CN1169957C

CN1169957C - 编码具有抑制癌细胞生长功能的人蛋白的多核苷酸

Info

Publication number: CN1169957C
Application number: CNB001119907A
Authority: CN
Inventors: 顾健人; 杨胜利
Original assignee: Shanghai Cancer Institute
Current assignee: Shanghai Cancer Institute
Priority date: 2000-03-13
Filing date: 2000-03-13
Publication date: 2004-10-06
Anticipated expiration: 2020-03-13
Also published as: CN1313316A

Abstract

本发明公开了一类新的具有抑癌功能的人蛋白，编码此多肽的多核苷酸和经重组技术产生该多肽的方法。本发明还公开了此多肽用于治疗多种疾病如癌症等的方法。本发明还公开了抗此多肽的拮抗剂及其治疗作用。本发明还公开了编码这类新的具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸的用途。

Description

编码具有抑制癌细胞生长功能的人蛋白的多核苷酸

本发明属于生物技术领域，具体地说，本发明涉及新的编码具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸，以及此多核苷酸编码的多肽。本发明还涉及此多核苷酸和多肽的用途和制备。

人基因组学研究目前是国际上的热点，除人染色体DNA大规模测序，表达序列测序(EST)的方法外，还缺少从功能开始的筛选具有功能基因的高通量的方法。

癌症是危害人类健康的主要疾病之一。为了有效地治疗和预防肿瘤，目前人们已越来越关注肿瘤的基因治疗。因此，本领域迫切需要开发研究具有抑癌功能的人蛋白及其激动剂/抑制剂。

本发明的目的是提供一类新的具有抑癌功能的人蛋白多肽以及其片段、类似物和衍生物。

本发明的另一目的是提供编码这些多肽的多核苷酸。

本发明的另一目的是提供生产这些多肽的方法以及该多肽和编码序列的用途。

在本发明的第一方面，提供新颖的分离出的具有抑癌功能的蛋白多肽，它包含具有选自下组的氨基酸序列的多肽：SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：8、SEQ IDNO：11、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：26；或其保守性变异多肽、或其活性片段、或其活性衍生物。

较佳地，该多肽是具有选自下组的氨基酸序列的多肽：SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：20、SEQ IDNO：23、SEQ ID NO：26。

在本发明的第二方面，提供了一种分离的多核苷酸，它包含一核苷酸序列，该核苷酸序列与选自下组的一种核苷酸序列有至少85％相同性：(a)编码上述的具有抑癌功能的蛋白多肽的多核苷酸；(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。较佳地，该多核苷酸编码的多肽具有选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：8、SEQ IDNO：11、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：26。更佳地，该多核苷酸的序列选自下组：SEQ ID NO：3、SEQIDNO：6、SEQ ID NO：9、SEQID NO：12、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：18、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：24、SEQ ID NO：27的编码区序列或全长序列。

在本发明的第三方面，提供了含有上述多核苷酸的载体，以及被该载体转化或转导的宿主细胞或者被上述多核苷酸直接转化或转导的宿主细胞。

在本发明的第四方面，提供了制备具有具有抑癌功能的蛋白活性的多肽的制备方法，该方法包含：(a)在适合表达具有抑癌功能的蛋白的条件下，培养上述被转化或转导的宿主细胞；(b)从培养物中分离出具有具有抑癌功能的蛋白活性的多肽。

在本发明的第五方面，提供了与上述的具有抑癌功能的蛋白多肽特异性结合的抗体。还提供了可用于检测的核酸分子，它含有上述的多核苷酸中连续的10-800个核苷酸。

在本发明的第六方面，提供了一种药物组合物，它含有安全有效量的本发明的具有抑癌功能的蛋白多肽以及药学上可接受的载体。这些药物组合物可治疗癌症以及细胞异常增殖等病症。

本发明的其它方面由于本文的技术的公开，对本领域的技术人员而言是显而易见的。

本发明采用大规模cDNA克隆转染癌细胞，在获得具有抑癌作用的基础上，经测序证明为新的基因，进一步得到全长cDNA克隆。DNA转染试验证明，本发明的具有抑癌功能的蛋白对癌细胞(肝癌细胞)具有抑制克隆形成的作用，其抑制率在50％或50％以上。

如本文所用，“分离的”是指物质从其原始环境中分离出来(如果是天然的物质，原始环境即是天然环境)。如活体细胞内的天然状态下的多聚核苷酸和多肽是没有分离纯化的，但同样的多聚核苷酸或多肽如从天然状态中同存在的其他物质中分开，则为分离纯化的。

如本文所用，“分离的具有抑癌功能的蛋白或多肽”是指具有抑癌功能的蛋白多肽基本上不含天然与其相关的其它蛋白、脂类、糖类或其它物质。本领域的技术人员能用标准的蛋白质纯化技术纯化具有抑癌功能的蛋白。基本上纯的多肽在非还原聚丙烯酰胺凝胶上能产生单一的主带。具有抑癌功能的蛋白多肽的纯度能用氨基酸序列分析。

本发明的多肽可以是重组多肽、天然多肽、合成多肽，优选重组多肽。本发明的多肽可以是天然纯化的产物，或是化学合成的产物，或使用重组技术从原核或真核宿主(例如，细菌、酵母、高等植物、昆虫和哺乳动物细胞)中产生。根据重组生产方案所用的宿主，本发明的多肽可以是糖基化的，或可以是非糖基化的。本发明的多肽还可包括或不包括起始的甲硫氨酸残基。

本发明还包括具有抑癌功能的人蛋白的片段、衍生物和类似物。如本文所用，术语“片段”、“衍生物”和“类似物”是指基本上保持本发明的天然具有抑癌功能的人蛋白相同的生物学功能或活性的多肽。本发明的多肽片段、衍生物或类似物可以是(i)有一个或多个保守或非保守性氨基酸残基(优选保守性氨基酸残基)被取代的多肽，而这样的取代的氨基酸残基可以是也可以不是由遗传密码编码的，或(ii)在一个或多个氨基酸残基中具有取代基团的多肽，或(iii)成熟多肽与另一个化合物(比如延长多肽半衰期的化合物，例如聚乙二醇)融合所形成的多肽，或(iv)附加的氨基酸序列融合到此多肽序列而形成的多肽(如前导序列或分泌序列或用来纯化此多肽的序列或蛋白原序列)。根据本文的教导，这些片段、衍生物和类似物属于本领域熟练技术人员公知的范围。

本发明的多核苷酸可以是DNA形式或RNA形式。DNA形式包括cDNA、基因组DNA或人工合成的DNA。DNA可以是单链的或是双链的。DNA可以是编码链或非编码链。以PP894蛋白(在本申请中，蛋白质的命名采用其克隆编号)为例，编码成熟多肽的编码区序列可以与SEQ ID NO：3所示的编码区序列相同或者是简并的变异体。如本文所用，“简并的变异体”在本发明中是指编码具有SEQ ID NO：2的蛋白质，但与SEQ IDNO：3所示的编码区序列有差别的核酸序列。以PP1030蛋白(在本申请中，蛋白质的命名采用其克隆编号)为例，编码成熟多肽的编码区序列可以与SEQ ID NO：6所示的编码区序列相同或者是简并的变异体。如本文所用，“简并的变异体”在本发明中是指编码具有SEQ ID NO：5的蛋白质，但与SEQ ID NO：6所示的编码区序列有差别的核酸序列。对于其他具有抑癌功能的蛋白，可依此类推。对于其他具有抑癌功能的蛋白，可依此类推。

编码成熟多肽的多核苷酸包括：只编码成熟多肽的编码序列；成熟多肽的编码序列和各种附加编码序列；成熟多肽的编码序列(和任选的附加编码序列)以及非编码序列。

术语“编码多肽的多核苷酸”可以是包括编码此多肽的多核苷酸，也可以是还包括附加编码和/或非编码序列的多核苷酸。

本发明还涉及上述多核苷酸的变异体，其编码与本发明有相同的氨基酸序列的多肽或多肽的片段、类似物和衍生物。此多核苷酸的变异体可以是天然发生的等位变异体或非天然发生的变异体。这些核苷酸变异体包括取代变异体、缺失变异体和插入变异体。如本领域所知的，等位变异体是一个多核苷酸的替换形式，它可能是一个或多个核苷酸的取代、缺失或插入，但不会从实质上改变其编码的多肽的功能。

本发明还涉及与上述的序列杂交且两个序列之间具有至少50％，较佳地至少70％，更佳地至少80％相同性的多核苷酸。本发明特别涉及在严格条件下与本发明所述多核苷酸可杂交的多核苷酸。在本发明中，“严格条件”是指：(1)在较低离子强度和较高温度下的杂交和洗脱，如0.2×SSC，0.1％SDS，60℃；或(2)杂交时加有变性剂，如50％(v/v)甲酰胺，0.1％小牛血清/0.1％Ficoll，42℃等；或(3)仅在两条序列之间的相同性至少在95％以上，更好是97％以上时才发生杂交。并且，可杂交的多核苷酸编码的多肽与SEQ IDNO：2所示的成熟多肽有相同的生物学功能和活性。

本发明还涉及与上述的序列杂交的核酸片段。如本文所用，“核酸片段”的长度至少含15个核苷酸，较好是至少30个核苷酸，更好是至少50个核苷酸，最好是至少100个核苷酸以上。核酸片段可用于核酸的扩增技术(如PCR)以确定和/或分离编码具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸。

本发明中的多肽和多核苷酸优选以分离的形式提供，更佳地被纯化至均质。

本发明的DNA序列能用几种方法获得。例如，用本领域熟知的杂交技术分离DNA。这些技术包括但不局限于：1)用探针与基因组或cDNA文库杂交以检出同源性核苷酸序列，和2)表达文库的抗体筛选以检出具有共同结构特征的克隆的DNA片段。

编码具有抑癌功能的蛋白的特异DNA片段序列产生也能用下列方法获得：1)从基因组DNA分离双链DNA序列；2)化学合成DNA序列以获得所需多肽的双链DNA。

上述提到的方法中，分离基因组DNA最不常用。当需要的多肽产物的整个氨基酸序列已知时，DNA序列的直接化学合成是经常选用的方法。如果所需的氨基酸的整个序列不清楚时，DNA序列的直接化学合成是不可能的，选用的方法是cDNA序列的分离。分离感兴趣的cDNA的标准方法是从高表达该基因的供体细胞分离mRNA并进行逆转录，形成质粒或噬菌体cDNA文库。提取mRNA的方法已有多种成熟的技术，试剂盒也可从商业途径获得(Qiagene)。而构建cDNA文库也是通常的方法(Sambrook，et al.，Molecular Cloning，A Laboratory Manual，Cold Spring Harbor Laboratory.New York，1989)。还可得到商业供应的cDNA文库，如Clontech公司的不同cDNA文库。当结合使用聚合酶反应技术时，即使极少的表达产物也能克隆。

可用常规方法从这些cDNA文库中筛选本发明的基因。这些方法包括(但不限于)：(1)DNA-DNA或DNA-RNA杂交；(2)标志基因的功能出现或丧失；(3)测定具有抑癌功能的蛋白的转录本的水平；(4)通过免疫学技术或测定生物学活性，来检测基因表达的蛋白产物。上述方法可单用，也可多种方法联合应用。

在第(1)种方法中，杂交所用的探针是与本发明的多核苷酸的任何一部分同源，其长度至少15个核苷酸，较好是至少30个核苷酸，更好是至少50个核苷酸，最好是至少100个核苷酸。此外，探针的长度通常在2kb之内，较佳地为1kb之内。此处所用的探针通常是在本发明的基因DNA序列信息的基础上化学合成的DNA序列。本发明的基因本身或者片段当然可以用作探针。DNA探针的标记可用放射性同位素，荧光素或酶(如碱性磷酸酶)等。

在第(4)种方法中，检测具有抑癌功能的蛋白基因表达的蛋白产物可用免疫学技术如Western印迹法，放射免疫沉淀法，酶联免疫吸附法(ELISA)等。

应用PCR技术扩增DNA/RNA的方法(Saiki，et al.Science 1985；230：1350-1354)被优选用于获得本发明的基因。特别是很难从文库中得到全长的cDNA时，可优选使用RACE法(RACE-cDNA末端快速扩增法)，用于PCR的引物可根据本文所公开的本发明的序列信息适当地选择，并可用常规方法合成。可用常规方法如通过凝胶电泳分离和纯化扩增的DNA/RNA片段。

如上所述得到的本发明的基因，或者各种DNA片段等的核苷酸序列的测定可用常规方法如双脱氧链终止法(Sanger et al.PNAS，1977，74：5463-5467)。这类核苷酸序列测定也可用商业测序试剂盒等。为了获得全长的cDNA序列，测序需反复进行。有时需要测定多个克隆的cDNA序列，才能拼接成全长的cDNA序列。

本发明也涉及包含本发明的多核苷酸的载体，以及用本发明的载体或具有抑癌功能的蛋白编码序列经基因工程产生的宿主细胞，以及经重组技术产生本发明所述多肽的方法。

通过常规的重组DNA技术，可利用本发明的多聚核苷酸序列可用来表达或生产重组的具有抑癌功能的蛋白多肽(Science，1984；224：1431)。一般来说有以下步骤：

(1).用本发明的编码具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸(或变异体)，或用含有该多核苷酸的重组表达载体转化或转导合适的宿主细胞；

(2).在合适的培养基中培养的宿主细胞；

(3).从培养基或细胞中分离、纯化蛋白质。

本发明中，具有抑癌功能的人蛋白多核苷酸序列可插入到重组表达载体中。术语“重组表达载体”指本领域熟知的细菌质粒、噬菌体、酵母质粒、植物细胞病毒、哺乳动物细胞病毒如腺病毒、逆转录病毒或其他载体。在本发明中适用的载体包括但不限于：在细菌中表达的基于T7的表达载体(Rosenberg，et al.Gene，1987，56：125)；在哺乳动物细胞中表达的pMSXND表达载体(Lee and Nathans，J Bio Chem.263：3521，1988)和在昆虫细胞中表达的来源于杆状病毒的载体。总之，只要能在宿主体内复制和稳定，任何质粒和载体都可以用。表达载体的一个重要特征是通常含有复制起点、启动子、标记基因和翻译控制元件。

本领域的技术人员熟知的方法能用于构建含具有抑癌功能的人蛋白编码DNA序列和合适的转录/翻译控制信号的表达载体。这些方法包括体外重组DNA技术、DNA合成技术、体内重组技术等(Sambroook，et al.Molecular Cloning，a Laboratory Manual，coldSpring Harbor Laboratory.New York，1989)。所述的DNA序列可有效连接到表达载体中的适当启动子上，以指导mRNA合成。这些启动子的代表性例子有：大肠杆菌的lac或trp启动子；λ噬菌体P_L启动子；真核启动子包括CMV立即早期启动子、HSV胸苷激酶启动子、早期和晚期SV40启动子、反转录病毒的LTRs和其他一些已知的可控制基因在原核或真核细胞或其病毒中表达的启动子。表达载体还包括翻译起始用的核糖体结合位点和转录终止子。

此外，表达载体优选地包含一个或多个选择性标记基因，以提供用于选择转化的宿主细胞的表型性状，如真核细胞培养用的二氢叶酸还原酶、新霉素抗性以及绿色荧光蛋白(GFP)，或用于大肠杆菌的四环素或氨苄青霉素抗性。

包含上述的适当DNA序列以及适当启动子或者控制序列的载体，可以用于转化适当的宿主细胞，以使其能够表达蛋白质。

宿主细胞可以是原核细胞，如细菌细胞；或是低等真核细胞，如酵母细胞；或是高等真核细胞，如哺乳动物细胞。代表性例子有：大肠杆菌，链霉菌属：鼠伤寒沙门氏菌的细菌细胞；真菌细胞如酵母；植物细胞；果蝇S2或Sf9的昆虫细胞；CHO、COS或Bowes黑素瘤细胞的动物细胞等。

本发明的多核苷酸在高等真核细胞中表达时，如果在载体中插入增强子序列时将会使转录得到增强。增强子是DNA的顺式作用因子，通常大约有10到300个碱基对，作用于启动子以增强基因的转录。可举的例子包括在复制起始点晚期一侧的100到270个碱基对的SV40增强子、在复制起始点晚期一侧的多瘤增强子以及腺病毒增强子等。

本领域一般技术人员都清楚如何选择适当的载体、启动子、增强子和宿主细胞。

用重组DNA转化宿主细胞可用本领域技术人员熟知的常规技术进行。当宿主为原核生物如大肠杆菌时，能吸收DNA的感受态细胞可在指数生长期后收获，用CaCl₂法处理，所用的步骤在本领域众所周知。可供选择的是用MgCl₂。如果需要，转化也可用电穿孔的方法进行。当宿主是真核生物，可选用如下的DNA转染方法：磷酸钙共沉淀法，常规机械方法如显微注射、电穿孔、脂质体包装等。

获得的转化子可以用常规方法培养，表达本发明的基因所编码的多肽。根据所用的宿主细胞，培养中所用的培养基可选自各种常规培养基。在适于宿主细胞生长的条件下进行培养。当宿主细胞生长到适当的细胞密度后，用合适的方法(如温度转换或化学诱导)诱导选择的启动子，将细胞再培养一段时间。

在上面的方法中的重组多肽可包被于细胞内、细胞外或在细胞膜上表达或分泌到细胞外。如果需要，可利用其物理的、化学的和其它特性通过各种分离方法分离和纯化重组的蛋白。这些方法是本领域技术人员所熟知的。这些方法的例子包括但并不限于：常规的复性处理、用蛋白沉淀剂处理(盐析方法)、离心、渗透破菌、超处理、超离心、分子筛层析(凝胶过滤)、吸附层析、离子交换层析、高效液相层析(HPLC)和其它各种液相层析技术及这些方法的结合。

重组的具有抑癌功能的人蛋白或多肽有多方面的用途。这些用途包括(但不限于)：直接做为药物治疗具有抑癌功能的蛋白功能低下或丧失所致的疾病，和用于筛选促进或对抗具有抑癌功能的蛋白功能的抗体、多肽或其它配体。例如，抗体可用于激活或抑制具有抑癌功能的人蛋白的功能。用表达的重组具有抑癌功能的人蛋白筛选多肽库可用于寻找有治疗价值的能抑制或刺激具有抑癌功能的人蛋白功能的多肽分子。

本发明也提供了筛选药物以鉴定提高(激动剂)或阻遏(拮抗剂)具有抑癌功能的人蛋白的药剂的方法。激动剂提高具有抑癌功能的人蛋白刺激细胞增殖等生物功能，而拮抗剂阻止和治疗与细胞过度增殖有关的紊乱如各种癌症。例如，能在药物的存在下，将哺乳动物细胞或表达具有抑癌功能的人蛋白的膜制剂与标记的具有抑癌功能的人蛋白一起培养。然后测定药物提高或阻遏此相互作用的能力。

具有抑癌功能的人蛋白的拮抗剂包括筛选出的抗体、化合物、受体缺失物和类似物等。具有抑癌功能的人蛋白的拮抗剂可以与具有抑癌功能的人蛋白结合并消除其功能，或是抑制具有抑癌功能的人蛋白的产生，或是与多肽的活性位点结合使多肽不能发挥生物学功能。具有抑癌功能的人蛋白的拮抗剂可用于治疗用途。

在筛选作为拮抗剂的化合物时，可以将具有抑癌功能的蛋白加入生物分析测定中，通过测定化合物影响具有抑癌功能的蛋白和其受体之间的相互作用来确定化合物是否是拮抗剂。用上述筛选化合物的同样方法，可以筛选出起拮抗剂作用的受体缺失物和类似物。

本发明的多肽可直接用于疾病治疗，例如，各种恶性肿瘤、和细胞异常增殖等。

本发明的多肽，及其片段、衍生物、类似物或它们的细胞可以用来作为抗原以生产抗体。这些抗体可以是多克隆或单克隆抗体。多克隆抗体可以通过将此多肽直接注射动物的方法得到。制备单克隆抗体的技术包括杂交瘤技术，三瘤技术，人B-细胞杂交瘤技术，EBV-杂交瘤技术等。

可以将本发明的多肽和拮抗剂与合适的药物载体组合后使用。这些载体可以是水、葡萄糖、乙醇、盐类、缓冲液、甘油以及它们的组合。组合物包含安全有效量的多肽或拮抗剂以及不影响药物效果的载体和赋形剂。这些组合物可以作为药物用于疾病治疗。

本发明还提供含有一种或多种容器的药盒或试剂盒，容器中装有一种或多种本发明的药用组合物成分。与这些容器一起，可以有由制造、使用或销售药品或生物制品的政府管理机构所给出的指示性提示，该提示反映出生产、使用或销售的政府管理机构许可其在人体上施用。此外，本发明的多肽可以与其它的治疗化合物结合使用。

药物组合物可以以方便的方式给药，如通过局部、静脉内、腹膜内、肌内、皮下、鼻内或皮内的给药途径。具有抑癌功能的蛋白以有效地治疗和/或预防具体的适应症的量来给药。施用于患者的具有抑癌功能的蛋白的量和剂量范围将取决于许多因素，如给药方式、待治疗者的健康条件和诊断医生的判断。

具有抑癌功能的人蛋白的多聚核苷酸也可用于多种治疗目的。基因治疗技术可用于治疗由于具有抑癌功能的蛋白的无表达或异常/无活性的具有抑癌功能的蛋白的表达所致的细胞增殖、发育或代谢异常。重组的基因治疗载体(如病毒载体)可设计成表达变异的具有抑癌功能的蛋白，以抑制内源性的具有抑癌功能的蛋白活性。例如，一种变异的具有抑癌功能的蛋白可以是缩短的、缺失了信号传导功能域的具有抑癌功能的蛋白，虽可与下游的底物结合，但缺乏信号传导活性。因此重组的基因治疗载体可用于治疗具有抑癌功能的蛋白表达或活性异常所致的疾病。来源于病毒的表达载体如逆转录病毒、腺病毒、腺病毒相关病毒、单纯疱疹病毒、细小病毒等可用于将具有抑癌功能的蛋白基因转移至细胞内。构建携带具有抑癌功能的蛋白基因的重组病毒载体的方法可见于已有文献(Sambrook，et al.)。另外重组具有抑癌功能的人蛋白基因可包装到脂质体中转移至细胞内。

抑制具有抑癌功能的人蛋白mRNA的寡聚核苷酸(包括反义RNA和DNA)以及核酶也在本发明的范围之内。核酶是一种能特异性分解特定RNA的酶样RNA分子，其作用机制是核酶分子与互补的靶RNA特异性杂交后进行核酸内切作用。反义的RNA和DNA及核酶可用已有的任何RNA或DNA合成技术获得，如固相磷酸酰胺化学合成法合成寡核苷酸的技术已广泛应用。反义RNA分子可通过编码该RNA的DNA序列在体外或体内转录获得。这种DNA序列已整合到载体的RNA聚合酶启动子的下游。为了增加核酸分子的稳定性，可用多种方法对其进行修饰，如增加两侧的序列长度，核糖核苷之间的连接应用磷酸硫酯键或肽键而非磷酸二酯键。

多聚核苷酸导入组织或细胞内的方法包括：将多聚核苷酸直接注入到体内组织中；或在体外通过载体(如病毒、噬菌体或质粒等)先将多聚核苷酸导入细胞中，再将细胞移植到体内等。

本发明的多肽还可用作肽谱分析，例如，多肽可用物理的、化学或酶进行特异性切割，并进行一维或二维或三维的凝胶电泳分析。

本发明还提供了针对具有抑癌功能的人蛋白抗原决定簇的抗体。这些抗体包括(但不限于)：多克隆抗体、单克隆抗体、嵌合抗体、单链抗体、Fab片段和Fab表达文库产生的片段。

抗具有抑癌功能的人蛋白的抗体可用于免疫组织化学技术中，检测活检标本中的具有抑癌功能的人蛋白。

与具有抑癌功能的人蛋白结合的单克隆抗体也可用放射性同位素标记，注入体内可跟踪其位置和分布。这种放射性标记的抗体可作为一种非创伤性诊断方法用于肿瘤细胞的定位和判断是否有转移。

本发明中的抗体可用于治疗或预防与具有抑癌功能的人蛋白相关的疾病。给予适当剂量的抗体可以刺激或阻断具有抑癌功能的人蛋白的产生或活性。

抗体也可用于设计针对体内某一特殊部位的免疫毒素。如具有抑癌功能的人蛋白高亲和性的单克隆抗体可与细菌或植物毒素(如白喉毒素，蓖麻蛋白，红豆碱等)共价结合。一种通常的方法是用巯基交联剂如SPDP，攻击抗体的氨基，通过二硫键的交换，将毒素结合于抗体上，这种杂交抗体可用于杀灭具有抑癌功能的人蛋白阳性的细胞。

多克隆抗体的生产可用具有抑癌功能的人蛋白或多肽免疫动物，如家兔，小鼠，大鼠等。多种佐剂可用于增强免疫反应，包括但不限于弗氏佐剂等。

具有抑癌功能的人蛋白单克隆抗体可用杂交瘤技术生产(Kohler and Milstein.Nature，1975，256：495-497)。将人恒定区和非人源的可变区结合的嵌合抗体可用已有的技术生产(Morrison et al，PNAS，1985，81：6851)。而已有的生产单链抗体的技术(U.S.PatNo.4946778)也可用于生产抗具有抑癌功能的人蛋白的单链抗体。

能与具有抑癌功能的人蛋白结合的多肽分子可通过筛选由各种可能组合的氨基酸结合于固相物组成的随机多肽库而获得。筛选时，必须对具有抑癌功能的人蛋白分子进行标记。

本发明还涉及定量和定位检测具有抑癌功能的人蛋白水平的诊断试验方法。这些试验是本领域所熟知的，且包括FISH测定和放射免疫测定。试验中所检测的具有抑癌功能的人蛋白水平，可以用作解释具有抑癌功能的人蛋白在各种疾病中的重要性和用于诊断具有抑癌功能的蛋白起作用的疾病。

具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸可用于具有抑癌功能的蛋白相关疾病的诊断和治疗。在诊断方面，具有抑癌功能的蛋白的多聚核苷酸可用于检测具有抑癌功能的蛋白的表达与否或在疾病状态下具有抑癌功能的蛋白的异常表达。如具有抑癌功能的蛋白DNA序列可用于对活检标本的杂交以判断具有抑癌功能的蛋白的表达异常。杂交技术包括Southern印迹法，Northern印迹法、原位杂交等。这些技术方法都是公开的成熟技术，相关的试剂盒都可从商业途径得到。本发明的多核苷酸的一部分或全部可作为探针固定在微阵列(Microarray)或DNA芯片(又称为“基因芯片”)上，用于分析组织中基因的差异表达分析和基因诊断。用具有抑癌功能的蛋白特异的引物进行RNA-聚合酶链反应(RT-PCR)体外扩增也可检测具有抑癌功能的蛋白的转录产物。

检测具有抑癌功能的蛋白基因的突变也可用于诊断具有抑癌功能的蛋白相关的疾病。具有抑癌功能的蛋白突变的形式包括与正常野生型具有抑癌功能的蛋白DNA序列相比的点突变、易位、缺失、重组和其它任何异常等。可用已有的技术如Southern印迹法、DNA序列分析、PCR和原位杂交检测突变。另外，突变有可能影响蛋白的表达，因此用Northern印迹法、Western印迹法可间接判断基因有无突变。

本发明的序列对染色体鉴定也是有价值的。该序列会特异性地针对某条人染色体具体位置且并可以与其杂交。目前，需要鉴定染色体上的各基因的具体位点。现在，只有很少的基于实际序列数据(重复多态性)的染色体标记物可用于标记染色体位置。根据本发明，为了将这些序列与疾病相关基因相关联，其重要的第一步就是将这些DNA序列定位于染色体上。

简而言之，根据cDNA制备PCR引物(优选15-35bp)，可以将序列定位于染色体上。然后，将这些引物用于PCR筛选含各条人染色体的体细胞杂合细胞。只有那些含有相应于引物的人基因的杂合细胞会产生扩增的片段。

体细胞杂合细胞的PCR定位法，是将DNA定位到具体染色体的快捷方法。使用本发明的的寡核苷酸引物，通过类似方法，可利用一组来自特定染色体的片段或大量基因组克隆而实现亚定位。可用于染色体定位的其它类似策略包括原位杂交、用标记的流式分选的染色体预筛选和杂交预选，从而构建染色体特异的cDNA库。

将cDNA克隆与中期染色体进行荧光原位杂交(FISH)，可以在一个步骤中精确地进行染色体定位。此技术的综述，参见Verma等，Human Chromosomes：a Manual of BasicTechniques，Pergamon Press，New York(1988)。

一旦序列被定位到准确的染色体位置，此序列在染色体上的物理位置就可以与基因图数据相关联。这些数据可见于例如，V.Mckusick，Mendelian Inheritance in Man(可通过与Johns Hopkins University Welch Medical Library联机获得)。然后可通过连锁分析，确定基因与业已定位到染色体区域上的疾病之间的关系。

接着，需要测定患病和未患病个体间的cDNA或基因组序列差异。如果在一些或所有的患病个体中观察到某突变，而该突变在任何正常个体中未观察到，则该突变可能是疾病的病因。比较患病和未患病个体，通常涉及首先寻找染色体中结构的变化，如从染色体水平可见的或用基于cDNA序列的PCR可检测的缺失或易位。根据目前的物理作图和基因定位技术的分辨能力，被精确定位至与疾病有关的染色体区域的cDNA，可以是50至500个潜在致病基因间之一种(假定1兆碱基作图分辨能力和每20kb对应于一个基因)。

本发明的具有抑癌功能的蛋白核苷酸全长序列或其片段通常可以用PCR扩增法、重组法或人工合成的方法获得。对于PCR扩增法，可根据本发明所公开的有关核苷酸序列，尤其是开放阅读框序列来设计引物，并用市售的cDNA库或按本领域技术人员已知的常规方法所制备的cDNA库作为模板，扩增而得有关序列。当序列较长时，常常需要进行两次或多次PCR扩增，然后再将各次扩增出的片段按正确次序拼接在一起。

一旦获得了有关的序列，就可以用重组法来大批量地获得有关序列。这通常是将其克隆入载体，再转入细胞，然后通过常规方法从增殖后的宿主细胞中分离得到有关序列。

此外，还可用人工合成的方法来合成有关序列，尤其是片段长度较短时。通常，通过先合成多个小片段，然后再进行连接可获得序列很长的片段。

目前，已经可以完全通过化学合成来编码本发明蛋白(或其片段，或其衍生物)的DNA序列。然后可将该DNA序列引入本领域中的各种DNA分子(如载体)和细胞中。此外，还可通过化学合成将突变引入本发明蛋白序列中。

此外，由于本发明的具有抑癌功能的蛋白具有源自人的天然氨基酸序列，因此，与来源于其他物种的同族蛋白相比，预计在施用于人时将具有更高的活性和/或更低的副作用(例如在人体内的免疫原性更低或没有)。

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件如Sambrook等人，分子克隆：实验室手册(New York：Cold Spring Harbor LaboratoryPress，1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。

实施例1：cDNA基因的获得及对癌细胞克隆形成的抑制作用

PP894，PP1030，PP1164，PP1187，PP1498，PP2464，PP3051，PP3105，PP5423是通过用常规方法构建人胎盘cDNA文库获得的。取3、6、10月龄的胎盘组织，用Trizol试剂(GIBCO BRL公司)按厂方说明书提取总RNA，用mRNA提纯试剂盒(Pharmacia公司)提取mRNA。用pCMV-script TMXR cDNA文库构建试剂盒(Stratagene公司)构建上述mRNA的cDNA文库。其中反转录酶改用MMLV-RT-SuperscriptII(GIBCO BRL)，反转录反应在42℃进行。转化XL 10-Gold感受细胞，获得了1×10⁶cfu/μg cDNA滴度的cDNA文库。第一轮随机挑取cDNA克隆，其后以高丰度cDNA克隆和已证明有抑癌细胞生长功能的cDNA克隆为探针，杂交筛选cDNA文库，挑取弱阳性及阴性克隆。用Qiagen 96孔板质粒抽提试剂盒，按厂家说明书进行质粒DNA的提取。质粒DNA和空载体同时转染肝癌细胞系7721。100ng DNA酒精沉淀干燥后，加6μl H₂O溶解，待转染。每份DNA样品中加0.74μl脂质体及9.3μl无血清培液，混匀后，室温放置10分钟。每管中加150μl无血清培液，均分加入3孔生长于96孔板的7721细胞中，37℃放置2小时，每孔再加50μl无血清培液，37℃24小时。每孔换100μl全培液，37℃ 24小时，换含G418的全培液100μl，37℃ 24～48小时，边观察，边换G418浓度不等的培液。约2～3次后，直到镜检细胞有克隆形成，计数。发现上述克隆有抑制细胞克隆形成作用，结果如下表所示。

cDNA克隆转染细胞(7721)克隆形成情况

cDNA克隆名称 CDNA克隆数(三个重复) 空载体克隆数(三个重复)

PP894 70 68 65 57 54 40

PP1030 0 0 0 54 45 40

PP1164 0 0 0 30 37 41

PP1187 0 1 1 30 37 41

PP1498 0 0 0 26 23 32

PP2464 2 0 0 28 30 27

PP3051 8 10 11 12 18 20

PP3105 0 2 0 12 18 20

PP5423 23 50 30 19 32 21

对cDNA克隆采用双脱氧终止法，在ABI377 DNA自动测序仪上测定其一端近500bp的核苷酸序列。分析后，确定为新基因克隆，进行另一端测序，仍未获得全长cDNA序列，设计引物，再次进行测序，直到获得全长序列(SEQ ID NO：1、4、7、10、13、16、19、22、25)。

实施例2：从胎盘cDNA中PCR获得全长基因：

取3、6、10月龄的胎盘组织，用Trizol试剂(GIBCO BRL公司)按厂方说明书提取总RNA，用mRNA提纯试剂盒(Pharmacia公司)提取mRNA。用MMLV-RT-SuperscriptII(GIBCO BRL)反转录酶在42℃进行反转录反应，获得胎盘cDNA。利用各个基因的转异引物(如下表所示)，按90℃ 3分钟1个循环：94℃ 30秒，60℃ 30秒，72℃ 1分钟，共35个循环；72℃ 10分钟，1个循环进行PCR扩增，获得含有完整开放阅读框序列的各蛋白基因的扩增产物。扩增产物经测序验证，与实施例1测得的序列相符，随后用常规技术将扩增产物转入宿主细胞，以获得重组蛋白。

基因特异引物序列

克隆名称特异引物1(5′→3′) 特异引物2(5′→3′)

PP894 GTCGTGGACTGTGGTTGGGGGAG ACCCAGAGCAGGTTCCAGAGCCC

PP1030 ACAGCACGAGAGCACAGCCCTGA GCCACCACCACAAAAGGCTCCAG

PP1164 TTACAGACGCATTTCAGCCCCGC TGAGCCACTGTCCCCAGCGTTTT

PP1187 TCAGCTTCCGGGAGTTCCTGCTC AGGAGACAGAGGTGGGCAGGCAT

PP1498 GTCAGGCCTGGTCAACGTGGTGT CAAAGGGGCACCAGACAGGGAAC

PP2464 AGACCTCCTCGAAGGAGCAGCCA GAAGATCTCCCCAGGGGGCTTTG

PP3051 GAGCTGGCGTGCAAGCTGGAG AGGAGACAGAGGTGGGCAGGCAT

PP3105 GGGGGCGGGAGACAGAAAGAGAG CAATTCGATTTCTCCTGCATACA

PP5423 TGGAGCCTGAGTGCATCATGGAG GTCAGGGGCAAGAGCCAAGCTGT

实施例3：cDNA克隆序列分析

1.PP894

A：核苷酸序列：(SEQ ID NO：1)长度：1492bp

1 GGCATCTGAG AGGCTGGTCG TGGACTGTGG TTGGGGGAGG TGGGAGCTGT

51 TTTAACCGTG TGCCCCCTCT CCTGTGCCGG CGTGGGCATC CCCCGGGGCA

101 GTGGAACGCG GGCGCTCCTC CAGCTTCCGA GTCCAGCCAG CCTGGGCGCG

151 GGGCGCCGCC CCCGAGACAC CCGAGGAGTC CGTTCCTCCC TGGTTACGTG

201 GACTGTGGAG CTGGTCTCTT GTGGCTCAGC GCCGTGCGGA GGTTGAAGCG

251 TACCTGCGGA GGTCGCACCA GGGCGTGAGG AGGAGGAGGA AGGGCATGAG

301 CCGAGCTTGA GGAATCCGTG CTCCAAACTC TACACTCAAG GGTGGCCCTT

351 GGGTAGGGTG AAGATCCCCT GTCTTTATCC TAGTTCCACA CCTTGGTGTG

401 GGTTACTGGG TGCAGGATGA ACTGTCGCTC GGAGGTGCTG GAGGTGTCGG

451 TGGAGGGGCG GCAGGTGGAG GAGGCCATGC TGGCTGTGCT GCACACGGTG

501 CTTCTGCACC GCAGCACAGG CAAGTTCCAC TACAAGAAGG AGGGCACCTA

551 CTCCATTGGC ACCGTGGGCA CCCAGGATGT TGACTGTGAC TTCATCGACT

601 TCACTTATGT GCGTGTCTCT TCTGAGGAAC TGGATCGTGC CCTGCGCAAG

651 GTTGTTGGGG AGTTCAAGGA TGCACTGCGC AACTCTGGTG GCGATGGGCT

701 GGGGCAGATG TCCTTGGAGT TCTACCAGAA GAAGAAGTCT CGCTGCCATT

751 CTCAGACGAG TGCATCCCAT GGGAAGTGTG GACGGTCAAG GTGCATGTGG

801 TAGCCCTGGC CACGGAGCAG GAGCGGCAGA TCTGCCGGGA GAAGGTGGGT

851 GAGAAACTCT GCGAGAAGAT CATCAACATC GTGGAGGTGA TGAATCGGCA

901 TGAGTACTTG CCCAAGATGC CCACACAGTC GGAGGTGGAT AACGTGTTTG

951 ACACAGGCTT GCGGGACGTG CAGCCCTACC TGTACAAGAT CTCCTTCCAG

1001 ATCACTGATG CCCTGGGCAC CTCAGTCACC ACCACCATGC GCAGGCTCAT

1051 CAAAGACACC CTTGCCCTCT GAGCGTCGGT GGATCTCTGG GAGCTCCTTG

1101 ATGGCTCCCA GACCTTGGCT TTTGGGAATT GCACTTTTGG GCCTTTGGGC

1151 TCTGGAACCT GCTCTGGGTC ATTGGTGAGA CTTGGAAGGG GCAGCCCCCG

1201 CTGGCTTCTT GGTTTTGTGG TTGCCAGCCT CAGGTCATCC TTTTAATCTT

1251 TGCTGATGGT TCAGTCCTGC CTCTACTGTC TCTCCATAGC CCTGGTGGGG

1301 TCCCCCTTCT TTCTCCACTG TACAGAAGAG CCACCACTGG GATGGGGAAT

1351 AAAGTTGAGA ACATGAGTTT GGAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA

1401 AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA

1451 CCTGGGGGGG GGGCCCGGTC CCAGGTAAGT GTACCCAATT CG

B：氨基酸序列：(SEQ ID NO：2)长度：128个氨基酸

1 MNCRSEVLEV SVEGRQVEEA MLAVLHTVLL HRSTGKFHYK KEGTYSIGTV

51 GTQDVDCDFI DFTYVRVSSE ELDRALRKVV GEFKDALRNS GGDGLGQMSL

101 EFYQKKKSRC HSQTSASHGK CGRSRCMW

C：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：3)

克隆号和蛋白名称：PP894

起始编码子： 417 ATG 终止编码子：803 TAG

蛋白质分子量：14426.67

1 GG CAT CTG AGA GGC TGG TCG TGG ACT GTG GTT GGG GGA GGT GGG AGC 47

48 TGT TTT AAC CGT GTG CCC CCT CTC CTG TGC CGG CGT GGG CAT CCC CCG 95

96 GGG CAG TGG AAC GCG GGC GCT CCT CCA GCT TCC GAG TCC AGC CAG CCT 143

144 GGG CGC GGG GCG CCG CCC CCG AGA CAC CCG AGG AGT CCG TTC CTC CCT 191

192 GGT TAC GTG GAC TGT GGA GCT GGT CTC TTG TGG CTC AGC GCC GTG CGG 239

240 AGG TTG AAG CGT ACC TGC GGA GGT CGC ACC AGG GCG TGA GGA GGA GGA 287

288 GGA AGG GCA TGA GCC GAG CTT GAG GAA TCC GTG CTC CAA ACT CTA CAC 335

336 TCA AGG GTG GCC CTT GGG TAG GGT GAA GAT CCC CTG TCT TTA TCC TAG 383

384 TTC CAC ACC TTG GTG TGG GTT ACT GGG TGC AGG ATG AAC TGT CGC TCG 431

1 Met Asn Cys Arg Ser 5

432 GAG GTG CTG GAG GTG TCG GTG GAG GGG CGG CAG GTG GAG GAG GCC ATG 479

6 Glu Val Leu Glu Val Ser Val Glu Gly Arg Gln Val Glu Glu Ala Met 21

480 CTG GCT GTG CTG CAC ACG GTG CTT CTG CAC CGC AGC ACA GGC AAG TTC 527

22 Leu Ala Val Leu His Thr Val Leu Leu His Arg Ser Thr Gly Lys Phe 37

528 CAC TAC AAG AAG GAG GGC ACC TAC TCC ATT GGC ACC GTG GGC ACC CAG 575

38 His Tyr Lys Lys Glu Gly Thr Tyr Ser Ile Gly Thr Val Gly Thr Gln 53

576 GAT GTT GAC TGT GAC TTC ATC GAC TTC ACT TAT GTG CGT GTC TCT TCT 623

54 Asp Val Asp Cys Asp Phe Ile Asp Phe Thr Tyr Val Arg Val Ser Ser 69

624 GAG GAA CTG GAT CGT GCC CTG CGC AAG GTT GTT GGG GAG TTC AAG GAT 671

70 Glu Glu Leu Asp Arg Ala Leu Arg Lys Val Val Gly Glu Phe Lys Asp 85

672 GCA CTG CGC AAC TCT GGT GGC GAT GGG CTG GGG CAG ATG TCC TTG GAG 719

86 Ala Leu Arg Asn Ser Gly Gly Asp Gly Leu Gly Gln Met Ser Leu Glu 101

720 TTC TAC CAG AAG AAG AAG TCT CGC TGC CAT TCT CAG ACG AGT GCA TCC 767

102 Phe Tyr Gln Lys Lys Lys Ser Arg Cys His Ser Gln Thr Ser Ala Ser 117

768 CAT GGG AAG TGT GGA CGG TCA AGG TGC ATG TGG TAG CCC TGG CCA CGG 815

118 His Gly Lys Cys Gly Arg Ser Arg Cys Met Trp *** 129

816 AGC AGG AGC GGC AGA TCT GCC GGG AGA AGG TGG GTG AGA AAC TCT GCG 863

864 AGA AGA TCA TCA ACA TCG TGG AGG TGA TGA ATC GGC ATG AGT ACT TGC 911

912 CCA AGA TGC CCA CAC AGT CGG AGG TGG ATA ACG TGT TTG ACA CAG GCT 959

960 TGC GGG ACG TGC AGC CCT ACC TGT ACA AGA TCT CCT TCC AGA TCA CTG 1007

1008 ATG CCC TGG GCA CCT CAG TCA CCA CCA CCA TGC GCA GGC TCA TCA AAG 1055

1056 ACA CCC TTG CCC TCT GAG CGT CGC TGG ATC TCT GGG AGC TCC TTG ATG 1103

1104 GCT CCC AGA CCT TGG CTT TTG GGA ATT GCA CTT TTG GGC CTT TGG GCT 1151

1152 CTG GAA CCT GCT CTG GGT CAT TGG TGA GAC TTG GAA GGG GCA GCC CCC 1199

1200 GCT GGC TTC TTG GTT TTG TGG TTG CCA GCC TCA GGT CAT CCT TTT AAT 1247

1248 CTT TGC TGA TGG TTC AGT CCT GCC TCT ACT GTC TCT CCA TAG CCC TGG 1295

1296 TGG GGT CCC CCT TCT TTC TCC ACT GTA CAG AAG AGC CAC CAC TGG GAT 1343

1344 GGG GAA TAA AGT TGA GAA CAT GAG TTT GGA AAA AAA AAA AAA AAA AAA 1391

1392 AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA 1439

1440 AAA AAA AAA AAC CTG GGG GGG GGG CCC GGT CCC AGG TAA GTG TAC CCA 1487

1488 ATT CG 1492

D：Blastp结果

Query＝PP894[基因＝PP894](128个氨基酸)

>SP_FUN：O13978 O13978 schizosaccharomyces pombe(fission yeast).

hypothetical 20.3 kd protein c25h1.03 in chromosome i.

6/1998

长度＝184

分值＝35.6bits(80)，预计值＝0.17

相同性＝30/103(29％)，相似性＝44/103(42％)，缺口＝18/103(17％)

Query：8 LEVSVEGRQVEEAMLAVLHTVLLHRSTGKFHYKKEGTYSIGTVGTQDVDCDFIDFTYVRV 67

+E+ + + E + AVL +L HR TV + +D +D T +

Sbjct：7 IELKIGYKYAAEVVKAVLGVILFHRQ-------------FSTVPARTIDV--LDITVPTL 51

Query：68 SSEELDRALRKVVGEFKDALRNSGGDGLGQMSLEFYQK--KKS 108

EL+ L EF D +RN G GQM L Y++ KKS

Sbjct：52 VGAELNEQLATKAAEFIDTIRNEAGAN-GQMILLLYERSPKKS 93

2.PP1030

A：核苷酸序列：(SEQ ID NO：4)长度：2258bp

1 CCCAACTGGG GGTGGTCCCT GGGATTGGAC ACTAGTGGAG GAGGGCGATG

51 GACGCCTTCA GCCCCAGGCA CCCAGCTGGC CGGCAGCTGA GGAGGGAGAG

101 GGGGAGCGTA GCCTTACAGC ACGAGAGCAC AGCCCTGAGG AGGCGCGGGA

151 GCTGCGGGCT GCGGTGATCC AGCTTCTGGA CACCTCCTAT CTGCTCACTC

201 CTGTGGCCCA GGCCCAGCTC CTGTGGCTGC TGGGCTGGGC CCTGCGGGGT

251 CTGCAGGGAC AGCCACCGGC ACTCTTCAAG CCGCAGCTGG TACGGCTGCT

301 AGGCACAGCA CAGCTGACAC TGTTGCACGC CATGCTTGCG CTCAAGGCGG

351 CCTTTGGTGA GGCCTTGTTC ACAGCCCAGG ATGAAGCGTT GCTGCTCCGC

401 CGGCTCACCT TGGCTGCCCA GCACCCTGCT CTGCCTCCGC CCACCCATCT

451 CTTTTACCTG CACTGCGTCC TGAGCTTCCC TGAGAACTGG CCGCTGGGCC

501 TGAAGGTGAG GAGGCTGCCC CACTGCTGCT AGGGCCCCAG CTATGCCGTG

551 GTCTCCTGCC CAGTCTCCTG CATGACCCAA TGGCCCTCCT GGCCCGCCTG

601 CATTTACTGT GCCTGCTCTG TGCGGAGGAG GAAGAAGAGG AGAAAGGCCA

651 GCTTCCAAGC CCACGGCACT ACCTGGAAGA GCTGCTGGCT GGCTTGCGGC

701 ACGGGGCAGC CCTGGATGGG GGCCCCCGGG CTTGGCCACT CTCTGCTTCC

751 AGGCCTCGTA TCTGGTGGCC TGCTGCCTGG CTGGGCAACC TACGGTGCTG

801 ACCCCCTTGA TCCACGGACT GGCCCAGCTG TACCAAGCCC GGCCCATGCT

851 GGCTCCCCAC TTTGTGGACC TCTTGGATCA GGTGGACTCT GAGCTGAGGG

901 AGCCCCTGAA GGTGGTGTTG CGGCAGGTGG TGGTGTCCAG GCCGGGCAGG

951 GATGAAGCTC TTTGCTGGCA CCTGCAAATG CTGGCAAAGG TGGCAGATGG

1001 AGATGCCCAG AGTGCTACCC TCAACTTTCT ACAGGCCGCG GCTGCCCACT

1051 GCACGAACTG GGACCTACAG CAGGGCCTGC TGCGGGTCTG CCGGGCGCTG

1101 CTGCGGGCAG GGGTGAGGGG CGGCCTGGTC GACTTGCTGC AGGTGCTGGC

1151 CAGGCAGCTG GAGGACCCTG ATGGGCGTGA CCACGCCCGC CTCTACTACA

1201 TCCTGCTGGC ACACCTGGCA GCACCCAAGT TGGGGGTGGC CCTGGGCCCC

1251 TCGCTTGCCG CACCTGCACT GGCCTCTTCA CTGGTGGCCG AGAACCAGGG

1301 CTTTGTGGCA GCACTGATGG TGCAGGAGGC ACCGGCCCTG GTACGGCTGA

1351 GCCTGGGGTC CCATCGGGTC AAGGGCCCAC TCCCAGTGTT GAAGCTCCAC

1401 CGGAGGCGCT GGAGCCCATC TACTCTCTGG AGTGCGCTTC GTGTGGAAGG

1451 ACAGCTGTAT GCACCCCTGG AGGCTGTCCA TGTGCCCTGC CTGTGTCCTG

1501 GCCGCCCTGC CCGCCCTCTG CTCCTGCCTC TGCAGCCCCG ATGCCCGGCC

1551 CCCGCACGGC TGGATGTCCA TGCCCTTTAC ACCACATCCA CTGGTCTCAC

1601 GTGCCATGCC CACTTGCCAC CCCTGTTCTG TGAACTTTGC CGACCTCTTT

1651 CTGCCTTTCC CGCAGCCTCC AGAGGGGGCC GGGCTGGGCT TCTTTGAGGA

1701 GCTCTGGGAT TCCTGCCTGC CAGAGGGTGC TGAGAGTCGT GTGTGGTGTC

1751 CACTTGGGCC ACAGGGCCTG GAGGGCTTGG TGTCCCGCCA CCTGGAGCCT

1801 TTTGTGGTGG TGGCCCAGCC TCCTACCAGC TACTGTGTAG CAATCCACCT

1851 GCCCCCGGAC TCAAAGCTGC TGCTGCGGCT GGAGGCGGCC CTGGCAGATG

1901 GAGTGCCTGT GGCCCTGCGG ACCGATGACT GGGCCGTGCT GCCCCTGGCG

1951 GGGGACTACC TCCGTGGGCT GGCGGCTGCT GTTTGAGCCC CGGGAGACCA

2001 GGTGGGGGCA GGACTGTGGC CCTTGTGGGG GCCAAGGCAC ACTCCTGTAG

2051 CTCTGTCGCC AAAACCCTGC ATTCCGCAGT GCCCTCGCTG GCTTGTTTTC

2101 TTTTGGGCCC CGGTTGGGAG CAGGCTCCTG GGGGTGAGGG TCTGTCTGAG

2151 TCTGTTTTTG CTGCTCTAGC AAGATCCCTG AGACGGGGTA AGTTATAATA

2201 AACAGAAATG TATTGGCTCC GCAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA

2251 AAAAAAAA

B：氨基酸序列：(SEQ ID NO：5)长度：283个氨基酸

1 MLAPHFVDLL DQVDSELREP LKVVLRQVVV SRPGRDEALC WHLQMLAKVA

51 DGDAQSATLN FLQAAAAHCT NWDLQQGLLR VCRALLRAGV RGGLVDLLQV

101 LARQLEDPDG RDHARLYYIL LAHLAAPKLG VALGPSLAAP ALASSLVAEN

151 QGFVAALMVQ EAPALVRLSL GSHRVKGPLP VLKLHRRRWS PSTLWSALRV

201 EGQLYAPLEA VHVPCLCPGR PARPLLLPLQ PRCPAPARLD VHALYTTSTG

251 LTCHAHLPPL FCELCRPLSA FPAASRGGRA GLL

C：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：6)

克隆号和蛋白名称：PP1030

起始编码子： 846 ATG 终止编码子：1697 TAG

蛋白质分子量：30594.17

1 CC CAA CTG GGG GTG GTC CCT GGG ATT GGA CAC TAG TGG AGG AGG GCG 47

48 ATG GAC GCC TTC AGC CCC AGG CAC CCA GCT GGC CGG CAG CTG AGG AGG 95

96 GAG AGG GGG AGC GTA GCC TTA CAG CAC GAG AGC ACA GCC CTG AGG AGG 143

144 CGC GGG AGC TGC GGG CTG CGG TGA TCC AGC TTC TGG ACA CCT CCT ATC 191

192 TGC TCA CTC CTG TGG CCC AGG CCC AGC TCC TGT GGC TGC TGG GCT GGG 239

240 CCC TGC GGG GTC TGC AGG GAC AGC CAC CGG CAC TCT TCA AGC CGC AGC 287

288 TGG TAC GGC TGC TAG GCA CAG CAC AGC TGA CAC TGT TGC ACG CCA TGC 335

336 TTG CGC TCA AGG CGG CCT TTG GTG AGG CCT TGT TCA CAG CCC AGG ATG 383

384 AAG CGT TGC TGC TCC GCC GGC TCA CCT TGG CTG CCC AGC ACC CTG CTC 431

432 TGC CTC CGC CCA CCC ATC TCT TTT ACC TGC ACT GCG TCC TGA GCT TCC 479

480 CTG AGA ACT GGC CGC TGG GCC TGA AGG TGA GGA GGC TGC CCC ACT GCT 527

528 GCT AGG GCC CCA GCT ATG CCG TGG TCT CCT GCC CAG TCT CCT GCA TGA 575

576 CCC AAT GGC CCT CCT GGC CCG CCT GCA TTT ACT GTG CCT GCT CTG TGC 623

624 CGA GGA GGA AGA AGA GGA GAA AGG CCA GCT TCC AAG CCC ACG GCA CTA 671

672 CCT GGA AGA GCT GCT GGC TGG CTT GCG GCA CGG GGC AGC CCT GGA TGG 719

720 GGG CCC CCG GGC TTG GCC ACT CTC TGC TTC CAG GCC TCG TAT CTG GTG 767

768 GCC TGC TGC CTG GCT GGG CAA CCT ACG GTG CTG ACC CCC TTG ATC CAC 815

816 GGA CTG GCC CAG CTG TAC CAA GCC CGG CCC ATG CTG GCT CCC CAC TTT 863

1 Met Leu Ala Pro His Phe 6

864 GTG GAC CTC TTG GAT CAG GTG GAC TCT GAG CTG AGG GAG CCC CTG AAG 911

7 Val Asp Leu Leu Asp Gln Val Asp Ser Glu Leu Arg Glu Pro Leu Lys 22

912 GTG GTG TTG CGG CAG GTG GTG GTG TCC AGG CCG GGC AGG GAT GAA GCT 959

23 Val Val Leu Arg Gln Val Val Val Ser Arg Pro Gly Arg Asp Glu Ala 38

960 CTT TGC TGG CAC CTG CAA ATG CTG GCA AAG GTG GCA GAT GGA GAT GCC 1007

39 Leu Cys Trp His Leu Gln Met Leu Ala Lys Val Ala Asp Gly Asp Ala 54

1008 CAG AGT GCT ACC CTC AAC TTT CTA CAG GCC GCG GCT GCC CAC TGC ACG 1055

55 Gln Ser Ala Thr Leu Asn Phe Leu Gln Ala Ala Ala Ala His Cys Thr 70

1056 AAC TGG GAC CTA CAG CAG GGC CTG CTG CGG GTC TGC CGG GCG CTG CTG 1103

71 Asn Trp Asp Leu Gln Gln Gly Leu Leu Arg Val Cys Arg Ala Leu Leu 86

1104 CGG GCA GGG GTG AGG GGC GGC CTG GTC GAC TTG CTG CAG GTG CTG GCC 1151

87 Arg Ala Gly Val Arg Gly Gly Leu Val Asp Leu Leu Gln Val Leu Ala 102

1152 AGG CAG CTG GAG GAC CCT GAT GGG CGT GAC CAC GCC CGC CTC TAC TAC 1199

103 Arg Gln Leu Glu Asp Pro Asp Gly Arg Asp His Ala Arg Leu Tyr Tyr 118

1200 ATC CTG CTG GCA CAC CTG GCA GCA CCC AAG TTG GGG GTG GCC CTG GGC 1247

119 Ile Leu Leu Ala His Leu Ala Ala Pro Lys Leu Gly Val Ala Leu Gly 134

1248 CCC TCG CTT GCC GCA CCT GCA CTG GCC TCT TCA CTG GTG GCC GAG AAC 1295

135 Pro Ser Leu Ala Ala Pro Ala Leu Ala Ser Ser Leu Val Ala Glu Asn 150

1296 CAG GGC TTT GTG GCA GCA CTG ATG GTG CAG GAG GCA CCG GCC CTG GTA 1343

151 Gln Gly Phe Val Ala Ala Leu Met Val Gln Glu Ala Pro Ala Leu Val 166

1344 CGG CTG AGC CTG GGG TCC CAT CGG GTC AAG GGC CCA CTC CCA GTG TTG 1391

167 Arg Leu Ser Leu Gly Ser His Arg Val Lys Gly Pro Leu Pro Val Leu 182

1392 AAG CTC CAC CGG AGG CGC TGG AGC CCA TCT ACT CTC TGG AGT GCG CTT 1439

183 Lys Leu His Arg Arg Arg Trp Ser Pro Ser Thr Leu Trp Ser Ala Leu 198

1440 CGT GTG GAA GGA CAG CTG TAT GCA CCC CTG GAG GCT GTC CAT GTG CCC 1487

199 Arg Val Glu Gly Gln Leu Tyr Ala Pro Leu Glu Ala Val His Val Pro 214

1488 TGC CTG TGT CCT GGC CGC CCT GCC CGC CCT CTG CTC CTG CCT CTG CAG 1535

215 Cys Leu Cys Pro Gly Arg Pro Ala Arg Pro Leu Leu Leu Pro Leu Gln 230

1536 CCC CGA TGC CCG GCC CCC GCA CGG CTG GAT GTC CAT GCC CTT TAC ACC 1583

231 Pro Arg Cys Pro Ala Pro Ala Arg Leu Asp Val His Ala Leu Tyr Thr 246

1584 ACA TCC ACT GGT CTC ACG TGC CAT GCC CAC TTG CCA CCC CTG TTC TGT 1631

247 Thr Ser Thr Gly Leu Thr Cys His Ala His Leu Pro Pro Leu Phe Cys 262

1632 GAA CTT TGC CGA CCT CTT TCT GCC TTT CCC GCA GCC TCC AGA GGG GGC 1679

263 Glu Leu Cys Arg Pro Leu Ser Ala Phe Pro Ala Ala Ser Arg Gly Gly 278

1680 CGG GCT GGG CTT CTT TGA GGA GCT CTG GGA TTC CTG CCT GCC AGA GGG 1727

279 Arg Ala Gly Leu Leu *** 284

1728 TGC TGA GAG TCG TGT GTG GTG TCC ACT TGG GCC ACA GGG CCT GGA GGG 1775

1776 CTT GGT GTC CCG CCA CCT GGA GCC TTT TGT GGT GGT GGC CCA GCC TCC 1823

1824 TAC CAG CTA CTG TGT AGC AAT CCA CCT GCC CCC GGA CTC AAA GCT GCT 1871

1872 GCT GCG GCT GGA GGC GGC CCT GGC AGA TGG AGT GCC TGT GGC CCT GCG 1919

1920 GAC CGA TGA CTG GGC CGT GCT GCC CCT GGC GGG GGA CTA CCT CCG TGG 1967

1968 GCT GGC GGC TGC TGT TTG AGC CCC GGG AGA CCA GGT GGG GGC AGG ACT 2015

2016 GTG GCC CTT GTG GGG GCC AAG GCA CAC TCC TGT AGC TCT GTC GCC AAA 2063

2064 ACC CTG CAT TCC GCA GTG CCC TCG CTG GCT TGT TTT CTT TTG GGC CCC 2111

2112 GGT TGG GAG CAG GCT CCT GGG GGT GAG GGT CTG TCT GAG TCT GTT TTT 2159

2160 GCT GCT CTA GCA AGA TCC CTG AGA CGG GGT AAG TTA TAA TAA ACA GAA 2207

2208 ATG TAT TGG CTC CGC AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA 2255

2256 AAA 2258

D：Blastp结果

Query＝PP1030[基因＝PP1030](283个氨基酸)

>SW：DIS3_SCHPO P37202 schizosaccharomyces pombe(fission yeast).

mitotic control protein dis3.12/1998

长度＝970

分值＝36.7bits(83)，预计值＝0.23

相同性＝23/75(30％)，相似性＝42/75(55％)，缺口＝3/75(4％)

Query：12 QVDSELREPLKVVLRQVVVSRPGRDE-ALCWHLQMLAKVADGDAQSATLNFLQAAAAHCT 70

Q D+E +P+ V ++Q++ + +E L ++ + K+ D Q+A L + AA T

Sbjct：669 QTDNETSDPMDVEIKQLLETNSLVEEFMLLANISVAQKIYDAFPQTAVLR--RHAAPPLT 726

Query：71 NWDLQQGLLRVCRAL 85

N+D Q +LRVC+ +

Sbjct：727 NFDSLQDILRVCKGM 741

3.PP1164

A：核苷酸序列：(SEQ ID NO：7)长度：1094bp

1 GAGGGCCTCA CGGGGTGGGT GTGAGTCTGG CCTGCCTGGG CTCGGGGTGG

51 GGGGTGTTTA CAGACGCATT TCAGCCCCGC AGCAGGGGCT GGGGAGGTCC

101 CGCTCGTGAC AGTCTCTGCA CCAAGGCAGG AGAGATGGAA GCCGCCCAGA

151 GAACTGCCAC TCCATAGCCT GTGGGCATCC AGGGGTGAGC GGCAGCGATG

201 GCGCCCCATG GAGGAAACAC ACTGGAAATC GTGCAGAAGA TGGGAAGATG

251 CAGGCTGGAG TGCGGAGAAG GACTGAGACC CTGCCTGGTA GACGGCACCG

301 TCACAGCAGC CGTCTGCCTG CTAGGAGGAG CGTCTCCACC AGCAGCAGGC

351 CGGCCCCTGA GGGAGACAGC AGAGAGCTGG AGTCCTGGCC AGCCAGGCGG

401 GGATCCTTCA GCAGGACACA GGGGACACAG CAGGCAACAG GAGCTCAGAA

451 CGCTCTCGGC GACCCTGCTG AGTAACTTGT GGACTTTGTC GTCTGGCCAG

501 TCATGCAGGA TCCGGCACAG GACGTACAGC TCAGCGCTGG GGAGGGGGTC

551 CCTGAAAAAG TCACCTGGTT TAAAGACAAA AGGAGACACG TCCGTCAGGT

601 ATGGAAGAAG CAGTCCTCCC CGGACAGATC CTGGGACGGC CACCCGCATC

651 CTAAGTCAGG GACAGAGAAG AGAGGGGTGT GGGCGGGAAT GGGTCTTCCT

701 GAAGTACATC CCCGTGGGGA CTTGAACAGA GCTCCATGAG GAGCTGGTTA

751 GTGATGTCAC GCCCGTGCGG TTTGACTCCG GCTGAGAAAA CGCTGGGGAC

801 AGTGGCTCAC ACCTGTAATC TCAGCCTCCC AGACGGCTGG GATTCCAGGC

851 GTGAGCCTGG GCACGTGGCC CAGGCGTCTC CTGTCAATCC GTCCTGGCCT

901 CAGCAGCTGC CACCTGGAAG TTCTCCTTCA AGTCTAACCT AAGGCCGCCC

951 TGTGACGGCT CTCGGGTCAG TTCCTTCTGT GACCTCGGCA CCGTGGATGC

1001 CCATGAATGC TGATCTCGGC TGTTCCCCAT CTCCACTCCC CTCCCGTCTC

1051 GGCTATTTGC ACTGATGATA ACTTCAAAAA AAAAAAAAAA AAAA

B：氨基酸序列：(SEQ ID NO：8)长度：175个氨基酸

1 MAPHGGNTLE IVQKMGRCRL ECGEGLRPCL VDGTVTAAVC LLGGASPPAA

51 GRPLRETAES WSPGQPGGDP SAGHRGHSRQ QELRTLSATL LSNLWTLSSG

101 QSCRIRHRTY SSALGRGSLK KSPGLKTKGD TSVRYGRSSP PRTDPGTATR

151 ILSQGQRREG CGREWVFLKY IPVGT

C：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：9)

克隆号和蛋白名称：PP1164

起始编码子： 198 ATG 终止编码子：725 TGA

蛋白质分子量：18634.15

1 GA GGG CCT CAC GGG GTG GGT GTG AGT CTG GCC TGC CTG GGC TCG GGG 47

48 TGG GGG GTG TTT ACA GAC GCA TTT CAG CCC CGC AGC AGG GGC TGG GGA 95

96 GGT CCC GCT CGT GAC AGT CTC TGC ACC AAG GCA GGA GAG ATG GAA GCC 143

144 GCC CAG AGA ACT GCC ACT CCA TAG CCT GTG GGC ATC CAG GGG TGA GCG 191

192 GCA GCG ATG GCG CCC CAT GGA GGA AAC ACA CTG GAA ATC GTG CAG AAG 239

1 Met Ala Pro His Gly Gly Asn Thr Leu Glu Ile Val Gln Lys 14

240 ATG GGA AGA TGC AGG CTG GAG TGC GGA GAA GGA CTG AGA CCC TGC CTG 287

15 Met Gly Arg Cys Arg Leu Glu Cys Gly Glu Gly Leu Arg Pro Cys Leu 30

288 GTA GAC GGC ACC GTC ACA GCA GCC GTC TGC CTG CTA GGA GGA GCG TCT 335

31 Val Asp Gly Thr Val Thr Ala Ala Val Cys Leu Leu Gly Gly Ala Ser 46

336 CCA CCA GCA GCA GGC CGG CCC CTG AGG GAG ACA GCA GAG AGC TGG AGT 383

47 Pro Pro Ala Ala Gly Arg Pro Leu Arg Glu Thr Ala Glu Ser Trp Ser 62

384 CCT GGC CAG CCA GGC GGG GAT CCT TCA GCA GGA CAC AGG GGA CAC AGC 431

63 Pro Gly Gln Pro Gly Gly Asp Pro Ser Ala Gly His Arg Gly His Ser 78

432 AGG CAA CAG GAG CTC AGA ACG CTC TCG GCG ACC CTG CTG AGT AAC TTG 479

79 Arg Gln Gln Glu Leu Arg Thr Leu Ser Ala Thr Leu Leu Ser Asn Leu 94

480 TGG ACT TTG TCG TCT GGC CAG TCA TGC AGG ATC CGG CAC AGG ACG TAC 527

95 Trp Thr Leu Ser Ser Gly Gln Ser Cys Arg Ile Arg His Arg Thr Tyr 110

528 AGC TCA GCG CTG GGG AGG GGG TCC CTG AAA AAG TCA CCT GGT TTA AAG 575

111 Ser Ser Ala Leu Gly Arg Gly Ser Leu Lys Lys Ser Pro Gly Leu Lys 126

576 ACA AAA GGA GAC ACG TCC GTC AGG TAT GGA AGA AGC AGT CCT CCC CGG 623

127 Thr Lys Gly Asp Thr Ser Val Arg Tyr Gly Arg Ser Ser Pro Pro Arg 142

624 ACA GAT CCT GGG ACG GCC ACC CGC ATC CTA AGT CAG GGA CAG AGA AGA 671

143 Thr Asp Pro Gly Thr Ala Thr Arg Ile Leu Ser Gln Gly Gln Arg Arg 158

672 GAG GGG TGT GGG CGG GAA TGG GTC TTC CTG AAG TAC ATC CCC GTG GGG 719

159 Glu Gly Cys Gly Arg Glu Trp Val Phe Leu Lys Tyr Ile Pro Val Gly 174

720 ACT TGA ACA GAG CTC CAT GAG GAG CTG GTT AGT GAT GTC ACG CCC GTG 767

175 Thr *** 176

768 CGG TTT GAC TCC GGC TGA GAA AAC GCT GGG GAC AGT GGC TCA CAC CTG 815

816 TAA TCT CAG CCT CCC AGA CGG CTG GGA TTC CAG GCG TGA GCC TGG GCA 863

864 CGT GGC CCA GGC GTC TCC TGT CAA TCC GTC CTG GCC TCA GCA GCT GCC 911

912 ACC TGG AAG TTC TCC TTC AAG TCT AAC CTA AGG CCG CCC TGT GAC GGC 959

960 TCT CGG GTC AGT TCC TTC TGT GAC CTC GGC ACC GTG GAT GCC CAT GAA 1007

1008 TGC TGA TCT CGG CTG TTC CCC ATC TCC ACT CCC CTC CCG TCT CGG CTA 1055

1056 TTT GCA CTG ATG ATA ACT TCA AAA AAA AAA AAA AAA AAA 1094

D：Blastp结果

Query＝PP1164[基因＝PP1164](175个氨基酸)

>SP_IN：O17642 O17642 caenorhabditis elegans.c34f6.3 protein.5/1999

长度＝283

分值＝31.3bits(69)，预计值＝5.5

相同性＝23/56(41％)，相似性＝28/56(49％)，缺口＝10/56(17％)

Query：23 GEGLRPCLVDGTVTAAVCLLGGASPPAAGRPLRETAESWSPGQPGGDPSAGHRGHS 78

GEG RP T +A SPP G+P + E SPG+PG D AGH G +

Sbjct：190 GEGGRPGQAGQTRSAP-------SPP--GQP-GQPGEPGSPGEPGPDGRAGHPGRN 235

>SP_IN：O17641 O17641 caenorhabditis elegans.c34f6.2 protein.5/1999

长度＝283

分值＝31.3bits(69)，预计值＝5.5

相同性＝23/56(41％)，相似性＝28/56(49％)，缺口＝10/56(17％)

Query：23 GEGLRPCLVDGTVTAAVCLLGGASPPAAGRPLRETAESWSPGQPGGDPSAGHRGHS 78

GEG RP T +A SPP G+P + E SPG+PG D AGH G +

Sbjct：190 GEGGRPGQAGQTRSAP-------SPP--GQP-GQPGEPGSPGEPGPDGRAGHPGRN 235

4.PP1187

A：核苷酸序列：(SEQ ID NO：10)长度：1562bp

1 CGGAGACTAA CGAGTGTCCT TTCATCCCGG TCATGCATTC CTTTGACCCT

51 GCAGGTATGA CGCTGGGCGG GATGGCTTCA TCGACCTGAT GGAGCTGAAG

101 CTGATGATGG AGAAGCTGGG GGCCCCCCAG ACCCACCTGG GCCTGAAGAG

151 CATGATCAAG GAGGTGGATG AGGACTTCGA TGGCAAGCTC AGCTTCCGGG

201 AGTTCCTGCT CATTTTCCAC AAGGCCGCGG CAGGGGAGCT GCAGGAGGAC

251 AGTGGGCTGA TGGCGCTGGC AAAGCTTTCT GAGATCGATG TGGCCCTGGA

301 GGGTGTCAAA GGTGCCAAGA ACTTCTTTGA AGCCAAGGTC CAAGCCTTGT

351 CATCGGCCAG TAAGTTTGAA GCAGAGTTGA AAGCTGAGCA AGATGAGCGG

401 AAGCGGGAGG AGGAGGAGAG GCGGCTCCGC CAGGCAGCCT TCCAGAAACT

451 CAAGGCCAAC TTCAATACAT AGTCCTGCTG ACCTTGCCCT CTGCCCACAG

501 CTGTGCCTCA CAGATGCCCC GAGAAGAGAT GACTAGGCAT CTTCATCACT

551 GCTGTCGGTC CCCTCCCTGA GCCAGCATCT CCATCCACCA CCCCGTGCCA

601 GCTCCCATGC CAGCCTTCAT TCTTCCCAGT GTCCAAGCCC CTCCAGGAGG

651 GTCCTGGGGT GGGCCAGATG CCTGCCCACC TCTGTCTCCT GCCTCTGCTC

701 CTCTGCCCTT CTTATAGCCA GAACTTGTAT CTTCTCAGCA ACCTTCACTT

751 TGTCCTTGTC CCTTTACCAT TCCCCATCAA AGAGTAGTCT GCTATATCAA

801 TTTGTGTAGA TATGTCTGTC TTTTTGGGTC CTCAGAGAAA ATGCCCATTT

851 TCTCGGAGAA TTCTCTGCAC TCCTCTCTGC TTCACATTCA ACTTCCCTGT

901 TCTCATCTTT GGTAGGATTC TGCCAGTTGC TTTTGCATCT TCTGTTCCTG

951 GGTAATGGTG GGTCTTAATG GAGGCTGGGT GGACCACTGC CCGTCCACTC

1001 TTCAACAGGA GGAACAGCAT GCCACCACAG TAACACACAT TAGAGAAAGG

1051 ACAGAGGTCT GCTCCTTCCT GCCACCTTTC TCCTGGCCCC TTAGCATTCC

1101 CCCAGTCCCT CCCTCTTCAC CTTGCTCCGT CTATGTCTTC CCAGCTCAGC

1151 CTTTTCCCCA CTCTTAAATA CTGTACTACT TCACTGTAAG AACGAAAGAA

1201 TAGTTAGGAT ACCAATGAGT AAAAGGGTTC CTGTTCACTC TGACTCTGTG

1251 CAAATTGTAT TACAGTAGAC CGCTGACGTT CCCAAGTGAC AGATCCAGGG

1301 CCTTTCAAAC ATCCCCAAAG TCATGGCCAT ACTCACCATT AGCCAGTTTC

1351 TAACATCTGT TTCAGGGTAT CCAGCTGTAG ATGTTCTTAT CCCCCATACT

1401 TGTGAGTTCT TGGGGTTGCT CACAAATACT AGGGGTTTTT GTTGTATTTT

1451 TAACAAATAT ATCCTAATGT CATATTTATT CTCTTTTGTA ACTGCTGTCT

1501 TTACAATAAA GAAATCATCT GCCAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA

1551 AAAAAAAAAA AA

B：氨基酸序列：(SEQ ID NO：11)长度：127个氨基酸

1 MELKLMMEKL GAPQTHLGLK SMIKEVDEDF DGKLSFREFL LIFHKAAAGE

51 LQEDSGLMAL AKLSEIDVAL EGVKGAKNFF EAKVQALSSA SKFEAELKAE

101 QDERKREEEE RRLRQAAFQK LKANFNT

C：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：12)

克隆号和蛋白名称：PP1187

起始编码子： 89 ATG 终止编码子：472 TAG

蛋白质分子量：30129.28

1 C GGA GAC TAA CGA GTG TCC TTT CAT CCC GGT CAT GCA TTC CTT TGA 46

47 CCC TGC AGG TAT GAC GCT GGG CGG GAT GGC TTC ATC GAC CTG ATG GAG 94

1 Met Glu 2

95 CTG AAG CTG ATG ATG GAG AAG CTG GGG GCC CCC CAG ACC CAC CTG GGC 142

3 Leu Lys Leu Met Met Glu Lys Leu Gly Ala Pro Gln Thr His Leu Gly 18

143 CTG AAG AGC ATG ATC AAG GAG GTG GAT GAG GAC TTC GAT GGC AAG CTC 190

19 Leu Lys Ser Met Ile Lys Glu Val Asp Glu Asp Phe Asp Gly Lys Leu 34

191 AGC TTC CGG GAG TTC CTG CTC ATT TTC CAC AAG GCC GCG GCA GGG GAG 238

35 Ser Phe Arg Glu Phe Leu Leu Ile Phe His Lys Ala Ala Ala Gly Glu 50

239 CTG CAG GAG GAC AGT GGG CTG ATG GCG CTG GCA AAG CTT TCT GAG ATC 286

51 Leu Gln Glu Asp Ser Gly Leu Met Ala Leu Ala Lys Leu Ser Glu Ile 66

287 GAT GTG GCC CTG GAG GGT GTC AAA GGT GCC AAG AAC TTC TTT GAA GCC 334

67 Asp Val Ala Leu Glu Gly Val Lys Gly Ala Lys Asn Phe Phe Glu Ala 82

335 AAG GTC CAA GCC TTG TCA TCG GCC AGT AAG TTT GAA GCA GAG TTG AAA 382

83 Lys Val Gln Ala Leu Ser Ser Ala Ser Lys Phe Glu Ala Glu Leu Lys 98

383 GCT GAG CAA GAT GAG CGG AAG CGG GAG GAG GAG GAG AGG CGG CTC CGC 430

99 Ala Glu Gln Asp Glu Arg Lys Arg Glu Glu Glu Glu Arg Arg Leu Arg 114

431 CAG GCA GCC TTC CAG AAA CTC AAG GCC AAC TTC AAT ACA TAG TCC TGC 478

115 Gln Ala Ala Phe Gln Lys Leu Lys Ala Asn Phe Asn Thr *** 128

479 TGA CCT TGC CCT CTG CCC ACA GCT GTG CCT CAC AGA TGC CCC GAG AAG 526

527 AGA TGA CTA GGC ATC TTC ATC ACT GCT GTC GGT CCC CTC CCT GAG CCA 574

575 GCA TCT CCA TCC ACC ACC CCG TGC CAG CTC CCA TGC CAG CCT TCA TTC 622

623 TTC CCA GTG TCC AAG CCC CTC CAG GAG GGT CCT GGG GTG GGC CAG ATG 670

671 CCT GCC CAC CTC TGT CTC CTG CCT CTG CTC CTC TGC CCT TCT TAT AGC 718

719 CAG AAC TTG TAT CTT CTC AGC AAC CTT CAC TTT GTC CTT GTC CCT TTA 766

767 CCA TTC CCC ATC AAA GAG TAG TCT GCT ATA TCA ATT TGT GTA GAT ATG 814

815 TCT GTC TTT TTG GGT CCT CAG AGA AAA TGC CCA TTT TCT CGG AGA ATT 862

863 CTC TGC ACT CCT CTC TGC TTC ACA TTC AAC TTC CCT GTT CTC ATC TTT 910

911 GGT AGG ATT CTG CCA GTT GCT TTT GCA TCT TCT GTT CCT GGG TAA TGG 958

959 TGG GTC TTA ATG GAG GCT GGG TGG ACC ACT GCC CGT CCA CTC TTC AAC 1006

1007 AGG AGG AAC AGC ATG CCA CCA CAG TAA CAC ACA TTA GAG AAA GGA CAG 1054

1055 AGG TCT GCT CCT TCC TGC CAC CTT TCT CCT GGC CCC TTA GCA TTC CCC 1102

1103 CAG TCC CTC CCT CTT CAC CTT GCT CCG TCT ATG TCT TCC CAG CTC AGC 1150

1151 CTT TTC CCC ACT CTT AAA TAC TGT ACT ACT TCA CTG TAA GAA CGA AAG 1198

1199 AAT AGT TAG GAT ACC AAT GAG TAA AAG GGT TCC TGT TCA CTC TGA CTC 1246

1247 TGT GCA AAT TGT ATT ACA GTA GAC CGC TGA CGT TCC CAA GTG ACA GAT 1294

1295 CCA GGG CCT TTC AAA CAT CCC CAA AGT CAT GGC CAT ACT CAC CAT TAG 1342

1343 CCA GTT TCT AAC ATC TGT TTC AGG GTA TCC AGC TGT AGA TGT TCT TAT 1390

1391 CCC CCA TAC TTG TGA GTT CTT GGG GTT GCT CAC AAA TAC TAG GGG TTT 1438

1439 TTG TTG TAT TTT TAA CAA ATA TAT CCT AAT GTC ATA TTT ATT CTC TTT 1486

1487 TGT AAC TGC TGT CTT TAC AAT AAA GAA ATC ATC TGC CAA AAA AAA AAA 1534

1535 AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA A 1562

5.PP1498

A：核苷酸序列：(SEQ ID NO：13)长度：2112bp

1 CCTGTGTGGC CTTCGCCTGG GTGTCCCTCA ATGCATGGTT CTGGTCCACA

51 GTCTTCCACA CCAGGGACAC TGACCTCACA GAGAAAATGG ACTACTTCTG

101 TGCCTCCACT GTCATCCTAC ACTCAATCTA CCTGTGCTGC GTCAGGCCTG

151 GTCAACGTGG TGTGGTGGCT GGCCTGGTGC CTGTGGAACC AGCGGCGGCT

201 GCCTCACGTG CGCAAGTGCG TGGTGGTGGT CTTGCTGCTG CAGGGGCTGT

251 CCCTGCTCGA GCTGCTTGAC TTCCCACCGC TCTTCTGGGT CCTGGATGCC

301 CATGCCATCT GGCACATCAG CACCATCCCT GTCCACGTCC TCTTTTTCAG

351 CTTTCTGGAA GATGACAGCC TGTACCTGCT GAAGGAATCA GAGGACAAGT

401 TCAAGCTGGA CTGAAGACCT TGGAGCGAGT CTGCCCCAGT GGGGATCCTG

451 CCCCCGCCCT GCTGGCCTCC CTTCTCCCCT CAACCCTTGA GATGATTTTC

501 TCTTTTCAAC TTCTTGAACT TGGACATGAA GGATGTGGGC CCAGAATCAT

551 GTGGCCAGCC CACCCCCTGT TGGCCCTCAC CAGCCTTGGA GTCTGTTCTA

601 GGGAAGGCCT CCCAGCATCT GGGACTCGAG AGTGGGCAGC CCCTCTACCT

651 CCTGGAGCTG AACTGGGGTG GAACTGAGTG TGTTCTTAGC TCTACCGGGA

701 GGACAGCTGC CTGTTTCCTC CCCACCAGCC TCCTCCCCAC ATCCCCAGCT

751 GCCTGGCTGG GTCCTGAAGC CCTCTGTCTA CCTGGGAGAC CAGGGACCAC

801 AGGCCTTAGG GATACAGGGG GTCCCCTTCT GTTACCACCC CCCACCCTCC

851 TCCAGGACAC CACTAGGTGG TGCTGGATGC TTGTTCTTTG GCCAGCCAAG

901 GTTCACGGCG ATTCTCCCCA TGGGATCTTG AGGGACCAAG CTGCTGGGAT

951 TGGGAAGGAG TTTCACCCTG ACCGTTGCCC TAGCCAGGTT CCCAGGAGGC

1001 CTCACCATAC TCCCTTTCAG GGCCAGGGCT CCAGCAAGCC CAGGGCAAGG

1051 ATCCTGTGCT GCTGTCTGGT TGAGAGCCTG CCACCGTGTG TCGGGAGTGT

1101 GGGCCAGGCT GAGTGCATAG GTGACAGGGC CGTGAGCATG GGCCTGGGTG

1151 TGTGTGAGCT CAGGCCTAGG TGCGCAGTGT GGAGACGGGT GTTGTCGGGG

1201 AAGAGGTGTG GCTTCAAAGT GTGTGTGTGC AGGGGGTGGG TGTGTTAGCG

1251 TGGGTTAGGG GAACGTGTGT GCGCGTGCTG GTGGGCATGT GAGATGAGTG

1301 ACTGCCGGTG AATGTGTCCA CAGTTGAGAG GTTGGAGCAG GATGAGGGAA

1351 TCCTGTCACC ATCAATAATC ACTTGTGGAG CGCCAGCTCT GCCCAAGACG

1401 CCACCTGGGC GGACAGCCAG GAGCTCTCCA TGGCCAGGCT GCCTGTGTGC

1451 ATGTTCCCTG TCTGGTGCCC CTTTGCCCGC CTCCTGCAAA CCTCACAGGG

1501 TCCCCACACA ACAGTGCCCT CCAGAAGCAG CCCCTCGGAG GCAGAGGAAG

1551 GAAAATGGGG ATGGCTGGGG CTCTCTCCAT CCTCCTTTTC TCCTTGCCTT

1601 CGCATGGCTG GCCTTCCCCT CCAAAACCTC CATTCCCCTG CTGCCAGCCC

1651 CTTTGCCATA GCCTGATTTT GGGGAGGAGG AAGGGGCGAT TTGAGGGAGA

1701 AGGGGAGAAA GCTTATGGCT GGGTCTGGTT TCTTCCCTTC CCAGAGGGTC

1751 TTACTGTTCC AGGGTGGCCC CAGGGCAGGC AGGGGCCACA CTATGCCTGC

1801 GCCCTGGTAA AGGTGACCCC TGCCATTTAC CAGCAGCCCT GGCATGTTCC

1851 TGCCCCACAG GAATAGAATG GAGGGAGCTC CAGAAACTTT CCATCCCAAA

1901 GGCAGTCTCC GTGGTTGAAG CAGACTGGAT TTTTGCTCTG CCCCTGACCC

1951 CTTGTCCCTC TTTGAGGGAG GGGAGCTATG CTAGGACTCC AACCTCAGGG

2001 ACTCGGGTGG CCTGCGCTAG CTTCTTTTGA TACTGAAAAC TTTTAAGGTG

2051 GGAGGGTGGC AAGGGATGTG CTTAATAAAT CAATTCCAAG CCTCAAAAAA

2101 AAAAAAAAAA AA

B：氨基酸序列：(SEQ ID NO：14)长度：240个氨基酸

1 MKDVGPESCG QPTPCWPSPA LESVLGKASQ HLGLESGQPL YLLELNWGGT

51 ECVLSSTGRT AACFLPTSLL PTSPAAWLGP EALCLPGRPG TTGLRDTGGP

101 LLLPPPTLLQ DTTRWCWMLV LWPAKVHGDS PHGILRDQAA GIGKEFHPDR

151 CPSQVPRRPH HTPFQGQGSS KPRARILCCC LVESLPPCVG SVGQAECIGD

201 RAVSMGLGVC ELRPRCAVWR RVLSGKRCGF KVCVCRGWVC

C：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：15)

克隆号和蛋白名称：PP1498

起始编码子： 526 ATG 终止编码子：1248 TAG

蛋白质分子量：25690.60

1 CCT GTG TGG CCT TCG CCT GGG TGT CCC TCA ATG CAT GGT TCT GGT CCA 48

49 CAG TCT TCC ACA CCA GGG ACA CTG ACC TCA CAG AGA AAA TGG ACT ACT 96

97 TCT GTG CCT CCA CTG TCA TCC TAC ACT CAA TCT ACC TGT GCT GCG TCA 144

145 GGC CTG GTC AAC GTG GTG TGG TGG CTG GCC TGG TGC CTG TGG AAC CAG 192

193 CGG CGG CTG CCT CAC GTG CGC AAG TGC GTG GTG GTG GTC TTG CTG CTG 240

241 CAG GGG CTG TCC CTG CTC GAG CTG CTT GAC TTC CCA CCG CTC TTC TGG 288

289 GTC CTG GAT GCC CAT GCC ATC TGG CAC ATC AGC ACC ATC CCT GTC CAC 336

337 GTC CTC TTT TTC AGC TTT CTG GAA GAT GAC AGC CTG TAC CTG CTG AAG 384

385 GAA TCA GAG GAC AAG TTC AAG CTG GAC TGA AGA CCT TGG AGC GAG TCT 432

433 GCC CCA GTG GGG ATC CTG CCC CCG CCC TGC TGG CCT CCC TTC TCC CCT 480

481 CAA CCC TTG AGA TGA TTT TCT CTT TTC AAC TTC TTG AAC TTG GAC ATG 528

1 Met 1

529 AAG GAT GTG GGC CCA GAA TCA TGT GGC CAG CCC ACC CCC TGT TGG CCC 576

2 Lys Asp Val Gly Pro Glu Ser Cys Gly Gln Pro Thr Pro Cys Trp Pro 17

577 TCA CCA GCC TTG GAG TCT GTT CTA GGG AAG GCC TCC CAG CAT CTG GGA 624

18 Ser Pro Ala Leu Glu Ser Val Leu Gly Lys Ala Ser Gln His Leu Gly 33

625 CTC GAG AGT GGG CAG CCC CTC TAC CTC CTG GAG CTG AAC TGG GGT GGA 672

34 Leu Glu Ser Gly Gln Pro Leu Tyr Leu Leu Glu Leu Asn Trp Gly Gly 49

673 ACT GAG TGT GTT CTT AGC TCT ACC GGG AGG ACA GCT GCC TGT TTC CTC 720

50 Thr Glu Cys Val Leu Ser Ser Thr Gly Arg Thr Ala Ala Cys Phe Leu 65

721 CCC ACC AGC CTC CTC CCC ACA TCC CCA GCT GCC TGG CTG GGT CCT GAA 768

66 Pro Thr Ser Leu Leu Pro Thr Ser Pro Ala Ala Trp Leu Gly Pro Glu 81

769 GCC CTC TGT CTA CCT GGG AGA CCA GGG ACC ACA GGC CTT AGG GAT ACA 816

82 Ala Leu Cys Leu Pro Gly Arg Pro Gly Thr Thr Gly Leu Arg Asp Thr 97

817 GGG GGT CCC CTT CTG TTA CCA CCC CCC ACC CTC CTC CAG GAC ACC ACT 864

98 Gly Gly Pro Leu Leu Leu Pro Pro Pro Thr Leu Leu Gln Asp Thr Thr 113

865 AGG TGG TGC TGG ATG CTT GTT CTT TGG CCA GCC AAG GTT CAC GGC GAT 912

114 Arg Trp Cys Trp Met Leu Val Leu Trp Pro Ala Lys Val His Gly Asp 129

913 TCT CCC CAT GGG ATC TTG AGG GAC CAA GCT GCT GGG ATT GGG AAG GAG 960

130 Ser Pro His Gly Ile Leu Arg Asp Gln Ala Ala Gly Ile Gly Lys Glu 145

961 TTT CAC CCT GAC CGT TGC CCT AGC CAG GTT CCC AGG AGG CCT CAC CAT 1008

146 Phe His Pro Asp Arg Cys Pro Ser Gln Val Pro Arg Arg Pro His His 161

1009 ACT CCC TTT CAG GGC CAG GGC TCC AGC AAG CCC AGG GCA AGG ATC CTG 1056

162 Thr Pro Phe Gln Gly Gln Gly Ser Ser Lys Pro Arg Ala Arg Ile Leu 177

1057 TGC TGC TGT CTG GTT GAG AGC CTG CCA CCG TGT GTC GGG AGT GTG GGC 1104

178 Cys Cys Cys Leu Val Glu Ser Leu Pro Pro Cys Val Gly Ser Val Gly 193

1105 CAG GCT GAG TGC ATA GGT GAC AGG GCC GTG AGC ATG GGC CTG GGT GTG 1152

194 Gln Ala Glu Cys Ile Gly Asp Arg Ala Val Ser Met Gly Leu Gly Val 209

1153 TGT GAG CTC AGG CCT AGG TGC GCA GTG TGG AGA CGG GTG TTG TCG GGG 1200

210 Cys Glu Leu Arg Pro Arg Cys Ala Val Trp Arg Arg Val Leu Ser Gly 225

1201 AAG AGG TGT GGC TTC AAA GTG TGT GTG TGC AGG GGG TGG GTG TGT TAG 1248

226 Lys Arg Cys Gly Phe Lys Val Cys Val Cys Arg Gly Trp Val Cys *** 241

1249 CGT GGG TTA GGG GAA CGT GTG TGC GCG TGC TGG TGG GCA TGT GAG ATG 1296

1297 AGT GAC TGC CGG TGA ATG TGT CCA CAG TTG AGA GGT TGG AGC AGG ATG 1344

1345 AGG GAA TCC TGT CAC CAT CAA TAA TCA CTT GTG GAG CGC CAG CTC TGC 1392

1393 CCA AGA CGC CAC CTG GGC GGA GAG CCA GGA GCT CTC CAT GGC CAG GCT 1440

1441 GCC TGT GTG CAT GTT CCC TGT CTG GTG CCC CTT TGC CCG CCT CCT GCA 1488

1489 AAC CTC ACA GGG TCC CCA CAC AAC AGT GCC CTC CAG AAG CAG CCC CTC 1536

1537 GGA GGC AGA GGA AGG AAA ATG GGG ATG GCT GGG GCT CTC TCC ATC CTC 1584

1585 CTT TTC TCC TTG CCT TCG CAT GGC TGG CCT TCC CCT CCA AAA CCT CCA 1632

1633 TTC CCC TGC TGC CAG CCC CTT TGC CAT AGC CTG ATT TTG GGG AGG AGG 1680

1681 AAG GGG CGA TTT GAG GGA GAA GGG GAG AAA GCT TAT GGC TGG GTC TGG 1728

1729 TTT CTT CCC TTC CCA GAG GGT CTT ACT GTT CCA GGG TGG CCC CAG GGC 1776

1777 AGG CAG GGG CCA CAC TAT GCC TGC GCC CTG GTA AAG GTG ACC CCT GCC 1824

1825 ATT TAC CAG CAG CCC TGG CAT GTT CCT GCC CCA CAG GAA TAG AAT GGA 1872

1873 GGG AGC TCC AGA AAC TTT CCA TCC CAA AGG CAG TCT CCG TGG TTG AAG 1920

1921 CAG ACT GGA TTT TTG CTC TGC CCC TGA CCC CTT GTC CCT CTT TGA GGG 1968

1969 AGG GGA GCT ATG CTA GGA CTC CAA CCT CAG GGA CTC GGG TGG CCT GCG 2016

2017 CTA GCT TCT TTT GAT ACT GAA AAC TTT TAA GGT GGG AGG GTG GCA AGG 2064

2065 GAT GTG CTT AAT AAA TCA ATT CCA AGC CTC AAA AAA AAA AAA AAA AAA 2112

6.PP2464

A：核苷酸序列：(SBQ ID NO：16)长度：2811bp

1 CCTAGGCCAG CCCCCCCCGC AGGAAGAGTC CCCTTCCTCT GAAGCAAAGA

51 GCAGAGGACC CACCCCACCA GCCATGGGCC CACGGGATGC CAGACCTCCT

101 CGAAGGAGCA GCCAGCCATC TCCAACAGCA GTGCCAGCCT CCGACAGCCC

151 TCCCACCAAG CAAGAGGTGA AGAAGGCAGG AGAGAGACAC AAGCTGGCAA

201 AGGAGCGGCG AGAAGAGCGG GCCAAGTACC TGGCGGCCAA GAAGGCAGTG

251 TGGCTGGAGA AGGAGGAGAA GGCCAAGGCG CTGCGGGAGA AGCAGCTCCA

301 GGAGCGCCGG CGCCGGCTGG AGGAGCAACG TCTTAAAGCC GAGCAACGCC

351 GTGCAGCCCT GGAGGAACGG CAGCGGCAGA AGCTCGAGAA AACAGCAAGG

401 AGCGCTATGA AGCAGCCATC CAACGGTCAG TGAAGAAGAC GTGGGCCGAA

451 ATCCGGCAGC AGCGCTGGTC CTGGGCAGGG GCCCTGCACC ACAGCTCTCC

501 AGGACATAAG ACCAGTGGGA GCAGGTGCTC CGTGTCGGCA GTTAACCTGC

551 CCAAACACGT GGACTCTATA ATCAACAAGC GGCTCTCAAA GTCCTCTGCC

601 ACGCTCTGGA ACTCCCCCAG TAGAAATCGC AGCCTGCAGC TGAGCGCATG

651 GGAGAGCAGC ATCGTGGATC GTCTGATGAC GCCCACTCTC TCCTTCCTTG

701 CTCGGAGTCG CAGCGCGGTC ACACTGCCCC GCAACGGCCG GGACCAGGCC

751 GTGCCGGTGT GCCCGCGCTC GGCCTCCGCC AGCCCCCTGA CGCCGTGCAG

801 CGTCACCCGA AGCGTGCACC GCTGCGCCCC CGCCGGTGAG CGCGGGGAGC

851 GCCGCAAGCC CAACGCCGGG GGCAGCCCCG CTCCGGTGCG CCGCCGGCCG

901 GAGGCCTCGC CGGTGCAGAA AAAGGAGAAG AAGGACAAGG AGCGGGAAAA

951 CGAGAAGGAG AAGAGTGCCC TAGCCCGGGA GCGCAGCCTC AAGAAGCGCC

1001 AGTCGCTGCC CGCCTCCCCA CGTGCCCGCC TCTCCGCCAG CACCGCCTCT

1051 GAGCTCAGCC CCAAATCCAA GGCCAGGCCA TCCTCTCCCT CCACATCCTG

1101 GCACAGGCCT GCCTCCCCCT GCCCCAGCCC AGGGCCAGGC CACACTCTGC

1151 CTCCAAAGCC ACCGTCCCCC CGAGGCACCA CTGCATCCCC CAAGGGGCGG

1201 GTTCGGAGGA AGGAGGAGGC AAAGGAGAGC CCCAGCGCCG CAGGGCCCGA

1251 GGACAAGAGC CAGAGCAAGC GCAGGGCCAG TAACGAGAAG GAGTCAGCAG

1301 CCCCAGCCTC ACCGGCACCT TCGCCGGCGC CCTCGCCCAC CCCAGCCCCG

1351 CCCCAGAAGG AGCAGCCCCC CGCGGAGACC CCTACAGACG CTGCTGTCTT

1401 GACCTCACCC CCAGCCCCTG CTCCCCCGGT GACCCCTAGC AAACCAATGG

1451 CCGGCACCAC AGACCGAGAA GAAGCCACTC GGCTCTTGGC TGAAAAGCGG

1501 CGCCAGGCCC GGGAGCAGCG GGAGCGCGAG GAGCAGGAGC GGAGGCTGCA

1551 GGCAGAAAGG GACAAGCGAA TGCGAGAGGA GCAGCTGGCA CGGGAGGCCG

1601 AGGCCCGGGC GGAGCGGGAG GCGGAGGCCC GGAGGCGGGA GGAGCAGGAG

1651 GCACGAGAGA AGGCGCAGGC CGAGCAGGAG GAGCAGGAGC GGCTGCAGAA

1701 GCAGAAAGAG GAGGCCGAAG CTCGGTCGCG GGAAGAGGCG GAGCGGCAGC

1751 GTCTGGAGCG GGAAAAGCAC TTCCAGCAGC AGGAGCAAGA GCGGCAAGAG

1801 CGCAGAAAGC GTCTGGAGGA GATCATGAAG AGGACTCGGA AGTCAGAAGT

1851 TTCTGAAACC AAGAAGCAGG ACAGCAAGGA GCGCRAWCGC CAACGGTTCC

1901 AGCCCAGAGC CTGTGAAAGC TGTGGAGGCT CGGTCCCCAG GGCTGCAGAA

1951 GGAGGCTGTG CAGAAAGAGG AGCCCATCCC ACAGGAGCCT CAGTGGAGTC

2001 TCCCAAGCAA GGAGTTGCCA GCGTCCCTGG TGAATGGCCT GCAGCCTCTC

2051 CCAGCACACC AGGAGAATGG CTTCTCCACC AACGGACCCT CTGGGGACAA

2101 GAGTCTGAGC CGAACACCAG AGACACTCCT GCCCTTTGCA GAGGCAGAAG

2151 CCTTCCTCAA GAAAGCTGTG GTGCAGTCCC CGCAGGTCAC AGAAGTCCTT

2201 TAAGAGGGTT TGCCTTGGAT CCGGGCACAG TTGTGAGGGC TCCTCTGCAT

2251 CACCTACCAG GATGTCTGGA GGAGAAAAAG ACAGAACAAA GATGGAAGTG

2301 GCCTGGGCCC CTGGGGGTGG GTCCTCTCTG TTGTTTTTAA TCTGCACCTT

2351 ATAGACTGAT GTCTCTTTGG CCGGAGCCAG ATCTGCCCCT CAGTGCATTC

2401 GTGTGCTCGC ACGCGCAGAC ATCCCTTCTC CCCCATACAC ACATATACAC

2451 TCACAGCCTC TCTGGCCTCT TCCCTTGGGG AGGGGCCACC TGTAGTATTT

2501 GCCTTGATTT GGTGGGGTAC AGTGGATGTG AATACTGTAA ATAGCTTGTG

2551 CTCAGACTCC TCTGCGTGGA GAGGGTGGGT GCAGGAGGCA GACCCTCCCC

2601 CCAAAGCCCC CTGGGGAGAT CTTCCTCTCT CTATTTAACT GTAACTGAGG

2651 GGGATCCCAG GTCTGGGGAT GGGGGACACC TTGGGCCACA GGATACTGGT

2701 TGCTTCAGGG GTACCCATGC CCCCTGCCCT CGCCTGGAAT CAGTGTTACT

2751 GCATCTGATT AAATGTCTCC AGAAATAAAG AATAATTCTG CCAAAAAAAA

2801 AAAAAAAAAA A

B：氨基酸序列：(SEQ ID NO：17)长度：554个氨基酸

1 MTPTLSFLAR SRSAVTLPRN GRDQAVPVCP RSASASPLTP CSVTRSVHRC

51 APAGERGERR KPNAGGSPAP VRRRPEASPV QKKEKKDKER ENEKEKSALA

101 RERSLKKRQS LPASPRARLS ASTASELSPK SKARPSSPST SWHRPASPCP

151 SPGPGHTLPP KPPSPRGTTA SPKGRVRRKE EAKESPSAAG PEDKSQSKRR

201 ASNEKESAAP ASPAPSPAPS PTPAPPQKEQ PPAETPTDAA VLTSPPAPAP

251 PVTPSKPMAG TTDREEATRL LAEKRRQARE QREREEQERR LQAERDKRMR

301 EEQLAREAEA RAEREAEARR REEQEAREKA QAEQEEQERL QKQKEEAEAR

351 SREEAERQRL EREKHFQQQE QERQERRKRL EEIMKRTRKS EVSETKKQDS

401 KERXRQRFQP RACESCGGSV PRAAEGGCAE RGAHPTGASV ESPKQGVASV

451 PGEWPAASPS TPGEWLLHQR TLWGQESEPN TRDTPALCRG RSLPQESCGA

501 VPAGHRSPLR GFALDPGTVV RAPLHHLPGC LEEKKTEQRW KWPGPLGVGP

551 LCCF

C：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：18)

克隆号和蛋白名称：PP2464

起始编码子： 676 ATG 终止编码子：2340 TAA

蛋白质分子量：61259.91

1 CCT AGG CCA GCC CCC CCC GCA GGA AGA GTC CCC TTC CTC TGA AGC AAA 48

49 GAG CAG AGG ACC CAC CCC ACC AGC CAT GGG CCC ACG GGA TGC CAG ACC 96

97 TCC TCG AAG GAG CAG CCA GCC ATC TCC AAC AGC AGT GCC AGC CTC CGA 144

145 CAG CCC TCC CAC CAA GCA AGA GGT GAA GAA GGC AGG AGA GAG ACA CAA 192

193 GCT GGC AAA GGA GCG GCG AGA AGA GCG GGC CAA GTA CCT GGC GGC CAA 240

241 GAA GGC AGT GTG GCT GGA GAA GGA GGA GAA GGC CAA GGC GCT GCG GGA 288

289 GAA GCA GCT CCA GGA GCG CCG GCG CCG GCT GGA GGA GCA ACG TCT TAA 336

337 AGC CGA GCA ACG CCG TGC AGC CCT GGA GGA ACG GCA GCG GCA GAA GCT 384

385 CGA GAA AAC AGC AAG GAG CGC TAT GAA GCA GCC ATC CAA CGG TCA GTG 432

433 AAG AAG ACG TGG GCC GAA ATC CGG CAG CAG CGC TGG TCC TGG GCA GGG 480

481 GCC CTG CAC CAC AGC TCT CCA GGA CAT AAG ACC AGT GGG AGC AGG TGC 528

529 TCC GTG TCG GCA GTT AAC CTG CCC AAA CAC GTG GAC TCT ATA ATC AAC 576

577 AAG CGG CTC TCA AAG TCC TCT GCC ACG CTC TGG AAC TCC CCC AGT AGA 624

625 AAT CGC AGC CTG CAG CTG AGC GCA TGG GAG AGC AGC ATC GTG GAT CGT 672

673 CTG ATG ACG CCC ACT CTC TCC TTC CTT GCT CGG AGT CGC AGC GCG GTC 720

1 Met Thr Pro Thr Leu Ser Phe Leu Ala Arg Ser Arg Ser Ala Val 15

721 ACA CTG CCC CGC AAC GGC CGG GAC CAG GCC GTG CCG GTG TGC CCG CGC 768

16 Thr Leu Pro Arg Asn Gly Arg Asp Gln Ala Val Pro Val Cys Pro Arg 31

769 TCG GCC TCC GCC AGC CCC CTG ACG CCG TGC AGC GTC ACC CGA AGC GTG 816

32 Ser Ala Ser Ala Ser Pro Leu Thr Pro Cys Ser Val Thr Arg Ser Val 47

817 CAC CGC TGC GCC CCC GCC GGT GAG CGC GGG GAG CGC CGC AAG CCC AAC 864

48 His Arg Cys Ala Pro Ala Gly Glu Arg Gly Glu Arg Arg Lys Pro Asn 63

865 GCC GGG GGC AGC CCC GCT CCG GTG CGC CGC CGG CCG GAG GCC TCG CCG 912

64 Ala Gly Gly Ser Pro Ala Pro Val Arg Arg Arg Pro Glu Ala Ser Pro 79

913 GTG CAG AAA AAG GAG AAG AAG GAC AAG GAG CGG GAA AAC GAG AAG GAG 960

80 Val Gln Lys Lys Glu Lys Lys Asp Lys Glu Arg Glu Asn Glu Lys Glu 95

961 AAG AGT GCC CTA GCC CGG GAG CGC AGC CTC AAG AAG CGC CAG TCG CTG 1008

96 Lys Ser Ala Leu Ala Arg Glu Arg Ser Leu Lys Lys Arg Gln Ser Leu 111

1009 CCC GCC TCC CCA CGT GCC CGC CTC TCC GCC AGC ACC GCC TCT GAG CTC 1056

112 Pro Ala Ser Pro Arg Ala Arg Leu Ser Ala Ser Thr Ala Ser Glu Leu 127

1057 AGC CCC AAA TCC AAG GCC AGG CCA TCC TCT CCC TCC ACA TCC TGG CAC 1104

128 Ser Pro Lys Ser Lys Ala Arg Pro Ser Ser Pro Ser Thr Ser Trp His 143

1105 AGG CCT GCC TCC CCC TGC CCC AGC CCA GGG CCA GGC CAC ACT CTG CCT 1152

144 Arg Pro Ala Ser Pro Cys Pro Ser Pro Gly Pro Gly His Thr Leu Pro 159

1153 CCA AAG CCA CCG TCC CCC CGA GGC ACC ACT GCA TCC CCC AAG GGG CGG 1200

160 Pro Lys Pro Pro Ser Pro Arg Gly Thr Thr Ala Ser Pro Lys Gly Arg 175

1201 GTT CGG AGG AAG GAG GAG GCA AAG GAG AGC CCC AGC GCC GCA GGG CCC 1248

176 Val Arg Arg Lys Glu Glu Ala Lys Glu Ser Pro Ser Ala Ala Gly Pro 191

1249 GAG GAC AAG AGC CAG AGC AAG CGC AGG GCC AGT AAC GAG AAG GAG TCA 1296

192 Glu Asp Lys Ser Gln Ser Lys Arg Arg Ala Ser Asn Glu Lys Glu Ser 207

1297 GCA GCC CCA GCC TCA CCG GCA CCT TCG CCG GCG CCC TCG CCC ACC CCA 1344

208 Ala Ala Pro Ala Ser Pro Ala Pro Ser Pro Ala Pro Ser Pro Thr Pro 223

1345 GCC CCG CCC CAG AAG GAG CAG CCC CCC GCG GAG ACC CCT ACA GAC GCT 1392

224 Ala Pro Pro Gln Lys Glu Gln Pro Pro Ala Glu Thr Pro Thr Asp Ala 239

1393 GCT GTC TTG ACC TCA CCC CCA GCC CCT GCT CCC CCG GTG ACC CCT AGC 1440

240 Ala Val Leu Thr Ser Pro Pro Ala Pro Ala Pro Pro Val Thr Pro Ser 255

1441 AAA CCA ATG GCC GGC ACC ACA GAC CGA GAA GAA GCC ACT CGG CTC TTG 1488

256 Lys Pro Met Ala Gly Thr Thr Asp Arg Glu Glu Ala Thr Arg Leu Leu 271

1489 GCT GAA AAG CGG CGC CAG GCC CGG GAG CAG CGG GAG CGC GAG GAG CAG 1536

272 Ala Glu Lys Arg Arg Gln Ala Arg Glu Gln Arg Glu Arg Glu Glu Gln 287

1537 GAG CGG AGG CTG CAG GCA GAA AGG GAC AAG CGA ATG CGA GAG GAG CAG 1584

288 Glu Arg Arg Leu Gln Ala Glu Arg Asp Lys Arg Met Arg Glu Glu Gln 303

1585 CTG GCA CGG GAG GCC GAG GCC CGG GCG GAG CGG GAG GCG GAG GCC CGG 1632

304 Leu Ala Arg Glu Ala Glu Ala Arg Ala Glu Arg Glu Ala Glu Ala Arg 319

1633 AGG CGG GAG GAG CAG GAG GCA CGA GAG AAG GCG CAG GCC GAG CAG GAG 1680

320 Arg Arg Glu Glu Gln Glu Ala Arg Glu Lys AAa Gln Ala Glu Gln Glu 335

1681 GAG CAG GAG CGG CTG CAG AAG CAG AAA GAG GAG GCC GAA GCT CGG TCG 1728

336 Glu Gln Glu Arg Leu Gln Lys Gln Lys Glu Glu Ala Glu Ala Arg Ser 351

1729 CGG GAA GAG GCG GAG CGG CAG CGT CTG GAG CGG GAA AAG CAC TTC CAG 1776

352 Arg Glu Glu Ala Glu Arg Gln Arg Leu Glu Arg Glu Lys His Phe Gln 367

1777 CAG CAG GAG CAA GAG CGG CAA GAG CGC AGA AAG CGT CTG GAG GAG ATC 1824

368 Gln Gln Glu Gln Glu Arg Gln Glu Arg Arg Lys Arg Leu Glu Glu Ile 383

1825 ATG AAG AGG ACT CGG AAG TCA GAA GTT TCT GAA ACC AAG AAG CAG GAC 1872

384 Met Lys Arg Thr Arg Lys Ser Glu Val Ser Glu Thr Lys Lys Gln Asp 399

1873 AGC AAG GAG CGC RAW CGC CAA CGG TTC CAG CCC AGA GCC TGT GAA AGC 1920

400 Ser Lys Glu Arg Xxx Arg Gln Arg Phe Gln Pro Arg Ala Cys Glu Ser 415

1921 TGT GGA GGC TCG GTC CCC AGG GCT GCA GAA GGA GGC TGT GCA GAA AGA 1968

416 Cys Gly Gly Ser Val Pro Arg Ala Ala Glu Gly Gly Cys Ala Glu Arg 431

1969 GGA GCC CAT CCC ACA GGA GCC TCA GTG GAG TCT CCC AAG CAA GGA GTT 2016

432 Gly Ala His Pro Thr Gly Ala Ser Val Glu Ser Pro Lys Gln Gly Val 447

2017 GCC AGC GTC CCT GGT GAA TGG CCT GCA GCC TCT CCC AGC ACA CCA GGA 2064

448 Ala Ser Val Pro Gly Glu Trp Pro Ala Ala Ser Pro Ser Thr Pro Gly 463

2065 GAA TGG CTT CTC CAC CAA CGG ACC CTC TGG GGA CAA GAG TCT GAG CCG 2112

464 Glu Trp Leu Leu His Gln Arg Thr Leu Trp Gly Gln Glu Ser Glu Pro 479

2113 AAC ACC AGA GAC ACT CCT GCC CTT TGC AGA GGC AGA AGC CTT CCT CAA 2160

480 Asn Thr Arg Asp Thr Pro Ala Leu Cys Arg Gly Arg Ser Leu Pro Gln 495

2161 GAA AGC TGT GGT GCA GTC CCC GCA GGT CAC AGA AGT CCT TTA AGA GGG 2208

496 Glu Ser Cys Gly Ala Val Pro Ala Gly His Arg Ser Pro Leu Arg Gly 511

2209 TTT GCC TTG GAT CCG GGC ACA GTT GTG AGG GCT CCT CTG CAT CAC CTA 2256

512 Phe Ala Leu Asp Pro Gly Thr Val Val Arg Ala Pro Leu His His Leu 527

2257 CCA GGA TGT CTG GAG GAG AAA AAG ACA GAA CAA AGA TGG AAG TGG CCT 2304

528 Pro Gly Cys Leu Glu Glu Lys Lys Thr Glu Gln Arg Trp Lys Trp Pro 543

2305 GGG CCC CTG GGG GTG GGT CCT CTC TGT TGT TTT TAA TCT GCA CCT TAT 2352

544 Gly Pro Leu Gly Val Gly Pro Leu Cys Cys Phe *** 555

2353 AGA CTG ATG TCT CTT TGG CCG GAG CCA GAT CTG CCC CTC AGT GCA TTC 2400

2401 GTG TGC TCG CAC GCG CAG ACA TCC CTT CTC CCC CAT ACA CAC ATA TAC 2448

2449 ACT CAC AGC CTC TCT GGC CTC TTC CCT TGG GGA GGG GCC ACC TGT AGT 2496

2497 ATT TGC CTT GAT TTG GTG GGG TAC AGT GGA TGT GAA TAC TGT AAA TAG 2544

2545 CTT GTG CTC AGA CTC CTC TGC GTG GAG AGG GTG GGT GCA GGA GGC AGA 2592

2593 CCC TCC CCC CAA AGC CCC CTG GGG AGA TCT TCC TCT CTC TAT TTA ACT 2640

2641 GTA ACT GAG GGG GAT CCC AGG TCT GGG GAT GGG GGA CAC CTT GGG CCA 2688

2689 CAG GAT ACT GGT TGC TTC AGG GGT ACC CAT GCC CCC TGC CCT CGC CTG 2736

2737 GAA TCA GTG TTA CTG CAT CTG ATT AAA TGT CTC CAG AAA TAA AGA ATA 2784

2785 ATT CTG CCA AAA AAA AAA AAA AAA AAA 2811

7.PP3051

A：核苷酸序列：(SEQ ID NO：19)长度：1923bp

1 GGCACAGGCG AGGAGCGCGC CGCCCGCCAG CTCCCTGCGT CCCGTCCCGC

51 GTCCCCGCGT TCCCGCGTCC TGCGATCCGC CGCCATGGCC AGTGAGGAGC

101 TGGCGTGCAA GCTGGAGCGC CGGCTGCGGC GCGAGGAGGC CGAGGAGAGT

151 GGCCCCCAGC TGGCTCCCCT CGGCGCCCCA GCCCCGGAGC CCAAGCCCGA

201 GCCCGAGCCT CCCGCCCGTG CGCCCACGGC CAGCGCCGAC GCGGAGCTGA

251 GCGCCCAGCT GAGCCGGCGG CTGGACATCA ACGAGGGCGC TGCGCGGCCC

301 GGCGCTGCAG GGTCTTCAAC CCCTACACGG AGTTCCCTGA GTTCAGCCGC

351 CGCCTCATCA AGGACCTGGA GAGCATGTTC AAACTGTATG ACGCTGGGCG

401 GGATGGCTTC ATCGACCTGA TGGAGCTGAA GCTGATGATG GAGAAGCTGG

451 GGGCCCCCCA GACCCACCTG GGCCTGAAGA GCATGATCAA GGAGGTGGAT

501 GAGGACTTCG ATGGCAAGCT CAGCTTCCGG GAGTTCCTGC TCATTTTCCA

551 CAAGGCCGCG GCAGGGGAGC TGCAGGAGGA CAGTGGGCTG ATGGCGCTGG

601 CAAAGCTTTC TGAGATCGAT GTGGCCCTGG AGGGTGTCAA AGGTGCCAAG

651 AACTTCTTTG AAGCCAAGGT CCAAGCCTTG TCATCGGCCA GTAAGTTTGA

701 AGCAGAGTTG AAAGCTGAGC AAGATGAGCG GAAGCGGGAG GAGGAGGAGA

751 GGCGGCTCCG CCAGGCAGCC TTCCAGAAAC TCAAGGCCAA CTTCAATACA

801 TAGTCCTGCT GACCTTGCCC TCTGCCCACA GCTGTGCCTC ACAGATGCCC

851 CGAGAAGAGA TGACTAGGCA TCTTCATCAC TGCTGTCGGT CCCCTCCCTG

901 AGCCAGCATC TCCATCCACC ACCCCGTGCC AGCTCCCATG CCAGCCTTCA

951 TTCTTCCCAG TGTCCAAGCC CCTCCAGGAG GGTCCTGGGG TGGGCCAGAT

1001 GCCTGCCCAC CTCTGTCTCC TGCCTCTGCT CCTCTGCCCT TCTTATAGCC

1051 AGAACTTGTA TCTTCTCAGC AACCTTCACT TTGTCCTTGT CCCTTTACCA

1101 TTCCCCATCA AAGAGTAGTC TGCTATATCA ATTTGTGTAG ATATGTCTGT

1151 CTTTTTGGGT CCTCAGAGAA AATGCCCATT TTCTCGGAGA ATTCTCTGCA

1201 CTCCTCTCTG CTTCACATTC AACTTCCCTG TTCTCATCTT TGGTAGGATT

1251 CTGCCAGTTG CTTTTGCATC TTCTGTTCCT GGGTAATGGT GGGTCTTAAT

1301 GGAGGCTGGG TGGACCACTG CCCGTCCACT CTTCAACAGG AGGAACAGCA

1351 TGCCACCACA GTAACACACA TTAGAGAAAG GACAGAGGTC TGCTCCTTCC

1401 TGCCACCTTT CTCCTGGCCC CTTAGCATTC CCCCAGTCCC TCCCTCTTCA

1451 CCTTCCTCCG TCTATGTCTT CCCAGCTCAG CCTTTTCCCC ACTCTTAAAT

1501 ACTGTACTAC TTCACTGTAA GAACGAAAGA ATAGTTAGGA TACCAATGAG

1551 TAAAAGGGTT CCTGTTCACT CTGACTCTGT GCAAATTGTA TTACAGTAGA

1601 CCGCTGACGT TCCCAAGTGA CAGATCCAGG GCCTTTCAAA CATCCCCAAA

1651 GTCATGGCCA TACTCACCAT TAGCCAGTTT CTAACATCTG TTTCAGTGTA

1701 TCCAGCTGTA GATGTTCTTA TCCCCCATAC TTGTGAGTTC TTGGGGTTGC

1751 TCACAAATAC TAGGGGTTTT TGTTGTATTT TTAACAAATA TATCCTAATG

1801 TCATATTTAT TCTCTTTTGT AACTGCTGTC TTTACAATAA AGAAATCATC

1851 TGCCTTTCTA TCTTAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA

1901 AAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AAA

B：氨基酸序列：(SEQ ID NO：20)长度：142个氨基酸

1 MFKLYDAGRD GFIDLMELKL MMEKLGAPQT HLGLKSMIKE VDEDFDGKLS

51 FREFLLIFHK AAAGELQEDS GLMALAKLSE IDVALEGVKG AKNFFEAKVQ

101 ALSSASKFEA ELKAEQDERK REEEERRLRQ AAFQKLKANF NT

C：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：21)

克隆号和蛋白名称：PP3051

起始编码子： 375 ATG 终止编码子：803 TAG

蛋白质分子量：16105.65

1 GG CAC AGG CGA GGA GCG CGC CGC CCG CCA GCT CCC TGC GTC CCG TCC 47

48 CGC GTC CCC GCG TTC CCG CGT CCT GCG ATC CGC CGC CAT GGC CAG TGA 95

96 GGA GCT GGC GTG CAA GCT GGA GCG CCG GCT GCG GCG CGA GGA GGC CGA 143

144 GGA GAG TGG CCC CCA GCT GGC TCC CCT CGG CGC CCC AGC CCC GGA GCC 191

192 CAA GCC CGA GCC CGA GCC TCC CGC CCG TGC GCC CAC GGC CAG CGC CGA 239

240 CGC GGA GCT GAG CGC CCA GCT GAG CCG GCG GCT GGA CAT CAA CGA GGG 287

288 CGC TGC GCG GCC CGG CGC TGC AGG GTC TTC AAC CCC TAC ACG GAG TTC 335

336 CCT GAG TTC AGC CGC CGC CTC ATC AAG GAC CTG GAG AGC ATG TTC AAA 383

1 Met Phe Lys 3

384 CTG TAT GAC GCT GGG CGG GAT GGC TTC ATC GAC CTG ATG GAG CTG AAG 431

4 Leu Tyr Asp Ala Gly Arg Asp Gly Phe Ile Asp Leu Met Glu Leu Lys 19

432 CTG ATG ATG GAG AAG CTG GGG GCC CCC CAG ACC CAC CTG GGC CTG AAG 479

20 Leu Met Met Glu Lys Leu Gly Ala Pro Gln Thr His Leu Gly Leu Lys 35

480 AGC ATG ATC AAG GAG GTG GAT GAG GAC TTC GAT GGC AAG CTC AGC TTC 527

36 Ser Met Ile Lys Glu Val Asp Glu Asp Phe Asp Gly Lys Leu Ser Phe 51

528 CGG GAG TTC CTG CTC ATT TTC CAC AAG GCC GCG GCA GGG GAG CTG CAG 575

52 Arg Glu Phe Leu Leu Ile Phe His Lys Ala Ala Ala Gly Glu Leu Gln 67

576 GAG GAC AGT GGG CTG ATG GCG CTG GCA AAG CTT TCT GAG ATC GAT GTG 623

68 Glu Asp Ser Gly Leu Met Ala Leu Ala Lys Leu Ser Glu Ile Asp Val 83

624 GCC CTG GAG GGT GTC AAA GGT GCC AAG AAC TTC TTT GAA GCC AAG GTC 671

84 Ala Leu Glu Gly Val Lys Gly Ala Lys Asn Phe Phe Glu Ala Lys Val 99

672 CAA GCC TTG TCA TCG GCC AGT AAG TTT GAA GCA GAG TTG AAA GCT GAG 719

100 Gln Ala Leu Ser Ser Ala Ser Lys Phe Glu Ala Glu Leu Lys Ala Glu 115

720 CAA GAT GAG CGG AAG CGG GAG GAG GAG GAG AGG CGG CTC CGC CAG GCA 767

116 Gln Asp Glu Arg Lys Arg Glu Glu Glu Glu Arg Arg Leu Arg Gln Ala 131

768 GCC TTC CAG AAA CTC AAG GCC AAC TTC AAT ACA TAG TCC TGC TGA CCT 815

132 Ala Phe Gln Lys Leu Lys Ala Asn Phe Asn Thr *** 143

816 TGC CCT CTG CCC ACA GCT GTG CCT CAC AGA TGC CCC GAG AAG AGA TGA 863

864 CTA GGC ATC TTC ATC ACT GCT GTC GGT CCC CTC CCT GAG CCA GCA TCT 911

912 CCA TCC ACC ACC CCG TGC CAG CTC CCA TGC CAG CCT TCA TTC TTC CCA 959

960 GTG TCC AAG CCC CTC CAG GAG GGT CCT GGG GTG GGC CAG ATG CCT GCC 1007

1008 CAC CTC TGT CTC CTG CCT CTG CTC CTC TGC CCT TCT TAT AGC CAG AAC 1055

1056 TTG TAT CTT CTC AGC AAC CTT CAC TTT GTC CTT GTC CCT TTA CCA TTC 1103

1104 CCC ATC AAA GAG TAG TCT GCT ATA TCA ATT TGT GTA GAT ATG TCT GTC 1151

1152 TTT TTG GGT CCT CAG AGA AAA TGC CCA TTT TCT CGG AGA ATT CTC TGC 1199

1200 ACT CCT CTC TGC TTC ACA TTC AAC TTC CCT GTT CTC ATC TTT GGT AGG 1247

1248 ATT CTG CCA GTT GCT TTT GCA TCT TCT GTT CCT GGG TAA TGG TGG GTC 1295

1296 TTA ATG GAG GCT GGG TGG ACC ACT GCC CGT CCA CTC TTC AAC AGG AGG 1343

1344 AAC AGC ATG CCA CCA CAG TAA CAC ACA TTA GAG AAA GGA CAG AGG TCT 1391

1392 GCT CCT TCC TGC CAC CTT TCT CCT GGC CCC TTA GCA TTC CCC CAG TCC 1439

1440 CTC CCT CTT CAC CTT CCT CCG TCT ATG TCT TCC CAG CTC AGC CTT TTC 1487

1488 CCC ACT CTT AAA TAC TGT ACT ACT TCA CTG TAA GAA CGA AAG AAT AGT 1535

1536 TAG GAT ACC AAT GAG TAA AAG GGT TCC TGT TCA CTC TGA CTC TGT GCA 1583

1584 AAT TGT ATT ACA GTA GAC CGC TGA CGT TCC CAA GTG ACA GAT CCA GGG 1631

1632 CCT TTC AAA CAT CCC CAA AGT CAT GGC CAT ACT CAC CAT TAG CCA GTT 1679

1680 TCT AAC ATC TGT TTC AGT GTA TCC AGC TGT AGA TGT TCT TAT CCC CCA 1727

1728 TAC TTG TGA GTT CTT GGG GTT GCT CAC AAA TAC TAG GGG TTT TTG TTG 1775

1776 TAT TTT TAA CAA ATA TAT CCT AAT GTC ATA TTT ATT CTC TTT TGT AAC 1823

1824 TGC TGT CTT TAC AAT AAA GAA ATC ATC TGC CTT TCT ATC TTA AAA AAA 1871

1872 AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA AAA 1919

1920 AAA A 1923

8.PP3105

A：核苷酸序列：(SEQ ID NO：22)长度：1803bp

1 GTTGTGGGGG CGGGAGACAG AAAGAGAGAG AGATCCAGAG ACCGAGTCTT

51 ACGTTGACAC GCAGAGAGAA AGACGCAGAG ACAGACAAAC AAACAGATAG

101 GAGAGGCTCT CCAGGAGGCC GGGGGGCCCA CTCCGCCTAT CGCTCCCCTC

151 GGCTACGCTG CCACTTCAAT GCCCCGCAGG TCGCGAGCTG CTGTTCTTTC

201 GAAGGCGTCG GAGAACCAGG GGCGTCCCGC GCCACCTCTG ACTCGGAGCA

251 GCGCCGAGCA CTGACGCTCC CGCCCTTGGG CAAGGACGCC AGTGCGCCCG

301 CGCGCGTCCC TCTGCGCGGC AGCCCGTCGC GGGCCCTCAA GGGGAAGCCC

351 AGGCCAGGAT GGCCCCGGGT CGCGCGGTGG CCGGGCTCCT GTTGCTGGCG

401 GCCGCCGGCC TCGGAGGAGT GGCGGAGGGG CCAGGGCTAG CCTTCAGCGA

451 GGATGTGCTG AGCGTGTTCG GCGCGAATCT GAGCCTGTCG GCGGCGCAGC

501 TCCAGCACTT GCTGGAGCAG ATGGGAGCCG CCTCCCGCGT GGGCGTCCCG

551 GAGCCTGGCC AGCTGCACTT CAACCAGTGT TTAACTGCTG AAGAGATCTT

601 TTCCCTTCAT GGCTTTTCAA ATGCTACCCA AATAACCAGC TCCAAATTCT

651 CTGTCATCTG TCCAGCAGTC TTACAGCAAT TGAACTTTCA CCCATGTGAG

701 GATCGGCCCA AGCACAAAAC AAGACCAAGT CATTCAGAAG TTTGGGGATA

751 TGGATTCCTG TCAGTGACGA TTATTAATCT GGCATCTCTC CTCGGATTGA

801 TTTTGACTCC ACTGATAAAG AAATCTTATT TCCCAAAGAT TTTGACCTTT

851 TTTGTGGGGC TGGCTATTGG GACTCTTTTT TCAAATGCAA TTTTCCAACT

901 TATTCCAGAG GCATTTGGAT TTGATCCCAA AGTCGACAGT TATGTTGAGA

951 AGGCAGTTGC TGTGTTTGGT GGATTTTACC TACTTTTCTT TTTTGAAAGA

1001 ATGCTAAAGA TGTTATTAAA GACATATGGT CAGAATGGTC ATACCCACTT

1051 TGGAAATGAT AACTTTGGTC CTCAAGAAAA AACTCATCAA CCTAAAGCAT

1101 TACCTGCCAT CAATGGTGTG ACATGCTATG CAAATCCTGC TGTCACAGAA

1151 GCTAATGGAC ATATCCATTT TGATAATGTC AGTGTGGTAT CTCTACAGGA

1201 TGGAAAAAAA GAGCCAAGTT CATGTACCTG TTTGAAGGGG CCCAAACTGT

1251 CAGAAATAGG GACGATTGCC TGGATGATAA CGCTCTGCGA TGCCCTCCAC

1301 AATTTCATCG ATGGCCTGGC GATTGGGGCT TCCTGCACCT TGTCTCTCCT

1351 TCAGGGACTC AGTACTTCCA TAGCAATCCT ATGTGAGGAG TTTCCCCACG

1401 AGTTAGGAGA CTTTGTGATC CTACTCAATG CAGGGATGAG CACTCGACAA

1451 GCCTTGCTAT TCAACTTCCT TTCTGCATGT TCCTGCTATG TTGGGCTAGC

1501 TTTTGGCATT TTGGTGGGCA ACAATTTCGC TCCAAATATT ATATTTGCAC

1551 TTGCTGGAGG CATGTTCCTC TATATTTCTC TGGCAGATAT GTTTCCAGAG

1601 ATGAATGATA TGCTGAGAGA AAAGGTAACT GGAAGAAAAA CCGATTTCAC

1651 CTTCTTCATG ATTCAGAATG CTGGAATGTT AACTGGATTC ACAGCCATTC

1701 TACTCATTAC CTTGTATGCA GGAGAAATCG AATTGGAGTA ATAGAAAATG

1751 GAAGATGGTG TTGTTAATAA AGGCATTTAA TAGATAAAAA AAAAAAAAAA

1801 AAA

B：氨基酸序列：(SEQ ID NO：23)长度：460个氨基酸

1 MAPGRAVAGL LLLAAAGLGG VAEGPGLAFS EDVLSVFGAN LSLSAAQLQH

51 LLEQMGAASR VGVPEPGQLH FNQCLTAEEI FSLHGFSNAT QITSSKFSVI

101 CPAVLQQLNF HPCEDRPKHK TRPSHSEVWG YGFLSVTIIN LASLLGLILT

151 PLIKKSYFPK ILTFFVGLAI GTLFSNAIFQ LIPEAFGFDP KVDSYVEKAV

201 AVFGGFYLLF FFERMLKMLL KTYGQNGHTH FGNDNFGPQE KTHQPKALPA

251 INGVTCYANP AVTEANGHIH FDNVSVVSLQ DGKKEPSSCT CLKGPKLSEI

301 GTIAWMITLC DALHNFIDGL AIGASCTLSL LQGLSTSIAI LCEEFPHELG

351 DFVILLNAGM STRQALLFNF LSACSCYVGL AFGILVGNNF APNIIFALAG

401 GMFLYISLAD MFPEMNDMLR EKVTGRKTDF TFFMIQNAGM LTGFTAILLI

451 TLYAGEIELE

C：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：24)

克隆号和蛋白名称：PP3105

起始编码子： 359 ATG 终止编码子：1741 TAA

蛋白质分子量：49627.97

1 G TTG TGG GGG CGG GAG ACA GAA AGA GAG AGA GAT CCA GAG ACC GAG 46

47 TCT TAC GTT GAC ACG CAG AGA GAA AGA CGC AGA GAC AGA CAA ACA AAC 94

95 AGA TAG GAG AGG CTC TCC AGG AGG CCG GGG GGC CCA CTC CGC CTA TCG 142

143 CTC CCC TCG GCT ACG CTG CCA CTT CAA TGC CCC GCA GGT CGC GAG CTG 190

191 CTG TTC TTT CGA AGG CGT CGG AGA ACC AGG GGC GTC CCG CGC CAC CTC 238

239 TGA CTC GGA GCA GCG CCG AGC ACT GAC GCT CCC GCC CTT GGG CAA GGA 286

287 CGC CAG TGC GCC CGC GCG CGT CCC TCT GCG CGG CAG CCC GTC GCG GGC 334

335 CCT CAA GGG GAA GCC CAG GCC AGG ATG GCC CCG GGT CGC GCG GTG GCC 382

1 Met Ala Pro Gly Arg Ala Val Ala 8

383 GGG CTC CTG TTG CTG GCG GCC GCC GGC CTC GGA GGA GTG GCG GAG GGG 430

9 Gly Leu Leu Leu Leu Ala Ala Ala Gly Leu Gly Gly Val Ala Glu Gly 24

431 CCA GGG CTA GCC TTC AGC GAG GAT GTG CTG AGC GTG TTC GGC GCG AAT 478

25 Pro Gly Leu Ala Phe Ser Glu Asp Val Leu Ser Val Phe Gly Ala Asn 40

479 CTG AGC CTG TCG GCG GCG CAG CTC CAG CAC TTG CTG GAG CAG ATG GGA 526

41 Leu Ser Leu Ser Ala Ala Gln Leu Gln His Leu Leu Glu Gln Met Gly 56

527 GCC GCC TCC CGC GTG GGC GTC CCG GAG CCT GGC CAG CTG CAC TTC AAC 574

57 Ala Ala Ser Arg Val Gly Val Pro Glu Pro Gly Gln Leu His Phe Asn 72

575 CAG TGT TTA ACT GCT GAA GAG ATC TTT TCC CTT CAT GGC TTT TCA AAT 622

73 Gln Cys Leu Thr Ala Glu Glu Ile Phe Ser Leu His Gly Phe Ser Asn 88

623 GCT ACC CAA ATA ACC AGC TCC AAA TTC TCT GTC ATC TGT CCA GCA GTC 670

89 Ala Thr Gln Ile Thr Ser Ser Lys Phe Ser Val Ile Cys Pro Ala Val 104

671 TTA CAG CAA TTG AAC TTT CAC CCA TGT GAG GAT CGG CCC AAG CAC AAA 718

105 Leu Gln Gln Leu Asn Phe His Pro Cys Glu Asp Arg Pro Lys His Lys 120

719 ACA AGA CCA AGT CAT TCA GAA GTT TGG GGA TAT GGA TTC CTG TCA GTG 766

121 Thr Arg Pro Ser His Ser Glu Val Trp Gly Tyr Gly Phe Leu Ser Val 136

767 ACG ATT ATT AAT CTG GCA TCT CTC CTC GGA TTG ATT TTG ACT CCA CTG 814

137 Thr Ile Ile Asn Leu Ala Ser Leu Leu Gly Leu Ile Leu Thr Pro Leu 152

815 ATA AAG AAA TCT TAT TTC CCA AAG ATT TTG ACC TTT TTT GTG GGG CTG 862

153 Ile Lys Lys Ser Tyr Phe Pro Lys Ile Leu Thr Phe Phe Val Gly Leu 168

863 GCT ATT GGG ACT CTT TTT TCA AAT GCA ATT TTC CAA CTT ATT CCA GAG 910

169 Ala Ile Gly Thr Leu Phe Ser Asn Ala Ile Phe Gln Leu Ile Pro Glu 184

911 GCA TTT GGA TTT GAT CCC AAA GTC GAC AGT TAT GTT GAG AAG GCA GTT 958

185 Ala Phe Gly Phe Asp Pro Lys Val Asp Ser Tyr Val Glu Lys Ala Val 200

959 GCT GTG TTT GGT GGA TTT TAC CTA CTT TTC TTT TTT GAA AGA ATG CTA 1006

201 Ala Val Phe Gly Gly Phe Tyr Leu Leu Phe Phe Phe Glu Arg Met Leu 216

1007 AAG ATG TTA TTA AAG ACA TAT GGT CAG AAT GGT CAT ACC CAC TTT GGA 1054

217 Lys Met Leu Leu Lys Thr Tyr Gly Gln Asn Gly His Thr His Phe Gly 232

1055 AAT GAT AAC TTT GGT CCT CAA GAA AAA ACT CAT CAA CCT AAA GCA TTA 1102

233 Asn Asp Asn Phe Gly Pro Gln Glu Lys Thr His Gln Pro Lys Ala Leu 248

1103 CCT GCC ATC AAT GGT GTG ACA TGC TAT GCA AAT CCT GCT GTC ACA GAA 1150

249 Pro Ala Ile Asn Gly Val Thr Cys Tyr Ala Asn Pro Ala Val Thr Glu 264

1151 GCT AAT GGA CAT ATC CAT TTT GAT AAT GTC AGT GTG GTA TCT CTA CAG 1198

265 Ala Asn Gly His Ile His Phe Asp Asn Val Ser Val Val Ser Leu Gln 280

1199 GAT GGA AAA AAA GAG CCA AGT TCA TGT ACC TGT TTG AAG GGG CCC AAA 1246

281 Asp Gly Lys Lys Glu Pro Ser Ser Cys Thr Cys Leu Lys Gly Pro Lys 296

1247 CTG TCA GAA ATA GGG ACG ATT GCC TGG ATG ATA ACG CTC TGC GAT GCC 1294

297 Leu Ser Glu Ile Gly Thr Ile Ala Trp Met Ile Thr Leu Cys Asp Ala 312

1295 CTC CAC AAT TTC ATC GAT GGC CTG GCG ATT GGG GCT TCC TGC ACC TTG 1342

313 Leu His Asn Phe Ile Asp Gly Leu Ala Ile Gly Ala Ser Cys Thr Leu 328

1343 TCT CTC CTT CAG GGA CTC AGT ACT TCC ATA GCA ATC CTA TGT GAG GAG 1390

329 Ser Leu Leu Gln Gly Leu Ser Thr Ser Ile Ala Ile Leu Cys Glu Glu 344

1391 TTT CCC CAC GAG TTA GGA GAC TTT GTG ATC CTA CTC AAT GCA GGG ATG 1438

345 Phe Pro His Glu Leu Gly Asp Phe Val Ile Leu Leu Asn Ala Gly Met 360

1439 AGC ACT CGA CAA GCC TTG CTA TTC AAC TTC CTT TCT GCA TGT TCC TGC 1486

361 Ser Thr Arg Gln Ala Leu Leu Phe Asn Phe Leu Ser Ala Cys Ser Cys 376

1487 TAT GTT GGG CTA GCT TTT GGC ATT TTG GTG GGC AAC AAT TTC GCT CCA 1534

377 Tyr Val Gly Leu Ala Phe Gly Ile Leu Val Gly Asn Asn Phe Ala Pro 392

1535 AAT ATT ATA TTT GCA CTT GCT GGA GGC ATG TTC CTC TAT ATT TCT CTG 1582

393 Asn Ile Ile Phe Ala Leu Ala Gly Gly Met Phe Leu Tyr Ile Ser Leu 408

1583 GCA GAT ATG TTT CCA GAG ATG AAT GAT ATG CTG AGA GAA AAG GTA ACT 1630

409 Ala Asp Met Phe Pro Glu Met Asn Asp Met Leu Arg Glu Lys Val Thr 424

1631 GGA AGA AAA ACC GAT TTC ACC TTC TTC ATG ATT CAG AAT GCT GGA ATG 1678

425 Gly Arg Lys Thr Asp Phe Thr Phe Phe Met Ile Gln Asn Ala Gly Met 440

1679 TTA ACT GGA TTC ACA GCC ATT CTA CTC ATT ACC TTG TAT GCA GGA GAA 1726

441 Leu Thr Gly Phe Thr Ala Ile Leu Leu Ile Thr Leu Tyr Ala Gly Glu 456

1727 ATC GAA TTG GAG TAA TAG AAA ATG GAA GAT GGT GTT GTT AAT AAA GGC 1774

457 Ile Glu Leu Glu *** 461

1775 ATT TAA TAG ATA AAA AAA AAA AAA AAA AA 1803

D：Blastp结果

Query＝PP3105[基因＝PP3105](460个氨基酸)

>SP_IN：Q22395 Q22395 caenorhabditis elegans.t11f9.2 protein.1/1999

长度＝586

分值＝98.7bits(242)，预计值＝9e-20

相同性＝48/154(31％)，相似性＝92/154(59％)，缺口＝3/154(1％)

Query：295 PKLSEIGTIAWMITLCDALHNFIDGLAIGASCTLSLLQGLSTSIAILCEEFPHELGDFVI 354

P E+ ++A+MI + +NF+DG+++GA+ + +LL+GLS IA++ ++FP ELG I

Sbjct：420 PAAMEVASVAYMIIFGSSANNFVDGMSMGAAFSDNLLRGLSIGIAVISQQFPQELGTLAI 479

Query：355 LLNAGMSTRQALLFNFLSACSCYVGLAFGILVG--NNFAPNIIFALAGGMFLYISLADMF 412

L+ +G+ ++ LLFN + ++G + G+++ ++ IFA++ GM++YI L +

Sbjct：480 LVKSGLGLKKTLLFNMVPIVLSFLGFSIGVMLDSVDDSYDEYIFAISSGMYMYIFLGTLI 539

Query：413 PEMNDMLREKVTGRKTD-FTFFMIQNAGMLTGFT 445

PE+ + E + + ++Q G+L G T

Sbjct：540 PEIRESTNELIKENLAESILVSILQACGILFGTT 573

分值＝63.6bits(152)，预计值＝3e-09

相同性＝32/101(31％)，相似性＝57/101(55％)，缺口＝1/101(0％)

Query：122 RPSHSEVWGYGFLSVTIINLASLLGLILTPLIKKSYFPKILTFFVGLAIGTLFSNAIFQL 181

+P + WG GF V+ + ++ LG++L P + KS + +I+TF V + IG L + IF +

Sbjct：117 KPPAWQTWGIGFAIVSGCSFSAPLGILLLPCLSKSLYERIMTFLVAVGIGALSGSTIFIM 176

Query：182 IPEAFGFDP-KVDSYVEKAVAVFGGFYLLFFFERMLKMLLK 221

+P+AF + Y K++ + Y F +RML+ +L+

Sbjct：177 LPQAFHLTSFEHFEYHTKSLIILCALYAFFTVDRMLQYILE 217

>PIR2：S49959 probable membrane protein YIL023c-yeast

(Saccharomyces cerevisiae)

长度＝346

分值＝71.0bits(171)，预计值＝2e-11

相同性＝69/330(20％)，相似性＝127/330(37％)，缺口＝70/330(21％)

Query：134 LSVTIINLASLLGLILTPLIKKSYFPKI-LTFFVGLAIGTLFSNAIFQLIPEAFGFDPKV 192

+++ II L L ++ P ++K+ + L+ V ++GTL + + +IPE+ V

Sbjct：71 VAILIIQLMPCLFVLFVPGLRKNDRASLTLSLLVSFSLGTLLGDILLHVIPESLS---GV 127

Query：193 DSYVEKAVAVFGGFYLLFFFERMLKMLLKTYGQNGHTHFGNDNFGPQEKTHQPKALPAIN 252

A+F GF ++ +++L T +G H

Sbjct：128 TDVTMVGGAIFLGFISFLTLDKTMRILSGTSNDDGSIH---------------------- 165

Query：253 GVTCYANPAVTEANGHIHFDNVSVVSLQDGKKEPSSCTCLKGPKLSEIGTIAWMITLCDA 312

++ H H + K+ A++ +

Sbjct：166 ------------SHSHSHTPQQTA------------------EKKAGFNMSAYLNVISGI 195

Query：313 LHNFIDGLAIGASCTLSLLQGLSTSIAILCEEFPHELGDFVILLNAGMSTRQALLFNFLS 372

H+ DG+A+ S S G+ TSIA+ E PHELGDF ILL++G + QA+ ++

Sbjct：196 AHHITDGIALATSFYSSTQVGIMTSIAVTFHEIPHELGDFAILLSSGFTFPQAIRAQAVT 255

Query：373 ACSCYVGLAFGIL---VGNNF---------APNIIFALAGGMFLYISLADMFPEMNDMLR 420

A VG + G +GNN A ++ G +YI+ + P++ +

Sbjct：256 AFGAVVGTSIGCWMNEIGNNSHKATSSSANASELMLPFTAGGLIYIATTSVVPQI--LHS 313

Query：421 EKVTGRKTDFTFFMIQNAGMLTGFTAILLI 450

+ +F + +Q + GF + L+

Sbjct：314 SAPDSKLREFKKWALQLVFIFVGFAVMALM 343

9.PP5423

A：核苷酸序列：(SEQ ID NO：25)长度：1832bp

1 TTGGAGCTCC ACCGCGGTGG CGGCCGCTCT AGCCCGGGCG GATCCCCCGG

51 GCTGCAGGGA CCATCAACGC ACGGGCCGAG GAGGATGTGG AGCCTGAGTG

101 CATCATGGAG AAGGTGGCCA AGGCTTCAGG TGCCAACTAC AGCTTTCACA

151 AGGAGAGTGG CCGCTTCCAG GACGTGGGAC CCCAGGCCCC AGTGGGCTCT

201 GTGTACCAGA AGACCAATGC CGTGTCTGAG ATTAAAAGGG TTGGTAAAGA

251 CAGCTTCTGG GCCAAAGCAG AGAAGGAGGA GGAGAACCGT CGGCTGGAGG

301 AAAAGCGGCG GGCCGAGGAG GCACAGCGGC AGCTGGAGCA GGAGCGCCGG

351 GAGCGTGAGC TGCGTGAGGC TGCACGCCGG GAGCAGCGCT ATCAGGAGCA

401 GGGTGGCGAG GCCAGCCCCC AAAGGACGTG GGAGCAGCAG CAAGAAGTGG

451 TTTCAAGGAA CCGAAATGAG CAGGAGTCTG CCGTGCACCC GAGGGAGATT

501 TTCAAGCAGA AGGAGAGGGC CATGTCCACC ACCTCCATCT CCAGTCCTCA

551 GCCTGGCAAG CTGAGGAGCC CCTTCCTGCA GAAGCAGCTC ACCCAACCAG

601 AGACCCACTT TGGCAGAGAG CCAGCTGCTG CCATCTCAAG GCCCAGGGCA

651 GATCTCCCTG CTGAGGAGCC GGCGCCCAGC ACTCCTCCAT GTCTGGTGCA

701 GGCAGAAGAG GAGGCTGTGT ATGAGGAACC TCCAGAGCAG GAGACCTTCT

751 ACGAGCAGCC CCCACTGGTG CAGCAGCAAG GTGCTGGCTC TGAGCACATT

801 GACCACCACA TTCAGGGCCA GGGGCTCAGT GGGCAAGGGC TCTGTGCCCG

851 TGCCCTGTAC GACTACCAGG CAGCCGACGA CACAGAGATC TCCTTTGACC

901 CCGAGAACCT CATCACGGGC ATCGAGGTGA TCGACGAAGG CTGGTGGCGT

951 GGCTATGGGC CGGATGGCCA TTTTGGCATG TTCCCTGCCA ACTACGTGGA

1001 GCTCATTGAG TGAGGCTGAG GGCACATCTT GCCCTTCCCC TCTCAGACAT

1051 GGCTTCCTTA TTGCTGGAAG AGGAGGCCTG GGAGTTGACA TTCAGCACTC

1101 TTCCAGGAAT AGGACCCCCA GTGAGGATGA GGCCTCAGGG CTCCCTCCGG

1151 CTTGGCAGAC TCAGCCTGTC ACCCCAAATG CAGCAATGGC CTGGTGATTC

1201 CCACACATCC TTCCTGCATC CCCCGACCCT CCCAGACAGC TTGGCTCTTG

1251 CCCCTGACAG GATACTGAGC CAAGCCCTGC CTGTGGCCAA GCCCTGAGTG

1301 GCCACTGCCA AGCTGCGGGG AAGGGTCCTG AGCAGGGGCA TCTGGGAGGC

1351 TCTGGCTGCC TTCTGCATTT ATTTGCCTTT TTTCTTTTTC TCTTGCTTCT

1401 AAGGGGTGGT GGCCACCACT GTTTAGAATG ACCCTTGGGA ACAGTGAACG

1451 TAGAGAATTG TTTTTAGCAG AGTTTGTGAC CAAAGTCAGA GTGGATCATG

1501 GTGGTTTGGC AGCAGGGAAT TTGTCTTGTT GGAGCCTGCT CTGTGCTCCC

1551 CACTCCATTT CTCTGTCCCT CTGCCTGGGC TATGGGAAGT GGGGATGCAG

1601 ATGGCCAAGC TCCCACCCTG GGTATTCAAA AACGGCAGAC ACAACATGTT

1651 CCTCCACGCG GCTCACTCGA TGCCTGCAGG CCCCAGTGTG TGCCTCAACT

1701 GATTCTGACT TCAGGAAAAG TAACACAGAG TGGCCTTGGC CTGTTGTCTT

1751 CCCCTATTTT CTGTCCCAGC TCATCCGTGT CTCTGAAGAA CAAATATGCT

1801 TTTGGACCAC GAAAAAAAAA AAAAAAAAAA AA

B：氨基酸序列：(SEQ ID NO：26)长度：302个氨基酸

1 MEKVAKASGA NYSFHKESGR FQDVGPQAPV GSVYQKTNAV SEIKRVGKDS

51 FWAKAEKEEE NRRLEEKRRA EEAQRQLEQE RRERELREAA RREQRYQEQG

101 GEASPQRTWE QQQEVVSRNR NEQESAVHPR EIFKQKERAM STTSISSPQP

151 GKLRSPFLQK QLTQPETHFG REPAAAISRP RADLPAEEPA PSTPPCLVQA

201 EEEAVYEEPP EQETFYEQPP LVQQQGAGSE HIDHHIQGQG LSGQGLCARA

251 LYDYQAADDT EISFDPENLI TGIEVIDEGW WRGYGPDGHF GMFPANYVEL

301 IE

C：核苷酸及氨基酸组合序列(SEQ ID NO：27)

克隆号和蛋白名称：PP5423

起始编码子： 105 ATG 终止编码子：1013 TGA

蛋白质分子量：34386.03

1 TT GGA GCT CCA CCG CGG TGG CGG CCG CTC TAG CCC GGG CGG ATC CCC 47

48 CGG GCT GCA GGG ACC ATC AAC GCA CGG GCC GAG GAG GAT GTG GAG CCT 95

96 GAG TGC ATC ATG GAG AAG GTG GCC AAG GCT TCA GGT GCC AAC TAC AGC 143

1 Met Glu Lys Val Ala Lys Ala Ser Gly Ala Asn Tyr Ser 13

144 TTT CAC AAG GAG AGT GGC CGC TTG CAG GAC GTG GGA CCC CAG GCC CCA 191

14 Phe His Lys Glu Ser Gly Arg Phe Gln Asp Val Gly Pro Gln Ala Pro 29

192 GTG GGC TCT GTG TAC CAG AAG ACC AAT GCC GTG TCT GAG ATT AAA AGG 239

30 Val Gly Ser Val Tyr Gln Lys Thr Asn Ala Val Ser Glu Ile Lys Arg 45

240 GTT GGT AAA GAC AGC TTC TGG GCC AAA GCA GAG AAG GAG GAG GAG AAC 287

46 Val Gly Lys Asp Ser Phe Trp Ala Lys Ala Glu Lys Glu Glu Glu Asn 61

288 CGT CGG CTG GAG GAA AAG CGG CGG GCC GAG GAG GCA CAG CGG CAG CTG 335

62 Arg Arg Leu Glu Glu Lys Arg Arg Ala Glu Glu Ala Gln Arg Gln Leu 77

336 GAG CAG GAG CGC CGG GAG CGT GAG CTG CGT GAG GCT GCA CGC CGG GAG 383

78 Glu Gln Glu Arg Arg Glu Arg Glu Leu Arg Glu Ala Ala Arg Arg Glu 93

384 CAG CGC TAT CAG GAG CAG GGT GGC GAG GCC AGC CCC CAA AGG ACG TGG 431

94 Gln Arg Tyr Gln Glu Gln Gly Gly Glu Ala Ser Pro Gln Arg Thr Trp 109

432 GAG CAG CAG CAA GAA GTG GTT TCA AGG AAC CGA AAT GAG CAG GAG TCT 479

110 Glu Gln Gln Gln Glu Val Val Ser Arg Asn Arg Asn Glu Gln Glu Ser 125

480 GCC GTG CAC CCG AGG GAG ATT TTC AAG CAG AAG GAG AGG GCC ATG TCC 527

126 Ala Val His Pro Arg Glu Ile Phe Lys Gln Lys Glu Arg Ala Met Ser 141

528 ACC ACC TCC ATC TCC AGT CCT CAG CCT GGC AAG CTG AGG AGC CCC TTC 575

142 Thr Thr Ser Ile Ser Ser Pro Gln Pro Gly Lys Leu Arg Ser Pro Phe 157

576 CTG CAG AAG CAG CTC ACC CAA CCA GAG ACC CAC TTT GGC AGA GAG CCA 623

158 Leu Gln Lys Gln Leu Thr Gln Pro Glu Thr His Phe Gly Arg Glu Pro 173

624 GCT GCT GCC ATC TCA AGG CCC AGG GCA GAT CTC CCT GCT GAG GAG CCG 671

174 Ala Ala Ala Ile Ser Arg Pro Arg Ala Asp Leu Pro Ala Glu Glu Pro 189

672 GCG CCC AGC ACT CCT CCA TGT CTG GTG CAG GCA GAA GAG GAG GCT GTG 719

190 Ala Pro Ser Thr Pro Pro Cys Leu Val Gln Ala Glu Glu Glu Ala Val 205

720 TAT GAG GAA CCT CCA GAG CAG GAG ACC TTC TAC GAG CAG CCC CCA CTG 767

206 Tyr Glu Glu Pro Pro Glu Gln Glu Thr Phe Tyr Glu Gln Pro Pro Leu 221

768 GTG CAG CAG CAA GGT GCT GGC TCT GAG CAC ATT GAC CAC CAC ATT CAG 815

222 Val Gln Gln Gln Gly Ala Gly Ser Glu His Ile Asp His His Ile Gln 237

816 GGC CAG GGG CTC AGT GGG CAA GGG CTC TGT GCC CGT GCC CTG TAC GAC 863

238 Gly Gln Gly Leu Ser Gly Gln Gly Leu Cys Ala Arg Ala Leu Tyr Asp 253

864 TAC CAG GCA GCC GAC GAC ACA GAG ATC TCC TTT GAC CCC GAG AAC CTC 911

254 Tyr Gln Ala Ala Asp Asp Thr Glu Ile Ser Phe Asp Pro Glu Asn Leu 269

912 ATC ACG GGC ATC GAG GTG ATC GAC GAA GGC TGG TGG CGT GGC TAT GGG 959

270 Ile Thr Gly Ile Glu Val Ile Asp Glu Gly Trp Trp Arg Gly Tyr Gly 285

960 CCG GAT GGC CAT TTT GGC ATG TTC CCT GCC AAC TAC GTG GAG CTC ATT 1007

286 Pro Asp Gly His Phe Gly Met Phe Pro Ala Asn Tyr Val Glu Leu Ile 301

1008 GAG TGA GGC TGA GGG CAC ATC TTG CCC TTC CCC TCT CAG ACA TGG CTT 1055

302 Glu *** 303

1056 CCT TAT TGC TGG AAG AGG AGG CCT GGG AGT TGA CAT TCA GCA CTC TTC 1103

1104 CAG GAA TAG GAC CCC CAG TGA GGA TGA GGC CTC AGG GCT CCC TCC GGC 1151

1152 TTG GCA GAC TCA GCC TGT CAC CCC AAA TGC AGC AAT GGC CTG GTG ATT 1199

1200 CCC ACA CAT CCT TCC TGC ATC CCC CGA CCC TCC CAG ACA GCT TGG CTC 1247

1248 TTG CCC CTG ACA GGA TAC TGA GCC AAG CCC TGC CTG TGG CCA AGC CCT 1295

1296 GAG TGG CCA CTG CCA AGC TGC GGG GAA GGG TCC TGA GCA GGG GCA TCT 1343

1344 GGG AGG CTC TGG CTG CCT TCT GCA TTT ATT TGC CTT TTT TCT TTT TCT 1391

1392 CTT GCT TCT AAG GGG TGG TGG CCA CCA CTG TTT AGA ATG ACC CTT GGG 1439

1440 AAC AGT GAA CGT AGA GAA TTG TTT TTA GCA GAG TTT GTG ACC AAA GTC 1487

1488 AGA GTG GAT CAT GGT GGT TTG GCA GCA GGG AAT TTG TCT TGT TGG AGC 1535

1536 CTG CTC TGT GCT CCC CAC TCC ATT TCT CTG TCC CTC TGC CTG GGC TAT 1583

1584 GGG AAG TGG GGA TGC AGA TGG CCA AGC TCC CAC CCT GGG TAT TCA AAA 1631

1632 ACG GCA GAC ACA ACA TGT TCC TCC ACG CGG CTC ACT CGA TGC CTG CAG 1679

1680 GCC CCA GTG TGT GCC TCA ACT GAT TCT GAC TTC AGG AAA AGT AAC ACA 1727

1728 GAG TGG CCT TGG CCT GTT GTC TTC CCC TAT TTT CTG TCC CAG CTC ATC 1775

1776 CGT GTC TCT GAA GAA CAA ATA TGC TTT TGG ACC ACG AAA AAA AAA AAA 1823

1824 AAA AAA AAA 1832

Claims

1.一种分离的多核苷酸，其特征在于，它包含一核苷酸序列，该核苷酸序列选自下组：

(a)编码具有抑癌功能的人蛋白的多核苷酸，所述蛋白具有选自下组的氨基酸序列：

SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：26；

(b)与多核苷酸(a)互补的多核苷酸。

2.如权利要求1所述的多核苷酸，其特征在于，该多核苷酸编码的多肽具有选自下组的氨基酸序列：SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：5、SEQ ID NO：8、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：14、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：20、SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：26。

3.如权利要求1所述的多核苷酸，其特征在于，该多核苷酸的序列选自下组：

SEQ ID NO：3、SEQ ID NO：6、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：12、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：18、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：24、SEQ ID NO：27的编码区序列或全长序列。

4.一种载体，其特征在于，它含有权利要求1所述的多核苷酸。

5.一种遗传工程化的宿主细胞，其特征在于，它是选自下组的一种宿主细胞：

(a)用权利要求4所述的载体转化或转导的宿主细胞；

(b)用权利要求1所述的多核苷酸转化或转导的宿主细胞。