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CN119212994A - 作为shp2抑制剂的吡唑并吡嗪化合物 - Google Patents

作为shp2抑制剂的吡唑并吡嗪化合物 Download PDF

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CN119212994A
CN119212994A CN202280089698.1A CN202280089698A CN119212994A CN 119212994 A CN119212994 A CN 119212994A CN 202280089698 A CN202280089698 A CN 202280089698A CN 119212994 A CN119212994 A CN 119212994A
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CN
China
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alkyl
compound
pharmaceutically acceptable
acceptable salt
independently
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Application number
CN202280089698.1A
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English (en)
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G·贝吉斯
M·比安奇奥托
I·德维尔斯
Y·福里希尔
A·吉尼沃-波莱拉
A·L·吉尔
A·卡尔森
E·S·科尔顿
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Ruixin Pharmaceutical Co
Genzyme Corp
Original Assignee
Ruixin Pharmaceutical Co
Genzyme Corp
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Abstract

本文提供了用于调节SHP2的化合物及其药物组合物以及它们在疾病治疗中的用途。

Description

作为SHP2抑制剂的吡唑并吡嗪化合物
相关申请的交叉引用
本申请要求2021年12月17日提交的美国临时申请第63/291,012号和2022年12月8日提交的美国临时申请第63/431,260号的优先权，每个临时申请的公开内容特此通过引用整体并入。
技术领域
本公开涉及可用于治疗疾病或病症如癌症的蛋白酪氨酸磷酸酶SHP2的抑制剂。具体地，本公开描述了抑制SHP2的化合物和组合物，治疗与SHP2相关的疾病的方法，以及合成这些化合物的方法。
背景技术
SH2结构域的蛋白酪氨酸磷酸酶-2(SHP2)是由PTPN11基因编码的非受体蛋白酪氨酸磷酸酶，其促成多种细胞功能，包括增殖、分化、细胞周期维持和迁移。SHP2参与通过Ras-促分裂原活化蛋白激酶、JAK-STAT或磷酸肌醇3-激酶-AKT途径的信号传导。
PTPN11基因中的突变以及随后SHP2中的突变已经在几种人疾病中得以鉴定，这些疾病如努南综合征(Noonan Syndrome)、豹皮综合征(Leopard Syndrome)、幼年型粒单核细胞白血病、黑素瘤、成神经细胞瘤、急性髓性白血病，以及乳腺癌、肺癌、结肠癌和脑癌，包括成胶质细胞瘤(Chan,G.等人，Cancer Metastasis Rev.2008,27,179-192；Zhang,J.等人，J.Cell.Mol.Med.2015,19,2075-2083；Roccograndi L.等人，J.Neuro-Oncol.2017,135,487-496；Mitra R.等人，ChemMedChem 2021,16,777-787)。因此，SHP2代表开发用于治疗各种疾病(包括癌症)的新疗法的高度有吸引力的靶标。对于治疗或预防与脑部相关的癌症，具有脑穿透能力的SHP2抑制剂是特别有吸引力的。
因此，在一个方面，本文提供了作为SHP2调节剂用于治疗疾病如癌症的化合物。
发明内容
在某些实施方案中，本文描述了用于调节SHP2以治疗疾病如癌症的化合物及其组合物。
涵盖以下实施方案。
实施方案1是一种式(I)化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
环A为C3-C6环烷基、苯基、5至6元杂环烷基或5至6元杂芳基，其中所述杂环烷基和所述杂芳基含有1-3个选自N、O和S的杂原子；
每个R1独立地为卤代基、氰基、-NR2aR2b、C1-C6烷基、氧代基、羟基、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基-OH、C1-C6烷基-CN、-C(O)NR2aR2b、-C(O)(C1-C6烷基)、-CO2H、-CO2(C1-C6烷基)、-Si(Ra)(Rb)(Rc)、-P(O)(Ra)(Rb)、-OP(O)(Ra)(Rb)、C3-C6环烷基、苯基、5至6元杂环烷基或5至6元杂芳基，其中所述杂环烷基和所述杂芳基含有1-3个选自N、O和S的杂原子；
或者两个R1基团与它们所附接的碳原子或杂原子一起形成稠合苯基、5至6元杂环烷基或5至6元杂芳基，其中每一个任选地被1-4个R6基团取代，其中所述稠合杂环烷基和杂芳基含有1-3个选自N、O和S的杂原子；
每个Ra、Rb和Rc独立地为羟基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基；
每个R2a和R2b独立地为H、C1-C6烷基或C3-C6环烷基；
L为键、S、O、C(O)或N(Rd)；
Rd为H或C1-C6烷基；
X为CR3aR3b、NR3a或O；
R3a和R3b独立地为H或C1-C6烷基；
R4为H、C1-C6烷基、C1-C6烷基-OH、C1-C6卤代烷基或-NH2；
每个R5独立地为卤代基、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、-(C1-C6亚烷基)(C1-C6烷氧基)或C1-C6烷基-OH；
环B为稠合苯基或含有1-3个选自N、O和S的杂原子的5至6元杂芳基；
每个R6独立地为C1-C6烷基、卤代基或C1-C6卤代烷基；
每个R7独立地为C1-C6烷基、卤代基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基-OH、羟基、氰基、-Si(Ra)(Rb)(Rc)、-P(O)(Ra)(Rb)、-OP(O)(Ra)(Rb)、-NR2aR2b或C1-C6卤代烷基；
x为0-5；
y为0-2；并且
z为0-4；
其中所述化合物中的一个或多个氢原子任选地被氘置换。
实施方案2是如实施方案1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
环A为C3-C5环烷基、苯基、6元杂环烷基或5至6元杂芳基，其中所述杂环烷基和所述杂芳基含有1-2个选自N、O和S的杂原子。
实施方案3是如实施方案1或2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
环A为环丙基、苯基、二氢吡啶基、二氢吡喃基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡唑基、咪唑基、吡咯基、噻唑基、异噁唑基或噻吩基。
实施方案4是如实施方案1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
为：
实施方案5是如实施方案1-4中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
x为0、1、2或3；
每个R1当存在时独立地为卤代基、氰基、-NR2aR2b、C1-C3烷基、氧代基、羟基、C1-C3卤代烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3烷基-OH、C1-C3烷基-CN、-C(O)NR2aR2b、-C(O)(C1-C3烷基)、-CO2H、-CO2(C1-C3烷基)、-Si(Ra)(Rb)(Rc)、-P(O)(Ra)(Rb)、-OP(O)(Ra)(Rb)、C3-C5环烷基、苯基或6元杂环烷基，其中所述杂环烷基含有1-2个选自N和O的杂原子；
或者两个R1基团与它们所附接的碳原子或杂原子一起形成稠合苯基、5至6元杂环烷基或5至6元杂芳基，其中每一个任选地被1-2个R6基团取代，其中所述稠合杂环烷基和杂芳基含有1-2个选自N、O和S的杂原子；
每个Ra、Rb和Rc独立地为C1-C3烷基或C1-C3烷氧基；
每个R2a和R2b独立地为H、C1-C3烷基或C3-C5环烷基；并且
每个R6独立地为C1-C3烷基、卤代基或C1-C3卤代烷基。
实施方案6是如实施方案1-5中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
每个R1当存在时独立地为F、Cl、-CN、-CH2CN、-NH2、-N(H)CH3、-N(CH3)2、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、氧代基、-CF3、-OCH3、-CH2OH、-C(O)N(CH3)2、-C(O)CH3、环丙基或
或两个R1基团与它们所附接的碳原子或杂原子一起形成选自以下的稠合基团：
实施方案7是如实施方案1-6中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
为：
实施方案8是如实施方案1-7中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
L为键、O、C(O)或N(Rd)；并且
Rd为H或C1-C3烷基。
实施方案9是如实施方案1-8中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
X为CR3aR3b、NR3a或O；并且
R3a和R3b独立地为H或C1-C3烷基。
实施方案10是如实施方案9所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
X为CH2、N(H)、N(CH3)或O。
实施方案11是如实施方案1-10中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
R4为H、C1-C3烷基、C1-C3烷基-OH、C1-C3卤代烷基或-NH2。
实施方案12是如实施方案11所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
R4为H、CH3、-CH2OH、-CH2F或-CHF2。
实施方案13是如实施方案1-12中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
y为0或1；
每个R5当存在时独立地为卤代基、C1-C3烷基、C1-C3卤代烷基、-(C1-C3亚烷基)(C1-C3烷氧基)或C1-C3烷基-OH。
实施方案14是如实施方案13所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
每个R5当存在时独立地为Cl、F、-CH2F、-CHF2、-CH2OCH3或-CH2OH。
实施方案15是如实施方案1-14中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
环B为稠合苯基或含有1-2个选自N、O和S的杂原子的5至6元杂芳基。
实施方案16是如实施方案15所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
环B为稠合苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、噻唑基或噁唑基。
实施方案17是如实施方案1-16中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
z为0、1或2；
每个R7当存在时独立地为C1-C3烷基、卤代基、C1-C3烷氧基、C1-C3烷基-OH、羟基、氰基、-Si(Ra)(Rb)(Rc)、-P(O)(Ra)(Rb)、-OP(O)(Ra)(Rb)、-NR2aR2b或C1-C3卤代烷基；
每个Ra、Rb和Rc独立地为羟基、C1-C3烷基或C1-C3烷氧基；并且
每个R2a和R2b独立地为H、C1-C3烷基或C3-C5环烷基。
实施方案18是如实施方案17所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
每个R7当存在时独立地为CH3、F、-OCH3、-CH2OH、羟基、-CN、-N(CH3)2或-CHF2。
实施方案19是如实施方案1-18中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
为：
实施方案20是如实施方案1-19中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物具有式(IIa)、(IIb)、(IIc)、(IId)、(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(IIId)、(IIIe)或(IIIf)：
实施方案21是如实施方案20所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物具有式(IIa-1)：
实施方案22是如实施方案21所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
x为0、1或2；
每个R1当存在时独立地为卤代基；并且
R4为C1-C6烷基。
实施方案23是如实施方案22所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
x为0或1；
R1当存在时为F；并且
R4为-CH3。
实施方案24是如实施方案1-19中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物具有式(IVa)、(IVb)、(IVc)、(IVd)或(IVe)：
实施方案25是一种选自表1的化合物的化合物或其药学上可接受的盐。
实施方案26是一种药物组合物，其包含如实施方案1-25中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的赋形剂。
实施方案27是一种抑制SHP2的方法，其包括使SHP2与有效量的如实施方案1-25中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，或如实施方案26所述的药物组合物接触。
实施方案28是一种治疗有需要的受试者中与SHP2调节相关的疾病的方法，其包括向所述受试者施用有效量的如实施方案1-25中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，或如实施方案26所述的药物组合物。
实施方案29是如实施方案28所述的方法，其中所述疾病是努南综合征、豹皮综合征、幼年型粒单核细胞白血病、成神经细胞瘤、黑素瘤、急性髓性白血病、乳腺癌、肺癌、结肠癌或脑癌，任选地其中所述脑癌是成胶质细胞瘤。
具体实施方式
定义
除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与要求保护的主题所属领域中的技术人员通常所理解的相同含义。应理解，前面的概述和下面的详述仅为示例性和说明性而非限制所要求保护的任何主题。就通过引用并入本文的任何材料与本公开的明确内容不一致而言，以明确内容为准。在本申请中，除非另有明确说明，否则单数的使用包括复数。必须指出的是，如本说明书和所附权利要求书中所用，除非上下文另外明确指出，否则单数形式“一”、“一种(个)”和“所述(该)”包括复数指示物。在本申请中，除非上下文另有要求，否则“或”的使用意指“和/或”。此外，术语“包括(including)”以及其他形式(诸如“包括(include)”、“包括(includes)”和“包括(included)”)的使用不是限制性的。
本说明书中对“一些实施方案”、“一实施方案”，“一个实施方案”或“其他实施方案”的引用意指结合实施方案描述的具体特点、结构或特性包括在本发明的至少一些实施方案中，但不一定包括在本发明的所有实施方案中。
如本文所用，范围和量可以表示为“约”特定值或范围。约还包括确切的量。因此，“约5μL”意指“约5μL”，还意指“5μL”。通常，术语“约”包括预期在实验误差范围诸如15％、10％或5％以内的量。
本文所使用的小节标题仅出于组织性目的并且不解释为限制所描述的主题。
“烷基”是指无支链或有支链的饱和烃链。如本文所用，烷基具有1至20个碳原子(即，C1-C20烷基)、1至10个碳原子(即，C1-C10烷基)、1至6个碳原子(即，C1-C6烷基)或1至3个碳原子(即，C1-C3烷基)。烷基基团的实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、戊基、2-戊基、异戊基、新戊基、己基、2-己基、3-己基和3-甲基戊基。当具有特定碳数的烷基残基通过化学名称命名或通过分子式鉴定时，可涵盖具有该碳数的所有位置异构体；因此，例如，“丁基”包括正丁基(即，-(CH2)3CH3)、异丁基(即，-CH2CH(CH3)2)、仲丁基(即，-CH(CH3)CH2CH3)和叔丁基(即，-C(CH3)3)；并且“丙基”包括正丙基(即，-(CH2)2CH3)和异丙基(即，-CH(CH3)2)。
“烷基-CN”是指如上定义的无支链或有支链的烷基基团，其中一个或多个氢原子被-CN置换。例如，“C1-C6烷基-CN”是指被一个或多个-CN基团取代的C1-C6烷基。烷基-CN可含有附接至同一碳原子或多个碳原子的多个氰基基团。
“烷基-OH”是指如上定义的无支链或有支链的烷基基团，其中一个或多个氢原子被-OH置换。例如，“C1-C6烷基-OH”是指被一个或多个-OH基团取代的C1-C6烷基。烷基-OH可含有附接至同一碳原子或多个碳原子的多个羟基基团。
“烷氧基”基团是-O-(烷基)，其中烷基是以上定义的。
“芳基”基团是具有单环(例如，苯基或C6芳基)或多个稠环(例如，萘基或蒽基)的6至14个碳原子的芳族碳环基团(C6-C14芳基)。在一些实施方案中，芳基基团在所述基团的环部分中含有6-14个碳(C6-C14芳基)，并且在其他实施方案中含有6至12个碳(C6-C12芳基)或甚至6至10个碳原子(C6-C10芳基)。特定的芳基包括苯基、联苯基、萘基等。芳基基团可以是经取代或未经取代的。
“环烷基”是指具有单环或多环(包括稠环、桥环和螺环系统)的饱和或部分不饱和环状烷基基团。术语“环烷基”包括环烯基(即，具有至少一个双键的环状基团)。如本文所用，环烷基具有3至20个环碳原子(即，C3-C20环烷基)、3至10个环碳原子(即，C3-C10环烷基)或3至6个环碳原子(即，C3-C6环烷基)。当在同一碳原子上存在两个取代位置时，环烷基还包括“螺环烷基”。单环基团包括例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基和环辛基。多环基团包括例如金刚烷基、降冰片基、十氢萘基、7,7-二甲基-双环[2.2.1]庚烷基等。此外，术语环烷基旨在涵盖可与芳基环稠合的任何非芳族环，而与分子的其余部分的附接无关。
“卤代烷基”是指如上定义的无支链或有支链的烷基基团，其中一个或多个氢原子被卤素置换。例如，“C1-C6卤代烷基”是指被一个或多个卤素原子取代的C1-C6烷基。C1卤代烷基是指可被1-3个卤代基基团取代的甲基基团，C2卤代烷基是指可被1-5个卤代基基团取代的乙基基团，C3卤代烷基是指可被1-7个卤代基基团取代的丙基基团，等等。卤代烷基的实例包括三氟甲基、二氟甲基、三氯甲基、2,2,2-三氟乙基、1,2-二氟乙基、3-溴-2-氟丙基、1,2-二溴乙基等。卤代烷基可含有一个或多个相同的卤原子(即，全部为氟)或卤原子的混合物(即，氯和氟)。
“杂芳基”是指具有单环、多环或多个稠环的芳族基团(例如，5-14元环系)，其中一个或多个环杂原子独立地选自氮、氧和硫。如本文所用，杂芳基在环内包括1至10个环碳原子和1至4个独立地选自氮、氧和硫的杂原子。杂芳基基团的实例包括吡咯基、吡唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、喹啉基、奎宁环基、异喹啉基、四氢喹啉基、噻唑基、噻二唑基、三唑基、四唑基、三嗪基和噻吩基(thiophenyl)(即，噻吩基(thienyl))。
“杂环基”是指具有一个或多个独立地选自氮、氧和硫的环杂原子的饱和或不饱和环状烷基基团。术语“杂环基”包括杂环烯基基团(即，具有至少一个双键的杂环基基团)、桥接杂环基基团、稠合杂环基基团和螺杂环基基团。杂环基可以是单环或多环，其中所述多环可以是稠合的、桥接的或螺环的，并且可以包含一个或多个氧代(C＝O)或N-氧化物(N-O-)部分。含有至少一个杂原子的任何非芳族环被认为是杂环基，无论附接如何(即，可以通过碳原子或杂原子结合)。此外，术语杂环基旨在涵盖含有至少一个杂原子的任何非芳族环，所述环可与芳基或杂芳基环稠合，而与分子的其余部分的附接无关。如本文所用，杂环基具有1至10个环碳原子、1至8个碳原子、1至6个碳原子或1至4个碳原子及1至5个环杂原子、1至4个杂原子、1至3个杂原子或1至2个杂原子，所述杂原子独立地选自氮、硫和氧。杂环基基团的实例包括二氧戊环基、噻吩基[1,3]二噻烷基、十氢异喹啉基、咪唑啉基、咪唑烷基、异噻唑烷基、异噁唑烷基、吗啉基、八氢吲哚基、八氢异吲哚基、2-氧代哌嗪基、2-氧代哌啶基、2-氧代吡咯烷基、噁唑烷基、哌啶基、哌嗪基、4-哌啶酮基、吡咯烷基、吡唑烷基、奎宁环基、噻唑烷基、四氢呋喃基、三噻烷基、四氢吡喃基、硫代吗啉基、硫吗啉基、1-氧代-硫代吗啉基和1,1-二氧代-硫代吗啉基。
“氰基”是指基团-CN。
“卤素”或“卤代基”包括氟、氯、溴和碘。
“羟基”是指基团-OH。
“氧代基”是指原子(＝O)或(O)。
可以使用某些常用的替代化学名称。例如，二价基团如二价“烷基”基团、二价“苯基”基团、二价“杂芳基”基团、二价“杂环基”基团等，也可分别称为“亚烷基”基团、“亚苯基”基团、“杂亚芳基”基团或“杂亚环基”基团。
术语“任选的”或“任选地”意指随后描述的事件或情形可能发生或可能不发生，并且该描述包括所述事件或情形发生的情况和不发生的情况。
此外，术语“任选取代的”是指指定原子或基团上的任何一个或多个氢原子可以被或可以不被除氢以外的部分置换。经取代的基团可以被一个或多个取代基，例如1、2、3、4或5个取代基取代。在一些实施方案中，取代基选自本文提供的官能团。在一些实施方案中，取代基选自氧代基、卤代基、-CN、NO2、-CO2Rx、-ORx、-SRx、-SORx、-SO2Rx、-NRyRz、-CONRyRz、-SO2NRyRz、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、-CRx＝C(Rx)2、-CCRx、C3-C10环烷基、C4-C10杂环基、C6-C14芳基和C5-C12杂芳基，其中每个Rx独立地为氢、C1-C6烷基、C3-C12环烷基、C4-C10杂环基、C6-C14芳基或C2-C12杂芳基；其中每个烷基、环烷基、杂环基、芳基或杂芳基任选地被1-3个卤代基、1-3个C1-C6烷基、1-3个C1-C6卤代烷基或1-3个C1-C6烷氧基取代。在一些实施方案中，取代基选自氯、氟、-OCH3、甲基、乙基、异丙基、环丙基、-OCF3、-CF3和-OCHF2。Ry和Rz独立地为氢；任选被-CO2H取代的C1-C6烷基或其酯；C1-C6烷氧基；氧代基；-CRw＝C(Rw)2；-CCRw；C3-C10环烷基；C3-C10杂环基；C6-C14芳基；或C5-C12杂芳基；其中每个Rw独立地为氢、C1-C6烷基、C3-C12环烷基、C4-C10杂环基、C6-C14芳基或C5-C12杂芳基；其中每个环烷基、杂环基、芳基或杂芳基任选地被1-3个烷基基团或1-3个卤代基基团取代，或Ry和Rz与它们所附接的氮原子一起形成5-7元杂环。
本文所述的任何化合物或化学式旨在表示化合物的未标记形式以及同位素标记形式。除了一个或多个原子是由具有选定原子质量或质量数的原子置换之外，同位素标记的化合物具有本文给出的化学式所描绘的结构。可掺入所公开的化合物中的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、氟、氯和碘的同位素，诸如分别为2H、3H、11C、13C、14C、13N、15N、15O、17O、18O、31P、32P、35S、18F、36Cl、123I和125I。本公开的各种同位素标记的化合物，例如其中掺入放射性同位素如2H、3H、13C和14C的那些，包括在本公开中。此类同位素标记的化合物可用于代谢研究、反应动力学研究、检测或成像技术，诸如正电子发射断层扫描(PET)或单光子发射计算机断层扫描(SPECT)，包括药物或底物组织分布测定，或者可用于患者的放射性治疗。
本公开还包括本文所述的化合物的“氘代类似物”，其中附接至碳原子的1至n个氢被氘置换，其中n为分子中氢的数目。当化合物中存在多个氘原子时，氘原子可在分子的同一部分上(例如，在单个烷基上或在单个环上)或在分子的不同部分上(例如，在单独的烷基基团上或单独的环上)。此类化合物可以表现出增加的代谢抗性，并且因此可以用于增加任何化合物当施用于哺乳动物(特别是人)时的半衰期。参见，例如，Foster,“DeuteriumIsotope Effects in Studies of Drug Metabolism,”Trends Pharmacol.Sci.5(12):524-527(1984)。此类化合物通过本领域熟知的方法合成，例如通过采用其中一个或多个氢已被氘置换的原材料。
“药学上可接受的”是指可用于制备适于兽医或人药物用途的药物组合物的化合物、盐、组合物、剂型和其他材料。
术语给定化合物的“药学上可接受的盐”是指保留给定化合物的生物有效性和特性并且不是生物学上或其他方面不期望的盐。“药学上可接受的盐”包括例如与无机酸的盐和与有机酸的盐。另外，如果本文所述的化合物作为酸加成盐获得，则游离碱可通过碱化酸式盐的溶液而获得。相反，如果产物是游离碱，则加成盐，特别是药学上可接受的加成盐，可以按照从碱化合物制备酸加成盐的常规方法，通过将游离碱溶解在合适的有机溶剂中并用酸处理所述溶液来制备。本领域技术人员将认识到可用于制备无毒的药学上可接受的加成盐的各种合成方法。药学上可接受的酸加成盐可由无机酸和有机酸制备。衍生自无机酸的盐包括盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、硝酸盐、磷酸盐等。衍生自有机酸的盐包括乙酸盐、丙酸盐、乙醇酸盐、丙酮酸盐、草酸盐、苹果酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、富马酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、苯甲酸盐、肉桂酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、乙磺酸盐、对甲苯磺酸盐、水杨酸盐等。同样，药学上可接受的碱加成盐可以由无机碱和有机碱来制备。仅举例而言，衍生自无机碱的盐包括钠盐、钾盐、锂盐、铵盐、钙盐和镁盐。衍生自有机碱的盐包括但不限于伯胺、仲胺和叔胺如烷基胺的盐。仅举例而言，合适的胺的具体实例包括异丙胺、三甲胺、二乙胺、三(异丙基)胺、三(正丙基)胺、乙醇胺、2-二甲基氨基乙醇、哌嗪、哌啶、吗啉、N-乙基哌啶等。应当理解，提及特定的盐，诸如盐酸盐或甲酸盐，可以指单盐，诸如单盐酸盐或单甲酸盐，或者可以指多盐，如二盐酸盐或二甲酸盐。
本文公开的化合物或其药学上可接受的盐可以包括不对称中心，并且因此可以产生对映异构体、非对映异构体和其他立体异构形式，这些异构体可以根据绝对立体化学定义为(R)-或(S)-，或对于氨基酸而言可以定义为(D)-或(L)-。本公开意在包括所有此类可能的异构体，以及它们的外消旋形式和光学纯形式。光学活性(+)和(-)、(R)-和(S)-或(D)-和(L)-异构体可以使用手性合成子或手性试剂制备，或使用常规技术拆分，例如色谱法和分级结晶。用于制备/分离单个对映异构体的常规技术包括从合适的光学纯前体手性合成或使用例如手性高压液相色谱(HPLC)拆分外消旋体(或盐或衍生物的外消旋体)。
“互变异构体”是指质子位置不同的化合物替代形式，诸如烯醇-酮和亚胺-烯胺互变异构体，或含有附接至环-NH-部分和环＝N部分的环原子的杂芳基的互变异构形式，诸如吡唑、咪唑、苯并咪唑、三唑和四唑。旨在包括本文所述的化合物的所有互变异构形式。
“立体异构体”是指由通过相同键键合的相同原子组成但具有不可互换的不同三维结构的化合物。本公开考虑了各种立体异构体及其混合物，并且包括“对映异构体”，“对映异构体”是指分子彼此为不可重叠的镜像的两种立体异构体。
“非对映异构体”是具有至少两个不对称原子，但彼此不互为镜像的立体异构体。
如本文所用，“药学上可接受的载体”或“药学上可接受的赋形剂”或“赋形剂”包括任何和所有溶剂、分散介质、包衣、抗细菌剂和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂等。此类介质和药剂用于药物活性物质的用途是本领域熟知的。除非任何常规介质或药剂与活性成分不相容，否则考虑其在治疗组合物中使用。补充活性成分也可以掺入组合物中。
化合物或组合物的“有效量”或剂量是指基于本文的公开内容产生预期结果的化合物或组合物的量。有效量可在细胞培养物或实验动物中通过标准制药程序测定，包括但不限于通过测定LD50(对50％群体致死的剂量)和ED50(在50％群体中治疗有效的剂量)。
化合物或组合物的“治疗有效量”或剂量是指引起受试者(即，人患者)中症状减少或抑制或生存期延长的化合物或组合物的量。结果可能需要多剂量的化合物或组合物。
受试者中疾病的“治疗”是指1)预防疾病在易患疾病或尚未显示疾病症状的患者中发生；2)抑制疾病或阻止其发展；或3)改善或致使疾病消退。如本文所用，“治疗”是用于获得有益或期望的结果(包括临床结果)的方法。出于本公开的目的，有益或期望的结果包括但不限于以下项中的一项或多项：减少由疾病或病症引起的一种或多种症状、减轻疾病或病症的程度、稳定疾病或病症(例如，预防或延迟疾病或病症的恶化)、延迟疾病或病症的发生或复发、延迟或减缓疾病或病症的进展、改善疾病或病症状态、提供疾病或病症的缓解(部分或全部缓解)、减少治疗疾病或病症所需的一种或多种其他药物的剂量、增强用于治疗疾病或病症的另一药物的作用、延迟疾病或病症的进展、提高生活质量以及/或者延长受试者生存期。“治疗”还涵盖疾病或病症的病理结果的减轻。本发明的方法考虑了这些治疗方面中的任何一个或多个方面。
如本文所用，术语“受试者”和“患者”是指任何哺乳动物。在一些实施方案中，哺乳动物是人。在一些实施方案中，哺乳动物是非人，如灵长类动物、狗、猫、兔或啮齿动物。所述术语中没有一个要求或限于以健康护理工作者(例如，医生、注册护士、护士执业者、医师助手、护理员或临终关怀工作者)的监督(例如，持续或间歇)为特征的情形。
如本文所用，术语“药物组合物”或“药物”是指适于在受试者中药用，例如作为SHP2抑制剂的组合物。
尽管可以在单个实施方案的背景下描述本发明的各种特点，但是这些特点也可以单独地或以任何合适的组合来提供。相反，尽管为了清楚起见，本文中可以在单独实施方案的背景下描述本发明，但是本发明也可以在单个实施方案中实现。
化合物
在一个方面，本文提供了一种式(I)化合物
或其药学上可接受的盐，其中：
环A为C3-C6环烷基、苯基、5至6元杂环烷基或5至6元杂芳基，其中所述杂环烷基和所述杂芳基含有1-3个选自N、O和S的杂原子；
每个R1独立地为卤代基、氰基、-NR2aR2b、C1-C6烷基、氧代基、羟基、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基-OH、C1-C6烷基-CN、-C(O)NR2aR2b、-C(O)(C1-C6烷基)、-CO2H、-CO2(C1-C6烷基)、-Si(Ra)(Rb)(Rc)、-P(O)(Ra)(Rb)、-OP(O)(Ra)(Rb)、C3-C6环烷基、苯基、5至6元杂环烷基或5至6元杂芳基，其中所述杂环烷基和所述杂芳基含有1-3个选自N、O和S的杂原子；
或者两个R1基团与它们所附接的碳原子或杂原子一起形成稠合苯基、5至6元杂环烷基或5至6元杂芳基，其中每一个任选地被1-4个R6基团取代，其中所述稠合杂环烷基和杂芳基含有1-3个选自N、O和S的杂原子；
每个Ra、Rb和Rc独立地为羟基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基；
每个R2a和R2b独立地为H、C1-C6烷基或C3-C6环烷基；
L为键、S、O、C(O)或N(Rd)；
Rd为H或C1-C6烷基；
X为CR3aR3b、NR3a或O；
R3a和R3b独立地为H或C1-C6烷基；
R4为H、C1-C6烷基、C1-C6烷基-OH、C1-C6卤代烷基或-NH2；
每个R5独立地为卤代基、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、-(C1-C6亚烷基)(C1-C6烷氧基)或C1-C6烷基-OH；
环B为稠合苯基或含有1-3个选自N、O和S的杂原子的5至6元杂芳基；
每个R6独立地为C1-C6烷基、卤代基或C1-C6卤代烷基；
每个R7独立地为C1-C6烷基、卤代基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基-OH、羟基、氰基、-Si(Ra)(Rb)(Rc)、-P(O)(Ra)(Rb)、-OP(O)(Ra)(Rb)、-NR2aR2b或C1-C6卤代烷基；
x为0-5；
y为0-2；并且
z为0-4；
其中所述化合物中的一个或多个氢原子任选地被氘置换。
在一些实施方案中，环A为C3-C6环烷基、苯基、5至6元杂环烷基或5至6元杂芳基，其中所述杂环烷基和杂芳基含有1-3个选自N、O和S的杂原子。在一些实施方案中，环A为C3-C5环烷基、苯基、6元杂环烷基或5至6元杂芳基，其中所述杂环烷基和杂芳基含有1-2个选自N、O和S的杂原子。在一些实施方案中，环A为环丙基、苯基、二氢吡啶基、二氢吡喃基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡唑基、咪唑基、吡咯基、噻唑基、异噁唑基或噻吩基。在一些实施方案中，环A为任选地取代的。
在一些实施方案中，环A为C3-C6环烷基。在一些实施方案中，环A为C3-C5环烷基。在一些实施方案中，环A为C3-C4环烷基。在一些实施方案中，环A为环丙基、环丁基、环戊基或环己基。在一些实施方案中，环A为环丙基。在一些实施方案中，环A为环丁基。在一些实施方案中，环A为环戊基。在一些实施方案中，环A为环己基。
在一些实施方案中，环A为苯基。
在一些实施方案中，环A为含有1-3个选自N、O和S的杂原子的5至6元杂环烷基。在一些实施方案中，环A为含有1-3个选自N、O和S的杂原子的5元杂环烷基。在一些实施方案中，环A为含有1-3个选自N、O和S的杂原子的6元杂环烷基。在一些实施方案中，杂环烷基含有1-2个不饱和键。在一些实施方案中，杂环烷基含有1个不饱和键。在一些实施方案中，杂环烷基含有2个不饱和键。在一些实施方案中，杂环烷基含有1-2个选自N、O和S的杂原子。在一些实施方案中，杂环烷基含有1-2个选自N和O的杂原子。在一些实施方案中，杂环烷基含有1个选自N和O的杂原子。在一些实施方案中，杂环烷基含有1个氮原子。在一些实施方案中，杂环烷基含有1个氧原子。在一些实施方案中，环A为二氢吡啶基、二氢吡喃基、哌啶基或四氢吡喃基。
在一些实施方案中，环A为含有1-3个选自N、O和S的杂原子的5至6元杂芳基。在一些实施方案中，环A为含有1-3个选自N、O和S的杂原子的5元杂芳基。在一些实施方案中，环A为含有1-3个选自N、O和S的杂原子的6元杂芳基。在一些实施方案中，杂芳基含有1-2个选自N、O和S的杂原子。在一些实施方案中，环A为含有1-2个氮原子的5元杂芳基。在一些实施方案中，环A为含有1个氮原子的5元杂芳基。在一些实施方案中，环A为含有2个氮原子的5元杂芳基。在一些实施方案中，环A为含有1个氮原子和1个硫原子的5元杂芳基。在一些实施方案中，环A为含有1个氮原子和1个氧原子的5元杂芳基。在一些实施方案中，环A为含有1个硫原子的5元杂芳基。在一些实施方案中，环A为含有1-2个氮原子的6元杂芳基。在一些实施方案中，环A为含有1个氮原子的6元杂芳基。在一些实施方案中，环A为含有2个氮原子的6元杂芳基。在一些实施方案中，环A为吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡唑基、咪唑基、吡咯基、噻唑基、噁唑基、异噁唑基或噻吩基。
在一些实施方案中，为：
在一些实施方案中，x为0-5。在一些实施方案中，x为0-4。在一些实施方案中，x为0、1、2或3。在一些实施方案中，x为0。在一些实施方案中，x为1。在一些实施方案中，x为2。在一些实施方案中，x为3。在一些实施方案中，x为4。在一些实施方案中，x为5。
在一些实施方案中，环A是未经取代的。在一些实施方案中，环A被1-5个R1基团取代。在其中环A为C3-C6环烷基的一些变型中，环A是经取代的。在其中环A为嘧啶基的一些变型中，环A是经取代的。在其中环A为哒嗪基的一些变型中，环A是经取代的。
在一些实施方案中，每个R1独立地为卤代基、氰基、-NR2aR2b、C1-C6烷基、氧代基、羟基、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基-OH、C1-C6烷基-CN、-C(O)NR2aR2b、-C(O)(C1-C6烷基)、-CO2H、-CO2(C1-C6烷基)、-Si(Ra)(Rb)(Rc)、-P(O)(Ra)(Rb)、-OP(O)(Ra)(Rb)、C3-C6环烷基、苯基、5至6元杂环烷基或5至6元杂芳基，其中所述杂环烷基和杂芳基含有1-3个选自N、O和S的杂原子。在一些实施方案中，每个R1独立地为卤代基、氰基、-NR2aR2b、C1-C3烷基、氧代基、羟基、C1-C3卤代烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3烷基-OH、C1-C3烷基-CN、-C(O)NR2aR2b、-C(O)(C1-C3烷基)、-CO2H、-CO2(C1-C3烷基)、-Si(Ra)(Rb)(Rc)、-P(O)(Ra)(Rb)、-OP(O)(Ra)(Rb)、C3-C5环烷基、苯基或6元杂环烷基，其中所述杂环烷基含有1-2个选自N和O的杂原子。在一些实施方案中，每个Ra、Rb和Rc独立地为C1-C3烷基或C1-C3烷氧基。在一些实施方案中，每个R2a和R2b独立地为H、C1-C3烷基或C3-C5环烷基。在一些实施方案中，本文对于R1公开的任何基团是任选取代的。
在一些实施方案中，R1为卤代基。在一些实施方案中，R1为F、Cl、Br或I。在一些实施方案中，R1为F、Cl或Br。在一些实施方案中，R1为F或Cl。在一些实施方案中，R1为F。在一些实施方案中，R1为Cl。
在一些实施方案中，R1为氰基。在一些实施方案中，R1为氧代基。在一些实施方案中，R1为羟基。在一些实施方案中，R1为-CO2H。
在一些实施方案中，R1为-NR2aR2b，其中R2a和R2b独立地为H、C1-C6烷基或C3-C6环烷基。在一些实施方案中，R2a和R2b独立地为H、C1-C3烷基或C3-C5环烷基。在一些实施方案中，R2a和R2b均为H。在一些实施方案中，R2a和R2b均为C1-C3烷基。在一些实施方案中，R2a和R2b中的一者为H且另一者为C1-C3烷基。在一些实施方案中，R2a和R2b中的一者为H且另一者为C3-C6环烷基。在一些实施方案中，R2a和R2b中的一者为C1-C3烷基且另一者为C3-C6环烷基。在一些实施方案中，R1为-NH2、-N(H)CH3或-N(CH3)2。在一些实施方案中，R1是-NH2。在一些实施方案中，R1为-N(H)CH3。在一些实施方案中，R1为-N(CH3)2。在一些实施方案中，本文对于R2a和R2b公开的任何基团是任选取代的。
在一些实施方案中，R1为C1-C6烷基。在一些实施方案中，R1为C1-C3烷基。在一些实施方案中，R1为甲基、乙基、正丙基或异丙基。在一些实施方案中，R1为甲基、乙基或异丙基。在一些实施方案中，R1为甲基。在一些实施方案中，R1为乙基。在一些实施方案中，R1为异丙基。
在一些实施方案中，R1为C1-C6卤代烷基。在一些实施方案中，R1为含有1-13个卤素原子的C1-C6卤代烷基。在一些实施方案中，R1为C1-C3卤代烷基。在一些实施方案中，R1为含有1-7个卤素原子的C1-C3卤代烷基。在一些实施方案中，R1为-CF3、-CHF2、-CH2F、-CCl3、-CHCl2、-CH2Cl、-CF2Cl、-CFCl2、-CH2CF3、-CH2CHF2或-CH2CCl3。在一些实施方案中，R1是-CF3。
在一些实施方案中，R1为C1-C6烷氧基。在一些实施方案中，R1为C1-C3烷氧基。在一些实施方案中，R1为-OCH3、-OCH2CH3或-OCH(CH3)2。在一些实施方案中，R1是-OCH3。在一些实施方案中，R1为-OCH2CH3。
在一些实施方案中，R1为C1-C6烷基-OH。在一些实施方案中，R1为C1-C3烷基-OH。在一些实施方案中，R1为-CH2OH、-CH2CH2OH、-CH2CH2CH2OH、-CH(OH)CH3、-CH(OH)CH2OH或-CH2CH(OH)CH3。在一些实施方案中，R1为-CH2OH。在一些实施方案中，R1为-CH2CH2OH。
在一些实施方案中，R1为C1-C6烷基-CN。在一些实施方案中，R1为C1-C3烷基-CN。在一些实施方案中，R1为-CH2CN、-CH2CH2CN、-CH2CH2CH2CN、-CH(CN)CH3、-CH(CN)CH2OH或-CH2CH(CN)CH3。在一些实施方案中，R1为-CH2CN。在一些实施方案中，R1为-CH2CH2CN。
在一些实施方案中，R1为-C(O)NR2aR2b，其中R2a和R2b独立地为H、C1-C6烷基或C3-C6环烷基。在一些实施方案中，R2a和R2b独立地为H、C1-C3烷基或C3-C5环烷基。在一些实施方案中，R2a和R2b均为H。在一些实施方案中，R2a和R2b均为C1-C3烷基。在一些实施方案中，R2a和R2b中的一者为H且另一者为C1-C3烷基。在一些实施方案中，R2a和R2b中的一者为H且另一者为C3-C6环烷基。在一些实施方案中，R2a和R2b中的一者为C1-C3烷基且另一者为C3-C6环烷基。在一些实施方案中，R1为-C(O)NH2、-C(O)N(CH3)2或-C(O)N(H)(CH3)。在一些实施方案中，R1为-C(O)N(CH3)2。在一些实施方案中，R1为-C(O)NH2。在一些实施方案中，R1为-C(O)N(H)(CH3)。
在一些实施方案中，R1为-C(O)(C1-C6烷基)。在一些实施方案中，R1为-C(O)(C1-C3烷基)。在一些实施方案中，R1为-C(O)CH3、-C(O)CH2CH3或-C(O)CH(CH3)。在一些实施方案中，R1为-C(O)CH3。
在一些实施方案中，R1为-CO2(C1-C6烷基)。在一些实施方案中，R1为-CO2(C1-C3烷基)。在一些实施方案中，R1为-CO2CH3、-CO2CH2CH3或-CO2CH(CH3)2。
在一些实施方案中，R1为-Si(Ra)(Rb)(Rc)，其中Ra、Rb和Rc独立地为羟基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基。在一些实施方案中，Ra、Rb和Rc独立地为羟基、C1-C3烷基或C1-C3烷氧基。在一些实施方案中，Ra、Rb和Rc独立地为羟基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基或异丙氧基。在一些实施方案中，R1为-Si(CH3)3或-Si(CH3)3。在一些实施方案中，本文对于Ra、Rb和Rc公开的任何基团是任选取代的。
在一些实施方案中，R1为-P(O)(Ra)(Rb)，其中Ra和Rb独立地为羟基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基。在一些实施方案中，Ra和Rb独立地为羟基、C1-C3烷基或C1-C3烷氧基。在一些实施方案中，Ra和Rb独立地为羟基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基或异丙氧基。在一些实施方案中，R1为-P(O)(OH)2、-P(O)(CH3)2、-P(O)(OH)(OCH3)或-P(O)(OCH3)2。
在一些实施方案中，R1为-OP(O)(Ra)(Rb)，其中Ra和Rb独立地为羟基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基。在一些实施方案中，Ra和Rb独立地为羟基、C1-C3烷基或C1-C3烷氧基。在一些实施方案中，Ra和Rb独立地为羟基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基或异丙氧基。在一些实施方案中，R1为-OP(O)(OH)2、-OP(O)(CH3)2、-OP(O)(OH)(OCH3)或-OP(O)(OCH3)2。
在一些实施方案中，R1为C3-C6环烷基。在一些实施方案中，R1为C3-C5环烷基。在一些实施方案中，R1为环丙基、环丁基、环戊基或环己基。在一些实施方案中，R1为环丙基、环丁基或环戊基。在一些实施方案中，R1为环丙基。
在一些实施方案中，R1为苯基。
在一些实施方案中，R1为含有1-3个选自N、O和S的杂原子的5至6元杂环烷基。在一些实施方案中，R1为含有1-3个选自N、O和S的杂原子的5元杂环烷基。在一些实施方案中，R1为含有1-3个选自N、O和S的杂原子的6元杂环烷基。在一些实施方案中，杂环烷基含有1-2个选自N和O的杂原子。在一些实施方案中，杂环烷基含有一个氮原子和一个氧原子。在一些实施方案中，杂环烷基含有2个氮原子。在一些实施方案中，杂环烷基含有2个氧原子。在一些实施方案中，R1为吗啉基、哌嗪基、哌啶基、吡咯烷基、四氢吡喃基或四氢呋喃基。
在一些实施方案中，R1为含有1-3个选自N、O和S的杂原子的5至6元杂芳基。在一些实施方案中，R1为含有1-3个选自N、O和S的杂原子的5元杂芳基。在一些实施方案中，R1为含有1-3个选自N、O和S的杂原子的6元杂芳基。在一些实施方案中，杂芳基含有1-2个选自N和O的杂原子。在一些实施方案中，杂芳基含有一个氮原子和一个氧原子。在一些实施方案中，杂芳基含有2个氮原子。在一些实施方案中，R1为吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡唑基、咪唑基、吡咯基、噻唑基、噁唑基、异噁唑基或噻吩基。
在一些实施方案中，每个R1独立地为F、Cl、-CN、-CH2CN、-NH2、-N(H)CH3、-N(CH3)2、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、氧代基、-CF3、-OCH3、-CH2OH、-C(O)N(CH3)2、-C(O)CH3、环丙基或
在一些实施方案中，两个R1基团与它们所附接的碳原子或杂原子一起形成任选地被1-4个R6基团取代的稠合苯基。
在一些实施方案中，两个R1基团与它们所附接的碳原子或杂原子一起形成任选地被1-4个R6基团取代的稠合5至6元杂环烷基，其中所述稠合杂环烷基含有1-3个选自N、O和S的杂原子。在一些实施方案中，所述稠合杂环烷基任选地被1-2个R6基团取代。在一些实施方案中，所述稠合杂环烷基含有1-2个选自N、O和S的杂原子。在一些实施方案中，两个R1基团与它们所附接的碳原子或杂原子一起形成任选地被1-4个R6基团取代的稠合5元杂环烷基。在一些实施方案中，两个R1基团与它们所附接的碳原子或杂原子一起形成任选地被1-4个R6基团取代的稠合6元杂环烷基。在一些实施方案中，两个R1基团与它们所附接的碳原子或杂原子一起形成稠合吡喃基、二氢二噁英基或二氢呋喃基。
在一些实施方案中，两个R1基团与碳原子或杂原子一起形成任选地被1-4个R6基团取代的稠合5至6元杂芳基，其中所述稠合杂芳基含有1-3个选自N、O和S的杂原子。在一些实施方案中，所述稠合杂芳基任选地被1-2个R6基团取代。在一些实施方案中，所述稠合杂芳基含有1-2个选自N、O和S的杂原子。在一些实施方案中，两个R1基团与它们所附接的碳原子或杂原子一起形成任选地被1-4个R6基团取代的稠合5元杂芳基。在一些实施方案中，两个R1基团与它们所附接的碳原子或杂原子一起形成任选地被1-4个R6基团取代的稠合6元杂芳基。在一些实施方案中，两个R1基团与它们所附接的碳原子或杂原子一起形成稠合吡啶基、吡嗪基、吡咯基或噻唑基。
在一些实施方案中，两个R1基团与它们所附接的碳原子或杂原子一起形成选自以下的稠合基团：
在一些实施方案中，每个R6独立地为C1-C6烷基、卤代基或C1-C6卤代烷基。在一些实施方案中，每个R6独立地为C1-C3烷基、卤代基或C1-C3卤代烷基。
在一些实施方案中，R6为C1-C6烷基。在一些实施方案中，R6为C1-C3烷基。在一些实施方案中，R6为甲基、乙基、正丙基或异丙基。在一些实施方案中，R6为甲基、乙基或异丙基。在一些实施方案中，R6为甲基。在一些实施方案中，R6为乙基。在一些实施方案中，R6为异丙基。在一些实施方案中，本文对于R6公开的任何基团是任选取代的。
在一些实施方案中，R6为卤代基。在一些实施方案中，R6为F、Cl、Br或I。在一些实施方案中，R6为F、Cl或Br。在一些实施方案中，R6为F或Cl。在一些实施方案中，R6为F。在一些实施方案中，R6为Cl。
在一些实施方案中，R6为C1-C6卤代烷基。在一些实施方案中，R6为含有1-13个卤素原子的C1-C6卤代烷基。在一些实施方案中，R6为C1-C3卤代烷基。在一些实施方案中，R6为含有1-7个卤素原子的C1-C3卤代烷基。在一些实施方案中，R6为-CF3、-CHF2、-CH2F、-CCl3、-CHCl2、-CH2Cl、-CF2Cl、-CFCl2、-CH2CF3、-CH2CHF2或-CH2CCl3。在一些实施方案中，R6是-CF3。
在一些实施方案中，为：
在一些实施方案中，L为键。在一些实施方案中，L为S。在一些实施方案中，L为O。在一些实施方案中，L为C(O)。在一些实施方案中，L为N(Rd)，其中Rd为H或C1-C6烷基。在一些实施方案中，Rd为H。在一些实施方案中，Rd为C1-C6烷基。在一些实施方案中，Rd为C1-C3烷基，诸如甲基、乙基或丙基。在一些实施方案中，L为NH。在一些实施方案中，L为N(CH3)。在一些实施方案中，本文对于Rd公开的任何基团是任选取代的。
在一些实施方案中，X为CR3aR3b、NR3a或O，其中R3a和R3b独立地为H或C1-C6烷基。在一些实施方案中，X为CR3aR3b、NR3a或O，其中R3a和R3b独立地为H或C1-C3烷基。在一些实施方案中，本文对于R3a和R3b公开的任何基团是任选取代的。
在一些实施方案中，X为O。
在一些实施方案中，X为CR3aR3b，其中R3a和R3b独立地为H或C1-C6烷基。在一些实施方案中，R3a和R3b独立地为H或C1-C3烷基。在一些实施方案中，R3a和R3b均为H。在一些实施方案中，R3a和R3b均为C1-C3烷基，诸如甲基、乙基或丙基。在一些实施方案中，R3a和R3b中的一者为H且另一者为C1-C3烷基。在一些实施方案中，X为CH2、CH(CH3)或C(CH3)2。在一些实施方案中，X为CH2。
在一些实施方案中，X为NR3a，其中R3a为H或C1-C6烷基。在一些实施方案中，R3a为是H或C1-C3烷基。在一些实施方案中，R3a为H。在一些实施方案中，R3a为C1-C3烷基，诸如甲基、乙基或丙基。在一些实施方案中，X为N(H)或N(CH3)。在一些实施方案中，X为N(H)。在一些实施方案中，X为N(CH3)。
在一些实施方案中，R4为H、C1-C6烷基、C1-C6烷基-OH、C1-C6卤代烷基或-NH2。在一些实施方案中，R4为H、C1-C3烷基、C1-C3烷基-OH、C1-C3卤代烷基或-NH2。在一些实施方案中，本文对于R4公开的任何基团是任选取代的。
在一些实施方案中，R4为H。
在一些实施方案中，R4为C1-C6烷基。在一些实施方案中，R4为C1-C3烷基。在一些实施方案中，R4为甲基、乙基、正丙基或异丙基。在一些实施方案中，R4为甲基、乙基或异丙基。在一些实施方案中，R4为甲基。在一些实施方案中，R4为乙基。在一些实施方案中，R4为异丙基。
在一些实施方案中，R4为C1-C6烷基-OH。在一些实施方案中，R4为C1-C3烷基-OH。在一些实施方案中，R4为-CH2OH、-CH2CH2OH、-CH2CH2CH2OH、-CH(OH)CH3、-CH(OH)CH2OH或-CH2CH(OH)CH3。在一些实施方案中，R4为-CH2OH。在一些实施方案中，R4为-CH2CH2OH。
在一些实施方案中，R4为C1-C6卤代烷基。在一些实施方案中，R4为含有1-13个卤素原子的C1-C6卤代烷基。在一些实施方案中，R4为C1-C3卤代烷基。在一些实施方案中，R4为含有1-7卤素原子的C1-C3卤代烷基。在一些实施方案中，R4为-CF3、-CHF2、-CH2F、-CCl3、-CHCl2、-CH2Cl、-CF2Cl、-CFCl2、-CH2CF3、-CH2CHF2或-CH2CCl3。在一些实施方案中，R4为-CF3、-CHF2或-CH2F。在一些实施方案中，R4为-CHF2。在一些实施方案中，R4为-CH2F。
在一些实施方案中，R4是-NH2。
在一些实施方案中，每个R5独立地为卤代基、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、-(C1-C6亚烷基)(C1-C6烷氧基)或C1-C6烷基-OH。在一些实施方案中，每个R5独立地为卤代基、C1-C3烷基、C1-C3卤代烷基、-(C1-C3亚烷基)(C1-C3烷氧基)或C1-C3烷基-OH。在一些实施方案中，每个R5独立地为Cl、F、-CH2F、-CHF2、-CH2OCH3或-CH2OH。在一些实施方案中，本文对于R5公开的任何基团是任选取代的。
在一些实施方案中，R5为卤代基。在一些实施方案中，R5为F、Cl、Br或I。在一些实施方案中，R5为F、Cl或Br。在一些实施方案中，R5为F或Cl。在一些实施方案中，R5为F。在一些实施方案中，R5为Cl。
在一些实施方案中，R5为C1-C6烷基。在一些实施方案中，R5为C1-C3烷基。在一些实施方案中，R5为甲基、乙基、正丙基或异丙基。在一些实施方案中，R5为甲基、乙基或异丙基。在一些实施方案中，R5为甲基。在一些实施方案中，R5为乙基。在一些实施方案中，R5为异丙基。
在一些实施方案中，R5为C1-C6卤代烷基。在一些实施方案中，R5为含有1-13个卤素原子的C1-C6卤代烷基。在一些实施方案中，R5为C1-C3卤代烷基。在一些实施方案中，R5为含有1-7个卤素原子的C1-C3卤代烷基。在一些实施方案中，R5为-CF3、-CHF2、-CH2F、-CCl3、-CHCl2、-CH2Cl、-CF2Cl、-CFCl2、-CH2CF3、-CH2CHF2或-CH2CCl3。在一些实施方案中，R5为-CF3、-CHF2或-CH2F。在一些实施方案中，R5是-CHF2。在一些实施方案中，R5为-CH2F。
在一些实施方案中，R5为-(C1-C6亚烷基)(C1-C6烷氧基)。在一些实施方案中，R5为-(C1-C3亚烷基)(C1-C3烷氧基)。在一些实施方案中，R5为-(C1-亚烷基)(C1-C3烷氧基)，诸如-CH2OCH3、-CH2COH2CH3或-CH2COH2CH2CH3。在一些实施方案中，R5为-(C2-亚烷基)(C1-C3烷氧基)，诸如-CH2CH2COH3、-CH2CH2COH2CH3或-CH2CH2COH2CH2CH 3。在一些实施方案中，R5为-(C3-亚烷基)(C1-C3烷氧基)，诸如-CH2CH2CH2COH3、-CH2CH2CH2COH2CH3或-CH2CH2CH2COH2CH2CH3。在一些实施方案中，R5为-CH2COH3。
在一些实施方案中，R5为C1-C6烷基-OH。在一些实施方案中，R5为C1-C3烷基-OH。在一些实施方案中，R5为-CH2OH、-CH2CH2OH、-CH2CH2CH2OH、-CH(OH)CH3、-CH(OH)CH2OH或-CH2CH(OH)CH3。在一些实施方案中，R5为-CH2OH。在一些实施方案中，R5为-CH2CH2OH。
在一些实施方案中，y为0-2。在一些实施方案中，y为0或1。在一些实施方案中，y为0。在一些实施方案中，y为1。在一些实施方案中，y为2。
在一些实施方案中，环B为稠合苯基或含有1-3个选自N、O和S的杂原子的5至6元杂芳基。在一些实施方案中，环B为稠合苯基或含有1-2个选自N、O和S的杂原子的5至6元杂芳基。在一些实施方案中，环B为稠合苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、噻唑基或噁唑基。在一些实施方案中，环B是任选地取代的。
在一些实施方案中，环B为稠合苯基。
在一些实施方案中，环B为含有1-3个选自N、O和S的杂原子的稠合5至6元杂芳基。在一些实施方案中，环B为含有1-3个选自N、O和S的杂原子的稠合5元杂芳基。在一些实施方案中，环B为含有1-3个选自N、O和S的杂原子的稠合6元杂芳基。在一些实施方案中，稠合杂芳基含有1-2个选自N、O和S的杂原子。在一些实施方案中，环B为吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、噻唑基或噁唑基。
在一些实施方案中，每个R7独立地为C1-C6烷基、卤代基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基-OH、羟基、氰基、-Si(Ra)(Rb)(Rc)、-P(O)(Ra)(Rb)、-OP(O)(Ra)(Rb)、-NR2aR2b或C1-C6卤代烷基。在一些实施方案中，每个R7独立地为C1-C3烷基、卤代基、C1-C3烷氧基、C1-C3烷基-OH、羟基、氰基、-Si(Ra)(Rb)(Rc)、-P(O)(Ra)(Rb)、-OP(O)(Ra)(Rb)、-NR2aR2b或C1-C3卤代烷基。在一些实施方案中，每个R7独立地为CH3、F、-OCH3、-CH2OH、羟基、-CN、-N(CH3)2或-CHF2。在一些实施方案中，本文对于R7公开的任何基团是任选取代的。
在一些实施方案中，R7为C1-C6烷基。在一些实施方案中，R7为C1-C3烷基。在一些实施方案中，R7为甲基、乙基、正丙基或异丙基。在一些实施方案中，R7为甲基、乙基或异丙基。在一些实施方案中，R7为甲基。在一些实施方案中，R7为乙基。在一些实施方案中，R7为异丙基。
在一些实施方案中，R7为卤代基。在一些实施方案中，R7为F、Cl、Br或I。在一些实施方案中，R7为F、Cl或Br。在一些实施方案中，R7为F或Cl。在一些实施方案中，R7为F。在一些实施方案中，R7为Cl。
在一些实施方案中，R7为C1-C6烷氧基。在一些实施方案中，R7为C1-C3烷氧基。在一些实施方案中，R7为-OCH3、-OCH2CH3或-OCH(CH3)2。在一些实施方案中，R7是-OCH3。在一些实施方案中，R7为-OCH2CH3。
在一些实施方案中，R7为C1-C6烷基-OH。在一些实施方案中，R7为C1-C3烷基-OH。在一些实施方案中，R7为-CH2OH、-CH2CH2OH、-CH2CH2CH2OH、-CH(OH)CH3、-CH(OH)CH2OH或-CH2CH(OH)CH3。在一些实施方案中，R7为-CH2OH。在一些实施方案中，R7为-CH2CH2OH。
在一些实施方案中，R7为羟基。在一些实施方案中，R7为氰基。
在一些实施方案中，R7为-Si(Ra)(Rb)(Rc)，其中Ra、Rb和Rc独立地为羟基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基。在一些实施方案中，Ra、Rb和Rc独立地为羟基、C1-C3烷基或C1-C3烷氧基。在一些实施方案中，Ra、Rb和Rc独立地为羟基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基或异丙氧基。在一些实施方案中，R7为-Si(CH3)3或Si(OCH3)3。
在一些实施方案中，R7为-P(O)(Ra)(Rb)，其中Ra和Rb独立地为羟基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基。在一些实施方案中，Ra和Rb独立地为羟基、C1-C3烷基或C1-C3烷氧基。在一些实施方案中，Ra和Rb独立地为羟基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基或异丙氧基。在一些实施方案中，R7为-P(O)(OH)2、-P(O)(CH3)2、-P(O)(OH)(OCH3)或-P(O)(OCH3)2。
在一些实施方案中，R7为-OP(O)(Ra)(Rb)，其中Ra和Rb独立地为羟基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基。在一些实施方案中，Ra和Rb独立地为羟基、C1-C3烷基或C1-C3烷氧基。在一些实施方案中，Ra和Rb独立地为羟基、甲基、乙基、正丙基、异丙基、甲氧基、乙氧基或异丙氧基。在一些实施方案中，R7为-OP(O)(OH)2、-OP(O)(CH3)2、-OP(O)(OH)(OCH3)或-OP(O)(OCH3)2。
在一些实施方案中，R7为-NR2aR2b，其中R2a和R2b独立地为H、C1-C6烷基或C3-C6环烷基。在一些实施方案中，R2a和R2b独立地为H、C1-C3烷基或C3-C5环烷基。在一些实施方案中，R2a和R2b均为H。在一些实施方案中，R2a和R2b均为C1-C3烷基。在一些实施方案中，R2a和R2b中的一者为H且另一者为C1-C3烷基。在一些实施方案中，R2a和R2b中的一者为H且另一者为C3-C6环烷基。在一些实施方案中，R2a和R2b中的一者为C1-C3烷基且另一者为C3-C6环烷基。在一些实施方案中，R7为-NH2、-N(H)CH3或-N(CH3)2。在一些实施方案中，R7为-N(CH3)2。
在一些实施方案中，R7为C1-C6卤代烷基。在一些实施方案中，R7为含有1-13个卤素原子的C1-C6卤代烷基。在一些实施方案中，R7为C1-C3卤代烷基。在一些实施方案中，R7为含有1-7个卤素原子的C1-C3卤代烷基。在一些实施方案中，R7为-CF3、-CHF2、-CH2F、-CCl3、-CHCl2、-CH2Cl、-CF2Cl、-CFCl2、-CH2CF3、-CH2CHF2或-CH2CCl3。在一些实施方案中，R7为-CF3、-CHF2或-CH2F。在一些实施方案中，R4是-CHF2。在一些实施方案中，R7为-CH2F。
在一些实施方案中，z为0-4。在一些实施方案中，z为0-3。在一些实施方案中，z为0、1或2。在一些实施方案中，z为0。在一些实施方案中，z为1。在一些实施方案中，z为2。在一些实施方案中，z为3。在一些实施方案中，z为4。
在一些实施方案中，为：
在一些实施方案中，每个Ra、Rb和Rc独立地为羟基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基。在一些实施方案中，每个Ra、Rb和Rc独立地为羟基、C1-C3烷基或C1-C3烷氧基。
在一些实施方案中，Ra为羟基。
在一些实施方案中，Ra为C1-C6烷氧基。在一些实施方案中，Ra为C1-C3烷氧基。在一些实施方案中，Ra为-OCH3、-OCH2CH3或-OCH(CH3)2。在一些实施方案中，Ra为-OCH3。在一些实施方案中，Ra为-OCH2CH3。
在一些实施方案中，Ra为C1-C6烷基。在一些实施方案中，Ra为C1-C3烷基。在一些实施方案中，Ra为甲基、乙基、正丙基或异丙基。在一些实施方案中，Ra为甲基、乙基或异丙基。在一些实施方案中，Ra为甲基。在一些实施方案中，Ra为乙基。在一些实施方案中，Ra为异丙基。
在一些实施方案中，Rb为羟基。
在一些实施方案中，Rb为C1-C6烷氧基。在一些实施方案中，Rb为C1-C3烷氧基。在一些实施方案中，Rb为-OCH3、-OCH2CH3或-OCH(CH3)2。在一些实施方案中，Rb为-OCH3。在一些实施方案中，Rb为-OCH2CH3。
在一些实施方案中，Rb为C1-C6烷基。在一些实施方案中，Rb为C1-C3烷基。在一些实施方案中，Rb为甲基、乙基、正丙基或异丙基。在一些实施方案中，Rb为甲基、乙基或异丙基。在一些实施方案中，Rb为甲基。在一些实施方案中，Rb为乙基。在一些实施方案中，Rb为异丙基。
在一些实施方案中，Rc为羟基。
在一些实施方案中，Rc为C1-C6烷氧基。在一些实施方案中，Rc为C1-C3烷氧基。在一些实施方案中，Rc为-OCH3、-OCH2CH3或-OCH(CH3)2。在一些实施方案中，Rc为-OCH3。在一些实施方案中，Rc为-OCH2CH3。
在一些实施方案中，Rc为C1-C6烷基。在一些实施方案中，Rc为C1-C3烷基。在一些实施方案中，Rc为甲基、乙基、正丙基或异丙基。在一些实施方案中，Rc为甲基、乙基或异丙基。在一些实施方案中，Rc为甲基。在一些实施方案中，Rc为乙基。在一些实施方案中，Rc为异丙基。
在一些实施方案中，每个R2a和R2b独立地为H、C1-C6烷基或C3-C6环烷基。在一些实施方案中，每个R2a和R2b独立地为H、C1-C3烷基或C3-C5环烷基。
在一些实施方案中，R2a为H。
在一些实施方案中，R2a为C1-C6烷基。在一些实施方案中，R2a为是C1-C3烷基。在一些实施方案中，R2a为甲基、乙基、正丙基或异丙基。在一些实施方案中，R2a为甲基、乙基或异丙基。在一些实施方案中，R2a为甲基。在一些实施方案中，R2a为乙基。在一些实施方案中，R2a为异丙基。
在一些实施方案中，R2a为C3-C6环烷基。在一些实施方案中，R2a为是C3-C5环烷基。在一些实施方案中，R2a为环丙基、环丁基、环戊基或环己基。在一些实施方案中，R2a为环丙基、环丁基或环戊基。在一些实施方案中，R2a为环丙基。
在一些实施方案中，R2b为H。
在一些实施方案中，R2b为C1-C6烷基。在一些实施方案中，R2b为C1-C3烷基。在一些实施方案中，R2b为甲基、乙基、正丙基或异丙基。在一些实施方案中，R2b为甲基、乙基或异丙基。在一些实施方案中，R2b为甲基。在一些实施方案中，R2b为乙基。在一些实施方案中，R2b为异丙基。
在一些实施方案中，R2b为C3-C6环烷基。在一些实施方案中，R2b为是C3-C5环烷基。在一些实施方案中，R2b为环丙基、环丁基、环戊基或环己基。在一些实施方案中，R2b为环丙基、环丁基或环戊基。在一些实施方案中，R2b为环丙基。
在一些实施方案中，R2a和R2b均为H。在一些实施方案中，R2a和R2b均为C1-C3烷基。在一些实施方案中，R2a和R2b中的一者为H且另一者为C1-C3烷基。在一些实施方案中，R2a和R2b中的一者为H且另一者为C3-C6环烷基。在一些实施方案中，R2a和R2b中的一者为C1-C3烷基且另一者为C3-C6环烷基。
在一些实施方案中，式(I)化合物是式(Ia)化合物：
其中环A、R1、R4、R5、R7、x、y、z、X、L和环B如对于式(I)所述。
在一些实施方案中，式(I)化合物是式(Ib)化合物：
其中环A、R1、R4、R5、R7、x、y、z、X、L和环B如对于式(I)所述。
在一些实施方案中，式(I)化合物是式(IA)化合物：
其中环A、R1、R4、R5、R7、x、y、z、X和环B如对于式(I)所述；并且L为键、O、C(O)或N(Rd)，其中Rd如对于式(I)所述。在一些实施方案中，L为键。在一些实施方案中，L为O。在一些实施方案中，L为C(O)。在一些实施方案中，L为N(Rd)。
在一些实施方案中，式(I)化合物是式(IIa)、(IIb)、(IIc)或(IId)化合物：
其中环A、R1、R4、R5、R7、x、y、z、X和L如对于式(I)所述。在一些实施方案中，该化合物具有式(IIa)。在一些实施方案中，该化合物具有式(IIb)。在一些实施方案中，该化合物具有式(IIc)。在一些实施方案中，该化合物具有式(IId)。在一些实施方案中，L为键。
在一些实施方案中，式(I)化合物是式(IIa-1)化合物：
其中R1、R4和x如对于式(I)所述。在一些实施方案中，每个R1独立地为卤代基；x为0、1或2；并且R4为C1-C6烷基。在一些实施方案中，R1为F；x为0或1；并且R4为-CH3。
在一些实施方案中，式(I)化合物是式(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(IIId)、(IIIe)或(IIIf)化合物：
其中环A、R1、R4、R5、R7、x、y、z、X和L如对于式(I)所述。在一些实施方案中，该化合物具有式(IIIa)。在一些实施方案中，该化合物具有式(IIIb)。在一些实施方案中，该化合物具有式(IIIc)。在一些实施方案中，该化合物具有式(IIId)。在一些实施方案中，该化合物具有式(IIIe)。在一些实施方案中，该化合物具有式(IIIf)。
在一些实施方案中，式(I)化合物是式(IVa)化合物：
其中环A、R1、R4、R5、R7、x、y、z、X和环B如对于式(I)所述。
在一些实施方案中，式(I)化合物是式(IVb)、(IVc)、(IVd)或(IVe)化合物：
其中环A、R1、R4、R5、R7、Rd、x、y、z、X和环B如对于式(I)所述。在一些实施方案中，该化合物具有式(IVb)。在一些实施方案中，该化合物具有式(IVc)。在一些实施方案中，该化合物具有式(IVd)。在一些实施方案中，该化合物具有式(IVe)。
在本文所述的任何实施方案或变型中，应理解，附接至螺环基环的-NH2基团的碳原子处的立体化学结构(下文用“*”指示)具有(R)构型或(S)构型。
在一些实施方案中，附接至螺环基环的-NH2基团的碳原子(*)具有(R)构型。在其他实施方案中，附接至螺环基环的-NH2基团的碳原子(*)具有(S)构型。在一些实施方案中，附接至螺环基环的-NH2基团的碳原子的构型为：在一些实施方案中，附接至螺环基环的-NH2基团的碳原子的构型为：在本文所述的任何药物组合物中，式(I)化合物可以作为对映体纯的化合物存在或作为外消旋混合物存在。在一些实施方案中，药物组合物包含高纯度的式(I)化合物的(S)异构体(即，在上文所示附接至螺环基环的-NH2基团的碳原子(*)处为(S)构型)。在一些实施方案中，药物组合物包含占式(I)化合物总量的至少约50％、60％、70％、80％或90％的式(I)化合物的(S)异构体。在一些实施方案中，药物组合物包含占式(I)化合物总量的至少约90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的式(I)化合物的(S)异构体。在一些实施方案中，药物组合物包含少量的式(I)化合物的(R)异构体(即，在上文所示附接至螺环基环的-NH2基团的碳原子(*)处为(R)构型)。在一些实施方案中，药物组合物包含占式(I)化合物总量的小于约50％、40％、30％、20％或10％的式(I)化合物的(R)异构体。在一些实施方案中，药物组合物包含占式(I)化合物总量的小于约10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％或1％的式(I)化合物的(R)异构体。在一些实施方案中，药物组合物包含式(I)化合物的(S)异构体而非(R)异构体。
在本文的描述中，应当理解，一个部分的每个描述、变型、实施方案或方面可以与其他部分的每个描述、变型、实施方案或方面组合，就好像明确单独地列出描述的每个组合一样。例如，本文提供的关于式(I)的环A的每个描述、变型、实施方案或方面可以与R1、Ra、Rb、Rc、Rd、R2a、R2b、R3a、R3b、R4、R5、R6、R7、L、X、环B、x、y和z的每个描述、变型、实施方案或方面组合，就好像明确单独地列出每个组合一样。还应理解，式(I)的所有描述、变型、实施方案或方面，在适用的情况下，同样适用于本文详述的其他化学式并且被同样地描述，就好像每个描述、变型、实施方案或方面都针对所有化学式分开单独列出一样。例如，式(I)的所有描述、变型、实施方案或方面，在适用的情况下，同样适用于本文详述的任何化学式，诸如式(Ia)、(Ib)、(IIa)、(IIb)、(IIc)、(IId)、(IIa-1)、(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(IIId)、(IIIe)、(IIIf)、(IVa)、(IVb)、(IVc)、(IVd)和(IVe)，被同样地描述，就好像每个描述、变型、实施方案或方面都针对所有化学式分开单独列出一样。
应理解，在式(I)的任何前述实施方案及其变型中，取代基R1、Ra、Rb、Rc、Rd、R2a、R2b、R3a、R3b、R4、R5、R6、R7、L、X、环A和环B中的任何一个或多个可以任选地被取代。
在一些实施方案中，提供了一种选自表1中的化合物的化合物或其药学上可接受的盐。尽管本公开(包括表1)中描述的某些化合物作为特定的立体异构体和/或以非立体化学形式存在，但是应该理解，本文描述了本公开(包括表1中)的任何化合物的任何或所有非立体化学形式(包括任何对映异构体或非对映异构体形式)，以及任何互变异构体或其他形式。类似地，尽管在本公开(包括表1)中描述的某些化合物以特定盐的形式呈现，但是应该理解本文描述了本公开(包括表1中)的任何化合物的任何药学上可接受的盐。还应该理解，尽管本公开(包括表1)中描述的某些化合物以特定盐的形式呈现，但是本文也描述了本公开(包括表1中)的化合物的游离形式。
表1.
或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，式(I)化合物或其药学上可接受的盐不包括化合物编号33、129、145、146、147、172、210、225、226和227。
应该理解在本说明书中，仅当此类贡献产生稳定化合物时，所描绘的化学式的取代基和/或变量的组合才是容许的。
此外，所有以游离碱或游离酸形式存在的式(I)化合物均可通过本领域技术人员已知的方法，用适当的无机或有机碱或酸处理而转化成它们药学上可接受的盐。式(I)化合物的盐可通过标准技术转化成它们的游离碱或游离酸形式。
合成方法
在另一个方面，本文提供了制备式(I)化合物或其药学上可接受的盐的方法。
式(I)化合物或其任何变型可根据方案1和方案2中所示的一般反应制备。
方案1.
某些式(I)化合物(其中L为键或S)的一般合成在方案1中概述。将7-溴-4-氯(或4-溴)吡唑并[1,5-a]吡嗪(中间体A)与经取代的仲胺(中间体B)偶联，得到7-溴-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-胺(中间体D)。在一些情况下，经取代的仲胺(中间体B)可带有任选被保护的伯胺(PG＝保护基)或随后将转化为伯胺的酮。中间体D可以在钯催化剂的存在下与经取代的芳基、杂芳基或烷基硼酸/酯(R为H或烷基)、锡烷或经取代的杂芳基-硫醇(中间体C)偶联，并且可以进行另外的脱保护和/或官能化步骤以生成最终的式(I)化合物。
方案2.
方案2提供了某些另外的式(I)化合物的一般合成，诸如其中L为CO。中间体D可以在钯催化剂和CO源的存在下与经取代的芳基、杂芳基或烷基硼酸/酯偶联(R为H或烷基)，并且可以进行另外的脱保护和/或官能化步骤以生成最终的式(I)化合物。
在本文所述的方法的一些实施方案中，式(I)化合物通过还原步骤(例如，使用DIBAL-H的亚磺酰亚胺还原)合成，以在下面用“*”指示的碳原子处得到高纯度的(S)构型。
应理解，本文公开的合成工艺可通过选择适当的试剂和原材料进行修改以得到本公开的各种化合物。
以游离碱或游离酸形式存在的如本文所述的所有式(I)化合物或其任何变型可通过本领域技术人员已知的方法用适当的无机或有机碱或酸处理而转化成其药学上可接受的盐。本公开的化合物的盐可通过标准技术转化成其游离碱或游离酸形式。
本文还提供了可用于制备式(I)化合物或其药学上可接受的盐的中间体化合物。
药物组合物
在另一个方面，本文提供式(I)化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物。因此，本公开包括包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体或赋形剂的药物组合物。根据本公开的药物组合物可以采取适合于口服、经颊、舌下、肠胃外(皮下、肌内、静脉内或鞘内)、经鼻、局部、阴道、直肠、脑内、皮内、玻璃体内、骨内输注、腹膜内或吸入施用的形式。本公开的药物组合物包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
本文所述的化合物可用于通过将作为活性成分的化合物与药学上可接受的赋形剂组合来制备药物组合物。可充当药学上可接受的赋形剂的材料的一些实例包括：糖，诸如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，诸如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，诸如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和醋酸纤维素；表面活性剂，诸如聚山梨醇酯80(即，吐温80)；黄蓍胶粉；麦芽；明胶；滑石；赋形剂，诸如可可脂和栓剂蜡；油，诸如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；二醇，诸如丙二醇；多元醇，诸如甘油、山梨糖醇、甘露糖醇和聚乙二醇；酯类，诸如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，诸如氢氧化镁和氢氧化铝；海藻酸；无热原水；等渗盐水；林格氏溶液(Ringer's solution)；乙醇；pH缓冲溶液；聚酯、聚碳酸酯和/或聚酸酐；和药物配制物中采用的任何其他无毒相容性物质。药物配制物可以通过已知的制药方法制备。合适的配制物可以在例如Remington:The Science and Practiceof Pharmacy,Lippincott Williams&Wilkins，第21板(2005)中找到，其通过引用并入本文。
在组合物中还可以存在润湿剂、乳化剂和润滑剂，诸如十二烷基硫酸钠和硬脂酸镁，以及着色剂、释放剂、包衣剂、甜味剂、调味剂和芳香剂、防腐剂和抗氧化剂。
药学上可接受的抗氧化剂的实例包括：水溶性抗氧化剂，诸如抗坏血酸、盐酸半胱氨酸、硫酸氢钠、焦亚硫酸钠、亚硫酸钠等；油溶性抗氧化剂，诸如抗坏血酸棕榈酸酯、丁基羟基苯甲醚(BHA)、丁基羟基甲苯(BHT)、卵磷脂、没食子酸丙酯、α-生育酚等；以及金属螯合剂，诸如柠檬酸、乙二胺四乙酸(EDTA)、山梨醇、酒石酸、磷酸等。
药物组合物可以方便地以单位剂型存在并且可以通过药学领域熟知的任何方法制备。可与载体材料组合以产生单剂型的活性成分的量将根据被治疗的受试者和特定的施用模式而变化。可以与载体材料组合以产生单一剂型的活性成分的量通常为产生治疗效果的化合物的量。通常，该量的范围将是约1％至约99％的活性成分，优选地为约5％至约70％，最优选地为约10％至约30％。
在某些实施方案中，本公开的药物组合物包含选自由环糊精、脂质体、胶束形成剂(例如胆汁酸)和聚合物载体(例如聚酯和聚酸酐)组成的组的赋形剂；和式(I)化合物或其药学上可接受的盐。在某些实施方案中，该药物组合物使式(I)化合物或其药学上可接受的盐口服生物可利用。
适于口服施用的本公开的药物组合物可以呈以下形式：胶囊、扁囊剂、丸剂、片剂、锭剂(使用经调味的基质，通常为蔗糖和阿拉伯胶或黄蓍胶)、散剂、颗粒剂或作为水性液体或非水性液体中的溶液或混悬剂、或作为水包油或油包水乳剂、或作为酏剂或糖浆剂、或作为软锭剂(pastille)(使用惰性基质，诸如明胶和甘油，或蔗糖和阿拉伯胶)和/或为漱口剂等，每种均含有预定量的作为活性成分的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。式(I)化合物或其药学上可接受的盐还可以作为大丸剂、药糖剂或糊剂施用。
在用于口服施用的本公开的固体剂型(胶囊、片剂、丸剂、糖锭剂、散剂、颗粒剂等)中，将活性成分与一种或多种药学上可接受的载体(诸如柠檬酸钠或磷酸二钙)和/或以下中的任何一种进行混合：填充剂或增充剂，诸如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、和/或硅酸；粘合剂，诸如，例如，羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和/或阿拉伯胶；湿润剂，诸如甘油；崩解剂，诸如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、藻酸、某些硅酸盐、以及碳酸钠；溶液延迟剂，诸如石蜡；吸收加速剂，如季铵化合物；润湿剂，诸如，例如，鲸蜡醇、单硬脂酸甘油酯和非离子表面活性剂；吸收剂，诸如高岭土和膨润土；润滑剂，诸如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠及其混合物；以及着色剂。在胶囊、片剂以及丸剂的情况下，药物组合物还可以包含缓冲剂。相似类型的固体组合物也可用作软壳和硬填壳明胶胶囊中的填充剂，其使用诸如乳糖(lactose)或乳糖(milk sugar)的赋形剂以及高分子量聚乙二醇等。
可以任选地与一种或多种辅助成分通过压制或模制来制备片剂。可以使用粘合剂(例如，明胶或羟丙基甲基纤维素)、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、崩解剂(例如，淀粉乙醇酸钠或交联羧甲基纤维素钠)、表面活性剂或分散剂来制备压缩片剂。可以在合适的机器中制备模制片剂，在合适的机器中用惰性液体稀释剂润湿粉末状化合物的混合物。
本公开的药物组合物的片剂和其他固体剂型，诸如糖衣丸、胶囊、丸剂和颗粒剂，可以任选地刻痕或制备有包衣和壳，诸如肠溶衣和药物配制领域中熟知的其他包衣。也可以使用例如，提供所需释放特性的不同比例的羟丙基甲基纤维素、其他聚合物基质、脂质体和/或微球体将它们配制成提供其中活性成分的缓释或控释。它们可以配制用于快速释放，例如冻干。它们可以通过例如以下方式灭菌：通过细菌截留过滤器(bacterial-retainingfilter)过滤，或通过掺入无菌固体组合物形式的灭菌剂，该灭菌剂可在使用前立即溶解在无菌水或一些其他无菌可注射介质中。这些组合物也可以任选地含有遮光剂并且可以是这样的组合物，以便它们仅仅或者优先在胃肠道的某一部分任选地以一种延迟方式释放活性成分。可以使用的包埋组合物的实例包括聚合物质和蜡。活性成分还可以是微囊化形式，如果适当的话，可包含一种或多种上述赋形剂。
用于口服施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐的液体剂型包括药学上可接受的乳剂、微乳剂、溶液、混悬剂、糖浆剂和酏剂。除了活性成分之外，液体剂型可以含有本领域常用的惰性稀释剂(诸如水或其他溶剂)、增溶剂和乳化剂，诸如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、油类(特别是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢呋喃甲醇、聚乙二醇和脱水山梨糖醇脂肪酸酯，及其混合物。
除了惰性稀释剂之外，口服组合物还可包括佐剂，诸如润湿剂、乳化和悬浮剂、甜味剂、调味剂、着色剂、芳香剂以及防腐剂。
除了含有活性化合物外，混悬液还可以含有悬浮剂如，例如乙氧化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇和山梨糖醇酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝(aluminum metahydroxide)、膨润土、琼脂和黄蓍胶及其混合物。
用于直肠或阴道施用的本公开的药物组合物可以作为栓剂形式存在，栓剂可以通过将本公开的一种或多种化合物与一种或多种合适的无刺激性赋形剂或载体混合而制备，这些赋形剂或载体包括例如可可脂、聚乙二醇、栓剂蜡或水杨酸盐，栓剂在室温下为固体，但在体温下为液体，因此将在直肠或阴道腔内融化并释放出活性化合物。
用于局部或透皮施用本公开的化合物的剂型包括散剂、喷雾剂、软膏剂、糊剂、乳膏、洗剂、凝胶剂、溶液、贴剂以及吸入剂。可将活性化合物(即，式(I)化合物或其药学上可接受的盐)在无菌条件下与药学上可接受的载体以及与可能需要的任何防腐剂、缓冲剂或推进剂混合。
除式(I)化合物或其药学上可接受的盐之外，软膏剂、糊剂、乳膏和凝胶剂可以含有赋形剂，诸如动植物脂肪、油、蜡、石蜡、淀粉、黄蓍胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅酮、膨润土、硅酸、滑石和氧化锌，或其混合物。
除式(I)化合物或其药学上可接受的盐之外，散剂和喷雾剂可以含有赋形剂，诸如乳糖、滑石、硅酸、氢氧化铝、硅酸钙和聚酰胺粉末，或这些物质的混合物。喷雾剂另外还可以含有常规推进剂诸如氯氟烃和挥发性的未取代的烃诸如丁烷和丙烷。
适合肠胃外施用的本公开的药物组合物可以包含与一种或多种药学上可接受的以下试剂组合的一种或多种式(I)化合物或其药学上可接受的盐：无菌等渗水性或非水性溶液、分散液、混悬液或乳液、或者可以就在使用之前重构成无菌注射溶液或分散液的无菌粉末，这些可以含有糖、醇、抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂、使配制物与预期受者的血液等渗的溶质、或悬浮剂或增稠剂。
可以用于本公开的药物组合物中的合适的水性和非水性载体的实例包括水、乙醇、多元醇(诸如甘油、丙二醇、聚乙二醇等)，及其合适的混合物、植物油(诸如橄榄油)以及可注射有机酯，诸如油酸乙酯。可以例如通过使用诸如卵磷脂的包衣材料、在分散液的情况下通过维持所要求的粒度、以及通过使用表面活性剂来维持适当流动性。
药物组合物还可以含有佐剂，诸如防腐剂、润湿剂、乳化剂和分散剂。可以通过包括各种抗细菌剂和抗真菌剂(例如，对羟苯甲酸酯、三氯叔丁醇、山梨酸苯酚等)确保防止微生物对主题化合物的作用。还令人希望的是在组合物中包含等渗剂，诸如糖、氯化钠等。另外，可通过包含延迟吸收的药剂(诸如单硬脂酸铝和明胶)来实现可注射药物形式的延迟吸收。
在某些情况下，为了延长药物的作用，希望的是减慢皮下或肌内注射药物的吸收。这可通过用水溶性低的晶体或非晶体物质的液体混悬液实现。药物的吸收速率则取决于它的溶解速率，所述溶解速率又可取决于晶体大小和结晶形式。可替代地，通过将药物溶解或悬浮于油性媒介物中可以延迟肠胃外施用的药物形式的吸收。
通过在生物可降解的聚合物(诸如聚乳酸交酯-聚乙交酯)中形成主题化合物的微胶囊基质来制得可注射的贮库形式。根据药物与聚合物的比率、以及所采用的特定聚合物的性质，可以控制药物释放速率。其他生物可降解聚合物的实例包括聚(原酸酯)和聚(酸酐)。还通过将药物包埋在与人体组织相容的脂质体或微乳液中来制备贮库型可注射配制剂。
在本文所述的药物组合物的一些实施方案中，该药物组合物包含高纯度的式(I)化合物的(S)异构体(即，在下文所示附接至螺环基环的-NH2基团的碳原子(*)处为(S)构型)。
在一些实施方案中，该药物组合物包含占式(I)化合物总量的至少约50％、60％、70％、80％或90％的式(I)化合物的(S)异构体。在一些实施方案中，该药物组合物包含占式(I)化合物总量的至少约90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的式(I)化合物的(S)异构体。在一些实施方案中，该药物组合物包含占式(I)化合物总量的至少约95％的式(I)化合物的(S)异构体。在一些实施方案中，该药物组合物包含占式(I)化合物总量的100％的式(I)化合物的(S)异构体。在一些实施方案中，该药物组合物包含少量的式(I)化合物的(R)异构体(即，在上文所示附接至螺环基环的-NH2基团的碳原子(*)处为(R)构型)。在一些实施方案中，该药物组合物包含占式(I)化合物总量的小于约50％、40％、30％、20％或10％的式(I)化合物的(R)异构体。在一些实施方案中，该药物组合物包含占式(I)化合物总量的小于约10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％或1％的式(I)化合物的(R)异构体。在一些实施方案中，该药物组合物包含占式(I)化合物总量的小于约5％的式(I)化合物的(R)异构体。在一些实施方案中，该药物组合物不包含式(I)化合物的(R)异构体。
治疗方法
式(I)化合物或其药学上可接受的盐和包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物可用于本文提供的施用和治疗方法中。这些化合物和药物组合物也可用于体外方法，诸如为了筛选目的和/或为了进行质量控制测定将化合物或药物组合物施用于细胞的体外方法。
在一个方面，本文提供了一种调节SHP2的方法，其包括使有效量的本文所述的化合物或其药学上可接受的盐或有效量的本文提供的药物组合物与SHP2接触。SHP2的调节(例如，抑制或活化)可以通过本领域已知的多种方式来评估和证明。药盒和可商购的测定法可用于确定SHP2是否已被调节(例如，被抑制或活化)以及调节的程度。在某些实施方案中，本公开的化合物是SHP2的变构调节剂。
在一些实施方案中，本文提供了一种抑制SHP2的方法，其包括使有效量的本文所述的化合物或其药学上可接受的盐或有效量的本文提供的药物组合物与SHP2接触。在某些实施方案中，本公开的化合物是SHP2的变构抑制剂。
在一些实施方案中，式(I)化合物或其药学上可接受的盐将SHP2的活性调节约1％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或100％。在一些实施方案中，式(I)化合物将SHP2的活性调节约1-100％、5-100％、10-100％、15-100％、20-100％、25-100％、30-100％、35-100％、40-100％、45-100％、50-100％、55-100％、60-100％、65-100％、70-100％、75-100％、80-100％、85-100％、90-100％、95-100％、5-95％、5-90％、5-85％、5-80％、5-75％、5-70％、5-65％、5-60％、5-55％、5-50％、5-45％、5-40％、5-35％、5-30％、5-25％、5-20％、5-15％、5-10％、10-90％、20-80％、30-70％或40-60％。
在一些实施方案中，式(I)化合物或其药学上可接受的盐将SHP2的活性抑制约1％、5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％或100％。在一些实施方案中，式(I)化合物将SHP2的活性抑制约1-100％、5-100％、10-100％、15-100％、20-100％、25-100％、30-100％、35-100％、40-100％、45-100％、50-100％、55-100％、60-100％、65-100％、70-100％、75-100％、80-100％、85-100％、90-100％、95-100％、5-95％、5-90％、5-85％、5-80％、5-75％、5-70％、5-65％、5-60％、5-55％、5-50％、5-45％、5-40％、5-35％、5-30％、5-25％、5-20％、5-15％、5-10％、10-90％、20-80％、30-70％或40-60％。
在一些实施方案中，式(I)化合物或其药学上可接受的盐渗透血脑屏障。因此，在一些实施方案中，式(I)化合物可用于治疗有需要的受试者中与SHP2调节相关的疾病，其中该疾病是脑部疾病，诸如脑癌。不希望受理论束缚，式(I)的吡唑并吡嗪核，包括稠合双环中氮原子的相对位置，促进有利的脑穿透特性(增强的血脑屏障渗透)。在一些实施方案中，与具有除吡唑并吡嗪以外的核环结构的化合物相比，式(I)化合物具有增强的血脑屏障渗透能力。本领域技术人员熟悉测量脑穿透的方法，例如测量血脑屏障渗透。
在另一个方面，本文提供了一种用于治疗有需要的受试者中与SHP2调节相关的疾病的方法，其包括向受试者施用有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本文提供了一种用于预防有需要的受试者中与SHP2调节相关的疾病的方法，其包括向受试者施用有效量的式(I)化合物。与SHP2调节相关的疾病的非限制性实例包括努南综合征、豹皮综合征、幼年型粒单核细胞白血病、成神经细胞瘤、黑素瘤、急性髓性白血病、乳腺癌、肺癌、结肠癌或脑癌。在一些实施方案中，脑癌是成胶质细胞瘤。在一些实施方案中，与SHP2调节相关的疾病是遗传病症。在一些实施方案中，与SHP2调节相关的疾病是努南综合征。在一些实施方案中，与SHP2调节相关的疾病是豹皮综合征。在一些实施方案中，与SHP2调节相关的疾病是癌症。在一些实施方案中，与SHP2调节相关的疾病是幼年型粒单核细胞白血病。在一些实施方案中，与SHP2调节相关的疾病是成神经细胞瘤。在一些实施方案中，与SHP2调节相关的疾病是黑素瘤。在一些实施方案中，与SHP2调节相关的疾病是急性髓性白血病。在一些实施方案中，与SHP2调节相关的疾病是乳腺癌。在一些实施方案中，与SHP2调节相关的疾病是肺癌。在一些实施方案中，与SHP2调节相关的疾病是结肠癌。在一些实施方案中，与SHP2调节相关的疾病是脑癌，例如成胶质细胞瘤。
在一些实施方案中，与SHP2调节相关的疾病包括EGFR/RAS途径依赖性的脑转移瘤或成胶质细胞瘤。在一些变型中，脑转移瘤可在用EGFR抑制剂治疗的非小细胞肺癌(NSCLC)患者中发展。在一些实施方案中，EGFR/RAS途径依赖性的脑转移瘤或成胶质细胞瘤的治疗包括向受试者施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐与ALK抑制剂的组合。
与SHP2调节相关的疾病的其他非限制性实例包括以下：造血系统癌症；淋巴系统疾病；骨髓增生综合征；骨髓增生异常综合征；白血病；急性骨髓性白血病；幼年型粒单核细胞白血病；食管癌；乳腺癌；肺癌；结肠癌；胃癌；成神经细胞瘤；膀胱癌；前列腺癌；成胶质细胞瘤；尿道上皮癌；子宫癌；腺样体和卵巢浆液性囊腺癌；副神经节瘤；嗜铬细胞瘤；胰腺癌；肾上腺皮质癌；胃腺癌；肉瘤；横纹肌肉瘤；淋巴瘤；头颈癌；皮肤癌；腹膜癌；肠癌(小肠和大肠)；甲状腺癌；子宫内膜癌；胆道癌；软组织癌；卵巢癌；中枢神经系统癌症(例如原发性CNS淋巴瘤)；胃癌；垂体癌；生殖道癌；尿路癌；唾液腺癌；宫颈癌；肝癌；眼癌；肾上腺癌；自主神经节癌症；上呼吸消化道癌；骨癌；睾丸癌；胸膜癌；肾癌；阴茎癌；甲状旁腺癌；脑膜癌；外阴癌和黑素瘤。
在一些实施方案中，与SHP2调节相关的疾病是选自以下的癌症：肺癌(例如，NSCLC)、结肠癌、食管癌、直肠癌、乳腺癌、黑素瘤、胰腺癌、幼年型粒单核细胞白血病和神经鞘瘤(Schwannoma)。在一些实施方案中，与SHP2调节相关的疾病是子宫癌、子宫内膜癌或卵巢癌。
在一些实施方案中，与SHP2调节相关的疾病是Ras突变驱动的癌症(例如，KRASG12C、KRAS G12D或KRAS G12V)。
在一些实施方案中，与SHP2调节相关的疾病是选自以下的癌症：EGFR突变型非小细胞肺癌、KRAS突变型非小细胞肺癌(NSCLC)、头颈鳞状细胞肺癌、黑素瘤、胃肠道间质瘤、结直肠癌、甲状腺髓样癌和ALK重排型NSCLC。在一些实施方案中，与SHP2调节相关的疾病是选自以下的癌症：上皮癌(例如，呼吸道癌、胃肠癌、生殖器癌、分泌系统癌、乳腺癌)、间皮瘤、肉瘤、造血系统肿瘤、成视网膜细胞瘤，或中枢神经系统或外周神经系统的肿瘤。
在一些实施方案中，向有需要的受试者施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐削弱受试者中与SHP2调节相关的疾病的程度(例如，肿瘤大小、肿瘤生长速率、转移)。在一些实施方案中，向有需要的受试者施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐稳定与SHP2调节相关的疾病(例如，预防或延迟癌症的恶化)。在一些实施方案中，向有需要的受试者施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐延迟与SHP2调节相关的疾病的发生或复发。在一些实施方案中，向有需要的受试者施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐减缓与SHP2调节相关的疾病的进展。在一些实施方案中，向有需要的受试者施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐提供与SHP2调节相关的疾病(诸如癌症)的部分缓解。在一些实施方案中，向有需要的受试者施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐提供与SHP2调节相关的疾病(诸如癌症)的完全缓解。在一些实施方案中，向有需要的受试者施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐降低治疗与SHP2调节相关的疾病(诸如癌症)所需的一种或多种其他药物的剂量。在一些实施方案中，向有需要的受试者施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐增强用于治疗与SHP2调节相关的疾病(诸如癌症)的另一种药物的效果。在一些实施方案中，向有需要的受试者施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐延迟与SHP2调节相关的疾病(诸如癌症)的进展。在一些实施方案中，向有需要的受试者施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐提高患有与SHP2调节相关的疾病(诸如癌症)的受试者的生活质量。在一些实施方案中，向有需要的受试者施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐延长患有与SHP2调节相关的疾病(诸如癌症)的受试者的生存期。
在一些方面，本文提供了减缓受试者中与SHP2调节相关的疾病(诸如癌症)的进展的方法，该方法包括向受试者施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本文提供了稳定受试者中与SHP2调节相关的疾病(诸如癌症)的方法，该方法包括向受试者施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，该方法预防与SHP2调节相关的疾病(诸如癌症)的进展。在一些实施方案中，该方法延迟与SHP2调节相关的疾病(诸如癌症)的进展。在一些实施方案中，该方法提供与SHP2调节相关的疾病(诸如癌症)的部分缓解或完全缓解。
在另一个方面，本文提供了延迟受试者中与SHP2调节相关的疾病(诸如癌症)的发生或复发的方法，该方法包括向受试者施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐。
在另外的方面，本文提供了降低治疗受试者中与SHP2调节相关的疾病(诸如癌症)所需的一种或多种其他药物的剂量的方法，该方法包括向受试者施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，本文提供了增强用于治疗受试者中与SHP2调节相关的疾病(诸如癌症)的另一种药物的效果的方法，该方法包括向受试者施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐。
本文还提供了延迟受试者中与SHP2调节相关的疾病(诸如癌症)的进展的方法，该方法包括向受试者施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，该方法提高患有与SHP2调节相关的疾病(诸如癌症)的受试者的生活质量。在一些实施方案中，该方法延长患有与SHP2调节相关的疾病(诸如癌症)的受试者的生存期。
在一些方面，本文提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其用于治疗与SHP2调节相关的疾病。在其他方面，本文提供了式(I)化合物或其药学上可接受的盐，其用于制造用于治疗与SHP2调节相关的疾病的药物。
给药和施用方法
如本文所用的短语“肠胃外施用(parenteral administration)”和“肠胃外施用(administered parenterally)”意指除了肠道和局部施用以外的施用模式，通常通过注射施用，并且包括但不限于静脉内、肌内、动脉内、鞘内、囊内、眶内、心内、皮内、腹膜内、经气管、皮下、表皮下、关节内、囊下、蛛网膜下、脊柱内以及胸骨内注射和输注。
如本文所用的短语“全身施用(systemic administration)”、“全身施用(administered systemically)”、“外周施用(peripheral administration)”和“外周施用(administered peripherally)”意指将化合物、药物或其他材料不直接施用至中枢神经系统，使其进入患者的系统，并因此经受代谢和其他类似过程，例如皮下施用。
这些化合物可以通过任何合适的施用途径施用给人和其他动物用于治疗，这些合适的施用途径包括口服、经鼻，如通过例如喷雾、直肠、阴道内、肠胃外、脑池内和局部，如通过散剂、软膏剂或滴剂，包括经颊和舌下。
无论选择何种施用途径，本公开的化合物或本公开的药物组合物通过本领域技术人员已知的常规方法配制成药学上可接受的剂型。
本公开的药物组合物中活性成分的实际剂量水平可以变化以便于获得有效实现对于特定的患者、组合物、以及施用模式而言所需的治疗应答而对患者无毒的量的活性成分。
选择的剂量水平将取决于各种因素，包括所采用的本公开的特定化合物或其酯、盐或酰胺的活性，施用途径、施用时间、所采用的特定化合物的排泄率或代谢、治疗持续时间，与所采用的特定化合物组合使用的其他药物、化合物和/或材料，所治疗的患者的年龄、性别、体重、状况、总体健康和先前病史，以及在医学领域中熟知的类似因素。可以使用每日、每周或每月剂量(或其他时间间隔)。
具有本领域普通技术的医师或兽医可以容易地确定并开出所需的药物组合物的有效量。例如，医师或兽医可以以低于获得期望治疗效果所需要的水平开始药物组合物中采用的本公开化合物的剂量，然后逐渐增加剂量直至实现期望效果。
一般而言，本公开的化合物的合适日剂量将是有效产生治疗效果(例如，抑制坏死)的最低剂量的化合物的量。此类有效剂量通常将取决于上述因素。通常，当用于所示效果时，本公开的化合物用于患者的剂量范围为约0.0001至约100mg/kg体重/天。优选地，日剂量范围将为0.001至50mg化合物/kg体重，甚至更优选0.01至10mg化合物/kg体重。
如果需要，活性化合物的有效日剂量可以在全天以适当的间隔，作为单独施用的2、3、4、5、6个或更多个亚剂量施用，任选地以单位剂型施用。
在某些实施方案中，本公开涉及用于调节SHP2的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物由式(I)表示。在某些实施方案中，本公开的化合物是SHP2的变构调节剂。在任何情况下，本公开的化合物优选以小于约50微摩尔，诸如小于约10微摩尔或小于1微摩尔的浓度对调节SHP2发挥其作用。
当本公开的化合物作为药品施用给人和动物时，它们可以本身给予或作为药物组合物给予，该药物组合物含有例如0.1％至99.5％(诸如0.5％至90％)的活性成分与药学上可接受的载体的组合。
本申请的化合物或其药物组合物可以使用上述任何合适的模式每天施用一次、两次、三次或四次。此外，化合物的施用或治疗可持续数天；例如，通常治疗将持续至少7天、14天或28天，持续一个治疗周期。治疗周期是众所周知的，并且在周期之间经常交替约1至28天，通常约7天或约14天的休息期。在某些实施方案中，治疗周期也可以是连续的。
当口服施用时，人受试者的总日剂量可为约1mg至1,000mg、约1,000-2,000mg/天、约10-500mg/天、约50-300mg/天、约75-200mg/天或约100-150mg/天。
日剂量也可描述为每剂或每天施用的本文所述的化合物的总量。化合物的日剂量可为约1mg至4,000mg、约2,000至4,000mg/天、约1至2,000mg/天、约1至1,000mg/天、约10至500mg/天、约20至500mg/天、约50至300mg/天、约75至200mg/天或约15至150mg/天。
在某些实施方案中，该方法包括向受试者施用约1至800mg初始日剂量的本文所述的化合物，并以增量增加剂量直至实现临床功效。可以使用约5、10、25、50或100mg的增量来增加剂量。剂量可以每天、每隔一天、每周两次或每周一次增加。
在某些实施方案中，口服施用化合物或药物制剂。在某些实施方案中，静脉内施用化合物或药物制剂。替代性的施用途径包括舌下、肌内和透皮施用。
本公开的制剂可以口服、肠胃外、局部或直肠给予。当然，它们以适于每种施用途径的形式给予。例如，它们以片剂或胶囊形式施用；通过注射、吸入、洗眼液、软膏、栓剂、输注、吸入等施用；通过洗剂或软膏局部施用；以及通过栓剂直肠施用。在某些实施方案中，施用是口服的。
组合疗法
本公开的方法可包括单独使用或与一种或多种另外的疗法(例如，非药物治疗或治疗剂)组合使用的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。当单独施用时，一种或多种另外的疗法(例如，非药物治疗或治疗剂)的剂量可以从标准剂量减少。例如，可以根据经验从药物的组合和排列确定剂量，或者可以通过等辐射分析推断剂量(例如，Black等人，Neurology 65:S3-S6(2005))。
式(I)化合物或其药学上可接受的盐可在一种或多种此类另外的疗法之前、之后或同时施用。当组合时，式(I)化合物或其药学上可接受的盐的剂量和该一种或多种另外的疗法(例如，非药物治疗或治疗剂)的剂量提供治疗效果(例如，协同或累加治疗效果)。式(I)化合物或其药学上可接受的盐和另外的疗法(诸如抗癌剂)可以一起施用，诸如以单一药物组合物施用，或分开施用，并且当分开施用时，这可以同时或依序发生。此类依序施用可以在时间上接近或远离。
在一些实施方案中，另外的疗法是施用限制副作用的药剂(例如，旨在减少治疗副作用的发生或严重程度的药剂)。例如，在一些实施方案中，式(I)化合物或其药学上可接受的盐还可与治疗恶心的治疗剂组合使用。可用于治疗恶心的药剂的实例包括：屈大麻酚、格拉司琼(granisetron)、甲氧氯普胺(metoclopramide)、昂丹司琼(ondansetron)和丙氯拉嗪(prochlorperazine)，或其药学上可接受的盐。
在一些实施方案中，该一种或多种另外的疗法包括非药物治疗(例如，手术或放射疗法)。在一些实施方案中，该一种或多种另外的疗法包括治疗剂(例如，作为抗血管生成剂、信号转导抑制剂、抗增殖剂、糖酵解抑制剂或自噬抑制剂的化合物或生物制剂)。在一些实施方案中，该一种或多种另外的疗法包括非药物治疗(例如，手术或放射疗法)和治疗剂(例如，作为抗血管生成剂、信号转导抑制剂、抗增殖剂、糖酵解抑制剂或自噬抑制剂的化合物或生物制剂)。在其他实施方案中，该一种或多种另外的疗法包括两种治疗剂。还有其他实施方案中，该一种或多种另外的疗法包括三种治疗剂。在一些实施方案中，该一种或多种另外的疗法包括四种或更多种治疗剂。
在该组合疗法部分中，所有参考文献通过引用并入本文以提及所描述的药剂或其药学上可接受的盐、溶剂化物、异构体(例如，立体异构体)、前药或互变异构体，无论是否明确地这样陈述。
非药物疗法
非药物治疗的实例包括但不限于放射疗法、冷冻疗法、高温疗法、手术(例如，手术切除肿瘤组织)和T细胞过继转移(ACT)疗法。
在一些实施方案中，式(I)化合物或其药学上可接受的盐可用作手术后的辅助疗法。在一些实施方案中，式(I)化合物或其药学上可接受的盐可用作手术前的新辅助疗法。
放射疗法可用于在受试者(例如，哺乳动物，诸如人)中抑制异常细胞生长或治疗过度增生性病症，诸如癌症。用于施用放射疗法的技术是本领域已知的。放射疗法可以通过几种方法中的一种或方法的组合来施用，这些方法包括但不限于外照射疗法、内放射疗法、植入放射、立体定向放射外科、全身放射疗法、放射疗法和永久性或暂时性间质近距离放射疗法。如本文所用，术语“近距离放射疗法”是指通过插入到体内肿瘤或其他增生性组织疾病部位处或附近的空间上受限的放射性材料递送的放射疗法。该术语旨在但不限于包括暴露于放射性同位素(例如，At-211、I-131、I-125、Y-90、Re-186、Re-188、Sm-153、Bi-212、P-32和Lu的放射性同位素)。用作本公开的细胞调理剂的合适的放射源包括固体和液体。作为非限制性实例，放射源可以是放射性核素，诸如作为固体源的I-125、I-131、Yb-169、Ir-192，作为固体源的I-125，或发射光子、β粒子、γ放射或其他治疗射线的其他放射性核素。放射性材料也可以是由任何放射性核素溶液(例如，I-125或I-131溶液)制成的流体，或者放射性流体可以使用含有固体放射性核素诸如Au-198或Y-90的小颗粒的合适流体的浆料来产生。而且，放射性核素可以蕴含在凝胶或放射性微球中。
在一些实施方案中，式(I)化合物或其药学上可接受的盐可使异常细胞对放射治疗更敏感以杀伤或抑制此类细胞的生长。因此，本公开还涉及使哺乳动物中的异常细胞对放射治疗敏感的方法，其包括向哺乳动物施用一定量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐，该量有效地使异常细胞对放射治疗敏感。该方法中化合物的量可根据本文所述的用于确定此类化合物的有效量的手段来确定。在一些实施方案中，式(I)化合物或其药学上可接受的盐可用作放射疗法后的辅助疗法或用作放射疗法前的新辅助疗法。
在一些实施方案中，非药物治疗是T细胞过继转移(ACT)疗法。在一些实施方案中，T细胞是活化T细胞。可以修饰T细胞以表达嵌合抗原受体(CAR)。CAR修饰的T(CAR-T)细胞可以通过本领域已知的任何方法产生。例如，CAR-T细胞可通过将编码CAR的合适表达载体引入T细胞中而产生。在T细胞扩增和遗传修饰之前，从受试者获得T细胞来源。T细胞可以从许多来源获得，包括外周血单核细胞、骨髓、淋巴结组织、脐带血、胸腺组织、来自感染部位的组织、腹水、胸腔积液、脾脏组织和肿瘤。在本公开的某些实施方案中，可以使用本领域可用的许多T细胞系。在一些实施方案中，T细胞是自体T细胞。无论在遗传修饰T细胞以表达期望的蛋白质(例如，CAR)之前还是之后，通常使用例如美国专利6,352,694、6,534,055、6,905,680、6,692,964、5,858,358、6,887,466、6,905,681、7,144,575、7,067,318、7,172,869、7,232,566、7,175,843、7,572,631、5,883,223、6,905,874、6,797,514和6,867,041中描述的方法活化和扩增T细胞。
治疗剂
治疗剂可以是用于治疗癌症或其相关症状的化合物。
例如，治疗剂可以是类固醇。因此，在一些实施方案中，该一种或多种另外的疗法包括类固醇。合适的类固醇可以包括但不限于21-乙酰氧基孕烯醇酮、阿氯米松(alclometasone)、阿尔孕酮(algestone)、安西奈德(amcinonide)、倍氯米松(beclomethasone)、倍他米松(betamethasone)、布地奈德(budesonide)、氯泼尼松(chloroprednisone)、氯倍他索(clobetasol)、氯可托龙(clocortolone)、氯泼尼醇(cloprednol)、皮质酮(corticosterone)、可的松(cortisone)、可的伐唑(cortivazol)、地夫可特(deflazacort)、地奈德(desonide)、去羟米松(desoximetasone)、地塞米松(dexamethasone)、双氟拉松(diflorasone)、双氟可龙(diflucortolone)、二氟孕甾丁酯(difuprednate)、甘草次酸(enoxolone)、氟扎可特(fluazacort)、氟氯奈德(fiucloronide)、氟甲松(flumethasone)、氟尼缩松(flunisolide)、醋酸氟轻松(fluocinolone acetonide)、醋酸氟轻松(fluocinonide)、氟可丁丁酯(fluocortinbutyl)、氟可龙(fluocortolone)、氟米龙(fluorometholone)、醋酸氟培龙(fluperoloneacetate)、醋酸氟泼尼定(fluprednidene acetate)、氟泼尼龙(fluprednisolone)、氟氢缩松(flurandrenolide)、丙酸氟替卡松(fluticasone propionate)、福莫可他(formocortal)、哈西奈德(halcinonide)、丙酸卤倍他索(halobetasol propionate)、卤米松(halometasone)、氢化可的松(hydrocortisone)、依碳酸氯替泼诺(loteprednoletabonate)、马泼尼酮(mazipredone)、甲羟松(medrysone)、甲泼尼松(meprednisone)、甲基强的松龙(methylprednisolone)、糠酸莫米松(mometasone furoate)、帕拉米松(paramethasone)、泼尼卡酯(prednicarbate)、强的松龙(prednisolone)、强的松龙25-二乙基氨基乙酸酯、强的松龙磷酸钠、强的松(prednisone)、泼尼松龙戊酸酯(prednival)、泼尼立定(prednylidene)、利美索龙(rimexolone)、替可的松(tixocortol)、去炎松(triamcinolone)、曲安缩松(triamcinolone acetonide)、苯曲安缩松(triamcinolonebenetonide)、己曲安缩松(triamcinolone hexacetonide)及其盐或衍生物。
可用于与式(I)化合物或其药学上可接受的盐的组合疗法中的治疗剂的其他实例包括以下专利中描述的化合物：美国专利号6,258,812、6,630,500、6,515,004、6,713,485、5,521,184、5,770,599、5,747,498、5,990,141、6,235,764和8,623,885，以及国际专利申请WO01/37820、WO01/32651、WO02/68406、WO02/66470、WO02/55501、WO04/05279、WO04/07481、WO04/07458、WO04/09784、WO02/59110、WO99/45009、WO00/59509、WO99/61422、WO00/12089和WO00/02871。
治疗剂可以是用于治疗癌症或其相关症状的生物制剂(例如，细胞因子(例如，干扰素或白介素诸如IL-2))。在一些实施方案中，生物制剂是基于免疫球蛋白的生物制剂，例如，使靶标激动以刺激抗癌应答或拮抗对癌症重要的抗原的单克隆抗体(例如，人源化抗体、全人抗体、Fc融合蛋白或其功能片段)。还包括抗体-药物缀合物。
治疗剂可以是T细胞检查点抑制剂。在一个实施方案中，检查点抑制剂是抑制性抗体(例如，单特异性抗体诸如单克隆抗体)。抗体可以是，例如人源化的或全人的。在一些实施方案中，检查点抑制剂是融合蛋白，例如Fc-受体融合蛋白。在一些实施方案中，检查点抑制剂是与检查点蛋白相互作用的试剂，诸如抗体。在一些实施方案中，检查点抑制剂是与检查点蛋白的配体相互作用的试剂，诸如抗体。在一些实施方案中，检查点抑制剂是CTLA-4的抑制剂(例如，抑制性抗体或小分子抑制剂)(例如，抗CTLA-4抗体或融合蛋白)。在一些实施方案中，检查点抑制剂是PD-1的抑制剂或拮抗剂(例如，抑制性抗体或小分子抑制剂)。在一些实施方案中，检查点抑制剂是PD-L1的抑制剂或拮抗剂(例如，抑制性抗体或小分子抑制剂)。在一些实施方案中，检查点抑制剂是PD-L2(例如，PD-L2/Ig融合蛋白)的抑制剂或拮抗剂(例如，抑制性抗体或Fc融合物或小分子抑制剂)。在一些实施方案中，检查点抑制剂是B7-H3、B7-H4、BTLA、HVEM、TIM3、GAL9、LAG3、VISTA、KIR、2B4、CD160、CGEN-15049、CHK 1、CHK2、A2aR、B-7家族配体或其组合的抑制剂或拮抗剂(例如，抑制性抗体或小分子抑制剂)。在一些实施方案中，检查点抑制剂是帕博利珠单抗(pembrolizumab)、纳武单抗(nivolumab)、PDR001(NVS)、REGN2810(Sanofi/Regeneron)、PD-L1抗体诸如阿维鲁单抗(avelumab)、德瓦鲁单抗(durvalumab)、阿特珠单抗(atezolizumab)、匹地利珠单抗(pidilizumab)、JNJ-63723283(JNJ)、BGB-A317(BeiGene&Celgene)或Preusser,M.等人(2015)Nat.Rev.Neurol.中公开的检查点抑制剂，包括但不限于伊匹单抗(ipilimumab)、曲美木单抗(tremelimumab)、纳武单抗、帕博利珠单抗、AMP224、AMP514/MEDI0680、BMS936559、MEDl4736、MPDL3280A、MSB0010718C、BMS986016、IMP321、利瑞鲁单抗(lirilumab)、IPH2101、1-7F9和KW-6002。
治疗剂可以是抗TIGIT抗体，诸如MBSA43、BMS-986207、MK-7684、COM902、AB154、MTIG7192A或OMP-313M32(艾替利单抗(etigilimab))。
治疗剂可以是治疗癌症或其相关症状的药剂(例如，细胞毒性剂、非肽小分子或可用于治疗癌症或其相关症状的其他化合物，统称为“抗癌剂”)。抗癌剂可以是例如化学治疗剂或靶向治疗剂。
抗癌剂包括有丝分裂抑制剂、插入性抗生素、生长因子抑制剂、细胞周期抑制剂、酶、拓扑异构酶抑制剂、生物反应调节剂、烷化剂、抗代谢物、叶酸类似物、嘧啶类似物、嘌呤类似物和相关抑制剂、长春花生物碱(vinca alkaloids)、表鬼臼毒素、抗生素、L-天冬酰胺酶、拓扑异构酶抑制剂、干扰素、铂配位络合物、蒽二酮取代的脲、甲基肼衍生物、肾上腺皮质抑制剂、肾上腺皮质类固醇、黄体酮、雌激素、抗雌激素、雄激素、抗雄激素和促性腺激素释放激素类似物。其他抗癌剂包括甲酰四氢叶酸(LV)、伊立替康(irenotecan)、奥沙利铂(oxaliplatin)、卡培他滨(capecitabine)、紫杉醇(paclitaxel)和多西他赛(doxetaxel)。在一些实施方案中，该一种或多种另外的疗法包括两种或更多种抗癌剂。该两种或更多种抗癌剂可用于混合液中以组合施用或分开施用。组合抗癌剂的合适给药方案是本领域已知的并且描述于例如Saltz等人，Proc.Am.Soc.Clin.Oncol.18:233a(1999)和Douillard等人，Lancet 355(9209):1041-1047(2000)中。
抗癌剂的其他非限制性实例包括(甲磺酸伊马替尼(ImatinibMesylate))；(卡非佐米(carfilzomib))；(硼替佐米(bortezomib))；CasodexTM(比卡鲁胺(bicalutamide))；(吉非替尼(gefitinib))；烷化剂，诸如噻替哌(thiotepa)和环磷酰胺；烷基磺酸酯，诸如白消安(busulfan)、英丙舒凡(improsulfan)和哌泊舒凡(piposulfan)；氮杂环丙烷，诸如苯佐替哌(benzodopa)、卡波醌(carboquone)、美妥替哌(meturedopa)及乌瑞替哌(uredopa)；乙烯亚胺和甲基蜜胺，包括六甲蜜胺(altretamine)、三乙烯蜜胺、三乙烯磷酰胺、三乙烯硫代磷酰胺和三羟甲基蜜胺；多聚乙酰(尤其是布拉他辛(bullatacin)及布拉他辛酮(bullatacinone))；喜树碱(camptothecin)(包括合成类似物拓扑替康(topotecan))；苔藓抑素(bryostatin)；卡利他汀(callystatin)；CC-1065(包括其阿多来新(adozelesin)、卡折来新(carzelesin)和比折来新(bizelesin)合成类似物)；念珠藻素(cryptophycin)(特别是念珠藻素1和念珠藻素8)；海兔毒素(dolastatin)；倍癌霉素(duocarmycin)(包括合成类似物KW-2189和CB1-TM1)；伊斯罗宾(eleutherobin)；水鬼蕉碱(pancratistatin)；匍枝珊瑚醇A(sarcodictyinA)；海绵抑素(spongistatin)；氮芥，诸如苯丁酸氮芥(chlorambucil)、萘氮芥(chlornaphazine)、胆磷酰胺(cholophosphamide)、雌莫司汀(estramustine)、异环磷酰胺(ifosfamide)、甲氮芥(mechlorethamine)、氧化甲氮芥盐酸盐(mechlorethamine oxidehydrochloride)、美法仑(melphalan)、新恩比兴(novembichin)、苯芥胆甾醇(phenesterine)、泼尼莫司汀(prednimustine)、曲磷胺(trofosfamide)、乌拉莫司汀(uracil mustard)；亚硝基脲，诸如卡莫司汀(carmustine)、氯脲霉素(chlorozotocin)、福莫司汀(fotemustine)、洛莫司汀(lomustine)、尼莫司汀(nimustine)及雷诺莫司汀(ranimustine)；抗生素，诸如烯二炔类抗生素(例如刺孢霉素(calicheamicin)，诸如刺孢霉素γII和刺孢霉素ωII(参见例如，Agnew,Chem.Intl.Ed Engl.33:183-186(1994))；达内霉素(dynemicin)，诸如达内霉素A；双膦酸盐，诸如氯屈膦酸盐(clodronate)；埃斯波霉素(esperamicin)；新制癌菌素发色团(neocarzinostatin chromophore)及相关色蛋白烯二炔抗生素发色团、阿克拉霉素(aclacinomysin)、放线菌素(actinomycin)、安曲霉素(authramycin)、重氮丝氨酸(azaserine)、博来霉素(bleomycin)、放线菌素C(cactinomycin)、刺孢霉素(calicheamicin)、卡拉比星(carabicin)、卡米诺霉素(caminomycin)、洋红霉素(carminomycin)、嗜癌菌素(carzinophilin)、色霉素(chromomycins)、放线菌素D(dactinomycin)、道诺霉素(daunorubicin)、地托比星(detorubicin)、6-重氮-5-氧代-L-正亮氨酸、阿德力霉素(adriamycin)(多柔比星)、吗啉代多柔比星、氰基吗啉代多柔比星、2-吡咯啉并-多柔比星、去氧多柔比星、表柔比星(epirubicin)、依索比星(esorubicin)、伊达比星(idarubicin)、麻西罗霉素(marcellomycin)、丝裂霉素(mitomycin)(诸如丝裂霉素C)、霉酚酸(mycophenolic acid)、诺拉霉素(nogalamycin)、橄榄霉素(olivomycin)、培洛霉素(peplomycin)、泊非霉素(potfiromycin)、嘌呤霉素(puromycin)、三铁阿霉素(quelamycin)、罗多比星(rodorubicin)、链黑霉素(streptonigrin)、链佐星(streptozocin)、杀结核菌素(tubercidin)、乌苯美司(ubenimex)、净司他丁(zinostatin)、左柔比星(zorubicin)；抗代谢物，诸如胺甲喋呤(methotrexate)和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物，诸如二甲叶酸(denopterin)、蝶罗呤(pteropterin)、三甲曲沙(trimetrexate)；嘌呤类似物，诸如氟达拉滨(fludarabine)、6-巯基嘌呤、硫咪嘌呤(thiamiprine)、硫鸟嘌呤(thioguanine)；嘧啶类似物，诸如安西他滨(ancitabine)、阿扎胞苷(azacitidine)、6-氮杂尿苷、卡莫氟(carmofur)、阿糖胞苷(cytarabine)、双去氧尿苷、去氧氟尿苷(doxifluridine)、依诺他滨(enocitabine)、氟尿苷(floxuridine)；雄激素，诸如卡普睾酮(calusterone)、丙酸屈他雄酮(dromostanolone propionate)、环硫雄醇(epitiostanol)、美雄烷(mepitiostane)、睾内酯(testolactone)；抗肾上腺素，诸如胺鲁米特(aminoglutethimide)、米托坦(mitotane)、曲洛司坦(trilostane)；叶酸补充剂，诸如亚叶酸(frolinic acid)；醋葡醛内酯(aceglatone)；醛磷酰胺糖苷(aldophosphamide glycoside)；胺基乙酰丙酸(aminolevulinic acid)；恩尿嘧啶(eniluracil)；安吖啶(amsacrine)；阿莫司汀(bestrabucil)；比生群(bisantrene)；伊达曲沙(edatraxate)；地磷酰胺(defofamine)；秋水仙胺(demecolcine)；地吖醌(diaziquone)；依氟米星(elfomithine)；依利醋铵(elliptinium acetate)；艾普塞隆(epothilone)，诸如艾普塞隆B；依托格鲁(etoglucid)；硝酸镓；羟基脲；香菇多糖(lentinan)；氯尼达明(lonidamine)；类美登醇(maytansinoid)，诸如美登素(maytansine)和安丝菌素(ansamitocin)；米托胍腙(mitoguazone)；米托蒽醌(mitoxantrone)；莫哌达醇(mopidamol)；尼曲吖啶(nitracrine)；喷司他丁(pentostatin)；蛋氨氮芥(phenamet)；吡柔比星(pirarubicin)；洛索蒽醌(losoxantrone)；鬼臼酸(podophyllinic acid)；2-乙基酰肼；丙卡巴肼(procarbazine)；多糖复合物(JHS Natural Products,Eugene,OR)；雷佐生(razoxane)；根瘤菌素(rhizoxin)；西佐喃(sizofiran)；锗螺胺(spirogermanium)；细交链孢菌酮酸(tenuazonicacid)；三亚胺醌(triaziquone)；2,2',2”-三氯三乙胺；单端孢霉烯(trichothecene)，诸如T-2毒素、疣孢霉素A(verracurin A)、漆斑菌素A(roridin A)和蛇形菌素(anguidine)；乌拉坦(urethane)；长春地辛(vindesine)；达卡巴嗪(dacarbazine)；甘露莫司汀(mannomustine)；二溴甘露醇(mitobronitol)；二溴卫矛醇(mitolactol)；哌泊溴烷(pipobroman)；加西托肽(gacytosine)；阿拉伯糖苷(arabinoside)(“Ara-C”)；环磷酰胺；噻替哌；类紫杉醇(taxoid)，例如(杉醇)、(不含聚氧乙烯氢化蓖麻油、经白蛋白工程改造的紫杉醇纳米粒子配制物)和(多西他赛)；苯丁酸氮芥(chloranbucil)；他莫昔芬(tamoxifen)(NolvadexTM)；拉洛昔芬(raloxifene)；芳香酶抑制性4(5)-咪唑；4-羟基他莫昔芬；曲沃昔芬(trioxifene)；科沃昔芬(keoxifene)；LY117018；奥那斯酮(onapristone)；托瑞米芬(toremifene)氟他胺(flutamide)、尼鲁米特(nilutamide)、比卡鲁胺(bicalutamide)、亮丙立德(leuprolide)、戈舍瑞林(goserelin)；苯丁酸氮芥；吉西他滨(gemcitabine)；6-硫鸟嘌呤；巯基嘌呤；铂配位络合物，诸如顺铂(cisplatin)、奥沙利铂(oxaliplatin)和卡铂(carboplatin)；长春花碱(vinblastine)；铂；依托泊苷(etoposide)(VP-16)；异环磷酰胺；米托蒽醌；长春新碱(vincristine)；(长春瑞宾(vinorelbine))；能灭瘤(novantrone)；替尼泊苷(teniposide)；依达曲沙(edatrexate)；道诺霉素(daunomycin)；氨基喋呤(aminopterin)；伊班膦酸盐(ibandronate)；伊立替康(irinotecan)(例如CPT-11)；拓扑异构酶抑制剂RFS2000；二氟甲基鸟氨酸(DMFO)；类视黄醇，诸如视黄酸；埃斯波霉素(esperamicins)；卡培他滨(例如及上述任一者的药学上可接受的盐。
抗癌剂的另外的非限制性实例包括曲妥珠单抗(trastuzumab)贝伐珠单抗(bevacizumab)西妥昔单抗(cetuximab)利妥昔单抗(rituximab) ABVD、勒樘碱(avicine)、阿巴伏单抗(abagovomab)、吖啶甲酰胺(acridine carboxamide)、阿德木单抗(adecatumumab)、17-N-烯丙基氨基-17-去甲氧基格尔德霉素(demethoxygeldanamycin)、阿法拉丁(alpharadin)、艾沃昔布(alvocidib)、3-氨基吡啶-2-甲醛硫代半卡巴腙(thiosemicarbazone)、胺萘非特(amonafide)、蒽二酮(anthracenedione)、抗CD22免疫毒素、抗肿瘤药(例如细胞周期非特异性抗肿瘤剂和其他本文所述的抗肿瘤剂)、抗肿瘤发生草药、阿帕齐醌(apaziquone)、阿替莫德(atiprimod)、硫唑嘌呤(azathioprine)、贝洛替康(belotecan)、苯达莫司汀(bendamustine)、BIBW 2992、比立考达(biricodar)、溴他立辛(brostallicin)、苔藓抑素(bryostatin)、丁硫胺酸亚砜亚胺(buthionine sulfoximine)、CBV(化学疗法)、海绵诱癌素(calyculin)、二氯乙酸、圆皮海绵内酯(discodermolide)、依沙芦星(elsamitrucin)、依诺他滨(enocitabine)、艾日布林(eribulin)、依沙替康(exatecan)、依昔舒林(exisulind)、弥罗松酚(ferruginol)、呋咯地辛(forodesine)、磷雌酚(fosfestrol)、ICE化学疗法方案、IT-101、伊美克(imexon)、咪喹莫特(imiquimod)、吲哚并咔唑(indolocarbazole)、伊洛福芬(irofulven)、兰尼奎达(laniquidar)、拉洛他宾(larotaxel)、来那度胺(lenalidomide)、甲硫蒽酮(lucanthone)、勒托替康(lurtotecan)、马磷酰胺(mafosfamide)、米托唑胺(mitozolomide)、萘克沙朵(nafoxidine)、奈达铂(nedaplatin)、奥拉帕尼(olaparib)、奥他赛(ortataxel)、PAC-1、木瓜、匹杉琼(pixantrone)、蛋白酶体抑制剂、蝴蝶霉素(rebeccamycin)、瑞喹莫德(resiquimod)、鲁比替康(rubitecan)、SN-38、盐孢菌素A(salinosporamide A)、沙帕他滨(sapacitabine)、Stanford V、苦马豆素(swainsonine)、他拉泊芬(talaporfin)、他立喹达(tariquidar)、替加氟-尿嘧啶(tegafur-uracil)、替莫达(temodar)、替西他赛(tesetaxel)、四硝酸三铂(triplatin tetranitrate)、三(2-氯乙基)胺、曲沙他滨(troxacitabine)、乌拉莫司汀(uramustine)、伐地美生(vadimezan)、长春氟宁(vinflunine)、ZD6126和唑喹达(zosuquidar)。
抗癌剂的其他非限制性实例包括天然产物，诸如长春花生物碱类(例如，长春花碱、长春新碱和长春瑞宾)、表鬼臼毒素(例如，依托泊苷和替尼泊苷)、抗生素(例如，放线菌素D(dactinomycin/actinomycin D)、道诺霉素和伊达比星)、蒽环霉素(anthracycline)、米托蒽醌、博来霉素(bleomycin)、光神霉素(plicamycin)(米拉霉素(mithramycin))、丝裂霉素、酶(例如，L-天冬酰胺酶，其全身性代谢L-天冬酰胺且除去自身不能合成天冬酰胺的细胞)、抗血小板剂、抗增生/抗有丝分裂烷化剂诸如氮芥(例如，甲氮芥、环磷酰胺及类似物美法仑和苯丁酸氮芥)、乙烯亚胺和甲基蜜胺(例如，六甲基蜜胺和噻替哌)、CDK抑制剂(例如，CDK4/6抑制剂，诸如阿贝西利(abemaciclib)、瑞博西利(ribociclib)、帕博西利(palbociclib)、塞利西利(seliciclib)、UCN-01、P1446A-05、PD-0332991、迪纳西利(dinaciclib)、P27-00、AT-7519、RGB286638和SCH727965)、烷基磺酸酯(例如，白消安)、亚硝基脲(例如，卡莫司汀(BCNU)及类似物，及链佐星(streptozocin))、四氮烯-氮烯唑胺(trazenes-dacarbazinine)(DTIC)、抗增生/抗有丝分裂抗代谢物(诸如叶酸类似物)、嘧啶类似物(例如，氟尿嘧啶、氮尿苷和阿糖胞苷)、嘌呤类似物及相关抑制剂(例如，巯基嘌呤、硫鸟嘌呤、喷司他丁和2-氯去氧腺苷)、芳香酶抑制剂(例如，阿那曲唑(anastrozole)、依西美坦(exemestane)和来曲唑(letrozole))及铂配位络合物(例如，顺铂和卡铂)、丙卡巴肼(procarbazine)、羟基脲、米托坦、胺鲁米特、组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂(例如，曲古抑菌素(trichostatin)、丁酸钠、艾匹丹(apicidan)、辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoylanilide hydroamic acid)、伏立诺他(vorinostat)、LBH 589、罗米地辛(romidepsin)、ACY-1215和帕比司他(panobinostat))、mTOR抑制剂(例如，维托塞布(vistusertib)、替西罗莫司(temsirolimus)、依维莫司(everolimus)、地磷莫司(ridaforolimus)和西罗莫司(sirolimus))、KSP(Eg5)抑制剂(例如，Array 520)、DNA结合剂(例如，PI3K抑制剂诸如PI3Kδ抑制剂(例如，GS-1101和TGR-1202)、PI3Kδ和γ抑制剂(例如，CAL-130)、库潘尼西(copanlisib)、阿博利布(alpelisib)和艾代拉里斯(idelalisib)；多激酶抑制剂(例如，TG02和索拉非尼(sorafenib))、激素(例如，雌激素)和激素激动剂，诸如促黄体激素释放激素(LHRH)激动剂(例如，戈舍瑞林、亮丙瑞林(leuprolide)和曲普瑞林(triptorelin))、BAFF中和抗体(例如，LY2127399)、IKK抑制剂、p38MAPK抑制剂、抗IL-6(例如，CNT0328)、端粒酶抑制剂(例如，GRN 163L)、极光激酶抑制剂(例如，MLN8237)、细胞表面单克隆抗体(例如，抗CD38(HUMAX-CD38)、抗CSl(例如，埃罗妥珠单抗(elotuzumab))、HSP90抑制剂(例如，17AAG和KOS 953)、P13K/Akt抑制剂(例如，哌立福新(perifosine))、Akt抑制剂(例如，GSK-2141795)、PKC抑制剂(例如，恩扎妥林(enzastaurin))、FTI(例如，ZarnestraTM)、抗CD138(例如，BT062)、Torcl/2特异性激酶抑制剂(例如，INK128)、ER/UPR靶向剂(例如，MKC-3946)、cFMS抑制剂(例如，ARRY-382)、JAK1/2抑制剂(例如，CYT387)、PARP抑制剂(例如，奥拉帕尼和维利帕尼(veliparib)(ABT-888))和BCL-2拮抗剂。
在一些实施方案中，抗癌剂选自甲氮芥、喜树碱、异环磷酰胺、他莫昔芬、雷洛昔芬、吉西他滨、索拉非尼，或前述的任何类似物或衍生物变体。
在一些实施方案中，抗癌剂是HER2抑制剂。HER2抑制剂的非限制性实例包括单克隆抗体，诸如曲妥珠单抗和帕妥珠单抗小分子酪氨酸激酶抑制剂，诸如吉非替尼埃罗替尼皮利替尼(pilitinib)、CP-654577、CP-724714、卡奈替尼(canertinib)(CI 1033)、HKI-272、拉帕替尼(lapatinib)(GW-572016；PKI-166、AEE788、BMS-599626、HKI-357、BIBW 2992、ARRY-334543和JNJ-26483327。
在一些实施方案中，抗癌剂是ALK抑制剂。ALK抑制剂的非限制性实例包括色瑞替尼(ceritinib)、TAE-684(NVP-TAE694)、PF02341066(克唑替尼(crizotinib)或1066)、阿来替尼(alectinib)；布加替尼(brigatinib)；恩曲替尼(entrectinib)；恩沙替尼(ensartinib)(X-396)；劳拉替尼(lorlatinib)；ASP3026；CEP-37440；4SC-203；TL-398；PLB1003；TSR-011；CT-707；TPX-0005；及AP26113。ALK激酶抑制剂的其他实例描述于WO05016894的实施例3-39中。
在一些实施方案中，抗癌剂是受体酪氨酸激酶(RTK)/生长因子受体下游成员的抑制剂(例如，SOS1抑制剂(例如，BI-1701963、BI-3406、SDR5、BAY-293或RMC-5845，或其药学上可接受的盐、溶剂化物、异构体(例如，立体异构体)、前药或互变异构体)、Raf抑制剂、MEK抑制剂、ERK抑制剂、PI3K抑制剂、PTEN抑制剂、AKT抑制剂或mTOR抑制剂(例如，mTORC1抑制剂或mTORC2抑制剂)。在一些实施方案中，抗癌剂是JAB-3312。
在一些实施方案中，抗癌剂是SOS1抑制剂。在一些实施方案中，SOS1抑制剂选自WO2021173524、WO 2021130731、WO 2021127429、WO 2021092115、WO 2021105960、WO2021074227、WO 2020180768、WO 2020180770、WO 2020173935、WO 2020146470、WO2019201848、WO 2019122129、WO 2018172250和WO 2018115380中公开的那些，或其药学上可接受的盐、溶剂化物、异构体(例如，立体异构体)、前药或互变异构体。
在一些实施方案中，抗癌剂是另外的Ras抑制剂或Ras疫苗，或设计成直接或间接降低Ras致癌活性的另一种治疗模态。在一些实施方案中，抗癌剂是另外的Ras抑制剂。在一些实施方案中，Ras抑制剂靶向呈其活性或GTP结合状态的Ras。在一些实施方案中，Ras抑制剂靶向呈其非活性或GDP结合状态的Ras。在一些实施方案中，Ras抑制剂是诸如K-Ras G12C的抑制剂，诸如AMG 510(索托拉尼(sotorasib))、MRTX1257、MRTX849(阿达拉尼(adagrasib))、JNJ-74699157、LY3499446、ARS-1620、ARS-853、BPI-421286、LY3537982、JDQ443、JAB-21000、IBI351、ERAS-3490、RMC-6291、ASP2453或GDC-6036，或其药学上可接受的盐、溶剂化物、异构体(例如，立体异构体)、前药或互变异构体。在一些实施方案中，Ras抑制剂是K-Ras G12D的抑制剂，诸如MRTX1133或JAB-22000，或其药学上可接受的盐、溶剂化物、异构体(例如，立体异构体)、前药或互变异构体。在一些实施方案中，Ras抑制剂是K-RasG12V抑制剂，诸如JAB-23000，或其药学上可接受的盐、溶剂化物、异构体(例如，立体异构体)、前药或互变异构体。在一些实施方案中，Ras抑制剂是RMC-6236，或其药学上可接受的盐、溶剂化物、异构体(例如，立体异构体)、前药或互变异构体。在一些实施方案中，Ras抑制剂选自通过引用整体并入本文的以下文献中公开的Ras(ON)抑制剂或其药学上可接受的盐、溶剂化物、异构体(例如，立体异构体)、前药或互变异构体：WO 2021091982、WO2021091967、WO 2021091956和WO 2020132597。可与本公开的Ras抑制剂组合的Ras抑制剂的其他实例是通过引用整体并入本文的以下文献中提供的：WO 20220133038、WO2022133345、WO 2022132200、WO 2022119748、WO 2022109485、WO 2022109487、WO2022066805、WO 2021239058、WO 2021236920、WO 2021231526、WO 2021228161、WO2021222333、WO 2021219091、WO 2021219090、WO 2021219072、WO 2021218939、WO2021217019、WO 2021216770、WO 2021215545、WO 2021215544、WO 2021211864、WO2021197499、WO 2021190467、WO 2021185233、WO 2021180181、WO 2021175199、WO2021173923、WO 2021169990、WO 2021169963、WO 2021168193、WO 2021158071、WO2021155716、WO 2021152149、WO 2021150613、WO 2021147967、WO 2021147965、WO2021143693、WO 2021142252、WO 2021141628、WO 2021139748、WO 2021139678、WO2021129824、WO 2021129820、WO 2021127404、WO 2021126816、WO 2021126799、WO2021124222、WO 2021121371、WO 2021121367、WO 2021121330、WO 2020050890、WO2020047192、WO 2020035031、WO 2020028706、WO 2019241157、WO 2019232419、WO2019217691、WO 2019217307、WO 2019215203、WO 2019213526、WO 2019213516、WO2019155399、WO 2019150305、WO 2019110751、WO 2019099524、WO 2019051291、WO2018218070、WO 2018217651、WO 2018218071、WO 2018218069、WO 2018206539、WO2018143315、WO 2018140600、WO 2018140599、WO 2018140598、WO 2018140514、WO2018140513、WO 2018140512、WO 2018119183、WO 2018112420、WO 2018068017、WO2018064510、WO 2017201161、WO 2017172979、WO 2017100546、WO 2017087528、WO2017058807、WO 2017058805、WO 2017058728、WO 2017058902、WO 2017058792、WO2017058768、WO 2017058915、WO 2017015562、WO 2016168540、WO 2016164675、WO2016049568、WO 2016049524、WO 2015054572、WO 2014152588、WO 2014143659和WO2013155223，或其医药学上可接受的盐、溶剂化物、异构体(例如，立体异构体)、前药或互变异构体。
在一些实施方案中，可与式(I)化合物或其药学上可接受的盐组合的治疗剂是MAP激酶(MAPK)途径的抑制剂(或“MAPK抑制剂”)。MAPK抑制剂包括但不限于Cancers(Basel)2015Sep；7(3):1758–1784中描述的一种或多种MAPK抑制剂。例如，MAPK抑制剂可以选自以下的一种或多种：曲美替尼(trametinib)、比美替尼(binimetinib)、司美替尼(selumetinib)、考比替尼(cobimetinib)、LErafAON(NeoPharm)、ISIS 5132；维罗非尼(vemurafenib)、匹马色替(pimasertib)、TAK733、RO4987655(CH4987655)；CI-1040；PD-0325901；CH5126766；MAP855；AZD6244；瑞法替尼(refametinib)(RDEA 119/BAY 86-9766)；GDC-0973/XL581；AZD8330(ARRY-424704/ARRY-704)；RO5126766(Roche，描述于PLoSOne.2014年11月25日；9(11)中)；及GSK1120212(或JTP-74057，描述于Clin CancerRes.2011年3月1日；17(5):989-1000中)。MAPK抑制剂可以是PLX8394、LXH254、GDC-5573或LY3009120。
在一些实施方案中，抗癌剂是RAS-RAF-ERK或PI3K-AKT-TOR或PI3K-AKT信号传导途径的破坏剂或抑制剂。PI3K/AKT抑制剂可包括但不限于Cancers(Basel)2015Sep；7(3):1758–1784中描述的一种或多种PI3K/AKT抑制剂。例如，PI3K/AKT抑制剂可选自以下的一种或多种：NVP-BEZ235；BGT226；XL765/SAR245409；SF1126；GDC-0980；PI-103；PF-04691502；PKI-587；GSK2126458。
在一些实施方案中，抗癌剂是PD-1或PD-L1拮抗剂。
在一些实施方案中，另外的治疗剂包括ALK抑制剂、HER2抑制剂、EGFR抑制剂、IGF-1R抑制剂、MEK抑制剂、PI3K抑制剂、AKT抑制剂、TOR抑制剂、MCL-1抑制剂、BCL-2抑制剂、蛋白酶体抑制剂和免疫疗法。在一些实施方案中，治疗剂可为泛-RTK抑制剂，诸如阿法替尼(afatinib)。
IGF-1R抑制剂包括林西替尼(linsitinib)或其药学上可接受的盐。
EGFR抑制剂包括但不限于小分子拮抗剂、抗体抑制剂或特异性反义核苷酸或siRNA。有用的EGFR抗体抑制剂包括西妥昔单抗(cetuximab)帕尼单抗(panitumumab)扎鲁木单抗(zalutumumab)、尼妥珠单抗(nimotuzumab)和马妥珠单抗(matuzumab)。其他基于抗体的EGFR抑制剂包括可部分或完全阻断其天然配体对EGFR的活化的任何抗EGFR抗体或抗体片段。基于抗体的EGFR抑制剂的非限制性实例包括Modjtahedi等人，Br.J.Cancer1993,67:247-253；Teramoto等人，Cancer 1996,77:639-645；Goldstein等人，Clin.Cancer Res.1995,1:1311-1318；Huang等人，1999,CancerRes.15:59(8):1935-40；和Yang等人，Cancer Res.1999,59:1236-1243中描述的那些。EGFR抑制剂可以是单克隆抗体Mab E7.6.3(Yang,1999，同上)，或Mab C225(ATCC登录号HB-8508)，或对其具有结合特异性的抗体或抗体片段。
EGFR的小分子拮抗剂包括吉非替尼(gefitinib)埃罗替尼和拉帕替尼参见，例如Yan等人，Pharmac ogenetics and PharmacogenomicsIn Oncology Therapeutic Antibody Development,BioTechniques 2005,39(4):565-8；和Paez等人，EGF R Mutations In Lung Cancer Correlation With Clinical ResponseTo Gefitinib Therapy,Science 2004,304(5676):1497-500。在一些实施方案中，EGFR抑制剂为奥西替尼(osimertinib)小分子EGFR抑制剂的其他非限制性实例包括以下专利公开中描述的任何EG FR抑制剂，和此类EGFR抑制剂的所有药学上可接受的盐：EP0520722；EP 0566226；WO96/33980；美国专利号5,747,498；WO96/30347；EP 0787772；WO97/30034；WO97/30044；WO97/38994；WO 97/49688；EP 837063；WO98/02434；WO97/38983；WO95/19774；WO95/19970；WO97/13771；WO98/02437；WO98/02438；WO97/32881；DE 19629652；WO98/33798；WO97/32880；WO97/32880；EP 682027；WO97/02266；WO97/27199；WO98/07726；WO97/34895；WO96/31510；WO98/14449；WO98/14450；WO98/14451；WO95/09847；WO97/19065；WO98/17662；美国专利号5,789,427；美国专利号5,650,415；美国专利号5,656,643；WO99/35146；WO99/35132；WO99/07701；和WO92/20642。小分子EGFR抑制剂的其他非限制性实例包括Traxler等人，Exp.Opin.Ther.Patents 1998,8(12):1599-1625中描述的EGFR抑制剂。在一些实施方案中，EGFR抑制剂是ERBB抑制剂。在人中，ERBB家族含有HER1(EGFR、ERBB1)、HER2(NEU、ERBB2)、HER3(ERBB3)和HER(ERBB4)。
MEK抑制剂包括但不限于匹马色替、司美替尼、考比替尼曲美替尼和比美替尼在一些实施方案中，MEK抑制剂靶向MEK突变，该MEK突变是选自D67N；P124L；P124S；和L177V的I类MEK1突变。在一些实施方案中，MEK突变是选自ΔE51-Q58；ΔF53-Q58；E203K；L177M；C121S；F53L；K57E；Q56P；和K57N的II类MEK1突变。
PI3K抑制剂包括但不限于渥曼青霉素；WO06/044453中描述的17-羟基渥曼青霉素类似物；4-[2-(1H-吲唑-4-基)-6-[[4-(甲基磺酰基)哌嗪-1-基]甲基]噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基]吗啉(也称为匹替利昔(pictilisib)或GDC-0941且在WO09/036082和WO09/055730中有描述)；2-甲基-2-[4-[3-甲基-2-氧代-8-(喹啉-3-基)-2,3-二氢咪唑并[4,5-c]喹啉-1-基]苯基]丙腈(也称为BEZ 235或NVP-BEZ 235并在WO06/122806中有描述)；(S)-l-(4-((2-(2-氨基嘧啶-5-基)-7-甲基-4-吗啉代噻吩并[3,2-d]嘧啶-6-基)甲基)哌嗪-1-基)-2-羟基丙-1-酮(在WO08/070740中有描述)；LY294002(2-(4-吗啉基)-8-苯基-4H-l-苯并吡喃-4-酮(可从Axon Medchem获得)；PI 103盐酸盐(3-[4-(4-吗啉基吡啶并-[3',2':4,5]呋喃并[3,2-d]嘧啶-2-基]苯酚盐酸盐(可从Axon Medchem获得)；PIK 75(2-甲基-5-硝基-2-[(6-溴咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)亚甲基]-1-甲基酰肼-苯磺酸单盐酸盐)(可从AxonMedchem获得)；PIK 90(N-(7,8-二甲氧基-2,3-二氢-咪唑并[l,2-c]喹唑啉-5-基)-烟酰胺(可从Axon Medchem获得)；AS-252424(5-[l-[5-(4-氟-2-羟基-苯基)-呋喃-2-基]-甲-(Z)-亚基]-噻唑烷-2,4-二酮(可从Axon Medchem获得)；TGX-221(7-甲基-2-(4-吗啉基)-9-[1-(苯氨基)乙基]-4H-吡啶并-[1,2-a]嘧啶-4-酮(可从Axon Medchem获得)；XL-765；和XL-147。其他PI3K抑制剂包括去甲氧基绿胶霉素(demethoxyviridin)、哌立福辛(perifosine)、CAL101、PX-866、BEZ235、SF1126、INK1117、IPI-145、BKM120、XL147、XL765、Palomid 529、GSK1059615、ZSTK474、PWT33597、IC87114、TGI 00-115、CAL263、PI-103、GNE-477、CUDC-907和AEZS-136。
AKT抑制剂包括但不限于Akt-1-1(抑制Aktl)(Barnett等人，Biochem.J.2005,385(Pt.2):399-408)；Akt-1-1,2(抑制Akl和2)(Barnett等人，Biochem.J.2005,385(Pt.2):399-408)；API-59CJ-Ome(例如，Jin等人，Br.J.Cancer 2004,91:1808-12)；1-H-咪唑并[4,5-c]吡啶基化合物(例如，WO 05/011700)；吲哚-3-甲醇及其衍生物(例如，美国专利号6,656,963；Sarkar和Li J Nutr.2004,134(12增刊):3493S-3498S)；哌立福辛(例如，干扰Akt膜定位；Dasmahapatra等人Clin.Cancer Res.2004,10(15):5242-52)；磷脂酰肌醇醚脂质类似物(例如，Gills和Dennis Expert.Opin.Investig.Drugs 2004,13:787-97)；和曲西立滨(triciribine)(TCN或API-2或NCI标识符：NSC 154020；Yang等人，Cancer Res.2004,64:4394-9)。
mTOR抑制剂包括但不限于ATP竞争性mTORC1/mTORC2抑制剂，例如PI-103、PP242、PP30；Torin 1；FKBP12增强剂；4H-1-苯并吡喃-4-酮衍生物；以及雷帕霉素(也称为西罗莫司)及其衍生物，包括：替西罗莫司依维莫司WO94/09010)；地磷莫司(ridaforolimus)(也称为地伏莫司(deforolimus)或AP23573)；雷帕霉素类似物，例如WO98/02441和WO01/14387中公开的，例如AP23464和AP23841；40-(2-羟乙基)雷帕霉素；40-[3-羟基(羟甲基)甲基丙酸酯]-雷帕霉素(也称为CC1779)；40-表-(四唑基)-雷帕霉素(也称为ABT578)；32-去氧雷帕霉素；16-戊炔氧基-32(S)-二氢雷帕霉素；WO05/005434中公开的衍生物；美国专利号5,258,389、5,118,677、5,118,678、5,100,883、5,151,413、5,120,842和5,256,790及WO94/090101、WO92/05179、WO93/111130、WO94/02136、WO94/02485、WO95/14023、WO94/02136、WO95/16691、WO96/41807、WO96/41807和WO2018204416中公开的衍生物；和含磷雷帕霉素衍生物(例如，WO05/016252)。在一些实施方案中，mTOR抑制剂是双重空间抑制剂(参见，例如WO2018204416、WO2019212990和WO2019212991)，诸如RMC-5552，其具有以下结构：
可与式(I)化合物或其药学上可接受的盐组合使用的BRAF抑制剂包括例如维罗非尼、达拉非尼和康奈非尼(encorafenib)。BRAF可包含3类BRAF突变。在一些实施方案中，3类BRAF突变选自人BRAF中以下氨基酸取代中的一者或多者：D287H；P367R；V459L；G466V；G466E；G466A；S467L；G469E；N581S；N581I；D594N；D594G；D594A；D594H；F595L；G596D；G596R和A762E。
MCL-1抑制剂包括但不限于AMG-176、MIK665和S63845。髓细胞白血病-1(MCL-1)蛋白是B细胞淋巴瘤-2(BCL-2)蛋白家族的关键抗凋亡成员之一。已将MCL-1过度表达与肿瘤进展以及抗性密切关联，不仅是对传统化学疗法的抗性，而且还有对包括BCL-2抑制剂诸如ABT-263的靶向治疗剂的抗性。
蛋白酶体抑制剂包括但不限于卡非佐米(carfilzomib)硼替佐米和奥普佐米(oprozomib)。
免疫疗法包括但不限于单克隆抗体、免疫调节酰亚胺(IMiD)、GITR激动剂、基因工程化T细胞(例如，CAR-T细胞)、双特异性抗体(例如，BiTE)和抗PD-1、抗PD-L1、抗CTLA4、抗LAGl和抗OX40剂)。
免疫调节剂(IMiD)是一类含有酰亚胺基团的免疫调节药物(调节免疫应答的药物)。IMiD类包括沙利度胺及其类似物(来那度胺(lenalidomide)、泊马度胺(pomalidomide)和阿普斯特(apremilast))。
示例性的抗PD-1抗体及其使用方法由Goldberg等人，Blood 2007,110(1):186-192；Thompson等人，Clin.Cancer Res.2007,13(6):1757-1761；和WO06/121168A1)描述，以及在本文其他地方有描述。
GITR激动剂包括但不限于GITR融合蛋白和抗GITR抗体(例如，二价抗GITR抗体)，诸如美国专利号6,111,090、美国专利号8,586,023、WO2010/003118和WO2011/090754中描述的GITR融合蛋白；或例如在美国专利号7,025,962、EP 1947183、美国专利号7,812,135、美国专利号8,388,967、美国专利号8,591,886、美国专利号7,618,632、EP 1866339及WO2011/028683、WO2013/039954、WO05/007190、WO07/133822、WO05/055808、WO99/40196、WO01/03720、WO99/20758、WO06/083289、WO05/115451和WO2011/051726中描述的抗GITR抗体。
可与式(I)化合物或其药学上可接受的盐组合使用的治疗剂的另一实例为抗血管生成剂。抗血管生成剂包括但不限于体外合成制备的化学组合物、抗体、抗原结合区、放射性核素及其组合和缀合物。抗血管生成剂可以是激动剂、拮抗剂、变构调节剂、毒素，或更一般地，可以起到抑制或刺激其靶标(例如，受体或酶活化或抑制)的作用，从而促进细胞死亡或阻止细胞生长。在一些实施方案中，该一种或多种另外的疗法包括抗血管生成剂。
抗血管生成剂可以是MMP-2(基质-金属蛋白酶2)抑制剂、MM P-9(基质-金属蛋白酶9)抑制剂和COX-II(环加氧酶11)抑制剂。抗血管生成剂的非限制性实例包括雷帕霉素、替西罗莫司(CCI-779)、依维莫司(RAD001)、索拉非尼、舒尼替尼和贝伐单抗。有用的COX-II抑制剂的实例包括阿来昔布(alecoxib)、伐地考昔(valdecoxib)和罗非昔布(rofecoxib)。有用的基质金属蛋白酶抑制剂的实例描述于WO96/33172、WO96/27583、WO98/07697、WO98/03516、WO98/34918、WO 98/34915、WO98/33768、WO98/30566、WO90/05719、WO99/52910、WO99/52889、WO99/29667、WO99007675、EP0606046、EP0780386、EP1786785、EP1181017、EP0818442、EP1004578和US20090012085，及美国专利号5,863,949和5,861,510中。优选的MMP-2和MMP-9抑制剂是具有很少或没有抑制MMP-1的活性的那些。更优选的是相对于其他基质金属蛋白酶(即，MAP-1、MMP-3、MMP-4、MMP-5、MMP-6、MMP-7、MMP-8、MMP-10、MMP-11、MMP-12和MMP-13)选择性抑制MMP-2或AMP-9的那些。MMP抑制剂的一些具体实例是AG-3340、RO 32-3555和RS13-0830。
另外的示例性抗血管生成剂包括KDR(激酶结构域受体)抑制剂(例如，与激酶结构域受体特异性结合的抗体和抗原结合区)、抗VEGF剂(例如，特异性结合VEGF的抗体或抗原结合区(例如，贝伐单抗)，或可溶性VEGF受体或其配体结合区)(诸如VEGF-TRAPTM)，和抗VEGF受体剂(例如，与之特异性结合的抗体或抗原结合区)、EGFR抑制剂(例如，与之特异性结合的抗体或抗原结合区)(诸如(帕尼单抗)、埃罗替尼抗Angl和抗Ang2剂(例如，与之特异性结合或与其受体例如Tie2/Tek特异性结合的抗体或抗原结合区)和抗Tie2激酶抑制剂(例如，与之特异性结合的抗体或抗原结合区)。其他抗血管生成剂包括Campath、IL-8、B-FGF、Tek拮抗剂(US2003/0162712；US6,413,932)、抗TWEAK剂(例如，特异性结合抗体或抗原结合区，或可溶性TWEAK受体拮抗剂；参见US6,727,225)、拮抗整联蛋白与其配体结合的ADAM解整联蛋白结构域(US 2002/0042368)、特异性结合抗eph受体或抗肝配蛋白抗体或抗原结合区(美国专利号5,981,245；5,728,813；5,969,110；6,596,852；6,232,447；6,057,124及其专利家族成员)和抗PDGF-BB拮抗剂(例如，特异性结合抗体或抗原结合区)以及与PDGF-BB配体特异性结合的抗体或抗原结合区，和PDGFR激酶抑制剂(例如，与之特异性结合的抗体或抗原结合区)。其他抗血管生成剂包括：SD-7784(Pfizer,USA)；西仑吉肽(Merck KGaA,Germany,EPO 0770622)；哌加他尼八钠，(Gilead Sciences,USA)；阿法他汀(Alphastatin)，(BioActa,UK)；M-PGA，(Celgene,USA,US 5712291)；伊洛马司他(ilomastat)，(Arriva,USA,US5892112)；恩沙尼(emaxanib)，(Pfizer,USA,US5792783)；瓦他拉尼(vatalanib)，(Novartis,Switzerland)；2-甲氧基雌二醇(EntreMed,USA)；TLC ELL-12(Elan,Ireland)；乙酸阿奈可他(anecortave acetate)(Alcon,USA)；α-D148 Mab(Amgen,USA)；CEP-7055(Cephalon,USA)；抗Vn Mab(Crucell,Netherlands)；DAC抗血管生成剂(ConjuChem,Canada)；安格西丁(Angiocidin)(InKine Pharmaceutical,USA)；KM-2550(Kyowa Hakko,Japan)；SU-0879(Pfizer,USA)；CGP-79787(Novartis,Switzerland,EP 0970070)；ARGENT技术(Ariad,USA)；YIGSR-Stealth(Johnson&Johnson,USA)；纤维蛋白原-E片段(BioActa,UK)；血管生成抑制剂(Trigen,UK)；TBC-1635(EncysivePharmaceuticals,USA)；SC-236(Pfizer,USA)；ABT-567(Abbott,USA)；米塔斯他汀(Metastatin)(EntreMed,USA)；丝抑蛋白(maspin)(Sosei,Japan)；2-甲氧基雌二醇(Oncology Sciences Corporation,USA)；ER-68203-00(IV AX,USA)；BeneFin(Lane Labs,USA)；Tz-93(Tsumura,Japan)；TAN-1120(Takeda,Japan)；FR-111142(Fujisawa,Japan,JP02233610)；血小板因子4(RepliGen,USA,EP 407122)；血管内皮生长因子拮抗剂(Borean,Denmark)；贝伐单抗(pINN)(Genentech,USA)；血管生成抑制剂(SUGEN,USA)；XL 784(Exelixis,USA)；XL 647(Exelixis,USA)；第二代α5β3整联蛋白MAb(Applied MolecularEvolution,USA和Medlmmune,USA)；盐酸恩扎妥林(Lilly,USA)；CEP 7055(Cephalon,USA和Sanofi-Synthelabo,France)；BC 1(Genoa Institute of Cancer Research,Italy)；rBPI21和BPI源性抗血管生成剂(XOMA,USA)；PI 88(Progen,Australia)；西仑吉肽(MerckKGaA,German；Munich Technical University,Germany,Scripps Clinic and ResearchFoundation,USA)；AVE 8062(Ajinomoto,Japan)；AS1404(Cancer Research Laboratory,New Zealand)；SG 292,(Telios,USA)；内皮抑素(Boston Childrens Hospital,USA)；ATN161(Attenuon,USA)；2-甲氧基雌二醇(Boston Childrens Hospital,USA)；ZD 6474，(AstraZeneca,UK)；ZD 6126，(Angiogene Pharmaceuticals,UK)；PPI 2458，(Praecis,USA)；AZD 9935，(AstraZeneca,UK)；AZD 2171，(AstraZeneca,UK)；瓦他拉尼(pINN)，(Novartis,Switzerland和Schering AG,Germany)；组织因子途径抑制剂，(EntreMed,USA)；哌加他尼(Pinn)，(Gilead Sciences,USA)；束骨姜黄醇(xanthorrhizol)，(YonseiUniversity,South Korea)；基于基因的VEGF-2疫苗，(Scripps Clinic and ResearchFoundation,USA)；SPV5.2，(Supratek,Canada)；SDX 103，(University of California atSan Diego,USA)；PX 478，(ProlX,USA)；米塔斯他汀(METASTATIN)，(EntreMed,USA)；肌钙蛋白I，(Harvard University,USA)；SU 6668，(SUGEN,USA)；OXI 4503，(OXiGENE,USA)；o-胍，(Dimensional Pharmaceuticals,USA)；莫妥拉明C(motuporamine C)，(BritishColumbia University,Canada)；CDP 791，(Celltech Group,UK)；阿替莫德(atiprimod)(pINN)，(GlaxoSmithKline,UK)；E 7820，(Eisai,Japan)；CYC 381，(Harvard University,USA)；AE 941，(Aeterna,Canada)；血管生成疫苗，(EntreMed,USA)；尿激酶纤溶酶原激活物抑制剂，(Dendreon,USA)；奥谷法奈(oglufanide)(pINN)，(Melmotte,USA)；HIF-lα抑制剂，(Xenova,UK)；CEP 5214,(Cephalon,USA)；BAY RES2622,(Bayer,Germany)；安格西丁(Angiocidin)，(InKine,USA)；A6，(Angstrom,USA)；KR 31372，(Korea ResearchInstitute of Chemical Technology,South Korea)；GW 2286，(GlaxoSmithKline,UK)；EHT 0101，(ExonHit,France)；CP 868596，(Pfizer,USA)；CP 564959，(OSI,USA)；CP547632，(Pfizer,USA)；786034，(GlaxoSmithKline,UK)；KRN 633，(Kirin Brewery,Japan)；眼内药物递送系统，2-甲氧基雌二醇；安格尼斯(anginex)(MaastrichtUniversity,Netherlands，及Minnesota University,USA)；ABT 510(Abbott,USA)；AAL993(Novartis,Switzerland)；VEGI(ProteomTech,USA)；肿瘤坏死因子-α抑制剂；SU 11248(Pfizer,USA and SUGEN USA)；ABT 518，(Abbott,USA)；YH16(Yantai Rongchang,China)；S-3APG(Boston Childrens Hospital,USA和EntreMed,USA)；MAb,KDR(ImClone Systems,USA)；MAb，α5β(Protein Design,USA)；KDR激酶抑制剂(Celltech Group,UK，及Johnson&Johnson,USA)；GFB 116(South Florida University,USA和Yale University,USA)；CS706(Sankyo,Japan)；考布他汀(combretastatin)A4前药(Arizona State University,USA)；软骨素酶AC(IBEX,Canada)；BAY RES2690(Bayer,Germany)；AGM 1470(HarvardUniversity,USA,Takeda,Japan和TAP,USA)；AG 13925(Agouron,USA)；四硫代钼酸盐(University of Michigan,USA)；GCS100(Wayne State University,USA)CV 247(IvyMedical,UK)；CKD 732(Chong Kun Dang,South Korea)；伊索拉定(irsogladine)，(NipponShinyaku,Japan)；RG 13577(Aventis,France)；WX 360(Wilex,Germany)；角鲨胺，(Genaera,USA)；RPI 4610(Sirna,USA)；肝素酶抑制剂(InSight,Israel)；KL 3106(Kolon,South Korea)；和厚朴酚(Emory University,USA)；ZK CDK(Schering AG,Germany)；ZKAngio(Schering AG,Germany)；ZK 229561(Novartis,Switzerland，及Schering AG,Germany)；XMP 300(XOMA,USA)；VGA 1102(Taisho,Japan)；VE-钙粘着蛋白-2拮抗剂(ImClone Systems,USA)；血管抑制因子(Vasostatin)(National Institutes of Health,USA)；Flk-1(ImClone Systems,USA)；TZ 93(Tsumura,Japan)；TumStatin(Beth IsraelHospital,USA)；截短的可溶性FLT 1(血管内皮生长因子受体1)(Merck&Co,USA)；Tie-2配体(Regeneron,USA)；和凝血栓蛋白1抑制剂(Allegheny Health,Education and ResearchFoundation,USA)。
可与式(I)化合物或其药学上可接受的盐组合使用的治疗剂的其他实例包括特异性结合并抑制生长因子活性的药剂(例如，抗体、抗原结合区或可溶性受体)，诸如肝细胞生长因子(HGF，也称为分散因子)的拮抗剂，和特异性结合其受体c-Met的抗体或抗原结合区。
可与式(I)化合物或其药学上可接受的盐组合使用的治疗剂的另一实例为自噬抑制剂。自噬抑制剂包括但不限于氯喹、3-甲基腺嘌呤、羟氯喹(PlaquenilTM)、巴佛洛霉素(bafilomycin)A1、5-氨基-4-咪唑甲酰胺核糖核苷(AICAR)、冈田酸(okadaic acid)、抑制2A型或1型蛋白磷酸酶的自噬抑制性藻类毒素、cAMP类似物和提高cAMP水平的药物，诸如腺苷、LY204002、N6-巯基嘌呤核糖核苷和长春花碱。另外，还可以使用抑制包括但不限于ATG5(其牵涉自噬)的蛋白质的表达的反义或siRNA。在一些实施方案中，该一种或多种另外的疗法包括自噬抑制剂。
可与式(I)化合物或其药学上可接受的盐组合使用的治疗剂的另一实例为抗肿瘤剂。在一些实施方案中，该一种或多种另外的疗法包括抗肿瘤剂。抗肿瘤剂的非限制性实例包括醋孟南(acemannan)、阿柔比星(aclarubicin)、阿地白介素(aldesleukin)、阿仑单抗(alemtuzumab)、阿利维A酸(alitretinoin)、六甲蜜胺、胺磷汀(amifostine)、氨基乙酰丙酸、氨柔比星(amrubicin)、安吖啶(amsacrine)、阿那格雷(anagrelide)、阿那曲唑(anastrozole)、安塞尔(ancer)、安塞司亭(ancestim)、阿格拉宾(arglabin)、三氧化二砷、BAM-002(Novelos)、贝沙罗汀(bexarotene)、比卡鲁胺(bicalutamide)、溴尿苷(broxuridine)、卡培他滨、西莫白介素(celmoleukin)、西曲瑞克(cetrorelix)、克拉屈滨(cladribine)、克霉唑(clotrimazole)、阿糖胞苷烷磷酯(cytarabine ocfosfate)、DA3030(Dong-A)、达克珠单抗(daclizumab)、地尼白介素(denileukin diftitox)、地洛瑞林(deslorelin)、右雷佐生(dexrazoxane)、地拉齐普(dilazep)、多西他赛、多可沙诺(docosanol)、度骨化醇(doxercalciferol)、去氧氟尿苷(doxifluridine)、多柔比星(doxorubicin)、溴麦角环肽(bromocriptine)、卡莫司汀、阿糖胞苷、氟尿嘧啶、HIT双氯芬酸、干扰素α、道诺霉素、多柔比星、维A酸(tretinoin)、依地福新(edelfosine)、依决洛单抗(edrecolomab)、依氟鸟氨酸(eflornithine)、乙嘧替氟(emitefur)、表柔比星(epirubicin)、贝他依伯汀(epoetin beta)、磷酸依托泊苷(etoposide phosphate)、依西美坦(exemestane)、依昔舒林(exisulind)、法屈唑(fadrozole)、非格司亭(filgrastim)、非那雄胺(finasteride)、磷酸氟达拉滨(fludarabine phosphate)、福美坦(formestane)、福莫司汀(fotemustine)、硝酸镓、吉西他滨(gemcitabine)、吉妥珠单抗奥唑米星(gemtuzumab zoga micin)、吉美拉西(gimeracil)/奥特拉西(oteracil)/替加氟(tegafur)组合、格力考品(glycopine)、戈舍瑞林、庚铂(heptaplatin)、人绒毛膜促性腺素、人胎儿甲胎蛋白、伊班膦酸(ibandronic acid)、伊达比星(idarubic in)、咪喹莫特(imiquimod)、干扰素α、天然干扰素α、干扰素α-2、干扰素α-2a、干扰素α-2b、干扰素α-Nl、干扰素α-n3、集成干扰素-1、天然干扰素α、干扰素β、干扰素β-la、干扰素β-lb、干扰素γ、天然干扰素γ-la、干扰素γ-lb、介白素-1β、碘苄胍(iobenguane)、伊立替康、伊索拉定(irsogladine)、兰瑞肽(lanreotide)、LC 9018(Yakult)、来氟米特(leflunomide)、来格司亭(lenograstim)、硫酸香菇多糖(lentina n sulfate)、来曲唑、白细胞α干扰素、亮丙瑞林、左旋咪唑(levamiso le)+氟尿嘧啶、利阿唑(liarozole)、洛铂(lobaplatin)、氯尼达明(lonida mine)、洛伐他汀(lovastatin)、马索罗酚(masoprocol)、美拉胂醇(melarsoprol)、甲氧氯普胺(metoclopramide)、米非司酮(mifepristone)、米替福新(miltefosine)、米立司亭(mirimostim)、错配双链RNA、米托胍腙、二溴卫矛醇、米托蒽醌、莫拉司亭(molgramostim)、那法瑞林(nafarel in)、纳洛酮(naloxone)+喷他佐辛(pentazocine)、那托司亭(nartograst im)、奈达铂、尼鲁米特、那可丁(noscapine)、新型促红细胞生成蛋白、NSC 631570奥曲肽(octreotide)、奥普瑞白介素(oprelvekin)、奥沙特隆(osaterone)、奥沙利铂、紫杉醇、帕米膦酸(pamidronic acid)、培门冬酶(pegaspargase)、聚乙二醇干扰素α-2b、戊聚糖聚硫酸钠(pentosa n polysulfatesodium)、喷司他丁、毕西巴尼(picibanil)、吡柔比星、兔抗胸腺细胞多克隆抗体、聚乙二醇干扰素α-2a、卟吩姆钠(porfimer sodium)、雷洛昔芬(raloxifene)、雷替曲赛(raltitrexed)、拉斯伯门特(ras buriembodiment)、羟乙膦酸铼Re 186、RII异维A酰胺(retinamide)、利妥昔单抗(rituximab)、罗莫肽(romurtide)、来昔决南钐(153Sm)(samarium lexidronam)、沙格司亭(sargramostim)、西佐喃(sizofiran)、索布佐生(sobuzoxane)、索纳明(sonermin)、氯化锶-89、舒拉明(suramin)、他索那明(tasonermin)、他扎罗汀(tazarotene)、替加氟、替莫泊芬(tem oporfin)、替莫唑胺(temozolomide)、替尼泊苷(teniposide)、四氯十氧化物(tetrachlorodecaoxide)、沙立度胺、胸腺法新(thymalfasin)、促甲状腺素α(thyrotropin alfa)、拓扑替康(topotecan)、托瑞米芬(toremifene)、托西莫单抗-碘131(tositumomab-iodine 131)、曲妥珠单抗、曲奥舒凡(treosulfan)、维A酸、曲洛司坦(trilostane)、三甲曲沙(trimetrexate)、曲普瑞林(triptorelin)、天然肿瘤坏死因子α、乌苯美司、膀胱癌疫苗、Maruyama疫苗、黑素瘤溶解产物疫苗、戊柔比星(valrubicin)、维替泊芬(verteporfin)、长春瑞宾、维鲁利秦(virulizin)、净司他丁斯酯(zinostatin stimalamer)或唑来膦酸；阿倍瑞克(abarelix)；AE 941(Aeterna)、氨莫司汀(ambamustine)、反义寡核苷酸、bcl-2(Genta)、APC 8015(Dendreon)、地西他滨(decitabine)、去氨基格鲁米特(dexaminoglutethimide)、地吖醌(diaziquone)、EL 532(Elan)、EM 800(Endorecherche)、恩尿嘧啶(eniluracil)、依他硝唑(etanidazole)、芬维A胺(fenretinide)、非格司亭(filgrastim)SD01(Amgen)、氟维司群(fulvestrant)、加洛他滨(galocitabine)、胃泌素17免疫原、HLA-B7基因疗法(Vical)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子、组胺二盐酸盐、替伊莫单抗(ibritumomab tiuxetan)、伊洛马司他(ilomastat)、IM 862(Cytran)、白介素-2、伊普昔芬(iproxifene)、LDI 200(Milkhaus)、勒瑞斯亭(leridistim)、林妥珠单抗(lintuzumab)、CA 125MAb(Biomira)、癌症MAb(Japan Pharmaceutical Development)、HER-2及Fc MAb(Medarex)、独特型105AD7MAb(CRC Technology)、独特型CEA MAb(Trilex)、LYM-1-碘131MAb(Techni clone)、多形性上皮粘蛋白-钇90MAb(Antisoma)、马立马斯他(marimastat)、美诺立尔(menogaril)、米妥莫单抗(mitumomab)、莫特沙芬钆(motexafin gadolinium)、MX 6(Galderma)、奈拉滨(nelarabine)、诺拉曲塞(nolatrexed)、P 30蛋白、培维索孟(pegvisomant)、培美曲塞(pemetrexed)、泊非霉素(porfiromycin)、普啉司他(prinomastat)、RL 0903(Shire)、鲁比特康(rubitecan)、赛特铂(satraplatin)、苯乙酸钠、斯帕福斯酸(sparfosic acid)、SRL172(SR Pharma)、SU 5416(SUGEN)、TA 077(Tanabe)、四硫代钼酸盐、塞班斯汀(thaliblastine)、血小板生成素、锡乙基初红紫素(tin ethyl etiopurpurin)、替拉扎明(tirapazamine)、癌症疫苗(Biomira)、黑素瘤疫苗(New York University)、黑素瘤疫苗(Sloan Kettering Institute)、黑素瘤肿瘤溶解产物疫苗(New York Medical College)、病毒黑素瘤细胞溶解产物疫苗(Royal Newcastle Hospital)或戊司泊达(valspodar)。
可与式(I)化合物或其药学上可接受的盐组合使用的治疗剂的其他实例包括伊匹单抗曲美木单抗；加利昔单抗(galiximab)；纳武单抗(nivolumab)，也称为BMS-936558派姆单抗(K阿维鲁单抗AMP224；BMS-936559；MPD L3280A，也称为RG7446；MEDI-570；AMG557；MGA271；IMP321；BMS-663513；PF-05082566；CDX-1127；抗OX40(Providence Health Services)；huMAbOX40L；阿特昔普(atacicept)；CP-870893；鲁卡木单抗(lucatumumab)；达西珠单抗(dacetuzumab)；莫罗单抗(muro monab)-CD3；易普木单抗(ipilumumab)；MEDI4736MS B0010718C；AMP 224；阿达木单抗(adalimumab)ado-曲妥珠单抗美坦新(ado-trastuzumabemtansine)阿柏西普(aflibercept)阿仑单抗(alemtuzumab)巴利昔单抗(basiliximab)贝利木单抗(belimumab)巴利昔单抗(basiliximab)贝利木单抗维布妥昔单抗(brentuximab vedotin)卡那津单抗(canakinuma b)聚乙二醇结合赛妥珠单抗(certolizumab pegol) 达克珠单抗达雷木单抗(daratumumab)地诺单抗(denosumab)依库珠单抗(eculizumab)依法利珠单抗(efalizumab)吉妥珠单抗奥唑米星(gemtuz umab ozogamicin)戈利木单抗(golimumab)替伊莫单抗(ibritumomab tiuxetan)英夫利昔单抗(inflixi mab)莫维珠单抗(motavizumab)那他株单抗(natalizumab)奥滨尤妥珠单抗(obinutuzumab) 奥法木单抗(ofatumumab)奥马珠单抗(omalizumab)帕利珠单抗(palivizumab)帕妥珠单抗(pertuzumab)兰尼单抗(ranibizumab)雷昔库单抗(ra xibacumab)托珠单抗(tocilizumab)托西莫单抗(tositumomab)；托西莫单抗-i-131；优特克单抗(ustekinumab) AMG 102；AMG 386；AMG 479；AMG 655；AMG 706；AMG 745；和AMG 951。
在一些实施方案中，式(I)化合物或其药学上可接受的盐可与以下中的一种或多种组合使用：SOS1抑制剂、Ras抑制剂(例如，Ras(ON)抑制剂，诸如RMC-6291或RMC-6236)或Ras(OFF)抑制剂，诸如阿达格拉西布(adagrasib)或索托拉西布(sotorasib))、MEK抑制剂、EGFR抑制剂或免疫检查点抑制剂(例如，抗PD1抑制剂，诸如帕博利珠单抗)。
在一些实施方案中，式(I)化合物或其药学上可接受的盐与ERK抑制剂和BRAF抑制剂组合使用(即，作为三重组合疗法的一部分)。
本公开中描述的化合物可以与本文公开的药剂或其他合适的药剂组合使用，这取决于所治疗的疾患。因此，在一些实施方案中，该一种或多种式(I)化合物或其药学上可接受的盐将与本文所述的其他疗法共同施用。当用于组合疗法中时，本文所述的化合物可以与第二药剂同时或分开施用。这种组合施用可包括以同一剂型同时施用两种药剂，以分开的剂型中同时施用，及分开施用。即，式(I)化合物或其药学上可接受的盐和本文所述的任何药剂可一起配制成相同剂型并同时施用。可替代地，式(I)化合物或其药学上可接受的盐和本文所述的任何疗法可同时施用，其中两种药剂存在于分开的配制物中。在另一个替代方案中，可以施用式(I)化合物或其药学上可接受的盐，并且随后施用本文所述的任何疗法，或反之亦然。在分开施用方案的一些实施方案中，式(I)化合物或其药学上可接受的盐和本文所述的任何疗法间隔几分钟，或间隔几小时，或间隔几天施用。
在本文所述的任何方法的一些实施方案中，第一疗法(例如，式(I)化合物或其药学上可接受的盐)和一种或多种另外的疗法同时施用或以任一顺序依序施用。第一治疗剂可以在该一种或多种另外的疗法之前或之后立即、至多1小时、至多2小时、至多3小时、至多4小时、至多5小时、至多6小时、至多7小时、至多8小时、至多9小时、至多10小时、至多11小时、至多12小时、至多13小时、14小时、至多16小时、至多17小时、至多18小时、至多19小时、至多20小时、至多21小时、至多22小时、至多23小时、至多24小时或至多1-7天、1-14天、1-21天或1-30天施用。
药盒/制品
在某些实施方案中，本文公开了与本文所述的一种或多种化合物、组合物或方法一起使用的药盒和制品。此类药盒包括载体、包装或容器，其被分隔以容纳一个或多个容器，诸如小瓶、管等，每个容器包括在本文所述的方法中使用的单独要素之一。合适的容器包括例如瓶子、小瓶、注射器和试管。在一个实施方案中，容器可由多种材料，诸如玻璃或塑料形成。
药盒通常包括列出内容物和/或使用说明书的标签，以及具有使用说明书的包装插页。通常还将包括一组说明。
在一个实施方案中，标签处于容器上或与容器相关联。在一个实施方案中，当形成标签的字母、数字或其他字符被附着、模塑或蚀刻到容器本身中时，标签处于容器上，当标签存在于也容纳容器的贮藏器或载体内时，标签与容器相关联，例如作为包装插页。在一个实施方案中，标签用于指示内容物用于特定的治疗应用。标签还指示内容物的使用指导，诸如在本文所述的方法中使用。
在某些实施方案中，药物组合物呈现于包装或分配器装置中，该包装或分配器装置含有一个或多个含有本文提供的化合物的单位剂型。该包装例如含有金属箔或塑料箔，诸如泡罩包装。在一个实施方案中，该包装或分配器装置附有施用说明。在一个实施方案中，包装或分配器还附有与容器相关联的由监管药物的制造、使用或销售的政府机构规定的形式的通知，该通知反映该机构批准用于人或兽医施用的药物的形式。例如，此类通知是由美国食品和药品管理局对于药物批准的标签，或批准的产品插页。在一个实施方案中，还制备了在相容的药物载体中配制的含有本文提供的化合物的组合物，将组合物置于适当的容器中，并标记用于治疗所指示的疾患。
示例性实施方案
进一步通过以下实施方案来描述本公开。在适当和实用的情况下，每个实施方案的特点可与任何其他实施方案组合。
实施方案P1.一种式(I)化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
环A为C3-C6环烷基、苯基、5至6元杂环烷基或5至6元杂芳基，其中所述杂环烷基和所述杂芳基含有1-3个选自N、O和S的杂原子；
每个R1独立地为卤代基、氰基、-NR2aR2b、C1-C6烷基、氧代基、羟基、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基-OH、C1-C6烷基-CN、-C(O)NR2aR2b、-C(O)(C1-C6烷基)、-CO2H、-CO2(C1-C6烷基)、-Si(Ra)(Rb)(Rc)、-P(O)(Ra)(Rb)、-OP(O)(Ra)(Rb)、C3-C6环烷基、苯基、5至6元杂环烷基或5至6元杂芳基，其中所述杂环烷基和所述杂芳基含有1-3个选自N、O和S的杂原子；
或者两个R1基团与它们所附接的碳原子或杂原子一起形成稠合苯基、5至6元杂环烷基或5至6元杂芳基，其中每一个任选地被1-4个R6基团取代，其中所述稠合杂环烷基和杂芳基含有1-3个选自N、O和S的杂原子；
每个Ra、Rb和Rc独立地为羟基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基；
每个R2a和R2b独立地为H、C1-C6烷基或C3-C6环烷基；
L为键、S、O、C(O)或N(Rd)；
Rd为H或C1-C6烷基；
X为CR3aR3b、NR3a或O；
R3a和R3b独立地为H或C1-C6烷基；
R4为H、C1-C6烷基、C1-C6烷基-OH、C1-C6卤代烷基或-NH2；
每个R5独立地为卤代基、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、-(C1-C6亚烷基)(C1-C6烷氧基)或C1-C6烷基-OH；
环B为稠合苯基或含有1-3个选自N、O和S的杂原子的5至6元杂芳基；
每个R6独立地为C1-C6烷基、卤代基或C1-C6卤代烷基；
每个R7独立地为C1-C6烷基、卤代基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基-OH、羟基、氰基、-Si(Ra)(Rb)(Rc)、-P(O)(Ra)(Rb)、-OP(O)(Ra)(Rb)、-NR2aR2b或C1-C6卤代烷基；
x为0-5；
y为0-2；并且
z为0-4；
其中所述化合物中的一个或多个氢原子任选地被氘置换。
实施方案P2.如实施方案P1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
环A为C3-C5环烷基、苯基、6元杂环烷基或5至6元杂芳基，其中所述杂环烷基和所述杂芳基含有1-2个选自N、O和S的杂原子。
实施方案P3.如实施方案P1或P2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
环A为环丙基、苯基、二氢吡啶基、二氢吡喃基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡唑基、咪唑基、吡咯基、噻唑基、异噁唑基或噻吩基。
实施方案P4.如实施方案P1-P3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
为：
实施方案P5.如实施方案P1-P4中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
x为0、1、2或3。
实施方案P6.如实施方案P1-P5中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
每个R1独立地为卤代基、氰基、-NR2aR2b、C1-C3烷基、氧代基、羟基、C1-C3卤代烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3烷基-OH、C1-C3烷基-CN、-C(O)NR2aR2b、-C(O)(C1-C3烷基)、-CO2H、-CO2(C1-C3烷基)、-Si(Ra)(Rb)(Rc)、-P(O)(Ra)(Rb)、-OP(O)(Ra)(Rb)、C3-C5环烷基、苯基或6元杂环烷基，其中所述杂环烷基含有1-2个选自N和O的杂原子；
或者两个R1基团与它们所附接的碳原子或杂原子一起形成稠合苯基、5至6元杂环烷基或5至6元杂芳基，其中每一个任选地被1-2个R6基团取代，其中所述稠合杂环烷基和杂芳基含有1-2个选自N、O和S的杂原子；
每个Ra、Rb和Rc独立地为C1-C3烷基或C1-C3烷氧基；
每个R2a和R2b独立地为H、C1-C3烷基或C3-C5环烷基；并且
每个R6独立地为C1-C3烷基、卤代基或C1-C3卤代烷基。
实施方案P7.如实施方案P1-P6中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
每个R1独立地为F、Cl、-CN、-CH2CN、-NH2、-N(H)CH3、-N(CH3)2、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、氧代基、-CF3、-OCH3、-CH2OH、-C(O)N(CH3)2、-C(O)CH3、环丙基或
或两个R1基团与它们所附接的碳原子或杂原子一起形成选自以下的稠合基团：
实施方案P8.如实施方案P1-P7中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
为：
实施方案P9.如实施方案P1-P8中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
L为键。
实施方案P10.如实施方案P1-P8中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
L为S。
实施方案P11.如实施方案P1-P8中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
L为O。
实施方案P12.如实施方案P1-P8中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
L为C(O)。
实施方案P13.如实施方案P1-P8中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
L为N(Rd)；并且
Rd为H或C1-C3烷基。
实施方案P14.如实施方案P1-P13中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
X为CR3aR3b、NR3a或O；并且
R3a和R3b独立地为H或C1-C3烷基。
实施方案P15.如实施方案P14所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
X为CH2、N(H)、N(CH3)或O。
实施方案P16.如实施方案P1-P15中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
R4为H、C1-C3烷基、C1-C3烷基-OH、C1-C3卤代烷基或-NH2。
实施方案P17.如实施方案P16所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
R4为H、CH3、-CH2OH、-CH2F或-CHF2。
实施方案P18.如实施方案P1-P17中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
y为0或1。
实施方案P19.如实施方案P1-P18中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
每个R5独立地为卤代基、C1-C3烷基、C1-C3卤代烷基、-(C1-C3亚烷基)(C1-C3烷氧基)或C1-C3烷基-OH。
实施方案P20.如实施方案P19所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
每个R5独立地为Cl、F、-CH2F、-CHF2、-CH2OCH3或-CH2OH。
实施方案P21.如实施方案P1-P20中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
环B为稠合苯基或含有1-2个选自N、O和S的杂原子的5至6元杂芳基。
实施方案P22.如实施方案P21所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
环B为稠合苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、噻唑基或噁唑基。
实施方案P23.如实施方案P1-P22中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
z为0、1或2。
实施方案P24.如实施方案P1-P23中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
每个R7独立地为C1-C3烷基、卤代基、C1-C3烷氧基、C1-C3烷基-OH、羟基、氰基、-Si(Ra)(Rb)(Rc)、-P(O)(Ra)(Rb)、-OP(O)(Ra)(Rb)、-NR2aR2b或C1-C3卤代烷基；
每个Ra、Rb和Rc独立地为羟基、C1-C3烷基或C1-C3烷氧基；并且
每个R2a和R2b独立地为H、C1-C3烷基或C3-C5环烷基。
实施方案P25.如实施方案P24所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
每个R7独立地为CH3、F、-OCH3、-CH2OH、羟基、-CN、-N(CH3)2或-CHF2。
实施方案P26.如实施方案P1-P25中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
为：
实施方案P27.如实施方案P1-P26中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物具有式(IIa)、(IIb)、(IIc)或(IId)：
实施方案P28.如实施方案P27所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
L为键。
实施方案P29.如实施方案P27或P28所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物具有式(IIa-1)：
实施方案P30.如实施方案P29所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
每个R1独立地为卤代基；
x为0、1或2；并且
R4为C1-C6烷基。
实施方案P31.如实施方案P30所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
R1为F；
x为0或1；并且
R4为-CH3。
实施方案P32.如实施方案P1-P26中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物具有式(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(IIId)、(IIIe)或(IIIf)：
实施方案P33.如实施方案P1-P9和P14-P26中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物具有式(IVa)：
实施方案P34.如实施方案P1-P26中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物具有式(IVb)、(IVc)、(IVd)或(IVe)：
实施方案P35.一种选自表1的化合物的化合物或其药学上可接受的盐。
实施方案P36.一种药物组合物，其包含如实施方案P1-P35中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的赋形剂。
实施方案P37.一种抑制SHP2的方法，其包括使SHP2与有效量的如实施方案P1-P35中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，或如实施方案P36所述的药物组合物接触。
实施方案P38.一种治疗有需要的受试者中与SHP2调节相关的疾病的方法，其包括向所述受试者施用有效量的如实施方案P1-P35中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，或如实施方案P36所述的药物组合物。
实施方案P39.如实施方案P38所述的方法，其中所述疾病是努南综合征、豹皮综合征、幼年型粒单核细胞白血病、成神经细胞瘤、黑素瘤、急性髓性白血病、乳腺癌、肺癌、结肠癌或脑癌。
实施方案P40.如实施方案P39所述的方法，其中所述脑癌是成胶质细胞瘤。
实施例
下面提供的实施例和制剂进一步例示和举例说明本公开的化合物和测试此类化合物的方法。应理解，本公开的范围不以任何方式受限于以下实施例的范围。
所描述的实施例中的化学反应可以容易地适用于制备本文公开的许多其他化合物，并且用于制备本公开的化合物的替代方法被认为在本公开的范围内。例如，通过本领域技术人员显而易见的修改，例如，通过适当地保护干扰基团，通过利用除描述的那些试剂之外的本领域已知的其他合适试剂，或者通过对反应条件、试剂和原材料的常规修改，可以进行根据本公开的非示例性化合物的合成。可替代地，本文公开的或本领域已知的其他反应将被认为对制备本公开的其他化合物具有适用性。
以下缩写可与本申请相关。
缩写
ACN或MeCN：乙腈
AcOH：乙酸
AIBN：偶氮二异丁腈
aq：水性
BF3.Et2O：三氟化硼醚合物
Bis-pin：双(频哪醇合)二硼
Boc：叔丁氧基羰基
Boc2O：二碳酸二叔丁酯(di-tert-Butyl decarbonate)BSA：牛血清白蛋白
conc.：浓缩
DAST：二乙氨基三氟化硫
DCM：二氯甲烷
DIBAL-H：二异丁基氢化铝
DIEA或DIPEA：二异丙基乙胺
DiFMUP：6,8-二氟-4-甲基伞形酮磷酸酯
二噁烷：1,4-二噁烷
DMA：N,N-二甲基乙酰胺
DMF：二甲基甲酰胺
DMSO：二甲基亚砜
DTT：二硫苏糖醇
EDTA：乙二胺四乙酸
Et2O：乙醚
Et3N：三乙胺
EtOAc：乙酸乙酯
EtOH：乙醇
h：小时
HEPES：4-(2-羟乙基)-1-哌嗪乙磺酸
HPLC：高效液相色谱法
IBX：2-碘酰苯甲酸
iPr2O：二异丙醚
iPrOH：异丙醇
KOAc：乙酸钾
L：升
LCMS：液相色谱法/质谱法
LDA：二异丙基氨基锂
m-CPBA：3-氯过苯甲酸
mCPBA：间氯过氧苯甲酸
Max：最大值
2-MeTHF：2-甲基四氢呋喃
MeOH：甲醇
min：分钟
Min：最小值
MTBE：叔丁基甲基醚
NBS：N-溴代琥珀酰亚胺
n-BuLi：正丁基锂
NMP：N-甲基吡咯烷酮
NMR：核磁共振
Pd(AmPhos)2Cl2：双(对甲基氨基苯基-二叔丁基膦)二氯化钯(II)
Pd(dba)2：钯(0)双(二亚苄基丙酮)
Pd(dppf)Cl2：双(1,1'-二苯基膦二茂铁)-二氯化钯(ll)
Pd(PPh3)4：四(三苯基膦)钯(0)
Pd2(dba)3：三(二亚苄基丙酮)二钯(0)
PPTS：对甲苯磺酸吡啶盐
psi：磅/平方英寸
Py.HBr3：氢溴酸吡啶过溴化物
rt：保留时间
RT：室温
SFC：超临界流体色谱法
SPhos Pd G2：(2-二环己基膦-2',6'-二甲氧基-1,1'-联苯基)[2-(2'-氨基-1,1’-联苯基)]氯化钯(II)
SPhos Pd G4：甲磺酸(2-二环己基膦-2',6'-二甲氧基联苯)(2'-甲基氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)
SPhos：2-二环己基膦-2′,6′-二甲氧基联苯
TBAB：四丁基溴化铵
TBS：叔丁基二甲基甲硅烷基
t-BuOK：叔丁醇钾
TEA：三乙胺
TFA：三氟乙酸
TFAA：三氟乙酸酐
THF：四氢呋喃
Ti(OEt)4：钛(IV)酸乙酯
TIPS：三异丙基甲硅烷基
TIPSCl：三异丙基甲硅烷基氯
XantPhos：4,5-双(二苯基膦)-9,9-二甲基氧杂蒽
XPhos Pd G4：甲磺酸(2-二环己基膦-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)(2'-甲基氨基-1,1'-联苯-2-基)钯(II)
XPhos：2-二环己基膦-2′,4′,6′-三异丙基联苯
合成实施例
中间体化合物
实施例i-1.中间体A-1(7-溴-4-氯-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪)
步骤a：在室温下在N2下向吡唑-3-甲酸乙酯(510g，3.64mol)于DMF(3L)中的溶液中添加1-氯丙-2-酮(504g，5.46mol)和碳酸钾(1005g，7.27mol)并将混合物搅拌2h。将残余物倒入水(7.00L)中。用乙酸乙酯(3.00L*3)萃取水相。将合并的有机相用盐水(3.00L)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至1/1)纯化，得到呈黄色固体的2-丙酮基吡唑-3-甲酸乙酯(139g，680mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.56(d,J＝2.0Hz,1H),6.91(d,J＝2.0Hz,1H),5.36(s,2H),4.31(q,J＝7.2Hz,2H),2.20(s,3H),1.36(t,J＝7.2Hz,3H)。
步骤b：在室温下在N2下向2-丙酮基吡唑-3-甲酸乙酯(139g，708mmol)于CH3CO2H(690mL)中的溶液中添加CH3CO2NH4(273g，3.54mol)。将反应在130℃下搅拌16h。真空浓缩溶液。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至1/1)纯化，得到呈褐色固体的6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮(68.0g，433mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.8(s,1H),7.79(d,J＝2.4Hz,1H),7.33(s,1H),7.06(d,J＝2.0Hz,1H),2.31(d,J＝1.2Hz,3H)。
步骤c：在0℃下在N2下向6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮(68.0g，455mmol)于DMF(340mL)中的溶液中添加NBS(89.2g，501mmol)。将反应在0℃下搅拌5min。将残余物倒入饱和亚硫酸钠水溶液(2.00L)和H2O(2.00L)中。用乙酸乙酯(1.50L*3)萃取水相。将合并的有机相用盐水(2.00L)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将粗产物在室温下用MTBE(80.0mL)研磨30min，得到呈白色固体的7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮(43.0g，182mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.1(s,1H),7.90(d,J＝2.0Hz,1H),7.22(d,J＝2.0Hz,1H),2.49(s,3H)。
步骤d：将7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮(43.0g，188mmol)在PCl3(215mL)中的溶液在110℃在N2下搅拌20min。将残余物小心地倒入水(1.50L)中并搅拌5min。用饱和碳酸氢钠水溶液将水相的pH值调节至约7。用乙酸乙酯(1.00L*2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(1.00L)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至1/1)纯化残余物，得到呈灰白色固体的7-溴-4-氯-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪(33.0g，131mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.09(d,J＝2.0Hz,1H),6.98(d,J＝2.4Hz,1H),2.68(s,3H)。LCMS m/z[M+H]+245.9。
实施例i-2.中间体A-2(4,7-二溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪)
向7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮(19.0g，83.3mmol)在DCM(200mL)中的溶液中添加磷酰溴(11mL，108mmol)和DMF(6mL)。将混合物在40℃下搅拌6h。将混合物缓慢地倒入水(200mL)中并用乙酸乙酯(200mL*2)萃取。将合并的有机相用盐水(100mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至0/1)纯化，得到呈白色固体的4,7-二溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪(15.0g，51.5mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.06(d,J＝2.40Hz,1H),6.92(d,J＝2.40Hz,1H),2.67(s,3H)。
实施例i-3.中间体A-3(7-溴-4-氯-吡唑并[1,5-a]吡嗪)
步骤a：在室温下向吡唑-3-甲酸(200g，1.78mol)在二噁烷(1400mL)中的混合物中一次性添加1,1'-羰基二咪唑(318g，1.96mol)。将反应混合物在50℃下搅拌30min。然后在50℃下向混合物中一次性添加氨基乙醛缩二甲醇(214mL，1.96mol)。将反应混合物在50℃下搅拌30min。然后在50℃下向混合物中一次性添加HCl水溶液(12M，743mL)。将反应混合物在100℃下搅拌16h。然后真空浓缩混合物。向残余物中添加水(2.00L)并将混合物搅拌30min。通过过滤收集固体并用水(500mL*2)洗涤，得到呈褐色固体的粗制吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮(100g)，将其不经进一步纯化用于下一步骤。
步骤b：在0℃下在N2下向先前获得的粗制吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮(100g)于DMF(700mL)中的溶液中添加AcOH(127mL，2.22mol)和NBS(132g，0.74mol)。将反应在0℃下搅拌5min，然后倒入冰水中。用乙酸乙酯萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到粗制7-溴吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮(80g)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
步骤c：将粗制7-溴吡唑并[1,5-a]吡嗪-4(5H)-酮(80g)在PCl3(800mL，8.61mol)中的溶液在100℃下搅拌2h。将残余物小心地倒入水(500mL)中。用饱和NaHCO3溶液将水相的pH值调节至约7。用乙酸乙酯(300mL*2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(200mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至1/1)纯化，然后通过制备型HPLC(中性条件)纯化，得到呈白色固体的7-溴-4-氯-吡唑并[1,5-a]吡嗪(30.0g，128mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.39(d,J＝2.4Hz,1H),8.11(s,1H),7.27(d,J＝1.2Hz,1H)。LCMS m/z[M+H]+233.9。
实施例i-4.中间体A-4(7-溴-4-氯-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲酸乙酯)
步骤a：在室温下向3,5-吡唑二甲酸二乙酯(4.4g，21mmol)于丙酮(100mL)中的混合物中添加碳酸钾(3.9g，28.2mmol)，然后添加1-氯丙-2-酮(1.8mL，23.0mmol)。将反应混合物在55℃下搅拌3h。然后真空浓缩混合物。向残余物中添加水(100mL)并将水相用乙酸乙酯(150mL*2)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到呈褐色油状物的4-羟基-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲酸乙酯(5.83g)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
步骤b：向先前获得的粗制3,5-吡唑二甲酸二乙酯(5.83g)于AcOH(90mL)中的混合物中添加乙酸铵(33.5g，435.0mmol)。将反应混合物在120℃下搅拌20h。将混合物冷却至室温，然后倒入水(300mL)中并搅拌15min。通过过滤收集沉淀物并用水洗涤，得到呈褐色固体的粗制7-溴-4-羟基-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲酸乙酯(2.01g)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
步骤c：向冷却至0℃的先前获得的粗制7-溴-4-羟基-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲酸乙酯(2.01g)于二氯甲烷(40mL)中的混合物中添加NBS(1.95g，11.0mmol)。然后将反应在0℃下搅拌1h。添加二氯甲烷(120mL)和硫代硫酸钠的饱和水溶液(200mL)，并将混合物在室温搅拌30min。通过过滤收集沉淀物并用水洗涤，得到呈褐色固体的粗制7-溴-4-氯-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲酸乙酯(2.43g)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
步骤d：将粗制7-溴-4-氯-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲酸乙酯(2.43g)于PCl3(38mL，408mmol)中的溶液在120℃下搅拌2h。将残余物小心地倒入水(500mL)中。用饱和NaHCO3溶液将水相的pH值调节至约7。用乙酸乙酯(300mL*2)萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到呈浅褐色固体的7-溴-6-甲基-4-(5-氧代螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲酸乙酯(2.18g，6.84mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.60(s,1H),4.41(d,J＝7.1Hz,3H),2.61(s,3H),1.36(t,J＝7.1Hz,3H)。LCMS m/z[M+H]+320.0。
实施例i-5.中间体A-5(7-溴-4-氯-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲酸乙酯)
步骤a：向在-78℃下冷却的7-溴-6-甲基-4-(5-氧代螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲酸乙酯(1g，3.14mmol)于无水THF(40mL)中的混合物中滴加DIBAL-H(1M于甲苯中，7mL，7mmol)。将反应混合物在-78℃下搅拌1.5h，然后使其升温至0℃。添加罗谢尔盐(Rochelle salt)的饱和水溶液(10mL)，然后添加水(40mL)和乙酸乙酯(40mL)。将混合物在室温下搅拌16h。分离有机层并用乙酸乙酯(40mL)萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝8/2至6/4)纯化，得到呈白色固体的7-溴-4-氯-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)甲醇(535mg，1.93mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.97(s,1H),5.42(t,J＝5.9Hz,1H),4.64(d,J＝5.9Hz,2H),3.21(s,3H)。LCMS m/z[M+H]+277.9。
步骤b：向冷却至0℃的7-溴-4-氯-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)甲醇(0.53g，1.92mmol)于二氯甲烷(20mL)中的混合物中分批添加戴斯马丁氧化剂(Dess-Martin periodinane)(1.0g，2.36mmol)。将反应在0℃下搅拌45min，然后在室温下搅拌45min。添加硫代硫酸钠(20mL)、碳酸氢钠(20mL)和二氯甲烷(20mL)的饱和水溶液，并将混合物搅拌1h。将混合物在疏水筒柱(液/液萃取柱，上过滤，然后真空浓缩，得到呈褐色固体的粗制7-溴-4-氯-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲醛(0.82g)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。
步骤c：向在-20℃冷却的粗制7-溴-4-氯-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲醛(0.82g)于二氯甲烷(20mL)中的混合物中滴加二乙基氨基三氟化硫(1.6mL，12.1mmol)。将反应混合物在-20℃下搅拌2h，然后在室温下搅拌2h。将混合物冷却至0℃并缓慢添加饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)，然后添加固体碳酸氢钠以将水相的pH值调节至约8。添加水(20mL)和二氯甲烷(30mL)，将混合物在疏水筒柱(液/液萃取柱，上过滤，然后真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝100/0至95/5)纯化，得到呈白色固体的7-溴-4-氯-2-(二氟甲基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪(437mg，1.47mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.48(br s,1H),7.37(t,J＝53.7Hz,1H),3.61(s,3H)。LCMS m/z[M+H]+297.9。
实施例i-6.中间体A-6(7-溴-4-氯-3-氟-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪)
步骤a：在室温下向4-氟-1H-吡唑(5g，58mmol)于DMSO(110mL)中的混合物中添加碳酸铯(2.8g，87mmol)，然后添加1-溴-2,2-二甲氧基-丙烷(11g，8.2mL，61mmol)。将反应混合物在120℃下搅拌5天。将反应混合物倒入水(600mL)中并用乙酸乙酯(2*150mL)萃取水相。将合并的有机相用水、盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到黄色油状物，将其通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝85/15)纯化，得到呈无色油状物的1-(2,2-二甲氧基丙基)-4-氟-吡唑(7.69g)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.76(dd,J＝4.4Hz,J＝0.8Hz1H),7.46(dd,J＝4.4Hz,J＝0.8Hz 1H),4.13(s,2H),3.18(s,6H),1.08(s,3H)。
步骤b：在-70℃下在N2下向1-(2,2-二甲氧基丙基)-4-氟-吡唑(7.69g，40.9mmol)于无水THF(150mL)中的溶液中滴加LDA(用21mL于己烷中的2.5M nBuLi和7.5mL于10mL THF中的二异丙胺新鲜制备，52.5mmol)。将反应混合物在-70℃下搅拌1h，然后在-70℃下滴加氯甲酸乙酯(6.65g，61.3mmol)。将反应混合物搅拌30min，然后使其升温至室温。将反应混合物倒入NH4Cl溶液中并用乙酸乙酯(2*150mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到橙色油状物，将其通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝9/1)纯化，得到呈浅黄色油状物的2-(2,2-二甲氧基丙基)-4-氟-吡唑-3-甲酸乙酯(9.73g)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.72(d,J＝4.4Hz,1H),4.59(s,2H),4.33(d,J＝7.2Hz,2H),3.15(s,6H),1.30(m,3H),1.03(s,3H)。LCMS m/z[M+Na]+283.2。
步骤c：向2-(2,2-二甲氧基丙基)-4-氟-吡唑-3-甲酸乙酯(9.73g，37.4mmol)于THF/水1/1混合物(25mL)中的溶液中添加三氟乙酸(4.26g，28.6mL，374mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h。然后将反应混合物减压浓缩，得到呈白色固体的粗制2-丙酮基-4-氟-吡唑-3-甲酸乙酯(7.95g)，其不经进一步纯化即使用。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.74(s,1H),5.35(s,2H),4.28(m,2H),2.18(s,3H),1.26(m,3H)。LCMS m/z[M+H]+215.1。
步骤d：向2-丙酮基-4-氟-吡唑-3-甲酸乙酯(7.95g，37.1mmol)于AcOH(10.6mL)中的混合物中添加乙酸铵(14.3g，186mmol)。将反应混合物在回流下搅拌15h。真空浓缩混合物。添加水(300mL)和乙酸乙酯(300mL)，分离水层并用DCM(300mL)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤并浓缩至干，得到粗产物，将粗产物在二异丙醚(40mL)和乙酸乙酯(2mL)中研磨，冰冻并过滤，得到呈米色固体的3-氟-6-甲基-5H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-酮(5.03g，30.1mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.24(s,1H),8.18(s,1H),7.87(s,1H),7.41(s,1H),2.08(s,3H)。LCMS m/z[M+H]+168.1。
步骤e：向冷却至0℃的3-氟-6-甲基-5H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-酮(5.03g，30.1mmol)于DMF(150mL)中的混合物中添加NBS(5.62g，31.6mmol)。将反应在0℃下搅拌1h。用乙酸乙酯(150mL)稀释反应混合物。添加饱和硫代硫酸钠水溶液(700mL)，并将混合物在室温下搅拌30min，然后用乙酸乙酯(3*200mL)萃取。将固体从中间相过滤，提供粗产物(1.1g)。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤并浓缩至干，提供褐色固体(4.9g)。将获得的合并的粗产物在乙腈(20mL)中研磨，冰冻并过滤，得到7-溴-3-氟-6-甲基-5H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-酮(5.17g，21mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.63(s,1H),8.03(s,1H),2.25(s,3H)。LCMS m/z[M+H]+246.0。
步骤f：将7-溴-3-氟-6-甲基-5H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-酮(5.3g，22mmol)于PCl3(66g，40mL，430mmol)中的溶液加热至回流持续2h。将残余物冷却至室温并小心地倒入冰水(800mL)中，并将获得的混合物搅拌45min。用乙酸乙酯(2*200mL)萃取水相。用饱和NaHCO3溶液将水相的pH值调节至约7。用乙酸乙酯(300mL*2)萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到粗产物，将粗产物在二异丙醚(40mL)中研磨，冰冷并过滤，得到呈米色粉末的7-溴-4-氯-3-氟-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪(4.95g，18.7mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.44(s,1H),2.57(s,3H)。LCMS m/z[M+H]+264.0。
实施例i-7.中间体A-7(7-溴-4-氯-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸乙酯)
步骤a：在室温下向1H-吡唑-4-甲酸乙酯(15g，107.0mmol)于DMSO(210mL)中的混合物中添加碳酸钾(5.2g，161mmol)，然后添加1-溴-2,2-二甲氧基-丙烷(21g，15.90mL，117.7mmol)。将反应混合物在120℃下搅拌24h。将反应混合物倒入水(500mL)中并用乙酸乙酯(2*400mL)萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到橙色油状物，将其通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝7/3)纯化，得到呈黄色油状物的1-(2,2-二甲氧基丙基)吡唑-4-甲酸乙酯(17.5g)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.21(s,1H),7.85(s,1H),4.28(s,2H),4.21(q,J＝7.1Hz,2H),3.20(s,6H),1.27(t,J＝7.1Hz,3H),1.12(s,3H)。LCMS m/z[M+H]+243.2。
步骤b：在-70℃下在N2下向1-(2,2-二甲氧基丙基)吡唑-4-甲酸乙酯(8.5g，35.1mmol)于无水THF(130mL)中的溶液中滴加LDA(2M于THF中，23mL，46mmol)。将反应混合物在-70℃下搅拌30min，然后在-70℃下滴加氯甲酸乙酯(5.71g，52.6mmol)。将反应混合物搅拌30min，然后使其升温至室温。将反应混合物倒入盐水溶液中并用乙酸乙酯(2*150mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到橙色油状物，将其通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝8/2)纯化，得到呈黄色液体的2-(2,2-二甲氧基丙基)吡唑-3,4-二甲酸二乙酯(3.67g，11.7mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.92(s,1H),4.43(s,2H),4.34(q,J＝7.1Hz,2H),4.21(q,J＝7.1Hz,2H),3.11(s,6H),1.32(t,J＝7.1Hz,3H),1.25(t,J＝7.1Hz,3H),1.05(s,3H)。
步骤c：向2-(2,2-二甲氧基丙基)吡唑-3,4-二甲酸二乙酯(3.67g，11.7mmol)于THF/水1/1混合物(20mL)中的溶液中添加三氟乙酸(2.66g，17.9mL，234mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h。减压浓缩反应混合物。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝6/4)纯化，得到呈无色油状物的2-丙酮基吡唑-3,4-二甲酸二乙酯(2.18g)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.92(s,1H),5.37(s,2H),4.21-4.31(m,4H),2.17(s,3H),1.24-1.28(m,6H)。LCMS m/z[M+H]+269.2。
步骤d：向2-丙酮基吡唑-3,4-二甲酸二乙酯(1.62g，4.7mmol)于AcOH(1.34mL)中的混合物中添加乙酸铵(1.8g，23.4mmol)。将反应混合物在回流下搅拌5h。将混合物冷却至室温，然后倒入水(300mL)中并搅拌15min。通过过滤收集固体并用水洗涤，得到呈米色固体的粗制6-甲基-4-氧代-5H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸乙酯(1.1g)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.5(s,1H),8.18(s,1H),7.58(s,1H),4.24(q,J＝7.1Hz,2H),2.12(s,3H),1.28(t,J＝7.1Hz,3H)。LCMS m/z[M+H]+222.1。
步骤e：向冷却至0℃的先前获得的6-甲基-4-氧代-5H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸乙酯(1.1g)于DMF(25mL)中的混合物中添加NBS(929mg，5.2mmol)。将反应在0℃下搅拌1h。添加乙酸乙酯和饱和硫代硫酸钠水溶液，并将混合物在室温下搅拌30min。通过过滤收集沉淀物并用水洗涤，得到呈粉色固体的粗制7-溴-6-甲基-4-氧代-5H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸乙酯(1g)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.9(s,1H),8.28(s,1H),4.26(q,J＝7.1Hz,2H),2.29(s,3H),1.30(t,J＝7.1Hz,3H)。LCMS m/z[M+H]+300.0。
步骤f：将粗制7-溴-6-甲基-4-氧代-5H-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸乙酯(1.14g)于PCl3(16.4g，10mL，106.2mmol)中的溶液加热至回流持续2h。将残余物小心地倒入冰水(500mL)中。用饱和NaHCO3将水相的pH值调节至约7。用乙酸乙酯(300mL*2)萃取水相。将合并的有机相用饱和NaHCO3水溶液、盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物在二异丙醚中研磨，冰冻并过滤，得到呈米色粉末的7-溴-4-氯-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲酸乙酯(1.11g，3.5mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.68(s,1H),4.35(q,J＝7.1Hz,3H),2.62(s,3H),1.34(t,J＝7.1Hz,3H)。LCMS m/z[M+H]+318.0。
实施例i-8.中间体A-8((7-溴-4-氯-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-基)甲醇)
向在-78℃下冷却的中间体A-7(980mg，3.47mmol)于无水THF(40mL)中的溶液中滴加DIBAL-H(1M于甲苯中，6.9mL，6.9mmol)。将反应混合物在-78℃下搅拌1.5h，然后使其升温至0℃。添加罗谢尔盐的饱和水溶液(10mL)，然后添加水(40mL)和乙酸乙酯(40mL)。将混合物在室温下搅拌10min。分离有机层并用乙酸乙酯(40mL)萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到呈白色固体的7-溴-4-氯-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-基)甲醇(980mg，3.47mmol)，其不经任何进一步纯化即用于下一步骤。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.24(s,1H),5.28(t,J＝5.4Hz,1H),4.85(d,J＝5.4Hz,2H),2.57(s,3H)。LCMS m/z[M+H]+276.0。
实施例i-9.中间体A-9(7-溴-4-氯-3-(二氟甲基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪)
步骤a：向冷却至0℃的中间体A-8(400mg，1.45mmol)于二氯甲烷(20mL)中的混合物中分批添加戴斯马丁氧化剂(736mg，1.74mmol)。将反应在0℃下搅拌10min，然后在室温下搅拌1h。添加另一份戴斯马丁氧化剂(150mg)。添加硫代硫酸钠(20mL)、碳酸氢钠(20mL)和二氯甲烷(20mL)的饱和水溶液，并将混合物搅拌1h。将混合物在疏水性PTFE筒柱(液/液萃取柱，上过滤，然后真空浓缩，得到呈米色固体的粗制7-溴-4-氯-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲醛(506mg)，其不经进一步纯化即用于下一步骤。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.48(s,1H),8.80(s,1H),2.65(s,3H)。LCMS m/z[M+H]+276.0。
步骤b：向在-20℃冷却的先前获得的粗制7-溴-4-氯-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-甲醛于二氯甲烷(20mL)中的混合物中滴加二乙基氨基三氟化硫(1.2mL，8.66mmol)。将反应混合物在-20℃下搅拌2h，然后在室温下搅拌48h。在剧烈搅拌下将混合物倒入冰冷的饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)中以将水相的pH值调节至约8。添加水(20mL)和二氯甲烷(30mL)，将混合物在疏水性PTFE筒柱(液/液萃取柱，上过滤，然后真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝90/10)纯化，得到呈白色粉末的7-溴-4-氯-3-(二氟甲基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪(345mg，1.16mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.61(s,1H),7.55(t,J＝54.7Hz,1H),2.61(s,3H)。LCMS m/z[M+H]+298.0。
实施例i-10.中间体B-1(螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-酮盐酸盐)
在室温下向5-氧代-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(Labnetwork，20g，66.14mmol)于二氯甲烷(200mL)和甲醇(100mL)中的混合物中滴加HCl溶液(4M于二噁烷中，165.3mL，661.4mmol)。将混合物搅拌18h，然后真空浓缩。将残余物溶解于乙酸乙酯(50mL)中并搅拌5min。通过过滤收集沉淀物并用戊烷(50mL)洗涤，得到呈白色固体的螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-酮盐酸盐(18.1g)，其无需进一步纯化即使用。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.43(s,1H),9.12(s,1H),8.92(d,J＝3.2Hz,1H),8.17(d,J＝8.0Hz,1H),7.58(dd,J＝8.0,5.2Hz,1H),3.30-3.37(m,4H),3.01-3.10(m,2H),1.95-2.03(m,2H),1.67-1.70(m,2H)。
实施例i-11.中间体B-2((5S)-5-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯)
步骤a：向5-氧代-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(Labnetwork，14g，46.30mmol)于2-甲基四氢呋喃(100mL)中的溶液中添加(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(11.45g，92.59mmol)。将混合物在60℃下加热并滴加Ti(OEt)4(58mL，185.2mmol)。将混合物在80℃下搅拌18h。将混合物冷却至室温并添加2-甲基四氢呋喃(150mL)、5％ Na2SO4水溶液(100mL)和硅藻土(15g)。将混合物搅拌30min，然后过滤，并将固体用2-甲基四氢呋喃洗涤。然后将滤液用水(6*300mL)、盐水(200mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝1/0至0/1)纯化，得到呈灰白色固体的(5Z)-5-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(15.42g，38.02mmol)。LCMS m/z[M+H]+406.2。
步骤b：向在-78℃下冷却的(5Z)-5-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(5.7g，14.07mmol)于无水THF(115mL)中的混合物中滴加DIBAL-H(1M于甲苯中，17mL，17mmol)。将反应混合物在-78℃下搅拌15min，添加乙酸乙酯(140mL)，然后添加罗谢尔盐的饱和水溶液(100mL)。移除冷却批料并将混合物在室温下搅拌1h。分离水层，然后用乙酸乙酯(50mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，二氯甲烷/甲醇＝100/0至95/5)纯化，得到呈白色固体的(5S)-5-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(5.2g，12.8mmol)。LCMS m/z[M+H]+408.2。
实施例i-12.中间体B-3((R)-2-甲基-N-[(5S)-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]丙烷-2-亚磺酰胺)
向中间体B-2(0.7g，1.71mmol)于二氯甲烷(5mL)中的溶液中添加TFA(1.5mL，20mmol)。将混合物在室温下搅拌3h。添加二氯甲烷(10mL)和水(10mL)，用1N NaOH水溶液将水相的pH值调节至11-12，并将混合物在疏水筒柱(液/液萃取柱，上过滤，然后真空浓缩，得到呈米色固体的(R)-2-甲基-N-[(5S)-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]丙烷-2-亚磺酰胺(0.34g，1.12mmol)。LCMS m/z[M+H]+308.2。
实施例i-13.中间体B-4((5S)-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺盐酸盐)
将中间体B-2(2.35g，5.77mmol)于HCl溶液(2.5M于乙醇中，30mL，75mmol)中的混合物在室温下搅拌3h。然后将反应混合物真空浓缩。将残余物溶解于乙酸乙酯(50mL)和二异丙醚(50mL)中，研磨、过滤并用二异丙醚(2*50mL)、戊烷(50mL)洗涤，得到呈白色固体的(5S)-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺盐酸盐(1.8g，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
实施例i-14.中间体B-5(3-氯螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-酮盐酸盐)
步骤a：在-15℃下向(3-溴-5-氯吡啶-2-基)甲醇(1.25g，5.62mmol)于无水二氯甲烷(15mL)中的溶液中添加三乙胺(1.7mL，12.2mmol)，然后添加甲磺酰氯(0.5mL，6.4mmol)。添加后，将混合物在室温下搅拌1h，添加水(20mL)，并将混合物在疏水筒柱(液/液萃取柱，上过滤，然后真空浓缩，得到呈油状物的甲磺酸(3-溴-5-氯-2-吡啶基)甲酯(1.2g，3.99mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝301.8。
步骤b：在-78℃下向N-Boc-哌啶-4-甲酸乙酯(2.48g，9.64mmol)于无水THF(15mL)中的溶液中滴加LDA(2M，6mL，12mmol)。添加后，将混合物在该温度下搅拌1.5h，并滴加在无水THF(6mL)中的甲磺酸(3-溴-5-氯-2-吡啶基)甲酯(2.85g，9.48mmol)。然后使所得混合物缓慢升温至0℃。通过添加饱和NH4Cl水溶液(10mL)淬灭反应混合物。添加水(30mL)并将混合物用EtOAc(40mL*2)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝95/5)纯化，得到呈橙色油状物的4-[(3-溴-5-氯-2-吡啶基)甲基]哌啶-1,4-二甲酸O1-叔丁酯O4-乙酯(3.23g，6.99mmol)。LCMS m/z[M-56+H]+＝406.9。
步骤c：在室温下向4-[(3-溴-5-氯-2-吡啶基)甲基]哌啶-1,4-二甲酸O1-叔丁酯O4-乙酯(3.22g，6.97mmol)于甲醇(30mL)和水(6mL)中的溶液中添加氢氧化钠水溶液(35％，6mL，72.12mmol)。将混合物在65℃下搅拌18h，然后使其冷却至室温。添加水并过滤混合物；用乙腈洗涤沉淀物，得到呈白色固体的4-[(3-溴-5-氯-2-吡啶基)甲基]-1-叔丁氧基羰基-哌啶-4-甲酸钠盐(1.96g，4.30mmol)。
步骤d：在-20℃下向4-[(3-溴-5-氯-2-吡啶基)甲基]-1-叔丁氧基羰基-哌啶-4-甲酸钠盐(1.96g，4.30mmol)于无水THF(10mL)中的混悬液中滴加n-BuLi(2.1M于己烷中，3mL，6.3mmol)。添加结束后，将混合物在该温度下搅拌1h，并通过添加水(40mL)淬灭反应混合物，然后用EtOAc(40mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝8/2)纯化，得到呈白色固体的3-氯-5-氧代-螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(175mg，0.52mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝337.1。
步骤e：向3-氯-5-氧代-螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(390mg，1.16mmol)于甲醇(10mL)中的混合物中滴加HCl溶液(4M于二噁烷中，1.5mL，6mmol)。将混合物在室温下搅拌16h，然后真空浓缩，得到呈粉色固体的粗制3-氯螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-酮盐酸盐(352mg)，其不经进一步纯化即使用。
实施例i-15.中间体B-6((5S)-3-甲氧基螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺盐酸盐)
步骤a：在0℃下在N2下向3-溴-2-氯-5-甲氧基吡啶(15.0g，67.4mmol)于THF(150mL)中的溶液中滴加i-PrMgCl(2M于THF中，40.5mL，91mmol)。将反应在室温下搅拌2h。然后在0℃下向溶液中滴加4-甲酰基-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(23.0g，101mmol)于THF(75mL)中的溶液。将反应在室温下搅拌30min。然后将混合物倒入水(200mL)中。用乙酸乙酯(80mL*3)萃取水相。将合并的有机相用盐水(50mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至1/1)纯化残余物，得到呈黄色油状物的粗制4-((2-氯-5-甲氧基吡啶-3-基)(羟基)甲基)-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(26.0g)，其不经进一步纯化即使用。
步骤b：在0℃下在N2下向粗制4-((2-氯-5-甲氧基吡啶-3-基)(羟基)甲基)-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(26.0g)于DCM(260mL)中的溶液中添加戴斯马丁氧化剂(59.5g，140mmol)。将反应在室温下搅拌3h。将混合物倒入饱和亚硫酸钠水溶液(300mL)中。用乙酸乙酯(80mL*3)萃取水相。将合并的有机相用盐水(100mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至1/1)纯化，得到呈黄色油状物的4-(2-氯-5-甲氧基烟酰基)-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(22.0g，59.6mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.10(d,J＝3.2Hz,1H),6.99(d,J＝2.8Hz,1H),3.88(s,3H),3.69-3.75(m,2H),3.21-3.28(m,2H),1.96-2.03(m,2H),1.57-1.61(m,2H),1.45(s,9H),1.36(s,3H)。
步骤c：在室温下在N2下向4-(2-氯-5-甲氧基烟酰基)-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(22.0g，59.6mmol)于均三甲苯(220mL)中的溶液中添加Pd(OAc)2(670mg，2.98mmol)、Cs2CO3(23.4g，71.6mmol)、三环己基膦四氟硼酸盐(2.20g，5.96mmol)和特戊酸(2.06mL，17.9mmol)。将溶液用N2脱气10min。然后将反应在160℃下搅拌4h。将反应冷却至室温，然后倒入水(500mL)中。用乙酸乙酯(150mL*3)萃取水相。将合并的有机相用盐水(150mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至1/1)纯化，得到呈黄色固体的3-甲氧基-5-氧代-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(15.0g，45.1mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.57(d,J＝2.8Hz,1H),7.43(d,J＝2.8Hz,1H),4.15(s,2H),3.89(s,3H),3.12(s,2H),3.02(s,2H),1.90-1.98(m,2H),1.41-1.49(m,11H)。
步骤d：在室温下在N2下向3-甲氧基-5-氧代-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(14.0g，21.1mmol)于Ti(OEt)4(70.0mL)中的溶液中添加(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(12.7g，105.0mmol)。将反应在110℃下搅拌13h。将混合物倒入水(500mL)中。用乙酸乙酯(200mL*3)萃取水相。将合并的有机相用盐水(200mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至1/1)纯化，得到呈黄色油状物的(R,Z)-5-((叔丁基亚磺酰基)亚氨基)-3-甲氧基-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(6.80g，15.6mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.41-8.42(m,2H),4.09-4.17(m,2H),3.90(s,3H),3.09(s,2H),2.94(s,2H),1.94-1.97(m,2H),1.39-1.57(m,11H),1.35(s,9H)。
步骤e：在-78℃下在N2下向(R,Z)-5-((叔丁基亚磺酰基)亚氨基)-3-甲氧基-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(6.8g，15.6mmol)于THF(50mL)中的溶液中添加DIBAL-H(1M，62.4mL，62.4mmol)。将反应在-78℃下搅拌1h。然后缓慢添加水(40mL)并将混合物搅拌15min。添加无水Na2SO4(100g)，将混合物搅拌5min，然后过滤。将滤液真空浓缩并将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至1/1)纯化，得到呈黄色固体的5-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-3-甲氧基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(3.40g，7.72mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.11-8.14(m,1H),7.26(s,1H),4.50(d,J＝8.8Hz,1H),4.01-4.04(m,2H),3.86(s,3H),3.63(s,1H),2.81-3.14(m,4H),2.05(s,1H),1.46-1.73(m,11H),1.23-1.45(m,10H)。LCMS m/z[M+H]+＝438.2。
步骤f：在室温下向5-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-3-甲氧基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(0.4g，0.91mmol)在二氯甲烷(6mL)和甲醇(2mL)中的溶液中滴加HCl溶液(4M于二噁烷中，2mL，8mmol)。将混合物在室温下搅拌4h，然后真空浓缩。将残余物溶解于乙醚(40mL)中并搅拌5min。通过过滤收集固体并用乙醚洗涤，得到呈黄色固体的3-甲氧基螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺盐酸盐(0.32g，粗品)，其无需进一步纯化即使用。
实施例i-16.中间体B-7((5S)-3-氟代螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺盐酸盐)
步骤a：在0℃下在N2下向3-溴-2-氯-5-氟吡啶(21.0g，99.8mmol)于THF(420mL)中的溶液中滴加i-PrMgCl-LiCl(1.30M于THF中，92.1mL，119.7mmol)。将反应混合物在室温下搅拌2h，然后在0℃下滴加4-甲酰基-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(29.5g，130mmol)于THF(210mL)中的溶液。将反应混合物在室温下搅拌30min，然后倒入饱和氯化铵水溶液(800mL)中。用乙酸乙酯(300mL*3)萃取水相。将合并的有机相用盐水(800mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至10/1)纯化残余物，得到呈黄色油状物的4-((2-氯-5-氟吡啶-3-基)(羟基)甲基)-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(26.7g，74.4mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.19-8.21(m,1H),7.67(dd,J＝12Hz,1H),4.91(s,1H),3.95(s,2H),2.86-2.94(m,3H),1.79-1.80(m,1H),1.54-1.61(m,3H),1.45-1.46(m,11H),1.04-1.05(m,3H)。LCMS m/z[M-tBu+H]+＝303.0。
步骤b：在0℃下向4-((2-氯-5-氟吡啶-3-基)(羟基)甲基)-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(26.7g，74.4mmol)于DCM(160mL)中的搅拌溶液中添加戴斯马丁氧化剂(58.1g，137mmol)。将反应混合物在室温下搅拌3h，然后倒入饱和Na2SO3水溶液(200mL)中，然后用DCM(150mL)稀释。将混悬液过滤并将滤液用DCM(100mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(300mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至10/1)纯化，得到呈白色固体的4-(2-氯-5-氟烟酰基)-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(13.9g，38.9mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)d 8.33(d,J＝2.8Hz 1H),7.27-7.30(m,1H),3.72-3.78(m,2H),3.25-3.31(m,2H),1.98-2.05(m,2H),1.59-1.65(m,2H),1.48(s,9H),1.39(s,3H)。
步骤c：向4-(2-氯-5-氟烟酰基)-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(6.50g，18.2mmol)于均三甲苯(80mL)中的搅拌溶液中添加三环己基膦四氟硼酸盐(671mg，1.82mmol)、特戊酸(0.63mL，5.46mmol)和Cs2CO3(7.12g，21.9mmol)，并将混合物用N2脱气5min。将Pd(OAc)2(204mg，0.91mmol)添加到反应混合物中并再次用N2脱气。将反应混合物在160℃下搅拌2h。将反应冷却至室温，然后倒入水(150mL)中。用乙酸乙酯(60mL*3)萃取水相。将合并的有机相用盐水(150mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至10/1)纯化，得到呈黄色固体的3-氟-5-氧代-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1-甲酸酯(4.50g，14.1mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.71(d,J＝3.6Hz,1H),7.68(s,J＝9.6Hz 1H),4.11-4.15(m,2H),3.16(s,2H),3.00-3.07(m,2H),1.90-1.97(m,2H),1.44-1.48(m,12H)。
步骤d：在室温向3-氟-5-氧代-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1-甲酸酯(5.00g，15.6mmol)于Ti(OEt)4(25.0mL)中的搅拌溶液中添加(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(3.78g，31.2mmol)，然后将反应混合物在100℃下搅拌16h。将反应混合物倒入水(100mL)中，然后用乙酸乙酯80mL稀释，将混悬液过滤。用乙酸乙酯(30mL*3)萃取滤液。将合并的有机层用盐水150mL洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至10/1)纯化，得到呈黄色固体的(R,Z)-5-((叔丁基亚磺酰基)亚氨基)-3-氟-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(5.80g，13.7mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.65(s,1H),8.56(d,J＝2.8Hz,1H),4.12-4.17(m,2H),3.14(s,2H),2.95-3.05(m,2H),1.92-1.97(m,2H),1.50(s,11H),1.36(s,9H)。
步骤e：在-70℃下向(R,Z)-5-((叔丁基亚磺酰基)亚氨基)-3-氟-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1-甲酸叔丁酯(5.10g，12.0mmol)于THF(26.0mL)中的搅拌溶液中添加DIBAL-H(1M，48mL，48mmol)并将混合物搅拌1h。将反应混合物倒入水(100mL)中并过滤混悬液。用乙酸乙酯(40mL*3)萃取滤液。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至10/1)纯化，得到呈白色固体的(5S)-5-(叔丁基亚磺酰基氨基)-3-氟-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(2.5g，5.87mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.31(s,1H),7.40(d,J＝5.6Hz 1H),4.54(d,J＝9.2Hz 1H),4.04-4.15(m,2H),3.68(s,1H),3.18(s,1H),2.87-2.96(m,3H),2.05-2.13(m,1H),1.45-1.73(m,12H),1.29-1.49(m,9H)。LCMS m/z[M+H]+＝426.2。
步骤f：在0℃下向(5S)-5-(叔丁基亚磺酰基氨基)-3-氟-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.5g，3.53mmol)于甲醇(10mL)中的混合物中滴加HCl溶液(4M于二噁烷中，8.8mL，35.3mmol)。将混合物在室温下搅拌1h，添加甲醇(14mL)并将混合物搅拌16h。然后将混合物真空浓缩，得到呈黄色固体的粗制(5S)-3-氟代螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺盐酸盐(1.24g，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
实施例i-17.中间体B-8((1S)-5-甲氧基螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-胺盐酸盐)
步骤a：在-78℃下在Ar下向1-boc-4-氰基哌啶(3.0g，14.27mmol)于无水THF(60mL)中的溶液中滴加LDA(2M，10mL，20mmol)。添加后，将混合物在该温度下搅拌1h，并滴加2-溴-5-甲氧基苄基溴(4.8g，17.27mmol)。将所得混合物在-78℃下搅拌3h，然后使其升温至0℃。通过添加水(100mL*2)淬灭反应混合物，然后用EtOAc(100mL x 2)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝95/5至80/20)纯化，得到呈黄色蜡状物的4-[(2-溴-5-甲氧基-苯基)甲基]-4-氰基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.93g，12.0mmol)。LCMS m/z[M-100+H]+＝309.0。
步骤b：将4-[(2-溴-5-甲氧基-苯基)甲基]-4-氰基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.93g，12mmol)、DIPEA(10mL，57.4mmol)、Pd(AmPhos)2Cl2(0.86g，1.21mmol)在DMA(80mL)和H2O(15mL)中的混合物用Ar脱气3min，然后将混合物在140℃下搅拌2h。将反应冷却至室温，添加水(350mL)和EtOAc(350mL)，然后添加HCl水溶液(37％，3mL)以达到pH约2。分离有机层并用EtOAc(350mL)萃取水层。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物溶解于乙醚(50mL)中，将醚层用水(50mL*3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到呈橙色固体的粗制甲氧基-1-氧代-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸酯(3.72g)，其不经进一步纯化即使用。
步骤c：将粗制甲氧基-1-氧代-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸酯(3.72g)、Ti(OEt)4(13.0mL，62.01mmol)和(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(3.0g，24.75mmol)的混合物在105℃下搅拌16h。添加Ti(OEt)4(3.0mL，14.31mmol)，并将混合物在105℃下搅拌24h，然后冷却至室温。添加水(150mL)和乙酸乙酯(100mL)并过滤混合物。分离有机层并用乙酸乙酯萃取水层。将合并的有机相用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝8/2至6/4)纯化，得到呈黄色固体的粗制(1Z)-1-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-5-甲氧基-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.01g)。LCMS m/z[M+H]+＝435.3。
步骤d：向在-78℃下冷却的粗制(1Z)-1-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-5-甲氧基-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.0g)于无水THF(35mL)中的混合物中滴加DIBAL-H(1M于甲苯中，6mL，6mmol)。将反应混合物在-78℃下搅拌45min，然后使其升温至-20℃。添加罗谢尔盐的饱和水溶液(10mL)并将混合物在室温下搅拌1h。添加水和乙酸乙酯。分离有机层并用乙酸乙酯萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到呈黄色固体的粗制(1S)-1-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-5-甲氧基-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(984mg)。LCMS m/z[M+H]+＝437.3。
步骤e：向粗制(1S)-1-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-5-甲氧基-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(984mg)于二氯甲烷(12mL)和甲醇(4mL)中的混合物中滴加HCl溶液(4M于二噁烷中，3.5mL，14mmol)。将混合物在室温下搅拌16h，然后真空浓缩。将残余物溶解于乙醚(40mL)中并过滤，得到呈黄色固体的粗制(1S)-5-甲氧基螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-胺盐酸盐(755mg)，其不经进一步纯化即使用。
实施例i-18.中间体B-9(2-甲氧基-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-7-胺盐酸盐)
步骤a：在室温下在N2下向2-溴-6-甲氧基烟醛(42.0g，194mmol)于MeOH(294mL)中的溶液中添加NaBH4(3.64g，96.2mmol)。然后将反应在室温下搅拌30min。将残余物倒入水(500mL)中。用乙酸乙酯(200mL*3)萃取水相。将合并的有机相用盐水(200mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到呈无色油状物的(2-溴-6-甲氧基吡啶-3-基)甲醇(42.0g，193mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.76-7.80(m,1H),6.87(d,J＝8.0Hz,1H),5.44(t,J＝5.6Hz,1H),4.43(d,J＝5.6Hz,2H),3.83(s,3H)。
步骤b：在室温下在N2下向(2-溴-6-甲氧基吡啶-3-基)甲醇(42.0g，193mmol)和CBr4(76.7g，231mmol)于DCM(210mL)中的溶液中添加PPh3(60.6g，231mmol)于DCM(126mL)中的溶液。然后将反应在室温下搅拌30min。将残余物倒入水(500mL)中。将水相用DCM(200mL*3)萃取。将合并的有机相用盐水(200mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至0/1)纯化，得到呈白色固体的2-溴-3-(溴甲基)-6-甲氧基吡啶(43.0g，153mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.91-7.94(m,1H),6.89-6.93(m,1H),4.69(s,2H),3.86(s,3H)。
步骤c：在0℃下在N2下向1-boc-4-氰基哌啶(35.4g，168mmol)于THF(215mL)中的溶液中添加LDA(2.00M，153mL，306mmol)。将反应在0℃下搅拌30min。然后在0℃在N2下向反应中添加2-溴-3-(溴甲基)-6-甲氧基吡啶(43.0g，153mmol)于THF(215mL)中的溶液。将反应在室温下搅拌2h。将残余物倒入NH4Cl溶液(1L)中。用乙酸乙酯(500mL*3)萃取水相。将合并的有机相用盐水(100mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至1/1)纯化。将获得的固体与石油醚(100mL)在室温搅拌1h。将混悬液过滤并且将滤饼真空干燥，得到呈白色固体的4-[(2-溴-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基]-4-氰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(17.0g，41.4mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.69(d,J＝8.4Hz,1H),6.74(t,J＝8.4Hz,1H),4.16(s,2H),3.94(s,3H),2.96-3.03(m,4H),1.72-1.89(m,2H),1.64-1.71(m,2H),1.47(s,9H)。
步骤d：在室温下在N2下向4-[(2-溴-6-甲氧基吡啶-3-基)甲基]-4-氰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(17.0g，41.4mmol)于DMA(170mL)和H2O(17mL)中的溶液中添加Pd(AmPhos)2Cl2(2.93g，4.14mmol，2.93mL)和TEA(16.8g，166mmol，23.1mL)。将反应在120℃下在N2下搅拌12h。将残余物倒入水(600mL)中。用乙酸乙酯(300mL*3)萃取水相。将合并的有机相用盐水(200mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至1/1)纯化，得到呈黄色固体的2-甲氧基-7-氧代-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(12.0g，36.1mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.70(d,J＝8.4Hz,1H),6.98(d,J＝8.4Hz,1H),4.23(s,2H),4.03(s,3H),2.99-3.06(m,2H),2.95(s,2H),1.91-1.99(m,2H),1.48(s,9H),1.38-1.43(m,2H)。
步骤e：在室温下在N2下向2-甲氧基-7-氧代-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(12.0g，36.1mmol)和Ti(OEt)4(71.9mL，347mmol)于2-MeTHF(84mL)中的溶液中添加(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(17.5g，144mmol)。将反应在90℃下搅拌16h。将残余物倒入水(300mL)中。过滤混悬液并用乙酸乙酯(150mL*3)萃取滤液。将合并的有机相用盐水(100mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至0/1)纯化，得到呈黄色固体的(7Z)-2-甲氧基-7-{[(R)-2-甲基丙烷2-亚磺酰基]亚氨基}-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(8.00g，18.4mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.61-7.64(m,1H),6.86-6.89(m,1H),4.12(s,2H),4.03(s,3H),2.89-3.00(m,4H),2.10-2.17(m,1H),1.90-1.98(m,1H),1.44-1.43(m,12H),1.25-1.32(m,9H)。
步骤f：在0℃下在N2下向(7Z)-2-甲氧基-7-{[(R)-2-甲基丙烷2-亚磺酰基]亚氨基}-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(8.00g，18.4mmol)于THF(56mL)中的溶液中添加NaBH4(2.08g，55.1mmol)。将反应在室温下搅拌1h。将残余物倒入水(100mL)中。用乙酸乙酯(75mL*3)萃取水相。将合并的有机相用盐水(75mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至0/1)纯化，得到呈黄色固体和呈非对映异构体3/2混合物的2-甲氧基-7-{[(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基}-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(2.00g，4.55mmol)，其不经进一步纯化即使用。LCMS m/z[M+H]+＝438.1。
步骤g：在室温下向于甲醇(20mL)中的2-甲氧基-7-{[(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]氨基}-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(875mg，2mmol)的非对映异构体的3/2混合物中滴加HCl溶液(4M于二噁烷中，3mL，12mmol)。将混合物搅拌4h，然后真空浓缩，得到呈黄色固体和对映异构体的混合物的2-甲氧基-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-7-胺盐酸盐(800mg，粗品)，其不经进一步纯化即使用。LCMS m/z[M+H]+＝234.2。
实施例i-19.中间体B-10(3-氨基螺[茚满-2,4'-哌啶]-5-甲腈盐酸盐)
步骤a：在-78℃下在Ar下向1-boc-4-氰基哌啶(2.0g，9.51mmol)于无水THF(20mL)中的溶液中滴加LDA(2M，7mL，14mmol)。添加后，将混合物在该温度下搅拌1h，并在-78℃下滴加3-溴-4-(溴甲基)苄腈(2.65g，9.64mmol)。将所得混合物在-78℃下搅拌3h，然后使其升温至0℃。通过添加饱和NH4Cl水溶液(10mL)淬灭反应混合物，然后用EtOAc(50mL*2)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝95/5至80/20)纯化，得到呈白色固体的4-[(2-溴-4-氰基-苯基)甲基]-4-氰基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.1g，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
步骤b：将粗制4-[(2-溴-4-氰基-苯基)甲基]-4-氰基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.1g)、DIPEA(4.5mL，26mmol)、Pd(AmPhos)2Cl2(0.35g，0.5mmol)于DMA(30mL)和H2O(5mL)中的混合物用Ar脱气3min，然后将混合物在140℃下搅拌2h。将反应冷却至室温，添加水(100mL)和EtOAc(100mL)，然后添加HCl水溶液(37％，3mL)。分离有机层并用EtOAc(100mL x2)萃取水层。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝95/5至80/20)纯化，得到呈白色固体的6-氰基-1-氧代-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.14g，3.49mmol)。
步骤c：将6-氰基-1-氧代-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(680mg，2.08mmol)、Ti(OEt)4(6.0mL，28.62mmol)和(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(770mg，6.35mmol)的混合物在100℃下搅拌1h，然后在室温下搅拌16h。添加水和二氯甲烷，将混合物在疏水筒柱(液/液萃取柱，上过滤，然后真空浓缩。将残余物溶解于乙醚和水中，分离有机层，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到呈黄色固体的粗制(1Z)-1-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-6-氰基-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(806mg)，其不经进一步纯化即使用。
步骤d：向在-50℃冷却的粗制(1Z)-1-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-6-氰基-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(250mg)于无水THF(7mL)中的混合物中一次性添加NaBH4(45mg，1.19mmol)。将反应混合物在-50℃下搅拌30min，然后使其升温至0℃。缓慢添加NH4Cl饱和水溶液(3mL)，然后添加水(20mL)和乙酸乙酯(20mL)。分离有机层并用乙酸乙酯萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到呈非对映异构体混合物的粗制1-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-6-氰基-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(260mg)，其不经进一步纯化。
步骤e：在0℃下向粗制1-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-6-氰基-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(260mg)于二氯甲烷(4mL)和甲醇(1mL)中的混合物中滴加HCl溶液(4M于二噁烷中，0.85mL，3.4mmol)。将混合物在室温下搅拌16h，添加乙醚并将混合物过滤，得到呈白色固体、对映异构体混合物的3-氨基螺[茚满-2,4'-哌啶]-5-甲腈盐酸盐(140mg，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
实施例i-20.中间体B-11((R)-2-甲基-N-[(7S)-螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-7-基]丙烷-2-亚磺酰胺)
步骤a：在室温下在N2下向3-溴-4-吡啶甲醇(40.0g，212mmol)于DCM(200mL)中的溶液中添加DMF(1.64mL，21.2mmol)，然后滴加SOCl2(30.8mL，425mmol)。将混合物在35℃下搅拌4h。在10℃下通过添加NaHCO3水溶液(500mL)淬灭反应混合物，并用EtOAc(100mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到呈黄色油状物的3-溴-4-(氯甲基)吡啶(35.4g，171mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.72(s,1H),8.54(d,J＝4.8Hz,1H),7.46(d,J＝4.8Hz,1H),4.63(s,2H)。
步骤b：在-78℃下向1-boc-4-氰基哌啶(36.0g，171mmol)于THF(720mL)中的溶液中滴加LDA(2M，111mL，222mmol)。添加后，将混合物在该温度下搅拌1h，然后滴加3-溴-4-(氯甲基)吡啶(35.4g，171mmol)。将所得混合物在-78℃下搅拌2h。在0℃下通过添加NH4Cl水溶液(500mL)淬灭反应混合物，并用EtOAc(200mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至0/1)纯化，得到呈灰白色固体的4-[(3-溴-4-吡啶基)甲基]-4-氰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(32.2g，84.6mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.76(s,1H),8.51(d,J＝4.8Hz,1H),7.46(d,J＝4.8Hz,1H),4.17(s,2H),3.10(s,2H),2.99(s,2H),1.85-1.88(m,2H),1.64-1.71(m,2H),1.46(s,9H)。
步骤c：将4-[(3-溴-4-吡啶基)甲基]-4-氰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(32.0g，84.1mmol)、DIPEA(58.6mL，336mmol)、Pd(AmPhos)2Cl2(5.96g，8.41mmol)于DMA(436mL)和H2O(44mL)中的混合物用N2脱气，然后在100℃下在N2气氛下搅拌18h。在室温下通过添加H2O(700mL)淬灭反应混合物，并用EtOAc(200mL*7)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL*3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将粗产物在室温下用MTBE(80mL)研磨1h并过滤，得到呈白色固体的7-氧代-5,7-二氢螺[环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(21.0g，69.4mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.99(s,1H),8.72(d,J＝4.8Hz,1H),7.43(d,J＝4.8Hz,1H),4.09(s,2H),3.08(s,2H),2.97-3.03(m,2H),1.85-1.92(m,2H),1.46(s,9H),1.36-1.40(m,2H)。
步骤d：向7-氧代-5,7-二氢螺[环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(18.5g，61.2mmol)于2-MeTHF(130mL)中的溶液中添加Ti(OEt)4(76.1mL，367mmol)和(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(29.6g，244mmol)。将混合物在80℃下搅拌16h。通过添加H2O(200mL)淬灭反应混合物并过滤。用EtOAc(2.0L)洗涤滤饼，并用EtOAc(200mL*3)萃取水相。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将粗产物在室温下用MTBE(100mL)研磨30min，得到呈黄色固体的7-{[(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]亚氨基}-5,7-二氢螺[环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(20.0g，49.3mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.59(s,1H),8.64(d,J＝4.8Hz,1H),7.36(d,J＝4.8Hz,1H),4.13(s,2H),3.06(s,2H),2.94(s,2H),1.94-1.99(m,2H),1.47(s,9H),1.39-1.42(m,2H),1.33(s,9H)。
步骤e：在-78℃下在N2下向7-{[(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]亚氨基}-5,7-二氢螺[环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(20.0g，49.3mmol)于THF(140mL)中的溶液中滴加DIBAL-H(1M于甲苯中，98.6mL，98.6mmol)。将所得混合物在-78℃下搅拌3h。通过在0℃下添加NH4Cl水溶液(200mL)淬灭反应混合物并在室温下搅拌30min，接着过滤。用EtOAc(500mL)洗涤滤饼，并用EtOAc(100mL*3)萃取水相。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将粗产物在室温下用MTBE(80mL)研磨1h并过滤，得到呈灰白色固体的(7S)-7-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(14.0g，33.8mmol)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.55(s,1H),8.45-8.48(m,1H),7.17(s,1H),4.58(d,J＝9.6Hz,1H),4.02(d,J＝13.6Hz,1H),3.58(s,1H),2.68-3.07(m,4H),2.11(s,1H),1.74(s,2H),1.44-1.60(m,11H),1.28(s,9H)。
步骤f：在室温下向(7S)-7-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(900mg，2.14mmol)在二氯甲烷(7mL)中的混合物中添加TFA(1.64mL，21.4mmol)。将混合物搅拌1h并将混合物倒入2N NaOH水溶液中。将混合物在疏水筒柱(液/液萃取柱，上过滤，然后真空浓缩，得到呈白色固体的(R)-2-甲基-N-[(7S)-螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-7-基]丙烷-2-亚磺酰胺(663mg，2.09mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.43(s,1H),8.37(d,J＝4.9Hz,1H),7.25(d,J＝4.8Hz,1H),5.67(d,J＝10.2Hz,1H),4.42(d,J＝10.2Hz,1H),3.04(d,J＝16.6Hz,1H),2.85-2.89(m,2H),2.60-2.70(m,3H),1.78-1.85(m,1H),1.58-1.65(m,1H),1.37-1.40(m,1H),1.13-1.21(m,10H)。LCMS m/z[M+H]+＝308.1。
实施例i-21.中间体B-12((R)-2-甲基-N-[(3R)-螺[3H-苯并呋喃-2,4'-哌啶]-3-基]丙烷-2-亚磺酰胺)
步骤a：向2-氟苯甲醛(45.0g，362mmol)于DCM(225mL)中的溶液中添加1,3-丙二硫醇(36.3mL，362mmol)和I2(2.76g，10.9mmol)。将混合物在室温下搅拌4h。将残余物倒入Na2S2O3(180mL)和NaOH(150mL)的水溶液中。将混合物用DCM(180mL*3)萃取，将有机层经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至0/1)纯化，得到呈白色固体的2-(2-氟苯基)-1,3-二硫戊环(41.0g，191mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.62-7.63(m,1H),7.28-7.30(m,1H),7.17-7.19(m,1H),7.07-7.09(m,1H),5.57(s,1H),3.11-3.17(m,2H),2.92-2.97(m,2H),2.18-2.22(m,1H),1.95-1.99(m,1H)。
步骤b：在-78℃下在N2下向2-(2-氟苯基)-1,3-二硫戊环(18.0g，84.0mmol)于THF(90mL)中的混合物中缓慢添加LDA(2M于庚烷/THF中，84.0mL，168mmol)。然后将混合物在-20℃下搅拌30min，然后冷却至-78℃并添加4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(16.7g，84.0mmol)。将混合物在-78℃下搅拌2h。通过添加NH4Cl水溶液(180mL)淬灭混合物。用EtOAc(180mL*3)萃取混合物。将有机层经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝30/1至0/1)纯化，得到呈黄色固体的4-[2-(2-氟苯基)-1,3-二噻烷-2-基]-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(16.0g，38.7mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.04-8.08(m,1H),7.34-7.36(m,1H),7.19-7.22(m,1H),7.09-7.13(m,1H),3.92(d,J＝12Hz,2H),2.99-3.00(m,2H),2.82-2.86(m,2H),2.64-2.68(m,2H),2.60(s,1H),1.85-1.90(m,2H),1.77(s,4H),1.42(s,9H)。
步骤c：将4-[2-(2-氟苯基)-1,3-二噻烷-2-基]-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(10.0g，24.2mmol)、TBAB(2.34g，7.25mmol)、Py.HBr3(11.6g，36.3mmol)和吡啶(5.85mL，72.5mmol)于DCM(10mL)和H2O(2.5mL)中的混合物在室温下搅拌8h。添加水(50mL)并将混合物用DCM(50mL*3)萃取，将有机层经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至0/1)纯化，得到呈白色固体的4-(2-氟苯甲酰基)-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(7.5g，23.2mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.36-7.50(m,1H),7.35-7.36(m,1H),7.23-7.25(m,1H),7.15-7.17(m,1H),4.04(d,J＝12Hz,2H),3.31(s,1H),3.12-3.20(m,2H),1.98-2.03(m,2H),1.64(d,J＝12.0Hz,2H),1.45(s,9H)。
步骤d：将4-(2-氟苯甲酰基)-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(13.0g，40.2mmol)和t-BuOK(4.96g，44.2mmol)于二噁烷(65mL)中的混合物在室温下在N2下搅拌2h。添加水(65mL)并将混合物用EtOAc(65mL*3)萃取，将有机层经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将粗产物用石油醚/乙酸乙酯＝50/1研磨，过滤并将滤饼减压干燥，得到呈白色固体的3-氧代-3H-螺[1-苯并呋喃-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(5.80g，19.1mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.36-7.507.63-7.69(m,2H),7.08-7.14(m,2H),4.15(d,J＝12Hz,2H),3.21-3.28(m,2H),1.91-1.99(m,2H),1.58(d,J＝12Hz,2H),1.49(s,9H)。
步骤e：将3-氧代-3H-螺[1-苯并呋喃-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(4.78g，15.8mmol)和(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(11.5g，94.5mmol)于Ti(OEt)4(23.9mL)中的混合物在80℃在N2下搅拌2h。将混合物用水(75mL)和EtOAc(30mL*3)萃取，将有机层经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝20/1至0/1)纯化，得到呈白色固体的(3R)-3-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基]螺[3H-苯并呋喃-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(4.68g，11.53mmol)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.33(d,J＝8Hz,1H),7.51-7.55(m,1H),7.03-7.08(m,2H),4.17(s,1H),3.20(s,2H),1.93-1.96(m,2H),1.71-1.74(m,1H),1.64(d,J＝12Hz,1H),1.50(s,9H),1.31(s,9H)。
步骤f：向(3R)-3-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基]螺[3H-苯并呋喃-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(7.50g，18.5mmol)于THF(40mL)中的混合物中滴加DIBAL-H(1M，73.8mL，73.8mmol)。将混合物在-78℃下在N2下搅拌45min，然后通过在-78℃下添加水(120mL)淬灭，然后使其升温至室温。将混合物用EtOAc(40mL*3)萃取，将有机层经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝15/1至0/1)纯化，然后将粗产物用石油醚/乙酸乙酯＝15/1在室温下研磨，过滤并将滤饼减压干燥，得到呈白色固体的(3R)-3-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]螺[3H-苯并呋喃-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(2.26g，5.55mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.23-7.29(m,2H),6.90-6.94(m,1H),6.82(d,J＝8Hz,1H),4.63(d,J＝8.0Hz,1H),4.10(s,2H),3.66(s,1H),3.17(s,2H),1.69-2.01(m,4H),1.47(s,9H),1.26(s,9H)。
步骤g：在室温下向(3R)-3-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]螺[3H-苯并呋喃-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.5g，3.67mmol)于二氯甲烷(10mL)中的混合物中添加TFA(2.81mL，36.7mmol)。将混合物搅拌2h并将混合物倒入2N NaOH水溶液中。将混合物在疏水筒柱(液/液萃取柱，上过滤，然后真空浓缩，得到呈灰白色固体的(R)-2-甲基-N-[(3R)-螺[3H-苯并呋喃-2,4'-哌啶]-3-基]丙烷-2-亚磺酰胺(1.13g，3.66mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.25(d,J＝7.4Hz,1H),7.16-7.20(m,1H),6.85-6.89(m,1H),6.78(d,J＝8.0Hz,1H),5.97(d,J＝10.3Hz,1H),4.52(d,J＝10.3Hz,1H),2.75-2.90(m,4H),1.58-1.85(m,4H),1.18(s,9H)。LCMS m/z[M+H]+＝309.5。
实施例i-22.中间体B-13((R)-2-甲基-N-[(3R)-螺[3H-呋喃并[2,3-b]吡啶-2,4'-哌啶]-3-基]丙烷-2-亚磺酰胺)
步骤a：在室温下向2-氟烟醛(48.0g，384mmol)和1,3-丙二硫醇(42.4mL，422mmol)于DCM(240mL)中的溶液中滴加BF3.Et2O(47.0％纯度，31.2mL，119mmol)。将所得混合物在室温下搅拌16h。将反应用饱和NaHCO3水溶液(300mL)淬灭并用DCM(150mL*3)萃取。将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至0/1)纯化，得到呈无色油状物的3-(1,3-二噻烷-2-基)-2-氟吡啶(46.0g，214mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.15(d,J＝4.0Hz,1H),8.01-8.05(m,1H),7.20-7.27(m,1H),5.44(s,1H),3.09-3.16(m,2H),2.92-2.96(m,2H)2.18-2.23(m,1H),1.93-1.96(m,1H)。
步骤b：在-78℃下向3-(1,3-二噻烷-2-基)-2-氟吡啶(30.0g，138.9mmol)于THF(150mL)中的溶液中滴加LDA(2M，146.4mL，292.8mmol)。将混合物在-20℃下搅拌1h。在-78℃下添加4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(55.5g，278.7mmol)于THF(60mL)中的溶液。将反应在-78℃下搅拌1h。在0℃下将反应混合物倒入NH4Cl水溶液(300mL)中。用乙酸乙酯(200mL*3)萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至0/1)纯化，得到呈白色固体的4-[2-(2-氟吡啶-3-基)-1,3-二噻烷-2-基]-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(21.0g，50.7mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.49-8.54(m,1H),8.21(d,J＝4.0Hz,1H),7.27-7.31(m,1H),3.94(d,J＝12Hz,2H),2.98-2.99(m,2H),2.84-2.88(m,2H),2.57-2.61(m,2H),1.88-1.92(m,2H),1.74-1.81(m,4H),1.43(s,9H)。
步骤c：向4-[2-(2-氟吡啶-3-基)-1,3-二噻烷-2-基]-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(13.5g，32.6mmol)于H2O(14.0mL)和DCM(70.0mL)中的溶液中添加TBAB(3.15g，9.77mmol)、吡啶(3.15mL，39.1mmol)和Py.HBr3(12.5g，39.1mmol)。将混合物在室温下搅拌10h。在0℃下将残余物倒入H2O(300mL)中。将水相用DCM(150mL*3)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至0/1)纯化，得到呈黄色油状物的4-(2-氟吡啶-3-羰基)-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(14.3g，44.1mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.34(d,J＝4.0Hz,1H),7.88-7.92(m,1H),7.30-7.33(m,1H),4.03(d,J＝12.0Hz,2H),3.11-3.19(m,2H),1.98-2.02(m,2H),1.68(d,J＝12.0Hz,2H),1.45(s,9H)。
步骤d：在室温下向4-(2-氟吡啶-3-羰基)-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(14.3g，44.1mmol)于二噁烷(70mL)中的溶液中添加t-BuOK(5.44g，48.5mmol)。将反应在室温下搅拌2h。在0℃下将残余物倒入H2O(200mL)中。用乙酸乙酯(100mL*3)萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将粗产物用石油醚/乙酸乙酯＝50/1(25.0mL)在室温下研磨30min，得到呈黄色固体的3-氧代螺[呋喃并[2,3-b]吡啶-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(9.20g，30.2mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.61-8.62(m,1H),8.04-8.06(m,1H),7.13-7.16(m,1H),4.16(s,2H),3.27-3.33(m,2H),1.95-2.04(m,2H),1.65(d,J＝12Hz,2H),1.49(s,9H)。
步骤e：在室温下在N2下向3-氧代螺[呋喃并[2,3-b]吡啶-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(9.2g，30.2mmol)于2-MeTHF(94mL)中的混合物中添加(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(22.0g，181.4mmol)和Ti(OEt)4(25mL，121mmol)。将混合物在85℃下搅拌2h。将反应物倒入水(80mL)中。过滤混悬液并用乙酸乙酯(30.0mL*3)萃取滤液。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至0/1)纯化，得到呈黄色固体的(3R)-3-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基]螺[3H-呋喃并[2,3-b]吡啶-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(10.2g，25.0mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.79(d,J＝4Hz,1H),8.43-8.44(m,1H),7.06-7.09(m,1H),4.11-4.19(m,2H),3.26(s,2H),1.89-2.04(m,2H),1.77-1.81(m,2H),1.50(s,9H),1.33(s,9H)。
步骤f：在-78℃下向(3R)-3-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基]螺[3H-呋喃并[2,3-b]吡啶-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(6.00g，14.7mmol)于THF(30.0mL)中的溶液中滴加DIBAL(1M，58.9mL，58.9mmol)。将混合物在-78℃下搅拌1h。在-20℃下将混合物倒入H2O(50mL)中。用乙酸乙酯(30.0mL*3)萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至0/1)纯化，得到呈白色固体的(3R)-3-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]螺[3H-呋喃并[2,3-b]吡啶-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(3.07g，7.51mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.12(d,J＝4.0Hz,1H),7.63(d,J＝8.0Hz,1H),6.86-6.89(m,1H),4.66(d,J＝8.0Hz,1H),4.11(s,2H),3.76(d,J＝8.0Hz,1H),3.23(s,2H),1.89-1.99(m,2H),1.71-1.79(m,2H),1.46(s,9H),1.25(s,9H)。
步骤g：在室温下向(3R)-3-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]螺[3H-呋喃并[2,3-b]吡啶-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(300mg，0.73mmol)于二氯甲烷(2mL)中的混合物中添加TFA(0.56mL，7.33mmol)。将混合物搅拌2h并将混合物倒入2N NaOH水溶液中。将混合物在疏水筒柱(液/液萃取柱，上过滤，然后真空浓缩，得到呈白色固体的(R)-2-甲基-N-[(3R)-螺[3H-呋喃并[2,3-b]吡啶-2,4'-哌啶]-3-基]丙烷-2-亚磺酰胺(225mg，0.73mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.04(m,1H),7.65(m,1H),6.92(m,1H),6.10(d,J＝10.3Hz,1H),4.57(d,J＝10.3Hz,1H),2.78-2.94(m,4H),1.65-1.88(m,4H),1.17(s,9H)。LCMS m/z[M+H]+＝310.5。
实施例i-23.中间体B-14((4S)-4-(叔丁基亚磺酰基氨基)-2-氯-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯)
步骤a：在-78℃下向哌啶-1,4-二甲酸1-叔丁基4-乙酯(90g，350mmol)于THF(500mL)中的溶液中滴加LDA(2M，192.4mL，384.8mmol)。将混合物在-78℃下搅拌1h。然后在-78℃下滴加2-氯-5-(氯甲基)-1,3-噻唑(58.8g，350mmol)。将反应在-78℃下搅拌1h。然后将反应在室温下搅拌12h。将反应物倒入水(800mL)中，用石油醚/乙酸乙酯(1/1，500mL*3)萃取，将合并的有机层用盐水(500mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至0/1)纯化，得到呈黄色油状物的4-((2-氯噻唑-5-基)甲基)哌啶-1,4-二甲酸1-(叔丁基)4-乙酯(50.0g，129mmol)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δδ7.14(s,1H),4.10(q,J＝6.8Hz,2H),3.80(d,J＝11.2Hz,2H),2.88-2.93(m,4H),2.04(d,J＝13.6Hz,2H),1.38(s,9H),1.33-1.36(m,2H),1.19(t,J＝7.2Hz,3H)。
步骤b：在-78℃下向4-((2-氯噻唑-5-基)甲基)哌啶-1,4-二甲酸1-(叔丁基)4-乙酯(50.0g，128.6mmol)于THF(500mL)中的溶液中添加LDA(2M，160.8mL，321.6mmol)。将混合物在-78℃下搅拌1h。将反应物缓慢倒入水(1.0L)中，用EtOAc(200mL*3)萃取，将合并的有机层用盐水(500mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝20/1至0/1)纯化，得到呈黄色固体的2-氯-4-氧代-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(14.0g，40.8mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.08-4.16(m,2H),3.10(s,2H),2.97(t,J＝12.4Hz,2H),1.92-2.00(m,2H),1.43-1.47(m,12H)。
步骤c：将2-氯-4-氧代-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(10.0g，29.2mmol)和(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(10.6g，87.5mmol)于Ti(OEt)4(70mL)中的混合物用N2脱气，然后将混合物在100℃下在N2下搅拌16h。将反应物倒入水(200mL)和EtOAc(200mL)中，将混悬液过滤，将滤液用EtOAc(200mL*3)萃取，将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝30/1至0/1)纯化，得到呈黄色固体的(R,Z)-4-((叔丁基亚磺酰基)亚氨基)-2-氯-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(10.72g，24.03mmol)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ4.02-4.11(m,2H),3.02(d,J＝4.8Hz,2H),2.85(br s,2H),2.03-2.11(m,1H),1.92-1.96(m,1H),1.45-1.57(m,2H),1.41(s,9H),1.20(s,9H)。
步骤d：在-78℃下向(R,Z)-4-((叔丁基亚磺酰基)亚氨基)-2-氯-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(10.0g，22.4mmol)于THF(50mL)中的溶液中滴加DIBAL-H(1M，89.7mL，89.7mmol)。将混合物在-78℃下搅拌1h。通过在0℃以下滴加H2O(30mL)淬灭反应，将混合物在室温下搅拌12h。将混悬液过滤，将滤液用EtOAc(30mL*2)萃取，将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝5/1至0/1)纯化，得到呈黄色固体的(4S)-4-(叔丁基亚磺酰基氨基)-2-氯-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(6.0g，13.4mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.32(d,J＝9.2Hz,1H),3.84(d,J＝13.6Hz,2H),2.96-3.03(m,2H),2.69-2.78(m,2H),1.79-1.92(m,2H),1.44-1.55(m,2H),1.39(s,9H),1.18(s,9H)。
实施例i-24.中间体B-15((4S)-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-4-胺盐酸盐)
步骤a：在N2下向中间体B-14(6.0g，13.4mmol)于MeOH(30mL)和TEA(6mL)中的溶液中添加Pd/C(10％，3g)。将混悬液真空脱气并用H2吹扫数次。将混合物在50℃下在H2(40psi)下搅拌2h。过滤混悬液，真空浓缩滤液。将残余物用柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝5/1至0/1)纯化，得到呈灰白色固体的(4S)-4-((R)-叔丁基亚磺酰基氨基)螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(2.74g，6.47mmol)。1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.87(s,1H),4.37(s,1H),3.87-3.98(m,2H),3.09-3.19(m,2H),2.94(q,J＝9.2Hz,2H),1.89-1.93(m,1H),1.47-1.76(m,3H),1.26(s,9H),1.23(s,9H)。
步骤b：在室温下向(4S)-4-((R)-叔丁基亚磺酰基氨基)螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.5g，3.6mmol)于二氯甲烷(25mL)中的混合物中滴加HCl溶液(2.5M于乙醇中，25mL，62.5mmol)。将混合物搅拌3h，然后真空浓缩。将残余物溶解于二氯甲烷(50mL)中，过滤，用二异丙醚(30mL)洗涤，然后用戊烷(30mL)洗涤，得到(4S)-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-4-胺盐酸盐(1.2g，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
实施例i-25.中间体B-16((4S)-2-氯螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-4-胺盐酸盐)
将中间体B-14(1.5g，3.3mmol)于HCl溶液(2.5M于乙醇中，15mL，37.5mmol)中的混合物搅拌3h，然后真空浓缩。将残余物溶解于EtOAc(10mL)和二异丙醚(10mL)中，过滤，用二异丙醚洗涤，然后用戊烷洗涤，得到((4S)-2-氯螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-4-胺盐酸盐(1.04g，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
实施例i-26.中间体B-17((6S)-6-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-2-氯-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯)
步骤a：在-78℃下向哌啶-1,4-二甲酸1-叔丁基4-乙酯(50.0g，194mmol)于THF(350mL)中的溶液中滴加LDA(2M，117mL，234mmol)。将混合物在-78℃下搅拌1h。然后在-78℃下滴加2-氯-4-(氯甲基)噻唑(31.0g，185mmol)。将反应在-78℃下搅拌1h。然后将反应在室温下搅拌12h。将反应物倒入水(100mL)中，用石油醚/乙酸乙酯(1/1，50mL*3)萃取，将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至0/1)纯化，得到呈黄色油状物的4-((2-氯噻唑-4-基)甲基)哌啶-1,4-二甲酸1-(叔丁基)4-乙酯(20.0g，51.5mmol)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ6.80(s,1H),4.15(q,J＝7.2Hz,2H),3.89(br s,2H),2.80-2.94(m,3H),2.11(d,J＝13.2Hz,2H),1.50-1.52(m,2H),1.45(s,9H),1.24(t,J＝7.2Hz,3H)。
步骤b：在-78℃下向4-((2-氯噻唑-4-基)甲基)哌啶-1,4-二甲酸1-(叔丁基)4-乙酯(30g，77.14mmol)于THF(210mL)中的溶液中滴加LDA(2M，57.9mL，115.8mmol)。将混合物在-78℃下搅拌1h。将反应物缓慢倒入盐水(200mL)中并用EtOAc(100mL*3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至0/1)纯化，得到呈黄色固体的2-氯-6-氧代-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(13.0g，37.9mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.09(d,J＝13.2Hz,2H),2.98(s,2H),2.88(t,J＝8.0Hz,2H),1.86-1.93(m,2H),1.41-1.44(m,10H)。
步骤c：向2-氯-6-氧代-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(13.0g，37.9mmol)于Ti(OEt)4(65mL)中的溶液中添加(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(13.8g，114mmol)。将混合物在100℃下搅拌16h，然后使其冷却至室温。将反应物倒入水(50mL)和EtOAc(50mL)中，将混悬液过滤，将滤液用EtOAc(20mL*3)萃取，将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到呈黄色油状物的(R,Z)-6-((叔丁基亚磺酰基)亚氨基)-2-氯-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(11.0g，24.7mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.06-4.13(m,2H),2.80-2.92(m,4H),1.84-2.01(m,3H),1.41(s,9H),1.16(s,9H)。
步骤d：在-78℃下向6-(((R)-叔丁基亚磺酰基)亚氨基)-2-氯-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(12.0g，26.9mmol)于THF(60mL)中的溶液中滴加DIBAL-H(1M，108mL，108mmol)。将混合物在-78℃下搅拌1h。通过在0℃以下滴加H2O(50mL)淬灭反应，将混合物在室温下搅拌12h。将混悬液过滤，将滤液用EtOAc(50mL*2)萃取，将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝5/1至0/1)纯化，得到呈黄色固体的(6S)-6-(((R)叔丁基亚磺酰基)氨基)-2-氯-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(7.00g，15.6mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.49(d,J＝8.8Hz,1H),3.95-3.98(m,2H),3.61(d,J＝7.2Hz,1H),2.79-3.30(m,4H),1.73-1.84(m,2H),1.54-1.61(m,2H),1.44(s,9H),1.19(s,9H)。
实施例i-27.中间体B-18((6S)-2-氯螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-胺盐酸盐)
将中间体B-17(0.81g，2.3mmol)于HCl溶液(4M于二噁烷中，15mL，60mmol)中的混合物在室温下搅拌24h。然后将混合物过滤，用二异丙醚洗涤，得到呈黄色固体的(6S)-2-氯螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-胺盐酸盐(813mg，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
实施例i-28.中间体B-19((6S)-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-胺盐酸盐)
步骤a：在N2下向中间体B-17(7.00g，15.6mmol)于MeOH(35mL)和TEA(7mL)中的溶液中添加Pd/C(10％，3.00g，15.6mmol)。将混悬液真空脱气并用H2吹扫数次。将混合物在50℃下在H2(40psi)下搅拌5h。过滤混悬液，真空浓缩滤液。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝5/1至0/1)纯化，得到呈白色固体的(6S)-6-(((R)叔丁基亚磺酰基)氨基)-2-氯-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(4.5g，10.8mmol)。1HNMR(400MHz,MeOD)δ8.98(s,1H),4.57(s,1H),3.94-4.03(m,2H),3.04-3.13(m,2H),2.90(q,J＝15.6Hz,2H),1.86-1.91(m,1H),1.76-1.77(m,1H),1.64-1.68(m,2H),1.47(s,9H),1.24(s,9H)。
步骤b：将(6S)-6-(((R)叔丁基亚磺酰基)氨基)-2-氯-4,6-二氢螺[环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(500mg，1.21mmol)于HCl溶液(2.5M于乙醇中，10mL，25mmol)中的混合物在室温下搅拌3h。然后真空浓缩混合物。将残余物溶解于乙酸乙酯(30mL)中，过滤，用二异丙醚(30mL)洗涤，然后用戊烷(30mL)洗涤，得到(6S)-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-胺盐酸盐(320mg，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
实施例i-29.中间体B-20((6S)-2-甲基螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-胺盐酸盐)
步骤a：在N2气氛下，向中间体B-17(2.50g，5.58mmol)、三甲基环三硼氧烷(50％纯度，2.34mL，8.37mmol)和K2CO3(1.54g，11.2mmol)于二噁烷(5mL)中的混合物中添加Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(227mg，0.28mmol)。将混合物在115℃下搅拌2h。过滤混悬液，真空浓缩滤液。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10/1至0/1)纯化，得到呈浅黄色固体的(6S)-6-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基]-2-甲基-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(3.00g，7.02mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.49(d,J＝8.4Hz,1H),3.99(s,2H),3.54(s,1H),2.96-3.04(m,2H),2.81(s,2H),2.73(s,3H),1.73-1.84(m,2H),1.58-1.63(m,2H),1.46(s,9H),1.21(s,9H)。
步骤b：将(6S)-6-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-2-甲基-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.0g，2.3mmol)于HCl溶液(4M于二噁烷中，15mL，60mmol)中的混合物在室温下搅拌24h。然后将混合物过滤并用二异丙醚洗涤，得到呈白色固体的(6S)-2-甲基螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-胺盐酸盐(763mg，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
实施例i-30.中间体B-21((5S)-2-甲基螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺盐酸盐)
步骤a：在75℃下在N2下向3-溴-2,6-二甲基吡啶(160g，860mmol)于CHCl3(1.12L)中的溶液中添加NBS(184g，1.03mol)和AIBN(42.4g，258mmol)并且将混合物搅拌4h。将残余物倒入水(500mL)中。将水相用DCM(350mL*3)萃取。将合并的有机相用盐水(200mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/0至0/1)纯化，得到呈褐色油状物的化合物3-溴-2-(溴甲基)-6-甲基吡啶(33.3g，119.5mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.74(d,J＝8.4Hz,1H),6.98(d,J＝8.4Hz,1H),4.68(s,2H),2.53(s,3H)。
步骤b：在-78℃下在N2下向哌啶-1,4-二甲酸1-叔丁基4-甲酯(21.0g，86.3mmol)于THF(91.0mL)中的混合物中滴加LDA(2.00M，64.7mL，129.4mmol)。然后将混合物在室温下搅拌1h。添加3-溴-2-(溴甲基)-6-甲基吡啶(32.3g，104mmol)并将混合物搅拌2h。将反应混合物倒入水(200mL)中。用乙酸乙酯(100mL*3)萃取水相。将合并的有机相用盐水(100mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至0/1)纯化，得到呈黄色油状物的4-((3-溴-6-甲基-2-吡啶基)甲基)哌啶-1,4-二甲酸1-(叔丁基)4-甲酯(17.0g，39.0mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.66(d,J＝8.4Hz,1H),6.85(d,J＝8.4Hz,1H),3.82(s,2H),3.72(s,3H),3.23(s,2H),3.03(t,J＝12Hz,2H),2.43(s,3H),2.09(d,J＝7.6Hz,2H),1.61(t,J＝2Hz,2H),1.46(s,9H)。
步骤c：在室温下向4-((3-溴-6-甲基-2-吡啶基)甲基)哌啶-1,4-二甲酸1-(叔丁基)4-甲酯(66.9g，157mmol)于H2O(134mL)和MeOH(468mL)中的混合物中添加NaOH(31.3g，783mmol)。将混合物在65℃下搅拌16h。将混合物浓缩至干，并将粗品用水(50mL)溶解并用MTBE(20mL)洗涤。分离水层并通过添加2N HCl水溶液达到pH6-7。将化合物用EtOAc(25mL*2)萃取。将合并的有机相用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到呈白色固体的1-(叔丁氧基羰基)-4-((3-溴-6-甲基-2-吡啶基)甲基)哌啶-4-甲酸(75.0g，粗品)。
步骤d：在-15℃下在N2下向粗制1-(叔丁氧基羰基)-4-((3-溴-6-甲基-2-吡啶基)甲基)哌啶-4-甲酸(75.0g)于THF(105mL)中的混合物中一次性添加NaH(60％，6.97g，174mmol)。将混合物在-15℃下搅拌15min，然后冷却至-60℃并滴加n-BuLi(1.79M，114mL，204mmol)，然后经30min将温度升高至-20℃。在0℃下通过添加水(350mL)淬灭反应混合物，并用乙酸乙酯(400mL*2)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至0/1)纯化，得到呈黄色油状物的2-甲基-5-氧代-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(11.0g，34.8mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.91(d,J＝3.2,1H),7.20(d,J＝4Hz,1H),4.12(s,2H),3.12(s,2H),3.01(t,J＝10.4Hz,2H),2.67(s,3H),1.92(t,J＝12Hz,2H),1.47(s,9H),1.41(d,J＝5.8Hz,2H)。
步骤e：将2-甲基-5-氧代-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(12.5g，39.5mmol)和(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(14.4g，119mmol)于Ti(OEt)4(87.5mL)中的混合物在110℃下搅拌11h，然后使其冷却至室温。通过添加水(100mL)淬灭反应混合物，然后过滤并用乙酸乙酯(100mL*2)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL*2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至0/1)纯化，得到呈白色固体的(5S)-5-((叔丁基亚磺酰基)亚氨基)-2-甲基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(18.5g，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
步骤f：在-78℃下向(5S)-5-((叔丁基亚磺酰基)亚氨基)-2-甲基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(18.5g，粗品)于THF(116mL)中的混合物中滴加DIBAL-H(1.00M，172mL，172mmol)。将混合物在-78℃下搅拌1h。通过在0℃下添加水(300mL)淬灭反应混合物并搅拌40min，然后过滤并用乙酸乙酯(200mL*2)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL*2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将粗产物在室温下用MTBE(100mL)研磨20min，过滤，得到呈白色固体的(5S)-5-((叔丁基亚磺酰基)氨基)-2-甲基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(2.90g，6.81mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.55(d,J＝3.6Hz,1H),7.01(d,J＝4Hz,1H),4.48(d,J＝4.4Hz,1H),4.01(d,J＝8.8Hz,2H),3.55(s,1H),3.11(s,1H),2.945(t,J＝10.4Hz,2H),2.84(d,J＝7.2Hz,1H),2.561(s,3H),2.03-2.05(m,1H),1.53(s,1H),1.49(s,1H),1.46(s,9H),1.35(s,1H),1.26(s,9H)。
步骤g：向(5S)-5-((叔丁基亚磺酰基)氨基)-2-甲基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.0g，2.37mmol)于二氯甲烷(5mL)中的混合物中添加HCl溶液(2.5M于乙醇中，15mL，38mmol)。将混合物在室温下搅拌3h，然后真空浓缩，得到呈黄色固体的(5S)-2-甲基螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺盐酸盐(1.045g，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
实施例i-31.中间体B-22(1-(三异丙基甲硅烷氧基甲基)螺[7H-环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-5-酮)
步骤a：在0℃下向(3-氯-2-吡啶基)甲醇(24.0g，167mmol)和TIPSCl(39.3mL，184mmol)于DCM(120mL)中的溶液中添加咪唑(22.7g，334mmol)，然后将混合物在室温下搅拌2h。添加水(100mL)并将混合物用DCM萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝1/0至0/1)纯化，得到呈无色油状物的3-氯-2-(三异丙基甲硅烷氧基甲基)吡啶(50.0g，167mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.48(dd,J＝4.4Hz,1.2Hz,1H),7.67(dd,J＝8.0Hz,1.2Hz,1H),7.17(dd,J＝8.0Hz,4.8Hz,1H),4.99(s,2H),1.16-1.22(m,3H),1.08-1.10(m,18H)。
步骤b：在-78℃下在N2下向3-氯-2-(三异丙基甲硅烷氧基甲基)吡啶(30.0g，100mmol)于THF(600mL)中的溶液中滴加LDA(2M，60.0mL，120mmol)，将混合物在-78℃下搅拌1.5h。将THF(30mL)中的4-甲酰基-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(22.7g，100mmol)添加到混合物中并将混合物在-78℃下搅拌1h。将混合物用水(1000mL)淬灭并用EtOAc(500mL*2)萃取，将有机层经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝1/0至0/1)纯化，得到呈白色固体的4-[[3-氯-2-(三异丙基甲硅烷氧基甲基)-4-吡啶基]-羟基-甲基]-4-甲基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(19.0g，36.0mmol)。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.45(d,J＝4.8Hz,1H),7.40(d,J＝5.2Hz,1H),4.96-5.05(m,3H),3.92(m,2H),2.81-2.89(m,2H),2.23(s,1H),1.79-1.82(m,1H),1.55-1.61(m,2H),1.45(s,9H),1.17-1.20(m,4H),1.06-1.09(m,18H),1.03(s,3H)。
步骤c：向4-[[3-氯-2-(三异丙基甲硅烷氧基甲基)-4-吡啶基]-羟基-甲基]-4-甲基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(10.0g，19.0mmol)于MeCN(150mL)和DCM(50mL)中的溶液中添加IBX(10.6g，37.9mmol)，将混合物在65℃下搅拌12h。添加水(100mL)并将混合物用DCM(100mL)萃取，将有机层经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝1/0至0/1)纯化，得到呈无色油状物的4-[3-氯-2-(三异丙基甲硅烷氧基甲基)吡啶-4-羰基]-4-甲基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(9.00g，17.1mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.52(d,J＝5.2Hz,1H),6.99(d,J＝4.8Hz,1H),5.01(s,2H),3.69-3.73(m,2H),3.20-3.27(m,2H),1.96-2.02(m,2H),1.50-1.53(m,2H),1.46(s,9H),1.34(s,3H),1.15-1.21(m,3H),1.07-1.09(m,18H)。
步骤d：将4-[3-氯-2-(三异丙基甲硅烷氧基甲基)吡啶-4-羰基]-4-甲基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(8.50g，16.2mmol)、Cs2CO3(6.33g，19.4mmol)、三环己基膦四氟硼酸盐(596mg，1.62mmol)和特戊酸(496mg，4.86mmol)于均三甲苯(59.5mL)中的混合物用N2脱气，然后添加Pd(OAc)2(182mg,0.81mmol)。将溶液在160℃下搅拌4h。将混合物冷却至室温并添加水(100mL)。将混合物用EtOAc(200mL)萃取，将有机层分离，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝1/0至0/1)纯化，得到呈黄色固体的5-氧代-1-(三异丙基甲硅烷氧基甲基)螺[7H-环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(6.03g，12.0mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.59(d,J＝4.8Hz,1H),7.50(d,J＝4.8Hz,1H),5.10(s,2H),4.14(s,2H),3.33(s,2H),2.98-3.04(m,2H),1.86-1.92(m,2H),1.49(s,9H),1.35-1.42(m,2H),1.11-1.23(m,3H),1.08-1.10(m,18H)。
步骤e：向5-氧代-1-(三异丙基甲硅烷氧基甲基)螺[7H-环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.0g，2.05mmol)于二氯甲烷(10mL)中的溶液中添加TFA(1.6mL，21.6mmol)。将混合物在室温下搅拌18h。添加二氯甲烷(20mL)和水(20mL)，用35％ NaOH水溶液将水相的pH值调节至11-12，并将混合物在疏水筒柱(液/液萃取柱，上过滤，然后真空浓缩，得到呈橙色油状物的1-(三异丙基甲硅烷氧基甲基)螺[7H-环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-5-酮(739mg，1.9mmol)。LCMS m/z[M+H]+389.7。
实施例i-32.中间体B-23((R)-N-[(7S)-3-(羟甲基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-7-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺)
步骤a：在0℃下向5-溴-2-甲基吡啶(70.0g，406mmol)于DCM(420mL)中的混合物中添加m-CPBA(85％纯度，99.1g，488mmol)并且在室温下搅拌12h。将反应混合物倒入Na2SO3水溶液中。将混合物搅拌10min，然后添加NaHCO3水溶液。分离水层，然后用DCM萃取，将有机层经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到呈黄色固体的5-溴-2-甲基吡啶1-氧化物(77g，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
步骤b：在60℃下向5-溴-2-甲基吡啶1-氧化物(70.0g，粗品)于H2SO4(350mL)中的混合物中添加HNO3(83.7mL，1.86mol)。将混合物在90℃下搅拌4h。将合并的反应混合物倒入冰水(1L)中并用DCM(300mL*6)萃取，将有机层经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。在室温下用MTBE(100mL)研磨粗产物并过滤。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至0/1)纯化，得到呈黄色固体的5-溴-2-亚甲基-4-硝基-1,2-二氢吡啶1-氧化物(50g，214mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.53(s,1H),7.99(s,1H),2.50(s,3H)。
步骤c：向5-溴-2-亚甲基-4-硝基-1,2-二氢吡啶1-氧化物(50.0g，214mmol)于DCM(300mL)中的混合物中添加PCl3(59.8mL，643mmol)。将混合物在室温下搅拌12h，然后缓慢倒入水(750mL)中。分离水层，然后用DCM(300mL*3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将粗产物在室温下用MTBE(100mL)研磨并过滤，得到呈白色固体的5-溴-4-氯-2-甲基吡啶1-氧化物(35.7g，160mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.73(s,1H),7.85(s,1H),2.28(s,3H)。
步骤d：在0℃下在N2下向5-溴-4-氯-2-甲基吡啶1-氧化物(45.0g，202mmol)于CHCl3(225mL)中的混合物中添加TFAA(84.4mL，606mmol)。将混合物在60℃下搅拌12h。将反应混合物倒入水(500mL)中。用NaOH水溶液将水层的pH调节至pH约8并用DCM(500mL*3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至0/1)纯化，得到呈白色固体的(5-溴-4-氯-2-吡啶基)甲醇(27g，121mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.74(s,1H),7.66(s,1H),4.53(s,2H)。
步骤e：向(5-溴-4-氯-2-吡啶基)甲醇(15.0g，67.4mmol)于DCM(75mL)中的混合物中添加3,4-二氢吡喃(9.25mL，101mmol)和对甲苯磺酸一水合物(1.28g，6.74mmol)。将反应在室温下搅拌1h，然后倒入水(100mL)中。用NaHCO3水溶液将水层的pH调节至pH约7并用DCM(200mL*3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至0/1)纯化，得到呈无色油状物的5-溴-4-氯-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)吡啶(19.0g，61.9mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.65(s,1H),7.58(s,1H),4.83(d,J＝4.0Hz,1H),4.75-4.77(m,1H),4.56(d,J＝8.0Hz,1H),3.84-3.89(m,1H),3.54-3.57(m,1H),1.56-1.83(m,6H)。
步骤f：在0℃下在N2下向5-溴-4-氯-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)吡啶(19.0g，61.9mmol)于THF(47.5mL)中的混合物中添加i-PrMgCl-LiCl(1.30M，57.2mL，74.4mmol)。将混合物在0℃下搅拌2h，然后在0℃下添加4-甲酰基-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(16.9g，74.3mmol)于THF(47.5mL)中的溶液。将混合物在室温下搅拌1h，然后倒入NH4Cl水溶液(400mL)中并用乙酸乙酯(500mL*3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至0/1)纯化，得到呈黄色油状物的4-[[4-氯-6-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-3-吡啶基]-羟基-甲基]-4-甲基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(16.0g，35.1mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.68(s,1H),7.51(s,1H),4.97(d,J＝4.0Hz,1H),4.85-4.88(m,1H),4.78-4.97(m,1H),4.62-4.63(m,1H),3.88-3.93(m,3H),3.56-3.59(m,1H),2.82-2.89(m,2H),2.17(s,1H),1.80-1.89(m,1H),1.75-1.78(m,3H),1.58-1.64(m,5H),1.45(s,9H),1.05(s,3H)。
步骤g：在室温下在N2下向4-[[4-氯-6-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-3-吡啶基]-羟基-甲基]-4-甲基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(16.0g，35.1mmol))于MeCN(80mL)中的混合物中添加IBX(19.6g，70.3mmol)。将混合物在50℃下搅拌2h。过滤混合物，并减压浓缩过滤液。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至0/1)纯化，得到呈黄色油状物的4-[4-氯-6-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)吡啶-3-羰基]-4-甲基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(14.0g，30.9mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.36(s,1H),7.58(s,1H),4.89(d,J＝8.0Hz,1H),4.77-4.79(m,1H),4.63(d,J＝8.0Hz,1H),3.88-3.91(m,1H),3.56-3.60(m,3H),3.29-3.35(m,2H),1.99-2.06(m,2H),1.89-1.92(m,1H),1.71-1.81(m,2H),1.54-1.65(m,5H),1.45(s,9H),1.34(s,3H)。
步骤h：在室温下在N2下向4-[4-氯-6-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)吡啶-3-羰基]-4-甲基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(12.0g，26.4mmol)于均三甲苯(60mL)中的混合物中添加Pd(OAc)2(297mg，1.32mmol)、碳酸铯(10.3g，31.7mmol)、三环己基膦四氟硼酸盐(975mg，2.65mmol)和特戊酸(0.91mL，7.95mmol)。将混合物用N2脱气10min。然后将混合物在160℃下搅拌4h。将反应混合物倒入水(300mL)中并用乙酸乙酯(100mL*3)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至0/1)纯化，得到呈黄色固体的7-氧代-3-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)螺[5H-环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(6.90g，16.2mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.81(s,1H),7.68(s,1H),4.78-4.84(m,2H),4.66(d,J＝8.0Hz,1H),3.92-3.95(m,2H),3.76-3.81(m,1H),3.48-3.51(m,1H),3.19(s,2H),2.95(s,2H),1.71-1.78(m,2H),1.51-1.58(m,6H),1.41(s,9H),1.37-1.38(m,2H)。
步骤i：向7-氧代-3-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)螺[5H-环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.5g，3.6mmol)于2-MeTHF(4.5mL)中的溶液中添加Ti(OEt)4(4mL，18.0mmol)和(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.1g，9.0mmol)。将混合物在80℃下搅拌16h。添加水和二氯甲烷，将混合物在疏水筒柱(液/液萃取柱，上过滤。将有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝1/1至1/9)纯化，得到呈黄色蜡状物的外消旋-(7Z)-7-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-3-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)螺[5H-环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.3g，2.5mmol)。LCMS m/z[M+H]+520.4。
步骤j：在-78℃下在Ar下向外消旋-(7Z)-7-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-3-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)螺[5H-环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.3g，2.5mmol)于无水THF(25mL)中的溶液中滴加DIBAL-H(1M于甲苯中，5.3mL，5.3mmol)。将混合物在-78℃下搅拌3h。添加罗谢尔盐的浓缩水溶液(30mL)，然后添加乙酸乙酯(30mL)，将混合物在室温下搅拌1h。分离有机层并用乙酸乙酯萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝1/0至0/1，随后是乙酸乙酯/甲醇95/5)纯化，得到呈白色泡沫的(7S)-7-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-3-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.14g，2.19mmol)。LCMS m/z[M+H]+522.7。
步骤k：在0℃下向(7S)-7-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-3-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.13g，2.17mmol)于二氯甲烷(6mL)中的溶液中添加TFA(2.23mL，29.5mmol)。将混合物在室温下搅拌5h。添加二氯甲烷(10mL)和水(10mL)，用1N NaOH水溶液将水相的pH值调节至11-12，并将混合物在疏水筒柱(液/液萃取柱，上过滤，然后真空浓缩，得到呈米色蜡状物的(R)-N-[(7S)-3-(羟甲基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-7-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(0.43g，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
实施例i-33.中间体B-24((R)-2-甲基-N-[(7S)-螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-7-基]丙烷-2-亚磺酰胺)
步骤a：在-78℃下向1-boc-4-氰基哌啶(4.42g，20mmol)于THF(50mL)中的溶液中滴加LDA(1M THF:己烷，21.4mL，21.4mmol)。添加后，将混合物在该温度下搅拌1h，并滴加4-溴-5-(溴甲基)-2-甲基-吡啶(4.42g，15.8mmol)于THF(100mL)中的溶液。将所得混合物在-78℃下搅拌30min，然后使其达到室温过夜。在0℃下通过添加NH4Cl水溶液(100mL)淬灭反应混合物，并用EtOAc(50mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝6/4)纯化，得到呈白色固体的4-[(4-溴-6-甲基吡啶-3-基)甲基]-4-氰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(5.31g，13.5mmol)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.45(s,1H),7.63(s,1H),4.05(m,2H),3.10(s,2H),2.82(m,2H),2.45(s,3H),1.81-1.89(m,2H),1.62-1.71(m,2H),1.40(s,9H)。LCMS m/z[M+H]+394.1。
步骤b：将4-[(4-溴-6-甲基吡啶-3-基)甲基]-4-氰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(5.29g，13.4mmol)、DIPEA(6.94g，53.7mmol)、Pd(AmPhos)2Cl2(712mg，1.01mmol)于DMA(270mL)和H2O(30mL)中的混合物用N2脱气，然后将混合物在130℃下在N2气氛下搅拌18h。在室温下通过添加H2O(150mL)淬灭反应混合物，并用EtOAc(200mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL*3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝80/20)纯化，提供粗产物，将粗产物在iPr2O(50mL)中研磨，冰冻并过滤，得到呈米色固体的3-甲基-5-氧代螺[7H-环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(3.05g，9.64mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.82(s,1H),7.45(s,1H),3.88-3.99(m,2H),3.12(s,2H),2.89-3.07(m,2H),2.56(s,3H),1.53-1.63(m,2H),1.46(s,9H),1.39-1.40(m,2H)。LCMS m/z[M+H]+317.2。
步骤c：向3-甲基-5-氧代螺[7H-环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(3.04g，9.61mmol)于2-MeTHF(20mL)中的溶液中添加Ti(OEt)4(67％纯度，含有33％的TiO2，12mL，38.4mmol)和(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(2.38g，19.2mmol)。将混合物在90℃下搅拌16h。通过添加盐水(20mL)淬灭反应混合物，搅拌15min，然后在硅藻土上过滤。将滤液浓缩至干，得到黄色油状物，将其溶解于Et2O(50mL)中，并将有机层用盐水(20mL*3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将粗产物用iPr2O(30mL)研磨，冰冻并过滤，得到呈黄色粉末的(5E)-5-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-3-甲基螺[7H-环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(3.38g，7.89mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.73(s,1H),8.02(br s,1H),3.92-3.99(m,2H),3.13(s,2H),2.90-3.06(m,2H),2.56(s,3H),1.60-1.79(m,2H),1.46-1.55(m,1.47(s,11H),1.23(s,9H)。LCMS m/z[M+H]+420.2。
步骤d：在-78℃下在N2下向(5E)-5-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-3-甲基螺[7H-环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(3.10g，7.4mmol)于THF(74mL)中的溶液中滴加DIBAL-H(1M于甲苯中，30mL，30mmol)。将所得混合物在-78℃下搅拌1.5h。在-65℃下将反应混合物用乙酸乙酯(100mL)稀释，然后通过添加罗谢尔盐溶液(1M，41mL)淬灭。将混合物在室温下搅拌1h，然后过滤。将分离的有机相减压浓缩。将残余物溶解于EtOAc(100mL)、甲苯(10mL)和盐水(200mL)中。分离有机层，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将粗产物在室温下用iPr2O(50mL)和AcOEt(40mL)研磨1h，冰冻并过滤，得到呈白色固体的(5S)-5-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-3-甲基螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(2.37g，5.61mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.25(s,1H),7.10(s,1H),5.68(d,J＝10.5Hz,1H),4.42(d,J＝10.5Hz,1H),3.80-3.91(m,2H),3.08(d,J＝15.7Hz,1H),2.72-3.01(m,2H),2.60(d,J＝15.7Hz,1H),2.45(m,4H),1.89-1.96(m,1H),1.47-1.53(m,2H),1.40(s,9H),1.21(s,9H),1.08(m,1H)。LCMS m/z[M+H]+422.7。
步骤e：在室温下向(5S)-5-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-3-甲基螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(975mg，2.31mmol)于二氯甲烷(8mL)中的混合物中添加TFA(1.77mL，23.3mmol)。将混合物搅拌5h并将混合物倒入2N NaOH水溶液(30mL)中。将混合物在疏水筒柱(液/液萃取柱，上过滤，然后真空浓缩，得到呈白色固体的(R)-2-甲基-N-[(7S)-螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-7-基]丙烷-2-亚磺酰胺(704mg，2.19mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.27(s,1H),7.08(s,1H),5.63(d,J＝10.4Hz,1H),4.32(d,J＝10.4Hz,1H),3.03(d,J＝15.7Hz,1H),2.82-2.86(m,2H),2.61-2.70(m,2H),2.56(d,J＝15.8Hz,1H),2.43(s,3H),1.86-1.94(m,2H),1.38-1.58(m,2H),1.40(s,9H),1.22(s,9H),1.03-1.07(m,2H)。LCMS m/z[M+H]+322.2。
实施例i-34.中间体B-25((R)-N-[(5S)-3-甲氧基螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺)
步骤a：在室温下在N2下向4-溴-6-甲氧基吡啶-3-甲醛(500mg，2.31mmol)于THF(11mL)和水(3mL)中的溶液中添加NaBH4(96mg，2.54mmol)。然后将反应在室温下搅拌45min。将残余物倒入饱和NH4Cl水溶液(15mL)中。用乙酸乙酯(50mL*3)萃取水相。将合并的有机相用盐水(20mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到呈橙色固体的(4-溴-6-甲氧基-3-吡啶基)甲醇(417mg，1.91mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.17(s,1H),7.13(s,1H),5.30(t,J＝5.4Hz,1H),4.48(d,J＝5.2Hz,2H),3.85(s,3H)。LCMS m/z[M+H]+218.0。
步骤b：在0℃下在N2下向(4-溴-6-甲氧基-3-吡啶基)甲醇(415mg，1.90mmol)于DCM(9.5mL)中的溶液中添加DMF(0.5mL)，然后滴加SOCl2(271mg，2.28mmol)。将混合物在室温下搅拌1h。在10℃下通过添加NaHCO3水溶液(5mL)淬灭反应混合物。将混合物在疏水筒柱(液/液萃取柱，上过滤，然后真空浓缩，得到呈黄色固体的4-溴-5-(氯甲基)-2-甲氧基吡啶(365mg，1.54mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.36(s,1H),7.24(s,1H),4.81(s,2H),3.87(s,3H)。LCMS m/z[M+H]+236.0。
步骤c：在-78℃下向1-boc-4-氰基哌啶(1.64g，7.4mmol)于THF(45mL)中的溶液中滴加LDA(1M THF:己烷，7.8mL，7.8mmol)。添加后，将混合物在该温度下搅拌1h，并滴加4-溴-5-(氯甲基)-2-甲氧基吡啶(1.58g，6.74mmol)于THF(15mL)中的溶液。将所得混合物在-78℃下搅拌30min，然后使其达到室温过夜。在0℃下通过添加NH4Cl(100mL)淬灭反应混合物，并用EtOAc(50mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝8/2，随后是第二柱，SiO2，二氯甲烷/含有10％的NH4OH的甲醇99.5/0.5)纯化，得到呈无色胶状固体的4-[(4-溴-6-甲基吡啶-3-基)甲基]-4-氰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.82g，2.0mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.20(s,1H),7.20(s,1H),4.01(m,2H),3.87(s,3H),3.06(s,2H),2.81(m,2H),2.45(s,3H),1.83-1.86(m,2H),1.58-1.66(m,2H),1.40(s,9H)。LCMS m/z[M+H]+410.1。
步骤d：将4-[(4-溴-6-甲基吡啶-3-基)甲基]-4-氰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(710mg，1.73mmol)、DIPEA(1.21mL，6.92mmol)、Pd(AmPhos)2Cl2(62mg，0.09mmol)于DMA(27mL)和H2O(3mL)中的混合物用N2脱气，然后将混合物在130℃下搅拌3h。添加Pd(AmPhos)2Cl2(62mg，0.09mmol)并将混合物在130℃下再搅拌3h。添加乙酸乙酯并将有机层用水、盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝7/3)纯化，得到呈米色固体的3-甲氧基-5-氧代螺[7H-环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(380mg，1.14mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.53(s,1H),6.96(s,1H),3.94(m,2H),3.90(s,3H),2.97-3.08(m,4H),1.53-1.60(m,2H),1.43(s,9H),1.39-1.40(m,2H)。LCMS m/z[M+H]+333.2。
步骤e：向3-甲氧基-5-氧代螺[7H-环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(440mg，1.32mmol)于2-MeTHF(3mL)中的溶液中添加Ti(OEt)4(1.7mL，5.3mmol)和(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(327mg，2.65mmol)。将混合物在80℃下搅拌3h。添加乙酸乙酯(20mL)，然后添加水(2mL)。将混合物在硅藻土上过滤并浓缩至干。将残余物溶解于乙酸乙酯(50mL)中并将有机层用盐水(20mL*3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝6/4)纯化，得到呈黄色半固体的(5E)-5-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-3-甲氧基螺[7H-环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(525mg，1.21mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.41(s,1H),7.62(br s,1H),3.92-3.95(m,2H),3.88(s,3H),3.07(s,2H),2.95-2.97(m,2H),1.44-1.66(m,4H),1.41(s,9H),1.24(s,9H)。LCMS m/z[M+H]+436.2。
步骤f：在-78℃下在N2下向(5E)-5-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-3-甲氧基螺[7H-环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(525mg，1.21mmol)于THF(12mL)中的溶液中滴加DIBAL-H(1M于甲苯中，3.6mL，3.6mmol)。将所得混合物在-78℃下搅拌1h。在-65℃下用乙酸乙酯(30mL)稀释反应混合物，然后通过添加1M罗谢尔盐水溶液(10mL)淬灭并在室温下搅拌1h，然后过滤。分离有机相，然后减压浓缩。将残余物溶解于EtOAc(30mL)和盐水(50mL)中，分离有机层，然后经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将粗产物用iPr2O(50mL)研磨，冰冻并过滤，得到呈米色粉末的(5S)-5-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-3-甲氧基螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(524mg，1.14mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.96(s,1H),6.59(s,1H),5.73(d,J＝10.5Hz,1H),4.39(d,J＝10.5Hz,1H),3.86-3.90(m,2H),3.80(s,3H),3.04(d,J＝15.5Hz,1H),2.61-2.96(m,2H),2.55(m 1H),1.92(m,1H),1.44-1.60(m,2H),1.40(s,9H),1.21(s,9H),1.03(m,1H)。LCMS m/z[M+H]+438.1。
步骤g：在室温下向(5S)-5-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-3-甲氧基螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(520mg，1.13mmol)于二氯甲烷(4mL)中的混合物中添加TFA(0.9mL，11.29mmol)。将混合物搅拌1.5h，然后倒入2N NaOH水溶液(10mL)中。将混合物在疏水筒柱(液/液萃取柱，上过滤，然后真空浓缩，得到呈白色固体的(R)-N-[(5S)-3-甲氧基螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(380mg，1.13mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.96(s,1H),6.60(s,1H),5.66(d,J＝10.4Hz,1H),4.29(d,J＝10.1Hz,1H),3.80(s,3H),3.01(d,J＝15.4Hz,1H),2.79-2.86(m,2H),2.57-2.66(m,2H),2.48(m,1H),1.93(m,1H),1.37-1.51(m,2H),1.21(s,9H),0.98-1.02(m,1H)。LCMS m/z[M+H]+338.1。
实施例i-35.中间体B-26((R)-N-[(7S)-3-甲氧基螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-7-基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺)
步骤a：在-78℃下向1-boc-4-氰基哌啶(1.56g，7.44mmol)于THF(30mL)中的溶液中滴加LDA(1M于THF:己烷中，7.8mL，7.8mmol)。添加后，将混合物在该温度下搅拌1h，并滴加5-溴-4-(溴甲基)-2-甲氧基吡啶(2.00g，6.76mmol)于THF(10mL)中的溶液。将所得混合物在-78℃下搅拌30min，然后使其达到室温过夜。在0℃下通过添加NH4Cl水溶液(100mL)淬灭反应混合物，并用EtOAc(50mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝9/1至8/2，随后是第二柱，SiO2，二氯甲烷/甲醇99.5/0.5)纯化，得到呈无色油状物的4-[(5-溴-2-甲氧基吡啶-4-基)甲基]-4-氰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.68g，4.1mmol，纯度62％)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.37(s,1H),6.96(s,1H),4.02(m,2H),3.86(s,3H),3.72(s,1H),3.08(s,2H),1.84-1.87(m,2H),1.60-1.68(m,2H),1.40(s,9H),0.84-0.88(m,1H)。LCMS m/z[M+H]+410.0。
步骤b：将4-[(5-溴-2-甲氧基吡啶-4-基)甲基]-4-氰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(993mg，2.42mmol，纯度62％)、DIPEA(1.6g，12.4mmol)、Pd(AmPhos)2Cl2(171mg，0.25mmol)于DMA(5mL)和H2O(1mL)中的混合物用N2脱气，然后将混合物在130℃下在N2气氛下搅拌18h。添加水和乙酸乙酯，分离水层，然后用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝85/15)纯化，得到呈黄色油状物的3-甲氧基-7-氧代螺[5H-环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(406mg，1.22mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.53(s,1H),6.96(s,1H),3.94(m,2H),3.90(s,3H),2.97-3.08(m,4H),1.53-1.60(m,2H),1.39-1.43(m,11H)。LCMS m/z[M+H]+333.2。
步骤c：向3-甲氧基-7-氧代螺[5H-环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(577mg，1.74mmol)于2-MeTHF(3mL)中的溶液中添加Ti(OEt)4(67％纯度，含有33％的TiO2，2.17mL，6.94mmol)和(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(421mg，3.47mmol)。将混合物在90℃下搅拌3天。添加乙酸乙酯(20mL)，然后添加水(3mL)。将混合物在室温下搅拌45min，然后在硅藻土上过滤。将有机层用水(20mL*3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝8/2)纯化，得到呈黄色固体的(7E)-7-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-3-甲氧基螺[5H-环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(509mg，1.17mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.09(s,1H),6.92(s,1H),3.94(m,5H),,3.10(m,2H),2.93-2.95(m,2H),1.66-1.69(m,2H),1.41(m,11H),1.23(s,9H)。LCMS m/z[M+H]+436.1。
步骤d：在-78℃下在N2下向(7E)-7-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-3-甲氧基螺[5H-环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(467mg，1.07mmol)于THF(6mL)中的溶液中滴加DIBAL-H(1M于甲苯中，4.3mL，4.3mmol)。将所得混合物在-78℃下搅拌1h。在-65℃下添加乙酸乙酯(25mL)，接着添加1M罗谢尔盐水溶液(10mL)，将反应混合物在室温下搅拌2h。分离有机层，然后用水(15mL*3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到呈米色固体的(7S)-7-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-3-甲氧基螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(393mg，0.90mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.97(s,1H),6.64(s,1H),5.62(d,J＝10.1Hz,1H),4.38(d,J＝10.0Hz,1H),3.80(m,5H),2.99(d,J＝16.7Hz,1H),2.87-2.92(m,2H),2.61(d,J＝16.6Hz,1H),2.60(m,1H),1.74-1.79(m,1H),1.54-1.59(m,1H),1.40(s,9H),1.19(m,10H)。LCMS m/z[M+H]+438.2。
步骤e：在室温下向(7S)-7-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-3-甲氧基螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(393mg，0.9mmol)于二氯甲烷(2.5mL)中的混合物中添加TFA(0.7mL，9mmol)。将混合物搅拌1.5h并将混合物倒入2N NaOH水溶液(10mL)中。将混合物在疏水筒柱(液/液萃取柱，上过滤，然后真空浓缩，得到呈白色固体的(R)-N-[(7S)-3-甲氧基螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-7-基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(249mg，0.82mmol)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.00(s,1H),6.64(s,1H),5.73(d,J＝10.0Hz,1H),4.42(d,J＝9.9Hz,1H),3.81(s,3H),3.10-3.16(m,2H),3.03(d,J＝16.8Hz,1H),2.84-2.93(m,2H),2.70(m,1H),2.30(m,1H),1.87(m,1H),1.76-1.84(m,2H),1.35-1.55(m,1H),1.19(s,9H)。LCMS m/z[M+H]+338.2。
实施例i-36.中间体B-27(4-甲氧基螺[3H-茚-2,4'-哌啶]-1-酮)
步骤a：在-78℃下向1-boc-4-氰基哌啶(3.74g，17.8mmol)于THF(100mL)中的溶液中滴加LDA(1M THF/己烷，20mL，20mmol)。添加后，将混合物在该温度下搅拌1h，并滴加1-溴-2-(溴甲基)-3-甲氧基-苯(4.5g，16mmol)于THF(4mL)中的溶液。将所得混合物在-78℃下搅拌30min，然后使其达到室温过夜。在0℃下通过添加NH4Cl水溶液(100mL)淬灭反应混合物，并用EtOAc(50mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝85/15)纯化，得到呈无色半固体的4-[(2-溴-6-甲氧基-苯基)甲基]-4-氰基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.6g，11.2mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.22-7.24(m,2H),7.05-7.08(m,1H),3.95-3.99(m,2H),3.79(s,3H),3.11(m,2H),2.84-2.90(m,2H),1.84-1.87(m,2H),1.59-1.67(m,2H),1.40(s,9H)。LCMS m/z[M+H]+409.1。
步骤b：将4-[(2-溴-6-甲氧基苯基)甲基]-4-氰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.6g，11mmol)、DIPEA(7.3g，56.5mmol)、Pd(AmPhos)2Cl2(820mg，1.16mmol)于DMA(100mL)和H2O(15mL)中的混合物用Ar脱气，然后将混合物在130℃下搅拌18h。添加水和乙酸乙酯，分离水层，然后用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到粗制4-甲氧基-1-氧代-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯，其不经进一步纯化下用于下一步骤。
步骤c：将先前获得的粗制4-甲氧基-1-氧代-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯在甲醇(40mL)和HCl水溶液(2M，55mL，110mmol)中的混合物在回流下搅拌2h。减压蒸发甲醇。添加2N NaOH水溶液和乙酸乙酯。分离有机层，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，二氯甲烷/甲醇＝90/10，然后是二氯甲烷/含有10％浓NH3水溶液的甲醇＝90/10)纯化，得到呈橙色粘性油状物的4-甲氧基螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-酮(2.17g，9.4mmol)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.40-7.42(m,1H),7.22-7.27(m,2H),3.88(s,3H),2.93-3.00(m,5H),2.66(m,2H),1.62-1.70(m,2H),1.23-1.34(m,2H)。LCMS m/z[M+H]+231.1。
实施例i-37.中间体B-28(6-甲氧基螺[茚-2,4'-哌啶]-1(3H)-酮盐酸盐)
步骤a：在-78℃下向1-boc-4-氰基哌啶(2.43g，10.97mmol)于无水THF(70mL)中的溶液中滴加LDA(1M THF/己烷，11.5mL，11.5mmol)。添加后，将混合物在该温度下搅拌1h，并滴加2-溴-1-(溴甲基)-4-甲氧基苯(2.94g，9.98mmol)于无水THF(12mL)中的溶液。将所得混合物在-78℃下搅拌30min，然后使其达到室温过夜。在0℃下通过添加NH4Cl水溶液(100mL)淬灭反应混合物，并用EtOAc(50mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝70/30)纯化，得到呈白色固体的4-(2-溴-4-甲氧基苄基)-4-氰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.87g，9.44mmol)。LCMS m/z[M+H]+409.2。
步骤b：将4-(2-溴-4-甲氧基苄基)-4-氰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(3.78g，9.24mmol)、DIPEA(8.3mL，47.2mmol)、Pd(AmPhos)2Cl2(650mg，0.92mmol)于DMA(20mL)和H2O(3.4mL)中的混合物用Ar脱气，然后将混合物在130℃下搅拌18h。添加水和乙酸乙酯，分离水层，然后用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝9/1至7/3)纯化，得到6-甲氧基-1-氧代-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(2.76g，8.3mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝332.2。
步骤c：向6-甲氧基-1-氧代-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(2.37g，7.15mmol)于甲醇(70mL)中的溶液中添加HCl溶液(4M于二噁烷中，12.5mL，50mmol)。将混合物搅拌18h，然后减压浓缩。将残余物在iPr2O中研磨，得到呈白色固体的6-甲氧基螺[茚-2,4'-哌啶]-1(3H)-酮盐酸盐(1.9g，7.15mmol)，其不经进一步纯化即使用。LCMS m/z[M+H]+＝232.1。
实施例i-38.中间体B-29((3R)-螺[1,3-二氢吲哚-2,4'-哌啶]-3-胺盐酸盐)
步骤a：在室温下向1-boc-4-哌啶酮(11.58g，58.13mmol)和2-溴苯胺(10g，53.13mmol)于无水冰醋酸(80mL)中的溶液中小心地滴加三甲基氰硅烷(8.0mL，63.95mmol)。将混合物在室温下搅拌18h。添加5M NaOH水溶液(100mL)和EtOAc(50mL)，分离水层，然后用EtOAc(50mL*2)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物在iPr2O(30mL)和石油醚(50mL)的混合物中研磨，冰冻并过滤，得到呈白色粉末的4-(2-溴苯胺基)-4-氰基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(19.24g，50.59mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.56(dd,J＝7.9,,1.5Hz 1H)；7.31(td,J＝7.8,1.4Hz 1H)；7.17(dd,J＝7.9,1.5Hz 1H)；6.80(td,J＝7.5,1.5Hz 1H)；5.20(s,1H)；3.68(m,2H)；3.23(m,2H)；2.32(m,2H)；1.95(m,2H)；1.41(s,9H)。LCMS m/z[M-100+H2O]+297.0；[M+Na]+402.1。
步骤b：将4-(2-溴苯胺基)-4-氰基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(10g，26.3mmol)、三乙胺(14.7mL，105.2mmol)、Pd(AmPhos)2Cl2(1.86g,2.63mmol)于DMA(180mL)和H2O(40mL)中的混合物用Ar脱气，然后将混合物在120℃下搅拌18h。添加水和乙酸乙酯，分离水层，然后用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝1/0至65/35)纯化，得到3-氧代螺[二氢吲哚-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(3.05g，10.2mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.82(s,1H)；7.45(m,2H)；6.89(d,J＝8.4Hz,1H)；6.71(m,1H)；3.96(m,2H)；3.13(br s l,2H)；1.59(m,2H)；1.42(s,9H)；1.29(m,2H)。LCMS m/z[M-H]-301.1
步骤c：向3-氧代螺[二氢吲哚-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(3.75g，12.4mmol)于2-MeTHF(30mL)和Ti(OEt)4(38.7mL)中的溶液中添加(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(6.0g，49.6mmol)。将混合物在90℃下搅拌16h。添加(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(6.0g，49.6mmol)并将混合物在90℃下搅拌3天。添加乙酸乙酯，然后添加盐水(10mL)。将混合物在室温下搅拌15min，然后在硅藻土上过滤并减压浓缩。将残余物溶解于Et2O(50mL)中并将有机层用盐水(20mL*2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到呈黄色固体的(3E)-3-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基螺[二氢吲哚-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(2.05g，5.05mmol)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.04-8.00(m,1H)；7.42-7.38(m,1H)；6.84-6.82(m,1H)；6.72-6.68(m,1H)；4.05-3.95(m,2H)；3.1(br s,2H)；1.74-1.60(m,2H)；1.42(s,9H)；1.40-1.33(m,2H)；1.19(s,9H)。LCMSm/z[M+H]+406.6。
步骤d：在-78℃下在N2下向(3E)-3-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基螺[二氢吲哚-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.37g，3.38mmol)于THF(40mL)中的溶液中滴加DIBAL-H(1M于甲苯中，13.5mL，13.5mmol)。将所得混合物在-78℃下搅拌1.5h。在-65℃下添加乙酸乙酯(100mL)，接着添加1M罗谢尔盐水溶液(20mL)，将反应混合物在室温下搅拌1h。分离水层并用乙酸乙酯萃取。然后将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝45/55)纯化，提供预期产物，将其用iPr2O(15mL)研磨，冰冻并过滤，得到呈白色粉末的(3S)-3-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]螺[二氢吲哚-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.15g，2.82mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.05(d,J＝7.3Hz1H)；7.01-6.97(m,1H)；6.59-6.54(m,1H)；6.49(d,J＝7.5Hz 1H)；6.15(s,1H)；5.75(d,J＝10.5Hz 1H)；4.38(d,J＝10.6Hz 1H)；3.91-3.79(m,2H)；3.02(s br,2H)；1.81(td,J＝13.0,3.7Hz 1H)；1.67(td,J＝12.5,4.3Hz 1H)；1.50-1.43(m,2H)；1.41(s,9H)；1.20(s,9H)。LCMS m/z[M+H]+408.2。
步骤e：在室温下向(3S)-3-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]螺[二氢吲哚-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(950mg，2.3mmol)于甲醇(30mL)中的混合物中滴加HCl溶液(4M于二噁烷中，8.2mL，32.6mmol)。将混合物在室温下搅拌18h，然后减压浓缩。将残余物在乙腈(4mL)中研磨，冰冻并过滤，得到呈白色固体的粗制(3R)-螺[1,3-二氢吲哚-2,4'-哌啶]-3-胺盐酸盐(707mg)，其不经进一步纯化即使用。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.23(br d,J＝9.6Hz1H)；9.00(br d,J＝9.6Hz 1H)；8.45(br s,3H)；7.43(d,J＝7.2Hz 1H)；7.13-7.17(m,1H)；6.66-6.70(m,1H)；6.62(m,1H)；4.41(m,1H)；3.10-3.40(m,4H)；2.16-2.23(m,1H)；1.78-1.85(m,2H)；1.61-1.65(m,1H)。
实施例i-39.中间体B-30((3R)-1-甲基螺[3H-吲哚-2,4'-哌啶]-3-胺盐酸盐)
步骤a：在0℃下向惰性气氛下(3E)-3-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基螺[二氢吲哚-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.94g，4.78mmol)于THF(70mL)中的溶液中添加NaHMDS(1M于THF中，7mL，7mmol)。添加后，将混合物在该温度下搅拌30min，并滴加甲基碘(15mL，24mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌30min。将反应混合物倒入饱和碳酸氢钠水溶液(500mL)中，并用EtOAc(250mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(500mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到呈黄色固体的(3E)-3-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-1-甲基-螺[二氢吲哚-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.89g，4.50mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.02(d,J＝7.4Hz 1H)；7.47-7.43(m,1H)；6.86(d,J＝8.3Hz,1H)；6.73-6.69(m,1H)；3.88-3.77(m,2H)；3.73-3.60(m,2H)；2.89(s,3H)；1.99-1.87(m,2H)；1.57-1.47(m,2H)；1.43(s,9H)；1.22(s,9H)。LCMS m/z[M+H]+420.1。
步骤b：在-78℃下在N2下向(3E)-3-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-1-甲基-螺[二氢吲哚-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.89g，4.50mmol)于THF(60mL)中的溶液中滴加DIBAL-H(1M于甲苯中，18mL)。将所得混合物在-78℃下搅拌1.5h。在-65℃下添加乙酸乙酯(100mL)，接着添加1M罗谢尔盐水溶液(20mL)，将反应混合物在室温下搅拌1h。分离水层并用乙酸乙酯萃取。然后将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝2/3)纯化，得到呈白色粉末的(3S)-3-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-1-甲基-螺[二氢吲哚-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.13g，2.68mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.05 05(d,J＝7.2Hz 1H)；7.01-6.95(m,1H)；6.52-6.46(m,1H)；6.33(d,J＝7.9Hz 1H)；5.66(d,J＝9.3Hz 1H)；4.48(d,J＝9.3Hz 1H)；3.82-3.72(m,2H)；2.88(br s,2H)；2.50(s,3H)；1.92-1.85(m,2H)；1.61(td,J＝13.2,5.1Hz 1H)；1.47(td,J＝13.3,4.9Hz 1H)；1.31(s,9H)；1.21-1.02(m,2H)；1.00(s,9H)。LCMS m/z[M+H]+422.2。
步骤c：在室温下向(3S)-3-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-1-甲基-螺[二氢吲哚-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.13g，2.68mmol)于甲醇(20mL)中的混合物中滴加HCl溶液(4M于二噁烷中，6.7mL，26.8mmol)。将混合物在室温下搅拌1h，然后减压浓缩。将残余物在乙腈(10mL)中研磨，冰冻并过滤，得到呈白色固体的粗制(3S)-1-甲基螺[二氢吲哚-2,4'-哌啶]-3-胺盐酸盐(878mg)，其不经进一步纯化即使用。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.30(brs,3H)；8.40(br s,2H)；7.42(d,J＝6.5Hz,1H)；7.24(td,J＝7.8Hz和1.1Hz,1H)；6.73(td,J＝7.4Hz和0.76Hz,1H)；6.59(d,J＝7.9Hz,1H)；4.82(q,J＝4.7Hz,1H)；3.37-3.17(m,4H)；2.67(s,3H)；1.89(d,J＝14.2Hz,1H)；1.29(d,J＝13.9Hz,1H)；1.10(s,1H)；1.04(s,1H)。
实施例i-40.中间体B-31(螺[5H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-7-酮盐酸盐)
步骤a：在-78℃下向1-boc-4-氰基哌啶(2.75g，12.4mmol)于THF(75mL)中的溶液中滴加LDA(1M THF/己烷，13mL，13mmol)。添加后，将混合物在该温度下搅拌1h，并滴加2-溴-3-(溴甲基)吡啶(2.95g，11.3mmol)于THF(25mL)中的溶液。将所得混合物在-78℃下搅拌30min，然后使其达到室温过夜。在0℃下通过添加NH4Cl水溶液(100mL)淬灭反应混合物，并用EtOAc(50mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝3/2)纯化，得到呈米色固体的4-[(2-溴-3-吡啶基)甲基]-4-氰基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.2g，11.0mmol)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.33(m,1H),7.88(m,1H),7.47-7.50(m,1H),4.00-4.04(m,2H),3.13(s,3H),2.83(m,2H),1.84-1.87(m,2H),1.62-1.70(m,2H),1.40(s,9H)。
步骤b：在0℃下，向4-[(2-溴-3-吡啶基)甲基]-4-氰基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.66g，4.4mmol)于THF(27mL)中的溶液中滴加Turbo格氏试剂iPrMgCl.LiCl络合物(1.3M，6.7mL，8.7mmol)。添加后，将混合物在该温度下搅拌2h。将反应混合物冷却至-78℃并滴加丁基锂溶液(2.5M于己烷中，1.92mL，4.8mmol)。将所得混合物在-78℃下搅拌2h，然后在0℃下倒入NH4Cl水溶液(100mL)中，并用EtOAc(50mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝7/3)纯化，得到预期产物，为呈米色固体的7-氧代螺[5H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯和7-亚氨基螺[5H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯的酮/亚胺混合物(酮/亚胺9/1，542mg)。向获得的产物于甲醇(18mL)中的溶液中添加HCl水溶液(2N，9mL，18mmol)。将混合物加热至回流并搅拌1h，然后减压浓缩，得到呈米色固体的螺[5H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-7-酮盐酸盐(0.55g，4.4mmol)，其不经任何进一步纯化即使用。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.25(br s,1H)；8.93(br s,1H)；8.77(m,1H),8.07-8.10(m,1H),7.64-7.67(m,1H),3.33-3.36(m,2H),3.17(s,5H),3.00-3.09(m,2H),1.93-2.00(m,2H),1.64-1.67(m,2H)。
实施例i-41.中间体B-32((R)-N-[(5S)-3-(二氟甲基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺)
步骤a：向(5-溴-6-氯-3-吡啶基)甲醇(4.0g，18.0mmol)于DCM(40mL)中的溶液中添加3,4-二氢-2H-吡喃(3.38mL，36mmol)和对甲苯磺酸吡啶盐(0.46g，1.8mmol)并将混合物在40℃下搅拌18h。添加1N NaOH水溶液，分离有机层，然后用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝1/0至8/2)纯化，得到呈无色油状物的3-溴-2-氯-5-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)吡啶(5.27g，17.2mmol)。
步骤b：在-78℃下在Ar下向3-溴-2-氯-5-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)吡啶(5.25g，17.1mmol)于THF(60mL)中的溶液中滴加n-BuLi(2.1M，9.4mL，19.7mmol)，将混合物在-78℃下搅拌35min。将在THF(20mL)中的4-甲酰基-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.5g，19mmol)滴加到混合物中并将混合物在-78℃下搅拌2h。将混合物用水(75mL)淬灭并用EtOAc(75mL*2)萃取，将有机层用盐水(75mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝1/0至1/1)纯化，得到呈米色泡沫的4-[[2-氯-5-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-3-吡啶基]-羟基-甲基]-4-甲基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.51g，3.32mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝455.3。
步骤c：在0℃下在Ar下向4-[[2-氯-5-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-3-吡啶基]-羟基-甲基]-4-甲基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.51g，3.3mmol)于DCM(16mL)中的溶液中添加戴斯马丁氧化剂(2.1g，5.0mmol)。将反应在室温下搅拌2h。将混合物倒入20％亚硫酸钠水溶液中。分离有机层，然后用饱和NaHCO3水溶液、盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝1/0至7/3)纯化，得到呈黄色油状物的4-[2-氯-5-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)吡啶-3-羰基]-4-甲基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.0g，2.2mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝453.3。
步骤d：将4-[2-氯-5-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)吡啶-3-羰基]-4-甲基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.0g，2.2mmol)、Cs2CO3(0.86g，2.2mmol)、特戊酸(67mg，0.66mmol)、Pd(OAc)2(25mg，0.11mmol)、三环己基膦四氟硼酸盐(81mg，0.22mmol)于均三甲苯(11mL)中的混合物用Ar脱气10min。然后将反应在140℃下搅拌20h。将反应冷却至室温，添加乙酸乙酯和水。分离水层并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。剩余的均三甲苯与乙醇共沸两次。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝1/0至3/7)纯化，得到呈橙色蜡状物的5-氧代-3-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(0.5g，1.2mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝417.5。
步骤e：在室温下在Ar下向5-氧代-3-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(0.5g，1.2mmol)于Ti(OEt)4(1.0mL)和Me-THF(1.5mL)中的溶液中添加(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.3g，2.4mmol)。将反应在100℃下搅拌18h。将残余物溶解于水和二氯甲烷中，并将混合物在疏水筒柱(液/液萃取柱，上过滤，然后真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝1/0至0/1)纯化，得到呈黄色蜡状物的(5Z)-5-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-3-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(0.475g，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
步骤f：在-78℃下在Ar下向粗制(5Z)-5-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-3-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(0.475g)于无水THF(8mL)中的溶液中滴加DIBAL-H(1M于甲苯中，1.7mL，1.7mmol)。将混合物在-78℃下搅拌1h；添加乙酸乙酯，然后添加罗谢尔盐的饱和水溶液，使混合物升温至室温并搅拌2h。分离有机层并用乙酸乙酯萃取水相两次。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝1/0至0/1，然后是二氯甲烷/甲醇＝9/1)纯化，得到呈灰白色泡沫的(5S)-5-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-3-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(0.44g，0.84mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝522.7。
步骤g：将得到的(5S)-5-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-3-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(0.44g，0.84mmol)和对甲苯磺酸一水合物(29mg，0.17mmol)于甲醇(4.2mL)中的混合物在50℃下搅拌24h。添加更多的对甲苯磺酸一水合物(29mg，0.17mmol)，将混合物在50℃下搅拌20h，然后真空浓缩。将残余物溶解于乙酸乙酯和饱和NaHCO3水溶液中，分离有机层，然后用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到呈黄色泡沫的(5S)-5-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-3-(羟甲基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(0.3g，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
步骤h：在0℃下在Ar下向(5S)-5-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-3-(羟甲基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(0.3g，粗品)于DCM(6.6mL)中的溶液中添加戴斯马丁氧化剂(0.43g，1.0mmol)。将反应在室温下搅拌1h。将混合物倒入20％亚硫酸钠水溶液中，然后搅拌2h。分离有机层，然后用饱和NaHCO3水溶液、盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到呈灰白色泡沫的(5S)-5-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-3-甲酰基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(0.27g，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
步骤i：在-20℃下在Ar下向(5S)-5-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-3-甲酰基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(0.27g，粗品)于二氯甲烷(6.2mL)中的溶液中滴加DAST(0.4mL，3mmol)。使混合物缓慢升温至10℃(在大约2h内)，将混合物冷却至0℃并缓慢添加饱和NaHCO3水溶液。添加二氯甲烷并分离有机层。用二氯甲烷萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到呈米色固体的(5S)-5-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-3-(二氟甲基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯和副产物(0.3g，粗品)的7/3混合物，其不经进一步纯化即使用。
步骤j：在0℃下向先前获得的粗产物(0.3g)于二氯甲烷(3mL)中的溶液中添加TFA(0.48mL，6.2mmol)。将混合物在室温下搅拌2h。添加二氯甲烷(5mL)和35％ NaOH溶液，分离有机层。用二氯甲烷萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到呈褐色泡沫的(R)-N-[(5S)-3-(二氟甲基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺和副产物(0.22g，粗品)的7/3混合物，其不经进一步纯化即使用。
实施例i-42.中间体B-33(2-(三异丙基甲硅烷氧基甲基)螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-酮)
步骤a：向(5-溴-6-氯-2-吡啶基)甲醇(4.0g，18.0mmol)于DCM(45mL)中的溶液中添加3,4-二氢-2H-吡喃(3.35mL，35.6mmol)和对甲苯磺酸吡啶盐(0.45g，1.8mmol)并将混合物在40℃下搅拌16h。添加1N NaOH水溶液，分离有机层，然后用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过硅胶色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝1/0至95/5)纯化，得到呈无色油状物的3-溴-2-氯-6-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)吡啶(5.5g，18mmol)。
步骤b：在-78℃下在Ar下向3-溴-2-氯-6-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)吡啶(5.5g，18mmol)于THF(80mL)中的溶液中滴加n-BuLi(2.1M，9.9mL，20.7mmol)，将混合物在-78℃下搅拌25min。将在THF(20mL)中的4-甲酰基-4-甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.95g，20.7mmol)滴加到混合物中并将混合物在-78℃下搅拌1h。将混合物用水(100mL)淬灭并用EtOAc(75mL*2)萃取，将有机层用盐水(75mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝1/0至6/4)纯化，得到呈灰白色泡沫的4-[[2-氯-6-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-3-吡啶基]-羟基-甲基]-4-甲基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.45g，3.2mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝455.3。
步骤c：在0℃下在Ar下向4-[[2-氯-6-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-3-吡啶基]-羟基-甲基]-4-甲基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.45g，3.2mmol)于DCM(16mL)中的溶液中添加戴斯马丁氧化剂(2.0g，4.8mmol)。将反应在室温下搅拌2h。将混合物倒入20％亚硫酸钠水溶液中。分离有机层，然后用饱和NaHCO3水溶液、盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝1/0至75/25)纯化，得到呈无色蜡状物的4-[2-氯-6-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)吡啶-3-羰基]-4-甲基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.94g，2.07mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝453.3。
步骤d：将4-[2-氯-6-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)吡啶-3-羰基]-4-甲基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(0.935g，2.06mmol)、Cs2CO3(0.81g，2.5mmol)、特戊酸(63mg，0.62mmol)、Pd(OAc)2(23mg，0.1mmol)、三环己基膦四氟硼酸盐(76mg，0.2mmol)于均三甲苯(10mL)中的混合物用Ar脱气10min。然后将反应在140℃下搅拌22h。将反应冷却至室温，通过硅藻土垫过滤，用乙酸乙酯洗涤。将有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。剩余的均三甲苯与乙醇共沸两次。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝1/0至7/3)纯化，得到呈橙色蜡状物的5-氧代-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(0.52g，1.26mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝417.3。
步骤e：将得到的5-氧代-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(0.28g，0.67mmol)和对甲苯磺酸一水合物(25mg，0.15mmol)于甲醇(3.4mL)中的混合物在50℃下搅拌2.5h。然后将混合物真空浓缩。将残余物收在乙酸乙酯和饱和NaHCO3水溶液中，分离有机层，然后用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到呈黄色固体的2-(羟甲基)-5-氧代-螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(0.22g,0.67mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝333.3。
步骤f：在0℃下在Ar下向2-(羟甲基)-5-氧代-螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(0.22g，0.67mmol)于二氯甲烷(2.7mL)中的溶液中添加咪唑(91mg，1.34mmol)和三异丙基甲硅烷基氯(0.16mL，0.74mmol)。30min后，将混合物在室温下搅拌4h。在0℃下添加咪唑(91mg，1.34mmol)和三异丙基甲硅烷基氯(0.16mL，0.74mmol)，并将混合物在室温下搅拌16h。添加二氯甲烷和水，分离有机层，然后用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝1/0至9/1)纯化，得到呈灰白色固体的5-氧代-2-(三异丙基甲硅烷氧基甲基)螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(0.2g，0.41mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝489.6。
步骤g：在0℃下向5-氧代-2-(三异丙基甲硅烷氧基甲基)螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(0.2g，0.41mmol)于二氯甲烷(2mL)中的溶液中添加TFA(0.31mL，4.1mmol)。将混合物在室温下搅拌1h。添加二氯甲烷和35％ NaOH溶液，分离有机层。用二氯甲烷萃取水相四次。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到呈黄色油状物的2-(三异丙基甲硅烷氧基甲基)螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-酮(0.16g，0.41mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝389.4。
实施例i-43.中间体B-34((R)-N-[(5S)-2-甲氧基螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺)
步骤a：在0℃下向(3-溴-6-甲氧基吡啶-2-基)甲醇(14.0g，64.2mmol)和CBr4(25.4g，77.0mmol)于DCM(60mL)中的混合物中添加在DCM(30mL)中的PPh3(20.2g，77mmol)，并将混合物在0℃下搅拌30min。将反应混合物倒入水(300mL)中并用DCM(100mL*3)萃取，将有机层经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至0/1)纯化，得到呈黄色油状物的3-溴-2-(溴甲基)-6-甲氧基吡啶(12.0g，42.7mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.66(d,J＝8.8Hz,1H),6.59(d,J＝4.0Hz,1H),4.60(s,2H),3.93(s,3H)。
步骤b：在-78℃下向1-boc-4-氰基哌啶(8.00g，38.0mmol)于THF(80mL)中的溶液中添加LDA(2M，18.4mL，36.8mmol)并将混合物在该温度下搅拌1h。在-78℃下添加在THF(40mL)中的3-溴-2-(溴甲基)-6-甲氧基吡啶(7.98g，28.3mmol)并将混合物在-78℃下搅拌1h。将反应混合物倒入水(500mL)中并用乙酸乙酯(200mL*3)萃取，将有机层经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至0/1)纯化，得到呈黄色油状物的4-[(3-溴-6-甲氧基-2-吡啶基)甲基]-4-氰基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(10.0g，24.3mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.67(d,J＝8.8Hz,1H),6.56(d,J＝4.4Hz,1H),4.10-4.15(m,2H),4.06(s,3H),3.16(s,2H),3.07-3.14(m,2H),2.07(d,J＝12.4Hz,2H),1.57-1.68(m,2H),1.46(s,9H)。
步骤c：在室温下在N2下向4-[(3-溴-6-甲氧基-2-吡啶基)甲基]-4-氰基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(10.0g，24.3mmol)于DMA(200mL)和H2O(10mL)中的混合物中添加TEA(13.5mL，97.4mmol)和PdCl2(Amphos)2(1.73g，2.44mmol)。将溶液用N2脱气10min。将混合物在130℃下搅拌2h。将反应混合物倒入水(500mL)中并用乙酸乙酯(100mL*3)萃取，将有机层经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至0/1)纯化，得到呈黄色固体的2-甲氧基-5-氧代-螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(4.00g，12.0mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.87(d,J＝8.8Hz,1H),6.73(d,J＝8.4Hz,1H),4.11-4.18(m,2H),4.05(s,3H),3.04(s,2H),2.95-3.01(m,2H),1.90-1.98(m,2H),1.48(s,9H),1.40(d,J＝13.6Hz,2H)。
步骤d：向2-甲氧基-5-氧代-螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(4.50g，13.5mmol)于2-MeTHF(27mL)中的混合物中添加(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(9.85g，81.2mmol)和Ti(OEt)4(14.0mL，67.6mmol)，然后将混合物在100℃下搅拌12h。将反应混合物倒入水(200mL)中并用乙酸乙酯(50mL*3)萃取，将有机层经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝50/1至0/1)纯化，得到呈黄色固体的(5Z)-5-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-2-甲氧基-螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(3.00g，6.89mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.59(d,J＝8.4Hz,1H),6.70(d,J＝8.8Hz,1H),4.03-4.18(m,2H),4.00(s,3H),3.04(s,2H),2.88-2.95(m,2H),1.96-2.04(m,2H),1.48(s,9H),1.31(s,9H)。
步骤e：在-78℃下在N2下向(5Z)-5-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-2-甲氧基-螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(3.00g，6.89mmol)于THF(21mL)中的混合物中添加DIBAL-H(1M，27.5mL，27.5mmol)。将混合物在-78℃下搅拌45min。将反应混合物倒入水(200mL)中。用乙酸乙酯萃取水相。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将粗产物在室温下用石油醚/乙酸乙酯＝30/1研磨，过滤并将滤饼减压干燥，得到呈白色固体的(5S)-5-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-2-甲氧基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(2.27g，5.14mmol)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.52(d,J＝8.0Hz,1H),6.58(d,J＝8.0Hz,1H),4.42(d,J＝8.8Hz,1H),3.99-4.11(m,2H),3.93(s,3H),3.50(s,1H),2.92-2.99(m,3H),2.72-2.80(m,1H),1.52-1.76(m,2H),1.46(s,1H),1.41(s,9H),1.27-1.39(m,1H),1.25(s,9H)。LCMS m/z[M+H]+＝338.2。
步骤f：在0℃下向在二氯甲烷(10mL)中的(5S)-5-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-2-甲氧基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(0.5g，1.1mmol)中添加TFA(0.78mL，10.5mmol)。将混合物在室温下搅拌6h。添加二氯甲烷(10mL)和水(20mL)，用35％NaOH水溶液将水相的pH值调节至11-12，并将混合物在疏水筒柱(液/液萃取柱，上过滤，然后真空浓缩，得到呈白色固体的(R)-N-[(5S)-2-甲氧基螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(0.36g，1.07mmol)，其不经进一步纯化即使用。
实施例i-44.中间体B-35((R)-N-[(5S)-2-(二氟甲基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺)
步骤a：在室温下在Ar下向5-氧代-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(0.79g，1.9mmol)于Ti(OEt)4(1.7mL)和Me-THF(2.3mL)中的溶液中添加(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.47g，3.8mmol)。将反应在100℃下搅拌18h。将残余物溶解于水和二氯甲烷中，并将混合物在疏水筒柱(液/液萃取柱，上过滤，然后真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝1/0至0/1)纯化，得到呈黄色固体的(5Z)-5-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(0.85mg，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
步骤b：在-78℃下在Ar下向粗制(5Z)-5-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(0.58g)于无水THF(15mL)中的溶液中滴加DIBAL-H(1M于甲苯中，3.1mL，3.1mmol)。将混合物在-78℃下搅拌2h。添加罗谢尔盐的饱和水溶液，然后添加乙酸乙酯，使混合物升温至室温并搅拌2h。分离有机层并用乙酸乙酯萃取水相两次。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝1/0至0/1)纯化，得到呈灰白色泡沫的(5S)-5-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(0.58g，1.11mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝522.4。
步骤c：将得到的(5S)-5-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(0.56g，1.11mmol)和对甲苯磺酸一水合物(43mg，0.25mmol)于甲醇(5.5mL)中的混合物在60℃下搅拌16h。添加对甲苯磺酸一水合物(38mg，0.17mmol)，将混合物在70℃下搅拌4h，然后真空浓缩。将残余物收在乙酸乙酯和饱和NaHCO3水溶液中，分离有机层，然后用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到呈灰白色固体的(5S)-5-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-2-(羟甲基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(0.45g，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
步骤d：在0℃下在Ar下向(5S)-5-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-2-(羟甲基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(0.45g，粗品)于DCM(10mL)中的溶液中添加戴斯马丁氧化剂(0.65g，1.5mmol)。将反应在室温下搅拌3h。将混合物倒入20％亚硫酸钠水溶液中，然后搅拌30min。分离有机层，然后用饱和NaHCO3水溶液、盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到呈灰白色泡沫的(5S)-5-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-2-甲酰基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(0.45g，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
步骤e：在-20℃下在Ar下向(5S)-5-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-2-甲酰基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(445mg，粗品)于二氯甲烷(10mL)中的溶液中滴加DAST(0.67mL，5.1mmol)。使混合物缓慢升温至0℃(在大约2h内)，将混合物冷却至0℃并缓慢添加饱和NaHCO3水溶液。添加二氯甲烷并分离有机层。用二氯甲烷萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到呈米色半固体的(5S)-5-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-2-(二氟甲基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯和副产物(0.46g，粗品)的约1/1混合物，其不经进一步纯化即使用。
步骤f：在0℃下向在二氯甲烷(7mL)中的先前获得的混合物(0.46g，粗品)中添加TFA(1.1mL，14mmol)。将混合物在室温下搅拌2h。添加二氯甲烷(5mL)和35％ NaOH溶液，分离有机层。用二氯甲烷萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到呈褐色泡沫的含有(R)-N-[(5S)-2-(二氟甲基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(0.36g，粗品)的混合物，其不经进一步纯化即使用。
实施例i-45.中间体B-36((R)-2-甲基-N-[(7S)-3-甲基螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-7-基]丙烷-2-亚磺酰胺)
步骤a：在-78℃下向4-氰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.74g，21.4mmol)于THF(79mL)中的溶液中滴加LDA(用n-BuLi(2.5M于己烷中，9mL)和二异丙胺(3.18mL)于THF(3.2mL)中新鲜制备)。然后将混合物在该温度下搅拌1h，并滴加4-溴-5-(溴甲基)-2-甲基-吡啶(3.15g，11.9mmol)于THF(20mL)中的溶液。将所得混合物在-78℃下搅拌30min，然后使其达到室温过夜。在0℃下通过添加NH4Cl水溶液(100mL)淬灭反应混合物，并用EtOAc(50mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝9/1至7/3)纯化，得到呈浅黄色油状物的4-[(5-溴-2-甲基-4-吡啶基)甲基]-4-氰基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.75g，4.31mmol)。LCMS m/z[M+H]+394.2。
步骤b：将4-[(5-溴-2-甲基-4-吡啶基)甲基]-4-氰基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.85g，7.23mmol)、DIPEA(5.05mL，28.9mmol)、Pd(AmPhos)2Cl2(384mg，0.54mmol)于DMA/H2O 9/1(153mL)中的混合物用Ar脱气，然后将混合物在130℃下搅拌18h。添加水(150mL)和乙酸乙酯(200mL)，分离水层，然后用乙酸乙酯(200mL)萃取。将合并的有机层用水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝65/35)纯化，得到粗产物，将其在iPr2O(40mL)和乙腈(3mL)中研磨，冰冻并过滤，得到3-甲基-7-氧代-螺[5H-环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(400mg，1.26mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.76(s,1H),7.49(s,1H),3.91-3.95(m,2H),3.11(s,2H),2.97(m,2H),2.58(s,3H),1.54-1.62(m,2H),1.29-1.42(m,11H)。LCMS m/z[M+H]+317.3。
步骤c：向3-甲基-7-氧代-螺[5H-环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(396mg，1.25mmol)于2-MeTHF(10mL)中的溶液中添加Ti(OEt)4(67％纯度，含有33％的TiO2，1.6mL，5.0mmol)和(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(310mg，2.5mmol)。将混合物在90℃下搅拌16h。添加乙酸乙酯(70mL)，然后添加盐水(3mL)。将混合物在室温下搅拌5min，在硅藻土上过滤，然后减压浓缩。将残余物溶解于Et2O(50mL)中并将有机层用盐水(20mL*3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将粗产物用iPr2O(10mL)研磨，冰冻并过滤，得到呈白色粉末的(7Z)-7-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-3-甲基-螺[5H-环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(439mg，1.05mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.30(s,1H),7.44(s,1H),3.93-3.96(m,2H),3.13(s,2H),2.83-2.98(m,2H),2.55(s,3H),1.62-1.81(m,2H),1.41-1.59(m,11H),1.23(s,9H)。LCMS m/z[M+H]+420.6。
步骤d：在-78℃下在N2下向(7Z)-7-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-3-甲基-螺[5H-环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(435mg，1.05mmol)于THF(25mL)中的溶液中滴加DIBAL-H(1M于甲苯中，4.1mL，4.1mmol)。将所得混合物在-78℃下搅拌2h。在-65℃下添加乙酸乙酯(35mL)，接着添加1M罗谢尔盐水溶液(6mL)，将反应混合物在室温下搅拌1h，然后减压浓缩。将残余物溶解于乙酸乙酯(25mL)和盐水(25mL)中，分离有机层，然后经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将粗产物用iPr2O(25mL)研磨，冰冻并过滤，得到呈白色粉末的(7S)-7-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-3-甲基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(378mg，0.9mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.28(s,1H),7.10(s,1H),5.66(d,J＝10.4Hz,1H),4.43(d,J＝10.4Hz,1H),3.80-3.84(m,2H),2.88-3.02(m,3H),2.63(d,J＝16.8Hz,1H),2.43(m,3H),1.77-1.82(m,1H),1.56-1.61(m,1H),1.40(s,9H),1.19(s,9H)。LCMS m/z[M+H]+422.4。
步骤e：在室温下向(7S)-7-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-3-甲基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(375mg，0.89mmol)于二氯甲烷(3mL)中的混合物中添加TFA(0.7mL，8.9mmol)。将混合物搅拌2h。将反应混合物用二氯甲烷(10mL)稀释并将混合物倒入2N NaOH水溶液(15mL)中。将混合物在疏水性PTFE筒柱(液/液萃取柱，上过滤，然后真空浓缩，得到呈白色固体的粗制(R)-2-甲基-N-[(7S)-3-甲基螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-7-基]丙烷-2-亚磺酰胺(289mg)，将其不经进一步纯化即使用。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.28(s,1H),7.10(s,1H),5.58(d,J＝10.0Hz,1H),4.35(d,J＝10.4Hz,1H),2.96(d,J＝16.8Hz,1H),2.84-2.87(m,2H),2.60-2.72(m,3H),2.42(s,3H),1.72-1.79(m,1H),1.53-1.64(m,1H)1.41-1.48(m,1H),1.19(s,10H)。LCMS m/z[M+H]+322.3。
实施例i-46.中间体B-37((5S)-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡嗪-6,4'-哌啶]-5-胺盐酸盐)
步骤a：在-78℃下，向用nBuLi(2.5M于己烷中，57mL)和二异丙胺(19.5mL)新鲜制备的LDA于THF(380mL)中的溶液中滴加2-溴吡嗪(10g，62.9mmol)于THF(20mL)中的溶液。添加后，将混合物在该温度下搅拌30min，并滴加二甲基甲酰胺(12.1mL，157mmol)。将所得混合物在-78℃下搅拌2h。在该温度下，滴加甲醇(150mL)并将反应混合物搅拌10min，然后分批添加NaBH4(4.76g，126mmol)。然后使温度升温至0℃，保持1小时。在0℃下通过添加NH4Cl水溶液(1000mL)淬灭反应混合物，并用EtOAc(500mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(300mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，用二氯甲烷洗脱)纯化，得到呈黄色固体的(3-溴吡嗪-2-基)甲醇(4.04g，21.4mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(d,J＝4.0Hz,1H),8.41(d,J＝4.0Hz,1H),5.42(t,J＝4.0Hz,1H),4.65(d,J＝4.0Hz,1H)。LCMS m/z[M+H]+191.0。
步骤b：在0℃下向(3-溴吡嗪-2-基)甲醇(8g，42.3mmol)于Et2O(200mL)中的溶液中滴加三溴化磷(4.4mL，46.5mmol)。将反应混合物在回流下搅拌4h。将反应混合物冷却至室温并倒入饱和碳酸氢钠溶液(200mL)中，用二氯甲烷(200mL*2)萃取。将合并的有机相经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯9/1)纯化，得到呈粉色固体的2-溴-3-(溴甲基)吡嗪(7.2g，29mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.65(d,J＝2.4Hz,1H),8.47(d,J＝2.4Hz,1H),4.77(s,2H)。LCMS m/z[M+H]+252.9。
步骤c：在-78℃下在惰性气氛下向1-(叔丁氧基羰基)-4-哌啶甲酸乙酯(6.74g，26.2mmol)于无水THF(200mL)中的溶液中滴加LDA(1M于THF中，33.3mL，33.3mmol)。添加后，将混合物在该温度下搅拌1h，并滴加2-溴-3-(溴甲基)吡嗪(6g，23.8mmol)于THF(30mL)中的溶液。将所得混合物在-78℃下搅拌30min，然后使其达到室温过夜。在0℃下通过添加NH4Cl水溶液(450mL)淬灭反应混合物，并用EtOAc(150mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(150mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝7/3)纯化，得到呈褐色油状物的4-[(3-溴吡嗪-2-基)甲基]哌啶-1,4-二甲酸1-O-叔丁基4-O-乙酯(7.74g，18.1mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.57(d,J＝4.0Hz,1H),8.34(d,J＝4Hz,1H),4.03(q,J＝8Hz,1H),3.66-3.71(m,2H),3.22(s,2H),2.90-3.02(m,2H),1.96-2.00(m,2H),1.54-1.61(m,2H),1.39(s,9H),1.06(t,J＝8Hz,3H)。LCMS m/z[M+H-BoC]+330.0。
步骤d：在-78℃下在惰性气氛下向4-[(3-溴吡嗪-2-基)甲基]哌啶-1,4-二甲酸1-O-叔丁基4-O-乙酯(7.74g，18.1mmol)于无水THF(350mL)中的溶液中滴加n-BuLi溶液(2.5M于己烷中，13mL，32.5mmol)。将反应混合物升温至-10℃，并在该温度下搅拌3h。通过在室温下添加饱和NH4Cl(500mL)将反应混合物在室温下淬灭并用EtOAc(200mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL*3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过2次连续柱色谱法(SiO2，乙酸乙酯/甲醇＝98/2)，然后(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝7/3)纯化，得到呈橙色油状物的5-氧代螺[7H-环戊二烯并[b]吡嗪-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(3.54g，10.9mmol)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.76(d,J＝2.4Hz,1H),8.54(d,J＝2.4Hz,1H),3.91-3.95(m,2H),3.23(s,2H),2.97-3.05(m,2H),2.58(s,3H),1.60-1.68(m,2H),1.51-1.54(m,2H),1.43(s,9H)。LCMS m/z[M+H-57-18]230.0。
步骤e：向5-氧代螺[7H-环戊二烯并[b]吡嗪-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(3.54g，11.7mmol)于2-MeTHF(60mL)中的溶液中添加Ti(OEt)4(67％纯度，含有33％的TiO2，14.6mL，46.7mmol)和(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(2.83g，23.3mmol)。将混合物在90℃下搅拌16h。添加乙酸乙酯(300mL)，然后添加盐水(5mL)。将混合物在室温下搅拌5min，在硅藻土上过滤，然后减压浓缩。将残余物溶解于Et2O(100mL)中并将有机层用盐水(40mL*3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将粗产物通过柱色谱法(SiO2，用乙酸乙酯洗脱)纯化，得到呈橙色固体的(5Z)-5-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基螺[7H-环戊二烯并[b]吡嗪-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.2g，3.0mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.83(d,J＝4.4Hz,1H),8.54(d,J＝4Hz,1H),3.93-4.00(m,2H),3.26(s,2H),2.90-3.09(m,2H),1.79-1.86(m,2H),1.67-1.74(m,2H),1.58-1.64(m,2H),1.43(s,9H),1.17(s,9H)。LCMS m/z[M+H]+407.3。
步骤f：在-78℃下在N2下向(5Z)-5-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基螺[7H-环戊二烯并[b]吡嗪-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(745mg，1.8mmol)于THF(18mL)中的溶液中滴加DIBAL-H(1M于甲苯中，3.6mL，3.6mmol)。将所得混合物在-78℃下搅拌1.5h。添加罗谢尔盐的饱和水溶液(30mL)，然后添加乙酸乙酯(20mL)，将混合物在室温下搅拌2h。分离水层并用乙酸乙酯(20mL)萃取。将合并的有机相用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4洗涤，过滤并减压浓缩，得到呈褐色蜡状物的(5S)-5-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡嗪-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(790mg，粗品)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.42(m,2H),5.76(d,J＝10.0Hz,1H),4.46(d,J＝10.0Hz,1H),3.81-3.84(m,2H),2.79-3.12(m,4H),1.50-1.78(m,2H),1.41(s,9H),1.26(m,10H)。LCMS m/z[M+H]+409.4。
步骤g：在0℃下向(5S)-5-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡嗪-6,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(752mg，1.84mmol)于甲醇(20mL)中的溶液中添加HCl溶液(4M于二噁烷中，4.6mL，18.4mmol)。将混合物在室温下搅拌18h，然后真空浓缩。将残余物在乙腈中研磨，将固体过滤，然后用乙醚洗涤，得到呈黑色固体的(5S)-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡嗪-6,4'-哌啶]-5-胺盐酸盐(476mg，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
实施例i-47.中间体B-38((1S)-6-氟代螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-胺盐酸盐)
步骤a：在-78℃下向1-boc-4-氰基哌啶(4.09g，18.48mmol)于四氢呋喃(70mL)中的溶液中滴加LDA(1M四氢呋喃/己烷，19.32mL，19.32mmol)。添加后，将混合物在相同温度下搅拌1h，并滴加2-溴-4-氟苄基溴(4.5g，16.8mmol)于THF(20mL)中的溶液。将所得混合物在-78℃下搅拌30min，然后使其达到室温过夜，然后通过添加饱和氯化铵溶液(100mL)淬灭。添加乙酸乙酯(200mL)并倾析混合物。将有机层用水(5x 250mL)、盐水(20mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝100/0至80/20)纯化，得到呈白色固体的4-[(2-溴-4-氟-苯基)甲基]-4-氰基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(5.75g，14.12mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝397。
步骤b：将4-[(2-溴-4-氟-苯基)甲基]-4-氰基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(5.0g，12.59mmol)、DIPEA(7.1mL，50.34mmol)、Pd(AmPhos)2Cl2(0.45g，0.63mmol)在DMA(250mL)和H2O(5mL)中的混合物用Ar脱气10min，然后将混合物在120℃下搅拌18h。将反应冷却至室温，添加水(500mL)和EtOAc(500mL)。分离有机层并用EtOAc萃取水层。将合并的有机层用水、盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝100/0至75/25)纯化，得到呈米色固体的6-氟-1-氧代-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(3.46g，10.8mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝320。
步骤c：将6-氟-1-氧代-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(2g，6.26mmol)、(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.52g，12.52mmol)和四乙氧基钛(5.71g，25.05mmol)的混合物在100℃下搅拌15h。将混合物用二氯甲烷(150mL)和水(140mL)稀释。搅拌3h后，通过过滤将盐取出并用二氯甲烷(100mL)洗涤。将有机层用盐水(100mL)洗涤，经MgSO4干燥并减压浓缩，得到呈黄色固体的(1Z)-1-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-6-氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(2.6g，6.2mmol)，其不经进一步纯化即使用。
步骤d：在-65℃下在Ar下向(1Z)-1-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-6-氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(2.6g，6.2mmol)于无水THF(30ml)中的溶液中滴加DIBAL-H(1M于甲苯中，30mL，30mmol)。将混合物在-65℃下搅拌45min，然后添加罗谢尔盐的饱和水溶液(60mL)和水(20mL)，使混合物升温至室温并搅拌40min。将混合物用乙酸乙酯(200mL)萃取。将合并的有机相用罗谢尔盐的饱和水溶液(2x50mL)、盐水(100mL)洗涤，用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝100/0至50/50)纯化，得到呈白色固体的(1S)-1-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-6-氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.75g，4.12mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝425。
步骤e：将(1S)-1-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-6-氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.155g，2.72mmol)和HCl溶液(2.5N于乙醇中，30mL，75mmol)的混合物在室温下搅拌3h，然后减压浓缩。将残余物溶解于甲醇(50mL)中并将溶液减压浓缩。该操作重复一次。将粗产物用乙酸乙酯(50mL)和二异丙醚(50mL)研磨。过滤固体，用二异丙醚(2x 50mL)和戊烷(50mL)洗涤，得到呈白色固体的(1S)-6-氟代螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-胺盐酸盐(1.45g)，其不经进一步纯化即使用。
实施例i-48.中间体B-39((1S)-4-氟代螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-胺盐酸盐)
步骤a：在-78℃下向1-boc-4-氰基哌啶(3.9g，18mmol)于四氢呋喃(50mL)中的溶液中滴加LDA(1M四氢呋喃/己烷，19mL，19mmol)。添加后，将混合物在相同温度下搅拌1h，并滴加1-溴-2-(溴甲基)-3-氟-苯(4.5g，17mmol)于THF(20mL)中的溶液。将所得混合物在-78℃下搅拌30min，然后使其达到室温过夜，并通过添加饱和氯化铵溶液(500mL)淬灭。添加乙酸乙酯(400mL)并倾析混合物。将有机层用水(5x 250mL)、盐水(200mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝100/0至80/20)纯化，得到呈无色油状物的4-[(2-溴-6-氟-苯基)甲基]-4-氰基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(5.7g，14mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝397。
步骤b：将4-氟-1-氧代-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(3.8g，12mmol)、DIPEA(7.1mL，50.34mmol)、Pd(AmPhos)2Cl2(0.45g，0.63mmol)在DMA(250mL)和H2O(5mL)中的混合物用Ar脱气10min，然后将混合物在120℃下搅拌18h。将反应冷却至室温，添加水(500mL)和EtOAc(500mL)。分离有机层并用EtOAc萃取水层。将合并的有机层用水、盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝100/0至75/25)纯化，得到呈米色固体的4-氟-1-氧代-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(3.8g，12mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝320。
步骤c：将4-氟-1-氧代-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1010mg，3.16mmol)、(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(766mg，6.32mmol)和四乙氧基钛(2.88g，12.65mmol)的混合物在100℃下搅拌15h。将混合物用二氯甲烷和水稀释。通过过滤将盐取出并用二氯甲烷洗涤。将有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥并减压浓缩，得到呈固体的(1Z)-1-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-4-氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.33g，3.15mmol)，其不经进一步纯化即使用。LCMS m/z[M+H]+＝423。
步骤d：在-65℃下在Ar下向(1Z)-1-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-4-氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1330mg，3.15mmol)于无水THF(22ml)中的溶液中滴加DIBAL-H(1M于甲苯中，15.1mL，15.1mmol)。将混合物在-65℃下搅拌45min，然后添加罗谢尔盐的饱和水溶液(60mL)和水(20mL)，使混合物升温至室温并搅拌40min。将混合物用乙酸乙酯(200mL)萃取。将合并的有机相用罗谢尔盐的饱和水溶液(2x 50mL)、盐水(100mL)洗涤，用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物溶解于二异丙醚中。添加二氧化硅(3g)，将混悬液搅拌1h，过滤并用乙酸乙酯(50mL)洗涤。减压浓缩滤液，得到呈白色固体的(1S)-1-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-4-氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.32g，3.11mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝425。
步骤e：将(1S)-1-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-4-氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.32g，3.11mmol)和HCl溶液(2.5N于乙醇中，30mL，75mmol)的混合物在室温下搅拌3h并减压浓缩。将残余物溶解于甲醇(50mL)中并将溶液减压浓缩。该操作重复一次。将粗产物用乙酸乙酯(50mL)和二异丙醚(50mL)研磨。过滤固体，用二异丙醚(2x 50mL)和戊烷(50mL)洗涤，得到呈白色固体的(1S)-4-氟代螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-胺盐酸盐(0.985g，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
实施例i-49.中间体B-40((1S)-5,6-二氟代螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-胺盐酸盐)
步骤a：在-70℃下向1-boc-4-氰基哌啶(1.54g，7.31mmol)于四氢呋喃(10mL)中的溶液中滴加LDA(2M四氢呋喃/己烷，3.82mL，7.64mmol)。添加后，将混合物在相同温度下搅拌1h，并滴加1-溴-2-(溴甲基)-3-氟-苯(2g，6.65mmol)于THF(20mL)中的溶液。将所得混合物在-70℃下搅拌30min，然后使其达到室温过夜，通过添加饱和氯化钠溶液淬灭并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层经MgSO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝100/0至70/30)纯化，得到4-[(2-溴-4,5-二氟-苯基)甲基]-4-氰基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(970mg，2.34mmol)。LCMS m/z[M-Boc+H]+＝315。
步骤b：将4-[(2-溴-4,5-二氟-苯基)甲基]-4-氰基-哌啶-1-甲酸叔丁酯(970mg，2.34mmol)、DIPEA(1.3mL，9.34mmol)、Pd(AmPhos)2Cl2(83mg，0.117mmol)在DMA(25mL)和H2O(1mL)中的混合物用Ar脱气10min，然后将混合物在120℃下搅拌18h。将反应冷却至室温，添加水(50mL)和EtOAc(50mL)。分离有机层并用EtOAc萃取水层。将合并的有机层用水、盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝100/0至75/25)纯化，得到5,6-二氟-1-氧代-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(150mg)。
步骤c：将5,6-二氟-1-氧代-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(150mg，0.444mmol)、(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(108mg，0.889mmol)和四乙氧基钛(1014mg，4.45mmol)的混合物在100℃下搅拌15h。将混合物用二氯甲烷(50mL)和水(100mL)稀释。搅拌1h后，通过过滤将盐取出并用二氯甲烷(50mL)洗涤。将有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝100/0至70/30)纯化，得到呈黄色固体的(1Z)-1-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-5,6-二氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(144mg，0.327mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝441。
步骤d：在-65℃下在Ar下向(1Z)-1-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-5,6-二氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(144mg，0.326mmol)于无水THF(10ml)中的溶液中滴加DIBAL-H(1M于甲苯中，1.57mL，1.57mmol)。将混合物在-65℃下搅拌1h，然后添加罗谢尔盐的饱和水溶液(60mL)和水(20mL)，使混合物升温至室温并搅拌1h。用乙酸乙酯(30mL)萃取混合物。将合并的有机相用罗谢尔盐的饱和水溶液(2x 50mL)、盐水(100mL)洗涤，用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝100/0至80/20)纯化，得到呈黄色固体的(1S)-1-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-5,6-二氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(120mg，0.27mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝443。
步骤e：将(1S)-1-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-5,6-二氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(120mg，0.271mmol)和HCl溶液(4N于二噁烷中，5mL，20mmol)的混合物在室温下搅拌15h并减压浓缩。用二异丙醚研磨粗产物。过滤固体，得到呈黄色固体的(1S)-5,6-二氟代螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-胺盐酸盐(85mg)，其不经进一步纯化即使用。
实施例i-50.中间体B-41((1S)-4,6-二氟代螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-胺盐酸盐)
步骤a：在-70℃下向N-boc-哌啶-4-甲酸乙酯(5g，19.43mmol)于四氢呋喃(75mL)中的溶液中滴加LDA(2M四氢呋喃/己烷，11.66mL，23.32mmol)。添加后，将混合物在相同温度下搅拌1h，并滴加2,4-二氟苄基溴(4.22g，20.4mmol)于THF(20mL)中的溶液。将所得混合物在-70℃下搅拌30min，然后使其达到室温过夜，通过添加饱和氯化钠溶液(500mL)淬灭。添加乙酸乙酯(700mL)和水(200mL)并倾析混合物。将有机层用水(500mL)、盐水(2x 500mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/二异丙醚＝100/0至50/50)纯化，得到呈浅黄色油状物的4-[(2,4-二氟苯基)甲基]哌啶-1,4-二甲酸O1-叔丁基O4-乙酯(6.4g，17mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝384。
步骤b：将4-[(2,4-二氟苯基)甲基]哌啶-1,4-二甲酸O1-叔丁基O4-乙酯(1.2g，3.1mmol)、氢氧化钠(5N，10mL，50mmol)于乙醇(15mL)中的溶液的混合物在回流下加热20h并使其冷却至室温。减压消除乙醇后，通过添加盐酸溶液(2N，25mL)酸化混合物，并用二氯甲烷(50mL)萃取。将有机层用盐水(40mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并减压浓缩，得到呈米色固体的1-叔丁氧基羰基-4-[(2,4-二氟苯基)甲基]哌啶-4-甲酸(1.03g，2.9mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝356。
步骤c：将1-叔丁氧基羰基-4-[(2,4-二氟苯基)甲基]哌啶-4-甲酸(3.2g，9mmol)和亚硫酰氯(2.6mL，36mmol)于二氯甲烷(70mL)中的溶液在室温下搅拌1h。添加更多的亚硫酰氯(2.6mL，36mmol)，在室温下继续搅拌2h并减压浓缩混合物。将残余物溶解于二氯甲烷(70mL)中。将溶液冷却至0℃，添加氯化铝(2.4g，18mmol)并将混合物在室温下搅拌15h，然后倒在冰(40g)上。通过添加2N氢氧化钠碱化至pH 10后，添加焦碳酸二叔丁酯(18mmol，3.9g)。将混合物在室温下搅拌2h。添加二氯甲烷(50mL)并将有机相用水(50mL)、盐水(100mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝100/0至80/20)纯化，得到呈白色固体的4,6-二氟-1-氧代-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(650mg，1.84mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝338。
步骤d：将4,6-二氟-1-氧代-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.2g，3.6mmol)、(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.86g，7.1mmol)和四乙氧基钛(3.2g，14mmol)的混合物在100℃下搅拌15h。将混合物用二氯甲烷(150mL)和水(550mL)稀释。搅拌3h后，通过过滤将盐取出并用二氯甲烷(50mL)洗涤。将有机层用盐水(100mL)洗涤，经MgSO4干燥并减压浓缩，得到呈黄色固体的(1Z)-1-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-4,6-二氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.6g，3.6mmol)，其不经进一步纯化即使用。
步骤e：在-65℃下在Ar下向(1Z)-1-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基-4,6-二氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.6g，3.6mmol)于无水THF(30ml)中的溶液中滴加DIBAL-H(1M于甲苯中，17mL，17mmol)。将混合物在-65℃下搅拌45min，然后添加罗谢尔盐的饱和水溶液(60mL)和水(20mL)，使混合物升温至室温并搅拌40min。将混合物用乙酸乙酯(200mL)萃取。将合并的有机相用罗谢尔盐的饱和水溶液(2x 50mL)、盐水(100mL)洗涤，用无水MgSO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝100/0至50/50)纯化，得到呈白色固体的(1S)-1-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-4,6-二氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.15g，2.6mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝443。
步骤f：将(1S)-1-[[(R)-叔丁基亚磺酰基]氨基]-4,6-二氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1'-甲酸叔丁酯(1.15g，2.6mmol)和HCl溶液(2.5N于乙醇中，30mL，75mmol)的混合物在室温下搅拌3h，然后减压浓缩。将残余物溶解于甲醇(50mL)中并将溶液减压浓缩。该操作重复一次。将粗产物用乙酸乙酯(50mL)和二异丙醚(50mL)研磨。过滤固体，用二异丙醚(2x50mL)和戊烷(50mL)洗涤，得到呈白色固体的(1S)-4,6-二氟代螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-胺盐酸盐(745mg，2.14mmol)，其不经进一步纯化即使用。
实施例i-51.中间体C-1((3-氯-2-环丙基-4-吡啶基)硼酸)
在-78℃下向3-氯-2-环丙基-吡啶(1.04g，6.7mmol)于无水THF(5mL)中的溶液中滴加LDA(2M，6.7mL，13.4mmol)。添加后，将混合物在-78℃下搅拌2h，然后滴加硼酸三异丙酯(2.49mL，10.8mmol)。将混合物在-78℃下搅拌3h，然后使其升温至0℃。然后通过添加水(2.5mL)淬灭混合物。将混合物在室温下搅拌1h。添加水，然后添加1N NaOH水溶液，使水相的pH值达到11-12。水层用乙酸乙酯洗涤两次。用5N HCl水溶液将水相的pH值调节至pH 6。将水层用EtOAc萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物在乙醚中研磨，过滤并用乙醚洗涤，得到呈米色固体的(3-氯-2-环丙基-4-吡啶基)硼酸(507mg，2.56mmol)。
实施例i-52.中间体C-2((3-氯-2-异丙基-4-吡啶基)硼酸)
步骤a：在0℃下，向3-氯-2-氟-吡啶(600mg，4.33mmol)和2-甲基丙酸叔丁酯(750mg，5.2mmol)于无水甲苯(5mL)中的溶液中滴加NaHMDS(1M于THF中，6.5mL，6.5mmol)。30min后，将混合物在室温下搅拌16h。添加浓NH4Cl水溶液(20mL)，并用EtOAc萃取水层两次。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝1/0至95/5)纯化，得到呈无色油状物的2-(3-氯-2-吡啶基)-2-甲基-丙酸叔丁酯(885mg，3.46mmol)。
步骤b：将2-(3-氯-2-吡啶基)-2-甲基-丙酸叔丁酯(880mg，3.44mmol)和4-甲基苯磺酸一水合物(327mg，1.72mmol)于甲苯(6.9mL)中的混合物在110℃下搅拌16h。使混合物冷却至室温，然后添加乙酸乙酯。将有机相用1N NaOH溶液洗涤，然后用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到呈黄色液体的3-氯-2-异丙基-吡啶(563mg，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
步骤c：如对于中间体C-1所述，以3-氯-2-异丙基-吡啶(625mg，粗品)开始进行类似程序，得到呈米色固体的(3-氯-2-异丙基-4-吡啶基)硼酸(332mg，1.66mmol)。
实施例i-53.中间体C-3((3-氯-2-乙基-4-吡啶基)硼酸)
步骤a：将3-氯-2-氟-吡啶(3.0g，22.81mmol)、丙二酸二乙酯(4.15mL，27.4mmol)和碳酸铯(10.4g，31.9mmol)于DMSO(45mL)中的混合物在90℃下搅拌16h。使混合物冷却至室温，添加水(180mL)并将水层用EtOAc萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝1/0至8/2)纯化，得到呈无色油状物的2-(3-氯-2-吡啶基)丙二酸二乙酯(3.09g，11.4mmol)。
步骤b：将2-(3-氯-2-吡啶基)丙二酸二乙酯(3.09g，11.4mmol)、碘甲烷(2.12mL，34.1mmol)和碳酸钾(3.9g，28.4mmol)于DMF(25mL)中的混合物在室温下搅拌18h。添加水(100mL)并用EtOAc萃取水层两次。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝1/0至8/2)纯化，得到呈无色油状物的2-(3-氯-2-吡啶基)-2-甲基-丙二酸二乙酯(2.67g，9.34mmol)。
步骤c：向2-(3-氯-2-吡啶基)-2-甲基-丙二酸二乙酯(2.66g，9.3mmol)于甲醇(23mL)中的溶液中添加2N NaOH水溶液(28mL，56mmol)。将混合物在70℃下搅拌18h，然后减压蒸发甲醇。用5M HCl水溶液将混合物的pH值调节至4，添加甲醇(20mL)并将混合物在70℃下搅拌20h。添加5M HCl水溶液(5mL)并将混合物在100℃下搅拌4h，然后减压蒸发甲醇。用1N NaOH水溶液将混合物的pH值调节至11-12。分离水层并用乙酸乙酯萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到呈无色油状物的3-氯-2-乙基-吡啶(975mg，6.89mmol)，其不经进一步纯化即使用。
步骤d：如对于中间体C-1所述，以3-氯-2-乙基-吡啶(965mg，6.81mmol)开始进行类似程序，得到呈米色固体的(3-氯-2-乙基-4-吡啶基)硼酸(710mg，3.83mmol)。
实施例i-54.中间体C-4([3-氯-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-4-吡啶基]硼酸)
步骤a：将(3-氯-2-吡啶基)甲醇(1.0g，6.62mmol)、3,4-二氢-2H-吡喃(1.24mL，13.23mmol)和PPTS(167mg，0.66mmol)于二氯甲烷(16.5mL)中的混合物在40℃下加热16h。使混合物冷却至室温，并将混合物用1N NaOH溶液、盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝1/0至7/3)纯化，得到呈无色油状物的3-氯-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)吡啶(1.41g，6.19mmol)。
步骤b：如对于中间体C-1所述，以3-氯-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)吡啶(1.4g，6.15mmol)开始进行类似程序，得到呈米色固体的[3-氯-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-4-吡啶基]硼酸(540mg，1.99mmol)。
实施例i-55.中间体C-5([5-氟-2-(三氟甲基)-4-吡啶基]硼酸)
如对于中间体C-1所述，以5-氟-2-三氟甲基-吡啶(1.0g，5.92mmol)开始进行类似程序，得到呈灰白色固体的[5-氟-2-(三氟甲基)-4-吡啶基]硼酸(206mg，0.99mmol)。
实施例i-56.中间体C-6((5-氟-2,3-二氢-1,4-苯并二噁英-6-基)硼酸)
步骤a：在室温下向5-氟-2,3-二氢-1,4-苯并二噁英(780mg，5.06mmol)于甲醇(10mL)中的溶液中添加NBS(900mg，5.06mmol)。将反应混合物在70℃下搅拌3h，然后减压浓缩。将残余物溶解于水(30mL)和二氯甲烷(70mL)中，并将混合物在疏水筒柱(液/液萃取柱，上过滤，然后真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝100/0至95/5)纯化，得到呈米色固体的6-溴-5-氟-2,3-二氢-1,4-苯并二噁英和5-溴-8-氟-2,3-二氢-1,4-苯并二噁英的约3/1混合物(713mg)，其不经进一步纯化即使用。
步骤b：在-78℃下向先前获得的混合物(713mg)于无水THF(10mL)中的溶液中滴加n-BuLi(2.1M于己烷中，2.2mL，4.6mmol)。添加后，将混合物在该温度下搅拌1h，然后滴加硼酸三异丙酯(1.1mL，4.8mmol)。在-78℃下1小时后，使混合物升温至0℃，然后用2.5NHCl溶液(6mL)淬灭。将反应混合物在室温下搅拌30min。添加水(25mL)并用EtOAc(25mL*3)萃取混合物。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物溶解于戊烷中，过滤，得到呈白色固体的含有作为主要产物的(5-氟-2,3-二氢-1,4-苯并二噁英-6-基)硼酸(185mg，粗品)的混合物，其不经进一步纯化即使用。
实施例i-57.中间体C-7(2-(6-氟-2,3-二氢-1,4-苯并二噁英-7-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷)
步骤a：在室温下向4-氟邻苯二酚(2.0g，15.6mmol)于DMF(30mL)中的溶液中添加碳酸铯(12.7g，39.0mmol)。将反应混合物在40℃下搅拌30min，然后添加溴化乙烯(1.7mL，19.7mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌18h，然后使其冷却至室温。过滤固体并向滤液中添加水(100mL)和EtOAc(200mL)。分离水层，然后用EtOAc(100mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝95/5至80/20)纯化，得到呈无色油状物的6-氟-2,3-二氢-1,4-苯并二噁英(365mg，2.35mmol)。
步骤b：在室温下向6-氟-2,3-二氢-1,4-苯并二噁英(360mg，2.34mmol)于乙腈(5mL)中的溶液中添加NBS(620mg，3.48mmol)和TFA(20μL，0.26mmol)。将混合物搅拌2h，然后真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝100/0至95/5)纯化，得到呈白色固体的6-溴-7-氟-2,3-二氢-1,4-苯并二噁英(392mg，1.68mmol)。
步骤c：将6-溴-7-氟-2,3-二氢-1,4-苯并二噁英(670mg，2.76mmol)、乙酸钾(495mg，5.04mmol)、双(频哪醇合)二硼(470mg，1.85mmol)和Pd(dppf)Cl2·DCM(45mg，0.05mmol)于二噁烷(6mL)中的混合物在80℃下搅拌18h。向该混合物中添加乙酸钾(495mg，5.04mmol)、双(频哪醇合)二硼(470mg，1.85mmol)和Pd(dppf)Cl2·DCM(90mg，0.11mmol)，并将该混合物在80℃下搅拌24h。使混合物冷却至室温，添加水(100mL)和EtOAc(100mL)并将混合物通过硅藻土垫过滤。分离水层，然后用EtOAc(100mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝95/5至80/20)纯化，得到呈白色固体的2-(6-氟-2,3-二氢-1,4-苯并二噁英-7-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷连同约1mol的双(频哪醇合)二硼(171mg)，其不经进一步纯化即使用。
实施例i-58.中间体C-8(1-乙基-5-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡唑)
在-50℃下向4-溴-1-乙基-5-甲基-1H-吡唑(400mg，2.11mmol)于无水THF(6mL)中的混悬液中滴加n-BuLi(2.1M于己烷中，1.2mL，2.5mmol)。添加后，将混合物在该温度下搅拌10min，并滴加2-异丙氧基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(0.44mL，2.16mmol)。使混合物升温至室温。将混合物在室温下搅拌1h，然后通过添加浓NH4Cl溶液(5mL)淬灭。添加水(40mL)并将混合物用EtOAc(30mL*2)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到呈黄色油状物的1-乙基-5-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡唑(508mg，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
实施例i-59.中间体C-9(5-氯-1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡唑)
步骤a：在-78℃下向4-碘-1-甲基-1H-吡唑(1.0g，4.8mmol)于无水THF(8mL)中的混悬液中滴加LDA(2M，3.2mL，6.4mmol)。添加后，将混合物在该温度下搅拌20min，然后滴加六氯乙烷(1.4g，5.9mmol)于无水THF(2.5mL)中的溶液。将混合物在-78℃下搅拌30min，然后使其升温至-10℃。然后通过添加水(5mL)淬灭混合物。添加浓NH4Cl溶液(50mL)并用EtOAc(50mL x 2)萃取混合物。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝1/0至95/5)纯化，得到呈黄色固体的5-氯-4-碘-1-甲基-吡唑(670mg，2.76mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.63(s,1H),3.86(s,3H)。
步骤b：将5-氯-4-碘-1-甲基-吡唑(670mg，2.76mmol)、乙酸钾(820mg，8.35mmol)、双(频哪醇合)二硼(1.06g，4.17mmol)和X Phos Pd G2(220mg，0.28mmol)于DMSO(4mL)中的混合物在55℃下搅拌4h。使混合物冷却至室温，添加水(30mL)并用EtOAc(30mL x 2)萃取混合物。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝1/0至0/1)纯化，得到呈黑色固体的5-氯-1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡唑(820mg，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
实施例i-60.中间体C-10((5-氟喹喔啉-6-基)硼酸)
步骤a：将4-溴-3-氟-苯-1,2-二胺(270mg，1.3mmol)和1,4-二噁烷-2,3-二醇(221mg，1.8mmol)于乙醇(5mL)中的混合物在室温下搅拌18h。添加1,4-二噁烷-2,3-二醇(55mg，0.45mmol)并将混合物再搅拌1小时。然后将混合物减压浓缩至干。添加水和乙酸乙酯，分离水层并用乙酸乙酯萃取两次。将合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝1/0至0/1)纯化，得到呈白色固体的6-溴-5-氟-喹喔啉(190mg，0.84mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝227。
步骤b：将6-溴-5-氟-喹喔啉(100mg，0,44mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(336mg，1.32mmol)和乙酸钾(130mg，1.32mmol)于1,4-二噁烷(5mL)中的混合物用氩气脱气10min。添加[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(37mg，0.053mmol)并将所得混合物在氩气下再脱气5min并在100℃下加热10h。将反应混合物在0.45μm Whatman过滤器上过滤，并将固体材料用甲醇和乙腈洗涤。将所得液体减压浓缩至干。将残余物通过制备型HPLC色谱法(柱C18 Sun Fire 30x100，5μm，含0.1％甲酸的水/含0.1％甲酸的乙腈，95/5至50/50)纯化，得到呈白色固体的(5-氟喹喔啉-6-基)硼酸(42mg，0.21mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝193。
实施例i-61.中间体C-11((5-氯喹喔啉-6-基)硼酸)
将6-溴-5-氯-喹喔啉(200mg，0.82mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(417mg，1.64mmol)和乙酸钾(242mg，46mmol)于1,4-二噁烷(5mL)中的混合物用氩气脱气10分钟。然后添加[[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(72mg，0.10mmol)并将所得混合物用氩气再脱气5min并在75℃下搅拌1h。将反应混合物在0.45μm Whatman过滤器上过滤，并将固体材料用甲醇和乙腈洗涤。将所得液体减压浓缩至干。将残余物通过制备型HPLC色谱法(柱C18 Sun Fire30x100，5μm，含0.1％甲酸的水/含0.1％甲酸的乙腈，80/20至30/70)纯化，得到呈白色固体的(5-氯喹喔啉-6-基)硼酸(115mg)。LCMS m/z[M+H]+＝209.1，纯度UV/DAD＝76％。产物不经进一步纯化即用于下一步骤。
实施例i-62.中间体D-1((R)-N-[(5S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺)
步骤a：向中间体B-1(15.0g，62.8mmol)和中间体A-1(20.1g，69.1mmol)于NMP(300mL)中的溶液中添加DIEA(57mL，327mmol)。将混合物在90℃下搅拌6h。将混合物倒入水(1.5L)中，然后用乙酸乙酯(1.0L*2)萃取。将合并的有机相用盐水(500mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至0/1)纯化，得到呈黄色固体的1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-酮(20g，48.5mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.91(d,J＝1.6Hz,1H),8.06-8.11(m,2H),7.49-7.53(m,1H),7.19(d,J＝2.4Hz,1H),4.43(d,J＝13.6Hz,2H),3.36-3.40(m,3H),2.46(s,3H),1.88-1.95(m,2H),1.60-1.63(m,2H)。
步骤b：向1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-酮(20.0g，48.5mmol)于Ti(OEt)4(200mL)中的溶液中添加(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(11.7g，97.0mmol)。将混合物在90℃下搅拌12h。将混合物倒入水(1.0L)和EtOAc(1.0L)中，然后过滤。分离水层，然后用EtOAc(1.0L)萃取。将合并的有机层用盐水(500mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100/1至0/1)纯化，得到呈黄色固体的(NZ,R)-N-[1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-亚基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(15.0g，29.1mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.73(d,J＝1.6Hz,1H),8.61(s,1H),8.01(d,J＝8.4Hz,1H),7.42-7.45(m,1H),5.26(s,2H),4.40(d,J＝11.6Hz,2H),3.24(s,3H),2.40(s,3H),1.95-1.97(m,2H),1.61-1.69(m,2H),1.17(s,9H)。
步骤c：在-78℃下在Ar下向(NZ,R)-N-[1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-亚基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(11.5g，22.3mmol)于无水THF(230mL)中的溶液中滴加DIBAL-H(1M于甲苯中，33.5mL，33.5mmol)。将混合物在-78℃下搅拌30min并添加乙酸乙酯(350mL)，然后添加1M罗谢尔盐水溶液(100mL)，使混合物升温至室温并搅拌30min。分离有机层并用乙酸乙酯(100mL)萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物溶解于二异丙醚(200mL)中并搅拌30min，将沉淀物过滤并用二异丙醚(20mL)洗涤，然后用戊烷(50mL)洗涤，得到呈白色固体的(R)-N-[(5S)-1'-(7-b溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(9.0g，17.39mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.38(d,J＝4.8Hz,1H),8.02(s,1H),7.61(d,J＝7.6Hz,1H),7.22(m,1H),7.10(s,1H),5.78(d,J＝10Hz,1H),4.48(d,J＝10.4Hz,1H),4.37(d,J＝13.2Hz,2H),3.17-3.30(m,3H),2.85(d,J＝16.4Hz,2H),2.41(s,3H),2.02-2.07(m,2H),1.82-1.89(m,2H),1.63-1.67(m,1H),1.36-1.39(m,2H),1.18(s,9H)。
实施例i-63.中间体D-2((5S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺)
在室温下向中间体D-1(980mg，1.89mmol)于二氯甲烷(10mL)和甲醇(10mL)中的混合物中滴加HCl溶液(4M于二噁烷中，3mL，12mmol)。将混合物搅拌2h，然后真空浓缩。将残余物溶解于乙醚中并通过过滤收集固体。将固体溶解于乙酸乙酯(25mL)和水(25mL)中，并用35％ NaOH水溶液将水相的pH值调节至11-12。分离水层并用乙酸乙酯(25mL)萃取。将合并的有机相用盐水(25mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到呈米色固体的(5S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺(640mg，1.55mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝413.2。
实施例i-64.中间体D-3(N-[(5S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]氨基甲酸叔丁酯)
步骤a：在室温下向中间体D-1(6.0g，11.59mmol)于甲醇(60mL)中的混合物中缓慢添加HCl溶液(4M于二噁烷中，15mL，60mmol)。将混合物搅拌1h，然后真空浓缩。将残余物溶解于乙醚中，将混合物搅拌16h，然后过滤，得到呈白色固体的(5S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺盐酸盐(6.15g，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
步骤b：在0℃下向(5S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺盐酸盐(6.15g，粗品)于二氯甲烷(200mL)中的混合物中添加二碳酸二叔丁酯(3.35g，15.3mmol)，接着添加三乙胺(8.2mL，59mmol)。将混合物在室温下搅拌3h，然后冷却至0℃，并添加二碳酸二叔丁酯(1.0g，4.6mmol)和三乙胺(3mL，21.5mmol)。将混合物在室温下搅拌48h。添加浓NaHCO3水溶液(150mL)。分离水层并用二氯甲烷(200mL)萃取。将合并的有机相用盐水(100mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝6/4至4/6)纯化，得到呈粉色固体的N-[(5S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]氨基甲酸叔丁酯(4.87g，9.49mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝513.2。
实施例i-65.中间体D-4((R)-N-[(5S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-氯-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺)
步骤a：如对于中间体D-1步骤a所述，使用中间体B-5(350mg，1.28mmol)和中间体A-1(340mg，1.38mmol)进行类似程序，得到呈黄色固体的1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-氯-螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-酮(185mg，0.41mmol)。LCMSm/z[M+H]+＝446.0。
步骤b：如对于中间体D-1步骤b所述，使用在Ti(OEt)4(1.2mL)中的1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-氯-螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-酮(170mg，0.38mmol)、(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(195mg，1.61mmol)进行类似程序，得到呈黄色固体的(NZ,R)-N-[1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-氯-螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-亚基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(147mg，0.27mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝549.0。
步骤c：如对于中间体D-1步骤c所述，使用(NZ,R)-N-[1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-氯-螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-亚基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(145mg，0.26mmol)和DIBAL-H(1M于甲苯中，0.6mL，0.6mmol)进行类似程序，得到呈橙色固体的(R)-N-[(5S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-氯-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(167mg，粗品)。LCMS m/z[M+H]+＝551.0。
实施例i-66.中间体D-5(1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-甲氧基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺)
向中间体B-6(320mg，粗品)和中间体A-1(260mg，1.05mmol)于NMP(8mL)中的溶液中添加DIEA(1mL，5.74mmol)。将混合物在80℃下搅拌18h。将混合物倒入水(40mL)中并用乙酸乙酯(40mL*2)萃取。将合并的有机相用盐水(40mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，二氯甲烷:甲醇＝1:0至95:5)纯化，得到呈褐色蜡状物的1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-甲氧基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺(76mg，0.17mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝443.1。
实施例i-67.中间体D-6(N-[(5S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-氟-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]氨基甲酸叔丁酯)
向中间体B-7(900mg，粗品)和中间体A-1(860mg，3.5mmol)于DMF(17.5mL)中的溶液中添加DIEA(3.1mL，5.74mmol)。将混合物在60℃下搅拌18h。将混合物倒入1N NaOH水溶液(70mL)中并用乙酸乙酯(50mL*3)萃取。将合并的有机相用盐水(40mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物溶解于THF(10mL)中并向该混合物中添加Boc2O(1.15g，5.27mmol)和三乙胺(1mL，7.17mmol)。将混合物在室温下搅拌20h，然后添加水和乙酸乙酯。分离水层并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷:乙酸乙酯＝1:0至6:4)纯化，得到呈白色泡沫的N-[(5S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-氟-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]氨基甲酸叔丁酯(855mg，1.61mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝531.2。
实施例i-68.中间体D-7((1S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-5-甲氧基-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-胺)
如对于中间体D-5所述，使用中间体B-8(750mg，2.46mmol)和中间体A-1(730mg，2.96mmol)进行类似程序，得到(1S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-5-甲氧基-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-胺(62mg，0.14mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝442.1。
实施例i-69.中间体D-8((1'-(7-溴-6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲氧基-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-7-基)氨基甲酸叔丁酯)
如对于中间体D-6所述，使用中间体B-9(685mg，2mmol)和中间体A-1(493mg，2mmol)进行类似程序，得到呈褐色泡沫且呈对映异构体混合物的(1'-(7-溴-6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲氧基-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-7-基)氨基甲酸叔丁酯(500mg，0.92mmol)，其不经进一步纯化即使用。LCMS m/z[M+H]+＝543.3。
实施例i-70.中间体D-9(3-氨基-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[茚满-2,4'-哌啶]-5-甲腈)
如对于中间体D-5所述，使用中间体B-10(335mg，粗品)和中间体A-1(330mg，1.34mmol)进行类似程序，得到呈橙色固体且呈对映异构体混合物的3-氨基-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[茚满-2,4'-哌啶]-5-甲腈(167mg，0.38mmol)，其未经进一步纯化即使用。LCMS m/z[M+H]+＝443.1。
实施例i-71.中间体D-10(1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺)
如对于中间体D-5所述，使用(1S)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺二盐酸盐(750mg，2.64mmol)和中间体A-1(700mg，2.84mmol)进行类似程序，得到呈红色固体的(S)-1'-(7-溴-6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺(461mg，1.12mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝412.2。
实施例i-72.中间体D-11(1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺)
如对于中间体D-5所述，使用(1S)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺二盐酸盐(240mg，0.85mmol)和中间体A-3(250mg，1.08mmol)进行类似程序，得到呈橙色油状物的(S)-1'-(7-溴吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-1,3-二氢螺[茚-2,4'-哌啶]-1-胺(137mg，0.34mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝398.1。
实施例i-73.中间体D-12(N-[(5S)-1'-(7-溴吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]氨基甲酸叔丁酯)
将中间体B-4(900mg)、中间体A-2(703mg，3.022mmol)、碳酸钾(2.39g，17.3mmol)于二甲基甲酰胺(20mL)中的混合物在80℃下搅拌20h并冷却至室温。过滤去除固体物质后，减压浓缩滤液。将残余物溶解于二氯甲烷(40mL)中，并在室温搅拌下向所得溶液中添加三乙胺(1.2mL，8.63mmol)和焦碳酸二叔丁酯(659mg，3.021mmol)。在室温下20h后，将饱和碳酸钠溶液(100mL)添加到反应介质中并倾析混合物。将有机层用盐水(50mL)洗涤，经MgSO4干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝50/50至0/100)纯化，得到呈白色固体的N-[(5S)-1'-(7-溴吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]氨基甲酸叔丁酯(1.03g，2.06mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝499。
实施例i-74.中间体D-13((R)-N-[(5S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲氧基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺)
将中间体B-34(360mg，1.07mmol)、中间体A-1(290mg，1.17mmol)和碳酸钾(450mg，3.26mmol)于DMF(6mL)中的混合物在85℃下搅拌1h。添加水(30mL)和乙酸乙酯(30mL)，分离水层，然后用乙酸乙酯(30mL)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，二氯甲烷/甲醇＝1/0至95/5)纯化，得到呈粉色泡沫的(R)-N-[(5S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲氧基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(421mg，0.77mmol)。LCMSm/z[M+H]+＝457.3。
实施例i-75.中间体D-14(N-[(7S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-甲基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-7-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺)
如对于中间体D-13所述，使用中间体B-36(284mg，0.88mmol)和中间体A-2(298mg，0.97mmol)进行类似程序，得到呈粉色泡沫的N-[(7S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-甲基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-7-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(355mg，0.67mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝531.2。
实施例i-76.中间体D-15((R)-N-[(7S)-1'-(7-溴-6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-7-基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺)
步骤a：向中间体B-31(490mg，1.79mmol)和中间体A-1(400mg，1.79mmol)于NMP(8mL)中的溶液中添加DIEA(1.07g，8.14mmol)。将混合物在90℃下搅拌4h。将混合物倒入水(50mL)中并用乙酸乙酯(50mL*2)萃取。将合并的有机相用盐水(50mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，二氯甲烷:甲醇＝98:2)纯化，得到预期产物，将其在乙腈(10mL)中研磨，冰冻并过滤，得到呈米色固体的1'-(7-溴-6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-7-酮(515mg，1.24mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.77(m,1H),8.09-8.11(m,1H),8.05(d,J＝2.4Hz 1H),7.63-7.66(m,1H),7.18(d,J＝2.5Hz,1H),4.38-4.43(m,2H),3.33-3.40(m,2H),3.23(s,2H),2.45(s,3H),1.85-1.92(m,2H),1.56-1.59(m,2H)。LCMS m/z[M+H]+412.1。
步骤b：向1'-(7-溴-6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-7-酮(420mg，1.02mmol)在乙酸乙酯(14mL)中的溶液中添加Ti(OEt)4(1.07mL,5.1mmol)和(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(252mg，2.04mmol)。将反应混合物在105℃下搅拌4h。添加Ti(OEt)4(0.53mL，2.55mmol)和(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(126mg，1.02mmol)，并将反应混合物在105℃下搅拌2h。将混合物通过添加水(1mL)淬灭并用乙酸乙酯(20mL)稀释。将反应混合物搅拌15min，然后过滤。将有机层用水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，乙酸乙酯＝100％)纯化，得到呈黄色固体的(NZ,R)-N-[1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-7-亚基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(367mg，0.64mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.76(m,1H),8.02-8.05(m,2H),7.56-7.59(m,1H),7.20(d,J＝2.5Hz,1H),4.40-4.48(m,2H),3.32-3.38(m,2H),3.25(m,2H),3.24(s,3H),2.44(s,3H),1.92-2.10(m,2H),1.67-1.71(m,2H),1.15(s,9H)。LCMS m/z[M+H]+515.2。
步骤c：在-78℃下在Ar下向(NZ,R)-N-[1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-7-亚基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(365mg，0.63mmol)于无水THF(6mL)中的溶液中滴加DIBAL-H(1M于甲苯中，1.9mL，1.9mmol)。将混合物在-78℃下搅拌1.5h并添加乙酸乙酯(15mL)，然后添加1M罗谢尔盐水溶液(3mL)，使混合物升温至室温并搅拌30min。分离有机层并用乙酸乙酯(100mL)萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，二氯甲烷:甲醇＝95:5)纯化，得到呈粉色固体的(R)-N-[(7S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-7-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(330mg，0.59mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.39(m,1H),8.02(d,J＝2.4Hz,1H),7.64(m,1H),7.20-7.23(m,1H),7.11(d,J＝2.4Hz,1H),5.62(d,J＝9.7Hz,1H),4.40(d,J＝9.7Hz,1H),4.25-4.29(m,2H),3.36-3.42(m,2H),3.13(d,J＝16.1Hz,1H),2.76(d,J＝16.1Hz,1H),2.42(s,3H),1.85-1.97(m,2H),1.63-1.66(m,1H),1.41-1.44(m,2H),1.19(s,9H)。LCMS m/z[M+H]+517.2。
实施例i-77.中间体D-16((R)-N-[(1S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-4-甲氧基-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺)
步骤a：向中间体B-27(2.41g，10.4mmol)和中间体A-1(2.33g，9.45mmol)于DMF(50mL)中的溶液中添加DIEA(4.89g，37.8mmol)。将混合物在90℃下搅拌18h。将混合物用乙酸乙酯(50mL)和NH4Cl水溶液(50mL)稀释并用乙酸乙酯(50mL*2)萃取。将合并的有机相用盐水(50mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，二氯甲烷:甲醇＝100:0至98:2)纯化，得到预期产物，将其在iPr2O和乙酸乙酯(10mL)中研磨，冰冻并过滤，得到呈橙色固体的1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-4-甲氧基-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-酮(3.33g，7.54mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝441.1。
步骤b：向1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-4-甲氧基-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-酮(3.27g，7.4mmol)于2-Me-THF(4.5mL)中的溶液中添加Ti(OEt)4(67％纯对，含有33％的TiO2，23.2mL，74.1mmol)和(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.83g，14.8mmol)。将反应混合物在90℃下搅拌18h。将混合物用乙酸乙酯(50mL)和THF(200mL)稀释。添加盐水(50mL)并将混合物搅拌15min。将混合物过滤并减压浓缩。将残余物溶解于Et2O(50mL)中。将醚层用盐水(25mL*3)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到原材料和预期产物的混合物。对粗产物进行相同的方案，得到残余物，将其通过柱色谱法(SiO2，二氯甲烷:甲醇99:1)纯化，得到呈黄色固体的(NZ,R)-N-[1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-4-甲氧基-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-亚基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(2.7g，4.66mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.04(d,J＝2.4Hz,1H),7.87(m,1H),7.44(m,1H),7.24(d,J＝8.0Hz,1H),7.17(d,J＝2.4Hz,1H),4.46(d,J＝13.5Hz,1H),3.90(s,3H),3.10(s,2H),2.45(s,3H),2.00(m,2H),1.61(m,2H),1.33(m,1H),1.18(s,9H)。LCMS m/z[M+H]+＝544.1。
步骤c：在-78℃下在Ar下向(NZ,R)-N-[1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-4-甲氧基-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-亚基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(2.7g，4.66mmol)于无水THF(50mL)中的溶液中滴加DIBAL-H(1M于甲苯中，14mL，14mmol)。将混合物在-78℃下搅拌1.5h并添加乙酸乙酯(15mL)，然后添加1M罗谢尔盐水溶液(3mL)，使混合物升温至室温并搅拌30min。分离有机层并用乙酸乙酯(100mL)萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物溶解于二异丙醚(40mL)中，加热至45℃并在声波浴中搅拌30min，将沉淀物冰冻并过滤，得到呈白色粉末的(R)-N-[(1S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-4-甲氧基-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.97g，3.6mmol)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)d 8.39(m,1H),8.02(d,J＝2.4Hz,1H),7.20(m,1H),7.10(d,J＝2.4Hz,1H),6.83-6.89(m,2H),5.62(d,J＝10.4Hz,1H),4.39(m,3H),3.79(s,3H),3.04(d,J＝16.1Hz,1H),2.63(d,J＝16.1Hz,1H),2.42(s,3H),2.00-2.07(m,1H),1.79-1.85(m,1H),1.60(m,1H),1.36(m,1H),1.17(s,9H)。LCMS m/z[M+H]+＝546.1。
实施例i-78.中间体D-17((R)-N-[(1S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-6-甲氧基-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺)
步骤a：如对于中间体D-16步骤a所述，使用中间体B-28(1.98g，7.38mmol)和中间体A-1进行类似程序，得到(1.98g，7.38mmol)，得到1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-6-甲氧基-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-酮(2.82g，6.4mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝441.1。
步骤b：如对于中间体D-16步骤b所述，使用在Ti(OEt)4(5.2mL)中的1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-6-甲氧基-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-酮(2.20g，4.99mmol)、(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.21g，9.97mmol)进行类似程序，得到呈黄色固体的(NZ,R)-N-[1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-6-甲氧基-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-亚基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.59g，2.9mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.04(d,J＝2.4Hz,1H),7.88(m,1H),7.47(d,J＝8.5Hz,1H),7.25(dd,J＝8.4Hz,J＝2.5Hz,1H),7.17(d,J＝2.5Hz,1H),4.44(d,J＝13.6Hz,1H),3.79(s,3H),3.25(m,2H),3.15(s,2H),2.44(s,3H),1.99(m,2H),1.61(m,2H),1.18(s,11H),0.86(m,1H)。LCMS m/z[M+H]+＝544.1。
步骤c：如对于中间体D-16步骤c所述，使用(NZ,R)-N-[1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-6-甲氧基-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-亚基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.43g，2.64mmol)和DIBAL-H(1M于甲苯中，7.9mL，7.9mmol)进行类似程序，得到呈白色固体的(R)-N-[(1S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-6-甲氧基-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.40g，2.56mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.02(d,J＝2.4Hz,1H),7.10-7.15(m,2H),6.80(m,2H),5.62(d,J＝10.3Hz,1H),4.35-4.41(m,3H),3.70(s,3H),3.25(m,2H),3.08(d,J＝15.6Hz,1H),2.67(m,1H),2.42(s,3H),2.06-2.12(m,1H),1.75-1.82(m,1H),1.62-1.65(m,1H),1.34(m,1H),1.19(m,10H)。LCMS m/z[M+H]+＝546.2。
实施例i-79.中间体D-18((R)-N-[(5S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-甲基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺)
如对于中间体D-13所述，使用中间体B-24(704mg，2.19mmol)和中间体A-1(500mg，2.03mmol)进行类似程序，得到呈灰白色粉末的(R)-N-[(5S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-甲基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(929mg，1.75mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.32(s,1H),8.03(d,J＝2.4Hz,1H),7.12(s,1H),5.73(d,J＝10.4Hz,1H),4.35-4.48(m,3H),3.17-3.28(m,3H),2.70(m,1H),2.46(s,3H),2.43(s,3H),2.14(m,1H),1.73-1.80(m,1H),1.67(m,1H),1.30(m,1H),1.20(s,9H)。LCMS,m/z[M+H]+＝531.1。
实施例i-80.中间体D-19((R)-N-[(7S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-7-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺)
如对于中间体D-13所述，使用中间体B-11(660mg，2.08mmol)和中间体A-1(467mg，1.89mmol)进行类似程序，得到呈浅黄色固体的(R)-N-[(7S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-7-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(827mg，1.58mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.45(s,1H),8.41(d,J＝4.9Hz,1H),8.02(d,J＝2.4Hz,1H),7.30(d,J＝4.9Hz,1H),7.11(d,J＝2.5Hz,1H),5.78(d,J＝10.2Hz,1H),4.56(d,J＝10.2Hz,1H),4.32-4.37(m,2H),3.34(m,2H+H2O),3.16(m,1H),2.80(d,J＝16.7Hz,1H),2.42(s,3H),2.01-2.08(m,1H),1.79-1.86(m,1H),1.62-1.65(m,1H),1.34-1.38(m,1H),1.19(s,9H)。LCMS m/z[M+H]+＝517.0。
实施例i-81.中间体D-20((R)-N-[(5S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-甲氧基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺)
如对于中间体D-13所述，使用中间体B-25(380mg，1.13mmol)和中间体A-1(252mg，1.02mmol)进行类似程序，得到呈白色固体的(R)-N-[(5S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-甲氧基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(510mg，0.93mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.02(d,J＝10.1Hz,2H),7.12(s,1H),6.63(s,1H),5.77(d,J＝10.4Hz,1H),4.34-4.46(m,3H),3.82(s,3H),3.14-3.27(m,3H),2.66(d,J＝15.5Hz,1H),2.42(s,3H),2.10-2.17(m,1H),1.66-1.76(m,2H),1.22-1.25(m,1H),1.18(s,9H)。LCMS m/z[M+H]+＝547.1。
实施例i-82.中间体D-21((R)-N-[(7S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-甲氧基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-7-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺)
如对于中间体D-13所述，使用中间体B-26(248mg，0.63mmol)和中间体A-1(140mg，0.57mmol)进行类似程序，得到呈白色固体的(R)-N-[(7S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-甲氧基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-7-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(263mg，0.48mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.02(d,J＝2.5Hz,2H),7.12(d,J＝2.5Hz,2H),6.68(s,1H),5.65(d,J＝10.0Hz,1H),4.44(d,J＝9.8Hz,1H),4.30(m,2H),3.83(s,3H),3.08-3.12(m,1H),2.89(m,1H),2.66(m,2H),2.30-2.42m,5H),1.99(m,2H),1.79-1.86(m,1H),1.58-61(m,1H),1.37-1.40(m,1H),1.17(s,10H)。LCMS m/z[M+H]+＝547.1。
实施例i-83.中间体D-22((R)-N-[(3R)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[3H-苯并呋喃-2,4'-哌啶]-3-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺)
如对于中间体D-13所述，使用中间体B-12(1.13g，3.65mmol)和中间体A-1(820mg，3.33mmol)进行类似程序，得到呈白色固体的(R)-N-[(3R)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[3H-苯并呋喃-2,4'-哌啶]-3-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.46g，2.66mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.04(d,J＝2.5Hz,2H),7.17-7.29(m,3H),6.85-6.94(m,2H),6.10(d,J＝10.4Hz,1H),4.65(d,J＝10.3Hz,1H),4.40-4.49(m,2H),3.37-3.48(m,2H),2.44(s,3H),2.66(d,J＝15.5Hz,1H),2.42(s,3H),1.84-2.10(m,4H),1.16(s,9H)。LCMS m/z[M+H]+＝518.1。
实施例i-84.中间体D-23((R)-N-[(3R)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[3H-呋喃并[2,3-b]吡啶-2,4'-哌啶]-3-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺)
如对于中间体D-13所述，使用中间体B-13(1.22g，3.94mmol)和中间体A-1(884mg，3.59mmol)进行类似程序，得到呈黄色固体的(R)-N-[(3R)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[3H-呋喃并[2,3-b]吡啶-2,4'-哌啶]-3-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(1.59g，2.75mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.05-8.10(m,2H),7.67-7.70(m,1H),7.19(d,J＝2.5Hz,1H),6.96-6.99(m,1H),4.71(d,J＝10.3Hz,1H),4.41-4.51(m,2H),3.38-3.49(m,2H),2.44(s,3H),2.66(d,J＝15.5Hz,1H),2.42(s,3H),1.87-2.11(m,4H),1.16(s,9H)。LCMS m/z[M+H]+＝519.2。
实施例i-85.中间体D-24(N-[(3R)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[二氢吲哚-2,4'-哌啶]-3-基]氨基甲酸叔丁酯)
如对于中间体D-12所述，使用中间体B-29(419mg，2.06mmol)和中间体A-1(484mg，1.98mmol)进行类似程序，得到(3R)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[二氢吲哚-2,4'-哌啶]-3-胺盐酸盐(691mg，1.67mmol)，然后将其用Boc2O(438mg，2.0mmol)和三乙胺(0.46mL，3.34mmol)于THF(20mL)中处理，在色谱法(SiO2，庚烷:乙酸乙酯＝7:3)后得到呈白色泡沫的N-[(3R)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[二氢吲哚-2,4'-哌啶]-3-基]氨基甲酸叔丁酯(811mg，1.58mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝513.2。
实施例i-86.中间体D-25(N-[(3R)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-1-甲基-螺[二氢吲哚-2,4'-哌啶]-3-基]氨基甲酸叔丁酯)
如对于中间体D-12所述，使用中间体B-30(780mg，2.69mmol)和中间体A-1(602mg，2.44mmol)进行类似程序，得到(3R)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-1-甲基-螺[二氢吲哚-2,4'-哌啶]-3-胺(769mg，1.8mmol)，然后将其用Boc2O(471mg，2.16mmol)和三乙胺(0.5mL，3.60mmol)于DCM(10mL)中处理，在色谱法(SiO2，庚烷:乙酸乙酯＝8:2)后得到呈粉色泡沫的N-[(3R)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-1-甲基-螺[二氢吲哚-2,4'-哌啶]-3-基]氨基甲酸叔丁酯(703mg，1.33mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝527.2。
实施例i-87.中间体D-26(N-[(5R)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-(二氟甲基)-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺)
如对于中间体D-13所述，使用中间体B-32(220mg，粗品)和中间体A-2(210mg，0.67mmol)进行类似程序，得到呈粉色泡沫的N-[(5R)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-(二氟甲基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(148mg，0.26mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝567.2。
实施例i-88.中间体D-27(N-[(5S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-(二氟甲基)-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺)
如对于中间体D-13所述，使用中间体B-35(360mg，粗品)和中间体A-2(470mg，1.5mmol)进行类似程序，在通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝1/0至2/8)纯化后，得到呈粉色泡沫的N-[(5S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-(二氟甲基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(321mg，0.57mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝567.2。
实施例i-89.中间体D-28((R)-N-[(5S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-1-(羟甲基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺)
步骤a：如对于中间体D-13所述，使用中间体B-22(735mg，1.89mmol)和中间体A-1(515mg，2.09mmol)进行类似程序，得到呈粉色固体的1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-1-(三异丙基甲硅烷氧基甲基)螺[7H-环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-5-酮(841mg，1.40mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝598.3。
步骤b：如对于中间体D-1步骤b所述，使用1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-1-(三异丙基甲硅烷氧基甲基)螺[7H-环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-5-酮(835mg，1.39mmol)、(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(375mg，3.09mmol)和Ti(OEt)4(1.5mL，7.2mmol)于MeTHF(10mL)中进行类似程序，得到呈黄色固体的(NZ,R)-N-[1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-1-(三异丙基甲硅烷氧基甲基)螺[7H-环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-5-亚基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(834mg，1.19mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝701.3。
步骤c：如对于中间体D-1步骤c所述，使用(NZ,R)-N-[1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-1-(三异丙基甲硅烷氧基甲基)螺[7H-环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-5-亚基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(830mg，1.18mmol)和DIBAL-H(1M于甲苯中，2.4mL，2.4mmol)进行类似程序，得到呈粉色固体的(R)-N-[(5S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-1-(羟甲基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(313mg,0.57mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝547.2。
实施例i-90.中间体D-29(N-[(7S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-(羟甲基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-7-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺)
如对于中间体D-13所述，使用中间体B-23(430mg，粗品)和中间体A-2(610mg，2.1mmol)进行类似程序，得到呈灰白色固体的(N-[(7S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-3-(羟甲基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[c]吡啶-6,4'-哌啶]-7-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(105mg，0.2mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝547.3。
实施例i-91.中间体D-30((5S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡嗪-6,4'-哌啶]-5-胺)
如对于中间体D-13所述，使用中间体B-37(476mg，粗品)和中间体A-2(470mg，1.5mmol)进行类似程序，在通过柱色谱法(SiO2，二氯甲烷/甲醇＝1/0至9/1)纯化后，得到呈褐色半固体的(5S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡嗪-6,4'-哌啶]-5-胺(46mg，0.11mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝414.2。
实施例i-92.中间体D-31(1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-5-氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-酮)
将5-氟代螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-酮盐酸盐(702mg，2.744mmol)、中间体A-1(615mg，2.49mmol)、碳酸钾(1.03g，7.49mmol)于二甲基甲酰胺(20mL)中的混合物在90℃下搅拌20h并冷却至室温。过滤固体，并减压浓缩滤液。将残余物溶解于乙酸乙酯(100mL)和水(50mL)。分离有机层，用盐水(50mL)洗涤，经MgSO4干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝100/0至77/23)纯化，得到呈米色固体的1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-5-氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-酮(860mg，2mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝429。
实施例i-93.中间体D-32((R)-N-[(1S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-5-氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺)
步骤a：将中间体D-31(860mg，2mmol)、(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(486mg，4mmol)和四乙氧基钛(1.83g，8.01mmol)的混合物在100℃下搅拌15h。将混合物用二氯甲烷(500mL)和水(550mL)稀释并搅拌3h。通过过滤将盐取出并用二氯甲烷(50mL)洗涤。将有机层从滤液分离，然后用盐水(50mL)洗涤，经MgSO4干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝80/20至45/55)纯化，得到呈浅绿色固体的(NZ,R)-N-[1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-5-氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-亚基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(845mg，1.53mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝532。
步骤b：在-65℃下在Ar下向(NZ,R)-N-[1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-5-氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-亚基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(840mg，1.56mmol)于无水THF(22mL)中的溶液中滴加DIBAL-H(1M于甲苯中，7.57mL，7.57mmol)。将混合物在-65℃下搅拌1h，然后添加用水(20mL)稀释的罗谢尔盐的饱和水溶液(80mL)。然后将混合物在室温下搅拌40min，然后用乙酸乙酯(200mL)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，用无水MgSO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝100/0至50/50)纯化，得到呈白色固体(R)-N-[(1S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-5-氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(501mg，0.935mmol)，呈无色油状物。LCMS m/z[M+H]+＝534。
实施例i-94.中间体D-33(N-[(1S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-6-氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-基]氨基甲酸叔丁酯)
将中间体B-38(897mg，2.72mmol)、中间体A-1(704mg，2.86mmol)、碳酸钾(2.26g，16.3mmol)于二甲基乙酰胺(10mL)中的混合物在90℃下搅拌20h并冷却至室温。过滤固体并用二甲基乙酰胺(5mL)冲洗。在搅拌下向滤液中添加三乙胺(1.1mL，8.1mmol)和焦碳酸二叔丁酯(1.2g，5.4mmol)。在室温下15h后，将饱和碳酸钠溶液(200mL)和乙酸乙酯(150mL)添加到反应介质中。通过过滤去除不溶物，倾析滤液。将有机层用水(25mL)、盐水(40mL)洗涤，经MgSO4干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷:乙酸乙酯＝100/0至75/25)纯化，得到呈白色固体的N-[(1S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-6-氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-基]氨基甲酸叔丁酯(1.14g，1.59mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝530。
实施例i-95.中间体D-34(N-[(1S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-4-氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-基]氨基甲酸叔丁酯)
将中间体B-39(980mg，3mmol)、中间体A-1(770mg，3.1mmol)、碳酸钾(2.5g，18mmol)于二甲基乙酰胺(20mL)中的混合物在90℃下搅拌20h并冷却至室温。过滤固体并用二甲基乙酰胺(5mL)冲洗。在搅拌下向滤液中添加三乙胺(1.3mL，9.1mmol)和焦碳酸二叔丁酯(690mg，3.2mmol)。在室温下15h后，将饱和碳酸钠溶液(200mL)和乙酸乙酯(150mL)添加到反应介质中。通过过滤去除不溶物，倾析滤液。将有机层用水(7x 40mL)、盐水(40mL)洗涤，经MgSO4干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷:乙酸乙酯＝100/0至75/25)纯化，得到呈白色固体的N-[(1S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-4-氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-基]氨基甲酸叔丁酯(845mg，1.59mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝530。
实施例i-96.中间体D-35(N-[(1S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-5,6-二氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-基]氨基甲酸叔丁酯)
将中间体B-40(85mg，0.244mmol)、中间体A-1(56mg，0.227mmol)、二乙基异丙基胺(0.119mL，0.682mmol)于二甲基甲酰胺(5mL)中的混合物在90℃下搅拌18h并冷却至室温。在搅拌下向溶液中添加焦碳酸二叔丁酯(198mg，0.908mmol)。在室温下72h后，将反应介质减压浓缩。将残余物溶于乙酸乙酯(100mL)中并添加饱和氯化铵溶液(100mL)。倾析有机层并用乙酸乙酯(2*100mL)萃取水相。合并有机层，用盐水洗涤，经MgSO4干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷:乙酸乙酯＝100/0至70/30)纯化，得到呈白色固体的N-[(1S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-5,6-二氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-基]氨基甲酸叔丁酯(76mg，0.139mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝548。
实施例i-97.中间体D-36(N-[(1S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-4,6-二氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-基]氨基甲酸叔丁酯)
将中间体B-41(400mg，1.15mmol)、中间体A-1(298mg，1.21mmol)、碳酸钾(954mg，6.9mmol)于二甲基乙酰胺(10mL)中的混合物在90℃下搅拌20h并冷却至室温。过滤固体并用二甲基乙酰胺(5mL)冲洗。在搅拌下向滤液中添加三乙胺(0.481mL，3.45mmol)和焦碳酸二叔丁酯(502mg，2.3mmol)。在室温下20h后，将饱和碳酸钠溶液(200mL)和乙酸乙酯(150mL)添加到反应介质中。倾析滤液，并将有机层用水(25mL)、盐水(40mL)洗涤，经MgSO4干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷:乙酸乙酯＝100/0至75/25)纯化，得到呈白色固体的N-[(1S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-4,6-二氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-基]氨基甲酸叔丁酯(510mg，0.81mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝548。
实施例i-98.中间体D-37(N-[(4S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-氯-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-4-基]氨基甲酸叔丁酯)
将中间体B-16(1.04g)、中间体A-1(1.1g，4.48mmol)、碳酸钾(2.36g，17.1mmol)于二甲基甲酰胺(10mL)中的混合物在80℃下搅拌15h并冷却至室温。过滤去除固体物质后，减压浓缩滤液。将残余物溶解于二氯甲烷(40mL)中，并在室温搅拌下向所得溶液中添加三乙胺(1.19mL，8.54mmol)和焦碳酸二叔丁酯(1.03g，4.7mmol)。在室温下15h后，将饱和碳酸钠溶液(50mL)添加到反应介质中并倾析混合物。将有机层用盐水(50mL)洗涤，经MgSO4干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷:乙酸乙酯＝100/0至70/30)纯化，得到呈白色固体的N-[(4S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-氯-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-4-基]氨基甲酸叔丁酯(854mg，1.54mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝553。
实施例i-99.中间体D-38(N-[(4S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲基-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-4-基]氨基甲酸叔丁酯)
向中间体D-37(400mg，0.722mmol)、三甲基环三硼氧烷(0.151mL，1.083mmol)和K2CO3(200mg，1.444mmol)于二噁烷(5mL)中的混合物中添加Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(118mg，0.144mmol)。将混合物用Ar脱气，然后在95℃下搅拌2h。过滤混悬液并真空浓缩滤液。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷:乙酸乙酯＝100/0至50/50)纯化，得到呈米色固体的N-[(4S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲基-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-4-基]氨基甲酸叔丁酯(285mg，0.534mmol)。
实施例i-100.中间体D-39(N-[(4S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-4-基]氨基甲酸叔丁酯)
将中间体B-15(1.21g)、中间体A-1(1.11g，4.5mmol)、碳酸钾(3.56g，25.7mmol)于二甲基甲酰胺(30mL)中的混合物在80℃下搅拌16h。向反应介质中添加更多的碳酸钾(2.0g，14.44mmol)后，在相同温度下继续反应6h，然后在室温下反应15h。过滤去除固体物质后，减压浓缩滤液。将残余物溶解于二氯甲烷(70mL)中，并在室温搅拌下向所得溶液中添加于二氯甲烷(15mL)中的三乙胺(1.7mL，12.16mmol)和焦碳酸二叔丁酯(983mg，4.46mmol)。在室温下15h后，将饱和碳酸钠溶液(150mL)添加到反应介质中并倾析混合物。将有机层用盐水(100mL)洗涤，经MgSO4干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷:乙酸乙酯＝50/50至0/100)纯化，得到呈白色固体的N-[(4S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-4-基]氨基甲酸叔丁酯(770mg，1.48mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝519。
实施例i-101.中间体D-40(N-[(6S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-基]氨基甲酸叔丁酯)
将中间体B-19(1.2g)、中间体A-1(1.2g，4.9mmol)、碳酸钾(3.6g，26.0mmol)于二甲基甲酰胺(50mL)中的混合物在80℃下搅拌3h并在室温下搅拌15h。过滤去除固体物质后，减压浓缩滤液。将残余物溶解于二氯甲烷(85mL)中，并且在室温搅拌下向所得溶液中添加二碳酸二叔丁酯(1.09g，4.96mmol)和三乙胺(2.13mL，15.26mmol)。4h后，添加更多的三乙胺(1mL，7.16mmol)并将混合物在室温下搅拌48h。将饱和碳酸钠溶液(150mL)添加到反应介质中并倾析混合物。将有机层用盐水(100mL)洗涤，经MgSO4干燥并减压浓缩。将反应介质减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷:乙酸乙酯＝80/20至40/60)纯化，得到呈白色固体的N-[(6S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-基]氨基甲酸叔丁酯(1.96g，3.77mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝519。
实施例i-102.中间体D-41(N-[(6S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-氯-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-基]氨基甲酸叔丁酯)
将中间体B-18(813mg)、中间体A-1(565mg，2.29mmol)、二乙基异丙基胺(2.4mL，13.75mmol)于二甲基甲酰胺(15mL)中的混合物在90℃下搅拌18h。添加更多的中间体A-1(280mg，1.146mmol)后，在相同温度下继续反应3h。然后使混合物冷却至室温。在搅拌下向溶液中添加焦碳酸二叔丁酯(2.0g，9.165mmol)。在室温下15h后，将反应介质减压浓缩。将残余物溶于乙酸乙酯(100mL)和饱和氯化铵溶液(100mL)中。倾析有机层并用乙酸乙酯(2*100mL)萃取水相。合并有机层，用盐水洗涤，经MgSO4干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷:乙酸乙酯＝100/0至85/15)纯化，得到呈黄色固体的N-[(6S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-氯-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-基]氨基甲酸叔丁酯(637mg，1.15mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝555。
实施例i-103.中间体D-42(N-[(6S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲基-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-基]氨基甲酸叔丁酯)
将中间体B-20(763mg)、中间体A-1(565mg，2.292mmol)、二乙基异丙基胺(1.2mL，6.877mmol)于二甲基甲酰胺(15mL)中的混合物在90℃下搅拌18h。添加更多的中间体A-1(280mg，1.146mmol)后，在相同温度下继续反应3h。然后使混合物冷却至室温。在搅拌下向溶液中添加二碳酸二叔丁酯(2.0g，9.165mmol)。在室温下15h后，将反应介质减压浓缩。将残余物溶于乙酸乙酯(100mL)和饱和氯化铵溶液(100mL)中。倾析有机层并用乙酸乙酯(2*100mL)萃取水相。合并有机层，用盐水洗涤，经MgSO4干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷:乙酸乙酯＝100/0至65/35)纯化，得到呈米色固体的N-[(6S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲基-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-基]氨基甲酸叔丁酯(343mg，0.64mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝535。
实施例i-104.中间体D-43(N-[(6S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲氧基-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-基]氨基甲酸叔丁酯)
向中间体D-41(290mg)于甲醇(10mL)中的溶液中添加甲醇钠(113mg)。将混合物在90℃下搅拌22h，添加更多的甲醇钠(113mg)并在相同温度下继续反应6天。将反应介质倒入磷酸二氢钾饱和溶液中并将混合物用乙酸乙酯(x 3)萃取。合并有机层，用盐水洗涤，经MgSO4干燥并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷:乙酸乙酯＝100/0至70/30)纯化，得到呈白色固体的N-[(6S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲氧基-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-基]氨基甲酸叔丁酯(200mg，0.364mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝549。
实施例i-105.中间体D-44(N-[(5S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]氨基甲酸叔丁酯)
将中间体B-21(774mg，2.37mmol)、中间体A-1(613mg，2.49mmol)、碳酸钾(3.3g，17mmol)于二甲基甲酰胺(32mL)中的混合物在80℃下搅拌20h并使其冷却至室温。过滤去除固体物质后，减压浓缩滤液。将残余物溶解于二氯甲烷(100mL)中，并且在室温搅拌下向所得溶液中添加二碳酸二叔丁酯(1.31g，5.93mmol)和三乙胺(2.64mL，19mmol)。在室温下15h后，将饱和碳酸钠溶液(150mL)添加到反应介质中并倾析混合物。将有机层用盐水(100mL)洗涤，经MgSO4干燥并减压浓缩。将反应介质减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝80/20至90/10)纯化，得到呈白色泡沫的N-[(5S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-甲基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]氨基甲酸叔丁酯(0.65g，1.24mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝527。
实施例i-106.中间体D-45((R)-N-[(5S)-1'-[7-溴-2-(羟甲基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺)
步骤a：如对于中间体D-1所述，使用中间体B-1(655mg，2.74mmol)和中间体A-4(680mg，2.13mmol)进行类似程序，得到呈橙色固体的7-溴-6-甲基-4-(5-氧代螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲酸乙酯(803mg，1.66mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝484.2。
步骤b：如对于中间体D-1-步骤b所述，使用在Ti(OEt)4(3.5mL)中的7-溴-6-甲基-4-(5-氧代螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲酸乙酯(760mg，1.57mmol)、(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(800mg，6.60mmol)进行类似程序，得到呈黄色固体的7-溴-4-[(5Z)-5-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基]-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲酸乙酯(550mg，0.94mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝587.0。
步骤c：如对于中间体D-1-步骤c所述，使用7-溴-4-[(5Z)-5-[(R)-叔丁基亚磺酰基]亚氨基螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基]-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-2-甲酸乙酯(545mg，0.93mmol)和DIBAL-H(1M于甲苯中，4.0mL，4.0mmol)进行类似程序，得到呈白色固体的(R)-N-[(5S)-1'-[7-溴-2-(羟甲基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(383mg，0.70mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝547.1。
实施例i-107.中间体D-46((R)-N-[(5S)-1'-[7-溴-2-(二氟甲基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺)
如对于中间体D-13所述，使用中间体B-3(355mg，1.15mmol)和中间体A-5(315mg，1.06mmol)进行类似程序，得到呈粉色固体的(R)-N-[(5S)-1'-[7-溴-2-(二氟甲基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(475mg，0.84mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝567.2。
实施例i-108.中间体D-47((R)-N-[(5S)-1'-(7-溴-3-氟-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺)
如对于中间体D-13所述，使用中间体B-3(589mg，1.92mmol)和中间体A-6(469mg，1.77mmol)进行类似程序，得到呈白色固体的(R)-N-[(5S)-1'-(7-溴-3-氟-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(911mg，1.70mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝537.2.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.38(s,1H),8.18(d,J＝4.0Hz,1H),7.63(d,J＝7.2Hz,1H),7.22(dd,J＝7.6Hz,J＝4.8Hz,1H),5.79(d,J＝10.4Hz,1H),4.50(d,J＝10.4Hz,1H),3.89-3.97(m,2H),3.15-3.25(m,3H),2.82-2.89(m,1H),2.42(s,3H),2.05-2.12(m,1H),1.87-1.98(m,1H),1.63-1.70(m,1H),1.35-1.42(m,1H),1.20(s,9H)。
实施例i-109.中间体D-48((R)-N-[(5S)-1'-[7-溴-3-(羟甲基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺)
如对于中间体D-13所述，使用中间体B-3(400mg，1.3mmol)和中间体A-8(300mg，1.08mmol)进行类似程序，得到呈白色粉末的(R)-N-[(5S)-1'-[7-溴-3-(羟甲基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(529mg，0.97mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝547.2.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.38(d,J＝4.9Hz,1H),8.04(s,1H),7.64(d,J＝7.5Hz,1H),7.22(dd,J＝7.5Hz,J＝4.9Hz,1H),5.80(d,J＝10.2Hz,1H),5.20-5.23(m,1H),4.70-4.78(m,2H),4.53(d,J＝10.2Hz,1H),3.65-3.76(m,2H),2.99-3.16(m,3H),2.80(d,J＝16.4Hz,1H),2.46(s,3H),2.14-2.21(m,1H),1.94-2.01(m,1H),1.64-1.68(m,1H),1.39-1.42(m,1H),1.21(s,9H)。
实施例i-110.中间体D-49((R)-N-[(5S)-1'-[7-溴-3-(二氟甲基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺)
如对于中间体D-13所述，使用中间体B-3(423mg，1.4mmol)和中间体A-9(340mg，1.15mmol)进行类似程序，得到呈白色粉末的(R)-N-[(5S)-1'-[7-溴-3-(二氟甲基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(609mg，1.04mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝567.3.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.45(s,1H),8.38(d,J＝4.2Hz,1H),7.63(d,J＝7.5Hz,1H),7.36(t,J＝55Hz,1H),7.22(dd,J＝7.4Hz,J＝5.1Hz,1H),5.81(d,J＝10.3Hz,1H),4.54(d,J＝10.3Hz,1H),3.54-3.60(m,2H),3.03-3.16(m,3H),2.82(d,J＝16.5Hz,1H),2.52(s,3H),2.21-2.28(m,1H),1.98-2.06(m,1H),1.69-1.72(m,1H),1.36-1.39(m,1H),1.23(s,9H)。
最终化合物
实施例S1.(5S)-1'-[7-(2,3-二氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺(化合物1)
步骤a：将中间体D-1(120mg，0.23mmol)、2,3-二氟苯基硼酸(93mg，0.58mmol)、碳酸氢钠(59mg，0.70mmol)和四(三苯基膦)钯(8mg，6.9μmol)于二噁烷(1.8mL)和水(0.3mL)的混合物中的混合物用Ar脱气5min，然后在微波辐射下在120℃下加热30min。当反应未完成时，向反应混合物中添加2,3-二氟苯基硼酸(36.5mg，0.23mmol)、碳酸氢钠(29.5mg，0.35mmol)和四(三苯基膦)钯(8mg，6.9μmol)。将混合物用Ar脱气5min，然后在微波辐射下在120℃下加热30min。添加乙酸乙酯(10mL)并将有机层用水(5mL*2)、盐水(5mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，乙酸乙酯/甲醇＝1/0至97/3)纯化，得到呈白色泡沫的(R)-N-[(5S)-1'-[7-(2,3-二氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(104mg，0.19mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝551.2。
步骤b：在0℃下向(R)-N-[(5S)-1'-[7-(2,3-二氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(101mg，0.18mmol)于二氯甲烷(1mL)和甲醇(1mL)的混合物中的溶液中添加HCl溶液(4N于二噁烷中，0.23mL，0.92mmol)。将混合物在室温下搅拌2h，然后减压浓缩。添加水(5mL)并用1N NaOH水溶液将水相的pH值调节至11-12。将固体过滤并用水洗涤，得到呈白色固体的(5S)-1'-[7-(2,3-二氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺(80mg，0.18mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝447.1.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.22(br d,J＝13Hz,1H),1.64(br d,J＝1Hz,1H),1.74-2.00(m,4H),2.16(s,3H),2.79(d,J＝16Hz,1H),3.15(d,J＝16Hz,1H),3.35-3.47(m,2H),3.92(s,1H),4.35-4.48(m,2H),7.01(d,J＝3Hz,1H),7.18(dd,J＝8,5Hz,1H),7.30-7.40(m,2H),7.57(m,1H),7.66(dt,J＝8,2Hz,1H),7.86(d,J＝2Hz,1H),8.32(m,1H)。SHP2 IC50为6nM。
实施例S1a.化合物2-20
使用适当的原材料和中间体，使用如针对实施例S1(化合物1)所例示的程序或对程序进行修改来制备表2中列出的以下化合物。化合物以其游离碱或盐酸盐的形式分离。
表2.
实施例S2.(1S)-1'-[6-甲基-7-(3-甲基异噁唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-胺(化合物21)
将中间体D-10(75mg，0.18mmol)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)异噁唑(55mg，0.26mmol)、碳酸氢钠(40mg，0.38mmol)和四(三苯基膦)钯(21mg，18.2μmol)于二甲氧基乙烷(2mL)和水(1mL)的混合物中的混合物用Ar脱气5min，然后在微波辐射下在150℃下加热25min。当反应未完成时，向反应混合物中添加3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)异噁唑(27mg，0.13mmol)、碳酸氢钠(40mg，0.37mmol)和四(三苯基膦)钯(11mg，9.5μmol)。将混合物用Ar脱气3min，然后在微波辐射下在150℃下加热15min。添加乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)，分离水层，然后用乙酸乙酯(20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过制备型HPLC色谱法纯化(0.1％HCO2H于H2O中/CH3CN，梯度洗脱90:10至0:100XSELECT CSHPrep C18 5μm OBD 50*250mm)。将固体溶解于二氯甲烷和水中，用1N NaOH水溶液将水层的pH值调节至11-12。将混合物在疏水筒柱(液/液萃取柱，上过滤，经Na2SO4干燥，然后真空浓缩，得到呈白色固体的(1S)-1'-[6-甲基-7-(3-甲基异噁唑-4-基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-胺(13mg，0.03mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝415.2.1HNMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 1.20(br d,J＝13Hz,1H),1.63(m,1H),1.79(td,J＝13,4Hz,1H),1.90(td,J＝12,4Hz,1H),1.88-1.97(m,2H),2.08(s,3H),2.21(s,3H),2.68(d,J＝16Hz,1H),3.12(d,J＝16Hz,1H),3.31-3.43(m,2H),3.88(s,1H),4.39(dd,J＝19,14Hz,2H),7.01(d,J＝2Hz,1H),7.15-7.23(m,3H),7.32(d,J＝7Hz,1H),7.90(d,J＝2Hz,1H),9.09(s,1H)。SHP2 IC50为58nM。
实施例S2a.化合物22-26
使用适当的原材料和中间体，使用如针对实施例S2(化合物21)所例示的程序或对程序进行修改来制备表3中列出的以下化合物。化合物以其游离碱、盐酸盐或甲酸盐的形式分离。
表3.
实施例S3.(5S)-1'-(6-甲基-7-喹喔啉-6-基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺盐酸盐(化合物27)
步骤a：将中间体D-3(80mg，0.16mmol)、喹喔啉-6-硼酸频哪醇酯(126mg，0.47mmol)、碳酸氢钠(39mg，0.47mmol)和四(三苯基膦)钯(22mg，19μmol)于二噁烷(4mL)和水(1mL)的混合物中的混合物用Ar脱气5min，然后在微波辐射下在150℃下加热20min。将反应混合物过滤，然后倒入水中。将水层用EtOAc萃取两次。将合并的有机层用水、盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝1/0至0/1)纯化，得到呈白色泡沫的N-[(5S)-1'-(6-甲基-7-喹喔啉-6-基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]氨基甲酸叔丁酯(76mg，0.135mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝563.6。
步骤b：将N-[(5S)-1'-(6-甲基-7-喹喔啉-6-基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]氨基甲酸叔丁酯(76mg，0.135mmol)于HCl溶液(2.5N于乙醇中，2mL，5mmol)中的混合物在室温下搅拌18h。添加二异丙醚，然后过滤沉淀物，用二异丙醚洗涤，得到呈褐色固体的(5S)-1'-(6-甲基-7-喹喔啉-6-基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺盐酸盐(45mg，0.09mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝463.2.1H(400MHz,DMSO-d6)δppm 1.69(br d,J＝14Hz,1H),1.81(br d,J＝13Hz,1H),1.87-2.10(m,2H),2.30(s,3H),3.28(d,J＝18Hz,1H),3.46-3.61(m,3H),4.35-4.59(m,3H),7.16(br s,1H),7.61(m,1H),7.93-7.99(m,2H),8.20-8.25(m,2H),8.34(d,J＝8Hz,1H),8.68(d,J＝5Hz,1H),8.87(br s,3H),9.02(d,J＝3Hz,1H),9.03(d,J＝3Hz,1H)。SHP2 IC50为16nM。
实施例S3a.化合物28-30
使用适当的原材料和中间体，使用如针对实施例S3(化合物27)所例示的程序或对程序进行修改来制备表4中列出的以下化合物。化合物以其游离碱、盐酸盐或甲酸盐的形式分离。
表4.
实施例S4.(5S)-1'-[7-(2-氟-5-甲氧基-苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺(化合物31)
步骤a：将中间体D-1(200mg，0.37mmol)、(2-氟-5-甲氧基-苯基)硼酸(94mg，0.55mmol)、K3PO4(171mg，0.81mmol)和XPhos(17.5mg，0.037mmol)于THF(6.2mL)和水(1.1mL)的混合物中的混合物用Ar脱气5min，然后添加XPhos Pd G4(32mg，0.037mmol)并将混合物在80℃下搅拌2h。添加水(10mL)并用EtOAc(10mL*2)萃取水层。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，并且过滤和减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯1/0至0/1，随后是乙酸乙酯/甲醇＝1/0至9/1)纯化，得到呈灰白色泡沫的(R)-N-[(5S)-1'-[7-(2-氟-5-甲氧基-苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(146mg，0.26mmol)。LCMSm/z[M+H]+＝563.1。
步骤b：在室温下向(R)-N-[(5S)-1'-[7-(2-氟-5-甲氧基-苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(146mg，0.26mmol)于二氯甲烷(2.6mL)中的溶液中添加HCl溶液(4N于二噁烷中，0.39mL，1.56mmol)。将混合物搅拌45min，添加二氯甲烷，过滤沉淀物并用二氯甲烷洗涤。将固体溶解于水中并用1N NaOH水溶液将混合物的pH值调节至11-12。过滤固体并用水洗涤，得到呈白色固体的(5S)-1'-[7-(2-氟-5-甲氧基-苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺(111mg，0.24mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝459.2.1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.22(br d,J＝14Hz,1H),1.61(br d,J＝14Hz,1H),1.77-1.98(m,4H),2.15(s,3H),2.79(d,J＝16Hz,1H),3.15(d,J＝16Hz,1H),3.32-3.44(m,2H),3.77(s,3H),3.92(s,1H),4.38(tt,J＝9,4Hz,2H),6.97(d,J＝2Hz,1H),7.03(dd,J＝6,3Hz,1H),7.08(m,1H),7.18(dd,J＝7,5Hz,1H),7.27(t,J＝9Hz,1H),7.66(d,J＝7Hz,1H),7.84(d,J＝3Hz,1H),8.32(d,J＝5Hz,1H)。SHP2IC50为13nM。
实施例S4a.化合物32-61
使用适当的原材料和中间体，使用如针对实施例S4(化合物31)所例示的程序或对程序进行修改来制备表5中列出的以下化合物。
表5.
实施例S5.(1S)-1'-[7-(1,5-二甲基吡唑-4-基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-5-甲氧基-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-胺(化合物62)
将中间体D-7(60mg，0.14mmol)、1,5-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(45mg，0.20mmol)、K3PO4(65mg，31mmol)和XPhos(4mg，8.4μmol)于THF(2mL)和水(0.5mL)的混合物中的混合物用Ar脱气5min，然后添加XPhos Pd G4(6mg，7μmol)并将混合物在80℃下搅拌2h。添加水(20mL)并用EtOAc(20mL*2)萃取水层。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，DCM/甲醇＝1/0至9/1)纯化，得到呈橙色固体的(1S)-1'-[7-(1,5-二甲基吡唑-4-基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-5-甲氧基-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-胺(24mg，0.05mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝458.2.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.22(br d,J＝12Hz,1H),1.55(br d,J＝13Hz,1H),1.71-1.95(m,2H),2.05(s,3H),2.17(s,3H),2.63(d,J＝16Hz,1H),3.04(d,J＝16Hz,1H),3.23-3.27(m隐藏,2H),3.73(s,3H),3.80(s,1H),3.82(s,3H),4.27(td,J＝9,4Hz,2H),6.73(dd,J＝8,2Hz,1H),6.76-6.80(m,1H),6.91(d,J＝2Hz,1H),7.20(d,J＝8Hz,1H),7.44(s,1H),7.83(d,J＝2Hz,1H)。SHP2 IC50为17nM。
实施例S6.(5S)-1'-[7-(2-氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡嗪-6,4'-哌啶]-5-胺(化合物63)
如对于实施例S5(化合物62)所述，使用中间体D-30(45mg，0.11mmol)和2-氟苯基硼酸(21mg，0.15mmol)进行类似程序，得到呈灰白色固体状的(5S)-1'-[7-(2-氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡嗪-6,4'-哌啶]-5-胺(16mg，0.04mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝430.3.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 1.27(br d,J＝13Hz,1H),1.67(br d,J＝13Hz,1H),1.84–2.04(m,4H),2.15(s,3H),2.87(d,J＝17Hz,1H),3.20(d,J＝16Hz,1H),3.43-3.54(m,2H),4.00(s,1H),4.26-4.38(m,2H),6.99(dd,J＝2,1Hz,1H),7.32–7.39(m,2H),7.48–7.60(m,2H),7.84(d,J＝2Hz,1H),8.37–8.41(m,2H)。SHP2 IC50为112nM。
实施例S7.(1S)-4-氟-1'-[7-(2-氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-胺盐酸盐(化合物64)
步骤a：将中间体D-34(125mg，0.205mmol)、磷酸三钾(91mg，0,431mmol)、XPhos(9.8mg，0.0205mmol)及四氢呋喃(4mL)和水(1mL)的混合物在Ar下脱气10min。在添加2-氟苯基硼酸(43mg，0.308mmol)和Xphos Pd G4(17.6mg，0.0205mmol)后，将反应介质在Ar下在微波辐射下在70℃加热2h并使其冷却至室温。过滤混合物，并用乙酸乙酯洗涤不溶物。分离有机层，用盐水(3x 10mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷:乙酸乙酯＝100/0至85/15)纯化，得到呈白色固体的N-[(1S)-4-氟-1'-[7-(2-氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-基]氨基甲酸叔丁酯(98mg，0.175mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝546。
步骤b：将N-[(1S)-4-氟-1'-[7-(2-氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-基]氨基甲酸叔丁酯(96mg，0.180mmol)于HCl溶液(2.5M于乙醇中，15mL，37.5mmol)中的溶液在室温下搅拌1h。将混合物减压浓缩至干。将残余物溶解于甲醇中并将溶液减压浓缩至干。再重复该操作一次。将产物在乙酸乙酯(5mL)中研磨，过滤并将固体用戊烷洗涤，得到呈白色固体的(1S)-4-氟-1'-[7-(2-氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-胺盐酸盐(76mg，0.137mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝446.1.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 1.62(br d,J＝14Hz,1H),1.69(br d,J＝12Hz,1H),1.81-1.99(m,2H),2.16(s,3H),3.12(m,1H),3.24(m,1H),3.40-3.51(m,2H),4.37-4.52(m,3H),7.04(s,1H),7.22(t,J＝9Hz,1H),7.30-7.46(m,4H),7.49(t,J＝7Hz,1H),7.58(m,1H),7.88(d,J＝2Hz,1H),8.51(br s,3H)。IC50为46nM。
实施例S7a.化合物65-107
使用适当的原材料和中间体，使用如针对实施例S7(化合物64)所例示的程序或对程序进行修改来制备表6中列出的以下化合物。化合物以盐酸盐或甲酸盐的形式分离。
表6.
N.D.＝未测定
实施例S8.化合物108-147
使用适当的原材料和中间体，使用如针对实施例S4(化合物31)所例示的程序或对程序进行修改，但对于Suzuki交叉偶联反应使用SPhos/SPhos Pd G4代替XPhos/XPhos PdG4来制备表7中列出的以下化合物。化合物以其游离碱或盐酸盐的形式分离。
表7.
实施例S9.化合物148-152.
使用适当的原材料和中间体，使用如针对实施例S5(化合物62)所例示的程序或对程序进行修改，但对于Suzuki交叉偶联反应使用SPhos/SPhos Pd G4代替XPhos/XPhos PdG4来制备表8中列出的以下化合物。
表8.
实施例S10.化合物153-163.
使用适当的原材料和中间体，使用如针对实施例S7(化合物64)所例示的程序或对程序进行修改，但对于Suzuki交叉偶联反应使用SPhos/SPhos Pd G4代替XPhos/XPhos PdG4来制备表9中标识的以下化合物。化合物以其游离碱或盐酸盐的形式分离。
表9.
实施例S11.(5S)-1'-[7-(2,3-二甲基苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺(化合物164)
将中间体D-2(20.6mg，50μmol)、2,3-二甲基苯基硼酸(15mg，100μmol)、K3PO4(24mg，110μmol)和XPhos(2.4mg，10μmol)的混合物用Ar脱气5min，然后添加XPhos Pd G4(4.3mg，10μmol)并将混合物在75℃下搅拌2h。将反应混合物用乙酸乙酯(10mL)和5％NaCl水溶液(5mL)稀释。通过XTR筒柱干燥有机层，并用乙酸乙酯冲洗。将100mg的Si-硫醇清除剂添加到有机相中。将混合物在室温下振摇48h，在具有玻璃料的筒柱上过滤并用乙酸乙酯冲洗。将滤液减压浓缩。将残余物溶于1.0ml DMF中，经筒柱过滤，用0.50ml DMF冲洗并在Viridis BEH-2-乙基吡啶柱上通过SFC(CO2/MeOH＝85/15至70/30)纯化，得到(5S)-1'-[7-(2,3-二甲基苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺(4mg，0.009mmol)。1H NMR(600MHz,DMSO-d6)δppm 1.23(br d,J＝13Hz,1H),1.62(br d,J＝13Hz,1H),1.81–1.96(m,5H),2.04(s,3H),2.32(s,3H),2.80(d,J＝16Hz,1H),3.15(d,J＝16Hz,1H),3.30-3.40(m,2H),3.95(s,1H),4.30-4.40(m,2H),6.93-6.95(m,1H),7.07(d,J＝7Hz,1H),7.16–7.22(m,2H),7.27(d,J＝7Hz,1H),7.68(d,J＝7.5Hz,1H),7.81(d,J＝2Hz,1H),8.33(d,J＝5Hz,1H)。LCMS m/z[M+H]+＝439.1。SHP2 IC50为7nM。
实施例S11a.化合物165-206
使用适当的原材料，使用如针对实施例S11(化合物164)所例示的程序或对程序进行修改来制备表10中列出的以下化合物。
表10.
实施例S12.[4-[4-[(5S)-5-氨基螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基]-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-7-基]-3-氯-2-吡啶基]甲醇(化合物207)
步骤a：如对于实施例S4(化合物31)所述，使用中间体A-1(220mg，0.425mmol)和中间体C-4(173mg，0.64mmol)进行类似程序，得到呈褐色蜡状物的(R)-N-[(5S)-1'-[7-[3-氯-2-(四氢吡喃-2-基氧甲基)-4-吡啶基]-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(225mg，0.34mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝664.2。
步骤b：如对于实施例S4(化合物31)-步骤b所述，使用(R)-N-[(5S)-1'-[7-[3-氯-2-(四氢吡喃-2-基氧基甲基)-4-吡啶基]-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(94mg，0.14mmol)和HCl溶液(4N于二噁烷中，0.25mL，1mmol)进行类似程序，得到呈米色固体的[4-[4-[(5S)-5-氨基螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基]-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-7-基]-3-氯-2-吡啶基]甲醇(52mg，0.11mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝476.2.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.25(br d,J＝13Hz,1H),1.64(br d,J＝13Hz,1H),1.76-1.98(m,2H),2.08(s,3H),2.08-2.21(m,2H),2.80(d,J＝16Hz,1H),3.16(d,J＝16Hz,1H),3.35-3.50(m,2H),3.95(s,1H),4.44(ddd,J＝13,8,4Hz,2H),4.74(d,J＝6Hz,2H),5.28(t,J＝6Hz,1H),7.02(dd,J＝3,2Hz,1H),7.19(dd,J＝8,5Hz,1H),7.52(d,J＝5Hz,1H),7.68(dt,J＝7,1Hz,1H),7.85(d,J＝3Hz,1H),8.33(dd,J＝4,1Hz,1H),8.65(d,J＝5Hz,1H)。SHP2 IC50为16nM。
实施例S13.(5S)-1'-[7-(4-氟-1H-吲哚-7-基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺(化合物208)
步骤a：将中间体D-1(150mg，0.29mmol)、4-氟-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吲哚(100mg，0.38mmol)、碳酸钾(140mg，1.01mmol)和Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(25mg,0.03mmol)于二噁烷(1.8mL)和水(0.3mL)的混合物中的混合物用Ar脱气5min，然后在微波辐射下在110℃下加热45min。添加EtOAc(10mL)和水(10mL)，分离水层，然后用EtOAc(10mL)萃取。将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，并且过滤和减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，DCM/甲醇＝1/0至95/5)纯化，得到呈浅褐色固体的N-[(5S)-1'-[7-(4-氟-1H-吲哚-7-基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(110mg，0.19mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝572.3。
步骤b：如对于实施例S1-步骤b所述，使用N-[(5S)-1'-[7-(4-氟-1H-吲哚-7-基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(105mg，0.18mmol)和HCl溶液(4N于二噁烷中，0.5mL，2mmol)进行类似程序，得到呈白色固体的(5S)-1'-[7-(4-氟-1H-吲哚-7-基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺(37mg，0.08mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝468.3.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 1.26(br d,J＝13Hz,1H),1.65(br d,J＝13Hz,1H),1.82-2.03(m,4H),2.09(s,3H),2.81(d,J＝16Hz,1H),3.17(d,J＝16Hz,1H),3.34-3.44(m,2H),3.95(s,1H),4.35-4.46(m,2H),6.56(dd,J＝3,2Hz,1H),6.90(dd,J＝10,8Hz,1H),6.95(d,J＝2Hz,1H),7.09(dd,J＝8,5Hz,1H),7.19(dd,J＝7,5Hz,1H),7.27(t,J＝3Hz,1H),7.68(d,J＝7Hz,1H),7.76(d,J＝2Hz,1H),8.33(d,J＝5Hz,1H),11.05(brs,1H)。SHP2 IC50为3nM。
实施例S14.(5S)-5-氨基-1'-[7-(2-氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-3-甲腈(化合物209)
步骤a：如对于实施例S4(化合物31)所述，使用中间体D-4(165mg，0.3mmol)和2-氟苯基硼酸(65mg，0.46mmol)进行类似程序，得到N-[(5S)-3-氯-1'-[7-(2-氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(44mg，粗品)。
步骤b：将N-[(5S)-3-氯-1'-[7-(2-氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(44mg，粗品)于DMF(1.5mL)中的溶液用Ar脱气5min，然后添加氰化锌(20mg，0.17mmol)和XPhos PdG4(7mg，8.1μmol)。将混合物在120℃下搅拌45min，然后使混合物冷却至室温。添加乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)，用1N NaOH水溶液将水相的pH值调节至11-12。分离有机层并用乙酸乙酯(20mL)萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到N-[(5S)-3-氰基-1'-[7-(2-氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(53mg，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
步骤c：如对于实施例S4(化合物31)-步骤b所述，使用N-[(5S)-3-氰基-1'-[7-(2-氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(53mg，粗品)和HCl溶液(4N于二噁烷中，0.25mL，1mmol)进行类似程序，得到呈白色固体的(5S)-5-氨基-1'-[7-(2-氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-3-甲腈(6mg，13μmol)。LCMS m/z[M+H]+＝454.2.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 1.27(m,1H),1.65(br d,J＝13Hz,1H),1.78-2.02(m,2H),2.14(s,3H),2.95(d,J＝16Hz,1H),3.26(m,1H),3.32-3.45(m,2H),4.04(s,1H),4.40(br t,J＝11Hz,2H),6.99(d,J＝2Hz,1H),7.32-7.40(m,2H),7.48-7.60(m,2H),7.85(d,J＝2Hz,1H),8.11(s,1H),8.82(d,J＝2Hz,1H)。SHP2 IC50为21nM。
实施例S15.(5S)-1'-(7-环丙基-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺(化合物210)
步骤a：将中间体D-1(60mg，0.11mmol)、环丙基三氟硼酸钾(52mg，0.35mmol)、碳酸钾(56mg，0.40mmol)和四(三苯基膦)钯(6.8mg，5.8μmol)于甲苯(0.6mL)和水(0.06mL)的混合物中的混合物用Ar脱气5min，然后在100℃下加热18h。使混合物冷却至室温。添加EtOAc(10mL)和水(5mL)。分离水层并用EtOAc(5mL*2)萃取。将合并的有机层用1N NaOH溶液(10mL)、盐水(10mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，二氯甲烷/甲醇＝1/0至95/5)纯化，得到呈橙色蜡状物的(R)-N-((S)-1'-(7-环丙基-6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(47mg，0.10mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝479.2。
步骤b：如对于实施例S1-步骤b所述，使用(R)-N-((S)-1'-(7-环丙基-6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(47mg，0.10mmol)和HCl溶液(4N于二噁烷中，0.125mL，0.50mmol)进行类似程序，得到呈灰白色固体状的(5S)-1'-(7-环丙基-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺(31mg，0.08mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝375.3.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ0.79(m,J＝4Hz,2H),1.06-1.27(m,3H),1.57(br d,J＝13Hz,1H),1.75-2.01(m,5H),2.41(s,3H),2.75(d,J＝16Hz,1H),3.11(d,J＝16Hz,1H),3.16-3.28(m,2H),3.90(s,1H),4.18-4.28(m,2H),6.87(d,J＝2Hz,1H),7.17(dd,J＝7,5Hz,1H),7.66(d,J＝7Hz,1H),7.94(d,J＝2Hz,1H),8.31(d,J＝5Hz,1H)。SHP2 IC50为>1000nM。
实施例S16.(3S)-3-氨基-1'-[7-(1,5-二甲基吡唑-4-基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[茚满-2,4'-哌啶]-5-甲腈(化合物211)和(3R)-3-氨基-1'-[7-(1,5-二甲基吡唑-4-基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[茚满-2,4'-哌啶]-5-甲腈(化合物212)
如对于实施例S4(化合物31)所述，使用中间体D-9(160mg，0.37mmol)和1,5-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(125mg，0.56mmol)进行类似程序，得到对映异构体的混合物，将其在40℃下在IH-5μm、3x 25cm柱上使用超临界CO2和MeOH(+0.1％ TEA)作为流动相进行SFC纯化，用在CO2中的20％ MeOH(+0.1％ TEA)进行等度洗脱，得到第一洗脱物，为呈白色固体的(3R)-3-氨基-1'-[7-(1,5-二甲基吡唑-4-基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[茚满-2,4'-哌啶]-5-甲腈(20mg，0.04mmol)，接着得到呈白色固体的(3S)-3-氨基-1'-[7-(1,5-二甲基吡唑-4-基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[茚满-2,4'-哌啶]-5-甲腈(56mg，0.12mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝453.2.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)1.13(br d,J＝13Hz,1H),1.61(d,J＝13Hz,1H),1.79(td,J＝12,4Hz,1H),1.85-1.98(m,3H),2.06(s,3H),2.18(s,3H),2.75(d,J＝17Hz,1H),3.21(br d,J＝17Hz,1H),3.26-3.38(m,2H),3.83(s,3H),3.92(s,1H),4.18-4.45(m,2H),6.92(d,J＝3Hz,1H),7.42(d,J＝8Hz,1H),7.45(s,1H),7.64(d,J＝8Hz,1H),7.71(s,1H),7.84(d,J＝2Hz,1H)。化合物211，SHP2 IC50为8nM。化合物212，SHP2 IC50为288nM。
实施例S17.(7S)-1'-[7-(2,3-二氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲氧基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-7-胺(化合物213)和(7R)-1'-[7-(2,3-二氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲氧基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-7-胺(化合物214)
如对于实施例S1-步骤a所述，使用中间体D-8(250mg，0.46mmol)和(2,3-二氟苯基)硼酸(109mg，0.69mmol)进行类似程序，得到呈非对映异构体的混合物的N-[1'-[7-(2,3-二氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲氧基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-7-基]氨基甲酸叔丁酯(198mg，0.34mmol)。将该混合物用TFA(0.38mL，5.1mmol)在二氯甲烷(0.5mL)中处理，2h后，将混合物真空浓缩。将残余物溶解于乙酸乙酯(5mL)和1N NaOH水溶液(5mL)中，分离水层并用乙酸乙酯(5mL)萃取。将合并的有机相用盐水(5mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。使用超临界CO2和MeOH(+0.1％ TEA)作为流动相在IH-5μm，3x 25cm柱上在40℃下对残余物进行SFC纯化，用25％ MeOH(+0.1％TEA)在CO2中进行等度洗脱，得到呈白色泡沫的(7S)-1'-[7-(2,3-二氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲氧基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-7-胺(38mg，80μmol)和(7R)-1'-[7-(2,3-二氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲氧基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-7-胺(21mg，44μmol)。LCMS m/z[M+H]+＝477.2.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.35(br d,J＝13Hz,1H),1.64(br d,J＝13Hz,1H),1.77-2.04(m,4H),2.16(s,3H),2.65(br d,J＝13Hz,1H),2.98(d,J＝16Hz,1H),3.44-3.55(m,2H),3.87(s,3H),3.89(s,1H),4.24-4.35(m,2H),6.62(d,J＝8Hz,1H),7.01(dd,J＝3,1Hz,1H),7.33-7.39(m,2H),7.51-7.62(m,2H),7.86(d,J＝2Hz,1H)。化合物213，SHP2 IC50为22nM。化合物214，SHP2 IC50为594nM。
实施例S18.(7S)-1'-[7-(2-氯-3-氟-苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲氧基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-7-胺(化合物215)和(7R)-1'-[7-(2-氯-3-氟-苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲氧基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-7-胺(化合物216)
如对于实施例S17(化合物213和214)所述，使用中间体D-8(250mg，0.46mmol)和2-氯-3-氟苯基硼酸(96mg，0.55mmol)进行类似程序，在脱保护后得到对映异构体的混合物，将其进行SFC纯化，得到(7S)-1'-[7-(2-氯-3-氟-苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲氧基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-7-胺(41mg，83μmol)和(7R)-1'-[7-(2-氯-3-氟-苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲氧基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-7-胺(22mg，44μmol)。LCMS m/z[M+H]+＝493.2.1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.35(br d,J＝14Hz,1H),1.64(br d,J＝13Hz,1H),1.79-2.00(m,2H),2.08(s,3H),2.65(d,J＝15Hz,1H),2.98(d,J＝15Hz,1H),3.43-3.58(m,2H),3.87(s,3H),3.88(s,1H),4.29(m,2H),6.62(d,J＝8Hz,1H),6.99(dd,J＝3,1Hz,1H),7.37(m,1H),7.49-7.60(m,3H),7.84(d,J＝2Hz,1H)。化合物215，SHP2 IC50为23nM。化合物216，SHP2 IC50为685nM。
实施例S19.(1S)-1'-[7-(3-氯-2-甲基-4-吡啶基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-5-氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-胺甲酸盐(化合物217)
步骤a：将1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-5-氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-酮(150mg，0.35mmol)、3-氯-2-甲基吡啶-4-硼酸(183mg，1.05mmol)和碳酸氢钠(88mg，1.05mmol)于二噁烷(4mL)和水(1mL)中的混合物用Ar脱气10min。添加三苯基膦钯(48.5mg，0.042mmol)后，将混合物再次用Ar脱气5min，然后在微波辐射下在150℃下加热20min。使反应介质冷却至室温并通过0.45μm孔Whatman过滤器过滤。向滤液中添加水，并将所得混合物用乙酸乙酯萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝100/0至0/100)纯化，得到呈粉色固体的1'-[7-(3-氯-2-甲基-4-吡啶基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-5-氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-酮(35mg，0.074mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝476。
步骤b：将1'-[7-(3-氯-2-甲基-4-吡啶基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-5-氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-酮(34mg，0.071mmol)、(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(17mg，0.143mmol)和四乙氧基钛(65mg，0.286mmol)的混合物在100℃下搅拌15h。将混合物用二氯甲烷和水稀释。通过过滤将盐取出并用二氯甲烷洗涤。将有机层从滤液中倾析并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷/乙酸乙酯＝100/0至0/100)纯化，得到(NZ,R)-N-[1'-[7-(3-氯-2-甲基-4-吡啶基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-5-氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-亚基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(32mg，0.055mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝579。
步骤c：在-65℃下在Ar下向(NZ,R)-N-[1'-[7-(3-氯-2-甲基-4-吡啶基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-5-氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-亚基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(32mg，0.055mmol)于无水THF(1ml)中的溶液中滴加DIBAL-H(1M于甲苯中，0,265mL，0.265mmol)。将混合物在-65℃下搅拌45min，然后添加1M罗谢尔盐的水溶液(10mL)。使混合物升温至室温，搅拌20min，用水稀释并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水MgSO4干燥，过滤并减压浓缩，得到呈白色固体的(R)-N-[(1S)-1'-[7-(3-氯-2-甲基-4-吡啶基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-5-氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(52mg)，其不经进一步纯化即使用。
步骤d：如对于实施例S1-步骤b所述，使用(R)-N-[(1S)-1'-[7-(3-氯-2-甲基-4-吡啶基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-5-氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(32mg，0.055mmol)和HCl溶液(4N于二噁烷中，1mL，4mmol)进行类似程序。在反应完成之后，将混合物减压浓缩并且将残余物通过制备型HPLC色谱法(柱C18Sun Fire30x100 5μm，含0.1％甲酸的乙腈/含0.01％甲酸的水＝10/90至60/40)进行纯化，得到呈白色固体的(1S)-1'-[7-(3-氯-2-甲基-4-吡啶基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-5-氟-螺[茚满-2,4'-哌啶]-1-胺甲酸盐(12mg，0.023mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝477.2.1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 1.36(br d,J＝12Hz,1H),1.60(br d,J＝13Hz,1H),1.78-1.92(m,2H),2.07(s,3H),2.65(s,3H),2.81(d,J＝16Hz,1H),3.14(d,J＝16Hz,1H),3.41-3.44(m隐藏,2H),4.01(s,1H),4.41(d,J＝13Hz,2H),6.99-7.06(m,2H),7.08(dd,J＝9,2Hz,1H),7.38(d,J＝5Hz,1H),7.40(d,J＝5Hz,1H),7.85(d,J＝2Hz,1H),8.18(s,1H),8.54(d,J＝5Hz,1H)。SHP2 IC50为8nM。
实施例S20.(6S)-6-氨基-1'-[7-(3-氯-2-甲基-4-吡啶基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-2-醇盐酸盐(化合物218)
步骤a：将中间体D-43(97mg，0.1765mmol)、(3-氯-2-甲基-4-吡啶基)硼酸(45mg，0.265mmol)、磷酸三钾(79mg，0.371mmol)及四氢呋喃(4mL)和水(1mL)的混合物在Ar下脱气10min。添加XPhos(8.4mg，0.0176mmol)和Xphos Pd G4(15.1mg，0.0176mmol)后，将反应介质用Ar脱气5min并在微波辐射下在85℃下加热2.5h。添加更多的(3-氯-2-甲基-4-吡啶基)硼酸(45mg，0.265mmol)、XPhos(8.4mg，0.0176mmol)和Xphos Pd G4(15.1mg，0.0176mmol)后，将混合物在Ar下脱气5min，在微波辐射下在85℃下加热3.5h并使其冷却至室温。将乙酸乙酯和水添加到反应混合物中，分离有机层，并用乙酸乙酯(2*10mL)萃取水相。将合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷:乙酸乙酯＝100/0至0/100)纯化，得到呈黄色固体的N-[(6S)-1'-[7-(3-氯-2-甲基-4-吡啶基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲氧基-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-基]氨基甲酸叔丁酯(52mg，0.087mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝596。
步骤b：将N-[(6S)-1'-[7-(3-氯-2-甲基-4-吡啶基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲氧基-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-基]氨基甲酸叔丁酯(52mg，0.087mmol)和盐酸溶液(4M于二噁烷中，5mL，20mmol)的混合物在室温下搅拌3h，并减压浓缩至干。将残余物在二异丙醚中研磨并通过过滤分离，得到呈浅橙色固体的(6S)-6-氨基-1'-[7-(3-氯-2-甲基-4-吡啶基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-2-醇盐酸盐(30mg，0.062mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝482.1.1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 1.68-2.04(m,4H),2.09(s,3H),2.67(s,3H),2.72-2.87(m,2H),3.27(t,J＝12Hz,1H),3.42(t,J＝12Hz,1H),4.13(s,1H),4.46(d,J＝14Hz,1H),4.54(d,J＝14Hz,1H),7.06(d,J＝2Hz,1H),7.43(d,J＝5Hz,1H),7.89(d,J＝3Hz,1H),8.32(brs,3H),8.57(d,J＝5Hz,1H),11.70(s,1H)。SHP2 IC50为179nM。
实施例S21.(6S)-1'-[7-(3-氯-2-甲基-4-吡啶基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲氧基-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-胺(化合物219)
向如实施例S20(化合物218)中所描绘那样制备的N-[(6S)-1'-[7-(3-氯-2-甲基-4-吡啶基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲氧基-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-基]氨基甲酸叔丁酯(70mg，0.117mmol)于二氯甲烷(3mL)中的溶液中添加三氟乙酸(0.6mL，8.0mmol)。将混合物在室温下搅拌2h，然后减压浓缩至干。向冷却至4℃的残余物中添加饱和碳酸氢钠溶液(20mL)。用二氯甲烷萃取所得混合物。将合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并减压浓缩，得到呈灰白色固体的(6S)-1'-[7-(3-氯-2-甲基-4-吡啶基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲氧基-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-胺(28mg，0.056mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝495.9.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 1.58-1.84(m,3H),1.92(m,1H),2.07(s,3H),2.65(s,3H),2.68-2.81(m,2H),3.39-3.60(m,2H),3.96(br s,1H),4.01(s,3H),4.20-4.46(m,2H),7.02(d,J＝3Hz,1H),7.40(d,J＝5Hz,1H),7.85(d,J＝3Hz,1H),8.54(d,J＝5Hz,1H)。SHP2 IC50为5nM。
实施例S22.(6S)-1'-[7-(1,5-二甲基吡唑-4-基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲氧基-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-胺(化合物220)
步骤a：将中间体D-43(85mg，0.155mmol)、1,5-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1H-吡唑(53mg，0.232mmol)、磷酸三钾(69mg，0.325mmol)及四氢呋喃(4mL)和水(1mL)的混合物在Ar下脱气10min。添加XPhos(7.4mg，0.016mmol)和XphosPd G4(13.3mg，0.016mmol)后，将反应介质用Ar脱气5min并在微波辐射下在85℃下加热3.5h，并使其冷却至室温。将乙酸乙酯和水添加到反应混合物中，分离有机层，并用乙酸乙酯(2*10mL)萃取水相。将合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，庚烷:乙酸乙酯＝100/0至20/80)纯化，得到呈黄色固体的N-[(6S)-1'-[7-(1,5-二甲基吡唑-4-基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲氧基-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-基]氨基甲酸叔丁酯(81mg，0.143mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝565。
步骤b：向N-[(6S)-1'-[7-(1,5-二甲基吡唑-4-基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲氧基-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-基]氨基甲酸叔丁酯(81mg，0.143mmol)于二氯甲烷(5mL)中的溶液中添加三氟乙酸(0.6mL，8.0mmol)。将混合物在室温下搅拌1h，然后减压浓缩至干。向冷却至4℃的残余物中添加饱和碳酸氢钠溶液(20mL)。用二氯甲烷萃取所得混合物。将合并的有机层用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并减压浓缩，得到呈浅粉色固体的(6S)-1'-[7-(1,5-二甲基吡唑-4-基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲氧基-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噻唑-5,4'-哌啶]-6-胺(47mg，0.10mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝465.2.1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 1.60–1.67(m,2H),1.72–1.80(m,1H),1.87–1.97(m,1H),2.06(s,3H),2.18(s,3H),2.60–2.74(m,2H),3.30-3.48(m,2H，被水部分掩蔽),3.82(s,3H),3.90(br s,1H),4.00(s,3H),4.14-4.27(m,2H),6.93(d,J＝2Hz,1H),7.45(s,1H),7.84(d,J＝2Hz,1H)。SHP2 IC50为26nM。
实施例S23.(5S)-1'-[7-(2,3-二氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲氧基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺)(化合物221)和((5S)-5-氨基-1'-[7-(2,3-二氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-2-醇盐酸盐(化合物222)
步骤a：如对于实施例S1-步骤a所述，使用中间体D-13(109mg，0.20mmol)和(2,3-二氟苯基)硼酸(38mg，0.24mmol)进行类似程序，得到(R)-N-[(5S)-1'-[7-(2,3-二氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲氧基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(89mg，0.15mmol)。
步骤b：在0℃下向(R)-N-[(5S)-1'-[7-(2,3-二氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲氧基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(84mg，0.14mmol)于二氯甲烷(0.7mL)和甲醇(0.7mL)中的溶液中添加HCl溶液(4N于二噁烷中，0.18mL，0.72mmol)。将混合物在室温下搅拌2h，然后减压浓缩。添加水(5mL)并用乙醚(5mL*2)洗涤水层。用1N NaOH水溶液将水相的pH值调节至11-12。用乙酸乙酯(10mL*2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(10mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，二氯甲烷/甲醇＝95/5)纯化。将获得的白色固体溶解于二氯甲烷(1mL)中并添加HCl溶液(2N于乙醚中，0.22mL，0.44mmol)，并将混合物在室温下搅拌10min，然后过滤。将固体通过制备型HPLC色谱法(0.1％ HCl于H2O中/CH3CN，梯度洗脱84:16至0:100XSELECT CSH Prep C18 5μm OBD 50*250mm)纯化，得到呈白色固体的(5S)-5-氨基-1'-[7-(2,3-二氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-2-醇盐酸盐(15mg，0.03mmol)和呈白色固体的(5S)-1'-[7-(2,3-二氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲氧基-螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺(15mg，0.03mmol)，这是在通过用饱和碳酸氢钠溶液处理脱盐后获得的。
化合物221：LCMS m/z[M+H]+＝477.2.1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 1.38(br d,J＝13Hz,1H),1.60(br d,J＝13Hz,1H),1.78-1.90(m,2H),2.16(s,3H),2.77(d,J＝16Hz,1H),3.05(d,J＝17Hz,1H),3.38-3.49(m,2H),3.84(s,3H),3.88(s,1H),4.34-4.45(m,2H),6.62(d,J＝8Hz,1H),7.01(dd,J＝2,1Hz,1H),7.35(td,J＝6,3Hz,2H),7.54-7.60(m,1H),7.62(d,J＝8Hz,1H),7.87(d,J＝2Hz,1H)。SHP2 IC50为21nM。
化合物222：LCMS m/z[M+H]+＝463.2。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 1.65(br d,J＝13Hz,1H),1.73-1.90(m,2H),1.99(m,1H),2.19(s,3H),2.89(d,J＝18Hz,1H),3.04(d,J＝18Hz,1H),3.23-3.42(m,2H),4.16(q,J＝5Hz,1H),4.30-4.59(m,2H),6.26(d,J＝9Hz,1H),7.10(t,J＝2Hz,1H),7.26-7.45(m,2H),7.59(m,1H),7.65(d,J＝13Hz,1H),7.93(d,J＝2Hz,1H),8.38(br d,J＝1Hz,3H)。SHP2 IC50为1nM。
实施例S24.[(5S)-5-氨基-1'-(6-甲基-7-苯基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-2-基]甲醇(化合物223)
步骤a：如对于中间体D-13所述，使用中间体B-33(159mg，0.41mmol)和中间体A-2(135mg，0.44mmol)进行类似程序，得到呈白色泡沫的1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-(三异丙基甲硅烷氧基甲基)螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-酮(118mg，0.20mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝598.4。
步骤b：如对于中间体D-1-步骤b所述，使用1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-(三异丙基甲硅烷氧基甲基)螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-酮(115mg，0.19mmol)、(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(47mg，0.38mmol)和Ti(OEt)4(0.26mL)进行类似程序，得到呈黄色蜡状物的外消旋-(NZ,R)-N-[1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-(三异丙基甲硅烷氧基甲基)-螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-亚基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(91mg，0.13mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝701.5。
步骤c：如对于中间体D-1-步骤c所述，对外消旋-(NZ,R)-N-[1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-(三异丙基甲硅烷氧基甲基)-螺[7H-环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-亚基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(87mg，0.12mmol)和DIBAL-H(1M于甲苯中，0.3mL，0.3mmol)进行类似程序，得到呈黄色蜡状物的(R)-N-[(5S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-(三异丙基甲硅烷氧基甲基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-yl]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(87mg，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
步骤d：如对于实施例S4(化合物31)所述，使用(R)-N-[(5S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-(三异丙基甲硅烷氧基甲基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(87mg)和苯基硼酸(23mg，0.19mmol)进行类似程序，得到呈黄色蜡状物的(R)-2-甲基-N-[(5S)-1'-(6-甲基-7-苯基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-(三异丙基甲硅烷氧基甲基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]丙烷-2-亚磺酰胺(61mg，0.09mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝701.6。
步骤e：在0℃下向(R)-2-甲基-N-[(5S)-1'-(6-甲基-7-苯基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-2-(三异丙基甲硅烷氧基甲基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]丙烷-2-亚磺酰胺(59mg，0.08mmol)于二氯甲烷(1mL)和甲醇(0.5mL)中的混合物中添加HCl溶液(4M于二噁烷中，0.15mL，0.6mmol)。将混合物搅拌18h，添加HCl溶液(4M于二噁烷中，0.1mL，0.4mmol)，并将混合物搅拌24h，然后真空浓缩。将残余物溶解于水和乙醚中，添加几滴1N HCl水溶液。分离水层并用1N NaOH水溶液将水相的pH值调节至11-12。通过过滤收集固体并用水洗涤，得到呈灰白色固体的[(5S)-5-氨基-1'-(6-甲基-7-苯基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-2-基]甲醇(10mg，0.03mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝441.4.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 1.24(br d,J＝13Hz,1H),1.61(br d,J＝12Hz,1H),1.77-1.97(m,4H),2.17(s,3H),2.75(br d,J＝16Hz,1H),3.11(d,J＝16Hz,1H),3.32-3.44(m,2H),3.91(s,1H),4.27-4.40(m,2H),4.53(br d,J＝5Hz,2H),5.29(t,J＝6Hz,1H),6.96(d,J＝3Hz,1H),7.26(d,J＝8Hz,1H),7.40-7.55(m,5H),7.66(d,J＝8Hz,1H),7.84(d,J＝3Hz,1H)。SHP2 IC50为13nM。
实施例S25.(6S)-1'-[7-(2-氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲基-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噁唑-5,4'-哌啶]-6-胺(化合物224)
5-溴-4-(溴甲基)-2-甲基-噁唑的制备：向在-78℃下冷却的5-溴-2-甲基-噁唑-4-甲酸乙酯(2.49g，10.6mmol)于无水二氯甲烷(22mL)中的混合物中滴加DIBAL-H(1M于甲苯中，20mL，20mmol)。将反应混合物在-78℃下搅拌1h，然后倒入罗谢尔盐的饱和水溶液(75mL)和乙酸乙酯(50mL)中。将混合物在室温下剧烈搅拌2h。分离有机层并用乙酸乙酯(50mL)萃取水相。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。按照相同的方案重新使用残余物，最终得到呈黄色半固体的(5-溴-2-甲基-噁唑-4-基)甲醇(1.25g，粗品)，其不经任何进一步纯化即使用。
在0℃下在Ar下向先前获得的(5-溴-2-甲基-噁唑-4-基)甲醇(1.25g，粗品)和CBr4(2.6g，7.8mmol)于DCM(22mL)中的溶液中分批添加PPh3(2.05g，7.8mmol)。将反应在室温下搅拌1h，然后真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝1/0至4/1)纯化，得到呈黄色油状物的5-溴-4-(溴甲基)-2-甲基-噁唑(1.06g，4.17mmol)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 4.44(s,2H),2.42(s,3H)。
化合物224的合成。如以下方案中所概述制备标题化合物：
步骤a：将哌啶-4-甲酸乙酯(0.54mL，3.45mmol)、中间体A-2(1.0g，3.26mmol)和碳酸钾(1.36g，9.8mmol)于二甲基甲酰胺(16mL)中的混合物在85℃下搅拌18h。然后将反应混合物冷却至室温并倒入水(100mL)和乙酸乙酯(50mL)中。分离水层，然后用乙酸乙酯(50mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥并减压浓缩，得到呈粉色油状物的1-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-甲酸乙酯(1.4g，粗品)。
步骤b：如对于实施例S4(化合物31)-步骤a所述，使用1-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)哌啶-4-甲酸乙酯(1.2g，粗品)和2-氟苯基硼酸(0.7g，4.9mmol)进行类似程序，得到呈黄色固体的1-[7-(2-氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]哌啶-4-甲酸乙酯(1.24g，3.24mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝383.3。
步骤c：在-78℃下向1-[7-(2-氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]哌啶-4-甲酸乙酯(1.12g，2.93mmol)于THF(3mL)中的溶液中添加LDA(2M于THF中，1.5mL，3.0mmol)，并将混合物在该温度下搅拌1h。然后在-78℃下添加在THF(2mL)中的5-溴-4-(溴甲基)-2-甲基-噁唑(0.65g，2.5mmol)，并将混合物在该温度搅拌3.5h。将反应混合物倒入水(15mL)中并用乙酸乙酯(15mL*2)萃取，将有机层经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝1/0至7/3)纯化，得到呈灰白色泡沫的4-[(5-溴-2-甲基-噁唑-4-基)甲基]-1-[7-(2-氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]哌啶-4-甲酸乙酯(1.13g，2.03mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝556.3。
步骤d：在-78℃下向4-[(5-溴-2-甲基-噁唑-4-基)甲基]-1-[7-(2-氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]哌啶-4-甲酸乙酯(1.13g，2.03mmol)于THF(8.4mL)中的溶液中滴加Turbo格氏试剂iPrMgCl.LiCl络合物(1.3M于THF中，2.4mL，3.1mmol)，然后使其缓慢升温至0℃。将混合物在0℃下搅拌2h，然后倒入NH4Cl水溶液(40mL)中，并用EtOAc(50mL*3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物首先通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝1/0至1/1)纯化，然后进行SFC纯化，得到呈灰白色固体的1'-[7-(2-氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲基-螺[4H-环戊二烯并[d]噁唑-5,4'-哌啶]-6-酮(127mg，0.29mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝432.3。
步骤e：向1'-[7-(2-氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲基-螺[4H-环戊二烯并[d]噁唑-5,4'-哌啶]-6-酮(126mg，0.29mmol)于2-MeTHF(0.3mL)中的混合物中添加(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(145mg，1.17mmol)和Ti(OEt)4(0.65mL，2.95mmol)，然后将混合物在110℃下搅拌22h。添加水和二氯甲烷，将混合物在疏水筒柱(液/液萃取柱，上过滤，然后真空浓缩。将残余物进行SFC纯化，接着进行柱色谱法(SiO2，二氯甲烷/甲醇＝1/0至9/1)，得到呈黄色蜡状物的(NZ,R)-N-[1'-[7-(2-氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲基-螺[4H-环戊二烯并[d]噁唑-5,4'-哌啶]-6-亚基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(25mg，47μmol)。LCMS m/z[M+H]+＝535.3。
步骤f：在-78℃下在Ar下向(NZ,R)-N-[1'-[7-(2-氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲基-螺[4H-环戊二烯并[d]噁唑-5,4'-哌啶]-6-亚基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(25mg，47μmol)于THF(0.5ml)中的溶液中滴加DIBAL-H(1M于甲苯中，0.11mL，0.11mmol)。将混合物在-78℃下搅拌2h，然后添加罗谢尔盐的饱和溶液(6mL)，接着添加乙酸乙酯(5mL)。使混合物升温至室温，搅拌1.5h。分离水层并用乙酸乙酯(5mL*2)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，二氯甲烷/甲醇＝1/0至93/7)纯化，得到呈黄色蜡状物的(R)-N-[(6S)-1'-[7-(2-氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲基-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噁唑-5,4'-哌啶]-6-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(5mg，9.3μmol)。LCMS m/z[M+H]+＝537.3。
步骤g：如对于实施例S4(化合物31)-步骤b所述，使用(R)-N-[(6S)-1'-[7-(2-氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲基-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噁唑-5,4'-哌啶]-6-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(5mg，9.3μmol)和HCl溶液(4M于二噁烷中，15μL，60μmol)进行类似程序，得到呈灰白色固体的(6S)-1'-[7-(2-氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]-2-甲基-螺[4,6-二氢环戊二烯并[d]噁唑-5,4'-哌啶]-6-胺(2mg，4.6μmol)。LCMS m/z[M+H]+＝433.2.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 1.20–1.29(m,1H),1.64–1.82(m,3H),1.90-2.00(m,2H),2.15(s,3H),2.42(s,3H),3.40–3.50(m,1H),3.51–3.60(m,1H),3.79(s,1H),4.18–4.34(m,2H),7.00(t,d＝2Hz,1H),7.32-7.40(m,2H),7.47-7.60(m,2H),7.85(d,J＝2Hz,1H)。SHP2 IC50：27nM。
实施例S26.(5S)-1'-[7-(2-氟苯基)-3-(甲氧基甲基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺(化合物225)和[4-[(5S)-5-氨基螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基]-7-(2-氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-基]甲醇(化合物226)
步骤a：如对于实施例S4(化合物31)-步骤a所述，使用中间体D-48(130mg，0.24mmol)和2-氟苯基硼酸(50mg，0.36mmol)进行类似程序，得到呈黄色固体的(R)-N-[(5S)-1'-[7-(2-氟苯基)-3-(羟甲基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(115mg，0.20mmol)。LCMSm/z[M+H]+＝563.4。
步骤b：向(R)-N-[(5S)-1'-[7-(2-氟苯基)-3-(羟甲基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(110mg，0.19mmol)于甲醇(2mL)中的混合物溶液中添加HCl溶液(4N于二噁烷中，1mL，4mmol)，然后将混合物在室温下搅拌1.5h。将混合物减压浓缩并将残余物溶解于水和二氯甲烷中。用1N NaOH水溶液将水相的pH值调节至11-12。将混合物在疏水筒柱(液/液萃取柱，上过滤并将有机层在真空中浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，二氯甲烷/含有10％浓NH3(水溶液)的甲醇＝95/5)纯化，得到呈白色固体的(5S)-1'-[7-(2-氟苯基)-3-(甲氧基甲基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺(36mg，0.07mmol)和呈白色固体的[4-[(5S)-5-氨基螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基]-7-(2-氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-基]甲醇(38mg，0.08mmol)。
((5S)-1'-[7-(2-氟苯基)-3-(甲氧基甲基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺)(化合物225)：LCMS m/z[M+H]+＝473.3.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 1.27(br d,J＝13Hz,1H),1.65(br d,J＝13Hz,1H),1.87-2.14(m,2H),2.19(s,3H),2.77(d,J＝16Hz,1H),3.04-3.35(m,5H),3.37(s,3H),3.68-3.85(m,2H),3.98(s,1H),4.59-4.71(m,2H),7.18(dd,J＝8,5Hz,1H),7.31-7.43(m,2H),7.48-7.64(m,2H),7.69(d,J＝8Hz,1H),7.92(s,1H),8.33(dd,J＝5,1Hz,1H)。SHP2IC50为>1000nM。
([4-[(5S)-5-氨基螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基]-7-(2-氟苯基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-3-基]甲醇)(化合物226)：LCMS m/z[M+H]+＝459.3.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 1.27(br d,J＝13Hz,1H),1.64(br d,J＝13Hz,1H),1.89-2.09(m,4H),2.17(s,3H),2.76(d,J＝16Hz,1H),3.04-3.22(m,4H),3.76(m,1H),3.97(s,1H),4.78(d,J＝5Hz,2H),5.14(t,J＝5Hz,1H),7.18(dd,J＝8,5Hz,1H),7.33-7.42(m,2H),7.49-7.62(m,2H),7.69(dt,J＝8,1Hz,1H),7.87(s,1H),8.32(d,J＝5Hz,1H)。SHP2IC50为>1000nM。
实施例S27.3-[4-[(5S)-5-氨基螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基]-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-7-基]-1-甲基-吡啶-2-酮(化合物227)
步骤a：将3-溴-1-甲基-吡啶-2-酮(500mg，2.52mmol)、六丁基二锡(1.8mL，3.54mmol)、四(三苯基膦)钯(146mg，0.13mmol)于二噁烷(12mL)中的混合物用Ar脱气5min，然后在微波辐射下在150℃下加热30min。将反应混合物真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝95/5至1/1)纯化，得到呈无色油状物的1-甲基-3-三丁基甲锡烷基-吡啶-2-酮(541mg，1.36mmol)。
步骤b：将1-甲基-3-三丁基甲锡烷基-吡啶-2-酮(541mg，1.36mmol)、(R)-N-[(5S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(740mg，1.36mmol)、四(三苯基膦)钯(78mg，0.08mmol)于二噁烷(7mL)中的混合物用Ar脱气5min，然后在110℃下加热16h。使反应混合物冷却至室温，添加乙酸乙酯并将混合物通过GF/F滤纸过滤。将滤液用水洗涤，然后用盐水洗涤。用DCM/iPrOH 9/1混合物萃取水层。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，二氯甲烷/含有1％浓NH3(水溶液)的MeOH＝1/0至92/8)纯化。将获得的固体在二氯甲烷/戊烷混合物中研磨，然后过滤，得到呈黄色固体的(R)-2-甲基-N-[(5S)-1'-[6-甲基-7-(1-甲基-2-氧代-3-吡啶基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]丙烷-2-亚磺酰胺(186mg，0.34mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝546.3。
步骤c：如对于实施例S1-步骤b所述，使用(R)-2-甲基-N-[(5S)-1'-[6-甲基-7-(1-甲基-2-氧代-3-吡啶基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]丙烷-2-亚磺酰胺(186mg，0.34mmol)和HCl溶液(4N于二噁烷中，0.5mL，2mmol)进行类似程序，得到呈黄色蜡状物的3-[4-[(5S)-5-氨基螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基]-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-7-基]-1-甲基-吡啶-2-酮(95mg，0.21mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝442.2.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 1.21(br d,J＝13Hz,1H),1.60(br d,J＝13Hz,1H),1.73-1.99(m,4H),2.13(s,3H),2.78(br d,J＝16Hz,1H),3.14(br d,J＝16Hz,1H),3.36-3.43(m hidden,2H),3.50(s,3H),3.95(s,1H),4.28-4.41(m,2H),6.34(t,J＝7Hz,1H),6.91(d,J＝2Hz,1H),7.18(t,J＝6Hz,1H),7.55(dd,J＝7,2Hz,1H),7.67(d,J＝7Hz,1H),7.79(d,J＝2Hz,1H),7.84(dd,J＝7,2Hz,1H),8.33(d,J＝5Hz,1H)。SHP2 IC50为>1000nM。
实施例S28.4-[4-[(5S)-5-氨基螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基]-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-7-基]-3-氟-1-甲基-吡啶-2-酮(化合物228)
步骤a：将4-溴-3-氟-1H-吡啶-2-酮(352mg，1.83mmol)、碳酸铯(740mg，2.75mmol)和碘甲烷(0.17mL，2.75mmol)于二噁烷(9.2mL)中的混合物在80℃下搅拌16h。使混合物冷却至室温，然后过滤。添加水(20mL)并将水层用乙酸乙酯(20mL*2)萃取。将合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到4-溴-3-氟-1-甲基-吡啶-2-酮(393mg，粗品)，其不经进一步纯化即使用。
步骤b：将4-溴-3-氟-1-甲基-吡啶-2-酮(393mg，粗品)、六丁基二锡(1.3mL，2.6mmol)、四(三苯基膦)钯(109mg，0.09mmol)于二噁烷(9.5mL)中的混合物用Ar脱气5min，然后在微波辐射下在150℃下加热30min。添加四(三苯基膦)钯(109mg，0.09mmol)并将混合物在微波辐射下在150℃下加热30min；然后再重复该操作一次。将反应混合物减压浓缩并将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯1/0至1/1)纯化，得到呈无色油状物的3-氟-1-甲基-4-三丁基甲锡烷基-吡啶-2-酮(326mg，0.78mmol)。
步骤c：将3-氟-1-甲基-4-三丁基甲锡烷基-吡啶-2-酮(140mg，0.33mmol)、(R)-N-[(5S)-1'-(7-溴-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(183mg，0.33mmol)、四(三苯基膦)钯(19mg，17μmol)和CuI(26mg，0.14mmol)于二噁烷(1.7mL)中的混合物用Ar脱气5min，然后在110℃下搅拌16h。将反应混合物真空浓缩并将残余物通过柱色谱法(SiO2，二氯甲烷/含有1％浓NH3(水溶液)的MeOH＝1/0至9/1)纯化，得到呈灰白色固体的(R)-N-[(5S)-1'-[7-(3-氟-1-甲基-2-氧代-4-吡啶基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(53mg，0.09mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝564.3。
步骤d：如对于实施例S1-步骤b所述，使用(R)-N-[(5S)-1'-[7-(3-氟-1-甲基-2-氧代-4-吡啶基)-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(52mg，0.09mmol)和HCl溶液(4N于二噁烷中，0.14mL，0.55mmol)进行类似程序，得到呈白色固体的4-[4-[(5S)-5-氨基螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-1'-基]-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-7-基]-3-氟-1-甲基-吡啶-2-酮(33mg，0.07mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝460.0.1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δppm 1.22(br d,J＝14Hz,1H),1.61(br d,J＝13Hz,1H),1.76-1.96(m,4H),2.19(s,3H),2.79(d,J＝16Hz,1H),3.15(m,1H),3.38-3.44(m,2H),3.57(s,3H),3.92(s,1H),4.37-4.47(m,2H),6.30(t,J＝6Hz,1H),7.02(d,J＝2Hz,1H),7.18(dd,J＝7,5Hz,1H),7.63-7.67(m,2H),7.89(d,J＝2Hz,1H),8.32(d,J＝4Hz,1H)。SHP2 IC50为86nM。
实施例S29.(5S)-1'-[7-[(3-氟-2-甲基-4-吡啶基)硫烷基]-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺)(化合物229)
步骤a：将4-溴-3-氟-2-甲基吡啶(500mg，2.63mmol)、DIEA(0.92mL，5.28mmol)、XantPhos(155mg，0.27mmol)、3-巯基丙酸2-乙基己酯(0.66mL，2.9mmol)和Pd2(dba)3(120mg，0.13mmol)于二噁烷(12mL)中的混合物用Ar脱气5min，然后在微波辐射下在110℃下加热1h。将反应混合物倒入水(50mL)中，然后用乙酸乙酯(50mL*3)萃取。将合并的有机相用盐水(3.00L)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/乙酸乙酯＝95/5至8/2)纯化，得到呈橙色油状物的3-[(3-氟-2-甲基-4-吡啶基)硫烷基]丙酸2-乙基己酯(730mg，2.23mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝328.6。
步骤b：向3-[(3-氟-2-甲基-4-吡啶基)硫烷基]丙酸2-乙基己酯(725mg，2.21mmol)于乙醇(20mL)中的溶液中缓慢添加乙醇钠溶液(21％于乙醇中，1.7mL，4.6mmol)。将混合物搅拌45min，然后添加饱和NH4Cl水溶液(6mL)。将混合物搅拌10min，然后过滤。真空浓缩滤液。将残余物溶解于乙醚中并过滤，得到3-氟-2-甲基-吡啶-4-硫醇(890mg，粗品)以及铵盐。产物无需进一步纯化即使用。
步骤c：将中间体D-2(100mg，0.24mmol)、DIEA(0.17mL，0.98mmol)、XantPhos(15mg，0.026mmol)、3-氟-2-甲基-吡啶-4-硫醇(70mg，先前获得的粗品)和Pd2(dba)3(12mg，0.013mmol)于二噁烷(2.5mL)中的混合物用Ar脱气5min，然后在微波辐射下在110℃下加热45min。添加XantPhos(15mg，0.026mmol)、3-氟-2-甲基-吡啶-4-硫醇(70mg，先前获得的粗品)和Pd2(dba)3(12mg，0.013mmol)，并将反应混合物在微波辐射下在110℃下加热1h。将反应混合物倒入水(20mL)中，然后用乙酸乙酯(25mL*2)萃取。将合并的有机相用盐水(25mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，二氯甲烷/甲醇＝1/0至95/5)纯化，得到呈橙色固体的(5S)-1'-[7-[(3-氟-2-甲基-4-吡啶基)硫烷基]-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺(21mg，44μmol)。LCMS m/z[M+H]+＝476.2.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm 1.26(br d,J＝11Hz,1H),1.67(m,1H),1.79-1.97(m,2H),1.98-2.12(m,2H),2.45(d,J＝3Hz,3H),2.49(s,3H),2.81(d,J＝16Hz,1H),3.17(d,J＝16Hz,1H),3.32-3.57(m,2H),3.95(s,1H),4.48-4.58(m,2H),6.34(t,J＝5Hz,1H),7.13(d,J＝3Hz,1H),7.19(dd,J＝7,5Hz,1H),7.67(d,J＝7Hz,1H),7.91(d,J＝3Hz,1H),7.95(d,J＝5Hz,1H),8.33(d,J＝4Hz,1H)。SHP2 IC50为14nM。
实施例S30.(5S)-1'-(6-甲基-7-((2-(三氟甲基)吡啶-3-基)硫基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺(化合物230)
步骤a：将中间体D-1(115mg，0.22mmol)、DIEA(0.08mL，0.46mmol)、XantPhos(30mg，0.05mmol)、2-(三氟甲基)吡啶-3-硫醇(50mg，0.26mmol)和Pd2(dba)3(20mg，0.02mmol)于二噁烷(2.5mL)中的混合物用Ar脱气5min，然后在微波辐射下在120℃下加热两次，持续45min。添加XantPhos(30mg，0.05mmol)、2-(三氟甲基)吡啶-3-硫醇(50mg，0.26mmol)和Pd2(dba)3(20mg，0.02mmol)，并将反应混合物在微波辐射下在120℃下加热两次，持续45min。添加XantPhos(30mg，0.05mmol)、2-(三氟甲基)吡啶-3-硫醇(50mg，0.26mmol)和Pd2(dba)3(20mg，0.02mmol)，并将反应混合物在微波辐射下在120℃下加热45min。将反应混合物倒入水(25mL)中，然后用乙酸乙酯(25mL*2)萃取。将合并的有机相用盐水(25mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，二氯甲烷/甲醇＝1/0至95/5)纯化，得到呈橙色固体的(R)-2-甲基-N-((S)-1'-(6-甲基-7-((2-(三氟甲基)吡啶-3-基)硫基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基)丙烷-2-亚磺酰胺(55mg，0.09mmol)。
步骤b：如对于实施例S1-步骤b所述，使用(R)-2-甲基-N-((S)-1'-(6-甲基-7-((2-(三氟甲基)吡啶-3-基)硫基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基)丙烷-2-亚磺酰胺(55mg，0.09mmol)和HCl溶液(4N于二噁烷中，0.25mL，1mmol)进行类似程序，得到呈橙色固体的(5S)-1'-(6-甲基-7-((2-(三氟甲基)吡啶-3-基)硫基)吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺(25mg，0.05mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝512.3.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1.26(d,J＝13Hz,1H),1.66(d,J＝13Hz,1H),1.78-1.94(m,2H),1.93-2.12(m,2H),2.52(s隐藏,3H),2.81(d,J＝16Hz,1H),3.17(d,J＝16Hz,1H),3.37-3.54(m,2H),3.94(s,1H),4.48-4.60(m,2H),7.08-7.15(m,2H),7.19(dd,J＝7,5Hz,1H),7.43(dd,J＝8,5Hz,1H),7.67(d,J＝7Hz,1H),7.90(d,J＝2Hz,1H),8.33(d,J＝4Hz,1H),8.47(d,J＝4Hz,1H)。SHP2 IC50为15nM。
实施例S31.(S)-1'-(7-((3-氯-2-甲基吡啶-4-基)硫基)-6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺(化合物231)
如对于实施例S30(化合物230)所述，使用中间体D-1(150mg，0.29mmol)和3-氯-2-甲基吡啶-4-硫醇(70mg，0.42mmol)进行类似程序，得到呈白色固体的(S)-1'-(7-((3-氯-2-甲基吡啶-4-基)硫基)-6-甲基吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基)-5,7-二氢螺[环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺(5mg，0.01mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝492.2.1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ1.26(br d,J＝14Hz,1H),1.66(br d,J＝13Hz,1H),1.79-1.95(m,2H),2.04-2.32(m,2H),2.47(s,3H),2.57(s,3H),2.82(d,J＝16Hz,1H),3.17(d,J＝16Hz,1H),3.43-3.55(m,2H),3.95(s,1H),4.54(t,J＝13Hz,2H),6.24(d,J＝5Hz,1H),7.14(d,J＝2Hz,1H),7.19(dd,J＝7,5Hz,1H),7.68(d,J＝7Hz,1H),7.90(d,J＝2Hz,1H),8.02(d,J＝5Hz,1H),8.34(d,J＝4Hz,1H)。SHP2 IC50为8nM。
实施例S32.(5S)-1'-[7-[(2-氨基-3-氯-4-吡啶基)硫烷基]-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-胺(化合物232)
步骤a：将中间体D-1(150mg，0.29mmol)、DIEA(0.15mL，0.87mmol)、XantPhos(33.5mg，0.058mmol)、2-氨基-3-氯-吡啶-4-硫醇(51mg，0.32mmol)于二噁烷(2.4mL)和NMP(0.8mL)的混合物中的混合物用Ar脱气5min，然后添加Pd2(dba)3(28mg，0.03mmol)，并将混合物在微波辐射下在120℃下加热1.5h。将反应混合物倒入水(15mL)中，然后用乙酸乙酯(15mL*3)萃取。将合并的有机相用盐水(15mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过柱色谱法(SiO2，环己烷/EtOAc＝1/0至0/1，随后是EtOAc/甲醇＝1/0至85/15)纯化，得到呈褐色固体的(R)-N-[(5S)-1'-[7-[(2-氨基-3-氯-4-吡啶基)硫烷基]-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(124mg，0.21mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝597.3。
步骤b：如对于实施例S1步骤b所述，使用(R)-N-[(5S)-1'-[7-[(2-氨基-3-氯-4-吡啶基)硫烷基]-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基]-2-甲基-丙烷-2-亚磺酰胺(123mg，0.21mmol)和HCl溶液(4N于二噁烷中，0.3mL，1.2mmol)进行类似程序，得到呈米色固体的(5S)-1'-[7-[(2-氨基-3-氯-4-吡啶基)硫烷基]-6-甲基-吡唑并[1,5-a]吡嗪-4-基]螺[5,7-二氢环戊二烯并[b]吡啶-6,4'-哌啶]-5-基-胺(85mg，0.17mmol)。LCMS m/z[M+H]+＝493.0.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δppm1.24(br d,J＝13Hz,1H),1.64(br d,J＝13Hz,1H),1.75-2.02(m,4H),2.45(s,3H),2.80(d,J＝16Hz,1H),3.16(d,J＝16Hz,1H),3.39-3.55(m,2H),3.93(s,1H),4.45-4.59(m,2H),5.56(d,J＝5Hz,1H),6.32(s,2H),7.11(d,J＝3Hz,1H),7.18(dd,J＝8,5Hz,1H),7.53(d,J＝5Hz,1H),7.66(d,J＝8Hz,1H),7.90(d,J＝3Hz,1H),8.32(d,J＝4Hz,1H)。SHP2 IC50为4nM。
生物学实施例
实施例B1.SHP2磷酸酶测定
使用人重组6His-Nterm(SEQ ID NO:1)SHP2全长(Thr2-Arg593，R&D system)、NsCs双磷酸化活化肽(NH2-LN(pY)AQLWHA(PE G8)LTI(pY)ATIRRF-酰胺乙酸盐(SEQ ID NO:2)，Thermofischer Sc ientific)和DiFMUP作为替代磷酸酶底物(Molecular Probes)评价对S HP2磷酸酶活性的抑制。所有反应在室温下在384孔黑色聚苯乙烯非结合板(Corning)中用测定缓冲液(50mM HEPES-NaOH pH 7.2、100mM NaCl、0.5mM EDTA、包含0.02％ BSA的0.001％ Brij35和临时添加的1mM DTT)进行。将SHP2与活化肽(分别为0.2nM和100nM)预温育至少10分钟。将10μL该混合物添加到已经含有15nL化合物(1000-0.05nM)的测定板中。在预温育30min后，通过在不含BSA的测定缓冲液中添加5μL DiFMUP(20μM)而引发酶促反应。温育45min后，通过添加15μL过钒酸钠溶液(100μM)终止反应。使用Pherastar仪器(BMG-LabTech)分别在350nm和450nm的激发波长和发射波长下测量荧光信号。使用下式，由阳性对照和阴性对照在450nm处的荧光信号计算抑制百分比(I％)：
阳性对照(Max)：对应于在预温育步骤中在替代抑制剂的15nL DMSO的存在下获得的最大荧光信号。
阴性对照(Min)：对应于在1μM的RMC-4550的存在下获得的最小信号，RMC-4550的结构如下所示：
然后使用4参数逻辑模型由10个浓度的测试化合物的剂量-应答曲线计算IC50：
参数A和(A+C)是下限和上限，B是拐点处曲线的斜率，M参数是拐点处横坐标的对数，且X是化合物的浓度。
测试化合物的IC50值在上文实施例S1-S32和表2-10中提供，并汇总于下表11中。
表11.
虽然本文已经显示和描述了本公开的优选实施方案，但是对于本领域技术人员显而易见的是，此类实施方案仅以举例的方式提供。在不脱离本公开的情况下，现在本领域技术人员将想到许多改变、变化和取代。应该理解的是，本文所述的本公开的实施方案的各种替代方案可用于实践本公开。其意图是以下权利要求限定本公开的范围，并且由此覆盖这些权利要求及其等同项范围内的方法和结构。本文引用的所有专利和科学文献的公开内容明确地通过引用整体并入本文。就任何并入的材料与本公开的明确内容不一致而言，以明确内容为准。

Claims (29)

1.一种式(I)化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
环A为C3-C6环烷基、苯基、5至6元杂环烷基或5至6元杂芳基，其中所述杂环烷基和所述杂芳基含有1-3个选自N、O和S的杂原子；
每个R1独立地为卤代基、氰基、-NR2aR2b、C1-C6烷基、氧代基、羟基、C1-C6卤代烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基-OH、C1-C6烷基-CN、-C(O)NR2aR2b、-C(O)(C1-C6烷基)、-CO2H、-CO2(C1-C6烷基)、-Si(Ra)(Rb)(Rc)、-P(O)(Ra)(Rb)、-OP(O)(Ra)(Rb)、C3-C6环烷基、苯基、5至6元杂环烷基或5至6元杂芳基，其中所述杂环烷基和所述杂芳基含有1-3个选自N、O和S的杂原子；
或者两个R1基团与它们所附接的碳原子或杂原子一起形成稠合苯基、5至6元杂环烷基或5至6元杂芳基，其中每一个任选地被1-4个R6基团取代，其中所述稠合杂环烷基和杂芳基含有1-3个选自N、O和S的杂原子；
每个Ra、Rb和Rc独立地为羟基、C1-C6烷基或C1-C6烷氧基；
每个R2a和R2b独立地为H、C1-C6烷基或C3-C6环烷基；
L为键、S、O、C(O)或N(Rd)；
Rd为H或C1-C6烷基；
X为CR3aR3b、NR3a或O；
R3a和R3b独立地为H或C1-C6烷基；
R4为H、C1-C6烷基、C1-C6烷基-OH、C1-C6卤代烷基或-NH2；
每个R5独立地为卤代基、C1-C6烷基、C1-C6卤代烷基、-(C1-C6亚烷基)(C1-C6烷氧基)或C1-C6烷基-OH；
环B为稠合苯基或含有1-3个选自N、O和S的杂原子的5至6元杂芳基；
每个R6独立地为C1-C6烷基、卤代基或C1-C6卤代烷基；
每个R7独立地为C1-C6烷基、卤代基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷基-OH、羟基、氰基、-Si(Ra)(Rb)(Rc)、-P(O)(Ra)(Rb)、-OP(O)(Ra)(Rb)、-NR2aR2b或C1-C6卤代烷基；
x为0-5；
y为0-2；并且
z为0-4；
其中所述化合物中的一个或多个氢原子任选地被氘置换。
2.如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
环A为C3-C5环烷基、苯基、6元杂环烷基或5至6元杂芳基，其中所述杂环烷基和所述杂芳基含有1-2个选自N、O和S的杂原子。
3.如权利要求1或2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
环A为环丙基、苯基、二氢吡啶基、二氢吡喃基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡唑基、咪唑基、吡咯基、噻唑基、异噁唑基或噻吩基。
4.如权利要求1-3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
为：
5.如权利要求1-4中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
x为0、1、2或3；
每个R1当存在时独立地为卤代基、氰基、-NR2aR2b、C1-C3烷基、氧代基、羟基、C1-C3卤代烷基、C1-C3烷氧基、C1-C3烷基-OH、C1-C3烷基-CN、-C(O)NR2aR2b、-C(O)(C1-C3烷基)、-CO2H、-CO2(C1-C3烷基)、-Si(Ra)(Rb)(Rc)、-P(O)(Ra)(Rb)、-OP(O)(Ra)(Rb)、C3-C5环烷基、苯基或6元杂环烷基，其中所述杂环烷基含有1-2个选自N和O的杂原子；
或者两个R1基团与它们所附接的碳原子或杂原子一起形成稠合苯基、5至6元杂环烷基或5至6元杂芳基，其中每一个任选地被1-2个R6基团取代，其中所述稠合杂环烷基和杂芳基含有1-2个选自N、O和S的杂原子；
每个Ra、Rb和Rc独立地为C1-C3烷基或C1-C3烷氧基；
每个R2a和R2b独立地为H、C1-C3烷基或C3-C5环烷基；并且
每个R6独立地为C1-C3烷基、卤代基或C1-C3卤代烷基。
6.如权利要求1-5中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
每个R1当存在时独立地为F、Cl、-CN、-CH2CN、-NH2、-N(H)CH3、-N(CH3)2、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、氧代基、-CF3、-OCH3、-CH2OH、-C(O)N(CH3)2、-C(O)CH3、环丙基或
或两个R1基团与它们所附接的碳原子或杂原子一起形成选自以下的稠合基团：
7.如权利要求1-6中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
为：
8.如权利要求1-7中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
L为键、O、C(O)或N(Rd)；并且
Rd为H或C1-C3烷基。
9.如权利要求1-8中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
X为CR3aR3b、NR3a或O；并且
R3a和R3b独立地为H或C1-C3烷基。
10.如权利要求9所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
X为CH2、N(H)、N(CH3)或O。
11.如权利要求1-10中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
R4为H、C1-C3烷基、C1-C3烷基-OH、C1-C3卤代烷基或-NH2。
12.如权利要求11所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
R4为H、CH3、-CH2OH、-CH2F或-CHF2。
13.如权利要求1-12中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
y为0或1；
每个R5当存在时独立地为卤代基、C1-C3烷基、C1-C3卤代烷基、-(C1-C3亚烷基)(C1-C3烷氧基)或C1-C3烷基-OH。
14.如权利要求13所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
每个R5当存在时独立地为Cl、F、-CH2F、-CHF2、-CH2OCH3或-CH2OH。
15.如权利要求1-14中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
环B为稠合苯基或含有1-2个选自N、O和S的杂原子的5至6元杂芳基。
16.如权利要求15所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
环B为稠合苯基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、噻唑基或噁唑基。
17.如权利要求1-16中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
z为0、1或2；
每个R7当存在时独立地为C1-C3烷基、卤代基、C1-C3烷氧基、C1-C3烷基-OH、羟基、氰基、-Si(Ra)(Rb)(Rc)、-P(O)(Ra)(Rb)、-OP(O)(Ra)(Rb)、-NR2aR2b或C1-C3卤代烷基；
每个Ra、Rb和Rc独立地为羟基、C1-C3烷基或C1-C3烷氧基；并且
每个R2a和R2b独立地为H、C1-C3烷基或C3-C5环烷基。
18.如权利要求17所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
每个R7当存在时独立地为CH3、F、-OCH3、-CH2OH、羟基、-CN、-N(CH3)2或-CHF2。
19.如权利要求1-18中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
为：
20.如权利要求1-19中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物具有式(IIa)、(IIb)、(IIc)、(IId)、(IIIa)、(IIIb)、(IIIc)、(IIId)、(IIIe)或(IIIf)：
21.如权利要求20所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物具有式(IIa-1)：
22.如权利要求21所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
x为0、1或2；
每个R1当存在时独立地为卤代基；并且
R4为C1-C6烷基。
23.如权利要求22所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中：
x为0或1；
R1当存在时为F；并且
R4为-CH3。
24.如权利要求1-19中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物具有式(IVa)、(IVb)、(IVc)、(IVd)或(IVe)：
25.一种选自表1的化合物的化合物或其药学上可接受的盐。
26.一种药物组合物，其包含如权利要求1-25中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的赋形剂。
27.一种抑制SHP2的方法，其包括使SHP2与有效量的如权利要求1-25中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，或如权利要求26所述的药物组合物接触。
28.一种治疗有需要的受试者中与SHP2调节相关的疾病的方法，其包括向所述受试者施用有效量的如权利要求1-25中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，或如权利要求26所述的药物组合物。
29.如权利要求28所述的方法，其中所述疾病是努南综合征、豹皮综合征、幼年型粒单核细胞白血病、成神经细胞瘤、黑素瘤、急性髓性白血病、乳腺癌、肺癌、结肠癌或脑癌，任选地其中所述脑癌是成胶质细胞瘤。
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