ES2981999T3

ES2981999T3 - Composiciones limpiadoras que contienen dispersinas V

Info

Publication number: ES2981999T3
Application number: ES18203740T
Authority: ES
Inventors: Mirko Weide; Susanne Wieland; Ulrike Denguth; Rebecca Vejborg; Dorotea Raventos Segura; Jesper Salomon; Johanne M Jensen; Rune Nygaard Monrad; Anne Vindum Due; Martin Gudmand
Original assignee: Henkel AG and Co KGaA
Current assignee: Henkel AG and Co KGaA
Priority date: 2018-10-31
Filing date: 2018-10-31
Publication date: 2024-10-14
Anticipated expiration: 2038-10-31
Also published as: EP3647398A1; WO2020088958A1; EP3647398B1

Abstract

La presente invención se refiere a composiciones de limpieza específicas que comprenden enzimas. La invención se refiere además al uso de dichas composiciones en procesos de limpieza. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Composiciones limpiadoras que contienen dispersinas V

Referencia a un listado de secuencias

La presente solicitud contiene un listado de secuencias en forma legible por ordenador.

Antecedentes de la invención

La presente invención se refiere a composiciones específicas, tal como se definen en la presente memoria, que comprenden enzimas con actividad de hexosaminidasa que comprenden el motivo D[IV]AR[TK] (SEC ID n.° 12), tales como dispersinas obtenidas deStaphylococcus.La invención se refiere, además, a métodos y a la utilización de dichas composiciones que comprenden dichos enzimas en procedimientos de limpieza, p. ej., para la eliminación de manchas.

Descripción de la técnica relacionada

Los enzimas se han utilizado en los detergentes desde hace décadas. Normalmente se añade un cóctel de diversos enzimas a las composiciones de detergente. El cóctel de enzimas con frecuencia comprende diversos enzimas, en el que cada enzima tiene como diana un sustrato específico, p. ej., las amilasas son activas contra las manchas de almidón, las proteasas, para las manchas proteicas, etc. Las superficies textiles y las superficies duras, tales como platos o el espacio interior de una lavadora que pasa por varios ciclos de lavado, se ensucian con muchos tipos diferentes de suciedad, que puede estar compuesta de proteínas, grasas, almidón, etc. Un tipo de mancha puede estar compuesta de materia orgánica, tal como residuos celulares, biofilm, EPS, etc. Entre los polipéptidos con actividad de hexoaminidasa se incluyen dispersinas, tales como la dispersina B (DspB), que se describen como p-N-acetilglucosaminidasas pertenecientes a la familia de la glucósido hidrolasa 20. El documento n.° WO04061117 A2 (Kane Biotech INC) describe la utilización de composiciones que comprenden DspB para reducir y prevenir el biofilm causado por bacterias productoras de poli-N-acetilglucosamina, y Kane et al. describen la utilización de composiciones que comprenden dispersinas para reducir los biofilm sobre dispositivos médicos y para el cuidado de heridas. La solicitud n.°WO9850512 (Procter and Gamble) da a conocer productos de lavado de ropa o de limpieza que comprenden uno o más enzimas hexosaminidasa. La presente invención proporciona enzimas adecuados para la utilización en detergentes y para la limpieza profunda de elementos tales como ropa, y en el proceso de limpieza.

El documento n.°WO 2017/186943 se refiere a polipéptidos que presentan actividad de hexosaminidasa, y a polinucleótidos codificantes de los polipéptidos. En particular, se refiere a constructos de ácidos nucleicos, vectores y células huésped que comprenden los polinucleótidos, así como a métodos de producción y utilización de los polipéptidos.

El documento n.°WO 2017/186936 se refiere a polipéptidos que presentan actividad de hexosaminidasa, y a polinucleótidos codificantes de los polipéptidos. En particular, se refiere a constructos de ácidos nucleicos, vectores y células huésped que comprenden los polinucleótidos, así como a métodos de producción y utilización de los polipéptidos.

El documento n.°WO 2017/186937 se refiere a polipéptidos que presentan actividad de hexosaminidasa, y a polinucleótidos codificantes de los polipéptidos. En particular, se refiere a constructos de ácidos nucleicos, vectores y células huésped que comprenden los polinucleótidos, así como a métodos de producción y utilización de los polipéptidos.

En la literatura no de patentes, en "Purification of a 51 kDa endo-beta-N-acetylglucosaminidase from Staphylococcus aureus" de Sugai et al. (FEMS MICROBIOLOGY LETTERS, WILEY-BLACKWELL PUBLISHING LTD, GB, vol. 61, n.° 3, 15 de octubre de 1989, páginas 267-272) se aisló un enzima bacterolítico y se caracterizó para encontrar que el enzima purificado actuaba como una endo-6-W-acetilglucosaminidase.

En la literatura no de patentes, "Bacteriolytic enzymes fromStaphylococcus aureus.Purification of an endo-[beta]-N-acetylglucosaminidase" de Wadstrom et al. (BiOc HEMICAL JOURNAL, vol. 120, n.° 4, 1 de diciembre de 1970, páginas 725-734) ha encontrado que al cultivarStaphylococcus aureusen un medio líquido completo, se observa actividad bacteriolítica extracelularmente. El enzima purificado (endo-beta-N-acetilglucosaminidasa) se ha encontrado que proporciona una única banda en el gel de poliacrilamida y electroforesis en acetato de celulosa, y carecía de la totalidad de los 14 enzimas y toxinas estafilocócicos para las que se realizaron ensayos.

El documento n.° EP 0 425 019 se refiere a una composición antimicrobiana que comprende endo-beta-N-acetilglucosaminidasa y/o endoglucopeptidasa y lisozima de estómago de rumiante.

Descripción resumida de la invención

La presente invención y sus realizaciones preferentes resultarán evidentes a partir del juego adjunto de reivindicaciones.

En donde a continuación se hace referencia a «composiciones de la invención» o «composiciones tales como las descritas en la presente memoria», se hace referencia a las composiciones (a)-(j) enumeradas en la reivindicación 1. Además, en caso de que no se indique lo contrario, todas las referencias a porcentajes en relación a las composiciones dadas a conocer se refieren a % en peso respecto al peso total de la composición respectiva. Se entiende que en donde se hace referencia a composiciones que contienen una hexosaminidasa tal como se define en la presente memoria, la composición respectiva contiene por lo menos una de dichas hexosaminidasasa, aunque también puede comprender dos o más de ellas.

La hexosaminidasa preferentemente presenta actividad de N-acetilglucosaminidasa, preferentemente actividad de p-1,6 N-acetilglucosaminidasa

La presente invención se refiere, además, a una composición, tal como se define en la presente memoria, que comprende por lo menos 0,01 mg de hexosaminidasa deStaphylococcusque comprende el motivo D[IV]AR[TK] (SEC ID n.° 12) y opcionalmente, un componente limpiador adicional, en donde el componente limpiador se selecciona de: (a) por lo menos un tensioactivo,

(b) por lo menos un coadyuvante, y

(c) por lo menos un componente blanqueador.

La invención se refiere, además, a un método para formular una composición, tal como se define en la presente memoria, que comprende añadir una hexosaminidasa deStaphylococcusque comprende el motivo D[IV]AR[T<k>] (SEC ID n.° 12) y por lo menos un componente limpiador.

La invención se refiere, además, a un método de tratamiento de un tejido, que comprende:

(a) poner en contacto el tejido con una composición tal como se define en la presente memoria o una solución acuosa de la misma,

(b) y opcionalmente el enjuague y secado del textil.

La invención se refiere, además, a un método para la limpieza o lavado de un elemento, que comprende las etapas de:

(a) exponer un elemento a una composición de la invención o a una solución de lavado que comprende una composición de la invención,

(b) completar por lo menos un ciclo de lavado, y

(c) opcionalmente, enjuagar el elemento, en donde el elemento es un tejido.

Figuras

(Figura 1). Los polipéptidos mostrados pertenece al cladoStaphylococcus,que se ilustra en forma de árbol filogenético en la figura 1. El cladoStaphylococcuso clado deStaphylococcuses un grupo de enzimas la totalidad de los cuales están relacionados con el mismo antepasado y comparten propiedades comunes. Los polipéptidos que forman un grupo dentro del clado (un «subclado») del árbol filogenético también pueden compartir propiedades comunes y están más estrechamente relacionados con otros polipéptidos en el clado. La composición según la presente invención comprende una hexosaminidasa deStaphylococcusque comprende el motivo D[IV]AR[TK] (SEC ID n.° 12).

(Figura 2). Se muestra una alineación de los polipéptidos dados a conocer.

Vista general de las secuencias del cladoStaphylococcus.

La SEC ID n.° 1 es el ADN codificante del polipéptido de longitud completa deStaphylococcus cohnii subsp.La SEC ID n.° 2 es el polipéptido derivado de SEC ID n.° 1.

La SEC ID n.° 3 es el polipéptido maduro de SEC ID n.° 2.

La SEC ID n.° 4 es el ADN codificante del polipéptido de longitud completa deStaphylococcus fleurettii.La SEC ID n.° 5 es el polipéptido derivado de SEC ID n.° 4.

La SEC ID n.° 6 es el polipéptido maduro de SEC ID n.° 5.

La SEC ID n.° 7 es la señal de secreción deBacillus clausii.

La SEC ID n.° 8 es una etiqueta de etiqueta de His.

La SEC ID n.° 9 es el motivo polipeptídico GXDE.

La SEC ID n.° 10 es el motivo polipeptídico [EQ][NRSHA][YVFL][AGSTC][IVLF][EAQYN][SN].

La SEC ID n.° 11 es el motivo polipeptídico [VLIM][LIV]G[GAV]DE[VI][PSA].

La SEC ID n.° 12 es el motivo polipeptídico D[IV]AR[t K].

Descripción detallada de la invención

Se aplican diversos enzimas en procedimientos de limpieza, cada uno con diana en tipos específicos de ensuciamiento, tal como el ensuciamiento por proteínas, almidón y grasas. Los enzimas son ingredientes estándares en los detergentes para lavado de ropa y lavado de platos. La eficacia de dichos enzimas comerciales proporciona detergentes que eliminan gran parte de la suciedad. Sin embargo, las manchas orgánicas, tales como SPE (sustancia polimérica extracelular), comprendidas en muchos biofilms constituyen un tipo difícil de suciedad debido a la naturaleza compleja de dichas materias orgánicas. Las SPE están compuestas mayoritariamente de polisacárido (exopolisacáridos), p. ej., PNAG (poli-N-acetilglucosamina) yy proteínas, aunque incluyen otras macromoléculas, tales como ADNe, lípidos y otras sustancias orgánicas. Las manchas orgánicas, como los biofilms o componentes de los mismos, tales como PNAG, pueden ser pegajosos o encolantes, que al estar presentes sobre textiles, pueden dar lugar a redeposición o retroteñido de la mancha, dando como resultado en un agrisamiento del textil. Además, al lavar prendas de ropa sucia junto con prendas menos sucias, la suciedad presente en la solución de lavado tiende a adherirse a las manchas orgánicas, p. ej., biofilms o componentes de biofilm, como resultado, por lo que la prenda de ropa resulta más «ensuciada» después del lavado que antes del mismo. Este efecto también puede denominarse «redeposición». Otra desventaja de las manchas orgánicas es el mal olor, ya que diversas moléculas relacionadas con los malos olores con frecuencia están asociadas a manchas orgánicas, tales como los biofilms.

La presente invención se refiere a composiciones que comprenden hexosaminidasas que comprenden el motivo D[IV]AR[TK] (SEC ID n.° 12) obtenidas deStaphylococcus,tal como se define en la presente memoria, así como a la utilización y métodos de uso de las mismas. Las expresiones «hexosaminidasa deStaphylococcus»y «hexosaminidasa obtenida deStaphylococcus»se utilizan indistintamente en todo el presente documento. Las hexosaminidasas preferentemente son dispersinas y comprenden actividad de N-acetilglucosaminidasa y/o p-1,6-N-acetilglucosamininidasa.

Polipéptidos que presentan actividad de hexosaminidasa.

Dispersina: el término «dispersina» y la abreviatura «Dsp» se refieren a un polipéptido que presenta actividad de hexosaminidasa, EC 3.2.1, que cataliza la hidrólisis de los enlaces p-1,6-glucosídicos de polímeros N-acetilglucosamina (poli-N-acetilglucosamina, PNAG) que se encuentran en, p. ej., biofilms. De esta manera, las dispersinas son enzimas que presentan actividad de beta-1,6-N-acetilglucosaminidasa.

Hexosaminidasa:el término «hexosaminidasas» se refiere a un polipéptido que presenta actividad de hexosaminidasa (hexosaminidasas) e incluye EC 3.2.1, p. ej., que cataliza la hidrólisis de los polímeros de N-acetil-D-hexosamina o N-acetil-glucosamina presentes en, p. ej., los biofilms. El término incluye dispersinas e incluye polipéptidos que presentan actividad de N-acetilglucosaminidasa y actividad de p-N-acetilglucosaminidasa. La expresión «polipéptido que presenta actividad de hexosaminidasa» puede utilizarse intercambiablemente con el término hexosaminidasas y de manera similar la expresión «polipéptido que presenta actividad de p-N-acetilglucosaminidasa» puede utilizarse intercambiablemente con el término p-1,6-N-acetilglucosaminidasas. Para los fines de la presente invención, la actividad de hexosaminidasa se determina de acuerdo con el procedimiento descrito en el Ensayo 1.

El polipéptido útil de acuerdo con la invención está comprendido en un clado específico de hexosaminidasas. Este clado se denomna en el presente contexto«Staphylococcus»,ya que las hexosaminidasas del clado se obtienen de bacterias dentro de la familia taxonómica«Staphylococcaceae»,preferentemente del géneroStaphylococcus.La composición de la presente invención comprende una hexosaminidasa deStaphylococcusque comprende el motivo D[IV]AR[TK] (SEC ID n.° 12). Para los fines de la presente invención, la expresión «obtenido de» tal como se utiliza en la presente memoria sobre una fuente dada significará que el polipéptido codificante por un polinucleótido es producido por la fuente o por una cepa en la que se ha insertado el polinucleótido procedente de la fuente. En un aspecto, el polipéptido obtenido de una fuente dada se secreta extracelularmente.

En la figura 1 se muestra el árbol filogenético del cladoStaphylococcus.Los polipéptidos comprendidos en el cladoStaphylococcus,que encuentran utilidad en los procedimientos y composiciones de limpieza de la invención, se enumeran en la tabla, posteriormente. Las hexosaminidasas de la Tabla 1 presentan actividad de 1,6 N-acetilglucosaminadasa y, de esta manera, son dispersinas. Las dispersinas de este grupo se ha encontrado que resultan particularmente útiles en la limpieza de manchas orgánicas, p. ej., PNAG, de textiles. En particular, las dispersinas de la Tabla 1 pueden formularse en composiciones limpiadoras, que comprenden una dispersina obtenida deStaphylococcusy un auxiliar de detergente. Según la presente invención, la hexosaminidasa deStaphylococcuscomprende el motivo D[IV]AR[TK] (SEC ID n.° 12). Las composiciones de la invención resultan útiles en procedimientos de limpieza tales como el lavado de ropa.

Tabla 1. Lista de polipéptidos hexosaminidasa que presentan actividad de beta-1,6 N-acetilglucosaminidasa comprendidos en el cladoStaphylococcus

(continuación)

El dominio Gluco_hidro_20 incluye los polipéptidos que presentan actividad de hexosaminidasa, preferentemente actividad de beta-1,6 N-acetilglucosaminidasa, p. ej., actividad de PNAG; estos polipéptidos comprenden tres clados específicos que son los clados ENYA, VLG y/o DIARK, tal como se describen posteriormente y en el Ejemplo 5 y la figura 1.

Las secuencias polipeptídicas que contienen un dominio Gluco_hidro_20 comprenden varios motivos; un ejemplo es GXDE (SEC ID n.° 9), situado en las posiciones 157 a 160 enStaphylococcus cohnii subsp. cohnii(SEC ID n.° 3). Los residuos D y E son los residuos catalíticos clave de los enzimas Gluco_hidro_20 (posiciones 159 a 160 en la SEC ID n.° 3). La composición de la presente invención comprende una hexosaminidasa deStaphylococcusque comprende el motivo D[IV]AR[TK] (SEC ID n.° 12).

Las hexosaminidasas, p. ej., las dispersinas, útiles en las composiciones de la invención pueden dividirse en grupos de clado o dominio caracterizados porque presentan diversos motivos. La composición de la presente invención comprende una hexosaminidasa deStaphylococcusque comprende el motivo D[IV]AR[TK] (SEC ID n.° 12). Se identificó un clado (ENYA). Dicho clado no ha sido descrito anteriormente. El clado se denomina IES y los polipéptidos de este clado comprenden polipéptidos de dominio Gluco_hidro_20 de origen bacteriano y además presentan actividad de beta-1,6 N-acetilglucosaminidasa y actividad de PNAG, caracterizados porque comprenden determinados motivos. Los polipéptidos del clado comprenden el motivo de ejemplo [EQ][NRSHA][YVFL][AGSTC][IVLF][EAQYN][SN] (SEC ID n.° 10), correspondiente a e Ny AIES en las posiciones 44 a 50 de la Se C ID n.° 3.

Se identificó otro clado. Dicho clado no ha sido descrito anteriormente. El clado se denomina VLG y los polipéptidos de este clado comprenden polipéptidos de dominio Gluco_hidro_20 de origen bacteriano y además presentan actividad de beta-1,6 N-acetilglucosaminidasa y actividad de PNAG, caracterizados porque comprenden determinados motivos. Los polipéptidos del clado comprenden el motivo de ejemplo [VIMS][LIV]G[GAV]DE[VI][PSA] (SEC ID n.° 11), correspondiente a VLGGDEVP (posiciones 155 a 162 de SEC ID n.° 3), en donde G y<d>E (correspondientes a las posiciones 157 y 159-160 de la SEC ID n.° 3) están totalmente conservados en el clado VLG y parte del sitio activo. Los residuos D y E son los residuos catalíticos clave de los enzimas Gluco_hidro_20 (posiciones 159 a 160 en la SEC ID n.° 3).

Todavía otro clado denominado DIARK comprende las hexosaminidasas, p. ej., dispersinas, útiles en las composiciones de la invención. Los polipéptidos del clado comprenden el motivo de ejemplo D[IV]AR[TK] (SEC ID n.° 12), correspondiente a las posiciones 10 a 14 de SEC ID n.° 3, en la que D y Ar están totalmente conservados en el clado DIARK (posiciones 10 y 12 a 13 en la SEC ID n.° 3). Según la presente invención, las hexosaminidasas deStaphylococcus,p. ej., dispersinas, comprenden el motivo D[IV]AR[TK] (SEC ID n.° 12).

En un aspecto de la invención, la hexosaminidasa, p. ej., la dispersina, comprende uno o más de los motivos siguientes: GXDE (SEC ID n.° 9), [EQ][NRSHA][YVFL][AGSTC][IVLF][EAQYN][SN] (SEC ID n.° 10), o [VLIM][LIV]G[GAV]DE[VI][PSA] (SEC ID n.° 11), además de D[IV]AR[TK] (SEC ID n.° 12). En un aspecto, la hexosaminidasa, p. ej., la dispersina, comprende la totalidad de los cuatro motivos: GXDE (SEC ID n.° 9), [EQ][NRSHA][YVFL][AGSTC][IVLF][EAQYN][SN] (SEC ID n.° 10), [VLIM][UV]G[GAV]DE[VI][PSA] (SEC ID n.° 11) y D[IV]AR[TK] (SEC iD n.° 12). En un aspecto, la hexosaminidasa, p. ej., la dispersina, comprende los tres motivos: GXDE (SEC ID n.° 9), [EQ][NRSHA][YVFL][AGSTC][IVLF][EAQYN][SN] (SEC ID n.° 10) y D[IV]AR[TK] (SEC ID n.° 12).

Una alineación de los polipéptidos útiles en las composiciones de la invención se muestra en la figura 2. En la figura 1 se muestra el árbol filogenético de los polipéptidos útiles en las composiciones de la invención.

Un polipéptido útil en las composiciones de la presente invención preferentemente presenta una identidad de secuencia respecto a la secuencia del polipéptido maduro mostrado en la SEC ID n.° 3 de por lo menos 60 %, p. ej., de por lo menos 65 %, por lo menos 70 %, por lo menos 75 %, por lo menos 80 %, por lo menos 85 %, por lo menos 90 %, por lo menos 91 %, por lo menos 92 %, por lo menos 93 %, por lo menos 94 %, por lo menos 95 %, por lo menos 96 %, por lo menos 97 %, por lo menos 98 %, por lo menos 99 %, o 100 %, en donde el polipéptido presenta actividad de hexosaminidasa, preferentemente actividad de 1,6 N-acetilglucosaminidasa. En un aspecto, el polipéptido difiere en hasta 10 aminoácidos, p. ej., 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 respecto al polipéptido mostrado en la SeC ID n.° 3 y preferentemente presenta actividad de beta-1,6 N-acetilglucosaminidasa.

Un polipéptido útil en las composiciones de la presente invención preferentemente presenta una identidad de secuencia respecto a la secuencia del polipéptido maduro mostrado en la SEC ID n.° 6 de por lo menos 60 %, p. ej., de por lo menos 65 %, por lo menos 70 %, por lo menos 75 %, por lo menos 80 %, por lo menos 85 %, por lo menos 90 %, por lo menos 91 %, por lo menos 92 %, por lo menos 93 %, por lo menos 94 %, por lo menos 95 %, por lo menos 96 %, por lo menos 97 %, por lo menos 98 %, por lo menos 99 %, o 100 %, en donde el polipéptido presenta actividad de hexosaminidasa, preferentemente actividad de 1,6 N-acetilglucosaminidasa. En un aspecto, el polipéptido difiere en hasta 10 aminoácidos, p. ej., 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10 respecto al polipéptido mostrado en la SeC ID n.° 6 y preferentemente presenta actividad de beta-1,6 N-acetilglucosaminidasa.

El grado de relación entre dos secuencias de aminoácidos o entre dos secuencia de nucleótidos se describe mediante el parámetro «identidad de secuencias».

Para los fines de la presente invención, la identidad de secuencias entre dos secuencias de aminoácidos se determina utilizando el algoritmo de Needleman-Wunsch (Needleman y Wunsch, 1970, J. Mol. Biol. 48: 443-453) tal como se implemente en el programa Needle del paquete EMBOSS (EMBOSS: The European Molecular Biology Open Software Suite, Rice et al., 2000, Trends Genet. 16: 276-277), preferentemente la versión 5.0.0 o posterior. Los parámetros utilizados con: penalización de hueco abierto de 10, penalización de extensión de hueco de 0,5 y la matriz de sustitución EBLOSUM62 (versión EMBOSS de BLOSUM62). Se utiliza el resultado de Needle etiquetado como «identidad más larga» (obtenida utilizando la opción «-nobrief») como el porcentaje de identidad y se calcula del modo siguiente:

(Residuos idénticos x 100) / (Longitud de alineación - Número total de huecos en la alineación).

Los aminoácidos esenciales en un polipéptido pueden identificarse de acuerdo con procedimientos conocidos de la técnica, tales como la mutagénesis dirigida a sitio o la mutagénesis por escaneo de alaninas (Cunningham y Wells, 1989, Science 244: 1081-1085). En la última técnica, se introducen mutaciones de alanina individuales en cada residuo en la molécula, y las moléculas mutantes resultantes se someten a ensayo para actividad de hexosaminidasa para identificar los residuos aminoácidos que resultan críticos para la actividad de la molécula. Ver también Hilton et al., 1996, J. Biol. Chem. 271: 4699-4708. El sitio activo del enzima u otra interacción biológica también puede determinarse mediante análisis físico de la estructura, según se determina mediante técnicas tales como la resonancia magnética nuclear, la cristalografía, la difracción de electrones o el marcaje de fotoafinidad, junto con la mutación de aminoácidos putativos de sitio de contacto. Ver, por ejemplo, de Vos et al., 1992, Science 255: 306-312; Smith et al., 1992, J. Mol. Biol. 224: 899-904; Wlodaver et al., 1992, f Eb S Lett. 309: 59-64. La identidad de los aminoácidos esenciales también puede inferirse a partir de la alineación con un polipéptido relacionado.

Composiciones.

La invención se refiere a composiciones, tal como se definen en la presente memoria, que comprenden hexosaminidasas deStaphylococcusque comprenden el motivo D[IV]AR[TK] (SEC ID n.° 12), preferentemente dispersinas, así como a la utilización y métodos de uso de las mismas.

Formulaciones líquidas.

En un aspecto, la composición limpiadora es una composición líquida, tal como se define en la presente memoria. La hexosaminidasa puede formularse como una formulación enzimática líquida, que es generalmente una composición vertible, aunque también puede presentar una viscosidad elevada. La apariencia física y propiedades de una formulación enzimática líquida puede variar mucho; por ejemplo, puede presentar diferentes viscosidades (con un aspecto de entre gel y agua), ser coloreada, no coloreada, transparente, turbia e incluso con partículas sólidas, como lodos y suspensiones. Los ingredientes mínimos son el enzima o enzimas y un sistema de solventes para convertirlo en un líquido.

El sistema de solventes puede comprender agua, polioles (tales como glicerol, (mono, di, ortri)propilenglicol, alcohol de azúcar (p. ej., sorbitol), polipropilenglicol y/o polietilenglicol), etanol, azúcares y sales. Habitualmente, el sistema de solventes incluye, además, un agente conservante y/o otros estabilizantes.

Puede prepararse una formulación enzimática líquida mediante la mezcla de un sistema de solventes y un concentrado enzimático con un grado deseado de pureza (o partículas enzimáticas para obtener un lodo/suspensión).

En una realización, la composición enzimática líquida comprende:

(a) por lo menos 0,01 % p/p de proteína enzimática activa,

(b) por lo menos 0,5 % p/p de poliol,

(c) agua y

(d) opcionalmente un agente conservante.

Las hexosaminidasas, p. ej., las dispersinas, en la composición líquida de la invención pueden estabilizarse utilizando agentes estabilizantes convencionales, p. ej., un poliol, tal como propilenglicol o glicerol, etilenglicol, polietilenglicol, alcoholes de azúcar, sorbitol, manitol, eritritol, dulcitol, inositol, xilitol y adonitol.

Una realización de la invención se refiere a una composición que comprende una hexosaminidasa deStaphylococcus,tal como se define en la presente memoria, en donde la composición comprende, además:

(a)

i. uno o más polioles, preferentemente seleccionados de glicerol, (mono, di o tri)propilenglicol, etilenglicol, polietilenglicol, alcoholes de azúcar, sorbitol, manitol, eritritol, dulcitol, inositol, xilitol y adonitol,

ii. opcionalmente uno o más enzimas, preferentemente seleccionados de proteasas, amilasas o lipasas, iii. opcionalmente uno o más tensioactivos, preferentemente seleccionados de tensioactivos aniónicos y no iónicos, o

iv. opcionalmente uno o más polímeros.

Otra realización preferente se refiere a una composición que comprende una hexosaminidasa deStaphylococcus,tal como se define en la presente memoria, en donde la composición comprende, además:

(a)

iv. opcionalmente uno o más polímeros, en donde la hexosaminidasa presenta actividad de N-acetilglucosaminidasa, preferentemente actividad de p-1,6 N-acetilglucosaminidasa.

Un aspecto preferente se refiere a una composición que comprende una hexosaminidasa deStaphylococcus,p. ej., una dispersina, tal como se define en la presente memoria, en donde la hexosaminidasa deStaphylococcusse selecciona del grupo que consiste en polipéptidos mostrados en las SEC ID n.° 3, SEC ID n.° 6 o polipéptidos que presentan una identidad de secuencias de por lo menos 60%, por lo menos 70 %, por lo menos 75 %, por lo menos 80 %, por lo menos 85 %, por lo menos 90 %, por lo menos 95 %, por lo menos 98 % o tal como por lo menos 99 % respecto a la misma y en donde la composición opcionalmente comprende, además:

(a)

Un aspecto preferente se refiere a una composición que comprende una hexosaminidasa deStaphylococcus,p. ej., una dispersina, tal como se define en la presente memoria, en la que la hexosaminidasa deStaphylococcusse selecciona del grupo mostrado en la Tabla 1 que comprende el motivo D[IV]AR[TK] (SEC ID n.° 12) y en donde la composición comprende opcionalmente, además:

(a)

i. uno o más polioles, preferentemente seleccionados de glicerol, (mono, di o tri)propMenglicol, etilenglicol, polietilenglicol, alcoholes de azúcar, sorbitol, manitol, eritritol, dulcitol, inositol, xilitol y adonitol,

Formulaciones granulares.

Pueden producirse granulados que no producen polvo, p. ej., tal como se da a conocer en los documentos n.° US 4.106.991 y n.° 4.661.452 y opcionalmente pueden recubrirse mediante métodos conocidos de la técnica. Son ejemplos de materiales de recubrimiento ceroso los productos de óxido de polietileno (polietilenglicol, PEG) con pesos molares medios de entre 1000 y 20000; nonilfenoles etoxilados que presentan entre 16 y 50 unidades de óxido de etileno; alcoholes grasos etoxilados en los que el alcohol contiene entre 12 y 20 átomos de carbono y en los que hay entre 15 y 80 unidades de óxido de etileno; alcoholes grasos, ácidos grasos y mono, di-y triglicéridos de ácidos grasos. Se proporcionan ejemplos de materiales de recubrimiento formadores de película adecuados para la aplicación mediante técnicas de lecho fluido en el documento GB 1483591.

La hexosaminidasa deStaphylococcuspara la utilización en las composiciones de la invención puede formularse como un gránulo, por ejemplo como un cogránulo que combina uno o más enzimas o agentes beneficiosos, tales como MnTACN. En este caso cada enzima estará presente en más gránulos, consiguiendo una distribución más uniforme de los enzimas en el detergente. Lo anterior también reduce la segregación física de los diferentes enzimas debido a los diferentes tamaños de partícula. Se dan a conocer métodos para producir cogranulos multienzimáticos para la industria de los detergentes en la publicación de IP.com n.° IPC0M000200739D.

Otro ejemplo de formulación de enzimas mediante la utilización de cogranulados se da a conocer en el documento n .°w O 2013/188331, que se refiere a una composición de detergente que comprende: (a) un cogránulo multienzimático, (b) menos de 10 % en peso de zeolita (base anhidra), y (c) menos de 10 % en peso de sal fosfato (base anhidra), en donde dicho cogránulo enzimático comprende entre 10 % y 98 % en peso de componentes absorbentes de la humedad y la composición comprende adicionalmente entre 20 % y 80 % en peso de componentes absorbentes de la humedad del detergente. El documento n.° WO 2013/188331 se refiere, además, a un método de tratamiento y/o limpieza de una superficie, preferentemente una superficie de tejido que comprende las etapas de: (i) poner en contacto dicha superficie con la composición de detergente según se reivindica y se describe en la presente memoria en solución acuosa de lavado, (ii) enjuague y/o secado de la superficie.

Una realización de la invención se refiere a composiciones, tal como se definen en la presente memoria, que comprenden un gránulo/partícula enzimático que comprende una hexosaminidasa deStaphylococcustal como se describe en la presente memoria. El gránulo está compuesto de un núcleo, y opcionalmente uno o más recubrimientos (capas externas) circundantes del núcleo. Normalmente, el tamaño de gránulo/partícula, medido como diámetro esférico equivalente (tamaño de partícula medio volumétrico), del gránulo es de entre 20 y 2000 pm, particularmente de entre 50 y 1500 pm, de entre 100 y 1500 pm o de entre 250 y 1200 pm. El núcleo puede incluir materiales adicionales, tales como rellenos, materiales de fibra (fibras de celulosa o sintéticas), agentes estabilizantes, agentes solubilizadores, agentes de suspensión, agentes reguladores de la viscosidad, esferas ligeras, plastificadores, sales, lubricantes y fragancias. El núcleo puede incluir aglutinantes, tales como polímero sintético, cera, grasa o carbohidrato. El núcleo puede comprender una sal de un catión multivalente, un agente reductor, un antioxidante, un catalizador de descomposición de peróxido /o un componente tampón ácido, normalmente en forma de una mezcla homogénea. El núcleo puede consistir en una partícula inerte con el enzima adsorbido en ella, o aplicarse sobre la superficie, p. ej. mediante recubrimiento en lecho fluido. El núcleo puede presentar un diámetro de entre 20 y 2000 pm, particularmente de entre 50 y 1500 pm, de entre 100 y 1500 pm o de entre 250 y 1200 pm. El núcleo puede prepararse mediante granulación de una mezcla de los ingredientes, p. ej., mediante un método que comprende técnicas de granulación, tales como cristalización, precipitación, recubrimiento en bombo, recubrimiento en lecho fluido, aglomeración en lecho fluido, atomización rotativa, extrusión, granulación porprilling,esferonización, métodos de reducción de tamaño, granulación en tambor y/o granulación de alta cizalla. Los métodos para preparar el núcleo pueden encontrarse en: Handbook of Powder Technology; Particle size enlargement, por C. E. Capes; volumen 1; 1980; Elsevier. El núcleo del gránulo/partícula de enzima puede estar circundado por como mínimo un recubrimiento, p. ej., para mejorar la estabilidad de almacenamiento, para reducir la formación de polvo durante la manipulación, o para el coloreado del gránulo. El recubrimiento o recubrimientos opcionales pueden incluir un recubrimiento salino, u otros materiales de recubrimiento adecuados, tales como polietilenglicol (PEG), metil-hidroxipropilcelulosa (MHPC, por sus siglas en inglés) y alcohol polivinílico (PVA, por sus siglas en inglés). Se muestran ejemplos de gránulos de enzima con múltiples recubrimientos en los documentos n.° WO 93/07263 y n.° WO 97/23606.

El recubrimiento puede aplicarse en una cantidad de por lo menos 0,1 % en peso del núcleo, p. ej., por lo menos 0,5 %, 1 % o 5 %. La cantidad puede ser como máximo de 100 %, 70 %, 50 %, 40 % o 30 %.

El recubrimiento es preferentemente de por lo menos 0,1 pm de grosor, particularmente de por lo menos 0,5 pm, por lo menos 1 pm o por lo menos 5 pm. En una realización, el grosor del recubrimiento es inferior a 100 pm. En una realización más particular, el grosor del recubrimiento es inferior a 60 |jm. En una realización todavía más particular, el grosor total del recubrimiento es inferior a 40 jm . El recubrimiento debería encapsular la unidad de núcleo mediante la formación de una capa sustancialmente continua. Una capa sustancialmente continua debe entenderse como un recubrimiento que presenta pocos o ningún orificio, de manera que la unidad de núcleo esté encapsulando/encerrando pocas o ninguna zona no recubierta. La capa o recubrimiento preferentemente debe ser de grosor homogéneo. El recubrimiento puede contener, además, otros materiales conocidos de la técnica, p. ej., rellenos, agentes antipegajosidad, pigmentos, tintes, plastificadores y/o aglutinantes, tales como dióxido de titanio, caolín, carbonato cálcico o talco. Un recubrimiento salino puede comprender por lo menos 60 % en peso p/p de una sal, p. ej., por lo menos 65 %, por lo menos 70 %, por lo menos 75 %, por lo menos 80 %, por lo menos 85 %, por lo menos 90 %, por lo menos 95 % o por lo menos 99 % en peso p/p. La sal puede añadirse a partir de una solución salina en la que la sal está completamente disuelta o a partir de una suspensión salina en la que las partículas finas son de menos de 50 jm , tal como de menos de 10 jm o de menos de 5 jm . El recubrimiento salino puede comprender una única sal o una mezcla de dos o más sales. La sal puede ser soluble en agua, preferentemente con una solubilidad de por lo menos 0,1 gramos en 100 g de agua a 20 °C, preferentemente por lo menos 0,5 g por 100 g de agua, p. ej., por lo menos 1 g por 100 g de agua, p. ej., por lo menos 5 g por 100 g de agua.

La sal puede ser una sal inorgánica, p. ej., sales sulfato, sulfito, fosfato, fosfonato, nitrato, cloruro o carbonato, o sales de ácidos orgánicos simples (de menos de 10 átomos de carbono, p. ej., 6 o menos átomos de carbono), tales como citrato, malonato o acetato. Son ejemplos de cationes en dichas sales, iones de metal alcalino o alcalinotérreo, el ion amonio o iones metálicos de la primera serie de transición, tales como sodio, potasio, magnesio, calcio, zinc o aluminio. Entre los ejemplos de aniones se incluyen cloruro, bromuro, yoduro, sulfato, sulfito, bisulfito, tiosulfato, fosfato, fosfato monobásico, fosfato dibásico, hipofosfito, dihidrogenopirofosfato, tetraborato, borato, carbonato, bicarbonato, metasilicato, citrato, malato, maleato, malonato, succinato, lactato, formato, acetato, butirato, propionato, benzoato, tartrato, ascorbato o gluconato. Preferentemente pueden utilizarse sales de metal alcalino o alcalinotérreo de sulfato, fosfato, fosfonato, nitrato, cloruro o carbonato, o sales de ácidos orgánicos simples, tales como citrato, malonato o acetato.

La sal en el recubrimiento puede presentar una humedad constante a 20 °C superior a 60 %, particularmente superior a 70 %, superior a 80 % o superior a 85 %, o puede ser otra forma hidrato de dicha sal (p. ej., anhidrato). El recubrimiento salino puede ser tal como se describe en el documento n.° WO 00/01793 o n.°WO 2006/034710.

Son ejemplos específicos de sales adecuadas, NaCl (CH20 °C=76 %), Na<2>CO<3>(CH20°C=92 %), NaNO<3>(CH20°C=73 %), Na<2>HPO<4>(CH20 °C=95%), Na<3>PO<4>(CH25 °C=92 %), NH<4>CI (CH20 °C=79,5 %), (NH<4>)<2>HPO<4>(CH20 °C=93,0 %), NH<4>H<2>PO<4>(CH20 °C=93,1 %), (NH<4>)<2>SO<4>(CH20 °C=81,1 %), KCI (CH20 °C=85 %), K<2>HPO<4>(CH20 °C=92 %), KH<2>PO<4>(CH20 °C=96,5 %), KNO<3>(CH20 °C=93,5 %), Na<2>SO<4>(CH20 °C=93 %), K<2>SO<4>(CH20 °C=98 %), KHSO<4>(CH20 °C=86 %), MgSO<4>(CH20 °C=90 %), ZnSO<4>(CH20 °C=90 %) y citrato sódico (CH25 °C=86 %). Entre otros ejemplos se incluyen NaH<2>PO<4>, (NH<4>)H<2>PO<4>, CuSO<4>, Mg(NO<3>)<2>y acetato de magnesio.

La sal puede encontrarse en forma anhidra, o puede ser una sal hidratada, es decir, un hidrato de sal cristalina con agua o aguas ligadas de cristalización, tal como se describe en el documento n.°WO 99/32595. Entre los ejemplos específicos se incluyen sulfato sódico anhidro (Na<2>SO<4>), sulfato de magnesio anhidro (MgSO<4>), heptahidrato de sulfato de magnesio (MgSO<4 ->7H<2>O), heptahidrato de sulfato de zinc (ZnSO<4 ->7H<2>O), heptahidrato dibásico de fosfato sódico (Na<2>HPO<4 ->7H<2>O), hexahidrato de nitrato de magnesio (Mg(NO<3>)<2>(6H<2>O)), dihidrato de citrato sódico y tetrahidrato de acetato de magnesio. Preferentemente, la sal se aplica en forma de una solución de la sal, p. ej., utilizando un lecho fluido.

En un aspecto, la presente invención proporciona una composición, tal como se define en la presente memoria, que comprende un gránulo, que comprende:

(a) un núcleo que comprende una hexosaminidasa deStaphylococcus,p. ej., una dispersina según la invención, y (b) opcionalmente un recubrimiento que consiste en una o más capas que circundan el núcleo.

Un aspecto de la invención se refiere a una composición, tal como se define en la presente memoria, que comprende un gránulo, que comprende:

(a) un núcleo que comprende una hexosaminidasa deStaphylococcus,p. ej., una dispersina,

en la que la hexosaminidasa deStaphylococcusse selecciona del grupo que consiste en los polipéptidos mostrados en la SEC ID n.° 3, SEC ID n.° 6 o polipéptidos que presentan una identidad de secuencias de por lo menos 60 %, por lo menos 70 %, por lo menos 75 %, por lo menos 80 %, por lo menos 85 %, por lo menos 90 %, por lo menos 95 %, por lo menos 98 % o tal como una identidad de secuencias de por lo menos 99 % respecto a la misma, y

(b) opcionalmente un recubrimiento que consiste en una o más capas que circundan el núcleo.

(a) un núcleo que comprende una hexosaminidasa deStaphylococcusseleccionada del grupo mostrado en la Tabla 1, que comprende el motivo D[IV]AR[TK] (SEC ID n.° 12), y

Otro aspecto se refiere a una composición, tal como se define en la presente memoria, que comprende un gránulo en capas, que comprende:

(a) un núcleo (no enzimático),

(b) un recubrimiento que circunda el núcleo, en donde el recubrimiento comprende una hexosaminidasa deStaphylococcus,p. ej., una dispersina, según la invención, y

(c) opcionalmente un recubrimiento salino protector que circunda el recubrimiento que contiene enzima.

(a) un núcleo (no enzimático),

(b) un recubrimiento que circunda el núcleo, en el que el recubrimiento comprende hexosaminidasa deStaphylococcus,p. ej., una dispersina, en donde la hexosaminidasa deStaphylococcusse selecciona del grupo que consiste en los polipéptidos mostrados en la SEC ID n.° 3, SEC ID n.° 6 o polipéptidos que presentan una identidad de secuencias de por lo menos 60 %, por lo menos 70 %, por lo menos 75 %, por lo menos 80 %, por lo menos 85 %, por lo menos 90 %, por lo menos 95 %, por lo menos 98 % o tal como una identidad de secuencias de por lo menos 99 % respecto a la misma, y

(a) un núcleo (no enzimático),

(b) un recubrimiento que circunda el núcleo, en el que el recubrimiento comprende una hexosaminidasa deStaphylococcusseleccionada del grupo mostrado en la Tabla 1, que comprende el motivo D[IV]AR[TK] (SEC ID n.° 12), y

Composiciones limpiadoras.

Las composiciones de la invención son composiciones limpiadoras que comprenden una hexosaminidasa deStaphylococcus,p. ej., dispersina que comprende el motivo D[IV]AR[TK] (SEC ID n.° 12) en combinación con uno o más componentes de composición limpiadora adicionales, tal como se define en la presente memoria. La selección de componentes adicionales se encuentra comprendida dentro de los conocimientos del experto en la materia e incluye ingredientes convencionales, incluyendo los componentes no limitativos de ejemplo expuestos posteriormente.

Un aspecto de la invención se refiere a una composición, tal como se define en la presente memoria, que comprende: a) por lo menos 0,01 mg/ml de por lo menos una hexosaminidasa deStaphylococcus,p. ej., una dispersina, según la invención, y

b) opcionalmente por lo menos un componente de composición limpiadora adicional, preferentemente seleccionado de tensioactivos, coadyuvantes, componentes blanqueadores, polímeros, agentes dispersantes y enzimas adicionales.

Un aspecto de la invención se refiere a una composición, tal como se define en la presente memoria, que comprende: a) por lo menos 0,01 mg/ml de por lo menos una hexosaminidasa deStaphylococcus,p. ej., una dispersina, en la que la hexosaminidasa deStaphylococcusse selecciona del grupo mostrado en la Tabla 1 que comprende el motivo D[IV]AR[TK] (SEC ID n.° 12), y

Un aspecto de la invención se refiere a una composición, tal como se define en la presente memoria, que comprende: a) por lo menos 0,01 mg/ml de por lo menos una hexosaminidasa deStaphylococcus,p. ej., una dispersina, en la que la hexosaminidasa deStaphylococcusse selecciona de polipéptidos que presentan una identidad de secuencia de por lo menos 80 % respecto a los polipéptidos mostrados en la SEC ID n.° 3 o n.° 6, y

La hexosaminidasa deStaphylococcusque comprende el motivo D[IV]AR[TK] (SEC ID n.° 12) puede incluirse en las composiciones, p. ej., la composición limpiadora, p. ej., detergente, de la presente invención, en un nivel de entre por lo menos 0,0001 y por lo menos 100, de entre por lo menos 0,001 y por lo menos 100, de entre por lo menos 0,01 y por lo menos 100, de entre por lo menos 0,02 y por lo menos 100, de entre por lo menos 0,01 y por lo menos 100, de entre por lo menos 0,1 y por lo menos 100, de entre por lo menos 0,2 y por lo menos 100, de entre por lo menos 0,5 y por lo menos 100 mg/ml, preferentemente la concentración de dicho enzima hexosaminidasa deStaphylococcusen la composición limpiadora, p. ej. detergente, está comprendida en el intervalo de entre 0,01 y 100, de entre 0,1 y 50 o de entre 1 y 10 mg/ml. De esta manera, la composición de detergente puede comprender por lo menos 0,00008 %, preferentemente por lo menos 0,002 %, 0,003 %, 0,004 %, 0,005 %, 0,006 %, 0,008 %, 0,01 %, 0,02 %, 0,03 %, 0,05 %, 0,1 %, 0,2 %, 0,3 %, 0,4 %, 0,6 %, 0,7 %, 0,8 %, 0,9 % o 1,0 % de hexosaminidasa deStaphylococcusque comprende el motivo D[IV]AR[TK] (SEC ID n.° 12),

La elección de componentes de la composición para composiciones líquidas y granulares y de los componentes limpiadores para la composición limpiadora tal como se ha descrito anteriormente puede incluir cualquiera de los componentes mencionados posteriormente.

Las composiciones limpiadoras de la invención pueden comprender uno o más tensioactivos, que podrían ser aniónicos y/o catiónicos, y/o no iónicos, y/o semipolares y/o zwiteriónicos, o una mezcla de los mismos. En una realización particular, la composición de detergente incluye una mezcla de uno o más tensioactivos no iónicos y uno o más tensioactivos aniónicos. El tensioactivo o tensioactivos habitualmente están presentes a un nivel de entre aproximadamente 0,1 % y 60 % en peso, tal como entre aproximadamente 1 % y aproximadamente 40 %, o entre aproximadamente 3 % y aproximadamente 20 %, o entre aproximadamente 3 % y aproximadamente 10 %. El tensioactivo o tensioactivos se seleccionan basándose en la aplicación de lavado deseada, e incluyen cualquier tensioactivo o tensioactivos convencionales conocidos de la técnica.

Las composiciones definidas en la presente memoria, si no se indica lo contrario, pueden comprender entre 0 % y 65 % en peso, entre aproximadamente 2 % en peso y aproximadamente 60 % en peso, entre aproximadamente 5 % en peso y aproximadamente 50 % en peso, entre aproximadamente 5 % en peso y aproximadamente 40 % en peso, entre aproximadamente 5 % en peso y aproximadamente 30 % en peso, entre aproximadamente 5 % en peso y aproximadamente 20 % en peso, entre aproximadamente 5 % en peso y aproximadamente 10 % en peso de tensioactivos aniónicos, anfotéricos y/o no iónicos. «Aproximadamente», tal como se utiliza en la presente memoria en relación con un valor numérico, se refiere a dicho valor ±10 %, preferentemente ±5 %. «Aproximadamente 5 % en peso» significa, de esta manera, entre 4,5 % y 5,5 % en peso, preferentemente entre 4,75 % y 5,25 % en peso.

A menos que se indique lo contrario, el tensioactivo puede seleccionarse generalmente de tensioactivos no iónicos, aniónicos y/o anfotéricos. En general, resultan preferentes los tensioactivos estables frente al blanqueo. Los tensioactivos aniónicos preferentes son los tensioactivos sulfato, y en particular los sulfatos de éter alquílico, especialmente los sulfatos de éter alquílico C<9>-C<15>, preferentemente los etoxilatos o etoxilatos/propoxilatos mixtos, tales como aquellos con 1 a 30 OE (óxidos de etileno), etoxilato de alcohol primario C<2>-C<15>, tal como aquellos con 1 a 30 unidades de OE, sulfatos de éster C<8>-C<16>y sulfatos de éster C<10>-C<14>, tales como los sulfatos de éster monododecílico. Entre los ejemplos no limitativos de tensioactivos aniónicos se incluyen sulfatos y sulfonatos, en particular, alquilbencenosulfonatos lineales (LAS, por sus siglas en inglés), en particular sulfonatos de alquilbenceno C<12>-C<13>, isómeros de LAS, alquilbencenosulfonatos ramificados (BABS), fenilalcanosulfonatos, alfa-olefinsulfonatos (AOS), sulfonatos de olefina, sulfonatos de alqueno, alcano-2,3-diilbis(sulfatos), hidroxialcanosulfonatos y disulfonatos, sulfatos de alquilo (AS, por sus siglas en inglés), tales como dodecilsulfato sódico (SDS), sulfatos de alcohol graso (FAS, por sus siglas en inglés), sulfatos de alcohol primario (PAS, por sus siglas en inglés), etersulfatos de alcohol (AES, AEOS o FES, también conocidos como etoxisulfatos de alcohol o sulfatos de éter de alcohol graso, alcanosulfonatos secundarios (SAS, por sus siglas en inglés), sulfonatos de parafina (PS, por sus siglas en inglés), sulfonatos de éster, ésteres de glicerol de ácido graso sulfonado, ésteres metílicos de alfa-sulfo-ácidos grasos (alfa-SFMe o SES, por sus siglas en inglés), incluyendo sulfonato de éster metílico (MES, por sus siglas en inglés), ácido alquil- o alquenilsuccínico, ácido dodecenil/tetradecenil-succínico (DTSA, por sus siglas en inglés), derivados de ácido graso de aminoácidos, diésteres y monoésteres de ácido sulfosuccínico o sal de ácidos grasos (jabón), y combinaciones de los mismos. Los tensioactivos aniónicos preferentemente se añaden al detergente en la forma de sales. Los cationes adecuados en dichas sales son iones de metal alcalino, tales como sales de sodio, potasio y litio, y sales de amonio, por ejemplo (2-hidroxietil)amonio, bis(2-hidroxetil)amonio y tris(2-hidroxietil)amonio. Entre los ejemplos no limitativos de tensioactivos no iónicos se incluyen etoxilatos de alcohol (AE o AEO), propoxilatos de alcohol, alcoholes grasos propoxilados (PFA, por sus siglas en inglés), ésteres alquílicos de ácido graso alcoxilado, tales como ésteres alquílicos de ácido graso etoxilado y/o propoxilado, etoxilatos de alquilfenol (APE, por sus siglas en inglés), etoxilatos de nonilfenol (NPE, por sus siglas en inglés), alquilpoliglucósido (ApG, por sus siglas en inglés), aminas alcoxiladas, monoetanolamidas de ácido graso (FAM, por sus siglas en inglés), dietanolamidas de ácido graso (FADA, por sus siglas en inglés), monoetanolamidas de ácido graso etoxiladas (EFAM, por sus siglas en inglés), monoetanolamidas de ácido graso propoxiladas (PFAM, por sus siglas en inglés), amidas de ácidos grasos alquilados polihidroxilados o derivados N-acilo N-alquilo de glucosamina (glucamidas, GA, o glucamidas de ácido graso, FAGA, por sus siglas en inglés), así como productos disponibles bajo los nombres comerciales SPAN y TWEEN, y combinaciones de los mismos. Entre los tensioactivos no iónicos disponibles comercialmente se incluyen las gamas Plurafac ™, Lutensol™ y Pluronic™ de BASF, la serie Dehypon™ de Cognis y la serie Genapol™ de Clariant.

En diversas realizaciones, dicho tensioactivo preferentemente comprende por lo menos un sulfato de éter alquílico. Los sulfatos de éter alquílico preferentes son los de fórmula (I):

R1-O-(AO)n-SOs- X+ (I).

En la fórmula (I) R1 representa un grupo alquilo sustituido o no sustituido lineal o ramificado, preferentemente un grupo alquilo no sustituido lineal, más preferentemente una fracción de alcohol graso. Las fracciones R1 preferentes se seleccionan del grupo que consiste en las fracciones decilo, undecilo, dodecilo, tridecilo, tetradecilo, pentadecilo, hexadecilo, heptadecilo, octadecilo, nonadecilo y eicosilo, y mezclas de las mismas, en donde resultan preferentes aquellos grupos con un número par de átomos de carbono. Las fracciones R1 particularmente preferentes se derivan de alcoholes grasos C10-C18, tales como los derivados de alcoholes de aceite de coco, aceites de alcoholes grasos de sebo, alcohol laurílico, miristílico, cetílico o estearílico o de oxoalcoholes C10-C20.

AO representa un grupo de óxido de etileno (OE) u óxido de propileno (OP), preferentemente un grupo óxido de etileno. El índice «n» representa un número entero entre 1 y 50, preferentemente entre 1 y 20, y más preferentemente, entre 1 y 10. Particularmente preferentemente «n» es 1,2, 3, 4, 5, 6, 7 u 8. X representa un catión monovalente o la n-ésima parte de un catión n-valente; resultan preferentes los cationes de metal alcalino, específicamente Na+ y K+; lo más preferentemente, Na+. Pueden seleccionarse cationes X+ adicionales de entre NH4+, 12 Zn2+,% Mg2+,% Ca2+,% Mn2+, y combinaciones de los mismos.

En diversas realizaciones preferentes, las composiciones detergentes comprenden un sulfato de éter alquílico seleccionado de sulfatos de éter de alcohol graso de fórmula (II):

en la que k=9 a 19, y n=1,2, 3, 4, 5, 6, 7 u 8. Los sulfatos de éter de alcohol graso C10-16 con 1 a 7 OE (k=9 a 15, n=1 a 7), tal como los sulfatos de éter de alcohol graso C12-14 con 1 a 3, particularmente 2 OE (k=11 a 13, n=1 a 3 o 2), más particularmente, las sales de sodio de los mismos. Una realización específica de los mismos es la sal sódica de sulfato de éter laurílico con 2 OE. El nivel de etoxilación es un valor medio y puede ser, para un compuesto específico, un número entero o un número fraccionario.

En diversas realizaciones, el tensioactivo comprende por lo menos un sulfonato de alquilbenceno. Dicho sulfonato de alquilbenceno puede estar presente alternativamente al sulfato de éter alquílico anteriormente indicado o, preferentemente, además del mismo.

Entre los sulfonatos de alquilbenceno de ejemplo se incluyen, aunque sin limitarse a ellos, sulfonatos de alquilbenceno lineales y ramificados, preferentemente sulfonatos de alquilbenceno lineales. Son compuestos ejemplares aquellos de fórmula (III):

(n i) .

en la que R' y R" son, independientemente, H o alquilo y combinados comprenden 9 a 19, preferentemente 9 a 15, y más preferentemente 9 a 13 átomos de carbono. Resultan particularmente preferentes los sulfonatos de dodecil- y tridecilbenceno, en particular las sales sódicas de los mismos.

Adicional o alternativamente, las composiciones de la invención pueden comprender, además, uno o más tensioactivos no iónicos. Los tensioactivos no iónicos preferentes son aquellos de fórmula (IV):

R<2>-O-(AO)<m>-H (IV),

en la que R<2>representa una fracción alquilo sustituida o no sustituida, lineal o ramificada; OA representa un óxido de etileno (OE) o un óxido de propileno (OP) y «m» es un número entero entre 1 y 50.

En la fórmula (IV), R<2>preferentemente representa un grupo alquilo sustituido o no sustituido, lineal o ramificado, preferentemente un grupo alquilo no sustituido lineal, particularmente preferentemente un grupo de alcohol graso. Los grupos preferentes son R<2>seleccionados de entre los grupos decilo, undecilo, dodecilo, tridecilo, tetradecilo, pentadecilo, hexadecilo, heptadecilo, octadecilo y eicosilo, y combinaciones de los mismos, en donde resultan preferentes aquellos grupos con un número par de átomos de carbono. Las fracciones R2 particularmente preferentes se derivan de alcoholes grasos C i2-C i8, tales como alcohol de aceite de coco, alcohol de aceite de sebo, alcohol laurílico, miristílico, cetílico o estearílico o de oxoalcoholes C10-C20.

AO representa un grupo de óxido de etileno (OE) u óxido de propileno (OP), preferentemente un grupo óxido de etileno. El índice «n» representa un número entero entre 1 y 50, preferentemente entre 1 y 20, y más preferentemente, entre 1 y 6. Particularmente preferentemente, m es 1,2, 3, 4 o 5, lo más preferentemente 3 a 5, ya que los grados más altos de etoxilación pueden influir negativamente sobre la viscosidad y la estabilidad.

En diversas realizaciones preferentes, las composiciones detergentes comprenden un éter alquílico seleccionado de éteres de alcohol graso de fórmula (V):

en la que k=11 a 19, y m=1,2, 3, 4, 5, 6, 7 u 8. Resultan preferentes los alcoholes grasos C12-18 con 1 a 6 OE (k=11 a 17, m=1 a 5 en la fórmula (V)). Resultan más preferentes los alcoholes C12-14que presentan 1 a 5 OE, lo más preferentemente éteres alquílicos C12-14 con 3 a 5 OE, en particular éter laurílico con 5 Oe .

Las composiciones detergentes pueden incluir, además, otros tensioactivos no iónicos, tales como glucósidos de alquilo de fórmula general RO(G)x, en la que R es un radical alifático lineal primario o ramificado con 2-metilo que contiene 8 a 22, y preferentemente 12 a 18, átomos de carbono, y G representa una unidad de glucosa. El grado de oligomerización x, que indica la distribución de monoglucósidos y oligoglucósidos, es un número entre 1 y 10 y preferentemente es un número entre 1,2 y 1,4.

En diversas realizaciones, la composición comprende por lo menos dos tensioactivos aniónicos, p. ej., por lo menos un sulfato de éter alquílico y preferentemente por lo menos un sulfonato de alquilbenceno, y opcionalmente un éter alquílico.

Los tensioactivos anfotéricos adecuados comprenden betaínas. Las betaínas preferentes son las alquilbetaínas, las alquilamidobetaínas, las imidazolinio betaínas, las sulfobetaínas (INCI sultaínas) y las fosfobetaínas. Son ejemplos de betaínas y sulfobetaínas adecuadas los compuestos siguientes (con denominación INCI): betaínas de amidopropilo de almendra, betaínas de amidopropilo de albaricoque, betaínas de amidopropilo de aguacate, betaínas de amidopropilo de fruta de babassú, betaínas de behenamidaidopropilo, betaínas de behenilo, betaínas, betaínas de canolaidopropilo, idopropil betaínas caprílicas/capramo, carnitinas, betaínas de cetilo, betaínas de cocamidoetilo, betaínas de cocamidopropilo, betaínas de cocamidopropil hidroxisultaínas, cocobetaínas, coco-hidroxisultaínas, betaínas de coco/oleamidopropilo, coco-sultaínas, betaínas de decilo, glicinatos de oleíl-dihidroxietilo, dihidroxietilglicinatos de soja, estearilglicinatos de dihidroxietilo, dihidroxietilglicinatos de sebo, propil-PG-betaínas de dimeticona, hidroxisultaínas de erucamidopropilo, betaínas de sebo hidrogenado, betaínas de isostearamidopropilo, betaínas de lauramidopropilo, betaínas de laurilo, hidroxisultaína de laurilo, sultaínas de laurilo, betaínas de amidopropilo de leche, betaínas de amidopropilo de visón, betaínas de miristamidopropilo, betaínas de miristilo, betaínas de oleamidopropilo, hidroxisultaína de oleamidopropilo, betaína de oleílo, betaínas de amidopropilo de oliva, betaínas de amidopropilo de palma, betaínas de palmitamidopropilo, carnitina de palmitoílo, betaínas de nuez de amidopropilo de palma, acetoxipropilbetaína de politetrafluoroetileno, betaína de ricinolamidopropilo, betaínas de sesamidopropilo, betaínas de amidopropilo de soja, betaínas de estearamidopropilo, betaínas de estearilo, betaínas de amidopropilo de sebo, hidroxisultaína de amidopropilo de sebo, betaína de sebo, dihidroxietilbetaínas de sebo, betaínas de undecilenamidopropilo y amidopropilbetaína de germen de trigo. Una betaína preferente es, por ejemplo, la cocamidopropilbetaína (cocoamidopropilbetaína). Las betaínas resultan particularmente preferentes para composiciones de lavavajillas, lo más preferentemente, composiciones detergentes lavavajillas a mano.

Entre los tensioactivos adecuados adicionales se incluyen los óxidos de amina. Entre los óxidos de amina adecuados de acuerdo con la invención se incluyen óxidos de alquilamina, en particular, óxidos de alquildimetilamina, óxidos de alquilamidoamina y óxidos de alcoxialquilamina. Son ejemplos de óxidos de amina adecuados los compuestos siguientes (con denominación INCI): óxidos de amidopropilamina de almendra, óxidos de amidopropilamina de fruta de babassú, óxidos de behenamina, óxidos de cocamidopropilamina, óxidos de cocamidopropilamina, óxidos de cocamina, óxidos de coco-morfolina, óxidos de decilamina, óxidos de deciltetradecilamina, óxidos de diaminopirimidina, óxidos de dihidroxietil-alcoxi C8-10-propilaminas, óxidos de dihidroxietil-alcoxi C9-11-propilaminas, óxidos de dihidroxietil-alcoxi C12-15-propilaminas, óxidos de dihidroxietilcocamina, óxidos de dihidroxietil-lauramina, óxidos de dihidroxietil-estearaminas, óxidos de didhidroxietil-amina de sebo, óxidos de amina hidrogenada de nuez de palma, óxidos de amina de sebo hidrogenada, óxidos de hidroxietilhidroxipropil-alcoxi C12-15-propilaminas, óxidos de isoestearmidopropilaminas, óxidos de isoestearamidopropil-morfolina, óxidos de lauramidopropilamina, óxidos de lauramina, óxidos de metilmorfolina, óxidos de amidopropilamina de leche, óxidos de amidopropilamina de visón, óxidos de idopropilamina de miristamina, óxidos de miristamina, óxidos de miristil/cetilaminas, óxidos de oleamidopropilamina, óxidos de oleamina, óxidos de amidopropilamina de oliva, óxidos de palmitamidopropilamina, óxidos de palmitamina, óxidos de PEG-3 lauramina, fosfatos de óxidos de dihidroxetilcocamina potasio, óxidos de trisfosfonometilamina potasio, óxidos de sesamidopropilamina, óxidos de amidopropilamina de soja, óxidos de estearamidopropilamina, óxidos de estearaminas, óxidos de amidopropilamina de sebo, óxidos de amina de sebo, óxidos de undecilenamidopropilamina y óxidos de amidopropilamina de germen de trigo. Un óxido de amina preferente es, por ejemplo, óxidos de cocamidopropilamina (óxido de cocoamidopropilamina).

Para las aplicaciones de lavavajillas automático, preferentemente se utilizan tensioactivos no iónicos de baja producción de espuma, en particular tensioactivos no iónicos de baja producción de espuma alcoxilados, especialmente, etoxilados. Con particular preferencia los detergentes lavavajillas automáticos contienen tensioactivos no iónicos del grupo de los alcoholes alcoxilados. Se proporciona preferencia particular a los tensioactivos no iónicos que presentan un punto de fusión superior a la temperatura ambiente. Los tensioactivos no iónicos presentan un punto de fusión superior a 20 °C, preferentemente superior a 25 °C, más preferentemente de entre 25 °C y 60 °C, y especialmente de entre 26,6 °C y 43,3 °C resultan particularmente preferentes. Los tensioactivos utilizados preferentemente son aquellos de los grupos de tensioactivos no iónicos alcoxilados, en particular alcoholes primarios etoxilados y mezclas de dichos tensioactivos con tensioactivos estructuralmente más complejos, tales como los tensioactivos polioxipropileno/polioxietileno/polioxipropileno (OP/OE/OP). Dichos tensioactivos no iónicos (OP/OE/OP) también se caracterizan por un buen control de la producción de espuma. Los tensioactivos no iónicos particularmente preferentes son aquellos que contienen unidades alternantes de óxido de etileno y diferentes unidades de óxido de alquileno. Entre ellos, a su vez, resultan preferentes los bloques OE-OA-OE-OA, con uno a diez grupos OE u OA antes de seguir con un bloque del otro grupo. Son tensioactivos no iónicos de ejemplos los que presentan un grupo alquilo C<g>con 1 a 4 unidades de óxido de etileno seguido de 1 a 4 unidades de óxido de propileno, seguidas de 1 a 4 unidades de óxido de etileno seguido de 1 a 4 unidades de óxido de propileno. Se proporciona particular preferencia a los tensioactivos no iónicos poli(oxialquilados) con caperuza terminal, en los que la caperuza terminal es un radical hidrocarburo alifático o aromático, saturado o insaturado, lineal o ramificado, R, que presenta 1 a 30 átomos de carbono. Los grupos alquilo pueden comprender, además, grupos hidroxilo. El grupo de dichos tensioactivos no iónicos incluye, por ejemplo, el alcohol graso C<4-22>(OE)<10-50>-2-hidroxialquil éteres, en particular también alcohol graso C<8-12>(OE)<22>-2-hidroxidecil éteres y los alcohol graso C<4-22>(OE)<40-80>-2-hidroxialquil éteres.

Al incluirlo en el mismo, el detergente habitualmente contendrá entre aproximadamente 1 % y aproximadamente 40 % en peso, tal como entre aproximadamente 5 % y aproximadamente 30 %, incluyendo entre aproximadamente 5 % y aproximadamente 15 %, entre aproximadamente 15 % y aproximadamente 20 %, o entre aproximadamente 20 % y aproximadamente 25 % de un tensioactivo aniónico. Entre los ejemplos no limitativos de tensioactivos aniónicos se incluyen sulfatos y sulfonatos, en particular, alquilbencenosulfonatos lineales (LAS), isómeros de LAS, alquilbencenosulfonatos ramificados (BABS), fenilalcanosulfonatos, alfa-olefinsulfonatos (AOS), sulfonatos de olefina, sulfonatos de alqueno, alcano-2,3-diilbis(sulfatos), hidroxialcanosulfonatos y disulfonatos, sulfatos de alquilo (AS), tales como dodecilsulfato sódico (SDS), sulfatos de alcohol graso (FAS), sulfatos de alcohol primario (PAS), etersulfatos de alcohol (AES, AEOS o FES, también conocidos como etoxisulfatos de alcohol o sulfatos de éter de alcohol graso), alcanosulfonatos secundarios (SAS), sulfonatos de parafina (PS), sulfonatos de éster, ésteres de glicerol de ácido graso sulfonado, ésteres metílicos de alfa-sulfo-ácidos grasos (alfa-SFMe o SES), incluyendo éster metílico de sulfonato (MES), ácido alquil- o alquenilsuccínico, ácido dodecenil/tetradecenil-succínico (DTSA), derivados de ácido graso de aminoácidos, diésteres y monoésteres de ácido sulfosuccínico o sal de ácidos grasos (jabón), y combinaciones de los mismos.

Cuando se incluyen en ellos, el detergente habitualmente contendrá entre aproximadamente 1% y aproximadamente 40 % en peso de un tensioactivo catiónico, por ejemplo entre aproximadamente 0,5 % y aproximadamente 30 %, en particular entre aproximadamente 1 % y aproximadamente 20 %, entre aproximadamente 3 % y aproximadamente 10 %, tal como entre aproximadamente 3 % y aproximadamente 5 %, entre aproximadamente 8 % y aproximadamente 12 %, o entre aproximadamente 10% y aproximadamente 12 %. Entre los ejemplos no limitativos de tensioactivos catiónicos se incluyen alquildimetiletanolamina cuaternario (ADMEAQ, por sus siglas en inglés), bromuro de cetiltrimetilamonio (CTAB, por sus siglas en inglés), cloruro de dimetildiestearilamonio (DSDMAC, por sus siglas en inglés) y alquilbencildimetilamonio, compuestos de alquil-amonio cuaternario, compuestos de amonio cuaternario alcoxilados (AQA, por sus siglas en inglés), ésteres cuaternarios y combinaciones de los mismos.

Cuando se incluyen en ellos, el detergente habitualmente contendrá entre aproximadamente 0,2 % y aproximadamente 40 % en peso de un tensioactivo no iónico, por ejemplo entre aproximadamente 0,5 % y aproximadamente 30 %, en particular entre aproximadamente 1 % y aproximadamente 20 %, entre aproximadamente 3 % y aproximadamente 10 %, tal como entre aproximadamente 3 % y aproximadamente 5 %, entre aproximadamente 8 % y aproximadamente 12 %, o entre aproximadamente 10% y aproximadamente 12 %. Entre los ejemplos no limitativos de tensioactivos no iónicos se incluyen etoxilatos de alcohol (AE o AEO), propoxilatos de alcohol, alcoholes grasos propoxilados (PFA, por sus siglas en inglés), ésteres alquílicos de ácido graso alcoxilado, tales como ésteres alquílicos de ácido graso etoxilado y/o propoxilado, etoxilatos de alquilfenol (APE, por sus siglas en inglés), etoxilatos de nonilfenol (NPE, por sus siglas en inglés), alquilpoliglucósido (APG, por sus siglas en inglés), aminas alcoxiladas, monoetanolamidas de ácido graso (FAM, por sus siglas en inglés), dietanolamidas de ácido graso (FADA, por sus siglas en inglés), monoetanolamidas de ácido graso etoxiladas (EFAM, por sus siglas en inglés), monoetanolamidas de ácido graso propoxiladas (PFAM, por sus siglas en inglés), amidas de ácidos grasos alquilados polihidroxilados o derivados N-acilo N-alquilo de glucosamina (glucamidas, GA, o glucamidas de ácido graso, FAGA, por sus siglas en inglés), así como productos disponibles bajo los nombres comerciales SPAN y TWEEN, y combinaciones de los mismos.

Cuando se incluyen en ellos, el detergente habitualmente contendrá entre aproximadamente 0,01%y aproximadamente 10 % en peso de un tensioactivo semipolar. Entre los ejemplos no limitativos de tensioactivos semipolaers se incluyen óxidos de amina (OA), tales como óxido de alquildimetilamina, óxido de N-(cocoalquil)-N,N-dimetilamina y óxido de N-(alquil-sebo)-N,N-bis(2-hidroxietil)amina, y combinaciones de los mismos.

Cuando se incluyen en ellos, el detergente habitualmente contendrá entre aproximadamente 0,01 % y aproximadamente 10 % en peso de un tensioactivo zwiteriónico. Entre los ejemplos no limitativos de tensioactivos zwiteriónicos se incluyen betaínas, tales como alquildimetilbetaínas, sulfobetaínas y combinaciones de las mismas.

Las composiciones limpiadoras de la invención pueden contener entre aproximadamente 0 % y 65 % en peso, tal como entre aproximadamente 5 % y aproximadamente 50 % de un coadyuvante o co-coadyuvante, o una mezcla de los mismos. En un detergente para el lavado de vajillas, el nivel de mejorador habitualmente es de entre 40 % y 65 %, particularmente de entre 50 % y 65 %. El mejorador y/o co-coadyuvante puede ser particularmente un agente quelante que forma complejos solubles en agua con Ca y Mg. Puede utilizarse cualquier coadyuvante y/o co-coadyuvante conocido de la técnica para el uso en detergentes limpiadores. Entre los ejemplos no limitativos de coadyuvantes se incluyen zeolitas, difosfatos (pirofosfatos), trifosfatos, tales como trifosfato sódico (STP o STPP, por sus siglas en inglés), carbonatos, tales como carbonato sódico, silicatos solubles, tales como metasilicato sódico, silicatos en capas (p. ej., SKS-6 de Hoechst), etanolaminas, tales como 2-aminoetán-1-ol (MEA, por sus siglas en inglés), dietanolamina (DEA, también conocida como 2,2'-iminodietán-1-ol), trietanolamina (TEA, también conocida como 2,2',2”-nitriotrietán-1 -ol) y (carboximetil)inulina (CMI, por sus siglas en inglés), y combinaciones de los mismos. El término «co coadyuvante», tal como se utiliza en la presente memoria, se refiere a que el componente respectivo se utiliza en combinación con otro coadyuvante. Todos los compuestos dados a conocer como co-coadyuvantes en la presente memoria también pueden utilizarse como coadyuvantes principales y viceversa, a menos que se indique lo contrario.

En diversas composiciones, la composición, tal como se define en la presente memoria, si no se indica lo contrario, puede comprender entre 0 % y 65 % en peso, por ejemplo entre aproximadamente 1 % en peso y aproximadamente 65 % en peso, entre aproximadamente 5 % en peso y aproximadamente 50 % en peso, preferentemente entre aproximadamente 40 % y aproximadamente 65 % en peso, tal como entre 50 % y 65 % en peso, particularmente entre aproximadamente 20 % en peso y aproximadamente 65 % en peso, particularmente entre 10 % en peso y 50 % en peso de por lo menos un coadyuvante.

Generalmente, y en caso de que no se indique lo contrario, el coadyuvante puede seleccionarse preferentemente de entre citrato, carbonato, silicato, aluminosilicato (zeolita) y combinaciones de los mismos. Entre los coadyuvantes adecuados se incluyen fosfonatos, polifosfonatos, bicarbonatos, boratos y policarboxilatos adicionales. Los mejoradores de citrato, p. ej., ácido cítrico y sales solubles del mismo (particularmente sales sódicas) resultan mejoradores orgánicos solubles en agua particularmente adecuados. Pueden utilizarse citratos en combinación con zeolita, silicatos como los tipos BRITESIL, y/o agentes mejoradores de silicato laminados. El coadyuvante y/o co coadyuvante pueden ser cualquier agente quelante que forme complejos solubles en agua con Ca y Mg. Puede utilizarse cualquier coadyuvante y/o co-coadyuvante conocido de la técnica para el uso en detergentes limpiadores. Entre los ejemplos no limitativos de coadyuvantes se incluyen zeolitas, en particular la zeolita A, P o X; carbonatos, tales como carbonato sódico; silicatos solubles, tales como metasilicato sódico, silicatos laminados (p. ej., SKS-6 de Hoechst) y (carboximetil)inulina (CMI) y combinaciones de los mismos. Entre los ejemplos no limitativos adicionales se incluyen aminocarboxilatos, aminopolicarboxilatos y ácido alquil- o alquenilsuccínico. Entre los ejemplos específicos adicionales se incluyen ácido 2,2',2"-nitrilotriacético (NTA, por sus siglas en inglés), ácido etilendiamintetraacético (EDTA), ácido dietilentriaminapentaacético (DTPA), ácido iminodisuccínico (IDS), ácido etilendiamín-N,N'-disuccínico (EDDS), ácido metilglicina-N,N-diacético (MGDA), ácido glutámico-ácido N,N-diacético (GLDA), ácido 1-hidroxietán-1,1-difosfónico, ácido N-(2-hidroxietil)iminodiacético (EDG), ácido aspártico-ácido N-monoacético (ASMA), ácido aspártico-ácido N,N-diacético (ASDA), ácido aspártico-ácido N-monopropiónico (ASMP), ácido iminodisuccínico (IDA), ácido N-(sulfometil)aspártico (SMAS), ácido N-(2-sulfoetil)-aspártico (SEAS), ácido N-(sulfometilglutámico (s Mg l ), ácido N-(2-sulfoetil)-glutámico (SEGL), ácido N-metiliminodiacético (MIDA), ácido serín-N,N-diacético (SEDA), ácido isoserín-N,N-diacético (ISDA), ácido fenilalanín-N,N-diacético (PHDA), ácido antranílico-ácido N,N-diacético (ANDA), ácido sulfanílico-ácido N,N-diacético (SLDA), ácido taurín-N,N-diacético (TUDA) y N'-(2-hidroxietil)etilendiamín-N,N,N'-triacético (HEDTA), dietanolglicina (DEG), y combinaciones y sales de los mismos. Entre los fosfonatos adecuados para la utilización en la presente memoria se incluyen ácido 1-hidroxietán-1,1-difosfónico (HEDP), ácido etilendiamintetrakis(metilenfosfónico) (EDTMPA), ácido dietilentriaminpentakis (metilenfosfónico) (DTMPA, DTPMPA o DTPMP), ácido nitrilotris (metilenfosfónico) (ATMP o NTMP), ácido 2-fosfonobután-1,2,4-tricarboxílico (PBTC), ácido hexametilendiamintetrakis(metilenfosfónico) (HDTMP). Resultan particularmente preferentes HEDP y DTPMP.

Son silicatos adecuados, los silicatos sódicos laminados cristalinos de la fórmula general NaMSixO2+1*yH2O, en la que M es sodio o H, «x» es un número entre 1,9 y 4, e «y» es un número entre 0 y 20, y «x» es preferentemente 2, 3 o 4. Dichos silicatos se dan a conocer, por ejemplo, en el documento n.° EP-A-0 164514. Resultan preferentes los silicatos en los que M es sodio y es 2 o 3. Resultan particularmente preferentes disilicato p- y 5-sodio, NazSizOs*yHzO.

Aunque no resultan preferentes, las composiciones pueden comprender, además, fosfatos, difosfatos (pirofosfatos) y/o trifosfatos, tales como trifosfato sódico (STP o STPP, por sus siglas en inglés). Sin embargo, resulta preferente que todas las composiciones dadas a conocer en la presente memoria estén libres de fosfato, es decir, que no contengan fosfato añadido deliberadamente, en particular el contenido de fosfato es inferior a 1 % en peso, más preferentemente inferior a 0,5 % en peso, todavía más preferentemente inferior a 0,1 % en peso, respecto al peso total de la composición. En realizaciones alternativas, la invención se refiere, además, a composiciones limpiadoras libres de fosfato en general que contienen los polipéptidos de la invención. En un aspecto, la invención proporciona, de esta manera, una composición limpiadora libre de fosfato que comprende uno o más cualesquiera de los polipéptidos que presentan actividad de hexosaminidasa dados a conocer en la presente memoria.

Si no se indique lo contrario, la composición puede contener, además, entre aproximadamente 0 % y 50% en peso, tal como entre aproximadamente 5 % y aproximadamente 30% de un co-coadyuvante de detergencia. La composición de detergente puede incluir un co-coadyuvante solo o en combinación con un mejorador, por ejemplo, un mejorador de zeolita. Entre los ejemplos no limitativos de co-coadyuvantes se incluyen homopolímeros de poliacrilatos o copolímeros de los mismos, tales como poli(ácido acrílico) (PAA, por sus siglas en inglés) o copoli(ácido acrílico/ácido maleico) (PAA/PMA, por sus siglas en inglés) o ácido poliaspártico. Se describen mejoradores de ejemplo y/o comejoradores adicionales en, p. ej., los documentos n.°WO 09/102854 y n.° US 5977053.

Resultan preferentes como co-coadyuvantes los polímeros solubles en agua que contienen acrilato, tales como las sales de metal alcalino de ácido poliacrílico o ácido polimetacrílico, por ejemplo los que presentan un peso molecular M<w>comprendido en el intervalo de 600 a 750.000 g/mol, según se determina mediante cromatografía de permeación en gel (CPG), de acuerdo con la norma DIN 55672-1:2007-08, con THF como un eluyente.

Son polímeros preferentes los poliacrilatos con un peso molecular, M<w>, de 1.000 a 15.000 g/mol, más preferentes son, debido a su solubilidad, los poliacrilatos de cadena corta con un peso molecular, M<w>, de 1.000 a 10.000 g/mol; lo más preferentemente, de 1.000 a 5.000 g/mol.

Los acrilatos preferentes para la utilización en la presente invención son las sales de metal alcalino de ácido acrílico, preferentemente las sales sódicas, en particular aquellas con pesos moleculares comprendidos en el intervalo de 1.000 a 10.000 g/mol, o de 1.000 a 5.000 g/mol. Los acrilatos adecuados están disponibles comercialmente, por ejemplo bajo el nombre comercial de Acusol<®>, de Dow Chemical. También resultan adecuados los copolímeros de acrilatos, en particular los de ácido acrílico y ácido metacrílico, y de ácido acrílico, ácido metacrílico y ácido maleico.

En realizaciones preferentes, las composiciones de la invención comprenden un sulfopolímero, preferentemente un copolímero que comprende un sulfonato/ácido sulfónico etilénicamente insaturado como un comonómero. Resultan particularmente adecuados los monómeros de ácidos alilsulfónicos, tales como ácido aliloxibencenosulfónico y ácido metalilsulfónico. Son monómeros que contienen grupo ácido sulfónico particularmente preferentes, ácido 1-acrilamidopropanosulfónico, 2-acrilamido-2-propanosulfónico, ácido 2-acrilamido-2-metil-1-propanosulfónico, ácido 2-metacrilamido-2-metil-1-propanosulfónico, ácido 3- metacrilamido-2-hidroxi-propanosulfónico , ácido alilsulfónico , ácido metalilsulfónico , ácido aliloxibencenosulfónico , ácido metaliloxibenzolsulfónico, ácido 2-hidroxi-3- (2-propeniloxi)propanosulfónico , ácido 2-metil-2-propenilsulfónico , ácido estirenosulfónico , ácido vinilsulfónico, 3-sulfopropilo, 3-sulfopropilo, sulfometacrilamida, sulfometilmetacrilamida y mezclas de dichos ácidos o sus sales solubles en agua. Los sulfopolímeros son preferentemente copolímeros de los monómeros anteriormente indicados con ácidos carboxílicos insaturados. Resultan especialmente preferentes los ácidos carboxílicos insaturados ácido acrílico, ácido metacrílico, ácido etacrílico, ácido cloroacrílico, ácido alfa-cianoacrílico, ácido crotónico, ácido alfafenilacrílico, ácido maleico, anhídrido maleico, ácido fumárico, ácido itacónico, ácido citracónico, ácido metilenmalónico, ácido sórbico, ácido cinámico o mezclas de los mismos. También son evidentemente utilizables los ácidos dicarboxílicos insaturados. Resultan preferentes los copolímeros con acrilatos, en particular con ácido acrílico y ácido metacrílico, y ácido acrílico, ácido metacrílico y ácido maleico.

Dichos polímeros están, por ejemplo, disponibles comercialmente bajo los nombres comerciales Acusol<®>590 o Acusol<®>588 de Dow Chemical.

En un aspecto de la invención, las composiciones limpiadoras de la invención comprenden un polipéptido tal como se define en la presente memoria y por lo menos un sulfopolímero, tal como se ha definido anteriormente. Dichas composiciones son preferentemente composiciones lavavajillas.

En una realización preferente, el coadyuvante es un coadyuvante no basado en fósforo, tal como ácido cítrico y/o ácido metilglicín-N,N-diacético (MGDA, por sus siglas en inglés) y/o ácido glutámico-N-N-diacético (GLDA, por sus siglas en inglés) y/o sales de los mismos.

Entre los ejemplos no limitativos adicionales de co-coadyuvantes se incluyen citrato, quelantes, tales como aminocarboxilatos, aminopolicarboxilatos y fosfonatos, y ácido alquil- o alquenilsuccínico. Entre los ejemplos específicos adicionales se incluyen ácido 2,2',2"-nitrilotriacético (NTA), ácido etilendiaminatetraacético (EDTA), ácido dietilentriaminapentaacético (DTPA), ácido iminodisuccínico (IDS), ácido etilendiamín-N,N'-disuccínico (EDDS), ácido metilgicindiacético (MGDA), ácido glutámico-ácido N,N-diacético (GLDA), ácido 1-hidroxietán-1,1-difosfónico (HEDP), ácido etilendiamintetra-(metilenfosfónico) (EDTMPA), ácido dietilentriaminapentakis(metilenfosfónico) (DTMPA o DTPMPA), ácido N-(2-hidroxietil)iminodiacético (EDG), ácido aspártico-ácido N-monoacético (ASMA), ácido aspárticoácido N,N-diacético (ASDA), ácido aspártico-ácido N-monopropiónico (ASMP), ácido iminodisuccínico (IDA), ácido N-(2-sulfometil)-aspártico (<s>M<a>S), ácido N-(2-sulfoetil)-aspártico (S<e>A<s>), ácido N-(2-sulfometil)-glutámico (SMGL), ácido N-(2-sulfoetil)-glutámico (SEGL), ácido N-metiliminodiacético (MIDA), ácido a-alanín-N, N-diacético (a-ALDA), ácido serina-N, N-diacético (SEDA), ácido isoserina-N, N-diacético (ISDA), ácido fenilalanina-N, N-diacético (PHDA), ácido antranílico-ácido N, N-diacético (ANDA), ácido sulfanílico-ácido N, N-diacético (SLDA), ácido taurina-N, N-diacético (TUDA) y ácido sulfometil-N, N-diacético (SMDA), N-(2-hidroxietil)-etilidendiamín-N, N', N'-triacetato (HEDTA), dietanolglicina (DEG), ácido dietilentriamín-penta(metilenfosfónico) (DTPMP), ácido aminotris(metilenfosfónico) (ATMP) y combinaciones y sales de los mismos. Se describen coadyuvantes y/o co coadyuvantes de ejemplo adicionales en, p. ej., los documentos n.° WO 09/102854 y n.° US 5977053 La composición, p. ej., la composición limpiadora, puede contener entre 0 % y 50 % en peso, tal como entre 1 % y 40 %, tal como entre 1 % y 30 %, tal como entre aproximadamente 1 % y aproximadamente 20 % de un sistema blanqueador. Puede utilizarse cualquier sistema blanqueador que comprenda componentes conocidos de la técnica para el uso en detergentes limpiadores. Entre los componentes adecuados del sistema blanqueador se incluyen fuentes de peróxido de hidrógeno, fuentes de perácidos y catalizadores o reforzadores de blanqueo.

Son fuentes adecuadas de peróxido de hidrógeno, las persales inorgánicas, incluyendo sales de metal alcalino, tales como percarbonato sódico y perboratos sódicos (habitualmente mono- o tetrahidrato) y peróxido de hidrógeno-urea (1/1).

Los perácidos pueden (a) incorporarse directamente como perácidos preformados o (b) formarsein situen la solución de lavado del peróxido de hidrógeno y un activado de blanqueo (perhidrólisis) o (c) formarsein situen la solución de lavado a partir de peróxido de hidrógeno y una perhidrolasa y un sustrato adecuado para esta última, p. ej., un éster.

a) Entre los perácidos preformados adecuados se incluyen, aunque sin limitarse a ellos, ácidos peroxicarboxílicos, tales como ácido peroxibenzoico y sus derivados de anillo sustituido, ácido peroxi-a-naftoico, ácido peroxiftálico, ácido peroxiláurico, ácido peroxiesteárico, ácido £-ftalimidoperoxicaproico [ácido ftalimidoperoxihexanoico (PAP, por sus siglas en inglés)] y ácido o-carboxibenzamido-peroxicaproico; ácidos diperoxidicarboxílicos alifáticos y aromáticos, tales como ácido diperoxidodecanodioico, ácido diperoxiazelaico, ácido diperoxisebácico, ácido diperoxibrasílico, ácido 2-decildiperoxibutanodioico y ácido diperoxiftálico, isoftálico y tereftálico; ácidos perimídicos; ácido peroximonosulfúrico; ácido peroxidisulfúrico; ácido peroxifosfórico; ácido peroxisilícico, y mezclas de dichos compuestos. Se entiende que los perácidos mencionados pueden añadirse mejor, en algunos casos, en forma de sales adecuadas, tales como sales de metal alcalino (p. ej., Oxone<®>) o sales de metal alcalinotérreo.

b) Entre los activadores de blanqueo adecuados se incluyen los pertenecientes a la clase de ésteres, amidas, imidas, nitrilos o anhídridos y, en su caso, sales de los mismos. Son ejemplos adecuados, tetraacetiletilendiamina (TAED, por sus siglas en inglés), 4-[(3,5,5-trimetilhexanoíl)oxi]benceno-1-sulfonato sódico (ISONOBS, por sus siglas en inglés), 4-(dodecanoiloxi)benceno-1-sulfonato sódico (LOBS, por sus siglas en inglés), 4-(decanoiloxi)benceno-1-sulfonato sódico, ácido 4-(decanoiloxi)benzoico (DOBa , por sus siglas en inglés), 4-(nonanoiloxi)benceno-1-sulfonato sódico (NOBS), y/o los dados a conocer en el documento n.° WO98/17767. Una familia particular de activadores de blanqueo de interés se ha dado a conocer en el documento n.° EP624154 y resulta particularmente preferente en ese familia, el citrato de acetiltrietilo (ATC, por sus siglas en inglés). El ATC o un triglicérido de cadena corta como la triacetina presenta la ventaja de que son medioambientalmente respetuosos. Además, el citrato de acetiltrietilo y la triacetina presentan una buena estabilidad hidrolítica en el producto con el almacenamiento y son activadores de blanqueamiento eficientes. Finalmente, el ATC es multifuncional, ya que el citrato liberado en la reacción de perhidrólisis puede funcionar como un coadyuvante.

El sistema blanqueador puede incluir, además, un catalizador o reforzador de blanqueamiento.

Entre algunos ejemplos no limitativos de catalizadores de blanqueo que pueden utilizarse en las composiciones de la presente invención se incluyen catalizadores de oxalato de manganeso, acetato de manganeso, manganesocolágeno, cobalto-amina y triazaciclononano de manganeso (MnTACN); resultan particularmente preferentes los complejos de manganeso con 1,4,7-trimetil-1,4,7-triazaciclononano (Me<3>-TACN) o 1,2,4,7-tetrametil-1,4,7-triazaciclononano (Me<4>-TACN), en particular Me<3>-TACN, tal como el complejo de manganeso dinuclear [(Me<3>-TACN)Mn(O)<3>Mn(Me<3>-TACN)](PF<6>)<2>, y [2,2',2"-nitrilotris(etano-1,2-diilazanililidén-KN-metanililidén)trifenolato-K<3>O]manganeso (III). Los catalizadores de blanqueo también pueden ser otros compuestos de metal, tales como complejos de hierro o cobalto.

En algunas realizaciones, en las que se incluye una fuente de un perácido, puede utilizarse un catalizador de blanqueo orgánico o reforzador de blanqueo, que presente una de las fórmulas siguientes:

(iii) y mezclas de los mismos, en los que cada R1 es independientemente un grupo alquilo ramificado que contiene entre 9 y 24 carbonos o un grupo de alquilo lineal que contiene entre 11 y 24 carbonos, preferentemente cada R1 es independientemente un grupo alquilo ramificado que contiene entre 9 y 18 carbonos o un grupo de alquilo lineal que contiene entre 11 y 18 carbonos, más preferentemente cada R1 se selecciona independientemente del grupo que consiste en 2-propilheptilo, 2-butiloctilo, 2-pentilnonilo, 2-hexildecilo, dodecilo, tetradecilo, hexadecilo, octadecilo, isononilo, isodecilo, isotridecilo e isopentadecilo.

Se describen otros sistemas de blanqueo de ejemplo, p. ej., en los documentos n.° WO2007/087258, n.° WO2007/087244, n.° WO2007/087259, n.° EP1867708 (vitamina K) y documento n.° WO2007/087242. Los fotoblanqueadores adecuados pueden ser, por ejemplo, ftalocianinas de zinc o aluminio sulfonados.

Las composiciones pueden comprender agentes de cuidado de metales. Los agentes de cuidado de metales pueden impedir o reducir el empañamiento, la corrosión u oxidación de metales, incluyendo aluminio, acero inoxidable y metales no ferrosos como la plata y el cobre Entre los ejemplos adecuados se incluyen uno o más de los siguientes:

(a) benzatriazoles, incluyendo benzotriazol o bis-benzotriazol y derivados sustituidos de los mismos. Los derivados de benzotriazol son aquellos compuestos en los que los sitios de sustitución disponibles en el anillo aromático se sustituyen parcial o completamente. Entre los sustituyentes adecuados se incluyen grupos de alquilo C1-C20 de cadena lineal o ramificada (p. ej., grupos alquilo C1-C20) e hidroxilo, tio, fenilo o halógeno, tal como flúor, cloro, bromo y yodo.

(b) sales y complejos de metales seleccionados del grupo que consiste en sales y/o complejos de zinc, manganeso, titanio, zirconio, hafnio, vanadio, cobalto, galio y cerio, en donde los metales se encuentran en uno de los estados de oxidación II, III, IV, V o VI. En un aspecto, las sales metálicas y/o complejos metálicos adecuados pueden seleccionarse del grupo que consiste en sulfato de Mn(ll), citrato de Mn(ll), estearato de Mn(ll), acetilacetonato de Mn(ll), KATiF6(p. ej., ^TiFa), KAZrF6(e.g., K2ZrF6), CoSO4, Co(NOs)2y Ce(NOs)3, sales de zinc, por ejemplo sulfato de zinc, hidrozincita o acetato de zinc;

(c) silicatos, incluyendo silicato sódico o potásico, disilicato sódico, metasilicato sódico, filosilicato cristalino y mezclas de los mismos.

Se dan a conocer sustancias redox activas orgánicas e inorgánicas adecuadas adicionales que actúan como inhibidores de la corrosión de plata/cobre, en los documentos n.° WO 94/26860 y n.°WO 94/26859. Preferentemente, la composición de la invención comprende entre 0,1 % y 5 % en peso de la composición de un agente de cuidado de metales, preferentemente el agente de cuidado de metales es una sal de zinc.

La composición puede comprender, p. ej., uno o más hidrótropos, que son compuestos que solubilizan los compuestos hidrofóbicos en soluciones acuosas (o a la inversa, sustancias polares en un medio no polar). Normalmente, los hidrótropos presentan un carácter tanto hidrofílico como hidrofóbico (denominadas propiedades anfifílicas, como se conocen en los tensioactivos); sin embargo, la estructura molecular de los hidrótropos generalmente no favorece la autoagregación espontánea, ver, p. ej., la revisión de Hodgdon y Kaler (2007), Current Opinion in Colloid & Interface Science 12: 121-128. Los hidrótrotopos no muestran una concentración crítica sobre la cual ocurre la autoagregación, tal como se observa en tensioactivos y en lípidos que forman fases micelares, lamelares u otras mesofases bien definidas. Por el contrario, muchos hidrótropos muestran un proceso de agregación de tipo continuo en el que el tamaño de los agregados crece a medida que se incrementa la concentración. Sin embargo, muchos hidrótropos alteran el comportamiento de las fases, la estabilidad y la propiedades coloidales de los sistemas que contienen sustancias de carácter polar y no polar, incluyendo mezclas de agua, aceite, tensioactivos y polímeros. Los hidrótrotopos se han utilizado clásicamente en los sectores farmacéutico, del cuidado personal, alimentario y en aplicaciones técnicas. La utilización de hidrótrotopos en las composiciones de detergente permite producir, por ejemplo, formulaciones más concentradas de tensioactivos (tal como en el procedimiento de compactación de detergentes líquidos mediante la eliminación del agua) sin inducir fenómenos no deseados, tales como la separación de fases o una viscosidad elevada.

La composición limpiadora puede contener 0 % a 10 % en peso, por ejemplo 0 % a 5 % en peso, tal como entre aproximadamente 0,5 % y aproximadamente 5 %, o entre aproximadamente 3 % y aproximadamente 5 % de un hidrótropo. Puede utilizarse cualquier hidrótrotopo conocido de la técnica para el uso en detergentes. Entre los ejemplos no limitativos de hidrótropos se incluyen bencenosulfonato sódico, p-toluenosulfonato sódico (STS), xilenosulfonato sódico (SXS), cumeno-sulfonato sódico (SCS), cimeno-sulfonato sódico, óxidos de amina, alcoholes y poliglicoléteres, hidroxinaftoato sódico, hidroxinaftalensulfonato sódico, etilhexilsulfato sódico y combinaciones de los mismos.

La composición, p. ej., la composición limpiadora, puede contener entre 0 % y 10 % en peso, tal como entre 0,5 % y 5 %, entre 2%y 5 %, entre 0,5%y 2 % o entre 0,2 % y 1%de un polímero. Puede utilizarse cualquier polímero conocido de la técnica para el uso en detergentes. El polímero puede funcionar como un co-coadyuvante tal como se ha mencionado anteriormente, o puede proporcionar propiedades antirredeposición, de protección de fibras, de desprendimiento de la suciedad, de inhibición de la transferencia de tintes, de limpieza de grasas y/o antiespumantes. Algunos polímeros puede presentar más de una de las propiedades anteriormente mencionadas y/o más de uno de los motivos mencionados posteriormente. Entre los polímeros de ejemplo se incluyen (carboximetil)celulosa (CMC), alcohol polivinílico (PVA), polivinilpirrolidona (PVP), polietilenglicol u óxido de polietileno (PEG), polietilenimina etoxilada, carboximetilinulina (CMI) y policarboxilatos, tales como PAA, PAA/PMA, ácido poliaspártico y copolímeros de metacrilato de laurilo/ácido acrílico, CMC modificado hidrofóbicamente (HM-CMC) y siliconas, copolímeros de ácido tereftálico y glicoles oligoméricos, copolímeros de tereftalato de polietileno y poli(tereftalato de oxieteno) (PET-POET), PVP, poli(vinilimidazol) (PVI), poli(vinilpiridín-N-óxido) (PVPO o PVPNO) y polivinilpirrolidona-vinilimidazol (PVPVI). Entre los ejemplos adecuados se incluyen PVP-M5, PVP-K30, ChromaBond S-400, ChromaBond S- 403E y Chromabond S-100 de Ashland Aqualon, y Sokalan® HP 165, Sokalan® HP 50 (agente dispersante), Sokalan® HP 53 (agente dispersante), Sokalan® HP 59 (agente dispersante), Sokalan® HP 56 (inhibidor de transferencia de tintes), Sokalan® HP 66 K (inhibidor de transferencia de tintes) de BASF. Entre los polímeros de ejemplo adicionales se incluyen policarboxilatos sulfonados, óxido de polietileno y óxido de polipropileno (PEO-PPO) y etoxisulfato de dicuaternium. Se dan a conocer otros polímeros de ejemplos en, p. ej., el documento n.° WO 2006/130575. También se encuentran contempladas sales de los polímeros anteriormente mencionados. Es un polímero particularmente preferente, el homopolímero etoxilado Sokalan® HP 20 de BASF, que ayuda a impedir la redeposición de suciedad en la solución de lavado.

Las composiciones, p. ej., la composición limpiadora de la presente invención, pueden incluir, además, agentes matizantes de tejidos, tales como tintes o pigmentos, que al formularse en composiciones de detergente, pueden depositarse sobre un tejido al poner dicho tejido en contacto con una solución de lavado que comprende dichas composiciones de detergente, alterando de esta manera el tinte de dicho tejido mediante absorción/reflexión de la luz visible. Los agentes blanqueadores fluorescentes emiten por lo menos una cierta cantidad de luz visible. En contraste, los agentes matizantes de tejidos alteran el tinte de una superficie, ya que absorben por lo menos una parte del espectro de luz visible. Entre los agentes matizantes de tejidos adecuados se incluyen tintes y conjugados de tintearcilla, y pueden incluir también pigmentos. Entre los tintes adecuados se incluyen los tintes de molécula pequeña y los tintes poliméricos. Entre los tintes de molécula pequeña adecuados se incluyen los tintes de molécula pequeña seleccionados del grupo que consiste en tintes dentro de las clasificaciones de Índice de color (I.C.) de Direct Blue, Direct Red, Direct Violet, Acid Blue, Acid Red, Acid Violet, Basic Blue, Basic Violet y Basic Red, o mezclas de los mismos, por ejemplo tal como se describe en los documentos n.° WO2005/03274, n.° WO2005/03275, n.° WO2005/03276 y n.° EP1876226. La composición de detergente preferentemente comprende entre aproximadamente 0,00003 % en peso y aproximadamente 0,2 % en peso, entre aproximadamente 0,00008 % en peso y aproximadamente 0,05 % en peso, o incluso entre aproximadamente 0,0001 % en peso y aproximadamente 0,04 % en peso de agente matizante de tejidos. La composición puede comprender entre 0,0001 % en peso y 0,2 % en peso de agente matizante de tejidos; esto puede resultar especialmente preferente cuando la composición se encuentra en la forma de una bolsa de dosis unitaria. Los agentes matizantes de tejidos adecuados también se dan a conocer en, p. ej., los documentos n.° WO 2007/087257 y n.° WO2007/087243.

La composición, p. ej., la composición limpiadora puede comprender uno o más enzimas adicionales, tales como una o más de lipasa, cutinasa, una amilasa, carbohidrasa, celulasa, pectinasa, mananasa, arabinasa, galactanasa, xilanasa, oxidasa, p. ej., una lacasa y/o peroxidasa.

En general, las propiedades del enzima o enzimas seleccionados deben ser compatibles con el detergente seleccionado (es decir, pH óptimo, compatibilidad con otros ingredientes enzimáticos y no enzimáticos, etc.) y el enzima y enzimas deben estar presentes en cantidades eficaces.

Entre las proteasas adecuadas para las composiciones de la invención se incluyen las de origen bacteriano, fúngico, vegetal, vírico o animal, p. ej., de origen vegetal o microbiano. Resulta preferente el origen microbiano. Están incluidos los mutantes químicamente modificados o de proteínas manipuladas. Puede ser una proteasa alcalina, tal como una serina-proteasa o una metaloproteasa. Una serina-proteasa puede ser, por ejemplo, de la familia S1, tal como tripsina, o de la familia S8, tal como la subtilisina. Una proteasa metaloproteasa puede ser, por ejemplo, una termolisina de, p. ej., la familia M4 u otra metaloproteasa, tal como las de las familias M5, M7 o M8.

Son ejemplos de subtilasas las derivadas deBacillus,tales comoBacillus lentus, Bacillus alkalophilus, Bacillus subtilis, Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus pumilusandBacillus gibsoniidescritas en los documentos n.° US7262042 y n.° WO09/021867.Subtilisin lentus, SubtilisinNovo,subtilisinCarlsberg,Bacillus licheniformis, subtilisinaBPN',subtilisina309,subtilisina147 ysubtilisina168 y, p. ej., la proteasa PD138 descrita en el documento n.° (WO93/18140). Otras proteasas útiles pueden ser las descritas en los documentos n.° WO01/016285 y n.° WO02/016547. Son ejemplos de proteasas de tipo tripsina, la tripsina (p.ej., de origen porcino o bovino) y la proteasa deFusariumdescrita en los documentos n.° WO94/25583 y n.° WO05/040372, y las proteasas quimotripsina derivada deCellumonasdescritas en los documentos n.° WO05/052161 y n.° WO05/052146.

Una proteasa preferente adicional es la proteasa alcalina deBacillus lentusDSM 5483, tal como se describe en, por ejemplo, el documento n.° WO95/23221, y variantes de la misma, que se describen en los documentos n.° WO92/21760, n.° WO95/23221, n.° EP1921147y n.° EP1921148.

Son ejemplos de metaloproteasas las metaloproteasas neutras descritas en el documento n.° WO07/044993 (Proctor & Gamble/Genencor Int.) tales como las derivadas deBacillus amyloliquefaciens.

Son ejemplos de proteasas útiles las variantes descritas en: los documentos n.° WO89/06279, n.° WO92/19729, n.° WO96/034946, n.° WO98/20115, n.° WO98/20116, n.° WO99/011768, n.°WO01/44452, n.° WO03/006602, n.° WO04/03186, n.° WO04/041979, n.° WO07/006305, n.° WO11/036263, n.° WO11/036264, especialmente las variantes con sustituciones en una o más de las posiciones siguientes: 3, 4, 9, 15, 24, 27, 42, 55, 59, 60, 66, 74, 85, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 104, 116, 118, 121, 126, 127, 128, 154, 156, 157, 158, 161, 164, 176, 179, 182, 185, 188, 189, 193, 198, 199, 200, 203, 206, 211, 212, 216, 218, 226, 229, 230, 239, 246, 255, 256, 268 y 269 en el que las posiciones corresponden a las posiciones de la proteasa deBacillus lentusmostradas en SEC ID n.° 1 del documento n.°WO 2016/001449. Las variantes de proteasa más preferentes pueden comprender una o más mutaciones seleccionadas del grupo que consiste en: S3T, V4I, S9R, S9E, A15T, S24G, S24R, K27R, N42R, S55P, G59E, G59D, N60D, N60E, V66A, N74D, S85R, A96S, S97G, S97D, S97A, S97SD, S99E, S99D, S99G, S99M, S99N, S99R, S99H, S101A, V102I, V102Y, V102N, S104A, G116V, G116R, H118D, H118N, A120S, S126L, P127Q, S128A, S154D, A156E, G157D, G157P, S158E, Y161A, R164S, Q176E, N179E, S182E, Q185N, A188P, G189E, V193M, N198D, V199I, Y203W, S206G, L211Q, L211D, N212D, N212S, M216S, A226V, K229L, Q230H, Q239R, N246K, N255W, N255D, N255E, L256E, L256D T268A y R269H. Las variantes de proteasa son preferentemente variantes de la proteasa deBacillus lentus(Savinase®) mostrada en SEC ID n.° 1 del documento n.° W<o>2016/001449, la proteasa deBacillus amylolichenifaciens(BPN') mostrada en SEC ID n.° 2 del documento n.° WO2016/001449. Las variantes de proteasa preferentemente presentan una identidad de secuencia de por lo menos 80 % respecto a SEC ID n.° 1 o SEC ID n.° 2 del documento n.° WO 2016/001449.

Una variante de proteasa que comprende una sustitución en una o más posiciones correspondientes a las posiciones 171, 173, 175, 179 o 180 de SEC ID n.° 1 del documento n.° WO2004/067737, en el que dicha variante de proteína presenta una identidad de secuencias de por lo menos 75 %, aunque inferior a 100 % respecto a la SEC ID n.° 1 del documento n.° WO2004/067737.

Entre los enzimas proteasa disponibles comercialmente adecuados se incluyen los comercializados bajo los nombres comerciales Alcalase®, DuralaseTm, DurazymTm, Relase®, Relase® Ultra, Savinase®, Savinase® Ultra, Primase®, Polarzyme®, Kannase®, Liquanase®, Liquanase® Ultra, Ovozyme®, Coronase®, Coronase® Ultra, Blaze®, Blaze Evity®100T, Blaze Evity®125T, Blaze Evity®150T, Neutrase®, Everlase®y Esperase® (Novozymes A/S); los comercializados bajo el nombre comercial Maxatase®, Maxacal®, Maxapem®, Purafect Ox®, Purafect OxP®, Puramax®, FN2®, FN3®, FN4®, Excellase®, Excellenz P1000™, Excellenz P1250™, Eraser®, Preferenz P100™, Purafect Prime®, Preferenz P110™, Effectenz P1000™, Purafect®™, Effectenz P1050™, Purafect Ox®™, Effectenz P2000™, Purafast®, Properase®, Opticlean®y Optimase® (Danisco/DuPont), Axapem™ (Gist-Brocases N.V.), BLAP (secuencia mostrada en la figura 29 del documento n.° US5352604) y las variantes de los mismos (Henkel AG) y KAP (subtilisina deBacillus alkalophilus)de Kao.

La proteasas, tal como se ha indicado anteriormente, puede estabilizarse utilizando agentes estabilizantes convencionales, p. ej., un poliol, tal como glicerol, (mono, di o tri)propilenglicol, alcohol de azúcar, polipropilenglicol y/o polietilenglicol, preferentemente polietilenglicol o polipropilenglicol con un peso molecular comprendido en el intervalo de entre 200 y 1000, o compuestos que actúan mediante reducción temporal de la actividad de las proteasas (inhibidores reversibles).

De esta manera, la composición de la invención puede incluir, además, un inhibidor/estabilizante de proteasa, que es un inhibidor reversible de la actividad de proteasa, p. ej., actividad de serina proteasa. Preferentemente, el inhibidor de proteasa es un inhibidor (reversible de proteasa subtilisina. En particular, el inhibidor de proteasa puede ser un péptido aldehido, ácido bórico o un ácido borónico, o un derivado de cualquiera de ellos.

El inhibidor de proteasa puede presentar una constante de inhibición a una serina proteasa, Ki (mol/l de entre 10-12 y 10-3; más preferentemente de entre 10-11 y 10-4, todavía más preferentemente de entre 10-10 y 10-5, todavía más preferentemente de entre 10-10 y 10-6, y lo más preferentemente de entre 10-9 y 10-7.

El inhibidor de proteasa puede ser un ácido borónico o un derivado del mismo; preferentemente, un ácido fenilborónico o un derivado del mismo. En una realización de la invención, el derivado de ácido fenilborónico presenta la fórmula siguiente:

en la que R se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, hidroxi, alquilo C<1>-C<6>, alquilo C<1>-C<6>sustituido, alquenilo C<i>-C<a>y alquenilo C<1>-C<6>sustituido. Preferentemente, R es hidrógeno, CH<3>, CH<3>CH<2>o CH<3>CH<2>CH<2>.

En una realización preferente, el inhibidor de proteasa (derivado de ácido fenilborónico) es ácido 4-formilfenilborónico (4-FPBA, por sus siglas en inglés).

En otra realización particular, el inhibidor de proteasa se selecciona del grupo que consiste en ácido tiofén-2-borónico, ácido tiofén-3-borónico, ácido acetamidofenilborónico, ácido benzofurán-2 borónico, ácido naftalén-1-borónico, ácido naftalén-2-borónico, 2-FPBA, 3-FBPA, 4-FPBA, ácido 1-tiantrenoborónico, ácido 4-dibenzofuranborónico, ácido 5-metiltiofén-2 borónico, ácido tionaftrenborónico, ácido furán-2-borónico, ácido furán-3-borónico, ácido 4,4-bifenildiborínico, 6-hidroxi-2-naftaleno, ácido 4-(metiltio)fenilborónico, ácido 4 (trimetil-silil)fenilborónico, ácido 3-bromotiofenborónico, ácido 4-metiltiofenborónico, ácido 2-naftilborónico, 5-bromotiofenborónico, 5-clorotiofenborónico, ácido dimetiltiofenborónico, ácido 2-bromofenilborónico, ácido 3-clorofenilborónico, 3-metoxi-2-tiofeno, ácido p-metil-feniletilborónico, ácido 2-tiantrenborónico, ácido dibenzotiofenborónico, ácido 4-carboxifenilborónico, ácido 9-antrilborónico, ácido 3,5 diclorofenilborónico, anhídrido de ácido difenilborónico, ácido oclorofenilborónico, ácido p-clorofenilborónico, ácido m-bromofenilborónico, ácido p-bromofenilborónico, ácido pfluorofenilborónico, ácido p-tolilborónico, ácido o-tolilborónico, ácido octilborónico, ácido 1,3,5 trimetilfenilborónico, ácido 3-cloro-4-fluorofenilborónico, ácido 3-aminofenilborónico, 3,5-bis-(trifluorometil)fenilborónico, ácido 2,4 diclorofenilborónico y ácido 4-metoxifenilborónico.

Se describen derivados de ácido borónico adicionales adecuados como inhibidores de proteasa en la composición de detergente en los documentos n.° US 4.963.655, n.° US 5.159.060, n.°WO 95/12655, n.° WO 95/29223, n.° WO 92/19707, n °W O 94/04653, n.° WO 94/04654, n.° US 5442100, n.° US 5488157 y n.° US 5472628.

El estabilizador de proteasa puede presentar la fórmula: P-(A)y-L-(B)x-B0-R*, en la que:

R* es H (hidrógeno), CH<3>, CX<3>, CHX<2>o CH<2>X. Preferentemente, R*=H de manera que el estabilizante es un péptido aldehido con la fórmula P-(A)y-L-(B)x-B0-H;

X es un átomo de halógeno, particularmente F (flúor);

B0 es un único residuo aminoácido con configuración L o D de fórmula -NH-CH(R)-C(=O)-;

x es 1,2 o 3;

Bx es independientemente un único residuo aminoácido, cada uno conectado al siguiente B o a B0 mediante su extremo C-terminal;

L está ausente o es independientemente un grupo conector de fórmula -C(=O)-, -C(=O)-C(=O)-, -C(=S)-, - C(=S)-C(=S)- o -C(=S)-C(=O)-;

A está ausente si L está ausente o es independientemente un solo residuo aminoácido conectado a L mediante el extremo N-terminal del aminoácido;

P se selecciona el grupo que consiste en hidrógeno o si L está ausente, un grupo de protección N-terminal; y es 0, 1 o 2,

R se selecciona independientemente del grupo que consiste en alquilo C<1-6>, arilo C<6-10>o arilalquilo C<7 -10>, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes idénticos o diferentes R';

R' se selecciona independientemente del grupo que consiste en halógeno, -OH, -OR", -SH, -SR", -NH<2>, -NHR", -NR"<2>, -COzH, -CONH<2>, -CONHR", -CONR"<2>, -NHC(=N)NH<2>, y

R" es un grupo alquilo C<1 -6>.

x puede ser 1,2 o 3 y, por lo tanto, B puede ser 1, 2 o 3 residuos aminoácidos, respectivamente. De esta manera, B puede representar B1, B2-B1 o B3-B2-B1, donde B3, B2 y B1 representan, cada uno, un residuo aminoácido. y puede ser 0, 1 o 2 y, por lo tanto, A puede estar ausente, o 1 o 2 residuos aminoácidos que presentan, respectivamente, la fórmula A1 o A2-A1, en la que A2 y A1 representan, cada uno, un residuo aminoácido.

B0 puede ser un solo residuo aminoácido con configuración L o D, que está conectado a H mediante el extremo C-terminal del aminoácido. B0 presenta la fórmula -NH-CH(R)-C(=O)-, en la que R es una cadena lateral alquilo C<1-6>, arilo C<6-10>o arilalquilo C<7 -10>, tal como metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, fenilo o bencilo, y en la que R puede sustituirse opcionalmente con uno o más sustituyentes R' idénticos o diferentes. Son ejemplos particulares de B0, la forma D o L de arginina (Arg), 3,4-dihidroxifenilalanina, isoleucina (Ile), leucina (Leu), metionina (Met), norleucina (Nle), norvalina (Nva), fenilalanina (Phe), m-tirosina, p-tirosina (Tyr) y valina (Val). Una realización particular es aquella en la que B0 es leucina, metionina, fenilalanina, p-tirosina y valina.

B1, que se conecta a B0 mediante el extremo C-terminal del aminoácido, puede ser un aminoácido alifático, hidrofóbico y/o neutro. Son ejemplos de B1, alanina (Ala), cisteína (Cys), glicina (Gly), isoleucina (Ile), leucina (Leu), norleucina (Nle), norvalina (Nva), prolina (Pro), serina (Ser), treonina (Thr) y valina (Val). Son ejemplos particulares de B1, alanina, glicina, isoleucina, leucina y valina. Una realización particular es aquella en la que B es alanina, glicina o valina.

En caso de estar presente, B2, que se conecta a B1 mediante el extremo C-terminal del aminoácido, puede ser un aminoácido alifático, hidrofóbico, neutro y/o polar. Son ejemplos de B2, alanina (Ala), arginina (Arg), capreomicidina (Cpd), cisteína (Cys), glicina (Gly), isoleucina (Ile), leucina (Leu), norleucina (Nle), norvalina (Nva), fenilalanina (Phe), prolina (Pro), serina (Ser), treonina (Thr) y valina (Val). Son ejemplos particulares de B2, alanina, arginina, capreomicidina, glicina, isoleucina, leucina, fenilalanina y valina. Una realización particular es aquella en la que B2 es arginina, glicina, leucina, fenilalanina o valina.

B3, que en caso de estar presente está conectado a B2 mediante el extremo C-terminal del aminoácido, puede ser un aminoácido alifático, aromático, hidrofóbico y/o neutro grande. Son ejemplos de B3, isoleucina (Ile), leucina (Leu), norleucina (Nle), norvalina (Nva), fenilalanina (Phe), fenilglicina, tirosina (Tyr), triptófano (Trp) y valina (Val). Son ejemplos particulares de B3, leucina, fenilalanina, tirosina y triptófano.

El grupo conector puede estar ausente o seleccionarse del grupo que consiste en -C(=O)-, -C(=O)-C(=O)-, - C(=S)-, -C(=S)-C(=S)- o -C(=S)-C(=O)-. Son realizaciones particulares de la invención aquellas en las que L está ausente o L es un grupo carbonilo, -C(=O)-.

A1, que en caso de estar presente está conectado a L mediante el extremo N-terminal del aminoácido, puede ser un aminoácido alifático, aromático, hidrofóbico, neutro y/o polar. Son ejemplos de A1, alanina (Ala), arginina (Arg), capreomicidina (Cpd), glicina (Gly), isoleucina (Ile), leucina (Leu), norleucina (Nle), norvalina (Nva), fenilalanina (Phe), treonina (Thr), tirosina (Tyr), triptófano (Trp) y valina (Val). Son ejemplos particulares de A1, alanina, arginina, glicina, leucina, fenilalanina, tirosina, triptófano y valina. Una realización particular es aquella en la que B es leucina, fenilalanina, tirosina o triptófano.

El residuo A1, que en caso de estar presente está conectado a A1 mediante el extremo N-terminal del aminoácido, puede ser un aminoácido alifático, aromático, hidrofóbico y/o neutro grande. Son ejemplos de A2, arginina (Arg), isoleucina (Ile), leucina (Leu), norleucina (Nle), norvalina (Nva), fenilalanina (Phe), fenilglicina, tirosina (Tyr), triptófano (Trp) y valina (Val). Son ejemplos particulares de A2, fenilalanina y tirosina.

El grupo de protección N-terminal P (en caso de estar presente) puede seleccionarse de formilo, acetilo (Ac), benzoílo (Bz), trifluoroacetilo, metoxisuccinilo, grupos protectores uretano aromáticos y alifáticos, tales como fluorenilmetoxicarbonilo (Fmoc), metoxicarbonilo (Moc), (fluorometoxi)carbonilo, benciloxicarbonilo (Cbz), tbutiloxicarbonilo (Boc) y adamantiloxicarbonilo, p-metoxibencilcarbonilo, bencilo (Bn), p-metoxibencilo (PMB), pmetoxifenilo (PMP), metoxiacetilo, metilamino-carbonilo, metilsulfonilo, etilsulfonilo, bencilsulfonilo, metilfosforamidilo (MeOP(OH)(=O)) y bencilfosforamidilo (PhCHzOP(OH)(=O)).

En el caso de un aldehído tripéptido con un grupo de protección (es decir, x=2, L está ausente y A está ausente), P es preferentemente acetilo, metoxicarbonilo, benciloxicarbonilo, metilamino-carbonilo, metilsulfonilo, bencilsulfonilo y bencilfosforamidilo. En el caso de un aldehído tetrapéptido con un grupo de protección (es decir, x=3, L está ausente y A está ausente), P es preferentemente acetilo, metoxicarbonilo, metilsulfonilo, etilsulfonilo y metilfosforamidilo.

Se describen los péptidos aldehído adecuados en los documentos n.° WO94/04651, n.° WO95/25791, n.° WO98/13458, n.° WO98/13459, n.° WO98/13460, n.° WO98/13461, n.° WO98/13462, n.° WO07/141736, n.°WO07/145963, n.° WO09/118375, n.° WO10/055052 y n.° WO11/036153. Más particularmente, el péptido aldehído puede ser Cbz-Arg-Ala-Tyr-H, Ac-Gly-Ala-Tyr-H, Cbz-Gly-Ala-Tyr-H, Cbz-Gly-Ala-Tyr-CF<3>, Cbz-Gly-Ala-Leu-H, Cbz-Val-Ala-Leu-H, Cbz-Val-Ala-Leu-CF<3>, Moc-Val-Ala-Leu-CF<3>, Cbz-Gly-Ala-Phe-H, Cbz-Gly-Ala-Phe-CF<3>, Cbz-Gly-Ala-Val-H, Cbz-Gly-Gly-Tyr-H, Cbz-Gly-Gly-Phe-H, Cbz-Arg-Val-Tyr-H, Cbz-Leu-Val-Tyr-H, Ac-Leu-Gly-Ala-Tyr-H, Ac-Phe-Gly-Ala-Tyr-H, Ac-Tyr-Gly-Ala-Tyr-H, Ac-Phe-Gly-Ala-Leu-H, Ac-Phe-Gly-Ala-Phe-H, Ac-Phe-Gly-Val-Tyr-H, Ac-Phe-Gly-Ala-Met-H, Ac-Trp-Leu-Val-Tyr-H, MeO-CO-Val-Ala-Leu-H, MeNCO-Val-Ala-Leu-H, MeO-CO-Phe-Gly-Ala-Leu-H, MeO-CO-Phe-Gly-Ala-Phe-H, MeSOz-Phe-Gly-Ala-Leu-H, MeSOz-Val-Ala-Leu-H, PhCHzO-P(OH)(O)-Val-Ala-Leu-H, EtSOz-Phe-Gly-Ala-Leu-H, PhCH<2>SO<2>-Val-Ala-Leu-H, PhCH<2>O-P(OH)(O)-Leu-Ala-Leu-H, PhCHzO-P(OH)(O)-Phe-Ala-Leu-H, or MeO-P(OH)(O)-Leu-Gly-Ala-Leu-H. Un estabilizante preferente para la utilización en la composición líquida de la invención es Cbz-Gly-Ala-Tyr-H o un aducto hidrosulfito del mismo, en donde Cbz es benciloxicarbonilo.

Entre los ejemplos adicionales de dichos péptidos aldehído se incluyen a-MAPI, p-MAPI, Phe-C(=O)-Arg-Val-Tyr-H, Phe-C(=O)-Gly-Gly-Tyr-H, Phe-C(=O)-Gly-Ala-Phe-H, Phe-C(=O)-Gly-Ala-Tyr-H, Phe-C(=O)-Gly-Ala-L-H, Phe-C(=O)-Gly-Ala-Nva-H, Phe-C(=O)-Gly-Ala-Nle-H, Tyr-C(=O)-Arg-Val-Tyr-H, Tyr-C(=O)-Gly-Ala-Tyr-H, Phe-C(=S)-Arg-Val-Phe-H, Phe-C(=S)-Arg-Val-Tyr-H, Phe-C(=S)-Gly-Ala-Tyr-H, antipaína, GE20372A, GE20372B, quimostatina A, quimostatina B y quimostatina C.

El estabilizante de proteasa puede ser un aducto hidrosulfito del péptido aldehído descrito anteriormente, p. ej., tal como se describe en el documento n.°WO 2013/004636. El aducto puede presentar la fórmula P-(A)y-L-(B)x-N(H)-CHR-CH(OH)-SO<3>M, en la que P, A, y, L, B, x y R son tal como se ha definido anteriormente, y M es H o un metal alcalino, preferentemente Na o K.

Una solución acuosa del aducto hidrosulfito puede prepararse mediante la reacción del péptido aldehído correspondiente con una solución acuosa de bisulfito sódico (hidrogenosulfito sódico, NaHSOs), bisulfito potásico (KHSOs), mediante métodos conocidos, p. ej., tal como se describe en los documentos n.°WO 98/47523, n.° US 6.500.802 y n.° US 5,436,229; J. Am. Chem. Soc. (1978) 100, 1228; Org. Synth., Coll. vol. 7: 361.

Los estabilizantes de proteasa péptido aldehido particularmente preferentes presentan la fórmula P-B3-B2-B1-B0-H, o un aducto hidrosulfito que presenta la fórmula P-B3-B2-B1-N(h )-CHR-CHOH-SO<3>M, en la que:

i) H es hidrógeno,

ii) B0 es un único residuo aminoácido con configuración L o D de fórmula -NH-CH(R)-C(=O)-,

iii) B1 y B2 son independientemente residuos aminoácidos individuales,

iv) B3 es un único residuo aminoácido, o está ausente,

v) R se selecciona independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-6, arilo C6-10 o arilalquilo C7-10, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes idénticos o diferentes R';

vi) R' se selecciona independientemente del grupo que consiste en halógeno, -OH, -OR", -SH, -SR", -NH2, - NHR", -NR"2, -COzH, -CONH2, -CONHR", -CONR"2, -NHC(=N)NH2,

vii) R" es un grupo alquilo C1-6.

viii) P es un grupo de protección N-terminal, preferentemente metoxicarbonilo (Moc) o benciloxicarbonilo (Cbz), y ix) M es H o un metal alcalino, preferentemente Na o K.

En una realización todavía más preferente, el estabilizante de proteasa péptido aldehido presenta la fórmula P-B2-B1-B0-H o un aducto que presenta la fórmula P-B2-B1-N(H)-CHR-CHOH-So<3>M, en la que:

i) H es hidrógeno,

iii) B1 y B2 son independientemente residuos aminoácidos individuales,

iv) R se selecciona independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-6, arilo C6-10 o arilalquilo C7-10, opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes idénticos o diferentes R';

v) R' se selecciona independientemente del grupo que consiste en halógeno, -OH, -OR", -SH, -SR", -NH2, - NHR", -NR"2, -COzH, -CONH2, -CONHR", -CONR"2, -NHC(=N)NH2,

vi) R" es un grupo alquilo C1-6,

vii) P es un grupo de protección N-terminal, preferentemente metoxicarbonilo (Moc) o benciloxicarbonilo (Cbz), y viii) M es H o un metal alcalino, preferentemente Na o K.

Son realizaciones preferentes de B0, B1, B2, B3 y P las indicadas anteriormente.

La proporción molar de los péptido aldehidos anteriormente mencionados (o aductos hidrosulfito) a la proteasa puede ser de por lo menos 1:1 o 1,5:1, y puede ser inferior a 1000:1, más preferentemente inferior a 500.1, todavía más preferentemente de entre 100:1 y 2:1, o de entre 20:1 y 2:1, o lo más preferentemente, la proporción molar es de entre 10:1 y 2:1.

Las sales formato (p. ej., formato sódico) y el ácido fórmico también han mostrado buenos efectos como inhibidor de la actividad de proteasa. El formato puede utilizarse sinérgicamente con los inhibidores de proteasa anteriormente mencionados, tal como se muestra en el documento n.°WO 2013/004635. Las sales formato pueden estar presentes en la composición de suspensión en una cantidad de por lo menos 0,1 % p/p o 0,5 % p/p, p. ej., por lo menos 1,0 %, por lo menos 1,2 % o por lo menos 1,5 %. La cantidad es habitualmente inferior a 5 % p/p, inferior a 4 % o inferior a 3 %.

En una realización, la proteasa es una metaloproteasa y el inhibidor es un inhibidor de metaloproteasa, p. ej., un inhibidor b asado en hidrolizado de proteína (p. ej., tal como se describe en el documento n.° WO 2008/134343).

Entre las celulasas adecuadas se incluyen las de origen bacteriano o fúngico. Están incluidos los mutantes químicamente modificados o de proteínas manipuladas. Entre las celulasas adecuadas se incluyen celulasas de los génerosBacillus, Pseudomonas, Humicola, Fusarium, Thielavia, Acremonium,p. ej., las celulasas fúngicas producidas a partir deHumicola insolens, Myceliophthora thermophilayFusarium oxysporumdadas a conocer en los documentos n.° US 4.435.307, n.° US 5.648.263, n.° US 5.691.178, n.° US 5.776.757 y n.° WO 89/09259.

Son celulasas especialmente adecuadas, las celulasas alcalinas o neutras que presentan beneficios de cuidado del color. Se describen ejemplos de dichas celulasas en los documentos n.° Ep 0495 257, n.° EP 0 531 372, n.° WO 96/11262, n.° WO 96/29397 y n.° WO 98/08940. Otros ejemplos son polipéptidos celulasas, tales como las descritas en los documentos n.° WO 94/07998, n.° EP 0531 315, n.° US 5.457.046, n.° US 5.686.593, n.° US 5.763.254, n.° WO 95/24471, n.° WO 98/12307 y n.° WO99/001544.

Otras celulasas son enzima endo-beta-1,4-glucanasa que presenta una secuencia de identidad mínima de 97 % respecto a la secuencia de aminoácidos entre las posiciones 1 y 773 de SEC ID n.° 2 del documento n.°WO 2002/099091 o una xiloglucanasa de familia 44, en donde el enzima xiloglucanasa presenta una secuencia de por lo menos 60 % de identidad respecto a las posiciones 40 a 559 de SEC ID n.° 2 del documento n.° WO 2001/062903:

Entre las celulosa disponibles comercialmente se incluyen Celluzyme™, and Carezyme™ (Novozymes A/S) Carezyme Premium™ (Novozymes A/S), Celluclean ™ (Novozymes A/S), Celluclean Classic™ (Novozymes A/S), Cellusoft™ (Novozymes A/S), Whitezyme™ (Novozymes A/S), Clazinase™y Puradax HA™ (Genencor International Inc.) y KAC-500(B)™ (Kao Corporation).

Entre las mananasas adecuadas se incluyen las de origen bacteriano o fúngico. Están incluidos los mutantes química o genéticamente modificados. La mananasa puede ser una mananasa alcalina de familia 5 o 26. Puedeser un tipo salvaje deBacillusoHumicola,particularmenteB. agaradhaerens, B. licheniformis, B. halodurans, B. clausiioH. insolens.Se describen mananasas adecuadas en el documento n.° WO1999/064619. Una mananasa disponible comercialmente es Mannaway (Novozymes A/S).

Entre las peroxidasas/oxidasas adecuadas se incluyen las de origen vegetal, bacteriano o fúngico. Están incluidos los mutantes químicamente modificados o de proteínas manipuladas. Entre los ejemplos de peroxidasas útiles se incluyen peroxidasas deCoprinus,p.ej., deC. cinereus,y variantes de las mismas tales como las indicadas en los documentos n.° WO 93/24618, n.° WO 95/10602 y n.° WO 98/15257. Entre las peroxidasas disponibles comercialmente se incluyen Guardzyme™ (Novozymes A/S).

Entre las lipasas y cutinasas adecuadas se incluyen las de origen bacteriano o fúngico. Se incluyen enzimas mutantes químicamente modificados o de proteínas manipuladas. Entre los ejemplos se incluyen lipasa deThermomyces,p. ej. deT. lanuginosus(previamente denominadoHumicola lanuginosa)tal como se describe en el documento n.° EP258068 y n.° EP305216, cutinasa deHumicola,p. ej.,H. insolens(documento n.° WO96/13580), lipasa de las cepas dePseudomonas(algunas de ellas actualmente renombradas comoBurkholderia),p.ej.,P. alcaligenesoP. pseudoalcaligenes(documento n.° EP218272), P.cepacia(documento n.° EP331376), P. sp. cepa SD705 (documentos n.° WO95/06720 y n.° WO96/27002), P.wisconsinensis(documento n.° WO96/12012), lipasas deStreptomycestipo GDSL (documento n.° WO10/065455), cutinasa deMagnaporthe grisea(documento n.° WO10/107560), cutinasa dePseudomonas mendocina(documento n.° US5.389.536), lipasa deThermobifida fusca(documento n.° WO11/084412),Geobacillus stearothermophiluslipase (documento n.° WO11/084417), lipasa deBacillus subtilis(documento n.° WO11/084599), y lipasa deStreptomyces griseus(documento n.° WO11/150157) y S.pristinaespiralis(documento n.° WO12/137147).

Son otros ejemplos, variantes de lipasa tales como las indicadas en los documentos n.° EP407225, n.° WO92/05249, n.° WO94/01541, n.° WO94/25578, n.° WO95/14783, n.° WO95/30744, n.° WO95/35381, n.° WO95/22615, n.° WO96/00292, n.° WO97/04079, n.° WO97/07202, n.° WO00/34450, n.° WO00/60063, n.° WO01/92502, n.° WO07/87508 y n.° WO09/109500.

Entre los productos de lipasa comercial preferentes se incluyen Lipolase™, Lipex™; Lipolex™ y Lipoclean™ (Novozymes A/S), Lumafast (originalmente de Genencor) y Lipomax (originalmente de Gist-Brocades).

Todavía otros ejemplos son lipasas en ocasiones denominadas aciltransferasas o perhidrolasas, p. ej., aciltransferasas con homología respecto a la lipasa A deCandida antarctica(documento n.° WO10/111143), aciltransferasa deMycobacterium smegmatis(documento n.° WO05/56782), perhidrolasas de la familia CE 7 (documento n.°WO09/67279) y variantes de la perhidrolasa deM. smegmatis,en particular la variante S54V utilziada en el producto comercial Gentle Power Bleach de Huntsman Textile Effects Pte Ltd (documento n.° WO10/100028).

Entre las amilasas adecuadas se incluyen alfa-amilasas o glucoamilasas y puede ser de origen bacteriano o fúngico. Están incluidos los mutantes químicamente modificados o de proteínas manipuladas. Entre las amilasas se incluyen, por ejemplo, las alfa-amilasas obtenidas deBacillus,p. ej., una cepa especial deBacillus licheniformis,descrita en mayor detalle en el documento n.° GB 1.296.839.

Entre las amilasas adecuadas se incluyen las amilasas que presentan SEC ID n.° 2 en el documento n.°WO 95/10603 o variantes que presentan una identidad de secuencia de 90 % respecto a SEC ID n.° 3 de las mismas. Las variantes preferentes se describen en los documentos n.° WO 94/02597, n.° WO 94/18314, n.° WO 97/43424 y en SEC ID n.° 4 del documento n.° WO 99/019467, tales como variantes con sustituciones en una o más de las posiciones siguientes: 15, 23, 105, 106, 124, 128, 133, 154, 156, 178, 179, 181, 188, 190, 197, 201, 202, 207, 208, 209, 211, 243, 264, 304, 305, 391, 408 y 444.

Entre otras amilasas adecuadas se incluyen las amilasas que presentan SEC ID n.° 6 en el documento n.°WO 02/010355 o variantes de las mismas que presentan una identidad de secuencia de 90 % respecto a SEC ID n.° 6. Son variantes preferentes de SEC ID n° 6 aquellas que presentan una deleción en las posiciones 181 y 182 y una sustitución en la posición 193.

Otras amilasas que resultan adecuadas son la alfa-amilasa híbrida que comprende los residuos 1 a 33 de la alfaamilasa derivada deB. amyloliquefaciensmostrada en SEC ID n.° 6 del documento n.° WO 2006/066594 y los residuos 36-483 de la alfa-amilasa deB. licheniformismostrada en SEC ID n.° 4 del documento n.°WO 2006/066594 o variantes que presentan una identidad de secuencia de 90 % respecto a la misma. Las variantes preferentes de dicha alfa-amilasa híbrida son aquellas que presentan una sustitución, una deleción o una inserción en una o más de las posiciones siguientes: G48, T49, G107, H156, A181, N190, M197, I201, A209 y Q264. Las variantes más preferentes de la alfa-amilasa híbrida que comprenden los residuos 1-33 de la alfa-amilasa derivada deB. amyloliquefaciensmostrada en SEC ID n.° 6 del documento n.°WO 2006/066594 y los residuos 36-483 de SEC ID n.° 4 son aquellas que presentan las sustituciones:

M197T;

H156Y+A181T+N190F+A209V+Q264S; o G48A+T49I+G107A+H156Y+A181T+N190F+I201F+A209V+Q264S.

Son amilasas adicionales que resultan adecuadas las amilasas que presentan SEC ID n.° 6 en el documento n.° WO 99/019467 o variantes de las mismas que presentan una identidad de secuencia de 90 % respecto a SEC ID n.° 6. Son variantes preferentes de SEC ID n° 6, aquellas que presentan una sustitución, una deleción o una inserción en una o más de las posiciones siguientes: R181, G182, h 183, G184, N195, I206, E212, E216 y K269. Son amilasas particularmente preferentes las que presentan una deleción en las posiciones R181 y G182, o en las posiciones H183 y G184.

Son amilasas adicionales que pueden utilizarse, aquellas que presentan SEC ID n.° 1, SEC ID n° 3, SEC ID n° 2 o SEQ ID n° 7 del documento n.°WO 96/023873 o variantes de las mismas que presentan una identidad de secuencia de 90 % respecto a SEC ID n.° 1, SEC ID n° 2, SEC ID n° 3 o SEQ ID n° 7. Son variantes preferentes de SEC ID n° 1, SEC ID n° 2, SEC ID n° 3 o SEQ ID n° 7, aquellas que presentan una sustitución, una deleción o una inserción en una o más de las posiciones siguientes: 140, 181, 182, 183, 184, 195, 206, 212, 243, 260, 269, 304 y 476, utilizando la SEC ID n.° 2 del documento n.°WO 96/023873 para la numeración. Son variantes más preferentes aquellas que presentan una deleción en dos posiciones seleccionadas de 181, 182, 183 y 184, tales como 181 and 182, 182 y 183, o las posiciones 183 y 184. Las variantes de amilasa más preferentes de s Ec ID n° 1, SEC ID n° 2 o SEQ ID n° 7 son aquellas que presentan una deleción en las posiciones 183 y 184 y una sustitución en una o más de las posiciones 140, 195, 206, 243, 260, 304 y 476.

Otras amilasas que pueden utilizarse son las amilasas que presentan SEC ID n.° 2 del documento n.° WO 08/153815, SEC ID n.° 10 en el documento n.° WO 01/66712 o variantes de las mismas que presentan una identidad de secuencia de 90 % respecto a SEC ID n.° 2 en el documento n.° WO 08/153815 o una identidad de secuencia de 90 % respecto a SEC ID n.° 10 en el documento n.° WO 01/66712. Son variantes preferentes de SEC ID n° 10 del documento n.° WO 01/66712 aquellas que presentan una sustitución, una deleción o una inserción en una o más de las posiciones siguientes: 176, 177, 178, 179, 190, 201, 207, 211 y 264.

Son amilasas adecuadas adicionales las amilasas que presentan SEC ID n.° 2 del documento n.° WO 09/061380 o variantes que presentan una identidad de secuencia de 90 % respecto a SEC ID n.° 2 de las mismas. Son variantes preferentes de SEC ID n.° 2 aquellas que presentan un tranco del extremo C-terminal y/o una sustitución, una deleción o una inserción en una de las posiciones siguientes: Q87, Q98, S125, N128, T131, T165, K178, R180, S181, T182, G183, M201, F202, N225, S243, N272, N282, Y305, R309, D319, Q320, Q359, K444 y G475. Son variantes más preferentes de SEC ID n.° 2 aquellas que presentan la sustitución en una o más de las posiciones siguientes: Q87E,R, Q98R, S125A, N128C, T131I, T165I, K178L, T182G, M201L, F202Y, N225E,R, N272E,R, S243Q,A,E,D, Y305R, R309A, Q320R, Q359E, K444E y G475K y/o una deleción en la posición R180 y/o S181 o de T182 y/o G183. Las variantes de amilasa más preferentes de SEC ID n.° 2 son aquellas que presentan las sustituciones:

N128C+K178L+T182G+Y305R+G475K;

N128C+K178L+T182G+F202Y+Y305R+D319T+G475K,

S125A+N128C+K178L+T182G+Y305R+G475K, o S125A+N128C+T131I+T165I+K178L+T182G+Y305R+G475K en las variantes están truncadas C-terminalmente y opcionalmente comprenden, además, una sustitución en la posición 243 y/o una deleción en la posición 180 y/o en la posición 181.

Son amilasas adecuadas adicionales las amilasas que presentan SEC ID n.° 1 del documento n.° WO13184577 o variantes que presentan una identidad de secuencia de 90 % respecto a SEC ID n.° 1 de las mismas. Son variantes preferentes de SEC ID n.° 1, aquellas que presentan una sustitución, una deleción o una inserción en una o más de las posiciones siguientes: K176, R178, G179, T180, G181, E187, N192, M199, I203, S241, R458, T459, D460, G476 y G477. Son variantes más preferentes de SEC ID n.° 1 aquellas que presentan la sustitución en una o más de las posiciones siguientes: K176L, E187P, N192FYH, M199L, I203YF, S241QADN, R458N, T459S, D460T, G476K y G477K y/o una deleción en la posición R178 y/o S179 o de T180 y/o G181. Las variantes de amilasa más preferentes de SEC ID n.° 1 son aquellas que presentan las sustituciones:

E187P+I203Y+G476K

E187P+I203Y+R458N+T459S+D460T+G476K

en las que las variantes opcionalmente comprenden, además, una sustitución en la posición 241 y/o una deleción en la posición 178 y/o en la posición 179.

Son amilasas adecuadas adicionales las amilasas que presentan SEC ID n.° 1 del documento n.° WO10104675 o variantes que presentan una identidad de secuencia de 90 % respecto a SEC ID n.° 1 de las mismas. Son variantes preferentes de SEC ID n° 1, aquellas que presentan una sustitución, una deleción o una inserción en una o más de las posiciones siguientes: N21, D97, V128 K177, R179, S180, I181, G182, M200, L204, E242, G477 y G478. Son variantes más preferentes de SEC ID n° 1 aquellas que presentan la sustitución en una o más de las posiciones siguientes: N21D, D97N, V128I K177L, M200L, L204YF, E242QA, G477K y G478K y/o una deleción en la posición R179 y/o S180 o de I181 y/o G182. Las variantes de amilasa más preferentes de SEC ID n° 1 son aquellas que presentan las sustituciones:

N21D+D97N+V128I

en las que las variantes opcionalmente comprenden, además, una sustitución en la posición 200 y/o una deleción en la posición 180 y/o en la posición 181.

Otras amilasas adecuadas son la alfa-amilasa que presenta SEC ID n.° 12 en el documento n.° WO01/66712 o una variante que presenta una identidad de secuencia de por lo menos 90 % respecto a SEC ID n.° 12. Las variantes de amilasa preferente son aquellas que presentan una sustitución, una deleción o una inserción en una o más de las posiciones siguientes de SEC ID n.° 12 en el documento n.° WO01/66712: R28, R118, N174; R181, G182, D183, G184, G186, W189, N195, M202, Y298, N299, K302, S303, N306, R310, N314; R320, H324, E345, Y396, R400, W439, R444, N445, K446, Q449, R458, N471, N484. Entre las amilasas preferentes particulares se incluyen variantes que presentan una deleción de D183 y G184 y que presentan las sustituciones R118K, N195F, R320K y R458K, y una variante que adicionalmente presenta sustituciones en una o más posiciones seleccionadas del grupo: M9, G149, G182, G186, M202, T257, Y295, N299, M323, E345 y A339; resulta más preferente una variante que adicionalmente presenta sustituciones en la totalidad de dichas posiciones.

Otros ejemplos son variantes de amilasa tales como los indicados en los documentos n.°WO2011/098531, n.° WO2013/001078 y n.° WO2013/001087.

Son amilasas disponibles comercialmente, Duramyl™, Termamyl™, Fungamyl™, Stainzyme™, Stainzyme Plus™, Natalase™, Liquozyme X y BAN™ (de Novozymes A/S), y Rapidase™, Purastar™/Effectenz™, Powerasa, Preferenz S1000, Preferenz S100 y Preferenz S110 (de Genencor International Inc./DuPont).

Una peroxidasa adecuada puede ser un enzima peroxidasa comprendida en la clasificación enzimática EC 1.11.1.7 tal como se expone en el Comité de nomenclatura de la Unión internacional de bioquímica y biología molecular (IUBMB, por sus siglas en inglés), o cualquier fragmento derivado del mismo, que muestra actividad de peroxidasa.

Entre las peroxidasas adecuadas se incluyen las de origen vegetal, bacteriano o fúngico. Están incluidos los mutantes químicamente modificados o de proteínas manipuladas. Entre los ejemplos de peroxidasas útiles se incluyen peroxidasas deCoprinopsis,p. ej., deC. cinerea(documento n.° EP 179.486), y variantes de las mismas, tales como las descritas en los documentos n.° WO 93/24618, n.° WO 95/10602 y n.° w O 98/15257.

Una peroxidasa adecuada incluye un enzima haloperoxidasa, tal como cloroperoxidasa, bromoperoxidasa y compuestos que muestran actividad de cloroperoxidasa o bromoperoxidasa. Las haloperoxidasas se clasifican según su especificidad para los iones haluro. Las cloroperoxidasas (E.C. 1.11.1.10) catalizan la formación de hipoclorito a partir de iones cloruro. Preferentemente, la haloperoxidasa es una vanadio haloperoxidasa, es decir, una haloperoxidasa que contiene vanadato. Se han aislado haloperoxidasas a partir de muchos hongos diferentes, en particular del grupo de hongos hifomicetos dematiáceos, tales comoCaldariomyces,p. ej., C.fumago, Alternaria, Curvularia,e.g., C.verruculosa yC.inaequalis, Drechslera, UlocladiumyBotrytis.

También se han aislado haloperoxidasas a partir de bacterias, tales comoPseudomonas,p. ej.,P. pyrrociniayStreptomyces,p. ej., S.aureofaciens.

Una oxidasa adecuada incluye, en particular, cualquier enzima lacasa comprendido en la clasificación de enzimas EC 1.10.3.2, o cualquier fragmento derivado del mismo que muestre actividad de lacasa o un compuesto que muestra una actividad similar, tal como una catecol oxidasa (EC 1.10.3.1), una o-aminofenol oxidasa (EC 1.10.3.4) o una bilirrubina oxidasa (EC 1.3.3.5). Los enzimas lacasa preferentes son enzimas de origen microbiano. Los enzimas pueden derivarse de plantas, bacterias u hongos (incluyendo hongos filamentosos y levaduras). Entre los ejemplos adecuados de hongos se incluyen una lacasa derivable de una cepa deAspergillus, Neurospora, p. ej., N. crassa, Podospora, Botrytis, Collybia, Fomes, Lentinus, Pleurotus, Trametes,p. ej.,T. villosay T.versicolor, Rhizoctonia,p. ej.,R. solani, Coprinopsis, p. ej., C. cinerea, C. comatus, C. friesii,yC. plicatilis, Psathyrella,p. ej.,P. condelleana, Panaeolus, p. ej., P. papilionaceus, Myceliophthora,p. ej.,M. thermophila, Schytalidium,p. ej., S.thermophilum, Polyporus,p. ej.,P. pin situs, Phlebia,p. ej.,P. radiata(documento n.° WO 92/01046), oCoriolus,p. ej.,C. hirsutus(documento n.° JP 2238885). Entre los ejemplos adecuados de bacterias se incluyen una lacasa derivable de una cepa deBacillus.Una lacasa derivada deCoprinopsisoMyceliophthoraresulta preferente; en particular, una lacasa derivada deCoprinopsis cinerea,tal como se da a conocer en el documento n.° Wo 97/08325; o deMyceliophthora thermophila,tal como se da a conocer en el documento n.° WO 95/33836.

La composición, p. ej., la composición limpiadora de la presente invención, también puede contener dispersantes. En particular, los detergentes en polvo pueden comprender dispersantes. Entre los materiales orgánicos solubles en agua adecuados se incluyen ácidos homo- o copoliméricos o sus sales, en los que el ácido policarboxílico comprende por lo menos dos radicales carboxilo separados entre sí por no más de dos átomos de carbono. Se describen dispersantes adecuados en, por ejemplo, Powdered Detergents, Surfactant science series, volumen 71, Marcel Dekker, Inc.

La composición, p. ej., la composición limpiadora de la presente invención, también puede incluir uno o más agentes inhibidores de la transferencia de tintes. Entre los agentes inhibidores de la transferencia de tintes poliméricos adecuados se incluyen, aunque sin limitarse a ellos, polímeros polivinilpirrolidona, polímeros N-óxido de poliamina, copolímeros de N-vinilpirrolidona y N-vinilimidazol, poliviniloxazolidonas y polivinilimidazolas o mezclas de los mismos. Cuando están presentes en una composición de la invención, los agentes inhibidores de la transferencia de tintes pueden estar presentes a niveles de entre aproximadamente 0,0001 % y aproximadamente 10 %, de entre aproximadamente 0,01 % y aproximadamente 5 %, o incluso de entre aproximadamente 0,1 % y aproximadamente 3 % en peso de la composición.

La composición de la presente invención preferentemente también contendrá componentes adicionales que pueden tintar artículos que se están lavando, tales como agente blanqueador fluorescente o abrillantadores ópticos. En caso de estar presente, el abrillantador preferentemente se encuentra a un nivel de entre aproximadamente 0,01 % y aproximadamente 0,5 %. Puede utilizarse cualquier agente blanqueador fluorescente adecuado para el uso en una composición de detergente de lavandería en la composición de la presente invención. Los agentes blanqueadores fluorescentes más comúnmente utilizados son los pertenecientes a las clases de derivados del ácido diaminoestilbénsulfónico, derivados de diarilpirazolina y derivados bisfenilo-diestirilo. Entre los ejemplos del tipo derivado de ácido diaminoestilbén-sulfónico de agentes blanqueadores fluorescentes se incluyen las sales sódicas de: 4,4'-bis-(2-dietanolamino-4-anilino-s-triazín-6-ilamino)estilbén-2,2'-disulfonato, 4,4'-bis-(2,4-dianilino-s-triazín-6-ilamino) estilbén-2.2'-disulfonato, 4,4'-bis-(2-anilino-4-(N-metil-N-2-hidroxi-etilamino)-s-triazín-6-ilamino)estilbén-2,2'-disulfonato, 4,4'-bis-(4-fenil-1,2,3-triazol-2-il)estilbén-2,2'-disulfonato y 5-(2H-nafto[1,2-d][1,2,3]triazol-2-il)-2-[(E)-2-fenilvinil]bencenosulfonato sódico. Los agentes blanqueadores fluorescentes preferentes son Tinopal DMS y Tinopal CBS, disponibles de Ciba-Geigy AG, Basel, Suiza. Tinopal DMS es la sal disódica de 4,4'-bis-(2-morfolino-4-anilino-striazín-6-ilamino)estilbén-2,2'-disulfonato. Tinopal CBS es la sal disódica de 2,2'-bis-(fenil-estiril)disulfonato. También resultan preferentes los agentes blanqueadores fluorescentes como Parawhite KX disponible comercialmente, suministrado por Paramount Minerals and Chemicals, Mumbai, India. Entre otros fluorescentes adecuados para el uso en la invención se incluyen las 1,3-diarilpirazolinas y las 7-alquilaminocoumarinas. Entre los niveles de abrillantador fluorescente adecuado se incluyen niveles entre niveles más bajos, de aproximadamente 0,01 %, 0,05 %, aproximadamente 0,1 % o incluso aproximadamente 0,2 % en peso y niveles más altos, de 0,5 % o incluso 0,75 % en peso.

La composición de la presente invención puede incluir, además, uno o más polímeros facilitadores del desprendimiento de la suciedad, que ayudan a eliminar la suciedad de los tejidos, tales como el algodón y los tejidos a base de poliéster, en particular la eliminación de manchas hidrofóbicas en tejidos a base de poliéster. Los polímeros facilitadores del desprendimiento de suciedad pueden ser, por ejemplo, polímeros a base de tereftalato no iónicos o aniónicos, polivinilcaprolactamo y copolímeros relacionados, copolímeros de injertación de vinilo, poliamidas de poliéster; ver, por ejemplo, el capítulo 7 en: Powdered Detergents, Surfactant science series, volumen 71, Marcel Dekker, Inc.. Otro tipo de polímeros facilitadores del desprendimiento de la suciedad son los polímeros desgrasantes alcoxilados anfifílicos que comprenden una estructura central y una pluralidad de grupos alcoxilato unidos a esa estructura central. La estructura central puede comprender una estructura de polialquilenimina o una estructura de polialcanolamina tal como se describe en detalle en el documento n.° 2009/087523. Además, los copolímeros injertados aleatorios son polímeros facilitadores del desprendimiento de la suciedad adecuados. Se describen copolímeros injertados en mayor detalle en los documentos n.° WO 2007/138054, WO 2006/108856 y n.° WO 2006/113314. Entre los polímeros de polietilenglicol adecuados se incluyen copolímeros de injerto aleatorio que comprenden: (i) esqueleto hidrofílico que comprende polietilenglicol, y (ii) una o más cadenas laterales seleccionadas del grupo que consiste en: grupo alquilo C<4>-C<25>, polipropileno, polibutileno, éster vinílico de un ácido monocarboxílico C<1>-C<6>saturado, éster de alquilo C<1>-C<6>de ácido acrílico o metacrílico, y mezclas de los mismos. Los polímeros polietilenglicol adecuados presentan un esqueleto polietilenglicol con cadenas laterales de acetato de polivinilo de injerto aleatorio. El peso molecular medio del esqueleto polietilenglicol puede estar comprendido en el intervalo de entre 2.000 Da y 20.000 Da, o de entre 4.000 y 8.000 Da. La proporción de pesos moleculares del esqueleto polietilenglicol a cadenas laterales de acetato de polivinilo puede estar comprendida en el intervalo de entre 1: 1 y 1:5, o de entre 1: 1,2 y 1:2. El número medio de sitios de injertación por unidad de óxido de etileno puede ser inferior a 1, o inferior a 0,8; el número medio de sitios de injertación por unidad de óxido de etileno puede estar comprendido en el intervalo de entre 0,5 y 0,9, o el número medio de sitios de injertación por unidad de óxido de etileno puede estar comprendido en el intervalo de entre 0,1 y 0,5, o de entre 0,2 y 0,4. Un polímero polietilenglicol adecuado es Sokalan HP22. Otros polímeros facilitadores del desprendimiento de la suciedad son estructuras polisacáridas sustituidas, especialmente estructuras celulósicas sustituidas, tales como derivados de celulosa modificada, tales como los descritos en el documento n.° EP 1867808 o en el documento n.°WO 2003/040279. Entre los polímeros celulósicos adecuados se incluyen celulosa, éteres de celulosa, ésteres de celulosa, amidas de celulosa y mezclas de los mismos. Entre los polímeros celulósicos adecuados se incluyen celulosa modificada aniónicamente, celulosa modificada no iónicamente, celulosa modificada catiónicamente, celulosa modificada zwiteriónicamente y mezclas de las mismas. Entre los polímeros celulósicos adecuados se incluyen metilcelulosa, carboximetilcelulosa, etilcelulosa, hidroxietilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, éster de celulosa carboximetilada, y mezclas de las mismas.

La composición de la presente invención puede incluir, además, uno o más agentes antirredeposición, tales como carboximetilcelulosa (CMC), alcohol polivinílico (PVA), polivinilpirrolidona (PVP), polioxietileno y/o polietilenglicol (PEG), homopolímeros de ácido acrílico, copolímeros de ácido acrílico y ácido maleico, y polietileniminas etoxiladas. Los polímeros basados en celulosa descritos en el aparato sobre polímeros facilitadores del desprendimiento de la suciedad también podrían funcionar como agentes antirredeposición.

La composición de la presente invención puede incluir, además, uno o más modificadores reológicos, estructurantes o espesantes, diferentes de agentes reductores de la viscosidad. Los modificadores reológicos se seleccionan del grupo que consiste en materiales hidroxifuncionales cristalinos no poliméricos, modificadores reológicos poliméricos que proporcionan características de adelgazamiento por cizalladura a la matriz líquida acuosa de la composición detergente líquida. La reología y viscosidad del detergente pueden modificarse y ajustarse mediante métodos conocidos de la técnica, por ejemplo tal como se muestra en el documento n.° EP 2169040.

Entre otros componentes de composición limpiadora adecuada se incluyen, aunque sin limitarse a ellos, agentes antiencogimiento, agentes antiarruga, bactericidas, aglutinantes, portadores, tintes, estabilizantes de enzimas, suavizantes de tejidos, rellenos, reguladores de la espuma, hidrótropos, perfumes, pigmentos, supresores de la espuma, solventes, agentes amargantes y estructurantes para detergentes líquidos y/o agentes elastificadores de la estructura.

En diversas realizaciones, la invención se refiere a composiciones que comprenden los polipéptidos que presentan actividad de hexosaminidasa, tal como se describe en la presente memoria, y uno o más cualesquiera de un ingrediente adyuvante seleccionado de agentes amargantes y solventes orgánicos, tales como glicerol y 1,2-propanodiol.

Formulación de productos enzimáticos.

La composición limpiadora de la invención puede presentar cualquier forma conveniente, p. ej., una barra, una tableta homogénea, una tableta que presenta dos o más capas, una bolsa que presenta uno o más compartimientos, tal como 2 o más, preferentemente 2, 3, 4 o 5 compartimientos, unos polvos regulares o compactos, un gránulo, una pasta, un gel, o un líquido regular, compacto o concentrado.

Las bolsas pueden configurarse como de compartimiento único o multicompartimiento. Puede ser de cualquier forma y material que resulte adecuado para contener la composición, p. ej., sin permitir la salida de la composición de la bolsa antes del contacto con agua. La bolsa está hecha de película soluble en agua que encierra un volumen interior. Dicho volumen interior puede dividirse en compartimientos de la bolsa. Las películas preferentes son materiales poliméricos, preferentemente polímeros que se conforman como una película o lámina. Los polímeros, copolímeros o derivados de los mismos preferentes son poliacrilatos seleccionados y copolímeros de acrilato solubles en agua, metilcelulosa, carboximetilcelulosa, dextrina sódica, etilcelulosa, hidroxietilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, maltodextrina, polimetacrilatos, lo más preferentemente copolímeros de alcohol polivinílico e hidroxipropilmetilcelulosa (HPMC). Preferentemente, el nivel de polímero en la película, por ejemplo PVA, es de por lo menos aproximadamente 60 %. El peso molecular medio preferente habitualmente es de entre aproximadamente 20.000 y aproximadamente 150.000. Las películas también pueden ser de composiciones de mezcla que comprenden mezclas de polímero hidrolíticamente degradables y solubles en agua, tales como poliláctido y alcohol polivinílico (conocido con la referencia comercial M8630, tal como es comercializado por MonoSol LLC, Indiana, EE. UU.) más plastificadores como el glicerol, etilenglicerol, propilenglicol, sorbitol y mezclas de los mismos. Las bolsas pueden comprender una composición limpiadora sola para el lavado de ropa o componentes parciales y/o una composición limpiadora líquida o componentes parciales separados por la película soluble en agua. El compartimiento para componentes líquidos puede presentar una composición diferente que los compartimientos que contienen sólidos: documento n.° US2009/0011970 A1.

Los ingredientes del detergente pueden estar separados físicamente unos de otros por compartimientos en bolsas solubles en agua o en diferentes capas de tabletas. De esta manera, pueden evitarse las interacciones negativas entre componentes durante el almacenamiento. Los diferentes perfiles de disolución de cada uno de los compartimientos también puede dar lugar a una ralentización de la disolución de componentes seleccionados en la solución de lavado.

Un detergente líquido o en gel que no se presente en forma de dosis unitaria puede ser acuoso, conteniendo normalmente por lo menos 20 % en peso y hasta 95 % de agua, tal como hasta aproximadamente 70 % de agua, hasta aproximadamente 65 % de agua, hasta aproximadamente 55 % de agua, hasta aproximadamente 45 % de agua o hasta aproximadamente 35 % de agua. Pueden incluirse en un líquido acuoso o gel otros tipos de líquidos, incluyendo, aunque sin limitación, alcanoles, aminas, dioles, éteres y polioles. Un detergente líquido acuoso o en gel puede contener entre 0 % y 30 % de solvente orgánico. Un detergente líquido o en gel puede ser no acuoso.

Usos.

La presente invención se refiere, además, a métodos de utilización de una composición, tal como se define en la presente memoria, que comprende una hexosaminidasa deStaphylococcus,p. ej., una dispersina, de la invención y composiciones de la misma. Una hexosaminidasa deStaphylococcusde la invención resulta útil en procedimientos de lavado, habitualmente de ropa/textiles/telas (lavado de ropa doméstico, lavado de ropa industrial) o limpieza de superficies duras (lavado automático de vajillas, lavado de coches, superficies industriales).

Un aspecto de la invención se refiere a la utilización de una composición, tal como se define en la presente memoria, que comprende una hexosaminidasa deStaphylococcus,p. ej., una dispersina, que comprende el motivo D[IV]AR[TK] (SEC ID n.° 12) para la limpieza de un elemento, en donde el elemento es un textil o una superficie.

Un aspecto de la invención se refiere a la utilización de una composición, tal como se define en la presente memoria, que comprende una hexosaminidasa deStaphylococcus,p. ej., una dispersina, para el lavado de un elemento, en donde el elemento es un textil o una superficie, en donde la hexosaminidasa deStaphylococcusse selecciona del grupo que consiste en polipéptidos mostrados en SEC ID n.° 3, SEC ID n.° 6 o polipéptidos que presentan una identidad de secuencias de por lo menos 60 %, por lo menos 70 %, por lo menos 75 %, por lo menos 80 %, por lo menos 85 %, por lo menos 90 %, por lo menos 95 %, por lo menos 98 % o tal como por lo menos 99 % respecto a las mismas.

Un aspecto de la invención se refiere a la utilización de una composición, tal como se define en la presente memoria, que comprende una hexosaminidasa deStaphylococcusde la invención,

a) para la prevención, reducción o eliminación de la pegajosidad del elemento,

b) para el pretratamiento de manchas sobre el elemento,

c) para la prevención, reducción o eliminación de la redeposición de suciedad durante un ciclo de lavado, d) para la prevención, reducción o eliminación de la adherencia de la suciedad al elemento,

e) para mantener o mejorar la blancura del elemento,

f) para prevenir, reducir o eliminar los malos olores del elemento, en donde el elemento es un textil.

Un aspecto de la invención se refiere a la utilización de una composición, tal como se define en la presente memoria, que comprende una hexosaminidasa deStaphylococcus,en donde la hexosaminidasa deStaphylococcusse selecciona del grupo que consiste en polipéptidos mostrados en SEC ID n.° 3, SEC ID n.° 6 o polipéptidos que presentan una identidad de secuencias de por lo menos 60 %, por lo menos 70 %, por lo menos 75 %, por lo menos 80 %, por lo menos 85 %, por lo menos 90 %, por lo menos 95 %, por lo menos 98 % o tal como por lo menos 99 % respecto a las mismas,

b) para el pretratamiento de manchas sobre el elemento,

e) para mantener o mejorar la blancura del elemento,

f) para la prevención, reducción o eliminación de malos olores del elemento,

en donde el elemento es un textil.

La composición de detergente de la presente invención puede formularse, por ejemplo, como una composición de detergente de lavado de ropa a mano o a máquina, que incluye una composición de aditivo de lavado de ropa adecuada para el pretratamiento de tejidos manchados y una composición suavizante de tejidos añadida en el enjuague, o formularse en forma de una composición de detergente para la utilización en operaciones de limpieza de superficies duras domésticas generales, o formularse para operaciones de lavado de vajillas a mano o a máquina. En un aspecto específico, la presente invención proporciona un aditivo de detergente que comprende uno o más enzimas tal como se describen en la presente memoria.

Un aspecto de la invención se refiere a la utilización de una composición, tal como se define en la presente memoria, preferentemente una composición de detergente que comprende una hexosaminidasa deStaphylococcus,p. ej., una dispersina, que comprende el motivo D[IV]AR[TK] (SEC ID n.° 12) para el lavado de un elemento, en donde el elemento es un textil o una superficie.

Un aspecto de la invención se refiere a la utilización de una composición, tal como se define en la presente memoria, preferentemente una composición de detergente que comprende una hexosaminidasa deStaphylococcus,p. ej., una dispersina, para el lavado de un elemento, en donde el elemento es un textil o una superficie, en donde la hexosaminidasa deStaphylococcusse selecciona del grupo que consiste en polipéptidos mostrados en SEC ID n.° 3, SEC ID n.° 6 o polipéptidos que presentan una identidad de secuencias de por lo menos 60 %, por lo menos 70 %, por lo menos 75 %, por lo menos 80 %, por lo menos 85 %, por lo menos 90 %, por lo menos 95 %, por lo menos 98 % o tal como por lo menos 99 % respecto a las mismas.

Un aspecto de la invención se refiere a la utilización de una composición, tal como se define en la presente memoria, preferentemente una composición de detergente que comprende una hexosaminidasa deStaphylococcus,p. ej., una dispersina, de la invención,

b) para el pretratamiento de manchas sobre el elemento,

e) para mantener o mejorar la blancura del elemento,

f) para la prevención, reducción o eliminación de malos olores del elemento,

en donde el elemento es un textil.

Un aspecto de la invención se refiere a la utilización de una composición, tal como se define en la presente memoria, preferentemente una composición de detergente que comprende una hexosaminidasa deStaphylococcus,p. ej., una dispersina en la que la hexosaminidasa deStaphylococcusse selecciona del grupo que consiste en los polipéptidos mostrados en la SEC ID n.° 3, SEC ID n.° 6 o polipéptidos que presentan una identidad de secuencias de por lo menos 60 %, por lo menos 70 %, por lo menos 75 %, por lo menos 80 %, por lo menos 85 %, por lo menos 90 %, por lo menos 95 %, por lo menos 98 % o tal como una identidad de secuencias de por lo menos 99 % respecto a la misma,

b) para el pretratamiento de manchas sobre el elemento,

e) para mantener o mejorar la blancura del elemento,

f) para la prevención, reducción o eliminación de malos olores del elemento,

en donde el elemento es un textil.

Métodos.

(a) poner en contacto el tejido con una composición de la invención o una solución acuosa de la misma, (b) y opcionalmente el enjuague y secado del textil.

Un aspecto se refiere a un método de tratamiento de un tejido, que comprende:

(a) poner en contacto el tejido con una composición de la invención o una solución acuosa de la misma, en donde dicha composición comprende una hexosaminidasa deStaphylococcus,p. ej., una dispersina, en donde la hexosaminidasa deStaphylococcusse selecciona del grupo que consiste en polipéptidos mostrados en SEC ID n.° 3, SEC ID n.° 6 o polipéptidos que presentan una identidad de secuencias de por lo menos 60 %, por lo menos 70 %, por lo menos 75 %, por lo menos 80 %, por lo menos 85 %, por lo menos 90 %, por lo menos 95 %, por lo menos 98 % o tal como por lo menos 99 % respecto a las mismas,

(b) y opcionalmente el enjuague y secado del textil.

a. exponer un elemento a una composición de la invención o una solución de lavado que comprende dicha composición, en donde dicha composición comprende una hexosaminidasa deStaphylococcus,p. ej., una dispersina, que comprende el motivo D[IV]AR[TK] (SEC ID n.° 12),

b. completar por lo menos un ciclo de lavado, y

c. opcionalmente enjuagar el elemento,

en donde el elemento es un tejido.

a. exponer un elemento a una composición de la invención o a una solución de lavado que comprende una composición de la invención, en donde dicha composición comprende una hexosaminidasa deStaphylococcus,p. ej., una dispersina, en donde la hexosaminidasa deStaphylococcusse selecciona del grupo que consiste en polipéptidos mostrados en SEC ID n.° 3, SEC ID n.° 6 o polipéptidos que presentan una identidad de secuencias de por lo menos 60 %, por lo menos 70 %, por lo menos 75 %, por lo menos 80 %, por lo menos 85 %, por lo menos 90 %, por lo menos 95 %, por lo menos 98 % o tal como por lo menos 99 % respecto a las mismas, b. completar por lo menos un ciclo de lavado, y

c. opcionalmente, enjuagar el elemento, en donde el elemento es un tejido.

Una realización se refiere a un método, en donde la hexosaminidasa deStaphylococcus,p. ej., la dispersina, comprende uno o más de los motivos siguientes: GXDE (SEC ID n.° 9), [EQ][NRSHA][YVFL][AGSTC][IVLF][EAQYN][SN] (SEC ID n.° 10) o [VIMS][LIV]G[GAV]DE[VI][PSA] (SEC ID n.° 11), además de D[IV]AR[TK] (SEC ID n.° 12).

Según la presente invención, el método, en donde la hexosaminidasa deStaphylococcuscomprende el motivo D[IV]AR[TK] (SEC ID n.° 12).

El pH de la solución acuosa/líquido o solución de lavado puede estar comprendido en el intervalo de entre 1 y 11, tal como en el intervalo de entre 5,5 y 11, tal como en el intervalo de entre 7 y 9, en el intervalo de entre 7 y 8, o en el intervalo de entre 7 y 8,5.

La solución de lavado puede presentar una temperatura comprendida en el intervalo de entre 5 °C y 95 °C, o en el intervalo de entre 10 °C y 80 °C, en el intervalo de entre 10 °C y 70°C, en el intervalo de entre 10 °C y 60 °C, en el intervalo de entre 10 °C y 50 °C, en el intervalo de entre 15 °C y 40 °C o en el intervalo de entre 20 °C y 30 °C. En un aspecto, la temperatura de la solución de lavado es de 30 °C.

La concentración de la hexosaminidasa deStaphylococcusen la solución de lavado habitualmente está comprendida en el intervalo de entre por lo menos 0,00001 ppm y por lo menos 10 ppm, de entre por lo menos 0,00002 ppm y por lo menos 10 ppm, de entre por lo menos 0,0001 ppm y por lo menos 10 ppm, de entre por lo menos 0,0002 ppm y por lo menos 10 ppm, de entre por lo menos 0,001 ppm y por lo menos 10 ppm, de entre por lo menos 0,002 ppm y por lo menos 10 ppm, de entre por lo menos 0,01 ppm y por lo menos 10 ppm, de entre por lo menos 0,02 ppm y por lo menos 10 ppm, de entre por lo menos 0,1 ppm y por lo menos 10 ppm, de entre por lo menos 0,2 ppm y por lo menos 10 ppm, de entre por lo menos 0,5 ppm y por lo menos 5 ppm.

Definiciones.

Cualquier grupo de microorganismos puede producir un biofilm en el que las células se adhieren entre sí o se adhieren a una superficie, tal como un textil, pieza de vajilla o superficie dura u otro tipo de superficie. Dichas células adherentes frecuentemente están incluidas dentro de una matriz autoproducida de sustancia polimérica extracelular (SPE). La SPE de biofilm es un conglomerado polimérico generalmente compuesto de ADN extracelular, proteínas y polisacáridos. Los biofilms pueden formarse sobre superficies vivas o no vivas. Las células microbianas que crecen en un biofilm son fisiológicamente diferentes de las células planctónicas del mismo organismo, que, en contraste, son unicelulares y pueden flotar o nadar en un medio líquido. Las bacterias que viven en un biofilm presentan propiedades significativamente diferentes de las bacterias planctónicas de la misma especie, ya que el medio denso y protegido de la película les permite cooperar e interactuar de diversas maneras. Un beneficio de este medio para los microorganismos es la resistencia incrementada a detergentes y antibióticos, ya que la matriz extracelular densa y la capa externa de células protegen el interior de la comunidad. En la ropa para lavado pueden encontrarse bacterias productoras de biofilm de las especies siguientes:Acinetobacter sp., Aeromicrobium sp., Brevundimonas sp., Microbacterium sp., Micrococcus luteus, Pseudomonas sp., Staphylococcus epidermidisyStenotrophomonassp. Sobre superficies duras pueden encontrarse bacterias productoras de biofilm de las especies siguientes:Acinetobacter sp., Aeromicrobium sp., Brevundimonas sp., Microbacterium sp., Micrococcus luteus, Pseudomonas sp., Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus aureusyStenotrophomonas sp.En un aspecto, la cepa productora de biofilm esBrevundimonassp. En un aspecto, la cepa productora de biofilm esPseudomonas,p. ej.,Pseudomonas alcaliphilaoPseudomonas fluorescens.En un aspecto, la cepa productora de biofilm esStaphylococcus aureus.

La expresión «limpieza profunda» se refiere a la disrupción o eliminación de componentes de materia orgánica, p. ej., un biofilm, tal como polisacáridos, p. ej., PNAG, proteínas, ADN, suciedad u otros componentes presentes en la materia orgánica.

Componente limpiador o un adyuvante limpiador: El componente limpiador o adyuvante limpiador es diferente de la hexosaminidasa deStaphylococcus.La naturaleza precisa de estos componentes complementarios (adicionales) y niveles de incorporación de los mismos, dependerá de la forma física de la composición y de la naturaleza de la operación para la que se va a utilizar. Entre los materiales complementarios adecuados se incluyen, aunque sin limitarse a ellos, los componentes indicados posteriormente, tales como tensioactivos, coadyuvantes, adyuvantes de floculación, agentes quelantes, inhibidores de transferencia de colorantes, enzimas, estabilizadores de enzimas, inhibidores de enzimas, materiales catalíticos, activadores de blanqueo, peróxido de hidrógeno, fuentes de peróxido de hidrógeno, perácidos preformados, agentes poliméricos, agentes de eliminación de tierra arcillosa/antiredeposición, abrillantadores, supresores de espuma, tintes, perfumes, agentes elastificantes de estructura, suavizantes de tejidos, portadores, hidrótropos, coadyuvantes y co-coadyuvantes, agentes de teñido de tejidos, agentes antiespumantes, dispersantes, adyuvantes de procesamiento y/o pigmentos

Composición limpiadora: La expresión «composición limpiadora» se refiere a composiciones que encuentran utilidad en la eliminación de compuestos no deseados de elementos que van a lavarse, tales como textiles. La composición detergente puede utilizarse para, p. ej., limpiar textiles tanto para la limpieza doméstica como la industrial. Las expresiones comprenden cualesquiera materiales/compuestos seleccionados para el tipo particular de composición limpiadora deseada y la forma del producto (p. ej., composiciones líquidas, de gel, en polvo, granuladas, en pasta o en spray) e incluye, aunque sin limitación, composiciones detergentes (p. ej., detergentes líquidos y/o sólidos de lavado de ropa y detergentes de tejidos finos, suavizantes de tejidos, suavizantes de tejidos, y prequitamanchas/pretratamiento para textiles y ropa). Además de contener los enzimas descritos en la presente memoria, la formulación de detergente puede contener uno o más enzimas adicionales (tales como proteasas, amilasas, lipasas, cutinasas, celulasas, endoglucanasas, xiloglucanasas, pectinasas, pectina liasas, xantanasas, peroxidasas, haloperoxigenasas, catalasas y mananasas, o cualquier mezcla de las mismas) y/o ingredientes complementarios de detergente, tales como tensioactivos, coadyuvantes, quelantes o agentes quelantes, sistema de blanqueo o componentes de blanqueador, polímeros, acondicionadores de tejidos, reforzadores de espuma, supresores de espumas, tintes, perfume, inhibidores de deslustre, abrillantadores ópticos, bactericidas, fungicidas, agentes de suspensión de suciedad, agentes anticorrosión, inhibidores o estabilizantes enzimáticos, activadores enzimáticos, una o más transferasas, enzimas hidrolíticos, oxidorreductasas, agentes azuladores y colorantes fluorescentes, antioxidantes y solubilizadores.

La expresión «limpieza de superficies duras» se define en la presente memoria como la limpieza de superficies duras, en donde las superficies duras pueden incluir suelos, mesas, paredes, techos, etc., así como superficies de objetos duros, tales como coches (lavado de coches) y vajillas (lavado de vajillas). El lavado de vajillas incluye, aunque sin limitación, el lavado de platos, tazas, vasos, boles, cubertería, tales como cucharas, cuchillos, tenedores, utensilios para servir, cerámica, plásticos, metales, porcelana, vidrio y acrílicos.

La expresión «rendimiento de lavado» se utiliza como la capacidad de un enzima de eliminar manchas presentes en el objeto que va a limpiarse durante, p. ej., el lavado o limpieza de superficies duras.

El término «blancura» se define en la presente memoria como la calidad o estado de un textil de ser blanco. La pérdida de blancura puede deberse a la eliminación de agentes abrillantadores ópticos/matizantes y resulta en el agrisamiento o amarillamiento de los textiles. El agrisamiento y el amarillamiento puede deberse a redeposición de suciedad, suciedad corporal, coloreamiento de, p. ej., iones de hierro y cobre o la transferencia de tintes. La blancura podría incluir uno o varios problemas de la lista a continuación: efectos de colorantes o tintes; eliminación incompleta de manchas (p. ej., suciedad corporal, sebo, etc.), redeposición (agrisamiento, amarillamiento u otras decoloraciones del objeto( la suciedad eliminada se reasocia a otras partes del textil, sucio o no sucio); cambios químicos en el textil durante la aplicación, y aclarado o abrillantamiento de colores.

El término «lavandería» se refiere tanto a la lavandería doméstica como a la lavandería industrial y se refiere al procedimiento de tratamiento de textiles con una solución que contiene una composición limpiadora o detergente de la presente invención. El procedimiento de lavandería puede llevarse a cabo, por ejemplo, utilizando una lavadora doméstica o industrial, o puede llevarse a cabo a mano.

La expresión «malos olores» se refiere a olores que no se desean en los elementos lavados. La prenda limpia debe presentar un olor fresco y limpio, sin malos olores adheridos a la prenda. Un ejemplo de mal olor son compuestos con un olor desagradable, que puede ser producido por microorganismos. Otro ejemplo de olores desagradables puede ser el olor a sudor u olor corporal adherido al elemento que ha estado en contacto con el ser humano o animal. Otro ejemplo de mal olor puede ser el olor de especias, que se engancha a los elementos, por ejemplo de curry u otras especias exóticas de olor fuerte, tabaco, olores a cocina (aceite frito, pescado, etc.), aromas de perfume, tales como desodorante y agua de colonia.

La expresión «polipéptido maduro» se refiere a un polipéptido en su forma final después de la modificación traduccional y cualquier modificación post-traduccional, tal como el procesamiento del extremo N-terminal, el truncado del extremo C-terminal, la glucosilación, la fosforilación, etc.

El término «textil» se refiere a cualquier material textil, incluyendo hilos, intermediarios de hilo, fibras, materiales no tejidos, materiales naturales, materiales sintéticos y cualquier otro material textil, telas fabricadas con estos materiales y productos hechos a partir de telas (por ejemplo, prendas y otros artículos) El textil o tela puede presentar la forma de tejidos de punto, tejidos, tejanos, telas no tejidas, fieltros, hilos y toallas. El textil puede ser a base de celulosa, tal como celulósicos naturales, incluyendo algodón, lino, yute, ramio, sisal ocoir,o celulósicos fabricados (por ejemplo, originados a partir de pulpa de madera), incluyendo viscosa/rayón, fibras de acetato de celulosa (tricell), lyocell, o mezclas de los mismos El textil o tela también puede no estar basado en celulosa, tal como poliamidas naturales, incluyendo lana, camello, cachemira,mohair,conejo y seda, o polímeros sintéticos, tales como nailon, aramida, poliéster, acrílico, polipropileno yspandex/elastano,o mezclas de los mismos, así como mezclas de fibras basadas en celulosa y no celulósicas. Son ejemplos de mezclas, las mezclas de algodón y/o rayón/viscosa con uno o más materiales acompañantes, tales como lana, fibras sintéticas (p. ej., fibras de poliamida, fibras acrílicas, fibras de poliéster, fibras de alcohol polivinílico, fibras de cloruro de polivinilo, fibras de poliuretano, fibras de poliurea y fibras de aramida) y/o fibras que contienen celulosa (p.ej., rayón/viscosa, ramio, lino, yute, fibras de acetato de celulosa y lyocell) El tejido puede ser de lavandería lavable convencional, por ejemplo, lavandería doméstica manchada. En donde se utilice el término «tejido» o «prenda», pretende incluir también el término más amplio «textiles».

El término «variante» se refiere a un polipéptido que presenta la actividad del polipéptido parental o precursor y que comprende una alteración, es decir, una sustitución, inserción y/o deleción, en una o más (p. ej., varias) posiciones en comparación con el polipéptido precursor o parental. Una sustitución significa el reemplazo del aminoácido que ocupa una posición por un aminoácido diferente; una deleción significa la eliminación del aminoácido que ocupa una posición, y una inserción significa la adición de un aminoácido contiguo y que sigue inmediatamente al aminoácido que ocupa una posición.

Identidad de secuencias: el grado de relación entre dos secuencias de aminoácidos o entre dos secuencia de nucleótidos se describe mediante el parámetro «identidad de secuencias». Para los fines de la presente invención, la identidad de secuencias entre dos secuencias de aminoácidos se determina utilizando el algoritmo de Needleman-Wunsch (Needleman y Wunsch, 1970, J. Mol. Biol. 48: 443-453) tal como se implemente en el programa Needle del paquete E<m>BOSS (<e>M<b>OSS: The European Molecular Biology Open Software Suite, Rice et al., 2000, Trends Genet.

16: 276-277), preferentemente la versión 6.6.0 o posterior. Los parámetros utilizados con: penalización de hueco abierto de 10, penalización de extensión de hueco de 0,5 y la matriz de sustitución EBLOSUM62 (versión EMBOSS de BLOSUM62). Se utiliza el resultado de Needle etiquetado como «identidad más larga» (obtenida utilizando la opción «-nobrief») como el porcentaje de identidad y se calcula del modo siguiente:

(Residuos idénticos x 100) / (Longitud de la alineación - Número total de huecos en la alineación)Ciado:grupo de polipéptidos agrupados entre sí basándose en características homólogas que se remontan a un antepasado común. Los clados de polipéptidos pueden visualizarse en forma de árboles filogenéticos y un clado es un grupo de polipéptidos que consiste en un antepasado común y todos sus descendientes lineales.

Nomenclatura

Para los fines de la presente invención, la nomenclatura [IV] o [I/V] significa que el aminoácido en esta posición puede ser isoleucina (Ile, I) o valina (Val, V). De manera similar, la nomenclatura [LVI] y [L/V/I] significa que el aminoácido en esta posición puede ser una leucina (Leu, L), valina (Val, V) o isoleucina (Ile, I), etc. para otras combinaciones tales como las indicadas en la presente memoria. A menos que se limite de otro modo adicionalmente, el aminoácido X se define de manera que puede ser cualquiera de los 20 aminoácidos naturales.

A menos que se indique lo contrario, o si resulta evidente a partir del contexto que se pretendía otra cosa, todos los porcentajes son en peso (% p/p).

Ejemplos

Ensayos.

Ensayo de lavado.

Sistema de lavado de modelo Mini Launder-O-Meter (MiniLOM).

MiniLOM es un sistema de minilavado en el que los lavados se llevan a cabo en probetas de 50 ml situadas en un rotador Stuart. Cada tubo simula una pequeña lavadora y durante cada experimento, cada uno contenía una solución de un sistema específico de detergente/enzima para el ensayo junto con tejidos sucios y no sucios en los que se sometía a ensayo. Se aplicó estrés mecánico mediante rotación (normalmente a 20 rpm) y la temperatura se controló mediante la introducción de un rotador en una cámara/sala de calentamiento.

Ensayo I: ensayo de la actividad de hexosaminidasa.

Se determinó la actividad de hexosaminidasa de los polipéptidos enumerados en la tabla, posteriormente, utilizando 4-metilmbeliferil-N-acetil-p-D-glucosaminida (Sigma-Aldrich) como sustrato. La reacción enzimática se llevó a cabo por triplicado en una placa de microtitulación de poliestireno de fondo plano de 96 pocillos (Thermo Scientific) bajo las condiciones siguientes: tampón de ácido 3-(N-morfolino)propanosulfónico 20 mM, pH 7, 4-metilumbeliferil N-acetil-p-D-glucosaminida 5 mM, detergente Brij 35 (éter polioxietilén-laurílico, CAS 9002-92-0) al 0,01 % vol. y muestra de enzima purificado 50 nM en un volumen total de reacción de 200 pl. Se sometieron a ensayo en paralelo muestras de blanco sin polipéptido. Las reacciones se llevaron a cabo a temperatura ambiente utilizando un lector de microplacas SpectraMax M2e de Molecular Devices. La longitud de onda de excitación se estableció en 368 nm y la lectura de la emisión fluorescente, en 448 nm. Se realizó un seguimiento de la señal fluorescente durante 15 min en modo cinético. Se evaluó la velocidad de reacción inicial en unidades de URF/min mediante el cálculo del incremento inicial máximo de la señal fluorescente durante el tiempo a medida que se liberaba 4-metilumbeliferilo a partir del sustrato de 4-metilumbeliferil N-acetil-p-D-glucosaminida debido a la reacción enzimática.

Composición de detergente modelo A (líquido).

Ingredientes: LAS 12 %, AEO 11 % Biosoft N25-7 (Nl), AEOS 5 % (SLES), MPG 6 % (monopropilenglicol), etanol 3 %, TEA 3 %, jabón de coco 2,75 %, jabón de soja 2,75 %, glicerol 2 %, hidróxido sódico 2 %, citrato sódico 2 %, formato sódico 1 %, DTMPA 0,2 % y PCA 0,2 % (todos los porcentajes son en p/p).

Se preparó detergente modelo no iónico Triple-20 mediante disolución de 3,33 g/l de detergente no iónico que contenía NaOH 0,87 %, MPG (monopropilenglicol) 6 %, glicerol 2 %, jabón-soja 2,75 %, jabón de coco 2,75 %, p Ca (Sokalon CP-5) 0,2 %, AEO Biosoft N25-7(NI) 16 %, formiato sódico 1 %, citrato sódico 2 %, DTMPA 0,2 %, etanol (al 96 %) 3 %, ajuste del pH con NaOH o ácido cítrico hasta el 100 % en agua (todos los porcentajes son en p/p (peso/volumen) con dureza de 15 dH.

Ejemplo 1: cepa y ADN.

La secuencia génica codificante de los polipéptidos hexosaminidasa (SEC ID n.° 2 y n.° 5) de las cepasStaphylococcus cohnii subsp. cohniiyStaphylococcus fleurettii,respectivamente, se encontraron en la base de datos pública (número de acceso SWISSPROT:A0A0M2NYI1 y EMBLWGS:LAKJ01000034 para la SEC ID n.° 1 y SWISSPROT:A0A1T1GHQ2 y EMBLWGS:MWJM01000007 para la SEC ID n.° 4). Se obtuvo el ADN sintético con codones optimizados codificante de las secuencias peptídicas maduras de las dos hexosaminidasas de la compañía Geneart. Los polipéptidos maduros se muestran en SEC ID n.° 3 y n.° 6.

Tabla 1:

Ejemplo 2: clonación y expresión de hexosaminidasas Gluco_hidro_20

Los genes sintéticos con codones optimizados codificantes de las secuencias del péptido maduro de la hexosaminidasa con SEC ID n.° 3 y n.° 6 se insertaron en un vector de expresiónBacillustal como se describe en el documento n.° WO12/025577. Brevemente, se clonó el ADN codificante del péptido maduro del gen de hexosaminidasa Gluco_hidro_20 en el mismo marco que una señal de secreción deBacillus clausii(BcSP; con la secuencia de aminoácidos siguiente: MKKPLGKIVASt A l LISVAFSSSIASA (SEC ID n.° 7). Se sustituyó BcSP por la señal de secreción nativa en el gen. Cadena abajo de la secuencia de BcSP, se introdujo una secuencia de etiqueta de afinidad para facilitar el procedimiento de purificación (etiqueta His, con la secuencia de aminoácidos siguiente: HHHHHHPR (SEC ID n.° 8). Por lo tanto, el gen que se expresó comprendía la secuencia de BcSP seguido de la secuencia de la etiqueta de His, seguido de la secuencia de Gluco_hidro_20 de tipo salvaje maduro. El plásmido de expresión final (BcSP-etiqueta His- Gluco_hidro_20) se transformó en el huésped de expresiónBacillus subtilis.El gen de fusión Gluco_hidro_20 BcSP se integró mediante recombinación homóloga en el genoma de la célula huésped deBacillus subtilistras la transformación. El constructo génico se expresó bajo el control de un sistema de triple promotor (tal como se describe en el documento n.° WO99/43835). Se utilizó el gen codificante de la cloranfenicol acetiltransferasa como marcador (tal como se describe en Diderichsen et al., 1993, Plasmid 30: 312-315)). Se seleccionaron los transformantes en medio LB suplementado con 6 microgramos de cloranfenicol por ml. Se seleccionó un clon recombinante deBacillus subtilisque contenía el constructo de expresión de Gluco_hidro-20 y se cultivó en una mesa de agitación giratoria en matraces Erlenmeyer de 500 ml con deflectores, cada uno de los cuales contenía 100 ml de medio basado en extracto de levadura. Tras 3 a 5 días de cultivo a una temperatura entre 30 °C y 37 °C, se recolectó el sobrenadante que contenía el enzima, mediante centrifugación, y se purificaron los enzimas mediante purificación con la etiqueta His.

Ejemplo 3: método de purificación con etiqueta de His.

Se purificó el enzima hexosaminidasa Gluco_hidro_20 etiquetado con His, mediante cromatografía de metal inmovilizado (IMAC, por sus siglas en inglés) utilizando Ni2+ como el ion metálico en columnas HisTrap Excel de 5 ml (GE Healthcare Life Sciences). La purificación tuvo lugar a pH 7 y la proteína ligada se eluyó con imidazol. Se verificó la pureza del enzima purificado mediante SDS-PAGE y se determinó la concentración del enzima a partir de la absorbancia a 280 nm tras intercambio de tampones en HEPES 50 mM, NaCl 100 mM, pH 7,0.

SEC ID n.° 7: MKKPLGKIVASTALLISVAFSSSIASA

SEC ID n° 8: HHHHHHPR

Ejemplo 4: crecimiento de biofilm y ensayo de desprendimiento.

Staphylococcus aureus15981 fue proporcionado por Iñigo Lasa (Valle et al., Mol Microbiol.2003 May; 48 (4):1075-87). La cepa se cultivó en agar tripticasa de soja (TSA, por sus siglas en inglés) a 37 °C durante la noche. Al día siguiente, se transfirió una sola colonia a 15 ml de caldo tripticasa de soja (TSB, por sus siglas en inglés) y se incubó durante 5 horas a 37 °C bajo agitación. El cultivo se diluyó 1:100 en TSB+glucosa al 1 % y se transfirieron 100 pl de la suspensión bacteriana a cada pocillo de placas de microtitulación de 96 pocillos (Thermo Scientific, Nunclon Delta Surface, n.° de cat. 167008) y se incubaron durante 24 horas a 37 °C sin agitación, y se transfirieron 100 pl de la suspensión bacteriana a cada pocillo de placas de microtitulación de 96 pocillos (Thermo Scientific, Nunclon Delta Surface, n.° de cat. 167008) y se incubaron durante 24 horas a 37 °C sin agitación. Se aspiró el sobrenadante y los pocillos se lavaron con 100 pl de solución de cloruro sódico al 0,9%y se llenaron con 100 |jl de agua dura o 3,3 g/l de detergente no iónico o 3,3 g/l de detergente modelo A (composición de agua dura, no iónico y modelo A) que contenía 0 (control) o 20, 10, 5, 2,5, 1,25, 0,62, 0,31, 0,16, 0,08, 0,04, 0,02 y 0,01 jg/m l de enzima (SEC ID n.° 3 y n.° 6). Tras la incubación a 37 °C durante 1 hora, se lavaron los pocillos con agua y se tiñeron durante 15 min con 100 j l de solución de cristal violeta al 0,095 % (SIGMA V5265). A continuación, los pocillos se enjuagaron dos veces con 100 j l de agua, se secaron y se escanearon las placas. Se determinó la concentración más baja de cada enzima que pudo eliminar la formación visible de biofilm del organismo S.aureus15981 tras 1 hora de incubación, en presencia y en ausencia de detergente (ver la Tabla 2). Todos los enzimas se sometieron a ensayo por duplicado en tres ensayos independientes. La media de la concentración mínima de enzima que eliminó la formación visible de S.aureus15981 de los tres ensayos se enumera en la Tabla 2.

Tabla 2. Concentración mínima de enzima que puede reducir la formación visible de S.aureus15981 tras 1 hora de incubación en agua dura o en detergente modelo A.

Ejemplo 5. Propiedades de limpieza de hexosaminidasas en detergente modelo líquido.

Se preparó un extracto crudo de sustancias poliméricas extracelulares (SPE) de biofilm deStaphylococcus aureus(obtenido de Iñigo Lasa (Valle, J., A. Toledo-Arana, C. Berasain, J. M. Ghigo, B. Amorena, J. R. Penades y I. Lasa. 2003, Mol. Microbiol. 48:1075-1087) del modo siguiente: Se inocularon 500 ml de TBS glucosa al 1 % (24563; Roquette Freres), se dividieron el alícuotas en tubos de centrífuga cónicos de 50 ml (339652; Thermo Scientific Nunc) y se incubaron durante 24 horas a 37 °C bajo condiciones de agitación (200 rpm). Tras la incubación, las células se peletizaron mediante centrifugación (10 min, 6000xg, 25 °C), se agruparon y se resuspendieron en 4 ml de NaCl 3 M. La suspensión se sometió a agitación con vórtex vigorosamente y se incubó durante 15 min a temperatura ambiente para extraer las SPE asociadas a la superficie. A continuación, se peletizaron nuevamente las células (10 min, 5000g, 25 °C) y se recuperó el sobrenadante que contenía SPE. Se añadió agua milli-Q (6 ml) y la solución se filtró a esterilidad dos veces (0,45 jm , seguido de 0,2 jm ). El extracto en bruto se almacenó a -20 °C hasta la utilización posterior. Para los ensayos de rendimiento de lavado, se aplicaron en puntos alícuotas de 50 j l de los diferentes extractos de SPE crudo sobre trozos de textil estériles (WFK20A) y se incubaron durante 15 min a temperatura ambiente. Los trozos de tejido (estériles o con SPE) se introdujeron en probetas de 50 ml y se añadieron 10 ml de solución de lavado (agua dH 150 con 0,2 g/l de nanopolvos de óxido de hierro (III) (544884; Sigma-Aldrich) con 3,33 g/l de detergente líquido modelo A o 3,33 g/l de detergente modelo no iónico) y se añadió enzima a cada tubo. Se incluyeron lavados sin enzima a modo de controles. Se introdujeron las probetas en un rotador Stuart y se incubaron durante 1 hora a 37 °C a 20 rpm. A continuación, se extrajo la solución de lavado y los trozos de tejido se enjuagaron dos veces con agua dH 150 y se dejaron sobre papel de filtro para secarse durante la noche. Se midieron los valores de reemisión (REM460 nm) utilizando un instrumento Macbeth Color-Eye 7000 (CE7000) y se muestran en la Tabla 3. También se indican los valores delta (REM460 nm(lavado sin enzima) - REM460

Tabla 3. Efectos de limpieza de hexosaminidasas en detergente modelo líquido.

Ejemplo 5: construcción de clados y árboles filogenéticos

El dominio Gluco_hidro_20 incluye los polipéptidos que presentan actividad de hexosaminidasa, p. ej., de PNAG, y comprende los clados ENYA, VLG y/o DIAR<k>. Según la invención, la hexosaminidasa deStaphylococcuscomprende el motivo D[IV]AR[TK] (SEC ID n.° 12).

Se construyó un árbol filogenético, de secuencias polipeptídicas que contenían un dominio Gluco_hidro_20, tal como se define en PFAM (PF00728, Pfam, versión 31.0 Finn (2016). Nucleic Acids Research, Database Issue 44:D279-D285). Se construyó el árbol filogenético a partir de una alineación múltiple de secuencias de polipéptido maduro que contenían por lo menos un dominio Gluco_hidro_20. Las secuencias se alinearon utilizando el algoritmo MUSCLE, versión 3.8.31 (Edgar, 2004. Nucleic Acids Research 32(5): 1792-1797), y los árboles se construyeron utilizando FastTree, versión 2.1.8 (Price et al., 2010, PloS one 5(3)) y se visualizaron utilizando iTOL (Letunic y Bork, 2007. Bioinformatics 23(1): 127-128). Las secuencias polipeptídicas que contienen un dominio Gluco_hidro_20 comprenden varios motivos; un ejemplo es GXDE (SEC ID n.° 9), situado en las posiciones 157 a 160 enStaphylococcus cohnii subsp. cohnii(SEC ID n.° 3). Los residuos D y E son los residuos catalíticos clave de los enzimas Gluco_hidro_20 (posiciones 159 a 160 en la SEC ID n.° 3).

Los polipéptidos en Gluco_hidro_20 pueden separarse en múltiples subagregados diferentes, o clados, tal como se enumeran posteriormente. Los diferentes motivos para cada clado se describen en detalle posteriormente.

Generación de clado ENYA.

Se identificó un clado, preferentemente compartido por los polipéptidos de la invención. Dicho clado no ha sido descrito anteriormente. El clado se denomina IES y los polipéptidos de este clado comprenden polipéptidos de dominio Gluco_hidro_20 de origen bacteriano y además presentan actividad de PNAG, caracterizado porque comprenden determinados motivos. Los polipéptidos del clado comprenden el motivo de ejemplo [EQ][NRSHA][YVFL][AGSTC][IVLF][EAQYN][SN] (SEC ID n.° 10), correspondiente a ENYAIES en las posiciones 44 a 50 de la SEC ID n.° 3.

Generación de ciado VLG.

Se identificó un clado, preferentemente compartido por los polipéptidos de la invención. Dicho clado no ha sido descrito anteriormente. El clado se denomina VLG y los polipéptidos de este clado comprenden polipéptidos de dominio Gluco_hidro_20 de origen bacteriano y además presentan actividad de PNAG, caracterizado porque comprenden determinados motivos. Los polipéptidos del clado comprenden el motivo de ejemplo [VIMS][LIV]G[GAV]DE[VI][PSA] (SEC ID n.° 11), correspondiente a VLGGDEVP (posiciones 155 a 162 de SEC ID n.° 3), en donde G y DE (correspondientes a las posiciones 157 y 159-160 de la SEC ID n.° 3) están totalmente conservados en el clado VLG y parte del sitio activo. Los residuos D y E son los residuos catalíticos clave de los enzimas Gluco_hidro_20 (posiciones 159 a 160 en la SEC ID n.° 3).

Generación de ciado DIARK.

El clado DIARK comprende polipéptidos de dominio VLG de origen bacteriano que presentan actividad de hexosaminidasa, p. ej., actividad de PNAG. Los polipéptidos del clado comprenden el motivo de ejemplo D[IV]AR[TK] (SEC ID n.° 12), correspondiente a las posiciones 10 a 14 de SEC ID n.° 3, en la que D y Ar están totalmente conservados en el clado DIARK (posiciones 10 y 12 a 13 en la SEC ID n.° 3). Según la presente invención, la hexosaminidasa deStaphylococcuscomprende el motivo D[IV]AR[TK] (SEC ID n.° 12).

En la figura 2 se muestra una alineación de los polipéptidos de la invención. En la figura 1 se muestra un árbol filogenético de los polipéptidos de la invención.

Ejemplo 6: caracterización de dispersinas.

Actividad de dispersina como función del pH.

Ensayo de actividad:Se midió la actividad de la dispersina que presentaba la SEC ID n.° 6 con 4-nitrofenil-N-acetil-p-D-glucosaminida (4-NAG, número CAS 3459-18-5, CHE00244) como sustrato en función del pH (4 a 10 en incrementos de 1 unidad). La concentración de sustrato y de la dispersina que presentaba la SEC ID n.° 6 eran 1 mM y 1,0|jM, respectivamente, en todas las mediciones. Los tampones de dilución comprenden: MES 50 mM (número CAS: 4432-31-9), glicina 50 mM (número CAS: 56-40-6), ácido acético 50 mM (número CAS: 64-19-7) ajustado a pH 4-10.

La solución de sustrato (10 mM) se preparó mediante disolución de 34,23 mg de 4-NAG en 10,0 ml de agua. La disolución requirió una mezcla con vórtex rigurosa y un calentamiento suave. Se determinó la concentración de enzima mediante UV-Vis (£280=54760 M'1cirr1).

Se incubaron las muestras de enzima a los diferentes valores de pH en volúmenes de 200 j l en un termómetro (en MTP) durante 10 min y 500 rpm a 30 °C. Tras 10 min, se incubó el MTP a 95 °C y 500 rpm durante 10 min en termomezclador para finalizar la reacción. A continuación, se transfirieron las muestras a un baño de hielo y se enfriaron durante 2 min. A las muestras se añadieron 20 j l de NaOH 4 M para desprotonar pNP (inducción de color amarillo). Se midió la absorbancia a 405 nm durante 2 min en intervalos de 10 s. Todas las mediciones se realizaron por triplicado y se produjeron muestras de referencia para todas las condiciones (tampón en lugar de enzima).

Resultados:la tabla a continuación muestra la absorbancia (actividad) media de la que se ha restado la absorbancia media de las muestras de referencia medida tras la incubación durante 10 min a diferentes valores de pH:

Estabilidad de la dispersina como función del pH y NaCl.

Ensayo de estabilidad: fluorimetría de escaneo diferencial:Se midió la estabilidad térmica de la dispersina que presentaba la SEC ID n.° 6 como función del pH (4, 6, 7,8 y 10) y la concentración de NaCl (100, 200 y 300 mM). Se realizó un seguimiento del despliegue térmico utilizando la fluorescencia intrínseca con un instrumento Prometheus NT.48. La concentración de dispersina que presentaba SEC ID n.° 6 fue de 0,2 mg/ml en todas las mediciones. Se determinó la concentración de enzima mediante UV-Vis (£280=54760 M'1cirr1). Los tampones de dilución comprenden: MES 50 mM (número CAS: 4432-31-9), glicina 50 mM (número CAS: 56-40-6), ácido acético 50 mM (número CAS: 64-19-7) ajustado a pH 4, 6, 7, 8 o 10.

Se prepararon muestras de enzima mediante la mezcla de una solución madre de NaCl 5 M, tampón, agua (MQ) y enzima para obtener las concentraciones deseadas. El volumen total de cada mezcla era de 100 pl. Las muestras se cargaron en el instrumento por duplicado y se midieron a una temperatura de entre 20 °C y 95 °C, con una rampa de temperatura de 2,0 °C/min.

Resultados:se derivaron temperaturas de fusión (valores deTm )a partir de los termogramas utilizando el software PR.ThermControl v.2.0.4. La tabla a continuación muestra los valores medios deTmobtenidos bajo las diferentes condiciones:

pH

4 6 7 8 10

[NaCl] mM 0 43,5 45,9 40,2 34,8 N/A

100 40,4 46,6 41,2 35,5 N/A

200 39,4 47,6 42,3 37,3 N/A

300 39,1 48,4 43,1 38,4 N/A

Actividad de dispersina como función de la temperatura.

Ensayo de actividad:se midió la actividad de la dispersina que presentaba la SEC ID n.° 6 con 4-nitrofenil-N-acetil-p-D-glucosaminida (4-NAG, número CAS 3459-18-5, CHE00244) como sustrato a pH 7. La concentración de sustrato y de la dispersina que presentaba la SEC ID n.° 6 eran 1 mM y 0,5 pM, respectivamente, en todas las mediciones. El tampón de dilución comprendía: MES 50 mM (número CAS: 4432-31-9), glicina 50 mM (número CAS: 56-40-6), ácido acético 50 mM (número CAS: 64-19-7), pH 7.

La solución de sustrato (10 mM) se preparó mediante disolución de 35,9 mg de 4-NAG en 10,482 ml de agua.

La disolución requirió una mezcla con vórtex rigurosa y un calentamiento suave. Se determinó la concentración de enzima mediante UV-Vis (£280=54760 M'1cirr1). La mezcla de reacción comprendía 15,9 pl de enzima (6,3 pM), 20 pl de sustrato y 164,1 pl de tampón.

Las muestras de enzima se incubaron en volúmenes de 200 pl en un termomezclador durante 10 min y a 500 rpm a 20, 30, 40, 45, 50, 55, 60 o 70 °C. Tras 10 min, las muestras se transfirieron a un baño de hielo y se enfriaron durante 2 min. A las muestras se añadieron 10 pl de NaOH 4 M para desprotonar pNP (inducción de color amarillo). Los 180 pl de mezcla de reacción se transfirieron a una placa MT y se midió la absorbancia a 405 nm durante 1 min en intervalos de 10 s. Todas las mediciones se realizaron por duplicado y se produjeron muestras de referencia para todas las condiciones (tampón en lugar de enzima).

Resultados:la tabla a continuación muestra la absorbancia (actividad) media de la que se ha restado la absorbancia media de las muestras de referencia medida tras la incubación durante 10 min a diferentes temperaturas:

Claims

REIVINDICACIONES

Composición que comprende hexosaminidasa deStaphylococcus,en donde la hexosaminidasa deStaphylococcuscomprende el motivo D[IV]AR[TK] (SEC ID n.° 12) y en donde la composición:

(a) es una composición detergente de lavado de ropa sólida, preferentemente granulada, y comprende, además:

(a1) por lo menos un coadyuvante zeolita, preferentemente en una cantidad de entre 10 % y 50 % en peso, más preferentemente de entre 20 % y 30 % en peso,

(a2) por lo menos un coadyuvante fosfonato, preferentemente en una cantidad de entre 0,1 % y 5 % en peso, más preferentemente de entre 0,4 % y 1,5 % en peso,

(a3) por lo menos un enzima adicional, preferentemente una celulasa, preferentemente en una cantidad de enzima activo de entre 100 y 5000 ppb, más preferentemente de entre 1000 y 2000 ppb, y

(a4) por lo menos un polímero, preferentemente un polímero polivinilpirrolidona, preferentemente en una cantidad de entre 0,01 % y 1 % en peso, más preferentemente de entre 0,1 % y 0,3 % en peso, o

(b) es una composición detergente de lavado de ropa sólida y comprende, además:

(b1) por lo menos un coadyuvante silicato, preferentemente en una cantidad de entre 2 % y 20 % en peso, más preferentemente de entre 5 % y 10 % en peso,

(b2) opcionalmente carboximetilcelulosa, preferentemente en una cantidad de entre 0,1 % y 10 % en peso, más preferentemente de entre 0,1 % y 4 % en peso,

(b3) por lo menos un enzima adicional, preferentemente una celulasa, preferentemente en una cantidad de enzima activo de entre 0,1 y 100 ppm, más preferentemente de entre 0,1 y 10 ppm,

(b4) opcionalmente por lo menos un polímero facilitador del desprendimiento de la suciedad, preferentemente un polímero polivinilpirrolidona, en una cantidad de entre 0,1 % y 3 % en peso, más preferentemente de entre 0,1 % y 1,0 % en peso, y

(b5) por lo menos un sistema blanqueador, que comprende un agente de blanqueo, un activador de blanqueo y un catalizador de blanqueo, preferentemente en una cantidad de entre 0,1 % y 50 % en peso, más preferentemente de entre 0,1 % y 30 % en peso, o

(c) es una composición detergente líquida de lavado de ropa y comprende, además:

(c1) por lo menos un tensioactivo, preferentemente un tensioactivo no iónico, preferentemente en una cantidad de entre 1 % y 20 % en peso, preferentemente de entre 3 % y 15 % en peso,

(c2) opcionalmente por lo menos un coadyuvante fosfonato, preferentemente en una cantidad de entre 0,1 % y 3 % en peso, más preferentemente de entre 0,25 % y 1,5 % en peso,

(c3) opcionalmente por lo menos un enzima adicional, preferentemente una celulasa, preferentemente en una cantidad de composición de enzima de entre 0,001 % y 1 % en peso, más preferentemente de entre 0,001 % y 0,6 % en peso, y

(c4) opcionalmente por lo menos un solvente orgánico, preferentemente glicerol, preferentemente en una cantidad de entre 0,1 % y 10 % en peso, más preferentemente de entre 0,1 % y 5 % en peso, o

(d) es un detergente líquido de lavado de ropa en forma de dosis unitaria, preferentemente una bolsa que comprende una película soluble en agua, y que comprende, además:

(d1) agua en una cantidad de hasta 20 % en peso, preferentemente de entre 5 % y 15 % en peso, (d2) opcionalmente por lo menos un agente amargante, preferentemente bencildietil(2,6-xililcarbamoíl)-metilamonio-benzoato, preferentemente en una cantidad de entre 0,00001 % y 0,04 % en peso, (d3) opcionalmente por lo menos un abrillantador óptico, preferentemente en una cantidad de entre 0,01 % y 2 % en peso, más preferentemente de entre 0,01 % y 1 % en peso, y

(d4) opcionalmente por lo menos un polímero, preferentemente en una cantidad de entre 0,01 % y 7 % en peso, más preferentemente de entre 0,1 % y 5 % en peso, o

(e) es un agente de acabado textil y comprende, además:

(e1) por lo menos una silicona ablandadora, preferentemente una silicona funcionalizada con amino, preferentemente en una cantidad de entre 0,1 % y 10 % en peso, más preferentemente de entre 0,1 % y 2 % en peso,

(e2) por lo menos un perfume, preferentemente encapsulado por lo menos parcialmente en microcápsulas, más preferentemente por lo menos parcialmente encapsulado en microcápsulas de melamina-formaldehído, preferentemente en una cantidad de entre 0,01 % y 3 % en peso, más preferentemente de entre 0,1 % y 1 % en peso,

(e3) opcionalmente policuaternio-10 en una cantidad de entre 0,1 % y 20 % en peso, preferentemente de entre 0,1 % y 13 % en peso,

(e4) opcionalmente policuaternio-37 en una cantidad de entre 0,1%y 20%en peso, preferentemente de entre 0,1 % y 13 % en peso,

(e5) opcionalmente un esterquat de origen vegetal, preferentemente un esterquat de colza o palma, en una cantidad de entre 0,1 % y 20 % en peso, preferentemente de entre 0,1 % y 13 % en peso, y (e6) opcionalmente ácido adípico, en una cantidad de entre 0,1 % y 20 % en peso, preferentemente de entre 0,1 % y 13 % en peso, o

(f) es un agente limpiador ácido, preferentemente que presenta un pH inferior a 6, y que comprende, además:

(f1) tensioactivos de origen vegetal o biológicos, cada uno de ellos preferentemente en una cantidad de entre 0,1 % y 5 %, más preferentemente cada uno en una cantidad de entre 0,1 % y 2 % en peso, (f2) por lo menos un biocida ácido, preferentemente seleccionado de ácidos, más preferentemente HCl y ácido fórmico, y

(f3) por lo menos un polímero facilitador del desprendimiento de la suciedad, repelente al agua o de dispersión del agua, preferentemente en una cantidad de entre 0,01 % y 3 % en peso, más preferentemente de entre 0,01 % y 0,5 % en peso, o

(g) es un agente limpiador neutro, preferentemente que presenta un pH de entre 6,0 y 7,5, y que comprende, además:

(g1) tensioactivos de origen vegetal o biológicos, cada uno de ellos preferentemente en una cantidad de entre 0,1 % y 5 %, más preferentemente cada uno en una cantidad de entre 0,1 % y 2 % en peso, (g2) por lo menos un biocida, preferentemente seleccionado de compuestos de amonio cuaternario y alcoholes, y

(g3) por lo menos un polímero facilitador del desprendimiento de la suciedad, repelente al agua o de dispersión del agua, preferentemente en una cantidad de entre 0,01 % y 3 % en peso, más preferentemente de entre 0,01 % y 0,5 % en peso, o

(h) es un agente limpiador alcalino, preferentemente que presenta un pH superior a 7,5 y que comprende, además:

(h1) tensioactivos de origen vegetal o biológico, preferentemente cada uno en una cantidad de entre 0,1 % y 5 %, más preferentemente cada uno en una cantidad de entre 0,1 % y 2 % en peso, o

(i) es un agente lavavajillas para lavado a mano, preferentemente un agente lavavajillas para lavado a mano líquido, y que comprende, además, (i1) por lo menos un tensioactivo aniónico, preferentemente en una cantidad de entre 0,1 % y 40 % en peso, más preferentemente de entre 5 % y 30 % en peso,

(12) por lo menos un tensioactivo anfotérico, preferentemente betaína, preferentemente en una cantidad de entre 0,1 % y 25 % en peso, más preferentemente de entre 1 % y 15 % en peso,

(13) por lo menos un tensioactivo no iónico, preferentemente en una cantidad de entre 0,1 % y 25 % en peso, más preferentemente de entre 2 % y 10 % en peso,

(14) por lo menos un enzima adicional, preferentemente seleccionado de proteasas, amilasas y combinaciones de las mismas, preferentemente en una cantidad de composición de enzima de hasta 1 % en peso, más preferentemente de hasta 0,6 % en peso, o

(j) es una composición lavavajillas para lavado automático y que comprende, además:

(j1) por lo menos un coadyuvante seleccionado de citrato, aminocarboxilatos y combinaciones de los mismos, preferentemente en una cantidad de entre 5 % y 30 % en peso, más preferentemente de entre 10 % y 20 % en peso,

(j2) por lo menos un coadyuvante fosfonato, preferentemente en una cantidad de entre 0,1 % y 5 % en peso, más preferentemente de entre 0,4 % y 1,5 % en peso,

(j3) por lo menos un tensioactivo no iónico, preferentemente en una cantidad de entre 0,1 % y 10 % en peso, más preferentemente de entre 1 % y 5 % en peso,

(j4) por lo menos un sistema blanqueador, que comprende un agente de blanqueo, un activador de blanqueo y un catalizador de blanqueo, preferentemente en una cantidad de entre 0,1 % y 50 % en peso, más preferentemente de entre 0,1 % y 30 % en peso, y

(j5) por lo menos un polímero seleccionado de sulfopolímeros, polímeros catiónicos y poliacrilatos, preferentemente en una cantidad de entre 0,01 % y 15 % en peso, más preferentemente de entre 2 % y 10 % en peso.

Composición según la reivindicación 1, en donde la composición comprende, además:

(a)

i. uno o más polioles, preferentemente seleccionados de glicerol, (mono, di o tri)propilenglicol, etilenglicol, polietilenglicol, alcoholes de azúcar, sorbitol, manitol, eritritol, dulcitol, inositol, xilitol y adonitol,

ii. opcionalmente uno o más enzimas, preferentemente seleccionados de proteasas, amilasas o lipasas,

iii. opcionalmente uno o más tensioactivos, preferentemente seleccionados de tensioactivos aniónicos y no iónicos,

iv. opcionalmente uno o más polímeros,

o

(b) gránulos que comprenden:

i. un núcleo que comprende una hexosaminidasa deStaphylococcusy opcionalmente,

ii. un recubrimiento que consiste en una o más capas que circundan el núcleo.

Composición según la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en la que la hexosaminidasa presenta actividad de N-acetilglucosaminidasa, preferentemente actividad de p-1,6 N-acetilglucosaminidasa.

Composición según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en la que el polipéptido que presenta actividad de hexosaminidasa comprende la secuencia de aminoácidos SEC ID n.° 3 o polipéptidos que presentan una identidad de secuencias de por lo menos 60 %, p. ej., 80 %, 85 %, 90 %, 95 %, 98 % o 99 % respecto a la misma.

Composición según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde la composición comprende, además, uno o más enzimas seleccionados del grupo que consiste en proteasas, lipasas, cutinasas, amilasas, carbohidrasas, celulasas, pectinasas, mananasas, arabinasas, galactanasas, xilanasas y oxidasas.

Utilización de una composición según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, preferentemente una composición de detergente que comprende una hexosaminidasa deStaphylococcus,

a) para la prevención, reducción o eliminación de la pegajosidad del elemento,

b) para el pretratamiento de manchas sobre el elemento,

c) para la prevención, reducción o eliminación de la redeposición de suciedad durante un ciclo de lavado, d) para la prevención, reducción o eliminación de la adherencia de la suciedad al elemento, e) para mantener o mejorar la blancura del elemento,

f) para la prevención, reducción o eliminación de malos olores del elemento,

en donde el elemento es un textil.