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KR20190072615A - 신경펩티드 y 수용체의 조절제로서의 사이클릭 펩티드 티로신 티로신 화합물 - Google Patents

신경펩티드 y 수용체의 조절제로서의 사이클릭 펩티드 티로신 티로신 화합물 Download PDF

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KR20190072615A
KR20190072615A KR1020197015094A KR20197015094A KR20190072615A KR 20190072615 A KR20190072615 A KR 20190072615A KR 1020197015094 A KR1020197015094 A KR 1020197015094A KR 20197015094 A KR20197015094 A KR 20197015094A KR 20190072615 A KR20190072615 A KR 20190072615A
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KR
South Korea
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fmoc
acid
peptide
resin
synthesis
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KR1020197015094A
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English (en)
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KR102653376B1 (ko
Inventor
마크 마시엘렉
레이몬드 제이. 패치
루이 장
마틴 에이. 케이스
마크 월
유에-메이 장
Original Assignee
얀센 파마슈티카 엔.브이.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
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Publication date
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Application filed by 얀센 파마슈티카 엔.브이. filed Critical 얀센 파마슈티카 엔.브이.
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Abstract

본 발명은 화학식 I의 화합물을 포함한다:
[화학식 I]
Figure pct00491

상기 식에서,
Z4, Z7, Z9, Z11, Z22, Z23, Z26, Z30, Z34, Z35, p, m, n, q, 및 가교(BRIDGE)는 본 명세서에 정의되어 있다. 본 발명은 또한 약제학적 조성물 및 이의 사용 방법에 관한 것이다. 신규 화합물은, 특히 비만, 제2형 당뇨병, 대사 증후군, 인슐린 저항성, 및 이상지질혈증과 같은 질병 및 장애를 예방, 치료 또는 개선하는 데 유용하다.

Description

신경펩티드 Y 수용체의 조절제로서의 사이클릭 펩티드 티로신 티로신 화합물
본 발명은 대체로 신규 사이클릭 펩티드 티로신 티로신(PYY) 화합물에 관한 것으로, 이는 신경펩티드 Y2 수용체의 조절제이다. 본 발명은 또한 약제학적 조성물 및 이의 사용 방법에 관한 것이다. 신규 화합물은, 특히 비만, 제2형 당뇨병, 대사 증후군, 인슐린 저항성, 및 이상지질혈증과 같은 질병 및 장애를 예방, 치료 또는 개선하는 데 유용하다.
관련 출원의 상호 참조
본 출원은 2016년 10월 27일자로 출원된 미국 가특허 출원 제62/413,613호 및 2016년 10월 27일자로 출원된 미국 가특허 출원 제62/413,586호에 대한 우선권을 주장한다. 각각의 개시내용은 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함된다.
전자적으로 제출된 서열 목록에 대한 언급
본 출원은, 파일명이 "PRD3411 서열 목록"이고 생성 일자가 2017년 10월 23일이고 크기가 96 kb인 ASCII 포맷 서열 목록으로서 EFS-웹을 통해 전자적으로 제출된 서열 목록을 포함한다. EFS-웹을 통해 제출된 서열 목록은 본 명세서의 일부이며, 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함된다. 본 명세서에 기재된 정보와 파일명 "PRD3411 서열 목록"을 갖는 EFS-웹을 통해 전자적으로 제출된 서열 목록 사이에 서열 번호 1-111에 대한 구조에 관하여 어떠한 불일치가 발생되는 경우에, 본 명세서의 정보가 좌우할 것이다.
신경펩티드 Y(NPY) 수용체는 "NPY 패밀리"로 불리는 펩티드 효능제(agonist)의 근연군(closely related group)에 의해 활성화되며, 이때 NPY 패밀리는 각각의 수용체 아형(sub-type)에 대해 상이한 친화성을 갖는다. NPY, 펩티드 티로신-티로신(PYY) 및 췌장 폴리펩티드(PP)(이들 모두 36개의 아미노산 길이)는 NPY 수용체 패밀리에 대한 효능제이다. NPY는 노르에피네프린 및 에피네프린과 함께 합성되고, 동시저장(co-store)되고, 방출되는 신경전달물질이다. NPY는 인간 및 설치류의 중추 신경계(CNS)에서 가장 풍부하고 널리 분포된 펩티드들 중 하나이며, 섭식 및 스트레스와 관련된 뇌의 영역에서 발현된다. 말초 신경계에서, NPY-함유 뉴런은 주로 교감신경이다. PYY는 주로 장 내분비 세포에 의해 합성되고 방출된다. 내피 세린-프로테아제인 다이-펩티딜 펩티다제 IV(DPP-IV)에 의한 NPY 및 PYY의 절단은 NPY3-36 및 PYY3-36을 생성하는데, 이들은 NPY 수용체 패밀리의 Y2 및 Y5 아형에 대한 선택적 리간드이다. PP는 인슐린, 글루카곤 또는 소마토스타틴을 저장하는 세포와 구별되는 췌도 세포에서 주로 발견된다.
5개의 별개의 NPY 수용체가 지금까지 확인되어 있으며, 이들 중 4개는 인간 생리학적 특성과 관련된 것으로 이해된다. 수용체 Y1, Y2 및 Y5는 NPY 및 PYY와 우선적으로 결합하는 반면, Y4 수용체는 PP와 우선적으로 결합한다. Y2 및 Y5 수용체는 또한 NPY3-36 및 PYY3-36에 의해 강력하게 활성화된다. 일반적으로, NPY 리간드 패밀리는 NPY 수용체 아이소형(isoform) 각각에 대한 가변 선택성을 가지며, 이때 PYY3-36은 Y2 아이소형에 대해 온화한 내지 강력한 선택성을 갖는 것으로 이전에 보고되어 있다. 이들 수용체 각각은 백일해-독소 민감성 Gαi를 통한 아데닐레이트 사이클라제의 억제를 위해 커플링된다.
PYY는 음식에 반응하여, 특히 지방 섭취 후에 내분비 L-세포로부터 분비된다. PYY1-36은 공복 상태에서 우세하며, PYY3-36은 인간에서 식사 후 발견되는 주요 형태이며, 혈장 농도는 소모된 칼로리의 수치와 음의 상관관계에 있다. PYY3-36은 인간, 원숭이, 래트, 토끼, 및 마우스에서 음식 섭취량을 감소시키는 것으로 입증되어 있다(문헌[Batterham RL et al. Nature 2002 Aug 8; 418(6898):650-4]; 문헌[Batterham RL et al. N Engl J Med 2003 Sep 4; 349(10):941-8]; 문헌[Challis BG et al., Biochem Biophys Res Commun 2003 Nov 28; 311(4):915-9]). PYY3-36의 식욕억제 효과는, Y2 수용체에서의 우선적 결합 및 Y2-결핍 마우스에서의 섭식 효능의 손실에 기초하여, Y2-매개되는 것으로 여겨진다(문헌[Batterham RL, et al. Nature 2002 Aug 8; 418(6898):650-4)]]. PYY3-36의 궁상내(intra-arcuate) 주사는 래트 및 마우스에서 먹이 섭취량을 감소시키는데(문헌[Batterham et al. Nature 2002 Aug 8; 418(6898):650-4]), 이는 시상하부 Y2 수용체의 결합이 이들 효과를 매개할 수 있음을 시사한다. 섭식에 대한 급성 효과는 또한 ob/ob 마우스, DIO 마우스 및 Zucker fa/fa 마우스에서 체중에 대한 용량-의존적 효과로 변환되는 것으로 밝혀져 있다(문헌[Pittner RA et al. Int J Obes relat Metab Disord 2004 Aug; 28(8):963-71]). 게다가, PYY3―36은 또한 DIO 설치류에서 인슐린-매개 글루코스 처리 및 인슐린 감수성을 개선하는 것으로 밝혀져 있다(문헌[Vrang N et al., Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol Aug; 291(2):R367-75]). 비만대사 수술(bariatric surgery)은 증가된 순환 PYY-면역반응성을 가져오는데(문헌[le Roux CW et al., Ann Surg 2006 Jan; 243(1);108-14]), 이는 수술후 체중 손실에 있어서 역할을 하는 것으로 나타난다.
포유동물에서의 식욕 및 음식 섭취량을 제어하는 데 있어서의 역할뿐만 아니라 포유동물에서의 위장관에서의 항분비 및 흡수촉진 효과를 고려하면, PYY3-36은 비만 및 관련 질환을 치료하는 데 있어서뿐만 아니라 다수의 위장 장애에도 효과적일 수 있다. 그러나, 치료제로서의 PYY3―36 자체의 치료적 유용성은 그의 급속한 대사 및 결과적인 짧은 순환 반감기에 의해 제한된다(문헌[Torang et al., Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 310:R866-R874 (2016)]).
따라서, PYY3-36에 비하여 개선된 대사 안정성 및 약동학적 프로파일을 갖는 PYY 유사체 또는 이의 유도체를 얻는 것이 바람직하다. 생체내(in vivo)에서 오랜 반감기를 갖는 그러한 유도체는 더 긴 작용 지속시간으로 Y2 수용체 조절을 제공하여, 그들을 그러한 조절을 필요로 하는 대상체에 대한 치료제로서 적합하게 한다.
전술한 논의는 오로지 당업계에서 직면한 문제들의 성질에 대한 더 우수한 이해를 제공하기 위해 제시될 뿐이며, 어떠한 방식으로든 종래 기술에 대한 인정으로서 해석되어서도, 또는 본 명세서에서의 임의의 참고문헌의 인용이 그러한 참고문헌이 본 출원에 대한 "종래 기술"을 구성한다는 인정으로서 해석되어서도 안 된다.
본 발명의 일반적인 일 태양은 화학식 I의 화합물:
[화학식 I]
Figure pct00001
(상기 식에서,
p는 0 또는 1이고;
m은 0, 1, 2, 3, 4, 또는 5이고;
n은 1, 2, 3, 또는 4이고;
q는 0 또는 1이되; 단, Z30이 부재하는 경우에만 q가 1이고;
가교(BRIDGE)는 -Ph-CH2-S-, -트라이아졸릴-, -NHC(O)CH2S-, -SCH2C(O)NH-, -(OCH2CH2)2NHC(O)CH2S, -NHC(O)-, 또는 -CH2S-이고;
Z4는 K, A, E, S, 또는 R이고;
Z7은 A 또는 K이고;
Z9는 G 또는 K이고;
Z11은 D 또는 K이고;
Z22는 A 또는 K이고;
Z23은 S 또는 K이고;
Z26은 A 또는 H이고;
Z30은 L, W, 부재, 또는 K이되;
단, q가 1인 경우에만 Z30이 부재하고;
Z34는
Figure pct00002
또는
Figure pct00003
이고;
Z35는
Figure pct00004
,
Figure pct00005
,
Figure pct00006
, 또는
Figure pct00007
임);
또는 이의 유도체(상기 유도체는 아미드화, 글리코실화, 카르바밀화, 황산화, 인산화, 환화, 지질화, 또는 페길화(pegylation)를 포함하는 하나 이상의 공정에 의해 개질된 화학식 I의 화합물임); 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염에 관한 것이다.
본 발명은 또한, 비만, 제2형 당뇨병, 대사 증후군(즉, 증후군 X), 인슐린 저항성, 내당능 장애(예를 들어, 당불내성), 고혈당증, 고인슐린혈증, 고트라이글리세라이드혈증, 이상지질혈증, 죽상경화증, 당뇨병성 신장병증, 및 다른 심혈관 위험 인자, 예컨대 고혈압 및 관리되지 않은 콜레스테롤 및/또는 지질 수준과 관련된 심혈관 위험 인자, 골다공증, 염증, 및 습진으로 이루어진 군으로부터 선택되는 증후군, 장애 또는 질병, 또는 상기 증후군, 장애 또는 질병의 임의의 하나 이상의 증상을 예방, 치료, 발병의 지연, 또는 개선하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 이를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 화학식 I의 화합물, 이의 유도체 또는 약제학적으로 허용되는 염, 또는 이의 형태, 조성물 또는 약제, 또는 본 명세서에 기재된 임의의 병용물을 투여하는 단계를 포함한다.
본 발명은 또한 병용 요법으로 본 명세서에 기재된 질병, 장애, 증후군, 또는 증상 중 임의의 것을 예방, 치료, 발병의 지연, 또는 개선하는 것을 고려하는데, 상기 병용 요법은 이를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 화학식 I의 화합물, 이의 유도체 또는 약제학적으로 허용되는 염, 또는 이의 형태, 조성물 또는 약제를 하기 추가의 화합물들 중 임의의 하나 이상과 병용하여 투여하는 단계를 포함한다: 다이펩티딜 펩티다제-4(DPP-4) 억제제(예를 들어, 시타글립틴, 삭사글립틴, 리나글립틴, 알로글립틴 등); GLP-1 수용체 효능제(예를 들어, 단시간-작용형 GLP-1 수용체 효능제, 예컨대 엑세나타이드 및 릭시세나타이드; 중간시간-작용형 GLP-1 수용체 효능제, 예컨대 리라글루타이드; 장시간-작용형 GLP-1 수용체 효능제, 예컨대 연장-방출형 엑세나타이드, 알비글루타이드, 둘라글루타이드); 나트륨-글루코스 공동-수송체-2(SGLT-2) 억제제(예를 들어, 카나글리포진, 다파글리포진, 엠파글리포진 등); 담즙산 봉쇄제(예를 들어, 콜레세벨람 등); 및 도파민 수용체 효능제(예를 들어, 신속-방출형 브로모크립틴). 일부 실시 형태에서, 추가의 화합물의 용량은 화학식 I의 화합물, 이의 유도체 또는 약제학적으로 허용되는 염과 병용하여 제공될 때 감소된다. 일부 실시 형태에서, 화학식 I의 화합물과 병용하여 사용되는 경우, 추가의 화합물은 각각 단독으로 사용되는 경우보다 더 낮은 용량으로 사용될 수 있다.
본 발명은 병용 요법으로 본 명세서에 기재된 질병, 장애, 증후군, 또는 증상 중 임의의 것을 예방, 치료, 발병의 지연, 또는 개선하는 것을 고려하는데, 상기 병용 요법은 이를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 화학식 I의 화합물, 이의 유도체 또는 약제학적으로 허용되는 염, 또는 이의 형태, 조성물 또는 약제를 하기 추가의 화합물들 중 임의의 하나 이상과 병용하여 투여하는 단계를 포함한다: 바이구아나이드(예를 들어, 메트포르민 등); 인슐린; 옥신토모듈린; 설포닐우레아(예를 들어, 클로르프로파미드, 글리메피라이드, 글리피자이드, 글리부라이드, 글리벤클라미드, 글리보누라이드, 글리속세파이드, 글리클로피라미드, 톨라자미드, 톨부타미드, 아세토헥사미드, 카부타미드 등); 및 티아졸리딘다이온(예를 들어, 피오글리타존, 로시글리타존, 로베글리타존, 시글리타존, 다글리타존, 엔글리타존, 네토글리타존, 리보글리타존, 트로글리타존 등). 일부 실시 형태에서, 화학식 I의 화합물, 이의 유도체 또는 약제학적으로 허용되는 염과 병용하여 사용되는 경우, 추가의 화합물은 각각 단독으로 사용되는 경우보다 더 낮은 용량으로 사용될 수 있다.
또 다른 실시 형태에서, 본 발명은 병용 요법으로 본 명세서에 기재된 질병, 장애, 증후군, 또는 증상 중 임의의 것을 예방, 치료, 발병의 지연, 또는 개선하는 것을 고려하는데, 상기 병용 요법은 이를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 화학식 I의 화합물, 이의 유도체 또는 약제학적으로 허용되는 염, 또는 이의 형태, 조성물 또는 약제를 하기와 같은 외과적 요법과 병용하여 투여하는 단계를 포함한다: 비만대사 수술(예를 들어, 위 우회술, 예컨대 루와이(Roux-en-Y) 위 우회술; 위소매 절제술; 조정가능한 위 밴드 수술; 십이지장 교체를 갖는 담도췌장 우회술; 위내 풍선; 위주름 성형술; 및 이들의 조합).
본 발명의 추가의 태양, 특징 및 이점은 하기의 본 발명의 상세한 설명 및 청구범위를 읽을 때 더 잘 이해될 것이다.
다양한 간행물, 논문, 및 특허가 배경기술에 그리고 본 명세서 전체에 걸쳐 인용되어 있거나 기재되어 있으며; 이들 참고문헌 각각은 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함된다. 본 명세서에 포함된 문헌, 행동, 재료, 디바이스, 물품 등에 대한 논의는 본 발명에 대한 상황을 제공하는 것을 목적으로 한다. 그러한 논의는 이들 대상 중 임의의 것 또는 모든 것이 개시되거나 청구된 임의의 발명에 대하여 종래 기술을 형성하는 것을 인정하는 것은 아니다.
달리 정의되지 않는 한, 본 명세서에 사용된 모든 기술 및 과학 용어는 본 발명이 속하는 기술 분야의 당업자에 의해 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 그렇지 않으면, 본 명세서에 사용되는 소정의 용어는 본 명세서에 제시된 바와 같은 의미를 갖는다.
본 명세서 및 첨부된 청구범위에서 사용되는 바와 같이, 단수 형태("a", "an", 및 "the")는, 문맥이 명확하게 달리 지시하지 않으면, 복수의 지시 대상을 포함한다는 것에 유의해야 한다.
달리 언급되지 않는 한, 본 명세서에 기재된 농도 또는 농도 범위와 같은 임의의 수치 값은 모든 경우에 용어 "약"에 의해 수식되는 것으로 이해되어야 한다. 따라서, 수치 값은 전형적으로 인용된 값의 ± 10%를 포함한다. 예를 들어, 1 mg/mL의 농도는 0.9 mg/mL 내지 1.1 mg/mL를 포함한다. 마찬가지로, 1% 내지 10% (w/v)의 농도 범위는 0.9% (w/v) 내지 11% (w/v)를 포함한다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, 문맥이 명백히 달리 지시하지 않는 한, 수치 범위의 사용은 모든 가능한 하위범위, 그 범위 내의 모든 개별 수치 값, 예를 들어 그러한 범위 내의 정수 및 값의 분율을 명시적으로 포함한다.
달리 지시되지 않는 한, 일련의 요소 앞의 용어 "적어도"는 일련 내의 각각의 모든 요소를 지칭하는 것으로 이해되어야 한다. 당업자는 단지 일반적인 실험을 사용하여, 본 명세서에서 설명된 본 발명의 구체적인 실시 형태에 대한 많은 등가물을 인식하거나 확인할 수 있을 것이다. 그러한 등가물은 본 발명에 의해 포함되도록 의도된다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "포함하다", "포함하는", "구비하다", "구비하는", "갖는다", "갖는", "함유하다" 또는 "함유하는", 또는 이들의 임의의 다른 변형은 언급된 정수 또는 정수들의 군의 포함을 내포하지만 임의의 다른 정수 또는 정수들의 군의 배제를 내포하지 않는 것으로 이해될 것이며, 비배타적 또는 개방형(open-ended)인 것으로 의도된다. 예를 들어, 요소들의 목록을 포함하는 조성물, 혼합물, 공정, 방법, 물품, 또는 장치는 반드시 그러한 요소들만으로 제한되지는 않고, 그러한 조성물, 혼합물, 공정, 방법, 물품, 또는 장치에 고유하거나 명시적으로 열거되어 있지 않은 다른 요소들을 포함할 수 있다. 또한, 명시적으로 반대로 기재되어 있지 않는 한, "또는"은 배타적 '또는'이 아니라 포괄적 '또는'을 지칭한다. 예를 들어, 조건 A 또는 B는 하기 중 어느 하나에 의해 만족된다: A가 참(또는 존재함)이고 B가 거짓(또는 존재하지 않음)임, A가 거짓(또는 존재하지 않음)이고 B가 참(또는 존재함)임, A 및 B 둘 모두가 참(또는 존재함)임.
또한, 본 명세서에서 바람직한 발명의 구성요소의 치수 또는 특성을 언급할 때 사용되는 용어 "약", "대략", "대체로", "실질적으로" 및 유사한 용어들은 기재된 치수/특성이 엄격한 경계 또는 파라미터가 아니고, 그로부터 기능적으로 동일하거나 유사한 사소한 변동은 배제하지 않음을 나타낸다는 것이 이해되어야 하며, 이는 당업자에 의해 이해되는 바와 같을 것이다. 최소한으로, 수치 파라미터를 포함하는 그러한 언급은 당업계에서 허용되는 수학적 및 산업적 원리(예를 들어, 반올림, 측정 오차 또는 다른 계통 오차, 제조 공차 등)를 사용하여, 최소 유효 숫자를 변화시키지 않게 될 변형을 포함할 것이다.
2개 이상의 핵산 또는 폴리펩티드 서열(예를 들어, 사이클릭 PYY3-36 폴리펩티드 서열)과 관련하여, 용어 "동일한" 또는 퍼센트 "동일성"은, 본 개시내용을 고려하여 당업계에 알려진 방법을 사용하여 시각적 검사에 의해, 또는 하기 서열 비교 알고리즘들 중 하나를 사용하여 측정되는 바와 같이, 최대 일치도(maximum correspondence)에 대해 비교되고 정렬될 때, 동일하거나, 또는 동일한 아미노산 잔기 또는 뉴클레오티드의 명시된 백분율을 갖는 2개 이상의 서열 또는 하위서열을 지칭한다.
서열 비교를 위하여, 전형적으로 하나의 서열이 시험 서열의 비교 대상이 되는 기준 서열로서 작용한다. 서열 비교 알고리즘을 사용하는 경우, 시험 서열 및 참조 서열을 컴퓨터에 입력하고, 필요에 따라 하위서열 좌표를 지정하고, 서열 알고리즘 프로그램 파라미터를 지정한다. 이어서, 서열 비교 알고리즘은 지정된 프로그램 파라미터에 기초하여, 참조 서열과 대비하여 시험 서열(들)에 대한 퍼센트 서열 동일성을 계산한다.
비교를 위한 서열의 최적 정렬은, 예를 들어 스미스 및 워터만 (문헌[Smith & Waterman, Adv. Appl. Math. 2:482 (1981)])의 국부 상동성 알고리즘에 의해, 니들만 및 분쉬 (문헌[Needleman & Wunsch, J. Mol. Biol. 48:443 (1970)])의 상동성 정렬 알고리즘에 의해, 피어슨 및 립만 (문헌[Pearson & Lipman, Proc. Nat'l. Acad. Sci. USA 85:2444 (1988)])의 유사성 검색 방법에 의해, 이들 알고리즘의 전산화 구현 (미국 위스콘신주 매디슨, 575 사이언스 드라이브 소재의 Genetics Computer Group의 Wisconsin Genetics Software Package의 GAP, BESTFIT, FASTA, 및 TFASTA)에 의해, 또는 시각적 검사(전반적으로, 문헌[Current Protocols in Molecular Biology, F.M. Ausubel et al., eds., Current Protocols, a joint venture between Greene Publishing Associates, Inc. and John Wiley & Sons, Inc., (1995 Supplement) (Ausubel)] 참조)에 의해 수행될 수 있다.
퍼센트 서열 동일성 및 서열 유사성을 결정하기에 적합한 알고리즘의 예는 BLAST 및 BLAST 2.0 알고리즘이며, 이들은 각각 문헌[Altschul et al. (1990) J. Mol. Biol. 215: 403-410] 및 문헌[Altschul et al. (1997) Nucleic Acids Res. 25: 3389-3402]에 기재되어 있다. BLAST 분석을 수행하기 위한 소프트웨어는 미국 국립생물공학정보센터(National Center for Biotechnology Information)를 통해 공개적으로 입수가능하다.
2개의 핵산 서열 또는 폴리펩티드가 실질적으로 동일하다는 추가의 지표는, 하기에 기재된 바와 같이, 제1 핵산에 의해 인코딩된 폴리펩티드가 제2 핵산에 의해 인코딩된 폴리펩티드와 면역학적으로 교차 반응성이라는 것이다. 따라서, 폴리펩티드가 전형적으로 제2 폴리펩티드와 실질적으로 동일한 경우는, 예를 들어 이들 2개의 펩티드가 보존적 치환에 의해서만 상이한 경우뿐이다. 2개의 핵산 서열이 실질적으로 동일하다는 다른 지표는, 하기에 기재된 바와 같이, 2개의 분자가 엄격한 조건 하에서 서로 혼성화되는 것이다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, "대상체"는 임의의 동물, 바람직하게는 포유동물, 가장 바람직하게는 인간을 의미한다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "포유동물"은 임의의 포유동물을 포함한다. 포유동물의 예에는 소, 말, 양, 돼지, 고양이, 개, 마우스, 래트, 토끼, 기니 피그, 원숭이, 인간 등, 더 바람직하게는 인간이 포함되지만 이로 한정되지 않는다.
본 발명의 방법과 관련하여 용어 "투여하는"은, 본 발명의 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염(이들은 선택적으로 반감기 연장 모이어티(half-life extension moiety)에 접합됨), 또는 이의 형태, 조성물 또는 약제를 사용함으로써, 본 명세서에서 기재된 바와 같은 증후군, 장애 또는 질병을 치료적으로 또는 예방적으로, 예방, 치료 또는 개선하기 위한 방법을 의미한다. 그러한 방법은 유효량의 상기 화합물, 화합물 형태, 조성물 또는 약제를 요법 과정 동안 상이한 시간에 또는 병용물 형태로 동시에 투여하는 단계를 포함한다. 본 발명의 방법은 모든 공지된 치료적 처치 계획을 포함하는 것으로 이해되어야 한다.
용어 "유효량"은, 치료 중인 증후군, 장애 또는 질병, 또는 치료 중인 증후군, 장애 또는 질병의 증상을 예방, 치료 또는 개선하는 것을 포함하는, 연구원, 수의사, 의사, 또는 기타 임상의에 의해 모색되고 있는, 조직 시스템, 동물 또는 인간에서의 생물학적 또는 의학적 반응을 유도하는 활성 화합물 또는 약제학적 작용제의 양을 의미한다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "조성물"은 특정 양의 특정 성분을 포함하는 생성물뿐만 아니라, 특정 양의 특정 성분들의 조합으로부터 직접적으로 또는 간접적으로 생성되는 임의의 생성물을 포함하는 것으로 의도된다.
화합물
일반적인 일 태양에서, 본 발명은 화학식 I의 화합물:
[화학식 I]
Figure pct00008
(상기 식에서,
p는 0 또는 1이고;
m은 0, 1, 2, 3, 4, 또는 5이고;
n은 1, 2, 3, 또는 4이고;
q는 0 또는 1이되; 단, Z30이 부재하는 경우에만 q가 1이고;
가교는 -Ph-CH2-S-, -트라이아졸릴-, -NHC(O)CH2S-, -SCH2C(O)NH-, (OCH2CH2)2NHC(O)CH2S, -NHC(O)-, 또는 -CH2S-이고;
Z4는 K, A, E, S, 또는 R이고;
Z7은 A 또는 K이고;
Z9는 G 또는 K이고;
Z11은 D 또는 K이고;
Z22는 A 또는 K이고;
Z23은 S 또는 K이고;
Z26은 A 또는 H이고;
Z30은 L, W, 부재, 또는 K이되;
단, q가 1인 경우에만 Z30이 부재하고;
Z34는
Figure pct00009
또는
Figure pct00010
이고;
Z35는
Figure pct00011
,
Figure pct00012
,
Figure pct00013
, 또는
Figure pct00014
임);
또는 이의 유도체(상기 유도체는 아미드화, 글리코실화, 카르바밀화, 황산화, 인산화, 환화, 지질화, 또는 페길화를 포함하는 하나 이상의 공정에 의해 개질된 화학식 I의 화합물임); 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염에 관한 것이다.
일 실시 형태에서, 본 발명은 청구항 1의 화합물 또는 이의 유도체(상기 유도체는 아미드화, 지질화, 또는 페길화를 포함하는 하나 이상의 공정에 의해 개질된 화학식 I의 화합물임), 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함한다.
다른 실시 형태에서, 본 발명은
p는 0 또는 1이고;
m은 0, 1, 2, 3, 4, 또는 5이고;
n은 1, 2, 3, 또는 4이고;
q는 0 또는 1이되; 단, Z30이 부재하는 경우에만 q가 1이고;
가교는 -Ph-CH2-S-, -트라이아졸릴-, -NHC(O)CH2S-, -SCH2C(O)NH-,
-(OCH2CH2)2NHC(O)CH2S, -NHC(O)-, 또는 -CH2S-이고;
Z4는 K, A, E, S, 또는 R이고;
Z7은 A 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00015
,
Figure pct00016
,
Figure pct00017
Figure pct00018
(여기서, i는 0 내지 24의 정수이고, X는 Br, I 또는 Cl임),
-C(O)CH2Br, -C(O)CH2I, 또는 -C(O)CH2Cl로 선택적으로 치환되고;
Z9는 G 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00019
(여기서, t는 0, 1, 또는 2이고;
u는 0 또는 1이고;
v는 14, 16, 또는 18임),
Figure pct00020
,
Figure pct00021
,
Figure pct00022
,
Figure pct00023
,
Figure pct00024
,
Figure pct00025
,
Figure pct00026
,
Figure pct00027
,
Figure pct00028
,
Figure pct00029
(여기서, i는 0 내지 24의 정수이고, X는 Br, I 또는 Cl임),
-C(O)CH2Br, -C(O)CH2I, 또는 -C(O)CH2Cl로 선택적으로 치환되고;
Z11은 D 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00030
(여기서, w는 0, 1, 2, 또는 4이고;
x는 0 또는 1이고;
y는 14, 16, 또는 18임),
Figure pct00031
,
Figure pct00032
,
Figure pct00033
(여기서, i는 0 내지 24의 정수이고, X는 Br, I 또는 Cl임),
Figure pct00034
,
Figure pct00035
,
Figure pct00036
,
Figure pct00037
,
Figure pct00038
,
Figure pct00039
,
Figure pct00040
,
-C(O)CH2Br, -C(O)CH2I, 또는 -C(O)CH2Cl로 선택적으로 치환되고;
Z22는 A 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00041
,
Figure pct00042
,
Figure pct00043
,
Figure pct00044
,
Figure pct00045
(여기서, i는 0 내지 24의 정수이고, X는 Br, I 또는 Cl임),
-C(O)CH2Br, -C(O)CH2I, 또는 -C(O)CH2Cl로 선택적으로 치환되고;
Z23은 S 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00046
,
Figure pct00047
,
Figure pct00048
,
Figure pct00049
,
Figure pct00050
(여기서, i는 0 내지 24의 정수이고, X는 Br, I 또는 Cl임),
C(O)CH2Br, -C(O)CH2I, 또는 -C(O)CH2Cl로 선택적으로 치환되고;
Z26은 A 또는 H이고;
Z30은 L, W, 부재, 또는 K 이되; 단, q가 1인 경우에만 Z30이 부재하며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00051
,
Figure pct00052
,
Figure pct00053
,
Figure pct00054
,
Figure pct00055
,
Figure pct00056
,
Figure pct00057
,
Figure pct00058
(여기서, r은 0, 1, 또는 2이고;
s는 0 또는 1이고;
q는 14, 16, 또는 18임), 또는
Figure pct00059
;
Figure pct00060
;
Figure pct00061
;
Figure pct00062
;
Figure pct00063
;
Figure pct00064
;
Figure pct00065
;
Figure pct00066
;
Figure pct00067
;
Figure pct00068
;
Figure pct00069
;
Figure pct00070
;
Figure pct00071
;
Figure pct00072
로 선택적으로 치환되고;
Z34는
Figure pct00073
또는
Figure pct00074
이고;
Z35는
Figure pct00075
,
Figure pct00076
,
Figure pct00077
, 또는
Figure pct00078
인 화학식 I의 화합물 또는 이의 유도체,
또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함한다.
다른 실시 형태에서, 본 발명은
p는 0 또는 1이고;
m은 0, 1, 2, 3, 또는 5이고;
n은 1, 2, 또는 4이고;
q는 0 또는 1이되; 단, Z30이 부재하는 경우에만 q가 1이고;
가교는 -Ph-CH2-S-, -트라이아졸릴-, -NHC(O)CH2S-, -(OCH2CH2)2NHC(O)CH2S, -NHC(O)-, 또는 -CH2S-이고;
Z4는 K, A, E, S, 또는 R이고;
Z7은 A 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00079
,
Figure pct00080
, 또는
Figure pct00081
로 치환되고;
Z9는 G 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00082
(여기서, t는 0이고;
u는 1이고;
v는 14임)로 치환되고;
Z11은 D 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00083
(여기서, w는 0 또는 4이고;
x는 1이고;
y는 14임),
Figure pct00084
,
Figure pct00085
,
Figure pct00086
,
Figure pct00087
,
Figure pct00088
, -C(O)CH2Br,
Figure pct00089
,
Figure pct00090
, 또는
Figure pct00091
로 선택적으로 치환되고;
Z22는 A 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00092
,
Figure pct00093
,
Figure pct00094
로 치환되고;
Z23은 S 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00095
,
Figure pct00096
, 또는
Figure pct00097
로 치환되고;
Z26은 A 또는 H이고;
Z30은 L, W, 부재, 또는 K 이되; 단, q가 1인 경우에만 Z30이 부재하며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00098
,
Figure pct00099
,
Figure pct00100
,
Figure pct00101
,
Figure pct00102
(여기서, r은 0 또는 2이고;
s는 1이고;
q는 14, 16, 또는 18임), 또는
Figure pct00103
;
Figure pct00104
;
Figure pct00105
; ;
Figure pct00107
;
Figure pct00108
;
Figure pct00109
;
Figure pct00110
;
Figure pct00111
;
Figure pct00112
;
Figure pct00113
;
Figure pct00114
; 또는
Figure pct00115
;
Z34는
Figure pct00116
또는
Figure pct00117
이고;
Z35는
Figure pct00118
,
Figure pct00119
,
Figure pct00120
, 또는
Figure pct00121
인 화학식 I의 화합물 또는 이의 유도체,
또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함한다.
다른 실시 형태에서, 본 발명은
p는 0 또는 1이고;
m은 0, 1, 2, 3, 또는 5이고;
n은 1, 2, 또는 4이고;
q는 0 또는 1이되; 단, Z30이 부재하는 경우에만 q가 1이고;
가교는 -Ph-CH2-S-, -트라이아졸릴-, -NHC(O)CH2S-, -(OCH2CH2)2NHC(O)CH2S, -NHC(O)-, 또는 -CH2S-이고;
Z4는 K, A, E, S, 또는 R이고;
Z7은 A 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00122
, 또는
Figure pct00123
;
Z9는 G 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00124
(여기서, t는 0이고;
u는 1이고;
v는 14임)로 치환되고;
Z11은 D 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00125
(여기서, w는 0 또는 4이고;
x는 1이고;
y는 14임),
Figure pct00126
,
Figure pct00127
,
Figure pct00128
, 또는
Figure pct00129
로 선택적으로 치환되고;
Z22는 A 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00130
, 또는
Figure pct00131
로 치환되고;
Z23은 S 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00132
, 또는
Figure pct00133
로 치환되고;
Z26은 A 또는 H이고;
Z30은 L, W, 부재, 또는 K 이되; 단, q가 1인 경우에만 Z30이 부재하며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00134
,
Figure pct00135
,
Figure pct00136
,
Figure pct00137
,
Figure pct00138
(여기서, r은 0 또는 2이고;
s는 1이고;
q는 14, 16, 또는 18임), 또는
Figure pct00139
;
Figure pct00140
;
Figure pct00141
;
Figure pct00142
;
Figure pct00143
;
Figure pct00144
;
Figure pct00145
;
Figure pct00146
;
Figure pct00147
;
Figure pct00148
;
Figure pct00149
;
Figure pct00150
; 또는
Figure pct00151
;
Z34는
Figure pct00152
또는
Figure pct00153
이고;
Z35는
Figure pct00154
,
Figure pct00155
,
Figure pct00156
, 또는
Figure pct00157
인 화학식 I의 화합물 또는 이의 유도체,
또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함한다.
본 발명의 다른 실시 형태는 서열 번호 1 내지 서열 번호 110으로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식 I의 화합물 또는 이의 유도체, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다.
본 발명의 다른 실시 형태는 서열 번호 2 내지 서열 번호 72로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식 I의 화합물 또는 이의 유도체, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염이다.
본 발명의 다른 일반적인 태양은 화학식 I의 화합물, 이의 유도체 또는 약제학적으로 허용되는 염 및 이것에 접합된 반감기 연장 모이어티를 포함하는 접합체에 관한 것이다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "접합된"은, 직접적으로 또는 링커(linker)를 통해, 반감기 연장 모이어티에 공유적으로 결합되거나 공유적으로 연결된 본 발명의 화합물을 지칭한다. 본 명세서에서, 화학식 I의 화합물, 이의 유도체 또는 약제학적으로 허용되는 염과 관련하여, 어구 "화합물 및 이것에 접합된 반감기 연장 모이어티를 포함하는 접합체"는 어구 "반감기 연장 모이어티에 접합된 화합물"과 상호교환 가능하게 사용된다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "링커"는 본 발명의 화합물을 반감기 연장 모이어티에 공유적으로 연결하는 공유적 사슬 또는 원자 사슬을 포함하는 화학 모듈을 지칭한다. 링커는, 예를 들어, 펩티드 링커, 탄화수소 링커, 폴리에틸렌 글리콜(PEG) 링커, 폴리프로필렌 글리콜(PPG) 링커, 다당류 링커, 폴리에스테르 링커, PEG 및 매립된 헤테로사이클로 이루어진 하이브리드 링커, 및 탄화수소 사슬을 포함할 수 있지만 이로 한정되지 않는다. 링커는, 예를 들어, 먼저 본 발명의 화합물에 공유적으로 연결되고, 이어서 반감기 연장 모이어티에 공유적으로 연결될 수 있다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, "반감기 연장 모이어티"는 용어 "반감기 연장성 모이어티"와 상호교환 가능하게 사용된다. 예시적인 반감기 연장 모이어티는 단일클론 항체 또는 이의 단편, 알부민, 알부민 변이체, 알부민-결합 단백질 및/또는 도메인, 트랜스페린 및 이의 단편 및 유사체를 포함하지만 이로 한정되지 않는다. 원하는 특성을 위해 본 발명의 접합체 내로 도입될 수 있는 추가의 반감기 연장 모이어티는, 예를 들어 폴리에틸렌 글리콜(PEG) 분자, 예컨대 PEG5000 또는 PEG20,000, α-토코페롤릴, 상이한 사슬 길이의 지방산 및 지방산 에스테르, 예를 들어 라우레이트, 미리스테이트, 스테아레이트, 아라키데이트, 베헤네이트, 올레에이트, 아라키도네이트, 옥탄이산, 테트라데칸이산, 옥타데칸이산, 도코산이산 등, 폴리라이신, 옥탄, 탄수화물(덱스트란, 셀룰로스, 올리고당 또는 다당)을 포함할 수 있다.
본 발명의 화합물은 본 개시내용을 고려하여 당업계에 공지된 방법을 사용하여 반감기 연장 모이어티들 중 하나 이상에 공유적으로 결합될 수 있다. 예를 들어, 하기 실시예에 의해 예시되는 바와 같이, 반감기 연장 모이어티, 예컨대 PEG 모이어티 또는 친유성 모이어티가 본 발명의 펩티드 분자에 부가될 수 있는데, 이는, 예를 들어 시스테인 또는 라이신 잔기를 상기 분자에 도입시키고, 잘 알려진 방법을 사용하여 반감기 연장 모이어티를 시스테인 또는 라이신에 부착시킴으로써 행해진다. 반감기 연장 모이어티로서의 단일클론 항체에 접합된 본 발명의 화합물의 예는 또한 2016년 10월 27일자로 출원된 미국 가특허 출원 제62/413,586호, 및 대리인 문서 번호 PRD3436을 갖는, 이 출원과 동일자로 출원된 발명의 명칭이 "Antibody-coupled cyclic peptide tyrosine tyrosine compounds as modulators of neuropeptide receptors"인 미국 특허 출원 제______호에 기재되어 있으며, 이들 두 출원 모두의 내용은 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함된다.
본 발명의 실시 형태에 따르면, 친전자체, 예컨대 브로모아세트아미드 또는 말레이미드가 본 발명의 사이클릭 PYY의 측쇄 상에 도입되는데, 이는 반감기 연장 모이어티, 예컨대 단일클론 항체 또는 이의 단편 내로 조작된 Cys 잔기의 설프하이드릴 기와 부위 특이적으로 반응하여, 사이클릭 PYY 펩티드와 반감기 연장 모이어티 사이에 공유 결합을 생성한다. 본 발명의 화합물은 반감기 연장 모이어티들 중 하나 이상에 직접적으로 또는 링커를 통해 공유적으로 결합될 수 있다. 본 발명에 유용한 링커는 펩티드 링커, 탄화수소 링커, 폴리에틸렌 글리콜(PEG) 링커, 폴리프로필렌 글리콜(PPG) 링커, 다당류 링커, 폴리에스테르 링커, 또는 PEG 및 매립된 헤테로사이클로 이루어진 하이브리드 링커를 포함하지만 이로 한정되지 않는다. 소정 실시 형태에서, 링커를 갖는 반감기 연장 모이어티는 당업계에 알려진 방법을 사용하여 사이클릭 PYY의 하나 이상의 아미노산 위치, 예컨대 PYY의 아미노산 잔기 4, 7, 9, 10, 11, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 26, 30, 또는 31에서 본 발명의 화합물에 접합될 수 있다. 소정 실시 형태에서, 링커를 갖지 않는 반감기 연장 모이어티는 당업계에 알려진 방법을 사용하여 사이클릭 PYY의 하나 이상의 아미노산 위치, 예컨대 PYY의 아미노산 잔기 4, 7, 9, 10, 11, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 26, 30, 또는 31에서 본 발명의 화합물에 접합될 수 있다. 아미노산 잔기 넘버링은 hPYY3-36의 것을 따른다. 서열 번호 1 내지 서열 번호 110을 포함하지만 이로 한정되지 않는 임의의 본 발명의 화합물은 직접적으로 또는 링커를 통해 간접적으로 반감기 연장 모이어티에 접합될 수 있다. 본 발명의 실시 형태에 따르면, 서열 번호 74, 95, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109 및 110으로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염은 링커를 통해 반감기 연장 모이어티, 예컨대 단일클론 항체 또는 이의 단편에 공유적으로 결합될 수 있다.
본 발명의 펩티드 분자, 또는 하나 이상의 반감기 연장 모이어티에 공유적으로 결합된 상기 펩티드 분자를 포함하는 접합체는 본 개시내용을 고려하여 공지된 검정에 의해 기능성에 대해 검정될 수 있다. 예를 들어, 단독으로의 또는 본 발명에 따른 접합체 형태의 본 발명의 펩티드 분자의 생물학적 또는 약동학적 활성은 공지된 시험관내(in vitro) 또는 생체내 검정을 사용하여 검정되고 비교될 수 있다.
일 실시 형태에서, 본 발명은 화학식 II의 화합물:
[화학식 II]
Figure pct00158
(상기 식에서,
p는 0 또는 1이고;
m은 0, 1, 2, 3, 4, 또는 5이고;
n은 1, 2, 3, 또는 4이고;
가교는 -Ph-CH2-S-, -트라이아졸릴-, 또는 -NHC(O)CH2S-이고;
Z4는 K, A, E, 또는 S이고;
Z9는 G 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00159
(여기서, t는 0, 1, 또는 2이고;
u는 0 또는 1이고;
v는 14, 16, 또는 18임),
Figure pct00160
,
Figure pct00161
,
Figure pct00162
,
Figure pct00163
, 또는
Figure pct00164
로 치환되고;
Z11은 D 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00165
(여기서, w는 0, 1, 또는 2이고;
x는 0 또는 1이고;
y는 14, 16, 또는 18임),
Figure pct00166
,
Figure pct00167
,
Figure pct00168
,
Figure pct00169
, 또는
Figure pct00170
로 치환되고;
Z26은 A 또는 H이고;
Z30은 L 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00171
,
Figure pct00172
,
Figure pct00173
,
Figure pct00174
,
Figure pct00175
(여기서, r은 0, 1, 또는 2이고;
s는 0 또는 1이고;
q는 14, 16, 또는 18임), 또는
Figure pct00176
로 치환되고;
Z34는
Figure pct00177
또는
Figure pct00178
이고;
Z35는
Figure pct00179
,
Figure pct00180
,
Figure pct00181
, 또는
Figure pct00182
임),
또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함한다.
다른 실시 형태에서, 본 발명은
p는 0 또는 1이고;
m은 0, 2, 3, 또는 5이고;
n은 1, 2, 또는 4이고;
가교는 -Ph-CH2-S-, -트라이아졸릴-, 또는 -NHC(O)CH2S-이고;
Z4는 K, A, E, 또는 S이고;
Z9는 G 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00183
로 치환되고;
Z11은 D 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00184
,
Figure pct00185
,
Figure pct00186
, 또는
Figure pct00187
로 치환되고;
Z26은 A 또는 H이고;
Z30은 L 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00188
,
Figure pct00189
,
Figure pct00190
,
Figure pct00191
, 또는
Figure pct00192
(여기서, r은 0 또는 2이고;
s는 0 또는 1이고;
q는 14, 16, 또는 18임)로 치환되고,
Z34는
Figure pct00193
또는
Figure pct00194
이고;
Z35는
Figure pct00195
,
Figure pct00196
,
Figure pct00197
, 또는
Figure pct00198
인 화학식 II의 화합물,
또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함한다.
다른 실시 형태에서, 본 발명은
p는 0 또는 1이고;
m은 0, 2, 3, 또는 5이고;
n은 1, 2, 또는 4이고;
가교는 -Ph-CH2-S-, -트라이아졸릴-, 또는 -NHC(O)CH2S-이고;
Z4는 K, A, E, 또는 S이고;
Z9는 G 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00199
로 치환되고;
Z11은 D 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00200
,
Figure pct00201
,
Figure pct00202
, 또는
Figure pct00203
로 치환되고;
Z26은 A 또는 H이고;
Z30은 L 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00204
,
Figure pct00205
,
Figure pct00206
,
Figure pct00207
, 또는
Figure pct00208
(여기서, r은 0 또는 2이고;
s는 0 또는 1이고;
q는 14, 16, 또는 18임)로 치환되고,
Z34는
Figure pct00209
또는
Figure pct00210
이고;
Z35는
Figure pct00211
또는
Figure pct00212
인 화학식 II의 화합물;
또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함한다.
다른 실시 형태에서, 본 발명은
p는 0 또는 1이고;
m은 0, 2, 3, 또는 5이고;
n은 1, 2, 또는 4이고;
가교는 -Ph-CH2-S-, -트라이아졸릴-, 또는 -NHC(O)CH2S-이고;
Z4는 K, A, E, 또는 S이고;
Z9는 G 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00213
로 치환되고;
Z11은 D 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00214
,
Figure pct00215
,
Figure pct00216
, 또는
Figure pct00217
로 치환되고;
Z26은 A 또는 H이고;
Z30은 L 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00218
, 또는
Figure pct00219
(여기서, q는 14, 16, 또는 18임)로 치환되고;
Z34는
Figure pct00220
또는
Figure pct00221
이고;
Z35는
Figure pct00222
,
Figure pct00223
,
Figure pct00224
, 또는
Figure pct00225
인 화학식 II의 화합물,
또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함한다.
다른 실시 형태에서, 본 발명은
p는 0 또는 1이고;
m은 0, 2, 3, 또는 5이고;
n은 1, 2, 또는 4이고;
가교는 -Ph-CH2-S-, -트라이아졸릴-, 또는 -NHC(O)CH2S-이고;
Z4는 K, A, E, 또는 S이고;
Z9는 G 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00226
로 치환되고;
Z11은 D 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00227
,
Figure pct00228
,
Figure pct00229
, 또는
Figure pct00230
로 치환되고;
Z26은 A 또는 H이고;
Z30은 L 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00231
(여기서, q는 14, 16, 또는 18임)로 치환되고;
Z34는
Figure pct00232
또는
Figure pct00233
이고;
Z35는
Figure pct00234
,
Figure pct00235
,
Figure pct00236
, 또는
Figure pct00237
인 화학식 II의 화합물,
또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함한다.
다른 실시 형태에서, 본 발명은
p는 0 또는 1이고;
m은 0, 2, 3, 또는 5이고;
n은 1, 2, 또는 4이고;
가교는 -Ph-CH2-S-, -트라이아졸릴-, 또는 -NHC(O)CH2S-이고;
Z4는 K, A, E, 또는 S이고;
Z9는 G이고;
Z11은 D이고;
Z26은 A 또는 H이고;
Z30은 L 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
Figure pct00238
(여기서, q는 14, 16, 또는 18임)로 치환되고;
Z34는
Figure pct00239
또는
Figure pct00240
이고;
Z35는
Figure pct00241
,
Figure pct00242
,
Figure pct00243
, 또는
Figure pct00244
인 화학식 II의 화합물,
또는 이의 약제학적으로 허용되는 염을 포함한다.
다른 실시 형태에서, 본 발명은 서열 번호 2 내지 서열 번호 46으로 이루어진 군으로부터 선택되는 화학식 II의 화합물을 포함한다.
본 발명의 다른 실시 형태는 hPYY(3-36)와 적어도 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 또는 99% 서열 동일성을 나타내는 PYY의 N-말단-측쇄(N-terminus to side chain) 사이클릭 유사체를 포함한다. 2개의 유사체 사이의 서열 동일성을 결정하기 위한 방법의 예로서, 2개의 펩티드
Figure pct00245
(서열 번호 1)와 hPYY(3-36)
Figure pct00246
(서열 번호 111)을 정렬시킨다. hPYY(3-36)에 대한 유사체의 서열 동일성은 [정렬된 잔기의 총수 - 상이한 잔기의 수](즉, 정렬된 동일한 잔기의 수) / [hPYY3-36 내의 잔기의 총수]로 주어진다. 이 예에서, 상이한 잔기들은 D11(이는 치환된 K11로 교환되었음), 이어서 V31(이는 hC31로 교환되었음), 그리고 마지막으로 R35(이는 탈카르보닐화되었음)이다. 따라서, 상기 예에서, 서열 동일성은 (34-3)/34 × 100 이다.
사이클릭 PYY 펩티드
PYY3-36은 음식 섭취량을 억제하도록 Y2 수용체의 효능제로서 작용하는 원위 장(distal gut) 내의 L 세포에 의해 분비되는 내인성 호르몬이다. 포유동물에서의 식욕 및 음식 섭취량을 제어하는 데 있어서의 역할뿐만 아니라 포유동물에서의 위장관에서의 항분비 및 흡수촉진 효과를 고려하면, PYY3-36은 비만 및 관련 질환을 치료하는 데 있어서뿐만 아니라 다수의 위장 장애에도 효과적일 수 있다. 그러나, 치료제로서의 PYY3―36 자체의 치료적 유용성은 그의 급속한 대사 및 짧은 순환 반감기에 의해 제한된다. 따라서, 본 발명은 대체로 변형된 PYY3-36 접합체에 관한 것으로, 상기 접합체는 PYY3-36 펩티드의 반감기를 연장시키고 생체내에서의 펩티드의 대사를 감소시킨다.
본 발명의 소정 실시 형태에서, 변형된 PYY3-36 펩티드는 사이클릭 PYY 펩티드이다. 용어 "사이클릭 PYY 펩티드", "사이클릭 PYY3-36 유사체", 및 "사이클릭 PYY3-36 펩티드 유사체"는 상호교환 가능하게 사용될 수 있다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "NTSC-PYY"는 PYY의 N-말단-측쇄 사이클릭 유사체를 기술하고자 한다.
본 명세서에 기재된 펩티드 서열은 펩티드의 N-말단 영역은 좌측에 있고 C-말단 영역은 우측에 있다는 통상의 규약에 따라 표기된다. 아미노산의 이성질체 형태가 공지되어 있지만, 이는, 달리 명시적으로 지시되지 않는 한, 표현된 아미노산의 L-형태이다. 본 발명의 분자를 설명하는 데 있어서 편의상, 다양한 아미노산(단일 문자 코드 및 3-문자 코드 둘 모두) 및 기능적 모이어티에 대한 통상적인 약어 및 비통상적인 약어가 사용된다. 이들 약어는 당업자에게 친숙하지만, 명확함을 위해 하기와 같이 열거된다: A = Ala = 알라닌; R = Arg = 아르기닌; N = Asn = 아스파라긴; D = Asp = 아스파르트산; βA = βAla = 베타-알라닌; C = Cys = 시스테인; hC = hCys = 호모시스테인; E = Glu = 글루탐산; Q = Gln = 글루타민; G = Gly = 글리신; H = His = 히스티딘; I = Ile = 아이소류신; L = Leu = 류신; K = Lys = 라이신; Nle = 노르류신; F = Phe = 페닐알라닌; P = Pro = 프롤린; S = Ser = 세린; T = Thr = 트레오닌; W = Trp = 트립토판; Y = Tyr = 티로신 및 V = Val = 발린.
편의상, 본 발명의 NTSC-PYY 펩티드를 명명하는 데 사용된 아미노산 잔기 넘버링 규약은 hPYY3-36의 것을 따른다. hPYY3-36 내의 상응하는 위치에서의 천연 잔기와 대비하여, NTSC-PYY 펩티드 내로 도입된 특정 아미노산 대체는 적절한 아미노산 코드로 표시되고, 이어서 치환의 위치가 표시된다. 따라서, NTSC-PYY 펩티드 내의 "S4"는 세린이 hPYY3-36의 상응하는 천연 lys4 잔기를 대체한 펩티드를 지칭한다. 유사하게, NTSC-PYY 펩티드 내의 "hC31"은 호모시스테인이 hPYY3-36의 상응하는 천연 val31 잔기를 대체한 펩티드를 지칭한다. NTSC-PYY 펩티드 내에서 발생하는 추가의 아미노산 대체는 이러한 규약에 따라 기재되어 있으며, 당업자에 의해 그러한 것으로 인식될 것이다.
또한 편의상, 본 발명의 NTSC-PYY 펩티드에 사용되는 명명 규칙은 사이클에 관여하는 아미노산 잔기들과 함께, 사이클에 관여하는 N-말단 잔기에서 출발하여, 좌측에서 우측 방향으로의 이들 사이의 연결기(들)를 포함시킨다. 모든 경우에, 사이클의 N-말단 아미노산 잔기는 그의 α-아미노 작용기에 의해 연결기에 연결되고, 이는 다시, NTSC-PYY 펩티드의 위치 31의 아미노산의 측쇄 잔기에 연결된다. 따라서, "사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31)"은 Ile3의 α-아미노 작용기가 메타-톨루산 잔기에 의해 아실화되고, 이의 메틸 기는 티오에테르 결합에 의해 hCys31 잔기의 측쇄에 추가로 연결된 NTSC-PYY 펩티드의 사이클을 기술하는데 사용된다. 유사하게, "사이클로-(K4-CO(CH2)2NHCOCH2-hC31)"은, 천연 Ile3 잔기가 결실되어 있고 (현재 N-말단) lys4의 α-아미노 작용기가 3-아세트아미도프로파노일 기에 의해 아실화되고, 그의 아세트아미도 메틸렌 탄소는 티오에테르 결합에 의해 hCys31 잔기의 측쇄에 연결된 NTSC-PYY 펩티드의 사이클을 기술하는 데 사용된다.
추가의 유도체화를 위한 편리한 기능적 취급을 제공하기 위하여, 라이신 잔기가 hPYY3-36 서열의 다양한 위치에 도입될 수 있다. 라이신 잔기는 단일클론 항체에 직접적으로 또는 간접적으로 커플링되도록 변형될 수 있다. 단일클론 항체에 대한 간접 커플링에서, 라이신 잔기는 사이클릭 PYY 펩티드가 단일클론 항체에 커플링될 수 있게 할 링커를 포함하도록 변형될 수 있다. 당업자는 관련된 오르토로그가 또한 그 자체로 효과적으로 사용될 수 있고 본 명세서에 고려된다는 것을 인식할 것이다.
펩티드 서열에서 나타나는 용어 "K(γ-Glu)"는 측쇄 ε-아미노 기가 글루탐산의 γ-카르복실 기에 의해 아실화된 라이신 잔기를 나타낸다.
용어 "K(γ-Glu-Pal(팔미토일))"은 측쇄 ε-아미노 기가 N-헥사데칸-1-오일글루탐산의 γ-카르복실 기에 의해 아실화된 라이신 잔기를 나타낸다.
용어 "K(γ-Glu-Stear(스테아로일))"는 측쇄 ε-아미노 기가 N-옥타데칸-1-오일글루탐산의 γ-카르복실 기에 의해 아실화된 라이신 잔기를 나타낸다.
용어 "K(γ-Glu-Arach(아라키도일))"은 측쇄 ε-아미노 기가 N-도데칸-1-오일글루탐산의 γ-카르복실 기에 의해 아실화된 라이신 잔기를 나타낸다.
용어 "K(OEG) (8-아미노-3,6-다이옥사옥타노일)"은 측쇄 ε-아미노 기가 8-아미노-3,6-다이옥사옥탄산에 의해 아실화된 라이신 잔기를 나타낸다.
용어 "(OEG)2"는 아미드 결합을 통해 연속해서 함께 연결된 2개의 OEG 단위(즉, 17-아미노-10-옥소-3,6,12,15-테트라옥사-9-아자헵타데칸산)를 나타낸다.
용어 "K(OEG)2"는 측쇄 ε-아미노 기가 17-아미노-10-옥소-3,6,12,15-테트라옥사-9-아자헵타데칸산에 의해 아실화된 라이신 잔기를 나타낸다.
용어 "K((OEG)2-γ-Glu"는 측쇄 ε-아미노 기가 (22S)-22-아미노-10,19-다이옥소-3,6,12,15-테트라옥사-9,18-다이아자트라이코산이산에 의해 그의 1-카르복실산 작용기를 통해 아실화된 라이신 잔기를 나타낸다.
용어 "K((OEG)2-γ-Stear"는 측쇄 ε-아미노 기가 (22S)-10,19-다이옥소-22-스테아르아미도-3,6,12,15-테트라옥사-9,18-다이아자트라이코산이산에 의해 그의 1-카르복실산 작용기를 통해 아실화된 라이신 잔기를 나타낸다.
용어 "K((OEG)2-γ-Glu-COC16CO2H"는 측쇄 ε-아미노 기가 (21S)-9,18,23-트라이옥소-2,5,11,14-테트라옥사-8,17,22-트라이아자노나트라이아콘탄-1,21,39-트라이카르복실산에 의해 그의 1-카르복실산 작용기를 통해 아실화된 라이신 잔기를 나타낸다.
유사하게, 용어 "K((OEG)2-γ -Glu-COC18CO2H"는 측쇄 ε-아미노 기가 (21S)-9,18,23-트라이옥소-2,5,11,14-테트라옥사-8,17,22-트라이아자헨테트라콘탄-1,21,41-트라이카르복실산에 의해 그의 1-카르복실산 작용기를 통해 아실화된 라이신 잔기를 나타낸다.
용어 "K((OEG)2-COC16CO2H)"는 측쇄 ε-아미노 기가 10,19-다이옥소-3,6,12,15-테트라옥사-9,18-다이아자헥사트라이아콘탄이산에 의해 그의 1-카르복실산 작용기를 통해 아실화된 라이신 잔기를 나타낸다.
용어 "K(PEG24-AcBr)"은 측쇄 ε-아미노 기가 N-브로모아세틸-75-아미노-4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49,52,55,58,61,64,67,70,73-테트라코사옥사펜타헵타콘탄산에 의해 그의 1-카르복실산 작용기를 통해 아실화된 라이신 잔기를 나타낸다.
용어 "K(PEG12-AcBr)"은 측쇄 ε-아미노 기가 N-브로모아세틸-39-아미노-4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37-도데카옥사노나트라이아콘탄산에 의해 그의 1-카르복실산 작용기를 통해 아실화된 라이신 잔기를 나타낸다.
용어 "K(PEG6-AcBr)"은 측쇄 ε-아미노 기가 N-브로모아세틸-3-[(17-아미노-3,6,9,12,15-펜타옥사헵타데크-1-일)옥시]-프로판산에 의해 그의 1-카르복실산 작용기를 통해 아실화된 라이신 잔기를 나타낸다.
용어 "K(PEG8-트라이아졸릴-CH2CH2CO-PEG4-AcBr)"은 측쇄 ε-아미노 기가 27-[4-[2-[3-[2-[2-[3-(N-브로모아세틸아미노)프로폭시]에톡시]에톡시]프로필아미노카르보닐]에틸]테트라졸-1-일]-4,7,10,13,16,19,22,25-옥타옥사헵타코산산에 의해 그의 1-카르복실산 작용기를 통해 아실화된 라이신 잔기를 나타낸다.
용어 "K(mPEG16)"은 측쇄 ε-아미노 기가 4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37,40,43,46,49-헥사데카옥사펜타콘탄산에 의해 그의 1-카르복실산 작용기를 통해 아실화된 라이신 잔기를 나타낸다.
용어 "K(mPEG12)"는 측쇄 ε-아미노 기가 4,7,10,13,16,19,22,25,28,31,34,37-도데카옥사옥타트라이아콘탄산에 의해 그의 1-카르복실산 작용기를 통해 아실화된 라이신 잔기를 나타낸다.
용어 "VitE"는 분자 내의 α-토코페롤릴 단위를 나타낸다.
용어 "AcVitE"는 페놀성 기가 에테르-결합된 메틸레닐카르복시 작용기를 갖는 α-토코페롤릴 단위를 나타낸다.
용어 "K-γ-Glu-AcVitE"는 측쇄 ε-아미노 기가 (2-(((2R)-2,5,7,8-테트라메틸-2-((4R,8R)-4,8,12-트라이메틸트라이데실)크로만-6-일)옥시)아세틸)-L-글루탐산에 의해 그의 γ-카르복실산 작용기를 통해 아실화된 라이신 잔기를 나타낸다.
본 발명의 화합물들 중 다수는 서열의 C-말단 잔기, Y36과 그의 인접한 잔기, R35 사이에 환원된 아미드 결합을 도입하고 있다. 이러한 환원된 아미드 결합은 용어 "psi-(R35,Y36)"로 나타낸다.
본 발명의 소정 서열을 포함하는 다양한 아미노산 잔기는 메틸화된 α-아미노 기를 함유한다. 따라서, 용어 "N-Me-Q34" 또는 "N-Me-R35"는 서열의 위치 34에서 α-N-메틸화된 글루타민, 및 서열의 위치 35에서 α-N-메틸화된된 아르기닌을 각각 나타낸다.
서열 설명에서 용어 "N-Me-Q34, psi-(R35,Y36)"은 위치 34에서의 α-메틸 글루타민 잔기뿐만 아니라 잔기 R35와 Y36 사이의 환원된 아미드 결합 둘 모두를 함유하는 서열을 지칭한다.
유사하게, 서열 설명에서 용어 "N-Me-R35, psi-(R35,Y36)"은 위치 35에서의 α-메틸 아르기닌 잔기뿐만 아니라 이 잔기와 Y36 사이의 환원된 아미드 결합 둘 모두를 함유하는 서열을 지칭한다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "페길화"는 하나 이상의 폴리에틸렌 글리콜(PEG) 분자와 하나 이상의 NTSC-PYY 펩티드의 공유적 접합체(covalent conjugate)를 지칭한다. 상기 접합체는 하나의 NTSC-PYY 펩티드 상의 1 내지 24개의 PEG 분자를 포함할 수 있지만 이로 한정되지 않는다. 상기 접합체는 PEG 분자와 NTSC-PYY 분자 사이에 적합한 링커를 추가로 포함할 수 있으며, 이에는 γ-글루타메이트, -NHC(O), C(O), 및 C(1-4)알킬이 포함되지만 이로 한정되지 않는다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 어구 "지질화"는 NTSC-PYY 펩티드와 하나 이상의 친유성 기의 공유적 접합체를 지칭한다. 바람직한 친유성 기는 장쇄 탄화수소 기를 포함한다. 다른 친유성 기는 스테로이드, 테르펜, 지용성 비타민, 피토스테롤, 테르페노이드, 인지질, 글리세롤, 및 천연 또는 합성 지방산을 포함한다. 친유성 기의 예에는 α-토코페롤릴, 스테아르산, 팔미트산, 및 아라키드산이 포함되지만 이로 한정되지 않는다. 상기 접합체는 친유성 분자와 NTSC-PYY 분자 사이에 적합한 링커를 추가로 포함할 수 있으며, 이에는 γ-글루타메이트, -NHC(O), C(O), 및 C(1-4)알킬이 포함되지만 이로 한정되지 않는다.
용어 "PYY3-36"은 하기 화합물(서열 번호 111)을 지칭할 것이다:
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약제학적 조성물
다른 일반적인 태양에서, 본 발명은 본 발명의 접합체 및 화합물 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "약제학적 조성물"은 약제학적으로 허용되는 담체와 함께 본 발명의 접합체를 포함하는 생성물을 의미한다. 본 발명의 접합체 및 화합물 및 이를 포함하는 조성물은 또한 본 명세서에 언급된 치료적 응용을 위한 약제의 제조에 유용하다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "담체"는 임의의 부형제, 희석제, 충전제, 염, 완충제, 안정화제, 가용화제, 오일, 지질, 지질 함유 베시클, 미소구체, 리포좀 캡슐화, 또는 약제학적 제형에 사용하기 위한 당업계에 잘 알려진 다른 물질을 지칭한다. 담체, 부형제, 또는 희석제의 특성은 특정 응용을 위한 투여 경로에 좌우될 것임이 이해될 것이다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "약제학적으로 허용되는 담체"는 본 발명에 따른 조성물의 유효성 또는 본 발명에 따른 조성물의 생물학적 활성을 방해하지 않는 비독성 물질을 지칭한다. 특정 실시 형태에 따르면, 본 개시내용을 고려하여, 항체에 사용하기에 적합한 임의의 약제학적으로 허용되는 담체가 본 발명에 사용될 수 있다.
본 발명에 사용하기 위한 약제학적으로 허용되는 산성/음이온성 염은 아세테이트, 벤젠설포네이트, 벤조에이트, 바이카르보네이트, 바이타르트레이트, 브로마이드, 칼슘 에데테이트, 캄실레이트, 카르보네이트, 클로라이드, 시트레이트, 다이하이드로클로라이드, 에데테이트, 에디실레이트, 에스톨레이트, 에실레이트, 푸마레이트, 글리셉테이트, 글루코네이트, 글루타메이트, 글리콜릴아르사닐레이트, 헥실레조시네이트, 하이드라바민, 하이드로브로마이드, 하이드로클로라이드, 하이드록시나프토에이트, 요오다이드, 이세티오네이트, 락테이트, 락토바이오네이트, 말레이트, 말레에이트, 만델레이트, 메실레이트, 메틸브로마이드, 메틸니트레이트, 메틸설페이트, 뮤케이트, 나프실레이트, 니트레이트, 파모에이트, 판토테네이트, 포스페이트/다이포스페이트, 폴리갈락투로네이트, 살리실레이트, 스테아레이트, 서브아세테이트, 석시네이트, 설페이트, 탄네이트, 타르트레이트, 테오클레이트, 토실레이트 및 트라이에티오다이드를 포함하지만 이로 한정되지 않는다. 유기 또는 무기 산은 또한 요오드화수소산, 과염소산, 황산, 인산, 프로피온산, 글리콜산, 메탄설폰산, 하이드록시에탄설폰산, 옥살산, 2-나프탈렌설폰산, p-톨루엔설폰산, 사이클로헥산설팜산, 사카린산 또는 트라이플루오로아세트산을 포함하지만 이로 한정되지 않는다.
약제학적으로 허용되는 염기성/양이온성 염은 알루미늄, 2-아미노-2-하이드록시메틸-프로판-1,3-다이올(트리스(하이드록시메틸)아미노메탄, 트로메탄 또는 "TRIS"로도 알려져 있음), 암모니아, 벤자틴, t-부틸아민, 칼슘, 클로로프로카인, 콜린, 사이클로헥실아민, 다이에탄올아민, 에틸렌다이아민, 리튬, L-라이신, 마그네슘, 메글루민, N-메틸-D-글루카민, 피페리딘, 칼륨, 프로카인, 퀴닌, 나트륨, 트라이에탄올아민, 또는 아연을 포함하지만 이로 한정되지 않는다.
본 발명의 일부 실시 형태에서, 본 발명의 화합물을 약 0.001 mg/ml 내지 약 100 mg/ml, 약 0.01 mg/ml 내지 약 50 mg/ml, 또는 약 0.1 mg/ml 내지 약 25 mg/ml의 양으로 포함하는 약제학적 제형이 제공된다. 약제학적 제형은 pH가 약 3.0 내지 약 10, 예를 들어 약 3 내지 약 7, 또는 약 5 내지 약 9일 수 있다. 제형은 완충 시스템, 방부제(들), 장성제(tonicity agent)(들), 킬레이트제(들), 안정화제(들) 및 계면활성제(들)로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나의 성분을 추가로 포함할 수 있다.
약제학적으로 허용되는 담체를 함유하는 약제학적으로 활성인 성분의 제형은 당업계에, 예를 들어 문헌[Remington: The Science and Practice of Pharmacy (e.g. 21st edition (2005), and any later editions)]에 공지되어 있다. 추가의 성분의 비제한적인 예에는 완충제, 희석제, 용매, 장성 조절제, 방부제, 안정화제, 및 킬레이트제가 포함된다. 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 담체가 본 발명의 약제학적 조성물을 제형화하는 데 사용될 수 있다.
본 발명의 일 실시 형태에서, 약제학적 조성물은 액체 제형이다. 액체 제형의 바람직한 예는 수성 제형, 즉 물을 포함하는 제형이다. 액체 제형은 용액, 현탁액, 에멀젼, 마이크로에멀젼, 겔 등을 포함할 수 있다. 수성 제형은 전형적으로 적어도 50% w/w의 물, 또는 적어도 60%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 또는 적어도 95% w/w의 물을 포함한다.
일 실시 형태에서, 약제학적 조성물은, 예를 들어 주사 장치(예를 들어, 주사기 또는 주입 펌프)를 통해 주사될 수 있는 주사제로서 제형화될 수 있다. 주사는, 예를 들어 피하, 근육내, 복막내, 또는 정맥내 전달될 수 있다.
다른 실시 형태에서, 약제학적 조성물은 고체 제형, 예를 들어 냉동-건조 또는 분무-건조된 조성물이며, 이것은 그대로 사용될 수 있거나, 또는 이것에 의사 또는 환자가 사용 전에 용매 및/또는 희석제를 첨가한다. 고체 투여 형태는 정제, 예컨대 압축 정제, 및/또는 코팅된 정제, 및 캡슐(예를 들어, 경질 또는 연질 젤라틴 캡슐)을 포함할 수 있다. 약제학적 조성물은 또한, 예를 들어 사셰(sachet), 당의정, 분말, 과립, 로젠지(lozenge), 또는 재구성을 위한 분말의 형태일 수 있다.
투여 형태는 즉시 방출(이 경우에, 이들은 수용성 또는 수분산성 담체를 포함할 수 있음)일 수 있거나, 또는 이들은 지연 방출, 지속 방출, 또는 조절 방출(이 경우에, 이들은 위장관에서의 투여 형태의 용해 속도를 조절하는 수불용성 중합체를 포함할 수 있음)일 수 있다.
다른 실시 형태에서, 약제학적 조성물은 비강내, 협측내, 또는 설하 전달될 수 있다.
수성 제형 중의 pH는 pH 3 내지 pH 10일 수 있다. 본 발명의 일 실시 형태에서, 제형의 pH는 약 7.0 내지 약 9.5이다. 본 발명의 다른 실시 형태에서, 제형의 pH는 약 3.0 내지 약 7.0이다.
본 발명의 다른 실시 형태에서, 약제학적 조성물은 완충제를 포함한다. 완충제의 비제한적인 예에는 아르기닌, 아스파르트산, 바이신, 시트레이트, 인산수소이나트륨, 푸마르산, 글리신, 글리실글리신, 히스티딘, 라이신, 말레산, 말산, 소듐 아세테이트, 탄산나트륨, 인산이수소나트륨, 인산나트륨, 석시네이트, 타르타르산, 트라이신, 및 트리스(하이드록시메틸)-아미노메탄, 및 이들의 혼합물이 포함된다. 완충제는 약 0.01 mg/ml 내지 약 50 mg/ml, 예를 들어 약 0.1 mg/ml 내지 약 20 mg/ml의 농도로 개별적으로 또는 응집체로 존재할 수 있다. 이들 특정 완충제 각각을 포함하는 약제학적 조성물은 본 발명의 대안적인 실시 형태를 구성한다.
본 발명의 다른 실시 형태에서, 약제학적 조성물은 방부제를 포함한다. 완충제의 비제한적인 예에는 벤제토늄 클로라이드, 벤조산, 벤질 알코올, 브로노폴, 부틸 4-하이드록시벤조에이트, 클로로부탄올, 클로로크레졸, 클로로헥시딘, 클로르페네신, o-크레졸, m-크레졸, p-크레졸, 에틸 4-하이드록시벤조에이트, 이미드우레아, 메틸 4-하이드록시벤조에이트, 페놀, 2-페녹시에탄올, 2-페닐에탄올, 프로필 4-하이드록시벤조에이트, 소듐 데하이드로아세테이트, 티오메로살, 및 이들의 혼합물이 포함된다. 방부제는 약 0.01 mg/ml 내지 약 50 mg/ml, 예를 들어 약 0.1 mg/ml 내지 약 20 mg/ml의 농도로 개별적으로 또는 응집체로 존재할 수 있다. 이들 특정 방부제 각각을 포함하는 약제학적 조성물은 본 발명의 대안적인 실시 형태를 구성한다.
본 발명의 다른 실시 형태에서, 약제학적 조성물은 등장제(isotonic agent)를 포함한다. 실시 형태의 비제한적인 예에는 염(예컨대, 염화나트륨), 아미노산(예컨대, 글리신, 히스티딘, 아르기닌, 라이신, 아이소류신, 아스파르트산, 트립토판, 및 트레오닌), 알디톨(예컨대, 글리세롤, 1,2-프로판다이올 프로필렌글리콜, 1,3-프로판다이올, 및 1,3-부탄다이올), 폴리에틸렌글리콜(예를 들어, PEG400), 및 이들의 혼합물이 포함된다. 등장제의 다른 예는 당을 포함한다. 당의 비제한적인 예는 단당류, 이당류, 또는 다당류, 또는 수용성 글루칸(예를 들어, 프룩토스, 글루코스, 만노스, 소르보스, 자일로스, 말토스, 락토스, 수크로스, 트레할로스, 덱스트란, 풀루란, 덱스트린, 사이클로덱스트린, 알파 및 베타-HPCD, 가용성 전분, 하이드록시에틸 전분, 및 소듐 카르복시메틸셀룰로스를 포함함)일 수 있다. 등장제의 다른 예는 당 알코올이며, 여기서 용어 "당 알코올"은 적어도 하나의 -OH 기를 갖는 C(4-8) 탄화수소로서 정의된다. 당 알코올의 비제한적인 예에는 만니톨, 소르비톨, 이노시톨, 갈락티톨, 둘시톨, 자일리톨, 및 아라비톨이 포함된다. 이 단락에 열거된 각각의 등장제를 포함하는 약제학적 조성물은 본 발명의 대안적인 실시 형태를 구성한다. 등장제는 약 0.01 mg/ml 내지 약 50 mg/ml, 예를 들어 약 0.1 mg/ml 내지 약 20 mg/ml의 농도로 개별적으로 또는 응집체로 존재할 수 있다. 이들 특정 등장제 각각을 포함하는 약제학적 조성물은 본 발명의 대안적인 실시 형태를 구성한다.
본 발명의 다른 실시 형태에서, 약제학적 조성물은 킬레이트제를 포함한다. 킬레이트제의 비제한적인 예에는 시트르산, 아스파르트산, 에틸렌다이아민테트라아세트산(EDTA)의 염, 및 이들의 혼합물이 포함된다. 킬레이트제는 약 0.01 mg/ml 내지 약 50 mg/ml, 예를 들어 약 0.1 mg/ml 내지 약 20 mg/ml의 농도로 개별적으로 또는 응집체로 존재할 수 있다. 이들 특정 킬레이트제 각각을 포함하는 약제학적 조성물은 본 발명의 대안적인 실시 형태를 구성한다.
본 발명의 다른 실시 형태에서, 약제학적 조성물은 안정화제를 포함한다. 안정화제의 비제한적인 예에는 하나 이상의 응집 억제제, 하나 이상의 산화 억제제, 하나 이상의 계면활성제, 및/또는 하나 이상의 프로테아제 억제제가 포함된다.
본 발명의 다른 실시 형태에서, 약제학적 조성물은 안정화제를 포함하며, 상기 안정화제는 카르복시-/하이드록시셀룰로스 및 이의 유도체(예컨대, HPC, HPC-SL, HPC-L 및 HPMC), 사이클로덱스트린, 2-메틸티오에탄올, 폴리에틸렌 글리콜(예컨대, PEG 3350), 폴리비닐 알코올(PVA), 폴리비닐 피롤리돈, 염(예컨대, 염화나트륨), 황-함유 물질, 예컨대 모노티오글리세롤), 또는 티오글리콜산이다. 안정제는 약 0.01 mg/ml 내지 약 50 mg/ml, 예를 들어 약 0.1 mg/ml 내지 약 20 mg/ml의 농도로 개별적으로 또는 응집체로 존재할 수 있다. 이들 특정 안정화제 각각을 포함하는 약제학적 조성물은 본 발명의 대안적인 실시 형태를 구성한다.
본 발명의 추가의 실시 형태에서, 약제학적 조성물은 하나 이상의 계면활성제, 바람직하게는 하나의 계면활성제, 적어도 하나의 계면활성제, 또는 2개의 상이한 계면활성제를 포함한다. 용어 "계면활성제"는 수용성(친수성) 부분 및 지용성(친유성) 부분으로 구성된 임의의 분자 또는 이온을 지칭한다. 계면활성제는, 예를 들어, 음이온성 계면활성제, 양이온성 계면활성제, 비이온성 계면활성제, 및/또는 쯔비터이온성 계면활성제로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 계면활성제는 약 0.1 mg/ml 내지 약 20 mg/ml의 농도로 개별적으로 또는 응집체로 존재할 수 있다. 이들 특정 계면활성제 각각을 포함하는 약제학적 조성물은 본 발명의 대안적인 실시 형태를 구성한다.
본 발명의 추가의 실시 형태에서, 약제학적 조성물은 하나 이상의 프로테아제 억제제, 예컨대 EDTA, 및/또는 벤즈아미딘 염산(HCl)을 포함한다. 프로테아제 억제제는 약 0.1 mg/ml 내지 약 20 mg/ml의 농도로 개별적으로 또는 응집체로 존재할 수 있다. 이들 특정 프로테아제 억제제 각각을 포함하는 약제학적 조성물은 본 발명의 대안적인 실시 형태를 구성한다.
본 발명의 약제학적 조성물은 조성물의 저장 동안 폴리펩티드의 응집체 형성을 감소시키기에 충분한 양의 아미노산 염기를 포함할 수 있다. 용어 "아미노산 염기"는 하나 이상의 아미노산(예컨대, 메티오닌, 히스티딘, 이미다졸, 아르기닌, 라이신, 아이소류신, 아스파르트산, 트립토판, 트레오닌), 또는 이들의 유사체를 지칭한다. 임의의 아미노산이 그의 유리 염기 형태 또는 그의 염 형태로 존재할 수 있다. 아미노산 염기의 임의의 입체이성질체(즉, L, D, 또는 이들의 혼합물)가 존재할 수 있다. 아미노산 염기는 약 0.01 mg/ml 내지 약 50 mg/ml, 예를 들어 약 0.1 mg/ml 내지 약 20 mg/ml의 농도로 개별적으로 또는 다른 아미노산 염기와의 배합물로 존재할 수 있다. 이들 아미노산 염기 각각을 포함하는 약제학적 조성물은 본 발명의 대안적인 실시 형태를 구성한다.
또한, 본 발명의 화합물 또는 이의 약제학적 조성물에 대한 치료적 유효 용량이 원하는 효과에 따라 달라질 것이라는 것은 당업자에게 명백하다. 따라서, 투여하고자 하는 최적 투여량은 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있으며, 사용되는 특정 화합물, 투여 방식, 제제의 강도, 및 질병 상태의 진행도에 따라 변동될 것이다. 게다가, 대상체, 연령, 체중, 식이 및 투여 시간을 포함한, 치료되는 특정 대상체와 관련된 인자에 따라, 적절한 치료 수준으로 용량을 조정해야 할 것이다.
모든 적응증에 대하여, 본 발명의 화합물은 바람직하게는 단회 또는 분할 용량으로 하루에 약 1 ㎍ 내지 약 5 mg의 용량으로(예를 들어, 단회 용량은 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 또는 10회의 하위용량으로 분할될 수 있음), 또는 용량당 약 0.01 ㎍/㎏ 내지 약 500 ㎍/㎏, 더 바람직하게는 약 0.05 ㎍/㎏ 내지 약 250 ㎍/㎏, 가장 바람직하게는 약 50 ㎍/㎏ 미만으로 말초적으로 투여된다. 이들 범위의 투여량은 물론 각각의 효능제의 효력(potency)에 따라 변동될 것이며, 당업자에 의해 용이하게 결정된다. 따라서, 상기 투여량은 평균적인 경우의 예이다. 물론 더 많거나 더 적은 투여량 범위가 유익한 개별적인 경우가 있을 수 있으며, 그러한 경우도 본 발명의 범주 내에 있다.
소정 실시 형태에서, 본 발명의 화합물은 약 1 ㎍ 내지 약 5 mg의 용량으로, 또는 약 0.01 ㎍/㎏ 내지 약 500 ㎍/㎏의 용량으로, 더 바람직하게는 약 0.05 ㎍/㎏ 내지 약 250 ㎍/㎏의 용량으로, 가장 바람직하게는 약 50 ㎍/㎏ 미만의 용량으로, 일정 용량의 제2 치료제(예를 들어, 리라글루타이드)와 함께 투여되며, 이때 제2 치료제는 약 1 ㎍ 내지 약 5 mg의 용량으로, 또는 약 0.01 ㎍/㎏ 내지 약 500 ㎍/㎏의 용량으로, 더 바람직하게는 약 0.05 ㎍/㎏ 내지 약 250 ㎍/㎏의 용량으로, 가장 바람직하게는 약 50 ㎍/㎏ 미만의 용량으로 투여된다.
본 발명의 화합물의 약제학적으로 허용되는 염은 무기 또는 유기 산 또는 염기로부터 형성되는 통상적인 비독성 염 또는 4차 암모늄 염을 포함한다. 그러한 산 부가 염의 예에는 아세테이트, 아디페이트, 벤조에이트, 벤젠설포네이트, 시트레이트, 캄포레이트, 도데실설페이트, 하이드로클로라이드, 하이드로브로마이드, 락테이트, 말레에이트, 메탄설포네이트, 니트레이트, 옥살레이트, 피발레이트, 프로피오네이트, 석시네이트, 설페이트 및 타르트레이트가 포함된다. 염기 염은 암모늄 염, 나트륨 및 칼륨 염과 같은 알칼리 금속 염, 칼슘 및 마그네슘 염과 같은 알칼리 토금속 염, 다이사이클로헥실아미노 염과 같은 유기 염기와의 염 및 아르기닌과 같은 아미노산과의 염을 포함한다. 또한, 염기성 질소-함유 기는, 예를 들어 알킬 할라이드로 4차화될 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물은 그들의 의도한 목적을 달성하는 임의의 수단에 의해 투여될 수 있다. 예에는 비경구, 피하, 정맥내, 근육내, 복막내, 경피, 협측 또는 안구 경로에 의한 투여가 포함된다. 투여는 경구 경로에 의해 행해질 수 있다. 비경구 투여를 위한 적합한 제형은 수용성 형태의 활성 접합체의 수용액, 예를 들어 수용성 염, 산성 용액, 알칼리성 용액, 덱스트로스-물 용액, 등장성 탄수화물 용액 및 사이클로덱스트린 포접 복합체를 포함한다.
본 발명은 또한 임의의 본 발명의 화합물과 약제학적으로 허용되는 담체를 혼합하는 단계를 포함하는 약제학적 조성물의 제조 방법을 포함한다. 게다가, 본 발명은 임의의 본 발명의 화합물과 하나 이상의 약제학적으로 허용되는 담체를 혼합함으로써 제조되는 약제학적 조성물을 포함한다.
더욱이, 본 발명의 화합물은 하나 이상의 다형체 또는 무정형 결정질 형태를 가질 수 있으며, 이들은 본 발명의 범주 내에 포함되는 것으로 의도된다. 게다가, 화합물은 용매화물, 예를 들어 물과의 용매화물(즉, 수화물) 또는 통상적인 유기 용매와의 용매화물을 형성할 수 있다. 본 명세서에 사용되는 용어 "용매화물"은 본 발명의 화합물과 하나 이상의 용매 분자와의 물리적 회합을 의미한다. 이러한 물리적 회합은 수소 결합을 비롯한 다양한 정도의 이온 결합 및 공유 결합을 포함한다. 경우에 따라서는, 용매화물은 예를 들어, 하나 이상의 용매 분자가 결정질 고체의 결정 격자에 포함될 경우, 단리될 수 있을 것이다. 용어 "용매화물"은 용액상(solution-phase) 및 단리가능한 용매화물 둘 모두를 포함하는 것으로 의도된다. 적합한 용매화물의 비제한적인 예에는 에탄올레이트, 메탄올레이트 등이 포함된다.
본 발명은 본 발명의 접합체의 다형체 및 용매화물을 그의 범주 내에 포함하고자 한다. 따라서, 본 발명의 치료 방법에서, 용어 "투여하는"은 본 발명의 접합체, 또는 이의 다형체 또는 용매화물을 사용하여 본 명세서에 기재된 증후군, 장애 또는 질병을 치료, 개선 또는 예방하는 수단을 포함할 것이며, 이는 구체적으로 개시되어 있지 않지만 본 발명의 범주 내에 명백히 포함될 것이다.
다른 실시 형태에서, 본 발명은 약제로서 사용되는 본 발명의 화합물에 관한 것이다.
본 발명은 본 발명의 화합물의 전구약물을 그 범주 내에 포함한다. 일반적으로, 그러한 전구약물은 필요한 화합물로 생체내에서 용이하게 전환가능한 화합물의 기능성 유도체일 것이다. 따라서, 본 발명의 치료 방법에서, 용어 "투여하는"은 구체적으로 개시된 화합물에 의해 또는 구체적으로 개시되어 있지 않을 수 있지만 환자에게 투여 후 생체내에서 명시된 화합물로 전환되는 화합물에 의한, 기재된 다양한 장애의 치료를 포함할 것이다. 적합한 전구약물 유도체의 선택과 제조를 위한 통상적인 절차는 예를 들어, 문헌["Design of Prodrugs", Ed. H. Bundgaard, Elsevier, 1985]에 기재되어 있다.
더욱이, 본 발명의 범주 내에서, 임의의 원소는, 특히 본 발명의 화합물과 관련하여 언급되는 경우, 천연 존재비 또는 동위원소적으로 풍부화된 형태로 천연 발생 또는 합성적으로 제조된 상기 원소의 모든 동위원소 및 동위원소 혼합물을 포함할 것으로 의도된다. 예를 들어, 수소에 대한 언급은 그의 범위 내에 1H, 2H(D), 및 3H(T)를 포함한다. 유사하게, 탄소 및 산소에 대한 언급은 각각 이들의 범위 내에 12C, 13C 및 14C와, 16O 및 18O를 포함한다. 동위원소는 방사성 또는 비방사성일 수 있다. 본 발명의 방사성 표지 화합물은 3H, 11C, 18F, 122I, 123I, 125I, 131I, 75Br, 76Br, 77Br 및 82Br의 군으로부터 선택되는 방사성 동위원소를 포함할 수 있다. 바람직하게는, 방사성 동위원소는 3H, 11C 및 18F의 군으로부터 선택된다.
본 발명의 일부 화합물은 회전장애 이성질체로서 존재할 수 있다. 회전장애 이성질체는 단일 결합을 중심으로 한 장애 회전에 의해 생긴 입체 이성질체이며, 여기서는 회전에 대한 입체 변형 장벽이 형태 이성질체를 단리할 수 있을 정도로 충분히 높다. 모든 그러한 형태 이성질체 및 이들의 혼합물이 본 발명의 범위 내에 포함되는 것으로 이해되어야 한다.
본 발명에 따른 화합물이 적어도 하나의 입체 중심을 갖는 경우, 이는 그에 따라 거울상 이성질체 또는 부분입체 이성질체로서 존재할 수 있다. 모든 그러한 이성질체 및 이들의 혼합물이 본 발명의 범위 내에 포함되는 것으로 이해되어야 한다.
본 발명에 따른 화합물의 제조 방법에 의해 입체 이성질체의 혼합물이 생성되는 경우, 이들 이성질체는 분취용 크로마토그래피와 같은 통상적인 기술에 의해 분리될 수 있다. 화합물은 라세미 형태로 제조될 수 있거나, 또는 거울상 이성질체 특이적(enantiospecific) 합성에 의하여 또는 분할에 의하여 개별 거울상 이성질체가 제조될 수 있다. 화합물은 예를 들어, 표준 기술, 예를 들어, (-)-다이-p-톨루오일-D-타르타르산 및/또는 (+)-다이-p-톨루오일-L-타르타르산과 같은 광학 활성 산을 이용한 염 형성과, 이어서 분별 결정화 및 유리 염기의 재생에 의한 부분입체 이성질체 쌍의 형성에 의해 그들의 구성성분 거울상 이성질체로 분할될 수 있다. 화합물은 또한, 부분입체 이성질체 에스테르 또는 아미드의 형성 후, 크로마토그래피 분리 및 키랄 보조제의 제거에 의하여 분할될 수 있다. 대안적으로, 화합물은 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC) 또는 SFC를 통해 키랄 컬럼을 사용하여 분할될 수 있다. 일부 경우에, 1H NMR에 의해 관측될 수 있는 화합물의 회전 이성질체가 존재할 수 있으며, 이는 1H NMR 스펙트럼에서 복합 다중선 및 피크 적분을 가져온다.
본 발명의 화합물의 임의의 제조 방법 동안, 임의의 대상 분자 상의 민감성 또는 반응성 기를 보호하는 것이 필요하고/하거나 바람직할 수 있다. 이는 통상적인 보호기, 예컨대 문헌[Protective Groups in Organic Chemistry, ed. J.F.W. McOmie, Plenum Press, 1973]; 및 문헌[T.W. Greene & P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, 1991]에 기재된 것들에 의해 달성될 수 있으며, 이들 각각은 모든 목적상 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함된다. 보호기는 당업계에서 알려진 방법을 사용하여 편리한 후속 단계에서 제거될 수 있다.
사용 방법
본 발명은 Y2 수용체 매개 증후군, 장애 또는 질병의 예방, 치료 또는 개선을 필요로 하는 대상체에서 Y2 수용체 매개 증후군, 장애 또는 질병을 예방, 치료 또는 개선하기 위한 방법에 관한 것으로, 상기 방법은 이를 필요로 하는 대상체에게 본 발명의 유효량의 화합물, 이의 유도체 또는 약제학적으로 허용되는 염(이는 선택적으로 반감기 연장 모이어티에 접합됨), 또는 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.
본 발명은 장애, 질병, 또는 질환 또는 상기 장애, 질병, 또는 질환의 임의의 하나 이상의 증상의 예방, 치료, 발병의 지연, 또는 개선을 필요로 하는 대상체에서 장애, 질병, 또는 질환 또는 상기 장애, 질병, 또는 질환의 임의의 하나 이상의 증상을 예방, 치료, 발병의 지연, 또는 개선하기 위한 방법을 또한 제공하며, 상기 방법은 이를 필요로 하는 대상체에게 본 발명의 유효량의 화합물, 이의 유도체 또는 약제학적으로 허용되는 염(이는 선택적으로 반감기 연장 모이어티에 접합됨), 또는 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.
특정 실시 형태에 따르면, 질병, 장애, 또는 질환은 비만, 제I형 또는 제II형 당뇨병, 대사 증후군(즉, 증후군 X), 인슐린 저항성, 내당능 장애(예를 들어, 당불내성), 고혈당증, 고인슐린혈증, 고트라이글리세라이드혈증, 선천성 고인슐린증(CHI)으로 인한 저혈당증, 이상지질혈증, 죽상경화증, 당뇨병성 신장병증, 및 다른 심혈관 위험 인자, 예컨대 고혈압 및 관리되지 않은 콜레스테롤 및/또는 지질 수준과 관련된 심혈관 위험 인자, 골다공증, 염증, 비알코올성 지방간 질병(NAFLD), 비알코올성 지방성 간염(NASH), 신장 질병, 및/또는 습진으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
특정 실시 형태에 따르면, 치료적 유효량은 하기 효과 중 하나, 둘, 셋, 넷, 또는 그 이상을 달성하기에 충분한 요법의 양을 지칭한다: (i) 치료하고자 하는 질병, 장애, 또는 질환, 또는 이와 관련된 증상의 중증도를 감소 또는 개선함; (ii) 치료하고자 하는 질병, 장애 또는 질환, 또는 이와 관련된 증상의 지속기간을 감소시킴; (iii) 치료하고자 하는 질병, 장애 또는 질환, 또는 이와 관련된 증상의 진행을 예방함; (iv) 치료하고자 하는 질병, 장애 또는 질환, 또는 이와 관련된 증상의 퇴행을 야기함; (v) 치료하고자 하는 질병, 장애 또는 질환, 또는 이와 관련된 증상의 발생 또는 발병을 예방함; (vi) 치료하고자 하는 질병, 장애 또는 질환, 또는 이와 관련된 증상의 재발을 예방함; (vii) 치료하고자 하는 질병, 장애 또는 질환, 또는 이와 관련된 증상을 갖는 대상체의 입원을 감소시킴; (viii) 치료하고자 하는 질병, 장애 또는 질환, 또는 이와 관련된 증상을 갖는 대상체의 입원 길이를 감소시킴; (ix) 치료하고자 하는 질병, 장애 또는 질환, 또는 이와 관련된 증상을 갖는 대상체의 생존율을 증가시킴; (xi) 대상체에서 치료하고자 하는 질병, 장애 또는 질환, 또는 이와 관련된 증상을 억제하거나 감소시킴; 및/또는 (xii) 다른 요법의 예방적 또는 치료적 효과(들)를 향상시키거나 개선함.
치료적 유효량 또는 투여량은 다양한 인자, 예컨대 치료하고자 하는 질병, 장애 또는 질환, 투여 수단, 표적 부위, 대상체의 생리학적 상태(예를 들어, 연령, 체중, 건강을 포함함), 대상체가 인간인지 또는 동물인지의 여부, 투여되는 다른 약, 및 치료가 예방적인지 또는 치료적인지의 여부에 따라 변동될 수 있다. 치료 투여량은 안전성 및 효능을 최적화하기 위해 최적으로 적정된다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 용어 "치료하다", "치료하는", 및 "치료"는 모두 질병, 장애, 또는 질환과 관련된 하나 이상의 측정가능한 물리적 파라미터의 개선 또는 역전을 지칭하고자 하는 것이며, 이는 반드시 대상체에서 식별가능하지는 않지만, 대상체에서 식별가능할 수도 있다. 용어 "치료하다", "치료하는", 및 "치료"는 또한, 퇴행을 야기하거나, 진행을 예방하거나, 적어도 질병, 장애 또는 질환의 진행을 둔화시키는 것을 지칭할 수 있다. 특정 실시 형태에서, "치료하다", "치료하는", 및 "치료"는 질병, 장애, 또는 질환과 관련된, 경감, 발생 또는 발병의 예방, 또는 하나 이상의 증상의 지속기간의 감소를 지칭한다. 특정 실시 형태에서, "치료하다", "치료하는", 및 "치료"는 질병, 장애 또는 질환의 재발의 예방을 지칭한다. 특정 실시 형태에서, "치료하다", "치료하는", 및 "치료"는 질병, 장애 또는 질환을 갖는 대상체의 생존율의 증가를 지칭한다. 특정 실시 형태에서, "치료하다", "치료하는", 및 "치료"는 대상체에서 질병, 장애 또는 질환의 제거를 지칭한다.
일 실시 형태에서, 본 발명은 비만, 또는 비만의 임의의 하나 이상의 증상의 예방, 치료, 발병의 지연, 또는 개선을 필요로 하는 대상체에서 비만, 또는 비만의 임의의 하나 이상의 증상을 예방, 치료, 발병의 지연, 또는 개선하기 위한 방법을 제공하며, 상기 방법은 이를 필요로 하는 대상체에게 본 발명의 유효량의 화합물, 이의 유도체 또는 약제학적으로 허용되는 염(이는 선택적으로 반감기 연장 모이어티에 접합됨), 또는 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 대상체의 체중은, 예를 들어, 본 명세서에 기재된 본 발명의 접합체, 화합물, 약제학적 조성물, 형태, 또는 약제 중 임의의 것의 투여 전의 대상체의 체중과 대비하여, 또는 본 명세서에 기재된 본 발명의 접합체, 조성물, 형태, 약제, 또는 병용물 중 임의의 것을 제공받지 않은 대조 대상체와 대비하여 약 0.01% 내지 약 0.1%, 약 0.1% 내지 약 0.5%, 약 0.5% 내지 약 1%, 약 1% 내지 약 5%, 약 2% 내지 약 3%, 약 5% 내지 약 10%, 약 10% 내지 약 15%, 약 15% 내지 약 20%, 약 20% 내지 약 25%, 약 25% 내지 약 30%, 약 30% 내지 약 35%, 약 35% 내지 약 40%, 약 40% 내지 약 45%, 또는 약 45% 내지 약 50%만큼 감소된다.
일부 실시 형태에서, 체중 감소는, 예를 들어 약 1주 동안, 약 2주 동안, 약 3주 동안, 약 1개월 동안, 약 2개월 동안, 약 3개월 동안, 약 4개월 동안, 약 5개월 동안, 약 6개월 동안, 약 7개월 동안, 약 8개월 동안, 약 9개월 동안, 약 10개월 동안, 약 11개월 동안, 약 1년 동안, 약 1.5년 동안, 약 2년 동안, 약 2.5년 동안, 약 3년 동안, 약 3.5년 동안, 약 4년 동안, 약 4.5년 동안, 약 5년 동안, 약 6년 동안, 약 7년 동안, 약 8년 동안, 약 9년 동안, 약 10년 동안, 약 15년 동안, 또는 약 20년 동안 유지된다.
본 발명은 또한, 비만, 제I형 또는 제II형 당뇨병, 대사 증후군(즉, 증후군 X), 인슐린 저항성, 내당능 장애(예를 들어, 당불내성), 고혈당증, 고인슐린혈증, 고트라이글리세라이드혈증, 선천성 고인슐린혈증(CHI)으로 인한 저혈당증, 이상지질혈증, 죽상경화증, 당뇨병성 신장병증, 및 다른 심혈관 위험 인자, 예컨대 고혈압 및 관리되지 않은 콜레스테롤 및/또는 지질 수준과 관련된 심혈관 위험 인자, 골다공증, 염증, 비알코올성 지방간 질병(NAFLD), 비알코올성 지방성 간염(NASH), 신장 질병, 및 습진으로 이루어진 군으로부터 선택되는 증후군, 장애 또는 질병, 또는 상기 증후군, 장애 또는 질병의 임의의 하나 이상의 증상의 예방, 치료, 발병의 지연, 또는 개선을 필요로 하는 대상체에서 상기 증후군, 장애 또는 질병, 또는 상기 증후군, 장애 또는 질병의 임의의 하나 이상의 증상을 예방, 치료, 발병의 지연, 또는 개선하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 이를 필요로 하는 대상체에게 본 발명의 유효량의 화합물, 이의 유도체 또는 약제학적으로 허용되는 염(이는 선택적으로 반감기 연장 모이어티에 접함됨), 또는 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함한다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 대사 증후군은 하기 중 임의의 하나 이상을 갖는 대상체를 지칭한다: 고혈당(예를 들어, 고공복 혈당), 고혈압, 비정상적 콜레스테롤 수준(예를 들어, 낮은 HDL 수준), 비정상적 트라이글리세라이드 수준(예를 들어, 고 트라이글리세라이드), 큰 허리선(즉, 허리 둘레), 복부 영역에서의 증가된 지방, 인슐린 저항성, 당불내성, 상승된 C-반응성 단백질 수준(즉, 전염증성 상태), 및 증가된 혈장 플라스미노겐 활성 억제인자-1 및 피브리노겐 수준(즉, 전혈전 상태).
본 발명은 음식 섭취량의 감소를 필요로 하는 대상체에서 음식 섭취량을 감소시키는 방법을 제공하며, 상기 방법은 이를 필요로 하는 대상체에게 본 발명의 유효량의 화합물, 이의 유도체 또는 약제학적으로 허용되는 염(이는 선택적으로 반감기 연장 모이어티에 접합됨), 또는 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 대상체의 음식 섭취량은, 예를 들어, 본 명세서에 기재된 본 발명의 접합체, 화합물, 조성물, 형태, 약제, 또는 병용물 중 임의의 것의 투여 전의 대상체의 음식 섭취량과 대비하여, 또는 본 명세서에 기재된 본 발명의 접합체, 화합물, 조성물, 형태, 약제, 또는 병용물 중 임의의 것을 제공받지 않은 대조 대상체와 대비하여 약 0.01% 내지 약 0.1%, 약 0.1% 내지 약 0.5%, 약 0.5% 내지 약 1%, 약 1% 내지 약 5%, 약 2% 내지 약 3%, 약 5% 내지 약 10%, 약 10% 내지 약 15%, 약 15% 내지 약 20%, 약 20% 내지 약 25%, 약 25% 내지 약 30%, 약 30% 내지 약 35%, 약 35% 내지 약 40%, 약 40% 내지 약 45%, 또는 약 45% 내지 약 50%만큼 감소된다.
일부 실시 형태에서, 음식 섭취량의 감소는, 예를 들어 약 1주 동안, 약 2주 동안, 약 3주 동안, 약 1개월 동안, 약 2개월 동안, 약 3개월 동안, 약 4개월 동안, 약 5개월 동안, 약 6개월 동안, 약 7개월 동안, 약 8개월 동안, 약 9개월 동안, 약 10개월 동안, 약 11개월 동안, 약 1년 동안, 약 1.5년 동안, 약 2년 동안, 약 2.5년 동안, 약 3년 동안, 약 3.5년 동안, 약 4년 동안, 약 4.5년 동안, 약 5년 동안, 약 6년 동안, 약 7년 동안, 약 8년 동안, 약 9년 동안, 약 10년 동안, 약 15년 동안, 또는 약 20년 동안 유지된다.
본 발명은 당화 헤모글로빈(A1C)의 감소를 필요로 하는 대상체에서 당화 헤모글로빈을 감소시키는 방법을 제공하며, 상기 방법은 이를 필요로 하는 대상체에게 본 발명의 유효량의 화합물, 이의 유도체 또는 약제학적으로 허용되는 염(이는 선택적으로 반감기 연장 모이어티에 접합됨), 또는 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시 형태에서, 대상체의 A1C는, 예를 들어, 본 명세서에 기재된 본 발명의 접합체, 화합물, 조성물, 형태, 약제, 또는 병용물 중 임의의 것의 투여 전의 대상체의 A1C와 대비하여, 또는 본 명세서에 기재된 본 발명의 접합체, 화합물, 조성물, 형태, 약제, 또는 병용물 중 임의의 것을 제공받지 않은 대조 대상체와 대비하여 약 0.001% 내지 약 0.01%, 약 0.01% 내지 약 0.1%, 약 0.1% 내지 약 0.2%, 약 0.2% 내지 약 0.3%, 약 0.3% 내지 약 0.4%, 약 0.4% 내지 약 0.5%, 약 0.5% 내지 약 1%, 약 1% 내지 약 1.5%, 약 1.5% 내지 약 2%, 약 2% 내지 약 2.5%, 약 2.5% 내지 약 3%, 약 3% 내지 약 4%, 약 4% 내지 약 5%, 약 5% 내지 약 6%, 약 6% 내지 약 7%, 약 7% 내지 약 8%, 약 8% 내지 약 9%, 또는 약 9% 내지 약 10%만큼 감소된다.
다른 실시 형태에서, 공복 혈당 수준의 감소를 필요로 하는 대상체에서 공복 혈당 수준을 감소시키기 위한 방법이 제공되며, 상기 방법은 이를 필요로 하는 대상체에게 본 발명의 유효량의 화합물, 이의 유도체 또는 약제학적으로 허용되는 염(이는 선택적으로 반감기 연장 모이어티에 접합됨), 또는 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 공복 혈당 수준은 본 명세서에 기재된 본 발명의 접합체, 화합물, 조성물, 형태, 약제, 또는 병용물 중 임의의 것의 투여 전의 대상체의 공복 혈당 수준과 대비하여, 또는 본 명세서에 기재된 본 발명의 접합체, 화합물, 조성물, 형태, 약제, 또는 병용물 중 임의의 것을 제공받지 않은 대조 대상체와 대비하여 약 140 mg/dL 미만 내지 약 150 mg/dL, 약 140 mg/dL 미만 내지 약 130 mg/dL, 약 130 mg/dL 미만 내지 약 120 mg/dL, 약 120 mg/dL 미만 내지 약 110 mg/dL, 약 110 mg/dL 미만 내지 약 100 mg/dL, 약 100 mg/dL 미만 내지 약 90 mg/dL, 또는 약 90 mg/dL 미만 내지 약 80 mg/dL로 감소될 수 있다.
본 발명은 Y2 수용체 활성의 조절을 필요로 하는 대상체에서 Y2 수용체 활성을 조절하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 이를 필요로 하는 대상체에게 본 발명의 유효량의 화합물, 이의 유도체 또는 약제학적으로 허용되는 염(이는 선택적으로 반감기 연장 모이어티에 접합됨), 또는 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 본 명세서에 사용되는 바와 같이, "조절하는"은 수용체 활성을 증가 또는 감소시키는 것을 지칭한다.
일부 실시 형태에서, 본 발명의 유효량의 화합물, 이의 유도체 또는 약제학적으로 허용되는 염(이는 선택적으로 반감기 연장 모이어티에 접합됨), 또는 약제학적 조성물은 이를 필요로 하는 대상체에게 일일 1회, 일일 2회, 일일 3회, 일일 4회, 일일 5회, 일일 6회, 일일 7회, 또는 일일 8회 투여된다. 다른 실시 형태에서, 본 발명의 유효량의 화합물, 이의 유도체 또는 약제학적으로 허용되는 염(이는 선택적으로 반감기 연장 모이어티에 접합됨), 또는 약제학적 조성물은 이를 필요로 하는 대상체에게 격일로 1회, 주 1회, 주 2회, 주 3회, 주 4회, 주 5회, 주 6회, 개월당 2회, 개월당 3회, 또는 개월당 4회 투여된다.
본 발명의 다른 실시 형태는 질병, 장애 또는 증후군, 또는 상기 질병, 장애 또는 증후군 중 임의의 것의 하나 이상의 증상의 예방, 치료, 발병의 지연, 또는 개선을 필요로 하는 대상체에서 질병, 장애 또는 증후군, 또는 상기 질병, 장애 또는 증후군 중 임의의 것의 하나 이상의 증상을 예방, 치료, 발병의 지연, 또는 개선하기 위한 방법을 포함하며, 상기 방법은 이를 필요로 하는 대상체에게 병용 요법으로 본 발명의 유효량의 화합물, 이의 유도체 또는 약제학적으로 허용되는 염(이는 선택적으로 반감기 연장 모이어티에 접합됨), 또는 약제학적 조성물을 투여하는 단계를 포함한다. 소정 실시 형태에서, 병용 요법은 제2 치료제이다. 소정 실시 형태에서, 병용 요법은 외과적 요법이다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 대상체에 대한 2가지 이상의 요법의 투여와 관련하여 용어 "병용하여"는 하나 초과의 요법의 사용을 지칭한다.
본 명세서에 사용되는 바와 같이, 병용 요법은 이를 필요로 하는 대상체에게, 본 발명의 유효량의 화합물, 이의 유도체 또는 약제학적으로 허용되는 염(이는 선택적으로 반감기 연장 모이어티에 접합됨), 또는 약제학적 조성물과 병행하여, 하나 이상의 추가의 치료제, 또는 하나 이상의 외과적 요법을 투여하는 것을 지칭한다. 일부 실시 형태에서, 하나 이상의 추가의 치료제 또는 외과적 요법은 본 발명의 유효량의 화합물, 이의 유도체 또는 약제학적으로 허용되는 염(이는 선택적으로 반감기 연장 모이어티에 접합됨), 또는 약제학적 조성물과 동일한 날에 투여될 수 있으며, 다른 실시 형태에서, 하나 이상의 추가의 치료제 또는 외과적 요법은 본 발명의 유효량의 화합물, 이의 유도체 또는 약제학적으로 허용되는 염(이는 선택적으로 반감기 연장 모이어티에 접합됨), 또는 약제학적 조성물과 동일한 주 또는 동일한 달에 투여될 수 있다.
질병 또는 장애가 비만, 제II형 당뇨병, 대사 증후군, 인슐린 저항성 및 이상지질혈증으로 이루어진 군으로부터 선택되는 소정 실시 형태에서, 제2 치료제는 항당뇨병제일 수 있다. 소정 실시 형태에서, 항당뇨병제는 글루카곤-유사 펩티드-1(GLP-1) 수용체 조절제일 수 있다.
본 발명은 또한 병용 요법을 사용하여 본 명세서에 기재된 질병, 장애, 증후군, 또는 증상 중 임의의 것의 예방, 치료, 발병의 지연, 또는 개선을 필요로 하는 대상체에서 상기 질병, 장애, 증후군, 또는 증상 중 임의의 것을 예방, 치료, 발병의 지연, 또는 개선하는 것을 고려하며, 상기 병용 요법은 이를 필요로 하는 대상체에게 본 발명의 유효량의 화합물, 이의 유도체 또는 약제학적으로 허용되는 염(이는 선택적으로 반감기 연장 모이어티에 접합됨), 또는 약제학적 조성물을 하기 치료제들 중 임의의 하나 이상과 병용하여 투여하는 것을 포함한다: 다이펩티딜 펩티다제-4(DPP-4) 억제제(예를 들어, 시타글립틴, 삭사글립틴, 리나글립틴, 알로글립틴 등); GLP-1 수용체 효능제(예를 들어, 단시간-작용형 GLP-1 수용체 효능제, 예컨대 엑세나타이드 및 릭시세나타이드; 중간시간-작용형 GLP-1 수용체 효능제, 예컨대 리라글루타이드; 장시간-작용형 GLP-1 수용체 효능제, 예컨대 연장-방출형 엑세나타이드, 알비글루타이드, 둘라글루타이드); 나트륨-글루코스 공동-수송체-2(SGLT-2) 억제제(예를 들어, 카나글리포진, 다파글리포진, 엠파글리포진 등); 담즙산 봉쇄제(예를 들어, 콜레세벨람 등); 도파민 수용체 효능제(예를 들어, 신속-방출형 브로모크립틴). 바이구아나이드(예를 들어, 메트포르민 등); 인슐린; 옥신토모듈린; 설포닐우레아(예를 들어, 클로르프로파미드, 글리메피라이드, 글리피자이드, 글리부라이드, 글리벤클라미드, 글리보누라이드, 글리속세파이드, 글리클로피라미드, 톨라자미드, 톨부타미드, 아세토헥사미드, 카부타미드 등); 및 티아졸리딘다이온(예를 들어, 피오글리타존, 로시글리타존, 로베글리타존, 시글리타존, 다글리타존, 엔글리타존, 네토글리타존, 리보글리타존, 트로글리타존 등). 일부 실시 형태에서, 추가의 치료제(들)의 용량은 본 발명의 유효량의 화합물, 이의 유도체 또는 약제학적으로 허용되는 염(이는 선택적으로 반감기 연장 모이어티에 접합됨), 또는 약제학적 조성물과 병용하여 제공될 때 감소된다. 일부 실시 형태에서, 본 발명의 접합체 또는 화합물과 병용하여 사용되는 경우, 추가의 치료제(들)는 각각 단독으로 사용되는 경우보다 더 낮은 용량으로 사용될 수 있다.
소정 실시 형태에서, 질병 또는 장애가 비만, 제I형 또는 제II형 당뇨병, 대사 증후군(즉, 증후군 X), 인슐린 저항성, 내당능 장애(예를 들어, 당불내성), 고혈당증, 고인슐린혈증, 고트라이글리세라이드혈증, 선천성 고인슐린증(CHI)으로 인한 저혈당증, 이상지질혈증, 죽상경화증, 당뇨병성 신장병증, 및 다른 심혈관 위험 인자, 예컨대 고혈압 및 관리되지 않은 콜레스테롤 및/또는 지질 수준과 관련된 심혈관 위험 인자, 골다공증, 염증, 비알코올성 지방간 질병(NAFLD), 비알코올성 지방성 간염(NASH), 신장 질병, 및 습진으로 이루어진 군으로부터 선택되는 경우, 제2 치료제는 리라글루타이드일 수 있다.
본 발명은 또한 병용 요법을 사용하여 본 명세서에 기재된 질병, 장애, 증후군, 또는 증상 중 임의의 것의 예방, 치료, 발병의 지연, 또는 개선을 필요로 하는 대상체에서 상기 질병, 장애, 증후군, 또는 증상 중 임의의 것을 예방, 치료, 발병의 지연, 또는 개선하는 것을 고려하며, 상기 병용 요법은 이를 필요로 하는 대상체에게 본 발명의 유효량의 화합물, 이의 유도체 또는 약제학적으로 허용되는 염(이는 선택적으로 반감기 연장 모이어티에 접합됨), 또는 약제학적 조성물을 외과적 요법과 병용하여 투여하는 것을 포함한다. 소정 실시 형태에서, 외과적 요법은 하기와 같을 수 있다: 비만대사 수술(예를 들어, 위 우회술, 예컨대 루와이 위 우회술; 위소매 절제술; 조정가능한 위 밴드 수술; 십이지장 교체를 갖는 담도췌장 우회술; 위내 풍선; 위주름 성형술; 및 이들의 조합).
하나 이상의 추가의 치료제 또는 외과적 요법이 본 발명의 유효량의 접합체 또는 화합물과 동일한 날에 투여되는 실시 형태에서, 본 발명의 접합체 또는 화합물은 추가의 치료제 또는 외과적 요법 전에, 그 후에, 또는 그와 동시에 투여될 수 있다. 용어 "병용하여"의 사용은 요법이 대상체에게 투여되는 순서를 제한하지 않는다. 예를 들어, 대상체에게 제2 요법을 투여하기 전에(예를 들어, 5분, 15분, 30분, 45분, 1시간, 2시간, 4시간, 6시간, 12시간, 16시간, 24시간, 48시간, 72시간, 96시간, 1주, 2주, 3주, 4주, 5주, 6주, 8주, 또는 12주 전에), 그와 동시에, 또는 그 후에(예를 들어, 5분, 15분, 30분, 45분, 1시간, 2시간, 4시간, 6시간, 12시간, 16시간, 24시간, 48시간, 72시간, 96시간, 1주, 2주, 3주, 4주, 5주, 6주, 8주, 또는 12주 후에) 제1 요법(예를 들어, 본 명세서에 기재된 조성물)이 투여될 수 있다.
약어
하기 약어가 본 명세서 및 본 출원서에 사용될 수 있다. Abu: 4-아미노부티르산; Ac 2 O: 아세트산 무수물; aq: 수성; alloc: 알릴옥시카르보닐; arach: 아라키도일; Boc: tert-부톡시카르보닐; BSA: 소혈청 알부민; CDI: 1,1'-카르보닐다이이미다졸; DCM: 다이클로로메탄; Dde: 1-(4,4-다이메틸-2,6-다이옥소사이클로헥스-1-일리덴)에틸; DIBAL-H: 다이아이소부틸알루미늄 하이드라이드; DIC: 다이아이소프로필카르보다이이미드; DIEA: 다이아이소프로필에틸아민; DMA: N, N-다이메틸아세트아미드; DMF: N, N-다이메틸포름아미드; DMSO: 메틸 설폭사이드; DODT: 2,2'-(에틸렌다이옥시)다이에탄티올; EDC: N-(3-다이메틸아미노프로필)-N'-에틸카르보다이이미드; EDCI: 1-(3-다이메틸아미노프로필)-3-에틸카르보다이이미드 하이드로클로라이드; Et: 에틸; EtOAc: 에틸 아세테이트; EtOH: 에틸 알코올; FBS: 소태아 혈청; Fmoc: 9-플루오레닐메틸옥시카르보닐; g: 그램; h: 시간; HATU: 2-(1H-7-아자벤즈트라이아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸아미늄 헥사플루오로포스페이트; HBSS: 행크 평형 염 용액(Hank's balanced salt solution); HBTU: 2-(1H-벤조트라이아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸우로늄 헥사플루오로포스페이트); HCTU: 2-(6-클로로-1H-벤즈트라이아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸아미늄 헥사플루오로포스페이트; HCl: 염산; HEPES: 4-(2-하이드록시에틸)-1-피페라진에탄설폰산; HOBT: 1-하이드록시벤즈트라이아졸; HPLC: 고성능 액체 크로마토그래피; ivDde: 1-(4,4-다이메틸-2,6-다이옥소사이클로헥스-1-일리덴)-3-메틸부틸; LAH: 수소화알루미늄리튬; LCMS: 질량 분석계를 이용한 고압 액체 크로마토그래피; Me: 메틸; MeCN: 아세토니트릴; MeOH: 메틸 알코올; mg: 밀리그램; min: 분; Mmt: 4-메톡시트라이틸; mpm: 분당 mL; Mtt: 4-메틸트라이틸; NHS: N-하이드록시석신이미드; NMP: 1-메틸-2-피롤리돈; OEG: 8-아미노-3,6-다이옥사옥타노일; 옥시마: 에틸 시아노(하이드록시이미노)아세테이트; Pal: 팔미토일; Pbf: 2,2,4,6,7-펜타메틸다이하이드로벤조푸란-5-설포닐; Pd(PPh 3 ) 4 : 테트라키스(트라이페닐포스핀)팔라듐(0); PhSiH 3 : 페닐실란; psi: 환원된 아미드 결합(인접한 아미노산들 사이); PyBroP: 브로모-트리스-피롤리디노-포스포늄 헥사플루오로포스페이트; 피옥심: 1-시아노-2-에톡시-2-옥소에틸리덴아미노옥시-트리스-피롤리디노-포스포늄 헥사플루오로포스페이트; rt: 실온; RT: 체류 시간; satd.: 포화; SPPS: 고상 펩티드 합성; Stear: 스테아로일; t-Bu: tert-부틸; TBTU: 2-(1H-벤조트라이아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸아미늄 테트라플루오로보레이트; TFA: 트라이플루오로아세트산; THF: 테트라하이드로푸란; THP: 테트라하이드로피라닐; TIPS: 트라이아이소프로필실란; Tris: 트리스(하이드록시메틸)아미노메탄; Trt: 트라이페닐메틸
합성
본 발명의 화학식 I의 화합물은 당업자에게 공지된 일반적인 합성 방법에 따라 합성될 수 있다. 합성에 관한 하기의 설명은 예시적인 목적을 위한 것이며, 어떠한 방식으로든 본 발명의 제한인 것으로 의미되지 않는다.
본 발명의 NTSC 사이클릭 PYY(NTSC-PYY) 유사체 또는 유도체는 아미노산들 사이의 연속적인 펩티드 결합의 형성을 위한 다양한 공지된 통상적인 절차에 의해 합성될 수 있으며, 자동화 펩티드 합성기, 전통적인 벤치 합성, 두 접근법의 조합을 사용하여 문헌[Merrifield (J. Am. Chem. Soc., 1963, 85, 2149-2154)]에 전반적으로 기재된 바와 같이, 고상 펩티드 합성(SPPS)에 의해 우선적으로 수행된다. 펩티드 합성에 대한 통상적인 절차는 하나의 아미노산 잔기의 유리 아미노 기(이 잔기의 다른 반응성 작용기는 적합하게 보호되어 있음)와 다른 아미노산의 유리 카르복실기(이 잔기의 반응성 작용기는 또한 적합하게 보호되어 있음) 사이의 축합을 수반한다. 펩티드 결합 형성에 전형적으로 이용되는 축합제의 예에는 1-하이드록시벤즈트라이아졸 (HOBT) 또는 에틸 시아노(하이드록시이미노)아세테이트(옥시마 퓨어(Oxyma Pure))를 동반하거나 동반하지 않는 다이아이소프로필카르보다이이미드(DIC), 2-(1H-벤조트라이아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸아미늄 헥사플루오로포스페이트(HBTU), 2-(1H-7-아자벤즈트라이아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸아미늄 헥사플루오로포스페이트(HATU), 2-(6-클로로-1H-벤즈트라이아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸아미늄 헥사플루오로포스페이트(HCTU), 1-시아노-2-에톡시-2-옥소에틸리덴아미노옥시-트리스-피롤리디노-포스포늄 헥사플루오로포스페이트(피옥심), 2-(1H-벤조트라이아졸-1-일)-1,1,3,3-테트라메틸아미늄 테트라플루오로보레이트(TBTU) 브로모-트리스-피롤리디노-포스포늄 헥사플루오로포스페이트(PyBroP) 등이 포함된다.
자동화 펩티드 합성 방법은 문헌[Yu (J. Org. Chem., 1992, 57, 4781-4784)]에 기재된 바와 같이, 그리고 더욱 최근에는 문헌[Palasek (J. Pept. Sci., 2007, 13, 143-148)]에 의해 정교해진 바와 같이, 실온에서, 또는 승온에서, 바람직하게는 마이크로파 가열의 인가를 통해 수행될 수 있다.
본 발명의 화합물(C-말단 아미드)은 N-α-Fmoc 보호된 아미노산 방법을 사용하여 편리하게 제조될 수 있으며, 여기서는 적합하게 보호된 N-α-Fmoc 보호된 아미노산의 카르복시 말단이 적합한 커플링제를 사용하여 통상적인 고상 수지 상에 커플링된다. 적합한 통상적인 구매가능한 고상 수지는 링크 아미드 MBHA 수지, 링크 아미드 AM 수지, Tentagel S RAM 수지, Fmoc-PAL-PEG PS 수지, SpheriTide 링크 아미드 수지, ChemMatrix 링크 수지, Sieber 아미드 수지, TG Sieber 수지 등을 포함한다. 이어서, 수지-결합된 Fmoc-아미노산은 DMF 또는 NMP 중 20% 피페리딘에 노출시킴으로써 탈보호될 수 있으며, 이의 처리는 Fmoc 보호기를 선택적으로 제거하는 역할을 한다. 이어서, 추가의 Fmoc-보호된 아미노산이 후속으로 순차적으로 커플링되고 탈보호되어, 원하는 수지-결합된 보호된 펩티드를 생성한다. 소정의 경우에, Fmoc 탈보호 조건을 견뎌낼 펩티드 서열 내의 다른 아민에 대한 직교 반응성 보호기를 이용하는 것이 필요할 수 있다. 보호기, 예컨대 4-메틸트라이틸(Mtt) 또는 4-메톡시트라이틸(Mmt)(둘 모두 1% TFA/DCM 처리에 의해 제거가능함), 또는 바람직하게는 알릴옥시카르보닐(alloc; Pd(PPh3)4/PhSiH3 처리에 의해 제거가능함), 1-(4,4-다이메틸-2,6-다이옥소사이클로헥스-1-일리덴)에틸(Dde; 2 내지 3% 하이드라진/DMF에 의한 처리에 의해 제거가능함) 및 1-(4,4-다이메틸-2,6-다이옥소사이클로헥스-1-일리덴)-3-메틸부틸(ivDde; 2 내지 3% 하이드라진/DMF에 의한 처리에 의해 제거가능함)이 그러한 경우에 효과적으로 사용될 수 있다.
통상적인 펩티드 합성 방법에서, 알파 아미노산의 반응성 측쇄는 일반적으로 합성 전체에 걸쳐 적합한 보호기로 보호되어 그들이 커플링 및 탈보호 프로토콜에 대해 불활성이 되게 한다. 아미노산 측쇄에 대한 다수의 보호기가 당업계에 공지되어 있지만, 본 발명에서는 하기 보호기가 가장 바람직하다: 세린, 트레오닌, 글루탐산, 아스파르트산 및 티로신의 경우 tert-부틸(t-Bu); 아스파라긴, 글루타민, 시스테인, 호모시스테인 및 히스티딘의 경우 트라이틸(Trt); 트립토판의 경우 tert-부틸옥시카르보닐(Boc) 및 라이신의 경우 ε-아미노 기; 그리고 아르기닌의 경우 2,2,4,6,7-펜타메틸다이하이드로벤조푸란-5-설포닐(Pbf)을 포함한다. 이들 보호기는 강산 처리 시에, 예컨대 고농도의 트라이플루오로아세트산(TFA)을 사용하여 제거된다.
SPPS의 완료 시에, 수지-결합된, 측쇄-보호된 펩티드는 탈보호되고, 동시에, 카르보양이온 포착제, 예컨대 트라이아이소프로필실란(TIPS), 물, 페놀 및 아니솔의 다양한 조합과 함께 (TFA)로 주로 이루어진 절단 칵테일을 사용하여 수지로부터 절단된다. 이어서, 차가운 에테르를 사용한 펩티드/칵테일 여과액의 침전에 의해 조(crude) 고체 펩티드가 단리된다. Sieber 수지-결합된, 보호된 펩티드의 특별한 경우에, 수지로부터의 보호된 펩티드의 절단은 측쇄 탈보호를 야기하지 않으면서 DCM 중 1 내지 2% TFA에 의한 반복된 처리 시에 유리하게 달성될 수 있다. 일단 단리되면, 보호된 펩티드의 추가의 조작은 용액상 반응에서 수행될 수 있다. 마지막으로, 보호된 펩티드는 절단 칵테일에 의한 별도의 처리를 사용하여 전역적으로(globally) 탈보호되고 전술된 바와 같이 침전될 수 있다. 이어서, 이렇게 얻어진 조 펩티드는 유기 공용매, 예컨대 아세토니트릴 또는 에탄올을 함유하는 대체로 수성인 용매 시스템 중에 저농도(약 4 mg/mL 미만)로 용해된다. 이어서, 용액의 pH를 5를 초과하여 상승시킬 때, 펩티드는 분자내 환화 반응을 거쳐서 본 발명의 상응하는 조 NTSC PYY 유사체를 형성한다. 이렇게 형성된 NTSC PYY 유사체는 당업계에 일반적으로 공지된 정제 기술을 사용하여 정제될 수 있다. 본 발명에 사용되는 바람직한 펩티드 정제 방법은 역상 고압 액체 크로마토그래피(HPLC)이다. 이어서, 정제된 펩티드는 액체 크로마토그래피/질량 분석(LC/MS)에 의해 특성화된다.
일반적인 반응도식
가교가 -Ph-CH2-S-인 C-말단 아미드 NTSC-PYY 펩티드의 합성에 대한 일반적인 합성 절차가 반응도식 1에 나타나 있다.
Figure pct00248
반응도식 1: 톨루오일 티오에테르-연결된 NTSC-PYY 펩티드의 합성: C-말단 아미드.
A) 수지-결합된 C-말단 아미드 펩티드의 합성
반응도식 1에 나타낸 바와 같이, 0.1 mmol의 규모로 저 로딩 링크 아미드 수지, 바람직하게는 Fmoc-PAL-PEG PS 수지(약 0.16 내지 0.2 meq/g, Applied Biosystems에 의해 공급됨)를 사용하여 CEM Liberty Blue Microwave 펩티드 합성기 상에서, 전술된 바와 같이 Fmoc 전략을 사용하여 보호된 펩티딜 수지를 합성할 수 있다. 표준 Fmoc-보호된 아미노산(Novabiochem(EMD Millipore), Bachem, Peptides International 또는 Chem-Impex에 의해 공급됨)을, 커플링제로서 DIC/옥시마를 사용하고 약 90℃의 반응 온도를 4분 동안 사용하여, 수지 로딩량에 대해 5배 과량으로 커플링할 수 있다. Fmoc-Arg(Pbf)-OH는 각각 4분 동안 90℃에서 이중 커플링할 수 있고, Fmoc-His(Trt)-OH는 다음 2-단계 프로토콜을 사용하여 커플링할 수 있다: 실온에서 4분, 이어서 50℃에서 8분. 90℃에서 1.5분 동안 DMF 중 20% 피페리딘(탈보호 용액)을 사용하여 단일 Fmoc 탈보호를 수행할 수 있다.
B) 할로메틸벤조산의 커플링 절차
마이크로파 반응기 내에서 75℃에서 15분 동안 DMF(4 mL) 중 클로로- 또는 브로모메틸벤조산(20 당량)의 원하는 이성질체(메타 또는 파라) 및 DIC(10 당량)의 용액으로 Fmoc-탈보호된 펩티드-수지(0.1 mmol)를 처리할 수 있다. 반응 완성도는 카이저(Kaiser) 닌하이드린 시험에 의해 결정될 수 있다(문헌[Kaiser, et al., Anal. Biochem., 1970, 34, 595-598]). 커플링이 불완전한 것으로 판단되는 경우에, 새로운(fresh) 시약을 사용하여 커플링을 반복할 수 있다.
C) 수지로부터의 펩티드 절단을 위한 절차
SPPS의 완료 시에, 수지를 DMF로 그리고 이어서 DCM으로 광범위하게 세척하고, 건조시킬 수 있다. 이어서, 수지를 TFA/물/TIPS(95:2.5:2.5)(절단 칵테일 A) 또는 더 바람직하게는 TFA/물/페놀/TIPS(88:5:5:2)(절단 칵테일 B)로 이루어진 절단 칵테일(10 mL / 0.1 mmol 규모)로 처리하고, 38℃에서 40분 동안 마이크로파 반응기 내에서 가열하고, 이어서 여과할 수 있다. 수지를 TFA로 세척하고, 합한 여과액을 질소 스트림 하에서 약 2.5 mL의 부피로 농축시킬 수 있으며, 이어서 펩티드를 차가운 다이에틸 에테르(40 mL)의 첨가에 의해 침전시킬 수 있다. 펩티드/에테르 현탁액을 원심분리할 수 있으며 에테르 층을 디캔팅(decanting)하였다. 펩티드 펠릿을 에테르 중에 재현탁시키고, 원심분리하고, 디캔팅할 수 있으며, 이 공정을 3회째로 반복할 수 있다. 이어서, 이렇게 얻어진 조 펩티드를 온화한 질소 스트림 하에서 건조시킬 수 있다.
D) 펩티드 환화를 위한 절차(티오에테르 형성)
조 시스테인- 또는 호모시스테인-함유 펩티드를 4 mg/mL 미만의 농도로, 탈산소화된 MeCN/물(50 내지 60% MeCN) 또는 EtOH/물(60% EtOH) 중에 용해시킬 수 있다. 이어서, 펩티드 용액의 pH를 고체 NaHCO3, 포화 수성 NaHCO3 또는 1 M 수성 Tris 완충액(pH 7.5)의 첨가를 통해 약 7 내지 9로 상승시킬 수 있으며, 생성된 용액을 실온에서 3 내지 16시간 동안 교반할 수 있다. 전형적으로, 분석용 LC/MS에 의해 결정되는 바와 같이, 환화는 3 내지 4시간 이내에 완료된다.
E) 펩티드 정제를 위한 절차
환화 반응 혼합물을 TFA의 첨가에 의해 pH 1.5 내지 3으로 산성화하고, 용액을 농축시켜 대부분의 유기 공용매(MeCN 또는 EtOH)를 약간의 혼탁이 일어나는 시점까지 제거할 수 있다. 최소량의 공용매를 필요에 따라 다시 첨가하여 혼합물을 균질하게 만들 수 있으며, 이어서 생성된 용액을 다회의 주입으로 분취용 HPLC에 의해 직접 정제할 수 있다. 정제는 다음으로부터 선택되는 역상 C18 또는 C8 컬럼을 사용하는 Agilent PrepStar HPLC 시스템 또는 Gilson HPLC 2020 퍼스널 정제 시스템(Personal Purification System) 상에서 수행할 수 있다: Varian Pursuit XRs C18(21×250 mm, 100 Å, 5 μm); Varian Pursuit XRs 다이페닐(30×100 mm, 100 Å, 5 μm); Zorbax 300 SB-C8(21×250 mm, 300 Å, 5 μm); Waters Atlantis T3 C18(19×250 mm, 100 Å, 5 μm); Agilent Polaris 5 C18-A(30×250 mm, 180 Å, 5 μm). 이동상은, 10 내지 20% B의 초기 농도 내지 40 내지 90% B의 최종 농도 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어질 수 있으며, 이때 실행 시간은 36 내지 80분의 범위이다. 220 및 254 nm에서 UV 검출을 모니터링할 수 있다. 상기로부터의 적절한 컬럼 유형(4.6×250 mm, 5 μm)을 사용하는 Agilent 1100 HPLC 시스템 상에서의 분석용 HPLC에 의해 생성물-함유 분획을 분석할 수 있다. 순수한 분획을 합하고, 농축시켜 유기 상(organic phase)의 대부분을 제거하고, 이어서 동결건조시킬 수 있다. 후속으로, 문헌[Andrushchenko, et al., (J. Pept. Sci., 2006, 13, 37-43)]에 기재된 절차에 따라 2 mM HCl로부터의 삼중 동결건조에 의해 TFA/HCl 염 교환을 수행할 수 있다.
가교가 -NHC(O)CH2S-인 C-말단 아미드 NTSC-PYY 펩티드의 합성에 대한 일반적인 합성 절차가 반응도식 2에 나타나 있다.
Figure pct00249
반응도식 2: 아세트아미도일 티오에테르-연결된 NTSC-PYY 펩티드의 합성: C-말단 아미드
단계 A, C, D 및 정제(E)는 반응도식 1에 기재된 것들과 본질적으로 동일하다. 그러나, 하기에 기재된 바와 같이, 단계 B에서 대안적인 가교를 도입할 수 있다.
Fmoc-탈보호된 펩티드-수지(0.1 mmol)를 마이크로파 반응기 내에서 50℃에서 5분 동안 DMF(5 mL) 중 브로모아세트산 무수물(6 내지 20 당량)의 용액으로 처리할 수 있으며, 이 시간쯤에 반응은 일반적으로 카이저 닌하이드린 시험에 따라 완료된 것으로 판단될 수 있다. 커플링이 불완전한 것으로 판단되는 경우에, 새로운 시약을 사용하여 커플링을 반복할 수 있다.
Z35가
Figure pct00250
, 또는
Figure pct00251
인 C-말단 아미드 NTSC-PYY 펩티드의 합성에 대한 일반적인 합성 절차가 반응도식 3에 나타나 있다.
Figure pct00252
반응도식 3: Siber 수지 상에의 psi-(R35,Y36) 빌딩 블록(Building Block)의 로딩
A) HATU-매개 커플링:
프릿화된(fritted) 마이크로파 반응 용기(CEM Corporation에 의해 공급됨) 내에서, NovaSyn TG Sieber 수지(Novabiochem에 의해 공급됨)(0.1 mmol)를 탈보호 용액(5 mL)으로 처리하고, 50℃에서 2.5분 동안 가열할 수 있다. 반응물을 드레인(drain)하고, DMF로 세척하고, 50℃에서 5분 동안 탈보호 용액으로 다시 처리한다. 수지를 드레인하고 DMF로 세척한 후에, 제3 탈보호 처리를 50℃에서 5분 동안 수행한다. 수지를 드레인하고, DMF로 그리고 이어서 DCM으로 광범위하게 세척한다. 이어서, 수지를 DMF(4 mL) 중 반응도식 14로부터의 Fmoc-Arg(Pbf)-psi-(N-Boc)Tyr(tBu)-OH(3 내지 5 당량), HATU(2.75 내지 4.5 당량) 및 DIEA(6 내지 10 당량)의 용액으로 처리하고, 실온에서 24시간 동안 혼합한다. 혼합물을 드레인하고, 수지를 DMF로 광범위하게 세척하였다. 이어서, 수지를 50℃에서 5분 동안 마이크로파 조건 하에서 DMF(5 mL) 중 20% Ac2O로 처리하여 캡핑한다. 반응물을 드레인하고, 수지를 DMF로 그리고 이어서 DCM으로 광범위하게 세척한다.
A) (대안적인) DIC/옥시마-매개 커플링:
프릿화된 마이크로파 반응 용기 내에서, NovaSyn TG Sieber 수지(0.1 mmol)를 상기 단계 A에 기재된 바와 같이 탈보호하고, 이어서 MeCN(4 mL) 중 moc-Arg(Pbf)-psi-(N-Boc)Tyr(tBu)-OH(2.75 당량), DIC(2.75 당량), 옥시마(2.75 당량) 및 DIEA(0.275 당량)의 용액으로 처리하고, 실온에서 24시간 동안 혼합할 수 있다. 반응물을 드레인하고, 수지를 DMF로 그리고 이어서 DCM으로 광범위하게 세척하고, 이것은 캡핑 없이 직접 사용할 수 있다.
B) 사전 로딩된 Sieber 수지 상의 환원된 아미드(psi-R35,Y36) 펩티드의 정교화
사전 로딩된 (psi-R35,Y36)-Sieber 수지 상에의 추가의 아미노산 연장을 CEM Liberty Blue 마이크로파 펩티드 합성기 상에서 수행할 수 있다. 표준 Fmoc-보호된 아미노산을 커플링제로서 HBTU/DIEA를 사용하고 약 50℃의 반응 온도를 15분 동안 사용하여 초기 수지 로딩량에 대해 5배 과량으로 커플링하였다. Fmoc-Arg(Pbf)-OH는 각각의 커플링에 대해 2-단계 프로토콜(실온에서 25분, 이어서 50℃에서 15분)을 사용하여 이중 커플링할 수 있고, Fmoc-His(Trt)-OH는 각각의 커플링에 대해 2-단계 프로토콜(실온에서 4분, 이어서 50℃에서 8분)을 사용하여 이중-커플링할 수 있다. Fmoc 탈보호를 각각의 단계에 대해 새로운 탈보호 용액을 사용하여 2 단계로 수행할 수 있다: 1) 50℃에서 2.5분 동안, 그리고 2) 50℃에서 5분 동안. 일부 경우에, 단리된 조 펩티드의 품질을 개선하기 위해 전체에 걸쳐 이중 커플링을 유리하게 사용할 수 있다.
티오에테르 가교 모이어티의 도입은 반응도식 1의 단계 B에 나타낸 브로모메틸벤조산 커플링에 의해 진행할 수 있으며, 이때 반응 온도는 50 °이다. 대안적으로, 반응도식 2의 단계 B에 나타낸 브로모아세틸화 커플링을 사용하여 티오에테르 가교 모이어티를 도입할 수 있다.
SPPS의 완료 시에, 수지를 DMF로 그리고 이어서 DCM으로 광범위하게 세척하고, 건조시킨다. 이어서, Sieber 수지로부터의 보호된 펩티드의 절단을 DCM 중 1 내지 2% TFA 용액(10 mL / 0.1 mmol 규모)으로 달성하고, 약 10분 동안 혼합하고, 이어서 여과할 수 있다. 이러한 처리를 각각의 처리마다 새로운 칵테일을 사용하여 추가 9회 반복할 수 있다. 이어서, 합한 여과액을 농축시켜 황색 시럽/고체로서 조 보호된 펩티드를 얻으며, 이것을 후속 전역적 탈보호에 직접 사용할 수 있다. 상기에서 얻어진 보호된 펩티드를 실온에서 2.5시간 동안 절단 칵테일 B(10 mL)로 처리하고, 이어서 질소 스트림 하에서 약 2.5 mL의 부피로 농축시킨다. 조 펩티드를 차가운 다이에틸 에테르(40 mL)의 첨가에 의해 침전시킬 수 있다. 펩티드/에테르 현탁액을 원심분리할 수 있으며 에테르 층을 디캔팅한다. 펩티드 펠릿을 에테르 중에 재현탁시키고, 원심분리하고, 디캔팅할 수 있으며, 이 공정을 3회째로 반복할 수 있다. 이렇게 얻어진 조 펩티드를 온화한 질소 스트림 하에서 건조시킬 수 있다. 환원된 아미드(psi-R35,Y36) 펩티드의 환화 및 정제를 반응도식 1의 단계 D 및 단계 E에 기재된 절차에 따라 달성할 수 있다.
지질화된 C-말단 아미드 NTSC-PYY 펩티드의 합성을 반응도식 4에 따라 달성할 수 있다.
Figure pct00253
반응도식 4: PAL-PEG PS 링크 아미드 수지 상에서 합성된 펩티드 서열 내로 지질화된 라이신 잔기를 도입하기 위한 절차
A) 표준 링크 아미드 수지 상에 구축된 펩티드 서열 내로 유도체화된 라이신 잔기를 도입하기 위한 절차
원하는 유도체화 지점보다 앞선 지점까지 정교화되고 반응도식 1의 단계 A에 기재된 바와 같이 제조된 수지-결합된 C-말단 아미드 펩티드에, 반응도식 1의 단계 A에 기재된 바와 같은 DIC/옥시마 커플링 방법을 사용하여 마이크로파 조건(수동으로 또는 Liberty Blue 펩티드 합성기 상에서) 하에서 Dde-Lys(Fmoc)-OH 또는 ivDde-Lys(Fmoc)-OH, 그리고 이어서 Fmoc-Glu-OtBu(모두 Novabiochem에 의해 공급됨)를 순차적으로 커플링할 수 있다. Fmoc 탈보호 후, 90℃에서 10분 동안 마이크로파 조건 하에서 DMF 중 친유성 산[팔미트산 또는 α-토코페릴옥시아세트산(AcVitE)](5 내지 10 당량), DIC(5 내지 10 당량) 및 HOBT 또는 옥시마(5 내지 10 당량)의 용액으로 수지를 처리할 수 있다. 이어서, 반응물을 드레인하고, 수지를 DMF로 세척한다.
B) Dde- 또는 ivDde-보호된 라이시닐 펩티드를 보호하기 위한 절차
유도체화된 라이시닐 펩티드 수지를 90℃에서 3.5분 동안 마이크로파 조건 하에서 DMF(6 mL/0.1 mmol 수지) 중 3% 하이드라진의 용액으로 처리할 수 있다. 반응물을 드레인하고, 이 절차를 추가 2회 반복할 수 있다. 반응물을 드레인하고, 수지를 DMF로 그리고 이어서 DCM으로 광범위하게 세척한다.
C) Fmoc-Lys(Pal-Glu-OtBu)-OH 잔류물의 직접 도입을 위한 절차
팔미토일화-γ-Glu-라이시닐 잔기가 서열 내로 도입되는 경우에, Fmoc-Lys(Pal-Glu-OtBu)-OH(Peptides International 또는 ActivePeptide로부터 입수가능함)를 반응도식 1의 단계 A에 기재된 절차에서 직접 사용할 수 있다.
지질화된 라이신 잔기를 갖는 본 발명의 화합물은 반응도식 1의 단계 B, C, D 및 E의 절차에 따라 완성될 수 있다.
지질화된, 환원된 아미드(psi-R35,Y36), C-말단 아미드, NTSC-PYY 펩티드의 합성은 반응도식 5에 따라 달성될 수 있다.
Figure pct00254
반응도식 5: (psi-R35,Y36) 사전 로딩된 Sieber 수지 상에서 합성된 펩티드 서열 내로 유도체화된 라이신 잔기를 도입하기 위한 절차
A) (psi-R35,Y36) 사전 로딩된 Sieber 수지 상에 구축된 펩티드 서열 내로 유도체화된 라이신 잔기를 도입하기 위한 절차
반응도식 3의 단계 A에 기재된 바와 같이 제조된, 부분적으로 정교화된 환원된 아미드(psi-R35,Y36) 펩티드에, 50℃에서 15분 동안 HATU/DIEA 또는 HBTU/DIEA 커플링 방법을 사용하여 Alloc-Lys(Fmoc)-OH(Chem-Impex 또는 AAPPTec, LLC로부터 입수가능함), 이어서 Fmoc-Glu-OtBu 그리고 이어서 팔미트산(각각 5 당량)을 순차적으로 커플링할 수 있다. 커플링될 친유성 산이 스테아르산, 아라키드산, 옥타데칸이산, 모노-tert-부틸 에스테르(AstaTech, Inc.로부터 입수가능함) 또는 20-(tert-부톡시)-20-옥소아이코산산(Key Organics, Inc.로부터 입수가능함)인 경우, 개선된 시약 가용성의 이유로 용매로서 NMP가 사용될 수 있으며, 커플링 반응은 50℃에서 30분 동안 HATU/DIEA에 의해 매개될 수 있다. 대안적으로 아라키드산의 경우, 커플링은 반응도식 1의 단계 A에 기재된 DIC/옥시마-매개 절차를 사용하여 수행될 수 있지만, 5 당량의 시약을 사용하고 반응 용매로서 THF를 사용한다.
B) Alloc 탈보호를 위한 절차
상기 수지(0.1 mmol)를 탈산소화된 DCM으로 세척하고, 이어서 탈산소화된 DCM(5 mL) 중 PhSiH3(12.5 당량)로 처리한다. 2분 후에, 탈산소화된 DCM(5 mL) 중 Pd(PPh3)4(0.25 당량)의 용액을 첨가할 수 있으며, 반응물을 질소 분위기 하에서 0.5시간 동안 혼합한다. 반응물을 드레인하고, 수지를 탈산소화된 DCM으로 1회 세척한다. 수지를 상기에서와 같이 PhSiH3(12.5 당량) 및 Pd(PPh3)4(0.25 당량)로 다시 처리하고, 추가 0.5시간 동안 반응시킨다. 반응물을 드레인하고, 수지를 DCM, DMF 및 DCM으로 연속해서 세척한다.
펩티드의 추가의 정교화 및 완성이 반응도식 3의 단계 B로 시작하여, 본 명세서에 전술된 바와 같이 수행될 수 있다.
가교가 트라이아졸릴인 C-말단 아미드 NTSC-PYY 유사체의 합성이 반응도식 6에 나타나 있다.
Figure pct00255
반응도식 6: 트라이아졸로-연결된 NTSC-PYY 유사체의 합성: C-말단 아미드 펩티드
A) 아지도- 및 알키닐-함유 수지-결합된 C-말단 아미드 펩티드의 합성
N-말단에서 4-펜틴산으로 캡핑된 수지-결합된 ε-아지도노르류신-함유 보호된 펩티드를 반응도식 1의 단계 A에 따라 제조할 수 있다. 이중-커플링 프로토콜이 4-펜틴산의 도입을 위해 사용될 수 있다.
B) 유도체화된 라이신 잔기를 아지도- 및 알키닐-함유 수지-결합된 C-말단 아미드 펩티드 내로 도입하기 위한 절차
반응도식 1의 단계 A에 기재된 절차에 따라, Fmoc-Lys(Dde)-OH를 SPPS에서 유도체화하고자 하는 서열 위치에 도입할 수 있다. (4-펜틴산의 도입 후) 선형 서열의 완성 시에, 수지를 실온에서 5분 동안 DMF 중 3% 하이드라진(8 mL / 0.1 mmol 규모)으로 처리하고, 이어서 혼합물을 드레인한다. 이 절차를 약 6회 반복할 수 있으며, 이후에 수지를 DMF로 그리고 이어서 DCM으로 광범위하게 세척한다. 이어서, Fmoc-Glu-OtBu 및 친유성 산을 실시예 6 A에 기재된 절차에 따라 Dde-탈보호된 수지 상에 순차적으로 커플링한다.
C) 수지로부터의 아지도- 및 알키닐-함유 펩티드 절단을 위한 절차
SPPS의 완료 시에, 수지를 DMF로 그리고 이어서 DCM으로 광범위하게 세척하고, 건조시킬 수 있다. 이어서, 수지를 TFA/물/DODT/TIPS(92.5:2.5:2.5:2.5)로 이루어진 절단 칵테일(10 mL / 0.1 mmol 규모)(절단 칵테일 C)로 처리하고, 38℃에서 40분 동안 마이크로파 반응기 내에서 가열하고, 이어서 여과한다. 수지를 TFA로 세척하고, 합한 여과액을 질소 스트림 하에서 약 2.5 mL의 부피로 농축시키고, 펩티드를 차가운 다이에틸 에테르(40 mL)의 첨가에 의해 침전시킬 수 있다. 펩티드/에테르 현탁액을 원심분리할 수 있으며 에테르 층을 디캔팅한다. 펩티드 펠릿을 에테르 중에 재현탁시키고, 원심분리하고, 디캔팅할 수 있으며, 이 공정을 3회째로 반복할 수 있다. 이렇게 얻어진 조 펩티드를 온화한 질소 스트림 하에서 건조시킬 수 있다.
D) 펩티드 환화를 위한 절차(트라이아졸 형성)
하기 용액을 탈산소화된 물을 사용하여 제조할 수 있다:
1) CuSO4(2 mL의 물 중 7 mg)
2) 5.4 mL의 EtOH 및 0.6 mL의 MeCN 중 30 mg의 TBTA
3) 프리믹스 용액 1(943 μL) 및 용액 2(4.8 mL)
4) 소듐 아스코르브산(3 mL의 물 중 30 mg)
탈산소화된 물 또는 HEPES 완충액(pH 7.4)(20 mL) 중 단계 C로부터의 조 펩티드(0.021 mmol)의 용액에 용액 3, 이어서 용액 4(2.4 mL)를 첨가하고, 생성된 유백색 용액을 LCMS 분석에 의해 결정될 때 환화가 완료될 때까지(약 1 내지 5시간) 35 내지 40℃로 가온한다. 반응 용액을 물(0.1% TFA) 또는 60% MeCN/물(0.1% TFA)을 사용하여 40 mL로 희석시키고, 여과하고, 반응도식 1의 단계 E에 기재된 바와 같이 다회의 주입을 사용하여 분취용 HPLC에 의해 직접 정제할 수 있다.
가교가 락탐인 C-말단 아미드 NTSC-PYY 유사체의 합성이 반응도식 7에 나타나 있다.
Figure pct00256
반응도식 7: 락탐-가교된 사이클릭 펩티드의 합성.
A) 수지-결합된 C-말단 아미드 펩티드의 합성
Protein Technologies로부터의 Symphony X 펩티드 합성기 상에서 Fmoc 전략을 사용하여, 보호된 펩티딜 수지를 합성될 수 있다. 실온에서 10분 동안 DMF 중 HATU 및 NMM을 사용하여 링크 아미드 수지 또는 Sieber 수지 상에서 커플링을 수행할 수 있다. Fmoc 아미노산을 6배 과량으로 사용하고, 이중 커플링할 수 있다. psi-(R35,Y36) 변형을 함유하는 펩티드의 경우, Fmoc-Arg(Pbf)Ψ[CH2N(Boc)]Tyr(t-Bu)-OH를 실온에서 1시간 동안 DMF 중 HATU 및 NMM을 사용하여 3배 과량으로 커플링하였다. 선형 서열의 말단 잔기의 α-아미노는 Boc-보호될 수 있고, 락탐 가교를 형성하는 글루탐산 잔기의 γ-카르복실기는 알릴 보호될 수 있다. 펩티드 내의 라이신(들)은 직교적으로 Dde 보호될 수 있다.
B) γ-글루타메이트-N-하이드록시석신이미드 에스테르의 합성
선형 서열의 완성 후에, DCM 중 Pd(PPh3)4 및 PhSiH3를 사용하여 글루타메이트 측쇄 알릴 보호기를 제거할 수 있다. 이어서, N-하이드록시석신이미드(NHS) 에스테르를, 실온에서 10분 동안 HATU 및 DIEA를 사용하여 NHS를 이중 커플링함으로써 합성할 수 있다.
C) 락탐 환화를 위한 절차
펩티드를 수지로부터 절단하고, 실온에서 2시간 동안 TFA/TIPS/물(95:2.5:2.5)로 처리하여 전역적으로 탈보호하고, 이어서 에테르 중으로 침전시키고, 원심분리에 의해 수집하고, 건조시킬 수 있다. 조 생성물을 DMSO 중에 용해시킬 수 있으며; TEA(10 당량)를 첨가하고, 환화를 실온에서 1시간 동안 진행되게 한다. 조 생성물을 물로 희석시키고, 분취용 RP-HPLC에 의해 정제할 수 있다. 직교적으로 Dde-보호된 라이신을, 펩티드를 (5 mM의 농도로) 2% 하이드라진/DMF 중에 용해시키고, 실온에서 1시간 동안 교반함으로써 탈보호할 수 있다. 반응 혼합물을 물로 희석시킬 수 있고, 10% TFA/물의 첨가에 의해 pH를 2로 조정하고, 이 용액을 반응도식 1의 단계 E에 기재된 바와 같이 분취용 RP-HPLC에 의해 직접 정제할 수 있다. 가교가 락탐인 지질화된 C-말단 아미드 NTSC-PYY 유사체의 용액상 합성이 반응도식 8에 나타나 있다.
가교가 락탐인 지질화된 C-말단 아미드 NTSC-PYY 유사체의 용액상 합성이 반응도식 8에 나타나 있다.
Figure pct00257
반응도식 8: Z11 라이신에 대해 나타낸, 락탐-가교된 C-말단 아미드 사이클릭 펩티드의 용액상 지질화.
Z4, Z7, Z9, Z11, Z22, Z23, 또는 Z30 중 단지 하나만이 라이신일 수 있는 상기 반응도식 7에서 얻어진 펩티드를 (5 mM의 농도로) DMF 중에 용해시키고, TEA(5 당량)를 첨가하고, 이어서 보호된 지질의 N-하이드록시 에스테르(2 당량)를 첨가한다. 반응물을 실온에서 하룻밤 진행되게 하고, 이어서 분취용 HPLC에 의해 정제할 수 있다. t-부틸 에스테르를 실온에서 30분 동안 TFA/TIPS/물(95:2.5:2.5) 중에서 탈보호하고, 반응물을 농축시키고, 반응도식 1의 단계 E에 기재된 바와 같이 분취용 RP-HPLC에 의해 정제할 수 있다.
브로모아세틸화 사이클릭-티오에테르 펩티드의 합성에 대한 일반적 절차
반응도식 9, 10, 및 11은 모두 본 발명의 브로모아세틸화 사이클릭-티오에테르 펩티드에 대한 다양한 경로를 나타낸다. 반응도식 9에서는, 펩티드 서열 내의 티올-함유 아미노산 측쇄를 펩티드의 아미노 말단에 있는 브로모아세틸 기와 반응시켜 티오에테르 가교를 형성한다. 반응도식 10은 반응도식 9와 유사한 접근법을 예시하지만, 여기서는 별개의 PEG 스페이서를 라이신 측쇄와 브로모아세틸 기 사이에 삽입한다. 반응도식 11은 다른 부류의 브로모아세틸화 사이클릭-티오에테르 펩티드의 합성을 위한 전략을 예시하는데, 여기서는 펩티드의 아미노 말단에 있는 티올 친핵체를 펩티드 서열 내의 라이신 측쇄에 공유적으로 부착된 브로모아세틸 기와 반응시킴으로써 가교를 형성한다.
A. 수지-결합된 C-말단 아미드 펩티드의 합성
수지 상의 보호된 펩티드를, Fmoc 전략을 사용하여 Sieber 아미드 또는 링크 아미드 수지 상에서 합성할 수 있다. 표준 Fmoc-보호된 아미노산(Novabiochem(EMD Millipore), Bachem, Peptides International 또는 Chem-Impex에 의해 공급됨)을, 커플링제로서 DIC/옥시마, HBTU/DIPEA 또는 HATU/NMM를 실온 또는 승온에서 사용하여, 수지 로딩량에 대해 3 내지 6배 과량으로 커플링할 수 있다. 월등한 순도를 위해, 그리고 특히 α-N-알킬화 아미노산 상에 커플링된 아미노산에 대해 이중-커플링을 수행할 수 있다. psi-(R35,Y36) 변형을 함유하는 펩티드의 경우, Fmoc-Arg(Pbf)Ψ[CH2N(Boc)]Tyr(t-Bu)-OH를 실온에서 1시간 동안 DMF 중 HATU 및 NMM을 사용하여 3배 과량으로 커플링할 수 있다.
B. 수지-결합된 펩티드의 브로모아세틸화를 위한 절차
브로모아세틸화될 라이신을 alloc, ivDDE 또는 DDE 보호기로 직교적으로 보호할 수 있다. 수지 상의 선형 서열의 완성 후에, 직교적으로 보호된 라이신을 탈보호할 수 있고(alloc의 경우, DCM 중 Pd(Ph3)4 및 페닐 실란; DDE 또는 ivDDE의 경우, DDE 중 2% 하이드라진), 하기와 같은 다양한 조건 하에서 아미노 기를 브로모아세틸화할 수 있다: 1) 마이크로파 반응기 내에서 50℃에서 5분 동안 DMF 중 큰 과량의 브로모아세트산 무수물과 반응시키는 조건 - 이 시간쯤에 반응은 일반적으로 카이저 닌하이드린 시험에 따라 완료된 것으로 판단될 수 있음; 2) 실온에서 염기, 예컨대 TEA 또는 DIPEA의 존재 하에서 DMF 또는 DCM 중 큰 과량의 브로모아세트산 무수물과 반응시키는 조건; 또는 3) DIC, 또는 DIC/옥시마를 사용하여 브로모아세트산과 커플링하는 조건.
C. 수지로부터의 펩티드 절단을 위한 절차
SPPS의 완료 시에, 수지를 DMF로 그리고 이어서 DCM으로 광범위하게 세척하고, 건조시킬 수 있다. Sieber 아미드 수지-결합된 펩티드의 경우에는, 건조된 수지를 DCM(10 mL) 중 1 내지 2% TFA의 용액으로 5 내지 10분 동안 처리하고, 이어서 여과할 수 있다. 이러한 처리를 각각의 처리마다 새로운 칵테일을 사용하여 수회 더 반복할 수 있다. 이어서, 여과액을 합하고 농축시켜, 황색 포말로서 조 보호된 펩티드를 얻는다. 이어서, 이 포말을 절단 칵테일 절단 칵테일 TFA/페놀/H2O/TIPS(88/5/5/2), 또는 TFA/물/TIPS(95:2.5:2.5), 또는 TFA/페놀/H2O/TIPS/DTT(84/10/2.5/2.5/1)로 처리하고, 38℃에서 30 내지 45분 동안, 또는 실온에서 2 내지 3.5시간 동안 가열할 수 있다. 조 펩티드를 차가운 다이에틸 에테르 중에서 침전시킬 수 있다. 펩티드/에테르 현탁액을 원심분리할 수 있으며 에테르 층을 디캔팅한다. 펩티드 펠릿을 에테르 중에 재현탁시키고, 원심분리하고, 디캔팅할 수 있으며, 이 공정을 3회째로 반복할 수 있다. 이렇게 얻어진 조 펩티드를 온화한 질소 스트림 하에서 건조시킬 수 있다.
대안적으로, Sieber 아미드 또는 링크 아미드 수지-결합된 펩티드를 DCM 중 1 내지 2% TFA에 의한 전처리 없이 상기에서와 같이 절단 칵테일로 처리하여 완전 탈보호된 펩티드를 얻을 수 있다.
D. 펩티드 환화를 위한 절차(티오에테르 형성)
조 유리 티올 및 브로모아세트아미드-함유 펩티드를 4 내지 10 mg/mL의 농도로, 탈산소화된 MeCN/물 또는 EtOH/물 중에 용해시킬 수 있으며, 이때 선택적으로 EDTA를 첨가한다. 이어서, 염기, 예컨대 NaHCO3, NaOH, DIPEA, 또는 TEA의 첨가를 통해 펩티드 용액의 pH를 약 7 내지 9로 상승시킬 수 있으며, 생성된 용액을 실온에서 0.25 내지 2.5시간 동안 교반한다.
대안적으로, 조 펩티드를 HPLC에 의해 정제하고, 펩티드 분획을 합하고, 약 pH 7 내지 9로 염기성화하고, 선택적으로 EDTA의 존재 하에서 실온에서 0.25 내지 2.5시간 동안 교반할 수 있다. 산성화 후에, 반응 용액을 실온에서 농축시켜 유기 용매를 제거하고, 이어서 HPLC 정제를 수행할 수 있다.
E. 펩티드 정제를 위한 절차
환화 반응 혼합물을 TFA로 산성화할 수 있고, 이 용액을 농축시켜 대부분의 유기 공용매(MeCN 또는 EtOH)를 제거하고, 이어서 생성된 용액을 역상 컬럼 상에서의 분취용 HPLC에 의해 직접 정제할 수 있다. 이동상은, 0 내지 20% B의 초기 농도 내지 40 내지 90% B의 최종 농도 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어지며, 이때 실행 시간은 20 내지 60분의 범위이다. 220 및 254 nm에서 UV 검출을 모니터링할 수 있다. Waters T3 Atlantis C18 컬럼(4.6×250 mm, 5 μm)을 사용하는 Agilent 1100 HPLC 시스템 상에서의 HPLC에 의해 생성물-함유 분획을 분석할 수 있다. 순수한 분획을 합하고, 농축시켜 유기 상의 대부분을 제거하고, 이어서 동결건조시킬 수 있다.
Figure pct00258
반응도식 9. 브로모아세틸화 사이클릭-티오에테르 C-말단 아미드 펩티드의 합성 - 여기서는, 펩티드 서열 내의 티올-함유 아미노산 측쇄를 펩티드의 아미노 말단에 있는 브로모아세틸 기와 반응시켜 티오에테르 가교를 형성함. 이 반응도식에서는, dde 보호기를 사용하여 라이신 측쇄를 보호하고, DMF 중 2% 하이드라진에 의한 처리에 의해 제거한다.
Figure pct00259
반응도식 10. 브로모아세틸화 사이클릭-티오에테르 펩티드의 합성 - 여기서는, 펩티드 서열 내의 티올-함유 아미노산 측쇄를 펩티드의 아미노 말단에 있는 브로모아세틸 기와 반응시켜 티오에테르 가교를 형성하고, 별개의 PEG 스페이서를 브로모아세틸 기와 라이신 측쇄 사이에 도입함. 이 반응도식에서는, alloc 보호기를 사용하여 라이신 측쇄를 보호하고, Pd(PPh3)4 및 페닐실란에 의한 처리에 의해 제거한다.
Figure pct00260
반응도식 11. 브로모아세틸화 사이클릭-티오에테르 펩티드의 합성 - 여기서는, 펩티드의 아미노 말단에 있는 티올 기를 펩티드 서열 내의 브로모아세틸화 라이신 측쇄와 반응시켜 티오에테르 가교를 형성하고, 별개의 PEG 스페이서를 브로모아세틸 기와 다른 라이신 측쇄 사이에 도입함.
브로모아세틸화 사이클릭-락탐 펩티드의 합성에 대한 일반적 절차
사이클릭 락탐 펩티드는 반응도식 12에 나타낸 절차에 따라 합성될 수 있다. Z4, Z7, Z9, Z11, Z22, Z23, 또는 Z30 중 단지 하나만이 라이신인 반응도식 7에 따라 사이클릭 락탐 펩티드를 먼저 합성한다. 이어서, pH 10, 실온, 20분에서 10% ACN/물 중 브로모아세트산 N-하이드록시석신이미드 에스테르(3 내지 7 당량)를 사용하여 라이신을 브로모아세틸화한다. 최종 브로모아세틸화 펩티드를 사이클릭-티오에테르 펩티드에 대해 개략적으로 설명된 바와 같이 RP-HPLC에 의해 정제할 수 있다.
Figure pct00261
반응도식 12. 브로모아세틸화 사이클릭-락탐 C-말단 아미드 펩티드의 합성.
브로모아세틸화 사이클릭 트라이아졸-연결된 펩티드의 합성에 대한 일반적 절차
브로모아세틸화 사이클릭 트라이아졸-연결된 펩티드는 반응도식 13에 나타낸 절차에 따라 합성될 수 있다. L-아지도-라이신이 트라이아졸 형성을 위해 도입될 수 있고 N-말단 잔기가 4-펜틴산일 수 있다는 것을 제외하고는, 반응도식 10에서 사이클릭-티오에테르 펩티드에 대해 기재된 바와 유사한 방식으로 수지 상의 선형 보호된 펩티드를 합성할 수 있다. Fmoc를 DMF 중 20% 피페리딘으로 제거하고, 이어서 브로모아세트산 무수물과 반응시킬 수 있다. 선형 서열을 전역적으로 탈보호하고(TFA/TIPS/물: 95%/2.5%/2.5%), 조 펩티드를 차가운 에테르 중으로 침전시키고, 원심분리에 의해 수집하고, 분취용 RP-HPLC에 의해 정제할 수 있다. 정제된 선형 펩티드를 완충 용액(HEPES, MOPS 등) 중에서 CuSO4/TBTA 및 NaASrb의 존재 하에서 환화하여 사이클릭 트라이아졸-연결된 펩티드를 제공할 수 있으며, 이는 반응도식 1의 단계 E에 기재된 바와 같이 분취용 RP-HPLC에 의해 정제될 수 있다.
전술된 바와 유사한 방식으로, N-말단 잔기가 아지도 카르복실산(예를 들어, 5-아지도 펜탄산)이고, 위치 30 또는 31의 잔기가 알키닐 아미노산(예를 들어, 2-아미노-7-옥틴산)인 선형 서열로 시작하여, 사이클릭 트라이아졸-연결된 펩티드의 대안적인 부류를 당업자에 의해 합성할 수 있다.
Figure pct00262
반응도식 13. 브로모아세틸화 사이클릭 트라이아졸-연결된 C-말단 아미드 펩티드의 합성.
펩티드 분석 및 특성화
정제된 펩티드를 Waters Atlantis T3 C18(4.6×250 mm, 300 Å, 5 μm) 컬럼을 사용하는 HP 1100 시리즈 HPLC로 구성된 Hewlett Packard 시리즈 1100 MSD 시스템 상에서 LC/MS에 의해 분석하였다. 펩티드의 극성/비극성 성질에 따라, 다음 3가지 구배 중 하나를 1 mL/min의 유량 및 35℃의 컬럼 온도에서 사용하였다(상기에서와 같은 완충액 A 및 완충액 B): 방법 1) 22분에 걸쳐 15 내지 60% B; 방법 2) 22분에 걸쳐 30 내지 60% B; 방법 3) 22분에 걸쳐 40 내지 90% B. 전기분무 분석(ES-API, 양이온 스캔)은 각각의 펩티드에 대한 질량 분석을 제공하였다. 모든 경우에, 다수의 하전된 화학종이 관찰되었는데, 1/3[M+3]+ 및 1/4[M+4]+ 이온이 가장 우세하게 관찰된 특징적인 이온이었다. 모든 생성물은 그들의 예상되는 다중-하전된 이온을 허용가능한 한계 이내에서 생성하였다. 펩티드의 질량 스펙트럼 분석 및 관찰된 LC 체류 시간(RT)의 결과가 표 1에 나타나 있다:
[표 1]
Figure pct00263
Figure pct00264
중간체
본 명세서에 기재된 하기 실시예 및 실시 형태는 단지 예시적인 목적을 위한 것이고, 그에 비추어 다양한 변형 또는 변화가 당업자에게 시사될 것이고, 이는 본 출원의 사상 및 범위 그리고 첨부된 청구범위의 범주 내에 포함되어야 함이 이해된다. 본 명세서에 인용된 모든 간행물, 특허, 및 특허 출원은 모든 목적을 위하여 전체적으로 본 명세서에 참고로 포함된다.
중간체 1
α-토코페릴옥시아세트산(AcVitE)(8)의 합성
A) tert-부틸 α-토코페릴옥시아세테이트(7):
Figure pct00265
아세톤(10 mL) 중 α-토코페롤(1.14 g, 2.65 mmol), tert-부틸 브로모아세테이트(470 μL, 3.18 mmol) 및 K2CO3(1.1 g, 7.94 mmol)의 혼합물을 실온에서 2 내지 3일 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 K2CO3의 소형 플러그를 통해 여과하고, 여과액을 감압 하에서 농축시켰다. 생성된 잔류물을 EtOAc/헵탄(0 내지 5%)으로 용리하는 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 정제하여, 무색 오일로서 tert-부틸 α -토코페릴옥시아세테이트(7)를 얻었다. 1H NMR (CDCl3) 4.17 (s, 2H), 2.56 (t, J = 6.57 ㎐, 2H), 2.18 (s, 3H), 2.14 (s, 3H), 2.07 (s, 3H), 1.65 - 1.86 (m, 2H), 1.52 (s, 9H), 0.98 - 1.46 (m, 22H), 0.80 - 0.90 (m, 14H).
B) (α-토코페릴옥시아세트산(AcVitE)(8)
Figure pct00266
DCM(12 mL) 중 tert-부틸 α-토코페릴옥시아세테이트(7) (1.4 g, 2.57 mmol)의 용액에 TFA(6 mL)를 첨가하고, 생성된 용액을 실온에서 교반하였다. 2시간 후에, 용액을 감압 하에서 농축시키고, 생성된 어두운 오일을 MeOH/DCM(0.5% HOAc를 함유하는 0 내지 2.5%)으로 용리하는 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 정제하여, 호박색 시럽으로서 α-토코페릴옥시아세트산(AcVitE)(8)을 얻었으며, 이는 진공 하에서 서서히 고화되었다. 1H NMR (CDCl3) δ 4.34 (s, 2H), 2.57 (t, J = 6.82 ㎐, 2H), 2.16 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 2.08 (s, 3H), 1.79 (qt, J = 6.76, 13.01 ㎐, 2H), 1.48 - 1.59 (m, 3H), 1.18 - 1.48 (m, 12H), 1.01 - 1.17 (m, 7H), 0.77 - 0.93 (m, 14H). LC/MS: C31H52O4에 대한 질량 계산치: 488.75; 실측치: 489.5 [M+H]+.
중간체 2
1. (S)-22-(tert-부톡시카르보닐)-43,43-다이메틸-10,19,24,41-테트라옥소-3,6,12,15,42-펜타옥사-9,18,23-트라이아자테트라테트라콘탄-1-산(16)의 합성
A) 벤질 2,2-다이메틸-4-옥소-3,8,11-트라이옥사-5-아자트라이데칸-13-오에이트(9)
Figure pct00267
100 mL 둥근바닥 플라스크 내로, 2,2-다이메틸-4-옥소-3,8,11-트라이옥사-5-아자트라이데칸-13-산(18 g, 68.366 mmol), 벤질 브로마이드(23.386 g, 136.732 mmol), 탄산칼륨(28.346 g, 205.099 mmol) 및 DMF(200 mL)를 넣었다. 생성된 용액을 실온에서 하룻밤 교반하고, EtOAc(500 mL)로 희석시켰다. 혼합물을 물(300 mL) 및 염수(150 mL × 2)로 세척하였다. 유기 상을 증발시키고, 실리카 겔 컬럼(EtOAc/프로필 에테르, 1:5)에 의해 정제하여, 무색 오일로서 벤질 2,2-다이메틸-4-옥소-3,8,11-트라이옥사-5-아자트라이데칸-13-오에이트(9)를 얻었다. LC/MS: C18H27NO6에 대한 질량 계산치: 353.2, 실측치: 354.05 [M+H]+.
B) 벤질 2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)아세테이트(10)
Figure pct00268
500 mL 둥근바닥 플라스크 내로, 벤질 2,2-다이메틸-4-옥소-3,8,11-트라이옥사-5-아자트라이데칸-13-오에이트(12 g, 33.955 mmol), TFA(19.358 g, 169.774 mmol) 및 DCM(150 mL)을 넣었다. 생성된 용액을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 혼합물을 증발시키고 건조시켜, 담황색 오일로서 벤질 2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)아세테이트(10)를 얻었다. LC/MS: C13H19NO4에 대한 질량 계산치: 253.13, 실측치: 254.05 [M+H]+.
C). 벤질 2,2-다이메틸-4,13-다이옥소-3,8,11,17,20-펜타옥사-5,14-다이아자도코산-22-오에이트(11)
Figure pct00269
250 mL 둥근바닥 플라스크 내로, 2,2-다이메틸-4-옥소-3,8,11-트라이옥사-5-아자트라이데칸-13-산(8.835 g, 33.558 mmol), 벤질 2-(2-(2-아미노에톡시)에톡시)아세테이트(8.5 g, 33.558 mmol), HATU(15.312 g, 40.270 mmol), DIEA(8.674 g, 67.116 mmol) 및 DMF(100 mL)를 넣었다. 생성된 용액을 실온에서 하룻밤 교반하고, EtOAc(500 mL)로 희석시켰다. 유기 상을 물(200 mL) 및 염수(100 mL × 2)로 세척하였다. 유기 상을 증발시키고, 실리카 겔 컬럼(DCM/MeOH, 10:1)에 의해 정제하여, 담황색 오일로서 벤질 2,2-다이메틸-4,13-다이옥소-3,8,11,17,20-펜타옥사-5,14-다이아자도코산-22-오에이트(11)를 얻었다. LC/MS: C24H38N2O9에 대한 질량 계산치: 498.26, 실측치: 499.50 [M+H]+.
D) 벤질 17-아미노-10-옥소-3,6,12,15-테트라옥사-9-아자헵타데칸-1-오에이트(12)
Figure pct00270
500 mL 둥근바닥 플라스크 내로, 벤질 2,2-다이메틸-4,13-다이옥소-3,8,11,17,20-펜타옥사-5,14-다이아자도코산-22-오에이트(15 g, 30.086 mmol), TFA(17.153 g, 150.431 mmol) 및 DCM(200 mL)을 넣었다. 생성된 용액을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 혼합물을 증발시키고 건조시켜, 담황색 오일로서 벤질 17-아미노-10-옥소-3,6,12,15-테트라옥사-9-아자헵타데칸-1-오에이트(12)를 얻었다. LC/MS: C19H30N2O7에 대한 질량 계산치: 398.21, 실측치: 399.2 [M+H]+.
E) (S)-1-벤질 23-tert-부틸 22-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐아미노)-10,19-다이옥소-3,6,12,15-테트라옥사-9,18-다이아자트라이코산-1,23-다이오에이트(13)
Figure pct00271
250 mL 둥근바닥 플라스크 내로, 벤질 17-아미노-10-옥소-3,6,12,15-테트라옥사-9-아자헵타데칸-1-오에이트(11 g, 27.607 mmol), (S)-4-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐아미노)-5-tert-부톡시-5-옥소펜탄산(11.746 g, 27.607 mmol), HATU(12.596 g, 33.128 mmol), DIEA(7.136 g, 55.214 mmol) 및 DMF(100 mL)를 넣었다. 생성된 용액을 실온에서 하룻밤 교반하고, EtOAc(500 mL)로 희석시켰다. 유기 상을 물(200 mL × 2) 및 염수(200 mL)로 세척하였다. 유기 상을 증발시키고, 실리카 겔 크로마토그래피(DCM/MeOH, 10:1)에 의해 정제하여, 담황색 오일로서 (S)-1-벤질 23-tert-부틸 22-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐아미노)-10,19-다이옥소-3,6,12,15-테트라옥사-9,18-다이아자트라이코산-1,23-다이오에이트(13)를 얻었다. LC/MS: C43H55N3O12에 대한 질량 계산치: 805.38, 실측치: 806.80 [M+H]+.
F) (S)-1-벤질 23-tert-부틸 22-아미노-10,19-다이옥소-3,6,12,15-테트라옥사-9,18-다이아자트라이코산-1,23-다이오에이트(14)
Figure pct00272
250 mL 둥근바닥 플라스크 내로, (S)-1-벤질 23-tert-부틸 22-(((9H-플루오렌-9-일)메톡시)카르보닐아미노)-10,19-다이옥소-3,6,12,15-테트라옥사-9,18-다이아자트라이코산-1,23-다이오에이트(10 g, 12.408 mmol) 및 DCM 중 DBU(3%, 100 mL)를 넣었다. 생성된 용액을 실온에서 하룻밤 교반하고, 이어서 물(200 mL × 2)로 세척하였다. 유기 상을 농축시켰다. 잔류물을 물(200 mL)로 용해시키고, 에테르(200 mL × 2)로 추출하였다. 수성 상(aqueous phase)을 DCM(200 mL)으로 추출하였다. 유기 상을 증발시키고 건조시켜, 담황색 오일로서 (S)-1-벤질 23-tert-부틸 22-아미노-10,19-다이옥소-3,6,12,15-테트라옥사-9,18-다이아자트라이코산-1,23-다이오에이트(14)를 얻었다. LC/MS: C28H45N3O10에 대한 질량 계산치: 583.31, 실측치: 584.65 [M+H]+.
G) (S)-1-벤질 21,39-다이-tert-부틸 9,18,23-트라이옥소-2,5,11,14-테트라옥사-8,17,22-트라이아자노나트라이아콘탄-1,21,39-트라이카르복실레이트(15)
Figure pct00273
50 mL 둥근바닥 플라스크 내로, (S)-1-벤질 23-tert-부틸 22-아미노-10,19-다이옥소-3,6,12,15-테트라옥사-9,18-다이아자트라이코산-1,23-다이오에이트(1.575 g, 2.699 mmol), 18-tert-부톡시-18-옥소옥타데칸산(1 g, 2.699 mmol), HATU(1.231 g, 3.239 mmol), DIEA(697.654 mg, 5.398 mmol, 2 당량) 및 DMF(15 mL)를 넣었다. 생성된 용액을 실온에서 하룻밤 교반하고, EtOAc(200 mL)로 희석시켰다. 유기 상을 물(100 mL × 2) 및 염수(100 mL)로 세척하였다. 유기 상을 농축시키고, 실리카 겔 크로마토그래피(DCM/MeOH, 10:1)에 의해 정제하여, 담황색 오일로서 (S)-1-벤질 21,39-다이-tert-부틸 9,18,23-트라이옥소-2,5,11,14-테트라옥사-8,17,22-트라이아자노나트라이아콘탄-1,21,39-트라이카르복실레이트(15)를 얻었다. LC/MS: C50H85N3O13에 대한 질량 계산치: 935.61, 실측치: 936.6 [M+H]+.
H) (S)-22-(tert-부톡시카르보닐)-43,43-다이메틸-10,19,24,41-테트라옥소-3,6,12,15,42-펜타옥사-9,18,23-트라이아자테트라테트라콘탄-1-산(16)
Figure pct00274
100 mL 둥근바닥 플라스크 내로, (S)-1-벤질 21,39-다이-tert-부틸 9,18,23-트라이옥소-2,5,11,14-테트라옥사-8,17,22-트라이아자노나트라이아콘탄-1,21,39-트라이카르복실레이트(2.5 g, 3.041 mmol), Pd/C(10% wt, 500 mg) 및 MeOH(50 mL)를 넣었다. 생성된 용액을 H2(3.5 atm) 하에서 실온에서 하룻밤 교반하였다. 잔류물을 여과하고, 농축시키고, 역상 실리카 겔 크로마토그래피(NH4HCO3/H2O, 0.05%)에 의해 정제하여, 담황색 반고체로서 (S)-22-(tert-부톡시카르보닐)-43,43-다이메틸-10,19,24,41-테트라옥소-3,6,12,15,42-펜타옥사-9,18,23-트라이아자테트라테트라콘탄-1-산(16)을 얻었다. LC/MS: C43H79N3O13에 대한 질량 계산치: 845.56, 실측치: 846.55 [M+H]+. 1H NMR (300 ㎒, CD3OD) δ: 4.24-4.29 (m, 1H), 4.07 (s, 2H), 4.03 (s, 2H), 3.69-3.72 (m, 8H), 3.57-3.67 (m, 4H), 3.45-3.49 (m, 2H), 3.34-3.42 (m, 2H), 2.23-2.35 (m, 6H), 2.12-2.21 (m, 1H), 1.93-1.96 (m, 1H),1.52-1.70 (m, 4H), 1.45-1.51 (m, 18H), 1.33 (s, 24H).
실시예
본 발명의 화합물은 당업자에게 공지된 방법에 의해 제조될 수 있다. 하기 실시예는 단지 본 발명의 실시예를 나타내고자 하는 것으로, 본 발명을 제한하고자 하는 것은 아니다.
실시예 1: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 1의 합성
Figure pct00275
반응도식 14. Fmoc-psi-[Arg(Pbf)-(N-Boc)Tyr(tBu)]-OH의 합성
1. Fmoc - psi -[ Arg ( Pbf )- (N-Boc)Tyr(tBu) ]-OH의 합성
A. H2N-Tyr(tBu)-OAll의 합성
DMF(500 mL) 중 Fmoc-Tyr(tBu)-O(69 g, 150.15 mmol) 및 K2CO3(62 g, 445.36 mmol)의 빙랭 용액에 알릴브로마이드(72 g, 595.16 mmol)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 3시간 동안 교반하였다. 이어서, 얼음/물(1 L)을 첨가하고, 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 건조시키고(Na2SO4), 감압 하에서 농축시켜, 황색 오일로서 Fmoc-Tyr(tBu)-OAll을 얻었다. DMF(600 mL) 중 Fmoc-Tyr(tBu)-OAll(70 g, 140.1 mmol)의 빙랭 용액에 피페리딘(150 mL)을 20분의 기간에 걸쳐 적가하였다. 3시간 후에, 반응 용액을 물/얼음(1 L)에 붓고, EtOAc(2 × 2 L)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 건조시키고(Na2SO4), 감압 하에서 농축시켰다. 이렇게 얻어진 잔류물을 EtOAc/석유 에테르(10:1)로 용리하는 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 정제하여, 황색 오일로서 34 g의 H2N-Tyr(tBu)-OAll을 얻었다.
B. Fmoc-Arg(Pbf)-N(Me)OMe(2)의 합성
DCM(500 mL) 중 Fmoc-Arg(Pbf)-OH(1) (64.8 g, 99.88 mmol), N,O-다이메틸하이드록실아민 하이드로클로라이드(20 g, 206.2 mmol) 및 HATU(57 g, 149.91 mmol)의 빙랭 혼합물에 DIEA(52 g, 402.2 mmol)를 10분의 기간에 걸쳐 적가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반되게 하였다. 이어서, 반응물을 물/얼음(1 L)에 붓고, DCM(1 L)으로 추출하였다. 유기 추출물을 건조시키고(Na2SO4), 감압 하에서 농축시켜, 황색 고체로서 70 g의 조 Fmoc-Arg(Pbf)-N(Me)OMe(2)를 얻었으며, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.
C. Fmoc-Arg(Pbf)-CHO(3)의 합성
불활성 질소 분위기 하에서 THF(1 M, 107 mL, 0.107 mmol) 중 LAH의 냉각된(-78℃) 용액에 THF(100 mL) 중 Fmoc-Arg(Pbf)-N(Me)OMe(2) (50 g, 72.3 mmol)의 냉각된(-50℃) 용액을 캐뉼라를 통해 1시간의 기간에 걸쳐 적가하였다. ―78℃에서 5시간 동안 교반한 후에, 혼합물을 1 N HCl 용액(300 mL)에 붓고, 추가 1 N HCl을 필요에 따라 첨가하여 pH를 4로 조정하고, 이어서 EtOAc(2 × 2 L)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 건조시키고(Na2SO4), 감압 하에서 농축시켜, 황색 고체로서 45 g의 조 Fmoc-Arg(Pbf)-CHO(3)를 얻었으며, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.
D. Fmoc-psi-[Arg(Pbf)-Tyr(tBu)]-OAll(4)의 합성
THF(200 mL), MeOH(200 mL) 및 HOAc(15 mL) 중 단계 C로부터의 Fmoc-Arg(Pbf)-CHO(3)(45 g, 71.12 mmol) 및 단계 A로부터의 H2N-Tyr(tBu)-OAll(32 g, 115.37 mmol)의 빙랭 용액에 시아노붕수소화나트륨(18.0 g, 286.4 mmol)을 30분의 기간에 걸쳐 일부씩 첨가하고, 생성된 용액을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응물을 포화 NaHCO3 수용액(500 mL)을 첨가하여 켄칭(quenching)하고, 혼합물을 EtOAc(2 × 2 L)로 추출하였다. 합한 유기 추출물을 건조시키고(Na2SO4), 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc/석유 에테르(10:1)로 용리하는 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 정제하여, 황색 고체로서 40 g의 Fmoc-psi-[Arg(Pbf)-Tyr(tBu)]-OAll(4)을 얻었다.
E. Fmoc-psi-[Arg(Pbf)-N(Boc)Tyr(tBu)]-OAll(5)의 합성
MeCN(240 mL) 중 Fmoc-psi-[Arg(Pbf)-Tyr(tBu)-OAll](4) (53 g, 59.28 mmol)의 용액에 다이-tert-부틸 다이카르보네이트(20 g, 91.3 mmol)를 첨가하고, 생성된 용액을 50℃에서 하룻밤 교반하였다. 이어서, 혼합물을 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 EtOAc/석유 에테르(1:1)로 용리하는 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 정제하여, 황색 고체로서 32 g의 Fmoc-psi-[Arg(Pbf)-N(Boc)Tyr(tBu)]-OAll(5)을 얻었다.
F. Fmoc-psi-[Arg(Pbf)-N(Boc)Tyr(tBu)]-OH(6)의 합성
질소 불활성 분위기 하에서 DCM(600 mL) 중 Fmoc-psi-[Arg(Pbf)-N(Boc)Tyr(tBu)]-OAll(5) (32 g, 32 mmol)의 냉각된(-30℃) 용액에 Pd(PPh3)4(3.0 g, 4.33 mmol)를 첨가한 후, N-메틸아닐린(10 g, 93 mmol)을 30분의 기간에 걸쳐 적가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하고, 이어서 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc/석유 에테르(1:1)로 용리하는 실리카 겔 크로마토그래피에 의해 정제하여, 황색을 띤 고체로서 26.8 g의 Fmoc-psi-[Arg(Pbf)-N(Boc)Tyr(tBu)]-OH(6)를 얻었다. 1H NMR (300 ㎒, CD3OD) δ 7.75-7.77 (2H, m), 7.59-7.60 (2H, m), 7.32-7.33 (4H, m), 7.09-7.11 (2H, m), 6.87-7.00 (2H, m), 4.27-4.50 (3H, m),3.30-3.50 (4H, m), 3.02-3.23 (3H, m), 2.75- 2.98 (3H, m), 2.57 (3H, s), 2.48 (3H, s), 2.00 (3H,s), 1.31-1.41 (28H, m). LC/MS (ES, m/z): C52H67N5O10S에 대한 질량 계산치: 953.46, 실측치: 954.55 [M+H]+.
2. Sieber 수지 상에의 Fmoc - psi -(R35-N( Boc )-Y36)의 로딩
프릿화된 마이크로파 반응 용기(CEM Corporation에 의해 공급됨) 내에서, NovaSyn TG Sieber 수지(Novabiochem에 의해 공급됨)(0.2 mmol)를 DMF(10 mL) 중 20% 피페리딘으로 처리하고, CEM 마이크로파 반응기 내에서 50℃에서 2.5분 동안 가열하였다. 반응물을 드레인하고, 수지를 DMF로 세척하고, CEM 마이크로파 반응기 내에서 50℃에서 5분 동안 DMF 중 20% 피페리딘으로 다시 처리하였다. 수지를 드레인하고 DMF로 세척한 후에, 탈보호 처리를 1회 더 반복하였다. 이어서, 수지를 DMF(4 mL) 중 상기로부터 얻어진 Fmoc-psi-[Arg(Pbf)-(N-Boc)Tyr(tBu)]-OH(3 내지 5 당량), HATU(2.75 내지 4.8 당량) 및 DIEA(6 내지 10 당량)의 용액으로 처리하고, 실온에서 6 내지 24시간 동안 혼합하였다. 혼합물을 드레인하고, 수지를 DMF로 광범위하게 세척하고, 이어서 50℃에서 5분 동안 마이크로파 조건 하에서 DMF(5 mL) 중 20% Ac2O로 처리하여 캡핑하였다. 반응물을 드레인하고, 수지를 DMF 및 DCM으로 광범위하게 세척하였다.
3. Fmoc -βA - IKPEAPGEK(Alloc)ASPEELNRYYASLRHYLNL (hC) TRQ ( psi - R35Y36 )- Sieber 수지의 합성
사전 로딩된 (psi-R35,Y36)-Sieber 수지(0.2 mmol) 상에의 아미노산 연장을 CEM Liberty Blue 마이크로파 펩티드 합성기 상에서 수행하였다. 표준 α-Fmoc-보호된 아미노산을, 커플링제로서 HBTU/DIEA를 사용하여 50℃에서 15분 동안 초기 수지 로딩량에 대해 3.8배 과량으로 이중-커플링하였다. Fmoc-Arg(Pbf)-OH는 2-단계 프로토콜(실온에서 25분, 이어서 50℃에서 15분)을 사용하여 이중 커플링하였고, Fmoc-His(Trt)-OH는 2-단계 프로토콜(실온에서 4분, 이어서 50℃에서 8분)을 사용하여 이중-커플링하였다.
4. Fmoc -βA - IKPEAPGEK(NH 2 )ASPEELNRYYASLRHYLNL (hC) TRQ ( psi - R35Y36 )- Sieber 수지의 합성: Alloc 탈보호
상기로부터 생성된 수지를 탈산소화된 DCM(10 mL) 중 페닐실란(25 당량)의 용액으로 처리하였다. 약 2분 동안 교반한 후에, DCM(10 mL) 중 Pd(PPh3)4(0.5 당량)의 용액을 첨가하고, 수지 혼합물을 아르곤 하에서 30분 동안 교반하였다. 반응물을 드레인하고, 수지를 탈산소화된 DCM으로 세척하였다. 새로운 시약으로 탈보호를 반복하고, 이후에 반응물을 드레인하고, 수지를 DCM 및 DMF로 광범위하게 세척하였다.
5. Fmoc -βA - IKPEAPGEK (NH- dPEG 12 - NHFmoc ) ASPEELNRYY ASLRHYLNL(hC)TRQ ( psi -R35Y36)-Sieber 수지의 합성: 11K 상에의 N- Fmoc dPEG 12 카르복실산의 커플링
상기로부터의 Alloc-탈보호된 펩티드-Sieber 수지를 50℃에서 15분 동안 CEM 마이크로파 반응기 내에서 DMF(7 mL) 중 N-Fmoc-dPEG12-카르복실산(5 당량), HBTU(4.8 당량) 및 DIEA(10당량)의 용액으로 처리하였으며, 이 시간쯤에 반응은 음성 카이저 시험을 나타내었다. 반응물을 드레인하고, 수지를 DMF 및 DCM으로 광범위하게 세척하였다.
6. BrCH 2 COHN -βA - IKPEAPGEK (NH- dPEG 12 - NHCOCH 2 Br ) ASPEEL NRYYASLRHYLNL(hC)TRQ ( psi -R35Y36)-Sieber 수지의 합성: βA 및 dPEG 12 에서의 비스 - 브로모아세틸화
상기 수지를 CEM 마이크로파 반응기 내에서 50℃에서 5분 동안 DMF 중 새로운 20% 피페리딘을 사용하여 Fmoc-탈보호를 거쳤다. 탈보호를 2회 반복하였다. 이렇게 얻어진 Fmoc-탈보호된 펩티드-수지를 CEM 마이크로파 반응기 내에서 50℃에서 10분 동안 DMF(5 mL) 중 브로모아세트산 무수물(20 당량)의 용액으로 처리하였으며, 이 시간쯤에 반응은 음성 카이저 시험을 나타내었다. 반응물을 드레인하고, 수지를 DMF 및 DCM으로 광범위하게 세척하고, 이어서 건조시켰다.
7. BrCH 2 COHN -βA - IKPEAPGEK (NH- dPEG 12 - NHCOCH 2 Br ) ASPEEL NRYYASLRHYLNL(hC)TRQ ( psi -R35Y36)-CONH 2 의 합성: 수지로부터의 절단 및 전역적 탈보호
건조된 수지를 DCM(10 mL) 중 1.5% TFA의 용액으로 처리하고, 5 내지 10분 동안 혼합하고, 이어서 여과하였다. 이러한 처리를 각각의 처리마다 새로운 칵테일을 사용하여 추가 9회 반복하였다. 이어서, 합한 여과액을 합하고 농축시켜, 황색 포말로서 조 보호된 펩티드를 얻었다. 이 포말을 실온에서 2.5시간 동안 20 mL의 절단 칵테일(TFA/페놀/H2O/TIPS = 88/5/5/2)로 처리하고, 이어서 질소 스트림 하에서 약 2.5 mL의 부피로 농축시키고, 이어서 차가운 에테르(40 mL)를 첨가하여 펩티드를 침전시켰다. 혼합물을 원심분리하고(5분; 5000 rpm) 디캔팅하였다. 이 공정을 2회 더 반복하여, 황백색(off-white) 분말로서 조 펩티드를 얻었다.
대안적으로, 수지를 DCM 중 1 내지 2% TFA에 의한 전처리 없이 절단 칵테일로 처리하여 완전 탈보호된 펩티드를 얻었다.
8. 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 1: 환화 절차 A 및 정제
상기로부터의 조 펩티드를 탈산소화된 50% MeCN/물 중에 용해시키고(5 내지 10 mg/mL), EDTA(1 mM)를 선택적으로 첨가하였다. 이어서, 7.5 w/v % NaHCO3 용액의 첨가를 통해 반응 용액의 pH를 약 8로 상승시켰다. 생성된 용액을 실온에서 0.5 내지 2.5시간 동안 교반하고, 이어서 TFA의 첨가에 의해 pH를 1 미만으로 산성화하였다. 이어서, 용액을 감압 하에서 실온에서 원래 부피(약 24 mL)의 약 절반으로 농축시켰다. 생성된 용액을 역상 분취용 HPLC에 의해 정제하였다. Varian Pursuit XRs C18 컬럼(30 × 250 mm, 100 Å, 5 μm)을 사용하는 Gilson HPLC 2020 퍼스널 정제 시스템 상에서 정제를 수행하였다. 이동상은, 36분에 걸쳐 20% B의 초기 농도로부터 50% B의 최종 농도에 이르는 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다. 220 및 254 nm에서 UV 검출을 모니터링하였다. 상기에서와 동일한 컬럼 유형(4.6 × 250 mm, 5 μm)을 사용하는 Agilent 1100 HPLC 시스템 상에서의 분석용 HPLC에 의해 생성물-함유 분획을 분석하였다. 순수한 분획을 합하고, 이어서 동결건조시켜, 면-유사(cotton-like) 고체로서 생성물을 얻었다. LCMS: 12.27분에서의 생성물 피크에 대해 1225.5 (M+4H)/4, 1633.4 (M+3H)/3 및 2450.0 (M+2H)/2 (LC: Atlantis T3 C18 컬럼, 5 um, 4.6 × 250 mm, 1.0 mL/min, 15 내지 60% 구배).
실시예 2: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 2의 합성
1. H 2 N-IKPEAPGEDASPEELNRYYASLRHYLNL(hC) TRQRY-PAL-PEG 수지의 합성
반응도식 1에 나타낸 바와 같이, 0.1 mmol의 규모로 저 로딩 링크 아미드 수지, 바람직하게는 Fmoc-PAL-PEG PS 수지(약 0.16 내지 0.2 meq/g, Applied Biosystems에 의해 공급됨)를 사용하여 CEM Liberty Blue Microwave 펩티드 합성기 상에서, 전술된 바와 같이 Fmoc 전략을 사용하여 보호된 펩티딜 수지를 합성하였다. 표준 Fmoc-보호된 아미노산을 커플링제로서 DIC/옥시마를 사용하고 약 90℃의 반응 온도를 4분 동안 사용하여 수지 로딩량에 대해 5배 과량으로 커플링하였다. Fmoc-Arg(Pbf)-OH는 각각 4분 동안 90℃에서 이중 커플링하였고, Fmoc-His(Trt)-OH는 다음 2-단계 프로토콜을 사용하여 커플링하였다: 실온에서 4분, 이어서 50℃에서 8분. 90℃에서 1.5분 동안 DMF 중 20% 피페리딘(탈보호 용액)을 사용하여 단일 Fmoc 탈보호를 수행하였다.
2. m -BrCH 2 PhCOHN-IKPEAPGEDASPEELNRYYASLRHYLNL(hC) TRQRY-PAL-PEG 수지의 합성
상기로부터의 Fmoc-탈보호된 펩티드-수지(0.1 mmol)를 마이크로파 반응기 내에서 75℃에서 15분 동안 DMF(4 mL) 중 m-브로모메틸벤조산(20 당량) 및 DIC(10 당량)의 용액으로 처리하였으며, 이 시간쯤에 반응은 일반적으로 카이저 닌하이드린 시험에 따라 완료된 것으로 판단되었다(문헌[Kaiser, et al., Anal. Biochem., 1970, 34, 595-598]). 커플링이 불완전한 것으로 판단된 경우에, 새로운 시약을 사용하여 커플링을 반복하였다. 반응물을 드레인하고, 수지를 DMF 및 DCM으로 광범위하게 세척하였다.
3. m -BrCH 2 PhCOHN-IKPEAPGEDASPEELNRYYASLRHYLNL(hC) TRQRY-CONH 2 의 합성: 탈보호 및 수지로부터의 절단
이어서, 상기로부터의 수지를 TFA/물/페놀/TIPS(88:5:5:2)로 이루어진 절단 칵테일(10 mL / 0.1 mmol 규모)로 처리하고, 38℃에서 40분 동안 마이크로파 반응기 내에서 가열하고, 이어서 여과하였다. 수지를 TFA로 세척하고, 합한 여과액을 질소 스트림 하에서 약 2.5 mL의 부피로 농축시키고, 펩티드를 차가운 다이에틸 에테르(40 mL)의 첨가에 의해 침전시켰다. 펩티드/에테르 현탁액을 원심분리하고, 에테르 층을 디캔팅하였다. 펩티드 펠릿을 에테르 중에 재현탁시키고, 원심분리하고, 디캔팅하고, 이 공정을 3회째로 반복하였다. 이렇게 얻어진 조 펩티드를 온화한 질소 스트림 하에서 건조시켰다.
4. 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 2: 환화 절차 A 및 정제
상기로부터의 조 펩티드를 4 mg/mL 이하의 농도로, 탈산소화된 MeCN/물(60% MeCN) 중에 용해시켰다. 이어서, NH4OAc 수용액(200 mM, pH 8.4)의 첨가를 통해 펩티드 용액의 pH를 약 7 내지 9로 상승시키고, 생성된 용액을 LCMS에 따라 환화가 완료될 때까지(전형적으로, 3 내지 4시간) 실온에서 교반하였다. 환화 반응 혼합물을 TFA의 첨가에 의해 pH 1.5 내지 3으로 산성화하고, 용액을 농축시켜 대부분의 유기 공용매를 약간의 혼탁이 일어나는 시점까지 제거하였다. 최소량의 MeCN을 필요에 따라 다시 첨가하여 혼합물이 균질하게 되게 하고, 이어서 생성된 용액을 C18 Varian Pursuit XRs C18 (21×250 mm, 100 Å, 5 μm) 컬럼을 사용하여 다회의 주입으로 분취용 HPLC에 의해 직접 정제하였다. 이동상은, 45분에 걸쳐 20% B의 초기 농도로부터 40% B의 최종 농도에 이르는 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다. 220 및 254 nm에서 UV 검출을 모니터링하였다. 표 1에 열거된 바와 같은 적절한 컬럼을 사용하는 Agilent 1100 HPLC 시스템 상에서의 분석용 HPLC에 의해 생성물-함유 분획을 분석하였다. 순수한 분획을 합하고, 농축시켜 유기 상의 대부분을 제거하고, 이어서 동결건조시켰다.
실시예 3: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 3의 합성
1. (H 2 N)-IKPEAPGEDASPEELNRYYASLRHYLNL-(아지도-norLeu)-TRQRYPAL-PEG 수지의 합성
위치 31에서 Fmoc-hCys(trt)-OH 대신에 Fmoc-아지도norLeu-OH를 사용하여, 실시예 2, 단계 1에 기재된 방법에 따라 0.1 mmol 규모로 수지-결합된 펩티드를 제조하였다.
2. (HCCH(CH 2 ) 2 CONH)-IKPEAPGEDASPEELNRYYASLRHYLNL-(아지도-norLeu)-TRQRYPAL-PEG 수지의 합성
DIC/HOBT 프로토콜을 사용하여 마이크로파 조건 하에서(75℃, 10분) 상기 수지 상에 4-펜틴산을 커플링하였다. 반응물을 드레인하고, 수지를 DMF 및 DCM으로 광범위하게 세척하였다.
3. (HCCH(CH 2 ) 2 CONH)-IKPEAPGEDASPEELNRYYASLRHYLNL-(아지도-norLeu)-TRQRYPAL-CONH 2 의 합성
상기 수지를 마이크로파 조건 하에서(38℃, 40분) TFA/DODT/H2O/TIS(92.5:2.5:2.5:2.5)로 이루어진 10 mL의 절단 칵테일로 처리하였다. 반응물을 드레인하고, 수지를 TFA(10 mL)로 세척하였다. 이어서, 합한 여과액을 질소 스트림 하에서 약 2.5 mL의 부피로 농축시켰다. 이어서, 차가운 에테르(40 mL)를 첨가하여 펩티드를 침전시키고, 혼합물을 원심분리하고(5분; 5000 rpm), 디캔팅하였다. 이 공정을 2회 더 반복하여, 황백색 분말로서 조 펩티드를 얻었다.
4. 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 3
2 mL의 탈산소화된 H2O 중 7 mg의 CuSO4를 제조하였다. 5.4 mL의 EtOH 및 0.6 mL의 MeCN 중 30 mg의 TBTA를 제조하였다. 0.94 mL의 CuSO4 용액과 4.8 mL의 TBTA 용액을 예비혼합하였다. 3 mL의 탈산소화된 H2O 중 30 mg의 소듐 아스코르베이트를 제조하였다.
20 mL의 탈산소화된 물 중 단계 3으로부터의 조 아지도-함유 펩티드 용액(100 mg)의 용액에 예비혼합된 CuSO4/TBTA 용액을 첨가한 후, 2.4 mL의 소듐 아스코르베이트 용액을 첨가하였다(용액은 즉시 유백색으로 되었다). 혼합물을 40℃로 가온하고, 1.5시간 동안 교반하고, 이 시점에서 LCMS 분석은 완전한 반응을 나타내었다. 혼합물을 물(0.1% TFA)을 사용하여 약 40 mL로 희석시키고; 혼합물을 원심분리하고, 상층액을 역상 분취용 HPLC에 의해 정제하였다. 35℃에서 Varian Pursuit XRs C18 컬럼(21 × 250 mm, 100 Å, 5 μm)을 사용하여 정제를 수행하였다. 이동상은, 35분에 걸쳐 10% B의 초기 농도로부터 18% B의 중간 농도로(21 mpm), 그리고 이어서 33% B의 최종 농도에 이르는(10.5 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다. 220 및 254 nm에서 UV 검출을 모니터링하였다. 상기에서와 동일한 컬럼 유형(4.6 × 250 mm, 5 μm)을 사용하는 Agilent 1100 HPLC 시스템 상에서의 분석용 HPLC에 의해 생성물-함유 분획을 분석하였다. 순수한 분획을 합하고, 이어서 동결건조시켜, 면-유사 고체로서 생성물을 얻었다.
실시예 4: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 4의 합성
1. (Dde)K(NH 2 )ASPEELNRYYASLRHYLNL(hC) TRQRY-PAL-PEG 수지의 합성
실시예 2, 단계 1에 기재된 방법을 사용하여, 수지-결합된 펩티드를 제조하였다.
2. (Dde)K(NH-Glu-(OtBu)NH 2 )ASPEELNRYYASLRHYLNL(hC) TRQRY-PAL-PEG 수지의 합성
DIC/옥시마 커플링 방법을 사용하여 마이크로파 조건 하에서(90℃, 6분; dc) 상기 수지 상에 Fmoc-Glu-OtBu(5 당량)를 커플링하였다. 수지를 드레인하고, DMF로 세척하였다. 이어서, 3-단계 프로토콜(75℃에서 0.5분 동안; 75℃에서 3분 동안; 75℃에서 3분 동안) (각각의 단계마다 DMF 세척이 행해짐)을 사용하여 DMF 중 20% 피페리딘을 사용하여 Fmoc 탈보호를 수행하였다.
3. (Dde)K(NH-Glu-(OtBu)NH-Pal)ASPEELNRYYASLRHYLNL(hC) TRQRY-PAL-PEG 수지의 합성
DIC/옥시마 커플링 방법을 사용하여 마이크로파 조건 하에서(90℃, 5분) 상기 수지 상에 팔미트산(5 당량)을 커플링하였다. 수지를 드레인하고, DMF 및 DCM으로 광범위하게 세척하였다.
4. (H 2 N)K(NH-Glu-(OtBu)NH-Pal)ASPEELNRYYASLRHYLNL(hC) TRQRY-PAL-PEG 수지의 합성
상기 수지를 DMF로 세척한 후, 그것을 실온에서 5분 동안 DMF 중 2% 하이드라진의 용액으로 처리하고(6 mL / 0.1 mmol 수지), 이어서 드레인하고, DMF로 세척하였다. 이 처리를 추가 5회 반복하였다.
5. (H 2 N)IKPEAPGEK(NH-Glu-(OtBu)NH-Pal)ASPEELNRYYASLRHYLNL(hC) TRQRY-PAL-PEG 수지의 합성
실시예 2, 단계 1에 기재된 방법을 사용하여, 나머지 아미노산 커플링을 수행하였다.
6. 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 4
실시예 2, 단계 2 내지 단계 4에 기재된 방법을 사용하여 합성의 나머지 부분을 수행하였다. 실온에서 Varian Pursuit XRS C18 컬럼(21 × 250 mm, 100 Å, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 5분에 걸쳐 23% B로부터 33% B의 중간 농도로(21 mpm), 그리고 이어서 55분에 걸쳐 48% B의 최종 농도에 이르는(10.5 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다.
실시예 5: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 5의 합성
단계 3에서 팔미트산 대신에 α-토코페릴옥시아세트산(AcVitE)(8)을 사용하여, 실시예 4에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 실온에서 Agilent 300SB C8 컬럼(21 × 250 mm, 100 Å, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 5분에 걸쳐 35% B의 초기 농도로부터 45% B의 중간 농도로(21 mpm), 그리고 이어서 60분에 걸쳐 60% B의 최종 농도에 이르는(10.5 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다.
실시예 6: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 6의 합성
1. (HCCH(CH 2 ) 2 CONH)-IKPEAPGEDASPEELNRYYASLRHYLNK(Dde)-(아지도-norLeu)-TRQRY-PAL-PEG 수지의 합성
실시예 3, 단계 1에서, 위치 30에서 Fmoc-Leu-OH 대신에 Fmoc-Lys(Dde)-OH를 사용하고, 이 단계에서 위치 2에 4-펜틴산(이중 커플링됨)을 도입한 후, 위치 3에 Fmoc-Ile-OH를 도입하여, 실시예 3, 단계 1에 기재된 바와 같이 수지-결합된 펩티드를 제조하였다.
2. (HCCH(CH 2 ) 2 CONH)-IKPEAPGEDASPEELNRYYASLRHYLNK(NH 2 )-(아지도-norLeu)-TRQRY-PAL-PEG 수지의 합성
상기 수지를 실온에서 5분 동안 DMF 중 3% 하이드라진으로 처리하고(8 mL / 0.1 mmol 규모), 이어서 혼합물을 드레인하고, DMF로 세척하였다. 이 절차를 약 5회 반복하였으며, 이후에 수지를 DMF로 그리고 이어서 DCM으로 광범위하게 세척하였다.
3. (HCCH(CH 2 ) 2 CONH)-IKPEAPGEDASPEELNRYYASLRHYLNK(NH-γ-Glu-AcVitE)-(아지도-norLeu)-TRQRY-PAL-PEG 수지의 합성
5분의 커플링 시간으로 실시예 2, 단계 1에 기재된 커플링 프로토콜을 사용하여, Fmoc-Glu-OtBu를 상기 수지 상에 커플링하였다. 3-단계 마이크로파 프로토콜(75℃, 0.5분; 75℃, 3분; 75℃, 3분)을 사용하여 DMF 중 20% 피페리딘으로 처리함으로써 수지를 탈보호하고, 이후에 수지를 DMF 및 DCM으로 광범위하게 세척하였다. 이어서, Fmoc-Glu-OtBu를 커플링하기 위해 사용된 것과 동일한 절차를 사용하여, α-토코포릴옥시아세트산(AcVitE)(8)을 수지 상에 커플링하였다.
4. (HCCH(CH 2 ) 2 CONH)-IKPEAPGEDASPEELNRYYASLRHYLNK(NH-γ-Glu-AcVitE)-(아지도-norLeu)-TRQRY-CONH 2 의 합성
실시예 3, 단계 3에 기재된 절차를 사용하여, 상기 수지로부터의 펩티드의 절단 및 침전을 수행하였다.
5. 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 6
실시예 3, 단계 4에 기재된 절차를 사용하여 표제 화합물을 제조하였다. 35℃에서 Varian Pursuit XRs C8 컬럼(21 × 250 mm, 100 Å, 5 μm) 상에서 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 5분에 걸쳐 35% B의 초기 농도로부터 48% B의 중간 농도로(21 mpm), 그리고 이어서 40분에 걸쳐 63% B의 최종 농도에 이르는(10.5 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다.
실시예 7: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 7의 합성
위치 11 대신에 위치 9에 K(NH-γ-Glu-Pal) 잔기를 도입하여, 실시예 4에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 실온에서 Agilent 300SB C8 컬럼(21 × 250 mm, 100 Å, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 40분에 걸쳐 23% B의 초기 농도로부터 43% B의 중간 농도로(21 mpm), 그리고 이어서 43% B의 최종 농도에 이르는(10.5 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다. 80분에 걸쳐 25% B의 초기 농도로부터 35% B의 중간 농도로(21 mpm), 그리고 이어서 45% B의 최종 농도에 이르기까지(10.5 mpm)의 구배를 사용하여 실온에서 Waters T3 C18 컬럼(250 × 19 mm, 100 Å, 5 μm) 상에서 불순한 생성물-함유 분획을 재정제하였다.
실시예 8: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 8의 합성
위치 11 대신에 위치 30에 K(NH-γ-Glu-Pal) 잔기를 도입하여, 실시예 4에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 35℃에서 Agilent 300SB C8 컬럼(21 × 250 mm, 100 Å, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 40분에 걸쳐 21% B의 초기 농도로부터 31% B의 중간 농도로(21 mpm), 그리고 이어서 41% B의 최종 농도에 이르는(10.5 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다. 80분에 걸쳐 21% B의 초기 농도로부터 31% B의 중간 농도로(21 mpm), 그리고 이어서 40% B의 최종 농도에 이르기까지(10.5 mpm)의 구배를 사용하여 실온에서 Waters T3 C18 컬럼(250 × 19 mm, 100 Å, 5 μm) 상에서 불순한 생성물-함유 분획을 재정제하였다.
실시예 9: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 9의 합성
1. H 2 N-IKPEAPGEDASPEELNRYYASLRHYLNL(hC) TRQ( psi -R35Y36)-Sieber 수지의 합성
5배 과량의 보호된 아미노산을 사용하는 변형을 가하여, 실시예 1, 단계 3에 기재된 바와 같이, 실시예 1, 단계 2로부터의 사전 로딩된 (psi-R35, Y36)-Sieber 수지 상에 아미노산 연장을 수행하였다.
2. m -BrCH 2 PhCOHN-IKPEAPGEDASPEELNRYYASLRHYLNL(hC) TRQ( psi -R35Y36)-Sieber 수지의 합성
75℃ 대신에 50℃에서 커플링을 수행하는 변형을 가하여, 실시예 1, 단계에 기재된 절차에 따라 상기 수지 상에 m-브로모메틸벤조산을 커플링하였다.
3. 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 9
실시예 1, 단계 7 및 단계 8에 기재된 절차에 따라 상기 수지로부터 표제 화합물을 제조하였다. 35℃에서 Varian Pursuit XRs C18 컬럼(21 × 250 mm, 100 Å, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 10분에 걸쳐 10% B의 초기 농도로부터 18% B의 중간 농도로(21 mpm), 그리고 이어서 35분에 걸쳐 33% B의 최종 농도에 이르는(10.5 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다.
실시예 10: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 10의 합성
단계 3에서, 위치 30에서 Fmoc-Leu-OH 대신에 Dde-Lys(Fmoc)-OH를 그리고 팔미트산 대신에 α-토코페릴옥시아세트산(AcVitE)(8)을 사용하여, 실시예 4에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 실온에서 Agilent 300SB C8 컬럼(21 × 250 mm, 100 Å, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 10분에 걸쳐 30% B의 초기 농도로부터 40% B의 중간 농도로(21 mpm), 그리고 이어서 35분에 걸쳐 55% B의 최종 농도에 이르는(21 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다. 5분에 걸쳐 35% B의 초기 농도로부터 43% B의 중간 농도로(21 mpm), 그리고 이어서 40분에 걸쳐 58% B의 최종 농도에 이르기까지(10.5 mpm)의 변형된 구배를 사용하여 불순한 생성물-함유 분획을 재정제하였다.
실시예 11: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 11의 합성
1. (Alloc)K(NH 2 )-(hC)-TRQ( psi -R35Y36)-Sieber 수지
위치 30에서 Fmoc-Leu-OH 대신에 Alloc-Lys(Fmoc)-OH를 사용하여, 실시예 9, 단계 1에 기재된 절차에 따라 상기 수지를 제조하였다.
2. (Alloc)K(NH-γ-Glu-AcVitE)-(hC)-TRQ( psi -R35Y36)-Sieber 수지의 합성
Fmoc-Glu-OtBu 및 α-토코페릴옥시아세트산(AcVitE)(8) (각각 5 당량)을 50℃에서 15 내지 20분 동안 마이크로파 조건 하에서 HBTU/DIEA-매개 커플링을 사용하여 상기 수지 상에 순차적으로 커플링하였다.
3. H 2 N-K(NH-γ-Glu-AcVitE)-(hC)-TRQ( psi -R35Y36)-Sieber 수지의 합성
실시예 1, 단계 4에 기재된 절차에 따라 alloc 보호기를 제거하였다.
4. 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 11
NH4OAc 완충액 대신에 1 M TRIS/HCl 완충액(pH 7.5)을 사용하여 환화를 달성하는 변형을 가하여, 실시예 9, 단계 1 내지 단계 3에 기재된 절차에 따라 상기 수지로부터 표제 화합물을 제조하였다. 35℃에서 Varian Pursuit XRs C18 컬럼(21 × 250 mm, 100 Å, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 10분에 걸쳐 10% B의 초기 농도로부터 18% B의 중간 농도로(21 mpm), 그리고 이어서 35분에 걸쳐 33% B의 최종 농도에 이르는(10.5 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다.
실시예 12: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 12의 합성
단계 1에서, 위치 35에서 Fmoc-Arg(pbf)-OH 대신에 Fmoc-N-Me-Arg(pbf)-OH를 사용하고, 이와 함께, NH4OAc 완충액 대신에 1 M NaHCO3 완충액을 사용하여 환화를 달성하는 변형을 가하여, 실시예 2에 기재된 바와 같은 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 실온에서 Varian Pursuit XRs C18 컬럼(30 × 250 mm, 100 Å, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 36분에 걸쳐 10% B로부터 60% B에 이르는(30 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다.
실시예 13: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 13의 합성
단계 2에서, α-토코페릴옥시아세트산(AcVitE)(8) 대신에 팔미트산을 사용하고, 이와 함께, 용매로서 MeCN/H2O 대신에 60% EtOH/H2O를 사용하고, NH4OAc 완충액 대신에 포화 NaHCO3 수용액을 사용하여 환화를 달성하는 변형을 가하여, 실시예 11에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 실온에서 Waters XBridge C18 OBD 컬럼(50 × 250 mm, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 5분에 걸쳐 15% B의 초기 농도로부터 20% B의 중간 농도로(100 mpm), 그리고 이어서 40분에 걸쳐 35% B의 최종 농도에 이르는(100 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 10 mM NH4OH, 약 pH 9) 및 완충액 B(MeCN)의 구배 용리로 이루어졌다.
실시예 14: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 14의 합성
단계 1에서 위치 11 대신에 위치 30에 Lys(NH-γ-Glu-Pal)잔기를 도입하고, 위치 35에서 Fmoc-Arg(pbf)-OH 대신에 Fmoc-N-Me-Arg(pbf)-OH를 사용하고, 이와 함께, 단계 6에서 NH4OAc 완충액 대신에 1 M NaHCO3 완충액을 사용하여 환화를 달성하는 변형을 가하여, 실시예 4에 기재된 바와 같은 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 실온에서 Varian Pursuit XRs C18 컬럼(30 × 250 mm, 100 Å, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 36분에 걸쳐 20% B로부터 70% B에 이르는(30 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다. 25분에 걸쳐 30 내지 50% B의 구배를 사용하여(30 mpm) 실온에서 Varian Pursuit XRs 다이페닐 컬럼(30 × 100 mm, 100 Å, 5 μm) 상에서 불순한 분획을 재정제하였다.
실시예 15: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 15의 합성
위치 11 대신에 위치 30에 Lys(NH-γ-Glu-Pal) 잔기를 도입하고, 위치 3에서의 Fmoc-Ile-OH 커플링 대신에 Fmoc-βAla-OH를 사용하고, 이와 함께, NH4OAc 완충액 대신에 1 M NaHCO3 완충액을 사용하여 환화를 달성하고, 하기 절차를 사용하여 단계 6(실시예 2로부터 단계 2)에서 m-브로모메틸벤조산 대신에 브로모아세트산 무수물과의 커플링을 사용하는 변형을 가하여, 실시예 4에 기재된 바와 같은 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. Fmoc-탈보호된 펩티드-수지(0.1 mmol)를 마이크로파 반응기 내에서 50℃에서 5 내지 10분 동안 DMF(5 mL) 중 브로모아세트산 무수물(10 당량)의 용액으로 처리하였으며, 이 시간쯤에 반응은 일반적으로 카이저 닌하이드린 시험에 따라 완료된 것으로 판단되었다. 커플링이 불완전한 것으로 판단된 경우에, 새로운 시약을 사용하여 커플링을 반복하였다. 실온에서 Varian Pursuit XRs C18 컬럼(30 × 250 mm, 100 Å, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 36분에 걸쳐 20% B로부터 60% B에 이르는(30 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다. 25분에 걸쳐 30 내지 50% B의 구배를 사용하여(30 mpm) 실온에서 Varian Pursuit XRs 다이페닐 컬럼(30 × 100 mm, 100 Å, 5 μm) 상에서 불순한 분획을 재정제하였다.
실시예 16: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 16의 합성
위치 11 대신에 위치 30에 Lys(NH-γ-Glu-Pal) 잔기를 도입하고, 위치 3에서 Fmoc-Ile-OH 커플링을 생략하고, 단계 6(실시예 2로부터의 단계 2)에서 m-브로모메틸벤조산 대신에 p-브로모메틸벤조산을 사용하여, 실시예 4에 기재된 바와 같은 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 추가적으로, NH4OAc 완충액 대신에 1 M NaHCO3 완충액을 사용하여 환화를 달성하였다. 실온에서 Varian Pursuit XRs C18 컬럼(30 × 250 mm, 100 Å, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 36분에 걸쳐 20% B로부터 70% B에 이르는(30 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다. 25분에 걸쳐 30 내지 50% B의 구배를 사용하여(30 mpm) 실온에서 Varian Pursuit XRs 다이페닐 컬럼(30 × 100 mm, 100 Å, 5 μm) 상에서 불순한 분획을 재정제하였다.
실시예 17: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 17의 합성
단계 1에서, 위치 11 대신에 위치 30에 Lys(NH-γ-Glu-Pal) 잔기를 도입하고, 위치 4에서 Fmoc-Lys(Boc)-OH 대신에 Fmoc-Ala-OH를 사용하여, 실시예 4에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 단계 6에서 NH4OAc 완충액 대신에 TRIS/HCl 완충액(1 M, pH 7.5)을 사용하여 환화를 달성하였다. 실온에서 Agilent Polaris C18-A 컬럼(30 × 250 mm, 100 Å, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 5분에 걸쳐 20% B의 초기 농도로부터 35% B의 중간 농도로(40 mpm), 그리고 이어서 40분에 걸쳐 45% B의 최종 농도에 이르는(40 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다.
실시예 18: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 18의 합성
단계 1에서, 위치 11 대신에 위치 30에 Lys(NH-γ-Glu-Pal) 잔기를 도입하고, 위치 4에서 Fmoc-Lys(Boc)-OH 대신에 Fmoc-Glu(OtBu)-OH를 사용하여, 실시예 4에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 단계 6에서 NH4OAc 완충액 대신에 TRIS/HCl 완충액(1 M, pH 7.5)을 사용하여 환화를 달성하였다. 실온에서 Agilent Polaris C18-A 컬럼(30 × 250 mm, 100 Å, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 5분에 걸쳐 20% B의 초기 농도로부터 35% B의 중간 농도로(40 mpm), 그리고 이어서 40분에 걸쳐 45% B의 최종 농도에 이르는(40 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다.
실시예 19: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 19의 합성
단계 1에서, 위치 11 대신에 위치 30에 Lys(NH-γ-Glu-Pal) 잔기를 도입하고, 위치 35에서 Fmoc-Arg(pbf)-OH 대신에 Fmoc-N-Me-Arg(pbf)-OH를 사용하고, Fmoc-hCys(trt)-OH 대신에 Fmoc-Cys(trt)-OH를 사용하고, 단계 6(실시예 2로부터의 단계 2)에서 m-브로모메틸벤조산 대신에 p-브로모메틸벤조산을 사용하여, 실시예 4에 기재된 바와 같은 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
단계 6(실시예 2로부터의 단계 3 및 단계 4)에 대해 하기 변형을 가하였다: 환화 전에 얻어진 조 펩티드를 실온에서 Varian Pursuit XRs C18 컬럼(30 × 250 mm, 100 Å, 5 μm)을 사용하여 정제하였다. 이동상은, 36분에 걸쳐 20% B로부터 70% B에 이르는(30 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다. 생성물-함유 분획을 합하고, 고체 NaHCO3로 처리하여 pH를 약 7 내지 8로 상승시켰으며; 생성된 용액을 실온에서 4시간 동안 교반하고, 이어서 TFA를 사용하여 pH 4로 산성화하였다. 용액을 5 내지 10 mL의 부피로 농축시키고, MeCN을 첨가하여 임의의 침전물을 가용화하였다. 36분에 걸쳐 20 내지 60% B의 구배를 사용하여(30 mpm), 상기에서와 같이 생성물 정제를 수행하였다.
실시예 20: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 20의 합성
단계 1에서, 위치 11 대신에 위치 30에 Lys(NH-γ-Glu-Pal) 잔기를 도입하고, 위치 35에서 Fmoc-Arg(pbf)-OH 대신에 Fmoc-N-Me-Arg(pbf)-OH를 사용하고, Fmoc-hCys(trt)-OH 대신에 Fmoc-Cys(trt)-OH를 사용하여, 실시예 4에 기재된 바와 같은 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 조 선형 펩티드를 실시예 19에 기재된 변형에 따라 정제하고 환화하였다. 36분에 걸쳐 20 내지 60% B의 구배를 사용하여(30 mpm), 최종 생성물 정제를 수행하였다.
실시예 21: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 21의 합성
단계 1에서, 위치 11 대신에 위치 30에 Lys(NH-γ-Glu-Pal) 잔기를 도입하고, 위치 26에서 Fmoc-His(trt)-OH 대신에 Fmoc-Ala-OH를 사용하고, 위치 4에서 Fmoc-Lys(Boc)-OH 대신에 Fmoc-Ala-OH를 사용하여, 실시예 4에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 단계 6에서 NH4OAc 완충액 대신에 TRIS/HCl 완충액(1 M, pH 7.5)을 사용하여 환화를 달성하였다. 실온에서 Agilent Polaris C18-A 컬럼(30 × 250 mm, 100 Å, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 5분에 걸쳐 20% B의 초기 농도로부터 35% B의 중간 농도로(40 mpm), 그리고 이어서 40분에 걸쳐 45% B의 최종 농도에 이르는(40 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다.
실시예 22: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 22의 합성
단계 1에서, 위치 11 대신에 위치 30에 Lys(NH-γ-Glu-Pal) 잔기를 도입하고, 위치 26에서 Fmoc-His(trt)-OH 대신에 Fmoc-Ala-OH를 사용하고, 위치 4에서 Fmoc-Lys(Boc)-OH 대신에 Fmoc-Glu(OtBu)-OH를 사용하여, 실시예 4에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 단계 6에서 NH4OAc 완충액 대신에 TRIS/HCl 완충액(1 M, pH 7.5)을 사용하여 환화를 달성하였다. 실온에서 Agilent Polaris C18-A 컬럼(30 × 250 mm, 100 Å, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 5분에 걸쳐 20% B의 초기 농도로부터 33% B의 중간 농도로(40 mpm), 그리고 이어서 40분에 걸쳐 43% B의 최종 농도에 이르는(40 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다.
실시예 23: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 23의 합성
단계 2에서, α-토코페릴옥시아세트산(AcVitE)(8) 대신에 옥타데칸이산, 모노-tert-부틸 에스테르(AstaTech, Inc.로부터 입수가능함)를 사용하고, 50℃에서 30분 동안 HATU/DIEA를 그리고 용매로서 DMF 대신에 NMP를 사용하는 커플링 프로토콜을 사용하고, 단계 2에서, Fmoc-Glu-OtBu를 커플링하기 전에 탠덤 형태로(in tandem) Fmoc-OEG-OH의 2개의 단위를 커플링하여, 실시예 11에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 조 선형 펩티드를, 20 내지 60% B의 구배를 사용하여, 실시예 19에 기재된 변형에 따라 정제하고 환화하였다. 36분에 걸쳐 20 내지 70% B의 구배를 사용하여(30 mpm), 최종 생성물 정제를 수행하였다.
실시예 24: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 24의 합성
옥타데칸이산, 모노-tert-부틸 에스테르 대신에 20-(tert-부톡시)-20-옥소아이코산산(Key Organics, Inc.로부터 입수가능함)을 사용하여, 실시예 23에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 조 선형 펩티드를, 20 내지 60% B의 구배를 사용하여, 실시예 19에 기재된 변형에 따라 정제하고 환화하였다. 36분에 걸쳐 20 내지 60% B의 구배를 사용하여(30 mpm), 최종 생성물 정제를 수행하였다.
실시예 25: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 25의 합성
단계 2에서, α-토코페릴옥시아세트산(AcVitE)(8) 대신에 스테아르산을 사용하고, 50℃에서 30분 동안 HATU/DIEA를 사용하는 커플링 프로토콜을 사용하고, DMF 대신에 용매로서 NMP를 사용하여, 실시예 11에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 조 선형 펩티드를, 20 내지 80% B의 구배를 사용하여, 실시예 19에 기재된 변형에 따라 정제하고 환화하였다. 36분에 걸쳐 20 내지 80% B의 구배를 사용하여(30 mpm), 최종 생성물 정제를 수행하였다.
실시예 26: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 26의 합성
단계 2에서, α-토코페릴옥시아세트산(AcVitE)(8) 대신에 아라키드산을 사용하고, 50℃에서 30분 동안 HATU/DIEA를 사용하는 커플링 프로토콜을 사용하고, DMF 대신에 용매로서 NMP를 사용하여, 실시예 11에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 조 선형 펩티드를, 20 내지 90% B의 구배를 사용하여, 실시예 19에 기재된 변형에 따라 정제하고 환화하였다. 36분에 걸쳐 20 내지 90% B의 구배를 사용하여(30 mpm), 최종 생성물 정제를 수행하였다.
실시예 27: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 27의 합성
탠덤 Fmoc-OEG-OH 커플링 후에 Fmoc-Glu-OtBu의 커플링을 생략한 것을 제외하고는, 실시예 23에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 조 선형 펩티드를, 20 내지 60% B의 구배를 사용하여, 실시예 19에 기재된 변형에 따라 정제하고 환화하였다. 36분에 걸쳐 20 내지 60% B의 구배를 사용하여(30 mpm), 최종 생성물 정제를 수행하였다.
실시예 28: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 28의 합성
α-토코페릴옥시아세트산(AcVitE)(8) 대신에 팔미트산을 사용하고, 위치 3에서 Fmoc-Ile-OH의 커플링을 생략하고, 단계 4(실시예 9, 단계 2)에서 m-브로모메틸벤조산 대신에 p-브로모메틸벤조산을 사용하여, 실시예 11에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 조 선형 펩티드를, 20 내지 60% B의 구배를 사용하여, 실시예 19에 기재된 변형에 따라 정제하고 환화하였다. 36분에 걸쳐 20 내지 60% B의 구배를 사용하여(30 mpm), 최종 생성물 정제를 수행하였다.
실시예 29: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 29의 합성
α-토코페릴옥시아세트산(AcVitE)(8) 대신에 팔미트산을 사용하고, 위치 3에서 Fmoc-Ile-OH 대신에 Fmoc-βAla-OH를 사용하고, 실시예 15에 기재된 변형을 사용하여 단계 4(실시예 9, 단계 2)에서 m-브로모메틸벤조산 대신에 브로모아세트산 무수물을 커플링하여, 실시예 11에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 조 선형 펩티드를, 20 내지 60% B의 구배를 사용하여, 실시예 19에 기재된 변형에 따라 정제하고 환화하였다. 36분에 걸쳐 20 내지 60% B의 구배를 사용하여(30 mpm), 최종 생성물 정제를 수행하였다.
실시예 30: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 30의 합성
α-토코페릴옥시아세트산(AcVitE)(8) 대신에 팔미트산을 사용하고, 위치 3에서 Fmoc-Ile-OH 대신에 Fmoc-Ａβυ-OH를 사용하고, 실시예 15에 기재된 변형을 사용하여 단계 4(실시예 9, 단계 2)에서 m-브로모메틸벤조산 대신에 브로모아세트산 무수물을 커플링하여, 실시예 11에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 조 선형 펩티드를, 20 내지 60% B의 구배를 사용하여, 실시예 19에 기재된 변형에 따라 정제하고 환화하였다. 36분에 걸쳐 20 내지 60% B의 구배를 사용하여(30 mpm), 최종 생성물 정제를 수행하였다.
실시예 31: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 31의 합성
옥타데칸이산, 모노-tert-부틸 에스테르 대신에 스테아르산을 사용하여, 실시예 23에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 조 선형 펩티드를, 20 내지 60% B의 구배를 사용하여, 실시예 19에 기재된 변형에 따라 정제하고 환화하였다. 36분에 걸쳐 20 내지 60% B의 구배를 사용하여(30 mpm), 최종 생성물 정제를 수행하였다.
실시예 32: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 32의 합성
단계 2에서, α-토코페릴옥시아세트산(AcVitE)(8) 대신에 팔미트산을 사용하고, 위치 26에서 Fmoc-His(trt)-OH 대신에 Fmoc-Ala-OH를 사용하고, 단계 4(실시예 9, 단계 1)에서 위치 4에서 Fmoc-Lys(Boc)-OH 대신에 Fmoc-Ala-OH를 사용하여, 실시예 11에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 단계 6에서 NH4OAc 완충액 대신에 TRIS/HCl 완충액(1 M, pH 7.5)을 사용하여 환화를 달성하였다. 실온에서 Agilent Polaris C18-A 컬럼(30 × 250 mm, 100 Å, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 5분에 걸쳐 20% B의 초기 농도로부터 35% B의 중간 농도로(40 mpm), 그리고 이어서 40분에 걸쳐 45% B의 최종 농도에 이르는(40 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다.
실시예 33: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 33의 합성
단계 2에서 α-토코페릴옥시아세트산(AcVitE)(8) 대신에 팔미트산을 사용하고, 단계 4(실시예 9, 단계 1)에서 위치 34에서 Fmoc-Gln(trt)-OH 대신에 Fmoc-N(Me)-Gln(trt)-OH를 사용하여, 실시예 11에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 이 경우에, 용매로서 NMP를 사용하고 HATU/DIEA 프로토콜(1시간, 단일 커플링)을 사용하여 실온에서 커플링을 수행하였으며; Fmoc-N(Me)-Gln(trt)-OH 및 Fmoc-Arg(pbf)-OH를 이중 커플링하였다. 전체에 걸쳐 2-단계 Fmoc 탈보호 프로토콜을 사용하였다(DMF 중 20% 피페리딘; 실온; 10분, 15분). 조 선형 펩티드를, 20 내지 70% B의 구배를 사용하여, 실시예 19에 기재된 변형에 따라 정제하고 환화하였다. 36분에 걸쳐 20 내지 70% B의 구배를 사용하여(30 mpm), 최종 생성물 정제를 수행하였다.
실시예 34: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 34의 합성
α-토코페릴옥시아세트산(AcVitE)(8) 대신에 팔미트산을 사용하고, 위치 31에서 Fmoc-hCys(trt)-OH 대신에 Fmoc-Cys(trt)-OH를 사용하고, 위치 3에서 Fmoc-Ile-OH 대신에 6-Fmoc-아미노헥산산을 사용하고, 실시예 15에 기재된 변형을 사용하여 단계 4(실시예 9, 단계 2)에서 m-브로모메틸벤조산 대신에 브로모아세트산 무수물을 커플링하여, 실시예 11에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. NH4OAc 완충액 대신에 NaHCO3 수용액(2 N)을 사용하여 환화를 달성하였다. 실온에서 Varian Pursuit XRs C18 컬럼(30 × 250 mm, 100 Å, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 36분에 걸쳐 20% B로부터 70% B에 이르는(30 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다.
실시예 35: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 35의 합성
하기의 변형을 가하여, 실시예 9에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다: 실시예 1, 단계 1에 기재된 절차에 따라, Fmoc-Arg(Pbf)-OH 대신에 Fmoc-N-Me-Arg(pbf)-OH로부터 제조된 Fmoc-psi-[N-Me-Arg(Pbf)-N(Boc)Tyr(tBu)]-OH를 Fmoc-psi-[Arg(Pbf)-N(Boc)Tyr(tBu)]-OH(6) 대신에 사용하여, 여기서 사용되는 로딩된 Sieber 수지를 제조하였으며; 위치 30에서 Leu 대신에 Fmoc-Lys(Pal-Glu-OtBu)-OH(활성 펩티드로부터의 것)를 사용하였으며; 단계 2에서 m-브로모메틸벤조산 대신에 m-클로로메틸벤조산을 사용하였으며; 용매로서 NMP를 사용하여 실온에서 커플링을 수행하고, HATU/DIEA 프로토콜(1시간, 단일 커플링)을 사용하였으며; Fmoc-Arg(pbf)-OH를 이중 커플링하였다. 전체에 걸쳐 2-단계 Fmoc 탈보호 프로토콜을 사용하였다(DMF 중 20% 피페리딘; 실온; 10분, 15분). 조 선형 펩티드를, 20 내지 70% B의 구배를 사용하여, 실시예 19에 기재된 변형에 따라 정제하고 환화하였다. 36분에 걸쳐 20 내지 70% B의 구배를 사용하여(30 mpm), 최종 생성물 정제를 수행하였다.
실시예 36: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 36의 합성
위치 3에서 Fmoc-Ile-OH 대신에 Fmoc-βAla-OH를 사용하고, 실시예 15에 기재된 변형을 사용하여 단계 4(실시예 9, 단계 2)에서 m-브로모메틸벤조산 대신에 브로모아세트산 무수물을 커플링하여, 실시예 35에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 실시예 19의 변형된 후처리(workup)는 생략하였다. Fmoc-βAla-OH를 마이크로파 조건 하에서 50℃에서 20분 동안 커플링하였다. NH4OAc 완충액 대신에 포화 NaHCO3 수용액을 사용하여 환화를 달성하였다. 실온에서 Varian Pursuit XRs C18 컬럼(30 × 250 mm, 100 Å, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 36분에 걸쳐 20% B로부터 70% B에 이르는(30 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다.
실시예 37: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 37의 합성
위치 31에서 Fmoc-hCys(trt)-OH 대신에 Fmoc-Cys(trt)-OH를 사용하고, 위치 30에서 Fmoc-Leu-OH 대신에 Fmoc-Lys(Pal-Glu-OtBu)-OH(Active Peptide로부터의 것)를 사용하여, 실시예 9에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 게다가, 단계 1에서, Fmoc-Abu-OH를 서열 상의 위치 2에 부가하고, 실시예 15에 기재된 변형을 사용하여, 단계 2에서 m-브로모메틸벤조산 대신에 브로모아세트산 무수물과의 커플링을 사용하였다. 단계 3에서 NH4OAc 완충액 대신에 포화 NaHCO3 수용액을 사용하여 환화를 달성하였다. 실온에서 Varian Pursuit XRs C18 컬럼(30 × 250 mm, 100 Å, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 36분에 걸쳐 20% B로부터 70% B에 이르는(30 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다.
실시예 38: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 38의 합성
하기의 변형을 가하여, 실시예 35에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다: 50℃에서 20분 동안 마이크로파 조건을 사용하여 단계 1에 따라, Fmoc-βAla-OH를 서열 상의 위치 2에 부가하고, 실시예 15에 기재된 변형을 사용하여, 단계 2에서 m-브로모메틸벤조산 대신에 브로모아세트산 무수물과의 커플링을 사용하였다. NH4OAc 완충액 대신에 포화 NaHCO3 수용액을 사용하여 환화를 달성하였다. 실온에서 Varian Pursuit XRs C18 컬럼(30 × 250 mm, 100 Å, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 36분에 걸쳐 20% B로부터 80% B에 이르는(30 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다.
실시예 39: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 39의 합성
단계 2에서 α-토코페릴옥시아세트산(AcVitE)(8) 대신에 아라키드산을 사용하여, 실시예 11에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 단계 4(실시예 9, 단계 1)에서 위치 4에서 Fmoc-Lys(Boc)-OH 대신에 Fmoc-Ser(tBu)-OH를 사용하고, 단계 4(실시예 9, 단계 2)에서 m-브로모메틸벤조산 대신에 m-클로로메틸벤조산을 사용하였다. 용매로서 MeCN/H2O 대신에 60% EtOH/H2O를 사용하고, 단계 4에서 NH4OAc 완충액 대신에 포화 NaHCO3 수용액을 사용하여 환화를 달성하였다. 실온에서 Waters XBridge C18 OBD 컬럼(50 × 250 mm, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 5분에 걸쳐 20% B의 초기 농도로부터 25% B의 중간 농도로(100 mpm), 그리고 이어서 40분에 걸쳐 40% B의 최종 농도에 이르는(100 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 10 mM NH4OH, 약 pH 9) 및 완충액 B(MeCN)의 구배 용리로 이루어졌다.
실시예 40: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 40의 합성
1. (HCCH(CH 2 ) 2 CONH)-IKPEAPGEDASPEELNRYYASLRHYLNK(Dde)-(아지도-norLeu)-TRQ( psi -R35Y36)-Sieber 수지의 합성
용매로서의 NMP, 5배 과량의 보호된 아미노산 및 HATU/DIEA 프로토콜(1시간, 단일 커플링)을 사용하여 실온에서, 실시예 1, 단계 2로부터의 사전 로딩된 (psi-R35, Y36)-Sieber 수지(0.1 mmol) 상에의 아미노산 연장을 수행하였으며; Fmoc-Arg(pbf)-OH 및 Fmoc-His(trt)-OH를 이중 커플링하였다. 전체에 걸쳐 2-단계 Fmoc 탈보호 프로토콜을 사용하였다(DMF 중 20% 피페리딘; 실온; 10분, 15분).
2. (HCCH(CH 2 ) 2 CONH)-IKPEAPGEDASPEELNRYYASLRHYLNK(NH 2 )-(아지도-norLeu)-TRQ( psi -R35Y36)-Sieber 수지의 합성
상기 수지를 실온에서 2분 동안 DMF 중 2% 하이드라진으로 처리하고(12 mL / 0.2 mmol 규모), 이어서 혼합물을 드레인하였다. 이 절차를 약 4회 반복하였으며, 이후에 수지를 DMF로 그리고 이어서 DCM으로 광범위하게 세척하였다.
3. (HCCH(CH 2 ) 2 CONH)-IKPEAPGEDASPEELNRYYASLRHYLNK((OEG) 2 - γ -Glu-Pal)-(아지도-norLeu)-TRQ( psi -R35Y36)-Sieber 수지의 합성
상기 수지를 실온에서 1.5시간 동안 HBTU/DIEA 프로토콜을 사용하여 (S)-10,19-다이옥소-22-팔미트아미도-3,6,12,15-테트라옥사-9,18-다이아자트라이코산이산(5 당량)[단계 G에서 18-tert-부톡시-18-옥소옥타데칸산 대신에 팔미트산으로 치환함으로써, 중간체 3의 합성에 대해 기재된 절차에 따라 제조됨]과 커플링하였다. 수지를 드레인하고, DMF 및 DCM으로 광범위하게 세척하였다.
4. (HCCH(CH 2 ) 2 CONH)-IKPEAPGEDASPEELNRYYASLRHYLNK((OEG) 2 - γ -Glu-Pal)-(아지도-norLeu)-TRQ( psi -R35Y36)-CONH 2 의 합성
건조된 수지를 DCM(20 mL) 중 2% TFA의 용액으로 처리하고, 20분 동안 혼합하고, 이어서 여과하였다. 이러한 처리를 각각의 처리마다 새로운 칵테일을 사용하여 추가 2회 반복하였다. 이어서, 합한 여과액을 합하고 농축시켜, 황색 포말로서 조 보호된 펩티드를 얻었다. 이 포말을 실온에서 2.5시간 동안 20 mL의 절단 칵테일(TFA/H2O/TIPS = 95/2.5/2.5)로 처리하고, 이어서 질소 스트림 하에서 약 2.5 mL의 부피로 농축시켰다. 이어서, 차가운 에테르(40 mL)를 첨가하여 펩티드를 침전시키고, 혼합물을 원심분리하고(5분; 5000 rpm), 디캔팅하였다. 이 공정을 2회 더 반복하여, 황백색 분말로서 조 펩티드를 얻었다.
대안적으로, 수지를 DCM 중 1 내지 2% TFA에 의한 전처리 없이 절단 칵테일로 처리하여 완전 탈보호된 펩티드를 직접 얻었다.
조 펩티드를 Varian Pursuit XRs C18 컬럼(30 × 250 mm, 100 Å, 5 μm)을 사용하여 역상 분취용 HPLC에 의해 정제하였다. 이동상은, 36분에 걸쳐 20% B로부터 70% B에 이르는 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다. 220 및 254 nm에서 UV 검출을 모니터링하였다. 상기에서와 동일한 컬럼 유형(4.6 × 250 mm, 5 μm)을 사용하는 Agilent 1100 HPLC 시스템 상에서의 분석용 HPLC에 의해 생성물-함유 분획을 분석하였다. 순수한 분획을 합하고, 이어서 동결건조시켜, 면-유사 고체로서 생성물을 얻었다. LCMS: 16.87분에서의 생성물 피크에 대해 1211.8 (M+4H)/4, 1615.4 (M+3H)/3 및 2422.9 (M+2H)/2 (LC: Atlantis T3 C18 컬럼, 5 μm, 4.6 × 250 mm, 1.0 mL/min, 30 내지 60% 구배).
5. 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 40
1 mL의 H2O 중 5.1 mg의 CuSO4를 제조하였다. 3 mL의 EtOH 중 10.4 mg의 TBTA를 제조하였다. 400 μL의 CuSO4 용액과 3 mL의 TBTA 용액을 예비혼합하였다. 2 mL의 H2O 중 13 mg의 소듐 아스코르베이트를 제조하였다.
4 mL의 HEPES(0.1 M, pH 7.4) 중 단계 4로부터의 정제된 아지도-함유 펩티드(37 mg)의 용액에 1.7 mL의 예비혼합된 CuSO4/TBTA 용액을 첨가한 후, 1 mL의 소듐 아스코르베이트 용액을 첨가하였다. 반응 용액이 투명해질 때까지 EtOH/H2O 비를 조정하였다. 혼합물을 실온에서 교반하고, HPLC로 모니터링하였다. 30분 후에, 반응을 완료하였다. 혼합물을 pH 4로 조정하고, 역상 분취용 HPLC에 의해 정제하였다. Varian Pursuit XRs C18 컬럼(30 × 250 mm, 100 Å, 5 μm)을 사용하여 정제를 수행하였다. 이동상은, 36분에 걸쳐 20% B로부터 60% B에 이르는 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다. 220 및 254 nm에서 UV 검출을 모니터링하였다. 상기에서와 동일한 컬럼 유형(4.6 × 250 mm, 5 μm)을 사용하는 Agilent 1100 HPLC 시스템 상에서의 분석용 HPLC에 의해 생성물-함유 분획을 분석하였다. 순수한 분획을 합하고, 이어서 동결건조시켜, 면-유사 고체로서 생성물을 얻었다.
실시예 41: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 41의 합성
단계 3에서 (S)-10,19-다이옥소-22-팔미트아미도-3,6,12,15-테트라옥사-9,18-다이아자트라이코산이산 대신에 L-글루탐산, N-(1-옥소헥사데실)-, 1-(1,1-다이메틸에틸) 에스테르를 사용하여, 실시예 40에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 42: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 42의 합성
단계 3에서 (S)-10,19-다이옥소-22-팔미트아미도-3,6,12,15-테트라옥사-9,18-다이아자트라이코산이산 대신에 (S)-22-(tert-부톡시카르보닐)-43,43-다이메틸-10,19,24,41-테트라옥소-3,6,12,15,42-펜타옥사-9,18,23-트라이아자테트라테트라콘탄-1-산(16) (중간체 2)을 사용하여, 실시예 40에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 43: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 43의 합성
1. (Alloc)Lys((OEG) 2 -γ-Glu-NH 2 )-(hC)-TRQ( psi -R35Y36)-Sieber 수지의 합성
용매로서의 NMP, 5배 과량의 보호된 아미노산 및 HATU/DIEA 프로토콜(1시간, 단일 커플링)을 사용하여 실온에서, 실시예 1, 단계 2로부터의 사전 로딩된 (psi-R35, Y36)-Sieber 수지(0.1 mmol) 상에의 아미노산 연장을 수행하였으며; Fmoc-Arg(pbf)-OH를 이중 커플링하였다. 전체에 걸쳐 2-단계 Fmoc 탈보호 프로토콜을 사용하였다(DMF 중 20% 피페리딘; 실온; 10분, 15분).
2. (Alloc)Lys((OEG) 2 -γ-Glu-Pal)-(hC)-TRQ( psi -R35Y36)-Sieber 수지의 합성
용매로서 NMP를 그리고 50℃에서 20 내지 30분 동안 HATU/DIEA를 사용하는 마이크로파 조건을 사용하여, 팔미트산을 단계 1로부터의 수지 상에 커플링하였다.
3. (H 2 N)Lys((OEG) 2 --γ-Glu-Pal)-(hC)-TRQ( psi -R35Y36)-Sieber 수지의 합성
실시예 1, 단계 4에 기재된 절차에 따라 상기 수지의 alloc 보호기를 제거하였다.
4. 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 43
단계 2에서 m-브로모메틸벤조산 대신에 m-클로로메틸벤조산을 사용하여, 실시예 9, 단계 1 내지 단계 3에 기재된 절차에 따라 상기 수지로부터 표제 화합물을 제조하였다. 조 선형 펩티드를, 20 내지 60% B의 구배를 사용하여, 실시예 19에 기재된 변형에 따라 정제하고 환화하였다. 36분에 걸쳐 20 내지 60% B의 구배를 사용하여(30 mpm), 최종 생성물 정제를 수행하였다.
실시예 44: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 44의 합성
탠덤 Fmoc-OEG-OH 단위 및 Fmoc-Glu-OtBu 단위가 단계 1 대신에 단계 2에서 도입되도록 변형된, 실시예 43에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 단계 2에서, 팔미트산 대신에 옥타데칸이산, 모노-tert-부틸 에스테르(AstaTech, Inc.)를 사용하고, 위치 30 대신에 위치 11에 링커-지질 서열을 도입하였다. 조 선형 펩티드를, 20 내지 70% B의 구배를 사용하여, 실시예 19에 기재된 변형에 따라 정제하고 환화하였다. 36분에 걸쳐 20 내지 70% B의 구배를 사용하여(30 mpm), 최종 생성물 정제를 수행하였다.
실시예 45: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 45의 합성
탠덤 Fmoc-OEG-OH 단위 대신에 Fmoc-dPEG24-카르복실산을 사용하고, 팔미트산과 함께, 단계 2에 도입되도록 변형된, 실시예 43에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 위치 30 대신에 위치 11에 링커-지질 서열을 도입하였다. 조 선형 펩티드를, 20 내지 90% B의 구배를 사용하여, 실시예 19에 기재된 변형에 따라 정제하고 환화하였다. 36분에 걸쳐 20 내지 90% B의 구배를 사용하여(30 mpm), 최종 생성물 정제를 수행하였다.
실시예 46: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 46의 합성
위치 30에서 Leu 대신에 Fmoc-Lys(Pal-Glu-OtBu)-OH(Active Peptide로부터의 것)를 사용하여, 실시예 9에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 게다가, 50℃에서 20분 동안 마이크로파 조건을 사용하여 단계 1에 따라, Fmoc-βAla-OH를 서열 상의 위치 2에 부가하고, 실시예 15에 기재된 변형을 사용하여, 단계 2에서 m-브로모메틸벤조산 대신에 브로모아세트산 무수물과의 커플링을 사용하였다. 고체의 조 선형 펩티드를, 20 내지 70% B의 구배를 사용하여, 실시예 19에 기재된 변형에 따라 정제하고 환화하였다. 36분에 걸쳐 20 내지 70% B의 구배를 사용하여(30 mpm), 최종 생성물 정제를 수행하였다.
실시예 47: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 47의 합성
위치 11 대신에 위치 7에 링커-지질 서열을 도입하여, 실시예 44에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 실온에서 Varian Pursuit XRs C18 컬럼(30 × 250 mm, 100 Å, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 조 선형 펩티드를, 20 내지 60% B의 구배를 사용하여, 실시예 19에 기재된 변형에 따라 정제하고 환화하였다. 36분에 걸쳐 20 내지 60% B의 구배를 사용하여(30 mpm), 최종 생성물 정제를 수행하였다.
실시예 48: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 48의 합성
30분의 커플링 시간과 함께, 단계 2에서 팔미트산 대신에 옥타데칸이산, 모노-tert-부틸 에스테르(AstaTech, Inc.)를 사용하고, 위치 30 대신에 위치 22에 링커-지질 서열을 도입하여, 실시예 43에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 조 선형 펩티드를, 20 내지 70% B의 구배를 사용하여, 실시예 19에 기재된 변형에 따라 정제하고 환화하였다. 36분에 걸쳐 20 내지 70% B의 구배를 사용하여(30 mpm), 최종 생성물 정제를 수행하였다.
실시예 49: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 49의 합성
단계 2에서 α-토코페릴옥시아세트산(AcVitE)(8) 대신에 16-테트라하이드로피란-2-일옥시팔미트산을 사용하고, 단계 4(실시예 9, 단계 2)에서 m-브로모메틸벤조산 대신에 m-클로로메틸벤조산을 사용하여, 실시예 11에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 용매로서 MeCN/H2O 대신에 60% EtOH/H2O를 사용하고, 단계 4에서 NH4OAc 완충액 대신에 포화 NaHCO3 수용액을 사용하여 환화를 달성하였다. 실온에서 Waters XBridge C18 OBD 컬럼(50 × 250 mm, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 5분에 걸쳐 20% B의 초기 농도로부터 10% B의 중간 농도로(100 mpm), 그리고 이어서 40분에 걸쳐 30% B의 최종 농도에 이르는(100 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 10 mM NH4OH, 약 pH 9) 및 완충액 B(MeCN)의 구배 용리로 이루어졌다.
실시예 50: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 50의 합성
위치 30 대신에 위치 23에 링커-지질 서열을 도입하여, 실시예 48에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 51: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 51의 합성
단계 1에서, 위치 30에서 Fmoc-Leu-OH 대신에 Fmoc-Lys(Pal-Glu-OtBu)-OH(Active Peptide로부터의 것)를 그리고 위치 4에서 Fmoc-Lys(Boc)-OH 대신에 Fmoc-Ser(tBu)-OH를 사용하여, 실시예 9에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 용매로서 MeCN/H2O 대신에 60% EtOH/H2O를 사용하고, 단계 4에서 NH4OAc 완충액 대신에 포화 NaHCO3 수용액을 사용하여 환화를 달성하였다. 실온에서 Waters XBridge C18 OBD 컬럼(50 × 250 mm, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 5분에 걸쳐 10% B의 초기 농도로부터 20% B의 중간 농도로(100 mpm), 그리고 이어서 40분에 걸쳐 30% B의 최종 농도에 이르는(100 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 10 mM NH4OH, 약 pH 9) 및 완충액 B(MeCN)의 구배 용리로 이루어졌다. 5분에 걸쳐 10% B의 초기 농도로부터 20% B의 중간 농도로(100 mpm), 그리고 이어서 60분에 걸쳐 30% B의 최종 농도에 이르는(100 mpm) 것으로 구성된 구배를 사용하여 불순한 분획을 재크로마토그래피하였다.
실시예 52: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 52의 합성
단계 2에서, 탠덤 Fmoc-OEG-OH 단위 대신에 Fmoc-dPEG12-카르복실산을 사용하고, 그것을 Fmoc-Glu-OtBu 및 팔미트산과 함께 도입하여, 실시예 43에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 위치 30 대신에 위치 11에 링커-지질 서열을 도입하였다. 조 선형 펩티드를, 20 내지 70% B의 구배를 사용하여, 실시예 19에 기재된 변형에 따라 정제하고 환화하였다. 36분에 걸쳐 20 내지 70% B의 구배를 사용하여(30 mpm), 최종 생성물 정제를 수행하였다.
실시예 53: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 53의 합성
Fmoc-dPEG12-카르복실산 대신에 탠덤 형태로 4개의 Fmoc-OEG-OH 단위를 사용하여, 실시예 52에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 54: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 54의 합성
2개의 Fmoc-OEG-OH 단위 대신에 탠덤 형태로 2개의 Fmoc-OEG-OH 단위를 도입하여, 실시예 53에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 55: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 55의 합성
위치 30 대신에 위치 23에 링커-지질 서열을 도입하여, 실시예 43에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 조 선형 펩티드를, 20 내지 70% B의 구배를 사용하여, 실시예 19에 기재된 변형에 따라 정제하고 환화하였다. 36분에 걸쳐 20 내지 70% B의 구배를 사용하여(30 mpm), 최종 생성물 정제를 수행하였다.
실시예 56: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 56의 합성
단계 2에서 α-토코페릴옥시아세트산(AcVitE)(8) 대신에 (4'-클로로바이페닐-4-일)-아세트산을 사용하고, 단계 4(실시예 9, 단계 2)에서 m-브로모메틸벤조산 대신에 m-클로로메틸벤조산을 사용하여, 실시예 11에 기재된 방법을 사용하여 표제 화합물을 제조하였다. 용매로서 MeCN/H2O 대신에 60% EtOH/H2O를 사용하고, 단계 4에서 NH4OAc 완충액 대신에 포화 NaHCO3 수용액을 사용하여 환화를 달성하였다. 실온에서 Waters XBridge C18 OBD 컬럼(50 × 250 mm, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 40분에 걸쳐 10% B로부터 28% B에 이르는(100 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 10 mM NH4OH, 약 pH 9) 및 완충액 B(MeCN)의 구배 용리로 이루어졌다.
실시예 57: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 57의 합성
단계 2에서 α-토코페릴옥시아세트산(AcVitE)(8) 대신에 3-[(2,4-다이클로로페녹시)펜-4-일]프로피온산을 사용하고, 단계 4(실시예 9, 단계 2)에서 m-브로모메틸벤조산 대신에 m-클로로메틸벤조산을 사용하여, 실시예 11에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 용매로서 MeCN/H2O 대신에 60% EtOH/H2O를 사용하고, 단계 4에서 NH4OAc 완충액 대신에 포화 NaHCO3 수용액을 사용하여 환화를 달성하였다. 실온에서 Waters XBridge C18 OBD 컬럼(50 × 250 mm, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 40분에 걸쳐 10% B로부터 30% B에 이르는(80 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 10 mM NH4OH, 약 pH 9) 및 완충액 B(MeCN)의 구배 용리로 이루어졌다. 생성물-함유 분획을 합하고, TFA로 산성화하고, 농축시키고, 실온에서 Agilent Polaris C18-A 컬럼(30 × 250 mm, 100 Å, 5 μm) 상에서 재크로마토그래피하였다. 이동상은, 45분에 걸쳐 20% B의 초기 농도로부터 15% B의 중간 농도로(40 mpm), 그리고 45% B의 최종 농도에 이르는(40 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다.
실시예 58: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 58의 합성
단계 2에서 α-토코페릴옥시아세트산(AcVitE)(8) 대신에 11-(4-플루오로페닐}운데칸산을 사용하고, 단계 4(실시예 9, 단계 2)에서 m-브로모메틸벤조산 대신에 m-클로로메틸벤조산을 사용하여, 실시예 11에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 용매로서 MeCN/H2O 대신에 60% EtOH/H2O를 사용하고, 단계 4에서 NH4OAc 완충액 대신에 포화 NaHCO3 수용액을 사용하여 환화를 달성하였다. 실온에서 Waters XBridge C18 OBD 컬럼(50 × 250 mm, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 40분에 걸쳐 15% B로부터 35% B에 이르는(100 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 10 mM NH4OH, 약 pH 9) 및 완충액 B(MeCN)의 구배 용리로 이루어졌다.
실시예 59: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 59의 합성
단계 2를 생략하고, 단계 1에 팔미트산 커플링을 포함시켜, 실시예 43에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 위치 11 대신에 위치 22에 링커-지질 서열을 도입하였다. 조 선형 펩티드를, 20 내지 70% B의 구배를 사용하여, 실시예 19에 기재된 변형에 따라 정제하고 환화하였다. 36분에 걸쳐 20 내지 70% B의 구배를 사용하여(30 mpm), 최종 생성물 정제를 수행하였다.
실시예 60: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 60의 합성
4개의 Fmoc-OEG-OH 단위 대신에 2개의 Fmoc-OEG-OH 단위를 탠덤 형태로 도입하고, 위치 11 대신에 위치 7에 링커-지질 서열을 도입하여, 실시예 53에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 조 선형 펩티드를, 20 내지 80% B의 구배를 사용하여, 실시예 19에 기재된 변형에 따라 정제하고 환화하였다. 36분에 걸쳐 20 내지 80% B의 구배를 사용하여(30 mpm), 최종 생성물 정제를 수행하였다.
실시예 61: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 61의 합성
단계 2에서 α-토코페릴옥시아세트산(AcVitE)(8) 대신에 11-[(4-트라이플루오로메틸)페닐]운데칸산을 사용하고, 단계 4(실시예 9, 단계 2)에서 m-브로모메틸벤조산 대신에 m-클로로메틸벤조산을 사용하여, 실시예 11에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 용매로서 MeCN/H2O 대신에 60% EtOH/H2O를 사용하고, 단계 4에서 NH4OAc 완충액 대신에 포화 NaHCO3 수용액을 사용하여 환화를 달성하였다. 실온에서 Waters XBridge C18 OBD 컬럼(50 × 250 mm, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 40분에 걸쳐 15% B로부터 35% B에 이르는(100 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 10 mM NH4OH, 약 pH 9) 및 완충액 B(MeCN)의 구배 용리로 이루어졌다.
실시예 62: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 62의 합성
단계 2에서 α-토코페릴옥시아세트산(AcVitE)(8) 대신에 11,11,11-트라이플루오로운데칸산을 사용하고, 단계 4(실시예 9, 단계 2)에서 m-브로모메틸벤조산 대신에 m-클로로메틸벤조산을 사용하여, 실시예 11에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 용매로서 MeCN/H2O 대신에 60% EtOH/H2O를 사용하고, 단계 4에서 NH4OAc 완충액 대신에 포화 NaHCO3 수용액을 사용하여 환화를 달성하였다. 실온에서 Waters XBridge C18 OBD 컬럼(50 × 250 mm, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 40분에 걸쳐 10% B로부터 28% B에 이르는(100 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 10 mM NH4OH, 약 pH 9) 및 완충액 B(MeCN)의 구배 용리로 이루어졌다.
실시예 63: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 63의 합성
단계 2에서 α-토코페릴옥시아세트산(AcVitE)(8) 대신에 15,15,15-트라이플루오로펜타데칸산을 사용하고, 단계 4(실시예 9, 단계 2)에서 m-브로모메틸벤조산 대신에 m-클로로메틸벤조산을 사용하여, 실시예 11에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 용매로서 MeCN/H2O 대신에 60% EtOH/H2O를 사용하고, 단계 4에서 NH4OAc 완충액 대신에 포화 NaHCO3 수용액을 사용하여 환화를 달성하였다. 실온에서 Waters XBridge C18 OBD 컬럼(50 × 250 mm, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 40분에 걸쳐 15% B로부터 30% B에 이르는(100 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 10 mM NH4OH, 약 pH 9) 및 완충액 B(MeCN)의 구배 용리로 이루어졌다.
실시예 64: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 64의 합성
단계 2에서 α-토코페릴옥시아세트산(AcVitE)(8) 대신에 16-에톡시팔미트산을 사용하고, 단계 4(실시예 9, 단계 2)에서 m-브로모메틸벤조산 대신에 m-클로로메틸벤조산을 사용하여, 실시예 11에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 용매로서 MeCN/H2O 대신에 60% EtOH/H2O를 사용하고, 단계 4에서 NH4OAc 완충액 대신에 포화 NaHCO3 수용액을 사용하여 환화를 달성하였다. 실온에서 Waters XBridge C18 OBD 컬럼(50 × 250 mm, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 40분에 걸쳐 15% B로부터 30% B에 이르는(100 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 10 mM NH4OH, 약 pH 9) 및 완충액 B(MeCN)의 구배 용리로 이루어졌다.
실시예 65: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 65의 합성
단계 2에서 α-토코페릴옥시아세트산(AcVitE)(8) 대신에 13,13,14,14,15,15,16,16,16-D9-팔미트산(Cambridge Isotopes)을 사용하고, 단계 4(실시예 9, 단계 2)에서 m-브로모메틸벤조산 대신에 m-클로로메틸벤조산을 사용하여, 실시예 11에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 용매로서 MeCN/H2O 대신에 60% EtOH/H2O를 사용하고, 단계 4에서 NH4OAc 완충액 대신에 포화 NaHCO3 수용액을 사용하여 환화를 달성하였다. 실온에서 Waters XBridge C18 OBD 컬럼(50 × 250 mm, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 5분에 걸쳐 15% B로부터 20% B로(100 mpm), 그리고 이어서 40분에 걸쳐 35% B에 이르는(100 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 10 mM NH4OH, 약 pH 9) 및 완충액 B(MeCN)의 구배 용리로 이루어졌다.
실시예 66: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 66의 합성
단계 2에서 α-토코페릴옥시아세트산(AcVitE)(8) 대신에 11-[(2,4-비스(트라이플루오로메틸)페닐]운데칸산을 사용하고, 단계 4(실시예 9, 단계 2)에서 m-브로모메틸벤조산 대신에 m-클로로메틸벤조산을 사용하여, 실시예 11에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 용매로서 MeCN/H2O 대신에 60% EtOH/H2O를 사용하고, 단계 4에서 NH4OAc 완충액 대신에 포화 NaHCO3 수용액을 사용하여 환화를 달성하였다. 실온에서 Waters XBridge C18 OBD 컬럼(50 × 250 mm, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 40분에 걸쳐 15% B로부터 35% B에 이르는(100 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 10 mM NH4OH, 약 pH 9) 및 완충액 B(MeCN)의 구배 용리로 이루어졌다.
실시예 67: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 67의 합성
단계 2에서 α-토코페릴옥시아세트산(AcVitE)(8) 대신에 11-[(3,5-비스(트라이플루오로메틸)페닐]운데칸산을 사용하고, 단계 4(실시예 9, 단계 2)에서 m-브로모메틸벤조산 대신에 m-클로로메틸벤조산을 사용하여, 실시예 11에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 용매로서 MeCN/H2O 대신에 60% EtOH/H2O를 사용하고, 단계 4에서 NH4OAc 완충액 대신에 포화 NaHCO3 수용액을 사용하여 환화를 달성하였다. 실온에서 Waters XBridge C18 OBD 컬럼(50 × 250 mm, 5 μm)을 사용하여 생성물 정제를 수행하였다. 이동상은, 40분에 걸쳐 15% B로부터 35% B에 이르는(100 mpm) 범위의, 완충액 A(물 중 10 mM NH4OH, 약 pH 9) 및 완충액 B(MeCN)의 구배 용리로 이루어졌다.
실시예 68: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 68의 합성
1. (Fmoc)-βA-IKPEAPGEK(Alloc)ASPEELNRYYASLRHYLNCVTRQ( psi -R35Y36)-Sieber 수지의 합성
용매로서의 DMF, 6배 과량의 보호된 아미노산 및 HATU/DIEA 프로토콜(10분, 이중 커플링)을 사용하여 실온에서, 실시예 1, 단계 2로부터의 사전 로딩된 (psi-R35, Y36)-Sieber 수지(0.1 mmol) 상에의 아미노산 연장을 수행하였다. 전체에 걸쳐 2-단계 Fmoc 탈보호 프로토콜을 사용하였다(DMF 중 20% 피페리딘; 실온; 10분, 15분).
2. (Fmoc)-βA-IKPEAPGEK((OEG) 2 -γ-Glu-NHCO(CH 2 ) 16 CO 2 tBu)-ASPEELNRYYASLRHYLNCVTRQ( psi -R35Y36)-Sieber 수지의 합성
각각의 처리마다 10분의 변형된 반응 시간을 사용하여, 실시예 1, 단계 4에 기재된 방법에 따라 상기 수지의 탈보호를 수행하였다. 이어서, DMF 중에서 HATU/DIEA 프로토콜(1시간, 실온)을 사용하여, 수지를 중간체 2(15) (5 당량)와 커플링하였다.
3. (BrAc)-βA-IKPEAPGEK((OEG) 2 -γ-Glu-NHCO(CH 2 ) 16 CO 2 tBu)-ASPEELNRYYASLRHYLNCVTRQ( psi -R35Y36)-Sieber 수지의 합성
Fmoc 탈보호(20% 피페리딘/DMF) 후에, 상기 수지를 브로모아세트산 무수물(10 당량; 실온, 30분)로 처리하여 브로모아세틸화 수지를 얻었다.
4. (BrAc)-βA-IKPEAPGEK((OEG) 2 -γ-Glu-NHCO(CH 2 ) 16 CO 2 tBu)-ASPEELNRYYASLRHYLNCVTRQ( psi -R35Y36)-CONH 2 의 합성
상기 수지를 실온에서 1.5시간 동안 TFA/H2O/TIPS(95:2.5:2.5)로 이루어진 절단 칵테일로 처리하였다. 조 펩티드를 실시예 1, 단계 7에 기재된 절차에 따라 에테르를 사용하여 침전시켰다.
5. 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 68
상기에서 얻은 조 펩티드를 10 mg/mL의 농도로 10% MeCN/H2O 중에 용해시키고, TEA를 첨가하여 용액 pH를 8 내지 9로 상승시켰다. 실온에서 약 20분 동안 교반한 후, TFA를 첨가하여 pH를 2로 낮추고, 이 용액을 Kinetics C18 Evo 컬럼(30 × 100 mm, 100 Å, 5 μm) 상에서 분취용 HPLC에 의해 직접 정제하였다. 이동상은, 22분에 걸쳐 20% B로부터 60% B에 이르는 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다. 220 및 254 nm에서 UV 검출을 모니터링하였다. 순수한 분획을 합하고, 이어서 동결건조시켜, 면-유사 고체로서 생성물을 얻었다.
실시예 69: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 69의 합성
1. (Boc)-G-ISPEAPGEK(dde)ASPEELNRYYASLRHYLNLE(OAllyl)TRQ( psi -R35Y36)-Sieber 수지의 합성
용매로서의 DMF, 6배 과량의 보호된 아미노산 및 HATU/NMM 프로토콜(10분, 이중 커플링)을 사용하여 실온에서 실시예 1, 단계 2로부터의 사전 로딩된 (psi-R35, Y36)-Sieber 수지(0.1 mmol) 상에의 아미노산 연장을 수행하였다. 전체에 걸쳐 2-단계 Fmoc 탈보호 프로토콜을 사용하였다(DMF 중 20% 피페리딘; 실온; 10분, 15분).
2. (Boc)-G-ISPEAPGEK(dde)ASPEELNRYYASLRHYLNLE(NHS)TRQ( psi -R35Y36)-Sieber 수지의 합성
각각의 처리마다 10분의 변형된 반응 시간을 사용하여, 실시예 1, 단계 4에 기재된 방법에 따라 상기 수지의 Alloc-탈보호를 수행하였다. 이어서, DMF 중에서 HATU/DIEA 프로토콜(1시간, 실온, 이중 커플링)을 사용하여, 수지를 NHS(10 당량)와 커플링하였다.
3. (NH 2 )-G-ISPEAPGEK(dde)ASPEELNRYYASLRHYLNLE(NHS)TRQ( psi -R35Y36)의 합성
상기 수지를 실온에서 1.5시간 동안 TFA/H2O/TIPS(95:2.5:2.5)로 이루어진 절단 칵테일로 처리하였다. 조 펩티드를 실시예 1, 단계 7에 기재된 절차에 따라 에테르를 사용하여 침전시켰다.
4. 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 69
상기에서 얻어진 조 펩티드를 80 mg/mL의 농도로 DMSO 중에 용해시키고, TEA(25 당량)를 첨가하여 락탐화를 달성하였다. 실온에서 약 30분 동안 교반한 후, 반응물을 10% MeCN/물로 10배 희석시키고, pH를 2로 조정하고, 조 펩티드를 Kinetics C18 Evo 컬럼(30 × 100 mm, 100Å, 5 μm) 상에서 분취용 HPLC에 의해 직접 정제하였다. 이동상은, 22분에 걸쳐 10% B로부터 60% B에 이르는 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배로 이루어졌다. 220 및 254 nm에서 UV 검출을 모니터링하였다. 순수한 분획을 합하고, 이어서 동결건조시켜 K(Dde)-보호된 펩티드를 얻었다. 실온에서 30분 동안 2% 하이드라진/DMF(10 mg 펩티드/ml)를 사용하여 Dde 보호기를 제거하였다. 반응물을 10% MeCN/물로 10배 희석시키고, TFA를 사용하여 pH를 2로 조정하고, 조 펩티드 용액을 상기에서와 같이 정제하여, 면-유사 고체로서 생성물을 얻었다.
실시예 70: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 70의 합성
위치 30에서 Fmoc-Leu-OH 대신에 Fmoc-E(OAll)-OH를 사용하고, 위치 31에서 Fmoc-E(OAll)-OH 대신에 Fmoc-Val-OH를 사용하여, 실시예 69에서의 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 71: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 71의 합성
1. (Boc)-G-ISPEAPGEK(dde)ASPEELNRYYASLRHYLN E(OAllyl)VTRQ(N-Me-R)Y-NovaSyn TGR 수지의 합성
실시예 69, 단계 1에 기재된 절차를 사용하여, NovaSyn TGR 수지(0.1 mmol) 상에의 아미노산 연장을 수행하였다.
2. 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 71
실시예 69, 단계 2 내지 단계 4에 기재된 절차에 따라 상기 수지로부터 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 72: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 72의 합성
1. (S)-22-(tert-부톡시카르보닐)-43,43-다이메틸-10,19,24,41-테트라옥소-3,6,12,15,42-펜타옥사-9,18,23-트라이아자테트라테트라콘탄-1-산 N-하이드록시석신이미드 에스테르의 합성
1.0 ml의 DMF 중 (S)-22-(tert-부톡시카르보닐)-43,43-다이메틸-10,19,24,41-테트라옥소-3,6,12,15,42-펜타옥사-9,18,23-트라이아자테트라테트라콘탄-1-산(중간체 2(16)) (54.0 mg, 0.063 mmol), N-하이드록시석신이미드(14.6 mg, 0.127 mmol), 및 HATU(24.1 mg, 0.063 mmol)의 용액에 DIEA(0.022 ml, 0.127 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하고, 추가의 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다.
2. 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 72의 합성
DMF(0.2 mL) 중 [사이클로-(G2-E30), S4, K11, psi-(R35,Y36)]-PYY2-36(실시예 70에서 제조됨) (4 mg, 0.96 μmol)의 용액에 24 μL의 N-하이드록시 에스테르 용액(단계 1에서 제조됨), 및 TEA(0.66 μL; 5 당량)를 첨가하고, 혼합물을 실온에서 하룻밤 교반하였다. 반응물을 10% MeCN/물로 10배 희석시키고, TFA를 사용하여 pH를 2로 조정하고, 조 펩티드를 Kinetics C18 Evo 컬럼(30 × 100 mm, 100 Å, 5 μm) 상에서 분취용 HPLC에 의해 직접 정제하였다. 이동상은, 22분에 걸쳐 10% B로부터 60% B에 이르는 범위의, 완충액 A(물 중 0.1% TFA) 및 완충액 B(MeCN 중 0.1% TFA)의 구배 용리로 이루어졌다. 220 및 254 nm에서 UV 검출을 모니터링하였다. 순수한 분획을 합하고, 이어서 동결건조시켜 t-부틸 에스테르-보호된 펩티드를 얻었다. t-부틸 에스테르 보호기를 실온에서 1.5시간 동안 TFA/H2O/TIPS(95:2.5:2.5)의 혼합물을 사용하여 제거하였다. 혼합물을 농축시키고, 펩티드를 상기에서와 같이 정제하여, 면-유사 고체로서 생성물을 얻었다.
실시예 73: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 73의 합성
단계 5에서 N-Fmoc-dPEG12-카르복실산 대신에 N-Fmoc-dPEG6-카르복실산을 사용하여, 실시예 1에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 74: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 74의 합성
단계 5의 PEG 링커 커플링을 생략한 것을 제외하고는, 실시예 1에 기재된 바와 같은 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 75: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 75의 합성
단계 3에서, 위치 31에서 Fmoc-hCys(trt)-OH 대신에 Fmoc-Cys(trt)-OH를 사용하고, Fmoc-βAla-OH 커플링 단계를 생략하여, 실시예 1에 기재된 바와 같은 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 76: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 76의 합성
변형된 단계 3 및 단계 4를 사용하여, 실시예 1에 기재된 바와 같은 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다. 단계 3에서는, Fmoc-Lys(Alloc)-OH 및 Fmoc-Lys(dde)-OH를 각각 위치 30 및 위치 11에 사용하였다. 위치 30의 Alloc을 Pd(PPh3)4-페닐실란으로 탈보호한 후, mPEG16-카복실산을 HAT-DIPEA와 커플링하였다. 단계 4에서는, DMF 중 2% 하이드라진을 사용하여 위치 11의 dde를 제거하였다.
실시예 77: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 77의 합성
단계 3에서 mPEG16-카르복실산 대신에 mPEG12-카르복실산을 사용하고, 단계 5에서 Fmoc-dPEG12-카르복실산 커플링 단계를 생략하여, 실시예 76에 기재된 바와 같은 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 78: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 78의 합성
단계 3에서 Fmoc-Gln(trt)-OH 대신에 Fmoc-N-Me-Gln(trt)-OH를 사용하여, 실시예 1에 기재된 바와 같은 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 79: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 79의 합성
단계 1B에서 Fmoc-Arg(pbf)-OH 대신에 Fmoc-N-Me-Arg(pbf)-OH를 사용하여, 실시예 1에 기재된 바와 같은 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 80: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 80의 합성
단계 3에서, 위치 4에서 Fmoc-Lys(Boc)-OH 대신에 Fmoc-Arg(pbf)-OH를 사용하고, 위치 30에서 Fmoc-Leu-OH 대신에 Fmoc-Trp(Boc)-OH를 사용하여, 실시예 79에 기재된 바와 같은 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 81: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 81의 합성
단계 3에서, 위치 31에서 Fmoc-hCys(trt)-OH 대신에 Fmoc-Cys(trt)-OH를 사용하고, Fmoc-βAla-OH 대신에 Fmoc-γ-아미노부탄산을 사용하여, 실시예 80에 기재된 바와 같은 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 82: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 82의 합성
단계 3에서, 위치 31에서 Fmoc-βAla-OH 대신에 Fmoc-PEG2-카르복실산을 그리고 Fmoc-hCys(trt)-OH 대신에 Fmoc-Cys(trt)-OH를 사용할 뿐만 아니라, Fmoc-Ile-OH의 커플링을 생략하여, 실시예 1에 기재된 바와 같은 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 83: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 83의 합성
단계 3에서, 위치 31에서 Fmoc-hCys(trt)-OH 대신에 Fmoc-Lys(N3)-OH를 사용하고, Fmoc-βAla-OH 대신에 펜트-4-인산을 사용하여, 실시예 1에 기재된 바와 같은 절차에 따라, 그리고 하기에서와 같은 환화 절차 B에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
환화 절차 B: 2 mL의 HEPES(pH 7.4) 중 PEG12-AcBr이 위치 11에 도입된 완전 탈보호된 펩티드(38 mg, 0.0067 mmol)의 용액에 1.7 mL의 예비혼합된 CuSO4/TBTA 용액(이 용액은 물(0.4 mL) 중 2.2 mg의 CuSO4의 용액을 EtOH 중 11 mg의 TBTA의 용액과 혼합함으로써 제조함)을 첨가한 후, 물(1 mL) 중 7 mg의 소듐 아스코르베이트를 첨가하였다. 투명한 반응 용액을 실온에서 그대로 혼합하면서 HPLC에 의해 모니터링하였다. 30분 후에, 반응이 완료되었으며, 반응 혼합물을 TFA를 사용하여 pH 4로 조정하고, HPLC 정제(Pursuit XRS 5 250 × 30 mm C18 컬럼, 30 mpm 유량으로 이동, 214 nM 파장을 모니터링함, 36분에 걸쳐 20 내지 60% MeCN-물/물(둘 모두 TFA를 함유함)의 범위의 구배를 사용함)를 거쳤다. 원하는 분획을 수집하고 동결건조시켰다.
실시예 84: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 84의 합성
Fmoc-βAla-OH 커플링 단계를 생략하고, 단계 5에서 Fmoc-dPEG12-카르복실산 대신에 N3-PEG8-카르복실산을 사용하고, 단계 3에서 브로모아세트산 무수물 아실화 대신에 DIC와의 3-(브로모메틸)벤조산 커플링을 사용하고, 하기에서와 같은 환화 절차 C에 따라, 실시예 1에 기재된 바와 같은 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
환화 절차 C: 5 mL의 탈기된 물 중 완전 탈보호된 펩티드(20 mg, 0.0035 mmol)의 용액에, NaHCO3 수용액을 첨가하여 반응 혼합물을 pH 6.4 이상으로 조정하였다. 20분 후에, LCMS는 반응이 완료되었음을 나타내었으며, 반응 혼합물을 TFA를 사용하여 pH 4로 조정하고, HPLC 정제(Pursuit XRS 5 250 × 30 mm C18 컬럼, 30 mpm 유량으로 이동, 214 nM 파장을 모니터링함, 36분에 걸쳐 10 내지 60% MeCN-물/물(둘 모두 TFA를 함유함)의 범위의 구배를 사용함)를 거쳤다. 원하는 분획을 수집하고 동결건조시켰다.
환화 후에, 환화된 중간체를 N-(1-브로모-2-옥소-7,10,13-트라이옥사-3-아자헥사데칸-16-일)펜트-4-인아미드를 사용하여 환화 절차 B에 따라 클릭 화학(click chemistry)에 의해 링커 연장을 거쳤는데, 이때 상기 물질은 HATU-DIPEA를 사용하여 N-Boc-PEG4-NH2를 펜트-4-인산과 커플링한 후, TFA에 의한 Boc의 탈보호 및 TEA의 존재 하에서의 브로모아세트산 무수물에 의한 아실화를 수행함으로써 제조하였다.
실시예 85: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 85의 합성
위치 11 대신에 위치 23에 PEG12-AcBr 링커를 도입하여, 실시예 1에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 86: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 86의 합성
위치 11 대신에 위치 22에 PEG12-AcBr 링커를 도입하여, 실시예 1에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 87: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 87의 합성
위치 11 대신에 위치 7에 PEG12-AcBr 링커를 도입하여, 실시예 1에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 88: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 88의 합성
단계 3에서, 위치 31에서 Fmoc-hCys(trt)-OH 대신에 Fmoc-V-OH를 사용하고, 위치 30에서 Fmoc-Leu-OH 대신에 Fmoc-Cys(trt)-OH를 사용하고, Fmoc-βAla-OH 대신에 Fmoc-Gly-OH를 사용하여, 실시예 1에 기재된 바와 같은 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 89: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 89의 합성
환원된 다이펩티드를 제조하는 단계 1을 생략하고, 단계 2에서 Fmoc-psi-(R35-N(Boc)-Y36)-OH 로딩 대신에 Fmoc-Tyr(tBu)-OH 로딩 후의 Fmoc-(N-Me)Arg-OH와의 커플링을 사용하여, 실시예 88에 기재된 바와 같은 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 90: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 90의 합성
단계 3에서 Fmoc-Gly-OH 대신에 Fmoc-βAla-OH를 사용하여, 실시예 89에 기재된 바와 같은 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 91: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 91의 합성
단계 3에서 위치 30에서 Fmoc-Cys(trt)-OH 대신에 Fmoc-hCys(trt)-OH를 사용하여, 실시예 89에 기재된 바와 같은 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 92: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 92의 합성
단계 3에서, 위치 31에서 Fmoc-Val-OH 대신에 Fmoc-hCys(trt)-OH를 사용하고, 위치 30에서 Fmoc-Cys(trt)-OH 대신에 Fmoc-Leu-OH를 사용하여, 실시예 90에 기재된 바와 같은 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 93: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 93의 합성
단계 3에서, 위치 31에서 Fmoc-hCys(trt)-OH 대신에 Fmoc-Val-OH를 사용하고, 위치 30에서 Fmoc-Leu-OH 대신에 Fmoc-Cys(trt)-OH를 사용하고, N-말단에서 Fmoc-βAla-OH 대신에 Fmoc-Gly-OH를 사용하여, 실시예 1에 기재된 바와 같은 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 94: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 94의 합성
단계 3에서, 위치 31에서 Fmoc-hCys(trt)-OH 대신에 Fmoc-Val-OH를 사용하고, 위치 30에서 Fmoc-Leu-OH 대신에 Fmoc-Cys(trt)-OH를 사용하여, 실시예 1에 기재된 바와 같은 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 95: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 95의 합성
단계 3에서, 위치 31에서 Fmoc-hCys(trt)-OH 대신에 Fmoc-Val-OH를 사용하고, 위치 30에서 Fmoc-Leu-OH 대신에 Fmoc-Glu(OAlloc)-OH를 사용하고, 위치 11에서 Fmoc-Lys(Alloc)-OH 대신에 Fmoc-Lys(Dde)-OH를 사용하고, 위치 4에서 Fmoc-Lys(Boc)-OH 대신에 Fmoc-Ser(tBu)-OH를 사용하고, N-말단에서 Fmoc-βAla-OH 대신에 Boc-Gly-OH를 사용하여, 실시예 1에 기재된 바와 같은 절차에 따라 (0.05 mmol 규모로) 표제 화합물을 제조하였다.
상기로부터 생성된 수지에, 탈산소화된 DCM(10 mL), 페닐실란(10 당량), 및 DCM(1 mL) 중 Pd(PPh3)4(0.2 당량)의 용액을 첨가하고, 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 반응물을 드레인하고, 수지를 탈산소화된 DCM으로 세척하고, 탈보호를 1회 반복하였다.
상기로부터 생성된 수지에 DMF(10 ml), HATU(5 당량), 및 DIEA(10 당량)를 첨가하고, 혼합물을 5분 동안 교반하고, 이어서 DMF 중 N-하이드록시석신이미드(10 당량)의 용액을 첨가하고, 추가 20분 동안 교반하였다. 수지를 여과하고, 절차를 1회 반복하였다.
상기로부터의 수지를 실온에서 2시간 동안 TFA/TIPS/물(95/2.5/2.5)(10 ml) 중에서 탈보호하였다. 절단 칵테일을 대략 1 ml로 농축시키고, 이어서 40 ml의 에테르에 첨가하였다. 생성된 침전물을 원심분리에 의해 수집하고, N2 하에서 건조시켰다.
상기로부터 생성된 물질을 9 mL의 DMSO 중에 용해시키고, 이것에 10 당량의 TEA를 첨가하고, 반응이 실온에서 3시간 동안 진행되게 하였다. 생성된 용액을 물을 사용하여 30 ml로 희석시키고, pH를 2로 조정하고, 물(0.1% TFA) 중 20 내지 40% MeCN의 선형 구배로 용리하는 30 mm × 250 mm C18 컬럼 상에서 RP-HPLC에 의해 30분만에 정제하였다. 생성물을 함유하는 분획을 동결건조시켰다.
이어서, 상기로부터 생성된 물질을 1 내지 2% 하이드라진/DMF(1 mL)로 처리하여 라이신으로부터 Dde를 제거하였다. 생성된 혼합물을 물을 사용하여 10 ml로 희석시키고, pH를 2로 조정하고, 이어서 상기에서와 같이 RP-HPLC에 의해 정제하였다.
이어서, 생성된 생성물을 10% MeCN/물 중에 용해시키고, pH를 10으로 조정하고, 브로모아세트산 N-하이드록시석신이미드 에스테르의 용액(3 당량의 0.1 M/DMF 용액)을 첨가하고, 반응이 실온에서 10분 동안 진행되게 하였다. 생성된 혼합물을 물을 사용하여 10 ml로 희석시키고, pH를 2로 조정하고, 이어서 상기에서와 같이 RP-HPLC에 의해 정제하여 표제 화합물을 얻었다.
실시예 96: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 96의 합성
단계 5에서 N-Fmoc-dPEG12-카르복실산 대신에 N-Fmoc-dPEG24-카르복실산을 사용하여, 실시예 1에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 97: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 97의 합성
단계 3에서 Fmoc-βAla-OH 대신에 Fmoc-Gly-OH를 사용하여, 실시예 1에 기재된 바와 같은 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 98: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 98의 합성
단계 5에서 Fmoc-dPEG12-카르복실산 커플링 단계를 생략한 것을 제외하고는, 실시예 89에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 99: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 99의 합성
단계 5에서 Fmoc-dPEG12-카르복실산 커플링 단계를 생략한 것을 제외하고는, 실시예 90에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
실시예 100: 사이클릭 PYY 유사체 서열 번호 100의 합성
단계 5에서 Fmoc-dPEG12-카르복실산 커플링 단계를 생략한 것을 제외하고는, 실시예 94에 기재된 절차에 따라 표제 화합물을 제조하였다.
하기 서열 모두는 본 발명의 예인 것으로 고려된다.
서열 목록
서열 번호 1
명칭: [사이클로-(βA2-COCH2-hC31), K(PEG12-AcBr)11, psi-(35R,36Y)]-PYY2-36
구조:
Figure pct00276
서열 번호 2
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00277
서열 번호 3
명칭: [사이클로-(I3-CO(CH2)2트라이아졸릴-Nle31)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00278
서열 번호 4
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K(γ-Glu-Pal)11]-PYY3-36
구조:
Figure pct00279
서열 번호 5
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K(γ-Glu-AcVitE)11]-PYY3-36
구조:
Figure pct00280
서열 번호 6
명칭: [사이클로-(I3-CO(CH2)2트라이아졸릴-Nle31), K(γ-Glu-AcVitE)11]-PYY3-36
구조:
Figure pct00281
서열 번호 7
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K(γ-Glu-Pal)9]-PYY3-36
구조:
Figure pct00282
서열 번호 8
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K(γ-Glu-Pal)30]-PYY3-36
구조:
Figure pct00283
서열 번호 9
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), psi-(R35Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00284
서열 번호 10
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K(γ-Glu-AcVitE)30]-PYY3-36
구조:
Figure pct00285
서열 번호 11
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K(γ-Glu-AcVitE)30, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00286
서열 번호 12
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), (N-Me-R35)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00287
서열 번호 13
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K(γ-Glu-Pal)30, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00288
서열 번호 14
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K(γ-Glu-Pal)30, (N-Me-R35)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00289
서열 번호 15
명칭: [사이클로-(K4-CO(CH2)2NHCOCH2-hC31), K(γ-Glu-Pal)30]-PYY4-36
구조:
Figure pct00290
서열 번호 16
명칭: [사이클로-(K4-p-COPhCH2-hC31), K(γ-Glu-Pal)30]-PYY4-36
구조:
Figure pct00291
서열 번호 17
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), A4, K(γ-Glu-Pal)30]-PYY3-36
구조:
Figure pct00292
서열 번호 18
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), E4, K(γ-Glu-Pal)30]-PYY3-36
구조:
Figure pct00293
서열 번호 19
명칭: [사이클로-(I3-p-COPhCH2- C31), K(γ-Glu-Pal)30, (N-Me-R35)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00294
서열 번호 20
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-C31), K(γ-Glu-Pal)30, (N-Me-R35)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00295
서열 번호 21
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), A4, A26, K(γ-Glu-Pal)30]-PYY3-36
구조:
Figure pct00296
서열 번호 22
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), E4, A26, K(γ-Glu-Pal)30]-PYY3-36
구조:
Figure pct00297
서열 번호 23
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K((OEG)2-γ-Glu-COC16CO2H)30, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00298
서열 번호 24
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K((OEG)2-γ-Glu-COC18CO2H)30, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00299
서열 번호 25
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K(γ-Glu-Stear)30, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00300
서열 번호 26
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K(γ-Glu-Arach)30, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00301
서열 번호 27
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K((OEG)2-COC16CO2H)30, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00302
서열 번호 28
명칭: [사이클로-(K4-p-COPhCH2-hC31), K(γ-Glu-Pal)30, psi-(R35,Y36)]-PYY4-36
구조:
Figure pct00303
서열 번호 29
명칭: [사이클로-(K4-CO(CH2)2NHCOCH2-hC31), K(γ-Glu-Pal)30, psi-(R35,Y36)]-PYY4-36
구조:
Figure pct00304
서열 번호 30
명칭: [사이클로-(K4-CO(CH2)3NHCOCH2- C31), K(γ-Glu-Pal)30, psi-(R35,Y36)]-PYY4-36
구조:
Figure pct00305
서열 번호 31
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K((OEG)2-γ-Glu-Stear)30, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00306
서열 번호 32
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), A4, A26, K(γ-Glu-Pal)30, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00307
서열 번호 33
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K(γ-Glu-Pal)30, (N-Me-Q34), psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00308
서열 번호 34
명칭: [사이클로-(K4-CO(CH2)5NHCOCH2-C31), K(γ-Glu-Pal)30, psi-(R35,Y36)]-PYY4-36
구조:
Figure pct00309
서열 번호 35
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K(γ-Glu-Pal)30, (N-Me-R35), psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00310
서열 번호 36
명칭: [사이클로-(K4-CO(CH2)2NHCOCH2-hC31), K(γ-Glu-Pal)30, (N-Me-R35), psi-(R35,Y36)]-PYY4-36
구조:
Figure pct00311
서열 번호 37
명칭: [사이클로-(I3-CO(CH2)3NHCOCH2- C31), K(γ-Glu-Pal)30, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00312
서열 번호 38
명칭: [사이클로-(I3-CO(CH2)2NHCOCH2-hC31), K(γ-Glu-Pal)30, (N-Me-R35), psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00313
서열 번호 39
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), S4, K(γ-Glu-Arach)30, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00314
서열 번호 40
명칭: [사이클로-(I3-CO(CH2)2트라이아졸릴-Nle31), K((OEG)2-γ-Glu-Pal)30, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00315
서열 번호 41
명칭: [사이클로-(I3-CO(CH2)2트라이아졸릴-Nle31), K(γ-Glu-Pal)30, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00316
서열 번호 42
명칭: [사이클로-(I3-CO(CH2)2트라이아졸릴-Nle31), K((OEG)2-γ-Glu-COC16CO2H)30, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00317
서열 번호 43
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K((OEG)2-γ-Glu-Pal)30, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00318
서열 번호 44
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K((OEG)2-γ-Glu-COC16CO2H)11, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00319
서열 번호 45
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K(COCH2CH2(OCH2CH2)24NH-γ-Glu-Pal)11, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00320
서열 번호 46
명칭: [사이클로-(I3-CO(CH2)2NHCOCH2- hC31), K(γ-Glu-Pal)30, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00321
서열 번호 47
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K((OEG)2-γ-Glu-COC16CO2H)7, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00322
서열 번호 48
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K((OEG)2-γ-Glu-COC16CO2H)22, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00323
서열 번호 49
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K(γ-Glu-(Pal-16-OH))30, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00324
서열 번호 50
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K((OEG)2-γ-Glu-COC16CO2H)23, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00325
서열 번호 51
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), S4, K(γ-Glu-Pal)30, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00326
서열 번호 52
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K(COCH2CH2(OCH2CH2)12NH-γ-Glu-Pal)11, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00327
서열 번호 53
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K((OEG)4-γ-Glu-Pal)11, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00328
서열 번호 54
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K((OEG)2-γ-Glu-Pal)11, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00329
서열 번호 55
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K((OEG)2-γ-Glu-Pal)23, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00330
서열 번호 56
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K(γ-Glu-COCH2Ph-(4-ClPh)30, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00331
서열 번호 57
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K(γ-Glu-CO(CH2)2PhO-(2,4-Cl2Ph)30, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00332
서열 번호 58
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K(γ-Glu-CO(CH2)10-(4-F-Ph))30, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00333
서열 번호 59
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K((OEG)2-γ-Glu-Pal)22, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00334
서열 번호 60
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K((OEG)2-γ-Glu-Pal)7, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00335
서열 번호 61
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K(γ-Glu-CO(CH2)10-(4-F3C-Ph))30, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00336
서열 번호 62
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K(γ-Glu-CO(CH2)10-CF3)30, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00337
서열 번호 63
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K(γ-Glu-CO(CH2)13-CF3)30, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00338
서열 번호 64
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K(γ-Glu-(Pal-16-OEt))30, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00339
서열 번호 65
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K(γ-Glu-CO(CH2)11(CD2)3CD3)30, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00340
서열 번호 66
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K(γ-Glu-CO(CH2)10-(2,4-(CF3)2-Ph))30, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00341
서열 번호 67
명칭: [사이클로-(I3-m-COPhCH2-hC31), K(γ-Glu-CO(CH2)10-(3,5-(CF3)2-Ph))30, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00342
서열 번호 68
명칭: [사이클로-(I3-CO(CH2)2NHCOCH2- C30), K((OEG)2-γ-Glu-COC16CO2H)11, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00343
서열 번호 69
명칭: [사이클로-(G2-E31), S4, K11, psi-(R35,Y36)]-PYY2-36
구조:
Figure pct00344
서열 번호 70
명칭: [사이클로-(G2-E30), S4, K11, psi-(R35,Y36)]-PYY2-36
구조:
Figure pct00345
서열 번호 71
명칭: [사이클로-(G2-E30), S4, K11, (N-Me-R35)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00346
서열 번호 72
명칭: [사이클로-(G2- E30), S4, K((OEG)2-γ-Glu-COC16CO2H)11, psi-(R35,Y36)]-PYY2-36
구조:
Figure pct00347
서열 번호 73
명칭: [사이클로-(βA2-COCH2-hC31), K(PEG6-AcBr)11, psi-(R35,Y36)]-PYY2-36
구조:
Figure pct00348
서열 번호 74
명칭: [사이클로-(βA2-COCH2-hC31), K(AcBr)11, psi-(R35,Y36)]-PYY2-36
구조:
Figure pct00349
서열 번호 75
명칭: [사이클로-(I3-COCH2-C31), K(PEG12-AcBr)11, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00350
서열 번호 76
명칭: [사이클로-(βA2-COCH2-hC31), K(PEG12-AcBr)11, K(mPEG16)30, psi-(R35,Y36)]-PYY2-36
구조:
Figure pct00351
서열 번호 77
명칭: [사이클로-(βA2-COCH2-hC31), K(AcBr)11, K(mPEG12)20, psi-(R35,Y36)]-PYY2-36
구조:
Figure pct00352
서열 번호 78
명칭: [사이클로-(βA2-COCH2-hC31), K(PEG12-AcBr)11, (N-Me)Q34, psi-(R35,Y36)]-PYY2-36
구조:
Figure pct00353
서열 번호 79
명칭: [사이클로-(βA2-COCH2-hC31), K(PEG12-AcBr)11, N-Me-R35, psi-(R35,36Y)]-PYY2-36
구조:
Figure pct00354
서열 번호 80
명칭: [사이클로-(βA2-COCH2-hC31), R4, K(PEG12-AcBr)11, W30, psi-(R35,Y36)]-PYY2-36
구조:
Figure pct00355
서열 번호 81
명칭: [사이클로-(3I-COCH2CH2CH2NHCOCH2-C31), R4, K(PEG12-AcBr)11, W30, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00356
서열 번호 82
명칭: [사이클로-(K4-OEG-COCH2-C31), K(PEG12-AcBr)11, psi-(R35,Y36)]-PYY4-36
구조:
Figure pct00357
서열 번호 83
명칭: [사이클로-(I3-COCH2CH2트라이아졸릴Nle31), K(PEG12-AcBr)11, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조
Figure pct00358
서열 번호 84
명칭: [사이클로-(I3-m-CO-벤질-hC31), K(PEG8-트라이아졸릴-CH2CH2CO-PEG4-AcBr)11, psi-(R35,Y36)]-PYY3-36
구조:
Figure pct00359
서열 번호 85
명칭: [사이클로-(βA2-COCH2-hC31), K(PEG12-AcBr)23, psi-(R35,Y36)]-PYY2-36
구조:
Figure pct00360
서열 번호 86
명칭: [사이클로-(βA2-COCH2-hC31), K(PEG12-AcBr)22, psi-(R35,Y36)]-PYY2-36
구조:
Figure pct00361
서열 번호 87
명칭: [사이클로-(βA2-COCH2-hC31), K(PEG12-AcBr)7, psi-(R35,Y36)]-PYY2-36
구조:
Figure pct00362
서열 번호 88
명칭: [사이클로-(G2-COCH2-C30), K(PEG12-AcBr)11, psi-(R35,Y36)]-PYY2-36
구조:
Figure pct00363
서열 번호 89
명칭: [사이클로-(G2-COCH2-C30), K(PEG12-AcBr)11, N-Me-R35]-PYY2-36
구조:
Figure pct00364
서열 번호 90
명칭: [사이클로-(βA2-COCH2-C30), K(PEG12-AcBr)11, N-Me-R35]-PYY2-36
구조:
Figure pct00365
서열 번호 91
명칭: [사이클로-(G2-COCH2-hC30), K(PEG12-AcBr)11, N-Me-R35]-PYY2-36
구조:
Figure pct00366
서열 번호 92
명칭: [사이클로-(βA2-COCH2-hC31), K(PEG12-AcBr)11, N-Me-R35]PYY2-36
구조:
Figure pct00367
서열 번호 93
명칭: [사이클로-(G2-COCH2-hC30), K(PEG12-AcBr)11, psi-(R35,Y36)]-PYY2-36
구조:
Figure pct00368
서열 번호 94
명칭: [사이클로-(βA2-COCH2-C30), K(PEG12-AcBr)11, psi-(R35,Y36)]-PYY2-36
구조:
Figure pct00369
서열 번호 95
명칭: [사이클로-(G2-E30), S4, K(AcBr)11, psi-(R35,Y36)]-PYY2-36
구조:
Figure pct00370
서열 번호 96
명칭: [사이클로-(βA2-COCH2-hC31), K(PEG24-AcBr)11, psi-(R35,Y36)]-PYY2-36
구조:
Figure pct00371
서열 번호 97
명칭: [사이클로-(G2-Ac-hC31), K(PEG12-AcBr)11, psi-(R35-Y36)]-PYY2-36
구조:
Figure pct00372
서열 번호 98
명칭: [사이클로-(G2-COCH2-C30), K(AcBr)11, N-Me-R35]-PYY2-36
구조:
Figure pct00373
서열 번호 99
명칭: [사이클로-(βA2-COCH2-C30), K(AcBr)11, N-Me-R35]-PYY2-36
구조:
Figure pct00374
서열 번호 100
명칭: [사이클로-(βA2-COCH2-C30), K(AcBr)11, psi-(R35,Y36)]-PYY2-36
구조:
Figure pct00375
서열 번호 101
명칭: [사이클로-(βA2-COCH2-hC31), psi-(R35,Y36)]-PYY2-36
구조:
Figure pct00376
서열 번호 102
명칭: [사이클로-(βA2-COCH2-hC31), K11, psi-(R35,Y36)]-PYY2-36
구조:
Figure pct00377
서열 번호 103
명칭: [사이클로-(G2-E30), S4, psi-(R35,Y36)]-PYY2-36
구조:
Figure pct00378
서열 번호 104
명칭: [사이클로-(G2-E30), S4,K11, psi-(R35,Y36)]-PYY2-36
구조:
Figure pct00379
서열 번호 105
명칭: [사이클로-(G2-COCH2-C30), N-Me-R35]-PYY2-36
구조:
Figure pct00380
서열 번호 106
명칭: [사이클로-(G2-COCH2-C30), K11, N-Me-R35]-PYY2-36
구조:
Figure pct00381
서열 번호 107
명칭: [사이클로-(βA2-COCH2-C30), N-Me-R35]-PYY2-36
구조:
Figure pct00382
서열 번호 108
명칭: [사이클로-(βA2-COCH2-C30), K11, N-Me-R35]-PYY2-36
구조:
Figure pct00383
서열 번호 109
명칭: [사이클로-(βA2-COCH2-C30), psi-(R35,Y36)]-PYY2-36
구조:
Figure pct00384
서열 번호 110
명칭: [사이클로-(βA2-COCH2-C30), K11, psi-(R35,Y36)]-PYY2-36
구조:
Figure pct00385
실시예 111: 인간 NPY2R cAMP 시험관내 효력 검정(hY2 검정)
시험관내에서 PYY 유사체의 효력을 시험하기 위해 사용된 방법은 인간 NPY2R Gi-단백질 커플링된 수용체의 조절을 통해 아데닐레이트 사이클라제에 의해 생성된 포스콜린-유도 cAMP의 억제를 측정하도록 설계된 세포 기반 검정이었다. 인간 NPY2R 형질감염된 HEK 세포에서의 포스콜린-유도 cAMP 생성은 용량-의존적 방식으로 PYY 유사체 및 대조군에 의한 NPY2R의 활성화를 통해 감소되었으며, LANCE FRET-기반 경쟁적 cAMP 면역검정(PerkinElmer)에서 측정하였다.
세포를 동결보존으로부터 해동시키고, 15 ml의 세포 배지(DMEM/고 글루코스(Cellgro), 10% FBS(Hyclone), 1% Pen/Strep(Life Technologies), 1% L-글루타민(Thermo Scientific), 1% 소듐 피루베이트(Thermo Scientific))에 첨가하였다. 세포를 450 × g로 5분 동안 원심분리하고, 상층액을 흡인하고, 세포를 0.2 × 106개 세포/ml의 밀도로 세포 배지 중에 재현탁시켰다. Biocoat 콜라겐-코팅된 백색 384-웰 플레이트(Becton Dickinson)에 5000개 세포/웰의 최종 밀도로 세포를 분배하고(25 μL/웰), 37℃, 5% CO2에서 16 내지 24시간 동안 인큐베이션하였다. 검정 플레이트 내의 상층액을 디캔팅하였다. PYY 유사체 및 대조군의 희석물을 1x HBSS(Cellgro), 5 mM HEPES(Cellgro), 0.1% BSA(PerkinElmer) 및 0.5 mM 3-아이소부틸-1-메틸잔틴(Sigma) 중에 제조하고, 6 μL/웰의 각각의 샘플을 지정된 웰에 첨가하였다. Lance cAMP 항체(PerkinElmer)를 1x HBSS(Cellgro), 5 mM HEPES(Cellgro), 0.005 mM 포스콜린(Sigma), 0.1% BSA(PerkinElmer) 및 0.5 mM 3-아이소부틸-1-메틸잔틴(Sigma) 중에 1:100으로 희석시키고, 6 μL의 항체 혼합물을 플레이트에 첨가하고, 이어서 이것을 실온에서 25분 동안 인큐베이션하였다. 이어서, 비오틴-cAMP(1:750) 및 유로퓸-W8044(1:2250)를 함유하는 12 μL/웰의 LANCE cAMP 검출 시약 혼합물(PerkinElmer)을 각각의 검정 플레이트에 첨가하고, 이어서 이것을 실온에서 2시간 동안 인큐베이션하였다. PerkinElmer Envision 플레이트 판독기(여기 320 nm, 방출 ― 615 nm 및 665 nm) 상에서 플레이트를 판독하였으며, 이때 상대 형광 단위(RFU)는 (615 nm/665 nm) × 10,000으로 계산하였다. 모든 샘플은 3회 반복하여 측정하였다. Eudean Shaw에 의해 설계된 Crucible 사내 데이터 분석 소프트웨어를 사용하여 데이터를 분석하였다. 각각의 웰 내의 미지의 cAMP 농도를 각각의 플레이트 내에 포함된 기지의 cAMP 농도의 기준 표준물로부터 보간하였다. Janssen R&D의 Non-Clinical Statistics & Computing 부서에 의해 구현된 R 환경(http://cran.us.r-project.org/) 내에서 비선형 가중 최소 제곱 적용을 사용하는 4-P 모델에 대해 적합화된 로그 화합물 농도에 대해 cAMP 농도 값을 도표로 나타냄으로써, EC50, Log(EC50), 사면(HillSlope)(nH), 상부, 및 하부와 같은 파라미터를 도출하였다.
동일한 검정에서 대조군으로서 사용된 PYY3-36와 대비한 본 발명의 NTSC-PYY 유사체의 효력이 하기 표 2에 제시되어 있다:
[표 2]
Figure pct00386
실시예 112: 생체내 효능 연구
A) 마른 C57BL6N 마우스에서의 먹이 섭취량: 급성 투여
수컷 C57BL/6 마우스(10 내지 12주령)를 Taconic Laboratory로부터 입수하였다. 12시간 명/암 주기를 갖는 온도 제어실에 AlphaDri 잠자리를 갖는 케이지마다 마우스를 1 마리씩 수용하였다. 마우스는 물에 대한 자유식(ad libitum) 접근이 허용되었고, 그들의 일반 식이(regular diet) (Lab Diet Cat: 5001)로 유지되었다. 동물들을 실험 시작 전 72시간 이상 BioDAQ 케이지(미국 뉴저지주 뉴 브런즈윅 소재의 Research Diets, Inc.) 내에서 순응시켰다.
일단 BioDAQ 케이지 내에서 순응하면, 마우스를 이전 24시간에 걸친 그들의 개별 먹이 섭취량에 기초하여 8 마리의 동물로 된 코호트(cohort)로 그룹화하였다. 4:00 내지 5:00 pm에, 동물들의 체중을 측정하고, 피하 투여를 통해 비히클(2.7 mM 다이소듐 포스페이트, 61.33 mM 프로필렌 글리콜, 19.5 mM 페놀, pH 8.2) 또는 1 μmol/㎏(500 nmol/mL)의 용량의 시험 화합물로 처리하였다. 화합물 투여 후, 각각의 케이지마다의 먹이량의 변화를 24시간 동안 BioDAQ 자동화 모니터링 시스템에 의해 연속적으로 기록하였다. 부스러기를 호퍼(hopper)로부터 매일 제거하고, 케이지 주위의 영역이 진공이 되도록 하였다. 필요에 따라 먹이를 보충하였다. 화합물 투여 후 24시간의 기간에 걸친 비히클 대비 평균 누적 먹이 섭취량의 백분율을 계산하였으며, 이는 표 3에 기록되어 있다. Prism에서 일원 분산분석(one-way ANOVA)을 터키 사후 검정(Tukey's post-test)과 함께 사용하여 통계학적 분석을 수행하였다. 모든 데이터는 평균으로 제시되어 있다.
B) 식이-유도 비만(DIO) 마우스에서의 체중 손실: 급성 투여
수컷 DIO C57BL/6 마우스(20주령, 고지방 식이 14주)를 Taconic Laboratory로부터 입수하였다. 12시간 명/암 주기를 갖는 온도 제어실에 AlphaDri 잠자리를 갖는 케이지마다 마우스를 1 마리씩 수용하였다. 마우스는 물에 대한 자유식 접근이 허용되었고, 고지방 식이(D12492, Research Diet)로 유지되었다. 동물들을 실험 시작 전 적어도 1주 동안 시설에 순응시켰다.
투여 전날, 마우스를 개별 체중에 기초하여 8 마리의 동물로 된 코호트로 그룹화하였다. 다음날 3:00 내지 4:00 pm에, 동물들의 체중을 측정하고, 피하 투여를 통해 비히클(2.7 mM 다이소듐 포스페이트, 61.33 mM 프로필렌 글리콜, 19.5 mM 페놀, pH 8.2) 또는 100 nmol/㎏(50 nmol/mL)의 용량의 시험 화합물로 처리하였다. 투여 후 24시간째에 체중을 측정하고 체중 손실의 백분율을 계산하였으며, 이는 표 3에 기록되어 있다. Prism에서 일원 분산분석을 터키 사후 검정과 함께 사용하여 통계학적 분석을 수행하였다. 모든 데이터는 평균으로 제시되어 있다.
C) 식이-유도 비만 마우스에서의 체중 손실: 만성 투여
수컷 DIO C57BL/6 마우스(20주령, 고지방 식이 14주)를 Taconic Laboratory로부터 입수하였다. 12시간 명/암 주기를 갖는 온도 제어실에 AlphaDri 잠자리를 갖는 케이지마다 마우스를 1 마리씩 수용하였다. 마우스는 물에 대한 자유식 접근이 허용되었고, 고지방 식이(D12492, Research Diet)로 유지되었다. 동물들을 실험 시작 전 적어도 1주 동안 시설에 순응시켰다.
투여 전날, 마우스를 개별 체중에 기초하여 그룹화하였다. 다음 7일에 대해 매일 3:00 내지 4:00 pm에, 동물들의 체중을 측정하고, 이어서 피하 투여를 통해 비히클(2.7 mM 다이소듐 포스페이트, 61.33 mM 프로필렌 글리콜, 19.5 mM 페놀, pH 8.2) 또는 100 nmol/㎏(50 nmol/mL)의 용량의 시험 화합물로 처리하였다. 7일 후, 체중을 측정하고 체중 손실의 백분율을 계산하였으며, 이는 표 3에 기록되어 있다. Prism에서 일원 분산분석을 터키 사후 검정과 함께 사용하여 통계학적 분석을 수행하였다. 모든 데이터는 평균으로 제시되어 있다.
[표 3]
Figure pct00387
상술한 명세서는 예시를 목적으로 제공된 실시예와 함께, 본 발명의 원리를 교시하지만, 본 발명의 실시는 하기 청구범위 및 그 등가물의 범주 내에 속하는 모든 통상의 변형, 개조 및/또는 변경을 포함하는 것으로 이해될 것이다.
본 명세서에 인용된 모든 문헌은 참고로 포함된다.
SEQUENCE LISTING <110> Janssen Pharmaceutica NV <120> Cyclic Peptide Tyrosine Tyrosine Compounds as Modulators of Neuropeptide Y Receptors <130> PRD3411 <150> US62/413,613 <151> 2016-10-27 <150> US62/413,586 <151> 2016-10-27 <160> 111 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ala <222> (1)..(1) <223> Ala with chemical modification as described in the specification <220> <221> Lys <222> (10)..(10) <223> Lys with chemical modification as described in the specification <220> <221> Cys <222> (30)..(30) <223> Cys, wherein Cys is a homocysteine with chemical modification as described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with chemical modification as described in the specification <400> 1 Ala Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 2 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with chemical modification as described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cyse, wherein Cys is homocysteine with chemical modification as described in the specification <400> 2 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 3 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Leu <222> (29)..(29) <223> Leu, wherien Leu is a norleucine with the chemical modification as described in the specification <400> 3 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Leu Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 4 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Lys <222> (9)..(9) <223> Lys with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein cys is a homocysteine with the chemical modification as described in the specification <400> 4 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 5 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Lys <222> (9)..(9) <223> Lys with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein cys is homocysteine with the chemical modification as described in the specification <400> 5 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 6 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Lys <222> (9)..(9) <223> Lys with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Leu <222> (29)..(29) <223> Leu, wherein the leu is norleucine with the chemical modification as described in the specification <400> 6 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Leu Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 7 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Lys <222> (7)..(7) <223> Lys with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein cys is homocysteine with the chemical modification as described in the specification <400> 7 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Lys Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 8 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein cys is homocysteine with the chemical modification as described in the specification <400> 8 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 9 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein cys is a homocysteine with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification as described in the specification <400> 9 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 10 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein cys is homocysteine with the chemical modification as described in the specification <400> 10 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Lys Cys Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 11 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein cys is homocysteine with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification as described in the specification <400> 11 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Lys Cys Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 12 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is homocysteine with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification as described in the specification <400> 12 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 13 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is homocysteine with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification as described in the specification <400> 13 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 14 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is homocysteine with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification as described in the specification <400> 14 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 15 <211> 33 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Lys <222> (1)..(1) <223> Lys with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Lys <222> (27)..(27) <223> Lys with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Cys <222> (28)..(28) <223> Cys, wherein cys is homocysteine with the chemical modification as described in the specification <400> 15 Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn Arg 1 5 10 15 Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln Arg 20 25 30 Tyr <210> 16 <211> 33 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Lys <222> (1)..(1) <223> Lys with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Lys <222> (27)..(27) <223> Lys with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Cys <222> (28)..(28) <223> Cys, wherein the cys is homocysteine with the chemical modification as described in the specification <400> 16 Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn Arg 1 5 10 15 Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln Arg 20 25 30 Tyr <210> 17 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification as described in the specification <400> 17 Ile Ala Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 18 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein cys is homocysteine with the chemical modification as described in the specification <400> 18 Ile Glu Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 19 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification as described in the specification <400> 19 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 20 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification as described in the specification <400> 20 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 21 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein cys is a homocysteine with the chemical modification as described in the specification <400> 21 Ile Ala Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg Ala Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 22 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification as described in the specification <400> 22 Ile Glu Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg Ala Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 23 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein cys is a homocysteine with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification as described in the specification <400> 23 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 24 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein cys is homocysteine with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification as described in the specification <400> 24 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 25 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein cys is a homocysteine with the chemical modification as described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification as described in the specification <400> 25 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 26 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the application <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification described in the application <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the application <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the application <400> 26 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 27 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 27 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 28 <211> 33 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Lys <222> (1)..(1) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (27)..(27) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (28)..(28) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (32)..(32) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 28 Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn Arg 1 5 10 15 Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln Arg 20 25 30 Tyr <210> 29 <211> 33 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Lys <222> (1)..(1) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (27)..(27) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (28)..(28) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (32)..(32) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 29 Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn Arg 1 5 10 15 Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln Arg 20 25 30 Tyr <210> 30 <211> 33 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Lys <222> (1)..(1) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (27)..(27) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (28)..(28) <223> Cys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (32)..(32) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 30 Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn Arg 1 5 10 15 Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln Arg 20 25 30 Tyr <210> 31 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 31 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 32 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 32 Ile Ala Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg Ala Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 33 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Gln <222> (32)..(32) <223> Gln with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 33 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 34 <211> 33 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Lys <222> (1)..(1) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (27)..(27) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (28)..(28) <223> Cys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (32)..(32) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 34 Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn Arg 1 5 10 15 Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln Arg 20 25 30 Tyr <210> 35 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 35 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 36 <211> 33 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Lys <222> (1)..(1) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (27)..(27) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (28)..(28) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (32)..(32) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 36 Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn Arg 1 5 10 15 Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln Arg 20 25 30 Tyr <210> 37 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 37 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 38 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 38 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 39 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 39 Ile Ser Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 40 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Leu <222> (29)..(29) <223> Leu, wherein the leu is a norleucine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 40 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Leu Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 41 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Leu <222> (29)..(29) <223> Leu, wherein the leu is a norleucine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 41 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Leu Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 42 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Leu <222> (29)..(29) <223> Leu, wherein the leu is a norleucine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 42 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Leu Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 43 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 43 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 44 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (9)..(9) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 44 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 45 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (9)..(9) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 45 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 46 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 46 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 47 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (5)..(5) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 47 Ile Lys Pro Glu Lys Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 48 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (20)..(20) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 48 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Lys Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 49 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 49 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 50 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (21)..(21) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 50 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Lys Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 51 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 51 Ile Ser Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 52 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (9)..(9) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <400> 52 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 53 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (9)..(9) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 53 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 54 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (9)..(9) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 54 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 55 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (21)..(21) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 55 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Lys Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 56 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <400> 56 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 57 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <400> 57 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 58 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 58 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 59 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (20)..(20) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 59 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Lys Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 60 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (5)..(5) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 60 Ile Lys Pro Glu Lys Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 61 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 61 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 62 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 62 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 63 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 63 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 64 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 64 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 65 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 65 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 66 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 66 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 67 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (28)..(28) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 67 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 68 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (9)..(9) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (28)..(28) <223> Cys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 68 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Cys Val Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 69 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Gly <222> (1)..(1) <223> Gly with the chemical modification described in the specification <220> <221> Glu <222> (30)..(30) <223> Glu with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 69 Gly Ile Ser Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Glu Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 70 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Gly <222> (1)..(1) <223> Gly with the chemical modification described in the specification <220> <221> Glu <222> (29)..(29) <223> Glu with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 70 Gly Ile Ser Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Glu Val Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 71 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Gly <222> (1)..(1) <223> Gly with the chemical modification described in the specification <220> <221> Glu <222> (29)..(29) <223> Glu with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 71 Gly Ile Ser Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Glu Val Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 72 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Gly <222> (1)..(1) <223> Gly with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (10)..(10) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Glu <222> (29)..(29) <223> Glu with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 72 Gly Ile Ser Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Glu Val Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 73 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ala <222> (1)..(1) <223> Ala with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (10)..(10) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (30)..(30) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 73 Ala Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 74 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ala <222> (1)..(1) <223> Ala with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (10)..(10) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (30)..(30) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 74 Ala Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 75 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (9)..(9) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 75 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 76 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ala <222> (1)..(1) <223> Ala with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (10)..(10) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (29)..(29) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (30)..(30) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 76 Ala Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Lys Cys Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 77 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ala <222> (1)..(1) <223> Ala with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (10)..(10) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (19)..(19) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (30)..(30) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 77 Ala Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Lys Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 78 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ala <222> (1)..(1) <223> Ala with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (10)..(10) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (30)..(30) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Gln <222> (33)..(33) <223> Gln with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 78 Ala Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 79 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ala <222> (1)..(1) <223> Ala with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (10)..(10) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (30)..(30) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 79 Ala Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 80 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ala <222> (1)..(1) <223> Ala with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (10)..(10) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (30)..(30) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 80 Ala Ile Arg Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Trp Cys Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 81 <211> 34 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (9)..(9) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 81 Ile Arg Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Trp Cys Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr <210> 82 <211> 33 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Lys <222> (1)..(1) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (8)..(8) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (28)..(28) <223> Cys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (32)..(32) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 82 Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn Arg 1 5 10 15 Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg Gln Arg 20 25 30 Tyr <210> 83 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (9)..(9) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Leu <222> (29)..(29) <223> Leu, wherein the leu is a norleucine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 83 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Leu Val Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 84 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ile <222> (1)..(1) <223> Ile with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (9)..(9) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (33)..(33) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 84 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Val Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 85 <211> 36 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ala <222> (1)..(1) <223> Ala with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (22)..(22) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (30)..(30) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 85 Ala Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Lys Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Val Thr 20 25 30 Arg Gln Arg Tyr 35 <210> 86 <211> 36 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ala <222> (1)..(1) <223> Ala with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (21)..(21) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (30)..(30) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 86 Ala Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Lys Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Val Thr 20 25 30 Arg Gln Arg Tyr 35 <210> 87 <211> 36 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ala <222> (1)..(1) <223> Ala with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (6)..(6) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (30)..(30) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 87 Ala Ile Lys Pro Glu Lys Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Val Thr 20 25 30 Arg Gln Arg Tyr 35 <210> 88 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Gly <222> (1)..(1) <223> Gly with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (10)..(10) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 88 Gly Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Cys Val Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 89 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Gly <222> (1)..(1) <223> Gly with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (10)..(10) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 89 Gly Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Cys Val Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 90 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ala <222> (1)..(1) <223> Ala with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (10)..(10) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 90 Ala Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Cys Val Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 91 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Gly <222> (1)..(1) <223> Gly with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (10)..(10) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 91 Gly Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Cys Val Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 92 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ala <222> (1)..(1) <223> Ala with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (10)..(10) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (30)..(30) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 92 Ala Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 93 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Gly <222> (1)..(1) <223> Gly with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (10)..(10) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 93 Gly Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Cys Val Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 94 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ala <222> (1)..(1) <223> Ala with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (10)..(10) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 94 Ala Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Cys Val Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 95 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Gly <222> (1)..(1) <223> Gly with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (10)..(10) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Glu <222> (29)..(29) <223> Glu with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 95 Gly Ile Ser Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Glu Val Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 96 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ala <222> (1)..(1) <223> Ala with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (10)..(10) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (30)..(30) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 96 Ala Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 97 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Gly <222> (1)..(1) <223> Gly with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (10)..(10) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (30)..(30) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 97 Gly Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 98 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Gly <222> (1)..(1) <223> Gly with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (10)..(10) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 98 Gly Ile Ser Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Cys Val Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 99 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ala <222> (1)..(1) <223> Ala with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (10)..(10) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 99 Ala Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Cys Val Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 100 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ala <222> (1)..(1) <223> Ala with the chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (10)..(10) <223> Lys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys with the chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with the chemical modification described in the specification <400> 100 Ala Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Cys Val Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 101 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ala <222> (1)..(1) <223> Ala with chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (30)..(30) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with chemical modification described in the specification <400> 101 Ala Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 102 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ala <222> (1)..(1) <223> Ala with chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (10)..(10) <223> Lys with chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (30)..(30) <223> Cys, wherein the cys is a homocysteine with chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with chemical modification described in the specification <400> 102 Ala Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Cys Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 103 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Gly <222> (1)..(1) <223> Gly with chemical modification described in the specification <220> <221> Glu <222> (29)..(29) <223> Glu with chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with chemical modification described in the specification <400> 103 Gly Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Glu Val Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 104 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Gly <222> (1)..(1) <223> Gly with chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (10)..(10) <223> Lys with chemical modification described in the specification <220> <221> Glu <222> (29)..(29) <223> Glu with chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with chemical modification described in the specification <400> 104 Gly Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Glu Val Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 105 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Gly <222> (1)..(1) <223> Gly with chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys with chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with chemical modification described in the specification <400> 105 Gly Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Cys Val Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 106 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Gly <222> (1)..(1) <223> Gly with chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (10)..(10) <223> Lys with chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys with chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with chemical modification described in the specification <400> 106 Gly Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Cys Val Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 107 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ala <222> (1)..(1) <223> Ala with chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys with chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with chemical modification described in the specification <400> 107 Ala Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Cys Val Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 108 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ala <222> (1)..(1) <223> Ala with chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (10)..(10) <223> Lys with chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys with chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with chemical modification described in the specification <400> 108 Ala Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Cys Val Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 109 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ala <222> (1)..(1) <223> Ala with chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys with chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with chemical modification described in the specification <400> 109 Ala Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Cys Val Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 110 <211> 35 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Cyclic PYY Peptide Compound <220> <221> Ala <222> (1)..(1) <223> Ala with chemical modification described in the specification <220> <221> Lys <222> (10)..(10) <223> Lys with chemical modification described in the specification <220> <221> Cys <222> (29)..(29) <223> Cys with chemical modification described in the specification <220> <221> Arg <222> (34)..(34) <223> Arg with chemical modification described in the specification <400> 110 Ala Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Lys Ala Ser Pro Glu Glu Leu 1 5 10 15 Asn Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Cys Val Thr Arg 20 25 30 Gln Arg Tyr 35 <210> 111 <211> 34 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 111 Ile Lys Pro Glu Ala Pro Gly Glu Asp Ala Ser Pro Glu Glu Leu Asn 1 5 10 15 Arg Tyr Tyr Ala Ser Leu Arg His Tyr Leu Asn Leu Val Thr Arg Gln 20 25 30 Arg Tyr

Claims (15)

  1. 화학식 I의 화합물:
    [화학식 I]
    Figure pct00388

    (상기 식에서,
    p는 0 또는 1이고;
    m은 0, 1, 2, 3, 4, 또는 5이고;
    n은 1, 2, 3, 또는 4이고;
    q는 0 또는 1이되; 단, Z30이 부재하는 경우에만 q가 1이고;
    가교(BRIDGE)는 -Ph-CH2-S-, -트라이아졸릴-, -NHC(O)CH2S-, -SCH2C(O)NH-, -(OCH2CH2)2NHC(O)CH2S, -NHC(O)-, 또는 -CH2S-이고;
    Z4는 K, A, E, S, 또는 R이고;
    Z7은 A 또는 K이고;
    Z9는 G 또는 K이고;
    Z11은 D 또는 K이고;
    Z22는 A 또는 K이고;
    Z23은 S 또는 K이고;
    Z26은 A 또는 H이고;
    Z30은 L, W, 부재, 또는 K이되;
    단, q가 1인 경우에만 Z30이 부재하고;
    Z34는
    Figure pct00389
    또는
    Figure pct00390
    이고;
    Z35는
    Figure pct00391
    ,
    Figure pct00392
    ,
    Figure pct00393
    , 또는
    Figure pct00394
    임);
    또는 이의 유도체(상기 유도체는 아미드화, 글리코실화, 카르바밀화, 황산화, 인산화, 환화, 지질화, 또는 페길화(pegylation)를 포함하는 하나 이상의 공정에 의해 개질된 화학식 I의 화합물임); 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  2. 제1항에 있어서, 화학식 I의 화합물 또는 아미드화, 지질화, 또는 페길화를 포함하는 하나 이상의 공정에 의해 개질된 화학식 I의 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  3. 제2항에 있어서,
    가교는 -Ph-CH2-S-, -트라이아졸릴-, -NHC(O)CH2S-, -SCH2C(O)NH-,
    -(OCH2CH2)2NHC(O)CH2S, -NHC(O)-, 또는 -CH2S-이고;
    Z7은 A 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
    Figure pct00395
    ,
    Figure pct00396
    ,
    Figure pct00397
    ,
    Figure pct00398
    ,
    Figure pct00399
    (여기서, i는 0 내지 24의 정수이고, X는 Br, I 또는 Cl임),
    -C(O)CH2Br, -C(O)CH2I, 또는 -C(O)CH2Cl로 선택적으로 치환되고;
    Z9는 G 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
    Figure pct00400

    (여기서, t는 0, 1, 또는 2이고;
    u는 0 또는 1이고;
    v는 14, 16, 또는 18임),
    Figure pct00401
    ,
    Figure pct00402
    ,
    Figure pct00403
    ,
    Figure pct00404
    ,
    Figure pct00405
    ,
    Figure pct00406
    ,
    Figure pct00407
    ,
    Figure pct00408
    ,
    Figure pct00409
    ,
    Figure pct00410
    (여기서, i는 0 내지 24의 정수이고, X는 Br, I 또는 Cl임),
    -C(O)CH2Br, -C(O)CH2I, 또는 -C(O)CH2Cl로 선택적으로 치환되고;
    Z11은 D 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
    Figure pct00411

    (여기서, w는 0, 1, 2, 또는 4이고;
    x는 0 또는 1이고;
    y는 14, 16, 또는 18임),
    Figure pct00412
    ,
    Figure pct00413
    ,
    Figure pct00414
    (여기서, i는 0 내지 24의 정수이고, X는 Br, I 또는 Cl임),
    Figure pct00415
    ,
    Figure pct00416
    ,
    Figure pct00417
    ,
    Figure pct00418
    ,
    Figure pct00419
    ,
    Figure pct00420
    ,
    Figure pct00421
    ,
    -C(O)CH2Br, -C(O)CH2I, 또는 -C(O)CH2Cl로 선택적으로 치환되고;
    Z22는 A 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
    Figure pct00422
    ,
    Figure pct00423
    ,
    Figure pct00424
    ,
    Figure pct00425

    Figure pct00426
    (여기서, i는 0 내지 24의 정수이고, X는 Br, I 또는 Cl임),
    -C(O)CH2Br, -C(O)CH2I, 또는 -C(O)CH2Cl로 선택적으로 치환되고;
    Z23은 S 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
    Figure pct00427
    ,
    Figure pct00428
    ,
    Figure pct00429
    ,
    Figure pct00430
    ,
    Figure pct00431
    (여기서, i는 0 내지 24의 정수이고, X는 Br, I 또는 Cl임),
    -C(O)CH2Br, -C(O)CH2I, 또는 -C(O)CH2Cl로 선택적으로 치환되고;
    Z30은 L, W, 부재, 또는 K 이되; 단, q가 1인 경우에만 Z30이 부재하며, 상기 K의 아미노 측쇄는
    Figure pct00432
    ,
    Figure pct00433
    ,
    Figure pct00434
    ,
    Figure pct00435
    ,
    Figure pct00436
    ,
    Figure pct00437
    ,
    Figure pct00438
    ,
    Figure pct00439

    (여기서, r은 0, 1, 또는 2이고;
    s는 0 또는 1이고;
    q는 14, 16, 또는 18임), 또는
    Figure pct00440
    ;
    Figure pct00441
    ;
    Figure pct00442
    ;
    Figure pct00443
    ;
    Figure pct00444
    ;
    Figure pct00445
    ;
    Figure pct00446
    ;
    Figure pct00447
    ;
    Figure pct00448
    ;
    Figure pct00449
    ;
    Figure pct00450
    ;
    Figure pct00451
    ;
    Figure pct00452
    ;
    Figure pct00453
    로 선택적으로 치환되는 화합물,
    또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  4. 제3항에 있어서,
    m은 0, 1, 2, 3, 또는 5이고;
    n은 1, 2, 또는 4이고;
    Z7은 A 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
    Figure pct00454
    ,
    Figure pct00455
    , 또는
    Figure pct00456
    로 치환되고;
    Z9는 G 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
    Figure pct00457

    (여기서, t는 0이고;
    u는 1이고;
    v는 14임)로 치환되고;
    Z11은 D 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
    Figure pct00458

    (여기서, w는 0 또는 4이고;
    x는 1이고;
    y는 14임),
    Figure pct00459
    ,
    Figure pct00460
    ,
    Figure pct00461
    ,
    Figure pct00462
    ,
    Figure pct00463
    , -C(O)CH2Br,
    Figure pct00464
    ,
    Figure pct00465
    , 또는
    Figure pct00466
    로 선택적으로 치환되고;
    Z22는 A 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
    Figure pct00467
    ,
    Figure pct00468
    , 또는
    Figure pct00469
    로 치환되고;
    Z23은 S 또는 K이며, 상기 K의 아미노 측쇄는
    Figure pct00470
    ,
    Figure pct00471
    , 또는
    Figure pct00472
    로 치환되고;
    Z30은 L, W, 부재, 또는 K 이되; 단, q가 1인 경우에만 Z30이 부재하며, 상기 K의 아미노 측쇄는
    Figure pct00473
    ,
    Figure pct00474
    ,
    Figure pct00475
    ,
    Figure pct00476
    ,
    Figure pct00477

    (여기서, r은 0 또는 2이고;
    s는 1이고;
    q는 14, 16, 또는 18임), 또는
    Figure pct00478
    ;
    Figure pct00479
    ;
    Figure pct00480
    ;
    Figure pct00481
    ;
    Figure pct00482
    ;
    Figure pct00483
    ;
    Figure pct00484
    ;
    Figure pct00485
    ;
    Figure pct00486
    ;
    Figure pct00487
    ;
    Figure pct00488
    ;
    Figure pct00489
    ; 또는
    Figure pct00490
    로 치환되는 화합물,
    또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  5. 제1항에 있어서, 서열 번호 1 내지 서열 번호 110으로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물, 또는 이의 약제학적으로 허용되는 염.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 화합물 및 이것에 접합된 반감기 연장 모이어티(half-life extension moiety)를 포함하는, 접합체.
  7. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 화합물 또는 제6항의 접합체 및 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는, 약제학적 조성물.
  8. 비만을 예방, 치료 또는 개선하는 방법으로서,
    이를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 화합물, 제6항의 접합체, 또는 이의 형태, 조성물 또는 약제를 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  9. 비만, 제2형 당뇨병, 대사 증후군, 인슐린 저항성 및 이상지질혈증으로 이루어진 군으로부터 선택되는 증후군, 장애 또는 질병을 예방, 치료 또는 개선하는 방법으로서,
    이를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 화합물, 제6항의 접합체, 또는 이의 형태, 조성물 또는 약제를 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  10. 제9항에 있어서, 상기 증후군, 장애 또는 질병은 제2형 당뇨병인, 방법.
  11. 음식 섭취량을 감소시키는 방법으로서,
    이를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 화합물, 제6항의 접합체, 또는 이의 형태, 조성물 또는 약제를 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  12. Y2 수용체 활성을 조절하는 방법으로서,
    이를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 화합물, 제6항의 접합체, 또는 이의 형태, 조성물 또는 약제를 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  13. 비만, 제2형 당뇨병, 대사 증후군, 인슐린 저항성 및 이상지질혈증으로 이루어진 군으로부터 선택되는 질병, 장애 또는 증후군을 치료하는 방법으로서,
    이를 필요로 하는 대상체에게 유효량의 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 화합물, 제6항의 접합체, 또는 이의 형태, 조성물 또는 약제를 적어도 하나의 항당뇨병제와 병용하여 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  14. 제13항에 있어서, 상기 항당뇨병제는 글루카곤-유사-펩티드-1 수용체 조절제인, 방법.
  15. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 화합물 또는 제6항의 접합체를 약제학적으로 허용되는 담체와 배합하는 단계를 포함하는, 약제학적 조성물의 제조 방법.
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Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2015095604A2 (en) 2013-12-18 2015-06-25 President And Fellows Of Harvard College Methods and assays relating to circulating tumor cells
JOP20190097A1 (ar) * 2016-10-27 2019-04-28 Janssen Pharmaceutica Nv الجلوبولينات المناعية واستخداماتها
US10875902B2 (en) 2018-04-25 2020-12-29 Janssen Pharmaceutica Nv Glucagon like peptide 1 (GLP-1) fusion peptide coupled cyclic peptide tyrosine tyrosine conjugates and uses thereof
TWI847981B (zh) * 2018-04-25 2024-07-11 比利時商健生藥品公司 類升糖素肽1 (glp-1)融合肽偶合環狀酪酪肽接合物及其用途
CN113748125A (zh) * 2019-03-19 2021-12-03 恩泽生物科学有限公司 胰高血糖素样肽-1(glp-1)受体激动剂及其类似物的制备方法
WO2020262590A1 (ja) * 2019-06-28 2020-12-30 味の素株式会社 環状ペプチドの製造方法
CA3156452A1 (en) 2019-11-11 2021-05-20 Boehringer Ingelheim International Gmbh Npy2 receptor agonists
CN111494606B (zh) * 2020-04-24 2021-12-14 广州医科大学 神经肽y的新应用
CN116171282A (zh) 2020-08-07 2023-05-26 勃林格殷格翰国际有限公司 可溶npy2受体激动剂
CN115073556A (zh) * 2021-03-12 2022-09-20 上海天慈生命科学发展有限公司 一类阿片/神经肽ff受体多靶点环肽分子及其制备和应用
US20230015478A1 (en) * 2021-06-14 2023-01-19 Resolute Bio, Inc. Glp-1 receptor agonists having improved pharmacological and drug delivery properties
WO2023097363A1 (en) * 2021-11-30 2023-06-08 Garvan Institute Of Medical Research Improved binding proteins and uses thereof
CN115028551B (zh) * 2022-07-15 2024-01-05 成都普康生物科技有限公司 一种叠氮-九甘醇-丙酸的制备方法
CN116098987A (zh) * 2023-02-09 2023-05-12 华东医院 甘丙肽在制备治疗非酒精性脂肪性肝病药物中的用途

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005089789A2 (en) * 2004-03-17 2005-09-29 7Tm Pharma A/S Y2 selective receptor agonists for therapeutic interventions

Family Cites Families (39)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2434149A1 (fr) 1978-06-22 1980-03-21 Parcor Nouveaux derives de la l-cysteine
US5393669A (en) 1993-02-05 1995-02-28 Martek Biosciences Corp. Compositions and methods for protein structural determinations
US7166575B2 (en) 2002-12-17 2007-01-23 Nastech Pharmaceutical Company Inc. Compositions and methods for enhanced mucosal delivery of peptide YY and methods for treating and preventing obesity
WO2005077094A2 (en) 2004-02-11 2005-08-25 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Pancreatic polypeptide family motifs and polypeptides comprising the same
US20070244041A1 (en) * 2004-02-23 2007-10-18 Reoscience A/S Peptide Yy Analogues
JP2008511337A (ja) 2004-09-02 2008-04-17 ジェネンテック・インコーポレーテッド ヘテロ多量体分子
ES2592271T3 (es) 2005-03-31 2016-11-29 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Métodos de producción de polipéptidos mediante la regulación de la asociación de los polipéptidos
DE102005028778A1 (de) 2005-06-22 2006-12-28 SUNJÜT Deutschland GmbH Mehrlagige Folie mit einer Barriere- und einer antistatischen Lage
EP2471810A1 (en) 2006-02-22 2012-07-04 Merck Sharp & Dohme Corporation Oxyntomodulin derivatives
CA2646598C (en) * 2006-03-21 2014-08-19 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Peptide-peptidase inhibitor conjugates and methods of using same
EP2035456A1 (en) 2006-06-22 2009-03-18 Novo Nordisk A/S Production of bispecific antibodies
CA2665808A1 (en) 2006-10-05 2008-05-22 Centocor Ortho Biotech Inc. Ccr2 antagonists for treatment of fibrosis
JP2008169195A (ja) * 2007-01-05 2008-07-24 Hanmi Pharmaceutical Co Ltd キャリア物質を用いたインスリン分泌ペプチド薬物結合体
WO2009033743A1 (en) 2007-09-13 2009-03-19 University Of Zurich Prorektorat Forschung Monoclonal amyloid beta (abeta)-specific antibody and uses thereof
WO2009085462A1 (en) 2007-12-19 2009-07-09 Centocor, Inc. Design and generation of human de novo pix phage display libraries via fusion to pix or pvii, vectors, antibodies and methods
CN102272151B (zh) 2008-11-04 2014-08-20 詹森药业有限公司 Crhr2肽激动剂及其用途
JP2012507487A (ja) * 2008-11-05 2012-03-29 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー 神経ペプチド２受容体（ｙ−２ｒ）アゴニスト及びその使用
AU2010245011B2 (en) 2009-04-27 2015-09-03 Oncomed Pharmaceuticals, Inc. Method for making heteromultimeric molecules
US9156901B2 (en) 2009-07-13 2015-10-13 Ditte Riber Acylated glucagon analogues
JP2013505221A (ja) 2009-09-18 2013-02-14 ノヴォ ノルディスク アー／エス 長時間作用性ｙ２受容体アゴニスト
JP2013506628A (ja) 2009-09-30 2013-02-28 グラクソ グループ リミテッド 延長された半減期を有する薬物融合物及びコンジュゲート
NZ701825A (en) 2010-04-20 2016-06-24 Genmab As Heterodimeric antibody fc-containing proteins and methods for production thereof
ES2757857T3 (es) 2010-09-27 2020-04-30 Janssen Biotech Inc Anticuerpos de unión a colágeno II humano
US8906649B2 (en) * 2010-09-27 2014-12-09 Janssen Biotech, Inc. Antibodies binding human collagen II
JP6167040B2 (ja) 2010-11-05 2017-07-19 ザイムワークス，インコーポレイテッド Ｆｃドメイン中に突然変異を有する、安定したヘテロ二量体抗体の設計
BR112013018877A2 (pt) * 2011-01-28 2016-10-04 Sanofi Sa composições farmacêuticas que compreendem anticorpos humanos para pcsk9
CA3080189C (en) 2011-06-17 2023-01-17 Hanmi Science Co., Ltd. A conjugate comprising oxyntomodulin and an immunoglobulin fragment, and use thereof
WO2013063702A1 (en) 2011-11-04 2013-05-10 Zymeworks Inc. Stable heterodimeric antibody design with mutations in the fc domain
JP6148729B2 (ja) * 2012-07-04 2017-06-14 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 共有結合している抗原−抗体結合体
TWI816739B (zh) 2012-11-06 2023-10-01 南韓商韓美藥品股份有限公司 包含調酸素及免疫球蛋白片段之蛋白質接合物的液態製劑
WO2014102299A2 (en) 2012-12-27 2014-07-03 Sanofi Anti-lamp1 antibodies and antibody drug conjugates, and uses thereof
EP2943512A4 (en) * 2013-01-11 2016-06-01 California Inst Biomedical Res BOVINE FUSION ANTIBODY
HK1214829A1 (zh) 2013-05-02 2016-08-05 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited 治疗肽
TR201903526T4 (tr) 2014-04-11 2019-03-21 Medimmune Llc Sistein-mühendislik uygulanmış antikorlar içeren konjuge edilmiş bileşikler.
AR100978A1 (es) 2014-06-26 2016-11-16 Hoffmann La Roche LANZADERAS CEREBRALES DE ANTICUERPO HUMANIZADO ANTI-Tau(pS422) Y USOS DE LAS MISMAS
EA035581B1 (ru) 2014-07-30 2020-07-10 НДжМ БИОФАРМАСЬЮТИКАЛЗ, ИНК. Композиции и способы применения для лечения метаболических расстройств
EA201891084A1 (ru) 2015-11-02 2019-10-31 Антитела к il1rap, биспецифические антигенсвязывающие молекулы, которые связываются с il1rap и cd3, и их применение
JOP20190097A1 (ar) * 2016-10-27 2019-04-28 Janssen Pharmaceutica Nv الجلوبولينات المناعية واستخداماتها
TWI847981B (zh) * 2018-04-25 2024-07-11 比利時商健生藥品公司 類升糖素肽1 (glp-1)融合肽偶合環狀酪酪肽接合物及其用途

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005089789A2 (en) * 2004-03-17 2005-09-29 7Tm Pharma A/S Y2 selective receptor agonists for therapeutic interventions

Also Published As

Publication number Publication date
MX2024001845A (es) 2024-03-06
EP3988123A1 (en) 2022-04-27
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KR102653376B1 (ko) 2024-04-02
SG11201902879SA (en) 2019-05-30
CO2019003938A2 (es) 2019-04-30
EP3532486B8 (en) 2022-01-12
US11767354B2 (en) 2023-09-26
US20180117170A1 (en) 2018-05-03
SA519401647B1 (ar) 2022-01-26
JP2022137031A (ja) 2022-09-21
US20190345214A1 (en) 2019-11-14
CO2019004203A2 (es) 2019-05-10
CL2019001129A1 (es) 2019-07-05
JP7231539B2 (ja) 2023-03-01
EP3534928A1 (en) 2019-09-11
US11401315B2 (en) 2022-08-02
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TW201829455A (zh) 2018-08-16
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JP7090077B2 (ja) 2022-06-23
MD3532486T2 (ro) 2022-01-31
IL266204A (en) 2019-06-30
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AU2021269420A1 (en) 2021-12-16
US10968265B2 (en) 2021-04-06
MA46672A (fr) 2019-09-04
IL266202B2 (en) 2023-09-01
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ES3025907T3 (en) 2025-06-10
JOP20190096A1 (ar) 2019-04-28
CY1124732T1 (el) 2022-07-22

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