KR20200124258A - 크산탄 리아제 및 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물 - Google Patents
크산탄 리아제 및 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 엔도글루카나제 변이체 및 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물 및 상기 조성물의 사용 방법에 관한 것이다.
Description
서열 목록에 대한 참조
본 출원은 컴퓨터 판독가능한 형태의 서열 목록을 함유하며, 이는 본원에 참조로 포함된다.
발명의 분야
본 발명은 세제 안정성 (예를 들어 세제 조성물에서의, 예를 들어 킬레이트화제, 예를 들어 EDTA 또는 시트레이트의 존재 하에서의 개선된 안정성) 및/또는 저장 안정성 (예를 들어 세제 조성물에서의, 예를 들어 킬레이트화제, 예를 들어 EDTA 또는 시트레이트의 존재 하에서의 개선된 저장 안정성)을 포함한 1종 이상의 특성에서 각각, 각각의 모 크산탄 리아제 및 엔도글루카나제에 비해 변경을 나타내는 크산탄 리아제 및 엔도글루카나제 변이체를 포함하는, 세제 조성물, 예컨대 세탁 조성물, 및 수동 세척 및 자동 식기 세척 조성물을 포함한 식기 세척 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 추가로 크산탄 검에 대해 활성을 갖는 크산탄 리아제 및 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다. 본 발명은 또한 본 발명의 조성물의 생산 및 사용 방법에 관한 것이다. 본원에 기재된 변이체는 세정 과정 및 세제 조성물에 사용하기에 특히 적합하다.
크산탄 검은 크산토모나스 캄페스트리스(Xanthomonas campestris)의 박테리아 코트에서 유래된 폴리사카라이드이다. 이는 크산토모나스 캄페스트리스 박테리아에 의한 글루코스, 수크로스 또는 락토스의 발효에 의해 생산된다. 발효 기간 후에, 폴리사카라이드는 이소프로필 알콜을 함유하는 성장 배지로부터 침전되고, 건조되고, 미세 분말로 분쇄된다. 그 후, 이는 액체 배지에 첨가되어 검을 형성한다. 크산탄 검은 여러 상이한 결합, 예컨대 β-D-만노실-β-D-1,4-글루쿠로노실 결합 및 β-D-글루코실-β-D-1,4-글루코실 결합에 의해 연결된 상이한 당으로 이루어진 천연 폴리사카라이드이다. 크산탄 검은 물에서 적어도 부분적으로 가용성이고, 고도로 점성인 용액 또는 겔을 형성한다. 크산탄 검의 완전한 효소적 분해는 크산탄 리아제 활성 및 엔도-β-1,4-글루카나제 활성을 포함한 여러 효소적 활성을 필요로 한다. 크산탄 리아제는 크산탄의 β-D-만노실-β-D-1,4-글루쿠로노실 결합을 절단하는 효소이고, 문헌에 기재되어 있다. 크산탄 리아제는 관련 기술분야에 공지되어 있고, 예를 들어 2종의 크산탄 리아제가 파에니바실루스 알기놀리티쿠스(Paenibacillus alginolyticus) XL-1로부터 단리되었다 (예를 들어 문헌 [Ruijssenaars et al. (1999) 'A pyruvated mannose-specific xanthan lyase involved in xanthan degradation by Paenibacillus alginolyticus XL-1', Appl. Environ. Microbiol. 65(6): 2446-2452, and Ruijssenaars et al. (2000), 'A novel gene encoding xanthan lyase of Paenibacillus alginolyticus strain XL-1', Appl. Environ. Microbiol. 66(9): 3945-3950]). 글리코시드 히드롤라제는 글리코실 결합의 가수분해를 촉매하여 보다 작은 당을 방출하는 효소이다. 분류되어 있는 100개 초과의 부류의 글리코시드 히드롤라제가 존재하며, 문헌 [Henrissat et al. (1991) 'A classification of glycosyl hydrolases based on amino-acid sequence similarities', J. Biochem. 280: 309-316] 및 유니프롯 웹사이트 www.cazy.org를 참조한다. 글리코시드 히드롤라제 패밀리 9 (GH9)는 70종 초과의 상이한 효소로 이루어지며, 대부분은 엔도-글루카나제 (EC 3.2.1.4), 셀로비오히드롤라제 (EC 3.2.1.91), β-글루코시다제 (EC 3.2.1.21) 및 엑소-β-글루코사미니다제 (EC 3.2.1.165)이다. 최근 수년간, 크산탄 검은 식품 (예를 들어 샐러드 드레싱 및 유제품의 증점제로서) 및 화장품 (예를 들어 성분이 분리되는 것을 방지하고 올바른 제품 텍스쳐를 제공하기 위한 치약 및 메이크업, 크림 및 로션의 안정화제 및 증점제로서)을 포함한 많은 소비자 제품의 성분으로서 사용되어 왔다. 추가로 크산탄 검은 오일 산업에서 시추 유체의 점도를 조절하는 등을 위한 첨가제로서의 용도가 발견되어 왔다. 크산탄 검의 광범위한 사용은 크산탄 검을 함유하는 용액, 겔 또는 혼합물을 분해하여 부산물을 보다 용이하게 제거하고자 하는 필요로 이어졌다. 크산탄 검의 분해를 위한 엔도글루카나제 및 크산탄 리아제, 및 세정 목적, 예컨대 크산탄 검 함유 얼룩의 제거를 위한, 및 시추 및 오일 산업에서의 이러한 효소의 용도는 관련 기술분야, 예를 들어 WO2013/167581A1에 공지되어 있다.
서열식별번호(SEQ ID NO): 2를 갖는 공지된 크산탄 엔도글루카나제 및 서열식별번호: 6을 갖는 공지된 크산탄 리아제는 둘 다 킬레이트화제를 함유하는 세제의 존재에 민감한 것으로 발견되었다. 이러한 효소의 적용성 및/또는 비용 및/또는 성능을 개선시키기 위해, 변경된 특성, 예를 들어 킬레이트화제, 예를 들어 EDTA 또는 시트레이트 등의 존재 하의 세제 조성물에서 예컨대 증가된 안정성, 예를 들어 개선된 안정성을 갖는 변이체에 대한 연구가 계속되고 있다. 그러나, 대형 효소의 돌연변이유발에 이은 돌연변이체 라이브러리의 정제 및 기능적 분석은 매우 고비용이고 노동적일 수 있다.
일부 측면에서, 본 발명은
(A) 서열식별번호: 2의 아미노산 95 내지 105에 상응하는 영역 1, 서열식별번호: 2의 아미노산 115 내지 138에 상응하는 영역 2, 서열식별번호: 2의 아미노산 210 내지 251에 상응하는 영역 3, 서열식별번호: 2의 아미노산 267 내지 301에 상응하는 영역 4, 서열식별번호: 2의 아미노산 339 내지 361에 상응하는 영역 5, 서열식별번호: 2의 아미노산 547 내지 595에 상응하는 영역 6, 서열식별번호: 2의 아미노산 612 내지 660에 상응하는 영역 7, 서열식별번호: 2의 아미노산 806 내지 828에 상응하는 영역 8, 서열식별번호: 2의 아미노산 839 내지 1042에 상응하는 영역 9, 및/또는 서열식별번호: 2의 아미노산 1 내지 94에 상응하는 영역 10, 서열식별번호: 2의 아미노산 106 내지 114에 상응하는 영역 11, 서열식별번호: 2의 아미노산 139 내지 209에 상응하는 영역 12, 서열식별번호: 2의 아미노산 252 내지 266에 상응하는 영역 13, 서열식별번호: 2의 아미노산 302 내지 338에 상응하는 영역 14, 서열식별번호: 2의 아미노산 362 내지 546에 상응하는 영역 15, 서열식별번호: 2의 아미노산 596 내지 611에 상응하는 영역 16, 서열식별번호: 2의 아미노산 661 내지 805에 상응하는 영역 17, 서열식별번호: 2의 아미노산 829 내지 838에 상응하는 영역 18, 및 서열식별번호: 2의 아미노산 1043 내지 1055에 상응하는 영역 19로 이루어진 군으로부터 선택된 (킬레이트화제-유도된 불안정성) 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 포함하는 엔도글루카나제 변이체; 및
(B) 서열식별번호: 6의 아미노산 154 내지 176에 상응하는 영역 1, 서열식별번호: 6의 아미노산 614 내지 658에 상응하는 영역 2, 서열식별번호: 6의 아미노산 731 내지 803에 상응하는 영역 3, 서열식별번호: 6의 아미노산 807 내지 846에 상응하는 영역 4, 서열식별번호: 6의 아미노산 872 내지 885에 상응하는 영역 5, 서열식별번호: 6의 아미노산 903 내지 1004에 상응하는 영역 6, 및/또는 서열식별번호: 6의 아미노산 1 내지 153에 상응하는 영역 7, 서열식별번호: 6의 아미노산 177 내지 613에 상응하는 영역 8, 서열식별번호: 6의 아미노산 659 내지 730에 상응하는 영역 9, 서열식별번호: 6의 아미노산 804 내지 806에 상응하는 영역 10, 서열식별번호: 6의 아미노산 847 내지 871에 상응하는 영역 11, 서열식별번호: 6의 아미노산 886 내지 902에 상응하는 영역 12, 및 서열식별번호: 6의 아미노산 1005 내지 1037에 상응하는 영역 13으로 이루어진 군으로부터 선택된 (킬레이트화제-유도된 불안정성) 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 포함하는 크산탄 리아제 변이체
를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
다양한 측면에서, 엔도글루카나제 변이체 (A)는 서열식별번호: 2에 대해 적어도 60% 및 100% 미만의 서열 동일성을 갖고; 바람직하게는 상기 엔도글루카나제 변이체는 크산탄 리아제로 사전-처리된 크산탄 검에 대해 활성을 갖고/거나; 크산탄 리아제 변이체 (B)는 서열식별번호: 6에 대해 적어도 60% 및 100% 미만의 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 상기 크산탄 리아제 변이체는 크산탄 검에 대해 활성을 갖는다.
일부 측면에서, 본 발명은 하기 특색: 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 상대적으로 입체형태적으로 덜 안정함; 및/또는 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 상기 킬레이트화제에 상대적으로 더 노출됨; 및/또는 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 상기 킬레이트화제에 상대적으로 더 접근가능함; 및/또는 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 상대적으로 입체형태적으로 더 동적임; 및/또는 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 중수소 혼입을 상대적으로 더 잘 수용함 중 1종 이상을 갖는 모 엔도글루카나제 (예를 들어 서열식별번호: 2) 또는 모 크산탄 리아제 (예를 들어 서열식별번호: 6)의 킬레이트화제-유도된 불안정성 영역을 규정한다. 본 발명에서, "상대적으로"라고 언급하는 경우, 이는 상기 제시된 바와 같은 주어진 영역의 특색이 킬레이트화제의 존재 하에서의 그의 특색 및/또는 특성과, 킬레이트화제의 부재 하에서의 그의 특색 및/또는 특성 사이에서 관찰되는 차이에 기초한다는 것을 의미한다 (즉 킬레이트화제의 영향을 결정하기 위해, 각각의 영역이 상기 킬레이트화제의 부재 하에 그 자체로 비교되고, 킬레이트화제의 부재 하의 그의 천연 특색/특성에 대비하여 임의의 변화가 결정됨).
일부 측면에서, 본 발명은 서열식별번호: 2에 대해 적어도 61%, 62%, 63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 서열 동일성을 갖는 엔도글루카나제 변이체를 포함하는, 본원에 정의된 바와 같은 세제 조성물에 관한 것이다.
일부 측면에서, 본 발명은 서열식별번호: 6에 대해 적어도 61%, 62%, 63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 서열 동일성을 갖는 크산탄 리아제 변이체를 포함하는, 본원에 정의된 바와 같은 세제 조성물에 관한 것이다.
일부 측면에서, 세제 조성물은 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입)을 포함하는 엔도글루카나제 변이체를 포함한다:
i) 서열식별번호: 2의 아미노산 95 내지 105에 상응하는 영역 1, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
ii) 서열식별번호: 2의 아미노산 115 내지 138에 상응하는 영역 2, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
iii) 서열식별번호: 2의 아미노산 210 내지 251에 상응하는 영역 3, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 226, 227, 228, 229, 230, 231, 232, 233, 234, 235, 236, 237, 238, 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 249, 250, 251로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
iv) 서열식별번호: 2의 아미노산 267 내지 301에 상응하는 영역 4, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 267, 268, 269, 270, 271, 272, 273, 274, 275, 276, 277, 278, 279, 280, 281, 282, 283, 284, 285, 286, 287, 288, 289, 290, 291, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298, 299, 300, 301로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
v) 서열식별번호: 2의 아미노산 339 내지 361에 상응하는 영역 5, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 339, 340, 341, 342, 343, 344, 345, 346, 347, 348, 349, 350, 351, 352, 353, 354, 355, 356, 357, 358, 359, 360, 361로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
vi) 서열식별번호: 2의 아미노산 547 내지 595에 상응하는 영역 6, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 547, 548, 549, 550, 551, 552, 553, 554, 555, 556, 557, 558, 559, 560, 561, 562, 563, 564, 565, 566, 567, 568, 569, 570, 571, 572, 573, 574, 575, 576, 577, 578, 579, 580, 581, 582, 583, 584, 585, 586, 587, 588, 589, 590, 591, 592, 593, 594, 595로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
vii) 서열식별번호: 2의 아미노산 612 내지 660에 상응하는 영역 7, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 612, 613, 614, 615, 616, 617, 618, 619, 620, 621, 622, 623, 624, 625, 626, 627, 628, 629, 630, 631, 632, 633, 634, 635, 636, 637, 638, 639, 640, 641, 642, 643, 644, 645, 646, 647, 648, 649, 650, 651, 652, 653, 654, 655, 656, 657, 658, 659, 660으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
viii) 서열식별번호: 2의 아미노산 806 내지 828에 상응하는 영역 8, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 806, 807, 808, 809, 810, 811, 812, 813, 814, 815, 816, 817, 818, 819, 820, 821, 822, 823, 824, 825, 826, 827, 828로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
ix) 서열식별번호: 2의 아미노산 839 내지 1042에 상응하는 영역 9, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 839, 840, 841, 842, 843, 844, 845, 846, 847, 848, 849, 850, 851, 852, 853, 854, 855, 856, 857, 858, 859, 860, 861, 862, 863, 864, 865, 866, 867, 868, 869, 870, 871, 872, 873, 874, 875, 876, 877, 878, 879, 880, 881, 882, 883, 884, 885, 886, 887, 888, 889, 890, 891, 892, 893, 894, 895, 896, 897, 898, 899, 900, 901, 902, 903, 904, 905, 906, 907, 908, 909, 910, 911, 912, 913, 914, 915, 916, 917, 918, 919, 920, 921, 922, 923, 924, 925, 926, 927, 928, 929, 930, 931, 932, 933, 934, 935, 936, 937, 938, 939, 940, 941, 942, 943, 944, 945, 946, 947, 948, 949, 950, 951, 952, 953, 954, 955, 956, 957, 958, 959, 960, 961, 962, 963, 964, 965, 966, 967, 968, 969, 970, 971, 972, 973, 974, 975, 976, 977, 978, 979, 980, 981, 982, 983, 984, 985, 986, 987, 988, 989, 990, 991, 992, 993, 994, 995, 996, 997, 998, 999, 1000, 1001, 1002, 1003, 1004, 1005, 1006, 1007, 1008, 1009, 1010, 1011, 1012, 1013, 1014, 1015, 1016, 1017, 1018, 1019, 1020, 1021, 1022, 1023, 1024, 1025, 1026, 1027, 1028, 1029, 1030, 1031, 1032, 1033, 1034, 1035, 1036, 1037, 1038, 1039, 1040, 1041, 1042로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
x) 서열식별번호: 2의 아미노산 1 내지 94에 상응하는 영역 10, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
xi) 서열식별번호: 2의 아미노산 106 내지 114에 상응하는 영역 11, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
xii) 서열식별번호: 2의 아미노산 139 내지 209에 상응하는 영역 12, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 209로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
xiii) 서열식별번호: 2의 아미노산 252 내지 266에 상응하는 영역 13, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 252, 253, 254, 255, 256, 257, 258, 259, 260, 261, 262, 263, 264, 265, 266으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
xiv) 서열식별번호: 2의 아미노산 302 내지 338에 상응하는 영역 14, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 302, 303, 304, 305, 306, 307, 308, 309, 310, 311, 312, 313, 314, 315, 316, 317, 318, 319, 320, 321, 322, 323, 324, 325, 326, 327, 328, 329, 330, 331, 332, 333, 334, 335, 336, 337, 338로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
xv) 서열식별번호: 2의 아미노산 362 내지 546에 상응하는 영역 15, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 362, 363, 364, 365, 366, 367, 368, 369, 370, 371, 372, 373, 374, 375, 376, 377, 378, 379, 380, 381, 382, 383, 384, 385, 386, 387, 388, 389, 390, 391, 392, 393, 394, 395, 396, 397, 398, 399, 400, 401, 402, 403, 404, 405, 406, 407, 408, 409, 410, 411, 412, 413, 414, 415, 416, 417, 418, 419, 420, 421, 422, 423, 424, 425, 426, 427, 428, 429, 430, 431, 432, 433, 434, 435, 436, 437, 438, 439, 440, 441, 442, 443, 444, 445, 446, 447, 448, 449, 450, 451, 452, 453, 454, 455, 456, 457, 458, 459, 460, 461, 462, 463, 464, 465, 466, 467, 468, 469, 470, 471, 472, 473, 474, 475, 476, 477, 478, 479, 480, 481, 482, 483, 484, 485, 486, 487, 488, 489, 490, 491, 492, 493, 494, 495, 496, 497, 498, 499, 500, 501, 502, 503, 504, 505, 506, 507, 508, 509, 510, 511, 512, 513, 514, 515, 516, 517, 518, 519, 520, 521, 522, 523, 524, 525, 526, 527, 528, 529, 530, 531, 532, 533, 534, 535, 536, 537, 538, 539, 540, 541, 542, 543, 544, 545, 546으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
xvi) 서열식별번호: 2의 아미노산 596 내지 611에 상응하는 영역 16, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 596, 597, 598, 599, 600, 601, 602, 603, 604, 605, 606, 607, 608, 609, 610, 611로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
xvii) 서열식별번호: 2의 아미노산 661 내지 805에 상응하는 영역 17, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 661, 662, 663, 664, 665, 666, 667, 668, 669, 670, 671, 672, 673, 674, 675, 676, 677, 678, 679, 680, 681, 682, 683, 684, 685, 686, 687, 688, 689, 690, 691, 692, 693, 694, 695, 696, 697, 698, 699, 700, 701, 702, 703, 704, 705, 706, 707, 708, 709, 710, 711, 712, 713, 714, 715, 716, 717, 718, 719, 720, 721, 722, 723, 724, 725, 726, 727, 728, 729, 730, 731, 732, 733, 734, 735, 736, 737, 738, 739, 740, 741, 742, 743, 744, 745, 746, 747, 748, 749, 750, 751, 752, 753, 754, 755, 756, 757, 758, 759, 760, 761, 762, 763, 764, 765, 766, 767, 768, 769, 770, 771, 772, 773, 774, 775, 776, 777, 778, 779, 780, 781, 782, 783, 784, 785, 786, 787, 788, 789, 790, 791, 792, 793, 794, 795, 796, 797, 798, 799, 800, 801, 802, 803, 804, 805로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
xviii) 서열식별번호: 2의 아미노산 829 내지 838 내지 1042에 상응하는 영역 18, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 829, 830, 831, 832, 833, 834, 835, 836, 837, 838로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함), 및
xix) 서열식별번호: 2의 아미노산 1043 내지 1055에 상응하는 영역 19, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치 1043, 1044, 1045, 1046, 1047, 1048, 1049, 1050, 1051, 1052, 1053, 1054, 1055로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함).
일부 측면에서, 상기 언급된 변이체는 서열식별번호: 2에 대해 적어도 60% 및 100% 미만의 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 상기 엔도글루카나제 변이체는 크산탄 리아제로 사전-처리된 크산탄 검에 대해 활성을 갖는다.
일부 측면에서, 세제 조성물은 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 포함하는 크산탄 리아제 변이체를 포함한다:
i) 서열식별번호: 6의 아미노산 154 내지 176에 상응하는 영역 1, 예를 들어 서열식별번호: 6의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 6의 넘버링을 사용함),
ii) 서열식별번호: 6의 아미노산 614 내지 658에 상응하는 영역 2, 예를 들어 서열식별번호: 6의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 614, 615, 616, 617, 618, 619, 620, 621, 622, 623, 624, 625, 626, 627, 628, 629, 630, 631, 632, 633, 634, 635, 636, 637, 638, 639, 640, 641, 642, 643, 644, 645, 646, 647, 648, 649, 650, 651, 652, 653, 654, 655, 656, 657, 658로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 6의 넘버링을 사용함),
iii) 서열식별번호: 6의 아미노산 731 내지 803에 상응하는 영역 3, 예를 들어 서열식별번호: 6의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 731, 732, 733, 734, 735, 736, 737, 738, 739, 740, 741, 742, 743, 744, 745, 746, 747, 748, 749, 750, 751, 752, 753, 754, 755, 756, 757, 758, 759, 760, 761, 762, 763, 764, 765, 766, 767, 768, 769, 770, 771, 772, 773, 774, 775, 776, 777, 778, 779, 780, 781, 782, 783, 784, 785, 786, 787, 788, 789, 790, 791, 792, 793, 794, 795, 796, 797, 798, 799, 800, 801, 802, 803으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 6의 넘버링을 사용함),
iv) 서열식별번호: 6의 아미노산 807 내지 846에 상응하는 영역 4, 예를 들어 서열식별번호: 6의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 807, 808, 809, 810, 811, 812, 813, 814, 815, 816, 817, 818, 819, 820, 821, 822, 823, 824, 825, 826, 827, 828, 829, 830, 831, 832, 833, 834, 835, 836, 837, 838, 839, 840, 841, 842, 843, 844, 845, 846으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 6의 넘버링을 사용함),
v) 서열식별번호: 6의 아미노산 872 내지 885에 상응하는 영역 5, 예를 들어 서열식별번호: 6의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 872, 873, 874, 875, 876, 877, 878, 879, 880, 881, 882, 883, 884, 885로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 6의 넘버링을 사용함),
vi) 서열식별번호: 6의 아미노산 903 내지 1004에 상응하는 영역 6, 예를 들어 서열식별번호: 6의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 903, 904, 905, 906, 907, 908, 909, 910, 911, 912, 913, 914, 915, 916, 917, 918, 919, 920, 921, 922, 923, 924, 925, 926, 927, 928, 929, 930, 931, 932, 933, 934, 935, 936, 937, 938, 939, 940, 941, 942, 943, 944, 945, 946, 947, 948, 949, 950, 951, 952, 953, 954, 955, 956, 957, 958, 959, 960, 961, 962, 963, 964, 965, 966, 967, 968, 969, 970, 971, 972, 973, 974, 975, 976, 977, 978, 979, 980, 981, 982, 983, 984, 985, 986, 987, 988, 989, 990, 991, 992, 993, 994, 995, 996, 997, 998, 999, 1000, 1001, 1002, 1003, 1004로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 6의 넘버링을 사용함),
vii) 서열식별번호: 6의 아미노산 1 내지 153에 상응하는 영역 7, 예를 들어 서열식별번호: 6의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152 및 153으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경,
viii) 서열식별번호: 6의 아미노산 177 내지 613에 상응하는 영역 8, 예를 들어 서열식별번호: 6의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 226, 227, 228, 229, 230, 231, 232, 233, 234, 235, 236, 237, 238, 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 249, 250, 251, 252, 253, 254, 255, 256, 257, 258, 259, 260, 261, 262, 263, 264, 265, 266, 267, 268, 269, 270, 271, 272, 273, 274, 275, 276, 277, 278, 279, 280, 281, 282, 283, 284, 285, 286, 287, 288, 289, 290, 291, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298, 299, 300, 301, 302, 303, 304, 305, 306, 307, 308, 309, 310, 311, 312, 313, 314, 315, 316, 317, 318, 319, 320, 321, 322, 323, 324, 325, 326, 327, 328, 329, 330, 331, 332, 333, 334, 335, 336, 337, 338, 339, 340, 341, 342, 343, 344, 345, 346, 347, 348, 349, 350, 351, 352, 353, 354, 355, 356, 357, 358, 359, 360, 361, 362, 363, 364, 365, 366, 367, 368, 369, 370, 371, 372, 373, 374, 375, 376, 377, 378, 379, 380, 381, 382, 383, 384, 385, 386, 387, 388, 389, 390, 391, 392, 393, 394, 395, 396, 397, 398, 399, 400, 401, 402, 403, 404, 405, 406, 407, 408, 409, 410, 411, 412, 413, 414, 415, 416, 417, 418, 419, 420, 421, 422, 423, 424, 425, 426, 427, 428, 429, 430, 431, 432, 433, 434, 435, 436, 437, 438, 439, 440, 441, 442, 443, 444, 445, 446, 447, 448, 449, 450, 451, 452, 453, 454, 455, 456, 457, 458, 459, 460, 461, 462, 463, 464, 465, 466, 467, 468, 469, 470, 471, 472, 473, 474, 475, 476, 477, 478, 479, 480, 481, 482, 483, 484, 485, 486, 487, 488, 489, 490, 491, 492, 493, 494, 495, 496, 497, 498, 499, 500, 501, 502, 503, 504, 505, 506, 507, 508, 509, 510, 511, 512, 513, 514, 515, 516, 517, 518, 519, 520, 521, 522, 523, 524, 525, 526, 527, 528, 529, 530, 531, 532, 533, 534, 535, 536, 537, 538, 539, 540, 541, 542, 543, 544, 545, 546, 547, 548, 549, 550, 551, 552, 553, 554, 555, 556, 557, 558, 559, 560, 561, 562, 563, 564, 565, 566, 567, 568, 569, 570, 571, 572, 573, 574, 575, 576, 577, 578, 579, 580, 581, 582, 583, 584, 585, 586, 587, 588, 589, 590, 591, 592, 593, 594, 595, 596, 597, 598, 599, 600, 601, 602, 603, 604, 605, 606, 607, 608, 609, 610, 611, 612 및 613으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경,
ix) 서열식별번호: 6의 아미노산 659 내지 730에 상응하는 영역 9, 예를 들어 서열식별번호: 6의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 659, 660, 661, 662, 663, 664, 665, 666, 667, 668, 669, 670, 671, 672, 673, 674, 675, 676, 677, 678, 679, 680, 681, 682, 683, 684, 685, 686, 687, 688, 689, 690, 691, 692, 693, 694, 695, 696, 697, 698, 699, 700, 701, 702, 703, 704, 705, 706, 707, 708, 709, 710, 711, 712, 713, 714, 715, 716, 717, 718, 719, 720, 721, 722, 723, 724, 725, 726, 727, 728, 729 및 730으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경,
x) 서열식별번호: 6의 아미노산 804 내지 806에 상응하는 영역 10, 예를 들어 서열식별번호: 6의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 804, 805 및 806으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경,
xi) 서열식별번호: 6의 아미노산 847 내지 871에 상응하는 영역 11, 예를 들어 서열식별번호: 6의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 847, 848, 849, 850, 851, 852, 853, 854, 855, 856, 857, 858, 859, 860, 861, 862, 863, 864, 865, 866, 867, 868, 869, 870 및 871로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경,
xii) 서열식별번호: 6의 아미노산 886 내지 902에 상응하는 영역 12, 예를 들어 서열식별번호: 6의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 886, 887, 888, 889, 890, 891, 892, 893, 894, 895, 896, 897, 898, 899, 900, 901 및 902로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경, 및
xiii) 서열식별번호: 6의 아미노산 1005 내지 1037에 상응하는 영역 13, 예를 들어 서열식별번호: 6의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 1005, 1006, 1007, 1008, 1009, 1010, 1011, 1012, 1013, 1014, 1015, 1016, 1017, 1018, 1019, 1020, 1021, 1022, 1023, 1024, 1025, 1026, 1027, 1028, 1029, 1030, 1031, 1032, 1033, 1034, 1035, 1036 및 1037로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경.
일부 측면에서, 상기 언급된 변이체는 서열식별번호: 6에 대해 적어도 60% 및 100% 미만의 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 상기 크산탄 리아제 변이체는 크산탄 검에 대해 활성을 갖는다.
일부 측면에서, 세제 조성물은 하기 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 포함하는 엔도글루카나제 변이체를 포함한다:
a) 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 영역:
i) 서열식별번호: 2의 아미노산 95 내지 105에 상응하는 영역 1, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
ii) 서열식별번호: 2의 아미노산 115 내지 138에 상응하는 영역 2, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
iii) 서열식별번호: 2의 아미노산 210 내지 251에 상응하는 영역 3, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 226, 227, 228, 229, 230, 231, 232, 233, 234, 235, 236, 237, 238, 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 249, 250, 251로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
iv) 서열식별번호: 2의 아미노산 267 내지 301에 상응하는 영역 4, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 267, 268, 269, 270, 271, 272, 273, 274, 275, 276, 277, 278, 279, 280, 281, 282, 283, 284, 285, 286, 287, 288, 289, 290, 291, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298, 299, 300, 301로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
v) 서열식별번호: 2의 아미노산 339 내지 361에 상응하는 영역 5, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 339, 340, 341, 342, 343, 344, 345, 346, 347, 348, 349, 350, 351, 352, 353, 354, 355, 356, 357, 358, 359, 360, 361로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
vi) 서열식별번호: 2의 아미노산 547 내지 595에 상응하는 영역 6, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 547, 548, 549, 550, 551, 552, 553, 554, 555, 556, 557, 558, 559, 560, 561, 562, 563, 564, 565, 566, 567, 568, 569, 570, 571, 572, 573, 574, 575, 576, 577, 578, 579, 580, 581, 582, 583, 584, 585, 586, 587, 588, 589, 590, 591, 592, 593, 594, 595로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
vii) 서열식별번호: 2의 아미노산 612 내지 660에 상응하는 영역 7, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 612, 613, 614, 615, 616, 617, 618, 619, 620, 621, 622, 623, 624, 625, 626, 627, 628, 629, 630, 631, 632, 633, 634, 635, 636, 637, 638, 639, 640, 641, 642, 643, 644, 645, 646, 647, 648, 649, 650, 651, 652, 653, 654, 655, 656, 657, 658, 659, 660으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
viii) 서열식별번호: 2의 아미노산 806 내지 828에 상응하는 영역 8, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 806, 807, 808, 809, 810, 811, 812, 813, 814, 815, 816, 817, 818, 819, 820, 821, 822, 823, 824, 825, 826, 827, 828로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함), 및
ix) 서열식별번호: 2의 아미노산 839 내지 1042에 상응하는 영역 9, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 839, 840, 841, 842, 843, 844, 845, 846, 847, 848, 849, 850, 851, 852, 853, 854, 855, 856, 857, 858, 859, 860, 861, 862, 863, 864, 865, 866, 867, 868, 869, 870, 871, 872, 873, 874, 875, 876, 877, 878, 879, 880, 881, 882, 883, 884, 885, 886, 887, 888, 889, 890, 891, 892, 893, 894, 895, 896, 897, 898, 899, 900, 901, 902, 903, 904, 905, 906, 907, 908, 909, 910, 911, 912, 913, 914, 915, 916, 917, 918, 919, 920, 921, 922, 923, 924, 925, 926, 927, 928, 929, 930, 931, 932, 933, 934, 935, 936, 937, 938, 939, 940, 941, 942, 943, 944, 945, 946, 947, 948, 949, 950, 951, 952, 953, 954, 955, 956, 957, 958, 959, 960, 961, 962, 963, 964, 965, 966, 967, 968, 969, 970, 971, 972, 973, 974, 975, 976, 977, 978, 979, 980, 981, 982, 983, 984, 985, 986, 987, 988, 989, 990, 991, 992, 993, 994, 995, 996, 997, 998, 999, 1000, 1001, 1002, 1003, 1004, 1005, 1006, 1007, 1008, 1009, 1010, 1011, 1012, 1013, 1014, 1015, 1016, 1017, 1018, 1019, 1020, 1021, 1022, 1023, 1024, 1025, 1026, 1027, 1028, 1029, 1030, 1031, 1032, 1033, 1034, 1035, 1036, 1037, 1038, 1039, 1040, 1041, 1042로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함); 및/또는
b) (i') 서열식별번호: 2의 아미노산 1 내지 94에 상응하는 영역 10; (ii') 서열식별번호: 2의 아미노산 106 내지 114에 상응하는 영역 11; (iii') 서열식별번호: 2의 아미노산 139 내지 209에 상응하는 영역 12; (iv') 서열식별번호: 2의 아미노산 252 내지 266에 상응하는 영역 13; (v') 서열식별번호: 2의 아미노산 302 내지 338에 상응하는 영역 14; (vi') 서열식별번호: 2의 아미노산 362 내지 546에 상응하는 영역 15; (vii') 서열식별번호: 2의 아미노산 596 내지 611에 상응하는 영역 16; (viii') 서열식별번호: 2의 아미노산 661 내지 805에 상응하는 영역 17; (ix') 서열식별번호: 2의 아미노산 829 내지 838에 상응하는 영역 18; 및 (x') 서열식별번호: 2의 아미노산 1043 내지 1055에 상응하는 영역 19로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 인접 영역.
일부 측면에서, 본 발명은 하기 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 포함하는 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다:
a) 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 영역:
i) 서열식별번호: 2의 아미노산 1 내지 94에 상응하는 영역 10, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
ii) 서열식별번호: 2의 아미노산 106 내지 114에 상응하는 영역 11, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
iii) 서열식별번호: 2의 아미노산 139 내지 209에 상응하는 영역 12, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 209로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
iv) 서열식별번호: 2의 아미노산 252 내지 266에 상응하는 영역 13, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 252, 253, 254, 255, 256, 257, 258, 259, 260, 261, 262, 263, 264, 265, 266으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
v) 서열식별번호: 2의 아미노산 302 내지 338에 상응하는 영역 14, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 302, 303, 304, 305, 306, 307, 308, 309, 310, 311, 312, 313, 314, 315, 316, 317, 318, 319, 320, 321, 322, 323, 324, 325, 326, 327, 328, 329, 330, 331, 332, 333, 334, 335, 336, 337, 338로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
vi) 서열식별번호: 2의 아미노산 362 내지 546에 상응하는 영역 15, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 362, 363, 364, 365, 366, 367, 368, 369, 370, 371, 372, 373, 374, 375, 376, 377, 378, 379, 380, 381, 382, 383, 384, 385, 386, 387, 388, 389, 390, 391, 392, 393, 394, 395, 396, 397, 398, 399, 400, 401, 402, 403, 404, 405, 406, 407, 408, 409, 410, 411, 412, 413, 414, 415, 416, 417, 418, 419, 420, 421, 422, 423, 424, 425, 426, 427, 428, 429, 430, 431, 432, 433, 434, 435, 436, 437, 438, 439, 440, 441, 442, 443, 444, 445, 446, 447, 448, 449, 450, 451, 452, 453, 454, 455, 456, 457, 458, 459, 460, 461, 462, 463, 464, 465, 466, 467, 468, 469, 470, 471, 472, 473, 474, 475, 476, 477, 478, 479, 480, 481, 482, 483, 484, 485, 486, 487, 488, 489, 490, 491, 492, 493, 494, 495, 496, 497, 498, 499, 500, 501, 502, 503, 504, 505, 506, 507, 508, 509, 510, 511, 512, 513, 514, 515, 516, 517, 518, 519, 520, 521, 522, 523, 524, 525, 526, 527, 528, 529, 530, 531, 532, 533, 534, 535, 536, 537, 538, 539, 540, 541, 542, 543, 544, 545, 546으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
vii) 서열식별번호: 2의 아미노산 596 내지 611에 상응하는 영역 16, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 596, 597, 598, 599, 600, 601, 602, 603, 604, 605, 606, 607, 608, 609, 610, 611로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
viii) 서열식별번호: 2의 아미노산 661 내지 805에 상응하는 영역 17, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 661, 662, 663, 664, 665, 666, 667, 668, 669, 670, 671, 672, 673, 674, 675, 676, 677, 678, 679, 680, 681, 682, 683, 684, 685, 686, 687, 688, 689, 690, 691, 692, 693, 694, 695, 696, 697, 698, 699, 700, 701, 702, 703, 704, 705, 706, 707, 708, 709, 710, 711, 712, 713, 714, 715, 716, 717, 718, 719, 720, 721, 722, 723, 724, 725, 726, 727, 728, 729, 730, 731, 732, 733, 734, 735, 736, 737, 738, 739, 740, 741, 742, 743, 744, 745, 746, 747, 748, 749, 750, 751, 752, 753, 754, 755, 756, 757, 758, 759, 760, 761, 762, 763, 764, 765, 766, 767, 768, 769, 770, 771, 772, 773, 774, 775, 776, 777, 778, 779, 780, 781, 782, 783, 784, 785, 786, 787, 788, 789, 790, 791, 792, 793, 794, 795, 796, 797, 798, 799, 800, 801, 802, 803, 804, 805로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
ix) 서열식별번호: 2의 아미노산 829 내지 838 내지 1042에 상응하는 영역 18, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 829, 830, 831, 832, 833, 834, 835, 836, 837, 838로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함)
x) 서열식별번호: 2의 아미노산 1043 내지 1055에 상응하는 영역 19, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치 1043, 1044, 1045, 1046, 1047, 1048, 1049, 1050, 1051, 1052, 1053, 1054, 1055로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함); 및/또는
b) (i') 서열식별번호: 2의 아미노산 95 내지 105에 상응하는 영역 1; (ii') 서열식별번호: 2의 아미노산 115 내지 138에 상응하는 영역 2; (iii') 서열식별번호: 2의 아미노산 210 내지 251에 상응하는 영역 3; (iv') 서열식별번호: 2의 아미노산 267 내지 301에 상응하는 영역 4; (v') 서열식별번호: 2의 아미노산 339 내지 361에 상응하는 영역 5; (vi') 서열식별번호: 2의 아미노산 547 내지 595에 상응하는 영역 6; (vii') 서열식별번호: 2의 아미노산 612 내지 660에 상응하는 영역 7; (viii') 서열식별번호: 2의 아미노산 806 내지 828에 상응하는 영역 8; 및 (ix') 서열식별번호: 2의 아미노산 839 내지 1042에 상응하는 영역 9로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 인접 영역.
특정한 측면에서, 본원에 기재된 바와 같은 엔도글루카나제 변이체는 영역 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 및 19 외부의 위치에서는 어떠한 아미노산 변경도 포함하지 않는 것이다. 이러한 측면에서, 엔도글루카나제 변이체는 따라서 서열식별번호: 2의 아미노산 95 내지 105에 상응하는 영역 1, 서열식별번호: 2의 아미노산 115 내지 138에 상응하는 영역 2, 서열식별번호: 2의 아미노산 210 내지 251에 상응하는 영역 3, 서열식별번호: 2의 아미노산 267 내지 301에 상응하는 영역 4, 서열식별번호: 2의 아미노산 339 내지 361에 상응하는 영역 5, 서열식별번호: 2의 아미노산 547 내지 595에 상응하는 영역 6, 서열식별번호: 2의 아미노산 612 내지 660에 상응하는 영역 7, 서열식별번호: 2의 아미노산 806 내지 828에 상응하는 영역 8, 및 서열식별번호: 2의 아미노산 839 내지 1045에 상응하는 영역 9로 이루어진 군으로부터 선택된 영역에서 어떠한 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)도 포함하지 않는다. 대안적으로, 본원에 기재된 바와 같은 엔도글루카나제 변이체는 영역 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 및 9 외부의 위치에서는 어떠한 아미노산 변경도 포함하지 않는 것이다. 이러한 측면에서, 엔도글루카나제 변이체는 따라서 영역 10, 영역 11, 영역 12, 영역 13, 영역 14, 영역 15, 영역 16, 영역 17, 영역 18, 및 영역 19로 이루어진 군으로부터 선택된 영역에서 어떠한 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)도 포함하지 않는다. 그러나 엔도글루카나제 변이체는 영역 1-9 중 임의의 것에서 적어도 1개의 변경 및 영역 10-19 중 어느 하나에서 적어도 1개의 변경을 포함하는 것이 바람직하다.
일부 측면에서, 세제 조성물은 (i) 영역 6 및 17; (ii) 영역 6, 15 및 17; (iii) 영역 10, 12 및 15; (iv) 영역 6, 7, 16, 및 17; (v) 영역 6, 9, 10, 12, 15, 및 17; (vi) 영역 14 및 15; (vii) 영역 9; (viii) 6, 7, 9, 14, 15, 16, 및 17; 또는 (ix) 3, 6, 7, 9, 14, 15, 16, 및 17의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 엔도글루카나제 변이체를 포함하며; 여기서 상기 변이체는 바람직하게는 언급된 것 외의 다른 영역에서 어떠한 변경도 갖지 않는다.
일부 측면에서, 세제 조성물은 위치: 4, 17, 18, 20, 51, 53, 55, 56, 60, 63, 71, 79, 87, 92, 99, 120, 125, 126, 130, 137, 182, 186, 189, 192, 213, 216, 221, 226, 228, 230, 231, 232, 233, 235, 240, 243, 247, 249, 278, 279, 281, 283, 285, 289, 292, 294, 298, 302, 311, 313, 333, 346, 353, 358, 386, 387, 388, 390, 403, 408, 410, 416, 441, 448, 451, 471, 472, 476, 489, 507, 512, 515, 538, 555, 556, 557, 558, 559, 560, 561, 562, 563, 564, 567, 568, 570, 575, 578, 579, 580, 581, 583, 589, 590, 591, 592, 593, 595, 598, 599, 602, 603, 605, 607, 609, 616, 627, 630, 631, 635, 636, 638, 639, 640, 641, 642, 643, 644, 651, 676, 683, 688, 690, 694, 698, 699, 706, 711, 713, 1719, 720, 744, 749, 754, 756, 760, 781, 786, 797, 810, 811, 812, 815, 823, 824, 825, 827, 828, 833, 834, 835, 837, 843, 848, 868, 869, 870, 871, 872, 873, 874, 880, 881, 883, 884, 885, 887, 888, 890, 892, 894, 898, 905, 906, 912, 920, 921, 924, 926, 927, 928, 932, 933, 934, 935, 937, 938, 939, 940, 941, 942, 943, 946, 948, 950, 952, 953, 954, 956, 957, 960, 966, 971, 972, 980, 989, 991, 994, 995, 998, 999, 1006, 1009, 1010, 1011, 1029, 1030, 1031, 1032, 1035, 1037, 1038, 1040, 1041, 1042, 1044, 1045, 및 1048로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 엔도글루카나제 변이체를 포함하며, 여기서 넘버링은 서열식별번호: 2에 따른다.
하나의 대안적 실시양태에서, 엔도글루카나제 변이체는 서열식별번호: 2의 285, 333, 353, 558, 633, 635, 638, 639, 994, 281, 563, 575, 921, 558+559+560+561+562, 558, 559, 560, 561, 562 125, 126, 130, 213, 221, 228, 230, 231, 232, 235, 240, 243, 249, 278, 292, 297, 346, 556, 564, 565, 567, 568, 569, 570, 576, 578, 579, 580, 583, 589, 590, 591, 592, 593, 616, 627, 630, 636, 641, 642, 643, 644, 651, 810, 811, 812, 815, 823, 824, 825, 827, 843, 870, 871, 872, 873, 874, 881, 883, 884, 885, 887, 894, 920, 932, 933, 934, 935, 937, 938, 939, 940, 941, 942, 943, 950, 952, 953, 954, 960, 964, 966, 971, 974, 989, 991, 995, 998, 1006, 1010, 1011, 1029, 1030, 1031, 1032, 1035, 1037, 1038, 1040, 1041, 1044, 1045, 559+579, 564+579, 562+579, 559+579+99, 99, 559+579+281, 281+559+579, 559+579+616, 559+579+636, 559+579+651, 559+579+948, 948, 559+579+1009, 1009, 559+579+627, 579+921, 559+579+921, 99+579, 579+651, 579+948, 579+1009, 559+579+934, 934, 559+579+921+934, 559+579+627, 559+579+627+616, 559+579+627, 559+579+921+651, 559+579+921+627, 559+579+921+636, 559+579+921+616, 559+579+921+636, 559+579+921+627+636, 559+579+636+651, 559+579+616+651, 559+579+616+636, 559+579+616+921+934, 559+579+651+627, 559+579+651+636, 559+579+651+627+636, 559+579+651+616, 559+579+651+921+934, 636+934, 636+921, 636+627, 636+579, 638+934, 638+921, 638+627, 638+579, 627+51, 51, 627+451, 451, 627+559,627+579, 579+934, 651+638, 570+651, 570+921, 570+627, 570+559, 570+579, 570+638, 570+579, 570+638, 570+651, 570+636, 570+934, 570+638, 570+921, 570+627, 570+559, 570+885, 885+934, 885+627, 559+579+636, 559+579+638, 559+579+870, 559+579+560, 559+579+564, 559+579+570, 559+579+570, 559+579+570, 559+579+570, 559+579+570, 559+579+570, 559+579+570, 559+579+570, 559+570+579, 559+570+579, 559+570+579, 559+570+579, 559+570+579, 559+570+579, 559+570+579, 559+570+579, 559+560+579, 559+579+651, 559+579+651+934, 559+579+638, 559+579+921, 559+579+616+921, 559+579+636, 559+579, 559+579, 559+579+921, 559+579+616, 638+934, 627+636, 627+934, 570+579, 416+559+579+636, 128+559+579+627, 128+559+579+636, 및 579+636 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서 변경을 포함한다.
일부 측면에서, 세제 조성물은 N285G, W333L, T353D, N558NP, N558F, T633V, D635L, D635M, D635T, F638Y, T639D, G994N, 및 K281T, G563E, I575M, I575A, K921D, N558K+A559K+S560F+T561P+G562W, N558K, A559K, S560F, T561P, G562W 및 I125V, A126R, K130R, K213R, A221R, K228E, K228I, G230F, G230L, G230A, G230H, G230N, G230W, G230T, F231Y, F231N, V232R, V232G, H235D, N240Q, G243K, G243R, A249N, A278S, K281F, K281V, K281Y, K281H, K281Q, K281N, K281W, N285L, N285M, N285S, N285P, N285T, N285Y, N285H, N285K, N285D, N285W, N285R, T292F, T292L, T292I, T292V, T292S, T292P, T292Y, T292Q, T292N, T292K, T292D, T292G, F297L, A346H, G556S, N558D, N558M, N558Q, N558I, N558Y, N558H, A559N, A559F, A559M, A559P, A559Y, A559H, A559Q, A559D, A559R, A559G, A559I, A559S, S560P, S560K, S560G, S560D, T561P, T561E, T561Q, T561S, T561D, A564I, A564Y, A564H, A564Q, A564K, A564E, E565M, V567F, K568R, L569F, L569Y, L569D, L569E, P570F, P570L, P570I, P570M, P570V, P570S, P570T, P570A, P570Y, P570H, P570Q, P570N, P570K, P570E, P570W, P570R, P570G, I575D, I575E, I576F, I576M, I576P, D578R, Y579F, Y579W, V580L, D583M, Q589G, P590S, P590T, P590E, E591L, G592D, S593P, S593H, S593Q, S593N, S593K, S593D, S593E, S593R, S616D, K627L, K627M, K627V, K627S, K627T, K627Q, K627R, I630F, I630V, I630Y, D635A, D635P, D635N, D635K, D635E, D635G, D635W, S636L, S636M, S636A, S636H, S636Q, S636N, S636K, S636R, F638I, F638V, F638T, F638L, F638H, T639V, T639S, T639L, T639I, T639M, T639A, T639E, T639W, T639G, Y641E, S642T, S642N, N643D, N643H, N643T, T644F, A651P, S810R, A811S, V812F, V812I, V812M, V812W, V812R, N815V, N815Y, N815E, N815W, N815R, S823Q, A824T, T825N, T825W, T825A, T825D, V827I, V827M, V827S, T843V, D870F, D870L, D870I, D870M, D870V, D870S, D870T, D870Y, D870H, D870Q, D870N, D870K, D870E, D870W, D870R, D870G, P871F, P871L, P871I, P871M, P871V, P871S, P871T, P871A, P871Y, P871H, P871Q, T872S, T872F, T872A, T872Y, T872H, T872Q, T872N, T872K, T872D, T872E, T872W, T872R, T872G, D873K, D873E, T874V, T874S, T874P, T874A, T874H, T874Q, T874N, T874K, V881Q, T883K, Y884H, A885F, A885Q, A885N, T887L, T887I, T887S, T887H, T887R, K894E, N920D, K921R, K921E, T932A, N933V, N933S, Y934G, Y934M, Y934S, Y934A, Y934Q, Y934N, Y934E, Y934W, Y934R, T935W, A937F, A937V, A937S, A937T, A937Q, A937D, A937E, V938I, K939I, K939V, D940E, N941S, N941H, N941D, A942P, A942E, D943Y, D943H, R950V, R950H, R950N, F952S, F952W, N953Y, G954L, Y960F, A964N, A964C, N966P, N966C, G971A, Q974K, Q974C, Q989I, Q991L, Q991I, Q991M, Q991V, Q991T, Q991K, Q991C, S995I, S995V, S995Q, S995R, S995C, G998V, G998A, S1006T, S1006A, S1006K, S1006R, Y1010W, L1011M, L1011S, L1011A, L1011Q, L1011N, L1011D, L1011E, R1029N, F1030M, K1031I, K1031S, K1031T, K1031H, V1032G, K1035A, A1037E, A1037W, S1038L, S1038I, L1040N, L1040E, G1041F, L1044F, L1044S, L1044N, L1044W, P1045Q, P1045W, 및 A559N+Y579F, A559N, Y579F, A564E+Y579F, A564E, Y579F, A559N+Y579W, A559N, Y579W, G562P+Y579W, G562P, Y579W, A564D+Y579W, A564D, Y579W, A559N+Y579W+K99R, A559N, Y579W, K99R, A559N+Y579W+K281R, A559N, Y579W, K281R, K281R+A559N+Y579W, K281R, A559N, Y579W, A559N+Y579W+S616D, A559N, Y579W, S616D, A559N+Y579W+S636N, A559N, Y579W, S636N, A559N+Y579W+A651P, A559N, Y579W, A651P, A559N+Y579W+K948E, A559N, Y579W, K948E, A559N+Y579W+K1009E, A559N, Y579W, K1009E, A559N+Y579W+K627R, A559N, Y579W, K627R, Y579W+K921R, Y579W, K921R, A559N+Y579W+K921R, A559N, Y579W, K921R, K99R+Y579W, K99R, Y579W, Y579W+A651P, Y579W, A651P, Y579W+K948E, Y579W, K948E, Y579W+K1009E, Y579W, K1009E, A559N+Y579W+Y934G, A559N, Y579W, Y934G, A559N+Y579W+K921R+Y934G, A559N, Y579W, K921R, Y934G, A559N+Y579W+K627M, A559N, Y579W, K627M, A559N+Y579W+K627R+S616D, A559N, Y579W, K627R, S616D, A559N+Y579F+K627R, A559N, Y579F, K627R, A559N+Y579W+K921R+A651P, A559N, Y579W, K921R, A651P, A559N+Y579W+K921R+K627R, A559N, Y579W, K921R, K627R, A559N+Y579W+K921R+S636K, A559N, Y579W, K921R, S636K, A559N+Y579W+K921R+S616D, A559N, Y579W, K921R, S616D, A559N+Y579W+K921R+S636N, A559N, Y579W, K921R, S636N, A559N+Y579W+K921R+K627R+S636N, A559N, Y579W, K921R, K627R, S636N, A559N+Y579W+S636N+A651P, A559N, Y579W, S636N, A651P, A559N+Y579W+S616D+A651P, A559N, Y579W, S616D, A651P, A559N+Y579W+S616D+S636K, A559N, Y579W, S616D, S636K, A559N+Y579W+S616D+K921R+Y934G, A559N, Y579W, S616D, K921R, Y934G, A559N+Y579W+A651P+K627M, A559N, Y579W, A651P, K627M, A559N+Y579W+A651P+S636K, A559N, Y579W, A651P, S636K, A559N+Y579W+A651P+K627R+S636N, A559N, Y579W, A651P, K627R, S636N, A559N+Y579W+A651P+S616D, A559N, Y579W, A651P, S616D, A559N+Y579W+A651P+K921R+Y934G, A559N, Y579W, A651P, K921R, Y934G, S636N+Y934G, S636N, Y934G, S636N+K921R, S636N, K921R, S636N+K627R, S636N, K627R, S636N+Y579W, S636N, Y579W, F638I+Y934G, F638I, Y934G, F638I+K921R, F638I, K921R, F638I+K627R, F638I, K627R, F638I+Y579W, F638I, Y579W, K627R+K51Q, K627R, K51Q, K627R+K451S, K627R, K451S, K627R+A559N, K627R, A559N, K627R+Y579W, K627R, Y579W, Y579W+Y934G, Y579W, Y934G, A651P+F638I, A651P, F638I, P570Q+A651P, P570Q, A651P, P570Q+K921R, P570Q, K921R, P570Q+K627R, P570Q, K627R, P570Q+A559N, P570Q, A559N, P570Q+Y579W, P570Q, Y579W, P570Q+F638I, P570Q, F638I, P570K+Y579W, P570K, Y579W, P570K+F638I, P570K, F638I, P570T+A651P, P570T, A651P, P570T+S636N, P570T, S636N, P570T+Y934G, P570T, Y934G, P570T+F638I, P570T, F638I, P570T+K921R, P570T, K921R, P570T+K627R, P570T, K627R, P570T+A559N, P570T, A559N, P570T+A885F, P570T, A885F, A885F+Y934G, A885F, Y934G, A885F+K627R, A885F, K627R, A559N+Y579W+S636L, A559N, Y579W, S636L, A559N+Y579W+F638I, A559N, Y579W, F638I, A559N+Y579W+D870M, D870M, A559N+Y579W+S560P, S560P, A559N+Y579W+A564I, A564I, A559N+Y579W+P570N, P570N, A559N+Y579W+P570K, P570K, A559N+Y579W+P570R, P570R, A559N+Y579W+P570A, P570A, A559N+Y579W+P570T, P570T, A559N+Y579W+P570S, P570S, A559N+Y579W+P570Q, P570Q, A559N+Y579W+P570H, P570H, 및 N558E, A559P, A559N, A559H, T561P, A564E, P570A, P570Q, P570R, P570S, P570K, P570T, P570N, Y579W, Y579F, T581M, S616D, K627R, K627M, K627Q, S636N, S636Q, S636R, S636K, S636M, S636H, F638I, F638L, N643D, A651P, A651S, A885F, A885Q, K921R, Y934R, Y934G, N966C, L1011A, K1031I, 및 A559N+P570A+Y579W, A559N+P570H+Y579W, A559N+P570K+Y579W, A559N+P570N+Y579W, A559N+P570Q+Y579W, A559N+P570R+Y579W, A559N+P570S+Y579W, A559N+P570T+Y579W, A559N+S560P+Y579W, A559N+Y579W+A651P, A559N+Y579W+A651P+Y934G, A559N+Y579W+F638I, A559N+Y579W+K921R, A559N+Y579W+S616D+K921R, A559N+Y579W+S636N, A559N+Y579F, A559N+Y579W, A559N+Y579W+K921R, A559N+Y579W+S616D, F638I+Y934G, K627R+S636N, K627R+Y934G, P570K+Y579W, Q416D+A559N+Y579W+S636N, Q416D, S128X+A559N+Y579W+K627R, S128X, S128X+A559N+Y579W+S636N, Y579W+S636N, V4T, S17A, N18G, F20P, F20N, F20G, F20Y, K51Q, K51H, E53Y, E53P, E53G, Y55M, Y55D, V56M, Y60F, S63F, A71E, 579W, T87R, T92S, A120P, N129D, F137L, H182Y, A186P, N189K, K192N, N216D, N216Q, N216R, L226K, G230H, L233H, D247N, G279E, K281R, A283D, N285D, N285G, Q289E, T292A, T292F, T292Y, A294V, Q298E, I302D, I302H, I302V, I302M, H311N, S313D, A346D, A386P, I387T, K388R, K390Q, I403Y, E408D, E408N, E408S, E408P, E408A, E408G, P410G, Q416S, Q416D, N441G, A448E, A448W, A448S, K451S, K451Q, G471S, S472Y, D476R, Q489P, K507R, K512P, S515V, S538C, L555Q, G557R, N558E, A559N, A559P, A559H, A559D, S560P, S560G, T561P, A564E, A564I, V567P, K568R, P570R, P570Q, P570K, P570A, P570T, P570G, P570S, P570H, P570N, I575V, Y579W, Y579F, T581M, S593N, S593E, S595L, S598Q, A599S, I602T, I602D, V603P, S605T, S607C, G609E, S616G, S616D, K627R, K627M, K627Q, K631R, K631A, D635A, D635E, D635M, D635N, D635L, D635W, S636N, S636K, S636L, S636Q, S636R, S636M, S636H, F638N, F638I, F638L, F638V, F638H, F638M, T639G, T639I, T639M, T639Y, T639W, T639P, T639E, T640S, S642N, S642T, N643D, N643H, A651P, A651S, D676H, Q683E, A688G, Y690F, T694A, T697G, R698W, T699A, T706Q, T711S, T711V, T711Y, K713R, W719R, K720H, K744H, K744Q, A749T, K754R, V756Y, V756H, S760G, T781M, N786K, T797S, S810Q, A824D, T825G, N828D, N833D, Q834E, S835A, S835D, V837I, N848D, A868E, A869V, D870V, T872G, T872H, T872W, T872Q, R880K, V881Q, V881T, T883R, T883V, T883C, T883K, Y884H, A885N, A885Q, A885F, T887K, T887S, L888M, V890R, T892P, T892V, R898Q, N905D, F906A, Q912V, N920P, K921R, A924D, V926F, V926P, K927R, S928D, T932A, N933S, N933V, Y934G, Y934R, Y934Q, A937E, V938I, K939V, N941S, A942P, G946R, K948R, Q956Y, Q956S, A957L, A957P, N966C, T972K, M980I, G994D, T999R, L1011A, K1031I, A1037E, S1038G, G1041R, Y1042N, 및 F1048W로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 엔도글루카나제 변이체를 포함한다.
일부 측면에서, 본 발명은 서열식별번호: 2의 위치: 17, 20, 51, 53, 55, 56, 60, 63, 79, 87, 192, 302, 387, 388, 390, 403, 408, 410, 416, 448, 451, 471, 472, 507, 512, 515, 538, 598, 602, 605, 609, 676, 694, 698, 699, 711, 754, 760, 781, 786, 797, 834, 및 835로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
일부 측면에서, 본 발명은 서열식별번호: 2의 S17A, F20P, F20N, F20G, F20Y, K51Q, K51H, E53P, E53G, Y55M, V56M, Y60F, S63F, T87R, K192N, I302H, I302V, I302M, I387T, K388R, K390Q, I403Y, E408D, E408S, E408P, E408A, E408G, E408N, P410G, Q416S, Q416D, A448E, A448W, A448S, K451S, G471S, S472Y, K507R, K512P, S515V, S538C, Y579W, S598Q, I602T, I602D, S605T, G609E, D676H, T694A, R698W, T699A, T711V, T711Y, K754R, S760G, T781M, N786K, T797S, Q834E, 및 S835D로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
일부 측면에서, 본 발명은 서열식별번호: 2의 위치: 559+579+697; 512+559+579+697; 18+71+186+408+579+602+651+688+756; 18+189+408+559+579+688+697+756+921+934; 313+488; 880+905+921+934; 302+313+408+579+602+651+697+880+921+934; 또는 216+313+408+476+579+602+638+651+697+719+880+887+921+934로 이루어진 군으로부터 선택된 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
일부 측면에서, 본 발명은 서열식별번호: 2의 하기 변경: A559N+Y579W+T697G; K512P+A559N+Y579W+T697G; N18G+A71E+A186P+E408D+Y579W+I602T+A651P+A688G+V756Y; N18G+N189K+E408D+A559N+Y579W+A688G+T697G+V756Y+K921R+Y934G; S313D+E408D; R880K+N905D+K921R+Y934G; I302D+S313D+E408D+Y579W+I602T+A651P+T697G+R880K+K921R+Y934G; 및 N216Q+S313D+E408D+D476R+Y579W+I602T+F638N+A651P+T697G+W719R+R880K+T887K+K921R+Y934G로 이루어진 군으로부터 선택된 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
일부 측면에서, 본 발명은 크산탄 리아제로 사전-처리된 크산탄 검에 대해 활성을 갖는 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이고; 바람직하게는 상기 활성은 엔도글루카나제 EC 3.2.1.4 활성을 포함하고, 추가로 바람직하게는 상기 활성은 엔도글루카나제 EC 3.2.1.4 활성이다.
일부 측면에서, 본 발명은 모 엔도글루카나제 (예를 들어 서열식별번호: 2를 가짐)와 비교하여 세제 조성물에서 개선된 안정성을 갖는 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
일부 측면에서, 본 발명은 모 엔도글루카나제 또는 야생형 엔도글루카나제보다 개선된 반감기를 갖는 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
한 실시양태에서, 엔도글루카나제 변이체는 25℃의 온도 및 90%의 세제 농도에서 측정한 경우 적어도 1.5시간의 반감기를 갖는다. 특정한 실시양태에서, 반감기는 실시예 3 및 7에 기재된 바와 같이 측정된다.
일부 측면에서, 본 발명은 모 엔도글루카나제, 예를 들어 서열식별번호: 2의 엔도글루카나제 대비 >1.0의 반감기 개선 지수 (HIF)를 갖는 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
일부 측면에서, 본 발명은 크산탄 리아제로 사전처리된 크산탄 검에 대해 활성을 갖는 단리된 GH9 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
일부 측면에서, 세제 조성물은 (i) 서열식별번호: 6의 아미노산 154 내지 176에 상응하는 영역 1; (ii) 서열식별번호: 6의 아미노산 614 내지 658에 상응하는 영역 2; (iii) 서열식별번호: 6의 아미노산 731 내지 803에 상응하는 영역 3; (iv) 서열식별번호: 6의 아미노산 807 내지 846에 상응하는 영역 4; (v) 서열식별번호: 6의 아미노산 872 내지 885에 상응하는 영역 5; 및 (vi) 서열식별번호: 6의 아미노산 903 내지 1004에 상응하는 영역 6으로 이루어진 군으로부터 선택된 2개 이상, 3개 이상, 4개 이상, 5개 또는 모든 6개의 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 포함하는 크산탄 리아제 변이체를 포함한다.
일부 측면에서, 세제 조성물은 (i) 서열식별번호: 6의 아미노산 1 내지 153에 상응하는 영역 7; (ii) 서열식별번호: 6의 아미노산 177 내지 613에 상응하는 영역 8; (iii) 서열식별번호: 6의 아미노산 659 내지 730에 상응하는 영역 9; (iv) 서열식별번호: 6의 아미노산 804 내지 806에 상응하는 영역 10; (v) 서열식별번호: 6의 아미노산 847 내지 871에 상응하는 영역 11; (vi) 서열식별번호: 6의 아미노산 886 내지 902에 상응하는 영역 12; 및 (vii) 서열식별번호: 6의 아미노산 1005 내지 1037에 상응하는 영역 13으로 이루어진 군으로부터 선택된 2개 이상의 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 포함하는 크산탄 리아제 변이체를 포함한다.
일부 측면에서, 세제 조성물은 (i) 서열식별번호: 6의 아미노산 154 내지 176에 상응하는 영역 1; (ii) 서열식별번호: 6의 아미노산 614 내지 658에 상응하는 영역 2; (iii) 서열식별번호: 6의 아미노산 731 내지 803에 상응하는 영역 3; (iv) 서열식별번호: 6의 아미노산 807 내지 846에 상응하는 영역 4; (v) 서열식별번호: 6의 아미노산 872 내지 885에 상응하는 영역 5; (vi) 서열식별번호: 6의 아미노산 903 내지 1004에 상응하는 영역 6; (vii) 서열식별번호: 6의 아미노산 1 내지 153에 상응하는 영역 7; (iii) 서열식별번호: 6의 아미노산 177 내지 613에 상응하는 영역 8; (xi) 서열식별번호: 6의 아미노산 659 내지 730에 상응하는 영역 9; (x) 서열식별번호: 6의 아미노산 804 내지 806에 상응하는 영역 10; (xi) 서열식별번호: 6의 아미노산 847 내지 871에 상응하는 영역 11; (xii) 서열식별번호: 6의 아미노산 886 내지 902에 상응하는 영역 12; 및 (xiii) 서열식별번호: 6의 아미노산 1005 내지 1037에 상응하는 영역 13으로 이루어진 군으로부터 선택된 2개 이상, 3개 이상, 4개 이상, 5개 이상, 6개 이상, 7개 이상, 8개 이상, 9개 이상, 10개 이상, 11개 이상, 12개 또는 모든 13개 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 포함하는 크산탄 리아제 변이체를 포함한다.
본 발명의 세제 조성물의 일부 측면에서, 크산탄 리아제 변이체는 적어도 1개의 킬레이트화제-유도된 불안정성 영역의 1개 이상의 위치에서의 변경 뿐만 아니라 적어도 1개의 인접 영역의 1개 이상의 위치에서의 변경을 포함한다. 따라서, 일부 측면에서 크산탄 리아제 변이체는, 상기 및 본원의 다른 곳에서 제시된 바와 같이 영역 1, 2, 3, 4, 5 및 6으로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 1개의 영역의 1개 이상의 위치에서의 변경에 더하여, (vii) 서열식별번호: 6의 아미노산 1 내지 153에 상응하는 영역 7; (viii) 서열식별번호: 6의 아미노산 177 내지 613에 상응하는 영역 8; (ix) 서열식별번호: 6의 아미노산 659 내지 730에 상응하는 영역 9; (x) 서열식별번호: 6의 아미노산 804 내지 806에 상응하는 영역 10; (xi) 서열식별번호: 6의 아미노산 847 내지 871에 상응하는 영역 11; (xii) 서열식별번호: 6의 아미노산 886 내지 902에 상응하는 영역 12; 및 (xiii) 서열식별번호: 6의 아미노산 1005 내지 1037에 상응하는 영역 13으로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 1개의 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 추가로 포함한다.
크산탄 리아제 변이체는 예를 들어 영역 7, 8, 9, 10, 11, 12 및 13으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상, 2개 이상, 3개 이상, 4개 이상, 5개 이상, 6개 또는 모든 7개 영역 각각의 1개 이상의 위치에서 변경을 포함할 수 있다.
특정한 측면에서, 본원에 기재된 바와 같은 크산탄 리아제 변이체는 영역 7, 8, 9, 10, 11, 12 및 13 외부의 위치에서는 어떠한 아미노산 변경도 포함하지 않는 것이다. 이러한 측면에서, 크산탄 리아제 변이체는 따라서 서열식별번호: 6의 아미노산 154 내지 176에 상응하는 영역 1, 서열식별번호: 6의 아미노산 614 내지 658에 상응하는 영역 2, 서열식별번호: 6의 아미노산 731 내지 803에 상응하는 영역 3, 서열식별번호: 6의 아미노산 807 내지 846에 상응하는 영역 4, 서열식별번호: 6의 아미노산 872 내지 885에 상응하는 영역 5, 및 서열식별번호: 6의 아미노산 903 내지 1004에 상응하는 영역 6으로 이루어진 군으로부터 선택된 영역에서 어떠한 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)도 포함하지 않는다. 대안적으로, 본원에 기재된 바와 같은 크산탄 리아제 변이체는 영역 1, 2, 3, 4, 5 및 6 외부의 위치에서는 어떠한 아미노산 변경도 포함하지 않는 것이다. 이러한 측면에서, 크산탄 리아제 변이체는 따라서 영역 7, 영역 8, 영역 9, 영역 10, 영역 11, 영역 12, 및 영역 13으로 이루어진 군으로부터 선택된 영역에서 어떠한 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)도 포함하지 않는다. 그러나 엔도글루카나제 변이체는 영역 1-6 중 임의의 것에서 적어도 1개의 변경 및 영역 7-13 중 어느 하나에서 적어도 1개의 변경을 포함하는 것이 바람직하다.
일부 측면에서, 본원에 기재된 바와 같은 크산탄 리아제 변이체는 (i) 영역 3 및 5; (ii) 영역 3, 5 및 12; (iii) 영역 8, 및 9; (iv) 영역 2, 3, 및 5; (v) 영역 2, 3, 5, 및 12; (vi) 영역 3, 5, 8, 9, 및 12; (vii) 영역 2, 3, 5, 8, 및 9; (viii) 3, 5, 8, 9, 및 12; (ix) 2, 3, 5, 8, 9, 및 12; (x) 영역 3; (xi) 영역 3, 4 및 5; (xii) 영역 7, 8 및 9; (xiii) 영역 12 및 13; (xiv) 영역 3, 4, 5, 8, 9, 및 12; (xv) 영역 8, 9, 12, 및 13; (xvi) 영역 7, 8, 9, 12, 및 13; (xvii) 영역 3, 4, 5, 7, 8, 9, 및 12; 및 (xviii) 영역 3, 4, 5, 7, 8, 9, 12, 및 13의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 포함하는 것이며, 여기서 상기 변이체는 바람직하게는 언급된 것 외의 다른 영역에서 어떠한 변경도 갖지 않는다.
일부 측면에서, 세제 조성물은 서열식별번호: 6의 위치: 155, 159, 620, 624, 626, 631, 635, 645, 649, 650, 656, 738, 745, 746, 748, 752, 753, 754, 757, 764, 769, 774, 775, 777, 779, 782, 785, 786, 789, 792, 796, 799, 800, 801, 819, 824, 843, 845, 875, 903, 911, 912, 915, 919, 921, 923, 925, 927, 928, 930, 932, 933, 941, 966, 967, 991 및 998로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 크산탄 리아제 변이체를 포함한다.
일부 측면에서, 본 발명은 Y155E, A159P, K620R, A624E, A626G, T631N, T631E, S635E, S635T, S635Q, A645S, T649V, T649K, T649R, Q650G, I656V, G738L, K745R, F746L, L748T, P752R, P752K, G753E, G753Q, G753S, S754E, S754L, S754Q, S754R, S757D, S757P, S757E, P764V, P764K, A769D, A769T, A769R, A769S, A769E, A769Q, A769*, A774V, L775M, L775Y, L775A, L775I, L775S, L775F, L775Q, D777K, D777R, P779V, Y782I, A785T, N786K, G789R, K792W, K792Y, K792V, K792A, N796Q, A799H, V800P, D801G, K819R, K819T, K824R, A843P, D845E, 875T, K875E, T903A, T903Q, A911V, A911M, A911S, A912T, A912I, A912Y, T915Q, T915S, T915V, T915A, T919F, T919G, T919D, T921R, T921S, T923H, T923D, T925Q, T925D, T925R, T927K, D928W, Y930H, Y930L, Y930F, A932P, D933M, G941E, G941D, A966P, A967D, N991D 및 V998K로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 치환을 갖는 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
일부 측면에서, 본 발명은 624, 635, 649, 656, 738, 753, 754, 757, 769, 775, 777, 801, 843 및 875로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
일부 측면에서, 본 발명은 A624E, S635E, T649K, I656V, G738L, G753E, S754E, S754R, S757D, A769D, L775A, D777R, D801G, A843P 및 K875T로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 치환을 갖는 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
일부 측면에서, 영역 7, 8, 9, 10, 11, 12 및 13으로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 1개의 영역의 1개 이상의 위치에서의 변경은 서열식별번호: 6의 9, 15, 18, 46, 58, 66, 89, 95, 100, 106, 109, 183, 188, 190, 203, 204, 221, 229, 234, 238, 240, 242, 243, 257, 258, 284, 291, 293, 316, 317, 320, 324, 329, 333, 339, 341, 352, 354, 360, 372, 377, 399, 400, 419, 440, 450, 451, 454, 458, 481, 492, 505, 533, 567, 568, 576, 578, 579, 582, 664, 672, 703, 722, 726, 727, 728, 851, 855, 856, 867, 887, 892, 899, 900, 901, 902, 915, 1008 및 1016으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 변경이다. 크산탄 리아제 변이체는 예를 들어 이들 위치 중 2개 이상에서, 예를 들어 이들 위치 중 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개 또는 10개에서 변경을 포함할 수 있다.
일부 측면에서, 영역 7, 8, 9, 10, 11, 12 및 13으로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 1개의 영역의 1개 이상의 위치에서의 변경은 서열식별번호: 6의 K9R, N15T, T18D, L46D, A58L, S66H, Q89Y, K95E, S100D, N106Y, Q109R, Q109D, Q109F, Q109K, Q109A, K183Q, K183R, V188I, A190Q, A203P, K204R, A221P, E229N, E229S, E229V, I234V, I238W, I238L, I238M, I240W, N242S, G243V, Y257W, R258E, R284G, K291R, A293G, A293P, K316R, R317K, K320R, L324Q, K329R, K333R, L339M, I341P, V352I, S354P, K360G, K360R, Q372H, F377Y, N399K, K400R, F419Y, N440K, D450P, K451E, K451R, A454V, D458S, K481R, A492H, A492L, T505I, L533I, K567R, G568A, S578K, S578N, S578R, S579R, S579K, S582K, T664K, N672D, I703L, I722F, P726Q, T727P, M728V, S851F, K855R, E856D, P867S, K887R, N892Y, N892W, N892F, G899S, I900G, D901A, T902F, N1008D 및 K1016T로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 치환을 포함한다. 크산탄 리아제 변이체는 예를 들어 이들 치환 중 2개 이상, 예를 들어 상기 치환 중 3개, 4개, 5개, 6개, 7개, 8개, 9개 또는 10개를 포함할 수 있다.
본 발명의 세제 조성물의 일부 측면에서, 크산탄 리아제 변이체는 영역 1, 2, 3, 4, 5 및 6으로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 1개의 영역의 1개 이상의 위치에서의 변경, 및 영역 7, 8, 9, 10, 11, 12 및 13으로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 1개의 영역의 1개 이상의 위치에서의 변경을 포함한다. 한 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 위치 624, 631, 635, 649, 656, 738, 752, 753, 754, 757, 769, 775, 777, 800, 801, 843, 875, 911 및 915로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 변경, 및 위치 89, 100, 190, 229, 234, 352, 360, 399, 440, 458, 492, 567, 582, 664, 672, 703, 728, 892, 1008 및 1016으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 변경을 포함한다.
변이체는, 예를 들어, 서열식별번호: 6의 위치 624, 631, 635, 649, 656, 738, 752, 753, 754, 757, 769, 775, 777, 800, 801, 843, 875, 911 및 915로 이루어진 군으로부터 선택된 2개 이상의 위치, 예를 들어 3개, 4개, 5개 이상의 위치에서의 변경, 및 위치 89, 100, 190, 229, 234, 352, 360, 399, 440, 458, 492, 567, 582, 664, 672, 703, 728, 892, 1008 및 1016으로 이루어진 군으로부터 선택된 2개 이상의 위치, 예를 들어 2개, 3개, 4개, 5개 이상의 위치에서의 변경을 포함할 수 있다.
이러한 측면에서 변경을 위한 바람직한 위치는 서열식별번호: 6의 위치 624, 635, 649, 656, 738, 753, 754, 757, 769, 775, 777, 801, 843 및 875로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치 및 위치 100, 190, 229, 234, 360, 399, 440, 458, 492, 567, 582, 672, 892 및 1008로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치를 포함한다.
이러한 측면의 한 실시양태에서, 크산탄 리아제 변이체는 Q89Y, S100D, A190Q, E229S, I234V, V352I, K360G, N399K, N440K, D458S, A492H, A492L, K567R, S582K, T664K, N672D, I703L, M728V, N892Y N1008D 및 K1016T로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 치환, 및 A624E, T631N, S635E, T649K, I656V, G738L, P752K, P752R, G753E, S754E, S754R, S757D, A769D, L775A, D777R, V800P, D801G, A843P, K875T, A911V 및 T915A로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 치환을 포함한다. 변이체는, 예를 들어, Q89Y, S100D, A190Q, E229S, I234V, V352I, K360G, N399K, N440K, D458S, A492H, A492L, K567R, S582K, T664K, N672D, I703L, M728V, N892Y N1008D 및 K1016T로 이루어진 군으로부터 선택된 2개 이상의 치환, 예를 들어 3개, 4개, 5개 이상의 치환, 및 A624E, T631N, S635E, T649K, I656V, G738L, P752K, P752R, G753E, S754E, S754R, S757D, A769D, L775A, D777R, V800P, D801G, A843P, K875T, A911V 및 T915A로 이루어진 군으로부터 선택된 2개 이상의 치환, 예를 들어 3개, 4개, 5개 이상의 치환을 포함할 수 있다. 이러한 실시양태에서의 바람직한 치환은 S100D, A190Q, E229S, I234V, K360G, N399K, N440K, D458S, A492H, K567R, S582K, N672D, N892Y 및 N1008D로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 치환, 및 A624E, S635E, T649K, I656V, G738L, G753E, S754E, S754R, S757D, A769D, L775A, D777R, D801G, A843P 및 K875T로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 치환을 포함한다.
이러한 변이체의 비제한적 예는 하기를 포함한다:
일부 측면에서, 본 발명은 서열식별번호: 6의 위치: 9, 15, 46, 58, 66, 89, 95, 100, 106, 109, 183, 188, 190, 203, 204, 221, 229, 234, 238, 240, 242, 243, 257, 258, 291, 293, 316, 320, 324, 329, 333, 339, 341, 352, 354, 360, 377, 400, 419, 450, 451, 454, 481, 492, 567, 568, 578, 579, 664, 672, 855, 887 및 892로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
일부 측면에서, 본 발명은 K9R, N15T, L46D, A58L, S66H, Q89Y, K95E, S100D, N106Y, Q109R, Q109D, Q109F, Q109K, Q109A, K183Q, K183R, V188I, A190Q, A203P, K204R, A221P, E229N, E229S, I234V, I238W, I238L, I238M, I240W, N242S, G243V, Y257W, R258E, K291R, A293G, A293P, K316R, K320R, L324Q, K329R, K333R, L339M, I341P, V352I, S354P, K360R, F377Y, K400R, F419Y, D450P, K451E, K451R, A454V, K481R, A492L, K567R, G568A, S578K, S578R, S579R, S579K, T664K, N672D, K855R, K887R, N892Y, N892W 및 N892F로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 치환을 갖는 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
일부 측면에서, 본 발명은 서열식별번호: 6의 위치: 190, 229, 234, 440, 582, 624, 631, 635, 672, 703, 738, 752, 753, 754, 757, 769, 775, 801, 875, 892, 및 그의 임의의 조합, 바람직하게는 229+672+752+753+769+775+801+875+892; 229+672+753+754+769+775+801+875+892; 229+672+752+753+754+769+775+801+875+892; 190+229+234+624+672+753+754+769+775+801+875; 190+229+631+672+703+752+753+769+775+801+875; 190+229+234+582+672+753+754+757+769+775+801+875+892; 229+440+582+624+635+672+738+753+754+757+769+775+801+875+892; 또는 100+229+360+458+582+672+753+754+757+769+775+801+843+875+892+1008로 이루어진 군으로부터 선택된 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
일부 측면에서, 본 발명은 서열식별번호: 6의 하기 변경: E229N+N672D+P752K+G753E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; E229S+N672D+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; E229S+N672D+P752R+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; A190Q+E229S+I234V+A624E+N672D+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T; A190Q+E229S+T631N+N672D+I703L+P752K+G753E+A769D+L775A+D801G+K875T; A190Q+E229S+I234V+S582K+N672D+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; E229S+N440K+S582K+A624E+S635E+N672D+G738L+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; 또는 S100D+E229S+K360G+D458S+S582K+N672D+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+A843P+K875T+N892Y+N1008D로 이루어진 군으로부터 선택된 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
일부 측면에서, 본 발명은 크산탄 검에 대해 활성을 갖는 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이고; 바람직하게는 상기 활성은 크산탄 리아제 EC 4.2.2.12 활성을 포함하고, 추가로 바람직하게는 상기 활성은 크산탄 리아제 EC 4.2.2.12 활성이다.
일부 측면에서, 본 발명은 모 크산탄 리아제 (예를 들어, 서열식별번호: 6을 가짐)와 비교하여 상기 세제 조성물에서 개선된 안정성을 갖는 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
일부 측면에서, 본 발명은 모 크산탄 리아제 대비 >1.0의 반감기 개선 지수 (HIF)를 갖는 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
일부 측면에서, 본 발명은 본 발명에 따른 크산탄 검에 대해 활성을 갖는 단리된 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
일부 측면에서, 본 발명은 서열식별번호: 2에 대해 적어도 61%, 62%, 63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 또는 98% 서열 동일성을 갖고, 서열식별번호: 2의 위치: 559+579+697; 512+559+579+697; 18+71+186+408+579+602+651+688+756; 18+189+408+559+579+688+697+756+921+934; 313+488; 880+905+921+934; 302+313+408+579+602+651+697+880+921+934; 또는 216+313+408+476+579+602+638+651+697+719+880+887+921+934로 이루어진 군으로부터 선택된 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 엔도글루카나제 변이체를 포함하는, 본원에 정의된 바와 같은 세제 조성물에 관한 것이다. 바람직하게는, 엔도글루카나제 변이체는 서열식별번호: 2의 하기 변경: A559N+Y579W+T697G; K512P+A559N+Y579W+T697G; N18G+A71E+A186P+E408D+Y579W+I602T+A651P+A688G+V756Y; N18G+N189K+E408D+A559N+Y579W+A688G+T697G+V756Y+K921R+Y934G; S313D+E408D; R880K+N905D+K921R+Y934G; I302D+S313D+E408D+Y579W+I602T+A651P+T697G+R880K+K921R+Y934G; 및 N216Q+S313D+E408D+D476R+Y579W+I602T+F638N+A651P+T697G+W719R+R880K+T887K+K921R+Y934G로 이루어진 군으로부터 선택된 변경을 갖는다. 특정한 측면에서, 엔도글루카나제 변이체는 상기 언급된 변경 외에 서열식별번호: 2의 모 효소 대비 어떠한 추가의 변경도 갖지 않고, 즉 나머지 서열은 서열식별번호: 2와 동일하다.
일부 측면에서, 본 발명은 서열식별번호: 6에 대해 적어도 61%, 62%, 63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 또는 98% 서열 동일성을 갖고, 서열식별번호: 6의 위치: 229+672+752+753+769+775+801+875+892; 229+672+753+754+769+775+801+875+892; 229+672+752+753+754+769+775+801+875+892; 190+229+234+624+672+753+754+769+775+801+875; 190+229+631+672+703+752+753+769+775+801+875; 190+229+234+582+672+753+754+757+769+775+801+875+892; 229+440+582+624+635+672+738+753+754+757+769+775+801+875+892; 또는 100+229+360+458+582+672+753+754+757+769+775+801+843+875+892+1008로 이루어진 군으로부터 선택된 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 크산탄 리아제 변이체를 포함하는, 본원에 정의된 바와 같은 세제 조성물에 관한 것이다. 바람직하게는, 크산탄 리아제 변이체는 서열식별번호: 6의 하기 변경: E229N+N672D+P752K+G753E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; E229S+N672D+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; E229S+N672D+P752R+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; A190Q+E229S+I234V+A624E+N672D+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T; A190Q+E229S+T631N+N672D+I703L+P752K+G753E+A769D+L775A+D801G+K875T; A190Q+E229S+I234V+S582K+N672D+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; E229S+N440K+S582K+A624E+S635E+N672D+G738L+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; 또는 S100D+E229S+K360G+D458S+S582K+N672D+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+A843P+K875T+N892Y+N1008D로 이루어진 군으로부터 선택된 변경을 갖는다. 특정한 측면에서, 크산탄 리아제 변이체는 상기 언급된 변경 외에 서열식별번호: 6의 모 효소 대비 어떠한 추가의 변경도 갖지 않고, 즉 나머지 서열은 서열식별번호: 6과 동일하다.
다양한 실시양태에서, 바람직한 엔도글루카나제 변이체는 바람직한 크산탄 리아제 변이체와 조합된다. 일부 측면에서, 세제 조성물은 따라서 하기를 포함한다:
(A) 서열식별번호: 2에 대해 적어도 61%, 62%, 63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 또는 98% 서열 동일성을 갖고, 서열식별번호: 2의 위치: 559+579+697; 512+559+579+697; 18+71+186+408+579+602+651+688+756; 18+189+408+559+579+688+697+756+921+934; 313+488; 880+905+921+934; 302+313+408+579+602+651+697+880+921+934; 또는 216+313+408+476+579+602+638+651+697+719+880+887+921+934로 이루어진 군으로부터 선택된 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖고, 바람직하게는 서열식별번호: 2의 하기 변경: (A1) A559N+Y579W+T697G; (A2) K512P+A559N+Y579W+T697G; (A3) N18G+A71E+A186P+E408D+Y579W+I602T+A651P+A688G+V756Y; (A4) N18G+N189K+E408D+A559N+Y579W+A688G+T697G+V756Y+K921R+Y934G; (A5) S313D+E408D; (A6) R880K+N905D+K921R+Y934G; (A7) I302D+S313D+E408D+Y579W+I602T+A651P+T697G+R880K+K921R+Y934G; 및 (A8) N216Q+S313D+E408D+D476R+Y579W+I602T+F638N+A651P+T697G+W719R+R880K+T887K+K921R+Y934G로 이루어진 군으로부터 선택된 변경을 갖는 것으로부터 선택된 엔도글루카나제 변이체; 및
(B) 서열식별번호: 6에 대해 적어도 61%, 62%, 63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 또는 98% 서열 동일성을 갖고, 서열식별번호: 6의 위치: 229+672+752+753+769+775+801+875+892; 229+672+753+754+769+775+801+875+892; 229+672+752+753+754+769+775+801+875+892; 190+229+234+624+672+753+754+769+775+801+875; 190+229+631+672+703+752+753+769+775+801+875; 190+229+234+582+672+753+754+757+769+775+801+875+892; 229+440+582+624+635+672+738+753+754+757+769+775+801+875+892; 또는 100+229+360+458+582+672+753+754+757+769+775+801+843+875+892+1008로 이루어진 군으로부터 선택된 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖고, 바람직하게는 서열식별번호: 6의 하기 변경: (B1) E229N+N672D+P752K+G753E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; (B2) E229S+N672D+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; (B3) E229S+N672D+P752R+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; (B4) A190Q+E229S+I234V+A624E+N672D+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T; (B5) A190Q+E229S+T631N+N672D+I703L+P752K+G753E+A769D+L775A+D801G+K875T; (B6) A190Q+E229S+I234V+S582K+N672D+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; (B7) E229S+N440K+S582K+A624E+S635E+N672D+G738L+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; 및 (B8) S100D+E229S+K360G+D458S+S582K+N672D+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+A843P+K875T+N892Y+N1008D로 이루어진 군으로부터 선택된 변경을 갖는 크산탄 리아제 변이체.
일부 측면에서, 엔도글루카나제 및/또는 크산탄 리아제 변이체는 상기에서 명백하게 언급된 것 외에 어떠한 추가의 치환도 포함하지 않고, 즉 나머지 서열은 각각 서열식별번호: 2 및 서열식별번호: 6에 제시된 바와 같은 모 효소의 것과 동일하다.
일부 측면에서, 본 발명의 세제 조성물에서, 상기 정의된 바와 같은 엔도글루카나제 변이체 A1은 상기 정의된 바와 같은 크산탄 리아제 변이체 B1, B2, B3, B4, B5, B6, B7 및 B8 중 어느 하나와 조합될 수 있고, 여기서 각각의 효소는 바람직하게는 각각 서열식별번호: 2 및 서열식별번호: 6에 대해 적어도 90%, 바람직하게는 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96% 또는 97% 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 본원에 명백하게 언급된 치환을 제외하고는 그의 각각의 모 서열과 동일하다.
일부 측면에서, 본 발명의 세제 조성물에서, 상기 정의된 바와 같은 엔도글루카나제 변이체 A2는 상기 정의된 바와 같은 크산탄 리아제 변이체 B1, B2, B3, B4, B5, B6, B7 및 B8 중 어느 하나와 조합될 수 있고, 여기서 각각의 효소는 바람직하게는 각각 서열식별번호: 2 및 서열식별번호: 6에 대해 적어도 90%, 바람직하게는 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96% 또는 97% 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 본원에 명백하게 언급된 치환을 제외하고는 그의 각각의 모 서열과 동일하다.
일부 측면에서, 본 발명의 세제 조성물에서, 상기 정의된 바와 같은 엔도글루카나제 변이체 A3은 상기 정의된 바와 같은 크산탄 리아제 변이체 B1, B2, B3, B4, B5, B6, B7 및 B8 중 어느 하나와 조합될 수 있고, 여기서 각각의 효소는 바람직하게는 각각 서열식별번호: 2 및 서열식별번호: 6에 대해 적어도 90%, 바람직하게는 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96% 또는 97% 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 본원에 명백하게 언급된 치환을 제외하고는 그의 각각의 모 서열과 동일하다.
일부 측면에서, 본 발명의 세제 조성물에서, 상기 정의된 바와 같은 엔도글루카나제 변이체 A4는 상기 정의된 바와 같은 크산탄 리아제 변이체 B1, B2, B3, B4, B5, B6, B7 및 B8 중 어느 하나와 조합될 수 있고, 여기서 각각의 효소는 바람직하게는 각각 서열식별번호: 2 및 서열식별번호: 6에 대해 적어도 90%, 바람직하게는 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96% 또는 97% 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 본원에 명백하게 언급된 치환을 제외하고는 그의 각각의 모 서열과 동일하다.
일부 측면에서, 본 발명의 세제 조성물에서, 상기 정의된 바와 같은 엔도글루카나제 변이체 A5는 상기 정의된 바와 같은 크산탄 리아제 변이체 B1, B2, B3, B4, B5, B6, B7 및 B8 중 어느 하나와 조합될 수 있고, 여기서 각각의 효소는 바람직하게는 각각 서열식별번호: 2 및 서열식별번호: 6에 대해 적어도 90%, 바람직하게는 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96% 또는 97% 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 본원에 명백하게 언급된 치환을 제외하고는 그의 각각의 모 서열과 동일하다.
일부 측면에서, 본 발명의 세제 조성물에서, 상기 정의된 바와 같은 엔도글루카나제 변이체 A6은 상기 정의된 바와 같은 크산탄 리아제 변이체 B1, B2, B3, B4, B5, B6, B7 및 B8 중 어느 하나와 조합될 수 있고, 여기서 각각의 효소는 바람직하게는 각각 서열식별번호: 2 및 서열식별번호: 6에 대해 적어도 90%, 바람직하게는 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96% 또는 97% 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 본원에 명백하게 언급된 치환을 제외하고는 그의 각각의 모 서열과 동일하다.
일부 측면에서, 본 발명의 세제 조성물에서, 상기 정의된 바와 같은 엔도글루카나제 변이체 A7은 상기 정의된 바와 같은 크산탄 리아제 변이체 B1, B2, B3, B4, B5, B6, B7 및 B8 중 어느 하나와 조합될 수 있고, 여기서 각각의 효소는 바람직하게는 각각 서열식별번호: 2 및 서열식별번호: 6에 대해 적어도 90%, 바람직하게는 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96% 또는 97% 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 본원에 명백하게 언급된 치환을 제외하고는 그의 각각의 모 서열과 동일하다.
일부 측면에서, 본 발명의 세제 조성물에서, 상기 정의된 바와 같은 엔도글루카나제 변이체 A8은 상기 정의된 바와 같은 크산탄 리아제 변이체 B1, B2, B3, B4, B5, B6, B7 및 B8 중 어느 하나와 조합될 수 있고, 여기서 각각의 효소는 바람직하게는 각각 서열식별번호: 2 및 서열식별번호: 6에 대해 적어도 90%, 바람직하게는 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96% 또는 97% 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 본원에 명백하게 언급된 치환을 제외하고는 그의 각각의 모 서열과 동일하다.
일부 측면에서, 본 발명의 엔도글루카나제 변이체 및 크산탄 리아제 변이체의 바람직한 조합은 표 34-36에 개시된 조합이다.
일부 측면에서, 본 발명은 1종 이상의 추가의 세제 성분, 바람직하게는 계면활성제를 추가적으로 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
일부 측면에서, 본 발명은 본 발명의 조성물의 용도에 관한 것이며, 여기서 용도는 크산탄 검 분해 용도 및 세정 과정, 예컨대 세탁 또는 경질 표면 세정 예컨대 식기 세척에서의 용도로 이루어진 군으로부터 선택된다.
일부 측면에서, 본 발명은 추가로 크산탄 검을 분해하기 위한, 텍스타일 및/또는 경질 표면을 세척 또는 세정하기 위한, 예컨대 식기 세척을 위한 본 발명의 세제 조성물의 용도에 관한 것이며, 여기서 조성물은 효소 세제력 이익을 갖는다.
일부 측면에서, 본 발명은 또한 본 발명의 세제 조성물을 사용하여 크산탄 검을 분해하는 방법에 관한 것이며, 여기서 크산탄 검은 경질 표면 또는 텍스타일의 표면 상에 존재한다.
서열 목록의 개관
서열식별번호: 1은 파에니바실루스 종의 균주로부터의 모 성숙 엔도글루카나제의 DNA 서열이다.
서열식별번호: 2는 서열식별번호: 1에 의해 코딩된 성숙 폴리펩티드의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 3은 바실루스 리케니포르미스(Bacillus licheniformis)로부터의 알파-아밀라제 분비 신호의 DNA 서열이다.
서열식별번호: 4는 바실루스 리케니포르미스로부터의 알파-아밀라제 분비 신호의 아미노산 서열이다.
서열식별번호: 5는 파에니바실루스 종의 균주로부터의 모 성숙 크산탄 리아제의 DNA 서열이다.
서열식별번호: 6은 서열식별번호: 5에 의해 코딩된 성숙 폴리펩티드의 아미노산 서열이다.
정의
cDNA: 용어 "cDNA"는 진핵 또는 원핵 세포로부터 수득된 성숙, 스플라이싱된 mRNA 분자로부터 역전사에 의해 제조될 수 있는 DNA 분자를 의미한다. cDNA는 상응하는 게놈 DNA에 존재할 수 있는 인트론 서열이 결여되어 있다. 초기의, 1차 RNA 전사체는 성숙 스플라이싱된 mRNA로의 출현 전에, 스플라이싱을 포함한 일련의 단계를 통해 프로세싱되는 mRNA의 전구체이다.
세정 또는 세제 적용분야: 용어 "세정 또는 세제 적용분야"는 수동, 기계 또는 자동화에 의한 경질 표면 또는 텍스타일의 세정 또는 세척 목적으로 임의의 조성물 중 적용분야의 엔도글루카나제를 적용하는 것을 의미한다.
세정 조성물: 용어 "세정 조성물"은 세정하고자 하는 물품, 예컨대 텍스타일, 식기, 및 경질 표면으로부터 바람직하지 않은 화합물의 제거에서의 용도가 발견된 조성물을 지칭한다. 용어는 특정한 유형의 목적하는 세정 조성물 및 제품의 형태 (예를 들어, 액체, 겔, 분말, 과립화, 페이스트, 또는 분무 조성물)에 대해 선택된 임의의 물질/화합물을 포괄하고, 세제 조성물 (예를 들어, 액체 및/또는 고체 세탁 세제 및 미분 직물 세제; 경질 표면 세정 제제, 예컨대 유리, 목재, 세라믹 및 금속 주방 조리대 및 창문용; 카펫 클리너; 오븐 클리너; 직물 청정제; 직물 유연제; 및 텍스타일 및 세탁 프리-스팟터, 뿐만 아니라 식기 세척 세제)을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 엔도글루카나제 및 크산탄 리아제에 더하여, 세제 제제는 1종 이상의 추가의 효소 (예컨대 크산탄 리아제, 프로테아제, 아밀라제, 리파제, 큐티나제, 셀룰라제, 엔도글루카나제, 크실로글루카나제, 펙티나제, 펙틴 리아제, 크산타나제, 퍼옥시다제, 할로퍼옥시게나제, 카탈라제 및 만난아제, 또는 그의 임의의 혼합물), 및/또는 성분 예컨대 계면활성제, 빌더, 킬레이트화제 또는 킬레이트화 작용제, 표백 시스템 또는 표백 성분, 중합체, 직물 컨디셔너, 폼 부스터, 비누거품 억제제, 염료, 퍼퓸, 갈화 억제제, 광학 증백제, 살박테리아제, 살진균제, 오염 현탁화제, 부식방지제, 효소 억제제 또는 안정화제, 효소 활성화제, 트랜스퍼라제(들), 가수분해 효소, 옥시도 리덕타제, 블루잉제 및 형광 염료, 항산화제, 및 가용화제를 함유할 수 있다.
코딩 서열: 용어 "코딩 서열"은 폴리펩티드의 아미노산 서열을 직접적으로 구체화하는 폴리뉴클레오티드를 의미한다. 코딩 서열의 경계는 일반적으로 개시 코돈, 예컨대 ATG, GTG, 또는 TTG에서 시작하고 정지 코돈, 예컨대 TAA, TAG, 또는 TGA에서 종결되는 오픈 리딩 프레임에 의해 결정된다. 코딩 서열은 게놈 DNA, cDNA, 합성 DNA, 또는 그의 조합일 수 있다.
색상 명확화: 세척 및 착용 동안 느슨해지거나 파손된 섬유가 직물 표면에 축적될 수 있다. 하나의 결과는 직물의 색상이 표면 오염으로 인해 덜 밝거나 또는 덜 강하게 나타날 수 있다는 것이다. 텍스타일로부터 느슨해지거나 또는 파손된 섬유를 제거하면 부분적으로 원래의 색상 및 텍스타일의 외양이 복원될 것이다. 본원에 사용된 용어 "색상 명확화"는, 텍스타일의 초기 색상을 부분적으로 복원하는 것을 의미한다.
제어 서열: 용어 "제어 서열"은 본 발명의 성숙 폴리펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드의 발현을 위해 필요한 핵산 서열을 의미한다. 각각의 제어 서열은 폴리펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드에 대해 천연 (즉, 동일한 유전자로부터의 것) 또는 외래 (즉, 상이한 유전자로부터의 것)일 수 있거나 또는 서로 천연 또는 외래일 수 있다. 이러한 제어 서열은 리더, 폴리아데닐화 서열, 프로펩티드 서열, 프로모터, 신호 펩티드 서열, 및 전사 종결인자를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 최소한, 제어 서열은 프로모터, 및 전사 및 번역 정지 신호를 포함한다. 폴리펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드의 코딩 영역과 제어 서열의 라이게이션을 용이하게 하는 특정 제한 부위를 도입하기 위해 링커가 제어 서열에 제공될 수 있다.
에 상응하는: 본원에 사용된 용어 "에 상응하는"은 특정 아미노산 서열을 참조하는 서열의 특정 아미노산을 결정하는 방법을 지칭한다. 예를 들어 본 발명의 목적상, 특정 아미노산 위치를 참조할 때, 통상의 기술자는 특정 아미노산이 또 다른 아미노산 서열에서 관심대상이 될 수 있는지 결정하기 위해, 참조하고자 하는 상기 아미노산 서열에 상기 또 다른 아미노산 서열을 정렬시킬 수 있을 것이다. 예를 들어 서열식별번호: 2에 제시된 바와 같은 서열 또는 본원에 열거된 임의의 다른 아미노산 서열과 또 다른 아미노산 서열의 정렬은, 본원의 다른 곳에 기재되어 있다. 대안적인 정렬 방법이 사용될 수 있고, 이는 통상의 기술자에게 널리 공지되어 있다.
크산탄 검 분해 및 크산탄 검 분해 활성: 용어 "크산탄 검 분해" 및 "크산탄 검 분해 활성"은 상호교환가능하게 사용되고, 크산탄 검의 보다 작은 성분으로의 탈중합, 분해 또는 절단으로 정의된다. 크산탄 검의 분해는 1개 이상의 측쇄 사카라이드의 제거, 크산탄 검의 백본의 보다 작은 성분으로의 컷팅 또는 1개 이상의 측쇄 사카라이드의 제거 및 크산탄 검의 백본의 보다 작은 성분으로의 컷팅일 수 있다. 크산탄 검의 분해를 측정하기 위한 바람직한 검정은 본원의 실시예 3 및 7에 기재된 바와 같은 환원당 검정이다. 크산탄 검 분해 활성의 비제한적 예는 엔도글루카나제 EC 3.2.1.4 활성 및/또는 크산탄 리아제 EC 4.2.2.12 활성을 포함한다.
세제 성분: 용어 "세제 성분"은 세제 조성물에 사용될 수 있는 화학물질의 유형을 의미하는 것으로 본원에 정의된다. 세제 성분의 예는 계면활성제, 굴수성제, 빌더, 코-빌더, 킬레이트화제 또는 킬레이트화 작용제, 표백 시스템 또는 표백 성분, 중합체, 직물 색조부여제, 직물 컨디셔너, 폼 부스터, 비누거품 억제제, 분산제, 이염 억제제, 형광 미백제, 퍼퓸, 광학 증백제, 살박테리아제, 살진균제, 오염 현탁화제, 방오 중합체, 재부착방지제, 효소 억제제 또는 안정화제, 효소 활성화제, 항산화제, 및 가용화제이다. 세제 조성물은 임의의 유형의 세제 성분 중 1종 이상을 포함할 수 있다.
세제 조성물: 용어 "세제 조성물"은 세정하고자 하는 물품, 예컨대 텍스타일, 식기, 및 경질 표면으로부터 바람직하지 않은 화합물의 제거에서의 용도가 발견된 조성물을 지칭한다. 세제 조성물은 예를 들어 가정용 세정 및 산업용 세정 둘 다를 위해 텍스타일, 식기 및 경질 표면을 세정하는데 사용될 수 있다. 용어는 특정한 유형의 목적하는 세정 조성물 및 제품의 형태 (예를 들어, 액체, 겔, 분말, 과립화, 페이스트, 또는 분무 조성물)에 대해 선택된 임의의 물질/화합물을 포괄하고, 세제 조성물 (예를 들어, 액체 및/또는 고체 세탁 세제 및 미분 직물 세제; 경질 표면 세정 제제, 예컨대 유리, 목재, 세라믹 및 금속 주방 조리대 및 창문용; 카펫 클리너; 오븐 클리너; 직물 청정제; 직물 유연제; 및 텍스타일 및 세탁 프리-스팟터, 뿐만 아니라 식기 세척 세제)을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 본원에 기재된 바와 같은 GH9 엔도글루카나제 및/또는 크산탄 리아제를 함유하는 것에 더하여, 세제 제제는 1종 이상의 추가의 효소 (예컨대 크산탄 리아제, 프로테아제, 아밀라제, 리파제, 큐티나제, 셀룰라제, 엔도글루카나제, 크실로글루카나제, 펙티나제, 펙틴 리아제, 크산타나제, 퍼옥시다제, 할로퍼옥시게나제, 카탈라제 및 만난아제, 또는 그의 임의의 혼합물), 및/또는 성분 예컨대 계면활성제, 빌더, 킬레이트화제 또는 킬레이트화 작용제, 표백 시스템 또는 표백 성분, 중합체, 직물 컨디셔너, 폼 부스터, 비누거품 억제제, 염료, 퍼퓸, 갈화 억제제, 광학 증백제, 살박테리아제, 살진균제, 오염 현탁화제, 부식방지제, 효소 억제제 또는 안정화제, 효소 활성화제, 트랜스퍼라제(들), 가수분해 효소, 옥시도 리덕타제, 블루잉제 및 형광 염료, 항산화제, 및 가용화제를 함유할 수 있다.
식기 세척: 용어 "식기 세척"은, 예를 들어, 수동 또는 자동 식기 세척에 의해 식기를 세척하는 모든 형태를 지칭한다. 식기를 세척하는 것은 크로커리, 예컨대 플레이트, 컵, 글라스, 보울, 모든 형태의 커트러리, 예컨대 스푼, 나이프, 포크 및 서빙 기구 뿐만 아니라 세라믹, 플라스틱, 금속, 자기, 유리 및 아크릴의 모든 형태의 세정을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
식기 세척 조성물: 용어 "식기 세척 조성물"은 경질 표면을 세정하기 위한 모든 형태의 조성물을 지칭한다. 본 발명은 임의의 특정한 유형의 식기 세척 조성물 또는 임의의 특정한 세제로 제한되지 않는다.
엔도글루카나제: 용어 "엔도글루카나제" 또는 "EG"는 셀룰로스, 셀룰로스 유도체 (예컨대 카르복시메틸 셀룰로스 및 히드록시에틸 셀룰로스), 리케닌의 1,4-베타-D-글리코시드 연결, 혼합된 베타-1,3 글루칸 예컨대 곡류 베타-D-글루칸, 크실로글루칸, 크산탄 및 다른 식물 물질 함유 셀룰로스 성분의 베타-1,4 결합의 엔도가수분해를 촉매하는 엔도-1,4-(1,3;1,4)-베타-D-글루칸 4-글루카노히드롤라제 (EC 3.2.1.4)를 의미한다. 엔도글루카나제 활성은 기질 점도의 감소 또는 환원당 검정 (Zhang et al., 2006, Biotechnology Advances 24: 452-481)에 의해 결정되는 환원 말단의 증가를 측정함으로써 결정될 수 있다. 엔도글루카나제 활성을 측정하기 위한 바람직한 검정은 본원의 실시예 3 및 7에 기재된 바와 같은 환원당 검정이다. 엔도글루카나제의 비제한적 예는 서열식별번호: 2를 갖는 성숙 모 엔도글루카나제를 포함한다.
효소 세제력 이익: 용어 "효소 세제력 이익"은 효소가 그러한 효소를 함유하지 않는 동일한 세제와 비교하여 세제에 부가할 수 있는 유리한 효과로서 본원에 정의된다. 효소에 의해 제공될 수 있는 중요한 세제력 이익은 세척 및 또는 세정 후 전혀 보이지 않거나 거의 보이지 않는 오염을 동반한 얼룩을 제거하는 것, 재부착방지로도 불리는 효과인, 세척 과정에서 방출된 오염의 재부착을 방지 또는 감소시키는 것, 미백으로도 불리는 효과인, 원래는 백색이었지만 반복적인 사용 및 세척 후에 회색빛 또는 황색빛의 외관이 생성된 텍스타일의 백색도를 완전히 또는 부분적으로 복원시키는 것이다. 촉매적 얼룩 제거 또는 오염의 재부착 방지와 직접적으로 관련되지 않는 텍스타일 관리 이익이 또한 효소 세제력 이익에 중요하다. 이러한 텍스타일 관리 이익의 예는, 이염 억제 또는 역염색방지로도 불리는 효과인, 한 직물에서 또 다른 직물로의 이염 또는 동일한 직물의 또 다른 부분으로의 이염의 방지 또는 감소, 보풀형성방지로도 불리는 효과인, 직물 표면으로부터 돌출되거나 파손된 섬유를 제거하여 보풀형성 경향의 감소 또는 이미 존재하는 보풀 또는 솜털의 제거, 직물-부드러움 개선, 직물의 색상 명확화, 및 직물 또는 의류의 섬유에 갇혀 있는 미립자 오염의 제거이다. 효소적 표백이 추가의 효소 세제력 이익이며, 여기서 촉매 활성은 일반적으로 표백 성분, 예컨대 과산화수소 또는 다른 과산화물의 형성을 촉매하기 위해 사용된다.
발현: 용어 "발현"은 전사, 전사후 변형, 번역, 번역후 변형, 및 분비를 포함하나 이에 제한되지는 않는, 폴리펩티드의 생산에 수반되는 임의의 단계를 포함한다.
발현 벡터: 용어 "발현 벡터"는 폴리펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 포함하고, 그의 발현을 제공하는 제어 서열에 작동가능하게 연결된 선형 또는 원형 DNA 분자를 의미한다.
단편: 용어 "단편"은 성숙 폴리펩티드의 아미노 및/또는 카르복실 말단에 부재하는 1개 이상 (예를 들어 여러개)의 아미노산을 갖는 폴리펩티드를 의미하며; 여기서 단편은 엔도글루카나제 활성을 갖는다. 한 측면에서, 단편은 성숙 폴리펩티드의 아미노산 개수의 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94% 또는 95%를 함유한다.
크산탄 리아제로 사전처리된 크산탄 검에 대해 활성을 갖는 엔도글루카나제 변이체: 용어 "크산탄 리아제로 사전처리된 크산탄 검에 대해 활성을 갖는 엔도글루카나제 변이체" 또는 "크산탄 리아제로 사전처리된 크산탄 검에 대해 활성을 갖고 글리코실 히드롤라제의 GH9 부류에 속하는 엔도글루카나제"는 글리코실 히드롤라제의 GH9 부류에 속하고 크산탄 리아제로 사전처리된 크산탄 검에 대해 활성 (예를 들어, 효소적 활성, 크산탄 분해 활성, 엔도글루카나제 EC 3.2.1.4 활성)을 갖는 도메인을 포함하는 폴리펩티드로 정의된다. 크산탄 리아제로 사전처리된 크산탄 검에 대한 활성을 측정하기 위한 바람직한 검정은 본원의 실시예 3에 개시되어 있다.
크산탄 검에 대해 활성을 갖는 크산탄 리아제 변이체: 용어 "크산탄 검에 대해 활성을 갖는 크산탄 리아제 변이체"는 크산탄의 β-D-만노실-β-D-1,4-글루쿠로노실 결합을 절단하는 (예를 들어, 크산탄 리아제 EC 4.2.2.12 활성) 폴리펩티드로 정의된다. 크산탄 검에 대한 활성을 측정하기 위한 바람직한 검정은 본원의 실시예 7에 개시되어 있다. 크산탄 검에 대해 활성을 갖는 크산탄 리아제 변이체의 예는 이와 같은 크산탄 리아제 폴리펩티드이다. 따라서, 크산탄의 β-D-만노실-β-D-1,4-글루쿠로노실 결합을 절단하는 폴리펩티드.
반감기: 용어 "반감기"는 효소가 주어진 조건의 세트 하에 그의 효소적 활성의 절반을 상실하는데 걸리는 시간이다. 이는 T½로 표시되고, 시간 (h)으로 측정된다. 분해는 지수 붕괴에 따르고 인큐베이션 시간 (시)은 공지되어 있기 때문에, 반감기는 야생형 대조군 및/또는 변이체에 대해 주어진 세제 농도 및 저장 온도에서, 즉 하기 식에 따라 계산될 수 있다:
T1/2 (변이체) = (Ln (0.5)/Ln (RA-변이체/100))*시간
T1/2 (야생형) = (Ln (0.5)/Ln (RA-야생형/100))*시간
여기서 'RA'는 퍼센트 단위의 잔류 활성이고, '시간'은 시간 단위의 인큐베이션 시간이다.
반감기 개선 지수: 용어 "반감기 개선 지수" 또는 "HIF"는 모 폴리펩티드, 예컨대 모 엔도글루카나제와 비교하여 변이체의 반감기의 개선이다. 주어진 저장 조건의 세트 (세제 농도 및 온도) 하에서의 반감기 개선 지수 (HIF)는: HIF = T1/2 (변이체)/T1/2 (야생형)와 같이 계산될 수 있고, 여기서 야생형 (wt)은 변이체와 동일한 저장 조건 (세제 농도 및 인큐베이션 온도) 하에 인큐베이션된다. 야생형과 변이체 사이의 안정성에서의 차이가 너무 커서 동일한 인큐베이션 시간을 사용하여 야생형 및 변이체 둘 다에 대한 반감기를 정확하게 평가할 수 없는 경우에, 야생형 및 변이체에 대한 인큐베이션 시간은 예를 들어 야생형의 경우 1시간 및 가장 안정한 변이체의 경우 >100시간으로 상이하다. 반감기 개선 지수는 또한 반드시 야생형이 아닌 모 크산탄 리아제 (하기 "모"의 정의 참조)의 반감기에 기초하여 계산될 수 있다. HIF를 계산하는 바람직한 방법은 또한 본원의 실시예 3 및 7에 기재되어 있다.
경질 표면 세정: 용어 "경질 표면 세정"은 경질 표면의 세정으로서 본원에 정의되며, 여기서 경질 표면은 바닥, 테이블, 벽, 지붕 등 뿐만 아니라 단단한 물체, 예컨대 차 (차 세척) 및 식기 (식기 세척)의 표면을 포함할 수 있다. 식기 세척은 플레이트, 컵, 유리, 보울, 및 커트러리, 예컨대 스푼, 나이프, 포크, 서빙 기구, 세라믹, 플라스틱, 금속, 자기, 유리 및 아크릴의 세정을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
숙주 세포: 용어 "숙주 세포"는 본 발명의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 핵산 구축물 또는 발현 벡터에 의한 형질전환, 형질감염, 형질도입 등에 감수성인 임의의 세포 유형을 의미한다. 용어 "숙주 세포"는 복제 동안 발생하는 돌연변이로 인해 모 세포와 동일하지 않은 모 세포의 임의의 자손을 포괄한다.
개선된 특성: 용어 "개선된 특성"은 모 효소와 비교하여 개선된, 변이체와 연관된 특징을 의미한다. 이러한 개선된 특성은 촉매 효율, 촉매 속도, 화학적 안정성, 산화 안정성, pH 활성, pH 안정성, 비활성, 저장 조건 하에서의 안정성, 킬레이트화제 안정성, 기질 결합, 기질 절단, 기질 특이성, 기질 안정성, 표면 특성, 열 활성, 및 열안정성을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
개선된 세척 성능: 용어 "개선된 세척 성능"은, 예를 들어 증가된 얼룩 제거에 의해, 모 프로테아제 변이체의 세척 성능에 대비하여 프로테아제 변이체의 세척 성능의 변경을 나타내는 (변이체) 효소 (또한 효소의 블렌드, 반드시 변이체 뿐만 아니라 백본, 및 특정 세정 조성물과 조합된 것 등)로서 본원에 정의된다. 용어 "세척 성능"은 세탁에서의 세척 성능 뿐만 아니라 예를 들어 식기 세척에서의 세척 성능도 포함한다.
단리된: 용어 "단리된"은 자연에서는 발생하지 않는 형태 또는 환경에서의 물질을 의미한다. 단리된 물질의 비제한적 예는 (1) 임의의 비-자연 발생 물질, (2) 자연에서 회합된 자연 발생 성분 중 1종 이상 또는 모두로부터 적어도 부분적으로 제거된, 임의의 효소, 변이체, 핵산, 단백질, 펩티드 또는 보조인자를 포함하나 이에 제한되지는 않는 임의의 물질; (3) 자연에서 발견되는 물질에 대비하여 사람의 손에 의해 변형된 임의의 물질; 또는 (4) 자연 회합된 다른 성분에 대비하여 물질의 양을 증가시킴으로써 변형된 임의의 물질 (예를 들어, 물질을 코딩하는 유전자의 다중 카피; 물질을 코딩하는 유전자와 자연 회합된 프로모터보다 더 강력한 프로모터의 사용)을 포함한다. 단리된 물질은 발효 브로쓰 샘플에 존재할 수 있다.
세탁: 용어 "세탁"은 가정용 세탁 및 산업용 세탁 둘 다에 관한 것이고, 텍스타일을 본 발명의 세정 또는 세제 조성물을 함유하는 용액으로 처리하는 과정을 의미한다. 세탁 과정은 예를 들어 가정용 또는 산업용 세탁기를 사용하여 예를 들어 수행될 수 있거나, 또는 수동으로 수행될 수 있다.
성숙 폴리펩티드: 용어 "성숙 폴리펩티드"는 번역 및 임의의 번역후 변형, 예컨대 N-말단 프로세싱, C-말단 말단절단, 글리코실화, 인산화 등 후의 그의 최종 형태의 폴리펩티드를 의미한다. 한 측면에서, 성숙 폴리펩티드는 서열식별번호: 2의 아미노산 1 내지 1055 또는 서열식별번호: 6의 아미노산 1 내지 1037이다.
숙주 세포가 동일한 폴리뉴클레오티드에 의해 발현된 2개 이상의 상이한 성숙 폴리펩티드 (즉, 상이한 C-말단 및/또는 N-말단 아미노산을 가짐)의 혼합물을 생산할 수 있다는 것이 관련 기술분야에 공지되어 있다. 또한, 상이한 숙주 세포는 폴리펩티드를 상이하게 프로세싱하므로, 폴리뉴클레오티드를 발현하는 하나의 숙주 세포는 동일한 폴리뉴클레오티드를 발현하는 또 다른 숙주 세포와 비교하여 상이한 성숙 폴리펩티드 (예를 들어, 상이한 C-말단 및/또는 N-말단 아미노산을 가짐)를 생산할 수 있는 것으로 관련 기술분야에 공지되어 있다.
성숙 폴리펩티드 코딩 서열: 용어 "성숙 폴리펩티드 코딩 서열"은 효소적 활성 예컨대 크산탄 리아제로 사전처리된 크산탄 검에 대해 활성 또는 크산탄 리아제 활성을 갖는 성숙 폴리펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 의미한다. 한 측면에서, 성숙 폴리펩티드 코딩 서열은 서열식별번호: 1의 뉴클레오티드 1 내지 3165 및 서열식별번호: 5의 뉴클레오티드 1 내지 3111이다.
돌연변이체: 용어 "돌연변이체"는 변이체를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 의미한다.
핵산 구축물: 용어 "핵산 구축물"은 자연 발생 유전자로부터 단리되거나, 또는 자연에서 달리 존재하지 않거나 또는 합성인 방식으로 핵산의 절편을 함유하도록 변형된, 1개 이상의 제어 서열을 포함하는 단일 가닥 또는 이중 가닥의 핵산 분자를 의미한다.
작동가능하게 연결된: 용어 "작동가능하게 연결된"은 제어 서열이 코딩 서열의 발현을 지시하도록, 제어 서열이 폴리뉴클레오티드의 코딩 서열에 대해 적절한 위치에 놓인 구성을 의미한다.
모: 용어 "모" 또는 "모 엔도글루카나제"는 엔도글루카나제 활성을 갖는 임의의 폴리펩티드를 의미하며, 그에 대한 변경은 본 발명의 효소 변이체를 생산한다. 한 측면에서, 모는 변이체와 동일한 아미노산 서열을 갖지만, 명시된 위치 중 1개 이상에서 변경을 갖지 않는 엔도글루카나제이다. 표현 "동일한 아미노산 서열을 갖는"은 100% 서열 동일성에 관한 것으로 이해될 것이다. 모 엔도글루카나제의 비제한적 예는 서열식별번호: 2를 갖는 성숙 모 엔도글루카나제를 포함한다.
서열 동일성: 2개의 아미노산 서열 사이 또는 2개의 뉴클레오티드 서열 사이의 관련성은 파라미터 "서열 동일성"에 의해 기재된다. 본 발명의 목적상, 2개의 아미노산 서열 사이의 서열 동일성은 EMBOSS 패키지 (EMBOSS: 유럽 분자 생물학 오픈 소프트웨어 스위트, Rice et al., 2000, Trends Genet. 16: 276-277), 바람직하게는 버전 5.0.0 또는 후속 버전의 니들 프로그램에 구현된 바와 같은 니들만-분쉬 알고리즘 (Needleman and Wunsch, 1970, J. Mol. Biol. 48: 443-453)을 사용하여 결정된다. 사용된 파라미터는 갭 개방 페널티 10, 갭 연장 페널티 0.5, 및 EBLOSUM62 (BLOSUM62의 EMBOSS 버전) 치환 매트릭스이다. 니들 라벨링된 "최장 동일성" (-노브리프 옵션을 이용하여 수득됨)의 산출은 퍼센트 동일성으로서 사용되고, 다음과 같이 계산된다:
(동일한 잔기 x 100)/(정렬 길이 - 정렬에서 갭의 총수).
본 발명의 목적상, 2개의 데옥시리보뉴클레오티드 서열 사이의 서열 동일성은 EMBOSS 패키지 (EMBOSS: 유럽 분자 생물학 오픈 소프트웨어 스위트, Rice et al., 2000, 상기 문헌), 바람직하게는 버전 5.0.0 또는 후속 버전의 니들 프로그램에 구현된 바와 같은 니들만-분쉬 알고리즘 (Needleman and Wunsch, 1970, 상기 문헌)을 사용하여 결정된다. 사용된 파라미터는 갭 개방 페널티 10, 갭 연장 페널티 0.5, 및 EDNAFULL (NCBI NUC4.4의 EMBOSS 버전) 치환 매트릭스이다. 니들 라벨링된 "최장 동일성" (-노브리프 옵션을 이용하여 수득됨)의 산출은 퍼센트 동일성으로서 사용되고, 다음과 같이 계산된다:
(동일한 데옥시리보뉴클레오티드 x 100)/(정렬 길이 - 정렬에서 갭의 총수).
엄격도 조건: 상이한 엄격도 조건이 다음과 같이 정의된다.
용어 "매우 낮은 엄격도 조건"은 적어도 100개의 뉴클레오티드 길이의 프로브, 5X SSPE, 0.3% SDS, 200 mg/mL 전단 및 변성된 연어 정자 DNA, 및 25% 포름아미드 중 42℃에서의 사전혼성화 및 혼성화, 12 내지 24시간 동안의 후속 표준 서던 블롯팅 절차를 의미한다. 담체 물질은 최종적으로 45℃에서 2X SSC, 0.2% SDS를 사용하여 각각 15분 동안 3회 세척된다.
용어 "낮은 엄격도 조건"은 적어도 100개의 뉴클레오티드 길이의 프로브, 5X SSPE, 0.3% SDS, 200 mg/mL 전단 및 변성된 연어 정자 DNA, 및 25% 포름아미드 중 42℃에서의 사전혼성화 및 혼성화, 12 내지 24시간 동안의 후속 표준 서던 블롯팅 절차를 의미한다. 담체 물질은 최종적으로 50℃에서 2X SSC, 0.2% SDS를 사용하여 각각 15분 동안 3회 세척된다.
용어 "중간 엄격도 조건"은 적어도 100개의 뉴클레오티드 길이의 프로브, 5X SSPE, 0.3% SDS, 200 mg/mL 전단 및 변성된 연어 정자 DNA, 및 35% 포름아미드 중 42℃에서의 사전혼성화 및 혼성화, 12 내지 24시간 동안의 후속 표준 서던 블롯팅 절차를 의미한다. 담체 물질은 최종적으로 55℃에서 2X SSC, 0.2% SDS를 사용하여 각각 15분 동안 3회 세척된다.
용어 "중간-높은 엄격도 조건"은 적어도 100개의 뉴클레오티드 길이의 프로브, 5X SSPE, 0.3% SDS, 200 mg/mL 전단 및 변성된 연어 정자 DNA, 및 35% 포름아미드 중 42℃에서의 사전혼성화 및 혼성화, 12 내지 24시간 동안의 후속 표준 서던 블롯팅 절차를 의미한다. 담체 물질은 최종적으로 60℃에서 2X SSC, 0.2% SDS를 사용하여 각각 15분 동안 3회 세척된다.
용어 "높은 엄격도 조건"은 적어도 100개의 뉴클레오티드 길이의 프로브, 5X SSPE, 0.3% SDS, 200 mg/mL 전단 및 변성된 연어 정자 DNA, 및 50% 포름아미드 중 42℃에서의 사전혼성화 및 혼성화, 12 내지 24시간 동안의 후속 표준 서던 블롯팅 절차를 의미한다. 담체 물질은 최종적으로 65℃에서 2X SSC, 0.2% SDS를 사용하여 각각 15분 동안 3회 세척된다.
용어 "매우 높은 엄격도 조건"은 적어도 100개의 뉴클레오티드 길이의 프로브, 5X SSPE, 0.3% SDS, 200 mg/mL 전단 및 변성된 연어 정자 DNA, 및 50% 포름아미드 중 42℃에서의 사전혼성화 및 혼성화, 12 내지 24시간 동안의 후속 표준 서던 블롯팅 절차를 의미한다. 담체 물질은 최종적으로 70℃에서 2X SSC, 0.2% SDS를 사용하여 각각 15분 동안 3회 세척된다.
하위서열: 용어 "하위서열"은 성숙 폴리펩티드 코딩 서열의 5' 및/또는 3' 말단에서 1개 이상 (예를 들어 여러개)의 뉴클레오티드가 부재하는 폴리뉴클레오티드를 의미하며; 여기서 하위서열은 효소적 활성, 예컨대 크산탄 리아제로 사전처리된 크산탄 검에 대한 활성 또는 크산탄 리아제 활성을 갖는 단편을 코딩한다.
텍스타일: 용어 "텍스타일"은 원사, 원사 중간체, 섬유, 부직포 물질, 천연 물질, 합성 물질, 및 임의의 다른 텍스타일 물질을 포함한 임의의 텍스타일 물질, 이들 물질로 만든 직물 및 직물로부터 제조된 제품 (예를 들어, 의류 및 다른 물품)을 의미한다. 텍스타일 또는 직물은 니트, 직조물, 데님, 부직물, 펠트, 원사, 및 타월천의 형태일 수 있다. 텍스타일은 셀룰로스계, 예컨대 면, 아마/린넨, 황마, 라미, 사이잘 또는 코이어를 포함한 천연 셀룰로스, 또는 비스코스/레이온, 라미, 셀룰로스 아세테이트 섬유 (트리셀), 리오셀 또는 그의 블렌드를 포함한 인공 셀룰로스 (예를 들어, 목재 펄프로부터 유래한 것)일 수 있다. 텍스타일 또는 직물은 또한, 비-셀룰로스계, 예컨대 울, 낙타, 캐시미어, 모헤어, 토끼 및 실크를 포함한 천연 폴리아미드, 또는 합성 중합체, 예컨대 나일론, 아라미드, 폴리에스테르, 아크릴, 폴리프로필렌 및 스판덱스/엘라스탄, 또는 그의 블렌드 뿐만 아니라 셀룰로스계 섬유와 비-셀룰로스계 섬유의 블렌드일 수 있다. 블렌드의 예는 면 및/또는 레이온/비스코스와 1종 이상의 동반 물질, 예컨대 울, 합성 섬유 (예를 들어 폴리아미드 섬유, 아크릴 섬유, 폴리에스테르 섬유, 폴리비닐 알콜 섬유, 폴리비닐 클로라이드 섬유, 폴리우레탄 섬유, 폴리우레아 섬유, 아라미드 섬유), 및 셀룰로스-함유 섬유 (예를 들어 레이온/비스코스, 라미, 아마/린넨, 황마, 셀룰로스 아세테이트 섬유, 리오셀)의 블렌드이다. 직물은 통상적인 세척가능한 세탁물, 예를 들어 얼룩진 가정 세탁물일 수 있다. 용어 직물 또는 의류가 사용되는 경우, 이는 더 넓은 범위의 용어 텍스타일을 또한 포함하는 것으로 의도된다.
텍스타일 관리 이익: 촉매적 얼룩 제거 또는 오염물의 재부착 방지와 직접적으로 관련되지 않은 "텍스타일 관리 이익"이 또한 효소 세제력 이익에 중요하다. 이러한 텍스타일 관리 이익의 예는, 이염 억제 또는 역염색방지로도 불리는 효과인, 한 텍스타일에서 또 다른 텍스타일로의 이염 또는 동일한 텍스타일의 또 다른 부분으로의 이염의 방지 또는 감소, 보풀형성방지로도 불리는 효과인, 텍스타일 표면으로부터 돌출되거나 파손된 섬유를 제거하여 보풀형성 경향의 감소 또는 이미 존재하는 보풀 또는 솜털의 제거, 텍스타일-부드러움 개선, 텍스타일의 색상 명확화, 및 텍스타일의 섬유에 갇혀 있는 미립자 오염의 제거이다. 효소적 표백이 추가의 효소 세제력 이익이며, 여기서 촉매 활성은 일반적으로 표백 성분, 예컨대 과산화수소 또는 다른 과산화물 또는 다른 표백 종의 형성을 촉매하기 위해 사용된다.
변이체: 용어 "변이체"는 1개 이상 (예를 들어 여러개)의 위치에서 변경, 즉, 치환, 삽입 및/또는 결실을 포함하는 폴리펩티드 (예를 들어, GH9 엔도글루카나제 폴리펩티드)를 의미한다. 치환은 위치를 차지하는 아미노산의 상이한 아미노산으로의 대체를 의미하고; 결실은 위치를 차지하는 아미노산의 제거를 의미하고; 삽입은 위치를 차지하는 아미노산에 인접하여 그에 바로 후속하여 1개 이상 (예를 들어 여러개)의 아미노산, 예를 들어, 1-5개의 아미노산의 부가를 의미한다. 본원에 기재된 엔도글루카나제/ 크산탄 리아제 변이체의 비제한적 예는 크산탄 검 (크산탄 리아제의 경우) 및 크산탄 리아제로 사전처리된 크산탄 검 (엔도글루카나제의 경우)에 대해 활성을 갖는 엔도글루카나제 / 크산탄 리아제 변이체를 포함한다. 본원에 기재된 변이체의 비제한적 예는 추가로 서열식별번호: 2 또는 서열식별번호: 6을 갖는 성숙 모의 적어도 20%, 예를 들어 적어도 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 또는 100% 엔도글루카나제 활성을 갖는 변이체를 포함한다. 크산탄 검 (임의로 크산탄 리아제로 사전처리된 것)에 대한 활성을 측정하기 위한 바람직한 검정은 본원의 실시예 3 및 7에 개시되어 있다.
안정성: 용어 "안정성"은 변화, 언폴딩, 붕해, 변성 또는 활성 손실에 대한 저항성 또는 저항성의 정도를 의미한다. 안정성의 비제한적 예는 입체형태적 안정성, 저장 안정성 및 사용 동안, 예를 들어 세척 과정 동안의 안정성을 포함하고, 이는 시간의 함수로서 폴리펩티드 (예를 들어 본 발명에 따른 엔도글루카나제 또는 크산탄 리아제 변이체)의 안정성, 예를 들어 상기 폴리펩티드 (예를 들어 상기 엔도글루카나제 또는 크산탄 리아제 변이체)가 용액, 특히 세제 용액 중에 유지되는 경우 얼마나 많은 활성이 보유되는지를 반영한다. 안정성은 많은 인자, 예를 들어 킬레이트화제(들)의 존재, pH, 온도, 세제 조성물, 예를 들어 빌더, 계면활성제, 킬레이트화제 등의 양에 의해 영향을 받는다. 엔도글루카나제 또는 크산탄 리아제 안정성은 본원의 실시예 3 및 7에 기재된 바와 같이, 예를 들어 서열식별번호: 2 또는 6을 갖는 모 효소와 대비하여, 반감기 개선 지수 (HIF)를 이용하여 측정될 수 있다. 엔도글루카나제 안정성은 또한 본원의 실시예 3에 기재된 바와 같은 환원당 검정을 사용하여 측정될 수 있다.
개선된 안정성: 용어 "개선된 안정성" 또는 "증가된 안정성"은 모 엔도글루카나제/크산탄 리아제의 안정성에 대비하여, 변이체와 동일한 아미노산 서열을 갖지만 명시된 위치 중 1개 이상에서 변경을 갖지 않는 엔도글루카나제/크산탄 리아제에 대비하여, 또는 각각 서열식별번호: 2 및 서열식별번호: 6에 대비하여 세제 조성물 중에서의 (예를 들어 용액 중에서의, 예를 들어 킬레이트화제, 예를 들어 EDTA 또는 시트레이트의 존재 하에서의) 증가된 안정성으로서 본원에 정의된다. 용어 "개선된 안정성" 및 "증가된 안정성"은 "개선된 화학적 안정성", "세제 안정성" 및 "개선된 세제 안정성"을 포함한다.
개선된 화학적 안정성: 용어 "개선된 화학적 안정성"은 모 효소의 효소적 활성을 감소시키는 자연 발생 또는 합성인 화학물질 또는 화학물질들의 존재 하에서의 인큐베이션 기간 후, 효소적 활성을 보유함을 나타내는 변이체 효소로서 본원에 정의된다. 개선된 화학적 안정성은 또한 변이체가 이러한 화학물질의 존재 하에서 반응을 더 잘 (예를 들어, 모 효소보다 더 우수하게) 촉매할 수 있도록 할 수 있다. 본 발명의 특정한 측면에서 개선된 화학적 안정성은 세제 중, 특히 액체 세제 중에서의 개선된 안정성이다. 용어 "세제 안정성" 또는 "개선된 세제 안정성"은, 본 발명의 엔도글루카나제 변이체/크산탄 리아제 변이체가 액체 세제 제제 내로, 특히 킬레이트화제 (예를 들어 EDTA 또는 시트레이트)를 포함하는 액체 세제 제제 내로 혼합된 경우, 특히 모 엔도글루카나제/크산탄 리아제와 비교하여 엔도글루카나제/크산탄 리아제의 개선된 안정성이다.
입체형태적 안정성: 용어 "입체형태적 안정성"은 입체형태적 변화, 언폴딩 또는 붕해에 대한 저항성 또는 저항성의 정도를 의미한다. 따라서, 용어 "입체형태적으로 덜 안정한"은 입체형태적 변화, 언폴딩 또는 붕해에 대해 덜 저항성이거나 더 낮은 정도의 저항성을 갖는 것을 의미한다.
불안정성: 용어 "불안정성"은 안정성의 결여를 의미한다. 불안정성의 비제한적 예는 입체형태적 불안정성, 언폴딩, 변성, 붕해, 활성 손실을 포함한다.
킬레이트화제-유도된 불안정성 영역: 용어 "킬레이트화제-유도된 불안정성 영역"은 킬레이트화제의 존재 하에 상기 폴리펩티드의 불안정성에 기여하는 폴리펩티드의 임의의 영역을 의미한다. 킬레이트화제의 비제한적 예는 EDTA (에틸렌디아민테트라아세트산) 및 시트레이트를 포함한다. 킬레이트화제-유도된 불안정성 영역의 비제한적 예는 하기 특색: 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 입체형태적으로 덜 안정함; 및/또는 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 상기 킬레이트화제에 더 노출됨; 및/또는 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 상기 킬레이트화제에 더 접근가능함; 및/또는 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 입체형태적으로 더 동적임; 및/또는 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 중수소 혼입을 더 잘 수용함 중 1개 이상을 갖는 폴리펩티드의 임의의 영역을 포함한다. 킬레이트화제-유도된 불안정성 영역의 비제한적 예는 추가로 킬레이트화제-유도된 불안정성의 원인이 되는 폴리펩티드의 임의의 영역을 포함한다. 성숙 엔도글루카나제 (예를 들어 서열식별번호: 2를 가짐) 또는 성숙 크산탄 리아제 (예를 들어 서열식별번호: 6을 가짐)의 킬레이트화제-유도된 불안정성 영역의 비제한적 예는 상기 기재된 영역을 포함한다.
인접 영역: 용어 "인접 영역"은 킬레이트화제-유도된 불안정성 영역이 아닌 폴리펩티드의 임의의 영역을 의미한다. 성숙 엔도글루카나제 (예를 들어 서열식별번호: 2를 가짐) 또는 성숙 크산탄 리아제 (예를 들어 서열식별번호: 6을 가짐)의 인접 영역의 비제한적 예는 상기 개시되어 있다.
킬레이트화제 노출: 용어 "킬레이트화제 노출"은 폴리펩티드에 도달한 킬레이트화제의 농도 또는 양을 의미한다. 따라서, 본 발명의 문맥에서 용어 "킬레이트화제에 더 노출됨"은 특정한 영역 (예를 들어 킬레이트화제-유도된 불안정성 영역)의 킬레이트화제 노출이 상이한 영역 (예를 들어 인접 영역)의 킬레이트화제 노출보다 더 크다는 것을 의미한다. 한 측면에서, 킬레이트화제 노출은 농도, 지속기간, 및 빈도 (예를 들어 화학적 작용제, 예를 들어 킬레이트화제에 대한 것) 또는 강도의 수치 용어로 표현될 수 있다.
킬레이트화제 접근성: 용어 "킬레이트화제 접근성"은 킬레이트화제에 의한 영향에 대한 개방성 및 킬레이트화제에 의한 접근의 용이성을 포괄한다. 따라서, 본 발명의 문맥에서 용어 "킬레이트화제에 더 접근가능함"은 특정한 영역 (예를 들어 킬레이트화제-유도된 불안정성 영역)의 킬레이트화제 접근성이 상이한 영역 (예를 들어 인접 영역)의 킬레이트화제 접근성보다 더 크다는 것을 의미한다.
입체형태적 동적: 용어 "입체형태적 동적"은 (예를 들어 용액 중에서의) 폴리펩티드의 진동, 구조적 재배열 및 전이를 포괄한다. 따라서, 본 발명의 문맥에서 용어 "입체형태적으로 더 동적임"은 특정한 영역 (예를 들어 킬레이트화제-유도된 불안정성 영역)의 입체형태적 동적이 상이한 영역 (예를 들어 인접 영역)의 입체형태적 동적보다 더 크다는 것을 의미한다.
중수소 혼입에 대한 수용성: 용어 "중수소 혼입에 대한 수용성"은 수소-중수소 교환 동안 중수소 원자에 의해 대체되는 수소 원자의 양을 의미한다. 상기 양은 상대적 (예를 들어 또 다른 양과 비교됨) 또는 절대적 (예를 들어 수치로 표현됨) 용어로 측정될 수 있다. 따라서, 본 발명의 문맥에서 용어 "중수소 혼입을 더 잘 수용함"은 특정한 영역 (예를 들어 킬레이트화제-유도된 불안정성 영역)의 중수소 혼입에 대한 수용성이 상이한 영역 (예를 들어 인접 영역)의 중수소 혼입에 대한 수용성보다 더 크다는 것을 의미한다.
세척 성능: 용어 "세척 성능"은, 예를 들어 세척 또는 경질 표면 세정 동안 세정될 대상에 존재하는 얼룩을 제거할 수 있는 효소의 능력으로서 사용된다. 세척 성능의 개선은 '세탁에 대한 자동 기계적 스트레스 검정 (AMSA)'에서의 소위 강도 값 (Int) 또는 완화 값 (Rem)을 계산함으로써 정량화될 수 있다.
변이체의 명칭에 대한 규정
본 발명의 목적상, 서열식별번호: 2에 개시된 성숙 폴리펩티드는 또 다른 엔도글루카나제에서 상응하는 아미노산 잔기를 결정하는데 사용되고, 서열식별번호: 6에 개시된 성숙 폴리펩티드는 또 다른 크산탄 리아제에서 상응하는 아미노산 잔기를 결정하는데 사용된다. 또 다른 엔도글루카나제/크산탄 리아제의 아미노산 서열은 서열식별번호: 2 또는 서열식별번호: 6에 개시된 성숙 폴리펩티드와 정렬되고, 정렬에 기초하여, 서열식별번호: 2 또는 6에 개시된 성숙 폴리펩티드의 임의의 아미노산 잔기에 상응하는 아미노산 위치 번호는 EMBOSS 패키지 (EMBOSS: 유럽 분자 생물학 오픈 소프트웨어 스위트, Rice et al., 2000, Trends Genet. 16: 276-277), 바람직하게는 버전 5.0.0 또는 후속 버전의 니들 프로그램에 구현된 바와 같은 니들만-분쉬 알고리즘 (Needleman and Wunsch, 1970, J. Mol. Biol. 48: 443-453)을 사용하여 결정된다. 사용된 파라미터는 갭 개방 페널티 10, 갭 연장 페널티 0.5, 및 EBLOSUM62 (BLOSUM62의 EMBOSS 버전) 치환 매트릭스이다.
또 다른 엔도글루카나제/크산탄 리아제의 상응하는 아미노산 잔기의 확인은 MUSCLE (로그-예상에 의한 다중 서열 비교; 버전 3.5 또는 후속 버전; Edgar, 2004, Nucleic Acids Research 32: 1792-1797), MAFFT (버전 6.857 또는 후속 버전; Katoh and Kuma, 2002, Nucleic Acids Research 30: 3059-3066; Katoh et al., 2005, Nucleic Acids Research 33: 511-518; Katoh and Toh, 2007, Bioinformatics 23: 372-374; Katoh et al., 2009, Methods in Molecular Biology 537: 39-64; Katoh and Toh, 2010, Bioinformatics 26: 1899-1900), 및 EMBOSS EMMA 활용 클러스탈W (1.83 또는 후속; Thompson et al., 1994, Nucleic Acids Research 22: 4673-4680)를 포함하나 이에 제한되지는 않는 여러 컴퓨터 프로그램을 사용하여, 그의 각각의 디폴트 파라미터를 사용하여 다중 폴리펩티드 서열을 정렬함으로써 결정될 수 있다.
서열식별번호: 2 또는 6의 성숙 폴리펩티드로부터 다른 효소가 분기되어 전통적인 서열-기반 비교로 그의 관계를 검출하지 못하는 경우에 (Lindahl and Elofsson, 2000, J. Mol. Biol. 295: 613-615), 다른 쌍별 서열 비교 알고리즘이 사용될 수 있다. 서열-기반 검색에서의 보다 큰 감도는, 데이터베이스 검색을 위해 폴리펩티드 패밀리의 확률론적 표현 (프로파일)을 사용하는 검색 프로그램을 사용하여 달성될 수 있다. 예를 들어, PSI-BLAST 프로그램은 반복 데이터베이스 검색 과정을 통해 프로파일을 생성하고, 이는 원격 상동체를 검출할 수 있다 (Atschul et al., 1997, Nucleic Acids Res. 25: 3389-3402). 폴리펩티드에 대한 패밀리 또는 슈퍼패밀리가 단백질 구조 데이터베이스에서 1종 이상의 표현을 갖는 경우에 심지어 더 큰 감도가 달성될 수 있다. GenTHREADER과 같은 프로그램 (Jones, 1999, J. Mol. Biol. 287: 797-815; McGuffin and Jones, 2003, Bioinformatics 19: 874-881)은 입력내용으로서 다양한 공급원 (PSI-BLAST, 2차 구조 예측, 구조적 정렬 프로파일, 및 용매화 잠재력)으로부터 질의 서열에 대한 구조적 폴딩을 예측하는 뉴럴 네트워크까지의 정보를 사용한다. 유사하게, 문헌 [Gough et al., 2000, J. Mol. Biol. 313: 903-919]의 방법을 사용하여 미지의 구조의 서열을 SCOP 데이터베이스에 존재하는 슈퍼패밀리 모델과 정렬시킬 수 있다. 차례로 이들 정렬을 사용하여 폴리펩티드에 대한 상동성 모델을 생성할 수 있고, 평가 목적을 위해 개발된 다양한 툴을 사용하여 이러한 모델을 정확도에 대해 평가할 수 있다.
공지된 구조의 단백질의 경우, 구조적 정렬을 검색하고 생성하기 위해 여러 툴 및 리소스가 이용가능하다. 예를 들어 단백질의 SCOP 슈퍼패밀리가 구조적으로 정렬된 바 있고, 그러한 정렬은 접근가능하고 다운로드가능하다. 다양한 알고리즘, 예컨대 거리 정렬 매트릭스 (Holm and Sander, 1998, Proteins 33: 88-96) 또는 조합 연장 (Shindyalov and Bourne, 1998, Protein Engineering 11: 739-747)을 사용하여 2개 이상의 단백질 구조를 정렬할 수 있고, 가능한 구조적 상동체를 발견하기 위해 관심 구조를 갖는 구조 데이터베이스를 질의하는데 이들 알고리즘의 구현이 추가적으로 사용될 수 있다 (예를 들어, Holm and Park, 2000, Bioinformatics 16: 566-567).
본 발명의 변이체를 기재함에 있어서, 하기 기재된 명명법이 참조의 용이성을 위해 적합화된다. 적합화된 IUPAC 단일 문자 또는 3문자 아미노산 약어가 사용된다.
치환. 아미노산 치환의 경우, 하기 명명법이 사용된다: 원래의 아미노산, 위치, 치환된 아미노산. 따라서, 위치 226의 트레오닌의 알라닌에 의한 치환은 "Thr226Ala" 또는 "T226A"로 표시된다. 다중 돌연변이는 부가 마크 ("+")에 의해 분리되고, 예를 들어 "Gly205Arg+Ser411Phe" 또는 "G205R+S411F"는 각각 위치 205 및 411에서의 글리신 (G)의 아르기닌 (R)에 의한 치환 및 세린 (S)의 페닐알라닌 (F)에 의한 치환을 나타낸다.
결실. 아미노산 결실의 경우, 하기 명명법이 사용된다: 원래의 아미노산, 위치, *. 따라서, 위치 195의 글리신의 결실은 "Gly195*" 또는 "G195*"로 표시된다. 다중 결실은 부가 마크 ("+")에 의해, 예를 들어, "Gly195*+Ser411*" 또는 "G195*+S411*"로 분리된다.
삽입. 아미노산 삽입의 경우, 하기 명명법이 사용된다: 원래의 아미노산, 위치, 원래의 아미노산, 삽입된 아미노산. 따라서 위치 195의 글리신 다음의 리신의 삽입은 "Gly195GlyLys" 또는 "G195GK"로 표시된다. 다중 아미노산의 삽입은 [원래의 아미노산, 위치, 원래의 아미노산, 삽입된 아미노산 #1, 삽입된 아미노산 #2; 등]으로 표시된다. 예를 들어, 위치 195의 글리신 다음의 리신 및 알라닌의 삽입은 "Gly195GlyLysAla" 또는 "G195GKA"로 표시된다. 특정한 위치에서의 삽입의 표시는 원래의 아미노산 잔기 다음의 삽입인 것으로 이해된다. 예를 들어, "위치 195에서의 삽입"은 위치 195에서의 원래의 잔기 다음의 삽입인 것으로 이해된다.
이러한 경우에 삽입된 아미노산 잔기(들)는 삽입된 아미노산 잔기(들)에 선행하는 아미노산 잔기의 위치 번호에의 소문자의 부가에 의해 넘버링된다. 상기 예에서, 서열은 따라서 하기일 것이다:
다중 변경. 다중 변경을 포함하는 변이체는 부가 마크 ("+")에 의해 분리되고, 예를 들어 "Arg170Tyr+Gly195Glu" 또는 "R170Y+G195E"는 각각 위치 170 및 195에서의 아르기닌 및 글리신의 티로신 및 글루탐산에 의한 치환을 나타낸다.
상이한 변경. 상이한 변경이 한 위치에 도입될 수 있는 경우에, 상이한 변경은 콤마에 의해 분리되고, 예를 들어 "Arg170Tyr,Glu"는 위치 170의 아르기닌의 티로신 또는 글루탐산에 의한 치환을 나타낸다. 따라서, "Tyr167Gly,Ala+Arg170Gly,Ala"는 하기 변이체를 표시한다: "Tyr167Gly+Arg170Gly", "Tyr167Gly+Arg170Ala", "Tyr167Ala+Arg170Gly", 및 "Tyr167Ala+Arg170Ala". 대안적으로, 상이한 변경은 괄호, 예를 들어 Arg170[Tyr, Gly]를 사용하여, 또는 1-문자 코드 R170[Y,G]로 표시될 수 있다.
발명의 상세한 설명
공지되어 있는 서열식별번호: 2를 갖는 크산탄 엔도글루카나제 및 서열식별번호: 6을 갖는 크산탄 리아제는 둘 다 대형 효소이다 (>1000개 잔기). 따라서 세제 조성물 중에서, 예를 들어 킬레이트화제의 존재 하에서 예를 들어 안정성의 개선을 위해 그의 특성을 표적화하는 것은 매우 노동적이고 비용이 많이 들 수 있다. 일부 측면에서, 본 발명은 서열식별번호: 2의 아미노산 95 내지 105에 상응하는 영역 1, 서열식별번호: 2의 아미노산 115 내지 138에 상응하는 영역 2, 서열식별번호: 2의 아미노산 210 내지 251에 상응하는 영역 3, 서열식별번호: 2의 아미노산 267 내지 301에 상응하는 영역 4, 서열식별번호: 2의 아미노산 339 내지 361에 상응하는 영역 5, 서열식별번호: 2의 아미노산 547 내지 595에 상응하는 영역 6, 서열식별번호: 2의 아미노산 612 내지 660에 상응하는 영역 7, 서열식별번호: 2의 아미노산 806 내지 828에 상응하는 영역 8, 및 서열식별번호: 2의 아미노산 839 내지 1042에 상응하는 영역 9, 및/또는 서열식별번호: 2의 아미노산 1 내지 94에 상응하는 영역 10, 서열식별번호: 2의 아미노산 106 내지 114에 상응하는 영역 11, 서열식별번호: 2의 아미노산 139 내지 209에 상응하는 영역 12, 서열식별번호: 2의 아미노산 252 내지 266에 상응하는 영역 13, 서열식별번호: 2의 아미노산 302 내지 338에 상응하는 영역 14, 서열식별번호: 2의 아미노산 362 내지 546에 상응하는 영역 15, 서열식별번호: 2의 아미노산 596 내지 611에 상응하는 영역 16, 서열식별번호: 2의 아미노산 661 내지 805에 상응하는 영역 17, 서열식별번호: 2의 아미노산 829 내지 838에 상응하는 영역 18, 및 서열식별번호: 2의 아미노산 1043 내지 1055에 상응하는 영역 19로 이루어진 군으로부터 선택된 영역에 대해 단백질 조작을 사용하여, 엔도글루카나제 분자를 안정화하고자 하는 경우 표적화를 위한 잔기의 수를 감소시킨다.
일부 측면에서, 본 발명은 서열식별번호: 6의 아미노산 154 내지 176에 상응하는 영역 1, 서열식별번호: 6의 아미노산 614 내지 658에 상응하는 영역 2, 서열식별번호: 6의 아미노산 731 내지 803에 상응하는 영역 3, 서열식별번호: 6의 아미노산 807 내지 846에 상응하는 영역 4, 서열식별번호: 6의 아미노산 872 내지 885에 상응하는 영역 5, 및 서열식별번호: 6의 아미노산 903 내지 1004에 상응하는 영역 6, 및/또는 서열식별번호: 6의 아미노산 1 내지 153에 상응하는 영역 7, 서열식별번호: 6의 아미노산 177 내지 613에 상응하는 영역 8, 서열식별번호: 6의 아미노산 659 내지 730에 상응하는 영역 9, 서열식별번호: 6의 아미노산 804 내지 806에 상응하는 영역 10, 서열식별번호: 6의 아미노산 847 내지 871에 상응하는 영역 11, 서열식별번호: 6의 아미노산 886 내지 902에 상응하는 영역 12, 및 서열식별번호: 6의 아미노산 1005 내지 1037에 상응하는 영역 13으로 이루어진 군으로부터 선택된 영역에 대해 단백질 조작을 사용하여, 크산탄 리아제 분자를 안정화하고자 하는 경우 표적화를 위한 잔기의 수를 감소시킨다.
한 실시양태에서, 본 발명은 단백질 조작을 사용하여 엔도글루카나제/크산탄 리아제 분자를 안정화하고자 하는 경우 표적화를 위한 잔기의 수를 상당히 감소시킨다.
또 다른 실시양태에서, 본 발명은 모 효소, 예컨대 야생형 엔도글루카나제/크산탄 리아제와 비교하여 둘 다 유의하게 개선된 안정성을 갖는, 본원에 기재된 바와 같은 엔도글루카나제 및 크산탄 리아제의 변이체를 포함하는 세제 조성물을 제공한다. 이러한 개선된 안정성은 모 엔도글루카나제/크산탄 리아제, 예컨대 야생형 엔도글루카나제/크산탄 리아제와 비교하여 변이체의 개선된 반감기로서 측정될 수 있다. 게다가, 변이체의 안정성은 또한 정상적으로 단백질을 절단할 프로테아제의 존재 하에 개선된 것으로 입증된다. 본 발명은 프로테아제 절단에 대해 개선된 안정성을 갖도록 변형된 변이체를 개시한다.
변이체
한 실시양태에서, EDTA를 함유하는 완중체 중에서 분자를 인큐베이션할 경우에 영향을 받는 서열식별번호: 2를 갖는 공지된 크산탄 엔도글루카나제의 단백질 서열 내의 킬레이트화제-유도된 불안정성 영역은 하기: 서열식별번호: 2의 아미노산 95 내지 105에 상응하는 영역 1, 서열식별번호: 2의 아미노산 115 내지 138에 상응하는 영역 2, 서열식별번호: 2의 아미노산 210 내지 251에 상응하는 영역 3, 서열식별번호: 2의 아미노산 267 내지 301에 상응하는 영역 4, 서열식별번호: 2의 아미노산 339 내지 361에 상응하는 영역 5, 서열식별번호: 2의 아미노산 547 내지 595에 상응하는 영역 6, 서열식별번호: 2의 아미노산 612 내지 660에 상응하는 영역 7, 서열식별번호: 2의 아미노산 806 내지 828에 상응하는 영역 8, 및 서열식별번호: 2의 아미노산 839 내지 1042에 상응하는 영역 9이다. 본 실시양태는 세제, 예를 들어 킬레이트화제, 예를 들어 EDTA 또는 시트레이트를 포함하는 세제 조성물 중에서 분자를 안정화하기 위해 엔도글루카나제의 어느 부분을 돌연변이시킬지에 대한 중요한 안내에 관한 것이다.
따라서, 한 실시양태에서 본 발명은 서열식별번호: 2의 아미노산 95 내지 105에 상응하는 영역 1, 서열식별번호: 2의 아미노산 115 내지 138에 상응하는 영역 2, 서열식별번호: 2의 아미노산 210 내지 251에 상응하는 영역 3, 서열식별번호: 2의 아미노산 267 내지 301에 상응하는 영역 4, 서열식별번호: 2의 아미노산 339 내지 361에 상응하는 영역 5, 서열식별번호: 2의 아미노산 547 내지 595에 상응하는 영역 6, 서열식별번호: 2의 아미노산 612 내지 660에 상응하는 영역 7, 서열식별번호: 2의 아미노산 806 내지 828에 상응하는 영역 8, 및 서열식별번호: 2의 아미노산 839 내지 1042에 상응하는 영역 9로 이루어진 군으로부터 선택된 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 포함하는 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이며, 여기서 상기 변이체는 서열식별번호: 2에 대해 적어도 60% 및 100% 미만의 서열 동일성을 갖고; 바람직하게는 상기 엔도글루카나제 변이체는 크산탄 리아제로 사전처리된 크산탄 검에 대해 활성을 갖고, 추가로 바람직하게는 상기 활성은 크산탄 검 분해 활성이다.
한 실시양태에서, 세제 중에서 분자를 인큐베이션할 경우에 영향을 받는 서열식별번호: 2를 갖는 공지된 크산탄 엔도글루카나제의 단백질 서열 내의 영역은 하기: 서열식별번호: 2의 아미노산 1 내지 94에 상응하는 영역 10, 서열식별번호: 2의 아미노산 106 내지 114에 상응하는 영역 11, 서열식별번호: 2의 아미노산 139 내지 209에 상응하는 영역 12, 서열식별번호: 2의 아미노산 252 내지 266에 상응하는 영역 13, 서열식별번호: 2의 아미노산 302 내지 338에 상응하는 영역 14, 서열식별번호: 2의 아미노산 362 내지 546에 상응하는 영역 15, 서열식별번호: 2의 아미노산 596 내지 611에 상응하는 영역 16, 서열식별번호: 2의 아미노산 661 내지 805에 상응하는 영역 17, 서열식별번호: 2의 아미노산 829 내지 838에 상응하는 영역 18, 및 서열식별번호: 2의 아미노산 1043 내지 1055에 상응하는 영역 19이다. 본 실시양태는 세제 중에서 분자를 안정화하기 위해 엔도글루카나제의 어느 부분을 돌연변이시킬지에 대한 중요한 안내에 관한 것이다.
한 실시양태에서 본 발명은 서열식별번호: 2의 아미노산 1 내지 94에 상응하는 영역 10, 서열식별번호: 2의 아미노산 106 내지 114에 상응하는 영역 11, 서열식별번호: 2의 아미노산 139 내지 209에 상응하는 영역 12, 서열식별번호: 2의 아미노산 252 내지 266에 상응하는 영역 13, 서열식별번호: 2의 아미노산 302 내지 338에 상응하는 영역 14, 서열식별번호: 2의 아미노산 362 내지 546에 상응하는 영역 15, 서열식별번호: 2의 아미노산 596 내지 611에 상응하는 영역 16, 서열식별번호: 2의 아미노산 661 내지 805에 상응하는 영역 17, 서열식별번호: 2의 아미노산 829 내지 838에 상응하는 영역 18, 및 서열식별번호: 2의 아미노산 1043 내지 1055에 상응하는 영역 19로 이루어진 군으로부터 선택된 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 포함하는 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이며; 바람직하게는 상기 엔도글루카나제 변이체는 크산탄 리아제로 사전처리된 크산탄 검에 대해 활성을 갖고, 추가로 바람직하게는 상기 활성은 크산탄 검 분해 활성이다.
한 실시양태에서 본 발명은 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 포함하는 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다:
i) 서열식별번호: 2의 아미노산 95 내지 105에 상응하는 영역 1, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 및 105로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
ii) 서열식별번호: 2의 아미노산 115 내지 138에 상응하는 영역 2, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 및 138로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
iii) 서열식별번호: 2의 아미노산 210 내지 251에 상응하는 영역 3, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 226, 227, 228, 229, 230, 231, 232, 233, 234, 235, 236, 237, 238, 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 249, 250, 및 251로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
iv) 서열식별번호: 2의 아미노산 267 내지 301에 상응하는 영역 4, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 267, 268, 269, 270, 271, 272, 273, 274, 275, 276, 277, 278, 279, 280, 281, 282, 283, 284, 285, 286, 287, 288, 289, 290, 291, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298, 299, 300, 및 301로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
v) 서열식별번호: 2의 아미노산 339 내지 361에 상응하는 영역 5, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 339, 340, 341, 342, 343, 344, 345, 346, 347, 348, 349, 350, 351, 352, 353, 354, 355, 356, 357, 358, 359, 360, 361로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
vi) 서열식별번호: 2의 아미노산 547 내지 595에 상응하는 영역 6, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 547, 548, 549, 550, 551, 552, 553, 554, 555, 556, 557, 558, 559, 560, 561, 562, 563, 564, 565, 566, 567, 568, 569, 570, 571, 572, 573, 574, 575, 576, 577, 578, 579, 580, 581, 582, 583, 584, 585, 586, 587, 588, 589, 590, 591, 592, 593, 594, 및 595로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
vii) 서열식별번호: 2의 아미노산 612 내지 660에 상응하는 영역 7, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 612, 613, 614, 615, 616, 617, 618, 619, 620, 621, 622, 623, 624, 625, 626, 627, 628, 629, 630, 631, 632, 633, 634, 635, 636, 637, 638, 639, 640, 641, 642, 643, 644, 645, 646, 647, 648, 649, 650, 651, 652, 653, 654, 655, 656, 657, 658, 659, 및 660으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
viii) 서열식별번호: 2의 아미노산 806 내지 828에 상응하는 영역 8, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 806, 807, 808, 809, 810, 811, 812, 813, 814, 815, 816, 817, 818, 819, 820, 821, 822, 823, 824, 825, 826, 827, 및 828로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함), 및
ix) 서열식별번호: 2의 아미노산 839 내지 1042에 상응하는 영역 9, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 839, 840, 841, 842, 843, 844, 845, 846, 847, 848, 849, 850, 851, 852, 853, 854, 855, 856, 857, 858, 859, 860, 861, 862, 863, 864, 865, 866, 867, 868, 869, 870, 871, 872, 873, 874, 875, 876, 877, 878, 879, 880, 881, 882, 883, 884, 885, 886, 887, 888, 889, 890, 891, 892, 893, 894, 895, 896, 897, 898, 899, 900, 901, 902, 903, 904, 905, 906, 907, 908, 909, 910, 911, 912, 913, 914, 915, 916, 917, 918, 919, 920, 921, 922, 923, 924, 925, 926, 927, 928, 929, 930, 931, 932, 933, 934, 935, 936, 937, 938, 939, 940, 941, 942, 943, 944, 945, 946, 947, 948, 949, 950, 951, 952, 953, 954, 955, 956, 957, 958, 959, 960, 961, 962, 963, 964, 965, 966, 967, 968, 969, 970, 971, 972, 973, 974, 975, 976, 977, 978, 979, 980, 981, 982, 983, 984, 985, 986, 987, 988, 989, 990, 991, 992, 993, 994, 995, 996, 997, 998, 999, 1000, 1001, 1002, 1003, 1004, 1005, 1006, 1007, 1008, 1009, 1010, 1011, 1012, 1013, 1014, 1015, 1016, 1017, 1018, 1019, 1020, 1021, 1022, 1023, 1024, 1025, 1026, 1027, 1028, 1029, 1030, 1031, 1032, 1033, 1034, 1035, 1036, 1037, 1038, 1039, 1040, 1041, 및 1042로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함).
한 실시양태에서, 본 발명은 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 포함하는 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다:
i) 서열식별번호: 2의 아미노산 1 내지 94에 상응하는 영역 10, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
ii) 서열식별번호: 2의 아미노산 106 내지 114에 상응하는 영역 11, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
iii) 서열식별번호: 2의 아미노산 139 내지 209에 상응하는 영역 12, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 209로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
iv) 서열식별번호: 2의 아미노산 252 내지 266에 상응하는 영역 13, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 252, 253, 254, 255, 256, 257, 258, 259, 260, 261, 262, 263, 264, 265, 266으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
v) 서열식별번호: 2의 아미노산 302 내지 338에 상응하는 영역 14, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 302, 303, 304, 305, 306, 307, 308, 309, 310, 311, 312, 313, 314, 315, 316, 317, 318, 319, 320, 321, 322, 323, 324, 325, 326, 327, 328, 329, 330, 331, 332, 333, 334, 335, 336, 337, 338로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
vi) 서열식별번호: 2의 아미노산 362 내지 546에 상응하는 영역 15, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 362, 363, 364, 365, 366, 367, 368, 369, 370, 371, 372, 373, 374, 375, 376, 377, 378, 379, 380, 381, 382, 383, 384, 385, 386, 387, 388, 389, 390, 391, 392, 393, 394, 395, 396, 397, 398, 399, 400, 401, 402, 403, 404, 405, 406, 407, 408, 409, 410, 411, 412, 413, 414, 415, 416, 417, 418, 419, 420, 421, 422, 423, 424, 425, 426, 427, 428, 429, 430, 431, 432, 433, 434, 435, 436, 437, 438, 439, 440, 441, 442, 443, 444, 445, 446, 447, 448, 449, 450, 451, 452, 453, 454, 455, 456, 457, 458, 459, 460, 461, 462, 463, 464, 465, 466, 467, 468, 469, 470, 471, 472, 473, 474, 475, 476, 477, 478, 479, 480, 481, 482, 483, 484, 485, 486, 487, 488, 489, 490, 491, 492, 493, 494, 495, 496, 497, 498, 499, 500, 501, 502, 503, 504, 505, 506, 507, 508, 509, 510, 511, 512, 513, 514, 515, 516, 517, 518, 519, 520, 521, 522, 523, 524, 525, 526, 527, 528, 529, 530, 531, 532, 533, 534, 535, 536, 537, 538, 539, 540, 541, 542, 543, 544, 545, 546으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
vii) 서열식별번호: 2의 아미노산 596 내지 611에 상응하는 영역 16, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 596, 597, 598, 599, 600, 601, 602, 603, 604, 605, 606, 607, 608, 609, 610, 611로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
viii) 서열식별번호: 2의 아미노산 661 내지 805에 상응하는 영역 17, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 661, 662, 663, 664, 665, 666, 667, 668, 669, 670, 671, 672, 673, 674, 675, 676, 677, 678, 679, 680, 681, 682, 683, 684, 685, 686, 687, 688, 689, 690, 691, 692, 693, 694, 695, 696, 697, 698, 699, 700, 701, 702, 703, 704, 705, 706, 707, 708, 709, 710, 711, 712, 713, 714, 715, 716, 717, 718, 719, 720, 721, 722, 723, 724, 725, 726, 727, 728, 729, 730, 731, 732, 733, 734, 735, 736, 737, 738, 739, 740, 741, 742, 743, 744, 745, 746, 747, 748, 749, 750, 751, 752, 753, 754, 755, 756, 757, 758, 759, 760, 761, 762, 763, 764, 765, 766, 767, 768, 769, 770, 771, 772, 773, 774, 775, 776, 777, 778, 779, 780, 781, 782, 783, 784, 785, 786, 787, 788, 789, 790, 791, 792, 793, 794, 795, 796, 797, 798, 799, 800, 801, 802, 803, 804, 805로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
ix) 서열식별번호: 2의 아미노산 829 내지 838에 상응하는 영역 18, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 829, 830, 831, 832, 833, 834, 835, 836, 837, 838로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함)
x) 서열식별번호: 2의 아미노산 1043 내지 1055에 상응하는 영역 19, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치 1043, 1044, 1045, 1046, 1047, 1048, 1049, 1050, 1051, 1052, 1053, 1054, 1055로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함).
한 실시양태에서 본 발명은 서열식별번호: 2의 아미노산 95 내지 105에 상응하는 영역 1, 서열식별번호: 2의 아미노산 115 내지 138에 상응하는 영역 2, 서열식별번호: 2의 아미노산 210 내지 251에 상응하는 영역 3, 서열식별번호: 2의 아미노산 267 내지 301에 상응하는 영역 4, 서열식별번호: 2의 아미노산 339 내지 361에 상응하는 영역 5, 서열식별번호: 2의 아미노산 547 내지 595에 상응하는 영역 6, 서열식별번호: 2의 아미노산 612 내지 660에 상응하는 영역 7, 서열식별번호: 2의 아미노산 806 내지 828에 상응하는 영역 8, 및 서열식별번호: 2의 아미노산 839 내지 1042에 상응하는 영역 9로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 영역의 1개 이상의 위치에서의 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환) 또는 1개의 영역에서의 다중 변경 (예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개) 또는 다중 영역 (예를 들어 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 또는 9개)에서의 다중 변경 (예를 들어 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개)을 포함하는 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이며, 여기서 상기 변이체는 서열식별번호: 2에 대해 적어도 60% 및 100% 미만의 서열 동일성을 갖고; 바람직하게는 상기 엔도글루카나제 변이체는 크산탄 리아제로 사전처리된 크산탄 검에 대해 활성을 갖고, 추가로 바람직하게는 상기 활성은 크산탄 검 분해 활성이다.
한 실시양태에서 본 발명은 서열식별번호: 2의 아미노산 1 내지 94에 상응하는 영역 10, 서열식별번호: 2의 아미노산 106 내지 114에 상응하는 영역 11, 서열식별번호: 2의 아미노산 139 내지 209에 상응하는 영역 12, 서열식별번호: 2의 아미노산 252 내지 266에 상응하는 영역 13, 서열식별번호: 2의 아미노산 302 내지 338에 상응하는 영역 14, 서열식별번호: 2의 아미노산 362 내지 546에 상응하는 영역 15, 서열식별번호: 2의 아미노산 596 내지 611에 상응하는 영역 16, 서열식별번호: 2의 아미노산 661 내지 805에 상응하는 영역 17, 서열식별번호: 2의 아미노산 829 내지 838에 상응하는 영역 18, 및 서열식별번호: 2의 아미노산 1043 내지 1055에 상응하는 영역 19로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 포함하는 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이며, 여기서 상기 변이체는 서열식별번호: 2에 대해 적어도 60% 및 100% 미만의 서열 동일성을 갖고; 바람직하게는 상기 엔도글루카나제 변이체는 크산탄 리아제로 사전처리된 크산탄 검에 대해 활성을 갖고, 추가로 바람직하게는 상기 활성은 크산탄 검 분해 활성이다.
한 실시양태에서 본 발명은 서열식별번호: 2의 아미노산 1 내지 94에 상응하는 영역 10, 서열식별번호: 2의 아미노산 106 내지 114에 상응하는 영역 11, 서열식별번호: 2의 아미노산 139 내지 209에 상응하는 영역 12, 서열식별번호: 2의 아미노산 252 내지 266에 상응하는 영역 13, 서열식별번호: 2의 아미노산 302 내지 338에 상응하는 영역 14, 서열식별번호: 2의 아미노산 362 내지 546에 상응하는 영역 15, 서열식별번호: 2의 아미노산 596 내지 611에 상응하는 영역 16, 서열식별번호: 2의 아미노산 661 내지 805에 상응하는 영역 17, 서열식별번호: 2의 아미노산 829 내지 838에 상응하는 영역 18, 및 서열식별번호: 2의 아미노산 1043 내지 1055에 상응하는 영역 19로 이루어진 군으로부터 선택된 (예를 들어 서열식별번호: 2 또는 또 다른 모 엔도글루카나제의) 1개의 영역에서 다중 변경 (예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개)을 갖는 본원에 기재된 바와 같은 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이며, 여기서 상기 변이체는 서열식별번호: 2에 대해 적어도 60% 및 100% 미만의 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 상기 엔도글루카나제 변이체는 크산탄 리아제로 사전처리된 크산탄 검에 대해 활성을 갖고, 추가로 바람직하게는 상기 활성은 크산탄 검 분해 활성이다.
한 실시양태에서 본 발명은 서열식별번호: 2의 아미노산 1 내지 94에 상응하는 영역 10, 서열식별번호: 2의 아미노산 106 내지 114에 상응하는 영역 11, 서열식별번호: 2의 아미노산 139 내지 209에 상응하는 영역 12, 서열식별번호: 2의 아미노산 252 내지 266에 상응하는 영역 13, 서열식별번호: 2의 아미노산 302 내지 338에 상응하는 영역 14, 서열식별번호: 2의 아미노산 362 내지 546에 상응하는 영역 15, 서열식별번호: 2의 아미노산 596 내지 611에 상응하는 영역 16, 서열식별번호: 2의 아미노산 661 내지 805에 상응하는 영역 17, 서열식별번호: 2의 아미노산 829 내지 838에 상응하는 영역 18, 및 서열식별번호: 2의 아미노산 1043 내지 1055에 상응하는 영역 19로 이루어진 군으로부터 선택된 (예를 들어 서열식별번호: 2 또는 또 다른 모 엔도글루카나제의) 다중 영역 (예를 들어 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개)에서 다중 변경 (예를 들어 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개)을 갖는 본원에 기재된 바와 같은 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이며, 바람직하게는 상기 엔도글루카나제 변이체는 크산탄 리아제로 사전처리된 크산탄 검에 대해 활성을 갖고, 추가로 바람직하게는 상기 활성은 크산탄 검 분해 활성이다.
한 실시양태에서 본 발명은 영역 1-9로 이루어진 군으로부터 선택된 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 본 발명의 모 엔도글루카나제 (예를 들어 서열식별번호: 2)를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이며, 여기서 상기 영역은 킬레이트화제-유도된 불안정성 영역이고, 바람직하게는 상기 킬레이트화제-유도된 불안정성 영역은 하기 특색: 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 입체형태적으로 덜 안정함; 및/또는 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 상기 킬레이트화제에 더 노출됨; 및/또는 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 상기 킬레이트화제에 더 접근가능함; 및/또는 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 입체형태적으로 더 동적임; 및/또는 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 중수소 혼입을 더 잘 수용함 중 1개 이상을 갖고; 추가로 바람직하게는 상기 인접 영역은 서열식별번호: 2의 아미노산 1 내지 94에 상응하는 영역 10, 서열식별번호: 2의 아미노산 106 내지 114에 상응하는 영역 11, 서열식별번호: 2의 아미노산 139 내지 209에 상응하는 영역 12, 서열식별번호: 2의 아미노산 252 내지 266에 상응하는 영역 13, 서열식별번호: 2의 아미노산 302 내지 338에 상응하는 영역 14, 서열식별번호: 2의 아미노산 362 내지 546에 상응하는 영역 15, 서열식별번호: 2의 아미노산 596 내지 611에 상응하는 영역 16, 서열식별번호: 2의 아미노산 661 내지 805에 상응하는 영역 17, 서열식별번호: 2의 아미노산 829 내지 838에 상응하는 영역 18, 및 서열식별번호: 2의 아미노산 1043 내지 1055에 상응하는 영역 19로 이루어진 군으로부터 선택되고; 추가로 가장 바람직하게는 상기 킬레이트화제는 EDTA 또는 시트레이트이다.
한 실시양태에서 본원에 언급된 인접 영역은 하기: 서열식별번호: 2의 아미노산 1 내지 94에 상응하는 영역 10, 서열식별번호: 2의 아미노산 106 내지 114에 상응하는 영역 11, 서열식별번호: 2의 아미노산 139 내지 209에 상응하는 영역 12, 서열식별번호: 2의 아미노산 252 내지 266에 상응하는 영역 13, 서열식별번호: 2의 아미노산 302 내지 338에 상응하는 영역 14, 서열식별번호: 2의 아미노산 362 내지 546에 상응하는 영역 15, 서열식별번호: 2의 아미노산 596 내지 611에 상응하는 영역 16, 서열식별번호: 2의 아미노산 661 내지 805에 상응하는 영역 17, 서열식별번호: 2의 아미노산 829 내지 838에 상응하는 영역 18, 및 서열식별번호: 2의 아미노산 1043 내지 1055에 상응하는 영역 19 중 1개 이상 또는 모두일 수 있다.
한 실시양태에서 본 발명은 (예를 들어 서열식별번호: 2 또는 또 다른 모 엔도글루카나제의) 영역 1-9로 이루어진 군으로부터 선택된 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 본 발명의 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이며, 여기서 세제 성분을 포함하는 수용액 중에서 (예를 들어 서열식별번호: 2 또는 또 다른 모 엔도글루카나제의) 상기 영역은 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 상기 세제 성분에 상대적으로 더 접근가능하다.
한 실시양태에서 본 발명은 (예를 들어 서열식별번호: 2 또는 또 다른 모 엔도글루카나제의) 영역 1-9로 이루어진 군으로부터 선택된 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 본 발명의 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이며, 여기서 세제 성분을 포함하는 수용액 중에서 (예를 들어 서열식별번호: 2 또는 또 다른 모 엔도글루카나제의) 상기 영역은 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 상기 세제 성분에 상대적으로 더 노출된다.
한 실시양태에서 본 발명은 (예를 들어 서열식별번호: 2 또는 또 다른 모 엔도글루카나제의) 영역 1-9로 이루어진 군으로부터 선택된 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 본 발명의 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이며, 여기서 세제 성분을 포함하는 수용액 중에서 (예를 들어 서열식별번호: 2 또는 또 다른 모 엔도글루카나제의) 상기 영역은 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 상기 세제 성분에 상대적으로 더 접근가능하다.
한 실시양태에서 본 발명은 (예를 들어 서열식별번호: 2 또는 또 다른 모 엔도글루카나제의) 영역 1-9로 이루어진 군으로부터 선택된 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 본 발명의 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이며, 여기서 세제 성분을 포함하는 수용액 중에서 (예를 들어 서열식별번호: 2 또는 또 다른 모 엔도글루카나제의) 상기 영역은 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 상대적으로 입체형태적으로 더 동적이다.
한 실시양태에서 본 발명은 (예를 들어 서열식별번호: 2 또는 또 다른 모 엔도글루카나제의) 영역 1-9로 이루어진 군으로부터 선택된 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 본 발명의 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이며, 여기서 세제 성분을 포함하는 수용액 중에서 (예를 들어 서열식별번호: 2 또는 또 다른 모 엔도글루카나제의) 상기 영역은 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 중수소 혼입을 상대적으로 더 잘 수용한다.
한 실시양태에서 본 발명은 서열식별번호: 2의 아미노산 95 내지 105에 상응하는 영역 1, 서열식별번호: 2의 아미노산 115 내지 138에 상응하는 영역 2, 서열식별번호: 2의 아미노산 210 내지 251에 상응하는 영역 3, 서열식별번호: 2의 아미노산 267 내지 301에 상응하는 영역 4, 서열식별번호: 2의 아미노산 339 내지 361에 상응하는 영역 5, 서열식별번호: 2의 아미노산 547 내지 595에 상응하는 영역 6, 서열식별번호: 2의 아미노산 612 내지 660에 상응하는 영역 7, 서열식별번호: 2의 아미노산 806 내지 828에 상응하는 영역 8, 및 서열식별번호: 2의 아미노산 839 내지 1042에 상응하는 영역 9로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 추가로 포함하는 본 발명의 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이며, 여기서 상기 변이체는 서열식별번호: 2에 대해 적어도 60% 및 100% 미만의 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 상기 엔도글루카나제 변이체는 크산탄 리아제로 사전처리된 크산탄 검에 대해 활성을 갖고, 추가로 바람직하게는 상기 활성은 크산탄 검 분해 활성이다.
한 실시양태에서 본 발명은 서열식별번호: 2의 아미노산 95 내지 105에 상응하는 영역 1, 서열식별번호: 2의 아미노산 115 내지 138에 상응하는 영역 2, 서열식별번호: 2의 아미노산 210 내지 251에 상응하는 영역 3, 서열식별번호: 2의 아미노산 267 내지 301에 상응하는 영역 4, 서열식별번호: 2의 아미노산 339 내지 361에 상응하는 영역 5, 서열식별번호: 2의 아미노산 547 내지 595에 상응하는 영역 6, 서열식별번호: 2의 아미노산 612 내지 660에 상응하는 영역 7, 서열식별번호: 2의 아미노산 806 내지 828에 상응하는 영역 8, 및 서열식별번호: 2의 아미노산 839 내지 1042에 상응하는 영역 9로 이루어진 군으로부터 선택된 (예를 들어 서열식별번호: 2 또는 또 다른 모 엔도글루카나제의) 1개의 영역에서 다중 변경 (예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개)을 갖는 본 발명의 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이며, 여기서 상기 변이체는 서열식별번호: 2에 대해 적어도 60% 및 100% 미만의 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 상기 엔도글루카나제 변이체는 크산탄 리아제로 사전처리된 크산탄 검에 대해 활성을 갖고, 추가로 바람직하게는 상기 활성은 크산탄 검 분해 활성이다.
한 실시양태에서 본 발명은 서열식별번호: 2의 아미노산 95 내지 105에 상응하는 영역 1, 서열식별번호: 2의 아미노산 115 내지 138에 상응하는 영역 2, 서열식별번호: 2의 아미노산 210 내지 251에 상응하는 영역 3, 서열식별번호: 2의 아미노산 267 내지 301에 상응하는 영역 4, 서열식별번호: 2의 아미노산 339 내지 361에 상응하는 영역 5, 서열식별번호: 2의 아미노산 547 내지 595에 상응하는 영역 6, 서열식별번호: 2의 아미노산 612 내지 660에 상응하는 영역 7, 서열식별번호: 2의 아미노산 806 내지 828에 상응하는 영역 8, 및 서열식별번호: 2의 아미노산 839 내지 1042에 상응하는 영역 9로 이루어진 군으로부터 선택된 (예를 들어 서열식별번호: 2 또는 또 다른 모 엔도글루카나제의) 다중 영역 (예를 들어 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 또는 9개)에서 다중 변경 (예를 들어 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개)을 갖는 본 발명의 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이며, 여기서 상기 변이체는 서열식별번호: 2에 대해 적어도 60% 및 100% 미만의 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 상기 엔도글루카나제 변이체는 크산탄 리아제로 사전처리된 크산탄 검에 대해 활성을 갖고, 추가로 바람직하게는 상기 활성은 크산탄 검 분해 활성이다.
추가 실시양태에서, 본 발명은 서열식별번호: 2의 아미노산 95 내지 105에 상응하는 영역 1, 서열식별번호: 2의 아미노산 115 내지 138에 상응하는 영역 2, 서열식별번호: 2의 아미노산 210 내지 251에 상응하는 영역 3, 서열식별번호: 2의 아미노산 267 내지 301에 상응하는 영역 4, 서열식별번호: 2의 아미노산 339 내지 361에 상응하는 영역 5, 서열식별번호: 2의 아미노산 547 내지 595에 상응하는 영역 6, 서열식별번호: 2의 아미노산 612 내지 660에 상응하는 영역 7, 서열식별번호: 2의 아미노산 806 내지 828에 상응하는 영역 8, 및 서열식별번호: 2의 아미노산 839 내지 1042에 상응하는 영역 9로 이루어진 군으로부터 선택된 (예를 들어 서열식별번호: 2 또는 또 다른 모 엔도글루카나제의) 다중 영역 (예를 들어 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 또는 9개)에서 다중 변경 (예를 들어 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개)을 갖고, 서열식별번호: 2의 아미노산 1 내지 94에 상응하는 영역 10, 서열식별번호: 2의 아미노산 106 내지 114에 상응하는 영역 11, 서열식별번호: 2의 아미노산 139 내지 209에 상응하는 영역 12, 서열식별번호: 2의 아미노산 252 내지 266에 상응하는 영역 13, 서열식별번호: 2의 아미노산 302 내지 338에 상응하는 영역 14, 서열식별번호: 2의 아미노산 362 내지 546에 상응하는 영역 15, 서열식별번호: 2의 아미노산 596 내지 611에 상응하는 영역 16, 서열식별번호: 2의 아미노산 661 내지 805에 상응하는 영역 17, 서열식별번호: 2의 아미노산 829 내지 838에 상응하는 영역 18, 및 서열식별번호: 2의 아미노산 1043 내지 1055에 상응하는 영역 19로 이루어진 군으로부터 선택된 다중 인접 영역 (예를 들어 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10개)에서 다중 변경 (예를 들어 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10개)을 갖는 본 발명의 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이며; 여기서 상기 변이체는 서열식별번호: 2에 대해 적어도 60% 및 100% 미만의 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 상기 엔도글루카나제 변이체는 크산탄 리아제로 사전처리된 크산탄 검에 대해 활성을 갖고, 추가로 바람직하게는 상기 활성은 크산탄 검 분해 활성이다.
한 실시양태에서, 본 발명은 성숙 모 폴리펩티드 (예를 들어 서열식별번호: 2)의 1개 이상 (예를 들어 여러개)의 위치에서 변경 (예를 들어, 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 포함하는 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이며, 여기서 각각의 변경은 독립적으로 치환, 삽입 또는 결실이고, 여기서 변이체는 엔도글루카나제 활성을 갖는다.
한 실시양태에서, 변이체는 모 엔도글루카나제의 아미노산 서열에 대해 적어도 60%, 예를 들어 적어도 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99%, 그러나 100% 미만의 서열 동일성을 갖는다.
한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드에 대해 적어도 60%, 예를 들어 적어도 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99%, 그러나 100% 미만의 서열 동일성을 갖는다.
한 실시양태에서 본 발명은 본 발명의 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이며, 여기서 상기 변이체는 서열식별번호: 2에 대해 적어도 61%, 62%, 63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 서열 동일성을 갖는다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 4, 17, 18, 20, 51, 53, 55, 56, 60, 63, 71, 79, 87, 92, 99, 120, 125, 126, 130, 137, 182, 186, 189, 192, 213, 216, 221, 226, 228, 230, 231, 232, 233, 235, 240, 243, 247, 249, 278, 279, 281, 283, 285, 289, 292, 294, 298, 302, 311, 313, 333, 346, 353, 358, 386, 387, 388, 390, 403, 408, 410, 416, 441, 448, 451, 471, 472, 476, 489, 507, 512, 515, 538, 555, 556, 557, 558, 559, 560, 561, 562, 563, 564, 567, 568, 570, 575, 578, 579, 580, 581, 583, 589, 590, 591, 592, 593, 595, 598, 599, 602, 603, 605, 607, 609, 616, 627, 630, 631, 635, 636, 638, 639, 640, 641, 642, 643, 644, 651, 676, 683, 688, 690, 694, 698, 699, 706, 711, 713, 1719, 720, 744, 749, 754, 756, 760, 781, 786, 797, 810, 811, 812, 815, 823, 824, 825, 827, 828, 833, 834, 835, 837, 843, 848, 868, 869, 870, 871, 872, 873, 874, 880, 881, 883, 884, 885, 887, 888, 890, 892, 894, 898, 905, 906, 912, 920, 921, 924, 926, 927, 928, 932, 933, 934, 935, 937, 938, 939, 940, 941, 942, 943, 946, 948, 950, 952, 953, 954, 956, 957, 960, 966, 971, 972, 980, 989, 991, 994, 995, 998, 999, 1006, 1009, 1010, 1011, 1029, 1030, 1031, 1032, 1035, 1037, 1038, 1040, 1041, 1042, 1044, 1045, 1048에 상응하는 1개 이상 (예를 들어 여러개)의 위치에서 변경을 포함하며, 여기서 넘버링은 서열식별번호: 2에 따른다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 4, 17, 18, 20, 51, 53, 55, 56, 60, 63, 71, 79, 87, 92, 99, 120, 125, 126, 130, 137, 182, 186, 189, 192, 213, 216, 221, 226, 228, 230, 231, 232, 233, 235, 240, 243, 247, 249, 278, 279, 281, 283, 285, 289, 292, 294, 298, 302, 311, 313, 333, 346, 353, 358, 386, 387, 388, 390, 403, 408, 410, 416, 441, 448, 451, 471, 472, 476, 489, 507, 512, 515, 538, 555, 556, 557, 558, 559, 560, 561, 562, 563, 564, 567, 568, 570, 575, 578, 579, 580, 581, 583, 589, 590, 591, 592, 593, 595, 598, 599, 602, 603, 605, 607, 609, 616, 627, 630, 631, 635, 636, 638, 639, 640, 641, 642, 643, 644, 651, 676, 683, 688, 690, 694, 698, 699, 706, 711, 713, 1719, 720, 744, 749, 754, 756, 760, 781, 786, 797, 810, 811, 812, 815, 823, 824, 825, 827, 828, 833, 834, 835, 837, 843, 848, 868, 869, 870, 871, 872, 873, 874, 880, 881, 883, 884, 885, 887, 888, 890, 892, 894, 898, 905, 906, 912, 920, 921, 924, 926, 927, 928, 932, 933, 934, 935, 937, 938, 939, 940, 941, 942, 943, 946, 948, 950, 952, 953, 954, 956, 957, 960, 966, 971, 972, 980, 989, 991, 994, 995, 998, 999, 1006, 1009, 1010, 1011, 1029, 1030, 1031, 1032, 1035, 1037, 1038, 1040, 1041, 1042, 1044, 1045, 1048 중 임의의 것에 상응하는 2개의 위치에서 변경을 포함하며, 여기서 넘버링은 서열식별번호: 2에 따른다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 4, 17, 18, 20, 51, 53, 55, 56, 60, 63, 71, 79, 87, 92, 99, 120, 125, 126, 130, 137, 182, 186, 189, 192, 213, 216, 221, 226, 228, 230, 231, 232, 233, 235, 240, 243, 247, 249, 278, 279, 281, 283, 285, 289, 292, 294, 298, 302, 311, 313, 333, 346, 353, 358, 386, 387, 388, 390, 403, 408, 410, 416, 441, 448, 451, 471, 472, 476, 489, 507, 512, 515, 538, 555, 556, 557, 558, 559, 560, 561, 562, 563, 564, 567, 568, 570, 575, 578, 579, 580, 581, 583, 589, 590, 591, 592, 593, 595, 598, 599, 602, 603, 605, 607, 609, 616, 627, 630, 631, 635, 636, 638, 639, 640, 641, 642, 643, 644, 651, 676, 683, 688, 690, 694, 698, 699, 706, 711, 713, 1719, 720, 744, 749, 754, 756, 760, 781, 786, 797, 810, 811, 812, 815, 823, 824, 825, 827, 828, 833, 834, 835, 837, 843, 848, 868, 869, 870, 871, 872, 873, 874, 880, 881, 883, 884, 885, 887, 888, 890, 892, 894, 898, 905, 906, 912, 920, 921, 924, 926, 927, 928, 932, 933, 934, 935, 937, 938, 939, 940, 941, 942, 943, 946, 948, 950, 952, 953, 954, 956, 957, 960, 966, 971, 972, 980, 989, 991, 994, 995, 998, 999, 1006, 1009, 1010, 1011, 1029, 1030, 1031, 1032, 1035, 1037, 1038, 1040, 1041, 1042, 1044, 1045, 1048 중 임의의 것에 상응하는 3개의 위치에서 변경을 포함하며, 여기서 넘버링은 서열식별번호: 2에 따른다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 4, 17, 18, 20, 51, 53, 55, 56, 60, 63, 71, 79, 87, 92, 99, 120, 125, 126, 130, 137, 182, 186, 189, 192, 213, 216, 221, 226, 228, 230, 231, 232, 233, 235, 240, 243, 247, 249, 278, 279, 281, 283, 285, 289, 292, 294, 298, 302, 311, 313, 333, 346, 353, 358, 386, 387, 388, 390, 403, 408, 410, 416, 441, 448, 451, 471, 472, 476, 489, 507, 512, 515, 538, 555, 556, 557, 558, 559, 560, 561, 562, 563, 564, 567, 568, 570, 575, 578, 579, 580, 581, 583, 589, 590, 591, 592, 593, 595, 598, 599, 602, 603, 605, 607, 609, 616, 627, 630, 631, 635, 636, 638, 639, 640, 641, 642, 643, 644, 651, 676, 683, 688, 690, 694, 698, 699, 706, 711, 713, 1719, 720, 744, 749, 754, 756, 760, 781, 786, 797, 810, 811, 812, 815, 823, 824, 825, 827, 828, 833, 834, 835, 837, 843, 848, 868, 869, 870, 871, 872, 873, 874, 880, 881, 883, 884, 885, 887, 888, 890, 892, 894, 898, 905, 906, 912, 920, 921, 924, 926, 927, 928, 932, 933, 934, 935, 937, 938, 939, 940, 941, 942, 943, 946, 948, 950, 952, 953, 954, 956, 957, 960, 966, 971, 972, 980, 989, 991, 994, 995, 998, 999, 1006, 1009, 1010, 1011, 1029, 1030, 1031, 1032, 1035, 1037, 1038, 1040, 1041, 1042, 1044, 1045, 1048에 상응하는 각각의 위치 (또는 적어도 4개의 위치)에서 변경을 포함하며, 여기서 넘버링은 서열식별번호: 2에 따른다.
또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 위치 17, 20, 51, 53, 55, 56, 60, 63, 79, 87, 192, 302, 387, 388, 390, 403, 408, 410, 416, 448, 451, 471, 472, 507, 512, 515, 538, 598, 602, 605, 609, 676, 694, 698, 699, 711, 754, 760, 781, 786, 797, 834, 및 835에 상응하는 각각의 위치 (또는 적어도 4개의 위치)에서 변경을 포함한다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 4에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 4에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 V4T를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 17에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 17에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 S17A를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 18에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 18에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 N18G를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 20에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 20에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 F20P, F20N, F20G, 또는 F20Y, 바람직하게는 F20P를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 51에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 51에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 K51Q 또는 K51H, 바람직하게는 K51Q를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 53에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 53에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 E53Y, E53P, 또는 E53G, 바람직하게는 E53Y를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 55에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 55에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 Y55M 또는 Y55D, 바람직하게는 Y55M을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 56에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 56에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 V56M을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 60에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 60에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 Y60F를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 63에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 63에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 S63F를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 71에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 71에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 A71E를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 79에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 79에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 S79W를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 87에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 87에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 T87R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 92에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 92에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 T92S를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 120에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 120에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 A120P를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 129에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 129에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 N129D를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 137에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 137에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 F137L을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 182에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 182에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 H182Y를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 186에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 186에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 A186P를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 189에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 189에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 N189K를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 192에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 192에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 K192N을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 216에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 216에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 N216D, N216Q, 또는 N216R, 바람직하게는 N216D를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 226에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 226에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 L226K를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 228에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 228에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 K228E를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 230에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 230에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 G230H를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 233에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 233에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 L233H를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 247에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 247에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 D247N을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 278에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 278에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 A278S를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 279에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 279에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 G279E를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 281에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 281에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 K281R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 283에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 283에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 A283D를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 285에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 285에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 N285L, N285M, N285S, N285P, N285T, N285Y, N285H, N285K, N285D, N285W, N285R, 또는 N285G, 바람직하게는 N285G를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 289에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 289에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 Q289E를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 292에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 292에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 T292F, T292L, T292I, T292V, T292S, T292P, T292Y, T292Q, T292N, T292K, T292D, T292A, 또는 T292G, 바람직하게는 T292A를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 294에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 294에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 A294V를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 297에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 297에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 F297L을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 298에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 298에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 Q298E를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 302에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 302에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 I302D, I302H, I302V, 또는 I302M, 바람직하게는 I302D를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 311에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 311에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 H311N을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 313에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 313에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 S313D를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 333에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 333에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 W333L을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 346에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 346에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 A346H 또는 A246D를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 353에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 353에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 T353D를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 386에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 386에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 A386P를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 387에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 387에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 I387T를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 388에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 388에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 K388R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 390에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 390에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 K390Q를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 403에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 403에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 I403Y를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 408에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 408에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 E408D, E408N, E408S, E408P, E408A, E408G, 또는 E408G, 바람직하게는 E408D를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 410에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 410에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 P410G를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 416에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 416에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 Q416S 또는 Q416D, 바람직하게는 Q416S를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 441에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 441에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 N441G를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 448에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 448에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 A448E, A448W, 또는 A448S, 바람직하게는 A448E를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 451에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 451에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 K451S 또는 K451Q, 바람직하게는 K451S 또는 바람직하게는 K451Q를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 471에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 471에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 G471S를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 472에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 472에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 S472Y를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 476에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 476에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 D476R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 489에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 489에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 Q489P를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 507에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 507에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 K507R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 512에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 512에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 K512P를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 515에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 515에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 S515V를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 538에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 538에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 S538C를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 555에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 555에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 L555Q를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 557에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 557에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 G557R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 558에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 558에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 변경 N558D, N558NP, N558F, N558I, N558E, 또는 N558M을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 559에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 559에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 A559S, A559N, A559F, A559M, A559P, A559Y, A559H, A559Q, A559D, 또는 A559G, 바람직하게는 A559N을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 560에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 560에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 S560P 및 S560G, 바람직하게는 S560P를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 561에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 561에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 T561P를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 564에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 564에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 A564I, A564Y, A564Q, A564E, 또는 A564K, 바람직하게는 A564I를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 567에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 567에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 V567F 또는 V567P를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 568에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 568에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 K568R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 570에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 570에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 P570K, P570Q, P570R, P570T, P570S, P570A, P570H, P570G, 및 P570N, 바람직하게는 P570K 또는 P570R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 575에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 575에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 I575V를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 579에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 579에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 Y579W 또는 Y579F, 바람직하게는 Y579W를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 581에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 581에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 T581M을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 592에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 592에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 G592D를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 593에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 593에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 S593N 및 S593E, 바람직하게는 S593N을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 595에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 595에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 S595L을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 598에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 598에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 S598Q를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 599에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 599에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 A599S를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 602에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 602에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 I602T 또는 I602D, 바람직하게는 I602T를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 603에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 603에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 V603P를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 605에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 605에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 S605T를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 607에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 607에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 S607C를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 609에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 609에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 G609E를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 616에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 616에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 S616D 또는 S616G, 바람직하게는 S616D를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 627에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 627에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 K627L, K627M, K627V, K627S, K627T, K627Q, 또는 K627R, 바람직하게는 K627R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 630에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 630에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 I630F, I630V, 또는 I630Y를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 631에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 631에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 K631A 또는 K631R, 바람직하게는 K631R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 633에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 633에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 T633V를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 635에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 635에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 D635P, D635N, D635K, D635E, D635W, D635L, D635M, D635T, D635A, 또는 D635G, 바람직하게는 D635A를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 636에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 636에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 S636M, S636A, S636H, S636Q, S636N, S636R, S636L, S636H, 또는 S636K, 바람직하게는 S636N을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 638에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 638에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 F638N, F638I, F638V, F638T, F638L, F638Y, F638M 또는 F638H, 바람직하게는 F638N을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 639에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 639에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 T639S, T639I, T639M, T639V, T639A, T639D, T639E, T639Y, T639W, T639P, 또는 T639G, 바람직하게는 T639G 또는 T639I를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 640에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 640에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 T640S를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 642에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 642에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 S642T 또는 S642N, 바람직하게는 S642N을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 643에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 643에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 N643D 또는 N643H, 바람직하게는 N643D를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 651에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 651에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 A651P 또는 A651S, 바람직하게는 A651P를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 676에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 676에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 D676H를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 683에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 683에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 Q683E를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 688에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 688에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 A688G를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 690에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 690에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 Y690F를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 694에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 694에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 T694A를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 697에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 697에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 T697G를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 698에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 698에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 R698W를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 699에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 699에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 T699A를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 706에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 706에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 T706Q를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 711에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 711에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 T711S, T711V, 또는 T711Y, 바람직하게는 T711V를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 713에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 713에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 K713R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 719에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 719에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 W719R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 720에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 720에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 K720H를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 744에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 744에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 K744H 또는 K744Q, 바람직하게는 K744H를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 749에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 749에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 A749T를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 754에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 754에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 K754R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 756에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 756에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 V756Y 또는 V756H, 바람직하게는 V756Y를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 760에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 760에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 S760G를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 781에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 781에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 T781M을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 786에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 786에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 N786K를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 797에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 797에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 T797S를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 810에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 810에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 S810Q를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 824에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 824에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 A824D를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 825에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 825에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 T825G를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 828에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 828에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 N828D를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 833에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 833에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 N833D를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 834에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 834에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 Q834E를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 835에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 835에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 S835A 또는 S835D, 바람직하게는 S835A를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 837에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 837에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 V837I를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 848에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 848에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 N848D를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 868에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 868에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 A868E를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 869에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 869에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 A869V를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 870에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 870에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 D870V를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 872에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 872에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 T872G, T872H, T872W, 또는 T872Q, 바람직하게는 T872G를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 880에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 880에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 R880K를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 881에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 881에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 V881Q 또는 V881T, 바람직하게는 V881Q를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 883에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 883에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 T883R, T883V, T883C, 또는 T883K, 바람직하게는 T883R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 884에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 884에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 Y884H를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 885에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 885에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 A885Q, A885N, 또는 A885F, 바람직하게는 A885F를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 887에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 887에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 T887S 또는 T887K, 바람직하게는 T887K를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 888에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 888에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 L888M을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 890에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 890에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 V890R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 892에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 892에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 T892V 또는 T892P, 바람직하게는 T892P를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 898에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 898에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 R898Q를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 905에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 905에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 N905D를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 906에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 906에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 F906A를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 912에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 912에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 Q912V를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 920에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 920에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 N920D 또는 N920P를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 921에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 921에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 K921R 또는 K921E를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 924에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 924에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 A924D를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 926에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 926에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 V926F 또는 V926P, 바람직하게는 V926P를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 927에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 927에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 K927R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 928에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 928에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 S928D를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 932에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 932에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 T932A를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 933에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 933에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 N933S 또는 N933V, 바람직하게는 N933S를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 934에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 934에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 Y934G, Y034R, 또는 Y934Q, 바람직하게는 Y934G를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 937에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 937에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 A937E를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 938에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 938에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 V938I를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 939에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 939에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 K939V를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 941에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 941에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 N941S를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 942에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 942에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 A942P를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 946에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 946에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 G946R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 948에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 948에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 K948R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 956에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 956에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 Q956Y 또는 A956S, 바람직하게는 Q956Y를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 957에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 957에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 A957L 또는 A957P, 바람직하게는 A957L을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 966에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 966에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 N966C를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 972에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 972에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 T972K를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 980에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 980에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 M980I를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 994에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 994에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 G994N 또는 G994D를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 999에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 999에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 T999R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 1011에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 1011에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 L1011A를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 1031에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 1031에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 K1031I를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 1037에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 1037에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 A1037E를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 1038에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 1038에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 S1038G를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 1041에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 1041에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 G1041R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 1042에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 1042에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 Y1042N을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 1048에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 1048에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 F1048W를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 559+579에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 559+579에 상응하는 위치에서의 아미노산은 독립적으로 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 치환 A559N+Y579W 또는 A559N+Y579F를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 위치: 17, 20, 51, 53, 55, 56, 60, 63, 79, 87, 192, 302, 387, 388, 390, 403, 408, 410, 416, 448, 451, 471, 472, 507, 512, 515, 538, 598, 602, 605, 609, 676, 694, 698, 699, 711, 754, 760, 781, 786, 797, 834, 및 835에서의 변경으로 이루어진 군으로부터 선택된 위치에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 상기 기재된 바와 같은 위치 중 임의의 것에 상응하는 위치에서의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 S17A, F20P, F20N, F20G, F20Y, K51Q, K51H, E53P, E53G, Y55M, V56M, Y60F, S63F, T87R, K192N, I302H, I302V, I302M, I387T, K388R, K390Q, I403Y, E408D, E408S, E408P, E408A, E408G, E408N, P410G, Q416S, Q416D, A448E, A448W, A448S, K451S, G471S, S472Y, K507R, K512P, S515V, S538C, Y579W, S598Q, I602T, I602D, S605T, G609E, D676H, T694A, R698W, T699A, T711V, T711Y, K754R, S760G, T781M, N786K, T797S, Q834E, 및 S835D로 이루어진 군으로부터 선택된 치환을 포함하거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 넘버링은 서열식별번호: 2에 따른다.
또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 위치: 4, 17, 18, 20, 51, 53, 55, 56, 60, 63, 71, 79, 87, 92, 99, 120, 125, 126, 130, 137, 182, 186, 189, 192, 213, 216, 221, 226, 228, 230, 231, 232, 233, 235, 240, 243, 247, 249, 278, 279, 281, 283, 285, 289, 292, 294, 298, 302, 311, 313, 333, 346, 353, 358, 386, 387, 388, 390, 403, 408, 410, 416, 441, 448, 451, 471, 472, 476, 489, 507, 512, 515, 538, 555, 556, 557, 558, 559, 560, 561, 562, 563, 564, 567, 568, 570, 575, 578, 579, 580, 581, 583, 589, 590, 591, 592, 593, 595, 598, 599, 602, 603, 605, 607, 609, 616, 627, 630, 631, 635, 636, 638, 639, 640, 641, 642, 643, 644, 651, 676, 683, 688, 690, 694, 698, 699, 706, 711, 713, 1719, 720, 744, 749, 754, 756, 760, 781, 786, 797, 810, 811, 812, 815, 823, 824, 825, 827, 828, 833, 834, 835, 837, 843, 848, 868, 869, 870, 871, 872, 873, 874, 880, 881, 883, 884, 885, 887, 888, 890, 892, 894, 898, 905, 906, 912, 920, 921, 924, 926, 927, 928, 932, 933, 934, 935, 937, 938, 939, 940, 941, 942, 943, 946, 948, 950, 952, 953, 954, 956, 957, 960, 966, 971, 972, 980, 989, 991, 994, 995, 998, 999, 1006, 1009, 1010, 1011, 1029, 1030, 1031, 1032, 1035, 1037, 1038, 1040, 1041, 1042, 1044, 1045, 1048에서의 변경으로 이루어진 군으로부터 선택된 위치에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 상기 기재된 바와 같은 위치 중 임의의 것에 상응하는 위치에서의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 N285G, W333L, T353D, N558NP, N558F, T633V, D635L, D635M, D635T, F638Y, T639D, G994N, 및 K281T, G563E, I575M, I575A, K921D, N558K+A559K+S560F+T561P+G562W, N558K, A559K, S560F, T561P, G562W 및 I125V, A126R, K130R, K213R, A221R, K228E, K228I, G230F, G230L, G230A, G230H, G230N, G230W, G230T, F231Y, F231N, V232R, V232G, H235D, N240Q, G243K, G243R, A249N, A278S, K281F, K281V, K281Y, K281H, K281Q, K281N, K281W, N285L, N285M, N285S, N285P, N285T, N285Y, N285H, N285K, N285D, N285W, N285R, T292F, T292L, T292I, T292V, T292S, T292P, T292Y, T292Q, T292N, T292K, T292D, T292G, F297L, A346H, G556S, N558D, N558M, N558Q, N558I, N558Y, N558H, A559N, A559F, A559M, A559P, A559Y, A559H, A559Q, A559D, A559R, A559G, A559I, A559S, S560P, S560K, S560G, S560D, T561P, T561E, T561Q, T561S, T561D, A564I, A564Y, A564H, A564Q, A564K, A564E, E565M, V567F, K568R, L569F, L569Y, L569D, L569E, P570F, P570L, P570I, P570M, P570V, P570S, P570T, P570A, P570Y, P570H, P570Q, P570N, P570K, P570E, P570W, P570R, P570G, I575D, I575E, I576F, I576M, I576P, D578R, Y579F, Y579W, V580L, D583M, Q589G, P590S, P590T, P590E, E591L, G592D, S593P, S593H, S593Q, S593N, S593K, S593D, S593E, S593R, S616D, K627L, K627M, K627V, K627S, K627T, K627Q, K627R, I630F, I630V, I630Y, D635A, D635P, D635N, D635K, D635E, D635G, D635W, S636L, S636M, S636A, S636H, S636Q, S636N, S636K, S636R, F638I, F638V, F638T, F638L, F638H, T639V, T639S, T639L, T639I, T639M, T639A, T639E, T639W, T639G, Y641E, S642T, S642N, N643D, N643H, N643T, T644F, A651P, S810R, A811S, V812F, V812I, V812M, V812W, V812R, N815V, N815Y, N815E, N815W, N815R, S823Q, A824T, T825N, T825W, T825A, T825D, V827I, V827M, V827S, T843V, D870F, D870L, D870I, D870M, D870V, D870S, D870T, D870Y, D870H, D870Q, D870N, D870K, D870E, D870W, D870R, D870G, P871F, P871L, P871I, P871M, P871V, P871S, P871T, P871A, P871Y, P871H, P871Q, T872S, T872F, T872A, T872Y, T872H, T872Q, T872N, T872K, T872D, T872E, T872W, T872R, T872G, D873K, D873E, T874V, T874S, T874P, T874A, T874H, T874Q, T874N, T874K, V881Q, T883K, Y884H, A885F, A885Q, A885N, T887L, T887I, T887S, T887H, T887R, K894E, N920D, K921R, K921E, T932A, N933V, N933S, Y934G, Y934M, Y934S, Y934A, Y934Q, Y934N, Y934E, Y934W, Y934R, T935W, A937F, A937V, A937S, A937T, A937Q, A937D, A937E, V938I, K939I, K939V, D940E, N941S, N941H, N941D, A942P, A942E, D943Y, D943H, R950V, R950H, R950N, F952S, F952W, N953Y, G954L, Y960F, A964N, A964C, N966P, N966C, G971A, Q974K, Q974C, Q989I, Q991L, Q991I, Q991M, Q991V, Q991T, Q991K, Q991C, S995I, S995V, S995Q, S995R, S995C, G998V, G998A, S1006T, S1006A, S1006K, S1006R, Y1010W, L1011M, L1011S, L1011A, L1011Q, L1011N, L1011D, L1011E, R1029N, F1030M, K1031I, K1031S, K1031T, K1031H, V1032G, K1035A, A1037E, A1037W, S1038L, S1038I, L1040N, L1040E, G1041F, L1044F, L1044S, L1044N, L1044W, P1045Q, P1045W, 및 A559N+Y579F, A559N, Y579F, A564E+Y579F, A564E, Y579F, A559N+Y579W, A559N, Y579W, G562P+Y579W, G562P, Y579W, A564D+Y579W, A564D, Y579W, A559N+Y579W+K99R, A559N, Y579W, K99R, A559N+Y579W+K281R, A559N, Y579W, K281R, K281R+A559N+Y579W, K281R, A559N, Y579W, A559N+Y579W+S616D, A559N, Y579W, S616D, A559N+Y579W+S636N, A559N, Y579W, S636N, A559N+Y579W+A651P, A559N, Y579W, A651P, A559N+Y579W+K948E, A559N, Y579W, K948E, A559N+Y579W+K1009E, A559N, Y579W, K1009E, A559N+Y579W+K627R, A559N, Y579W, K627R, Y579W+K921R, Y579W, K921R, A559N+Y579W+K921R, A559N, Y579W, K921R, K99R+Y579W, K99R, Y579W, Y579W+A651P, Y579W, A651P, Y579W+K948E, Y579W, K948E, Y579W+K1009E, Y579W, K1009E, A559N+Y579W+Y934G, A559N, Y579W, Y934G, A559N+Y579W+K921R+Y934G, A559N, Y579W, K921R, Y934G, A559N+Y579W+K627M, A559N, Y579W, K627M, A559N+Y579W+K627R+S616D, A559N, Y579W, K627R, S616D, A559N+Y579F+K627R, A559N, Y579F, K627R, A559N+Y579W+K921R+A651P, A559N, Y579W, K921R, A651P, A559N+Y579W+K921R+K627R, A559N, Y579W, K921R, K627R, A559N+Y579W+K921R+S636K, A559N, Y579W, K921R, S636K, A559N+Y579W+K921R+S616D, A559N, Y579W, K921R, S616D, A559N+Y579W+K921R+S636N, A559N, Y579W, K921R, S636N, A559N+Y579W+K921R+K627R+S636N, A559N, Y579W, K921R, K627R, S636N, A559N+Y579W+S636N+A651P, A559N, Y579W, S636N, A651P, A559N+Y579W+S616D+A651P, A559N, Y579W, S616D, A651P, A559N+Y579W+S616D+S636K, A559N, Y579W, S616D, S636K, A559N+Y579W+S616D+K921R+Y934G, A559N, Y579W, S616D, K921R, Y934G, A559N+Y579W+A651P+K627M, A559N, Y579W, A651P, K627M, A559N+Y579W+A651P+S636K, A559N, Y579W, A651P, S636K, A559N+Y579W+A651P+K627R+S636N, A559N, Y579W, A651P, K627R, S636N, A559N+Y579W+A651P+S616D, A559N, Y579W, A651P, S616D, A559N+Y579W+A651P+K921R+Y934G, A559N, Y579W, A651P, K921R, Y934G, S636N+Y934G, S636N, Y934G, S636N+K921R, S636N, K921R, S636N+K627R, S636N, K627R, S636N+Y579W, S636N, Y579W, F638I+Y934G, F638I, Y934G, F638I+K921R, F638I, K921R, F638I+K627R, F638I, K627R, F638I+Y579W, F638I, Y579W, K627R+K51Q, K627R, K51Q, K627R+K451S, K627R, K451S, K627R+A559N, K627R, A559N, K627R+Y579W, K627R, Y579W, Y579W+Y934G, Y579W, Y934G, A651P+F638I, A651P, F638I, P570Q+A651P, P570Q, A651P, P570Q+K921R, P570Q, K921R, P570Q+K627R, P570Q, K627R, P570Q+A559N, P570Q, A559N, P570Q+Y579W, P570Q, Y579W, P570Q+F638I, P570Q, F638I, P570K+Y579W, P570K, Y579W, P570K+F638I, P570K, F638I, P570T+A651P, P570T, A651P, P570T+S636N, P570T, S636N, P570T+Y934G, P570T, Y934G, P570T+F638I, P570T, F638I, P570T+K921R, P570T, K921R, P570T+K627R, P570T, K627R, P570T+A559N, P570T, A559N, P570T+A885F, P570T, A885F, A885F+Y934G, A885F, Y934G, A885F+K627R, A885F, K627R, A559N+Y579W+S636L, A559N, Y579W, S636L, A559N+Y579W+F638I, A559N, Y579W, F638I, A559N+Y579W+D870M, D870M, A559N+Y579W+S560P, S560P, A559N+Y579W+A564I, A564I, A559N+Y579W+P570N, P570N, A559N+Y579W+P570K, P570K, A559N+Y579W+P570R, P570R, A559N+Y579W+P570A, P570A, A559N+Y579W+P570T, P570T, A559N+Y579W+P570S, P570S, A559N+Y579W+P570Q, P570Q, A559N+Y579W+P570H, P570H, 및 N558E, A559P, A559N, A559H, T561P, A564E, P570A, P570Q, P570R, P570S, P570K, P570T, P570N, Y579W, Y579F, T581M, S616D, K627R, K627M, K627Q, S636N, S636Q, S636R, S636K, S636M, S636H, F638I, F638L, N643D, A651P, A651S, A885F, A885Q, K921R, Y934R, Y934G, N966C, L1011A, K1031I, 및 A559N+P570A+Y579W, A559N+P570H+Y579W, A559N+P570K+Y579W, A559N+P570N+Y579W, A559N+P570Q+Y579W, A559N+P570R+Y579W, A559N+P570S+Y579W, A559N+P570T+Y579W, A559N+S560P+Y579W, A559N+Y579W+A651P, A559N+Y579W+A651P+Y934G, A559N+Y579W+F638I, A559N+Y579W+K921R, A559N+Y579W+S616D+K921R, A559N+Y579W+S636N, A559N+Y579F, A559N+Y579W, A559N+Y579W+K921R, A559N+Y579W+S616D, F638I+Y934G, K627R+S636N, K627R+Y934G, P570K+Y579W, Q416D+A559N+Y579W+S636N, Q416D, S128X+A559N+Y579W+K627R, S128X, S128X+A559N+Y579W+S636N, Y579W+S636N, V4T, S17A, N18G, F20P, F20N, F20G, F20Y, K51Q, K51H, E53Y, E53P, E53G, Y55M, Y55D, V56M, Y60F, S63F, A71E, 579W, T87R, T92S, A120P, N129D, F137L, H182Y, A186P, N189K, K192N, N216D, N216Q, N216R, L226K, G230H, L233H, D247N, G279E, K281R, A283D, N285D, N285G, Q289E, T292A, T292F, T292Y, A294V, Q298E, I302D, I302H, I302V, I302M, H311N, S313D, A346D, A386P, I387T, K388R, K390Q, I403Y, E408D, E408N, E408S, E408P, E408A, E408G, P410G, Q416S, Q416D, N441G, A448E, A448W, A448S, K451S, K451Q, G471S, S472Y, D476R, Q489P, K507R, K512P, S515V, S538C, L555Q, G557R, N558E, A559N, A559P, A559H, A559D, S560P, S560G, T561P, A564E, A564I, V567P, K568R, P570R, P570Q, P570K, P570A, P570T, P570G, P570S, P570H, P570N, I575V, Y579W, Y579F, T581M, S593N, S593E, S595L, S598Q, A599S, I602T, I602D, V603P, S605T, S607C, G609E, S616G, S616D, K627R, K627M, K627Q, K631R, K631A, D635A, D635E, D635M, D635N, D635L, D635W, S636N, S636K, S636L, S636Q, S636R, S636M, S636H, F638N, F638I, F638L, F638V, F638H, F638M, T639G, T639I, T639M, T639Y, T639W, T639P, T639E, T640S, S642N, S642T, N643D, N643H, A651P, A651S, D676H, Q683E, A688G, Y690F, T694A, T697G, R698W, T699A, T706Q, T711S, T711V, T711Y, K713R, W719R, K720H, K744H, K744Q, A749T, K754R, V756Y, V756H, S760G, T781M, N786K, T797S, S810Q, A824D, T825G, N828D, N833D, Q834E, S835A, S835D, V837I, N848D, A868E, A869V, D870V, T872G, T872H, T872W, T872Q, R880K, V881Q, V881T, T883R, T883V, T883C, T883K, Y884H, A885N, A885Q, A885F, T887K, T887S, L888M, V890R, T892P, T892V, R898Q, N905D, F906A, Q912V, N920P, K921R, A924D, V926F, V926P, K927R, S928D, T932A, N933S, N933V, Y934G, Y934R, Y934Q, A937E, V938I, K939V, N941S, A942P, G946R, K948R, Q956Y, Q956S, A957L, A957P, N966C, T972K, M980I, G994D, T999R, L1011A, K1031I, A1037E, S1038G, G1041R, Y1042N, 및 F1048W로 이루어진 군으로부터 선택된 치환을 포함하거나 또는 이로 이루어지며, 여기서 넘버링은 서열식별번호: 2에 따른다.
또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 위치 17, 20, 51, 53, 55, 56, 60, 63, 79, 87, 192, 302, 387, 388, 390, 403, 408, 410, 416, 448, 451, 471, 472, 507, 512, 515, 538, 598, 602, 605, 609, 676, 694, 698, 699, 711, 754, 760, 781, 786, 797, 834, 및 835에 상응하는 1개 이상 (예를 들어 여러개)의 위치에서 변경을 포함한다.
또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 위치 17, 20, 51, 53, 55, 56, 60, 63, 79, 87, 192, 302, 387, 388, 390, 403, 408, 410, 416, 448, 451, 471, 472, 507, 512, 515, 538, 598, 602, 605, 609, 676, 694, 698, 699, 711, 754, 760, 781, 786, 797, 834, 및 835 중 임의의 것에 상응하는 2개의 위치에서 변경을 포함한다.
또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 위치 17, 20, 51, 53, 55, 56, 60, 63, 79, 87, 192, 302, 387, 388, 390, 403, 408, 410, 416, 448, 451, 471, 472, 507, 512, 515, 538, 598, 602, 605, 609, 676, 694, 698, 699, 711, 754, 760, 781, 786, 797, 834, 및 835 중 임의의 것에 상응하는 3개의 위치에서 변경을 포함한다. 따라서, 한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 2의 하기에 상응하는 위치에서 변경을 포함한다: 17+20, 17+51, 17+53, 17+55, 17+56, 17+60, 17+63, 17+79, 17+87, 17+192, 17+302, 7+387, 17+388, 17+390, 17+403, 17+408, 17+410, 17+416, 17+448, 17+451, 17+471, 17+472, 17+507, 17+512, 17+515, 17+538, 17+598, 17+602, 17+605, 17+609, 17+676, 17+694, 17+698, 17+699, 17+711, 17+754, 17+760, 17+781, 17+786, 17+797, 17+834, 17+835, 20+51, 20+53, 20+55, 20+56, 20+60, 20+63, 20+79, 20+87, 20+192, 20+302, 20+387, 20+388, 20+390, 20+403, 20+408, 20+410, 20+416, 20+448, 20+451, 20+471, 20+472, 20+507, 20+512, 20+515, 20+538, 20+598, 20+602, 20+605, 20+609, 20+676, 20+694, 20+698, 20+699, 20+711, 20+754, 20+760, 20+781, 20+786, 20+797, 20+834, 20+835, 51+53, 51+55, 51+56, 51+60, 51+63, 51+79, 51+87, 51+192, 51+302, 51+387, 51+388, 51+390, 51+403, 51+408, 51+410, 51+416, 51+448, 51+451, 51+471, 51+472, 51+507, 51+512, 51+515, 51+538, 51+598, 51+602, 51+605, 51+609, 51+676, 51+694, 51+698, 51+699, 51+711, 51+754, 51+760, 51+781, 51+786, 51+797, 51+834, 51+835, 53+55, 53+56, 53+60, 53+63, 53+79, 53+87, 53+192, 53+302, 53+387, 53+388, 53+390, 53+403, 53+408, 53+410, 53+416, 53+448, 53+451, 53+471, 53+472, 53+507, 53+512, 53+515, 53+538, 53+598, 53+602, 53+605, 53+609, 3+676, 53+694, 53+698, 53+699, 53+711, 53+754, 53+760, 53+781, 53+786, 53+797, 53+834, 53+835, 55+56, 55+60, 55+63, 55+79, 55+87, 55+192, 55+302, 55+387, 55+388, 55+390, 55+403, 55+408, 55+410, 55+416, 55+448, 55+451, 55+471, 55+472, 55+507, 55+512, 55+515, 55+538, 55+598, 55+602, 55+605, 55+609, 55+676, 55+694, 55+698, 55+699, 55+711, 55+754, 55+760, 55+781, 55+786, 55+797, 55+834, 55+835, 56+60, 56+63, 56+79, 56+87, 56+192, 56+302, 56+387, 56+388, 56+390, 56+403, 56+408, 56+410, 56+416, 56+448, 56+451, 56+471, 56+472, 56+507, 56+512, 56+515, 56+538, 56+598, 56+602, 56+605, 56+609, 56+676, 56+694, 56+698, 56+699, 56+711, 56+754, 56+760, 56+781, 56+786, 56+797, 56+834, 56+835, 60+63,60+79, 60+87, 60+192, 60+302, 60+387, 60+388, 60+390, 60+403, 60+408, 60+410, 60+416, 60+448, 60+451, 60+471, 60+472, 60+507, 60+512, 60+515, 60+538, 60+598, 60+602, 60+605, 60+609, 60+676, 60+694, 60+698, 60+699, 60+711, 60+754, 60+760, 60+781, 60+786, 60+797, 60+834, 60+835, 63+79, 63+87, 63+192, 63+302, 63+387, 63+388, 63+390, 63+403, 63+408, 63+410, 63+416, 63+448, 63+451, 63+471, 63+472, 63+507, 63+512, 63+515,63+538, 63+598, 63+602, 63+605, 63+609, 63+676, 63+694, 63+698, 63+699, 63+711, 63+754, 63+760, 63+781, 63+786, 63+797, 63+834, 63+835, 79+87, 79+192, 79+302, 79+387, 79+388, 79+390, 79+403, 79+408, 79+410, 79+416, 79+448, 79+451, 79+471, 79+472, 79+507, 79+512, 79+515, 79+538, 79+598, 79+602, 79+605, 79+609, 79+676, 79+694, 79+698, 79+699, 79+711, 79+754, 79+760, 79+781, 79+786, 79+797, 79+834, 79+835, 87+192, 87+302, 87+387, 87+388, 87+390, 87+403, 87+408, 87+410, 87+416, 87+448, 87+451, 87+471, 87+472, 87+507, 87+512, 87+515, 87+538, 87+598, 87+602, 87+605, 87+609, 87+676, 87+694, 87+698, 87+699, 87+711, 87+754, 87+760, 87+781, 87+786, 87+797, 87+834, 87+835, 192+302, 192+387, 192+388, 192+390, 192+403, 192+408, 192+410, 192+416, 192+448, 192+451, 192+471, 192+472, 192+507, 192+512, 192+515, 192+538, 192+598, 192+602, 192+605, 192+609, 192+676, 192+694, 192+698, 192+699, 192+711, 192+754, 192+760, 192+781, 192+786, 192+797, 192+834, 192+835, 302+387, 302+388, 302+390, 302+403, 302+408, 302+410, 302+416, 302+448, 302+451, 302+471, 302+472, 302+507, 302+512, 302+515, 302+538, 302+598, 302+602, 302+605, 302+609, 302+676, 302+694, 302+698, 302+699, 302+711, 302+754, 302+760, 302+781, 302+786, 302+797, 302+834, 302+835, 387+388, 387+390, 387+403, 387+408, 387+410, 387+416, 387+448, 387+451, 387+471, 387+472, 387+507, 387+512, 387+515, 387+538, 387+598, 387+602, 387+605, 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609+754+797, 609+754+834, 609+754+835, 609+760+781, 609+760+786, 609+760+797, 609+760+834, 609+760+835, 609+781+786, 609+781+797, 609+781+834, 609+781+835, 609+786+797, 609+786+834, 609+786+835, 609+797+834, 609+797+835, 609+834+835, 676+694+698, 676+694+699, 676+694+711, 676+694+754, 676+694+760, 676+694+781, 676+694+786, 676+694+797, 676+694+834, 676+694+835, 676+698+699, 676+698+711, 676+698+754, 676+698+760, 676+698+781, 676+698+786, 676+698+797, 676+698+834, 676+698+835, 676+699+711, 676+699+754, 676+699+760, 676+699+781, 676+699+786, 676+699+797, 676+699+834, 676+699+835, 676+711+754, 676+711+760, 676+711+781, 676+711+786, 676+711+797, 676+711+834, 676+711+835, 676+754+760, 676+754+781, 676+754+786, 676+754+797, 676+754+834, 676+754+835, 676+760+781, 676+760+786, 676+760+797, 676+760+834, 676+760+835, 676+781+786, 676+781+797, 676+781+834, 676+781+835, 676+786+797, 676+786+834, 676+786+835, 676+797+834, 676+797+835, 676+834+835, 694+698+699, 694+698+711, 694+698+754, 694+698+760, 694+698+781, 694+698+786, 694+698+797, 694+698+834, 694+698+835, 694+699+711, 694+699+754, 694+699+760, 694+699+781, 694+699+786, 694+699+797, 694+699+834, 694+699+835, 694+711+754, 694+711+760, 694+711+781, 694+711+786, 694+711+797, 694+711+834, 694+711+835, 694+754+760, 694+754+781, 694+754+786, 694+754+797, 694+754+834, 694+754+835, 694+760+781, 694+760+786, 694+760+797, 694+760+834, 694+760+835, 694+781+786, 694+781+797, 694+781+834, 694+781+835, 694+786+797, 694+786+834, 694+786+835, 694+797+834, 694+797+835, 694+834+835, 698+699+711, 698+699+754, 698+699+760, 698+699+781, 698+699+786, 698+699+797, 698+699+834, 698+699+835, 968+711+754, 698+711+760, 698+711+781, 698+711+786, 698+711+797, 698+711+834, 698+711+835, 698+754+760, 698+754+781, 698+754+786, 698+754+797, 698+754+834, 698+754+835, 698+760+781, 698+760+786, 698+760+797, 698+760+834, 698+760+835, 698+781+786, 698+781+797, 698+781+834, 698+781+835, 698+786+797, 698+786+834, 698+786+835, 698+797+834, 698+797+835, 698+834+835, 699+711+754, 699+711+760, 699+711+781, 699+711+786, 699+711+797, 699+711+834, 699+711+835, 699+754+760, 699+754+781, 699+754+786, 699+754+797, 699+754+834, 699+754+835, 699+760+781, 699+760+786, 699+760+797, 699+760+834, 699+760+835, 699+781+786, 699+781+797, 699+781+834, 699+781+835, 699+786+797, 699+786+834, 699+786+835, 699+797+834, 699+797+835, 699+834+835, 711+754+760, 711+754+781, 711+754+786, 711+754+797, 711+754+834, 711+754+835, 711+760+781, 711+760+786, 711+760+797, 711+760+834, 711+760+835, 711+781+786, 711+781+797, 711+781+834, 711+781+835, 711+786+797, 711+786+834, 711+786+835, 711+797+834, 711+797+835, 711+834+835, 754+760+781, 754+760+786, 754+760+797, 754+760+834, 754+760+835, 754+781+786, 754+781+797, 754+781+834, 754+781+835, 754+786+797, 754+786+834, 754+786+835, 754+797+834, 754+797+835, 754+834+835, 760+781+786, 60+781+797, 760+781+834, 760+781+835, 760+786+797, 760+786+834, 760+786+835, 760+797+834, 760+797+835 760+834+835, 781+786+797, 781+786+834, 781+786+835, 781+797+834, 781+797+835, 781+834+835, 786+797+834, 786+797+835, 786+834+835, 및 797+834+835.
상기 목록에 표시된 위치에서의 구체적 치환은 바람직하게는 개별 위치와 관련하여 상기 기재된 것이다.
서열식별번호: 2의 위치: 559+579+697; 512+559+579+697; 18+71+186+408+579+602+651+688+756; 18+189+408+559+579+688+697+756+921+934; 313+488; 880+905+921+934; 302+313+408+579+602+651+697+880+921+934; 또는 216+313+408+476+579+602+638+651+697+719+880+887+921+934로 이루어진 군으로부터 선택된 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 엔도글루카나제 변이체가 바람직하다.
하기 변경: A559N+Y579W+T697G; K512P+A559N+Y579W+T697G; N18G+A71E+A186P+E408D+Y579W+I602T+A651P+A688G+V756Y; N18G+N189K+E408D+A559N+Y579W+A688G+T697G+V756Y+K921R+Y934G; S313D+E408D; R880K+N905D+K921R+Y934G; I302D+S313D+E408D+Y579W+I602T+A651P+T697G+R880K+K921R+Y934G; 및 N216Q+S313D+E408D+D476R+Y579W+I602T+F638N+A651P+T697G+W719R+R880K+T887K+K921R+Y934G로 이루어진 군으로부터 선택된 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 엔도글루카나제 변이체가 특히 바람직하다.
모든 상기 변경은 서열식별번호: 2에 관한 것이다.
특정한 실시양태에서, 본 발명은 본원의 표 2-12 또는 13에 제시된 엔도글루카나제 변이체로 이루어진 군으로부터 선택된 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
특정한 실시양태에서, 본 발명은 본원의 표 14에 제시된 엔도글루카나제 변이체로 이루어진 군으로부터 선택된 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
특정한 실시양태에서, 본 발명은 본원의 표 15에 제시된 엔도글루카나제 변이체로 이루어진 군으로부터 선택된 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
특정한 실시양태에서, 본 발명은 본원의 표 16에 제시된 엔도글루카나제 변이체로 이루어진 군으로부터 선택된 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
한 실시양태에서, EDTA를 함유하는 완중체 중에서 분자를 인큐베이션할 경우에 영향을 받는 서열식별번호: 6을 갖는 공지된 크산탄 리아제의 단백질 서열 내의 킬레이트화제-유도된 불안정성 영역은 하기: 서열식별번호: 6의 아미노산 154 내지 176에 상응하는 영역 1, 서열식별번호: 6의 아미노산 614 내지 658에 상응하는 영역 2, 서열식별번호: 6의 아미노산 731 내지 803에 상응하는 영역 3, 서열식별번호: 6의 아미노산 807 내지 846에 상응하는 영역 4, 서열식별번호: 6의 아미노산 872 내지 885에 상응하는 영역 5, 및 서열식별번호: 6의 아미노산 903 내지 1004에 상응하는 영역 6이다. 본 실시양태는 세제, 예를 들어 킬레이트화제, 예를 들어 EDTA 또는 시트레이트를 포함하는 세제 조성물 중에서 분자를 안정화하기 위해 크산탄 리아제의 어느 부분을 돌연변이시킬지에 대한 중요한 안내에 관한 것이다.
한 실시양태에서, 세제 조성물은 서열식별번호: 6의 아미노산 154 내지 176에 상응하는 영역 1, 서열식별번호: 6의 아미노산 614 내지 658에 상응하는 영역 2, 서열식별번호: 6의 아미노산 731 내지 803에 상응하는 영역 3, 서열식별번호: 6의 아미노산 807 내지 846에 상응하는 영역 4, 서열식별번호: 6의 아미노산 872 내지 885에 상응하는 영역 5, 및 서열식별번호: 6의 아미노산 903 내지 1004에 상응하는 영역 6으로 이루어진 군으로부터 선택된 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 포함하는 크산탄 리아제 변이체를 포함하며, 여기서 상기 변이체는 서열식별번호: 6에 대해 적어도 60% 및 100% 미만의 서열 동일성을 갖고; 바람직하게는 상기 크산탄 리아제 변이체는 크산탄 검에 대해 활성을 갖고, 추가로 바람직하게는 상기 활성은 크산탄 검 분해 활성이다.
한 실시양태에서, 세제 조성물은 서열식별번호: 6의 아미노산 154 내지 176에 상응하는 영역 1, 서열식별번호: 6의 아미노산 614 내지 658에 상응하는 영역 2, 서열식별번호: 6의 아미노산 731 내지 803에 상응하는 영역 3, 서열식별번호: 6의 아미노산 807 내지 846에 상응하는 영역 4, 서열식별번호: 6의 아미노산 872 내지 885에 상응하는 영역 5, 및 서열식별번호: 6의 아미노산 903 내지 1004에 상응하는 영역 6으로 이루어진 군으로부터 선택된 2개 이상 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 포함하는 크산탄 리아제 변이체를 포함하며, 여기서 상기 변이체는 서열식별번호: 6에 대해 적어도 60% 및 100% 미만의 서열 동일성을 갖고; 바람직하게는 상기 크산탄 리아제 변이체는 크산탄 검에 대해 활성을 갖고, 추가로 바람직하게는 상기 활성은 크산탄 검 분해 활성이다.
한 실시양태에서, 세제 조성물은 영역 1-6으로 이루어진 군으로부터 선택된 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 본원에 기재된 바와 같은 모 크산탄 리아제 (예를 들어 서열식별번호: 6)를 포함하며, 여기서 상기 영역은 킬레이트화제-유도된 불안정성 영역이고, 바람직하게는 상기 킬레이트화제-유도된 불안정성 영역은 하기 특색: 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 입체형태적으로 덜 안정함; 및/또는 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 상기 킬레이트화제에 더 노출됨; 및/또는 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 상기 킬레이트화제에 더 접근가능함; 및/또는 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 입체형태적으로 더 동적임; 및/또는 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 중수소 혼입을 더 잘 수용함 중 1개 이상을 갖고; 추가로 바람직하게는 상기 인접 영역은 서열식별번호: 6의 아미노산 1 내지 153에 상응하는 영역 7, 서열식별번호: 6의 아미노산 177 내지 613에 상응하는 영역 8, 서열식별번호: 6의 아미노산 659 내지 730에 상응하는 영역 9, 서열식별번호: 6의 아미노산 804 내지 806에 상응하는 영역 10, 서열식별번호: 6의 아미노산 847 내지 871에 상응하는 영역 11, 서열식별번호: 6의 아미노산 886 내지 902에 상응하는 영역 12, 및 서열식별번호: 6의 아미노산 1005 내지 1037에 상응하는 영역 13으로 이루어진 군으로부터 선택되고, 추가로 가장 바람직하게는 상기 킬레이트화제는 EDTA 또는 시트레이트이다.
한 실시양태에서 인접 영역은 하기: 서열식별번호: 6의 아미노산 1 내지 153에 상응하는 영역 7, 서열식별번호: 6의 아미노산 177 내지 613에 상응하는 영역 8, 서열식별번호: 6의 아미노산 659 내지 730에 상응하는 영역 9, 서열식별번호: 6의 아미노산 804 내지 806에 상응하는 영역 10, 서열식별번호: 6의 아미노산 847 내지 871에 상응하는 영역 11, 서열식별번호: 6의 아미노산 886 내지 902에 상응하는 영역 12, 및 서열식별번호: 6의 아미노산 1005 내지 1037에 상응하는 영역 13 중 1개 이상 또는 모두일 수 있다.
한 실시양태에서, 세제 조성물은 (예를 들어 서열식별번호: 6 또는 또 다른 모 크산탄 리아제의) 영역 1-6으로 이루어진 군으로부터 선택된 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 크산탄 리아제 변이체를 포함하며, 여기서 세제 성분을 포함하는 수용액 중에서 (예를 들어 서열식별번호: 6 또는 또 다른 모 크산탄 리아제의) 상기 영역은 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 상기 세제 성분에 상대적으로 더 접근가능하다.
한 실시양태에서, 세제 조성물은 (예를 들어 서열식별번호: 6 또는 또 다른 모 크산탄 리아제의) 영역 1-6으로 이루어진 군으로부터 선택된 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 크산탄 리아제 변이체를 포함하며, 여기서 세제 성분을 포함하는 수용액 중에서 (예를 들어 서열식별번호: 6 또는 또 다른 모 크산탄 리아제의) 상기 영역은 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 상기 세제 성분에 상대적으로 더 노출된다.
한 실시양태에서, 세제 조성물은 (예를 들어 서열식별번호: 6 또는 또 다른 모 크산탄 리아제의) 영역 1-6으로 이루어진 군으로부터 선택된 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 크산탄 리아제 변이체를 포함하며, 여기서 세제 성분을 포함하는 수용액 중에서 (예를 들어 서열식별번호: 6 또는 또 다른 모 크산탄 리아제의) 상기 영역은 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 상대적으로 입체형태적으로 더 동적이다.
한 실시양태에서, 세제 조성물은 (예를 들어 서열식별번호: 6 또는 또 다른 모 크산탄 리아제의) 영역 1-6으로 이루어진 군으로부터 선택된 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 크산탄 리아제 변이체를 포함하며, 여기서 세제 성분을 포함하는 수용액 중에서 (예를 들어 서열식별번호: 6 또는 또 다른 모 크산탄 리아제의) 상기 영역은 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 중수소 혼입을 상대적으로 더 잘 수용한다.
한 실시양태에서, 세제 조성물은 서열식별번호: 6의 아미노산 154 내지 176에 상응하는 영역 1, 서열식별번호: 6의 아미노산 614 내지 658에 상응하는 영역 2, 서열식별번호: 6의 아미노산 731 내지 803에 상응하는 영역 3, 서열식별번호: 6의 아미노산 807 내지 846에 상응하는 영역 4, 서열식별번호: 6의 아미노산 872 내지 885에 상응하는 영역 5, 및 서열식별번호: 6의 아미노산 903 내지 1004에 상응하는 영역 6으로 이루어진 군으로부터 선택된 2개 이상 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 포함하는 본 발명의 크산탄 리아제 변이체를 포함하며, 여기서 상기 변이체는 서열식별번호: 6에 대해 적어도 60% 및 100% 미만의 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 상기 변이체는 크산탄 검에 대해 활성을 갖고, 추가로 바람직하게는 상기 활성은 크산탄 검 분해 활성이다.
한 실시양태에서, 세제 조성물은 서열식별번호: 6의 아미노산 154 내지 176에 상응하는 영역 1, 서열식별번호: 6의 아미노산 614 내지 658에 상응하는 영역 2, 서열식별번호: 6의 아미노산 731 내지 803에 상응하는 영역 3, 서열식별번호: 6의 아미노산 807 내지 846에 상응하는 영역 4, 서열식별번호: 6의 아미노산 872 내지 885에 상응하는 영역 5, 및 서열식별번호: 6의 아미노산 903 내지 1004에 상응하는 영역 6으로 이루어진 군으로부터 선택된 (예를 들어 서열식별번호: 6 또는 또 다른 모 크산탄 리아제의) 1개의 영역에서 다중 변경 (예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개)을 갖는 크산탄 리아제 변이체를 포함하며, 여기서 상기 변이체는 서열식별번호: 6에 대해 적어도 60% 및 100% 미만의 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 상기 변이체는 크산탄 검에 대해 활성을 갖고, 추가로 바람직하게는 상기 활성은 크산탄 검 분해 활성이다.
한 실시양태에서, 세제 조성물은 서열식별번호: 6의 아미노산 154 내지 176에 상응하는 영역 1, 서열식별번호: 6의 아미노산 614 내지 658에 상응하는 영역 2, 서열식별번호: 6의 아미노산 731 내지 803에 상응하는 영역 3, 서열식별번호: 6의 아미노산 807 내지 846에 상응하는 영역 4, 서열식별번호: 6의 아미노산 872 내지 885에 상응하는 영역 5, 및 서열식별번호: 6의 아미노산 903 내지 1004에 상응하는 영역 6으로 이루어진 군으로부터 선택된 (예를 들어 서열식별번호: 6 또는 또 다른 모 크산탄 리아제의) 다중 영역 (예를 들어 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개)에서 다중 변경 (예를 들어 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개)을 갖는 크산탄 리아제 변이체를 포함하며, 여기서 상기 변이체는 서열식별번호: 6에 대해 적어도 60% 및 100% 미만의 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 상기 변이체는 크산탄 검에 대해 활성을 갖고, 추가로 바람직하게는 상기 활성은 크산탄 검 분해 활성이다.
한 실시양태에서, 예를 들어 액체 세제 조성물 중에서의 저장 동안 분자의 안정성에 영향을 미치는 서열식별번호: 6을 갖는 공지된 크산탄 리아제의 단백질 서열 내의 영역은 하기: 서열식별번호: 6의 아미노산 1 내지 153에 상응하는 영역 7, 서열식별번호: 6의 아미노산 177 내지 613에 상응하는 영역 8, 서열식별번호: 6의 아미노산 659 내지 730에 상응하는 영역 9, 서열식별번호: 6의 아미노산 804 내지 806에 상응하는 영역 10, 서열식별번호: 6의 아미노산 847 내지 871에 상응하는 영역 11, 서열식별번호: 6의 아미노산 886 내지 902에 상응하는 영역 12, 및 서열식별번호: 6의 아미노산 1005 내지 1037에 상응하는 영역 13이다. 본 실시양태는 세제 중에서 분자를 안정화하기 위해 크산탄 리아제의 어느 부분을 돌연변이시킬지에 대한 중요한 안내에 관한 것이다.
한 실시양태에서, 세제 조성물은 서열식별번호: 6의 아미노산 1 내지 153에 상응하는 영역 7, 서열식별번호: 6의 아미노산 177 내지 613에 상응하는 영역 8, 서열식별번호: 6의 아미노산 659 내지 730에 상응하는 영역 9, 서열식별번호: 6의 아미노산 804 내지 806에 상응하는 영역 10, 서열식별번호: 6의 아미노산 847 내지 871에 상응하는 영역 11, 서열식별번호: 6의 아미노산 886 내지 902에 상응하는 영역 12, 및 서열식별번호: 6의 아미노산 1005 내지 1037에 상응하는 영역 13으로 이루어진 군으로부터 선택된 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 포함하는 크산탄 리아제 변이체를 포함하며, 여기서 상기 변이체는 서열식별번호: 6에 대해 적어도 60% 및 100% 미만의 서열 동일성을 갖고; 바람직하게는 상기 크산탄 리아제 변이체는 크산탄 검에 대해 활성을 갖고, 추가로 바람직하게는 상기 활성은 크산탄 검 분해 활성이다.
한 실시양태에서, 세제 조성물은 (i) 서열식별번호: 6의 아미노산 1 내지 153에 상응하는 영역 7; (ii) 서열식별번호: 6의 아미노산 177 내지 613에 상응하는 영역 8; (iii) 서열식별번호: 6의 아미노산 659 내지 730에 상응하는 영역 9; (iv) 서열식별번호: 6의 아미노산 804 내지 806에 상응하는 영역 10; (v) 서열식별번호: 6의 아미노산 847 내지 871에 상응하는 영역 11; (vi) 서열식별번호: 6의 아미노산 886 내지 902에 상응하는 영역 12; (vii) 서열식별번호: 6의 아미노산 1005 내지 1037에 상응하는 영역 13으로 이루어진 군으로부터 선택된 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 포함하는 크산탄 리아제 변이체를 포함한다.
한 실시양태에서, 세제 조성물은 서열식별번호: 6의 아미노산 1 내지 153에 상응하는 영역 7, 서열식별번호: 6의 아미노산 177 내지 613에 상응하는 영역 8, 서열식별번호: 6의 아미노산 659 내지 730에 상응하는 영역 9, 서열식별번호: 6의 아미노산 804 내지 806에 상응하는 영역 10, 서열식별번호: 6의 아미노산 847 내지 871에 상응하는 영역 11, 서열식별번호: 6의 아미노산 886 내지 902에 상응하는 영역 12, 및 서열식별번호: 6의 아미노산 1005 내지 1037에 상응하는 영역 13으로 이루어진 군으로부터 선택된 2개 이상 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 포함하는 크산탄 리아제 변이체를 포함하며, 여기서 상기 변이체는 서열식별번호: 6에 대해 적어도 60% 및 100% 미만의 서열 동일성을 갖고; 바람직하게는 상기 크산탄 리아제 변이체는 크산탄 검에 대해 활성을 갖고, 추가로 바람직하게는 상기 활성은 크산탄 검 분해 활성이다.
한 실시양태에서, 세제 조성물은 서열식별번호: 6의 아미노산 1 내지 153에 상응하는 영역 7, 서열식별번호: 6의 아미노산 177 내지 613에 상응하는 영역 8, 서열식별번호: 6의 아미노산 659 내지 730에 상응하는 영역 9, 서열식별번호: 6의 아미노산 804 내지 806에 상응하는 영역 10, 서열식별번호: 6의 아미노산 847 내지 871에 상응하는 영역 11, 서열식별번호: 6의 아미노산 886 내지 902에 상응하는 영역 12, 및 서열식별번호: 6의 아미노산 1005 내지 1037에 상응하는 영역 13으로 이루어진 군으로부터 선택된 (예를 들어 서열식별번호: 6 또는 또 다른 모 크산탄 리아제의) 1개의 영역에서 다중 변경 (예컨대 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개)을 갖는 본원에 기재된 바와 같은 크산탄 리아제 변이체를 포함하며, 여기서 상기 변이체는 서열식별번호: 6에 대해 적어도 60% 및 100% 미만의 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 상기 변이체는 크산탄 검에 대해 활성을 갖고, 추가로 바람직하게는 상기 활성은 크산탄 검 분해 활성이다.
한 실시양태에서, 세제 조성물은 서열식별번호: 6의 아미노산 1 내지 153에 상응하는 영역 7, 서열식별번호: 6의 아미노산 177 내지 613에 상응하는 영역 8, 서열식별번호: 6의 아미노산 659 내지 730에 상응하는 영역 9, 서열식별번호: 6의 아미노산 804 내지 806에 상응하는 영역 10, 서열식별번호: 6의 아미노산 847 내지 871에 상응하는 영역 11, 서열식별번호: 6의 아미노산 886 내지 902에 상응하는 영역 12, 및 서열식별번호: 6의 아미노산 1005 내지 1037에 상응하는 영역 13으로 이루어진 군으로부터 선택된 (예를 들어 서열식별번호: 6 또는 또 다른 모 크산탄 리아제의) 다중 영역 (예를 들어 2, 3, 4, 5, 6 또는 7개)에서 다중 변경 (예를 들어 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개)을 갖는 본원에 기재된 바와 같은 크산탄 리아제 변이체를 포함하며, 여기서 상기 변이체는 서열식별번호: 6에 대해 적어도 60% 및 100% 미만의 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 상기 변이체는 크산탄 검에 대해 활성을 갖고, 추가로 바람직하게는 상기 활성은 크산탄 검 분해 활성이다.
한 실시양태에서, 세제 조성물은 성숙 모 폴리펩티드 (예를 들어 서열식별번호: 6)의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 포함하는 크산탄 리아제 변이체를 포함하며, 여기서 각각의 변경은 독립적으로 치환, 삽입 또는 결실이고, 여기서 변이체는 크산탄 리아제 활성을 갖는다.
한 실시양태에서, 변이체는 모 크산탄 리아제의 아미노산 서열에 대해 적어도 60%, 예를 들어 적어도 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99%, 그러나 100% 미만의 서열 동일성을 갖는다.
한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드에 대해 적어도 60%, 예를 들어 적어도 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99%, 그러나 100% 미만의 서열 동일성을 갖는다.
한 실시양태에서, 세제 조성물은 서열식별번호: 6에 대해 적어도 61%, 62%, 63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 서열 동일성을 갖는, 본원에 기재된 바와 같은 크산탄 리아제 변이체를 포함한다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 155, 159, 620, 624, 626, 631, 635, 645, 649, 650, 656, 738, 745, 746, 748, 752, 753, 754, 757, 764, 769, 774, 775, 777, 779, 782, 785, 786, 789, 792, 796, 799, 800, 801, 819, 824, 843, 845, 875, 903, 911, 912, 915, 919, 921, 923, 925, 927, 928, 930, 932, 933, 941, 966, 967, 991 및 998에 상응하는 1개 이상의 위치에서 변경을 포함한다. 또 다른 측면에서, 변이체는 위치 155, 159, 620, 624, 626, 631, 635, 645, 649, 650, 656, 738, 745, 746, 748, 752, 753, 754, 757, 764, 769, 774, 775, 777, 779, 782, 785, 786, 789, 792, 796, 799, 800, 801, 819, 824, 843, 845, 875, 903, 911, 912, 915, 919, 921, 923, 925, 927, 928, 930, 932, 933, 941, 966, 967, 991 및 998 중 임의의 것에 상응하는 2개의 위치에서 변경을 포함한다. 또 다른 측면에서, 변이체는 위치 155, 159, 620, 624, 626, 631, 635, 645, 649, 650, 656, 738, 745, 746, 748, 752, 753, 754, 757, 764, 769, 774, 775, 777, 779, 782, 785, 786, 789, 792, 796, 799, 800, 801, 819, 824, 843, 845, 875, 903, 911, 912, 915, 919, 921, 923, 925, 927, 928, 930, 932, 933, 941, 966, 967, 991 및 998 중 임의의 것에 상응하는 3개의 위치에서 변경을 포함한다. 또 다른 측면에서, 변이체는 위치 155, 159, 620, 624, 626, 631, 635, 645, 649, 650, 656, 738, 745, 746, 748, 752, 753, 754, 757, 764, 769, 774, 775, 777, 779, 782, 785, 786, 789, 792, 796, 799, 800, 801, 819, 824, 843, 845, 875, 903, 911, 912, 915, 919, 921, 923, 925, 927, 928, 930, 932, 933, 941, 966, 967, 991 및 998에 상응하는 4개 이상의 위치, 예를 들어 5개, 6개, 7개, 8개, 9개, 10개 또는 그 초과의 위치에서 변경을 포함한다.
한 실시양태에서, 세제 조성물은 서열식별번호: 6의 위치: 155, 159, 620, 624, 626, 631, 635, 645, 649, 650, 656, 738, 745, 746, 748, 752, 753, 754, 757, 764, 769, 774, 775, 777, 779, 782, 785, 786, 789, 792, 796, 799, 800, 801, 819, 824, 843, 845, 875, 903, 911, 912, 915, 919, 921, 923, 925, 927, 928, 930, 932, 933, 941, 966, 967, 991 및 998로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서 변경을 갖는 크산탄 리아제 변이체를 포함하며, 여기서 각각의 위치는 서열식별번호: 6의 위치에 상응한다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 9, 15, 46, 58, 66, 89, 95, 100, 106, 109, 183, 188, 190, 203, 204, 221, 229, 234, 238, 240, 242, 243, 257, 258, 291, 293, 316, 320, 324, 329, 333, 339, 341, 352, 354, 360, 377, 400, 419, 450, 451, 454, 481, 492, 567, 568, 578, 579, 664, 672, 855, 887 및 892에 상응하는 1개 이상의 위치에서 변경을 포함한다. 또 다른 측면에서, 변이체는 위치 9, 15, 46, 58, 66, 89, 95, 100, 106, 109, 183, 188, 190, 203, 204, 221, 229, 234, 238, 240, 242, 243, 257, 258, 291, 293, 316, 320, 324, 329, 333, 339, 341, 352, 354, 360, 377, 400, 419, 450, 451, 454, 481, 492, 567, 568, 578, 579, 664, 672, 855, 887 및 892 중 임의의 것에 상응하는 2개의 위치에서 변경을 포함한다. 또 다른 측면에서, 변이체는 위치 9, 15, 46, 58, 66, 89, 95, 100, 106, 109, 183, 188, 190, 203, 204, 221, 229, 234, 238, 240, 242, 243, 257, 258, 291, 293, 316, 320, 324, 329, 333, 339, 341, 352, 354, 360, 377, 400, 419, 450, 451, 454, 481, 492, 567, 568, 578, 579, 664, 672, 855, 887 및 892 중 임의의 것에 상응하는 3개의 위치에서 변경을 포함한다. 또 다른 측면에서, 변이체는 위치 9, 15, 46, 58, 66, 89, 95, 100, 106, 109, 183, 188, 190, 203, 204, 221, 229, 234, 238, 240, 242, 243, 257, 258, 291, 293, 316, 320, 324, 329, 333, 339, 341, 352, 354, 360, 377, 400, 419, 450, 451, 454, 481, 492, 567, 568, 578, 579, 664, 672, 855, 887 및 892에 상응하는 4개 이상의 위치, 예를 들어 5개, 6개, 7개, 8개, 9개, 10개 또는 그 초과의 위치에서 변경을 포함한다.
한 실시양태에서, 세제 조성물은 Y155E, A159P, K620R, A624E, A626G, T631N, T631E, S635E, S635T, S635Q, A645S, T649V, T649K, T649R, Q650G, I656V, G738L, K745R, F746L, L748T, P752R, P752K, G753E, G753Q, G753S, S754E, S754L, S754Q, S754R, S757D, S757P, S757E, P764V, P764K, A769D, A769T, A769R, A769S, A769E, A769Q, A769*, A774V, L775M, L775Y, L775A, L775I, L775S, L775F, L775Q, D777K, D777R, P779V, Y782I, A785T, N786K, G789R, K792W, K792Y, K792V, K792A, N796Q, A799H, V800P, D801G, K819R, K819T, K824R, A843P, D845E, K875T, K875E, T903A, T903Q, A911V, A911M, A911S, A912T, A912I, A912Y, T915Q, T915S, T915V, T915A, T919F, T919G, T919D, T921R, T921S, T923H, T923D, T925Q, T925D, T925R, T927K, D928W, Y930H, Y930L, Y930F, A932P, D933M, G941E, G941D, A966P, A967D, N991D 및 V998K로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서 변경을 갖는 크산탄 리아제 변이체를 포함하며, 여기서 넘버링은 서열식별번호: 6에 따른다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 155에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 155에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 Y155E를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 159에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 159에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 치환 A159P를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 620에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 620에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 K620R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 624에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 624에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 A624E를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 626에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 626에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 A626Q를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 631에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 631에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 T631N 또는 T631E를 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 위치 631에 상응하는 위치에서의 바람직한 치환은 T631N이다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 635에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 635에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 치환 S635E, S635T 또는 S635Q를 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 위치 635에 상응하는 위치에서의 바람직한 치환은 S635E이다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 649에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 649에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 T649V, T649K 또는 T649R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 위치 649에 상응하는 위치에서의 바람직한 치환은 T649K이다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 650에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 650에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 Q650G를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 656에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 656에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 I656V를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 738에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 738에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 G738L을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 745에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 745에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 K745R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 746에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 746에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 F746L을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 748에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 748에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 L748T를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 752에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 752에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 P752R 또는 P752K를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 753에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 753에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 G753E, G753Q 또는 G753S를 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 위치 753에 상응하는 위치에서의 바람직한 치환은 G753E이다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 754에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 754에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 S754E, S754L, S754Q 또는 S754R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 위치 754에 상응하는 위치에서의 바람직한 치환은 S754E 또는 S754R이다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 757에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 757에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 S757D, S757P 또는 S757E를 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 위치 757에 상응하는 위치에서의 바람직한 치환은 S757D이다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 764에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 764에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 P764V 또는 P764K를 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 위치 764에 상응하는 위치에서의 바람직한 치환은 P764V이다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 769에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 769에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 변경 A769D, A769T, A769R, A769S, A769E, A769Q 또는 A769*를 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 위치 769에 상응하는 위치에서의 바람직한 치환은 A769D이다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 774에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 774에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 A774V를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 775에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 775에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 L775A 또는 L775F 또는 L775I 또는 L775M 또는 L775Q 또는 L775S 또는 L775Y를 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 위치 775에 상응하는 위치에서의 바람직한 치환은 L775M, L775Y 또는 L775A이다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 779에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 779에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 P779V를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 782에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 782에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 치환 Y782I를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 786에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 786에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 치환 N786K를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 789에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 789에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 치환 G789R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 792에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 792에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 K792W, K792Y, K792V 또는 K792A를 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 위치 792에 상응하는 위치에서의 바람직한 치환은 K792W 또는 K792Y이다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 796에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 796에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 N796Q를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 799에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 799에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 A799H를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 800에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 800에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 V800P를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 801에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 801에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 D801G를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 819에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 819에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 K819R 또는 K819T를 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 위치 819에 상응하는 위치에서의 바람직한 치환은 K819R 또는 K819T이다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 824에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 824에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 K824R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 843에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 843에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 치환 A843P를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 845에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 845에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 위치 845에 상응하는 위치에서의 바람직한 치환은 D845E이다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 875에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 875에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 K875T 또는 K875E를 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 위치 875에 상응하는 위치에서의 바람직한 치환은 K875T이다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 903에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 903에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 T903A 또는 T903Q를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 911에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 911에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 A911M, A911V 또는 A911S를 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 위치 911에 상응하는 위치에서의 바람직한 치환은 A911V이다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 912에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 912에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 A912I 또는 A912T 또는 A912Y를 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 위치 912에 상응하는 위치에서의 바람직한 치환은 A912T이다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 915에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 915에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 T915S, T915Q, T915A 또는 T915V를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 919에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 919에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 T919D, T919F 또는 T919G를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 921에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 921에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 T921R 또는 T921S를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 923에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 923에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 T923D 또는 T923H를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 925에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 925에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 T925D 또는 T925Q 또는 T925R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 927에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 927에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 T927K를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 928에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 928에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 D928W를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 930에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 930에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 Y930F 또는 Y930H 또는 Y930L을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 933에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 933에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 D933M을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 941에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 941에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 G941D 또는 G941E를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 966에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 966에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 A966P를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 991에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 991에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 N991D를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
또 다른 측면에서, 변이체는 위치 998에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 위치 998에 상응하는 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환된다. 또 다른 측면에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 V998K를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 9에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 K9R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 15에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 N15T를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 46에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 L46D를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 58에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 A58L을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 66에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 S66H를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 89에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 Q89Y를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 95에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 K95E를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 100에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 S100D를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 106에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 N106Y를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 109에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 Q109R, Q109D, Q109F, Q109K 또는 Q109A를 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 위치 109에 상응하는 위치에서의 바람직한 치환은 Q109R이다.
한 측면에서, 변이체는 위치 183에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 K183Q 또는 K183R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 188에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 V188I를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 190에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 A190Q를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 203에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 A203P를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 204에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 K204R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 221에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 A221P를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 229에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 E229N 또는 E229S를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 234에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 I234V를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 238에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 I238W, I238L 또는 I238M을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 위치 238에 상응하는 위치에서의 바람직한 치환은 I238W 및 I238L이다.
한 측면에서, 변이체는 위치 240에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 I240W를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 242에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 N242S를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 243에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 G243V를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 257에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 Y257W를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 258에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 R258E를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 291에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 K291R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 293에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 A293G 또는 A293P를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 316에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 K316R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 320에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 K320R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 324에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 L324Q를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 329에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 K329R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 333에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 K333R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 339에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 L339M을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 341에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 I341P를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 352에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 V352I를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 354에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 S354P를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 360에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 K360R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 377에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 F377Y를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 400에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 K400R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 419에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 F419Y를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 450에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 D450P를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 451에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 K451E 또는 K451R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 454에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 A454V를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 481에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 K481R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 492에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 A492L을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 567에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 K567R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 568에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 G568A를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 578에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 S578K 또는 S578R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 579에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 S579R 또는 S579K를 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 위치 579에 상응하는 위치에서의 바람직한 치환은 S579R이다.
한 측면에서, 변이체는 위치 664에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 T664K를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 672에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 N672D를 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 885에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 K855R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 887에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 K887R을 포함하거나 또는 이로 이루어진다.
한 측면에서, 변이체는 위치 892에 상응하는 위치에서의 변경을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 한 실시양태에서, 이러한 위치의 아미노산은 Ala, Arg, Asn, Asp, Cys, Gln, Glu, Gly, His, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr, 또는 Val로 치환될 수 있다. 특정한 실시양태에서, 변이체는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 치환 N892Y, N892W 또는 N892F를 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 위치 892에 상응하는 위치에서의 바람직한 치환은 N892Y이다.
한 실시양태에서 본 발명은 서열식별번호: 6의 위치: 9, 15, 46, 58, 66, 89, 95, 100, 106, 109, 183, 188, 190, 203, 204, 221, 229, 234, 238, 240, 242, 243, 257, 258, 291, 293, 316, 320, 324, 329, 333, 339, 341, 352, 354, 360, 377, 400, 419, 450, 451, 454, 481, 492, 567, 568, 578, 579, 664, 672, 855, 887 및 892로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서 변경을 갖는, 본원에 기재된 바와 같은 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이며, 여기서 각각의 위치는 서열식별번호: 6의 위치에 상응한다.
한 실시양태에서 본 발명은 K9R, N15T, L46D, A58L, S66H, Q89Y, K95E, S100D, N106Y, Q109R, Q109D, Q109F, Q109K, Q109A, K183Q,K183R, V188I, A190Q, A203P, K204R, A221P, E229N, E229S, I234V, I238W, I238L, I238M, I240W, N242S, G243V, Y257W, R258E, K291R, A293G, A293P, K316R, K320R, L324Q, K329R, K333R, L339M, I341P, V352I, S354P, K360R, F377Y, K400R, F419Y, D450P, K451E, K451R, A454V, K481R, A492L, K567R, G568A, S578K, S578R, S579R, S579K, T664K, N672D, K855R, K887R, N892Y, N892W 및 N892F로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 치환을 갖는, 본원에 기재된 바와 같은 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이며, 여기서 넘버링은 서열식별번호: 6에 따른다.
서열식별번호: 6의 위치: 190, 229, 234, 440, 582, 624, 631, 635, 672, 703, 738, 752, 753, 754, 757, 769, 775, 801, 875, 892, 및 그의 임의의 조합, 바람직하게는 229+672+752+753+769+775+801+875+892; 229+672+753+754+769+775+801+875+892; 229+672+752+753+754+769+775+801+875+892; 190+229+234+624+672+753+754+769+775+801+875; 190+229+631+672+703+752+753+769+775+801+875; 190+229+234+582+672+753+754+757+769+775+801+875+892; 또는 229+440+582+624+635+672+738+753+754+757+769+775+801+875+892로 이루어진 군으로부터 선택된 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 크산탄 리아제 변이체가 바람직하다.
하기 변경: E229N+N672D+P752K+G753E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; E229S+N672D+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; E229S+N672D+P752R+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; A190Q+E229S+I234V+A624E+N672D+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T; A190Q+E229S+T631N+N672D+I703L+P752K+G753E+A769D+L775A+D801G+K875T; A190Q+E229S+I234V+S582K+N672D+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+K875T+ N892Y; E229S+N440K+S582K+A624E+S635E+N672D+G738L+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; 및 S100D+E229S+K360G+D458S+S582K+N672D+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+A843P+K875T+N892Y+N1008D로 이루어진 군으로부터 선택된 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 크산탄 리아제 변이체가 특히 바람직하다.
모든 상기 변경은 서열식별번호: 6에 관한 것이다.
특정한 실시양태에서, 본 발명은 본원의 표 17에 제시된 크산탄 리아제 변이체로 이루어진 군으로부터 선택된 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
특정한 실시양태에서, 본 발명은 본원의 표 18에 제시된 크산탄 리아제 변이체로 이루어진 군으로부터 선택된 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
특정한 실시양태에서, 본 발명은 본원의 표 19에 제시된 크산탄 리아제 변이체로 이루어진 군으로부터 선택된 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
특정한 실시양태에서, 본 발명은 본원의 표 20에 제시된 크산탄 리아제 변이체로 이루어진 군으로부터 선택된 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
특정한 실시양태에서, 본 발명은 본원의 표 21에 제시된 크산탄 리아제 변이체로 이루어진 군으로부터 선택된 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
특정한 실시양태에서, 본 발명은 본원의 표 22에 제시된 크산탄 리아제 변이체로 이루어진 군으로부터 선택된 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
특정한 실시양태에서, 본 발명은 본원의 표 23에 제시된 크산탄 리아제 변이체로 이루어진 군으로부터 선택된 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
특정한 실시양태에서, 본 발명은 본원의 표 24에 제시된 크산탄 리아제 변이체로 이루어진 군으로부터 선택된 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
특정한 실시양태에서, 본 발명은 본원의 표 25에 제시된 크산탄 리아제 변이체로 이루어진 군으로부터 선택된 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
특정한 실시양태에서, 본 발명은 본원의 표 26에 제시된 크산탄 리아제 변이체로 이루어진 군으로부터 선택된 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
특정한 실시양태에서, 본 발명은 본원의 표 27에 제시된 크산탄 리아제 변이체로 이루어진 군으로부터 선택된 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
특정한 실시양태에서, 본 발명은 본원의 표 28에 제시된 크산탄 리아제 변이체로 이루어진 군으로부터 선택된 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
특정한 실시양태에서, 본 발명은 본원의 표 29에 제시된 크산탄 리아제 변이체로 이루어진 군으로부터 선택된 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
특정한 실시양태에서, 본 발명은 본원의 표 30에 제시된 크산탄 리아제 변이체로 이루어진 군으로부터 선택된 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
특정한 실시양태에서, 본 발명은 본원의 표 31에 제시된 크산탄 리아제 변이체로 이루어진 군으로부터 선택된 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
특정한 실시양태에서, 본 발명은 본원의 표 32에 제시된 크산탄 리아제 변이체로 이루어진 군으로부터 선택된 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
특정한 실시양태에서, 본 발명은 본원의 표 33에 제시된 크산탄 리아제 변이체로 이루어진 군으로부터 선택된 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
다양한 실시양태에서, 바람직한 엔도글루카나제 변이체는 바람직한 크산탄 리아제 변이체와 조합된다. 일부 측면에서, 세제 조성물은 따라서 하기를 포함한다:
(A) 서열식별번호: 2에 대해 적어도 61%, 62%, 63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 또는 98% 서열 동일성을 갖고, 서열식별번호: 2의 위치: 559+579+697; 512+559+579+697; 18+71+186+408+579+602+651+688+756; 18+189+408+559+579+688+697+756+921+934; 313+488; 880+905+921+934; 302+313+408+579+602+651+697+880+921+934; 또는 216+313+408+476+579+602+638+651+697+719+880+887+921+934로 이루어진 군으로부터 선택된 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖고, 바람직하게는 서열식별번호: 2의 하기 변경: (A1) A559N+Y579W+T697G; (A2) K512P+A559N+Y579W+T697G; (A3) N18G+A71E+A186P+E408D+Y579W+I602T+A651P+A688G+V756Y; (A4) N18G+N189K+E408D+A559N+Y579W+A688G+T697G+V756Y+K921R+Y934G; (A5) S313D+E408D; (A6) R880K+N905D+K921R+Y934G; (A7) I302D+S313D+E408D+Y579W+I602T+A651P+T697G+R880K+K921R+Y934G; 및 (A8) N216Q+S313D+E408D+D476R+Y579W+I602T+F638N+A651P+T697G+W719R+R880K+T887K+K921R+Y934G로 이루어진 군으로부터 선택된 변경을 갖는 것으로부터 선택된 엔도글루카나제 변이체; 및
(B) 서열식별번호: 6에 대해 적어도 61%, 62%, 63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 또는 98% 서열 동일성을 갖고, 서열식별번호: 6의 위치: 229+672+752+753+769+775+801+875+892; 229+672+753+754+769+775+801+875+892; 229+672+752+753+754+769+775+801+875+892; 190+229+234+624+672+753+754+769+775+801+875; 190+229+631+672+703+752+753+769+775+801+875; 190+229+234+582+672+753+754+757+769+775+801+875+892; 229+440+582+624+635+672+738+753+754+757+769+775+801+875+892; 또는 100+229+360+458+582+672+753+754+757+769+775+801+843+875+892+1008로 이루어진 군으로부터 선택된 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖고, 바람직하게는 서열식별번호: 6의 하기 변경: (B1) E229N+N672D+P752K+G753E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; (B2) E229S+N672D+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; (B3) E229S+N672D+P752R+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; (B4) A190Q+E229S+I234V+A624E+N672D+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T; (B5) A190Q+E229S+T631N+N672D+I703L+P752K+G753E+A769D+L775A+D801G+K875T; (B6) A190Q+E229S+I234V+S582K+N672D+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; (B7) E229S+N440K+S582K+A624E+S635E+N672D+G738L+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; 및 (B8) S100D+E229S+K360G+D458S+S582K+N672D+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+A843P+K875T+N892Y+N1008D로 이루어진 군으로부터 선택된 변경을 갖는 크산탄 리아제 변이체.
일부 측면에서, 엔도글루카나제 및/또는 크산탄 리아제 변이체는 상기에서 명백하게 언급된 것 외에 어떠한 추가의 치환도 포함하지 않고, 즉 나머지 서열은 각각 서열식별번호: 2 및 서열식별번호: 6에 제시된 바와 같은 모 효소의 것과 동일하다.
일부 측면에서, 본 발명의 세제 조성물에서, 상기 정의된 바와 같은 엔도글루카나제 변이체 A1은 상기 정의된 바와 같은 크산탄 리아제 변이체 B1, B2, B3, B4, B5, B6, B7 및 B8 중 어느 하나와 조합될 수 있고, 여기서 각각의 효소는 바람직하게는 각각 서열식별번호: 2 및 서열식별번호: 6에 대해 적어도 90%, 바람직하게는 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96% 또는 97% 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 본원에 명백하게 언급된 치환을 제외하고는 그의 각각의 모 서열과 동일하다.
일부 측면에서, 본 발명의 세제 조성물에서, 상기 정의된 바와 같은 엔도글루카나제 변이체 A2는 상기 정의된 바와 같은 크산탄 리아제 변이체 B1, B2, B3, B4, B5, B6, B7 및 B8 중 어느 하나와 조합될 수 있고, 여기서 각각의 효소는 바람직하게는 각각 서열식별번호: 2 및 서열식별번호: 6에 대해 적어도 90%, 바람직하게는 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96% 또는 97% 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 본원에 명백하게 언급된 치환을 제외하고는 그의 각각의 모 서열과 동일하다.
일부 측면에서, 본 발명의 세제 조성물에서, 상기 정의된 바와 같은 엔도글루카나제 변이체 A3은 상기 정의된 바와 같은 크산탄 리아제 변이체 B1, B2, B3, B4, B5, B6, B7 및 B8 중 어느 하나와 조합될 수 있고, 여기서 각각의 효소는 바람직하게는 각각 서열식별번호: 2 및 서열식별번호: 6에 대해 적어도 90%, 바람직하게는 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96% 또는 97% 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 본원에 명백하게 언급된 치환을 제외하고는 그의 각각의 모 서열과 동일하다.
일부 측면에서, 본 발명의 세제 조성물에서, 상기 정의된 바와 같은 엔도글루카나제 변이체 A4는 상기 정의된 바와 같은 크산탄 리아제 변이체 B1, B2, B3, B4, B5, B6, B7 및 B8 중 어느 하나와 조합될 수 있고, 여기서 각각의 효소는 바람직하게는 각각 서열식별번호: 2 및 서열식별번호: 6에 대해 적어도 90%, 바람직하게는 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96% 또는 97% 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 본원에 명백하게 언급된 치환을 제외하고는 그의 각각의 모 서열과 동일하다.
일부 측면에서, 본 발명의 세제 조성물에서, 상기 정의된 바와 같은 엔도글루카나제 변이체 A5는 상기 정의된 바와 같은 크산탄 리아제 변이체 B1, B2, B3, B4, B5, B6, B7 및 B8 중 어느 하나와 조합될 수 있고, 여기서 각각의 효소는 바람직하게는 각각 서열식별번호: 2 및 서열식별번호: 6에 대해 적어도 90%, 바람직하게는 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96% 또는 97% 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 본원에 명백하게 언급된 치환을 제외하고는 그의 각각의 모 서열과 동일하다.
일부 측면에서, 본 발명의 세제 조성물에서, 상기 정의된 바와 같은 엔도글루카나제 변이체 A6은 상기 정의된 바와 같은 크산탄 리아제 변이체 B1, B2, B3, B4, B5, B6, B7 및 B8 중 어느 하나와 조합될 수 있고, 여기서 각각의 효소는 바람직하게는 각각 서열식별번호: 2 및 서열식별번호: 6에 대해 적어도 90%, 바람직하게는 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96% 또는 97% 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 본원에 명백하게 언급된 치환을 제외하고는 그의 각각의 모 서열과 동일하다.
일부 측면에서, 본 발명의 세제 조성물에서, 상기 정의된 바와 같은 엔도글루카나제 변이체 A7은 상기 정의된 바와 같은 크산탄 리아제 변이체 B1, B2, B3, B4, B5, B6, B7 및 B8 중 어느 하나와 조합될 수 있고, 여기서 각각의 효소는 바람직하게는 각각 서열식별번호: 2 및 서열식별번호: 6에 대해 적어도 90%, 바람직하게는 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96% 또는 97% 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 본원에 명백하게 언급된 치환을 제외하고는 그의 각각의 모 서열과 동일하다.
일부 측면에서, 본 발명의 세제 조성물에서, 상기 정의된 바와 같은 엔도글루카나제 변이체 A8은 상기 정의된 바와 같은 크산탄 리아제 변이체 B1, B2, B3, B4, B5, B6, B7 및 B8 중 어느 하나와 조합될 수 있고, 여기서 각각의 효소는 바람직하게는 각각 서열식별번호: 2 및 서열식별번호: 6에 대해 적어도 90%, 바람직하게는 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96% 또는 97% 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 본원에 명백하게 언급된 치환을 제외하고는 그의 각각의 모 서열과 동일하다.
달리 명백하게 나타내지 않는 한, 상기 기재된 모든 변이체는 본원에 기재된 영역 중 임의의 것의 1개 이상 (예를 들어 여러개)의 다른 위치에 1개 이상의 추가의 변경을 추가로 포함할 수 있다.
아미노산 변화는 경도의 속성일 수 있고, 즉 단백질의 폴딩 및/또는 활성에 유의한 영향을 미치지 않는 보존적 아미노산 치환 또는 삽입; 전형적으로 1-30개 아미노산의 작은 결실; 작은 아미노- 또는 카르복실-말단 연장, 예컨대 아미노-말단 메티오닌 잔기; 20-25개 이하 잔기의 작은 링커 펩티드; 또는 알짜 전하 또는 또 다른 기능, 예컨대 폴리-히스티딘 트랙트, 항원성 에피토프 또는 결합 도메인를 변화시킴으로써 정제를 용이하게 하는 작은 연장일 수 있다.
보존적 치환의 예는 염기성 아미노산 (아르기닌, 리신 및 히스티딘), 산성 아미노산 (글루탐산 및 아스파르트산), 극성 아미노산 (글루타민 및 아스파라긴), 소수성 아미노산 (류신, 이소류신 및 발린), 방향족 아미노산 (페닐알라닌, 트립토판 및 티로신), 및 작은 아미노산 (글리신, 알라닌, 세린, 트레오닌 및 메티오닌)의 군 내이다. 특이적 활성을 일반적으로 변경시키지 않는 아미노산 치환이 관련 기술분야에 공지되어 있고, 예를 들어 문헌 [H. Neurath and R.L. Hill, 1979, In, The Proteins, Academic Press, New York]에 기재되어 있다. 통상적인 치환은 Ala/Ser, Val/Ile, Asp/Glu, Thr/Ser, Ala/Gly, Ala/Thr, Ser/Asn, Ala/Val, Ser/Gly, Tyr/Phe, Ala/Pro, Lys/Arg, Asp/Asn, Leu/Ile, Leu/Val, Ala/Glu, 및 Asp/Gly이다.
대안적으로, 아미노산 변화는 폴리펩티드의 물리-화학적 특성을 변경시키는 이러한 속성의 것이다. 예를 들어, 아미노산 변화는 폴리펩티드의 열적 안정성을 개선시키고, 기질 특이성을 변경시키고, pH 최적을 변화시킬 수 있는 것 등이다.
폴리펩티드에서 필수 아미노산은 관련 기술분야에 공지된 절차, 예컨대 부위-지정 돌연변이유발 또는 알라닌-스캐닝 돌연변이유발에 따라 확인될 수 있다 (Cunningham and Wells, 1989, Science 244: 1081-1085). 후자의 기술에서, 단일 알라닌 돌연변이는 분자의 모든 잔기에 도입되고, 생성된 돌연변이체 분자는 분자의 활성에 중요한 아미노산 잔기를 확인하기 위해 크산탄 리아제 활성에 대해 시험된다. 또한, 문헌 [Hilton et al., 1996, J. Biol. Chem. 271: 4699-4708]을 참조한다. 효소 또는 다른 생물학적 상호작용의 활성 부위는 또한 추정 접촉 부위 아미노산의 돌연변이와 함께, 핵 자기 공명, 결정학, 전자 회절 또는 광친화성 표지화와 같은 기술에 의해 결정되는 바와 같은, 구조의 물리적 분석에 의해 결정될 수 있다. 예를 들어, 문헌 [de Vos et al., 1992, Science 255: 306-312; Smith et al., 1992, J. Mol. Biol. 224: 899-904; Wlodaver et al., 1992, FEBS Lett. 309: 59-64]을 참조한다. 필수 아미노산의 동일성은 또한 관련 폴리펩티드와의 정렬로부터 추론될 수 있다.
한 실시양태에서, 본 발명은 서열식별번호: 2와 비교하여 변경의 총수가 1 내지 20개, 예를 들어 1 내지 18개 또는 5 내지 15개 또는 8 내지 14개, 예컨대 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 또는 15개 변경인 본 발명의 엔도글루카나제 변이체, 및 서열식별번호: 6과 비교하여 변경의 총수가 1 내지 20개, 예를 들어 1 내지 18개 또는 5 내지 17개 또는 10 내지 16개, 예컨대 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 또는 18개 변경인 본원에 기재된 바와 같은 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
한 실시양태에서, 본 발명은 본 발명의 엔도글루카나제 변이체, 및 크산탄 검에 대해 활성을 갖는 본 발명의 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이고, 바람직하게는 상기 크산탄 검에 대한 활성은 크산탄 검 분해 활성이고, 추가로 바람직하게는 상기 크산탄 검 분해 활성은 EC 4.2.2.12 활성 및 엔도글루카나제 EC 3.2.1.4 활성이다.
한 실시양태에서, 변이체는 모 효소 (예를 들어 서열식별번호: 2 또는 6)와 비교하여 세제 조성물에서 개선된 안정성을 갖는다. 한 실시양태에서, 개선된 안정성은 개선된 반감기로서 측정된다. 한 실시양태에서, 개선된 안정성은 반감기 개선 지수로서 측정된다.
한 실시양태에서 본 발명은 본 발명의 엔도글루카나제/크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이며, 여기서 상기 변이체는 (예를 들어, 서열식별번호: 2 또는 6을 갖는) 모 효소와 비교하여 세제 조성물에서 개선된 안정성을 갖고; 바람직하게는 상기 세제 조성물은 킬레이트화제를 포함하고; 추가로 바람직하게는 상기 킬레이트화제는 EDTA 또는 시트레이트이다.
한 실시양태에서 본 발명은 본 발명의 엔도글루카나제/크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이며, 여기서 상기 변이체는 모 엔도글루카나제/크산탄 리아제 대비 ≥1.0의 반감기 개선 지수 (HIF)를 갖고; 바람직하게는 상기 변이체는 >1.0, 바람직하게는 적어도 1.2, 예컨대 적어도 1.5, 예를 들어 적어도 2.0의 반감기 개선 지수 (HIF)를 갖는다. 상기 반감기 개선 지수 (HIF)를 계산하는 바람직한 방법은 본원의 실시예 3 및 7에 기재되어 있다. 따라서, 잔류 활성 (RA)는 하기 식: RA (%) = (Abs(스트레스)/Abs(Ref) x 100%를 사용하여 계산될 수 있고, 여기서 Abs(스트레스)는 관련 배경 흡광도 기여를 차감한 후의 스트레스 마이크로타이터 플레이트 (MTP) (예를 들어 25℃에서 밤새, 또는 온도 및 시간의 임의의 다른 조합에서 인큐베이션됨)에서의 샘플의 405 nm에서의 흡광도이고, Abs(Ref)는 관련 배경 흡광도 기여를 차감한 후의 참조 MTP (예를 들어 4℃에서 밤새 인큐베이션됨)에서의 샘플의 405 nm에서의 흡광도이며, 여기서 각각의 변이체 및 모 엔도글루카나제/크산탄 리아제의 분해에 대한 반감기 (예를 들어 25℃에서)는 하기 식: T1/2 (변이체 또는 모) = (Ln (0.5)/Ln (RA-변이체/100))*시간을 사용하여 계산되고, 여기서 "RA"는 퍼센트 단위의 잔류 활성이고, "시간"은 스트레스 및 참조 MTP 둘 다에 대한 시간 단위의 인큐베이션 시간이고, 여기서 반감기-개선 지수 (HIF)는 하기 식: HIF = T1/2 (변이체)/T1/2 (야생형)을 사용하여 계산되고, 예를 들어 여기서 T1/2 wt (또는 야생형)는 서열식별번호: 2 또는 6을 갖는 성숙 모 엔도글루카나제/크산탄 리아제의 T1/2이다.
한 실시양태에서 본 발명은 본 발명의 엔도글루카나제/크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이며, 여기서 반감기 개선 지수 (HIF)는 세제 조성물 중 25℃ 또는 30℃에서의 약 30분 내지 약 20시간의 기간 동안의 상기 엔도글루카나제/크산탄 리아제 변이체의 인큐베이션 후에 결정된다.
모 효소
모 엔도글루카나제는 (a) 서열식별번호: 2 또는 6의 성숙 폴리펩티드에 대해 적어도 60% 서열 동일성을 갖는 폴리펩티드; (b) 낮은 엄격도 조건 하에 (i) 서열식별번호: 1 또는 5의 성숙 폴리펩티드 코딩 서열, 또는 (ii) (i)의 전장 상보체와 혼성화하는 폴리뉴클레오티드에 의해 코딩된 폴리펩티드; 또는 (c) 서열식별번호: 1 또는 5의 성숙 폴리펩티드 코딩 서열에 대해 적어도 60% 서열 동일성을 갖는 폴리뉴클레오티드에 의해 코딩된 폴리펩티드일 수 있다.
한 측면에서, 모 효소는 서열식별번호: 2 또는 6의 성숙 폴리펩티드에 대해 적어도 60%, 예를 들어 적어도 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100%의 서열 동일성을 갖고, 엔도글루카나제/크산탄 리아제 활성을 갖는다. 한 측면에서, 모 효소의 아미노산 서열은 서열식별번호: 2 또는 6의 성숙 폴리펩티드와 최고 10개의 아미노산만큼, 예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10개만큼 상이하다.
또 다른 측면에서, 모 엔도글루카나제는 서열식별번호: 2의 아미노산 서열을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 모 엔도글루카나제는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드를 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 모 엔도글루카나제는 서열식별번호: 2의 아미노산의 수의 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94% 또는 95%를 함유하는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 단편이다. 또 다른 실시양태에서, 모 엔도글루카나제는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 대립유전자 변이체이다.
또 다른 측면에서, 모 크산탄 리아제는 서열식별번호: 6의 아미노산 서열을 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 모 크산탄 리아제는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드를 포함하거나 또는 이로 이루어진다. 또 다른 측면에서, 모 크산탄 리아제는 서열식별번호: 6의 아미노산의 수의 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94% 또는 95%를 함유하는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 단편이다. 또 다른 실시양태에서, 모 크산탄 리아제는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 대립유전자 변이체이다.
또 다른 측면에서, 모 효소는 매우 낮은 엄격도 조건, 낮은 엄격도 조건, 중간 엄격도 조건, 중간-높은 엄격도 조건, 높은 엄격도 조건, 또는 매우 높은 엄격도 조건 하에 (i) 서열식별번호: 1 또는 5의 성숙 폴리펩티드 코딩 서열 또는 (ii) (i)의 전장 상보체와 혼성화하는 폴리뉴클레오티드에 의해 코딩된다 (Sambrook et al., 1989, Molecular Cloning, A Laboratory Manual, 2d edition, Cold Spring Harbor, New York).
서열식별번호: 1 또는 5의 폴리뉴클레오티드 또는 그의 하위서열, 뿐만 아니라 서열식별번호: 2 또는 6의 폴리펩티드 또는 그의 단편은 관련 기술분야에 널리 공지된 방법에 따라 상이한 속 또는 종의 균주로부터 모 효소를 코딩하는 DNA를 확인하고 클로닝하기 위해 핵산 프로브를 설계하는데 사용될 수 있다. 특히, 이러한 프로브는 관심 세포의 게놈 DNA 또는 cDNA 내의 상응하는 유전자를 확인하고 단리하기 위해 표준 서던 블롯팅 절차에 따라 관심 세포의 게놈 DNA 또는 cDNA와의 혼성화에 사용될 수 있다. 이러한 프로브는 전체 서열보다 상당히 더 짧을 수 있지만, 적어도 15, 예를 들어, 적어도 25, 적어도 35, 또는 적어도 70개 뉴클레오티드 길이이어야 한다. 바람직하게는, 핵산 프로브는 적어도 100개 뉴클레오티드 길이, 예를 들어, 적어도 200개 뉴클레오티드, 적어도 300개 뉴클레오티드, 적어도 400개 뉴클레오티드, 적어도 500개 뉴클레오티드, 적어도 600개 뉴클레오티드, 적어도 700개 뉴클레오티드, 적어도 800개 뉴클레오티드, 또는 적어도 900개 뉴클레오티드 길이이다. DNA 및 RNA 프로브 둘 다가 사용될 수 있다. 프로브는 전형적으로 상응하는 유전자를 검출하기 위해 (예를 들어, 32P, 3H, 35S, 비오틴 또는 아비딘으로) 라벨링된다. 이러한 프로브는 본 발명에 포괄된다.
이러한 다른 균주로부터 제조된 게놈 DNA 또는 cDNA 라이브러리는 상기 기재된 프로브와 혼성하고 모 효소를 코딩하는 DNA에 대해 스크리닝될 수 있다. 이러한 다른 균주로부터의 게놈 또는 다른 DNA는 아가로스 또는 폴리아크릴아미드 겔 전기영동, 또는 다른 분리 기술에 의해 분리될 수 있다. 라이브러리로부터의 DNA 또는 분리된 DNA는 니트로셀룰로스 또는 다른 적합한 캐리어 물질 위로 옮겨져 고정될 수 있다. 서열식별번호: 1 또는 5 또는 그의 하위서열과 혼성하는 클론 또는 DNA를 확인하기 위해, 캐리어 물질이 서던 블롯에 사용된다.
본 발명의 목적상, 혼성화는 폴리뉴클레오티드가 매우 낮은 내지 매우 높은 엄격도 조건 하에 (i) 서열식별번호: 1 또는 5; (ii) 서열식별번호: 1 또는 5의 성숙 폴리펩티드 코딩 서열; (iii) 그의 전장 상보체; 또는 (iv) 그의 하위서열에 상응하는 표지된 핵산 프로브와 혼성화하는 것을 나타낸다. 이들 조건 하에 핵산 프로브가 혼성화하는 분자는, 예를 들어, X선 필름 또는 관련 기술분야에 공지된 임의의 다른 검출 수단을 사용하여 검출될 수 있다.
한 측면에서, 핵산 프로브는 서열식별번호: 1 또는 5의 성숙 폴리펩티드 코딩 서열이다. 또 다른 측면에서, 핵산 프로브는 서열식별번호: 2 또는 6의 폴리펩티드; 그의 성숙 폴리펩티드; 또는 그의 단편을 코딩하는 폴리뉴클레오티드이다. 또 다른 측면에서, 핵산 프로브는 서열식별번호: 1 또는 5이다.
또 다른 실시양태에서, 모 효소는 서열식별번호: 1 또는 5의 성숙 폴리펩티드 코딩 서열에 대해 적어도 60%, 예를 들어, 적어도 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100%의 서열 동일성을 갖는 폴리뉴클레오티드에 의해 코딩된다.
폴리펩티드는 하나의 폴리펩티드의 영역이 또 다른 폴리펩티드의 영역의 N-말단 또는 C-말단에 융합된 하이브리드 폴리펩티드일 수 있다.
모 효소는 또 다른 폴리펩티드가 본 발명의 폴리펩티드의 N-말단 또는 C-말단에 융합된 융합 폴리펩티드 또는 절단가능한 융합 폴리펩티드일 수 있다. 융합 폴리펩티드는 또 다른 폴리펩티드를 코딩하는 폴리뉴클레오티드를 본 발명의 폴리뉴클레오티드에 융합시키는 것에 의해 생산된다. 융합 폴리펩티드를 생산하는 기술은 관련 기술분야에 공지되어 있고, 폴리펩티드를 코딩하는 코딩 서열을 인 프레임으로, 융합 폴리펩티드의 발현이 동일한 프로모터(들) 및 종결인자의 제어 하에 있도록 라이게이션하는 것을 포함한다. 융합 폴리펩티드는 또한 인테인 기술을 사용하여 구축될 수 있고, 여기서 번역후 융합 폴리펩티드가 생성된다 (Cooper et al., 1993, EMBO J. 12: 2575-2583; Dawson et al., 1994, Science 266: 776-779).
융합 폴리펩티드는 추가로 2개의 폴리펩티드 사이에 절단 부위를 포함할 수 있다. 융합 단백질의 분비 시, 부위는 절단되어 2개의 폴리펩티드를 방출한다. 절단 부위의 예는 문헌 [Martin et al., 2003, J. Ind. Microbiol. Biotechnol. 3: 568-576; Svetina et al., 2000, J. Biotechnol. 76: 245-251; Rasmussen-Wilson et al., 1997, Appl. Environ. Microbiol. 63: 3488-3493; Ward et al., 1995, Biotechnology 13: 498-503; 및 Contreras et al., 1991, Biotechnology 9: 378-381; Eaton et al., 1986, Biochemistry 25: 505-512; Collins-Racie et al., 1995, Biotechnology 13: 982-987; Carter et al., 1989, Proteins: Structure, Function, and Genetics 6: 240-248; 및 Stevens, 2003, Drug Discovery World 4: 35-48]에 개시된 부위를 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
모 효소는 임의의 속의 미생물로부터 수득될 수 있다. 본 발명의 목적상, 주어진 공급원과 관련하여 본원에 사용된 용어 "로부터 수득된"은 폴리뉴클레오티드에 의해 코딩된 모 효소가 상기 공급원에 의해 생산되거나, 또는 공급원으로부터의 폴리뉴클레오티드가 삽입된 균주에 의해 생산된다는 것을 의미할 것이다. 한 측면에서, 모 효소는 세포외 분비된다.
모 효소는 박테리아 효소일 수 있다. 예를 들어, 모 효소는 그람-양성 박테리아 폴리펩티드 예컨대 바실루스(Bacillus), 클로스트리디움(Clostridium), 엔테로코쿠스(Enterococcus), 게오바실루스(Geobacillus), 락토바실루스(Lactobacillus), 락토코쿠스(Lactococcus), 오세아노바실루스(Oceanobacillus), 스타필로코쿠스(Staphylococcus), 스트렙토코쿠스(Streptococcus), 또는 스트렙토미세스(Streptomyces) 효소, 또는 그람-음성 박테리아 폴리펩티드 예컨대 캄필로박터(Campylobacter), 이. 콜라이(E. coli), 플라보박테리움(Flavobacterium), 푸소박테리움(Fusobacterium), 헬리코박터(Helicobacter), 일리오박터(Ilyobacter), 네이세리아(Neisseria), 슈도모나스(Pseudomonas), 살모넬라(Salmonella), 또는 우레아플라스마(Ureaplasma) 효소일 수 있다.
한 측면에서, 모 효소는 바실루스 알칼로필루스(Bacillus alkalophilus), 바실루스 아밀로리퀘파시엔스(Bacillus amyloliquefaciens), 바실루스 브레비스(Bacillus brevis), 바실루스 시르쿨란스(Bacillus circulans), 바실루스 클라우시이(Bacillus clausii), 바실루스 코아굴란스(Bacillus coagulans), 바실루스 피르무스(Bacillus firmus), 바실루스 라우투스(Bacillus lautus), 바실루스 렌투스(Bacillus lentus), 바실루스 리케니포르미스(Bacillus licheniformis), 바실루스 메가테리움(Bacillus megaterium), 바실루스 푸밀루스(Bacillus pumilus), 바실루스 스테아로써모필루스(Bacillus stearothermophilus), 바실루스 서브틸리스(Bacillus subtilis) 또는 바실루스 투린기엔시스(Bacillus thuringiensis) 효소이다.
또 다른 측면에서, 모 효소는 스트렙토코쿠스 에퀴시밀리스(Streptococcus equisimilis), 스트렙토코쿠스 피오게네스(Streptococcus pyogenes), 스트렙토코쿠스 우베리스(Streptococcus uberis), 또는 스트렙토코쿠스 에퀴 아종 주에피데미쿠스(Zooepidemicus) 효소이다.
또 다른 측면에서, 모 효소는 스트렙토미세스 아크로모게네스(Streptomyces achromogenes), 스트렙토미세스 아베르미틸리스(Streptomyces avermitilis), 스트렙토미세스 코엘리콜로르(Streptomyces coelicolor), 스트렙토미세스 그리세우스(Streptomyces griseus) 또는 스트렙토미세스 리비단스(Streptomyces lividans) 효소이다.
모 효소는 진균 효소일 수 있다. 예를 들어, 모 효소는 효모 효소 예컨대 칸디다(Candida), 클루이베로미세스(Kluyveromyces), 피키아(Pichia), 사카로미세스(Saccharomyces), 쉬조사카로미세스(Schizosaccharomyces) 또는 야로위아(Yarrowia) 효소; 또는 사상 진균 효소 예컨대 아크레모니움(Acremonium), 아가리쿠스(Agaricus), 알테르나리아(Alternaria), 아스페르길루스(Aspergillus), 아우레오바시디움(Aureobasidium), 보트리오스파에리아(Botryosphaeria), 세리포리옵시스(Ceriporiopsis), 카에토미디움(Chaetomidium), 크리소스포리움(Chrysosporium), 클라비셉스(Claviceps), 코클리오볼루스(Cochliobolus), 코프리놉시스(Coprinopsis), 코프토테르메스(Coptotermes), 코리나스쿠스(Corynascus), 크리포넥트리아(Cryphonectria), 크립토코쿠스(Cryptococcus), 디플로디아(Diplodia), 엑시디아(Exidia), 필로바시디움(Filobasidium), 푸사리움(Fusarium), 지베렐라(Gibberella), 홀로마스티고토이데스(Holomastigotoides), 휴미콜라(Humicola), 이프렉스(Irpex), 렌티눌라(Lentinula), 렙토스파에리아(Leptosphaeria), 마그나포르테(Magnaporthe), 멜라노카르푸스(Melanocarpus), 메리필루스(Meripilus), 뮤코르(Mucor), 미셀리오프토라(Myceliophthora), 네오칼리마스틱스(Neocallimastix), 뉴로스포라(Neurospora), 파에실로미세스(Paecilomyces), 페니실리움(Penicillium), 파네로카에테(Phanerochaete), 피로미세스(Piromyces), 포이트라시아(Poitrasia), 슈도플렉타니아(Pseudoplectania), 슈도트리코님파(Pseudotrichonympha), 리조뮤코르(Rhizomucor), 쉬조필룸(Schizophyllum), 스키탈리디움(Scytalidium), 탈라로미세스(Talaromyces), 써모아스쿠스(Thermoascus), 티엘라비아(Thielavia), 톨리포클라디움(Tolypocladium), 트리코더마(Trichoderma), 트리코파에아(Trichophaea), 베르티실리움(Verticillium), 볼바리엘라(Volvariella), 또는 크실라리아(Xylaria) 효소일 수 있다.
또 다른 측면에서, 모 효소는 사카로미세스 칼스베르겐시스(Saccharomyces carlsbergensis), 사카로미세스 세레비지아에(Saccharomyces cerevisiae), 사카로미세스 디아스타티쿠스(Saccharomyces diastaticus), 사카로미세스 도우글라시이(Saccharomyces douglasii), 사카로미세스 클루이베리(Saccharomyces kluyveri), 사카로미세스 노르벤시스(Saccharomyces norbensis) 또는 사카로미세스 오비포르미스(Saccharomyces oviformis) 효소이다.
또 다른 측면에서, 모 효소는 아크레모니움 셀룰롤리티쿠스(Acremonium cellulolyticus), 아스페르길루스 아쿨레아투스(Aspergillus aculeatus), 아스페르길루스 아와모리(Aspergillus awamori), 아스페르길루스 포에티두스(Aspergillus foetidus), 아스페르길루스 푸미가투스(Aspergillus fumigatus), 아스페르길루스 자포니쿠스(Aspergillus japonicus), 아스페르길루스 니둘란스(Aspergillus nidulans), 아스페르길루스 니거(Aspergillus niger), 아스페르길루스 오리자에(Aspergillus oryzae), 크리소스포리움 이놉스(Chrysosporium inops), 크리소스포리움 케라티노필룸(Chrysosporium keratinophilum), 크리소스포리움 룩크노웬세(Chrysosporium lucknowense), 크리소스포리움 메르다리움(Chrysosporium merdarium), 크리소스포리움 판니콜라(Chrysosporium pannicola), 크리소스포리움 퀸스란디쿰(Chrysosporium queenslandicum), 크리소스포리움 트로피쿰(Chrysosporium tropicum), 크리소스포리움 조나툼(Chrysosporium zonatum), 푸사리움 박트리디오이데스(Fusarium bactridioides), 푸사리움 세레알리스(Fusarium cerealis), 푸사리움 크루크웰렌세(Fusarium crookwellense), 푸사리움 쿨모룸(Fusarium culmorum), 푸사리움 그라미네아룸(Fusarium graminearum), 푸사리움 그라미눔(Fusarium graminum), 푸사리움 헤테로스포룸(Fusarium heterosporum), 푸사리움 네군디(Fusarium negundi), 푸사리움 옥시스포룸(Fusarium oxysporum), 푸사리움 레티쿨라툼(Fusarium reticulatum), 푸사리움 로세움(Fusarium roseum), 푸사리움 삼부시눔(Fusarium sambucinum), 푸사리움 사르코크로움(Fusarium sarcochroum), 푸사리움 스포로트리키오이데스(Fusarium sporotrichioides), 푸사리움 술푸레움(Fusarium sulphureum), 푸사리움 토루로숨(Fusarium torulosum), 푸사리움 트리코테키오이데스(Fusarium trichothecioides), 푸사리움 베네나툼(Fusarium venenatum), 휴미콜라 그리세아(Humicola grisea), 휴미콜라 인솔렌스(Humicola insolens), 휴미콜라 라누기노사(Humicola lanuginosa), 이르펙스 락테우스(Irpex lacteus), 뮤코르 미에헤이(Mucor miehei), 미셀리오프토라 써모필라(Myceliophthora thermophila), 뉴로스포라 크라사(Neurospora crassa), 페니실리움 푸니쿨로숨(Penicillium funiculosum), 페니실리움 푸르푸로게눔(Penicillium purpurogenum), 파네로카에테 크리소스포리움(Phanerochaete chrysosporium), 티엘라비아 아크로마티카(Thielavia achromatica), 티엘라비아 알보미세스(Thielavia albomyces), 티엘라비아 알보필로사(Thielavia albopilosa), 티엘라비아 아우스트랄리엔시스(Thielavia australiensis), 티엘라비아 피메티(Thielavia fimeti), 티엘라비아 미크로스포라(Thielavia microspora), 티엘라비아 오비스포라(Thielavia ovispora), 티엘라비아 페루비아나(Thielavia peruviana), 티엘라비아 세토사(Thielavia setosa), 티엘라비아 스페데도니움(Thielavia spededonium), 티엘라비아 서브써모필라(Thielavia subthermophila), 티엘라비아 테레스트리스(Thielavia terrestris), 트리코더마 하르지아눔(Trichoderma harzianum), 트리코더마 코닌기이(Trichoderma koningii), 트리코더마 롱기브라키아툼(Trichoderma longibrachiatum), 트리코더마 레에세이(Trichoderma reesei) 또는 트리코더마 비리데(Trichoderma viride) 효소이다.
또 다른 측면에서, 모 효소는 파에니바실루스 종 크산탄 리아제, 예를 들어, 서열식별번호: 6의 크산탄 리아제이다.
또 다른 측면에서, 모 효소는 GH9 패밀리의 파에니바실루스 종 엔도글루카나제, 예를 들어, 서열식별번호: 2의 엔도글루카나제이다.
상기 언급된 종의 경우, 본 발명은 공지된 종 명칭에 관계없이, 완전한 상태 및 불완전한 상태 둘 다, 및 다른 분류학상 등가물, 예를 들어, 불완전세대를 포괄하는 것으로 이해될 것이다. 관련 기술분야의 통상의 기술자는 적절한 등가물의 실체를 용이하게 인지할 것이다.
이들 종의 균주는 수많은 컬쳐 콜렉션, 예컨대 아메리칸 타입 컬쳐 콜렉션(American Type Culture Collection) (ATCC), 도이체 잠룽 폰 미크로오르가니스멘 운트 첼쿨투렌 게엠베하(Deutsche SammLung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH) (DSMZ), 센트라알부레아우 부르 쉼멜쿨투레스(Centraalbureau Voor Schimmelcultures) (CBS), 및 아그리컬쳐럴 리서치 서비스 페이턴트 컬쳐 콜렉션(Agricultural Research Service Patent Culture Collection), 노던 리져널 리서치 센터(Northern Regional Research Center) (NRRL)에서 대중이 용이하게 접근가능하다.
모 효소는 자연 (예를 들어, 토양, 퇴비, 물 등)으로부터 단리된 미생물 또는 상기-언급된 프로브를 사용하여 천연 물질 (예를 들어, 토양, 퇴비, 물 등)로부터 직접적으로 수득된 DNA 샘플을 포함한 다른 공급원으로부터 확인되고 수득될 수 있다. 천연 서식지로부터 미생물 및 DNA를 직접적으로 단리하는 기술은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다. 모 효소를 코딩하는 폴리뉴클레오티드는 이어서 또 다른 미생물 또는 혼합된 DNA 샘플의 게놈 DNA 또는 cDNA 라이브러리를 유사하게 스크리닝함으로써 수득될 수 있다. 모 효소를 코딩하는 폴리뉴클레오티드가 프로브(들)에 의해 검출되면, 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 기술을 사용하여 폴리뉴클레오티드가 단리되고 클로닝될 수 있다 (예를 들어 문헌 [Sambrook et al., 1989, 상기 문헌] 참조).
실시양태
한 실시양태에서, 본 발명은 본원에 기재된 바와 같은 적어도 1종 (예를 들어 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10종)의 엔도글루카나제 변이체 및 본원에 기재된 바와 같은 적어도 1종 (예를 들어 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10종)의 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물에 관한 것이다.
한 실시양태에서, 본 발명의 세제 조성물은 프로테아제, 아밀라제, 리케나제, 리파제, 큐티나제, 셀룰라제, 엔도글루카나제, 크실로글루카나제, 펙티나제, 펙틴 리아제, 크산타나제, 퍼옥시다제, 할로퍼옥시게나제, 카탈라제 및 만난아제, 또는 그의 임의의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 추가의 효소를 추가로 포함한다.
본 발명의 세제 조성물은 1종 이상의 세제 성분을 추가로 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서 상기 세제 성분은 킬레이트화제, 예컨대 EDTA 또는 시트레이트일 수 있다.
한 실시양태에서, 세제 조성물은 1종 이상의 세제 성분을 추가로 포함하고, 여기서 상기 세제 조성물은 바, 균질 정제, 2개 이상의 층을 갖는 정제, 1개 이상의 구획을 갖는 파우치, 레귤러 또는 콤팩트 분말, 과립, 페이스트, 겔, 또는 레귤러, 콤팩트 또는 농축 액체의 형태이다.
한 실시양태에서 본 발명은 본 발명의 세제 조성물의 용도에 관한 것이며, 여기서 상기 용도는 크산탄 검을 분해하는 용도 및 세정 과정, 예컨대 세탁 또는 경질 표면 세정 예컨대 식기 세척에서의 용도의 군으로부터 선택된다.
한 실시양태에서 본 발명은 본 발명의 세제 조성물의 용도에 관한 것이며, 여기서 상기 조성물은 효소 세제력 이익을 갖는다.
한 실시양태에서 본 발명은 본 발명의 세제 조성물을 크산탄 검에 적용하는 것을 포함하는 크산탄 검을 분해하는 방법에 관한 것이다.
한 실시양태에서 본 발명은 본 발명의 세제 조성물을 크산탄 검에 적용하는 것을 포함하는 크산탄 검을 분해하는 방법에 관한 것이며, 여기서 상기 크산탄 검은 텍스타일 또는 경질 표면, 예컨대 식기 세척의 표면 상에 존재한다.
조성물
하나의 특정 측면에서, 본 발명에 따른 변이체는 모 효소와 비교하여 또는 변이체와 동일한 아미노산 서열을 갖지만 명시된 위치 중 1개 이상에서 변경 (예를 들어, 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖지 않는 엔도글루카나제/크산탄 리아제와 비교하여, 또는 서열식별번호: 2에 제시된 아미노산 서열을 갖는 엔도글루카나제 또는 서열식별번호: 6에 제시된 바와 같은 아미노산 서열을 갖는 크산탄 리아제와 비교하여 세제 중에서 개선된 안정성을 갖고, 여기서 세제 중에서의 활성 및/또는 안정성은 본원의 실시예 3 및 7에 개시된 바와 같이 측정된다.
효소 외에 세제 조성물은 추가의 성분을 포함할 수 있다. 추가의 성분의 선택은 통상의 기술자의 기술 수준 내이며, 하기에 제시된 예시적인 비제한적 성분을 포함한 통상적인 성분을 포함한다. 성분의 선택은 직물 관리의 경우, 세정하고자 하는 직물의 유형, 오염물형성의 유형 및/또는 정도, 세정이 이루어질 온도, 및 세제 생성물의 제형을 고려하는 것을 포함할 수 있다. 하기 언급된 성분이 특정한 기능성에 따라 일반적 표제에 의해 카테고리화되지만, 성분은 통상의 기술자가 인지할 추가적인 기능성을 포함할 수 있기 때문에, 이것이 제한으로서 해석되서는 안된다.
세제 조성물은 텍스타일 예컨대 예를 들어 직물, 의류 또는 리넨의 세탁에, 또는 경질 표면 예컨대 예를 들어 바닥, 테이블의 세정, 또는 식기 세척에 적합할 수 있다.
세제 조성물
한 실시양태에서, 본원에 기재된 바와 같은 엔도글루카나제 변이체는 세척액 리터당 0.0001-200 mg의 효소 단백질, 예컨대 0.0005-100 mg의 효소 단백질, 바람직하게는 0.001-30 mg의 효소 단백질, 보다 바람직하게는 0.005-8 mg의 효소 단백질, 보다 더 바람직하게는 0.01-2 mg의 효소 단백질에 상응하는 양으로 세제 조성물에 첨가될 수 있다.
한 실시양태에서, 본원에 기재된 크산탄 리아제 변이체는 세척액 리터당 0.0001-200 mg의 효소 단백질, 예컨대 0.0005-100 mg의 효소 단백질, 바람직하게는 0.001-30 mg의 효소 단백질, 보다 바람직하게는 0.005-8 mg의 효소 단백질, 보다 더 바람직하게는 0.01-2 mg의 효소 단백질에 상응하는 양으로 세제 조성물에 첨가될 수 있다.
일부 실시양태에서, 각각의 본원에 기재된 바와 같은 엔도글루카나제 변이체 및 본원에 기재된 바와 같은 크산탄 리아제 변이체는 세척액 리터당 0.0001-200 mg의 효소 단백질, 예컨대 0.0005-100 mg의 효소 단백질, 바람직하게는 0.001-30 mg의 효소 단백질, 보다 바람직하게는 0.005-8 mg의 효소 단백질, 보다 더 바람직하게는 0.01-2 mg의 효소 단백질에 상응하는 양으로 세제 조성물에 각각 첨가될 수 있다.
자동 식기세척 (ADW)에 사용하기 위한 조성물은, 예를 들어, 조성물의 중량 기준으로 0.0001-50%, 예컨대 0.001-20%, 예컨대 0.01-10%, 예컨대 0.05-5%의 각각의 효소 단백질을 포함할 수 있다.
세탁 과립 또는 고체/과립상 세탁 조성물에 사용하기 위한 조성물은 일반적으로, 예를 들어, 조성물의 중량 기준으로 0.0001-50%, 예컨대 0.001-20%, 예컨대 0.01-10%, 예컨대 0.05-5%의 각각의 효소 단백질을 포함할 수 있다.
세탁 액체에 사용하기 위한 조성물은, 예를 들어, 조성물의 중량 기준으로 0.0001-10%, 예컨대 0.001-7%, 예컨대 0.1-5%의 각각의 효소 단백질을 포함할 수 있다.
본 발명의 세제 조성물의 효소(들)는 통상적인 안정화제, 예를 들어, 폴리올, 예컨대 프로필렌 글리콜 또는 글리세롤, 당 또는 당 알콜, 락트산, 붕산, 또는 붕산 유도체, 예를 들어, 방향족 보레이트 에스테르, 또는 페닐 보론산 유도체, 예컨대 4-포르밀페닐 보론산을 사용하여 안정화될 수 있고, 조성물은 예를 들어 WO92/19709 및 WO92/19708에 기재된 바와 같이 제제화될 수 있다.
특정 시장에서 상이한 세척 조건이 사용되고, 이에 따라 상이한 유형의 세제가 사용된다. 이는 예를 들어 EP1025240에 개시되어 있다. 예를 들어, 아시아 (일본)에서는 낮은 세제 농도 시스템이 사용되는 반면에, 미국에서는 중간 세제 농도 시스템이 사용되고, 유럽에서는 높은 세제 농도 시스템이 사용된다.
낮은 세제 농도 시스템은 약 800 ppm 미만의 세제 성분의 세척수 중에 존재하는 세제를 포함한다. 일본 세제는 세척수 중에 대략 667 ppm의 세제 성분이 존재하기 때문에 전형적으로 낮은 세제 농도 시스템으로 간주된다.
중간 세제 농도는 약 800 ppm 내지 약 2000 ppm의 세제 성분이 세척수 중에 존재하는 세제를 포함한다. 북미 세제는 세척수 중에 대략 975 ppm의 세제 성분이 존재하기 때문에 일반적으로 중간 세제 농도 시스템인 것으로 간주된다.
높은 세제 농도 시스템은 약 2000 ppm 초과의 세제 성분이 세척수 중에 존재하는 세제를 포함한다. 유럽 세제는 세척수 중에 대략 4500-5000 ppm의 세제 성분을 갖기 때문에 일반적으로 높은 세제 농도 시스템인 것으로 간주된다.
라틴 아메리카 세제는 일반적으로 높은 비누거품 포스페이트 빌더 세제이고, 라틴 아메리카에서 사용되는 세제의 범위는 그들이 세척수 중 1500-6000 ppm의 세제 성분 범위이기 때문에 중간 및 높은 세제 농도 둘 다에 속할 수 있다. 이러한 세제 조성물은 본 발명의 모든 실시양태이다.
본 발명의 폴리펩티드는 또한, 본원에 참조로 포함되는 WO97/07202에 개시된 세제 제제에 혼입될 수 있다.
계면활성제
세제 조성물은 음이온성 및/또는 양이온성 및/또는 비이온성 및/또는 반-극성 및/또는 쯔비터이온성, 또는 그의 혼합물일 수 있는 1종 이상의 계면활성제를 포함할 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 본 발명의 세제 조성물은 적어도 1종의 계면활성제를 포함한다. 특정한 실시양태에서, 세제 조성물은 1종 이상의 비이온성 계면활성제 및 1종 이상의 음이온성 계면활성제의 혼합물을 포함한다. 계면활성제(들)는 전형적으로 중량 기준으로 약 0.1-60%, 예컨대 약 1-40%, 또는 약 3-20%, 또는 약 3-10%의 수준으로 존재한다. 계면활성제(들)는 목적하는 세정 적용분야에 기초하여 선택되고, 관련 기술분야에 공지된 임의의 통상적인 계면활성제(들)를 포함한다. 세제에 사용하기 위해 관련 기술분야에 공지된 임의의 계면활성제가 사용될 수 있다.
그에 포함되는 경우 세제는 통상적으로 중량 기준으로 약 1-40%, 예컨대 약 5-15%, 또는 약 20-25%를 포함한 약 5-30%의 음이온성 계면활성제를 포함할 것이다. 음이온성 계면활성제의 비제한적 예는 술페이트 및 술포네이트, 특히, 선형 알킬벤젠술포네이트 (LAS), LAS의 이성질체, 분지형 알킬벤젠술포네이트 (BABS), 페닐알칸술포네이트, 알파-올레핀술포네이트 (AOS), 올레핀 술포네이트, 알켄 술포네이트, 알칸-2,3-디일비스(술페이트), 히드록시알칸술포네이트 및 디술포네이트, 알킬 술페이트 (AS), 예컨대 소듐 도데실 술페이트 (SDS), 지방 알콜 술페이트 (FAS), 1급 알콜 술페이트 (PAS), 알콜 에테르술페이트 (AES 또는 AEOS 또는 FES, 또한 알콜 에톡시술페이트 또는 지방 알콜 에테르 술페이트로도 공지됨), 2급 알칸술포네이트 (SAS), 파라핀 술포네이트 (PS), 에스테르 술포네이트, 술폰화 지방산 글리세롤 에스테르, 메틸 에스테르 술포네이트 (MES)를 포함한 알파-술포 지방산 메틸 에스테르 (알파-SFMe 또는 SES), 알킬- 또는 알케닐숙신산, 도데세닐/테트라데세닐 숙신산 (DTSA), 아미노산의 지방산 유도체, 술포-숙신산의 디에스테르 및 모노에스테르 또는 비누, 및 그의 조합을 포함한다.
그에 포함되는 경우 세제는 통상적으로 중량 기준으로 약 0-10%의 양이온성 계면활성제를 포함할 것이다. 양이온성 계면활성제의 비제한적 예는 알킬디메틸에탄올아민 쿼트 (ADMEAQ), 세틸트리메틸암모늄 브로마이드 (CTAB), 디메틸디스테아릴암모늄 클로라이드 (DSDMAC), 및 알킬벤질디메틸암모늄, 알킬 4급 암모늄 화합물, 알콕실화 4급 암모늄 (AQA) 화합물, 및 그의 조합을 포함한다.
그에 포함되는 경우 세제는 통상적으로 중량 기준으로 약 0.2-40%, 예를 들어 약 0.5-30%, 특히 약 1-20%, 약 3-10%, 예컨대 약 3-5%, 또는 약 8-12%의 비이온성 계면활성제를 포함할 것이다. 비이온성 계면활성제의 비제한적 예는 알콜 에톡실레이트 (AE 또는 AEO), 알콜 프로폭실레이트, 프로폭실화 지방 알콜 (PFA), 알콕실화 지방산 알킬 에스테르, 예컨대 에톡실화 및/또는 프로폭실화 지방산 알킬 에스테르, 알킬페놀 에톡실레이트 (APE), 노닐페놀 에톡실레이트 (NPE), 알킬폴리글리코시드 (APG), 알콕실화 아민, 지방산 모노에탄올아미드 (FAM), 지방산 디에탄올아미드 (FADA), 에톡실화 지방산 모노에탄올아미드 (EFAM), 프로폭실화 지방산 모노에탄올아미드 (PFAM), 폴리히드록시 알킬 지방산 아미드, 또는 글루코사민의 N-아실 N-알킬 유도체 (글루카미드, GA 또는 지방산 글루카미드, FAGA), 뿐만 아니라 상표명 스팬(SPAN) 및 트윈(TWEEN) 하에 입수가능한 제품, 및 그의 조합을 포함한다.
그에 포함되는 경우 세제는 통상적으로 중량 기준으로 약 0-10%의 반극성 계면활성제를 포함할 것이다. 반극성 계면활성제의 비제한적 예는 아민 옥시드 (AO) 예컨대 알킬디메틸아민옥시드, N-(코코 알킬)-N,N-디메틸아민 옥시드 및 N-(탈로우-알킬)-N,N-비스(2-히드록시에틸)아민 옥시드, 지방산 알칸올아미드 및 에톡실화 지방 산 알칸올아미드, 및 그의 조합을 포함한다.
그에 포함되는 경우 세제는 통상적으로 중량 기준으로 약 0-10%의 쯔비터이온성 계면활성제를 포함할 것이다. 쯔비터이온성 계면활성제의 비제한적 예는 베타인, 알킬디메틸베타인, 술포베타인, 및 그의 조합을 포함한다.
굴수성제
굴수성제는 수용액 중의 소수성 화합물 (또는 반대로, 비-극성 환경에서 극성 물질)을 가용화시키는 화합물이다. 전형적으로, 굴수성제는 친수성 및 소수성 특징 둘 다를 갖지만 (계면활성제로부터 공지된 바와 같은 소위 친양쪽성 특성); 굴수성제의 분자 구조는 일반적으로 자발적인 자기-응집을 선호하지 않는다 (예를 들어, 문헌 [Hodgdon and Kaler (2007), Current Opinion in Colloid & Interface Science 12: 121-128]에 의한 고찰 참조). 굴수성제는 미셀러, 층상 또는 다른 널리 정의된 중간상을 형성하는, 계면활성제 및 지질에 대해 발견되는 바와 같이 그 초과에서 자기-응집이 일어나는 임계 농도를 나타내지 않는다. 대신, 많은 굴수성제는 농도가 증가함에 따라 응집체의 크기가 커지는 연속형 응집 과정을 보여준다. 그러나, 많은 굴수성제는 물, 오일, 계면활성제 및 중합체의 혼합물을 포함하여 극성 및 비-극성 특징의 물질을 함유하는 시스템의 상 거동, 안정성 및 콜로이드 특성을 변경시킨다. 굴수성제는 제약, 개인 위생, 식품에서 기술 적용분야까지 산업 전반에 걸쳐 고전적으로 사용된다. 굴수성제를 세제 조성물에 사용하면, 예를 들어, 상 분리 또는 고 점도와 같은 바람직하지 않은 현상을 유도하지 않으면서 계면활성제의 보다 농축된 제제가 가능하게 된다 (물을 제거함으로써 액체 세제를 압착하는 과정에서와 같음).
세제는 중량 기준으로 0-5%, 예컨대 약 0.5-5%, 또는 약 3-5%의 굴수성제를 포함할 수 있다. 세제에 사용하기 위해 관련 기술분야에 공지된 임의의 굴수성제가 사용될 수 있다. 굴수성제의 비제한적 예는 나트륨 벤젠 술포네이트, 나트륨 p-톨루엔 술포네이트 (STS), 나트륨 크실렌 술포네이트 (SXS), 나트륨 쿠멘 술포네이트 (SCS), 나트륨 시멘 술포네이트, 아민 옥시드, 알콜 및 폴리글리콜에테르, 나트륨 히드록시나프토에이트, 나트륨 히드록시나프탈렌 술포네이트, 나트륨 에틸헥실 술페이트, 및 그의 조합을 포함한다.
빌더 및 코-빌더
세제 조성물은 중량 기준으로 약 0-65%, 예컨대 약 5-45%의 세제 빌더 또는 코-빌더, 또는 그의 혼합물을 포함할 수 있다. 식기 세척 세제에서, 빌더의 수준은 전형적으로 40-65%, 특히 50-65%이다. 빌더 및/또는 코-빌더는 특히, Ca 및 Mg와 수용성 착물을 형성하는 킬레이트화제일 수 있다. 세탁 세제에 사용하기 위한 관련 기술분야에 공지된 임의의 빌더 및/또는 코-빌더가 사용될 수 있다. 빌더의 비제한적 예는 제올라이트, 디포스페이트 (피로포스페이트), 트리포스페이트, 예컨대 소듐 트리포스페이트 (STP 또는 STPP), 카르보네이트, 예컨대 소듐 카르보네이트, 가용성 실리케이트, 예컨대 소듐 메타실리케이트, 층상 실리케이트 (예를 들어, 훽스트(Hoechst)로부터의 SKS-6), 에탄올아민 예컨대 2-아미노에탄-1-올 (MEA), 디에탄올아민 (DEA, 또한 이미노디에탄올로도 공지됨), 트리에탄올아민 (TEA, 또한 2,2',2"-니트릴로트리에탄올로도 공지됨), 및 카르복시메틸 이눌린 (CMI), 및 그의 조합을 포함한다.
세제 조성물은 또한 중량 기준으로 0-20%, 예컨대 약 5-10%의 세제 코-빌더, 또는 그의 혼합물을 포함할 수 있다. 세제 조성물은 코-빌더를 단독으로 포함할 수 있거나, 또는 빌더, 예를 들어 제올라이트 빌더와 조합하여 포함할 수 있다. 코-빌더의 비제한적 예는 폴리아크릴레이트의 단독중합체 또는 그의 공중합체, 예컨대 폴리(아크릴산) (PAA) 또는 코폴리(아크릴산/말레산) (PAA/PMA)을 포함한다. 추가의 비제한적 예는 시트레이트, 킬레이트화제 예컨대 아미노카르복실레이트, 아미노폴리카르복실레이트 및 포스포네이트, 및 알킬- 또는 알케닐숙신산을 포함한다. 추가의 구체적 예는 2,2',2"-니트릴로트리아세트산 (NTA), 에틸렌디아민테트라아세트산 (EDTA), 디에틸렌트리아민펜타아세트산 (DTPA), 이미노디숙신산 (IDS), 에틸렌디아민-N,N'-디숙신산 (EDDS), 메틸글리신디아세트산 (MGDA), 글루탐산-N,N-디아세트산 (GLDA), 1-히드록시에탄-1,1-디포스폰산 (HEDP), 에틸렌디아민테트라-(메틸렌포스폰산) (EDTMPA), 디에틸렌트리아민펜타키스(메틸렌포스폰산) (DTPMPA 또는 DTMPA), N-(2-히드록시에틸)이미노디아세트산 (EDG), 아스파르트산-N-모노아세트산 (ASMA), 아스파르트산-N,N-디아세트산 (ASDA), 아스파르트산-N-모노프로피온산 (ASMP), 이미노디숙신산 (IDA), N-(2-술포메틸)-아스파르트산 (SMAS), N-(2-술포에틸)-아스파르트산 (SEAS), N-(2-술포메틸)-글루탐산 (SMGL), N-(2-술포에틸)-글루탐산 (SEGL), N-메틸이미노디아세트산 (MIDA), α-알라닌-N,N-디아세트산 (α-ALDA), 세린-N,N-디아세트산 (SEDA), 이소세린-N,N-디아세트산 (ISDA), 페닐알라닌-N,N-디아세트산 (PHDA), 안트라닐산-N,N-디아세트산 (ANDA), 술파닐산-N,N-디아세트산 (SLDA), 타우린-N,N-디아세트산 (TUDA) 및 술포메틸-N,N-디아세트산 (SMDA), N-(2-히드록시에틸)-에틸리덴디아민-N,N',N'-트리아세테이트 (HEDTA), 디에탄올글리신 (DEG), 디에틸렌트리아민 펜타(메틸렌포스폰산) (DTPMP), 아미노트리스(메틸렌포스폰산) (ATMP), 및 그의 조합 및 염을 포함한다. 추가의 예시적인 빌더 및/또는 코-빌더는 예를 들어 WO09/102854, US 5977053에 기재되어 있다.
표백 시스템: 세제는 중량 기준으로 0-50%, 예컨대 약 0.1-25%의 표백 시스템을 포함할 수 있다. 세탁 세제에 사용하기 위한 관련 기술분야에 공지된 임의의 표백 시스템이 사용될 수 있다. 적합한 표백 시스템 성분은 표백 촉매, 광표백제, 표백 활성화제, 과산화수소의 공급원, 예컨대 과탄산나트륩 및 과붕산나트륨, 미리 형성된 과산 및 그의 혼합물을 포함한다. 적합한 미리 형성된 과산은 퍼옥시카르복실산 및 염, 과탄산 및 염, 퍼이미드산 및 염, 퍼옥시모노황산 및 염, 예를 들어, 옥손 (R), 및 그의 혼합물을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 표백 시스템의 비제한적 예는, 예를 들어, 과산-형성 표백 활성화제와 조합하여, 알칼리 금속 염, 예컨대 퍼보레이트 (통상적으로 1수화물 또는 4수화물), 퍼카르보네이트, 퍼술페이트, 퍼포스페이트, 퍼실리케이트 염의 나트륨 염을 포함한 무기 염을 포함할 수 있는 과산화물-기반 표백 시스템을 포함한다. 용어 표백 활성화제는 본원에서, 과산화수소와 같은 과산소 표백제와 반응하여 과산을 형성하는 화합물로서 의도된다. 이에 따라 형성된 과산은 활성화된 표백제를 구성한다. 본원에서 사용하기에 적합한 표백 활성화제는 에스테르, 아미드, 이미드 또는 무수물 부류에 속하는 것을 포함한다. 적합한 예는 테트라아세틸에틸렌 디아민 (TAED), 소듐 4-[(3,5,5-트리메틸헥사노일)옥시]벤젠 술포네이트 (ISONOBS), 디퍼옥시 도데칸산, 4-(도데카노일옥시)벤젠술포네이트 (LOBS), 4-(데카노일옥시)벤젠술포네이트, 4-(데카노일옥시)벤조에이트 (DOBS), 4-(노나노일옥시)-벤젠술포네이트 (NOBS), 및/또는 WO98/17767에 개시된 것이다. 특정한 패밀리의 관심 표백 활성화제가 EP624154에 개시되어 있고, 그러한 패밀리에서 특히 바람직한 것은 아세틸 트리에틸 시트레이트 (ATC)이다. ATC 또는 트리아세틴과 같은 단쇄 트리글리세리드는 결과적으로 시트르산 및 알콜로 분해되기 때문에 환경 친화적이라는 이점을 갖는다. 더욱이, 아세틸 트리에틸 시트레이트 및 트리아세틴은 저장 시 생성물 내에서 우수한 가수분해 안정성을 갖고, 이는 효율적인 표백 활성화제이다. 마지막으로 ATC는 세탁 첨가제에 우수한 빌딩 능력을 제공한다. 대안적으로, 표백 시스템은, 예를 들어, 아미드, 이미드, 또는 술폰 유형의 퍼옥시산을 포함할 수 있다. 표백 시스템은 또한 과산, 예컨대 6-(프탈이미도)퍼옥시헥산산 (PAP)을 포함할 수 있다. 표백 시스템은 또한, 표백 촉매를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서 표백 성분은 하기 화학식을 갖는 유기 촉매:
(iii) 및 그의 혼합물
로 이루어진 군으로부터 선택된 유기 촉매일 수 있고; 여기서 각각의 R1은 독립적으로 9 내지 24개의 탄소를 함유하는 분지형 알킬 기 또는 11 내지 24개의 탄소를 함유하는 선형 알킬 기이고, 바람직하게는 각각의 R1은 독립적으로 9 내지 18개의 탄소를 함유하는 분지형 알킬 기 또는 11 내지 18개의 탄소를 함유하는 선형 알킬 기이고, 보다 바람직하게는 각각의 R1은 독립적으로 2-프로필헵틸, 2-부틸옥틸, 2-펜틸노닐, 2-헥실데실, n-도데실, n-테트라데실, n-헥사데실, n-옥타데실, 이소-노닐, 이소-데실, 이소-트리데실 및 이소-펜타데실로 이루어진 군으로부터 선택된다. 다른 예시적인 표백 시스템이, 예를 들어 WO2007/087258, WO2007/087244, WO2007/087259 및 WO2007/087242에 기재되어 있다. 적합한 광표백제는 예를 들어 술폰화 아연 프탈로시아닌일 수 있다.
중합체: 세제는 중량 기준으로 0-10%, 예컨대 0.5-5%, 2-5%, 0.5-2% 또는 0.2-1%의 중합체를 포함할 수 있다. 세제에 사용하기 위한 관련 기술분야에 공지된 임의의 중합체가 사용될 수 있다. 중합체는 상기 언급된 바와 같은 코-빌더로서 기능할 수 있거나, 또는 재부착방지, 섬유 보호, 방오, 이염 억제, 그리스 세정 및/또는 소포 특성을 제공할 수 있다. 일부 중합체는 상기 언급된 특성 중 1종 초과 및/또는 하기 언급된 모티프 중 1종 초과를 가질 수 있다. 예시적인 중합체는 (카르복시메틸)셀룰로스 (CMC), 폴리(비닐 알콜) (PVA), 폴리(비닐피롤리돈) (PVP), 폴리(에틸렌글리콜) 또는 폴리(에틸렌 옥시드) (PEG), 에톡실화 폴리(에틸렌이민), 카르복시메틸 이눌린 (CMI), 및 폴리카르복실레이트 예컨대 PAA, PAA/PMA, 폴리-아스파르트산, 및 라우릴 메타크릴레이트/아크릴산 공중합체, 소수성 변형된 CMC (HM-CMC) 및 실리콘, 테레프탈산 및 올리고머 글리콜의 공중합체, 폴리(에틸렌 테레프탈레이트) 및 폴리(옥시에텐 테레프탈레이트)의 공중합체 (PET-POET), PVP, 폴리(비닐이미다졸) (PVI), 폴리(비닐피리딘-N-옥시드) (PVPO 또는 PVPNO) 및 폴리비닐피롤리돈-비닐이미다졸 (PVPVI)을 포함한다. 추가적 예시적인 중합체는 황산화 폴리카르복실레이트, 폴리에틸렌 옥시드 및 폴리프로필렌 옥시드 (PEO-PPO) 및 디쿼터늄 에톡시 술페이트를 포함한다. 다른 예시적인 중합체가 예를 들어 WO 2006/130575에 개시되어 있다. 상기 언급된 중합체의 염이 또한 고려된다.
직물 색조부여제: 본 발명의 세제 조성물은 또한, 세제 조성물 중에 제제화되는 경우에, 직물이 상기 세제 조성물을 포함하는 세척액과 접촉될 때 직물 상에 침착되어 가시 광선의 흡수/반사를 통해 직물의 색조를 변경시킬 수 있는 직물 색조부여제, 예컨대 염료 또는 안료를 포함할 수 있다. 형광 미백제는 적어도 일부 가시 광선을 방출한다. 대조적으로, 직물 색조부여제는 이것이 적어도 일부의 가시 광선 스펙트럼을 흡수하기 때문에 표면의 색조를 변경시킨다. 적합한 직물 색조부여제는 염료 및 염료-점토 접합체를 포함하고, 또한 안료를 포함할 수 있다. 적합한 염료는 소분자 염료 및 중합체 염료를 포함한다. 적합한 소분자 염료는, 예를 들어 WO2005/03274, WO2005/03275, WO2005/03276 및 EP1876226 (본원에 참조로 포함됨)에 기재된 바와 같은, 다이렉트 블루, 다이렉트 레드, 다이렉트 바이올렛, 애시드 블루, 애시드 레드, 애시드 바이올렛, 베이직 블루, 베이직 바이올렛 및 베이직 레드의 색 지수 (C.I.) 분류에 속하는 염료로 이루어진 군으로부터 선택된 소분자 염료, 또는 그의 혼합물을 포함한다. 세제 조성물은 바람직하게는, 약 0.00003-0.2 wt%, 약 0.00008-0.05 wt%, 또는 심지어 약 0.0001-0.04 wt% 직물 색조부여제를 포함한다. 조성물은 0.0001-0.2 wt% 직물 색조부여제를 포함할 수 있고, 이는 조성물이 단위 용량 파우치의 형태일 때 특히 바람직할 수 있다. 적합한 색조부여제는 또한, 예를 들어 WO2007/087257 및 WO2007/087243에 개시되어 있다.
추가의 효소
세제 첨가제 뿐만 아니라 세제 조성물은 1종 이상의 [추가의] 효소 예컨대 프로테아제, 리파제, 큐티나제, 아밀라제, 리케나제, 카르보히드라제, 셀룰라제, 펙티나제, 만난아제, 아라비나제, 갈락타나제, 크실라나제, 옥시다제, 예를 들어, 락카제 및/또는 퍼옥시다제를 포함할 수 있다.
일반적으로, 선택된 효소(들)의 특성은 선택된 세제와 상용성이어야 하고 (즉, pH-최적, 다른 효소적 및 비-효소적 성분과의 상용성 등), 효소(들)는 유효량으로 존재해야 한다.
셀룰라제
적합한 셀룰라제는 박테리아 또는 진균 기원의 것을 포함한다. 화학적으로 변형된 또는 단백질 조작된 돌연변이체가 포함된다. 적합한 셀룰라제는 속 바실루스, 슈도모나스, 휴미콜라, 푸사리움, 티엘라비아, 아크레모니움으로부터의 셀룰라제, 예를 들어 US4435307, US5648263, US5691178, US5776757 및 WO89/09259에 개시된 휴미콜라 인솔렌스, 티엘라비아 테레스트리스, 미셀리오프토라 써모필라 및 푸사리움 옥시스포룸으로부터 생산된 진균 셀룰라제를 포함한다.
특히 적합한 셀룰라제는 색상 관리 이익을 갖는 알칼리성 또는 중성 셀룰라제이다. 이러한 셀룰라제의 예는 EP0495257, EP0531372, WO96/11262, WO96/29397, WO98/08940에 기재된 셀룰라제이다. 다른 예는 WO94/07998, EP0531315, US5457046, US5686593, US5763254, WO95/24471, WO98/12307 및 PCT/DK98/00299에 기재된 것과 같은 셀룰라제 변이체이다.
엔도-베타-1,4-글루카나제 활성 (EC 3.2.1.4)을 나타내는 셀룰라제의 예는 WO02/099091에 기재된 것이다.
셀룰라제의 다른 예는 WO96/29397에 기재된 패밀리 45 셀룰라제, 및 특히 WO02/099091의 서열식별번호: 8의 하기 위치: 2, 4, 7, 8, 10, 13, 15, 19, 20, 21, 25, 26, 29, 32, 33, 34, 35, 37, 40, 42, 42a, 43, 44, 48, 53, 54, 55, 58, 59, 63, 64, 65, 66, 67, 70, 72, 76, 79, 80, 82, 84, 86, 88, 90, 91, 93, 95, 95d, 95h, 95j, 97, 100, 101, 102, 103, 113, 114, 117, 119, 121, 133, 136, 137, 138, 139, 140a, 141, 143a, 145, 146, 147, 150e, 150j, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160c, 160e, 160k, 161, 162, 164, 165, 168, 170, 171, 172, 173, 175, 176, 178, 181, 183, 184, 185, 186, 188, 191, 192, 195, 196, 200, 및/또는 20에 상응하는 위치 중 1개 이상에서, 바람직하게는 P19A, G20K, Q44K, N48E, Q119H 또는 Q146 R 중에서 선택된 치환, 삽입 및/또는 결실을 갖는 그의 변이체를 포함한다.
상업적으로 입수가능한 셀룰라제는 셀루자임(Celluzyme)™, 및 케어자임(Carezyme)™ (노보자임스 A/S(Novozymes A/S)), 클라지나제(Clazinase)™, 및 푸라닥스 HA(Puradax HA)™ (제넨코어 인터내셔널 인크.(Genencor International Inc.)) 및 KAC-500(B)™ (카오 코포레이션(Kao Corporation))을 포함한다.
프로테아제
추가의 효소는 또 다른 프로테아제 또는 프로테아제 변이체일 수 있다. 프로테아제는 화학적으로 또는 유전자 변형된 돌연변이체를 포함한, 동물, 식물 또는 미생물 기원의 것일 수 있다. 미생물 기원이 바람직하다. 이는 알칼리성 프로테아제, 예컨대 세린 프로테아제 또는 메탈로프로테아제일 수 있다. 세린 프로테아제는, 예를 들어 S1 패밀리의 것, 예컨대 트립신, 또는 S8 패밀리의 것, 예컨대 서브틸리신일 수 있다. 메탈로프로테아제 프로테아제는 예를 들어 패밀리 M4, M5, M7 또는 M8로부터의 예를 들어 써모리신일 수 있다.
용어 "서브틸라제"는 문헌 [Siezen et al., Protein Engng. 4 (1991) 719-737 및 Siezen et al. Protein Science 6 (1997) 501-523]에 따른 세린 프로테아제의 하위-군을 지칭한다. 세린 프로테아제는 기질과 함께 공유 부가물을 형성하는, 활성 부위에 세린을 갖는 것을 특징으로 하는 프로테아제의 하위군이다. 서브틸라제는 6가지 하위-부문, 즉 서브틸리신 패밀리, 써미타제 패밀리, 프로테이나제 K 패밀리, 란티바이오틱 펩티다제 패밀리, 켁신 패밀리 및 피롤리신 패밀리로 나뉠 수 있다. 본 발명의 한 측면에서 프로테아제는 서브틸라제, 예컨대 서브틸리신 또는 그의 변이체일 수 있다. 추가로 서브틸라제 (및 세린 프로테아제)는 세린에서 떨어진 2개의 활성 부위 아미노산 잔기, 즉 히스티딘 및 아스파르트산 잔기를 갖는 것을 특징으로 한다.
서브틸리신의 예는 WO89/06279에 기재된 바실루스로부터 유래된 것 예컨대 서브틸리신 렌투스, 바실루스 렌투스, 서브틸리신 노보, 서브틸리신 칼스버그, 바실루스 리케니포르미스, 서브틸리신 BPN', 서브틸리신 309, 서브틸리신 147 및 서브틸리신 168 및 프로테아제 PD138 (WO93/18140)이다. 추가의 세린 프로테아제 예는 WO98/020115, WO01/44452, WO01/58275, WO01/58276, WO03/006602 및 WO04/099401에 기재되어 있다. 서브틸라제 변이체의 예는 BPN' 넘버링을 사용하여 위치: 3, 4, 9, 15, 27, 36, 68, 76, 87, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 106, 118, 120, 123, 128, 129, 130, 160, 167, 170, 194, 195, 199, 205, 217, 218, 222, 232, 235, 236, 245, 248, 252 및 274 중 임의의 것에서 돌연변이를 갖는 것일 수 있다. 보다 바람직한 서브틸라제 변이체는 돌연변이: S3T, V4I, S9R, A15T, K27R, *36D, V68A, N76D, N87S,R, *97E, A98S, S99G,D,A, S99AD, S101G,M,R S103A, V104I,Y,N, S106A, G118V,R, H120D,N, N123S, S128L, P129Q, S130A, G160D, Y167A, R170S, A194P, G195E, V199M, V205I, L217D, N218D, M222S, A232V, K235L, Q236H, Q245R, N252K, T274A (BPN' 넘버링을 사용함)를 포함할 수 있다. 추가의 바람직한 프로테아제는, 예를 들어 WO95/23221에 기재된 바와 같은 바실루스 렌투스 DSM 5483으로부터의 알칼리성 프로테아제, 및 WO92/21760, WO95/23221, EP1921147 및 EP1921148에 기재된 그의 변이체이다.
트립신-유사 프로테아제의 예는 (예를 들어 돼지 또는 소 기원의) 트립신 및 WO89/06270 및 WO94/25583에 기재된 푸사리움 프로테아제이다. 유용한 프로테아제의 예는 WO92/19729, WO98/20115, WO98/20116, 및 WO98/34946에 기재된 변이체, 특히 하기 위치: 27, 36, 57, 76, 87, 97, 101, 104, 120, 123, 167, 170, 194, 206, 218, 222, 224, 235, 및 274 중 1개 이상에서 치환을 갖는 변이체이다.
메탈로프로테아제의 예는 WO 07/044993에 기재된 바와 같은 중성 메탈로프로테아제이다.
바람직한 상업적으로 입수가능한 프로테아제 효소는 알칼라제(Alcalase)™, 코로나제(Coronase)™, 듀랄라제(Duralase)™, 듀라자임(Durazym)™, 에스페라제(Esperase)™, 에벌라제(Everlase)™, 칸나제(Kannase)™, 리쿠아나제(Liquanase)™, 리쿠아나제 울트라(Liquanase Ultra)™, 오보자임(Ovozyme)™, 폴랄자임(Polarzyme)™, 프리마제(Primase)™, 렐라제(Relase)™, 사비나제(Savinase)™ 및 사비나제 울트라™, (노보자임스 A/S), 악사펨(Axapem)™ (기스트-브로카세스 엔.브이.(Gist-Brocases N.V.)), BLAP 및 BLAP X (헨켈 아게 & 캄파니 카게아아(Henkel AG & Co. KGaA)), 엑셀라제(Excellase)™, FN2™, FN3™, FN4™, 막사카(Maxaca)™, 막사펨(Maxapem)™, 막사타제(Maxatase)™, 프로페라제(Properase)™, 퓨라파스트(Purafast)™, 퓨라펙트(Purafect)™, 퓨라펙트 OxP™, 퓨라펙트 프라임™ 및 퓨라막스(Puramax)™ (제넨코어 인터내셔널(Genencor int.))를 포함한다.
리파제 및 큐티나제
적합한 리파제 및 큐티나제는 박테리아 또는 진균 기원의 것을 포함한다. 화학적으로 변형되거나 단백질 조작된 돌연변이체 효소가 포함된다. 예는 써모미세스로부터의, 예를 들어 EP258068 및 EP305216에 기재된 바와 같은 티. 라누기노수스 (이전에 휴미콜라 라누기노사로 명명됨)로부터의 리파제, 휴미콜라, 예를 들어 에이치. 인솔렌스로부터의 큐티나제 (WO96/13580), 슈도모나스 (이들 중 일부는 현재 부르크홀데리아로 개명됨), 예를 들어 피. 알칼리게네스 또는 피. 슈도알칼리게네스 (EP218272), 피. 세파시아 (EP331376), 피. 에스피. 균주 SD705 (WO95/06720 & WO96/27002), 피. 위스콘시넨시스 (WO96/12012) 균주로부터의 리파제, GDSL-유형 스트렙토미세스 리파제 (WO10/065455), 마그나포르테 그리세아로부터의 큐티나제 (WO10/107560), 슈도모나스 멘도시나로부터의 큐티나제 (US5389536), 써모비피다 푸스카로부터의 리파제 (WO11/084412), 게오바실루스 스테아로써모필루스 리파제 (WO11/084417), 바실루스 서브틸리스로부터의 리파제 (WO11/084599), 및 스트렙토미세스 그리세우스 (WO11/150157) 및 에스. 프리스티나에스피랄리스 (WO12/137147)로부터의 리파제를 포함한다.
추가의 예는 아실트랜스퍼라제 또는 퍼히드롤라제, 예를 들어 칸디다 안타르크티카(Candida antarctica) 리파제 A (WO10/111143)와 상동성을 갖는 아실트랜스퍼라제, 미코박테리움 스메그마티스(Mycobacterium smegmatis)로부터의 아실트랜스퍼라제 (WO05/56782), CE 7 패밀리로부터의 퍼히드롤라제 (WO09/67279), 및 엠. 스메그마티스 퍼히드롤라제의 변이체, 특히 헌츠만 텍스타일 이펙츠 프라이빗 리미티드(Huntsman Textile Effects Pte Ltd)로부터의 상업용 제품 젠틀 파워 블리치(Gentle Power Bleach) (WO10/100028)에 사용된 S54V 변이체로서 때때로 지칭되는 리파제이다.
다른 예는 EP407225, WO92/05249, WO94/01541, WO94/25578, WO95/14783, WO95/30744, WO95/35381, WO95/22615, WO96/00292, WO97/04079, WO97/07202, WO00/34450, WO00/60063, WO01/92502, WO07/87508 및 WO09/109500에 기재된 것과 같은 리파제 변이체이다.
바람직한 상업적 리파제 제품은 리폴라제(Lipolase)™, 리펙스(Lipex)™; 리폴렉스(Lipolex)™ 및 리포클린(Lipoclean)™ (노보자임스 A/S), 루마패스트(Lumafast) (원래 제넨코어로부터의 것) 및 리포맥스(Lipomax) (원래 기스트-브로카데스(Gist-Brocades)로부터의 것)를 포함한다.
아밀라제
아밀라제는 알파-아밀라제, 베타-아밀라제 또는 글루코아밀라제일 수 있고, 박테리아 또는 진균 기원의 것일 수 있다. 화학적으로 변형되거나 단백질 조작된 돌연변이체가 포함된다. 아밀라제는, 예를 들어, GB1296839에 보다 상세히 기재된, 바실루스, 예를 들어, 바실루스 리케니포르미스의 특수 균주로부터 수득된 알파-아밀라제를 포함한다.
아밀라제의 예는 WO95/10603의 서열식별번호: 3을 갖는 것 또는 서열식별번호: 3에 대해 90% 서열 동일성을 갖는 그의 변이체이다. 바람직한 변이체는 WO94/02597, WO94/18314, WO97/43424 및 WO99/019467의 서열식별번호: 4에 기재되어 있고, 예컨대 변이체는 WO95/10603의 서열식별번호: 3의 하기 위치: 15, 23, 105, 106, 124, 128, 133, 154, 156, 178, 179, 181, 188, 190, 197, 201, 202, 207, 208, 209, 211, 243, 264, 304, 305, 391, 408, 및 444 중 1개 이상에서 치환을 갖는다.
추가의 아밀라제는 WO02/010355의 서열식별번호: 6을 갖는 아밀라제, 또는 서열식별번호: 6에 대해 90% 서열 동일성을 갖는 그의 변이체이다. 서열식별번호: 6의 바람직한 변이체는 위치 181 및 182에서 결실을 갖고 위치 193에서 치환을 갖는 것이다.
다른 아밀라제는 예는 WO2006/066594의 서열식별번호: 6에 제시된 비. 아밀로리퀘파시엔스로부터 유래된 알파-아밀라제의 잔기 1-33, 및 WO2006/066594의 서열식별번호: 4에 제시된 비. 리케니포르미스 알파-아밀라제의 잔기 36-483을 포함하는 하이브리드 알파-아밀라제, 또는 그의 90% 서열 동일성을 갖는 변이체이다. 이러한 하이브리드 알파-아밀라제의 바람직한 변이체는 하기 위치: G48, T49, G107, H156, A181, N190, M197, I201, A209 및 Q264 중 1개 이상에서 치환, 결실 또는 삽입을 갖는 것이다. WO2006/066594의 서열식별번호: 6에 제시된 비. 아밀로리퀘파시엔스로부터 유래된 알파-아밀라제의 잔기 1-33 및 서열식별번호: 4의 잔기 36-483을 포함하는 하이브리드 알파-아밀라제의 가장 바람직한 변이체는 치환: M197T; H156Y+A181T+N190F+A209V+Q264S; 또는 G48+T49+G107+H156+A181+N190+I201+A209+Q264를 갖는 것이다.
추가의 아밀라제 예는 WO99/019467의 서열식별번호: 6을 갖는 아밀라제, 또는 서열식별번호: 6에 대해 90% 서열 동일성을 갖는 그의 변이체이다. 서열식별번호: 6의 바람직한 변이체는 하기 위치: R181, G182, H183, G184, N195, I206, E212, E216 및 K269 중 1개 이상에서 치환, 결실 또는 삽입을 갖는 것이다. 특히 바람직한 아밀라제는 위치 G182 및 H183 또는 위치 H183 및 G184에서 결실을 갖는 것이다.
추가의 아밀라제는 WO96/023873의 서열식별번호: 1, 서열식별번호: 2 또는 서열식별번호: 7을 갖는 것 또는 서열식별번호: 1, 서열식별번호: 2 또는 서열식별번호: 7에 대해 90% 서열 동일성을 갖는 그의 변이체이다. 서열식별번호: 1, 서열식별번호: 2 또는 서열식별번호: 7의 바람직한 변이체는 하기 위치: 140, 181, 182, 183, 184, 195, 206, 212, 243, 260, 269, 304 및 476 중 1개 이상에서 치환, 결실 또는 삽입을 갖는 것이다. 보다 바람직한 변이체는 위치 182 및 183 또는 위치 183 및 184에서 결실을 갖는 것이다. 서열식별번호: 1, 서열식별번호: 2 또는 서열식별번호: 7의 가장 바람직한 아밀라제 변이체는 위치 183 및 184에서 결실을 갖고 위치 140, 195, 206, 243, 260, 304 및 476에서 치환을 갖는 것이다.
사용될 수 있는 다른 아밀라제는 WO08/153815의 서열식별번호: 2, WO01/66712의 서열식별번호: 10을 갖는 아밀라제, 또는 WO08/153815의 서열식별번호: 2에 대해 90% 서열 동일성 또는 WO01/66712의 서열식별번호: 10에 대해 90% 서열 동일성을 갖는 그의 변이체이다. WO01/66712의 서열식별번호: 10의 바람직한 변이체는 하기 위치: 176, 177, 178, 179, 190, 201, 207, 211 및 264 중 1개 이상에서 치환, 결실 또는 삽입을 갖는 것이다.
사용될 수 있는 추가의 아밀라제는 WO09/061380의 서열식별번호: 2를 갖는 아밀라제 또는 서열식별번호: 2에 대해 90% 서열 동일성을 갖는 그의 변이체이다. 서열식별번호: 2의 바람직한 변이체는 하기 위치: Q87, Q98, S125, N128, T131, T165, K178, R180, S181, T182, G183, M201, F202, N225, S243, N272, N282, Y305, R309, D319, Q320, Q359, K444 및 G475 중 1개 이상에서 치환, 결실 또는 삽입을 갖는 것이다. 서열식별번호: 2의 보다 바람직한 변이체는 하기 위치: Q87E,R, Q98R, S125A, N128C, T131I, T165I, K178L, T182G, M201L, F202Y, N225E,R, N272E,R, S243Q,A,E,D, Y305R, R309A, Q320R, Q359E, K444E 및 G475K 중 1개 이상에서 치환 및/또는 위치 R180 및/또는 S181에서 결실을 갖는 것이다. 서열식별번호: 2의 가장 바람직한 아밀라제 변이체는 치환: N128C+K178L+T182G+Y305R+G475K; N128C+K178L+T182G+F202Y+Y305R+D319T+G475K; S125A+N128C+K178L+T182G+Y305R+G475K; 또는 S125A+N128C+T131I+T165I+K178L+T182G+Y305R+G475K를 갖는 것이며, 여기서 변이체는 임의로 추가로, 위치 243에서 치환 및/또는 위치 180 및/또는 위치 181에서 결실을 포함한다.
다른 아밀라제는 WO2016/203064의 서열식별번호: 1에 대해 적어도 75% 서열 동일성을 갖는 WO2016/203064의 서열식별번호: 1의 변이체이다. 바람직한 변이체는 서열식별번호: 1의 위치 1, 54, 56, 72, 109, 113, 116, 134, 140, 159, 167, 169, 172, 173, 174, 181, 182, 183, 184, 189, 194, 195, 206, 255, 260, 262, 265, 284, 289, 304, 305, 347, 391, 395, 439, 469, 444, 473, 476, 또는 477에 상응하는 1개 이상의 위치에서 변형을 포함하는 변이체이며, 여기서 상기 알파-아밀라제 변이체는 서열식별번호: 1에 대해 적어도 75%, 그러나 100% 미만의 서열 동일성을 갖는다.
아밀라제의 다른 예는 WO01/66712의 서열식별번호: 12를 갖는 알파-아밀라제 또는 서열식별번호: 12에 대해 적어도 90%, 예컨대 적어도 95% 서열 동일성을 갖는 변이체이다. 바람직한 아밀라제 변이체는 WO01/66712의 서열식별번호: 12의 하기 위치: R28, R118, N174; R181, G182, D183, G184, G186, W189, N195, M202, Y298, N299, K302, S303, N306, R310, N314; R320, H324, E345, Y396, R400, W439, R444, N445, K446, Q449, R458, N471, N484 중 1개 이상에서 치환, 결실 또는 삽입을 갖는 것이다. 특히 바람직한 아밀라제는 D183 및 G184의 결실을 갖고 치환 R118K, N195F, R320K 및 R458K를 갖는 변이체, 및 군: M9, G149, G182, G186, M202, T257, Y295, N299, M323, E345 및 A339로부터 선택된 1개 이상의 위치에서 치환을 추가적으로 갖는 변이체를 포함하고, 가장 바람직한 변이체는 모든 이들 위치에서 치환을 추가적으로 갖는 것이다.
상업적으로 입수가능한 아밀라제는 듀라밀(Duramyl)™, 테르마밀(Termamyl)™, 푼가밀(Fungamyl)™, 스테인자임(Stainzyme)™, 스테인자임 플러스™, 나탈라제(Natalase)™ 및 BAN™ (노보자임스 A/S), 라피다제(Rapidase)™ 및 푸라스타(Purastar)™ (제넨코어 인터내셔널 인크.로부터의 것)이다.
퍼옥시다제/옥시다제: 적합한 퍼옥시다제/옥시다제는 식물, 박테리아 또는 진균 기원의 것을 포함한다. 화학적으로 변형되거나 단백질 조작된 돌연변이체가 포함된다. 유용한 퍼옥시다제의 예는 코프리누스, 예를 들어 WO93/24618, WO95/10602, 및 WO98/15257에 기재된 바와 같은 씨. 시네레우스로부터의 퍼옥시다제 및 그의 변이체를 포함한다. 상업적으로 입수가능한 퍼옥시다제는 가드자임(Guardzyme)™ (노보자임스 A/S)을 포함한다.
세제 효소(들)는 1종 이상의 효소를 함유하는 개별 첨가제를 첨가하거나, 또는 이들 효소를 모두 포함하는 조합 첨가제를 첨가함으로써 세제 조성물에 포함될 수 있다. 본 발명의 세제 첨가제, 즉 개별 첨가제 또는 조합 첨가제는, 예를 들어, 과립, 액체, 슬러리 등으로서 제제화될 수 있다. 바람직한 세제 첨가제 제형은 과립, 특히 비-산포 과립, 액체, 특히 안정화된 액체, 또는 슬러리이다.
비-산포 과립은, 예를 들어 US4106991 및 4661452에 개시된 바와 같이 생성될 수 있고, 임의로 관련 기술분야에 공지된 방법에 의해 코팅될 수 있다. 왁스 코팅 물질의 예는 1000 내지 20000의 평균 몰 중량을 갖는 폴리(에틸렌 옥시드) 생성물 (폴리에틸렌글리콜, PEG); 16 내지 50개의 에틸렌 옥시드 단위를 갖는 에톡실화 노닐페놀; 알콜이 12 내지 20개의 탄소 원자를 함유하고 15 내지 80개의 에틸렌 옥시드 단위가 있는 에톡실화 지방 알콜; 지방 알콜; 지방산; 및 지방산의 모노- 및 디- 및 트리글리세리드이다. 유동층 기술에 의해 적용하기에 적합한 필름-형성 코팅 물질의 예가 GB1483591에 제공된다. 액체 효소 제제는, 예를 들어, 확립된 방법에 따라 폴리올, 예컨대 프로필렌 글리콜, 당 또는 당 알콜, 락트산 또는 붕산을 첨가함으로써 안정화될 수 있다. 보호된 효소는 EP238216에 개시된 방법에 따라 제조될 수 있다.
보조 물질: 세탁 세제에 사용하기 위한 관련 기술분야에 공지된 임의의 세제 성분이 또한 사용될 수 있다. 다른 임의적인 세제 성분은 부식 방지제, 수축 방지제, 오염물 재부착 방지제, 주름 방지제, 살박테리아제, 결합제, 부식 억제제, 붕해제/붕해 작용제, 염료, 효소 안정화제 (붕산, 보레이트, CMC, 및/또는 폴리올, 예컨대 프로필렌 글리콜 포함), 점토를 포함한 직물 컨디셔너, 충전제/프로세싱 보조제, 형광 미백제/광학 증백제, 폼 부스터, 폼 (비누거품) 조절제, 퍼퓸, 오염물 현탁화제, 연화제, 비누거품 억제제, 변색 억제제, 및 위킹 작용제를 단독으로 또는 조합하여 포함한다. 세탁 세제에 사용하기 위한 관련 기술분야에 공지된 임의의 성분이 사용될 수 있다. 이러한 성분의 선택은 통상의 기술자의 기술 수준 내이다.
분산제: 본 발명의 세제 조성물은 또한 분산제를 함유할 수 있다. 특히 분말 세제는 분산제를 포함할 수 있다. 적합한 수용성 유기 물질은 단독- 또는 공-중합체 산 또는 그의 염을 포함하며, 여기서 폴리카르복실산은 2개 이하의 탄소 원자에 의해 서로 분리된 적어도 2개의 카르복실 라디칼을 포함한다. 적합한 분산제는, 예를 들어 문헌 [Powdered Detergents, Surfactant science series volume 71, Marcel Dekker, Inc.]에 기재되어 있다.
이염 억제제: 본 발명의 세제 조성물은 또한 1종 이상의 이염 억제제를 포함할 수 있다. 적합한 중합체 이염 억제제는 폴리비닐피롤리돈 중합체, 폴리아민 N-옥시드 중합체, N-비닐피롤리돈과 N-비닐이미다졸의 공중합체, 폴리비닐옥사졸리돈 및 폴리비닐이미다졸 또는 그의 혼합물을 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 대상 조성물에 존재할 때, 이염 억제제는 조성물의 중량 기준으로 약 0.0001-10%, 약 0.01-5% 또는 심지어 약 0.1-3%의 수준으로 존재할 수 있다.
형광 미백제: 본 발명의 세제 조성물은 바람직하게는 또한, 세정되는 물품에 색조를 부여할 수 있는 추가의 성분, 예컨대 형광 미백제 또는 광학 증백제를 함유할 것이다. 존재하는 경우에, 증백제는 바람직하게는 약 0.01-0.5%의 수준이다. 세탁 세제 조성물에 사용하기에 적합한 임의의 형광 미백제가 본 발명의 조성물에 사용될 수 있다. 가장 통상적으로 사용되는 형광 미백제는 디아미노스틸벤-술폰산 유도체, 디아릴피라졸린 유도체 및 비스페닐-디스티릴 유도체의 부류에 속하는 것들이다. 형광 미백제의 디아미노스틸벤-술폰산 유도체 유형의 예는 4,4'-비스-(2-디에탄올아미노-4-아닐리노-s-트리아진-6-일아미노) 스틸벤-2,2'-디술포네이트; 4,4'-비스-(2,4-디아니리노-s-트리아진-6-일아미노) 스틸벤-2.2'-디술포네이트; 4,4'-비스-(2-아닐리노-4(N-메틸-N-2-히드록시-에틸아미노)-s-트리아진-6-일아미노) 스틸벤-2,2'-디술포네이트, 4,4'-비스-(4-페닐-2,1,3-트리아졸-2-일)스틸벤-2,2'-디술포네이트; 4,4'-비스-(2-아닐리노-4(1-메틸-2-히드록시-에틸아미노)-s-트리아진-6-일아미노) 스틸벤-2,2'-디술포네이트 및 2-(스틸빌-4"-나프토-1.,2':4,5)-1,2,3-트리졸-2"-술포네이트의 나트륨 염을 포함한다. 바람직한 형광 미백제는 스위스 바젤 소재의 시바-가이기 아게(Ciba-Geigy AG)로부터 입수가능한 티노팔(Tinopal) DMS 및 티노팔 CBS이다. 티노팔 DMS는 4,4'-비스-(2-모르폴리노-4 아닐리노-s-트리아진-6-일아미노) 스틸벤 디술포네이트의 이나트륨 염이다. 티노팔 CBS는 2,2'-비스-(페닐-스티릴)-디술포네이트의 이나트륨 염이다. 형광 미백제가 인도 뭄바이 소재의 파라마운트 미네랄즈 앤드 케미칼스(Paramount Minerals and Chemicals)에 의해 공급된 상업적으로 입수가능한 파라화이트 KX(Parawhite KX)인 것이 또한 바람직하다. 본 발명에 사용하기에 적합한 다른 형광제는 1-3-디아릴 피라졸린 및 7-알킬아미노쿠마린을 포함한다. 적합한 형광 증백제 수준은 약 0.01, 0.05, 약 0.1 또는 심지어 약 0.2 wt%의 하위 수준 내지 0.5 또는 심지어 0.75 wt%의 상위 수준을 포함한다.
방오 중합체: 본 발명의 세제 조성물은 또한, 직물, 예컨대 면 및 폴리에스테르 기반 직물로부터의 오염물의 제거, 특히 폴리에스테르 기반 직물로부터의 소수성 오염물의 제거를 보조하는 1종 이상의 방오 중합체를 포함할 수 있다. 방오 중합체는, 예를 들어 비이온성 또는 음이온성 테레프탈레이트 기반 중합체, 폴리비닐 카프로락탐 및 관련 공중합체, 비닐 그라프트 공중합체, 폴리에스테르 폴리아미드일 수 있고, 예를 들어 문헌 [Chapter 7 in Powdered Detergents, Surfactant science series volume 71, Marcel Dekker, Inc.]을 참조한다. 또 다른 유형의 방오 중합체는 코어 구조와 그러한 코어 구조에 부착된 복수의 알콕실레이트 기를 포함하는 친양쪽성 알콕실화 그리스 세정 중합체이다. 코어 구조는 WO2009/087523 (본원에 참조로 포함됨)에 상세히 기재된 바와 같은 폴리알킬렌이민 구조 또는 폴리알칸올아민 구조를 포함할 수 있다. 또한 무작위 그라프트 공중합체가 적합한 방오 중합체이다. 적합한 그라프트 공중합체가 WO2007/138054, WO 2006/108856 및 WO2006/113314 (본원에 참조로 포함됨)에 보다 상세하게 기재되어 있다. 다른 방오 중합체는 치환된 폴리사카라이드 구조, 특히 치환된 셀룰로스 구조, 예컨대 변형된 셀룰로스 유도체, 예컨대 EP1867808 또는 WO2003/040279 (둘 다 본원에 참조로 포함됨)에 기재된 것이다. 적합한 셀룰로스 중합체는 셀룰로스, 셀룰로스 에테르, 셀룰로스 에스테르, 셀룰로스 아미드 및 그의 혼합물을 포함한다. 적합한 셀룰로스 중합체는 음이온성으로 변형된 셀룰로스, 비이온성으로 변형된 셀룰로스, 양이온성으로 변형된 셀룰로스, 쯔비터이온성으로 변형된 셀룰로스, 및 그의 혼합물을 포함한다. 적합한 셀룰로스 중합체는 메틸 셀룰로스, 카르복시 메틸 셀룰로스, 에틸 셀룰로스, 히드록실 에틸 셀룰로스, 히드록실 프로필 메틸 셀룰로스, 에스테르 카르복시 메틸 셀룰로스, 및 그의 혼합물을 포함한다.
재부착 방지제: 본 발명의 세제 조성물은 또한, 1종 이상의 재부착 방지제, 예컨대 카르복시메틸셀룰로스 (CMC), 폴리비닐 알콜 (PVA), 폴리비닐피롤리돈 (PVP), 폴리옥시에틸렌 및/또는 폴리에틸렌글리콜 (PEG), 아크릴산의 단독중합체, 아크릴산과 말레산의 공중합체, 및 에톡실화 폴리에틸렌이민을 포함할 수 있다. 상기 방오 중합체 하에 기재된 셀룰로스 기반 중합체가 또한 재부착 방지제로서 기능할 수 있다.
다른 적합한 보조 물질은 수축 방지제, 주름 방지제, 살박테리아제, 결합제, 담체, 염료, 효소 안정화제, 섬유 유연제, 충전제, 거품 조절제, 굴수성제, 퍼퓸, 안료, 비누거품 억제제, 용매, 및 액체 세제용 구조화제 및/또는 구조 탄성화제를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
세제 생성물의 제형
세제 조성물은 임의의 편리한 형태, 예를 들어, 바, 균질 정제, 2개 이상의 층을 갖는 정제, 1개 이상의 구획을 갖는 파우치, 레귤러 또는 콤팩트 분말, 과립, 페이스트, 겔, 또는 레귤러, 콤팩트 또는 농축 액체일 수 있다. 수많은 세제 제형 형태 예컨대 층 (동일하거나 상이한 상), 파우치, 뿐만 아니라 기계 투여 단위를 위한 형태가 존재한다.
파우치는 단일 또는 다중 구획으로 구성될 수 있다. 이는, 예를 들어 물과 접촉하기 전에 조성물이 파우치로부터 방출되지 않도록 하면서, 조성물을 보유하기에 적합한 임의의 형태, 형상 및 물질일 수 있다. 파우치는 내부 용적을 둘러싸는 수용성 필름으로 만들어진다. 상기 내부 용적은 파우치의 구획들로 나뉠 수 있다. 바람직한 필름은 중합체 물질, 바람직하게는 필름 또는 시트로 성형되는 중합체이다. 바람직한 중합체, 공중합체 또는 그의 유도체는 선택된 폴리아크릴레이트, 및 수용성 아크릴레이트 공중합체, 메틸 셀룰로스, 카르복시 메틸 셀룰로스, 나트륨 덱스트린, 에틸 셀룰로스, 히드록시에틸 셀룰로스, 히드록시프로필 메틸 셀룰로스, 말토 덱스트린, 폴리 메타크릴레이트, 가장 바람직하게는 폴리비닐 알콜 공중합체 및 히드록시프로필 메틸 셀룰로스 (HPMC)이다. 바람직하게는 필름 내의 중합체, 예를 들어 PVA의 수준은 적어도 약 60%이다. 바람직한 평균 분자량은 전형적으로 약 20,000 내지 약 150,000일 것이다. 필름은 또한 가수분해에 의해 분해가능하고 수용성인 중합체 블렌드 예컨대 폴리락티드 및 폴리비닐 알콜 (미국 인디애나주 게리 소재의 크리스 크라프트 In. Prod.(Chris Craft In. Prod.)에 의해 판매되는 상표 참조 M8630 하에 공지됨) 플러스 글리세롤, 에틸렌 글리세롤, 프로필렌 글리콜, 소르비톨 및 그의 혼합물과 같은 가소제를 포함하는 블렌드 조성물일 수 있다. 파우치는 고체 세탁 세정 조성물 또는 부분 성분 및/또는 액체 세정 조성물 또는 수용성 필름에 의해 분리된 부분 성분을 포함할 수 있다. 액체 성분을 위한 구획은 고체를 함유하는 구획과 조성에서 상이할 수 있다. 참조: (US2009/0011970A1).
세제 성분은 물 용해성 파우치 또는 상이한 층의 정제 내에서 구획에 의해 서로 물리적으로 분리될 수 있다. 이로써 성분들 사이의 부정적인 저장 상호작용을 피할 수 있다. 각각의 구획의 상이한 용해 프로파일은 또한, 세척 용액에서 선택된 성분의 지연된 용해를 일으킬 수 있다.
단위 투여되지 않는 액체 또는 겔 세제는, 전형적으로 중량 기준으로 적어도 20% 및 최대 95%의 물, 예컨대 최대 약 70%의 물, 최대 약 65%의 물, 최대 약 55%의 물, 최대 약 45%의 물, 최대 약 35%의 물을 함유하는 수성일 수 있다. 비제한적으로, 알칸올, 아민, 디올, 에테르 및 폴리올을 포함하는 다른 유형의 액체가 수성 액체 또는 겔에 포함될 수 있다. 수성 액체 또는 겔 세제는 0-30%의 유기 용매를 함유할 수 있다. 액체 또는 겔 세제는 비-수성일 수 있다.
세탁 비누 바
본 발명의 효소는 세탁 비누 바에 첨가될 수 있고, 세탁물, 직물 및/또는 텍스타일을 손 세척하는데 사용될 수 있다. 용어 세탁 비누 바는 세탁 바, 비누 바, 콤보 바, 합성세제 바 및 세제 바를 포함한다. 바의 유형은 통상적으로 이들이 함유하는 계면활성제의 유형에 있어서 상이하고, 용어 세탁 비누 바는 지방산으로부터의 비누 및/또는 합성 비누를 함유하는 것을 포함한다. 세탁 비누 바는 실온에서 고체이고 액체, 겔 또는 분말이 아닌 물리적 형태를 갖는다. 용어 고체는 시간의 경과에 따라 유의하게 변하지 않는 물리적 형태로서 정의되고, 즉 고체 물체 (예를 들어, 세탁 비누 바)가 용기 내부에 놓이면, 고체 물체는 그것이 놓인 용기를 채우기 위해 변화되지 않는다. 바는 전형적으로 바 형태의 고체이지만 원형 또는 타원형과 같은 다른 고체 형상일 수 있다.
세탁 비누 바는 1종 이상의 추가의 효소, 프로테아제 억제제, 예컨대 펩티드 알데히드 (또는 히드로술파이트 부가물 또는 헤미아세탈 부가물), 붕산, 보레이트, 보락스 및/또는 페닐보론산 유도체, 예컨대 4-포르밀페닐보론산, 1종 이상의 비누 또는 합성 계면활성제, 폴리올, 예컨대 글리세린, pH 제어 화합물, 예컨대 지방산, 시트르산, 아세트산 및/또는 포름산, 및/또는 1가 양이온 및 유기 음이온의 염을 함유할 수 있고, 여기서 1가 양이온은 예를 들어 Na+, K+ 또는 NH4 +일 수 있고, 유기 음이온은 예를 들어 포르메이트, 아세테이트, 시트레이트 또는 락테이트일 수 있으므로, 1가 양이온 및 유기 음이온의 염은, 예를 들어 포름산나트륨일 수 있다.
세탁 비누 바는 또한, 착물화제, 예컨대 EDTA 및 HEDP, 퍼퓸 및/또는 상이한 유형의 충전제, 계면활성제, 예를 들어 음이온성 합성 계면활성제, 빌더, 중합체 방오 작용제, 세제 킬레이트화제, 안정화제, 충전제, 염료, 착색제, 이염 억제제, 알콕실화 폴리카르보네이트, 비누거품 억제제, 구조화제, 결합제, 침출제, 표백 활성화제, 점토 오염물 제거제, 재부착 방지제, 중합체 분산제, 증백제, 섬유 유연제, 퍼퓸 및/또는 관련 기술분야에 공지된 다른 화합물을 함유할 수 있다.
세탁 비누 바는 통상적인 세탁 비누 바 제조 장비, 예컨대 비제한적으로 혼합기, 플로더, 예를 들어 2개의 단계의 진공 플로더, 압출기, 커터, 로고-스탬퍼, 냉각 터널 및 포장기에서 가공될 수 있다. 본 발명은 임의의 단일 방법에 의해 세탁 비누 바를 제조하는 것에 제한되지 않는다. 본 발명의 프리믹스는 과정의 상이한 단계에서 비누에 첨가될 수 있다. 예를 들어, 비누, 효소, 임의로 1종 이상의 추가의 효소, 프로테아제 억제제, 및 1가 양이온과 유기 음이온의 염을 함유하는 프리믹스가 제조될 수 있고, 이어서 혼합물은 플로드된다. 효소 및 임의적인 추가의 효소는, 예를 들어 액체 형태로 프로테아제 억제제와 동시에 첨가될 수 있다. 혼합 단계 및 플로딩 단계 외에, 상기 과정은 밀링, 압출, 커팅, 스탬핑, 냉각 및/또는 포장 단계를 추가로 포함할 수 있다.
조성물을 생산하는 방법
본 발명은 또한 조성물을 생산하는 방법에 관한 것이다. 방법은 세제 조성물의 (저장) 안정성과 관련될 수 있다: 예를 들어 비누 바 프리믹스 방법 WO2009155557.
용도
본 발명은 또한 그의 세제 조성물을 사용하는 방법에 관한 것이다. 본 발명은 예를 들어 크산탄 검의 분해를 필요로 하는 임의의 세제 적용분야에 사용될 수 있다.
크산탄 검을 분해하기 위한 용도
크산탄 검은 식품 및 화장품을 포함한 많은 소비자 제품의 성분으로서 사용되어 왔고, 석유 산업에서 용도가 발견되었다. 따라서 크산탄 검의 분해는 개선된 세정 과정, 예컨대 보다 용이한 검 예컨대 크산탄 검 함유 얼룩의 제거를 발생시킬 수 있다. 따라서 본 발명은 크산탄 검을 분해하기 위한 본 발명의 GH9 엔도글루카나제 (예를 들어 본원에 기재된 변이체)를 포함하는 세제 조성물의 용도에 관한 것이다. 본 발명은 또한, 크산탄 검을 분해하기 위한 본 발명의 조성물에서의 크산탄 리아제의 용도에 관한 것이다. 한 실시양태는 크산탄 검을 분해하기 위한, 크산탄 리아제와 함께 본원에 기재된 바와 같은 GH9 엔도글루카나제 (예를 들어 변이체)를 포함하는 세제 조성물의 용도이다. 크산탄 검의 분해는 바람직하게는 점도 감소 검정 (예를 들어, ViPr 검정)을 사용하여 또는 대안적으로 본원의 실시예 3 및 7에 기재된 바와 같이 측정될 수 있다.
GH9 엔도글루카나제 활성은 대안적으로 문헌 [Lever (1972), Anal. Biochem. 47: 273-279, 1972]에 개발된 비색 검정을 사용하여 크산탄 리아제로 사전처리된 크산탄 검의 환원 말단의 평가에 의해 측정될 수 있다. 바람직한 실시양태는 크산탄 리아제로 사전처리된 0.1% 크산탄 검의 사용이다. 크산탄 리아제로 사전처리된 크산탄 검의 분해는 블랭크와 샘플 사이의 차이를 계산함으로써 결정될 수 있고, 여기서 0.5 mAU 초과, 바람직하게는 0.6 mAU 초과, 보다 바람직하게는 0.7 mAU 초과 또는 보다 더 바람직하게는 0.8 mAU 초과의 차이가 크산탄 리아제로 사전처리된 크산탄 검의 분해를 나타낸다.
크산탄 리아제 활성은 대안적으로 문헌 [Lever (1972), Anal. Biochem. 47: 273-279, 1972]에 개발된 비색 검정을 사용하여 크산탄 검으로부터 유리된 환원 말단의 평가에 의해 측정될 수 있다. 바람직한 실시양태는 0.1% 크산탄 검의 사용이다. 크산탄 검의 분해는 블랭크와 샘플 사이의 차이를 계산함으로써 결정될 수 있고, 여기서 0.1 mAU 초과, 바람직하게는 0.15 mAU 초과, 보다 바람직하게는 0.2 mAU 초과 또는 보다 더 바람직하게는 0.25 mAU 초과의 차이가 크산탄 검의 분해를 나타낸다.
GH9 엔도글루카나제 및 크산탄 리아제 활성은 대안적으로 문헌 [Lever (1972), Anal. Biochem. 47: 273-279, 1972]에 개발된 비색 검정을 사용하여 크산탄 검으로부터 유리된 환원 말단의 평가에 의해 측정될 수 있다. 바람직한 실시양태는 0.1% 크산탄 검의 사용이다. 크산탄 검의 분해는 블랭크와 샘플 사이의 차이를 계산함으로써 결정될 수 있고, 여기서 0.4 mAU 초과, 바람직하게는 0.5 mAU 초과, 보다 바람직하게는 0.6 mAU 초과 또는 보다 더 바람직하게는 0.8 mAU 초과의 차이가 크산탄 검의 분해를 나타낸다.
본 발명은 또한 본원에 기재된 1종 이상의 GH9 엔도글루카나제 (예를 들어 변이체) 및 본원에 기재된 1종 이상의 크산탄 리아제 (예를 들어 변이체)를 포함하는 세제 조성물을 크산탄 검에 적용하는 것을 포함하는, 크산탄 검을 분해하는 방법에 관한 것이다.
세제에서의 용도
본 발명은 특히 세정 과정, 예컨대 텍스타일 및 직물의 세탁 (예를 들어, 가정용 세탁 세척 및 산업용 세탁 세척) 뿐만 아니라 가정용 및 산업용 경질 표면 세정, 예컨대 식기 세척에 있어서의 본원에 기재된 바와 같은 GH9 엔도글루카나제 및 크산탄 리아제 (예를 들어 변이체)를 포함하는 세제 조성물의 용도에 관한 것이다. 이를 위해, GH9 엔도글루카나제 및 크산탄 리아제 (예를 들어 변이체)는 1종 이상의 세제 성분을 포함하는 세제 조성물에 첨가될 수 있다.
본원에 기재된 폴리펩티드 (예를 들어 변이체)는 세제 조성물에 첨가되어 이에 따라 그의 성분이 될 수 있다. 세제 조성물은, 예를 들어, 얼룩진 직물의 사전처리에 적합한 세탁 첨가제 조성물 및 린스 첨가된 섬유 유연제 조성물을 포함한, 가정용 및 산업용 세탁 세정 둘 다를 위한 손 또는 기계 세탁 세제 조성물로서 제형화될 수 있거나, 또는 일반적 가정용 또는 산업용 경질 표면 세정 작업에 사용하기 위한 세제 조성물로서 제형화될 수 있거나, 또는 손 또는 기계 (가정용 및 산업용 둘 다) 식기세척 작업을 위해 제형화될 수 있다. 구체적 측면에서, 본 발명은 본원에 기재된 바와 같은 폴리펩티드를 포함하는 세제 첨가제에 관한 것이다.
본 발명은 또한, 본원에 기재된 바와 같은 세제 조성물을 크산탄 검에 적용하는 것을 포함하는, 텍스타일의 표면 또는 경질 표면, 예컨대 식기 세척 시의 크산탄 검을 분해하는 방법에 관한 것이다.
본원에 기재된 바와 같은 GH9 엔도글루카나제 및 크산탄 리아제 (예를 들어 본원에 기재된 바와 같은 변이체)의 단독 사용은 효소 세제력 이익, 바람직하게는 크산탄 검에 대한 효소 세제력 이익을 제공하는 것으로 고려된다.
일부 측면에서 본 발명은 1종 이상의 세제 성분 및 본원에 기재된 단리된 GH9 엔도글루카나제 (예를 들어 변이체)를 본원에 기재된 단리된 크산탄 리아제 (예를 들어 변이체)와 함께 포함하는 세제 조성물의 용도에 관한 것이다.
본 발명은 하기 단락에서 추가로 규정된다:
1.
(A) 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)
i) 서열식별번호: 2의 아미노산 95 내지 105에 상응하는 영역 1, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
ii) 서열식별번호: 2의 아미노산 115 내지 138에 상응하는 영역 2, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
iii) 서열식별번호: 2의 아미노산 210 내지 251에 상응하는 영역 3, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 226, 227, 228, 229, 230, 231, 232, 233, 234, 235, 236, 237, 238, 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 249, 250, 251로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
iv) 서열식별번호: 2의 아미노산 267 내지 301에 상응하는 영역 4, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 267, 268, 269, 270, 271, 272, 273, 274, 275, 276, 277, 278, 279, 280, 281, 282, 283, 284, 285, 286, 287, 288, 289, 290, 291, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298, 299, 300, 301로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
v) 서열식별번호: 2의 아미노산 339 내지 361에 상응하는 영역 5, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 339, 340, 341, 342, 343, 344, 345, 346, 347, 348, 349, 350, 351, 352, 353, 354, 355, 356, 357, 358, 359, 360, 361로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
vi) 서열식별번호: 2의 아미노산 547 내지 595에 상응하는 영역 6, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 547, 548, 549, 550, 551, 552, 553, 554, 555, 556, 557, 558, 559, 560, 561, 562, 563, 564, 565, 566, 567, 568, 569, 570, 571, 572, 573, 574, 575, 576, 577, 578, 579, 580, 581, 582, 583, 584, 585, 586, 587, 588, 589, 590, 591, 592, 593, 594, 595로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
vii) 서열식별번호: 2의 아미노산 612 내지 660에 상응하는 영역 7, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 612, 613, 614, 615, 616, 617, 618, 619, 620, 621, 622, 623, 624, 625, 626, 627, 628, 629, 630, 631, 632, 633, 634, 635, 636, 637, 638, 639, 640, 641, 642, 643, 644, 645, 646, 647, 648, 649, 650, 651, 652, 653, 654, 655, 656, 657, 658, 659, 660으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
viii) 서열식별번호: 2의 아미노산 806 내지 828에 상응하는 영역 8, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 806, 807, 808, 809, 810, 811, 812, 813, 814, 815, 816, 817, 818, 819, 820, 821, 822, 823, 824, 825, 826, 827, 828로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함), 및
ix) 서열식별번호: 2의 아미노산 839 내지 1042에 상응하는 영역 9, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 839, 840, 841, 842, 843, 844, 845, 846, 847, 848, 849, 850, 851, 852, 853, 854, 855, 856, 857, 858, 859, 860, 861, 862, 863, 864, 865, 866, 867, 868, 869, 870, 871, 872, 873, 874, 875, 876, 877, 878, 879, 880, 881, 882, 883, 884, 885, 886, 887, 888, 889, 890, 891, 892, 893, 894, 895, 896, 897, 898, 899, 900, 901, 902, 903, 904, 905, 906, 907, 908, 909, 910, 911, 912, 913, 914, 915, 916, 917, 918, 919, 920, 921, 922, 923, 924, 925, 926, 927, 928, 929, 930, 931, 932, 933, 934, 935, 936, 937, 938, 939, 940, 941, 942, 943, 944, 945, 946, 947, 948, 949, 950, 951, 952, 953, 954, 955, 956, 957, 958, 959, 960, 961, 962, 963, 964, 965, 966, 967, 968, 969, 970, 971, 972, 973, 974, 975, 976, 977, 978, 979, 980, 981, 982, 983, 984, 985, 986, 987, 988, 989, 990, 991, 992, 993, 994, 995, 996, 997, 998, 999, 1000, 1001, 1002, 1003, 1004, 1005, 1006, 1007, 1008, 1009, 1010, 1011, 1012, 1013, 1014, 1015, 1016, 1017, 1018, 1019, 1020, 1021, 1022, 1023, 1024, 1025, 1026, 1027, 1028, 1029, 1030, 1031, 1032, 1033, 1034, 1035, 1036, 1037, 1038, 1039, 1040, 1041, 1042로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함)
을 포함하는 엔도글루카나제 변이체이며,
여기서 상기 변이체는 서열식별번호: 2에 대해 적어도 60%, 예를 들어 적어도 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99%, 및 100% 미만의 서열 동일성을 갖고; 바람직하게는 상기 엔도글루카나제 변이체는 크산탄 리아제로 사전처리된 크산탄 검에 대해 활성을 갖고, 추가로 바람직하게는 상기 활성은 크산탄 검 분해 활성인 엔도글루카나제 변이체; 및
(B) (i) 서열식별번호: 6의 아미노산 154 내지 176에 상응하는 영역 1; (ii) 서열식별번호: 6의 아미노산 614 내지 658에 상응하는 영역 2; (iii) 서열식별번호: 6의 아미노산 731 내지 803에 상응하는 영역 3; (iv) 서열식별번호: 6의 아미노산 807 내지 846에 상응하는 영역 4; (v) 서열식별번호: 6의 아미노산 872 내지 885에 상응하는 영역 5; (vi) 서열식별번호: 6의 아미노산 903 내지 1004에 상응하는 영역 6; (vii) 서열식별번호: 6의 아미노산 1 내지 153에 상응하는 영역 7; (viii) 서열식별번호: 6의 아미노산 177 내지 613에 상응하는 영역 8; (ix) 서열식별번호: 6의 아미노산 659 내지 730에 상응하는 영역 9; (x) 서열식별번호: 6의 아미노산 804 내지 806에 상응하는 영역 10; (xi) 서열식별번호: 6의 아미노산 847 내지 871에 상응하는 영역 11; (xii) 서열식별번호: 6의 아미노산 886 내지 902에 상응하는 영역 12; (xiii) 서열식별번호: 6의 아미노산 1005 내지 1037에 상응하는 영역 13으로 이루어진 군으로부터 선택된 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 포함하는 크산탄 리아제 변이체이며; 여기서 상기 변이체는 서열식별번호: 6에 대해 적어도 60%, 예를 들어 적어도 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99%, 및 100% 미만의 서열 동일성을 갖고; 바람직하게는 상기 크산탄 리아제 변이체는 크산탄 검에 대해 활성을 갖고, 추가로 바람직하게는 상기 활성은 크산탄 검 분해 활성인 크산탄 리아제 변이체
를 포함하는 세제 조성물.
2. 단락 1에 있어서, (a) 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드에 대해 적어도 60% 서열 동일성을 갖는 폴리펩티드; (b) 낮은 엄격도 조건 하에 (i) 서열식별번호: 1의 성숙 폴리펩티드 코딩 서열, 또는 (ii) (i)의 전장 상보체와 혼성화하는 폴리뉴클레오티드에 의해 코딩된 폴리펩티드; (c) 서열식별번호: 1의 성숙 폴리펩티드 코딩 서열에 대해 적어도 60% 동일성을 갖는 폴리뉴클레오티드에 의해 코딩된 폴리펩티드; 및 (d) 엔도글루카나제 활성을 갖는 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 단편으로 이루어진 군으로부터 선택된 모 엔도글루카나제의 변이체인, 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물.
3. 단락 2에 있어서, 모 엔도글루카나제가 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드에 대해 적어도 60%, 예를 들어 적어도 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖는 것인, 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물.
4. 단락 2 또는 3에 있어서, 모 엔도글루카나제가 낮은 엄격도 조건, 중간 엄격도 조건, 중간-높은 엄격도 조건, 높은 엄격도 조건, 또는 매우 높은 엄격도 조건 하에 (i) 서열식별번호: 1의 성숙 폴리펩티드 코딩 서열 또는 (ii) (i)의 전장 상보체와 혼성화하는 폴리뉴클레오티드에 의해 코딩된 것인, 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물.
5. 단락 2 내지 4 중 어느 하나에 있어서, 모 엔도글루카나제가 서열식별번호: 1의 성숙 폴리펩티드 코딩 서열에 대해 적어도 60%, 예를 들어 적어도 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 폴리뉴클레오티드에 의해 코딩된 것인, 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물.
6. 단락 2 내지 5 중 어느 하나에 있어서, 모 엔도글루카나제가 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드를 포함하거나 또는 이로 이루어진 것인, 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물.
7. 단락 2 내지 6 중 어느 하나에 있어서, 모 엔도글루카나제가 서열식별번호: 2의 성숙 폴리펩티드의 단편이며, 여기서 단편은 엔도글루카나제 활성을 갖는 것인, 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물.
8. 단락 2 내지 7 중 어느 하나에 있어서, 모 엔도글루카나제의 아미노산 서열에 대해 적어도 60%, 예를 들어 적어도 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99%, 그러나 100% 미만의 서열 동일성을 갖는 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물.
9. 단락 1 내지 8 중 어느 하나에 있어서, 영역 1-9로 이루어진 군으로부터 선택된 상기 영역이 킬레이트화제-유도된 불안정성 영역이며;
바람직하게는 (예를 들어, 서열식별번호: 2 또는 또 다른 모 엔도글루카나제의) 상기 킬레이트화제-유도된 불안정성 영역은 하기 특색: (i) 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 입체형태적으로 덜 안정함; 및/또는 (ii) 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 상기 킬레이트화제에 더 노출됨; 및/또는 (iii) 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 상기 킬레이트화제에 더 접근가능함; 및/또는 (iv) 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 입체형태적으로 더 동적임; 및/또는 (v) 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 중수소 혼입을 더 잘 수용함; 중 1종 이상을 갖고;
추가로 바람직하게는 상기 인접 영역은 (vi) 서열식별번호: 2의 아미노산 1 내지 94에 상응하는 영역 10; (vii) 서열식별번호: 2의 아미노산 106 내지 114에 상응하는 영역 11; (viii) 서열식별번호: 2의 아미노산 139 내지 209에 상응하는 영역 12; (ix) 서열식별번호: 2의 아미노산 252 내지 266에 상응하는 영역 13; (x) 서열식별번호: 2의 아미노산 302 내지 338에 상응하는 영역 14; (xi) 서열식별번호: 2의 아미노산 362 내지 546에 상응하는 영역 15; (xii) 서열식별번호: 2의 아미노산 596 내지 611에 상응하는 영역 16; (xiii) 서열식별번호: 2의 아미노산 661 내지 805에 상응하는 영역 17; (xiv) 서열식별번호: 2의 아미노산 829 내지 838에 상응하는 영역 18; 및 (xv) 서열식별번호: 2의 아미노산 1043 내지 1055에 상응하는 영역 19로 이루어진 군으로부터 선택되고;
추가로 가장 바람직하게는 상기 킬레이트화제는 EDTA 또는 시트레이트인
엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물.
10. 단락 1 내지 9 중 어느 하나에 있어서, 상기 변이체가 적어도 1개의 인접 영역에서의 변경을 추가로 포함하고, 상기 인접 영역은 (i') 서열식별번호: 2의 아미노산 1 내지 94에 상응하는 영역 10; (ii') 서열식별번호: 2의 아미노산 106 내지 114에 상응하는 영역 11; (iii') 서열식별번호: 2의 아미노산 139 내지 209에 상응하는 영역 12; (iv') 서열식별번호: 2의 아미노산 252 내지 266에 상응하는 영역 13; (v') 서열식별번호: 2의 아미노산 302 내지 338에 상응하는 영역 14; (vi') 서열식별번호: 2의 아미노산 362 내지 546에 상응하는 영역 15; (vii') 서열식별번호: 2의 아미노산 596 내지 611에 상응하는 영역 16; (viii') 서열식별번호: 2의 아미노산 661 내지 805에 상응하는 영역 17; (ix') 서열식별번호: 2의 아미노산 829 내지 838에 상응하는 영역 18; 및 (x') 서열식별번호: 2의 아미노산 1043 내지 1055에 상응하는 영역 19로 이루어진 군으로부터 선택된 것인, 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물.
11. 단락 1 내지 10 중 어느 하나에 있어서, 세제 성분을 포함하는 수용액 중에서 영역 1-9로 이루어진 군으로부터 선택된 (예를 들어, 서열식별번호: 2 또는 또 다른 모 엔도글루카나제의) 상기 영역이 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 입체형태적으로 덜 안정하고;
바람직하게는 상기 인접 영역은 (i) 서열식별번호: 2의 아미노산 1 내지 94에 상응하는 영역 10; (ii) 서열식별번호: 2의 아미노산 106 내지 114에 상응하는 영역 11; (iii) 서열식별번호: 2의 아미노산 139 내지 209에 상응하는 영역 12; (iv) 서열식별번호: 2의 아미노산 252 내지 266에 상응하는 영역 13; (v) 서열식별번호: 2의 아미노산 302 내지 338에 상응하는 영역 14; (vi) 서열식별번호: 2의 아미노산 362 내지 546에 상응하는 영역 15; (vii) 서열식별번호: 2의 아미노산 596 내지 611에 상응하는 영역 16; (viii) 서열식별번호: 2의 아미노산 661 내지 805에 상응하는 영역 17; (ix) 서열식별번호: 2의 아미노산 829 내지 838에 상응하는 영역 18; 및 (x) 서열식별번호: 2의 아미노산 1043 내지 1055에 상응하는 영역 19로 이루어진 군으로부터 선택되고;
추가로 바람직하게는 상기 세제 성분은 킬레이트화제를 포함하고; 추가로 가장 바람직하게는 상기 킬레이트화제는 EDTA 또는 시트레이트인
엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물.
12. 단락 1 내지 11 중 어느 하나에 있어서, 세제 성분을 포함하는 수용액 중에서 영역 1-9로 이루어진 군으로부터 선택된 (예를 들어, 서열식별번호: 2 또는 또 다른 모 엔도글루카나제의) 상기 영역이 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 상기 세제 성분에 더 노출되고;
바람직하게는 상기 인접 영역은 (i) 서열식별번호: 2의 아미노산 1 내지 94에 상응하는 영역 10; (ii) 서열식별번호: 2의 아미노산 106 내지 114에 상응하는 영역 11; (iii) 서열식별번호: 2의 아미노산 139 내지 209에 상응하는 영역 12; (iv) 서열식별번호: 2의 아미노산 252 내지 266에 상응하는 영역 13; (v) 서열식별번호: 2의 아미노산 302 내지 338에 상응하는 영역 14; (vi) 서열식별번호: 2의 아미노산 362 내지 546에 상응하는 영역 15; (vii) 서열식별번호: 2의 아미노산 596 내지 611에 상응하는 영역 16; (viii) 서열식별번호: 2의 아미노산 661 내지 805에 상응하는 영역 17; (ix) 서열식별번호: 2의 아미노산 829 내지 838에 상응하는 영역 18; 및 (x) 서열식별번호: 2의 아미노산 1043 내지 1055에 상응하는 영역 19로 이루어진 군으로부터 선택되고;
추가로 바람직하게는 상기 세제 성분은 킬레이트화제를 포함하고; 추가로 가장 바람직하게는 상기 킬레이트화제는 EDTA 또는 시트레이트인
엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물.
13. 단락 1 내지 12 중 어느 하나에 있어서, 세제 성분을 포함하는 수용액 중에서 영역 1-9로 이루어진 군으로부터 선택된 (예를 들어, 서열식별번호: 2 또는 또 다른 모 엔도글루카나제의) 상기 영역이 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 상기 세제 성분에 더 접근가능하고;
바람직하게는 상기 인접 영역은 (i) 서열식별번호: 2의 아미노산 1 내지 94에 상응하는 영역 10; (ii) 서열식별번호: 2의 아미노산 106 내지 114에 상응하는 영역 11; (iii) 서열식별번호: 2의 아미노산 139 내지 209에 상응하는 영역 12; (iv) 서열식별번호: 2의 아미노산 252 내지 266에 상응하는 영역 13; (v) 서열식별번호: 2의 아미노산 302 내지 338에 상응하는 영역 14; (vi) 서열식별번호: 2의 아미노산 362 내지 546에 상응하는 영역 15; (vii) 서열식별번호: 2의 아미노산 596 내지 611에 상응하는 영역 16; (viii) 서열식별번호: 2의 아미노산 661 내지 805에 상응하는 영역 17; (ix) 서열식별번호: 2의 아미노산 829 내지 838에 상응하는 영역 18; 및 (x) 서열식별번호: 2의 아미노산 1043 내지 1055에 상응하는 영역 19로 이루어진 군으로부터 선택되고;
추가로 바람직하게는 상기 세제 성분은 킬레이트화제를 포함하고; 추가로 가장 바람직하게는 상기 킬레이트화제는 EDTA 또는 시트레이트인
엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물.
14. 단락 1 내지 13 중 어느 하나에 있어서, 세제 성분을 포함하는 수용액 중에서 영역 1-9로 이루어진 군으로부터 선택된 (예를 들어, 서열식별번호: 2 또는 또 다른 모 엔도글루카나제의) 상기 영역이 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 입체형태적으로 더 동적이고;
바람직하게는 상기 인접 영역은 (i) 서열식별번호: 2의 아미노산 1 내지 94에 상응하는 영역 10; (ii) 서열식별번호: 2의 아미노산 106 내지 114에 상응하는 영역 11; (iii) 서열식별번호: 2의 아미노산 139 내지 209에 상응하는 영역 12; (iv) 서열식별번호: 2의 아미노산 252 내지 266에 상응하는 영역 13; (v) 서열식별번호: 2의 아미노산 302 내지 338에 상응하는 영역 14; (vi) 서열식별번호: 2의 아미노산 362 내지 546에 상응하는 영역 15; (vii) 서열식별번호: 2의 아미노산 596 내지 611에 상응하는 영역 16; (viii) 서열식별번호: 2의 아미노산 661 내지 805에 상응하는 영역 17; (ix) 서열식별번호: 2의 아미노산 829 내지 838에 상응하는 영역 18; 및 (x) 서열식별번호: 2의 아미노산 1043 내지 1055에 상응하는 영역 19로 이루어진 군으로부터 선택되고;
추가로 바람직하게는 상기 세제 성분은 킬레이트화제를 포함하고; 추가로 가장 바람직하게는 상기 킬레이트화제는 EDTA 또는 시트레이트인
엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물.
15. 단락 1 내지 14 중 어느 하나에 있어서, 세제 성분을 포함하는 수용액 중에서 영역 1-9로 이루어진 군으로부터 선택된 (예를 들어, 서열식별번호: 2 또는 또 다른 모 엔도글루카나제의) 상기 영역이 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 중수소 혼입을 더 잘 수용하고;
바람직하게는 상기 인접 영역은 (i) 서열식별번호: 2의 아미노산 1 내지 94에 상응하는 영역 10; (ii) 서열식별번호: 2의 아미노산 106 내지 114에 상응하는 영역 11; (iii) 서열식별번호: 2의 아미노산 139 내지 209에 상응하는 영역 12; (iv) 서열식별번호: 2의 아미노산 252 내지 266에 상응하는 영역 13; (v) 서열식별번호: 2의 아미노산 302 내지 338에 상응하는 영역 14; (vi) 서열식별번호: 2의 아미노산 362 내지 546에 상응하는 영역 15; (vii) 서열식별번호: 2의 아미노산 596 내지 611에 상응하는 영역 16; (viii) 서열식별번호: 2의 아미노산 661 내지 805에 상응하는 영역 17; (ix) 서열식별번호: 2의 아미노산 829 내지 838에 상응하는 영역 18; 및 (x) 서열식별번호: 2의 아미노산 1043 내지 1055에 상응하는 영역 19로 이루어진 군으로부터 선택되고;
추가로 바람직하게는 상기 세제 성분은 킬레이트화제를 포함하고; 추가로 가장 바람직하게는 상기 킬레이트화제는 EDTA 또는 시트레이트인
엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물.
16. 단락 1 내지 15 중 어느 하나에 있어서, 하기의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환):
a) i) 서열식별번호: 2의 아미노산 95 내지 105에 상응하는 영역 1, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
ii) 서열식별번호: 2의 아미노산 115 내지 138에 상응하는 영역 2, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
iii) 서열식별번호: 2의 아미노산 210 내지 251에 상응하는 영역 3, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 226, 227, 228, 229, 230, 231, 232, 233, 234, 235, 236, 237, 238, 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 249, 250, 251로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
iv) 서열식별번호: 2의 아미노산 267 내지 301에 상응하는 영역 4, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 267, 268, 269, 270, 271, 272, 273, 274, 275, 276, 277, 278, 279, 280, 281, 282, 283, 284, 285, 286, 287, 288, 289, 290, 291, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298, 299, 300, 301로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
v) 서열식별번호: 2의 아미노산 339 내지 361에 상응하는 영역 5, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 339, 340, 341, 342, 343, 344, 345, 346, 347, 348, 349, 350, 351, 352, 353, 354, 355, 356, 357, 358, 359, 360, 361로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
vi) 서열식별번호: 2의 아미노산 547 내지 595에 상응하는 영역 6, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 547, 548, 549, 550, 551, 552, 553, 554, 555, 556, 557, 558, 559, 560, 561, 562, 563, 564, 565, 566, 567, 568, 569, 570, 571, 572, 573, 574, 575, 576, 577, 578, 579, 580, 581, 582, 583, 584, 585, 586, 587, 588, 589, 590, 591, 592, 593, 594, 595로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
vii) 서열식별번호: 2의 아미노산 612 내지 660에 상응하는 영역 7, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 612, 613, 614, 615, 616, 617, 618, 619, 620, 621, 622, 623, 624, 625, 626, 627, 628, 629, 630, 631, 632, 633, 634, 635, 636, 637, 638, 639, 640, 641, 642, 643, 644, 645, 646, 647, 648, 649, 650, 651, 652, 653, 654, 655, 656, 657, 658, 659, 660으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
viii) 서열식별번호: 2의 아미노산 806 내지 828에 상응하는 영역 8, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 806, 807, 808, 809, 810, 811, 812, 813, 814, 815, 816, 817, 818, 819, 820, 821, 822, 823, 824, 825, 826, 827, 828로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함), 및
ix) 서열식별번호: 2의 아미노산 839 내지 1042에 상응하는 영역 9, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 839, 840, 841, 842, 843, 844, 845, 846, 847, 848, 849, 850, 851, 852, 853, 854, 855, 856, 857, 858, 859, 860, 861, 862, 863, 864, 865, 866, 867, 868, 869, 870, 871, 872, 873, 874, 875, 876, 877, 878, 879, 880, 881, 882, 883, 884, 885, 886, 887, 888, 889, 890, 891, 892, 893, 894, 895, 896, 897, 898, 899, 900, 901, 902, 903, 904, 905, 906, 907, 908, 909, 910, 911, 912, 913, 914, 915, 916, 917, 918, 919, 920, 921, 922, 923, 924, 925, 926, 927, 928, 929, 930, 931, 932, 933, 934, 935, 936, 937, 938, 939, 940, 941, 942, 943, 944, 945, 946, 947, 948, 949, 950, 951, 952, 953, 954, 955, 956, 957, 958, 959, 960, 961, 962, 963, 964, 965, 966, 967, 968, 969, 970, 971, 972, 973, 974, 975, 976, 977, 978, 979, 980, 981, 982, 983, 984, 985, 986, 987, 988, 989, 990, 991, 992, 993, 994, 995, 996, 997, 998, 999, 1000, 1001, 1002, 1003, 1004, 1005, 1006, 1007, 1008, 1009, 1010, 1011, 1012, 1013, 1014, 1015, 1016, 1017, 1018, 1019, 1020, 1021, 1022, 1023, 1024, 1025, 1026, 1027, 1028, 1029, 1030, 1031, 1032, 1033, 1034, 1035, 1036, 1037, 1038, 1039, 1040, 1041, 1042로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함)
으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 영역에서의 상기 변경; 및/또는
b) 바람직하게는 (i') 서열식별번호: 2의 아미노산 1 내지 94에 상응하는 영역 10; (ii') 서열식별번호: 2의 아미노산 106 내지 114에 상응하는 영역 11; (iii') 서열식별번호: 2의 아미노산 139 내지 209에 상응하는 영역 12; (iv') 서열식별번호: 2의 아미노산 252 내지 266에 상응하는 영역 13; (v') 서열식별번호: 2의 아미노산 302 내지 338에 상응하는 영역 14; (vi') 서열식별번호: 2의 아미노산 362 내지 546에 상응하는 영역 15; (vii') 서열식별번호: 2의 아미노산 596 내지 611에 상응하는 영역 16; (viii') 서열식별번호: 2의 아미노산 661 내지 805에 상응하는 영역 17; (ix') 서열식별번호: 2의 아미노산 829 내지 838에 상응하는 영역 18; 및 (x') 서열식별번호: 2의 아미노산 1043 내지 1055에 상응하는 영역 19로 이루어진 군으로부터 선택된 인접 영역에서의 상기 변경 (예를 들어 위치: 51 (예를 들어 K51Q), 451 (예를 들어 K451S), 333 (예를 들어 W333L), 416 (예를 들어 Q416D)에 상응하는 1개 이상의 위치에서의 변경)
을 추가로 포함하며,
여기서 상기 변이체는 서열식별번호: 2에 대해 적어도 60%%, 예를 들어 적어도 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99%, 및 100% 미만의 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 상기 변이체는 크산탄 리아제로 사전처리된 크산탄 검에 대해 활성을 갖고, 추가로 바람직하게는 상기 활성은 크산탄 검 분해 활성인, 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물.
17. 단락 1 내지 16 중 어느 하나에 있어서, 상기 변이체가 서열식별번호: 2에 대해 적어도 61%, 62%, 63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 서열 동일성을 갖는 것인, 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물.
18. 단락 1 내지 17 중 어느 하나에 있어서, 1개 이상의 위치에서의 상기 변경이 위치: 4, 17, 18, 20, 51, 53, 55, 56, 60, 63, 71, 79, 87, 92, 99, 120, 125, 126, 130, 137, 182, 186, 189, 192, 213, 216, 221, 226, 228, 230, 231, 232, 233, 235, 240, 243, 247, 249, 278, 279, 281, 283, 285, 289, 292, 294, 298, 302, 311, 313, 333, 346, 353, 358, 386, 387, 388, 390, 403, 408, 410, 416, 441, 448, 451, 471, 472, 476, 489, 507, 512, 515, 538, 555, 556, 557, 558, 559, 560, 561, 562, 563, 564, 567, 568, 570, 575, 578, 579, 580, 581, 583, 589, 590, 591, 592, 593, 595, 598, 599, 602, 603, 605, 607, 609, 616, 627, 630, 631, 635, 636, 638, 639, 640, 641, 642, 643, 644, 651, 676, 683, 688, 690, 694, 698, 699, 706, 711, 713, 1719, 720, 744, 749, 754, 756, 760, 781, 786, 797, 810, 811, 812, 815, 823, 824, 825, 827, 828, 833, 834, 835, 837, 843, 848, 868, 869, 870, 871, 872, 873, 874, 880, 881, 883, 884, 885, 887, 888, 890, 892, 894, 898, 905, 906, 912, 920, 921, 924, 926, 927, 928, 932, 933, 934, 935, 937, 938, 939, 940, 941, 942, 943, 946, 948, 950, 952, 953, 954, 956, 957, 960, 966, 971, 972, 980, 989, 991, 994, 995, 998, 999, 1006, 1009, 1010, 1011, 1029, 1030, 1031, 1032, 1035, 1037, 1038, 1040, 1041, 1042, 1044, 1045, 1048에서의 변경으로 이루어진 군으로부터 선택되고, 여기서 넘버링은 서열식별번호: 2에 따른 것인, 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물.
19. 단락 1 내지 18 중 어느 하나에 있어서, 1개 이상의 위치에서의 상기 변경이 서열식별번호: 2의 위치: 285, 333, 353, *558, 558, 633, 635, 635, 635, 638, 639, 994, 281, 563, 575, 575, 921, 558+559+560+561+562, 558, 559, 560, 561, 562 125, 126, 130, 213, 221, 228, 228, 230, 230, 230, 230, 230, 230, 230, 231, 231, 232, 232, 235, 240, 243, 243, 249, 278, 281, 281, 281, 281, 281, 281, 281, 285, 285, 285, 285, 285, 285, 285, 285, 285, 285, 285, 292, 292, 292, 292, 292, 292, 292, 292, 292, 292, 292, 292, 297, 346, 556, 558, 558, 558, 558, 558, 558, 559, 559, 559, 559, 559, 559, 559, 559, 559, 559, 559, 559, 560, 560, 560, 560, 561, 561, 561, 561, 561, 564, 564, 564, 564, 564, 564, 565, 567, 568, 569, 569, 569, 569, 570, 570, 570, 570, 570, 570, 570, 570, 570, 570, 570, 570, 570, 570, 570, 570, 570, 575, 575, 576, 576, 576, 578, 579, 579, 580, 583, 589, 590, 590, 590, 591, 592, 593, 593, 593, 593, 593, 593, 593, 593, 616, 627, 627, 627, 627, 627, 627, 627, 630, 630, 630, 635, 635, 635, 635, 635, 635, 635, 636, 636, 636, 636, 636, 636, 636, 636, 638, 638, 638, 638, 638, 639, 639, 639, 639, 639, 639, 639, 639, 639, 641, 642, 642, 643, 643, 643, 644, 651, 810, 811, 812, 812, 812, 812, 812, 815, 815, 815, 815, 815, 823, 824, 825, 825, 825, 825, 827, 827, 827, 843, 870, 870, 870, 870, 870, 870, 870, 870, 870, 870, 870, 870, 870, 870, 870, 870, 871, 871, 871, 871, 871, 871, 871, 871, 871, 871, 871, 872, 872, 872, 872, 872, 872, 872, 872, 872, 872, 872, 872, 872, 873, 873, 874, 874, 874, 874, 874, 874, 874, 874, 881, 883, 884, 885, 885, 885, 887, 887, 887, 887, 887, 894, 920, 921, 921, 932, 933, 933, 934, 934, 934, 934, 934, 934, 934, 934, 934, 935, 937, 937, 937, 937, 937, 937, 937, 938, 939, 939, 940, 941, 941, 941, 942, 942, 943, 943, 950, 950, 950, 952, 952, 953, 954, 960, 964, 964, 966, 966, 971, 974, 974, 989, 991, 991, 991, 991, 991, 991, 991, 995, 995, 995, 995, 995, 998, 998, 1006, 1006, 1006, 1006, 1010, 1011, 1011, 1011, 1011, 1011, 1011, 1011, 1029, 1030, 1031, 1031, 1031, 1031, 1032, 1035, 1037, 1037, 1038, 1038, 1040, 1040, 1041, 1044, 1044, 1044, 1044, 1045, 1045, 559+579, 559, 579, 564+579, 564, 579, 559+579, 559, 579, 562+579, 562, 579, 564+579, 564, 579, 559+579+99, 559, 579, 99, 559+579+281, 559, 579, 281, 281+559+579, 281, 559, 579, 559+579+616, 559, 579, 616, 559+579+636, 559, 579, 636, 559+579+651, 559, 579, 651, 559+579+948, 559, 579, 948, 559+579+1009, 559, 579, 1009, 559+579+627, 559, 579, 627, 579+921, 579, 921, 559+579+921, 559, 579, 921, 99+579, 99, 579, 579+651, 579, 651, 579+948, 579, 948, 579+1009, 579, 1009, 559+579+934, 559, 579, 934, 559+579+921+934, 559, 579, 921, 934, 559+579+627, 559, 579, 627, 559+579+627+616, 559, 579, 627, 616, 559+579+627, 559, 579, 627, 559+579+921+651, 559, 579, 921, 651, 559+579+921+627, 559, 579, 921, 627, 559+579+921+636, 559, 579, 921, 636, 559+579+921+616, 559, 579, 921, 616, 559+579+921+636, 559, 579, 921, 636, 559+579+921+627+636, 559, 579, 921, 627, 636, 559+579+636+651, 559, 579, 636, 651, 559+579+616+651, 559, 579, 616, 651, 559+579+616+636, 559, 579, 616, 636, 559+579+616+921+934, 559, 579, 616, 921, 934, 559+579+651+627, 559, 579, 651, 627, 559+579+651+636, 559, 579, 651, 636, 559+579+651+627+636, 559, 579, 651, 627, 636, 559+579+651+616, 559, 579, 651, 616, 559+579+651+921+934, 559, 579, 651, 921, 934, 636+934, 636, 934, 636+921, 636, 921, 636+627, 636, 627, 636+579, 636, 579, 638+934, 638, 934, 638+921, 638, 921, 638+627, 638, 627, 638+579, 638, 579, 627+51, 627, 51, 627+451, 627, 451, 627+559, 627, 559, 627+579, 627, 579, 579+934, 579, 934, 651+638, 651, 638, 570+651, 570, 651, 570+921, 570, 921, 570+627, 570, 627, 570+559, 570, 559, 570+579, 570, 579, 570+638, 570, 638, 570+579, 570, 579, 570+638, 570, 638, 570+651, 570, 651, 570+636, 570, 636, 570+934, 570, 934, 570+638, 570, 638, 570+921, 570, 921, 570+627, 570, 627, 570+559, 570, 559, 570+885, 570, 885, 885+934, 885, 934, 885+627, 885, 627, 559+579+636, 559, 579, 636, 559+579+638, 559, 579, 638, 559+579+870, 870, 559+579+560, 560, 559+579+564, 564, 559+579+570, 570, 559+579+570, 570, 559+579+570, 570, 559+579+570, 570, 559+579+570, 570, 559+579+570, 570, 559+579+570, 570, 559+579+570, 570, 558, 559, 559, 559, 561, 564, 570, 570, 570, 570, 570, 570, 570, 579, 579, 581, 616, 627, 627, 627, 636, 636, 636, 636, 636, 636, 638, 638, 643, 651, 651, 885, 885, 921, 934, 934, 966, 1011, 1031, 559+570+579, 559+570+579, 559+570+579, 559+570+579, 559+570+579, 559+570+579, 559+570+579, 559+570+579, 559+560+579, 559+579+651, 559+579+651+934, 559+579+638, 559+579+921, 559+579+616+921, 559+579+636, 559+579, 559+579, 559+579+921, 559+579+616, 638+934, 627+636, 627+934, 570+579, 416+559+579+636, 416, 128+559+579+627, 128, 128+559+579+636, 579+636에서의 변경으로 이루어진 군으로부터 선택되고, 바람직하게는 넘버링은 서열식별번호: 2에 따르고, 추가로 바람직하게는 위치: 627, 636 또는 638에서의 변경으로 이루어진 군으로부터 선택되고, 여기서 넘버링은 서열식별번호: 2에 따른 것인, 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물.
20. 단락 1 내지 17 중 어느 하나에 있어서, 1개 이상의 위치에서의 상기 변경이 N285G, W333L, T353D, N558NP, N558F, T633V, D635L, D635M, D635T, F638Y, T639D, G994N, 및 K281T, G563E, I575M, I575A, K921D, N558K+A559K+S560F+T561P+G562W, N558K, A559K, S560F, T561P, G562W 및 I125V, A126R, K130R, K213R, A221R, K228E, K228I, G230F, G230L, G230A, G230H, G230N, G230W, G230T, F231Y, F231N, V232R, V232G, H235D, N240Q, G243K, G243R, A249N, A278S, K281F, K281V, K281Y, K281H, K281Q, K281N, K281W, N285L, N285M, N285S, N285P, N285T, N285Y, N285H, N285K, N285D, N285W, N285R, T292F, T292L, T292I, T292V, T292S, T292P, T292Y, T292Q, T292N, T292K, T292D, T292G, F297L, A346H, G556S, N558D, N558M, N558Q, N558I, N558Y, N558H, A559N, A559F, A559M, A559P, A559Y, A559H, A559Q, A559D, A559R, A559G, A559I, A559S, S560P, S560K, S560G, S560D, T561P, T561E, T561Q, T561S, T561D, A564I, A564Y, A564H, A564Q, A564K, A564E, E565M, V567F, K568R, L569F, L569Y, L569D, L569E, P570F, P570L, P570I, P570M, P570V, P570S, P570T, P570A, P570Y, P570H, P570Q, P570N, P570K, P570E, P570W, P570R, P570G, I575D, I575E, I576F, I576M, I576P, D578R, Y579F, Y579W, V580L, D583M, Q589G, P590S, P590T, P590E, E591L, G592D, S593P, S593H, S593Q, S593N, S593K, S593D, S593E, S593R, S616D, K627L, K627M, K627V, K627S, K627T, K627Q, K627R, I630F, I630V, I630Y, D635A, D635P, D635N, D635K, D635E, D635G, D635W, S636L, S636M, S636A, S636H, S636Q, S636N, S636K, S636R, F638I, F638V, F638T, F638L, F638H, T639V, T639S, T639L, T639I, T639M, T639A, T639E, T639W, T639G, Y641E, S642T, S642N, N643D, N643H, N643T, T644F, A651P, S810R, A811S, V812F, V812I, V812M, V812W, V812R, N815V, N815Y, N815E, N815W, N815R, S823Q, A824T, T825N, T825W, T825A, T825D, V827I, V827M, V827S, T843V, D870F, D870L, D870I, D870M, D870V, D870S, D870T, D870Y, D870H, D870Q, D870N, D870K, D870E, D870W, D870R, D870G, P871F, P871L, P871I, P871M, P871V, P871S, P871T, P871A, P871Y, P871H, P871Q, T872S, T872F, T872A, T872Y, T872H, T872Q, T872N, T872K, T872D, T872E, T872W, T872R, T872G, D873K, D873E, T874V, T874S, 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V881Q, V881T, T883R, T883V, T883C, T883K, Y884H, A885N, A885Q, A885F, T887K, T887S, L888M, V890R, T892P, T892V, R898Q, N905D, F906A, Q912V, N920P, K921R, A924D, V926F, V926P, K927R, S928D, T932A, N933S, N933V, Y934G, Y934R, Y934Q, A937E, V938I, K939V, N941S, A942P, G946R, K948R, Q956Y, Q956S, A957L, A957P, N966C, T972K, M980I, G994D, T999R, L1011A, K1031I, A1037E, S1038G, G1041R, Y1042N, F1048W로 이루어진 군으로부터 선택되고, 바람직하게는 넘버링은 서열식별번호: 2에 따르고, 추가로 바람직하게는 위치: K627R, S636N 또는 F638I에서의 변경으로 이루어진 군으로부터 선택되고, 여기서 넘버링은 서열식별번호: 2에 따른 것인, 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물.
21. 단락 1 내지 20 중 어느 하나에 있어서, 1개 이상의 위치에서의 상기 변경이 서열식별번호: 2의 위치: 17, 20, 51, 53, 55, 56, 60, 63, 79, 87, 192, 302, 387, 388, 390, 403, 408, 410, 416, 448, 451, 471, 472, 507, 512, 515, 538, 598, 602, 605, 609, 676, 694, 698, 699, 711, 754, 760, 781, 786, 797, 834, 및 835에서의 변경으로 이루어진 군으로부터 선택되고, 여기서 넘버링은 서열식별번호: 2에 따른 것인, 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물.
22. 단락 1 내지 21 중 어느 하나에 있어서, 1개 이상의 위치에서의 상기 변경이 서열식별번호: 2의 S17A, F20P, F20N, F20G, F20Y, K51Q, K51H, E53P, E53G, Y55M, V56M, Y60F, S63F, T87R, K192N, I302H, I302V, I302M, I387T, K388R, K390Q, I403Y, E408D, E408S, E408P, E408A, E408G, E408N, P410G, Q416S, Q416D, A448E, A448W, A448S, K451S, G471S, S472Y, K507R, K512P, S515V, S538C, Y579W, S598Q, I602T, I602D, S605T, G609E, D676H, T694A, R698W, T699A, T711V, T711Y, K754R, S760G, T781M, N786K, T797S, Q834E, 및 S835D로 이루어진 군으로부터 선택된 것인, 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물.
23. 단락 1 내지 22 중 어느 하나에 있어서, 모 엔도글루카나제 (예를 들어, 서열식별번호: 2)와 비교하여 변경의 총수가 1 내지 20개, 예를 들어 1 내지 18개 또는 5 내지 16개 또는 8 내지 14개, 예컨대 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 또는 16개의 변경인, 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물.
24. 단락 1 내지 23 중 어느 하나에 있어서, 크산탄 리아제로 사전처리된 크산탄 검에 대한 상기 활성이 크산탄 분해 활성이고, 바람직하게는 상기 크산탄 분해 활성이 엔도글루카나제 EC 3.2.1.4 활성인, 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물.
25. 단락 1 내지 24 중 어느 하나에 있어서, 상기 변이체가 (예를 들어, 서열식별번호: 2를 갖는) 모 엔도글루카나제와 비교하여 세제 조성물에서 개선된 안정성을 갖고; 임의로 상기 세제 조성물은 킬레이트화제를 포함하고; 추가로 바람직하게는 상기 킬레이트화제는 EDTA 또는 시트레이트인, 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물.
26. 단락 1 내지 25 중 어느 하나에 있어서, 상기 변이체가 모 엔도글루카나제, 예를 들어 서열식별번호: 2의 엔도글루카나제 대비 ≥1.0의 반감기 개선 지수 (HIF)를 갖고; 바람직하게는 상기 변이체가 >1.0의 반감기 개선 지수 (HIF)를 갖는 것인, 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물.
27. 단락 24에 있어서, 상기 반감기 개선 지수 (HIF)가 세제 조성물 중 25℃에서의 약 5-140시간 또는 약 17-20시간의 기간 동안의 상기 엔도글루카나제 변이체의 인큐베이션 후에 결정된 것인, 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물.
28. 단락 1 내지 27 중 어느 하나에 있어서, 크산탄 리아제 변이체가 a) 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드에 대해 적어도 60% 서열 동일성을 갖는 폴리펩티드; b) 낮은 엄격도 조건 하에 (i) 서열식별번호: 5의 성숙 폴리펩티드 코딩 서열, 또는 (ii) (i)의 전장 상보체와 혼성화하는 폴리뉴클레오티드에 의해 코딩된 폴리펩티드; (c) 서열식별번호: 5의 성숙 폴리펩티드 코딩 서열에 대해 적어도 60% 동일성을 갖는 폴리뉴클레오티드에 의해 코딩된 폴리펩티드; 및 (d) 크산탄 리아제 활성을 갖는 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 단편으로 이루어진 군으로부터 선택된 모 크산탄 리아제의 변이체인 세제 조성물.
29. 단락 28에 있어서, 모 크산탄 리아제가 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드에 대해 적어도 60%, 예를 들어 적어도 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100% 서열 동일성을 갖는 것인 세제 조성물.
30. 단락 28 또는 29에 있어서, 모 크산탄 리아제가 낮은 엄격도 조건, 중간 엄격도 조건, 중간-높은 엄격도 조건, 높은 엄격도 조건, 또는 매우 높은 엄격도 조건 하에 (i) 서열식별번호: 5의 성숙 폴리펩티드 코딩 서열 또는 (ii) (i)의 전장 상보체와 혼성화하는 폴리뉴클레오티드에 의해 코딩된 것인 세제 조성물.
31. 단락 28 내지 30 중 어느 하나에 있어서, 모 크산탄 리아제가 서열식별번호: 5의 성숙 폴리펩티드 코딩 서열에 대해 적어도 60%, 예를 들어 적어도 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99%, 또는 100% 서열 동일성을 갖는 폴리뉴클레오티드에 의해 코딩된 것인 세제 조성물.
32. 단락 28 내지 31 중 어느 하나에 있어서, 모 크산탄 리아제가 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드를 포함하거나 또는 이로 이루어진 것인 세제 조성물.
33. 단락 28 내지 32 중 어느 하나에 있어서, 모 크산탄 리아제가 서열식별번호: 6의 성숙 폴리펩티드의 단편이며, 여기서 단편은 크산탄 리아제 활성을 갖는 것인 세제 조성물.
34. 단락 28 내지 33 중 어느 하나에 있어서, 크산탄 리아제 변이체가 모 크산탄 리아제의 아미노산 서열에 대해 적어도 60%, 예를 들어 적어도 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99%, 그러나 100% 미만의 서열 동일성을 갖는 것인 세제 조성물.
35. 단락 1 내지 34 중 어느 하나에 있어서, 영역 1-6으로 이루어진 군으로부터 선택된 크산탄 리아제의 상기 영역이 킬레이트화제-유도된 불안정성 영역이며;
바람직하게는 (예를 들어, 서열식별번호: 6 또는 또 다른 모 크산탄 리아제의) 상기 킬레이트화제-유도된 불안정성 영역은 하기 특색: (i) 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 입체형태적으로 덜 안정함; 및/또는 (ii) 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 상기 킬레이트화제에 더 노출됨; 및/또는 (iii) 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 상기 킬레이트화제에 더 접근가능함; 및/또는 (iv) 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 입체형태적으로 더 동적임; 및/또는 (v) 킬레이트화제의 존재 하에 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 중수소 혼입을 더 잘 수용함; 중 1종 이상을 갖고;
추가로 바람직하게는 상기 인접 영역은 (vi) 서열식별번호: 6의 아미노산 1 내지 153에 상응하는 영역 7; (vii) 서열식별번호: 6의 아미노산 177 내지 613에 상응하는 영역 8; (viii) 서열식별번호: 6의 아미노산 659 내지 730에 상응하는 영역 9; (ix) 서열식별번호: 6의 아미노산 804 내지 806에 상응하는 영역 10; (x) 서열식별번호: 6의 아미노산 847 내지 871에 상응하는 영역 11; (xi) 서열식별번호: 6의 아미노산 886 내지 902에 상응하는 영역 12; 및 (xii) 서열식별번호: 6의 아미노산 1005 내지 1037에 상응하는 영역 13으로 이루어진 군으로부터 선택되고;
상기 킬레이트화제는 임의로 EDTA 또는 시트레이트인 세제 조성물.
36. 단락 1 내지 35 중 어느 하나에 있어서, 세제 성분을 포함하는 수용액 중에서 영역 1-6으로 이루어진 군으로부터 선택된 크산탄 리아제의 (예를 들어, 서열식별번호: 6 또는 또 다른 모 크산탄 리아제의) 상기 영역이 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 입체형태적으로 덜 안정하고;
바람직하게는 상기 인접 영역은 (i) 서열식별번호: 6의 아미노산 1 내지 153에 상응하는 영역 7; (ii) 서열식별번호: 6의 아미노산 177 내지 613에 상응하는 영역 8; (iii) 서열식별번호: 6의 아미노산 659 내지 730에 상응하는 영역 9; (iv) 서열식별번호: 6의 아미노산 804 내지 806에 상응하는 영역 10; (v) 서열식별번호: 6의 아미노산 847 내지 871에 상응하는 영역 11; (vi) 서열식별번호: 6의 아미노산 886 내지 902에 상응하는 영역 12; 및 (vii) 서열식별번호: 6의 아미노산 1005 내지 1037에 상응하는 영역 13으로 이루어진 군으로부터 선택되고,
상기 세제 성분은 임의로 킬레이트화제를 포함하고; 임의로 상기 킬레이트화제는 EDTA 또는 시트레이트인 세제 조성물.
37. 단락 1 내지 36 중 어느 하나에 있어서, 세제 성분을 포함하는 수용액 중에서 영역 1-6으로 이루어진 군으로부터 선택된 크산탄 리아제의 (예를 들어, 서열식별번호: 6 또는 또 다른 모 크산탄 리아제의) 상기 영역이 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 상기 세제 성분에 더 노출되고;
바람직하게는 상기 인접 영역은 (i) 서열식별번호: 6의 아미노산 1 내지 153에 상응하는 영역 7; (ii) 서열식별번호: 6의 아미노산 177 내지 613에 상응하는 영역 8; (iii) 서열식별번호: 6의 아미노산 659 내지 730에 상응하는 영역 9; (iv) 서열식별번호: 6의 아미노산 804 내지 806에 상응하는 영역 10; (v) 서열식별번호: 6의 아미노산 847 내지 871에 상응하는 영역 11; (vi) 서열식별번호: 6의 아미노산 886 내지 902에 상응하는 영역 12; 및 (vii) 서열식별번호: 6의 아미노산 1005 내지 1037에 상응하는 영역 13으로 이루어진 군으로부터 선택되고,
상기 세제 성분은 임의로 킬레이트화제를 포함하고; 상기 킬레이트화제는 임의로 EDTA 또는 시트레이트인 세제 조성물.
38. 단락 1 내지 37 중 어느 하나에 있어서, 세제 성분을 포함하는 수용액 중에서 영역 1-6으로 이루어진 군으로부터 선택된 크산탄 리아제의 (예를 들어, 서열식별번호: 6 또는 또 다른 모 크산탄 리아제의) 상기 영역이 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 상기 세제 성분에 더 접근가능하고;
바람직하게는 상기 인접 영역은 (i) 서열식별번호: 6의 아미노산 1 내지 153에 상응하는 영역 7, (ii) 서열식별번호: 6의 아미노산 177 내지 613에 상응하는 영역 8, (iii) 서열식별번호: 6의 아미노산 659 내지 730에 상응하는 영역 9, (iv) 서열식별번호: 6의 아미노산 804 내지 806에 상응하는 영역 10, (v) 서열식별번호: 6의 아미노산 847 내지 871에 상응하는 영역 11, (vi) 서열식별번호: 6의 아미노산 886 내지 902에 상응하는 영역 12, 및 (vii) 서열식별번호: 6의 아미노산 1005 내지 1037에 상응하는 영역 13으로 이루어진 군으로부터 선택되고,
상기 세제 성분은 임의로 킬레이트화제를 포함하고; 상기 킬레이트화제는 임의로 EDTA 또는 시트레이트인 세제 조성물.
39. 단락 1 내지 38 중 어느 하나에 있어서, 세제 성분을 포함하는 수용액 중에서 영역 1-6으로 이루어진 군으로부터 선택된 크산탄 리아제의 (예를 들어, 서열식별번호: 6 또는 또 다른 모 크산탄 리아제의) 상기 영역이 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 입체형태적으로 더 동적이고;
바람직하게는 상기 인접 영역은 (i) 서열식별번호: 6의 아미노산 1 내지 153에 상응하는 영역 7, (ii) 서열식별번호: 6의 아미노산 177 내지 613에 상응하는 영역 8, (iii) 서열식별번호: 6의 아미노산 659 내지 730에 상응하는 영역 9, (iv) 서열식별번호: 6의 아미노산 804 내지 806에 상응하는 영역 10, (v) 서열식별번호: 6의 아미노산 847 내지 871에 상응하는 영역 11, (vi) 서열식별번호: 6의 아미노산 886 내지 902에 상응하는 영역 12, 및 (vii) 서열식별번호: 6의 아미노산 1005 내지 1037에 상응하는 영역 13으로 이루어진 군으로부터 선택되고,
상기 세제 성분은 임의로 킬레이트화제를 포함하고; 상기 킬레이트화제는 임의로 EDTA 또는 시트레이트인 세제 조성물.
40. 단락 1 내지 39 중 어느 하나에 있어서, 세제 성분을 포함하는 수용액 중에서 영역 1-6으로 이루어진 군으로부터 선택된 크산탄 리아제의 (예를 들어, 서열식별번호: 6 또는 또 다른 모 크산탄 리아제의) 상기 영역이 1개 이상의 또는 모든 그의 인접 영역보다 중수소 혼입을 더 잘 수용하고;
바람직하게는 상기 인접 영역은 (i) 서열식별번호: 6의 아미노산 1 내지 153에 상응하는 영역 7, (ii) 서열식별번호: 6의 아미노산 177 내지 613에 상응하는 영역 8, (iii) 서열식별번호: 6의 아미노산 659 내지 730에 상응하는 영역 9, (iv) 서열식별번호: 6의 아미노산 804 내지 806에 상응하는 영역 10, (v) 서열식별번호: 6의 아미노산 847 내지 871에 상응하는 영역 11, (vi) 서열식별번호: 6의 아미노산 886 내지 902에 상응하는 영역 12, 및 (vii) 서열식별번호: 6의 아미노산 1005 내지 1037에 상응하는 영역 13으로 이루어진 군으로부터 선택되고,
상기 세제 성분은 임의로 킬레이트화제를 포함하고; 상기 킬레이트화제는 임의로 EDTA 또는 시트레이트인 세제 조성물.
41. 단락 1 내지 40 중 어느 하나에 있어서, 크산탄 리아제 변이체가 (i) 서열식별번호: 6의 아미노산 154 내지 176에 상응하는 영역 1, (ii) 서열식별번호: 6의 아미노산 614 내지 658에 상응하는 영역 2, (iii) 서열식별번호: 6의 아미노산 731 내지 803에 상응하는 영역 3, (iv) 서열식별번호: 6의 아미노산 807 내지 846에 상응하는 영역 4, (v) 서열식별번호: 6의 아미노산 872 내지 885에 상응하는 영역 5, (vi) 서열식별번호: 6의 아미노산 903 내지 1004에 상응하는 영역 6으로 이루어진 군으로부터 선택된 2개 이상 영역의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 포함하고, 여기서 상기 변이체는 서열식별번호: 6에 대해 적어도 60%, 예를 들어 적어도 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99%, 및 100% 미만의 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 상기 변이체는 크산탄 검에 대해 활성을 갖고, 추가로 바람직하게는 상기 활성은 크산탄 검 분해 활성인 세제 조성물.
42. 단락 1 내지 41 중 어느 하나에 있어서, 상기 크산탄 리아제 변이체가 서열식별번호: 6에 대해 적어도 61%, 62%, 63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 또는 99% 서열 동일성을 갖는 것인 세제 조성물.
43. 단락 1 내지 42 중 어느 하나에 있어서, 1개 이상의 위치에서의 크산탄 리아제의 상기 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)이 서열식별번호: 6의 위치: 155, 159, 620, 624, 626, 631, 635, 645, 649, 650, 656, 738, 745, 746, 748, 752, 753, 754, 757, 764, 769, 774, 775, 777, 779, 782, 785, 786, 789, 792, 796, 799, 800, 801, 819, 824, 843, 845, 875, 903, 911, 912, 915, 919, 921, 923, 925, 927, 928, 930, 932, 933, 941, 966, 967, 991 및 998에서의 변경으로 이루어진 군으로부터 선택되고, 여기서 넘버링은 서열식별번호: 6에 따르고, 바람직하게는 위치: 775, 779 또는 923에서의 변경으로 이루어진 군으로부터 선택되고, 여기서 넘버링은 서열식별번호: 6에 따른 것인 세제 조성물.
44. 단락 1 내지 43 중 어느 하나에 있어서, 1개 이상의 위치에서의 크산탄 리아제의 상기 변경이 Y155E, A159P, K620R, A624E, A626G, T631N, T631E, S635E, S635T, S635Q, A645S, T649V, T649K, T649R, Q650G, I656V, G738L, K745R, F746L, L748T, P752R, P752K, G753E, G753Q, G753S, S754E, S754L, S754Q, S754R, S757D, S757P, S757E, P764V, P764K, A769D, A769T, A769R, A769S, A769E, A769Q, A769*, A774V, L775M, L775Y, L775A, L775I, L775S, L775F, L775Q, D777K, D777R, P779V, Y782I, A785T, N786K, G789R, K792W, K792Y, K792V, K792A, N796Q, A799H, V800P, D801G, K819R, K819T, K824R, A843P, D845E, K875T, K875E, T903A, T903Q, A911V, A911M, A911S, A912T, A912I, A912Y, T915Q, T915S, T915V, T915A, T919F, T919G, T919D, T921R, T921S, T923H, T923D, T925Q, T925D, T925R, T927K, D928W, Y930H, Y930L, Y930F, A932P, D933M, G941E, G941D, A966P, A967D, N991D 및 V998K로 이루어진 군으로부터 선택되고, 여기서 넘버링은 서열식별번호: 6에 따른 것인 세제 조성물.
45. 단락 1 내지 44 중 어느 하나에 있어서, (vii) 서열식별번호: 6의 아미노산 1 내지 153에 상응하는 영역 7, (viii) 서열식별번호: 6의 아미노산 177 내지 613에 상응하는 영역 8, (ix) 서열식별번호: 6의 아미노산 659 내지 730에 상응하는 영역 9, (x) 서열식별번호: 6의 아미노산 804 내지 806에 상응하는 영역 10, (xi) 서열식별번호: 6의 아미노산 847 내지 871에 상응하는 영역 11, (xii) 서열식별번호: 6의 아미노산 886 내지 902에 상응하는 영역 12, 및 (xiii) 서열식별번호: 6의 아미노산 1005 내지 1037에 상응하는 영역 13으로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 1개의 영역의 1개 이상의 위치에서 크산탄 리아제의 변경을 포함하는 세제 조성물.
46. 단락 45에 있어서, 영역 7, 8, 9, 10, 11, 12 및 13으로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 1개의 영역의 1개 이상의 위치에서의 크산탄 리아제의 상기 변경이 서열식별번호: 6의 9, 15, 18, 46, 58, 66, 89, 95, 100, 106, 109, 183, 188, 190, 203, 204, 221, 229, 234, 238, 240, 242, 243, 257, 258, 284, 291, 293, 316, 317, 320, 324, 329, 333, 339, 341, 352, 354, 360, 372, 377, 399, 400, 419, 440, 450, 451, 454, 458, 481, 492, 505, 533, 567, 568, 576, 578, 579, 582, 664, 672, 703, 722, 726, 727, 728, 851, 855, 856, 867, 887, 892, 899, 900, 901, 902, 915, 1008 및 1016으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 변경인 세제 조성물.
47. 단락 46에 있어서, 영역 7, 8, 9, 10, 11, 12 및 13으로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 1개의 영역의 1개 이상의 위치에서의 크산탄 리아제의 상기 변경이 서열식별번호: 6의 K9R, N15T, T18D, L46D, A58L, S66H, Q89Y, K95E, S100D, N106Y, Q109R, Q109D, Q109F, Q109K, Q109A, K183Q, K183R, V188I, A190Q, A203P, K204R, A221P, E229N, E229S, E229V, I234V, I238W, I238L, I238M, I240W, N242S, G243V, Y257W, R258E, R284G, K291R, A293G, A293P, K316R, R317K, K320R, L324Q, K329R, K333R, L339M, I341P, V352I, S354P, K360G, K360R, Q372H, F377Y, N399K, K400R, F419Y, N440K, D450P, K451E, K451R, A454V, D458S, K481R, A492H, A492L, T505I, L533I, K567R, G568A, S578K, S578N, S578R, S579R, S579K, S582K, T664K, N672D, I703L, I722F, P726Q, T727P, M728V, S851F, K855R, E856D, P867S, K887R, N892Y, N892W, N892F, G899S, I900G, D901A, T902F, N1008D 및 K1016T로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 치환을 포함하는 것인 세제 조성물.
48. 단락 1 내지 47 중 어느 하나에 있어서, 크산탄 리아제 변이체가 서열식별번호: 6의 위치 624, 631, 635, 649, 656, 738, 752, 753, 754, 757, 769, 775, 777, 800, 801, 843, 875, 911 및 915로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 변경 및 위치 89, 100, 190, 229, 234, 352, 360, 399, 440, 458, 492, 567, 582, 664, 672, 703, 728, 892, 1008 및 1016으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 변경을 포함하는 것인 세제 조성물.
49. 단락 48에 있어서, 크산탄 리아제 변이체가 Q89Y, S100D, A190Q, E229S, I234V, V352I, K360G, N399K, N440K, D458S, A492H, A492L, K567R, S582K, T664K, N672D, I703L, M728V, N892Y N1008D 및 K1016T로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 치환 및 A624E, T631N, S635E, T649K, I656V, G738L, P752K, P752R, G753E, S754E, S754R, S757D, A769D, L775A, D777R, V800P, D801G, A843P, K875T, A911V 및 T915A로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 치환을 포함하는 것인 세제 조성물.
50. 단락 1 내지 49 중 어느 하나에 있어서, 1개 이상의 위치에서의 크산탄 리아제의 상기 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)이 서열식별번호: 6의 위치: 9, 15, 46, 58, 66, 89, 95, 100, 106, 109, 183, 188, 190, 203, 204, 221, 229, 234, 238, 240, 242, 243, 257, 258, 291, 293, 316, 320, 324, 329, 333, 339, 341, 352, 354, 360, 377, 400, 419, 450, 451, 454, 481, 492, 567, 568, 578, 579, 664, 672, 855, 887 및 892에서의 변경으로 이루어진 군으로부터 선택되고, 여기서 넘버링은 서열식별번호: 6에 따른 것인 세제 조성물.
51. 단락 1 내지 50 중 어느 하나에 있어서, 크산탄 리아제 변이체가 K9R, N15T, L46D, A58L, S66H, Q89Y, K95E, S100D, N106Y, Q109R, Q109D, Q109F, Q109K, Q109A, K183Q,K183R, V188I, A190Q, A203P, K204R, A221P, E229N, E229S, I234V, I238W, I238L, I238M, I240W, N242S, G243V, Y257W, R258E, K291R, A293G, A293P, K316R, K320R, L324Q, K329R, K333R, L339M, I341P, V352I, S354P, K360R, F377Y, K400R, F419Y, D450P, K451E, K451R, A454V, K481R, A492L, K567R, G568A, S578K, S578R, S579R, S579K, T664K, N672D, K855R, K887R, N892Y, N892W 및 N892F로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 치환을 갖고, 여기서 넘버링은 서열식별번호: 6에 따른 것인 세제 조성물.
52. 단락 1 내지 51 중 어느 하나에 있어서, 상기 크산탄 리아제 변이체가 영역 7, 8, 9, 10, 11, 12 및 13 외부의 위치에서는 어떠한 아미노산 변경도 포함하지 않는 것인 세제 조성물.
53. 단락 1 내지 52 중 어느 하나에 있어서, 모 크산탄 리아제 (예를 들어, 서열식별번호: 6)와 비교하여 크산탄 리아제의 변경의 총수가 1 내지 20개, 예를 들어 1 내지 18개 또는 5 내지 17개 또는 8 내지 16개, 예컨대 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 또는 18개의 변경인 세제 조성물.
54. 단락 1 내지 53 중 어느 하나에 있어서, 크산탄 검에 대한 상기 활성이 크산탄 검 분해 활성이고, 바람직하게는 상기 크산탄 리아제 변이체가 EC 4.2.2.12 활성을 갖는 것인 세제 조성물.
55. 단락 1 내지 54 중 어느 하나에 있어서, 상기 크산탄 리아제 변이체가 (예를 들어, 서열식별번호: 6을 갖는) 모 크산탄 리아제와 비교하여 세제 조성물에서 개선된 안정성을 갖고; 임의로 상기 세제 조성물은 킬레이트화제를 포함하고; 임의로 상기 킬레이트화제는 EDTA 또는 시트레이트인 세제 조성물.
56. 단락 1 내지 55 중 어느 하나에 있어서, 상기 크산탄 리아제 변이체가 모 크산탄 리아제, 예를 들어 서열식별번호: 6을 갖는 크산탄 리아제 대비 ≥1.0의 반감기 개선 지수 (HIF)를 갖고; 바람직하게는 상기 변이체가 >1.0, 보다 바람직하게는 적어도 1.2, 예컨대 적어도 1.5, 예를 들어 적어도 2.0의 반감기 개선 지수 (HIF)를 갖는 것인 세제 조성물.
57. 단락 56에 있어서, 상기 반감기 개선 지수 (HIF)가 세제 조성물 중 25℃에서의 약 30분 내지 약 20시간의 기간 동안의 상기 크산탄 리아제 변이체의 인큐베이션 후에 결정된 것인 세제 조성물.
58. 단락 1 내지 57 중 어느 하나에 있어서, 상기 변이체가 i) 본원의 표 17-33에 제시된 크산탄 리아제 변이체 및/또는 xii) 본원의 표 2-16 중 어느 하나에 제시된 엔도글루카나제 변이체로 이루어진 군으로부터 선택된 것인 세제 조성물.
59. 단락 1 내지 58 중 어느 하나에 있어서, 엔도글루카나제 변이체가 (i) 영역 6 및 17; (ii) 영역 6, 15 및 17; (iii) 영역 10, 12 및 15; (iv) 영역 6, 7, 16, 및 17; (v) 영역 6, 9, 10, 12, 15, 및 17; (vi) 영역 14 및 15; (vii) 영역 9; (viii) 6, 7, 9, 14, 15, 16, 및 17; 또는 (ix) 3, 6, 7, 9, 14, 15, 16, 및 17의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖고; 여기서 상기 변이체는 바람직하게는 언급된 것 외의 다른 영역에서 어떠한 변경도 갖지 않는 것인 세제 조성물.
60. 단락 1 내지 59 중 어느 하나에 있어서, 엔도글루카나제 변이체가 서열식별번호: 2의 위치: 559+579+697; 512+559+579+697; 18+71+186+408+579+602+651+688+756; 18+189+408+559+579+688+697+756+921+934; 313+488; 880+905+921+934; 302+313+408+579+602+651+697+880+921+934; 또는 216+313+408+476+579+602+638+651+697+719+880+887+921+934로 이루어진 군으로부터 선택된 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 것인 세제 조성물.
61. 단락 60에 있어서, 엔도글루카나제 변이체가 서열식별번호: 2의 하기 변경: A559N+Y579W+T697G; K512P+A559N+Y579W+T697G; N18G+A71E+A186P+E408D+Y579W+I602T+A651P+A688G+V756Y; N18G+N189K+E408D+A559N+Y579W+A688G+T697G+V756Y+K921R+Y934G; S313D+E408D; R880K+N905D+K921R+Y934G; I302D+S313D+E408D+Y579W+I602T+A651P+T697G+R880K+K921R+Y934G; 및 N216Q+S313D+E408D+D476R+Y579W+I602T+F638N+A651P+T697G+W719R+R880K+T887K+K921R+Y934G로 이루어진 군으로부터 선택된 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 것인 세제 조성물.
62. 단락 1 내지 61 중 어느 하나에 있어서, 크산탄 리아제 변이체가 (i) 영역 3 및 5; (ii) 영역 3, 5 및 12; (iii) 영역 8, 및 9; (iv) 영역 2, 3, 및 5; (v) 영역 2, 3, 5, 및 12; (vi) 영역 3, 5, 8, 9, 및 12; (vii) 영역 2, 3, 5, 8, 및 9; (viii) 3, 5, 8, 9, 및 12; (ix) 2, 3, 5, 8, 9, 및 12; (x) 영역 3; (xi) 영역 3, 4 및 5; (xii) 영역 7, 8 및 9; (xiii) 영역 12 및 13; (xiv) 영역 3, 4, 5, 8, 9, 및 12; (xv) 영역 8, 9, 12, 및 13; (xvi) 영역 7, 8, 9, 12, 및 13; (xvii) 영역 3, 4, 5, 7, 8, 9, 및 12; 및 (xviii) 영역 3, 4, 5, 7, 8, 9, 12, 및 13의 1개 이상의 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 포함하고, 여기서 상기 변이체는 바람직하게는 언급된 것 외의 다른 영역에서 어떠한 변경도 갖지 않는 것인 세제 조성물.
63. 단락 1 내지 62 중 어느 하나에 있어서, 크산탄 리아제 변이체가 서열식별번호: 6의 위치: 190, 229, 234, 440, 582, 624, 631, 635, 672, 703, 738, 752, 753, 754, 757, 769, 775, 801, 875, 892, 및 그의 임의의 조합, 바람직하게는 229+672+752+753+769+775+801+875+892; 229+672+753+754+769+775+801+875+892; 229+672+752+753+754+769+775+801+875+892; 190+229+234+624+672+753+754+769+775+801+875; 190+229+631+672+703+752+753+769+775+801+875; 190+229+234+582+672+753+754+757+769+775+801+875+892; 229+440+582+624+635+672+738+753+754+757+769+775+801+875+892; 또는 100+229+360+458+582+672+753+754+757+769+775+801+843+875+892+1008로 이루어진 군으로부터 선택된 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 것인 세제 조성물.
64. 단락 1 내지 63 중 어느 하나에 있어서, 크산탄 리아제 변이체가 서열식별번호: 6의 하기 변경: E229N+N672D+P752K+G753E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; E229S+N672D+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; E229S+N672D+P752R+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; A190Q+E229S+I234V+A624E+N672D+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T; A190Q+E229S+T631N+N672D+I703L+P752K+G753E+A769D+L775A+D801G+K875T; A190Q+E229S+I234V+S582K+N672D+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; E229S+N440K+S582K+A624E+S635E+N672D+G738L+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; 또는 S100D+E229S+K360G+D458S+S582K+N672D+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+A843P+K875T+N892Y+N1008D로 이루어진 군으로부터 선택된 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖는 것인 세제 조성물.
65. 단락 1 내지 64 중 어느 하나에 있어서, 서열식별번호: 2에 대해 적어도 61%, 62%, 63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 또는 98% 서열 동일성을 갖고, 서열식별번호: 2의 위치: 559+579+697; 512+559+579+697; 18+71+186+408+579+602+651+688+756; 18+189+408+559+579+688+697+756+921+934; 313+488; 880+905+921+934; 302+313+408+579+602+651+697+880+921+934; 또는 216+313+408+476+579+602+638+651+697+719+880+887+921+934로 이루어진 군으로부터 선택된 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖고, 바람직하게는 서열식별번호: 2의 하기 변경: A559N+Y579W+T697G; K512P+A559N+Y579W+T697G; N18G+A71E+A186P+E408D+Y579W+I602T+A651P+A688G+V756Y; N18G+N189K+E408D+A559N+Y579W+A688G+T697G+V756Y+K921R+Y934G; S313D+E408D; R880K+N905D+K921R+Y934G; I302D+S313D+E408D+Y579W+I602T+A651P+T697G+R880K+K921R+Y934G; 및 N216Q+S313D+E408D+D476R+Y579W+I602T+F638N+A651P+T697G+W719R+R880K+T887K+K921R+Y934G로 이루어진 군으로부터 선택된 변경을 갖는 엔도글루카나제 변이체, 바람직하게는 상기 언급된 변경 외에 서열식별번호: 2의 모 효소 대비 어떠한 추가의 변경도 갖지 않는 엔도글루카나제 변이체를 포함하는 세제 조성물.
66. 단락 1 내지 65 중 어느 하나에 있어서, 서열식별번호: 6에 대해 적어도 61%, 62%, 63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 또는 98% 서열 동일성을 갖고, 서열식별번호: 6의 위치: 229+672+752+753+769+775+801+875+892; 229+672+753+754+769+775+801+875+892; 229+672+752+753+754+769+775+801+875+892; 190+229+234+624+672+753+754+769+775+801+875; 190+229+631+672+703+752+753+769+775+801+875; 190+229+234+582+672+753+754+757+769+775+801+875+892; 229+440+582+624+635+672+738+753+754+757+769+775+801+875+892; 또는 100+229+360+458+582+672+753+754+757+769+775+801+843+875+892+1008로 이루어진 군으로부터 선택된 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖고, 바람직하게는 서열식별번호: 6의 하기 변경: E229N+N672D+P752K+G753E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; E229S+N672D+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; E229S+N672D+P752R+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; A190Q+E229S+I234V+A624E+N672D+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T; A190Q+E229S+T631N+N672D+I703L+P752K+G753E+A769D+L775A+D801G+K875T; A190Q+E229S+I234V+S582K+N672D+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; E229S+N440K+S582K+A624E+S635E+N672D+G738L+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; 또는 S100D+E229S+K360G+D458S+S582K+N672D+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+A843P+K875T+N892Y+N1008D로 이루어진 군으로부터 선택된 변경을 갖는 크산탄 리아제 변이체, 바람직하게는 상기 언급된 변경 외에 서열식별번호: 6의 모 효소 대비 어떠한 추가의 변경도 갖지 않는 크산탄 리아제 변이체를 포함하는 세제 조성물.
67. 단락 1 내지 66 중 어느 하나에 있어서,
(A) 서열식별번호: 2에 대해 적어도 61%, 62%, 63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 또는 98% 서열 동일성을 갖고, 서열식별번호: 2의 위치: 559+579+697; 512+559+579+697; 18+71+186+408+579+602+651+688+756; 18+189+408+559+579+688+697+756+921+934; 313+488; 880+905+921+934; 302+313+408+579+602+651+697+880+921+934; 또는 216+313+408+476+579+602+638+651+697+719+880+887+921+934로 이루어진 군으로부터 선택된 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖고, 바람직하게는 서열식별번호: 2의 하기 변경: (A1) A559N+Y579W+T697G; (A2) K512P+A559N+Y579W+T697G; (A3) N18G+A71E+A186P+E408D+Y579W+I602T+A651P+A688G+V756Y; (A4) N18G+N189K+E408D+A559N+Y579W+A688G+T697G+V756Y+K921R+Y934G; (A5) S313D+E408D; (A6) R880K+N905D+K921R+Y934G; (A7) I302D+S313D+E408D+Y579W+I602T+A651P+T697G+R880K+K921R+Y934G; 및 (A8) N216Q+S313D+E408D+D476R+Y579W+I602T+F638N+A651P+T697G+W719R+R880K+T887K+K921R+Y934G로 이루어진 군으로부터 선택된 변경을 갖는 것으로부터 선택된 엔도글루카나제 변이체; 및
(B) 서열식별번호: 6에 대해 적어도 61%, 62%, 63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 또는 98% 서열 동일성을 갖고, 서열식별번호: 6의 위치: 229+672+752+753+769+775+801+875+892; 229+672+753+754+769+775+801+875+892; 229+672+752+753+754+769+775+801+875+892; 190+229+234+624+672+753+754+769+775+801+875; 190+229+631+672+703+752+753+769+775+801+875; 190+229+234+582+672+753+754+757+769+775+801+875+892; 229+440+582+624+635+672+738+753+754+757+769+775+801+875+892; 또는 100+229+360+458+582+672+753+754+757+769+775+801+843+875+892+1008로 이루어진 군으로부터 선택된 위치에서 변경 (예를 들어 치환, 결실 또는 삽입, 바람직하게는 치환)을 갖고, 바람직하게는 서열식별번호: 6의 하기 변경: (B1) E229N+N672D+P752K+G753E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; (B2) E229S+N672D+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; (B3) E229S+N672D+P752R+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; (B4) A190Q+E229S+I234V+A624E+N672D+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T; (B5) A190Q+E229S+T631N+N672D+I703L+P752K+G753E+A769D+L775A+D801G+K875T; (B6) A190Q+E229S+I234V+S582K+N672D+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; (B7) E229S+N440K+S582K+A624E+S635E+N672D+G738L+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; 및 (B8) S100D+E229S+K360G+D458S+S582K+N672D+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+A843P+K875T+N892Y+N1008D로 이루어진 군으로부터 선택된 변경을 갖는 크산탄 리아제 변이체
를 포함하는 세제 조성물.
68. 단락 67에 있어서, 엔도글루카나제 및/또는 크산탄 리아제 변이체가, 바람직하게는 둘 다, 단락 67에 열거된 것 외에 어떠한 추가의 치환도 포함하지 않는 것인 세제 조성물.
69. 단락 1 내지 68 중 어느 하나에 있어서, 엔도글루카나제 변이체 A1, 및 크산탄 리아제 변이체 B1, B2, B3, B4, B5, B6, B7 및 B8 중 어느 하나를 포함하며, 여기서 각각의 효소는 바람직하게는 서열식별번호: 2 및 서열식별번호: 6에 대해 각각 적어도 90%, 바람직하게는 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96% 또는 97% 서열 동일성을 갖고, 보다 바람직하게는 명백하게 열거된 치환을 제외하고는 그의 각각의 모 서열과 동일한 것인 세제 조성물.
70. 단락 1 내지 68 중 어느 하나에 있어서, 엔도글루카나제 변이체 A2, 및 크산탄 리아제 변이체 B1, B2, B3, B4, B5, B6, B7 및 B8 중 어느 하나를 포함하며, 여기서 각각의 효소는 바람직하게는 서열식별번호: 2 및 서열식별번호: 6에 대해 각각 적어도 90%, 바람직하게는 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96% 또는 97% 서열 동일성을 갖고, 보다 바람직하게는 명백하게 열거된 치환을 제외하고는 그의 각각의 모 서열과 동일한 것인 세제 조성물.
71. 단락 1 내지 68 중 어느 하나에 있어서, 엔도글루카나제 변이체 A3, 및 크산탄 리아제 변이체 B1, B2, B3, B4, B5, B6, B7 및 B8 중 어느 하나를 포함하며, 여기서 각각의 효소는 바람직하게는 서열식별번호: 2 및 서열식별번호: 6에 대해 각각 적어도 90%, 바람직하게는 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96% 또는 97% 서열 동일성을 갖고, 보다 바람직하게는 명백하게 열거된 치환을 제외하고는 그의 각각의 모 서열과 동일한 것인 세제 조성물.
72. 단락 1 내지 68 중 어느 하나에 있어서, 엔도글루카나제 변이체 A4, 및 크산탄 리아제 변이체 B1, B2, B3, B4, B5, B6, B7 및 B8 중 어느 하나를 포함하며, 여기서 각각의 효소는 바람직하게는 서열식별번호: 2 및 서열식별번호: 6에 대해 각각 적어도 90%, 바람직하게는 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96% 또는 97% 서열 동일성을 갖고, 보다 바람직하게는 명백하게 열거된 치환을 제외하고는 그의 각각의 모 서열과 동일한 것인 세제 조성물.
73. 단락 1 내지 68 중 어느 하나에 있어서, 엔도글루카나제 변이체 A5, 및 크산탄 리아제 변이체 B1, B2, B3, B4, B5, B6, B7 및 B8 중 어느 하나를 포함하며, 여기서 각각의 효소는 바람직하게는 서열식별번호: 2 및 서열식별번호: 6에 대해 각각 적어도 90%, 바람직하게는 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96% 또는 97% 서열 동일성을 갖고, 보다 바람직하게는 명백하게 열거된 치환을 제외하고는 그의 각각의 모 서열과 동일한 것인 세제 조성물.
74. 단락 1 내지 68 중 어느 하나에 있어서, 엔도글루카나제 변이체 A6, 및 크산탄 리아제 변이체 B1, B2, B3, B4, B5, B6, B7 및 B8 중 어느 하나를 포함하며, 여기서 각각의 효소는 바람직하게는 서열식별번호: 2 및 서열식별번호: 6에 대해 각각 적어도 90%, 바람직하게는 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96% 또는 97% 서열 동일성을 갖고, 보다 바람직하게는 명백하게 열거된 치환을 제외하고는 그의 각각의 모 서열과 동일한 것인 세제 조성물.
75. 단락 1 내지 68 중 어느 하나에 있어서, 엔도글루카나제 변이체 A7, 및 크산탄 리아제 변이체 B1, B2, B3, B4, B5, B6, B7 및 B8 중 어느 하나를 포함하며, 여기서 각각의 효소는 바람직하게는 서열식별번호: 2 및 서열식별번호: 6에 대해 각각 적어도 90%, 바람직하게는 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96% 또는 97% 서열 동일성을 갖고, 보다 바람직하게는 명백하게 열거된 치환을 제외하고는 그의 각각의 모 서열과 동일한 것인 세제 조성물.
76. 단락 1 내지 68 중 어느 하나에 있어서, 엔도글루카나제 변이체 A8, 및 크산탄 리아제 변이체 B1, B2, B3, B4, B5, B6, B7 및 B8 중 어느 하나를 포함하며, 여기서 각각의 효소는 바람직하게는 서열식별번호: 2 및 서열식별번호: 6에 대해 각각 적어도 90%, 바람직하게는 적어도 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96% 또는 97% 서열 동일성을 갖고, 보다 바람직하게는 명백하게 열거된 치환을 제외하고는 그의 각각의 모 서열과 동일한 것인 세제 조성물.
77. 단락 67 또는 68에 있어서, (1) 엔도글루카나제 변이체 A1 및 크산탄 리아제 변이체 B1; (2) 엔도글루카나제 변이체 A1 및 크산탄 리아제 변이체 B2; (3) 엔도글루카나제 변이체 A1 및 크산탄 리아제 변이체 B3; (4) 엔도글루카나제 변이체 A1 및 크산탄 리아제 변이체 B4; (5) 엔도글루카나제 변이체 A1 및 크산탄 리아제 변이체 B5; (6) 엔도글루카나제 변이체 A1 및 크산탄 리아제 변이체 B6; (7) 엔도글루카나제 변이체 A1 및 크산탄 리아제 변이체 B7; (8) 엔도글루카나제 변이체 A1 및 크산탄 리아제 변이체 B8; (9) 엔도글루카나제 변이체 A2 및 크산탄 리아제 변이체 B1; (10) 엔도글루카나제 변이체 A2 및 크산탄 리아제 변이체 B2; (11) 엔도글루카나제 변이체 A2 및 크산탄 리아제 변이체 B3; (12) 엔도글루카나제 변이체 A2 및 크산탄 리아제 변이체 B4; (13) 엔도글루카나제 변이체 A2 및 크산탄 리아제 변이체 B5; (14) 엔도글루카나제 변이체 A2 및 크산탄 리아제 변이체 B6; (15) 엔도글루카나제 변이체 A2 및 크산탄 리아제 변이체 B7; (16) 엔도글루카나제 변이체 A2 및 크산탄 리아제 변이체 B8; (17) 엔도글루카나제 변이체 A3 및 크산탄 리아제 변이체 B1; (18) 엔도글루카나제 변이체 A3 및 크산탄 리아제 변이체 B2; (19) 엔도글루카나제 변이체 A3 및 크산탄 리아제 변이체 B3; (20) 엔도글루카나제 변이체 A3 및 크산탄 리아제 변이체 B4; (21) 엔도글루카나제 변이체 A3 및 크산탄 리아제 변이체 B5; (22) 엔도글루카나제 변이체 A3 및 크산탄 리아제 변이체 B6; (23) 엔도글루카나제 변이체 A3 및 크산탄 리아제 변이체 B7; (24) 엔도글루카나제 변이체 A3 및 크산탄 리아제 변이체 B8; (25) 엔도글루카나제 변이체 A4 및 크산탄 리아제 변이체 B1; (26) 엔도글루카나제 변이체 A4 및 크산탄 리아제 변이체 B2; (27) 엔도글루카나제 변이체 A4 및 크산탄 리아제 변이체 B3; (28) 엔도글루카나제 변이체 A4 및 크산탄 리아제 변이체 B4; (29) 엔도글루카나제 변이체 A4 및 크산탄 리아제 변이체 B5; (30) 엔도글루카나제 변이체 A4 및 크산탄 리아제 변이체 B6; (31) 엔도글루카나제 변이체 A4 및 크산탄 리아제 변이체 B7; (32) 엔도글루카나제 변이체 A4 및 크산탄 리아제 변이체 B8; (33) 엔도글루카나제 변이체 A5 및 크산탄 리아제 변이체 B1; (34) 엔도글루카나제 변이체 A5 및 크산탄 리아제 변이체 B2; (35) 엔도글루카나제 변이체 A5 및 크산탄 리아제 변이체 B3; (36) 엔도글루카나제 변이체 A5 및 크산탄 리아제 변이체 B4; (37) 엔도글루카나제 변이체 A5 및 크산탄 리아제 변이체 B5; (38) 엔도글루카나제 변이체 A5 및 크산탄 리아제 변이체 B6; (39) 엔도글루카나제 변이체 A5 및 크산탄 리아제 변이체 B7; (40) 엔도글루카나제 변이체 A5 및 크산탄 리아제 변이체 B8; (41) 엔도글루카나제 변이체 A6 및 크산탄 리아제 변이체 B1; (42) 엔도글루카나제 변이체 A6 및 크산탄 리아제 변이체 B2; (43) 엔도글루카나제 변이체 A6 및 크산탄 리아제 변이체 B3; (44) 엔도글루카나제 변이체 A6 및 크산탄 리아제 변이체 B4; (45) 엔도글루카나제 변이체 A6 및 크산탄 리아제 변이체 B5; (46) 엔도글루카나제 변이체 A6 및 크산탄 리아제 변이체 B6; (47) 엔도글루카나제 변이체 A6 및 크산탄 리아제 변이체 B7; (48) 엔도글루카나제 변이체 A6 및 크산탄 리아제 변이체 B8; (49) 엔도글루카나제 변이체 A7 및 크산탄 리아제 변이체 B1; (50) 엔도글루카나제 변이체 A7 및 크산탄 리아제 변이체 B2; (51) 엔도글루카나제 변이체 A7 및 크산탄 리아제 변이체 B3; (52) 엔도글루카나제 변이체 A7 및 크산탄 리아제 변이체 B4; (53) 엔도글루카나제 변이체 A7 및 크산탄 리아제 변이체 B5; (54) 엔도글루카나제 변이체 A7 및 크산탄 리아제 변이체 B6; (55) 엔도글루카나제 변이체 A7 및 크산탄 리아제 변이체 B7; (56) 엔도글루카나제 변이체 A7 및 크산탄 리아제 변이체 B8; (57) 엔도글루카나제 변이체 A8 및 크산탄 리아제 변이체 B1; (58) 엔도글루카나제 변이체 A8 및 크산탄 리아제 변이체 B2; (59) 엔도글루카나제 변이체 A8 및 크산탄 리아제 변이체 B3; (60) 엔도글루카나제 변이체 A8 및 크산탄 리아제 변이체 B4; (61) 엔도글루카나제 변이체 A8 및 크산탄 리아제 변이체 B5; (62) 엔도글루카나제 변이체 A8 및 크산탄 리아제 변이체 B6; (63) 엔도글루카나제 변이체 A8 및 크산탄 리아제 변이체 B7; (64) 엔도글루카나제 변이체 A8 및 크산탄 리아제 변이체 B8; 또는 (65) 표 34-36에 개시된 엔도글루카나제 변이체 및 크산탄 리아제 변이체 조합을 포함하는 세제 조성물.
78. 단락 1 내지 77 중 어느 하나에 있어서, 1종 이상의 세제 성분을 추가로 포함하는 세제 조성물.
79. 단락 1 내지 78 중 어느 하나에 있어서, 엔도글루카나제, 프로테아제, 아밀라제, 리케나제, 리파제, 큐티나제, 셀룰라제, 크산탄 리아제, 크실로글루카나제, 펙티나제, 펙틴 리아제, 크산타나제, 퍼옥시다제, 할로퍼옥시게나제, 카탈라제 및 만난아제, 또는 그의 임의의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 추가의 효소를 추가로 포함하는 세제 조성물.
80. 단락 1 내지 79 중 어느 하나에 있어서, 바, 균질 정제, 2개 이상의 층을 갖는 정제, 1개 이상의 구획을 갖는 파우치, 레귤러 또는 콤팩트 분말, 과립, 페이스트, 겔, 또는 레귤러, 콤팩트 또는 농축 액체의 형태인 세제 조성물.
81. 크산탄 검을 분해하기 위한, 단락 1 내지 80 중 어느 하나의 세제 조성물의 용도.
82. 단락 81에 있어서, 상기 엔도글루카나제 변이체 및/또는 크산탄 리아제 변이체가 효소 세제력 이익을 갖는 것인 용도.
83. 단락 1 내지 80 중 어느 하나의 세제 조성물을 크산탄 검에 적용하는 것을 포함하는, 크산탄 검을 분해하는 방법.
84. 단락 83에 있어서, 상기 크산탄 검이 표면 또는 경질 표면 상에 존재하는 것인 방법.
본 발명은 하기 실시예에 의해 추가로 기재되며, 이는 본 발명의 범주를 제한하는 것으로 해석되어서는 안된다.
실시예
실시예 1: 서열식별번호: 2를 갖는 성숙 모 엔도글루카나제의 GH9 엔도글루카나제 변이체의 구축
서열식별번호: 2의 GH9 엔도글루카나제의 성숙 모 폴리펩티드를 코딩하는 서열식별번호: 1을 갖는 성숙 모 뉴클레오티드 서열 (또한 동일한 것이 WO2013/167581의 서열식별번호: 1 내의 성숙 펩티드로서 개시됨), 및 그의 변이체의 클로닝을 위해 선형 통합 벡터-시스템을 사용하였다. 선형 통합 구축물은 2종의 바실루스 서브틸리스 상동 염색체 영역 사이의 유전자를 강력한 프로모터 및 클로람페니콜 저항성 마커와 함께 융합시킴으로써 제조된 PCR 융합체였다. 융합체는 중첩 연장에 의한 스플라이싱 (SOE) PCR (Horton et al. (1989)에 의해 제조하였다. 제한 효소의 사용의 부재 하에서의 조작 혼성화 유전자, 또는 유전자 스플라이싱이 중첩 연장에 의해 생산되었다 (Gene 77: 61-68). SOE PCR 방법은 또한 특허 출원 WO2003/095658에 기재되어 있다. 바실루스 리케니포르미스 알파-아밀라제 유전자 (amyL), 바실루스 아밀로리퀘파시엔스 알파-아밀라제 유전자 (amyQ)로부터의 프로모터, 및 안정화 서열을 포함하는 바실루스 투린기엔시스 crylllA 프로모터로 이루어진 삼중 프로모터 시스템 (WO99/43835에 기재된 바와 같음)의 제어 하에서 유전자를 발현시켰다. 클로람페니콜 아세틸트랜스퍼라제를 코딩하는 유전자를 마커로서 사용하였다 (예를 들어 문헌 [Diderichsen et al. (1993) A useful cloning vector for Bacillus subtilis. Plasmid 30:312]에 기재됨). 최종 유전자 구축물을 상동 재조합에 의해 바실루스 염색체 상의 펙테이트 리아제 유전자좌 내로 통합시켰다. 2개의 플랭킹 벡터 단편에 대한 오버행을 함유하는 유전자 특이적 프라이머를 사용하여 상응하는 균주의 염색체 DNA로부터 유전자 단편을 증폭시켰다. 모든 유전자가 천연 분비 신호를 대체한 서열식별번호: 3의 뉴클레오티드 서열 및 서열식별번호: 4의 아미노산 서열을 갖는 바실루스 리케니포르미스 알파-아밀라제 분비 신호와 함께 발현되었다.
생성된 서열에 목적하는 돌연변이를 도입하는, 특이적으로 설계된 돌연변이유발 올리고뉴클레오티드를 사용하는 메가프라이머 돌연변이유발 방법에 의해, 하기 실시예 3-4에 기재된 바와 같은 서열식별번호: 2를 갖는 파에니바실루스 종-62047로부터의 성숙 모 GH9 엔도글루카나제의 변이체를 제조하였다. 표적 서열 내로 목적하는 돌연변이를 도입하는 이러한 돌연변이유발 올리고뉴클레오티드의 설계 및 제조 방법은 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 널리 공지되어 있다. 따라서, 치환을 규정하는 DNA 염기 쌍에 의해 분리된, 목적하는 돌연변이 부위(들)에 플랭킹된 DNA 서열에 상응하는 돌연변이유발 올리고를 설계하고 합성하였다. 최종 발현 카세트는 상기 기재된 바와 같은 파에니바실루스 종-62047로부터의 참조 GH9 엔도글루카나제 (즉, 서열식별번호: 1을 갖는 모 GH9 엔도글루카나제)로 구성되었다. 목적하는 치환의 성공적인 도입을 GH9 엔도글루카나제 유전자의 DNA 서열분석에 의해 확인하였다. 후속해서 PCR 생성물의 분취물로 바실루스 서브틸리스를 형질전환시켰다. mL당 10 mM K2PO4, 0.4% 여분 글루코스 및 6 μg 클로람페니콜로 보충된 LB 한천 플레이트 상에서 형질전환체를 선택하였다. 통합된 발현 구축물을 함유하는 생성된 재조합 바실루스 서브틸리스 클론을 하기 기재된 바와 같이 액체 배양물 중에서 성장시켰다. 효소 함유 상청액을 수거하고, 환원당 검정을 사용하여 효소 (변이체)를 스트레스 시험하거나 또는 하기 기재된 바와 같이 정제하였다.
표준 프로토콜 (문헌 [F. William Studier (2005) Protein production by auto-induction in high-density shaking cultures, Protein Expression and Purification, 41: 207-234]에 기재된 바와 같은 표준 미량 금속 믹스를 함유하는 TB-글리세롤 배지)을 사용한 발효에 의해 상기 변이체를 생산하고, 30℃에서 4일 동안 성장시킨 후 수거하였다. 스트레스 시험에 사용된 샘플의 상청액을 37℃에서 성장시킨 밤샘 배양물로부터 접종하고, 후속해서 96-웰 플레이트 포맷으로 발효시켰다 (미량 금속 믹스 중 칼슘 부재 하의 상기 기재된 TB-글리세롤 배지, 4일 동안 30℃).
실시예 2: GH9 엔도글루카나제 변이체의 정제
소르발(Sorval) RC-6 플러스 원심분리기 (써모피셔 사이언티픽(ThermoFisher Scientific))를 사용하여 13'000 rpm (45분, 18℃, F12S-6 x 500 로터)에서 배양 브로쓰를 원심분리하였다. (NH4)2SO4로 상청액을 최종 농도 0.8 M까지 보충하였다. 0.2 μm 병-상부 신속 흐름 필터 (날진(Nalgene))를 사용하여 혼합물을 여과하였다. 0.8 M (NH4)2SO4를 함유하는 20 mM 트리스-HCl, pH 8.0으로 사전-평형화된 50 mL 페닐 세파로스 고성능 (지이 헬스케어(GE Healthcare), 스웨덴 웁살라) 상에 혼합물을 로딩하였다. 유량을 3 mL/분으로 설정하였다. 단백질 로딩 후, 유량을 5 mL/분으로 증가시키고, 비결합되거나 느슨하게 결합된 단백질을 여러 칼럼 부피의 평형 완충제에 의해 세척하였다. 용리는 용리 완충제 (20 mM 트리스-HCl, pH 8.0)의 단계적 증가에 의해 수행하였다. 표적 단백질은 (75-100%) 용리 단계 동안 용리되었다. 정제 동안 8 mL의 분획을 수집하였다. 분획을 SDS-PAGE (누페이지(NuPAGE), 인비트로젠(Invitrogen))를 사용하여 평가하였다. 20 mM 트리스-HCl, pH 8.0에 의해 용리된 분획을 풀링하고, 20 mM 트리스-HCl, pH 8.5에 의해 사전-평형화된 350 mL G25 탈염 칼럼 상에서 탈염시켰다. 탈염된 단백질 용액을 20 mM 트리스-HCl, pH 8.5로 사전-평형화된 20 mL 소스15Q 칼럼 상에 2 mL/분으로 적용하였다. 비결합되거나 느슨하게 결합된 단백질을, 안정한 UV 기준선이 수득될 때까지 적어도 2 칼럼 부피의 평형 완충제를 사용하여 세척하였다. 유량을 4 mL/분으로 상승시키고, 용리 완충제 (20 mM 트리스-HCl, pH 8.5 + 750 mM NaCl)를 사용하여 선형 NaCl 구배에 의해 용리를 수행하였다. 정제 동안 3 mL 분획을 수집하였다. SDS-PAGE를 사용하여 분획을 평가하였다. 순수한 분획을 풀링하고, 필요한 경우에 비바스핀 20(Vivaspin 20) (10 kDa 컷-오프, 사토리우스)을 사용하여 농축시켰다. 280 nm에서의 흡광도 측정을 사용하여 단백질 농도를 결정하였다.
실시예 3: 세제 안정성 검정
GH9 엔도글루카나제 (EG) 활성 (EC 3.2.1.4)을, 문헌 [Lever (1972), Anal. Biochem. 47: 273-279, 1972]에서 개발된 비색 검정을 사용하여 크산탄 리아제로 사전처리된 크산탄 검에 대한 환원 말단에 의해 결정하였다. 사전처리된 크산탄 검은 크산탄 당의 변형된 형태이며, 여기서 측쇄로부터 말단 피루베이트화된 만노스가 제거된다 (소스 켈트란(Keltran)으로부터의 문헌 [Nankai et al. (1999)]에 따라 제조됨). GH9 성숙 모 엔도글루카나제 및 그의 변이체는 사전처리된 크산탄 검의 글루칸 백본 내 베타-(1,4)-글루코실 결합에서 절단되어 환원 말단을 갖는 글루칸을 방출하고, 이는 p-히드록시벤조산 히드라지드 (PAHBAH)와의 반응에 의해 결정될 수 있다. 색상의 증가는 검정에 사용된 조건 하에서 효소 활성에 비례하고 (예를 들어, 표 1), 이를 사용하여 잔류 활성 (RA), 반감기 (T1/2) 및 반감기 개선 지수 (HIF)를 추정하였다.
표 1. 검정의 설명
방법 단계:
30 μL 효소 샘플 (정제된 변이체, 10-150 ppm)을 270 μL 세제와 마이크로타이터 플레이트 (MTP)에서 15분 동안 자기 교반을 사용하여 혼합하였다. 이러한 플레이트를 "스트레스 MTP"로 지정하였다. 혼합물 20 μL를 새로운 MTP로 옮기고, 2-단계 희석을 사용하여 100-배 희석하였다 (2x 10-배 희석). 샘플을 검정 완충제 (AB): 50 mM MOPS, 4 mM CaCl2, 0.01% 트리톤 X-100, pH 7.0 중에 희석하였다. 이러한 희석된 MTP는 "참조 MTP"이고, 이를 4℃에서 5-138시간 (하기 스트레스 MTP의 시간 간격과 동등한 시간 간격) 동안 저장하였다. 스트레스 MTP를 25, 26, 28 또는 30℃에서 5-138시간 동안 인큐베이션하였다. 인큐베이션 후, 스트레스 MTP를 처음에는 자기 교반에 의해 15분 동안 혼합하고, 이어서 스트레스 MTP를 참조 MTP에 대해 기재된 바와 같이 100-배 희석하였다. 효소적 활성을 평가하기 위해, 희석된 효소:세제 샘플 (참조 및 스트레스 MTP 둘 다로부터의 것) 50 μL를 50 μL 4 mg/mL 변형된 크산탄 검과 PCR 플레이트에서 혼합하였다. 이어서 샘플을 50℃에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 마지막으로, PCR 플레이트에서 모든 샘플에 75 μL PAHBAH 용액 (15 mg/mL PAHBAH, 50 g/L 타르타르산나트륨칼륨 4수화물, 20 g/L NaOH)을 첨가하여 환원 말단의 수준을 추정하였다. 이어서 샘플을 95℃에서 10분 동안 인큐베이션하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 405 nm에서 흡광도를 측정하였다. 잔류 활성 (RA)을 하기 식을 사용하여 계산하였다:
RA (%)= (Abs(스트레스))/(Abs(Ref)) x100%
Abs(스트레스): 관련 배경 흡광도 기여의 차감 후 스트레스 MTP (25, 26, 28 또는 30℃에서 인큐베이션됨)에서의 샘플의 405 nm에서의 흡광도.
Abs(Ref): 참조 MTP (4℃에서 인큐베이션됨)에서의 샘플의 405 nm에서의 흡광도.
또한, 각각의 변이체 및 모 엔도글루카나제의 분해에 대한 반감기는 하기 식을 사용하여 계산하였다 (EG의 분해에 대한 1차 반응 속도를 적용함):
T: 인큐베이션 시간. Abs(스트레스) 및 Abs(Ref): 상기 참조.
이어서 반감기 개선 지수 (HIF)를 다음과 같이 계산할 수 있다:
T1/2, 변이체: 특정 변이체에 대한 반감기
T1/2, wt (또는 야생형): EG wt (EG 야생형)에 대한 반감기, 여기서 상기 T1/2 wt는 서열식별번호: 2를 갖는 성숙 모 엔도글루카나제의 T1/2이다.
시험한 변이체의 HIF를 하기 표 2-7에 제시한다: 배양물 상청액에서 측정된 변이체의 모든 반감기 값은 배양물 상청액으로서 측정된 GH9 야생형 (서열식별번호: 2를 갖는 성숙 모 엔도글루카나제)의 반감기에 대비하여 계산하였다. 정제된 단백질로서 측정된 변이체의 모든 반감기 값은 정제된 단백질로서 측정된 GH9 야생형 (서열식별번호: 2를 갖는 성숙 모 엔도글루카나제)의 반감기에 대비하여 계산하였다. 모든 변이체의 HIF는 동일한 세제 농도 및 온도에서 인큐베이션된 야생형 엔도글루카나제 (서열식별번호: 2)에 기초하여 계산하였다 (규정에 따라 모든 표에서 야생형의 HIF = 1).
표 2. 성숙 모 GH9 엔도글루카나제 (서열식별번호: 2)의 변이체와 배양물 상청액으로서 측정된 상응하는 반감기 개선 지수 (HIF)
표 3. 성숙 모 GH9 엔도글루카나제 (서열식별번호: 2)의 변이체와 배양물 상청액으로서 측정된 상응하는 반감기 개선 지수 (HIF)
표 4. 성숙 모 GH9 엔도글루카나제 (서열식별번호: 2)의 변이체와 배양물 상청액으로서 측정된 상응하는 반감기 개선 지수 (HIF)
표 5. 성숙 모 GH9 엔도글루카나제 (서열식별번호: 2)의 변이체와 배양물 상청액으로서 측정된 상응하는 반감기 개선 지수 (HIF)
표 6. 성숙 모 GH9 엔도글루카나제 (서열식별번호: 2)의 변이체와 정제된 샘플로서 측정된 상응하는 반감기 개선 지수 (HIF)
표 7. 성숙 모 GH9 엔도글루카나제 (서열식별번호: 2)의 변이체와 정제된 샘플로서 측정된 상응하는 반감기 개선 지수 (HIF)
실시예 4: 킬레이트화제-유도된 불안정성 영역 및 인접 영역에서 돌연변이를 갖는 엔도글루카나제 변이체의 반감기 개선 지수 (HIF)
상기 실시예 1 및 2에 기재된 바와 같이 서열식별번호: 2의 성숙 모 엔도글루카나제의 변이체를 제조하고 정제하였다. 본 실시예의 목적상, 적어도 1개의 킬레이트화제-유도된 불안정성 영역 (영역 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9) 및/또는 적어도 1개의 인접 영역 (영역 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19)에서 돌연변이를 갖는 변이체를 생산하였다. 변이체의 세제-중 안정성을 실시예 3에 기재된 바와 같이, 세제 및 프로테아제와의 인큐베이션 후에 변이체의 정제된 샘플에 존재하는 효소적 활성을 측정함으로써 결정하였다. 인큐베이션은 90% 또는 95% 농도의 퍼실 유니버셜 겔 세제 (PUG)를 사용하여 수행하였고, 25, 26, 28, 또는 30℃의 온도에서 1½시간 내지 최대 720시간 범위의 변이체 인큐베이션 시간으로 인큐베이션하였다.
반감기 및 HIF를 상기 실시예 3에 기재된 바와 같이 계산하였다. 야생형 및 변이체 사이의 안정성에서의 차이가 너무 커서 동일한 인큐베이션 시간을 사용하여 야생형 및 변이체 둘 다에 대한 반감기를 정확하게 평가할 수 없는 경우, 야생형 및 변이체에 대한 인큐베이션 시간을, 예를 들어 야생형의 경우 1시간 및 가장 안정한 변이체의 경우 최대 720시간으로 상이하게 하였다.
하기 표 8-12는 각각의 변이체에 대한 시험 조건 (인큐베이션 온도, 세제 농도, 인큐베이션 시간)에 대한 정보와 함께 정제된 변이체에 대한 HIF를 제시한다. 모든 변이체의 HIF는 동일한 세제 농도 및 온도에서 인큐베이션된 야생형 엔도글루카나제 (서열식별번호: 2)에 기초하여 계산하였다 (규정에 따라 모든 표에서 야생형의 HIF = 1).
표 8. 성숙 모 GH9 엔도글루카나제 (서열식별번호: 2)의 변이체와 25℃의 온도에서 측정된 상응하는 반감기 개선 지수 (HIF)
표 9. 성숙 모 GH9 엔도글루카나제 (서열식별번호: 2)의 변이체와 26℃의 온도에서 측정된 상응하는 반감기 개선 지수 (HIF)
표 10. 성숙 모 GH9 엔도글루카나제 (서열식별번호: 2)의 변이체와 28℃의 온도에서 측정된 상응하는 반감기 개선 지수 (HIF)
표 11. 성숙 모 GH9 엔도글루카나제 (서열식별번호: 2)의 변이체와 30℃의 온도에서 측정된 상응하는 반감기 개선 지수 (HIF)
표 12. 성숙 모 GH9 엔도글루카나제 (서열식별번호: 2)의 변이체와 30℃의 온도에서 측정된 상응하는 반감기 개선 지수 (HIF)
시험된 추가로 정제된 변이체의 HIF를 하기 표 13-16에 제시한다. 표 14-16의 HIF는 변이체 및 대조군의 경우의 약간 증가된 인큐베이션 온도 (26-30℃)를 제외하고, 표 13에서와 동일한 방식으로 계산하였다. 정제된 변이체의 모든 반감기 값은 정제된 단백질과 동일한 세제 농도 및 측정 온도에서 인큐베이션한 GH9 야생형 (서열식별번호: 2를 갖는 성숙 모 엔도글루카나제)의 반감기와 대비하여 계산하였다. 모든 표의 GH9 야생형의 HIF는 1이다 (정의에 따름).
표 13. 모 엔도글루카나제, 예를 들어 서열식별번호: 2의 엔도글루카나제 대비 25℃에서 인큐베이션된 상응하는 반감기 개선 지수 (HIF)를 갖는 성숙 모 GH9 엔도글루카나제 (서열식별번호: 2)의 정제된 변이체.
표 14. 모 엔도글루카나제, 예를 들어 서열식별번호: 2의 엔도글루카나제 대비 26℃에서 인큐베이션된 상응하는 반감기 개선 지수 (HIF)를 갖는 성숙 모 GH9 엔도글루카나제 (서열식별번호: 2)의 정제된 변이체.
표 15. 모 엔도글루카나제, 예를 들어 서열식별번호: 2의 엔도글루카나제 대비 28℃에서 인큐베이션된 상응하는 반감기 개선 지수 (HIF)를 갖는 성숙 모 GH9 엔도글루카나제 (서열식별번호: 2)의 정제된 변이체.
표 16. 모 엔도글루카나제, 예를 들어 서열식별번호: 2의 엔도글루카나제 대비 30℃에서 인큐베이션된 상응하는 반감기 개선 지수 (HIF)를 갖는 성숙 모 GH9 엔도글루카나제 (서열식별번호: 2)의 정제된 변이체.
실시예 5: 크산탄 리아제 변이체의 구축 및 발현
크산탄 리아제 모 유전자 (즉, 서열식별번호: 5)를 상류에 프로모터 시스템 및 하류에 cat 선택 마커를 함유하는 선형 카세트 내로 PCR 어셈블리하였다. 비. 서브틸리스 숙주의 Pel 유전자좌에서의 상동 재조합에 의한 카세트의 염색체 통합을 가능하게 하기 위해, 통합 부위와 동일한 >2 kb DNA 서열을 카세트의 양쪽에 포함시켰다. 크산탄 리아제 모 유전자 (서열식별번호: 5)를 함유하는 균주로부터 제조된 게놈 DNA를 부위-지정 돌연변이체 생성을 위한 주형으로서 사용하였다. 돌연변이유발 정방향 및 역방향 프라이머를 사용하여 대략 6 kb PCR 단편을 생성하였다. 이 단편을 메가프라이머로서 또 다른 정방향 프라이머와 함께 사용하여 >8 kb DNA 단편을 증폭시켰다. 이 단편은 완전한 카세트 (Pel 유전자좌에서의 재조합에 필요한 상동 DNA 서열과 함께, 프로모터 시스템, 크산탄 리아제 및 cat 유전자)를 함유하였고, 형질전환에 사용되었다.
카세트에 사용된 3중 프로모터 시스템은 WO99/43835에 기재되어 있고, 이는 바실루스 리케니포르미스 알파-아밀라제 유전자 (amyL), 바실루스 아밀로리퀘파시엔스 알파-아밀라제 유전자 (amyQ)로부터의 프로모터, 및 안정화 서열을 포함하는 바실루스 투린기엔시스 cryIIIA 프로모터로 이루어진다. 바실루스 클라우시이로부터의 프로테아제 신호 서열은 세포에서 단백질을 유출시키기 위해 포함시켰다.
서열식별번호: 6의 성숙 모 크산탄 리아제의 생성된 변이체를 하기 표 17, 18, 및 19에 제시한다. 변경의 존재는 서열분석에 의해 확인되었다.
표 17. 서열식별번호: 6의 성숙 모 크산탄 리아제의 생성된 변이체
표 18. 서열식별번호: 6의 성숙 모 크산탄 리아제의 생성된 변이체
표 19. 서열식별번호: 6의 성숙 모 크산탄 리아제의 생성된 변이체
변이체를 함유하는 바실루스 유기체를 클로람페니콜 (6 μg/mL)을 함유하는 LB 브로쓰에 접종하고, 37℃에서 밤새 성장시켰다. 크산탄 리아제 변이체의 발현을 위해, 밤샘 배양물 2%를 1000 mL 배플형 플라스크에 담긴 10-R 배지 300 mL에 첨가하고, 30℃에서 96시간 동안 180 rpm에서 성장시켰다.
10-R 배지는 33 g/L 가용성 전분, 6 g/L (NH4)2HPO4, 5 g/L 감자 펩톤, 1.2 g/L (MgSO4 x 7 H2O), 12 g/L KH2PO4, 5 g/L (Na2HPO4 x 2 H2O), 18 mL/L 미량 금속 용액, 1.8 g/L K2SO4 및 0.1 g/L (CaCl2 x 2 H2O) 및 0.5 mL/L SB2121 (소포제)을 함유하였다. 미량 금속 용액은 0.49 g/L (MnSO4 x H2O), 1.97 g/L (FeSO4 x 7 H2O), 0.1 g/L (CuSO4 x 5 H2O), 0.3 g/L ZnCl2 및 19.6 g/L 시트르산을 혼합하여 제조하였다.
실시예 6: 크산탄 리아제 변이체의 정제
정제 전에, 바실루스 서브틸리스 브로쓰를 8000 x g에서 10℃에서 30분 동안 원심분리한 다음, 부흐너 깔때기에서 자이츠 필터 (K250) 및 와트만 유리 필터 GF/F 등급의 조합을 사용하여 진공 여과하여 정화하였다. 마지막으로, 상청액을 0.22μ 접선 흐름 여과 유닛을 통해 여과하였다.
크산탄 리아제 변이체를 3-단계 자동화된 탠덤 칼럼 크로마토그래피를 사용하여 정제하였다. 마크로-프렙 메틸 HIC 칼럼을 1 M (NH4)2SO4 및 1 mM CaCl2 완충제를 함유하는 50 mM 트리스, pH 8.0으로 사전-평형화하였다. 칼럼에의 샘플 로딩 동안, 정화된 배양물 상청액 (250 mL)을 2 M (NH4)2SO4 및 1 mM CaCl2 완충제를 함유하는 50 mM 트리스, pH 8.0으로 1:1 인-라인 희석하여 최종 농도 1 M이 되게 하였다. 280 nm에서의 흡광도가 0.1 AU 미만이 될 때까지 비결합된 또는 약하게 결합된 단백질을 평형 완충제로 세척하였다. 0.5 M (NH4)2SO4 및 1 mM CaCl2를 함유하는 50 mM 트리스 pH 8을 사용하여 용리를 수행하였다. 용리된 단백질 피크는 0.5 M (NH4)2SO4 및 1 mM CaCl2를 함유하는 50 mM 트리스, pH 8로 사전-평형화된 MEP-하이퍼셀 칼럼 상에 자동 로딩되었다. 280 nm에서의 흡광도가 0.1 AU 미만이 될 때까지 비결합된 또는 약하게 결합된 단백질을 평형 완충제로 세척하였다. 칼럼을 다시 1mM CaCl2를 함유하는 50 mM 트리스, pH 8로 세척하여 불순물을 제거하였다. 정제된 단백질을 1 mM CaCl2를 함유하는 50 mM Na-아세테이트, pH 5로 용리시켰다. 용리된 정제된 단백질은 탈염을 위해 1 mM CaCl2를 함유하는 50 mM MOPS, pH 8로 사전-평형화된 세파덱스 G-25 칼럼으로 자동 전달되었다.
실시예 7: 세제 안정성 검정
세제 안정성 검정을 위한 시약은 다음과 같이 제조하였다:
1.0 M MOPS 완충제의 스톡은 3-모르폴리노프로판술폰산 209.26 g을 밀리 Q 물에 용해시켜 제조하였다. NaOH를 사용하여 pH를 7.5로 조정하고, 완충제의 최종 부피를 1000 mL로 만들었다. 이러한 완충제 스톡을 사용 시까지 4℃에서 저장하였다. MOPS 완충제의 50 mM 작업 용액은 1.0 M 스톡 50 mL를 밀리 Q 물 950 mL에 첨가하여 제조하였다.
0.4% w/v 크산탄 검의 기질 용액은 크산탄 검 400 mg을 밀리 Q 물 100 mL 중에 용해시켜 새로이 제조하였다.
1.0 M Na2CO3, 0.17 M 타르타르산나트륨칼륨 및 5 mM (Bi(NO3)3 x 5 H2O)을 함유하는 원액 믹스는 Na2CO3 106.99 g, 타르타르산나트륨칼륨 47.98 g 및 (Bi(NO3)3 x 5 H2O) 2.42 mg을 최종 부피 1000 mL로 밀리 Q 물에 용해시켜 제조하였다. 이러한 원액 믹스를 여과하고, 실온에서 저장하였다.
PAHBAH 시약 (1.5% PAHBAH)은 p-히드록시벤조산 히드라지드 (PAHBAH) 1.5 g을 원액 믹스 중에 용해시켜 새로이 제조하였다.
세제 안정성 검정:
A. 변이체의 배양물 상청액의 스크리닝
세제-중 안정성은 30℃에서 세제 (70%, 최종 농도)와의 인큐베이션 후에 변이체 또는 야생형 대조군의 배양물 상청액에 존재하는 효소적 활성을 측정함으로써 결정하였다.
1000 rpm에서 15분 동안 진탕시킨 96-웰 마이크로타이터 플레이트의 웰에 배양물 상청액 30 μL 및 퍼실 유니버셜 겔 세제 (100%) 70 μL를 첨가하여 세제 스트레스를 수행하였다. 2개의 동일한 플레이트를 생성하여 그의 하나의 플레이트는 4℃ (비스트레스 플레이트)에서 인큐베이션하고 다른 플레이트는 30℃ (스트레스 플레이트)에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 인큐베이션 후, 비스트레스 및 스트레스 플레이트로부터의 샘플을 희석 완충제 (50 mM MOPS, 5 mM CaCl2, pH 7.5)로 50X 희석하였다.
희석된 효소-세제 샘플의 효소 활성을 측정하기 위해, 반응 혼합물을 96-웰 PCR 플레이트에 준비하였다. 희석된 샘플 50 μL를 새롭게 제조한 기질 용액 50 μL와 혼합하고, 40℃에서 1시간 동안 인큐베이션하였다.
인큐베이션 후에, PAHBAH 시약 75 μL를 동일한 PCR 플레이트에서 반응 혼합물에 첨가하고, 90℃에서 10분 동안 프로그램가능한 써멀 사이클러 (티-로보트(T-ROBOT))에서 인큐베이션한 다음, 10℃에서 후속 냉각시켰다. 샘플 (25 μL)을 384 웰 마이크로타이터 플레이트로 옮기고, 인피니트 M1000(Infinite M1000) 판독기 (테칸(TECAN), 스위스)를 사용하여 405 nm에서 흡광도를 측정하였다.
변이체 및 야생형 대조군에 대한 잔류 활성 (RA)은 4℃에서의 인큐베이션 후에 남아있는 효소적 활성 대비 30℃에서의 인큐베이션 후에 남아있는 효소적 활성의 백분율로서, 즉, 관련 배경 흡광도 기여를 차감한 후 하기 식에 따라 계산하였다:
잔류 활성 (RA) = 100% * Abs405 (30℃에서 인큐베이션한 샘플)/Abs405 (4℃에서 인큐베이션한 샘플).
플레이트에서 성장시킨 야생형과 관련하여 보다 높은 세제 안정성을 갖는 변이체를 골라내었다.
B. 정제된 변이체의 스크리닝
정제된 변이체의 세제 안정성은 30℃에서 세제 (90%, 최종 농도)와의 인큐베이션 후에 정제된 단백질의 효소 활성을 측정함으로써 결정하였다.
정제된 변이체를 50 mM MOPS 완충제를 사용하여 200 ppm의 농도로 희석하였다. 세제 처리를 위해, 1000 rpm에서 20분 동안 진탕시킨 96-웰 마이크로타이터 플레이트의 웰에서 희석된 정제된 샘플 10 μL를 퍼실 유니버셜 겔 세제 (100%) 90 μL와 혼합하였다. 2개의 동일한 플레이트를 생성하여 그의 하나의 플레이트는 4℃ (비스트레스 플레이트)에서 인큐베이션하고 다른 플레이트는 30℃ (스트레스 플레이트)에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 인큐베이션 후, 비스트레스 및 스트레스 플레이트로부터의 샘플을 희석 완충제 (50 mM MOPS, 1 mM CaCl2, pH 7.5)로 50X 희석하였다.
비스트레스 및 스트레스 샘플의 효소적 활성 분석을 섹션 A에 기재된 바와 같이 수행하였다.
C. 반감기 및 반감기 개선 지수 (HIF)의 계산
분해는 지수 붕괴에 따르고 인큐베이션 시간 (시간)은 공지되어 있기 때문에, 반감기 (T½ (시간 단위))를 야생형 대조군 및/또는 변이체에 대해 주어진 세제 농도 및 저장 온도에서, 즉 하기 식에 따라 계산하였다:
T1/2 (변이체) = (Ln (0.5)/Ln (RA-변이체/100))*시간
T1/2 (야생형) = (Ln (0.5)/Ln (RA-야생형/100))*시간
여기서 "RA"는 상기 계산된 바와 같은 퍼센트 단위의 잔류 활성이고, "시간"은 시간 단위의 인큐베이션 시간이다.
주어진 저장 조건 세트 (세제 농도 및 온도) 하에서의 반감기 개선 지수 (HIF)는 HIF = T½ (변이체)/T½ (야생형)와 같이 계산될 수 있고, 여기서 야생형은 변이체와 동일한 저장 조건 하에 인큐베이션된다.
야생형 및 변이체 사이의 안정성에서의 차이가 너무 커서 동일한 인큐베이션 시간을 사용하여 야생형 및 변이체 둘 다에 대한 반감기를 정확하게 평가할 수 없는 경우 (표 24 참조), 야생형 및 변이체에 대한 인큐베이션 시간을, 예를 들어 야생형의 경우 1시간 및 가장 안정한 변이체의 경우 최대 168시간으로 상이하게 하였다. 또한, 보다 안정한 변이체에 대해 보다 짧은 인큐베이션 시간 기간, 예를 들어 <168시간 내에 안정성 (반감기)을 결정하기 위해, 표 24의 일부 변이체에 대한 인큐베이션 온도를 2-5℃만큼 증가시켰다.
단일 돌연변이 변이체의 배양물 상청액에 대한 반감기 및 계산된 반감기 개선 지수 (HIF) 값을 하기 표 22에 제공한다. 표 23 및 24는 단일, 이중 또는 다중 돌연변이를 갖는 정제된 변이체에 대한 반감기, 뿐만 아니라 표 23의 변이체에 대한 반감기 개선 지수 (HIF) 값을 제시한다. 모든 변이체의 HIF는 동일한 세제 농도 및 온도에서 인큐베이션된 야생형 크산탄 리아제 (서열식별번호: 6)에 기초하여 계산하였다 (야생형의 HIF = 모든 표에서 1.0, 정의에 따름).
정제된 변이체에 대해 수득된 HIF 값을 하기 표 20-24에 제시한다.
표 20. 정제된 변이체의 반감기 개선 지수:
변이체의 배양물 상청액에 대해 수득된 HIF 값을 하기 표 21에 제시한다.
표 21. 변이체의 배양물 상청액의 반감기 개선 지수:
표 22. 변이체의 배양물 상청액의 반감기 및 반감기 개선 지수
70% 세제 농도 (30℃, 인큐베이션 시간 1시간)에서 시험된 정제된 변이체에 대해 수득된 반감기 및 HIF 값을 하기 표 23에 제시한다.
표 23. 정제된 변이체의 반감기 및 반감기 개선 지수
90% 세제 농도 (온도 및 인큐베이션 시간은 표시된 바와 같음)에서 시험된 정제된 변이체에 대해 수득된 반감기 값을 하기 표 24에 제시한다.
표 24. 정제된 변이체의 반감기 값
실시예 8: 크산탄 리아제 변이체의 반감기
상기 실시예 5 및 6에 기재된 바와 같이 서열식별번호: 6의 성숙 모 크산탄 리아제의 변이체를 제조하고 정제하였다. 변이체의 세제-중 안정성을 실시예 7에 기재된 바와 같이, 세제와의 인큐베이션 후에 변이체의 배양물 상청액 또는 정제된 샘플에 존재하는 효소적 활성을 측정함으로써 결정하였다. 인큐베이션은 배양물 상청액의 경우 30℃에서 70% 농도의 퍼실 유니버셜 겔 세제 (PUG)를 사용하여 수행하고, 정제된 변이체의 경우 30℃에서 70% 또는 90% 농도의 PUG 세제를 사용하여 수행하였고, 변이체 인큐베이션 시간은 배양물 상청액의 경우 1시간 및 정제된 변이체의 경우 1시간 또는 3시간으로 하였다.
배양물 상청액에 대한 반감기 및 계산된 반감기 개선 지수 (HIF) 값을 하기 표 25에 제공한다. 표 26은 정제된 변이체에 대한 반감기 및 반감기 개선 지수 (HIF)를 제시하고, 여기서 HIF는 70% 세제 농도와 함께 인큐베이션된 변이체의 경우에 야생형 반감기 0.22시간에 기초하여 계산하였고, 90% 세제 농도와 함께 인큐베이션된 변이체의 경우에 야생형 반감기 0.20시간에 기초하여 계산하였다.
표 25. 변이체의 배양물 상청액의 반감기 및 반감기 개선 지수 (HIF)
표 26. 정제된 변이체의 반감기 및 반감기 개선 지수 (HIF)
실시예 9: 킬레이트화제-유도된 불안정성 영역 및 인접 영역에서 돌연변이를 갖는 크산탄 리아제 변이체의 반감기
상기 실시예 5 및 6에 기재된 바와 같이 서열식별번호: 6의 성숙 모 크산탄 리아제의 변이체를 제조하고 정제하였다. 본 실시예의 목적상, 적어도 1개의 킬레이트화제-유도된 불안정성 영역 (영역 1, 2, 3, 4, 5, 6) 및 적어도 1개의 인접 영역 (영역 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13)에서 돌연변이를 갖는 변이체를 생산하였다. 변이체의 세제-중 안정성을 실시예 7에 기재된 바와 같이, 세제와의 인큐베이션 후에 변이체의 정제된 샘플에 존재하는 효소적 활성을 측정함으로써 결정하였다. 인큐베이션은 70%, 90% 또는 95% 농도의 퍼실 유니버셜 겔 세제 (PUG)를 사용하여 수행하였고, 30, 32, 35 또는 37℃의 온도에서 1시간 내지 최대 840시간 범위의 변이체 인큐베이션 시간으로 인큐베이션하였다.
반감기를 상기 실시예 7에 기재된 바와 같이 계산하였다. 야생형 및 변이체 사이의 안정성에서의 차이가 너무 커서 동일한 인큐베이션 시간을 사용하여 야생형 및 변이체 둘 다에 대한 반감기를 정확하게 평가할 수 없는 경우, 야생형 및 변이체에 대한 인큐베이션 시간을, 예를 들어 야생형의 경우 1시간 및 가장 안정한 변이체의 경우 최대 840시간으로 상이하게 하였다.
또한, 보다 안정한 변이체에 대해 보다 짧은 지속기간의 인큐베이션 시간, 예를 들어 <168시간 내에 안정성 (반감기)를 결정하기 위해, 일부 변이체의 경우 인큐베이션 온도를 2-7℃만큼 증가시켰다. 보다 높은 온도 (즉 >30℃)에서 시험된 변이체의 경우, 이들 온도에서는 야생형의 반감기 (분 단위의 자리수)를 정확하게 결정할 수 없었기 때문에 야생형에 기초한 HIF 값을 계산할 수 없었다. 따라서 하기 표의 변이체의 안정성은 반감기 (시간 단위)의 면에서 보고된다.
하기 표 27-33은 각각의 변이체에 대한 시험 조건 (온도, 세제 농도, 인큐베이션 시간)에 대한 정보와 함께 정제된 변이체에 대한 반감기를 제시한다.
표 27. 정제된 변이체의 반감기: 온도 (T) 30℃, 세제 농도 70%
표 28. 정제된 변이체의 반감기: 온도 (T) 30℃, 세제 농도 90%
표 29. 정제된 변이체의 반감기: 온도 (T) 30℃, 세제 농도 95%
표 30. 정제된 변이체의 반감기: 온도 (T) 32℃, 세제 농도 90%
표 31. 정제된 변이체의 반감기: 온도 (T) 35℃, 세제 농도 90%
표 32. 정제된 변이체의 반감기: 온도 (T) 35℃, 세제 농도 95%
표 33. 정제된 변이체의 반감기: 온도 (T) 37℃, 세제 농도 90%
실시예 10: 크산탄 리아제 및 엔도글루카나제 야생형 및 변이체의 미니-TOM 세척
크산탄 리아제 (XL) 변이체 및 엔도글루카나제 (EG) 변이체의 그의 각각의 야생형 (XL 및 EG 야생형) 대비 개선된 세제 안정성을 평가하기 위해, XL 및 EG 야생형 뿐만 아니라 XL 및 EG 변이체의 조합을 중질 액체 세제 (퍼실 유니버셜 겔, PUG) 중에서 30℃에서 13일 동안 인큐베이션하고, 그 후 이를 미니-TOM (미니-터그-오-토미터(terg-O-tometer)) 세척 설정에서의 세척 시험에 적용하였다. 액체 세제 중에 13일 저장한 효소 조합물의 세척 성능을, 세척 전에 세제 및 효소를 저장하지 않고 (즉 신선 세척 시험) 세척 시작 직전에 세척물에 바로 첨가한 동일한 미니-TOM 세척 시험과 비교하였다.
간략하게, 미니-TOM 세척은 각각의 비커의 크기가 (2 L 대신) 300 mL이고, (1 L 대신) 100 mL 세척액으로 채워진 TOM 세척 (터그-오-토미터 세척, 방법의 참고를 위해 WO2016/203064 참조)의 하향-규모화 버전이다. 모든 다른 파라미터 (예를 들어 교반)는 표준 TOM 세척과 동일하다.
세제 중에서의 효소의 저장: XL 효소를 MQ 물 중에 227 ppm으로 희석하고, EG 효소를 454 ppm으로 희석하였다. 0.90 g의 PUG 세제가 담긴 뚜껑이 있는 유리 바이알을 제조하였다. 희석된 XL 효소 50 μL 및 희석된 EG 효소 50 μL (야생형 또는 변이체)를 0.90 g의 PUG 세제가 담긴 동일한 유리 바이알에 첨가하였다. 유리 바이알을 30℃의 가열 캐비넷 안에서 13일 저장하였다.
세척물 중 투여 (저장된 샘플): 각각의 미니-TOM 비커에 대해, 효소를 함유하는 0.44 g 저장된 PUG 세제를 100 mL 16°dH 물 경도 용액 (Ca:Mg 5:1, HCO3 x 1.5) 중에 희석하여 0.05 ppm XL 및 0.1 ppm EG의 최종 농도를 수득하였다.
세척물 중 투여 (신선한 샘플): 각각의 미니-TOM 비커에 대해, 0.44 g PUG 세제를 100 mL 16 °dH 물 경도 용액 (Ca:Mg 5:1, HCO3 x 1.5) 중에 희석하고, 희석된 XL 및 EG 효소 (야생형 또는 변이체)를 각각의 미니-TOM 비커에 바로 첨가하여 0.05 ppm XL 및 0.1 ppm EG의 최종 농도를 수득하였다. 참조 샘플 (즉 XL 및 EG 효소가 부재하는 세제)을 세척 시험에 포함시켜 XL 및 EG 효소의 부재 하의 (참조) 세제 세정 수준을 평가하였다.
미니-TOM 세척 (저장된 샘플 또는 신선한 샘플): 효소 (저장된 것 또는 신선한 것), 및 2 cmØ 원형 얼룩으로 자른 각각의 상업적으로 입수가능한 얼룩 C-S-05S (면 상의 마요네즈 및 카본 블랙/그을음 - 결과에 대해 표 1 참조), C-S-17 (면 상의 유체 화장품 - 결과에 대해 표 3 참조) 및 C-S-44 (면 상의 순수 초콜릿 음료 - 결과에 대해 표 2 참조) (센터르 포르 테스트마테리알스 베.파우.(Center for Testmaterials b.v.), 네덜란드) 2 조각과 함께 PUG 세제 세척액 (4.4 g PUG/L 세척액) 100 mL를 함유하는 각각의 미니-TOM 비커를 40℃에서 120 rpm 하에 30분 동안 세척한 다음, 찬 수돗물로 30초 동안 헹구고, 이어서 여과지 시트 상에 두어 실온에서 밤새 건조시킨 다음, 측정 플레이트로 옮겼다.
잔류 세척 성능의 계산: 얼룩의 강도를 디지-아이(Digi-eye)를 사용하여 측정하고 (Tiff 파일), 컬러아이(Coloreye) 소프트웨어를 사용하여 강도 데이터를 획득하였다. 저장된 효소 샘플 및 신선한 효소 샘플 및 참조 샘플의 강도 데이터를 사용하여, 각각의 얼룩에 대한 델타 성능 (델타 강도, DI) 및 잔류 성능 (RP)을 계산하였다. 간략하게, 각각의 효소 조합물 DI에 대해 각각의 측정된 강도로부터 참조 강도를 차감함으로써 계산하였다. 또한, 하기 식에 의해 각각의 효소 조합물에 대해 잔류 성능을 계산하였다: RP = DI저장 / DI신선 * 100%.
표 34. PUG 세제 중에서 30℃에서 13일 저장 후 XL (크산탄 리아제) 및 EG (엔도글루카나제) 효소 조합물 (야생형 또는 변이체)의 잔류 세척 성능 (RP). 마요네즈 및 그을음 (CS-05S) 견본에서 시험함.
표 35. PUG 세제 중에서 30℃에서 13일 저장 후 XL 및 EG 효소 조합물 (야생형 또는 변이체)의 잔류 세척 성능 (RP). 초콜릿 음료 (CS-44) 견본에서 시험함.
표 36. PUG 세제 중에서 30℃에서 13일 저장 후 XL 및 EG 효소 조합물 (야생형 또는 변이체)의 잔류 세척 성능 (RP). 유체 화장품 (CS-17) 견본에서 시험함.
실시예 11: 세척 시험
표 37. 액체 세탁 세제 매트릭스:
시험할 효소를 상기 액체 세탁 세제 매트릭스와 하기의 주어진 농도로 조합하고, 균질화하고, 밀폐된 용기 내에서 30℃에서 8주 동안 저장하였다. 효소를 포함하는 새로이 제조된 매트릭스 및 30℃에서 8주 동안 저장된 효소를 함유하는 매트릭스를 하기 세척 시험에서 사용하였다:
표준 조건 (40℃, 컬러 프로그램, 16°dH) 하에 세척 시험을 수행하였고, 건조 및 다림질 후 밝기 측정을 통해 여러 상이한 상업적 얼룩의 밝기를 결정하였다. 얼룩 세트에, 3.5 kg의 깨끗한 면 텍스타일 및 4 SBL 시트를 첨가하였다.
얼룩 세트:
모든 세척 시험을 6회 수행하고 평균 값을 계산하였다.
효소를 102 mg 크산탄 리아제 및 1.53 mg 엔도글루카나제의 활성 단백질 농도로 사용하였다. 하기 효소 조합물을 시험하였다:
조합물 WT: 크산탄 리아제 WT (서열식별번호: 6) 및 엔도글루카나제 WT (서열식별번호: 2)
조합물 1: 크산탄 리아제 변이체 1 (하기 치환: A190Q+E229S+I234V+S582K+N672D+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y를 갖는 서열식별번호: 6) 및 엔도글루카나제 변이체 2 (하기 치환: N216Q+S313D+E408D+D476R+Y579W+I602T+F638N+A651P+T697G+W719R+R880K+T887K+K921R+Y934G를 갖는 서열식별번호: 2)
조합물 2: 크산탄 리아제 변이체 2 (E229S+N440K+S582K+A624E+S635E+N672D+G738L+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y를 갖는 서열식별번호: 6) 및 엔도글루카나제 변이체 1 (F20P+S313D+E408D+Y579W+S636K+A688G+T697G+N905D+A937E를 갖는 서열식별번호: 2)
조합물 3: 크산탄 리아제 변이체 3 (S100D+E229S+K360G+D458S+S582K+N672D+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+A843P+K875T+N892Y+N1008D를 갖는 서열식별번호: 6) 및 엔도글루카나제 변이체 2 (N216Q+S313D+E408D+D476R+Y579W+I602T+F638N+A651P+T697G+W719R+R880K+T887K+K921R+Y934G를 갖는 서열식별번호: 2)
하기 표에서, 본 발명의 제제의 델타 Y 값을 효소의 부재 하의 세제에 대비하여 제공하며, 각각은 5종의 주어진 얼룩의 합으로서 제공된다. 값이 높을수록 각각의 효소 조합물의 세정 성능이 더 우수하다.
표 38: 세척 시험 결과
결과에서 확인할 수 있는 바와 같이, 본 발명의 효소 조합물은 30℃에서의 장기간 저장 후에 유의하게 더 우수한 성능을 제공한다.
SEQUENCE LISTING
<110> Henkel AG & Co. KGaA
<120> DETERGENT COMPOSITION COMPRISING XANTHAN LYASE AND ENDOGLUCANASE
VARIANTS
<130> 2017P34700WO
<150> DE102018104165.9
<151> 2017-02-23
<160> 6
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 12110
<212> DNA
<213> Paenibacillus sp-62047
<400> 1
tctggttgtt ttcttcattt caggtttcgc cctttccttg ccaaatataa gaaaaacggc 60
gttccgataa tcgcggtgac ggtgattcat aaggaaatgc aatccatctg gccagaacat 120
ctgcgtacac cagcaaaatg gcaccgaaca gtgccgaaaa cggaagcacg tattgataat 180
gttctccgat cagcttgcgg acaatatgcg ggacgagcag cccgacaaag ccaatcggcc 240
cggcgacggc tacggaagcg ccggaaagaa ttaaaataat caaactgatc agaatcctga 300
tgccgttcat attttgtcca agcccttttg ctgtttcgtc tccgagaccg agaacagaaa 360
cagaaccgga aaatacgagg gcaagcccga tgccaatgac agaaaaagga gcgatggtta 420
tgacgtcctg ccagttgctg ccgtcgattg cgcctgtcat ccagtacaga acatcctcac 480
ctgactcatt taaaataatg atggcctgtg tcatagagga gaggaacaag tgcacggcca 540
ttcctgacag cgccagcttg acaggcgtca ttccgccgga tgaggcaatc atatacacaa 600
tcgcgccgcc tgctgccgca cccgcaaaag cgaatataac agatgaatag ggcgatgccg 660
gcagaatgac gagagaagca acaacaaaaa gcgatgcacc cgcattcaca ccgaaaattt 720
ggggtgaagc cagaggattt ctggtcatag cctgcatcag cgcccctgct acagctaggc 780
tggcgccgac aaaaacgccg attaatgtgc ggggaaggcg aagagtagag atgatgagct 840
gttcctttga accgtcccat acaaaaagat atttcaatga atctatgatg ctgatgtctg 900
aggctcctac tgaaagattc agcccaagcc caaatataaa aataatcagt gcaatgataa 960
acatcatcag tcttgatgat gagcgccgtt tggctgaatg atacaacagt ctcacttcct 1020
tactgcgtct ggttgcaaaa acgaagaagc aaggattccc ctcgcttctc atttgtccta 1080
tttattatac acttttttaa gcacatcttt ggcgcttgtt tcactagact tgatgcctct 1140
gaatcttgtc caagtgtcac ggtccgcatc atagacttgt ccatttttca ccgctttgag 1200
atttttccag agcgggttcg ttttccactc atctacaatg gttttgcctt cgttggctga 1260
gatgaacaaa atatcaggat cgattttgct caattgctca aggctgacct cttgataggc 1320
gttatctgac ttcacagcgt gtgtaaagcc tagcatttta aagatttctc cgtcatagga 1380
tgatgatgta tgaagctgga aggaatccgc tcttgcaacg ccgagaacga tgttgcggtt 1440
ttcatctttc ggaagttcgg cttttagatc gttgatgact tttttgtgct cggcaagctt 1500
ttcttttcct tcatcttctt tatttaatgc tttagcaatg gtcgtaaagc tgtcgatcgt 1560
ttcgtcatat gtcgcttcac ggctttttaa ttcaatcgtc ggggcgattt ttttcagctg 1620
tttataaatg tttttatggc gctcagcgtc agcgatgatt aaatcaggct tcaaggaact 1680
gatgacctca agattgggtt cgctgcgtgt gcctacagat gtgtaatcaa tggagctgcc 1740
gacaagcttt ttaatcatat cttttttgtt gtcatctgcg atgcccaccg gcgtaatgcc 1800
gagattgtga acggcatcca agaatgaaag ctcaagcaca accacccgct taggtgtgcc 1860
gcttactgtc gtttttcctt cttcgtcatg gatcactctg gaatccttag actcgctttt 1920
gccgcttccg ttgttattct ggcttgatga acagccggat acaatgaggc aggcgagcaa 1980
taaaacactc atgatggcaa tcaacttgtt agaataggtg cgcatgtcat tcttcctttt 2040
ttcagattta gtaatgagaa tcattatcac atgtaacact ataatagcat ggcttatcat 2100
gtcaatattt ttttagtaaa gaaagctgcg tttttactgc tttctcatga aagcatcatc 2160
agacacaaat aagtggtatg cagcgttacc gtgtcttcga gacaaaaacg catgggcgtt 2220
ggctttagag gtttcgaaca tatcagcagt gacataagga aggagagtgc tgagataacc 2280
ggacaatttc ttttctattt catctgttag tgcaaattca atgtcgccga tattcatgat 2340
aatcgagaaa acaaagtcga tatcgatatg aaaatgttcc tcggcaaaaa ccgcaagctc 2400
gtgaattcct ggtgaacatc cggcacgctt atggaaaatc tgtttgacta aatcactcac 2460
aatccaagca ttgtattgct gttctggtga aaagtattgc attagacata cctcctgctc 2520
gtacggataa aggcagcgtt tcatggtcgt gtgctccgtg cagcggcttc tccttaattt 2580
tgatttttct gaaaataggt cccgttccta tcactttacc atggacggaa aacaaatagc 2640
tactaccatt cctcctgttt ttctcttcaa tgttctggaa tctgtttcag gtacagacga 2700
tcgggtatga aagaaatata gaaaacatga aggaggaata tcgacatgaa accagttgta 2760
aaagagtata caaatgacga acagctcatg aaagatgtag aggaattgca gaaaatgggt 2820
gttgcgaaag aggatgtata cgtcttagct cacgacgatg acagaacgga acgcctggct 2880
gacaacacga acgccaacac gatcggagcc aaagaaacag gtttcaagca cgcggtggga 2940
aatatcttca ataaaaaagg agacgagctc cgcaataaaa ttcacgaaat cggtttttct 3000
gaagatgaag ccgctcaatt tgaaaaacgc ttagatgaag gaaaagtgct tctctttgtg 3060
acagataacg aaaaagtgaa agcttgggca taaagcaagg aaaaaaccaa aaggccaatg 3120
tcggcctttt ggtttttttg cggtctttgc ggtgggattt tgcagaatgc cgcaatagga 3180
tagcggaaca ttttcggttc tgaatgtccc tcaatttgct attatatttt tgtgataaat 3240
tggaataaaa tctcacaaaa tagaaaatgg gggtacatag tggatgaaaa aagtgatgtt 3300
agctacggct ttgtttttag gattgactcc agctggcgcg aacgcagctg atttaggcca 3360
ccagacgttg ggatccaatg atggctgggg cgcgtactcg accggcacga caggcggatc 3420
aaaagcatcc tcctcaaatg tgtataccgt cagcaacaga aaccagcttg tctcggcatt 3480
agggaaggaa acgaacacaa cgccaaaaat catttatatc aagggaacga ttgacatgaa 3540
cgtggatgac aatctgaagc cgcttggcct aaatgactat aaagatccgg agtatgattt 3600
ggacaaatat ttgaaagcct atgatcctag cacatggggc aaaaaagagc cgtcgggaac 3660
acaagaagaa gcgagagcac gctctcagaa aaaccaaaaa gcacgggtca tggtggatat 3720
ccctgcaaac acgacgatcg tcggttcagg gactaacgct aaagtcgtgg gaggaaactt 3780
ccaaatcaag agtgataacg tcattattcg caacattgaa ttccaggatg cctatgacta 3840
ttttccgcaa tggttgtaaa acgacggcca gtgaattctg atcaaatggt tcagtgagag 3900
cgaagcgaac acttgatttt ttaattttct atcttttata ggtcattaga gtatacttat 3960
ttgtcctata aactatttag cagcataata gatttattga ataggtcatt taagttgagc 4020
atattagagg aggaaaatct tggagaaata tttgaagaac ccgaggatct agatcaggta 4080
ccgcaacgtt cgcagatgct gctgaagaga ttattaaaaa gctgaaagca aaaggctatc 4140
aattggtaac tgtatctcag cttgaagaag tgaagaagca gagaggctat tgaataaatg 4200
agtagaaagc gccatatcgg cgcttttctt ttggaagaaa atatagggaa aatggtactt 4260
gttaaaaatt cggaatattt atacaatatc atatgtatca cattgaaagg aggggcctgc 4320
tgtccagact gtccgctgtg taaaaaaaag gaataaaggg gggttgacat tattttactg 4380
atatgtataa tataatttgt ataagaaaat ggaggggccc tcgaaacgta agatgaaacc 4440
ttagataaaa gtgctttttt tgttgcaatt gaagaattat taatgttaag cttaattaaa 4500
gataatatct ttgaattgta acgcccctca aaagtaagaa ctacaaaaaa agaatacgtt 4560
atatagaaat atgtttgaac cttcttcaga ttacaaatat attcggacgg actctacctc 4620
aaatgcttat ctaactatag aatgacatac aagcacaacc ttgaaaattt gaaaatataa 4680
ctaccaatga acttgttcat gtgaattatc gctgtattta attttctcaa ttcaatatat 4740
aatatgccaa tacattgtta caagtagaaa ttaagacacc cttgatagcc ttactatacc 4800
taacatgatg tagtattaaa tgaatatgta aatatattta tgataagaag cgacttattt 4860
ataatcatta catatttttc tattggaatg attaagattc caatagaata gtgtataaat 4920
tatttatctt gaaaggaggg atgcctaaaa acgaagaaca ttaaaaacat atatttgcac 4980
cgtctaatgg atttatgaaa aatcatttta tcagtttgaa aattatgtat tatggagctc 5040
tataaaaatg aggagggaac cgaatgaaac aacaaaaacg gctttacgcc cgattgctga 5100
cgctgttatt tgcgctcatc ttcttgctgc ctcattctgc agcagcagcg atcgcaggcg 5160
tggttcaaag cgtgaatgtc tcccaagctg gttatagttc aaacgatttt aagacggcta 5220
cggtgactgc gtcggataaa ctaagcgata ctagctacca gatattgcaa ggcactaccg 5280
ttatcgcaac cggtacgatg aaggatgaag gatatgtatg gggcaaatat gtgtactcga 5340
tcgatttctc ctccgttaca gctacgggca ccaactttac gatccgtagc aacggagttt 5400
catcttacac gttccctatc caaaccaata tgtggaatga atataaggat gaaatgaccg 5460
cgttctaccg tttgctccgg actacggata cctttgcggc ctatcctgca gggtacagca 5520
atattgcgcc ttcgaataaa atattacatc cggattcttt ccttgatgat gctttttcgc 5580
cggaccgaac gacgcattat gacctgactg gcggttggtt cgatgcagga gactacggta 5640
agtatggcgg caatcagtgg gtacagggaa atatcgccat ctcttatctg cggcatgcct 5700
cttcggcggc ggtcaatttc gataaggata ccaacggcat tccggatctg gtggatgaag 5760
cgatctttgg tagtcagtac ttggtgaagt ttgccaatca gcttggcggg gccattcata 5820
atattttgag gaaaggcggc tttgtgcttc cgcataaagt gacagacaat gttccgggta 5880
acacagacga ccgagcgctc gaagctgtcg aagcggtggg aggctccggg aaatcctctg 5940
gctcgctggc ggcaacggcg cgagcgattc gcactgccat cgcgggcggt aaagtggcag 6000
cgaataaagt cgcccagctg cagacacttg cgaatgagtt tcaggctgcc gcaatcatct 6060
tctataatta cacattgact catcaaagtg gaaaccatgg ctcctatgga acaatgaaca 6120
atggagggat tgcaaatcct ctcttatggg cggaagtaca gttgtatctg ttaacagggg 6180
acgctgcata caagacgcaa gctcagacac gcattaatgc aataaatgaa gcctatgttt 6240
cgtccacgaa ttattgggat atgcatccga ttgcgctggc cgaattttat tcctgaagca 6300
ccaagcatat tatttcatca cgctgatgga tgaaacgcca tacggtgtat tgaaccaatt 6360
cggcaatttt ggtgtgaatg agccgcatgc atcgtatatg gccgatttgc tccgatatta 6420
tgaattgttt aacgatccgg tagcgcttcg agcggcgaag aaggcgctgt actggattgt 6480
cggcaacaat ccatggaata tcagctgggt atccggtgtc ggctccaact tcaccgattt 6540
cctgcacact cgtctggatg aagaagcata cagccagacg aatacaggcg ttgttctgcc 6600
tggagccatg gttagcggac cgaatatcaa agatccgaat aacaaattga gctctagccc 6660
ttggtatgag gataaaccta tttgggcaga tgacaccaat caatggagat acaacgaata 6720
tagtgtcagt atacagacgg gattattcta caccatcatg ggcttgtcgg cccttggcgg 6780
aaatgcatcc actggtggcg cggagcccgt taagctgccg atcacttggc ctatcattgg 6840
ggattatgtg actggggatg tgacggtatt cgcacagccg gaaggcagct tgagcaatgt 6900
gtcagcgaac ggaatcgtct tgagcccctc cgacggtgtc tatacgacga cagtaagcac 6960
aagcgctgat gcaccatata ccgaaagaaa agtacagatc aaagggacgg acgacagcgg 7020
attcaccact tatagcaata cacatttcac ggtggcgcct gcacttccgg atccatctca 7080
tcctttactt ttcgatgact ttaaccagaa aggaatctgg ggtagccaaa agctggattg 7140
ggtgaattgg tataaccaaa acggaggtac agcatcctac acgcggacga cagtggatac 7200
aagaacagtt gggaaatttg cacatacccc tgcagccact acatccaaag ccaaattcca 7260
gccgtggaaa tacaacgcaa atcttaacgg atatcgctat cttaatttca ccatgaagaa 7320
tccgggttat cccaatacca aaattcggat agcagcgaat gacggcacca aatcagttaa 7380
ccttacgagc ggcgaggttg cgatctcgag cacgtggaca acgtatcaat atgatttgaa 7440
tctgcatccg acgctgaaca agagcaacgt tctgattgag gtatggctca gcaacccaac 7500
tgcgggggca tatggggaaa ttctcattga cgaaatctcg gctgtgaata cgaacagcgg 7560
aacggcgcca accttatccg ccacaggtgt gaacgcctcg atcggtaatc agtcgacggt 7620
atttacttat acagcgacct acaccgatgc taataatcaa gcgccgtttg atgtccaggt 7680
cgtcattgac ggcgtcatcc gttcgatgac ggcggcggat cctactgaca ctacttattc 7740
cgatgggaga gtgtatacgt acgctactac cttgccggtg gggacgcata agttttactt 7800
ccggacgaca gatacaacca cgaacttcgt cagcacttcc gtgcaaaccg gaccaaccgt 7860
cattcggaat atacacatgc tgtaaaagac aatgcggatg cgagcggagg gaagtatcgc 7920
ttgttcaatg gtcggcaggc caacgattat attgaatatg cggtgaatgt ccctaaggct 7980
ggaacatatc aagtatctgc cagagccatg agattaagcg acaatgggat ctaccagctg 8040
cagattaacg gcagcaatca aggtactccg ttcgatactt accagtcatc ggggaagtat 8100
cttgactatg ctcttggaaa tgtgaccata actagcccgg gaacgcagtt atttcgattc 8160
aaagtaacgg gcaaaaatgc aagctcactc ggatataagc tgccgcttga tttcattcag 8220
cttgttccag ttccgtaaac gcgttaatca ataaaaaaac gctgtgcggt taaagggcac 8280
agcgtttttt tgtgtatcgg caatagttac ccttattatc aagataagaa agaaaaggat 8340
ttttcgctac gctcaaatcc tttaaaaaaa cacaaaagac cacatttttt aatgtggtct 8400
ttattcttca actaaagcac ccattagttc aacaaacgaa aattggataa agtgggatat 8460
ttttaaaata tatatttatg ttacagtaat attgactttt aaaaaaggat tgattctaat 8520
gaagaaagca gacaagtaag cctcctaaat tcactttaga taaaaattta ggaggcatat 8580
caaatgaact ttaataaaat tgatttagac aattggaaga gaaaagagat atttaatcat 8640
tatttgaacc aacaaacgac ttttagtata accacagaaa ttgatattag tgttttatac 8700
cgaaacataa aacaagaagg atataaattt taccctgcat ttattttctt agtgacaagg 8760
gtgataaact caaatacagc ttttagaact ggttacaata gcgacggaga gttaggttat 8820
tgggataagt tagagccact ttatacaatt tttgatggtg tatctaaaac attctctggt 8880
atttggactc ctgtaaagaa tgacttcaaa gagttttatg atttatacct ttctgatgta 8940
gagaaatata atggttcggg gaaattgttt cccaaaacac ctatacctga aaatgctttt 9000
tctctttcta ttattccatg gacttcattt actgggttta acttaaatat caataataat 9060
agtaattacc ttctacccat tattacagca ggaaaattca ttaataaagg taattcaata 9120
tatttaccgc tatctttaca ggtacatcat tctgtttgtg atggttatca tgcaggattg 9180
tttatgaact ctattcagga attgtcagat aggcctaatg actggctttt ataatatgag 9240
ataatgccga ctgtactttt tacagtcggt tttctaacga tacattaata ggtacgaaaa 9300
agcaactttt tttgcgctta aaaccagtca taccaataac ttaagggtaa ctagcctcgc 9360
cggaaagagc gaaaatgcct cacatttgtg ccacctaaaa aggagcgatt tacatatgag 9420
ttatgcagtt tgtagaatgc aaaaagtgaa atcagctgga ctaaaagggg ccgcagagta 9480
gaatggaaaa ggggatcgga aaacaagtat ataggaggag acctatttat ggcttcagaa 9540
aaagacgcag gaaaacagtc agcagtaaag cttgttccat tgcttattac tgtcgctgtg 9600
ggactaatca tctggtttat tcccgctccg tccggacttg aacctaaagc ttggcatttg 9660
tttgcgattt ttgtcgcaac aattatcggc tttatctcca agcccttgcc aatgggtgca 9720
attgcaattt ttgcattggc ggttactgca ctaactggaa cactatcaat tgaggataca 9780
ttaagcggat tcgggaataa gaccatttgg cttatcgtta tcgcattctt tatttcccgg 9840
ggatttatca aaaccggtct cggtgcgaga atttcgtatg tattcgttca gaaattcgga 9900
aaaaaaaccc ttggactttc ttattcactg ctattcagtg atttaatact ttcacctgct 9960
attccaagta atacggcgcg tgcaggaggc attatatttc ctattatcag atcattatcc 10020
gaaacattcg gatcaagccc ggcaaatgga acagagagaa aaatcggtgc attcttatta 10080
aaaaccggtt ttcaggggaa tctgatcaca tctgctatgt tcctgacagc gatggcggcg 10140
aacccgctga ttgccaagct ggcccatgat gtcgcagggg tggacttaac atggacaagc 10200
tgggcaattg ccgcgattgt accgggactt gtaagcttaa tcatcacgcc gcttgtgatt 10260
tacaaactgt atccgccgga aatcaaagaa acaccggatg cggcgaaaat cgcaacagaa 10320
aaactgaaag aaatgggacc gttcaaaaaa tcggagcttt ccatggttat cgtgtttctt 10380
ttggtgcttg tgctgtggat ttttggcggc agcttcaaca tcgacgctac cacaaccgca 10440
ttgatcggtt tggccgttct cttattatca caagttctga cttgggatga tatcaagaaa 10500
gaacagggcg cttgggatac gctcacttgg tttgcggcgc ttgtcatgct cgccaacttc 10560
ttgaatgaat taggcatggt gtcttggttc agtaatgcca tgaaatcatc cgtatcaggg 10620
ttctcttgga ttgtggcatt catcatttta attgttgtgt attattactc tcactatttc 10680
tttgcaagtg cgacagccca catcagtgcg atgtattcag catttttggc tgtcgtcgtg 10740
gcagcgggcg caccgccgct tttagcagcg ctgagcctcg cgttcatcag caacctgttc 10800
gggtcaacga ctcactacgg ttctggagcg gctccggtct tcttcggagc aggctacatc 10860
ccgcaaggca aatggtggtc catcggattt atcctgtcga ttgttcatat catcgtatgg 10920
cttgtgatcg gcggattatg gtggaaagta ctaggaatat ggtagaaaga aaaaggcaga 10980
cgcggtctgc ctttttttat tttcactcct tcgtaagaaa atggattttg aaaaatgaga 11040
aaattccctg tgaaaaatgg tatgatctag gtagaaagga cggctggtgc tgtggtgaaa 11100
aagcggttcc atttttccct gcaaacaaaa ataatggggc tgattgcggc tctgctggtc 11160
tttgtcattg gtgtgctgac cattacgtta gccgttcagc atacacaggg agaacggaga 11220
caggcagagc agctggcggt tcaaacggcg agaaccattt cctatatgcc gccggttaaa 11280
gagctcattg agagaaaaga cggacatgcg gctcagacgc aagaggtcat tgaacaaatg 11340
aaagaacaga ctggtgcgtt tgccatttat gttttgaacg aaaaaggaga cattcgcagc 11400
gcctctggaa aaagcggatt aaagaaactg gagcgcagca gagaaatttt gtttggcggt 11460
tcgcatgttt ctgaaacaaa agcggatgga cgaagagtga tcagagggag cgcgccgatt 11520
ataaaagaac agaagggata cagccaagtg atcggcagcg tgtctgttga ttttctgcaa 11580
acggagacag agcaaagcat caaaaagcat ttgagaaatt tgagtgtgat tgctgtgctt 11640
gtactgctgc tcggatttat tggcgccgcc gtgctggcga aaagcatcag aaaggatacg 11700
ctcgggcttg aaccgcatga gatcgcggct ctatatcgtg agaggaacgc aatgcttttc 11760
gcgattcgag aagggattat tgccaccaat cgtgaaggcg tcgtcaccat gatgaacgta 11820
tcggcggccg agatgctgaa gctgcccgag cctgtgatcc atcttcctat agatgacgtc 11880
aaatgctgcc gaaccaggaa gtaagcgtca acgatcaagt gtttattatc aatacgaaag 11940
tgatgaatca aggcgggcag gcgtatggga ttgtcgtcag cttcagggag aaaacagagc 12000
tgaagaagct gatcgacaca ttgacagagg ttcgcaaata ttcagaggat ctcagggcgc 12060
agactcatga attttcaaat aagctttatg cgattttagg gctgcgtcga 12110
<210> 2
<211> 1050
<212> PRT
<213> Paenibacillus sp-62047
<400> 2
Ile Ala Gly Val Val Gln Ser Val Asn Val Ser Gln Ala Gly Tyr Ser
1 5 10 15
Ser Asn Asp Phe Lys Thr Ala Thr Val Thr Ala Ser Asp Lys Leu Ser
20 25 30
Asp Thr Ser Tyr Gln Ile Leu Gln Gly Thr Thr Val Ile Ala Thr Gly
35 40 45
Thr Met Lys Asp Glu Gly Tyr Val Trp Gly Lys Tyr Val Tyr Ser Ile
50 55 60
Asp Phe Ser Ser Val Thr Ala Thr Gly Thr Asn Phe Thr Ile Arg Ser
65 70 75 80
Asn Gly Val Ser Ser Tyr Thr Phe Pro Ile Gln Thr Asn Met Trp Asn
85 90 95
Glu Tyr Lys Asp Glu Met Thr Ala Phe Tyr Arg Leu Leu Arg Thr Thr
100 105 110
Asp Thr Phe Ala Ala Tyr Pro Ala Gly Tyr Ser Asn Ile Ala Pro Ser
115 120 125
Asn Lys Ile Leu His Pro Asp Ser Phe Leu Asp Asp Ala Phe Ser Pro
130 135 140
Asp Arg Thr Thr His Tyr Asp Leu Thr Gly Gly Trp Phe Asp Ala Gly
145 150 155 160
Asp Tyr Gly Lys Tyr Gly Gly Asn Gln Trp Val Gln Gly Asn Ile Ala
165 170 175
Ile Ser Tyr Leu Arg His Ala Ser Ser Ala Ala Val Asn Phe Asp Lys
180 185 190
Asp Thr Asn Gly Ile Pro Asp Leu Val Asp Glu Ala Ile Phe Gly Ser
195 200 205
Gln Tyr Leu Val Lys Phe Ala Asn Gln Leu Gly Gly Ala Ile His Asn
210 215 220
Ile Leu Arg Lys Gly Gly Phe Val Leu Pro His Lys Val Thr Asp Asn
225 230 235 240
Val Pro Gly Asn Thr Asp Asp Arg Ala Leu Glu Ala Val Glu Ala Val
245 250 255
Gly Gly Ser Gly Lys Ser Ser Gly Ser Leu Ala Ala Thr Ala Arg Ala
260 265 270
Ile Arg Thr Ala Ile Ala Gly Gly Lys Val Ala Ala Asn Lys Val Ala
275 280 285
Gln Leu Gln Thr Leu Ala Asn Glu Phe Gln Ala Ala Ala Ile Ile Phe
290 295 300
Tyr Asn Tyr Thr Leu Thr His Gln Ser Gly Asn His Gly Ser Tyr Gly
305 310 315 320
Thr Met Asn Asn Gly Gly Ile Ala Asn Pro Leu Leu Trp Ala Glu Val
325 330 335
Gln Leu Tyr Leu Leu Thr Gly Asp Ala Ala Tyr Lys Thr Gln Ala Gln
340 345 350
Thr Arg Ile Asn Ala Ile Asn Glu Ala Tyr Val Ser Ser Thr Asn Tyr
355 360 365
Trp Asp Met His Pro Ile Ala Leu Ala Glu Phe Tyr Pro Val Ala Asp
370 375 380
Ser Ala Ile Lys Thr Lys Ile Gln Ser Ile Leu Lys His Gln Ala Tyr
385 390 395 400
Tyr Phe Ile Thr Leu Met Asp Glu Thr Pro Tyr Gly Val Leu Asn Gln
405 410 415
Phe Gly Asn Phe Gly Val Asn Glu Pro His Ala Ser Tyr Met Ala Asp
420 425 430
Leu Leu Arg Tyr Tyr Glu Leu Phe Asn Asp Pro Val Ala Leu Arg Ala
435 440 445
Ala Lys Lys Ala Leu Tyr Trp Ile Val Gly Asn Asn Pro Trp Asn Ile
450 455 460
Ser Trp Val Ser Gly Val Gly Ser Asn Phe Thr Asp Phe Leu His Thr
465 470 475 480
Arg Leu Asp Glu Glu Ala Tyr Ser Gln Thr Asn Thr Gly Val Val Leu
485 490 495
Pro Gly Ala Met Val Ser Gly Pro Asn Ile Lys Asp Pro Asn Asn Lys
500 505 510
Leu Ser Ser Ser Pro Trp Tyr Glu Asp Lys Pro Ile Trp Ala Asp Asp
515 520 525
Thr Asn Gln Trp Arg Tyr Asn Glu Tyr Ser Val Ser Ile Gln Thr Gly
530 535 540
Leu Phe Tyr Thr Ile Met Gly Leu Ser Ala Leu Gly Gly Asn Ala Ser
545 550 555 560
Thr Gly Gly Ala Glu Pro Val Lys Leu Pro Ile Thr Trp Pro Ile Ile
565 570 575
Gly Asp Tyr Val Thr Gly Asp Val Thr Val Phe Ala Gln Pro Glu Gly
580 585 590
Ser Leu Ser Asn Val Ser Ala Asn Gly Ile Val Leu Ser Pro Ser Asp
595 600 605
Gly Val Tyr Thr Thr Thr Val Ser Thr Ser Ala Asp Ala Pro Tyr Thr
610 615 620
Glu Arg Lys Val Gln Ile Lys Gly Thr Asp Asp Ser Gly Phe Thr Thr
625 630 635 640
Tyr Ser Asn Thr His Phe Thr Val Ala Pro Ala Leu Pro Asp Pro Ser
645 650 655
His Pro Leu Leu Phe Asp Asp Phe Asn Gln Lys Gly Ile Trp Gly Ser
660 665 670
Gln Lys Leu Asp Trp Val Asn Trp Tyr Asn Gln Asn Gly Gly Thr Ala
675 680 685
Ser Tyr Thr Arg Thr Thr Val Asp Thr Arg Thr Val Gly Lys Phe Ala
690 695 700
His Thr Pro Ala Ala Thr Thr Ser Lys Ala Lys Phe Gln Pro Trp Lys
705 710 715 720
Tyr Asn Ala Asn Leu Asn Gly Tyr Arg Tyr Leu Asn Phe Thr Met Lys
725 730 735
Asn Pro Gly Tyr Pro Asn Thr Lys Ile Arg Ile Ala Ala Asn Asp Gly
740 745 750
Thr Lys Ser Val Asn Leu Thr Ser Gly Glu Val Ala Ile Ser Ser Thr
755 760 765
Trp Thr Thr Tyr Gln Tyr Asp Leu Asn Leu His Pro Thr Leu Asn Lys
770 775 780
Ser Asn Val Leu Ile Glu Val Trp Leu Ser Asn Pro Thr Ala Gly Ala
785 790 795 800
Tyr Gly Glu Ile Leu Ile Asp Glu Ile Ser Ala Val Asn Thr Asn Ser
805 810 815
Gly Thr Ala Pro Thr Leu Ser Ala Thr Gly Val Asn Ala Ser Ile Gly
820 825 830
Asn Gln Ser Thr Val Phe Thr Tyr Thr Ala Thr Tyr Thr Asp Ala Asn
835 840 845
Asn Gln Ala Pro Phe Asp Val Gln Val Val Ile Asp Gly Val Ile Arg
850 855 860
Ser Met Thr Ala Ala Asp Pro Thr Asp Thr Thr Tyr Ser Asp Gly Arg
865 870 875 880
Val Tyr Thr Tyr Ala Thr Thr Leu Pro Val Gly Thr His Lys Phe Tyr
885 890 895
Phe Arg Thr Thr Asp Thr Thr Thr Asn Phe Val Ser Thr Ser Val Gln
900 905 910
Thr Gly Pro Thr Val Ile Arg Asn Lys Leu Glu Ala Glu Val Leu Ser
915 920 925
Ile Asn Leu Thr Asn Tyr Thr His Ala Val Lys Asp Asn Ala Asp Ala
930 935 940
Ser Gly Gly Lys Tyr Arg Leu Phe Asn Gly Arg Gln Ala Asn Asp Tyr
945 950 955 960
Ile Glu Tyr Ala Val Asn Val Pro Lys Ala Gly Thr Tyr Gln Val Ser
965 970 975
Ala Arg Ala Met Arg Leu Ser Asp Asn Gly Ile Tyr Gln Leu Gln Ile
980 985 990
Asn Gly Ser Asn Gln Gly Thr Pro Phe Asp Thr Tyr Gln Ser Ser Gly
995 1000 1005
Lys Tyr Leu Asp Tyr Ala Leu Gly Asn Val Thr Ile Thr Ser Pro
1010 1015 1020
Gly Thr Gln Leu Phe Arg Phe Lys Val Thr Gly Lys Asn Ala Ser
1025 1030 1035
Ser Leu Gly Tyr Lys Leu Pro Leu Asp Phe Ile Gln
1040 1045 1050
<210> 3
<211> 87
<212> DNA
<213> Bacillus licheniformis
<400> 3
atgaaacaac aaaaacggct ttacgcccga ttgctgacgc tgttatttgc gctcatcttc 60
ttgctgcctc attctgcagc agcagcg 87
<210> 4
<211> 29
<212> PRT
<213> Bacillus licheniformis
<400> 4
Met Lys Gln Gln Lys Arg Leu Tyr Ala Arg Leu Leu Thr Leu Leu Phe
1 5 10 15
Ala Leu Ile Phe Leu Leu Pro His Ser Ala Ala Ala Ala
20 25
<210> 5
<211> 3111
<212> DNA
<213> Paenibacillus sp.
<400> 5
gacgagtttg acacgctaag ggaaaagtat aaggccatgc tgaacggagg gacaacctat 60
aatctctccg acccggatat agcggcgcgt gttaatgcca ttacggtgac tgcccaggga 120
tactgggact ccatgcttaa agatccgaac cgtaaccgtc tttggaacga tgcacccttt 180
ggctcggatt cgacttccat caccacgacc tacagacacc tttatgatat ggcgctagct 240
tatacgactt atggctccag tctgcagggc aatgccgcac ttaaagcgga tattatcagc 300
ggtttggact ggatgaatgc caatcaattt tataatggct gcagccaata tcaaaactgg 360
tggcactggc aaattggcgg tcccatggcc ttgaatgata tcgtggcatt aatgtacacg 420
gagctaaccg caacacaaat ttccaattac atggcggcca tttattacac ccaagcgagt 480
gttacgatga cgggggcaaa ccggctatgg gaaagtcagg ttattgccat ctccggaatc 540
ttgaataagg attccgccag agttgccgct ggtcgggatg gcatcagcgc tttgctgccg 600
tatgtcgcca agggtgacgg attttacaac gatggatcat tcgttcagca tacttattat 660
gcttacaacg gtggttatgg ttcagagctg ttatctggca ttgcagactt gatatttatt 720
ttgaatggct cttcatggca ggtaacggat cctaataaaa acaatgtata ccgttggatt 780
tatgattcct acgagccttt catctataaa gggaatctga tggacatggt ccgcggtaga 840
gagatctcaa ggcatggatt gcaggacgat aaggcagccg tgactgtgat ggcatcgatc 900
attcgtctgt cacaaaccgc tgcttccgcc gatgctaccg catttaagag aatggtgaaa 960
tattggctgc tgctggatac ggataagact ttccttaaag cagtatcgat tgatctgatt 1020
attgccgcga accaactggt gaacgattcc accgttacct ctcgagggga gctagtgaaa 1080
tataaacaat tctccggaat ggaccgcgct gtacagctta gacctggctt cggttttggg 1140
cttagcatgt tttccagccg gatcggtaat tatgagtcga ttaatgcaga gaacaacaaa 1200
ggctggcata ccggcgacgg catgacctac ctttacaata ctgacctgag tcagttcaat 1260
gaccatttct gggcaactgt ggataattac cgattgccgg gtaccacagt gctccagaac 1320
acgacgcaaa ccgcgaacag ccgcagcgac aaaagctggg ccggaggaac ggatattctt 1380
gggcaatatg gtgtttccgg catggaactg cataccgtag gtaagagcct gacagccaag 1440
aaatcctggt tcatgtttga cgatgagatc gtcgcgctgg gttcaggtat tgccagcacc 1500
gatggcatcg caaccgaaac gattgtagag aatcgaaagc tcaatagcag cggcaataat 1560
gcattgattg ttaacgggac ggcgaagccg ggctcccttg gatggtcgga aacaatgacc 1620
ggaaccaatt atattcatct agccggcagc gtacccggct ccgatatcgg ttattatttt 1680
cctggtggag cagcagtcaa aggcttgcgt gaagcccggt cgggaagctg gagctcgctg 1740
aattcctccg catcctggaa ggactcgaca ttgcatacac gcaactttat gacgctttgg 1800
ttcgatcatg gcatgaaccc gacaaacggt agttattctt atgtgctgct tccgaataag 1860
accagcagtg cggtggccag ctatgctgca acgcctcaga tcagcattct ggagaattct 1920
agctcggcgc aagcggtgaa ggagacgcaa ttgaatgtca ccggaattaa cttttggaac 1980
gatgagccaa ccacggtggg cctggttact tccaatcgga aagcatccgt tatgacaaaa 2040
gaaacggcta gtgatttcga gatatccgtt tccgacccga cccaaagtaa tgtggggacc 2100
atctatattg atgtcaacaa aagtgcaacc ggattgattt cgaaggataa tgaaataacg 2160
gtcattcagt actacccaac catgaagttt aaagtcaatg taaacaattc tggcgggaag 2220
tcctataaag taaagtttag cctgacagga acacccggca gcaacccgtc tccaatcccg 2280
ataccgaatc cttacgaagc ggaagctttg ccaattaacg ctctgacaga tactcccgtg 2340
gtttacaatg atgccaatgc cagtggtggc aagaagcttg gcttcaataa caatgcagtg 2400
gatgattatg tggagttcag tctggacgtc acacagcccg gcacctacga tgtcaaatcc 2460
cggattatga aatcaacgaa cagcgggatt tatcagctgt ctattaatgg gaccaacgta 2520
gggagcgcgc aggatatgtt ctggacgacc tccgagctgt ctaaggagtt tactatgggc 2580
tcatacagct tcagcacacc cgggagctat ttgttccgat taaaaacaac cggcaagaat 2640
gtcagttctt caggatataa gctgatgctg gacaatttta gtctggtatc aacaggtatt 2700
gatacaacgg tgattgtgga caatgccgat gcagctggtg ttacgaaggt gggtacttgg 2760
accggaacca atacgcagac cgatcggtac ggcgccgact acattcacga tgggaacacg 2820
gggaaaggta cgaagagcgt tacctttact ccaaatgtac ctatcagtgg aacttatcag 2880
gtttacatga tgtgggctgc ccatacgaat agggcaacga atgttcccgt agacgtaacg 2940
cattcaggcg gtacagcaac gctaaatgtt aaccaacaag gtaatggtgg tgtgtggaat 3000
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gcgacgaatg gatatgttgt agccgatgcc gtgaagctgg taaaggtccc a 3111
<210> 6
<211> 1037
<212> PRT
<213> Paenibacillus sp.
<400> 6
Asp Glu Phe Asp Thr Leu Arg Glu Lys Tyr Lys Ala Met Leu Asn Gly
1 5 10 15
Gly Thr Thr Tyr Asn Leu Ser Asp Pro Asp Ile Ala Ala Arg Val Asn
20 25 30
Ala Ile Thr Val Thr Ala Gln Gly Tyr Trp Asp Ser Met Leu Lys Asp
35 40 45
Pro Asn Arg Asn Arg Leu Trp Asn Asp Ala Pro Phe Gly Ser Asp Ser
50 55 60
Thr Ser Ile Thr Thr Thr Tyr Arg His Leu Tyr Asp Met Ala Leu Ala
65 70 75 80
Tyr Thr Thr Tyr Gly Ser Ser Leu Gln Gly Asn Ala Ala Leu Lys Ala
85 90 95
Asp Ile Ile Ser Gly Leu Asp Trp Met Asn Ala Asn Gln Phe Tyr Asn
100 105 110
Gly Cys Ser Gln Tyr Gln Asn Trp Trp His Trp Gln Ile Gly Gly Pro
115 120 125
Met Ala Leu Asn Asp Ile Val Ala Leu Met Tyr Thr Glu Leu Thr Ala
130 135 140
Thr Gln Ile Ser Asn Tyr Met Ala Ala Ile Tyr Tyr Thr Gln Ala Ser
145 150 155 160
Val Thr Met Thr Gly Ala Asn Arg Leu Trp Glu Ser Gln Val Ile Ala
165 170 175
Ile Ser Gly Ile Leu Asn Lys Asp Ser Ala Arg Val Ala Ala Gly Arg
180 185 190
Asp Gly Ile Ser Ala Leu Leu Pro Tyr Val Ala Lys Gly Asp Gly Phe
195 200 205
Tyr Asn Asp Gly Ser Phe Val Gln His Thr Tyr Tyr Ala Tyr Asn Gly
210 215 220
Gly Tyr Gly Ser Glu Leu Leu Ser Gly Ile Ala Asp Leu Ile Phe Ile
225 230 235 240
Leu Asn Gly Ser Ser Trp Gln Val Thr Asp Pro Asn Lys Asn Asn Val
245 250 255
Tyr Arg Trp Ile Tyr Asp Ser Tyr Glu Pro Phe Ile Tyr Lys Gly Asn
260 265 270
Leu Met Asp Met Val Arg Gly Arg Glu Ile Ser Arg His Gly Leu Gln
275 280 285
Asp Asp Lys Ala Ala Val Thr Val Met Ala Ser Ile Ile Arg Leu Ser
290 295 300
Gln Thr Ala Ala Ser Ala Asp Ala Thr Ala Phe Lys Arg Met Val Lys
305 310 315 320
Tyr Trp Leu Leu Leu Asp Thr Asp Lys Thr Phe Leu Lys Ala Val Ser
325 330 335
Ile Asp Leu Ile Ile Ala Ala Asn Gln Leu Val Asn Asp Ser Thr Val
340 345 350
Thr Ser Arg Gly Glu Leu Val Lys Tyr Lys Gln Phe Ser Gly Met Asp
355 360 365
Arg Ala Val Gln Leu Arg Pro Gly Phe Gly Phe Gly Leu Ser Met Phe
370 375 380
Ser Ser Arg Ile Gly Asn Tyr Glu Ser Ile Asn Ala Glu Asn Asn Lys
385 390 395 400
Gly Trp His Thr Gly Asp Gly Met Thr Tyr Leu Tyr Asn Thr Asp Leu
405 410 415
Ser Gln Phe Asn Asp His Phe Trp Ala Thr Val Asp Asn Tyr Arg Leu
420 425 430
Pro Gly Thr Thr Val Leu Gln Asn Thr Thr Gln Thr Ala Asn Ser Arg
435 440 445
Ser Asp Lys Ser Trp Ala Gly Gly Thr Asp Ile Leu Gly Gln Tyr Gly
450 455 460
Val Ser Gly Met Glu Leu His Thr Val Gly Lys Ser Leu Thr Ala Lys
465 470 475 480
Lys Ser Trp Phe Met Phe Asp Asp Glu Ile Val Ala Leu Gly Ser Gly
485 490 495
Ile Ala Ser Thr Asp Gly Ile Ala Thr Glu Thr Ile Val Glu Asn Arg
500 505 510
Lys Leu Asn Ser Ser Gly Asn Asn Ala Leu Ile Val Asn Gly Thr Ala
515 520 525
Lys Pro Gly Ser Leu Gly Trp Ser Glu Thr Met Thr Gly Thr Asn Tyr
530 535 540
Ile His Leu Ala Gly Ser Val Pro Gly Ser Asp Ile Gly Tyr Tyr Phe
545 550 555 560
Pro Gly Gly Ala Ala Val Lys Gly Leu Arg Glu Ala Arg Ser Gly Ser
565 570 575
Trp Ser Ser Leu Asn Ser Ser Ala Ser Trp Lys Asp Ser Thr Leu His
580 585 590
Thr Arg Asn Phe Met Thr Leu Trp Phe Asp His Gly Met Asn Pro Thr
595 600 605
Asn Gly Ser Tyr Ser Tyr Val Leu Leu Pro Asn Lys Thr Ser Ser Ala
610 615 620
Val Ala Ser Tyr Ala Ala Thr Pro Gln Ile Ser Ile Leu Glu Asn Ser
625 630 635 640
Ser Ser Ala Gln Ala Val Lys Glu Thr Gln Leu Asn Val Thr Gly Ile
645 650 655
Asn Phe Trp Asn Asp Glu Pro Thr Thr Val Gly Leu Val Thr Ser Asn
660 665 670
Arg Lys Ala Ser Val Met Thr Lys Glu Thr Ala Ser Asp Phe Glu Ile
675 680 685
Ser Val Ser Asp Pro Thr Gln Ser Asn Val Gly Thr Ile Tyr Ile Asp
690 695 700
Val Asn Lys Ser Ala Thr Gly Leu Ile Ser Lys Asp Asn Glu Ile Thr
705 710 715 720
Val Ile Gln Tyr Tyr Pro Thr Met Lys Phe Lys Val Asn Val Asn Asn
725 730 735
Ser Gly Gly Lys Ser Tyr Lys Val Lys Phe Ser Leu Thr Gly Thr Pro
740 745 750
Gly Ser Asn Pro Ser Pro Ile Pro Ile Pro Asn Pro Tyr Glu Ala Glu
755 760 765
Ala Leu Pro Ile Asn Ala Leu Thr Asp Thr Pro Val Val Tyr Asn Asp
770 775 780
Ala Asn Ala Ser Gly Gly Lys Lys Leu Gly Phe Asn Asn Asn Ala Val
785 790 795 800
Asp Asp Tyr Val Glu Phe Ser Leu Asp Val Thr Gln Pro Gly Thr Tyr
805 810 815
Asp Val Lys Ser Arg Ile Met Lys Ser Thr Asn Ser Gly Ile Tyr Gln
820 825 830
Leu Ser Ile Asn Gly Thr Asn Val Gly Ser Ala Gln Asp Met Phe Trp
835 840 845
Thr Thr Ser Glu Leu Ser Lys Glu Phe Thr Met Gly Ser Tyr Ser Phe
850 855 860
Ser Thr Pro Gly Ser Tyr Leu Phe Arg Leu Lys Thr Thr Gly Lys Asn
865 870 875 880
Val Ser Ser Ser Gly Tyr Lys Leu Met Leu Asp Asn Phe Ser Leu Val
885 890 895
Ser Thr Gly Ile Asp Thr Thr Val Ile Val Asp Asn Ala Asp Ala Ala
900 905 910
Gly Val Thr Lys Val Gly Thr Trp Thr Gly Thr Asn Thr Gln Thr Asp
915 920 925
Arg Tyr Gly Ala Asp Tyr Ile His Asp Gly Asn Thr Gly Lys Gly Thr
930 935 940
Lys Ser Val Thr Phe Thr Pro Asn Val Pro Ile Ser Gly Thr Tyr Gln
945 950 955 960
Val Tyr Met Met Trp Ala Ala His Thr Asn Arg Ala Thr Asn Val Pro
965 970 975
Val Asp Val Thr His Ser Gly Gly Thr Ala Thr Leu Asn Val Asn Gln
980 985 990
Gln Gly Asn Gly Gly Val Trp Asn Leu Leu Gly Thr Tyr Ser Phe Asn
995 1000 1005
Ala Gly Ser Thr Gly Ala Ile Lys Ile Arg Thr Asp Ala Thr Asn
1010 1015 1020
Gly Tyr Val Val Ala Asp Ala Val Lys Leu Val Lys Val Pro
1025 1030 1035
Claims (10)
- (A) 서열식별번호: 2의 아미노산 95 내지 105에 상응하는 영역 1, 서열식별번호: 2의 아미노산 115 내지 138에 상응하는 영역 2, 서열식별번호: 2의 아미노산 210 내지 251에 상응하는 영역 3, 서열식별번호: 2의 아미노산 267 내지 301에 상응하는 영역 4, 서열식별번호: 2의 아미노산 339 내지 361에 상응하는 영역 5, 서열식별번호: 2의 아미노산 547 내지 595에 상응하는 영역 6, 서열식별번호: 2의 아미노산 612 내지 660에 상응하는 영역 7, 서열식별번호: 2의 아미노산 806 내지 828에 상응하는 영역 8, 서열식별번호: 2의 아미노산 839 내지 1042에 상응하는 영역 9, 서열식별번호: 2의 아미노산 1 내지 94에 상응하는 영역 10, 서열식별번호: 2의 아미노산 106 내지 114에 상응하는 영역 11, 서열식별번호: 2의 아미노산 139 내지 209에 상응하는 영역 12, 서열식별번호: 2의 아미노산 252 내지 266에 상응하는 영역 13, 서열식별번호: 2의 아미노산 302 내지 338에 상응하는 영역 14, 서열식별번호: 2의 아미노산 362 내지 546에 상응하는 영역 15, 서열식별번호: 2의 아미노산 596 내지 611에 상응하는 영역 16, 서열식별번호: 2의 아미노산 661 내지 805에 상응하는 영역 17, 서열식별번호: 2의 아미노산 829 내지 838에 상응하는 영역 18, 및 서열식별번호: 2의 아미노산 1043 내지 1055에 상응하는 영역 19로 이루어진 군으로부터 선택된 영역의 1개 이상의 위치에서 변경, 바람직하게는 치환을 포함하는 엔도글루카나제 변이체; 및
(B) 서열식별번호: 6의 아미노산 154 내지 176에 상응하는 영역 1, 서열식별번호: 6의 아미노산 614 내지 658에 상응하는 영역 2, 서열식별번호: 6의 아미노산 731 내지 803에 상응하는 영역 3, 서열식별번호: 6의 아미노산 807 내지 846에 상응하는 영역 4, 서열식별번호: 6의 아미노산 872 내지 885에 상응하는 영역 5, 서열식별번호: 6의 아미노산 903 내지 1004에 상응하는 영역 6, 서열식별번호: 6의 아미노산 1 내지 153에 상응하는 영역 7, 서열식별번호: 6의 아미노산 177 내지 613에 상응하는 영역 8, 서열식별번호: 6의 아미노산 659 내지 730에 상응하는 영역 9, 서열식별번호: 6의 아미노산 804 내지 806에 상응하는 영역 10, 서열식별번호: 6의 아미노산 847 내지 871에 상응하는 영역 11, 서열식별번호: 6의 아미노산 886 내지 902에 상응하는 영역 12, 및 서열식별번호: 6의 아미노산 1005 내지 1037에 상응하는 영역 13으로 이루어진 군으로부터 선택된 영역의 1개 이상의 위치에서 변경, 바람직하게는 치환을 포함하는 크산탄 리아제 변이체
를 포함하는 세제 조성물이며;
여기서 엔도글루카나제 변이체 (A)는 서열식별번호: 2에 대해 적어도 60% 및 100% 미만의 서열 동일성을 갖고; 바람직하게는 상기 엔도글루카나제 변이체는 크산탄 리아제로 사전-처리된 크산탄 검에 대해 활성을 갖고; 크산탄 리아제 변이체 (B)는 서열식별번호: 6에 대해 적어도 60% 및 100% 미만의 서열 동일성을 갖고, 바람직하게는 상기 크산탄 리아제 변이체는 크산탄 검에 대해 활성을 갖는 것인 세제 조성물. - 제1항에 있어서, 상기 엔도글루카나제 변이체가 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 영역의 1개 이상의 위치에서 변경, 바람직하게는 치환을 포함하는 것인 세제 조성물:
i) 서열식별번호: 2의 아미노산 95 내지 105에 상응하는 영역 1, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
ii) 서열식별번호: 2의 아미노산 115 내지 138에 상응하는 영역 2, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
iii) 서열식별번호: 2의 아미노산 210 내지 251에 상응하는 영역 3, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 226, 227, 228, 229, 230, 231, 232, 233, 234, 235, 236, 237, 238, 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 249, 250, 251로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
iv) 서열식별번호: 2의 아미노산 267 내지 301에 상응하는 영역 4, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 267, 268, 269, 270, 271, 272, 273, 274, 275, 276, 277, 278, 279, 280, 281, 282, 283, 284, 285, 286, 287, 288, 289, 290, 291, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298, 299, 300, 301로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
v) 서열식별번호: 2의 아미노산 339 내지 361에 상응하는 영역 5, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 339, 340, 341, 342, 343, 344, 345, 346, 347, 348, 349, 350, 351, 352, 353, 354, 355, 356, 357, 358, 359, 360, 361로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
vi) 서열식별번호: 2의 아미노산 547 내지 595에 상응하는 영역 6, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 547, 548, 549, 550, 551, 552, 553, 554, 555, 556, 557, 558, 559, 560, 561, 562, 563, 564, 565, 566, 567, 568, 569, 570, 571, 572, 573, 574, 575, 576, 577, 578, 579, 580, 581, 582, 583, 584, 585, 586, 587, 588, 589, 590, 591, 592, 593, 594, 595로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
vii) 서열식별번호: 2의 아미노산 612 내지 660에 상응하는 영역 7, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 612, 613, 614, 615, 616, 617, 618, 619, 620, 621, 622, 623, 624, 625, 626, 627, 628, 629, 630, 631, 632, 633, 634, 635, 636, 637, 638, 639, 640, 641, 642, 643, 644, 645, 646, 647, 648, 649, 650, 651, 652, 653, 654, 655, 656, 657, 658, 659, 660으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
viii) 서열식별번호: 2의 아미노산 806 내지 828에 상응하는 영역 8, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 806, 807, 808, 809, 810, 811, 812, 813, 814, 815, 816, 817, 818, 819, 820, 821, 822, 823, 824, 825, 826, 827, 828로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
ix) 서열식별번호: 2의 아미노산 839 내지 1042에 상응하는 영역 9, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 839, 840, 841, 842, 843, 844, 845, 846, 847, 848, 849, 850, 851, 852, 853, 854, 855, 856, 857, 858, 859, 860, 861, 862, 863, 864, 865, 866, 867, 868, 869, 870, 871, 872, 873, 874, 875, 876, 877, 878, 879, 880, 881, 882, 883, 884, 885, 886, 887, 888, 889, 890, 891, 892, 893, 894, 895, 896, 897, 898, 899, 900, 901, 902, 903, 904, 905, 906, 907, 908, 909, 910, 911, 912, 913, 914, 915, 916, 917, 918, 919, 920, 921, 922, 923, 924, 925, 926, 927, 928, 929, 930, 931, 932, 933, 934, 935, 936, 937, 938, 939, 940, 941, 942, 943, 944, 945, 946, 947, 948, 949, 950, 951, 952, 953, 954, 955, 956, 957, 958, 959, 960, 961, 962, 963, 964, 965, 966, 967, 968, 969, 970, 971, 972, 973, 974, 975, 976, 977, 978, 979, 980, 981, 982, 983, 984, 985, 986, 987, 988, 989, 990, 991, 992, 993, 994, 995, 996, 997, 998, 999, 1000, 1001, 1002, 1003, 1004, 1005, 1006, 1007, 1008, 1009, 1010, 1011, 1012, 1013, 1014, 1015, 1016, 1017, 1018, 1019, 1020, 1021, 1022, 1023, 1024, 1025, 1026, 1027, 1028, 1029, 1030, 1031, 1032, 1033, 1034, 1035, 1036, 1037, 1038, 1039, 1040, 1041, 1042로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
x) 서열식별번호: 2의 아미노산 1 내지 94에 상응하는 영역 10, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
xi) 서열식별번호: 2의 아미노산 106 내지 114에 상응하는 영역 11, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
xii) 서열식별번호: 2의 아미노산 139 내지 209에 상응하는 영역 12, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 209로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
xiii) 서열식별번호: 2의 아미노산 252 내지 266에 상응하는 영역 13, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 252, 253, 254, 255, 256, 257, 258, 259, 260, 261, 262, 263, 264, 265, 266으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
xiv) 서열식별번호: 2의 아미노산 302 내지 338에 상응하는 영역 14, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 302, 303, 304, 305, 306, 307, 308, 309, 310, 311, 312, 313, 314, 315, 316, 317, 318, 319, 320, 321, 322, 323, 324, 325, 326, 327, 328, 329, 330, 331, 332, 333, 334, 335, 336, 337, 338로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
xv) 서열식별번호: 2의 아미노산 362 내지 546에 상응하는 영역 15, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 362, 363, 364, 365, 366, 367, 368, 369, 370, 371, 372, 373, 374, 375, 376, 377, 378, 379, 380, 381, 382, 383, 384, 385, 386, 387, 388, 389, 390, 391, 392, 393, 394, 395, 396, 397, 398, 399, 400, 401, 402, 403, 404, 405, 406, 407, 408, 409, 410, 411, 412, 413, 414, 415, 416, 417, 418, 419, 420, 421, 422, 423, 424, 425, 426, 427, 428, 429, 430, 431, 432, 433, 434, 435, 436, 437, 438, 439, 440, 441, 442, 443, 444, 445, 446, 447, 448, 449, 450, 451, 452, 453, 454, 455, 456, 457, 458, 459, 460, 461, 462, 463, 464, 465, 466, 467, 468, 469, 470, 471, 472, 473, 474, 475, 476, 477, 478, 479, 480, 481, 482, 483, 484, 485, 486, 487, 488, 489, 490, 491, 492, 493, 494, 495, 496, 497, 498, 499, 500, 501, 502, 503, 504, 505, 506, 507, 508, 509, 510, 511, 512, 513, 514, 515, 516, 517, 518, 519, 520, 521, 522, 523, 524, 525, 526, 527, 528, 529, 530, 531, 532, 533, 534, 535, 536, 537, 538, 539, 540, 541, 542, 543, 544, 545, 546으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
xvi) 서열식별번호: 2의 아미노산 596 내지 611에 상응하는 영역 16, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 596, 597, 598, 599, 600, 601, 602, 603, 604, 605, 606, 607, 608, 609, 610, 611로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
xvii) 서열식별번호: 2의 아미노산 661 내지 805에 상응하는 영역 17, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 661, 662, 663, 664, 665, 666, 667, 668, 669, 670, 671, 672, 673, 674, 675, 676, 677, 678, 679, 680, 681, 682, 683, 684, 685, 686, 687, 688, 689, 690, 691, 692, 693, 694, 695, 696, 697, 698, 699, 700, 701, 702, 703, 704, 705, 706, 707, 708, 709, 710, 711, 712, 713, 714, 715, 716, 717, 718, 719, 720, 721, 722, 723, 724, 725, 726, 727, 728, 729, 730, 731, 732, 733, 734, 735, 736, 737, 738, 739, 740, 741, 742, 743, 744, 745, 746, 747, 748, 749, 750, 751, 752, 753, 754, 755, 756, 757, 758, 759, 760, 761, 762, 763, 764, 765, 766, 767, 768, 769, 770, 771, 772, 773, 774, 775, 776, 777, 778, 779, 780, 781, 782, 783, 784, 785, 786, 787, 788, 789, 790, 791, 792, 793, 794, 795, 796, 797, 798, 799, 800, 801, 802, 803, 804, 805로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함),
xviii) 서열식별번호: 2의 아미노산 829 내지 838 내지 1042에 상응하는 영역 18, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 829, 830, 831, 832, 833, 834, 835, 836, 837, 838로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함), 및
xix) 서열식별번호: 2의 아미노산 1043 내지 1055에 상응하는 영역 19, 예를 들어 서열식별번호: 2의 아미노산 위치에 상응하는 위치 1043, 1044, 1045, 1046, 1047, 1048, 1049, 1050, 1051, 1052, 1053, 1054, 1055로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 2의 넘버링을 사용함). - 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 크산탄 리아제 변이체가 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 영역의 1개 이상의 위치에서 변경, 바람직하게는 치환을 포함하는 것인 세제 조성물:
i) 서열식별번호: 6의 아미노산 154 내지 176에 상응하는 영역 1, 예를 들어 서열식별번호: 6의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 6의 넘버링을 사용함),
ii) 서열식별번호: 6의 아미노산 614 내지 658에 상응하는 영역 2, 예를 들어 서열식별번호: 6의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 614, 615, 616, 617, 618, 619, 620, 621, 622, 623, 624, 625, 626, 627, 628, 629, 630, 631, 632, 633, 634, 635, 636, 637, 638, 639, 640, 641, 642, 643, 644, 645, 646, 647, 648, 649, 650, 651, 652, 653, 654, 655, 656, 657, 658로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 6의 넘버링을 사용함),
iii) 서열식별번호: 6의 아미노산 731 내지 803에 상응하는 영역 3, 예를 들어 서열식별번호: 6의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 731, 732, 733, 734, 735, 736, 737, 738, 739, 740, 741, 742, 743, 744, 745, 746, 747, 748, 749, 750, 751, 752, 753, 754, 755, 756, 757, 758, 759, 760, 761, 762, 763, 764, 765, 766, 767, 768, 769, 770, 771, 772, 773, 774, 775, 776, 777, 778, 779, 780, 781, 782, 783, 784, 785, 786, 787, 788, 789, 790, 791, 792, 793, 794, 795, 796, 797, 798, 799, 800, 801, 802, 803으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 6의 넘버링을 사용함),
iv) 서열식별번호: 6의 아미노산 807 내지 846에 상응하는 영역 4, 예를 들어 서열식별번호: 6의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 807, 808, 809, 810, 811, 812, 813, 814, 815, 816, 817, 818, 819, 820, 821, 822, 823, 824, 825, 826, 827, 828, 829, 830, 831, 832, 833, 834, 835, 836, 837, 838, 839, 840, 841, 842, 843, 844, 845, 846으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 6의 넘버링을 사용함),
v) 서열식별번호: 6의 아미노산 872 내지 885에 상응하는 영역 5, 예를 들어 서열식별번호: 6의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 872, 873, 874, 875, 876, 877, 878, 879, 880, 881, 882, 883, 884, 885로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 6의 넘버링을 사용함),
vi) 서열식별번호: 6의 아미노산 903 내지 1004에 상응하는 영역 6, 예를 들어 서열식별번호: 6의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 903, 904, 905, 906, 907, 908, 909, 910, 911, 912, 913, 914, 915, 916, 917, 918, 919, 920, 921, 922, 923, 924, 925, 926, 927, 928, 929, 930, 931, 932, 933, 934, 935, 936, 937, 938, 939, 940, 941, 942, 943, 944, 945, 946, 947, 948, 949, 950, 951, 952, 953, 954, 955, 956, 957, 958, 959, 960, 961, 962, 963, 964, 965, 966, 967, 968, 969, 970, 971, 972, 973, 974, 975, 976, 977, 978, 979, 980, 981, 982, 983, 984, 985, 986, 987, 988, 989, 990, 991, 992, 993, 994, 995, 996, 997, 998, 999, 1000, 1001, 1002, 1003, 1004로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경 (예를 들어 서열식별번호: 6의 넘버링을 사용함),
vii) 서열식별번호: 6의 아미노산 1 내지 153에 상응하는 영역 7, 예를 들어 서열식별번호: 6의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152 및 153으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경,
viii) 서열식별번호: 6의 아미노산 177 내지 613에 상응하는 영역 8, 예를 들어 서열식별번호: 6의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 221, 222, 223, 224, 225, 226, 227, 228, 229, 230, 231, 232, 233, 234, 235, 236, 237, 238, 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 246, 247, 248, 249, 250, 251, 252, 253, 254, 255, 256, 257, 258, 259, 260, 261, 262, 263, 264, 265, 266, 267, 268, 269, 270, 271, 272, 273, 274, 275, 276, 277, 278, 279, 280, 281, 282, 283, 284, 285, 286, 287, 288, 289, 290, 291, 292, 293, 294, 295, 296, 297, 298, 299, 300, 301, 302, 303, 304, 305, 306, 307, 308, 309, 310, 311, 312, 313, 314, 315, 316, 317, 318, 319, 320, 321, 322, 323, 324, 325, 326, 327, 328, 329, 330, 331, 332, 333, 334, 335, 336, 337, 338, 339, 340, 341, 342, 343, 344, 345, 346, 347, 348, 349, 350, 351, 352, 353, 354, 355, 356, 357, 358, 359, 360, 361, 362, 363, 364, 365, 366, 367, 368, 369, 370, 371, 372, 373, 374, 375, 376, 377, 378, 379, 380, 381, 382, 383, 384, 385, 386, 387, 388, 389, 390, 391, 392, 393, 394, 395, 396, 397, 398, 399, 400, 401, 402, 403, 404, 405, 406, 407, 408, 409, 410, 411, 412, 413, 414, 415, 416, 417, 418, 419, 420, 421, 422, 423, 424, 425, 426, 427, 428, 429, 430, 431, 432, 433, 434, 435, 436, 437, 438, 439, 440, 441, 442, 443, 444, 445, 446, 447, 448, 449, 450, 451, 452, 453, 454, 455, 456, 457, 458, 459, 460, 461, 462, 463, 464, 465, 466, 467, 468, 469, 470, 471, 472, 473, 474, 475, 476, 477, 478, 479, 480, 481, 482, 483, 484, 485, 486, 487, 488, 489, 490, 491, 492, 493, 494, 495, 496, 497, 498, 499, 500, 501, 502, 503, 504, 505, 506, 507, 508, 509, 510, 511, 512, 513, 514, 515, 516, 517, 518, 519, 520, 521, 522, 523, 524, 525, 526, 527, 528, 529, 530, 531, 532, 533, 534, 535, 536, 537, 538, 539, 540, 541, 542, 543, 544, 545, 546, 547, 548, 549, 550, 551, 552, 553, 554, 555, 556, 557, 558, 559, 560, 561, 562, 563, 564, 565, 566, 567, 568, 569, 570, 571, 572, 573, 574, 575, 576, 577, 578, 579, 580, 581, 582, 583, 584, 585, 586, 587, 588, 589, 590, 591, 592, 593, 594, 595, 596, 597, 598, 599, 600, 601, 602, 603, 604, 605, 606, 607, 608, 609, 610, 611, 612 및 613으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경,
ix) 서열식별번호: 6의 아미노산 659 내지 730에 상응하는 영역 9, 예를 들어 서열식별번호: 6의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 659, 660, 661, 662, 663, 664, 665, 666, 667, 668, 669, 670, 671, 672, 673, 674, 675, 676, 677, 678, 679, 680, 681, 682, 683, 684, 685, 686, 687, 688, 689, 690, 691, 692, 693, 694, 695, 696, 697, 698, 699, 700, 701, 702, 703, 704, 705, 706, 707, 708, 709, 710, 711, 712, 713, 714, 715, 716, 717, 718, 719, 720, 721, 722, 723, 724, 725, 726, 727, 728, 729 및 730으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경,
x) 서열식별번호: 6의 아미노산 804 내지 806에 상응하는 영역 10, 예를 들어 서열식별번호: 6의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 804, 805 및 806으로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경,
xi) 서열식별번호: 6의 아미노산 847 내지 871에 상응하는 영역 11, 예를 들어 서열식별번호: 6의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 847, 848, 849, 850, 851, 852, 853, 854, 855, 856, 857, 858, 859, 860, 861, 862, 863, 864, 865, 866, 867, 868, 869, 870 및 871로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경,
xii) 서열식별번호: 6의 아미노산 886 내지 902에 상응하는 영역 12, 예를 들어 서열식별번호: 6의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 886, 887, 888, 889, 890, 891, 892, 893, 894, 895, 896, 897, 898, 899, 900, 901 및 902로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경, 및
xiii) 서열식별번호: 6의 아미노산 1005 내지 1037에 상응하는 영역 13, 예를 들어 서열식별번호: 6의 아미노산 위치에 상응하는 위치: 1005, 1006, 1007, 1008, 1009, 1010, 1011, 1012, 1013, 1014, 1015, 1016, 1017, 1018, 1019, 1020, 1021, 1022, 1023, 1024, 1025, 1026, 1027, 1028, 1029, 1030, 1031, 1032, 1033, 1034, 1035, 1036 및 1037로 이루어진 군으로부터 선택된 1개 이상의 위치에서의 상기 변경. - 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 엔도글루카나제 변이체가 서열식별번호: 2의 위치: 559+579+697; 512+559+579+697; 18+71+186+408+579+602+651+688+756; 18+189+408+559+579+688+697+756+921+934; 313+488; 880+905+921+934; 302+313+408+579+602+651+697+880+921+934; 또는 216+313+408+476+579+602+638+651+697+719+880+887+921+934로 이루어진 군으로부터 선택된 위치에서 변경, 바람직하게는 치환을 갖고, 바람직하게는 서열식별번호: 2의 하기 변경: A559N+Y579W+T697G; K512P+A559N+Y579W+T697G; N18G+A71E+A186P+E408D+Y579W+I602T+A651P+A688G+V756Y; N18G+N189K+E408D+A559N+Y579W+A688G+T697G+V756Y+K921R+Y934G; S313D+E408D; R880K+N905D+K921R+Y934G; I302D+S313D+E408D+Y579W+I602T+A651P+T697G+R880K+K921R+Y934G; 및 N216Q+S313D+E408D+D476R+Y579W+I602T+F638N+A651P+T697G+W719R+R880K+T887K+K921R+Y934G로 이루어진 군으로부터 선택된 변경 세트를 갖는 것인 세제 조성물.
- 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 크산탄 리아제 변이체가 서열식별번호: 6의 위치: 190, 229, 234, 440, 582, 624, 631, 635, 672, 703, 738, 752, 753, 754, 757, 769, 775, 801, 875, 892, 및 그의 임의의 조합, 바람직하게는 229+672+752+753+769+775+801+875+892; 229+672+753+754+769+775+801+875+892; 229+672+752+753+754+769+775+801+875+892; 190+229+234+624+672+753+754+769+775+801+875; 190+229+631+672+703+752+753+769+775+801+875; 190+229+234+582+672+753+754+757+769+775+801+875+892; 229+440+582+624+635+672+738+753+754+757+769+775+801+875+892; 또는 100+229+360+458+582+672+753+754+757+769+775+801+843+875+892+1008로 이루어진 군으로부터 선택된 위치에서 변경, 바람직하게는 치환을 갖고, 바람직하게는 서열식별번호: 6의 하기 변경: E229N+N672D+P752K+G753E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; E229S+N672D+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; E229S+N672D+P752R+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; A190Q+E229S+I234V+A624E+N672D+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T; A190Q+E229S+T631N+N672D+I703L+P752K+G753E+A769D+L775A+D801G+K875T; A190Q+E229S+I234V+S582K+N672D+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; E229S+N440K+S582K+A624E+S635E+N672D+G738L+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; 및 S100D+E229S+K360G+D458S+S582K+N672D+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+A843P+K875T+N892Y+N1008D로 이루어진 군으로부터 선택된 변경 세트를 갖는 것인 세제 조성물.
- 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,
(A) 서열식별번호: 2에 대해 적어도 61%, 62%, 63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 또는 98% 서열 동일성을 갖고, 서열식별번호: 2의 위치: 559+579+697; 512+559+579+697; 18+71+186+408+579+602+651+688+756; 18+189+408+559+579+688+697+756+921+934; 313+488; 880+905+921+934; 302+313+408+579+602+651+697+880+921+934; 또는 216+313+408+476+579+602+638+651+697+719+880+887+921+934로 이루어진 군으로부터 선택된 위치에서 변경, 바람직하게는 치환을 갖고, 바람직하게는 서열식별번호: 2의 하기 변경 세트:
(A1) A559N+Y579W+T697G;
(A2) K512P+A559N+Y579W+T697G;
(A3) N18G+A71E+A186P+E408D+Y579W+I602T+A651P+A688G+V756Y;
(A4) N18G+N189K+E408D+A559N+Y579W+A688G+T697G+V756Y+K921R+Y934G;
(A5) S313D+E408D;
(A6) R880K+N905D+K921R+Y934G;
(A7) I302D+S313D+E408D+Y579W+I602T+A651P+T697G+R880K+K921R+Y934G; 및
(A8) N216Q+S313D+E408D+D476R+Y579W+I602T+F638N+A651P+T697G+W719R+R880K+T887K+K921R+Y934G
로 이루어진 군으로부터 선택된 변경을 갖는 것으로부터 선택된 엔도글루카나제 변이체; 및
(B) 서열식별번호: 6에 대해 적어도 61%, 62%, 63%, 64%, 65%, 66%, 67%, 68%, 69%, 70%, 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 또는 98% 서열 동일성을 갖고, 서열식별번호: 6의 위치: 229+672+752+753+769+775+801+875+892; 229+672+753+754+769+775+801+875+892; 229+672+752+753+754+769+775+801+875+892; 190+229+234+624+672+753+754+769+775+801+875; 190+229+631+672+703+752+753+769+775+801+875; 190+229+234+582+672+753+754+757+769+775+801+875+892; 229+440+582+624+635+672+738+753+754+757+769+775+801+875+892; 또는 100+229+360+458+582+672+753+754+757+769+775+801+843+875+892+1008로 이루어진 군으로부터 선택된 위치에서 변경, 바람직하게는 치환을 갖고, 바람직하게는 서열식별번호: 6의 하기 변경 세트:
(B1) E229N+N672D+P752K+G753E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y;
(B2) E229S+N672D+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y;
(B3) E229S+N672D+P752R+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y;
(B4) A190Q+E229S+I234V+A624E+N672D+G753E+S754E+A769D+L775A+D801G+K875T;
(B5) A190Q+E229S+T631N+N672D+I703L+P752K+G753E+A769D+L775A+D801G+K875T;
(B6) A190Q+E229S+I234V+S582K+N672D+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y;
(B7) E229S+N440K+S582K+A624E+S635E+N672D+G738L+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+K875T+N892Y; 및
(B8) S100D+E229S+K360G+D458S+S582K+N672D+G753E+S754E+S757D+A769D+L775A+D801G+A843P+K875T+N892Y+N1008D
로 이루어진 군으로부터 선택된 변경을 갖는 크산탄 리아제 변이체
를 포함하는 세제 조성물. - 제6항에 있어서, 엔도글루카나제 및/또는 크산탄 리아제 변이체가 어떠한 추가의 치환도 포함하지 않는 것인 세제 조성물.
- 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 1종 이상의 추가의 세제 성분, 바람직하게는 계면활성제를 추가적으로 포함하는 세제 조성물.
- 세탁 또는 식기세척 과정에서의, 또는 크산탄 검을 분해하기 위한, 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 따른 세제 조성물의 용도.
- 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 따른 세제 조성물을 사용하여 경질 표면 또는 텍스타일의 표면 상에 존재하는 크산탄 검을 분해하는 방법.
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WITB | Written withdrawal of application |