CZ298188B6

CZ298188B6 - Krystalický polymorf ritonaviru a zpusob jeho prípravy

Info

Publication number: CZ298188B6
Application number: CZ20010203A
Authority: CZ
Inventors: F. Bauer@John; Saleki-Gerhardt@Azita; A. Narayanan@Bikshandarkoil; R. Chemburkar@Sanjay; Patel@Ketan; O. Spiwek@Harry; E. Bauer@Philip; A. Allen@Kimberley
Original assignee: Abbott Laboratories
Priority date: 1998-07-20
Filing date: 1999-07-19
Publication date: 2007-07-18
Also published as: KR100793046B1; CA2674800A1; PT2017269E; BR9912010A; CN1310715B; JP4815050B2; PT1418174E; EP2298751A2; WO2000004016A3; SK922001A3; TWI271400B; AR049658A2; SI1097148T1; MY121765A; NO20042393L; CA2510949A1; NZ509125A; NO20010298D0; CZ2001203A3; CO5090830A1

Abstract

Popisuje se krystalický polymorf ritonaviru, neboli (2S, 3S, 5S)-5-(N-(N-((N-methyl-N-((2-isopropyl-4-thiazolyl)methyl)amino)karbonyl)-L-valinyl)amino)-2-(N-((5-thiazolyl)methoxykarbonyl)amino)-1,6-difenyl-3-hydroxyhexanu, a zpusoby jeho prípravy.

Description

Krystalický polymorf ritonaviru a způsob jeho přípravy

Oblast techniky

Tento vynález se týká nového krystalického polymorfu (2S,3S,5S)-5-(N(N-((N-methyl-N-((2izopropyM-thiazolyl)methyl)amino)karbonyl)-L-valinyl)amino)~2-(N-((5-thiazolyl)methoxykarbonyl)amino)~l,6-difcnyl--3-hydroxy hexanu, a způsobů jeho přípravy, jeho použití jako farmaceutického přípravku a farmaceutické kompozice obsahujícího nový krystalický polymorf.

Dosavadní stav techniky

Inhibitory proteáz viru lidské imunodeficience (HIV) jsou již několik let schváleny pro léčbu 15 infekce HIV. Zvláště účinný inhibitor proteáz HIV je (2S.3S,5S)-5-(N(N-((N-methyl-N-((2i zopro pyM-thiazolyl jmethyl jam i no )karbonyl)-L valinyl)amino)-2-(N-((5-thiazolyl)methoxykarbonyl)amÍno)-l,6-difenyl-3-hydroxyhexan (ritonavir), který je značen jako NORVUU Je známo, že ritonavir má inhibiční účinek na proteázu HIV, inhibuje infekci HIV, inhibuje monooxygcnázu cytochromu P450 a zvyšuje lármakokinetiku sloučenin, které jsou metabolizo20 vány monooxygenázou cylochromu P450. Ritonavir jc zvláště účinný jako inhibitor HIV infekce, a to je-li použit samotný nebo v kombinaci sjedním nebo více inhibitory reverzní transkriptázy a/nebo s jedním nebo více dalšími inhibitory HIV proteáz.

Ritonavir a způsoby jeho přípravy jsou popsány v patentu US 5 541 206, vydaném 30. července 25 1996. Tento patent popisuje postupy přípravy ritonaviru, který produkuje krystalický polymorf ritonaviru, nesoucí označení krystalická forma 1. Podstatně čistá forma I má práškový difrakční rentgenogram, C nukleární magnetické rezonanční spektrum pevného stavu. FT blízké infračervené spektrum a FT střední infračervené spektrum, které jsou na obr. I, 4, 6 a 8. Úhlové pozice (2 thelaj charakteristických píků práškového difrakčního rentgenogramu podstatně čisté 30 formy I v Obr. 1 jsou 3,33° ± 0,1 6,76° ±0,1°. 8,33° ± 0,1 14,61⁰ ± 0.17 16,33 ± 0,1°, 16,76° ±0,1°, 17,03° ±0,1, 18,02° ±0,1°, 18.62° ±0,1°. 19,47° ±0,1°. 19,86° ±0,1°. 20,25° ±0,1°. 21,46° ± 0,1 23,46° ± 0,1 ° a 24,36° + 0.1°.

Další postupy přípravy ritonaviru jsou popsány v patentu US 5 567 823. vydaném 22. října 1996. 35 Postupem popsaném v tomto patentu se také produkuje ritonavir jako kry stalická forma I.

Farmaceutické prostředky obsahující ritonavir nebo jeho farmaceuticky přijatelné soli, jsou popsány v patentech US 5 541 206. vydaném 30. července 1996; US 5 484 801, vydaném 16. ledna 1996; US 5 725 878, vydaném 10. března 1998; a US 5 559 158, vydaném 24. září 1996 a v mc40 zinárodní přihlášce WO 98/22106, publikované 28. května 1998 (odpovídající US patentové přihlášce 08/966 495. ze 7. listopadu 1997).

Použití ritonaviru pro inhibici infekce HIV je popsáno v patentu US 5 541206. vydaném 30. července 1996, Použití ritonaviru v kombinaci s jedním nebo více inhibitory reverzní trans45 kriptázy pro inhibici infekce HIV je popsáno v patentu US 5 635 523, vydaném 3. června 1997.

Použití ritonaviru v kombinaci s jedním nebo více inhibitory HIV proteáz pro inhibici infekce HIV jc popsáno v patentu US 5 674 882, vydaném 7. října 1997, Použití ritonaviru pro inhibici monooxygenázy cytochromu P450 a zvýšení farmakokinetiky sloučeniny melabolizovaných monooxygenázou cytochromu P450 je popsáno ve spisu WO 97/01349, publikovaném 16. ledna 50 1997 (odpovídající US přihlášce 08/687 774, ze 26. června 1996).

Neočekávaně se zjistilo, že ritonavir může být připraven jako nový kry stalický polymorf. který nese označení krystalická forma II.

Všechny publikace, vydané patenty a patentové přihlášky jsou zde začleněny formou odkazu.

- 1 CZ 298188 B6

Přehled obrázků na výkresech

Obr. 1 je práškový difrakční rentgenogram podstatně čisté formy 1 krystalického póly morfii ritonaviru.

Obr, 2 je práškový difrakční rentgenogram podstatně čisté formy II krystalického polyrnorfu ritonaviru.

Obr. 3 je 400 MHz ^L'C nukleární magnetické rezonanční spektrum pevné podstatně čisté formy I krystalického polyrnorfu ritonaviru (za účelem porovnání).

Obr. 4 jc 400 MHz ^bC nukleární magnetické rezonanční spektrum pevné podstatně čisté formy II krystalického polyrnorfu ritonaviru.

Obr. 5 jc FT blízké infračervené spektrum podstatně čisté formy 1 krystalického polyrnorfu ritonaviru.

Obr. 6 je FT blízké infračervené spektrum podstatně čisté formy II krystalického polyrnorfu ritonaviru.

Obr. 7 je FT střední infračervené spektrum podstatně čisté formy l krystalického polyrnorfu ritonaviru (za účelem porovnání).

Obr. 8 je FT střední infračervené spektrum podstatně čisté formy 19 krystalického polyrnorfu ritonaviru.

Podstata vynálezu

Vc shodě s tímto vynálezem se uvádí nový podstatně čistý krystalický polymorf (2S.3S.5S)-5(N(N-((N-mcthyl-N-((2-izopropyW-thiazolyl)methyl)amino)karbonyl)-L-valinyl)ainino) 2(N-((5-thiazolyl)methoxykarbonyl)amino)-1.6-difenyl-3-hydroxyhexanu (ritonavir). V zájmu identifikace je tento krystalický poly morf nazýván jako forma li kry stalického polyrnorfu ritonaviru.

Podstatně čistá forma H má práškový difrakční rentgenogram. ^L’C nukleární magnetické rezonanční spektrum pevného stavu, FT blízké infračervené spektrum a FT střední infračervené spektrum, které jsou uvedeny v obr. 2, 4, 6 a 8. 2—theta úhlové pozice charakteristických píku práškového difrakčního rentgenogramu podstatně čisté formy II uvedeno na obr. 2 jsou: 8,67° ±0,1°, 9,88° ±0.1°, 16Jl°10J°, 16,7O°±OJ°. 17,36° ± 0,1°, 17,78°±0,l°, i8,40° + 0.l°, 18,93° ± 0.1 20,07° + 0,1°, 20,65° ± OJ °, 21.71⁰ ± OJ⁰ a 25,38° ±0,1°.

Přednostněji, podstatně čistá forma II je charakterizována píky práškového difrakčního rentgenogramu majících 2--theta úhlové pozice uvedené na obr. 2: 8,67° ±0.1°, 9,51 ° 1 0,1 °, 9,88° ±0,1°. 10,97°±0,l°, 13,74° ±0,1°, 16,11⁰1 0,1 °. 16,70°±0,l°, 17,36°*0J°, 17,78° ±0.1°, 18,40° ±0,1°, 18,93° ±0,1°, 19,52° ±0,1°, 19.80° ±0,1°, 20.07° ±0,1°, 20.65° ±0,1°, 21.49° ±0,1°, 21,71° ± 0.1°. 22,23° ±0.1°, 25,38° i 0,1°, 26J5° ± 0J° a 28,62° ± 0J°.

Podstatně čistá forma II kry stalického polyrnorfu ritonaviru může být připraven z amorfního ritonaviru kontaktem amorfního ritonaviru sCl-C3 alkoholem. Metoda kontaktu může být bud' nasycením amorfní sloučeniny v rozpouštědle při teplotě místnosti a následným stáním směsi po delší dobu (například, přes noc), nebo rozpuštěním amorfní sloučeniny v rozpouštědle za zvýšené teploty, nejlépe pod refluxem, následným zchlazením na teplotu místnosti a izolací formy II.

V dalším provedení podstatně čistá forma 11 krystalického polymorfu ritonaviru může být připravena /amorfního ritonaviru přípravou saturovaného roztoku amorfního ritonaviru vCj-Cj alkoholu při teplotě místnosti a izolací formy II. která vznikne. V praxi to může být provedeno rozpuštěním dostatečného množství amorfního ritonaviru vC|-C; alkoholu za zvýšené teploty' (pod refluxem) tak. že ochlazením roztoku na teplotu místnosti vznikne nasycený roztok, ze kterého precipituje forma II a může být izolována. Preferovaným rozpouštědlem na přípravu formy lije bezvodý ethanol. Izolace výsledné pevné látky poskytne požadovanou formu II.

Podstatně čistý amorfní rítonavir jc připraven z formy i krystalického polymorfu ritonaviru táním formy I ritonaviru a následným rychlým zchlazením roztáté látky. Izolace výsledné pevné látky poskytne amorfní rítonavir.

Podstatně čistý amorfní rítonavir může být také připraven pomalým přidáváním roztoku ritonaviru formy 1 vc vhodném rozpouštědle (methylenchlorid a podobně; nejlépe methylenchlorid) o koncentraci nejlépe okolo 1 g ritonaviru na 1,5 až 2,0 ml rozpouštědla (nejlépe okolo 1 g ritonaviru/ na přibližně 1,5 ml methy lenchloridu) do anti-rozpouštědla (například hexan nebo heptan a podobně; nejlépe však hexan) na koncentraci okolo 60 až 110 ml antirozpouštědla/g ritonaviru; nejlépe okolo 85 až 90 ml hexanu/g ritonaviru, a následnou izolací (například filtrací) vzniklé pevné látky.

Podobně, podstatně čistý amorfní rítonavir může být také připraven pomalým přidáváním roztoku ritonaviru formy I ve vhodném rozpouštědle, jako je methanol nebo podobně, o koncentraci okolo 1 g ritonaviru na přibližně 1.5 až 2,0 ml rozpouštědla (nejlépe okolo I g ritonaviru/ 1,5 ml mcthanolu) do antirozpouštědla, jako jc methyl / butyl ether (MTBE) nebo podobně, na koncentraci okolo 60 až 150 ml antirozpouštědla/g ritonaviru, nejlépe okolo 90 až 110 ml MTBE/g ritonaviru a ještě lépe okolo 100 ml MTBE/g ritonaviru, a následnou izolací (například filtrací) vzniklé pevné látky.

Podstatně čistý amorfní rítonavir může být také připraven pomalým přidáváním roztoku ritonaviru formy I vc vhodném rozpouštědle (např, mcthanolu a podobně; preferovaný je methanol) o koncentraci okolo 1 g ritonaviru na 1.5 až 2.0 ml rozpouštědla (nejlépe okolo 1 g ritonaviru/příbližne 1,6 ml methanolu) do vody o teplotě okolo 0 °C na koncentraci 400 až 500 ml vody/g ritonaviru (nejlépe okolo 400 ml vody/g ritonaviru). následnou izolací (například filtrací) a sušením výsledné pevné látky.

Podstatně čistý amorfní rítonavir může být také připraven I yofi li žací z roztoku ritonaviru formy I. Preferovaná rozpouštědla jsou C|-C.₍, alkoholy . Nejpreferovanějším rozpouštědlem je izobutanol.

Nebo alternativní preferovaný postup: podstatně čistá forma II může být připravena naočkováním roztoku ritonaviru formy I ve vhodném rozpouštědle (nejlépe C|-C\ alkohol; ještě lepe ethanol) nerozpustným (2S)—'N-((IS) 1 benzyl-2-((4S,5SM-beiizyl-2 oxo-l,3-oxazolidin-5-yl)cthyl) 2 ((({2-ízopropyl-1.3-thiazoM-yl)methyl)amino)karbonyI)ainino)-3-rnethylbutanamidem. V preferované metodě je rítonavir formy I rozpuštěn v ethanolu (nejlépe 200 proof ethanol, proof ~ jednotka stupňovitosti lihu, asi 0,5 %) na koncentraci od okolo 150 g/l do koncentrace okolo 200 g/l, nejlépe okolo 160 g/l. Do roztoku se přidají očkovací krystaly (2S)-N((1S)— 1-benzy 1-2-((4S,5 S)~4-bcnzy 1-2 oxo-1,3-oxazolidin-5-yl)ethyl)-2-((((2-izopropy 1l,3-thiazol-4-yl)methyI)amino)karbonyl)amino)-3-methylbutanamidu v množství od asi 0,02 g do asi 0,10 g očkovacích krystalů/g ritonaviru. Použité množství očkovacích krystaluje takové, že převyšuje saturační množství v použitém rozpouštědle, což má za následek přítomnost nerozpustných očkovacích krystalů v roztoku ritonaviru. Směs se ponechá stát při teplotě od asi 0 do asi 15 °C (nejlépe okolo 5 °C) po dobu od asi 12 hodin do asi 48 hodin (nejlépe okolo 24 hodin). Výsledný krystalický rítonavir formy 11 je izolován filtrací.

V další alternativní upřednostňované metodě, podstatně čistá forma II muže být připravena rckrystalizací formy 1 nebo směsi formy 1 a formy II z roztoku ve vhodném rozpouštědle (napří

- □ CZ 298188 B6 klad ethylacetát nebo izopropylacctát nebo chloroform a jiná rozpouštědla s podobnou dielektrickou konstantou; nejlépe však ethylacetát), naočkováním krystalů formy II a následným přidáním anti-rozpouštědla s podobnou dielektrickou konstantou: preferovaný je heptan). Množství přidaných očkovacích krystalů je takové, žc převyšuje saturační množství v použitém rozpouštědle, co má za následek stálou přítomnost nerozpustných očkovacích krystalů v roztoku ritonaviru. V preferovaném postupu se ritonavir (forma 1 nebo směs formy I a formy II) rozpustí v ethylacetátu (od 4.0 I do okolo 6,0 1/kg ritonaviru) za zvýšené teploty (při teplotě od asi 65 do teploty okolo 70 °C). Roztok sc pomalu zchladí na teplotu asi 55 až asi 50 °C. nejlépe na teplotu okolo 52 °C. Přidají se očkovací krystaly ritonaviru formy II (od 0,5 g očkovacích krystalů formy Π/kg ritonaviru do 10,0 g očkovacích kry stalů formy ΙΙ/kg ritonaviru, nejlépe přibližně 1,25 g očkovacích krystalů formy Il/g ritonaviru) a směs se míchá po dobu 1 hodiny při teplotě od asi 55 do asi 50 °C, nejlépe při teplotě přibližně 52 °C. Množství přidaných očkovacích krystaluje takové, že převyšuje saturační množství v použitém rozpouštědle, co má za následek stálou přítomnost nerozpustných očkovacích krystalů v roztoku ritonaviru. Přidá se heptan (přibližně 1,0 l/kg ritonaviru až asi 4,0 l/kg ritonaviru; nejlépe však okolo 2,8 1/kg ritonaviru) za stálého míchání a směs se nechá pomalu chladit na přibližně 25 °C, pote se míchá po dobu nejméně 12 hodin při teplotě asi 25 °C. Produkt sc izoluje fíItrací/centrifugací a suší se za tepla pod vakuem. Ve výrobním měřítku (300 až 400 kg dávek), se zjistilo, že izolace fíItrací/centrifugací je značně rychlejší pro formu II než pro odpovídající množství formy 1(16 hodin oproti 24 až 30 hodinám).

Bylo také zjištěno, že forma 11 nebo směsi formy II a formy I mohou být převedeny na podstatně čistou formu I rozpuštěním za tepla formy II nebo směsi formy II a formy 1 ve vhodném rozpouštědle (například ethylacetát nebo izopropylacetát a podobně: nejlépe však ethylacetát) na koncentraci I kg ritonaviru/4 I rozpouštědla (nejlépe ethylacetát). Horký roztok ritonaviru se pomalu přidá (nejlépe přes filtr) do kašovité suspenze očkovacích krystalů ritonaviru formy 1 (asi 0.5 až asi 10 hmotnostních % vztaženo na množství ritonaviru formy 11 nebo směsi formy II a formy I: lépe okolo 0,5 až asi 5 hmotnostních % a nejlépe 0,5 až 1 hmotnostních %) ve vhodném an ti rozpouštědle (například heptan nebo hexan a podobně; nejlépe však heptan) na koncentraci okolo 1 kg ritonaviru (forma II nebo směs formy II a formy I) na přibližně 4 až 8 I ant i rozpouštědla (nejlépe I kg ritonaviru (forma II nebo směs formy II a formy l)/přibližně 4 I heptanu). Směs se zchladí na teplotu okolo 20 °C a míchá se po dobu nejméně 3 hodiny. Izoluje se (například filtrací) a sušením výsledné pevné látky se získá ritonavir formy 1.

Následující příklady sc zde uvádějí pro naznačení přípravy nových forem ritonaviru podle tohoto vynálezu a převedení formy II na formu I.

Příklady provedení vynálezu

Příklad I

Příprava amorfního ritonaviru

Krystalicky polymorf ritonavir formy I (lOOg) se nechá roztát zahříváním při 125 °C. Roztátý polymorf se udržuje při teplotě 125 °C po dobu 3 hodin. Poté se rychle zchladí umístěním kontejneru s póly morfiem do Dewarovy nádoby s tekutým dusíkem. Vzniklá sk lov i na se rozmělní pomocí hmoždíře a tloučku, čímž se získá amorfní ritonavir (100 g). Prášková difrakční rentgenová analýza potvrdí, že produkt jc amorfní. Diferenciálně snímanou kalorimetrickou analýzou se stanoví bod skelného přechodu, a to od asi 45 do přibližně 49 °C. (Měření začalo při 45,4 a skončilo při 49,08 ^QC, se středem při 48,99 °C).

-4LZ 136

Příklad 2

Příprava krystalického ritonaviru (forma II)

Amorfní ritonavir (40,0 g) se rozpustí ve vroucím bezvodéni ethanolu (100 ml). Zchladnutím roztoku na teplotu místnosti sc získá nasyceny roztok. Roztok se ponechá stát přes noc při teplotě místnosti a vzniklá pevná látka se izoluje zc směsi filtrací a suší se na vzduchu, čímž se získá forma 11 (přibližně 24.0 g).

Příklad 3

Příprava (2S)- N~(( 1 S)—l —benzyl—2—((4S,5S)—l-benzyl-2-oxo-l ,3-oxazolidin-5-yl)ethyl)-215 ((((2-izopropyl-l,3-thiazoM-yl)methyi)amino)karbonyl)amino)-3-methy1 butan amidu

Příklad 3a

Příprava (4 S. 5 S )-5-( (2 S)-2-t-bu tyl oxy karbony lani i no-3- fenyl propyl )-4-benzy 1-1,3-oxazol idin-2-onu

Sůl (2S.3S.5S)-2-amino-3-hydroxy-5-/-butyloxykarbony lamino- 1,6-difenylhexansukcinátu (30 g. 63 mmol; patent US 5 654 466), ((5-thiazolyl)methyl)-(4-nitrofenyl)karbonáthydrochlorid 25 (22,2 g; Patent US 5 597 926) a hydrogenuhličitan sodný (16,2 g) se smísí s 300 ml vody a 300 ml ethylacetátu a směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 30 minut. Poté se oddělí organická vrstva a zahřívá sc při 60 °C po dobu 12 hodin. Poté sc míchá při 20 až 25 °C po dobu 6 hodin a přidají se 3 ml hydroxidu amonného (29% amoniak ve vodě) a směs se míchá po dobu 1,5 hodiny. Výsledná směs se promyje 4 x 200 ml 10% vodným uhličitanem draselným a orgajo nicka vrstva sc oddělí a odpaří pod vakuem do vzniku oleje. Olej sc suspenduje v 250 ml heptanu. Heptan se odpaří pod vakuem, čímž sc získá žlutá pevná látka. Žlutá pevná látka sc rozpustí ve 300 ml THF a přidá sc 25 ml 10% vodného hydroxidu sodného. Po třech hodinách míchání se směs upraví na pH 7 přídavkem 4N HC1 (kolo 16 ml). THF sc odpaří pod vakuem do vzniku vodného zby tku, do kterého se přidá 300 ml destilované vody. Po zamíchání vznikne jemná suspenze 35 pevných látek. Pevná látka se shromáždí filtrací a z filtrovaná pevná látka se promyje vodou (1400 ml) v několika dávkách. Výsledkem je požadovaný produkt.

Příklad 3b

Příprava (4S,5S) 5 ((2S)-2-amino-3-f'enylpropyl)-4-benzyl-l,3-oxazolidin-2-onii

Surový mokrý produkt z příkladu 3a se rozmělní v I N HCI (192 ml) a kaše sc zahřeje na 70 °C za stálého míchání. Po hodině sc přidá THF (100 ml) a míchání pokračuje při 65 °C po dobu 45 4 hodiny. Směs se poté nechá vychladnout na teplotu 20 až 25 °C a míchá se při této teplotě přes noc. THF se odstraní odpařením pod vakuem a výsledný vodný roztok se zchladí na teplotu okolo 5 °C, což zapříčiní částečné srážení. Vodná směs se upraví na pFl 7 přídavkem 50% vodného hydroxidu sodného (přibližně 18,3 g). Výsledná směs sc extrahuje cthylacctátem (2 x 100 ml) při teplotě okolo 15 °C. Spojené organické extrakty se promyjí 100 ml solanky a organická vrstva se 50 oddělí a míchá sc síranem sodným (5 g) a Darco G—60 (3 g). Tato směs se ohřívá na horké plotně po dobu 1 hodina při 45 °C. I lorká směs se zfiltruje přes vrstvu křemeliny a filtrační podložka se promyje ethylacetátem (100 ml). Filtrát se odpaří pod vakuem, čímž se získá olej. Olej se znovu rozpustí v methy lenchloridu (300 ml) a rozpouštědlo se odpaří pod vakuem. Výsledný olej se suší při pokojové teplotě pod vakuem. Získá se požadovaný produkt (18,4 g) jako sklovitý sirup.

ss

- 5 CZ 298188 B6

Příklad 3c

Příprava (2S)-N--((lS)-l-benzyl-2-((4S,5S)-4-benzyl-2-oxo-l,3-oxazolidin-5“yl)ethyl)-2((((2-izopropyl-l ,3-thiazol-4-yl)rnethyl)amino)karbonyl)amino)-3-methylbutanaiTiidu

N-((N-methyl-N({2-izopropyl-4-thiazolyi)methyl)amino)karbonyl)- L valin (10,6g,

33,9 mmol; patent US 5 539 122 a mezinárodní patentová přihláška WO 98/00410), produkt z příkladu 3b (10,0 g. 32,2 mmol) a I-hydroxybenzotriazol (5,2 g. 34 mmol) sc rozpustí v THF (200 ml). Poté se přidá 1,3-dicyklohexylkarbodiimid (DCC, 7,0 g, 34 mmol) do THF směsi a směs se míchá při 22 °C po dobu 4 hodiny. Přidá se kyselina citrónová (25 ml 10% vodný roztok) a míchání pokračuje po dobu 30 minut. THF se pote odpaří pod vakuem. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu (250 ml) a promyje se 10% roztokem kyseliny citrónové (175 ml). Pro zrychlení separace vrstev se přidá NaCI (5 g). Organická vrstva se postupně promyje 10% vodným uhličitanem sodným (2 x 200 ml) a vodou (200 ml). Organická vrstva se poté suší nad síranem sodným (20 g), zfiltrujc sc a odpaří pod vakuem. Výsledný produkt (20,7 g pěny) se rozpustí v horkém ethylacetátu (150 ml) a poté sc přidá heptan (75 ml). Po zchlazení se přidá dalších 75 ml heptanu a směs se zahřívá pod refluxeni. Po zchlazení na teplotu místnosti se neutvoří žádný precipitát. Rozpouštědla se odpaří pod vakuem a zbytek se znovu rozpustí ve směsi 200 ml ethylacetátu/100 ml heptanu. Malé množství nerozpustné pevné látky se odstraní filtrací. Filtrát se odpaří pod vakuem a zbytek se rozpustí ve směsi 100 ml cthylacetátu/50 ml heptanu. čímž vznikne čirý roztok. Roztok se ochladí na -10 °C. čímž se utvoří bílý precipitát. Směs se ponechá stát při -15 °C po dobu 24 hodin. Výsledná pevná látka sc shromáždí filtrací, promyje směsí I : 1 ethylacetát/heptan (2 x 24 ml) a suší se ve vakuové peci při 55 °C. Získá se požadovaný produkt jako béžová pevná látka (16,4 g).

'H NMR (DMSO-d₆) Ó 7,84 (IH. dublet J ^_ 8,6), 7,71 (1H, singlet), 7,32 - 7.11 (1111, multiplet), 6,09 (IH, dublet, J - 8,5). 4,51 (1Η AB J - 16. 2), 4,43 (!H AB J = 16,2). 4,22 (ΊΗ, multiplet), 4,07 (IH, multiplet), 3,96 (IH, dublet dubletu .1 - 7,3. 7,4), 3.65 (IH, multiplet), 3,23 (IH. septuplet J = 6,9), 2,89 (3H, singlet), 2,84 - 2,60 (4H. multiplet), 1,94 (1H. multiplet). 1.76- 1,49 (2H, multiplet). 1,30 (611, dublet J - 6.9), 0,80 (3H. dublet J - 5,8), 0,77 (3H, dublet J - 5,8).

ⁱ³C NMR (DMSO-dJ Ó 177.2, 171,5, 157,6. 157.5, 152,8, 138,3, 136.5, 129,5, 129,2, 128,2, 128,0. 126.4, 126,0, 114,0, 77,2, 59.9. 57.6, 48,2, 46,2, 40,4, 40.1, 39,1, 34,5, 32,4. 30.3. 22,8. 22,8, 19.4, 18.3.

Příklad 4

Příprava krystalického ritonaviru (forma II)

Do roztoku 1,595 g ritonaviru formy I v 10 ml 200 proof ethanolu se přidá takové množství produktu z příkladu 3c (přibližně 50 mikrogramů). že se nerozpustí všechen přidaný produkt příkladu 3c. Tato směs se ponechá stát při teplotě 5 °C po dobu 24 hodiny. Výsledné krystaly se izolují filtrací skrz 0,45 mikronový nylonový filtr a suší se na vzduchu, čímž se získá ritonavir formy II.

Příklad 5

Alternativní příprava krystalického ritonaviru (forma 11)

Ethylacetát (6,0 L/kg ritonaviru) se přidá do ritonaviru (forma I nebo směs formy 1 a formy 11) v reakční nádobě. Směs se míchá a zahřívá 70 °C dokud se všechna pevná látka nerozpustí. Roztok se zfiltruje (použitím centrifugační pumpy a 5x20 palců filtrů majících pórovitosl 1,2 mikronů) a filtrát se zchladí na 52 °C rychlostí 2 až 10 °C/bodinu. Do tohoto roztoku se přidá takové množství očkovacích krystalů ritonaviru formy 11 (okolo 1,25 g očkovacích krystalů formy H/kg

-6CZ 29X188 B6 ritonaviru), že se všechny krystaly nerozpustí a směs sc míchá při 52 °C po dobu ne méně než 1 hodina při třepací rychlosti 15 ot/min. Směs se poté zchladí na 40 °C rychlostí 10 °C/hodinu. Přidá se heptan (2.8 l/kg ritonaviru) při rychlosti 7 l/minutu za stálého míchání. Směs se nechá zchladit na 25 °C rychlostí 10°C/hodina za stálého míchání. Poté se směs míchá po dobu ne s méně než 12 hodin při 25 °C. Produkt se izoluje filtrací, použije se centrifuga Heinkelova typu (pracovní doba přibližně 16 hodin). Produkt se suší při 55 °C pod vakuem (50 mm Hg) po dobu 16 až 25 hodin, čímž se získá krystalický ritonavir formy II.

io Porovnávací příklad 6

Příprava amorfního ritonaviru

Ritonavir formy 1 (40 g) sc rozpustí v methylenchloridu (60 ml). Tento roztok se pomalu přidává 15 po dobu 15 minut do baňky s kulatým dnem, vybavené vrchním míchadlem a obsahující hexany (3,5 I). Výsledná kaše se ponechá v chladu po dobu 10 minut. Prccipitát se zfiltruje a suší se při teplotě místnosti ve vakuové peci, čímž se získá amorfní ritonavir (40 g).

Porovnávací příklad 7

Příprava amorfního ritonaviru

Ritonavir formy 1 (5 g) se rozpustí v methanolu (8 ml). Tento roztok se pomalu přidá do baňky 2? s kulatým dnem vybavené vrchním míchadlem a obsahující destilovanou vodu (2 1). po tuto dobu se vnitřní teplota udržuje blízko teploty 0 °C. Výsledná pevná látka se zfiltruje. čímž se získá lepkavá pevná látka, která se suší ve vakuové peci při 20 až 25 °C po dobu 12 až 18 hodin. Získá se amorfní ritonavir (2,5 g).

Porovnávací příklad 8

Příprava ritonaviru formy I

Ritonavir forma II (1 kg) se přidá do reaktoru (A) a následně sc přidá ethylacetat (4 I). Tato směs sc refluxuje dokud se všechna pevná látka nerozpustí. Do odděleného reaktoru (B) se přidá takové množství očkovacích krystalu ritonaviru formy I (5 g), následovaných přídavkem heptanu (4 1), že všechny očkovací krystaly se nerozpustí. Tato směs (kaše) sc míchá při 23 °C ±5°C.

Horký roztok z reaktoru A se pomalu filtruje, použitím 0,2 mikronové filtrační vložky, do směsi v reaktoru B po dobu ne méně než 2 hodiny. Výsledná kaše v reaktoru B se zchladí na 20 °C a míchá se po dobu ne méně než 3 hodiny. Výsledná kaše se zfiltruje, zfiltrovaná pevná látka se promyje heptanem a pote sc suší ve vakuové peci při 65 °C. Získá se ritonavir formy I.

Preferované farmaceutické kompozice obsahující ritonavir, specielně ritonavir formy 11. mají následující složení, zapouzdřené v jemné elastické želatinovc kapsli.

Ritonavir formy II 100,0 mg

Ethanol, bezvodý 120.0 mg

Olejová kyselina 709,75 mg

Butylovaný hydroxytoluen 0,25 mg

Polyoxyl 35 ricínový olej (Cremophor El?') 60,0 mg

Voda 10.0 mg

C,Z 298188 B6

Preferované kompozice mohou být připraveny následující metodou.

Následující protokol je použit pro přípravu 1000 jemných želatinových kapslí:

Hmotnost (mg/kapsle)	Název	Množství (g)
Q.S.	Dusík. N. F.	Q. S.
io 118,0	Ethanol, absolutní, USP, 200 Proof	118,0
2.0	Ethanol, absolutní, USP. 200 Proof	2.0
0,25	Butylovaný hydroxytoluen, NF	0.25
15 704,75	Olejová kyselina, NF	704,75
100,0	Rilonavir forma II	100,0
10,0	Voda, přečištěná. USP (destilovaná)	10,0
60,0	Polyoxyl 35 ricínový olej, NF	60,0
5,000	Olejová kyselina, NF	5,000

Pozn.: Q.S. = pokud stačí.

Mísící tank a vhodný kontejner sc propláchne dusíkem. Naváží se 118.0 g ethanolu. překryje se dusíkem a uchová sc pro pozdější použití. Poté se naváží druhý podíl ethanolu (2 g) a míchá se 25 s 0,25 g butylovaného hydroxytoluenu dokud se nevyjasní. Směs se překryje dusíkem a uschová sc. Hlavní mísící tank se zahřeje na 28 °C (ne více než 30 °C). 704,75 g olejové kyseliny se poté přelije do mísícího tanku. 100.0 g ritonaviru formy II se poté přidá do olejové kyseliny a míchá se. Poté se přidá ethanol/butylovaný hydroxytoluen do mísícího tanku a poté sc přidává předtím navážených 118,0 g ethanolu a míchá se po dobu nejméně 10 minut. Poté se do tanku přelije 10 g 30 vody a míchá se dokud sc roztok nevyčeří (ne méně než 30 minut). 60,0 g Polyoxyl 35 ricínového oleje se přelije do tanku a míchá se dokud se homogenizujc. Roztok se uchová při 2 až 8 °C dokud se nevloží do kapslí. Podle postupu popsaném v mezinárodní patentové přihlášce WO 98/22106 se každá jemná želat i nová kapsle naplní 1,0 g roztoku a jemné želatinové kapsle sc poté suší a uchovají při 2 až 8 °C.

Jak zde bylo použito, termín ..podstatně čistý, je-li použit ve vztahu k polvmorfu ritonaviru, se týká polvmorfu ritonaviru, formy 1 nebo formy II. jehož čistota je vyšší než okolo 90 %. To znamená. že polymorf ritonaviru neobsahuje více než asi 10 % kterýchkoliv jiných sloučenin a zvláště pak neobsahuje více než asi 10 % žádné jiné formy ritonaviru. Přednostněji termín 40 „podstatně čistý se týká polymorfu ritonaviru. formy I nebo formy H, jehož čistota je vyšší než asi 95 %. To znamená, že polymorf ritonaviru neobsahuje více než asi 5 % kterýchkoliv jiných sloučenin a zvláště pak neobsahuje více než asi 5 % žádné jiné formy ritonaviru. Ještě lépe termín „podstatně čistý' se týká polymorfu ritonaviru, formy 1 nebo formy II, jehož čistota je vyšší než asi 97%. To znamená, že polymorf ritonaviru neobsahuje více než asi 3 % kterýchkoliv i? jiných sloučenin a zvláště pak neobsahuje více než asi 3 % žádné jiné formy ritonaviru.

Rentgenová difrakční analýza práškových vzorku byla provedena následujícím způsobem. Vzorky pro rentgenovou difrakční analýzu sc připraví rozprostřením práškového vzorku (bez nutného předchozího rozetření) do tenké vrstvy na držáku vzorků a jemným zarovnáním vzorku mikro50 skopickým podložním sklíčkem. Byl použit Nicolet 12/V rentgenový difrakční systém s následujícími parametry: zdroj rentgenového záření: Cu-Καΐ: rozsah: 2,00 - 40.00° 2 theta; snímací rychlost: 1,00 stupeň/minutu; velikost kroku: 0,02 stupně: vlnová délka: 1,540562 angstromů, tj. 1’540562.10 ¹⁰ m.

Charakteristické pozice píku práškové rentgenové difrakce jsou pro polymorfy uvedeny v termínech úhlové pozice (2 theta) s přípustnou variabilitou +0,1°. l ato přípustná variabilita je specifikována v US Pharmacopeia, strany 1843 1844 (1995). Variabilita +0.1° má smysl při porovnávání dvou práškových difrakčních rentgenogramů. V praxi, jestliže jc d i trakční vzorový pík z jednoho vzorku stanoven rozsahem úhlových poloh (2 theta), tedy měřená poloha píku je ± 0,1° a d i trakční vzorový pík z jiného vzorkuje určen rozsahem úhlových poloh (2 theta), tedy měřená poloha píku je ± 0.1° a pokud se tyto rozsahy poloh píku překrývajíc pak sc uvažuje, že tyto dva píky mají stejnou úhlovou polohu (2 theta). Například, jestliže jc difrakční vzorový pík / jednoho vzorku určen polohou 5,20°, pro účely srovnání přípustná variabilita dovoluje, aby byl pík určen polohou v rozsahu 5.10° až 5.30°. Jestliže jc srovnávací pík z jiného difrakčního vzorku určen polohou píku 5.35°. pro účely srovnání přípustná variabilita dovoluje, aby byl pík určen polohou v rozsahu 5.25° až 5.45°. Protože jc zde překrytí mezi dvěma rozsahy poloh píkú (tj., 5.10° až 5,30° a 5,25° až 5.45°) tyto dva srovnávané píky jsou uvažovány jako píky sc stejnou úhlovou polohou (2 theta).

Nukleární magnetická rezonanční analýza pevných vzorku byla provedena následujícím způsobem. Byl použit přístroj Brukcr AMX 400 MHz s následujícími parametry: CP- MAS (příčně polarizovaný magický úhel rotace): frekvence spektrometru pro ^HC: 100,627952576 MHz; pulzní sekvence: cp2lev; kontaktní doba: 2.5 milisekund; teplota: 27,0 °C; spinový poměr: 7000 Hz; relaxační prodleva: 6,000 sekund; šířka 1. impulzu: 3,8 mikrosekund; šířka 2. impulzu: 8.6 mikrosekund; akviziční čas: 0,034 sekund; šířka rozinítání 30303,0 Hz; 2000 snímků.

FT blízká infračervená analýza vzorků byla provedena následujícím způsobem. Vzorky byly analyzovány jako bez příměsí, naředěné prášky v čisté skleněné lékovce objemu 3,55cm\ Byl použit Nicolet Magna Systém 750 FT IR spektrometr s přístrojem blízké infračervené oblasti Nicolet SablR s optovláknovou sondou mající následující parametry : zdroj; bílé světlo, detektor: PbS; rozdělovač světla: CaF₂; rozteč vzorku: 1,0000; digitizér bitů: 20: rychlost zrcadla: 0,3165: apertura: 50.00; zisk vzorku: 1,0; horní propustný filtr: 200,0000: dolní propustný filtr: 11000,0000; počet měření vzorku: 64; délka snímání 75,9 sekund; rozlišení: 8,000; počet měřených bodů: 8480; počet bodů FTT: 8192: frekvence laseru: 15798,0 cm '; pozice píku interferogramu: 4096: apodizace: Happ-Genzcl; počet měření pozadí: 64 a zisk pozadí: 1,0.

FT střední infračervená analýza vzorků byla provedena následujícím způsobem. Vzorky byly analyzovány jako bez příměsí, naředěné prášky. Byl použit Nicolet Magna Systém 750 FT-IR spektrometr se Spectra-Tech Inspecl 1R video-microanalytickým příslušenstvím a Germaniový krystal s utlumenou totální odrazovostí (Ge ATR) s následujícími parametry: infračervený zdroj; detektor MCT/A; rozmítač svazku KBr; vzdálenost vzorků: 2,0000; digitizér bitů: 20; zrcadlová rychlost: 1,8988: apertura: 100,00; zisk vzorku: 1,0: horní propustný filtr: 200,0000; dolní propustný filtr: 20000,0000; počet snímků vzorku: 128; délka snímání: 79.9 sekund; rozlišení: 4,000: počet snímaných bodů: 8480: počet FFT bodů: 8192; laserová frekvence: 15798,0 cm pozice píku interferogramu: 4096; apodizace: trojúhelníková; počet snímků pozadí: 128 a zisk pozadí 1,0.

Diferenciálně snímaná kalorimetrická analýza vzorků byla provedena následujícím způsobem: Byl použit A 1. A. Teplotní Analyzátor 3100 s diferenciálním kalorimetrickým modulem 2910 společně s Modulovaným DSC softwarem verze 1,1 A. Parametry analýza: hmotnost vzorku: 2,28 mg, vzorek umístěn v kryté nezvlněnc hliníkové misce; rychlost zahřívání: od pokojové teploty do 150 °C při 5 °C/minutu při dusíkovém zavzdušnění.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Krystalicky polymorf (
2S.3S.5S) -5-(N4N4(N-mcthy l-N4(2-izopropyl-4-thia7oly limet hyl)amino)karbony l)-L^-val'ⁿyl )^am‘^no)”2-(N-(( 5-thíazolyl)met hoxy karbony l)am i no)-1,65 difcnyl-3-hydroxyhexanu nazývaný ritonavir, s charakteristickými píky práškového difrakčního rentgenogramu shodnotami 2 theta: 8.67°±0.l°. 9,88° ±0,1°, 16 ,ί 1⁰ ± 0,1 °, 16,70° ± 0,1°, 17.36° ± 0,1°, 17,78° 10.1°. 18,40° χ 0,1°, 18.93° ±0.1°, 20,07° ±0.1°, 20,65° ±0,1°, 21,71° ± 0,1° a 25,38° ± 0,1°.

10 2. Krystalický polymorf podle nároku 1, s charakteristickými píky v práškovém difrakčním rentgenogramu shodnotami 2 theta: 8.67° ±0,1°, 9,51° ±0,1°, 9,88° ±0,1°, 10,97° ±0.1°. 13,74° ±0,1°, 16,ll°±0.1°, 16.70°±0,l°, 17,36°±0.l°. 17.78°±0,l°. 18.40°±0.1°. 18,93° ±0.1°. 19,52° ±0,1°, 19,80 ±0,1°, 20,07° ±0,1°. 20,65° ±0,1°. 21,49° ±0.1°. 21.71° ±0,1°, 22,23° ±0.1°. 25.38° ±0,1°, 26.15° ±0,1° a 28.62° ±0.1°.
3. Krystalický polymorf (2S,3S,5S)-5-(N-(N-((N-methyl N 4(2—izopropyl—4—thiaxolyl)methyl)amino)karbonyl) L valmyl)ainino)-2-(N4(5-thiazolyl)methoxykarbonyl)amino)-] .6difenyl-3-hydroxyhexanu, nazývaný ritonavir. o čistotě větší než 90 % s charakteristickými píky práškového difrakčního rentgenogramu shodnotami 2 theta: 8,67° ±0,1°, 9,88° ±0,1°, 16,11°

20 ±0,1°, 16.70°±0.1°. I7,36°±O,1°. 17.78°±0,l°. I8.4O°±O.1°. 18.93° ± 0,1°, 20,07° ± 0,1°.

20,65° ± 0,1 °. 21,71 ° ± 0,1⁰ a 25,38° ± 0.1°.
4. Krystalický polymorf o čistotě vetší nez 90 % podle nároku 3, s charakteristickými píky práškovém difrakčním rentgenogramu shodnotami 2 theta: 8.67° ±0,1°. 9,51° ±0,1°, 9,88°

25 ±0,1°, 10,97°±0,l°. 13,74° ±04°, 16,1 1⁰ ± 0.1 °, 16,70°±0,l°, 17.36° ± 0,1°, 17,78°±0,l°,

18.40° ±0,1°, 18,93° ±0.1°, 19.52° ±0,1°, 19,80° ±0,1°. 20,07° ±0,1°. 20.65° ±0,1°, 21.49° ±0,1°, 21.71° ±0,1°. 22,23° ±0,1°. 25.38° ±0,1°. 26.15° ±0.1° a 28.62° ±0.1°.
5. Způsob přípravy krystalického polymorfu o čistotě větší než 90 % podle nároku 3. vytli z n a Č u j í c í se t í m , že zahrnuje naočkování roztoku ritonaviru očkovacími krystaly (2S)~

N ((1S) 1 benzyl-2-((4S,5SHl-bcnzyl-2-oxo-l ,3-oxazolidin~5-yl)ethyl)-2-((((2-izopropyll,3-thiazol-4-yl)methyl)amino)karbonyl)aniino)-3-methylbutananiidu v takovém množství, žc v roztoku ritonaviru jsou nerozpuštěné očkovací krystaly.

35
6. Způsob přípravy krystalického polymorfu o čistotě větší než 90 % podle nároku 3. vyznačující se t i m , žc zahrnuje naočkování roztoku ritonaviru v C|-C; alkoholu očkovacími krystaly (2S.)-N4( 1S)- l-tvcnzyl—2-((4 S.5 S)—4-benzyl-2-oxo-1.3-oxazolidin-5-yl)elhyl) 2-((((2-izopropy1-1.3—thiazol--4- yI)methyl)amino)karbonyl)amino)-3-mcthylbutanamidu v takovem množství, že v roztoku ritonaviru jsou nerozpuštěné očkovací krystaly.

ίο
7. Způsob podle nároku 6, vyznačující sc tím, že C |-C\ alkohol je ethanol.
8. Způsob přípravy krystalického polymorfu o čistotě vetší než 90 % podle nároku 3. vyznačující sc tím, že zahrnuje naočkování roztoku ritonaviru očkovacími krystaly ritonaviru formy II a s následným přidáním anti-rozpouštčdla.
9. Způsob přípravy krystalického polymorfu o čistotě větší než 90 % podle nároku 3, vyznačující se t í m , že zahrnuje naočkování roztoku ritonaviru v ethylacetátu očkovacími krystaly ritonaviru formy Has následným přidáním heptanu.
10. Způsob přípravy krystalického polymorfu o čistotě větší než 90 % podle nároku 3, vysil z n a Č u j í c í se t í m , že zahrnuje naočkování roztoku ritonaviru v ethylacetátu při teplotě od

50 do 55 °C očkovacími krystaly ritonaviru formy II a následným přidáním heptanu a zchlazením na teplotu 25 °C.