JP2975332B2 - 生物分解性眼移植物 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】眼の病気の治療のために、生
物分解性のマイクロカプセル化された移植体を提供す
る。

【０００２】

【従来の技術】眼は基本的には生涯を通じて最も重要な
器官の一つである。老齢化、病気および視覚に悪影響を
及ぼす可能性のある他の要因のために、眼の健康を維持
することは極めて重要になる。盲目の主要な原因は眼の
病気の治療において薬物または治療薬を眼に導入するこ
とが出来ないことである。正確な機構または理由は知ら
れていないが、（血液脳関門に類似の）血液眼関門が重
要な要因となり得ることは確かである。他方、薬物を眼
に注射するときには、薬物は速やかに洗い出されまたは
眼の内部から一般循環へと放出される。治療的観点から
は、これによって治療が極めて困難であり、薬物をまっ
たく投与しないに等しいこともある。薬物を眼に投与す
ることが本来的に困難であるため、眼の病気の有効な医
療治療はまったく不十分である。

【０００３】眼の病気の多くのその原因が現在では確認
されており、治療のための適当な適用法を用いることが
できればその多くは治療を行うことができるので、前記
の問題の解決が一層必要とされている。それ故、現在の
治療方式の限界を取り除く治療法を開発することに大き
な関心が寄せられている。一方または両方の眼房又はガ
ラス体に直接に薬物を導入することはかなりの抵抗があ
った。薬物の分布、放出の速度、眼の成分への結合、細
胞による濃厚化、速やかな減少および／または不活性化
等に関して多くの不確実な点があるために、直接導入の
効力を得ようとする勇気が起こらないのである。

【０００４】ヘラー(Heller)（１）は、「制御された薬
物輸送における生物分解性ポリマー」、治療薬担体系に
おけるＣＲＣ評論、１巻、ＣＲＣプレス・ボカ・ラート
ン，フロリダ，１９８７年、３９〜９０頁に、制御され
た薬物の輸送のためのカプセル化を記載している。ヘラ
ー(Heller)（２）は、「医学と薬学におけるハイドロゲ
ル」、エヌ・エイ・ペペス (N. A. Peppes) 監修、 III
巻、ＣＲＣプレス・ボカ・ラートン，フロリダ，１９８
７年、１３７〜１４９頁に、生物腐蝕性ポリマーを記載
しているので参照されたい。ヘラー (Heller) 、J. of
Controlled Release, １９８５年、２、１６７−１７
７；レオング(Leong) らは、BioMaterials, １９８５
年、７、３６４−３７１にポリ無水物微小球を記載して
いる。

【０００５】ジャッカニクス(Jackanics) ら、 Contrac
eption, １９７３年、８、２２７；ヨーレス (Yolles)
ら、「生物活性を有する薬剤の制御された放出」、タン
クァリー (Tanquary) ら監修、プレナム・プレス, ニュ
ー・ヨーク，ニュー・ヨーク、１９７４年、３章；リウ
(Liu) ら、 Opthamology, １９８７年、９４、 １１５５
−１１５９およびそれに引用された文献は、眼の病気の
治療にリポソームをガラス体内に使用する研究を報告し
ている。

【０００６】カットライト (Cutright) らの、 Oral Su
rgery, Oral Medicine, and Oral Pathology, １９７４
年、３７、１４２およびシンドラー (Shindler) ら、Co
ntemporary Topics in Polymer Science, １９７７年、
２、２５１−２８９も参照されたい。アンダーソン (An
derson) ら、 Contraception, １９７６年、１３、３７
５およびミラー (Miller) ら、 J. Biomed. Materials
Res., １９７７年、１１、７１１は、ポリ（ｄ１−酪
酸）の各種特性を記載している。興味ある特許明細書と
しては、次のものがある。

【０００７】第３，４１６，５３０号、第３，６２６，
９４０号、第３，８２８，７７７号、第３，８７０，７
９１号、第３，９１６，８９９号、第３，９４４，０６
４号、第３，９６２，４１４号、第４，００１，３８８
号、第４，０５２，５０５号、第４，０５７，６１９
号、第４，１６４，５５９号、第４，１７９，４９７
号、第４，１８６，１８４号、第４，１９０，６４２
号、第２，２８１，６５４号、第４，３０３，６３７
号、第４，３０４，７６５号、第４，３０４，７６７
号、第４，４３９，１９８号、第４，４５２，７７６
号、第４，４７４，７５１号、第４，６１３，３３０号
および第４，６１７，１８６号明細書。

【０００８】下記の書籍は、リポソームの薬物担体とし
ての使用について記載している。パパハジョポラス (Pa
pahadjopoulous) 、１９７８年、 The Annals of the N
ew York Academy of Science, ３０８巻、およびグレゴ
レアズ(Gregoriades) とアリソン(Allison) 、１９８０
年、「生物学的系におけるリポソーム」ジョン・ウィー
リー・アンド・サンズ。レーザーマン (Leserman) ら、
Nature, １９８１年、２９３、２２６−２２８；バルベ
ット (Barbet) ら、 Supramol. Struct. CellBio. Che
m., １９８１年、２４３−２５８；ハース(Heath) ら、
Science, １９８０年、２１０、５３９−５４１。リポ
ソームの調製は、スゾカ(Szoka) とパパハジョポラス
(Papahadjopoulous) 、Proc. Natl. Acad. Sci. USA,
１９７８年、７５、１４５−１４９に開示されている。

【０００９】

【課題を解決するための手段】生物混和性、特に生物分
解性で、薬物を含有しマイクロカプセル化された移植体
を眼房および／またはガラス体へ導入して、薬物の治療
上有効量を提供して眼の状態を治療する。マイクロカプ
セルはポリマー、詳細にはポリエステル、エーテルまた
はリポソームであってもよく、それぞれの場合に薬物
は、眼房又はガラス体に導入された際の即座の放出に対
するバリヤーによって取り囲まれている。

【００１０】徐放性の薬物を含有するマイクロカプセル
を眼房および／またはガラス体に直接に導入することに
よって、眼の状態、病気および異常を治療する。マイク
ロカプセルは、１種類以上の薬物を含み、長時間にわた
って治療上有効な投与量でガラス体液中で放出されるよ
うに処方されている。この方法では、マイクロカプセル
から放出されて眼房に入った薬物は、角膜、眼房水、小
柱網、虹彩、水晶体および眼房における関連構造に到達
する。

【００１１】ガラス体に導入されたマイクロカプセルは
ガラス体中に拡散し、（１０種類の異なる層からなる）
全網膜、脈絡膜および反対側の強膜中へと拡散する。し
たがって、薬物は、これを必要とする部位で利用可能に
なり且つ速やかに希釈されてしまうこと無く、または眼
において有効な水準を達成するには患者に極めて高水準
の薬物を投与する必要がある全身性服用の場合とは異な
り、有効投与量に保持される。薬物がリポソームにカプ
セル化される場合には、濃厚な投与量の薬物を眼の中に
送り、一層効果的で毒性の少ない治療を行うことができ
る。カプセルの主な要素はポリマー性または脂質カプセ
ル化剤である。組成物は生物適合性、好ましくは生物分
解性である。

【００１２】多くの場合は、ポリマー性組成物は有機エ
ステルまたはエーテルであり、分解されると、モノマー
を含む生理学的に許容される分解生成物を生じる。無水
物、アミド、オルトエステル等を、単独または他のモノ
マーと組み合わせて使用してもよい。ポリマーは付加重
合体または縮合重合体、特に縮合重合体であることがで
きる。ポリマーは架橋していても架橋していないもので
もよく、通常は僅かに架橋した程度のもの以下であり、
一般的には５％未満であり、通常は１％未満である。

【００１３】多くの場合、ポリマーは炭素および水素の
ほかに酸素及び窒素、特に酸素を含む。酸素は、オキ
シ、例えばヒドロキシまたはエーテルとして、またはカ
ルボニル、例えばカルボン酸エステルのような非オキソ
カルボニル等として存在してもよい。窒素は、アミド、
シアノおよびアミノとして存在してもよい。ヘラー(Hel
ler)（１）（前記文献）に記載のポリマーを用いてもよ
く、その開示内容は具体的には前記文献を参照された
い。ヒドロキシ脂肪族カルボン酸のポリマーであってホ
モポリマーまたはコポリマー、及び多糖類が特に興味が
ある。興味あるポリエステルには、Ｄ−乳酸、Ｌ−乳
酸、ラセミ乳酸、グリコール酸、ポリカプロラクトンの
ポリマーおよびそれらの組み合わせがある。Ｌ−ラクテ
ートを用いると、徐腐蝕性ポリマーが得られるが、ラク
テートラセミ化合物では腐蝕は実質的に高まる。

【００１４】多糖類にはアルギン酸カルシウムおよび官
能化セルロース、特に水に不溶性で分子量が約５kD〜５
００kDであることを特徴とするカルボキシメチルセルロ
ースエステルなどがある。他の興味あるポリマーには、
ポリビニルアルコール、エステルおよびエーテルであっ
て生物適合性で且つ生物分解性でも有り得るものがあ
る。大抵は、ポリマーの特徴は生物適合性、薬物との適
合性、カプセル化の容易さ、生理学的環境における半減
期が少なくとも６時間、好ましくは１日より長く、ガラ
ス体の粘度が余り高くならず、水に不溶性であることな
どである。

【００１５】脂質カプセル化剤では、薬物に対して比較
的耐漏洩性である水晶体胞の内腔中に薬物を導入するこ
とができる。リポソームの性質は広範囲に変化すること
ができ、各種の脂質を用いてリポソームを形成する。タ
ンパクまたは他の非脂質化合物がリポソーム膜に結合し
て、リポソームの性状に影響することもある。タンパク
性化合物が存在しないときには、酸性のリン脂質が少な
くとも少量存在することが望ましく、タンパク性物質が
存在するときには、リポソームは実質的に中性であるこ
とが望ましい。

【００１６】リポソームの調製に用いられる脂質には、
ホスファチド化合物、例えばホスファチジルコリン（Ｐ
Ｃ）、ホスファチジルセリン（ＰＳ）およびホスファチ
ジルエタノールアミン（ＰＥ）、スフィンゴ脂質、セレ
ブロシド、ガングリオシド、ステロイド、例えばコレス
テロール等がある。リポソームは約１０〜５０モル％の
ステロイドを有し、残りが主として脂肪族酸および有機
および無機酸のエステルであることが望ましい。少量の
他の種類の脂質物質が存在してもよく、一般的には約１
０モル％未満であり、通常は約５モル％未満である。

【００１７】マイクロカプセル化粒子を形成する生物分
解性ポリマーは酵素的または加水分解的に不安定化しや
すいことが望ましい。水溶性ポリマーは、加水分解性ま
たは生物分解性の不安定な架橋材料で架橋して、有用な
水不溶性のポリマーを提供することもできる。安定性の
程度は、モノマーの選定、ホモポリマーとコポリマーの
どちらを用いるか、ポリマーを各種の層として用いるこ
とができまたは混合することができる場合にポリマーの
混合物を用いることによって、広範囲に変動することが
できる。

【００１８】生物分解性ポリマー、特に生分解性が比較
的遅いポリマーを用いることによって、薬物の放出速度
は粒子の破壊よりはむしろ周囲膜または一体式ポリマー
構造によって主として制御される拡散である。多くの場
合、選択される粒子の寿命は投与の所望な間隔に少なく
とも等しく、好ましくは所望な投与間隔の少なくとも二
倍であり、所望な投与間隔の５〜１０倍の寿命を有して
いてもよい。投与の間隔は通常は少なくとも３日間であ
り、更に普通には少なくとも７日間であり、一般的には
少なくとも約１５日間であり、２０日間以上であっても
よい。

【００１９】粒子は組成および物理的特性に就いて実質
的に均質であってもまたは不均質であってもよい。すな
わち、中心が一つの物質からなり且つ表面が同じまたは
異なる種類の組成の１又は複数の層を有し、それらの層
が架橋し、異なる分子量のものであったり、または異な
る密度または多孔性等を有するものであるような粒子を
調製することができる。例えば、中心をポリラクテート
−ポリグリコレートコポリマーでコーティングしたラク
テートとして、初期分解速度を高めるようにすることが
できた。用いられるラクテート対グリコレートのおよそ
の比率は、約１：０〜１の範囲にある。また、中心をポ
リラクテートでコーティングしたポリビニルアルコール
として、ポリラクテートの分解時に中心が溶解して速や
かに眼から流れ出してしまうようにすることもできた。

【００２０】徐放性が望ましい任意の薬理活性を有する
薬剤を用いてもよい。薬物をガラス体に十分に可溶性に
して薬理学的に有効な投与量で存在するようにすること
が望ましい。用いられる薬剤は、米国特許第４，４７
４，４５１号明細書カラム４〜６および第４，３２７，
７２５号明細書カラム７〜８行目に記載されており、詳
細はこれらの文献を参照されたい。

【００２１】特に興味深い薬物は、ヒドロコルチゾン
（５〜２０μｇ／ｌ血漿水準）、ゲンタマイシン（６〜
１０μｇ／ml血清）、５−フルオロウラシル（約３０mg
／kg体重、血清中）、ソルビニル、ＩＬ−２、ＴＮＦ、
ファカン (Phakan) −ａ（グルタチオンの一成分）、チ
オラ−チオプロニン、ベンダザック、アセチルサリチル
酸、トリフルオロチミジン、インターフェロン（α，β
およびγ）、免疫モジュレーター、例えばリンホカイ
ン、モノカイン、および成長因子等を含む。

【００２２】他の興味深い薬物は、抗緑内障剤、例えば
チモロールマレエート、ベータキソロールおよびメチプ
ラノロールのようなβ−遮断薬；ピロカルピン、アセチ
ルコリン塩酸、イソフルロフェート、デマカリウムブロ
ミド、エコチオフェートヨーダイド、ホスホリンヨーダ
イド、カルバコールやフィソスチミジンのようなマイト
ティックス (mitotics) ；ジピベフリン塩酸のようなエ
ピネフリンおよび塩；およびジクロルフェンアミド、ア
セタゾールアミドおよびメタゾールアミド；アルドース
レダクターゼ阻害剤、例えばトルレスタット、リシノプ
リル、エナラプリルおよびスタチルのような抗白内障お
よび抗糖尿病性網膜症薬；上記以外のチオール架橋剤；

【００２３】抗癌剤レチン酸、メトトレキセート、アド
リアマイシン、ブレオマイシン、トリアムシノロン、マ
イトマイシン、シス−プラチナム、ビンクリスチン、ビ
ンブラスチン、アクチノマイシン−Ｄ、アラ−Ｃ、ビサ
ントレン、ＣＣＮＵ、活性化サイトキサン、ＤＴＩＣ、
ＨＭＭ、メルファラン、ミトラマイシン、プロカルバジ
ン、ＶＭ２６、ＶＰ１６およびタモキシフェン；上記以
外の免疫モジュレーター；血栓防止剤、例えば組織プラ
スミノーゲン活性剤、ウロキナーゼおよびストレプトキ
ナーゼ；スーパーオキシドジアムターゼのような組織損
傷防止剤；タンパクおよび核酸、例えばモノ−およびポ
リクローン抗体、酵素、タンパクホルモンおよび遺伝
子、遺伝子フラグメントおよびプラスミド；

【００２４】ステロイド、特に抗炎症性または抗線維
剤、例えばコルチゾン、ヒドロコルチゾン、プレドニゾ
ロン、プレドニソン、デキサメタゾン、プロゲステロン
様化合物、メドリゾン（ＨＭＳ）およびフルオロメトロ
ン；非ステロイド性抗炎症薬、例えばケトロラックトロ
メタミン、ジクロフェナックナトリウムおよびスプロフ
ェン；抗生物質、例えばロリジン（セファロリジン）、
クロラムフェニコール、クリンダマイシン、アミカシ
ン、トブラマイシン、メチシリン、リンコマイシン、オ
キシシリン、ペニシリン、アンフォテリシンＢ、ポリミ
キシンＢ、セファロスポリン類、アンピシリン、バシト
ラシン、カーベニシリン、セフォロシン、コリスチン、
エリスロマイシン、ストレプトマイシン、ネオマイシ
ン、スルフアセトアミド、バンコマイシン、硝酸銀、ス
ルフイソオキサゾールジオールアミンおよびテトラサイ
クリン；

【００２５】抗ウイルス剤を包含する他の抗病原剤、例
えばイドクスウリジン、トリフルオロウリジン、ビダラ
ビン（アデニンアラビノシド）、アシクロビル（アシク
ログアノシン）、ピリメタミン、トリスルファピリミジ
ン−２、クリンダマイシン、ニスタチン、フルシトシ
ン、ナタマイシン、ミコナゾールおよびピペリジン誘導
体、例えばジエチルカルバマジン；調節麻痺性および散
瞳剤、例えばアトロピン、シクロゲル、スコポラミン、
ホマトロピンおよびミドリアシルがある。

【００２６】他の薬剤には、抗コリン作用薬、抗凝血
薬、抗線維溶解剤、抗ヒスタミン剤、抗マラリア剤、抗
毒素、キレート剤、ホルモン、免疫抑制剤、血栓崩壊
剤、ビタミン、塩、脱感作剤、プロスタグランジン、ア
ミノ酸、代謝物および抗アレルギー剤がある。カプセル
で用いられる薬物の量は、必要な有効投与量および放出
速度によって広範囲に変動する。通常は、薬物はマイク
ロカプセルの約１〜８０、更に普通には２０〜４０重量
％である。

【００２７】他の薬剤を、様々な目的のための処方に用
いることができる。薬剤のほかに、緩衝剤および防腐剤
を用いることもできる。水溶性防腐剤には、重亜硫酸ナ
トリウム、チオ硫酸ナトリウム、アスコルベート、ベン
ザルコニウムクロリド、クロロブタノール、チメロザー
ル、ホウ酸フェニル水銀、パラベン、ベンジルアルコー
ルおよびフェニルエタノールがある。これらの薬剤は
０．００１〜５重量％、好ましくは０．０１〜２重量％
の量で存在することができる。好適な水溶性緩衝剤は、
アルカリまたはアルカリ土類炭酸塩、リン酸塩、重炭酸
塩、クエン酸塩、ホウ酸塩、酢酸塩、琥珀酸塩等、例え
ばリン酸、クエン酸、ホウ酸、酢酸、重炭酸および炭酸
ナトリウムがある。これらの薬剤は、系のpHを２〜９、
好ましくは４〜８に維持するのに十分な量で存在するこ
とができる。緩衝剤としては、全組成物の重量に対して
重量で５％でもよい。

【００２８】粒子は狭いまたは広い範囲の粒度のもので
あってもよく、通常は３００μｍを超過せず、１８ゲー
ジの針で投与することが出来るものでよい。通常は、粒
子範囲は平均粒度の約２００％を超えて異なるものでは
なく、更に普通には、約１００％を超過しない。平均粒
度は、通常は５μｍ〜２mmの範囲であり、更に普通には
１０μｍ〜１mmの範囲にある。場合によっては、平均直
径が１〜２mmの範囲の粒子を選択して大きな貯蔵部を提
供するようにするが、他の場合には粒子の平均直径は約
２５〜５００μｍの範囲であって小さな貯蔵部を提供す
るようになる。粒子の粒度を用いて、放出速度、治療期
間および眼の中の薬物濃度を制御することができる。あ
る状況では、同じまたは異なる種類の薬剤を用いて、粒
子の混合物を使用することができる。この方法では、単
回投与で薬物治療の経路を達成することができ、放出の
パターンを大幅に変化させることもできる。

【００２９】各種の技法を用いてカプセル化された薬物
を製造することができる。有用な技法には、溶媒蒸発
法、相分離法、界面法等がある。ポリマーでカプセル化
された薬物の調製では、大抵の場合には溶媒蒸発法が用
いられる。このため、予備成形した速度調節ポリマーを
クロロホルム、塩化メチレンまたはベンゼンのような揮
発性で実質的に水不混和性の溶媒に溶解する。時には、
水不混和性溶媒を、少量の水混和性の有機補助溶媒、特
に酸素化された溶媒、例えばメタノール、エタノール等
で改質する。通常は、水混和性の有機補助溶媒は、約４
０容積％未満であり、普通は約２５容積％未満である。
次に、このポリマー−溶媒溶液に薬剤を加えることがで
きる。

【００３０】薬物の性状によっては、薬物を粘稠なポリ
マー−溶媒混合物に分散させたりまたは薬剤を微粉化し
て微細な粉末、通常は約１mm未満、普通は約０．５mm未
満であって、約０．５μｍ以下であることもできる超微
小粉末を得ることができる場合には薬剤粒子の固形物分
散物とすることができる。媒質中に用いられるポリマー
の量は、所望な粒度、追加のコーティング剤を加えるか
どうか、溶液の粘度、ポリマーの溶解度等によって変化
する。通常は、ポリマーの濃度は１０〜８０重量％の範
囲である。薬剤対ポリマーの比率は所望な放出速度によ
って変わり、一般的にはポリマーの１〜８０重量％の範
囲で変化する。

【００３１】前記において得られた分散物または溶液
を、水と保護コロイドでもよい分散剤とからなる撹拌し
た水性溶液に素早く加える。高分子分散剤として特に興
味深いものは、ポリ（ビニルアルコール）のような化合
物またはスパン洗剤のような非イオン性洗剤である。有
機層の容積は水性層よりも小さく、通常は有機層対水性
層の容積比は約１：１〜１０³ であり、水中油エマルシ
ョンが生成する。撹拌速度を選択して適当な液滴の大き
さを生成させ、次の段階を通じて撹拌を継続する。

【００３２】第三の段階では、微小カプセル化容器を閉
じて中程度の真空を系に適用して、揮発性有機溶媒を蒸
発させる。溶媒を急速に蒸発させると、マイクロカプセ
ル壁に気泡やブローホールが生じるので、徐々に蒸発さ
せるべきである。蒸発速度は、文献に報告された経験を
用いて、経験的に決定することができる。通常は真空は
約３〜１０mmHgの範囲である。蒸発が完了した後、生成
するマイクロカプセルを遠心分離し、水で完全に洗浄
し、（例えば濾過によって）集め、水を除去する。通常
は、マイクロカプセルを篩を用いて二次分割して、所望
な直径の粒度範囲の粒子を単離する。

【００３３】工程は、通常は室温で行うことができる
が、具体的な状況では冷却または加熱を用いて工程を最
適にすることができる。最終生成物は通常は初期の比率
で生成するので、薬剤対ポリマーの比率を調整して最適
組成物を生成させるようにする。薬剤−ポリマー−溶媒
混合物および水性分散媒質の初期バルク粘度並びに撹拌
速度を調整することにより、所望な粒度のマイクロカプ
セルの生産を最適にすることができる。更に、溶解した
有機溶媒の組成と溶媒蒸発速度を試験して、マイクロカ
プセル中に大きめのまたは小さめの結晶の薬剤を有する
マイクロカプセルを製造することができる。加水分解を
受けやすいポリマーについては、溶媒蒸発段階の際にマ
イクロカプセルを水性分散媒質に余り長時間暴露すべき
でない。

【００３４】それぞれのバッチのマイクロカプセルの粒
度分布は、比較的狭くなる。しかしながら、所望なら
ば、これらの粒度分画を乾式または湿式整粒法のような
物理的分離法によって更に精製することもできる。生体
内のマイクロカプセルの潜在的薬剤放出の態様を定義す
るため、秤量したマイクロカプセルの試料を、４重量部
のエタノールと６重量部の脱イオン水を含む計量した容
積の溶液に加えることができる。この混合物を３７℃に
保持し、緩やかに撹拌してマイクロカプセルを懸濁され
た状態に保持した。

【００３５】時間の関数としての溶解した薬剤の出現
を、吸光度が一定になるかまたは薬剤の９０％を超える
量が放出されてしまうまで、分光分析法によって追跡す
ることができる。媒質中の１時間後の薬剤濃度は投与量
中の遊離のカプセル化されていない薬剤の量を示唆する
ものであり、９０％の薬剤が放出されるのに要する時間
は生体中投与量の予想持続時間に関連している。一般的
には、試験管内での薬物放出の１日は、生体内での薬物
放出の約３５日に等しい。放出は均一ではないが、放出
は比較的均一な放出にすることを許容するある平均値か
ら大きく変動することはない。

【００３６】リポソームでカプセル化された薬剤を用い
るときには、カプセル化用の脂質二重層膜を様々な方法
で調製することができる。一般的には、各種のリポソー
ム形成法および化合物の脂質基への結合法が文献に記載
されており、それらの方法の任意物を用いることができ
る。リポソームの調製については、特にスゾカ(Szoka)
とパパハジョポラス (Papahadjopoulous) 、Proc. Nat
l. Acad. Sci. USA, １９７８年、７５、１４５−１４
９を参照されたい。

【００３７】リポソーム溶液は、通常はこれが作用する
生理的流体と等張である。溶液のpHは一般的には約６よ
り高く且つ約９より高くなく、更に普通には約６〜８で
あり、好ましくは約６．５〜７．５である。生理学的に
許容される各種の緩衝液、詳細としてリン酸塩、炭酸塩
および酢酸塩を用いてもよい。薬剤の濃度は、生理学的
に有効な濃度、リポソームのルーメン中の濃度を維持す
る能力、リポソームの安定性および不透過性に対する化
合物の影響並びにリポソームの大きさおよび数によって
変化する。薬剤濃度は約０．０１mM〜約１００mMとする
ことができる。緩衝液の濃度は、一般的には約２０mM〜
約１００mMであるが、溶液１ml当たりの塩の濃度は一般
的には約０．２５〜０．９０％である。

【００３８】マイクロカプセルは、注射、輸液、トロカ
ール等の各種の方法で眼に投与することができる。物質
を眼房および／またはガラス体に導入する各種の技法が
公知になっており、例えばリウ(Liu) らの、１９８７
年、上記文献およびそこに引用されている文献を参照さ
れたい。

【００３９】下記の実施例は例示のためのものであり、
制限のためのものではない。

【００４０】

【実施例】ポリマーでカプセル化された薬物 適当な重量のポリマーを、ベンゼン、塩化メチレンまた
はクロロホルムのような水に不混和性の有機溶媒で可溶
化する。適当量の薬剤をポリマー混合物に加えてスラリ
ーを形成させ、これを混合して実質的に均質にする。次
に、このスラリーを、激しく撹拌した脱イオン水を入れ
た容器に容積比１：０．５〜１×１０³（有機スラリ
ー；水）で滴下して加える。水は２〜５重量％ポリビニ
ルアルコールである。容器を密閉して、中程度の真空を
約８〜１０時間を要して徐々に加えてマイクロカプセル
に気泡やブローホールが生じないようにする。

【００４１】溶媒を留去した後、マイクロカプセルを遠
心分離して、滅菌した蒸溜水で繰り返し洗浄し、濾過し
て、水を切った。マイクロカプセルを篩で整粒し、真空
で乾燥した後、直ちにトロカール注射によって使用して
眼のガラス体液中に導入することができる。スルファジ
アジンについては薬剤はポリマー重量の１０重量％であ
り、ヒドロコルチゾンについては４０重量％であり、メ
トトレキセートについては２５重量％であった。薬剤
は、超微小粉末≦２０μＭとして用いた。トロカール注
射は、２０ゲージ針を用いて行い、粒子の粒度は約０．
２mmであった。

【００４２】モノマーＤＬ−乳酸をアセトンから２度再
結晶し、メチルエチルケトンから２度再結晶した。乳酸
を重合管に入れて、空気と残存溶媒を真空で除去し、管
を加熱して乳酸を融解させた。触媒（テトラフェニルス
ズ、０．０２重量％）を加えて、管を密封して真空に
し、１７０〜１７５℃で７時間加熱した。冷却した後、
管を開いて、ポリマー生成物をアセトンに溶解させ、室
温にて水で沈澱させ、真空乾燥した。ポリマーは、特に
マイクロカプセル形成中の溶媒蒸発の際には長時間水に
暴露すべきでない。下記の表に結果を示す。

【００４３】

【表１】

【００４４】右眼の眼房（Ｃ）に入れたスルファジアジ
ンを含むポリ乳酸マイクロカプセルは、１２カ月間薬剤
を放出した。コントロールの左眼には何んら薬剤は検出
されなかった。

【００４５】

【表２】 表１の実験を、更に高い投与水準を用いて繰り返した。

【００４６】

【表３】

【００４７】短期間を用いて、放出の経路を監視した。
このデーターは、薬剤水準が２週間以内に平衡に達した
ことを示している（２週目の水準が８週目の水準と同じ
である）。動物を解剖した８週目にはガラス体の水準は
０であることが判った。このデーターは眼房に入れた医
薬はガラス体へは移動しなかったことを示している。

【００４８】

【表４】 この実験は、一層高い投与水準を用いることを除いて、
上記実験を繰り返している。

【００４９】

【表５】

【００５０】１０匹の異なる動物を、ポリ乳酸にヒドロ
コルチゾン琥珀酸塩を薬物として配合したものと共に用
いた。同量の薬物／ポリマーを各動物の右眼に投与し
た。各月の終わりに１匹の動物を屠殺してデーターを得
た。結果は、下記のことを示している。（１）眼のガラ
ス体に入れた薬物は検出可能な量では眼房に移行しなか
った。（２）薬物は１０か月目の時点でも凡その平衡水
準で放出された。（３）投薬しなかった左眼には薬物が
検出されなかった。

【００５１】

【表６】 メトトレキセートをポリ乳酸に配合し、マイクロカプセ
ルを左眼のガラス体に入れた。薬物は眼房への移行は生
じなかった。薬物は７か月目の時点でも放出されてい
た。

【００５２】脂質でカプセル化された薬剤 リポソームの調製 ドクソルビシンを、メタノール中薬物３９．３５μＭを
１９．６５μＭのカルジオリピンと共に用いて、リポソ
ームに配合した。混合物を窒素下にて蒸発によって乾燥
した。乾燥した混合物に、１００μＭのホスファチジル
コリン、６８．４μＭのコレステロールおよび３８．９
μＭのステライルアミンを加えた。これらを混合して、
窒素下にて乾燥した。混合物を０．８５％ＮａＣｌ、pH
７．４を含む０．０１Ｍリン酸緩衝液１０mlで水和し
た。

【００５３】３０分間膨潤した後、リポソームを１５分
間撹拌し、次いで窒素下にて３７℃の固定温度浴中で９
０分間音波処理をした。アントラップされた(untrappe
d) ドクソルビシンを、０．８５％ＮａＣｌ、pH７．４
を含む０．０１Ｍリン酸緩衝液に対して４℃で２４時間
緩衝溶液を数回取り替えながら十分に透析を行うことに
よってリポソームでカプセル化された薬物から分離し
た。カルジオリピンリポソームへのドクソルビシンの取
り込みは螢光によって計測した。用いたリポソームの大
きさは、９００〜１１００オングストローム単位であっ
た。

【００５４】Ｉ．ドクソルビシンの眼房（Ｃ）への注射 １．５０μｇ／０．１mlドクソルビシンを１０匹のニュ
ージーランド白ウサギの眼房（Ｃ）に注射した。眼房
（Ｃ）を切開してドクソルビシンを測定した。 ２．５０μｇ／０．１mlドクソルビシンを２匹のウサギ
の各々の右および左眼房（Ｃ）へ注射した。反対側の眼
には０．１０mlの規定食塩水を与えた。２匹の動物を眼
の毒性について２週間観察した。結果を表７に示す。

【００５５】

【表７】

【００５６】眼房（Ｃ）におけるドクソルビシンの平均
半減期は約１時間である。カプセル化されていないドク
ソルビシンは眼房（Ｃ）を注射した後２〜３日以内に眼
の炎症と虹彩の浮腫を生じる。コントロールの食塩水を
注射した眼は総体的検討および細隙燈生体鏡検では正常
であることが判った。

【００５７】II．眼房（Ｃ）へのリポソームでカプセル
化されたドクソルビシンの注射 １．リポソームでカプセル化されたドクソルビシン５０
μｇ／０．１０mlを２８匹のウサギの片方の眼の眼房
（Ｃ）へ注射した。反対側の注射をしなかった眼をコン
トロールとして用いた。 ２．リポソーム中５０μｇのドクソルビシンを２匹のウ
サギのそれぞれの一方の眼に注射し、３週間観察した。
反対側の眼には０．１０mlの規定食塩水を入れた。表８
にこれらの実験の結果を示す。

【００５８】

【表８】

【００５９】検出可能なカプセル化されたドクソルビシ
ンは、眼房（Ｃ）において２週間までは見出だすことが
できた。眼房（Ｃ）注射から８日後まではかなりの量が
存在した。臨床的には、眼はカプセル化された形態には
極めて良好のままであり、炎症および虹彩の浮腫の徴候
はほとんど見られなかった。臨床的観察のために注射を
行った２匹の動物の一方では、少量のリポソームが内部
眼房に見出だされた。眼は臨床的には穏やかであった。

【００６０】III. ガラス体（Ｖ）へのドクソルビシン
の注射 １．ドクソルビシン５０μｇ／０．１０mlを１０匹のウ
サギのそれぞれのガラス体（Ｖ）へ注射した。反対側の
眼をコントロールとして用いた。 ２．５０μｇ／０．１０mlのドクソルビシンを２匹のウ
サギのそれぞれの一方の眼に注射し、１週間観察した。
反対側の眼にはコントロール食塩水を注射した。表９に
ドクソルビシン注射の結果を示す。

【００６１】

【表９】 遊離のドクソルビシンの半減期は約３時間である。臨床
的には、ドクソルビシンのガラス体への注射は極めて良
好であった。毒性の徴候は見られなかった。

【００６２】IV．ガラス体へのドクソルビシンの注射 １．リポソームでカプセル化されたドクソルビシン５０
μｇ／０．１mlを２８匹のウサギの右眼のガラス体へ注
射した。左眼をコントロールとして用いた。 ２．（ドクソルビシンの配合と同様の比率で食塩水をカ
プセルに入れて調製した）空リポソームを４個の眼のガ
ラス体に下記の容量で注射した。０．０１２５ml、０．
０２５５ml、０．０５mlおよび０．１０ml。動物をコン
トロールとして４カ月間まで観察した。

【００６３】

【表１０】

【００６４】リポソームでカプセル化されたドクソルビ
シンは、注射の直後に局在化した濃密な濁りとしてガラ
ス体に観察された。炎症過程として生じるものは、最初
の７〜１０日間に見られた。ガラス体の濁りの縁が次第
に掠れ、局在化した濃密な濁りは減少し始め、小さくな
った。ガラス体の大部分の濁りは総ての場合に起こり、
実験から１４日目まで眼底の可視化を曇らせた。このガ
ラス体の曇りはドクソルビシンのクリアランスとは相関
せず、これは実験の開始から２日以内に明らかになっ
た。ドクソルビシンの残留水準は一定になり、２週間目
まではかなりの水準に保持された。多分、ガラス体に残
留するドクソルビシンがリポソームと結合して、ガラス
体から最少クリアランスを生じるためであろう。

【００６５】ガラス体の濁りは、空リポソームを注射し
た総ての眼に観察開始から全４か月まで見られた。この
濁りは薬物関連のものではなく、多分リポソームのリン
脂質とガラス体ゲルとの相互作用によるものと思われ
る。リポソームによってガラス体に誘発される濁りは最
初の１週間までは消失せず、少なくとも本発明者らの観
察の範囲では永久的なものと思われる。

【００６６】上記の結果からマイクロカプセルは極めて
多様な条件の治療のために眼房又はガラス体の内部で有
効に使用されることは明らかである。これらのマイクロ
カプセルは長期間に亙る薬物の連続投与を可能にし、患
者が局部投与のような余り正確とはいえない方法で薬物
を服用する必要がなくなる。更に、眼における薬物の適
度な治療水準を保持することによって治療を行うことが
でき、患者の体内で高濃度になり悪影響を及ぼす可能性
がある部分を極力少なくすることができる。この薬物
は、他の眼房またはガラス体への移行が観察されないの
で、適当な部位に保持される。平衡水準は速やかに達成
され且つ長期間保持される。更に、長期間に亙る治療で
は１回または数回のみの薬物の服用が必要なだけであ
り、患者が自己服用するときの負担を軽減し、継続され
制御された投薬が可能になり、患者の活動を干渉するこ
とが極めて少なくなる。

【００６７】ポリマーおよび脂質によるカプセル化は、
薬剤の投与量が希釈されたりまたは一般の循環において
分解されることから保護する。これらの薬剤はいかなる
改良もなしで各種の濃度で配合することができる。カプ
セル化によって高濃度で医薬を投与することができ、こ
れは遊離の薬物より一層有効で且つ毒性が低い。更に、
リポソーム中の薬物は、リポソームが生物分解性であり
且つ無毒であり、細胞膜に似ているので、酵素による攻
撃または免疫認識から保護することもできる。

【００６８】本発明の明細書に記載した総ての刊行物お
よび患者への適用は、本発明が関連する当業者の技術水
準を示すものである。総ての刊行物および特許出願明細
書はそれぞれの個々の刊行物または特許出願明細書が参
考のためであると具体的且つ個別的に述べられているの
と同程度に参考として引用される。上記発明を幾分詳細
に例示によって且つ例えば理解を容易にするために記載
してきたが、ある程度の変更および改良は特許請求の範
囲内で実施することができることは明らかである。

Claims (6)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ガラス体に導入して眼の状態を処置する
   組成物であって、約３００μｍ以下のマイクロカプセル
   化された薬剤粒子を含んで成り、これらの粒子が薬理学
   的に活性な薬剤及び薬理学的に許容される生物分解性ポ
   リマーを含んでなり、該組成物は前記薬剤の有効投与量
   を長期間に亙って提供する速度で分解可能であることを
   特徴とする組成物。
2. 【請求項２】 前記ポリマーが縮合ポリマーである、請
   求項１に記載の組成物。
3. 【請求項３】 前記粒子が薬理学的に許容される緩衝剤
   を含んで成る、請求項１又は２に記載の組成物。
4. 【請求項４】 前記薬剤が細胞毒性剤または成長因子の
   少なくとも一つである、請求項１〜３のいずれか１項に
   記載の組成物。
5. 【請求項５】 前記組成物が前記眼の状態の処置のため
   に有効な投与量を含み、該投与量が少なくとも１カ月間
   前記ガラス体に保持されるのに十分である、請求項１〜
   ４のいずれか１項に記載の組成物。
6. 【請求項６】 前記粒子の平均粒度が１０〜２５０μｍ
   である、請求項１〜５のいずれか１項に記載の組成物。