HUP0004120A2

HUP0004120A2 - cGMP-PDE5 enzimet gátló anyagok alkalmazása idegbetegség kezelésére szolgáló gyógyászati készítmény előállítására

Info

Publication number: HUP0004120A2
Application number: HU0004120A
Authority: HU
Inventors: Eric Ben Grossman; Nandan Parmanand Koppiker; Steven B. Leichter
Original assignee: Pfizer Inc.
Priority date: 1999-10-21
Filing date: 2000-10-20
Publication date: 2002-11-28
Also published as: DE60037347D1; HU0004120D0; ATE380049T1; JP2001122803A; HUP0004120A3; IL152925A; CO5271711A1; CY1107285T1; EP1129706A3; US20040122010A1; EP1440709A3; PE20010754A1; PT1440709E; AU781550B2; KR20010051181A; EP1129706A2; ES2295726T3; EP1440709A2; CA2323839C; CA2323839A1

Abstract

A találmány cGMP PDE5 enzimet gátló anyagok alkalmazása idegbetegség,különösen perifériás diabetikus idegbetegség kezelésére szolgálógyógyászati készítmény előállítására azzal a megkötéssel, hogy a gátlóanyag I) helyettesített 5-(3-piridil)-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-ontól, ii) helyettesített 2-(3-piridil)-4a,5-dihidroimidazo[5,1-f][1,2,4]triazin-4(3H)-ontól vagy iii) helyettesített 2-fenilpurin-6-ontól vagy helyettesített 2-(3-piridil)-purin-6-ontól eltérő. Ó

Description

cGMP PDE5 ENZIMET GÁTLÓ ANYAGOK ALKALMAZÁSA -A/

IDEGBETEGSÉG KEZELÉSÉRE SZOLGÁLÓ GYÓGYÁSZATI KÉSZÍTMÉNY ELŐÁLLÍTÁSÁRA

A találmány tárgya 5 típusú ciklusos guanozin-3’,5'-moi1o foszfát-foszfodieszteráz (cGMP PDE5) gátló anyagok, különö sen szildenafil alkalmazása idegbetegség, különösen diabetikus idegbetegség kezelésére szolgáló gyógyászati készítmény előállítására.

Megfigyeléseink szerint a cGMP PDE5 enzimet gátló vegyületek hatásos és hatékony vegyületek férfi merevedési zavarok (MED, impotencia) és női nemi rendellenességek kezelésére (WO 94/28902). Ez a felismerés vezetett a szildenafil hatóanyag - 5-[2-etoxi-5-(4-metil-1 -piperazinilszulfonil)-fenil]-1 -metil-3-n-propil-1,6-dihidro-7H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-on; VIAGRA - kifejlesztésére, amely kiemelkedően eredményesnek bizonyult MED első orálisan hatásos kezelésében.

Az idegbetegség általános kifejezés, amely olyan megbetegedési folyamatot ír le, amely az idegrendszer zavarához vezet. Az autonóm és perifériás idegrendszert befolyásoló idegbetegségnek számos oka van, ezek többek között anyagcsere-rendellenességek, így cukorbaj, pajzsmirigy csökkent működése, porfirinek fokozott képzése, toxikus anyagok, így alkohol és néhány nehézfém és kábítószerek; fertőzések és gyulladásos állapotok, így lepra és vazulitidisz, bütykös sokizületi gyulladás és szisztémás lupusz, valamint fehérvérűség, nyirokcsomó-duzzanat és egyéb daganatos állapotok. Idegbetegség genetikai vagy örökletes betegségekkel is, így amiloid

93238-4231 A/O/LZs

P00 04120 elfajulással vagy kórosan magas vérfehérjeszinttel is kapcsolatban lehet.

Idegbetegséget közelebbről a következő szisztémás betegségek okoznak: (közönséges) cukorbaj, (bizonyos esetekben) húgyvérüség, porfirinek fokozott képzése, alacsony vércukorszint, vitaminhiány, Bi₂-vitaminhiány, vérmérgezés (válságos betegség), krónikus májbetegség, elsődleges epezsugorodás, elsődleges szisztémás amiloid elfajulás, pajzsmirigy csökkent működése, krónikus elzáródásos tüdőbetegség, akromegália, felszívódási zavar (sprue, hasüregi betegség), (szenzoros) rák, (érzö-mozgatószervi) rák, előrehaladott rák, csontvelőrák, HIV-fertözés, Lyme-kór, nyirokszövet-daganat, így Hodgkin-betegség, vörösvérsejt-túltengés, (bomló típusú) áttételes csontvelődaganat, (csontkeményedéses vagy lokalizált plazmasejtdaganat típusú) áttételes csontvelödaganat, jóindulatú monoklonális gammopátia (IgA, IgG és IgM) vagy krioglobulinémia.

Idegbetegséget előidéznek ezenkívül különféle hatóanyagok, többek között (ritmusszabályozó) amiodaron, (reumaellenes) aurotioglükóz, (daganatellenes) ciszplatin, (többek között lepra ellen alkalmazott bőrgyógyászati) dapszon, (alkoholizmus elleni) diszulfiram, (vérnyomáscsökkentő) hidralazin, (protozoaellenes) izoniazid, metronidazle, (sugárérzékenyítő) miszonidazol, (húgyúti fertőtlenítő) nitofurantoin, (retrovírusellenes) nukleozidanalógok (ddC, ddl, d4T), (görcsoldó) fenitoin, piridoxin (vitamin) és (daganatellenes) szuramin, taxol vagy vinkrisztin.

93238-4231 Λ/0/LZs

P00 04120

Idegbetegséget előidéznek továbbá a környezetben előforduló mérgek, így akrilamid (pelyhesítőszer/cementálószer), arzén (herbicid/inszekticid), d iftéri atoxin, γ-diketonok, szervetlen ólom(vegyületek), szerves foszfátok vagy tallium (patkányméreg).

A fentieken kívül idegbetegséget kiváltanak még genetikai rendellenességek (így 1 A, 1 B, 2 és 4A típusú) Charcot-Marie-Tooth (CMT) betegség, örökletes, több idegre kiterjedő amiloid betegség, (I és II típusú) örökletes érzékelési idegbetegség, porfirinek fokozott képzésével kapcsolatos idegbetegség, öröklött bénulási hajlam, Fabry-betegség, gerincvelővel kapcsolatos idegbetegség, (A és B típusú) Dejerine-Sottas-idegbetegség, Refsum-kór, mozgásrendezettségi zavar, hajszálértágulat, Abetalipo-féle magas vérfehérjeszint, kiterjedt gerincagyi idegbetegség, metakromasiás leukodistrofia és Frieddreich-típusú paral ízis.

Idegbetegség egyike a cukorbaj fő szövődményeinek, ezzel kapcsolatban nem alakult ki bevált terápia - sem annak tüneti kezelése, sem az idegfunkcióban bekövetkező fokozatos hanyatlás megelőzése tekintetében. Cukorbaj esetében a több idegre kiterjedő betegség elterjedtsége széles határok (5-80%) között változik - jelentős mértékben a több idegre kiterjedő betegség meghatározásában és klinikai leírásában fellelhető nagy változatosság következtében. Mindazonáltal az Egyesült Királyságban kórházakban és rendelőintézetekben végzett tanulmányok egyaránt 20%-os nagyságrendű elterjedtséget mutatnak.

93238-4231 A/O/LZs

P00 04120

Cukorbaj eredetű idegbetegség egy összefoglaló kifejezés, amely idegbetegség klinikai típusainak széles körét foglalja magában, ezek a gócos (egy idegre kiterjedő) és szétterjedő (több idegre kiterjedő) idegbetegségek két fő csoportjába sorolhatók be. A cukorbaj eredetű idegbetegség egyúttal széles fogalom, amely magában foglalja a perifériás, az autonóm és a koponyaidegek cukorbaj által kiváltott elváltozásait. A cukorbaj eredetű idegbetegség osztályozása számos változatot foglal magában, amelyek többek között lehetnek olyan klinikailag eltérő esetek, mint disztális szimmetrikus szenzoros/érző-mozgató (kis vagy nagy kiterjedésű vagy vegyes rostokat érintő), több idegre kiterjedő betegség, rendellenes pupillaműködést magában foglaló autonóm idegbetegség, izzadás, gyomor/bél rendszer működési zavarai (beleértve a gyomor és epe pangását, hasmenést), ivar- és húgyszervi zavarok (közöttük húgyhólyagot érintő és szexuális zavarok), valamint szív- és érrendszeri autonóm idegbetegség. Autonóm idegbetegség megnyilvánulása lehet magas vércukorszint is. Cukorbaj eredetű gócos idegbetegségek többek között az egy idegre kiterjedő idegbetegségek és ezek változatai, az ideggyökbetegségek, az idegfonatgyulladások és a koponya-idegbetegség. A velőállomány csökkenésével járó krónikus gyulladásos ideggyökbetegség lehet gócos vagy szétterjedő. Szimmetrikus, több idegre kiterjedő idegbetegségek a cukorbaj eredetű, több idegre kiterjedő betegség klinikai eseteinek mintegy 90%-át teszik ki. Cukorbaj eredetű, több idegre kiterjedő betegség különösen szimmetrikus érző-mozgató idegekre kiterjedő betegséget foglal magában, amely az alsó végtagok test középpontjától távoli ré

93238-4231/VO/LZs

P00 04120 szeit befolyásolják. Cukorbaj során perifériás szenzoros idegbetegségek lehetnek akut vagy krónikus jellegűek. Több ideget érintő akut betegség gyakran az anyagcsere állapotában fellépő gyors változást követ, kevés klinikai tünettel járó “pozitív” szimptómák dominálása jellemzi, és általában 6-12 hónapon belül megszűnik. Több idegere kiterjedő krónikus betegség tünetei jellegükben hasonlóak a több idegre kiterjedő akut betegségéhez, azonban fellépése - siettető körülmények nélkül - fokozatosabb, általában klinikai tünetekkel jár, és számos éven keresztül tarthat.

Cukorbaj eredetű idegbetegség az érintett idegek típusának megfelelően szimmetrikus vagy aszimmetrikus idegbetegségek csoportjába sorolható be. Az előző csoportba a test középpontjától távoli szenzoros és érző-mozgató idegbetegség, hosszú rostokat és rövid rostokat érintő típusú idegbetegség, test középpontjától távoli, rövid rostokat érintő típusú idegbetegség, inzulin okozta idegbetegség és krónikus gyulladásos, csontvelösorvadásos áttételes ideggyökbetegség (CIDP) tartoznak. Cukorbaj kiváltotta aszimmetrikus idegbetegség többek között: egy idegre kiterjedő betegség, egy idegre kiterjedő betegség több válfaja, ideggyökbetegség, idegfonatbetegség, ideggyök/idegfonat betegség és aszimmetrikus CIDP.

Cukorbaj eredetű klinikai idegbetegség gócos és szétterjedő típusú betegségre osztályozható.

A szétterjedő idegbetegségek:

a) test középponjától távoli, szimmetrikus, több idegre kiterjedő érző-mozgatórendszeri idegbetegség, amelynek alcsoportjai:

93238-4231/VO/LZs

POO 04120

i) elsődleges, rövid rostokat érintő típusú beteség, amely égető fájdalom, bőr túlérzékenység, zsibbadás, nyilalló fájadalom, fájdalom- és hőérzékelés elvesztése, belső fájdalomérzés elvesztése és lábfekélyesedés tünetekkel jelentekezik;

ii) primer, hosszú rostokat érintő típusú idegbetegség, amely rázkódásérzékelés elvesztése, helyzetérzés elvesztése, reflexek elvesztése és az idegrendszerben vezetési sebesség lelassulása tüneteiben jelentkezik; és iii) vegyes változatok; és

b) autonóm idegbetegség, amelynek alcsoportjai:

i) abnormális pupillaműködés;

ii) verejtékezési zavar (abnormális izzadás);

iii) húgy- és ivarszervi zavarok, amelyek húgyhólyag működési zavara és csökkent hólyagérzékenység, akaratlan vizeletürítés és csökkent visszatartás alakjában lép fel;

iv) szexuális zavarok, többek között csökkent ondókilövellés, merevedési zavarok, hiányos nedvesítés (nőknél);

v) gyomor-bélrendszer zavarai, így gyomorparézis, nyelőcső mozgásképességének rendellenessége, epehólyag-ernyedtség, cukorbaj eredetű hasmenés vagy székrekedés; akaratlan székletürítés; vagy vi) magas vércukorszint bizonytalansága (mellékvese eredetű idegbetegség) és

93238-4231/VO/LZs

P00 04120

c) szív-érrendszeri zavarok, többek között kórosan szapora szívműködés, nem megfelelő testmozgás által kiváltott szív-érrendszeri válaszok, szívben be következő idegeltávolítás, hőmérsékletváltozáshoz nem megfelelő alkalmazkodás, káros értágulat, károsodott vénás/arteriális reflextől függő ödéma vagy álló testhelyzet okozta alacsony vérnyomás és

d) magas vércukorszint bizonytalansága.

A gócos idegbetegségek lehetnek: a) egy ideget érintő betegség, b) többfajta egy ideget érintő betegség, c) idegfonatbetegség, d) ideggyökbetegség, e) koponya-idegbetegség és f) végtag-idegbetegség, többek között alsó végtagokon a test középpontjától távoli, cukorbaj eredetű idegbetegség.

Cukorbaj eredetű, több ideget érintő betegség pontos kórokfejlődése még nem tisztázott, és ez majdnem biztosan több tényezőtől függ, amelyek között szerepelhetnek genetikai hajlam, anyagcsere eredetű és érrendszeri zavarok, valamint növekedési faktorok hiánya vagy zavara. A perifériás idegrendszer válasza cukorbajból származó anyagcserezavarokra láthatóan nem tér el 1 és 2 típusú cukorbaj esetén. Ez arra utal, hogy a betegség két primer alakja esetén alkalmazott terápiákra a klinikai válasz hasonló.

Jelenleg a cukorbaj eredetű, több idegre kiterjedő betegség kezelésére vizsgált hatóanyagok egyike sem csillapítja meggyőzően a tüneteket, és jelentős idegtengelyfonal-veszte

93238-4231/VO/LZs

P00 04120 séggel járó, több ideget érintő diagnosztizált betegségből való felépülést egyetlen hatóanyag sem biztosítja. Ennek alapján új, hatásosabb terápiás szerekre van szükség.

A WO 99/54333 dokumentum, valamint a GB 9924041.8 és GB 9924063 szabadalmi bejelentések cukorbaj eredetű perifériás idegbetegség kezelésére helyettesített 5-(3-piridiI)-pirazoIo[4,3-d]pirimidin-7-onokat ismertetnek.

A GB 9924028.5 és GB 0007345.2 dokumentumok helyettesített 2-(3-piridil)-4a,5-dihidroimidazo[5,1 f][ 1, 2,4]triazin-4(3H)-onokat ismertetnek cukorbaj eredetű perifériás idegbetegség kezelésére. A GB 9924020.2 dokumentum helyettesített 2-fenilpurin-6-onokat vagy helyettesített 2-(3-p i ri d i I)-pu ri n-6-onokat ír le cukorbaj eredetű perifériás idegbetegség kezelésére. Ezek a vegyületek cukorbaj eredetű perifériás idegbetegség kezelésére ki vannak zárva a találmány oltalmi köréből.

Fentiek alapján a találmány cGMP PDE5 enzimet gátló anyagok alkalmazása idegbetegség, különösen perifériás diabetikus idegbetegség kezelésére szolgáló gyógyászati készítmény előállítására azzal a megkötéssel, hogy a gátló anyag i) helyettesített 5-(3-piridil)-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-ontól, ii) helyettesített 2-(3-piridil)-4a, 5-d ihi droim idazo[5,1 -f][1,2,4]triazin-4(3H)-ontól vagy iii) helyettesített 2-fenilpurin-6-ontól vagy helyettesített 2-(3-

-p i ri d i I)-p u rí n-6-ont ól eltérő.

Az idegbetegség kifejezés az idegbetegségek fentiekben ismertetett valamennyi változatát magában foglalja. Ezenkívül az idegbetegség kifejezés nem korlátozódik adott kórokú ideg

93238-4231/VO/LZs

P00 04120 betegségre, hanem kiterjed valamennyi ok által kiváltott idegbetegségre, különösen a fentiekben ismertetettekre.

A találmány értelmében történő alkalmazáshoz megfelelő cGMP PDE5 enzimet gátló anyagok többek között:

pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-onok (EP-A-0463756);

pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-onok (EP-A-0526004);

pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-onok (WO 93/06104);

izomer pirazolo[3,4-d]pirimidin-4-onok (WO 93/07149);

kinazolin-4-onok (WO 93/12095);

pirido[3,2-d]pirimidin-4-onok (WO 94/05661);

purin-6-onok (WO 94/00453);

pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-onok (WO 98/49166);

pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-onok (WO 99/54333);

pirazolo[4,3-d]pirimidin-4-onok (EP-A-0995751);

pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-onok (WO 00/24745);

a pirazolo[4,3-d]pirimidin-4-onok (EP-A-0995750); valamint a WO 99/24433 és WO 93/07124 dokumentumokban ismertetett vegyületek, amelyeket hivatkozásunk útján beépítünk a leírásba.

A találmány értelmében történő alkalmazáshoz megfelelő V típusú foszfodieszterázt gátló előnyös anyagok lehetnek:

5-[2-etoxi-5-(4-metil-1 -piperazinilszulfonil)-fenil]-1 -metil-3-n-propil-1,6-dihidro-7H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-on (szíIdénafiI), amelynek másik elnevezése 1 -{[3-(6,7-dihidro-1 -metil-7-oxo-3-propil-1 H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-5-il)-4-etoxifenil]-szulfonil}-4-metilpiperazin (EP-A-0463756); 5-(2-etoxi-5-morfolinoacetilfenil)-1 -metil-3-n-propil-1,6-dihidro-7H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-on (EP-A-0526004);

93238-4231/VO/LZs

P00 04120

3-etil-5-[5-(4-etilpiperazin-1-il-szulfonil)-2-n-propoxifenil]-2-(piridin-2-il)-metil-2,6-dihidro-7H-pirazolo[4,3-d]pi ri midinkön (WO 98/49166);

3-e til-5-[5-(4-etilpipera zin-1 -il-szulfonil)-2-(2-metoxietoxi)-piridin-3-il]-2-(piridin-2-il)-metil-2,6-dihidro-7H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-on (WO 99/54333);

( + )-3-etil-5-[5-(4-etilpiperazin-1 -il-szulfonil)-2-(2-metoxi-1 (R)-metiletoxi)-piridin-3-il]-2-metil-2,6-dihidro-7H-pirazolo(4,3-d]pirimidin-7-on, másik nevén 3-etiI-5-{5-[4-etiIpiperazin-1 -il-szulfonil]-2-([(1 R)-2-metoxi-1 -metiletil]-oxi)-piridin-3-il}-2-metil-2,6-dihidro-7H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-on (WO 99/54333);

5-[2-etoxi-5-(4-etilpiperazin-1 -il-szulfonil)-piridin-3-il]-3-etil-2-[2-metoxietil]-2,6-dihidro-7H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-on, másik nevén 1 -{6-etoxi-5-[3-etiI-6,7-dihidro-2-(2-metoxietil)-7-oxo-2H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-5-il]-3-

-p i ri d i I-szu If ο n i l}-4-et i I p iperaz i n (lásd a továbbiakban az 1. példát);

5-[2-izo-butoxi-5-(4-etilpiperazin-1-il-szulfonil)-piridin-3-il]-3-etil-2-(1 -metilpiperidin-4-il)-2,6-dihidro-7H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-on (2. példa);

5-[2-etoxi-5-(4-etilpiperazin-1 -il-szulfonil)-piridin-3-il]-3-etil-2-fenil-2,6-dihidro-7H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-on (3. példa);

(6R,12aR)-2,3,6,7,12,12a-hexahidro-2-metil-6-(3,4-metiléndioxifenil)-pirazino[2', 1 ’: 6,1 ]pirido[3,4-b]indol-1,4-dione (IC-

-351), vagyis a WO 95/19978 dokumentum 78. és 95. pél-

93238-4231/VO/LZs

POO 04120 dái szerinti vegyületek, továbbá az 1., 3., 7. és 8. példák szerinti vegyületek;

2-[2-etoxi-5-(4-etil-piperazin-1 - i I -1 -szu If ο n i I)-f e n i I ]-5-me t i I -7-propil-3H-imidazo[5,1 -f][ 1,2,4]triazin-4-on (vardenafil), másik nevén 1 -[[3-(3,4-dihidro-5-metil-4oxo-7-propilimidazo[5,1 -f]asz-triazin-2-il)-4-etoxifenil]-szulfonil]-4-etilpiperazin, vagyis a WO 99/24433 dokumentum 19., 20., 336. és 337. példái szerinti vegyület;

a WO 93/07124 dokumentum 11. példája szerinti vegyület; és a Rotella D. P.: J. Med. Chem., 43, 1257 (2000) irodalmi forrás szerinti (3) és (14) képletű vegyületek.

A találmány értelmében történő alkalmazáshoz megfelelő cGMP PDE5 enzimet gátló további anyagok lehetnek: 4-bróm-5-( pirid ilmetilami no)-6-[3-(4-klórfeni l)-propoxi]3(2H )-piridazinon; 1 -{4-[(1,3-benzodioxol-5-il-metil)-amino]-6-klór-2-kinozolinil}-4-piperidin-karbonsav mononátriumsója; ( + )-cisz-5,6a, 7,9,9,9a-hexahidro-2-[4-(trifluorometil)-fenilmetil-5-metil-ciklopent-[4,5]imidazo[2,1 -b]purin-4(3H)-one; furazlocillin; cisz-2-hexil-5-metil-3,4,5,6a,7,8,9,9a-oktahidrociklopent-[4,5]imidazo[2,1 b]purin-4-on; 3-acetiI-1 -(2-klórbenzil)-2-propilindol-6-karboxilát; 3-aceti 1-1 -(2-klórbenzil)-2-propilindol-6-karboxilát; 4-bróm-5-(3-piridilmetilamino)-6-[3-(4-klórfenil)-propoxi]-3-(2H)-piridazinon; 1 -metil-5-(5-morfolinoacetil-2-n-propoxifenil)-3-n-propil-1,6-dihidro-7H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-on, 1 -[4-[(1,3-benzodioxol-5-il-metil)-amino]-6-klór-2-ki nazol i ni l]-4-piperidinkarbonsav mononátriumsója; valamint a következő kereskedelmi nevű vegyületek: Pharmaprojects No. 4516 (Glaxo

93238-4231/VO/LZs

P00 04120

Wellcome); Pharmaprojects No. 5051 (Bayer); Pharmaprojects No. 5064 (Kiowa Hakko; WO 96/26940); Pharmaprojects No. 5069 (Schering Plough); GF-196960 (Glaxo Wellcome); E-8010 és E-4010 (Eisai); Bay-38-3045 & 38-9456 (Bayer) és Sch-51866.

A cGMP PDE5 enzimet gátló bármely anyag alkalmasságát könnyen meghatározhatjuk hatásosságának és szelektivitásának vizsgálata útján, amelyhez szakirodalomból ismert eljárásokat használunk, ennek során a gyógyszerészeti gyakorlatban szokásos módszerekkel vizsgáljuk a hatóanyag toxicitását, felszívódását, viselkedését az anyagcsere során, valamint farmakokinetikai tulajdonságait.

A cGMP PDE5 enzimet gátló anyagok IC₅₀-értéke előnyösen legfeljebb 100 nmol/l, előnyösebben legfeljebb 50 nmol/l, még előnyösebben legfeljebb 10 nmol/l.

A cGMP PDE5 enzimet gátló anyagok IC₅₀-értékét meghatározhatjuk szakirodalomból ismert eljárással (EP-0 463 756-B1 és EP-0 526 004-A1).

A találmány értelmében alkalmazott cGMP PDE5 enzimet gátló anyagok előnyösen szelektívek a PDE5 enzimre nézve. E hatóanyagok előnyösen szelektívek PDE3 enzim tekintetében, még előnyösebben szelektívek PDE3 és PDE4 enzimek tekintetében. A találmány értelmében alkalmazott cGMP PDE5 enzimet gátló anyagok szelektivitási aránya PDE3 és előnyösebben PDE3 és PDE4 enzimre vonatkozóan nagyobb, mint 100, előnyösen nagyobb, mint 300.

Szelektivitási arányt szakember könnyen meghatározhat. A PDE3 és PDE4 enzimre vonatkozó IC₅₀-értékeket meghatároz

93238-4231/VO/LZs

P00 04120 hatjuk szakirodalomból ismert eljárással [S. A. Ballard és munkatársai: Journal of Urology, 159, 2164-2171, (1998)].

A cGMP PDE5 enzimet gátló anyagok, így szildenafil meglepő módon alkalmazhatók idegbetegség szisztémás kezelésére, ennek során előnyös az orális beadás.

A cGMP PDE5 enzimet gátló anyagokat beadhatjuk egyedül, azonban a humán gyógyászatban általában gyógyszerészetileg alkalmas kötőanyaggal vagy hordozóval hígítva adjuk be, amelyet a tervezett beadási módtól függően és a szokásos gyógyszerészeti gyakorlatnak megfelelően választunk meg.

így cGMP PDE5 enzimet gátló anyagokat beadhatunk orálisan, bukkálisan vagy szublinguálisan tabletta, kapszula, elixir, oldat vagy szuszpenzió alakjában, amelyek tartalmazhatnak ízesítő- vagy színezőanyagokat, és lehetnek azonnali, késleltetett, módosított vagy szabályozott hatóanyag-leadású készítmények.

Ilyen tabletták tartalmazhatnak kötőanyagokat, amelyek lehetnek mikrokristályos cellulóz, laktóz, nátrium-citrát, kalcium-karbonát, kalcium-hidrogén-foszfát és glicin, szétesést elősegítő anyagokat, így keményítőt (előnyösen kukorica-, burgonya- vagy tápiókakeményítőt), nátrium-keményítő-glikolátot, kroszkarmellóz-nátriumot és bizonyos komplex szilikátokat, továbbá granulálási kötőanyagokat, amelyek lehetnek poli(vinil-p írről időn), h i d rox i-p rop i I-met i I-ce 11 u I óz, hidroxi-propi (-cellulóz, szacharóz, zselatin és akácmézga. A tabletták ezenkívül tartalmazhatnak csúsztatószereket, amelyek többek között lehetnek magnézium-sztearát, sztearinsav, gliceril-behenát és talkum.

93238-4231/VO/LZs

P00 04120

Hasonló típusú szilárd készítményeket alkalmazhatunk zselatinkapszulákban lévő töltetként is. E tekintetben előnyös kötőanyagok többek között laktóz, keményítő, cellulóz, tejcukor vagy nagy molekulatömegei poIietiIéngIikolok. Vizes szuszpenziók és/vagy elixírek esetén a találmány szerinti cGMP PDE5 enzimet gátló anyagokat kombinálhatjuk különböző édesítővagy illatosítószerekkel, színezőanyagokkal vagy színezékekkel, emulgeáló- és/vagy szuszpendálőszerekkel, valamint hígítókkal, amelyek lehetnek víz, etanol, propilénglikol és glicerin, továbbá ezek elegyei.

A cGMP PDE5 enzimet gátló anyagok parenterálisan, így intravénásán, intraarteriálisan, intraperitoneálisan, intramuszkulárisan vagy szubkután is beadhatók, vagy pedig alkalmazhatók infúziós eljárásokhoz. Ilyen parenterális beadáshoz e hatóanyagokat legcélszerűbben steril vizes oldat alakjában használjuk, amely tartalmazhat egyéb anyagokat, így elegendő sót vagy glükózt ahhoz, hogy az oldat vérhez viszonyítva izotóniás legyen. A vizes oldatokat szükség esetén pufferoljuk (előnyösen a 3-9 pH-tartományban). Alkalmas parenterális készítményeket steril viszonyok között könnyen előállíthatunk szakember számráa ismert szokásos gyógyszerészeti eljárásokkal.

A cGMP PDE5 enzimet gátló anyag adagolása ilyen készítményekben függ annak hatásosságától, általában azonban az 1-500 mg tartományban van napi legfeljebb 3 alkalommal történő beadáshoz. Humán betegeknek orális és parenterális beadáshoz a cGMP PDE5 enzimet gátló anyag napi adagja szokásosan 5-500 mg (egyetlen vagy több részletre osztott dó93238-4231/VO/LZs

P00 04120

zisban). Szildenafil esetén előnyös a 10-100 mg dózis, amelyet naponta legfeljebb 3 alkalommal adhatunk be. A kezelőorvos által felírt pontos dózis azonban függ a beteg korától és testtömegétől, valamint a tünetek súlyosságától.

A cGMP PDE5 enzimet gátló anyagot tartalmazó tabletta vagy kapszula így 5-250 mg (alkalmasan 10-100 mg) hatóanyagot tartalmaz egyetlen vagy 2 vagy több egységadagban való beadáshoz. A tényleges - az egyes betegeknek legmegfelelőbb - adagolást minden esetben a kezelőorvos határozza meg, amely az adott beteg korától, testtömegétől és reakciójától függ. A fentiekben említett adagolások átlagos esetekre vonatkozó példák. Természetesen lehetnek egyedi esetek, amikor nagyobb vagy kisebb adagolási tartomány indokolt, és ezek az esetek is a találmány oltalmi körébe tartoznak.

A cGMP PDE5 enzimet gátló anyagok beadhatók intranazálisan vagy inhalálás útján is, ilyen esetben alkalmasan száraz port tartalmazó inhalálóberendezésből vagy aeroszol permetet szolgáltató, nyomás alatti tartályból, szivattyús tartályból permet vagy köd alakjában adagolhatok, ehhez alkalmas hajtógázt használunk, amely lehet diklórdifluormetán, diklórfluormetán, diklórtetrafluoretán, hidrofiuoralkán, így 1,1,1,2-tetraf I uoretán vagy 1,1,1,2,3,3,3-heptafluorpropán, szén-dioxid vagy egyéb alkalmas gáz. Túlnyomásos aeroszol esetén az adagolási egységet meghatározhatjuk mért mennyiséget adagoló szelep útján. A túlnyomásos tartály, szivattyú, porlasztó vagy ködképző berendezés tartalmazhatja cGMP PDE5 enzimet gátló anyag oldatát vagy szuszpenzióját, így oldószerként alkalmazhatjuk etanol és a hajtógáz elegyét, amely ezenkívül tartalmaz93238-4231 A/O/LZs

P00 04120 hat csúsztatószert, így szorbitántrioleátot. Inhaláló- vagy befúvóberendezésekben használt (többek között zselatinból készített) kapszulákat és patronokat előállíthatunk úgy, hogy a cGMP PDE5 enzimet gátló anyag és alkalmas alappor, így laktóz vagy keményítő porelegyét tartalmazzák.

Aeroszol vagy száraz por formálások előnyösen úgy vannak megoldva, hogy az egyes kiadagolt dózisok vagy „kifúvott adagok” a betegnek továbbítandó 1-50 mg cGMP PDE5 enzimet gátló anyagot tartalmaznak.

Aeroszollal beadott bruttó napi dózis az 1-50 mg tartományban van, amelyet beadhatunk egyetlen dózisban vagy szokásosabban - a nap folyamán több dózisra osztva.

További lehetőségként cGMP PDE5 enzimet gátló anyagok beadhatók kúp vagy pesszárium alakjában is.

A cGMP PDE5 enzimet gátló anyagot beadhatjuk helyileg is gél, hidrogél, lemosó oldat, oldat, krém, kenőcs vagy porzásra használt por alakjában is. A cGMP PDE5 enzimet gátló anyagot beadhatjuk dermálisan vagy transzdermálisan is, így bőrre használt tapaszként alkalmazva.

A bőrön történő helyi alkalmazáshoz a cGMP PDE5 enzimet gátló anyagokat formálhatjuk alkalmas kenőcsként, amely a gátló anyagot szuszpendálva vagy oldva tartalmazza többek között a következő anyagok egyikében vagy azok elegyében: ásványolaj, folyékony vazelin, fehér vazelin, propilénglikol, poli (ox i et i I én )/po I i (ox i p ro p i I é n) vegyület, emulgeáló viasz és víz. A találmány szerinti hatóanyagokat formálhatjuk továbbá alkalmas lemosó oldat vagy krém alakjában, ahol azok szuszpendált vagy oldott alakban vannak a következő anyagok egyi

93238-4231/VO/LZs

P00 04120 kében vagy azok elegyében: ásványolaj, szorbitán-monosztearát, polietilénglikol, folyékony paraffin, poliszorbát 60 kereskedelmi nevű termék, cetilészter-viasz, cetearil-alkohol, 2-oktildodekanol, benzil-alkohol és víz.

A cGMP PDE5 enzimet gátló anyagokat ciklodextrinnel együtt is használhatjuk. Ciklodextrinek hatóanyag-molekulákkal ismeretesen zárványkomplexeket és nem zárvány típusú komplexeket képeznek. Hatóanyag/ciklodextrin komplexek képzése módosíthatja hatóanyag-molekula oldhatóságát, oldódási sebességét, biológiai hozzáférhetőségét, és/vagy stabilitási tulajdonságait. Hatóanyag/ciklodextrin komplexek általában a legtöbb adagolási forma és beadási mód esetén hasznosak. A hatóanyaggal lejátszódó közvetlen komplexképzés helyett a ciklodextrin alkalmazható segédanyagként, így hordozóként, hígítóként vagy szolubilizáló anyagként. Általánosan használatosak α-, β- és γ-ciklodextrinek, amelyekre alkalmas példákat a szakirodalom ismertet (WO 91/11172, WO 94/02518 és WO 98/55148).

Humán betegek esetén a cGMP PDE5 enzimet gátló anyagok előnyös beadási módja az orális beadás, minthogy ez a legkényelmesebb. Amennyiben a beteg nyelési rendellenességben szenved, vagy orális beadás után a hatóanyag felszívódása elégtelen, a hatóanyag beadható parenterálisan, szublinguálisan vagy bukkálisan.

A cGMP PDE5 enzimet gátló anyagokat beadhatjuk egyéb hatóanyagokkal kombinálva is. Előnyös hatóanyagok: (pitvari natriuretikus peptidekként is ismert) vegyületek, amelyek modulálják pitvari natriuretikus faktor hatását, így semleges

93238-4231/VO/LZs

P00 04120 endopeptidázt gátló anyagok; angiotenzint konvertáló enzimet gátló vegyületek, így enalapril, valamint angiotenzint konvertáló enzimet és semleges endopeptidázt gátló kombinált anyagok, így omapatrilát; angiotenzin receptor antagonisták, így lezártán; NO-szintáz szubsztrátumai, így L-arginin; kalciumcsatorna-blokkolók, így amlopidin; endotelin receptor antagonisták és endotelint konvertáló enzimet gátló anyagok; koleszterinkoncentrációt csökkentő anyagok, így sztatin és fibrát; trombocitaromboló és trombocitaellenes szerek, többek között tPA, uPA, warfarin, hidrudin és egyéb trombininhibitorok, heparin, tromboplasztint aktiváló faktort gátló anyagok; inzulinérzékenyítő szerek, így rezulin és magas vércukorszint esetén alkalmazott szerek, így glipizid; L-DOPA és karbidopa; acetilkolineszterázt gátló anyagok, így donezipil vagy szteroidál; C0X2 gátló anyagok; pregabalén; gabapentén; triciklusos depressziógátló anyagok, így amitriptilin; nem szteroid gyulladásgátló szerek, és angiotenzint konvertáló enzimet (ACE) gátló anyagok, így kvinapril. Előnyösebb hatóanyagok: angiotenzint konvertáló enzimet gátló vegyületek; angiotenzin receptor antagonisták; endotelin receptorok NO-szintáz antagonistái számára szubsztrátumok és endotelint konvertáló enzimet gátló anyagok; koleszterinkoncentrációt csökkentő anyagok; valamint inzulinérzékenyítö szerek és magas vércukorszint esetén alkalmazott hatóanyagok, különösen inzulinérzékenyítö szerek és magas vércukorszint esetén alkalmazott hatóanyagok.

93238-4231/VO/LZs

P00 04120

Megjegyezzük, hogy a találmány gyógyító, enyhítő és megelőző kezelésre szolgáló gyógyászati készítmények előállítására egyaránt vonatkozik.

A következőkben a találmányt nem korlátozó értelmű példákkal szemléltetjük. Hatóanyag cGMP PDE5 enzimet gátló anyagot jelent.

1. formálás

Tablettát állítunk elő a következő alkotórészekből: 50 mg szíIdenafil-citrátot keverünk össze (mikrokristályos) cellulózzal, szilícium-dioxiddal, (habosított) sztearinsavval, majd az elegyet formában tablettává sajtoljuk.

2. formálás

Intravénás formálást állítunk elő 100 mg hatóanyagot 1000 ml izotóniás sóoldattal elegyítve.

A cGMP PDE5 enzimet gátló anyagok hatásosságát humán betegek idegbetegségének kezelése során a következő klinikai kísérlettel szemléltetjük.

A vizsgálatot szildenafil alkalmazásával folytatjuk le, nyilvánvaló azonban, hogy a vizsgálat lefolytatható egyéb cGMP PDE5 enzimet gátló anyagokkal, így a fentiekben felsorolt egy vagy több előnyös cGMP PDE5 enzimet gátló anyaggal.

Cukorbaj okozta idegbetegség pozitív tüneteit mutató férfiakat választunk ki a vizsgálathoz. A háttéradatok meghatározásához a betegeket 7-napos kezelésmentes szakaszban készítjük elő a vizsgálathoz, ennek során fájdalommeghatározás különböző módszereit alkalmazzuk, ezek többek között a fájdalom okozta gyengélkedési index (PDI; Tait és munkatársai: 1990-ben közölt módszerének adaptációjával), a fájdalom pont

93238-4231 Λ/0/LZs

P00 04120 száma a vizuális analóg skálán (VAS) és a fájdalomcsillapodás szóbeli meghatározása. A betegeket ekkor 10 napon keresztül éjszakánként 50 mg szildenafil vagy placebo beadásával kezeljük, majd közvetlenül e kezelési időszak után újra meghatározzuk a betegek fájdalmának fokát. Ezután 10-napos kimosási periódust iktatunk be, amikor a betegek nem részesülnek kezelésben. Ezt követően mindegyik beteget a másik típusú kezelésben részesítjük (vagyis ha az első kezelésben hatóanyagot kaptak, akkor most placebót kapnak és viszont) további 10 napon keresztül éjszakánként. Ezt követően ismét meghatározzuk a betegek fájdalmának fokát.

A fájdalom okozta gyengélkedési indexet (PDI) betegek által kitöltött kérdőív útján határozzuk meg, és a fájdalom átlagos mértékét (O-tól 10-ig terjedő skálán) szokásos napi tevékenységekkel összefüggésben (így otthoni/családi kötelezettségek, kikapcsolódás, társadalmi tevékenység, munkavégzés, önellátás, alvás kapcsán). Minthogy cukorbaj okozta idegbetegséggel járó fájdalom gyakran éjszaka a legnagyobb mértékű, PDI meghatározását ennek kifejezésére módosítjuk.

A fájdalom pontszámát vizuális analóg skálán (VAS) a beteg tünteti fel 0 (fájdalommentes) és 100 (a lehető legnagyobb fájdalom) között lévő folytonos vonalon a vizsgálati időszakban érzékelt átlagos fájdalomérzetnek megfelelően. A fájdalom három kategóriába van besorolva: felszíni fájdalom (égető érzés, zsibbadás), mély fájdalom (tűszúrások, villanyozás során fellépő fájdalomhoz hasonló fájdalom, zsibbadság okozta fájdalom) és izomfájdalom (mély fájdalom, fogfájásszerű fájdalom, görcsök).

93238-4231/VO/LZs

POO 04120

A fájdalom csillapodásának szóbeli meghatározását a beteg végzi el oly módon, hogy O-től 6-ig terjedő skálán a kezelés előtti háttérhez viszonyítva megadja az utolsó 10 napon keresztül érzett fájdalomcsillapodás átlagos értékét.

Az eredmények számos betegben az érzékelt fájdalom fokának csökkenését szemléltetik, ami igazolja cGMP PDE5 enzimet gátló anyagok hasznosságát e tekintetben.

Ezenkívül cukorbaj eredetű, több idegre kiterjedő betegségben szenvedő betegek egyetlen 50 mg dózisú szildenafil bevétele után a fájdalmas tünetek csillapodásáról számolnak be.

1. példa

2-(Metoxi-etil)-5-[2-etoxi-5-(4-etilpiperazin-1-il-szulfonil)-piridin-3-il]-3-etil-2,6-dihidro-7H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-on, az (1) képletű vegyület előállítása

Alábbi i) lépés szerinti 0,75 mmol termék, 298 mg (1,50 mmol) kálium-bisz(trimetilszilil)-amid és 73 μΙ (0,75 mmol) etil-acetát 10 ml etanolban lévő elegyét lezárt edényben 12 órán át 120 °C hőmérsékletre melegítjük. A lehűlt elegyet etil-acetát és vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldat között megosztjuk, majd a fázisokat elválasztjuk. A szerves fázist vízmentes MgSO₄ felett szárítjuk, majd csökkentett nyomáson betöményítjük. A nyers terméket szilikagélen lefolytatott oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, ennek során eluálószerként metilén-diklorid és metanol 98:2 térfogatarányú elegyét használva 164 mg cím szerinti vegyületet kapunk.

Elemanalízis a C₂₃H₃₃N₇O₅S 0,20C2H₅CO2CH₃ összegképletre:

93238-4231 A/O/LZs

P00 04120

	C%	H%	N%
számított:	53,21	6,49	18,25
mért:	53,18	6,48	18,14

CDCI₃: δ 1,04 (3H, t), 1,40 (3H, t), 1,58 (3H, t), 2,41 (2H, q) 2,57 (4H, m), 3,08 (2H, q), 3,14 (4H, m), 3,30 (3H, s), 3,92 (2H, t), 4,46 (2H, t), 4,75 (2H, q), 8,62 (1H, d), 9,04 (1H, d), 10,61 (1 H, s);

LRMS: m/z 520 (M + 1)⁺;

olvadáspont: 161-162 °C.

Kiindulási anyagok előállítása

a) Piridin-2-amino-5-szulfonsav, az (1a) képletű vegyület előállítása g (0,85 mól) 2-aminopiridint 30 perc alatt részletekben 320 g füstölgő kénsavhoz adunk, és a kapott oldatot 4 órán át 140 °C hőmérsékletre melegítjük. Lehűtés után a reakcióelegyet 200 g jéghez öntjük, és az elegyet további 2 órán át jég/só elegyét tartalmazó fürdőben keverjük. A kapott szuszpenziót szűrjük, a szilárd anyagot 200 ml jeges vízzel és 200 ml hideg IMS-sel mossuk, ezt követően elszívás alatt szárítva szilárd anyagként 111,3 g cím szerinti vegyületet kapunk. LRMS: m/z 175 (M + 1)⁺.

b) Piridin-2-amino-3-bróm-5-szulfonsav, az (1b) képletű vegyület előállítása

108 g (0,62 mól) fenti a) lépés szerinti termék 600 ml vízben készített forró oldatához 1 órán át cseppenként 99 g (0,62 mól) brómot adagolunk, ezáltal az elegyet visszacsepegő hűtő alatt állandóan forrásban tartjuk. Az adagolás befejeztével a reakcióelegyet lehűtjük, és a kapott elegyet szűrjük. A

93238-4231/VO/LZs

P00 04120 szilárd anyagot vízzel mossuk, majd elszívás alatt szárítva 53,4 g cím szerinti vegyületet kapunk.

(DMSOd₆, 300 MHz): δ 8,08 (1H, s), 8,14 (1H, s); LRMS: m/z 253 (M) ⁺ .

c) Piridin-3-bróm-2-klór-5-szulfonil-klorid, az (1c) képletű vegyület előállítása

7,6 g (110,0 mmol) nátrium-nitrit 30 ml vízben készített oldatát cseppenként 25,3 g (100,0 mmol) fenti b) lépés szerinti termék 115 ml 20 tömeg%-os vizes sósavoldatban lévő, jéggel hűtött oldatához adjuk, miközben az oldat hőmérsékletét 6 °C-nál alacsonyabb értéken tartjuk. A reakcióelegyet 30 percen át 0 °C, majd további 1 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet csökkentett nyomáson betöményítjük, majd a maradékot vákuumban 72 órán át 70 °C hőmérsékleten szárítjuk. A kapott szilárd anyag, 30,0 g (144 mmol) foszfor(V)-klorid és 1 ml (10,8 mmol) foszforil-klorid elegyét 3 órán át 125 °C hőmérsékletre melegítjük, majd lehűtjük. A reakcióelegyet 100 g jéghez öntjük, majd a kapott szilárd anyagot szűrjük és vízzel mossuk. A terméket metilén-dikloridban oldjuk, vízmentes MgSO₄ felett szárítjuk, majd csökkentett nyomáson betöményítve sárga színű szilárd anyagként 26,58 g cím szerinti vegyületet kapunk.

(CDCIs, 300 MHz): δ 8,46 (1H, s), 8,92 (1H, s).

d) 3-Bróm-2-klór-5-(4-etilpiperazin-1 -i I-szulfonilj-piridin, az (1d) képletű vegyület előállítása

11,3 ml (89,0 mmol) 1-etilpiperazin és 12,5 ml (89,0 mmol) trietil-amin 150 ml metilén-dikloridban lévő oldatát 23,0 g (79,0 mmol) fenti c) lépés szerinti termék 150 ml metilén-dikloridban

93238-4231 Λ/0/LZs

P00 04120 lévő, jéggel hűtött oldatához csepegtetjük, és a reakcióelegyet 1 órán át 0 °C hőmérsékleten keverjük. Ezután a reakcióelegyet csökkentett nyomáson betöményítjük, majd a kapott barna színű olajat szilikagélen lefolytatott oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, az alkalmazott gradienselúciós eljárás során a metilén-diklorid és metanol térfogatarányát 99:1-ről 97:3-ra változtatva narancsszínű szilárd anyagként 14,5 g cím szerinti vegyületet kapunk.

(CDCI₃, 300 MHz): δ 1,05 (3H, t), 2,42 (2H, q), 2,55 (4H, m), 3,12 (4H, m), 8,24 (1H, s), 8,67 (1H, s).

e) 3-Bróm-2-etoxi-5-(4-etilpiperazin-1 -il-szulfonil)-piridin, az (1e) képletű vegyület előállítása

6,60 g (17,9 mmol) d) lépés szerinti termék és 6,09 g (89,55 mmol) nátrium-etoxid 100 ml etanolban lévő elegyét 18 órán át visszacsepegö hűtő alatt forraljuk, majd lehűtjük. A reakcióelegyet csökkentett nyomáson betöményítjük, a maradékot 100 ml víz és 100 ml etil-acetát között megosztjuk, és a fázisokat elválasztjuk. A vizes fázist 2 x 100 ml etil-acetáttal extraháljuk, az egyesített szerves fázist vízmentes MgSO₄ felett szántjuk, és csökkentett nyomáson betöményítve barna színű szilárd anyagként 6,41 g cím szerinti vegyületet kapunk.

Elemanalízis	a C13H20θfN3O3	összegképletre;
	C%	H% N%
számított:	41,35	5,28 10,99
mért:	41,27	5,33 11,11

CDCI₃, 300 MHz: δ 1,06 (3H, t), 1,48 (3H, t), 2,42 (2H, q), 2,56 (4H, m), 3,09 (4H, m), 4,54 (2H, q), 8,10 (1H, s), 8,46 (1H, s);

93238-4231/VO/LZs

P00 04120

LRMS: m/z 378, 380 (M + 1) ⁺ .

f) Piridin-2-etoxi-5-(4-eti I pi perazin-1 -i I-szulf on i I )-3-karbonsav-etil-észter, az (1 f) képletű vegyület előállítása

6,40 g (16,92 mmol) e) lépés szerinti termék, 12 ml (86,1 mmol) trietil-amin és palládium(0)-trisz(trifenilfoszfin) 60 ml etanolban lévő elegyét szén-monoxid-atmoszféra alatt 100 °C hőmérsékleten és 1,378 MPa nyomáson 18 órán át melegítjük, majd lehűtjük. A reakcióelegyet csökkentett nyomáson betöményítjük, és a maradékot szilikagélen lefolytatott oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, a gradienselúciós eljárás során alkalmazott metilén-diklorid és metanol térfogataránya 100:0 és 97:3 között változik, így narancssárga olajként 6,2 g cím szerinti vegyületet kapunk.

CDCI₃, 300 MHz: δ 1,02 (3H, t), 1,39 (3H, t), 1,45 (3H, t), 2,40 (2H, q), 2,54 (4H, m), 3,08 (4H, m), 4,38 (2H, q), 4,55 (2H, q), 8,37 (1H, s), 8,62 (1H, s);

LRMS: m/z 372 (M + 1) ⁺ .

g) Piridin-2-etoxi-5-(4-etilpiperazin-1 -il-szulfonil)-3-karbonsav, az (1 g) képletű vegyület előállítása

4,96 g (13,35 mmol) f) lépés szerinti termék és 25 ml 2 mol/l koncentrációjú vizes nátrium-hidroxid-oldat (50,0 mmol) 25 ml etanolban lévő elegyét szobahőmérsékleten 2 órán át keverjük. A reakcióelegyet csökkentett nyomáson térfogatának felére betöményítjük, dietil-éterrel mossuk, és 4 mol/l koncentrációjú sósavoldattal pH=5 értékig megsavanyítjuk. A vizes oldatot 3 x 30 ml metilén-dikloriddal extraháljuk, az egyesített szerves extraktumot vízmentes MgSO₄ felett szárítjuk, majd

93238-4231/VO/LZs

P00 04120 csökkentett nyomáson betöményítve cserszínú szilárd anyagként 4,02 g cím szerinti vegyületet kapunk.

(DMSOdg, 300 MHz): δ 1,18 (3H, t), 1,37 (3H, t), 3,08 (2H, q), 3,17-3,35 (8H, m), 4,52 (2H, q), 8,30 (1H, s), 8,70 (1H, s).

h) 4-[2-Etoxi-5-(4-etilpiperazín-1 -il-szulfonil)-piridin-3-il-karboxamido]-1 H-3-etilpirazol-5-karboxamid, az (1 h) képletű vegyület előállítása

9,2 g (59,8 mmol) 3-etil-1 H-pirazol-5-karboxamid (WO 98/49166) 60 ml N,N-dimetilformamidban készített oldatát 21,7 g (62,9 mmol) g) lépés szerinti termék, 10,1 g (66,0 mmol) 1-hidroxibenzotriazol-hidrát és 13,15 ml (94,3 mmol) trietil-amin 240 ml metilén-dikloridban lévő oldatához adjuk. 13,26 g (69,2 mmol) 1 -(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimid-hidroklorid hozzáadása után a reakcióelegyet 6 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A metilén-dikloridot csökkentett nyomáson eltávolítjuk, a visszamaradó oldatot 400 ml etil-acetáthoz öntjük, és a kapott elegyet 400 ml vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal mossuk. A kapott kristályos csapadékot szűrjük, etil-acetáttal mossuk, majd vákuumban szárítva fehér színű porként 22 g cím szerinti vegyületet kapunk.

(CDCI₃ + 1 csepp DMSOd₆): δ 0,96 (3H, t), 1,18 (3H, t), 1,50 (3H, t), 2,25-2,56 (6H, m), 2,84 (2H, q), 3,00 (4H, m), 4,70 (2H, q), 5,60 (1H, széles s), 6,78 (1H, széles s), 8,56 (1H, d), 8,76 (1H, d), 10,59 (1H, s), 12,10-12,30 (1H, s);

LRMS: m/z 480 (M + 1) ⁺ .

i) 2-Metoxietil-4-[2-etoxi-5-(4-etilpiperazin-1-il-szulfonil)-piridin-3-il-karboxamido]-3-etilpirázol-5-karboxamid, az (1i) képletű vegyület előállítása

93238-4231/VO/LZs

POO 04120

750 mg (1,56 mmol) h) lépés szerinti termék és 1,12 g (3,44 mmol) cézium-karbonát 15 ml N, N-dimetilformamidban lévő oldatához 1,72 mmol 1 -bróm-2-metoxietánt adunk, és a reakcióelegyet 18 órán át 60 °C hőmérsékleten keverjük. A lehűlt elegyet víz és etil-acetát között megosztjuk, majd a fázisokat elválasztjuk egymástól. A szerves fázist (vízmentes MgSO₄ felett) szárítjuk, csökkentett nyomáson betöményítjük, majd toluollal azeotropdesztillációt végezve szilárd anyagot kapunk. Ezt a terméket éterből átkristályosítva fehér színű szilárd anyagként kapjuk a cím szerinti vegyületet.

2. példa

5-[2-izo-Butoxi-5-(4-etilpiperazin-2-il-szulfonil)-piridin-3-il]-3-eti 1-2-(1 -metilpi peridin-4-il)-2,6-di hidro-7H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-on, a (2) képletű vegyület előállítása mg (0,156 mmol) alábbi b) lépés szerinti termék, 156 mg (0,78 mmol) káIium-bisz(trimetiIsziIiI)-amid és 14 mg (0,156 mmol) etil-acetát 12 ml izopropanolban lévő elegyét lezárt edényben 6 órán át 130 °C hőmérsékleten keverjük. A lehűlt reakcióelegyet nátrium-hidrogén-karbonát 60 ml telített vizes oldatához öntjük, majd 60 ml etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves extraktumot vízmentes MgSO₄ felett szárítjuk, majd csökkentett nyomáson betöményítve gyantát kapunk. A nyers terméket szilikagéllel töltött oszlopon lefolytatott kromatográfiás eljárással tisztítjuk, ennek során metilén-diklorid, metanol és 0,88-as telítettségű ammóniaoldat 92,6:6,6:0,6 térfogatarányú elegyét használva krémszínű habként 36 mg cím szerinti vegyületet kapunk.

93238-4231/VO/LZs

P00 04120 (CDCI₃): δ 1,01 (3H, t), 1,12 (6H, d), 1,39 (3H, t), 1,94 (2H, m), 2,15 (2H, m), 2,22-2,44 (6H, m), 2,55 (6H, m), 3,02 (4H, m), 3,14 (4H, m), 4,22 (1 H, m), 4,43 (2H, d), 8,60 (1H, d), 9,00 (1 H, d), 10,54 (1 H, s).

A kiindulási anyagok előállítása

a) 2-(1-terc-Butoxikarbonilpiperidin-4-íl)-4-[2-etoxi-5-(4-eti I pi perazi n-1 -il-szulfonil)-piridin-3-il-karboxamido]-3-etilpirazol-5-karboxamid, a (2a) képletű vegyület előállítása

1,46 mmol 1. példa h) lépés szerinti termék 10 ml tetrahidrofuránban lévő oldatához (ásványolajban készített 60 tömeg%-os diszperzió alakjában) 64 mg (1,6 mmol) nátrium-hidridet adunk, és az oldatot 10 percen át keverjük. Az elegyhez 1,60 mmol terc-búti 1-4-[(méti Iszu Ifoni I )-oxt]-1 -piperidinkarboxi látót (WO 93/19059) adunk, majd a reakcióelegyet 3 napon át 60 °C hőmérsékleten keverjük. A lehűlt elegyet etil-acetát és nátrium-hidrogén-karbonát telített vizes oldata között megosztjuk, és a fázisokat elválasztjuk egymástól. A vizes fázist etil-acetáttal extraháljuk, az egyesített szerves fázist (vízmentes MgSO₄ felett) szárítjuk, majd csökkentett nyomáson betöményítjük. A maradékot szilikagéllel töltött oszlopon lefolytatott kromatográfiás eljárással tisztítjuk, ennek során eluálószerként metilén-diklorid és metanol (98:2 térfogatarányú) elegyét használva fehér színű habként 310 mg cím szerinti vegyületet kapunk.

(CDCI₃): δ 1,02 (3H, t), 1,23 (3H, t), 1,49 (9H, s), 1,57 (3H, m), 1,93 (2H, m), 2,16 (2H, m), 2,40 (2H, q), 2,54 (4H, m), 2,82-2,97 (4H, m), 3,10 (4H, m), 4,30 (3H, m), 4,79 (2H, q), 5,23 (1H, s), 6,65 (1H, s), 8,63 (1H, d), 8,82 (1H, d), 10,57 (1H, s).

93238-4231/VO/LZs

P00 04120

b) 4-[2-Etoxi-5-(4-etilpiperazin-1-il-szulfonil)-piridin-3-il-karboxamido]-3-etil-2-(1-metilpiperidin-4-il)-pirazol-5-karboxamid, a (2b) képletű vegyület előállítása

320 mg (0,48 mmol) fenti a) lépés szerinti termék 2 ml diklórmetánban lévő oldatához 1,5 ml trifluorecetsavat adunk, és az oldatot szobahőmérsékleten 2,5 órán át keverjük. A reakcióelegyet csökkentett nyomáson betöményítjük, és a maradékot dietil-éterrel alaposan elkeverve és vákuum alatt szárítva fehér színű szilárd anyagot kapunk. Az amin köztitermék 8 ml metilén-dikloridban készített oldatához 217 pl (37 tömeg%-os vizes, 2,90 mmol) formaldehidet adunk, és az oldatot 30 percen át intenzíven keverjük. Az oldathoz 88 μΙ (1,69 mmol) ecetsavat adunk, és a keverést további 30 percen át folytatjuk, a reakcióelegyhez 169 mg (0,80 mmol) nátrium-[triacetoxi-hidrido-borát(11l)]-ot adunk, majd 16 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldathoz öntjük és etil-acetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves extraktumot vízmentes MgSO₄ felett szárítjuk, majd csökkentett nyomáson betöményítjük. A kapott maradékot szilikagéllel töltött oszlopon lefolytatott kromatográfiás eljárással tisztítjuk, ennek során eluálószerként metilén-diklorid, metanol és 0,88-as telítettségű ammóniaoldat 91,75:7,5:0,75 térfogatarányú elegyét használva 70 mg cím szerinti vegyületet kapunk.

(CDCI₃): δ 1,02 (3H, t), 1,22 (3H, t), 1,58 (3H, t), 1,92 (2H, m), 2,14 (2H, m), 2,25-2,45 (7H, m), 2,54 (4H, m), 2,91 (2H, q), 2,99-3,16 (6H, m), 4,08 (1H, m), 4,78 (2H, q), 5,11 (1H, széles s), 6,65 (1H, széles s), 8,63 (1 H, d), 8,83 (1H, d), 10,53 (1H, s).

93238-4231/VO/LZs

P00 04120

3. példa

5-[2-Etoxi-5-(4-etilpiperazin-1-il-szulfonil)-piridin-3-il]-3-etil-2-fenil-2,6-dihidro-7H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-on, a (3) képletű vegyület előállítása

250 mg (0,54 mmol) alábbi a) lépés szerinti termék, 145 mg (0,72 mmol) réz(ll)-acetát-monohidrát, 132 mg (1,08 mmol) benzol-bórsav és 392 mg 0,4 nm-es molekulaszűrő 5 ml metilén-dikloridban lévő elegyéhez 0,1 ml (1,08 mmol) piridint adunk, és a reakcióelegyet 4 napon át szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet szűrjük, és a szűrletet csökkentett nyomáson betöményítjük. A nyers terméket sziIikagélIeI töltött oszlopon lefolytatott kromatográfiás eljárással tisztítjuk, ennek során eiuálószerként metilén-diklorid, metanol és 0,88-as telítettségű ammóniaoldat 97:3:0,5 térfogatarányú elegyét használjuk, majd a tisztított terméket dietil-éter és hexán elegyével eldörzsöljük. A kapott szilárd anyagot szűrve, majd izopropanol és metilén-diklorid elegyéből átkristályosítva szilárd anyagként 200 mg cím szerinti vegyületet kapunk.

(CDCI₃): δ 1,02 (3H, t), 1,47 (3H, t), 1,60 (3H, t), 2,42 (2H, q), 2,58 (4H, m), 3,10 (2H, q), 3,17 (4H, m), 4,76 (2H, q), 7,40 (1H, m), 7,51 (2H, m), 7,80 (2H, d), 8,67 (1H, d), 9,16 (1H, s), 10,90 (1H, s);

LRMS: m/z 538 (M + 1)⁺.

A kiindulási anyagok előállítása

a) 5-[2-Etoxi-5-(4-etilpiperazin-1 -il-szulfonil)-piridin-3-il]-3-etil-2,6-dihidro-7H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-on, a (3a) képletű vegyület előállítása

93238-4231/VO/LZs

P00 04120

Claims

10,0 g (20,8 mmol) 1. példa, h) lépés szerinti termék és 2 ml (20 mmol) etil-acetát 160 ml etanolban lévő oldatához 8,28 g (41,6 mmol) káIium-bisz(trimetiIsziIiI)-amidot adunk, és a reakcióelegyet lezárt edényben 12 órán át 120 °C hőmérsékletre melegítjük. A lehűlt reakcióelegyet csökkentett nyomáson betöményítjük, és a maradékot szilikagélen lefolytatott oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk, ennek során eluálószerként metilén-diklorid, metanol és 0,88-as telítettségű ammóniaoldat 95:5:0,5 térfogatarányú elegyét használva 3,75 g cím szerinti vegyületet kapunk.

(CDCI₃): δ 1,03 (3H, t), 1,42 (3H, t), 1,60 (3H, t), 2,42 (2H, q), 2,58 (4H, m), 3,02 (2H, q), 3,16 (4H, m), 4,78 (2H, q), 8,66 (1 H, d), 9,08 (1 H, d), 11,00 (1 H, s), 11,05-11,20 (1 H, széles s);

LRMS: m/z 462 (M + 1)⁺.

Szabadalmi igénypontok

1. cGMP PDE5 enzimet gátló anyagok alkalmazása idegbetegség, különösen perifériás diabetikus idegbetegség kezelésére szolgáló gyógyászati készítmény előállítására azzal a megkötéssel, hogy a gátló anyag

i) helyettesített 5-(3-piridil)-pirázolo[4,3-d]pirimidin-7-ontól, ii) helyettesített 2-(3-piridil)-4a,5-dihidroimidazo[5,1 -f][1,2,4]triazin-4(3H)-ontól vagy iii) helyettesített 2-fenilpurin-6-ontól vagy helyettesített 2-(3-

-pi ridi I )-puri n-6-ontól eltérő.

93238-4231/VO/LZs

P00 04120

2. Az 1. igénypont szerinti alkalmazás, ahol az idegbetegség diabetikus, több idegre kiterjedő betegség.

3. Az 1. vagy 2. igénypont szerinti alkalmazás, ahol a gátló anyagot orálisan adjuk be.

4. A 3. igénypont szerinti alkalmazás, ahol a napi dózis 5-500 mg.

5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol a gátló anyag IC_5Q értéke kisebb, mint 100 nmol/l.

6. Az 1-5. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol a gátló anyag szelektivitási aránya nagyobb, mint 1000.

7. Az 1-6. igénypontok bármelyike szerinti alkalmazás, ahol a gátló anyag szildenafil vagy valamely gyógyászatilag elfogadható sója.

8. A 7. igénypont szerinti alkalmazás, ahol a napi dózis 1 0-1 00 mg.

Pfizer Inc. helyett a meghatalmazott:

DANUBIA

Szabadalmi és Védjegy Iroda Kft.

dr. Vitális László szabadalmi ügyvivő

93238-4231/VO/LZs

P00 04120