《核酸分子可為單股或雙股。在一具體例中，本發明之核酸分子包含編碼本發明抗體之鄰接開放譯碼區、或其之片段、衍生物、突變蛋白或變異體。若二單股核酸之序列以反平行方向對準時，在一序列中之每一核苷酸均與在另一序列中之互補核苷酸相對而未引進空隙，以及在各序列之5，或3,端無未成對之核#酸，則謂該二單股核酸彼此「互補」。與一既定核苷酸序列互補之核酸分子，為與該既定核苷酸序列充分互補，以致於中度嚴苛條件下可與該既定核苷酸序列雜合者。因此，一核核酸可在未有其補體下與另一核酸互補。「载體」係一核酸，可用於將與其連結之另—核酸分二引進細胞。一類型之載體為「質體」，其係指直鏈或環注雙股DNA分子，其内可連接另外之核酸片段。另_類型々載體為病毒載體(例如複製缺陷性反錄病毒、腺病毒及; 病毒伴生病毒），其中另外之眶片段可被引進病毒基泛組。某些載體在其所進入之宿主細胞中可自行複製(例女包3細菌之複製起點之細菌類載體及附加體類之哺乳動彩 97211.doc -20- 1356064 載體（epiS0mal mammaiian vector))。其他載體（例如非附加體類之哺乳動物載體（n〇n_episomal mammalian vector))於引進宿主細胞後，會被整合入宿主細胞之基因組中，藉此與但主基因組一起複製。「表現載體」為可直接表現所選聚核苷酸之載體類型。若一調節序列會影響一核苷酸之表現（例如表現度、表現時機或表現位置）’則謂該核苷酸序列與該調節序列「可操控地連鎖」。「調節序列」為一核酸，其可影響另一核酸之表現（例如表現度、表現時機或表現位置）。調節序列例如可對被調節之核酸直接施加其作用，或經由一或多個多肽（例如會與該調節序列及/或該核酸結合之多肽）之作用施加其作用。調節序列之例子包括啟動子、促進子及其他表現控制單元（例如聚腺苷酸信號）：調節序列之其他例子例如被述於 Goeddel， 1990, Gene Expression

Technology : Methods in Enzymology 185，Academic Press， San Diego，CA 以及 Baron et al.，1995, Nucleic Acids Res. 23:3605-06 。「宿主細胞」為可被用於表現核酸，例如本發明之核酸之細胞。宿主細胞可為原核細胞，例如大腸桿菌，或可為真核細胞，例如單細胞真核細胞（例如酵母菌或其他真菌）、植物細胞（例如於草或番茄植物細胞）、動物細胞（例如人類細胞、猴子細胞、倉鼠細胞、大鼠細胞、小鼠細胞或昆蟲細胞）或融合瘤。宿主細胞之例子包括猴子腎臟細胞之 COS-7鈿胞系（ATCC CRL 1651)(見 Gluzman et al. 972U.doc -21 - 1356064 1981，Cell 23:175)、L 細胞、C127 細胞、3T3 細胞（ATCC CCL 163)、中國倉鼠卵巢（CHO)細胞或其衍生物諸如在無血清培養基中培養之Veggie CHO及相關細胞系（見 Rasmussen et al., 1998，Cytotechnology 28:3 1)或 CHO株 DX-B11(其缺乏 DHFR，見 Urlaub et al.，1980, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77:4216-20)、HeLa細胞、BHK(ATCC CRL 10)細胞系、衍生自非洲綠猴腎臟細胞系CV1 (ATCC CCL 70)之 CV1/EBNA細胞系（見 McMahan et al_, 1991，EMBO J. 10:2821)、人類胚胎腎臟細胞諸如293、293 EBNA或MSR 293、人類表皮A431細胞、人類結腸205細胞、其他經轉形之靈長類細胞系、正常雙倍體細胞、衍生自原生組織之試管培養物之細胞系、初次移植體、HL-60、U937、HaK或 Jurkat細胞。宿主細胞通常為可用編碼多肽之核酸轉形或轉染且該核酸繼而可在該宿主細胞中表現之培養細胞。片語「重組宿主細胞」可被用於表示已被待表現之核酸轉形或轉染之宿主細胞。宿主細胞亦可為包含該核酸，但除非調節序列被引進該宿主細胞以致其與該核酸成為可操控地連鎖，否則不會使該核酸以期望程度表現之細胞。應當了解術語宿主細胞不僅指特定個體細胞，亦指該細胞之後代或潛在後代細胞。由於在繼代細胞中可能因突變或環境影響產生某些修改，該後代細胞可能與親代細胞不完全相同，但仍包括在本文所用之術語宿主細胞之範圍内。「嵌合抗體」為抗體中重鏈及/或輕鏈之一部分與來自特定物種或屬於特定抗體類別或亞類之抗體同源或衍生自 97211.doc •22- 1356064 該抗體，但各鏈之其餘部分與來自另一物種或屬於另一抗體類別或亞類之抗體同源或衍生自該抗體者。該等抗體之片段，若能顯示期望之生物活性（亦即與IL-4受體特異性結合之能力）’將亦被包括在内。參見美國專利4,816,567號以及 Morrison, 1985, Science 229:1202-07。「CDR接枝抗體」為包含一或多個衍生自特定物種之抗體或其異構型之CDRs以及來自相同或不同物種之抗體或其異構型之骨架（framework)之抗體。「多重特異性抗體」為能識別在一或多個抗原上一個以上抗原決定部位（epitope)之抗體。該類型抗體之亞類為「二重特異性抗體」’其能識別在一或多個抗原上二個不同的抗原決定部位。多肽（例如抗體）之「變異體」包含相較於另—多肽序列’在其胺基酸序列中有一或多個胺基酸殘基被插入、刪除或取代而成之胺基酸序列。本發明之變型包括融合蛋白多肽之「衍生物」係經由一些不同於插入 '刪除或取代變異體之方式（例如經由與另一化學結構結合）修改之多肽 (例如抗體）。除非另有指定，術語「抗體」除了包括具有二全長重鏈及二全長輕鏈之抗體之外，尚包括其之衍生物、變異體、片段及突變蛋白，其之例子被述於下文中。若一分子與IL-4受體或其片段結合之親合力至少為其與 IL-4受體不相關之多肽之結合親合力之1 〇倍以上，則謂該分子「可與IL-4受體特異性地結合」。 97211.doc -23< 1356064 「抗原結合區域（domain)」或「抗原結合區（regi〇n)j為抗體分子之一部分，其含有可與抗原交互作用且賦予該抗體對該抗原之特異性及親合力之胺基酸殘基（或其他部分）。「抗原決定部位」為分子中與抗體結合之部分。抗原決定部位可包含分子中非鄰接之部分（例如就多肽而言，於多肽序列中彼此不鄰接，但同在該分子之範圍内且一起與抗體結.合之胺基酸殘基）。適應症本發明之另一態樣係提供一種治療、預防、根治、緩解或減輕疾病、異常、病症或病態之方法。可依照本發明治療之病症為氣喘、敗血性/反應性關節炎、疱疹樣皮膚炎、慢性異位性蓴痲疹、硬皮症、肥厚性疤痕、惠普耳氏病（Whipple’s Disease)、良性前列腺肥大症、il-4為致病原因之一之肺異常、IL-4誘生之表皮障壁破壞為致病因之一之病症、IL-4為致病原因之一之消化系統異常（包括發炎性腸疾病及胃腸道之其他發炎病症）、對於藥物之過敏性反應、川崎症（Kawasaki disease)、鐮刀細胞疾病（包括鐮刀細胞危象）、喬格-史特勞斯徵候群（Churg-Strauss syndrome)、格雷氏疾病（Grave’s disease)、子癇前症、修格連氏徵候群（Sjogren's syndrome)、自體免疫性淋巴增生徵候群、自體免疫性溶血性貧血、巴瑞特氏食道症 (Barrett's esophagus)、自體免疫性葡萄膜炎、肺結核及腎病，此等病症將在下文中詳述。亦發現IL-4R拮抗劑可作 97211.doc -24· U56064 為過敏性免疫治療之佐劑及疫苗佐劑。適於治療此等病症之抗體之例子被述於下文，以及包括會與IL-4R結合並抑制IL_4與IL-4R結合之抗體。特別有用之抗體亦會抑制虬-^與il-13受體（IL-13R)結合。本發明之特別具體例包括新穎抗體及抗體衍生物、片段、突變蛋白及變異體、多肽、核酸分子、細胞、製造上述者之方法、抑制IL-4Ra之方法及治療病患之方法，彼等之例子將述於下文。本發明之一態樣係提供一種將抗IL-4Ra抗體投與病患之方法’在一具體例中，病患罹患或有可能罹患經由IL-4R〇t 之/舌性直接或間接引起、誘生、媒介、增強、惡化或受到影響之病症（例如病態、感染、受傷、疾病、或異常）。此等病症包括經由IL-4及/或IL-13直接或間接引起、誘生、媒介、增強、惡化或受到影響之病症。其他因子或細胞激素在此等病症中亦可能擔任某種角色。 IL-4之生物活性經由與特異性細胞表面受體（被稱為介白素-4¾:體（IL-4R))結合而媒介。iL_4誘生之病症包括經由 IL-4與細胞上之天然IL_4受體結合而產生之生物反應或經由防止IL-4與IL-4受體結合而被抑制或減弱之生物反應所引起者。可被治療之病症包括（但不限於）#IL4或者il_4r 或IL-13R之一或多個組成分之表現異常（包括，例如，過度表現、在特定組織或細胞類型中錯誤表現、或在特定發育階段錯誤表現）’或者宿主對於比-4製造之反應異常。病症之另外例子為^一誘生之抗體製造、增生或特定細胞類 9721l.doc •25- ^56064 型之流入擔任有角声 ττ ^ 啕月色之病症。IL-4誘生之異常包括IL 4 使IL-4受體調升者^^IT4 ’ ττ有忒丨L-4誘使在疾病中擔任有角色之另一蛋白質之製造增加者（例如另一種細胞激素卜治療羅患此等異常之嗔乳動物（包括人類病患）之方法包· 含將抗-IL-4R抗體或其衍生物投與哺乳動物，或者使哺乳動物之IL-4R與抗體或衍生物接觸，例如在活體外方法中者可依照本發明方法治療之病症，被述於例如細1年$ 月1日申請之USSN 〇9/847,816’其之相關揭示内容以參考文獻方式納入本文。此等病症包括（但不限於）氣喘、⑯鲁血性/反應性關節[録樣皮膚炎、蓴痲療（尤其是慢性異位性蓴痲疹）、潰瘍、胃部發炎、黏膜發炎、潰瘍性結腸炎、克隆氏症（Crohn’s Disease)、發炎性腸疾病、其他 IL-4擔任有角色之消化系統異常（例如化一誘生之一部分胃腸道發炎）、IL-4誘生之障壁破壞擔任有角色之病症（例如以肺或消化道中表皮障壁功能減低為特徵之病症）、硬皮症肥尽性症痕、惠普耳氏病（Whipple’s Disease)、良性前擊列腺肥大症、IL-4誘生之肺部病症（包括下文所列出者）、對於藥物之過敏性反應、川崎症（Kawasaki Disease) '鐮刀細胞疾病或危象、喬格-史特勞斯徵候群（Churg、Strauss syndrome)、格雷氏疾病（Grave's disease)、子癇前症、修格連氏徵候群（Sjogren’s syndrome)、自體免疫性淋巴增生性徵候群、自體免疫性溶血性貧血、巴瑞特氏食道症 · (Barrett’s esophagus)、自體免疫性葡萄膜炎、肺結核、腎 · 病、尋常性天疱瘡或大疱性天疱瘡（自體免疫起疱性疾病） 972I1.doc •26- 1356064 及重症肌無力（自體免疫性肌肉疾病）。抗-IL-4R抗體及其衍生物亦可作為過敏免疫治療之佐劑以及疫苗佐劑。所以，抗-IL-4R抗體可被用作過敏免疫治療之佐劑。抗-IL-4R抗體尚可作為疫苗佐劑，諸如癌症疫苗及感染疾病疫苗之佐劑》IL-4佐劑之使用，尤其當針對於對ΤΗ 1反應之免疫反應時，在治療或預防其所引起之疾病上有效益。敗血性/反應性關節炎抗-IL-4R抗體可被用於治療敗血性關節炎（亦被稱為反應性關節炎或細菌性關節炎）。敗血性關節炎可由感染微生物諸如金黃色葡萄球菌、砂眼衣原體、耶氏桿菌（Yersinia) 諸如小腸結腸耶氏桿菌、沙門氏菌諸如沙門氏腸炎菌、痢疾桿菌（Shigella)及彎曲桿菌（Campylobacter)。曾報告金黃色葡萄球菌為敗血性關節炎之主要人類致病菌，大多數之病例皆是由該菌引起。 IL-4及IL-4依存性Th2反應在促進敗血性關節炎上擔任有角色。依照本發明，抗-IL-4R抗體可被用於在罹患敗血性關節炎之病人或有危險發生敗血性關節炎之病人中抑制 IL-4以及壓制Th2反應。 11-4經由抑制細菌之清除，會增加關節中之細菌量及細菌持久性。抗-IL-4R抗體可被用於幫助清除與反應性關節炎相關之細菌’藉此減少臨床上之徵候諸如關節之腫脹。可將抗-IL-4R抗體投與至罹患敗血性關節炎之人類病患，以減少IL-4媒介之關節發炎。在一方法中，將一拮抗劑注 97211.doc -27- 1356064 入關節中，例如注入膝蓋之滑囊液中。抗-IL-4R抗體之使用，經由壓制ΤΗ2反應及促進對抗感染之ΤΗ1反應，可能對於罹患（或可能罹患）敗血性關節炎之病患有所助益。ΤΗ2細胞激素可能有助於細菌持續存留於關節中’而ΤΗ 1反應則在清除細菌方面擔任角色。可將抗體投與至感染細菌或其他微生物（諸如下表所列者）之病患中，以預防敗血性關節炎之發生。舉例言之，可在診斷出該感染症後，但在敗血性關節炎之臨床症狀出現之前投與抗體。惠普耳氏病（Whipple’s Disease)

Tropheryma whippelii為惠普耳氏病之致病菌，惠普耳氏病亦被稱為腸道脂肪營養不良及嗜脂性肉芽腫。該疾病以脂肪性下痢、常為泛發性之淋巴結病、關節炎、發燒及咳漱。亦曾報告在惠普耳氏病患者中，於空腸固有層有許多「泡沫狀」巨噬細胞，以及淋巴結藉由電子顯微鏡觀察時可見到呈桿菌形之過碘酸·史契夫（schiff)陽性粒子 (Steadman's Medical Dictionary, 26th Edition, Williams & Wilkins, Baltimore, MD，1995)。抗-IL-4R抗體之使用，經由恢復病患之免疫反應中THi 組份與TH2組份間之正常平衡，可能對於罹患（或可能罹患）惠普耳氏病之患者有所助益。IL_4(一種TH2•型細胞激素）之生產增加及某些ΤΗ 1 -型細胞激素之濃度減低與惠普耳氏病有關。TH2細胞激素可能造成細菌持續存留，而 TH1反應在清除致病細菌上擔任某種角色。不論患者是否 972ll.doc -28- 1356064 顯現惠普耳氏病之臨床症狀，均可將IL-4R拮抗劑投給感染T. whippelii之患者。疱疹樣皮膚炎范療樣皮膚炎亦被稱為杜林氏症（Duhring's disease)，其係一種以起疱性皮膚損傷、皮膚IgA沉積及搔癢為特徵之慢性皮膚症狀。病人罹患免疫性大水疱皮膚異常連同麩質敏感性腸病變’其係由Th2免疫反應所媒介。依照本發明，投與抗-IL-4R抗體以抑制IL-4及Th2反應，因此可促進現有損傷之癒合以及減少或防止在伸肌體表面大疱之形成。肥厚性疤痕依照本發明，將抗-IL-4R抗體投與罹患或可能罹患肥厚性症痕之患者。在本文所提供之一方法中，將抗_IL_4R抗體投與罹患燒傷之病人《咸信對於燒傷及其他傷害之免疫反應在肥厚性疤痕之致病因中擔任某種角色。曾報告在羅患肥厚性疤痕之燒傷病人中，ΤΗ2·型細胞激素（包括IL_4) 之生產增加以及某些ΤΗ 1 -型細胞激素之濃度減少。抗 4R抗體之使用，經由壓制TH2-型免疫反應，可能對於罹患或可能罹患肥厚性疤痕之病患有效益。蓴麻珍蓴麻疹，尤其是其之慢性形式諸如慢性體質特異性蓴麻疹（CIU)，可依照本發明用抗·IL_4R抗體治療。CIU病患之 IL-4血清濃度比對照組者高，以及可能具有主要為th2-類型細胞激素之表徵。肥大細胞及Th2_類型τ細胞為慢性蓴 97211.doc •29- 1356064 麻療乍之主要作用細胞。IL-4刺激肥大細胞增生。肥大細胞脫顆粒導致組織胺釋放，繼而產生紅斑、嗜伊紅血球增多症、皮膚發紅及搔癢。投與抗-IL_4R抗體以抑制IL-4及減少TH2-類型回應，藉此幫助控制病患之蓴麻疹。潰瘍性結腸炎；胃腸道之其他異常 IL-4涉及潰瘍性結腸炎之致病。包括IL_4iTh2_類型細胞激素在罹患該異常之結腸黏膜中佔有優勢。使用抗·IL_ 4R抗體壓制TH2反應可減輕該病症。除了潰瘍性結腸炎，胃腸道或消化系統之其他異常可用抗-IL-4R抗體治療。該異常之例子包括（但不限於）發炎性腸疾病（IBD)(潰瘍性結腸炎及克隆氏疾病以IBD之形式呈現）、胃炎、潰瘍及黏膜發炎。

任何涉及IL-4之胃腸道病症可用依照本發明之抗_IL-4R 抗體治療。舉例言之，涉及IL_4誘生之部分胃腸道發炎之病症可用抗-IL-4R抗體治療。一特定之具體例為治療胃腸道之慢性發炎病症。其他之具體例係針對涉及IL-4誘生之障壁破壞之病症，此等病症之特徵為在至少一部分胃腸道中表皮障壁功能減低。此等病症例如涉及由IL-4直接或間接誘生之表皮損傷。 ' 腸表皮在腸腔與黏膜下層之間形成相對不可通透之障壁。表皮障壁之破壞與諸如發炎性腸疾病等病症有關。見在 Youakim，A. and Ahdieh (敲乂以㈣,π 说39):Gl279 Gi288, BN)中之 97211.doc •30· 討論，該文獻之全部内容以參考文獻方式納入本文。損傷或「滲漏」之障壁允許抗原通過障壁，其最終會誘發免疫反應，而進-步引起對胃腸組織之損傷。該免疫反應可能包括例如嗜中性球或τ細胞之增加。可投與抗_IL_4R抗體’以抑制免疫反應之不期望刺激。肺異常本發明提供治療IL-4誘生之肺異常之方法。該異常包括 (但不限於）肺纖維化（包括慢性纖維性肺疾病）、其他以肺中IL-4誘生之纖維母細胞増生或膠原蓄積為特徵之病症、涉及TH2-類型免疫反應之肺病症、以肺中障壁功能減低 (例如由IL-4誘生之表皮損傷引起）為特徵之病症或發炎反應中IL-4擔任有角色之病症（例如氣喘）。纖維囊腫係以黏液之過度生產及慢性感染之發生為特徵。抑制IL-4及Th2反應將減少黏液產生以及幫助控制感染諸如過敏性支氣管肺黃麴菌病（asperg⑴〇sis)(ABpA)。過敏性支氣管肺黴菌病主要出現在罹患纖維囊腫或氣喘之病患中，其中Th2免疫反應顯著。抑制IL_4及Th2反應將有助於清除及控制此等感染症。慢性阻塞性肺疾病與黏液過度分泌及纖維化相關。抑制 IL-4及Th2反應將減少黏液之產生及纖維化之發生，藉此改良呼吸功能及延遲疾病進展。博來黴素-誘生之肺病變及纖維化以及輻射_誘生之肺纖維化係以肺纖維化為特徵之異常，其之表徵為流入Th2、 CD4 +及巨嗟細胞’此等細胞產生IL_4，最終導致纖維化之 97211.doc 1356064 發生。抑制IL-4及Th2反應將減少或防止此等異常之發生。肺泡蛋白質沉積症以界面活性劑清除之破壞為特徵。 IL-4會增加界面活性劑產物β抗·il_4r抗體之使用將減少界面活性劑產生及降低對全部肺灌洗之需要。成人呼吸窘迫徵候群（ARDS)可歸因於許多因素，其中之一為暴露於毒性化學品》易罹患ARDS之一群病人為使用吟吸器之嚴重病患。ARDS為此等病人常見之併發症。抗-IL-4R抗體治療可經由減少發炎及黏著分子而減輕 ARDS，惟依照本發明治療此等病患之方法不受特殊作用機制所限。可使用抗-IL-4R抗體防止或治療Ards。類肉瘤病以肉芽腫樣損傷為特徵。本發明包括使用抗_ IL-4R抗體治療類肉瘤病，尤其是肺部類肉瘤病。涉及IL-4誘生之障壁破壞之病症（例如以肺部中表皮障壁功能減低為特徵之病症）可用抗_IL_4R抗體治療。肺部中表皮P导壁之損傷可由IL-4直接或間接誘生。肺部中之表皮具有選擇性障壁之功能，可防止肺腔中之内容物進入黏膜下層。損傷或「滲漏」之障壁允許抗原穿過障壁，其最終會引起免疫反應，而造成肺組織之進一步損傷。該免疫反應可包括例如嗜伊紅性白血球或肥大細胞增加。可投與抗_ IL-4R抗體，以抑制此等不被期望之免疫反應刺激。可使用抗IL-4R抗體促進肺表皮之癒合，因此恢復障壁功能。例如可使用抗_IL_4R抗體促進氣喘患者之肺表皮之癒合。或者可為了預防之目的投與拮抗劑，以防止IL-4誘 97211.doc -32- l356〇64 生之肺表皮損傷。肺結核 TH2-型免疫反應在肺結核（TB)病患中在引起組織損傷上

擔任某種角色（例如肺組織之壞死）。IL-4濃度之升高與TB 相關。IL-4製造在空洞性肺結核患者中特別會上升（例如在已出現肺空洞之TB病人中，可藉由胸部放射線顯影等技術檢測及/或觀察）。抗-IL-4R抗體經由壓制TH2_型免疫反應，可能對丁8病患 (尤其是空洞性TB患者）有效益。不過，依照本發明，治療此等病患之方法不受特定作用機制限制。抗_IL_4R抗體宜以能恢復所期望之免疫反應之TH丨與TH2組成份間之平衡以及減少IL-4誘生之組織損傷之量投與病人。香格-史特勞斯徵候群（Churg-Strauss syndrome) 喬格-史特勞斯徵候群，亦被稱為過敏性肉芽腫血管炎，其特徵為在有氣喘或過敏病史之人中出現也管發炎及嗜伊紅性白血球增多症。可將抗-^…尺抗體投與至該徵候群之患者以減輕發炎。使用抗^^々尺抗體壓制th2_型免疫反應以及對抗嗜伊紅性白血球增多症將對患者有助益。子癇前症子癇前症為懷孕後期之毒血症。該病症以懷孕第三期血壓急遽上升為特徵，通常伴隨水腫及白蛋白尿。 ΤΗ-1型及ΤΗ-2型免疫免疫反應提高在該病症中可能擔任某種角色。本發明提供一治療方法，其包含將抗 4R抗體投與至已出現子癇前症之懷孕婦女。抗抗體 97211.doc -33- 1356064 之投與量及投與期間應足以使IL-4(或全部TH2-型細胞激素）減低至在懷孕期間被視為正常之濃度。總言之，在懷孕全期反覆投與抗-IL-4R抗體。硬皮症依照本發明，將抗-IL-4R抗體投與至罹患硬皮症之病患。該抗體在病患體内會減少IL-4所誘生之經由纖維母細胞之膠原合成。可使用該抗體防止或減少皮膚、肺組織及其他在硬皮症病患中發生纖維化之組織之纖維化，以及治療與硬皮症相關之肺疾病。良性前列腺增生良性前列腺增生（ΒΡΗ)，亦被稱為良性前列腺肥大，可用抗-IL-4R抗體治療。雖然不期望受特定作用機制所限，但抗-IL-4R抗體之投與，經由壓制il-4誘生之發炎或經由壓制ΤΗ2-型免疫反應，可能對ΒΡΗ病患有助益。格雷氏疾病（Grave’s Disease) 對抗促甲狀腺激素（thyrotropin)受體之抗體在以曱狀腺亢進為特徵之格雷氏疾病中擔任重要角色。對於格雷氏疾病病患體内細胞激素生產之研究顯示移向TH2-型細胞激素反應。使用抗-IL-4R抗體壓制TH2-型免疫反應及壓制抗體生產對於格雷氏疾病病患將有助益。錄刀細胞疾病錄刀細胞疾病通常經歷稱之為危象（c r i s e s)之間歇性急性惡化，該危象分為貧血或血管阻塞二類。抗_il_4r抗體在 >台療或預防鐮刀細胞危象上有用，尤其是對於IL-4濃度上 97211.doc -34- 1356064 反應升之病患或免疫反應移向TH2_型反應之病患更為有用。鐮刀細胞疾病（尤其是鐮刀細胞危象）與對於感染性疾病（包括細菌性感染症）之感受性増加有關m4R抗體投給錄刀細胞疾病病患將有助於病患建立對抗感染性疾病之免疫修格連氏徵候群（Sj0gren，s syndr〇me) 被稱為修格連氏徵候群或教操激缺乾各徵候群之免疫疾病通常合併有乾眼及口乾，同時伴隨结缔卞間 π締組織異常諸如類風濕性關節炎、狼瘡、硬皮症或多發性肌炎。大部分之病人為中年 (或更老）之婦女。修格連氏徵候群為身體之線體（例如㈣及唾液腺）及其他組織織之I ^ \，心贫火性疾病。該徵候群通常與自體抗體產生有關。可投與抗·Ιί·4ΙΙ抗體以減少此等病患之發炎反應（諸如腺體（包括淚腺）之發炎）。抗_„^411抗體，經由壓制ΤΗ2•型免疫反應，可能對於修格連氏綜合症有所助益。不過，依照本發明治療病患之方法不受特定之作用機制所t 自體免疫性淋巴增生徵候群自體免疫性淋巴增生徵候群之表徵包括淋巴增生及自體抗體產生。據報告罹患該徵候群之病患在細胞凋亡方面具有遺傳的缺陷。抗-IL-4R抗體經由壓制TH2_型免疫反應，可旎對罹患该徵候群之病患有所助益。不過依照本發明治療此等病患之方法不受特定之作用機制所限。自體免疫性溶血性貧血過夕之IL-4分泌及ΤΗ 1 -型細胞激素缺陷涉及自體免疫性 9721i.doc •35- 1356064 溶血性貧血之致病。依照本發明投與抗_IL-4R抗體，經由，減少自體抗體產生以及經由恢復免疫反應之TH1與TH2組，成份間之較正常平衡，可能對於此等病人有所助益。自體免疫性葡萄膜炎葡萄膜炎涉及葡萄膜（通常被認為包括彩虹、睫狀體及脈络膜或一起）之發炎。過多之IL-4分泌在該視力受威脅之發炎性眼疾病之致病上擔任某種角色。依照本發明，將抗-IL-4R抗體投給罹患或可能罹患葡萄膜炎之病患。在一具體例中，將抗_IL-4R抗體投給具有自體免疫性葡萄膜視 _ 網膜炎之病患。川崎症（Kawasaki Disease) 川崎症（KD) ’亦被稱為黏膜皮膚淋巴結徵候群，主要侵犯小孩童。該疾病之特徵為在内襯於嘴唇及口之黏膜上有特殊變化以及淋巴結腫大及觸痛。症狀通常包括發燒、結膜炎、嘴唇及口腔黏膜發炎、頸部腺體腫大以及覆蓋於手及腳之疹子，導致在手及腳上硬化、腫脹及剝落之皮膚。鲁在罹患川崎症（KD)之孩童中，可能發生動脈發炎。川崎病由於在血管系統有病，所以曾報告其為引起孩童後天性心臟病之主要原因。可將抗-IL-4R抗體投給罹患川崎症之病患。過多之iL_4 分泌及ΤΗ-1型細胞激素缺陷導致該疾病之致病。巴瑞特氏食道症 · 巴瑞特氏食道症係以内襯食道較下部之表皮組織中細胞 · 之改變(繼發於刺激)為特徵。長時間胃部内容物經常流入 972il.doc -36· 1356064 食道可能導致巴瑞特氏食道症。罹患巴瑞特氏食道症之病患有發生食道癌（例如腺癌）之虞。雖然不希望受特定作用機制所限，抗-IL-4R抗體之投與經由壓制th_2型免疫反應’可能對巴瑞特氏食道症患者有所助益。在一具體例中，將抗-IL-4R抗體投與罹患食道炎之病患，以抑制巴瑞特氏食道症之進行。腎病腎病’亦被稱騎性徵候群，係非發炎性及非惡性腎疾 ^。在被稱為輕微變化型腎病之情況中’絲球體損傷（咸信由絲球體表皮細胞之結構性改㈣起）造成包括蛋白尿之異常。TH21免疫反應（尤其是TH2•型細胞㈣Μ及 IL-13之分泌）在輕微變化型腎病之致病上擔任某種角色。其他適應症可依照本發明治療之病，症之其他例+包括（但$限於）下列者。可使用抗-IL-4R抗體治療或預防IgE過高徵候群' 體質特異性嗜伊紅性白血球過高徵候群、對於治療藥劑之過敏性反應、自體免疫性起疱疾病（例如尋常性天疱瘡或大疱性天泡瘡）、重症肌無力（自體免疫性肌肉疾病）及慢性疲倦徵候群。抗-IL-4R抗體可被用於治療GVHD ;以該抗體與其他治療劑之組合治療GVHD之特定方法被述於下文。亦發現抗-IL-4R抗體可用於治療或預防藥物諸如雙氯滅痛（diclofenac，一種非類固醇類消炎藥）引起之肝毒性。抗-IL-4R抗體可被用作過敏免疫治療之佐劑。抗_il_4r 抗體亦可作為疫苗佐劑，諸如癌症疫苗及感染症疫苗之佐 9721l.doc •37· 1356064 劑。當促進ΤΗ-1 -型免疫反應在預防或治療有待投與疫苗之病症上有效益時’使用抗·ΙΓ^4ΙΙ抗體特別有利。當期望減少抗體-媒介之免疫反應及/或促進τ_細胞-媒介之免疫反應時，可使用抗-IL-4R抗體》抗-IL-4R抗體本發明之一態樣為提供一種抗體以及其之片段、衍生物、突變蛋白及變異體，彼等會與IL-4受體α(例如人類乩· 4受體α)結合。依照本發明可使用之抗-IL-4R抗體包括能抑制IL_4之生物活性之抗體。此等生物活性之例子包括與另一受體成分 (例如IL-2Ry或IL-13Ra)締合、與一信號分子（例如il-4或 JL-1 3)結合（以單獨或為多元受體複合物之一部分之方式結合）、以及回應與信號分子之結合而轉導信號。不同之抗-IL-4R抗體可與iL_4R之抗原決定部位之不同區域結合或經由不同的作用機制作用。其例子包括（但不限於）會干擾IL-4與IL-4R結合之抗體或抑制信號轉導之抗體。作用部位可為，例如，細胞内（例如經由干擾細胞内發信號系列）或細胞外。抗體無需完全抑制IL_4誘生之活性在本發明中亦有用途；降低IL-4之特定活性之抗體被認為亦有用。上文關於抗-IL-4R抗體之特定作用機制之討論只是例示成明’本發明之方法不艾其所限。抗-IL-4R抗體減輕疾病之作用機制不受上文討論者所限。抗-IL-4R抗體可能會抑制經由IL-4媒介之參與免疫或發 97211.doc 38· 1356064 炎反應之細胞之流入。抗體可經由例如減少特定細胞類型之增生、活化、移行、流入或蓄積’或者經由抑制直接或間接歸因於特定細胞類型之生物反應。特定細胞類型之例子為纖維母細胞、肥大細胞及嗜伊紅性白血球。如上文所討論者，一些病症可經由壓制TH2-類型免疫反應而治療。IL-4R與TH2反應相關’且為由類型2之T-辅助細胞（TH2細胞）分泌之細胞激素之一。可投與抗_il-4R抗體以減少TH2-類型免疫反應。據報IL-4R抗體可減少TH2 細胞之增生、壓制TH2細胞、使免疫反應移向ΤΗ 1反應或促進TH1-類型反應◊可將其他TH2-類型細胞激素諸如IL_ 5、IL-10或IL-13之拮抗劑投給罹患涉及此等細胞激素濃度上升之異常之病患《測量病患（例如病患血清）中此等細胞激素之量之技術為眾所熟知。本發明之一具體例係針對抑制IL_4誘生之表皮損傷之方去，其包含將抗-IL-4R抗體投給罹患或有可能罹患。-‘媒 ”之表皮障壁破壞為致病因之一之病症。本發明方法之特定具體例包含投與抗-IL-4R抗體，以抑制1L·4所誘生之在胃腸道或肺中之表皮傷害。此等方法可被用於防止表皮損傷或恢復表皮障壁功能（亦即促進表皮，修復或癒合）。抗_IL_4R抗體抑制IL_4誘生之表皮損傷之 ^力可Ή許多測定方法（如本文中所述者）之任-種確言正。任何與感料目關或繼發於感染之發炎亦可用抗.IL-4R抗體，口療。可投與抗體，以抑制任何il_4所誘生之源自於例 9721l.doc 1356064 如胃腸道中微生物感染之發炎反應之成分。二或多種抗體或抗體衍生物之組合，或者一種抗體或抗體衍生物與一或多種其他IL-4、IL-13、IL-4R及/或IL-13R 拮抗劑（例如在美國專利5,599,905、5,840,869、 5,856,296 、 5,767,065 、 5,717,072 、 6,391,581 、 5,710,023、Idzerda d α/.，1990, J. Exp_ Med· 171:861-73及 Mosley w β/.，1989, Cell 59:33 5-48，全部内容以參考文獻方式納入本文）之組合可被用於本發明之方法及組合物。寡核苷酸導引之定點突變方法可被用於提供具有依照所需之取代、刪除或插入而改變之特定密碼子之修改基因。產生此等修改之技術之例子被述於Waider et al.，1986, Gene 42:133; Bauer et al.} 1985, Gene 37:73; Craik, Bio Techniques, January 1985, 12-19; Smith et al., 1981, Genetic Engineering: Principles and Methods, Plenum Press;以及美國專利4,518,584號及4,737 462號中。此等及其他方法可被用於製造’例如，抗_IL 4R抗體之衍生勿此荨竹生物與未竹化之抗體相較，具有增加之親和性、活力或對於IL-4R之特異性。在本發明範圍内之抗_IL_4R抗體之其他衍生物包括抗_ IL-4R抗體之共價性或聚集性結合物、或其之片段、或者具有其他蛋白質或多肽者（諸如經由表現包含與抗-IL-4R抗體夕肽之N-終端或c—終端融合之異源多肽之重組融合蛋白貝而仔者）。舉例言之，結合型肽可為異源信號（或前導）多肽例如酵母α_因子前導序列者狀諸如抗原決定部位標 972ll.doc •40· 1356064 籤。含抗-IL-4R抗體之融合蛋白質可包含加入以促進抗-IL-4R抗體之純化或鑑定之肽（例如聚-His)。抗-IL-4R抗體多肽亦可與 FLAG 肽 Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys(DYKDDDDK)(序列編號：69)連結，如 Hopp et al·， Bio/Technology 6:1204, 1988 以及美國專利 5,011，912 中所述。FLAG肽具有高度抗原性，以及提供一可與特異性單株抗體（mAb)可逆性結合之抗原決定部位，因而能使被表現之重組蛋白質快速測定及容易純化。在製備FLAG肽與既定多肽融合而成之融合蛋白質上有用之試劑在市面有售 (Sigma, St. Louis, MO) ° 含有一或多種抗-IL-4R抗體多肽之寡聚物可被用作IL-4R拮抗劑。募聚物可為共價鍵結或非共價鍵結之二聚物、三聚物或較高寡聚物。可使用包含二或多個抗-IL-4R抗體多肽之寡聚物，其之一例為同元二聚物（homodimer)。其他寡聚物包括雜二聚物及雜三聚物等。一具體例係針對包含多個抗-IL-4R抗體多肽之寡聚物，該多個抗-IL-4R抗體多肽藉由肽部分之間之共價或非共價交互作用融合而成抗-IL-4R抗體多肽。該肽部分可為肽類連結子（間隔基）或具有促進寡聚性質之肽。白胺酸拉鍊 (leucine zipper)及某些衍生自抗體之多肽係屬可促進連接於IL-4R上之多肽寡聚之肽類，在下文中將對彼等更詳細地說明。在一特定具體例中，寡聚物包含2至4個抗-IL-4R抗體多肽。寡聚物之抗-IL-4R抗體部分可為上述之任何形式，例 97211.doc -41 - 1356064 如變異體或片段。該寡聚物較佳包含具有IL-4R結合活性之抗-IL-4R抗體多肽。在一具體例中，寡聚物使用衍生自免疫球蛋白之多肽製備。包含與衍生自抗體之多肽（包括Fc區域）之各種部分融合之某些異源多肽之融合蛋白質之製備曾被述於下列文獻中：Ashkenazi et al·，1991，PNAS USA 88:10535; Byrn et al., 1990, Nature 344:677;以及 Hollenbaugh et al.，1992 "Construction of Immunoglobulin Fusion Proteins", in Current Protocols in Immunology, Suppl. 4, pages 10.19.1-10.19.11。本發明之一具體例係針對包含二融合蛋白質之二聚物，該融合蛋白質係由抗-IL-4R抗體之IL-4R結合片段與抗體之F c區融合而成。該二聚物可藉由，例如，將編碑融合蛋白質之基因融合物插入適當表現載體中，再經由該重組表現載體轉形之宿主細胞中表現基因融合物，以及讓該被表現之融合蛋白質組裝成十分類似抗體之分子，此時在Fc部分之間形成鏈間之二硫鍵，得到二聚物。在本文中所用之術語「Fc多肽」包括衍生自抗體之Fc區之多肽之天然及突變蛋白形式。亦包括含有能促進二聚化之絞鏈區之此等多肽之截短形式。包含Fc部分之融合蛋白質（以及從其形成之寡聚物）提供易於經由蛋白質A或蛋白質G管柱之親和層析純化之優點。在PCT申請案WO 93/10151(以參考文獻之方式納入本文）中所述之一適當Fc多肽為從人類IgGl抗體之N-終端絞鏈區 97211.doc -42- 1356064 延伸至Fc區之天然C-終端。另一有用之Fc多肽為在美國專利 5,457,035及 Baum et al.，1994, EMBO J. 13:3992-4001 t 所述之Fc突變蛋白。該突變蛋白之胺基酸序列與在WO 93/10151中呈現之天然Fc序列相同，惟胺基酸19從Leu改變為Ala，胺基酸20從Leu改變為Glu以及胺基酸22從Gly改變為Ala。突變蛋白顯示對於Fc受體之親和力減低。在其他具體例中，抗-IL-4R抗體之重鏈及/或輕鏈之可變部分可以另一抗體之重鏈及/或輕鏈之可變部分取代。寡聚物之另一選擇為包含多個抗-IL-4R抗體多肽，連同或不連同肽類連結子（間隔基肽）之融合蛋白質。此等適當的肽類連結子如美國專利4,751，180號及4,935,233號所述者。製備寡聚抗-IL-4R抗體衍生物之另一方法涉及使用白胺酸拉鍊。白胺酸拉鍊區域為促進其所存在之蛋白質進行募聚之肽。白胺酸拉鍊原先係在數個DNA-結合性蛋白質中被鑑定出（Landschulz et al·，1988，Science 240:1759)以及曾在各種不同的蛋白質中被發現。已知之白胺酸拉鍊中有天然產生之肽及其二聚化或三聚化而成之衍生物。適於產生可溶性募聚蛋白質之白胺酸拉鍊之例子被述於pct申請案WO 94/10308號中，以及衍生自肺界面活性劑蛋白質D (SPD)之白胺酸拉鍊被述於H〇ppe ai.，1994，FEBS Letters 344:191中，此等文獻皆以參考文獻之方式那入本文中。白胺酸拉鍊中經修飾而允許與其融合之異源蛋白質食又地一 I化者之用途被述於Fansl〇w et ai·，1994, Semin. 97211.doc -43- 1356064

Immunol. 6:267-78中。在一方法中，將包含與自胺酸拉鍊肽融合之抗-IL-4R抗體片段或衍生物之重組融舍蛋白質在適當宿主細胞中表現，以及從培養上清液回收所生成之可溶性寡聚抗-IL-4R抗體片段或衍生物。本文中所述之抗-IL-4R抗體多肽及融合蛋白質可藉由許多習知技術之任一種製備。舉例言之，抗-IL-4R抗體多狀可從天然表現該多肽之細胞純化，或者可用任何本技藝已知之技術在重組表現系統中產生。在本技藝令已知之任何表現系統可被用於製造本發明& 重組多狀。一般而言，宿主細胞用包含編碼期爹之抗-IL-4R抗體多肽之DNA之重組表現載體轉形。可被使用之宿主細胞為原核細胞、酵母菌或較高等之真核細胞。原核細胞包括格蘭氏陰性或格蘭氏陽性生物，舉例言之，大腸桿菌或桿菌。較高等之真核細胞包括昆蟲細胞及已建立之來自哺乳動物之細胞系。適當的哺乳動物宿主細胞之例子包括猴子腎臟細胞之COS-7細胞系（ATCC CRL 1651) (Gluzman et al.，1981，Cell 23:175)、L細胞、293細胞、C127細胞、 3T3細胞（ATCC CCL 163)、中國倉鼠卵細胞（CHO)、HeLa 細胞、BHK(ATCC CRL 10)細胞系以及衍生自非洲綠猴腎臟細胞系 CVI(ATCC CCL 70)之 CVI/EBNA細胞系（McMahan et al.，1991，EMBO J. 10:2821)。供細菌、真菌、酵母菌及哺乳動物細胞宿主用之適當選殖及表現載體為Pouwels et al. (Cloning Vectors: A Laboratory Manual, Elsevier, New York, 1985)所述者。 97211.doc 1356064 將轉形細胞在促進抗_IL_4R抗體多肽表現之條件下培養，以及藉由習知蛋白質純化方法回收多肽。該純化方法之一包括使用在結合有IL-4R之一部分（例如細胞外區域）或全部之基質上進行之親和性層析。供本發明使用之多肽包括實貝上無内源性物質污染之實質均質之重組哺乳動物抗-IL-4R抗體多肽<» 本發明之另一態樣為提供一種可干擾IL_4與IL_4受體結合之抗體。此等抗體（在本文中稱為封阻抗體）可對抗il_4r 或其之片段、變異體或衍生物，以及藉由習知測定法篩選其之干擾IL-4與IL-4受體結合之能力◦適當測定法之例子為測試該抗體抑制IL-4與表現IL-4R細胞結合之能力之測疋法’或測試該抗體減少源自IL-4與IL-4受體結合之生物或細胞反應之能力之測定法。曾報告IL-4R〇t為某些多亞單位IL_丨3受體複合物之組成份（Zurawski et al·，1995，J. Biol. Chem. 270:13869 ; de Vries，1998，J. Allergy Clin. Immunol. 102:165 ;以及 Callard et al·，1996，Immunology Today，17:108，各個均以參考文獻之方式納入本文）。所以，在一具體例中，提供一葑阻IL-4與IL-13二者皆與細胞結合之抗體。該抗體抑制 IL-4誘生之生物活性，亦抑制IL_13誘生之活性，因此可被用於治療該二細胞激素之任一者或二者誘生之病症。該病症之例子包括（但不限於）IgE-媒介之病症、氣喘、過敏性病症、過敏性鼻炎以及包括異位性皮膚炎之皮膚炎。與IL-4Ra結合之抗體可藉由各種習知測定法測定彼等是 9721l.doc -45- 1356064 否會干擾IL-1 3與含IL-4Rot之IL-1 3受體複合物結合而篩選。此等抗體例如可藉由結合測定法或測試其抑制IL-1 3 誘生之生物活性之能力而篩選。一適合之測定法如以下實施例2中之說明。對於IL-4Rot具有特異性之抗體可使用本技藝已知之任何技術製備。例如，參見Monoclonal Antibodies, Hybridomas: A New Dimension in Biological Analyses, Kennet et al. (eds.)，Plenum Press, New York (1980) ; and

Antibodies: A Laboratory Manual, Harlow and Land (eds.), Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, (1988))。本發明抗體之抗原-結合片段可藉由習知技術製造。此等片段之例子包括（但不限於）Fab及F(ab')2片段。亦包括由基因工程技術產生之抗體片段及衍生物。除非另有指定，在本文中所使用之術語「抗體」及「單株抗體」涵蓋所有抗體及其之抗原-結合片段及/或衍生物。另外之具體例包括嵌合抗體，例如鼠單株抗體之人類化版（humanized version)。該人類化抗體可藉由已知技術製備，以及當將抗體投與至人類時，提供免疫引發能力減低之優點。在一具體例中，人類化單株抗體包含鼠抗體之可變區域（其之抗原結合部位之全部或一部分）以及衍生自人類抗體之恆定區域。或者，人類化抗體片段可包含鼠單株抗體之抗原結合部位及衍生自人類抗體之可變區域片段 (缺乏抗原結合部位）。嵌合及再加工單株抗體之製造方法 97211.doc •46· 1356064 包括 Riechmann et al·，1988，Nature 332:323，Liu et al., 1987, Proc. Nat. Acad. Sci. USA 84:3439, Larrick et al., 1989，Bio/Technology 7:934以及 Winter et al.，1993，TIPS 14:139所述者。在一具體例中，嵌合抗體為cdr接枝抗體。已發展出在非人類動物中產生人類或部分人類抗體抗體之方法。舉例言之’曾製備一或多種内源性免疫球蛋白基因已藉由各種方法去活化之小鼠，並將人類免疫球蛋白基因引進小鼠中’以取代去活化之小鼠基因。該動物產生之抗體納入被引進該動物之人類基因物質所編碼之人類免疫球蛋白多肽鏈。在一具體例中’非人類動物諸如基因轉移小鼠用IL-4R多肽免疫，以致在該動物中產生對抗IL-4R多肽之抗體。適當免疫原之一例為可溶性人類IL-4R，諸如包含序列編號：2之蛋白質之細胞外區域之多肽，或者序列編號：2之蛋白質之其他免疫原片段。製造人類或部分人類抗體用之基因轉移動物之製造技術實例及胃it被述於美國專利5,814,318號、5,569,825號及 5,545,806號令’此等專利以參考文獻之方式納入本文。本發明之另一態樣為提供可與IL-4受體結合之單株抗體。單株抗體可用本技藝已知之任何技術製《，例如藉由將取自基ϋ轉移動物動物之脾臟細胞於完成免疫處理後予以不死化。該脾臟細胞可用本技藝已知之任何技術不死化例如將其與骨趙細胞㉞合，生成融合瘤。供產生融合瘤之融合方法用之骨髓細胞較佳不會產生抗體、具有高融 972II.doc -47· 1356064 合效率、以及缺乏某種酶以致在某種僅支持期望之融合細胞（融合瘤）生長之選擇性培養基中不會生長。供小鼠細胞融合用之適當細胞系之例子包括8?-20、？3-乂63/八88、？3-X63-Ag8.653、NSl/l.Ag41、Sp210-Agl4、FO、NSO/U、 MPC-11、MPC11-X45-GTG 1.7 及 S194/5XX0 Bui ;供大鼠細胞融合用之適當細胞系之例子包括R210.RCY3、Y3-Ag 1.2.3、IR983F及4B210。其他供細胞融合用之細胞系為11-266、GM1500-GRG2、LICR-LON-HMy2及 UC729-6。在一具體例中，融合瘤細胞系藉由下述方法產生：將動物（例如具有人類免疫球蛋白序列之基因轉移動物）用IL-4R 免疫原使動物免疫；從被免疫之動物收取脾臟細胞；將收取之免疫細胞與骨趙瘤細胞融合，藉此生成融合瘤細胞；從融合瘤細胞建立融合瘤細胞系，以及鑑別出可產生會與 IL-4R多肽結合之抗體之融合瘤細胞系。此等融合瘤細胞系及從其產生之抗-IL-4R單株抗體皆被涵蓋在本發明之

由融合瘤細胞系分泌之單株抗體可用任何本技藝已知之技術純化。尚可進一步篩選融合瘤或mAbs以鑑別出具有特殊性質之mAbs，諸如封阻IL-4及/或IL-13誘生之活姓之能力。此等篩選之例子被記載於實例2、3及4中。製備針對人類IL-4之抗體（包括單株抗體）之方法之另外實例、鑑定出封阻性抗體之測定法、以及產生抗-IL-4抗體之人型化衍生物或經遺傳工程修飾之衍生物之方法被記載於美國專利 5,041,381 號、5,863,537 號、5,928,904 號及 9721l.doc •48- 1356064 5,676,940號’此等專利均以參考文獻之方式列入本文。可被作為IL-4拮抗劑之抗體之其他例子被記載於w〇 91/09059中’該專利亦以參考文獻之方式列入本文。本發明之另一態樣為提供會與IL-4R結合之人類抗體。在本發明之一實施例中，藉由涉及使用基因轉移小鼠之技術產生之對抗IL-4Ra之人類抗體會封阻IL-4及IL-13二者與細胞之結合。此等抗體為IL-4拮抗劑，此外亦作為il- 13拮抗劑。本發明之抗體可包含本技藝已知之任何恆定區。輕鏈恆定區可為例如κ-或λ-型輕鏈恆定區，例如人類κ_*λ_型輕鏈怪定區。重鏈恆定區可為例如α-、δ-、ε-、γ-或μ_型重鏈恆定區，例如人類〇C-、δ_ ' ε_、γ-或口_型重鏈恆定區。在一實施例中，輕鏈或重鏈恆定區可為天然產生恆定區之片段、衍生物、變異體或突變蛋白質。對抗IL-4R之抗體可被用於例如在試管中或活體中檢測 IL-4R多肽之存在之測定。此等抗體亦可被用於純化il_4r 蛋白質之免疫親和層析令。此等可封阻乩“與江“尺結合之抗體可被用於抑制此等結合產生之生物活性。封阻性抗體可供本發明之方法使用。&等作為IL_4拮抗劑之抗體可被用於治療任何IL_4誘生之病症，包括（但不限於）氣喘及過敏疾病（例如過敏性鼻炎、接觸性皮膚炎及異位性皮膚炎）。在-·實施例中，由包含基因轉移小鼠之免疫化之方法產生之人類抗_IL_4R單株抗體被用於治療此等病症。抗體可被用於試管内之方法或投與至活體内，以抑制 97211.doc -49- 1356064 IL-4誘生之生物活性。因此，可以治療由几_4與細胞表面 IL-4受體之交互作用（直接或間接）所引起或惡化之異常，此等異常之例子如上述》在一實施例中，本發明提供一種治療方法，該方法包含將比-4及/或IL-i3封阻性抗體投與至需要其之哺乳動物中，投與量為能有效減少IL_4及/或 IL-13誘生之生物活性者。本發明之抗體包括（但不限於）會抑制IL_4之生物活性，亦會抑制IL-13之生物活性之部分人類或完全人類單株抗體。一實施例係針對會至少部分封阻IL_4與細胞之結合以及會至少部分封阻IL-13與細胞之結合之人類單株抗體。在一實施例中，抗體藉由用IL-4受體免疫原免疫基因轉移小鼠而產生。在另一實施例中，免疫原為人類IL_4受體多肽。本發明亦提供衍生自如此免疫之小鼠之融合瘤細胞系’其中該融合瘤分泌會與IL-4R結合之單株抗體。雖然人類、部份人類或人型化抗體適於許多應用，尤其涉及將該抗體投與至人類者，但其他類型抗體將適於其他應用。本發明之非人類抗體例如可衍生自任何產生抗體動物，諸如小鼠、大鼠、兔子、山羊、鱸子或非人類靈長類 (諸如猴子（例如狒狒或恆河猴）或猿猴（例如猩猩））。本發明之非人類抗體可被用於例如試管内細胞培養方面之應用，或者任何其他對於本發明之抗體不會或幾乎不會產生反應、或該反應可被防止、該反應無關緊要、或該反應受到期待之應用。在一實施例中，將本發明之非人類抗體投與至非人類個體中。在另一實施例中，非人類抗體不會在非 972ll.doc -50- 1356064 人類個體中激發免疫反應。在又一實施例中’非人類抗體來自與非人類個體來自相同之物種，例如將本發明之小鼠抗體投與至小鼠。來自特定物種之抗體例如可藉由下述方法製造：用期望之免疫原（例如可溶性1]：_4受體多肽）免疫該物種之動物；或使用產生該物種之抗體之人造系統（例如供產生特定物種之抗體之細菌或嗜菌體顯示系統·或來自一物種之抗體經由以來自其他物種之恆定區取代該抗體之恆定區而轉變為另一物種之抗體；或取代該抗體之一個或多個胺基酸殘基使其更為類似來自其他物種之抗體之序列。在一實施例中，該抗體為嵌合抗體，其包含從來自二或多種不同物種之抗體衍生而來之胺基酸序列。本發明之另一態樣為提供一種抗體，其包含選自Li _L6 所成組群中之輕鏈可變區及/或選自HI _H24所成組群中之重鍵可反區，以及其之片段、衍生物、突變蛋白質及變異體（參見圖2及3)。該抗體可用「LxHy」表示，其中又對應於輕鏈可變區之數目以及y對應於重鏈可變區之數目，如在圖3中所標記者。舉例言之’ L4hi7，如圖3所示，係指具有一包含L4之胺基酸序列之輕鍵可變區及一包含H17之胺基酸序列之重鏈可變區之抗體。圖2及圖3亦顯示出此等可變區域序列之各個之CDR及框架區之位置。本發明之抗體包括例如 L2H1、L3H1、L4H1、L5H1、L1H2、L1H3、 L1H4、L1H5、L1H6、L1H7、L1H8、L1H9、L1H10、 L1H11、L2H4、L2H12、L2H13、L2H14、L6H1、L2H2、 L2H3、L2H6、L2H7、L2H8、L2H9、L2H10及 L2H11。亦 97211.doc -51 - 1356064 可使用另外之抗體可變序列，例如人類抗體可變序列。例如參見Sblattero et al·，1998, Immunotechnology 3:271-78, de Haard et al·，1999, J. Biol. Chem. 274:18218-30 〇在一實施例中，本發明提供一種抗體，其包含一輕鏈可變區’該輕鏈可變區在L2-L6之序列之任一者與L1之序列皆不同之處’包含與L1之序列僅有一或多個殘基不同之胺基酸序列（例如該抗體之該序列在殘基i、4及7等處與以之序列不同）。在另一實施例中’該輕鏈可變區域之該序列包含L2-L6之任一者之任何序列之至少一個胺基酸殘基且該胺基酸殘基位於與L1之序列不同之位置（例如該序列包含殘基E1D、L4M及S7T等）。在另一實施例中，該序列在至少一 CDR(例如CDR1、CDR2或CDR3)中與L1之序列不同。在另一實施例中，該序列在至少一 FR處（例如fri、 FR2、FR3或FR4)與L1之序列不同《在另一實施例中，本發明提供一種抗體，該重鏈可變區在H2-H24之序列之任一者與H1之序列皆不同之處，包含與H1之序列僅有一或多個殘基不同之胺基酸序列（例如該抗體之該序列在殘基6、 1 3及24等處與H1之序列不同）。在另一實施例中，該重鏈可變區域之該序列包含H2-H24之任一者之任何序列之至少一個胺基酸殘基且該胺基酸殘基位於與Η1之序列不同之位置（例如該序列包含殘基Q6E、H13Q及G24A等）。在另一實施例中，該序列在至少一 CDR(例如CDR2或CDR3)中與Η1 之序列不同。在另一實施例中，該序列在至少一 FR處（例如FR1或FR3)與Η1之序列不同。 97211.doc -52· 1356064 在另一實施例中’本發明提供一種抗體，其包含選自下列者所成組群中之胺基酸序列：輕鏈互補性決定區 (CDR) 1，其經由插入 '刪除或取代不超過3、2、i戋〇個胺基酸殘基而與選自下列者所成組群中之序列不同：序列编號：6之殘基24-35(其中在殘基8之N未被S取代）、序列編號：8之殘基24-35(其中在殘基5之T未被s取代及/或在殘基 7之N未被S取代及/或在殘基9之D未被S取代）、序列編號： 10之殘基24-35(其中在殘基9之D未被S取代）、序列編號： 12之殘基24-35(其中在殘基7之N未被S取代及/或在殘基9 之N未被S取代）及序列編號：14之殘基24-35(其中在殘基7 之G未被S取代），輕鍵C DR2 ’其經由插入、刪除或取代不超過3、2、1或0個胺基酸殘基而與選自下列者所成組群中之序列不同：序列編號：6之殘基5 1-57(其中在殘基7之p 未被T取代）、序列編说.10之殘基51-57(其中在殘基7之S 未被T取代）、及序列編號：12之殘基5 1-57(其中在殘基2之 T未被A取代及/或在殘基4之Y未被S取代）；輕鏈CDR3，其經由插入、刪除或取代不超過3、2、1或〇個胺基酸殘基而與選自下列者所成組群中之序列不同：序列編號：6之殘基90-99(其中在殘基4之D未被G取代，在殘基5之η未被S 取代’在殘基7之Α未被Ρ取代及/或在殘基8之〇未被Ρ取代）、序列編號：8之殘基90-99(其中在殘基5之r未被s取代）及序列編號：14之殘基90-99(其中在殘基1 〇之μ未被T 取代）；重鏈CDR2，其經由插入 '刪除或取代不超過3個胺基酸 9721l.doc -53- 1356064 殘基而與序列編號：18之殘基50-65不同（其中在殘基9之3 未被N取代）；以及重鏈CDR3，其經由插入、刪除或取代不超過3、2、1或〇個胺基酸殘基而與選自下列者所成組群中之序列不同：序列編號：18之殘基98-104(其中在殘基6 之T未被D取代，及/或在殘基7之Η未被γ取代）、序列編號：20之殘基98-104(其中在殘基4之W未被γ取代，在殘基5之Y未被F取代，在殘基6之N未被D取代及/或在殘基了之N未被Y取代）、序列編號：22之殘基98_1〇4(其中在殘基 6之P未被D取代及/或在殘基7之W未被γ取代）、序列編號：24之殘基98-104(其中在殘基6之T未被D取代及/或在殘基7之R未被Y取代）、序列編號：26之殘基981〇4(其中在殘基5之Y未被F取代）、序列編號：30之殘基98-104(其中在殘基4之W未被Y取代）、序列編號：34之殘基98_ 1〇4(其中在殘基4之W未被Y取代及/或在殘基5之γ未被1?取代）；其中該抗體會與IL-4受體α結合。在另一實施例中’該抗體會抑制IL-4與IL-4受體之結合。在另一實施例中，該抗體會抑制IL_丨3與IL_丨3受體之結合。在另一實施例中，抗體會抑制IL_4與IL-4受體之結合以及IL-13與IL-13受體之結合。在另一實施例中，該抗體會與IL-4受體α特異性地結合。在另一實施例中’該抗體包含二或三個該輕鏈互補性決定區（CDR)。在另一實施例中’該抗體包含二或三個該重鏈互補性決定區。 97211.doc -54· 1356064 在另一實施例中’該抗體尚包含框架片段（FR)，該框架片段包含選自下列者所成組群中之序列：輕鏈框架片段 (FR)l ’其經由插入、刪除或取代不超過3、2、1或〇個胺基酸殘基而與選自下列者所成組群中之序列不同：序列編號：4之殘基卜23、序列編號：1〇之殘基U23、序列編號： 12之殘基1-23及序列編號：14之殘基1-23所成組群中之序列；輕鏈FR2 ’其經由插入、刪除或取代不超過3、2、i或 0個胺基酸殘基而與選自下列者所成組群中之序列不同：序列編號·· 4之殘基36-50、序列編號：6之殘基36-50及序列編號：14之殘基36-50 ;輕鏈FR3，其經由插入、刪除或取代不超過3、2、1或0個胺基酸殘基而與選自下列者所成組群中之序列不同：包含一選自序列編號：4之殘基58-89、序列編號：10之殘基58-89及序列編號：12之殘基58-89 ;輕鏈FR4，其經由插入、刪除或取代不超過3、2、1或 0個胺基酸殘基而與選自下列者所成組群中之序列不同：序列編號：4之殘基100-109、序列編號：8之殘基100-109 及序列編號：12之殘基100-109 ;重鏈FR1，其經由插入、刪除或取代不超過3、2、1或〇個胺基酸殘基而與選自下列者所成組群中之序列不同：序列編號：16之殘基1-30及序列編號：42之殘基1-30所成組群中之序列；重鏈FR2，其經由插入、刪除或取代不超過3、2、1或0個胺基酸殘基而與序列編號：16之殘基36-49不同；重鏈FR3，其經由插入、刪除或取代不超過3、2、1或p個胺基酸殘基而與選自下列者所成組群中之序列不同：序列編號：16之殘基66- 97211.doc 55· 1356064 97、序列編號：18之殘基66-97及序列編號：42之殘基66-· 97 ;及重鏈FR4，其經由插入、刪除或取代不超過3個胺基酸殘基而與序列編號：16之殘基105-115不同。在另一具體例中，該抗體包含輕鏈可變區域，該輕鏈可變區域與選自序列編號：6、8、10、12及14所成組群中之序列具有至少80%、85%、90%、95%或100%之同一性，限制條件為該輕鏈可變區域不包含序列編號：4之序列。在另一具體例中，該抗體包含重鏈可變區域，該重鏈可變區域與選自序列編號：18、20、22、24、26、28、30、 32、34、36、38、40、42、44、46、48、50、52、54、 56、58、60及62所成組群中之序列具有至少80%、85%、 90%、95%或100%之同一性，限制條件為該重鏈可變區域不包含序列編號：16之序列》在另一具體例中，本發明提供該抗體之片段，其中該片段會與IL-4受體α結合。在一具體例中，本發明之特定抗體選自下列者所成之組群：L2H1、與L2H1具交又反應性之抗體、會和與L2H1相同之抗原決定部位結合之抗體、會與L2H1競爭與表現人類IL-4R之細胞結合之抗體、具有L2H1之生物活性之抗體及L2H1之抗原-結合性片段（包括藉由重組方式衍生者）。在一實施例中’該抗體具有對人類IL-4R之結合親和性且該結合親和性實質上與L2H1對人類IL-4R之結合親和性相等。本發明亦提供產生該抗體之任一種之融合瘤細胞系。 L2H1之生物活性之一例為作為IL_4拮抗劑及IL_n拮抗 97211.doc -56- 1356064 劑之能力。在一實施例中，本發明之抗體具有與L2H1實質相等之IL-4封阻活性以及具有與L2H1實質相等之il-13 封阻活性。該活性能以任何適當之習知測定方法測量（例如以實施例2所述之CD23表現測定法測量）》既定抗體之互補性決定區（CDRs)可用Kabat et al.在 Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5thED.， US Dept, of Health and Human Services, PHS, NIH, NIH Publication no. 91-3242，1991中所述之系統鑑定。本發明抗體之特定實施例在其之輕鏈之可變區域中包含至少一個在L2H1之輕鏈中所發現之互補性決定區（CDrs)或超變區。L2H1之CDRs將在實施例5中討論。因此，本發明提供之抗體中’亦涵蓋包含L2H1之輕鍵可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：6之胺基酸殘基24-35、殘基51 -57以及殘基90-99。本發明提供之特定抗體在其之重鏈之可變區域中包含至少一個在L2H1之重鏈中所發現之CDRs。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含重鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：16之胺基酸殘基31-35、殘基50-65以及殘基98-104。 L2H1之輕鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：$ 中’以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：6中。 L2H1之重鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：15 中，以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：16中。本發明之抗體包括（但不限於）在輕鏈中包含序列編號：6及 /或在重鏈中包含序列編號：16之抗體。 972ll.doc -57- 1356064 在一具體例中，本發明之特定抗體選自下列者所成之組群：L3H1、與L3H1具交又反應性之抗體、會和與“則相同之抗原決定部位結合之抗體、會與L3H1競爭與表現人類IL-4R之細胞結合之抗體、具有L3H1之生物活性之抗體及上述抗體之任一者之抗原-結合性片段。在_實施例中’該抗體具有對人類IL-4R之結合親和性且該結合親和性實質上與L3H1對人類IL-4R之結合親和性相等。本發明亦提供產生該抗體之任一種之融合瘤細胞系。 L3H1之生物活性之一例為作為IL-4拮抗劑及il-13拮抗劑之能力。在一實施例中，本發明之抗體具有與L3H1實質相等之IL-4封阻活性以及具有與L3H1實質相等之il- 13 封阻活性。該活性能以任何適當之習知測定方法測量（例如以實施例2所述之CD23表現測定法測量）。本發明提供衍生自L3H1之IgG4抗體。另一實施例係針對衍生自L3H1之IgM抗體。轉換（改變）抗體之亞類或異構型（isotope)之方法在本領域中為已知。該方法可包含，例如’藉由重組DNA技術’用編碼能賦與期望亞類特徵之抗體多肽鏈之DNA取代編碼母抗體之對應多肽鏈之DNA。 L3H1之輕鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：7 中，以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：8中。 L3H1之重鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：15 中’以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：16中。本發明之抗體包括（但不限於）在輕鏈中包含序列編號：8之殘基1至109及/或在重鍵中包含序列編號：16之殘基1至 9721l.doc • 58- 1356064 115之抗體。本發明抗體之特定實施例在其之輕鏈可變區域中包含至少一個在L3H1之輕鏈中所發現之互補性決定區（CDRs)或超變區。L3H1之CDRs將在實施例5中討論β因此，本發明知供之抗體中，亦涵蓋包含L3H1之輕鏈可變區域中之下歹J序列中之一至所有二個者.序列編號：8之胺基酸殘基 24-35、殘基51-57以及殘基90·99。本發明提供之特定抗體在其之重鏈可變區域中包含至少一個在L3H1之重鏈中所發現之CDRs。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含重鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：16之殘基31-35、殘基50-65以及殘基98-104。在另一具體例中，本發明之特定抗體選自下列者所成之組群：L4H1、與L4H1具交又反應性之抗體、會和與 L4H1相同之抗原決定部位結合之抗體、會與L4H丨競爭與表現人類IL-4R之細胞結合之抗體、具有L4H1之生物活性之抗體及上述抗體之任一者之抗原—結合性片段。在一實施例中’該抗體具有對人類IL-4R之結合親和性且該結合親和性實質上與L4H1對人類IL-4R之結合親和性相等。本發明亦提供產生該抗體之任一種之融合瘤細胞系。 L4H1之生物活性之一例為作為il-4拮抗劑及il- 1 3拮抗劑之能力。在一實施例中’本發明之抗體具有與L4H1實質相等之IL-4封阻活性以及具有與L4H1實質相等之il- 13 封阻活性。該活性能以任何適當之習知測定方法測量（例如以實施例2所述之CD23表現測定法測量）。 97211.doc -59· 1356064 L4H1之輕鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：9 中’以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號·· 1 〇中β L4H1重鏈之可變區域之DNA序列呈現於序列編號：i 5 中，以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：丨6中。本發明之抗體包括（但不限於）在輕鏈中包含序列編號：1〇之殘基1至109之抗體及/或在重鏈中包含序列編號· 16之殘基1至115之抗體。本發明抗體之特定實施例在其之輕鏈可變區域中包含至少一個在L4H1之輕鏈中所發現之互補性決定區（CDrs)或超變£。L4H1之CDRs將在貫施例5中討論。因此，本發明 k供之抗體中，亦涵蓋包含L4H1之輕鏈可變區域令之下列序列中之一至所有二個者：序列編號：丨〇之胺基酸殘基 24-35、殘基51-57以及殘基90-99。本發明提供之特定抗體在其之重鏈之可變區域中包含至少一個在L4H丨之重鏈中所發現之CDRs。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含重鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號.16之殘基31-35、殘基50-6 5以及殘基99-104。在另一具體例中，本發明之特定抗體選自下列者所成之組群：L5H1、與L5H1具交又反應性之抗體、會和與1^1^ 相同之抗原決定部位結合之抗體、會與L5H1競爭與表現人類IL-4R之細胞結合之抗體、具有^扪之生物活性之抗體及上述抗體之任一者之抗原-結合性片段。在一實施例中，該抗體具有對人類IL-4R之結合親和性且該結合親和性實質上與L5H1對人類IL-4R之結合親和性相等。本發明 972ll.doc -60- 1356064 亦提供產生該抗體之任一種之融合瘤細胞系。 L5H1之生物活性之一例為作為IL-4拮抗劑及IL-13结抗劑之能力。在一實施例中，本發明之抗體具有與L5H1實質相等之IL-4封阻活性以及具有與L5H1實質相等之IL-13 封阻活性。該活性能以任何適當之習知測定方法測量（例如以實施例2所述之CD23表現測定法測量）。 L5H1之輕鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：11 中’以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：12中。 L5H1之重鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：15 中，以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：16中。本發明之抗體包括（但不限於）在輕鏈中包含序列編號：12 之殘基1至109及/或在重鏈中包含序列編號：16之殘基1至 Π5之抗體。本發明抗體之特定實施例在其之輕鏈可變區域中包含至少一個在L5H1之輕鏈中所發現之互補性決定區（CDrs)或超變£。L5H1之CDRs將在實施例5中討論。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含L5H1之輕鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：丨2之胺基酸殘基 24-35 '殘基51-57以及殘基90-99 ^本發明提供之特定抗體在其之重鏈可變區域中包含至少一個在L5H1之重鏈中所發現之CDRs »因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含重鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號.16之殘基31-35 '殘基50-65以及殘基98-104。在另一具體例中，本發明之特定抗體選自下列者所成之 972ll.doc .61 · 1356064 組群：L1H2、與L1H2具交又反應性之抗體、會和與L1H2 相同之抗原決定部位結合之抗體、會與L1H2競爭與表現人類IL-4R之細胞結合之抗體、具有L1H2之生物活性之抗體及上述抗體之任一者之抗原-結合性片段。在一實施例中’該抗體具有對人類IL-4R之結合親和性且該結合親和性實質上與L1H2對人類IL-4R之結合親和性相等。本發明亦提供產生該抗體之任一種之融合瘤細胞系。 L1H2之生物活性之一例為作為IL-4拮抗劑及IL-1 3拮抗劑之能力。在一實施例中’本發明之抗體具有與L1H2實質相等之IL-4封阻活性以及具有與L1H2實質相等之IL-13 封阻活性。該活性能以任何適當之習知測定方法測量（例如以實施例2所述之CD23表現測定法測量）。 L 1H2之輕鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：3 中，以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：4中。 L1H2之重鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：i 7 中，以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：丨8中。本發明之抗體包括（但不限於）在輕鏈中包含序列編號：4之殘基1至109及/或在重鏈中包含序列編號：18之殘基1至 115之抗體。本發明抗體之特定實施例在其之輕鍵可變區域中包含至少一個在L1H2之輕鏈中所發現之互補性決定區超·ά_區。L1H2之CDRs將在實施例5中討論。因此，本發明 k供之抗體t，亦涵蓋包含L1H2之輕鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：4之胺基酸殘基 9721 l.doc -62· 1356064 24-35、殘基51-57以及殘基9〇_99。本發明提供之特定抗體在其之重鏈可變區域中包含至少一個在L1H2之重鏈中所發現之CDRs。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含重鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號.18之殘基31-35、殘基50-65以及殘基98-104。在另一具體例中，本發明之特定抗體選自下列者所成之組群.L1H3、與L1H3真交又反應性之抗體、會和與L丨H3 相同之抗原決定部位結合之抗體、會與L1H3競爭與表現人類IL-4R之細胞結合之抗體、具有L1H3之生物活性之抗體及上述抗體之任一者之抗原-結合性片段。在一實施例中’該抗體具有對人類IL-4R之結合親和性且該結合親和性μ質上與L1Η 3對人類IL - 4 R之結合親和性相等。本發明亦提供產生該抗體之任一種之融合瘤細胞系。 L1H3之生物活性之一例為作為IL_4拮抗劑及IL-13拮抗劑之能力。在一實施例中，本發明之抗體具有與L1H3實質相等之IL-4封阻活性以及具有與L1H3實質相等之IL-13 封阻活性。該活性能以任何適當之習知測定方法測量（例如以實施例2所述之CD23表現測定法測量）。 L1H3之輕鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：3 中，以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：4中。 L1H3之重鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：19 中’以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：20中。本發明之抗體包括（但不限於）在輕鏈中包含序列編號：4之殘基1至109及/或在重鍵中包含序列編號：20之殘基1至 972Il.doc • 63- 1356064 115之抗體。本發明抗體之特定實施例在其之輕鏈可變區域中包含至少一個在L1H3之輕鏈中所發現之互補性決定區（CDRs)或超變辱。L1H3之CDRs將在實施例5中討論。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含L1H3之輕鏈可變區域中之下列序列中之一至所有二個者.序列編號：4之胺基酸殘基 24-35、殘基5 1-57以及殘基90-99。本發明提供之特定抗體在其之重鏈可變區域中包含至少一個在L1H3之重鏈中所發現之CDRs。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含重鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：20之殘基31-35、殘基50-65以及殘基98-104。在另一具體例中，本發明之特定抗體選自下列者所成之組群：L1H4、與L1H4具交叉反應性之抗體、會和與Lm4 相同之抗原決定部位結合之抗體、會與L 1H4競爭與表現人類IL-4R之細胞結合之抗體、具有l 1H4之生物活性之抗體及上述抗體之任一者之抗原-結合性片段。在一實施例中’該抗體具有對人類IL-4R之結合親和性且該結合親和性實質上與L1H4對人類IL_4r之結合親和性相等。本發明亦k供產生该抗體之任一種之融合瘤細胞系。 L1H4之生物活性之一例為作為IL_4拮抗劑及IL U拮抗劑之也力β在一貫施例中，本發明之抗體具有與L1H4實質相等之IL-4封阻活性以及具有與l 1Η4實質相等之il- 13 封阻活性。該活性能以任何適當之習知測定方法測量（例如以實施例2所述之CD23表現測定法測量）。 972II.doc • 64 · 1356064 L1H4之輕鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：3 中，以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：4中。 L1H4之重鏈可變區域之Dna序列呈現於序列编號：2 j 中，以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：22中。本發明之抗體包括（但不限於）在輕鏈中包含序列編號：4之殘基1至109及/或在重鏈中包含序列編號：22之殘基1至 115之抗體。本發明抗體之特定實施例在其之輕鏈可變區域中包含至少一個在L1H4之輕鏈中所發現之互補性決定區（CDRs)或超變區。L1H4之CDRs將在實施例5中討論。因此，本發明提供之抗體中’亦涵蓋包含LI H4之輕鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：4之胺基酸殘基 24-35、殘基51-57以及殘基90-99。本發明提供之特定抗體在其之重鏈可變區域中包含至少一個在L1H4之重鍵中所發現之CDRs。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含重鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：22之殘基31-35、殘基50-65以及殘基98-104。在另一具體例中，本發明之特定抗體選自下列者所成之組群：L1H5、與L1H5具交又反應性之抗體、會和與L丨H5 相同之抗原決定部位結合之抗體、會與L1H5競爭與表現人類IL-4R之細胞結合之抗體、具有L1H5之生物活性之抗體及上述抗體之任一者之抗原-結合性片段。在一實施例中，該抗體具有對人類IL-4R之結合親和性且該結合親和性實質上與L1H5對人類IL-4R之結合親和性相等。本發明 9721l.doc -65- 1356064 亦提供產生該抗體之任一種之融合瘤細胞系。 L1H5之生物活性之一例為作為IL_4拮抗劑及IL_13拮抗劑之能力。在一實施例中，本發明之抗體具有與L1H5實質相等之IL-4封阻活性以及具有與L丨H5實質相等之IL_丄3 1封阻活性。該活性能以任何適當之習知測定方法測量（例如以實施例2所述之CD23表現測定丰測量）。 L1H5之輕鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：3 中，以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：4中。 L1H5之重鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：23 中’以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：24中。本發明之抗體包括（但不限於）在輕鏈中包含序列編號：4之殘基1至109及/或在重鏈中包含序列編號：24之殘基1至 115之抗體。本發明抗體之特定實施例在其之輕鏈可變區域中包含至少一個在L1H5之輕鏈中所發現之互補性決定區（CDRs)或超變區。L1H5之CDRs將在實施例5中討論。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含輕鏈可變區域中之下列序列中之一至所有二個者：序列編號：4之胺基酸殘基24_35、殘基51-57以及殘基90-99。本發明提供之特定抗體在其之重鍵可變區域中包含至少一個在L1H5之重鏈中所發現之 CDRs ^因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含重鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：24 之殘基31-35、殘基50-65以及殘基98-104 » 在另一具體例中，本發明之特定抗體選自下列者所成 97211.doc • 66- 1356064 之組群：L1H6、與L1H6具交叉反應性之抗體、會和與 L1H6相同之抗原決定部位結合之抗體、會與L1H6競爭與表現人類IL-4R之細胞結合之抗體 '具有L1H6之生物活性之抗體及上述抗體之任一者之抗原-結合性片段。在一實施例中，該抗體具有對人類IL-4R之結合親和性且該結合親和性實質上與L1H6對人類il-4R之結合親和性相等。本發明亦提供產生該抗體之任一種之融合瘤細胞系。 L1H6之生物活性之一例為作為IL_4拮抗劑及il-13拮抗劑之能力。在一實施例中，本發明之抗體具有與L1H6實質相等之IL-4封阻活性以及具有與L1H6實質相等之IL-13 封阻活性。該活性能以任何適當之習知測定方法測量（例如以實施例2所述之CD23表現測定法測量）。 L1H6之輕鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：3 中’以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：4中。 L1H6之重鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：25 中’以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：26中。本發明之抗體包括（但不限於）在輕鏈中包含序列編號：4之殘基1至109及/或在重鏈中包含序列編號：26之殘基1至 115之抗體。本發明抗體之特定實施例在其之輕鏈可變區域中包含至少一個在L1H6之輕鏈中所發現之互補性決定區（Cdrs)或超I區。L1H6之CDRs將在實施例5中討論。因此，本發明 k供之抗體中’亦涵蓋包含輕鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：4之胺基酸殘基24-35、殘 97211.doc -67- 1356064 基51-57以及殘基90-99 »本發明提供之特定抗體在其之重鏈可變區域中包含至少一個在UH6之重鏈中所發現之 CDRS。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含重鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：％之殘基31-35、殘基50-65以及殘基98-104。在另一具體例中，本發明之特定抗體選自下列者所成之組群.L1H7、與L1H7具交又反應性之抗體、會和與 L1H7相同之抗原決定部位結合之抗體、會與L丨H7競爭與表現人類IL-4R之細胞結合之抗體、具有L1H7之生物活性之抗體及上述抗體之任一者之抗原-結合性片段。在一實施例中’該抗體具有對人類IL-4R之結合親和性且該結合親和性實質上與L1H7對人類IL-4R之結合親和性相等。本發明亦提供產生該抗體之任一種之融合瘤細胞系。 L1H7之生物活性之一例為作為IL-4拮抗劑及IL-1 3拮抗劑之能力。在一實施例中，本發明之抗體具有與L1H7實質相等之IL-4封阻活性以及具有與L1H7實質相等之IL-13 封阻活性。該活性能以任何適當之習知測定方法測量（例如以實施例2所述之CD23表現測定法測量）。 L1H7之輕鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：3 中，以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：4中。 L1H7之重鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：27 中’以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：28中。本發明之抗體包括（但不限於）在輕鏈中包含序列編號：4之殘基1至109及/或在重鏈中包含序列編號：28之殘基1至 97211.doc •68- 1356064 Π5之抗體。本發明抗體之特定實施例在其之輕鏈可變區域中包含至少一個在L1H7之輕鏈中所發現之互補性決定區（Cdrs)或超變區》L1H7之CDRs將在實施例5中討論。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含輕鏈可變區域中之下列序列中之一至所有二個者：序列編號：4之胺基酸殘基24-35、殘基5 1-57以及殘基90-99 »本發明提供之特定抗體在其之重鏈可變區域中包含至少一個在L1H7之重鏈中所發現之 CDRs。因此，本發明提供之抗體中’亦涵蓋包含重鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：28 之殘基31-35、殘基50-65以及殘基98-104。在另一具體例中，本發明之特定抗體選自下列者所成之組群：L1H8、與L1H8具交又反應性之抗體、會和與 L1H8相同之抗原決定部位結合之抗體、會與競爭與表現人類IL-4R之細胞結合之抗體、具有L1H8之生物活性之抗體及上述抗體之任一者之抗原-結合性片段。在一實施例中，該抗體具有對人類IL-4R之結合輯和性且該結合親和性實質上與L1H8對人類IL-4R之結合親和性相等。本發明亦提供產生該抗體之任一種之融合瘤細胞系。 L1H8之生物活性之一例為作為IL_4拮抗劑及比·^拮抗劑之能力。在一實施例中，本發明之抗體具有與L丨H8實質相等之IL-4封阻活性以及具有與L1H8實質相等之IL_13 封阻活性。該活性能以任何適當之習知測定方法測量（例如以實施例2所述之CD23表現測定法測量）。 97211.doc -69· 1356064 L1H8之輕鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：3 中’以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：4中。 L1H8之重鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：29 中’以及其所编碼之胺基酸序列呈現於序列編號：30中。本發明之抗體包括（但不限於）在輕鏈_包含序列編號：4之殘基1至109及/或在重鏈争包含序列編號·· 30之殘基1至 115之抗體。本發明抗體之特定實施例在其之輕鍵可變區域中包含至少一個在L1H8之輕鏈中所發現之互補性決定區（cdrs)或超變區。L1H8之CDRs將在實施例5中討論。因此，本發明提供之抗體令，亦涵蓋包含輕鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：4之胺基酸殘基24-35、殘基5 1-57以及殘基90-99。本發明提供之特定抗體在其之重鏈可變區域中包含至少一個在L1H8之重鏈中所發現之 CDRs。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含重鍵可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：3〇之殘基31-35、殘基50-65以及殘基98-104。在另一具體例中，本發明之特定抗體選自下列者所成之組群：L1H9、與L1H9具交叉反應性之抗體、會和與L1H9 相同之抗原決定部位結合之抗體、會與UH9競爭與表現人類IL-4R之細胞結合之抗體、具有UH9之生物活性之抗體及上述抗體之任一者之抗原-結合性片段。在一實施例中，該抗體具有對人類IL_4R之結合親和性且該結合親和性實質上與L1H9對人類IL-4R之結合親和性相等。本發明 97211.doc -70- 1356064 亦提供產生該抗體之任一種之融合瘤細胞系。 L1H9之生物活性之一例為作為il-4拮抗劑及IL-13拮抗劑之能力。在一實施例中，本發明之抗體具有與L1H9實質相等之IL-4封阻活性以及具有與L1H9實質相等之IL-13 封阻活性。該活性能以任何適當之習知測定方法測量（例如以實施例2所述之CD23表現測定法測量）。 L1H9之輕鏈可變區域之Dna序列呈現於序列編號：3 中，以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：4中。 L1H9之重鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：3 1 中’以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：32中。本發明之抗體包括（但不限於）在輕鏈中包含序列編號：4之殘基1至109及/或在重鍵中包含序列編號：32之殘基1至 115之抗體。本發明抗體之特定實施例在其之輕鏈可變區域中包含至少一個在L1H9之輕鏈中所發現之互補性決定區（Cdrs)或超良區。L1H9之CDRs將在實施例5中討論。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含輕鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者··序列編號：4之胺基酸殘基24_35、殘基5 1-57以及殘基90-99。本發明提供之特定抗體在其之重鏈可變區域中包含至少一個在L1H9之重鏈中所發現之 CDRs。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含重鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：32 之殘基31-35、殘基50-65以及殘基98-104。在另一具體例中，本發明之特定抗體選自下列者所成之 97211.doc 1356064 組群：L1H10、與L1H10具交叉反應性之抗體、會和與 L1H10相同之抗原決定部位結合之抗體、會與L1H10競爭與表現人類IL-4R之細胞結合之抗體、具有L1H10之生物活性之抗體及上述抗體之任一者之抗原-結合性片段。在一實施例中，該抗體具有對人類IL-4R之結合親和性且該結合親和性實質上與L1H10對人類IL-4R之結合親和性相等。本發明亦提供產生該抗體之任一種之融合瘤細胞系。 L1H10之生物活性之一例為作為il-4拮抗劑及IL-13拮抗劑之能力。在一實施例中，本發明之抗體具有與L1H10實質相等之IL-4封阻活性以及具有與L1H10實質相等之IL-13 封阻活性。該活性能以任何適當之習知測定方法測量（例如以實施例2所述之CD23表現測定法測量）。 L1Η10之輕鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：3 中’以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：4中。 L1H10之重鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：33 中’以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：34中。本發明之抗體包括（但不限於）在輕鍵中包含序列編號：4之殘基1至109及/或在重鏈中包含序列編號：34之殘基1至 115之抗體。本發明抗體之特定實施例在其之輕鏈可變區域中包含至少一個在L1Η 10之輕鏈中所發現之互補性決定區（CDRs)或超良區。L1H10之CDRs將’在實施例5中討論。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含輕鏈可變區域中之下列序列中之一至所有二個者：序列編號：4之胺基酸殘基24-35、 97211.doc •72- 1356064 殘基51-57以及殘基90-99。本發明提供之特定抗體在其之重鏈可變區域中包含至少一個在L1H1〇之重鏈中所發現之 CDRs。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含重鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：34 之殘基31-35、殘基50-65以及殘基98-104。在另一具體例中，本發明之特定抗體選自下列者所成之組群· L 1Η11、與L1Η11具交又反應性之抗體、會和與 L1Η11相同之抗原決定部位結合之抗體、會與L丨η丨丨競爭與表現人類IL-4R之細胞結合之抗體、具有L1H11i生物活性之抗體及上述抗體之任一者之抗原-結合性片段。在一實施例中’該抗體具有對人類IL_4R之結合親和性且該結合親和性實質上與L1H11對人類IL-4R之結合親和性相等。本發明亦提供產生該抗體之任一種之融合瘤細胞系。 L1H11之生物活性之一例為作為IL_4拮抗劑& IL_13拮抗劑之能力。在一實施例中，本發明之抗體具有與L1Hi 1實質相等之IL-4封阻活性以及具有與L1H11實質相等之il-13 封阻活性。該活性能以任何適當之習知測定方法測量（例如以實施例2所述之CD23表現測定法測量）。 L1H11之輕鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：3 中，以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：4中。 L1H11之重鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：35 中，以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：36中。本發明之抗體包括（但不限於）在輕鏈中包含序列編號：4之殘基1至109及/或在重鏈中包含序列編號：36之殘基1至 972ll.doc •73· 1356064 115之抗體。本發明抗體之特定實施例在其之輕鏈可變區域中包含至少一個在L1H11之輕鏈中所發現之互補性決定區（CDRs)或超變區。L1Η11之CDRs將在實施例5中討論。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含輕鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：4之胺基酸殘基24-35、殘基51-57以及殘基90-99。本發明提供之特定抗體在其之重鏈可變區域中包含至少一個在L1H11之重鏈中所發現之 CDRs。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含重鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：36 之殘基31-35、殘基50-65以及殘基98-104。在另一具體例中，本發明之特定抗體選自下列者所成之組群：L2H4、與L2H4具交又反應性之抗體、會和與L2H4 相同之抗原決定部位結合之抗體、會與L2H4競爭與表現人類IL-4R之細胞結合之抗體、具有L2H4之生物活性之抗體及上述抗體之任一者之抗原-結合性片段。在一實施例中’該抗體具有對人類IL-4R之結合親和性且該結合親和性實質上與L2H4對人類IL-4R之結合親和性相等。本發明亦提供產生該抗體之任一種之融合瘤細胞系。 L2H4之生物活性之一例為作為IL_4拮抗劑及IL-13拮抗劑之能力。在一實施例中’本發明之抗體具有與L2H4實質相等之IL-4封阻活性以及具有與L2H4實質相等之IL-13 封阻活性。該活性能以任何適.當之習知測定方法測量（例如以實施例2所述之CD23表現測定法測量）。 97211.doc -74- 1356064 L2H4之輕鏈可變區域之dna序列呈現於序列編號：5 中’以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：6中。 L2H4之重鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：2 1 中’以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：22中。本發明之抗體包括（但不限於）在輕鏈中包含序列編號：6之殘基1至109及/或在重鏈中包含序列編號：22之殘基1至 115之抗體。本發明抗體之特定實施例在其之輕鏈可變區域中包含至少一個在L2H4之輕鏈中所發現之互補性決定區（cdrs)或超變區。L2H4之CDRs將在實施例5中討論。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含輕鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：6之胺基酸殘基24-35、殘基51-57以及殘基90-99。本發明提供之特定抗體在其之重鏈可變區域中包含至少一個在L2H4之重鏈中所發現之 CDRs。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含重鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：22 之殘基31-35、殘基50-65以及殘基98-104。在另一具體例中，本發明之特定抗體選自下列者所成之組群：L2H12 '與L2H12具交叉反應性之抗體、會和與 L2H12相同之抗原決定部位結合之抗體、會與l2jj 12競爭與表現人類IL-4R之細胞結合之抗體、具有L2H12之生物活性之抗體及上述抗體之任一者之抗原-結合性片段。在— 實施例中，該抗體具有對人類IL-4R之結合親和性且該結合親和性實質上與L2H12對人類IL-4R之結合親和性相等。 97211.doc •75· 1356064 本發明亦提供產生該抗體之任一種之融合瘤細胞系。 * L2H12之生物活性之一例為作為IL-4拮抗劑及IL-13拮抗 * * 劑之能力。在一實施例中，本發明之抗體具有與L2H12實 . 質相等之IL-4封阻活性以及具有與L2H12實質相等之IL-13 封阻活性。該活性能以任何適當之習知測定方法測量（例如以實施例2所述之CD23表現測定法測量）。 L2H12之輕鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：5 中，以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：6中。 _ L2H12之重鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：37 中，以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：38令。本發明之抗體包括（但不限於）在輕鏈中包含序列編號：6之殘基1至109及/或在重鏈中包含序列編號：38之殘基1至 115之抗體。本發明抗體之特定實施例在其之輕鏈可變區域中包含至少一個在L2H12之輕鏈中所發現之互補性決定區（CDrs)或超良區。L2H12之CDRs將在實施例5中討論。因此，本發鲁明提供之抗體中，亦涵蓋包含輕鏈可變區域中之下列序列中之至所有二個者：序列編號：6之胺基酸殘基24-35、殘基51-57以及殘基90_99。本發明提供之特定抗體在其之重鏈可變區域中包含至少一個在L2H12之重鏈中所發現之 CDRs。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含重鏈可變區域中之下列序列甲之一至所有三個者：序列編號：38 - 之殘基31-35、殘基50-65以及殘基98-104。，在另一具體例中，本發明之特定抗體選自下列者所成 97211.doc -76- 1356064 之組群：L2H13、與L2H13具交又反應性之抗體、會和與 L2H13相同之抗原決定部位結合之抗體、會與L2H13競爭與表現人類IL-4R之細胞結合之抗體、具有L2H13之生物活性之抗體及上述抗體之任一者之抗原-結合性片段。在一實施例中，該抗體具有對人類IL-4R之結合親和性且該結合親和性實質上與L2H13對人類IL-4R之結合親和性相等。本發明亦提供產生該抗體之任一種之融合瘤細胞系。 L2H1 3之生物活性之一例為作為IL-4拮抗劑及IL-1 3拮抗劑之能力。在一實施例中，本發明之抗體具有與L2H13實質相等之IL-4封阻活性以及具有與L2H13實質相等之IL-13 封阻活性。該活性能以任何適當之習知測定方法測量（例如以實施例2所述之CD23表現測定法測量）。 L2H13之輕鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：5 中，以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：6中。 L2H13之重鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：39 中’以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：4〇中。本發明之抗體包括（但不限於）在輕鏈中包含序列編號：6之殘基1至109及/或在重鏈中包含序列編號：4〇之殘基1至 115之抗體。本發明抗體之特定實施例在其之輕鏈可變區域中包含至少一個在L2H13之輕鏈中所發現之互補性決定區（CDRs)或超k區。L2H13之CDRs將在實施例5中討論。因此，本發明提供之抗體中’亦涵蓋包含輕鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：6之胺基酸殘基24_35、 9721l.doc -77· 1356064 殘基51-57以及殘基90-99。本發明提供之特定抗體在其之重鏈可變區域中包含至少一個在L2H13之重鏈中所發現之 CDRs。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含重鏈可變區域中之下列序列令之一至所有三個者：序列編號：4〇之殘基31-35、殘基50-65以及殘基98-104。在另一具體例中，本發明之特定抗體選自下列者所成之組群：L2H14、與L2H14具交叉反應性之抗體、會和與 L2H14相同之抗原決定部位結合之抗體、會與L2m4競爭與表現人類IL-4R之細胞結合之抗體、具有L2H14之生物活性之抗體及上述抗體之任一者之抗原-結合性片段。在一貫把例中’該抗體具有對人類IL-4R之結合親和性且該結合親和性實質上與L2H14對人類IL_4R之結合親和性相等。本發明亦&供產生遠抗體之任一種之融合瘤細胞系。 L2H14之生物活性之一例為作為IL_4拮抗劑及IL_丨3拮抗劑之能力。在一實施例中’本發明之抗體具有與]^21114實質相等之IL-4封阻活性以及具有與L2iii4實質相等之IL-13 封阻活性。該活性能以任何適當之習知測定方法測量（例如以實施例2所述之CD23表現測定法測量）。 L2H14之輕鏈可變區域之dna序列呈現於序列編號：5 中，以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：6中。 L2H14之重鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：41 中’以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：42中。本發明之抗體包括（但不限於）在輕鏈中包含序列編號：6之殘基1至109及/或在重鏈中包含序列編號：42之殘基1至 97211.doc •78· 1356064 115之抗體。本發明抗體之特定實施例在其之輕鏈可變區域中包含至少一個在L2H14之輕鏈中所發現之互補性決定區（CDRS)或超變區。L2H14之CDRs將在實施例5中討論。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含輕鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：6之胺基酸殘基24-35、殘基5 1-57以及殘基90-99。本發明提供之特定抗體在其之重鏈可變區域中包含至少一個在L2H14之重鏈中所發現之 CDRs。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含重鍵可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：42 之殘基31-35、殘基50-65以及殘基98-104。在另一具體例中’本發明之特定抗體選自下列者所成之組群：L6H1、與L6H1具交叉反應性之抗體、會和與L6H1 相同之抗原決定部位結合之抗體、會與L6H1競爭與表現人類IL-4R之細胞結合之抗體、具有L6H1之生物活性之抗體及上述抗體之任一者之抗原-結合性片段。在一實施例中’該抗體具有對人類IL-4R之結合親和性且該結合親和性實質上與L6H1對人類IL-4R之結合親和性相等。本發明亦提供產生該抗體之任一種之融合瘤細胞系。 L6H1之生物活性之一例為作為IL_4拮抗劑及IL_13拮抗劑之能力。在一實施例中，本發明之抗體具有與L6H1實質相等之IL-4封阻活性以及具有與L6H1實質相等之IL_n 封阻活性。該活性能以任何適當之習知測定方法測量（例如以實施例2所述之CD23表現測定法測量）。 9721l.doc -79· 1356064 L6H1之輕鏈可變區域之〇να序列呈現於序列编號：13 中’以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列编號：14中。 L6H1之重鏈可變區域之〇να序列呈現於序列编號：15 中’以及其所编碼之胺基酸序列呈現於序列編號：16中。本發明之抗體包括（但不限於）在輕鏈中包含序列編號：14 之殘基1至109之抗體、在重鏈中包含序列編號：16之殘基 1至115之抗體、以及在輕鏈中包含序列編號：14之殘基1 至109且在重鏈中包含序列編號：16之殘基1至115之抗體。本發明抗體之特定實施例在其之輕鏈可變區域中包含至少一個在L6H1之輕鏈中所發現之互補性決定區（CDrs)或超變區。L6H1之CDRs將在實施例5中討論。因此，本發明提供之抗體中’亦涵蓋包含輕鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：14之胺基酸殘基24-35、殘基51-57以及殘基90-99。本發明提供之特定抗體在其之重鏈可變區域中包含至少一個在L6H1之重鏈中所發現之 CDRs。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含重鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：16 之殘基31-35、殘基50-65以及殘基98-104。在另一具體例中，本發明之特定抗體選自下列者所成之組群：L2H2、與L2H2具交叉反應性之抗體、會和與L2H2 相同之抗原決定部位結合之抗體、會與L2H2競爭與表現人類IL-4R之鈿胞結合之抗體、具有L2H2之生物活性之抗體及上述抗體之任一者之抗原-結合性片段。在一實施例 9721l.doc •80- 1356064 中’該抗體具有對人類IL-4R之結合親和性且該結合親和性實質上與L2H2對人類IL-4R之結合親和性相等。本發明亦提供產生該抗體之任一種之融合瘤細胞系。 L2H2之生物活性之一例為作為il-4拮抗劑及IL-13拮抗劑之能力。在一實施例中’本發明之抗體具有與L2H2實質相等之IL-4封阻活性以及具有與L2H2實質相等之IL-13 封阻活性》該活性能以任何適當之習知測定方法測量（例如以實施例2所述之CD23表現測定法測量）。 L2H2之輕鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：5 中，以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：6中。 L2H2之重鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：17 中’以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：18中。本發明之抗體包括（但不限於）在輕鏈中包含序列編號：6之殘基1至109之抗體及/或在重鏈中包含序列編號：18之殘基1至115之抗體。本發明抗體之特定實施例在其之輕鏈可變區域中包含至少一個在L2H2之輕鏈中所發現之互補性決定區（Cdrs)或超變區。L2H2之CDRs將在實施例5中討論。因此，本發明提供之抗體中’亦涵蓋包含輕鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：6之胺基酸殘基24-35、殘基5 1 -57以及殘基90-99。本發明提供之特定抗體在其之重鏈可變區域中包含至少一個在L2H2之重鏈中所發現之 CDRs。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含重鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：i 8 9721l.doc •81 · 之殘基31-35、殘基50-65以及殘基98-104。在另一具體例中，本發明之特定抗體選自下列者所成之組群：L2H3、與L2H3具交叉反應性之抗體、會和與L2H3 相同之抗原決定部位結合之抗體、會與L2H3競爭與表現人類IL-4R之細胞結合之抗體、具有L2H3之生物活性之抗體及上述抗體之任一者之抗原-結合性片段。在一實施例中，該抗體具有對人類IL-4R之結合親和性且該結合親和性實質上與L2H3對人類IL-4R之結合親和性相等。本發明亦提供產生該抗體之任一種之融合瘤細胞系。 L2H3之生物活性之一例為作為IL-4拮抗劑及IL-13拮抗劑之能力。在一實施例中，本發明之抗體具有與L2H3實質相等之IL-4封阻活性以及具有與L2H3實質相等之IL-13 封阻活性。該活性能以任何適當之習知測定方法測量（例如以實施例2所述之CD23表現測定法測量）。 L2H3之輕鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：5 中，以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：6中。 L2H3之重鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：19 中，以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：20中。本發明之抗體包括（但不限於）在輕鏈中包含序列編號：6之殘基1至109及/或在重鏈中包含序列編號：20之殘基1至 115之抗體。本發明抗體之特定實施例在其之輕鏈可變區域中包含至少一個在L2H3之輕鏈中所發現之互補性決定區（CDRs)或超變區。L2H3之CDRs將在實施例5中討論。因此，本發明 97211.doc -82- 1356064 提供之抗體令，亦涵蓋包含輕鏈可變區域中之下列序列中之至所有二個者.序列编號：6之胺基酸殘基24-35、殘基5 1-57以及殘基90-99。本發明提供之特定抗體在其之重鏈可變區域中包含至少一個在L2H3之重鏈中所發現之 CDRs。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含重鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：2〇之殘基31-35、殘基50-65以及殘基98-104。在另一具體例中，本發明之特定抗體選自下列者所成之組群.L2H6、與L2H6具交又反應性之抗體、會和與L2H6 相同之抗原決定部位結合之抗體、會與L2H6競爭與表現人類IL-4R之細胞結合之抗體、具有L2H6i生物活性之抗體及上述抗體之任一者之抗原-結合性片段。在一實施例中，該抗體具有對人類IL-4R之結合親和性且該結合親和性實質上與L2H6對人類IL-4R之結合親和性相等。本發明亦提供產生該抗體之任一種之融合瘤細胞系。 L2H6之生物活性之一例為作為IL_4拮抗劑及IL_13拮抗劑之能力。在一實施例中，本發明之抗體具有與L2H6實質相等之IL-4封阻活性以及具有與L2H6實質相等之IL-13 封阻活性。該活性能以任何適當之習知測定方法測量（例如以實施例2所述之CD23表現測定法測量）。 L2H6之輕鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：5 中，以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：6中。 L2H6之重鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：25' 中’以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：26中。 9721i.doc •83· 1356064 本發明之抗體包括（但不限於）在輕鏈中包含序列編號：6之殘基1至109及/或在重鏈中包含序列編號：26之殘基丄至 115之抗體。本發明抗體之特定實施例在其之輕鏈可變區域中包含至少一個在L2H6之輕鏈中所發現之互補性決定區（CDRs)或超支區。L2Η6之CDRs將在實施例5中討論。因此，本發明 k供之抗體亦涵蓋包含輕鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：6之胺基酸殘基24_35、殘基51-57以及殘基90-99。本發明提供之特定抗體在其之重鏈可變區域中包含至少一個在L2H6之重鏈中所發現之 CDRs。因此’本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含重鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：26 之殘基31-35、殘基50-65以及殘基98-104。在另一具體例中，本發明之特定抗體選自下列者所成之組群：L2H7、與L2H7具交又反應性之抗體、會和與L2H7 相同之抗原決定部位結合之抗體 '會與L2H7競爭與表現人類IL-4R之細胞結合之抗體、具有L2H7之生物活性之抗體及上述抗體之任一者之抗原·結合性片段。在一實施例中’該抗體具有對人類IL-4R之結合親和性且該結合親和性實質上與L2H7對人類IL-4R之結合親和性相等。本發明亦提供產生該抗體之任一種之融合瘤細胞系。 L2H7之生物活性之一例為作為IL_4拮抗劑及IL_13拮抗劑之能力。在一實施例t，本發明之抗體具有與L2H7實. 質相等之IL-4封阻活性以及具有與L2H7實質相等之IL-13 97211.doc -84 - 1356064 封阻活性。該活性能以任何適當之習知測定方法測量（例如以實施例2所述之CD23表現測定法測量）。 L2H7之輕鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：5 中，以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：6中。 L2H7之重鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：27 中，以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：28中。本發明之抗體包括（但不限於）在輕鏈中包含序列編號：6之殘基1至109及/或在重鏈中包含序列編號·· 28之殘基1至 115之抗體。本發明抗體之特定實施例在其之輕鏈可變區域中包含至少一個在L2H7之輕鏈中所發現之互補性決定區（Cdrs)或超變區。L2H7之CDRs將在實施例5中討論。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含輕鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：6之胺基酸殘基24-35、殘基5 1-57以及殘基90-99。本發明提供之特定抗體在其之重鍵可變區域中包含至少一個在L2H7之重鏈中所發現之 CDRs。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含重鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：28 之殘基31-35、殘基50-65以及殘基98-104 » 在另一具體例中，本發明之特定抗體選自下列者所成之組群.L2H8、與L2H8具交又反應性之抗體、會和與L2H8 相同之抗原決定部位結合之抗體、會與L2H8競爭與表現人類IL-4R之細胞結合之抗體、具有L2H8i生物活性之抗體及上述抗體之任一者之抗原-結合性片段。在一實施例 972ll.doc -85 · 1356064 中，該抗體具有對人類IL-4R之結合親和性且該結合親和性實質上與L2H8對人類IL-4R之結合親和性相等。本發明亦提供產生該抗體之任一種之融合瘤細胞系。 L2H8之生物活性之一例為作為il-4拮抗劑及IL-13拮抗劑之能力。在一實施例中，本發明之抗體具有與L2H8實質相等之IL-4封阻活性以及具有與L2H8實質相等之IL-13 封阻活性。該活性能以任何適當之習知測定方法測量（例如以實施例2所述之CD23表現測定法測量）。 L2H8之輕鏈可變區域之Dna序列呈現於序列編號：5 中’以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：6中。 L2H8之重鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：29 中，以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：3〇中。本發明之抗體包括（但不限於）在輕鏈令包含序列編號：6之殘基1至109及/或在重鏈中包含序列編號：3〇之殘基1至 115之抗體。本發明抗體之特定實施例在其之輕鏈可變區域中包含至少一個在L2H8之輕鏈中所發現之互補性決定區（CDRs)或超是區。L2H8之CDRs將在實施例5中討論。因此，本發明提供之抗體令，亦涵蓋包含輕鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：6之胺基酸殘基24 35、殘基51-57以及殘基90-99。本發明提供之特定抗體在其之重鍵可變區域中包含至少一個在L2H8之重鏈中所發現之 CDRs。因此’本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含重鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：30 972H.doc 1356064 之殘基31-35、殘基50-65以及殘基98-104。在另一具體例中，本發明之特定抗體選自下列者所成之組群：L2H9、與L2H9具交又反應性之抗體、會和與L2H9 相同之抗原決定部位結合之抗體、會與L2H9競爭與表現人類IL-4R之細胞結合之抗體、具有L2H9之生物活性之抗體及上述抗體之任一者之抗原-結合性片段。在一實施例中’該抗體具有對人類IL-4R之結合親和性且該結合親和性實質上與L2H9對人類IL-4R之結合親和性相等。本發明亦提供產生該抗體之任一種之融合瘤細胞系。 L2H9之生物活性之一例為作為IL-4拮抗劑及IL-13拮抗劑之能力。在一實施例中’本發明之抗體具有與L2H9實質相等之IL-4封阻活性以及具有與L2H9實質相等之IL-13 封阻活性。該活性能以任何適當之習知測定方法測量（例如以實施例2所述之CD23表現測定法測量）。 L2H9之輕鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：5 中，以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：6中。 L2H9之重鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：3 1 中’以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：3 2中。本發明之抗體包括（但不限於）在輕鏈中包含序列編號：6之殘基1至109及/或在重鏈中包含序列編號：32之殘基1至 115之抗體。本發明抗體之特定實施例在其之輕鏈可變區域中包含至少一個在L2H9之輕鏈中所發現之互補性決定區（CDRs)或超變區。L2H9之CDRs將在實施例5中討論。因此，本發明 97211.doc -87- 1356064 k供之抗體中，亦涵蓋包含輕鍵可變區域中之下列序列中· · 之一至所有三個者：序列編號：6之胺基酸殘基24_35、殘 · 基51-57以及殘基90-99。本發明提供之特定抗體在豆之重 : 鏈可變區域中包含至少一個在L2H9之重鏈中所發現之 CDRs。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含重鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：32 之殘基31-35、殘基50-65以及殘基98-104。在另一具體例中’本發明之特定抗體選自下列者所成之組群：L2H10、與L2H10具交又反應性之抗體、會和與 L2H10相同之抗原決定部位結合之抗體、會與L2hi〇競爭與表現人類IL-4R之細胞結合之抗體、具有L2H10之生物活性之抗體及上述抗體之任一者之抗原-結合性片段。在一實施例申’該抗體具有對人類IL-4R之結合親和性且該結合親和性實質上與L2H10對人類IL-4R之結合親和性相等。本發明亦提供產生該抗體之任一種之融合瘤細胞系。 L2H10之生物活性之一例為作為IL-4拮抗劑及IL-13拮抗 · 劑之能力。在一實施例中，本發明之抗體具有與L2H10實質相等之IL-4封阻活性以及具有與L2H10實質相等之IL-13 封阻活性。該活性能以任何適當之習知測定方法測量（例如以實施例2所述之CD23表現測定法測量）。 L2H10之輕鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：5 中，以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：6中。 * L2H10之重鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：33 .· 中，以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：34中。 972U.doc -88 - 1356064 本發明之抗體包括（但不限於）在輕鏈中包含序列编號：6之殘基1至109及/或在重鏈中包含序列編號：34之抗體。本發明抗體之特定實施例在其之輕鏈可變區域中包含至少一個在L2H10之輕鏈中所發現之互補性決定區（CDrs)或超變區。L2H10之CDRs將在實施例5中討論。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含輕鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：6之胺基酸殘基24-35、殘基51-57以及殘基90-99。本發明提供之特定抗體在其之重鏈可變區域中包含至少一個在L2H10之重鏈中所發現之 CDRs。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含重鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：34 之殘基31-35、殘基50-65以及殘基98-104。在另一具體例中，本發明之特定抗體選自下列者所成之板群：L2H11 '與L2H11具交叉反應性之抗體、會和與 L2H11相同之抗原決定部位結合之抗體、會與L2h 11競爭與表現人類IL-4R之細胞結合之抗體、具有L2H11之生物活性之抗體及上述抗體之任一者之抗原-結合性片段。在一實施例中，該抗體具有對人類IL-4R之結合親和性且該結合親和性實質上與L2H11對人類IL-4R之結合親和性相等。本發明亦提供產生該抗體之任一種之融合瘤細胞系。 L2H11之生物活性之一例為作為IL-4拮抗劑及IL-1 3拮抗劑之能力。在一實施例中’本發明之抗體具有與L2H11實質相等之IL-4封阻活性以及具有與L2H11實質相等之il-13 封阻活性。該活性能以任何適當之習知測定方法測量（例 97211.doc -89- 1356064 如以實施例2所述之CD23表現測定法測量）。 - L2H11之輕鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：5 - • 中，以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：6中。 . L2H11之重鏈可變區域之DNA序列呈現於序列編號：35 中’以及其所編碼之胺基酸序列呈現於序列編號：36中。本發明之抗體包括（但不限於）在輕鏈中包含序列編號：6之殘基1至109及/或在重鏈中包含序列編號：36之殘基1至 115之抗體。本發明抗體之特定實施例在其之輕鏈可變區域中包含至少一個在L2H11之輕鏈中所發現之互補性決定區（CDrs)或超隻區。L2H11之CDRs將在實施例5中討論。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含輕鏈可變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：6之胺基酸殘基24-35、殘基51-57以及殘基90-99 »本發明提供之特定抗體在其之重鏈可變區域中包含至少一個在L2H11之重鏈中所發現之 CDRs。因此，本發明提供之抗體中，亦涵蓋包含重鏈可鲁變區域中之下列序列中之一至所有三個者：序列編號：36 之殘基31-35、殘基50-65以及殘基98-104。核酸本發明之一態樣提供一種單離核酸分子。該核酸包含例如編碼本發明之抗體之多肽、其之片段、衍生物、突變蛋白或變異體之聚核苷酸，足以作為雜合探針之聚核苷酸、_ 供鑑定、分析、致突變或擴增編碼多肽之聚核苷酸用之 - PCR引子或定序引子、抑制聚核苷酸表現用之反義核酸、 97211.doc -90- 1356064 以及上述者之互補序列。該核酸可為任何長度。彼等在長度上可為例如 5、10、15、20、25、30、35、40、45、 50、75、100、125、150、175、200、250、300、350、 400、450、500、750、1〇〇〇、1500、3000、5000 或以上個核苷酸及/或可包含1或多個另外序列，例如調節序列及/或較大型核酸（例如載體）之一部分❶該核酸可為單股或雙股以及可包含RNA及/或DNA核苷酸以及其之人造變異體（例如肽核酸）。編碼抗體多肽（例如重鏈或輕鏈、只有可變區域或全長）之DNA可從曾用IL-4R免疫之小鼠之Β_細胞單離。DNA可藉由習知方法諸如聚合酶連鎖反應（pCR)單離。嗜菌體展示法（phage display)為可製備抗體之衍生物之已知技術之一例。在一方法中，使為所探討抗體之組成分之多肽在任何適當之重組表現系統中表現，以及讓被表現之多肽集合成抗體分子。圖2提供編碼圖3所示之重鏈可變區及輕鏈可變區之核酸序列。由於遺傳密碼之簡併，圖3中多肽序列之各個亦由許多其他核酸序列編碼。本發明提供編碼本發明之各抗體之各簡併核苷酸序列。本發明尚提供於特定雜合條件下，與其他核酸(例如包含圖2之核苷酸序列之核酸）雜合之核酸。雜合核酸之方法在本技藝甲為眾所周知。例如參見Current Protocols in M〇leCUlar Bl〇〗〇gy，J〇hn Wiley & Sons, Ν·Υ.(1989)，6 3 1 U6。如在本中所界^，中度嚴苛雜合條件為：使用含有 97211.doc -91 - 1356064 5X 氣化鈉 / 檸檬酸鈉（SSC)、0_5%SDS、1.0 πιΜ EDTA(pH8.0)之預沖洗溶液：使用含有約5〇%甲醯胺及6Χ SSC之雜合缓衝液；雜合溫度：55°C (或使用其他類似雜合溶液，諸如含有約50%甲酿胺者，且雜合溫度為42°C );以及沖洗條件：在0.5X SSC、0.1%SDS中且溫度為6〇°c »嚴苛雜合條件：6X SSC/45°C，繼而以 0.1X SSC、0.2% SDS 於6 8 °C沖洗1或多次。再者，熟悉本技術人士可調整雜合及/或沖洗條件以增加或減少雜合之嚴苛度，致使包含彼此具有至少 65、70、75、80、85 ' 90、95、98 或 99%相同性之核苷酸序列之核酸通常仍可彼此雜合。影響雜合條件之選擇之基本參數以及設計適當條件之指南被記載於 Sambrook, Fritsch, and Maniatis (1989, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y.，chapters 9 and 11 ;以及Current

Protocols in Molecular Biology, 1995，Ausubel et al.，eds.， John Wiley & Sons，Inc.，sections 2.10 and 6.3-6.4)，以及可由一般熟習本技藝之人士依據DNA之長度及/或鹼基組成而決定。可藉由突變將改變引進核酸，藉此導致其所編碼之多肽 (例如抗體）之胺基酸序列改變。突變可藉由標準技術諸如定點突變及PCR-媒介之突變而引進。較佳在一或多個預期非為胺基酸殘基之處進行保守性胺基酸取代。或者可沿著編碼序列之全部或部分，藉由諸如飽和突變之技術隨機引進突變，以及篩選生成之突變體之生物活性以鑑別出保留 97211.doc -92· 1356064 活性之突變體（例如與IL_4受體之結合P致突變之後，可重組地表現被編碼之蛋白質以及決定蛋白質之活性。可將突變引進核酸中而不明顯改變其所編碼之肽之生物活性。舉例言之，可以使核苷酸取代而導致在非必須胺基酸殘基之胺基酸取代。在一實施例中，使圖2提供之核苷酸序列或其之期望片段、變異體或衍生物發生突變，致使其所編碼之胺基酸序列包含圖3所示之胺基酸殘基之一或多個删除或取代’而導致二或多個序列在此等殘基處不同。在另一具體例中’致突變作用在圖3所示之一或多個胺基酸殘基鄰近處插入胺基酸，而導致二或多個序列在此等殘基處不同。或者，可將突變引進核酸中，以選擇性地改變其所編碼之多肽之生物活性（例如IL_4受器之結合，抑制比_4及 /或IL-13等）。舉例言之，突變可定量或定性地改變生物活性。定量改變之例子包括增加、減少或清除活性。定性改變之例子包括改變抗體之抗原特異性。在另一態樣中，本發明提供適於作為檢測本發明之核酸序列之？丨子或雜合探針之核酸分子^本發明之核酸分子可僅包，編碼本發明全長多肽之核酸序列之—部分，舉例言可作為k針或引子之片段或者編碼本發明多肽之活性部分（例如IL-4受體結合部份）之片段。 &康本U核酸之序列之探針可被用於檢測本發明之核勺=11讀^ (例如編碼本發明多肽之轉錄體）。該探針可 #籤基’例如放射線同位素、螢光化合物、酶或酶輔因子。該探針可制於鑑定表現多肽之細胞。- 97211.doc 1356064 在另一態樣中，本發明提供一載體，其包含編碼本發明之多肽或其一部分之核酸。該載體之例子包括（但不限於）質體、病毒載體、非遊動基因類（non_episomaG —乳動物載體及表現載體（例如重組表現載體）。本發明之重組表現載體可包含本發明之核酸且其呈現在宿主細胞中適於表現之形式。重組表現載體包括一或多個調節序列’該調鄞序列依據用於表現之宿主細胞來選擇，其與待表現之核酸序列可操作式地連鎖。調節序列包括在許多類型宿主細胞令指引核苷酸序列之構成性表現者（例如S V40早期基因增強子、羅絲（R〇us)肉瘤病毒啟動子及巨細胞病毒啟動子）；只在某些宿主細胞中指引核苷酸序列表現者（例如組織-特異性調節序列，參見v〇ss et al.，1986, Trends Biochem. Sci. 11:287, Maniatis et al., 1987, Science 236:1237，其所有内容皆以參考文獻之方式納入本文）；指引核苷酸序列之誘導性表現以回應特殊之處理或條件（例如在哺乳動物細胞中之代謝啟動子以及在原核及真核系統一者中之tet-反應性及/或鏈黴素反應性啟動子）（見上文）。熟習本技藝者當了解表現載體之設計可視待轉形之宿主細胞之選擇以及所期望之蛋白質表現度等而定。可將本發明之表現載體引進宿主細胞中，藉此製造由本文所述之核酸編碼之蛋白質或肽（包括融合蛋白質或肽）。本發明之另一態樣提供一種引進有本發明之重組表現載體之伯主細胞。宿主細胞可為任何原核細胞（例如大腸桿菌）或真核細胞（例如酵母菌、昆蟲或哺乳動物細胞（例如 97211.doc -94- 1356064 CHO細胞））。可將載體DNA經由習知轉形或轉染技術引進原核或真核細胞。就哺乳動物細胞之安定轉染而言，已知視所用之表現載體及轉染技術而定，只有一小部分之細胞可將外來DNA整合入其之基因組。為了鑑定及選擇此等整合體，編碼選擇用標記（例如對抗生素之抗性）之基因通常與感興趣之基因一起被引進宿主細胞中。較佳之選擇用找記包括賦與對藥物（諸如G418、濕黴素及胺甲蝶吟）之抗性。以所引進之核酸安定地轉染之細胞可藉由藥物選擇鑑定（例如納入選擇用標記之基因之細胞可存活，而其他細胞則死亡），以及其他方法。抗體之衍生物、片段及突變體對抗IL-4R之抗體之衍生物可藉由許多已知技術之任一種製備或篩選其性質。某些技術涉及單離編碼感興趣抗體之多肽鏈（或其之一部分）之DNA以及藉由重組DNA技術處理DNA。該DNA可與另一感興趣之DNA融合，或者予以改變（例如致突變作用或其他習知技術）以加入、刪除或取代一或多個胺基酸殘基。本發明之另一態樣係提供本發明抗體之抗原-結合性片段。該片段可完全由自抗體衍生之序列組成或者可包含另外之序列。抗原-結合性片段之例子包括Fab及F(ab，）2。其他例子被記載在Lunde et al·，2002，Biochem. Soc. Trans. 30:500-06 中。單鏈抗體可藉由胺基駿橋（短肽類連結子）將重鏈及輕鏈可變區域（Fv區）片段連結在一起，生成單一多肽鏈。該單 97211.doc •95- 1356064 鏈Fvs(scFvs)曾藉由在編碼二可變區域多肽（VL及VH)之 DNAs之間融合編碼肽類連結子之DNA。生成之多肽可被摺疊回其本身上形成抗原-結合性單體或可形成多聚物（例如二聚物、三聚物或四聚物），此視二可變區域間之可撓曲連結子之長度而定（Kortt et al·，1997，Prot. Eng· 10:423 ; Kortt et al.，2001，Biomol. Eng. 18:95-108)。藉由組合不同的VL及VH-包含性多肽，可以形成與不同抗原決部位結合之多聚 scFvs(Kriangkum et al_, 2001, Biomol. Eng. 18:31-40)。被開發用來製造單鏈抗體之技術包括在美國專利4,946,778號；Bird，1988, Science 242:423 ； Huston et al., 1988，Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85:5879 ; Ward et al.,1989, Nature 334:544，de Graaf et al.，2002, Methods Mol Biol. 178:379-87中所述者。在本文中提供之衍生自抗體之單鏈抗體（非限定性地包括包含可變區域組合L2H1、 L3H1、L4H1、L5H1、L1H2、L1H3、L1H4、L1H5、 L1H6 、 L1H7 、 L1H8 、 L1H9 、 L1H10 、 L1H11 、 L2H4 、 L2H12、L2H13、L2H14、L6H1、L2H2、L2H3、L2H6、 L2H7、L2H8、L2H9、L2H10及 L2H11 之 scFvs)。自感興趣之抗體衍生成不同亞類或異構型之抗體之技術 (即亞類轉換法）為已知。因此，IgG抗體例如可衍生自IgM 抗體，反之亦然。該技術不僅允許製備具有既定抗體（母抗體）之抗原-結合性質之新穎抗體，而且顯示與母抗體不同之與抗體異構型或亞類締合之生物性質。可以使用重組 DNA技術。經選殖之編碟特殊抗體多肽之DNA(例如編碼 97211.doc •96· 1356064 期望之異構型抗體之恆定區域之DNA)可被應用於此等方法。亦可參見 Lantto et al.，2002, Methods Mol. Biol. 178:303-16 。所以，本發明之抗體包括：包含例如可變區域之血舍 L2H1 、L3H1 、L4H1 、L5H1 、L1H2、L1H3、L1H4、 L1H5 、 L1H6 、 L1H7 、 L1H8 、 L1H9 、 L1H10 、 L1H11 、 L2H4、L2H12、L2H13、L2H14、L6H1、L2H2、L2H3、 L2H6、L2H7、L2H8、L2H9、L2H10及 L2H11 者，彼等具有期望之異構型（例如IgA、IgGl、IgG2、IgG3、IgG4、 IgM、IgE及IgD)以及其之Fab或F(ab')2片段。再者，如 Bloom et al.，1997，Protein Science 6:407(該文以參考文獻方式納入本文）所述者，若IgG4被期望，亦可在絞鏈區引進點突變（CPSCP— CPPCP)，以減少形成重鏈内二硫鍵之傾向，該傾向會導致IgG4抗體内之異質性。再者，衍主具有不同性質之抗體（即改變對於其所結合之抗原之親和性）之技術亦為已知。此等技術之一，即鏈拖曳法（chain shuffling)，涉及在絲狀嗤菌體之表面上顯示免疫球蛋白可變區域基因清單，其常被稱為噬菌體呈現 (phage display)。鏈拖曳法曾被用於製備半抗原-2-笨>»号嗤-5-酮之高親和性抗體，如Marks et al.， 1992, BioTechnology，10:779中所述。在抗體結合部位之中心互補性決定區（CDRs)之分子評估曾被用於單離具增加親和性之抗體，舉例言之，具有對 c-erbB-2之增加親和性之抗體，如Schier et al·，1996，J. 97211.doc -97- 1356064

Mol· Biol. 263:55 1所述。所以，此等技術在製備比_411之，抗體上有用。、參在特殊具體例中’本發明抗體對IL-4R之結合親合力 (Ka)為至少1 X 1〇8。在其他實施例中，該抗體顯示Ka為至少 1 X 109，至少 1 X 1〇ι〇或至少 1 X 1〇ιι。本發明尚包括多特異性抗體，例如具有二不同抗原結合部位或區之二特異性抗體，諸如IL_4R之二不同抗原決定部位，或IL-4R之抗原決定部位及IL_13R之抗原決定部位。再者，本文所揭示之二特異性抗體可包含來自本文所 _ 述抗體之一之抗原結合部位以及來自本文所述抗體之另一者之第二抗原結合區。或者，二特異性抗體可包含來自本文所述抗體之一之抗原結合部位以及來自本技藝已知之另一 IL-4R抗體之第一抗原結合部位（或可藉由已知方法製備者）。製備二特異性抗體之許多方法在本技藝中為已知以及在 2001年4月20日申請之美國專利申請案〇9/839,632中被論及籲 (該案以參考文獻之方式納入本文中）。此等方法包括 Milstein et al·’ 1983, Nature 3〇5:537 以及其他文獻（美國專利第4,474,893號以及美國專利第6，1〇6,833號）所述之雜合· 融合瘤之使用、以及抗體片段之化學性偶合（Brennan以 al., 1985, Science 229:81 ； Glennie et al., 1987 J Immunol. 139:2367 ;美國專利案第 6 〇1〇 9〇2號）。再者，二特異性抗體可經由重組方式製造，例如藉由使角白胺酸 · 拉鍊部分（亦即來自Fos及jun蛋白質，其較佳形成雜二聚 97211.doc -98- 1356064 物，Kostelny et al·，1992, J. immun〇1 148:1547)或其他美國專利第5,582,996號所述之鎖匙交互作㈣域結構。其他有用的技術包括K〇m et a丨·，1997, supra ;美國專利第 5,959,083號及美國專利第5,8〇7,7〇6號。本發明之另一態樣為提供_種抗體之衍生物。該衍生之抗體可包含賦予該抗體期望性質之任何分子或物質，諸如在特殊用途方面增加之半衰期。衍生之抗體可包含，例如，可檢測（或標記）之部分（例如放射活性分子、比色用分子、抗原性或酶類分子）、可檢測珠粒（諸如磁性或金粒子）或會與其他分子結合之分子（例如生物素））、治療或診斷部分（例如放射活性、細胞毒性或藥理活性部分）、或增加抗體在特定用途上之適用性之分子（例如投與至病患諸如人類病患，或其他活體内或試管内用途）。可被用於衍化抗體之分子之例子為白蛋白（例如人類血清白蛋白）及聚乙二醇（PEG)。可用本技藝已知之技術製備抗體之白蛋白-鍵連及PEG化衍生物。在一實施例中，抗體與甲狀腺素結合前白蛋白（TTR)或TTR變異體結合或鍵連。該TTR或TTR變異體可用例如選自葡聚糖、聚（正-乙烯基吡咯啶酮）、聚乙二醇、丙二醇同元聚合物、聚環氧丙烷/環氧乙烷共聚物、聚氧乙基化多元醇及聚乙烯醇之化學品進行化學修飾。美國專利申請案第20030195 154號。治療方法及抗趙之投與本文所提供之方法包含將抗_IL_4R抗體投與病患，藉此減少在特定病症中擔任有角色之IL_4誘生之生物反應。在 9721l.doc •99- 1356064 特疋具體例令，本發明方法涉及在活體外步驟中，使内源性IL-4R與抗_IL-4R抗體接觸。治療涵蓋異常之至少一種症狀之減輕或預防或者疾病嚴重度之減輕。要作為有用之治療劑，抗體無需完全「治癒」或根除疾病之每—症狀或表^如在相關領域中所公認者，作為治療劑之藥物可減少既定疾病狀態之嚴重度，但無需去除該疾病之所有表徵方被視為有用之治療劑。本發月之一實施例係針對一包含將IL-4R拮抗劑投與病人之方法八中投與之量及時間必須足以使反應特定疾病嚴重度之指標之基礎值持續改善。抑制IL-4及IL-13二者與細胞結合之抗體在本文中被討論。抑制人類中IL-4_誘生及IL_13誘生之活性之方法，其包含投與有效量之該抗體。因此可以治療江_4或江_13或該二細胞激素誘生之病症。如在相關領域t所了解者’將該抗體以適於該適應症之方式投與病患。可藉由任何適當之技術投與抗體，此等技㈣限定性地包括腸道外、局部^經由吸人投^該抗體若以注射法投與’彳經由關節内、靜脈内、肌内、損傷處内、腹膜内或皮下途徑藉著濃注或連續輸注投與。當需要皮内輸送及從移植片持續釋放時，可考慮在疾病或:傷部位局部投與。藉由吸人輸送包括，例如（使用噴霧器）經鼻或口吸入及以氣化噴霧劑形式吸入拮抗劑等。其他投與方式包括眼滴劑；口服製劑，包括丸劑、糖漿、含錠或口'香糖；以及局部製劑諸如洗劑、凝膠、噴霧劑及軟膏。 972il.doc •100- 抗-IL-4R抗體亦可用於體外之方法。舉例言之，將病人他體液與會和IL_4R結合之抗體接觸。可將該抗體_之不溶性基質或固體支持物質結合。 ’ ㈣體宜以含至少—種抗_IL.4R抗體及_或多種盆他成分諸如生理料之㈣合物之形式技與纟發明提供此等供本發明方法使用之包含有效量抗-IL-4R抗體之組合物。該組合物含有呈本文所述形式之任一者之抗_il_4r抗體。該抗體可為整個抗體或其之抗原'结合性片段或以遺傳工程法製作之衍生物。該等組合物可包含，例如，抗體連同緩衝劑、抗氧化劑 (諸如抗壞血酸）、低分子量多肽（諸如具有少於W個胺基酸者）、蛋白質、胺基酸、碳水化合物（諸如葡萄糖、蔗糖或糊精）、螯合劑諸如EDTA、榖胱甘肽、以及其他安定劑及賦形劑。中性緩衝食鹽水或與非特異性企清白蛋白混合之食鹽水為適當稀釋劑之例子。依照適當的工業標準，亦可加入保存劑諸如节醇。可在用適當之賦形劑溶液（例如蔗糖）作為稀釋劑下將該組合物調配成凍乾液。適當之成分在所用劑量及濃度下，對於接受者無毒。可用於醫藥姐合物之成份之其他例子被記載於Remingt〇n，s pharmaceutical

Sciences, 16 Ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1980。醫事人員使用之套組包括抗-IL_4R抗體以及說明如何使用在治療本文討論之病症之任一者之標籤或其他指南。該 9721l.doc -101 - 1356064 套組較佳旬種或以上抗-IL-4R抗體之無菌製劑，其可為7 卜 >Γ iM* . 不之組合物之形式，以及可裝在—或多個小瓶中。一萬丨里及頻率可視投與途徑、所用之特定抗體、待療之疾病之本質及嚴重度、病症為急性或慢性以及病患體^•及般狀況而變化。適當的劑量可藉由相關技藝已知之方法決定，例如以涉及劑量漸增研究之臨床試驗決定。乂抗體了以—足之距離投與例如一或多次歷一段時間。在特定實施例中，可投與該抗體歷至少一個月或更久，例如1 2或3個月，甚至無限期。就治療慢性病症而言，長期/α療通㊉最為有效。不過，就治療急性病症而言，投與短時間，例如i至6個星期，可能已經足夠。一般而言，投與抗體直至病人顯示所選擇之單一指標或複數指標之基礎值獲得醫療上相關程度之改善。本發明之特定實施例涉及將抗體以約1 ng抗體/公斤（病患體重）/日（「1 ng/kg/曰」）至約1 〇. mg/kg/日之劑量投與至病患，該劑量以約500 ng/kg/日至約5 mg/kg/日為更佳，以約5 pg/kg/曰至約2 mg/kg/曰為最佳。在其他實施例中，將抗體投給成人每星期1次’每星期2次，每星期3次或3次以上’以治療IL-4及/或IL-13媒介之疾病、病症或異常，例如本文所揭示之醫療異常。若注射，該抗體之成人有效劑量可在1-20 mg/m2之範圍内，以約5-12 mg/m2為較佳。或者’可投與統一劑量（flat dose)，該量在5-100 mg/劑量之 97211.doc -102- 1356064 範圍内。該統一劑量之一範圍為20_30 mg/劑量。在本發明，之一實施例中，反覆注射25 mgy劑量之統一劑量。若使用，注射以外之投與途徑，可依照標準醫療實務適當地調整劑 ®。給藥法之一例為注射約2〇_3〇 mg之抗_IL-4R_抗體，每生期1至3次歷至少3個星期，惟可能需要治療較長時間以誘生期望程度之改善，就兒科病患（4_17歲）而言，給藥法之例為皮下注射〇.4 mg/kg之抗體，直至最大劑量為25 mg ’每星期投與2至3次。本文所提供方法之特定實施例涵蓋皮下注射〇 5爪2至丨〇謂 mg(以3至5 mg為較佳）之抗_IL_4R抗體，每星期1或2次。另一貫施例為經由肺投與（藉用噴霧器）3 mg或以上之抗體，一星期一次。本文提供之給藥法之例子包含皮下注射抗_IL_4r抗體— 生期一次，劑量為丨·5至3 mg，以治療氣喘、肺類肉瘤症、輕微變化型腎病、自體免疫性葡萄膜炎、喬格-史特勞斯徵候群（Churg-Strauss syndrome)、修格連氏徵候群 (Sjogren’s syndrome)、自體免疫性淋巴增生性徵候群、子癇前症 '自體免疫性溶血性貧血、巴瑞特氏食道症 (Barrett’s esophagus)、格雷氏疾病（Grave，s msease)、川崎症（Kawasaki Disease)及空洞性肺結核。繼續每星期投與抗-IL-4R抗體直至達成期望之結果，例如病患症狀減輕。該治療可於需要時再度施行，或者可投與維持劑量。在另一實施例中，將抗體投與至病患，其投與量及投與期間必須足以使反應正治療中疾病之嚴重度之至少—種指 97211.doc -103- 標改善，較佳為持續改善。可。估反應病心之病態、疾病或病症之程度之各種指標以成疋治療之1及時間是否足夠。此等指標包括，例如，所 w針對之異常之疾病嚴重度、症狀或表徵在臨床上公認之指 ?曰標。在大多數情況，若病患在分開2至4星期之至少二時點才點顯不改善’該改善將被視為持續。改善程度通常由醫師殺，^ ^ ^ 中夹疋，醫師可依據徵候或症狀做決定，亦可使用給病人之調杏列查表诸如為該疾病開發之生活品質調查表來決定。

關於治療良性前列踩肥大之—例，將抗I,抗體投與至病患，投與量及時間在苑痕緩解或完全治癒上有效。可給予維持劑量或於需要時再度施行治療。 IL-4濃度提高與上文討論之許多疾病有關。可以篩選罹患特定異常之病患，以鑑定出具有提高之1；1_4濃度之個別患者，或鑑定出具有提高之TH2-型免疫反應者，藉此鑑定出用抗-IL-4R抗體治療時可獲最大效益之病患。因此，本文提供之治療方法視情況可包含測量病患之IL_4濃度之第一步驟。可將抗-IL-4R抗體投與至IL-4濃度超過正常值之病患。另一選擇或可另加之步驟為在投與對抗一或多種 TH2-型細胞激素之抗體及/或拮抗劑之前預先篩選病.患，以決定病患是否具有提高之TH2-型免疫反應。在用抗-IL-4R抗體治療當時及/或之後，可以監測病患之 IL-4(或其他TH2-型細胞激素）之濃度’以檢測此等細胞激素之濃度是否下降。對於一些異常而言，IL-4濃度提高之發生率以及ΤΗ 1 -型與TH2-塑免疫反應間之平衡可視疾病 9721I.doc -104- 1356064 之階段或疾病之特定形式而定。可使用已知技術測量例如 -在病患血清中之IL-4濃度，以及評估TH2-型免疫反應。在 \ 血液檢體中細胞激素濃度例如可藉由ELISA、LUMINEXtm . 多種細胞激素分析（德州奥斯丁 Luminex公司）或 DELFIA®(PerkinElmer LifeScience, Wallac Oy., Turku, Finland) 測量。本發明之方法及組合物之特定實施例涉及使用抗-IL-4R 抗體以及一或多種另外的IL-4R拮抗劑，例如二或多種本 $ 發明之抗體或抗體衍生物，或者本發明之抗體或抗體衍生物與一或多種其他IL-4R拮抗劑。在另一實施例中，抗-IL-4R抗體可被單獨投與或者與在治療病人所患病症上有用之其他藥劑組合式投與。此等藥劑之例子包括蛋白質類及非蛋白質類藥劑。當多種治療劑被一起投與時，如相關技藝公知者，可調整劑量。「組合式投與」及合併療法不限於同時投與，而是包括「於將至少一種其他治療劑投給病人之治療期間，投與IL-4R抗體至少一次」之治療法。鲁可與IL-4R抗體組合式投與之其他藥劑之例子為其他抗體、細胞激素或細胞激素受體，其係依照待治療之特定病症來選擇。另一選擇為將在治療本文所討論之病症之一上有用之非蛋白質類藥物與IL-4R拮抗劑組合式投與。就治療IgE-媒介之病症而言，可將抗-IL-4R抗體與IgE拮抗劑組合式投與。其之一例為抗-IgE抗體，例如 ’ XOLAIR®(Genentech，South San Francisco，CA)。人類化抗-IgE單株抗體被記載於例如Presta et al.，1993，J. 97211.doc -105· 1356064

Immunol. 151:2623-32及 Adelroth et al.，2000，J· Allergy ** Clin. Immunol. 106:253-59。 . 抗-IL-4R抗體可與IL-5拮抗劑組合式投與，IL-5拮抗劑 . 可為干擾IL-5與IL-5受體結合之分子，諸如抗-IL-5R或抗-IL-5抗體（例如人類或人類化抗-IL-5或抗-IL-5R單株抗體），或受體諸如可溶性人類IL-5受體多肽。曾暗示IL-5在媒介過敏性反應上擔任某種角色。因此，咸認為1L-4R及 IL-5之拮抗劑之投與可治療過敏性反應，包括（但不限於）籲過敏性氣喘。可與IL-4R抗體合用之藥劑之其他例子包括抗-IL-4抗體、IL-4-突變蛋白質、IL-4R之IL-4結合性衍生物（被記載於例如美國專利第5,840,869號、5,599,905號、5,856,296 號、5,767,065 號、5,717,072 號、6,391，581 號、6,548,655 號、6,472,179號及 5,844,099號中）、IL-13之IL-13結合性衍生物、IL-4R及IL-13R之IL-4及/或IL-13結合性嵌合衍生物、IL-13突變蛋白質及CD23之拮抗劑[例如抗-CD23抗體隹諸如IDEC-152TM(加州聖地牙哥市IDEC藥品公司）];磷醯二 S旨酶 4(例如 ROFLUMILAST®， Byk Gulden Pharmaceuticals， Konstanz，Germany)、整合蛋白（例如 R411TM，Roche ’

Nutley，NJ)、TIMs、Gob5、STAT6及白三烯。就治療氣喘而言，IL-4R抗體可與其他抗氣喘藥物諸如吸入型皮質固醇、β-激動劑、白三烯拮抗劑、黃嘌呤類、 % 氟替卡松（fluticasone)、沙美泰羅（salmeterol)、沙丁胺醇 (albuterol)、非類固醇類藥劑諸如色甘酸鈉（cromolyn)以及 97211.doc • 106- 1356064 類似物組合式投與。IL-4R抗體可與其他抗過敏性藥物組，合式投與以治療過敏性反應。 - * 本發明之一實施例係將本發明之抗體或抗體衍生物與氟 · 替卡松及/或沙美泰羅組合式投與以治療異常諸如氣喘。本發明Φζ供包含本發明之抗體或抗體衍生物、氟替卡松及沙美泰羅之組合物。ADVAIR DISKUS® (GlaxoSmithKline， Research Tdangle Park，NC)包含氟替卡松丙酸酯及沙美泰羅羥萘丙酸鹽。ADVAIR DISKUS®以及抗體或抗體衍生籲物可經由任何對治療或預防特定疾病、異常、傷害或病症而言係有效之投與途徑（例如對氣喘而言藉由吸入）輸送。組合療法之另一例包含將本發明之抗體或抗體衍生物與 IL-9拮抗劑組合式投與至罹患氣喘的病人。可使用任何適當的IL-9拮抗劑，諸如IL-9受體（例如其之可溶形式）' 干擾IL-9與細胞表面受體結合之抗體（例如與IL_9或il-9受體多狀結合之坑體）或抑制IL - 9 -誘生之生物活性之另一化合物。IL-9受體包括WO 93/18047及美國專利5,789,237號及癱 5,962,269號所述者，此等專利以參考文獻之方式納入本文。在組合療法之另一實施例中，治療潰瘍性結腸炎之方法包含組合式投與本發明之抗體或抗體衍生物以及至少一種 IL-1拮抗劑。IL-1拮抗劑之例子包括I型il- 1受體、π型IL· 1受體、IL-1受體拮抗劑（IL-IRa)、針對IL-1之拮抗性（封阻 -性）抗體以及針對IL-1受體之拮抗性抗體。可以使用受體之 . 各種形式，諸如片段、變異體及融合物，例如Π型IL-1受 97211.doc -107· 1356064 體之可溶形式，例如美國專利5,350,683號所揭示者，該專利可以參考文獻之方式納入本文。本發明之一方法包含將本發明之抗體或抗體衍生物或者其與IL-13拮抗劑之組合式投與至罹患輕微型變化腎病之病患中’以減少疾病之嚴重度。本發明提供之另一方法為治療各種過敏性發炎病症之方法’包含組合式投與本發明之抗體或抗體衍生物以及IL_ 13结抗劑。病症諸如氣喘、過敏及慢性肺疾病諸如纖維性囊碰及慢性阻塞性肺疾病藉由該方法治療。可使用任何適當的IL-Π拮抗劑，包括（但不限於）IL_n 受體（較佳其之可溶形式）、IL_13受體拮抗劑、對抗IL_13 或IL-13R之抗體、干擾IL-13與IL-13R結合之其他蛋白質以及抑制IL-13-媒介之信號轉導之化合物。il-13受體以及以 IL-13R多肽為其成份之雜二聚物如上文所述。抗1[_4尺抗體’可如上述依其作為IL-13拮抗劑之能力而加以筛選。治療或預防以表皮障壁功能減輕為特徵之方法，該方法包含組合式投與本發明之抗體或抗體衍生物以及一或多種 IL-13拮抗劑。該病症如上所討論。在一實施例中，該病症為氣喘。一特定實施例係將一或多種本發明之抗體或抗體衍生物以及一或多種IL-13结抗劑組合式投與至罹患涉及肺表皮障壁功能或腸表皮障壁功能減低之病症（在此等病症中’ IL-4及IL-13皆擔任某一角色）之病患。il- 13對於肺及腸表皮障壁功能之不良影響可用諸如在實施例3中所述之分析技術確證。亦可參見Zund et al.，1996，J. Biol. 97211.doc -108- 1356064

Chem. 271:7460-64。本發明提供之另一方法包含將本發明之抗體或抗體衍生物及干擾素-γ(ΕΝ-γ)投與至罹患涉及肺表皮障壁功能減低之病患。視情況，該方法尚包含將一或多種IL_丨3拮抗劑組合式投與至病患（亦即組合式投與本發明之抗體或抗體衍生物、IFN-γ及IL-13拮抗劑）。在一實施例中，病患罹患氣喘》本發明之抗體或抗體衍生物、IFN_Y及/4IL_13拮抗劑可經由任何有效治療或預防特定疾病、異常、病症或傷害之輸送方法投與，例如以經由吸入或注射治療氣喘。本發明提供一種治療氣喘之方法，包含將本發明之抗體或抗體衍生物及干擾素-γ投與至罹患氣喘之人類。另一治療氣喘之方法包含將本發明之抗體或抗體衍生物、ΙΙ?Ν_γ 及IL-13拮抗劑投與至罹患氣喘之人類。在一實施例中，將IFN-γ與同時作為IL-4及IL-13之拮抗劑之抗體組合式投與至氣喘病患。此等抗體之例子在本文之他處被說明。如上所述，本發明之單一抗體或抗體衍生物可作為IL_4 拮抗劑及IL-13拮抗劑。該藥劑之一例為一些對抗IL_4Ra 之抗體可同時干擾IL-4及IL-13受體複合物之結合，因為在此等多亞單位受體複合物中共有IL-4Ra成分（如上所述者）。因此，在抑制障壁功能減少之方法中可使用本發明之單一抗體或抗體衍生物。可將本發明之抗體或抗體衍生物與一或多種白三稀受體拮抗劑組合式投與’以治療諸如過敏性發炎疾病（例如氣喘及過敏症）之異常。白三烯受體拮抗劑之例子包括（但非 97211.doc -109· 1356064 限於）蒙太司特（montelukast)(例如 SINGULAIR®，Merck & Co.，Whitehouse，NJ)、普舍司特（pranlukast)(例如 ΟΝΟΝ®，Ono Pharmaceuticals, Osaka, Japan)及札佛司特 (zafirlukast)(例如 ACCOLATE®，AstraZeneca，Wilmington, DE)。作為5-脂質氧化酶抑制劑之藥物可與IL-4R拮抗劑組合式投與以治療氣喘。本發明提供之方法包含將本發明之抗體或抗體衍生物以及一或多種之下列藥劑投給喬格-史特勞斯徵候群（Churg-Strauss syndrome)患者：IL-4R拮抗劑、IL-5括抗劑、IL-13 拮抗劑及IgE拮抗劑。該方法之一例涉及將本發明之抗體或抗體衍生物及IL-5拮抗劑投給喬格-史特勞斯徵候群 (Churg-Strauss syndrome)患者。在另一實施例中’將本發明之抗體或抗體衍生物以及拮抗劑組合式投與給病人。在又一實施例中，將本發明之抗體或抗體衍生物以及 IL-13拮抗劑紕合式投與給病人。激素鬆弛素（relaxin)可與本發明之抗體或抗體衍生物組合式投與，以治療硬皮症（全身性硬化症）、體質特異性肺纖維化或任何以肺纖維化（諸如上文所討論之涉及肺部纖維化之病症）為特徵之其他異常。較佳使用重組人類鬆弛素治療人類。治療良性前列腺肥大之方法包含組合式投與本發明之抗體或抗體衍生物以及一或多種其他消炎藥劑。抑制發炎之藥劑之例子包括腫瘤壞死因子（TNF)拮抗劑及IL-17拮抗劑0 97211.doc • 110· 1356064 可使用任何適當的IL-17拮抗劑，包括（但不限於）IL_17 受體（例如其之可溶形式）、IL-17受體拮抗劑、對抗IL-17 或IL-17受體之抗體、其他會干擾受體結合之蛋白質以及會抑制IL-17媒介之信號轉導之化合物。IL· i 7 受體’包括其之可溶形式及其之寡聚物，被記載於w〇 96/29408中’該專利申請案以參考文獻之方式納入本文。本發明提供之另一方法包含投與IL-17拮抗劑，以治療罹患良性前列腺肥大之病患。同樣地，可以使用任何適當之TNF拮抗劑，包括（但不限於）TNF受體（較佳其之可溶形式）、包含TNF受體（或包含 TNF受體之TNF-結合部分）之融合蛋白質、TNF受體拮抗劑、對抗TNF或TNF受體之抗體、其他干擾TNF與TNF受體結合之蛋白質、以及抑制TNF-媒介之信號轉導之化合物。TNF抑制劑之另一例子為藥物沙利多邁（thalidomide) 及己酮可可鹼（pentoxyfylline)。以使用被稱為p75或p80 TNF-R之TNF受體蛋白質為較佳。較佳之TNF拮抗劑為二聚物形式之可溶性人類TNF受體（sTNF-R)，諸如sTNF-R/Fc融合蛋白質之二聚物。一該二聚物為恩利 (etanercept)(ENBREL® » Immunex Corporation，Seattle， WA)。p75/p80 TNF-R(包括可溶性片段及其之其他形式）被記載於WO 91/03553中，該專利申請案以參考文獻之方式被納入本文。所以，在本發明之一具體例中，組合式投與本發明之抗體或抗體衍生物以及TNF拮抗劑以治療任何不期望之IL- 97211.doc -Ill - 1356064 4R媒介且TNF_誘生之免疫反應參與之病症’諸如發炎。· 本發明提供之一方法包含將本發明之抗體或抗體衍生物及·. TNF拮抗劑組合式投與至罹患發炎性腸疾病之病患、克隆· 氏症或潰瘍性结腸炎。其他實施例係關於將本發明之抗體或抗體組合物及TNF拮抗劑組合式投與至罹患川崎症、自體免疫性溶血性貧金、自體免疫性葡萄膜視網膜炎、自體免疫性淋巴增生性徵候群、修格連氏徵候群（Sj〇gren,s syndrome)、慢性倦怠徵候群或諸如雙氯滅痛（dicl〇fenac)籲等藥物誘生之肝毒性。本發明提供之另一方法包含將本發明之抗體或抗體衍生物與TNF拮抗劑組合式投與至發生子癇前症之懷孕婦女。在一實施例中，於懷孕期間持續投與本發明TNF-拮抗劑之抗體或抗體衍生物。恩利（etanercept)之適當劑量隨待治療之疾病之本質、疾病嚴重度、病人之體型（例如成人或小孩）以及在相關技藝中公認之其他因子而變。在本發明提供之方法之一實施例籲中，每星期皮下注射ENBREL®二次，每次劑量為！至25 mg。孩童劑量之一實施例為〇·4 mg/kg。本發明提供之特定方法包含將本發明之抗體或抗體衍生物與ENBREL®姐合式投與至罹患自體免疫性淋巴增生性徵候群或修格連氏徵候群之病患，其中皮下注射ENBREL®，劑量為1至25 mg。為了治療移植體對宿主疾病（「GVHD」），組合式投與 “ « 本發明之抗體或抗體衍生物以及至少一種下列藥劑：TNF 拮抗劑、IL-1拮抗劑 '類固醇或皮質固醇類。在一實施例 972U.doc -112 - 1356064 中，TNF抑制劑為ENBREL®。在另一實施例中，IL_丨拮抗劑為II型IL-1受體之可溶形式，例如在美國專利5 35〇 683 號中所述者《在另一實施例中，GVHD與骨髓移植相關。在屋制對抗移植細胞、組織及/或同種異體抗原 (alloantigen)之免疫反應之方法中，可將本發明之抗體或抗體衍生物與至少一種上述藥劑合用。許夕細胞激素拮抗劑及其他藥劑/藥物由於在治療特定療法之組合療法（例如與本發明之抗體或抗體衍生物組合扠與）中有用，所以被揭示於本文中。應了解該等拮抗劑 '藥劑、或藥物在治療此等疾病上亦可以單一藥劑使用。亦應了解涉及投與特定細胞激素之拮抗劑以治療疾病之方法之内备，除非另有指定，涵蓋投與一類型之拮抗劑，亦涵蓋投與該細胞激素之二或多種不同之拮抗劑。實施例1 :單株抗體該實施例示範製備識別人類IL-4受體之單株抗體之方法》可使用IL - 4受體多肽作為藉由習知技術（例如美國專利第 5,599,905號）產生單株抗體時之免疫原，該專利之全文以參考文獻之方式納入本文。咸認為可使用各種形式之多肽作為免疫原；該各種形式之多肽例如為全長蛋白質、其之片段、其之融合蛋白質諸如卜融合物、在細胞表面上表現重組抗體之細胞等。。法之例摘要於下將在弗氏完全佐劑中乳化之1乙_ . 4R免疫原皮下注射入路易士鼠中，注射量為1〇至〜。 9721I.doc •113· 1356064 一星期後，經免疫之動物以在弗氏不完全佐劑中乳化之另 . 一免疫原追加免疫，之後每三星期追加一次。藉由後眼窩二放血或尾端切割定期抽取血清檢體，以供藉由點_吸潰分 · 析法、ELISA(酶連結免疫吸附分析法表現性細胞之萃取物之結合之抑制而測試。檢測適當抗體力價後，對於陽性動物最後一次由靜脈注射在食鹽水中之抗原。3至4日後，將動物犧牲，收取脾細胞以及與鼠骨髓瘤細胞系AG8653融合。將生成之融合瘤細胞平面接種於籲多個微滴定盤之HAT選擇性培養基（次黃嗓呤、胺甲蝶呤及胸腺嘧啶）中，以抑制非融合細胞、骨髓瘤融合細胞及脾細胞融合細胞之增殖。如此生成之融合瘤純系就其與IL-4R之反應性來篩選。融合瘤上清液之初始篩選係利用部分純化之⑴1^-4受體之抗體捕捉及結合。篩選》去中為陽性之雜合瘤藉由經修飾之抗體捕捉來測試’以檢測出產生封阻性抗體之融合瘤田胞系因此檢測出可分泌能抑制125i-iL-4與表現IL-4R _ 之細胞結合之單株抗體之雜合瘤。然後將該融合瘤注射入裸鼠之腹臈腔内，以產生含高濃度（>1 mg/ml)抗-IL-4R單株抗體之腹水。生成之單株抗體可藉由硫酸敍沉殿，繼而藉由凝膠排阻層析及/或以抗體與蛋白質G之結合為基本之親和層析而純化。在基因轉移小鼠中產生人類抗體之方法在本技藝中已被揭不且為眾所週知。彳彳 ’ 例如參見Chen et al.，1993，Internat.

Immunol. 5.647-56 ; Chen et al·，1993, EMBO J. 12:821-30; 9721l.doc •114· 1356064

Choi et al., 1993, Nature Genetics 4:117-23 '» Fishwild et al·，1996，Nature Biotech· 14: 845-51 ; Harding et al_， 1995，Annals New York Acad. Sci ; Lonberg et al.,1994, Nature 368:856-59 ； Lonberg, 1994, Handbook Exper. I Pharmacol. 113:49-101 ； Lonberg et al., 1995, Internal Rev. Immunol. 13:65-93 '» Morrison, S, 1994, Nature 368:812-13 ; Neuberger, 1996, Nature Biotech. 14:826 ； Taylor et al.，1992, Nuc. Acids Res. 20:6287-95 ； Taylor et al.,1994, Internat. Immunol. 6:579-91 ； Tomizuka et al., 1997, Nature

Genetics 16:133-43; Tomizuka et al., 2000, Proc. Nat. Acad. Sci. USA 97:722-27 ； Tuaillon et al., 1993, Proc. Nat. Acad.

Sci. USA 90:3720-24; Tuaillon et al” 1994, J. Immunol. 152:2912-20 ； Russel et al., 2000, Infection and Immunity April 2000: 1820-26 ； Gallo et al., 2000, Eur. J. Immunol. 30:534-40 ； Davis et al.，1999，Cancer Metastasis Rev. 18:421-25 ； Green, 1999, J. Immunol. Methods 23 1:1 1-23 ； Jakobovits, 1998, Advanced Drug Delivery Rev. 3 1:33-42 ； Green et al., 1998, J. Exp. Med. 188:483-95 ； Jakobovits, 1998, Exp. Opin. Invest. Drugs 7:607-14 ; Tsuda et al., 1997, Genomics 42:413-21 ; Mendez et al.，1997, Nature Genetics 15:146-56 ； Jakobovits, 1996，Weir's Handbook of

Experimental Immunology, The Intergrated Immune System Vol. IV，194.1-194.7 ； Mendez et al., 1995, Genomics 26:294-307 ; Jakobovits, 1994, Current Biol. 4:761-63; 97211.doc -115 - 1356064

Arbones，1994，Immunity 1:247-60 ; Green et al.，1994, Nature Genetics 7:13-21 ; Jakobovits et al·，1993，Nature 362:255-58 i Jakobovits et al., 1993, Proc. Nat. Acad. Sci. USA 90:2551-55 〇實施例2 :評估封阻活性之分析本實施例係示範說明可被用於鑑定能減少CD23之IL-4及 /或IL-13-依存性表現之抗體之分析。該分析係基於IL-4及 IL-13二者在人類B細胞表面上具有增加活化-相關表面抗原CD23之表現之能力。對抗人類IL-4R(huIL-4R)之抗體以融合瘤上清液之形式或以純化蛋白質之形式被測試。於加至培養物之前，將抗體對著培養基（RPMI 1640 + 10%熱去活化牛胎血清）進行緩衝液交換，該交換係藉由離心及使用截除點為10 kDa 之Centricon過滤裝置（Amicon)進行。將人類周圍血液B細胞如先前所述純化（Morris et al.， 1999，J. Biol. Chem. 274:418-23)。將在培養基中之B細胞 (3 x 105/孔）置於96-孔圓底微量滴定m中，並與所示最終濃度之受試抗體於室溫預培育30分鐘。然後將重組人類 IL-4或IL-1 3以所示濃度加至培養物中，並將該細胞在含 5%C02之濕化大氣中於37°C培養20至24小時。於培養期終結時，將細胞在96-孔培養孤中以PBS + 0.02% NaN3沖洗一次並再懸浮於封阻緩衝液（2%正常兔子血清 +在PBS中之 1% 正常山羊血清 + NaN3)中。然後將藻紅素 (phycoerythrin，PE)-結合之 CD23 單株抗體（mAb)或 PE-結 9721l.doc -116· 1356064 合之異構型對照mAb(二者皆得自Pharmingen)加至細胞中且最終稀釋度為1 : 10。將細胞於4°C培育30分鐘，用PBS + NaN3 沖洗 3 次及在 FacScan (Becton Dickinson)上測定 CD23表現。包括作為陰性對照組之用融合瘤生長培養基培養之細胞或與異構型-相配之非封阻性人類抗-hIL-4R抗體。使用先前顯示會封阻hIL-4及hIL-13二者之結合及功能之抗-huIL-4R 鼠 mAb(MAB 230，R&D Systems，Minneapolis, MN)，以作為中和IL-4及IL-13誘生之CD23之陽性對照組。實施例3 :測量障壁功能損失之分析該實施例提供評估IL-4拮抗劑抑制IL-4誘生之表皮組織損傷及表皮障壁功能減損之能力之方法。本發明之一態樣為提供一種使用IL-4拮抗劑抑制IL-4誘生之表皮（非限定性地包括肺表皮或腸表皮）損傷之方法。表皮損傷會造成障壁功能減損。用於評估IL-4拮抗劑抑制 IL-4誘生之表皮損傷及表皮障壁功能減損之技術之非限定實施例述於下文。可用於製備表皮之試管模型（表皮障壁）之細胞為已知。舉例言之，Calu-3人類肺表皮細胞適合用於障壁功能研究 (Ahdieh et al., 2001， Am. J. Physiol. Cell Physiol. 281:C2029-38)。另一適當之細胞系為被命名為T84之人類腸表皮細胞系。如 Madara et al.，1985，J. Cell Biol.， 101:2124-33 » Madara et al., 1989, J. Clin. Invest. 83:724-27 以及 Youakim et al.， 199.9，Am. J. Physiol. 276 97211.doc -117- 1356064 (Gastrointest. Liver Physiol. 39):G1279-88所述，在能於通透性支持物上形成單層表皮細胞之條件下培養T48細胞。如此生成之表皮單層類似腸表皮障壁。對於培養得之表皮，測試可用於區別完整表皮與受傷表皮之性質（例如對於被動穿表皮離子流之耐性）。該分析之一為測定一特定放射線標記之化合物是否能夠穿過表皮單層。該放射線標記之化合物穿過單層而滲漏顯示該障壁可以通透而非完整。舉例言之，可以使用甘露醇通量分析，亦即藉由評估經放射線標記之甘露醇（例如Η3甘露醇）通過皁層之移動（見Madara and Stafford，同上文）來檢測表皮損傷。 3平估表皮狀況之方法之其他例子包括照影法（例如在 Madara and Stafford，上文中所討論者）及穿表皮電耐性測 1 (例如在Youakim and Ahdieh，上文令所討論者）。美國專㈣M33,688號（「·688專利」）（其之全文以參考文獻之方式納入本文）亦揭示可用於障壁通透性研究之方法；例如參見專利之實施例丨及4。在能使單層顯示穿表皮電耐性之條件下培養人類氣管表皮細胞。使用伏特計測定穿表皮耐性（顯示完整之障壁）。物質或治療對於表皮單層之如響藉由將單層暴露於物質或治療而評估，然後測量在 ussing室中之離子輸送活性（第8搁第的以行）。可使用從其他類型細胞（例如來自人類纖維性囊腫病患之支氣管表皮細胞）產生之單層#行相似之方法（見，_專利實施例4，第11欄）。 97211.doc -118- 1356064 因此一物質或治療抑制IL-4誘生之表皮層障壁功能咸低之能力可藉由將表皮層暴露於IL-4及暴露於該物f或治療’分析表皮層之狀況，以及將該表皮層之狀況與於不存在該物質或治療下暴露於IL-4之表皮層之狀況加以比較而評估。暴露於該物質或治療之表皮層相對於未暴露於該物質或治療之表皮層若顯示改良，表示該物質或治療能抑制 IL-4誘生之表皮組織損傷及表皮障壁功能減損。在一該測定中’如上所述’單層T84細胞作為腸表皮障壁之試管内模型。曾發現加至極性化表皮細胞之基底膜側之IL-4在治療之48至72小時内會減少障壁功能7〇%。當由細胞外區域組成之可溶性IL-4受體多肽與IL_4同時加入時，可以防止障壁功能之減少以及障壁功能維持在與未處理細胞（對照細胞）相同之位準。亦對衍生自肺表皮細胞之單層進行該分析法，該單層係作為肺表皮障壁之試管内模型。曾發現加至極性化肺表皮細胞之基底膜側之IL-4在治療之48至72小時内會減少障壁功能50〇/〇。當IL-4受體多肽與IL_4同時加入時，可以防止障壁功旎之減少以及障壁功能維持在與未處理細胞（對照細胞）相同之位準。實施例4 :測量結合活性之分析本只把例知_供評估抗-IL-4R抗體之結合活性之方法。使用固相氣胺-τ類似物（I0D0GEN®，pieixe，St

Louis’MO)或其適當之放射性標記技術，將抗_人類IL_ 4R(或其之變異體、衍生物或片段）以I25〗予以放射性標 972ll.doc •119· 1356064 記，比活性為約3 x 1016 cpm/mmol。藉由與對應之未標記蛋白質比較結合抑制度或其他生物性質抑制度來評估生物活性之減損。另一選擇為可以測臺抗-huIL-4R(或其之變異體或片段）對於經放射性標記之IL-4結合之抑制度。對於表現IL-4R之細胞之平衡結合度分析大體如idzerda，et al 1990, J. Exp· Med. 171:3 861-73 所述，在 96 孔微量滴定盤中進行。簡言之，將經放射性標記之蛋白質以補充有〇 5 mg/ml人類IgG及5%人類血清之結合用培養基（rpmi 1640 2.5% BSA，20 mM HEPES，0.02% 疊氮化鈉，pH 7 2)系列稀釋，將該系列稀釋液與細胞（2.5 X 106/孔）於4°C培育2小日守，其中總體積為15 0微升。游離型及結合型之經放射性標記之探針藉由通過苯二甲酸酯-油分離混合物之微量離心而分離以及以γ-計數器計數。抑制分析係於存在或不存在潛在抑制劑下使用恆定濃度為〇·5 ηΜ之經放射性標記之蛋白質。於存在100_倍過量之未標記蛋白質下測定非特異性結合。如 Dower et al，1984,】Immun〇1 132:751 所述，將依據單部位競爭性抑制模型之理論曲線與數據擬合。依據方程式i(%)=[100 Ki(I)/[1+Ka(L)+Ki⑴]計算抑制百分率，其中1為抑制劑之莫耳濃度，L為經放射性標記之蛋白質之莫耳濃度，以及Ki及Ka分別為抑制劑及蛋白質之常數。等溫平衡結合度及競爭性抑制度亦可在包覆有il_4r/Fc 或對照FC蛋白質之96孔微量滴定板中測定，其中經由山羊抗人類Fc多株抗體（或其他適當的抗·人類Fc抗體）來捕 972il.doc 1356064 捉。簡言之，將微量滴定板與5pg/ml之抗-人類Fc在PBS 中於4°C培育，用PBS沖洗二次，然後與IL-4R/FC或對照Fc 蛋白質在PBS/0.01% Tween 20中於4°C培育約12小時及再次用PBS沖洗2次。等溫平衡結合度使用在結合培養基中之 125I-標記結合蛋白質之系列稀釋液，以及抑制測定如上述係於存在或不存在未經標記之潛在競爭性抑制劑下使用恆定濃度為0.5 nM之經125I-標記之抗-huIL-4R。於4°C培育2 小時後，將該板用PBS沖洗2次，以及用50 mM檸檬酸鹽 (pH 3.0)或SDS處理釋出特異性結合之蛋白質，以及以γ-計數器測量釋出之經125Ι-標記之抗-huIL-4R。數據如Dower etal.，上文所述處理。結合活性亦可藉由使用BIACORE®生物感測器 (BIAcore International AB，Uppsala, Sweden)以表面電聚共振評估。簡言之，使用標準胺偶合法及依照廠商指示之試劑將γ-鏈特異性山羊-抗人類IgG(或其他適當的γ-鏈特異性抗體；GHFC)與生物感測器晶片共價性偶合。將抗-huIL-4R或對照抗體注射在固定之GHFC上，以及將變化量之IL-4R各自獨立地通過以GHFC包覆之晶片（陰性對照組）以及以抗-huIL-4R包覆之晶片。晶片之再生係用一次.尚達 10 μΐ量之100 mM磷酸以1 0 μΐ/分鐘之頻率沖洗而達成。所有結合均係在 HBS (10 mM HEPES，0.15 M NaCl，3.4 mM EDTA，0·02%NaN3，0·005%界面活性劑P20，pH7.4)中進行。實施例5 : IL_4受體結合性抗體 97211.doc -121 - 1356064 本實施例係提供會與huIL-4R結合之抗體及抗體衍生物之重鏈及輕鏈之可變區域之胺基酸序列及編碼彼等之核# ' 酸序列。包含L1之輕鏈可變區及H1之重鏈可變區之全長人類

IgG4抗體被記載在WO 01/92340(公開日：2001年12月6曰）之實施例8中，該專利申請案之全文以參考文獻方式納入本文。重鏈H1之可變區藉由聚合酶連鎖反應（PCR)從產生抗& # L1H1之融合瘤細胞系進行cDNA選殖而單離，在該PCR* 使用下列寡核苷酸作為引子： GTCGACGCCGCCACCATGGA (A/G) TT (G/T) GGGCTGAGCTGG (序列編號：70)

Sal I 簡併；與VH3030互補 CTTGACCAGGCAGCCCAGGGC (序列编號：71) 與huIgrG互補，Apa J部位之端將擴增產物以5α/ I片段插入pGem-T easy ^ (Promega，Madison，WI)。為了增進斷裂，原本的HI前導序列以 VH3-30 前導序列取代（Matsuda et al·，1993，Nature Genetics 3:88-94)。使用HI之重鏈可變區域之以寡核苷酸為本之致突變創建如圖3所示之重鏈可變區域序列H2-H14。此等重鏈可變區域序列之各個，在與L1之輕鏈可變區域序列組合時，顯示 _ 在酶-連結免疫吸附分析（ELISA)中會與IL-4受體a結合。 . 天然人類輕鏈可變區域基因藉由PCR從人類B細胞產生 97211.doc •122· 1356064 以及被用於構築可變區cDNA基因庫。從該基因庫中篩選 · 出當與重鏈可變區H1組合時可與人類IL-4受體結合者。使 ' 用該方法鑑定出輕鏈可變區L2-L6。彼等之核苷酸及胺基 -酸序列被分別顯示於圖2及圖3中，其中各鏈之CDR區以粗體字表示以及在L1中係以加底線表示。框架（FR)區亦被示出。為了選殖人類κ值定區，使用RNeasy Mini Kit (Qiagen， Valencia ’ CA)從表現人類K輕鏈之鼠融合瘤細胞系單離出 φ RNA。該RNA用第一股cDNA合成套組（Amersham Pharmacia Biotech, Piscataway，NJ)予以反錄。藉由 PCR從為BswI/Not I組合體（cassette)之cDNA擴增人類κ輕鏈核酸，其中使用下列引子： ATCAAACGTACGGTGGCTGCACCATCTGTCTTCATC (序列編號：72)

BsiW I

GTTTAAA.CGCGGCCGCGGATCCTAACACTCTCCCCTGTTGAAGCTCTTT (序列編號：7 3) Not I { 將輕鏈可變區L1及L2各自獨立地與人類κ輕鏈恆定區如下述接合：使用Vklll前導序列將編碼L1之輕鏈可變區之 A/7ie WI DNA片段與編碼人類κ輕鏈恆定區之召以· WI/iVoi I DNA片段同時分段選殖入pDC409哺乳動物表現載體（記載於 Giri et al·，1994，EMBO J. 13: 2822-30 及美國專利第6,642,358號中’彼等之全文以參考文獻之方式納入本文）中。該Vklll前導序列係藉由以pcR方式擴增 Kozak(Kozak，1989，J Cell Biol. 108: 229-41)及 Vklll A27 9721i.doc -123- 1356064 (Straubinger et al.，1988, J Mol Bi〇l. 199: 23-34)前導序列-而構築成心/ I/A/7ie I組合體，在該PCR中使用下列寡核苷 ’ 酸作為引子：

GTCGACGCCGCCACCATGGAAACCCCAGCGCAGCTTCTCTTCCTCCTGCTACTCTGGCTCCCAGA

Sal I TACCGCTAGCGAAATTGTGTTGACGCAGTCTCCA (序歹编號：74) TGGAGACTGCGTCAACACAATTTCGCTAGCGGTATCTGGGAGCCAGAGTAGCAGGAGGAAGAGAAG CTGCGCTGGGGTTTCCATGGTGGCGGCGTCGAC (序列编號：7 5)

Sal I

I 在天然Vklll A27前導序列中最後6個核苷酸以編碼iWie I . 部位之核苷酸取代。此造成胺基酸從酥胺酸改變為甘胺酸以及從丙胺酸改變為絲胺酸，但不影響斷裂部位。將各重鏈可變區HI、H4及H14如下述與人類IgG4恆定區接合：使用VH5a前導序列，將編碼H1之重鏈可變區之*Sfl/ l/Αρα I DNA片段及編碼人類IgG4恆定區之乂;I/A/W I DNA片段（序列編號：77)同時插入以Sal I/Not I消化之哺乳動物表現載體pDC409 (記載於Giri et al.，1994，EMBO J. ^ 13: 2822-30)中，其中該VH5a前導序列之3’端被修改成編碼iVAe I部位：

ATGGGGTCAACCGCCATCCTTGGCCTCCTCCTGGCTGTTCTCCAAGGAGTCGCTAGC

(序列編號：76) Whe I 該修改之結果為最後二胺基酸為丙胺酸及絲胺酸，而野生型VH5a之最後2個胺基酸為半胱胺酸及丙胺酸。將定點突變用於編碼H4-IgG4之構築體，以製造包含H12及H13重鏈可變區之構築體。H1-H14之核苷酸及胺基酸序列被分別 972tl.doc -124- 1356064 示於圖2及圖3中，其中各鏈之CDR區以粗體表示以及在HI 中係加底線。亦示出框架（FR)區。包含可變區域組合L1H1，L1H2，L1H3，L1H4， L1H5 ， L1H6 ， L1H7 ， L1H8 ， L1H9 ， L1H10 ， L1H11 ， L2H1，L2H2，L2H3，L2H4，L2H5，L2H6，L2H7， L2H8，L2H9，L2H10，L2H11 ，L2H12，L2H13， L2H14，L3H1，L4H1，L5H1及L6H1之抗體及/或抗體衍生物用生物化學結合分析及/或實施例2之方法測試，以及發現會與IL-4受體結合。實施例6:抗體之物種及序列特異性本實施例提供一種測定會與IL-4受體結合之抗體之物種及序列特異性之方法。可以使用螢光激活細胞分類儀（FACS)結合分析評估抗-IL-4受體抗體之物種及/或序列特異性。IL-4受體之細胞外區域包含細胞激素受體區域（區域I)及第III型纖維黏連蛋白 (fibronectin)區域（區域 II)(Hage et al·，1999, Cell 97:271-81)。包含人類IL-4受體區域I及/或II、鼠IL-4受體區域I及/ 或II、人類及鼠IL-4受體區域I及II之組合、或者人類或鼠 IL-4受體區域I及/或II之片段之構築體係以C-終端與鷄卻白素（avidin)以可譯碼方式融合（in-frame fusion)之形式被表現。（鼠 IL-4受體序列例如由 Schulte et al., 1997, J. Exp. Med. 186: 1419-29 ； Wrighton et al., 1992, Growth Factors 6:103-18 > Harada et al., 1990, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 87: 857-61，Mosley et al” 1989, Cell 59:335-48)提 97211.doc -125 - 1356064 供。將融合蛋白質表現載體個別暫時轉染入293T細胞中。 -將未純化之條件培養基（conditioned media，意指細胞培養 \ 上清液經一定步驟處理過者）作為融合蛋白質之來源。藉 . 由生物素-包覆之珠粒從溶液中捕捉IL-4受體構築體之卵白素標籤。使用以FITC標記之抗-卵白素抗體檢測融合構築體之卵白素部份。將抗-IL-4受體抗體與以生物素捕捉之 IL-4受體構築體一起培育。使用以FITC標記之鼠F(ab')2抗-人類IgG作為檢測用之二次抗體。珠粒-抗體混合物在 φ Becton Dickinson Bioscience FACScan (BD ，Franklin Lakes, NJ)上進行FACS分析。使用上述方法，發現數種本文所述之抗-IL-4受體抗體與包含人類IL-4受體之區域I及II之構築體結合良好，但不會與包含鼠IL-4受體之區域I及II之構築體結合。此等抗體與包含人類IL-4受體之區域1(但不包含區域II)之構築體結合微弱，與包含人類IL-4受體之區域11(但不包含區域I)之構築體則完全無法結合。另發現此等抗體與包含人類IL-4受鲁體之區域I及鼠IL-4受體之區域II之構築體結合良好。上述實施例，不論是實作性或預測性，皆非用於設限，而係舉例說明本發明之特定具體例。本文所引用之所有文獻皆係以其全文作為參考文獻之方式納入本文。【圖式簡單說明】圖1A-C呈現人類IL-4受體oc cDNA之編碼區之核苷酸序 · 列。亦呈現cDNA所編碼之胺基酸序列。將cDNA純系從衍生自人類T細胞系T22之cDNA庫單離。被編碼之蛋白質包 972U.doc -126- 1356064 含（從N-端至C-端）N-終端信號肽，繼而為細胞外區域、跨膜區（下方被劃線）及細胞質區域，其在PCT公開公報WO 01/92340 A3中被進一步討論。圖1A至1C之核苷酸序列及胺.基酸序列亦被分別列於序列編號：1及2中。圖2A至2D呈現编碼L1 (序列編號：3)、L2(序列編號： 5) ' L3(序列編號：7)、L4(序列編號：9)、L5(序列編號： 11)及L6(序列編號：13)之輕鏈可變區之聚核苷酸序列，以及編碼H1 (序列編號·· 15)、H2(序列編號：17)、H3(序列編號：19)、H4(序列編號：21)、H5(序列編號：23)、 H6(序列編號：25)、H7(序列編號：27)、H8(序列編號： 29)、H9(序列編號：31)、H10(序列編號：33)、H11 (序列編號：35)、H12(序列編號：37)、H13(序列編號：39)、 H14(序列編號：41)、H15(序列編號：43)、H16(序列編號：45)、H17(序列編號：47)、H18(序列編號：49)、 H19(序列編號：51)、H20(序列編號：53)、H21(序列編號：55)、H22(序列編號：57)、H23(序列編號：59)及 H24(序列編號：61)之重鏈可變區之聚核苷酸序列。該序列以一字母核苷酸簡稱表示。對應於CDR1、CDR2及 CDR3區之序列在各序列中以粗體字表示，在L1及H1中下方被劃線。對應於FR1、FR2、FR3及FR4之序列用普通字體表示。圖3呈現L1(序列編號：4)、L2(序列編號：6)、L3(序列編號：8)、L4(序列編號：1〇)、L5(序列編號：12)及L6(序列編號：14)之輕鍵可變區之胺基酸序列，編碼Η1 (序列編 972ll.doc -127- 1356064 號：16)、H2(序列編號：18)、H3(序列編號：20)、H4(序列編號：22)、H5(序列編號：24)、H6(序列編號：26)、 H7(序列編號：28)、H8(序列編號：30)、H9(序列編號： 32)、H10(序列編號：34)、H11 (序列編號：36)、H12(序列編號：38)、H13(序列編號：40)、H14(序列編號：42)、 H15(序列編號：44)、H16(序列編號：46)、H17(序列编號：48)、H18(序列編號：50)、H19(序列編號：52)、 H20(序列編號：54)、H21(序列編號：56)、H22(序列編號：58)、H23(序列編號：60)及H24(序列編號：62)之重鏈可變區之胺基酸序列。該序列以一字母胺基酸簡稱表示。其他輕鏈及重鏈可變序列在與L1或H1相同之殘基處以破折號表示，在與L1或H1不同處以適當的一字母胺基酸簡寫表示。對應於CDR1、CDR2及CDR3區之序列在各序列中以粗體字表示，在L1及H1中下方被劃線。對應於FR1、 FR2、FR3及FR4之序列用普通字體表示。 97211.doc 128 - 1356064 序列表 <110>美商艾蒙尼克公司 <12〇>與介白素4受體結合之抗體 <140> TW 093133677 <141> 2004-11-04 <150> 60/518,166 <151> 2003-11-07 <160> 77 <170> Patentln version 3.2 <210> 1 <211> 2475 <212> DNA<213>人類

<220> <221> CDS <222> (1) . . (2475) <400> 1 atg ggg tgg ctt tgc tct ggg etc ctg ttc cct gtg age tgc ctg gtc Met Gly Trp Leu Cys Ser Gly Leu Leu Phe Pro Val Ser Cys Leu Val 1 5 10 15 ctg ctg cag gtg gca age tct ggg aac atg aag gtc ttg cag gag ccc Leu' Leu Gin Val Ala Ser Ser Gly Asn Met Lys Val Leu Gin Glu Pro 20 25 3〇 acc tgc gtc tcc gac tac atg age ate tct act tgc gag tgg aag atg Thr Cys Val Ser Asp Tyr Met Ser lie Ser Thr Cys Glu Trp Lys Met 35 40 45 aat ggt ccc acc.aat tgc age acc gag etc ege ctg ttg tac cag ctg Asn Gly Pro Thr Asn Cys Ser Thr Glu Leu Arg Leu Leu Tyr Gin Leu 50 55 60 gtt ttt ctg etc tcc gaa gcc cac aeg tgt ate cct gag aac aac gga Val Phe Leu Leu Ser Glu Ala His Thr Cys lie Pro Glu Asn Asn Gly 65 70 75 80 ggc geg ggg tgc gtg tgc cac ctg etc atg gat gac gtg gtc agt geg Gly Ala Gly Cys Val Cys His Leu Leu Met Asp Asp Val Val Ser Ala 85 90 95 gat aac tat aca ctg gac ctg tgg get ggg cag cag ctg ctg tgg aag Asp Asn Tyr Thr Leu Asp Leu Trp Ala Gly Gin Gin Leu Leu Trp Lys 100 . 105 no 48 96 144 192 240 288

97211.doc 336 1356064 ggc tcc ttc aag ccc age gag cat gtg aaa ccc agg gee cca gga aac 384

Gly Ser Phe Lys Pro Ser Glu His Val Lys Pro Arg Ala Pro Gly Asn 115 120 125 ctg aca gtt cac acc aat gtc tec gac act ctg ctg ctg acc tgg age 432

Leu Thr Val His Thr Asn Val Ser Asp Thr Leu Leu Leu Thr Trp Ser 130 135 140 aac ccg tat ccc cct gac aat tac ctg tat aat cat etc acc tat gca 480

Asn Pro Tyr Pro Pro Asp Asn Tyr Leu Tyr Asn His Leu Thr Tyr Ala 145 150 155 160 gtc aac att tgg agt gaa aac gac ccg gca gat ttc aga ate tat aac 528

Val Asn lie Trp Ser Glu Asn Asp Pro Ala Asp Phe Arg lie Tyr Asn 165 170 175 gtg acc tac eta gaa ccc tec etc ege ate gca gee age acc ctg aag 576

Val Thr Tyr Leu Glu Pro Ser Leu Arg lie Ala Ala Ser Thr Leu Lys 180 185 190 tet ggg att tec tac agg gca egg gtg agg gee tgg get cag tgc tat 624

Ser Gly lie Ser Tyr Arg Ala Arg Val Arg Ala Trp Ala Gin Cys Tyr 195 200 205 aac acc acc tgg agt gag tgg age ccc age acc aag tgg cac aac tec 672

Asn Thr Thr Trp Ser Glu Trp Ser Pro Ser Thr Lys Trp His Asn Ser 210 215 220 tac agg gag ccc ttc gag cag cac etc ctg ctg ggc gtc age gtt tec 720

Tyr Arg Glu Pro Phe Glu Gin His Leu Leu Leu Gly Val Ser Val Ser 225 230 235 240 tgc att gtc ate ctg gee gtc tgc ctg ttg tgc tat gtc age ate acc 768

Cys 工le Val lie Leu Ala Val Cys Leu Leu Cys Tyr Val Ser lie Thr 245 250 255 aag att aag aaa gaa tgg tgg gat cag att ccc aac cca gee ege age 816

Lys lie Lys Lys Glu Trp Trp Asp Gin lie Pro Asn Pro Ala Arg Ser 260 265 270 ege etc gtg get ata ata ate cag gat get cag ggg tea cag tgg gag 864

Arg Leu Val Ala lie lie lie Gin Asp Ala Gin Gly Ser Gin Trp Glu 275 280 285 aag egg tec ega ggc cag gaa cca gee aag tgc cca cac tgg aag aat 912

Lys Arg Ser Arg Gly Gin Glu Pro Ala Lys Cys Pro His Trp Lys Asn 290 295 300 tgt ett acc aag etc ttg ccc tgt ttt ctg gag cac aac atg aaa agg 960

Cys Leu Thr Lys Leu Leu Pro Cys Phe Leu Glu His Asn Met Lys Arg 305 310 315 320 gat gaa gat cct cac aag get gee aaa gag atg cct ttc cag ggc tet 1008

Asp Glu Asp Pro His Lys Ala Ala Lys Glu Met Pro Phe Gin Gly Ser 325 330 335 gga aaa tea gca tgg tgc cca gtg gag ate age aag aca gtc etc tgg 1056

Gly Lys Ser Ala Trp Cys Pro Val Glu lie Ser Lys Thr Val Leu Trp 340 345 350 -2

97211.doc 1356064 cca gag age ate age gtg gtg ega tgt gtg gag ttg ttt gag gee ccg 1104 Pro Glu Ser lie Ser Val Val Arg Cys Val Glu Leu Phe Glu Ala Pro. 355 360 365 gtg gag tgt gag gag gag gag gag gta gag gaa gaa aaa 999 age ttc 1152 Val Glu Cys Glu Glu Glu Glu Glu Val Glu Glu Glu Lys Gly Ser Phe 370 375 380 tgt gca teg cct gag age age agg gat gac ttc cag gag gga agg gag 1200 Cys Ala Ser Pro Glu Ser Ser Arg Asp Asp Phe Gin Glu Gly Arg Glu 385 390 395 400 ggc att gtg gee egg eta aca gag age ctg ttc ctg gac ctg etc gga 1248 Gly He Val Ala Arg Leu Thr Glu Ser Leu Phe Leu Asp Leu Leu Gly 405 410 415 gag gag aat ggg ggc ttt tgc cag cag gac atg ggg gag tea tgc ctt 1296 Glu Glu Asn Gly Gly Phe Cys Gin Gin Asp Met Gly Glu Ser Cys Leu 420 425 430 ctt cca cct teg gga agt aeg agt get cac atg ccc tgg gat gag ttc 1344 Leu Pro Pro Ser Gly Ser Thr Ser Ala His Met Pro Trp Asp Glu Phe 435 440 445 cca agt gca ggg ccc aag gag gca cct ccc tgg ggc aag gag cag cct 1392 Pro Ser Ala Gly Pro Lys Glu Ala Pro Pro Trp Gly Lys Glu Gin Pro 450 455 460 etc cac ctg gag cca agt cct cct gee age ccg acc cag agt cca gac 1440 Leu His Leu Glu Pro Ser Pro Pro Ala Ser Pro Thr Gin Ser Pro Asp 465 470 475 480 aac ctg act tgc aca gag aeg ccc etc gtc ate gca ggc aac cct get 1488 Asn Leu Thr Cys Thr Glu Thr Pro Leu Val lie Ala Gly Asn Pro Ala 485 490 495 tac ege age ttc age aac tee ctg age cag tea ccg tgt ccc aga gag 1536 Tyr Arg Ser Phe Ser Asn Ser Leu Ser Gin Ser Pro Cys Pro Arg Glu 500 505 510 ctg ggt cca gac cca ctg ctg gee aga cac ctg gag gaa gta gaa ccc 1584 Leu Gly Pro Asp Pro Leu Leu Ala Arg His Leu Glu Glu Val Glu Pro 515 520 525 gag atg ccc tgt gtc ccc cag etc tet gag cca acc act gtg ccc caa 1632 Glu Met Pro Cys Val Pro Gin Leu Ser Glu Pro Thr Thr Val Pro Gin 530 535 540 cct gag cca gaa acc tgg gag cag ate etc ege ega aat gtc etc cag 1680 Pro Glu Pro Glu Thr Trp Glu Gin lie Leu Arg Arg Asn Val Leu Gin 545 550 555 560 cat ggg gca get gca gee ccc gtc teg gee ccc acc agt ggc tat cag 1728 His Gly Ala Ala Ala Ala Pro Val Ser Ala Pro Thr Ser Gly Tyr Gin 565 570 575 gag ttt gta cat geg gtg gag cag ggt ggc acc cag gee agt geg gtg 1776 Glu Phe Val His Ala Val Glu Gin Gly Gly Thr Gin Ala Ser Ala Val 580 5Θ5 590

97211.doc 4 1356064 gtg ggc ttg ggt ccc cca gga gag get ggt tac aag gee ttc tea age 1824

Val Gly Leu Gly Pro Pro Gly Glu Ala Gly Tyr Lys Ala Phe Ser Ser 595 600 605 ctg ett gee age agt get gtg tee cca gag aaa tgt ggg ttt ggg get 1872

Leu Leu Ala Ser Ser Ala Val Ser Pro Glu Lys Cys Gly Phe Gly Ala 610 615 620 age agt ggg gaa gag ggg tat asig cct ttc caa gac etc att cct ggc 192 0

Ser Ser Gly Glu Glu Gly Tyr Lys Pro Phe Gin Asp Leu lie Pro Gly 625 630 635 640 tgc cct ggg gac cct gee cca gtc cct gtc ccc ttg ttc acc ttt gga 1968

Cys Pro Gly Asp Pro Ala Pro Val Pro Val Pro Leu Phe Thr Phe Gly 645 650 655 ctg gac agg gag cca cct ege agt ccg cag age tea cat etc cca age 2016

Leu Asp Arg Glu Pro Pro Arg Ser Pro Gin Ser Ser His Leu Pro Ser 660 665 670 age tee cca gag cac ctg ggt ctg gag ccg ggg gaa aag gta gag gac 2064

Ser Ser Pro Glu His Leu Gly Leu Glu Pro Gly Glu Lys Val Glu Asp 675 680 685 atg cca aag ccc cca ett ccc cag gag cag gee aca gac ccc ett gtg 2112

Met Pro Lys Pro Pro Leu Pro Gin Glu Gin Ala Thr Asp Pro Leu Val 690 695 700 gac age ctg ggc agt ggc att gtc tac tea gee ett acc tgc cac ctg 2160

Asp Ser Leu Gly Ser Gly lie Val Tyr Ser Ala Leu Thr Cys His Leu 705 710 715 720 tgc ggc cac ctg aaa cag tgt cat ggc cag gag gat ggt ggc cag acc 2208

Cys Gly His Leu Lys Gin Cys His Gly Gin Glu Asp Gly Gly Gin Thr 725 730 735 cct gtc atg gee agt cct tgc tgt ggc tgc tgc tgt gga gac agg tee 2256

Pro Val Met Ala Ser Pro Cys Cys Gly Cys Cys Cys Gly Asp Arg Ser 740 745 750 teg ccc cct aca acc ccc ctg agg gee cca gac ccc tet cca ggt ggg 2304

Ser Pro Pro Thr Thr Pro Leu Arg Ala Pro Asp Pro Ser Pro Gly Gly 755 760 765 gtt cca ctg gag gee agt ctg tgt ccg gee tee ctg gca ccc teg ggc 2352

Val Pro Leu Glu Ala Ser Leu Cys Pro Ala Ser Leu Ala Pro Ser Gly 770 775 780 ate tea gag aag agt aaa tee tea tea tee ttc cat cct gee cct ggc 2400 lie Ser Glu Lys Ser Lys Ser Ser Ser Ser Phe His Pro Ala Pro Gly 785 790 79S 800 aat get cag age tea age cag acc ccc aaa ate gtg aac ttt gtc tee 2448

Asn Ala Gin Ser Ser Ser Gin Thr Pro Lys lie Val Asn Phe Val Ser 805 810 815 gtg gga ccc aca tac atg agg gtc tet 2475

Val Gly Pro Thr Tyr Met Arg Val Ser 820 825 4-

97211.doc 1356064 <210> 2 <211> 825

<212> PRT <213>人類 <400> 2

Met Gly Trp Leu Cys Ser Gly Leu Leu Phe Pro Val Ser Cys Leu Val 15 10 15

Leu Leu Gin Val Ala Ser Ser Gly Asn Met Lys Val Leu Gin Glu Pro 20 25 30

Thr Cys Val Ser Asp Tyr Met Ser lie Ser Thr Cys Glu Trp Lys Met 35 40 45

Asn Gly Pro Thr Asn Cys Ser Thr Glu Leu Arg Leu Leu Tyr Gin Leu 50 55 60

Val Phe Leu Leu Ser Glu Ala His Thr Cys lie Pro Glu Asn Asn Gly 65 70 75 80

Gly Ala Gly Cys Val Cys His Leu Leu Met Asp Asp Val Val Ser Ala 85 90 95

Asp Asn Tyr Thr Leu Asp Leu Trp Ala Gly Gin Gin Leu Leu Trp Lys 100 105 110

Gly Ser Phe Lys Pro Ser Glu His Val Lys Pro Arg Ala Pro Gly Asn 115 120 125

Leu Thr Val His Thr Asn Val Ser Asp Thr Leu Leu Leu Thr Trp Ser 130 135 140

Asn Pro Tyr Pro Pro Asp Asn Tyr Leu Tyr Asn His Leu Thr Tyr Ala 145 150 155 160

Val Asn lie Trp Ser Glu Asn Asp Pro Ala Asp Phe Arg lie Tyr Asn 165 170 175

Val Thr Tyr Leu Glu Pro Ser Leu Arg lie Ala Ala Ser Thr Leu Lys 180 185 190

Ser Gly lie Ser Tyr Arg Ala Arg Val Arg Ala Trp Ala Gin Cys Tyr 195 200 205

Asn Thr Thr Trp Ser Glu Trp Ser Pro Ser Thr Lys Trp His Asn Ser 210 215 220 972il.doc 1356064

Tyr Arg Glu Pro Phe Glu Gin His Leu Leu Leu Gly Val Ser Val Ser 225 230 235 240

Cys lie Val lie Leu Ala Val Cys Leu Leu Cys Tyr Val Ser lie Thr 245 250 255

Lys lie Lys Lys Glu Trp Trp Asp Gin lie Pro Asn Pro Ala Arg Ser 260 265 270

Arg Leu Val Ala lie lie He Gin Asp Ala Gin Gly Ser Gin Trp Glu 275 280 285

Lys Arg Ser Arg Gly Gin Glu Pro Ala Lys Cys Pro His Trp Lys Asn 290 295 300

Cys Leu Thr Lys Leu Leu Pro Cys Phe Leu Glu His Asn Met Lys Arg 305 310 315 320

Asp Glu Asp Pro His Lys Ala Ala Lys Glu Met Pro Phe Gin Gly Ser 325 330 335

Gly Lys Ser Ala Trp Cys Pro Val Glu lie Ser Lys Thr Val Leu Trp 340 345 350

Pro Glu Ser lie Ser Val Val Arg Cys Val Glu Leu Phe Glu Ala Pro 355 360 365

Val Glu Cys Glu Glu Glu Glu Glu Val Glu Glu Glu Lys Gly Ser Phe 370 375 380

Cys Ala Ser Pro Glu Ser Ser Arg Asp Asp Phe Gin Glu Gly Arg Glu 385 390 395 400

Gly lie Val Ala Arg Leu Thr Glu Ser Leu Phe Leu Asp Leu Leu Gly 405 410 415

Glu Glu Asn Gly Gly Phe Cys Gin Gin Asp Met Gly Glu Ser Cys Leu 420 425 430

Leu Pro Pro Ser Gly Ser Thr Ser Ala His Met Pro Trp Asp Glu Phe 435 . 440 445

Pro Ser Ala Gly Pro Lys Glu Ala Pro Pro Trp Gly Lys Glu Gin Pro 450 455 460 97211.doc 1356064

Leu His Leu Glu Pro Ser Pro Pro Ala Ser Pro Thr Gin Ser Pro Asp 465 470 475 480

Asn Leu Thr Cys Thr Glu Thr Pro Leu Val lie Ala Gly Asn Pro Ala 485 490 495

Tyr Arg Ser Phe Ser Asn Ser Leu Ser Gin Ser Pro Cys Pro Arg Glu 500 505 510

Leu Gly Pro Asp Pro Leu Leu Ala Arg His Leu Glu Glu Val Glu Pro 515 520 525

Glu Met Pro Cys Val Pro Gin Leu Ser Glu Pro Thr Thr Val Pro Gin 530 535 540

Pro Glu Pro Glu Thr Trp Glu Gin lie Leu Arg Arg Asn Val Leu Gin 545 550 555 560

His Gly Ala Ala Ala Ala Pro Val Ser Ala Pro Thr Ser Gly Tyr Gin 565 570 575

Glu Phe Val His Ala Val Glu Gin Gly Gly Thr Gin Ala Ser Ala Val 580 585 590

Val Gly Leu Gly Pro Pro Gly Glu Ala Gly Tyr Lys Ala Phe Ser Ser 595 600 605

Leu Leu Ala Ser Ser Ala Val Ser Pro Glu Lys Cys Gly Phe Gly Ala 610 615 620

Ser Ser Gly Glu Glu Gly Tyr Lys Pro Phe Gin Asp Leu lie Pro Gly 625 630 635 640

Cys Pro Gly Asp Pro Ala Pro Val Pro Val Pro Leu Phe Thr Phe Gly 645 650 655

Leu Asp Arg Glu Pro Pro Arg Ser Pro Gin Ser Ser His Leu Pro Ser 660 665 670

Ser Ser Pro Glu His Leu Gly Leu Glu Pro Gly Glu Lys Val Glu Asp 675 680 685

Met Pro Lys Pro Pro Leu Pro Gin Glu Gin Ala Thr Asp Pro Leu Val 690 695 700 97211.doc 1356064

Asp Ser Leu Gly Ser Gly lie Val Tyr Ser Ala Leu Thr Cys His Leu 705 710 715 720

Cys Gly His Leu Lys Gin Cys His Gly Gin Glu Asp Gly Gly Gin Thr 725 730 735

Pro Val Met Ala Ser Pro Cys Cys Gly Cys Cys Cys Gly Asp Arg Ser 740 745 750

Ser Pro Pro Thr Thr Pro Leu Arg Ala Pro -Asp Pro Ser Pro Gly Gly 755 760 765

Val Pro Leu Glu Ala Ser Leu Cys Pro Ala Ser Leu Ala Pro Ser Gly 770 775 780

lie Ser Glu Lys Ser Lys Ser Ser Ser Ser Phe His Pro Ala Pro Gly 785 790 795 800

Asn Ala Gin Ser Ser Ser Gin Thr Pro Lys lie Val Asn Phe Val Ser 805 810 815

Val Gly Pro Thr Tyr Met Arg Val Ser 820 825 <210> 3 <211> 327

<212> DNA <213>人造 <220> <223>輕鏈可變序列

<220> <221> CDS <222> (1) . . (327) <400> 3 gaa att gtg ttg acg cag tct cca ggc acc ctg tct ttg tct cca ggg 48

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15 gaa aga gcc acc etc tcc tgc agg gcc agt cag agt gtt age age age 96

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Ser Ser 20 25 30 tac tta gcc tgg tac cag cag aaa cct ggc cag get ccc agg etc etc 144

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 ate ttt ggt gca tcc age agg gcc act ggc ate cca gac agg ttc agt 192 lie Phe Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 97211.doc 240 1356064 ggc agt ggg tct ggg aca gac ttc act etc acc ate age aga ctg gag

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80 cct gaa gat ttt gca gtg tat tac tgt cag cag tat ggt age tea cct

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Tyr Gly Ser Ser Pro 85 90 95 ccg tgg aeg ttc ggc caa ggg acc aag gtg gaa ate aaa

Pro Trp Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 X05 <210> 4 <211> 109

<212> PRT <213>人造 <220> <223>合成構築鱧 <400> 4

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Ser Ser 20 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 lie Phe Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 β0

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Tyr Gly Ser Ser Pro 85 90 95 288 327

Pro Trp Thr Phe Gly Gin Gly Thr 100 <210> 5 <211> 327 <212> DNA <213> 人造 <220> <223> 輕鏈可變序列

Lys Val Glu lie Lys 105 97211.doc 1356064 <220> <221> CDS <222> (1) . . (327) <400> 5 gaa att gtg ttg acg cag tct cca ggc acc ctg tct ttg tct cca ggg 48

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15 gaa aga gcc acc etc tcc tgc agg gcc agt cag agt gtt age aac age 96

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Asn Ser 20 25 30 tac tta gcc tgg tac cag cag aaa cct ggc cag get ccc agg etc etc 144

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 ate tat ggt gca tcc age agg gcc cct ggc ate cca gac agg ttc agt 192 lie Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Pro Gly He Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 ggc agt ggg tct ggg aca gac ttc act etc acc ate age aga ctg gag 240

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80 cct gaa gat ttt gca gtg tat tac tgt cag cag tat gat cac tea gca 288

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Tyr Asp His Ser Ala 85 90 95 ggg tgg acg ttc ggc caa ggg acc aag gtg gag ate aaa 327

Gly Trp Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 6 <211> 109 <212> PRT <213> 人造 <220> <223> 合成構築體 <400> 6

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Asn Ser 20 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 lie Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Pro Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 -10·

97211.doc 1356064

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Tyr Asp His Ser Ala 85 90 95

Gly Trp Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 7 <211> 327 <212> DNA <213> 人造 <220> <223> 輕鏈可變序列

<220> <221> CDS <222> (1)..(327) <400> 7 gaa att gtg ttg acg cag tct cca ggc acc ctg tct ttg tct ccg ggg Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15 48 gaa aga gcc acc etc tcc tgc agg gcc agt cag act gtt aac age gac Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Thr Val Asn Ser Asp 20 25 30 96 tac tta gcc tgg tac cag cag aaa ccg ggc cag get ccc agg etc etc Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 144 ate tat ggt gca tcc age agg gcc act ggc ate cca gac agg ttc agt lie Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 ggc agt ggg tct ggg aca gac ttc act etc acc ate age aga ctg gag Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80 cct gaa gat ttt gca gtc tat tac tgt cag cag tat ggt agg tea cct Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Tyr Gly Arg Ser Pro 85 90 95 ccg tgg acg ttc ggc caa ggg acc aaa gtg gat ate aaa Pro Trp Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Asp lie Lys 100 105 192 240 288 327

<210> <211> <212> <213>

8 109 PRT 人造 972lt.doc -11 - 1356064 <220> <223 > 合成構築體 <400> 8

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Thr Val Asn Ser Asp 20 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 lie Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Tyr Gly Arg Ser Pro 85 90 95

Pro Trp Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Asp lie Lys 100 105 <210> 9 <211> 327 <212> DNA <213> 人造 <220> <223> 輕鏈可變序列

<220> <221> CDS <222> (1) - . (327) <400> 9 gaa att gtg atg acg cag tct cca ggc acc ctg tct ttg tct cca ggg Glu lie Val Met Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15 48 gaa aga gcc acc etc tcc tgc agg gcc agt cag agt gtt age age gac Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Ser Asp 20 25 30

9S tac tta gcc tgg tac cag cag aaa cct ggc cag get ccc agg etc etc Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 97211.doc -12- 144 1356064 ate tat ggt gca tet age agg gee tet ggc ate cca gac agg ttc agt 192 lie Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Ser Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 ggc agt ggg ttt ggg aca gac ttc act etc acc ate age aga ctg gag 240

Gly Ser Gly Phe Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80 cct gaa gat ttt gca ata tat tac tgt cag cag tat ggt age tea cct 288

Pro Glu Asp Phe Ala lie Tyr Tyr Cys Gin Gin Tyr Gly Ser Ser Pro 85 90 95 ccg tgg aeg ttc ggc caa ggg acc aag gtg gaa ate aaa 327

Pro Trp Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 10 <211> 109 <212> PRT <213> 人造 <220> <223> 合成構築體 <400> 10

Glu lie Val Met Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Ser Asp 20 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 lie Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Ser Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60

Gly Ser Gly Phe Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala lie Tyr Tyr Cys Gin Gin Tyr Gly Ser Ser Pro 85 90 95

Pro Trp Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 11 <211> 327

<212> DNA 人造 •13-

972ll.doc 1356064 <220> <223> 輕鏈可變序列 <220> <221> CDS <222> (1)..(327) <400> 11 gat att gtg ctg acc cag tct cca gcc acc ctg tct ttg tct cca ggg 48

Asp lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 l〇 15 gaa aga gcc acc etc tcc tgc agg gcc agt cag agt gtt aac age aac 36

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Asn Ser Asn 20 25 30 tac tta gcc tgg tac cag cag aaa cct ggc cag get ccc agg etc etc 144

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 ate tat ggt aca tcc tac agg gcc act ggc ate cca gac agg ttc agt 192 lie Tyr Gly Thr Ser Tyr Arg Ala Thr Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 ggc agt ggg tct ggg aca gac ttc act etc acc ate acc aga ctg gag 240

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Thr Arg Leu Glu 65 70 75 80 cct gaa gat ttt gca gtg tat tac tgt cag cag tat ggt age tea cca 288

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Tyr Gly Ser Ser Pro 85 90 95 cc9 tgg aeg ttc ggc caa ggg aca ega ctg gag att aaa 327

Pro Trp Thr Phe Gly Gin Gly Thr Arg Leu Glu He Lys 100 105 <210> 12 <211> 109 <212> PRT <213> 人造 <220> <223> 合成構築體 <400> 12

Asp lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 1 5 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Asn Ser Asn 20 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 .14·

97211.doc 1356064 lie Tyr Gly Thr Ser Tyr Arg Ala Thr Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Thr Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Tyr Gly Ser Ser Pro 85 90 95

Pro Trp Thr Phe Gly Gin Gly Thr Arg Leu Glu lie Lys 100 105 <210> 13 <211> 327

<212> DNA <213>人造 <220> <223>輕鏈可變序列 <220> <221> CDS <222> (1) .. (327) <400> 13 gat att gtg ctg acg cag act cca gcc acc ctg tct ttg tct cca ggg 48

Asp lie Val Leu Thr Gin Thr Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15 gaa aga gcc acc etc tcc tgc agg gcc agt cag agt gtt ggc age age 96

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Gly Ser Ser 20 25 30 tac tta gcc tgg tac cag cag aga cct ggc cag get ccc agg etc etc 144

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Arg Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 ate tat ggt gca tcc age agg gcc act ggc ate ccg gac agg ttc agt 192 工le Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60 ggc agt ggg tct ggg aca gac ttc act etc acg ate age aga ctg gag 240

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80 cct gaa gat ttt gca gtg tat tat tgt cag cag tat gga agt tea cct 288

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Tyr Gly Ser Ser Pro 85 90 95 ccg tgg atg ttc ggc caa ggg acc aag gtg gag ate aaa 327

Pro Trp Met Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 14 <211> 109 -15-

97211.doc 1356064 <212> PRT <213>人造 <220> <223> 合成構築體 <400> 14 Asp lie Val Leu Thr Gin Thr Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Gly Ser Ser 20 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Arg Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 lie Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 60

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Tyr Gly Ser Ser Pro 85 90 95

Pro Trp Met Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 15 <211> 345 <212> DNA <213> 人造 <220> <223> 重鏈可變序列

<220> <221> CDS <222> (1)..(345) <400> 15 gag gtt cag ctg gtg cag tct ggg gga ggc ttg gta cat cct ggg ggg Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly IS 10 15 48 tcc ctg aga etc tcc tgt gca ggc tct gga ttc acc ttc agt aga aat Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30 96 get atg ttc tgg gtt ege cag get cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 97211.doc -16 * 144 1356064 tea ggt att ggt act ggt ggt Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly 50 55 ggc ega ttc acc ate tee aga Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg 65 70 caa atg aac age ctg aga gee Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala 85 aga ggg agg tac tac ttt gac Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Asp 100 gtc tee tea Val Ser Ser 115 gee aca aac tat gca gac tee Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser 60 gac aat gee aag aac tee ttg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu 75 gag gac atg get gtg tat tac Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr 90 tac tgg ggc cag gga acc ctg Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 105 110 gtg aag 192 Val Lys tat ett 240 Tyr Leu 80 tgt gca 288 Cys Ala 95 gtc acc 336 Val Thr 345

<210> 16 <211> 115 <212> PRT <213> 人造 <220> <223>合成構築體 <400> 16

Gly Gly Gly Leu Val His Pro 10

Gly Gly 15

Glu Val Gin Leu Val Gin Ser 1 5

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95

Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110

A 97211.doc 17- 1356064

Val Ser Sex 115 <210> 17 <211> 345 <212> DNA <213> 人造· <220> <223> 重鏈可變序列 <220> <221> CDS <222> (1)..(345) <400> 17 gag gtt cag ctg gtg cag tct ggg gga ggc ttg gta cat cct ggg ggg Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly 15 10 15 tcc ctg aga etc tcc tgt gca ggc tct gga ttc acc ttc agt aga aat Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30 get atg ttc tgg gtt ege cag get cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 tea ggt att ggt act ggt ggt gcc aca age tat gca gac tcc gtg aag Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60 ggc ega ttc acc ate tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ett Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80 caa atg aac age ctg agt gcc gag gac atg get gtg tat tac tgt gca Gin Met Asn Ser Leu Ser Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 aga ggg agg tac tac ttc acc cac tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Thr His Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 gtc tcc tea Val Ser Ser 115 48 96 144 192 240 2Θ8 336 345

<210> 18 <211> 115 <212> PRT <213> 人造 <220><223>合成構築體 <400> 18 972il.doc -18- 1356064

Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80

Gin Met Asn Ser Leu Ser Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95

Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Thr His Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110

Val Ser Ser 115 <210> 19 <211> 345 <212> DNA <213> 人造 <220> <223> 重鏈可變序列 <220> <221> CDS <222> (1)..(345) <400> 19

gag gtt cag ctg gtg cag tct ggg gga ggc ttg gta cat cct ggg ggg Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly 15 10 15 48 tcc ctg aga etc tcc tgt gca ggc tct gga ttc acc ttc agt aga aat Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30 96 get atg ttc tgg gtt ege cag get cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 144 tea ggt att ggt act ggt ggt gcc aca age tat gca gac tcc gtg aag Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 6〇 97211.doc •19- 192 1356064 ggc cga ttc acc ate tee aga gac aat gee aag aac tee ttg tat ett 240

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80 caa atg aac age ctg aga gee gag gac atg get gtg tat tac tgt gca 288

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 aga ggg agg tac tgg tac aac aac tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc 336

Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Asn Asn Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 gtc tee tea 345

Val Ser Ser 115 <210> 20 <211> 115

<212> PRT <213> 人造 <220> <223>.合成構築體 <400> 20

Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Axg Asn 20 25 30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95

Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Asn Asn Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110

Val Ser Ser 115 .20-

97211.doc 1356064 Λ Λ Λ Λ 0 12 3 1111 2 2 2 2 5 A 14^.^ 2 3 D人 <220> <223> 重鏈可變序列 <220> <221> CDS <222> (1) . . (345) <400> 21 gag gtt cag ttg gtg cag tct ggg gga ggc ttg gta cat cct ggg ggg Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly 15 10 15 4Θ tcc ctg aga etc tcc tgt gca ggc tet gga ttc acc ttc agt aga aat Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30 get atg ttc tgg gtt ege cag get cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 96 144 tea ggt att ggt act ggt ggt gcc aca aac tat gca gac tcc gtg aag Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60 192 ggc ega ttc acc ate tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ett Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80 240 caa atg aac age ctg aga gcc gag gac atg get gtg tat tac tgt gca Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 288 aga ggg agg tac tac ttc ccg tgg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc 336 Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 gtc tcc tea 345 Val Ser Ser 115 <210> 22 <211> 115 <212> PRT <213> 人造 <220> <223> 合成構築鱧 <400> 22

Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly 1 5 10 15 972It.doc •21 1356064

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95

Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110

Val Ser Ser 115 <210> 23 <211> 345

<212> DNA <213>人造 <220> <223> 重鏈可變序列 <220> <221> CDS <222> (1)..(345) <400> 23 gag gtt cag ctg gtg cag tct ggg gga ggc ttg gta cat cct ggg ggg 4 8

Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly 15 10 15 tcc ctg aga etc tcc tgt gca ggc tct gga ttc acc ttc agt aga aat 96

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30 get atg ttc tgg gtt ege cag get cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta 144

Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 tea ggt att ggt act ggt ggt gcc aca aac tat gca gac tcc gtg aag 192

Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60 ggc ega ttc acc ate tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ett 240

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80 -22·

97211.doc 288 1356064 caa atg aac age ctg aga gcc gag gac atg get gtg tat tac tgt gca

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 336 aga ggg agg tac tac ttc aeg agg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc

Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Thr Arg Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 no gtc tcc tea Val Ser Ser 115 345 <210> 24 <211> 115 <212> PRT <213> 人造 <220> <223> 合成構築體 <400> 24

Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95

Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Thr Arg Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110

Val Ser Ser 115 <210> 25 <211> 345

<212> DNA <213> 人造 -23- 97211.doc 1356064 <220> <223> 重鏈可變序列 <220> <221> CDS <222> (1)..(345) <400> 25 gag gtt cag ttg gtg cag tct ggg gga ggc ttg gta cat cct ggg ggg 48

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80 caa atg aac age ctg aga gcc gag gac atg get gtg tat tac tgt gca 288

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 aga ggg agg tac tgg tac ccg tgg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc 336

Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 gtc tcc tea 345

Val Ser Ser 115 <210> 26 <211> 115 <212> PRT <2X3> 人造 <220> <223> 合成構築體 <400> 26

Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30 24

97211.doc 1356064

Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95

Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110

Val Ser Ser 115 <210> 27 <211> 345 <212> DNA <213> 人造 <220> <223> 重鍵可變序列 <220> <221> CDS <222> (1) . . (345) <400> 27 gag gtt cag ctg gtg cag tct ggg gga ggc ttg gta cat cct ggg ggg 48

Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 tea ggt att ggt act ggt ggt gcc aca age tat gca gac tcc gtg aag 192

Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60 ggc ega ttc acc ate tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ett 240

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 25-

97211.doc 336 1356064 aga ggg agg tac tgg tac ccg tgg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc

Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 no 345 gtc tcc tea Val Ser Ser 115 <210> 28 <211> 115 <212> PRT <213> 人造 <220> <223>合成構築體 <400> 28

Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95

Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110

Val Ser Ser 115 <210> 29 <211> 345

<212> DNA <213>人造 <220> <223> 重鍵可變序列 -26- 97211.doc 1356064 <220> <221> CDS <222> (1) . . (345) <400> 29 gag gtt cag ttg gtg cag tct ggg gga ggc ttg gta cat cct ggg ggg 48

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 aga ggg agg tac tgg ttc ccg tgg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc 336

Arg Gly Arg Tyr Trp Phe Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 gtc tcc tea 345

Val Ser Ser 115 <2X0> 30 <211> 115 <212> PRT <213> 人造 <220> <223> 合成構築體 <400> 30

Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 27·

97211.doc 1356064

Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95

Arg Gly Arg Tyr Trp Phe Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110

Val Ser Ser 115 <210> 31 <211> 345 <212> DNA <213> 人造 <220> <223> 重鏈可變序列

<220> <221> CDS <222> (1)..(345) <400> 31 gag gtt cag ctg gtg cag tct ggg gga ggc ttg gta cat cct ggg ggg Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly 15 10 15 tcc ctg aga etc tcc tgt gca ggc tct gga ttc acc ttc agt aga aat Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30 get atg ttc tgg gtt ege cag get cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 tea ggt att ggt act ggt ggt gcc aca age tat gca gac tcc gtg aag Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60 ggc ega ttc acc ate tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ett Gly Arg Phe Thr He Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80 caa atg aac age ctg aga gcc gag gac atg get gtg tat tac tgt gca Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 aga ggg agg tac tgg ttc ccg tgg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc Arg Gly Arg Tyr Trp Phe Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 48 96

144 192 240 288 9721l.doc -28 336 345 1356064 gtc tcc tea Val Ser Ser 115 <210> 32 <211> 115 <212> PRT <213> 人造 <220> <223> 合成構築體 <400> 32

Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Gly 工le Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95

Arg Gly Arg Tyr Trp Phe Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110

Val Ser Ser 115 <210> 33 <211> 345

<212> DNA <213> 人造 <220> <223> 重鏈可變序列 <220> <221> CDS <222> (1) . . (345) -29· 97211.doc 1356064 <400> 33 gag gtt cag ttg gtg cag tct ggg gga ggc ttg gta cat cct ggg ggg 48

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu iyr Leu 65 70 75 80 caa atg aac age ctg aga gcc gag gac atg get gtg tat tac tgt gca 288

Val Ser Ser 115 <210> 34 <211> 115 <212> PRT <213> 人造 <220> <223> 合成構築體 <400> 34

Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60 -30-

972ll.doc 1356064

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95

Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110

el SI 0 12 3 1111 2 2 2 2 < < < < 5仪造 4 N > 3 D人 <220> <223>重鍵可變序列 <220> <221> CDS <222> (1)..(345) <400> 35 gag gtt cag ctg gtg cag tct ggg gga ggc ttg gta cat cct ggg ggg Glu Val Gin Leu Val Gin Sar Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly 15 10 15 48 tcc ctg aga etc tcc tgt gca ggc tct gga ttc acc ttc agt aga aat Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30 96 get atg ttc tgg gtt ege cag get cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 144 tea ggt att ggt act ggt ggt gcc aca age tat gca gac tcc gtg aag Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60 192 ggc ega ttc acc ate tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ett Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80 240 caa atg aac age ctg aga gcc gag gac atg get gtg tat tac tgt gca Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 2ΘΘ a9a 999 agg tac tgg tac ccg tgg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 336 gtc tcc tea Val Ser Ser 115 345

97211.doc •31- 1356064 <210> 36 <211> 115 <212> PRT <213> 人造 <220> <223> 合成構築體 <400> 36

Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95

Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110

Val Ser Ser 115 <210> 37 <211> 345 <212> DNA <213> 人造 ^ <220> <223> 重鏈可變序列 <220> <221> CDS <222> (1) . . (345) <400> 37 gag gtt cag ctg gtg cag tct ggg gga ggc ttg gta cat cct ggg ggg Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly 15 10 15 32- 97211.doc 1356064 tcc ctg aga etc tee tgt gca ggc tet gga ttc acc ttc agt aga aat 96

Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 tea ggt att ggt act ggt ggt gee aca age tat gca gac tec gtg aag 192

Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60 ggc ega ttc acc ate tec aga gac aat gee aag aac tec ttg tat ett 240

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 aga ggg agg tac tac ttc ccg tgg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc 336

Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 gtc tec tea 345

Val Ser Ser 115 <210> 38 <211> 115 <212> PRT <213> 人造 <220> <223> 合成構築體 <400> 38

Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Gly He Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80 -33-

97211.doc 1356064

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95

Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110

Val Ser Ser 115 <210> 39 <211> 345 <212> DNA <213> 人造 <220> <223> 重鍵可變序列

<220> <221> CDS <222> (1)..(345) <400> 39 gag gtt cag ctg gtg cag tct ggg gga ggc ttg gta cat cct ggg ggg Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly 15 10 15 tcc ctg aga etc tcc tgt gca ggc tct gga ttc acc ttc agt aga aat Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30 get atg ttc tgg gtt ege cag get cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 tea ggt att ggt act ggt ggt gcc aca age tat gca gac tcc gtg aag Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60 ggc ega ttc acc ate tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ett Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80 caa atg aac age ctg agt gcc gag gac atg get gtg tat tac tgt gca Gin Met Asn Ser Leu Ser Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 aga ggg agg tac tac ttc ccg tgg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 gtc tcc tea Val Ser Ser 115 48 96 144 192 240 288 336

<210> 40 <211> 115 97211.doc 34· 345 1356064 <212> PRT <213> 人造 <220> <223> 合成構築體 <400> 40

Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80

Gin Met Asn Ser Leu Ser Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95

Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110

Val Ser Ser 115 <210> 41 <211> 345 <212> DNA <213> 人造 <220> <223> 重鏈可變序列 <220> <221> CDS <222> (1) . . (345) <400> 41 48 gag gtt cag ttg gtg gag tct ggg gga ggc ttg gta cag cct ggg ggg

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15 tcc ctg aga etc tcc tgt gca gcc tct gga ttc acc ttc agt aga aat

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30 •35 97211.doc 96 1356064 get atg ttc tgg gtt ege cag get cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta 144

Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 tea ggt att ggt act ggt ggt gee aca age tat gca gac tee gtg aag 192

Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60 ggc ega ttc acc ate tee aga gac aat gee aag aac tee ttg tat ett 240

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80 caa atg aac age ctg aga gee gag gac aeg get gtg tat tac tgt gca 288

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 aga ggg agg tac tac ttc ccg tgg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc 336

Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 gtc tee tea 345

Val Ser Ser 115 <210> 42 <211> 115 <212> PRT <213> 人造 <220.> <223> 合成構築體 <400> 42

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 •36·

97211.doc 1356064

Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110

Val Ser Ser 115 <210> 43 <211> 345

<212> DNA <213>人造 <220> <223>重鏈可變序列 <220> <221> CDS <222> (1)..(345) <400> 43 gag gtt cag ttg gtg gag tet ggg gga ggc ttg gta cag cct ggg 999 48 Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15 tcc ctg aga etc tcc tgt gca gcc tet gga ttc acc ttc agt aga aat 96 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30 get atg ttc tgg gtt ege cag get cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta 144 Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 tea ggt att ggt act ggt ggt gcc aca age tat gca gac tcc gtg aag 192 Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60 ggc ega ttc acc ate tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ett 240 Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80 caa atg aac age ctg aga gcc gag gac aeg get gtg tat tac tgt gca 288 Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 aga ggg agg tac tac ttt gac tac tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc 336 Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 gtc tcc tea 345 Val Ser Ser 115 <210> 44 <21X> 115 <212> PRT <213> 人造 -37·

972U.doc 1356064 <220> <223> 合成構築體 <400> 44

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95

Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110

Val Ser Ser 115 <210> 45 <211> 345 <212> DNA <213> 人造 <220> <223> 重鏈可變序列 <220> <221> CDS <222> (1) . . (345) <400> 45 48 gag gtt cag ttg gtg gag tct ggg gga ggc ttg gta cag cct ggg ggg Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly IS 10 15 tcc ctg aga etc tcc tgt gca gcc tct gga ttc acc ttc agt aga aat Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30 • 38 97211.doc 96 1356064 get atg ttc tgg gtt ege cag get cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta 144

Ser Gly lie Gly.Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60 ggc ega ttc acc ate tee aga gac aat gee aag aac tee ttg tat ett · 240

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 aga ggg agg tac tac ttc acc cac tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc 336

Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Thr His Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 gtc tee tea 345

Val Ser Ser 115 <210> 46 <211> 115 <212> PRT <213> 人造 <220> <223> 合成構築體 <400> 46

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95

Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Thr His Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 -39

972il.doc 1356064

r e s al V

r 5 el SI 5A查 7 4 N-1 4 3D人 Λ Λ Λ Λ 0 12 3 11X1 2 2 2 2 < < < < <220><223>重鏈可變序列 <220> <221> CDS <222> (1)..(345) <400> 47 gag gtt cag ttg gtg gag tct ggg gga ggc ttg gta cag cct ggg ggg Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly X 5 10 15 48 tcc ctg aga etc tcc tgt gca gcc tct gga ttc acc ttc agt aga aat Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30 96 get atg ttc tgg gtt ege cag get cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 144 tea ggt att ggt act ggt ggt gcc aca age tat gca gac tcc gtg aag Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60 192 ggc ega ttc acc ate tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ett Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80 240 caa atg aac age ctg aga gcc gag gac aeg get gtg tat tac tgt gca Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 288 a9a 999 a99 tac tgg tac aac aac tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Asn Asn Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 336 gtc tcc tea Val Ser Ser 115 345 <210> 48 <211> 115 <212> PRT <213> 人造 <220> <223>合成構築體 9721i.doc -40· 1356064 <400> 48

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 .

Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95

Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Asn Asn Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110

Val Ser Ser 115 <210> 49 <211> 345

<212> DNA <213> 人造 <220> <223>重鏈可變序列 <220> <221> CDS <222> (1) . . (345) <400> 49 gag gtt cag ttg gtg gag tct ggg gga ggc ttg gta cag cct ggg ggg 48

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15 tcc ctg aga etc tcc tgt gca gcc tct gga ttc acc ttc agt aga aat 96

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30 get atg ttc tgg gtt ege cag get cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta 144

Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 .41 -

972lt.doc 1356064 tea ggt att ggt act ggt ggt gee aca age tat gca gac tee gtg aag 192

Ser GXy He Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60 ggc ega ttc acc ate tee aga gac aat gee aag aac tee ttg tat ett 240

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 aga ggg agg tac tac ttc aeg agg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc 336

Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Thr Arg Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 gtc tee tea 345

Val Ser Ser 115

<210> 50 <211> 115 <212> • PRT <213> 人造 <220> <223> 合成構築體 <400> 50

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95

Arg Gly Arg Tyr Tyr Phe Thr Arg Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110

Val Ser Ser 115 •42- 97211.doc 1356064 0x2-3 1111 2 2 2 2 < < < < <220> <223>重鏈可變序列 <22〇> <221> CDS <222> (1)..(345) <400> 51 gag gtt cag ttg gtg gag tct ggg gga ggc ttg gta cag cct ggg ggg Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15 48 tcc ctg aga etc tcc tgt gca gcc tct gga ttc acc ttc agt aga aat Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30 96 get atg ttc tgg gtt ege cag get cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 144 tea ggt att ggt act ggt ggt gcc aca age tat gca gac tcc gtg aag Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60 192 ggc ega ttc acc ate tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ett Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80 240 caa atg aac age ctg aga gcc gag gac aeg get gtg tat tac tgt gca Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 288 aga ggg agg tac tgg tac ccg tgg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 336 gtc tcc tea Val Ser Ser 115 345 <210> 52 <211> 115 <212> PRT <213 > 人造 <220><223>合成構築體 <400: 52

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15 97211.doc 43- 1356064

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95

Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110

Val Ser Ser 115 <210> 53 <211> 345 <212> DNA <213> 人造 <220> <223> 重鍵可變序列 <220> <221> CDS <222> (1)..(345) <400> 53 gag gtt cag ttg gtg gag tct ggg gga ggc ttg gta cag cct ggg ggg 48

Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60 -44-

972ll.doc 1356064 ggc cga ttc acc ate tee aga Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg 65 70 caa atg aac age ctg aga gee Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala 85 aga ggg agg tac tgg tac ccg Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro 100 gtc tee tea Val Ser Ser 115 gac aat gee aag aac tee ttg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu 75 gag gac aeg get gtg tat tac Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr 90 tgg tgg ggc cag gga acc ctg Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu 105 110 tat ett 240 Tyr Leu 80 tgt gca 288 Cys Ala 95 gtc acc 336 Val Thr 345 <210> 54 <211> 115 <212> PRT <213> 人造 <220> <223>合成構築體 <400> 54 Glu Val Gin Leu Val Glu Ser 1 5

Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro 10

Gly Gly 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95

Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110

Val Ser Ser 115 <210> 55 <211> 345 97211.doc -45 ·

1356064 <212> DNA <213> 人造 <220> <223> 重鏈可變序列 <220> <221> CDS <222> (1) .. (345) <400> 55 gag gtt cag ttg gtg gag tct ggg gga ggc ttg gta cag cct ggg ggg Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15 tcc ctg aga etc tcc tgt gca gcc tct gga ttc acc ttc agt aga aat Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30 get atg ttc tgg gtt ege cag get cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 tea ggt att ggt act ggt ggt gcc aca age tat gca gac tcc gtg aag Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60 ggc ega ttc acc ate tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ett Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80 caa atg aac age ctg aga gcc gag gac aeg get gtg tat tac tgt gca Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 aga ggg agg tac tgg ttc ccg tgg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc Arg Gly Arg Tyr Trp Phe Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 48 96 144 192 240 288 336

gtc tcc tea Val Ser Ser 115 345

<210> 56 <211> 115 <212> PRT <213> 人造 <220> <223> 合成構築體 <400> 56

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30 97211.doc -46 1356064

Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95

Arg Gly Arg Tyr Trp Phe Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110

Val Ser Ser 115 <210> 57 <211> 345 <212> DNA <213> 人造 <220> <223> 重鍵可變序列 <220> <221> CDS <222> (1) . . (345) <400> 57 gag gtt cag ttg gtg gag tct ggg gga ggc ttg gta cag cct ggg ggg 48

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80 47·

97211.doc 1356064 0 12 3 1111 2 2 2 2 < < < <

5 T 1 R 人 caa atg aac age ctg aga gcc gag gac aeg get gtg tat tac tgt gca 288 Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 aga ggg agg tac tgg ttc ccg tgg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc 336 Arg Gly Arg Tyr Trp Phe Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 gtc tcc tea 345 Val Ser Ser 115 <220> <223>合成構築體 <400> 58

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95

Arg Gly Arg Tyr Trp Phe Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110

Val Ser Ser 115 5 A έ 9 4 N ^ 5 3D人 > > > > 0 12 3 1111 2 2 2 2 < < < < • 48- 97211.doc 1356064 <220><223> 重鏈可變序列 <220> <221> CDS <222> (1) . . (345) <400> 59 gag gtt cag ttg gtg gag tct ggg gga ggc ttg gta cag cct ggg ggg Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 15 10 15 tcc ctg aga etc tcc tgt gca gcc tct gga ttc acc ttc agt aga aat Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30 get atg ttc tgg gtt ege cag get cca gga aaa ggt ctg gag tgg gta Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45 tea ggt att ggt act ggt ggt gcc aca age tat gca gac tcc gtg aag Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60 ggc ega ttc acc ate tcc aga gac aat gcc aag aac tcc ttg tat ett Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80 caa atg aac age ctg aga gcc gag gac aeg get gtg tat tac tgt gca Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 aga ggg agg tac tgg tac ccg tgg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 48 96 144 192 240 2ΘΘ 336

gtc tcc tea Val Ser Ser 115 <210> 60 <211> 115 <212> PRT <213> 入造· <220> <223> 合成構築體 <400> 60 345

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30 97211.doc -49 1356064

Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Ser Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60 •e

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95

Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110

Val Ser Ser 115 <210> 61 <211> 345 <212> DNA <213> 人造 <220> <223> 重鍵可變序列 <220> <221> CDS <222> (1)..(345) <400> 61 gag gtt cag ttg gtg gag tct ggg gga ggc ttg gta cag cct ggg ggg 48

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 1.5 10 15 tcc ctg aga etc tcc tgt gca gcc tct gga ttc acc ttc agt aga aat 96

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80 caa atg aac age ctg aga gcc gag gac aeg get gtg tat tac tgt gca 2 88

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 50- 972U.doc 336 1356064 aga ggg agg tac tgg tac ccg tgg tgg ggc cag gga acc ctg gtc acc Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 110 gtc tcc tea Val Ser Ser 115 <210> 62 <211> 115 <212> PRT <213>人造 <220> <223>合成構築體 <400> 62

Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Asn 20 25 30

Ala Met Phe Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Gly lie Gly Thr Gly Gly Ala Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 9*5

Arg Gly Arg Tyr Trp Tyr Pro Trp Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr 100 105 no

Val Ser Ser 115 <210> 63 <211> 109

<212> PRT <213>人造 <220> <223> 27A1輕鏈可變區 <400> 63 -51 - 345 972ll.doc 1356064

Glu He Val Leu Thr Gin Ser Pro Gly Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly IS 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Ser Ser 20 25 30

Tyr Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu 35 40 45 lie Tyr Gly Ala Ser Ser Arg Ala Thr Gly lie Pro Asp Arg Phe Ser 50 55 6〇

Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Arg Leu Glu 65 70 75 80

Pro Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Tyr Gly Ser Ser Pro 85 90 95

Pro Trp Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu lie Lys 100 105 <210> 64 <211> 116 <212> PRT <213> 人造 <220> <223> 27A1重鏈可變區 <400> 64

Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Val Val Gin Pro Gly Arg 15 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ser Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Arg Tyr 20 25 30

Gly Met His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Arg Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ala lie lie Trp Phe Glu Gly Asn Asn Gin Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Val Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Glu Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95 52-

97211.doc 7lT造 5 o Ry 6 1 p Λ Λ Λ Λ Λ 0 12 3 X 1 1 X 2 2 2 2 < < < < 1356064

Ala Arg Gly Lys Tyr Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val 100 105 110

Thr Val Ser Ser 115 <220> <223> 5A1輕鏈可變區 <400> 65

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Ala Thr Leu Ser Leu Ser Pro Gly 15 10 15

Glu Arg Ala Thr Leu Ser Cys Arg Ala Ser Gin Ser Val Ser Ser Tyr 20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Gin Ala Pro Arg Leu Leu lie 35 40 45

Tyr His Ala Ser Asn Arg Ala Thr Gly lie Pro Ala Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Glu Pro 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Val Tyr Tyr Cys Gin Gin Arg Ser Asn Trp Pro Leu 85 90 95

Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu He Lys 100 105 <210> 66 <211> 123 <212> PRT <213> 人造 <220> <223> 5Α1重鏈可變區 <400> 66

Glu Val Gin Leu Val Gin Ser Gly Gly Gly Leu Val His Pro Gly Gly 15 10 15 972ll.doc -53-

1356064

Ser Leu Arg Leu Thr Cys Ala Gly Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Phe 20 25 30

Val Met His Trp Val Arg Gin Thr Pro Gly Gin Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ala He Gly Thr Gly Gly Gly Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys 50 55 60

Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ala Lys Ser Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80

Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Met Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95

Arg Asp Arg Pro Met Val Arg Gly Val lie lie Asp Tyr Phe Asp Tyr 100 105 110

Trp Gly Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 67 <211> 107 <212> PRT <213> 人造 <220> <223> 63輕鏈可變區 <400> 67

Asp lie Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15

Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gin Gly lie Ser Thr Trp 20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gin His Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu lie 35 40 45

Tyr Val Ala Ser Ser Leu Gin Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Ser Ser Leu Gin Pro 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Gin Ala Asn Ser Phe Pro Phe 85 90 95 •54- 97211.doc 1356064

Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp lie Lys 100 105 <210> 68 <211> 117

<212> PRT <213>人造 <220> <223> 63重鏈可變區 <400> 68

Glu Val Gin Val Leu Glu Ser Gly Gly Asn Leu Val Gin Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr 20 25 30

Ala Met Ser Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Ser lie Thr Gly Ser Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr lie Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr β5 70 75 80

Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala lie Phe Tyr Cys 85 90 95

Ala Lys Asp Asn Arg Gly Phe Phe His Tyr Trp Gly Gin Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 69 <211> 107

<212> PRT <213>人造 <220> <223> 1B7輕鏈可變區 <400> 69

Glu lie Val Leu Thr Gin Ser Pro Ser Ser Val Ser Ala Ser Val Gly 15 10 15 •55· 97211.doc 1356064

Asp Arg Val Thr lie Thr Cys Arg Ala Ser Gin Gly lie Ser Asn Arg 20 25 30

Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu lie 35 40 45

Tyr lie Ala Ser lie Leu Gin Arg Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr lie Thr Arg Leu Gin Pro 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Gin Ala Asn Ser Phe Pro Phe 85 90 95

Thr Phe Gly Pro Gly Thr Lys Val Asp lie Lys 100 105 <210> 70 <211> 36 <212> DNA <213> 人造 <220> <223> 引子 <220> <221> misc特徵 <222> (21)7. (21) <223> N為A或G <220> , <221> misc特徵 <222> (24)7. (24) <223> N為G或T <400> 70 36 gtcgacgccg ccaccatgga nttngggctg agctgg iA造 1 1 N" 7 2 D Λ Λ Λ Λ Λ 0 12 3 1111 2 2 2 2 V V V < <220> <223> 引子 <400> 71 cttgaccagg cagcccaggg c 21 56- 972ll.doc 1356064 <210> 72 <211> 36 <212> DNA <213>人造 <220> <223> 引子 <400> 72 atcaaacgta cggtggctgc accatctgtc ttcatc <210> 73 <211> 49 <212> DNA <213> 人造 <220> <223> 引子 <400> 73 gtttaaacgc ggccgcggat cctaacactc tcccctgttg aagctcttt 49 <210> 74 <211> 99 <212> DNA <213> 人造 <220> <223> 引子 <400> 74 gtcgacgccg ccaccatgga aaccccagcg cagcttctct tcctcctgct actctggctc ccagataccg ctagcgaaat tgtgttgacg cagtctcca 60 99 <210> 75 <211> 99 <212> DNA <213> 人造 <220> <223> 引子 <400> 75 tggagactgc gtcaacacaa tttcgctagc ggtatctggg agccagagta gcaggaggaa 60 gagaagctgc gctggggttt ccatggtggc ggcgtcgac 99 <210> 76 <211> 57 <212> DNA <213> 人造 <220> <223> 引子 97211.doc • 57- 1356064 <400> 76 atggggtcaa ccgccatcct tggcctcctc ctggctgttc tccaaggagt cgctagc 57 <210> 77 <211> 327

<212> PRT <213>人類 <400> 77

Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg 15 10 15

Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 20 25 30

Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 35 40 45

Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gin Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 50 55 60

Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr 65 70 75 80

Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 85 90 95

Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Ser Cys Pro Ala Pro 100 105 110

Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys 115 120 125

Asp Thr Leu Met lie Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val 130 135 140

Asp Val Ser Gin Glu Asp Pro Glu Val Gin Phe Asn Trp Tyr Val Asp 145 150 155 160

Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gin Phe 165 170 175

Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp 180 185 190 Λ

Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu 195 200 205 • 58· 97211.doc 1356064

Pro Ser Ser lie Glu Lys Thr lie Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg 210 215 220

Glu Pro Gin Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gin Glu Glu Met Thr Lys 225 230 235 240

Asn Gin Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp 245 250 255 lie Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys 260 265 270

Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser 275 280 285

Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Glu Gly Asn Val Phe Ser 290 295 300

Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser 305 310 315 320

Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys 325 59- 97211.doc

Claims

1356064 第093133677號專%申諸率_ _ 管群"I 修叩正本 1· 種單離抗體’其包含下列a)至c)中之任一者： a) 輕鏈可變區域，該輕鏈可變區域包含選自下列者所成組群中之胺基酸序列： i) 與選自序列編號：4 ’ 6，8，1 〇，12及14所成組群中之序列至少有95%相同之序列； u)與選自序列編號：3、5、7、9、11及13所成組群中之核苷酸序列至少有95%同一性之核苷酸序列所編碼之胺基酸序列；及 U1)於高度嚴苛條件下可與選自序列編號：3、5、 7、9、11及13所成組群中之核苷酸序列之互補體雜交之核苷酸序列所編碼之序列；或 b) 重鏈可變區域’該重鏈可變區域包含選自下列者所成組群中之胺基酸序列：〇與選自序列編號：16、18、20、22、24、26、 28 ' 30、32、34、36、38、40、42、44、46、 48、50、52、54、56、58、60及62所成組群中之序列具有至少95%同一性之序列； ii) 與選自序列編號：15、17、19、21、23、25、 27、29、31、33、35、37、39、41、43、45、 47、49、51、53、55、57、59及 61所成組群中之核苷酸序列至少有95%同—性之核苷酸序列所編碼之胺基酸序列；及 Ul)於高度嚴苛條件下可與選自序列編號：1 5、1 7、 97211-961128.doc 1356064 19、21、23、25、27、29、31、33、35、37、 39、41、43、45、47、49、51、53、55、57、59 及61所成組群中之核苷酸序列之互補體雜交之核苷酸序列所編碼之序列；或 c) a)之輕鏈可變區域與b)之重鏈可變區域；其限制條件為該抗體不同時包含序列編號：4、序列編號：63、序列編號：65、序列編號：67或序列編號： 69之輕鏈可變區域胺基酸序列以及序列編號：16、序列編號：64、序列編號：66或序列編號：68之重鏈可變區域胺基酸序列；以及其中該抗體會與人類IL-4受體結合。 2.如請求項1之抗體，其包含下列a)至c)中之任一者： a) 輕鏈可變區域，該輕鏈可變區域包含選自下列者所成組群中之胺基酸序列： 0與選自序列編號：4，6，8，10，12及14所成組群中之序列至少有97%相同之序列；及 u)與選自序列編號：3、5、7、9、11及13所成組群中之核苷酸序列至少有97%同一性之核苷酸序列所編碼之胺基酸序列；或 b) 重鏈可變區域，該重鏈可變區域包含選自下列者所成組群中之胺基酸序列： 0與選自序列編號：16、18、20、22 ' 24、26、以、30、32、34、36、38、40、42、44、耗、 48、5〇、52、54、56、58、6〇及62所成組群中之 97211-961128.doc 序列具有至少97%同一性之序列；及 u)與選自序列編號：15、17、19、21、23、25、 27、 29、31、.33、35 ' 37、39、41、43、45、 47、 49、51、53、55、57、59及61所成組群中之核苷酸序列至少有97%同一性之核苷酸序列所編碼之序列；或 c) a)之輕鏈可變區域與b)之重鏈可變區域。 3 | •如請求項2之抗體，其包含下列幻至〇中之任一者： a) 輕鏈可變區域，該輕鏈可變區域包含選自下列者所成組群中之胺基酸序列：〇與選自序列編號：4，6，8，1 〇，12及14所成組群中之序列至少有99%相同之序列；及 u)與選自序列編號：3、5、7、9、11及1 3所成組群中之核苷酸序列至少有99%同一性之核苷酸序列所編碼之胺基酸序列；或 b) 重鏈可變區域，該重鏈可變區域包含選自下列者所成組群中之胺基酸序列： 0 與選自序列編號：16、18 ' 20、22、24、26、 28、 30、32、34、36、38、40、42、44、46、 48、 50、52、54、56、58、60及 62所成組群中之序列具有至少9 9 °/。同一性之序列；及 Η)與選自序列編號：15、π、19、21、23、25、 27、29、31、33、35、37、39、41、43 ' 45 ' 47、49、51、53、55、57、59及 61 所成組群中之 97211-961128.doc 1356064 核苷酸序列至少有99%同一性之核苷酸序列所編碼之序列；或 c) a)之輕鏈可變區域與b)之重鏈可變區域。 4.如請求項3之抗體，其包含下列a)至c)中之任一者： a) 輕鏈可變區域，其包含選自序列編號：4，6，8, 10 ’ 12及14所成組群中之胺基酸序列；或 b) 重鏈可變區域’其包含選自序列編號：Μ、18、 20、22、24、26、28、30、32、34、36、38、40、 42、44、46、48、50、52、54、56、58、60及 62所成組群中之胺基酸序列；或 c) a)之輕鏈可變區域與b)之重鏈可變區域。 5·如請求項1之抗體，其包含下列a)至c)中之任一者： a) 輕鏈可變區域’其包含與序列編號：4不同之胺基酸序列’該不同處為具有至少一選自S28T、S30N、 S30G、S31N、S32D、S32N、A52T、S54Y、T57P、 T57S、G93D、S94H、S94R、P96A、P97G及 T99M所成組群中之胺基酸取代；或 b) 重鏈可變區域’其包含與序列編號·· 16不同之胺基酸序列，該不同處為具有至少一選自N58S、 Y101W、F102Y、D103T、D103N、D103P、 Y104H、Y104N、Y104W、Y104R及 T99M所成組群中之胺基酸取代；或 c) a)之輕鏈可變區域與b)之重鏈可變區域。 6_如請求項1之抗體’其包含下列甸至勾中之任一者： 97211-961128.doc 1356064 a) 輕鏈可變區域，其包含與序列編號：4不同之胺基酸序列，該不同處僅在於： i) 具有至少一選自 S28T、S30N、S30G、S31N、 S32D、S32N、A52T、S54Y、T57P、T57S、 G93D、S94H、S94R ' P96A、P97G及 T99M所成組群中之胺基酸取代，及 ii) 具有至少一選自 E1D、L4M、S7T、G9A、 K40R、F50Y、S68F、S77T、V86I、K105R、 V106L及E107D所成組群中之胺基酸取代；或 b) 重鏈可變區域，其包含與序列編號：16不同之胺基酸序列，該不同處僅在於： i) 具有至少一選自 N58S、Y101W、F102Y、D103T、 D103N、D103P、Υ104Η、Υ104Ν、Y104W及 Y104R 所成組群中之胺基酸取代，及 ii) 具有至少一選自 Q6E、H13Q、G24A、R86S及 Μ90Τ 所成組群中之胺基酸取代；或 c) a)之輕鏈可變區域與b)之重鏈可變區域。 7·如請求項1之抗體，其中： a. 輕鏈CDR1包含選自序列編號：6之殘基24·3 5、序列編號：8之殘基24-35、序列編號：10之殘基24·35、序列編號：12之殘基24-35及序列編號：14之殘基24-35所成組群中之序列；或 b. 輕鍵CDR2包含選自序列編號：4之殘基5 1 -5 7、序列編號：6之殘基51-57、序列編號：10之殘基51_57及序列 97211-961128.doc 1356064 編號：12之殘基51-57所成組群中之序列；或 c. 輕鏈CDR3包含選自序列編號：4之殘基90-99、序列編號：6之殘基90-99、序列編號：8之殘基90-99及序列編號：14之殘基90-99所成組群中之序列；或 d. 重鏈CDR1包含序列編號：16之殘基31-35之序列；或 e·重鏈CDR2包含選自序列編號：16之殘基50-65及序列編號：18之殘基50-65所成組群中之序列；或 f.重鏈CDR3包含選自序列編號：4之殘基90-99、序列編號：18之殘基98-104、序列編號：20之殘基98-104、序列編號：22之殘基98-104、序列編號：24之殘基98-104、序列編號：26之殘基98-104、序列編號：30之殘基98-104及序列編號：34之殘基98-104所成組群中之序列。 8.如請求項7之抗體，其中： a.輕鏈CDR1包含選自序列編號：6之殘基24-35、序列編號：8之殘基24-35、序列編號：1〇之殘基24-35、序列編號：12之殘基24-35及序列編號：14之殘基24-35所成組群中之序列；及 b_輕鏈CDR2包含選自序列編號：4之殘基51-57、序列編號：6之殘基51-57、序列編號：10之殘基51-57及序列編號：12之殘基5 1-57所成組群中之序列；及 c.輕鏈CDR3包含選自序列編號：4之殘基90-99、序列編號：6之殘基90-99、序列編號：8之殘基90-99及序列編號：14之殘基90-99所成組群中之序列；及 97211-961128.doc 1356064 d. 重鏈CDR1包含序列編號：16之殘基31-35之序列；及 e. 重鏈CDR2包含選自序列編號：16之殘基50-65及序列編號：18之殘基50-65所成組群中之序列；及 f. 重鏈CDR3包含選自序列編號：4之殘基90-99、序列編號：18之殘基98-104、序列編號：20之殘基98-104、序列編號：22之殘基98-104、序列編號：24之殘基98-104、序列編號：26之殘基98-104、序列編號：3 0之殘基98-104及序列編號：34之殘基98-104所成組群中之序列》 9.如請求項1之抗體，其中： a) 輕鏈FR1包含選自序列編號：4之殘基1-23、序列编號：10之殘基1-23、序列編號：12之殘基1-23及序列編號：14之殘基1 -23所成組群中之序列；或 b) 輕鏈FR2包含選自序列編號：4之殘基36-50及序列編號：14之殘基36-50所成組群中之序列；或 c) 輕鏈FR3包含選自序列編號：4之殘基58-89、序列編號：10之殘基58-89及序列編號：12之殘基58-89所成組群中之序列；或 d) 輕鏈FR4包含選自序列編號：4之殘基100-1 09、序列編號：8之殘基100-109及序列編號：12之殘基100· 109所成組群中之序列；或 e) 重鏈FR1包含選自序列編號：16之殘基1-30及序列編號：42之殘基1-30所成組群中之序列；或 f) 重鏈FR2包含序列編號：16之殘基36-49之序列；或 972H-961128.doc 1356064 g) 重鏈FR3包含選自序列編號：16之殘基66-97、序列編號：18之殘基66-97及序列編號：42之殘基66-97所成組群中之序列；或 h) 重鏈FR4包含序列編號：16之殘基105-115之序列。 10. 如請求項9之抗體，其中： a) 輕鏈FR1包含選自序列編號：4之殘基1-23、序列編號：10之殘基1-23、序列編號：12之殘基1-23及序列編號：14之殘基1-23所成組群中之序列；及 b) 輕鏈FR2包含選自序列編號：4之殘基36-50及序列編號：14之殘基36-50所成組群中之序列；及 c) 輕鏈FR3包含選自序列編號：4之殘基58-89、序列編號：10之殘基58-89及序列編號：12之殘基58-89所成組群中之序列；及 d) 輕鏈FR4包含選自序列編號：4之殘基100-109、序列編號：8之殘基100-109及序列編號：12之殘基1〇〇_ 109所成組群中之序列；及 e) 重鏈FR1包含選自序列編號：16之殘基1-30及序列編號：42之殘基1-30所成組群中之序列；及 f) 重鏈FR2包含序列編號：16之殘基36-49之序列；及 g) 重鏈FR3包含選自序列編號：16之殘基66-97、序列編號：18之殘基66-97及序列編號：42之殘基66-97所成組群中之序列；及 h) 重鏈FR4包含序列編號：16之殘基105-115之序列。 11. 如請求項1之抗體，其中該抗體係選自L1H2 ' L1H3、 97211-961128.doc 1356064 L1H4 、 L1H5 、 L1H6 、 L1H7 、 L1H8 、 L1H9 、 L1H10 、 L1H11 、 L2H1 、 L2H2 、 L2H3 、 L2H4 、 L2H5 、 L2H6 、 L2H7、L2H8、L2H9、L2H10、L2H11、L2H12、 L2H13、L2H14、L3H1、L4H1、L5H1及 L6H1所成組群中之抗體。 12. 13. 14. 15. 16. 17. 如請求項1之抗體，其中該抗體為人類、人類化或嵌合抗體。如請求項1之抗體，其中該抗體為單株抗體。如請求項1之抗體，其中該抗體選自IgE)、IgE、igM、 IgGl、lgG2、ig<33及IgG4所成組群且在絞鏈區具有至少一突變’該突變會使形成重鏈内二硫鍵之傾向減少。一種經單離之多肽，其包含請求項1之抗體之IL-4受體結合部分。如請求項15之經單離之多肽，其中該多肽包含Fab、 F(ab’)2、seFv、雙功能抗體、三功能抗體或四功能抗體。一種經單離之核酸，其包含下列a)至d)中之任一者： a)編碼請求項i(a)之抗體之輕鏈之枋#e ^ 體；或疋核苷酸序列或其補補肽 b)編碼請求項1(b)之抗體之重鏈 ^ % <核苷酸序列或其瓶，我 C)編碼包含請求項1之抗體之又體結合部分之多之核苷酸序列或其補體；或 d) a)之核苷酸序列及b)之核苷酸序列。 97211-961128.doc 1356064 18. 如請求項丨7之經單離核酸，其中該核酸包含至少—選序列蝙號：5、7、9、11、13、17、19、21、23、25 27 、 29 、 31 、 33 、 35 、 37 、 39 、 41 、 43 、 45 、 47 、 49 51、53、55、57、59及61所成組群中之序列。 19. 一種載體，其包含請求項17之核酸。 20. 如請求項19之载體，其中該載體為表現載體。 21. —種經單離之細胞，其包含請求項17之核酸。 22·如請求項21之經單離之細胞，其中該細胞為融合瘤。 23_如請求項21之經單離之細胞，其中該細胞為基因轉移細胞。 24.種製造清求項i之抗體之方法，其包含培育包含編碼名抗體之輕鏈之核酸及編碼該抗體之重鏈之核酸之細胞，其之培育條件係能使該細胞表現該輕鏈及該重鏈以及使該輕鏈及該重鏈組合成該抗體者；然後自該細胞單離該抗體。 25_如請求項24之方法，其中該細胞為融合瘤。 26. 如請求項24之方法，其中該細胞為基因轉移細胞。 27. —種如清求項1之抗體於製造抑制匕_4受體之藥物之用途。 28·如請求項27之用途，其中該藥劑係與表現比一受體之細胞接觸並與該IL-4受體結合以抑制經由該虬_4受體之信號轉導。 29_如請求項28之用途，其中該細胞為人類細胞。 30.如請求項29之用途，其中該人類細胞在人類中。 97211-961128.doc •10- 1356064 31. 32. 33. 34. 35. 36. 37. 38. 一種如請求項15之多肽於製造抑制il-4受體之藥物之用途。如吻求項31之用途，其中該藥劑係與表現IL-4受體之細胞接觸並與該受體結合以抑制經由該IL-4受體之信號轉導。如請求項32之用途，其中該細胞為人類細胞。如1求項3 3之用途，其中該人類細胞在人類中。一種如請求項丨之抗體於製造經匕一誘生或惡化之病症之藥劑之用途。如切求項35之用途，其中該病症為發炎病症或癌性病症。如請求項36之用途，其中該發炎病症或癌性病症為免疫性病症。如請求項37之用途，其中該病症為氣喘、敗血性關節炎、疱疹樣皮膚樣、慢性體質特異性蓴麻疹、潰瘍性結腸炎、硬皮症、肥厚性疤痕、輝普耳氏症（Whipp丨e，s DlSease)、良性前列腺肥大症、有IL-4受體參與之肺異常、有IL-4受體·媒介之表皮障壁損傷參與之病症、有 IL-4受體參與之消化系統異常、對於藥物之過敏反應、川崎症、鐮刀細胞疾病、喬格_史特勞斯徵候群（Churg_ Strauss syndr〇me)、格雷氏疾病（Grave，s disease)、子癇前症、修格連氏徵候群（Sj0gren，s syndr〇me)、自體免疫淋巴增生性徵候群、自體免疫溶血性貧血、巴瑞特氏食道症（Barrett's esophagus)、自體免疫葡萄膜炎、肺結 972Il-961128.doc 11 1356064 核、纖維囊腫、過敏性肺支氣管真菌症、慢性阻塞性肺疾病、博來黴素（bleomycin)引起之肺病變及纖維症、放射線引起之肺纖維化、肺泡蛋白質症、成人呼吸窘迫徵候群、類肉瘤病、IgE過高徵候群、體質特異性嗜伊紅性白血球徵候群、自體免疫性起皰症、尋常型天皰瘡、大皰性類天皰瘡、重症肌無力、慢性倦怠徵候群或腎病0 39. 40. 41. 42. 一種如請求項1 5之多肽於製造治療經IL_4誘生或惡化之病症之藥剤之用途。如請求項39之用途，其中該病症為發炎病症或癌性病症0 如請求項40之用途，其中該發炎病症或癌性病症為免疫性病症。如明求項4 1之用途’其中該病症為氣喘、敗血性關節炎、疮疹樣皮膚樣、慢性體質特異性蓴麻疹、潰瘍性結腸炎、硬皮症、肥厚性疤痕、輝普耳氏症（Whipple，s Disease)、良性前列腺肥大症、有IL_4受體參與之肺異常、有IL-4受體-媒介之表皮障壁損傷參與之病症、有 IL-4受體參與之消化系統異常、對於藥物之過敏反應、川崎症、鐮刀細胞疾病、喬格-史特勞斯徵候群（Churg_ Strauss syndrome)、格雷氏疾病（Grave's disease)、子痛前症、修格連氏徵候群（Sjogren's syndrome)、自體免疫淋巴增生性徵候群、自體免疫溶血性貧血、巴瑞特氏食道症（Barrett’s esophagus)、自體免疫葡萄膜炎、肺結 97211-96H28.doc 1356064 核、纖維囊腫、過敏性肺支氣管真菌症、慢性阻塞性肺疾病、博來黴素（bleomyCin)引起之肺病變及纖維症、放射線引起之肺纖維化、肺泡蛋白質症、成人呼吸窘迫微候群、類肉瘤病、IgE過高徵候群、體質特異性嗜伊紅性白血球徵候群、自體免疫性起皰症、尋常型天皰瘡、大跑性類天皰瘡、重症肌無力、慢性倦怠徵候群或腎病。 43. 44. 45. 46. 一種治療經IL-4誘生或惡化之疾病之醫藥組合物，其包含請求項1之抗體以及賦形劑、稀釋劑或緩衝劑。種、;。療經IL-4誘生或惡化之疾病之醫藥组合物，其包含請求項15之多肽以及賦形劑、稀釋劑或緩衝劑。如請求項1之抗體，其中該抗體不會與鼠仏“受體結合。如請求項丨之抗體，其中該抗體會與人類比_4受體之區威 1結合。 97211-961128.doc 13