ES2233733T3

ES2233733T3 - Proteinas de fusion del receptor de il-1 usadas como antagonistas y metodos para obtenerlas y usarlas.

Info

Publication number: ES2233733T3
Application number: ES02007831T
Authority: ES
Inventors: George D. Yancopoulos; Neil Stahl
Original assignee: Regeneron Pharmaceuticals Inc
Current assignee: Regeneron Pharmaceuticals Inc
Priority date: 1998-09-25
Filing date: 1999-09-22
Publication date: 2005-06-16
Anticipated expiration: 2019-09-22
Also published as: ES2267300T3; JP2002525119A; NZ510720A; DE122010000023I1; DE69922269T2; ATE336583T1; IL142103A; DE69922269D1; WO2000018932A3; NO20011513D0; CA2345109A1; HK1045847B; DK1229047T3; NO20011513L; DE69932832T2; AU6499499A; JP3902728B2; FR10C0025I2; HK1045847A1; CA2345109C

Abstract

Una molécula aislada de ácido nucleico que codifica para un polipéptido de fusión; tal polipéptido de fusión comprende los siguientes componentes polipeptídicos de fusión: (a) una parte de la unión a Interleuquina-1 (IL-1) del dominio extracelular del componente que determina la especificidad de un receptor de IL-1; (b) una parte de la unión a IL-1 de un dominio extracelular del componente transductor de señales de dicho receptor de IL-1 y (c) un componente multimerizante; tal componente multimerizante (c) multimeriza con un componente multimerizante (c) comprendido en otro de dichos polipéptidos de fusión para formar un multímero de dichos polipéptidos de fusión; tal multímero se une y atrapa IL-1 y, de este modo, actúa como un antagonista de IL-1.

Description

Proteínas de fusión receptor de IL-1 usadas como antagonistas y métodos para obtenerlas y usarlas.

Campo del invento

El presente invento se refiere a proteínas de fusión del receptor de IL-1 empleadas como antagonistas de IL-1.

Antecedentes del invento

El documento WO93/19777 proporciona proteínas de fusión que comprenden un polipéptido del receptor del factor de necrosis tumoral (TNF-R) y, al menos, un polipéptido adicional que se selecciona de entre una interleuquina-1 (IL-1R) y un segundo polipéptido TNF-R. El documento WO98/08969 proporciona la proteína soluble de la molécula accesoria del receptor de interleuquina-1 (IL-1R AcM), que es un miembro de la superfamilia de Ig, junto con moléculas aisladas de ácido nucleico que codifican para IL-1R AcM humana y vectores, células hospedadoras y métodos recombinantes para producir dicha proteína. El documento WO97/31010 proporciona un receptor proteico designado 2F1, la secuencia de aminoácidos del cual se dice que indica que es un miembro de la familia del receptor de IL-1. El documento EP-A-0 460.846 proporciona proteínas del receptor de tipo II de interleuquina-1, ADNs y vectores de expresión que codifican para IL-R de tipo II y procedimientos para producir IL-1R de tipo II como productos de cultivos celulares recombinantes.

Además, el documento WO95/11303 proporciona una proteína antagonista de citoquinas capaz de unirse a una citoquina para formar un complejo no funcional, que consta del componente soluble que determina la especificidad \alpha del receptor de citoquina y de un dominio extracelular de un componente \beta del receptor de citoquina.

Compendio del invento

El invento proporciona una molécula de ácido nucleico aislada que codifica para un polipéptido de fusión; tal polipéptido de fusión consta de los siguientes componentes polipeptídicos de fusión:

(a): una parte de la unión a interleuquina-1 (IL-1) del dominio extracelular del componente que determina la especificidad de un receptor de IL-1;

(b): una parte de la unión a IL-1 de un dominio extracelular del componente transductor de señales de dicho receptor de IL-1 y

(c): un componente multimerizante;

tal componente multimerizante (c) multimeriza con un componente multimerizante (c) incluido en otro de dichos polipéptidos de fusión para formar un multímero de dichos polipéptidos de fusión;

tal multímero se une y atrapa IL-1 y, de este modo, actúa como un antagonista de IL-1.

Breve descripción de las figuras

Figura 1: Componentes regulados de unión del receptor en un modelo de un receptor genérico de citoquina. El modelo indica que las citoquinas contienen hasta 3 lugares de unión al receptor y que interaccionan con sus componentes del receptor al unirse primero al componente \alpha opcional, seguido de unión a \beta1 y luego a \beta2. Los componentes \beta de muchos receptores de citoquinas interactúan a través de regiones proximales de membrana (cajas sombreadas) con la familia Jak/Tyk de proteínas tirosina quinasas citoplasmáticas. Sólo después de la dimerización de los componentes \beta se inicia la transducción de señales, según se esquematiza por las fosforilaciones (P) en tirosina de los componentes \beta y de las quinasas Jak/Tyk.

Figuras 2A-2E: Secuencia de nucleótidos, y su secuencia deducida de aminoácidos, que codifica para el polipéptido de fusión designado 569 que es capaz de unir la citoquina IL-1 para formar un complejo no funcional.

Figura 3: Muestra que el atrapador 1SC569 (descrito en las Figs. 2A-2E) es capaz de antagonizar los efectos de IL-1 y bloquear la producción de IL-6 de células MRC5 tras tratamiento con IL-1.

Figura 4: El atrapador de IL-1 humana bloquea los efectos in vivo de la huIL-1 administrada exógenamente. Los ratones BALB/c recibieron una inyección subcutánea de huIL-1 (0,3 \mug/kg) en el tiempo 0. Veinticuatro horas antes de la inyección de huIL-1, se trató previamente a los animales bien con vehículo o con un exceso molar de 150 veces del atrapador de huIL-1. Dos horas antes del sacrificio (26 horas), se volvió a someter a prueba a los ratones con una segunda inyección de huIL-1 (0,3 \mug/kg, s.c.). Las muestras de sangre se recogieron en varios tiempos y los sueros se sometieron a ensayo en cuanto a los niveles de IL-1 (expresados como media \pm DE; n = 5 por grupo).

Descripción detallada del invento

Una molécula aislada de ácido nucleico que codifica para un polipéptido de fusión; tal polipéptido de fusión consta de los siguientes componentes polipeptídicos de fusión:

(b): una parte de la unión a interleuquina-1 de un dominio extracelular del componente transductor de señales de dicho receptor de IL-1 y

(c): un componente multimerizante;

Por "parte de la unión a IL-1" lo que se entiende es la parte mínima del dominio extracelular necesaria para unirse a IL-1. Se acepta por los expertos en la técnica que una característica que define a un receptor de citoquinas es la presencia de los dos dominios tipo fibronectina que contienen cisteínas canónicas y de la caja WSXWS (Bazan, J.F., 1990, PNAS 87: 6934-6938). Las secuencias que codifican para los dominios extracelulares del componente de unión del receptor de IL-1 y del componente transductor de señales del receptor de IL-1 pueden usarse también para crear el polipéptido de fusión del invento. De forma similar, pueden emplearse secuencias más largas que codifican para partes mayores de los componentes del receptor de IL-1. Sin embargo, se contempla que fragmentos menores que el dominio extracelular funcionarán para unir IL-1 y, en consecuencia, el invento contempla polipéptidos de fusión que incluyan la mínima parte del dominio extracelular necesaria para unir IL-1 como la parte de la unión a IL-1.

El invento comprende un "componente que determina la especificidad" de un receptor de IL-1 y un "componente transductor de señales" de dicho receptor de IL-1. A pesar de la nomenclatura empleada para designar un componente o subunidad particular de un receptor de IL-1, un experto en la técnica reconocería qué componente o subunidad de un receptor es responsable de determinar la diana celular de la citoquina y, de ese modo, conocería qué componente constituye el "componente que determina la especificidad".

De forma similar, a pesar de la nomenclatura empleada, un experto en la técnica conocerá qué componente o subunidad de un receptor constituirá el "componente transductor de señales". Según se emplea en esta memoria, el "componente transductor de señales" es un componente del receptor nativo que no es el componente que determina la especificidad y el cual no se une, o lo hace débilmente, a citoquinas en ausencia del componente que determina la especificidad. En el receptor nativo, el "componente transductor de señales" puede participar en señalización.

Ejemplos de los componentes del receptor que pueden emplearse para preparar antagonistas de citoquinas de acuerdo con el invento se exponen en la Tabla 1.

TABLA 1

1

Referencias citadas en la Tabla 1

1. Greenfeder, et al., Journal of Biological Chemistry 270: 13757-13765 (1995)-Véase la página 13.757, columna 1, línea 6 hasta columna 2, línea 3 y columna 2, líneas 10-12; página 13.764, columna 2, últimas 3 líneas y página 13.765, columna 1, líneas 1-7;

2. Wesche, et al., Journal of Biological Chemistry 272: 7727-7731 (1997). Véase la página 7.731, líneas 20-26.

Al preparar la secuencia de ácido nucleico que codifica para el polipéptido de fusión del invento, el primer, segundo y tercer componentes del polipéptido de fusión son codificados por una cadena sencilla de nucleótidos la cual, cuando se expresa mediante un sistema de hospedador vector, produce una especie monómera del péptido de fusión. Los monómeros así expresados multimerizan después debido a las interacciones entre los componentes multimerizantes (los terceros componentes del polipéptido de fusión). Elaborar los polipéptidos de fusión de esta manera evita la necesidad de purificar las mezclas de heterodímeros que resultarían si el primer y segundo componentes se elaborasen como moléculas separadas y luego se multimerizasen. Por ejemplo, la patente de EE.UU. nº 5.470.952, publicada el 28 de Noviembre de 1995 describe la elaboración de proteínas heterodímeras que funcionan como antagonistas de CNTF o IL-6. Los heterodímeros se purifican a partir de líneas celulares cotransfectadas con los componentes alpha (\alpha) y beta (\beta) apropiados. Los heterodímeros se separan entonces de los homodímeros empleando métodos tales como la elución pasiva a partir de geles preparativos, no desnaturalizantes, de poliacrilamida o mediante cromatografía catiónica de intercambio de alta presión. La necesidad de esta etapa de purificación se evita por los métodos del presente
invento.

Además, la solicitud internacional PCT WO 96/11213, publicada el 18 de Abril de 1996, titulada Inhibidores dímeros de IL-4 declara que el solicitante ha preparado homodímeros en los que dos receptores de IL-4 se unen mediante un espaciador polímero y ha preparado heterodímeros en los que un receptor de IL-4 está unido mediante un espaciador polímero a una cadena gamma de receptor de IL-2. El espaciador polímero descrito es polietilenglicol (PEG). Los dos componentes de receptor, IL-4R e IL-2Rgamma se expresan separadamente y se purifican. Después se elaboran los homodímeros y heterodímeros pegilados juntando los componentes entre sí empleando reactivos bifuncionales de PEG. Una ventaja del presente invento es que evita la necesidad de tales etapas de purificación y pegilación costosas en tiempo y dinero.

En una realización del invento, la secuencia de nucleótidos que codifica para el primer componente está en 5' respecto de la secuencia de nucleótidos que codifica para el segundo componente. En otra realización del invento, la secuencia de nucleótidos que codifica para el primer componente está en 3' respecto de la secuencia de nucleótidos que codifica para el segundo componente. Pueden prepararse realizaciones adicionales del invento en las que el orden del primer, segundo y tercer componentes polipeptídicos de fusión estén cambiados de orden. Por ejemplo, si la secuencia de nucleótidos que codifica para el primer componente se designa 1, la secuencia de nucleótidos que codifica para el segundo componente se designa 2 y la secuencia de nucleótidos del tercer componente se designa 3, entonces el orden de los componentes en el ácido nucleico aislado del invento, según se lee de 5' a 3' puede tener cualquiera de las seis combinaciones siguientes: 1,2,3; 1,3,2; 2,1,3; 2,3,1; 3,1,2 ó 3,2,1.

La citoquina unida por el polipéptido de fusión es la interleuquina-1.

En realizaciones preferidas del invento, el componente multimerizante consta de un dominio derivado de inmunoglobulina. Más específicamente, el dominio derivado de inmunoglobulina puede seleccionarse del grupo que consiste en el dominio Fc de IgG, la cadena pesada de IgG y la cadena ligera de IgG. En otra realización, el componente multimerizante puede ser un dominio Fc del que se han eliminado los cinco primeros aminoácidos (incluída una cisteína) para producir un componente multimerizante denominado Fc(\DeltaC1). Alternativamente, el componente multimerizante puede ser un dominio Fc en el que una cisteína dentro de los primeros cinco aminoácidos se ha sustituido por otro aminoácido tal como, por ejemplo, serina o alanina.

El presente invento también proporciona polipéptidos de fusión codificados por moléculas de ácido nucleico aisladas del invento. Preferiblemente, los polipéptidos de fusión están en forma multímera, debido a la función del tercer componente multimerizante. En una realización preferida, el multímero es un dímero. Componentes multimerizantes adecuados son secuencias que codifican para una región bisagra de la cadena pesada de la inmunoglobulina (Takahashi et al., 1982, Cell 29: 671-679); secuencias génicas de inmunoglobulinas y sus partes. En una realización preferida del invento, las secuencias génicas de inmunoglobulina, especialmente la que codifica para el dominio Fc, se emplean para codificar el tercer componente multimerizante.

El presente invento también contempla un vector que comprende la molécula de ácido nucleico del invento según se describe en esta memoria.

Se proporciona también un vector de expresión que comprende una molécula de ácido nucleico del invento según se describe en esta memoria, en el que la molécula de ácido nucleico está unida operativamente a una secuencia de de control de la expresión. También se proporciona un sistema de hospedador vector para la elaboración de un polipéptido de fusión que comprende el vector de expresión del invento que se ha introducido en una célula hospedadora apropiada para la expresión del polipéptido de fusión. La célula hospedadora apropiada puede ser una célula bacteriana tal como E. coli, una célula de levadura tal como Pichia pastoris, una célula de insecto tal como Spodoptera frugiperda o una célula de mamífero tal como una célula COS, CHO, 293, BHK o NS0.

El presente invento también proporciona métodos para producir los polipéptidos de fusión del invento haciendo crecer células de los sistemas hospedador vector descritos en esta memoria, bajo condiciones que permiten producir los polipéptidos de fusión y recuperar el polipéptido de fusión elaborado de esa manera.

La tecnología descrita en esta memoria puede aplicarse a desarrollar un atrapador de citoquina para cualquier citoquina que emplea un componente \alpha que confiere especificidad, así como un componente \beta que, cuando se une al componente de especificidad \alpha, tiene una afinidad mayor por la citoquina que cualquier componente solo. En consecuencia, los antagonistas de acuerdo con el invento son antagonistas de interleuquina-1 [Greenfeder, et al., J. Biol. Chem. 270: 13757-13765 (1995); Guo, et al., J. Biol. Chem. 270: 27562-27568 (1995)].

Las composiciones farmacéuticas para usar, de acuerdo con el invento, incluyen los antagonistas descritos anteriormente en un vehículo líquido, sólido o semisólido farmacológicamente aceptable, unido a una molécula transportadora o dirigidora (p. ej., anticuerpo, hormona, factor de crecimiento, etc.) y/o incorporados dentro de liposomas, microcápsulas y preparaciones de liberación controlada (incluyendo células que expresan antagonista) antes de la administración in vivo. Por ejemplo, la composición farmacéutica puede comprender uno o más antagonistas en una disolución acuosa, tal como agua estéril, disolución salina, tampón fosfato o disolución dextrosa. Alternativamente, los agentes activos pueden incluirse en una formulación sólida (p. ej., cera) o semisólida (p. ej., gelatinosa) que puede implantarse en un paciente que precisa de tal tratamiento. La vía de administración puede ser cualquier modo de administración conocido en la técnica, lo que incluye, pero no está limitado a, intravenosamente, intratecalmente, subcutáneamente, por inyección dentro del tejido afectado, intraarterialmente, intranasalmente, oralmente o vía un dispositivo implantado.

La administración puede dar como resultado en la distribución del agente activo del invento a través del cuerpo o en un área localizada. Por ejemplo, en algunas afecciones que comprometen a regiones distantes del sistema nervioso, la administración intravenosa o intratecal del agente puede ser deseable. En ciertas situaciones, un implante que contenga el agente activo puede colocarse en o cerca del área lesionada. Implantes adecuados incluyen, pero no están limitados a, implantes basados en espuma en gel, cera o micropartículas.

Ejemplos Clonación de los componentes polipeptídicos de fusión

Los dominios extracelulares de los receptores de citoquina humana se obtuvieron mediante técnicas convencionales de PCR, empleando ADNc de tejido (CLONTECH) clonado dentro del vector de expresión pMT21 (Genetics Institute, Inc.) y las secuencias se secuenciaron mediante técnicas convencionales empleando un secuenciador de ADN ABI 373A y el kit de secuenciación Taq Dideoxy Terminator Cycle (Applied Biosystems, Inc., Foster City, CA). Para el IL-1RAcP, se clonaron los nucleótidos 1 hasta 1.074 (correspondientes a los aminoácidos 1-358) de la secuencia del Genbank AB006357. Para el IL-1RI, se clonaron los nucleótidos 55 hasta 999 (correspondientes a los aminoácidos 19-333) de la secuencia del Genbank X16896.

Producción de polipéptidos de fusión (atrapadores de citoquina)

Las secuencias de nucleótidos que codifican para los atrapadores de citoquina se construyeron a partir de ADNs individuales clonados (descritos supra) mediante técnicas convencionales de clonación y PCR. Las secuencias se construyeron en fase de tal modo que la secuencia que codifica para el primer componente polipeptídico de fusión se fusionó a la secuencia que codificaba para el segundo componente polipeptídico de fusión, seguido por un dominio Fc (región bisagra, CH2 y CH3 de la IgG1 humana) como componente multimerizante. Nucleótidos extra se insertaron en fase entre las secuencias que codifican para el primer y el segundo componentes polipeptídicos de fusión para añadir una región enlazadora entre los dos componentes (véanse las Figuras 2A-2E, atrapador 569).

Para el atrapador 569 de IL-1 (Figura 2A a Figura 2E), el componente IL-1RAcP está seguido por el componente IL-1RI en dirección 5' y luego del dominio Fc. Los constructos finales se clonaron dentro del vector de expresión de mamíferos pCDNA3.1 (STRATAGENE).

En la secuencia 569 (Figura 2A a Figura 2E), los nucleótidos 1-1.074 codifican para el componente IL1RAcP, los nucleótidos 1.075-1.098 codifican para una región enlazadora, los nucleótidos 1.099-2.043 codifican para el componente IL1RI y los nucleótidos 2.044-2.730 codifican para el dominio Fc.

Los constructos de ADN fueron bien transfectados de forma transitoria dentro de células COS o bien transfectados de forma estable dentro de células CHO mediante técnicas convencionales bien conocidas para los expertos en la técnica. Se recogieron los sobrenadantes y se purificaron mediante cromatografía de afinidad de proteína A y por cromatografía de exclusión por tamaño mediante técnicas convencionales. (Véase como ejemplo Harlow y Lane, Antibodies - A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, 1988).

Bioensayo en MRC5 para los atrapadores de IL1

Las células de fibroblastos pulmonares humanas MRC5 responden a la IL-1 por secreción de IL-6 y, de este modo, se emplearon para someter a ensayo la capacidad de los atrapadores de IL-1 para bloquear la producción de IL-6 dependiente de IL-1. El atrapador de IL1 1SC569 (Figura 2A-Figura 2E) se sometió a ensayo frente a IL-1-RI.Fc, que es el dominio extracelular del receptor tipo I de IL-1 fusionado a un dominio Fc.

Las células MRC5 se suspenden en medio a 1 x 10^{5} células por ml y 0,1 ml de células se siembran (10.000 células por pocillo) dentro de pocillos de una placa de cultivo de tejidos de 96 pocillos. Las placas se incuban durante 24 horas a 37ºC en un incubador humidificado con un 5% de CO_{2}.

El atrapador de IL-1 y la IL-1 recombinante humana, a diversas dosis, se incuban previamente en una placa de cultivo de tejidos de 96 pocillos y se incuban durante 2 horas a 37ºC. 0,1 ml de esta mezcla se añade entonces a la placa de 96 pocillos que contiene las células MRC5, de modo que la concentración final de atrapador de IL-1 es de 10 nM y las concentraciones finales de IL-1 varían desde 2,4 pM hasta 5 nM. Los pocillos control contienen atrapador solo o nada.

Las placas se incuban entonces a 37ºC durante 24 horas en un incubador humidificado con un 5% de CO_{2}. El sobrenadante se recoge y se someten a ensayo los niveles de IL-6 empleando el kit de inmunoensayo R&D Systems Quantikine de acuerdo con las instrucciones del fabricante.

Resultados

La Figura 3 muestra que el atrapador 569 (Figura 2A-Figura 2E) es capaz de antagonizar los efectos de IL-1 y de bloquear la producción de IL-6 de las células MRC 5 tras tratamiento con IL-1. A una concentración de 10 nM, el atrapador 569 es capaz de bloquear la producción de IL-6 hasta una concentración de IL-1 de 3 nM. En contraste, IL-1RI.Fc es un antagonista mucho peor de IL-1. Sólo es capaz de bloquear los efectos de IL-1 hasta aproximadamente 10-20 pM. De este modo, el atrapador 569 es aproximadamente 100x mejor en el bloqueo de IL-1 que IL1RI.Fc.

Bloqueo de IL-1 inyectado mediante atrapamiento de IL-1 in vivo

La IL-1 es una citoquina proinflamatoria. Se ha mostrado que la administración sistémica de IL-1 produce respuestas agudas en animales, que incluyen hiperglucemia transitoria, hipoinsulinemia, fiebre, anorexia y niveles séricos aumentados de interleuquina-6 (IL-6) (Reimers, 1998). Dado que los ratones responden tanto a la IL-1 murina como a la humana, puede emplearse IL-1 humana y pueden evaluarse los efectos de unión in vivo de antagonistas específicos de IL-1 humana. Este modelo agudo de ratón se empleó para determinar la capacidad de un atrapador de IL-1 humana para antagonizar los efectos in vivo de IL-1 humana administrada exógenamente. Esto proporciona una indicación rápida de la eficacia in vivo del atrapador de IL-1 humana y puede emplearse como ensayo para ayudar en la selección de moléculas.

Diseño experimental

Los ratones recibieron inyecciones subcutáneas de IL-1 humana (0,3 \mug/kg). Veinticuatro horas antes de la inyección de IL-1 humana, los animales se trataron previamente bien con transportador o bien con un exceso molar de 150 veces de atrapador de IL-1 humana (0,54 mg/kg). Dos horas antes del sacrificio (26 h), los ratones recibieron una segunda inyección de IL-1 humana (0,3 \mug/kg). Las muestras de sangre se recogieron en varios tiempos y los sueros se sometieron a ensayo en cuanto a niveles de IL-6.

Resultados

La administración exógena de IL-1 humana dio como resultado en una inducción drástica de los niveles séricos de IL-6. A un exceso molar de 150 veces, el atrapador de IL-1 humana bloqueó completamente el aumento de IL-6 (Figura 4). Además, los efectos del atrapador de IL-1 persistieron durante al menos otras 24 horas, lo que impidió un aumento de IL-6 incluso cuando la IL-1 se administró de nuevo (Figura 4). Esta eficacia de tan larga duración sugiere que pueda no resultar necesaria la inyección diaria de un atrapador de IL-1 en aplicaciones crónicas.

El presente invento no debe limitarse en su alcance por las realizaciones específicas descritas en esta memoria. De hecho, varias modificaciones del invento además de las descritas en esta memoria se harán aparentes a los expertos en la técnica a partir de la descripción antedicha y de las figuras acompañantes. Tales modificaciones pretenden incluirse en el alcance de las reivindicaciones anexas.

Claims

1. Una molécula aislada de ácido nucleico que codifica para un polipéptido de fusión; tal polipéptido de fusión comprende los siguientes componentes polipeptídicos de fusión:

(c): un componente multimerizante;

tal componente multimerizante (c) multimeriza con un componente multimerizante (c) comprendido en otro de dichos polipéptidos de fusión para formar un multímero de dichos polipéptidos de fusión;

2. La molécula aislada de ácido nucleico de la reivindicación 1, en la que el componente (a) de dicho polipéptido de fusión comprende una parte de la unión a IL-1 del dominio extracelular de IL-1R de tipo I y el componente (b) comprende una parte de la unión a IL-1 de un dominio extracelular de IL-1R AcP.

3. La molécula aislada de ácido nucleico de la reivindicación 1, en la que el componente (a) de dicho polipéptido de fusión comprende una parte de la unión a IL-1 del dominio extracelular de IL-1R de tipo II y el componente (b) comprende una parte de la unión a IL-1 de un dominio extracelular de IL-1R AcP.

4. La molécula aislada de ácido nucleico de una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que dicho multímero es un dímero.

5. La molécula aislada de ácido nucleico de una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que el componente multimerizante comprende un dominio derivado de inmunoglobulina.

6. La molécula aislada de ácido nucleico de la reivindicación 5, en la que el dominio derivado de inmunoglobulina se selecciona de entre el dominio Fc de IgG, la cadena pesada de IgG y la cadena ligera de IgG.

7. La molécula aislada de ácido nucleico de una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en la que la secuencia nucleotídica que codifica para el componente (a) se encuentra en 5' respecto de la secuencia nucleotídica que codifica para el componente (b).

8. La molécula de ácido nucleico de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en la que la secuencia nucleotídica que codifica para el componente (a) se encuentra en 3' respecto de la secuencia nucleotídica que codifica para el componente (b).

9. Un multímero que comprende de dos o más polipéptidos de fusión codificados por las moléculas de ácido nucleico de una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, tal multímero se une y atrapa IL-1 y actúa como un antagonista de IL-1.

10. Un multímero de la reivindicación 9 que es un dímero que comprende dos de dichos polipéptidos de fusión.

11. Un vector que comprende la molécula de ácido nucleico de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8.

12. Un vector de expresión que comprende una molécula de ácido nucleico de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en el que la molécula de ácido nucleico está unida operativamente a una secuencia de control de la expresión.

13. Un sistema hospedador vector para la producción de un polipéptido de fusión, el cual comprende el vector de expresión de la reivindicación 12 en una célula hospedadora.

14. El sistema hospedador vector de la reivindicación 13, en el que la célula hospedadora es una célula bacteriana, célula de levadura, célula de insecto o célula de mamífero.

15. El sistema hospedador vector de la reivindicación 13, en el que la célula hospedadora es E. coli, una célula COS, una célula CHO, una célula 293, una célula BHK o una célula NS0.

16. Un método para producir polipéptidos de fusión que comprende células en crecimiento del sistema hospedador vector de la reivindicación 13, 14 ó 15, en condiciones que permiten producir los polipéptidos de fusión y recuperar los polipéptidos de fusión producidos de esta manera.

17. Un método de acuerdo con la reivindicación 16, que comprende además el permitir a dichos polipéptidos de fusión formar multímeros de polipéptidos de fusión, según se define en la reivindicación 9.

18. Un método de acuerdo con la reivindicación 17, en el que dichos multímeros son dímeros según se define en la reivindicación 10.

19. Una composición farmacéutica que comprende un multímero de la reivindicación 9 o un dímero de la reivindicación 10 en un vehículo líquido, sólido o semisólido farmacológicamente aceptable, enlazado a una molécula transportadora o dirigidora y/o incorporado dentro de liposomas, microcápsulas o de una preparación de liberación controlada.