[go: up one dir, main page]

RU2668563C2 - Стабилизированные жидкие ферментные композиции - Google Patents

Стабилизированные жидкие ферментные композиции Download PDF

Info

Publication number
RU2668563C2
RU2668563C2 RU2013156600A RU2013156600A RU2668563C2 RU 2668563 C2 RU2668563 C2 RU 2668563C2 RU 2013156600 A RU2013156600 A RU 2013156600A RU 2013156600 A RU2013156600 A RU 2013156600A RU 2668563 C2 RU2668563 C2 RU 2668563C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
amino acid
subtilisin
peptide
residue
lipase
Prior art date
Application number
RU2013156600A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2013156600A (ru
Inventor
Лоне Киерстеин НИЛЬСЕН
Лисе Мунк МИККЕЛЬСЕН
Эсбен Петер ФРИИС
Юрген Карстен Франц КНЕТЦЕЛЬ
Оле СИМОНСЕН
Лотте Ругхольм СЕРЕНСЕН
Original Assignee
Новозимс А/С
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Новозимс А/С filed Critical Новозимс А/С
Publication of RU2013156600A publication Critical patent/RU2013156600A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2668563C2 publication Critical patent/RU2668563C2/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0808—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/1016—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2/00—Peptides of undefined number of amino acids; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0806—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atoms, i.e. Gly, Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0815—Tripeptides with the first amino acid being basic
    • C07K5/0817—Tripeptides with the first amino acid being basic the first amino acid being Arg
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/1005—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/101—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C07K5/1024—Tetrapeptides with the first amino acid being heterocyclic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C11D3/38663—Stabilised liquid enzyme compositions
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C12N9/52—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from bacteria or Archaea
    • C12N9/54—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from bacteria or Archaea bacteria being Bacillus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/96—Stabilising an enzyme by forming an adduct or a composition; Forming enzyme conjugates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
    • C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • C12Y304/21062—Subtilisin (3.4.21.62)
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Detergent Compositions (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

Изобретение относится к жидкой композиции для стабилизации субтилизина, содержащей субтилизин и пептидный альдегид формулы B-B-B-Н, где Н означает водород; Bпредставляет собой остаток Tyr; Bпредставляет собой один аминокислотный остаток Ala или Val; и Bпредставляет собой один аминокислотный остаток с присоединенной бензилоксикарбонильной группой (Cbz), или Впредставляет собой два аминокислотных остатка, содержащих ацетильную (Ас) N-концевую защитную группу; и где молярное соотношение пептидного альдегида к субтилизину составляет от по меньшей мере 1:1 до менее чем 1000:1. 2 н. и 3 з.п. ф-лы, 3 пр.

Description

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ
Настоящее изобретение относится к жидкой композиции, включающей субтилизин и пептидное соединение в качестве стабилизатора для субтилизина. Изобретение также относится к пептидному соединению, которое применяется в качестве стабилизатора для субтилизинов.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Протеазы типа субтилизина хорошо известны среди жидких водных моющих средств, особенно в использовании для стирки в прачечной. Часто встречающаяся проблема в таких жидких моющих средствах представляет собой разложение субтилизином других ферментов в композиции и разложение самого субтилизина. Следовательно, стабильность субтилизина и других ферментов в композиции жидкого моющего средства понижена, приводя в результате к получению жидкого моющего средства с пониженной степенью эффективности стирки.
В документах известного уровня техники активно обсуждается улучшение стабильности при хранении ферментов жидких моющих средств, например, путем добавления различных ингибиторов или стабилизаторов субтилизина. Известно, что борная кислота и бороновые кислоты обратимо ингибируют протеолитические ферменты. Применение пептидных альдегидов в жидких моющих средствах раскрыто в WO 94/04651, WO 98/13458, WO 98/13459, WO 98/13460 и WO 98/13462. Более конкретно, WO94/04651 раскрывает применение пептидных альдегидов, Phe-Gly-Ala-PheH и Phe-Gly-Ala-LeuH, для стабилизации протеаз типа субтилизина. WO94/04651 также раскрывает Leu-Leu-TyrH в качестве подходящего пептидного альдегида для стабилизации протеаз типа химотрипсина. Кроме того, WO94/04651 предлагает метилкарбамат или метилмочевину в качестве N-концевой защитной группы пептидных альдегидов. WO98/13460 раскрывает применение ингибиторов пептидных протеаз, и пептидных альдегидов и трифторметилкетонов, где пептидная цепь содержит 2-5 аминокислот, и альдегид/трифторметилкетон получают из аминокислот аланина, валина, изолейцина, лейцина, фенилглицина, фенилаланина или гомофенилаланина и где N-концевая защитная группа предпочтительно представляет собой сульфонамид или амидофосфат.
WO2007/141736, WO2007/145963 и WO2007/145964 раскрывают применение обратимых ингибиторов пептидных протеаз для стабилизации композиций жидких моющих средств. US2003/157088 описывает композиции, содержащие ферменты, стабилизированные ингибиторами.
WO 96/41638 и WO 2005/105826 раскрывают альдегиды и кетоны пептидов.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Авторы изобретения неожиданно обнаружили, что определенные альдегидные или кетоновые производные пептидов являются особенно эффективными для стабилизации протеаз типа субтилизина в водных композициях, таких как жидкие моющие средства, включающие пептидные соединения с OH-замещенным фенилаланином в качестве C-концевого остатка.
Соответственно, в изобретении предлагается жидкая композиция, включающая субтилизин и пептидное соединение формулы B2-B1-B0-R, где
- R представляет собой водород, CH3, CX3, CHX2 или CH2X, где X представляет собой атом галогена; и
- B1 представляет собой один аминокислотный остаток.
B0 может представлять собой остаток фенилаланина с OH-заместителем в пара-положении и/или в мета-положении; и B2 может состоять из одного или более аминокислотных остатков, причем B2 необязательно включает N-концевую защитную группу. Альтернативно, B0 может представлять собой один аминокислотный остаток; и B2 представляет собой остаток Gly, Arg или Leu с присоединенной N-концевой защитной группой.
В изобретении дополнительно предлагается пептидное соединение формулы B2-B1-B0-R, где
- R представляет собой водород, CH3, CX3, CHX2 или CH2X, где X представляет собой атом галогена; и
- B1 представляет собой один аминокислотный остаток.
- B0 может представлять собой остаток фенилаланина с OH-заместителем в пара-положении и/или в мета-положении; и B2 может состоять из одного или более аминокислотных остатков с бензилоксикарбонилом в качестве N-концевой защитной группы, или B2 может представлять собой остаток Gly, Arg или Leu с присоединенной N-концевой защитной группой. Альтернативно, B0 может представлять собой один аминокислотный остаток, и B1 может представлять собой небольшой аминокислотный остаток, и B2 может представлять собой остаток Gly, Arg или Leu с присоединенной ароматической N-концевой защитной группой.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Определения
"Аминокислотный остаток" означает группу со структурой, подобной -NH-CHR-CO-, с обозначением N-конца слева и C-конца справа.
Названия аминокислотных остатков сокращаются с использованием однобуквенных или трехбуквенных сокращений, включая следующие сокращения: аланин (A), фенилаланин (F), глицин (G), лейцин (L), аргинин (R), валин (V), триптофан (W), тирозин (Y). Сокращение "Y-H" обозначает тирозиналь, подразумевая, что C-концевая область остатка тирозина превращена из карбоксильной группы в альдегидную группу. Тирозиналь может быть получена с помощью известных способов.
Аминокислоты
Каждый аминокислотный остаток в B1 и B2 может представлять собой природную или искусственную альфа- или бета-аминокислоту, содержащую структуру -NH-(CH(R))n-C(=O)-, где n=1-2 (предпочтительно 1) и R выбран из линейной или разветвленной и/или циклической, замещенной или незамещенной структуры из следующих групп: C1-C6 алкил; фенил; C7-C9 алкиларил; C4-C8 циклоалкил. Сюда включены обе L- и D-формы аминокислот.
Аминокислота может представлять собой альфа-аминокислоту, такую как любая из природных аминокислот, норвалин (Nva), норлейцин (Nle), гомофенилаланин (Hph) или фенилглицин (Pgl). Альфа-углеродный атом аминокислоты может быть представлен в D- или L-конфигурации.
Пептидное соединение
OH-замещенный фенилаланин, такой как тирозин, представляет собой относительно гидрофильную аминокислоту, и его присутствие в пептиде будет, как правило, повышать растворимость пептида по сравнению с более гидрофобными аминокислотами типа фенилаланина, лейцина, аланина, цистеина, изолейцина, метионина и валина, которые все обладают положительным индексом гидрофобности по сравнению с отрицательным индексом гидрофобности тирозина (Kyte&Doolittle (1982), J. Mol. Biol. 157 (1), pp 105-132) (чем больше индекс гидрофобности, тем более гидрофобна аминокислота).
Пептидное соединение может иметь формулу:
Figure 00000001
где R представляет собой водород, CH3, CX3, CHX2 или CH2X, где X представляет собой атом галогена; X' представляет собой OH или H, причем, по меньшей мере, один X' представляет собой OH; B1 представляет собой один аминокислотный остаток; и B2 представляет собой один или более аминокислотных остатков, причем B2 необязательно включает N-концевую защитную группу.
Таким образом, B0 (аминокислотный остаток на C-конце) может представлять собой остаток тирозина (p-тирозин), m-тирозин или 3,4-дигидроксифенилаланин. Вместе с тирозиновым остатком пептидное соединение имеет следующую формулу:
Figure 00000002
В одном конкретном аспекте изобретения пептидное соединение включает только 3 аминокислотных остатка, включая C-концевой остаток. В этом аспекте изобретения синтез является более экономически эффективным, и признано, что соединения представляют собой высокоэффективные ингибиторы ферментной активности. Предпочтительно, пептидные соединения, содержащие только три аминокислотных остатка, защищены N-концевой защитной группой. Соответственно, в этом аспекте изобретение относится к соединениям, где B2 представляет собой один аминокислотный остаток, включающий N-концевую защитную группу.
В предпочтительном аспекте изобретения пептидное соединение представляет собой альдегид, включающий только 3 аминокислотных остатка, где B2 выбирают из аргинина, глицина и лейцина, включающих N-концевую защитную группу. В случае, где пептидное соединение представляет собой альдегид, включающий только 3 аминокислотных остатка, B2 предпочтительно выбирают из аргинина и глицина, включающих N-концевую защитную группу.
В другом аспекте изобретения пептидное соединение включает, по меньшей мере, четыре аминокислотных остатка. Предпочтительно, пептидное соединение, содержащее, по меньшей мере, четыре аминокислотных остатка, защищают с помощью N-концевой защитной группы. Соответственно, в этом аспекте изобретение относится к соединениям, где B2 представляет собой, по меньшей мере, два аминокислотных остатка, включающих N-концевую защитную группу.
В предпочтительном аспекте, в случае где пептидное соединение включает, по меньшей мере, четыре аминокислотных остатка, B2 включает N-концевой аминокислотный остаток, содержащий неполярную боковую цепь. В более предпочтительном воплощении второй аминокислотный остаток B2, считая от места присоединения к B1, содержит неполярную боковую цепь. В еще более предпочтительном воплощении пептидное соединение включает четыре аминокислотных остатка, где N-концевой аминокислотный остаток, содержащий неполярную боковую цепь, выбирают из глицина, лейцина, фенилаланина, тирозина и триптофана. Предпочтительно, N-концевой аминокислотный остаток дополнительно включает N-концевую защитную группу.
Предпочтительно, чтобы B1 представлял собой небольшой аминокислотный остаток. Более предпочтительно, B1 представляет собой аланин или валин. В этом контексте, предполагается, что следующие аминокислоты являются небольшими аминокислотами: аланин, цистеин, глицин, пролин, серин, треонин, валин, норвалин, норлейцин.
Пептидное соединение может представлять собой альдегид, где R представляет собой водород, B1 представляет собой одну аминокислоту, предпочтительно выбранную из небольших аминокислот, таких как валин и аланин, B2 включает, по меньшей мере, два аминокислотных остатка, и где, по меньшей мере, один из указанных аминокислотных остатков выбирают из фенилалланина, глицина и лейцина и где, второй аминокислотный остаток B2, содержащий неполярную боковую цепь, выбирают из фенилаланина, глицина, лейцина, тирозина и триптофана. Предпочтительно, B2 включает ацетильную (Ac) N-концевую защитную группу, представляя среди прочего соединения пептидных альдегидов Ac-FGAY-H, Ac-LGAY-H, Ac-YGAY-H, Ac-FGVY-H и Ac-WLVY-H. Предпочтительно, соединения согласно этому аспекту изобретения включают менее чем 10 аминокислотных остатков, например 9, 8, 7, 6, 5 или, наиболее предпочтительно, 4 аминокислотных остатка.
В другом аспекте пептидное соединение может представлять собой трипептидный альдегид, где R представляет собой водород, B1 представляет собой один аминокислотный остаток, выбранный из небольших аминокислот, например, валина и аланина, B2 включает аминокислотные остатки, выбранные из аргинина, глицина и лейцина. Предпочтительно, B2 включает N-концевую защитную группу, выбранную из бензилоксикарбонила (Z) и ацетила (Ac), с получением среди прочего соединений пептидных альдегидов Z-RAY-H, Z-GAY-H, Z-GAL-H, Z-GAF-H, Z-GAV-H, Z-RVY-H, Z-LVY-H и Ac-GAY-H. Наиболее предпочтительно, согласно этому аспекту B2 включает бензилоксикарбонильную (Z) N-концевую защитную группу.
В предпочтительном аспекте, в случае где пептидное соединение включает, по меньшей мере, четыре аминокислотных остатка, B2 включает N-концевой аминокислотный остаток, содержащий неполярную боковую цепь. В контексте настоящего изобретения с помощью термина "аминокислоты с неполярными боковыми цепями" обозначают аминокислоту или аминокислотный остаток, выбранные из группы, включающей фенилаланин, тирозин, триптофан, изолейцин, лейцин, метионин, валин, аланин, пролин, норвалин или норлейцин.
Особенно предпочтительные пептидные альдегиды по настоящему изобретению включают Z-RAY-H, Ac-GAY-H, Z-GAY-H, Z-GAL-H, Z-GAF-H, Z-GAV-H, Z-RVY-H, Z-LVY-H, Ac-LGAY-H, Ac-FGAY-H, Ac-YGAY-H, Ac-FGVY-H или Ac-WLVY-H, где Z представляет собой бензилоксикарбонил и Ac представляет собой ацетил.
N-концевая защитная группа
N-концевая защитная группа может представлять собой любую аминоконцевую защитную группу, которая может применяться в пептидном синтезе. Публикация Gross and Meinhoffer, eds., The Peptides, Vol. 3; 3-88 (1981), Academic Press, New York 1981, раскрывает многочисленные подходящие защитные группы для амина и для этой цели включена в настоящий документ с помощью ссылки.
Примеры подходящих групп включают формильную, ацетильную, бензоильную, трифторацетильную, фторметоксикарбонильную, метоксисукцинильную, ароматические уретановые защитные группы, такие как бензилоксикарбонильная; и алифатические уретановые защитные группы, такие как трет-бутилоксикарбонильная или адамантилоксикарбанильная, пара-метоксибензилкарбонильная (MOZ), бензильная (Bn), пара-метоксибензильная (PMB) или пара-метоксифенильная (PMP).
Предпочтительно, N-концевую защитную группу по настоящему изобретению выбирают из формила, ацетила, бензоила, ароматических или алифатических уретанов, более предпочтительно из ацетила или бензилоксикарбонила. В случае где пептидное соединение включает три аминокислоты, N-концевая защитная группа предпочтительно представляет собой ароматический уретан или алифатический уретан или ароматическую N-концевую защитную группу, в частности, бензилоксикарбонил (Cbz), пара-метоксибензилкарбонил (MOZ), бензил (Bn), пара-метоксибензил (PMB) или пара-метоксифенил (PMP), более предпочтительно, бензилоксикарбонил. В случае, где пептидное соединение включает четыре или более аминокислот, предпочтительно, чтобы N-концевая защитная группа представляла собой формил, ацетил или бензоил, более предпочтительно, ацетил.
Жидкая композиция
В предпочтительном воплощении пептидные соединения по настоящему изобретению применяются для стабилизации или ингибирования субтилизинов в жидких композициях, которые могут дополнительно включать поверхностно-активное вещество или другие ферменты.
В одном аспекте изобретение дополнительно относится к применению соединения, определенного выше, для стабилизации и/или ингибирования ферментов, включающих протеазу типа субтилизина. В предпочтительном аспекте ферменты стабилизируются и/или ингибируются в жидких моющих средствах. Добавление пептидного соединения к жидкому моющему средству может повысить моющую способность.
Жидкая композиция может представлять собой ферментную композицию, включающую субтилизин и необязательно второй фермент. Второй фермент может представлять собой любой коммерчески доступный фермент, в частности, фермент, выбранный из группы, состоящей из протеаз, амилаз, липаз, целлюлаз, маннаназ, оксидоредуктаз, лиаз и их любой смеси. Сюда также включены смеси ферментов из одного и того же класса (например, протеазы). Ферментная композиция также может включать другие стабилизаторы, например, полиол, такой как глицерин или пропиленгликоль, например, в количестве 25-75% по массе.
Количество фермента, используемого в жидкой композиции, варьируется согласно типу фермента(ов) и типу композиции. В композиции, такой как жидкое моющее средство, количество каждого фермента, рассчитанное для чистого ферментного белка, как правило, составляет 0,04-80 мкМ, в частности, 0,2-30 мкМ, в особенности, 0,4-20 мкМ (как правило, 1-2000 мг/л, в частности, 5-750 мг/л, в особенности, 10-500 мг/л). В композиции, такой как ферментный концентрат, количество каждого фермента, рассчитанное для чистого ферментного белка, как правило, составляет 0,01-20 мМ, в частности, 0,04-10 мМ, в особенности, 0,1-5 мМ (как правило, 0,3-500 г/л, в частности, 1-300 г/л, в особенности, 3-150 г/л).
Ферменты обычно включают в композиции моющих средств с достаточным для получения моющего эффекта уровнем, который известен специалисту в данной области. Обычно количество ферментов находится в интервале от 0,0001% (масс./масс.) до 5% (масс./масс.). Типичные количества находятся в интервале от 0,01% до 1% по массе композиции жидкого моющего средства. Молярное соотношение стабилизатора или ингибитора фермента согласно изобретению к протеазе составляет, по меньшей мере, 1:1 или 1,5:1, и составляет менее чем 1000:1, более предпочтительно, менее чем 500:1, еще более предпочтительно от 100:1 до 2:1 или от 20:1 до 2:1, или, наиболее предпочтительно, молярное соотношение составляет от 10:1 до 3:1.
В одном предпочтительном аспекте изобретение относится к композиции, включающей от 1 до 95% моющих(его) поверхностно-активных(ого) веществ(а) по массе, от 0,0001 до 5% по массе субтилизина, и от 0,00001 до 1% ингибитора пептида по массе, определенного выше. В более предпочтительном воплощении изобретение относится к композиции, включающей от 2 до 60% по массе моющих(его) поверхностно-активных(ого) веществ(а), от 0,0005 до 1% субтилизина по массе, и от 0,00005 до 0,2% определенного выше ингибитора пептида по массе. В еще более предпочтительном воплощении изобретение относится к композиции, включающей от 3 до 50% моющих(его) поверхностно-активных(ого) веществ(а) по массе, от 0,001 до 0,5% субтилизина по массе, и от 0,0001 до 0,1% определенного выше ингибитора пептида по массе.
Субтилизин
Субтилизин может быть животного, растительного или микробного происхождения, включая химически или генетически модифицированные мутанты. Он может быть сериновой протеазой, предпочтительно щелочной микробной протеазой. Примеры представляют собой протеазы типа субтилизина из группы I-S, определенной Siezen et al. (Protein Engineering, 1991 , vol. 4 no. 7 pp. 719-737). Примеры субтилизинов представляют собой субтилизины, полученные из Bacillus, например, субтилизин Novo, субтилизин Carlsberg, субтилизин BPN', субтилизин 309, субтилизин 147 и субтилизин 168 (описанные в WO 89/06279). Примеры описаны в WO 1998/020115, WO 01/44452, WO 01/58275, WO 01/58276, WO 2003/006602 и WO 2004/099401.
Примеры коммерчески доступных протеаз (пептидаз) включают KannaseTM, EverlaseTM, EsperaseTM, AlcalaseTM, NeutraseTM, DurazymTM, SavinaseTM, OvozymeTM, LiguanaseTM, PolarzymeTM, PyraseTM, панкреатический Трипсин NOVO (PTN), BiO-FeedTM Pro и Clear-LensTM Pro (все доступны от Novozymes A/S, Багсваерд, Дания). Другие коммерческие легкодоступные протеазы включают RonozymeTM Pro, MaxataseTM, MaxacalTM, MaxapemTM, OpticleanTM, ProperaseTM, PurafectTM, Purafect OxTM и Purafect PrimeTM (доступны от Genencor International Inc., Gist-Brocades, BASF, или от DSM Nutritional Products).
Второй фермент
Дополнительно к субтилизину жидкая композиция может включать второй фермент, выбранный из группы, состоящей из амилаз, липаз, целлюлаз, маннаназ, оксидоредуктаз и лиаз; особенно предпочтительной является жидкая композиция, в которой второй фермент представляет собой липазу.
Подходящие амилазы (альфа и/или бета) включают амилазы бактериального или грибкового происхождения. Сюда включены химически или генетически модифицированные мутанты. Амилазы включают, например, альфа-амилазу из B. licheniformis, описанную в GB 1296839. Коммерчески доступные амилазы представляют собой DuramylTM, TermamylTM, StainzymeTM, Stainzyme PlusTM, Termamyl UltraTM, FungamylTM и BANTM (доступные от Novozymes A/S) и RapidaseTM, Maxamyl РTM, Purastar и Purastar OxAm (доступные от Gist-Brocades и Genencor Inc.).
Подходящие целлюлазы могут быть бактериального или грибкового происхождения. Сюда включены химически или генетически модифицированные мутанты. Целлюлаза может быть из Humicola insolens (US 4435307) или из Trichoderma, например T. reesei или T. viride. Примеры целлюлаз описаны в EP 0495257. Коммерчески доступные целлюлазы включают CarezymeTM, CelluzymeTM, CellucleanTM, CelluclastTM и EndolaseTM (доступные от Novozymes), Puradax, Puradax HA и Puradax EG (доступные от Genencor).
Подходящие оксидоредуктазы включают пероксидазу или оксидазу, такую как лакказа. Сюда включены химически или генетически модифицированные мутанты. Пероксидаза может быть растительного, бактериального или грибкового происхождения. Примеры представляют собой пероксидазы, полученные из штамма Coprinus, например, C. cinerius или C. macrorhizus, или из штамма Bacillus, например, B. pumilus, в частности, пероксидаза согласно WO 91/05858. Подходящие лакказы согласно настоящему документу включают лакказы бактериального или грибкового происхождения. Примеры представляют собой лакказы из Trametes, например, T. villosa или T. versicolor, или из штамма Coprinus, например, C. cinereus, или из штамма Myceliophthora, например, M. thermophila.
Подходящие липолитические ферменты включают липазу или кутиназу бактериального или грибкового происхождения. Сюда включены химически или генетически модифицированные мутанты. Примеры включают липазу из Thermomyces lanuginosus (Humicola lanuginosa), описанную в EP 258068 и EP 305216, липазу Rhizomucor miehei, описанную например, в EP 238023, липазу Candida, такую как липаза C. antarctica, например, липаза А или В из C. antarctica, которые описаны в EP 214761, липазу Fusarium oxysporum (WO 98/26057), липазу Pseudomonas, такую как липаза из P. pseudoalcaligenes и P. alcaligenes, которые описаны например, в EP 218272, липазу P. cepacia, описанную например, в EP 331376, липазу P. stutzeri, раскрытую например в BP 1372034, липазу P. fluorescens, липазу Bacillus, например, липазу B. subtilis (Dartois et al. (1993), Biochemica et Biophysica acta 1131, 253-260), липазу B. stearothermophilus (JP 64/744992), липазу B. pumilus (WO 91/16422), липазу Penicillium camenbertii (Yamaguchi et al. (1991), Gene 103, 61-67), липазу Geotrichum candidum (Shimada, Y. et al. (1989), J. Biochem. 106, 383-388), и разнообразные липазы из Rhizopus, такие как липаза R. delemar (Hass, M.J. et al. (1991), Gene 109, 117-113), липазу R. niveus (Kugimiya et al. (1992), Biosci. Biotech. Biochem. 56, 716-719) и липазу R. oryzae. Дополнительные примеры представляют собой кутиназу из Pseudomonas mendocina (WO 88/09367), кутиназу из Fusarium solani pisi (WO 90/09446) и кутиназу из Humicola insolens (WO 2001/092502). Липолитический фермент может представлять собой вариант липазы, описанный, например, в WO 2000/060063.
Примеры коммерчески доступных липаз включают LipexTM, LipoprimeTM, LipopanTM, Lipopan FTM, Lipopan XtraTM, LipolaseTM, LipolaseTM Ultra, LipozymeTM, PalataseTM, ResinaseTM, NovozymTM 435 и LecitaseTM (все доступны от Novozymes A/S). Другие коммерчески доступные липазы включают LumafastTM (липаза Pseudomonas mendocina от Genencor International Inc.); LipomaxTM (липаза Ps. pseudoalcaligenes от Gist-Brocades/Genencor Int. Inc.); и липазу Bacillus sp. от фермента Solvay. Дополнительные липазы доступны из других источников, такие как липаза P "Amano" (Amano Pharmaceutical Co. Ltd.).
Подходящие маннаназы включают маннаназы бактериального или грибкового происхождения. Сюда включены химически или генетически модифицированные мутанты. Примеры коммерчески доступных маннаназ включают MannawayTM (продукт Novozymes) и MannaStar (продукт Genencor).
Подходящие лиазы включают лиазы бактериального или грибкового происхождения. Сюда включены химически или генетически модифицированные мутанты. Примеры лиаз включают пектат-лиазу и пектин-лиазу. Примеры коммерчески доступных лиаз представляют собой PectawashTM и PectawayTM (продукты Novozymes).
Настоящее изобретение дополнительно описано с помощью следующих примеров, которые не следует понимать как ограничение рамок сущности изобретения.
ПРИМЕРЫ
Пример 1
Разнообразные пептидные альдегиды были произведены компанией, специализирующейся на пептидном синтезе, все с чистотой >80%. Пептидные альдегиды растворяют в ДМСО до концентрации 10 мг/мл перед использованием.
Модельное жидкое моющее средство получают для тестирования разнообразных стабилизаторов:
Основа моющего средства:
Компонент % масс./масс.
Алкилэтоксисульфат натрия (С9-15, 2ЕО) 6,0
Додецилбензолсульфонат натрия 3,0
Толуолсульфонат натрия 3,0
Олеиновая кислота 2,0
Этоксилат первичного спирта (С12-15, 7ЕО) 3,0
Этоксилат первичного спирта (С12-15, 3ЕО) 2,5
Этанол 0,5
Монопропиленгликоль 2,0
Тринатрийцитрат 2Н2О 4,0
Триэтаноламин 0,4
Деионизированная вода Добавляли 100%
рН доводили до 8,5 с помощью NaOH
Получали эталонное моющее средство с ферментами:
Моющее средство A:
Компонент % масс./масс.
Основа моющего средства 99,0
Протеаза (Savinase 16,0 LEX) 0,5
Липаза (Lipex 100L) 0,5
Далее получали следующие моющие средства со стабилизаторами по изобретению, все примеры нормализованы к 100 г моющего средства:
ID Моющего средства Моющее средство А Стабилизатор (из раствора 10 мг/мл) Молярный избыток ингибитора по отношению к протеазе
B1 1,3 мг Z-RAY-H 3
B2 2,2 мг Z-RAY-H 5
B3 4,4 мг Z-RAY-H 10
C1 2,8 мг Ac-GAY-H 10
C2 7,0 мг Ac-GAY-H 25
D1 1,8 мг Z-GAY-H 5
D2 3,6 мг Z-GAY-H 10
E1 1,4 мг Z-RVY-H 3
E2 2,3 мг Z-RVY-H 5
E3 4,6 мг Z-RVY-H 10
F1 1,3 мг Z-LVY-H 3
F2 2,1 мг Z-LVY-H 5
F3 4,3 мг Z-LVY-H 10
G1 1,1 мг Ac-LGAY-H 3
G2 1,9 мг Ac-LGAY-H 5
G3 3,7 мг Ac-LGAY-H 10
H1 0,6 мг Ac-FGAY-H 1,5
H2 1,2 мг Ac-FGAY-H 3
H3 2 мг Ac-FGAY-H 5
H4 4 мг Ac-FGAY-H 10
H5 10 мг Ac-FGAY-H 25
I1 1,2 мг Ac-YGAY-H 3
I2 2,1 мг Ac-YGAY-H 5
I3 4,2 мг Ac-YGAY-H 10
J1 1,3 мг Ac-FGVY-H 3
J2 2,1 мг Ac-FGVY-H 5
J3 4,3 мг Ac-FGVY-H 10
K1 1,5 мг Ac-WLVY-H 3
2,5 мг Ac-WLVY-H 5
K3 5,1 мг Ac-WLVY-H 10
Моющие средства помещали в закрытые стаканы при 35°C и 40°C. Измеряли остаточную активность липазы и протеазы (путем сравнения с эталоном, который хранили при -18°C) в различные моменты времени с использованием стандартных ферментных аналитических методов (активность протеазы измеряли с помощью гидролиза N,N-диметилказеина при 40°C, pH 8,3, и активность липазы измеряли с помощью гидролиза пара-нитрофенилвалерата при 40°C, pH 7,7). В таблице, приведенной ниже, 3x обозначает 3-молярный избыток ингибитора по сравнению с протеазой и т.д.
Моющее средство Остаточная протеазная активность
1 неделя 40°С		 Остаточная липазная активность
1 неделя 35°С
A (эталон) 11% 3%
B1 (Z-RAY-H, 3х) 49% 12%
B2 (Z-RAY-H, 5х) 69% 37%
B3 (Z-RAY-H, 10х) 79% 63%
C1 (Ac-GAY-H, 10х) 59%
C2 (Ac-GAY-H, 25х) 73% 62%
D1 (Z-GAY-H, 5х) 55% 22%
D2 (Z-GAY-H, 10х) 77% 49%
E1 (Z-RVY-H, 3х) 54% 21%
E2 (Z-RVY-H, 5х) 67% 36%
E3 (Z-RVY-H, 10х) 80% 61%
F1 (Z-LVY-H, 3х) 32% 7%
F2 (Z-LVY-H, 5х) 43% 15%
F3 (Z-LVY-H, 10х) 59% 33%
G1 (Ac-LGAY-H, 3х) 62% 33%
G2 (Ac-LGAY-H, 5х) 82% 56%
G3 (Ac-LGAY-H, 10х) 90% 66%
H1 (Ac-FGAY-H, 1,5х) 24% 4%
H2 (Ac-FGAY-H, 3х) 42% 12%
H3 (Ac-FGAY-H, 5х) 78% 63%
H4 (Ac-FGAY-H, 10х) 91% 72%
H5 (Ac-FGAY-H, 25х) 93% 72%
I1 (Ac-YGAY-H, 3х) 53% 14%
I2 (Ac-YGAY-H, 5х) 90% 66%
I3 (Ac-YGAY-H, 10х) 88% 75%
J1 (Ac-FGVY-H, 3х) 62% 48%
J2 (Ac-FGVY-H, 5х) 82% 66%
J3 (Ac-FGVY-H, 10х) 96% 70%
K1 (Ac-WLVY-H, 3х) 26% 3%
K2 (Ac-WLVY-H, 5х) 35% 8%
K3 (Ac-WLVY-H, 10х) 53% 18%
Результаты демонстрируют, что тирозиновые пептидные альдегиды представляют собой очень эффективные стабилизаторы протеаз.
Пример 2
Получали эталонное моющее средство с ферментами:
Моющее средство L:
Компонент % масс./масс.
Основа моющего средства из примера 1 98,5
Протеаза (Савиназа 16,0 LEX) 0,5
Липаза (Липекс 100L) 0,5
Амилаза (Стаинзим 12L) 0,5
Получали следующее моющее средство со стабилизатором по изобретению и нормализовали к 100 г моющего средства:
ID моющего средства Моющее средство L Стабилизатор (из раствора 10 мг/мл) Молярный избыток ингибитора по отношению к протеазе
М 2 мг Ac-FGAY-H 5
Моющие средства помещали в закрытые стаканы при 25°C и 35°C. Измеряли остаточную активность липазы, амилазы и протеазы (путем сравнения с эталоном, который хранили при -18°C) в различные моменты времени (н=недели) с использованием стандартных ферментных аналитических методов (активность протеазы измеряли с помощью гидролиза N,N-диметилказеина при 40°C, pH 8,3, и активность липазы измеряли с помощью гидролиза пара-нитрофенилвалерата при 40°C, pH 7,7 и активность амилазы измеряли с помощью гидролиза 4,6-этилиден-(G7)пара-нитрофенил-(G1)-α,D-мальтогептазоида при 37°C, pH 7,35).
% остаточной активности Остаточная протеазная активность Остаточная липазная активность Остаточная амилазная активность
Моющее средство 4н 35°C 13н 25°C 4н 35°C 13н 25°C 4н 35°C 13н 25°C
L (эталон) 35% 62% 1% 2% 34% 42%
M (Ac-FGAY-H, 5×) 91% 100% 16% 71% 70% 88%
Видно, что тирозиновый пептидный альдегид значительно улучшает стабильность протеазы, липазы и амилазы в жидком моющем средстве при хранении.
Пример 3
Пептидные альдегиды Z-GAF-H, Z-GAL-H и Z-GAY-H получали с помощью пептидного синтеза, все с чистотой >80%. Пептидные альдегиды растворяли в ДМСО до концентрации 10 мг/мл перед использованием.
Получали следующее моющее средство N с ферментами:
Компонент % масс./масс.
Алкилэтоксисульфат натрия (С9-15, 2ЕО) 20,0
Толуолсульфонат натрия 3,0
Олеиновая кислота 4,0
Этоксилат первичного спирта (С12-15, 7ЕО) 2,5
Этоксилат первичного спирта (С12-15, 3ЕО) 2,0
Этанол 2,1
Карбонат натрия 4,5
Тринатрийцитрат 2Н2О 5,0
Деионизированная вода Добавляли 99%
рН доводили до 8,0 с помощью NaOH
Протеаза (Савиназа 16.0 LEX) 0,5
Липаза (Липекс 100L) 0,5
Получали следующие моющие средства со стабилизатором по изобретению и нормализовали к 100 г моющего средства:
ID моющего средства Моющее средство А Стабилизатор (из раствора 10 мг/мл) Молярный избыток ингибитора по отношению к протеазе
P (этанол) Нет 0
Q1 0,16 мг Z-GAL-H 0,5
Q2 0,31 мг Z-GAL-H 1,0
Q3 0,62 мг Z-GAL-H 2,0
Q4 1,6 мг Z-GAL-H 5,0
R1 0,17 мг Z-GAF-H 0,5
R2 0,34 мг Z-GAF-H 1,0
R3 0,68 мг Z-GAF-H 2,0
R4 1,7 мг Z-GAF-H 5,0
S1 0,18 мг Z-GAY-H 0,5
S2 0,35 мг Z-GAY-H 1,0
S3 100 г 0,71 мг Z-GAY-H 2,0
S4 1,8 мг Z-GAY-H 5,0
Моющие средства помещали в закрытые стаканы при 40°C. Измеряли остаточную протеазную активность (путем сравнения с эталоном, который хранили при -18°C) через 1 неделю с использованием стандартных ферментных аналитических методов (активность протеазы измеряли с помощью гидролиза N,N-диметилказеина при 40°C, pH 8,3).
% остаточной протеазной активности через 1 неделю при 40°C:
Молярный избыток ингибитора по отношению к протеазе Моющее средство N (эталон) Моющее средство N + Z-GAL-H Моющее средство N + Z-GAF-H Моющее средство N + Z-GAY-H
0 7% (P)
0,5 12% (Q1) 11%(R1) 13%(S1)
1 17% (Q2) 18%(R2) 28%(S2)
2 31% (Q3) 28%(R3) 41%(S3)
5 42% (Q4) 44%(R4) 65%(S4)
Результаты демонстрируют, что все три пептидных альдегида являются эффективными для стабилизации протеазы. Было обнаружено, что тирозиновый пептидный альдегид Z-GAY-H является наиболее эффективным, поскольку он требует только приблизительно половину избытка ингибитора по отношению к протеазе для достижения таких же остаточных активностей, как с использованием других пептидных альдегидов.

Claims (10)

1. Жидкая композиция для стабилизации субтилизина, содержащая субтилизин и пептидный альдегид формулы B2-B1-B0-Н, где
Н означает водород;
B0 представляет собой остаток Tyr;
B1 представляет собой один аминокислотный остаток Ala или Val; и
B2 представляет собой один аминокислотный остаток с присоединенной бензилоксикарбонильной группой (Cbz), или В2 представляет собой два аминокислотных остатка, содержащих ацетильную (Ас) N-концевую защитную группу; и
где молярное соотношение пептидного альдегида к субтилизину составляет от по меньшей мере 1:1 до менее чем 1000:1.
2. Композиция по п.1, где B2 представляет собой один остаток Gly, Arg или Leu с присоединенной бензилоксикарбонильной (Cbz) группой.
3. Композиция по п.1, где B2 состоит из двух аминокислотных остатков, содержащих ацетильную (Ас) N-концевую защитную группу, где один из остатков В2 представляет собой Phe, Gly или Leu, а второй остаток В2 представляет собой Phe, Gly, Leu, Tyr или Trp.
4. Жидкая композиция для стабилизации субтилизина, содержащая субтилизин и пептидный альдегид формулы Z-RAY-H, Ac-GAY-H, Z-GAY-H, Z-RVY-H, Z-LVY-H, Ac-LGAY-H, Ac-FGAY-H, Ac-YGAY-H, Ac-FGVY-H или Ac-WLVY-H, где Z представляет собой бензилоксикарбонил, и Ac представляет собой ацетил, где молярное соотношение указанного пептидного альдегида к субтилизину составляет от по меньшей мере 1:1 до менее чем 1000:1.
5. Композиция по п.4, представляющая собой Z-RAY-H, Z-GAY-H, Z-RVY-H или Z-LVY-H, где Z представляет собой бензилоксикарбонил.
RU2013156600A 2008-03-26 2013-12-19 Стабилизированные жидкие ферментные композиции RU2668563C2 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP08153299.6 2008-03-26
EP08153299 2008-03-26

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2010143597/04A Division RU2510662C2 (ru) 2008-03-26 2009-03-26 Стабилизированные жидкие ферментные композиции

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2018131246A Division RU2018131246A (ru) 2008-03-26 2018-08-30 Стабилизированные жидкие ферментные композиции

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2013156600A RU2013156600A (ru) 2015-06-27
RU2668563C2 true RU2668563C2 (ru) 2018-10-02

Family

ID=39671331

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2010143597/04A RU2510662C2 (ru) 2008-03-26 2009-03-26 Стабилизированные жидкие ферментные композиции
RU2013156600A RU2668563C2 (ru) 2008-03-26 2013-12-19 Стабилизированные жидкие ферментные композиции
RU2018131246A RU2018131246A (ru) 2008-03-26 2018-08-30 Стабилизированные жидкие ферментные композиции

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2010143597/04A RU2510662C2 (ru) 2008-03-26 2009-03-26 Стабилизированные жидкие ферментные композиции

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2018131246A RU2018131246A (ru) 2008-03-26 2018-08-30 Стабилизированные жидкие ферментные композиции

Country Status (10)

Country Link
US (1) US9181296B2 (ru)
EP (2) EP3725797A1 (ru)
JP (2) JP5973166B2 (ru)
CN (2) CN107090014B (ru)
BR (1) BRPI0909084B1 (ru)
ES (1) ES2807603T3 (ru)
MX (1) MX2010010348A (ru)
PL (1) PL2271660T3 (ru)
RU (3) RU2510662C2 (ru)
WO (1) WO2009118375A2 (ru)

Families Citing this family (169)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011076897A1 (en) 2009-12-22 2011-06-30 Novozymes A/S Use of amylase variants at low temperature
EP2343310A1 (en) 2010-01-08 2011-07-13 Novozymes A/S Serine hydrolase formulation
WO2011098531A1 (en) 2010-02-10 2011-08-18 Novozymes A/S Variants and compositions comprising variants with high stability in presence of a chelating agent
EP2357220A1 (en) 2010-02-10 2011-08-17 The Procter & Gamble Company Cleaning composition comprising amylase variants with high stability in the presence of a chelating agent
WO2012110563A1 (en) 2011-02-16 2012-08-23 Novozymes A/S Detergent compositions comprising metalloproteases
CN103476916A (zh) 2011-02-16 2013-12-25 诺维信公司 包含m7或m35金属蛋白酶的去污剂组合物
EP2675883A2 (en) 2011-02-16 2013-12-25 Novozymes A/S Detergent compositions comprising metalloproteases
EP2540824A1 (en) 2011-06-30 2013-01-02 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions comprising amylase variants reference to a sequence listing
DK2726592T3 (en) 2011-07-01 2015-07-06 Novozymes As stabilized subtilisinsammensætning
US20140228274A1 (en) * 2011-07-01 2014-08-14 Novozymes A/S Liquid Detergent Composition
MX350391B (es) 2011-09-22 2017-09-06 Novozymes As Polipeptidos que poseen actividad proteasa y polinucleotidos que los codifican.
MX2014006205A (es) 2011-11-25 2014-07-14 Novozymes As Variantes de subtilasa y polinucleotidos que las codifican.
WO2013092635A1 (en) 2011-12-20 2013-06-27 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
EP2607468A1 (en) 2011-12-20 2013-06-26 Henkel AG & Co. KGaA Detergent compositions comprising subtilase variants
CN104114698A (zh) 2012-02-17 2014-10-22 诺维信公司 枯草杆菌蛋白酶变体以及编码它们的多核苷酸
ES2582608T3 (es) 2012-02-17 2016-09-14 Henkel Ag & Co. Kgaa Composiciones detergentes que comprenden variantes de subtilasa
US10407650B2 (en) 2012-05-01 2019-09-10 Novozymes A/S Detergent compositions comprising a protease
EP2888360B1 (en) 2012-08-22 2017-10-25 Novozymes A/S Metalloproteases from alicyclobacillus sp.
BR112015003724A2 (pt) 2012-08-22 2017-08-08 Novozymes As polipeptídeo isolado, composição, uso de uma composição, polinucleotídeo isolado, constructo de ácido nucleico ou vetor de expressão, célula hospedeira recombinante, e, métodos de produção de um polipeptídeo e de produção de uma proteína.
WO2014029820A1 (en) 2012-08-22 2014-02-27 Novozymes A/S Detergent compositions comprising metalloproteases
BR112015014396B1 (pt) 2012-12-21 2021-02-02 Novozymes A/S Composição, construto de ácido nucleico ou vetor de expressão, microorganismo recombinante, métodos de melhoria do valor nutricional de uma ração animal, aditivo de ração animal, e, uso de uma ou mais proteases
WO2014115804A1 (ja) * 2013-01-25 2014-07-31 ライオン株式会社 洗浄剤用の酵素製剤及び液体洗浄剤ならびにこれらの製造方法
EP2970830B1 (en) 2013-03-14 2017-12-13 Novozymes A/S Enzyme and inhibitor contained in water-soluble films
WO2014173980A2 (en) * 2013-04-23 2014-10-30 Novozymes A/S Liquid automatic dish washing detergent compositions
MX365786B (es) 2013-05-03 2019-06-14 Novozymes As Microencapsulacion de enzimas detergentes.
WO2014207227A1 (en) 2013-06-27 2014-12-31 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
EP3013955A1 (en) 2013-06-27 2016-05-04 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
EP3339436B1 (en) 2013-07-29 2021-03-31 Henkel AG & Co. KGaA Detergent composition comprising protease variants
EP3309249B1 (en) 2013-07-29 2019-09-18 Novozymes A/S Protease variants and polynucleotides encoding same
WO2015014790A2 (en) 2013-07-29 2015-02-05 Novozymes A/S Protease variants and polynucleotides encoding same
EP3083954B1 (en) 2013-12-20 2018-09-26 Novozymes A/S Polypeptides having protease activity and polynucleotides encoding same
CN112899086A (zh) 2014-04-11 2021-06-04 诺维信公司 洗涤剂组合物
WO2016001319A1 (en) 2014-07-03 2016-01-07 Novozymes A/S Improved stabilization of non-protease enzyme
CN119709709A (zh) 2014-07-04 2025-03-28 诺维信公司 枯草杆菌酶变体以及编码它们的多核苷酸
EP3164486B1 (en) 2014-07-04 2020-05-13 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
EP3227444B1 (en) 2014-12-04 2020-02-12 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
CN119736125A (zh) 2014-12-04 2025-04-01 诺维信公司 包括蛋白酶变体的液体清洁组合物
PL3399031T3 (pl) 2014-12-15 2020-05-18 Henkel Ag & Co. Kgaa Kompozycja detergentowa zawierająca odmiany subtylazy
CN117904083A (zh) * 2014-12-19 2024-04-19 诺维信公司 蛋白酶变体以及对其进行编码的多核苷酸
EP3741849A3 (en) 2014-12-19 2021-03-17 Novozymes A/S Protease variants and polynucleotides encoding same
DE102015208655A1 (de) * 2015-05-11 2016-11-17 Henkel Ag & Co. Kgaa Enzymstabilisatoren
DE102015210828A1 (de) 2015-06-12 2016-12-15 Henkel Ag & Co. Kgaa Phosphatfreies flüssiges Geschirrspülmittel
WO2016205755A1 (en) 2015-06-17 2016-12-22 Danisco Us Inc. Bacillus gibsonii-clade serine proteases
EP3106508B1 (en) 2015-06-18 2019-11-20 Henkel AG & Co. KGaA Detergent composition comprising subtilase variants
EP3872175A1 (en) 2015-06-18 2021-09-01 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
CA2987160C (en) 2015-07-01 2022-12-13 Novozymes A/S Methods of reducing odor
CN107969136B (zh) 2015-07-06 2021-12-21 诺维信公司 脂肪酶变体以及编码它们的多核苷酸
WO2017060493A1 (en) 2015-10-07 2017-04-13 Novozymes A/S Polypeptides
US10675589B2 (en) 2015-10-14 2020-06-09 Novozymes A/S Cleaning of water filtration membranes
US20180171318A1 (en) 2015-10-14 2018-06-21 Novozymes A/S Polypeptides Having Protease Activity and Polynucleotides Encoding Same
CA2996749C (en) 2015-10-28 2023-10-10 Novozymes A/S Detergent composition comprising amylase and protease variants
US11001821B2 (en) 2015-11-24 2021-05-11 Novozymes A/S Polypeptides having protease activity and polynucleotides encoding same
US10731111B2 (en) 2015-11-25 2020-08-04 Conopco, Inc. Liquid laundry detergent composition
CN108431220B (zh) 2015-12-07 2022-06-07 诺维信公司 具有β-葡聚糖酶活性的多肽、编码其的多核苷酸及其在清洁和洗涤剂组合物中的用途
EP3408366B1 (en) 2016-01-28 2021-12-08 Novozymes A/S Method for cleaning a medical or dental instrument
MX2018008051A (es) 2016-01-29 2018-08-23 Novozymes As Variantes de beta-glucanasa y polinucleotidos que las codifican.
CN114480035B (zh) 2016-04-08 2024-10-11 诺维信公司 洗涤剂组合物及其用途
CN109563450A (zh) 2016-05-31 2019-04-02 诺维信公司 稳定的液体过氧化物组合物
EP3464599A1 (en) 2016-05-31 2019-04-10 Danisco US Inc. Protease variants and uses thereof
DE102016209406A1 (de) 2016-05-31 2017-11-30 Henkel Ag & Co. Kgaa Stabilisierte Enzym-haltige Wasch- und Reinigungsmittel
CN109715792A (zh) 2016-06-03 2019-05-03 诺维信公司 枯草杆菌酶变体和对其进行编码的多核苷酸
US11946080B2 (en) 2016-06-17 2024-04-02 Danisco Us Inc. Protease variants and uses thereof
US11203732B2 (en) 2016-06-30 2021-12-21 Novozymes A/S Lipase variants and compositions comprising surfactant and lipase variant
EP3519548A1 (en) 2016-09-29 2019-08-07 Novozymes A/S Use of enzyme for washing, method for washing and warewashing composition
WO2018085524A2 (en) 2016-11-07 2018-05-11 Danisco Us Inc Laundry detergent composition
JP2019536879A (ja) 2016-12-01 2019-12-19 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピアＢａｓｆ Ｓｅ 組成物中の酵素の安定化
WO2018118917A1 (en) 2016-12-21 2018-06-28 Danisco Us Inc. Protease variants and uses thereof
CN110312794B (zh) 2016-12-21 2024-04-12 丹尼斯科美国公司 吉氏芽孢杆菌进化枝丝氨酸蛋白酶
MX2019009093A (es) 2017-02-01 2019-12-05 Procter & Gamble Composiciones de limpieza que comprenden variantes de amilasa.
US11453871B2 (en) 2017-03-15 2022-09-27 Danisco Us Inc. Trypsin-like serine proteases and uses thereof
WO2018202846A1 (en) 2017-05-05 2018-11-08 Novozymes A/S Compositions comprising lipase and sulfite
WO2018224544A1 (en) 2017-06-08 2018-12-13 Novozymes A/S Compositions comprising polypeptides having cellulase activity and amylase activity, and uses thereof in cleaning and detergent compositions
WO2019002356A1 (en) 2017-06-30 2019-01-03 Novozymes A/S ENZYMATIC SUSPENSION COMPOSITION
EP3692148A1 (en) 2017-10-02 2020-08-12 Novozymes A/S Polypeptides having mannanase activity and polynucleotides encoding same
US11746310B2 (en) 2017-10-02 2023-09-05 Novozymes A/S Polypeptides having mannanase activity and polynucleotides encoding same
EP3701001A1 (en) 2017-10-24 2020-09-02 Novozymes A/S Compositions comprising polypeptides having mannanase activity
EP3704240A1 (en) 2017-11-01 2020-09-09 Novozymes A/S Polypeptides and compositions comprising such polypeptides
BR112020008737A2 (pt) 2017-11-01 2020-10-13 Novozymes A/S polipeptídeos e composições que compreendam tais polipeptídeos
DE102017219993A1 (de) 2017-11-09 2019-05-09 Henkel Ag & Co. Kgaa Enzymhaltiges Wasch- oder Reinigungsmittel
BR112020010630A2 (pt) 2017-11-29 2020-11-10 Basf Se preparação de enzima líquida, processo para fabricar uma preparação de enzima, métodos para estabilizar pelo menos uma enzima e para remover manchas, e, formulação detergente.
EP3717643A1 (en) 2017-11-29 2020-10-07 Danisco US Inc. Subtilisin variants having improved stability
WO2019175240A1 (en) 2018-03-13 2019-09-19 Novozymes A/S Microencapsulation using amino sugar oligomers
EP3768835A1 (en) 2018-03-23 2021-01-27 Novozymes A/S Subtilase variants and compositions comprising same
EP3781680A1 (en) 2018-04-19 2021-02-24 Novozymes A/S Stabilized cellulase variants
CN118460512A (zh) 2018-04-19 2024-08-09 诺维信公司 稳定化的纤维素酶变体
WO2019245704A1 (en) 2018-06-19 2019-12-26 Danisco Us Inc Subtilisin variants
WO2019245705A1 (en) 2018-06-19 2019-12-26 Danisco Us Inc Subtilisin variants
EP3814489A1 (en) 2018-06-29 2021-05-05 Novozymes A/S Subtilase variants and compositions comprising same
EP3850068A1 (en) * 2018-09-11 2021-07-21 Ecolab USA Inc. Phase stable and low foaming aqueous detergent compositions having a long time enzyme activity
WO2020068486A1 (en) 2018-09-27 2020-04-02 Danisco Us Inc Compositions for medical instrument cleaning
EP3677676A1 (en) 2019-01-03 2020-07-08 Basf Se Compounds stabilizing amylases in liquids
US20210395650A1 (en) 2018-10-05 2021-12-23 Basf Se Compounds stabilizing hydrolases in liquids
BR112021005954A2 (pt) 2018-10-05 2021-06-29 Basf Se preparação enzimática, processo para produzir uma preparação enzimática estável, métodos para reduzir perda de atividade lipolítica de pelo menos uma lipase, para preparar uma formulação de detergente, para remover manchas e para aumentar a estabilidade de armazenagem de uma formulação de detergente líquido, usos de um composto e da preparação enzimática, e, formulação de detergente.
MX2021003931A (es) 2018-10-05 2021-06-04 Basf Se Compuestos estabilizadores de amilasas en liquidos.
EP3647397A1 (en) 2018-10-31 2020-05-06 Henkel AG & Co. KGaA Cleaning compositions containing dispersins iv
ES2981999T3 (es) 2018-10-31 2024-10-14 Henkel Ag & Co Kgaa Composiciones limpiadoras que contienen dispersinas V
DE102018129277A1 (de) 2018-11-21 2020-05-28 Henkel Ag & Co. Kgaa Mehrkomponenten Wasch- oder Reinigungsmittel enthaltend eine Chinon-Oxidoreduktase
EP3887515A1 (en) 2018-11-28 2021-10-06 Danisco US Inc. Subtilisin variants having improved stability
WO2020114965A1 (en) 2018-12-03 2020-06-11 Novozymes A/S LOW pH POWDER DETERGENT COMPOSITION
US20220056379A1 (en) 2018-12-03 2022-02-24 Novozymes A/S Powder Detergent Compositions
EP3702452A1 (en) 2019-03-01 2020-09-02 Novozymes A/S Detergent compositions comprising two proteases
US11248194B2 (en) 2019-03-14 2022-02-15 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions comprising enzymes
US10988715B2 (en) 2019-03-14 2021-04-27 The Procter & Gamble Company Method for treating cotton
US20200291332A1 (en) 2019-03-14 2020-09-17 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions comprising enzymes
BR112021019809A2 (pt) 2019-04-03 2021-12-07 Novozymes As Polipeptídeos que têm atividade de beta-glucanase, polinucleotídeos que codificam os mesmos e seus usos em composições de limpeza e de detergentes
EP3953463A1 (en) 2019-04-12 2022-02-16 Novozymes A/S Stabilized glycoside hydrolase variants
WO2020229480A1 (en) 2019-05-14 2020-11-19 Basf Se Compounds stabilizing hydrolases in liquids
EP3976776A1 (en) 2019-05-24 2022-04-06 Danisco US Inc. Subtilisin variants and methods of use
WO2020247582A1 (en) 2019-06-06 2020-12-10 Danisco Us Inc Methods and compositions for cleaning
CN118834855A (zh) 2019-06-24 2024-10-25 宝洁公司 包含淀粉酶变体的清洁组合物
EP3994148A1 (en) 2019-07-01 2022-05-11 Basf Se Peptide acetals for stabilising enzymes
US20220403298A1 (en) 2019-07-12 2022-12-22 Novozymes A/S Enzymatic emulsions for detergents
CN114466927A (zh) 2019-09-23 2022-05-10 巴斯夫欧洲公司 用于具有pH 5-12的制剂的甘露聚糖酶
CN114514306A (zh) 2019-09-23 2022-05-17 巴斯夫欧洲公司 用于具有pH 5-12的制剂的甘露聚糖酶
CN114585718A (zh) 2019-10-18 2022-06-03 巴斯夫欧洲公司 储存稳定的包含水解酶的液体
WO2021115912A1 (en) 2019-12-09 2021-06-17 Basf Se Formulations comprising a hydrophobically modified polyethyleneimine and one or more enzymes
CN114929848A (zh) 2019-12-20 2022-08-19 诺维信公司 稳定的液体无硼酶组合物
US20220411773A1 (en) 2019-12-20 2022-12-29 Novozymes A/S Polypeptides having proteolytic activity and use thereof
EP4081626A1 (en) 2019-12-23 2022-11-02 The Procter & Gamble Company Compositions comprising enzymes
US20250002888A1 (en) 2020-01-31 2025-01-02 Novozymes A/S Mannanase variants and polynucleotides encoding same
WO2021152123A1 (en) 2020-01-31 2021-08-05 Novozymes A/S Mannanase variants and polynucleotides encoding same
US20230143128A1 (en) 2020-04-08 2023-05-11 Novozymes A/S Carbohydrate binding module variants
WO2021239818A1 (en) 2020-05-26 2021-12-02 Novozymes A/S Subtilase variants and compositions comprising same
WO2022008732A1 (en) 2020-07-10 2022-01-13 Basf Se Enhancing the activity of antimicrobial preservatives
EP4204551A2 (en) 2020-08-25 2023-07-05 Novozymes A/S Variants of a family 44 xyloglucanase
WO2022047149A1 (en) 2020-08-27 2022-03-03 Danisco Us Inc Enzymes and enzyme compositions for cleaning
US20230323330A1 (en) 2020-08-28 2023-10-12 Novozymes A/S Polyester degrading protease variants
US20240240114A1 (en) 2020-09-22 2024-07-18 Basf Se Improved Combination of Protease and Protease Inhibitor with Secondary Enzyme
US20240052270A1 (en) 2020-09-22 2024-02-15 Basf Se Liquid composition comprising peptide aldehyde
WO2022094163A1 (en) 2020-10-29 2022-05-05 The Procter & Gamble Company Cleaning composition comprising alginate lyase enzymes
GB202017605D0 (en) * 2020-11-06 2020-12-23 Smarti Env Ltd biocidal Composition
WO2023288294A1 (en) 2021-07-16 2023-01-19 Novozymes A/S Compositions and methods for improving the rainfastness of proteins on plant surfaces
EP4032966A1 (en) 2021-01-22 2022-07-27 Novozymes A/S Liquid enzyme composition with sulfite scavenger
US20240117275A1 (en) 2021-01-29 2024-04-11 Danisco Us Inc. Compositions for cleaning and methods related thereto
US20240150396A1 (en) * 2021-03-03 2024-05-09 The Texas A&M University System Inhibitors of cysteine proteases
WO2022189521A1 (en) 2021-03-12 2022-09-15 Novozymes A/S Polypeptide variants
JP2023548846A (ja) 2021-03-15 2023-11-21 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー ポリペプチドバリアントを含有する洗浄組成物
CN117157382A (zh) 2021-05-05 2023-12-01 宝洁公司 制备清洁组合物及检测污垢的方法
EP4108767A1 (en) 2021-06-22 2022-12-28 The Procter & Gamble Company Cleaning or treatment compositions containing nuclease enzymes
EP4363544A1 (en) 2021-06-30 2024-05-08 Henkel AG & Co. KGaA Cleaning composition with improved anti-gray performance and/or anti-pilling performance
WO2023274923A1 (en) 2021-06-30 2023-01-05 Henkel Ag & Co. Kgaa Composition with improved moisture management performance
WO2023274922A1 (en) 2021-06-30 2023-01-05 Henkel Ag & Co. Kgaa Cleaning composition comprising lipolytic enzyme having polyesterase activity
WO2023278297A1 (en) 2021-06-30 2023-01-05 Danisco Us Inc Variant lipases and uses thereof
US20240384205A1 (en) 2021-09-03 2024-11-21 Danisco Us Inc. Laundry compositions for cleaning
US20250051748A1 (en) 2021-12-16 2025-02-13 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
EP4448750A2 (en) 2021-12-16 2024-10-23 Danisco US Inc. Subtilisin variants and uses thereof
CN118679252A (zh) 2021-12-16 2024-09-20 丹尼斯科美国公司 枯草杆菌蛋白酶变体和使用方法
CN118974227A (zh) 2022-03-01 2024-11-15 丹尼斯科美国公司 用于清洁的酶和酶组合物
EP4273210A1 (en) 2022-05-04 2023-11-08 The Procter & Gamble Company Detergent compositions containing enzymes
EP4273209A1 (en) 2022-05-04 2023-11-08 The Procter & Gamble Company Machine-cleaning compositions containing enzymes
EP4525615A2 (en) 2022-05-14 2025-03-26 Novozymes A/S Compositions and methods for preventing, treating, supressing and/or eliminating phytopathogenic infestations and infections
CN119487167A (zh) 2022-06-21 2025-02-18 丹尼斯科美国公司 用于清洁的包含具有嗜热菌蛋白酶活性的多肽的组合物和方法
WO2024050346A1 (en) 2022-09-02 2024-03-07 Danisco Us Inc. Detergent compositions and methods related thereto
CN119816592A (zh) 2022-09-02 2025-04-11 丹尼斯科美国公司 甘露聚糖酶变体和使用方法
WO2024050343A1 (en) 2022-09-02 2024-03-07 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods related thereto
WO2024102698A1 (en) 2022-11-09 2024-05-16 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
AU2023388516A1 (en) 2022-12-05 2025-04-10 Novozymes A/S Protease variants and polynucleotides encoding same
WO2024126697A1 (en) 2022-12-14 2024-06-20 Novozymes A/S High strength liquid protease formulations
WO2024131880A2 (en) 2022-12-23 2024-06-27 Novozymes A/S Detergent composition comprising catalase and amylase
CN118974229A (zh) 2023-02-01 2024-11-15 宝洁公司 含有酶的洗涤剂组合物
WO2024163584A1 (en) 2023-02-01 2024-08-08 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
EP4414443A1 (en) 2023-02-09 2024-08-14 Henkel AG & Co. KGaA Cleaning composition comprising polyesterase
WO2024186819A1 (en) 2023-03-06 2024-09-12 Danisco Us Inc. Subtilisin variants and methods of use
WO2024191711A1 (en) 2023-03-16 2024-09-19 Nutrition & Biosciences USA 4, Inc. Brevibacillus fermentate extracts for cleaning and malodor control and use thereof
EP4481027A1 (en) 2023-06-19 2024-12-25 The Procter & Gamble Company Cleaning compositions containing enzymes
EP4481026A1 (en) 2023-06-21 2024-12-25 The Procter & Gamble Company Detergent compositions containing enzymes
EP4488351A1 (en) 2023-07-03 2025-01-08 The Procter & Gamble Company Compositions containing a porphyrin binding protein
WO2025011933A1 (en) 2023-07-07 2025-01-16 Novozymes A/S Washing method for removing proteinaceous stains
WO2025071996A1 (en) 2023-09-28 2025-04-03 Danisco Us Inc. Variant cutinase enzymes with improved solubility and uses thereof

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1994004651A1 (en) * 1992-08-14 1994-03-03 The Procter & Gamble Company Liquid detergents containing a peptide aldehyde
WO1998013460A1 (en) * 1996-09-24 1998-04-02 The Procter & Gamble Company Liquid detergents containing proteolytic enzyme and protease inhibitors
RU2484138C2 (ru) * 2007-04-30 2013-06-10 ДАНИСКО ЮЭс ИНК., ДЖЕНЕНКОР ДИВИЖН Применение белковых гидролизатов для стабилизации детергентных составов металлопротеазы

Family Cites Families (56)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1296839A (ru) 1969-05-29 1972-11-22
DK187280A (da) 1980-04-30 1981-10-31 Novo Industri As Ruhedsreducerende middel til et fuldvaskemiddel fuldvaskemiddel og fuldvaskemetode
GB8321924D0 (en) * 1983-08-15 1983-09-14 Unilever Plc Enzymatic machine-dishwashing compositions
DK154572C (da) 1985-08-07 1989-04-24 Novo Industri As Enzymatisk detergentadditiv, detergent og fremgangsmaade til vask af tekstiler
JPH0697997B2 (ja) 1985-08-09 1994-12-07 ギスト ブロカデス ナ−ムロ−ゼ フエンノ−トチヤツプ 新規の酵素的洗浄剤添加物
DK122686D0 (da) 1986-03-17 1986-03-17 Novo Industri As Fremstilling af proteiner
US4810414A (en) 1986-08-29 1989-03-07 Novo Industri A/S Enzymatic detergent additive
EP0322429B1 (en) 1987-05-29 1994-10-19 Genencor International, Inc. Cutinase cleaning composition
DE3854249T2 (de) 1987-08-28 1996-02-29 Novonordisk As Rekombinante Humicola-Lipase und Verfahren zur Herstellung von rekombinanten Humicola-Lipasen.
JPS6474992A (en) 1987-09-16 1989-03-20 Fuji Oil Co Ltd Dna sequence, plasmid and production of lipase
DK6488D0 (da) 1988-01-07 1988-01-07 Novo Industri As Enzymer
JP3079276B2 (ja) 1988-02-28 2000-08-21 天野製薬株式会社 組換え体ｄｎａ、それを含むシュードモナス属菌及びそれを用いたリパーゼの製造法
JPH01228495A (ja) * 1988-03-09 1989-09-12 Suntory Ltd 酵素阻害剤、その製法並びに用途
WO1990009446A1 (en) 1989-02-17 1990-08-23 Plant Genetic Systems N.V. Cutinase
PE14291A1 (es) 1989-10-13 1991-04-27 Novo Nordisk As Procedimiento para inhibir la transferencia de tintes
JP3112937B2 (ja) 1990-04-14 2000-11-27 カリ―ヒエミー アクチエンゲゼルシヤフト アルカリ性バチルスーリパーゼ、これをコード化するｄｎａ配列およびこのリパーゼを生産するバチルス
DK204290D0 (da) 1990-08-24 1990-08-24 Novo Nordisk As Enzymatisk detergentkomposition og fremgangsmaade til enzymstabilisering
US5674833A (en) 1990-09-18 1997-10-07 Novo Nordisk A/S Detergent compositions containing protease and novel inhibitors for use therein
ATE219136T1 (de) 1991-01-16 2002-06-15 Procter & Gamble Kompakte waschmittelzusammensetzungen mit hochaktiven cellulasen
AU1531092A (en) * 1991-02-22 1992-09-15 Du Pont Merck Pharmaceutical Company, The Substituted alpha-aminoaldehydes and derivatives
ATE170555T1 (de) 1993-06-14 1998-09-15 Procter & Gamble Konzentriertes phosphatfreies flüssiges enzymhaltiges maschinengeschirrspülmittel
US5693617A (en) * 1994-03-15 1997-12-02 Proscript, Inc. Inhibitors of the 26s proteolytic complex and the 20s proteasome contained therein
US6660268B1 (en) * 1994-03-18 2003-12-09 The President And Fellows Of Harvard College Proteasome regulation of NF-KB activity
EP0751991A1 (en) * 1994-03-22 1997-01-08 The Procter & Gamble Company Protease enzyme manufacture using non-protein protease inhibitors
US5861366A (en) * 1994-08-31 1999-01-19 Ecolab Inc. Proteolytic enzyme cleaner
CA2224721A1 (en) 1995-06-13 1996-12-27 Matthew S. Miller Calpain inhibitors for the treatment of neurodegenerative diseases
JPH1066571A (ja) 1996-08-28 1998-03-10 Unitika Ltd フェニルアラニン脱水素酵素のチロシンに対する反応を阻害する反応阻害剤及びフェニルアラニン定量用試薬
BR9713470A (pt) * 1996-09-24 2000-04-11 Procter & Gamble Detergentes lìquidos contendo enzima proteolìtica e inibidores da protease
EP0929636B1 (en) 1996-09-24 2002-12-04 The Procter & Gamble Company Liquid detergents containing proteolytic enzyme, peptide aldehyde and a source of boric acid
DE69717133T2 (de) 1996-09-24 2003-07-10 The Procter & Gamble Company, Cincinnati Flüssige reinigungsmittel, die proteolytisches enzyme, peptidaldehyd und kalziumionen enthalten
JP2000506932A (ja) 1996-09-24 2000-06-06 ザ、プロクター、エンド、ギャンブル、カンパニー タンパク質分解酵素およびプロテアーゼインヒビターを含有した液体洗濯洗剤組成物
US6165966A (en) * 1996-09-24 2000-12-26 The Procter & Gamble Company Liquid detergents containing proteolytic enzyme and protease inhibitors
EP2278001B1 (en) 1996-11-04 2013-10-23 Novozymes A/S Protease variants and compositions
ES2183113T5 (es) 1996-12-09 2010-03-31 Novozymes A/S Reduccion de componentes con contenido en fosfolipidos en aceites comestibles conteniendo una cantidad elevada de fosforo no hidratable con el uso de una fosfolipasa, de una fosfolipasa de un hongo filamentoso que presenta actividad de fosfolipasa a y/o b.
AU3290597A (en) 1997-05-30 1998-12-30 Procter & Gamble Company, The Laundry bar with improved protease stability
AR015977A1 (es) 1997-10-23 2001-05-30 Genencor Int Variantes de proteasa multiplemente substituida con carga neta alterada para su empleo en detergentes
RU2252958C2 (ru) * 1997-10-23 2005-05-27 Джененкор Интернэшнл, Инк. Вариант субтилизина (варианты), кодирующая его днк, экспрессирующий вектор, очищающая композиция, корм для животных, композиция для обработки ткани
DE69900736T2 (de) 1998-07-17 2002-08-29 THE PROCTER & GAMBLE COMPANY, CINCINNATI Verfahren zur Herstellung von Waschmitteltabletten
US6939702B1 (en) 1999-03-31 2005-09-06 Novozymes A/S Lipase variant
CN101974375B (zh) 1999-12-15 2014-07-02 诺沃奇梅兹有限公司 对蛋渍具有改进洗涤性能的枯草杆菌酶变体
PL203212B1 (pl) 2000-02-08 2009-09-30 Dsm Ip Assets Bv Zastosowanie trwałej w kwasie proteazy w karmie zwierzęcej oraz w wytwarzaniu kompozycji do stosowania w karmie zwierzęcej, dodatek do karmy zwierzęcej, kompozycja karmy zwierzęcej i sposób obróbki białek roślinnych
CN101423824B (zh) 2000-06-02 2013-01-30 诺维信公司 角质酶变体
WO2002058721A1 (en) * 2000-12-08 2002-08-01 Baylor College Of Medicine Trem-1 splice variant for use in modifying immune responses
JP3959244B2 (ja) * 2001-05-09 2007-08-15 財団法人微生物化学研究会 生理活性化合物チロペプチンａおよびｂとその製造方法
DK200101090A (da) 2001-07-12 2001-08-16 Novozymes As Subtilase variants
JP2005515180A (ja) * 2001-11-13 2005-05-26 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー 阻害物質で安定化させた酵素を含有する局所適用組成物
GB0207430D0 (en) * 2002-03-28 2002-05-08 Unilever Plc Liquid cleaning compositionsand their use
DE602004016314D1 (de) 2003-05-07 2008-10-16 Maxygen Inc Enzymvarianten von subtilisin (subtilasen)
WO2005105826A1 (ja) 2004-04-28 2005-11-10 Zaidan Hojin Biseibutsu Kagaku Kenkyu Kai チロペプチンａ類縁体
EP1953216A4 (en) 2005-11-16 2009-11-11 Kao Corp composite
EP2038394A2 (en) 2006-06-05 2009-03-25 The Procter & Gamble Company Enzyme stabilizer
WO2007141736A2 (en) 2006-06-05 2007-12-13 The Procter & Gamble Company Enzyme stabilization
JP2009537665A (ja) * 2006-06-05 2009-10-29 ザ プロクター アンド ギャンブル カンパニー 酵素の安定化
US20090209447A1 (en) 2008-02-15 2009-08-20 Michelle Meek Cleaning compositions
WO2009121890A1 (en) 2008-04-01 2009-10-08 Novozymes A/S Process for the preparation of laundry soap bars with improved storage stability
CN102209776B (zh) 2008-11-13 2013-11-27 诺维信公司 洗涤剂组合物

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1994004651A1 (en) * 1992-08-14 1994-03-03 The Procter & Gamble Company Liquid detergents containing a peptide aldehyde
WO1998013460A1 (en) * 1996-09-24 1998-04-02 The Procter & Gamble Company Liquid detergents containing proteolytic enzyme and protease inhibitors
RU2484138C2 (ru) * 2007-04-30 2013-06-10 ДАНИСКО ЮЭс ИНК., ДЖЕНЕНКОР ДИВИЖН Применение белковых гидролизатов для стабилизации детергентных составов металлопротеазы

Also Published As

Publication number Publication date
EP2271660B1 (en) 2020-05-06
EP3725797A1 (en) 2020-10-21
CN107090014A (zh) 2017-08-25
JP5973166B2 (ja) 2016-08-23
WO2009118375A3 (en) 2010-02-25
RU2010143597A (ru) 2012-05-10
BRPI0909084A2 (pt) 2015-08-11
WO2009118375A2 (en) 2009-10-01
MX2010010348A (es) 2010-11-09
CN101981049B (zh) 2016-11-09
RU2018131246A (ru) 2020-03-02
BRPI0909084B1 (pt) 2020-11-03
JP2011515449A (ja) 2011-05-19
RU2018131246A3 (ru) 2021-11-12
RU2013156600A (ru) 2015-06-27
RU2510662C2 (ru) 2014-04-10
PL2271660T3 (pl) 2020-11-02
US20110039752A1 (en) 2011-02-17
ES2807603T3 (es) 2021-02-23
CN101981049A (zh) 2011-02-23
US9181296B2 (en) 2015-11-10
EP2271660A2 (en) 2011-01-12
CN107090014B (zh) 2023-04-25
JP2015180736A (ja) 2015-10-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2668563C2 (ru) Стабилизированные жидкие ферментные композиции
US10577568B2 (en) Detergent composition
EP2245060B1 (en) Liquid enzyme composition
EP2726590B1 (en) Liquid detergent composition
AU2012280414B2 (en) Stabilized subtilisin composition
EP2004789B1 (en) A stabilized liquid enzyme composition
US20080221008A1 (en) Detergent compositions and the use of enzyme combinations therein
EP3164476A1 (en) Improved stabilization of non-protease enzyme
JP2013192526A (ja) タンパク質溶液、このタンパク質溶液のプロテアーゼ活性の回復方法及びこのタンパク質溶液を含有する洗剤組成物
JP2012180514A (ja) 液体洗剤組成物