JP2018532430A5 - - Google Patents

Claims (16)

1. 嫌気性微生物の適応及び酸素耐性が高い嫌気性微生物の選択のための方法であって、当該方法は、段階的に増加させた印加電圧と酸素拡散による酸化ストレスの段階的な二元誘発を行い、酸化された対応物の濃度を段階的に増やすことと組み合わせて酸化防止剤の濃度を段階的に減らすことにより、酸化還元状態を調整するために酸化防止剤／酸化された対応物の濃度比を変化させて、前記微生物を培養する工程を含み、
   培地中の溶存酸素濃度が、全てではないが一部の細菌が殺される濃度である亜致死濃度に維持される、上記方法。
2. 酸化防止剤／酸化された対応物が、システイン／シスチン、グルタチオン／グルタチオンの酸化状態、アスコルビン酸／デヒドロアスコルベート、ジチオトレイトール／酸化ジチオトレイトール及び没食子酸／酸化没食子酸からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。
3. 前記方法の開始条件が、酸素の流れが低いか又はゼロである、印加電圧が低い、酸化防止剤の濃度が高い及び酸化された対応物の濃度が低いか又はゼロである、並びに酸素が除去された培地である、のうちの１つ以上又は全てから選択される、請求項１又は２に記載の方法。
4. 前記開始条件が、システイン８ｍＭ、シスチン０ｍＭ、印加電圧０．１Ｖ、及び酸素の流れが低いか又はゼロのうちの１つ以上又は全てから選択される、請求項３に記載の方法。
5. 前記段階的な変化が、最小システイン濃度３ｍＭ、最大シスチン濃度５ｍＭ、最大印加電圧０．６Ｖ、及び高い酸素の流れのうちの１つ以上又は全てが達成されるまで続けられる、請求項４に記載の方法。
6. 印加電圧が０．６Ｖを超えず、及び／又はシステイン濃度が３ｍＭ以上であり、及び／又はシスチン濃度が５ｍＭ以下である、請求項１〜４のいずれか一項に記載の方法。
7. 段階的な変化が終了したら、前記方法は、段階的な変化の後に達した、印加電圧、酸素拡散及び酸化防止剤／酸化された対応物の濃度比の最終的な条件下で前記微生物を培養する１つ以上のさらなる工程を含む、請求項１〜６のいずれか一項に記載の方法。
8. さらなる段階的な変化が行われる工程をさらに含む、請求項７に記載の方法。
9. 前記方法又はさらなる工程が、嫌気性微生物を新しい培地に再接種することを含む、請求項１〜８のいずれか一項に記載の方法。
10. 前記再接種が、培養条件における前記段階的な変化を含む、請求項９に記載の方法。
11. 前記微生物が、フィーカリバクテリウム・プラウスニッツィ（Ｆａｅｃａｌｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｐｒａｕｓｎｉｔｚｉｉ）である、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の方法。
12. 前記方法が、代謝特性を維持した最良の適応株を選択するために、適応株が酸素耐性、及び酪酸産生、及び／又は成長速度の評価についてスクリーニングされる更なる工程を含む、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の方法。
13. 嫌気性微生物の改善された生産のための方法であって、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の方法によって嫌気性微生物を適応させ、より酸素耐性が高い嫌気性微生物を選択し、及び更に、酸素適応微生物株の産生に最適化された一定の酸化電位／印加電圧、酸素拡散、及び酸化防止剤／酸化された対応物の濃度比の組み合わせで、溶存酸素濃度が、亜致死濃度に維持された培地中で微生物を培養し、それによって選択的な圧力が可能となり、その結果高収率で微生物株が得られる、上記方法。
14. （ｉ）前記培養条件が、３ｍＭのシステイン、５ｍＭのシスチン、０．６Ｖの印加電圧、及び０．２ｎｍｏｌｅｓ・ｍｌ^−１ｍｉｎ^−１の酸素の流れを含み、及び／又は（ｉｉ）前記微生物が、フィーカリバクテリウム・プラウスニッツィ（Ｆａｅｃａｌｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｐｒａｕｓｎｉｔｚｉｉ）である、請求項１３に記載の方法。
15. 請求項１〜１４のいずれか一項に記載の方法によって得られる酸素適応微生物株であって、該微生物が、フィーカリバクテリウム・プラウスニッツィ（Ｆａｅｃａｌｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｐｒａｕｓｎｉｔｚｉｉ）株であり、かつ該微生物が酸素適応化されていない出発株又は親株に比較して、周囲の空気に対して増加した耐性レベルを示す、上記酸素適応微生物株。
16. ＤＳＭ ３２３８０、ＤＳＭ ３２３７８及びＤＳＭ ３２３７９からなる群から選択される、フィーカリバクテリウム・プラウスニッツィ（Ｆａｅｃａｌｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｐｒａｕｓｎｉｔｚｉｉ）株。