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DE69332438T2 - 7-halo-und 7(beta), 8(beta)-methano-taxolen, antineoplastische verwendung und diese enthaltende pharmazeutische zusammenstellungen - Google Patents

7-halo-und 7(beta), 8(beta)-methano-taxolen, antineoplastische verwendung und diese enthaltende pharmazeutische zusammenstellungen

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DE69332438T2
DE69332438T2 DE69332438T DE69332438T DE69332438T2 DE 69332438 T2 DE69332438 T2 DE 69332438T2 DE 69332438 T DE69332438 T DE 69332438T DE 69332438 T DE69332438 T DE 69332438T DE 69332438 T2 DE69332438 T2 DE 69332438T2
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DE
Germany
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deoxy
fluorotaxol
nhc
phenyl
taxol
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DE69332438T
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A. Johnson
C. Kelly
G. Midy
I. Skulnick
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Pharmacia and Upjohn Co
Original Assignee
Pharmacia and Upjohn Co
Upjohn Co
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Publication date
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Publication of DE69332438D1 publication Critical patent/DE69332438D1/de
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Description

    HINTERGRUND DER ERFINDUNG
  • Taxol ist ein Mitglied der Taxanfamilie von Diterpenen, das die folgende Struktur aufweist:
  • Das für Taxol angegebene Numerierungssystem ist das von der IUPAC (IUPAC; Commission on the Nomenclature of Organic Chemistry, 1978) empfohlene.
  • Eine Übersicht über die Chemie des starken Antikrebsditerpenoids Taxol und von dessen Analoga mit dem Schwerpunkt auf Isolierung und Analyse, Strukturmodifikationen, Teilsynthese und Struktur-Aktivität-Beziehungen ist bei David G. I. Kingston, The Chemistry of Taxol, Pharmac. Ther., Band 52, S. 1-34, 1991, gegeben.
  • Ein Überblick über die klinische Pharmakologie von Taxol ist bei Eric K. Rowinsky und Ross C. Donehower, The Clinical Pharmacology and Use of Antimicrotubule Agents in Cancer Chemotherapeutics, Pharmac. Ther., Band 52, S. 35-84, 1991, gegeben. Ein Überblick über klinische und präklinische Untersuchungen mit Taxol ist bei William J. Slichenmyer und Daniel D. Von Hoff, Taxol: A New and Ef fective Anti-cancer Drug, Anti-Cancer Drugs, Band 2, S. 519-530, 1991, gegeben.
  • Taxol und dessen Analoga sind Gegenstand verschiedener Patente, umfassend beispielsweise die US-A-4 814 470; 4 857 653; 4 942 184; 4 924 011; 4 924 012; 4 960 790; 5 015 744; 5 157 049; 5 059 699; 5 136 060; 4 876 399; 5 227 400 sowie die PCT-Veröffentlichung WO 92/09589, die europäischen Patentanmeldungen 90305845.1 (Veröffentlichung Nr. A2 0 400 971), 90312366.9 (Veröffentlichung Nr. A1 0 428 376), 89400935.6 (Veröffentlichung Nr. A1 0 366 841) und 90402333.0 (Veröffentlichung Nr. 0 414 610 A1), 87401669.4 (A1 0 253 739), 92308608.6 (A1 0 534 708), 92308609.4 (A1 534 709) und die PCT-Veröffentlichungen Nr. WO 91/17977, WO 91/17976, WO 91/13066, WO 91/13053.
  • Verschiedene Verfahren zur Herstellung von Taxol (und Zwischenprodukten und Analoga desselben) sind in Tetrahedron Letters, 1992, 33, 5185; J. Org. Chem., 1991, 56, 1681 und J. Org. Chem., 1991, 56, 5114 beschrieben.
  • Chen et al., Serendipitous Synthesis of a Cyclopropane-Containing Taxol Analog via Anchimeric Participation of an Unactivated Angular Methyl Group, Advance ACS Abstracts, Band 1, Nr. 2, 15. Juli 1993 berichteten, dass die Behandlung eines 1-epi-Taxolderivats mit DAST in Dichlormethan zu einer unerwarteten Reaktion unter Teilnahme der C-19-Methylgruppe und sauberer Bildung eines Cyclopropanrings führte. Siehe auch J. Org. Chem., 1993, 58, 4520 (13. August 1993).
  • Die US-A-5 248 796 betrifft 10-Desacetoxy-11,12-dihydrotaxol-10,12(18)-dienderivate und die Herstellung von 10-Desacetoxytaxol.
  • Die WO-92/09589 offenbart Taxol- und Taxoterderivate, in denen die 3'-Arylgruppe substituiert ist.
  • Die WO-94/13654 (Stand der Technik nach Artikel 54(3) EPÜ) offenbart 7β,8β-Methanotaxole.
  • Die EP-A-0597083 (Stand der Technik nach Artikel 54(3) EPÜ) offenbart ebenfalls 7β,8β-Methanotaxole.
  • Die EP-A-0577082 (Stand der Technik nach Artikel 54(3) EPÜ) offenbart 7α-Fluortaxole.
    • ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG
  • Neue Verbindungen gemäß der Erfindung besitzen die Formel I gemäß der Definition in Anspruch 1. Bevorzugte Verbindungen sind in den Ansprüchen 2 bis 12 angegeben.
  • Verbindungen der Formel I eignen sich wiederum zur Behandlung der gleichen Krebsarten, gegenüber denen Taxol bekanntlich aktiv ist, einschließlich von humanem Eierstockkrebs, Brustkrebs und bösartigem Melanom sowie Lungenkrebs, Magenkrebs, Darmkrebs, Kopf- und Halskrebs und Leukämie.
    • ÜBEREINKÜNFTE FÜR FORMELN UND DEFINITIONEN VON VARIABLEN
  • Die chemischen Formeln, durch die in der Beschreibung die verschiedensten Verbindungen oder Molekülbruchstücke dargestellt sind, können neben den ausdrücklich festgelegten Strukturmerkmalen variable Substituenten enthalten. Diese variablen Substituenten werden durch einen Buchstaben oder einen Buchstaben mit einem anschließenden Zahlenindex, beispielsweise "Z&sub1;" oder "Ri" mit "i" gleich einer ganzen Zahl, identifiziert. Diese variablen Substituenten sind entweder ein- oder zweiwertig, d. h. sie repräsentieren eine an die Formel durch eine oder zwei chemische Bindung(en) gebundene Gruppe. Eine Gruppe 21 steht beispielsweise für eine zweiwertige Variable, wenn sie an die Formel wie folgt CH&sub3;-C(=Z&sub1;)H gebunden ist. Die Gruppen Ri und Rj stehen für einwertige variable Substituenten, wenn sie an die Formel wie folgt CH&sub3;CH&sub2;-C(Ri)(Rj)H gebunden sind. Wenn chemische Formeln - wie oben - linear dargestellt sind, sind die in Klammern enthaltenen variablen Substituenten an das Atom unmittelbar zur Linken des in Klammern geschriebenen variablen Substituenten gebunden. Wenn zwei oder mehrere aufeinanderfolgende variable Substituenten in Klammern gesetzt sind, ist jeder der aufeinanderfolgenden variablen Substituenten an das zur Linken unmittelbar vorhergehende Atom, das nicht in Klammern steht, gebunden. So sind in der angegebenen Formel beide Reste Ri und Rj an das vorhergehende Kohlenstoffatom gebunden. Für irgendein Molekül mit einem etablierten System einer Kohlenstoffatomnummerierung, wie Taxol, werden diese Kohlenstoffatome als Ci, mit "i" gleich einer ganzen Zahl entsprechend der Kohlenstoffatomnummer, bezeichnet. So bezeichnet beispielsweise C&sub6; die 6-Stellung oder Kohlenstoffatomnummer in dem Ring in der dem Fachmann geläufigen traditionellen Bezeichnung.
  • Chemische Formeln oder Teile derselben in linearer Anordnung bezeichnen Atome in einer linearen Kette. Das Symbol "-" steht im allgemeinen für eine Bindung zwischen zwei Atomen in der Kette. So bezeichnet CH&sub3;-O-CH&sub2;-CH(Ri)-CH&sub3; eine 2-substituierte 1-Methoxypropanverbindung. In ähnlicher Weise steht das Symbol "=" für eine Doppelbindung, beispielsweise CH&sub2;=C(Ri)-O-CH&sub3;, und das Symbol " " steht für eine Dreifachbindung, beispielsweise HC C-CH(Ri)-CH&sub2;-CH&sub3;. Carbonylgruppen werden auf eine von zwei Arten dargestellt: -CO- oder -C(=O)-, wobei erstere aus Gründen der Einfachheit bevorzugt wird.
  • Chemische Formeln cyclischer (Ring-)Verbindungen oder Molekülfragmente können in linearer Anordnung dargestellt werden. So kann die Verbindung 4-Chlor-2-methylpyridin in linearer Anordnung durch N*=C(CH&sub3;)-CH=CCl-CH=C*H mit der Übereinkunft, dass die mit einem Sternchen (*) markierten Atome unter Ringbildung aneinander gebunden sind, dargestellt werden. In ähnlicher Weise kann das cyclische Molekülfragment 4-(Ethyl)-1-piperazinyl durch -N*-(CH&sub2;)&sub2;-N(C&sub2;H&sub5;)-CH&sub2;-C*H&sub2; dargestellt werden. Ähnlich kann 2-Furyl durch -C*-O-CH=CH-C*H= und 2-Thienyl durch -C*-S-CH=CH-C*H= dargestellt werden.
  • Eine starre cyclische (Ring-)Struktur für irgendeine der vorliegenden Verbindungen legt für die an jedem Kohlenstoffatom der starren cyclischen Verbindung hängenden Substituenten eine Orientierung in bezug auf die Ringebene fest. Für gesättigte Verbindungen, bei denen zwei Substituenten an einem ein Teil eines Cyclussystems bildenden Kohlenstoffatom hängen, -C(X&sub1;)(X&sub2;)-, können die beiden Substituenten relativ zum Ring in entweder axialer oder äquatorialer Position sein und zwischen axial/äquatorial wechseln. Die Position der zwei Substituenten relativ zum Ring und zueinander bleibt jedoch fixiert. Zwar kann einer der Substituenten gelegentlich eher in der Ringebene (äquatorial) als oberhalb oder unterhalb der Ebene (axial) liegen, doch liegt ein Substituent immer oberhalb des anderen. In den solche Verbindungen darstellenden chemischen Strukturformeln wird ein "unterhalb" eines anderen Substituenten (X&sub2;) befindlicher Substituent (X&sub1;) als in alpha (α)-Konfiguration befindlich identifiziert und durch eine unterbrochene, gestrichelte oder gepunktete Bindungslinie zu dem Kohlenstoffatom, d. h. durch das Symbol "---" oder "...." angegeben. Der entsprechende "oberhalb" des anderen Substituenten (X&sub1;) befindliche Substituent (X&sub2;) wird als in beta(β)-Konfiguration befindlich bezeichnet und durch eine ununterbrochene Bindungslinie zum Kohlenstoffatom angegeben.
  • Wenn ein variabler Substituent zweiwertig ist, können die Valenzen bei der Definition der Variablen zusammengenommen und/oder getrennt genommen werden. Wenn beispielsweise eine Variable Ri an einem Kohlenstoffatom wie folgt -C(=Ri)- hängt, könnte sie zweiwertig sein und als Oxo oder Keto (also eine Carbonylgruppe (-CO-) bildend) oder zwei getrennt gebundene einwertige variable Substituenten α-Ri-j und β-Rik definiert sein. Wenn eine zweiwertige Variable Ri derart definiert ist, daß sie aus zwei einwertigen variablen Substituenten besteht, besitzt die zur Definition der zweiwertigen Variable benutzte Übereinkunft die Form "α-Ri-j: β-Ri-k" oder irgendeiner Variante hiervon. In einem solchen Fall sind beide Reste α-Ri-j und β-Ri-k wie folgt -C(α-Ri-j) (β-Ri-k)- an das Kohlenstoffatom gebunden. Wenn beispielsweise die zweiwertige Variable R&sub6; , -C(=R&sub6;)-, derart definiert ist, daß sie aus zwei einwertigen variablen Substituenten besteht, sind die beiden einwertigen variablen Substituenten α-R&sub6;&submin;&sub1;: β-R&sub6;&submin;&sub2;, ...... α-R&sub6;&submin;&sub9;: β-R&sub6;&submin;&sub1;&sub0; und dergleichen unter Bildung von -C(α-R&sub6;&submin;&sub1;) (β-R&sub6;&submin;&sub2;)-, .... -C(α-R&sub6;&submin;&sub9;) (β-R&sub6;&submin;&sub1;&sub0;)- und dergleichen. In gleicher Weise sind für die zweiwertige Variable R&sub1;&sub1;, -C(=R&sub1;&sub1;)-, die zwei einwertigen variablen Substituenten α-R&sub1;&sub1;&submin;&sub1;: β-R&sub1;&sub1;&submin;&sub2;. Für einen Ringsubstituenten, für den getrennte α- und β-Orientierungen nicht existieren (beispielsweise infolge der Anwesenheit einer Kohlenstoffdoppelbindung im Ring), und für einen an ein Kohlenstoffatom, das keinen Teil eines Rings bildet, gebundenen Substituenten gilt die angegebene Übereinkunft ebenfalls, wobei die α- und β-Bezeichnungen weggelassen werden.
  • Genauso wie eine zweiwertige Variable als zwei getrennte einwertige variable Substituenten definiert werden kann, können zwei getrennte einwertige variable Substituenten auch zusammen eine zweiwertige Variable bildend definiert werden. So können beispielsweise in der Formel -C&sub1;(Ri)H-C&sub2;(Rj)H- (C&sub1; und C&sub2; stehen willkürlich für ein erstes bzw. zweites Kohlenstoffatom) Ri und Rj derart definiert werden, daß sie zusammen
  • (1) eine zweite Bindung zwischen C&sub1; und C&sub2; oder
  • (2) eine zweiwertige Gruppe, z. B. Oxa (-O-), bilden,
  • und die Formel demnach ein Epoxid umschreibt. Wenn Ri und Rj zusammengenommen eine komplexere Einheit, z. B. die Gruppe -X-Y-, bilden, ist die Orientierung der Einheit derart, daß C&sub1; in der angegebenen Formel an X und C&sub2; an Y gebunden ist. Übereinkunftgemäß bedeutet folglich die Bezeichnung "... Ri, und Rj bilden zusammen -CH&sub2;-CH&sub2;-O-CO-... " ein Lacton, in dem das Carbonyl an C&sub2; gebunden ist. Die Bezeichnung "... Rj und Ri bilden zusammen -CO-O-CH&sub2;-CH&sub2;-" bedeutet nach der Übereinkunft ein Lacton, in dem das Carbonyl an C&sub1; gebunden ist.
  • Der Kohlenstoffatomgehalt variabler Substituenten wird auf eine von zwei Arten angegeben. Die erste Art benutzt ein Präfix zu dem gesamten Namen der Variablen, z. B. "C&sub1;-C&sub4;", wobei sowohl "1" als auch "4" ganze Zahlen entsprechend der Mindestzahl und Höchstzahl von Kohlenstoffatomen in der Variablen bedeuten. Das Präfix ist von der Variablen durch einen Zwischenraum (in der deutschen Übersetzung: -) getrennt. So steht beispielsweise "C&sub1;-C&sub4;-Alkyl" für Alkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen (einschließlich isomerer Formen hiervon, sofern nicht ausdrücklich etwas Gegenteiliges gesagt ist). Wenn dieses einzige Präfix angegeben ist, steht es für den gesamten Kohlenstoffatomgehalt der zu definierenden Variablen. So steht C&sub2;-C&sub4;-Alkoxycarbonyl für eine Gruppe CH&sub3;-(CH&sub2;)n-O-CO- mit n = 0, 1 oder 2. Durch die zweite Art wird der Kohlenstoffatomgehalt lediglich jeden Teils der Definition getrennt angegeben, indem die Bezeichnung "Ci-Cj" eingeklammert und unmittelbar (ohne Zwischenraum) vor den festzulegenden Teil der Definition gesetzt wird. Aufgrund dieser optionalen Übereinkunft besitzt (C&sub1;-C&sub3;)Alkoxycarbonyl dieselbe Bedeutung wie C&sub2;-C&sub4;- Alkoxycarbonyl, da der Ausdruck "C&sub1;-C&sub3;" sich lediglich auf den Kohlenstoffatomgehalt der Alkoxygruppe bezieht. Während in ähnlicher Weise sowohl C&sub2;-C&sub6;-Alkoxyalkyl als auch (C&sub1;-C&sub3;)Alkoxy-(C&sub1;-C&sub3;)alkyl Alkoxyalkylgruppen mit 2 bis 6 Kohlenstoffatomen festlegen, unterscheiden sich beide Definitionen, da es erstere Definition ermöglicht, daß entweder der Alkoxy- oder Alkylteil alleine 4 oder 5 Kohlenstoffatome enthält, während letztere Definition beide Gruppen auf 3 Kohlenstoffatome beschränkt.
  • Wenn die Ansprüche einen ziemlich komplexen (cyclischen) Substituenten enthalten, ist am Ende der Phrase zur Benennung/Bezeichnung des speziellen Substituenten eine Anmerkung in Klammern gegeben, die dem Namen/der Bezeichnung in einem der Reaktionsschemata entspricht, die auch die chemische Strukturformel des speziellen Substituenten angeben.
    • DETAILLIERTE BESCHREIBUNG DER ERFINDUNG
  • Eine bevorzugte Ausführungsform der vorliegenden Erfindung sind Verbindungen der Formel I, worin R&sub1; Phenyl oder mit Halogen substituiertes Phenyl ist, R&sub2; -NHC(O)C&sub6;H&sub5; ist, R&sub3; und R&sub5; -H sind, R&sub4; -OH ist und R&sub1;&sub0; -H oder -C(O)CH&sub3; ist. Eine weitere bevorzugte Ausführungsform der vorliegenden Erfindung sind Verbindungen der Formel I, worin R&sub1; Phenyl oder mit Halogen substituiertes Phenyl ist, R&sub2; -NHC(O)OC(CH&sub3;)&sub3; ist, R&sub3; und R&sub5; H sind, R&sub4; -OH ist und R&sub1;&sub0; -H oder -COCH&sub3; ist. Eine weitere bevorzugte Ausführungsform der vorliegenden Erfindung sind Verbindungen der Formel I, worin R&sub1; Phenyl oder mit Halogen substituiertes Phenyl ist, R&sub2; -NHC(O)NHC(CH&sub3;)&sub3; ist, R&sub3; und R&sub5; -H sind, R&sub4; -OH ist und R&sub1;&sub0; -H oder -COCH&sub3; ist.
  • Eine Ausführungsform der vorliegenden Erfindung sind Verbindungen der Formel I, worin R&sub1; aus der Gruppe aus -CH&sub3;, -C&sub6;H&sub5; oder Phenyl, das mit 1, 2 oder 3 Resten von C&sub1;-C&sub4;-Alkyl, C&sub1;-C&sub3;-Alkoxy, Halogen, C&sub1;-C&sub3;-Alkylthio, Trifluormethyl, C&sub2;-C&sub6;-Dialkylamino, Hydroxy oder Nitro substituiert ist, ausgewählt ist und R&sub2; aus der Gruppe aus -H, -NHC(O)H, -NHC(O)-C&sub1;-C&sub1;&sub0;-Alkyl (vorzugsweise -NHC(O)-C&sub4;-C&sub6;- Alkyl), -NHC(O)Phenyl, -NHC(O)Phenyl, das mit 1, 2 oder 3 Resten von C&sub1;-C&sub4;-Alkyl, C&sub1;-C&sub3;-Alkoxy, Halogen, C&sub1;-C&sub3;-Alkylthio, Trifluormethyl, C&sub2;-C&sub6;-Dialkylamino, Hydroxy oder Nitro substituiert ist, -NHC(O)C(CH&sub3;)=CHCH&sub3;, -NHC(O)OC(CH&sub3;)&sub3;, -NHC(O)OCH&sub2;-Phenyl, -NH&sub2;, -NHSO&sub2;-4-Methylphenyl, -NHC(O)(CH&sub2;)&sub3;COOH, -NHC(O)-4-(SO&sub3;H) Phenyl, -OH, -NHC(O)-1- Adamantyl, -NHC(O)O-3-Tetrahydrofuranyl, -NHC(O)O-4-Tetrahydropyranyl, -NHC(O)CH&sub2;C(CH&sub3;)&sub3;, -NHC(O)C(CH&sub3;)&sub3;, -NHC(O)O- C&sub1;-C&sub1;&sub0;-Alkyl, -NHC(O)NH-C&sub1;-C&sub1;&sub0;-Alkyl, -NHC(O)NHPh, das mit 1, 2 oder 3 Resten von C&sub1;-C&sub4;-Alkyl, C&sub1;-C&sub3;-Alkoxy, Halogen, C&sub1;-C&sub3;-Alkylthio, Trifluormethyl, C&sub2;-C&sub6;-Dialkylamino oder Nitro substituiert ist, ausgewählt ist.
  • Durch die vorliegende Erfindung erfolgt: auch die Bereitstellung von Taxolanaloga der allgemeinen Formel II
  • und der Formel III
  • worin X ein Halogenatom, das aus der Gruppe aus -F, -Br, -Cl und -I ausgewählt ist, ist; und worin R&sub1;, R&sub2;, R&sub3;, R&sub4;, R&sub5; und R&sub1;&sub0; wie im vorhergehenden definiert sind.
  • Eine Ausführungsform der vorliegenden Erfindung sind 7-Desoxy-7β,8β-methano-taxolanaloga der allgemeinen Formel II, worin:
  • R&sub1; aus der Gruppe aus -CH&sub3;, -C&sub6;H&sub5; oder Phenyl, das mit 1, 2 oder 3 Resten von C&sub1;-C&sub4;-Alkyl, C&sub1;-C&sub3;-Alkoxy, Halogen, C&sub1;-C&sub3;- Alkylthio, Trifluormethyl, C&sub2;-C&sub6;-Dialkylamino, Hydroxy oder Nitro substituiert ist, ausgewählt ist; und
  • R&sub2; aus der Gruppe aus -H, -NHC(O)-C&sub1;-C&sub1;&sub0;-Alkyl (vorzugsweise -NHC(O)-C&sub4;-C&sub6;-Alkyl), -NHC(O)Phenyl, -NHC(O)Phenyl, das mit 1, 2 oder 3 Resten von C&sub1;-C&sub4;-Alkyl, C&sub1;-C&sub3;-Alcoxy, Halogen, C&sub1;-C&sub3;-Alkylthio, Trifluormethyl, C&sub2;-C&sub6;-Dialkylamino, Hydroxy oder Nitro substituiert ist, -NHC(O)C(CH&sub3;)=CHCH&sub3;, -NHC(O)OC(CH&sub3;)&sub3;, -NH&sub2;, -NHSO&sub2;-4-Methylphenyl, -NHC(O)(CH&sub2;)&sub3;COOH, -NHC(O)-4-(SO&sub3;H) Phenyl oder -OH ausgewählt ist.
  • Eine weitere Ausführungsform der vorliegenden Erfindung sind 7-Desoxy-7β,8β-methano-taxolanaloga der allgemeinen Formel II, worin:
  • R&sub1; aus der Gruppe aus -CH&sub3;, -C&sub6;H&sub5; oder Phenyl, das mit 1, 2 oder 3 Resten von C&sub1;-C&sub4;-Alkyl, C&sub1;-C&sub3;-Alkoxy, Halogen, C&sub1;-C&sub3;- Alkylthio, Trifluormethyl, C&sub2;-C&sub6;-Alkylamino, Hydroxy oder Nitro substituiert ist, ausgewählt ist; und
  • R&sub2; aus der Gruppe aus -NHC(O)-1-Adamantyl, -NHC(O)O-3- Tetrahydrofuranyl, -NHC(O)O-4-Tetrahydropyranyl, -NHC(O)CH&sub2;C(CH&sub3;)&sub3;, -NHC(O)C(CH&sub3;)&sub3;, -NHC(O)O-C&sub1;-C&sub1;&sub0;-Alkyl, -NHC(O)NH-C&sub1;-C&sub1;&sub0;-Alkyl, -NHC(O)NHPh, das mit 1, 2 oder 3 Resten von C&sub1;-C&sub4;-Alkyl, C&sub1;-C&sub4;-Alkoxy, Halogen, C&sub1;-C&sub3;-Alkylthio, Trifluormethyl, C&sub2;-C&sub6;-Dialkylamino oder Nitro substituiert ist, -NHC(O)-C&sub3;-C&sub8;-Cycloalkyl ausgewählt ist.
  • Eine bevorzugte Ausführungsform der vorliegenden Erfindung sind Verbindungen der Formel II, worin R&sub1; Phenyl oder mit Halogen substituiertes Phenyl ist, R&sub2; -NHC(O)C&sub6;H&sub5; ist, R&sub3; und R&sub5; -H sind und R&sub1;&sub0; -C(O)CH&sub3; ist. Eine weitere bevorzugte Ausführungsform der vorliegenden Erfindung sind Verbindungen der Formel II, worin R&sub1; Phenyl oder mit Halogen substituiertes Phenyl ist, R&sub2; -NHC(O)OC(CH&sub3;)&sub3; ist und R&sub3;, R&sub5; und R&sub1;&sub0; -H sind. Eine weitere bevorzugte Ausführungsform der vorliegenden Erfindung sind Verbindungen der Formel II, worin R&sub1; Phenyl oder mit Halogen substituiertes Phenyl ist, R&sub2; -NHC(O)OC(CH&sub3;)&sub3; ist und R&sub3; und R&sub5; -H sind und R&sub1;&sub0; -C(O)CH&sub3; ist. Eine weitere bevorzugte Ausführungsform der vorliegenden Erfindung sind Verbindungen der Formel II, worin R&sub1; Phenyl oder mit Halogen substituiertes Phenyl ist, R&sub2; -NHC(O)NHC(CH&sub3;)&sub3; ist, R&sub3; und R&sub5; -H sind, R&sub4; -H ist und R&sub1;&sub0; -H oder -COCH&sub3; ist.
  • Weitere bevorzugte Ausführungsformen der Formel II umfassen:
  • 7-Desoxy-7β,8β-methano-taxol;
  • 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-desoxy-7β,8β- methano-taxol;
  • 10-Acetyl-7-desoxy-7β,8β-methano-taxotere; und
  • N-Debenzoyl-n-(tert.-butyl)-aminocarbonyl-7-desoxy-7β,8β- methano-taxol.
  • Eine weitere Ausführungsform der vorliegenden Erfindung sind 7-Halogentaxolanaloga der allgemeinen Formel III, worin:
  • R&sub1; aus der Gruppe aus -CH&sub3;, -C&sub6;H&sub5; oder Phenyl, das mit 1, 2 oder 3 Resten von C&sub1;-C&sub4;-Alkyl, C&sub1;-C&sub3;-Alkoxy, Halogen, C&sub1;-C&sub3;- Alkylthio, Trifluormethyl, C&sub2;-C&sub6;-Dialkylamino, Hydroxy oder Nitro substituiert ist, ausgewählt ist; und
  • R&sub2; aus der Gruppe aus -H, -NHC(O)Phenyl, -NHC(O)Phenyl, das mit 1, 2 oder 3 Resten von C&sub1;-C&sub4;-Alkyl, C&sub1;-C&sub3;-Alkoxy, Halogen, C&sub1;-C&sub3;-Alkylthio, Trifluormethyl, C&sub2;-C&sub6;-Dialkylamino, Hydroxy oder Nitro substituiert ist, -NHC(O)C(CH&sub3;)=CHCH&sub3;, -NHC(O)OC(CH&sub3;)&sub3;, -NH&sub2;, -NHSO&sub2;-4-Methylphenyl, -NHC(O)(CH&sub2;)&sub3;COOH, -NHC(O)-4- (SO&sub3;H) Phenyl oder -OH ausgewählt ist.
  • Eine weitere Ausführungsform der vorliegenden Erfindung sind 7-Halogentaxolanaloga der allgemeinen Formel III, worin:
  • R&sub1; aus der Gruppe aus -CH&sub3;, -C&sub6;H&sub5; oder Phenyl, das mit 1, 2 oder 3 Resten von C&sub1;-C&sub4;-Alkyl, C&sub1;-C&sub3;-Alkoxy, Halogen, C&sub1;-C&sub3;- Alkylthio, Trifluormethyl, C&sub2;-C&sub6;-Dialkylamino, Hydroxy oder Nitro substituiert ist, ausgewählt ist; und
  • R&sub2; aus der Gruppe aus -NHC(O)-1-Adamantyl, -NHC(O)O-3- Tetrahydrofuranyl, -NHC(O)O-4-Tetrahydropyranyl, NHC(O)CH&sub2;C(CH&sub3;)&sub3;, -NHC(O)C(CH&sub3;)&sub3;, -NHC(O)O-C&sub1;-C&sub1;&sub0;-Alkyl, -NHC(O)NH-C&sub1;-C&sub1;&sub0;-Alkyl, -NHC(O)NHPh, das mit 1, 2 oder 3 Resten von C&sub1;-C&sub4;-Alkyl, C&sub1;-C&sub3;-Alkoxy, Halogen, C&sub1;-C&sub3;-Alkylthio, Trifluormethyl, C&sub2;-C&sub6;-Dialkylamino oder Nitro substituiert ist, -NHC(O)-C&sub3;-C&sub8;-Cycloalkyl ausgewählt ist.
  • Die Verbindungen der Formel III umfassen sowohl die 7-α- als auch die 7-β-Konfiguration der 7-Halogensubstitution. Halogen bezeichnet -F, -Br, -Cl oder -I.
  • In den Verbindungen der Formel III sind X vorzugsweise -F und R&sub3; und R&sub5; vorzugsweise -H und R&sub1; vorzugsweise Phenyl oder mit Halogen substituiertes Phenyl.
  • Weitere bevorzugte Ausführungsformen der Formel III umfassen Verbindungen, worin:
  • R&sub4; -H und R&sub5; -OH ist;
  • R&sub4; von -H verschieden ist und R&sub5; gleich -H ist;
  • R&sub3; -H und R&sub1; Ph oder substituiertes Phenyl ist;
  • X -F ist;
  • X -α-F ist;
  • X -F ist und R&sub4; von -H verschieden ist und R&sub5; -H ist;
  • X -F ist, R&sub3; -H ist und R&sub1; Ph oder substituiertes Phenyl ist.
  • Bevorzugte Verbidungen der Formel III sind:
  • 7-Desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-desoxy-7- fluortaxol;
  • N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)aminocarbonyl-7-desoxy-7- fluortaxol;
  • 7-Desoxy-7α-fluortaxol, 7-Desoxy-7β-fluortaxol, 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-desoxy-7α- fluortaxol und
  • 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-desoxy-7β- fluortaxol.
  • Eine bevorzugte Ausführungsform der vorliegenden Erfindung sind Verbindungen der Formel III, worin R&sub1; Phenyl oder mit Halogen substituiertes Phenyl ist, R&sub2; -NHC(O)NHC(CH&sub3;)&sub3; ist, R&sub3; und R&sub5; -H sind, R&sub4; -OH ist und R&sub1;&sub0; -H oder -COCH&sub3; ist.
  • Beispiele für -NHC(O)-C&sub1;-C&sub1;&sub0;-Alkyl umfassen -NHC(O)-n-Pentyl und -NHC(O)CH(CH&sub3;)CH&sub2;CH&sub3;.
  • Beispiele für C&sub1;-C&sub6;-Alkyl umfassen gerade und verzweigte Alkylketten, die beispielsweise Methyl, Ethyl, Isopropyl, tert.-Butyl, Isobutyl und 2-Methyl-pentyl umfassen.
  • Beispiele für C&sub1;-C&sub3;-Alkoxy sind Methoxy, Ethoxy, Propoxy und isomere Formen derselben.
  • Halogen bezeichnet -F, -Br, -Cl oder -I.
  • Die erfindungsgemäßen Verbindungen werden nach dem bzw. den Verfahren, die in den Reaktionsschemata A, A', B und C angegeben sind, hergestellt.
  • Der Ausgangspunkt für das in Reaktionsschema A angegebene Verfahren ist ein Taxol- oder Taxolanalogonderivat A-1. Die Reaktion der Verbindung A-1 mit einem Reagens, wie Diethylaminoschwefeltrifluorid (DAST), Dimethylaminoschwefeltrifluorid (methylDAST), Bis(dimethylamino)schwefeldifluorid, Bis(diethylamino)schwefeldifluorid oder (Diethylamino)(dimethylamino)schwefeldifluorid, ergibt das 7-Desoxy-7β,8β-methano-analogon A'-2 (Reaktionsschema A-II) sowie das 7-Desoxy-7-fluor-analogon A"-2 (Reaktionsschema A-III). Das bevorzugte Verfahren für diese Umwandlung ist das mit DAST oder methylDAST. Die Reaktion mit DAST oder methylDAST wird in einem aprotischen Lösemittel, wie Methylenchlorid (CH&sub2;Cl&sub2;), Chloroform (CHCl&sub3;), Fluortrichlormethan (Freon 11®), Ethylenglykoldimethylether (glyme), 2-Methoxyethylether (diglyme), Pyridin, Kohlenwasserstoffen, wie Pentan, Hexan oder Isooctan, Tetrahydrofuran (THF), Benzol, Toluol, Xylol, durchgeführt. Das bevorzugte Lösemittel ist Methylenchlorid. Die Reaktion kann in einem Temperaturbereich von -100ºC bis 100ºC oder darüber durchgeführt werden. Im allgemeinen wird die Reaktion unter Bedingungen einer niedrigen Temperatur, beispielsweise -78ºC, begonnen und dann bei einer höheren Temperatur, beispielsweise 25ºC, fortschreiten gelassen. Das Reaktionsgemisch wird mit Wasser gequencht und das Rohprodukt wird durch Standardextraktionsverfahren isoliert und durch Standardchromatographieverfahren und/oder durch Kristallisation gereinigt. [Wenn R&sub4; -OC(O)OCH&sub2;C(Cl)&sub3; ist, dient die Behandlung von A'-2 (Reaktionsschema A-II) mit aktiviertem Zink in Methanol- Essigsäure-Lösung zur Entfernung der Schutzgruppe und zur Bildung des gewünschten 7-Desoxy-7β,β-methano-taxols oder 7-Desoxy-7β,β-methano-taxolanalogons A'-3 (Reaktionsschema A-II). Wenn R&sub4; -OC(O)OCH&sub2;C(Cl)&sub3; ist, dient die Behandlung von A"-2 (Reaktionsschema A-III) mit aktiviertem Zink in Methanol-Essigsäure-Lösung zur Entfernung der Schutzgruppe und Bildung des gewünschten 7-Desoxy-7-fluortaxols oder 7- Desoxy-7-fluortaxolanalogons A"-3 (Reaktionsscema A-III).] Die Methodik zur Anfügung verschiedener Schutzgruppen an Taxol oder Taxolanaloga und zur Entfernung dieser Gruppen findet sich bei: T. W. Greene und P. G. M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis", 2. Auflage, S. 10-142, Wiley, N. Y., 1991.
  • Alternativ können die Verbindungen (Formel II) der vorliegenden Erfindung durch die Behandlung eines 7-epi- Taxolderivats mit DAST in Dichlormethan gemäß der Offenbarung bei Chen et al., Serendipitous Synthesis of a Cyclopropane-Containing Taxol Analog via Anchimeric Participation of an Unactivated Angular Methyl Group, Advance ACS Abstracts, Band 1, Nr. 2, 15. Juli 1993 und J. Org. Chem., 1993, 56, 4520 (13. August 1993) hergestellt werden.
  • Die erfindungsgemäßen Verbindungen (Formel II) können auch gemäß dem in Reaktionsschema B-11 angegebenen Verfahren hergestellt werden. Bei diesem Verfahren ergibt, wenn Z' = H in Formel II (wenn Z' = H; R&sub1;&sub0; = -C(O)CH&sub3; ist diese Struktur der Formel II auch als Baccatin III bekannt), die Behandlung von Baccatin III oder eines geeignet geschützten (Z' = troc) Baccatin-III-Moleküls B-1 nach dem oben beschriebenen Verfahren 7-Desoxy-7β,8β-methano-baccatin III (B-2) nach der Entfernung der Schutzgruppe. Die Reaktion von B-2 mit einem Aktivierte-Seitenkette-Vorläufer B-3 nach einem von mehreren in der Literatur beschriebenen Verfahren (siehe: D. G. I. Kingston, Pharmac. Ther., 1991, 52, 1-34; A. Commercon; D. Bézard; F. Bernard,; J. D. Bourzat, Tetrahedron Lett., 1992, 33, 5185; G. I. Georg; Z. S. Cheruvallath; R. H. Himes; M. R. Mejillano, BioMed. Chem. Lett., 1992, 2, 295) ergibt B-4. Beispielsweise ergibt die Kopplung von 7-Desoxy-7β,8β-methano-baccatin III mit (4S,5R)-N-Boc-2,2-Dimethyl-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäure und die anschließende Umwandlung gemäß dem Verfahren von Commercon et al. ein Zwischenprodukt, das für weitere Umwandlungen in 7-Desoxy-7β,8β-methano-taxol, 7-Desoxy- 7β,8β-methano-taxotere [Verbindung der Formel II, worin R&sub1; = Ph; R&sub2; = NHC(O)O-tert.-Bu; R&sub3; = R&sub5; = H; R&sub4; = R&sub6; = OH;] und andere 7-Desoxy-7β,8β-methano-taxolanaloga geeignet ist.
  • Die erfindungsgemäßen Verbindungen (Formel II) können auch aus Taxol oder Taxolanaloga mit einem Substituenten an C-7 mit den Eigenschaften einer guten abspaltbaren Gruppe, beispielsweise
  • (a) einem Diazoniumionvorläufer, wie -NH&sub2;,
  • (b) einem Sulfonatester, -OSO&sub2;R (wobei R eine Gruppe wie beispielsweise -CH&sub3;, -CF&sub3;, C&sub6;H&sub4;-(p)-CH&sub3;, -C&sub6;H&sub4;-(p)-Br, -C&sub6;H&sub4;-(p)-NO&sub2; ist), oder
  • (c) einem der Halogene, Iod oder Brom (-I oder -Br), hergestellt werden. Ein C-7-Aminsubstituent wird bei Reaktion mit salpetriger Säure (HNO&sub2;) in ein Diazoniumion umgewandelt. Das Diazoniumion spaltet spontan Stickstoff ab, was zur Bildung der funktionellen 7β,8β-Methanogruppe führt. Ein C-7-Sulfonatester erfährt, wenn er in einem polaren Lösemittel (wie Methanol-Wasser, Ethanol-Wasser, Trifluoressigsäure) gelöst wird, eine Ionisierung, die zur Bildung der funktionellen 7β,8β-Methanogruppe führt. Die Ionisierung des C-7-Sulfonatesters kann durch die Zugabe einer nicht-nucleophilen Base [wie Kaliumcarbonat, Kaliumbicarbonat, 1,4-Diazabicyclo[2.2.2]octan (DABCO)] zu dem Reaktionsmedium verstärkt werden. Ein C-7-Iodid oder -Bromid erfährt eine Ionisierung und Bildung der funktionellen 7β,8β-Methanogruppe in einem polaren Lösemittel in Gegenwart von Metallsalzen, insbesondere Silbersalzen, wie Silberacetat, Silbertrifluoracetat, Silbertetrafluorborat.
  • Die erfindungsgemäßen Verbindungen (Formel III) können auch nach dem in Reaktionsschema B-III angegebenen Verfahren hergestellt werden. Bei diesem Verfahren ergibt, wenn Z' = H in Formel II (wenn Z' = H; R&sub1;&sub0; = -COCH&sub3;, ist diese Struktur der Formel II auch als Bacatin III bekannt), die Fluorierung von Bacatin III oder eines geeignet geschützten (Z' = troc) Baccatin-III-Moleküls B-1 nach dem oben beschriebenen Verfahren 7-Fluorbaccatin III (B-2) nach der Entfernung der Schutzgruppe. Die Reaktion von B-2 mit einem Aktivierte-Seitenkette-Vorläufer B-3 nach einem von mehreren in der Literatur beschriebenen Verfahren (s. D. G. I. Kingston, Pharmac. Ther., 1991, 52, 1-34; P.. Commercon; D. Bézard; F. Bernard; J. D. Bourzat, Tetrahedron Lett., 1992, 33, 5185; G. I. Georg; Z. S. Cheruvallath; R. H. Himes; M. R. Mejillano, BioMed. Chem. Lett. 1992, 2, 295) ergibt B-4. Beispielsweise ergibt die Kopplung von 7-Fluorbaccatin III mit (4S,5R)-N-Boc-2,2-Dimethyl-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäure und die anschließende Umwandlung gemäß dem Verfahren von Commercon et al. ein Zwischenprodukt, das für weitere Umwandlungen in 7-Desoxy-7-fluortaxol, 7-Desoxy-7- fluortaxotere [Verbindung der Formel III, worin R&sub1; = Ph; R&sub2; = NHC(O)O-tert. -Bu; R&sub3; = R&sub5; = H; R&sub4; = OH; R&sub1;&sub0; = -C(O)CH&sub3;] und andere 7-Desoxy-7-fluortaxolanaloga geeignet ist.
  • Die erfindungsgemäßen Verbindungen (Formel I einschließlich Formel II und III) können nach einem neuen, verbesserten Verfahren, das in den Reaktionsschemata A', B und C angegeben ist, hergestellt werden. Die Herstellung der 3-Azido-2-hydroxy-carbonsäureester 1 kann gemäß der Beschreibung in der Literatur (s. J.-N. Denis; A. Correa, A. E. Greene, J. Org. Chem., 1990, 55, 1957) erfolgen. Diese Materialien können ohne weiteres zu den freien Aminen hydriert werden, obwohl die Literatur dieses Zwischenprodukt absichtlich vermeidet, indem das Hydroxy-acylierte Zwischenprodukt vor der Reduktion des Azids hergestellt wird. Das Amin 2 ist so ausreichend stabil, dass keine Probleme bei dessen Isolation und direkten Verwendung zur Herstellung der N-acylierten freien Hydroxyverbindungen 3 auftreten. Die Verbindungen 3 wurden durch Schützen der Hydroxygruppe, Hydrolyse des Esters zur Säure und direkte Kondensation mit einem Baccatin-III-Derivat oder nach der Umwandlung in das Oxazinon (europäisches Patent 0 428 376 A1, US 436 235) verwendet. Diese Verfahren sind deutlich minderwertig, da sie einen großen Überschuss des Acylierungsmittels erfordern und im allgemeinen nicht über 60% hinaus ablaufen. Es wurden auch Verfahren beschrieben, die ein beta-Lactamzwischenprodukt verwenden, doch erfordern diese auch große Reagenzienüberschüsse oder die Einführung sehr starker Basen, wie LDA, was deren Ausführung schwierig und sie für bestimmte Analoga ungeeignet macht (I. Ojima; I. Habus, M. Zhao, G. I. George; L. R. Jayasinghe, J. Org. Chem., 1991, 56, 1681, EP 0 400 971 A2). Ein sehr effektives Kondensationsverfahren, das die Umwandlung des Hydroxyaminderivats 3 in ein Oxazolidin mit 2 Nicht- Wasserstoffsubstituenten an Position 2 umfasst, wurde durch A. Commercon, D. Bézard, F. Bernard, J. D. Bourzat in Tetrahedron Lett., 1992, 33, 5185 und dem Patent WO 92/09589 beschrieben. Die Kondensation erfolgt in sehr hoher Ausbeute, jedoch erfordert die Entfernung der Schutzgruppe eine so ausreichend starke Säure, dass empfindliche Taxolanaloga unter den Entschützungsbedingungen zerstört werden. Wir mo difizierten und verbesserten dieses Verfahren durch Bildung der Oxazolidine 5 nicht mit einem Keton, wie es die obigen Personen verwendeten, sondern mit einem elektronenreichen Benzaldehyd 4. Die von dem Benzaldehyd 4 abgeleiteten Oxazolidine werden als Gemisch von Diastereomeren gebildet, doch wurden diese in einigen Fällen aufgetrennt und es zeigte sich, dass die Diastereomere gleich geeignet waren, wenn diese in der Synthese weitergeführt wurden. Die Oxazolidine 5 werden ohne weiteres zu den Salzen 6 und den Säuren 7 hydrolysiert. Die Säure ist labil und muss kurz nach der Herstellung verwendet werden. Beide Oxazolidinisomere sind gleich wirksam bei der Kondensationsreaktion mit den geschützten Baccatinen 8, wobei sie eine hervorragende Ausbeute der Oxazolidin-geschütztes-Taxol-Analoga 9 ergaben. Noch wichtiger ist, dass beide Oxazolidinisomere von diesen elektronenreichen Benzaldehyden unter sehr milden sauren Bedingungen ohne weiteres hydrolysiert werden, was eine Entschützung ermöglicht, ohne unerwünschte Umwandlungen von hochsäureempfindlichen Taxolderivaten, wie 10, die Gegenstand dieser Erfindung sind, zu bewirken. Es gibt Literaturstellen zur Verwendung elektronenreicher Aldehyde zum Schutz von 1,2-Diolen als Dioxolanen, jedoch keine frühere Literaturstelle zur Verwendung dieser Aldehyde zum Schutz von 2-Hydroxy-geschützten Aminen. Die Entschützung kann derart durchgeführt werden, dass sowohl das Oxazolidin als auch das 7-geschützte Hydroxyl von 9 gleichzeitig entfernt werden oder jedes unabhängig voneinander entfernt werden kann. Zusätzlich wird die Entschützung ausgewählter Urethananaloga 10 zum freien Amin 11 beschrieben (Reaktionsschema B). Diese werden dann in eine Reihe aminacylierter Analoga 10 umgewandelt.
  • Die Umwandlung des Azids 1 in das Amin 2 wird durch einschlägig bekannte Reduktion bewirkt. So kann die Reaktion durch Hydrierung in Gegenwart einer Vielzahl von Hydrierungskatalysatoren, wie Palladium, Platin, Rhodium oder Ruthenium, durchgeführt werden. Alternativ kann das Azid durch Behandlung mit einem Phosphin, wie Triphenyl- oder Tributylphosphin, oder durch eine Säure, wie Salzsäure, Schwefelsäure, Trifluoressigsäure oder Bromwasserstoff, in Gegenwart eines Metalls, wie Zink, Eisen oder Zinn, re duziert werden. Diese Reaktionen können in einem Lösemittel, wie Ethanol, Methanol, Ethylacetat, Methyl-tert.- butylether oder Tetrahydrofuran u. dgl., durchgeführt werden. Die Umwandlung des Amins 2 in dessen acyliertes Derivat 3 wird durch Behandlung des Amins in Pyridin oder einem nicht-basischen Lösemittel, wie Methylenchlorid und Tetrahydrofuran, das ein tertiäres Amin, wie Triethylamin oder Ethyldiisopropylamin, enthält, mit einem Acylierungsmittel durchgeführt. Wenn 3 ein Urethan ist, wird 2 mit einem Mittel, wie Benzylchlorformiat, 2,2,2-Trichlorethoxycarbonylchlorid, Di-tert.-butyldicarbonat oder einem anderen einschlägig bekannten Urethan bildenden Mittel behandelt. Wenn 3 ein Amid ist, wird 2 mit einem Acylierungsmittel, wie einem Acylhalogenid und einem Acylanhydrid oder einem anderen einschlägig bekannten Acylierungsmittel, behandelt. Wenn 3 ein Harnstoff oder Thioharnstoff ist, wird 2 mit einem Mittel, wie Alkyl- oder Arylisocyanat, Alkyl- oder Arylisothiocyanat oder einem anderen einschlägig bekannten Harnstoff oder Thioharnstoff bildenden Mittel, behandelt.
  • Das Hydroxyamid oder Urethan 3 wird in das Oxazolidin 5 durch Behandlung mit einem elektronenreichen Benzaldehyd oder dessen Acetal, wie Dimethyl- oder Diethylacetal 4, und einem Säurekatalysator, wie p-Toluolsulfonsäure, Pyridinium-p-toluolsulfonat oder anderen einschlägig bekannten Säurekatalysatoren, in einem Lösemittel, wie Tetrahydrofuran, Toluol, Methylenchlorid oder einem anderen aprotischen Lösemittel, umgewandelt. Beispiele für elektronenreiche Benzaldehyde umfassen, ohne hierauf beschränkt zu sein, 2-, 3-, 4-Methoxybenzaldehyd; 2,4-, 3,5-, 2,5-Dimethoxybenzaldehyd; 2,4,6-Trimethoxybenzalehyd; und 4-Ethoxybenzaldehyd. Der bevorzugte Benzaldehyd ist 2,4-Dimethozybenzaldehyd. Die Oxazolidinbildung wird im allgemeinen durch Erhitzen unter Rückflußkühlung zur Abdestillation sowohl des Lösemittels als auch zur Entfernung des entwickelten Wassers oder Alkohols durchgeführt. Der Ester von 5 wird zu dem Salz 6 durch Behandlung mit einem Alkali oder quaternären Aminhydroxid oder durch ein Alkalicarbonat oder eine andere einschlägig bekannte Base in einem Lösemittel, wie Wasser, Methanol, Ethanol oder einem anderen aprotischen Lösemittel, hydrolysiert. Die Reaktion kann von -78ºC bis 100ºC durchgeführt werden. Das Produkt 6 ist stabil und kann durch Abdampfen der Lösemittel isoliert und als Feststoff aufbewahrt werden oder die Reaktion kann direkt zur Umwandlung von 6 zur Säure 7 durch Behandlung mit Säure verwendet werden. Im allgemeinen wird 7 durch Behandlung einer wässrigen Lösung von 6 in einem Scheidetrichter mit ausreichend Säure, wie Salzsäure, Schwefelsäure, Kaliumhydrogensulfat o. dgl., und Aufteilen der gewünschten Säure in ein organisches Lösemittel, wie Ethylacetat, Methylenchlorid, Ether o. dgl., und Abdampfen des Lösemittels erhalten. Die entstandene Säure 7 ist ausreichend rein und stabil zur Verwendung in der nächsten Reaktion, jedoch im allgemeinen nicht ausreichend stabil für eine längere Aufbewahrung. Die Säure 7 wird mit dem Baccatinderivat 8 zur Bildung des Esters 9 mit einem Dehydratisierungsmittel kondensiert. Am stärksten bevorzugt für dieses Verfahren ist ein Carbodiimid, wie Dicyclohexylcarbodiimid, Diisopropylcarbodiimid, Di-p-tolylcarbodiimid, Ethyldimethylaminopropylcarbodiimidhydrochloridsalz o. dgl., und ein basischer Katalysator, vorzugsweise 4-Dimethylaminopyridin. Die Reaktion wird im allgemeinen in einem aprotischen Lösemittel, wie Toluol, Benzol, Tetrahydrofuran, Dioxan o. dgl. bei 25ºC bis 100ºC durchgeführt. Andere Dehydrierungsverfahren zur Bildung von 9 können verwendet werden, beispielsweise die Umwandlung von 7 in dessen gemischten Ester mit einer Sulfonsäure, wie Toluolsulfonylchlorid oder Benzolsulfonylchlorid, oder die Bildung des Säurehalogenids aus dem getrockneten 6 in Gegenwart von Oxalylchlorid, wie dies für säureempfindliche Carbonsäuren einschlägig bekannt ist. Die Oxazolidine 9 können so entschützt werden, dass das schützende Oxazolidin und die das Hydroxyl an der Position 7 des Baccatins blockierenden Gruppen in einer beliebigen Reihenfolge einzeln oder beide zusammen in Abhängigkeit von der Schutzgruppe an der Position 7 und den Reaktionsbedingungen entschützt werden. Wenn R&sub1;&sub4; ein säurelabile Gruppe, beispielsweise ein Silylether ist, kann die Hydrolyse des Oxazolidins unter milden sauren Bedingungen durchgeführt werden und sie führt zur Entschützung der Position 7 sowie zur direkten Bildung von 10 MZ. Die Bedingungen für diese Umwandlungen umfassen eine Hydrolyse in wässriger Essigsäure, wässriger alkoholi scher Säure mit 0,01-0,1 N bei 0ºC bis 50ºC oder alkoholischer Säure mit 0,01-0,1 N bei 0ºC bis 50ºC. Alternativ kann der Schutz an der Position 7 in einer zweiten Stufe entfernt werden, wenn er nicht säurelabil ist. Beispielsweise kann die Trichlorethoxycarbonylgruppe an Position 7 von 10 MY (Reaktionsschema B) durch Reduktion in einschlägig bekannter Weise zur Bildung von 10 MZ entfernt werden. In Abhängigkeit von der Natur der Schutzgruppe am Stickstoff (d. h. R&sub2; oder R&sub3;) von 10 MZ (Reaktionsschema B) kann die Schutzgruppe zur Bildung von 112 entfernt werden. Wenn beispielsweise R&sub2; PhCH&sub2;OC(O)NH ist, kann sie durch milde Hydrogenolyse entfernt werden. Die Bedingungen für diese Umwandlungen umfassen eine Reduktion mit Wasserstoff über einem Metallkatalysator, wie Palladium, in einem Lösemittel, wie Ethanol oder Ethylacetat, bei Raumtemperatur und einem Druck von 1-3 atm. Andere Verfahren sind einschlägig bekannt. Das entstandene Amin 11Z kann erneut in ein Amid oder Urethan 10 MZ (Reaktionsschema B) durch Acylierungsverfahren gemäß der obigen Beschreibung für die Umwandlung von 2 in 3 umgewandelt werden. Das Produkt 10 MZ kann an dem 2'-Hydroxyl zur Bildung von 12 MZ geschützt werden (Reaktionsschema B). Beispielsweise kann das 2'-Hydroxyl mit Trichlorethoxycarbonylchlorid in Pyridin oder anderen aromatischen Aminlösemitteln oder in einem nichtbasischen Lösemittel, wie Toluol, Methylenchlorid oder Tetrahydrofuran, das eine tertiäre Aminbase enthält, acyliert werden. Die Reaktion kann bei -50ºC bis 100ºC durchgeführt werden. Andere Verfahren für derartige Acylierungen sind einschlägig bekannt.
  • Die Reaktion von Taxol, Taxolanaloga 10 MZ (R&sub1;&sub5; ist Acetat oder eine andere geeignete Acyleinheit), Baccatin III oder Baccatin-III-Analoga 8 (R&sub6; ist Acetat oder eine andere geeignete Acyleinheit) mit Hydrazin umfasst ein besonders vorteilhaftes Verfahren zur Herstellung von 10-Desacetyl-taxol, 10-Desacyl-taxolanaloga (10 MZ, R&sub1;&sub5; = H), 10-Desacetyl-baccatin III und 10-Desacyl-baccatin-III- analoga (8, R&sub6; = H). Während das berichtete Verfahren (G. Samaranayake et al., J. Org. Chem., 1991, 56, 5114) zur Entfernung der Acylgruppe aus dieser Position von Taxol- und Baccatin-Strukturen, d. h. Zinkbromid in Methanol, eine Reihe von anderen Produkten zusätzlich zu dem gewünschten Deacylierung-Nr. 2-Produkt ergibt, ergibt die Reaktion mit Hydrazin fast ausschließlich das gewünschte Deacylierungsprodukt. Die Reaktion kann bei Raumtemperatur in einem organischen Lösemittel durchgeführt werden und sie erfordert üblicherweise in Abhängigkeit vom Substrat 15 min oder bis zu 24 h. Das bevorzugte Lösemittel für die Reaktion ist 95% Ethanol und 98% Hydrazin ist die bevorzugte Form des Reagens.
    • Herstellungsbeispiel Nr. 1 Herstellung von (2R,3S)-β-Phenyl-isoserin-methylester (2)
  • Der (2R,3S) -3-Azido-2-hydroxy-3- phenylpropionsäuremethylester (1, 0,5 g) wird über 10%- Palladium-auf-Kohle (0,1 g) in Ethanol bei atmosphärischem Druck 1 h lang hydriert. Das Reaktionsgemisch wird filtriert und eingedampft, wobei das gewünschte Amin erhalten wird. Fp 106-108ºC.
  • NMR (CDCl&sub3;, TMS): δ 2,1 (bs); 3,80 (s, 3H); 4,31 (m, 2H); 7,28-7,45 (m, 5H).
    • Herstellungsbeispiel Nr. 2 Herstellung von (4S,5R)-N-Benzoyl-2-(2,4-dimethoxyphenyl)- 4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäuremethylester (5Aa & 5Ab)
  • N-Benzoyl-β-phenyl-isoserinmethylester (3A, 0,5 g, 1,67 mmol) wird in trockenem THF (10 ml) und Benzol (10 ml) gelöst und die Lösung wird mit 2,4-Dimethoxy-benzaldehyddimethylacetal (4, 0,420 g, 1,98 mmol) und Pyridinium-p- toluolsolfonat (12 mg) behandelt und die Lösung wird unter Rückflußkühlung erhitzt. Nach 30 min wird das Reaktionsgemisch auf Raumtemperatur gekühlt und über Nacht stehengelassen. Es wird danach erneut erwärmt, um die Hälfte des Lösemittels während 1 h langsam abzudestillieren. DC zeigt, dass die Reaktion an diesem Punkt beendet ist. Dieses Reaktionsgemisch wird unter Vakuum eingeengt und der Rückstand wird über 50 g von in (5-95) Methanol-Toluol gepacktem Silicagel chromatographiert. Die Säule wird mit Methanol- Toluol (5-95) eluiert. 12-ml-Fraktionen werden gewonnen. Das Produkt eluiert als Gemisch. Daher werden Fraktionen, die sowohl 5Aa als auch 5Ab enthalten, kombiniert und ein gedampft. Der Rückstand (0,90 g) wird über Silicagel (100 g) erneut chromatographiert. Die Säule wird mit Ethylacetat-Toluol (500 ml mit 15-85 und 500 ml mit 20-80) eluiert. 20-ml-Fraktionen werden gewonnen und mittels DC analysiert. Die Fraktionen, die jeweils 5Aa und 5Ab enthalten, werden vereinigt und unter Vakuum eingedampft.
    • Weniger polares Isomer 5Aa
  • Gemisch des weniger polaren und stärker polaren Isomers 5Aa und 5Ab stärker polares 5Ab.
  • Das Isomer 5Ab wird aus EtOAc umkristallisiert, wobei weiße Kristalle gebildet werden (142 mg, Fp 138-141ºC).
    • Daten für 5Aa
  • DC: Silicagel; 20% EtOAc-80% Toluol: Rf: 0,50.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS): δ 3,69 (s, 3H); 3,77 (s, 3H); 3,86 (s, 3H); 4,93 (d, 1H); 5,6 (br.s, 1H), 6,28-6,37 (m, 2H); 6,90 (s, 1H); 7,03 (d, 1H); 7,15-7,55 (m, 9).
    • Daten für 5Ab
  • DC: Silicagel; 20% EtOAc-80% Toluol: Rf: 0,41.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS): δ 3,62 (bs, 3H); 3,75 (br.s, 6H); 4,65 (d, 1H); 6,58 (bs, 1H); 6,2-6,5 (m, 2H); 6,8-7,55 (m, 11H).
  • UV: EtOH; 229 (16 000), 277 (3240), 281 sh (3170).
  • Elementaranalyse: Berechnet: C 69,79; H 5,63; N 3,13. Gefunden: C 69,61; H 5,62; N 2,93.
    • Herstellungsbeispiel Nr. 3 Herstellung von (4S,5R)-N-Benzyl-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4- phenyl-5-oxazolidin-carbonsäure-kaliumsalz. 6Ab
  • (4S,5R)-N-Benzyl-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5- oxazolidin-carbonsäure-methylester (Herstellungsbeispiel Nr. 2, 5Ab, 355 mg, 0,79 mmol) wird in 9 ml Methanol gelöst. Zu der Lösung werden Wasser (350 ul) und Kaliumcarbonat (155 mg, 1,12 mmol) gegeben. Nach 5-stündigem Rühren sind keine Feststoffe übrig und DC gibt an, dass sehr wenig Methylester übrig ist. Das Lösemittel wird unter Vakuum eingeengt und Wasser (10 ml) wird zu dem Öl gegeben. Die Lösung wird gefriergetrocknet, wobei 500 mg flockiges weißes Pulver erhalten werden, das 374 mg des Kaliumsalzes enthält.
  • DC: Silicagel 60; 1 : 2 EtOAc : Hexan; Rf: Ursprung.
    • Herstellungsbeispiel Nr. 4 Herstellung von 7-TES-Baccatin-III-13-(4S,5R)-N-benzoyl-2- (2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester (9AbA)
  • Eine Lösung von (4S,5R)-N-Benzoyl-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidin-carbonsäure-kaliumsalz (6Ab, Herstellungsbeispiel Nr. 3, 91,4 mg, etwa 0,15 mmol) in Ethylacetat wird mit 5%iger wässriger NaHSO&sub4;-Lösung gewaschen. Die Ethylacetatlösung wird getrocknet und eingedampft, wobei die entsprechende Säure 7Ab zurückbleibt. Der Rückstand wird in Methylenchlorid (0,8 ml) und Toluol (1,75 ml) gelöst und mit 7-Triethylsilyl-bac catin III (68 mg) vereinigt. Das Gemisch wird mit 4-Dimethylaminopyridin (6,3 mg) und 1,3-Dicyclohexylcarbodiimid (34 mg) behandelt. Das Reaktionsgemisch wird 90 min lang auf 80ºC erhitzt, gekühlt, filtriert und auf Silicagel in Ethylacetat-Hexan- Gemischen chromatographiert. Es wurde eine 86%ige Ausbeute des Kopplungsprodukts 9AbA erhalten.
  • NMR (CDCl&sub3;, TMS): δ 0,58 (m, 6H); 0,90 (m); 1,73 (s, 3H); 1,87 (m, 1H); 2,03 (m, 3H); 2,17 (bs, 3H); 2,20 (s, 3H); 2,23 (m, 2H); 2,50 (m, 1H); 3,78 (bs, 3H); 3,80 (s, 3H); 3,85 (d, 1H); 4,13 (d, 1H); 4,27 (d, 2H); 4,50 (m, 1H); 4,90 (m, 2H); 5,63 (bs, 1H); 5,68 (d, 1H); 6,25-6,48 (m, 3H); 6,50 (s, 1H); 6,86 (s, 1H); 7,09 (m, 1H); 7,15-7,65 (m, 13H); 8,05 (d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel Nr. 5 Herstellung von Taxol (Verbindung 10AA)
  • 7-TES-Baccatin-III-13-(4S,5R)-N-benzoyl-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester (9AbA) wird durch 10-minütiges Rühren in 0,1 M HCl in Methanol entschützt. Nach dem Verdünnen mit Ethylacetat wird die Lösung mit 5%iger NaHCO&sub3;-Lösung gewaschen, getrocknet und eingedampft. Das Produkt wird durch Säulenchromatographie auf Silicagel in Aceton-Hexan-Gemischen gereinigt. Die Proton- und Kohlenstoff-NMR-Daten sind mit natürlichem Taxol identisch.
    • Herstellungsbeispiel Nr. 6 Herstellung von (4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4- phenyl-5-oxazolidincarbonsäuremethylester (5Ba und 5Bb)
  • N-Boc-β-Phenylisoserinmethylester (3B) (0,5 g, 1,69 mmol) wird in trockenem THF (10 ml) und Toluol (10 ml) gelöst und zur Trockene eingeengt, um jegliches Kristallwasser zu entfernen. Der Rückstand wird dann in trockenem THF (10 ml) gelöst und die Lösung wird mit 2,4-Dimethoxy-benzaldehyd-dimethylacetal (4) (0,425 g, 2,0 mmol) und Pyridinium-p-toluolsulfonat (12 mg) behandelt und unter Rückflußkühlung erhitzt. Nach 30 min wird das Reaktionsgemisch auf Raumtemperatur gekühlt und über Nacht stehengelassen. Es wird dann erneut 3 h lang unter Rückflußkühiung erhitzt. Die Reaktion wird mittels DC überprüft und als unvollständig befunden. Das Reaktionsgemisch wird dann auf 85ºC erhitzt, um etwa 2/3 des THF abzudestillieren. Danach werden frisches THF (10 ml) und Acetal (200 mg) zugegeben und das Reaktionsgemisch wird weitere 2 h lang unter Rückflußkühlung erhitzt. DC gibt an, dass die Reaktion zu diesem Zeitpunkt beendet ist. Das Reaktionsgemisch wird unter Vakuum eingeengt und der Rückstand wird über 100 g Silicagel, das in (15-85) Aceton-Hexan gepackt ist, chromatographiert. Die Säule wird mit Aceton-Hexan (500 ml mit 15-85 und 500 ml mit 20-80) eluiert. 20-ml-Fraktionen werden gesammelt. Die gewünschten Produktisomere eluieren als Gemisch. Die das Gemisch von 5Ba und 5Bb enthaltenden Fraktionen werden vereinigt und unter Vakuum eingeengt, wobei ein weißer Schaum zurückbleibt. Der Schaum wird über 100 g Silicagel, das mit (10-90) EtOAc-Toluol gepackt ist und damit eluiert wird, erneut chromatographiert. 20-ml-Fraktionen werden gewonnen und mittels DC analysiert. Auf diese Weise werden 34 mg des weniger polaren Isomers 5Ba, 187 mg eines Gemischs des weniger polaren und stärker polaren Isomers 5Ba und 5Bb und 500 mg des stärker polaren Isomers 5Bb isoliert.
  • Das Isomer 5Bb wird aus EtOAc-Hexan umkristallisiert, wobei weiße Kristalle (378 mg) erhalten werden.
  • Das Gemisch der Isomere wird ebenfalls aus EtOAc-Hexan umkristallisiert, wobei kristallines 5Bb (113 mg) einer ähnlichen Reinheit aufgrund von DC wie die Mutterlaugen aus der Kristallisation des Tsomers 5Bb erhalten wird. Diese Kristalle und die Mutterlaugen werden daher vereinigt und aus EtOAc-Hexan umkristallisiert, wobei weiteres reines 5Bb (160 mg) erhalten wird.
    • Daten für 5Ba
  • DC: Silicagel 60; 10% EtOAc-90% Toluol; Rf: 0,44.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 1,26 (s, 9H); 3,80 (s, 3H); 3,84 (s, 3H); 3,85 (s, 3H); 4,86 (d, 1H); 5,24 (s, 1H); 6,40 (dd, 1H); 6,47 (d, 1H); 6,72 (s, 1H); 7,12 (d, 1H); 7,30-7,43 (m, 3H); 7,53 (d, 2H).
    • Daten für 5Bb
  • DC: Silicagel 60; 10% EtOAc-90% Toluol; Rf: 0,38
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 1,10 (s, 9H); 3,52 (bd, 3H); 3,81 (s, 3H); 3,87 (s, 3H); a4,54 (d, 1H); 5,43 (bs, 1H); 6,48 (s, 2H); 6,81 (bs, 1H): 7,13 (bs, 1H); 7,30-7,48 (m, 5H).
  • UV: EtOH; 233 (10.600), 260sh (1010), 277 (2840), 281sh (2680).
  • Elementaranalyse: Berechnet: C 65,00; H 6,59; N 3,16.
  • Gefunden: C 64,86; H 6,42; N 32,4.
    • Herstellungsbeispiel Nr. 7 Herstellung von (4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4- phenyl-5-oxazolidincarbonsäure-kaliumsalz (6Ba) und dessen freier Säure 75a
  • Eine Menge von 100 mg (0,23 mmol) (4S,5R)-N-Boc-2- (2,4-Dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäuremethylester (Herstellungsbeispiel Nr. 6, 5Ba) wird bei Raumtemperatur unter Stickstoff in 3 ml MeOH gerührt. 0,1 ml Wasser und 43 mg (0,31 mmol) Kaliumcarbonat werden zugesetzt. Nach 1 h zeigt DC, dass kein Ausgangsmaterial übrig ist. Nach der Aufbewahrung im Gefrierschrank über Nacht wird das Lösemittel am nächsten Morgen abgedampft, wobei (4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäure-kaliumsalz (6Ba) erhalten wird. Der Rückstand wird zwischen Methylenchlorid und Wasser, das 0,9 ml 1 N HCl enthält, aufgeteilt. Die Schichten werden getrennt und die wässrige Schicht wird erneut mit Methylenchlorid extrahiert. Die organischen Schichten werden vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Dies ergibt (4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäure (7Ba) als weißen Feststoff.
  • DC (Silicagel 60): 20% EtOAc-80% Hexan-2% HOAc: Rf: 0,07.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 1,26 (s, 9H): 3,76 (s, 6H); 4,77 (s, 1H); 5,34 (s, 1H); 6,33-6,45 (d, 2H); 6,60 (s, 1H); 7,07-7,16 (d, 1H); 7,24-7,40 (m, 3H); 7,42-7,54 (d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel Nr. 8 Herstellung von 7-TES-Baccatin-III-13-(4S,5R)-N-Boc-2-(2,4- dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester (9BaA)
  • Eine Menge von 0,23 mmol (4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäure (Herstellungsbeispiel Nr. 7, 7Ba) wird in 1,5 ml Methylenchlorid und 3 ml Toluol gelöst. 106 mg (0,15 mmol) 7-TES-Baccatin III (8A), 11 mg (0,09 mmol) DMAP und 49 mg (0,24 mmol) DCC werden zugegeben. Das Reaktionsgemisch wird 90 min lang unter Stickstoff gerührt und auf 75ºC erhitzt und anschließend auf Raumtemperatur gekühlt. Das entstandene Harnstoffnebenprodukt wird durch Filtration entfernt und das Filtrat wird unter Vakuum eingedampft. Der Rückstand wird über 20 g Silicagel unter Elution mit 30-70 EtOAc-Hexan chromatographiert. 5-ml-Fraktionen werden gewonnen, wobei diese mittels DC analysiert werden. Die Fraktionen 17-34 enthalten das gewünschte Produkt und sie werden vereinigt und eingedampft. 7-TES-Baccatin-III-13-(4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester (9BaA) wird als weißer Feststoff erhalten.
  • DC: Silicagel 60; 30% EtOAc-70% Hexan; Rf: 0,56.
  • Massenspektrum (FAB, m/z) 1112, 10,12, 874, 328, 284, 115, 105, 87.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 0,52-0,66 (m, 6H); 0,85-1,00 (m, 9H); 1,80-1,93 (m, 1H); 2,15 (s, 3H); 2,20 (s, 3H) 2,21-2,30 (m, 1H); 2,40-2,54 (m, 1H); 3,82 (s, 3H); 3,87 (s, 3H); 3,81 (d, 1H); 4,10 (d, 1H); 4,26 (d, 1H); 4,49 (m, 1H); 4,83-4,93 (m, 2H); 5,31 (d, 1H); 5,67 (d, 1H); 6,29 (t, 1H); 6,38-6,53 (m, 3H); 6,69 (s, 1H); 7,13 (d, 1H); 7,29-7,65 (m, 8H); 8,05 (d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel Nr. 9 Herstellung von 13-(N-Boc-β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin III (10BA)
  • Eine 0,1 M MCl-Lösung wird aus 0,071 ml Acetylchlorid und 9,929 ml MeOH hergestellt, die vor der Verwendung 30 min lang stehengelassen wird.
  • Zu 57 mg (0,051 mmol) 7-TES-Baccatin-III-13-(4S,5R)-N- Boc-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester (Herstellungsbeispiel Nr. 8, 9BaA) werden 0,5 ml der obigen methanolischen HCl-Lösung unter Rühren und unter Stickstoff gegeben. Die Reaktion ist nach 75 min vollständig, wie DC zeigt. Das Reaktionsgemisch wird zwischen Ethylacetat-5% Natriumbicarbonat aufgeteilt. Die Schichten werden getrennt und die wässrige Schicht wird mit Ethylacetat erneut extrahiert. Die organischen Schichten werden vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingedampft.
  • Das Rohprodukt wird über 10 g Silicagel unter Elution mit 50-50 Ethylacetat-Toluol chromatographiert. 2-ml-Fraktionen werden gewonnen, wobei diese mittels DC analysiert werden. Reines Produkt findet sich in den Fraktionen 19-42, die vereinigt und eingedampft werden. 13-(N-Boc-β-Phenyl- isoserinyl)-baccatin III (10BA) wird als weißer Feststoff erhalten.
  • DC: Silicagel 60; 50-50 EtOAc-Toluol; Rf: 0,38.
  • Massenspektrum (FAB): (M + H) gemessen bei 850,3680; theoretisch für C&sub4;&sub5;H&sub5;&sub6;N&sub1;O&sub1;&sub5; 850,3650; m/z 794, 569, 509, 105, 57.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS): δ 1,14 (s, 3H); 1,27 (s, 3H); 1,33 (s, 9H); 1,67 (s, 3H): 1,84 (s, 3H); 2,24 (s, 3H); 2,38, (s, 3H); 3,44 (d, 1H); 3,81 (d, 1H); 4,17 (d, 1H); 4,30 (d, 1H); 4,41 (m, 1H); 4,63 (bs, 1H); 4,95 (d, 1H); 5,26 (bd, 1H); 5,43 (bd, 1H); 5,67 (d, 1H); 6,23 (t, 1H); 6,28 (s, 1H); 7,27-7,45 (m, 5H); 7,50 (t, 2H); 7,62 (t, 1H); 8,11 (d, 2H).
    • Herstellun sbeispiel Nr. 10 Herstellung von (4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4- phenyl-5-oxazolidincarbonsäure-kaliumsalz (6Bb)
  • Eine Lösung von (4S,5R)-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4- phenyl-5-oxazolidincarbonsäure-methylester (Herstellungsbeispiel Nr. 6; 5Bb, 374 mg, 0,84 mmol) in MeOH (11 ml) wird bei Raumtemperatur unter Stickstoff gerührt und mit Wasser (0,37 ml) und Kaliumcarbonat (161 mg, 1,17 mmol) behandelt. Nach 2 h zeigt DC an, dass die Reaktion zu etwa 70% erfolgt ist. Nach dem Rühren über Nacht zeigt sich, dass die Reaktion vollständig ist. Das Lösemittel wird abgedampft und der Rückstand wird in 10 ml Wasser gelöst und gefriergetrocknet. Dies ergibt 507 mg flockigen weißen Feststoff, der (4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4- phenyl-5-oxazolidincarbonsäure-kaliumsalz (6Bb, 393 mg) enthält.
  • DC: Silicagel; 20% EtOAc-80% Hexan; Rf: Ursprung.
    • Herstellungsbeispiel Nr. 11 Herstellung von 7-TES-Baccatin-III-13-(4S,5R)-N-Boc-2-(2,4- dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester (9BbA)
  • Eine Menge von 0,12 mmol rohes (4S,5R)-N-Boc-2-(2,4- Dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäure-kaliumsalz (Herstellungsbeispiel Nr. 10, 6Bb) wird zwischen Ethylacetat-5% Natriumbisulfat aufgeteilt. Die Schichten werden getrennt und die wässrige Schicht wird mit Ethylacetat erneut extrahiert. Die organischen Schichten werden vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingedampft.
  • Das entstandene 7Bb wird in 0,8 ml Methylenchlorid- 1,5 ml Toluol zusammen mit 53 mg (0,076 mmol) 7-TES- Baccatin III (8A; s. J.-N. Denis, A. E. Greene, D. Guénard, F. Guéritte-Vogelein, L. Mangatal, P. Potier, J. Am. Chem. Soc. 1988, 110, 5917), 6 mg (0,049 mmol) 4-Dimethylaminopyridin (DMAP) und 25 mg (0,12 mmol) Dicyclohexylcarbodiimid (DCC) gelöst. Das Reaktionsgemisch wird 90 min lang unter Stickstoff gerührt und auf 75ºC erhitzt. Das Reaktionsgemisch wird auf Raumtemperatur gekühlt und das Harnstoffnebenprodukt wird abfiltriert. Das Filtrat wird unter Vakuum eingedampft.
  • Der Rückstand wird über 15 g Silicagel unter Elution mit 0-70 EtOAc-Hexan eluiert. 7-ml-Fraktionen werden gewonnen, wobei sie mittels DC analysiert werden. Die Fraktionen 16-38 enthalten das Produkt und werden vereinigt und eingedampft. 7-TES-Baccatin-III-13-(4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-dimeth oxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester (9BbA) wird als weißer Feststoff erhalten.
  • DC: Silicagel 60; 30% EtOAc-70% Hexan; Rf: 0,33.
  • Massenspektrum (FAB, m/z) 1112, 1012, 384, 328, 284, 115, 105, 87, 57.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 0,50-0,61 (m, 6H); 0,84-0,97 (m, 9H); 1,08 (s, 9H); 2,21 (s, 3H); 3,67 (d, 1H); 3,80 (s, 3H); 3,90 (s, 3H); 4,07 (d, 1H); 4,23 (d, 1H); 4,40 (m, 1H); 4,53 (bd, 1H); 4,87 (d, 1H); 5,44 (bd, 1H); 5,60 (d, 1H); 6,34 (s, 1H); 6,44 (bs, 1H); 6,48 (s, 1H); 7,20 (bs, 1H); 7,30-7,50 (m, 7H); 7,60 (t, 1H); 8,01 (d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel Nr. 12 Herstellung von 13-(N-Boc-β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin III (10BA)
  • Eine 0,1 M HCl-Lösung wird aus 0,071 ml Acetylchlorid und 9,929 ml MeOH hergestellt, die vor dem Gebrauch 30 min lang stehengelassen wird.
  • Zu 45 mg (0,040 mmol) 7-TES-Baccatin-III-13-(4S,5R)-N- Boc-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester (Herstellungsbeispiel Nr. 11, 9BbA) werden 0,395 ml der obigen methanolischen HCl-Lösung unter Rühren unter Stickstoff gegeben. Die Reaktion ist nach 20 min vollständig, was mittels DC gezeigt wird.
  • Nach 30 min wird das Reaktionsgemisch zwischen Ethylacetat-5% Natriumbicarbonat aufgeteilt. Die Schichten werden getrennt und die wässrige Schicht wird mit Ethylacetat erneut extrahiert. Die organischen Schichten werden vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingedampft.
  • Das Rohprodukt wird über 5 g Silicagel unter Elution mit 50-50 Ethylacetat-Toluol chromatographiert. 5-ml-Fraktionen werden gewonnen und mittels DC analysiert. Reines Produkt findet sich in den Fraktionen 5-12, die vereinigt und eingedampft werden. 13-(N-Boc-β-Phenylisoserinyl)- baccatin III (10BA) wird als weißer Feststoff erhalten.
  • DC: Silicagel 60; 50-50 EtOAc-Toluol; Rf: 0,42.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS): δ 1,15 (s, 3H); 1,27 (s, 3H); 1,33 (s, 9H); 1,68 (s, 3H); 1,85 (s, 3H); 2,25 (s, 3H); 2,38 (s, 3H): 3,44 (d, 1H); 3,80 (d, 1H); 4,17 (d, 1H); 4,30 (d, 1H); 4,41 (m, 1H); 4,62 (bs, 1H); 4,95 (d, 1H); 5,26 (bd, 1H); 5,43 (bd, 1H): 5,67 (d, 1H); 6,23 (t, 1H); 6,29 (s, 1H); 7,13-7,45 (m, 5H); 7,49 (t, 2H); 7,62 (t, 1H); 8,11 (d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel Nr. 13 Herstellung von 7-(2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl)-baccatin- III-13-(4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5- oxazolidincarbonsäureester (9BaB, 9BbB)
  • Eine Menge von 0,39 mmol (4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäure-kaliumsalz (6Ba, 6Bb) wird zwischen Ethylacetat und 5% Natriumbisulfat aufgeteilt. Die Schichten werden getrennt und die wässrige Schicht wird mit Ethylacetat erneut extrahiert. Die organischen Schichten werden vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingedampft.
  • Die verbliebene Säure 7Ba, 7Bb wird unter Rühren und unter Stickstoff in 2 ml Methylenchlorid-6 ml Toluol gelöst. Anschließend werden 187 mg (0,245 mmol) 7-(2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl)-baccatin-III (8B, s. beispielsweise L. Mangatal, M.-T. Adeline, D. Guénard, F. Guéritte- Vogelein, P. Potier, Tetrahedron 1989, 45, 4177) und anschließend 22 mg (0,18 mmol) DMAP und 80 mg (0,39 mmol) DCC zugegeben. Kurz nachdem alles in Lösung gegangen ist, beginnt die Ausfällung des Harnstoffnebenprodukts. Das Reaktionsgemisch wird 70 min lang auf 80ºC erhitzt, wobei die Reaktion mittels DC verfolgt wird. Nach dem Abkühlen auf Raumtemperatur wird der Feststoff abfiltriert und das Filtrat unter Vakuum eingedampft. Das Rohprodukt wird über 50 g Silicagel unter Elution mit 400 ml 30-70, 200 ml 40- 60, 100 ml 70-30 Ethylacetat-Hexan chromatographiert. 15- ml-Fraktionen werden gewonnen, wobei diese mittels DC analysiert werden. Die folgenden Fraktionen werden vereinigt und unter Vakuum eingedampft, wobei weiße Feststoffe erhalten werden.
  • Fraktion 14-20, weniger polares Isoerm 9BaB
  • Fraktion 21-26, Isomerengemisch 9BaB, 9BbB
  • Fraktion 27-32, stärker polares Isomer 9BbB
  • Fraktion 37-44, Rückgewinnung des Ausgangsalkohols 8B.
    • Daten für Isomer 9BaB
  • DC: Silicagel 60; 40-60 Ethylacetat-Hexan; Rf: 0,67.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 1,26 (s); 1,82 (s, 3H); 2,12 (s, 3H); 2,19 (s, 3H); 2,58 (m, 1H); 3,81 (s, 3H); 3,91 (s, 3H); 3,97 (d, 1H); 4,13 (d, 1H); 4,28 (d, 1H); 4,66 (d, 1H); 4,92 (m, 2H); 5,03 (d, 1H); 5,36 (d, 1H); 5,63 (m, 1H); 5,67 (d, 1H); 6,32 (m, 1H); 6,40 (s, 1H); 6,51 (d, 1H); 6,69 (s, 1H); 7,16 (d, 1H); 7,37-7,62 (m, 8H); 8,02 (d, 2H).
    • Daten für Isomer 9BbB
  • DC: Silicagel 60; 40-60 Ethylacetat-Hexan; Rf: 0,55.
  • ¹H-NMR CDCl&sub3;, TMS) δ 2,17 (bs); 3,47 (m); 3,79-3,94 (m); 4,08 (d); 4,27 (d); 4,54 (m); 4,65 (m); 4,89 (d); 5,01 (m); 5,40 (m); 5,50 (m); 5,62 (d); 6,24 (bs); 6,49 (bs); 7,37-7,65 (m); 8,03 (d).
    • Herstellungsbeispiel Nr. 14 Herstellung von 7-(2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl)-13-(N-Bocβ-phenyl-isoserinyl)-baccatin III 10BB
  • Eine 0,1 M HCl-Lösung in MeOH wird aus 0,071 ml Acetylchlorid und 9,929 ml MeOH hergestellt und vor Gebrauch 30 min lang stehengelassen.
  • Eine Menge von 252 mg (0,216 mmol) 7-(2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl)-baccatin-III-13-(4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester (Herstellungsbeispiel Nr. 13; 9BaB, 9BbB) wird bei Raumtemperatur unter Stickstoff mit 2,2 ml der obigen 0,1 M HCl-Lösung in MeOH gerührt. Die Reaktion wird mittels DC verfolgt und da sie nach 20 min unvollständig ist, werden weitere 0,5 ml HCl-Lösung zugegeben und die Reaktion 15 min fortgesetzt.
  • Das Reaktionsgemisch wird dann mit Ethylacetat verdünnt und mit einer 5%igen Natriumbicarbonatlösung gewaschen. Die Schichten werden getrennt und die wässrige Schicht wird mit Ethylacetat erneut extrahiert. Die organischen Schichten werden vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingedampft. Das Rohprodukt wird über 30 g Silicagel unter Elution mit 200 ml 35-65 und 300 ml 40-60 Ethylacetat-Hexan chromatographiert. 5-ml-Fraktionen werden gewonnen, wobei sie mittels DC analysiert werden. Die Fraktionen 25-54 enthalten das reine Produkt und sie werden vereinigt und unter Vakuum eingedampft, wobei 7-(2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl)-13-(N-Boc-β-phenyl- isoserinyl)-baccatin III 10BB als weißer Feststoff erhalten wird.
  • DC: Silicagel 60; 40-60 Ethylacetat-Hexan; Rf: 0,36.
  • Massenspektrum (FAB, m/z) (M + H) bei 1024, 1026, 1028; (M + H) gemessen bei 1024, 2656; theoretisch für C&sub4;&sub8;H&sub5;&sub7;Cl&sub3;N&sub2;O&sub1;&sub7; 1024, 2692; 1024, 968, 924, 743, 683, 105, 57.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 1,17 (s, 3H); 1,24 (s, 3H); 1,34 (s, 9H); 1,83 (s, 3H); 1,91 (s, 3H); 2,17 (s, 3H); 2,39 (s, 3H); 2,62 (m, 1H); 3,60 (d, 1H); 3,94 (d, 1H); 4,16 (d, 1H); 4,30 (d, 1H); 4,63 and 5,04 (2d, 2H); 4,62 (bs, 1H); 4,95 (d, 1H); 5,26 (bd, 1H); 5,45-5,60 (m, 2H); 5,66 (d, 1H); 6,20 (t, 1H); 6,36 (s, 1H); 7,24-7,44 (m, 5H); 7,49 (t, 2H); 7,61 (t, 1H); 8,08 (d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel Nr. 15 Herstellung von 13-(N-Boc-β-phenyl-isoserinyl)-baccatin III (10BA) und 7-(2,2-Dichlorethoxycarbonyl)-13-(N-Boc-β- phenyl-isoserinyl)-baccatin III 10BG
  • Eine Menge von 150 mg (0,146 mmol) 7-(2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl)-13-(N-Boc-β-phenyl-isoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel Nr. 14, 10BB) wird bei. Raumtemperatur unter Stickstoff in 13,5 ml MeOH und 1,5 ml HOAc gerührt. Dazu werden 150 mg aktiviertes Zink gegeben und das Reaktionsgemisch wird 60 min lang auf 50ºC erhitzt. Die Reaktion wird mittels DC verfolgt und es werden 4 weitere 150-mg- Portionen Zink zugegeben, wobei 45 min lang nach jeder Zugabe erhitzt wird. Das Reaktionsgemisch wird filtriert und das Filtrat wird unter Vakuum eingedampft. Der Rückstand wird zwischen Methylenchlorid und Wasser aufgeteilt. Die Schichten werden getrennt und die wässrige Schicht wird mit Methylenchlorid erneut extrahiert. Die organischen Schichten werden vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft.
  • Das Rohprodukt wird über 20 g Silicagel unter Elution mit 200 ml 60-50 und 200 ml 70-30 Ethylacetat-Hexan chromatographiert. 5-ml-Fraktionen werden gewonnen, wobei sie mittels DC analysiert werden. Die folgenden Fraktionen werden vereinigt und eingedampft, wobei weiße Feststoffe erhalten werden.
  • Fraktion 9-13, 7-(2,2-Dichlorethoxycarbonyl)-13-(N-Boc-β- phenyl-isoserinyl)-baccatin III 10BG.
  • Fraktion 14-44, 13-(N-Boc-β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin IIII (10BA).
    • Daten für 7-(2,2-Dichlorethoxycarbonyl)-13-(N-Boc-β-phenyl- isoserinyl)-baccatin III 10BG
  • DC: Silicagel 60; 50-50 Ethylacetat-Hexan; Rf: 0,81 (dieses Produkt und Ausgangsmaterial laufen in diesem DC-System zusammen).
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 1,17 (s, 3H); 1,24 (s, 3H); 1,35 (s, 9H): 1,61 (s, 3H): 1,81 (s, 3H); 2,19 (s, 3H); 2,39 (s, 3H); 2,52-2,68 (m, 1H); 3,37 (d, 1H); 3,92 (d, 1H); 4,16 (d, 1H); 4,32 (d, 1H); 4,53 (m, 2H); 4,63 (bs, 1H); 4,95 (d, 1H); 5,26 (bd, 1H); 5,40 (bd, 1H); 4,48 (m, 1H); 5,67 (d, 1H); 5,96 (m, 1H); 6,20 (t, 1H); 6,45 (s, 1H); 7,28-7,44 (m, 5H); 7,50 (1, 2H); 7,62 (t, 1H): 8,10 (d, 2H).
    • Daten für 10BA
  • DC: Silicagel 60; 50-50 Ethylacetat-Hexan; Rf: 0,32
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 1,14 (s, 3H); 1,24 (s, 3H); 1,32 (s, 9H); 1,67 (s; 3H); 1,84 (s, 3H); 2,23 (s, 3H); 2,37 (s, 3H); 2,44-2,59 (m, 1H); 2,64 (bd, 1H); 3,70 (bs, 1H); 3,78 (d, 1H); 4,15 (d, 1H); 4,28 (d, 1H); 4,40 (m, 1H); 4,61 (bs, 1H); 4,94 (d, 1H); 5,25 (bd, 1H); 5,57 (bd, 1H); 5,65 (d, 1H): 6,22 (t, 1H); 6,29 (s, 1H): 7,24-7,44 (m, 5H); 7,48 (t, 2H); 7,60 (t, 1H); 8,08 (d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel Nr. 16 Herstellung von 7,10-Bis-troc-baccatin-III-13-(4S,5R)-N- Boc-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester (9BbC)
  • Rohes (4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4-phenyl- 5-oxazolidincarbonsäure-kaliumsalz (Herstellungsbeispiel Nr. 10; 6Bb) (0,089 mmol) wird zwischen EtOAc-5% NaHSO&sub4; aufgeteilt. Die Schichten werden getrennt und die wässrige Schicht wird mit EtOAc erneut extrahiert. Die organischen Schichten werden vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum eingedampft, wobei (4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäure (7Bb) zurückbleibt. Dieser Rückstand wird bei Raumtemperatur unter Stickstoff in Methylenchlorid (0,8 ml) und Toluol (1,5 ml) gerührt. Dazu wird 7,10-Bis-troc-10-desacetyl-baccatin III (8C, s. beispielsweise V. Senilh, F. Guéritte-Vogelein, D. Guénard, M. Colin, P. Potier, C. R. Acad. Sci. Paris, 1984, 299, 4177), 50 mg, 0,056 mmol gegeben. Die entstandene Lösung wird mit 4-Dimethylaminopyridin (5 mg, 0,04 mmol) und 1,3-Dicyclohexylcarbodiimid (18 mg, 0,087 mmol) behandelt und anschließend 25 min lang auf 75ºC erhitzt. Eine DC-Analyse nach 15 min Erhitzen zeigt, dass die Reaktion vollständig ist.
  • Der ausgefallene Dicyclohexylharnstoff wird abfiltriert. Das Filtrat wird auf Silicagel (1 g) aufgetragen und über Silicagel (10 g), das mit EtOAc-Hexan (30-70) eluiert wird, chromatographiert. 4-ml-Fraktionen werden gewonnen, wobei sie mittels DC analysiert werden. Die Fraktionen 16-42 enthalten das Produkt und sie werden vereinigt und unter Vakuum eingedampft. Hierbei wird 7,10-Bis-troc- baccatin-III-3-(4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4- phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester (9BbC) als weißer Feststoff erhalten.
  • DC (Silicagel 60): 40% EtOAc-60% Hexan: Rf: 0,56
  • Massenspektrum (FAB, m/z) 1304, 1306, 1308 (M + H), 1204, 875, 683, 384, 328, 284, 105 (Base), 57.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 1,07 (s, 3H); 1,14 (s, 3H); 1,22 (s, 3H); 1,79 (s, 3H); 2,56 (m, 1H); 3,79 (d, 1H); 3,81 (s, 3H); 3,89 (s, 3H); 4,08 (d, 1H); 4,25 (d, 1H); 4,54 (d, 1H); 4,59 und 4,88 (2d, 2H); 4,78 (s, 2H); 4,89 (bt, 1H); 5,43 (m, 1H); 5,50 (m, 1H); 5,62 (d, 1H); 6,05 (bs, 1H); 6,12 (s, 1H); 6,47 (d, 1H); 6,49 (s, 1H); 6,75 (bs, 1H); 7,21. (m, 1H); 7,35-7,53 (m, 7H); 7,62 (t, 1H); 8,01 (d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel Nr. 17 Herstellung von 7,10-Bis-troc-13-N-Boc-β-phenyl-isoserinyl)-baccatin III (10BC)
  • Acetylchlorid (0,071 ml, 80 mg, 1,0 mmol) wird zu Methanol (10 ml) gegeben und die Lösung wird 30 min lang stehen gelassen, wobei eine 0,1 N HCl-Lösung erhalten wird. 7,10-Bis-troc-baccatin-III-13-(4S,5R)-N-Boc-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester (Herstellungsbeispiel Nr. 16; 9BbC) (73 mg, 0,056 mmol) wird in der obigen methanolischen HCl-Lösung (0,553 ml) gelöst und 25 min lang stehen gelassen. Das Reaktionsgemisch wird dann mit EtOAc verdünnt und mit 5-%iger Natriumbicarbonatlösung gewaschen. Die Schichten werden getrennt und die wässrige Schicht wird mit EtOAc erneut extrahiert. Die organischen Phasen werden vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingedampft. Das Rohprodukt wird auf Silicagel (1 g) aufgetragen und über Silicagel (10 g) chromatographiert. Die Säule wird mit 20% EtOAc-80% Toluol eluiert. 4-ml-Fraktionen werden gewonnen, wobei sie mittels DC analysiert werden. Reines Produkt findet sich in den Fraktionen 10-20, die vereinigt und eingedampft werden. Unreines Produkt in den Fraktionen 7-9 wird wie oben erneut chromatographiert. Die Fraktionen 11-26 enthielten das reine Produkt und sie werden mit reinem Produkt aus der ersten Säule vereinigt. Hierbei wird 7, 10-Bis-troc-13-(N-Boc-β-phenyl- isoserinyl)-baccatin III (10BC) als weißer Feststoff erhalten.
  • DC (Silicagel 60): 30% EtOAc-70% Toluol; Rf: 0,59. Das Nebenprodukt 2,4-Dimethoxybenzaldehyd läuft direkt vor dem Produkt und da, wo das ausgangsmaterial kommt.
  • Massenspektrum (FAB, m/z) 1156, 1158, 1160 (M + H), 1100, 1056, 701, 685, 105 (Base), 57.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;: TMS): δ 1,20 (s, 3H); 1,27 (s, 3H); 1,35 (s, 9H); 1,85 (s, 3H); 1,95 (s, 3H); 2,35 (s, 3H); 3,41 (d, 1H); 3,90 (d, 1H); 4,17 (d, 1H); 4,33 (d, 1H); 4,60 und 4,92 (2d, 2H); 4,62 (bs, 1H); 4,78 (s, 2H); 4,95 (d, 1H); 5,26 (bd, 1H); 5,42 (bd, 1H); 5,54 (dd, 1H); 5,69 (d, 1H); 6,21 (t, 1H); 6,24 (s, 1H); 7,12-7,42 (m, 6H); 7,49 (t, 2H); 7,62 (t, 1H); 8,09 (d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel Nr. 18 Herstellung von 7-(2,2-DichlorethoxycarbonyL)-13-(N-Boc-β- phenyl-isoserinyl)-baccatin III (10BD), 10-(2,2-Dichlorethoxycarbonyl)-13-(N-Boc-β-phenyl-isoserinyl)-baccatin III (10BE) und 13-(N-Boc-β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin III (10BF, Taxotere)
  • 7,10-Bis-troc-13-(N-Boc-β-phenyl-isoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel Nr. 17; 10BC) (48 mg, 0,041 mmol) wird bei Raumtemperatur unter Stickstoff in 90% MeOH-10% HOAc (3 ml) gerührt und die Lösung wird mit aktiviertem Zink (85 mg) behandelt. Nach 30-minütiger Reaktion tritt eine Trübung auf. 1 ml weitere MeOH-HOAc-Lösung wird zugegeben und das Reaktionsgemisch wird klar. DC sieht nach 30 und 60 min sehr ähnlich aus, d. h. kein Ausgangsmaterial und zwei geringfügige und ein hauptsächliches stärker polares Produkt. Nach 70 min Reaktion wird das feste Zink abfiltriert. Das Filtrat wird unter Vakuum abgedampft. Der Rückstand wird zwischen Methylenchlorid und Wasser aufgeteilt. Die Schichten werden getrennt und die wässrige Schicht wird mit Methylenchlorid erneut extrahiert. Die organischen Schichten werden erneut mit Wasser gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet, vereinigt und unter Vakuum eingedampft. Das Rohproduktgemisch wird auf Silicagel (1 g) aufgetragen und über Silicagel (5 g) chromatographiert. Die Säule wird mit EtOAc-Hexan eluiert (jeweils 100 ml von 40-60, 50-50, 60-40 und 70-30). 4-ml-Fraktionen werden gewonnen, wobei sie mittels DC analysiert werden. Die folgenden Fraktionen werden vereinigt und eingedampft.
  • Fraktion 12-24, 10BD
  • Fraktion 29-42, 10BE
  • Fraktion 48-84, 10BF
    • Daten für 10BD
  • DC (Silicagel 60): 60% EtOAc-40% Hexan; Rf: 0,92.
  • Massenspektrum (FAB, m/z) 948, 950, 952 (M + H), 892, 848, 830, 667, 649, 105 (Base), 57.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 1,09 (s, 3H); 1,23 (s, 3H); 1,34 (s, 9H); 1,86 (s, 3H); 1,89 (s, 3H); 2,04 (m, 1H); 2,29 (d, 2H); 2,39 (s, 3H); 3,4 (bs, 1H); 3,99 (d, 1H); 4,05 (s, 1H); 4,20 (d, 1H); 4,33 (d, 1H); 4,48 (m, 2H); 4,62 und 4,93 (2d, 2H); 5,30 (m, 1H); 5,37 (s, 1H); 5,46 (d, 1H); 5,68 (d, 1H); 5,83 (t, 1H); 6,21 (t, 1H); 7,3-7,45 (m, 6H); 7,50 (t, 2H); 7,62 (t, 1H); 8,30 (d, 2H).
    • Daten für 10BE
  • DC (Silicagel 60): 60% EtOAc-40% Hexan; Rf: 0,65.
  • Massenspektrum (FAB, m/z) 948, 950, 952 (M + H), 892, 848, 667, 527, 509, 105 (Base), 57.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 1,16 (s, 3H); 1,27 (s, 3H); 1,33 (s, 9H); 1,70 (s, 3H); 1,89 (s, 3H); 2,39 (s, 3H); 2,57 (m, 1H); 3,40 (d, 1H): 3,75 (d, 1H); 4,17 (d, 1H); 4,33 (d, 1H); 4,35 (m, 1H); 4,56 (dd, 2H); 4,64 (m, 1H); 4,95 (d, 1H); 5,28 (m, 1H); 5,37 (d, 1H); 5,68 (d, 1H); 5,92 (d, 1H); 6,15 (s, 1H); 6,25 (t, 1H); 7,20-7,45 (m, 6H); 7,50 (t, 2H); 7,64 (t, 1H); 8,10 (d, 2H).
    • Daten für 10BF
  • DC (Silicagel 60): 60% EtOAc-40% Hexan; Rf: 0,23.
  • Massenspektrum (FAB, m/z) 808 (M + H), 790, 752, 708, 527, 509, 345, 327, 105 (Base), 57.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 1,12 (s, 3H); 1,23 (s, 3H); 1,33 (s, 9H); 1,74 (s, 3H); 1,84 (s, 3H); 2,37 (s, 3H); 2,56 (m, 1H); 3,60 (bs, 1H); 3,89 (d, 1H); 4,18 (d, 1H); 4,21 (m, 1H); 4,30 (d, 1H); 4,32 (s, 1H); 4,62 (bs, 1H); 4,94 (d, 1H); 5,23 (s, 1H); 5,28 (bs, 1H); 5,54 (d, 1H); 5,66 (d, 1H); 6,20 (t, 1H); 7,25-7,45 (m, 6H); 7,50 (t, 2H); 7,61 (t, 1H); 8,09 (d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel Nr. 19 Herstellung von (2R,3S)-N-Carbobenzyloxy-β-phenyl-isoserinmethylester (3C)
  • Eine Lösung von (2R,3S)-β-Phenyl-isoserinmethylester (2) (Herstellungsbeispiel Nr. 1, 2 mmol) in Pyridin, die eine geringe Menge DMAP enthält, wird in einem Eisbad gekühlt und mit Benzylchlorformiat (0,8 ml) behandelt. Nach Rühren bei Raumtemperatur über Nacht wird das Reaktionsgemisch mit Ethylacetat verdünnt, mit einer 5%igen wässrigen Natriumbisulfatlösung gewaschen, getrocknet und eingedampft. Das Produkt wird mittels Silicagelchromatographie in Ethylacetat-Hexan-Gemischen rein erhatlen.
  • Fp 120-121ºC.
  • NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 3,26 (m, 1H); 3,79 (s, 3H); 4,47 (m, 1H), 5,06 (m, 2H); 5,27 (d, 1H); 5,75 (m, 1H); 7,20-7,50 (m, 10H)
    • Herstellungsbeispiel Nr. 20 Herstellung von (4S,5R)-N-Carbobenzyloxy-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäuremethylester 5Cb
  • N-Carbobenzyloxy-β-phenylisoserinmethylester (Herstellungsbeispiel Nr. 19, 3C, 0,375 g, 1,14 mmol) wird in trockenem THF (10 ml) gelöst und die Lösung wird mit 2,4-Dimethoxy-benzaldehyddimethylacetal (4, 0,300 g, 1,42 mmol) und Pyridinium-p-toluolsulfonat (10 mg) behandelt und die Lösung wird zum Abdestillieren des THF und Methanol erhitzt. Nachdem die Hälfte des THF abdestilliert ist, wird THF (10 ml) zugesetzt und das Reaktionsgemisch erneut auf das halbe Volumen destilliert. Der Prozess wird dreimal wiederholt. Das Reaktionsgemisch wird dann unter Vakuum eingeengt und der Rückstand wird über 75 g Silicagel, das in Aceton-Hexan (300 ml 20-80 und 300 ml 25-75) gepackt ist und mit diesem eluiert wird, chromatographiert. 20-ml- Fraktionen werden gewonnen und mittels DC analysiert. Die folgenden Fraktionen werden vereinigt und unter Vakuum eingedampft.
  • Fraktion 26-44, 543 mg, Isomer 5Cb (weitere Versuche zeigten, dass dies das stärker polare Isomer ist)
    • Daten für 5Cb
  • DC: Silicagel; 20% Aceton-80% Hexan; Rf: 0,19.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 3,51 (bs, 3H); 3,81 (bs, 6H); 4,56 (d, 1H); 4,8 (bd, 1H); 4,94 (d, 1H); 5,54 (d, 1H); 6,4 (bs, 2H); 6,78 (d, 3H); 7,05-7,50 (m, 9H).
    • Herstellungsbeispiel Nr. 21 Herstellung von (4S,5R)-N-Cbz-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4- phenyl-5-oxazolidincarbonsäure-kaliumsalz 6Cb
  • (4S,5R)-N-Cbz-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5- oxazolidincarbonsäure-methylester (Herstellungsbeispiel Nr. 20, 5Cb, 444 mg, 0,93 mmol) wird in 10 ml Methanol gelöst. Zu der Lösung werden Wasser (400 ul) und Kaliumcarbonat (200 mg, 1,45 mmol) gegeben. Nach dem Rühren über Nacht sind keine Feststoffe übrig und DC zeigt an, dass sehr wenig Methylester übrig ist. Das Lösemittel wird unter Vakuum eingeengt und Wasser (20 ml) wird zu dem Öl gegeben. Die Lösung wird gefriergetrocknet, wobei 638 mg flockiges weißes Pulver übrig bleibt, das 466 mg des Kaliumsalzes 6Cb enthält.
  • DC: Silicagel 60; 1 : 4 EtOAc : Toluol; Rf: Ursprung
    • Herstellungsbeispiel Nr. 22 Herstellung von 7-Triethylsilyl-Baccatin-III-13-(4S,5R)-N- Cbz-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester 9CbA
  • Rohes (4S,5R)-N-Cbz-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4-phenyl- 5-oxazolidincarbonsäure-kaliumsalz (6Cb, Herstellungsbeispiel Nr. 21; 75 mg, 0,11 mmol) wird zwischen CH&sub2;Cl&sub2; und 5-%iger NaHSO&sub4;-Lösung aufgeteilt. Die Schichten werden getrennt und die wässrige Schicht wird mit EtOAc extrahiert. Die vereinigten organischen Schichten werden über wasserfreies Natriumsulfat filtriert und unter Vakuum eingeengt, wobei 51 mg (4S,5R)-N-Cbz-2-(2,4-Dimethoxyphenyl)-4-phenyl- 5-oxazolidincarbonsäure (7Cb) zurückbleiben.
  • 7-Triethylsilyl-baccatin III (8A, 50 mg, 0,07 mmol) wird in 700 ul Toluol gelöst. Die gesamte (4S,5R)-N-Cbz-2- (2,4-Dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäure wird in einer CH&sub2;Cl&sub2;-Lösung zugegeben. Zu der Lösung werden DCC (25 mg, 0,11 mmol) und DMAP (4 mg, 0,04 mmol) gegeben und die Lösung wird unter Abtreiben des CH&sub2;Cl&sub2; auf 80ºC erhitzt. Die Reaktion wird mittels DC überprüft und nach 1,5 h ist sehr wenig 7-Triethylsilyl-baccatin III zu beobachten. Das Reaktionsgemisch wird abkühlen gelassen und die Aufschlämmung wird filtriert. Das Filtrat wird unter Vakuum eingeengt und über 7 g Silicagel, das in 1 : 3 EtOAc : Hexan gepackt ist, chromatographiert. Die Säule wird mit 40 ml 1 : 3 EtOAc : Hexan und 75 ml 1 : 2 EtOAc : Hexan eluiert, wobei 3-ml-Fraktionen gesammelt werden. Das gewünschte Produkt findet sich in den Fraktionen 17-32.
  • Massenspektrum (FAB-hochauflösend) Theorie: 1146,4882. Gefunden: 1146,4915.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 0,51-0,59 (m, 6H); 0,88-0,94 (m) 1,13 (s, 3H); 1,18 (s, 3H); 1,79-1,89 (m, 1H); 2,17 (s, 3H); 2,40-2,50 (m 1H); 3,67 (d, 1H); 3,80 (br.s, 6H); 4,07 (d, 1H); 4,22 (d, 1H); 4,39 (m, 1H); 4,54 (d, 1H); 4,77 (d, 1H); 4,86 (d, 1H); 4,94 (d, 1H); 5,54 (d, 1H); 5,61 (d, 1H); 5,90 (m, 1H); 6,33 (s, 1H); 6,43 (m, 2H); 6,78 (m, 3H); 7,12-7,21 (m, 4H); 7,38-7,50 (m, 7H); 7,59 (m, 1H); 8,01 (d, 2H)
    • Herstellungsbeispiel Nr. 23 Herstellung von 13-(N-Cbz-β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin III 10CA und 10-Desacetyl-13-(N-Cbz-β-phenyl-isoserinyl)- baccatin III 10CB
  • 7-Triethylsilyl-Baccatin-III-13-(4S,5R)-N-Cbz-2-(2,4- dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester (9CbA, Herstellungsbeispiel Nr. 22; 630 mg, 0,55 mmol) wird in 10 ml 0,1 N HCl in Methanol gelöst. Die 0,1 N HCl-Lösung wird durch Verdünnen von 71 ul Acetylchlorid auf 10 ml mit Methanol und Reagierenlassen während mindestens 0,5 h hergestellt. Die Reaktion wird mittels DC überprüft und nach 0,5 h ist kein Ausgangsmaterial zu beobachten. Die Reaktionslösung wird zwischen Kochsalzlösung, 5-%iger NaHCO&sub3;- Lösung und EtOAc aufgeteilt. Die Schichten werden getrennt und die organische Schicht wird mit 5-%iger NaHCO&sub3;-Lösung extrahiert. Die vereinigten wässrigen Schichten werden mit EtOAc extrahiert und die vereinigten organischen Schichten werden über wasserfreies Natriumsulfat filtriert. Das Lösemittel wird unter Vakuum eingeengt und der Rückstand wird über 60 g Silicagel, das in 1 : 1 EtOAc : Hexan gepackt ist, chromatographiert. Die Säule wird mit 500 ml 1 : 1 EtOAc : Hexan, 250 ml 3 : 2 EtOAc : Hexan, 240 ml 2 : 1 EtOAc : Hexan eluiert, wobei 25-ml-Fraktionen gewonnen werden.
  • Fraktionen 16-36, 13-(N-Cbz-β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin III, 10CA.
  • Fraktionen 44-52, 10-Deacetyl-13-(N-Cbz-β-phenyl- isoserinyl)-baccatin III 10CB
    • Daten für 10CA
  • Massenspektrum (FAB-hochauflösend). Theorie 884,3493. Gefunden: 884,3490.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 1,13 (s, 3H); 1,80 (s, 3H); 1,86 (m, 1H); 2,24 (s, 3H); 2,37 (s, 3H); 2,54 (m, 2H); 3,43 (m, 1H); 3,76 (d, 1H); 4,19 (d, 1H); 4,28 (d, 1H); 4,39 (m, 1H); 4,66 (br.s, 1H); 4,90-4,97 (m, 1H); 4,94 (d, 1H); 5,05 (d, 1H); 5,34 (d, 1H); 5,64 (d, 1H); 5,75 (d, 1H); 6,23 (m, 1H); 6,25 (s, 1H); 7,17 (br.s, 2H); 7,25 (br.s, 3H); 7,29-7,41 (m, 5H); 7,50 (m, 2H); 7,61 (m, 1H); 8,12 (d, 2H)
    • Daten für 10CB
  • Massenspektrum (FAB-hochauflösend). Theorie 842, 3388. Gefunden: 842, 3364.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 2,37 (s, 3H); 2,57 (m, 1H); 3,40 (d, 1H); 3,87 (d, 1H); 4,18- 4,32 (m); 4,65 (br.s, 1H); 4,92 (d, 1H); 4,95 (d, 1H); 5,06 (d, 1H); 5,18 (s, 1H); 5,35 (d, 1H); 5,65 (d, 1H); 5,78 (d, 1H); 6,20 (m, 1H); 7,18 (m, 1H); 7,22-7,46 (m); 7,50 (m, 2H); 7,61 (m, 1H); 8,11 (d, 2H)
    • Herstellungsbeispiel Nr. 24 Herstellung von 13-(β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin III (11A) aus 13-(N-Cbz-β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin III (10CA)
  • Eine Menge von 405 mg (0,46 mmol) 13-(N-Cbz-β-Phenyl- isoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel Nr. 23; 10CA) wird bei Raumtemperatur gerührt und bei atmosphärischem Druck mit 40 ml absolutem Ethanol und 100 mg 10% Pd/C hydriert. Die Reaktion wird mittels DC verfolgt, wobei sie nach 5 h vollständig ist.
  • Das Reaktionsgemisch wird über Celite filtriert, wobei mit Ethylacetat gewaschen wird. Die vereinigten Filtrat- und Waschflüssigkeiten werden unter Vakuum eingedampft. Der Rückstand wird mit einer kleinen Menge Ethylacetat und einer größeren Menge Hexan behandelt und weitere zwei Male eingedampft. 13-(β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin III (11A) wird als weißer Feststoff erhalten.
  • DC: Silicagel 60; 70-30 EtOAc : Hexan; Rf: Streifen zwischen Ursprung und 1/3 der Platte nach oben.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS): δ 1,13 (s, 3H); 1,24 (s, 3H); 1,66 (s, 3H); 1,88 (s, 3H); 2,23 (s, 3H); 2,24 (s, 3H); 2,45-2,61 (m, 1H); 3,75 (d, 1H); 4,14 (d, 1H); 4,23-4,33 (m, 3 H); 4,40 (m, 1H); 4,93 (d, 1H); 5,63 (d, 1H); 6,13 (t, 1H); 6,27 (s, 1H); 7,26 (m, 1H); 7,39 (d, 4H); 7,52 (t, 2H); 7,65 (t, 1H); 8,06 (d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel Nr. 25 Herstellung von (2R,3S)-N-(2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl)-β- phenyl-isoserinmethylester (3D)
  • Gemäß dem allgemeinen Verfahren von Herstellungsbeispiel Nr. 19 [(2R,3S)-N-Carbobenzyloxy-β-phenyl-isoserinmethylester (3C)], jedoch ausgehend von 2,2,2-Trichlorethoxycarbonylchlorid zur Acylierung des Amins β-Phenylisoserinmethylester (2) wird das Produkt N-(2,2,2-Trichlorethoxycabonyl)-β-phenyl-isoserinmethylester (3D) hergestellt.
    • Herstellungsbeispiel Nr. 26 Herstellung von (4S,5R)-N-(2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl)-2- (2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäuremethylester 5Da und 5Db
  • Gemäß dem allgemeinen Verfahren des Verfahrens 20 [Herstellung von (4S,5R)-N-Carbobenzyloxy-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäure-methylester (5b)], jedoch ausgehend von (2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl)-β- phenyl-isoserinmethylester (3D) wird das Produkt (4S,5R)- N-(2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl)-2-(2,4-dimethoxyphenyl)- 4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäure-methylester (5Da, 5Db) hergestellt.
    • Herstellungsbeispiel Nr. 27 Herstellung von (4S,SR)-N-(2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl)-2- (2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäurekaliumsalz (6Da, 6Db)
  • Gemäß dem allgemeinen Verfahren von Herstellungsbeispiel 21 [(4S,5R)-N-Carbobenzyloxy-2-(2,4-dimethoxyphenyl)- 4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäure-kaliumsalz (6Cb)], jedoch ausgehend von (4S,5R)-N-(2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl)-2- (2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäuremethylester (5Da, 5Db) wird das Produkt (4S,5R)-N-(2,2,2- Trichlorethoxycarbonyl)-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5- oxazolidincarbonsäure-kaliumsalz (6Da, 6Db) hergestellt.
    • Herstellungsbeispiel Nr. 28 Herstellung von 7-Triethylsilyl-baccatin-III-13-(4S,5R)-N- (2,2,2-trichlorethoxycarbonyl)-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4- phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester (9DaA, 9DbA)
  • Gemäß dem allgemeinen Verfahren von Herstellungsbeispiel Nr. 22 [Herstellung von 7-Triethylsilyl-baccatin-III- 13-(4S,5R)-N-Cbz-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester, 9CbA], jedoch ausgehend von (4S,5R)-N-(2,2,2-Chlorethoxycarbonyl)-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäure (6Da, 6Db) wird der gewünschte 7-Triethylsilyl-baccatin-III-13-(4S,5R)-N- (2,2,2-trichlorethoxycarbonyl)-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4- phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester (9DaA, 9DbA) hergestellt.
    • Herstellungsbeispiel Nr. 29 Herstellung von 13-(N-(2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl)-β- phenyl-isoserinyl)-baccatin III (10DA)
  • Gemäß dem allgemeinen Verfahren von Herstellungsbeispiel Nr. 23 [Herstellung von 13-(N-Cbz-β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin III (10CA)], jedoch stattdessen ausgehend von 7-Triethylsilyl-baccatin-III-13-(4S,5R)-N-(2,2,2-trichlorethoxycarbonyl)-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester (9Da, 9Db) wird das Produkt 13-(N- (2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl)-β-phenyl-isoserinyl)- baccatin III (10DA) hergestellt.
    • Herstellungsbeispiel Nr. 30 Herstellung von 13-(β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin III (11A) aus 13-(N-(2,2,2-Trichlor-ethoxycarbonyl)-β-phenyl-isoserinyl)-baccatin III (10DA)
  • 13-(N-(2,2,2-Trichlor-ethoxycarbonyl)-β-phenyl-isoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel Nr. 29; 10DA, 1 g) wird in Methanol (50 ml) gelöst und die Lösung wird mit Zinkpulver (2 g) und Ammoniumchlorid (2 g) unter Rühren bei Raumtemperatur behandelt. Nach 3-stündigem Rühren wird das Reaktionsgemisch filtriert und das Filtrat unter Vakuum (weniger als 20 Torr) eingedampft. Der Rückstand wird zwischen Ethylacetat und 5-%iger wässriger Natriumbicarbonatlösung verteilt. Die organische Schicht wird abgetrennt, getrocknet (Natriumsulfat) und unter Vakuum eingeengt, wobei das Produkt 13-(β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin III (11A) zurückbleibt.
    • Herstellungsbeispiel Nr. 31 Herstellung von 13-(N-Boc-β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin III (10BA)
  • Eine Menge von 68 mg (0,09 mmol) 13-(β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel Nr. 24; 11A) wird bei Raumtemperatur unter Stickstoff in 0,5 ml trockenem THF gerührt. Zu diesem werden 20 mg (0,092 mmol) Ditert.-butyldicarbonat in 0,2 ml trockenem THF und 0,013 ml (0,093 mmol) Triethylamin gegeben. Die Reaktion wird 24 h lang ablaufen gelassen; DC nach 5 h zeigt, dass die Reaktion hauptsächlich erfolgt ist.
  • Das Reaktionsgemisch wird zwischen Ethylacetat und Kochsalzlösung aufgeteilt. Die Schichten werden getrennt und die wässrige Schicht wird mit Ethylacetat erneut extrahiert. Die organischen Schichten werden vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingedampft.
  • Das Rohprodukt wird über 10 g Silicagel unter Elution mit 60-40 Ethylacetat-Hexan chromatographiert. 2-ml-Fraktionen werden gewonnen, wobei sie mittels DC analysiert werden. Die Fraktionen 12-30 enthalten das Produkt und sie werden vereinigt und unter Vakuum eingedampft. Hierbei wird die Titelverbindung 10BA als weißer Feststoff erhalten.
  • DC: Silicagel 60; 60-40 EtOAc : Hexan; Rf: 0,46.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 1,15 (s, 3M); 1,33 (s, 9H); 1,85 (s, 3H); 2,25 (s, 3H); 2,30 (m); 2,38 (s, 3H); 2,54 (m); 3,46 (d, 1H); 3,80 (d, 1H); 4,17 (d, 1H); 4,31 (d, 1H); 4,41 (m, 1H); 4,63 (bs, 1H); 4,95 (d, 1H); 5,28 (bd, 1H); 5,42 (bd, 1H); 5,67 (d, 1H); 6,24 (t, 1H); 6,29 (s, 1H); 7,18 (d, 1H); 7,38 (m, 5H); 7,50 (t, 2H); 7,62 (t, 1H); 8,10 (d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel Nr. 32 Herstellung von 13-(N-(1-Adamantoyl)-β-phenyl-isoserinyl)- baccatin III (10EA)
  • Eine Menge von 44 mg (0,06 mmol) 13-(β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel Nr. 24; 11A) wird bei 0ºC unter Stickstoff in 1 ml trockenem Pyridin gerührt. Zu diesem werden 0,2 ml Methylenchlorid, das 13 mg (0,06 mmol) 1-Adamantan-carbonylchlorid enthält, gegeben. Nach 30 min Reaktion zeigt DC, dass die Reaktion vollständig ist.
  • Das Reaktionsgemisch wird zwischen 1 N HCl-Ethylacetat aufgeteilt. Die organische Schicht wird mit Kochsalzlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingedampft.
  • Der Rückstand wird über 5 g Silicagel unter Elution mit 65-35 EtOAc : Hexan chromatographiert. 2-ml-Fraktionen werden gewonnen, wobei sie mittels DC analysiert werden. Das Produkt findet sich in den Fraktionen 8-23, die nach dem Vereinigen und Eindampfen 33 mg (60% Ausbeute) eines weißen Feststoffs ergeben. Spektraldaten zeigen immer noch das Vorhandensein von 1-Adamantan-carbonsäure.
  • Das unreine Produkt wird in 1 ml frisch destilliertem THF gelöst. Überschüssiges etherisches Diazomethan wird zugegeben und das Reaktionsgemisch wird 30 min lang reagieren gelassen. Das Reaktionsgemisch wird dann unter Vakuum eingedampft und wie zuvor chromatographiert. Reines Produkt findet sich in den Fraktionen 6-25, die beim Eindampfen 13- (N-(1-Adamantoyl)-(β-phenyl-isoserinyl)-baccatin III 10OEA als Feststoff ergeben.
  • DC: Silicagel 60; 50-50 EtOAc : Hexan; Rf: 0,48.
  • Massenspektrum (FAB, m/z): (M + H) gemessen bei 912,4168; theoretisch für C&sub5;&sub1;H&sub6;&sub2;N&sub1;O&sub1;&sub4; 912,4170; 912, 852, 834, 569, 551, 509, 344, 326, 298, 268, 180, 135, 105.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 1,16 (s); 1,27 (s); 1,60-2,10 (m); 2,24 (s, 3H): 2,30 (m); 2,36 (s, 3H); 2,52 (m); 3,54 (d, 1H); 3,77 (d, 1H); 4,18 (d, 1H); 4,29 (d, 1H); 4,40 (m, 1H); 4,68 (m, 1H); 4,94 (d, 1H); 5,56 (dd, 3H); 5,68 (d, 1H); 6,15 (t, 1H); 6,28 (s, 1H); 6,47 (d, 1H); 7,37 (m, 5H); 7,50 (t, 2H); 7,61 (t, 1H); 8,10 (d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel Nr. 33 Herstellung von 13-(N-β-Tetrahydrofuranyloxycarbonyl)-β- phenyl-isoserinyl)-baccatin III (10FA)
  • 13-(β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel Nr. 24; 11A, 16,8 mg, 0,022 mmol) wird mit racemischem 3-Tetrahydrofuranol-succinimidyl-carbonat (5,0 mg, 0,023 mmol), Pyridin (5 ul) und Methylenchlorid (180 ul) behandelt. Das Reaktionsgemisch wird 2 Tage lang bei Raumtemperatur gerührt. Es wird mit Ethylacetat verdünnt und mit 5-%iger wässriger Natriumbisulfatlösung und 5-%iger wässriger Natriumbicarbonatlösung gewaschen. Die organische Lösung wird getrocknet und eingedampft, wobei ein Diastereomerengemisch, 13-(N-β-Tetrahydrofuranyloxycarbonyl)-β- phenyl-isoserinyl)-baccatin III (10FA), erhalten wird.
  • DC: Silicagel 60; 40-60 Aceton-Hexan; Rf: 0,16.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 1,16 (s); 1,27 (s); 1,68 (s + m); 1,83 (s); 1,90 (m); 2,25 (s + m); 2,37 (s); 2,55 (m); 3,7-4,0 (m); 4,18 (d, 1H); 4,30 (d, 1H); 4,43 (m, 1H); 4,64 (m, 1H); 4,95 (dd, 1H); 5,09 (m, 1H); 5,30 (m, 1H); 5,67 (m, 2H); 6,28 (s + m, 2H); 7,39 (m, 5H); 7,50 (m, 2H); 7,62 (m, 1H); 8,12 (d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel Nr. 34 Herstellung von 13-(N-(4-Tetrapyranyloxycarbonyl)-β-phenyl- isoserinyl)-baccatin III (10 GA)
  • 13-(β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel Nr. 24; 11A, 10 mg, 0,013 mmol) wird mit 4-Tetrahydropyranol-succinimidyl-carbonat (3,3 mg, 0,014 mmol), Pyridin (5 ul) und Methylenchlorid (100 ul) behandelt. Das Gemisch wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wird mit Ethylacetat verdünnt und mit 5- %iger wässriger Natriumbisulfatlösung und 5-%iger wässriger Natriumbicarbonatlösung gewaschen. Die Ethylacetatlösung wird getrocknet und eingedampft, wobei 10,3 mg Rohprodukt erhalten werden. Die Reinigung durch Säulenchromatographie auf Silicagel in (40-60) Aceton-Hexan ergibt reines 13-(N- (4-Tetrapyranyloxycarbonyl)-β-phenyl-isoserinyl)-baccatin III (10 GA).
  • DC: Silicagel 60; 40-60 Aceton-Hexan; Rf: 0,17.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 1,15 (s); 1,27 (s); 1,5-1,8 (m); 1,68 (s); 1,84 (s): 1,89 (m); 2,1-2,4 (m); 2,25 (s, 3H); 2,41 (s, 3H); 2,49 (d, 1H); 2,55 (m, 1H); 3,08 (m, 1H); 3,27 (m, 1H); 3,33 (d, 1H); 3,70 (m, 1H); 3,80 (d + m, 2H); 4,16 (d, 1H); 4,29 (d, 1H); 4,42 (m, 1H); 4,66 (m, 2H); 4,94 (d, 1H); 5,33 (m, 1H); 5,57 (m, 1H); 5,65 (d, 1H); 6,28 (s + m, 2H); 7,37 (m, 5H); 7,51 (m, 2H); 7,61 (m, 1H); 8,14 (d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel Nr. 35 Herstellung von 13-(N-(tert.-Butylacetyl)-β-phenyl-isoserinyl)-baccatin III (10HA) und 2'-tert.-Butylaceyl-13- (N-(tert.-butylacetyl)-β-phenyl-isoserinyl)-baccatin III (12CA)
  • Eine Menge von 51 mg (0,068 mmol) 13-(β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel Nr. 24; 11A) wird unter Stickstoff bei 0ºC in 1 ml trockenem Pyridin gerührt. Eine Menge von 0,01 ml (9,1 mg, 0,068 mmol) tert.- Butylacetylchlorid wird in 0,1 ml Methylenchlorid gelöst. Diese Lösung wird tropfenweise zu dem Ausgangsamin gegeben. Das Reaktionsgemisch wird 3 h lang bei 0ºC und über Nacht im Gefrierschrank reagieren gelassen.
  • Das Reaktionsgemisch wird mit Ethylacetat verdünnt und mit 1 N HCl und 5-%iger Natriumbicarbonatlösung gewaschen. Die wässrigen Schichten werden mit Ethylacetat zurückextrahiert. Die organischen Schichten werden vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingedampft.
  • Das Rohprodukt wird über 7 g Silicagel unter Elution mit 50-50 und 70-30 EtOAc : Hexan chromatographiert. 2-ml- Fraktionen werden gewonnnen, wobei sie mittels DC analysiert werden. Die folgenden Fraktionen werden vereinigt und unter Vakuum eingedampft.
  • Fraktion 11-21, unreines 2'-tert.-Butylaceyl-13-(N- (tert.-butylacetyl)-β-phenyl-isoserinyl)-baccatin III (12CA)
  • Fraktion 22-45, 13-(N-(tert.-Butylacetyl)-β-phenyl- isoserinyl)-baccatin III (10HA), weißer Feststoff.
  • 12CA ist noch unrein und wird über 3 g Silicagel unter Elution mit 10-90 Aceton-Methylenchlorid erneut chromato graphiert. 1-ml-Fraktionen werden gewonnen, wobei sie mittels DC analysiert werden. Die Fraktionen 11-28 enthielten das Produkt und sie werden vereinigt und unter Vakuum eingedampft, wobei reines 2'-tert.-Butylacetyl-13-(N-(tert.- butylacetyl)-β-phenyl-isoserinyl)-baccatin III (12CA) als weißer Feststoff erhalten wird.
    • Daten für 12CA
  • DC: Silicagel 60; 60-40 Ethylacetat-Hexan; Rf: 0,70.
  • Massenspektrum (FAB, m/z) (M + H) gemessen bei 946,4618; theoretisch für C&sub5;&sub2;H&sub6;&sub8;N&sub1;O&sub1;&sub5; 946,4589; 946, 509, 378, 360, 280, 262, 234, 105, 99, 57, 43.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 0,98 (s); 1,28 (s, 3H); 2,23 (s, 3H); 2,42 (s, 3H); 2,53 (m); 3,81 (d, 1H); 4,19 (d, 1H); 4,31 (d, 1H); 4,45 (m, 1H); 4,97 (d, 1H); 5,34 (d, 1H); 5,69 (d, 1H); 5,75 (m, 1H); 6,08 (d, 1H); 6,24 (m, 1H); 6,31 (s, 1H); 7,28-7,45 (m, 5H); 7,51 (t, 2H); 7,61 (t, 1H); 8,11 (d, 2H).
    • Daten für 10HA
  • DC: Silicagel 60; 60-40 Ethylacetat-Hexan; Rf: 0,27.
  • Massenspektrum (FAB, m/z) (M + H) gemessen bei 848,3863; theoretisch für C&sub4;&sub6;H&sub5;&sub8;N&sub1;O&sub1;&sub4; 848,3857; 848, 830, 788, 770, 569, 551, 509, 280, 262, 234, 182, 136, 115, 105, 99, 57, 43.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 0.97 (s); 1,26 (s, 3H); 2,24 (s, 3H); 2,33 (s, 3H); 2,52 (m, 2H); 3,60 (d, 1H); 3,78 (d, 1H); 4,18 (d, 1H); 4,29 (d, 1H); 4,39 (m, 1H); 4,65 (m, 1H); 4,93 (d, 1H); 5,55 (dd, 1H); 5,67 (d, 1H); 6,19 (t, 1H); 6,28 (s, 1H); 7,39 (m, 5H); 7,50 (t, 2H); 7,62 (t, 1H); 8,10 (d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel Nr. 36 Herstellung von 13-(N-(Pivaloyl)-β-phenyl-isoserinyl)- baccatin III (10IA)
  • Eine Menge von 44 mg (0,06 mmol) 13-(β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel Nr. 24; 11A) wird bei 0ºC unter Stickstoff in 1 ml trockenem Pyridin gerührt. Zu diesem wird während 5 min eine Lösung von 8 mg (0,06 mmol) Trimethylacetylchlorid in 0,2 ml Methylenchlorid gegeben. Nach 30 min Reaktion zeigt DC, dass das meiste Amin reagiert hat.
  • Das Reaktionsgemisch wird zwischen 1 N HCl und Ethylacetat aufgeteilt. Die organische Schicht wird mit Kochsalzlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingedampft.
  • Das Rohprodukt wird über 5 g Silicagel unter Elution mit (65-35) EtOAc : Hexan chromatographiert. 2-ml-Fraktionen werden gewonnen, die mittels DC analysiert werden. Das Produkt findet sich in den Fraktionen 10-38, die nach Vereinigen und Eindampfen unter Vakuum die Titelverbindung ergeben.
  • Spektraldaten belegen das Vorhandensein einer kleinen Menge Pivalinsäure. Deshalb wird das Produkt in Ethylacetat gelost, mit 5-%iger Natriumbicarbonatlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingedampft. Hierbei wird 10IA als weißer Feststoff erhalten.
  • DC: Silicagel 60; 50-50 EtOAc : Hexan; Rf: 0,29.
  • Massenspektrum (FAB, m/z) (M + H) gemessen bei 834,3712; theoretisch für C&sub4;&sub6;H&sub5;&sub6;N&sub1;O&sub1;&sub4; 834,3700; 834, 816, 774, 569, 551, 509, 387, 327, 266, 248, 220, 190, 105, 57.
  • ¹H-NMR: (CDCl&sub3;, TMS) δ 1,16 (s); 1,23 (s); 2,23 (s, 3H); 2,29 (d, 1H); 2,35 (s, 3H); 2,51 (m, 1H); 3,77 (d, 1H); 4,17 (d, 1H); 4,28 (d, 1H); 4,38 (m, 1H); 4,68 (d, 1H); 4,93 (d, 1H); 5,56 (dd, 1H); 5,66 (d, 1H); 6,17 (m, 1H); 6,28 (s, 1H); 6,54 (d, 1H); 7,35 (m, 5H); 7,49 (m, 2H); 7,60 (m, 1H); 8,10 (d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel Nr. 39 Herstellung von 7-Fluor-13-(N-Cbz-β-phenyl-isoserinyl)- baccatin III (18) aus 7-Fluor-13-(N-Cbz-β-phenyl-isoserinyl)-2'-troc-baccatin III (13BA)
  • Eine Lösung von 7-Fluor-13-(N-Cbz-β-phenyl-isoserinyl)-2'-troc-baccatin III (13BA, Beispiel 3) (0,079 g) in 9 : 1 Methanol/Essigsäure (20 ml) und Ethylacetat (8 ml) wird mit aktiviertem Zink (0,153 g) bei Raumtemperatur während 2 h gerührt. Nach dem Aufarbeiten wird das Rohprodukt über Silicagel unter Verwendung von 40% EtOAc : Hexan zur Elution chromatographiert, wobei 7-Fluor-13-(N-Cbz-β-phenyl-isoserinyl)-baccatin III (18) erhalten wird.
  • Masenspektrum, 886, 571, 511, 371, 347, 329, 316, 298, 105, 91 m/z.
    • Herstellungsbeispiel Nr. 40 Herstellung von 7-Fluor-13-(β-phenyl-isoserinyl)-baccatin III (19)
  • Eine Menge von 23,5 mg (0,027 mmol) 7-Fluor-13-(N-Cbzβ-phenyl-isoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel Nr. 39, 18) wird in 3 ml absolutem Ethanol gelöst und die Lösung wird mit 7 mg 10% Pd/C behandelt und bei atmosphärischem Druck und Raumtemperatur 4,5 h lang hydriert. Das Verschwinden des Ausgangsmaterials wird mittels DC verfolgt. Das Reaktionsgemisch wird über Celite filtriert, wobei das Celite mit Ethylacetat gewaschen wird. Die vereinigten Filtrat- und Waschflüssigkeiten werden unter Vakuum eingedampft. Der Rückstand wird zweimal mit Ethylacetat- Hexan behandelt und unter Vakuum eingedampft. Hierbei wird 7-Fluor-13-(β-phenyl-isoserinyl)-baccatin III (19) als weißer Feststoff erhalten.
  • DC: Silicagel 60; 50-50 EtOAc : Hexan; Rf: 0,11.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS): δ 2,20 (s, 3H); 2,26 (s, 3H); 2,54 (m, 1H); 3,99 (d, 1H); 4,24 (d, 1H); 4,27-4,42 (m, 3H); 4,55 (dd, J = 48 Hz, J = 5 Hz, 1H); 4,99 (d, 1H); 5,72 (d, 1H); 6,11 (m, 1H); 6,55 (s, 1H); 7,27 (s, 1H); 7,39 (m, 4H); 7,51 (m, 2H); 7,64 (m, 1H); 8,08 (d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel Nr. 41 Herstellung von 7-Fluor-13-(N-Boc-β-phenyl-isoserinyl)- baccatin III (20) und 7-Fluor-2'-Boc-13-(N-Boc-β-phenyl- isoserinyl)-baccatin III (13CA)
  • Eine Menge von 0,027 mmol 7-Fluor-13-(β-phenyl-isoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel Nr. 40; 19) wird unter Rühren in 0,2 ml frisch destilliertem THF bei Raumtemperatur und unter Stickstoff gelöst. 6 mg (0,027 mmol) Di-tert.-butyldicarbonat und 0,004 ml (0,029 mmol) Triethylamin werden zugegeben. Das Reaktionsgemisch wird 20 h lang reagieren gelassen.
  • Das Reaktionsgemisch wird zwischen Ethylacetat und Kochsalzlösung verteilt. Die Schichten werden getrennt und die wässrige Schicht wird mit Ethylacetat erneut extrahiert. Die organischen Schichten werden vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingedampft.
  • Das Produktgemisch wird über 3 g Silicagel unter Elution mit 30-70 Ethylacetat-Hexan bis zum Erscheinen des er sten Produkts und anschließend Umschalten auf 50-50 Ethylacetat-Hexan chromatographiert. 1-ml-Fraktionen werden gewonnen, wobei sie mittels DC analysiert werden. Die folgenden Fraktionen werden vereinigt und eingedampft, wobei weiße Feststoffe zurückbleiben.
  • Fraktion 16-30, 13CA
  • Fraktion 32-46, 20.
    • Daten für 13CA
  • DC: Silicagel 60; 50-50 Ethylacetat-Hexan; Rf: 0,83.
  • Massenspektrum (FAB, m/z) 952 (M + H), 878, 822, 778, 571, 511, 389, 329, 106, 162, 105, 57.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS): δ 1,17 (s, 3H); 1,24 (s, 3H); 1,25 (s, 9H); 1,90 (s, 9H); 2,08 (s, 3H); 2,22 (s, 3H); 2,0-2,7 (m, 4H); 4,02 (d, 1H); 4,24 (d, 1H); 4,36 (d, 1H); 4,59 (dd; J = 48 Hz, J = 5 Hz, 1H); 4,77 (bs, 1H); 5,02 (d, 1H); 5,22 (bs, 1H); 5,68 (m, 1H); 5,77 (d, 1H); 6,27 (m, 1H); 6,57 (s, 1H); 7,27-7,70 (m, 9H); 8,09 (d, 2H).
    • Daten für 20
  • DC: Silicagel 60; 50-50 Ethylacetat-Hexan; Rf: 0,54.
  • Massenspektrum (FAB, m/z); (M + H) gemessen bei 852,3638; theoretisch für C&sub4;&sub5;H&sub5;&sub5;F&sub1;N&sub1;O&sub1;&sub4; 852,3606; 852, 796, 752, 692, 674, 571, 511, 389, 347, 329, 105, 57, 43.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS): δ 1,17 (s, 3H); 1,23 (s, 3H); 1,34 (s, 9H); 2,22 (s, 3H); 2,39 (s, 3H); 2,0-2,7 (m, 4H); 3,36 (m, 1H); 4,04 (d, 1H); 4,28 (d, 1H); 4,37 (d, 1H); 4,48-4,68 (m, 2H); 5,01 (d, 1H); 5,30 (m, 1H); 5,45 (m, 1H); 5,76 (d, 1H); 6,21 (m, 1H); 6,56 (s, 1H); 7,30- 7,70 (m, 9H); 8,13 (d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel Nr. 42 Herstellung von 13-(N-Benzyloxycarbonyl-β-phenyl-isoserinyl)-7-desoxy-7β,8β-methanobaccatin III (21) aus 13-(N- Benzyloxycarbonyl-β-phenyl-isoserinyl)-2'-troc-7-desoxy- 7β,8β-methanobaccatin III (14BA)
  • Eine Lösung von 13-(N-Benzyloxycarbonyl-β-phenyl-isoserinyl)-2'-troc-7-desoxy-7β,8β-methanobaccatin III (14BA, Beispiel 3) (0,040 g) in 9 : 1 Methanol/Essigsaure (10 ml) wird bei Raumtemperatur mit aktiviertem Zink (0,144 g) 3 h lang gerührt. Nach dem Aufarbeiten wird das rohe Reaktionsprodukt über Silicagel unter Verwendung von 40% EtOAc:
  • Hexan zur Elution chromatographiert, wobei 13-(N- Benzyloxycarbonyl-β-phenyl-isoserinyl)-7-desoxy-7β,8β- methanobaccatin III (21) erhalten wird:
  • Massenspektrum,
  • Gefunden 866,3423, C&sub4;&sub8;H&sub5;&sub1;NO&sub1;&sub4; + H erfordert 866,3388, 848, 806, 788, 551, 533, 491, 105, 91 m/z.
    • Herstellungsbeispiel Nr. 43 Herstellung von 13-(β-Phenyl-isoserinyl)-7-desoxy-7β,8β- methanobaccatin III (22)
  • Eine Menge von 14 mg (0,016 mmol) 13-(N -Benzyloxycarbonyl-β-phenyl-isoserinyl)-7-desoxy-7β,8β-methanobaccatin III (Herstellungsbeispiel Nr. 42, 21) wird in 2 ml absolutem Ethanol gelöst. Nach der Zugabe von 5 mg 10%- Pd/C wird 6 h lang bei Raumtemperatur und atmosphärischem Druck hydriert. Die Reaktion wird mittels DC verfolgt und nach der Beendigung wird das Reaktionsgemisch über Celite filtriert, wobei mit Ethylacetat gewaschen wird. Das Filtrat und die Waschflüssigkeit werden vereinigt und unter Vakuum eingedampft. Nach zweimaliger Zugabe von Ethylacetat-Hexan wird erneut eingedampft, wobei 22 als weißer Feststoff erhalten wird. Nach dem Aufbewahren im Gefrierschrank über Nacht wird der Feststoff, so wie er ist, in Herstellungsbeispiel Nr. 44 verwendet.
  • DC: Silicagel 60; 50-50 EtOAc : Hexan; Rf: Streifen vom Ursprung teilweise die Platte hinauf.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 5,62 (d, 1H); 6,11 (t, 1H); 6,31 (s, 1H); 7,39 (m); 7,53 (m, 2H); 7,66 (m, 1H); 8,08 (d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel Nr. 44 Herstellung von 13-(N-Boc-β-Phenyl-isoserinyl)-7-desoxy- 7β,8β-methanobaccatin III (23) und 13-(N-Boc-2'-Boc-β- Phenyl-isoserinyl)-7-desoxy-7β,8β-methanobaccatin III (14CA)
  • Eine Menge von 0,016 mmol von 22 (Herstellungsbeispiel Nr. 44) wird unter Rühren unter Stickstoff in 0,12 ml trockenem THF gelöst. Zu diesem werden 3,5 mg (0,016 mmol) Ditert.-butyldicarbonat in 0,05 ml trockenem THF und 0,0025 ml (0,018 mmol) Triethylamin in 0,015 ml trockenem THF ge geben. Das Gemisch wird 27 h lang reagieren gelassen. Dann zeigt DC, dass die Reaktion ziemlich vollständig ist.
  • Das Reaktionsgemisch wird zwischen Ethylacetat und Kochsalzlösung aufgeteilt. Die Schichten werden getrennt und die wässrige Schicht wird mit Ethylacetat erneut extrahiert. Die vereinigten organischen Schichten werden über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingedampft.
  • Das rohe Produktgemisch wird über 3 g Silicagel chromatographiert und mit einem Gradienten von 30-70 bis 50-50 EtOAc : Hexan eluiert. 1-ml-Fraktionen werden gewonnen, wobei sie mittels DC analysiert werden. Die folgenden Fraktionen werden vereinigt und eingedampft, wobei weiße Feststoffe erhalten werden.
  • Fraktion 16-30, 14CA
  • Fraktion 33-53, 23.
  • 23 ist nicht ganz rein und wird über 1 g Silicagel unter Elution mit einem Gradienten von 40-60 bis 50-50 EtOAc: Hexan erneut chromatographiert. 0,5-ml-Fraktionen werden gewonnen und mittels DC analysiert. Das reine Produkt findet sich in den Fraktionen 11-20, die nach dem Vereinigen und Eindampfen unter Vakuum das gewünschte Produkt als weißen Feststoff (4 mg) ergeben.
    • Daten für 14CA
  • DC: Silicagel 60; 50-50 EtOAc : Hexan; Rf: 0,87. Massenspektrum (FAB, m/z) 858, 803, 798, 551, 491, 369, 327, 206, 105, 57.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 1,25 (s); 2,01 (s, 3H); 2,21 (s, 3H); 2,43 (m); .4,01 (d, 1H) ; 4,07 (d, 1H); 4,28 (d, 1H); 4,70 (m, 2H); 5,18 (bs, 1H); 5,64 (m, 2H); 6,25 (m, 1H); 6,33 (s, 1H); 7,39 (m, 5H); 7,51 (m, 2H); 7,64 (m, 1H); 8,09 (d, 2H).
    • Daten für 23
  • DC: Silicagel 60; 50-50 EtOAc : Hexan; Rf: 0,77. Massenspektrum (FABm, m/z); (M + H) gemessen: 832,3588; theoretisch für C&sub4;&sub5;H&sub5;&sub4;N&sub1;O&sub1;&sub4; 832,3544; 832, 814, 776, 732, 714, 696, 672, 551, 491, 105, 57.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 1,28 (s); 1,37 (m); 1,68 (m); 1,85 (s); 2,10 (m); 2,21 (s, 3H); 2,26 (m); 2,39 (s, 3H); 2,47 (m); 3,30 (m, 1H); 4,06 (m, 2H); 4,31 (d, 1H); 4,63 (m, 1H); 4,74 (d, 1H); 5,30 (m, 1H); 5,36 (d, 1H); 5,66 (d, 1H); 6,28 (m, 1H); 6,33 (s, 1H); 7,37 (m, 5H); 7,51 (m, 2H); 7,61 (m, 1H); 8,15 (d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel Nr. 45 Herstellung von 13-(N-Phenyl-harnstoff-β-phenyl- isoserinyl)-baccatin III; 13-(β-Phenyl-isoserinyl) - baccatin-III-N-phenyl-harnstoff (10JA)
  • Eine Menge von 48 mg (0,064 mmol) 13-(β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel Nr. 24; 11A) wird in 700 ul THF gelöst und mit 6,5 ul (0,060 mmol) Phenylisocyanat versetzt. DC zeigt, dass kein Amin verblieben ist. Die Lösung wird EtOAc verdünnt und mit gesättigter CuSO&sub4;-Lösung extrahiert. Die organische Schicht wird über Na&sub2;SO&sub4; filtriert und unter Vakuum eingeengt und über 5 g Silicagel, das in 1 : 1 EtOAc : Hexan gepackt ist, chromatographiert. Die Säule wird mit 20 ml 1 : 1 EtOAc : Hexan, 20 ml 3 : 2 EtOAc : Hexan und 20 ml 2 : 1 EtOAc : Hexan eluiert, wobei 3-ml-Fraktionen gewonnen werden. Das gewünschte Produkt findet sich in den Fraktionen 17-31.
  • Massenspektrum (FAB-hochauflösend) Theorie: 869,3496. Gefunden: 869,3512.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 1,13 (s, 3H); 1,19 (s, 3H); 1,81 (s, 3H); 2,19 (s, 3H); 2,27 (m); 2,37 (s, 3H); 2,51 (m, 1H); 2,66 (m, 1H); 3,76 (d, 1H); 4,18 (d, 1H); 4,28 (d, 1H); 4,37 (m, 1H); 4,67 (m, 1H); 4,93 (d, 1H); 5,49 (dd, 1H); 5,67 (d, 1H); 6,21 (m, 1H); 6,27 (s, 1H); 6,93 (m, 2H); 7,07 (m, 2H); 7,19 (m, 3H); 7,26-7,40 (m); 7,48 (m, 1H); 7,60 (m, 1H); 8,10 (d, 2H)
    • Herstellungsbeispiel Nr. 46 Herstellung von N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)aminocarbonyl- taxol; 13-(β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin-III-N-tert.-butylharnstoff (10KA)
  • N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)aminocarbonyltaxol (51 mg, 0,07 mmol; Herstellungsbeispiel Nr. 24, 11A) wird in 700 ul THF gelöst und 7 ul (0,061 mmol) tert.-Butylisocyanat werden zugegeben. DC zeigt, dass etwas Amin verblieben ist, weshalb weitere 3 ul zugegeben werden. Dies wird zweimal wiederholt, bis DC wenig verbliebenes Amin zeigt (3 ul und 4 ul). Die Lösung wird unter Vakuum eingeengt und der Rückstand wird über 5 g Silicagel, das in 1 : 1 EtOAc : Hexan gepackt ist, chromatographiert. Die Säule wird mit 50 ml 1 : 1 EtOAc : Hexan, 25 ml 3 : 2 EtOAc : Hexan und 25 ml 2 : 1 EtOAc : Hexan eluiert, wobei 3-ml-Fraktionen gewonnen werden. Das gewünschte Produkt findet sich in den Fraktionen 21-40. Massenspektrum (FAB-hochauflösend) Theorie: 849,3809. Gefunden: 849,3809.
  • 1H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 1,14 (s, 3H); 1,22 (s); 1,24 (s); 1,83 (s, 3H); 2,23 (s, 31H); 2,44 (s, 3H); 2,50 (m, 1H); 3,77 (d, 1H); 4,17 (d, 1H); 4,29 (d, 1H); 4,38 (m, 1H); 4,61 (m, 1H); 4,94 (d, 1H); 5,29 (m, 2H); 5,67 (d, 1H); 6,18 (m, 1H); 6,29 (s, 1H); 7,33 (m, 5H); 7,49 (m, 1H); 7,61 (m, 1H); 8,09 (d, 2H)
    • Herstellungsbeispiel Nr. 47 Herstellung von 13-(N-1-Methyl-1-cyclohexamid-β-phenyl- isoserinyl)-baccatin III; 13-(N-(1-Methyl-1-cyclohexanoyl)- β-phenyl-isoserinyl)-baccatin III (10MA)
  • Eine Menge von 30 mg (0,04 mmol) 13-(β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel Nr. 24; 11A) wird in 400 ul Pyridin gelöst und auf 0ºC gekühlt. Nach dem Abkühlen werden 20 ul von 300 mg/l ml 1-Methyl-1-cyclohexylcarbonylchlorid in CH&sub2;Cl&sub2; (0,037 mmol) zugegeben. DC zeigte, dass etwas Amin übrig ist, weshalb weitere 10 ul zugegeben wurden. DC zeigt, dass wenig Amin übrig ist. Die Lösung wird mit EtOAc verdünnt und mit gesättigte CuSO&sub4;- Lösung extrahiert. Die organische Schicht wird über Na&sub2;SO&sub4; filtriert und unter Vakuum eingeengt und über 3 g Silicagel, das in 1 : 1 EtOAc : Hexan gepackt ist, chromatographiert. Die Säule wird mit 50 ml 1 : 1 EtOAc : Hexan und 20 ml 3 : 2 EtOAc : Hexan eluiert, wobei 2-ml-Fraktionen gewonnen werden. Das gewünschte Produkt findet sich in den Fraktionen 11-28. Massenspektrum (FAB-hochauflösend) Theorie: 874,4013. Gefunden: 874,4011.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 1,12 (s, 3H); 1,15 (s, 3H); 1,26 (s, 3H); 1,81 (s, 3H); 1,87 (m, 3H); 2,24 (s, 3H); 2,36 (s, 3H); 2,54 (m, 1H); 3,78 (d, 1H); 4,18 (d, 1H); 4,29 (d, 1H); 4,40 (m, 1H); 4,70 (d, 1H); 4,94 (d, 1H); 5,61 (dd, 1H); 5,67 (d, 1H); 6,19 (m, 1H); 6,28 (s, 1H); 6,51 (d, 1H); 7,38 (m, 5H); 7,50 (m, 2H); 7,61 (m, 1H); 8,11 (d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel Nr. 48 Herstellung von 13-(N-1-Phenyl-1-cyclopentamid-β-phenyl- isoserinyl)-baccatin III; 13-(N-(1-Phenyl-1-cyclopentanoyl)-β-phenyl-isoserinyl)-baccatin III (10NA)
  • Eine Menge von 26 mg (0,035 mmol) 13-(β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel Nr. 24; 11A) wird in 400 ul Pyridin gelöst und auf 0ºC gekühlt. Nach dem Abkühlen werden 20 ul von 350 mg/l ml 1-Phenyl-1- cyclopentyl-carbonylchlorid in CH&sub2;Cl&sub2; (0,033 mmol) zugegeben. DC zeigte, dass etwas Amin verblieben ist, weshalb weiter 20 ul zugegeben werden. DC zeigt kein Amin. Die Lösung wird mit EtOAc verdünnt und mit gesättigter CuSO&sub4;- Lösung extrahiert. Die organische Schicht wird über Na&sub2;SO&sub4; filtriert und unter Vakuum eingeengt und über 3 g Silicagel, das in 1 : 1 EtOAc : Hexan gepackt ist, chromatographiert. Die Säule wird mit 50 ml 1 : 1 EtOAc : Hexan und. 25 ml 3 : 2 EtOAc : Hexan eluiert, wobei 2-ml-Fraktionen gesammelt werden. Das gewünschte Produkt findet sich in den Fraktionen 12-29.
  • Massenspektrum (FAB-hochauflösend) Theorie: 922,4013. Gefunden: 922,4022.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 1,16 (s, 3H); 1,27 (s, 3H); 1,77 (s, 3H; 1,60-2,10 (m); 2,25 (s, 3H); 2,35 (s, 3H); 2,25-2,65 (m); 3,75 (d, 1H); 4,19 (d, 1H); 4,28 (d, 1H); 4,38 (m, 1H); 4,59 (d, 1H); 4,92 (d, 1H); 5,49 (dd, 1H); 5,66 (d, 1H); 6,10 (m, 2H); 6,26 (s, 1H); 7,08 (m, 2H); 7,29 (m); 7,53 (m, 2H); 7,63 (m, 1H); 8,12 (d, 2H)
    • Herstellungsbeispiel Nr. 49 Herstellung von 13-(N-Phthalimid-β-phenyl-isoserinyl)- baccatin III; 13-(β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin-III-N- phthalimid (10PA)
  • Eine Menge von 29 mg (0,04 mmol) 13-(β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel Nr. 24; 11A) wird in 400 ul Pyridin und 15 mg (0,07 mmol) Carbethoxyphthalimid gelöst. Die Reaktion wird mittels DC überprüft und nach 72 h ist kein Amin zu beobachten. Die Lösung wird mit EtOAc verdünnt und mit gesättigter CuSO&sub4;-Lösung verdünnt. Die organische Schicht wird über Na&sub2;SO&sub4; filtriert und unter Vakuum eingeengt und über 4 g Silicagel, das in 1 : 1 EtOAc : Hexan gepackt ist, chromatographiert. Die Säule wid mit 20 ml 1 : 1 EtOAc : Hexan, 20 ml 3 : 2 EtOAc : Hexan, 20 ml 2 : 1 EtOAc : Hexan und 20 ml 4 : 1 EtOAc : Hexan eluiert, wobei 2-ml-Fraktionen gewonnen werden. Das gewünschte Produkt findet sich in den Fraktionen 16-28.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 1,09 (s, 3H); 1,16 (s, 3H); 1,81 (s, 3H); 2,21 (s, 3H); 2,44 (s, 3H); 2,52 (m, 2H); 3,76 (d, 1H); 4,15 (d, 1H); 4,28 (d, 1H); 4,41 (m, 2H); 4,96 (d, 1H); 5,31 (m, 1H); 5,61 (d, 1H); 5,76 (d, 1H); 6,08 (m, 1H); 6,24 (s, 1H); 7,23 (m, 1H); 7,36 (m, 2H); 7,52 (m, 4H); 7,66 (m, 1H); 7,80 (m, 4H); 8,10 (d, 2H),
    • Herstellungsbeispiel Nr. 50 Herstellung von N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)aminothiocarbonyl-taxol (10LA)
  • Eine Menge von 24 mg (0,032 mmol) 13-(β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel Nr. 24; 11A) wird bei Raumtemperatur unter Stickstoff in 0,2 ml trockenem THF gerührt. Eine Menge von 4 ul (0,032 mmol) tert.- Butyl-isothiocyanat wird zugegeben. DC nach 5 h zeigt, dass die Reaktion unvollständig ist. Weitere 4 ul tert.-Butylisothiocyanat werden zugegeben und die Reaktion wird über Nacht weiterlaufen gelassen. Das Rohprodukt wird auf 0,5 Silicagel aufgetragen und über 3 g Silicagel unter Elution mit 60-40 Ethylacetat-Hexan chromatographiert. 1-ml-Fraktionen werden gewonnen, wobei sie mittels DC analysiert werden. Die Fraktionen 7-20 enthalten das Produkt und sie werden vereinigt und unter Vakuum eingedampft, wobei das gewünschte Produkt erhalten wird. DC: Silicagel 60; 60-40 EtOAc : Hexan; Rf: 0,40.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) d 1,14 (s, 3H); 1,40 (s, 9H); 1,80 (s, 3H); 2,25 (s, 3H); 2,40 (s, 3H); 3,50 (s, 1H); 3,80 (d, 1H); 4,23 (m, 2H); 4,40 (bs, 1H); 4,86 (s, 1H); 4,93 (d, 1H); 5,66 (d, 1 H); 6,18 (s, 1H); 6,27 (s, 1H); 6,28-6,40 (m, 2H); 6,59 (d, 1H); 7,30-7,54 (m, 7H); 7,58 (t, 1H); 8,09 (d, 2H).
  • Massenspektrum (FAB, m/z) (M + H) gemessen bei 865,3577; theoretisch für C&sub4;&sub5;H&sub5;&sub7;N&sub2;O&sub1;&sub3;S 865,3581; 865, 569, 509, 297, 279, 251, 133, 105, 77, 57.
    • Herstellungsbeispiel Nr. 51 Herstellung von Taxotere (10BF) aus 10-Acetyl-taxotere (10-BA)
  • Eine Menge von 25 mg (0,029 mmol) 10-Acetyl-taxotere (Herstellungsbeispiel Nr. 1, 10BA) wird bei Raumtemperatur unter Stickstoff in 1,0 ml 95% Ethanol gerührt. Nach der Zugabe von 2 Tropfen wasserfreiem Hydrazin und Reagierenlassen während 1,5 h zeigte DC, dass die Reaktion fast beendet war. Das Reaktionsgemisch wird zwischen Wasser und Methylenchlorid aufgeteilt. Die wässrige Schicht wird mit Methylenchlorid erneut extrahiert. Die organischen Schichten werden vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingedampft.
  • Das Rohprodukt wird über 3 g Silicagel unter Elution mit 70-30 Ethylacetat-Hexan chromatographiert. 1-ml- Fraktionen werden gewonnen, wobei sie mittels DC analysiert werden. Die Fraktionen 14-28 enthalten das Produkt und sie werden vereinigt und unter Vakuum eingedampft.
  • DC: Silicagel 60; 70-30 EtOAc : Hexan; Rf: 0,33.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 1,12 (s, 3H); 1,23 (s, 3H); 1,34 (s, 9H); 1,74 (s, 3H); 1,85 (s, 3H); 2,37 (s, 3H); 2,56 (m, 1H); 3,53 (bs, 1H); 3,90 (d, 1H); 4,18 (d, 1H); 4,21 (m, 1H); 4,30 (d, 1H); 4,32 (s, 1H); 4,62 (bs, 1H); 4,94 (d, 1H); 5,23 (s, 1H); 5,28 (bs, 1H); 5,52 (d, 1H); 5,66 (d, 1H); 6,20 (t, 1H); 7,25-7,45 (m, 6H); 7,50 (1, 2H); 7,61 (t, 1H); 8,11 (d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel Nr. 52 Herstellung von 13-(β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin-TII-N- tert.-amylurethan (10RA) Teil A: Herstellung von tert.-Amyl-4-nitrophenyl-carbonat
  • Eine Lösung von tert.-Amylalkohol (0,54 ml, 5,0 mmol) in Pyridin (1 ml) wurde bei 0ºC mit 4-Nitrophenylchlorformiat (1,00 g, 4,97 mmol) behandelt. Nach der Zugabe von 1,5 ml Methylenchlorid wurde das Reaktionsgemisch bei Raumtemperatur über Nacht gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde mit Toluol verdünnt und filtriert. Verunreinigungen kristallisierten aus Methylenchlorid-Hexan aus.
  • NMR δ 0,981 (t, 3H); 1,54 (s, 6H); 1,88 (q, 2H); 7, 36 (d, 2H); 8,28 (d, 2H).
    • Teil B
  • Eine Menge von 29 rng (0,039 mmol) 13-(β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin IIT (Herstellungsbeispiel Nr. 24; 11A) und tert.-Amyl-4-nitrophenyl-carbonat (13 mg, 0,051 mmol) in Pyridin (0,10 ml) werden 3 Tage lang bei Raumtemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wird mit Ethylacetat verdünnt und mit einer 5-%igen wässrigen Natriumbisulfatlösung gewaschen. Die Ethylacetatlösung wird über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet, eingedampft und auf einer Silicagelsäule (3 g, 230-400 mesh) chromatographiert. Die Säule wird mit Ethylacetat-Hexan-Gemischen eluiert. Das gewünschte Produkt ist nicht vollständig rein und es wird daher in einem Aceton-Hexan-System erneut chromatographiert.
  • NMR (CDCL&sub3;, TMS): δ 0,86 (t, 3H); 1,15 (s, 3H); 1,27 (s, 3H); 1,29 (s, 3H); 1,30 (s, 3H); 1,68 (s, 3H); 1,85 (s + m, 4H); 2,25 (s + m, 4H); 2,38 (s, 3H); 2,53 (m, 2H); 3,37 (d, 1H); 3,80 (d, 1H); 4,17 (d, 1H); 4,30 (d, 1H); 4,41 (m, 1H); 4,63 (m, 1H); 4,95 (d, 1H); 5,30 (m, 1H); 5,40 (m, 1H); 5,67 (d, 1H); 6,24 (m, 1H); 6,29 (s, 1H); 7,31-7,68 (m, 8H); 8,11 (d, 2H).
  • ¹³C-NMR (CDCl&sub3;, TMS): 8,16, 9,53, 14,85, 20,85, 21,86, 22,61, 25, 25, 25,71, 25,91, 26,73, 33,22, 35,42, 35,56, 43,18, 45,59, 56,05, 58,53, 72,14, 72,36, 73,57, 74,94, 75,55, 76,44, 79,03, 79,28, 81,05, 82,68, 84,37, 126,67. 128,05, 128,68, 128,84, 128,91, 130,16, 132,95, 133,69, 138,28, 142,28, 155,25, 167,03, 170,16, 171,27, 172,92, 203,66.
  • Massenspektrum (FAB); (m + H)&spplus; = 864. Hauptionen m/z 794, 569, 527, 509, 345, 327.
    • Herstellungsbeispiel Nr. 53 Herstellung von 13-(β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin-III-N- neopentylurethan (10UA) Teil A: Herstellung von Neopentyl-4-nitrophenyl-carbonat
  • Eine Lösung aus Neopentylalkohol (0,54 ml, 5,01 mmol), Pyridin (1 ml), 4-Nitrophenylchlorformiat (1,00 g, 5,0 mmol) und destilliertem THF (2 ml) in einem flammgetrockneten Kolben wird 40 h lang bei Raumtemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wird mit Hexan verdünnt, filtriert und eingedampft. Das Produkt wird auf Silicagel in Ethylacetat- Hexan-Gemischen chromatographiert. Das Produkt, das aus der Säule eluiert, wird durch Umkristallisieren aus Methylenchlorid-Hexan weiter gereinigt.
  • NMR (CDCl&sub3;, TMS): δ 1,02 (s, 9H); 3,99 (s, 2H); 7,39 (d, 2H); 8,29 (d, 2H).
    • Teil B
  • Eine Menge von 20 mg (0,027 mmol) 13-((3-Phenyl- isoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel Nr. 24; 11A) und Neopentyl-4-nirophenyl-carbonat (7,4 mg, 0,031 mmol) in Pyridin (80 ul) wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wird mit Ethylacetat verdünnt und mit 5-%iger wässriger Natriumbisulfatlösung gewaschen. Die organische Lösung wird über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und eingeengt. Das Rohprodukt wird zweimal auf Silicagel, zunächst in Aceton-Hexan, dann in Ethylacetat- Hexan-Gemischen chromatographiert, wobei das gewünschte Produkt erhalten wird.
  • NMR (CDCL3, TMS): δ 0,82 (s, 9H); 1,15 (s, 3H); 1,26 (s, 3H); 1,68 (s, 3H); 1,84 (s + m, 4H); 2,25 (s + m, 4H); 2,38 (s, 3H); 2,52 (m, 2H); 3,40 (d, 1H); 3,61 (d, 1H); 3,72 (m, 1H); 3,79 (d, 1H); 4,18 (d, 1H); 4,29 (d, 1H); 4,41 (m, 1H); 4,66 (m, 1H); 4,94 (d, 1H); 5,33 (m, 1H); 5,59 (m, 1H); 5,66 (d, 1H); 6,28 (s + m, 2H); 7,30-7,70 (m, 8H); 8,12 (d, 2H).
  • ¹³C-NMR (CDCl&sub3;, TMS); 9,45, 14,74, 20,73, 21,79, 22,47, 26,09, 26,72, 31,32, 35,46, 43,05, 45,50, 56,38, 58,45, 72,03, 73,47, 74,57, 75,42, 76,36, 79,02, 81,00, 84,28, 126,6, 128,09, 128,58, 128,79, 128,96, 130,11, 132,97, 133,61, 138,10, 141,97, 156,30, 166,91, 170,23, 171,14, 172,47, 203,50.
  • Massenspektrum (FAB): (m + H)&spplus; = 864. Hauptionen m/z 569, 551, 509, 327, 296, 250.
    • Herstellungsbeispiel Nr. 54 Herstellung von 13-(β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin-III-N- (2-chlor-1,1-dimethylethyl)urethan (10SA) Teil A
  • Eine Lösung von 1-Chlor-2-methyl-2-propanol (0,51 ml, 5,0 mmol), 4-Nitrophenylchlorformiat (0,999 g, 5,00 mmol), Pyridin (400 ul, 5,0 mmol) und THF (2 ml) in einem trockenen Kolben wird 40 h lang bei Raumtemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wird mit Hexan verdünnt und filtriert. Das Filtrat wird eingedampft und aus Methylenchlorid-Hexan umkristallisiert, wobei das gewünschte Produkt erhalten wird.
  • NMR (CDCl&sub3;, TMS): δ 1,64 (s, 6H); 3,87 (s, 2H); 7,38 (d, 2H); 8,28 (d, 2H)
    • Teil B
  • Eine Menge von 28 mg (0,037 mmol) 13-(β-Phenyl- isoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel Nr. 24; 11A) und Chlor-tert.-butyl-4-nitrophenyl-carbonat (12,0 mg, 0,044 mmol) in Pyridin (0,10 ml) wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wird mit Ethylacetat verdünnt und mit einer 5-%igen wassrigen Natriumbisulfatlösung gewaschen. Die organische Schicht wird über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Das Rohprodukt wird durch Säulenchromatographie auf Silicagel in Aceton-Hexan-Gemischen gereinigt.
  • NMR (CDCL&sub3;, TMS): δ 0,82 (s, 9H); 1,15 (s, 3H); 1,26 (s, 3H); 1,68 (s, 3H); 1,84 (s + m, 411); 2,25 (s + m, 4H); 2,38 (s, 3H); 2,52 (m, 2H); 3,40 (d, 1H); 3,61 (d, 1H); 3,72 (m, 1H); 3,79 (d, 1H); 4,18 (d, 1H); 4,29 (d, 1H); 4,41 (m, 1H); 4,66 (m, 1H); 4,94 (d, 1H); 5,33 (m, 1H); 5,59 (m, 1H); 5,66 (d, 1H); 6,28 (s + m, 2H); 7,30-7,70 (m, 8H); 8,12 (d, 2H).
  • ¹³C-NMR-(CDCl&sub3;, TMS): 9,45, 14,74, 20,73, 21,79, 22,47, 26,09, 26,72, 31,32, 35,46, 43,05, 45,50, 56,38, 58,45, 72,03, 73,47, 74,57, 75,42, 76,36, 79,02, 81,00, 84,28, 126,61, 128,09, 128,58, 128,79, 128,96, 130,11, 132,97, 133,61, 138,10, 141,97, 156,30, 166,91, 170,23, 171,14, 172,47, 203,50.
  • Massenspektrum (FAB); (m + H)&spplus; = 864, Hauptionen m/z 569, 551, 509, 327, 296, 250.
    • Herstellungsbeispiel Nr. 55 Herstellung von 13-(β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin-III-N-(3- methyl-3-pentyl)urethan (10TA) Teil A Herstellung von 3-Methyl-3-pentyl-4-nitrophenyl-carbonat
  • Ein Gemisch aus 3-Methyl-3-pentanol (0,62 ml, 5,0 mmol), 4-Nitrophenylchlorformiat (1,01 g, 5,0 mmol), THF (2 ml) und Pyridin (1 ml) wird 40 h lang bei Raumtemperatur gerührt. Acetonitril (2 ml) wird zugegeben und es wird über Nacht weitergerührt. Das Reaktionsgemisch wird mit Methylenchlorid und Hexan verdünnt, filtriert und eingedampft.
  • Das Produkt wird auf Silicagel in Ethylacetat-Hexan- Gemischen chromatographiert.
  • NMR (CDCl&sub3;, TMS): δ 0,95 (t, 6H); 1,50 (s, 3H); 1,90 (m, 4H); 7,35 (d, 2H); 8,27 (d, 2H).
    • Teil B
  • Eine Menge von 32 mg (0,043 mmol) 13-(β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin III (Herstellungsbeispiel Nr. 24; 11A) und 3-Methyl-3-pentyl-4-nitrophenyl-carbonat. (12,5 mgh, 0,047 mmol) in Pyridin (0,15 ml) wird 60 h lang bei Raumtemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wird mit Ethylacetat verdünnt und mit einer 5-%igen wässrigen Natriumbisulfatlösung gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Das Produkt wird durch Säulenchromatographie auf Silicagel in Aceton/Hexan-Gemischen gereinigt.
  • NMR (CDCL&sub3;, TMS): δ 0,76 (t, 6H); 1,15 (s, 3H); 1,24 (s, 3H); 1,27 (s, 3H); 1,50-1,98 (3s + m, 12H); 2,25 (s + m, 5H); 2,38 (s, 3H); 2,53 (m, 2H); 3,37 (bs, 1H): 3,80 (d, 1H); 4,17 (d, 1H); 4,30 (d, 1H); 4,41 (m, 1H); 4,64 (m, 1H); 4,95 (d, 1H); 5,29 (m, 1H); 5,42 (m, 1H); 5,66 (d, 1H); 6,24 (m, 1H); 6,29 (s 1H); 7,30-7,70 (m, 8H); 8,11 (d, 2H).
  • ¹³C-NMR (CDCl&sub3;, TMS): 7,61, 9,27, 14,58, 20,58, 21,63, 22,35, 22,58, 26,46, 30,18, 30,26, 35,15, 35,29, 42,91, 45,31, 55,68, 58,26, 71,88, 72,13, 73,27, 74,71, 75,29, 76,31, 78,78, 80,79, 84,10, 84,95, 126,38, 127,77, 128,41, 128,58, 128,81, 129,90, 132,71, 133,41, 138,06, 142,03, 154,86, 166,70, 169,88, 171,00, 172,68, 203,40.
  • Massenspektrum (FAB); (m + H)&spplus; = 878, Hauptionen m/z 794, 569, 527, 509, 345, 327.
    • Herstellungsbeispiel Nr. 56 Herstellung von N-(tert.-Butylaminocarbonyl)-β-phenyl- isoserinmethylester (3K)
  • (2R,3S)-β-Phenyl-isoserinmethylester (4,35 g, 22 mmol) wird in 100 ml trockenem THF gelöst und der Kolben wird auf 0ºC gekühlt. Zu der Lösung wird tert.-Butylisocyanat (2,8 ml, 25 mmol) zugegeben. DC nach 15 min zeigt, dass Ausgangsmaterial vorhanden ist, weshalb weitere 0,5 ml des Isocyanats zugegeben werden. DC nach 1 h ergibt kein Ausgangsmaterial, weshalb das Lösemittel unter Vakuum eingeengt wird, wobei N-(tert.-Butylaminocarbonyl)-β-phenyl- isoserinmethylester (3K) erhalten wird.
  • Proton-NMR (CDCl&sub3;, TMS): δ 1,27 (s, 9H); 3,43 (d, 1H); 3,81 (s, 3H); 4,34 (br.s, 1H); 4,48 (m, 1H); 5,27 (m, 1H); 5,32 (m, 1H); 7,29 (m, 2H); 7,34 (m, 3H).
  • Massenspektrum (FAB-hochauflösend) Theorie für C&sub1;&sub5;H&sub2;&sub2;N&sub2;O&sub4; + H: 1295,1658. Gefunden: 295,1663.
    • Herstellungsbeispiel Nr. 57
  • Herstellung von (4S,5R)-N-(tert.-Butylaminocarbonyl)-2- (2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäuremethylester (5Ka und 5Kb)
  • N-(tert.-Butylaminocarbonyl)-β-phenyl-isoserin-methylester (68 mg, 0,23 mmol; 3K, Herstellungsbeispiel Nr. 56) wird in 5 ml trockenem THF gelöst und die Lösung wird mit 2,4-Dimethoxy-benzaldehyd-dimethylacetal (70 mg, 0,33 mmol) und Pyridinium-p-toluolsulfonat (6 mg, 0,02 mmol) behandelt und unter Rückflußkühlung erhitzt. Etwa 2 ml Lösemittel werden dreimal in einem Zeitraum von 45 min unter Ergänzung mit 2 ml frischem THF abgedampft, wonach DC kein Ausgangsmaterial zeigt. Das Lösemittel wird unter Vakuum eingeengt und über 7 g Silicagel, das in 1 : 3 EtOAc : Hexan gepackt ist, chromatographiert. Die Säule wird mit 80 ml 1 : 3 EtOAc: Hexan, 45 ml 1 : 2 EtOAc : Hexan, 30 ml 2 : 3 EtOAc : Hexan und 30 ml 1 : 1 EtOAc : Hexan eluiert, wobei 3-ml-Fraktionen gewonnen werden.
  • Ein weniger polares Isomer, (4S,5R)-N-(tert.-Butylaminocarbonyl)-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäure-methylester (5Ka) findet sich in den Fraktionen 21-31.
  • Proton-NMR (CDCl&sub3;, TMS): δ 1,19 (s, 9H); 3,82 (s, 3H); 3,85 (s, 3H); 3,89 (s, 3H); 4,68 (br.s, 1H); 4,88 (d, 1H); 5,52 (d, 1H); 6,46 (m); 6,70 (s, 1H); 7,25-7,50 (m)
  • Massenspektrum (FAB-hochauflösend); Theoretisch für C&sub2;&sub4;H&sub3;&sub1;N&sub2;O&sub6; + H: 443,2182: Gefunden: 443,2172.
  • Ein stärker polares Isomer, (4S,5R)-N-(tert.-Butylaminocarbonyl)-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäure-methylester (5Kb) findet sich in den Fraktionen 33-42.
  • Proton-NMR (CDCl&sub3;, TMS): δ 0,99 (m, 9H); 3,53 (m, 3H); 3,81 (m, 3H); 3,88 (m, 3H); 4,05 (m, 1H); 4,55 (m, 1H); 5,45 (m, 1H); 6,48 (m, 2H); 6,79 (m, 1H); 7,25-7,50 (m) Massenspektrum (FAB-hochauflösend): Theoretisch für C&sub2;&sub4;H&sub3;&sub1;N&sub2;O&sub6; + H: 443,2182: Gefunden: 443,2180.
    • Herstellungsbeispiel Nr. 58 Herstellung von (4S,5R)-N-(tert.-Butylaminocarbonyl)-2- (2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäurekaliumsalz (6Ka) und dessen freier Säure (7Ka)
  • Eine Menge von 100 mg (0,23 mmol) des weniger polaren Isomers von (4S,5R)-N-(tert.-Butylaminocarbonyl)-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäure-methylester (Herstellungsbeispiel 57, 5Ka) wird bei Raumtemperatur unter Stickstoff in 3 ml MeOH gerührt. Dazu werden 0,1 ml Wasser und 43 mg (0,31 mmol) Kaliumcarbonat gegeben. Nach 1 h zeigt DC, dass kein Ausgangsmaterial übrig ist. Nach der Aufbewahrung im Gefrierschrank über Nacht wird das Lösemittel am nächsten Morgen abgedampft, wobei (4S,5R)-N-(tert.- Butylaminocarbonyl)-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäure-kaliumsalz (6Ka) erhalten wird.
  • Proton-NMR (d&sub6;-DMSO): δ 1,20 (s, 9H): 3,51 (s, 1H); 3,76 (s, 3H); 3,96 (s, 3H); 4,32 (d, 2H); 4,80 (s, 1H); 5,29 (d, 1H); 6,60-6,68 (m, 2H); 6,71, (d, 1H); 7,26 (d, 1H); 7,35 (5, 1H); 7,45 (t, 2H); 7,53 (d, 2H).
    • Herstellungsbeispiel Nr. 59 Herstellung von (4S,5R)-N-(tert.-Butylaminocarbonyl)-2- (2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäure (7Ka)
  • (4S,5R)-N-(tert.-Butylaminocarbonyl)-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäure-kaliumsalz (6Ka, Herstellungsbeispiel 58) wird zwischen Methylenchlorid und Wasser, das 0,9 ml 1 N HCl enthält, aufgeteilt. Die Schichten werden getrennt und die wässrige Schicht wird mit Methylenchlorid erneut extrahiert. Die organischen Schichten werden vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Hierbei wird (4S,5R)-N-(tert.-Butylaminocarbonyl)- 2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäure (7Ka) als weißer Feststoff erhalten.
    • Herstellungsbeispiel Nr. 60 Herstellung von 7-TES-Baccatin-III-13-(4S,5R)-N-(tert.- butylaminocarbonyl)-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester (9KaA)
  • (4S,5R)-N-(tert.-Butylaminocarbonyl)-2-(2,4-dimethoxyhenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäure (1,07 mmol, Herstellungsbeispiel 59, 7Ka) wird in 1,5 ml Methylenchlorid (3 ml Toluol gelöst. Dazu werden 7-TES-Baccatin III (500 mg, 0,71 mmol, 8A), DMAP (45 mg, 0,36 mmol) und DCC (240 mg, 1,15 mmol) gegeben. Das Reaktionsgemisch wird unter Stickstoff 1 h lang bei Raumtemperatur gerührt. Das entstandene Harnstoffnebenprodukt wird durch Filtration entfernt und das Filtrat wird unter Vakuum eingedampft. Der Rückstand wird über Silicagel (80 g) unter Elution mit 25-75 EtOAc : Hexan (200 ml) und 33-67 EtOAc : Hexan (1 l) chromatographiert. 20-ml-Fraktionen werden gewonnen, wobei sie mittels DC analysiert werden. Die Fraktionen 28-47 enthalten das gewünschte Produkt und sie werden vereinigt und eingedampft. 7-TES-Baccatin-III-13-(4S,5R)-N-(tert.butylaminocarbonyl)-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester (9KaA) wird als weißer Feststoff erhalten.
  • Massenspektrum (FAB, M + H): Berechnet für C&sub6;&sub0;H&sub7;&sub9;N&sub2;O&sub1;&sub6;Si 1111,5198: Gefunden 1111,5189.
    • Herstellungsbeispiel Nr. 61 Herstellung von 13-(N-(tert.-Butylaminocarbonyl)-β-phenyl- isoserinyl)-baccatin III; N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)- aminocrbonyl-taxol; 13-(β-Phenyl-isoserinyl)-baccatin-III- N-tert.-butylharnstoff (10Ka)
  • Eine 0,1 M HC&sub1;-Lösung wird aus 0,071 ml Acetylchlorid und 9,929 ml MeOH hergestellt, die vor Gebrauch 30 min lang stehengelassen wird.
  • 7-TES-Baccatin-III-13-(4S,5R)-N-(tert.-butylaminocarbonyl)-2-(2,4-dimethoxyphenyl)-4-phenyl-5-oxazolidincarbonsäureester (100 mg, Herstellungsbeispiel 60, 9KaA) wird mit der obigen methanolischen HCl-Lösung (0,5 ml) unter Rühren unter Stickstoff behandelt. Die Reaktion ist nach 45 min vollständig, was durch DC gezeigt wird. Das Reaktionsgemisch wird zwischen Ethylacetat und 5-%iger Natriumbicarbo natlösung aufgeteilt. Die Schichten werden getrennt und die wässrige Schicht wird mit Ethylacetat erneut extrahiert. Die organischen Schichten werden vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und unter Vakuum eingedampft.
  • Das Rohprodukt wird über Silicagel (8 g) unter Elution mit 33-67 Aceton-Hexan (70 ml) und 40-60 Aceton-Hexan (35 ml) chromatographiert. 2-ml-Fraktionen werden gewonnen, wobei sie mittels DC analysiert werden. Reines Produkt findet sich in den Fraktionen 18-29, die vereinigt und eingedampft werden. 13-(N-(tert.-Butylaminocarbonyl)-β-phenyl-isoserinyl)-baccatin III (10KA) wird als weißer Feststoff erhalten. Die physikalischen Daten entsprechen den zuvor bei Herstellungsbeispiel Nr. 46 erhaltenen.
    • HERSTELLUNGSBEISPIEL 1A 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-taxol-7-methylxanthat
  • Methyliodid (1,3 Äquivalente) wird zu einer gerührten Lösung von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-taxol (1 Äquivalent) in Schwefelkohlenstoff gegeben. Natriumhydrid (2,1 Äquivalente) wird zugegeben und das entstandene Gemisch wird gerührt und mittels DC auf die Bildung des Methylxanthats überprüft. Wenn die Reaktion beendet ist, werden der überschüssige Schwefelkohlenstoff und Methyliodid durch Abdampfen entfernt und der Rückstand wird zwischen Wasser und Ether aufgeteilt, die Schichten werden getrennt, die organische Schicht wird getrocknet, filtriert und eingeengt, wobei die Titelverbindung erhalten wird.
    • HERSTELLUNGSBEISPIEL 2A 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-taxol-7-methansulfonat
  • Methansulfonylchlorid (1,2 Äquivalente) wird tropfenweise zu einer Lösung von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)- oxy}carbonyl]-taxol (1 Äquivalent) und Pyridin (5 Äquivalente) in CH&sub2;Cl&sub2;, die bei Eisbadtemperatur gerührt wird, gegeben. Das Reaktionsgemisch wird sich erwärmen gelassen und das Rühren wird fortgesetzt, bis der Nachweis durch DC ergibt, dass die Reaktion beendet ist. Das Reaktionsgemisch wird mit Eiswasser gequencht und mit CH&sub2;Cl&sub2; extrahiert und diese Extrakte werden nacheinander mit verdünnter wässriger Säure, verdünnter wässriger NaHCO&sub2;-Lösung und Wasser gewaschen und anschließend getrocknet, filtriert und eingeengt, wobei das rohe Reaktionsprodukt erhalten wird. Die Chromatographie des Rohprodukts über Silicagel ergibt die reine Titelverbindung.
    • HERSTELLUNGSBEISPIEL 3A 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-taxol-7-trifluormethylsulfonat
  • Trifluormethansulfonsäureanhydrid (1,3 Äquivalente) wird tropfenweise zu einer Lösung von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)-oxy}carbonyl]-taxol (1 Äquivalent) in Pyridin gegeben, wobei die Lösung gerührt und auf -30ºC gekühlt wird. Das Reaktionsgemisch wird sich erwärmen gelassen und das Rühren wird fortgesetzt, bis der Nachweis durch DC ergibt, dass die Reaktion beendet ist. Die Reaktionslösung wird mit Eiswasser gequencht und mit CH&sub2;Cl&sub2; extrahiert. Die CH&sub2;Cl&sub2;-Extrakte werden nacheinander mit kalter, verdünnter wässriger Säure, verdünnter wässriger NaHCO&sub2;-Lösung und Wasser gewaschen und anschließend getrocknet, filtriert und eingeengt, wobei das rohe Reaktionsprodukt erhalten wird. Die Chromatographie des Rohprodukts über Silicagel ergibt die reine Titelverbindung.
    • HERSTELLUNGSBEISPIEL 4A 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-desoxy-7-azidotaxol
  • Eine Lösung von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-taxol-7-trifluormethylsulfonat (1 Äquivalent) und 18- Krone-6 (1 Äquivalent) N,N-Dimethylpropylenharnstoff wird mit Kaliumazid (10 Äquivalente) gerührt. Das Gemisch wird gerührt und erwärmt, bis ein Nachweis durch DC ergibt, dass die Reaktion beendet ist. Das Reaktionsgemisch wird mit kaltem Wasser gequencht und die entstandene Lösung wird mit Ether extrahiert. Der Ether wird sorgfältig mit Wasser gewaschen, getrocknet, filtriert und eingeengt, wobei das rohe Reaktionsprodukt erhalten wird. Die Chromatographie des Rohprodukts über Silicagel ergibt die reine Titelverbindung.
    • HERSTELLUNGSBEISPIEL 5A 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-desoxy-7-aminotaxol
  • Eine Lösung von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-desoxy-7-azidotaxol in Ethanol wird mit dem Katalysator 10%-Palladium-auf-Kohle in einer Wasserstoffatmosphäre gerührt. Nach der Reaktion wird der Katalysator durch Filtration entfernt und das Filtrat wird eingeengt, wobei das rohe Reaktionsprodukt erhalten wird. Die Chromatographie des Rohprodukts über Silicagel ergibt die reine Titelverbindung.
    • HERSTELLUNGSBEISPIEL 6A Herstellung von N-Debenzoyl-N-benzyloxycarbonyl-2'- {[(2,2,2-trichlorethyl)oxy]carbonyl}-taxol (({2aR- [2aα,4β,4aβ,6β,9α,(αR*, β5* ),11α,12α,12aα,12bα]}-β-(Benzyloxycarbonylamino)-α-{[(2,2,2-trichlorethoxy)-carbonyl)- oxy}benzolpropansäure-6,12b-bis(acetyloxy)-12-(benzoyloxy)- 2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b-dodecahydro-4,11-dihydroxy-4a,8,13,13-tetramethyl-5-oxo-7,11-methano-1H- cyclodeca[3,4]benz[1,2-b]-oxet-9-yl-ester)) (12BA); und N-Debenzoyl-N-benzyloxycarbonyl-2',7-bis{[(2,2,2-trichlorethyl)oxy]carbonyl}-taxol (({2aR-[2aα,4β,4aβ,6β,9α, (αR*,βS*),11α,12α,12aα,12bα]}-β-(benzyloxycarbonylamino)- α-{[(2,2,2-trichlorethoxy)-carbonyl]oxy}benzolpropansäure- 6,12b-bis(acetyloxy)-12-(benzoyloxy)-4-{[(trichlorethoxy)- carbonyl]oxy}-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b-dodecahydro- 11-hydroxy-4a,8,13,13-tetramethyl-5-oxo-7,11-methano-1H- cyclodeca[3,4]benz[1,2-b]-oxet-9-yl-ester))
  • Es wird dem für die Herstellung von 2'-Troc-taxol beschriebenen Verfahren [Magri et al., J. Org. Chem. 1986, 51, 797] gefolgt, wobei N-Debenzoyl-N-benzyloxycarbonyltaxol (0,290 g, 0,328 mmol) und 2,2,2-Trichlorethylchlorformiat (59 ul, 0,091 g, 0,43 mmol) in CH&sub2;Cl&sub2; (11 ml), das Pyridin (1,6 ml) enthält, verwendet wird. Nach dem Aufarbeiten wird das Rohprodukt (0,340 g) über Silicagel (40-63 um, Säule der Größe B von Merck) unter Verwendung einer CH&sub2;Cl&sub2;-Lösung zur Applikation des Materials auf die Säule und 40% EtOAc-Hexan (90 Fraktionen), 60% EtOAc : Hexan (30 Fraktionen) und EtOAc zur Elution der Säule chromatogra phiert (8-ml-Fraktionen werden gewonnen). N-Debenzoyl-N- benzyloxycarbonyl-2',7-bistroc-taxol (0,053 g, 13%) wird in den Fraktionen 14-23 eluiert. Ausgangsmaterial (0,014 g, 5%) wird in den Fraktionen 139-143 gewonnen. Das gewünschte N-Debenzoyl-N-benzyloxycarbonyl-2'-troc-taxol 12BA (0,248 g, 0,234 mmol, 71%) wird in den Fraktionen 49-80 eluiert und durch die folgenden Spektraldaten charakterisiert:
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS): δ 8,15 (d, 2H, aromatisch), 7,62 (t, 1H, aromatisch), 7,52 (t, 2H, aromatisch), 7,30-7,50 (m, 5H, aromatisch), 7,17 (m 2H, aromatisch), 6,26 (m, 1H, H&sub1;&sub3;, 6,25 (s, 1H, H&sub1;&sub0;), 5,71 (m, 1H, -NH-), 5,67 (d, 1H, H&sub2;), 5,58 (m, 1H, H3'), 5,41 (d, 1H, H2'), 5,08 (d, 1H, PhCHaHO-), 4,96 (d, 1H, PhCHHbO-), 4,94 (m, 1H, H5), 4,79 (d, 1H, -OCHaHCCl&sub3;), 4,68 (d, 1H, J = 11,8 H&sub2;, -OCHHbCCl&sub3;), 4,42 (m, 1H, H&sub7;), 4,31 (d, 1H, H20a), 4,18 (d, 1H, H20b), 3,78 (d, 1H, H&sub3;), 2,55 (m, 1H, H6a), 2,47 (m, 1H, H14a), 2,45 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,31 (m, 1H, H14b), 2,24 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,92 (m, 1H, H6b), 1,86 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,68 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,23 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,14 (s, 3H, -CH&sub3;);
  • Massenspektrum 1058, 569, 551, 509, 104, 91 m/z.
    • HERSTELLUNGSBEISPIEL 7A 10-Desacetyltaxol
  • Eine Lösung aus Taxol (0,026 g, 0,030 mmol) und 98% Hydrazin (0,035 g, 1,1 mmol) in 95% Ethanol (1,0 ml) wird 2 h lang bei Raumtemperatur gerührt. Die Lösung wird in Wasser und Ether gegossen, das Gemisch wird gut geschüttelt und die Schichten werden getrennt. Die wässrige Schicht wird mit weiterem Ether extrahiert. Die vereinigten Etherextrakte werden über Na&sub2;SO&sub4; getrocknet, filtriert und eingeengt, wobei 0,021 g der Titelverbindung erhalten werden. Das ¹H-NMR-Spektrum in CDCl&sub3; ist mit dem für 10-Desacetyltaxol berichteten Spektrum (I. Ringel, S. B. Horwitz, J. Pharmacol. Exp. Ther., 1987, 242, 692) identisch und mit dem Spektrum einer authentischen Probe identisch.
    • HERSTELLUNGSBEISPIEL 8A 10-Desacetylbaccatin III
  • Eine Lösung von Baccatin III (0,024 g, 0,041 mmol) in 95% Ethanol (1,0 ml) wird durch Erwärmen des Gemischs hergestellt. Die Lösung wird auf Raumtemperatur gekühlt, mit 98% Hydrazin (0,035 g, 1,1 mmol) versetzt und die Lösung wird 24 h bei Raumtemperatur gerührt. Die Lösung wird in Wasser/Ether gegossen, gut geschüttelt und die Schichten werden getrennt. Die Etherschicht wird mit Wasser gewaschen, getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;), filtriert und eingeengt, wobei 0,010 g der Titelverbindung erhalten werden. Das ¹H-NMR- Spektrum in CDCl&sub3; (schwer löslich) ist mit dem einer authentischen Probe von 10-Desacetylbaccatin III identisch.
    • HERSTELLUNGSBEISPIEL 10A N-Debenzoyl-N-{[(2,2,2-trichlorethyl)oxy]carbonyl}-2'- triethylsilyltaxol
  • N-Debenzoyl-N-{[(2,2,2-trichlorethyl)oxy]carbonyl}- taxol((13-[N-(2,2,2-trichlorethoxycarbonyl)-β-phenyl-isoserinyl]-baccatin III; 10DA, Herstellungsbeispiel 28)) wird durch Reaktion mit Triethylsilylchlorid in Pyridin, das eine katalytische Menge 4-Dimethylaminopyridin enthält, selektiv silyliert. Das Reaktionsgemisch wird durch Gießen in Eiswasser gequencht und mit CH&sub2;Cl&sub2; extrahiert. Der Extrakt wird getrocknet, filtriert und eingeengt und das Rohprodukt wird durch Silicagelchromatographie gereinigt, wobei die reine Titelverbindung erhalten wird.
    • HERSTELLUNGSBEISPIEL 13A N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)oxycarbonyl-2'-{[(2,2,2-trichlorethyl)oxy]carbonyl}-taxol (Verbindung 12DA); (({2aR- [2aα,4β,4aβ,6β,9α,(αR*,βS*), 11α, 12α, 12aα, 12ba]}-χ- [(tert.- Butyl)oxycarbonylamino]-α-{((2,2,2-trichlorethoxy)-carbonyl]oxy}benzolpropansäure-6,12b-bis(acetyloxy)-12-(benzoyloxy)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a, 12b-dodecahydro-4,11- dihydroxy-4a,8,13,13-tetramethyl-5-oxo-7,11-methano-1H- cyclodeca[3,4]benz[1,2-b]-oxet-9-yl-ester)) und N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)oxycarbonyl-2',7-bis{[(2,2,2- trichlorethyl)oxy]carbonyl}-taxol (({2aR-[2aα,4β,4aβ,6β, 9α,(αR*,βS* ),11α,12α,12aα,12bα]}-β-[(tert.-Butyl)oxycarbonylamino]-α-{[(2,2,2-trichlorethoxy)-carbonyl]oxy}benzolpropansäure-6,12b-bis(acetyloxy)-12-(benzoyloxy)-4-{[(trichlorethoxy)cabonyl]oxy}-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b- dodecahydro-11-hydroxy-4a,8,13,13-tetramethyl-5-oxo-7,11- methano-1H-cyclodeca[3,4]benz[1,2-b]-oxet-9-yl-ester))
  • Gemäß dem Verfahren zur Herstellung von 2'-Troc-taxol (Magri et al., J. Org. Chem., 1986, 51, 797), jedoch ausgehend von N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)oxycarbonyltaxol (Verbindung 10BA, 1,98 g, 2,33 mmol) und 2,2,2-Trichlorethylchlorformiat (405 ul, 0,622 g, 2, 94 mmol) in CH&sub2;Cl&sub2; (80 ml) wird das Produkt 12DA hergestellt. Nach dem Aufarbeiten wird das Rohprodukt über Silicagel (40-63 um, 37 · 350 mm, 190 g) unter Verwendung einer CH&sub2;Cl&sub2;-Lösung zur Applikation des Materials auf die Säule und 40% EtOAc : Hexan (63 Fraktionen) und anschließend 75% EtOAc : Hexan zur Elution der Säule chromatographiert (45-ml-Fraktionen werden gewonnen). N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)oxycarbonyl-2',7-bistroctaxol (0,140 g) wird in Fraktion 6 eluiert. Ausgangsmaterial (0,192 g) wird in den Fraktionen 70-78 gewonnen. Das gewünschte N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)oxycarbonyl-2'-troctaxol (Verbindung 12DA) wird in den Fraktionen 18-38 eluiert und durch die folgenden Spektraldaten charakterisiert:
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,12 (d, 2H, J = 8,1 Hz), 7,62 (t, 1H, J = 7,2 Hz), 7,51 (t, 2H, J = 7,7 Hz), 7,30-7,44 (m, 5H), 6,30 (s, 1H, H&sub1;&sub0;), 6,30 (t, 1H, H&sub1;&sub3;), 5,68 (d, 1H, J = 7,1 Hz, H&sub2;), 5,48 (d, 1H, -NH- oder H3'), 5,44 (d, 1H, H&sub3;, oder NH-),5,36 (d, 1H, J = 2,2 Hz, H2'), 4,98 (d, 1H, J = 9,3 Hz, H&sub5;), 4,79 (d, 2H, J = 11,9 Hz, 2'-Troc-Ha), 4,70 (d, 2H, J = 11,8 Hz, 2'Troc-Hb), 4,44 (m, 1H, H&sub7;) = 4,32 (d, 1H, J = 8,4 Hz, H20a), 4,18 (d, 1H, J = 8,4 Hz, H20b), 3,82 (d, 1H, J = 6,8 Hz, H&sub3;)
    • HERSTELLUNGSBEISPIEL 14A 2'-Triethylsilyl-taxol-7-methylxanthat
  • Eine Menge von 500 mg (0,52 mmol) 2'-Triethylsilyltaxol wird in 5 ml destilliertem THF gelöst. Zu der Lösung werden 50 ul (0,80 mmol) Methyliodid und 155 ul (2,58 mmol) Schwefelkohlenstoff gegeben. Eine Aufschlämmung von 40 mg (60% Natriumhydrid in Öl) in destilliertem THF wird hergestellt und etwa zur Hälfte zugegeben und das erhaltene Gemisch wird gerührt und durch DC auf die Bildung des Methyl xanthats überprüft. Nach 0,5 h wird der Rückstand zwischen einer gesättigten NH&sub4;Cl-Lösung und EtOAc verteilt. Die Schichten werden getrennt, die organische Schicht wird über Na&sub2;SO&sub4; filtriert und eingeengt, wobei die Titelverbindung erhalten wird. Das Produkt wird durch Säulenchromatographie unter Verwendung von 60 g Silicagel in 1 : 4 EtOAc : Hexan gereinigt. Das Produkt wird unter Verwendung von Methylenchlorid zugegeben und die Säule wird mit 400 ml 1 : 4 EtOAc : Hexan, 400 ml 1 : 3 EtOAc : Hexan und 300 ml 1 : 2 EtOAc : Hexan eluiert. Die Produkt enthaltenden Fraktionen werden mittels DC ermittelt und vereinigt und eingedampft, wobei das 2'- Triethylsilyl-taxol-7-methylxanthat als weißer Feststoff erhalten wird.
  • DC: Silicagel 60; 33% EtOAc- 67% Hexan; Rf: 0,40.
  • NMR (CDCl&sub3;, TMS): δ 0,44 (m, 6H); 0,81 (m); 1,19 (s, 3H); 1,22 (s, 3H); 2,16 (s, 3H); 2,48 (s, 3H); 2,58 (s, 3H); 2,94 (m, 1H); 4,03 (d, 1H); 4,25 (d, 1H); 4,37 (d, 1H) 4,70 (s, 1H); 5,00 (d, 1H); 5,73 (m, 2H); 6,28 (m, 1H): 6,32 (s, 1H); 6,40 (m, 1H); 7,11 (d, 1H); 7,30- 7,65 (m); 7,75 (d, 2H); 8,15 (d, 2H).
    • HERSTELLUNGSBEISPIEL 15A 2'-TES-Taxol-7-triflat
  • Eine Lösung von 2'-Triethylsilyltaxol [0,10 g; Chaudhary et al., J. Org. Chem. 1993, 58, 3798] und trockenem Pyridin (0, 29 ml) in CH&sub2;Cl&sub2; (4 ml) wird auf -20ºC gekühlt und mit Trifluormethansulfonsäureanhydrid (0,17 ml) versetzt. Die Lösung wird gerührt und sich auf etwa -10ºC erwärmen gelassen. Nach 3 h wird gesättigte NH&sub4;Cl-Lösung zu dem Reaktionsgemisch gegeben und das Gemisch wird mit EtOAc extrahiert. Die organische Extraktlösung wird mit verdünnter wässriger NaHSO&sub4;-Lösung, mit gesättigter NaHCO&sub3;-Lösung gewaschen, über Na&sub2;SO&sub4; getrocknet, filtriert und bei Raumtemperatur eingeengt. Das rohe Reaktionsprodukt wird über Silicagel unter Verwendung von 30% EtOAc in Hexan zur Elution der Säule (flash)chromatographiert und Fraktionen eines Volumens von 5 ml werden gewonnen. Die das gewünschte Produkt enthaltenden Fraktionen (4-10) werden vereinigt und ergeben die Titelverbindung (0,094 g).
    • HERSTELLUNGSBEISPIEL 16A Baccatin-III-7-O-triflat (24)
  • Eine Lösung von Baccatin III (5,25 g, 8,93 mmol) in CH&sub2;Cl&sub2; (21 ml) und Pyridin (18,1 ml) wird in einem Bad von -30ºC gekühlt. Trifluormethansulfonsäureanhydrid (3,76 ml, 6,31 g, 22,3 mmol) wird zugesetzt und das erhaltene Gemisch wird über einen Zeitraum von 1 h gerührt und sich auf Raumtemperatur erwärmen gelassen. Die Reaktion ist nach 4 h beendet; gesättigte wässrige NH&sub4;Cl-Lösung (50 ml) wird zugegeben und das Gemisch wird mit CH&sub2;Cl&sub2; extrahiert. Der organische Extrakt wird nacheinander mit 1 M wässriger NaHSO&sub4;- Lösung (50 ml), gesättigter wässriger NaHCO&sub3;-Lösung (2 · 50 ml), gesättigter wässriger NaCl-Lösung gewaschen und getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;), filtriert und unter vermindertem Druck eingeengt. Es ist darauf zu achten, dass die Lösung während der Entfernung des Lösemittels nicht auf mehr als 40ºC erwärmt wird. Ein blaßgelber Feststoff wird erhalten, der über Silicagel (6" Silicagel in einer 75-mm-Säule, 125 ml- Fraktionen) flashchromatographiert wird. Das Material wird auf die Säule in einer CH&sub2;Cl&sub2;-Lösung appliziert und die Säule wird mit 5% CH&sub3;CN-CH&sub2;Cl&sub2; eluiert. Die Fraktionen 19-35 enthalten das gewünschte Baccatin-III-7-O-triflat (4,837 g, 6,71 mmol, 75%), das ein weißer Feststoff ist.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,10 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 7,63 (t, 1H, J = 7,4 Hz), 7,49 (t, 2H, J = 7,6 Hz), 6,63 (s, 1H, H&sub1;&sub0;), 5,68 (d, 1H, J = 7,0 Hz, H&sub2;), 5,52 (dd, 1H, J = 7,5, 10,1 Hz, H&sub7;), 4,94 (d, 1H, J = 8,4 Hz, H&sub5;), 4,86 (m, 1H, H&sub1;&sub3;), 4,35 (d, 1H, J = 8,4 Hz, H20a), 4,15 (d, 1H, J = 8,4 Hz, H20b, 4,01 (d, 1H, J = 7,0 Hz, H&sub3;), 2,87 (5Linien, H14a), 2,30 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,20 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,10-2,30 (m, H6a, H6b, H14b), 1,87 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,59 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,19 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,05 (s, 3H, -CH&sub3;).
    • HERSTELLUNGSBEISPIEL 18A 7-Desoxy-7β,8β-methano-baccatin III (26)
  • Eine Lösung von 7-Trifluormethansulfonyl-baccatin III (24, 87 mg, 0,12 mmol) in destilliertem Dioxan (1,5 ml) wird mit einer wässrigen Natriumazidlösung (0,10 g, 1,5 mmol NaN&sub3; in 0,30 ml Wasser) behandelt. Das Reaktionsgemisch wird 1 h lang unter Stickstoff unter Rückflußkühlung erhitzt. Das Gemisch wird mit Ethylacetat verdünnt und mit Wasser und Kochsalzlösung gewaschen, über wasserfreiem Na triumsulfat getrocknet und eingedampft. Das Produkt wird durch Säulenchromatographie auf Silicagel 60 in 25% Ethylacetat-Methylenchlorid gereinigt, wobei eine 56-%ige Ausbeute (39 mg) von weißem kristallinem 7-Desoxy-7β,8β- methano-baccatin III erhalten wird.
  • NMR (CDCl&sub3;, TMS): δ 1,10 (s, 3H); 1,22 (s, 3H); 1,35 (m, 1H); 1,64 (m, 1H); 1,78 (s, 1H); 2,03 (s + m, 4H); 2,21 (s, 3H); 2,26 (s, 3H); 2,20-2,55 (m, 5H); 4,04 (d, 1H, J = 8,5 Hz); 4,28 (d, 1H, J = 7,5 Hz); 4,30 (d, 1H, J = 8,5 Hz); 4,74 (d, 1H); 4,83 (m, 1H); 5,63 (d, 1H, J = 7,5 Hz); 6,35 (s, 1H); 7,49 (m, 2H); 7,62 (m, 1H); 8,13 (m, 2H).
  • ¹³C-NMR (CDCl&sub3;, TMS): 15,15, 15,28, 20,43, 20,82, 21,99, 25,90, 26,35, 31,63, 35,19, 38,57, 38,76, 42,20, 67,51, 75,30, 76,20, 76,49, 79,23, 79,91, 84,73, 128,50, 129,33, 129,99, 132,59, 133,54, 144,19, 167,20, 169,63, 170,00, 202,08.
    • HERSTELLUNGSBEISPIEL 19A 7-Desoxy-7α-azido-baccatin III (27)
  • Ein Gemisch von 7-Trifluormethansulfonyl-baccatin III (24, 102 mg, 0,14 mmol), Natriumazid (13 mg, 0,20 mmol) und 18-Krone-6 (32 mg, 0,12 mmol) in 1,3-Dimethyl-3,4,5,6- tetrahydro-2(1H)-pyrimidinon (1,0 ml) wird über Nacht bei Raumtemperatur in einer inerten Atmosphäre gerührt. Das Reaktionsgemisch wird zwischen Ethylacetat und Wasser aufgeteilt. Die organische Schicht wird über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Das Rohprodukt wird durch Säulenchromatographie auf Silicagel 60 in 15% Ethylacetat-Methylenchlorid gereinigt. Das Produkt wird des weiteren durch Kristallisation aus Methylenchlorid-Hexan gereinigt, wobei 37 mg 7-Desoxy-7α-azido-baccatin III erhalten werden.
  • NMR (DMSO-d&sub6;, TMS): δ 0,96 (s, 6H); 1,59 (s, 3H); 1,91 (s, 3H); 2,13 (s, 3H); 2,25 (s, 3H); 2,10-2,35 (m, 4H); 2,47 (m, 1H); 3,80 (m, 2H); 4,07 (d, 1H, J = 8,0 Hz); 4,33 (d, 1H, J = 8,0 Hz); 4,60 (s + m, 2H); 4,99 (dd, 1H); 5,35 (d, 1H); 5,48 (d, 1H, J = 7,2 Hz); 6,79 (s, 1H); 7,59 (m, 2H); 7,69 (m, 1H); 8,05 (m, 2H).
  • ¹³C-NMR (DMSO-d&sub6;, TMS): 15,40, 17,31, 20,67, 22,20, 25,93, 29,81, 39,22, 40,63, 41,73, 55,57, 64,28, 65,91, 75,33, 76,91, 77,33, 78,22, 80,44, 80,94, 128,77, 129,58, 129,98, 130,28, 133,33, 145,43, 165,30, 168,75, 169,09, 207,11.
  • Die folgenden Beispiele erläutern die vorliegende Erfindung weiter.
    • Beispiel 1 Herstellung von 2'-{[(2,2,2-Trichlorethyl)oxy]carbonyl}-7-desoxy-7- fluortaxol (Verbindung 13AA; IIIa) (({2aR-[2aα,4β,4aβ, 6β,9α,(αR*, βS*),11α,12α,12aα,12bα]}-β-(Benzoylamino)-α- {[(2,2,2-trichlorethoxy)carbonyl]oxy}benzolpropansäure- 6,12b-bis(acetyloxy)-12-(benzoyloxy)-2a,3,4,4a,5,6,9,10, 11,12,12a,12b-dodecahydro-4-fluor-11-hydroxy-4a,8,13,13- tetramethyl-5-oxo-7,11-methano-1H-cyclodeca[3,4]benz[1,2- b]-oxet-9-yl-ester)) und 2'-{[(2,2,2-Trichlorethyl)oxy]carbonyl}-7-desoxy-7β,8β- methanotaxol (Verbindung 14AA) (({2aR-[2aα,4β,4aβ,6β,9α, (αR*,βS*),11α,12α,12aα,12bα]}-β-(Benzoylamino)-α-{[(2,2,2- trichlorethoxy)carbonyl]oxy}benzolpropansäure-6,12b-bis- (acetyloxy)-12-(benzoyloxy)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a, 12b-dodecahydro-11-hydroxy-8,13,13-trimethyl-5-oxo-4, 4a; 7,11-bismethano-1H-cyclodeca[3,4]benz[1,2-b]-oxet-9-yl- ester))
  • Dimethylaminoschwefeltrifluorid (MethylDAST) (250 ul, 0,340 g, 2,56 mmol) wird auf einmal mittels einer Spritze zu einer gerührten und gekühlten (Aceton/Trockeneisbad) Lösung von 2'-{[(2,2,2-Trichlorethyl)oxy]carbonyl}taxol 12AA [N. F. Magri, D. G. I. Kingston, J. Org. Chem., 1986, 51, 797] (1,60 g, 1,55 mmol) in CH&sub2;Cl&sub2; (180 ml) gegeben. Das Kühlbad wird entfernt und der Reaktionsbehälter wird auf Raumtemperatur kommen gelassen. Das Reaktionsgemisch wird gerührt und es zeigt sich, dass das Ausgangsmaterial innerhalb von 70 min nach der Beurteilung durch dünnschichtchromatographischen Nachweis vollständig aufgebraucht ist. Das Reaktionsgemisch wird durch die Zugabe von Wasser gequencht und mit Hilfe von weiterem CH&sub2;Cl&sub2; in einen Scheidetrichter übertragen. Die Schichten werden getrennt und die organische Schicht wird einmal mit Wasser gewaschen, getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;), filtriert und eingeengt, wobei ein weißer Feststoff (1,65 g) erhalten wird. Der Rückstand wird über Silicagel (40-63 um, 195 g in einer Säule von 3,7 · 35 cm; 40 ml- Fraktionen) unter Verwendung einer CH&sub2;Cl&sub2;-Lösung zur Applikation auf dieser Säule und 25% Aceton in Hexan zur Elution der Säule chromatographiert.
  • Die Fraktionen 32-39 enthalten ein Gemisch von mindestens zwei Verbindungen.
  • Die Fraktionen 40-42 enthalten ein Gemisch, das Verbindung 14AA enthalten kann.
  • Die Fraktionen 43-49 (0,391 g) enthalten primär die Verbindung 14AA (Rf = 0,22 in 30% Aceton-Hexan) zusammen mit zwei Nebenkomponenten.
  • Die Fraktionen 50-54 enthalten 0,162 g eines Gemischs von 14AA und 13AA. Dieses Gemisch wird über Silicagel (Säule Merck Lobare der Größe B, 8-ml-Fraktionen) unter Verwendung von CH&sub2;Cl&sub2; zur Applikation auf die Säule und 25% Aceton-Hexan zur Elution der Säule erneut chromatographiert. Die Fraktionen 58-70 enthalten 0,056 g 14AA, das mit den im vorhergehenden genannten 0,391 g aus den Fraktionen 43-49 (insgesamt 0,447 g) vereinigt wird und die Fraktionen 76-92 enthalten 0,053 g 13AA.
  • Eine der zwei Nebenkomponenten des Pools A wird abgetrennt und durch erneute Chromatographie des Gemischs über Silicagel (2 Säulen Merck Lobar® der Größe B, 9-ml-Fraktionen) als reine Verbindung erhalten. Das Gemisch wird auf die Säule in CH&sub2;Cl&sub2; appliziert und die Säule wird mit 25% EtOAc : Hexan bis zur Fraktion 72, 30% EtOAc : Hexan bis zur Fraktion 180 und 40% EtOAc : Hexan danach eluiert.
  • Die Fraktionen 195-215 (0,373 g) enthalten 14AA und die zweite Nebenkomponente, die erst nach der Entfernung der troc-Schutzgruppen abgetrennt wird. Trotz des Vorhandenseins der Nebenkomponente bildet die Verbindung 14AA beim langsamen Verdampfen des Lösemittels schöne Kristalle und die folgenden Spektraldaten werden aufgezeichnet:
  • Das FAB-Massenspektrum ergibt Peaks bei 1012, 1010, 551, 533, 511, 491, 460 und 442 Masseeinheiten.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,19 (d, 2H, J = 7,1 Hz), 7,71 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 7,59 (t, 1H), 7,48 (m), 7,36 (m), 6,98 (d, 1H, -NH-), 6,57 (s, 1H, H&sub1;&sub0;), 6,28 (t, 1H, J = 8,7 Hz, H&sub1;&sub3;), 6,08 (dd, 1H, J = 9,5, 2,7 Hz, H3'), 5,67 (d, 1H, J = 7,6 Hz, H&sub2;), 5,54 (d, 1H, J = 2,8 Hz, H2'), 4,77 (dd, 2H, 2'-Troc-CH&sub2;-), 4,74 (1H, H&sub5;), 4,32 (d, 1H, J = 8,6 Hz, H20a), 4,09 (d, 1H, J = 8,6 Hz, H20b), 4,07 (1H, H&sub3;), 2,47 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,23 (dd, 1H, JH-7 = 9,9 Hz, JH-19a = 5,3 Hz, H19b), 2,19 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,90 (d, 3H, J = 1,3 Hz, -CH&sub3;), 1,67 (dd, 1H, JH-7 = 7,2, JH-19a = 5,3 Hz, H19b), 1,38 (m, 1H, H&sub7;), 1,26 (s, 3H, -CH&sub3;) und 1,21 (s, 3H, -CH&sub3;); ¹³C-NMR (CDCl&sub3;, TMS) 201,88, 169,64, 169,59, 167,45, 167,03, 166,96, 153,24, 140,41, 136,43, 133,89, 133,61, 133,36, 132,05, 130,31, 129,25, 129,15, 129,07, 128,95, 128,75, 128,68, 128,59, 127,17, 126,49, 93,82, 84,83, 80,11, 79,56, 79,47, 77,78, 77,23, 75,66, 75,41, 72,17, 52,58, 42,85, 38,57, 35,93, 35,04, 32,25, 26,05, 22,30, 21,60, 20,83, 15,82, 14,56 ppm.
  • Die Fraktionen 55-65 (0,480 g) enthalten die reine Verbindung 13AA und sie ergeben zusammen mit dem 13AA, dass bei der obigen erneuten Chromatographie der Mischfraktionen erhalten wird, 13AA als farblosen kristallinen Feststoff:
  • Rf = 0,19 in 30% Aceton-Hexan.
  • FAB-Massenspektrum: Peaks bei 1034, 1032, 571, 511, 460, 442, 210 und 105 Masseeinheiten.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,18 (dd, 2H, J = 7,0, 1,5 Hz), 7,76 (dd, 2H, J = 7,0, 1,5 Hz), 7,62 (t, 1H), 7,50 (m), 7,43 (m), 6,95 (d, 1H, -NH-), 6,57 (s, 1H, H&sub1;&sub0;), 6,27 (t, 1H, H&sub1;&sub3;), 6,08 (dd, 1H, J = 9,5, 2,6 Hz, H3'), 5,78 (d, 1H, J = 7,3 Hz, H&sub2;), 5,55 (d, 1H, J = 2,7 Hz, H2'), 5,05 (d, 1H, J = 7,5 Hz, H&sub5;), 4,78 (d, 1H, J = 11,8 Hz, H20a), 4,74 (d, 1H, J = 11,8 Hz, H20b), 4,48 (dd, 1H, JF = 48 Hz, H&sub7;), 4,40 (d, 1H, J = 8,4 Hz, H20a), 4,31 (d, 1H, J = 8,2 Hz, H20b,), 4,04 (d, 1H, 7,2 Hz, H&sub3;), 2,63-2,45 (m), 2,49 (s, 3H), 2,27-2,10 (m), 2,20 (s, 3H), 1,91 (s, 3H), 1,74 (s, 3H), 1,20 (s, 3H) und 1,17 (s, 3H); ¹³C-NMR (CDCl&sub3;, TMS) 206,0, 169,9, 168,8, 167,2, 167,17, 153,2, 140,9, 136,4, 133,7, 133,5, 132,1, 130,3, 129,3, 129,2, 128,8, 128,7, 128,6, 127,2, 126,5, 96,2, 93,9, 81,9, 80,8, 78,8, 77,9, 77,8, 77,4, 77,2, 75,0, 72,1, 56,8 (d, J = 18 Hz), 52,7, 42,7, 40,1, 35,7, 33,9, 33,6, 25,8, 22,6, 21,3, 20,8, 14,6, 14,4 ppm.
    • Beispiel 3 Herstellung von: N-Debenzoyl-N-benzyloxycarbonyl-2'-{[(2,2,2-trichlorethyl)- oxy]carbonyl}-7-desoxy-7-fluortaxol (13BA) (({2aR-[2aα,4β, 4aβ,6β,9α,(αR*,βS* ),11α,12α,12aα,12bα]}-β-(Benzyloxycarbonylamino)-α-{[(2,2,2-trichlorethoxy)-carbonyl]oxy}benzolpropansäure-6,12b-bis(acetyloxy)-12-(benzoyloxy)-2a,3,4, 4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b-dodecahydro-4-fluor-11-hydroxy- 4a,8,13,13-tetramethyl-5-oxo-7,11-methano-1H-cyclodeca- [3,4]benz[1,2-b]-oxet-9-yl-ester)) und N-Debenzoyl-N-benzyloxycarbonyl-2'-{[(2,2,2-trichlorethyl)- oxy]carbonyl}-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol (14BA)(({2aR- [2aα,4β,4aβ,6β,9α,(αR*,βS* ),11α,12α,12aα,12bα]}-β-(Benzyloxy-carbonylamino)-α-{[(2,2,2-trichlorethoxy)-carbonyl]- oxy}benzolpropansäure-6,12b-bis(acetyloxy)-12-(benzoyloxy)- 2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b-dodecahydro-11-hydroxy- 8,13,13-trimethyl-5-oxo-4,4a; 7,11-bismethano-1H-cyclodeca[3,4]benz[1,2-b]-oxet-9-yl-ester))
  • Es wird dem für die Behandlung von 2'-Troc-taxol mit methylDAST beschriebenen Verfahren gefolgt (Beispiel 1), wobei N-Debenzoyl-N-benzyloxycarbonyl-2'-troc-taxol (12BA, Herstellungsbeispiel 6A; 0,223 g, 0,21 mmol) und Dimethylaminoschwefeltrifluorid (MethylDAST, 49 ul, 0,066 g, 0,50 mmol insgesamt, Zugabe in zwei Portionen) in CH&sub2;Cl&sub2; (20 ml) unter Stickstoff bei -78ºC verwendet werden. Nach dem Aufarbeiten wird das rohe Reaktionsproduktgemisch (0,211 g, weißer Feststoff) über Silicagel (40-63 um, zwei Säulen von Merck der Größe B) unter Verwendung einer CH&sub2;Cl&sub2;-Lösung zur Applikation des Materials auf die Säule und 25% Aceton- Hexan zur Elution der Säule chromatographiert. Fraktionen von 8 ml Volumen werden gewonnen. Die Fraktionen 107-118 enthalten ein Gemisch von zwei Komponenten (0,065 g), das in einer zweiten Chromatographie, die im folgenden beschrieben wird, aufgetrennt wird. Die Fraktionen 128-140 enthalten die Verbindung 13BA (0,081 g, 0,076 mmol, 36%), die durch die folgenden Spektraldaten charakterisiert ist:
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,16 (d, 2H, J = 7,2 Hz, aromatisch), 7,63 (t, 1H, J = 7,5 Hz, aromatisch, 7,53 (t, 2H, J = 7,6 Hz aromatisch), 7,30-7,45 (m, 5H, aromatisch), 7,24 (m, aromatisch), 7,12-7,19 (m, 2H, aromatisch), 6,56 (s, 1H, H&sub1;&sub0;), 6,24 (t, 1H, H&sub1;&sub3;), 5,74 (d, 1H, J = 7,4 Hz, H&sub2;), 5,74 (1H, -NH-), 5,62 (d, 1H, H3'), 5,44 (d, 1H, H2'), 5,09 (d, 1H, J = 12,5 Hz, PhCHaHO-), 5,03 (d, 1H, H&sub5;), 4,97 (d, 1H, PhCHHbO-), 4,77 (d, 1H, J = 11,9 Hz, -CHaHCCl&sub3;, 4,68 (d, 1H, J = 11,9 Hz, -OCHHbCCl&sub2;), 4,56 (dd, 1H, JF = 50 Hz, H&sub7;), 4,37 (d, 1H, H20a), 4,30 (d, 1H, H20b), 4,00 (d, 1H, J = 7,3 Hz, H&sub3;) 2,57 (m, 1H, H6a), 2,46 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,40 (m, 1H, H14a), 2,21 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,15 (m, 1H, H14b) 1,89 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,85 (m, 1H, H6b), 1,74 (s, 3H, CH&sub3;), 1,19 (s, 3H, CH&sub3;), 1,16 (s, 3H, CH&sub3;);
  • Massenspektrum (FAB) 1060,2466, C&sub5;&sub1;H&sub5;&sub3;Cl&sub3;FNO&sub1;&sub6; + H erfordert 1060,2492, 571, 553, 511, 472, 389, 347, 329, 105, 91 m/z.
  • Die gepoolten Fraktionen 107-118 (0,065 g) aus der vorhergehenden Säule werden erneut über Silicagel (40-63 um, eine Säule von Merck der Größe B) unter Verwendung von CH&sub2;Cl&sub2; zur Applikation auf die Säule und 10% MeCH-CH&sub2;Cl&sub2; zur Elution der Säule chromatographiert. Fraktionen von 8 ml Volumen werden gewonnen.
  • Die Fraktionen 96-120 enthalten 0,043 g (0,041 mmol, 20%) der Verbindung 14BA:
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,17 (d, 2H, J = 7,1 Hz, aromatisch), 7,59 (t, 1H, aromatisch), 7,52 (t, 2H, aromatisch), 7,31-7,46 (m, 5H, aromatisch), 7,24 (m, aromatisch), 7,09 (m, 2H, aromatisch), 6,32 (s, 1H, H&sub1;&sub0;), 6,28 (t, 1H, J = 8,6 Hz, H&sub1;&sub3;), 5,75 (d, 1H, J = 10,0 Hz, -NH-), 5,64 (d, 1H, J = 7,8 Hz, H&sub2;), 5,59 (d, 1H, H3'), 5,41 (d, 1H, J = 2,6 Hz, H2'), 5,00 (d, 1H, J = 12,5 Hz, ArCHaHO-), 4,91 (d, 1H, J = 12,6 Hz, ArCHHbO-), 4,76 (d, 1H, J = 9,8 Hz, -OCHaCCl&sub3;), 4,73 (d, 1H, H&sub5;), 4,68 (d, 1H, J = 9,9 Hz, -OCHHbCCl&sub3;), 4,30 (d, 1H, J = 8,6 Hz, H20a), 4,07 (d, 1H, H&sub3;), 4,05 (d, 1H, H20b), 2,50 (m, 1H, H14a), 2,43 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,36 (m, 1H, H6a), 2, 24 (m, 1H, H19a), 2,20 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,10 (d, 1H, J = 16,1 Hz, H14b), 1,88 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,66 (m, 1H, H19b), 1,38 (m, 1H, H&sub7;), 1,26 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,21 (s, 3H, -CH&sub3;);
  • Massenspektrum (FAB) 1040,2416, C&sub5;&sub1;H&sub5;&sub2;Cl&sub3;NO&sub1;&sub6; + H erfordert 1040, 2430, 980, 962, 551, 491, 369, 105, 91 m/z.
    • Beispiel 10 Herstellung von [2aR-{2aα,4aβ,6β,9α,(αR*,βS*),11α,12α, 12aα,12bα]}-β-(Benzoylamino)-α-{[(2,2,2-trichlorethoxy)- carbonyl]oxy}benzolpropansäure-6,12b-bis(acetyloxy)-12- (benzoyloxy)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b-dodecahydro- 4-fluor-11-hydroxy-4a,8,13,13-tetramethyl-5-oxo-7,11- methano-1H-cyclodeca[3,4]benz[1,2-b]-oxet-9-yl-ester; 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-desoxy-7- fluortaxol (Verbindung 13AA, IIIa)
  • Eine Lösung von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]taxol [N. F. Magri, D. G. I. Kingston, J. Org. Chem., 1986, 51, 797] (0,021 g, 0,020 mmol) in CH&sub2;Cl&sub2; (1,5 ml) wird mittels einer Spritze während eines Zeitraums von 5 min zu einer gerührten und gekühlten (Aceton/Trockeneisbad) Lösung von Dimethylaminoschwefeltrifluorid (DAST) (2 ul, 0,014 mmol) in CH&sub2;Cl&sub2; (0,5 ml), die in einer Reacti-vial® von 3 ml enthalten ist, gegeben. Das Kühlbad wird nach 15 min entfernt und der Reaktionsbehälter wird auf Raumtempe ratur kommen gelassen. Das Reaktionsgemisch wird gerührt und die Lösung wird erneut in einem Aceton/Trockeneisbad gekühlt und weiteres DAST (4 ul, 0,028 mmol) in CH&sub2;Cl&sub2; wird zu dem Reaktionsgemisch gegeben. Das Kühlbad wird nach 15 min entfernt und nach 90 min wird die Reaktionslösung mit weiterem CH&sub2;Cl&sub2; verdünnt und anschließend mit Wasser gewaschen. Die Schichten werden getrennt und die organische Schicht wird getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;), filtriert und eingeengt, wobei ein Rückstand (0,017 g) erhalten wird. Der Rückstand wird über Silicagel (40-63 um, 60 g) unter Verwendung einer CH&sub2;Cl&sub2;-Lösung zur Applikation auf die Säule und 30% Aceton in Hexan zur Elution der Säule chromatographiert, wobei das gewünschte Titelprodukt mit einem Rf-Wert von 0,19 (30% Aceton-Hexan) erhalten wird:
  • FAB-Spektrum: Peaks bei 1034, 1032, 1030, 571, 511, 460, 442, 210 und 105 Masseeinheiten.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,18 (dd, 2H), 7,76 (dd, 2H), 7,62 (t, 1H), 7,50 (m), 7,43 (m), 6,95 (d, 1H), 6,57 (s, 1H), 6,27 (t, 1H), 6,08 (dd, 1H), 5,78 (d, 1H), 5,55 (d, 1H), 5,05 (d, 1H), 4,78 und 4,76 (d, 2H), 4,66 (d, 0,5H, 4,50 (d, 0,5H), 4,40 (d, 1H), 4,31 (d, 1H) 4,04 (d, 1H), 2,63-2,45 (m), 2,49 (s, 3H), 2,27-2,10 (m), 2,20 (s, 3H), 1,91 (s, 3H), 1,74 (s, 3H), 1,20 (s, 3H) und 1,17 (s, 3H); ¹³C-NMR (CDCl&sub3;, TMS) 206,0, 169,9, 168,8, 167,2, 167,17, 153,2, 140,9, 136,4, 133,7, 133,5, 132,1, 130,3, 129,3, 129,2, 128,8, 128,7, 128,6, 127,2, 126,5, 96,2, 93,9, 81,9, 80,8, 78,8, 77,9, 77,8, 77,4, 77,2, 75,0, 72,1, 56,8 d, J = 18 Hz), 52,7, 42,7, 40,1, 35,7, 33,9, 33,6, 25,8, 22,6, 21,3, 20,8, 14,6, 14,4 ppm.
    • Beispiel 11 Herstellung von [2aR-(2aα,4aβ,6β,9α,(αR*,βS*),11α,12α, 12aα,12bα]}-β-(Benzoylamino)-α-hydroxybenzolpropansäure- 6,12b-bis(acetyloxy)-12-(benzoyloxy)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11, 12,12a,12b-dodecahydro-4-fluor-11-hydroxy-4a,8,13,13- tetramethyl-5-oxo-7,11-methano-1H-cyclodeca[3,4]benz[1,2- b]-oxet-9-yl-ester; 7-Desoxy-7-fluortaxol (Verbindung IIIb)
  • Eine Lösung von 2'-[((2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-desoxy-7-fluortaxol (Verbindung 13AA, IIIa; 0,010 g, 0,0097 mmol) in 9 : 1 Methanol/Essigsäure (1,0 ml) wird mit aktiviertem Zinkmetall (0,012 g) bei Raumtemperatur gerührt. Nach 90 min wird das Reaktionsgemisch durch Entfernen des Zinks durch Filtration und Einengen des Filtrats unter vermindertem Druck aufgearbeitet. Der Rückstand wird in CH&sub2;Cl&sub2; gelöst und diese Lösung wird mit 0,1 N wässriger Hoi, mit 5-%iger wässriger NaHCO&sub3;-Lösung und mit Wasser gewaschen. Die wässrige Schicht wird mit CH&sub2;Cl&sub2; rückextrahiert und die vereinigten organischen Extrakte werden getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;), filtriert und eingeengt, wobei ein Rückstand (0,009 g) erhalten wird. Der Rückstand wird über Silicagel (40-63 um, Säule von 8 mm · 250 mm) chromatographiert und auf die Säule in einer CH&sub2;Cl&sub2;-Lösung appliziert. Die Säule wird mit 60 ml 20% EtOAc in Hexan eluiert und anschließend mit 40% EtOAc in Hexan eluiert. Das gewünschte Produkt (Verbindung IIIb) wird als Feststoff erhalten:
  • FAB-Massenspektrum: 856, 511, 286, 240, 210, 105 Masseeinheiten.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,15 (dd, 2H), 7,75 (dd, 2H), 7,63 (t, 1H), 7,50 (m), 7,38 (m), 7,06 (d, 1H), 6,53 (s, 1H), 6,18 (t, 1H), 5,83 (dd, 1H), 5,76 (d, 1H), 5,02 (d, 1H), 4,80 (t, 1H), 4,65 (d, 0,5H), 4,50 (d, 0,5H), 4,38 (d, 1H), 4,29 (d, 1H), 4,04 (d, 1H), 3,55 (d, 1H), 2,70-2,40 (m), 2,40 (s, 3H), 2,37-2,25 (m), 2,21 (s, 3H), 1,75 (3H), 1,62 (s, 3H), 1,20 (s, 3H), 1,18 (s, 3H); ¹³C-NMR (CDCl&sub3;, TMS) 205,7, 172,4, 169,5, 169,4, 167,1, 166,9, 140,4, 138,0, 133,8, 133,7, 132,4, 131,9, 130,2, 129,2, 129,0, 128,75, 128,71, 128,3, 127,02, 126,98, 81,9, 81,0, 78,6, 77,2, 74,8, 73,2, 72,1, 57,0 (J = 17 Hz), 54,7, 42,6, 39,9, 35,8, 16,0, 22,5, 21,0, 20,8, 14,7, 14,2 ppm.
  • Gemäß dem von Magri und Kingston für die Herstellung von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]taxol beschriebenen Verfahren wird das 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}- carbonyl]-Derivat von 7-Epitaxol (Literaturstelle: I. Ringel, S. B. Horwitz, J. Pharmacol. Exp. Ther., 1987, 242, 692; vorzugsweise Chaudhary et al., J. Org. Chem., 1993, 58, 3798) hergestellt.
    • Beispiel 12 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-desoxy-7-epifluortaxol
  • Gemäß dem Verfahren von Beispiel 10, jedoch unter Ersatz von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-taxol durch 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-epitaxol wird die Titelverbindung hergestellt. Der im Namen der Titelverbindung verwendete Ausdruck 7-Desoxy-7-epifluortaxol bedeutet lediglich, dass die Konfiguration des Fluoxsubsti tuenten zu der von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]- 7-desoxy-7-fluortaxol (Verbindung 13AA, IIIa; Beispiel 1) epimer ist und er impliziert nicht eine zu der von 7-Epitaxol analoge Konfiguration.
    • Beispiel 13 7-Desoxy-7-epifluortaxol
  • Gemäß dem Verfahren von Beispiel 11, jedoch unter Ersatz von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-desoxy-7- fluortaxol durch 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7- desoxy-7-epifluortaxol wird die Titelverbindung hergestellt. Der im Namen der Titelverbindung verwendete Ausdruck 7-Desoxy-7-epifluortaxol bedeutet lediglich, dass die Konfiguration des Fluorsubstituenten zu der von 7-Desoxy-7- fluortaxol (Verbindung IIIb; Beispiel 11) epimer ist und er impliziert nicht eine zu der von 7-Epitaxol analoge Konfiguration.
    • Beispiel 14 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxylcarbonyl]taxol-7-methansulfonat
  • Methansulfonylchlorid (1,2 Äquivalente) wird tropfenweise zu einer Lösung von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}- carbonyl]taxol (1 Äquivalent) und Pyridin (5 Äquivalente) in CH&sub2;Cl&sub2;, das bei Eisbadtemperatur gerührt wird, gegeben. Das Reaktionsgemisch wird sich erwärmen gelassen und das Rühren wird fortgesetzt, bis der Nachweis durch DC angibt, dass die Reaktion beendet ist. Das Reaktionsgemisch wird mit Eiswasser gequencht und mit CH&sub2;O&sub1;&sub2; extrahiert und diese Extrakte werden nacheinander mit verdünnter wässriger Säure, verdünnter wässriger NaHCO&sub3;-Lösung und Wasser gewaschen und anschließend getrocknet, filtriert und eingeengt, wobei das rohe Reaktionsprodukt erhalten wird. Die Chromatographie des rohen Produkts über Silicagel ergibt die reine Titelverbindung.
    • Beispiel 15 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-desoxy-7α-chlortaxol
  • Eine Lösung von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]taxol-7-methansulfonat (1 Äquivalent) in N,N-Dimethylformamid (DMF) wird mit Kaliumchlorid (10 Äquivalente) gerührt. Ein Phasentransferkatalysator wird zugegeben und das Reaktionsgemisch wird zur Erhöhung der Reaktionsgeschwindigkeit erwärmt. Der Verlauf der Reaktion wird mittels DC verfolgt. Das Reaktionsgemisch wird durch die Zugabe von Wasser und Extraktion mit CH&sub2;Cl&sub2; aufgearbeitet. Die organischen Extrakte werden getrocknet, filtriert und eingeengt und der Rückstand des rohen Reaktionsprodukts wird über Silicagel chromatographiert, wobei die reine Titelverbindung erhalten wird.
    • Beispiel 16 7-Desoxy-7α-chlortaxol
  • Gemäß dem Verfahren von Beispiel 11, jedoch unter Ersatz von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-desoxy- 7-fluortaxol durch 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]- 7-desoxy-7α-chlortaxol wird die Titelverbindung hergestellt.
    • Beispiel 17 7-Desoxy-7β-chlortaxol
  • Gemäß den Verfahrensmaßnahmen der Beispiele 14 und 15, jedoch ausgehend von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-epitaxol wird die Titelverbindung hergestellt.
  • Gemäß den allgemeinen Verfahrensmaßnahmen der Beispiele 15 und 11, jedoch unter Verwendung geeigneter Metallsalze, wie Natrium- oder Kaliumbromid und Natrium- und Kaliumiodid im Verfahren von Beispiel 15 werden die folgenden Verbindungen hergestellt:
  • 7-Desoxy-7α-bromtaxol;
  • 7-Desoxy-7β-bromtaxol;
  • 7-Desoxy-7α-iodtaxol;
  • 7-Desoxy-7β-iodtaxol.
  • Verbindungen der Formel III, worin X Chlor, Brom oder Iod ist, können auch durch Reaktion eines entsprechend ge schützten Vorläufers (beispielsweise I, worin R&sub1; = -C&sub6;H5; R&sub2; = -NHC(O)C&sub6;H&sub5;; R&sub3; = H; R&sub4; = -Otroc; R&sub5; = H; R&sub1;&sub0; = -COCH&sub3;; und X = OH) mit (C&sub6;H&sub5;)&sub3;P/X&sub2;; (C&sub6;H&sub5;)&sub3;P/CX&sub4; oder (C&sub6;H&sub5;O)&sub3;P/X&sub2; gemäß beispielsweise den zahlreichen Beispielen und Versuchsbedingungen, die bei B. R. Castro, Organic Reactions, 1983, 29, S. 1-162, beschrieben sind, hergestellt werden.
  • Derivate der 7-Desoxy-7-halogentaxole, in denen die 2'-Hydroxylgruppe verestert ist, werden direkt aus dem gewünschten 7-Desoxy-7-halogentaxol nach Verfahren, die bei A. E. Mathew et al., J. Med. Chem., 1992, 35, 145; US-Patent 4 960 790; US-Patent 4 942 184; US-Patent 4 059 699 angegeben sind, hergestellt.
  • Gemäß den allgemeinen Verfahrensmaßnahmen von Mathew et al. (s. beispielsweise US-Patent 4 960 790, 4 924 184 und 5 059 699), jedoch unter Ersatz des entsprechenden 7- Desoxy-7-halogentaxolanalogons werden die folgenden Verbindungen hergestellt:
  • 2'-Succinyl-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(β-Alanyl)-7-desoxy-7-fluortaxolformiat;
  • 2'-Glutaryl-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-[C(O)(CH&sub2;)&sub3;C(O)NH(CH&sub2;)&sub3;N CH&sub3;)&sub2;]-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(β-Sulfopropionyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(2-Sulfoethylamido)succinyl-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(3-Sulfopropylamido)succinyl-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(Triethylsilyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(tert.-Butyldimethylsilyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(N,N-Diethylaminopropionyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(N,N-Dimethylglycyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(Glycyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(L-Alanyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(L-Leucyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(L-Isoleucyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(L-Valyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(L-Phenylalanyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(L-Prolyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(L-Lysyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(L-Glutamyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 2'-(L-Arginyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
  • 7-Desoxy-7-fluortaxotere;
  • 2'-Succinyl-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(β-Alanyl)-7-desoxy-7-chlortaxolformiat;
  • 2'-Glutaryl-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-[C(O)(CH&sub2;)&sub3;C(O)NH(CH&sub2;)&sub3;N(CH&sub3;)&sub2;]-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(β-Sulfopropionyl)-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(2-Sulfoethylamido)succinyl-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(3-Sulfopropylamido)succinyl-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(Triethylsilyl)-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(tert.-Butyldimethylsilyl)-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(N,N-Diethylaminopropionyl)-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(N,N-Dimethylglycyl)-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(Glycyl)-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(L-Alanyl)-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(L-Leucyl)-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(L-Isoleucyl)-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(L-Valyl)-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(L-Phenylalanyl)-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(L-Prolyl)-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(L-Lysyl)-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(L-Glutamyl)-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 2'-(L-Arginyl)-7-desoxy-7-chlortaxol;
  • 7-Desoxy-7-chlortaxotere;
  • 2'-Succinyl-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(β-Alanyl)-7-desoxy-7-bromtaxolformiat;
  • 2'-Glutaryl-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-[C(O)(CH&sub2;)&sub3;C(O)NH(CH&sub2;)&sub3;N(CH&sub3;)&sub2;]-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(β-Sulfopropionyl)-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(2-Sulfoethylamido)succinyl-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(3-Sulfopropylamido)succinyl-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(Triethylsilyl)-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(tert.-Butyldimethylsilyl)-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(N,N-Diethylaminopropionyl)-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(N,N-Dimethylglycyl)-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(Glycyl)-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(L-Alanyl)-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(L-Leucyl)-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(L-Isoleucyl)-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(L-Valyl)-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(L-Phenylalanyl)-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(L-Prolyl)-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(L-Lysyl)-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(L-Glutamyl)-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 2'-(L-Arginyl)-7-desoxy-7-bromtaxol;
  • 7-Desoxy-7-bromtaxotere;
  • 2'-Succinyl-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(β-Alanyl)-7-desoxy-7-iodtaxolformiat;
  • 2'-Glutaryl-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-[C(O)(CH&sub2;)&sub3;C(O)NH(CH&sub2;)&sub3;N(CH&sub3;)&sub2;]-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(β-Sulfopropionyl)-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(2-Sulfoethylamido)succinyl-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(3-Sulfopropylamido)succinyl-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(Triethylsilyl)-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(tert.-Butyldimethylsilyl)-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(N,N-Diethylaminopropionyl)-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(N,N-Dimethylglycyl)-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(Glycyl)-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(L-Alanyl)-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(L-Leucyl)-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(L-Isoleucyl)-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(L-Valyl)-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(L-Phenylalanyl)-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(L-Prolyl)-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(L-Lysyl)-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(L-Glutamyl)-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 2'-(L-Arginyl)-7-desoxy-7-iodtaxol;
  • 7-Desoxy-7-iodtaxotere und
  • pharmazeutisch akzeptable Salze derselben, wenn die Verbindung entweder eine saure oder basische funktionelle Gruppe enthält.
    • Beispiel 18 Herstellung von [2aR-[2aα,4β,4aβ,6β,9α,(αR*,βS*),11α,12α, 12aα,12bα]}-β-(Benzoylamino)-α-{[(2,2,2-trichlorethoxy)- carbonyl]oxy}benzolpropansäure-6,12b-bis(acetyloxy)-12- (benzoyloxy)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b-dodecahydro-11-hydroxy-8,13,13-trimethyl-5-oxo-4,4a;7,11-bismethano-1H- cyclodeca[3,4]benz[1,2-b]-oxet-9-yl-ester; 2'-[{(2,2,2- Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-desoxy-7β,8β-methanotaxol (Verbindung 14AA; IIa)
  • Eine Lösung von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-taxol [N. F. Magri, D. G. E. Kingston, J. Org. Chem., 1986, 51, 797] (0,021 g, 0,020 mmol) in CH&sub2;Cl&sub2; (1,5 ml) wurde mit einer Spritze während eines Zeitraums von 5 min zu einer gerührten und gekühlten (Aceton/Trockeneisbad) Lösung von Dimethylaminoschwefeltrifluorid (DAST) (2 ul, 0,014 mmol in CH&sub2;Cl&sub2; (0,5 ml)), die in einer Reacti-vial® von 3 ml enthalten war, gegeben. Das Kühlbad wurde nach 15 min entfernt und der Reaktionsbehälter wurde auf Raumtemperatur kommen gelassen. Das Reaktionsgemisch wurde gerührt und die Lösung wurde erneut in einem Aceton/Trockeneisbad gekühlt und weiteres DAST (4 ul, 0,028 mmol) in CH&sub2;Cl&sub2; wurde zu dem Reaktionsgemisch gegeben. Das Kühlbad wurde nach 15 min entfernt und nach 90 min wurde die Reaktionslösung mit weiterem CH&sub2;Cl&sub2; verdünnt und anschließend mit Wasser gewaschen. Die Schichten wurden getrennt und die organische Schicht wurde getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;), filtriert und eingeengt, wobei ein Rückstand (0,017 g) erhalten wurde. Der Rückstand wurde über Silicagel (40-63 um, 60 g) unter Verwendung einer CH&sub2;Cl&sub2;-Lösung zur Applikation auf die Säule und 30% Aceton in Hexan zur Elution der Säule chromatographiert. Die gewünschte Titelverbindung besitzt einen Rf-Wert von 0,22 (30% Aceton-Hexan) und kristallisiert aus Aceton- Hexan als farblose Nadeln:
  • FAB-Massenspektrum: Peaks bei 1012, 1010, 551, 533, 511, 491, 460 und 442 Masseeinheiten.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,19 (d, 2H), 7,1 (d, 2H), 7,59 (t, 1H), 7,48 (m), 7,36 (m), 6,98 (d, 1H), 6,57 (s, 1H), 6,28 (t, 1H), 6,08 (dd, 1H), 5,67 (d, 1H), 5,54 (d, 1H), 4,77 (dd, 2H), 4,74, 4,32 (d, 1H), 4,09 (d, 1H), 4,07, 2,47 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 1,90 (s, 3H), 1,67 (dd, 1H), 1,38 (m, 1H), 1,26 (s, 3H) und 1,21 (s, 3H); ¹³C-NMR (CDCl&sub3;, TMS) 201,88, 169,64, 169,59, 167,45, 167,03, 166,96, 153,24, 140,41, 136,43, 133,89, 133,61, 133,36, 132,05, 130,31, 129,25, 129,15, 129,07, 128,95, 128,75, 128,68, 128,59, 127,17, 126,49, 93,82, 84,83, 80,11, 79,56, 79,47, 77,78, 77,23, 75,66, 75,41, 72,17, 52,58, 42,85, 38,57, 35,93, 35,04, 32,26, 26,05, 22,30, 21,60, 20,83, 15,82, 14,56 ppm.
    • Beispiel 19 Herstellung von [2aR-[2aα,4β,4aβ,6β,9α,(αR*,βS*),11α,12α, 12aα,12bα]}-β-(Benzoylamino)-α-hydroxybenzolpropansäure- 6,12b-bis(acetyloxy)-12-(benzoyloxy) -2a,3,4,4a,5,6,9,10,11, 12,12a,12b-dodecahydro-11-hydroxy-8,13,13-trimethyl-5-oxo- 4,4a;7,11-bismethano-1H-cyclodeca[3,4]benz[1,2-b]-oxet-9- yl-ester; 7-Desoxy-7β,8β-methanotaxol (Verbindung IIb)
  • Eine Lösung von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-desoxy-7β,8β-methanotaxol (Verbindung 14AA, IIa; 0,008 g, 0,0079 mmol) in 9 : 1 Methanol/Essigsäure (1,0 ml) wurde mit aktiviertem Zinkmetall (0,010 g) bei Raumtemperatur gerührt. Nach 60 min wurde weiteres Zink (0,010 g) zugegeben und das Rühren wurde 30 min lang fortgesetzt. Die Feststoffe wurden aus dem Reaktionsgemisch durch Filtration entfernt und das Filtrat wurde unter vermindertem Druck eingeengt. Der auf diese Weise erhaltene Rückstand würde in CH&sub2;Cl&sub2; gelöst und die Lösung wurde nacheinander mit wässriger 0,1 N HCl, mit wässriger 5-%iger NaHCO&sub3;-Lösung und mit Wasser gewaschen. Die organische Schicht wurde getrocknet (Na&sub2;SO&sub4;), filtriert und eingeengt und der Rückstand würde über Silicagel chromatographiert (40-63 um, Säule von 8 · 250 mm, Applikation in CH&sub2;Cl&sub2;-Lösung und Elution mit 40% Ethylacetat in Hexan). Die Titelverbindung ist ein farbloser Feststoff:
  • FAB-Spektrum: Peaks bei 836, 776, 758, 551, 533, 491, 286, 240 und 105 Masseeinheiten.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,19 (d, 2H), 7,69 (d, 2H), 7,60 (t, 1H), 760-7,35 (m), 6,95 (d, 1H), 6,31 (s, 1H), 6,25 (t, 1H), 5,82 (d, 1H), 5,66 (d, 1H), 4,78 (dd, 1H), 4,72 (d, 1H), 4,31 (d, 1H), 4,07 (d, 1H), 4,06 (m, 1H), 2,40 (s, 3H), 2,20 (s, 3H), 1,60 (s, 3H), 1,38 (m, 1H), 1,26 (s, 3H) und 1,22 (s, 3H); ¹³C-NMR (CDCl&sub3;, TMS) 204,45, 201,81, 172,74, 169,87, 169,56, 167,41, 166,96, 140,12, 138,04, 134,07, 133,53, 131,93, 130,33, 129,28, 129,04, 128,74, 128,55, 128,32, 127,04, 126,86, 84,86, 80,03, 79,57, 79,40, 77,21, 75,66, 75,46, 73,22, 72,28, 54,79, 42,86, 38,54, 36,07, 35,09, 32,15, 26,11, 22,27, 21,49, 20,88, 15,77 und 14,59 ppm.
    • Beispiel 20 Herstellung von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7- desoxy-7β,8β-methanotaxol (14AA; IIa) aus 2'-[{(2,2,2- Trichlorethyl)-oxy}carbonyl]-7-desoxy-7-aminotaxol
  • Eine eiskalte Lösung von Natriumnitrit (1,5 Äquivalente) wird in Portionen zu einem kräftig gerührten eiskalten zweiphasigen Gemisch aus einer Lösung von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]-7-desoxy-7-aminotaxol (1 Äquivalent) in Ether und einer Lösung von Schwefelsäure in Wasser gegeben. Das Gemisch wird nach der Zugabe mehrere Stunden bei Eisbadtemperatur gerührt. Danach wird überschüssige salpetrige Säure durch die Zugabe einer wässrigen Harnstofflösung gequencht. Die wässrige Phase des Gemischs wird durch die vorsichtige Zugabe von Natriumcarbonat auf einen nahezu neutralen pH-Wert gebracht. Die Schichten werden getrennt und die wässrige Phase wird mit weiterem Ether weiter extrahiert. Die vereinigten Etherextrakte werden getrocknet, filtriert und eingeengt, wobei das rohe Reaktionsprodukt erhalten wird. Die Chromatographie des Rohprodukts über Silicagel ergibt die reine Verbindung 14AA.
    • Beispiel 21 Herstellung von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)-oxy}carbonyl]-7- desoxy-7β,8β-methanotaxol (14AA; IIa) aus 2'-[{(2,2,2- Trichlorethyl)oxy}carbonyl]taxol-7-trifluormethylsulfonat
  • Eine Lösung von 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxy}carbonyl]taxol-7-trifluormethylsulfonat in 80% Ethanol-Wasser wird erwärmt und die Reaktion wird mittels DC-Verfahren verfolgt. Wenn die Reaktion beendet ist, wird die Reaktionslösung mit Natriumbicarbonat neutralisiert, überschüssiges Ethanol unter vermindertem Druck entfernt und die wässrige Phase mit Methylenchlorid extrahiert. Die Extrakte werden getrocknet, filtriert und eingeengt, wobei das rohe Reaktionsprodukt erhalten wird. Das Rohprodukt wird über Silicagel chromatographiert, wobei die reine Verbindung 14AA erhalten wird.
    • Beispiel 22 N-Debenzoyl-N-benzyloxycarbonyl-7-desoxy-7-fluortaxol (Verbindung 18) (({2aR- [2aα,4β,4aβ,6β,9α,(αR*,βS*), 11α,12α,12aα,12bα]}-β-(Benzyloxycarbonylamino)-α-hydroxybenzolpropansäure-6,12b-bis(acetyloxy)-12-(benzoyloxy)- 2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b-dodecahydro-4-fluor-11- hydroxy-4a,8,13,13-tetramethyl-5-oxo-7,11-methano-1H- cyclodeca[3,4]benz[1,2-b]-oxet-9-yl-ester))
  • Gemäß dem allgemeinen Verfahren von Beispiel Nr. 11 [Reaktion von 2'-Troc-7-desoxy-7-fluortaxol mit aktiviertem Zink], jedoch unter Verwendung von N-Debenzoyl-N-benzyloxycarbonyl-2'-{[(2,2,2-trichlorethyl)oxy]carbonyl}-7-desoxy- 7-fluortaxol (Beispiel 3, Verbindung 13BA; 0,079 g, 0,074 mmol) und aktiviertem Zinkmetall (0,153 g) in CH&sub3;OH-HOAc (9 : 1, 16 ml) und EtOAc (8 ml) wird das gewünschte Produkt 18 hergestellt. Nach dem Aufarbeiten (Reaktionsdauer von 2 h) wird eine Chromatographie (Silicagel, 40% EtOAc : Hexan, 8-ml-Fraktionen) des Rohprodukts durchgeführt und das gewünschte Produkt 18 wird in den Fraktionen 59-76 als Feststoff eluiert und auf der Basis der folgenden Analysedaten charakterisiert:
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,14 (d, 2H, J = 7,4 Hz), 7,62 (t, 1H, J = 7,4 Hz), 7,52 (t, 2H, J = 7,75, 7,30 Hz), 7,30-7,42 (m, 5H), 7,17 (m, 2H), 6,53 (s, 1H, H&sub1;&sub0;), 6,18 (t, 1H, H&sub1;&sub3;), 5,75 (d, 1H, -NH-), 5,73 (d, 1H, J = 7,2 Hz, H&sub2;), 5,38 (d, 1H, H3'), 5,09 (d, 1H, J = 12,5 Hz, -OCHaHPh), 4,99 (d, 1H, H&sub5;), 4,96 (d, 1H, J = 12,3 Hz, -OCHHbPh), 4,66 (d, 1H, H2'), 4,57 (dd, 1H, JF = 54 Hz, H&sub7;), 4,36 (d, 1H, J = 8,4 Hz, H20a), 4,29 (d, 1H, H20b), 3,41 (d, 1H, J = 7,3 Hz, H&sub3;), 2,63-2,46 (7Linien, 1H), 2,38 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,43-2,30 (m, 1H), 2,28-2,10 (m, 1H), 2,22 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,01 (m, 1H), 1,77 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,73 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,19 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,16 (s, 3H, -CH&sub3;);
  • ¹³C-NMR (CDCl&sub3;, TMS), 206, 172, 169,5, 169,3, 166,9, 156, 140,5, 138, 137, 133,7, 132, 130,2, 129,3, 128,8, 128,7, 128,4, 128,0, 127,6, 126,7, 96,93, 81,9, 80,9, 78,6, 78, 74,8, 73,6, 71,8, 66,8, 57, 56, 42,5, 39,9, 35,9, 34,34, 25,9, 22,4, 21,0, 20,8, 14,5, 14 ppm;
  • Massenspektrum 886, 571, 511, 371, 347, 329, 316, 298, 105, 91 m/z.
    • Beispiel 23 N-Debenzoyl-N-benzyloxycarbonyl-7-desoxy-7-fluortaxol (Verbindung 21) (({2aR-[2aα,4β,4aβ,6β,9α,(αR*,βS*), 11α,12α,12aα,12bα]}-β-(Benzyloxycarbonylarnzno)-α-hydroxybenzolpropannsäure-6,12b-bis(acetyloxy)-12-(benzoyloxy)- 2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b-dodecahydro-4-fluor-11- hydroxy-4a,8,13,13-tetramethyl-5-oxo-7,11-methano-1H- cyclodeca[3,4]benz[1,2-b]-oxet-9-yl-ester))
  • Gemäß dem allgemeinen Verfahren von Beispiel 1 [Reaktion von 2'-Troc-7-desoxy-7-fluortaxol mit aktiviertem Zink], jedoch unter Verwendung von N-Debenzoyl-N-benzyloxycarbonyl-2'-{[(2,2,2-trichlorethyl)oxy]carbonyl}-7-desoxy-7β,8β-methanotaxol (14BA; 0,040 g, 0,038 mmol) und aktiviertem Zinkmetall (0,072 g und anschließend weitere 0,072 g) in CH&sub3;OH-HOAc (9 : 1; 10 ml) wird das gewünschte Produkt 21 hergestellt. Nach dem Aufarbeiten nach einer Reaktionsdauer von 3 h und einer Chromatographie (Silicagel, 40% EtOAc : Hexan, 8-ml-Fraktionen) des Rohprodukts wird Ausgangsmaterial (0,007 g) in den Fraktionen 30-37 und das gewünschte Produkt (21, 0,020 g, 0,023 mmol, 61%) in den Fraktionen 75-100 eluiert und als Feststoff erhalten und auf der Basis der folgenden Analysedaten charakterisiert:
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,17 (d, 2H, J = 7,3 Hz), 7,58 (m, 1H), 7,50 (1,2H), 7,42-7,30 (m, 5H), 7,24 (m), 7,08 (m, 2H), 6,31 (s, 1H, H&sub1;&sub0;), 6,26 (t, 1H, J = 8,6 Hz, H&sub1;&sub3;), 5,70 (d, 1H, J = 9,6 Hz, -NH-), 5,64 (d, 1H, J = 7,7 Hz, H&sub2;), 5,38 (d, 1H, J = 8,1 Hz, H3'), 4,98 (d, 1H, J = 12,5 Hz, -OCHaHPh), 4,88 (d, 1H, J = 12,5 Hz, -OCHHbPh), 4,71 (d, 1H, J = 3,7 Hz, H&sub5;), 4,65 (s, 1H, H2'), 4,28 (d, 1H J = 8,6 Hz, H20a), 4,07 (d, 1H, H&sub3;), 4,05 (d, 1H, H20b), 2,49-2,34 (m, 1H), 2,38 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,23 (m), 2,21 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,08 (m), 1,94 (m), 1,82 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,37 (m, 1H, H&sub7;), 1,25 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,21 (s, 3H, -CH&sub3;);
  • ¹³C NMR (CDCl&sub3;, TMS) 202, 172,5, 169,2, 169,1, 167, 155,5, 149,5, 138, 136, 133,5, 133, 130,0, 128,6, 128,4, 128,1, 127,7, 127,2, 126,3, 84,5, 79,9, 79,2, 79,0, 75,3, 75,2, 73, 71,7, 66,5, 56, 42,5, 38,2, 36, 34,7, 32, 25,7, 21,5, 21, 20,5, 15,5, 14,2 ppm;
  • Massenspektrum: 866, 3423, C&sub4;&sub8;H&sub5;&sub1;NO&sub1;&sub4; + H erfordert 866, 3388, 848, 806, 788, 551, 533, 491, 105, 91 m/z.
    • Beispiel 24 N-Debenzoyl-N-(tert.-butyloxycarbonyl-2'-{[(2,2,2-trichlorethyl)oxy]carbonyl}-7-desoxy-7-fluortaxol (Verbindung 13DA) (({2aR-[2aα,4β,4aß,6β,9α,(αR*,βS*),11α,12α,12aα,12bα]}-β- (tert.-Butyl)oxycarbonylamino]-α-{[(2,2,2-trichlorethoxy)- carbonyl]oxy}benzolpropansäure-6,12b-bis(acetyloxy)-12- (benzoyloxy)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b-dodecahydro- 4-fluor-11-hydroxy-4a,8,13,13-tetramethyl-5-oxo-7,11- methano-1H-cyclodeca[3,4]benz-[1,2-b]-oxet-9-yl-ester)) und N-Debenzoyl-N-(tert.-butyloxycarbonyl-2'-{[(2,2,2-trichlorethyl)oxy]carbonyl}-7-desoxy-7β,8β-methanotaxol (Verbindung 14DA) (({2aR-12aα,4β,4aβ,6β,9α,(αR*,βS*),11α,12a,12aα, 12bα]}-β-(tert.-Butyl)oxycarbonylamino]-α-{[(2,2,2-trichlorethoxy)-carbonyl]oxy}benzolpropansaure-6,12b-bis- (acetyloxy)-12-(benzoyloxy)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12, 12α,12b-dodecahydro-11-hydroxy-8,13,13-trimethyl-5-oxo- 4,4a;7,11-bismethano-1H-cyclodeca[3,4]benz[1,2-b]-oxet-9- yl-ester))
  • Dem allgemeinen Verfahren von Beispiel 10 [Reaktion von 2'-Troc-taxol mit methylDAST] wird gefolgt, wobei N- Debenzoyl-N-(tert.-butyl)oxycarbonyl-2'-troc-taxol (Verbindung 12DA; 1,800 g, 1,75 mmol) und Dimethylaminoschwefeltrifluorid (methylDAST, 286 ul, 0,390 g, 2,93 mmol) in CH&sub2;Cl&sub2; (120 ml) unter N&sub2; bei -78ºC verwendet werden. Nach dem Aufarbeiten wird das rohe Produktgemisch (1,77 g) über Silicagel (40-63 um, 191 g in einer Säule von 37-350 mm, 45-ml-Fraktionen) unter Verwendung einer CH&sub2;Cl&sub2;-Lösung zur Applikation des Materials auf die Säule und 20% Aceton-Hexan (1,5 l) und anschließend 25% Aceton-Hexan zur Elution der Säule chromatographiert wird. Ein 14DA (0,511 g) enthaltendes Gemisch wird in den Fraktionen 41-46 eluiert. Die Fraktionen 47-48 (0,085 g) enthalten ein Gemisch von Produkten. Die Fraktionen 49-61 (0,814 g) enthalten reines 13DA. Die erneute Chromatographie der gemischten Fraktionen 47-48 liefert weitere Mengen eirLes Gemisches, das 14DA enthält und von reinem 13DA.
  • Reines 13DA wird als Feststoff erhalten und auf der Basis der folgenden Analysedaten charakterisiert:
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,15 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 7,62 (t, 1H, J = 7,2 Hz), 7,51 (t, 2H, J = 7,7 Hz), 7,25-7,44 (m, 5H), 6,58 (s, 1H), H&sub1;&sub0;, 6,28 (t, 1H, J = 8,7 Hz, H13), 5,77 (d, 1H, J = 7,2 Hz, H&sub2;) 5,51 (d, 1H, -NH-), 5,48 (d, 1H, J = 10,0 Hz, H3'), 5,40 (d, 1H, J = 2,0 Hz, H2', 5,05 (d, 1H, J = 8,1 Hz, H&sub5;), 4,77 (d, 1H, J = 11,8 Hz, Troc-Ha), 4,68 (d, 1H, J = 11,8 Hz, Troc-Hb), 4,58 (dd, 1H, J = 4,6, 46,9 Hz, H&sub7;), 4,39 (d, 1H, J = 8,4 Hz, H20a), 4,27 (d, 1H, J = 8,4 Hz, H20b), 4,04 (d, 1H, J = 7,1 Hz, H&sub3;), 2,57 (m, 1H, H6a), 2,48 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,21 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,91 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,73 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,34 (s, 9H, Me&sub3;C-), 1,23 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,17 (s, 3H, -CH&sub3;);
  • Massenspektrum: Gefunden: 1026, 2660, C&sub4;&sub8;H&sub5;&sub5;Cl&sub3;FNO&sub1;&sub6; +H erfordert 1026,2648, 970, 571, 511, 407, 389, 347, 329, 105, 57 m/z.
  • Alle Fraktionen, die ein Gemisch von 14DA enthalten, werden vereinigt und über Silicagel (zwei Lobar-Säulen von Merck der Größe B, 9-ml-Fraktionen) durch Applikation des Materials auf die Säule in einer CH&sub2;Cl&sub2;-Lösung und Elution der Säule mit 10% CH&sub3;CH-CH&sub2;Cl&sub2; (68 Fraktionen) und anschließend 15% CH&sub3;CN-CH&sub2;Cl&sub2; erneut chromatographiert.
  • Die reine Verbindung 14DA wird in den Fraktionen 100- 131 als Feststoff eluiert und auf der Basis der folgenden Analysedaten charakterisiert:
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,15 (d, 2H, J = 7,1 Hz), 7,61 (t, 1H, J = 7,3 Hz), 7,51 (t, 2H, J = 7,5 Hz), 7,30-7,44 (m, 5H), 6,34 (s, 1H, H&sub1;&sub0;), 6,30 (t, 1H, J = 8,6 Hz, H&sub1;&sub3;), 5,67 (d, 1H, J = 7,6 Hz, H&sub2;), 5,54 (d, 1H, -NH-), 5,45 (d, 1H, J = 10,1 Hz, H3'), 5,38 (d, 1H, J = 2,3 Hz, H2'), 4,76 (d, 1H, J = 11,8 Hz, Troc-Ha), 4,76 (1H, H&sub5;), 4,69 (d, 1H, J = 11,8 Hz, Troc-Hb), 4,33 (d, 1H, J = 8,6 Hz, H20a), 4,09 (d, 1H, J = 7,5 Hz, H&sub3;), 4,04 (d, 1H, J = 8,7 Hz, H20b), 2,48 (m, 1H, H14a), 2,44 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,37 (m, 1H, H6a), 2,24 (m, 1H, H19a), 2,20 (s, 3H, CH&sub3;), 2,11 (d, 1H, J = 16,0 Hz, H14b), 1,90 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,66 (m, 1H, H19b), 137 (m, 1H, H&sub7;), 1,28 (s, 9H, Me&sub3;C-), 1,27 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,25 (s, 3H, -CH&sub3;);
  • Massenspektrum: Gefunden: 1006,2560, C&sub4;&sub8;H&sub5;&sub4;Cl&sub3;NO&sub1;&sub6; +H erfordert 1006, 2486, 950, 551, 533, 491, 369, 327, 105, 57 m/e.
    • Beispiel 25 N-Debenzoyl-N-(tert.-butyloxycarbonyl-7-desoxy-7-fluortaxol (Verbindung 20) (({2aR-[2aα,4β,4aβ,6β,9α,(αR*,βS*),11α,12α, 12aα,12bα]}-β-(tert.-Butyl)oxycarbonylamino]-α-hydroxybenzolpropansäure-6,12b-bis(acetyloxy)-12-(benzoyloxy)- 2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b-dodecahydro-4-fluor-11- hydroxy-4a,8,13,13-tetramethyl-5-oxo-7,11-methano-1H-cyclodeca[3,4]benz[1,2-b]-oxet-9-yl-ester))
  • Dem allgemeinen Verfahren von Beispiel 11 [Reaktion von 2'-Troc-7-desoxy-7-fluortaxol mit aktiviertem Zink] wird gefolgt, wobei N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)oxycarbonyl- 2'-{[(2,2,2-trichlorethyl)oxy]carbonyl}-7-desoxy-7-fluortaxol (13DA, 0,100 g, 0,097 mmol) und aktiviertes Zinkmetall (0,183 g und anschließend weiteres 0,050 g) in CH&sub3;OH- HOAc (9 : 1, 10 ml) verwendet werden. Nach einer Reaktionsdauer von 1 h wird das Reaktionsgemisch über Nacht bei -33 ºC gelagert und anschließend aufgearbeitet und das Rohprodukt chromatographiert (Silicagel, 40% EtOAc : Hexan, 8-ml- Fraktionen), wobei das gewünschte Produkt 20 in den Fraktionen 53-76 als Feststoff erhalten und auf der Basis der folgenden Analysedaten charakterisiert wird:
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;, TMS) δ 8,13 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 7,62 (t, 1H, J = 7,4 Hz), 7,51 (t, 2H, J = 7,5 Hz), 7,30-7,42 (m, 5H), 6,56 (s, 1H, H&sub1;&sub0;), 6,21 (t, 1H, H&sub1;&sub3;), 5,76 (d, 1H, J = 7,2 Hz, H&sub2;), 5,42 (d, 1H, J = 9,7 Hz, -NH-), 5,29 (d, 1H, H3'), 5,01 (d, 1H, J = 7,5 Hz, H&sub5;), 4,63 (m, 1H, H2'), 4,57 (dd, 1H, J = 4,3, 46,8 Hz, H&sub7;), 4,37 (d, 1H, J = 8,4 Hz, H20a), 4,27 (d, 1H, J = 8,4 Hz, H20b,), 4,04 (d, 1H, J = 7,1 Hz, H&sub3;), 2,56 (siebenLinien, 1H, H6a), 2,39 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,31 (m, 1H), 2,25 (m, 1H), 2,22 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,14 (66, 1H), 1,81 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,73 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,34 (s, 9H, Me3C-), 1,23 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,18 (s, 3H, -CH&sub3;);
    • Beispiel 26 N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)oxycarbonyl-7-desoxy-7β,8β- methanotaxol (Verbindung 23) (({2aR-[2aα,4β,4aβ,6β,9α, (αR*,βS* ),11α,12α,12aα,12bα]}-β-(tert.-Butyl)oxycarbonylamino]-α-hydroxyoxybenzolpropansäure-6,12b-bis(acetyloxy)- 12-(benzoyloxy)-2a,3,4,4a,5,6,9,10,11,12,12a,12b-dodecahydro-11-hydroxy-8,13,13-trimethyl-5-oxo-4,4a;7,11-bis- methano-1H-cyclodeca[3,4]benz[1,2-b]-oxet-9-yl-ester))
  • Dem allgemeinen Verfahren von Beispiel 11 [Reaktion von 2'-Troc-7-desoxy-7-fluortaxol mit aktiviertem Zink] wird gefolgt, wobei N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)oxycarbonyl- 2'-{[(2,2,2-trichlorethyl)oxy]carbonyl}-7-desoxy-7β,8β- methanotaxol (14DA, 0,100 g, 0,099 mmol) und aktiviertes Zinkmetall (0,200 g und anschließend weitere 0,050 g) in CH&sub3;OH-HOAc (9 : 1,10 ml) verwendet werden. Nach einem Aufarbeiten nach einer Reaktionsdauer von 3 h und Chromatographie (Silicagel, 40% EtOAc : Hexan, 8-ml-Fraktionen) des Rohprodukts wird das gewünschte Produkt 23, das in den Fraktionen 58-86 eluiert wird, als Feststoff erhalten und auf der Basis der folgenden Analysedaten charakterisiert:
  • ¹H-NMR (CDl&sub3;, TMS) δ 8,15 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 7,61 (t, 1H, J = 7,3 Hz), 7 51 (t, 2H, J = 7,7 Hz), 7,28-7,45 (m, 5H), 6,33 (s, 1H, H&sub1;&sub0;), 6,27 (t, 1H, H&sub1;&sub3;), 5,67 (d, 1H, J = 7,6 Hz, H&sub2;), 5,36 (d, 1H, J = 9,5 Hz, H3'), 5,30 (m, 1H, -NH-), 4,73 (d, 1H, J = 3,7 Hz, H2'), 4,62 (m, 1H, H&sub5;), 4,31 (d, 1H, J = 8,6 Hz, H20a'), 4,09 (d, 1H, J = 7,5 Hz, H&sub3;), 4,04 (d, 1H, J = 8,7 Hz, H20b), 2,46 (d von t, 1H, J = 4,3, 16,1 Hz, H6a), 2,38 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,24 (m, 1H), 2,21 (s, 3H, -CH&sub3;), 2,10 (d, 1H, J = 16,0 Hz), 1,85 (s, 3H, -CH&sub3;), 1,67 (dd, 1H, J = 7,1, 5,2 Hz), 1,36 (m, 1H, H&sub7;), 1,28 (s, 12 H, Me&sub3;C-, CH&sub3;-), 1,25 (s, 3H, -CH&sub3;);
    • Beispiel 29 2'-TES-7-Desoxy-7α-chlortaxol
  • Eine Lösung von 2'-TES-Taxol-7-triflat (Herstellungsbeispiel 15A; 1 Äquivalent) in N,N-Dimethylformamid (DMF) wird mit Kaliumchlorid (10 Äquivalente) gerührt. Ein Phasentransferkatalysator wird zugesetzt und das Reaktionsgemisch wird zur Erhöhung der Reaktionsgeschwindigkeit erwärmt. Der Verlauf der Reaktion wird mittels DC verfolgt.
  • Das Reaktionsgemisch wird durch die Zugabe von Wasser und Extraktion mit CH&sub2;Cl&sub2; aufgearbeitet. Die organischen Extrakte werden getrocknet, filtriert und eingeengt und der Rückstand des rohen Reaktionsprodukts wird über Silicagel chromatographiert, wobei die reine Titelverbindung erhalten wird.
    • Beispiel 30 7-Desoxy-7α-chlortaxol
  • Gemäß den Verfahren von Herstellungsbeispiel 12A, jedoch ausgehend von 2'-TES-7-desoxy-7α-chlortaxol wird die Titelverbindung hergestellt.
  • Gemäß den allgemeinen Verfahren von Beispiel 29 und 30, jedoch unter Verwendung entsprechender Metallsalze, wie Natrium- oder Kaliumbromid und Natrium- oder Kaliumiodid, in dem Verfahren des Beispiels 29, werden die folgenden Verbindungen hergestellt:
  • 7-Desoxy-7α-bromtaxol;
  • 7-Desoxy-7β-bromtaxol;
  • 7-Desoxy-7α-iodtaxol;
  • 7-Desoxy-7β-iodtaxol.
    • Beispiel 31 Herstellung von N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)aminocarbonyl-7- desoxy-7-fluor-taxol; Verbindung 28
  • N-Debenzoyl-N-Cbz-7-desoxy-7-fluor-taxol 18 (60 mg, 0,07 mmol; Herstellungsbeispiel 39) wird in 3 ml absolutem Ethanol gelöst und 20 mg 10%-Pd-auf-Kohle werden zugegeben. Dieses wird 6 h lang bei atmosphärischem Druck hydriert. DC zeigt, dass kein Ausgangsmaterial übrig ist. Deshalb wird das Reaktionsgemisch über Celite filtriert und unter Vakuum eingeengt. Der Rückstand, der 13-(β-Phenyl- isoserinyl)-7-fluor-baccatin III (19, 52 mg, 0,07 mmol; Herstellungsbeispiel 40) ist, wird in 700 ul THF gelöst und auf 0ºC gekühlt und mit 7 ul (0,061 mmol) tert.-Butylisocyanat versetzt. DC zeigt, dass noch etwas Amin vorhanden ist. Deshalb werden weitere 7 ul zugegeben. Nach 20 h wird die Lösung unter Vakuum eingeengt und über 6 g Silicagel, das in 1 : 2 EtOAc : Hexan gepackt ist, chromatographiert. Die Säule wird mit 30 ml 1 : 2 EtOAc : Hexan, 60 ml 2 : 3 EtOAc: Hexan, 50 ml 1 : 1 EtOAc : Hexan und 20 ml 2 : 1 EtOAc : Hexan eluiert, wobei 3-ml-Fraktionen gewonnen werden. Das gewünschte N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)aminocarbonyl-7-desoxy-7-fluortaxol findet sich in den Fraktionen 35-52.
  • Massespektrum (FAB-hochaufgelöst) Theorie: 851,3755. Gefunden: 851,3792.
  • ¹H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 1,16 (s, 3H); 1,20 (s); 1,72 (s, 3H); 1,80 (s, 3H); 2,15-2,15-2,60 (m); 2,19 (s, 3H); 2,52 (s, 3H); 4,02 (d, 1H); 4,28 (d, 1H); 4,35 (d, 1H); 4,55 (dd, 1H): 4,59 (d, 1H); 4,88 (br s, 1H); 4,99 (d, 1H); 5,34 (m, 2H); 5,76 (d, 1H); 6,13 (m, 1H); 6,55 (s, 1H); 7,32 (m); 7,49 (m, 2H); 7,61 (m, 1H); 8,11 (d, 2H)
    • Beispiel 32 Herstellung von N-Debenzoyl-N-(tert.-butylaminocarbonyl-7- desoxy-7β,8β-methano-taxol; Verbindung 29
  • N-Debenzoyl-N-Cbz-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol 21 (60 mg, 0,07 mmol; Herstellungsbeispiel 42) wird in 3 ml absolutem Ethanol gelöst und mit 20 mg 10%-Pd-auf-Kohle versetzt. Dies wird 5,5 h bei atmosphärischem Druck hydriert. DC zeigt, dass kein Ausgangsmaterial übrig ist. Deshalb wird das Reaktionsgemisch über Celite filtriert und unter Vakuum eingeengt.
  • Der Rückstand, der 13-(β-Phenyl-isoserinyl)-7-desoxy- 7β,8β-methano-baccatin III (22, 52 mg, 0,07 mmol; Herstellungsbeispiel 43) ist, wird in 1 ml THF gelost und mit 8 ml (0,07 mmol) tert-Butylisocyanat versetzt. DC zeigt, dass noch etwas Amin vorhanden ist. Deshalb wird das Reaktionsgemisch auf 0ºC gekühlt und mit 7 ml tert.-Butylisocyanat versetzt. Amin ist immer noch vorhanden. Deshalb werden weitere 7 ml und 3 · 5 ml zugesetzt, wobei die Reaktion mittels DC zwischen jeder Zugabe überprüft wird. Das Reaktionsgemisch wird zum Abschrecken mit Wasser versetzt und die Lösung wird zwischen saurer Kochsalzlösung und EtOAc aufgeteilt. Die Schichten werden getrennt und die organische Schicht wird über Na&sub2;SO&sub4; filtriert und unter Vakuum eingeengt und über 6 g Silicagel, das in 1 : 2 EtOAc : Hexan gepackt ist, chromatographiert. Die Säule wird mit 30 ml 1 : 2 EtOAc : Hexan, 50 ml 2 : 3 EtOAc : Hexan und 80 ml 1 : 1 EtOAc: Hexan eluiert, wobei 3-ml-Fraktionen gewonnen werden. Das gewünschte N-Debenzoyl-N-(tert.-butylaminocarbonyl-7-des oxy-7β,8β-methano-taxol findet sich in den Fraktionen 29- 48.
  • Massenspektrum (FAB-hochauflösend) Theorie: 831,3704. Gefunden: 831,3717.
  • ²H-NMR (CDCl&sub3;; TMS): δ 1,18 (s); 1,23 (s, 3H); 1,26b (s, 3H); 1,66 (m); 1,82 (s, 3H); 1,98- 2,48 (m); 2,20 (s, 3H); 2,38 (s, 3H); 4,05 (m, 2H); 4,30 (d, 1H); 4,50 (m, 1H); 4,60 (d, 1H); 4,73 (m, 1H); 5,33 (m, 1H); 5,66 (d, 1H); 6,19 (m, 1H); 6,31 (s, 1H); 7,32 (m); 7,51 (m, 2H); 7,61 (m, 1H); 8,13 (d, 2H)
  • Derivate der 7-Desoxy-7β,8β-methano-taxole, in denen die 2'-Hydroxylgruppe verestert ist, werden direkt aus dem gewünschten 7-Desoxy-7β,8β-methano-taxol nach Verfahren, die bei A. E. Mathew et al., J. Med. Chem., 1992, 35, 145; US-Patent 4 960 790; US-Patent 4 942 184; US-Patent 5 059 699 angegeben sind, hergestellt.
  • Gemäß den allgemeinen Verfahren von Mathew et al. (s. beispielsweise US-Patent 4 960 790, 4 924 184 und 5 059 699), jedoch unter Ersatz des entsprechenden 7-Desoxy- 7β,8β-methano-taxolanalogons werden die folgenden Verbindungen hergestellt:
  • 2'-Succinyl-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol;
  • 2'-(β-Alanyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxolformiat;
  • 2'-Glutaryl-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol;
  • 2'-[C(O)(CH&sub2;)&sub3;C(O)NH(CH&sub2;)&sub3;N(CH&sub3;)&sub2;]-7-desoxy-7β,8β-methano- taxol;
  • 2'-(β-Sulfopropionyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol;
  • 2'-(2-Sulfoethylamido)succinyl-7-desoxy-7β,8β-methano- taxol;
  • 2'-(3-Sulfopropylamido)succinyl-7-desoxy-7β,8β-methano- taxol;
  • 2'-(Triethylsilyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol;
  • 2'-(tert.-Butyldimethylsilyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol;
  • 2'-(N,N-Diethylaminopropionyl)-7-desoxy-7β,8β-methano- taxol;
  • 2'-(N,N-Dimethylglycyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol;
  • 2'-(Glycyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol;
  • 2'-(L-Alanyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol;
  • 2'-(L-Leucyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol;
  • 2'-(L-Isoleucyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol;
  • 2'-(L-Valyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol;
  • 2'-(L-Phenylalanyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol;
  • 2'-(L-Prolyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol;
  • 2'-(L-Lysyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol;
  • 2'-(L-Glutamyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol;
  • 2'-(L-Arginyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol;
  • 7-Desoxy-7β,8β-methano-taxotere; und
  • pharmazeutisch akzeptable Salze derselben, wenn die Verbindung entweder eine saure oder basische funktionelle Gruppe enthält.
  • Taxol und die anderen Ausgangstaxolanaloga sind bekannt oder können ohne weiteres nach bekannten Verfahren hergestellt werden. Siehe Chemistry of Taxol, Pharmac. Ther., Band 52, S. 1-34, 1991, sowie US-Patent Nr. 4 814 470, 4 857 653, 4 942 184, 4 924 011, 4 924 012, 4 960 790, 5 015 744, 5 059 699, 5 136 060, 5 157 049, 4 876 399, 5 227 400 sowie die PCT-Veröffentlichung Nr. WO 92/09589, die europäische Patentanmeldung 90305845.1 (Veröffentlichung Nr. A2 0 400 971), 89400935.6 (Veröffentlichung Nr. A1 0 366 841) und 90402333.0 (Veröffentlichung Nr. A1 0 414 610), 87401669.4 (A1 0 253 739), 92308608.6 (A1 0 534 708), 92308609.4 (A1 534 709) und PCT-Veröffentlichung Nr. WO 91/17977, WO 91/17976, WO 91/13066, WO 91/13053, die hier alle als Bezug aufgenommen sind.
  • Die erfindungsgemäßen Verbindungen können als solche in pharmazeutischen Zubereitungen formuliert werden oder in der Form pharmazeutisch akzeptabler Salze derselben, insbesondere als nicht-toxische pharmazeutisch akzeptable Additionssalze oder akzeptable Basensalze formuliert werden. Diese Salze können aus den erfindungsgemäßen Verbindungen, die saure oder basische Gruppen enthalten, gemäß üblichen chemischen Verfahren hergestellt werden.
  • Normalerweise werden die Salze durch Umsetzen der freien Base oder Säure mit stöchiometrischen Mengen oder mit einem Überschuss der das gewünschte Salz bildenden anorganischen oder organischen Säure in einem geeignete Lösemittel oder verschiedenen Kombinationen von Lösemitteln hergestellt. Als Beispiel kann die freie Base in einer wässrigen Lösung der entsprechenden Säure gelöst und das Salz nach Standardverfahren, beispielsweise durch Verdamp fen der Lösung, gewonnen werden. Alternativ kann die freie Base in einem organischen Lösemittel, wie einem Niederalkanoyl, einem Ether, einem Alkylester oder Gemischen derselben, beispielsweise Methanol, Ethanol, Ether, Ethylacetat, eine Ethylacetat-Ether-Lösung u. dgl., gelöst werden, wonach sie mit der entsprechenden Säure zur Bildung des entsprechenden Salzes behandelt wird. Das Salz wird nach Standardgewinnungsverfahren gewonnen, beispielsweise durch Filtration des gewünschten Salzes bei spontaner Abtrennung aus der Lösung oder es kann durch die Zugabe eines Lösemittels, in dem das Salz unlöslich ist, gefällt und aus diesem gewonnen werden.
  • Die erfindungsgemäßen Taxolderivate können bei der Behandlung von Krebsarten aufgrund ihrer cytotoxischen Antitumoraktivität verwendet werden. Die neuen Verbindungen sind in der Form von Tabletten, Pillen, Pulvergemischen, Kapseln, injizierbaren Formen, Lösungen, Suppositorien, Emulsionen, Dispersionen, Nahrungsmittelvormischungen und anderer geeigneter Form verabreichbar. Die pharmazeutische Zubereitung, die die Verbindung enthält, wird geeigneterweise mit einem nicht-toxischen pharmazeutischen organischen Träger oder einem nicht-toxischen pharmazeutischen anorganischen Träger üblicherweise mit etwa 0,01 mg bis zu 2500 mg oder einer höheren Dosierungseinheit, vorzugsweise 50-500 mg gemischt. Typische pharmazeutisch akzeptable Träger sind beispielsweise Mannit, Harnstoff, Dextrane, Lactose, Kartoffel- und Maisstärkearten, Magnesiumstearat, Talkum, pflanzliche Öle, Polyalkylenglykole, Ethylcellulose, Poly(vinylpyrrolidon), Calciumcarbonat, Ethyloleat, Isopropylmyristat, Benzylbenzoat, Natriumcarbonat, Gelatine, Kaliumcarbonat, Kieselsäure und andere herkömmlicherweise verwendete akzeptable Träger. Die pharmazeutische Zubereitung kann auch nicht-toxische Hilfssubstanzen, wie Emulgatoren, Konservierungsmittel, Feuchthaltemittel u. dgl. beispielsweise Sorbitanmonolaurat, Triethanolaminoleat, Polyoxyethylenmonostearat, Glyceryltripalmitat, Dioctylnatriumsulfosuccinat u. dgl. enthalten.
  • Beispielhaft für ein typisches Verfahren zur Herstellung einer die aktiven Mittel enthaltenden Tablette ist es, zunächst das Mittel mit einem nicht-toxischen Bindemittel, wie Gelatine, Akazienschleim, Ethylcellulose o. dgl. zu mischen. Das Mischen wird günstigerweise in einem Standard-V- Mischer und üblicherweise unter wasserfreien Bedingungen durchgeführt. Als nächstes kann das frisch hergestellte Gemisch durch herkömmliche Tablettierungsmaschinen zu Rohlingen geformt und die Rohlinge zu Tabletten ge formt werden. Die frisch hergestellten Tabletten können überzogen werden oder sie können unbeschichtet bleiben. Repräsentativ für geeignete Überzüge sind die nicht-toxischen Überzüge, die Schellack, Methylcellulose, Carnaubawachs, Styrol-Maleinsäure-Copolymere u. dgl. umfassen. Zur oralen Verabreichung werden Presstabletten, die 0,01 mg, 5 mg, 25 mg, 50 mg, 500 mg u. dgl. bis zu 2500 mg enthalten, im Licht der obigen Offenbarung und nach einschlägig bekannten Herstellungsverfahren, die einschlägig bekannt und in Remington's Pharmaceutical Science, Kapitel 39, Mack Publishing Co., 1965, angegeben sind, hergestellt.
  • Zur Formulierung der Tablette werden die aktive Verbindung, Maisstärke, Lactose, Dicalciumphosphat und Calciumcarbonat unter trockenen Bedingungen in einem herkömmlichen V-Mischer gleichförmig vermischt, bis alle Bestahdteile gleichförmig miteinander vermischt sind. Als nächstes wird die Maisstärkepaste als 10-%ige Paste hergestellt und mit dem frisch hergestellten Gemisch bis zur Bildung eines gleichförmigen Gemischs vermischt. Das Gemisch wird dann durch ein Standardsieb mit großen Maschen gegeben, in einer wasserfreien Atmosphäre getrocknet und anschließend mit Calciumstearat gemischt und zu Tabletten gepresst und nach Bedarf beschichtet. Andere Tabletten, die 10, 50, 100, 150 mg u. dgl. enthalten, werden auf eine ähnliche Art und Weise hergestellt.
  • Die folgende Formulierung I ist ein Beispiel für eine Tablettenformulierung, die eine erfindungsgemäße Verbindung umfasst.
    • FORMULIERUNG I
  • Bestandteile: mg pro Tablette
  • Aktive Verbindung 50,0
  • Maisstärke 15,0
  • Maisstärkepaste 4,5
  • Calciumcarbonat 15,0
  • Lactose 67,0
  • Calciumstearat 2,0
  • Dicalciumphosphat 50,0
  • Die Herstellung von Kapseln, die 10 mg bis 2500 mg enthalten, zur oralen Verwendung besteht im wesentlichen aus dem Vermischen der aktiven Verbindung mit einem nicht- toxischen Träger und dem Einschließen des Gemischs in eine Polymerhülle, üblicherweise Gelatine oder dergleichen. Die Kapseln können einschlägig bekannte weiche Kapseln sein, die durch Einschließen der Verbindung in inniger Verteilung in einem essbaren kompatiblen Träger hergestellt werden, sein, oder die Kapsel kann eine Hartkapsel, die im wesentlichen aus der neuen Verbindung, die mit einem nicht- toxischen Feststoff, wie Talkum, Calciumstearat, Calciumcarbonat o. dgl. gemischt ist, besteht, sein. Kapseln, die 25 mg, 75 mg, 125 mg u. dgl. der neuen Verbindung allein oder Gemische von zwei oder mehr der neuen Verbindungen enthalten, werden beispielsweise wie folgt hergestellt:
    • FORMULIERUNG II
  • Bestandteile: mg pro Kapsel
  • Aktive Verbindung 50,0
  • Calciumcarbonat 100,0
  • Lactose USP 200,0
  • Stärke 130,0
  • Magnesiumstearat 4,5
  • Die obigen Bestandteile werden in einem Standardmischer zusammen gemischt und anschließend in im Handel erhältliche Kapseln eingebracht. Wenn höhere Konzentrationen des aktiven Mittels verwendet werden, erfolgt eine entsprechende Reduzierung der Lactosemenge.
  • Die erfindungsgemäßen Verbindungen können auch gefriergetrocknet und nach Bedarf mit anderen pharmazeutisch akzeptablen Streckmitteln vereinigt werden, um zur parenteralen injizierbaren Verabreichung geeignete Formulierungen herzustellen. Für diese Verabreichung kann die Formulierung in Wasser (normales, Kochsalzlösung) oder einem Gemisch aus Wasser und einem organischen Lösemittel, wie Propylenglykol, Ethanol u. dgl., wiede hergestellt werden.
  • Die verabreichte Dosis, sei es eine Einzeldosis, eine Mehrfachdosis oder eine Tagesdosis, variiert natürlich aufgrund der unterschiedlichen Stärke der Verbindung, des gewählten Verabreichungswegs, der Größe des Empfängers und der Natur der Erkrankung des Patienten mit der speziellen erfindungsgemäßen Verbindung. Die verabreichte Dosis unterliegt keinen bestimmten Grenzen. Sie ist jedoch üblicherweise eine wirksame Menge oder das Äquivalent der pharmakologisch aktiven freien Form auf molarer Basis, die von einer Dosisformulierung bei der metabolischen Freisetzung des aktiven Arzneimittels gebildet werden, zum Erreichen der gewünschten pharmakologischen und physiologischen Wirkung.
  • Typischerweise können die erfindungsgemäßen Verbindungen durch intravenöse Injektion mit Dosisgaben von 1-500 mg pro Patient pro Behandlungsgang, vorzugsweise mit Dosisgaben von 2-100 mg verabreicht werden, wobei die genaue Dosisgabe vom Alter, Gewicht und der Erkrankung des Patienten abhängt. Ein Beispiel für eine geeignete Formulierung zur Injektion ist die Verwendung einer Lösung der erfindungsgemäßen Verbindung in einem Gemisch aus einem Polysorbatalkohol und dehydratisiertem Alkohol (beispielsweise 1 : 1) mit anschließender Verdünnung mit 5% Dextrose in Wasser vor der Infusion oder Injektion.
  • Die Verbindungen der Formel I (die II und III umfassen) sind für die gleichen Krebsarten, für die Taxol als aktiv befunden wurde, geeignet, wobei diese humane Eierstocktumore, Mammatumore und bösartiges Melanom, Lungentumore, Magentumore, Darmtumore, Kopf- und Halstumore und Leukämie umfassen. Die klinische Pharmakologie von Taxol it beispielsweise von Eric K. Rowinsky und Ross C. Donehower, The Clinical Pharmacology and Use of Antimicrotubule Agents in Cancer Chemotherapeutics, Pharmac. Ther., Band 52, S. 35-84, 1991, zusammengefasst. Klinische und vorklinische Untersuchungen mit Taxol sind bei William J. Slichenmyer und Daniel D. Von Hoff, Taxol: A New and Effective Anticancer Drug, Anti-Cancer Drugs, Band 2, S. 519-530, 1991, zusammengefasst.
  • Die biologische Aktivität der erfindungsgemäßen 7-Desoxy-7β,8β-Methano-taxolverbindungen (Formel II) wurde unter Verwendung bekannter Verfahren bestätigt. Beispielsweise ergab der Vergleich der Cytotoxizität von Desoxy-7β,8β- Methano-taxol (Verbindung IIb; Produkt von Beispiel 19) mit Taxol selbst in L1210-Maus-Leukämiekarzinomzellen in Kultur, dass der IC&sub9;&sub0;-Wert (90%-Wachstumhemmkonzentration) für Desoxy-7β,8β-Methano-taxol 0,025 mg/ml und für Taxol 0,06 mg/ml betrug. Bei einem In-vitro-Tubulinpolymerisationstest, der auf die Art und Weise von F. Gaskin et al.; J. Mol. Biol. 89: 737, 1974, durchgeführt wurde, konnte 7- Desoxy-7β,8β-Methano-taxol die Tubulinpolymerisation in vitro bei 20ºC in einer Taxol sehr ähnlichen Weise induzieren.
  • Die biologische Aktivität der 7-Desoxy-7-halogentaxolverbindungen (Formel II) gemäß der Erfindung wurde unter Verwendung bekannter Verfahren bestätigt. Beispielsweise ergab ein Vergleich der Cytotoxizität von 7-Desoxy-7-fluortaxol (Verbindung IIIb; Produkt von Beispiel 11) mit Taxol selbst in A2780(humanes Eierstockkarzinom)-Zellen in Kultur, dass der IC&sub9;&sub0;-Wert (90%-Wachstumshemmkonzentration) für 7-Desoxy-7-fluortaxol 0,016 mg/ml und für Taxol 0,007 mg/ml betrug. Bei einem In-vitro-Tubulinpolymerisationstest, der auf die Art und Weise von F. Gaskin et al., J. Mol. Biol., 89: 737, 1974, durchgeführt wurde, konnte 7-Desoxy-7-fluortaxol die Tubulinpolymerisation in vitro bei 20ºC in einer Taxol sehr ähnlichen Weise induzieren. Bei diesem Test war 7-Desoxy-7-fluortaxol etwa halb so stark wie Taxol.
  • Die biologische Aktivität der erfindungsgemäßen Verbindungen wurde ferner unter Verwendung von bekannten Verfahren gegenüber L1210-Leukämie bestätigt und die Ergebnisse sind in Tabelle I angegeben. Die Ergebnisse wurden unter Verwendung von bekannten Standardverfahren erhalten (L. H. Li, S. L. Kuentzel, L. L. Murch, L. M. Pschigoga und W. C. Krueger, "Comparative biological and biochemical effects of nogalarnycin and its analogs on L1210 leukemia", Cancer Res. 39: 4816-4822 (1979)). Die Ergebnisse sind als IC&sub5;&sub0; angegeben, wobei dies die Arzneimittelkonzentration ist, die zur Hemmung der Zellproliferation auf 50% der von unbehandelten Kontrollzellen erforderlich ist. Kleinere Zahlen belegen eine größere Aktivität.
    • TABELLE I
  • Verbindung Nr. L1210 (IC&sub5;&sub0; ug/ml)
  • 13AA 0,054
  • 14AA > 0,1
  • IIIb 0,010
  • IIb 0,012
  • 13DA 0,015
  • 14DA 0,012
  • 20 0,0038
  • 23 0,0046
  • 28 0,0055
  • 29 0,006
  • Taxol 0,015
  • Taxotere 0,004 PEAKTIONSSCHEMA A-I REAKTIONSSCHEMA A-II REAKTIONSSCHEMA A-III REAKTIONSSCHEMA A' REAKTIONSSCHEMA B REAKTIONSSCHEMA B-II REAKTIONSSCHEMA B-III REAKTIONSSCHEMA C FORMELSCHEMA FORMELSCHEMA Fortsetzung FORMELSCHEMA Fortsetzung FORMELSCHEMA Fortsetzung FORMELSCHEMA Fortsetzung FORMELSCHEMA Fortsetzung FORMELSCHEMA Fortsetzung FORMELSCHEMA Fortsetzung FORMELSCHEMA Fortsetzung FORMELSCHEMA Fortsetzung FORMELSCHEMA Fortsetzung FORMELSCHEMA Fortsetzung FORMELSCHEMA Fortsetzung FORMSLSCHEMA Fortsetzung FORMELSCHEMA Fortsetzung

Claims (14)

1. Verbindung der Formel I:
worin:
R&sub1; ausgewählt ist aus der Gruppe aus
-CH&sub3;,
-C&sub6;H&sub5; oder Phenyl, das mit 1, 2 oder 3 Resten von C&sub1;-C&sub4;- Alkyl, C&sub1;-C&sub3;-Alkoxy, Halogen, C&sub1;-C&sub3;-Alkylthio, Trifluormethyl, C&sub2;-C&sub6;-Dialkylamino, Hydroxy oder Nitro substituiert ist,
-2-Furyl, 2-Thienyl, 1-Naphthyl, 2-Naphthyl oder 3,4- Methylendioxyphenyl;
R&sub2; ausgewählt ist aus der Gruppe aus -H, -NHC(O)H, -NHC(O)-C&sub1;-C&sub1;&sub0;-Alkyl, -NHC(O)Phenyl, -NHC(O)Phenyl, das mit 1, 2 oder 3 Resten von C&sub1;-C&sub4;-Alkyl, C&sub1;-C&sub3;-Alkoxy, Halogen, C&sub1;-C&sub3;-Alkylthio, Trifluormethyl, C&sub2;-C&sub6;-Dialkylamino, Hydroxy oder Nitro substituiert ist, -NHC(O)C(CH&sub3;)=CHCH&sub3;, -NHC(O)OC(CH&sub3;)&sub3;, -NHC(O)OCH&sub2;-Phenyl, -NH&sub2;, -NHSO&sub2;-4-Methylphenyl, -NHC(O)(CH&sub2;)&sub3;COOH, -NHC(O)-4-(SO&sub3;H)Phenyl, -OH, -NHC(O)-1-Adamantyl, -NHC(O)O-3-Tetrahydrofuranyl, -NHC(O)O-4-Tetrahydropyranyl, -NHC(O)CH&sub2;C(CH&sub3;)&sub3;, -NHC(O)C(CH&sub3;)&sub3;, -NHC(O)O-C&sub1;-C&sub1;&sub0;-Alkyl, -NHC(O)NH-C&sub1;-C&sub1;&sub0;- Alkyl, -NHC(O)NHPh, -NHC(O)NHPh, das mit 1, 2 oder 3 Resten von C&sub1;-C&sub4;-Alkyl, C&sub1;-C&sub3;-Alkoxy, Halogen, C&sub1;-C&sub3;-Alkylthio, Trifluormethyl, C&sub2;-C&sub6;-Dialkylamino oder Nitro substituiert ist, -NHC(O)-C&sub3;-C&sub8;-Cycloalkyl, -NHC(O)C(CH&sub2;CH&sub3;)&sub2;CH&sub3;, -NHC(O)C(CH&sub3;)&sub2;CH&sub2;Cl, -NHC(O)C(CH&sub3;)&sub2;CH&sub2;CH&sub3;, Phthalimido, -NHC(O)-1-Phenyl-1-cyclopentyl, -NHC(O)-1-Methyl-1-cyclohexyl, -NHC(S)NHC(CH&sub3;)&sub3;, -NHC(O)NHCC(CH&sub3;)&sub3; oder -NHC(O)NHPh;
R&sub3; ausgewählt ist aus der Gruppe aus -H, -NHC(O)Phenyl oder -NHC(O)OC(CH&sub3;)&sub3;, wobei insgesamt gilt, dass einer der Reste R&sub2; und R&sub3; -H ist, jedoch R&sub2; und R&sub3; nicht beide -H sind;
R&sub4; -H ist oder ausgewählt ist aus der Gruppe aus -OH, -OAc(-OC(O)CH&sub3;), -OC(O)OCH&sub2;C(Cl)&sub3;, -OCOCH&sub2;CH&sub2;NH&sub3;&spplus; HCOO&supmin;, -NHC(O)Phenyl, -NHC(O)OC(CH&sub3;)&sub3;, -OCOCH&sub2;-CH&sub2;COOH und pharmaceutisch akzeptablen Salzen derselben, -OCO(CH&sub2;)&sub3;COOH und pharmazeutisch akzeptablen Salzen derselben und -OC(O)-Z-C(O)-R' [worin Z Ethylen (-CH&sub2;CH&sub2;-), Propylen (-CH&sub2;CH&sub2;CH&sub2;-), -CH=CH-, 1,2-Cyclohexan oder 1,2-Phenylen bedeutet, R' -OH, eine -OH-Base, -NR'&sub2;R'&sub3;, -OR'&sub3;, -SR'&sub3;, OCH&sub2;C(O)NR'&sub4;R'&sub5; mit R'&sub2; gleich -H oder -CH&sub3;, R'&sub3; gleich -(CH&sub2;)nNR'&sub6;R'&sub7; oder (CH&sub2;)nN&spplus;R'&sub6;R'&sub7;R'&sub8;X&supmin; mit n gleich 1-3, R'&sub4; gleich -H oder -C&sub1;-C&sub4;-Alkyl, R'&sub5; gleich -H, -C&sub1;-C&sub4;-Alkyl, Benzyl, Hydroxyethyl, -CH&sub2;CO&sub2;H oder Dimethylaminoethyl, R'&sub6; und R'&sub7; jeweils gleich -CH&sub3;, -CH&sub2;CH&sub3; oder Benzyl oder NR'&sub6;R'&sub7; gleich einer Pyrrolidino-, Piperidino-, Morpholino- oder N-Methylpiperazinogruppe, R'&sub8; gleich -CH&sub3;, -CH&sub2;CH&sub3; oder Benzyl, X- gleich einem Halogenid und Base gleich NH&sub3;, (HOC&sub2;H&sub4;)&sub3;N, N(CH&sub3;)&sub3;, CH&sub3; N(C&sub2;H&sub4;)&sub2;NH, NH&sub2;(CH&sub2;)&sub6;NH&sub2;, N-Methylglucamin, NaOH oder KOH bedeutet], -OC(O)(CH&sub2;)nNR²R³ [worin n 1-3 ist, R² -H oder -C&sub1;-C&sub3;-Alkyl bedeutet und R -H oder -C&sub1;-C&sub3;-Alkyl bedeutet], -OC(O)(CH(R")NH&sub2; [worin R" ausgewählt ist aus -H, -CH&sub3;, -CH&sub2;CH(CH&sub3;)&sub2;, -CH(CH&sub3;)CH&sub2;CH&sub3;, -CH(CH&sub3;)&sub2;, -CH&sub2;-Phenyl, -(CH&sub2;)&sub4;NH&sub2;, -CH&sub2;CH&sub2;COOH und -(CH&sub2;)&sub3;NHC(=NH)NH&sub2;], dem Prolinrest, -OC(O)OH=CH&sub2;, -OC(O)CH&sub2;CH&sub2;C(O)OCH&sub2;OH oder -C(O)CH&sub2;CH&sub2;C(O)NHCH&sub2;CH&sub2;SO&sub3;&supmin;Y&spplus; oder -OC(O)CH&sub2;CH&sub2;C(O)NHCH&sub2;CH&sub2;CH&sub2;SO&sub3;&supmin;Y&spplus;, worin Y&spplus; Nat oder N(Bu)&sub4; ist;
R&sub5; -H oder -OH bedeutet, wobei gilt, dass, wenn R&sub5; -OH ist, R&sub4; -H ist, und dass, wenn R&sub5; -H ist, R&sub4; von -H verschieden ist;
R&sub6; -H bedeutet;
entweder R&sub7; α-R&sub7;&sub1;:β-R&sub7;&sub2;, wobei einer der Reste R&sub7;&sub1; und R&sub7;&sub2; -H ist und der andere Halogen ist, und R&sub8; -CH&sub3; bedeutet; oder
R&sub7; α-H:β-R&sub7;&sub4; bedeutet und R&sub7;&sub4; und R&sub8; zusammen einen Cyclopropylring bilden; und
R&sub1;&sub0; -H oder -C(O)CH&sub3; bedeutet;
oder ein pharmazeutisch akzeptables Salz derselben, wenn die Verbindung entweder eine saure oder basische funktionelle Gruppe enthält;
wobei außerdem gilt, dass
(i) R&sub1; CH&sub3; bedeutet, wenn R&sub2; NH-CO-Phenyl oder NH-CO-O- Alkyl ist, R&sub3; und R&sub5; jeweils H sind, R&sub4; OH oder
-OC(O)OCH&sub2;CCl&sub3; ist und R&sub7; α-H: β-R&sub7;&sub4; ist, wobei R&sub7;&sub4; und R&sub8; zusammen eine Cyclopropylgruppe bilden; und
(ii) R&sub1; nicht Phenyl bedeutet, wenn R&sub2; -NHCOC&sub6;H&sub5; oder
-NHCOOC(CH&sub3;)&sub3; ist, R&sub3; und R&sub5; jeweils H sind, R&sub4; OH ist und R&sub7; α-F:β-H ist.
2. Verbindung gemäß Anspruch 1, worin R&sub2; -NHC(O)C&sub6;H&sub5; bedeutet, R&sub4; Hydroxy bedeutet, R&sub3; und R&sub5; -H bedeuten und R&sub1; Phenyl oder substituiertes Phenyl bedeutet.
3. Verbindung gemäß Anspruch 1, worin R&sub2; -NHC(O)OC(CH&sub3;)&sub3; bedeutet, R&sub1; Phenyl oder substituiertes Phenyl bedeutet, R&sub4; Hydroxy bedeutet und R&sub3; und R&sub5; -H bedeuten.
4. Verbindung gemäß Anspruch 1, worin R&sub7; α-R&sub7;&sub1;:β-R&sub7;&sub2; bedeutet, wobei einer der Reste R&sub7;&sub1; und R&sub7;&sub2; -H ist und der andere Halogen ist, und R&sub8; -CH&sub3; bedeutet.
5. Verbindung gemäß Anspruch 4, ausgewählt aus 7-Desoxy- 7β-fluortaxol, 2'-[{(2,2,2-Trichlorethyl)oxycarbonyl}- carbonyl]-7-desoxy-7a-fluortaxol und 2'-[{(2,2,2- Trichlorethyl)oxy}-carbonyl]-7-desoxy-7β-fluortaxol.
6. Verbindung gemäß Anspruch 1, worin R&sub7; α-H:β-R&sub7;&sub4; bedeutet, wobei R&sub7;&sub4; und R&sub8; zusammen eine Cyclopropylgruppe bilden.
7. Verbindung nach Anspruch 1, ausgewählt aus
2'-Succinyl-7-desoxy-7-fluortaxol;
2'-(β-Alanyl)-7-desoxy-7-fluortaxolformiat;
2'-Glutaryl-7-desoxy-7-fluortaxol;
2'-[C(O)(CH&sub2;)&sub3;C(O)NH(CH&sub2;)&sub3;N(CH&sub3;)&sub2;]-7-desoxy-7-fluortaxol;
2'-(β-Sulfopropionyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
2'-(2-Sulfoethylamido)succinyl-7-desoxy-7-fluortaxol;
2'-(3-Sulfopropylamido)succinyl-7-desoxy-7-fluortaxol;
2'-(Triethylsilyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
2'-(tert.-Butyldimethylsilyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
2'-(N,N-Diethylaminopropionyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
2'-(N,N-Dimethylglycyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
2'-(Glycyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
2'-(L-Alanyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
2'-(L-Leucyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
2'-(L-Isoleucyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
2'-(L-Valyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
2'-(L-Phenylalanyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
2'-(L-Prolyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
2'-(L-Lysyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
2'-(L-Glutamyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
2'-(L-Arginyl)-7-desoxy-7-fluortaxol;
N-Debenzoyl-N-tetrahydropyran-4-yloxycarbonyl-7-desoxy-7- fluortaxol;
N-Debenzoyl-N-pivaloyl-7-desoxy-7-fluortaxol;
N-Debenzoyl-N-n-hexylaminocarbonyl-7-desoxy-7-fluortaxol und
N-Debenzoyl-N-(tert.-butyl)aminocarbonyl-7-desoxy-7- fluortaxol.
8. Verbindung nach Anspruch 1, ausgewählt aus
2'-Succinyl-7-desoxy-7α-fluortaxol;
2'-(β-Alanyl)-7-desoxy-7α-fluortaxolformiat;
2'-Glutaryl-7-desoxy-7α-fluortaxol;
2'-[C(O)(CH&sub2;)&sub3;C(O)NH(CH&sub2;)&sub3;N(CH&sub3;)&sub2;]-7-desoxy-7α-fluortaxol;
2'-(β-Sulfopropionyl)-7-desoxy-7α-fluortaxol;
2'-(2-Sulfoethylamido)succinyl-7-desoxy-7α-fluortaxol;
2'-(3-Sulfopropylamido)succinyl-7-desoxy-7α-fluortaxol;
2'-(Triethylsilyl)-7-desoxy-7cc-fluortaxol;
2'-(tert.-Butyldimethylsilyl)-7-desoxy-7α-fluortaxol;
2'-(N,N-Diethylaminopropionyl)-7-desoxy-7α-fluortaxol;
2'-(N,N-Dimethylglycyl)-7-desoxy-7α-fluortaxol;
2'-(Glycyl)-7-desoxy-7α-fluortaxol;
2'-(L-Alanyl)-7-desoxy-7α-fluortaxol;
2'-(L-Leucyl)-7-desoxy-7α-fluortaxol;
2'-(L-Isoleucyl)-7-desoxy-7α-fluortaxol;
2'-(L-Valyl)-7-desoxy-7α-fluortaxol;
2'-(L-Phenylalanyl)-7-desoxy-7α-fluortaxol;
2'-(L-Prolyl)-7-desoxy-7α-fluortaxol;
2'-(L-Lysyl)-7-desoxy-7α-fluortaxol;
2'-(L-Glutamyl)-7-desoxy-7α-fluortaxol und
2'-(L-Arginyl)-7-desoxy-7α-fluortaxol.
9. Verbindung nach Anspruch 1, ausgewählt aus
2'-Succinyl-7-desoxy-7β-fluortaxol;
2'-(β-Alanyl)-7-desoxy-7β-fluortaxolformiat;
2'-Glutaryl-7-desoxy-7β-fluortaxol;
2'-[C(O)(CH&sub2;)&sub3;C(O)NH(CH&sub2;)&sub3;N(CH&sub3;)&sub2;]-7-desoxy-7β-fluortaxol;
2'-(β-Sulfopropionyl)-7-desoxy-7β-fluortaxol;
2'-(2-Sulfoethylamido)succinyl-7-desoxy-7β-fluortaxol;
2'-(3-Sulfopropylamido)succinyl-7-desoxy-7β-fluortaxol;
2'-(Triethylsilyl)-7-desoxy-7β-fluortaxol;
2'-(tert.-Butyldimethylsilyl)-7-desoxy-7β-fluortaxol;
2'-(N,N-Diethylaminopropionyl)-7-desoxy-7β-fluortaxol;
2'-(N,N-Dimethylglycyl)-7-desoxy-7β-fluortaxol;
2'-(Glycyl)-7-desoxy-7β-fluortaxol;
2'-(L-Alanyl)-7-desoxy-7β-fluortaxol;
2'-(L-Leucyl)-7-desoxy-7β-fluortaxol;
2'-(L-Isoleucyl)-7-desoxy-7β-fluortaxol;
2'-(L-Valyl)-7-desoxy-7β-fluortaxol;
2'-(L-Phenylalanyl)-7-desoxy-7β-fluortaxol;
2'-(L-Prolyl)-7-desoxy-7β-fluortaxol;
2'-(L-Lysyl)-7-desoxy-7β-fluortaxol;
2'-(L-Glutamyl)-7-desoxy-7β-fluortaxol und
2'-(L-Arginyl)-7-desoxy-7β-fluortaxol.
10. Verbindung nach Anspruch 1, ausgewählt aus
2'-Succinyl-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol;
2'-(β-Alanyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxolformiat;
2'-Glutaryl-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol;
2'-[C(O)(CH&sub2;)&sub3;C(O)NH(CH&sub2;)&sub3;N(CH&sub3;)&sub2;]-7-desoxy-7β,8β-methano- taxol;
2'-(β-Sulfopropionyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol;
2'-(2-Sulfoethylamido)succinyl-7-desoxy-7β,8β-methano- taxol;
2'-(3-Sulfopropylamido)succinyl-7-desoxy-7β,8β-methano- taxol;
2'-(Triethylsilyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol
2'-(tert.-Butyldimethylsilyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol;
2'-(N,N-Diethylaminopropionyl)-7-desoxy-7β,8β-methano- taxol;
2'-(N,N-Dimethylglycyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol;
2'-(Glycyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol;
2'-(L-Alanyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol;
2'-(L-Leucyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol;
2'-(L-Isoleucyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol;
2'-(L-Valyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol;
2'-(L-Phenylalanyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol;
2'-(L-Prolyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol;
2'-(L-Lysyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol;
2'-(L-Glutamyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol und
2'-(L-Arginyl)-7-desoxy-7β,8β-methano-taxol.
11. Verbindung nach Anspruch 1, ausgewählt aus
N-Debenzoyl-N-tetrahydrofuran-3-yloxycarbonyl-7-desoxy- 7β,8β-methanotaxol;
N-Debenzoyl-N-(1-adamantoyl)-7-desoxy-7β,8β-methanotaxol;
N-Debenzoyl-N-phenylaminocarbonyl-7-desoxy-7β,8β-methano- taxol;
N-Debenzoyl-N-(1-methyl-1-cylcohexylanoyl)-7-desoxy-7β,8β- methanotaxol;
N-Debenzoyl-N-(1-phenyl-1-cyclopentanoyl)-7-desoxy-7β,8β- methanotaxol;
N-Debenzoyl-N-phthalimido-7-desoxy-7β,8β-methanotaxol;
N-Debenzoyl-N-tert.-butylaminothiocarbonyl-7-desoxy-7β,8β- methanotaxol und
N-Debenzoyl-N-(2-chlor-1,1-dimethylethyl)oxycarbonyl-7- desoxy-7β,8β-methanotaxol.
12. Verbindung nach Anspruch 1, ausgewählt aus
N-Debenzoyl-N-tetrahydropyran-4-yloxycarbonyl-7-desoxy-7- fluortaxol;
N-Debenzoyl-N-pivaloyl-7-desoxy-7-fluortaxol;
N-Debenzoyl-N-n-hexylaminocarbonyl-7-desoxy-7-fluortaxol;
N -Debenzoyl-N-tert.-butylaminocarbonyl-7-desoxy-7-fluortaxol;
N-Debenzoyl-N-(1-methyl-1-cyclohexylanoyl)-7-desoxy-7- fluortaxol;
N-Debenzoyl-N-(1-phenyl-1-cyclopentanoyl)-7-desoxy-7- fluortaxol;
N-Debenzoyl-N-phthalimido-7-desoxy-7-fluortaxol;
N-Debenzoyl-N-tert.-butylaminothiocarbonyl)-7-desoxy-7- fluortaxol und
N-Debenzoyl-N-(2-chlor-1,1-dimethylethyl)oxycarbonyl-7- desoxy-7-fluortaxol.
13. Pharmazeutische Zusammensetzung zur Verwendung gegen Krebs, die eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 12 umfasst.
14. Verwendung einer Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 12 zur Herstellung eines Medikaments zur Verwendung gegen Krebs.
DE69332438T 1992-12-15 1993-12-13 7-halo-und 7(beta), 8(beta)-methano-taxolen, antineoplastische verwendung und diese enthaltende pharmazeutische zusammenstellungen Expired - Fee Related DE69332438T2 (de)

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