RU2012147249A

RU2012147249A - TNF-α- СВЯЗЫВАЮЩИЕ БЕЛКИ

Info

Publication number: RU2012147249A
Application number: RU2012147249/10A
Authority: RU
Inventors: Лоренцо БЕНАТУИЛ; Тарик ГХАЮР; Кэрри Л. ГУДРО; Питер С. ИСАКСОН; Йохен ЗАЛЬФЕЛД
Original assignee: Эббви Инк.
Priority date: 2010-04-07
Filing date: 2011-04-06
Publication date: 2014-05-20
Also published as: TWI508745B; CO6630164A2; AU2011237679B2; CL2012002783A1; JP2013523153A; CA2795734A1; UA107490C2; TW201138825A; EP2555797A1; PH12012501991A1; PE20130528A1; WO2011127141A1; CN102958537B; CR20120506A; KR20150038556A; US20160176958A1; UY33319A; AR080840A1; AU2011237679A1; ECSP12012272A

Abstract

1. Гуманизированный связывающий белок, содержащий антигенсвязывающий домен, способный связывать фактор-альфа некроза опухолей человека (TNF-α), причем антигенсвязывающий домен содержит, по меньшей мере, одну CDR, содержащую аминокислотную последовательность остатков 31-35 SEQ ID NO:22; остатков 50-65 SEQ ID NO:22; остатков 98-106 SEQ ID NO:22; остатков 24-34 SEQ ID NO:23; остатков 50-56 SEQ ID NO:23 или остатков 89-97 SEQ ID NO:23, где связывающий белок содержит акцепторный каркас человека.2. Связывающий белок по п.1, где связывающий белок содержит, по меньшей мере, 3 CDR.3. Связывающий белок по п.2, где, по меньшей мере, 3 CDR содержат CDR-набор вариабельного домена, содержащий (a) остатки 31-35 SEQ ID NO:22; остатки 50-65 SEQ ID NO:22 и остатки 98-106 SEQ ID NO:22; и (b) остатки 24-34 SEQ ID NO:23; остатки 50-56 SEQ ID NO:23 и остатки 89-97 SEQ ID NO:23.4. Связывающий белок по п.3, где антигенсвязывающий домен содержит аминокислотную последовательность, содержащую остатки 31-35 SEQ ID NO:22; остатки 50-65 SEQ ID NO:22; остатки 98-106 SEQ ID NO:22; остатки 24-34 SEQ ID NO:23; остатки 50-56 SEQ ID NO:23 и остатки 89-97 SEQ ID NO:23.5. Связывающий белок по п.1, где антигенсвязывающий белок содержит область VH.6. Связывающий белок по п.5, где область VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:24, 25, 28, 29, 30, 31, 32 или 33.7. Связывающий белок по п.1, где антигенсвязывающий домен содержит область VL.8. Связывающий белок по п.7, где аминокислотной последовательностью области VL является SEQ ID NO:26, 27, 34, 35 или 36.9. Связывающий белок по п.7, где антигенсвязывающий домен содержит область VH и область VL.10. Связывающий белок по п.9, где область VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:24, 25, 28, 29, 30, 31, 32 или 33, и область VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:26, 27, 34, 35 или 36.11. Связывающий белок �

Claims

1. Гуманизированный связывающий белок, содержащий антигенсвязывающий домен, способный связывать фактор-альфа некроза опухолей человека (TNF-α), причем антигенсвязывающий домен содержит, по меньшей мере, одну CDR, содержащую аминокислотную последовательность остатков 31-35 SEQ ID NO:22; остатков 50-65 SEQ ID NO:22; остатков 98-106 SEQ ID NO:22; остатков 24-34 SEQ ID NO:23; остатков 50-56 SEQ ID NO:23 или остатков 89-97 SEQ ID NO:23, где связывающий белок содержит акцепторный каркас человека.

2. Связывающий белок по п.1, где связывающий белок содержит, по меньшей мере, 3 CDR.

3. Связывающий белок по п.2, где, по меньшей мере, 3 CDR содержат CDR-набор вариабельного домена, содержащий (a) остатки 31-35 SEQ ID NO:22; остатки 50-65 SEQ ID NO:22 и остатки 98-106 SEQ ID NO:22; и (b) остатки 24-34 SEQ ID NO:23; остатки 50-56 SEQ ID NO:23 и остатки 89-97 SEQ ID NO:23.

4. Связывающий белок по п.3, где антигенсвязывающий домен содержит аминокислотную последовательность, содержащую остатки 31-35 SEQ ID NO:22; остатки 50-65 SEQ ID NO:22; остатки 98-106 SEQ ID NO:22; остатки 24-34 SEQ ID NO:23; остатки 50-56 SEQ ID NO:23 и остатки 89-97 SEQ ID NO:23.

5. Связывающий белок по п.1, где антигенсвязывающий белок содержит область VH.

6. Связывающий белок по п.5, где область VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:24, 25, 28, 29, 30, 31, 32 или 33.

7. Связывающий белок по п.1, где антигенсвязывающий домен содержит область VL.

8. Связывающий белок по п.7, где аминокислотной последовательностью области VL является SEQ ID NO:26, 27, 34, 35 или 36.

9. Связывающий белок по п.7, где антигенсвязывающий домен содержит область VH и область VL.

10. Связывающий белок по п.9, где область VH содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:24, 25, 28, 29, 30, 31, 32 или 33, и область VL содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:26, 27, 34, 35 или 36.

11. Связывающий белок по п.1, где акцепторный каркас человека содержит, по меньшей мере, одну аминокислотную последовательность из SEQ ID NO:6-21.

12. Связывающий белок по п.11, где акцепторный каркас человека содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:9, 10, 11, 12, 15, 16, 17 или 21.

13. Связывающий белок по п.11 или 12, где акцепторный каркас человека содержит, по меньшей мере, одну замену аминокислоты каркаса, где аминокислотная последовательность каркаса, по меньшей мере, на 65% идентична последовательности акцепторного каркаса человека и содержит, по меньшей мере, 70 аминокислотных остатков, идентичных акцепторному каркасу человека.

14. Связывающий белок по п.13, где акцепторный каркас человека содержит, по меньшей мере, одну замену аминокислоты каркаса в ключевом остатке, который является остатком, смежным с CDR; остатком сайта гликозилирования; редким остатком; остатком, способным взаимодействовать с TNF-α человека; остатком, способным взаимодействовать с CDR; каноническим остатком; остатком контакта между вариабельной областью тяжелой цепи и вариабельной областью легкой цепи; остатком в пределах зоны Vernier; остатком в области, которая перекрывается между определяемым по Хотиа CDR1 вариабельной тяжелой цепи или определяемым по Кабату первым каркасом тяжелой цепи.

15. Связывающий белок по п.14, где ключевым остатком является H1, H12, H24, H27, H29, H37, H48, H49, H67, H71, H73, H76, H78, L13, L43, L58, L70 или L80.

16. Связывающий белок по п.15, где мутацией VH является Q1E, I12V, A24V, G27F, I29L, V29F, F29L, I37V, I48L, V48L, S49G, V67L, F67L, V71K, R71K, T73N, N76S, L78I или F78I.

17. Связывающий белок по п.15, где мутацией VL является V13L, A43S, I58V, E70D или S80P.

18. Связывающий белок по п.1, где связывающий белок содержит два вариабельных домена, которые имеют аминокислотные последовательности SEQ ID NO:24 и SEQ ID NO:26; SEQ ID NO:24 и SEQ ID NO:27; SEQ ID NO:25 и SEQ ID NO:26; SEQ ID NO:25 или SEQ ID NO:27.

19. Связывающий белок по п.1, где связывающий белок модулирует биологическую функцию TNF-α.

20. Связывающий белок по п.1, где связывающий белок нейтрализует TNF-α.

21. Связывающий белок по п.1, где связывающий белок уменьшает способность TNF-α связываться с его рецептором.

22. Связывающий белок по п.21, где связывающий белок уменьшает способность про-TNF-α человека, зрелого TNF-α человека или укороченного TNF-α человека связываться с их рецептором.

23. Связывающий белок по п.1, где связывающий белок уменьшает продуцирование одного или более TNF-зависимых цитокинов; убивание TNF-зависимых клеток; TNF-зависимое воспаление; TNF-зависимую эрозию костей и TNF-зависимое повреждение хряща.

24. Связывающий белок по п.1, где связывающий белок имеет константу скорости ассоциации (K_on), по меньшей мере, приблизительно 10²M^-1с^-1;, по меньшей мере, приблизительно 10³M^-1с^-1;, по меньшей мере, приблизительно 10⁴М^-1с^-1;, по меньшей мере, приблизительно 10⁵М^-1с^-1 или, по меньшей мере, приблизительно 10⁶М^-1с^-1, как измерено с использованием поверхностного плазмонного резонанса.

25. Связывающий белок по п.1, где связывающий белок имеет константу скорости диссоциации (K_off) самое большее приблизительно 10^-3с^-1, самое большее приблизительно 10^-4с^-1; самое большее 10^-5с^-1 или самое большее приблизительно 10^-6с^-1, как измерено с использованием поверхностного плазмонного резонанса.

26. Связывающий белок по п.1, где связывающий белок имеет константу ассоциации (K_D) самое большее приблизительно 10^-7 M; самое большее приблизительно 10^-8 М; самое большее 10^-9 М; самое большее приблизительно 10^-10 М; самое большее приблизительно 10^-11 М; самое большее приблизительно 10^-12 М или самое большее 10^-13 М.

27. Связывающий белок по п.1, где связывающий белок содержит константный домен тяжелой цепи иммуноглобулина: константный домен IgM человека, константный домен IgG1 человека, константный домен IgG2 человека, константный домен Ig3 человека, константный домен Ig4 человека, константный домен Ig5 человека или константный домен IgE человека.

28. Связывающий белок по п.27, где домен константной области тяжелой цепи иммуноглобулина представляет собой константный домен IgG1 человека.

29. Связывающий белок по п.1 или 27, где связывающий белок дополнительно содержит константный домен Ig каппа человека или константный домен Ig лямбда человека.

30. Связывающий белок по п.28, где константный домен IgG1 человека содержит аминокислотную последовательность SEQ ID NO:2 или SEQ ID NO:3.

31. Связывающий белок по п.29, где домен константной области легкой цепи иммуноглобулина представляет собой константный домен Ig каппа человека, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO:5.

32. Связывающий белок, способный связывать TNF-α человека, причем связывающий белок содержит:

константную тяжелую область Ig, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:2 или SEQ ID NO:3;

константную легкую область Ig, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:4 или SEQ ID NO:5;

вариабельную тяжелую область Ig, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:24, 25, 28, 29, 30, 31, 32 или 33; и

вариабельную легкую область Ig, имеющую аминокислотную последовательность SEQ ID NO:26, 27, 34, 35 или 36.

33. Связывающий белок по п.1, где связывающий белок представляет собой молекулу иммуноглобулина, Fv, связанный дисульфидом Fv, моноклональное антитело, scFv, химерное антитело, содержащее единственный домен антитело, CDR-трансплантированное антитело, диатело, гуманизированное антитело, мультиспецифическое антитело, Fab, двойное специфическое антитело, Fab'-фрагмент, биспецифическое антитело, F(ab')₂-фрагмент, DVD-Ig™, бивалентный фрагмент, содержащий два Fab-фрагмента, связанные дисульфидным мостиком в шарнирной области; Fd-фрагмент, состоящий из доменов VH и CH1; Fv-фрагмент, состоящий из доменов VL и VH единственного плеча антитела, dAb-фрагмент, выделенную, определяющую комплементарность область (CDR) и одноцепочечное антитело.

34. Кристаллизованный связывающий белок, содержащий связывающий белок по п.1, где связывающий белок находится в форме кристалла.

35. Кристаллизованный связывающий белок по п.34, где кристалл является свободным от носителя фармацевтическим кристаллом регулируемого высвобождения.

36. Кристаллизованный связывающий белок по п.34, где связывающий белок имеет большее время полужизни in vivo, чем растворимая копия связывающего белка.

37. Композиция для высвобождения TNF-α-связывающего белка, причем композиция содержит: (a) препарат, где препарат содержит связывающий белок по п.1 или 34 и один ингредиент; и (b) по меньшей мере, один полимерный носитель.

38. Композиция по п.37, где ингредиент выбран из группы, состоящей из альбумина, сахарозы, трегалозы, лактита, желатина, гидроксипропил-β-циклодекстрина, метоксиполэтиленгликоля и полиэтиленгликоля.

39. Композиция по п.37, где полимерным носителем является полимер, выбранный из одного или более полимеров группы, состоящей из: полиакриловой кислоты, полицианоакрилата, полиаминокислоты, полиангидрида, полидепсипептида, простого полиэфира, полимолочной кислоты, сополимеров молочной и гликолевой кислоты, поли-β-гидроксибутирата, поликапролактона, полидиоксанона; полиэтиленгликоля, полигидроксипропилметакриламида, полиорганофосфацена, полиортоэфиров, поливинилового спирта, поливинилпирролидона, сополимеров малеинового ангидрида-алкилвинилового эфира, полиолов плюроника, альбумина, альгината, целлюлозы и производных целлюлозы, коллагена, фибрина, желатина, гиалуроновой кислоты, олигосахаридов, гликаминогликанов, сульфатированных полисахаридов и их смесей, и сополимеров.

40. Конструкт TNF-α-связывающего белка, содержащий связывающий белок по п.1 и линкер или константный домен иммуноглобулина.

41. Конструкт TNF-α-связывающего белка по п.40, где связывающий белок имеет паттерн гликозилирования человека.

42. Конструкт связывающего белка по п.40, где конструкт связывающего белка является конструктом кристаллизованного TNF-α-связывающего белка.

43. Конструкт TNF-α-связывающего белка по п.42, где конструкт кристаллизованного TNF-α-связывающего белка представляет собой не имеющий носителя фармацевтический конструкт кристаллизованного TNF-α-связывающего белка с регулируемым высвобождением.

44. Конструкт TNF-α-связывающего белка по п.40, где конструкт связывающего белка имеет большее время полужизни in vivo, чем растворимая копия конструкта связывающего белка.

45. Конъюгат TNF-α-связывающего белка, содержащий конструкт TNF-α-связывающего белка по п.40, причем конъюгат TNF-α-связывающего белка дополнительно содержит молекулу иммуноадгезии, визуализирующий агент, терапевтический агент и цитотоксический агент.

46. Конъюгат TNF-α-связывающего белка по п.45, где агентом является визуализирующий агент, который представляет собой радиометку, фермент, флуоресцентную метку, люминесцентную метку, биолюминесцентную метку, магнитную метку или биотин.

47. Конъюгат TNF-α-связывающего белка по п.46, где радиометкой является ³H, ¹⁴C, ³⁵S, ⁹⁰Y, ⁹⁹Tc, ¹¹¹In, ¹²⁵I, ¹³¹I, ¹⁷⁷Lu,¹⁶⁶Ho и ¹⁵³Sm.

48. Конъюгат TNF-α-связывающего белка по п.47, где агентом является терапевтический или цитотоксический агент, который представляет собой антиметаболит, алкилирующий агент, антибиотик, фактор роста, цитокин, антиангиогенный агент, антимитотический агент, антрациклин, токсин или апоптотический агент.

49. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая связывающий белок, содержащий аминокислотную последовательность по п.1.

50. Выделенная нуклеиновая кислота, кодирующая конструкт TNF-α-связывающего белка, содержащий аминокислотную последовательность по п.40.

51. Вектор, содержащий выделенную нуклеиновую кислоту по п.49 или 50.

52. Вектор по п.51, где вектор выбран из группы, состоящей из pcDNA, pTT, pTT3, pEFBOS, pBV, pJV и pBJ.

53. Клетка-хозяин, содержащая вектор по п.51.

54. Клетка-хозяин по п.53, где клеткой-хозяином является прокариотическая клетка.

55. Клетка-хозяин по п.53, где клеткой-хозяином является эукариотическая клетка.

56. Клетка-хозяин по п.55, где эукариотической клеткой является клетка одноклеточного организма, клетка животного, клетка растения, клетка гриба или клетка дрожжей, клетка млекопитающего, клетка птицы или клетка насекомого.

57. Клетка-хозяин по п.55, где клеткой-хозяином является клетка СНО, клетка COS или клетка Saccharomyces cerevisiae.

58. Способ получения белка, который связывает TNF-α, причем способ включает стадии культивирования клетки-хозяина по п.53 в культуральной среде в условиях, достаточных для продуцирования связывающего белка, который связывает TNF-α.

59. TNF-α-связывающий белок, полученный способом по п.58.

60. Фармацевтическая композиция, содержащая связывающий белок по п.1 и фармацевтически приемлемый носитель.

61. Фармацевтическая композиция по п.60, где фармацевтически приемлемый носитель действует в качестве адъюванта.

62. Фармацевтическая композиция по п.61, где адъювантом является гиалуронидаза.

63. Фармацевтическая композиция по п.60, дополнительно содержащая, по меньшей мере, один дополнительный терапевтический агент, для лечения нарушения, при котором активность TNF-α является вредной.

64. Фармацевтическая композиция по п.63, где дополнительным агентом является терапевтический агент, визуализирующий агент, цитотоксический агент, ингибитор ангиогенеза, ингибитор киназы, ингибитор молекул костимуляции, ингибитор молекул адгезии, анти-цитокин-антитело или его функциональный фрагмент, метотрексат, циклоспорин, рапамицин, FK506, детектируемая метка, детектируемый репортер, антагонист TNF-α, антиревматический агент; миорелаксант, наркотическое средство, нестероидное противовоспалительное лекарственное средство (NSAID), аналгетик, анестетик, седативное средство, локальный анестетик, нейромышечный блокатор, антимикробный агент, антипсориатическое средство, кортикостероид, анаболический стероид, эритропоэтин, иммунизирующее вещество, иммуноглобулин, иммуносупрессивный агент, гормон роста, заменяющее гормон лекарственное средство, радиофармацевтическое средство, антидепрессант, антипсихотическое средство, стимулятор, средство для лечения астмы, бета-агонист, ингалируемый стероид, пероральный стероид, эпинефрин или его аналог, цитокин и антагонист цитокина.

65. Способ лечения млекопитающего, включающий стадию введения указанному млекопитающему эффективного количества фармацевтической композиции по п.60.

66. Способ уменьшения активности TNF-α человека, включающий стадию приведения TNF-α человека в контакт со связывающим белком по п.1 таким образом, что активность TNF-α человека уменьшается.

67. Способ уменьшения активности TNF-α человека у субъекта-человека, страдающего нарушением, при котором активность TNF-α является вредной, причем способ включает стадию введения указанному субъекту-человеку связывающего белка по п.1 таким образом, что активность TNF-α человека у субъекта-человека уменьшается и/или достигается излечение.

68. Способ лечения пациента, страдающего нарушением, при котором активность TNF-α является вредной, включающий стадию введения связывающего белка по п.1 до, одновременно или после введения второго агента, где второй агент представляет собой антитело или его фрагмент, способный связывать IL-12 человека; PGE2; LPA; NGF; CGRP; SubP; RAGE; гистамин; ингибитор рецептора гистамина; брадикинин; IL-1 альфа; IL-1 бета; VEGF; PLGF; метотрексат; кортикостероид, модулятор рецептора глюкокортикоида; циклоспорин, рапамицин, FK506 или нестероидный противовоспалительный агент.

69. Способ по п.68, где нарушением является респираторное нарушение; астма; аллергическая и неаллергическая астма; астма, возникающая вследствие инфицирования; астма вследствие инфицирования респираторно-синцитиальным вирусом (RSV); хроническое обструктивное заболевание легких (COPD); состояние, включающее воспаление дыхательных путей; эозинофилия; фиброз и избыточное продуцирование слизи; муковисцидоз; фиброз легких; атопическое нарушение; атопический дерматит; крапивница; экзема; аллергический ринит; аллергический энтерогастрит; воспалительное и/или аутоиммунное состояние кожи; воспалительное и/или аутоиммунное состояние желудочно-кишечных органов; воспалительные заболевания пищеварительного тракта (IBD); язвенный колит; болезнь Крона; воспалительное и/или аутоиммунное состояние печени; цирроз печени; фиброз печени; фиброз печени, вызываемый вирусом гепатита В и/или С; склеродермия; опухоли или виды рака; гепатоцеллюлярная карцинома; глиобластома; лимфома; лимфома Ходжкина; вирусная инфекция; бактериальная инфекция; паразитарная инфекция; HTLV-1-инфекция; супрессия проявления протективных иммунных реакций типа 1 и супрессия проявления протективной реакции типа 1 во время вакцинации.

70. способ по п.68, где нарушение выбрано из группы, состоящей из: ревматоидного артрита, остеоартрита, ювенильного хронического артрита, септического артрита, артрита Лайма, псориатического артрита, реактивного артрита, спондилоартропатии, системной красной волчанки, болезни Крона, язвенного колита, воспалительного заболевания пищеварительного тракта, инсулинозависимого сахарного диабета, тиреоидита, астмы, аллергических заболеваний, псориаза, дерматической склеродермии, заболевания трансплантат против хозяина, отторжения трансплантата, острого или хронического иммунного заболевания, ассоциированного с трансплантацией органов, саркоидоза, атеросклероза, диссеминированного внутрисосудистого свертывания, болезни Кавасаки, болезни Грейвса, нефротического синдрома, синдрома хронической усталости, гранулематоза Вегенера, болезни (пурпуры) Шенлейна-Геноха, микроскопического васкулита почек, хронического активного гепатита, увеита, септического шока, синдрома токсического шока, синдрома сепсиса, кахексии, инфекционных заболеваний, паразитарных заболеваний, синдрома приобретенного иммунодефицита, острого поперечного миелита, хореи Гентингтона, болезни Паркинсона, болезни Альцгеймера, инсульта, первичного билиарного цирроза, гемолитической анемии, злокачественностей, сердечной недостаточности, инфаркта миокарда, Аддисоновой болезни, спорадической, плюригландулярной недостаточности типа I и плюригландулярной недостаточности типа II, синдрома Шмидта, (острого) респираторного дистресс-синдрома взрослых, алопеции, гнездной (очаговой) алопеции, серонегативной артропатии, артропатии, синдрома Рейтера, псориатической артропатии, связанной с язвенным колитом артропатии, энтеропатического синовита, ассоциированной с Chlamydia, Yersinia и Salmonella артропатии, спондилоартропатии, атероматозного заболевания/артериосклероза, атопической аллергии, аутоиммунного поликистозного заболевания, обыкновенной пузырчатки, листовидной пузырчатки, пемфигоида, линейного IgA-заболевания, аутоиммунной гемолитической анемии, анемии с положительной реакцией Кумбса, приобретенной пернициозной злокачественной анемии (болезни Аддисона-Бирмера), ювенильной пернициозной анемии, миалгического энцефалита/британского миалгического энцефаломиелита, хронического кандидоза кожи и слизистых оболочек, гигантоклеточного артериита, первичного склерозирующего гепатита, криптогенного аутоиммунного гепатита, Синдрома Приобретенного Иммунодефицита, болезней, родственных приобретенному иммунодефициту, гепатита В, гепатита С, общего вариабельного иммунодефицита (общей вариабельной гипогаммаглобулинемии), дилатационной кардиомиопатии, женского бесплодия, недостаточности яичников, преждевременной декомпенсации яичников, фиброзного заболевания легких, криптогенного фиброзирующего альвеолита, послевоспалительного интерстициального заболевания легких, интерстициальной пневмонии, ассоциированного с воспалением соединительной ткани интерстициального заболевания легких, смешанного ассоциированного с заболеванием соединительной ткани заболевания легких, ассоциированного с системным склерозом интерстициального заболевания легких, ассоциированного с ревматоидным артритом интерстициального заболевания легких, ассоциированного с системной красной волчанкой заболевания легких, ассоциированного с дерматомиозитом/полимиозитом заболевания легких, ассоциированного с болезнью Шегрена заболевания легких, ассоциированного с анкилозирующим спондилитом заболевания легких, васкулитного диффузного заболевания легких, ассоциированного с гемосидерозом заболевания легких, индуцированного лекарственным средством интерстициального заболевания легких, фиброза, лучевого фиброза, констриктивного (облитерирующего) бронхиолита, хронической эозинофильной пневмонии, лимфоцитарного инфильтрационного заболевания легких, постинфекционного интерстициального заболевания легких, подагрического артрита, аутоиммунного гепатита, аутоиммунного гепатита типа-1 (классического аутоиммунного или волчаночного гепатита), аутоиммунного гепатита типа-2 (гепатита с анти-LKM-антителом), аутоиммунно-опосредованной гипогликемии, инсулинорезистентности типа В с черным акантозом, гипопаратиреоза, острого иммунного заболевания, ассоциированного с трансплантацией органов, хронического иммунного заболевания, ассоциированного с трансплантацией органов, остеоартроза, первичного склерозирующего холангита, псориаза типа 1, псориаза типа 2, идиопатической лейкопении, аутоиммунной нейтропении, заболевания почек NOS (без уточнения диагноза), гломерулонефрита, микроскопического васкулита почек, болезни Лайма, дискоидной красной волчанки, мужского бесплодия, идиопатического или NOS (без уточнения диагноза), аутоиммунности спермы, рассеянного склероза (всех подтипов), симпатической офтальмии, легочной гипертензии, вторичной относительно заболевания соединительной ткани, синдрома Гудпасчера, легочного проявления узелкового полиартериита, ревматической атаки, ревматоидного спондилита, болезни Стилла, системного склероза, синдрома Шегрена, болезни Такаясу (болезни отсутствия пульса)/артериита, аутоиммунной тромбоцитопении, идиопатической тромбоцитопении, аутоиммунного заболевания щитовидной железы, гипертиреоза, хронического аутоиммунного гипотиреоза (болезни Хашимото), атрофического аутоиммунного гипотиреоза, первичной микседемы, факогенного увеита, первичного васкулита, витилиго, острого заболевания печени, хронических заболеваний печени, алкогольного цирроза, индуцированного алкоголем повреждения печени, холеостаза, идиосинкратического заболевания печени, индуцированного лекарственным средством гепатита, неалкогольного стеатогепатита, аллергии и астмы, стрептококковой инфекции группы В (GBS), психических нарушений (например, депрессии и шизофрении), Th2-типа и Th1-типа опосредованных заболеваний, острой и хронической боли (различных форм боли) и таких типов рака, как рак легкого, молочной железы, желудка, мочевого пузыря, ободочной кишки, поджелудочной железы, яичника, предстательной железы и ректального рака и гемопоэтических злокачественностей (лейкоза и лимфомы), абеталипопротеинемии, акроцианоза, острых и хронических паразитарных или инфекционных процессов, острого лейкоза, острого лимфобластного лейкоза (ALL), острого миелоидного лейкоза (AML), острой или хронической бактериальной инфекции, острого панкреатита, острой почечной недостаточности, аденокарцином, предсердной экстрасистолии, комплекса СПИД-деменция, индуцированного алкоголем гепатита, аллергического конъюнктивита, аллергического контактного дерматита, аллергического ринита, отторжения трансплантата, альфа-1-антитрипсин-1-индуцированной недостаточности, амиотрофического латерального склероза, анемии, стенокардии, дегенерации клеток переднего рога, анти-CD3-терапии, антифосфолипидного синдрома, аллергических анти-рецепторных реакций, аневризмы аорты и периферических сосудов, иссечения участка аорты, артериальной гипертензии, артериосклероза, артериовенозной фистулы, атаксии, фибрилляции предсердий (непрерывной или пароксизмальной), трепетания предсердий, атриовентрикулярной блокады, B-клеточной лимфомы, отторжения костных трансплантатов, отторжения трансплантатов костного мозга (BMT), блокады ножек пучков Гиса, лимфомы Беркитта, ожогов, сердечных аритмий, синдрома оглушенного острой ишемией миокарда, сердечных опухолей, кардиомиопатии, воспалительной реакции экстракорпорального кровообращения, отторжения трансплантата хряща, мозжечково-кортикальных дегенераций, мозжечковых нарушений, хаотичной или политопной предсердной тахикардии, ассоциированных с химиотерапией нарушений, хронического миелоцитарного лейкоза (CML), хронического алкоголизма, хронических воспалительных патологий, хронического лимфоцитарного лейкоза (CLL), хронического обструктивного легочного заболевания (COPD), хронической интоксикации салицилатом, колоректальной карциномы, застойной сердечной недостаточности, конъюнктивитов, контактных дерматитов, легочного сердца (cor pulmonale), болезни коронарной артерии, болезни Крейтцфельдта-Якоба, культура-негативного сепсиса, муковисцидоза, ассоциированных с терапией цитокинами нарушений, деменции боксеров, димиелинизирующих заболеваний, геморрагической лихорадки денге, дерматита, дерматологических состояний, диабета, сахарного диабета, диабетического артериосклеротического заболевания, болезней распространенных (диффузных) телец Леви, застойной (дилатационной) кардиомиопатии, нарушений базальных ядер (головного мозга), синдрома Дауна в среднем возрасте, индуцированных лекарственным средством нарушений движения, индуцированных лекарственными средствами, которые блокируют рецепторы допамина ЦНС, чувствительности к лекарственным средствам, экземы, энцефаломиелита, эндокардита, эндокринопатии, эпиглоттита, инфекции вируса Эпштейна-Барра, эритромелалгии, экстрапирамидальных и мозжечковых нарушений, наследственного гемофагоцитарного лимфогистиоцитоза, отторжения имплантата фетального тимуса, наследственной атаксии Фридрейха, функциональных нарушений периферических артерий, грибкового сепсиса, газовой гангрены, язвы желудка, гломерулярного нефрита, отторжения трансплантата любых органов или ткани, грамотрицательного сепсиса, грамположительного сепсиса гранулем вследствие внутриклеточных организмов, злокачественного (гистиоцитарного) ретикулоэндотелиоза, болезни Галлервордена-Шпатца, тиреоидита Хашимото, сенной лихорадки, отторжения сердечного трансплантата, гемохроматоза, гемодиализа, гемолитического уремического синдрома/тромболитической тромбоцитопенической пурпуры, кровотечения, гепатита (А), аритмий пучков Гиса, ВИЧ-инфекции/ВИЧ-нейропатии, болезни Ходжкина, гиперкинетических нарушений движения, аллергических реакций, аллергического пневмонита, гипертензии, гипокинетических нарушений движения, диагностики системы гипоталамус-гипофиз-надпочечника, идиопатической болезни Аддисона, идиопатического пневмофиброза, антитело-опосредуемой цитотоксичности, астении, детской спинально-мышечной атрофии, воспаления аорты, гриппа а, подвергания ионизирующей радиации, иридоцистита/увеита/ретробульбарного неврита, ишемии-реперфузионного повреждения, ишемического инсульта, ювенильного ревматоидного артрита (JRA), ювенильной спинально-мышечной атрофии, саркомы Капоши, отторжения трансплантата почки, Legionella, лейшманиоза, проказы, повреждений кортико-спинномозговой системы, жирового отека, отторжения трансплантата печени, лимфедемы, малярии, злокачественной лимфомы, злокачественного гистиоцитоза, злокачественной меланомы, менингита, менингококкемии, метаболической/идиопатической мигрени (головной боли), митохондриального мультисистемного нарушения, комплексного заболевания соединительной ткани, моноклональной гаммапатии, множественной миеломы, дегенераций множественных систем (Menzel, Dejerine-Thomas, Shy-Drager и Machado-Joseph), тяжелой псевдопаралитической миастении, Mycobacterium avium intracellulare, Mycobacterium tuberculosis, синдрома миелодисплазии, инфаркта миокарда, ишемических нарушений миокарда, носоглоточной карциномы, неонатального хронического заболевания легких, нефрита, пионефроза, нейродегенеративных заболеваний, нейрогенных I мышечных атрофий, нейтропенической лихорадки, не-ходжкинской лимфомы, окклюзии брюшной аорты и ее ответвлений, окклюзионных артериальных нарушений, OKT3®-терапии, орхита/эпидидимита, обращенных процедур орхита/вазэктомии, увеличения органа, остеопороза, отторжения трансплантата поджелудочной железы, панкреатической карциномы, злокачественности паранеопластического синдрома/гиперкальциемии, отторжения трансплантата паращитовидной железы, воспалительного заболевания полости таза, хронического аллергического ринита, перикардиального заболевания, периферического атеросклеротического заболевания, периферических васкулярных нарушений, перитонита, пернициозной анемии, пневмонии Pneumocystis carinii, пневмонии, синдрома POEMS (синдрома полиневропатии, увеличения органов, эндокринопатии, моноклональной гаммапатии и синдрома кожных изменений), послеперфузионного синдрома, постгемодиализного синдрома, синдрома пост-MI-кардиотомии, преэклампсии, прогрессирующего супрануклеарного паралича, первичной легочной гипертензии, лучевой терапии, синдрома и заболевания Рейно, болезни Рейно, болезни Рефсума, регулярной узкой QRS-тахикардии, реноваскулярной гипертензии, реперфузионного повреждения, рестриктивной кардиомиопатии, сарком, склеродермии, старческой хореи, сенильной деменции типа телец Леви, серонегативных артропатий, шока, анемии с серповидными эритроцитами, отторжения трансплантата кожи, синдрома изменений кожи, отторжения трансплантата тонкой кишки, солидных опухолей, специфических аритмий, спинномозговой атаксии, спиномозжечковых дегенераций, стрептококкового миозита, структурных повреждений мозжечка, подострого склерозирующего панэнцефалита, синкопе (обморока), сифилиса сердечно-сосудистой системы, системной анафилаксии, системного синдрома воспалительной реакции, системного возникновения ювенильного ревматоидного артрита, T-клеточных или FAB ALL, телеангиэктазии, облитерирующего тромбоангиита, тромбоцитопении, токсичности, трансплантатов, травмы/кровотечения, аллергических реакций типа III, аллергии типа IV, нестабильной стенокардии, уремии, уросепсиса, крапивницы, пороков клапана сердца, варикозных вен, васкулита, венозных заболеваний венозного тромбоза, фибрилляции желудочков, вирусных и грибковых инфекций, вирусного энцефалита/асептического менингита, вирусно-ассоциированного гемофагоцитарного синдрома, синдрома Вернике-Корсакофф, заболевания Уилсона, отторжения ксенотрансплантата любых органов или ткани, острых коронарных синдромов, острого идиопатического полиневрита, острой воспалительной димиелинизирующей полирадикулоневропатии, острой ишемии, заболевания Стилла взрослых, круговой алопеции, анафилаксии, синдрома антифосфолипидных антител, апластической анемии, артериосклероза, алокальной экземы, алокального дерматита, аутоиммунного дерматита, аутоиммунного нарушения, ассоциированного со стрептококковой инфекцией, аутоиммунной энтеропатии, аутоиммунной потери слуха, аутоиммунного лимфопролиферативного синдрома, (ALPS), аутоиммунного миокардита, аутоиммунной преждевременной недостаточности яичников, блефарита, бронхоэктаза, буллезного пемфигоида, сердечно-сосудистого заболевания, катастрофического антифосфолипидного синдрома, глютеновой болезни, цервикального спондилоза, хронической ишемии, рубцового пемфигоида, клинически выделенного синдрома (CIS) с риском рассеянного склероза, конъюнктивита, возникновения детского психиатрического нарушения, хронического обструктивного заболевания легких (COPD), дакриоцистита, дерматомиозита, диабетической ретинопатии, сахарного диабета, грыжи межпозвонкового диска, пролапса межпозвонкового диска, индуцированной лекарственным средством гемолитической анемии, эндокардита, эндометриоза, эндофтальмита, эписклерита, полиморфной эритемы, обширной полиформной эритемы, гестационного пемфигоида, синдрома Гийена-Барре (GBS), поллиноза (сенной лихорадки), синдрома Хугеса, идиопатической болезни Паркинсона, идиопатической интерстициальной пневмонии, IgE-опосредованной аллергии, иммунной гемолитической анемии, миозита телец включения, инфекционного глазного воспалительного заболевания, воспалительного демиелинирующего заболевания, воспалительной болезни сердца, воспалительной болезни почек, IPF/UIP, ирита, кератита, сухого кератоконъюнктивита, болезни Кусмауля-Мейера, паралича Ландри, гистицитоза клеток Лангерганса, сетчатого ливедо, дегенерации желтого пятна, микроскопической полиангиопатии, болезни Бехтерева, нарушений моторных нейронов, пемфигоида слизистых оболочек, недостаточности множественных органов, тяжелой псевдопаралитической миастении, синдрома миелоплазии, миокардита, нарушений нервных корешков, невропатии, не-А не-В гепатита, ретробульбарного неарита, остеолиза, рака яичника, ювенильного ревматоидного артрита (JRA) немногочисленных суставов, окклюзивного заболевания периферических артерий (PAOD), заболевания периферических артерий (PVD), болезни периферических артерий (PAD), флебита, узелкового полиартериита (или узелкового периартериита), полихондрита, ревматической полимиалгии, преждевременного поседения, полисуставного JRA, синдрома полиэндокринной недостаточности, полимиозита, ревматической полимиалгии (PMR), постгемодиализного синдрома, первичного паркинсонизма, рака предстательной железы и ректального рака, и гематопоэтических злокачественностей (лейкоза и лимфомы), простатита, истинной эритроцитарной аплазии, первичной недостаточности надпочечников, рецидивирующего нейромиелита зрительного нерва, рестеноза, ревматического заболевания сердца, SAPHO (синовита, акне, пустулезного высыпания, гиперостоза и остеита), склеродермии, вторичного амилоидоза, синдрома шокового легкого, склерита, ишиалгии, вторичной недостаточности надпочечников, ассоциированного с кремнием заболевания соединительной ткани, дерматоза Снеддона-Уилкинсона, анкилозирующего спондилита, синдрома Стивенса-Джонстона (SJS), синдрома системной воспалительной реакции, артериита височных артерий, токсоплазмозного (хорио) ретинита, токсического эпидермального некролиза, поперечного миелита, TRAPS (периодического синдрома, ассоциированного с рецептором фактора некроза опухолей), аллергической реакции типа 1, диабета типа II, крапивницы, обычной интерстициальной пневмонии (UIP), васкулита, весеннего конъюнктивита, вирусного ретинита, синдрома Фогта-Коянаги-Харада (VKH-синдрома), влажной дегенерации желтого пятна, заживления ран, ассоциированной с Yersinia и Salmonella артропатии.

71. Способ лечения пациента, страдающего нарушением, при котором TNF-α является вредным, включающий стадию введения связывающего белка по п.1 до, одновременно или после введения второго агента, где второй агент выбран из группы, состоящей из ингалируемого стероида; бета-агониста; бета-агониста короткого или продолжительного действия; антагониста лейкотриенов и рецепторов лейкотриенов; ADVAIR; ингибитора IgE; анти-IgE-антител; XOLAIR; ингибитора фосфодиэстеразы; ингибитора PDE4; ксантина; антихолинергического лекарственного средства; стабилизирующего мастоциты агента, кромолина; ингибитора IL-4; ингибитора IL-5; ингибиторов эотаксина/CCR3; антагонистов гистамина или его рецепторов, включающих H1, H2, H3 и H4; антагонистов простагландина D или его рецепторов DPI и CRTH2; антагонистов TNF; растворимого фрагмента рецептора TNF; ENBREL; ферментного антагониста TNF; ингибитора TNF-превращающего фермента (TACE); мускаринового антагониста рецептора; антагониста TGF-бета; интерферона гамма; перфенидона; химиотерапевтического агента, метотрексата; лефлуномида; сиролимуса (рапамицина) или его аналога, ингибитора CCI-779; COX2 или cPLA2; NSAID; иммуномодулятора; ингибитора p38; ингибитора TPL-2, MK-2 и NFkB; буденосида; эпидермального фактора роста; кортикостероида; циклоспорина; сульфасалазина; аминосалицилатов; 6-меркаптопурина; азатиоприна; метронидазола; ингибитора липоксигеназы; месаламина; олсалазина; балсалазина; антиоксиданта; ингибитора тромбоксана; антагониста рецептора IL-1; анти-IL-Ιβ-антитела; анти-IL-6-антитела; фактора роста; ингибитора эластазы; пиридинил-имидазольного соединения; антитела или агониста LT, IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12, IL-14, IL-15, IL-16, IL-17, IL-18, IL-19, IL-20, IL-21, IL-22, IL-23, IL-24, IL-25, IL-26, IL-27, IL-28, IL-29, IL-30, IL-31, IL-32, IL-33, EMAP-II, GM-CSF, FGF или PDGF; антитела CD2, CD3, CD4, CD8, CD25, CD28, CD30, CD40, CD45, CD69, CD90 или их лиганда; FK506; рапамицина; микофенолята мофетила; ибупрофена; преднизолона; ингибитора фосфодиэстеразы; агониста аденозина; антитромботического агента; ингибитора комплемента; адренергического агента; ингибитора IRAK, NIK, IKK, p38 или MAP киназы; ингибитора IL-1β-превращающего фермента; ингибитора TNF-α-превращающего фермента; ингибитора передачи сигнала T-клеток; ингибитора металлопротеиназы; 6-меркаптопурина; ингибитора ангиотензин-превращающего фермента; растворимого рецептора цитокина; растворимого TNF-рецептора р55; растворимого TNF-рецептора р75; sIL-1RII; sIL-1RII; sIL-6R; противовоспалительного цитокина; IL-4; IL-10; IL-11 или TGF-β.

72. Способ по п.67, где введение субъекту выполняют, по меньшей мере, одним из способов, выбранных из группы, состоящей из парентерального, подкожного, внутримышечного, внутривенного, внутрисуставного, внутрибронхиального, внутрибрюшного, внутрикапсульного (интракапсулярного), внутрихрящевого, внутриполостного интрацелиального, внутримозжечкового, интрацеребровентрикулярного, внутрь прямой кишки, интрацервикального, внутрижелудочного, внутрипеченочного, внутримиокардиального, интраостеального, внутритазового, интраперикардиального, интраперитонеального, интраплеврального, интрапростатического, внутрилегочного, интраректального, интраренального, интраретинального, интраспирального, внутрисуставного, интраторакального, внутриматочного, внутрипузарного, болюсного, вагинального, ректального, буккального, сублингвального, интраназального и трансдермального введения.

73. Способ определения присутствия TNF-α или его фрагмента в тестовом образце иммуноанализом, где иммуноанализ включает приведение тестового образца в контакт, по меньшей мере, с одним связывающим белком или его фрагментом по п.1 и, по меньшей мере, одной детектируемой меткой.

74. Способ по п.73, где способ дополнительно включает стадии:

(i) приведение тестового образца в контакт, по меньшей мере, с одним связывающим белком или его фрагментом, где связывающий белок связывается с эпитопом на TNF-α или его фрагменте, с образованием, таким образом, первого комплекса;

(ii) приведение комплекса в контакт, по меньшей мере, с одной детектируемой меткой, где детектируемая метка связывается с эпитопом на первом комплексе или на TNF-α или его фрагменте, который не связан связывающим белком или его фрагментом, с образованием второго комплекса; и

(iii) детектирования присутствия TNF-α или его фрагмента в тестовом образце на основе сигнала, генерируемого детектируемой меткой во втором комплексе, где присутствие TNF-α или его фрагмента непосредственно коррелирует с сигналом, генерируемым детектируемой меткой.

75. Способ по п.73, где способ дополнительно включает стадии:

(ii) приведение комплекса в контакт, по меньшей мере, с одной детектируемой меткой, где детектируемая метка конкурирует с TNF-α или его фрагментом за связывание со связывающим белком или его фрагментом, с образованием, таким образом, второго комплекса; и

(iii) детектирования присутствия TNF-α или его фрагмента в тестовом образце на основе сигнала, генерируемого детектируемой меткой во втором комплексе, где присутствие TNF-α или его фрагмента опосредованно коррелирует с сигналом, генерируемым детектируемой меткой.

76. Способ по п.73, где способ необязательно дополнительно включает диагностирование, прогнозирование или оценивание эффективности терапевтического/профилактического лечения пациента.