[go: up one dir, main page]

DE3220232A1 - Verfahren zur stabilisierung von blutplaettchen bei der bestimmung mehrfacher blutplaettchenparameter in vergleichskontrollen und eichzusammensetzungen - Google Patents

Verfahren zur stabilisierung von blutplaettchen bei der bestimmung mehrfacher blutplaettchenparameter in vergleichskontrollen und eichzusammensetzungen

Info

Publication number
DE3220232A1
DE3220232A1 DE19823220232 DE3220232A DE3220232A1 DE 3220232 A1 DE3220232 A1 DE 3220232A1 DE 19823220232 DE19823220232 DE 19823220232 DE 3220232 A DE3220232 A DE 3220232A DE 3220232 A1 DE3220232 A1 DE 3220232A1
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
platelets
platelet
stabilizing
blood
acid
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
DE19823220232
Other languages
English (en)
Other versions
DE3220232C2 (de
Inventor
James H. Ft. Lauderdale Fla. Carter II
Harold R. Miami Fla. Crews
Ted Miami Fla. Sena
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Coulter Electronics Inc
Original Assignee
Coulter Electronics Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Coulter Electronics Inc filed Critical Coulter Electronics Inc
Publication of DE3220232A1 publication Critical patent/DE3220232A1/de
Application granted granted Critical
Publication of DE3220232C2 publication Critical patent/DE3220232C2/de
Granted legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/96—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood or serum control standard
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
    • A01N1/10—Preservation of living parts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N1/00—Preservation of bodies of humans or animals, or parts thereof
    • A01N1/10—Preservation of living parts
    • A01N1/12—Chemical aspects of preservation
    • A01N1/122—Preservation or perfusion media
    • A01N1/126—Physiologically active agents, e.g. antioxidants or nutrients
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2496/00—Reference solutions for assays of biological material
    • G01N2496/05—Reference solutions for assays of biological material containing blood cells or plasma
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
    • Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10T436/10—Composition for standardization, calibration, simulation, stabilization, preparation or preservation; processes of use in preparation for chemical testing
    • Y10T436/101666—Particle count or volume standard or control [e.g., platelet count standards, etc.]
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
    • Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10T436/10—Composition for standardization, calibration, simulation, stabilization, preparation or preservation; processes of use in preparation for chemical testing
    • Y10T436/107497—Preparation composition [e.g., lysing or precipitation, etc.]
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
    • Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10T436/10—Composition for standardization, calibration, simulation, stabilization, preparation or preservation; processes of use in preparation for chemical testing
    • Y10T436/108331—Preservative, buffer, anticoagulant or diluent

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Description

Patentanwälte . .*-.."". -"-;"// ".-"" : Dipl.-Ing. BEder V W : : : " :..:.:!.
Dipl.-Ing. K. Schieschke
8000 München 40, Etisabethstr. 34 _. 4 _
Die Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren zur Stabilisierung von menschlichen und tierischen Blutplättchen ohne die Verwendung von Aldehyden oder anderen Fixiermitteln zur Bestimmung mehrfacher Blutplättchenparameter in Vergleichskontrollen unter Verwendung einer elektronischen Vorrichtung sowie auf Verdünnungsmittel dafür. Der technologische Fortschritt in jüngster Zeit hat die Entwicklung der Geräte zur Zählung von biologischen Zellbestandteilen für klinische Diagnosezwecke beschleunigt, was einen Wunsch nach Verbesserung von Qualitätskontrollprodukten hervorgerufen hat.
Um. Blutplättchenvergleichskontrollen herzustellen, werden die Blutplättchen aus dem Blut durch Zentrifugieren entfernt, mit gepufferter Salzlösung gewaschen und dann mit Mitteln "fixiert" wie Glutaraldehyd, Formaldehyd, Brenztraubensäure oder dergleichen. Die mit Aldehyd umgesetzten Blutplättchen werden dann in einem Puffer suspendiert.
Die suspendierten Blutplättchen sind nicht stabil und bilden unter zahlreichen Umständen Aggregate. Darüber hinaus ändern die mit Aldehyd umgesetzten Blutplättchen allmählich ihre Form, wobei sie mit ztmehmendem Alter zusammenschrumpfen.
Die aldehydumgesetzten Blutplättchen sind dazu vorgesehen, in Teilchenzellgeräten verwendet zu werden, die durch die Teilchengröße beeinträchtigt werden. Die Vergleichskontrolle sollte daher im Idealfall Blutplättchen enthalten, ^O die der Größe nach den Blutplättchenteilchen im normalen menschlichen Blut möglichst ähnlich sind. Es ist ersichtlich, daß die Aggregation die Zählung und die Größe der Teilchen in den Vergleichskontrollen beeinträchtigt. Es ist auch ersichtlich, daß jede vorkommende Schrumpfung oder Schwellung den Wert der Kontrolle beeinträchtigt, da die Blutplättchen dann nicht mehr die gleiche Größe aufweisen wie die Blutplättchen im frischen menschlichen Blut.
Es werden gegenwärtig mehrere menschliche Blutplättchenyergleichskontrollen auf den Markt gebracht. Es ist jedoch eine Verbesserung in bezug auf eine langanhaltende Stabilität bei der Messung des mittleren Blutplättchenvolumens und der Größenverteilungsbreite erforderlich.
Ein derartiges Gerät ist das Coulter Counter Model S-Plus Hämatologiesystem, das zählt und die Zählung sowie die Volumenverteilung menschlicher Blutplättchen in Gesamtblutproben überprüft. Ähnliche Geräte dieses Typs werden von anderen Unternehmen zu diesem Zweck hergestellt. Die Einzelheiten der elektronischen Eichung werden der Bedienungsperson derartiger Geräte genau beschrieben. Eine menschliche Blutplättchenvergleichskontrolle muß sämtliche Kriterien erfüllen, die mit menschlichen Patienten-Proben gemessen werden. Die Vergleichskontrolle muß einer normalen frischen Gesamtblutprobe möglichst nahe kommen. Sie muß auch den genau eingestellten Grenzwerten in bezug auf die Zählweise, genau ausgeglichenen Öffnungen, dem Strom, den Verstärkungseinstellungen und der Empfindlichkeit des Systems hinsichtlich sämtlichen funktioneilen Gesichtspunkten entsprechen.
Die mittlere Blutplättchenvolumenverteilungs-Analyse hat in jüngerer Zeit zunehmend Beachtung gefunden als geeignete Messung für die klinische Anwendung. Die Großenverteilungsbreite menschlicher Blutplättchen kann jetzt aufgrund spezifisch gemessener Parameter errechnet werden. Jed.em der gemessenen Parameter trägt zu einer Verbesserung bei der Prüfung der loaarithmischen normalen Verteilung von menschlichem Blutplättchen bei. Auch führen Änderungen und Verschiebungen bei dem Verfahren zu falschen Zählungen.
Der Grund für diese Zählabweichungen ist im allgemeinen die Aggregation. Die Aggregation der Blutplättchen führt zu Doubletten, die bei dem weißen Blutkörperchenverfahren gezählt werden, was zu unzuverlässigen Qualitätskontrollmessungen führt. In dem Ausmaß, in dem die Blutplättchen
τ- 6 -
j einer Aggregation unterliegen, erscheinen die Blutplättchen Aggregate der automatischen Vorrichtung als weiße Blutkörperchen und werden als solche gezählt. Da die Zahl der vorhandenen Blutplättchen. etwa 30 mal größer ist als die Zahl der im frischen Blut vorhandenen weißen Blutkörperchen, kann, selbst wenn nur ein kleiner Anteil der Blutplättchen Aggregate bildet, dies zu unzuverlässigen Ergebnissen bezüglich der Zählung der weißen Blutkörperchen führen, insbesondere nach Behandlung mit IQ den üblichen Fixiermitteln.
Die Haftfähigkeit der Blutplättchen führt gleichfalls zu falschen Zählungen. Die Adhäsion der Blutplättchen der Blutplättchen an "fremde" Oberflächen ist mit einer Viel-
l.h zahl von Methoden gemessen worden. Im Prinzip sind alle diese Tests die gleichen. Die Verringerung der Blutplattchenzahl, die auftritt, wenn Blut mit einer "fremden" Oberfläche für einen bestimmten Zeitraum in Berührung kommen kann, wird bestimmt. Diese Verringerung ist zum Teil ein Hinweis auf die Zahl der Blutplättchen, die an der fremden Oberfläche haften, wobei dieser Wert, der als Prozentsatz der ursprünglichen Blutplättchenzahl ausgedrückt wird, als Haftfähigkeit bezeichnet wird. Es ist jedoch bekannt, daß der Blutplättchenverlust zum Teil auch auf die Blutplättchenaggregation zurückzuführen ist. Die Haftfähigkeit der Blutplättchen, obgleich entweder von Kalzium- oder Magnesiumionen abhängig, ist nicht so selektiv in dieser Beziehung als die Haftfähigkeit der Polymorphonukleozyten.
Die Blutplättchen nehmen an der primären Hämostase teil, in dem sie Aggregate an verletzten Blutgefäßstellen bilden. Das Mittel, das letztlich für die Blutplättchenaggregation verantwortlich ist, dürfte Adenosindiphosphat (ADP) sein, das von verletztem Gewebe oder Erythozyten abgegeben werden kann oder von den Blutplättchen selbst abgegeben wird u. a. durch Kollagen, Thrombin und Epenephrin. Bei einigen Patienten mit Blutungsstörungen und bei
normalen Patienten nach der Einnahme von Arzneimitteln kann die Blutplättchenaggreaation durch eine oder mehrere dieser Mittel beeinträchtigt werden. Diese Beeinträchtigung der Blutplättchenaggregation kann zu einer verlängerten Blutungsdauer führen, die bei diesen Patienten oft auftritt .
Eine weitere Abweichung der Blutplättchenzählung wird durch das schlechte Stabilitätsverhalten bis zu dem erwarteten Verfallsdatum der Kontrolle hervorgerufen. Versuche, die menschlichen Blutplättchen zu stabilisieren, haben sich als außerordentlich schwierig erwiesen. Ein Hauptproblem besteht in der Zersetzung der Blutplättchenmembran. Es . sind Fixiermittel verwendet worden, um die Zersetzung zu
l·1' steuern. Wenn die Blutplättchenmembranen sich zersetzen, bilden sie Zerfallsprodukte, wodurch falsche Zählungen hervorgerufen werden.. Den neuen Methoden aufgrund einer verbesserten Computertechnologie zur Kurvenanpassung von Ausgangsdaten haften diese Probleme an.
In der-US-PS 4 198 206 wird ein Verfahren zur Herstellung von Kontrollen aus Blutplättchen beschrieben, die keine Aggregate bilden und die die gleiche Größe wie Blutplättchen im menschlichen Blut aufweisen sowie ihre Größe mindestens sechs Monate beibehalten. Diese Kontrolle ist eine Suspension aus mit Aldehyd umgesetzten Blutplättchen, die mit einer Lösung gewaschen worden sind aus
"!)· einer Aminosäure, nämlich Glycin oder Alanin;
ow 2) Glycol, Glyzerin oder Methanol;
3) Natriumchlorid und Natriumphosphat; und
4) ein festes Polyäthylenglycol (Molekulargewicht 4000 bis 20000).
Der vorgeschlagene Mechanismus dieser Reaktion zeigt, daß die Aminogruppe der Aminosäure mit der Aldehydgruppe reagiert, so daß eine weitere Reaktion, die eine Ver~ netzxing einschließt, die zu ". einer Verhärtung und einer
- 8 Schrumpfung der Blutplättchen führt, nicht auftreten kann.
Die Erfiridung bezieht sich auf ein Verfahren zur Aufarbeitung von menschlichen oder tierischen Blutplättchen und zur Stabilisierung von Blutplättchen ohne Verwendung von Fixiermitteln, wie Glutaraldehyd, das dazu beiträgt, die vorstehend erwähnten Abweichungen zu verhindern. Es werden überraschende und überlegene Ergebnisse durch die Verwendung von Jodacetamid erhalten, das die Formel JCH-CONHp aufweist, sowie von ADA, das die Formel .H2NCOCh2N(CH2COOH)2 besitzt, ohne Verwendung aldehydbehandelter Blutplättchen. Die Stabilität der Zellen während eines langen Zeitraums wird erhöht, ohne daß die Zellgrößenverteilung verändert wird.
Die Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren zur Stabilisierung von menschlichen und tierischem Blutplättchen ohne die Verwendung von Aldehyden oder anderen Fixiermitteln zur Bestimmung mehrfacher Blutplättchenparameter in Ver-
*i0 gleichskontrollen unter Verwendung einer elektronischen Vorrichtung, Insbesondere wird durch die .Erfindung eine neue stabilisierende Zusammensetzung zur Suspendierung von Blutplättchen zur Verfügung gestellt, die als Kontrollreagenz eingesetzt werden kann, das in der Lage ist die gewünschten Blutplättchenparameter der Patientenblutprobe zu überwachen. Diese Parameter umfassen die Blutplättchenzählung, die Größenverteilungsbreite, das mittlere Blutplättchenvolumen sowie das Signal/Untergrund-Verhältnis
(Zerfallsprodukte), insbesondere in Einzelpräparationen. 30
Die Stabilisierung der Blutplättchen wird dann durchgeführt, indem zu einer wässrigen Elektrolytlösung davon eine geeignete Menge einer Kombination von (1.) Jodacetamid und (2) Iminodiessigsäure sowie dessen Alkalimetall- und ^° Alkalipuffersalz gegeben wird, zusammen mit einem verträglichen bakteriostatischon Mittel, während die Lösung in einem vorbestimmten pH- und Osmolalitätsbereich gehalten wird.
— ΟΙ Die Iminodiessigsäure ist vorzugsweise N-- (2-Acetamido)-iminodiessigsäure (ADA) und die bakteriostatische Verbindung gehört vorzugsweise zur Penicillingruppe und ist insbesondere Natriumpenicillin, das eine weitere stabilisierende Wirkung auf die Blutplättchen haben kann.
Ethylendiamintetraessigsäure (EDTA), dessen Natrium-oder Kaliumsalz oder Hydroxyäthyläthylendiamintriessigsäure können in der Formulierung enthalten sein.
Bei der Erfindung wird zur Stabilisierung von Blutplättchen
eine Kombination von Jodacetamid und eine 'Iminoessigsaure oder dessen Salz zusammen mit einem verträglichen bakteriostatischen Mittel verwendet, und zwar in einer wässrigen Ib elektrolytischen Lösung, die auf einem vorbestimmten pH- und Osmolalitätsbereich gehalten wird.
Durch Jodacetamid wird eine Herabsetzung oder Beseitigung der Haftfähigkeit der Blutplättchen und der polymorphonuklearen Zellen bewirkt. Ohne Einschränkung auf irgendeine theoretische Wirkungsweise ist es bekannt, daß Blutplättchen und polymorphonukleare Zellen aktive glycolisierende Systeme aufweisen, wobei die Daten übereinstimmen mit der Hypothese, daß Jodacetanid auf die Haftfähigkeit durch Blockierung der Glycolyse einwirkt. Die Daten stimmen jedoch auch mit einer Hypothese überein, die die Haftfähigkeit einem schwefel— hydridabhängigen Mechanismus mit einer ähnlichen Empfindlichkeit gegenüber Jodacetamid zuschreibt.
Die Haftfähigkeit der Blutplättchen scheint gleichfalls von den zweiwertigen Kationen abhängig zu sein, obgleich die für die Blutplättchen erforderliche Konzentration viel niedriger zu sein scheint als diejenige, die für die polymorphonuklearen Zellen erforderlich ist. Sowohl Magnesium- wie Kalziumionen sind für die Haftfähigkeit erforderlich. Kalziumionen allein sind nicht in der Lage, die Haftfähigkeit der polymorphonuklearen Zellen aus Blut wieder herzustellen, das mit einem Chelatharz behandelt
- το -
worden ist, um die zweiwertigen Kationen zu entfernen.
Die kombinierte Verwendung von N-*(2-Acetamido) iminodi-■ essigsäure (ADA) und Jodacetamid als spezifische Chelatreagenzien hat auch gezeigt, daß menschliche Blutplättchen für eine ausgedehnte Zeitspanne ohne Aggregation oder Verlust ihrer Unversehrtheit stabilisiert werden können. Jodacetamid allein gleicht diese Faktoren nicht aus.: Auch sind die Puffereigenschaften für die Suspendierung in blutplättchenreichem Plasma nicht ausreichend.
Die Kombination von Iminodiessigsäuresalzen, insbesondere ADA, mit Jodacetamid erhöht die Stabilität, beseitigt die Aggregation und erhöht die Wirkung der antikoagülierenden Eigenschaften, des ADA. Die Puffereigenschaften des ADA sind für menschliche Blutplättchen ideal. Etwa 0,5 Gramm bis etwa 2,0 Gramm Jodacetamid werden pro Liter Stabilisierungslösung zugesetzt.
Geeignete Iminodiessigsäureverbindungen sind:
N-(2-Aoetamido)iminodiessigsäure (ADA), Natrium ADA, Kalium ADA, Lithium ADA, Tris-ADA oder Imidazol ADA. -. ·. Etwa 0,5 bis. 2,0 Gramm ADA oder das Ä'quivalentgewicht von dessen Salz wird pro Liter wässrige Blutplättchensu's— pension, beispielsweise einem blutplättchenreichen Plasma, zugesetzt.
Das verträgliche bakteriostatische Mittel umfaßt Natriumpenicillin G, Kaliumpenicillin G, Procainpenicillin G, ^ Kaliumpenicillin V, Ampicillin und Carbenicillin.
Bevorzugte Formulierung
1.. Jodacetamid 1,0 g
2. N-(2-Acetamido)iminodiessigsäure (ADA) 1,0 g
3. Natriumchlorid 9,4166 g
4. Natriumpenicillin 0,155 q' aufgefüllt auf einen Liter mit destilliertem Wasser
Osmolalität = 31.0 ; pH "
eingestellt auf 7,0 _+ 0,1 mit NaOH.
Bei der vorstehenden Formulierung ist es wünschenswert, Äthylendiamintetraessigsäure (EDTA) oder dessen Salze als möglichen Bestandteil zuzusetzen, um als Chelatreagenz für zweiwertige Ionen zu wirken. Etwa 0,5 Grammbis etwa 2,0 Gramm EDTA oder das Äquivalentgewicht dessen Salzes werden pro Liter wässrige Blutplättchensuspension zugesetzt.
Herstellungsverfahren
1. Etwa 500 ml destilliertes Wasser werden in einen
1.-Liter-Kolben gegeben..
:::, - .2. 1 Gramm ADA wird zugesetzt und aufgelöst.
3. Wenn die Formulierung Dinatrium EDTA umfaßt,wird 1. Gramm zugegeben und aufgelöst.
4. 1. Gramm Jodacetamid wird zugegeben und aufgelöst.
5. 9,4166 Gramm Natriumchlorid werden zugegeben und aufgelöst.
6. 0,155 Gramm Natriumpehicillin werden zugegeben und aufgelöst.
7. Mit destilliertem Wasser.wird auf einen Liter aufgefüllt.
8. Mit Natriumhydroxid wird der pH auf 7,0 +_ 0,5 eingestellt, und die Osmolalität mit Natriumchlorid auf 330 +_ 30.
9. Durch einen 0,22 Mikron Filter wird in sterile Beutel filtriert.
1.0. Es erfolgt eine Aufbewahrung bei Raumtemperatur bis zu sechs Monaten.
In der US-PS 4 116 635 werden die antikoagulierenden Eigenschaften sowohl von EDTA wie von ADA unter Verwendung von Gesamtblut beschrieben, wobei die in Tabelle I dieser Patentschrift angegebenen Ergebnisse genannt werden. Log K1, die bedingte Stabilitätskonstante bei pH 7,5 betrug 7,9 für EDTA und lediglich 4,0 für ADA. Nach einem
Verfahren zur Prüfung einer Blutprobe bezüglich der Koagulation und anderer Faktoren gemäß dem Anspruch 1. dieser Patentschrift wies das gewählte Antikoagulanz einen Log K1 von 3,4 bis etwa 4,2 auf, schloß also ADA ein, jedoch EDTA aus.
Es ist überraschend, daß erfindungsgemäß die besseren Ergebnisse erhalten werden, wenn sowohl ADA wie EDTA in etwa gleichen Mengen in der Formulierung verwendet werden. IQ Die Menge des EDTA, das der wässrigen Formulierung der Blutplättchen zugegeben wird, beträgt etwa 0,5 Gramm bis etwa 2,0 Gramm je Liter..
Die nachstehenden Beispiele veranschaulichen das Verfahren zur Stabilisierung der Blutplättchen ohne die Verwendung von Fixiermitteln zur Bestimmung mehrfacher Blutplättchenparameter mit einer elektronischen Vorrichtung.
Stabilität eines blutplättchenreichen Plasmas ohne Behandlung mit einer stabilisierenden Lösung
Zeit S/N MPV
6 ,6u
nach 4 Tagen 5,00 6,6ui:
6,1u 6,Ou ungeeignet
Die vorstehenden Ergebnisse wurden erhalten, wenn eine stabilisierende Lösung bei 2 bis 80C aufbewahrt und eine Bestimmung mit einem Standard Coulter Counter Model S-Plus Gerät erfolgte.
Das Signal/Untergrund-V.erhältnis nahm mit der Zeit ab, d. h. der Untergrund erhöhte sich gegenüber dem Signal. Alle Parameter zeigten Veränderungen mit der Zeit. Nach 7 Tagen zeigte sich ein vollständiger Zellzerfall, der zu einer
zu Beginn 5,55
nach 4 Tagen 5,00
nach 4 Tagen 2,08
nach 6 Tagen 1,82
nach 7 Tagen 1., 43
■ - 13 -
ungeeigneten Form der Verteilungsanalysen-Aufzeichnung führte. Die Blutplättchenzählung, das mittlere Blutplättchenvolumen (MPV) und die Größenverteilung konnten mit diesem Gerät nicht bestimmt werden.
Repräsentative Proben von glutaraldehydfixierten Blutplättchen in einer phosphatgepufferten salzhaltigen Lösung zeigten ebenfalls eine Abnahme des mittleren Blutplättchenvolumens nach einer bestimmten Zeit. Die gegenwärtig hergestellten klinischen hämatologischen Geräte können eine Verschiebung nach links (Abnahme) von der mittleren Blutpiättchengrößenverteilung nicht aufnehmen. Diese Verschiebung führt zu einer ungeeigneten Bedingung.
Eine zu große Menge an Bruchstücken führt zu ungeeigneten Größenverteilungskurven.
Repräsentative Proben nach der Behandlung von Blutplättchen mit einer stabilisierenden Lösung mit der bevorzugten· Formulierung
Mittleres Mittlere Tag Nr. S/N Zählung Blutplättchen Vol. Größenverteilung
17,1 17,1
17,2 17,1
Die vorstehenden Ergebnisse wurden erhalten, wenn bei 2 bis 80C aufbewahrt und mit einem Standard Coulter Counter Model S-Plus Gerät bestimmt wurde. Diese Ergebnisse zeigen, daß eine signifikante Änderung bei irgendeinem Parameter nach 1.80 Tagen auftritt. Es liegt eine hervorragende Stabilität in bezug auf sämtliche kritischen Parameter vor, die für Qualitätskontrollanwendungen, die mit elektronischen Vorrichtungen gemessen werden, notwendig sind.
30 4,54 206 7,8
60 4,0 202 7,9
90 4,0 193 7,6
120 4,0 206 7,7
• 180 4,0 193 7,6
Die Signal/Untergrund-Verhältnisse müssen maximiert werden, damit die Bedienungsperson sicher ist, daß das Instrument sich entsprechend den Daten des Herstellers verhält. Ein zu starker Untergrund ist ein stets vorhandenes Problem, aufgrund der Blutplättchenzerfallsprodukte und des Zellzerfalls während der Lebensdauer dieser Produkte. Bei diesen Proben zeigte das Signal/Untergrund-Verhältnis keine Abnahme, wodurch das Gerät nicht mehr in der Lage wäre, die Parameter bei Qualitätskontrollmessungen exakt zu messen. Verminderte Signal/Untergrund-Verhältnisse können bei elektronischen Teilchen Größenbestimmungsgeräten nicht akzeptiert werden, insbesondere bei niedrigen Grenzwerten, bei denen die Blutplättchen gezählt und ihre Teilchenverteilung bestimmt wird.
Statistische Daten dokumentieren die Verwendung der vorstehend angegebenen stabilisierten menschlichen Blutplättchen in Gesamtblutkontrollpräparaten nach 100 Tagen
in mehreren klinischen hämatologischen Laboratorien. •AU
Durch die Vorbehandlung menschlicher Blutplättchen mit der erfindungsgemäßen stabilisierenden Lösung können die Zellen erneut in menschlichen oder tierischen roten Blutkörperchenpräparaten als Kontrolle zur überwachung elektronischer Geräte suspendiert werden. Auch ist es möglich, menschliche Blutplättchen für invitrotherapeutische Anwendungen zu stabilisieren.
Zur Vorbehandlung der Blutplättchen werden etwa 50 bis
100 ml des stabilisierenden Verdünnungsmittels direkt zu einer 200 +5Og Menge eines blutplättchenreichen Plasmas (PRP) gegeben und gut vermischt. Das stabilisierte PRP kann dann bei Raumtemperatur 7 Tage stehen gelassen werden vor dem Zentrifugieren zur Erzeugung eines Blut— plättchenkonzentrats. Statt dessen kann das PRP durch die Zugabe des stabilisierenden Verdünnungsmittels bei 4 bis 60C bis zu 3 Monaten aufbewahrt werden, bevor eine Weiterverarbeitung durch Zentrifugieren erfolgt, um das
- 15 Blutplättchenkonzentrat zu erhalten.
PRP wird bei etwa 3800 U/min 5 Minuten lang (gekühlte Zentrifuge) zentrifugiert und der überstand wird abgedrückt und verworfen.. Eine phosphatgepufferte Salzhaltige Lösung mit einem pH von 7,0 bis 7,2 und 320 mOs/kg wird unter Rühren zugegeben und der Waschschritt wird ein zweites Mal wiederholt. Die Blutplättchen werden nach dem zweiten Waschgang konzentriert und zu einem einzigen hochkonzentriertem Vorrat zusammengefaßt.
Das Blutplättchenkonzentrat wird dann erneut in dem Verdünnungsmittel in der gewünschten Konzentration suspendiert, wobei dieses Präparat zu den stabilisierten Erythrozyten zugegeben wird, um als eine Gesamtblutkontrolle eingesetzt zu werden. Das Endpräparat wird bei 2 bis 80C bis zu 6 Monaten aufbewahrt.
. Dieses Verdünnungsmittel stabilisiert ein blutplättchenreiches Plasma mit Erfolg, das unter Verwendung von herkömmlich hergestellten Antikoagulanzien erhalten worden ist, wie CPD (Citrat-phosphat-dextrose), ACD (Säurecitratdextrose) und EDTA (Äthyl!endiamintetraessigsäure).
Die stabilisierten Blutplättchen können in einzelnen Blutplättchenkontrollen Verwendung finden, desgleichen in Gesamtblutvergleichskontrollen, um gute Qualitätskontrollverfahren sicherzustellen und mehrfache Blutplättchenparameter zu überwachen, einschließlich (1) der Zählung,
(2) der mittleren Teilchenverteilung, (3) dem mittleren Blutplättchenvolumen und (4) dem Signal/Untergrund-Verhältnis (Zerfallsprodukte).
Es ist bekannt, daß stabilisierte Blutzellenpräparate, ·.-?! ~ die sich zur überprüfung der Genauigkeit automatischer Zählgeräte für Blutbestandteile eignen, in einem gewissen Ausmaß akzeptierbaren Veränderungen unterliegen. Derartige Präparate werden kurz auf Seite 14 des Buchs "Hematology"
,. 1.6 -
von Williams, Beutler, Erslev und Rundles, McGraw-Hill, Inc. (1.972) erörtert.
In der Hämatologie wird ein Unterschied zwischen der Bezeichnung""Eichung" und "Vergleichskontrolle" gemacht. Eichungen sind Blutzellenpräparate, die verwendet werden, um das automatische Gerät im Hinblick auf bestimmte wesentliche Zahlen einzustellen wobei sie lediglich einmal verwendet werden. Vergleichskontrollen sind Blutzellenpräparate, die von Zeit zu Zeit verwendet werden, um die kontinuierliche Genauigkeit eines automatischen Geräts zu überprüfen, das vorher "geeicht" worden ist, mit dem. Blutzelleneichpräparat.
"j5 Ein Vorteil der Erfindung besteht darin, daß Blutplättchen, die nach dem hier beschriebenen Verfahren ohne die Verwendung von Aldehyden als Fixiermitteln stabilisiert worden sind, um. Vergleichskontrollen zu erhalten, die 60 Tage und mehr stabil sind, dann einer zweiten Stabilisierungsbehandlung nach anderen Verfahren unterworfen werden können, einschließlich Verfahren, bei denen Aldehyde und/oder oberflächenaktive Mittel eingesetzt werden, um Blutplättchenpräparate zu erhalten, die eine verbesserte Stabilität über einen langen Zeitraum aufweisen, insbesondere für bestimmte Zwecke. Solche Präparate sind insbesondere für Eichzusammensetzungen geeignet.
Diß Blutplättchen, die nach einer bevorzugten erfindungsgemäßen Formulierung stabilisiert sind, können beispielsweise dann mit einem Fixiermittel-Stabilisier-Medium behandelt werden, das folgende Formulierung aufweist:
- 17 - 0,1.96 g
NaH2PO4-H2O 9,980 g
Na2HPO4-7H2O 0,098 g
NaN3 7,9 g
NaCl 8,4 g
Glutaraldehyd, 49 % 0,5 g
Tergitol 1.5-S-1.2 1 L
Wasser (gefüllt)
Der pH wird mit Phosphat auf 7,3 bis 7,4 eingestellt, und die Osmolalität auf 290 mOs/kg mit 10 NaCl.
Tergitol 15-S—12 ist ein Gemisch aus Äthoxylaten isomerer linearer Alkohole, die in der US-PS 3 912 450 (1975) und der US-PS 3 968 248 (1976) beschrieben werden. Das l_5 Gemisch weist folgende Formel auf:
CH3-(CH2Jn-CH3
0-(CH2-CH2-O)x-H 2Ü
worin die Polyoxyäthylenkette zufallsverteilt an die lineare aliphatische Kette gebunden und η = 9 bis 13 und χ = 9 bis 13 ist. o,- Patentanwälte

Claims (11)

  1. Patentanwälte
    Dipl.-Ing. E. Eder
    Dipl.-Ing. K. Schieschke
    München 40, Elisabsthstr. 34
    COULTER ELECTRONICS, INC Hialeah / Florida U.S.A.
    Verfahren zur Stabilisierung von Blutplättchen bei der Bestimmung mehrfacher Blutplättchenparameter in Vergleichskontrollen und Eichzusammensetzungen; Verdünnungsmittel dafür sowie kombinierte Stabilisierunasverfähren
    Pate nt ansprüche
    Verfahren zur Stabilisierung von Blutplättchen, dadurch gekennzeichnet, daß zu den Blutplättchen in einer Suspensionsflüssigkeit eine stabilisierende Lösung zugegeben wird, die eine wässrige Lösung von Jodacetamid und einer Iminodiessigsäure sowie den Alkalimetall- und alkalischen Puffersalzen dieser Säure ist,zusammen mit einem verträglichen bakteriostatischen Mittel, wobei das'gebildete Medium in einem vorgegebenen pH- und Osmolalitätsbereich unter Verwendung eines Alkalimetallhydroxids und eines Alkalimetallchlorids gehalten wird.
  2. 2. Verfahren nach Anspruch 1., dadurch gekennzeichnet, daß die Blutplättchen eine geeignete Zeit bei einer geeigneten Temperatur stehen gelassen werden, um wenigstens eine teilweise Stabilisierung zu erreichen, die Blutplättchen von der stabilisierenden Lösung getrennt werden und dazu eine geeignete Menge Glutaraldehyd und eines nichtionischen
    oberflächenaktiven Mittels gegeben wird, das ein Gemisch aus Äthoxylaten isomerer linearer Alkohole mit der Formel
    0-(CH^CH9O)-H
    ist, worin die Polyoxyäthylenkette zufallsverteilt an die lineare aliphatische Kette gebunden und η = 9 bis χ = 9 bis 1.3 ist, wobei die Zusammensetzung auf einen vorbestimmten pH-*· und. Osmolalitätsbereich eingestellt wird..
  3. 3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß .Ethylendiamintetraessigsäure sowie deren Natrium oder Kaliumsalze als zusätzlicher Bestandteil der stabilisierenden Losung vorliegen.
  4. 4. Verfahren nach Anspruch 1, 2 oder 3, dadurch gekennzeichnet, daß die Iminodiessigsäure N-(2-Acetamido) iminodiessigsäure ist.
  5. 5. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, daß die Iminodiessigsäure in einer Konzentration von 0,5 g bis 2,0 g pro Liter vorliegt.
  6. 6. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 5, dadurch
    gekennzeichnet, daß das bakteriostatische Mittel der
    Penicillingruppe angehört, einschließlich Pencillin G, Kali=\ampenicillin G, Procainpenicillin G, Kaliümpenicillin V, Ampicillin und Carbenicillin.
  7. 7. Verfahren nach einem der Ansprüche 1. bis 6, dadurch
    gekennzeichnet, daß die stabilisierende Lösung z.u einem blutplättchenreichen Plasma gegeben wird.
  8. 8. Verfahren nach einem der Ansprüche 1. bis 7, dadurch gekennzeichnet, daß das Jodacetamid in einer Konzentration von 0,5 g bis 2,0 g pro Liter vorliegt.
  9. 9. Hämatologisches Vergleichskontrollmedium zur Be-^ Stimmung mehrfacher Blutplättchenparameter mit einer elektronischen Vorrichtung, gekennzeichnet durch eine Suspension von Blutplättchen, die nach dem Verfahren nach einem der Ansprüche 1. bis 8 stabilisiert sind.
  10. 1.0. Hämatologisches Vergleichskontrollmedium zur Mehrfachanalyse, gekennzeichnet durch eine Suspension roter Blutkörperchen und Blutplättchen, die nach dem Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 8 stabilisiert sind, wobei das Vergleichsmedium zur überprüfung der Genauigkeit der herkömmlichen roten Blutkörperchen- und Blutplättchenparameter geeignet ist.
  11. 11.. Verdünnungsmittel zur Verwendung in einer elektronischen Vorrichtung zur Stabilisierung von Blutplättchen für die Bestimmung von mehrfachen Blutplättchenparametern, gekennzeichnet durch eine wässrige Lösung von Jodacetamid und einer Iminodiessigsäure sowie den Alkalimetall- und alkalischen Puffersalzen dieser Säure zusammen mit verträglichen bakteriostatischen Mitteln, wobei das Verdünnungsmittel eine wässrige elektrolytische Lösung ist, die in einem vorbestimmten pH^· und Osmolalitätsbereich gehalten wird, um eine langandauernde Blutplättchenstabilität und Abwesenheit von Bruchstücken, die zu falschen Ergebnissen führen, zu gewährleisten.
    Patentanwälte
    Dipl.-lnc/fe. Eder
    Dipl.- Ing. Jfflfechieschk©
    BQOO Münche^sf&PsabBllistr. 3*
DE19823220232 1981-05-29 1982-05-28 Verfahren zur stabilisierung von blutplaettchen bei der bestimmung mehrfacher blutplaettchenparameter in vergleichskontrollen und eichzusammensetzungen Granted DE3220232A1 (de)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US06/268,050 US4405719A (en) 1981-05-29 1981-05-29 Method of stabilizing platelets for determining multiple platelet parameters in reference control and calibrator compositions; diluents therefor; and combination stabilization procedures

Publications (2)

Publication Number Publication Date
DE3220232A1 true DE3220232A1 (de) 1982-12-23
DE3220232C2 DE3220232C2 (de) 1987-10-22

Family

ID=23021258

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE19823220232 Granted DE3220232A1 (de) 1981-05-29 1982-05-28 Verfahren zur stabilisierung von blutplaettchen bei der bestimmung mehrfacher blutplaettchenparameter in vergleichskontrollen und eichzusammensetzungen

Country Status (8)

Country Link
US (1) US4405719A (de)
JP (1) JPS57203957A (de)
CA (1) CA1195931A (de)
DE (1) DE3220232A1 (de)
ES (1) ES8400874A1 (de)
FR (1) FR2506945A1 (de)
GB (1) GB2099281B (de)
HK (1) HK10686A (de)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3938907A1 (de) * 1989-11-24 1991-05-29 Behringwerke Ag Mittel zum lagern und suspendieren von zellen, insbesondere erythrozyten
WO1995001796A1 (en) * 1993-07-05 1995-01-19 Northern General Hospital N.H.S. Trust Preparation and stabilisation of cells
WO1995027203A1 (en) * 1994-04-05 1995-10-12 Northern General Hospital N.H.S. Trust Preparation and stabilisation of cell suspensions
EP0721104A2 (de) * 1993-07-05 1996-07-10 Northern General Hospital N.H.S. Trust Herstellung und Stabilisierung von Zellen

Families Citing this family (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA1216518A (en) * 1982-11-01 1987-01-13 Gail A. Rock Plasma-free medium for platelet storage
US4471051A (en) * 1983-06-13 1984-09-11 New England Medical Center Hospitals, Inc. Stabilization of neutrophils and platelets
US4828976A (en) * 1983-12-29 1989-05-09 Thomas Jefferson University Glucose free media for storing blood platelets
US4704364A (en) * 1984-05-18 1987-11-03 Coulter Electronics, Inc. Hematology control compositions for three populations of leukocytes; and methods for their preparation and use in whole blood control systems
US4847204A (en) * 1984-05-24 1989-07-11 Southeast Vetlab, Inc. Calibrator composition and method of producing and using same for veterinary applications
US4711852A (en) * 1984-11-05 1987-12-08 Akzo N.V. Control for blood gas analyzers and hemoglobin analysis
US4858154A (en) * 1986-04-07 1989-08-15 Coulter Electronics, Inc. Interlaboratory quality assurance program
US4788139A (en) * 1987-08-06 1988-11-29 Streck Laboratories, Inc. Platelet aggregation reagent, reagent container and method of determining platelet aggregation in EDTA-anticoagulated blood
US5008202A (en) * 1988-11-29 1991-04-16 Sequoia Turner Corporation Blood diluent for red blood cell analysis
US5256571A (en) * 1991-05-01 1993-10-26 Cytyc Corporation Cell preservative solution
US6509192B1 (en) * 1992-02-24 2003-01-21 Coulter International Corp. Quality control method
US6362003B1 (en) 1992-02-24 2002-03-26 Coulter Corporation Hematological reference control composition containing leukocyte analogs, methods of making, and uses thereof
DE69532236D1 (de) 1994-12-16 2004-01-15 Baxter Int Antikoagulierende Zusammensetzungen für Blutplättchen
DE19634313A1 (de) * 1996-08-24 1998-02-26 Behringwerke Ag Methode zur Stabilisierung von Plättchen
US7198953B2 (en) * 2003-10-12 2007-04-03 Beckman Coulter, Inc. Method of using a reference control composition for measurement of nucleated red blood cells
WO2005100979A1 (en) * 2004-04-07 2005-10-27 Beckman Coulter, Inc. Reference control containing a nucleated red blood cell component
US7109036B2 (en) * 2004-05-13 2006-09-19 Beckman Coulter, Inc. Hematology reference control containing an immature granulocyte component
US7531357B2 (en) * 2005-04-04 2009-05-12 Bio-Rad Laboratories, Inc. Preparation of platelet analogs
US7354767B2 (en) * 2006-03-16 2008-04-08 Beckman Coulter, Inc. Reference control composition containing a nucleated red blood cell component made of non-nucleated blood cells
WO2008061073A2 (en) 2006-11-14 2008-05-22 Beckman Coulter, Inc. Hematology linearity control composition system and method of use
US8835104B2 (en) * 2007-12-20 2014-09-16 Fenwal, Inc. Medium and methods for the storage of platelets
JP2014518547A (ja) 2011-04-07 2014-07-31 フェンウォール、インコーポレイテッド 削減された残存血漿容積を有する血小板濃縮物を提供するための自動化方法とシステムおよびそのような血小板濃縮物のための貯蔵媒体

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4160644A (en) * 1977-06-13 1979-07-10 Streck Laboratories, Inc. Platelet reference control and method of preparation
US4198206A (en) * 1977-06-13 1980-04-15 Ryan Wayne L Method for preparing a platelet reference control

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3968250A (en) * 1971-06-21 1976-07-06 Wave Energy Systems, Inc. Method and sporicidal compositions for synergistic disinfection or sterilization
US3873467A (en) * 1974-02-01 1975-03-25 United Medical Lab Inc Hematologic reference control
US3962125A (en) * 1975-01-13 1976-06-08 Coulter Diagnostics, Inc. Multi-purpose diluent for use in blood analysis by electronic instrumentation of the coulter type
DE2546166A1 (de) * 1975-10-15 1977-04-28 Behringwerke Ag Gegerbte thrombozyten
US4116635A (en) * 1977-03-14 1978-09-26 Jaeger Mark A General purpose in vitro anticoagulant
US4302355A (en) * 1977-08-01 1981-11-24 Warner-Lambert Company Platelet reference control
US4213876A (en) * 1978-08-22 1980-07-22 Coulter Electronics, Inc. Multi-purpose blood diluent for use in electronic blood analysis instrumentation
US4299726A (en) * 1979-05-07 1981-11-10 Coulter Electronics, Inc. Process for preparing whole blood reference controls having long term stability, preconditioning diluent and media therefor
US4324686A (en) * 1979-06-11 1982-04-13 R & D Systems, Inc. Hematology control composition and methods for its use

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4160644A (en) * 1977-06-13 1979-07-10 Streck Laboratories, Inc. Platelet reference control and method of preparation
US4198206A (en) * 1977-06-13 1980-04-15 Ryan Wayne L Method for preparing a platelet reference control

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3938907A1 (de) * 1989-11-24 1991-05-29 Behringwerke Ag Mittel zum lagern und suspendieren von zellen, insbesondere erythrozyten
DE3938907C2 (de) * 1989-11-24 1999-11-04 Dade Behring Marburg Gmbh Mittel zum Lagern und Suspendieren von Zellen, insbesondere Erythrozyten
WO1995001796A1 (en) * 1993-07-05 1995-01-19 Northern General Hospital N.H.S. Trust Preparation and stabilisation of cells
EP0721104A2 (de) * 1993-07-05 1996-07-10 Northern General Hospital N.H.S. Trust Herstellung und Stabilisierung von Zellen
EP0721104A3 (de) * 1993-07-05 1996-08-14 North Gen Hospital Nhs Trust
WO1995027203A1 (en) * 1994-04-05 1995-10-12 Northern General Hospital N.H.S. Trust Preparation and stabilisation of cell suspensions

Also Published As

Publication number Publication date
JPS648306B2 (de) 1989-02-13
FR2506945B3 (de) 1984-04-13
DE3220232C2 (de) 1987-10-22
GB2099281B (en) 1985-05-22
FR2506945A1 (fr) 1982-12-03
CA1195931A (en) 1985-10-29
JPS57203957A (en) 1982-12-14
HK10686A (en) 1986-02-21
ES512661A0 (es) 1983-12-01
ES8400874A1 (es) 1983-12-01
US4405719A (en) 1983-09-20
GB2099281A (en) 1982-12-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE3220232C2 (de)
DE69015999T2 (de) Reagenz zur Messung von Leukozyten und Hämoglobin im Blut.
DE3153618C2 (de)
DE3586619T2 (de) Haematologische zusammensetzungen als referenz fuer drei populationen von leukocyten, verfahren zu deren herstellung und deren verwendung in ganzbluttestverfahren.
DE69530627T2 (de) Reagenz zur Klassifizierung von Leukozyten
DE69120674T2 (de) Koagulationsassays und reagenzien
DE3220231A1 (de) Verfahren zur stabilisierung der blutplaettchen bei der bestimmung mehrfacher blutplaettchenparameter in vergleichskontroll- und eichzusammensetzungen sowie verduennungsmittel dafuer
DE3017152C2 (de)
DE3017151C2 (de)
EP0172437B1 (de) Dialysemembran aus modifizierter Cellulose mit verbesserter Biokompatibilität
DE69033033T2 (de) Verbesserte kontrollverfahren für stabile blutkoagulation
DE3689218T2 (de) Verfahren zur differenzierten Bestimmung weisser Blutkörperchen.
DE3851923T2 (de) Reagenz zur Retikulozytenzählung mittels Durchflusszytometrie.
DE69504646T2 (de) Herstellung und stabilisierung von zellsuspensionen
DE69716064T2 (de) Flüssigkeit zum sammeln von proben
DE68918097T2 (de) Standardlösung zur gas/kalzium-bestimmung in blut.
DE69417017T2 (de) Antikoagulierende zusammensetzung
DE3024044A1 (de) Verfahren zur kalibrierung oder qualitaetskontrolle von instrumenten und bezugsfluessigkeit
DE2602997C2 (de) Lyophilisierte Kollagenzubereitung und Verfahren zu ihrer Herstellung
EP0349934A2 (de) Verfahren zur Bestimmung der Ionenstärke oder des spezifischen Gewichts von Wässrigen Flüssigkeiten
DE69123445T2 (de) Verfahren zur bestimmung von endotoxinen
DE2951783A1 (de) Mittel zum eichen von geraeten zum messen der haematologischen werte von vollstaendigen blutproben und verfahren zu seiner herstellung
DE3875854T2 (de) Auf ligninsulfonat aufgebautes pharmazeutisches mittel mit einer atithrombose-aktivitaet.
DE69230209T2 (de) Reagenz zur Blutgerinnung
US4090977A (en) Osmotically balanced anticoaglant

Legal Events

Date Code Title Description
8110 Request for examination paragraph 44
D2 Grant after examination
8364 No opposition during term of opposition
8339 Ceased/non-payment of the annual fee