CN1634416A - 一种苦黄冻干粉针剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属中药制药技术领域。具体公开了一种苦黄冻干粉针剂，它是由茵陈、柴胡挥发油和大黄醇提物的羟丙基－β－环糊精包合物，茵陈、柴胡药渣与苦参、大青叶的醇提物与药用辅料制备而成。本发明还公开了其制备方法。含量测定、安全性实验、药理实验的结果说明：本发明含量更高、副作用更小、药理作用更好，具有更好的清热利湿、疏肝退黄功效。

Description

一种苦黄冻干粉针剂及其制备方法

技术领域

本发明属中药制药技术领域，具体涉及一种苦黄冻干粉针剂及其制备方法。

背景技术

由苦参、大黄、大青叶、茵陈、柴胡为原料制成的苦黄注射液[国家药典委员会。国家药品标准(新药转正标准第30册)，2003，12。]，具有清热利湿、疏肝退黄之功效；用于湿热内蕴、胆汁外溢、黄疸肋痛、乏力、纳差等症；黄疸型病毒性肝炎见上述征候者。其制备方法为：甲液取茵陈、柴胡加水蒸馏，收集蒸馏液再重蒸馏制得；乙液取大黄加蒸馏水蒸煮、过滤、浓缩，分别用浓度为70％-75％、80％-85％、85-87％的乙醇处理；丙液取苦参、大青叶和茵陈、柴胡药渣加蒸馏水蒸煮、过滤、浓缩，分别用浓度为70％-75％、80％-85％、85-87％的乙醇处理；将乙液与丙液合并，加注射用水、冷藏、过滤、脱炭、过滤、浓缩、再加入甲液和注射用水及吐温-80，制成针剂。上述制备方法有以下不足之处：虽然重蒸馏可以使用量减少，注射液的澄明度提高，但加热时间过长，容易使挥发性有效成分变质；溶液采用多次乙醇沉淀，有效成分损失严重、乙醇损耗量大、周期长、安全性差；用活性炭处理时，活性炭对有效成分也有很强的吸附作用，使有效成分损失；增溶剂吐温-80会造成溶血现象。苦黄注射液自上市以来，虽然在临床上取得了一定的疗效，但未能达到预期的治疗效果。因此，利用现代的科学技术方法对苦黄注射液进行进一步的开发，使其发挥更好的临床效果是很有必要的。

注射液对稳定性的要求较高，而且在生产、运输、贮藏过程中容易破碎。

在资料检索中未发现有关苦黄冻干粉针剂的任何报道。

发明内容

为了解决苦黄注射液制备方法中存在的问题，本发明的研究人员从制备工艺入手，采用先进的科学技术方法对制备工艺进行了改进，最大限度的保留了所含的有效成分的同时去除其中的杂质，并对有效成分进行了分离、纯化。最终制备成冻干粉针剂，使得制剂更加稳定，贮藏、运输、使用更加方便。

本发明的目的是提供一种制备工艺先进、有效成分含量高、疗效好、副作用小、使用方便的苦黄冻干粉针剂。

本发明的另一个目的是提供上述苦黄冻干粉针剂的制备方法。

本发明通过以下技术方案实现。

一、制备方法

(1)原料药材重量份配比为：苦参70-90，大黄150-200，大青叶150-180，茵陈200-250，柴胡200-250；

(2)取上述大黄药材，粉碎，过20-60目筛，加5-8倍量70％-90％乙醇溶液，放入超声提取罐中，进行超声振荡提取，时间为20-50分钟，振荡频率为20-100kHz，控制温度为室温，提取2-3次，每次1小时，合并提取液，静置，过滤，滤液以12000-20000转/分的速度离心，离心液用截留分子量为5000-7000的超滤膜超滤，滤液50℃以下减压浓缩成密度为1.25的清膏，用稀盐酸调节pH3-5，过已处理好的非极性或弱极性大孔吸附树脂柱，先用4-6倍柱体积的水洗脱，再用3-5倍柱体积70％-90％乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，50℃以下减压浓缩，干燥，粉碎，得到大黄醇提物；

(3)取上述茵陈、柴胡药材，粉碎，用水蒸气蒸馏法提取挥发油；药渣备用，将挥发油和上述大黄醇提物用少量乙醇溶解，缓慢加入到羟丙基-β-环糊精制成的饱和水溶液中，50℃搅拌3小时，室温下继续搅拌5小时，冷藏过夜，过滤，得到羟丙基-β-环糊精包合物40-80重量份；

(4)取上述苦参、大青叶药材与茵陈、柴胡药渣，用6-10倍量40％-70％乙醇回流提取2-3次，每次1小时，合并提取液，静置，过滤，滤液以12000-20000转/分的速度离心，离心液用截留分子量为5000-7000的超滤膜超滤，滤液50℃以下减压浓缩成密度为1.20的清膏，过已处理好的非极性或弱极性大孔吸附树脂柱，先用4-6倍柱体积的水洗脱，再用3-5倍柱体积70％-90％乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，50℃以下减压浓缩，干燥，粉碎，得到醇提物4-10重量份。

(5)将上述包合物、醇提物用注射用水溶解，滤过，加入冻干赋型剂30-76重量份，加注射用水至规定量，用葡甲胺调节pH7.5-8.5，用0.22μm的微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，即得。

羟丙基-β-环糊精极易溶于水，包合量大，无溶血反应，毒性低。对茵陈、柴胡药材中提取的挥发油和大黄中提取的大黄总蒽醌采用羟丙基-β-环糊精进行包合，包合物的水溶性很好，使得制成的制剂的更加稳定；由于去除了具有溶血作用的表面活性剂，使制剂的安全性更好。

超滤是一种膜分离技术，在常温、加压条件下，使溶液中不同分子量的物质分离的一种方法，能有效除去溶液中的引起制剂副作用和不稳定的鞣质、树脂、蛋白质、淀粉等大分子物质，而小分子的有效成分则不被超滤膜截留而滤过。制备过程中不需要长时间加热，保持了原药材的生物活性和有效成分的稳定性。在制剂的整个制备过程中，周期短，加热时间少，对有效成分的保留较好。

大孔吸附树脂对药材中所含的有效成分有亲和力，利用这一特点，使有效成分与其它非活性成分得以分离，对有效成分起到了纯化的作用。

二、含量分析

测定方法按照苦黄注射液[国家药典委员会。国家药品标准(新药转正标准第30册)，2003，12。]标准含量测定中的分光光度法进行测定大黄总蒽醌的含量，酸碱滴定法测定苦参生物碱的含量。苦黄注射液由常熟雷允上制药有限公司生产；本发明苦黄冻干粉针剂由广东天之骄药物开发有限公司提供。测定结果见表1。

                表1  苦黄制剂中指标成分的含量测定

            大黄总蒽醌(mg/支)              苦参生物碱(mg/支)       

批号

       苦黄注射液    苦黄冻干粉针剂    苦黄注射液    苦黄冻干粉针剂

1        0.75            0.94             4.26            5.62

2        0.76            0.90             4.34            5.58

3        0.74            0.92             4.18            5.60

4        0.75            0.92             4.30            5.46

5        0.78            0.93             4.22            5.54

注：苦黄注射液[国家药典委员会。国家药品标准(新药转正标准第30册)，2003，12。]标准含量测定项下规定：苦黄注射液每支含大黄总蒽醌不得少于0.72mg；每支含苦参生物碱应为4.0-6.0mg。

以上含量测定结果，用新工艺制备的苦黄冻干粉针剂中指标成分大黄总蒽醌和苦参生物碱的含量高于苦黄注射液中的含量，二者在统计学上有显著差异，说明本发明苦黄冻干粉针剂的工艺合理、科学，具有更好的实用性。

三、安全性考察

编号1：苦黄注射液由常熟雷允上制药有限公司生产；编号2：本发明苦黄冻干粉针剂由广东天之骄药物开发有限公司提供。

取家兔心脏血，置有玻璃珠的容器内，振摇数分钟，除去蛋白元，使成脱纤血，加生理盐水，摇匀，离心，顷去上清液，沉淀的红细胞再用生理盐水洗涤3次至离心后上清液不显红色为止，然后按所得红细胞体积用生理盐水稀释成2％的混悬液，当天使用，用时摇匀。取洁净试管5支，1号试管中加入上述1号苦黄注射液0.4ml；2号试管中加入上述2号本发明苦黄冻干粉针剂的溶液(一支用10ml注射用水溶解)0.4ml；3号试管中加入上述1号苦黄注射液0.5ml；4号试管中加入上述2号本发明苦黄冻干粉针剂的溶液(一支用10ml注射用水溶解)0.5ml；各管再按下表配比量加入生理盐水；5号试管加生理盐水2.5ml作为阴性对照，然后分别加2％红细胞混悬液2.5ml，摇匀，迅速置恒温箱内，保持在37℃，1小时以内每隔15分钟观察一次，1小时以后每隔1小时观察一次，共观察2小时。结果见表2。

                            表2  溶血试验结果

试管号    2％红血球混悬液(ml)    生理盐水(ml)    药液(ml)    溶血现象

1                2.5                 2.1          1号0.4         -

2                2.5                 2.1          2号0.4         -

3                2.5                 2.0          1号0.5         +

4                2.5                 2.0          2号0.5         -

5                2.5                 2.5          0.0            -

注：-表示无溶血现象发生；+表示有溶血现象发生。

以上实验结果说明，高浓度时，苦黄注射液具有明显溶血作用，本发明的苦黄冻干粉针剂则不含有溶血作用的吐温-80而使溶血反应明显降低。说明本发明苦黄冻干粉针剂副作用小，安全性好。

四、药理实施例

苦黄注射液由常熟雷允上制药有限公司生产；本发明苦黄冻干粉针剂由广东天之骄药物开发有限公司提供。

4.1苦黄制剂对大鼠胆汁分泌量的影响

将体重250±25g的Wistar大鼠30只，雌雄兼有，随机分为空白对照组(给予相同体积的生理盐水)，苦黄注射液组，本发明苦黄冻干粉针剂组。每组10只，用3％戊巴比妥钠1.5ml/kg，ip麻醉后剖腹，将细管插入胆总管引流胆汁。稳定0.5小时后，收集给药前1小时，给药后1，2小时的胆汁量并计量。结果见表3。

       表3  苦黄制剂对大鼠胆汁分泌量的影响(ml/h，kg，X±SD)

                   动物数   给药前               给药后(h)        

组别

                   (只)       1h            1               2

对照组              10    2.74±0.84    2.70±0.66      2.42±0.71

苦黄注射液组        10    2.82±0.77    3.16±0.85^*    2.88±0.64^*

苦黄冻干粉针剂组    10    2.89±0.92    3.37±0.78^*#   3.14±0.86^*#

注：与对照组比较：^*P＜0.01；

    与苦黄注射液组比较：#P＜0.05。

以上试验，苦黄注射液组和本发明苦黄冻干粉针剂组均可增加大鼠胆汁分泌量，和对照组相比，有显著性差异(P＜0.01)；本发明苦黄冻干粉针剂组和苦黄注射液组相比，增加大鼠胆汁分泌量也有差异(P＜0.05)，说明本发明苦黄冻干粉针剂的药理作用强于苦黄注射液。

4.2苦黄制剂对大鼠胆汁中胆红素含量的影响

取胆汁0.2ml，用氯仿∶乙醇(4∶6)混合液稀释至2ml，然后取出0.2ml于带塞试管中，加入1.6ml95％乙醇，0.2ml重氮化试剂，室温暗置1小时后，用分光光度计在波长520nm测定吸光度，带入已得到的标准曲线回归方程求出样品中的胆红素含量。结果见表4。

 表4  苦黄制剂对大鼠胆汁中胆红素含量的影响(μl/h，kg，X±SD)

                  动物数     给药前          给药后(h)      

组别

                   (只)        1h         1            2

对照组              10      256±58    226±82      238±57

苦黄注射液组        10      271±64    310±85^*    298±76^*

苦黄冻干粉针剂组    10      267±55    336±77^*#   316±64^*#

注：与对照组比较：^*P＜0.01；

    与苦黄注射液组比较：#P＜0.05。

以上试验，苦黄注射液组和本发明苦黄冻干粉针剂组均可增加大鼠胆汁中胆红素的含量，和对照组相比，有显著性差异(P＜0.01)；本发明苦黄冻干粉针剂组和苦黄注射液组相比，增加大鼠胆汁中胆红素的含量也有差异(P＜0.05)，说明本发明苦黄冻干粉针剂的药理作用强于苦黄注射液。

以上药理实验说明，本发明苦黄冻干粉针剂的药理作用强于苦黄注射液。说明用新的制备方法制成的本发明苦黄冻干粉针剂对于苦黄注射液的进一步开发是成功的，本发明的制备方法更加科学，更加合理，更加具有实用性。

五、制备实施例

以下实施例旨在进一步举例说明，而不是限制本发明。在不违背本发明的精神和原则的前提下，对发明个别技术步骤进行的任何改动或改变将落入本发明权利要求范围内。

实施例1

(1)原料药材为：苦参90g，大黄200g，大青叶180g，茵陈250g，柴胡250g；

(2)取上述大黄药材，粉碎，过60目筛，加8倍量90％乙醇溶液，放入超声提取罐中，进行超声振荡提取，时间为50分钟，振荡频率为100kHz，控制温度为室温，提取3次，每次1小时，合并提取液，静置，过滤，滤液以16000转/分的速度离心，离心液用截留分子量为5000的超滤膜超滤，滤液50℃以下减压浓缩成密度为1.25的清膏，用稀盐酸调节pH3，过已处理好的AB-8型大孔吸附树脂柱，先用6倍柱体积的水洗脱，再用5倍柱体积70％乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，50℃以下减压浓缩，干燥，粉碎，得到大黄醇提物；

(3)取上述茵陈、柴胡药材，粉碎，用水蒸气蒸馏法提取挥发油；药渣备用；将挥发油和上述大黄醇提物用少量乙醇溶解，缓慢加入到羟丙基-β-环糊精制成的饱和水溶液中，50℃搅拌3小时，室温下继续搅拌5小时，冷藏过夜，过滤，得到羟丙基-β-环糊精包合物80g；

(4)取上述苦参、大青叶药材与茵陈、柴胡药渣，用10倍量70％乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，静置，过滤，滤液以20000转/分的速度离心，离心液用截留分子量为5000的超滤膜超滤，滤液50℃以下减压浓缩成密度为1.20的清膏，过已处理好的AB-8型大孔吸附树脂柱，先用6倍柱体积的水洗脱，再用5倍柱体积90％乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，50℃以下减压浓缩，干燥，粉碎，得到醇提物10g。

(5)将上述包合物、醇提物用注射用水溶解，滤过，加入聚乙烯吡咯烷酮30g，加注射用水至1000ml，用葡甲胺调节pH8.5，用0.22μm的微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，即得本发明苦黄冻干粉针剂100支。

实施例2

(1)原料药材为：苦参70g，大黄150g，大青叶150g，茵陈200g，柴胡200g；

(2)取上述大黄药材，粉碎，过20目筛，加5倍量70％乙醇溶液，放入超声提取罐中，进行超声振荡提取，时间为20分钟，振荡频率为20kHz，控制温度为室温，提取2次，每次1小时，合并提取液，静置，过滤，滤液以14000转/分的速度离心，离心液用截留分子量为7000的超滤膜超滤，滤液50℃以下减压浓缩成密度为1.25的清膏，用稀盐酸调节pH5，过已处理好的D101型大孔吸附树脂柱，先用4倍柱体积的水洗脱，再用3倍柱体积90％乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，50℃以下减压浓缩，干燥，粉碎，得到大黄醇提物；

(3)取上述茵陈、柴胡药材，粉碎，用水蒸气蒸馏法提取挥发油；药渣备用；将挥发油和上述大黄醇提物用少量乙醇溶解，缓慢加入到羟丙基-β-环糊精制成的饱和水溶液中，50℃搅拌3小时，室温下继续搅拌5小时，冷藏过夜，过滤，得到羟丙基-β-环糊精包合物40g；

(4)取上述苦参、大青叶药材与茵陈、柴胡药渣，用6倍量40％乙醇回流提取2次，每次1小时，合并提取液，静置，过滤，滤液以12000转/分的速度离心，离心液用截留分子量为7000的超滤膜超滤，滤液50℃以下减压浓缩成密度为1.20的清膏，过已处理好的D101型大孔吸附树脂柱，先用4倍柱体积的水洗脱，再用3倍柱体积70％乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，50℃以下减压浓缩，干燥，粉碎，得到醇提物4g。

(5)将上述包合物、醇提物用注射用水溶解，滤过，加入甘露醇和葡聚糖76g，加注射用水至1000ml，用葡甲胺调节pH7.5，用0.22μm的微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，即得本发明苦黄冻干粉针剂100支。

实施例3

(1)原料药材为：苦参80g，大黄180g，大青叶170g，茵陈230g，柴胡210g；

(2)取上述大黄药材，粉碎，过40目筛，加6倍量80％乙醇溶液，放入超声提取罐中，进行超声振荡提取，时间为40分钟，振荡频率为70kHz，控制温度为室温，提取2次，每次1小时，合并提取液，静置，过滤，滤液以18000转/分的速度离心，离心液用截留分子量为6000的超滤膜超滤，滤液50℃以下减压浓缩成密度为1.25的清膏，用稀盐酸调节pH4，过已处理好的NKA型大孔吸附树脂柱，先用5倍柱体积的水洗脱，再用4倍柱体积80％乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，50℃以下减压浓缩，干燥，粉碎，得到大黄醇提物；

(3)取上述茵陈、柴胡药材，粉碎，用水蒸气蒸馏法提取挥发油；药渣备用；将挥发油和上述大黄醇提物用少量乙醇溶解，缓慢加入到羟丙基-β-环糊精制成的饱和水溶液中，50℃搅拌3小时，室温下继续搅拌5小时，冷藏过夜，过滤，得到羟丙基-β-环糊精包合物62g；

(4)取上述苦参、大青叶药材与茵陈、柴胡药渣，用8倍量50％乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，静置，过滤，滤液以18000转/分的速度离心，离心液用截留分子量为6000的超滤膜超滤，滤液50℃以下减压浓缩成密度为1.20的清膏，过已处理好的NKA型大孔吸附树脂柱，先用5倍柱体积的水洗脱，再用4倍柱体积80％乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，50℃以下减压浓缩，干燥，粉碎，得到醇提物7g。

(5)将上述包合物、醇提物用注射用水溶解，滤过，加入葡萄糖和乳糖51g，加注射用水至1000ml，用葡甲胺调节pH8.0，用0.22μm的微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，即得本发明苦黄冻干粉针剂100支。

实施例4

(1)原料药材为：苦参75g，大黄170g，大青叶160g，茵陈220g，柴胡240g；

(2)取上述大黄药材，粉碎，过40目筛，加7倍量75％乙醇溶液，放入超声提取罐中，进行超声振荡提取，时间为30分钟，振荡频率为50kHz，控制温度为室温，提取3次，每次1小时，合并提取液，静置，过滤，滤液以20000转/分的速度离心，离心液用截留分子量为5600的超滤膜超滤，滤液50℃以下减压浓缩成密度为1.25的清膏，用稀盐酸调节pH4.5，过已处理好的D101型大孔吸附树脂柱，先用4倍柱体积的水洗脱，再用3倍柱体积75％乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，50℃以下减压浓缩，干燥，粉碎，得到大黄醇提物；

(3)取上述茵陈、柴胡药材，粉碎，用水蒸气蒸馏法提取挥发油；药渣备用；将挥发油和上述大黄醇提物用少量乙醇溶解，缓慢加入到羟丙基-β-环糊精制成的饱和水溶液中，50℃搅拌3小时，室温下继续搅拌5小时，冷藏过夜，过滤，得到羟丙基-β-环糊精包合物71g；

(4)取上述苦参、大青叶药材与茵陈、柴胡药渣，用7倍量55％乙醇回流提取2次，每次1小时，合并提取液，静置，过滤，滤液以14000转/分的速度离心，离心液用截留分子量为5600的超滤膜超滤，滤液50℃以下减压浓缩成密度为1.20的清膏，过已处理好的D101型大孔吸附树脂柱，先用4倍柱体积的水洗脱，再用5倍柱体积75％乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，50℃以下减压浓缩，干燥，粉碎，得到醇提物6g。

(5)将上述包合物、醇提物用注射用水溶解，滤过，加入葡聚糖和果糖43g，加注射用水至1000ml，用葡甲胺调节pH7.8，用0.22μm的微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，即得本发明苦黄冻干粉针剂100支。

实施例5

(1)原料药材为：苦参850g，大黄1900g，大青叶1750g，茵陈2400g，柴胡2300g；

(2)取上述大黄药材，粉碎，过60目筛，加8倍量85％乙醇溶液，放入超声提取罐中，进行超声振荡提取，时间为45分钟，振荡频率为30kHz，控制温度为室温，提取3次，每次1小时，合并提取液，静置，过滤，滤液以12000转/分的速度离心，离心液用截留分子量为6400的超滤膜超滤，滤液50℃以下减压浓缩成密度为1.25的清膏，用稀盐酸调节pH3.5，过已处理好的AB-8型大孔吸附树脂柱，先用5倍柱体积的水洗脱，再用5倍柱体积85％乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，50℃以下减压浓缩，干燥，粉碎，得到大黄醇提物；

(3)取上述茵陈、柴胡药材，粉碎，用水蒸气蒸馏法提取挥发油；药渣备用；将挥发油和上述大黄醇提物用少量乙醇溶解，缓慢加入到羟丙基-β-环糊精制成的饱和水溶液中，50℃搅拌3小时，室温下继续搅拌5小时，冷藏过夜，过滤，得到羟丙基-β-环糊精包合物490g；

(4)取上述苦参、大青叶药材与茵陈、柴胡药渣，用9倍量60％乙醇回流提取2次，每次1小时，合并提取液，静置，过滤，滤液以16000转/分的速度离心，离心液用截留分子量为6400的超滤膜超滤，滤液50℃以下减压浓缩成密度为1.20的清膏，过已处理好的AB-8型大孔吸附树脂柱，先用6倍柱体积的水洗脱，再用4倍柱体积85％乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，50℃以下减压浓缩，干燥，粉碎，得到醇提物80g。

(5)将上述包合物、醇提物用注射用水溶解，滤过，加入甘露醇、聚乙烯吡咯烷酮和右旋糖苷630g，加注射用水至10000ml，用葡甲胺调节pH8.3，用0.22μm的微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，即得本发明苦黄冻干粉针剂1000支。

功能与主治：清热利湿、疏肝退黄之功效；用于湿热内蕴、胆汁外溢、黄疸肋痛、乏力、纳差等症；黄疸型病毒性肝炎见上述征候者。

用法与用量：静脉滴注，用500ml 5％或10％葡萄糖注射液稀释后使用，一次1-6支，一日1次，15天为一疗程；严重及郁胆型肝炎患者每次用量可增加至6支，或遵医嘱。

注意：(1)使用剂量应逐日增加，每一天1支，每二天2支，每三天3-6支。(2)滴速不宜过快，每分钟滴30滴。滴速快时，可致头昏、心慌，减慢滴速，症状可消失。

Claims (7)

1、一种苦黄冻干粉针剂，其特征在于，它是由茵陈、柴胡挥发油和大黄醇提物的羟丙基-β-环糊精包合物40-80重量份，茵陈、柴胡药渣与苦参、大青叶的醇提物4-10重量份与药用辅料30-76重量份制备而成。

2、根据权利要求1所述的冻干粉针剂，其特征在于，药用辅料是甘露醇、葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮、葡萄糖、果糖、右旋糖苷和乳糖中的一种、两种或几种的混合物。

3、根据权利要求1所述的苦黄冻干粉针剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)原料药材重量份配比为：苦参70-90，大黄150-200，大青叶150-180，茵陈200-250，柴胡200-250；

(2)取上述大黄药材，粉碎，过20-60目筛，加5-8倍量70％-90％乙醇溶液，放入超声提取罐中，进行超声振荡提取，时间为20-50分钟，振荡频率为20-100kHz，控制温度为室温，提取2-3次，每次1小时，合并提取液，静置，过滤，滤液高速离心，离心液用超滤膜超滤，滤液50℃以下减压浓缩成密度为1.25的清膏，用稀盐酸调节pH3-5，过已处理好的大孔吸附树脂柱，先用2-5倍柱体积的水洗脱，再用3-4倍柱体积乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，50℃以下减压浓缩，干燥，粉碎，得到大黄醇提物；

(3)取上述茵陈、柴胡药材，粉碎，用水蒸气蒸馏法提取挥发油；药渣备用；将挥发油和上述大黄醇提物用少量乙醇溶解，缓慢加入到羟丙基-β-环糊精制成的饱和水溶液中，50℃搅拌3小时，室温下继续搅拌5小时，冷藏过夜，过滤，得到羟丙基-β-环糊精包合物；

(4)取上述苦参、大青叶药材与茵陈、柴胡药渣，用6-10倍量40％-70％乙醇回流提取2-3次，每次1小时，合并提取液，静置，过滤，滤液高速离心，离心液用超滤膜超滤，滤液50℃以下减压浓缩成密度为1.20的清膏，过已处理好的大孔吸附树脂柱，先用4-6倍柱体积的水洗脱，再用3-5倍柱体积乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，50℃以下减压浓缩，干燥，粉碎，得到醇提物。

(5)将上述包合物、醇提物用注射用水溶解，滤过，加入冻干赋型剂，加注射用水至规定量，用葡甲胺调节pH7.5-8.5，用0.22μm的微孔滤膜过滤，灌装，冷冻干燥，即得。

4、根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，洗脱大孔吸附树脂所用乙醇溶液浓度为70％-90％。

5、根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，大孔吸附树脂为非极性或弱极性。

6、根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，高速离心的速度为12000-20000转/分。

7、根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所用的超滤膜截留分子量为5000-7000。