[go: up one dir, main page]

HUP0501025A2 - Substituted phenyl naphthalenes as estrogenic agents and their use - Google Patents

Substituted phenyl naphthalenes as estrogenic agents and their use

Info

Publication number
HUP0501025A2
HUP0501025A2 HU0501025A HUP0501025A HUP0501025A2 HU P0501025 A2 HUP0501025 A2 HU P0501025A2 HU 0501025 A HU0501025 A HU 0501025A HU P0501025 A HUP0501025 A HU P0501025A HU P0501025 A2 HUP0501025 A2 HU P0501025A2
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
naphthol
hydroxyphenyl
mmol
chloro
fluoro
Prior art date
Application number
HU0501025A
Other languages
English (en)
Inventor
Richard Eric Mewshaw
Richard James Edsall
Cuijian Yang
Heather Anne Harris
James Carl Keith Jr
Leo Massillamoney Albert
Eric Steven Manas
Original Assignee
Wyeth Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=23336481&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=HUP0501025(A2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Wyeth Corp filed Critical Wyeth Corp
Publication of HUP0501025A2 publication Critical patent/HUP0501025A2/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C255/00—Carboxylic acid nitriles
    • C07C255/49—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton
    • C07C255/54—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton containing cyano groups and etherified hydroxy groups bound to the carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C39/00—Compounds having at least one hydroxy or O-metal group bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring
    • C07C39/24—Halogenated derivatives
    • C07C39/38—Halogenated derivatives with at least one hydroxy group on a condensed ring system containing two rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/045—Hydroxy compounds, e.g. alcohols; Salts thereof, e.g. alcoholates
    • A61K31/05—Phenols
    • A61K31/055—Phenols the aromatic ring being substituted by halogen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/12—Antidiarrhoeals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/02—Drugs for disorders of the urinary system of urine or of the urinary tract, e.g. urine acidifiers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/10—Drugs for disorders of the urinary system of the bladder
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/02—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for disorders of the vagina
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/18—Feminine contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/22—Anxiolytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/24—Drugs for disorders of the endocrine system of the sex hormones
    • A61P5/30—Oestrogens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/24—Drugs for disorders of the endocrine system of the sex hormones
    • A61P5/32—Antioestrogens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/12—Antidiuretics, e.g. drugs for diabetes insipidus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C205/00—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton
    • C07C205/13—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by hydroxy groups
    • C07C205/20—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by hydroxy groups having nitro groups and hydroxy groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C07C205/25—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by hydroxy groups having nitro groups and hydroxy groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings having nitro groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings being part of a condensed ring system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C205/00—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton
    • C07C205/13—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by hydroxy groups
    • C07C205/26—Compounds containing nitro groups bound to a carbon skeleton the carbon skeleton being further substituted by hydroxy groups and being further substituted by halogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C255/00—Carboxylic acid nitriles
    • C07C255/49—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton
    • C07C255/53—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton containing cyano groups and hydroxy groups bound to the carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C39/00—Compounds having at least one hydroxy or O-metal group bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring
    • C07C39/12—Compounds having at least one hydroxy or O-metal group bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring polycyclic with no unsaturation outside the aromatic rings
    • C07C39/14—Compounds having at least one hydroxy or O-metal group bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring polycyclic with no unsaturation outside the aromatic rings with at least one hydroxy group on a condensed ring system containing two rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C39/00—Compounds having at least one hydroxy or O-metal group bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring
    • C07C39/12—Compounds having at least one hydroxy or O-metal group bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring polycyclic with no unsaturation outside the aromatic rings
    • C07C39/15—Compounds having at least one hydroxy or O-metal group bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring polycyclic with no unsaturation outside the aromatic rings with all hydroxy groups on non-condensed rings, e.g. phenylphenol
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C43/00—Ethers; Compounds having groups, groups or groups
    • C07C43/02—Ethers
    • C07C43/20—Ethers having an ether-oxygen atom bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring
    • C07C43/23—Ethers having an ether-oxygen atom bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring containing hydroxy or O-metal groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/61—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups
    • C07C45/67—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton
    • C07C45/68—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton by increase in the number of carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C49/00—Ketones; Ketenes; Dimeric ketenes; Ketonic chelates
    • C07C49/587—Unsaturated compounds containing a keto groups being part of a ring
    • C07C49/703—Unsaturated compounds containing a keto groups being part of a ring containing hydroxy groups
    • C07C49/747—Unsaturated compounds containing a keto groups being part of a ring containing hydroxy groups containing six-membered aromatic rings

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)

Description

100501-13984-GI
Szubsztituált fenil-naftalin-származékok ösztrogén hatású ágensekként, eljárás előállításukra és alkalmazásuk
KÖZZÉTÉTELI PÉLDÁNY
A találmány tárgyköre
A találmány ösztrogénhatású ágensekként alkalmazható, 5 szubsztituált fenil-naftalin-származékokra, valamint előállításukra szolgáló eljárásra és alkalmazásukra vonatkozik. A találmány háttere
Az ösztrogének pleiotrópiás hatása emlős szövetekben jól dokumentált, és elfogadott tény, hogy az ösztrogének 10 több szervrendszert befolyásolnak [Mendelsohn and Karas, New England Journal of Medicine, 340:1801-1811 (1999);
Epperson et al., Psychosomatic Medicine, 61:676-697 (1999); Crandall, Journal of Womens Health & Gender Based Medicine, 8:1155-1166 (1999); Monk & Brodaty, Dementia & Geriatric 15 Cognitive Disorders, 11:1-10 (2000); Hum & Macrae, Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism, 20:631-652 (2000);
Calvin, Maturitas, 34:195-210 (2000); Finking et al.,
Zeitschrift für Kardiologie, 89:442-453 (2000); Brincat,
Maturitas, 35:107-117 (2000); Al-Azzawi, Postgraduate
Medical Journal, 77:292-304 (2001)]. Az ösztrogének különböző módokon fejthetik ki hatásukat a szövetekre, a legjobban jellemzett hatásmechanizmusuk szerint ösztrogén-receptorokkal lépnek kölcsönhatásba, ami a gén-transzkripció megváltozásához vezet. Az ösztrogén-receptorok ligandumok 25 által aktivált transzkripciós faktorok, és a nukleár-hormon receptor alcsaládhoz tartoznak. E család más tagjai például a progeszteron, androgén, glükokortikoid és mineralokortikoid receptorok. A ligandum megkötésének hatására ezek a receptorok dimerizálódnak, és a gén-transzkripció aktiválá30 sa a DNS-en levő specifikus szekvenciákhoz (amelyek válaszelemként ismeretesek) való közvetlen kötődéssel, vagy pedig más olyan transzkripciós faktorokkal való kölcsönhatással történik, amelyek azután közvetlenül kötődnek a specifikus DNS szekvenciákhoz [Moggs & Orphanides, EMBO Reports, 2:775-781 (2001); Hall et al. , Journal of Bi ol ogi cal
Chemistry, 276:36869-36872 (2001); McDonnell, Principles of Molecular Regulation, 351-361. oldal (2000)]. Az „együttszabályozó proteinek szintén kölcsönhatásba léphetnek a ligandummal kötött receptorral, és tovább modulálhatják annak transzkripciós aktivitását [McKenna et al. , Endocrine Reviews, 20:321-344 (1999)]. Azt is kimutatták, hogy az ösztrogén-receptorok szuppresszálhatják az NFkB által közvetített transzkripciót, mind ligandumtól függő, mind attól független módon [Quaedackers et al., Endocrinology, 142:1156-1166 (2001); Bhat et al. , Journal of Steroid
Biochemistry & Molecular Biology, 67:233-240 (1998); Pelzer et al., Biochemical & Biophysical Research Communications, 286:1153-1157 (2001)].
Az ösztrogén-receptorok aktiválhatok foszforilezéssel is. A foszforilezést növekedési faktorok, például az EGF közvetíti, ami ligandum hiányában változást okoz a géntranszkripcióban [Moggs & Orphanides, EMBO Reports, 2:775-781 (2001); Hall et al., Journal of Biological Chemistry, 276:36869-36872 (2001)].
Egy kevésbé jól jellemzett eszköz, amellyel az ösztrogének befolyásolhatják a sejteket, feltételezhetőleg az úgy nevezett membrán-receptor. Az ilyen receptorok léte vitatott, azonban jól dokumentált tény, hogy az ösztrogének a sejtek nagyon gyors nem-genomiális válaszreakcióit képesek kiváltani. Még nem izolálták határozottan azt a molekulafajtát, amely az ilyen hatások átviteléért felelős, azonban van olyan bizonyíték, amely azt sugallja, hogy legalábbis rokon az ösztrogen—receptorok nukleáris formáival [Levin, Journal of Applied Physiology, 91:1860-1867 (2001); Levin, Trends in Endocrinology & Metabolism, 10:374-377 (1999)].
Eddig két ösztrogén-receptort ismertek fel. Az első ösztrogén-receptort körülbelül 15 éve klónozták, és ERa néven ismerjük [Green et al. , Nature, 320:134-139 (1986)]. Az ösztrogén-receptor másik formáját viszonylag nem régen találták meg, és ERp néven ismeretes [Kuiper et al. , Proceedings of the National Academy of Science of the United States of America, 93:5925-5930 (1996)]. Az ERP esetén végzett korai kutatások arra irányultak, hogy meghatározzák affinitását a különböző ligandumokra nézve, és így az ERa-val szemben némi különbség mutatkozott. Az ER3 szövetekben való eloszlását rágcsálók esetén jól feltérképezték, és ez nem esik egybe az ERa-val. Egyes szövetek, például az egér és patkány méh elsősorban ERa-t expresszál, míg az egér és patkány tüdő főleg ERβ-t [Couse et al. , Endocrinology, 138:4613-4621 (1997); Kuiper et al. ,
Endocrinology, 138: 863-870 (1997)]. Még ugyanazon a szerven belül is változhat az ERa és ERp eloszlása. így például az egér petefészekben az ERβ nagymértékben expresszálódik a granulóza sejtekben, míg az ERa expressziója a hüvely- és stromasejtekre korlátozódik [Sár & Welsch, Endocrinology, 140:963-971 (1999); Fitzpatrick et al., Endocrinology,
140-2581-2591 (1999)]. Vannak azonban példák, ahol a receptorok együtt expresszálódnak, és in vitro vizsgalatokból bizonyíték van arra, hogy az ERa és ER3 képes heterodimereket képezni [Cowley et al. , Journal of Biological Chemistry, 272:19858-19862 (1997)].
Számos olyan vegyületet ismertettek, amelyek vagy utánozzák, vagy blokkolják a 17p-ösztradiol aktivitását. A nagyjából a 17p-ösztradioléval, a leghatékonyabb endogén ösztrogénéval megegyező biológiai hatassal rendelkező vegyületeket „ösztrogén-receptor agonisták-nak nevezik. Azokat, amelyek 17p-ösztradiollal kombináltan adagolva blokkolják annak hatását, „ösztrogén-receptor antagonisták-nak nevezik. A valóságban folyamatos átmenet van az ösztrogén— receptor agonista és ösztrogén-receptor antagonista aktivitás között, és valójában némelyik vegyület egyes szövetekben ösztrogén-receptor agonistaként, míg más szövetekben ösztrogén-receptor antagonistaként viselkedik. Az ilyen kevert aktivitást mutató vegyületeket szelektív ösztrogénreceptor modulátoroknak (SERMS) nevezik, és ezek terápiásán hasznos ágensek (pl. EVISTA) [McDonnell, Journal of the Society for Gynecologic Investigation, 7:S10-S15 (2000); Goldstein et al., Human Reproduction Update, 6:212-224 (2000)]. Annak pontos okát, hogy ugyanaz a vegyület miért rendelkezhet sejt-specifikus hatásokkal, még nem tárták fel, azonban a receptorok konformációjában és/vagy az együtt-szabályozó proteinek miliőjében mutatkozó különbségekre gyanakszanak.
Bizonyos ideje ismeretes, hogy az ösztrogén-receptorok különböző konformációkat vesznek fel, ha ligandumokat kötnek meg. Azonban ennek a változásnak a következménye és bonyolultsága csak nemrégen derült ki. Az ERa és ΕΡβ háromdimenziós szerkezetét különböző ligandumokkal való együttkristályosítással határozták meg, és ez világosan azt mutatja, hogy egy olyan ösztrogén-receptor antagonista jelenlétében visszaalakul a 12-es helix, amely szférikusán akadályozza azokat a protein-szekvenciákat, amelyek szükségesek a receptor és az együtt-szabályozó protein közötti kölcsönhatáshoz [Pike et al., EMBO, 18:4608-4618 (1999); Shiau et al. , Cell, 95:927-937 (1998)]. Ezenkívül fágkimutatásí technikát használtak az olyan peptidek azonosítására, amelyek kölcsönhatásba lépnek az ösztrogén-receptorokkal különböző ligandumok jelenlétében [Paige et al., Proceedings of the National Academy of Science of the United States of America, 96:3999-4004 (1999)]. így például azonosítottak egy pepiidet, amely különbséget tett a teljesen ösztrogén5 receptor agonists 17β—ösztradiolhoz, illetve a dietil szil besztrolhoz kötött ERa között. Egy másik pepiidről kimutatták, hogy különbséget tesz az ERa-hoz, illetve ERβ-hoz kötött clomiphene között. Ezek az adatok arra utalnak, hogy az egyes ligandumok a receptort potenciálisan egyedi és előre meg nem jósolható konformációba viszik, azaz feltehetőleg megkülönböztethető biológiai aktivitásuk van.
Amint a fentiekben említettük, az ösztrogének a biológiai folyamatok nagyon nagy számát érintik. Emellett, ahol nemek közötti különbséget ismertettek (pl. betegségek gyakorisága, a provokációra adott válaszreakciók, stb.), lehetséges, hogy ezeknek a magyarazata az ösztrogénszintek nek a hímnemű és nőnemű egyebekben mutatkozó különbségében rejlik.
A találmány ismertetése
A találmány (I) általános képletű ösztrogén hatású vegyületekre és gyógyszerészetileg elfogadható sóikra vonatkozik, a képletben
Rí, R2, R3 és R4 jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, hidroxil-, 1-6 szénatomos alkil-, 1-6 szénatomos alkoxicsoport vagy halogénatom,
R5, R6, R7, Re, Rg és Rio jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, 1-6 szénatomos alkil-, 2-7 szénatomos alkenil-, 2-7 szénatomos alkinil-, halogénatom, 1-6 szénatomos alkoxi-, -CN, -CHO, fenilcsoport vagy egy 5- vagy 6-tagú, 1-4 heteroatomot, éspedig 0-, N- és/vagy S-atomot tartalmazó heterociklusos gyűrű;
ahol az R5, R6, Ri, Ra, Rg és Rio szubsztituensek esetén megadott alkil- és alkenilesöpörtök adott esetben hidroxil-, -CN, halogén, trifluoralkil-, trifluoralkoxi-, -NO2 vagy fenilcsoporttal lehetnek szubsztituálva; és az R5, R6, R7, Re, Rg és Rio szubsztituensek esetén megadott fenilcsoport adott esetben egyszeresen, kétsze résén vagy háromszorosan 1-6 szénatomos alkil-, 2-7 szénatomos alkenil-, halogén, hidroxil-, 1-6 szénatomos alkoxi-, -CN, -NO2, amino-, 1-6 szénatomos alkilamino-, di(l-6 szénatomos alkil) amino-, tio-, 1-6 szénatomos alkiltio-, 1-6 szénatomos alkilszulfinil-, 1-6 szénatomos alkilszulfonil-, 2-7 szénatomos alkoxikarbonil-, 2-7 szénatomos alkilkarbonil- vagy benzoilcsoporttal lehet szubsztituálva;
azzal a megkötéssel, hogy Ri, R2, R3, Ro R5, Rs< R?, Rs, R9 és Rio szubsztituensek közül legalább az egyiknek a jelentése hidroxilcsoport.
A gyógyszerészetileg elfogadható sók lehetnek szerves vagy szervetlen savakkal képzett sók, ilyen savak például de nem kizárólag - az ecetsav, propionsav, tejsav, citromsav, borkősav, borostyánkősav, fumársav, maleinsav, malonsav, mandulasav, almasav, ftálsav, sósav, hidrogén-bromid, foszforsav, salétromsav, kénsav, metánszulfonsav, naftalinszulfonsav, benzolszulfonsav, toluolszulfonsav, kámforszulfonsav stb., amennyiben a találmány szerinti vegyület bázikus csoportot tartalmaz. Sók képezhetők továbbá szerves vagy szervetlen bázisokkal, így például - de nem kizárólag - képezhetők alkálifém-sók (pl. nátrium-, lítium- vagy káliumsók), alkáliföldfém-sók, ammóniumsók, (1-6 szénatomos alkil)ammónium-sók, di(l-6 szénatomos alkil) ammónium-sók és tri(l-6 szénatomos alkil)ammónium-sók, amennyiben a találmány szerinti vegyület savas csoportot tartalmaz.
Az alkilcsoport és alkenilcsoport kifejezések magukban foglalják az egyenes és elágazó szénláncú, például 1-6, illetve 2-7 szénatomot tartalmazó csoportokat. Ilyen csoportok például a metil-, etil-, propil-, butil-, izopropil-, szek-butil-, terc-butil-, vinil-, allil-, 1-metil-vinil- stb. csoportok. Ha az alkil- vagy alkenilcsoportok szubsztituáltak, tipikusan mono-, di-, tri- vagy poliszub sztituáltak lehetnek. így halogénatommal szubsztituált csoportok például a 1-brómvinil-, 1-fluorvinil-, 1,2-difluorvinil-, 2,2-difluorvinil-, 1,2,2-trifluorvinil-, 1,2-dibrómetil-, 1,2-dilfuoretil-, 1-fluor-2-bróm-etil-, -CF2CF3, -CF2CF2CF3 stb. csoportok. A halogénatom kifejezésen bróm-, klór-, fluor- és jódatomot értünk.
5- vagy 6-tagú heterociklusos gyűrűk előnyösen a furán, tiofén, pírról, izopirrol, pirazol, imidazol, triazol, didiol, oxazol, oxatiol, izoxazol, oxazol, tiazol, izotiazolem, oxadiazol, furazán, oxatriazol, dioxazol, oxatíazol, tetrazol, pirán, piridin, piridazin, pirimidin, pirazin, triazin, oxazin, oxatiazin és oxadiazin. Még előnyösebb heterociklusos gyűrű a furán, tiofén és piridin.
A „biztosítunk vagy „juttatunk kifejezésen a találmány szerinti vegyületekkel vagy anyagokkal kapcsolatban azt értjük, hogy egy ilyen vegyületet vagy anyagot közvetlenül, vagy pedig egy olyan előhatóanyagot, származékot vagy analógot adagolunk, amely a szervezetben a vegyület vagy anyag hatékony mennyiségévé alakul.
A találmány szerinti (I) általános képletű vegyületek közül előnyösek az (la) általános képletű vegyületek és gyógyszerészetileg elfogadható sóik, a képletben Rí és Rz jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, hidroxil-, 1-6 szénatomos alkil-, 2-7 szénatomos alkenil-, 2-7 szénatomos alkinil·-, 1-6 szénatomos alkoxicsoport vagy halogénatom,
R5, R6, R7, Rg és R9 jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, 1-6 szénatomos alkil-, 2-7 szénatomos alkenil-, 2-7 szénatomos alkinil·-, halogénatom, 1-6 szénatomos alkoxi-, -CN, -CHO, trifluormetil-, 7-12 szénatomos fenilalkilcsoport vagy egy 5- vagy 6-tagú, 1-4 heteroatomot, éspedig 0-, N- és/vagy S-atomot tartalmazó heterociklusos gyűrű;
ahol az R5, Re/ R?, Rg és Rg szubsztituensek esetén megadott alkil- és alkenilcsoportok adott esetben hidroxil-, -CN, halogén, trifluoralkil-, trifluoralkoxi-, -NO2 vagy fenilcsoporttal lehetnek szubsztituálva; és az R5, Rg, Rj, Rs, R9 és Rio szubsztituensek esetén megadott fenilcsoport adott esetben egyszeresen, kétszeresen vagy háromszorosan 1-6 szénatomos alkil-, 2-7 szénatomos alkenil-, halogén, hidroxil-, 1-6 szénatomos alkoxi-, halogén, -CN, -NO2, amino-, 1-6 szénatomos alkilamino-, di(l-6 szénatomos alkil)amino-, tio-, 1-6 szénatomos alkiltio-, 1-6 szénatomos alkilszulfinil-, 1-6 szénatomos alkilszulfonil-, 2-7 szénatomos alkoxikarbonil-, 2-7 szénatomos alkilkarbonil- vagy benzoilcsoporttal lehet szubsztituálva;
azzal a megkötéssel, hogy R5, és R9 szubsztituensek közül legalább az egyiknek a jelentése hidrogénatomtól eltérő.
Az (I) általános képletű vegyületek közül még előnyösebbek az (Ib) általános képletű vegyületek, és még annál is előnyösebbek az olyan vegyületek, amelyek 5- vagy 6-tagú, 1-4 heteroatomot, éspedig 0-, N- és/vagy S-atomot tartalmazó gyűrűként furán-, tiofén- vagy piridingyűrűt tartalmaznak. Ezen is túlmenően előnyösek az olyan vegyületek, amelyek képletében R5, R6, R7, Re és R9 jelentése egymástól függetlenül hidrogén- vagy halogénatom, -CN vagy 2-7 szénatomos alkinilcsoport.
Rí és R2 jelentése lehet egymástól függetlenül például hidrogénatom vagy fluoratom.
R5, R6, R7, Re és Rg jelentése lehet egymástól függetlenül például hidrogénatom, halogénatom, -CN és/vagy 2-7 szénatomos alkinilcsoport.
R5 jelentése lehet például hidrogénatom, fluoratom vagy cianocsoport.
Z. <· 4::·Γ.:4
R9 jelentése lehet hidrogénatom, fluoratom vagy cianocsoport.
R6, R; és Rg jelentése lehet egymástól függetlenül hidrogénatom.
Az 5- vagy 6-tagú, 1-4 heteroatomot, éspedig 0-, Nés/vagy S-atomot tartalmazó heterociklusos gyűrű lehet például furán-, tiofén- vagy piridingyűrű.
A találmány szerinti (I) általános képletú vegyületek körébe tartoznak például a következő vegyületek és gyógyszerészetileg elfogadható sóik:
8-fluor-6-(3-fluor-4-hidroxifenil)-2-naftol;
l-klór-8-fluor-6-(3-fluor-4-hidroxifenil)-2-naftol;
3-(3-fluor-4-hidroxifenil)-7-hidroxi-l-naftonitril;
3-(3,5-difluor-4-hidroxifenil)-7-hidroxi-l-naftonitril;
6-(3-fluor-4-hidroxifenil)-2-naftol;
l-klór-6-(3-fluor-4-hidroxifenil)-2-naftol;
l-klór-6-(2-fluor-4-hidroxifenil)-2-naftol;
l-klór-6-(2,5-difluor-4-hidroxifenil)-2-naftol;
l-klór-6-(2,6-difluor-4-hidroxifenil)-2-naftol;
6-(2,5-difluor-4-hidroxifenil)-2-naftol;
6-(3,5-difluor-4-hidroxifeni1)-2-naftol;
l-klór-6-(3,5-difluor-4-hidroxifeni1)-2-naftol;
6-(2, 6-difluor-4-hidroxifenil)-2-naftol; vagy
8-klór-3-(3-fluor-4-hidroxifenil)-7-hidroxi-l-naftonitril;
7- (4-hidroxifenil)-2-naftol;
7-(3-hidroxifenil)-2-naftol;
6- (4-hidroxifenil)-1-naftol;
6-fenil-2-naftol;
6-(3-hidroxifenil)-2-naftol;
6-(3-klórfenil)-2-naftol;
2-fluor-4-(2-naftil)fenol;
6-(3-klór-4-hidroxifenol)-2-naftol;
l-klór-6-fenil-2-naftol;
l-bróm-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol;
l-klór-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol;
l-fluor-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol;
2-hidroxi-6-(4-hidroxifenil)-1-naftonitril;
6- (4-hidroxifenil)-1-fenil-2-naftol;
6-(4-hidroxifenil)-l-metil-2-naftol;
l-klór-6-(3-klór-4-hidroxifenil)-2-naftol;
6-(4-hidroxifenil)-l-nitro-2-naftol;
l-klór-6-(4-hidroxi-2-metilfenil)-2-naftol;
6-(4-hidroxi-2-metilfenil)-2-naftol;
6- (4-hidroxi-2-metoxifenil)-2-naftol;
6-(2-klór-4-hidroxifenil)-2-naftol;
l-klór-6-(2-klór-4-hidroxifenil)-2-naftol;
6-(2-fluor-4-hidroxifenil)-2-naftol;
8-fluor-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol;
l-klór-8-fluor-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol;
8-klór-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol;
1, 5-diklór-8-fluor-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol;
2-klór-4-(2-naftil)fenol;
3-bróm-8-klór-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol;
1, 8-diklór-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol;
3-bróm-l,8-diklór-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol;
7-hidroxi-3-(4-hidroxifenil)-1-naftonitril;
8-klór-3-(4-hidroxifenil)-7-hidroxi-l-naftonitril; 8-bróm-7-hidroxi-3-(4-hidroxifenil)-1-naftonitril.
A találmány tárgya továbbá eljárás a találmány szerinti (I) általános képletű vegyületek előállítására, amelynek során
a) egy (I) általános képletű vegyületet, ahol Ri-Ri0 jelentése a fenti, azzal a megkötéssel, hogy Ri, R2, R3, R4, R7, Rg, Rg és Rio szubsztituensek közül legalább egynek a jelentése alkoxi- vagy aralkiloxicsoport, például egy (II) általános képletű vegyületet, ahol R és R' közül legalább
az egyiknek a jelentése alkilcsoport, így például 1-6 szénatomos alkilcsoport, vagy aralkilcsoport, így például 7-12 szénatomos aralkilcsoport, dezalkilezünk vagy dezaralkilezünk, így egy megfelelő (I) általános képletű naftilszármazékot kapunk;
vagy
b) egy (Ic) általános képletű vegyületet, ahol R10 jelentése hidroxilcsoport, például egy (la) általános képletű vegyületet halogénezünk, így egy megfelelő halogénnaftol-származékot kapunk;
vagy
c) egy kapott bázikus (I) általános képletű vegyületet sóvá alakítunk, vagy pedig egy sót szabad (I) általános képletű vegyületté alakítunk.
A fent ismertetett reakciók bármelyikében a reakció megkezdése előtt a vegyületek bármelyik reaktív csoportja vagy helye védőcsoporttal látható el, majd a reakció befejezése után a védőcsoport letávolítható.
A találmány szerinti eljárásban alkalmazott reagensek kereskedelemben hozzáférhetők, vagy pedig kereskedelemben hozzáférhető kiindulási anyagokból, a szakirodalomból ismert módszerekkel előállíthatok.
A találmány szerinti vegyületek egyes képviselőinek előállítását az 1-5. reakcióvázlatokon mutatjuk be.
Léteznek standard biológiai tesztmódszerek egy adott tesztvegyület aktivitási profiljának meghatározására. Az alábbiakban röviden ismertetünk néhány reprezentatív tesztmódszert, és a találmány szerinti vegyületek esetén ezekkel kapott adatokat. Az összes vizsgálat - kivéve a radioligandum-kötési vizsgálatot - alkalmazható a vegyületek ösztrogén-receptor agonista vagy antagonista aktivitásának detektálására. Általánosságban: az ösztrogén-receptor agonista aktivitást úgy mérjük, hogy összehasonlítjuk a vegyület és referencia-ösztrogén (pl. 17p-ösztradiol, 17a-etinil-17βösztradiol, ösztron, dietil-sztilbesztrol stb.) aktivitását. Az ösztrogén-receptor antagonista aktivitást általában úgy mérjük, hogy a tesztvegyületet a referencia-ösztrogénnel együtt alkalmazzuk, és a kapott eredményeket összehasonlítjuk az önmagában referencia-ösztrogénnel kapott eredményekkel. SERM ágensek esetén alkalmazható standard farmakológiái tesztmódszereket ismertet az US-4 418 068 és az US-5 998 402 számú irat.
Kiérték elés ERg-hoz és ER3~hoz való kötődési affinitásra nézve
A találmány szerinti vegyületek reprezentatív képviselőit szokásos radioligandum-kötő vizsgálatban azon képességükre nézve vizsgáltuk, hogy versengenek a 17β-ösztradiollal ERa-ra és ERp-ra nézve. A teszteljárás az ERg és ER3 receptorok iránti viszonylagos affinitás meghatározasara szolgáló módszert biztosít. Az eljárást az alábbiakban röviden ismertetjük.
Receptor-extrák tűm előállítása a kötési szelektivitás meghatározásához: A ligandum-kötési doméneket - amelyeket itt egyszerűen úgy határoztunk meg, mint az összes, a DNS kötő doméntől lefelé elhelyezkedő szekvenciát - POR útján kaptuk meg, templátként és primerként teljes hosszúságú DNS~t alkalmazva, amely tartalmazta a megfelelő restrikciós helyeket szubklónozáshoz, miközben fennmaradt a megfelelő leolvasási keret az expresszáláshoz. Ezek a templátok a humán ERa Mgso-V595 aminosavait [Green et al. , Nature, 320:134-139 (1986)], valamint a humán ER3 Mi24-Q53o aminosavait tartalmazták [Ogawa et al. , Biochemical & Biophysical Research Communications, 243:122-126 (1998)]. A humán ERβ-t pET15b-be (Novagen, Madison WI) klónoztuk, a C-terminális Flag-véget hordozó Ncol-BamHl fragmens formájában. A humán ERa-1 a humán ΕΡβ—hoz hasonlóan klónoztuk, azzal az élté réssel, hogy N-terminális His-véget adtunk hozzá. Az összes használt konstrukció szekvenciáját ellenőriztük, mindkét szál teljes szekvenálásával.
A humán proteinek expresszálására BL21(DE3) sejteket használtunk. Tipikusan úgy jártunk el, hogy egy éjszakai tenyészet 10 ml-ével 1 liter BL tápközeget inokuláltunk, amely 100 pg/ml ampicillint tartalmazott. Az elegyet egy éjszakán át 37 °C-on inkubáltuk, majd IPTG-t adtunk hozzá 1 mmol/1 végkoncentrációig, és tovább inkubáltuk 25 C-on 2 óra hosszat. A sejteket centrifugálással (1500xg) összegyűjtöttük, az üledéket mostuk, és 100 ml 50 mmol/1 TrisHCl-t (pH=7,4) és 150 mmol/1 NaCl-t tartalmazó oldatban újra szuszpendáltuk. A sejteket French-sajtón 82800 kPa nyomáson történő kétszeri átjuttatással lizáltuk. A lizátumot 4°C-on 12 OOOx g-vel 30 percig centrifugáltuk, és -70°C-on tároltuk.
Az extraktumok kiértékelés [3H]-ösztradiol specifikus kötésére nézve: Vizsgáló pufferként 1 mmol/1 EDTA-val kiegészített Dulbecco-féle foszfáttal pufferolt konyhasó oldatot (Gibco, lx végkoncentráció) alkalmaztunk. A receptor mennyiségének a vizsgálatban való alkalmazáshoz történő optimalizálásához [3H]-17p-ösztradiolt (New England Nuclear; végkoncentráció = 2 nmol/1) ± 0,6 μmol/l dietilszilbesztrolt és 100 μΐ különböző higitású E. coli lizátumot mértünk be nagy kötőképességű, maszkírozott mikrotitráló lemez (EG&G Wallac) mélyedéseibe. A végső vizsgálati térfogat 120 μΐ volt, és a DMSO koncentrációja <1% volt. A lemezeket szobahőmérsékleten 5-18 óra hosszat inkubáltuk, a nem kötött anyagot leszívattuk, és a lemezeket körülbelül 300 μΐ vizsgálópufferrel háromszor mostuk. Mosás után min den mélyedéshez 135 μΐ szcintillációs koktélt (Optiphase Supermix, EG&G Wallac) adtunk, a lemezeket lezártuk és leg14
alább 5 percig kevertük, hogy a szcintilláló ágens elkeveredjen a maradék pufferrel. A megkötött radioaktivitást folyadék-szcintillációs számlálással (EG&G Wallac Microbeta Plus) értékeltük ki.
Miután meghatároztuk az egyes receptor-készítményekhez azt a hígítást, amely a maximális specifikus kötést biztosítja, a vizsgálatot tovább optimalizáltuk, a nemjelzett 17β-ösztradiol IC50 értékének meghatározására, a receptor-készítmények különböző hígításait alkalmazva. Az egyes receptor-készítmények végső hígítását úgy választottuk meg, hogy a nem-jelzett 17β-ösztradiol IC5o értéke 2-4 mmol/1 legyen.
Kompetitív ligandumkötési teszteljárás. A tesztvegyületeket először DMSO-val szolubilizáltuk, a DMSO végső koncentrációja a kötési vizsgálatban <1% volt. Az egyes tesztvegyületekből nyolc hígítást alkalmaztunk a [3H]-17β-ösztradiolhoz nem-jelzett kompetítorként. Tipikusan egy sorozat vegyület-hígítást kellett volna tesztelni párhuzamosan humán ERa és ERP esetén. Az eredményeket grafikusan ábrázoltuk, a mért DPM formájában a tesztvegyület koncentrációja függvényében. A hozzáillő dózis-válaszreakció görbe megállapításához a transzformált, súlyozott adatokhoz egy négyparaméteres logisztikai modellt illesztettünk hozzá, és az IC50 értéket a vegyület azon koncentrációjaként határoztuk meg, amely a maximális [3H]-17p-ösztradiol kötését 50%-kal csökkentette.
Egyes találmány szerinti vegyület ERa és ΕΗβ iránti kötési affinitás értékeit (IC5o értékek formájában mérve) az 1. táblázatban foglaltuk össze.
1. táblázat
Egyes találmány szerinti vegyületek ER kötési affinitása
Példaszám ΕΗβ IC50 (nmol/1) ERa IC50 (nmol/1)
la 0, 054 0, 280
1b 0, 570 3, 140
1c 0, 527 3,405
Id 0, 006 0, 022
le 0,0175 0, 180
If 0, 245 0, 638
ig 0, 374 1, 345
lh 0, 030 0, 230
li 0, 519 1,360
Íj 0, 242 2, 120
lk 0, 006 0, 092
11 0, 011 0, 107
lm 0, 468 1,785
In 1,360 3, 070
lo 0, 0127 0,266
ip 0, 0025 0, 091
iq 0, 114 0, 884
Ír 0, 007 0, 077
Is 0, 081 1, 402
It 0, 657 1,720
lu 0, 017 0,282
Ív 0, 004 0, 143
Iw 0, 032 0, 3565
Ix 0,206 0, 802
iy 0, 013 0, 140
Íz 0,0095 0, 039
laa 0, 027 0, 074
láb 0, 001 0, 006
lac 0,0032 0, 0032
Példaszám ERp IC50 (nmol/1) ERa IC50 (nmol/1)
lad 0,0020 0, 024
lae 0,0027 0, 018
laf 0, 002 0, 008
lag 0,0012 0, 058
lah 0, 011 0,131
lai 0,0025 0,038
laj 0,0016 0, 022
lak 0,0015 0, 021
lal 0,0011 0, 040
lám 0,0025 0, 125
lan 0,0035 0,029
lao 0,0016 0, 012
lap 0, 002 0, 029
laq 0, 002 0, 017
lar 0, 004 0, 052
las 0,0085 0, 043
lat 0, 010 0, 160
lau 0,0023 0, 105
lav 0,0028 0, 208
law 0, 006 0, 109
lax 0, 011 0, 299
lay 0,0084 0, 092
laz 0, 058 0, 548
Iba 0, 011 0, 519
Ibb 0,0095 0, 095
A fenti standard farmakológiai teszteljárással kapott eredmények ezt mutatják, hogy a találmány szerinti vegyületek az ösztrogén-receptor mindkét altípusát kötik. Az ERβ esetén az IC50 értékek általában alacsonyabbak, ami arra 5 utal, hogy ezek a vegyületek előnyösen ΕΚβ szelektív ligandumok, azonban figyelemre méltóan aktívak az ERa-nál ·*'* '*. *.:» j J * ·* is. A találmány szerinti vegyületek széleskörű aktivitást mutatnak, amelyek - legalább részben - receptor affinitás szelektivitási profiljukon alapszanak. Mivel a találmány szerinti vegyületek az ΕΚβ-t nagyobb affinitással kötik, mint az ERa-t, hasznosak lehetnek olyan betegségek kezelésében vagy gátlásában, amelyek ΕΕβ-η keresztül modulálhatok. Ezenkívül, mivel minden egyes receptor ligandum komplex egyedi, és így különböző együtt-szabályozó proteinekkel történő kölcsönhatásuk is egyedi, a találmány szerinti vegyületek különböző, előre meg nem jósolható aktivitásokat fognak kifejteni, amelyek a celluláris összefüggésektől függenek. így például lehetséges, hogy egy vegyület néhány sejttípus esetén ösztrogén-receptor agonistaként, míg más szövetekben ösztrogén-receptor antagonistaként viselkedik. Az ilyen aktivitást mutató vegyületeket néha SERM-ként (szelektív ösztrogén-receptor modulátorként) említik. A legtöbb ösztrogéntől eltérően azonban a SERM-ek legtöbbje nem okozza a méh nedves-tömegének növekedését. Ezek a vegyületek a méhben antiösztrogén hatást fejtenek ki, és a méh-szövetben képesek teljesen antagonizálni az ösztrogénreceptor agonisták trofikus hatását. A csontokban, szív-érrendszerben és a központi idegrendszerben viszont e vegyületek ösztrogén-receptor agonistaként hatnak. E vegyületek szövet-szelektív természetének köszönhetően alkalmazhatók emlősök esetén olyan betegségek vagy tünetek kezelésére vagy gátlására, amelyeknek oka ösztrogénhiány (bizonyos szövetekben, például csontokban és a szív-érrendszerben) vagy ösztrogénfölösleg (a méhben vagy az emlőmirigyekben), vagy pedig ezekkel kapcsolatosak. Emellett a találmány szerinti vegyületek szintén viselkedhetnek ösztrogén-receptor agonistaként az egyik receptortípuson, míg a másikon ösztrogén-receptor antagonistaként. így például kimutatták, hogy a vegyületek antagonizálhatják a 17β-ösztradiol hatá18
J**· · · · *· < · a·
u), <· :,r .u sát az ΕΚβ esetén, míg az ERa-nál ösztrogén-receptor agonista hatást fejtenek ki [Sun et al., Endocrinology, 140:800-804 (1999)]. Az ilyen ERSAA (ösztrogén-receptor szelektív agonista antagonista) aktivitás biztosítja e ve5 gyületek sorozatában a farmakológiailag megkülönböztethető ösztrogén aktivitást.
Metallotionein-II mRNS szabályozása
A hatásukat ERβ receptoron, és nem az ERoí receptoron keresztül kifejtő ösztrogének képesek fokozva szabályozni a 10 metallotionein-II mRNS-szintet Saos-2 sejtekben, amint ezt Harris ismertette [Endocrinology, 142:645-652 (2001)]. E tesztmódszer eredményei kombinálhatok az alábbiakban ismertetett tesztmódszer (ERE riporter tesztmódszer) eredményeivel, hogy megkapjuk a találmány szerinti vegyületek szelek15 tivitási profilját (lásd még WO 00/37681 számú iratot) Egyes vegyületek adatait a 2. táblázatban foglaltuk össze.
2. táblázat
Metallotionein-II mRNS szabályozása Saos-2 sejtekben
le példa 17, 0
11 példa 5, 5
lo példa 5,7
Ip példa 6, 0
Is példa 4,9
Tesztvegyületek kiértékelése ERE-riporter tesztmódszerrel 20 MCF-7 emlőrák sejtekben
A tesztvegyületek törzsoldatát DMSO-val készítettük (rendszerint 0,1 mol/1 koncentrációval), majd DMSO-val történő 10-100-szoros hígítással 1-10 mmol/I-es adagokat készítettünk a vizsgálathoz. A DMSO-oldatokat 4°C-on 25 (0,1 mol/1) vagy -20°C-on (<0,l mol/1) tároltuk. Az MCF-7 sejteket hetente kétszer passzáltuk tenyésztőközeggel (D-MEM/F-12 közeg, amely 10 térfogat%, hőkezeléssel inaktivált borjuembrio szérumot, 1 terfogat% penicillin—strepto— mycint és 2 mmol/1 glutaMax-l-t tartalmazott). A sejteket szellőztetett lombikokban tartottuk fenn 37°C-on, 5 térfogat% CO2/95 térfogat% nedvesített levegő összetétellel rendelkező légterű inkubátorban. A kezelés előtt egy nappal a sejteket 96 mélyedéses lemezen 25000 sejt/mélyedés koncentrációban tápközeggel szélesztettük, és egy éjszakán át 37°C-on inkubáltuk.
A sejtek fertőzését 2 óra hosszat 37°C-on 50 μΐ/mélyedés mennyiségben alkalmazott, kísérleti tápközeggel 1:10 arányban hígított adenovirus 5-ERE-tk-luciferázzal végeztük (a kísérleti tápközeg összetétele: fenolvöröstől mentes D-MEM/F-12 tápközeg, amely 10 térfogat%, hőkezeléssel inaktivált, aktívszénen leszívatott borjúembrió szérumot, 1 térfogat% penicillin-streptomycint, 2 mmol/1 glutaMax-l-t, 1 mmol/1 nátrium-piruvátot tartalmazott) . A mélyedéseket azután 150 μΐ kísérleti tápközeggel egyszer mostuk, és végül a sejteket, 8 mélyedés/kezelés ismétlésben, 24 óra hosszat 37°C-on 150 μΐ/mélyedés vivőanyaggal (<0,1 térfogat% DMSO) , illetve >1000-szeresen kísérleti tápközeggel hígított vegyülettel kezeltük.
A tesztvegyületek első szkrínelését egyetlen dózisnál, 1 pmol/l-nél végeztük, önmagukban (ösztrogén-receptor agonista mód), illetve 0,1 nmol/1 173-ösztradiollal kombinálva (ECbo/ ösztrogén-receptor antagonista mód) . Minden 96-mélyedéses lemez tartalmazott még vivőanyagos kontrollcsoportot (0,1 térfogat% DMSO), valamint ösztrogén-receptor agonista kontrollcsoportot is (0,1 nmol/1, illetve 1 nmol/1 17p-ösztradiol). A dózis-válaszreakció kísérleteket ösztrogén-receptor agonista és/vagy ösztrogén-receptor antagonista módban hajtottuk végre az aktív vegyületek 10'14-10’5 mol/1 tartományában. Ezekből a dózis-válaszreak ció görbékből meghatároztuk az EC50 és IC50 értékeket. Minden kezelési csoportban az utolsó mélyedés 5 μΐ 3xl0-5 mol/1 ICI-182780 jelű vegyületet tartalmazott (10~6 mol/1 végkoncentrációban) ösztrogén-receptor antagonista kontrollként.
Kezelés után a sejteket rázógépen 15 percig 25 μΐ/mélyedés Ix sejttenyészet-lizáló reagenssel (Promega Corporation) végzett kezeléssel lizáltuk. A sejtlizátumokat (20 μΐ) egy 96-mélyedéses luminométer-lemezre vittük át, és a luciferáz aktivitást MicroLumat LB 96 P luminométerrel (EG&G Berthold) 100 μΐ/mélyedés luciferáz szubsztrát (Promega Corporation) alkalmazásával mértük. A szubsztrát injektálása előtt minden mélyedés esetén 1 másodpercig háttér-mérést végeztünk. A szubsztrát injektálása után 1 másodperc várakozással 10 másodpercig mértük a luciferáz aktivitást. Az adatokat a luminométerről Macintosh személyi számítógépre vittük, és JMP szoftver (SAS Institute) alkalmazásával elemeztük; ez a program minden mélyedés esetén levonja a luciferáz mérésből a háttér-leolvasást, majd minden kezeléshez meghatározza az átlagot és a standard deviációt .
A luciferáz adatokat logaritmikusán transzformáltuk, és Huber-féle M-becslés alkalmazásával a kívül eső transzformált megfigyelés-értékeket súlyozással lehagytuk. A JMP szoftver segítségével elemeztük a transzformált súlyozott adatokat egyutas ANOVA-ra (Dunnett-teszt). A vegyületekkel végzett kezeléseket az ösztrogén-receptor agonista mód esetén a vivőanyagos kontroll eredményekkel, illetve az ösztrogén-receptor antagonista mód esetén a pozitív ösztrogénreceptor agonista kontroll eredményekkel (0,1 nmol/1 173-ösztradiol) vetettük össze. A kezdeti egyetlen dózissal végzett kísérlet esetén, ha a vegyülettel végzett kezelés eredményei szignifikánsan különböztek a megfelelő kontroll
Ζ, Ζ* Η* .421 értékektől (ρ<0,05), az eredményeket a 17β-öΞztradiolos kontrollra vonatkoztatva százalékban adtuk meg [azaz: ((vegyület - vivőanyagos kontrol)/(173-ösztradiolos kontroll - vivőanyagos kontroll))xlOO]. A JMP szoftver segítségével meghatároztuk továbbá az EC50 és IC50 értékeket a nem-lineáris dózis-válaszreakció görbékből.
Kiértékelés uterotrofikus aktivitásra nézve
A tesztvegyületek uterotrofikus aktivitását a következő standard farmakológiai tesztmódszerekkel lehet meghatározni .
1. módszer: Szexuálisan éretlen (18 napos) SpragueDawley patkányokat szereztünk be Taconic-tól, és korlátlan hozzáféréssel kazein-alapú étrendet (Purina Mills 5K96C) és vizet biztosítottunk számukra. A 19., 20. és 21. napon a patkányoknak szubkután 17α-etinil-17β-ösztradiolt (0,06 ug/patkány/nap), tesztvegyületet, illetve vivőanyagot (50 térfogati DMSO/50 térfogati Dulbecco-PBS) adtunk. Az ösztrogén-receptor agonista hatás meghatározására a vegyületeket a 17α-etinil-17β-ösztradiollal együtt (0,06 pg/patkány/nap) adagoltuk. Csoportonként hat patkányt alkalmaztunk, amelyeket az utolsó injekció adagolása után körülbelül 24 órával C02 belélegeztetéssel és a tüdő feltöltésével eutanizáltünk. A méheket kiemeltük, és a zsírszövet eltávolítása és a bennük levő folyadék kinyomása után lemértük. A szövetmintákat a génexpresszió (pl. komplement faktor 3 mRNS) elemzéséhez hirtelen le is lehet fagyasztani. Egyes találmány szerinti vegyületek esetén kapott eredményeket a 3. táblázatban foglaltuk össze.
3. táblázat
Egyes vegyületek kiértékelése patkány uterotrofikus tesztmódszerben
Vegyület Átlagos méh-tömeg (mg) + SEM
Vivőanyag 21,4 ± 1,6
17oí-etinil-17 6-ösztradiol (0,06 pg/patkány/nap) 85,5 ± 3, 1
lav példa vegyülete (2 mg/patkány/nap) 23,3 ± 1,3
lav példa vegyülete (2 mg/patkány/nap) + 17oí-etinil-173~ösztradiol (0,06 pg/patkány/nap) 81,9 ± 4,2
2. módszer: Szexuálisan éretlen (18 napos) 129 SvE egereket szereztünk be Taconic-tól, és korlátlan hozzáféréssel kazein-alapú étrendet (Purina Mills 5K96C) és vizet biztosítottunk számukra. A 22., 23., 24. és 25. napon az egereknek vegyületet, illetve vivőanyagot (kukoricaolaj) adtunk szubkután. Csoportonként hat egeret alkalmaztunk, 10 amelyeket az utolsó injekció adagolása után körülbelül 6 órával CO2 belélegeztetéssel és a tüdő feltöltésével eutanizáltunk. A méheket kiemeltük, és a zsírszövet eltávolítása és a bennük levő folyadék kinyomása után lemértük. Egyes találmány szerinti vegyületek esetén kapott eredményeket a 15 4. táblázatban foglaltuk össze.
. táblázat
Egyes vegyületek kiértékelése egér uterotrofikus tesztmódszerben
Vegyület Átlagos méh-tömeg (mg) ± SEM
Vivőanyag o ω 1+ o co
17p-ösztradiol (50 mg/kg/nap) 45, 3 ± 1,9
lav példa vegyülete (50 mg/kg/nap) ΓΌ 1+ o co
Kiértékelés csontritkulás és lipidmodulálás (kardioprotektív hatás) tekintetében
240-275 g testtömegű nőstény, petefészküktől megfosztott, illetve ál-operált Sprague-Dawley patkányokat szereztünk be 1 nappal az operáció után Taconic Farms-tól. Az állatokat 3-4 egyedet tartalmazó ketrecekben tartottuk egy 12/12 világos/sötét megvilágítási periódust biztosító teremben, és kívánság szerinti mennyiségű takarmányt (Purina 5K96C patkányrágcsa) és vizet adtunk nekik. A vizsgálatokhoz a kezelés 1 nappal a megérkezés után kezdődött, és hetente 7-szer 6 hétig tartott. Egy kor szerint összeállított, ál-operált, semmilyen kezelést nem kapott csoport szolgált érintetlen, ösztrogén-telített kontrollcsoportként minden vizsgálathoz.
A tesztvegyületekből 50 térfogat% DMSO (JT Baker, Phillipsburg, NJ) / Ix Dulbecco-féle foszfáttal pufferolt konyhasóoldat (Gibco BRL, Grand Island, NY) vivőanyaggal, meghatározott koncentrációjú oldatokat készítettünk úgy, hogy a kezelési térfogat 100 g testtömegre számítva 0,1 ml legyen. A 17p-ösztradiolt 20 pg/ml koncentrációban kukoricaolajban oldottuk, és szubkután 0,1 ml/patkány dózisban adagoltuk. A dózisokat háromhetente a csoport átlagos testtömegéhez igazítottuk, és szubkután adagoltuk.
A kezelés megkezdése után öt héttel és a vizsgálat befejezése előtt egy héttel minden patkánynál meghatároztuk a csont ásványsűrűségét (BMD). A proximális sípcsont teljes és gerendázatos sűrűségét az anesztetizált patkányokon értékeltük ki XCT-960M (pQCT; Stratec Medizintechnik, Pforzheim, Németország) készülék segítségével.
A méréséket a következőképpen végeztük: Tizenöt perccel a szkennelés előtt a patkányokat 45 mg/kg ketamin, 8,5 mg/kg xylazine és 1,5 mg/kg acepromazine intraperitoneális injektálásával anesztetizáltuk. A jobb hátsó lábat egy 25 mm átmérőjű polikarbonát csövön vezettük át, és szalagokkal rögzítettük egy akril kereten úgy, hogy a bokaízület 90° szöget, a térdízület pedig 180° szöget zárjon be. A polikarbonát csövet egy csúszó talpra rögzítettük, amely azt a pQCT nyílására merőleges helyzetben tartotta. A talpat úgy állítottuk be, hogy a combcsont disztális vége és a sípcsont proximális vége essen a szkennelő zónába. Egy kétdimenziós kutatósugarat futtattunk 10 mm hosszúságban és 0,2 mm vonalfelbontással. Miután a kutatósugarat egy monitoron megjelenítettük, meghatároztuk a sípcsont proximális végének helyzetét. A pQCT szkennelést ettől a ponttól 3,4 mm távolságban indítottuk. A pQCT szkennelés 1 mm vastagságban történt, a voxel (háromdimenziós pixel) mérete 0,140 mm, és a szeleten át 145 vetítési pontból áll.
Miután a pQCT szkennelés befejeződött, a képet megjelenítettük a monitoron. Kijelöltük a fontos területet, amely tartalmazta a sípcsontot, azonban a szárkapocscsontot nem. A lágy szöveteket egy iteratív algoritmussal matematikailag eltávolítottuk. A megmaradt csont sűrűségét (teljes sűrűség) mg/cm3 értékekben adtuk meg. A csont külső 55%-át koncentrikus spirálban matematikailag lehántottuk. A megmaradt csont sűrűségét (gerenda sűrűség) mg/cm3 értékekben adtuk meg.
A BMD kiértékelése után a patkányokat CO2 belélegeztetéssel és a tüdő feltöltésével eutanizáltuk, és vért vettünk a koleszterinszint meghatározására. A méheket szintén kiemeltük, és a zsírszövet eltávolítása és a bennük levő folyadék kinyomása után lemértük. Megmértük a teljes koleszterinszintet Boehringer-Mannheim Hitachi 911 klinikai elemzővel, Cholesterol/HP kit alkalmazásával. A statisztikai adatokat egyutas varianciaelemzéssel, Dunnet-teszttel hasonlítottuk össze.
Kiértékelés antioxidáns aktivitásra nézve
Sertés aortákat szereztünk be vágóhídról, mostuk, hűtött PBS-be helyeztük, és aorta belhám-sejteket gyűjtöttünk. A sejtek összegyűjtéséhez az aorta bordaközi edényeit elkötöttük, és az aorta egyik végét csipesszel leszorítottuk. Friss, sterilre szűrt, 0,2% kollagenázt (Sigma Type I) helyeztünk az edénybe, majd lezártuk a másik végét is, így zárt rendszert alakítottunk ki. Az aortát 37°C-on 15-20 percig inkubáltuk, majd a kollagenáz oldatot összegyűjtöttük, és 5 percig 2000xg-vel centrifugáltuk. Az üledékeket 7 ml belhámsejt-tenyésztő közegben szuszpendáltuk, amely fenolvörös mentes DMEM/Ham F12 közeg volt, 5 térfogat% aktívszénen szűrt FBS, 5 térfogat% NuSerum, 4 mmol/1 L-glutamin, 1000 E/ml, 100 pg/ml penicillin-streptomycin és 75 pg/ml gentamycin kiegészítéssel, majd 100 mm-es Petricsészékbe oltottuk, és 37°C-on 5 térfogat% CO2-t tartalmazó légtérben inkubáltuk. 20 perc múlva a sejteket PBS-sel öblítettük, friss tápközeget adagoltunk, és ezt 24 óra múlva megismételtük. A sejtek körülbelül egy hét múlva összefüggő réteget alkottak. A belhám-sejteket rutin eljárásban hetente kétszer tápláltuk, ha összefüggőek, tripszinnel kezeltük és 1:7 arányban oltottuk. 12,5 pg/ml LDL-nek a sejtek által közvetített oxidációját a kiértékelendő vegyület (5 pmol/l) jelenlétében 4 óra hosszat 37°C-on hagytuk végbemenni. Az eredményeket az oxidatív folyamat gátlásának százalékában fejeztük ki, a szabad aldehidek elemzésére szolgáló TBARS (tiobarbitursavval reaktív anyagok) módszerrel mérve [Yagi, Biochemical Medicine, 15:212-216 (1976)].
Progeszteron-receptor mRNS szabályozás standard farmakológiai tesztmódszere
A tesztmódszert a találmány szerinti vegyületek ösztrogén és antiösztrogén aktivitásának mérésére lehet alkalmazni [Shughrue et al. , Endocrinology, 138:5476-5484 10 (1997)]. Egyes találmány szerinti vegyületek esetén kapott eredményeket az 5. táblázatban foglaltuk össze.
5. táblázat
Egyes találmány szerinti vegyületek hatása progeszteron mRNS szabályozására a patkány-agy preoptikus területén
Vegyület Progeszteron-receptor mRNS (önkényes egységek; átlag ± SD)
Vivőanyag 55, 4 ± 9, 4
17p-ösztradiol (30 pg/kg) 557,1 ± 80,6
lav példa 10 mg/kg) 33,7 ± 20, 6
Patkány hőhullám tesztmódszer
A találmány szerinti vegyületek hőhullámra gyakorolt hatását olyan standard farmakológiai tesztmódszerrel értékelhetjük ki, amelyben a tesztvegyületek azon képességét mérjük, hogy tompítja a farok bőrének hőmérsékletemelkedé20 sét olyan morfin-függő patkányok esetén, amelyektől a drogot naloxon alkalmazásával megvontuk [Merchenthaler et al. , Maturias, 30:307-316 (1998)]. A módszer használható továbbá ösztrogén-receptor antagonista aktivitás detektálására, tesztvegyület és referencia-ösztrogén együttadagolásával.
Kiértékelés vasomotorikus funkció tekintetében, izolált patkány-aortagyűrűkben
240-260 g testtömegű Sprague-Dawley patkányokat 4 csoportba osztottunk:
1. normál, petefészküktől nem megfosztott (intakt),
2. petefészküktől megfosztott (ovex), vivőanyaggal kezelt, 3. petefészküktől megfosztott, 17p-ösztradiollal (1 mg/kg) kezelt,
4. petefészküktől megfosztott, tesztvegyületekkel (különböző dózisban) kezelt állatok.
Az állatok petefészkét körülbelül három héttel a kezelés előtt távolitottuk el. Az állatoknak 5 térfogat% Tween 80-t tartalmazó, desztillált, ionmentesített vízben oldott 17p-ösztradiolt (1 mg/kg/nap) vagy tesztvegyületet adtunk gyomorba. A vivőanyaggal kezelt állatoknak olyan mennyiségű vivőanyagot adagoltunk, amely a hatóanyaggal kezelt csoportoknak adott térfogatnak felelt meg.
Az állatokat CO2 belélegeztetéssel és kivéreztetéssel eutanizáltuk. A mellkasi aortákat gyorsan kiemeltük, és 37°C-os fiziológiás oldatba helyeztük, amelynek összetétele: NaCl 54,7 mmol/1, KC1 5,0 mmol/1 NaHC03 25, 0 mmol/1, MgCl2-2H2O 2,5 mmol/1, D-glükóz 11,8 mmol/1, CaCl2 0,2 mmol/1, 95:5 térfogatarányú CO2-O2 gázeleggyel telítve, végső pH=7,4. A külső felületről eltávolítottuk az ér külső felületét, és a véredényeket 2-3 mm széles gyűrűkre vagdaltuk. A gyűrűket 10 ml szövetfürdőbe függesztettük, alsó végüket a fürdő aljához rögzítettük, a másikat pedig egy erőátalakító szerkezethez. A gyűrűkre 1 g nyugalmi tenziót helyeztünk. A gyűrűket 1 óra hosszat ekvilibráltuk, majd a kapott jeleket elemeztük.
Ekvilibrálás után a gyűrűket phenylephrine növekvő (10-8—104 mol/1) koncentrációinak tettük ki, és a mért tenziót feljegyeztük. A fürdőket ezután háromszor friss puf ferrel öblítettük. Kimosás után 200 mmol/1 L-NAME-t adagoltunk a szövetfürdőhöz, és 30 percig hagytuk ekvilibrálódni. Ezután megismételtük a phenylephrine-koncentráció válaszreakció-görbe felvételét.
Kiértékelés kardioprotektív aktivitásra nézve
Apolipoprotein-E-hiányos C57/B1J (apo E KO) egereket szereztünk be Taconic Farm-tói. Az állatokkal végzett módszereket az IACUC előírások szigorú betartása mellett végeztük. 4-7 hetes nőstény, petefészküktől megfosztott apo E KO egereket cipősdoboz-ketrecekben tartottunk, táplálékhoz és vízhez való szabad hozzáféréssel. Az állatokat testtömeg szerint véletlenszerűen osztottuk 12-15 fős csoportokba. Az állatoknak precíz adagolási étrendelőírás szerint a táplálékban ösztrogént (17p-ösztradiol-szulfát mg/kg/nap) adtunk, a fogyasztott táplálékot hetente mértük, és a dózist annak megfelelően, az állatok testtömege alapján hozzáigazítottuk. Western-stílusú (57U5) étrendet alkalmaztunk, amelyet Purina gyárt, és amely 0,50 tömeg% koleszterint, 20 tömeg% disznózsírt és 25 NE/kg E-vitamint tartalmazott. Az állatokat 12 hétig ilyen módon tápláltuk, és láttuk el kezeléssel. A kontroll állatokat szintén Western-stílusú étrenden tartottuk, vegyület adagolása nélkül. A vizsgálati időszak végén az állatokat eutanizáltuk, és plazma-mintát vettünk tőlük. A szíveket helyben perfúziósán kezeltük, először konyhasóoldattal, majd semlegesre pufferolt 10 térfogat%-os formalinoldattal.
A plazmabeli lipidek és lipoproteinek meghatározására az össz-koleszterint és triglicerideket enzimatikus módszerekkel, kereskedelemben kapható (Boehringer Mannheim és Wako Biochemicals) készletekkel határoztuk meg, és Boehringer Mannheim Hitachii 911 Analyzer segítségével elemeztük. A plazmabeli lipoproteinek elválasztását és mennyiségi meghatározását FPLC méret-frakcionálással végeztük. Röviden:
• · ·«·· · · Μ·» ·. .. j «...
50-100 ml szérumot szűrtünk, és sorbakötött Superose-12 és Superose-6 oszlopra injektáltuk, és 1 mmol/l-es nátriumEDTA és 0,15 mol/1 NaCl-oldat konstans áramával eluáltuk. A VLDL, LDL és HDL görbék alatti területeket Waters Millennium szoftver segítségével integráltuk, és az egyes lipoprotein frakciók mennyiségi értékét az össz-koleszterin-érték és az egyes kromatogramm csúcsok alatti területek relatív százalékos értéke szorzataként határoztuk meg.
Az aortás atherosclerosis mennyiségi meghatározására az aortákat óvatosan izoláltuk, és kezelés előtt 48-72 óra hosszat formalin rögzítőoldatban tartottuk. Az atherosclerotikus léziókat Oil Red 0 festéssel határoztuk meg. A véredényeket rövid ideig színtelenítettük, majd Sony 3CCD videokamerával felszerelt Nikon SMU800 mikroszkóp rendszerrel és ezzel összhangban levő IMAQ Configuration Utility (National Instrument) képrögzítő szoftver segítségével felvételt készítettünk róluk. A léziókat az aortaív mentén egy felhasználói küszöbértéket hasznosító szoftvercsomag (Coleman Technologies) segítségével mennyiségileg értékeltük ki. Automatikus lézióbecslést végeztünk a véredényeken, a program küszöbérték funkciójának alkalmazásával, különösen az aortaíven belüli területen, a brachio-cefális törzs proximális szélétől a bal szubklaviális artéria disztális széléig. Az aorta atherosclerotikus adatait ezen adott területen belül található százalékos léziós területek formájában fejeztük ki.
Kiértékelés a gondolkodás/észlelés elősegítése tekintetében Petefészküktől megfosztott patkányokat (n=50) 5 egymás utáni napon 10-10 percig szoktattunk egy radiális, 8-karú labirintushoz. A hozzászoktatás, illetve a kísérlet előtt az állatoktól megvontuk a vizet. A labirintus karjainak végébe helyezett 100 μΐ víz szolgált megerősítésként. A radiális karú labirintusban a győzelem-eltolási feladatban • · · ······ Μ·· ·» · · 4 A*·· való tapasztalatszerzést úgy értük el, hogy az állatnak lehetővé tettük, hogy az egyik, csalétekkel ellátott karhoz hozzájusson. Ivás után az állat kilépett a karból, és a központi részen lépett be újra, ahol ekkor az előzőleg meglátogatott karhoz vagy egy új karhoz fért hozzá. A helyes választ az jelentette, ha az állat az új karba való belépést választotta. Minden állat 5 kísérletben vehetett részt naponta, 3 napon át. Az utolsó tapasztalatszerzési kísérlet után az állatokat a következő 4 csoport valamelyikébe osztottuk :
1. negatív kontroll: 10 térfogat% DMSO/szezámolaj vivőanyag injekció naponta, 6 napon át (1 ml/kg, s.c.);
2. pozitív kontroll: 17p-ösztradiol-benzoát injekció 2 napig, és a második injekció után 4 napon át tesztelve (17p-ösztradiol 10 pg/0,1 ml patkányonként);
3. ösztradiol: 17p-ösztradiol injekció naponta, 6 napon át (20 pg/kg, s.c.);
4. tesztvegyület: injekció naponta, 6 napon át (dózis változó) .
Az injekciók adagolását a tapasztalatszerzés utolsó napján végzett tesztelés után kezdtük. Az 1., 3. és 4. csoport utolsó injekcióját a munkamemória tesztelés előtt 2 órával adagoltuk.
A munkamemóriára nézve történő tesztelés egy késleltetett, mintához nem kötött (delayed non-metching-to sample = DNMS) feladat volt, 15, 30, illetve 60 másodperces késleltetéssel. A feladat a tapasztalatszerzési feladat egy variációja, amikoris az állatot a központi térre helyezzük, és egy karba engedjük belépni, úgy mint az előzőekben. Egy második kart akkor nyitunk meg, amikor az állat félútra jutott az első karban, és az állatnak ismét ezt a kart kell választania. Ha az állat félútig jutott a második karban, mindkét kaput zárjuk, és megindítjuk a késleltetést. Ha a
u.. ·..· késleltetés lejárt, megnyitjuk a két előbbi kaput, valamint ezzel párhuzamosan egy harmadikat. A helyes válasz az, ha az állat félútig eljut a harmadik karban. Helytelen választ jegyzünk fel, ha az állat félútig eljut az első vagy a má sodik karban. Minden állat 5 kísérletben vett részt, mindhárom késleltetési intervallum esetén, azaz állatonként 15 kísérletet végeztünk.
Kiértékelés mellhártyagyulladásra gyakorolt hatás tekintetében
A kísérletesen indukált mellhártyagyulladás tüneteinek csökkentését patkányok esetén Cuzzocrea módszerével végezhetjük [Endocrinology, 141:1455-1463 (2000)]. Kiértékelés emlő-végrügy tesztmódszerben
Ösztrogének szükségesek ahhoz, hogy az emlővezetékek teljes hosszukat elérjék és elágazzanak, majd progeszteron hatására a lobulo—alveoláris végrügyek kifejlődjenek. Ebben 3 tesztmódszerben egyes találmány szerinti vegyületek mám motrofikus aktivitását értékeltük ki a következő standard farmakológiái tesztmódszerrel. Huszonnyolc-napos SpragueDawley patkányok (Taconic Farms, Germantown, NY) petefészkét eltávolítottuk, és kilenc napig pihenni hagytuk őket. Az állatokat 12 óra sötét/világos megvilágítási ciklusban tartottuk, kazein-alapú Purina Laboratory Rodent Diet 5K96 (Purina Ricmind, IN) takarmányt kaptak, és vízhez szabadon hozzáfértek. A patkányoknak ezután hat napon át szubkután a következő injekciókat adagoltuk: vivőanyag [50 térfogat% DMSO (JT Baker, Phillipsburg, NJ)/50 térfogat% Ix Dulbeccoféle foszfáttal pufferolt konyhasóoldat (GibcoBRL, Grand Island, NY)], 17β-ösztradiol (0,1 mg/kg), illetve tesztvegyület (20 mg/kg) . Az utolsó három napon a patkányoknak még progeszteront (30 mg/kg) is adtunk szubkután. A hetedik na pon a patkányokat eutanizáltuk, és az emlő—zsírpárnát ki metszettük. Ezt a zsírpárnát elemeztük kazein kináz II mRNS-re nézve, amely a végrügyek proliferációjának markere. A kazein kináz II mRNS-t reális idejű RT-PCR módszerrel elemeztük. Röviden: RNS-t izoláltunk Trizol (GibcoBRL, Grand Island, NY) segítségével a gyártó utasítása szerint végzett kezelés után. A mintákat DNS-áz I-gyel kezeltük DNS-mentes készlet (Ambion) segítségével, és a kazein kináz II mRNS-szinteket reális idejű RT-PCR módszerrel, Tqman Gold eljárással (PE Applied Biosystems) mértük. 50 ng RNS-t elemeztünk három párhuzamos mérésben, kazein kináz II specifikus primer-pár (5' primer: CACACGGATGGC GCATACT; 3' primer: CTCGGGATGCACCATGAAG) és rendelésre készített próba (TAMRA-CGGCACTGGTTTCCCTCACATGCT-FAM) felhasználásával. A kazein kináz II mRNS szinteket az egyes mintákban levő 18s riboszomális RNS-re normalizáltuk, a reakciókban PE Applied Biosystems által biztosított primereket és mintákat alkalmaztunk. Egyes találmány szerinti vegyületek esetén kapott eredményeket a 6. táblázatban foglaltuk össze.
6. táblázat
A vegyületek kiértékelése patkány mammotrofikus vizsgálatban
Vegyület Kazein kináz II mRNS/18s rRNS (átlag ± SEM)
Vivőanyag 2,66 ± 0,13
Progeszteron (30 mg/kg) + 17p-ösztradiol (0,1 mg/kg) 39, 0 ± 5, 4
Progeszteron (30 mg/kg) + lav példa vegyülete (20 mg/kg) .1,06 ± 0,17
Kiértékelés vastagbél-gyulladásra nézve HLA patkány standard farmakológiai tesztmódszerben
A találmány szerinti vegyületek HLA patkány standard farmakológiai tesztmódszerben értékelhetők ki, amely embe rek vastagbél-gyulladását modellezi. Az alábbiakban röviden ismertetjük a módszert és a kapott eredményeket. 8-10 hetes him HLA-B27 patkányokat szereztünk be Taconic-tól, és korlátlan hozzáférést biztosítottunk számukra a táplálékhoz (PMI Lab diet 5001) és vízhez. A patkányoknak 46 napon át naponta vivőanyagot (2 térfogat% Tween 80/0,5 térfogat% metilcellulóz) , illetve lav példa szerinti vegyületet (10 mg/kg) adagoltunk orálisan. A széklet minőségét naponta ellenőriztük, és a következő beosztás szerint osztályoztuk: hasmenés = 3; lágy széklet = 2; normális széklet = 1. A vizsgálat végén szérummintát gyűjtöttünk, és -70°C-on tároltuk. A vastagbélből metszetet készítettünk hisztológiai elemzéshez, és egy további szegmenst vizsgáltunk mieloperoxidáz aktivitásra nézve. A kapott eredményeket a 7. táblázatban foglaltuk össze, melyből látható, hogy az lav példa szerinti vegyület adagolásának hatására a széklet normalizálódott 21 napon belül.
. táblázat napon át vivőanyaggal, illetve az lav példa szerinti vegyülettel orálisan kezelt HLA patkányok székletének jellemzői (a megadott értékek a csoport átlagpontszámát mutatják, az adagolás első 26 napján)
Nap Vivőanyag lav példa vegyülete
1 2,75 2, 75
2 3 2,5
3 3 2,25
4 3 2,5
5 3 2,25
6 3 2,5
7 3 2,5
8 3 2
9 3 1,5
Nap Vivőanyag lav példa vegyülete
10 3 1,5
11 3 1,5
12 3 1,75
13 3 1,75
14 3 1,5
15 3 1,5
16 3 1,25
17 3 1,25
18 3 1,25
19 3 1, 25
20 3 1, 25
21 3 1, 25
22 3 1
23 3 1
24 3 1
25 3 1
= hasmenés; 2 = lágy széklet; 1 = normális széklet
Hisztológiai elemzéshez a vastagbél-szövetet 10 térfogat%-os semlegesre pufferolt formaiinba merítettük. Az egyes vastagbél-mintákat négy mintára osztottuk a kiértéke5 léshez. A formaiinban rögzített szöveteket Tissue Tek vákuum-telitő módszerrel (Miles, Inc.; West Haven, Connecticut) paraffinba ágyaztuk. A mintákból 5 pm-es metszeteket vágtunk, és hematoxylinnel és eozinnal (H&E) megfestettük a Boughton-Smith szerinti módosított skálával történő hiszto10 lógiai vak kiértékeléshez. A pontszámok meghatározása után a vak mintákat azonosítottuk, az adatokat táblázatba foglaltuk, és AHOVA útján elemeztük, lineáris modellezéssel, többszörös átlag-összehasonlítással. A vastagbél-szövet metszeteket különböző betegség-indikátorokra nézve értékel15 tűk ki, és relatív pontszámokkal jellemeztük. Amint a ~·. ·.►· ..· ··:·
8. táblázatból látható, az lav példa szerinti vegyület hatékonyan csökkenti a szövetsérülés különböző mutatóit.
8. táblázat
Betegség súlyosságának hisztológiai pontozása HLA-B27 patkány modellben vivőanyag, illetve az lav példa szerinti vegyület 46 napig történő orális adagolása után
Vivőanyag lav példa vegyülete
Fekélyképződés (0-2) 1,19 ±0,69 0, 44 ±0, 43
Gyulladás (0-3) 2,38 ±0,32 1,13 + 0,43*
Lézió mélysége (0-2) 1,0 ± 0, 54 0, 38 ± 0, 43
Fibrózis (0-2) 0, 94 ± 0,75 0,07 ± 0,13*
Összes pontszám 5,50 ± 2,1 2,00 ± 1,14*
*szignifikánsan kisebb, mint a vivőanyag
Kiértékelés két artritisz modellben
Lewis patkány vizsgálat adjuvánssal indukált ízületi gyulladásra nézve. Hatvan 12-hetes nőstény Lewis patkányt standard tartási körülmények között tartottunk. Standard étrendet és vizet kívánság szerint kaptak. Az egyes állatokat ketrec-kártyával azonosítottuk, amelyen jelöltük a vizsgálati csoportot és az állat számát. A patkány-számokat letörölhetetlen jelzőtintával jelöltük az egyes állatok farkán. Legalább 10-21 nappal a vizsgálat előtt anesztetizáltuk az állatokat, és petefészküket standard aszeptikus sebészeti módszerrel eltávolítottuk.
Freund-féle komplett adjuvánst (Sigma Immuno Chemicals, St. Louis, MO) alkalmaztunk ízületi gyulladás indukálására, az adjuváns milliliterenként 1 mg hőkezeléssel elölt, szárított Micobacterium tuverculosist, 0,85 ml ásványolajat és 0,15 ml mannid-monooleátot (Lot. No. 084H8800) tartalmazott.
A következőkben ismertetünk két tesztmódszert.
Gátlási tesztmódszer: Harminc patkánynak intradermálisan, a farok tövébe 0,1 ml Freund-féle komplett adjuvánst adtunk. A patkányokat véletlenszerűen 6-fős csoportokba osztottuk. A csoportok naponta kaptak vivőanyagot [50 térfogat% DMSO (JT Baker, Phillipsburg, NJ) / lx Dulbecco-féle foszfáttal pufferolt konyhasóoldat (GibcoBRL, Grand Island, NY)], illetve tesztvegyületet (szubkután adagolva). A kezeléseket minden patkánynál az 1. napon kezdtük. Az lav példa szerinti vegyület esetén kapott eredményeket a 9. táblázatban foglaltuk össze.
Kezelési tesztmódszer: Harminc patkánynak intradermálisan, a farok tövébe 0,1 ml Freund-féle komplett adjuvánst adtunk. A patkányokat véletlenszerűen négy, 6-fős csoportba osztottuk. A csoportok naponta kaptak vivőanyagot [50 térfogat% DMSO (JT Baker, Phillipsburg, NJ)/ lx Dulbecco-féle foszfáttal pufferolt konyhasóoldat (GibcoBRL, Grand Island, NY)], illetve tesztvegyületet (szubkután adagolva). A kezeléseket minden patkánynál az adjuváns adagolása utáni 8. napon kezdtük. Az lav példa szerinti vegyület esetén kapott eredményeket a 10., 11. és 12. táblázatban foglaltuk össze.
Statisztikai elemzést végeztünk Abacus Concepts Super ANOVA (Abacus Concepts, Inc., Berkeley, CA) alkalmazásával. Az összes fontos paramétert variancia-elemzésnek vetettük alá Duncan-féle új többszörös tartomány utólagos teszteléssel a csoportok között. Az adatokat átlag ± standard deviáció (SD) formájában adtuk meg, és a különbségeket szignifikánsnak tekintettük, ha p<0,05.
Az izületi gyulladás súlyosságát naponta ellenőriztük, a következő betegség-indikátorokra nézve: hátsó mancs bőrpir, hátsó mancs duzzanat, ízületek érzékenysége, mozgások és póz. A bőrpír és duzzanat mértékének mérésére 0-3 egészszámokból álló fokozatokat alkalmaztunk, bőrpír ese37 tén: Ο = normális mancs, 1 = gyenge bőrpír, 2 = enyhe bőrpír, 3 = súlyos bőrpír; duzzanat esetén: 0 = normális mancs, 1 = gyenge duzzanat, 2 = enyhe duzzanat, 3 = súlyos duzzanat a hátsó mancson. A maximális pontszám naponta 12 5 volt.
A vizsgálat végén a patkányokat CO2-vel eutanizáltuk, a hátsó végtagokat a boncoláskor eltávolítottuk és 10 térfogat%-os pufferolt formaiinban rögzítettük, a lábtőízületeket mésztelenítettük, és paraffinba ágyaztuk. A hisztoló10 giai metszeteket hematoxylinnel és eozinnal, vagy pedig Saffranin 0 - Fast Green festékkel megfestettük.
A lemezeket úgy kódoltuk, hogy a vizsgáló személy vak legyen a vizsgálati csoportra nézve. A lábtő ízületek szinoviális szövetét értékeltük ki szinoviális hiperpláziára, 15 gyulladásos sejt beszűrődésre és pannus-képződésre nézve [Poole and Coombs, International Archives of Allergy & Applied Immunology, 54:97-113 (1977)], amint az alábbiakban ismertetjük.
Kategória Fokozat
1. Szinoviális bélelősejtek
a) Nincs változás. 0
b) Sejtek megnagyobbodtak, kissé meghíztak. 1
c) Sejtek megnagyobbodtak, számuk növekedett, enyhén meghíztak. Bolyhok nincsenek jelen. 2
d) Sejtek megnagyobbodtak, meghíztak. Bolyhok vannak jelen. 3
2. Fibroplázia
a) Nincs változás. 0
b) Fibroplázia van jelen a bélelősejtek alatt. 1
c) Kis területeken a sejtes szövetet rostos szövet helyettesíti. 2
d) Sejtes szövetet rostos szövet helyettesíti. 3
Kategória Fokozat
3. Gyulladásos sejtek
a) Esetileg látható, szétszórtan a kiválasztott területen. 0
b) Sejtek kis számban jelen vannak közvetlenül a bélelősejtréteg alatt és/vagy a véredények körül 1
c) Kis sejtcsoportok gócokban lehetnek jelen. 2
d) Nagyszámú sejt van jelen kapszulában és a bélelő sejtrétegben vagy az alatt. Gyakran nagy gócok láthatók. 3
4. Pannus
a) Nem észlelhető. 0
b) Észlelhető. 1
Ezenkívül az ízületi- és csont-porcot kiértékeltük Mankin-féle hisztológiai kategorizáló rendszerben [Mankin et al., Journal of Bone & Joint Surgery - American Volume, 53:523-537 (1971)] az alábbiak szerint.
Kategória Fokozat
1. Szerkezet
a) Normális 0
b) Felület szabálytalan 1
c) Pannus és felület szabálytalan 2
d) Repedések az átmeneti zónához 3
e) Repedések a radiális zónához 4
f) Repedések a meszes zónához 5
g) Teljes rendezetlenség 6
2. Sejtek
a) Normális 0
b) Diffúz hipercellularitás 1
c) Klónozódás 2
d) Hipocellularitás 3
Kategória Fokozat
3. Safranin 0 festés
a) Normális 0
b) Gyenge csökkenés 1
c) Mérsékelt csökkenés 2
d) Erőteljes csökkenés 3
e) Festődés nem figyelhető meg 4
4. Határvonal integritása
a) Érintetlen 0
b) Véredények keresztezik 1
9. táblázat
Lewis patkányok ízületi gyulladásának kiértékelése gátlási tesztmódszer
Nap Vivőanyag lav példa vegyülete
1 0, 00 0, 00
2 0, 00 0, 00
3 4.50 2, 66
4 5, 50 1, 83
5 9, 33 2, 66
6 10, 50 2,16
7 10, 60 2, 00
8 11, 00 1, 66
9 11,50 2, 00
10 11,33 2, 00
11 10, 83 1, 66
12 10, 83 1, 66
13 11, 00 2, 16
14 11,00 2, 00
15 11,00 2, 00
16 11,00 1, 00
17 10, 50 1,33
10. táblázat
Lewis patkányok ízületi gyulladásának kiértékelése, kezelési tesztmódszer
Nap Vivőanyag lav példa vegyülete
1 10, 83 11,33
2 11,00 10, 83
3 10, 83 9, 33
4 11,33 8,00
5 11,50 5, 83
6 11,50 3, 33
7 11,50 3, 00
8 11,50 2,50
9 11,00 2,50
10 11,00 2,50
11 10, 66 2,50
12 10, 66 2,50
13 10,50 2,50
14 9, 83 2,50
15 8, 10 2,00
16 7, 35 1,33
17 6, 50 1,00
11. táblázat
Szinovitisz hisztológiás kategorizálása Lewis patkányok lábtő ízületében (átlag ± SD); kezelési tesztmódszer
Vivőanyag 10 mg/ kg lav példa szerinti vegyület
Szinoviális szerkezet (0-3) 2,58 ± 0,38 1,58 ± 0,38*
Fibroplázia (0-3) 1,75 ± 0,42 0,74 + 0,42*
Gyulladásos sejtek (0-3) 2,92 ± 0,20 1,25 ± 0,42*
Pannus (0-1) 1, 00 ± 0,89 0,33 ± 0,61*
Szinovitisz-összpontszám (0-10) 8,25 ± 1,57 3,83 ± 0, 93* —
*szignifikánsan kisebb, mint a vivőanyag
12. táblázat
Porc változásának hisztológiai pontozása (Mankin-pontok) Lewis patkányok Lábtő ízületeiben (átlag ± SD) ; kezelési tesztmódszer
Vivőanyag 10 mg/ kg lav példa szerinti vegyület
Porc szerkezete (0-6) 2,83 ± 0,26 1,83 ± 0,68*
Porc sejtek (0-3) 2, 58 ± 0,38 0,75 ± 0,42*
Saffranin-O/FAst Green festés (0-4) 2, 50 ± 0, 32 1,25 ± 0,52*
Határvonal integritás(0-1) 0 0
Összes Mankin-pont (0-14) 7, 92 ± 0,74 3, 83 ± 1,21*
*szignifikánsan kisebb, mint a vivőanyag
Kiértékelés ízületi gyulladás HLA-B27 patkány modelljében. A találmány szerinti vegyületek kiértékelhetők HLAB27 patkány standard farmakológiai tesztmódszerrel, amely az emberi ízületi gyulladást utánozza. Az alábbiakban röviden ismertetjük az alkalmazott módszert és a kapott eredményeket. Hím HLA-B27 patkányokat szereztünk be Taconic-tól, és korlátlan hozzáféréssel táplálékkal (PMI Lab diet 5001) és vízzel láttuk el őket. Az ízületi pontszámokat és a hisztológiai eredményeket a Lewis patkányoknál, adjuvánssal indukált ízületi gyulladás esetén a fentiekben ismertetett módon értékeltük ki. A 8-10 hetes patkányoknak negyvenhat napon át, naponta egyszer orálisan adtunk vivőanyagot (2 térfogat% Tween-80/0,5 térfogat% metilcellulóz), illetve az lav példa szerinti vegyületet (10 mg/kg). A patkányokat 4-fős csoportokba osztottuk, és az utolsó dózist az eutanizálás előtt 2 órával adagoltuk. Amint a 13. táblázatból látható, az ízületi gyulladás az lav példa szerinti vegyü lettel végzett kezelés hatására csökkent. A szinovitisz és Mankin-pontok szintén csökkentek (lásd 14. táblázatot), azonban a vivóanyaggal kezelt állatokhoz kepest nem szigni fikáns módon.
13. táblázat napon át orálisan lav példa szerinti vegyülettel kezelt HLA patkányok ízületi gyulladásának kiértékelése
Nap Vivőanyag lav példa vegyülete (10 mg/kg)
29 2,5 0, 5
30 6 0, 5
31 5 0, 5
32 6, 75 1
33 8 1,75
34 8 1, 5
35 8 1
36 6 1,75
37 7,5 1,75
38 6, 5 1,5
39 7,5 0,75
40 7,5 0,75
41 6, 5 0, 5
42 6, 5 1,5
43 6 1,25
44 6, 75 1,75
45 5, 5 1,25
46 6 0, 75
14. táblázat napon át orálisan lav példa szerinti vegyülettel kezelt HLA patkányok ízületi hisztológiájának kiértékelése
Vegyület Szinovitisz pontszám (átlag ± SD) Mankin-pontszám (átlag ± SD)
Vivőanyag 7,6 ± 3,1 6,5 ± 1,2
lav példa vegyülete (10 mg/kg) 5, 0 ± 2,5 CO +1 LO
Kiértékelés karcinogenezis in vivo modelljében
A találmány szerinti vegyületek azon képessége, hogy alkalmasak különböző rosszindulatú daganatok és hiperproliferációs rendellenességek kezelésére és gátlására, a szakirodalomban hozzáférhető, standard farmakológiai tesztmódszerekkel értékelhető ki. Idetartozik a következő két módszer.
Emlőrák. Timuszuktól és petefészküktől megfosztott nu/nu (csupasz) egereket szereztünk be Charles River Laboratories-től (Wilmington, MA). A tumorsejtek injektálása előtt egy nappal az állatokba 0,36-1,7 mg 17p-ösztradiolt tartalmazó, hatóanyagot határozott ideig (60 vagy 90 napig) leadó pelletteket (Innovative Research of America, Sarasota, FL) , illetve placebot implantáltunk. A pelletteket szubkután a lapocka területére vittük be egy 10-gauge precíziós trokárral. Ezután az egereknek az emlőszövetbe szubkután IxlO7 MCF-7 sejtet, illetve IxlO7 BG-1 sejtet injektáltunk. A sejteket azonos térfogatú matrigéllel kevertük, amely a tumor képződésének elősegítésére szolgáló alapmembrán mátrixkészítmény. A tesztvegyületek kiértékelhetők egy nappal a tumorsejtek implantálása után (gátlási tesztmódszer), vagy pedig miután a tumor bizonyos méretet elért (kezelési tesztmódszer) . A vegyületeket naponta intraperitoneálisan vagy orálisan adagoltuk, 1 térfogat% Tween-80-t tartalmazó konyhasóoldat vivőanyagban. A tumor méretét minden harmadik vagy hetedik napon határoztuk meg.
Vastagbél rák. A vegyületek vastagbél-rákot gátló képessége Smirnoff tesztmódszerével értékelhető ki [Oncology Research, 11:255-264 (1999)].
Kiértékelés neuroprotektiv hatásra nézve két in vivo tesztmódszerrel
Átmeneti globális iszkémia mongol versenyegér esetén. A tesztvegyületek oxigénmegvonás/reperfúzió hatására kialakult agyi károsodást megelőző vagy kezelő hatása a következő tesztmódszerrel mérhető.
60-80 g testtömegű nőstény mongol versenyegereket (Charles River Laboratories, Kingston, NY) Wyeth-Ayerst állatgondozó berendezésben (AAALAC tanúsított) tartottunk, periodikus 12 óra világos - 12 óra sötét körülmények között, csapvízhez és alacsony ösztrogéntartalmú kazeinétrendhez (Purina; Richmond, IN) való szabad hozzáféréssel. Az állatokat a 0. napon izofluránnal (2-3 térfogat% oxigénnel) anesztetizáltuk, és petefészküket eltávolítottuk. A következő reggeltől (1. nap) kezdve az állatoknak naponta szubkután adagoltunk vivőanyagot (10 térfogat% etanol/kukoricaolaj), 17p-ösztradiolt (1 mg/kg) , vagy tesztvegyületet. A 6. napon az állatokat (n=4-5 egér/csoport) izofluránnal anesztetizáltuk, a közös nyaki artériát a nyak közepén tett bemetszésben láthatóvá tettük, és a két artériát nem-traumatikus mikro aneurizma csipeszekkel 5 percre párhuzamosan elzártuk. Ezután a csipeszeket eltávolítva agyi reperfúziót biztosítottunk, és a nyaki bemetszést sebzáró kapoccsal zártuk. Az állatokat a - tartós iszkémiás sérülést lehetővé tevő - globális iszkémiás sebészeti beavatkozás előtti éjszakán éheztettük. A 12. napon az állatokat letális CO2~ dózisnak tettük ki, az agyakat szárazjégen megfagyasz tottuk, és -80 °C-on tároltuk. A vizsgálatok során figyelembe vett előírásokat a Wyeth-Ayerst Research-nél működő Radnor/Collegeville Tinimai Care and Use Committee (RACUC/CACUC) nevű bizottság tekintette át és hagyta jóvá.
A neuroprotektív hatás mértéke a neurogranin mRNS in situ hibridizáziós elemzésével értékelhető ki. Röviden: 20 pm-es koronális kriosztatikus metszeteket készítettünk zselatinnal bevont lemezekre, szárítottuk, és -80 °C-on tároltuk. Feldolgozáskor a kiszárított lemezdobozokat szobahőmérsékletre melegítettük, a lemezeket utólag 4 térfogat%os paraformaldehiddel rögzítettük, ecetsavanhidriddel kezeltük, klroformmal és etanollal zsírmentesítettük és víz telenítettük. A feldolgozott metszetekkel ellátott lemezeket azután 200 μΐ (6χ10δ DPM/lemez) antiszensz vagy szensz (kontroll) neurogranin ribopróbával ( S-UTP-jelzett NG-241; 99-340. bázisok) hibridizáltattuk egy 50 térfogat-s os formaldehides hibridizációs keverékben, nedvesített lemezkamrában, fedőlemez nélkül, egy éjszakán át 55 °C-on inkubáltuk. A következő reggel a lemezeket állványra helyezve 2xSSC (0,3 mol/1 NaCl, 0,03 mol/1 nátrium—cifrát, pH=7,0)/10 mmol/1 DTT oldatba merítettük, RN-áz A-val (20 pg/ml) kezeltük, és 67 °C-on kétszer 30 percig 0, lx SSC-vel mostuk a nem-fajlagosan. kötött jelzőanyag eltávolítására. Víztelenítés után a lemezeket egy éjszakára BioMax (BMR-1; Kodak) röntgen-filmre helyeztük.
A neurogranin hibridizációs jel mértékét alkalmaztuk a CA1 régióban a sérülés utáni neuronvesztés mértékének becslésére és a 17p-ösztradiol, valamint a tesztvegyületek hatékonyságának kiértékelésére. E vizsgálatokhoz a neurogranin mRNS-t választottuk, mivel ez nagymértékben expreszszálódik a CAl-t magában foglaló hippokampusz neuronokbán, azonban a gliából és az agy e területén található más sejt típusokból hiányzik. Ezért a jelenlevő neurogranin mRNS mennyiségének mértéke a túlélő neuronokat képviseli. A neurogranin hibridizációs jel relatív optikai sűrűségének mértékét a filmek autoradiogramjairól kapjuk, számítógépen alapuló képelemező rendszer (C-Imaging Inc., Pittsburgh, PA) segítségével. Az állatonként 6 metszetből (egymástól 40 pm-re) kapott eredményeket átlagoltuk és statisztikailag kiértékeltük. A számszerű adatokat átlag ± SEM formájában adtuk meg. A neurogranin mRNS szintek különbségének tesztelésére egyutas varianciaelemzést alkalmaztunk, és az eredmények esetén az az állítás, hogy azok nem különböznek, feltételezi, hogy p>0,05.
Középagy-artériaelzáródás egerekben. A neuroprotektív hatás kiértékelhető Dubai tesztmódszerével [Dubai et al. , Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 98:1952-1957 (2001); Dubai et al.. Journal of Neuroscience, 19:6385-6393 (1999)].
Peteérés gátlása, standard farmakológiái tesztmódszer
Ezt a tesztmódszert alkalmaztuk annak meghatározására, hogy a tesztvegyületek képesek-e a peteérést gátolni vagy időpontját megváltoztatni. A módszer arra is alkalmazgató, hogy az ovulált oociták számát meghatározzuk [Lundeen et al. , J. Steroid Biochem. Mól. Bioi., 78:137-143 (2001)].
A standard farmakológiai tesztmódszerekkel· kapott eredmények alapján a találmány szerinti vegyületek ösztrogén-receptor modulátorok, és alkalmazhatók olyan állapotok, rendellenességek, illetve betegségek kezelésére vagy gátlására, amelyeket legalább részben az ösztrogén hiánya vagy fölöslege közvetít, vagy pedig amelyek egy osztrogén hatású ágens alkalmazásával kezelhetők vagy gátolhatok. A találmány szerinti vegyületek különösen alkalmasak olyan betegek kezelésére, akik menopauza körüli, menopauza vagy menopauza utáni korban vannak, amikor az endogén termelt ösztrogének • · · ····· · *·«· *· ·♦ 4 ··*· szintje nagymértékben csökken. A menopauzát általában az utolsó természetes menstruációs periódusként határozzák meg, és jellemző rá a petefészek funkciójának megszűnése, ami a véráramban keringő ösztrogén jelentős csökkenéséhez vezet. Menopauza alatt továbbá a csökkent ösztrogén-termelést is értjük, ami sebészeti beavatkozás, kemoterápia vagy olyan betegség következménye lehet, amely a petefészek funkciójának idő előtti csökkenését vagy megszűnését okozza.
A találmány szerinti vegyületek alkalmazhatók továbbá az ösztrogénmegvonás más hatásainak gátlására vagy kezelésére is, így hőhullámok, hüvelyi vagy külső szeméremtesti atrófia, atrófiás hüvelygyulladás, hüvelyszárazság, bőrviszketés, fájdalmas közösülés, nehézvizelés, gyakori vizelés, húgyúti inkontinencia, húgyúti fertőzések kezelésére. További reproduktív traktusbeli alkalmazás például rendellenes méhvérzés kezelése vagy gátlása. A vegyületek alkalmazhatók ezenkívül endometriózis kezelésére vagy gátlására.
A találmány szerinti vegyületek az agyban is fejtenek ki aktivitást, ezért alkalmazhatók Alzheimer-kór, gondolkodási/észlelési képességek romlása, csökkent libidó, öregkori demencia, neurodegeneratív rendellenességek, depresszió, szorongás, álmatlanság, skizofrénia és meddőség kezelésére vagy gátlására. A találmány szerinti vegyületek alkalmazhatók továbbá jóindulatú vagy rosszindulatú abnormális szövetnövekedés kezelésére vagy gátlására, ilyenek például a glomerulosclerosis, prosztata hipertrófia, méh leiomiómák, emlőrák, scleroderma, fibromatózis, méhbelhártya-rák, policisztás petefészek tünetegyüttes, méhbelhártya-polipok, jóindulatú emlőbetegség, adenomiózis, petefészekrák, melanoma, prosztatarák, vastagbél-rák, központi idegrendszeri rákok, például glióma és asztioblasztómia.
A találmány szerinti vegyületek kardioprotektiv és * · ·· · · · · 4.. ”Χ· .X..
antioxidáns hatással rendelkeznek, így alkalmazhatók a koleszterin-, triglicerid-, Lp(a)- és LDL-szint csökkentésére; hiperkoleszterémia, hiperlipidémia, szív-érrendszeri betegségek, atherosclerosis, perifériás érbetegségek, rész tenózis és érgörcs kezelésére és gátlására, valamint az érfal károsodásának gátlására, amely celluláris események következtében kialakuló, immunközvetített érkárosodás.
A találmány szerinti vegyületek alkalmazhatók továbbá gyulladással vagy autoimmun betegségekkel kapcsolatos rendellenességek kezelésére, ilyenek például a gyulladásos bélbetegségek (Crohn-betegség, fekélyes vastagbélgyulladás, határozatlan eredetű vastagbélgyulladás), ízületi gyulladások (reumás ízületi gyulladás, csigolyaízületi betegségek, csontízületi gyulladás), mellhártyagyulladás, iszkémiás/reperfúziós sérülés (pl. sztrók, transzplantátum kilökődés, szívizominfarktus stb.), asztma, óriássejtes verőérfalgyulladás, prosztatagyulladás, szövetközi hólyaggyulladás, uveagyulladás, pszoriázis, szklerózis multiplex, szisztémás lupusz eritematózusz és szepszis.
A találmány szerinti vegyületek alkalmazhatók továbbá szemészeti rendellenességek kezelésére és gátlására, ilyenek a hályogok, uveagyulladás és makuladegeneráció, valamint a bőr állapotának, például öregedés, kopaszodás és akne kezelésére.
A találmány szerinti vegyületek alkalmazhatók ezenkí vül metabolikus betegségek, például a II-típusú diabétesz, lipidmetabolizmus és étvágy-rendellenességek, például anorexia nervoza és bulimia kezelésére vagy gátlására.
A találmány szerinti vegyület alkalmazhatók továbbá vérzési rendellenességek, például örökletes vérzéses haj szálértágulat, rendellenes méhvérzés kezelésére és gátlásá ra, valamint vérzéses sokk leküzdésére.
A találmány szerinti vegyületek alkalmazhatók továbbá
3..
olyan betegségek esetén, ahol előnyös a menstruáció kimaradása, ilyenek például a leukémia, méhbelhártya-eltávolitas, krónikus vese- vagy májbetegségek, koagulációs betegségek vagy rendellenességek.
A találmány szerinti vegyületek ezenkívül alkalmazhatók fogamzásgátló ágensként, különösen progesztinnel kombinálva .
Ha a találmány szerinti vegyületeket bizonyos betegség vagy rendellenesség kezelésére vagy gátlására alkalmazzuk, a hatékony dózis változó lehet az adott alkalmazott vegyülettől, az adagolás módjától, a kezelendő állapottól és annak súlyosságától, valamint a kezelendő személlyel kapcsolatos különböző fizikai tényezőktől függően. A találmány szerinti vegyületek hatékony adagolása történhet orálisan, naponta mintegy 0,1 mg és mintegy 1000 mg közötti mennyiségben. Előnyösen naponta mintegy 10 mg és mintegy 600 mg közötti, még előnyösebben naponta mintegy 50 mg es mintegy 600 mg közötti mennyiséget adagolunk, egyetlen dózisban, vagy pedig két vagy több dózisban. A napi adagolási mennyiség változó lehet az adagolás útjától függően.
Az ilyen dózisok adagolhatok bármilyen olyan módon, amely a hatóanyagot a befogadó személy véráramába juttatja, így orálisan, implantátumok útján, parenterálisan (beleértve az intravénás, intraperitoneális, intraaticuláns es szubkután injekciókat), rektálisan, intranazálisan, topikálisan, okulárisan (szemcseppben), vaginálisan vagy transzdermálisan.
A találmány szerinti aktív vegyületeket tartalmazó orális készítmények lehetnek bármilyen, orálisan adagolható készítmény formájában, így tabletta, kapszula, bukkális forma, pilula, cukorka vagy orális folyadék, szuszpenzió vagy emulzió formájában. A kapszulák az aktív vegyület(ek) és inert töltőanyagok és/vagy hígítóanyagok keverékét tar50 talmazhatják, ilyen inert anyagok például a gyógyszereszetileg elfogadható keményítők (pl. kukorica-, burgonyatapiókakeményítő), cukrok, mesterséges édesítőszerek, porított cellulózok, például kristályos és mikrokristályos cellulózok, lisztek, zselatinok, gumik stb. Az alkalmas tablettakészítmények szokásos sajtolással, nedves granulálással vagy száraz granulálással állíthatók elő, gyógyszerészetileg elfogadható hígítóanyagok, kötőanyagok, lubrikánsok, dezintegrálószerek, felületmódosító ágensek (például felületaktív anyagok), szuszpendáló vagy stabilizáló ágensek, így például - de nem kizárólag - magnézium-sztearát, sztearinsav, talkum, nátrium-laurilszulfát, mikrokristályos cellulóz, karboximetilcellulóz-kalcium, polivinil-pirrolidon, zselatin, alginsav, akácmézga, xantángumi, nátriumcitrát, komplex szilikátok, kalcium-karbonát, glicin, dextrin, szacharóz, szorbit, dikalcium-foszfát, kalcium-szulfát, laktóz, kaolin, mannit, nátrium-klorid, talkum, száraz keményítők és porított cukor felhasználásával. Előnyös felületmódosító ágensek a nemionos és anionos feluletmodosito ágensek. Felületmódosító ágensek például - de nem kizárólag - a poloxamer 188, benzalkónium-klorid, kalcium-sztearát, cetosztearil-alkohol, cetomakrogol emulgeáló viasz, szorbitán-észterek, kolloid szilícium-dioxid, foszfátok, nátriumdodecilszulfát, magnézium-alumínium-szilikát és trietanolamin. Az orális készítmények lehetnek standard késleltetett vagy idő függvényében felszabadulást biztosító készítmények, az aktív vegyület(ek) abszorpciójának megváltoztatása céljából. Az orális készítmények lehetnek a hatóanyag vízben vagy gyümölcslében történő adagolását biztosító formában, amelyek kívánt esetben alkalmas szolubilizálószereket vagy emulgeálószereket tartalmazhatnak.
Bizonyos esetekben kívánatos lehet, hogy az adott vegyületet közvetlenül a légutakba adagoljuk, például aero- • · ·«· · t · szol formájában.
A találmány szerinti vegyületek adagolhatok parenterálisan vagy intraperitoneálisan is. A találmány szerinti vegyületek szabad bázis formájának vagy gyógyszerészetileg elfogadható sóiknak oldatai vagy szuszpenziói készíthetők vízzel, alkalmas módon felületaktív anyaggal, például hidroxi-propilcellulózzal keverve. Diszperziók szintén készíthetők glicerinnel, folyékony polietilén-glikolokkal és ezek olajokkal készült keverékeivel. A tárolás és alkalmazás normális körülményei között ezek a készítmények konzerválószert is tartalmaznak, a mikroorganizmusok növekedésének gátlására.
Az injekciós adagolásra alkalmas gyógyszerkészítmények lehetnek steril vizes oldatok vagy diszperziók, valamint steril porok az adagoláskor helyszínen készítendő steril injektálható oldatok vagy diszperziók előállításához. A készítményeknek minden esetben sterilnek és olyan mértékben folyékonynak kell lenniük, hogy könnyen fecskendezhető legyenek. Ezenkívül a gyártás és tárolás körülményei között stabilnak és konzerváltnak kell lenniük a mikroorganizmusok, például gombák szennyező hatásával szemben. A vivőanyag lehet oldószer vagy diszpergáló közeg, amely tartalmazhat például vizet, etanolt, poliolokat (például glicerint, propilén-glikolt és folyékony polietilén-glikolt), ezek keverékét és növényi olajokat.
Transzdermális adagolás alatt - jelen találmányunkkal kapcsolatban - a test felületén keresztül és a testüregek bélelőfelületén, így a hámszöveten és nyálkaszöveten keresztül történő adagolást értjük. Az ilyen adagolást végezhetjük a találmány szerinti vegyületeket vagy gyógyszerészetileg elfogadható sóikat tartalmazó lemosószerek, krémek, habok, flastromok, szuszpenziók, oldatok és kúpok (hüvelyi és végbélkúpok) útján.
• · »·♦ * · · » 9 * · *»·* · to * ►- ·« 1 »' ♦*
A transzdermális adagolás történhet az aktív vegyületet és olyan vivőanyagot tartalmazó transzdermális flastromok alkalmazásával, amely az aktív vegyülettel szemben inert, nem toxikus a bőrre nézve, és lehetővé teszi az aktív vegyület szisztémás abszorpcióját a bőrön keresztül a véráramba. A vivőanyag számos formában lehet, így például krémek, kenőcsök, paszták, gélek és elzáró eszközök formájában. A krémek és kenőcsök lehetnek viszkózus folyékony vagy fél-szilárd olaj-a-vízben vagy víz-az-olajban típusú emulziók. Az olyan paszták szintén alkalmasak lehetnek, amelyek abszorptív poroknak az aktív vegyületet tartalmazó ásványolaj-származékkal vagy hidrofil ásványolaj-származékkal készült diszperziójából állnak. Az elzáró eszközök számos formája alkalmazható az aktív vegyületek véráramba való juttatására, ilyenek a szemipermeábilis membránnal fedett tárolóeszközök, amelyek az aktív anyagot tartalmazzák vivőanyaggal vagy a nélkül, vagy pedig az aktív anyagot tartalmazó mátrixok. További elzáró eszközök a szakirodalomból ismeretesek.
A kúp készítmények készíthetők hagyományos anyagok, így kakaóvaj, a kúp olvadáspontjának megváltoztatására viaszok hozzáadásával vagy a nélkül, valamint glicerin felhasználásával. Vízoldható kúp-alapok, például különböző moltömegű polietilén-glikolok szintén alkalmazhatók.
A találmány szerinti megoldást a következő példákkal szemléltetjük, a korlátozás szándéka nélkül.
Az 1. reakcióvázlat szerinti vegyületek előállítása 2. intermedier
7-Metoxi-2-naftil-trifluormetánszulfonát
4,75 g (27,27 mmol) 7-metoxi-2-naf tol és 3,5 ml (44 mmol) piridin 200 ml diklórmetánnal készült oldatához 0 °C-on hozzáadunk 10,0 g (35 mmol) trifluormetán-szulfonsav-anhidridet. Az oldatot hagyjuk lassan szobahőmérséklet53 re melegedni, és egy éjszakán át keverjük. Ezután az oldatot 0 °C-ra lehűtjük, jeges vízzel keverjük a fölösleges anhidrid elbontása céljából. Ezután az elegyet telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldat adagolásával enyhén bázikusra állítjuk. A kapott fázisokat szétválasztjuk, a vizes fázist 2x250 ml diklórmetánnal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat vízzel mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és bepároljuk. A kapott vörös olajat szili— kagélen kromatográfiásan tisztítjuk, eluálószer 5 térfogat% etil-acetátot tartalmazó hexán, így 8,08 g (97%) cím szerinti vegyületet kapunk színtelen olaj formájában. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 3,92 (3H, s), 7,30 (1H, dd, J=2,58 Hz, J=8,93 Hz), 7,42 (1H, dd, J=2, 59 Hz, J=8, 93 Hz), 7,52 (1H, d,
J=2,38 Hz), 7,96 (1H, d, J=9, 12 Hz), 8,00 (1H, d, J=2,38 Hz), 8,06 (1H, d, J=8,73 Hz); MS (El) m/z 306 (M)+. Elemanalízis a C12H9F3O4S képletre számított: C(%) 47,06; H(%)
2,96. Talált: C(%) 46, 62; H(%) 2,84.
3. intermedier
2-Metoxi-7-(4-metoxi feni1)naftálin
A módszer
3,15 g (10,3 mmol) 7-metoxi-2-naftil-trifluormetánszulfonát, 2,2 g (14 mmol) 4-metoxi-f enilbórsav, 10 ml mol/l-es vizes nátrium-karbonát-oldat, 0,59 g (0,05 mmol) tetrakisz(trifenilfoszfin)palládium és 100 ml etilénglikol{qTmetiléter elegyet visszafolyato huto alatt 8 óra hosszat forraljuk. Ezután az elegyet szobahőmérsékletre lehűtjük, 100 ml 1 mol/l-es nátrium-hidroxid-oldatba öntjük. A kapott elegyet 3x250 ml etil-acetáttal extraháljuk, a szerves fázist 2x100 ml konyhasóoldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és bepároljuk. A kapott maradékot szilikagélen kromatográfiásan tisztítjuk, eluálószer 5-10 térfogat% etil-acetátot tartalmazó hexán, így 2,17 g (79%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában.
Op.: 154 °C. 1H-NMR (CDC13) δ: 3,87 (3H, s), 3,94 (3H, s),
7,02 (2H, d, J=8,72 Hz), 7,13 (1H, dd, J=2,54 Hz, J=9, 09
Hz), 7,18 (1H, d, J=2,55 Hz), 7,56 (1H, dd, J=l,82 Hz,
J=8,36 Hz), 7,65 (2H, d, J=8,72 Hz), 7,74 (1H, d, J=9, 09 Hz), 7,81 (1H, d, J=8,36 Hz), 7,89 (1H, d, J=l,09 Hz);
MS (EI) m/z 264 (M) . Elemanalízis a Ci8H16O2 képletre számított: C(%) 81,79; H(%) 6,10. Talált: C(%) 81,78; H(%) 6,17. 4. intermedier 2-Metoxi-7-(3-metoxifenil)naftalin
2,20 g (7,18 mmol) 7-metoxi-2-naftil-trifluormetánszulfonát és 1,20 g (7,90 mmol) 3-metoxifenilbórsav A módszer szerinti reagáltatásával a cím szerinti terméket fehér szilárd anyag formájában kapjuk. Op. : 58-59 °C. 1H-NMR (CDCI3) δ: 3,89 (3H, s) , 3,93 (3H, s) , 6,91-6,94 (1H, m) , 7,15 (1H, dd, J=2,42 Hz, J= 8,83 Hz), 7,19 (1H, d, J=2,27 Hz), 7,23-7,25 (1H, m) , 7,28-7,31 (1H, m) , 7,37-7,42 (1H, m) , 7,59 (1H, dd, J=l,56 Hz, J=8,46 Hz), 7,75 (1H, d, J=8,84 Hz), 7,83 (1H, d, J=8,45 Hz), 7,94 (slH, s) ; MS (ESI) m/z 265 (M+H). Elemanalízis a Ci8Hi6O2 képletre számított: C(%) 81,79; H(%) 6,10. Talált: C(%) 81,61; H(%) 5,99. 5. intermedier
2-Metoxi-7-fenilnaftalin
3,01 g (9,83 mmol) 7-metoxi-2-naftil-trifluormetánszulfonát és 1,4 g (12 mmol) fenilbórsav A módszer szerinti reagáltatásával 1,95 g (85%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op. : 62-64 °C. 1H-NMR (CDCI3) Ö: 3,95 (3H, s), 7,15 (1H, dd, J=2,56 Hz, J=8,79 Hz), 7,20 (1H, d, J=2,56 Hz), 7,36-7,39 (1H, m) , 7,46-7,50 (2H, m) , 7,60 (1H, dd, J=l,83 Hz, J=8,42 Hz), 7,70-7,73 (2H, m) , 7,76 (1H, d, J=8,79 Hz), 7,84 (1H, d, J=8,42 Hz), 7,94 (1H, d, J=l,46 Hz); MS (El) m/z 234 (M)+. Elemanalízis a C17H14OO, 1 H2O képletre számított: C(%) 86, 48; H(%) 6,06. Talált: C(%) 86, 29; H(%) 6,04.
1. a példa
7-(4-Hidroxifenil)-2-naftol B módszer
1,02 g (3,86 mmol) 2-metoxi-7-(4-metoxifenil)naftalint 190 °C-on hozzáadunk 10 g piridin-hidrokloridhoz . Az oldatot 3 óra hosszat 190 °C-on keverjük, majd szobahőmérsékletre lehűtjük, és 200 ml 1 mol/l-es sósavoldattal keverjük. A kapott szuszpenziót leszűrjük és 500 ml etilacetátban oldjuk. Az egyesített szerves fázisokat 200 ml vízzel mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és vákuumban bepároljuk. A kapott maradékot szilikagélen kromatográfiásan tisztítjuk, eluálószer 40 térfogat% etil-acetátot tartalmazó hexán, így 0,36 g (39%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op. : 210 °C. ^-NMR (DMSO-d6) δ: 6,89 (2H, d, J=8,58 Hz), 7,05 (1H, dd, J=2,42 Hz, J=8,77 Hz), 7,17 (1H, d, J=2,24 Hz), 7,52 (1H, dd, J=l,68 Hz, J=8,40 Hz), 7,61 (2H, d, J=8,58 Hz), 7,74 (1H, d, J=8,58 Hz), 7,79 (1H, d, J=8, 58 Hz), 7,86 (1H, d, J=l,12 Hz), 9,60 (1H, bs) , 9,72 (1H, bs); MS(ESI) m/z 235 (M-H)-. Elemanalízis a Ci6Hi2O2 képletre számított: C(%) 81,34; H(%) 5,12. Talált: C(%) 81,23; H(%) 5,09.
.b példa
7- (3-Hidroxifenil)-2-naftol
0,52 g (1,97 mmol) 2-metoxi-7-(3-metoxifenil)naftalin és 8 g piridin-hidroklorid 190 °C-on a B módszer szerint történő reagáltatásával 0,13 g (28%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op. : 163-165 °C.
1H-NMR (DMSO-ds) δ: 6, 78-6, 80 (1H, m) , 7,08 (1H, dd, 0=2,56 Hz, J=8,54 Hz), 7,13-7,14 (1H, m) , 7,17-7,20 (2H, m) ,
7,27-7,30 (1H, m) , 7,51 (1H, dd, J=2,14 Hz, J=8,54 Hz),
7,70 (1H, d, J=8,97 Hz), 7,83 (1H, d, J=8,54 Hz), 7,90 (1H, d, J=l,28 Hz), 9,55 (1H, s) , 9,78 (1H, s); MS(ESI) m/z 235 (M-H)”. Elemanalízis a Ci6Hi2O2 képletre számított: C(%) 81,34; H(%) 5,12. Talált: C(%) 80, 96; H(%) 5,07.
.c példa
7-Fenii-2-naftol
0,53 g (2,26 mmol) 2-metoxi-7-feniInaftalin és 10 g piridin-hidroklorid B módszer szerint 190 °C-on történő reagáltatásával 0,36 g (72%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op.: 142-143 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: ^-NMR (DMSO-d6) δ: 7,10 (1H, dd, J=2,75 Hz, J=8,70 Hz), 7,23 (1H, d, J=2,29 Hz), 7,37-7,40 (1H, m) , 7,48-7,51 (2H, m) , 7,58 (1H, dd, J=l,83 Hz, 8,70 Hz),
7,78-7,90 (3H, m) , 7,86 (1H, d, J=8,24 Hz), 7,99 (1H, d, J=0,92 Hz), 9,81 (1H, s); MS (ESI) m/z 219 (M-H). Elemanalízis a Ci6Hi2O-0,1 H2O képletre számított: C(%) 86, 66; H(%) 5,47. Talált: C (%) 86, 72; H(%) 5,62.
A 2. reakcióvázlat szerinti vegyületek szintézise . intermedier
6- (Trifluormetánszulfonát) -1-tetralon
Egy 500 ml-es lombikba bemérünk 4,8 g (29,6 mmol) 6hidroxi-l-tetralont xilolos azeotróp formájában, és 220 ml vízmentes díklórmetánban oldjuk. Az oldatot 0 °C-ra lehűtjük, és hozzáadunk 3,35 ml (41,4 mmol) vízmentes piridint, majd 10,0 g (35,5 mmol) triflin-anhidridet. Az elegyet fél óra hosszat 0 °C-on tartjuk, majd a reakciót telített nátrium-hidrogén- karbonát-oldattal leállítjuk, és az elegyet vízzel mossuk. A szerves fázist szilikagélen átszűrjük, majd bepároljuk, így 8,39 g (96%) cím szerinti terméket kapunk halványsárga olaj formájában. 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 2,07 (2H, m) , 2,65 (2H, t, J=6, 5 Hz), 3,03 (2H,
t, J=6, 0 Hz), 7,47 (1H, dd, J=8,7 Hz, 2,3 Hz), 7,57 (1H, d, J=l,9 Hz), 8,03 (1H, d, J=8,7 Hz).
. intermedier
6- (4-Hidroxifenil)-1-tetralon
4-{[Terc-butil(dimetil)szilil]oxi}fenilbórsav
Egy 500 ml-es lombikba bemérünk 15,0 g (52,2 mmol) (4-brómfenoxi)-terc-butildimetilszilánt és 125 ml vízmentes THF-t. Az elegyet -78 °C-ra lehűtjük, és egy fecskendőn keresztül lassan hozzáadunk 25 ml 2 mol/l-es hexános n-butillítium-oldatot (62,7 mmol). Az elegyet fél óra hosszat keverjük, majd hozzáadunk 60 ml (261 mmol) triizopropil-borátot, és az oldatot -78 °C-on másfél óra hosszat keverjük, majd hagyjuk környezeti hőmérsékletre melegedni. Ezután hozzáadunk 150 ml jéghideg 2 mol/l-es sósavoldatot, és az elegyet 10 percig keverjük. Ezután etil-acetáttal háromszor extraháljuk, nátrium-szulfáton szárítjuk, és csökkentett nyomáson körülbelül 50 ml-re bepároljuk. Ezután hexánt adunk hozzá, és három kristálymag adagolásával elindítjuk a kristályosodást. A kikristályosodott anyagot leszűrjük, vákuumban szárítjuk, így 12,36 g (89%) terméket kapunk piszkosfehér szilárd anyag formájában. 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 0,19 (6H, s) , 0,95 (9H, s) , 6,80 (2H, d, J=8,l Hz) , 7, 67 (2H, d, J=8,1 Hz) .
Egy 500 ml-es lombikba bemérünk 5,0 g (17,0 mmol) 6(trifluormetánszulfonát)-1-tetralont, 5,45 g (20,4 mmol) az előző lépésben előállított 4-{[terc-butil (dimetil)szilil]oxi}fenílbórsavat, 4,56 g (42,5 mmol) 2 mol/l-es vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldatot, és 0,48 g (0,85 mmol) tetrakisz(trifenilfoszfin)palládium(O)-t 200 ml DME-ben, és az elegyet visszafolyató hűtő alatt 12 óra hosszat forraljuk. Ezután az elegyet lehűtjük, etil-acetáttal háromszor extraháljuk, majd szárazra pároljuk. A kapott maradékot he58 xánnal mossuk, vákuumban szárítjuk, így 3,68 g 92% terméket kapunk barna, szilárd anyag formájában. Op. : 208-210 °C.
1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 2,06 (2H, m) , 2,60 (2H, t, J=6,5 Hz), 2,99 (2H, t, J=5,9 Hz), 6,87 (2H, d, J=8,6 Hz), 7,57 (4H, m) , 7,86 (1H, d, J=8,7 Hz), 9,74 (1H, s) ; MS m/z 237 (M-H+) . Elemanalízis a Ci6Hi4O2 képletre számított: C(%) 80, 65; H(%) 5,92. Talált: C(%) 79, 04; H(%) 5,60.
.d példa
6- (4-Hidroxifenil)-1-naftol
Egy 25 ml-es lombikba bemérünk 500 mg (2,12 mmol) 6(4-hidroxifenil)-1-tetralont, 510 mg szénhordozós palládiumot és 15 ml p-cimént. Az elegyet visszafolyató hűtő alatt 24 óra hosszat forraljuk, majd lehűtjük, Celiten leszűrjük és 2x25 ml 1 mol/l-es nátrium-hidroxiddal extraháljuk. A vizes fázist megsavanyítjuk, dietiléterrel háromszor extraháljuk, és egy szilikagélrétegen átszűrjük. A szűrletet csökkentett nyomáson bepároljuk, így 260 mg (53%) terméket kapunk barna szilárd anyag formájában. Op. : 200 °C felett (bomlik). 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 6,82 (1H, d, J=7,5 Hz), 6,87 (2H, d, J=8,l Hz), 7,29 (1H, t, J=7,5 Hz), 7,38 (1H, d, J=7,5 Hz), 7,63 (2H, d, J=8,2 Hz), 7,70 (1H, d, J=8,5 Hz), 7,99 (1H, s) 8,14 (1H, d, J=8,5 Hz), 9,59 (1H, s) , 10,09 (1H, s) ; MS m/z 235 (M-H+) . Elemanalízis a Ci6Hi2O2 képletre számított: C(%) 81,34; H(%) 5,12. Talált: C(%)
81,22; H(%) 5,30.
A 3. reakcióvázlat szerinti vegyületek szintézise 10. intermedier
-Metoxi - 6 - (4 -metoxi f eni 1) naf tálin
23,79 g (100,3 mmol) 2-bróm-6-metoxinaftalin és 5, 8 g (5 mmol) tetrakisz(trifenilfoszfin)palládium elegyéhez hozzáadunk 400 ml (200 mmol) 0,5 mol/l-es THF-es 4-metoxifenil-magnéziumbromid-oldatot. Az elegyet visszafolyató hűtő
alatt 3 óra hosszat keverés közben forraljuk, majd szobahőmérsékletre lehűtjük, és 200 ml 1 mol/l-es sósavoldatba keverjük. Az elegyet diklórmetánnal extraháljuk, szilikagél rétegen leszűrjük és diklórmetánnal mossuk. Az oldószert eltávolítjuk, így nyers sárga szilárd anyagot kapunk, amelyet szilikagélen kromatográfiásan tovább tisztítunk, eluálószer 20-50 térfogat% etil-acetátot tartalmazó hexán, így 25,68 g (97%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op. : 190 °C. 1H-NMR (CDC13) δ: 3,86 (3H, s), 3,93 (3H, s) , 7,01 (2H, d, J=8,57 Hz), 7,14-7,18 (2H, m) , 7,63 (2H, d, J=8,50 Hz), 7,67 (1H, dd, J=l,68 Hz,
J=8,73 Hz), 7,76-7,80 (2H, m) , 7,91 (1H, d, J=0,94 Hz) ; MS (ESI) m/z 265 (M+H) + . Elemanalízis a Ci8Hi6O2 képletre számított: C(%) 81,79; H(%) 6,10. Talált: C(%) 82, 04; H(%) 6, 17 .
11. intermedier
2-(4-Metoxifenil)naftalin
3,04 g (14,7 mmol) 2-bróm-naftalint és 4-metoxifenilmagnéziumbromidot a 10. intermedier előállításánál ismertetett módon reagáltatunk, így 2,89 g (89%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op. : 114 °C. 1H-NMR (CDC13) δ: 3,86 (3H, s) , 7,01 (2H, d, J=9, 06 Hz), 7,43-7,50 (2H, m) , 7,65 (2H, d, J=8,73 Hz), 7,71 (1H, dd, J=l,84 Hz, J=8,56 Hz), 7,83-7, 89 (3H, m) , 7,98 (1H, d, j=0, 67 Hz); MS (El) m/z 234 (M) + . Elemanalízis a C17Hi4O képletre számított: C(%) 87,15; H(%) 6,02. Talált: C(%) 86,75; H(%) 6,14. 12. intermedier 2-Metoxi-6-fenilnaftalin
1,97 g (8,31 mmol) 2-bróm-6-metoxinaftalint és fenilmagnézium-bromidot a 10. intermedier előállításánál ismertetett módon reagáltatunk, így 1,59 g (82%) cím szerinti
terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op. : 122-126 °C. ^-NMR (CDC13) δ: 3,94 (3H, s) , 7,16-7,18 (2H, m) , 7, 34-7,37 (1H, m) , 7,46-7,49 (2H, m) , 7,69-7,72 (2H, m) , 7, 78-7,82 (2H, m) , 7,97 (1H, s) ; MS (El) m/z 234,2 (M) + . Elemanalízis a Οι7Η14Ο képletre számított: C (%) 87,15; H(%) 6,02. Talált: C(%) 86, 79; H(%) 6,14. 13. intermedier
2-Metoxi-6-(3-metoxifenil)naftalin
3,09 g (13,0 mmol) 6-metoxi-2-brómnaftalint és 2,18 g (14,3 mmol) 3-metoxifenil-bórsavat az A módszer szerint reagáltatunk, így 1,18 g (34%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op.: 80°C. 1H-NMR (CDC13) δ: 3,88 (3H, s) , 3,92 (3H, s) , 6,90 (1H, dd, J=2,17 Hz, J=7,7 6 Hz), 7,14-7,18 (2H, m) , 7, 22-7,24 (1H, m) , 7,28 (1H, d,
J=7,45 Hz), 7,36-7,39 (1H, m) , 7,70 (1H, dd, J=l, 86 Hz, J=8,70 Hz), 7,77-7,80 (2H, m) , 7,96 (1H, d, J=l,24 Hz) ; MS (ESI) m/z 265 (M+H) + . Elemanalízis a C18H16O2 képletre számított: C(%) 81,79; H(%) 6,10. Talált: C(%) 81,61; H(%)
6, 47 .
1.i példa
6-(3-Klórfenil)-2-naftol ,78 g (8,0 mmol) 6-bróm-2-naftol, 1,5 g (9,6 mmol) 2-klór-fenilbórsav, 2,11 g (20,0 mmol) 2 mol/l-es vizes nátrium-karbonát és 550 mg (0,48 mmol) tetrakisz (trifenilfoszfin)palládium(0) 95 ml DME-vel készült elegyét az A módszer szerint reagáltatunk. A terméket oszlopkromatográfiásan tisztítjuk, eluálószer 30 térfogat-s etil —acetátot tartalmazó hexán, így 520 mg (26%) cím szerinti terméket kapunk sárgásbarna szilárd anyag formájában. Op. : 116-118 °C. XH-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 7,13 (2H, m) , 7,42 (1H, td, J=7,9 Hz, 0,9 Hz), 7,51 (1H, t, J=7, 6 Hz), 7,80 (5H, m) , 8,16 (1H, s) , 9,88 (1H, s) ; MS m/z 253/255 (Cl mintázat) (M-H+) . Elemanalizis a Ci6HhC1O képletre számított: C (%) 75,45; H(%) 4,35. Talált: C (%) 75,20; H (%) 4,34. 1. e példa
6-(4-Hidroxifenil)-2-naftol
5,61 g (21,2 mmol) 2-metoxi-6- (4-metoxifenil) naf talint 190 °C-on hozzáadunk 30 g piridin-hidrokloridhoz, az elegyet a B módszer szerint reagálta!juk, így 4,88 g (98%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op.: >220 (200 °C felett elhalványul). 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 6,87 (2H, d, J=8,54 Hz), 7,08 (1H, dd, J=2,34 Hz, J=8,76 Hz), 7,11 (1H, d, J=2,14 Hz), 7,58 (2H, d, J=8,54 Hz), 7,65 (1H, dd, J=l,92 Hz, J=8,76 Hz), 7,71 (1H, d, J=8,54 Hz), 7,79 (1H, d, J=8,97 Hz), 7,95 (1H, s) , 9,56 (1H, bs) , 9,70 (1H, bs) ; MS(ESI) m/z 235 (M-H)“. Elemanalízis a C16Hi2O2 képletre számított: C(%) 81,34; H(%) 5,12. Talált: C(%)
81,05; H(%) 5,18.
l.f példa
4-(2-Naftil)fenol
1,01 g (4,31 mmol) 2-(4-metoxifenil)naftalint és 10 g piridin-hidrokloridot 190 °C-on reagáltatunk a B módszer szerint, így 0,84 g (89%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op.: 148 °C. 1H-NMR (DMS0-d6) δ: 6,92 (2H, d, J=8,71 Hz), 7,46-7, 53 (2H, m) , 7,66 (2H, d, J=8,71 Hz), 7,79 (1H, dd, J=l,78 Hz, J=8,51 Hz), 7,90 (1H, d, J=8,31 Hz), 7,95 (2H, d, J=8,31 Hz), 8,11 (1H, d, J=l,19 Hz), 9,65 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 219 (M-H)~. Elemanalízis a Ci6Hi2O2 képletre számított: C (%) 87,25; H(%) 5,49. Talált: C(%) 87,31; H(%) 5,86.
. g példa
6-Fenil-2-naftol
0,54 g (2,30 mmol) 2-metoxi-6-fenilnaftalint és 10 g piridin-hidrokloridot 190 °C-on reagáltatunk a B módszer
szerint, igy 0,32 g (62%) cím szerinti terméket kapunk halvány rózsaszín szilárd anyag formájában. Op. : 169-170 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 7,12 (1H, dd, J=2,56 Hz, J=8,54 Hz), 7,16 (1H, d, J=2,56 Hz), 7,35-7,38 (1H, m) , 7,47-7,50 (2H, m) , 7,73 (1H, dd, J=l,71 Hz, J=8,54 Hz), 7,76-7, 79 (3H, m) , 7,85 (1H, d, J=8,54 Hz), 8,08 (1H, d, J=l,28 Hz), 9,82 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 219 (M-H)“. Elemanalízis a C16H12O képletre számított: C(%) 87,25; H(%) 5,49. Talált: C(%) 87,05; H(%) 5,55.
.h példa
6- (3-Hidroxifenil)-2-naftol
0,51 g (1,90 mmol) 2-metoxi-6-(3-metoxifenil)naftalint és 6 g piridin-hidrokloridot 190 °C-on reagáltatunk a B módszer szerint, így 0,21 g (47%) cím szerinti terméket kapunk piszkosfehér szilárd anyag formájában. Op. : 192-194 °C. 1H-NMR (DMSO~d6) δ: 6, 75-6, 78 (1H, m) , 7,10-7,14 (3H, m) , 7,16-7,18 (1H, m) , 7,65 (1H, dd, J=l,79 Hz, J=8,57 Hz), 7,75 (1H, d, J=8,77 Hz), 7,84 (1H, d, J=8,77 Hz), 8,01 (1H, d, J=l,59 Hz), 9,51 (1H, s) , 9,78 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 235 (M-H)”. Elemanalízis a Ci6Hi2O2 képletre számított: C(%) 81,34; H(%) 5,12. Talált: C(%) 80, 94; H(%) 5,09.
A 4. reakcióvázlat szerinti vegyületek szintézise 14. intermedier l-Bróm-2-metoxi-6-(4-metoxifenil)naftalin
9,68 g (36,6 mmol) 2-metoxi-6-(4-metoxifenil)naftalin és 150 ml jégecet elegyéhez lassan hozzáadjuk 5,85 g (36,6 mmol) bróm 20 ml jégecettel készült oldatát. Az elegyet egy óra hosszat keverjük, majd a kapott szuszpenziót 200 ml vízbe öntjük, és a szilárd komponenst leszűrjük. A szilárd maradékot vízzel, majd etil-acetáttal trituráljuk, így 11,25 g (90%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op. : 172-174 °C. 1H-NMR (CDC13) δ:
3,88 (3H, s) , 4,05 (3H, s) , 7,04 (2H, d, J=8,56 Hz), 7,30 (1H, d, J=9,01 Hz), 7,67 (2H, d, J=8,65 Hz), 7,81 (1H, dd, J=l,61 Hz, J=8,84 Hz), 7,87 (1H, d, J=9, 04 Hz), 7,94 (1H, d, J=l,47 Hz), 8,27 (1H, d, J=8,92 Hz); MS (EI) m/z 343 (M) + . Elemanalízis a C18Hi5BrO2 képletre számított: C(%) 62, 99; H(%) 4,41. Talált: C(%) 62,66; H(%) 4,57.
15. intermedier l-Klór-2-metoxi-6-(4-metoxifenil)naftalin C módszer
0,51 g (1,93 mmol) 2-metoxi-6-(4-metoxifenil)naftalin és 0,28 g (2,13 mmol) NCS 20 ml acetonitrillel készült szuszpenzióját visszafolyató hűtő alatt 3 óra hosszat forraljuk. A kapott oldatot szobahőmérsékletre lehűtjük, a kivált szilárd anyagot leszűrjük, és acetonitrillel öblítjük, így 0,41 g (72%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op. : 158-164 °C. 1H-NMR (CDC13) δ: 3,87 (3H, s) , 4,05 (3H, s) , 7,03 (2H, d, J=8,62 Hz), 7,32 (1H, d, J=9, 02 Hz), 7,65 (2H, d, J=8, 55 Hz), 7,82 (2H, d,
J=9,01 Hz), 7,95 (1H, d, J=l,36 Hz), 8,27 (1H, d, J=8,81 Hz); MS (El) m/z 298 (M) + . Elemanalízis a Ci8Hi5C102 képletre számított: C(%) 72,36; H(%) 5,06. Talált: C(%) 72,06; H(%) 4, 89.
1.o példa l-Bróm-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol
4,02 g (17,0 mmol) 6-(4-hidroxifenil)-2-naftol 150 ml acetonitrillel készült oldatához 0 °C-on hozzáadunk 3,03 g (17,0 mmol) NBS-t. A reakcióelegyet 0 °C-on 3 óra hosszat keverjük, majd 200 ml vízbe öntjük és 3x300 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat vízzel mossuk, nátrium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és bepároljuk, a maradékot szilikagélen kromatográfiásan tisztítjuk, eluálószer 20 térfogat% etil-acetátot tartalmazó hexán, így
M- f .1,.
5,33 g (100%) cím szerinti terméket kapunk sárgásbarna szilárd anyag formájában. Ezt a terméket reverz fázisú HPLC útján tovább tisztítjuk, így fehér szilárd anyagot kapunk. Op.: 208-210 °C. XH-NMR (DMSO-d6) δ: 6,89 (2H, d, J=8,47
Hz), 7,28 (1H, d, J=8,80 Hz), 7,63 (2H, d, J=8,50 Hz), 7,85 (2H, d, J=8,84 Hz), 8, 02-8,06 (2H, m) , 9,60 (1H, s) , 10,54 (1H, s) ; MS(ESI) m/z 313/315 (M-H)-. Elemanalízis a
Ci6HiiBrO2 képletre számított: C(%) 60, 98; H(%) 3,52. Talált: C(%) 60, 63; H(%) 3,46.
.p példa l-Klór-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol
0,32 g (1,07 romol) l-klór-2-metoxi-6-(4-metoxifenil)naftalint és 7 g piridin-hidrokloridot 190 °C-on a B módszer szerint reagáltatunk, így 0,12 g (41%) cím szerinti terméket kapunk piszkosfehér szilárd anyag formájában. Op.: 222-224 °C (bomlik). 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 6,88 (2H, d, J=8,46 Hz), 7,29 (1H, d, J=8,88 Hz), 7,63 (2H, d, J=8,50 Hz), 7,81-7,88 (2H, m) , 8,02-8,08 (2H, m) , 9,59 (1H, s) , 10,43 (1H, s) ; MS(ESI) m/z 269/271 (M-H)-. Elemanalízis a Ci6HhC1O2 képletre számított: C(%) 70, 99; H(%) 4,10. Talált: C(%) 70, 59; H(%) 4,12.
.q példa
6-(4-Hidroxifenil)-1-metoxi-2-naftol
0,41 g (1,30 romol) l-bróm-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol, 0,19 g (0,13 mmol) réz (I)-bromid, 3 ml 4,4 mol/l-es metanolos nátrium-roetoxid és 6 ml DMF elegyét visszafolyató hűtő alatt 3 óra hosszat forraljuk. Ezután az elegyet szobahőmérsékletre lehűtjük, 50 ml 1 mol/l-es sósavoldatba öntjük és 3x100 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, nátrium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és az oldószert ledesztilláljuk. A kapott maradékot szilikagél oszlo ··«· .1,.
pon kromatográfiásan tisztítjuk, eluálószer 40 térfogat% etil-acetátot tartalmazó hexán, így 0,31 g 89% cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op. : 204-206 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 6,88 (2H, d, J=8,47 Hz),
7,19 (1H, d, J=8,81 Hz), 7,57-7, 60 (3H, m) , 7,71 (1H, dd,
J=l,41 Hz, J=8,78 Hz), 7, 94-7, 98 (2H, m) , 9,54 (2H, s) ; MS m/z (M-H)= 265. Elemanalízis a C17H14O3 képletre számított: C(%) 76, 68; H(%) 5,30. Talált: C(%) 76, 46; H(%) 5,13.
Az 5. reakcióvázlat szerinti vegyületek szintézise
16. intermedier
2-Metoxi-6-(4-metoxifenil)-1-fluornaftalin
1,28 g (3,72 mmol) 2-metoxi-6-(4-metoxifenil)-1-brómnaftalin 25 ml THF-fel készült oldatához -78 °C-on lassan hozzáadunk 1,9 ml 2,5 mol/l-es hexános n-butil-lítium-olda15 tót. A kapott oldatot -78 °C-on 30 percig keverjük, majd hozzáadjuk 1,40 g (4,5 mmol) N-fluorbenzolszulfonimid 10 ml THF-fel készült oldatát. Az elegyet további 2 óra hosszat -78 °C-on keverjük, majd szobahőmérsékletre melegítjük, vízbe öntjük és 2x250 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az 20 egyesített szerves fázisokat vízzel mossuk, nátrium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és bepároljuk. A kapott maradékot szilikagélen kromatográfiásan tisztítjuk, eluálószer 5 térfogat% THF-tartalmú hexán, így 0,66 g (63%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op.:
150-155 °C. XH-NMR (CDC13) 5: 3,88 (3H, s) , 4,04 (3H, s) ,
7,02 (2H, d, J=8,69 Hz), 7,28-7,34 (1H, m) , 7,62-7, 67 (3H, m) , 7,74 (1H, dd, J=l,60 Hz, J=8,79 Hz), 7,93 (1H, s) , 8,09 (1H, d, J=8,77 Hz). Elemanalízis a Ci8H15O2F képletre számított : C(%) 76,58; H (%) 5,36. Talált: C(%) 75,78; H (%) 5,95.
17. intermedier
2-Metoxi-6-(4-metoxifenil)-1-naftonitril
0,76 g (2,21 g) l-bróm-2-metoxi-6-(4-metoxifenil)naftalin, 0,24 g (2,66 mmol) réz (I)-cianid és 10 ml DMF oldatát 120 °C-on 4 óra hosszat keverjük. Ezután az elegyet szobahőmérsékletre lehűtjük, etil-acetáttal elkeverjük, szilikagélen szűrjük, majd az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot szilikagéloszlopon kromatográfiásan tisztítjuk, eluálószer 20 térfogat% etil-acetátot tartalmazó hexán, így 0,19 g (30%) cím szerinti terméket kapunk halványsárga szilárd anyag formájában. Op.: 182-185 °C. 1H-NMR (CDC13) δ: 3,88 (3H, s) , 4,09 (3H, s) , 7,03 (2H, d, J=8,73 Hz), 7,29 (1H, d, J=9,12 Hz), 7,63 (2H, d, J=8,73 Hz), 7,88 (1H, dd, J=l,98 Hz, J=8,73 Hz), 7,97 (1H, d, J=l,98 Hz), 8,09 (1H, d, J=9, 12 Hz), 8,14 (1H, d, J=8,73 Hz). Elemanalízis a
Ci9H15O2N képletre számított: C(%) 78, 87; H(%) 5,23; N(%)
4,84. Talált: C (%) 79, 06; H(%) 7,27; N(%) 2,91. 18. intermedier
2-Metoxi-6-(4-metoxifenil)-1-fenilnaftalin
0,80 g (2,33 mmol) 2-metoxi-6-(4-metoxifenil)-1-brómnaftalin és 0,13 g (0,12 mmol) tetrakisz(trifenilfoszfin)palládium 10 ml THF-fel készült elegyéhez hozzáadunk 2,2 ml mol/l-es dietiléteres fenil-magnéziumbromidot. A reakcióelegyet visszafolyató hűtő alatt keverés közben egy éjszakán át forraljuk, majd szobahőmérsékletre lehűtjük, 100 ml 1 mol/l-es sósavoldatba öntjük, és 3x200 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és bepároljuk. A kapott maradékot szilikagél oszlopon kromatográfiásan tisztítjuk, eluálószer térfogat% etil-acetátot tartalmazó hexán, így 0,42 g (53%) cím szerinti terméket kapunk szürke szilárd anyag '·<· .ί >, 67 formájában. Op.: 157-160 °C. 1H-NMR (CDC13) δ: 3,85 (3H, s) , 3,87 (3H, s) , 7,01 (2H, d, J=8,64 Hz), 7,38-7, 46 (4H, m) , 7,49-7,57 (4H, m) , 7,64 (2H, d, J=8,64 Hz), 7,92 (1H, d, J=9, 05 Hz), 7,97 (1H, s). MS (ESI)m/z 341 (M+H) + . Elemanalízis a C24H2oO2-0,5 H2O képletre számított: C(%) 82,50; H(%) 6,06. Talált: C(%) 82, 60; H(%) 5,66. 19. intermedier
2-Metoxi-6-(4-metoxifenil)-1-metilnaftalin
2-Metoxi-6- (4-metoxifenil)-1-brómnaftalin 25 ml THF-fel készült oldatához 0 °C-on lassan hozzáadunk 2 ml 2,5 mol/1es n-butil-lítium-oldatot és kálium-hidroxidból frissen desztillált 0,60 g (5,13 mmol) TMEDA-t. Az elegyet 30 percig 0 °C-on tartjuk, majd hozzáadunk bázikus alumínium-oxidon átengedett 7,3 g (51,3 mmol) jódmetánt, és az elegyet keverés közben hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni, és szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük. Ezután az elegyet 100 ml vízbe öntjük, és 3x200 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat vízzel mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot szilikagéloszlopon kromatográfiásan tisztítjuk, eluálószer 5 térfogat% THF-et tartalmazó hexán, így 0,63 g (88%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op. : 136-138 °C. XH-NMR (CDC13) δ: 3,87 (3H, s) , 3,96 (3H, s) , 7,02 (2H, d, J=8,74 Hz), 7,29 (1H, d, J=9,01 Hz), 7, 60-7,80 (4H, m) , 7,95 (1H, d, J=l,76 Hz), 8,00 (1H, d, J=8,86 Hz); MS(ESI) m/z 279 (M+H) + . Elemanalízis a Ci9Hi8O2-0, 3 H2O képletre számított: C(%) 80, 43; H(%)
6,61. Talált: C(%) 80,20; H(%) 6,33.
.r példa l-Fluor-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol
0,250 g (0,886 mmol) 2-metoxi-6- (4-metoxifenil)-1fluornaftalint a D módszer szerinti módon 2,7 ml (2,7 mmol) mol/l-es bór-tribromid-oldattal reagálhatunk, így 0,13 g (15%) cím szerinti vegyületet kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op. : 219-224 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 6,89 (2H, d, J=8,49 Hz), 7,22-7,28 (1H, m) , 7,61 (2H, d, J=8,53 Hz), 7,65 (1H, d, J=9,12 Hz), 7,79 (1H, d, J=8,77 Hz), 7,92 (1H, d, J=8,73 Hz), 8,05 (1H, s) , 9,63 (1H, bs), 10,00 (1H, bs); MS (ESI) m/z 253 (M-H). Elemanalízis a Ci6HhFO2 képletre számított: C(%) 75, 58; H(%) 4,36. Talált: C(%) 75,13; H(%) 4,40.
1,s példa
2-Hidroxi-6-(4-hidroxifenil)-1-naftonitril
0,115 g (0,397 mmol) 2-metoxi-6-(4-metoxifenil)-1naftonitrilt a D módszer szerint 4 g piridin-hidrokloriddal reagáltatunk 190 °C-on, így 0,025 g (24%) cím szerinti terméket kapunk sárgásbarna szilárd anyag formájában. Op.: >220 °C. XH-NMR (DMSO-d6) δ: 6,89 (2H, d, J=8,37 Hz), 7,28 (1H, d, J=9,07 Hz), 7,63 (2H, d, J=8,42 Hz), 7, 88-7,98 (2H, m) , 8,12-8,16 (2H, m) , 9,63 (1H, s) , 11,65 (1H, bs);
MS (ESI) m/z 260 (M-H)-. Elemanalízis a CnHuN02-0, 4 H20 képletre számított: C(%) 76,05; H(%) 4,43; N(%) 5,22. Talált: C(%) 76, 09; H(%) 4,25; N(%) 4,83.
.t példa
6-(4-Hidroxifenil)-l-fenil-2-naftol
D módszer
0,36 g (1,06 mmol) 2-metoxi-6-(4-metoxifenil)-1-fenilnaftalin 25 ml diklórmetánnal készült elegyéhez 0 °C-on lassan hozzáadunk 3,2 ml 1 mol/l-es diklórmetános bór-tribromid-oldatot. Az elegyet hagyjuk lassan szobahőmérsékletre melegedni, és egy éjszakán át keverjük. A kapott oldatot 100 ml vízbe öntjük, és 3x100 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat telített nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, magnézium-szulfáton szá69 rítjuk, az oldószert eltávolítjuk, és a maradékot szilikagél oszlopon kromatográfiásan tisztítjuk, eluálószer 25 térfogat% etil-acetátot tartalmazó hexán, majd preparativ fordított fázisú HPLC útján tisztítjuk, vákuumban 105 °C-on szárítjuk, így 0,14 g (42%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op. : 142-146 °C.
^H-NMR (DMSO-d6) δ: 6,86 (2H, d, J=8,50 Hz), 7,26-7,42 (5H, m) , 7,48-7,61 (5H, m) , 7,84 (1H, d, J=8,96 Hz), 8,02 (1H, d, J=l,46 Hz), 9,52 (2H, s) ; MS(ESI) m/z 311 (M-H)’. Elemanalízis a C22Hi6O2-0,l H20 képletre számított: C(%) 84,11; H(%) 5,20. Talált: C(%) 83, 90; H(%) 5,15.
l.u példa
6-(4-Hidroxifenil)-1-metil-2-naftol
0,35 g (1,26 mmol) 2-metoxi-6-(4-metoxifenil)-1-metilnaftalint a D módszer szerinti módon 3,8 ml (3,8 mmol) 1 mol/l-es bór-tribromid-oldattal reagálhatunk, így 0,15 g (48%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op.: > 170 °C (bomlik). ^-NMR (DMSO-d6) δ: 2,42 (3H, s), 6,87 (2H, kd, J=8,33 Hz), 7,15 (1H, d, J=8,81 Hz), 7,59 (2H, d, 0=8,35 Hz), 7,65 (1H, d, 0=8,93 Hz), 7,71 (1H, dd, 0=1,24 Hz, 0=8,90 Hz), 7,88 (1H, d, 0=8,87 Hz), 7,95 (1H, s) , 9,49 (1H, s) , 9,52 (1H, s) ; MS(ESI) 249 m/z (M-H)’. Elemanalízis a C17H14O2 képletre számított: C(%) 81,58; H(-s) 5,64. Talált: C (%) 81,15; H(%) 5,58.
A 6. reakcióvázlat szerinti vegyületek szintézise
27. intermedier terc-Butil-[(6-bróm-2-naftil)oxi]dimetilszilán
E módszer
13,68 g (61,33 mmol) 6-bróm-2-naftol és 11,09 g (73,6 mmol) TBDMS-C1 50 ml DMF-fel készült oldatához hozzáadunk 10,2 g (150 mmol) imidazolt. Az oldatot 3 óra hosszat keverjük, majd 250 ml nátrium-hidrogén-karbonát-oldatot adunk hozzá, és 3x250 ml, 50 térfogat% etil acetátot tar talmazó hexánnal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat vízzel mossuk, magnézium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és bepároljuk, így sárgásbarna olajat kapunk, amelyet vákuumban szárítunk, így 19,92 g (97%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. 1H-NMR (CDC13) δ: XH-NMR (CDCI3) δ: 0,24 (6H, s) , 1,01 (9H, s) , 7,08 (1H, dd, J=2,26 Hz, J=8,81 Hz), 7,14 (1H, d, J=2,15 Hz), 7,46 (1H, dd, J=l,80 Hz, J=8,77 Hz), 7,54 (1H, d, J=8,77 Hz), 7,61 (1H, d, J=8,81 Hz), 7,90 (1H, s) ; MS (El) m/z 336/338 (M)+. Elemanalízis a Ci6H2iBrOiSi-0, 25 H20 képletre számított: C(%) 56, 97; H (%) 6,27. Talált: C (%) 56,81; H(%) 6,43.
22. intermedier terc-Butil-(4-bróm-2,6-difluor-feniloxi)dimetilszilán
10,54 g (50,4 mmol) 4-bróm-2,6-difluor-fenolt az E módszer szerinti módon 9,88 g (150,7 mmol) TBDMS-Cl-vel reagáltatunk, így 14,61 g (90%) cím szerinti terméket kapunk tiszta, színtelen olaj formájában. 1H-NMR (CDC13) δ: 0,17 (6H, s), 0,99 (9H, s), 7,02 (H, d, J=7,13 Hz).
28. intermedier terc-Butil-[(2-(6-naftil-bórsav)oxi]dimetilszilán
F módszer
19,18 g (56,9 mmol) terc-butil-[(6-bróm-2-naftil)oxi]dimetilszilán 200 ml THF-fel készült oldatához -78 °C-on lassan hozzáadunk 25 ml 2,5 mol/l-es hexános nbutil-lítium-oldatot. A kapott oldatot 30 percig keverjük, majd hozzáadunk 53,5 g (285 mmol) triizopropil-borátot. A kapott oldatot egy óra hosszat -78 °C-on keverjük, majd egy éjszakán át hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni. Ezután az oldatot 0 °C-ra lehűtjük, hozzáadunk 200 ml 1 mol/l-es sósavoldatot, és 10 percig keverjük. Ezután az elegyet 3x250 ml etil-acetáttal extraháljuk, az egyesített szerves fázisokat 25 ml térfogatra bepároljuk. A kristályosítást hexánnal indítjuk, a szilárd terméket leszűrjük, vákuumban szárítjuk, így 13,5 g (79%) cím szerinti terméket kapunk piszkosfehér szilárd anyag formájában. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 0,25 (6H, s) , 0,99 (9H, s) , 7,10 (1H, dd, J=2,56 Hz, J=8,97 Hz), 7,26 (1H, d, J=2,56 Hz), 7,73 (1H, d, J=8, 54 Hz), 7,82 (1H, dd, J=l,07 Hz, J=8,33 Hz), 7,83 (1H, d, J=8,97 Hz), 8,30 (1H, s); MS(ESI) m/z 303 (M+H)+. Elemanalízis a
C16H23BO3SÍ képletre számított: C (%) 63,58; H(%) 7,67. Talált: C(%) 46, 97; H(%) 6,78.
29. intermedier
3-Fluor-4-metoxifenilbórsav g (0, 049 mól) 4-bróm-2-fluoranizolt az F módszer szerinti módon 23,4 ml (0,059 mól) 2,5 mol/l-es hexános n butil-litiummal, majd 45,2 ml (0,196 mól, 36,9 g) triizopropil-boráttal reagáltatunk, így 7,1 g (85,2-s) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. MS(ESI) m/z 169 (M-H)”. ^-NMR (DMSO-d6) δ: 3,84 (3H, s) , 7,10-7,16 (1H, m) , 7,51-7,60 (2H, m) .
30. intermedier
5-Difluor-4 -terc-butildimetilszililoxibórsav
12,98 g (40,19 mmol) terc-butil(4-bróm-2,6-difluorfeniloxi)dimetilszilánt az F módszer szerinti módon 27,6 ml (44,2 mmol) 1,6 mol/l-es n-butil-lítium-oldattal, majd
37,8 g (200 mmol) triizopropil-boráttal reagáltatunk, így 4,38 g (38%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. ^-NMR (DMSO-d6) δ: 0,25 (6H, s) , 1,06 (9H, s), 7,54 (2H, d, J=7,93 Hz).
31. intermedier
4-Metoxi-2-metilfenilbórsav g (0,050 mól) 4-bróm-3-metilanizolt az F módszer szerinti módon 24 ml (0,055 mól) 2,5 mol/l-es hexános n-butil-litium-oldattal, majd 57,7 ml (47,02 g, 0,25 mol) triizopropil-boráttal reagálhatunk, így 5,7 g (69%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. MS (ESI) m/z 313 (2M-H2O-H)’.
33. intermedier
2-(3-Fluor-4-metoxifenil)naftalin
0,31 g (1/50 mmol) 2-brómnaftalint az A módszer szerinti módon 0,31 g (1,80 mmol) 3-fluor-4-metoxifenil-bórsavval reagáltatunk, így 0,30 g (79%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op.: 108-110 °C. ^-NMR (CDC13) δ: 3,96 (3H, s) , 7,04-7,10 (1H, m) ,
7,43-7, 52 (4H, m) , 7,68 (1H, dd, J=l,81 Hz, J=8,57 Hz), 7,84-7, 92 (3H, m) , 7,97 (1H, d, J=l,05 Hz). Elemanalízis a C17H13FO képletre számított: C (%) 80, 93; H(%) 5,19. Talált: C(%) 81,01; H(%) 4,78.
1.ay példa
6-(3,5-Difluor-4-hidroxifenil)-2-naftol
0,165 g (0,74 mmol) 6-bróm-2-naftolt az A módszer szerinti módon 0,25 g (0,87 mmol) 3,5-difluor-4-terc-butildimetilszililoxi-bórsavval reagáltatunk, így 0,14 g (70%) cím szerinti terméket kapunk sárgásbarna szilárd anyag formájában, amelyet preparatrv fordított fázisú HPLC útján tisztítunk, így a cím szerinti terméket fehér szilárd anyag formájában kapjuk. Op. : 216-220 °C. 1H-NMR (DMSO-ds) δ:
7,09-7,13 (2H, m) , 7,50 (2H, d, J=10,00 Hz), 7,73 (2H, s) , 7,78 (1H, d, J=8,58 Hz), 8,10 (1H, s) , 9,83 (1H, s) , 10,28 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 271 (M-H)~. Elemanalízis a
Ci6HioF202-0, 25 H20 képletre számított: C (%) 69, 44; H(%)
3,82. Talált: C (%) 69, 70; H(%) 3,63.
. intermedier
6-(3-Fluor-4-metoxifenil)-2-naftol
3,2 g (18,8 mmol) 6—bróm-2-naftolt az A módszer szerinti módon 3,5 g (15,7 mmol) 3-fluor-4-metoxifenilbórsavval reagáltatunk, így 3,3 g (78%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op. : 174-176 °C.
1H-NMR (DMSO-dg) 5: 3,89 (3H, s) , 7,11 (1H, dd, J-8,79 Hz, J=l,95 Hz), 7,13 (1H, s) , 7,26 (1H, J=8,79), 7,57 (1H, d, J=8,79 Hz), 7,66 (1H, dd, J=13,18 Hz, J=l,95 Hz), 7,71 (1H, dd, J=8,79 Hz, J=l,46 Hz), 7,75 (1H, d, J=8,79 Hz), 7,82 (1H, d, J=8,79 Hz), 8,07 (1H, s) , 9,81 (1 H, s) ; MS (ESI) m/z 267 (M-H)-. Elemanalízis a Cl7Hi3FO2 képletre számított: C(%) 76,11; H(%) 4,88. Talált: C(%) 76, 03; H(%) 4,78.
35. intermedier
6- (4-Metoxi-2-metilfenil) -2-naftol
1,8 g (5, 4 mmol) 6—bróm-2—naftolt az A módszer szerinti módon 1,74 g (7,0 mmol) 4-metoxi-3-metilfenilbórsavval reagáltatunk, így 1,56 g (73%) cím szerinti terméket kapunk sárgásszínű szilárd anyag formájában. Op.. 124-126 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 2,25 (3H, s) , 3,78 (3H, s) , 6,85 (1H, dd, J=8,35 Hz, J=2,56 Hz), 6,90 (1H, d, J=2,37 Hz), 7,09 (1H, dd, J=8,75 Hz, J=2,25 Hz), 7,13 (1H, s) , 7,20 (1H, d, J=8,33 Hz), 7,35 (1H, dd, J=8,39 Hz, J=l,37 Hz), 7,67 (1H, s) , 7,70 (1H, d, J=8,53 Hz), 7,78 (1H, d, J=8,78 Hz), 9,74 (1H, s); MS (ESI) m/z 263 (M-H)’. Elemanalízis a Ci8HiSO2 képletre számított: C(%) 81,79; H(%) 6,10. Talált: 0(%) 81,43; H(%) 6,01.
.j példa
2-Fluor-4-(2-naftil)fenol
0,22 g (0,87 mmol) 2-(3-fluor-4-metoxifenil)naftalint a D módszer szerinti módon 1,75 ml (1,75 mmol) 1 mol/l-es bór-tribromiddal reagáltatunk, így 0,13 g (63%) cím szerin ti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op. : 110-112 °C. ^-NMR (DMSO-d6) δ: 7,05-7,11 (1H, m) , 7,47-7,54 (3H, m) , 7,65 (1H, dd, J=2,20 Hz, J=12, 92 Hz), 7,82 (1H, dd, J=l,80 Hz, J=8,62), 7, 90-7, 98 (3H, m) , 8,17 (1H, bs), 10,07 (1 H, bs); MS (ESI) m/z 237 (M-H)-. Elemanalízis a
Ci6HhFO képletre számított: C(%) 80, 66; H(%) 4,65. Talált: C(%) 80,31; H(%) 4,29.
.k példa
6-(3-Fluor-4-hidroxifenil)-2-naftol
600 mg (2,24 mmol) 6-(3-fluor-4-metoxifenil)-2-naftolt a D módszer szerinti módon 6,27 ml (6,27 mmol) 1,0 mol/l-es diklórmetános bór-tribromid-oldattal reagáltatunk, így 385 mg (68%) cím szerinti terméket kapunk sárgásszínű szilárd anyag formájában. Op.: 216-219 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 7,03-7,13 (3H, m) , 7,43 (1H, dd, J=8,37 Hz, J=l,77 Hz), 7,58 (1H, dd, J=12,92 Hz, J=2,13 Hz), 7,68 (1H, dd, J=8,68 Hz, J=l,61 Hz), 7,74 (1H, d, J=8,68 Hz), 8,03 (1H, s) , 9,79 (1H, s) , 9,98 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 253 (M-H)-. Elemanalízis a CieHuFOa-0,13 H2O képletre számított. C(-e) 74, 89; H(%) 4,42. Talált: C(%) 74,86; H(%) 4,33.
A 7. reakcióvázlat szerinti vegyületek szintézise
36. intermedier l-Klór-6- (3-fluor-4-metoxifenil) -2-naftol g (3,73 mmol) 6— (3 — fluor—4—metoxifenil)—2—naftol és 748 mg (5,60 mmol) NCS 35 ml THF-fel készült oldatát az A módszer szerinti módon reagáltatjuk, így 780 mg (69-s) cím szerinti terméket kapunk barna szilárd anyag formájában. Op.: 137-139 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 3,89 (3H, s) , 7,26-7,33 (2H, m), 7,61 (1H, d, J=8,63 Hz), 7,71 (1H, dd, J=13,08 Hz, J=2,16 Hz), 7,84 (1H, d, J=8,93 Hz), 7,92 (1H, dd, J=8,92 Hz, J=l,80 Hz), 8,06 (1H, d, J=8,86 Hz), 8,19 (1H, d,
J=!,55 Hz), 10,52 (1H, s) ; MS(ESI) m/z 301/303 (M-H)-.
• ·τ .x..
Elemanalízis a C^HnClO képletre számított: C(%) 67,45;
H(%) 4,00. Talált: C(%) 67,35; H(%) 3,78.
37. intermedier
1-KIór-6- (4-metoxi“2-metilfenil) -2-naf tol
800 mg (3,03 mmol) 6- (4-metoxi-2-metilfenil) -2-naftolt 30 ml THF-ben 485 mg (3,61 mmol) NCS-sel reagáltatunk az A módszer szerinti módon, így 640 mg (71%) cím szerinti terméket kapunk sárga szilárd anyag formájában. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 2,26 (3H, s) , 3,79 (3H, s) , 6,86 (1H, dd,
J=8,36 Hz, J=2,63 Hz), 6,91 (1H, d, J=2,51 Hz), 7,22 (1H, d, J=8,34 HZ), 7,31 (1H, d, J=8,89 Hz), 7,56 (1H, dd, 3=8,7! Hz, J=l,71 Hz), 7,79-7,83 (2H, m) , 8,04 (1H, J=8,91 Hz), 10,46 (1H, s) ; 13C NMR (DMSO-d6) 5: 20,54, 55, 07,
111,48, 112,21, 115,71, 118,73, 121,94, 127,92, 128,15,
128,35, 129,34, 130, 12, 130,87, 133,26, 136, 14, 136, 36,
150,99, 158,49; MS(ESI) m/z 297/299 (M-H)-. Elemanalízis a C18H15C1O2 képletre számított: C(%) 72,36; H(%) 5,06. Talált: C(%) 72,02; H(%) 5,03.
.v példa l-Klór-6-(3-fluor-4-hidroxifenil)-2-naftol
420 mg (1,39 romol) l-klór-6-(3-fluor-4-metoxifenil) 2-naftolt a D módszer szerinti módon 3,9 ml (3,89 mmol) 1,0 mol/l-es diklórmetános bór-tribromid-oldattal reagáltatunk, így 330 mg (82%) cím szerinti terméket kapunk sárgásszínű szilárd anyag formájában. Op.: 195-198 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 7,08 (1H, t, 0=8,86 Hz), 7,32 (1H, d, J=8, 89 Hz), 7,47 (1H, dd, J=8,42 Hz, J=l,52 Hz), 7,63 (1H, dd, J=12,88 Hz, J=l,98 Hz), 7,83 (1H, d, J=8,95 Hz), 7,88 (1H, dd, J=8,93 Hz, J=l,61 Hz), 8,05 (1H, d, 8,86 Hz), 8,15 (1H, d/J=1,25 Hz), 10,05 (1H, s) , 10,50 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 287/289 (M-H)-. Elemanalízis a C16H10CIF02 képletre számi tott: C(%) 66, 56; H(%) 3,49. Talált: C(%) 66, 37; H(%) 3,65.
,y példa l-Klór-6-(4-hidroxi-2-metilfenil)-2-naftol
400 mg (1,41 mmol) l-klór-6-(4-metoxi-2-metilfenil)2-naftolt a D módszer szerinti módon 4,0 ml (4,0 mmol) 1,0 mol/l-es diklórmetános bór-tribromid-oldattal reagálhatunk, így 310 mg (77%) cím szerinti terméket kapunk sárgásszínű szilárd anyag formájában. Op. : 216-218 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 2,20 (1H, s) , 6,68 (1H, dd, J=8,19 Hz, J=2,42 Hz), 6,72 (1H, d, J=2,13 Hz), 7,10 (1H, d, J=8,16 Hz), 7,29 (1H, d, J=8,89 Hz), 7,29 (1H, d, J=8,89 Hz), 7,53 (1H, dd, J=8,78 Hz, J=l,62 Hz), 7,76 (1H, d, J=l,38 Hz), 7,80 (1H, d,J=8,94 Hz), 8,02 (1H, d, J=8,72 Hz), 9,4 (1H, s) , 10,43 (1H, s) ; 13C NMR (DMSO-d6) δ: 20, 47, 112,20, 112, 99, 117, 00, 118,66, 121,85, 127,83, 128,09, 128, 38, 129, 47, 130, 00,
130,88, 131,65, 136, 09, 136,51, 150, 88, 156, 62; MS(ESI) m/z 283/285 (M-H)-. Elemanalízis a C18Hi5C1O2 képletre számított: C(%) 71,71; H(%) 4,60. Talált: C(%) 71,30; H(%) 4,66.
A 8. reakcióvázlat szerinti vegyületek előállítása 38. intermedier
6-Metoxi-(2-naftalenil)bórsav
Egy 500 ml-es lombikba bemérünk 8,02 g (33,8 mmol) 2bróm-6-metoxinaftalint, 125 ml vízmentes THF-t és egy kevés 1,10-fenantrolin kristályt indikátorként. Az elegyet -78 °C-ra lehűtjük, és egy fecskendőn keresztül lassan hozzáadunk 56 ml (72,8 mmol) 1,3 mol/l-es hexános szek-butillítium-oldatot. Az elegyet fél óra hosszat keverjük, majd hozzáadunk 47 ml (203,7 mmol) triizopropil-borátot, és az oldatot egy óra hosszat -78 °C-on keverjük, majd hagyjuk környezeti hőmérsékletre melegedni. Ezután hozzáadunk 100 ml jéghideg 2 mol/l-es sósavat, és az elegyet 5 percig keverjük, majd további 100 ml 2 mol/l-es sósavoldatot adunk hozzá, és további 5 percig keverjük. Ezután az elegyet ·· ···· ·· · • · ···« · » etil-acetáttal háromszor extraháljuk, az egyesített szerves fázisokat magnézium-szulfáton szárítjuk, majd közel szárazra bepároljuk. A koncentrátumhoz hexánt adunk a kristályosítás beindítására, a kivált kristályokat leszűrjük, majd vákuumban szárítjuk, így 7,01 g (kb. 100%) cím szerinti terméket kapunk halvány narancsszínű por formájában. 1H-NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 3,88 (3H, s), 7,15 (1H, dd, J=8,9 Hz, 2,7 Hz), 7,29 (1H, d, J=2,5 Hz), 7,75 (1H, d, J=8,3 Hz), 7,83 (2H, appt), 8,30 (1H, s) ; MS (El) m/z 202, 17 (M+) .
39. intermedier
2-Klór-4-(6-metoxi-2-naftil)fenol
730 mg (3,5 mmol) 4-bróm-2-klórfenol, 780 mg (3,85 mól) (6-metoxi-2-naftalenil)bórsav, 930 mg (8,8 mmol) 2 mol/l-es vizes nátrium-karbonát-oldat és 203 mg (0,18 mmol) tetrakisz(trifenilfoszfin)palládium(0) 45 ml
DME-vel készült elegyét visszafolyató hűtő alatt 12 óra hosszat forraljuk. Ezután az elegyet lehűtjük, etil-acetáttal háromszor extraháljuk, nátrium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. A maradékot oszlopkromatográfiás úton tisztítjuk, eluálószer 30 térfogat% etil-acetátot tartalmazó he xán, így 360 mg (30%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op. : 129-130 °C. 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 3,88 (3H, s) , 7,08 (1H, d, J=8,2 Hz), 7,17 (1H, dd, J=8,6 Hz, 2,1 Hz), 7,34 (1H, d, J=2,l Hz), 7,59 (1H, dd, J=8,6 Hz, 2,1 Hz), 7,75 (2H, m) , 7,87 (1H, d, J=8,8
Hz), 7,88 (1H, d, J=8,6 Hz), 8,09 (1H, s) , 10,34 (1H, s) ;
MS m/z 283/285 (CT mintázat) (M-H+) . Elemanalízis a C17H13CIO2 képletre számított: C (%) 71,71; H(%) 4,60. Talált: C(%) 71,68; H(%) 4,72.
Λ· ··«··« · »4 * · · 4 · 4 · 0
40. intermedier
3-Klór-4-(6-metoxi-2-naftil)fenol
3,8 g (18,3 mmol) 4-bróm-3-klórfenolt az A módszer szerinti módon 4,81 g (23,8 mmol) 112372-104 jelű vegyülettel reagáltatunk, így 5,09 g (98%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op.: 139-142 °C.
1H-NMR (DMSO-d6) δ: 3,89 (3H, s) , 6,87 (1H, dd, J=8,39 Hz, J=2,45 Hz), 6,98 (1H, J=2,40 Hz), 7,19 (1H, dd, J=8,98 Hz, J=2,46 Hz), 7,32 (1H, d, J=8,39 Hz), 7,35 (1H, d, J=2,38 Hz), 7,50 (1H, dd, J=8,47 Hz, J=l,73 Hz), 7, 83-7,88 (3H, m) , 10,04 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 283/285 (M-H)’. Elemanalízis a CisHnClO képletre számított: C (%) 71,71; H(%) 4,60. Talált: C(%) 71,50; H(%) 4,62.
41. intermedier
2,6-Difluor-4-(6-metoxi-2-naftil)fenol
3,5 g (16,8 mmol) 4-bróm-2,6-difluorfenolt az A módszer szerinti módon 4,2 g (20,2 mmol) 38. intermedierrel reagáltatunk, így 1,1 g (23%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op. : 188-190 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 3,89 (3H, s) , 7,19 (1H, dd, J=8,92 Hz, J=2,52 Hz), 7,34 (1H, J=2,41 Hz), 7,48-7, 59 (2H, m) , 7,80 (1H, dd, J=8,61 Hz, J=l,76 Hz), 7,88 (1H, d, J=8,65 Hz), 8,17 (1H, d, J=l,25 Hz), 10,31 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 285 (M-H)’.
Elemanalízis a C17H12F2O2 képletre számított: C (%) 71,32;
H(%) 4,23. Talált: C(%) 71,10; H(%) 4,17.
42. intermedier
4-(6-Hidroxi-2-naftil)-3-metoxifenil-4-metilbenzolszulfonát 4-Bróm-3-metoxifenil-4-metilbenzolszulfonát
4,92 g (26,0 mmol) 4-bróm-rezorcinol, 5,95 g (31,2 mmol) p-toluolszulfonsav-klorid, 23 g (167 mmol) kálium-karbonát és 300 ml aceton elegyét visszafolyató hűtő alatt 16 óra hosszat forraljuk. Ezután hozzáadunk 9,89 g (70 mmol) jód-metánt, és az elegyet visszafolyató hűtő alatt további 12 óra hosszat forraljuk. Ezután az elegyet szobahőmérsékletre lehűtjük, és hozzáadunk 200 ml dietilétert, az így kapott szuszpenziót leszűrjük. A szűrletből az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot szilikagél oszlopon tisztítjuk, eluálószer 10 térfogat% etil-acetátot tartalmazó hexán, így 6,49 g (70%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. ^-NMR (CDC13) δ: 2,45 (3H, s), 3,78 (3H, s) , 6,40 (1H, dd, J=2,45 Hz, J=8,60 Hz), 6,59 (1H, d, J=2,48 Hz), 7,33 (2H, d, J=8,30 Hz), 7,40 (1H, d, J=8,69 Hz), 7,71 (2H, d, J=8,23 Hz); MS (ESI) m/z 355/357 (M-H). Elemanalízis a Ci4H13BrO4S képletre számított: C(%) 47,07; H(%) 3,67. Talált: C(%) 47,14; H(%) 3,57.
3,07 g (8,60 mmol) 4-bróm-3-metoxifenil-4-metilbenzolszulfonátot az A módszer szerinti módon 2,86 g (9,46 mmol) terc-butil-[2-(6-naftil-bórsav)oxi]dimetilszilánnal reagáltatunk, így 2,15 g (53%) cím szerinti terméket kapunk narancsszínű szilárd anyag formájában. ^-NMR (CDCI3) δ: 2,44 (3H, s) , 3,65 (3H, s), 6,69 (1H, dd, J=2,10 Hz, J=8,29 Hz), 6,74 (1H, d, J=2,10 Hz), 7,06-7,11 (2H, m) , 7,36 (1H, d, J=8,27 Hz), 7, 4569 (1H, dd, J=l,32 Hz, J=8,57 Hz), 7,51 (1H, d, J=8,28 Hz), 7,67 (1H, d, J=8,61 Hz), 7,77 (1H, d, J=8,80 Hz), 7,80-7, 85 (3H, m) , 9,78 (1H, s) ;
MS (ESI) m/z 419 (M-H)’. Elemanalízis a C24H20O5SO, 25 H2O képletre számított: C(%) 67,82; H(%) 4,86. Talált: C(%)
67,75; H(%) 4,56.
1. aa példa
6-(4-Hidroxi-2-metoxifenil)-2-naftol
1,74 g (4,05 mmol) 4-(6-hidroxi-2-naftil)-3-metoxifenil-4-metilbenzolszulfonát, 5 g kálium-hidroxid, 85 ml víz és 85 ml etanol elegyet 90 °C-on 2 óra hosszat keverjük. Ezután a reakcióelegyet szobahőmérsékletre lehűtjük, térfo ‘ÍUt gatát felére bepároljuk, ecetsavval semlegesítjük, és 3x200 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat konyhasóoldattal mossuk, nátrium-szulfáton szárítjuk, szűrjük és az oldószert eltávolítjuk, az így kapott maradékot szilikagél oszlopon tisztítjuk eluálószer 25 térfogat% etil-acetátot tartalmazó hexán, így 1,01 g (94%) cím szerinti terméket kapunk sárgásbarna szilárd anyag formájában. Ennek egy mintáját preparatív fordított fázisú HPLC útján tovább tisztítjuk, így sárgásbarna szilárd anyagot kapunk. Op. : 152-154 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 3,72 (3H, s) , 6,46 (1H, dd, J=l,52 Hz, J=8,20 Hz), 6,52 (1H, d, J=l,77 Hz), 7, 04-7, 09 (2H, m) , 7,16 (1H, d, J=8,23 Hz), 7,47 (1H, d, J=8,50 Hz), 7,63 (1H, d, 0=8,57 Hz), 7,72-7,75 (2H, m) , 9,56 (1H, bs), 9,68 (1H, bs); MS(ESI) m/z 265 (M-H)”. Elemanalízis a C17H14O3 képletre számított: C(%) 76, 68; H(%) 5,30. Talált: C (%) 76,68; H(%) 5,30.
1.1 példa
6-(3-Klór-4-hidroxifenol)-2-naftol
192 mg (0,71 mmol) 2-klór-4-(6-metoxi-2-naftil)fenolt és 3 g (26 mmol) piridin-hidroklorid elegyét keverés közben egy óra hosszat 200 °C-on hevítjük. Ezután az elegyet hagyjuk lehűlni, vizet adunk hozzá a szilárd komponens feloldására, majd a vizes fázist dietiléterrel háromszor extraháljuk. Az éteres fázisokat egyesítjük, nátrium-szulfáton szárítjuk, és szilikagél rétegen átszűrjük. A szűrletet csökkentett nyomáson bepároljuk, így 180 mg (98-s) cím szerinti terméket kapunk sárgásbarna szilárd anyag formájában. Op.: 176-177 °C. 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 7,09 (3H, m) , 7,57 (1H, dd, J=7,6 Hz, 1,5 Hz), 7,70 (3H, m) , 7,82 (1H, d, J=8,6 Hz), 8,02 (1H, s) , 9,77 (1H, s) , 10,28 (1H, s) ; MS m/z 269/271 (Cl mintázat) (M-H+) . Elemanalízis a Ci6HnC102 képletre számított: C(%) 70,99; H(%) 4,10. Talált: C(%)
0, 64; H(%) 4,16.
.ab példa
- (2-Klór-4-hidroxifenil)-2-naftol
2,4 g (8,43 mmol) 3-klór-4-(6-metoxi-2-naftil)fenolt a D módszer szerinti módon 21,9 ml (21,9 mmol) 1,0 mol/l-es diklórmetános bór-tribromid-oldattal reagáltatunk, így 2,1 g (92%) cím szerinti terméket kapunk sárgásszínű szilárd anyag formájában. Op. : 209-210 °C. 1H-NMR (DMSO-dg) δ: 6,86 (1H, dd, J=8,42 Hz, J=2,45 Hz), 6,97 (1H, d, 2,41 Hz), 7,11 (1H, dd, J=8,78 Hz, J=2,35 Hz), 7,16 (1H, d, J=2,15 Hz), 7,30 (1H, d, J=8,40 Hz), 7,42 (1H, dd, J=8,51 Hz, J=l,71 Hz), 7,71 (1H, d, J=8,59 Hz), 7,76 (1H, s) , 7,80 (1H, d, J=8,82 Hz), 9,82 (1H, s) , 10,01 (1H, s) ; 13C NMR (DMSO-d6) δ: 108,45, 114,79, 116, 21, 118, 90, 125, 53,
127,43, 127, 77, 127,92, 129, 56, 130, 70, 131,73, 132,34,
133,18, 133,52, 155,56, 157,46; MS(ESI) m/z 269/271 (M-H)-. Elemanalízis a Ci6HhC1O2 képletre számított: C(%) 70, 99;
H(%) 4,10. Talált: C(%) 70, 68; H(%) 4,09.
.w példa l-Klór-6-(3-klór-4-hidroxifenil)-2-naftol
500 mg (1,85 mmol) 6-(3-klór-4-hidroxifenil)-2-naftolt az A módszer szerinti módon, 37 ml THF-ben 346 mg (2,59 mmol) NCS-sel reagáltatunk, így 380 mg (68%) cím szerinti terméket kapunk sárgásszínű szilárd anyag formájában. Op.: 174-175 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 7,09 (1H, d, 8,47 Hz), 7,31 (1H, d, J=8,89 Hz), 7,60 (1H, dd, J=8,20 Hz, J=2,26 Hz), 7,78 (1H, d, J=2,22 Hz), 7,84 (1H, d, J=8,99 Hz), 7,88 (1H, dd, J=9, 00 Hz, J=l,80 Hz), 8,05 (1H, d, J=8,86 Hz), 8,14 (1H, d, J=l,60 Hz), 10,37 (1H, s) , 10,49 (1H, s); MS (ESI) m/z 303/305/307 (M-H)’. Elemanalízis a Ci6HioC1202 képletre számított: C (%) 62, 98; H(%) 3,30. Talált: C (%)
62, 65; H(%) 3,21.
.ac példa l-Klór-6-(2-klór-4-hidroxifenil)-2-naftol
500 mg (1,85 mmol) 6-(2-klór-4-hidroxifenil)-2-naftolt a C módszer szerinti módon, 40 ml THF-ben 321 mg (2,40 mmol) NCS-sel reagáltatunk, így 435 mg (77%) cím szerinti terméket kapunk sárgásszínű szilárd anyag formájában. Op. : 224-226 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 6,86 (1H, dd, J=8,42 Hz, J=2,41 Hz), 6,96 (1H, d, J=2,44 Hz), 7,30 (1H, d,
J=3,19 Hz), 7,33 (1H, d, J=2,65 Hz), 7,62 (1H, dd, J=8, 81 Hz, J=l,71 Hz), 7,83 (1H, d, J=8,93 Hz), 7,86 (1H, d,
J=l,54 Hz), 8,04 (1H, J=8,76 Hz), 10,04 (1H, s) , 10,51 (1H, s) ; 13C NMR (DMSO-d6) δ: 112,24, 114, 84, 116, 26, 118,79, 121,84, 128, 16, 128,24, 128, 35, 129, 27, 130, 03, 130, 40,
131,73, 132,38, 133,98, 151,24, 157,70. MS (ESI) m/z:
303/305/307 (M-H)-. Elemanalízis a Ci6HioC12O2 képletre számított: C(%) 62,98; H(%) 3,30. Talált: C(%) 62, 69; H(%)
3,36.
l.ba példa l-Klór-6-(3,5-difluor-4-hidroxifenil)-2-naftol
300 mg (1,10 mmol) 6-(3,5-difluor-4-hidroxifenil)-2naftolt a C módszer szerinti módon, 30 ml THF-ben 155 mg (1,16 mmol) NCS-sel reagáltatunk, így 264 mg (78%) cím szerinti terméket kapunk szürke szilárd anyag formájában. Op.: 209-210 °C. A-NMR (DMSO-dg) δ: 7,32 (1H, d, J=8,89 Hz),
7,50-7,61 (2H, m) , 7,83 (1H, d, J=8,96 Hz), 7,92 (1H, dd, J=8,94 Hz, J=l,59 Hz), 8,05 (1H, d, J=8,88 Hz), 8,22 (1H, d, J=l,19 Hz), 10,36 (1H, s) , 10,54 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 305/307 (M-H)-. Elemanalízis a C16H9CIF2O2 képletre számított: C (%) 62,66; H(%) 2,96. Talált: C (%) 62,58; H(%) 3,09.
A 9. reakcióvázlat szerinti vegyületek előállítása 43. intermedier
6-Bróm-l-klór-naftalin-2-ol g (13,4 mmol) 6-bróm-2-naftolt a C módszer szerinti módon, 50 ml THF-ben 2,47 g (18,5 mmol) NCS-sel reagáltatunk, így 2,2 g (64%) sárga szilárd anyagot kapunk. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 7,34 (1H, d, J=8,87 Hz), 7,69 (1H, dd, J=l,75 Hz, J=6, 09 Hz), 7,79 (1H, d, J=8,96 Hz), 7,96 (1H, d, J=9,03 Hz), 8,17 (1H, d, J=l,75 Hz), 10,68 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 255/257/259 (M-H)’.
1,m példa l-Klór-6-fenil-2-naftol
300 mg (1,17 mmol) 6-bróm-l-klórnaftalin-2-olt az A módszer szerinti módon 170,7 mg (1,40 mmol) fenilbórsavval reagáltatunk, így 240 mg (81%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op.: 135-137 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 7,33 (1H, d, J=8,85 Hz), 7,39 (1H, td, J=7,25 Hz, J= 0,7 5 Hz), 7,51 (2H, t, J=7,59 Hz), 7,80 (2H, d, J=7,63 Hz), 7,88 (1H, d, J=8,96 Hz), 7,93 (1H, dd, J=8, 85 Hz, J=l,19 Hz), 8,10 (1H, d, J=8,84 Hz), 8,20 (1H, s) ,
10,53 (1H, s) ; MS (ESI)m/z 253/255 (M-H)’. Elemanalízis a Ci6HhC1O képletre számított: C(%) 75, 45; H(%) 4,35. Talált: C(%) 75,16; H(%) 4,17.
44. intermedier
6-Bróm-l-nitro-2-naftol
2,53 g (4,95 mmol, tisztaság 82,6%) 4-nitro-4-metil2,3,5,6-tetrabróm-2,5-ciklohexadién-l-onhoz hozzáadjuk 1 g (4,5 mmol) 6-bróm-2-naftol 40 ml vízmentes dietiléterrel készült oldatát. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten 1,5 óra hosszat reagáltatjuk. Ezután a szilárd komponenst leszűrjük, így 144 mg 2,3,5,6-tetrabróm-4-metilfenolt kapunk. Ezután az oldatot vákuumban bepároljuk. A nyers elegyet etil-acetátban oldjuk, és vízzel mossuk. A szerves fázist vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, szűrjük, és az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. A nyers terméket etil-acetát és hexán elegyéből átkristályosítjuk, így 1,2 g 2,3,5,6-tetrabróm-4-metilfenolt kapunk. Az anyalúgot Florosil-re koncentráljuk, és szilikagél oszlopon tisztítjuk, eluálószer 15-20 térfogat% etil-acetátot tartalmazó hexán, így 0,731 g (61%) cím szerinti terméket kapunk sárga szilárd anyag formájában. Op.: 111-113 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 7,39 (1H, d, J=9, 07 Hz), 7,54 (1H, d, J=9, 05 Hz), 7,75 (1H, dd, J=9, 05 Hz, J=l,70 Hz), 8,03 (1H, d, J=9, 14 Hz), 8,29 (1H, d, J=l,84 Hz), 11,65 (1H, s) ; MS(ESI) m/z
266/268 (M-H). IR 1350 cm’1, 1490 cm-1. Elemanalízis a
Ci0H6BrNO3-0, 18 H2O képletre számított: C(%) 44,27; H(%)
2,36; N(%) 5,16. Talált: C(%) 44, 24; H(%) 2,14; N(%) 4,76. 45. intermedier
6-[4-(terc-Butil-dimetil-szilaniloxi)fenil]-l-nitro-2-naftol
560 mg (2,1 mmol) 6-bróm-l-nitro-2-naftolt az A módszer szerinti módon 688 mg (2,73 mmol) 4-terc-butil-dimeíiszi 1 i 1 oxi—borsavva 1 reagaltatunk, rgy 347 mg (42^) cím szerinti terméket kapunk sárgásszínű szilárd anyag formájában. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 0,23 (6H, s) , 0,98 (9H, s) , 6,99 (2H, d, J=8,47 Hz), 7,35 (1H, d, J=9,05 Hz), 7,64 (1H, d, J=8,86 Hz), 7,70 (2H, d, J=8,51 Hz), 7,94 (1H, dd, J=6, 62 Hz, J=l,25 Hz), 8,08 (1H, d, J=9, 16 Hz), 8,22 (1H, s) ,
11,45 (1H, s) ; MS(ESI) m/z 394 (M-H)-. 1,x példa
6- (4-Hidroxifenil) -1-nitro-2-naftol
302 mg (0,764 mmol) 6-[4-(terc-butil-dimetilszilaniloxi)fenil]-l-nitro-2-naftol 12 ml THF-fel készült oldatához hozzáadunk 0,92 ml (0,917 mmol) 1,0 mol/l-es THF-es
TBAF-oldatot. A kapott oldatot 10 percig szobahőmérsékleten kg-ygrjük, majd vízbe öntjük, és etil-acetáttal extraháljuk. A szerves fázisokat konyhasóoldattal· mossuk, és vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, szűrjük, majd az oldószert ledesztilláljuk. A maradékot szilikagél oszlopon tisztítjuk, eluálószer 20-40 térfogat% etil-acetátot tartalmazó hexán, így 130 mg (61%) narancsszínű szilárd anyagot kapunk. Ebből analitikai mintát veszünk és etil-acetát és hexán elegyéből átkristályosítva szárítjuk, így a cím szerinti terméket narancsszínű szilárd anyag formájában kapjuk. Op.: 199-201 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 6,89 (2H, d, J=8,51 Hz), 7,33 (1H, d, J=9, 05 Hz, J=l,59 Hz), 7,62 (1H, d, J=8,94 Hz), 7,63 (2H, d, 8,48 Hz), 7,91 (1H, dd, J—8,87 Hz, J=l,59 Hz), 8,06 (1H, d, J=9, 18 Hz), 8,17 (1H, d, J=l, 31 Hz), 9,64 (1H, s) , 11,40 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 280 (M-H)-. Elemanalízis a Ci6HnNO4 képletre számított:
C(%) 68, 32; H(%) 3,94; N(%) 4,98. Talált: C (%) 67,91;
H(%) 4,06, N(%) 4,60.
A 10. reakcióvázlat szerinti vegyületek előállítása 52. intermedier
2- (2,5-Difluor-4-metoxifenil) -6-metoxinaf talin
4,06 g (18,3 mmol) 4-bróm-2, 5-difluoranizolt az A módszer szerinti módon 4,81 g (23,8 mmol) 38. intermedierrel reagáltatunk, így 5,18 g (94,2%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op.: 153-155 °C.
1H-NMR (DMSO-d6) δ: 3,90 (3H, s) , 3,91 (3H, s) , 7,20 (1H, dd, J=8,94 Hz, J=2,50 Hz), 7,28 (1H, dd, J=12,38 Hz, J=7, 47 Hz), 7,36 (1H, d, J=2,42 Hz), 7,56 (1H, dd, J=12,17 Hz, J=7,53 Hz), 7, 62-7, 66 (1H, m) , 7,89 (2H, d, J=8,67 Hz), 8,02 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 301 (M-H) + . HRMS elemzés a
C18Hi4F2O2 képletre számítva: 300, 0962 [CI ISOBUTANE] ,
300, 0953. Elemanalízis a CiSHi4F2O2 képletre számított: C(%) 71,99; H(%) 4,70. Talált: C(%) 73, 00; H(%) 4,62.
53. intermedier
2-(2,g-Difluor-4-metoxifenil)-6-metoxinaftalin
4,06 g (18,3 mmol) 4-bróm-3,5-difluoranizolt az A módszer szerinti módon 4,43 g (22,0 mmol) 38. intermedierrel reagálhatunk, így 3,4 g (62%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op.: 130-132 °C.
1H-NMR (aceton-d6) δ: 3,91 (3H, s) , 3,94 (3H, s) , 6,72-6,80 (2H, m) , 7,20 (1H, dd, J=8,97 Hz, J=2,54 Hz), 7,35 (1H, d, J=2,48 Hz), 7, 48-7,52 (1H, m) , 7, 85-7, 90 (3H, m) ; MS(ESI) m/z 301 (M-H)+. Elemanalízis a 0ΐ8Η!4Ε202 képletre számított: C(%) 71,99; H(%) 4,70. Talált: C(%) 71,67; H(%) 4,81.
50. intermedier
Trifluor-metánszulfonsav-2-fluor-4-metoxi-fenilészter 2-Fluor-4 -metoxifenol g (41,9 mmol) 4-bróm-2-f luorf enol, 6,0 g (41,9 mmol) réz(I)-bromid, 95,8 ml 4,4 mol/l-es metanolos nátrium-metoxid és 200 ml DMF elegyét 150 °C-on 4 óra hosszat hevítjük. Ezután a reakcióelegyet szobahőmérsékletre lehűtjük, és 419 ml 2 mol/l-es vizes sósavoldatba öntjük, majd Celiten leszűrjük, és etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, nátrium-szulfáton szárítjuk, szűrjük, az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot szilikagél oszlopon kromatográfiásan tisztítjuk, eluálószer 5-15 térfogat% etil-acetátot tartalmazó hexán, így 5,63 g (95%) cím 2-fluor-4-metoxifenolt kapunk sárgásszínű olaj formájában. 1 H-NMR (DMSO-d6) δ: 3,67 (3H, s) , 6,55 (1H, m) , 6,78 (1H, dd, J=12,97 Hz, J=2,95 Hz), 6,85 (1H, dd, 0=10,14 Hz,
0=8,87 Hz), 9,24 (1H, s) , 3,67 (3H, s) .
• · · ···«· f ·· · · ·· ·· · ····
2,8 g (19,7 mmol) 2-fluor-4-metoxifenolt a B módszer szerinti módon 4,31 ml (7,23 g, 25,6 mmol) trifluormetánszulfonsav-anhidriddel reagáltatunk, igy 3,86 g (68%) cím szerinti vegyületet kapunk tiszta sárga olaj formájában. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 3,82 (3H, s), 6, 89-6, 94 (1H, m) , 7,24 (1H, dd, J=12,49 Hz, J=2,98 Hz), 7,61 (1H, t, J=9, 09 Hz).
. intermedier
2- (2-Fluor-4-metoxifenil) -6-metoxinaftalin
3,86 g (14,0 mmol) trifluor-metánszulfonsav-2-fluor4-metoxi-fenilésztert az A módszer szerinti módon 2,97 g (14,8 mmol) 8. intermedierrel reagáltatunk, így 2,27 g (58%) cím szerinti vegyületet kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op. : 104-106 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 3,83 (3H, s) , 3,89 (3H, s) , 6,92 (1H, dd, J=8,46 Hz, J=2, 64 Hz), 6,98 (1H, dd, J=12,92, J=2,48 Hz), 7,19 (1H, dd, J=8,94 Hz, J=2,46 Hz), 7,35 (1H, J=2,38 Hz), 7,53-7, 63 (2H, m) , 7,90 (2H, d, J=8,72 Hz), 7,97 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 283 (M+H+) . Elemanalízis a Ci8Hi5FO2 képletre számított: C(%) 76, 58;
H(%) 5,36. Talált: C(%) 76, 30; H(%) 5,23.
l.ar példa
2-Klór-4-(2-naftil)fenol
1,45 g (6,98 mmol) 4-bróm-2-klórfenol, 1,0 g (5,81 mmol) 2-naftalin-bórsav, 1,54 g (14,53 mmol) nátrium-karbonát 2 mol/l-es vizes oldata és 340 mg (0,3 mmol) tetrakisz(trifenilfoszfin)palládium(0) 70 ml DME-vel készült elegyét az A módszer szerinti módon visszafolyató hűtő alatt 6 óra hosszat forraljuk. Ezután a reakcióelegyet lehűtjük, etilacetáttal háromszor extraháljuk, nátrium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk. A maradékot oszlopkromatográfiásan tisztítjuk, eluálószer 30 térfogat% etil-acetátot tartalmazó hexán, így 610 mg (34%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Ennek egy analitikai mintáját fordított fázisú HPLC útján tovább tisztítjuk, eluálószer metilcianid és viz 0,1 térfogat% TFA-t tartalmazó elegye. Op.: 99,5-100, 0 °C. 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ: 7,10 (1H, d, J=8,4 Hz), 7,52 (2H, m) , 7,63 (1H, dd, J=8,5 Hz, 2,0 Hz), 7,81 (2H, m) , 7,95 (3H, m) , 8,17 (1H, s) , 10,40 (1H, s); MS m/z 253/255 (CI mintázat), (M-H+) . Elemanalizis a C16HhC1O képletre számított: C (%) 75, 45; H(%) 4,35. Talált: C(%) 75, 24; H(%) 4,34.
.z példa
6-(4-Hidroxi-2-metilfenil)-2-naftol
420 mg (1,59 mmol) 6-(4-metoxi-2-metilfenil)-2-naftolt a D módszer szerinti módon 4,53 ml (4,53 mmol)
1,0 mol/l-es diklórmetános bór-tribromiddal reagáltatunk, így 400 mg (kvantitatív hozam) cím szerinti vegyületet kapunk sárgásszínű szilárd anyag formájában. Op.: 191-193 °C. 1H-NMR (DMSO-ds) δ: 6,68 (1H, dd, J=8,41 Hz, J=2,21 Hz), 6,72 (1H, d, J=2,21 Hz), 7,07-7,11 (2H, m) , 7,14 (1H, d, J=2,21 Hz), 7,33 (1H, dd, J=8,41 Hz, J=2,21 Hz), 7,64 (1H, d, J=0, 885 Hz), 7,68 (1H, d, J=8, 41 Hz), 7,77 (1H, d, J—9,29 Hz), 9,33 (1H, s) , 9,69 (1H, s) ; 13C NMR (DMSO-ds) δ:
108,34, 112,82, 116, 84, 118, 68, 125, 47, 127, 13, 127,56,
128,02, 129,26, 130, 71, 132,26, 133,02, 135, 63, 135, 90,
155,11, 156,31; MS(ESI) m/z 249 (M-H)-. Elemanalízis a
C17H14O2 képletre számított: C(%) 81,58; H(%) 5,64. Talált: C(%) 81,36; H(%) 5,53.
.ad példa
6-(2-Fluor-4-hidroxifenil)-2-naftol
1,12 g (3,97 mmol) 2-(2-fluor-4-metoxifenil)-6-metoxinaftalint a D módszer szerinti módon 23,8 ml (23,8 mmol) 1,0 mol/l-es diklórmetános bór-tribromiddal reagáltatunk, így 0,92 g (91%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op. : 208-209 °C. ^-NMR (DMSO-d6) δ: 6, 66-6,75 (2H, m) , 7,08-7,13 (2H, m) , 7,41 (1H, dd, J=9, 37
Hz, J=8,57 Hz), 7,49-7,53 (1H, m) , 7,72 (1H, d, J=8,64 Hz), 7,80 (1H, d, J=8,76 Hz), 7,86 (1H, s) , 9,79 (1H, s) , 10,01 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 255 (M+H)+, MS (ESI) m/z 253 (M-H) . Elemanalízis a Ci6HhFO2-0,15 H2O képletre számított: C(%) 74,79; H (%) 4,43. Talált: C (%) 74,79; H (%) 4,23.
.ae példa
6-(2,5-Difluor-4-hidroxifenil)-2-naftol
1,5 g (5,0 mmol) 2-(2,5-difluor-4-metoxifenil)-6-metoxinaftalint a D módszer szerinti módon 25 ml (25 mmol) 1,0 mol/l-es diklórmetános bór-tribromiddal reagáltatunk, így 1,28 g (94%) cím szerinti terméket kapunk sárgásszínű szilárd anyag formájában. Op.: 217-219 °C. 1H-NMR (DMS0-d6) δ: 6,90 (1H, dd, J=ll,87 Hz, J=7,51 Hz), 7,10-7,15 (2H, m) , 7,45 (1H, dd, J=ll,87, J=7,61 Hz), 7,53-7,55 (1H, m) , 7,74 (1H, d, J=8,65 Hz), 7,92 (1H, s) , 9,85 (1H, s) , 10,50 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 271 (M-H). Elemanalízis a Ci6Hi0F2O2 képletre számított: C(%) 70,59; H(%) 3,70. Talált: C(%) 70,35; H(%) 3,65.
l.af példa
6-(2,6-Difluor-4-hidroxifenil) -2-naftol
1,5 g (5,0 mmol) 2-(2, 6-difluor-4-metoxifenil)-6-metoxinaftalint a D módszer szerinti módon 25 ml (25 mmol) 1,0 mol/l-es diklórmetános bór-tribromiddal reagáltatunk, így 1,35 g (99%) cím szerinti terméket kapunk sárgásszínű szilárd anyag formájában. Op.: > 240 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 6, 55-6, 63 (2H, m) , 7,11 (1H, dd, J=8,76 Hz, J=2,34 Hz), 7,15 (1H, d, J=2,05 Hz), 7,36 (1H, dd, J—8,58 Hz, J=l,34 Hz), 7,39 (1H, d, J=8,83 Hz), 7,79 (1H, s) , 7,80 (1H, d, J=8,74 Hz), 9,85 (1H, s) , 10,48 (1H, s) ; MS(ESI) m/z 271 (M-H); MS (ESI) m/z 543 (2M-H) . Elemanalízis a Ci6HioF202 képletre számított: C (%) 70,59; H(%) 3,70. Talált: C(%)
70,19; H(%) 3,58.
• ♦*·· · ·· · ··♦· .ag példa l-Klór-6-(2-fluor-4-hidroxifenil)-2-naftol
300 mg (1,18 mmol) 6-(2-fluor-4-hídroxifenil)-2-naftolt a C módszer szerinti módon 30 ml THF-ben oldott 191 mg (1,43 mmol) NCS-sel reagáltatunk, így 170 mg (50%) cím szerinti terméket kapunk sárgásszínű szilárd anyag formájában. Op.: 179-180 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 6,73 (1H, dd, J=12, 69 Hz, J=2,44 Hz), 6,75 (1H, dd, J=8,30 Hz, J-2,44 Hz), 7,31 (1H, d, J=8,79 Hz), 7,45 (1H, t, J=9,28 Hz), 7,70-7,72 (1H, m) , 7,83 (1H, d, J=8,79 Hz), 7,97 (1H, s) , 8,06 (1H, d, J=7,79 Hz), 10,06 (1H, s) , 10,48 (1H, s) ; MS(ESI) m/z
287/289 (M-H)“. Elemanalízis a Ci6Hi0C1FO2 képletre számított: C(%) 66, 56; H(%) 3,49. Talált: C(%) 66, 45; H(%) 3,52. 1,ah példa l-Klór-6-(2,5-difluor-4-hidroxifenil)-2-naftol
500 mg (1,84 mmol) 6-(2,5-difluor-4-hidroxifenil)-2naftolt a C módszer szerinti módon 37 ml THF-ben 295 mg (2,21 mmol) NCS-sel reagáltatunk, így 370 mg (66%) cím szerinti terméket kapunk sárgásszínű szilárd anyag formájában. Op.: 203-204 °C. ^-NMR (DMSO-ds) δ: 6,90 (1H, dd, J=U, 90 Hz, J=7,50 Hz), 7,32 (1H, d, J=8, 88 Hz), 7,49 (1H, dd,
J=ll,87 Hz, J=7,60 Hz), 7,72-7,76 (1H, m) , 7,84 (1H, d,
J=8, 97 Hz), 8,03 (1H, s), 8,06 (1H, d, 8,87 Hz), 10,58 (2H, s) ; MS (ESI) m/z 305/307 (M-H); HRMS elemzés a Ci6H9C1F2O2 képletre számítva 306,02591; talált: 305,01863 (M-H) . Elemanalízis a C16H9ClF2O2-0,4 H2O képletre számított: C(%) 61,22; H(%) 3,15. Talált: C (%) 61,29; H(%) 3,17.
1. ai példa l-Klór-6-(2,6-difluor-4-hidroxifenil)-2-naftol
510 mg (1,86 mmol) 6-(2,6-difluor-4-hidroxifenil)-2naftolt a C módszer szerinti módon 30 ml THF-ben 301 mg (2,25 mmol) NCS-sel reagáltatunk, így 440 mg (77%) cím sze
J.·.',.' 'T 3..
rinti terméket kapunk sárgásszínű szilárd anyag formájában. Op.: 213-214 °C. 1H-NMR (aceton-d6) δ: 6,71-6,78 (2H, m) , 7,47 (1H, d, J=8,85 Hz), 7,76 (1H, dd, J=8,12 Hz, J=l,52 Hz), 7,97 (1H, d, J=8,90 Hz), 8,04 (1H, s), 8,29 (1H, d, J=8,80 Hz), 9,26 (1H, s) , 9,60 (1H, s) ; MS(ESI) m/z 305/307 (M-H)-. HRMS elemzés a Ci6H9C1F2O2 képletre számítva 306,0259; talált (ESI-) 306,01991. Elemanalízis a Ci6H9C1F2O2-0, 25 H2O képletre számított: C(%) 61,75; H(%)
3,08. Talált: C(%) 61,75; H(%) 2,90.
A 11. reakcióvázlat szerinti vegyületek szintézise 56. intermedier
N-(7-Hidroxinaftil)acetamid
149,1 g (0,937 mól) 8-amino-2-naftol 1 liter metanollal készült oldatához hozzáadunk 93 ml (0,984 mól) ecetsavanhidridet. A reakcióelegyet 90 percig visszafolyató hűtő alatt forraljuk, majd szobahőmérsékletre lehűtjük. Ezután az oldószert eltávolítjuk, és a maradékot szilikagél rétegen átszűrjük, és etil-acetáttal öblítjük. Az oldószert eltávolítjuk, így 175,8 g (93%) cím szerinti terméket kapunk sötétvörös színű szilárd anyag formájában. Ebből egy analitikai mintát fordított fázisú preparatív HPLC útján tovább tisztítunk, így rózsaszínű szilárd anyagot kapunk. Op. : 161-162 °C. 1H-NMR (DMSO~d6) δ: 2,15 (3H, s) , 7,09 (1H, dd, J=l,95 Hz, J=8,79 Hz), 7,20-7,26 (2H, m) , 7,49 (1H, d, J=7,31 Hz), 7,63 (1H, d, J=8,ll Hz), 7,77 (1H, d, J=8,81 Hz), 9,76 (1H, s), 9,79 (1H, s) ; MS(ESI) m/z 202 (M+H) + . Elemanalízis a C12HuN02 képletre számított: C(%) 71,63;
H (%) 5,51; N (%) 6,96. Talált: C (%) 71,21; H (%) 5,45; N (%) 6, 89.
_ » ·»« «4 ‘
57. intermedier
Ν-(7-Metoxinaftil)acetamid
175,4 g (0, 872 mol) Ν- (7-hidroxinafti1) acetamid, 301 g (2,18 mól) kálium-karbonát és 1 liter aceton elegyéhez hozzáadunk 270 ml (4,36 mól) jódmetánt. A reakcióelegyet visszafolyató hűtő alatt 6 óra hosszat forraljuk, majd szobahőmérsékletre lehűtjük, es az oldószert eltávolítjuk. A maradékot szilikagélen szűrjük, éti1-acetáttal öblítjük, majd etil-acetáttal trituráljuk, így 161,6 g (86%) cím szerinti terméket kapunk szürke szilárd anyag formájában. Ebből egy analitikai mintát preparatív fordított fázisú HPLC útján tovább tisztítunk, így fehér szilárd anyagot kapunk. Op. : 154-156 °C. H-NMR (DMSO-d6) δ: 2,19 (3H, s) , 3,90 (3H, s) , 7,19 (1H, dd, J=2,39 Hz, J=8,94 Hz), 7,29-7,34 (2H, m) , 7,39 (1H, d, J=l,86 Hz), 7, 75-7, 68 (2H, m) , 7,87 (1H, d, J=8,96 Hz), 9,82 (1H, s) ; MS(ESI) m/ z 216 (M+H) + . Elemanalizis a C13H13NO2 képletre számított: C(%) 72,54; H(%) 6,09; N(%) 6,51. Talált: C(%) 72,24; H(%) 6,43; N (%) 6,52.
58. intermedier 7-Metoxinaftilamin
160,6 g (0, 747 mól) N-(7-metoxinaftil)acetamid és 1,5 liter 1 mol/l-es sósavoldat elegyét visszafolyató hűtő alatt 5 óra hosszat forraljuk. Az elegyet lehűtjük és szilárd nátrium—hidrogénkarbonáttal semlegesítjük, majd di — klórmetánnal extraháljuk, amíg UV-tiszta nem lesz. Az egyesített szerves fázisokat szilikagélen szűrjük, és az oldószert ledesztilláljuk, így 89,5 g (69%) cím szerinti terméket kapunk barna szilárd anyag formájában. Ebből egy analitikai mintát preparatív HPLC útján tisztítunk, így a cím szerinti termeket feher szilárd anyag formájában kap juk. Op.: 134-136 °C. 1H-NMR (CDC13) δ: 3,94 (3H, s) , 4,01 (2H, bs) , 6,80 (1H, d, J=7,26 Hz), 7,05 (1H, d, J=2,20 Hz),
-u. <· :·ί „T.
7,12-7,19 (2H, m) , 7,28 (1H, d, J=8,17 Hz), 7,71 (1H, d, J=8,93 Hz); MS (ESI) m/z 174 (M+H)+. Elemanalízis a
ChHiiNO-CF3CO2H képletre számított: C(%) 54,55; H(%) 3,87;
N(%) 4,89. Talált: C(%) 54,39; H(%) 4,28; N(%) 4,78.
59. intermedier l-Fluor-7-metoxinaftalin
10,94 g (63,24 mmol) 7-metoxinaftilamin, 15,8 ml (190 mmol) 12 mol/l-es sósav és 50 ml víz elegyéhez 10 °C-on 10 perc alatt hozzáadjuk 4,58 g (66,40 mmol) nátrium—nitrit 25 ml vízzel készült oldatát. A kapott oldatot 30 percig keverjük, majd hozzáadunk 100 ml fluor-bórsavat. A kivált zöld szilárd anyagot leszűrjük, először vízzel, majd etanollal, azután dietiléterrel mossuk, így 15,48 g (90%) sárga szilárd anyagot kapunk, amely fizikailag nem jellemzett diazónium-fluorborátsó intermedier. Ezt a sárga szilárd anyagot 250 ml xilolban egy óra hosszat visszafo— lyató hűtő alatt forraljuk. Ezután az oldószert ledesztil láljuk, és a maradékot etil-acetát és nátrium-hidrogénkarbonát-oldat között megosztjuk. A szerves fázist nátrium— szulfáton szárítjuk, szűrjük, az oldószert ledesztillál juk, és a maradékot szilikagélen tisztítjuk, eluálószer hexán, így a cím szerinti terméket halványsárga folyadék formájában kapjuk. 1H-NMR (CDC13) δ: 3,94 (3H, s),
7,1 0-7,28 (3H, m) , 7,34 (1H, d, J=2,50 Hz), 7,55 (1H, d, J=8,12 Hz), 7,75 (1H, dd, J=l, 69 Hz, J=9, 00 Hz) ; MS (El) m/z 176 (M)+. Elemanalízis a C11H9FO képletre számított:
C(%) 74, 99; H(%) 5,15. Talált: C(%) 74, 84; H(%) 5,14. 60. intermedier
8-Klór-2-metoxinaftalin
4,6 g (24,6 mmol) réz (II)-klorid és 4,46 g (43,3 mól) terc-butil-nitrit 125 ml acetonitrillel 0 °C-on készült elegyéhez lassan hozzáadjuk 4,99 g (28,8 mmol)
7-metoxinaftilamin 25 ml acetonitrillel készült oldatát. A reakcióelegyet hagyjuk szobahőmersekletre melegedni, és hozzáadunk 400 ml 2 mol/l-es sósavoldatot, majd 3x200 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat 2 mol/l-es sósavoldattal mossuk, nátrium-szulfáton szárítjuk, szűrjük, az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot szilikagél oszlopon tisztítjuk, elualoszer hexán, így 2,27 g (41%) cím szerinti terméket kapunk narancsszínű folyadék formájában. Ebből egy analitikai mintát fordított fázisú preparatív HPLC útján tovább tisztítunk, így a cím szerinti termeket sarga szilárd anyag formájában kapjuk. Op.: 32-34 °C. XH-NMR (CDC13) δ: 3,98 (3H, s), 7,20 (1H, dd, J=2,52 Hz, J=8,96 Hz), 7,22-7,27 (1H, m) , 7,52 (1H, d, J=2,47 Hz), 7,55 (1H, d, J=7,47 Hz), 7,69 (1H, d, J=8,15 Hz), 7,75 (1H, d, J=8,95 Hz); MS m/z 191/193 (M-H). Elemanalízis a CnH9C10 képletre számított: C(%) 68,58; H(%) 4,71. Talált: C(%) 68,35; H(%) 4,85.
61. intermedier l-Bróm-7-metoxinaftalin
15,7 g (70,3 mmol) réz (11) -bromid és 9,05 g (87,9 mmol) TBN 250 ml acetonitrillel készült oldatához 0 °C-on lassan hozzáadjuk 10,14 g (58,6 mmol) 2—metoxinaftilamin 60 ml acetonitrillel készült oldatát. A kapott sötét oldatot 0 °C-on 2,5 óra hosszat keverjük, majd szilikagélre pároljuk, és szilikagél oszlopon tisztítjuk, így 4,03 g (29%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Ebből egy analitikai mintát preparatív fordított fázi sú HPLC útján tovább tisztítunk, így a cím szerinti vegyületet fehér szilárd anyag formájában kapjuk. Op. : 54-58 °C. 1H-NMR (CDC13) δ: 3,97 (3H, s) , 7,15-7,21 (2H, m) , 7,50 (1H, d, J=2,42 Hz), 7,71-7,76 (3H, m) ; MS(EI) m/z
236 (M) + . Elemanalízis a CnH9BrO képletre számított: C(%) 55,72; H(%) 3,83. Talált: C (%) 55,58; H(%) 3,60.
62. intermedier
-Me toxi -1 -naf toni tri 1
3,26 g (13,8 mmol) l-bróm-7-metoxinaftalin, 2,26 g (19,2 mmol) cink-cianid és 1,6 g (1,4 mmol) tetrakisz(trifenilfoszfin)palládium 50 ml DMF-fel készült elegyét 120 °C-on 15 óra hosszat keverjük. Ezután a reakcióelegyet lehűtjük, 200 ml 1 mol/l-es ammóniumklorid-oldatba öntjük, és 3x350 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat konyhasóoldattal mossuk, nátrium-szulfáton szárítjuk, szűrjük, az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot szilikagél oszlopon tisztítjuk, eluálószer 10 térfogat% etil-acetátot tartalmazó hexán, így 1,28 g (51%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op.: 62-66 °C. 1H-NMR (DMSO~d6) δ: 4,00 (3H, s) , 7,25 (1H, dd, J=2,48 Hz, J=8,96 Hz), 7, 36-7,47 (1H, m) , 7,47 (1H, d, J=2,39 Hz), 7,81 (1H, d, J=9, 00 Hz), 7,88 (1H, dd, j=0,81 Hz, J=7,23 Hz), 8,00 (1H, d, J=8,21 Hz); MS(EI) m/z 183 (M) + . Elemanalízis a C12H9NO képletre számított: C (%) 78,67; H (%) 4,95; N (%) 7,65. Talált: C (%) 78,83; H (%) 4,60; N(%) 6,80.
64. intermedier
7-Metoxi-3,4-dihidronaftalin-l-karbonitril
39,65 g (0,23 mól) 7-metoxi-l-tetralon, 1,73 g (5,4 mmol) cink-jodid 100 ml benzollal készült elegyéhez hozzáadunk 25,0 g (0,25 mól) trimetil-szililcianidot, és az elegyet egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Ezután hozzáadunk 350 ml piridint, majd cseppenként 100 ml foszforoxikloridot, miközben a hőmérséklet enyhén emelkedik. Ezután az elegyet 6 óra hosszat visszafolyató hűtő alatt forraljuk. A TLC elemzés egy közepes Rf—foltot mutat, amely a kívánt terméket tartalmazza. Az elegyet szobahőmérsékle ten egy éjszakán át keverjük, majd óvatosan jég és sósav (körülbelül 1,5 liter, sósavra nézve 10 térfogat%-os) elegyébe öntjük. A teljes térfogat 2 liter, amelyet 3x500 ml etil-acetáttal extrahálunk. Az egyesített szerves fázisokat 2x500 ml vízzel, majd 500 ml konyhasóoldattal mossuk. Az éti1-acetátos fázist magnézium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk, az így kapott folyadék állás közben megszilárdul. Ezt a nyers szilárd terméket hexánban szuszpendáljuk, majd szűrjük, így 31,3 g (74%) sárgásbarna szilárd anyagot kapunk. Ebből egy mintát szilikagélen kromatográfiásan tisztítunk, eluálószer 10 térfogat% etil—acetátot tartalmazó hexán, így szilárd anyagot kapunk. Op. : 47-49 °C. XH-NMR (DMSO-d6) δ: 2, 44-2,50 (2H, m) , 2,72 (2H, t, J=8,4 Hz), 6,81 (1H, d, J=2, 6 Hz), 6,90 (1H, dd, J=2,9 Hz, J=8,2 Hz), 7,17-7,19 (2H, m) ; MS m/z 168 ([M-H]’). Elemanalízis a
C12H11NO képletre számított: C(%) 77,81; H(%) 5,99; N(%)
7,56. Talált: C(%) 77,71; H(%) 5,69; N(%) 7,50.
. intermedier
7-Metoxi-l-cianonaf talin
9,95 g (53,1 mmol) 7-metoxi-3,4-dihidronaftalin-lkarbonitril 100 ml p-ciménnel készült elegyéhez hozzáadunk 5 g 10 tömeg-6 os szenhordozos palládiumot, majd az elegyet keverés közben 150 C—on egy éjszakán at hevítjük. Ezután az elegyet lehűtjük, a katalizátort szűrősegédanyagon át leszűrjük. A p-cimént forgóbepárlóban vákuumban ledesztilláljuk, az így kapott folyadék állás közben megszilárdul. A kapott szilárd anyagot hexánban szuszpendáljuk, szűrjük és szárítjuk, így 4,3 g (44%) fehér szilárd anyagot kapunk. Ebből egy részletet szilikagélen tovább tisztítunk, eluálószer 10 térfogat% éti1-acetátot tartalmazó hexán, így fehér szilárd anyagot kapunk. Op. : 77-78 °C. ^-NMR (DMS0-d6) 6: 3,97 (3H, s), 7,36 (1H, s), 7,39 (1H, d, J=2,5 Hz), 7,52 (1H, t, J=7,4 Hz), 8,04-8,13 (2H, m) , 8,24 (1H, d, J=8,2 Hz). Elemanalízis a Ci2H9NO képletre számított: C(%) 78, 67; H(%) 4,95; N(%) 7,51. Talált: C(%) 78, 47; H(%) 4,73; N(%) 7,51 .
A 12. reakcióvázlat szerinti vegyületek előállítása 65, intermedier
8-Fluor-2-naftol
7,99 g (45,34 mmol) l-fluor-7-metoxinaftalint a D módszer szerinti módon 68 ml (68 mmol) 1 mol/l-es bórtribromid-oldattal reagáltatunk, így 3,99 g (54%) cím szerinti terméket kapunk piros szilárd anyag formájában. Ebből egy analitikai mintát preparatív fordított fázisú HPLC útján tovább tisztítunk, így fehér szilárd anyagot kapunk. Op.: 89-92 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 7,16 (1H, dd, J=2,42 Hz, J=8,90 Hz), 7,21-7,25 (3H, m) , 7, 62-7, 65 (1H, m) , 7,85 (1H, dd, J=l,72 Hz, J=8,87 Hz), 10,08 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 161 (M-H). Elemanalízis a Ci0H7FO képletre számított: C (%) 74,07; H(%) 4,35. Talált: C(%) 73, 90; H(%) 4,30.
66. intermedier
8-Klór-2-naftol
10,25 g (53,4 mmol) 8-klór-2-metoxinaftalint a D módszer szerinti módon 67 ml (67 mmol) 1 mol/l-es bór-tribromid-oldattal reagáltatunk, így 8,76 g (92%) cím szerinti terméket kapunk sárga szilárd anyag formájában. Ebből egy analitikai mintát fordított fázisú preparatív HPLC útján tovább tisztítunk, így a cím szerinti terméket fehér szilárd anyag formájában kapjuk. Op. : 95-100 °C. 1H-NMR (DMSO-dg) δ: 7,18 (1H, dd, J=2,37 Hz, J=8, 85 Hz), 7,23-7,28 (1H, m) , 7,41 (1H, d, J-2,28 Hz), 7,59 (1H, d, J=7,37 Hz), 7,81 (1H, d, J=8,15 Hz), 7,87 (1H, d, J=8,86 Hz), 10,17 (1H, s) ; MS m/z 177/179 (M-H). Elemanalízis a Ci0H7C1O kép letre számított: C (%) 67,24; H(%) 3,95. Talált: C(%) 66, 99; H(%) 4,06.
67. intermedier
7-Hidroxi-l-naftonitril
1,19 g (6,50 mmol) 7-metoxi-l-naftonitrilt a D módszer szerinti módon 9 g piridin-hidrokloriddal reagálhatunk, így 0,88 g (80%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op. : 184-188 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 7,25 (1H, dd, J=2,30 Hz, J=8,88 Hz), 7,38 (1H, d, J=2,20 Hz), 7,39-7, 44 (1H, m) , 7,98 (1H, d, J=8, 91 Hz), 8,04 (1H, d, J=7,14 Hz), 8,17 (1H, d, J=8,19 Hz), 10,48 (1H, s) ;
MS (ESI) m/z 170 ( [M+H]+); MS (ESI) m/z 168 (M-H). Elemanalízis a C11H7NO képletre számított: C(%) 78, 09; H(%) 4,17; N(%) 8,28. Talált: C(%) 77,99; H(%) 3,99; N(%) 8,47.
68. intermedier
6-Bróm-8-fluor-2-naftol
3,24 g (20,0 mmol) 8-fluor-2-naftol 30 ml jégecettel készült oldatához lassan hozzáadjuk 7,35 g (46,0 mmol) bróm 30 ml jégecettel készült oldatát. Az oldatot 100 °C-on egy óra hosszat keverjük, majd szobahőmérsékletre lehűtjük, 50 ml vízbe öntjük, és 3x150 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat nátrium-hidrogén-karbonátoldattal mossuk, nátrium-szulfáton szárítjuk, szűrjük, az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot szilikagél oszlopon tisztítjuk, eluálószer 2,5 térfogat% etil-acetátot tartalmazó hexán, így 3,96 g (12,4 mmol, 62%) 1,6-dibróm8-fluor-2-naftol intermediert kapunk sárga szilárd anyag formájában. A kapott szilárd anyagot, valamint 7,0 g (31 mmol) ón (11)-klorid, 35 ml jégecet és 35 ml 12 mol/les sósav elegyét 100 °C-on egy óra hosszat hevítjük. A kapott oldatot szobahőmérsékletre lehűtjük, 100 ml vízbe öntjük, és 3x200 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egye99 • · · ····« ♦ · · · *· »· · ···· sitett szerves fázisokat vízzel mossuk, nátrium—szulfáton szárítjuk, szűrjük, az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot szilikagélen tisztítjuk, eluálószer 2,5 térfogat% etil-acetátot tartalmazó hexán, így 1,97 g (41%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op.: 124-126 °C. 1H-NMR (DMSO-ds) δ: 7,20 (1H, s) , 7,23 (1H, d, J=2,39 Hz), 7,48 (1H, dd, J=l, 78 Hz, 0=10,52 Hz), 7,84-7, 88 (1H, m) , 7,94 (1H, d, J=0,79 Hz), 10,28 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 239/241 (M-H)’. Elemanalízis a Ci0H6BrFO képletre számított: C (%) 49, 83; H(%) 2,51. Talált: C(%) 49, 86; H(%) 2,46. 69. intermedier
3,6-Dibróm-8-klór-2-naftol
4,92 g (27,6 mmol) 8-klór-2-naftol 40 ml jégecettel készült oldatához lassan hozzáadjuk 9,7 g (60,7 mmol) bróm 40 ml jégecettel készült oldatát. A kapott oldatot 100 °C-on egy óra hosszat keverjük, majd szobahőmérsékletre lehűtjük, 250 ml vízbe öntjük, és etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, nátrium-szulfáton szárítjuk, szűrjük, az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot szilikagél oszlopon tisztítjuk, eluálószer 20 térfogat% etilacetátot tartalmazó hexán, így 4,61 g (50%) cím szerinti terméket kapunk sárgásszínű szilárd anyag formájában. Ebből egy analitikai mintát fordított fázisú preparatív HPLC útján tisztítunk, így a cím szerinti terméket fehér szilárd anyag formájában kapjuk. Op.: 156-158 °C. 1H-NMR (DMS0-d6) δ: 7,57 (1H, s) , 7,82 (1H, d, J=l,89 Hz), 8,11 (1H, d, J=l,69 Hz), 8,31 (1H, s) , 11,30 (1H, bs) ; MS(ESI) m/z 333/335/337 (M-H)’. Elemanalízis a Ci0H5Br2ClO képletre számított: C(%) 35, 70; H(%) 1,50. Talált: C (%) 35, 74; H(%) 1,44 .
100
70. intermedier
3-Bróm-7-hidroxi-1-naftoni tri1
26,03 g (154,0 mmol) 7-hidroxi-l-naftonitril 400 ml jégecet elegyéhez hozzáadunk 51,8 g (323 mmol) brómot. Az elegyet 100 °C-on 6 óra hosszat keverjük, majd hozzáadunk 400 ml 12 mol/l-es sósavoldatot, és 69 g (308 mmol) ón(II)kloridot, és az elegyet 100 °C-on egy óra hosszat keverjük. A kapott oldatot szobahőmérsékletre lehűtjük, és 1 liter vízbe öntjük. A kapott sárga csapadékot leszűrjük, vákuumban szárítjuk, és etil-acetáttal trituráljuk, így 14,68 g (38%) cím szerinti terméket kapunk piszkosfehér szilárd anyag formájában. Ebből egy analitikai mintát preparatív fordított fázisú HPLC útján tisztítunk, így a cím szerinti terméket fehér szilárd anyag formájában kapjuk. Op.: 222-224 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 7,28-7, 35 (2H, m) , 7,97 (1H, d, J=8,73 Hz), 8,26 (1H, s), 8,47 (1H, s) , 10,65 (1H, s); MS (ESI) m/z 246/247 (M-H)-. Elemanalízis a CnH6BrN0 képletre számított: C(%) 53,26; H(%) 2,44; N(%) 5,65. Talált:
C(%) 52,81; H(%) 2,70; N(%) 4,82. 71. intermedier terc-Butil-[(3,6-dibróm-8-klór-2-naftil)oxi]dimetilszilán
3,00 g (8,92 mmol) 3,6-dibróm-8-klór-2-naftolt az F módszer szerinti módon 1,75 g (150,7 mmol) TBDMS-Cl-lel reagáltatunk, így 3,36 g (84%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op.: 58-64 °C. 1H-NMR (CDC13) δ: 0,34 (6H, s) , 1,08 (9H, s) , 7,57 (1H, s) , 7,62 (1H, d, J=l,72 Hz), 7,75 (1H, d, J=l,24 Hz), 7,97 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 333/335/337 (M-H). Elemanalízis a C16Hi9Br2C10Si képletre számított: C(%) 42,64; H(%) 4,25. Talált: C(%)
42,73; H(%) 4,08.
:.. ·..· w· ··;· .ι».
101
72. intermedier
8-Fluor-6-(4-metoxifenil)-2-naftol
0,39 g (1,62 mmol) 6-bróm-8-fluor-2-naftolt az A módszer szerinti módon 0,34 g (2,27 mmol) 4-metoxifenil-bórsavval reagáltatunk, így 0,35 g (81%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op. : 150-151 °C.
1H-NMR (DMSO-d6) δ: 3,81 (3H, s) , 7,05 (2H, d, J=8,75 Hz), 7,16-7,20 (2H, m) , 7,57 (1H, dd, 0=1,21 Hz, J=12,76 Hz), 7,74 (2H, d, 0=8,74 Hz), 7,89-7, 92 (2H, m) , 10,10 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 269 (M-H)+ . Elemanalízis a C17H13FO2O, 1 H2O képletre számított: C(%) 75, 60; H(%) 4,93. Talált: C (%) 75,30; H(%) 4,57. 73. intermedier
8-Fluor-6- (3-fluor-4-metoxifenil)-2-naftol
0,66 g (2,74 mmol) 6-bróm-8-fluor-2-naftolt az A módszer szerinti módon 0,56 g (3,3 mmol) 3-fluor-4-metoxifenil-bórsavval reagáltatunk, így 0,67 g (85%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op.: 138-140 °C. ^-NMR (DMSO-d6) δ: 3,90 (3H, s) , 7,17-7,30 (3H, m) , 7, 60-7,65 (2H, m) , 7,71 (1H, dd, 0=2,19 Hz), 0=13,14 Hz), 7,90 (1H, d, 0=8,37 Hz), 7,99 (1H, bs), 10,15 (1H, bs) ; MS (ESI) m/z 285 (M-H)-. Elemanalízis a C17H12F2O2 képletre számított: C (%) 71,32; H(%) 4,23. Talált: C(%) 71,09; H(%) 4,15. 74. intermedier terc-Butil-[(3-bróm-8-klór- (4-metoxifenil)-2-naftil)oxi]dime tilszilán
1,95 g (4,32 mmol) terc-butil-[(3,6-dibróm-8-klór-2naftil)oxi]dimetilszilán, 13,8 ml (6,9 mmol) 0,5 mol/l-es 4-metoxifenilmagnézium-bromid-oldat és 0,25 g (0,21 mmol) tetrakisz(trifenilfoszfin)palládium 10 ml THF-fel készült oldatát visszafolyató hűtő alatt forralva 8 óra hosszat ke102 ·*»· verjük. Ezután a reakciót 100 ml vízzel leállítjuk, és az elegyet 3x150 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat vízzel mossuk, nátrium-szulfáton szárítjuk, szűrjük, az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot szilikagél oszlopon tisztítjuk, eluálószer 8 térfogat% etil-acetátot tartalmazó hexán, így 1,42 g (69%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. 1H-NMR (CDC13) δ: 0,36 (6H, s), 1,10 (9H, s) , 3,87 (3H, s), 7,01 (2H, d, J=8,78 Hz), 7,33 (1H, d, J=l,36 Hz), 7,58 (2H, d, J=8,75 Hz), 7,73 (1H, s) , 7,78 (1H, d, J=l,62 Hz), 8,10 (1H, s).
75. intermedier
7-Hidroxi-3- (4-metoxifenil)-1-naftonitril
0,249 g (1,00 mmol) 3-bróm-7-hidroxi-l-naf tonitrilt az A módszer szerinti módon 0,21 g (1,4 mmol) 4-metoxifenilbórsavval reagáltatunk, így 0,19 g (69%) cím szerinti terméket kapunk halványsárga szilárd anyag formájában. Op.: 226 °C. XH-NMR (DMS0-d6) δ: 3,82 (3H, s), 7,07 (2H, d,
J=8,82 Hz), 7,26 (1H, dd, J=2,32 Hz, J=8,90 Hz), 7,37 (1H, d, J=2,27 Hz), 7,80 (2H, d, J=8,80 Hz), 8,02 (1H, d, J=8,96 Hz), 8,37 (1H, d, J=l,85 Hz), 8,44 (1H, d, J=l,43 Hz),
10,48 (1H, bs) ; MS(ESI)m/z 274 (M-H)'. Elemanalízis a
Ci8Hi3NO2-0, 1 H2O képletre számított: C(%) 78, 02; H(%) 4,80; N(%) 5,05. Talált: C(%) 77, 73; H(%) 4,65; N(%) 4,92. 76. intermedier
3-(3-Fluor-4-metoxifenil)-7-hidroxi-l-naftonitril
0,208 g (0,839 mmol) 3-bróm-7-hidroxi-l-naftonitrilt az A módszer szerinti módon 0,18 g (1,1 mmol) 3-fluor-4metoxifenilbórsavval reagáltatunk, így 0,16 g (65%) cím szerinti terméket kapunk halványsárga szilárd anyag formájában. Ebből egy analitikai mintát fordított fázisú HPLC útján tisztítunk, így a cím szerinti terméket fehér szilárd
103 anyag formájában kapjuk. Op. : 214-216 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) 8: 3,90 (3H, s) , 7,23-7,32 (2H, m) , 7,37 (1H, d, J=2,24
Hz), 7, 65-7,70 (1H, m) , 7,79 (1H, dd, J=2,22 Hz, J=13,10 Hz), 8,03 (1H, d, J=8,96 Hz), 8,41 (1H, d, J=l,86 Hz), 8,50 (1H, d, J=l,43 Hz), 10,55 (1H, s) ; MS(ESI) m/z 292 (M-H)-. Elemanalízis a Ci8Hi2FNO2-0, 1 H20 képletre számított: C (%) 73,26; H(%) 4,17; N(%) 4,75. Talált: C(%) 72,91; H(%) 4,01; N(%) 4,60.
77. intermedier
3-Bróm-8-klór-6- (4-metoxifenil) -2-naftol
I módszer
0,50 g (1,06 mmol) terc-butil-{[3-bróm-8-klór-(4-metoxifenil ) -2-naftil] oxi Jdimetilszilán 20 ml THF-fel készült oldatához hozzáadunk 5 ml (55 mmol) 1 mol/l-es THF-es TBAFoldatot. A kapott oldatot egy óra hosszat szobahőmérsékleten keverjük, majd az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot 50 ml vízben felvesszük, majd 3x150 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat vízzel mossuk, nátrium-szulfáton szárítjuk, szűrjük, az oldószert ledesztilláljuk, a maradékot szilikagél oszlopon tisztítjuk, eluálószer 10 térfogat% etil-acetátot tartalmazó hexán, így 0,34 g (88%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Ebből egy analitikai mintát fordított fázisú preparatív HPLC útján tisztítunk, így a cím szerinti terméket fehér szilárd anyag formájában kapjuk. Op.: 138-139 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 3,82 (3H, s) , 7,06 (2H, d, J=8,76 Hz), 7,58 (1H, s) , 7,73 (2H, d, J=8,73 Hz), 7,94 (1H, d, J=l,56 Hz), 8,07 (H, bs) , 8,34 (1H, s) , 11,05 (1H, s) ; MS(ESI) m/z 361/363/365 (M-H)’. Elemanalízis a
Ci7Hi2BrC102-0, 6 H2O képletre számított: C(%) 54,53; H(%)
3,55. Talált: C(%) 54,30; H(%) 3,11.
• * · · w - »* ι· 4 - · t
104
1. az példa
3-(3,5-Difluor-4-hidroxifenil)-7-hidroxi-l-naftonitril
0,124 g (0,50 mmol) 3-bróm-7-hidroxi-l-naftonitrilt az A módszer szerinti módon 0,17 g (0,59 mmol) 2,5-difluor4-terc-butildimetilszililoxi-fenibórsavval reagáltatunk, így 0,090 g (61%) cím szerinti terméket kapunk sárga szilárd anyag formájában. Ebből egy analitikai mintát preparatív fordított fázisú HPLC útján tisztítunk, így a cím szerinti terméket halványsárga szilárd anyag formájában kapjuk. Op.: 300-304 °C (bomlik). ^-NMR (DMSO-d6) δ: 7,27 (1H, dd, J=2,26 Hz, J=8,88 Hz), 7,36 (1H, d, J=2,12 Hz), 7, 63-7,66 (2H, m) , 8,00 (1H, d, J=8,95 Hz), 8,43 (1H, d, J=l,77 Hz), 8,52 (1H, s), 10,44 (1H, s), 10,54 (1H, s); MS (ESI) m/z 296 (M-H)-. Elemanalízis a Ci7H9F2NO2-0, 3 H2O képletre számított: C(%) 67,46; H(%) 3,20; N(%) 4,63. Talált: C(%) 67,18; H(%) 2,8 9; N(%) 4,55.
l.aj példa
8-Fluor-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol
0,10 g (0,37 mmol) 8-fluor-6-(4-metoxifenil)-2-naftolt a D módszer szerinti módon 0,56 ml (0,56 mmol) 1 mol/l-es bór-tribromid-oldattal reagáltatunk, így 0,10 g (kvantitatív) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op. : 236-238 °C. ^-NMR (DMSO-d6) δ: 6,87 (2H, d, J=8,57 Hz), 7,14-7,18 (2H, m) , 7,52 (1H, dd, J=l,18 Hz, J=12,78 Hz), 7,61 (2H, d, J=8,59 Hz), 7,86-7,89 (2H, m) , 9,61 (1H, bs), 10,05 (1H, bs) ; MS(ESI) m/z 253 (M-H)-. Elemanalízis a Ci6HnFO2-0,1 H2O képletre számított: C (%) 75, 06; H(%) 4,41. Talált: C(%) 75,01; H(%) 4,11.
.ak példa θ-Fluor-S-(3-fluor-4-hidroxifenil)-2-naftol
0,10 g (0,35 mmol) 8-fluor-6-(3-fluor-4-metoxifenil)2-naftolt a D módszer szerinti módon 0,7 ml (0,7 mmol)
105 mol/l-es bór-tribromid-oldattal reagáltatunk, így 0,020 g (21%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op.: 218-220 °C. XH-NMR (DMSO-d6) δ: 7,01-7,07 (1H, m) , 7,16-7,19 (2H, m) , 7,46 (1H, dd, J=l,74 Hz, J=8,40 Hz), 7,56-7, 65 (2H, m) , 7,88 (1H, d, J=8,31 Hz), 7,93 (1H, bs), 10,04 (1H, s) , 10,11 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 271 (M-H)-.
Elemanalízis a Ci6Hi0F2O2 képletre számított: C (%) 69, 44;
H(%) 3,82. Talált: C(%) 69,13; H(%) 3,45.
l.au példa
7-Hidroxi-3-(4-hidroxifenil)-1-naftonitril
0,14 g (0,51 mmol) 7-hidroxi-3-(4-metoxifenil)-1-naftonitrilt a B módszer szerinti módon 3 g piridin-hidrokloriddal reagáltatunk, így 0,10 g (75%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op.: 254-257 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 6,89 (2H, d, J=8,53 Hz), 7,25 (1H, dd, J=2,15 Hz, J=8,88 Hz), 7,36 (1H, d, J=l,86 Hz), 7,67 (2H, d, J=8,55 Hz), 8,00 (1H, d, J=8,94 Hz), 8,31-8,38 (2H, m) , 9,70 (1H, bs), 10,44 (1H, bs) ; MS(ESI) m/z 260 (M-H)-. Elemanalízis a Ci7HnNO2-0,25 H2O képletre számított: C(%) 76, 83; H(%) 4,36; N(%) 5,27. Talált: C(%) 76, 85; H(%) 4,31; N(%) 5,10.
.av példa
3-(3-Fluor-4-hidroxifenil)-7-hidroxi-l-naftonitril
0,12 g (0,41 mmol) 7-hidroxi-3-(3-fluor-4-metoxifeníl)-1-naftonitrilt a B módszer szerinti módon 3 g piridinhidrokloriddal reagáltatunk, így 0,085 g (74%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op. : 265-269 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 7,04-7,09 (1H, m) , 7,26 (1H, dd, J=2,31 Hz, J=8,88 Hz), 7,36 (1H, d, J=2,19 Hz), 6,52 (1H, d, J=2,19 Hz), 6,52 (1H, dd, J=l,76 Hz, J=8,40 Hz), 6,71 (1H, dd, J=2,22 Hz, J=12,88 Hz), 8,01 (1H, d, J=8,97 Hz), 8,37 (1H, d, J=l,83 Hz), 8,45 (1H, d, J=l,41 Hz),
106
10,33 (2H, bs) ; MS (ESI) m/z 278 (M-H)-. Elemanalízis a C17H10FNO2 képletre számított: C (%) 73,11; H(%) 3,61; N(%)
5,02. Talált: C (%) 72,75; H(%) 3,45; N(%) 4,82.
A 13. reakcióvázlat szerinti vegyületek szintézise 78. és 79. intermedier l-Klór-6-metoxi-2-naftol és 1,5-diklór-6-metoxi-2-naftol
5,43 g (31,17 mmol) 6-metoxi-2-naftol, 4,58 g (34,3 mmol) NCS és 150 ml acetonitril elegyét egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük az A módszer szerint. Ezután az oldószert eltávolítjuk, és a kapott barna szilárd maradékot 500 ml etil-acetáttal felvesszük, vízzel mossuk, nátrium-szulfáton szárítjuk, az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot szilikagél oszlopon tisztítjuk, eluálószer 20 térfogat% etil-acetátot tartalmazó hexán, így a cím szerinti terméket fehér szilárd anyag formájában kapjuk. Ezt a szilárd anyagot fordított fázisú preparatív HPLC útján tovább tisztítjuk, így 3,91 g (60%) 78. intermediert kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op.: 104-105 °C. ^-NMR (DMS0-d6) δ: 3,85 (3H, s) , 7,22-7,26 (2H, m) , 7,31 (1H, d, J=2,42 Hz), 7,68 (1H, d, J=8,91 Hz), 7,93 (1H, d, J=9,17 Hz); MS (ESI) m/z 207/209 (M-H)-. Elemanalízis a
C11H9CIO2 képletre számított: C(%) 63,32; H(%) 4,35. Talált: C(%) 63,21; H(%) 4,50.
A HPLC elválasztással 0,83 g (3,43 mmol) 79. intermediert is kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op.: 152-158 °C. ^-NMR (DMSO-d6) δ: 3,97 (3H, s) , 7,41 (1H, d, J=9,22 Hz), 7,63 (1H, d, J=9, 17 Hz), 7,97 (1H, d, J=9,23 Hz), 8,04 (1H, d, 0=9,34 Hz), 10,51 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 241/243 (M-H)-. Elemanalízis a ΟιιΗ8Ο12Ο2 képletre számított: C(%) 54,35; H(%) 3,32. Talált: C(%) 54,13; H(%) 3,21.
107
80. intermedier
1-Klór-6-metoxi-2-naftil-trifluormetánszulfonát
0,70 g (3,36 mmol) l-klór-6-metoxi-2-naftolt a 6. intermedier előállításánál ismertetett módon 1,23 g (4,4 mmol) trifluormetánszulfonsav-anhidriddel reagáltatunk, így 1,02 g (89%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op. : 60-61 °C. 1H-NMR (CDC13) δ: 3,95 (3H, s) , 7,17 (1H, d, J=2,48 Hz), 7,35 (1H, dd, J=2,50 Hz,
J=9, 30 Hz), 7,39 (1H, d, J=9,06 Hz), 7,71 (1H, d, J=9,ll Hz), 8,21 (1H, d, J=9,28 Hz); MS(EI) m/z 340/342(M)+. Elemanalízis a Ci2HsClF3O4S képletre számított: C (%) 42,30; H(%) 2,37. Talált: C(%) 42,20; H(%) 2,37.
81. intermedier
1,5-Diklór-6-metoxi-2-naftil-trifluormetánszulfonát
0,27 g (1,11 mmol) 1,5-diklór-6-metoxi-2-naftolt a 6. intermedier előállításánál ismertetett módon 0,41 g (1,44 mmol) trifluormetánszulfonsav-anhidriddel reagáltatunk, így 0,37 g (89%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op.: 73-78 °C. 1H-NMR (CDC13) δ: 4,08 (3H, s) , 7,48-7,52 (2H, m) , 8,24-8,30 (2H, m) ; MS(EI) m/z 374/376/378 (M)+. Elemanalízis a Ci2H7C12F3O4S képletre számított: C(%) 38,42; H(%) 1,88. Talált: C(%) 38,65; H(%) 1, 90. 82. intermedier l-Klór-6-metoxi-2-(4-metoxifeni1)naftalin
0,95 g (2,79 mmol) 1-klór-6-metoxi-2-naftil-trifluormetánszulfonátot az A módszer szerinti módon 0,59 g (3,9 mmol) 4-metoxifenil-bórsavval reagáltatunk, így 0,71 g (85%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op.: 126-128 °C. 1H-NMR (CDC13) δ: 3,88 (3H, s), 3,95 (3H, s) , 7,01 (2H, d, J=8,60 Hz), 7,16 (1H, d, J=2,49 Hz), 7,27 (1H, dd, J=l, 97 Hz, J=8,99 Hz), 7,41 (1H, d,
108
J=8, 45 Hz), 7,46 (2H, d, J=8,61 Hz), 7,68 (1H, d, J=8,48 Hz), 8,28 (1H, d, J=9,27 Hz); MS(ESI) m/z 299/301 (M+H)+. Elemanalízis a Ci8Hi5C102-0, 25 H2O képletre számított: C(%) 71,29; H(%) 5,15. Talált: C(%) 70, 84; H(%) 4,80.
83. intermedier
1,5-Diklór-2-metoxi-6-(4-metoxifenil)naftalin
0,32 g (0,85 mmol) 1,5-diklór-6-metoxi-2-naftil-trifluormetánszulfonátot az A módszer szerinti módon 0,18 g (1,2 mmol) 4-metoxifenil-bórsavval reagáltatunk, így 0,27 g (95%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op.: 146-149 °C. 1H-NMR (CDC13) δ: 3,88 (3H, s) , 4,07 (3H, s) , 7,02 (2H, d, J=8, 73 Hz), 7,41 (1H, d, J=9, 52 Hz), 7,46 (2H, d, J=8,83 Hz), 7,53 (1H, d, J=8,73 Hz), 8,19 (1H, d, J=8,73 Hz), 8,36 (1H, d, J=9,12 Hz). Elemanalízis a C18H14CI2O2 képletre számított: C(%) 64, 88; H(%) 4,23. Talált: C(%) 64, 63; H(%) 4,28.
.ao példa
5-Klór-6- (4-hidroxifenil) -2-naftol
0,65 g (2,18 mmol) 1-klór-6-metoxi-2-(4-metoxifenil)naftalint a D módszer szerint 6,5 ml 1 mol/l-es bór-tribromid-oldattal reagáltatunk, így 0,44 g (75%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op.: > 220 °C. XH-NMR (DMSO-d6) δ: 6,86 (2H, d, J=8,33 Hz), 7,23-7,28 (2H, m) , 7,30 (2H, d, J=8,32 Hz), 7,37 (1H, d, J=8,51 Hz), 7,72 (1H, d, J=8,55 Hz), 8,13 (1H, d, J=9, 07 Hz); MS (ESI) m/z 269/271 (M-H). Elemanalízis a Ci6HuC1O2-0, 1 H2O képletre számított: C(%) 07,52; H(%) 4,14. Talált: C(%) 70,52; H(%) 4,05.
.ap példa
1,5-Diklór-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol
0,15 g (0,45 mmol) 1,5-diklór-2-metoxi-6-(4-metoxifenil ) naftalint a D módszer szerinti módon 1,4 ml 1 mol/l-es
109 bór-tribromid-oldattal reagáltatunk, így 0,10 g (73%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op.: 204-206 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 6,89 (2H, d, J=8,47 Hz), 7,33 (2H, d, J=8,45 Hz), 7,46 (1H, d, J=9,26 Hz), 7,56 (1H, d, J=8,80 Hz), 8,06 (1H, d, J=8, 81 Hz), 8,17 (1H, d, J=9,28 Hz), 9,68 (1H, bs), 10,84 (1H, bs) ; MS (ESI) m/z
303/305/307 (M-H). Elemanalízis a C16H10C12O2 képletre számított: C(%) 62, 98; H(%) 3,30. Talált: C(%) 62, 78; H(%)
3,28.
A 14. reakcióvázlat szerinti vegyületek szintézise 84. intermedier
8-Klór-6-(4-metoxifenil)-2-naftol
0, 254 g (0, 698 mmol) 3-bróm-8-klór-6-(4-metoxifenil) 2-naftol 25 ml THF-fel készült oldatához -78 °C-on lassan hozzáadunk 1,65 ml (2,8 mmol) 1,7 mol/l-es terc-butil-lítium-oldatot. A kapott oldatot 20 percig -78 °C-on keverjük, majd hozzáadunk 2,5 ml vizet, és az elegyet keverés közben lassan szobahőmérsékletre melegítjük. Ezután az elegyet 50 ml vízbe öntjük, és 3x100 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat vízzel mossuk, nátriumszulfáton szárítjuk, szűrjük, az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot szilikagél oszlopon tisztítjuk, eluálószer 10 térfogat% etil-acetátot tartalmazó hexán, így 0, 15 g (88%) cím szerinti terméket kapunk sárga szilárd anyag formájában. Ebből egy analitikai mintát preparatív fordított fázisú HPLC útján tovább tisztítunk, így a cím szerinti terméket halványsárga szilárd anyag formájában kapjuk. Op.: 116-118 °C. 1H-NMR (DMSO-ds) δ: 3,81 (3H, s) ,
7,05 (2H, d, J=8,75 Hz), 7,19 (1H, dd, J-2,34 Hz, J=8,84 Hz), 7,40 (1H, d, J=2,25 Hz), 7,74 (2H, d, J=8,73 Hz), 7,89 (1H, d, J=l,65 Hz), 7,92 (1H, d, J=8,93 Hz), 8,07 (1H, s) , 10,19 (1H, s) ; MS(ESI) m/z 283/285 (M-H). Elemanalízis a
110
Ci7Hi3C102-0, 1 H2O képletre számított: C(%) 71,26; H(%) 4,64. Talált: C(%) 71,18; H(%) 4,43.
85. intermedier l-Klór-8-fluor-6-(3-fluor-4-metoxifenil)-2-naftol
0,30 g (1,05 mmol) 8-fluor-6-(3-fluor-4-metoxifenil) 2-naftolt a C módszer szerinti módon 0,17 g (1,26 mmol) NCS-sel reagálhatunk, így 0,21 g (62%) cím szerinti terméket kapunk halvány narancsszínű szilárd anyag formájában. Op.: 126-128 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 3,90 (3H,s), 7,25-7,31 (1H, m) , 7,35 (1H, d, J=8, 91 Hz), 7,64-7,67 (1H, m) , 7,70-7,78 (2H, m) , 7,87 (1H, dd, J=l,58 Hz, J=9,04 Hz), 10,68 (1H, s) ; MS(ESI) m/z 319/321 (M-H)’. Elemanalízis a C17H11CIF2O2 képletre számított: C(%) 63,66; H(%) 3,46. Talált: C(%) 63,23; H(%) 3,39.
86. intermedier l-Klór-8-fluor-6-(4-metoxifenil)-2-naftol
0,17 g (0,63 mmol) 8-fluor-6-(4-metoxifenil)-2-naftol és 0,10 g (0,76 mmol) NOS 20 ml THF-fel készült oldatát nitrogénatmoszférában szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverünk a C módszer szerinti módon. Ezután az oldatot Florosilre koncentráljuk, és szilikagél oszlopon tisztítjuk, eluálószer 20 térfogat% etil-acetátot tartalmazó hexán, így 0,16 g (84%) cím szerinti terméket kapunk sárga szilárd anyag formájában. Ebből egy analitikai mintát preparatív fordított fázisú HPLC útján tovább tisztítunk, így a terméket halványsárga szilárd anyag formájában kapjuk. Op.: 120-124 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 3,82 (3H, s) , 7,06 (2H, d, J=8,80 Hz), 7,34 (1H, d, J=8, 91 Hz), 7,67 (1H, dd, J=l,69 Hz, J=15,48 Hz), 7,78 (2H, d, J=8,78 Hz), 8,01 (1H, d, J=l,54 Hz), 10,62 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 301/303 (M-H)’. Elemanalízis a Ci7H12ClFO2 képletre számított: C (%) 67,45; H(%) 4,00. Talált: C(%) 67,23; H(%) 3,65.
• · 4 · 4 ·· · · »«·* 4» ·· 4 «··*
111
87. intermedier
1,5- Diklór-8-fluor-6-(4-metoxifenil)-2-naftol
0,24 g (0,90 mmol) 8-fluor-6-(4-metoxifenil)-2-naftolt a C módszer szerinti módon 0,22 g (1,6 mmol) NCS 20 ml acetonitrillel készült oldatával reagáltatunk, így 0,22 g (73%) cím szerinti terméket kapunk sárga szilárd anyag formájában. 1H-NMR (DMSO-dg) δ: 3,82 (3H, s) , 7,06 (2H, d, j=8, 69 Hz), 7,39 (1H, d, J=14,34 Hz), 7,47 (2H, d, J=8,68 Hz), 7,53 (1H, d, J=9,36 Hz), 8,22 (1H, dd, J=l,65 Hz,
J=9,32 Hz), 11,01 (1H, s) ; MS(ESI) m/z 335/337 (M-H)-. 88. intermedier
3-Bróm-l,8-diklór-6-(4-metoxifenil)-2-naftol
0,69 g (1,90 mmol) 3-bróm-8-klór-6-(4-metoxifenil)-2naftolt a C módszer szerinti módon 0,31 g (2,3 mmol) NCS 25 ml THF-fel készült oldatával reagáltatunk, így 0,61 g (81%) cím szerinti terméket kapunk sárga szilárd anyag formájában. Ebből egy analitikai mintát preparatív fordított fázisú HPLC útján tisztítunk, így a cím szerinti terméket fehér szilárd anyag formájában kapjuk. Op. : 176-178 °C (bomlik). 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 3,82 (3H, s), 7,08 (2H, d, J=8,77 Hz), 7,77 (2H, d, J=8,75 Hz), 8,00 (1H, d, J=l,84 Hz), 8,19 (1H, d, J=l,84 Hz), 8,39 (1H, s) , 10,53 (1H, bs); MS (ESI) m/z 395/397/399 (M-H)-. Elemanalízis a Ci7HnBrCl2O2 képletre számított: C(%) 51,29; H(%) 2,79. Talált: C(%)
51,37; H(%) 2,62.
89. intermedier
8-Bróm-7-hidroxi-3-(4-metoxifenil)-1-naftonitril
0,160 g (0,58 mmol) 7-hidroxi-3-(4-metoxifenil)-1naftonitrilt a C módszer szerinti módon 0,12 g (0,70 mmol) NBS 10 ml THF-fel készült oldatával reagáltatunk, így 0,080 g (39%) cím szerinti terméket kapunk sárga szilárd anyag formájában. Op.: 145-146 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 3,83
112 (3H, s) , 7,08 (2H, d, J=8,79 Hz), 7,42 (1H, d, J=8,79 Hz), 7,84 (2H, d, J=8,79 Hz), 8,04 (1H, d, 3=8,79 Hz), 8,42 (1H, d, 3=1,95 Hz), 8,53 (1H, d, 3=1,95 Hz), 11,21 (1H, s); MS (ESI) m/z 354/356 (M+H)+; MS (ESI) m/z 352/354 (M-H)-. Elemanalízis a Ci8Hi2BrNO2-0,25 H2O képletre számított: C(%) 60, 27; H(%) 3,51; N(%) 3,90. Talált: C(%) 60,27; H(%) 3,51; N(%) 3,46. 90. intermedier
1,8-Diklór-6-(4-metoxifenil)-2-naftol
0,30 g (0,754 mmol) 3-bróm-l, 8-diklór-6-(4-metoxifenil )-2-naftolt 1,75 ml (3,0 mmol) 1,7 mol/l-es terc-butillítium-oldattal reagáltatunk a 84. intermedier előállításánál ismertetett módon, majd a reakciót vízzel leállítjuk, így 0,19 g (79%) sárga szilárd anyagot kapunk. Ebből egy analitikai mintát fordított fázisú preparatív HPLC útján tovább tisztítunk, így a cím szerinti terméket halványsárga szilárd anyag formájában kapjuk. Op. : 132-134 °C. 1H-NMR (DMS0-d6) δ: 3,82 (3H, s) , 7,06 (2H, d, J=8,77 Hz), 7,37 (1H, d, 3=8,90 Hz), 7,77 (2H, d, J=8,75 Hz), 7, 89-7, 93 (2H, m) , 8,15 (1H, d, 3=1,85 Hz), 10,68 (1H, s) ; MS(ESI) m/z 317/319/321 (M-H)-. Elemanalízis a Ci7Hi2Cl202 képletre számított: C(%) 63, 97; H(%) 3,79. Talált: C(%) 63,57; H(%)
3,65.
l.ai példa l-Klór-8-fluor-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol
0,14 g (0,46 mmol) l-klór-8-fluor-6-(4-metoxifenil)2-naftolt a D módszer szerinti módon 0,69 ml (0,69 mmol) 1 mol/l-es bór-tribromid-oldattal reagáltatunk, így 0,050 g (38%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op.: 174-176 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 6,88 (2H, d, 3=8,62 Hz), 7,33 (1H, d, J=8,92 Hz), 7,60-7,67 (3H, m) ,
7,86 (1H, dd, 3=1,43 Hz, 3=9,02 Hz), 7,95 (1H, d, 3=1, 37 ·' · · ···,· · ·«·· ·♦ *♦ ····
113
Hz), 9,68 (1H, s) , 10,59 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 287/289 (M-H)'. Elemanalízis a Ci6H1oC1FO2-0,25 H2O képletre számított: C (%) 65,54; H(%) 3,61. Talalt: C (%) 65,52; H (%) 3,19. 1.am példa
1-Klór-8-fluor-6-(3-fluor-4-hidroxifenil)-2-naftol
0,13 g (0,41 mmol) l-klór-8-fluor-6-(3-fluor-4-metoxifenil)-2-naftolt a D módszer szerinti módon 0,8 ml (0,8 mmol) 1 mol/l-es bór-tribromid-oldattal reagáltatunk, így 0,070 g (56%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op. : 198-200 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) Ö: 7, 03-7, 09 (1H, m) 7,34 (1H, d, J=8,92 Hz), 7, 49-7, 52 (1H, m) , 7,68 (2H, d, J=15, 0 Hz), 7,85-7,88 (1H, m) , 8,02 (1H, d, J=0,70 Hz), 10,13 (1H, s) , 10,66 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 305/307 (M-H)'. Elemanalízis a Ci6H9C1F2O2 képletre számított: C (%) 62,66; H(%) 2,96. Talált: C (%) 62,27; H(%) 2,90. 1. an példa 8-Klór-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol
0,10 g (0,35 mmol) 8-klór-6-(4-metoxifenil)-2-naftolt a D módszer szerinti módon 0,9 ml (0,9 mmol) 1 mol/l-es bór-tribromid-oldattal reagáltatunk, így 0,080 g (85%) cím szerinti terméket kapunk, amelyet fordított fázisú preparatív HPLC útján tovább tisztítunk, így a cím szerinti terméket fehér szilárd anyag formájában kapjuk. Op.: 204-206 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 6,87 (2H, d, J=8,61 Hz), 7,17 (1H, dd, J=2,34 Hz, J=8,83 Hz), 7,38 (1H, d, J=2,26 Hz), 7,62 (2H, d, J=8,59 Hz), 7,85 (1H, d, J=l,64 Hz), 7,90 (1H, d, J=8,92 Hz), 8,01 (1H, bs) , 9,62 (1H, s) , 10,14 (1H, s) ; MS(ESI) m/z 269/(M-H)-. Elemanalízis a Ci6HiiC1O2-0,25 H2O képletre számított: C(%) 70, 99; H{%) 4,10. Talált: C(%) 69, 95; H(%) 3, 89.
114 ··*’ .1..
.aq példa
1,5-Diklór-8-fluor-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol
0,15 g (0, 445 mmol) 1,5-dikl6r-8-fluor—6-(4-metoxifenil)-2-naftolt a D módszer szerinti módon 0,67 ml (0,67 mmol) 1 mol/l-es bór-tribromid-oldattal reagáltatunk, így 0,12 g (83%) cím szerinti terméket kapunk halványsárga szilárd anyag formájában. Op. : 206-216 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 6,88 (2H, d, J=8,55 Hz), 7,34-7,39 (3H, m) , 7,51 (1H, d, J=9,34 Hz), 8,21 (1H, dd, J=l,66 Hz, J=9,34 Hz), 9,74 (1H, bs), 10,99 (1H, bs); MS(ESI) m/z 321/323/326 (M-H). Elemanalízis a Ci6H9C12FO2-0, 1 H20 képletre számított: C(%)
59,13; H(%) 2,85. Talált: C(%) 58, 88; H(%) 2,85.
.ar példa
3-Bróm-8-klór-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol
0,24 g (0,66 mmol) 3-bróm-8-klór-6-(4-metoxifenil)-2naftolt a D módszer szerinti módon 1,6 ml (1,6 mmol) 1 mol/l-es bór-tribromid-oldattal reagáltatunk, így 0,14 g (61%) sárga olajat kapunk. Ezt fordított fázisú preparatív HPLC útján tovább tisztítjuk, így a cím szerinti terméket fehér szilárd anyag formájában kapjuk. Op. : 188-190 °C.
1H-NMR (DMSO-d6) Ö: 6,88 (1H, d, J=8,60 Hz), 7,57 (1H, s) , 7,71 (2H, d, J=8,61 Hz), 7,89 (1H, d, J=l,60 Hz), 8,02 (1H, s), 8,31 (1H, s) , 9,67 (1H, s), 11,01 (1H, s) ; MS(ESI) m/z 347/349/351 (M-H). Elemanalízis a Ci6H10BrClO2 képletre számított: C(%) 54,97; H(%) 2,88. Talált: C(%) 54,68; H(%) , 82 .
1. as példa
1,8-Diklór-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol
0,12 g (0,38 mmol) 1,8-diklór-6-(4-metoxifenil)-2naftolt a D módszer szerinti módon 0,75 ml (0,75 mmol) 1 mol/l-es bór-tribromid-oldattal reagáltatunk, így 0,10 g (86%) cím szerinti terméket kapunk, amelyet fordított fázi• ·η·
115 sú preparativ HPLC útján tovább tisztítunk, így a cím szerinti terméket fehér szilárd anyag formájában kapjuk. Op.: 172-174 °C (bomlik). 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 6,89 (2H, d, J=8, 54 Hz), 7,36 (1H, d, J=8,90 Hz), 7,65 (2H, d, J=8,56 Hz),
7,88-7,91 (2H, m) , 8,10 (1H, d, J=l, 63 Hz), 9,69 (1H, s) , 10,64 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 303/305/307 (M-H)’. Elemanalízis a Οι6Ηιο01202·0, 25 H2O képletre számított: C (%) 62, 98;
H(%) 3,30. Talált: C(%) 61,80; H(%) 3,08.
1. at példa
3-Bróm-l,8-diklór-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol
0,18 g (0,45 mmol) 3-bróm-l,8-diklór-6-(4-metoxifeníl)-2-naftolt a D módszer szerinti módon 0,9 ml (0,9 mmol) 1 mol/l-es bór-tribromid-oldattal reagáltatunk, így 0,12 g (69%) cím szerinti terméket kapunk halványbarna szilárd anyag formájában. Ezt fordított fázisú preparativ HPLC útján tovább tisztítjuk, így a cím szerinti terméket fehér szilárd anyag formájában kapjuk. Op.: 184-188 °C. 1H-NMR (DMSO-ds) δ: 6,89 (2H, d, J=8,59 Hz), 7,65 (2H, d, J=8,61 Hz), 7,95 (1H, d, J—1,78 Hz), 8,13 (1H, d, J—1,75 Hz), 8,37 (1H, s) , 9,74 (1H, s) , 10,50 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 381/383/385 (M-H)’. Elemanalízis a Ci6H9BrCl202-0,25 H20 képletre számított: C(%) 50, 04; H(%) 2,36. Talált: C (%) 49,10; H(%) 2,14.
.bb példa
8-Bróm-7-hidroxi-3-(4-hidroxifenil)-1-naftonitril
0,13 g (0,37 mmol) 8-bróm-7-hidroxi-3-(4-metoxifenil)-1-naftonitrilt a D módszer szerinti módon 1,1 ml (1,1 mmol) 1 mol/l-es bór-tribromid-oldattal reagáltatunk, így 0,050 g (40%) cím szerinti terméket kapunk piszkosfehér szilárd anyag formájában. Op.: 204-208 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 6,90 (2H, d, J=8,30 Hz), 7,41 (1H, d, J=8,79 Hz), 7,72 (2H, d, J=8,79 Hz), 8,02 (1H, d, J=9,23 Hz), 8,37 (1H, d,
116
A-’.’
J=l,95 Hz), 8,47 (1H, d, J=2,44 Hz), 9,72 (1H, s) , 11,16 (1H, s) ; MS(ESI) m/z 338/340 (M-H) . Elemanalízis a
CnHioBrNOz képletre számított: C (%) 60, 02; H(%) 2,96; N(%) 4,12. Talált: C(%) 59,84; H(%) 3,18; N(%) 3,83.
A 15. reakcióvázlat szerinti vegyületek szintézise
91. intermedier
3-Bróm-8-klór-7-hidroxi-l-naftonitril
0,127 g (0,63 mmol) 8-klór-7-hidroxi-l-naftonitril és 1 ml jégecet elegyéhez egy nyomásálló csőben hozzáadjuk 0,24 g (1,5 mmol) bróm 2 ml jégecettel készült oldatát. A csövet lezárjuk, és az elegyet 100 °C-on egy éjszakán át j^e-yerjük. Ezután a reakcióelegyet lehűtjük, 50 ml vízbe öntjük, és 3x100 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves fázisokat nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk, nátrium-szulfáton szárítjuk, szűrjük, az oldószert ledesztilláljuk, és a maradékot szilikagél oszlopon tisztítjuk, eluálószer 20 térfogat% etil-acetátot tartalmazó hexán, így 0,10 g (56%) cím szerinti terméket kapunk sárga szilárd anyag formájában. Ebből egy analitikai mintát preparatív fordított fázisú HPLC útján tisztítunk, így a cím szerinti terméket fehér szilárd anyag formájában kapjuk. Op.: 148-150 °C. XH-NMR (DMSO-ds) δ: 7,47 (1H, d,
J=8,98 Hz), 7,95 (1H, d, J=9, 02 Hz), 8,32 (1H, d, J=2,08 Hz), 8,55 (1H, d, 1=2,08 Hz), 11,33 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 280/282/284 (M-H). Elemanalízis a CnH5BrClNO-0, 25 H20 képletre számított: C(%) 46, 03; H(%) 1,93; N(%) 4,88. Talált: C(%) 45, 92; H(%) 1,75; N(%) 4,78.
91. intermedier
3-Bróm-8-klór-7-hidroxi-l-naftonitril
0,32 g (1,28 mmol) 3-bróm-7-hidroxi-l-naf tonitrilt a C módszer szerinti módon 0,24 g (1,8 mmol) NCS 25 ml THF-fel készült elegyével reagálta!juk 3 óra hosszat
117 °C-on, így 0,30 g (83%) cím szerinti terméket kapunk sárga szilárd anyag formájában. Ebből egy analitikai mintát preparativ fordított fázisú HPLC útján tisztítunk, így a cím szerinti terméket fehér szilárd anyag formájában kapjuk. Op.: 148-150 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 7,47 (1H, d,
J=8,98 Hz), 7,95 (1H, d, J=9,02 Hz), 8,32 (1H, d, J=2,08 Hz), 8,55 (1H, d, J=2,08 Hz), 11,33 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 280/282/284 (M-H)-. Elemanalízis a CuHsBrClNO-0,25 H20 képletre számított: C(%) 46, 03; H(%) 1,93; N(%) 4,88. Talált: C(%) 45, 92; H(%) 1,75; N(%) 4,78. 92 , intermedier
8-Klór-3-(3-fluor-4-metoxifenil)-7-hidroxi-l-naftonitril
0,20 g (0,71 mmol) 3-bróm-8-klór-7-hidroxi-l-naftonitrilt az A módszer szerinti módon 0,17 g (1,0 mmol) 3fluor-4-metoxifenilbórsavval reagáltatunk, így 0,14 g (60%) cím szerinti terméket kapunk sárga szilárd anyag formájában. Op.: 198-200 °C. XH-NMR (DMSO-ds) δ: 3,91 (3H, s),
7,27-7,33 (1H, m), 7,45 (1H, d, J=8,93 Hz), 7,71-7,74 (1H, m) , 7,85 (1H, dd, J=2,23 Hz, J=13,09 Hz), 8,00 (1H, d,
J=9,08 Hz), 8,48 (1H, d, J=l,97 Hz), 8,57 (1H, d, J=l, 95 Hz), 11,18 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 326/328 (M-H). Elemanalízis a Ci8HiiC1FNO2 képletre számított: C (%) 65, 97; H(%)
3,38; N(%) 4,27. Talált: C(%) 65, 76; H(%) 3,36; N(%) 4,11. 1.aw példa 8-Klór-3-(4-hidroxifenil)-7-hidroxi-l-naftonitril
0,10 g (0,37 mmol) 3-bróm-8-klór-7-hidroxi-l-naftonitrilt az A módszer szerinti módon 0,13 g (0,52 mmol) 4terc-butildimetilszililoxifenil-bórsavval reagáltatunk, így 0,036 g (33%) cím szerinti terméket kapunk fehér szilárd anyag formájában. Op. : 254-256 °C. XH-NMR (DMSO-d6) δ: 6,90 (2H, d, J=8,64 Hz), 7,43 (1H, d, J=8,95 Hz), 7,72 (2H, d, J=8,64 Hz), 7,99 (1H, d, J=8,97 Hz), 8,38 (1H, d, J=l, 95
118
Hz), 8,47 (1H, d, 1=1,92 Hz), 9,73 (1H, s) , 11,08 (1H, s) ; MS (ESI) m/z 294/296 (M-H). Elemanalízis a C17H10CIN02 képletre számított: C(%) 69,05; H(%) 3,41; N(%) 4,74. Talált: C(%) 69,01; H(%) 3,63; N(%) 4,31.
.ax példa
8-Klór-3-(3-fluor-4-hidroxifenil)-7-hidroxi-l-naftonitril
0,042 g (0,13 mmol) 8-klór-3-(3-fluor-4-metoxifenil)7-hidroxi-l-naftonitrilt a D módszer szerinti módon 1,8 g piridin-hidrokloriddal reagáltatunk, így 0,033 g (78%) cím szerinti terméket kapunk sárgásbarna szilárd anyag formájában. Ezt az anyagot preparatív fordított fázisú HPLC útján tovább tisztítjuk, így a cím szerinti terméket fehér szilárd anyag formájában kapjuk. Op.: 246-252 °C. 1H-NMR (DMSO-d6) δ: 7,04-7,10 (1H, m) , 7,44 (1H, d, J=8,94 Hz), 7,56 (1H, dd, J=l, 66 Hz, J=8,37 Hz), 7,76 (1H, dd, J=2,20 Hz, 1=12,88 Hz), 7,99 (1H, d, J=9, 09 Hz), 8,43 (1H, d, 1=1,98 Hz), 8,52 (1H, d, 1=1,94 Hz), 10,19 (1H, bs), 11,05 (1H, bs) ; MS(ESI) m/z 312/314 (M-H)’. Elemanalízis a
C17H9CIFNO20,25 H2O képletre számított: C(%) 64,16; H(%)
3,01; N(%) 4,40. Talált: C(%) 63, 75; H(%) 2,84; N(%) 4,20.

Claims (31)

119
Szabadalmi igénypontok
1. (la) általános képletű vegyületek és gyógyszerészetileg elfogadható sóik, a képletben
Rí és R2 jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, hidroxil-, 1-6 szénatomos alkil-, 2-7 szénatomos alkenil-, 2-7 szénatomos alkinil-, 1-6 szénatomos alkoxicsoport vagy halogénatom,
R5, R6, R7, Re és Rg jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, 1-6 szénatomos alkil-, 2-7 szénatomos alkenil-, 2-7 szénatomos alkinil-, halogénatom, 1-6 szénatomos alkoxi-, -CN, -CHO, trifluormetil-, 7-12 szénatomos fenilalkilcsoport vagy egy 5- vagy 6-tagú, 1-4 heteroatomot, éspedig 0-, N- és/vagy S-atomot tartalmazó heterociklusos gyűrű;
ahol az R5, Rs, R7, Re és Rg szubsztituensek esetén megadott alkil- és alkenilcsoportok adott esetben hidroxil-, -CN, halogén, trifluoralkil-, trifluoralkoxi-, -NO2 vagy fenilcsoporttal lehetnek szubsztituálva; és az R5, R6, R7, Re, Rg és Rio szubsztituensek esetén megadott fenilcsoport adott esetben egyszeresen, kétszeresen vagy háromszorosan 1-6 szénatomos alkil-, 2-7 szénatomos alkenil-, halogén, hidroxil-, 1-6 szénatomos alkoxi-, halogén, -CN, -N02, amino-, 1-6 szénatomos alkilamino-, di(l-6 szénatomos alkil)amino-, tio-, 1-6 szénatomos alkiltio-, 1-6 szénatomos alkilszulfinil-, 1-6 szénatomos alkilszulfonil-, 2-7 szénatomos alkoxikarbonil-, 2-7 szénatomos alkilkarbonil- vagy benzoilcsoporttal lehet szubsztituálva;
azzal a megkötéssel, hogy R5, és Rg szubsztituensek közül legalább az egyiknek a jelentése hidrogénatomtól eltérő.
2. Az 1. igénypont szerinti vegyületek körébe tartozó (Ib) általános képletű vegyületek és gyógyszerészetileg el-
120 fogadható sóik.
3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti olyan vegyületek, amelyek képletében Rí és R2 jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom vagy fluoratom.
4. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti olyan vegyületek, amelyek képletében R5, Re, R?, Re és R9 jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, halogénatom, -CN és/vagy 2-7 szénatomos alkinilcsoport.
5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti olyan vegyületek, amelyek képletében R5 jelentése hidrogénatom, fluoratom vagy cianocsoport.
6. Az 1-5. igénypontok bármelyike szerinti olyan vegyületek, amelyek képletében R9 jelentése hidrogénatom, fluoratom vagy cianocsoport.
7. Az 1-6. igénypontok bármelyike szerinti olyan vegyületek, amelyek képletében R6, R? és R8 jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom.
8. Az 1-7. igénypontok bármelyike szerinti olyan vegyületek, amelyek képletében az 5- vagy 6-tagú, 1-4 heteroatomot, éspedig 0-, N- és/vagy S-atomot tartalmazó heterociklusos gyűrű furán-, tiofén- vagy piridingyűrű.
9. Az 1. igénypont szerinti vegyületek körébe tartozó 8-fluor-6-(3-fluor-4-hidroxifenil)-2-naftol és gyógyszerészetileg elfogadható sói.
10. Az 1. igénypont szerinti vegyületek körébe tartozó l-klór-8-fluor-6-(3-fluor-4-hidroxifenil)-2-naftol és gyógyszerészetileg elfogadható sói.
11. Az 1. igénypont szerinti vegyületek körébe tartozó 3-(3-fluor-4-hidroxifenil)-7-hidroxi-l-naftonitril és gyógyszerészetileg elfogadható sói.
12. Az 1. igénypont szerinti vegyületek körébe tartozó 3-(3, 5-difluor-4-hidroxifenil)-7-hidroxi-l-naftonitril és gyógyszerészetileg elfogadható sói.
121
13. A következő naftolszármazékok és gyógyszerészetileg elfogadható sóik:
6- (3-fluor-4-hidroxifenil)-2-naftol;
l-klór-6-(3-fluor-4-hidroxifenil)-2-naftol;
l-klór-6-(2-fluor-4-hidroxifenil)-2-naftol;
l-klór-6-(2,5-difluor-4-hidroxifenil)-2-naftol;
l-klór-6-(2,6-difluor-4-hidroxifenil)-2-naftol;
6-(2,5-difluor-4-hidroxifenil)-2-naftol;
6-(3,5-difluor-4-hidroxifenil)-2-naftol;
l-klór-6-(3,5-difluor-4-hidroxifenil)-2-naftol;
6-(2,6-difluor-4-hidroxifenil)-2-naftol; vagy
8-klór-3-(3-fluor-4-hidroxifenil)-7-hidroxi-l-naftonitril .
14. A következő vegyületek és gyógyszerészetileg elfogadható sóik:
7-(4-hidroxifenil)-2-naftol;
7-(3-hidroxifenil)-2-naftol;
6-(4-hidroxifenil)-1-naftol;
6-fenil-2-naftol;
6-(3-hidroxifenil)-2-naftol;
6-(3-klórfenil)-2-naftol;
2-fluor-4-(2-naftil)fenol;
6-(3-klór-4-hidroxifenol)-2-naftol;
l-klór-6-fenil-2-naftol;
l-bróm-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol;
l-klór-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol;
l-fluor-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol;
2-hidroxi-6-(4-hidroxifenil)-1-naftonitril;
6-(4-hidroxifenil)-l-fenil-2-naftol;
6-(4-hidroxifenil)-l-metil-2-naftol;
l-klór-6-(3-klór-4-hidroxifenil)-2-naftol;
6-(4-hidroxifenil)-l-nitro-2-naftol;
l-klór-6-(4-hidroxi-2-metilfenil)-2-naftol;
6- (4-hidroxi-2-metilfenil)-2-naftol;
122
6- (4-hidroxi-2-metoxifenil)-2-naftol;
6-(2-klór-4-hidroxifenil)-2-naftol;
l-klór-6-(2-klór-4-hidroxifenil)-2-naftol;
6-(2-fluor-4-hidroxifenil)-2-naftol;
8-fluor-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol;
l-klór-8-fluor-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol;
8-klór-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol;
1,5-diklór-8-fluor-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol;
2-klór-4-(2-naftil)fenol;
3-bróm-8-klór-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol;
1,8-diklór-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol;
3-bróm-l,8-diklór-6-(4-hidroxifenil)-2-naftol;
7-hidroxi-3-(4-hidroxifenil)-1-naftonitril;
8-klór-3-(4-hidroxifenil)-7-hidroxi-l-naftonitril; 8-bróm-7-hidroxi-3-(4-hidroxifenil)-1-naftonitril.
15. Eljárás prostatitis vagy interstitial cystitis kezelésére vagy gátlására emlősök esetén, azzal j ellenezve, hogy az emlősnek valamely az 1-14. igénypontok bármelyike szerinti vegyület vagy gyógyszerészetileg elfogadható sója hatékony mennyiségét adagoljuk.
16. Eljárás gyulladásos bélbetegségek, Crohn-betegség, fekélyes végbélgyulladás vagy vastagbélgyulladás kezelésére vagy gátlására emlősök esetén, azzal jellemezve, hogy az emlősnek valamely az 1-14. igénypontok bármelyike szerinti vegyület vagy gyógyszerészetileg elfogadható sója hatékony mennyiségét adagoljuk.
17. Eljárás prosztata hipertófia, méh leiomiómák, emlőrák, scleroderma, fibromatózis, méhbelhártya-rák, policisztás petefészek tünetegyüttes, méhbelhártya-polipok, jóindulatú emlőbetegség, adenomiózis, petefészekrák, melanoma, prosztatarák, vastagbél-rák, glióma vagy astioblastomia kezelésére vagy gátlására emlősök esetén, azzal jellemezve, hogy az emlősnek valamely az 1-14. igénypontok
123 bármelyike szerinti vegyület vagy gyógyszerészetileg elfogadható sója hatékony mennyiségét adagoljuk.
18. Eljárás koleszterin-, triglicerid-, Lp(a)- és LDL-szint csökkentésére; hiperkoleszterémia, hiperlipidémia, szív-érrendszeri betegségek, atherosclerosis, magas vérnyomás, perifériás érbetegségek, restenózis vagy érgörcs kezelésére vagy gátlására emlősök esetén, azzal jellemezve, hogy az emlősnek valamely az 1-14. igénypontok bármelyike szerinti vegyület vagy gyógyszerészetileg elfogadható sója hatékony mennyiségét adagoljuk.
19. Eljárás gondolkodás/észlelés elősegítésére és az idegrendszer védelmére, öregkori demencia, Alzheimer-kór, gondolkodási/észlelési képességek romlása, sztrók, szorongás vagy neurodegeneratív rendellenességek kezelésére vagy gátlására emlősök esetén, azzal jellemezve, hogy az emlősnek valamely az 1-14. igénypontok bármelyike szerinti vegyület vagy gyógyszerészetileg elfogadható sója hatékony mennyiségét adagoljuk.
20. Eljárás szabadgyökök által előidézett betegségek kezelésére vagy gátlására emlősök esetén, azzal jellemezve, hogy az emlősnek valamely az 1-14. igénypontok bármelyike szerinti vegyület vagy gyógyszerészetileg elfogadható sója hatékony mennyiségét adagoljuk.
21. Eljárás hüvelyi vagy külső szeméremtesti atrófia, atrófiás hüvelygyulladás, hüvelyszárazság, bőrviszketés, fájdalmas közösülés, nehézvizelés, gyakori vizelés, húgyúti inkontinencia, húgyúti fertőzések kezelésére vagy gátlására emlősök esetén, azzal jellemezve, hogy az emlősnek valamely az 1-14. igénypontok bármelyike szerinti vegyület vagy gyógyszerészetileg elfogadható sója hatékony mennyiségét adagoljuk.
22. Eljárás vazomotorikus tünetek kezelésére vagy gátlására emlősök esetén, azzal jellemezve, hogy az emlős
124 nek valamely az 1-14. igénypontok bármelyike szerinti vegyület vagy gyógyszerészetileg elfogadható sója hatékony mennyiségét adagoljuk.
23. Eljárás fogamzásgátlásra emlősök esetén, azzal jellemezve, hogy az emlősnek valamely az 1-14. igénypontok bármelyike szerinti vegyület vagy gyógyszerészetileg elfogadható sója hatékony mennyiségét adagoljuk.
24. Eljárás izületi-gyulladás kezelésére vagy gátlására emlősök esetén, azzal jellemezve, hogy az emlősnek valamely az 1-14. igénypontok bármelyike szerinti vegyület vagy gyógyszerészetileg elfogadható sója hatékony mennyiségét adagoljuk.
25. A 24. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy izületi-gyulladásként reumás ízületi gyulladást, csontízületi-gyulladást vagy csigolyáizületi-gyulladást kezelünk .
26. Eljárás ízületek duzzanata vagy eróziója, arthroscopiás vagy sebészeti eljárások következtében kialakuló ízületi károsodások kezelésére vagy gátlására emlősök esetén, azzal jellemezve, hogy az emlősnek valamely az 1-14. igénypontok bármelyike szerinti vegyület vagy gyógyszerészetileg elfogadható sója hatékony mennyiségét adagolj uk.
27. Eljárás pszoriázis és bőrgyulladás kezelésére vagy gátlására emlősök esetén, azzal jellemezve, hogy az emlősnek valamely az 1-14. igénypontok bármelyike szerinti vegyület vagy gyógyszerészetileg elfogadható sója hatékony mennyiségét adagoljuk.
28. Eljárás iszkémiás vagy reperfúziós sérülések, asztma, mellhártyagyulladás, sclerosis multiplex, szisztémás lupus erythematosus, uveagyulladás, szepszis, vérzéses sokk, makula-degeneráció vagy Il-es típusú diabétesz kezelésére vagy gátlására emlősök esetén, azzal jellemezve,
125 •r .1 hogy az emlősnek valamely az 1-14. igénypontok bármelyike szerinti vegyület vagy gyógyszerészetileg elfogadható sója hatékony mennyiségét adagoljuk.
29. Eljárás endometriózis kezelésére vagy gátlására emlősök esetén, azzal jellemezve, hogy az emlősnek valamely az 1-14. igénypontok bármelyike szerinti vegyület vagy gyógyszerészetileg elfogadható sója hatékony mennyiségét adagoljuk.
30. Gyógyszerkészítmények, amelyek valamely az 1-14. igénypontok bármelyike szerinti vegyületet vagy annak gyógyszerészetileg elfogadható sóját tartalmazzák, gyógyszerészetileg elfogadható vivő- és egyéb segédanyagok mellett.
31. Eljárás az 1-13. igénypontok bármelyike szerinti naftilszármazékok előállítására, azzal jellemezve, hogy
a) egy (II) általános képletű vegyületet, ahol Rí, R2 és R5-R9 jelentése a fenti, és R és R' jelentése egymástól függetlenül hidrogénatom, alkil- vagy aralkoxicsoport, azzal a megkötéssel, hogy R és R' közül legalább az egyiknek a jelentése alkilcsoport, így 1-6 szénatomos alkilcsoport, vagy aralkilcsoport, így 7-12 szénatomos aralkilcsoport, dezalkilezünk vagy dezaralkilezünk, így egy megfelelő (I) általános képletű vegyületet kapunk;
vagy
b) egy (la) általános képletű vegyületet, ahol Rí, R2 és R5-R9 jelentése a fenti, így egy megfelelő 1-halogénnaftol-származékot kapunk;
vagy
c) egy kapott, 1-14. igénypontok bármelyike szerinti bázikus vegyületet sóvá alakítunk, vagy pedig egy sót szabad vegyületté alakítunk.
A meghatalmazott:
'DÁNUBIA
Szabadalmi és Védj&gy Iroda Kft.
Dr. Gárdonyi Zoltánná szabad^rmügjvivó'
HU0501025A 2001-12-13 2002-12-12 Substituted phenyl naphthalenes as estrogenic agents and their use HUP0501025A2 (en)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US34116401P 2001-12-13 2001-12-13
PCT/US2002/039883 WO2003051805A2 (en) 2001-12-13 2002-12-12 Substituted phenyl naphthalenes as estrogenic agents

Publications (1)

Publication Number Publication Date
HUP0501025A2 true HUP0501025A2 (en) 2006-03-28

Family

ID=23336481

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU0501025A HUP0501025A2 (en) 2001-12-13 2002-12-12 Substituted phenyl naphthalenes as estrogenic agents and their use

Country Status (18)

Country Link
US (2) US6914074B2 (hu)
EP (1) EP1453782A2 (hu)
JP (1) JP4566561B2 (hu)
KR (1) KR20040071197A (hu)
CN (1) CN1738788A (hu)
AR (1) AR038019A1 (hu)
AU (2) AU2002361659A1 (hu)
BR (1) BR0215042A (hu)
CA (1) CA2470109C (hu)
HU (1) HUP0501025A2 (hu)
IL (1) IL161740A0 (hu)
MX (1) MXPA04005629A (hu)
NO (1) NO20042955L (hu)
PL (1) PL374300A1 (hu)
RU (2) RU2314283C2 (hu)
TW (1) TWI306450B (hu)
WO (1) WO2003051805A2 (hu)
ZA (1) ZA200405512B (hu)

Families Citing this family (42)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EA007382B1 (ru) 2001-11-19 2006-10-27 Эли Лилли Энд Компани Замещенные бензопираны в качестве селективных агонистов бета-рецептора эстрогена
TWI306450B (en) * 2001-12-13 2009-02-21 Wyeth Corp Substituted phenyl naphthalenes as estrogenic agents
CA2518819A1 (en) 2003-04-21 2004-11-04 Eli Lilly And Company Substituted benzopyrans as selective estrogen receptor-beta agonists
EP1618102B1 (en) 2003-04-21 2010-02-10 Eli Lilly And Company Substituted benzopyrans as selective estrogen receptor-beta agonists
CL2004000985A1 (es) 2003-05-16 2005-01-14 Wyeth Corp Compuestos derivados de fenilquinolinas; composicion farmaceutica, proceso de preparacion; y uso para tratar osteoporosis, enfermedad de paget, dano vascular, osteoartritis, cancer oseo, cancer ovarico, cancer prostatico, hipercolesterolemia, aterosc
TW200500065A (en) * 2003-05-21 2005-01-01 Wyeth Corp Antiarthritic combinations
US7557237B2 (en) * 2003-09-09 2009-07-07 Wyeth Process for the synthesis of 3-(3-fluoro-4-hydroxyphenyl)-7-hydroxynaphthonitrile
US7196119B2 (en) * 2003-10-21 2007-03-27 The Regents Of The University Of California Development of new selective estrogen receptor modulators
EP1704856A4 (en) 2003-12-26 2009-08-19 Kyowa Hakko Kirin Co Ltd PROTEIN INHIBITOR OF THE HSP90 FAMILY
US7157492B2 (en) * 2004-02-26 2007-01-02 Wyeth Dibenzo chromene derivatives and their use as ERβ selective ligands
US7425580B2 (en) * 2004-05-19 2008-09-16 Wyeth (Diaryl-methyl)-malononitriles and their use as estrogen receptor ligands
MXPA06015270A (es) * 2004-07-01 2007-03-15 Wyeth Corp Compuestos tetraciclicos como ligandos de estrogeno.
US7145040B2 (en) * 2004-07-02 2006-12-05 Bristol-Myers Squibb Co. Process for the preparation of amino acids useful in the preparation of peptide receptor modulators
WO2006065968A2 (en) * 2004-12-17 2006-06-22 Wyeth The uses of estrogen beta agonists to treat cognitive diseases
WO2006073714A2 (en) * 2004-12-31 2006-07-13 Aventis Pharmaceuticals Inc. Use of certain phenyl-naphthyl compounds that do not have significant affintiy to er alpha or beta for protection of neurons and oligodendrocytes in the treatment of multiple sclerosis
EP1835896A2 (en) * 2005-01-04 2007-09-26 Aventis Pharmaceuticals Inc. Use of certain phenyl napthyl compounds for protection of neurons and oligodendrocytes in the treatment of multiple sclerosis (ms)
MX2007009914A (es) * 2005-02-16 2007-09-25 Wyeth Corp Uso de agonistas selectivos para el receptor-beta de estrogeno para la mucositis inducida por radiacion o por quimioterapia y para la cistitis inducida por radiacion.
EP1702558A1 (en) * 2005-02-28 2006-09-20 Euro-Celtique S.A. Method and device for the assessment of bowel function
US9271963B2 (en) 2005-03-03 2016-03-01 Universitat Des Saarlandes Selective inhibitors of human corticosteroid synthases
AU2007215131A1 (en) * 2006-02-14 2007-08-23 Wyeth Aqueous pharmaceutical formulations of ERbeta selective ligands
US9604931B2 (en) 2007-01-22 2017-03-28 Gtx, Inc. Nuclear receptor binding agents
US9623021B2 (en) * 2007-01-22 2017-04-18 Gtx, Inc. Nuclear receptor binding agents
BRPI0806371A2 (pt) 2007-01-22 2011-09-13 Gtx Inc agentes ligação de receptor nuclear
US20080182872A1 (en) * 2007-01-31 2008-07-31 Wyeth Use of er-beta selective ligands for treating acute lung injuries
AR065399A1 (es) * 2007-02-21 2009-06-03 Wyeth Corp Mono- y di- fosfatos de 3- (3-fluoro-4-hidroxi-fenil) -7-hidroxi-naftalen-1-carbonitrilo
DE102007015169A1 (de) 2007-03-27 2008-10-02 Universität des Saarlandes Campus Saarbrücken 17Beta-Hydroxysteroid-Dehydrogenase-Typ1-Inhibitoren zur Behandlung hormonabhängiger Erkrankungen
WO2008124812A1 (en) * 2007-04-10 2008-10-16 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Phen-naphthalene and phen-quinoline derivatives and their use for binding and imaging amyloid plaques
KR101101977B1 (ko) * 2009-04-09 2012-01-02 (주)에스메디 2-아릴나프탈렌, 2-아릴퀴놀린 유도체 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 함유하는 퇴행성 뇌질환의 진단 또는 치료용 약학적 조성물
US20120059026A1 (en) 2009-04-30 2012-03-08 University Of Medicine And Dentistry Of New Jersey Antimicrobial agents
CA2803890A1 (en) * 2010-06-25 2011-12-29 Rutgers, The State University Of New Jersey Antimicrobial agents
WO2013048145A2 (ko) * 2011-09-30 2013-04-04 부산대학교 산학협력단 6-(3-하이드록시페닐)-2-나프톨 또는 이의 약학적으로 허용되는 염을 유효성분으로 포함하는 염증성 질환 또는 골량 저하 관련 질환의 예방 또는 치료용 조성물
WO2013106756A2 (en) 2012-01-13 2013-07-18 Rutgers, The State University Of New Jersey Antimicrobial agents
US9475783B2 (en) 2012-03-21 2016-10-25 Rutgers, The State University Of New Jersey Antimicrobial agents
CN102675056A (zh) * 2012-05-24 2012-09-19 盛世泰科生物医药技术(苏州)有限公司 一种6-溴-8-氟-2-萘酚的制备方法
CN103193601A (zh) * 2013-04-11 2013-07-10 山东大学 2-苯基萘衍生物及其在制备抗肿瘤药物中的应用
US9458150B2 (en) 2013-11-08 2016-10-04 Rutgers, The State University Of New Jersey Antimicrobial agents
WO2016037171A1 (en) * 2014-09-05 2016-03-10 The Cleveland Clinic Foundation Flavonoid il-17a inhibitors
EP3400071A4 (en) * 2016-01-06 2019-10-30 The Board of Trustees of the University of Illinois Novel compounds for activating the Estrogen Receptors and compositions and methods of use thereof
US10513528B2 (en) 2016-02-25 2019-12-24 Taxis Pharmaceuticals, Inc. Synthetic processes and intermediates
CA3058183A1 (en) 2017-03-30 2018-10-04 Taxis Pharmaceuticals, Inc. Synthetic processes and synthetic intermediates
CN107474038B (zh) * 2017-07-17 2020-10-09 苏州楚凯药业有限公司 一类靶向雌激素受体荧光探针及其制备和使用方法
EP4036189A1 (en) * 2021-02-02 2022-08-03 Indian Oil Corporation Limited Process for synthesis of polyhydrocarbons as heat transfer agents

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IE58417B1 (en) 1984-04-27 1993-09-22 Ici Plc Chemical derivatives
GB8410901D0 (en) * 1984-04-27 1984-06-06 Ici Plc Phenol derivatives
LU85849A1 (fr) * 1985-04-11 1986-11-05 Cird Derives benzonaphtaleniques,leur procede de preparation et leur application dans les domaines pharmaceutiques et cosmetiques
FR2676052B1 (fr) 1991-05-02 1994-04-29 Cird Galderma Nouveaux composes polycycliques aromatiques et leur utilisation en medecine humaine ou veterinaire et en cosmetique.
DK77393D0 (da) 1993-06-29 1993-06-29 Novo Nordisk As Aktivering af enzymer
US5998401A (en) 1995-02-28 1999-12-07 Eli Lilly And Company Naphthyl compounds, intermediates, compositions, and methods
FR2744444B1 (fr) * 1996-02-01 1998-05-29 Roussel Uclaf Nouveaux composes biphenyles, procede et intermediaires de preparation, application a titre de medicaments et compositions pharmaceutiques les renfermant
US6448294B1 (en) * 1996-02-01 2002-09-10 Aventis Pharma S.A. Biphenyl compounds and their use as oestrogenic agents
FR2747041B1 (fr) * 1996-04-05 1998-05-22 Cird Galderma Utilisation de derives benzonaphtaleniques pour la fabrication de medicaments destines au traitement des neuropathies
US5916916A (en) * 1996-10-10 1999-06-29 Eli Lilly And Company 1-aryloxy-2-arylnaphthyl compounds, intermediates, compositions, and methods
TR200201762T2 (tr) * 1999-04-16 2002-10-21 Astrazeneca Ab B östrojen reseptörü ligandları.
CN1414941A (zh) 1999-12-13 2003-04-30 中外制药株式会社 具有羟羰基－卤代烷基侧链的化合物
TWI306450B (en) * 2001-12-13 2009-02-21 Wyeth Corp Substituted phenyl naphthalenes as estrogenic agents

Also Published As

Publication number Publication date
US20030181519A1 (en) 2003-09-25
IL161740A0 (en) 2005-11-20
JP4566561B2 (ja) 2010-10-20
MXPA04005629A (es) 2004-12-06
US6914074B2 (en) 2005-07-05
ZA200405512B (en) 2007-02-28
AU2002361659A1 (en) 2003-06-30
CN1738788A (zh) 2006-02-22
RU2004121227A (ru) 2006-01-10
RU2314283C2 (ru) 2008-01-10
CA2470109A1 (en) 2003-06-26
BR0215042A (pt) 2006-06-06
WO2003051805A3 (en) 2003-09-04
NO20042955L (no) 2004-07-12
EP1453782A2 (en) 2004-09-08
TWI306450B (en) 2009-02-21
JP2005538924A (ja) 2005-12-22
RU2007128958A (ru) 2009-02-10
AR038019A1 (es) 2004-12-22
KR20040071197A (ko) 2004-08-11
WO2003051805A2 (en) 2003-06-26
CA2470109C (en) 2010-12-21
US20040225123A1 (en) 2004-11-11
US7067524B2 (en) 2006-06-27
PL374300A1 (en) 2005-10-03
TW200300668A (en) 2003-06-16
AU2009222567A1 (en) 2009-10-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HUP0501025A2 (en) Substituted phenyl naphthalenes as estrogenic agents and their use
US6794403B2 (en) Substituted benzoxazoles as estrogenic agents
US6835745B2 (en) Phenyl substituted thiophenes as estrogenic agents
US6774248B2 (en) Substituted 2-phenyl benzofurans as estrogenic agents
US20080255057A1 (en) Prodrug substituted benzoxazoles as estrogenic agents
US6903238B2 (en) Substituted indenones as estrogenic agents
US6723747B2 (en) Substituted 6H-DiBenzo[c,h]chromenes as estrogenic agents
US6884814B2 (en) Phenyl benzisoxazoles as estrogenic agents

Legal Events

Date Code Title Description
FD9A Lapse of provisional protection due to non-payment of fees