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CN113454214A - α-淀粉酶变体以及对其进行编码的多核苷酸 - Google Patents

α-淀粉酶变体以及对其进行编码的多核苷酸 Download PDF

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CN113454214A
CN113454214A CN202080013503.6A CN202080013503A CN113454214A CN 113454214 A CN113454214 A CN 113454214A CN 202080013503 A CN202080013503 A CN 202080013503A CN 113454214 A CN113454214 A CN 113454214A
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CN
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CN202080013503.6A
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C.安德森
S.阿内赫德
L.L.H.克里斯坦森
A.法拉-阿拉吉
M.克林格
A.G.桑德斯特罗姆
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Novozymes AS
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Abstract

本发明涉及亲本α‑淀粉酶的α‑淀粉酶变体，其中所述α‑淀粉酶变体具有与所述亲本α‑淀粉酶相比改良的洗涤性能。本发明还涉及包含本发明的变体的组合物、所述变体的用途和产生所述变体的方法。

Description

α-淀粉酶变体以及对其进行编码的多核苷酸
序列表的引用
本申请含有计算机可读形式的序列表，将其通过引用并入本文。
发明背景
技术领域
本发明涉及α-淀粉酶变体、编码所述变体的多核苷酸、产生所述变体的方法以及使用所述变体的方法。
背景技术
α-淀粉酶(α-1,4-葡聚糖-4-葡聚糖水解酶，E.C.3.2.1)是通过切割内部α-1,4-糖苷键来水解淀粉、糖原和其他相关多糖的一组酶。多年来它一直用于例如洗衣，其中熟知的是α-淀粉酶在去除含淀粉或基于淀粉的污渍中具有有益的效果。然而，在其他商业应用中，所述酶已经变得重要，如在淀粉加工的初始阶段(液化)中、在纺织品退浆中、在酒精生产中和作为洗涤剂组合物中的清洁剂。
近年来，希望改良各种淀粉酶的特性。特别地，当提及家庭护理业时，主要关注降低洗衣温度以便降低能量消耗的目的。因此，已经为寻求改良的α-淀粉酶变体做了很多努力。
无论如何，仍然需要具有改变的特性，并在各种工业应用中提供改良的性能的α-淀粉酶变体。因此，本发明提供了与其亲本相比具有改良特性的这种进一步改良的α-淀粉酶变体。
本发明的目的是提供具有α-淀粉酶活性的多肽(α-淀粉酶)，该多肽具有改良的洗涤性能，尤其是用于自动洗涤机和/或餐具洗涤机。
发明内容
本发明涉及亲本α-淀粉酶的α-淀粉酶变体，所述变体在对应于以下位置的一个或多个位置处包含修饰：H1、H2、G7、I9、Q11、N16、N19、N25、A37、W43、W48、N54、V56、Y58、G59、A60、L63、T81、E84、E86、R90、Q98、V104、G109、A111、F113、R116、Q118、Q125、R127、E130、S132、G133、T134、Y135、Q136、A139、G142、N144、G149、R158、Y160、D163、W167、Q169、S170、R171、Q172、L173、A174、N175、R176、Y178、R181、G182、A186、W187、N195、M202、Y203、A204、V206、D209、H210、E212、T227、L235、V238、M246、Q256、K259、V264、A265、E266、Y267、K269、N270、L272、G273、A274、L275、E276、W284、M286、V291、L293、Y295、Y298、Q299、N302、S303、S304、N306、R310、N311、N314、G315、L317、Q319、R320、S323、F328、G337、A339、Q345、D357、Q365、P377、D375、Q385、K391、Q395、R400、D406、W408、V410、S431、G435、W439、R444、Q445、R458、N465、Q466、W469、F473、G476和V481，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性，并且其中所述变体与SEQ ID NO:1-17的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、在至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性，并且其中所述变体与所述亲本α-淀粉酶相比具有改良的洗涤性能，并且其中所述亲本α-淀粉酶具有SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2的氨基酸序列。
本发明还涉及编码所述变体的多核苷酸；包含所述多核苷酸的核酸构建体、载体和宿主细胞；以及产生所述变体的方法。
本发明还涉及改良亲本α-淀粉酶洗涤性能的方法。
具体实施方式
定义
根据此详细描述，以下定义适用。注意，单数形式“一种/个(a/an)”以及“所述(the)”包括复数个指示物，除非上下文中另外明确指明。
本文提及“约”值或参数包括针对该值或参数本身的方面。例如，提及“约X”的描述包括方面“X”。
除非另外定义或由上下文明确指示，否则本文所用的全部技术与科学术语具有如本发明所属领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
术语“α-淀粉酶”与术语“具有α-淀粉酶活性的多肽”是同义的。“α-淀粉酶活性”是指α-1,4-葡聚糖-4-葡聚糖水解酶(E.C.3.2.1.1)的活性，其构成催化淀粉以及其他直链和支链1,4-糖苷寡糖和多糖的水解的一组酶。因此，如本文使用的术语“α-淀粉酶”是指具有α-淀粉酶活性的酶(酶类：EC3.2.1.1)，其水解大的、经α键连接的多糖(如淀粉和糖原)的α键，产生葡萄糖和麦芽糖。术语“α-淀粉酶”和“淀粉酶”可以可互换地使用并且构成本文相同的含义和目的。出于本发明的目的，根据下文小标题方法中所述的程序测定α-淀粉酶活性。在一方面，本发明的α-淀粉酶具有SEQ ID NO:1-17的一种或多种多肽的至少20％，例如至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％或至少100％的α-淀粉酶活性。
如本文使用的术语“氨基酸”是指标准二十种遗传编码的氨基酸及其相应的处于“d”型(与天然“l”型进行对比)的立体异构体、ω-氨基酸、其他天然存在的氨基酸、非常规氨基酸(例如α,α-双取代的氨基酸、N-烷基氨基酸等)和化学衍生化的氨基酸。可以通过与功能性侧基团反应来实现一个或多个氨基酸的化学衍生物。此类衍生的分子包括例如，其中游离氨基基团已被衍生化以形成胺盐酸盐、对甲苯磺酰基基团、羧基苯氧基基团、叔丁氧基羰基基团、氯乙酰基基团或甲酰基基团的那些分子。游离羧基基团可被衍生化以形成盐、甲酯和乙酯或其他类型的酯和酰肼。游离羟基基团可被衍生化以形成O-酰基或O-烷基衍生物。作为化学衍生物还包括那些含有二十种标准氨基酸的天然存在的氨基酸衍生物的肽。例如：4-羟脯氨酸可以取代脯氨酸；5-羟赖氨酸可以取代赖氨酸；3-甲基组氨酸可以取代组氨酸；高丝氨酸可以取代丝氨酸并且鸟氨酸取代赖氨酸。只要维持必要的活性，衍生物也包括含有一个或多个添加或缺失的肽。其他包括的修饰是酰胺化、氨基末端酰化(例如乙酰化或巯基乙酸酰胺化)、末端羧基酰胺化(例如用氨或甲胺)、和类似的末端修饰。
当明确列举氨基酸，如“丙氨酸”或“Ala”或“A”时，除非另有明确说明，否则所述术语是指l-丙氨酸和d-丙氨酸两者。其他非常规氨基酸也可以是本发明多肽的适合组分，只要所需功能特性由多肽保留即可。对于所示的肽，适当时，每个编码的氨基酸残基由单字母代号表示，对应于常规氨基酸的普通名称。在一个实施例中，本发明的多肽包含l-氨基酸或由其组成。
术语“催化结构域”意指含有所述酶的催化机构的酶的区域。
术语“cDNA”意指可以通过从成熟的剪接的mRNA分子逆转录制备的DNA分子，该mRNA分子是从真核细胞中获得。cDNA缺少可存在于相应基因组DNA中的内含子序列。初始的初级RNA转录物是mRNA的前体，其要通过一系列的步骤(包括剪接)进行加工，然后呈现为成熟的剪接的mRNA。
术语“编码序列”意指直接指明其多肽产物的氨基酸序列的多核苷酸。编码序列的边界一般由开放阅读框决定，该开放阅读框通常以ATG起始密码子或替代起始密码子(如GTG和TTG)开始，并且以终止密码子(如TAA、TAG和TGA)结束。编码序列可以是DNA、cDNA、合成、或重组的多核苷酸。
术语“控制序列”意指对于表达编码本发明变体的多核苷酸所必需的所有组分。每个控制序列对于编码变体的多核苷酸可以是天然的或外源的，或者彼此可以是天然的或外源的。此类控制序列包括但不限于前导序列、多腺苷酸化序列、前肽序列、启动子、信号肽序列、以及转录终止子。最少，控制序列包括启动子、以及转录和翻译终止信号。出于引入促进控制序列与编码变体的多核苷酸的编码区域连接的特异性限制位点的目的，控制序列可以提供有接头。
如本文使用的术语“对应于”是指确定序列中的特定氨基酸(其中参考了特定氨基酸序列)的方式。例如出于本发明的目的，当参考特定氨基酸位置时，技术人员会能够将另一氨基酸序列与所述已经被参考的氨基酸序列进行比对，从而确定哪一个特定氨基酸可能是在所述另一氨基酸序列中是感兴趣的。已经在本文其他地方描述了另一氨基酸序列与例如如在SEQ ID NO:1中阐述的序列或本文列出的任何其他序列的比对。已经在本文其他地方描述了另一氨基酸序列与例如SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16或17中阐述的序列或本文列出的任何其他序列的比对。可使用可替代的比对方法，并且这些方法为本领域技术人员所熟知。
如本文使用的术语“餐具洗涤组合物”是指用于清洁硬表面的所有形式的组合物。本发明不限于任何特定类型的餐具洗涤组合物或任何特定的洗涤剂。因此，在一个实施例中，餐具洗涤组合物是液体餐具洗涤组合物、粉末餐具洗涤组合物，其中组合物可以任选地呈单位剂量的形式。
本文使用的术语“酶去垢力益处”是指可将一种酶添加至洗涤剂中与不具有所述酶的同一洗涤剂相比的有利作用。可能由酶提供的重要去垢力益处是污渍去除伴随在洗涤和/或清洁之后无可见污垢或几乎无可见污垢、预防或减少在洗涤过程中释放的污垢再沉积(一种又称作抗再沉积的作用)、完全或部分地恢复纺织品的白度(一种又称作增白的作用)，其中这些纺织品最初是白色的，但是在反复使用和洗涤后获得淡灰或淡黄色外观。不直接与污垢的催化污渍去除或其再沉积的预防相关的纺织品护理益处对于酶去垢力益处而言也是重要的。此类纺织品护理益处的实例是防止或减少染料从一织物转移至另一织物或同一织物的另一部分(也被称作染料转移抑制或抗返染的效果)，从织物表面去除突出或断裂的纤维以减少起球倾向或去除已经存在的球或绒毛(也被称作抗起球的效果)，改良织物柔软性，使织物的颜色澄清以及去除陷在织物或服装的纤维中的微粒状污垢。酶法漂白是一种另外的酶去垢力益处，其中通常将催化活性用于催化漂白组分(如过氧化氢或其他过氧化物)的形成。
如本文使用的术语“表达”是指涉及变体产生的任何步骤，包括但不限于，转录、转录后修饰、翻译、翻译后修饰以及分泌。
如本文使用的术语“表达载体”是指线性或环状DNA分子，该分子包含编码变体的多核苷酸并且可操作地连接至提供用于其表达的控制序列。
术语“片段”意指从成熟多肽的氨基和/或羧基末端缺失一个或多个(几个)氨基酸的多肽；其中片段具有α-淀粉酶活性。
术语“高严格条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言，遵循标准DNA印迹程序，在42℃在5X SSPE、0.3％SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑鱼精子DNA和50％甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。最后在65℃使用2X SSC、0.2％SDS将载体材料洗涤三次，每次15分钟。
如本文使用的术语“硬表面清洁”是指硬表面的清洁，其中硬表面可以包括地板、桌子、墙壁、屋顶等，连同硬物体(如汽车(汽车洗涤)和餐具(餐具洗涤))的表面。餐具洗涤包括但不限于，清洁盘子、杯子、玻璃杯、碗、刀叉餐具(如匙、刀、叉)、上菜用具、陶瓷、塑料、金属、瓷器、玻璃及丙烯酸酯。
术语“改良的特性”在本文中定义为与相对于亲本α-淀粉酶有所改良的变体相关的特征。这种改良的特性包括但不限于增加的淀粉分解活性，增加的催化效率，增加的催化速率，增加的化学稳定性，增加的氧化稳定性，增加的pH活性，增加的pH稳定性，增加的相对比活性，增加的比活性，增加的底物结合，增加的底物切割，增加的底物特异性，增加的底物稳定性，增加的表面特性，增加的热活性，增加的热稳定性，增加的洗涤性能(如去污性能，例如对含淀粉的污垢的性能)，污渍去除，抗灰化，稳定性(例如热稳定性，pH稳定性或在包括螯合剂在内的助洗剂存在下的稳定性，在粉末、液体或凝胶洗涤剂配制品或餐具洗涤组合物中的稳定性)，改变的温度依赖性性能以及活性曲线、pH活性、底物特异性、产物特异性和化学稳定性。改良的特性可以是本文定义和描述的那些中的任何一种，如洗涤性能。
术语“改良的洗涤性能”在本文中定义为显示本发明的淀粉酶的洗涤性能相对于SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2的亲本α-淀粉酶的洗涤性能的修饰。这种改变可以例如被视为增加的污渍去除。如果改良因子(IF)为至少1.1、至少1.2、至少1.3，则洗涤性能被改良。
如本文使用的术语“分离的”是指处于自然界中不存在的形式或环境中的物质。分离的物质的非限制性实例包括(1)任何非天然存在的物质，(2)包括但不限于任何酶、变体、核酸、蛋白质、肽或辅因子的任何物质，该物质至少部分地从与其性质相关的一种或多种或所有天然存在的成分中去除；(3)相对于自然界中发现的物质通过人工修饰的任何物质；或(4)通过增加所述物质相对于与其本质相关的其他组分的量而修饰的任何物质(例如，编码所述物质的基因的多拷贝；使用比编码所述物质的基因本质相关的启动子强的启动子)。分离的物质可以存在于发酵液样品中。
术语“分离的多核苷酸”意指通过人工修饰的多核苷酸。在一方面，如通过琼脂糖电泳所确定的，所述分离的多核苷酸是至少1％纯的，例如至少5％纯的、至少10％纯的、至少20％纯的、至少40％纯的、至少60％纯的、至少80％纯的、至少90％纯的、以及至少95％纯的。多核苷酸可以是基因组、cDNA、RNA、半合成、合成来源的，或其任何组合。
如本文使用的术语“成熟多肽”是指在翻译和任何翻译后修饰如N末端加工、C末端截短、糖基化作用、磷酸化作用等之后处于其最终形式的多肽。本领域内公知，宿主细胞可以产生由相同多核苷酸表达的两种或更多种不同的成熟多肽(即，具有不同的C末端和/或N末端氨基酸)的混合物。
如本文使用的术语“成熟多肽编码序列”是指编码具有α-淀粉酶活性的成熟多肽的多核苷酸。
在本发明的多肽的上下文中，术语“修饰”意指通过用不同的氨基酸取代、通过插入氨基酸、或通过缺失(优选地通过至少两个缺失)而改变在参考氨基酸序列(即SEQ IDNO:1或2)内的一个或多个氨基酸。术语“修饰”、“改变”和“突变”可以互换地使用并且构成相同的含义和目的。
术语“中严格条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言，遵循标准DNA印迹程序，在42℃，于5X SSPE，0.3％SDS，200微克/ml剪切并变性的鲑鱼精子DNA和35％甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。最后在55℃使用2X SSC、0.2％SDS将载体材料洗涤三次，每次15分钟。
术语“中-高严格条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言，遵循标准DNA印迹程序，在42℃，于5X SSPE，0.3％SDS，200微克/ml剪切并变性的鲑鱼精子DNA和35％甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。最后在60℃使用2X SSC、0.2％SDS将载体材料洗涤三次，每次15分钟。
术语“突变体”意指编码变体的多核苷酸。
术语“核酸构建体”意指从天然存在的基因中分离的、或以自然界中不会另外存在的方式被修饰成含有核酸片段的、或合成的单链或双链的核酸分子。当核酸构建体含有表达本发明编码序列所需要的控制序列时，术语核酸构建体与术语“表达盒”是同义的。
术语“可操作地连接”意指一种构型，在该构型中控制序列相对于多核苷酸的编码序列放置在适当位置处，这样使得控制序列指导编码序列的表达。
术语“亲本”或“亲本α-淀粉酶”意指进行修饰以产生本发明的酶变体的α-淀粉酶。亲本可以是天然存在的(野生型)多肽或其变体。
如本文使用的术语“序列同一性”是指两个氨基酸序列之间或两个核苷酸序列之间的相关性，其由参数“序列同一性”所描述。
出于本发明的目的，使用如在EMBOSS软件包(EMBOSS：欧洲分子生物学开放软件包(EMBOSS:The European Molecular Biology Open Software Suite)，Rice等人,2000,Trends Genet.[遗传学趋势]16:276-277)(优选5.0.0版本或更新版本)的尼德尔程序中所实施的尼德曼-翁施算法(Needleman-Wunsch algorithm)(Needleman和Wunsch,1970,J.Mol.Biol.[分子生物学杂志]48:443-453)来确定两个氨基酸序列之间的序列同一性。使用的参数可以是空位开放罚分10、空位延伸罚分0.5、以及EBLOSUM62(BLOSUM62的EMBOSS版本)取代矩阵。使用尼德尔标记的“最长同一性”的输出(使用非简化选项获得)作为同一性百分比并且如下计算：
(相同的残基x 100)/(比对长度-比对中的空位总数)
可替代地，所使用的参数可以是空位开放罚分10、空位延伸罚分0.5和EDNAFULL(NCBI NUC4.4的EMBOSS版本)取代矩阵。使用尼德尔标记的“最长同一性”的输出(使用非简化选项获得)作为同一性百分比并且如下计算：
(相同的脱氧核糖核苷酸x 100)/(比对长度-比对中的空位总数)
如本文使用的术语“子序列”是指从成熟多肽编码序列的5'端和/或3'端缺失一个或多个(例如，几个)核苷酸的多核苷酸；其中所述子序列编码具有α-淀粉酶活性的片段。
术语“纺织品”是指编织织物，连同适合于转化为或用作纱线、编织、针织以及非编织织物的短纤维和长丝。所述术语涵盖从天然以及合成(例如制造的)纤维制成的纱线。术语“纺织材料”是纤维、纱线中间体、纱线、织物以及制自纤维的产品(例如，服装以及其他物品)的通用术语。
被定义为不直接与污垢的催化污渍去除或其再沉积的预防相关的、如本文使用的术语“纺织品护理益处”对于酶去垢力益处而言也是重要的。此类纺织品护理益处的实例是防止或减少染料从一纺织品转移至另一纺织品或同一纺织品的另一部分(也被称作染料转移抑制或抗返染的效果)，从纺织品表面去除突出或断裂的纤维以减少起球倾向或去除已经存在的球或绒毛(也被称作抗起球的效果)，改良纺织品柔软性，使纺织品的颜色澄清以及去除陷在纺织品的纤维中的微粒状污垢。酶漂白是另一种酶洗涤益处，其中通常将催化活性用于催化漂白组分(如过氧化氢或其他过氧化物或其他漂白种类)的形成。
如本文使用的，当涉及本发明的变体的使用时，术语“变体”或“多肽变体”或“多肽”或“α-淀粉酶变体”是指相对于SEQ ID NO:1或2的“亲本”α-淀粉酶的一个或多个(例如，若干个)位置处包含修饰(即，取代、插入、和/或缺失)的具有α-淀粉酶活性的多肽。取代意指用不同的氨基酸替代占据某一位置的氨基酸；缺失意指去除占据某一位置的氨基酸；并且插入是指邻近占据位置的氨基酸并紧跟它添加一个氨基酸本发明的变体具有SEQ IDNO:1-17的多肽的至少20％，例如至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％或至少100％的α-淀粉酶活性。
术语“非常高严格条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言，遵循标准DNA印迹程序，在42℃在5X SSPE，0.3％SDS，200微克/ml剪切并变性的鲑鱼精子DNA和50％甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。最后在70℃使用2X SSC、0.2％SDS将载体材料洗涤三次，每次15分钟。
术语“非常低严格条件”意指对于长度为至少100个核苷酸的探针而言，遵循标准DNA印迹程序，在42℃，于5X SSPE，0.3％SDS，200微克/ml剪切并变性的鲑鱼精子DNA和25％甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。最后在45℃使用2X SSC、0.2％SDS将载体材料洗涤三次，每次15分钟。
术语“洗涤性能”在本文中定义为显示本发明的淀粉酶的洗涤性能相对于SEQ IDNO:1的亲本淀粉酶或SEQ ID NO:2的淀粉酶的洗涤性能的改变。改良的洗涤性能可以通过比较所谓的强度值来测量。
如本文使用的术语“野生型α-淀粉酶”是指由天然存在的微生物(如自然界中发现的细菌、酵母或丝状真菌)表达的α-淀粉酶。
对于餐具洗涤本文将术语“洗涤循环”定义为洗涤操作，其中通过循环所述洗涤液并且将所述洗涤液喷到所述餐具上，将所述餐具暴露于所述洗涤液一段时间，以便清洁所述餐具，并且最后去除多余的洗涤液。在相同或不同温度下，洗涤周期可以重复一次、两次、三次、四次、五次或甚至六次。此后，通常将餐具进行冲洗并且干燥。洗涤循环之一可以是浸泡步骤，其中将所述餐具保持浸泡在洗涤液中一段时间。
本文将术语“洗涤液”定义为水和洗涤剂组分的溶液或混合物。
对于自动餐具洗涤本文将术语“洗涤时间”定义为完整洗涤过程所花费的时间；即一个或多个洗涤周期和一个或多个漂洗周期在一起的时间。
除非另外指明，否则术语“洗涤剂组合物”包括颗粒或粉末形式的通用或重垢洗涤剂，尤其是清洁洗涤剂；液体、凝胶或糊状的通用洗涤剂，尤其是所谓的重垢液体(HDL)类型；液体精细织物洗涤剂；手动餐具洗涤剂或轻垢餐具洗涤剂，尤其是高起泡类型的那些；机器餐具洗涤剂，包括用于供家庭和公共机构使用的不同的片剂、颗粒、液体和冲洗助剂类型；液体清洁剂和消毒剂，包括抗菌手洗类型、清洁条、肥皂条、漱口水、义齿清洁剂、汽车或地毯香波、浴室清洁剂；洗发香波和头发冲洗剂；沐浴凝胶、泡沫浴液；金属清洁剂；以及清洁辅剂(如漂白添加剂)和“去污棒(stain-stick)”或预处理型。就旨在用于玷污的物体清洁的洗涤介质中的混合物而言，使用术语“洗涤剂组合物”和“洗涤剂配制品”。在一些实施例中，就洗涤织物和/或服装而言，使用所述术语(例如，“衣物洗涤剂”)。在替代性实施例中，所述术语是指如用于清洁餐具、刀具等的那些的其他洗涤剂(例如“餐具洗涤洗涤剂”)。
术语“自动餐具洗涤洗涤剂组合物”是指包括洗涤剂组分的组合物，该组合物供在餐具洗涤机中清洁餐具，如盘子、杯子、玻璃杯、碗、用餐工具(如匙、刀、叉)、上菜用具、陶瓷、塑料、金属、瓷器、玻璃及丙烯酸酯。并不旨在使本发明限于任何特定的洗涤剂配制品或组合物。
术语“洗涤剂组合物”不旨在限于含有表面活性剂的组合物。旨在除了本文所述的酶以外，这些洗涤剂组合物可以包含，例如，选自稳定剂、表面活性剂、助水溶剂、助洗剂、共助洗剂、螯合试剂、漂白系统、漂白活化剂、漂白催化剂、聚合物、金属护理剂、玻璃护理剂、晶体生长抑制剂和织物调色剂的一种或多种另外的组分。
术语“非织物洗涤剂组合物”包括非纺织品表面洗涤剂组合物，包括但不限于用于硬表面清洁的组合物，如餐具洗涤洗涤剂组合物、口腔洗涤剂组合物、义齿洗涤剂组合物以及个人清洁组合物。
术语“酶的有效量”是指在特定应用中，例如，在定义的洗涤剂组合物中达到所需的酶活性所必需的酶的量。此类有效量可以由本领域的普通技术人员容易地确定并且基于多种因素，如使用的具体酶、清洁应用、洗涤剂组合物的特定组成以及是否需要液体或干燥(例如，颗粒、棒状)组合物等。术语酶的“有效量”是指达到所希望的水平的酶活性(例如，在定义的洗涤剂组合物中)的前述酶的量。在一个实施例中，蛋白酶的有效量与α-淀粉酶的有效量相同。在另一个实施例中，蛋白酶的有效量不同于α-淀粉酶的有效量，例如，蛋白酶的有效量可以多于或少于α-淀粉酶的有效量。
如本文使用的术语“水硬度”或“硬度”(degree of hardness)或“dH”或“°dH”是指德国硬度(German degrees of hardness)。一度被定义为10毫克氧化钙/升水。
本文使用的术语“相关洗涤条件”指示在洗涤剂细分市场中实际用于家用的条件，具体是洗涤温度、时间、洗涤力学、洗涤剂浓度、洗涤剂类型以及水硬度。
术语“辅料”意指针对所希望的具体类型的洗涤剂组合物和产品形式(例如，液体、颗粒、粉末、棒状、糊状、喷雾、片剂、凝胶或泡沫组合物)选择的任何液体、固体或气体材料，这些材料也优选地与用于所述组合物中的酶可相容。在一些实施例中，颗粒组合物处于“压缩”形式，而在其他实施例中，液体组合物处于“浓缩”形式。
如本文使用的术语“污渍去除酶”描述帮助从织物或硬表面去除污渍或污垢的酶。污渍去除酶对特定底物起作用，例如，蛋白酶对蛋白质起作用、淀粉酶对淀粉起作用、脂肪酶和角质酶对脂质(脂肪和油)起作用、果胶酶对果胶起作用并且半纤维素酶对半纤维素起作用。污渍通常是具有不同组分的复杂混合物的沉积物，这导致材料自身局部变色或者在物体上留下粘性表面，该粘性表面可以吸引溶解于洗涤液中的污垢从而导致带有污渍的区域变色。当酶对其存在于污渍中的特定底物起作用时，所述酶降解或部分降解其底物，从而帮助在洗涤过程中去除与底物相关的污垢和污渍组分。例如，当蛋白酶对草地污渍起作用时，它降解草中的蛋白组分并且允许在洗涤期间释放绿色/棕色。
在此上下文中，术语“减少的量”意指在其他方面相同的条件下，所述组分的量小于将用于参考过程中的量。在一个优选的实施例中，所述量被减少例如至少5％，如至少10％、至少15％、至少20％或如另外本文所述的。
术语“低洗涤剂浓度”系统包括其中小于约800ppm的洗涤剂组分存在于洗涤水中的洗涤剂。亚洲(例如，日本)洗涤剂典型地被认为是低洗涤剂浓度体系。
术语“中洗涤剂浓度”系统包括其中约800ppm与约2000ppm之间的洗涤剂组分存在于洗涤水中的洗涤剂。北美洲洗涤剂一般被认为是中洗涤剂浓度系统。
术语“高洗涤剂浓度”系统包括其中大于约2000ppm的洗涤剂组分存在于洗涤水中的洗涤剂。欧洲洗涤剂一般被认为是高洗涤剂浓度系统。
如本文使用的术语“液体衣物洗涤剂组合物”是指处于稳定的液体形式并且用于洗涤织物的方法中的洗涤剂组合物。因此，所述洗涤剂组合物被配制为流体形式。
如本文使用的术语“粉末衣物洗涤剂组合物”是指用于洗涤织物的方法中的洗涤剂组合物，该洗涤剂组合物处于固体形式，如颗粒、非尘化的颗粒或粉末。
如本文使用的术语“液体餐具洗涤洗涤剂组合物”是指处于稳定的液体形式并且用于餐具洗涤的洗涤剂组合物。餐具洗涤可以是任何种类的餐具洗涤，诸如手动餐具洗涤和诸如自动餐具洗涤(ADW)。
如本文使用的术语“粉末餐具洗涤洗涤剂组合物”是指处于固体形式如颗粒状、粉状或紧密单元并且用于餐具洗涤的洗涤剂组合物。粉末餐具洗涤洗涤剂组合物典型地用于自动餐具洗涤中，但是所用不限于ADW，并且其还可以旨在被用于任何其他种类的餐具洗涤中，如手动餐具洗涤。
本文将术语“δ强度”或“δ强度值”定义为测试材料的强度测量结果，该测试材料是例如带有淀粉DM-277(来自BV测试材料中心，邮政信箱120，3133KT弗拉尔丁恩，荷兰)污渍的三聚氰胺瓷砖或硬表面。δ强度是用淀粉酶洗涤的测试材料的强度值减去未用淀粉酶洗涤的测试材料的强度值。
如本文使用的，术语“根据……进行编号”是指编号本发明多肽中每个氨基酸残基的方式。即技术人员会知道当，例如，根据SEQ ID NO:1对位置202进行编号时，他将知道通过任何其他多肽与SEQ ID NO:1的比对，他将能够确定其他多肽中的相应氨基酸残基。本文其他地方已描述了两个或更多个氨基酸序列的比对。
变体命名惯例
出于本发明的目的，使用在SEQ ID NO:1中披露的多肽来确定另一种α-淀粉酶中的相应氨基酸残基。将另一种α-淀粉酶的氨基酸序列与SEQ ID NO:1中披露的脂肪酶进行比对，并且基于比对，使用如在EMBOSS包(EMBOSS：欧洲分子生物学开放软件套件，Rice等人,2000,Trends Genet.[遗传学趋势]16:276-277)(优选3.0.0版本或更新版本)的尼德尔程序中所实施的尼德曼-翁施算法(Needleman和Wunsch,1970,J.Mol.Biol.[分子生物学杂志]48:443-453)来确定与SEQ ID NO:1中披露的多肽中的任何氨基酸残基相对应的氨基酸位置编号。
可以通过使用“ClustalW”(Larkin等人,2007,Bioinformatics[生物信息学]23:2947-2948)，对多个多肽序列进行比对来证实另一种α-淀粉酶中的相应氨基酸残基的鉴定。
当其他酶与SEQ ID NO:1的多肽相背离这样使得传统的基于序列的比较方法不能检测其关系时(Lindahl和Elofsson,2000,J.Mol.Biol.[分子生物学杂志]295:613-615)，可使用其他成对序列比较算法。在基于序列的搜索中较高的敏感度可使用搜索程序来获得，这些搜索程序利用多肽家族的概率表现(谱)来搜索数据库。例如，PSI-BLAST程序通过迭代数据库搜索过程来产生多个谱，并且能够检测远距离同源物(Atschul等人,1997,Nucleic Acids Res.[核酸研究]25:3389-3402)。如果多肽的家族或超家族具有在蛋白结构数据库中的一个或多个代表，可以实现甚至更高的敏感度。程序诸如GenTHREADER(Jones,1999,J.Mol.Biol.[分子生物学杂志]287:797-815；McGuffin和Jones,2003,Bioinformatics[生物信息学]19:874-881)利用来自多种来源(PSI-BLAST、二级结构预测、结构比对谱、以及溶剂化势)的信息作为预测查询序列的结构折叠的神经网络的输入。类似地，Gough等人,2000,J.Mol.Biol.[分子生物学杂志]313:903-919的方法可用于将未知结构的序列与存在于SCOP数据库中的超家族模型进行比对。这些比对进而可以用于产生多肽的同源性模型，并且使用出于该目的而开发的多种工具可以评估此类模型的准确度。
对于已知结构的蛋白质，有几种工具和资源可用于检索并产生结构比对。例如，蛋白质的SCOP超家族已经在结构上进行比对，并且那些比对是可访问且可下载的。可以使用多种算法如距离比对矩阵(Holm和Sander,1998,Proteins[蛋白质]33:88-96)或组合延伸(Shindyalov和Bourne,1998,Protein Engineering[蛋白质工程]11:739-747)比对两种或更多种蛋白质结构，并且这些算法的实施可以另外用于查询具有目的结构的结构数据库，以便发现可能的结构同源物(例如，Holm和Park,2000,Bioinformatics[生物信息学]16:566-567)。
在描述本发明的变体中，为了便于参考，对以下所述的命名法进行了改编。采用了已接受的IUPAC单字母或三字母的氨基酸缩写。
取代：对于氨基酸取代，使用以下命名法：原始氨基酸、位置、取代的氨基酸。相应地，将在位置226处的苏氨酸被丙氨酸取代表示为“Thr226Ala”或“T226A”。多个突变通过加号(“+”)分开，例如“Gly205Arg+Ser411Phe”或“G205R+S411F”代表在位置205和位置411处的甘氨酸(G)和丝氨酸(S)分别被精氨酸(R)和苯丙氨酸(F)取代。
缺失：对于氨基酸缺失，使用以下命名法：原始氨基酸、位置、*。相应地，将在位置195处的甘氨酸的缺失表示为“Gly195*”或“G195*”。多个缺失通过加号(“+”)分开，例如“Gly195*+Ser411*”或“G195*+S411*”。
插入。对于氨基酸插入，使用以下命名法：原始氨基酸、位置、原始氨基酸、插入的氨基酸。因此，将在位置195处的甘氨酸之后插入赖氨酸表示为“Gly195GlyLys”或“G195GK”。多个氨基酸的插入被表示为[原始氨基酸、位置、原始氨基酸、插入的氨基酸#1、插入的氨基酸#2；等]。例如，将在位置195处的甘氨酸之后插入赖氨酸和丙氨酸表示为“Gly195GlyLysAla”或“G195GKA”。
在此类情况下，通过将小写字母添加至在所插入的一个或多个氨基酸残基之前的氨基酸残基的位置编号而对所插入的一个或多个氨基酸残基进行编号。在以上实例中，所述序列因此会是：
<u>亲本：</u> <u>变体：</u>
195 195 195a 195b
G G-K-A
多重修饰：包含多个修饰的变体由加号(“+”)分开，例如“Arg170Tyr+Gly195Glu”或“R170Y+G195E”代表在位置170和位置195处的精氨酸和甘氨酸分别被酪氨酸和谷氨酸取代。
不同修饰：可以在位置处引入不同的修饰时，这些不同的改变由逗号分开，例如“Arg170Tyr,Glu”代表在位置170上的精氨酸被酪氨酸或谷氨酸取代。因此，“Tyr167Gly,Ala+Arg170Gly,Ala”表示以下变体：
“Tyr167Gly+Arg170Gly”、“Tyr167Gly+Arg170Ala”、“Tyr167Ala+Arg170Gly”、和“Tyr167Ala+Arg170Ala”。
发明详述
本发明涉及亲本α-淀粉酶的α-淀粉酶变体，所述变体在对应于以下位置的一个或多个(例如，几个)位置处包含修饰：1、2、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476或481，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中各修饰独立地为取代、插入或缺失，并且其中所述变体与SEQ ID NO:1-17的多肽具有至少59％，例如至少60％，例如至少65％，例如至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性并且其中所述变体与所述亲本多肽相比具有改良的洗涤性能。
在一方面，本发明涉及具有α-淀粉酶活性的亲本α-淀粉酶多肽的α-淀粉酶变体。因此，在特定方面，本发明涉及具有α-淀粉酶活性的亲本α-淀粉酶多肽的变体，其中所述变体具有改良的洗涤性能，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性。
在一方面，本发明涉及亲本α-淀粉酶的α-淀粉酶变体，该变体在对应于以下位置的一个或多个(例如，几个)位置处包含修饰：1、2、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476或481，使用SEQID NO:1进行编号，并且其中各修饰独立地为取代、插入或缺失，并且其中所述变体与SEQID NO:1-17的多肽具有至少59％，例如至少60％，例如至少65％，例如至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性并且其中所述变体与所述亲本多肽相比具有改良的洗涤性能，并且其中所述亲本α-淀粉酶具有SEQ ID NO:1或SEQ IDNO:2的氨基酸序列。
在一方面，改变的数目是1-50，例如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个，如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个改变。
在一方面，取代的数目是1-50，例如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个，如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个取代。
在一方面，取代的氨基酸残基与该位置处天然存在的氨基酸残基不同。在一个实施例中，所述取代选自下组，该组由以下组成：A、C、D、E、F、G、H、I、K、L、M、N、P、Q、R、S、T、V、W和Y，条件是所述取代的氨基酸残基与该位置处天然存在的氨基酸残基不同。
在某些实施例中，所述变体可以包括在α-淀粉酶的具体环内的成对缺失，其已被发现进一步稳定α-淀粉酶。因此，在一个实施例中，所述变体另外包括对应于R181、G182、D183和G184的氨基酸残基的成对缺失，使用SEQ ID NO:1进行编号，条件是当在对应于R181和/或G184的位置处的氨基酸被取代时，成对缺失在对应于G182和D183的位置，使用SEQ IDNO:1进行编号。
如本文使用的术语“成对缺失”是指在两个单独的位置处的一种缺失。这样的位置可以彼此相邻，但不限于这样的相邻对。因此，成对缺失也可以是一个氨基酸和另一个氨基酸的缺失，另一个氨基酸可以进一步距第一缺失的下游或上游多达三个氨基酸远。因此，在一个实施例中，所述变体包含选自下组的氨基酸残基的成对缺失，该组由以下组成：R181+G182、R181+D183、R181+G184、G182+D183、G182+G182和D183+G184，使用SEQ ID NO:1进行编号。
在一方面，SEQ ID NO:2是包含选自下组的氨基酸残基的双缺失的氨基酸序列，该组由以下组成：R181+G182、R181+D183、R181+G184、G182+D183、G182+G182和D183+G184，优选D183+G184，使用SEQ ID NO:1进行编号。
在一方面，缺失的数目是1-50，例如1-45、1-40、1-35、1-30、1-25、1-20、1-15、1-10或1-5个，如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49或50个缺失。
在另一方面，变体在对应于如下任一个位置的一个或多个位置处包含修饰：1、2、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性，并且其中所述变体与SEQ ID NO:1-17的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性序列同一性。
在另一方面，变体在对应于如下任一个位置的两个或更多个位置处包含修饰：1、2、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性，并且其中所述变体与SEQ ID NO:1-17的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性序列同一性。
在另一方面，变体在对应于如下任一个位置的三个或更多个位置处包含修饰：1、2、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性，并且其中所述变体与SEQ ID NO:1-17的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性序列同一性。
在另一方面，变体在对应于如下任一个位置的四个或更多个位置处包含修饰：1、2、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性，并且其中所述变体与SEQ ID NO:1-17的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性序列同一性。
在另一方面，变体在对应于如下任一个位置的五个或更多个位置处包含修饰：1、2、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性，并且其中所述变体与SEQ ID NO:1-17的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性序列同一性。
在另一方面，变体在对应于如下任一个位置的六个或更多个位置处包含修饰：1、2、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性，并且其中所述变体与SEQ ID NO:1-17的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性序列同一性。
在另一方面，变体在对应于如下任一个位置的七个或更多个位置处包含修饰：1、2、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性，并且其中所述变体与SEQ ID NO:1-17的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在另一方面，变体在对应于如下任一个位置的八个或更多个位置处包含修饰：1、2、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性，并且其中所述变体与SEQ ID NO:1-17的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在另一方面，变体在对应于如下任一个位置的九个或更多个位置处包含修饰：1、2、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性，并且其中所述变体与SEQ ID NO:1-17的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在另一方面，变体在对应于如下任一个位置的十个或更多个位置处包含修饰：1、2、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性，并且其中所述变体与SEQ ID NO:1-17的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在另一方面，变体在对应于如下任一个位置的每个位置处包含修饰：1、2、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性，并且其中所述变体与SEQ ID NO:1-17的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在一方面，本文可用的变体在对应于位置1、2、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481的位置处包含一个或多个以下修饰，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性，并且其中所述变体与SEQ ID NO:1-17的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在一方面，所述变体在对应于位置H1、H2、G7、I9、Q11、N16、N19、N25、A37、W43、W48、N54、V56、Y58、G59、A60、L63、T81、E84、E86、R90、Q98、V104、G109、A111、F113、R116、Q118、Q125、R127、E130、S132、G133、T134、Y135、Q136、A139、G142、N144、G149、R158、Y160、D163、W167、Q169、S170、R171、Q172、L173、A174、N175、R176、Y178、R181、G182、A186、W187、N195、M202、Y203、A204、V206、D209、H210、E212、T227、L235、V238、M246、Q256、K259、V264、A265、E266、Y267、K269、N270、L272、G273、A274、L275、E276、W284、M286、V291、L293、Y295、Y298、Q299、N302、S303、S304、N306、R310、N311、N314、G315、L317、Q319、R320、S323、F328、G337、A339、Q345、D357、Q365、P377、D375、Q385、K391、Q395、R400、D406、W408、V410、S431、G435、W439、R444、Q445、R458、N465、Q466、W469、F473、G476和V481的位置处包含一个或多个以下修饰，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且所述变体与SEQ ID NO:1-17的多肽具有至少59％，例如至少60％，例如至少65％，例如至少70％、至少75％、在至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在另一方面，所述变体在对应于位置1的位置处包含缺失，或由其组成。在另一方面，SEQ ID NO:2的多肽的对应于位置1的位置处的氨基酸缺失。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的缺失H1*，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置2的位置处包含缺失，或由其组成。在另一方面，SEQ ID NO:2的多肽的对应于位置2的位置处的氨基酸缺失。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的缺失H2*，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置7的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置7的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的取代G7A，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置9的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置9的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的取代I9M，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置11的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置11的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的取代Q11H，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置16的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置16的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的取代N16E或N16H或N16Y，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置19的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置19的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的取代N19D，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置25的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置25的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的取代N25K或N25M或N25T，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置37的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置37的位置处的氨基酸被Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的取代A37V，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置43的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置43的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的取代W43Y，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置48的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置48的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的取代W48Y，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置54的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置54的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的取代N54Q或N54S，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置56的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置56的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp或Tyr取代。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的取代V56I或V56T，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置58的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置58的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的取代Y58F，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置59的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置59的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的取代G59A，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置60的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置60的位置处的氨基酸被Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的取代A60S或A60T，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置63的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置63的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的取代L63F，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置81的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置81的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的取代T81A，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置84的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置84的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的取代E84Q，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置86的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置86的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的取代E86L，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置90的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置90的位置处的氨基酸被Ala、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的取代R90H或R90N或R90Q，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置98的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置98的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的取代Q98N，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置104的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置104的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp或Tyr取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代V104A，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置109的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置109的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代G109A，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置111的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置111的位置处的氨基酸被Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代A111T，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置113的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置113的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代F113A或F113G或F113N或F113Q或F113T或F113Y，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置116的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置116的位置处的氨基酸被Ala、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代R116C或R116D或R116F或R116H或R116K或R116N或R116S或R116Y，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置118的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置118的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代Q118N或Q118T，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置125的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置125的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代Q125G或Q125S，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置127的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置127的位置处的氨基酸被Ala、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代R127A或R127F或R127H或R127L或R127N或R127T，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置130的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置130的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代E130D或E130F或E130I或E130K或E130L或E130N或E130S或E130T或E130V，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置132的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置132的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代S132A或S132D或S132F或S132L或S132M或S132P或S132T，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置133的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置133的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代G133D，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置134的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置134的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代T134C或T134E或T134N或T134P或T134R或T134S或T134W或T134Y或T134A，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置135的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置135的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代Y135H，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置136的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置136的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代Q136D或Q136E或Q136G或136N或Q136R或Q136S，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置139的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置139的位置处的氨基酸被Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代A139T，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置142的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置142的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代G142H，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置144的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置144的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代N144H，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置149的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置149的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代G149A，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置158的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置158的位置处的氨基酸被Ala、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代R158C或R158H或R158K或R158Q或R158S，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置160的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置160的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代Y160D或Y160F或Y160H或Y160N，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置163的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置163的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代D163H，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置167的位置处包含缺失，或由其组成。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的缺失W167*，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置169的位置处包含缺失或取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置169的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQID NO:2的多肽的缺失Q169*，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置170的位置处包含缺失或取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置170的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQID NO:2的多肽的取代S170A，或由其组成。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的缺失S170*，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置171的位置处包含缺失或取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置171的位置处的氨基酸被Ala、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQID NO:2的多肽的取代R171H或R171K或R171L或R171Y，或由其组成。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的缺失R171*，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置172的位置处包含缺失或取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置172的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQID NO:2的多肽的取代Q172K或Q172N或Q172S，或由其组成。在另一方面，所述变体包含SEQID NO:2的多肽的缺失Q172*，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置173的位置处包含缺失或取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置173的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQID NO:2的多肽的取代L173K，或由其组成。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的缺失L173*，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置174的位置处包含缺失或取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置174的位置处的氨基酸被Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQID NO:2的多肽的取代A174N或A174S，或由其组成。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的缺失A174*，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置175的位置处包含缺失或取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置175的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQID NO:2的多肽的取代N175S，或由其组成。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的缺失N175*，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置176的位置处包含缺失或取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置176的位置处的氨基酸被Ala、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQID NO:2的多肽的取代R176A，或由其组成。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的缺失R176*，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置178的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置178的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代Y178F，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置181的位置处包含缺失或取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置181的位置处的氨基酸被Ala、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代R181A或R181C或R181E或R181G或R181H或R181K或R181N或R181Q，或由其组成。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的缺失R181*，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置182的位置处包含缺失或取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置182的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asp、Cys、Gln、Glu、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代G182T N175S，或由其组成。在另一方面，所述变体包含SEQ ID NO:2的多肽的缺失G182*，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置186的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置186的位置处的氨基酸被Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代A186D或A186E或A186H或A186K或A186N或A186T，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置187的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置187的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代W187M，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置195的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置195的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代N195D或N195F或N195H或N195Q或N195Y，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置202的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置202的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代M202L，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置203的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置203的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代Y203L，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置204的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置204的位置处的氨基酸被Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代A204V，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置206的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置206的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp或Tyr取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代V206L，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置209的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置209的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代D209N，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置210的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置210的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代H210K或H210N，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置212的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置212的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代E212D，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置227的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置227的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代T227K或T227N，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置235的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置235的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代L235I，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置238的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置238的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp或Tyr取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代V238A，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置246的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置246的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代M246I或M246L或M246T或M246V，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置256的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置256的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代Q256H或Q256N，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置259的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置259的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代K259G或K259H，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置264的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置264的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp或Tyr取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代V264A或V246I或V264T，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置265的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置265的位置处的氨基酸被Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代A265G，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置266的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置266的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代E266V，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置267的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置267的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代Y267F或Y267H或Y267L，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置269的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置269的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代K269M或K269Q或K269R，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置270的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置270的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代N270G或N270P，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置272的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置272的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代L272I，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置273的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置273的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代G273V，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置274的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置274的位置处的氨基酸被Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代A274K或A274S，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置275的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置275的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代L275A或L275I或L275V，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置276的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置276的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代E276N，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置291的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置291的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQID NO:2的多肽的取代V291A或V291I或V291T，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置284的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置284的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代W284R或W284Y，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置286的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置286的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代M286L，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置291的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置291的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp或Tyr取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代V291A或V291I或V291T，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置293的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置293的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代L293I或L293V，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置295的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置295的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代Y295F，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置298的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置298的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代Y298E或Y298N，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置299的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置299的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代Q299N或Q299Y，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置302的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置302的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代N302A或N302H或N302K或N302Q，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置303的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置303的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代S303G，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置304的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置304的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代S304G或S304Q，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置306的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置306的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代N306H或N306K或N306Q或N306R或N306Y，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置310的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置310的位置处的氨基酸被Ala、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代R310N或R310S或R310Q，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置311的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置311的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代N311K或N311R，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置314的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置314的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代N314Q，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置315的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置315的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代G315N，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置317的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置317的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代L317V，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置319的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置319的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代Q319H，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置320的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置320的位置处的氨基酸被Ala、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代R320K或R320Q或R320S，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置323的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置323的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代S323T或S323K，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置328的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置328的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代F328L，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置337的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置337的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代G337D或G337E，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置339的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置339的位置处的氨基酸被Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代A339S，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置345的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置345的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代Q345N或Q345R，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置357的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置357的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代L357F，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置365的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置365的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代Q365A或Q365C或Q365E或Q365H或Q365K或Q365M或Q365S，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置377的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置377的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代P377K或P377T，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置375的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置375的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代D375H或D375N或D375Y，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置386的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置386的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代Q386L，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置391的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置391的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代K391A，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置395的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置395的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代Q395K，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置400的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置400的位置处的氨基酸被Ala、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代R400S，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置406的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置406的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代D406H，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置408的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置408的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代W408H，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置410的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置410的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp或Tyr取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代V410I，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置431的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置431的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代S431F，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置435的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置435的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代G435C，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置439的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置439的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代W439R或W439T，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置444的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置444的位置处的氨基酸被Ala、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代R444T，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置445的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置445的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代Q445S，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置178的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置178的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代Y178F，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置458的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置458的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQID NO:2的多肽的取代R458K，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置465的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置465的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQID NO:2的多肽的取代N465G，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置466的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置466的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代Q466S，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置469的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置469的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代W469N或W469Y，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置178的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置178的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代Y178F，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置473的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置473的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQID NO:2的多肽的取代F473I或F473P或F473S，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置476的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置476的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp、Tyr或Val取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代G476K，或由其组成。
在另一方面，所述变体在对应于位置481的位置处包含取代，或由其组成。在另一方面，在对应于位置481的位置处的氨基酸被Ala、Arg、Asn、Asp、Cys、Gln、Glu、Gly、His、Ile、Leu、Lys、Met、Phe、Pro、Ser、Thr、Trp或Tyr取代。在另一方面，所述变体包含SEQ IDNO:2的多肽的取代V481A，或由其组成。
在一方面，所述变体在对应于位置H1*；H2*，G7A；I9M；Q11H；N16E；N16H；N16Y；N19D；N25K；N25M；N25T；A37V；W43Y；W48Y；N54Q；N54S；V56I；V56T；Y58F；G59A；A60S；A60T；L63F；T81A；E84Q；E86L；R90H；R90N；R90Q；Q98N；V104A；G109A；A111T；F113A；F113G；F113N；F113Q；F113T；F113Y；R116C；R116D；R116F；R116H；R116K；R116N；R116S；R116Y；Q118N；Q118T；Q125G；Q125S；R127A；R127F；R127H；R127L；R127N；R127T；E130D；E130F；E130I；E130K；E130L；E130N；E130S；E130T；E130V；S132A；S132D；S132F；S132L；S132M；S132P；S132T；G133D；T134C；T134E；T134N；T134P；T134R；T134S；T134W；T134Y；T134A；Y135H；Q136D；Q136E；Q136G；Q136N；Q136R；Q136S；A139T；G142H；N144H；G149A；R158C；R158H；R158K；R158Q；R158S；Y160D；Y160F；T160H；Y160N；D163H；W167*；Q169*；Q169E；Q169F；S170*；S170A；R171*；R171H；R171K；R171L；R171Y；Q172*；Q172K；Q172N；Q172S；L173*；L173K；A174*；A174N；A174S；N175*；N175S；R176*；R176A；Y178F；R181*；R181A；R181C；R181E；R181G；R181H；R181K；R181N；R181Q；G182*；G182T；A186D；A186E；A186H；A186K；A186N；A186T；W187M；N195D；N195F；N195H；N195Q；N195Y；M202L；Y203L；A204V；V206L；D209N；H210K；H210N；E212D；T227K；T227N；L235I；V238A；M246I；M246L；M246T；M246V；Q256H；Q256N；K259G；K259H；V264A；V246I；V264T；A265G；E266V；Y267F；Y267H；Y267L；K269M；K269Q；K269R；N270G；N270P；L272I；G273V；A274K；A274S；L275A；L275I；L275V；E276N；W284R；W284Y；M286L；V291A；V291I；V291T；L293I；L293V；Y295F；Y298E；Y298N；Q299N；Q299Y；N302A；N302H；N302K；N302Q；S303G；S304G；S304Q；N306H；N306K；N306Q；N306R；N306Y；R310N；R310S；R310Q；N311K；N311R；N314Q；G315N；L317V；Q319H；R320K；R320Q；R320S；S323T；H323K；F328L；G337D；G337E；A339S；Q345N；Q345R；L357F；Q365A；Q365C；Q365E；Q365H；Q365K；Q365M；Q365S；P377K；P377T；D375H；D375N；D375Y；Q386L；K391A；Q395K；R400S；D406H；W408H；V410I；S431F；G435C；W439R；W439T；R444T；Q445S；R458K；N465G；Q466S；W469N；W469Y；F473I；F473P；F473S；G476K；和V481A的位置处包含一个或多个以下修饰，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体与SEQ ID NO:1-17的多肽具有至少59％，例如至少60％，例如至少65％，例如至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
所述变体具有SEQ ID NO:1-17的多肽的至少20％，例如至少40％、至少50％、至少60％、至少70％、至少80％、至少90％、至少95％或至少100％的α-淀粉酶活性。
在一个实施例中，所述变体与具有α-淀粉酶活性的亲本多肽的氨基酸序列具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在另一个实施例中，所述变体与SEQ ID NO:1具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％，如至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在另一个实施例中，所述变体与SEQ ID NO:2具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％，如至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在另一个实施例中，所述变体与SEQ ID NO:3具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％，如至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在另一个实施例中，所述变体与SEQ ID NO:4具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％，如至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在另一个实施例中，所述变体与SEQ ID NO:5具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％，如至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在另一个实施例中，所述变体与SEQ ID NO:6具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％，如至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在另一个实施例中，所述变体与SEQ ID NO:7具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％，如至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在另一个实施例中，所述变体与SEQ ID NO:8具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％，如至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在另一个实施例中，所述变体与SEQ ID NO:9具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％，如至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在另一个实施例中，所述变体与SEQ ID NO:10具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％，如至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在另一个实施例中，所述变体与SEQ ID NO:11具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％，如至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在另一个实施例中，所述变体与SEQ ID NO:12具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％，如至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在另一个实施例中，所述变体与SEQ ID NO:13具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％，如至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在另一个实施例中，所述变体与SEQ ID NO:14具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％，如至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在另一个实施例中，所述变体与SEQ ID NO:15具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％，如至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在另一个实施例中，所述变体与SEQ ID NO:16具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％，如至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在另一个实施例中，所述变体与SEQ ID NO:17具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％，如至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在一方面，所述变体在对应于位置H1*；H2*，G7A；I9M；Q11H；N16E；N16H；N16Y；N19D；N25K；N25M；N25T；A37V；W43Y；W48Y；N54Q；N54S；V56I；V56T；Y58F；G59A；A60S；A60T；L63F；T81A；E84Q；E86L；R90H；R90N；R90Q；Q98N；V104A；G109A；A111T；F113A；F113G；F113N；F113Q；F113T；F113Y；R116C；R116D；R116F；R116H；R116K；R116N；R116S；R116Y；Q118N；Q118T；Q125G；Q125S；R127A；R127F；R127H；R127L；R127N；R127T；E130D；E130F；E130I；E130K；E130L；E130N；E130S；E130T；E130V；S132A；S132D；S132F；S132L；S132M；S132P；S132T；G133D；T134C；T134E；T134N；T134P；T134R；T134S；T134W；T134Y；T134A；Y135H；Q136D；Q136E；Q136G；Q136N；Q136R；Q136S；A139T；G142H；N144H；G149A；R158C；R158H；R158K；R158Q；R158S；Y160D；Y160F；T160H；Y160N；D163H；W167*；Q169*；Q169E；Q169F；S170*；S170A；R171*；R171H；R171K；R171L；R171Y；Q172*；Q172K；Q172N；Q172S；L173*；L173K；A174*；A174N；A174S；N175*；N175S；R176*；R176A；Y178F；R181*；R181A；R181C；R181E；R181G；R181H；R181K；R181N；R181Q；G182*；G182T；A186D；A186E；A186H；A186K；A186N；A186T；W187M；N195D；N195F；N195H；N195Q；N195Y；M202L；Y203L；A204V；V206L；D209N；H210K；H210N；E212D；T227K；T227N；L235I；V238A；M246I；M246L；M246T；M246V；Q256H；Q256N；K259G；K259H；V264A；V246I；V264T；A265G；E266V；Y267F；Y267H；Y267L；K269M；K269Q；K269R；N270G；N270P；L272I；G273V；A274K；A274S；L275A；L275I；L275V；E276N；W284R；W284Y；M286L；V291A；V291I；V291T；L293I；L293V；Y295F；Y298E；Y298N；Q299N；Q299Y；N302A；N302H；N302K；N302Q；S303G；S304G；S304Q；N306H；N306K；N306Q；N306R；N306Y；R310N；R310S；R310Q；N311K；N311R；N314Q；G315N；L317V；Q319H；R320K；R320Q；R320S；S323T；H323K；F328L；G337D；G337E；A339S；Q345N；Q345R；L357F；Q365A；Q365C；Q365E；Q365H；Q365K；Q365M；Q365S；P377K；P377T；D375H；D375N；D375Y；Q386L；K391A；Q395K；R400S；D406H；W408H；V410I；S431F；G435C；W439R；W439T；R444T；Q445S；R458K；N465G；Q466S；W469N；W469Y；F473I；F473P；F473S；G476K；和V481A的位置处包含一个或多个以下修饰，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体与SEQ ID NO:1的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在一方面，所述变体在对应于位置H1*；H2*，G7A；I9M；Q11H；N16E；N16H；N16Y；N19D；N25K；N25M；N25T；A37V；W43Y；W48Y；N54Q；N54S；V56I；V56T；Y58F；G59A；A60S；A60T；L63F；T81A；E84Q；E86L；R90H；R90N；R90Q；Q98N；V104A；G109A；A111T；F113A；F113G；F113N；F113Q；F113T；F113Y；R116C；R116D；R116F；R116H；R116K；R116N；R116S；R116Y；Q118N；Q118T；Q125G；Q125S；R127A；R127F；R127H；R127L；R127N；R127T；E130D；E130F；E130I；E130K；E130L；E130N；E130S；E130T；E130V；S132A；S132D；S132F；S132L；S132M；S132P；S132T；G133D；T134C；T134E；T134N；T134P；T134R；T134S；T134W；T134Y；T134A；Y135H；Q136D；Q136E；Q136G；Q136N；Q136R；Q136S；A139T；G142H；N144H；G149A；R158C；R158H；R158K；R158Q；R158S；Y160D；Y160F；T160H；Y160N；D163H；W167*；Q169*；Q169E；Q169F；S170*；S170A；R171*；R171H；R171K；R171L；R171Y；Q172*；Q172K；Q172N；Q172S；L173*；L173K；A174*；A174N；A174S；N175*；N175S；R176*；R176A；Y178F；R181*；R181A；R181C；R181E；R181G；R181H；R181K；R181N；R181Q；G182*；G182T；A186D；A186E；A186H；A186K；A186N；A186T；W187M；N195D；N195F；N195H；N195Q；N195Y；M202L；Y203L；A204V；V206L；D209N；H210K；H210N；E212D；T227K；T227N；L235I；V238A；M246I；M246L；M246T；M246V；Q256H；Q256N；K259G；K259H；V264A；V246I；V264T；A265G；E266V；Y267F；Y267H；Y267L；K269M；K269Q；K269R；N270G；N270P；L272I；G273V；A274K；A274S；L275A；L275I；L275V；E276N；W284R；W284Y；M286L；V291A；V291I；V291T；L293I；L293V；Y295F；Y298E；Y298N；Q299N；Q299Y；N302A；N302H；N302K；N302Q；S303G；S304G；S304Q；N306H；N306K；N306Q；N306R；N306Y；R310N；R310S；R310Q；N311K；N311R；N314Q；G315N；L317V；Q319H；R320K；R320Q；R320S；S323T；H323K；F328L；G337D；G337E；A339S；Q345N；Q345R；L357F；Q365A；Q365C；Q365E；Q365H；Q365K；Q365M；Q365S；P377K；P377T；D375H；D375N；D375Y；Q386L；K391A；Q395K；R400S；D406H；W408H；V410I；S431F；G435C；W439R；W439T；R444T；Q445S；R458K；N465G；Q466S；W469N；W469Y；F473I；F473P；F473S；G476K；和V481A的位置处包含一个或多个以下修饰，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体与SEQ ID NO:2的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在一方面，所述变体在对应于位置H1*；H2*，G7A；I9M；Q11H；N16E；N16H；N16Y；N19D；N25K；N25M；N25T；A37V；W43Y；W48Y；N54Q；N54S；V56I；V56T；Y58F；G59A；A60S；A60T；L63F；T81A；E84Q；E86L；R90H；R90N；R90Q；Q98N；V104A；G109A；A111T；F113A；F113G；F113N；F113Q；F113T；F113Y；R116C；R116D；R116F；R116H；R116K；R116N；R116S；R116Y；Q118N；Q118T；Q125G；Q125S；R127A；R127F；R127H；R127L；R127N；R127T；E130D；E130F；E130I；E130K；E130L；E130N；E130S；E130T；E130V；S132A；S132D；S132F；S132L；S132M；S132P；S132T；G133D；T134C；T134E；T134N；T134P；T134R；T134S；T134W；T134Y；T134A；Y135H；Q136D；Q136E；Q136G；Q136N；Q136R；Q136S；A139T；G142H；N144H；G149A；R158C；R158H；R158K；R158Q；R158S；Y160D；Y160F；T160H；Y160N；D163H；W167*；Q169*；Q169E；Q169F；S170*；S170A；R171*；R171H；R171K；R171L；R171Y；Q172*；Q172K；Q172N；Q172S；L173*；L173K；A174*；A174N；A174S；N175*；N175S；R176*；R176A；Y178F；R181*；R181A；R181C；R181E；R181G；R181H；R181K；R181N；R181Q；G182*；G182T；A186D；A186E；A186H；A186K；A186N；A186T；W187M；N195D；N195F；N195H；N195Q；N195Y；M202L；Y203L；A204V；V206L；D209N；H210K；H210N；E212D；T227K；T227N；L235I；V238A；M246I；M246L；M246T；M246V；Q256H；Q256N；K259G；K259H；V264A；V246I；V264T；A265G；E266V；Y267F；Y267H；Y267L；K269M；K269Q；K269R；N270G；N270P；L272I；G273V；A274K；A274S；L275A；L275I；L275V；E276N；W284R；W284Y；M286L；V291A；V291I；V291T；L293I；L293V；Y295F；Y298E；Y298N；Q299N；Q299Y；N302A；N302H；N302K；N302Q；S303G；S304G；S304Q；N306H；N306K；N306Q；N306R；N306Y；R310N；R310S；R310Q；N311K；N311R；N314Q；G315N；L317V；Q319H；R320K；R320Q；R320S；S323T；H323K；F328L；G337D；G337E；A339S；Q345N；Q345R；L357F；Q365A；Q365C；Q365E；Q365H；Q365K；Q365M；Q365S；P377K；P377T；D375H；D375N；D375Y；Q386L；K391A；Q395K；R400S；D406H；W408H；V410I；S431F；G435C；W439R；W439T；R444T；Q445S；R458K；N465G；Q466S；W469N；W469Y；F473I；F473P；F473S；G476K；和V481A的位置处包含一个或多个以下修饰，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体与SEQ ID NO:3的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在一方面，所述变体在对应于位置H1*；H2*，G7A；I9M；Q11H；N16E；N16H；N16Y；N19D；N25K；N25M；N25T；A37V；W43Y；W48Y；N54Q；N54S；V56I；V56T；Y58F；G59A；A60S；A60T；L63F；T81A；E84Q；E86L；R90H；R90N；R90Q；Q98N；V104A；G109A；A111T；F113A；F113G；F113N；F113Q；F113T；F113Y；R116C；R116D；R116F；R116H；R116K；R116N；R116S；R116Y；Q118N；Q118T；Q125G；Q125S；R127A；R127F；R127H；R127L；R127N；R127T；E130D；E130F；E130I；E130K；E130L；E130N；E130S；E130T；E130V；S132A；S132D；S132F；S132L；S132M；S132P；S132T；G133D；T134C；T134E；T134N；T134P；T134R；T134S；T134W；T134Y；T134A；Y135H；Q136D；Q136E；Q136G；Q136N；Q136R；Q136S；A139T；G142H；N144H；G149A；R158C；R158H；R158K；R158Q；R158S；Y160D；Y160F；T160H；Y160N；D163H；W167*；Q169*；Q169E；Q169F；S170*；S170A；R171*；R171H；R171K；R171L；R171Y；Q172*；Q172K；Q172N；Q172S；L173*；L173K；A174*；A174N；A174S；N175*；N175S；R176*；R176A；Y178F；R181*；R181A；R181C；R181E；R181G；R181H；R181K；R181N；R181Q；G182*；G182T；A186D；A186E；A186H；A186K；A186N；A186T；W187M；N195D；N195F；N195H；N195Q；N195Y；M202L；Y203L；A204V；V206L；D209N；H210K；H210N；E212D；T227K；T227N；L235I；V238A；M246I；M246L；M246T；M246V；Q256H；Q256N；K259G；K259H；V264A；V246I；V264T；A265G；E266V；Y267F；Y267H；Y267L；K269M；K269Q；K269R；N270G；N270P；L272I；G273V；A274K；A274S；L275A；L275I；L275V；E276N；W284R；W284Y；M286L；V291A；V291I；V291T；L293I；L293V；Y295F；Y298E；Y298N；Q299N；Q299Y；N302A；N302H；N302K；N302Q；S303G；S304G；S304Q；N306H；N306K；N306Q；N306R；N306Y；R310N；R310S；R310Q；N311K；N311R；N314Q；G315N；L317V；Q319H；R320K；R320Q；R320S；S323T；H323K；F328L；G337D；G337E；A339S；Q345N；Q345R；L357F；Q365A；Q365C；Q365E；Q365H；Q365K；Q365M；Q365S；P377K；P377T；D375H；D375N；D375Y；Q386L；K391A；Q395K；R400S；D406H；W408H；V410I；S431F；G435C；W439R；W439T；R444T；Q445S；R458K；N465G；Q466S；W469N；W469Y；F473I；F473P；F473S；G476K；和V481A的位置处包含一个或多个以下修饰，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体与SEQ ID NO:4的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在一方面，所述变体在对应于位置H1*；H2*，G7A；I9M；Q11H；N16E；N16H；N16Y；N19D；N25K；N25M；N25T；A37V；W43Y；W48Y；N54Q；N54S；V56I；V56T；Y58F；G59A；A60S；A60T；L63F；T81A；E84Q；E86L；R90H；R90N；R90Q；Q98N；V104A；G109A；A111T；F113A；F113G；F113N；F113Q；F113T；F113Y；R116C；R116D；R116F；R116H；R116K；R116N；R116S；R116Y；Q118N；Q118T；Q125G；Q125S；R127A；R127F；R127H；R127L；R127N；R127T；E130D；E130F；E130I；E130K；E130L；E130N；E130S；E130T；E130V；S132A；S132D；S132F；S132L；S132M；S132P；S132T；G133D；T134C；T134E；T134N；T134P；T134R；T134S；T134W；T134Y；T134A；Y135H；Q136D；Q136E；Q136G；Q136N；Q136R；Q136S；A139T；G142H；N144H；G149A；R158C；R158H；R158K；R158Q；R158S；Y160D；Y160F；T160H；Y160N；D163H；W167*；Q169*；Q169E；Q169F；S170*；S170A；R171*；R171H；R171K；R171L；R171Y；Q172*；Q172K；Q172N；Q172S；L173*；L173K；A174*；A174N；A174S；N175*；N175S；R176*；R176A；Y178F；R181*；R181A；R181C；R181E；R181G；R181H；R181K；R181N；R181Q；G182*；G182T；A186D；A186E；A186H；A186K；A186N；A186T；W187M；N195D；N195F；N195H；N195Q；N195Y；M202L；Y203L；A204V；V206L；D209N；H210K；H210N；E212D；T227K；T227N；L235I；V238A；M246I；M246L；M246T；M246V；Q256H；Q256N；K259G；K259H；V264A；V246I；V264T；A265G；E266V；Y267F；Y267H；Y267L；K269M；K269Q；K269R；N270G；N270P；L272I；G273V；A274K；A274S；L275A；L275I；L275V；E276N；W284R；W284Y；M286L；V291A；V291I；V291T；L293I；L293V；Y295F；Y298E；Y298N；Q299N；Q299Y；N302A；N302H；N302K；N302Q；S303G；S304G；S304Q；N306H；N306K；N306Q；N306R；N306Y；R310N；R310S；R310Q；N311K；N311R；N314Q；G315N；L317V；Q319H；R320K；R320Q；R320S；S323T；H323K；F328L；G337D；G337E；A339S；Q345N；Q345R；L357F；Q365A；Q365C；Q365E；Q365H；Q365K；Q365M；Q365S；P377K；P377T；D375H；D375N；D375Y；Q386L；K391A；Q395K；R400S；D406H；W408H；V410I；S431F；G435C；W439R；W439T；R444T；Q445S；R458K；N465G；Q466S；W469N；W469Y；F473I；F473P；F473S；G476K；和V481A的位置处包含一个或多个以下修饰，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体与SEQ ID NO:5的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在一方面，所述变体在对应于位置H1*；H2*，G7A；I9M；Q11H；N16E；N16H；N16Y；N19D；N25K；N25M；N25T；A37V；W43Y；W48Y；N54Q；N54S；V56I；V56T；Y58F；G59A；A60S；A60T；L63F；T81A；E84Q；E86L；R90H；R90N；R90Q；Q98N；V104A；G109A；A111T；F113A；F113G；F113N；F113Q；F113T；F113Y；R116C；R116D；R116F；R116H；R116K；R116N；R116S；R116Y；Q118N；Q118T；Q125G；Q125S；R127A；R127F；R127H；R127L；R127N；R127T；E130D；E130F；E130I；E130K；E130L；E130N；E130S；E130T；E130V；S132A；S132D；S132F；S132L；S132M；S132P；S132T；G133D；T134C；T134E；T134N；T134P；T134R；T134S；T134W；T134Y；T134A；Y135H；Q136D；Q136E；Q136G；Q136N；Q136R；Q136S；A139T；G142H；N144H；G149A；R158C；R158H；R158K；R158Q；R158S；Y160D；Y160F；T160H；Y160N；D163H；W167*；Q169*；Q169E；Q169F；S170*；S170A；R171*；R171H；R171K；R171L；R171Y；Q172*；Q172K；Q172N；Q172S；L173*；L173K；A174*；A174N；A174S；N175*；N175S；R176*；R176A；Y178F；R181*；R181A；R181C；R181E；R181G；R181H；R181K；R181N；R181Q；G182*；G182T；A186D；A186E；A186H；A186K；A186N；A186T；W187M；N195D；N195F；N195H；N195Q；N195Y；M202L；Y203L；A204V；V206L；D209N；H210K；H210N；E212D；T227K；T227N；L235I；V238A；M246I；M246L；M246T；M246V；Q256H；Q256N；K259G；K259H；V264A；V246I；V264T；A265G；E266V；Y267F；Y267H；Y267L；K269M；K269Q；K269R；N270G；N270P；L272I；G273V；A274K；A274S；L275A；L275I；L275V；E276N；W284R；W284Y；M286L；V291A；V291I；V291T；L293I；L293V；Y295F；Y298E；Y298N；Q299N；Q299Y；N302A；N302H；N302K；N302Q；S303G；S304G；S304Q；N306H；N306K；N306Q；N306R；N306Y；R310N；R310S；R310Q；N311K；N311R；N314Q；G315N；L317V；Q319H；R320K；R320Q；R320S；S323T；H323K；F328L；G337D；G337E；A339S；Q345N；Q345R；L357F；Q365A；Q365C；Q365E；Q365H；Q365K；Q365M；Q365S；P377K；P377T；D375H；D375N；D375Y；Q386L；K391A；Q395K；R400S；D406H；W408H；V410I；S431F；G435C；W439R；W439T；R444T；Q445S；R458K；N465G；Q466S；W469N；W469Y；F473I；F473P；F473S；G476K；和V481A的位置处包含一个或多个以下修饰，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体与SEQ ID NO:6的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在一方面，所述变体在对应于位置H1*；H2*，G7A；I9M；Q11H；N16E；N16H；N16Y；N19D；N25K；N25M；N25T；A37V；W43Y；W48Y；N54Q；N54S；V56I；V56T；Y58F；G59A；A60S；A60T；L63F；T81A；E84Q；E86L；R90H；R90N；R90Q；Q98N；V104A；G109A；A111T；F113A；F113G；F113N；F113Q；F113T；F113Y；R116C；R116D；R116F；R116H；R116K；R116N；R116S；R116Y；Q118N；Q118T；Q125G；Q125S；R127A；R127F；R127H；R127L；R127N；R127T；E130D；E130F；E130I；E130K；E130L；E130N；E130S；E130T；E130V；S132A；S132D；S132F；S132L；S132M；S132P；S132T；G133D；T134C；T134E；T134N；T134P；T134R；T134S；T134W；T134Y；T134A；Y135H；Q136D；Q136E；Q136G；Q136N；Q136R；Q136S；A139T；G142H；N144H；G149A；R158C；R158H；R158K；R158Q；R158S；Y160D；Y160F；T160H；Y160N；D163H；W167*；Q169*；Q169E；Q169F；S170*；S170A；R171*；R171H；R171K；R171L；R171Y；Q172*；Q172K；Q172N；Q172S；L173*；L173K；A174*；A174N；A174S；N175*；N175S；R176*；R176A；Y178F；R181*；R181A；R181C；R181E；R181G；R181H；R181K；R181N；R181Q；G182*；G182T；A186D；A186E；A186H；A186K；A186N；A186T；W187M；N195D；N195F；N195H；N195Q；N195Y；M202L；Y203L；A204V；V206L；D209N；H210K；H210N；E212D；T227K；T227N；L235I；V238A；M246I；M246L；M246T；M246V；Q256H；Q256N；K259G；K259H；V264A；V246I；V264T；A265G；E266V；Y267F；Y267H；Y267L；K269M；K269Q；K269R；N270G；N270P；L272I；G273V；A274K；A274S；L275A；L275I；L275V；E276N；W284R；W284Y；M286L；V291A；V291I；V291T；L293I；L293V；Y295F；Y298E；Y298N；Q299N；Q299Y；N302A；N302H；N302K；N302Q；S303G；S304G；S304Q；N306H；N306K；N306Q；N306R；N306Y；R310N；R310S；R310Q；N311K；N311R；N314Q；G315N；L317V；Q319H；R320K；R320Q；R320S；S323T；H323K；F328L；G337D；G337E；A339S；Q345N；Q345R；L357F；Q365A；Q365C；Q365E；Q365H；Q365K；Q365M；Q365S；P377K；P377T；D375H；D375N；D375Y；Q386L；K391A；Q395K；R400S；D406H；W408H；V410I；S431F；G435C；W439R；W439T；R444T；Q445S；R458K；N465G；Q466S；W469N；W469Y；F473I；F473P；F473S；G476K；和V481A的位置处包含一个或多个以下修饰，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体与SEQ ID NO:7的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在一方面，所述变体在对应于位置H1*；H2*，G7A；I9M；Q11H；N16E；N16H；N16Y；N19D；N25K；N25M；N25T；A37V；W43Y；W48Y；N54Q；N54S；V56I；V56T；Y58F；G59A；A60S；A60T；L63F；T81A；E84Q；E86L；R90H；R90N；R90Q；Q98N；V104A；G109A；A111T；F113A；F113G；F113N；F113Q；F113T；F113Y；R116C；R116D；R116F；R116H；R116K；R116N；R116S；R116Y；Q118N；Q118T；Q125G；Q125S；R127A；R127F；R127H；R127L；R127N；R127T；E130D；E130F；E130I；E130K；E130L；E130N；E130S；E130T；E130V；S132A；S132D；S132F；S132L；S132M；S132P；S132T；G133D；T134C；T134E；T134N；T134P；T134R；T134S；T134W；T134Y；T134A；Y135H；Q136D；Q136E；Q136G；Q136N；Q136R；Q136S；A139T；G142H；N144H；G149A；R158C；R158H；R158K；R158Q；R158S；Y160D；Y160F；T160H；Y160N；D163H；W167*；Q169*；Q169E；Q169F；S170*；S170A；R171*；R171H；R171K；R171L；R171Y；Q172*；Q172K；Q172N；Q172S；L173*；L173K；A174*；A174N；A174S；N175*；N175S；R176*；R176A；Y178F；R181*；R181A；R181C；R181E；R181G；R181H；R181K；R181N；R181Q；G182*；G182T；A186D；A186E；A186H；A186K；A186N；A186T；W187M；N195D；N195F；N195H；N195Q；N195Y；M202L；Y203L；A204V；V206L；D209N；H210K；H210N；E212D；T227K；T227N；L235I；V238A；M246I；M246L；M246T；M246V；Q256H；Q256N；K259G；K259H；V264A；V246I；V264T；A265G；E266V；Y267F；Y267H；Y267L；K269M；K269Q；K269R；N270G；N270P；L272I；G273V；A274K；A274S；L275A；L275I；L275V；E276N；W284R；W284Y；M286L；V291A；V291I；V291T；L293I；L293V；Y295F；Y298E；Y298N；Q299N；Q299Y；N302A；N302H；N302K；N302Q；S303G；S304G；S304Q；N306H；N306K；N306Q；N306R；N306Y；R310N；R310S；R310Q；N311K；N311R；N314Q；G315N；L317V；Q319H；R320K；R320Q；R320S；S323T；H323K；F328L；G337D；G337E；A339S；Q345N；Q345R；L357F；Q365A；Q365C；Q365E；Q365H；Q365K；Q365M；Q365S；P377K；P377T；D375H；D375N；D375Y；Q386L；K391A；Q395K；R400S；D406H；W408H；V410I；S431F；G435C；W439R；W439T；R444T；Q445S；R458K；N465G；Q466S；W469N；W469Y；F473I；F473P；F473S；G476K；和V481A的位置处包含一个或多个以下修饰，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体与SEQ ID NO:8的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在一方面，所述变体在对应于位置H1*；H2*，G7A；I9M；Q11H；N16E；N16H；N16Y；N19D；N25K；N25M；N25T；A37V；W43Y；W48Y；N54Q；N54S；V56I；V56T；Y58F；G59A；A60S；A60T；L63F；T81A；E84Q；E86L；R90H；R90N；R90Q；Q98N；V104A；G109A；A111T；F113A；F113G；F113N；F113Q；F113T；F113Y；R116C；R116D；R116F；R116H；R116K；R116N；R116S；R116Y；Q118N；Q118T；Q125G；Q125S；R127A；R127F；R127H；R127L；R127N；R127T；E130D；E130F；E130I；E130K；E130L；E130N；E130S；E130T；E130V；S132A；S132D；S132F；S132L；S132M；S132P；S132T；G133D；T134C；T134E；T134N；T134P；T134R；T134S；T134W；T134Y；T134A；Y135H；Q136D；Q136E；Q136G；Q136N；Q136R；Q136S；A139T；G142H；N144H；G149A；R158C；R158H；R158K；R158Q；R158S；Y160D；Y160F；T160H；Y160N；D163H；W167*；Q169*；Q169E；Q169F；S170*；S170A；R171*；R171H；R171K；R171L；R171Y；Q172*；Q172K；Q172N；Q172S；L173*；L173K；A174*；A174N；A174S；N175*；N175S；R176*；R176A；Y178F；R181*；R181A；R181C；R181E；R181G；R181H；R181K；R181N；R181Q；G182*；G182T；A186D；A186E；A186H；A186K；A186N；A186T；W187M；N195D；N195F；N195H；N195Q；N195Y；M202L；Y203L；A204V；V206L；D209N；H210K；H210N；E212D；T227K；T227N；L235I；V238A；M246I；M246L；M246T；M246V；Q256H；Q256N；K259G；K259H；V264A；V246I；V264T；A265G；E266V；Y267F；Y267H；Y267L；K269M；K269Q；K269R；N270G；N270P；L272I；G273V；A274K；A274S；L275A；L275I；L275V；E276N；W284R；W284Y；M286L；V291A；V291I；V291T；L293I；L293V；Y295F；Y298E；Y298N；Q299N；Q299Y；N302A；N302H；N302K；N302Q；S303G；S304G；S304Q；N306H；N306K；N306Q；N306R；N306Y；R310N；R310S；R310Q；N311K；N311R；N314Q；G315N；L317V；Q319H；R320K；R320Q；R320S；S323T；H323K；F328L；G337D；G337E；A339S；Q345N；Q345R；L357F；Q365A；Q365C；Q365E；Q365H；Q365K；Q365M；Q365S；P377K；P377T；D375H；D375N；D375Y；Q386L；K391A；Q395K；R400S；D406H；W408H；V410I；S431F；G435C；W439R；W439T；R444T；Q445S；R458K；N465G；Q466S；W469N；W469Y；F473I；F473P；F473S；G476K；和V481A的位置处包含一个或多个以下修饰，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体与SEQ ID NO:9的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在一方面，所述变体在对应于位置H1*；H2*，G7A；I9M；Q11H；N16E；N16H；N16Y；N19D；N25K；N25M；N25T；A37V；W43Y；W48Y；N54Q；N54S；V56I；V56T；Y58F；G59A；A60S；A60T；L63F；T81A；E84Q；E86L；R90H；R90N；R90Q；Q98N；V104A；G109A；A111T；F113A；F113G；F113N；F113Q；F113T；F113Y；R116C；R116D；R116F；R116H；R116K；R116N；R116S；R116Y；Q118N；Q118T；Q125G；Q125S；R127A；R127F；R127H；R127L；R127N；R127T；E130D；E130F；E130I；E130K；E130L；E130N；E130S；E130T；E130V；S132A；S132D；S132F；S132L；S132M；S132P；S132T；G133D；T134C；T134E；T134N；T134P；T134R；T134S；T134W；T134Y；T134A；Y135H；Q136D；Q136E；Q136G；Q136N；Q136R；Q136S；A139T；G142H；N144H；G149A；R158C；R158H；R158K；R158Q；R158S；Y160D；Y160F；T160H；Y160N；D163H；W167*；Q169*；Q169E；Q169F；S170*；S170A；R171*；R171H；R171K；R171L；R171Y；Q172*；Q172K；Q172N；Q172S；L173*；L173K；A174*；A174N；A174S；N175*；N175S；R176*；R176A；Y178F；R181*；R181A；R181C；R181E；R181G；R181H；R181K；R181N；R181Q；G182*；G182T；A186D；A186E；A186H；A186K；A186N；A186T；W187M；N195D；N195F；N195H；N195Q；N195Y；M202L；Y203L；A204V；V206L；D209N；H210K；H210N；E212D；T227K；T227N；L235I；V238A；M246I；M246L；M246T；M246V；Q256H；Q256N；K259G；K259H；V264A；V246I；V264T；A265G；E266V；Y267F；Y267H；Y267L；K269M；K269Q；K269R；N270G；N270P；L272I；G273V；A274K；A274S；L275A；L275I；L275V；E276N；W284R；W284Y；M286L；V291A；V291I；V291T；L293I；L293V；Y295F；Y298E；Y298N；Q299N；Q299Y；N302A；N302H；N302K；N302Q；S303G；S304G；S304Q；N306H；N306K；N306Q；N306R；N306Y；R310N；R310S；R310Q；N311K；N311R；N314Q；G315N；L317V；Q319H；R320K；R320Q；R320S；S323T；H323K；F328L；G337D；G337E；A339S；Q345N；Q345R；L357F；Q365A；Q365C；Q365E；Q365H；Q365K；Q365M；Q365S；P377K；P377T；D375H；D375N；D375Y；Q386L；K391A；Q395K；R400S；D406H；W408H；V410I；S431F；G435C；W439R；W439T；R444T；Q445S；R458K；N465G；Q466S；W469N；W469Y；F473I；F473P；F473S；G476K；和V481A的位置处包含一个或多个以下修饰，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体与SEQ ID NO:10的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在一方面，所述变体在对应于位置H1*；H2*，G7A；I9M；Q11H；N16E；N16H；N16Y；N19D；N25K；N25M；N25T；A37V；W43Y；W48Y；N54Q；N54S；V56I；V56T；Y58F；G59A；A60S；A60T；L63F；T81A；E84Q；E86L；R90H；R90N；R90Q；Q98N；V104A；G109A；A111T；F113A；F113G；F113N；F113Q；F113T；F113Y；R116C；R116D；R116F；R116H；R116K；R116N；R116S；R116Y；Q118N；Q118T；Q125G；Q125S；R127A；R127F；R127H；R127L；R127N；R127T；E130D；E130F；E130I；E130K；E130L；E130N；E130S；E130T；E130V；S132A；S132D；S132F；S132L；S132M；S132P；S132T；G133D；T134C；T134E；T134N；T134P；T134R；T134S；T134W；T134Y；T134A；Y135H；Q136D；Q136E；Q136G；Q136N；Q136R；Q136S；A139T；G142H；N144H；G149A；R158C；R158H；R158K；R158Q；R158S；Y160D；Y160F；T160H；Y160N；D163H；W167*；Q169*；Q169E；Q169F；S170*；S170A；R171*；R171H；R171K；R171L；R171Y；Q172*；Q172K；Q172N；Q172S；L173*；L173K；A174*；A174N；A174S；N175*；N175S；R176*；R176A；Y178F；R181*；R181A；R181C；R181E；R181G；R181H；R181K；R181N；R181Q；G182*；G182T；A186D；A186E；A186H；A186K；A186N；A186T；W187M；N195D；N195F；N195H；N195Q；N195Y；M202L；Y203L；A204V；V206L；D209N；H210K；H210N；E212D；T227K；T227N；L235I；V238A；M246I；M246L；M246T；M246V；Q256H；Q256N；K259G；K259H；V264A；V246I；V264T；A265G；E266V；Y267F；Y267H；Y267L；K269M；K269Q；K269R；N270G；N270P；L272I；G273V；A274K；A274S；L275A；L275I；L275V；E276N；W284R；W284Y；M286L；V291A；V291I；V291T；L293I；L293V；Y295F；Y298E；Y298N；Q299N；Q299Y；N302A；N302H；N302K；N302Q；S303G；S304G；S304Q；N306H；N306K；N306Q；N306R；N306Y；R310N；R310S；R310Q；N311K；N311R；N314Q；G315N；L317V；Q319H；R320K；R320Q；R320S；S323T；H323K；F328L；G337D；G337E；A339S；Q345N；Q345R；L357F；Q365A；Q365C；Q365E；Q365H；Q365K；Q365M；Q365S；P377K；P377T；D375H；D375N；D375Y；Q386L；K391A；Q395K；R400S；D406H；W408H；V410I；S431F；G435C；W439R；W439T；R444T；Q445S；R458K；N465G；Q466S；W469N；W469Y；F473I；F473P；F473S；G476K；和V481A的位置处包含一个或多个以下修饰，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体与SEQ ID NO:11的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在一方面，所述变体在对应于位置H1*；H2*，G7A；I9M；Q11H；N16E；N16H；N16Y；N19D；N25K；N25M；N25T；A37V；W43Y；W48Y；N54Q；N54S；V56I；V56T；Y58F；G59A；A60S；A60T；L63F；T81A；E84Q；E86L；R90H；R90N；R90Q；Q98N；V104A；G109A；A111T；F113A；F113G；F113N；F113Q；F113T；F113Y；R116C；R116D；R116F；R116H；R116K；R116N；R116S；R116Y；Q118N；Q118T；Q125G；Q125S；R127A；R127F；R127H；R127L；R127N；R127T；E130D；E130F；E130I；E130K；E130L；E130N；E130S；E130T；E130V；S132A；S132D；S132F；S132L；S132M；S132P；S132T；G133D；T134C；T134E；T134N；T134P；T134R；T134S；T134W；T134Y；T134A；Y135H；Q136D；Q136E；Q136G；Q136N；Q136R；Q136S；A139T；G142H；N144H；G149A；R158C；R158H；R158K；R158Q；R158S；Y160D；Y160F；T160H；Y160N；D163H；W167*；Q169*；Q169E；Q169F；S170*；S170A；R171*；R171H；R171K；R171L；R171Y；Q172*；Q172K；Q172N；Q172S；L173*；L173K；A174*；A174N；A174S；N175*；N175S；R176*；R176A；Y178F；R181*；R181A；R181C；R181E；R181G；R181H；R181K；R181N；R181Q；G182*；G182T；A186D；A186E；A186H；A186K；A186N；A186T；W187M；N195D；N195F；N195H；N195Q；N195Y；M202L；Y203L；A204V；V206L；D209N；H210K；H210N；E212D；T227K；T227N；L235I；V238A；M246I；M246L；M246T；M246V；Q256H；Q256N；K259G；K259H；V264A；V246I；V264T；A265G；E266V；Y267F；Y267H；Y267L；K269M；K269Q；K269R；N270G；N270P；L272I；G273V；A274K；A274S；L275A；L275I；L275V；E276N；W284R；W284Y；M286L；V291A；V291I；V291T；L293I；L293V；Y295F；Y298E；Y298N；Q299N；Q299Y；N302A；N302H；N302K；N302Q；S303G；S304G；S304Q；N306H；N306K；N306Q；N306R；N306Y；R310N；R310S；R310Q；N311K；N311R；N314Q；G315N；L317V；Q319H；R320K；R320Q；R320S；S323T；H323K；F328L；G337D；G337E；A339S；Q345N；Q345R；L357F；Q365A；Q365C；Q365E；Q365H；Q365K；Q365M；Q365S；P377K；P377T；D375H；D375N；D375Y；Q386L；K391A；Q395K；R400S；D406H；W408H；V410I；S431F；G435C；W439R；W439T；R444T；Q445S；R458K；N465G；Q466S；W469N；W469Y；F473I；F473P；F473S；G476K；和V481A的位置处包含一个或多个以下修饰，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体与SEQ ID NO:12的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在一方面，所述变体在对应于位置H1*；H2*，G7A；I9M；Q11H；N16E；N16H；N16Y；N19D；N25K；N25M；N25T；A37V；W43Y；W48Y；N54Q；N54S；V56I；V56T；Y58F；G59A；A60S；A60T；L63F；T81A；E84Q；E86L；R90H；R90N；R90Q；Q98N；V104A；G109A；A111T；F113A；F113G；F113N；F113Q；F113T；F113Y；R116C；R116D；R116F；R116H；R116K；R116N；R116S；R116Y；Q118N；Q118T；Q125G；Q125S；R127A；R127F；R127H；R127L；R127N；R127T；E130D；E130F；E130I；E130K；E130L；E130N；E130S；E130T；E130V；S132A；S132D；S132F；S132L；S132M；S132P；S132T；G133D；T134C；T134E；T134N；T134P；T134R；T134S；T134W；T134Y；T134A；Y135H；Q136D；Q136E；Q136G；Q136N；Q136R；Q136S；A139T；G142H；N144H；G149A；R158C；R158H；R158K；R158Q；R158S；Y160D；Y160F；T160H；Y160N；D163H；W167*；Q169*；Q169E；Q169F；S170*；S170A；R171*；R171H；R171K；R171L；R171Y；Q172*；Q172K；Q172N；Q172S；L173*；L173K；A174*；A174N；A174S；N175*；N175S；R176*；R176A；Y178F；R181*；R181A；R181C；R181E；R181G；R181H；R181K；R181N；R181Q；G182*；G182T；A186D；A186E；A186H；A186K；A186N；A186T；W187M；N195D；N195F；N195H；N195Q；N195Y；M202L；Y203L；A204V；V206L；D209N；H210K；H210N；E212D；T227K；T227N；L235I；V238A；M246I；M246L；M246T；M246V；Q256H；Q256N；K259G；K259H；V264A；V246I；V264T；A265G；E266V；Y267F；Y267H；Y267L；K269M；K269Q；K269R；N270G；N270P；L272I；G273V；A274K；A274S；L275A；L275I；L275V；E276N；W284R；W284Y；M286L；V291A；V291I；V291T；L293I；L293V；Y295F；Y298E；Y298N；Q299N；Q299Y；N302A；N302H；N302K；N302Q；S303G；S304G；S304Q；N306H；N306K；N306Q；N306R；N306Y；R310N；R310S；R310Q；N311K；N311R；N314Q；G315N；L317V；Q319H；R320K；R320Q；R320S；S323T；H323K；F328L；G337D；G337E；A339S；Q345N；Q345R；L357F；Q365A；Q365C；Q365E；Q365H；Q365K；Q365M；Q365S；P377K；P377T；D375H；D375N；D375Y；Q386L；K391A；Q395K；R400S；D406H；W408H；V410I；S431F；G435C；W439R；W439T；R444T；Q445S；R458K；N465G；Q466S；W469N；W469Y；F473I；F473P；F473S；G476K；和V481A的位置处包含一个或多个以下修饰，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体与SEQ ID NO:13的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在一方面，所述变体在对应于位置H1*；H2*，G7A；I9M；Q11H；N16E；N16H；N16Y；N19D；N25K；N25M；N25T；A37V；W43Y；W48Y；N54Q；N54S；V56I；V56T；Y58F；G59A；A60S；A60T；L63F；T81A；E84Q；E86L；R90H；R90N；R90Q；Q98N；V104A；G109A；A111T；F113A；F113G；F113N；F113Q；F113T；F113Y；R116C；R116D；R116F；R116H；R116K；R116N；R116S；R116Y；Q118N；Q118T；Q125G；Q125S；R127A；R127F；R127H；R127L；R127N；R127T；E130D；E130F；E130I；E130K；E130L；E130N；E130S；E130T；E130V；S132A；S132D；S132F；S132L；S132M；S132P；S132T；G133D；T134C；T134E；T134N；T134P；T134R；T134S；T134W；T134Y；T134A；Y135H；Q136D；Q136E；Q136G；Q136N；Q136R；Q136S；A139T；G142H；N144H；G149A；R158C；R158H；R158K；R158Q；R158S；Y160D；Y160F；T160H；Y160N；D163H；W167*；Q169*；Q169E；Q169F；S170*；S170A；R171*；R171H；R171K；R171L；R171Y；Q172*；Q172K；Q172N；Q172S；L173*；L173K；A174*；A174N；A174S；N175*；N175S；R176*；R176A；Y178F；R181*；R181A；R181C；R181E；R181G；R181H；R181K；R181N；R181Q；G182*；G182T；A186D；A186E；A186H；A186K；A186N；A186T；W187M；N195D；N195F；N195H；N195Q；N195Y；M202L；Y203L；A204V；V206L；D209N；H210K；H210N；E212D；T227K；T227N；L235I；V238A；M246I；M246L；M246T；M246V；Q256H；Q256N；K259G；K259H；V264A；V246I；V264T；A265G；E266V；Y267F；Y267H；Y267L；K269M；K269Q；K269R；N270G；N270P；L272I；G273V；A274K；A274S；L275A；L275I；L275V；E276N；W284R；W284Y；M286L；V291A；V291I；V291T；L293I；L293V；Y295F；Y298E；Y298N；Q299N；Q299Y；N302A；N302H；N302K；N302Q；S303G；S304G；S304Q；N306H；N306K；N306Q；N306R；N306Y；R310N；R310S；R310Q；N311K；N311R；N314Q；G315N；L317V；Q319H；R320K；R320Q；R320S；S323T；H323K；F328L；G337D；G337E；A339S；Q345N；Q345R；L357F；Q365A；Q365C；Q365E；Q365H；Q365K；Q365M；Q365S；P377K；P377T；D375H；D375N；D375Y；Q386L；K391A；Q395K；R400S；D406H；W408H；V410I；S431F；G435C；W439R；W439T；R444T；Q445S；R458K；N465G；Q466S；W469N；W469Y；F473I；F473P；F473S；G476K；和V481A的位置处包含一个或多个以下修饰，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体与SEQ ID NO:14的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在一方面，所述变体在对应于位置H1*；H2*，G7A；I9M；Q11H；N16E；N16H；N16Y；N19D；N25K；N25M；N25T；A37V；W43Y；W48Y；N54Q；N54S；V56I；V56T；Y58F；G59A；A60S；A60T；L63F；T81A；E84Q；E86L；R90H；R90N；R90Q；Q98N；V104A；G109A；A111T；F113A；F113G；F113N；F113Q；F113T；F113Y；R116C；R116D；R116F；R116H；R116K；R116N；R116S；R116Y；Q118N；Q118T；Q125G；Q125S；R127A；R127F；R127H；R127L；R127N；R127T；E130D；E130F；E130I；E130K；E130L；E130N；E130S；E130T；E130V；S132A；S132D；S132F；S132L；S132M；S132P；S132T；G133D；T134C；T134E；T134N；T134P；T134R；T134S；T134W；T134Y；T134A；Y135H；Q136D；Q136E；Q136G；Q136N；Q136R；Q136S；A139T；G142H；N144H；G149A；R158C；R158H；R158K；R158Q；R158S；Y160D；Y160F；T160H；Y160N；D163H；W167*；Q169*；Q169E；Q169F；S170*；S170A；R171*；R171H；R171K；R171L；R171Y；Q172*；Q172K；Q172N；Q172S；L173*；L173K；A174*；A174N；A174S；N175*；N175S；R176*；R176A；Y178F；R181*；R181A；R181C；R181E；R181G；R181H；R181K；R181N；R181Q；G182*；G182T；A186D；A186E；A186H；A186K；A186N；A186T；W187M；N195D；N195F；N195H；N195Q；N195Y；M202L；Y203L；A204V；V206L；D209N；H210K；H210N；E212D；T227K；T227N；L235I；V238A；M246I；M246L；M246T；M246V；Q256H；Q256N；K259G；K259H；V264A；V246I；V264T；A265G；E266V；Y267F；Y267H；Y267L；K269M；K269Q；K269R；N270G；N270P；L272I；G273V；A274K；A274S；L275A；L275I；L275V；E276N；W284R；W284Y；M286L；V291A；V291I；V291T；L293I；L293V；Y295F；Y298E；Y298N；Q299N；Q299Y；N302A；N302H；N302K；N302Q；S303G；S304G；S304Q；N306H；N306K；N306Q；N306R；N306Y；R310N；R310S；R310Q；N311K；N311R；N314Q；G315N；L317V；Q319H；R320K；R320Q；R320S；S323T；H323K；F328L；G337D；G337E；A339S；Q345N；Q345R；L357F；Q365A；Q365C；Q365E；Q365H；Q365K；Q365M；Q365S；P377K；P377T；D375H；D375N；D375Y；Q386L；K391A；Q395K；R400S；D406H；W408H；V410I；S431F；G435C；W439R；W439T；R444T；Q445S；R458K；N465G；Q466S；W469N；W469Y；F473I；F473P；F473S；G476K；和V481A的位置处包含一个或多个以下修饰，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体与SEQ ID NO:15的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在一方面，所述变体在对应于位置H1*；H2*，G7A；I9M；Q11H；N16E；N16H；N16Y；N19D；N25K；N25M；N25T；A37V；W43Y；W48Y；N54Q；N54S；V56I；V56T；Y58F；G59A；A60S；A60T；L63F；T81A；E84Q；E86L；R90H；R90N；R90Q；Q98N；V104A；G109A；A111T；F113A；F113G；F113N；F113Q；F113T；F113Y；R116C；R116D；R116F；R116H；R116K；R116N；R116S；R116Y；Q118N；Q118T；Q125G；Q125S；R127A；R127F；R127H；R127L；R127N；R127T；E130D；E130F；E130I；E130K；E130L；E130N；E130S；E130T；E130V；S132A；S132D；S132F；S132L；S132M；S132P；S132T；G133D；T134C；T134E；T134N；T134P；T134R；T134S；T134W；T134Y；T134A；Y135H；Q136D；Q136E；Q136G；Q136N；Q136R；Q136S；A139T；G142H；N144H；G149A；R158C；R158H；R158K；R158Q；R158S；Y160D；Y160F；T160H；Y160N；D163H；W167*；Q169*；Q169E；Q169F；S170*；S170A；R171*；R171H；R171K；R171L；R171Y；Q172*；Q172K；Q172N；Q172S；L173*；L173K；A174*；A174N；A174S；N175*；N175S；R176*；R176A；Y178F；R181*；R181A；R181C；R181E；R181G；R181H；R181K；R181N；R181Q；G182*；G182T；A186D；A186E；A186H；A186K；A186N；A186T；W187M；N195D；N195F；N195H；N195Q；N195Y；M202L；Y203L；A204V；V206L；D209N；H210K；H210N；E212D；T227K；T227N；L235I；V238A；M246I；M246L；M246T；M246V；Q256H；Q256N；K259G；K259H；V264A；V246I；V264T；A265G；E266V；Y267F；Y267H；Y267L；K269M；K269Q；K269R；N270G；N270P；L272I；G273V；A274K；A274S；L275A；L275I；L275V；E276N；W284R；W284Y；M286L；V291A；V291I；V291T；L293I；L293V；Y295F；Y298E；Y298N；Q299N；Q299Y；N302A；N302H；N302K；N302Q；S303G；S304G；S304Q；N306H；N306K；N306Q；N306R；N306Y；R310N；R310S；R310Q；N311K；N311R；N314Q；G315N；L317V；Q319H；R320K；R320Q；R320S；S323T；H323K；F328L；G337D；G337E；A339S；Q345N；Q345R；L357F；Q365A；Q365C；Q365E；Q365H；Q365K；Q365M；Q365S；P377K；P377T；D375H；D375N；D375Y；Q386L；K391A；Q395K；R400S；D406H；W408H；V410I；S431F；G435C；W439R；W439T；R444T；Q445S；R458K；N465G；Q466S；W469N；W469Y；F473I；F473P；F473S；G476K；和V481A的位置处包含一个或多个以下修饰，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体与SEQ ID NO:16的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在一方面，所述变体在对应于位置H1*；H2*，G7A；I9M；Q11H；N16E；N16H；N16Y；N19D；N25K；N25M；N25T；A37V；W43Y；W48Y；N54Q；N54S；V56I；V56T；Y58F；G59A；A60S；A60T；L63F；T81A；E84Q；E86L；R90H；R90N；R90Q；Q98N；V104A；G109A；A111T；F113A；F113G；F113N；F113Q；F113T；F113Y；R116C；R116D；R116F；R116H；R116K；R116N；R116S；R116Y；Q118N；Q118T；Q125G；Q125S；R127A；R127F；R127H；R127L；R127N；R127T；E130D；E130F；E130I；E130K；E130L；E130N；E130S；E130T；E130V；S132A；S132D；S132F；S132L；S132M；S132P；S132T；G133D；T134C；T134E；T134N；T134P；T134R；T134S；T134W；T134Y；T134A；Y135H；Q136D；Q136E；Q136G；Q136N；Q136R；Q136S；A139T；G142H；N144H；G149A；R158C；R158H；R158K；R158Q；R158S；Y160D；Y160F；T160H；Y160N；D163H；W167*；Q169*；Q169E；Q169F；S170*；S170A；R171*；R171H；R171K；R171L；R171Y；Q172*；Q172K；Q172N；Q172S；L173*；L173K；A174*；A174N；A174S；N175*；N175S；R176*；R176A；Y178F；R181*；R181A；R181C；R181E；R181G；R181H；R181K；R181N；R181Q；G182*；G182T；A186D；A186E；A186H；A186K；A186N；A186T；W187M；N195D；N195F；N195H；N195Q；N195Y；M202L；Y203L；A204V；V206L；D209N；H210K；H210N；E212D；T227K；T227N；L235I；V238A；M246I；M246L；M246T；M246V；Q256H；Q256N；K259G；K259H；V264A；V246I；V264T；A265G；E266V；Y267F；Y267H；Y267L；K269M；K269Q；K269R；N270G；N270P；L272I；G273V；A274K；A274S；L275A；L275I；L275V；E276N；W284R；W284Y；M286L；V291A；V291I；V291T；L293I；L293V；Y295F；Y298E；Y298N；Q299N；Q299Y；N302A；N302H；N302K；N302Q；S303G；S304G；S304Q；N306H；N306K；N306Q；N306R；N306Y；R310N；R310S；R310Q；N311K；N311R；N314Q；G315N；L317V；Q319H；R320K；R320Q；R320S；S323T；H323K；F328L；G337D；G337E；A339S；Q345N；Q345R；L357F；Q365A；Q365C；Q365E；Q365H；Q365K；Q365M；Q365S；P377K；P377T；D375H；D375N；D375Y；Q386L；K391A；Q395K；R400S；D406H；W408H；V410I；S431F；G435C；W439R；W439T；R444T；Q445S；R458K；N465G；Q466S；W469N；W469Y；F473I；F473P；F473S；G476K；和V481A的位置处包含一个或多个以下修饰，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中所述变体与SEQ ID NO:17的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在一方面，一个或多个位置处的修饰对应于以下：H1*；H2*，G7A；I9M；Q11H；N16E；N16H；N16Y；N19D；N25K；N25M；N25T；A37V；W43Y；W48Y；N54Q；N54S；V56I；V56T；Y58F；G59A；A60S；A60T；L63F；T81A；E84Q；E86L；R90H；R90N；R90Q；Q98N；V104A；G109A；A111T；F113A；F113G；F113N；F113Q；F113T；F113Y；R116C；R116D；R116F；R116H；R116K；R116N；R116S；R116Y；Q118N；Q118T；Q125G；Q125S；R127A；R127F；R127H；R127L；R127N；R127T；E130D；E130F；E130I；E130K；E130L；E130N；E130S；E130T；E130V；S132A；S132D；S132F；S132L；S132M；S132P；S132T；G133D；T134C；T134E；T134N；T134P；T134R；T134S；T134W；T134Y；T134A；Y135H；Q136D；Q136E；Q136G；Q136N；Q136R；Q136S；A139T；G142H；N144H；G149A；R158C；R158H；R158K；R158Q；R158S；Y160D；Y160F；T160H；Y160N；D163H；W167*；Q169*；Q169E；Q169F；S170*；S170A；R171*；R171H；R171K；R171L；R171Y；Q172*；Q172K；Q172N；Q172S；L173*；L173K；A174*；A174N；A174S；N175*；N175S；R176*；R176A；Y178F；R181*；R181A；R181C；R181E；R181G；R181H；R181K；R181N；R181Q；G182*；G182T；A186D；A186E；A186H；A186K；A186N；A186T；W187M；N195D；N195F；N195H；N195Q；N195Y；M202L；Y203L；A204V；V206L；D209N；H210K；H210N；E212D；T227K；T227N；L235I；V238A；M246I；M246L；M246T；M246V；Q256H；Q256N；K259G；K259H；V264A；V246I；V264T；A265G；E266V；Y267F；Y267H；Y267L；K269M；K269Q；K269R；N270G；N270P；L272I；G273V；A274K；A274S；L275A；L275I；L275V；E276N；W284R；W284Y；M286L；V291A；V291I；V291T；L293I；L293V；Y295F；Y298E；Y298N；Q299N；Q299Y；N302A；N302H；N302K；N302Q；S303G；S304G；S304Q；N306H；N306K；N306Q；N306R；N306Y；R310N；R310S；R310Q；N311K；N311R；N314Q；G315N；L317V；Q319H；R320K；R320Q；R320S；S323T；H323K；F328L；G337D；G337E；A339S；Q345N；Q345R；L357F；Q365A；Q365C；Q365E；Q365H；Q365K；Q365M；Q365S；P377K；P377T；D375H；D375N；D375Y；Q386L；K391A；Q395K；R400S；D406H；W408H；V410I；S431F；G435C；W439R；W439T；R444T；Q445S；R458K；N465G；Q466S；W469N；W469Y；F473I；F473P；F473S；G476K；和V481A，使用SEQ ID NO:1进行编号。
在一方面，所述变体在对应于位置A174*+A339S、A174*+G109A、A174*+G149A、A174*+G182T、A174*+H1*、A174*+I9M、A174*+K391A、A174*+M202L、A174*+N16Y、A174*+N195F、A174*+N54S、A174*+Q169E、A174*+Q169E、A174*+Q172K、A174*+Q299Y、A174*+Q345R、A174*+Q365S、A174*+R320K、A174*+R458K、A174*+S323T、A174*+V206L、A174*+Y295F、A339S+G109A、A339S+G149A、A339S+G182T、A339S+H1*、A339S+I9M、A339S+K391A、A339S+M202L、A339S+N16Y、A339S+N195F、A339S+N54S、A339S+Q169E、A339S+Q169E、A339S+Q172K、A339S+Q299Y、A339S+Q345R、A339S+Q365S、A339S+R320K、A339S+R458K、A339S+S323T、A339S+V206L、A339S+Y295F、G109A+G149A、G109A+G182T、G109A+H1*、G109A+I9M、G109A+K391A、G109A+M202L、G109A+N16Y、G109A+N195F、G109A+N54S、G109A+Q169E、G109A+Q169E、G109A+Q172K、G109A+Q299Y、G109A+Q345R、G109A+Q365S、G109A+R320K、G109A+R458K、G109A+S323T、G109A+V206L、G109A+Y295F、G149A+G182T、G149A+H1*、G149A+I9M、G149A+K391A、G149A+M202L、G149A+N16Y、G149A+N195F、G149A+N54S、G149A+Q169E、G149A+Q169E、G149A+Q172K、G149A+Q299Y、G149A+Q345R、G149A+Q365S、G149A+R320K、G149A+R458K、G149A+S323T、G149A+V206L、G149A+Y295F、G182T+H1*、G182T+I9M、G182T+K391A、G182T+M202L、G182T+N16Y、G182T+N195F、G182T+N54S、G182T+Q169E、G182T+Q169E、G182T+Q172K、G182T+Q299Y、G182T+Q345R、G182T+Q365S、G182T+R320K、G182T+R458K、G182T+S323T、G182T+V206L、G182T+Y295F、H1*+I9M、H1*+K391A、H1*+M202L、H1*+N16Y、H1*+N195F、H1*+N54S、H1*+Q169E、H1*+Q169E、H1*+Q172K、H1*+Q299Y、H1*+Q345R、H1*+Q365S、H1*+R320K、H1*+R458K、H1*+S323T、H1*+V206L、H1*+Y295F、I9M+K391A、I9M+M202L、I9M+N16Y、I9M+N195F、I9M+N54S、I9M+Q169E、I9M+Q169E、I9M+Q172K、I9M+Q299Y、I9M+Q345R、I9M+Q365S、I9M+R320K、I9M+R458K、I9M+S323T、I9M+V206L、I9M+Y295F、K391A+M202L、K391A+N16Y、K391A+N195F、K391A+N54S、K391A+Q169E、K391A+Q169E、K391A+Q172K、K391A+Q299Y、K391A+Q345R、K391A+Q365S、K391A+R320K、K391A+R458K、K391A+S323T、K391A+V206L、K391A+Y295F、M202L+N16Y、M202L+N195F、M202L+N54S、M202L+Q169E、M202L+Q169E、M202L+Q172K、M202L+Q299Y、M202L+Q345R、M202L+Q365S、M202L+R320K、M202L+R458K、M202L+S323T、M202L+V206L、M202L+Y295F、N16Y+N195F、N16Y+N54S、N16Y+Q169E、N16Y+Q169E、N16Y+Q172K、N16Y+Q299Y、N16Y+Q345R、N16Y+Q365S、N16Y+R320K、N16Y+R458K、N16Y+S323T、N16Y+V206L、N16Y+Y295F、N195F+N54S、N195F+Q169E、N195F+Q169E、N195F+Q172K、N195F+Q299Y、N195F+Q345R、N195F+Q365S、N195F+R320K、N195F+R458K、N195F+S323T、N195F+V206L、N195F+Y295F、N54S+Q169E、N54S+Q169E、N54S+Q172K、N54S+Q299Y、N54S+Q345R、N54S+Q365S、N54S+R320K、N54S+R458K、N54S+S323T、N54S+V206L、N54S+Y295F、Q169E+Q169E、Q169E+Q172K、Q169E+Q299Y、Q169E+Q345R、Q169E+Q365S、Q169E+R320K、Q169E+R458K、Q169E+S323T、Q169E+V206L、Q169E+Y295F、Q169E+Q172K、Q169E+Q299Y、Q169E+Q345R、Q169E+Q365S、Q169E+R320K、Q169E+R458K、Q169E+S323T、Q169E+V206L、Q169E+Y295F、Q172K+Q299Y、Q172K+Q345R、Q172K+Q365S、Q172K+R320K、Q172K+R458K、Q172K+S323T、Q172K+V206L、Q172K+Y295F、Q299Y+Q345R、Q299Y+Q365S、Q299Y+R320K、Q299Y+R458K、Q299Y+S323T、Q299Y+V206L、Q299Y+Y295F、Q345R+Q365S、Q345R+R320K、Q345R+R458K、Q345R+S323T、Q345R+V206L、Q345R+Y295F、Q365S+R320K、Q365S+R458K、Q365S+S323T、Q365S+V206L、Q365S+Y295F、R320K+R458K、R320K+S323T、R320K+V206L、R320K+Y295F、R458K+S323T、R458K+V206L、R458K+Y295F、S323T+V206L、S323T+Y295F、V206L+Y295F，使用SEQ ID NO:1进行编号并且其中所述变体与SEQ ID No:1-17的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在一方面，所述变体在对应于位置A174*+A339S+G109A、A174*+A339S+G149A、A174*+A339S+G182T、A174*+A339S+H1*、A174*+A339S+I9M、A174*+A339S+K391A、A174*+A339S+M202L、A174*+A339S+N16Y、A174*+A339S+N195F、A174*+A339S+N54S、A174*+A339S+Q169E、A174*+A339S+Q169E、A174*+A339S+Q172K、A174*+A339S+Q299Y、A174*+A339S+Q345R、A174*+A339S+Q365S、A174*+A339S+R320K、A174*+A339S+R458K、A174*+A339S+S323T、A174*+A339S+V206L、A174*+A339S+Y295F、A174*+G109A+G149A、A174*+G109A+G182T、A174*+G109A+H1*、A174*+G109A+I9M、A174*+G109A+K391A、A174*+G109A+M202L、A174*+G109A+N16Y、A174*+G109A+N195F、A174*+G109A+N54S、A174*+G109A+Q169E、A174*+G109A+Q169E、A174*+G109A+Q172K、A174*+G109A+Q299Y、A174*+G109A+Q345R、A174*+G109A+Q365S、A174*+G109A+R320K、A174*+G109A+R458K、A174*+G109A+S323T、A174*+G109A+V206L、A174*+G109A+Y295F、A174*+G149A+G182T、A174*+G149A+H1*、A174*+G149A+I9M、A174*+G149A+K391A、A174*+G149A+M202L、A174*+G149A+N16Y、A174*+G149A+N195F、A174*+G149A+N54S、A174*+G149A+Q169E、A174*+G149A+Q169E、A174*+G149A+Q172K、A174*+G149A+Q299Y、A174*+G149A+Q345R、A174*+G149A+Q365S、A174*+G149A+R320K、A174*+G149A+R458K、A174*+G149A+S323T、A174*+G149A+V206L、A174*+G149A+Y295F、A174*+G182T+H1*、A174*+G182T+I9M、A174*+G182T+K391A、A174*+G182T+M202L、A174*+G182T+N16Y、A174*+G182T+N195F、A174*+G182T+N54S、A174*+G182T+Q169E、A174*+G182T+Q169E、A174*+G182T+Q172K、A174*+G182T+Q299Y、A174*+G182T+Q345R、A174*+G182T+Q365S、A174*+G182T+R320K、A174*+G182T+R458K、A174*+G182T+S323T、A174*+G182T+V206L、A174*+G182T+Y295F、A174*+H1*+I9M、A174*+H1*+K391A、A174*+H1*+M202L、A174*+H1*+N16Y、A174*+H1*+N195F、A174*+H1*+N54S、A174*+H1*+Q169E、A174*+H1*+Q169E、A174*+H1*+Q172K、A174*+H1*+Q299Y、A174*+H1*+Q345R、A174*+H1*+Q365S、A174*+H1*+R320K、A174*+H1*+R458K、A174*+H1*+S323T、A174*+H1*+V206L、A174*+H1*+Y295F、A174*+I9M+K391A、A174*+I9M+M202L、A174*+I9M+N16Y、A174*+I9M+N195F、A174*+I9M+N54S、A174*+I9M+Q169E、A174*+I9M+Q169E、A174*+I9M+Q172K、A174*+I9M+Q299Y、A174*+I9M+Q345R、A174*+I9M+Q365S、A174*+I9M+R320K、A174*+I9M+R458K、A174*+I9M+S323T、A174*+I9M+V206L、A174*+I9M+Y295F、A174*+K391A+M202L、A174*+K391A+N16Y、A174*+K391A+N195F、A174*+K391A+N54S、A174*+K391A+Q169E、A174*+K391A+Q169E、A174*+K391A+Q172K、A174*+K391A+Q299Y、A174*+K391A+Q345R、A174*+K391A+Q365S、A174*+K391A+R320K、A174*+K391A+R458K、A174*+K391A+S323T、A174*+K391A+V206L、A174*+K391A+Y295F、A174*+M202L+N16Y、A174*+M202L+N195F、A174*+M202L+N54S、A174*+M202L+Q169E、A174*+M202L+Q169E、A174*+M202L+Q172K、A174*+M202L+Q299Y、A174*+M202L+Q345R、A174*+M202L+Q365S、A174*+M202L+R320K、A174*+M202L+R458K、A174*+M202L+S323T、A174*+M202L+V206L、A174*+M202L+Y295F、A174*+N16Y+N195F、A174*+N16Y+N54S、A174*+N16Y+Q169E、A174*+N16Y+Q169E、A174*+N16Y+Q172K、A174*+N16Y+Q299Y、A174*+N16Y+Q345R、A174*+N16Y+Q365S、A174*+N16Y+R320K、A174*+N16Y+R458K、A174*+N16Y+S323T、A174*+N16Y+V206L、A174*+N16Y+Y295F、A174*+N195F+N54S、A174*+N195F+Q169E、A174*+N195F+Q169E、A174*+N195F+Q172K、A174*+N195F+Q299Y、A174*+N195F+Q345R、A174*+N195F+Q365S、A174*+N195F+R320K、A174*+N195F+R458K、A174*+N195F+S323T、A174*+N195F+V206L、A174*+N195F+Y295F、A174*+N54S+Q169E、A174*+N54S+Q169E、A174*+N54S+Q172K、A174*+N54S+Q299Y、A174*+N54S+Q345R、A174*+N54S+Q365S、A174*+N54S+R320K、A174*+N54S+R458K、A174*+N54S+S323T、A174*+N54S+V206L、A174*+N54S+Y295F、A174*+Q169E+Q169E、A174*+Q169E+Q172K、A174*+Q169E+Q299Y、A174*+Q169E+Q345R、A174*+Q169E+Q365S、A174*+Q169E+R320K、A174*+Q169E+R458K、A174*+Q169E+S323T、A174*+Q169E+V206L、A174*+Q169E+Y295F、A174*+Q169E+Q172K、A174*+Q169E+Q299Y、A174*+Q169E+Q345R、A174*+Q169E+Q365S、A174*+Q169E+R320K、A174*+Q169E+R458K、A174*+Q169E+S323T、A174*+Q169E+V206L、A174*+Q169E+Y295F、A174*+Q172K+Q299Y、A174*+Q172K+Q345R、A174*+Q172K+Q365S、A174*+Q172K+R320K、A174*+Q172K+R458K、A174*+Q172K+S323T、A174*+Q172K+V206L、A174*+Q172K+Y295F、A174*+Q299Y+Q345R、A174*+Q299Y+Q365S、A174*+Q299Y+R320K、A174*+Q299Y+R458K、A174*+Q299Y+S323T、A174*+Q299Y+V206L、A174*+Q299Y+Y295F、A174*+Q345R+Q365S、A174*+Q345R+R320K、A174*+Q345R+R458K、A174*+Q345R+S323T、A174*+Q345R+V206L、A174*+Q345R+Y295F、A174*+Q365S+R320K、A174*+Q365S+R458K、A174*+Q365S+S323T、A174*+Q365S+V206L、A174*+Q365S+Y295F、A174*+R320K+R458K、A174*+R320K+S323T、A174*+R320K+V206L、A174*+R320K+Y295F、A174*+R458K+S323T、A174*+R458K+V206L、A174*+R458K+Y295F、A174*+S323T+V206L、A174*+S323T+Y295F、A174*+V206L+Y295F、A339S+G109A+G149A、A339S+G109A+G182T、A339S+G109A+H1*、A339S+G109A+I9M、A339S+G109A+K391A、A339S+G109A+M202L、A339S+G109A+N16Y、A339S+G109A+N195F、A339S+G109A+N54S、A339S+G109A+Q169E、A339S+G109A+Q169E、A339S+G109A+Q172K、A339S+G109A+Q299Y、A339S+G109A+Q345R、A339S+G109A+Q365S、A339S+G109A+R320K、A339S+G109A+R458K、A339S+G109A+S323T、A339S+G109A+V206L、A339S+G109A+Y295F、A339S+G149A+G182T、A339S+G149A+H1*、A339S+G149A+I9M、A339S+G149A+K391A、A339S+G149A+M202L、A339S+G149A+N16Y、A339S+G149A+N195F、A339S+G149A+N54S、A339S+G149A+Q169E、A339S+G149A+Q169E、A339S+G149A+Q172K、A339S+G149A+Q299Y、A339S+G149A+Q345R、A339S+G149A+Q365S、A339S+G149A+R320K、A339S+G149A+R458K、A339S+G149A+S323T、A339S+G149A+V206L、A339S+G149A+Y295F、A339S+G182T+H1*、A339S+G182T+I9M、A339S+G182T+K391A、A339S+G182T+M202L、A339S+G182T+N16Y、A339S+G182T+N195F、A339S+G182T+N54S、A339S+G182T+Q169E、A339S+G182T+Q169E、A339S+G182T+Q172K、A339S+G182T+Q299Y、A339S+G182T+Q345R、A339S+G182T+Q365S、A339S+G182T+R320K、A339S+G182T+R458K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ID NO:1进行编号并且其中所述变体与SEQ ID No:1-17的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在一方面，所述变体在对应于位置A174*+A339S+G109A+G149A、A174*+A339S+G109A+G182T、A174*+A339S+G109A+H1*、A174*+A339S+G109A+I9M、A174*+A339S+G109A+K391A、A174*+A339S+G109A+M202L、A174*+A339S+G109A+N16Y、A174*+A339S+G109A+N195F、A174*+A339S+G109A+N54S、A174*+A339S+G109A+Q169E、A174*+A339S+G109A+Q169E、A174*+A339S+G109A+Q172K、A174*+A339S+G109A+Q299Y、A174*+A339S+G109A+Q345R、A174*+A339S+G109A+Q365S、A174*+A339S+G109A+R320K、A174*+A339S+G109A+R458K、A174*+A339S+G109A+S323T、A174*+A339S+G109A+V206L、A174*+A339S+G109A+Y295F、A174*+A339S+G149A+G182T、A174*+A339S+G149A+H1*、A174*+A339S+G149A+I9M、A174*+A339S+G149A+K391A、A174*+A339S+G149A+M202L、A174*+A339S+G149A+N16Y、A174*+A339S+G149A+N195F、A174*+A339S+G149A+N54S、A174*+A339S+G149A+Q169E、A174*+A339S+G149A+Q169E、A174*+A339S+G149A+Q172K、A174*+A339S+G149A+Q299Y、A174*+A339S+G149A+Q345R、A174*+A339S+G149A+Q365S、A174*+A339S+G149A+R320K、A174*+A339S+G149A+R458K、A174*+A339S+G149A+S323T、A174*+A339S+G149A+V206L、A174*+A339S+G149A+Y295F、A174*+A339S+G182T+H1*、A174*+A339S+G182T+I9M、A174*+A339S+G182T+K391A、A174*+A339S+G182T+M202L、A174*+A339S+G182T+N16Y、A174*+A339S+G182T+N195F、A174*+A339S+G182T+N54S、A174*+A339S+G182T+Q169E、A174*+A339S+G182T+Q169E、A174*+A339S+G182T+Q172K、A174*+A339S+G182T+Q299Y、A174*+A339S+G182T+Q345R、A174*+A339S+G182T+Q365S、A174*+A339S+G182T+R320K、A174*+A339S+G182T+R458K、A174*+A339S+G182T+S323T、A174*+A339S+G182T+V206L、A174*+A339S+G182T+Y295F、A174*+A339S+H1*+I9M、A174*+A339S+H1*+K391A、A174*+A339S+H1*+M202L、A174*+A339S+H1*+N16Y、A174*+A339S+H1*+N195F、A174*+A339S+H1*+N54S、A174*+A339S+H1*+Q169E、A174*+A339S+H1*+Q169E、A174*+A339S+H1*+Q172K、A174*+A339S+H1*+Q299Y、A174*+A339S+H1*+Q345R、A174*+A339S+H1*+Q365S、A174*+A339S+H1*+R320K、A174*+A339S+H1*+R458K、A174*+A339S+H1*+S323T、A174*+A339S+H1*+V206L、A174*+A339S+H1*+Y295F、A174*+A339S+I9M+K391A、A174*+A339S+I9M+M202L、A174*+A339S+I9M+N16Y、A174*+A339S+I9M+N195F、A174*+A339S+I9M+N54S、A174*+A339S+I9M+Q169E、A174*+A339S+I9M+Q169E、A174*+A339S+I9M+Q172K、A174*+A339S+I9M+Q299Y、A174*+A339S+I9M+Q345R、A174*+A339S+I9M+Q365S、A174*+A339S+I9M+R320K、A174*+A339S+I9M+R458K、A174*+A339S+I9M+S323T、A174*+A339S+I9M+V206L、A174*+A339S+I9M+Y295F、A174*+A339S+K391A+M202L、A174*+A339S+K391A+N16Y、A174*+A339S+K391A+N195F、A174*+A339S+K391A+N54S、A174*+A339S+K391A+Q169E、A174*+A339S+K391A+Q169E、A174*+A339S+K391A+Q172K、A174*+A339S+K391A+Q299Y、A174*+A339S+K391A+Q345R、A174*+A339S+K391A+Q365S、A174*+A339S+K391A+R320K、A174*+A339S+K391A+R458K、A174*+A339S+K391A+S323T、A174*+A339S+K391A+V206L、A174*+A339S+K391A+Y295F、A174*+A339S+M202L+N16Y、A174*+A339S+M202L+N195F、A174*+A339S+M202L+N54S、A174*+A339S+M202L+Q169E、A174*+A339S+M202L+Q169E、A174*+A339S+M202L+Q172K、A174*+A339S+M202L+Q299Y、A174*+A339S+M202L+Q345R、A174*+A339S+M202L+Q365S、A174*+A339S+M202L+R320K、A174*+A339S+M202L+R458K、A174*+A339S+M202L+S323T、A174*+A339S+M202L+V206L、A174*+A339S+M202L+Y295F、A174*+A339S+N16Y+N195F、A174*+A339S+N16Y+N54S、A174*+A339S+N16Y+Q169E、A174*+A339S+N16Y+Q169E、A174*+A339S+N16Y+Q172K、A174*+A339S+N16Y+Q299Y、A174*+A339S+N16Y+Q345R、A174*+A339S+N16Y+Q365S、A174*+A339S+N16Y+R320K、A174*+A339S+N16Y+R458K、A174*+A339S+N16Y+S323T、A174*+A339S+N16Y+V206L、A174*+A339S+N16Y+Y295F、A174*+A339S+N195F+N54S、A174*+A339S+N195F+Q169E、A174*+A339S+N195F+Q169E、A174*+A339S+N195F+Q172K、A174*+A339S+N195F+Q299Y、A174*+A339S+N195F+Q345R、A174*+A339S+N195F+Q365S、A174*+A339S+N195F+R320K、A174*+A339S+N195F+R458K、A174*+A339S+N195F+S323T、A174*+A339S+N195F+V206L、A174*+A339S+N195F+Y295F、A174*+A339S+N54S+Q169E、A174*+A339S+N54S+Q169E、A174*+A339S+N54S+Q172K、A174*+A339S+N54S+Q299Y、A174*+A339S+N54S+Q345R、A174*+A339S+N54S+Q365S、A174*+A339S+N54S+R320K、A174*+A339S+N54S+R458K、A174*+A339S+N54S+S323T、A174*+A339S+N54S+V206L、A174*+A339S+N54S+Y295F、A174*+A339S+Q169E+Q169E、A174*+A339S+Q169E+Q172K、A174*+A339S+Q169E+Q299Y、A174*+A339S+Q169E+Q345R、A174*+A339S+Q169E+Q365S、A174*+A339S+Q169E+R320K、A174*+A339S+Q169E+R458K、A174*+A339S+Q169E+S323T、A174*+A339S+Q169E+V206L、A174*+A339S+Q169E+Y295F、A174*+A339S+Q169E+Q172K、A174*+A339S+Q169E+Q299Y、A174*+A339S+Q169E+Q345R、A174*+A339S+Q169E+Q365S、A174*+A339S+Q169E+R320K、A174*+A339S+Q169E+R458K、A174*+A339S+Q169E+S323T、A174*+A339S+Q169E+V206L、A174*+A339S+Q169E+Y295F、A174*+A339S+Q172K+Q299Y、A174*+A339S+Q172K+Q345R、A174*+A339S+Q172K+Q365S、A174*+A339S+Q172K+R320K、A174*+A339S+Q172K+R458K、A174*+A339S+Q172K+S323T、A174*+A339S+Q172K+V206L、A174*+A339S+Q172K+Y295F、A174*+A339S+Q299Y+Q345R、A174*+A339S+Q299Y+Q365S、A174*+A339S+Q299Y+R320K、A174*+A339S+Q299Y+R458K、A174*+A339S+Q299Y+S323T、A174*+A339S+Q299Y+V206L、A174*+A339S+Q299Y+Y295F、A174*+A339S+Q345R+Q365S、A174*+A339S+Q345R+R320K、A174*+A339S+Q345R+R458K、A174*+A339S+Q345R+S323T、A174*+A339S+Q345R+V206L、A174*+A339S+Q345R+Y295F、A174*+A339S+Q365S+R320K、A174*+A339S+Q365S+R458K、A174*+A339S+Q365S+S323T、A174*+A339S+Q365S+V206L、A174*+A339S+Q365S+Y295F、A174*+A339S+R320K+R458K、A174*+A339S+R320K+S323T、A174*+A339S+R320K+V206L、A174*+A339S+R320K+Y295F、A174*+A339S+R458K+S323T、A174*+A339S+R458K+V206L、A174*+A339S+R458K+Y295F、A174*+A339S+S323T+V206L、A174*+A339S+S323T+Y295F、A174*+A339S+V206L+Y295F、A174*+G109A+G149A+G182T、A174*+G109A+G149A+H1*、A174*+G109A+G149A+I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、Q169E+Q365S+V206L+Y295F、Q169E+R320K+R458K+S323T、Q169E+R320K+R458K+V206L、Q169E+R320K+R458K+Y295F、Q169E+R320K+S323T+V206L、Q169E+R320K+S323T+Y295F、Q169E+R320K+V206L+Y295F、Q169E+R458K+S323T+V206L、Q169E+R458K+S323T+Y295F、Q169E+R458K+V206L+Y295F、Q169E+S323T+V206L+Y295F、Q172K+Q299Y+Q345R+Q365S、Q172K+Q299Y+Q345R+R320K、Q172K+Q299Y+Q345R+R458K、Q172K+Q299Y+Q345R+S323T、Q172K+Q299Y+Q345R+V206L、Q172K+Q299Y+Q345R+Y295F、Q172K+Q299Y+Q365S+R320K、Q172K+Q299Y+Q365S+R458K、Q172K+Q299Y+Q365S+S323T、Q172K+Q299Y+Q365S+V206L、Q172K+Q299Y+Q365S+Y295F、Q172K+Q299Y+R320K+R458K、Q172K+Q299Y+R320K+S323T、Q172K+Q299Y+R320K+V206L、Q172K+Q299Y+R320K+Y295F、Q172K+Q299Y+R458K+S323T、Q172K+Q299Y+R458K+V206L、Q172K+Q299Y+R458K+Y295F、Q172K+Q299Y+S323T+V206L、Q172K+Q299Y+S323T+Y295F、Q172K+Q299Y+V206L+Y295F、Q172K+Q345R+Q365S+R320K、Q172K+Q345R+Q365S+R458K、Q172K+Q345R+Q365S+S323T、Q172K+Q345R+Q365S+V206L、Q172K+Q345R+Q365S+Y295F、Q172K+Q345R+R320K+R458K、Q172K+Q345R+R320K+S323T、Q172K+Q345R+R320K+V206L、Q172K+Q345R+R320K+Y295F、Q172K+Q345R+R458K+S323T、Q172K+Q345R+R458K+V206L、Q172K+Q345R+R458K+Y295F、Q172K+Q345R+S323T+V206L、Q172K+Q345R+S323T+Y295F、Q172K+Q345R+V206L+Y295F、Q172K+Q365S+R320K+R458K、Q172K+Q365S+R320K+S323T、Q172K+Q365S+R320K+V206L、Q172K+Q365S+R320K+Y295F、Q172K+Q365S+R458K+S323T、Q172K+Q365S+R458K+V206L、Q172K+Q365S+R458K+Y295F、Q172K+Q365S+S323T+V206L、Q172K+Q365S+S323T+Y295F、Q172K+Q365S+V206L+Y295F、Q172K+R320K+R458K+S323T、Q172K+R320K+R458K+V206L、Q172K+R320K+R458K+Y295F、Q172K+R320K+S323T+V206L、Q172K+R320K+S323T+Y295F、Q172K+R320K+V206L+Y295F、Q172K+R458K+S323T+V206L、Q172K+R458K+S323T+Y295F、Q172K+R458K+V206L+Y295F、Q172K+S323T+V206L+Y295F、Q299Y+Q345R+Q365S+R320K、Q299Y+Q345R+Q365S+R458K、Q299Y+Q345R+Q365S+S323T、Q299Y+Q345R+Q365S+V206L、Q299Y+Q345R+Q365S+Y295F、Q299Y+Q345R+R320K+R458K、Q299Y+Q345R+R320K+S323T、Q299Y+Q345R+R320K+V206L、Q299Y+Q345R+R320K+Y295F、Q299Y+Q345R+R458K+S323T、Q299Y+Q345R+R458K+V206L、Q299Y+Q345R+R458K+Y295F、Q299Y+Q345R+S323T+V206L、Q299Y+Q345R+S323T+Y295F、Q299Y+Q345R+V206L+Y295F、Q299Y+Q365S+R320K+R458K、Q299Y+Q365S+R320K+S323T、Q299Y+Q365S+R320K+V206L、Q299Y+Q365S+R320K+Y295F、Q299Y+Q365S+R458K+S323T、Q299Y+Q365S+R458K+V206L、Q299Y+Q365S+R458K+Y295F、Q299Y+Q365S+S323T+V206L、Q299Y+Q365S+S323T+Y295F、Q299Y+Q365S+V206L+Y295F、Q299Y+R320K+R458K+S323T、Q299Y+R320K+R458K+V206L、Q299Y+R320K+R458K+Y295F、Q299Y+R320K+S323T+V206L、Q299Y+R320K+S323T+Y295F、Q299Y+R320K+V206L+Y295F、Q299Y+R458K+S323T+V206L、Q299Y+R458K+S323T+Y295F、Q299Y+R458K+V206L+Y295F、Q299Y+S323T+V206L+Y295F、Q345R+Q365S+R320K+R458K、Q345R+Q365S+R320K+S323T、Q345R+Q365S+R320K+V206L、Q345R+Q365S+R320K+Y295F、Q345R+Q365S+R458K+S323T、Q345R+Q365S+R458K+V206L、Q345R+Q365S+R458K+Y295F、Q345R+Q365S+S323T+V206L、Q345R+Q365S+S323T+Y295F、Q345R+Q365S+V206L+Y295F、Q345R+R320K+R458K+S323T、Q345R+R320K+R458K+V206L、Q345R+R320K+R458K+Y295F、Q345R+R320K+S323T+V206L、Q345R+R320K+S323T+Y295F、Q345R+R320K+V206L+Y295F、Q345R+R458K+S323T+V206L、Q345R+R458K+S323T+Y295F、Q345R+R458K+V206L+Y295F、Q345R+S323T+V206L+Y295F、Q365S+R320K+R458K+S323T、Q365S+R320K+R458K+V206L、Q365S+R320K+R458K+Y295F、Q365S+R320K+S323T+V206L、Q365S+R320K+S323T+Y295F、Q365S+R320K+V206L+Y295F、Q365S+R458K+S323T+V206L、Q365S+R458K+S323T+Y295F、Q365S+R458K+V206L+Y295F、Q365S+S323T+V206L+Y295F、R320K+R458K+S323T+V206L、R320K+R458K+S323T+Y295F、R320K+R458K+V206L+Y295F、R320K+S323T+V206L+Y295F、R458K+S323T+V206L+Y295F，使用SEQ ID NO:1进行编号并且其中所述变体与SEQ ID No:1-17的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
在一方面，所述变体在对应于位置H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A、H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A、H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K，使用SEQ ID NO:1进行编号并且其中所述变体与SEQ ID No:1-17的多肽具有至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
本发明的发明人已经鉴定，SEQ ID NO:1或2中阐述的氨基酸序列的这些位置处的这些特定改变与和亲本多肽具有至少60％序列同一性的变体α-淀粉酶的性能改良特别相关。
根据本发明，1.0的值对应于亲本多肽所观察到的性能。值大于1.0表明与亲本多肽相比，测试的变体的性能的改良。因此，任何>1.0的值都是与亲本多肽相比在变体的特性方面(如性能)有改良的象征。
根据本发明，在至少一个受试条件下显示出特性的改良的变体被认为是与亲本多肽相比具有改良的特性的变体。
如本文其他地方所述，亲本多肽可以是具有α-淀粉酶活性并且与SEQ ID NO:2中阐述的任一个氨基酸序列具有至少60％序列同一性的任何多肽。
从实例3、4和5中获得的数据可以看出，在以下任一项中测试时，相对于具有SEQID NO:2的亲本多肽，所有测试变体具有至少1.1的改良因子(IF)，
(i)标准A洗涤剂和0.1mg/L的酶浓度，
(ii)在45℃下ADW标准洗涤剂和0.35mg/L的酶浓度，
(iii)在40℃下ADW标准洗涤剂和1.5mg/L的酶浓度，或
(iv)在45℃下ADW洗涤剂和0.9mg/L的酶浓度。
在一个实施例中，在与所述具有α-淀粉酶活性的亲本α-淀粉酶相比时，所述变体具有改良的洗涤性能，所述增强的洗涤性能对应于至少1.1，优选至少1.2、至少1.3、至少1.4、至少1.5、至少1.6、至少1.7、至少1.8、至少1.9、至少2.0、至少2.2、至少2.4、至少2.6、至少2.8、至少3.0、至少3.2、至少3.4、至少3.6、至少3.8、或至少4.0的改良因子(IF)，其中所述IF通过使用标准A洗涤剂组合物和/或ADW洗涤剂组合物来确定，并且其中所述亲本α-淀粉酶具有如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。
在一方面，所述变体选自下组，该组由以下组成：
A60T
Y135H
Q169E
W48Y
A174*
M246L
R90Q
Y203L+V206L
Q169F+S170A
S132D+G133D
N195F+Q365C
N195F+Q365S
N195F+Q365M
R127L+Q365S
R127N+Q365S
R127L+Q365C
N195F+Q365K
I9M+N195F
R171H+Q365C
Y267F+Q365S
F328L+Q365S
R171L+Q365S
N195F+M286L
T134P+N195F
S170*+R171*+A174*
V264I+A265G+Y267F
Q169*+S170*+A174*
M246L+L275V+Q365S
V264I+V291I+Q365S
V264I+V291T+Q365K
V264I+F328L+Q365C
I9M+N195F+Q365C
Q11H+Y267F+Q365C
I9M+N195F+Q365S
V264I+Y267F+Q365K
R127L+M246V+Q365S
A60S+R171Y+Q365S
R127N+M246T+L275V
V104A+N195F+Q365S
V264I+F328L+Q365S
R171H+N302H+Q365S
V264I+Y267F+Q365S
A174*+N175*+Y178F
V264I+A265G+Q365C
R171L+N302H+Q365C
R171L+M246V+Q365C
R171Y+M246L+Q365S
V264T+Y267F+Q365S
I9M+Y160H+N195F+Q365S
I9M+R127N+N195F+Q365S
R127H+L235I+Q365S+G435C
I9M+R171H+N195F+Q365S
I9M+A186H+N195F+Q365S
I9M+R171L+N195F+Q365S
Q169*+S170*+R171*+A174*
M246L+L275V+Q365S+D406H
I9M+G184K+N195F+Q365S
R127N+M246L+L275V+Q365S
R171H+M246L+L275V+Q365S
R127H+M246I+Q365C+V481A
Y267F+V291A+F328L+Q365C
I9M+A186E+N195F+Q365S
E86L+R171L+N306R+Q365S
V264I+Y267F+F328L+Q365S
I9M+N195F+V291A+Q365S
R127L+L235I+M246I+Q365C
Y267F+V291A+F328L+Q365S
V264I+Y267F+F328L+Q365K
Q11H+V264I+A265G+Q365C
W187M+N195F+H210K+Q365S
R127H+M246T+L275A+Q365S
I9M+A111T+N195F+Q365S
I9M+Y58F+N195F+Q365S
V264T+V291A+F328L+Q365S
V264I+A265G+V291A+Q365C
V264I+A265G+Y267F+Q365C
V264I+Y267F+V291A+F328L+Q365S
R127N+R171H+M246L+L275V+Q365S
V264I+A265G+V291A+F328L+Q365S
R127N+M246I+A265G+Y267H+Q365S
E130I+T134A+R181N+N195F+Q365S
R127N+M246L+L275V+N306R+Q365S
I9M+N195F+V206L+D209N+Q365S
R116S+S132F+R181N+N195F+Q365S
E130T+T134Y+A186K+N195F+Q365S
A37V+V264I+Y267F+F328L+Q365C
Q11H+V264I+Y267F+F328L+Q365C
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S
Q169*+R171*+Q172*+L173*+A174*
R116Y+S132P+Q136N+N195F+Q365S
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377Y
V264I+A265G+Y267F+F328L+Q365S
I9M+N195F+K269Q+A274K+Q365S
E130D+T134Y+R181H+N195F+Q365S
R116N+S132M+Q136R+N195F+Q365S
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377N
R127N+R171L+M246L+L275V+Q365S
N195F+G337E+Q365S+P375K+D377N
Q11H+V264I+A265G+Y267F+Q365C
R158Q+Y160N+W187M+N195F+Q365S
V264I+Y267F+Q365K+W408H+V410I
R127N+R171Y+M246L+L275V+Q365S
N54Q+F113T+R171H+N302A+Q365C
V264A+Y267F+V291T+F328L+Q365C
Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*
R116K+S132L+Q136R+R181C+N195F+Q365S
V264T+A265G+Y267F+V291A+F328L+Q365C
E130N+T134S+R181N+A186K+N195F+Q365S
E130V+T134N+R181Y+A186K+N195F+Q365S
E130D+T134W+R181KA186E+N195F+Q365S
R116N+S132A+Q136D+R181K+N195F+Q365S
E130S+T134E+R181S+A186T+N195F+Q365S
R116C+S132A+Q136S+R181A+N195F+Q365S
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+Q365S
R127H+R171H+M246L+L275V+N306R+Q365S
E130L+T134N+R181W+A186T+N195F+Q365S
R116C+S132M+Q136S+R181Q+N195F+Q365S
R116S+Y135H+Q136G+R181T+N195F+Q365S
R116S+S132L+Q136E+R181G+N195F+Q365S
N16E+N195F+G337E+Q365S+P375T+D377H
V264I+A265G+Y267F+V291I+F328L+Q365S
N16E+N195F+G337D+Q365S+P375K+D377N
V264I+A265G+Y267F+F328L+Q365S+Q395K
E130N+T134C+R181Q+A186N+N195F+Q365S
V264I+A265G+Y267F+V291A+F328L+Q365C
W167*+Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*
W167*+Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*+N175*
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+A204V+Q365S
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S
E130K+S132T+T134Y+R181T+A186K+N195F+Q365S
E130Y+S132T+T134S+R181E+A186D+N195F+Q365S
A139T+R158S+Y160D+W187M+N195F+H210N+Q365S
I9M+R171L+N195F+M246L+K269M+W284R+Y298N+Q365S
H1*+N54S+V56T+G109A+R171H+N195F+V206L+K391A
W167*+Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*+N175*+R176*
H1*+G59A+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A
H1*+Y58F+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A
H1*+N54S+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L293I+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+D209N+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195D+V206L+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A
N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A
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E130Y+S132T+T134S+R181E+A186D+N195F+Q365S
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H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172N+A174*+N175S+N195F+V206L+K391A+S431F
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172N+L173K+A174*+N175S+N195F+V206L+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Q172S+L173K+A174S+N175*+R176A+N195F+V206L+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+R116D+Q118T+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+R116H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N314Q+Q385L+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+R127F+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+R158K+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A
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H1*+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
I9M+A186E+N195F+Q365S
I9M+A186H+N195F+Q365S
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I9M+N195F+Q365C
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I9M+R127N+N195F+Q365S
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I9M+R171L+N195F+M246L+K269M+W284R+Y298N+Q365S
I9M+R171L+N195F+Q365S
I9M+Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
I9M+Y160H+N195F+Q365S
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I9M+G184K+N195F+Q365S
I9M+N16Y+N54S+V56T+G109A+R116Y+Q118T+Q125S+Q136E+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+R181H+N195F+M202L+V206L+R310N+R320Q+Q365S+K391A+R400S+W408H+R444T+Q445S+Q466S
I9M+N195F+Q365C
I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K
I9M+R127N+N195F+Q365S
I9M+R171H+N195F+Q365S
I9M+R171L+N195F+M246L+K269M+W284R+Y298N+Q365S
I9M+R171L+N195F+Q365S
I9M+Y160H+N195F+Q365S
M202L
M246L+L275V+Q365S+D406H
M246L
M246L+L275V+Q365S
M246L+L275V+Q365S+D406H
N16E+N195F+G337D+Q365S+P375K+D377N
N16E+N195F+G337E+Q365S+P375T+D377H
N16E+N195F+G337E+Q365S+P375T+D377H
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377N
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377Y
N195F+G337E+Q365S+P375K+D377N
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377Y
N195F+G337E+Q365S+P375K+D377N
N195F+Q365S
N54Q+F113T+R171H+N302A+Q365C
N54S+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
Q11H+V264I+A265G+Q365C
Q11H+V264I+A265G+Y267F+Q365C
Q11H+V264I+Y267F+F328L+Q365C
Q11H+Y267F+Q365C
Q11H+V264I+A265G+Q365C
Q169*+S170*+A174*
Q169*+S170*+R171*+A174*
Q98N+F113Y+R158Q+Y160F+S304Q+R320S+W439R+F473P
R116K+S132L+Q136R+R181C+N195F+Q365S
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+A204V+Q365S
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+A204V+Q365S
R116N+S132A+Q136D+R181K+N195F+Q365S
R116N+S132M+Q136R+N195F+Q365S
R116N+S132A+Q136D+R181K+N195F+Q365S
R116S+S132F+R181N+N195F+Q365S
R116S+Y135H+Q136G+R181T+N195F+Q365S
R116Y+S132P+Q136N+N195F+Q365S
R127H+L235I+Q365S+G435C
R127L+M246V+Q365S
R127L+Q365C
R127L+Q365S
R127L
R127N+M246L+L275V+Q365S
R127N+Q365S
R127N+R171L+M246L+L275V+Q365S
R127N+R171H+M246L+L275V+Q365S
R171H+Q365C
R171H+M246L+L275V+Q365S
R171H+N302H+Q365S
R171H
R171H+Q365C
R171L+N302H+Q365C
R171L+Q365S
R171Y++M246L+Q365S
R171Y+N306K
R181S+G184S
V104A+N195F+Q365S
V264A+Y267F+V291T+F328L+Q365C
V264I+A265G+V291A+F328L+Q365S
V264I+A265G+V291A+Q365C
V264I+A265G+Y267F+F328L+Q365S+Q395K
V264I+A265G+Y267F+F328L+Q365S
V264I+A265G+Y267F+V291I+F328L+Q365S
V264I+A265G+Y267F
V264I+F328L+Q365C
V264I+F328L+Q365S
V264I+L357F
V264I+Q365C
V264I+V291I+Q365S
V264I+V291T+Q365K
V264I+Y267F+F328L+Q365C
V264I+Y267F+F328L+Q365K
V264I+Y267F+F328L+Q365S
V264I+Y267F+Q365K+W408H+V410I
V264I+Y267F+Q365K
V264I+Y267F+Q365S
V264I+Y267F+V291A+F328L+Q365C
V264I+Y267F+V291A+F328L+Q365S
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S
V264I+A265G+Y267F
V264I+F328L+Q365C
V264I+Y267F+F328L+Q365K
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S
V264T+A265G+Y267F+V291A+F328L+Q365C
V264T+A265G+Y267L+F328L+Q365C
V264T+V291A+F328L+Q365S
V264T+Y267F+Q365S
V264T+Y267L+F328L+Q365C
V56T+Y160H+A174N+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
V56T+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
W187M+N195F+H210K+Q365S
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473I+G476K
Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
Y160H+A174S+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
Y160H+E212D+E276N+W284Y+N306R+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
Y160H+E212D+E276N+W284Y+N306Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
Y160H+E212D+E276N+W284Y+S304G+N306R+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
Y160H+E212D+E276N+W284Y+S304G+N306Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
Y160H+E212D+K259G+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
Y160H+E212D+Q256H+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
Y160H+E212D+Q256H+K259H+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
Y160H+E212D+Q256N+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473I+G476K
Y160H+N195F+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
Y160H+N195Q+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
Y160H+N195Y+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
Y160H+Q169E+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
Y160H+R171Y+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
Y267F+Q365S
Y267F+V291A+F328L+Q365C
Y267F+V291A+F328L+Q365S
Y267F+Q365S
Y267F+V291A+F328L+Q365S
Y295F，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在与所述亲本α-淀粉酶相比时，在标准A洗涤剂组合物和/或具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体的改良因子(IF)为至少1.1，优选至少1.2，如至少1.3，如至少1.4，如至少1.5，如至少1.6，如至少1.7，如至少1.8，如至少1.9，如至少2.0，如至少2.2，如至少2.4，如至少2.6，如至少2.8，如至少3.0，如至少3.2，如至少3.4，如至少3.6，如至少3.8，或如至少4.0，并且其中所述亲本α-淀粉酶具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。
在一方面，所述变体选自下组，该组由以下组成：
A60T
Y135H
Q169E
W48Y
A174*
M246L
R90Q
Y203L+V206L
Q169F+S170A
S132D+G133D
N195F+Q365C
N195F+Q365S
N195F+Q365M
R127L+Q365S
R127N+Q365S
R127L+Q365C
N195F+Q365K
I9M+N195F
R171H+Q365C
Y267F+Q365S
F328L+Q365S
R171L+Q365S
N195F+M286L
T134P+N195F
S170*+R171*+A174*
V264I+A265G+Y267F
Q169*+S170*+A174*
M246L+L275V+Q365S
V264I+V291I+Q365S
V264I+V291T+Q365K
V264I+F328L+Q365C
I9M+N195F+Q365C
Q11H+Y267F+Q365C
I9M+N195F+Q365S
V264I+Y267F+Q365K
R127L+M246V+Q365S
A60S+R171Y+Q365S
R127N+M246T+L275V
V104A+N195F+Q365S
V264I+F328L+Q365S
R171H+N302H+Q365S
V264I+Y267F+Q365S
A174*+N175*+Y178F
V264I+A265G+Q365C
R171L+N302H+Q365C
R171L+M246V+Q365C
R171Y+M246L+Q365S
V264T+Y267F+Q365S
I9M+Y160H+N195F+Q365S
I9M+R127N+N195F+Q365S
R127H+L235I+Q365S+G435C
I9M+R171H+N195F+Q365S
I9M+A186H+N195F+Q365S
I9M+R171L+N195F+Q365S
Q169*+S170*+R171*+A174*
M246L+L275V+Q365S+D406H
I9M+G184K+N195F+Q365S
R127N+M246L+L275V+Q365S
R171H+M246L+L275V+Q365S
R127H+M246I+Q365C+V481A
Y267F+V291A+F328L+Q365C
I9M+A186E+N195F+Q365S
E86L+R171L+N306R+Q365S
V264I+Y267F+F328L+Q365S
I9M+N195F+V291A+Q365S
R127L+L235I+M246I+Q365C
Y267F+V291A+F328L+Q365S
V264I+Y267F+F328L+Q365K
Q11H+V264I+A265G+Q365C
W187M+N195F+H210K+Q365S
R127H+M246T+L275A+Q365S
I9M+A111T+N195F+Q365S
I9M+Y58F+N195F+Q365S
V264T+V291A+F328L+Q365S
V264I+A265G+V291A+Q365C
V264I+A265G+Y267F+Q365C
V264I+Y267F+V291A+F328L+Q365S
R127N+R171H+M246L+L275V+Q365S
V264I+A265G+V291A+F328L+Q365S
R127N+M246I+A265G+Y267H+Q365S
E130I+T134A+R181N+N195F+Q365S
R127N+M246L+L275V+N306R+Q365S
I9M+N195F+V206L+D209N+Q365S
R116S+S132F+R181N+N195F+Q365S
E130T+T134Y+A186K+N195F+Q365S
A37V+V264I+Y267F+F328L+Q365C
Q11H+V264I+Y267F+F328L+Q365C
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S
Q169*+R171*+Q172*+L173*+A174*
R116Y+S132P+Q136N+N195F+Q365S
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377Y
V264I+A265G+Y267F+F328L+Q365S
I9M+N195F+K269Q+A274K+Q365S
E130D+T134Y+R181H+N195F+Q365S
R116N+S132M+Q136R+N195F+Q365S
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377N
R127N+R171L+M246L+L275V+Q365S
N195F+G337E+Q365S+P375K+D377N
Q11H+V264I+A265G+Y267F+Q365C
R158Q+Y160N+W187M+N195F+Q365S
V264I+Y267F+Q365K+W408H+V410I
R127N+R171Y+M246L+L275V+Q365S
N54Q+F113T+R171H+N302A+Q365C
V264A+Y267F+V291T+F328L+Q365C
Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*
R116K+S132L+Q136R+R181C+N195F+Q365S
V264T+A265G+Y267F+V291A+F328L+Q365C
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Y160H+N195Y+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
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G7A+F113N+R116N+E276N+S304G+R320S+Q345N+W439R+N465G+Q466S+W469Y
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H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+G315N+Q385L+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172N+A174*+N175S+N195F+V206L+K391A+S431F
Y160H+E212D+E276N+W284Y+S304G+N306Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L235I+V238A+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Q172S+L173K+A174S+N175*+R176A+N195F+V206L+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+R116D+Q118T+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A
V56T+Y160H+A174N+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
H1*+N54S+V56T+R90Q+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+E266V+Q385L+K391A
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V20+6L+Q385L+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+F113A+R116D+Q118T+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Y298E+N302K+S303G+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+R116H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N314Q+Q385L+K391A
H1*+I9M+N16Y+N54S+V56T+G109A+R116Y+Q118T+Q125S+Q136E+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+R181H+N195F+M202L+V206L+R310N+R320Q+Q365S+K391A+R400S+W408H+R444T+Q445S+Q466S，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在与所述亲本α-淀粉酶相比时，在标准A洗涤剂组合物中，所述变体的改良因子(IF)为至少1.1，优选至少1.2，如至少1.3，如至少1.4，如至少1.5，如至少1.6，如至少1.7，如至少1.8，如至少1.9，如至少2.0，如至少2.2，如至少2.4，如至少2.6，如至少2.8，如至少3.0，如至少3.2，如至少3.4，如至少3.6，如至少3.8，或如至少4.0，并且其中所述亲本α-淀粉酶具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。
在一方面，所述变体选自下组，该组由以下组成：
A139T+R158S+Y160D+W187M+N195F+H210N+Q365S
A186D+N195F
A60S+R171Y+Q365S
E130D+T134W+R181K+A186E+N195F+Q365S
E130D+T134Y+R181H+N195F+Q365S
E130D+T134W+R181K+A186E+N195F+Q365S
E130F+T134R+R181S+A186D+N195F+Q365S
E130I+T134A+R181N+N195F+Q365S
E130I+T134A+R181N+N195F+Q365S
E130L+T134N+R181W+A186T+N195F+Q365S
E130N+T134C+R181Q+A186N+N195F+Q365S
E130S+T134E+R181S+A186T+N195F+Q365S
E130T+T134Y+A186K+N195F+Q365S
E130V+T134N+R181Y+A186K+N195F+Q365S
E130Y+S132T+T134S+R181E+A186D+N195F+Q365S
E130Y+S132T+T134S+R181E+A186D+N195F+Q365S
E86L+R171L+N306R+Q365S
E86L+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
E86L+R171L+N306R+Q365S
F113Q+R116H
F113T+R171K+G273V
F328L+Q365S
H1*+I9M+N16Y+N54S+V56T+G109A+R116Y+Q118T+Q125S+Q136E+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+R181H+N195F+M202L+V206L+R310N+R320Q+Q365S+K391A+R400S+W408H+R444T+Q445S+Q466S
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+F113G+R116H+D163H+Q169E+R171H+Q172K+A174S+G182T+N195F+M202L+V206L+M246L+L275V+A288V+L317V+Q319H+H324K+Q365S+K391A
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+R320S+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+W284Y+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306R+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+V206L+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+R171H+N195F+V206L+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+G184K+N195F+V206L+T227N+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+R320S+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+M246L+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+R171H+N195F+V206L+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A
I9M+A186E+N195F+Q365S
I9M+A186H+N195F+Q365S
I9M+G184K+N195F+Q365S
I9M+N195F+K269Q+A274K+Q365S
I9M+N195F+N270G+Q365S
I9M+N195F+N270P+Q365S
I9M+N195F+Q365C
I9M+N195F+V206L+D209N+Q365S
I9M+N195F+V291A+Q365S
I9M+R127N+N195F+Q365S
I9M+R171H+N195F+Q365S
I9M+R171L+N195F+M246L+K269M+W284R+Y298N+Q365S
I9M+R171L+N195F+Q365S
I9M+Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
I9M+Y160H+N195F+Q365S
I9M+A186E+N195F+Q365S
I9M+A186H+N195F+Q365S
I9M+G184K+N195F+Q365S
I9M+N16Y+N54S+V56T+G109A+R116Y+Q118T+Q125S+Q136E+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+R181H+N195F+M202L+V206L+R310N+R320Q+Q365S+K391A+R400S+W408H+R444T+Q445S+Q466S
I9M+N195F+Q365C
I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K
I9M+R127N+N195F+Q365S
I9M+R171H+N195F+Q365S
I9M+R171L+N195F+M246L+K269M+W284R+Y298N+Q365S
I9M+R171L+N195F+Q365S
I9M+Y160H+N195F+Q365S
M202L
M246L
M246L+L275V+Q365S+D406H
M246L+L275V+Q365S
M246L+L275V+Q365S+D406H
N16E+N195F+G337D+Q365S+P375K+D377N
N16E+N195F+G337E+Q365S+P375T+D377H
N16E+N195F+G337E+Q365S+P375T+D377H
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377N
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377Y
N195F+G337E+Q365S+P375K+D377N
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377Y
N195F+G337E+Q365S+P375K+D377N
N195F+Q365S
N54Q+F113T+R171H+N302A+Q365C
Q11H+V264I+A265G+Q365C
Q11H+V264I+A265G+Y267F+Q365C
Q11H+V264I+Y267F+F328L+Q365C
Q11H+Y267F+Q365C
Q11H+V264I+A265G+Q365C
Q169*+S170*+A174*
Q169*+S170*+R171*+A174*
Q98N+F113Y+R158Q+Y160F+S304Q+R320S+W439R+F473P
R116K+S132L+Q136R+R181C+N195F+Q365S
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+A204V+Q365S
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+A204V+Q365S
R116N+S132A+Q136D+R181K+N195F+Q365S
R116N+S132M+Q136R+N195F+Q365S
R116N+S132A+Q136D+R181K+N195F+Q365S
R116S+S132F+R181N+N195F+Q365S
R116S+Y135H+Q136G+R181T+N195F+Q365S
R116Y+S132P+Q136N+N195F+Q365S
R127H+L235I+Q365S+G435C
R127L
R127L+M246V+Q365S
R127L+Q365C
R127L+Q365S
R127N+M246L+L275V+Q365S
R127N+Q365S
R127N+R171L+M246L+L275V+Q365S
R127N+R171H+M246L+L275V+Q365S
R171H
R171H+Q365C
R171H+M246L+L275V+Q365S
R171H+N302H+Q365S
R171H+Q365C
R171L+N302H+Q365C
R171L+Q365S
R171Y++M246L+Q365S
R171Y+N306K
*
R181S+G184S
V104A+N195F+Q365S
V264A+Y267F+V291T+F328L+Q365C
V264I+A265G+V291A+F328L+Q365S
V264I+A265G+V291A+Q365C
V264I+A265G+Y267F
V264I+A265G+Y267F+F328L+Q365S
V264I+A265G+Y267F+F328L+Q365S+Q395K
V264I+A265G+Y267F+V291I+F328L+Q365S
V264I+F328L+Q365C
V264I+F328L+Q365S
V264I+L357F
V264I+Q365C
V264I+V291I+Q365S
V264I+V291T+Q365K
V264I+Y267F+F328L+Q365C
V264I+Y267F+F328L+Q365K
V264I+Y267F+F328L+Q365S
V264I+Y267F+Q365K
V264I+Y267F+Q365K+W408H+V410I
V264I+Y267F+Q365S
V264I+Y267F+V291A+F328L+Q365C
V264I+Y267F+V291A+F328L+Q365S
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S
V264I+A265G+Y267F
V264I+F328L+Q365C
V264I+Y267F+F328L+Q365K
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S
V264T+A265G+Y267F+V291A+F328L+Q365C
V264T+A265G+Y267L+F328L+Q365C
V264T+V291A+F328L+Q365S
V264T+Y267F+Q365S
V264T+Y267L+F328L+Q365C
W187M+N195F+H210K+Q365S
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473I+G476K
Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K
Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473I+G476K
Y267F+Q365S
Y267F+V291A+F328L+Q365C
Y267F+V291A+F328L+Q365S
Y267F+Q365S
Y267F+V291A+F328L+Q365S
Y295F，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在与所述亲本α-淀粉酶相比时，在具有漂白剂的ADW洗涤剂中，所述变体的改良因子(IF)为至少1.1，优选至少1.2，如至少1.3，如至少1.4，如至少1.5，如至少1.6，如至少1.7，如至少1.8，如至少1.9，如至少2.0，如至少2.2，如至少2.4，如至少2.6，如至少2.8，如至少3.0，如至少3.2，如至少3.4，如至少3.6，如至少3.8，或如至少4.0，并且其中所述亲本α-淀粉酶具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。
在一方面，所述变体选自下组，该组由以下组成：
A60T、
Y135H、
Q169E、
W48Y、
A174*、
M246L、
R90Q、
Y203L+V206L、
Q169F+S170A、
S132D+G133D、
N195F+Q365C、
N195F+Q365S、
N195F+Q365M、
N195F+Q365K、
R127L+Q365S、
R127N+Q365S、
R127L+Q365C、
R171L+Q365S、
R171H+Q365C、
Y267F+Q365S、
F328L+Q365S、
I9M+N195F、
N195F+M286L、
T134P+N195F、
S170*+R171*+A174*、
V264I+A265G+Y267F、
Q169*+S170*+A174*、
M246L+L275V+Q365S、
V264I+V291I+Q365S、
V264I+V291T+Q365K、
V264I+F328L+Q365C、
I9M+N195F+Q365C、
Q11H+Y267F+Q365C、
I9M+N195F+Q365S、
V264I+Y267F+Q365K、
R127L+M246V+Q365S、
A60S+R171Y+Q365S、
R127N+M246T+L275V、
V104A+N195F+Q365S、
V264I+F328L+Q365S、
R171H+N302H+Q365S、
V264I+Y267F+Q365S、
A174*+N175*+Y178F、
V264I+A265G+Q365C、
R171L+N302H+Q365C、
R171L+M246V+Q365C、
R171Y+M246L+Q365S、
V264T+Y267F+Q365S、
I9M+Y160H+N195F+Q365S、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
R127H+L235I+Q365S+G435C、
I9M+R171H+N195F+Q365S、
I9M+A186H+N195F+Q365S、
I9M+R171L+N195F+Q365S、
Q169*+S170*+R171*+A174*、
M246L+L275V+Q365S+D406H、
I9M+G184K+N195F+Q365S、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
R127N+M246L+L275V+Q365S、
R171H+M246L+L275V+Q365S、
R127H+M246I+Q365C+V481A、
R127N+M246L+L275V+Q365S、
Y267F+V291A+F328L+Q365C、
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E86L+R171L+N306R+Q365S、
V264I+Y267F+F328L+Q365S、
I9M+N195F+V291A+Q365S、
R127L+L235I+M246I+Q365C、
Y267F+V291A+F328L+Q365S、
V264I+Y267F+F328L+Q365K、
Q11H+V264I+A265G+Q365C、
I9M+R171H+N195F+Q365S、
W187M+N195F+H210K+Q365S、
R127H+M246T+L275A+Q365S、
I9M+A111T+N195F+Q365S、
I9M+Y58F+N195F+Q365S、
V264T+V291A+F328L+Q365S、
V264I+A265G+V291A+Q365C、
V264I+A265G+Y267F+Q365C、
V264I+Y267F+V291A+F328L+Q365S、
R127N+R171H+M246L+L275V+Q365S、
V264I+A265G+V291A+F328L+Q365S、
R127N+M246I+A265G+Y267H+Q365S、
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R127N+M246L+L275V+N306R+Q365S、
I9M+N195F+V206L+D209N+Q365S、
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E130T+T134Y+A186K+N195F+Q365S、
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Q169*+R171*+Q172*+L173*+A174*、
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V264I+A265G+Y267F+F328L+Q365S、
I9M+N195F+K269Q+A274K+Q365S、
E130D+T134Y+R181H+N195F+Q365S、
R116N+S132M+Q136R+N195F+Q365S、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377N、
R127N+R171L+M246L+L275V+Q365S、
N195F+G337E+Q365S+P375K+D377N、
Q11H+V264I+A265G+Y267F+Q365C、
R158Q+Y160N+W187M+N195F+Q365S、
V264I+Y267F+Q365K+W408H+V410I、
R127N+R171Y+M246L+L275V+Q365S、
N54Q+F113T+R171H+N302A+Q365C、
V264A+Y267F+V291T+F328L+Q365C、
Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*、
R116K+S132L+Q136R+R181C+N195F+Q365S、
V264T+A265G+Y267F+V291A+F328L+Q365C、
E130N+T134S+R181N+A186K+N195F+Q365S、
E130V+T134N+R181Y+A186K+N195F+Q365S、
E130D+T134W+R181KA186E+N195F+Q365S、
R116N+S132A+Q136D+R181K+N195F+Q365S、
E130S+T134E+R181S+A186T+N195F+Q365S、
R116C+S132A+Q136S+R181A+N195F+Q365S、
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+Q365S、
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E130L+T134N+R181W+A186T+N195F+Q365S、
R116C+S132M+Q136S+R181Q+N195F+Q365S、
R116S+Y135H+Q136G+R181T+N195F+Q365S、
R116S+S132L+Q136E+R181G+N195F+Q365S、
N16E+N195F+G337E+Q365S+P375T+D377H、
V264I+A265G+Y267F+V291I+F328L+Q365S、
N16E+N195F+G337D+Q365S+P375K+D377N、
V264I+A265G+Y267F+F328L+Q365S+Q395K、
E130N+T134C+R181Q+A186N+N195F+Q365S、
V264I+A265G+Y267F+V291A+F328L+Q365C、
W167*+Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*、
W167*+Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*+N175*、
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+A204V+Q365S、
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S、
E130K+S132T+T134Y+R181T+A186K+N195F+Q365S、
E130Y+S132T+T134S+R181E+A186D+N195F+Q365S、
A139T+R158S+Y160D+W187M+N195F+H210N+Q365S、
I9M+R171L+N195F+M246L+K269M+W284R+Y298N+Q365S、
H1*+N54S+V56T+G109A+R171H+N195F+V206L+K391A、
W167*+Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*+N175*+R176*、
H1*+G59A+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+Y58F+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L293I+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+D209N+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195D+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195H+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+M246L+K391A、
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H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L275I+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+G337E+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N25K+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127T+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+D209N+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127N+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+L63F+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L275V+K391A、
H1*+N19D+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
A60S+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+R171L+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+G337D+K391A、
H1*+N25M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+T81A+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N25T+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+R90N+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+R171L+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
E86L+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+R158C+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L293V+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L272I+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R158H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+G109A+K391A+N16Y+N54S+V56T+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L、
H1*+N54S+V56T+G109A+R158S+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
R127N+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+A274S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+A186E+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+R90H+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
I9M+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+Q172S+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+G184H+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+A60S+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365C+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R116N+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306H+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N302H+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+R171Y+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365E+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+A186H+N195F+V206L+K391A、
A60S+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+A60S+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+R181S+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172S+A174*+N175S+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L275V+K391A、
H1*+N54S+V56T+E86L+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N302K+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127L+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+R171Y+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+V291A+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R116F+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306R+K391A、
Y160H+R171L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+G109A+K391A+N54S+V56T+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q118N+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+T134P+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*N195F+V206L+Q299Y+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306K+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365A+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q299N+K391A、
Y160H+E212D+L275V+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306Q+K391A、
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H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L275V+K391A、
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H1*+N54S+V56T+E84Q+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306H+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R158K+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127N+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
V56T+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
N54S+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+E86L+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
Y160H+E212D+Q256H+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q125G+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306R+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N311K+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K269M+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+G184K+N195F+V206L+K391A、
Y160H+E212D+K259G+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+A174S+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+N195Y+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+Q169E+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
E86L+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+N306Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
G7A+F113N+R116N+E276N+S304G+R320S+Q345N+W439R+N465G+Q466S+W469Y、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+D377H+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+V238A+K391A、
Y160H+N195F+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+E212D+Q256N+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365H+K391A、
Y160H+N195Q+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+R171Y+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
G109A+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+N306R+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127F+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172N+L173K+A174*+N175S+N195F+V206L+K391A、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+S304G+N306R+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+G142H+N144H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N302Q+Q385L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306R+Q385L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+G184K+N195F+V206L+T227N+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+T227K+K269R+K391A、
H1*+N54S+V56I+G109A+R127A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q385L+K391A、
Y160H+E212D+Q256H+K259H+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+G315N+Q385L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172N+A174*+N175S+N195F+V206L+K391A+S431F、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+S304G+N306Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L235I+V238A+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q172S+L173K+A174S+N175*+R176A+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R116D+Q118T+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
V56T+Y160H+A174N+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+R90Q+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+E266V+Q385L+K391A、
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V20+6L+Q385L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+F113A+R116D+Q118T+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Y298E+N302K+S303G+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R116H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N314Q+Q385L+K391A、
H1*+I9M+N16Y+N54S+V56T+G109A+R116Y+Q118T+Q125S+Q136E+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+R181H+N195F+M202L+V206L+R310N+R320Q+Q365S+K391A+R400S+W408H+R444T+Q445S+Q466S，使用SEQ ID NO:1进行编号并且其中关于洗涤性能的测量，与SEQ ID NO:2的亲本α-淀粉酶相比，在标准A洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥1.1的改良的相对比活性。
在一方面，所述变体选自下组，该组由以下组成：
M246L、
N195F+Q365C、
N195F+Q365S、
N195F+Q365M、
N195F+Q365K、
R127L+Q365S、
R127N+Q365S、
R127L+Q365C、
R171H+Q365C、
Y267F+Q365S、
F328L+Q365S、
I9M+N195F、
S170*+R171*+A174*、
V264I+A265G+Y267F、
Q169*+S170*+A174*、
M246L+L275V+Q365S、
V264I+V291I+Q365S、
V264I+V291T+Q365K、
V264I+F328L+Q365C、
I9M+N195F+Q365C、
Q11H+Y267F+Q365C、
I9M+N195F+Q365S、
V264I+Y267F+Q365K、
R127L+M246V+Q365S、
I9M+Y160H+N195F+Q365S、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
R127H+L235I+Q365S+G435C、
I9M+R171H+N195F+Q365S、
I9M+A186H+N195F+Q365S、
I9M+R171L+N195F+Q365S、
Q169*+S170*+R171*+A174*、
M246L+L275V+Q365S+D406H、
I9M+G184K+N195F+Q365S、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
R127N+M246L+L275V+Q365S、
R171H+M246L+L275V+Q365S、
R127H+M246I+Q365C+V481A、
R127N+M246L+L275V+Q365S、
Y267F+V291A+F328L+Q365C、
I9M+A186E+N195F+Q365S、
E86L+R171L+N306R+Q365S、
V264I+Y267F+F328L+Q365S、
I9M+N195F+V291A+Q365S、
R127L+L235I+M246I+Q365C、
Y267F+V291A+F328L+Q365S、
V264I+Y267F+F328L+Q365K、
Q11H+V264I+A265G+Q365C、
V264I+Y267F+V291A+F328L+Q365S、
V264I+A265G+V291A+F328L+Q365S、
R127N+M246I+A265G+Y267H+Q365S、
E130I+T134A+R181N+N195F+Q365S、
R127N+M246L+L275V+N306R+Q365S、
I9M+N195F+V206L+D209N+Q365S、
R116S+S132F+R181N+N195F+Q365S、
E130T+T134Y+A186K+N195F+Q365S、
A37V+V264I+Y267F+F328L+Q365C、
Q11H+V264I+Y267F+F328L+Q365C、
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S、
Q169*+R171*+Q172*+L173*+A174*、
R116Y+S132P+Q136N+N195F+Q365S、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377Y、
V264I+A265G+Y267F+F328L+Q365S、
I9M+N195F+K269Q+A274K+Q365S、
E130D+T134Y+R181H+N195F+Q365S、
R116N+S132M+Q136R+N195F+Q365S、
Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*、
R116K+S132L+Q136R+R181C+N195F+Q365S、
V264T+A265G+Y267F+V291A+F328L+Q365C、
E130N+T134S+R181N+A186K+N195F+Q365S、
E130V+T134N+R181Y+A186K+N195F+Q365S、
E130D+T134W+R181KA186E+N195F+Q365S、
R116N+S132A+Q136D+R181K+N195F+Q365S、
E130S+T134E+R181S+A186T+N195F+Q365S、
R116C+S132A+Q136S+R181A+N195F+Q365S、
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+Q365S、
R127H+R171H+M246L+L275V+N306R+Q365S、
E130L+T134N+R181W+A186T+N195F+Q365S、
R116C+S132M+Q136S+R181Q+N195F+Q365S、
R116S+Y135H+Q136G+R181T+N195F+Q365S、
R116S+S132L+Q136E+R181G+N195F+Q365S、
N16E+N195F+G337E+Q365S+P375T+D377H、
W167*+Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*、
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+A204V+Q365S、
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S、
E130K+S132T+T134Y+R181T+A186K+N195F+Q365S、
E130Y+S132T+T134S+R181E+A186D+N195F+Q365S、
I9M+R171L+N195F+M246L+K269M+W284R+Y298N+Q365S、
W167*+Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*+N175*+R176*、
H1*+G59A+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L293I+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+D209N+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195D+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+M246L+K391A、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L275I+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+G337E+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N25K+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127T+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+D209N+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127N+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+L63F+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L275V+K391A、
H1*+N19D+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
A60S+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+R171L+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+G337D+K391A、
H1*+N25M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+T81A+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N25T+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+R90N+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+R171L+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
E86L+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+R158C+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L293V+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L272I+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R158H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+G109A+K391A+N16Y+N54S+V56T+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L、
H1*+N54S+V56T+G109A+R158S+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
R127N+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+A274S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+A186E+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+R90H+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
I9M+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+Q172S+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+G184H+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+A60S+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365C+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R116N+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306H+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N302H+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+R171Y+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365E+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+A186H+N195F+V206L+K391A、
A60S+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+A60S+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+R181S+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172S+A174*+N175S+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L275V+K391A、
H1*+N54S+V56T+E86L+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N302K+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127L+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+R171Y+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+V291A+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R116F+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306R+K391A、
Y160H+R171L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+G109A+K391A+N54S+V56T+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q118N+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+T134P+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*N195F+V206L+Q299Y+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306K+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365A+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q299N+K391A、
Y160H+E212D+L275V+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306Q+K391A、
H1*+W43Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127L+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L275V+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N311R+K391A、
Y160H+E212D+M246L+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+E84Q+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306H+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R158K+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127N+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
V56T+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
N54S+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+E86L+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
Y160H+E212D+Q256H+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172N+L173K+A174*+N175S+N195F+V206L+K391A、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+S304G+N306R+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+G142H+N144H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N302Q+Q385L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306R+Q385L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+G184K+N195F+V206L+T227N+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+T227K+K269R+K391A、
H1*+N54S+V56I+G109A+R127A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q385L+K391A、
Y160H+E212D+Q256H+K259H+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+G315N+Q385L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172N+A174*+N175S+N195F+V206L+K391A+S431F、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+S304G+N306Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+R90Q+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+E266V+Q385L+K391A、
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V20+6L+Q385L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+F113A+R116D+Q118T+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Y298E+N302K+S303G+K391A，使用SEQ ID NO:1进行编号并且其中关于洗涤性能的测量，与SEQ ID NO:2的亲本α-淀粉酶相比，在标准A洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥1.5的改良的相对比活性。
在一方面，变体选自下组，该组由以下组成：
N195F+Q365C、
N195F+Q365S、
N195F+Q365M、
R127L+Q365S、
R127N+Q365S、
S170*+R171*+A174*、
V264I+A265G+Y267F、
Q169*+S170*+A174*、
V264I+V291I+Q365S、
V264I+V291T+Q365K、
V264I+F328L+Q365C、
I9M+Y160H+N195F+Q365S、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
R127H+L235I+Q365S+G435C、
I9M+R171H+N195F+Q365S、
I9M+A186H+N195F+Q365S、
I9M+R171L+N195F+Q365S、
Q169*+S170*+R171*+A174*、
M246L+L275V+Q365S+D406H、
I9M+G184K+N195F+Q365S、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
R127N+M246L+L275V+Q365S、
R171H+M246L+L275V+Q365S、
R127H+M246I+Q365C+V481A、
R127N+M246L+L275V+Q365S、
Y267F+V291A+F328L+Q365C、
V264I+Y267F+V291A+F328L+Q365S、
V264I+A265G+V291A+F328L+Q365S、
R127N+M246I+A265G+Y267H+Q365S、
E130I+T134A+R181N+N195F+Q365S、
R127N+M246L+L275V+N306R+Q365S、
I9M+N195F+V206L+D209N+Q365S、
Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*、
R116K+S132L+Q136R+R181C+N195F+Q365S、
V264T+A265G+Y267F+V291A+F328L+Q365C、
E130N+T134S+R181N+A186K+N195F+Q365S、
E130V+T134N+R181Y+A186K+N195F+Q365S、
W167*+Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*、
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+A204V+Q365S、
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S、
E130K+S132T+T134Y+R181T+A186K+N195F+Q365S、
E130Y+S132T+T134S+R181E+A186D+N195F+Q365S、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+M246L+K391A、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L275I+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+G337E+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N25K+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127T+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+D209N+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127N+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+L63F+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L275V+K391A、
H1*+N19D+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
A60S+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+R171L+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+G337D+K391A、
H1*+N25M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+T81A+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N25T+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+R90N+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+R171L+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172N+L173K+A174*+N175S+N195F+V206L+K391A、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+S304G+N306R+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+G142H+N144H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+R90Q+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+E266V+Q385L+K391A、
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V20+6L+Q385L+K391A，使用SEQ ID NO:1进行编号并且其中关于洗涤性能的测量，与SEQ ID NO:2的亲本α-淀粉酶相比，在标准A洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥2.0的改良的相对比活性。
在一方面，变体选自下组，该组由以下组成：
N195F+Q365C、
S170*+R171*+A174*、
I9M+Y160H+N195F+Q365S、
R127H+L235I+Q365S+G435C、
I9M+R171H+N195F+Q365S、
V264I+Y267F+V291A+F328L+Q365S、
Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*、
W167*+Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*、
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+A204V+Q365S、
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S、
E130K+S132T+T134Y+R181T+A186K+N195F+Q365S、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+M246L+K391A、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K，使用SEQ ID NO:1进行编号并且其中关于洗涤性能的测量，与SEQ ID NO:2的亲本α-淀粉酶相比，在标准A洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥2.5的改良的相对比活性。
在一个实施例中，所述变体具有改良的洗涤性能，使用自动机械应力测定(AMSA)评估，在与所述亲本α-淀粉酶相比时，在具有漂白剂的ADW洗涤剂中，所述增强的洗涤性能对应于至少1.1，优选至少1.2，如至少1.3，如至少1.4，如至少1.5，如至少1.6，如至少1.7，如至少1.8，如至少1.9，如至少2.0，如至少2.2，如至少2.4，如至少2.6，如至少2.8，如至少3.0，如至少3.2，如至少3.4，如至少3.6，如至少3.8，或如至少4.0的改良因子(IF)，并且其中所述亲本α-淀粉酶具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。
在一方面，所述变体选自下组，该组由以下组成：
Y295F、
M246L、
M202L、
R181S+G184S、
F113Q+R116H、
V264I+L357F、
Y267F+Q365S、
R171H、
R171Y+N306K、
R171H+Q365C、
R171L+Q365S、
R171H+N302H+Q365S、
R171L+N302H+Q365C、
R171Y++M246L+Q365S、
F328L+Q365S、
R127L、
R127N+Q365S、
R127L+Q365C、
R127L+Q365S、
R127L+M246V+Q365S、
A186D+N195F、
V264I+Q365C、
I9M+N195F+Q365C、
V264I+A265G+Y267F、
V264I+V291T+Q365K、
A60S+R171Y+Q365S、
V264I+Y267F+Q365K、
V264I+F328L+Q365C、
M246L+L275V+Q365S、
V264T+Y267F+Q365S、
V264I+F328L+Q365S、
Q11H+Y267F+Q365C、
V104A+N195F+Q365S、
V264I+V291I+Q365S、
V264I+Y267F+Q365S、
F113T+R171K+G273V、
Q169*+S170*+A174*、
I9M+R171H+N195F+Q365S、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
E86L+R171L+N306R+Q365S、
I9M+A186E+N195F+Q365S、
I9M+Y160H+N195F+Q365S、
I9M+A186H+N195F+Q365S、
R171H+M246L+L275V+Q365S、
I9M+N195F+V291A+Q365S、
I9M+G184K+N195F+Q365S、
M246L+L275V+Q365S+D406H、
Y267F+V291A+F328L+Q365S、
Y267F+V291A+F328L+Q365C、
V264I+Y267F+F328L+Q365K、
I9M+R171L+N195F+Q365S、
Q11H+V264I+A265G+Q365C、
V264T+V291A+F328L+Q365S、
V264I+Y267F+F328L+Q365S、
R127N+M246L+L275V+Q365S、
I9M+N195F+N270G+Q365S、
I9M+N195F+N270P+Q365S、
V264T+Y267L+F328L+Q365C、
V264I+A265G+V291A+Q365C、
W187M+N195F+H210K+Q365S、
V264I+Y267F+F328L+Q365C、
Q169*+S170*+R171*+A174*、
I9M+N195F+V206L+D209N+Q365S、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377N、
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S、
N195F+G337E+Q365S+P375K+D377N、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377Y、
V264I+A265G+V291A+F328L+Q365S、
I9M+N195F+K269Q+A274K+Q365S、
V264I+Y267F+Q365K+W408H+V410I、
E130D+T134Y+R181H+N195F+Q365S、
V264I+Y267F+V291A+F328L+Q365S、
E130I+T134A+R181N+N195F+Q365S、
R116Y+S132P+Q136N+N195F+Q365S、
R116N+S132M+Q136R+N195F+Q365S、
V264I+A265G+Y267F+F328L+Q365S、
Q11H+V264I+Y267F+F328L+Q365C、
Q11H+V264I+A265G+Y267F+Q365C、
E130T+T134Y+A186K+N195F+Q365S、
R116S+S132F+R181N+N195F+Q365S、
V264A+Y267F+V291T+F328L+Q365C、
N54Q+F113T+R171H+N302A+Q365C、
R127N+R171L+M246L+L275V+Q365S、
V264T+A265G+Y267L+F328L+Q365C、
V264I+Y267F+V291A+F328L+Q365C、
N16E+N195F+G337E+Q365S+P375T+D377H、
E130D+T134W+R181K+A186E+N195F+Q365S、
E130F+T134R+R181S+A186D+N195F+Q365S、
V264T+A265G+Y267F+V291A+F328L+Q365C、
E130V+T134N+R181Y+A186K+N195F+Q365S、
R116N+S132A+Q136D+R181K+N195F+Q365S、
E130L+T134N+R181W+A186T+N195F+Q365S、
V264I+A265G+Y267F+F328L+Q365S+Q395K、
N16E+N195F+G337D+Q365S+P375K+D377N、
E130N+T134C+R181Q+A186N+N195F+Q365S、
R116S+Y135H+Q136G+R181T+N195F+Q365S、
R116K+S132L+Q136R+R181C+N195F+Q365S、
V264I+A265G+Y267F+V291I+F328L+Q365S、
E130S+T134E+R181S+A186T+N195F+Q365S、
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S、
A139T+R158S+Y160D+W187M+N195F+H210N+Q365S、
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+A204V+Q365S、
E130Y+S132T+T134S+R181E+A186D+N195F+Q365S、
I9M+R171L+N195F+M246L+K269M+W284R+Y298N+Q365S、
Q98N+F113Y+R158Q+Y160F+S304Q+R320S+W439R+F473P、
H1*+N54S+V56T+G109A+R171H+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473I+G476K、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
E86L+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306R+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+R320S+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
I9M+Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+W284Y+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+F113G+R116H+D163H+Q169E+R171H+Q172K+A174S+G182T+N195F+M202L+V206L+M246L+L275V+A288V+L317V+Q319H+H324K+Q365S+K391A、
H1*+I9M+N16Y+N54S+V56T+G109A+R116Y+Q118T+Q125S+Q136E+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+R181H+N195F+M202L+V206L+R310N+R320Q+Q365S+K391A+R400S+W408H+R444T+Q445S+Q466S，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中使用AMSA评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥1.1的改良因子(IF)。
在一方面，所述变体选自下组，该组由以下组成：
Y295F、
M246L、
M202L、
R181S+G184S、
F113Q+R116H、
Y267F+Q365S、
R171H、
R171H+Q365C、
R171L+Q365S、
R171H+N302H+Q365S、
R171L+N302H+Q365C、
R171Y++M246L+Q365S、
F328L+Q365S、
I9M+N195F+Q365C、
V264I+A265G+Y267F、
V264I+V291T+Q365K、
A60S+R171Y+Q365S、
V264I+Y267F+Q365K、
V264I+F328L+Q365C、
M246L+L275V+Q365S、
V264T+Y267F+Q365S、
V264I+F328L+Q365S、
Q11H+Y267F+Q365C、
I9M+R171H+N195F+Q365S、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
E86L+R171L+N306R+Q365S、
I9M+A186E+N195F+Q365S、
I9M+Y160H+N195F+Q365S、
I9M+A186H+N195F+Q365S、
I9M+N195F+V291A+Q365S、
I9M+G184K+N195F+Q365S、
M246L+L275V+Q365S+D406H、
Y267F+V291A+F328L+Q365S、
Y267F+V291A+F328L+Q365C、
V264I+Y267F+F328L+Q365K、
I9M+R171L+N195F+Q365S、
Q11H+V264I+A265G+Q365C、
I9M+N195F+V206L+D209N+Q365S、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377N、
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S、
N195F+G337E+Q365S+P375K+D377N、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377Y、
V264I+A265G+V291A+F328L+Q365S、
I9M+N195F+K269Q+A274K+Q365S、
V264I+Y267F+Q365K+W408H+V410I、
E130D+T134Y+R181H+N195F+Q365S、
V264I+Y267F+V291A+F328L+Q365S、
E130I+T134A+R181N+N195F+Q365S、
R116Y+S132P+Q136N+N195F+Q365S、
R116N+S132M+Q136R+N195F+Q365S、
N16E+N195F+G337E+Q365S+P375T+D377H、
E130D+T134W+R181K+A186E+N195F+Q365S、
E130F+T134R+R181S+A186D+N195F+Q365S、
V264T+A265G+Y267F+V291A+F328L+Q365C、
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S、
I9M+R171L+N195F+M246L+K269M+W284R+Y298N+Q365S、
Q98N+F113Y+R158Q+Y160F+S304Q+R320S+W439R+F473P、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+R320S+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K、
H1*+I9M+N16Y+N54S+V56T+G109A+R116Y+Q118T+Q125S+Q136E+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+R181H+N195F+M202L+V206L+R310N+R320Q+Q365S+K391A+R400S+W408H+R444T+Q445S+Q466S，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中使用AMSA评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥1.5的改良因子(IF)。
在一方面，所述变体选自下组，该组由以下组成：
M202L、
R171H+Q365C、
R171L+Q365S、
R171H+N302H+Q365S、
R171L+N302H+Q365C、
I9M+N195F+Q365C、
V264I+A265G+Y267F、
E86L+R171L+N306R+Q365S、
I9M+A186E+N195F+Q365S、
I9M+Y160H+N195F+Q365S、
I9M+A186H+N195F+Q365S、
I9M+N195F+V206L+D209N+Q365S、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377N、
I9M+R171L+N195F+M246L+K269M+W284R+Y298N+Q365S、
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+R320S+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K、
H1*+I9M+N16Y+N54S+V56T+G109A+R116Y+Q118T+Q125S+Q136E+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+R181H+N195F+M202L+V206L+R310N+R320Q+Q365S+K391A+R400S+W408H+R444T+Q445S+Q466S，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中使用AMSA评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥2.0的改良因子(IF)。
在一方面，所述变体选自下组，该组由以下组成：
M202L、
R171H+Q365C、
I9M+N195F+Q365C、
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中使用AMSA评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥2.5的改良因子(IF)。
在一方面，所述变体选自下组，该组由以下组成：
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中使用AMSA评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥2.5的改良因子(IF)。
在一方面，所述变体选自下组，该组由以下组成：
V264I+A265G+Y267F、
R171L+Q365S、
Y267F+Q365S、
R127L+Q365S、
V264I+F328L+Q365C、
M246L+L275V+Q365S+D406H、
Q11H+V264I+A265G+Q365C、
R127N+R171H+M246L+L275V+Q365S、
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S、
Y267F+V291A+F328L+Q365S、
V264I+Y267F+F328L+Q365K、
R127H+L235I+Q365S+G435C、
N195F+Q365S、
I9M+N195F+Q365C、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
I9M+Y160H+N195F+Q365S、
I9M+A186E+N195F+Q365S、
I9M+R171H+N195F+Q365S、
I9M+A186H+N195F+Q365S、
I9M+G184K+N195F+Q365S、
N195F+G337E+Q365S+P375K+D377N、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377Y、
E130I+T134A+R181N+N195F+Q365S、
R116N+S132A+Q136D+R181K+N195F+Q365S、
N16E+N195F+G337E+Q365S+P375T+D377H、
E130D+T134W+R181K+A186E+N195F+Q365S、
E130Y+S132T+T134S+R181E+A186D+N195F+Q365S、
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+A204V+Q365S、
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S、
I9M+R171L+N195F+M246L+K269M+W284R+Y298N+Q365S、
Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473I+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+M246L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+G184K+N195F+V206L+T227N+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206LK+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+R320S+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K、
I9M+N16Y+N54S+V56T+G109A+R116Y+Q118T+Q125S+Q136E+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+R181H+N195F+M202L+V206L+R310N+R320Q+Q365S+K391A+R400S+W408H+R444T+Q445S+Q466S、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在40℃下使用全规模自动餐具洗涤(ADW)评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥1.1的改良因子(IF)。
在一方面，所述变体选自下组，该组由以下组成：
V264I+A265G+Y267F、
R127N+R171H+M246L+L275V+Q365S、
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S、
I9M+N195F+Q365C、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
I9M+Y160H+N195F+Q365S、
I9M+A186E+N195F+Q365S、
N195F+G337E+Q365S+P375K+D377N、
N16E+N195F+G337E+Q365S+P375T+D377H、
E130D+T134W+R181K+A186E+N195F+Q365S、
E130Y+S132T+T134S+R181E+A186D+N195F+Q365S、
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+A204V+Q365S、
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206LK+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+R320S+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K、
I9M+N16Y+N54S+V56T+G109A+R116Y+Q118T+Q125S+Q136E+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+R181H+N195F+M202L+V206L+R310N+R320Q+Q365S+K391A+R400S+W408H+R444T+Q445S+Q466S、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在40℃下使用全规模自动餐具洗涤(ADW)评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥1.5的改良因子(IF)。
在一方面，所述变体选自下组，该组由以下组成：
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206LK+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+R320S+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K、
I9M+N16Y+N54S+V56T+G109A+R116Y+Q118T+Q125S+Q136E+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+R181H+N195F+M202L+V206L+R310N+R320Q+Q365S+K391A+R400S+W408H+R444T+Q445S+Q466S、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在40℃下使用全规模自动餐具洗涤(ADW)评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥2.0的改良因子(IF)。
在一方面，所述变体选自下组，该组由以下组成：
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206LK+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+R320S+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在40℃下使用全规模自动餐具洗涤(ADW)评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥2.5的改良因子(IF)。
在一方面，所述变体选自下组，该组由以下组成：
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206LK+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+R320S+K391A、
I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在40℃下使用全规模自动餐具洗涤(ADW)评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥3.0的改良因子(IF)。
在一方面，所述变体选自下组，该组由以下组成：
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在40℃下使用全规模自动餐具洗涤(ADW)评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥3.5的改良因子(IF)。
在一方面，所述变体选自下组，该组由以下组成：
Y295F、
M246L、
N195F+Q365S、
R171H+Q365C、
V264I+A265G+Y267F、
E86L+R171L+N306R+Q365S、
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
I9M+R171L+N195F+Q365S、
N195F+G337E+Q365S+P375K+D377N、
H1*+N54S+V56T+G109A+R171H+N195F+V206L+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在45℃下使用全规模自动餐具洗涤(ADW)评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥1.1的改良因子(IF)。
在一方面，所述变体选自下组，该组由以下组成：
V264I+A265G+Y267F、
E86L+R171L+N306R+Q365S、
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
N195F+Q365S、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
I9M+R171L+N195F+Q365S、
N195F+G337E+Q365S+P375K+D377N、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在45℃下使用全规模自动餐具洗涤(ADW)评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥1.2的改良因子(IF)。
在一方面，所述变体选自下组，该组由以下组成：
N195F+Q365S、
V264I+A265G+Y267F、
E86L+R171L+N306R+Q365S、
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
I9M+R171L+N195F+Q365S、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在45℃下使用全规模自动餐具洗涤(ADW)评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥1.3的改良因子(IF)。
在一方面，所述变体选自下组，该组由以下组成：
V264I+A265G+Y267F
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S
I9M+R171L+N195F+Q365S
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在45℃下使用全规模自动餐具洗涤(ADW)评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥1.5的改良因子(IF)。
在一方面，所述变体选自下组，该组由以下组成：
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在45℃下使用全规模自动餐具洗涤(ADW)评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥2.0的改良因子(IF)。
在一方面，所述变体选自下组，该组由以下组成：
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在45℃下使用全规模自动餐具洗涤(ADW)评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥3.0的改良因子(IF)。
根据本发明的变体可以进一步包括在一个或多个(例如若干个)其他位置处的一个或多个另外的改变(与如上所述的那些相比)。
氨基酸改变可以具有微小性质，即，不会显著地影响蛋白质的折叠和/或活性的保守氨基酸取代或插入；典型地为1-30个氨基酸的小缺失；小的氨基末端或羧基末端延伸，如氨基末端的甲硫氨酸残基；多达20-25个残基的小接头肽；或小的延伸，其通过改变净电荷或另一功能(如聚组氨酸段、抗原表位或结合结构域)来促进纯化。
保守取代的实例是在下组之内：碱性氨基酸(精氨酸、赖氨酸和组氨酸)、酸性氨基酸(谷氨酸和天冬氨酸)、极性氨基酸(谷氨酰胺和天冬酰胺)、疏水性氨基酸(亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸)、芳香族氨基酸(苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸)以及小氨基酸(甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸和甲硫氨酸)。通常不会改变比活性的氨基酸取代是本领域已知的并且例如由H.Neurath和R.L.Hill,1979,于The Proteins[蛋白质],Academic Press[学术出版社],纽约中描述。常见取代为Ala/Ser、Val/Ile、Asp/Glu、Thr/Ser、Ala/Gly、Ala/Thr、Ser/Asn、Ala/Val、Ser/Gly、Tyr/Phe、Ala/Pro、Lys/Arg、Asp/Asn、Leu/Ile、Leu/Val、Ala/Glu和Asp/Gly。
可替代地，这些氨基酸改变具有这样的性质：改变多肽的物理化学特性。例如，氨基酸改变可以提高多肽的热稳定性、改变底物特异性、改变最适pH，等等。
可以根据本领域已知的程序，如定点诱变或丙氨酸扫描诱变(Cunningham和Wells,1989,Science[科学]244:1081-1085)来鉴定多肽中的必需氨基酸。在后一种技术中，在分子中的每个残基处引入单丙氨酸突变，并测试所得的突变分子的α-淀粉酶活性以鉴定对分子活性关键的氨基酸残基。还参见，Hilton等人,1996,J.Biol.Chem.[生物化学杂志]271:4699-4708。酶或其他生物学相互作用的活性位点还可以通过对结构的物理分析来确定，如通过诸如下述技术来确定：核磁共振、晶体学、电子衍射或光亲和标记，连同对推定的接触位点氨基酸进行突变。参见例如，de Vos等人,1992,Science[科学]255:306-312；Smith等人,1992,J.Mol.Biol.[分子生物学杂志]224:899-904；Wlodaver等人,1992,FEBSLett.[欧洲生化学会联合会快报]309:59-64。还可以从与相关多肽的比对来推断必需氨基酸的身份。
根据本发明的这些变体可以由400到485个氨基酸，例如410到485个、425到485个以及440到485个氨基酸组成。
亲本α-淀粉酶
亲本α-淀粉酶可以是与SEQ ID No:1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16或17的多肽中任一项具有至少60％序列同一性的多肽。
在一个实施例中，亲本与SEQ ID NO:1的多肽具有至少60％，例如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少87％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列同一性，所述多肽具有α-淀粉酶活性。在一个实施例中，亲本的氨基酸序列与SEQ ID NO:1的多肽相差不超过十个氨基酸，例如相差五个氨基酸、相差四个氨基酸、相差三个氨基酸、相差两个氨基酸以及相差一个氨基酸。
亲本优选包括SEQ ID NO:1的氨基酸序列，或由其组成。在一个实施例中，亲本包含SEQ ID NO:1的多肽，或由其组成。在另一个实施例中，亲本是SEQ ID NO:1的多肽的等位基因变体。
在一个实施例中，亲本与SEQ ID NO:2的多肽具有至少60％，例如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少87％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列同一性，所述多肽具有α-淀粉酶活性。在一个实施例中，亲本的氨基酸序列与SEQ ID NO:2的多肽相差不超过十个氨基酸，例如相差五个氨基酸、相差四个氨基酸、相差三个氨基酸、相差两个氨基酸以及相差一个氨基酸。
亲本优选包括SEQ ID NO:2的氨基酸序列，或由其组成。在一个实施例中，亲本包含SEQ ID NO:2的多肽，或由其组成。在另一个实施例中，所述亲本是SEQ ID NO:2的多肽的等位基因变体。
在一个实施例中，亲本与SEQ ID NO:3的多肽具有至少60％，例如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少87％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列同一性，所述多肽具有α-淀粉酶活性。在一个实施例中，亲本的氨基酸序列与SEQ ID NO:3的多肽相差不超过十个氨基酸，例如相差五个氨基酸、相差四个氨基酸、相差三个氨基酸、相差两个氨基酸以及相差一个氨基酸。
亲本优选包括SEQ ID NO:3的氨基酸序列，或由其组成。在一个实施例中，亲本包含SEQ ID NO:3的多肽，或由其组成。在另一个实施例中，亲本是SEQ ID NO:3的多肽的等位基因变体。
在一个实施例中，亲本与SEQ ID NO:4的多肽具有至少60％，例如至少65％、至少70％、至少80％、至少85％、至少87％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列同一性，所述多肽具有α-淀粉酶活性。在一个实施例中，亲本的氨基酸序列与SEQ ID NO:4的多肽相差不超过十个氨基酸，例如相差五个氨基酸、相差四个氨基酸、相差三个氨基酸、相差两个氨基酸以及相差一个氨基酸。
亲本优选包括SEQ ID NO:4的氨基酸序列，或由其组成。在一个实施例中，亲本包含SEQ ID NO:4的多肽，或由其组成。在另一个实施例中，亲本是SEQ ID NO:4的多肽的等位基因变体。
在一个实施例中，亲本与SEQ ID NO:5的多肽具有至少60％，例如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少87％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列同一性，所述多肽具有α-淀粉酶活性。在一个实施例中，亲本的氨基酸序列与SEQ ID NO:5的多肽相差不超过十个氨基酸，例如相差五个氨基酸、相差四个氨基酸、相差三个氨基酸、相差两个氨基酸以及相差一个氨基酸。
亲本优选包括SEQ ID NO:5的氨基酸序列，或由其组成。在一个实施例中，亲本包含SEQ ID NO:5的多肽，或由其组成。在另一个实施例中，亲本是SEQ ID NO:5的多肽的等位基因变体。
在一个实施例中，亲本与SEQ ID NO:6的多肽具有至少60％，例如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少87％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列同一性，所述多肽具有α-淀粉酶活性。在一个实施例中，亲本的氨基酸序列与SEQ ID NO:6的多肽相差不超过十个氨基酸，例如相差五个氨基酸、相差四个氨基酸、相差三个氨基酸、相差两个氨基酸以及相差一个氨基酸。
亲本优选包括SEQ ID NO:6的氨基酸序列或由其组成。在一个实施例中，亲本包含SEQ ID NO:6的多肽，或由其组成。在另一个实施例中，亲本是SEQ ID NO:6的多肽的等位基因变体。
在一个实施例中，亲本与SEQ ID NO:7的多肽具有至少60％，例如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少87％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列同一性，所述多肽具有α-淀粉酶活性。在一个实施例中，亲本的氨基酸序列与SEQ ID NO:7的多肽相差不超过十个氨基酸，例如相差五个氨基酸、相差四个氨基酸、相差三个氨基酸、相差两个氨基酸以及相差一个氨基酸。
亲本优选包括SEQ ID NO:7的氨基酸序列，或由其组成。在一个实施例中，亲本包含SEQ ID NO:7的多肽，或由其组成。在另一个实施例中，亲本是SEQ ID NO:7的多肽的等位基因变体。
在一个实施例中，亲本与SEQ ID NO:8的多肽具有至少60％，例如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少87％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列同一性，所述多肽具有α-淀粉酶活性。在一个实施例中，亲本的氨基酸序列与SEQ ID NO:8的多肽相差不超过十个氨基酸，例如相差五个氨基酸、相差四个氨基酸、相差三个氨基酸、相差两个氨基酸以及相差一个氨基酸。
亲本优选包括SEQ ID NO:8的氨基酸序列，或由其组成。在一个实施例中，亲本包含SEQ ID NO:8的多肽，或由其组成。在另一个实施例中，亲本是SEQ ID NO:8的多肽的等位基因变体。
在一个实施例中，亲本与SEQ ID NO:9的多肽具有至少60％，例如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少87％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列同一性，所述多肽具有α-淀粉酶活性。在一个实施例中，亲本的氨基酸序列与SEQ ID NO:9的多肽相差不超过十个氨基酸，例如相差五个氨基酸、相差四个氨基酸、相差三个氨基酸、相差两个氨基酸以及相差一个氨基酸。
亲本优选包括SEQ ID NO:9的氨基酸序列，或由其组成。在一个实施例中，亲本包含SEQ ID NO:9的多肽，或由其组成。在另一个实施例中，亲本是SEQ ID NO:9的多肽的等位基因变体。
在一个实施例中，亲本与SEQ ID NO:10的多肽具有至少60％，例如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少87％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列同一性，所述多肽具有α-淀粉酶活性。在一个实施例中，亲本的氨基酸序列与SEQ ID NO:10的多肽相差不超过十个氨基酸，例如相差五个氨基酸、相差四个氨基酸、相差三个氨基酸、相差两个氨基酸以及相差一个氨基酸。
亲本优选包括SEQ ID NO:10的氨基酸序列，或由其组成。在一个实施例中，亲本包含SEQ ID NO:10的多肽，或由其组成。在另一个实施例中，亲本是SEQ ID NO:10的多肽的等位基因变体。
在一个实施例中，亲本与SEQ ID NO:11的多肽具有至少60％，例如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少87％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列同一性，所述多肽具有α-淀粉酶活性。在一个实施例中，亲本的氨基酸序列与SEQ ID NO:11的多肽相差不超过十个氨基酸，例如相差五个氨基酸、相差四个氨基酸、相差三个氨基酸、相差两个氨基酸以及相差一个氨基酸。
亲本优选包括SEQ ID NO:11的氨基酸序列，或由其组成。在一个实施例中，亲本包含SEQ ID NO:11的多肽，或由其组成。在另一个实施例中，亲本是SEQ ID NO:11的多肽的等位基因变体。
在一个实施例中，亲本与SEQ ID NO:12的多肽具有至少60％，例如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少87％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列同一性，所述多肽具有α-淀粉酶活性。在一个实施例中，亲本的氨基酸序列与SEQ ID NO:12的多肽相差不超过十个氨基酸，例如相差五个氨基酸、相差四个氨基酸、相差三个氨基酸、相差两个氨基酸以及相差一个氨基酸。
亲本优选包括SEQ ID NO:12的氨基酸序列，或由其组成。在一个实施例中，亲本包含SEQ ID NO:12的多肽，或由其组成。在另一个实施例中，亲本是SEQ ID NO:12的多肽的等位基因变体。
在一个实施例中，亲本与SEQ ID NO:13的多肽具有至少60％，例如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少87％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列同一性，所述多肽具有α-淀粉酶活性。在一个实施例中，亲本的氨基酸序列与SEQ ID NO:13的多肽相差不超过十个氨基酸，例如相差五个氨基酸、相差四个氨基酸、相差三个氨基酸、相差两个氨基酸以及相差一个氨基酸。
亲本优选包括SEQ ID NO:13的氨基酸序列，或由其组成。在一个实施例中，亲本包含SEQ ID NO:13的多肽，或由其组成。在另一个实施例中，亲本是SEQ ID NO:13的多肽的等位基因变体。
在一个实施例中，亲本与SEQ ID NO:14的多肽具有至少60％，例如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少87％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列同一性，所述多肽具有α-淀粉酶活性。在一个实施例中，亲本的氨基酸序列与SEQ ID NO:14的多肽相差不超过十个氨基酸，例如相差五个氨基酸、相差四个氨基酸、相差三个氨基酸、相差两个氨基酸以及相差一个氨基酸。
亲本优选包括SEQ ID NO:14的氨基酸序列，或由其组成。在一个实施例中，亲本包含SEQ ID NO:14的多肽，或由其组成。在另一个实施例中，亲本是SEQ ID NO:14的多肽的等位基因变体。
在一个实施例中，亲本与SEQ ID NO:15的多肽具有至少60％，例如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少87％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列同一性，所述多肽具有α-淀粉酶活性。在一个实施例中，亲本的氨基酸序列与SEQ ID NO:15的多肽相差不超过十个氨基酸，例如相差五个氨基酸、相差四个氨基酸、相差三个氨基酸、相差两个氨基酸以及相差一个氨基酸。
亲本优选包括SEQ ID NO:15的氨基酸序列，或由其组成。在一个实施例中，亲本包含SEQ ID NO:15的多肽，或由其组成。在另一个实施例中，亲本是SEQ ID NO:15的多肽的等位基因变体。
在一个实施例中，亲本与SEQ ID NO:16的多肽具有至少60％，例如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少87％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列同一性，所述多肽具有α-淀粉酶活性。在一个实施例中，亲本的氨基酸序列与SEQ ID NO:16的多肽相差不超过十个氨基酸，例如相差五个氨基酸、相差四个氨基酸、相差三个氨基酸、相差两个氨基酸以及相差一个氨基酸。
亲本优选包括SEQ ID NO:16的氨基酸序列，或由其组成。在一个实施例中，亲本包含SEQ ID NO:16的多肽，或由其组成。在另一个实施例中，亲本是SEQ ID NO:16的多肽的等位基因变体。
在一个实施例中，亲本与SEQ ID NO:17的多肽具有至少60％，例如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少87％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％的序列同一性，所述多肽具有α-淀粉酶活性。在一个实施例中，亲本的氨基酸序列与SEQ ID NO:17的多肽相差不超过十个氨基酸，例如相差五个氨基酸、相差四个氨基酸、相差三个氨基酸、相差两个氨基酸以及相差一个氨基酸。
亲本优选包括SEQ ID NO:17的氨基酸序列，或由其组成。在一个实施例中，亲本包含SEQ ID NO:17的多肽，或由其组成。在另一个实施例中，亲本是SEQ ID NO:17的多肽的等位基因变体。
SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ IDNO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17的氨基酸序列或其活性片段可被用于设计核酸探针，以根据本领域熟知的方法从不同属或物种的菌株鉴定并克隆编码亲本的DNA。特别地，根据标准的DNA印迹方法，可将这些探针用于与感兴趣的属或物种的基因组或cDNA杂交，以鉴定和分离其中相应的基因。此类探针可明显短于完整序列，但是长度应为至少14个，例如至少25个、至少35个或至少70个核苷酸。优选地，核酸探针长度为至少100个核苷酸或长度为至少200个核苷酸、至少300个核苷酸、至少400个核苷酸、至少500个核苷酸、至少600个核苷酸、至少700个核苷酸、至少800个核苷酸或至少900个核苷酸。DNA和RNA探针两者都可使用。典型地将探针进行标记(例如，用32P、3H、35S、生物素、或抗生物素蛋白)，用于检测相应基因。此类探针涵盖于本发明中。
可以针对与上文所述的探针杂交并编码亲本的DNA来筛选由这类其他生物制备的基因组DNA或cDNA文库。可通过琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶电泳、或其他分离技术分离来自这类其他生物的基因组或其他DNA。可将来自文库的DNA或分离的DNA转移到并固定在用于DNA印迹中的硝化纤维素或其他适合的载体材料上。
出于本发明的目的，杂交指示多核苷酸在低至非常高严格条件下，与被标记的核苷酸探针杂交，该核苷酸探针对应于编码SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ IDNO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ IDNO:16、SEQ ID NO:17或其子序列的多核苷酸。可以使用例如X-射线片或本领域已知的任何其他检测手段来检测所述探针所杂交的分子。
在一方面，所述核酸探针是编码SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ IDNO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ IDNO:16、SEQ ID NO:17的多肽或其活性片段的多核苷酸。
对于长度为至少100个核苷酸的长探针而言，非常低至非常高严格条件定义为最佳地按照标准DNA印迹程序，在42℃在5X SSPE、0.3％SDS、200微克/ml剪切并变性的鲑精DNA中，以及对于非常低和低严格度在25％甲酰胺中，对于中和中-高严格度在35％甲酰胺中，或对于高和非常高严格度在50％甲酰胺中预杂交和杂交12至24小时。将载体材料最终使用2X SSC、0.2％SDS在45℃(非常低严格度)、50℃(低严格度)、55℃(中严格度)、60℃(中-高严格度)、65℃(高严格度)、或70℃(非常高严格度)洗涤三次，每次持续15分钟。
对于长度为约15个核苷酸至约70个核苷酸的短探针而言，严格条件定义为最佳地遵循标准DNA印迹程序，在比使用根据Bolton和McCarthy(1962,Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美国国家科学院院刊]48:1390)的计算所算出的Tm低约5℃至约10℃，在每ml 0.9M NaCl、0.09M Tris-HCl(pH 7.6)、6mM EDTA、0.5％NP-40、1X登哈特氏溶液(Denhardt’ssolution)、1mM焦磷酸钠、1mM磷酸二氢钠、0.1mM ATP、以及0.2mg的酵母RNA中预杂交和杂交12至24小时。将载体材料最终在比所计算的Tm低5℃至10℃，在6X SCC加0.1％SDS中洗涤一次(持续15分钟)并且使用6X SSC洗涤两次(每次15分钟)。
亲本可以从任何属的微生物中获得。出于本发明的目的，如文本与一种给定的来源相连使用的术语“从……中获得”意指由多核苷酸编码的亲本是由所述来源或者由其中已经插入来自所述来源的多核苷酸的细胞产生的。在一方面，亲本是胞外分泌的。
亲本可以是细菌α-淀粉酶。例如，所述亲本可以是革兰氏阳性细菌多肽，如芽孢杆菌属(Bacillus)、梭菌属(Clostridium)、肠球菌属(Enterococcus)、土芽孢杆菌属(Geobacillus)、乳杆菌属(Lactobacillus)、乳球菌属(Lactococcus)、海洋芽孢杆菌属(Oceanobacillus)、葡萄球菌属(Staphylococcus)、链球菌属(Streptococcus)、或链霉菌属(Streptomyces)α-淀粉酶，或者革兰氏阴性细菌多肽，如弯曲杆菌属(Campylobacter)、大肠杆菌(E.coli)、黄杆菌属(Flavobacterium)、梭杆菌属(Fusobacterium)、螺杆菌属(Helicobacter)、泥杆菌属(Ilyobacter)、奈瑟氏菌属(Neisseria)、假单胞菌属(Pseudomonas)、沙门氏菌属(Salmonella)、或脲原体属(Ureaplasma)α-淀粉酶。
在一方面，所述亲本是嗜碱芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、短芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、克劳氏芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、坚强芽孢杆菌、灿烂芽孢杆菌、迟缓芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、或苏云金芽孢杆菌α-淀粉酶。
在另一方面，所述亲本是似马链球菌(Streptococcus equisimilis)、酿脓链球菌(Streptococcus pyogenes)、乳房链球菌(Streptococcus uberis)、或马链球菌兽瘟亚种(Streptococcus equi subsp.Zooepidemicus)α-淀粉酶。
在另一方面，所述亲本是不产色链霉菌(Streptomyces achromogenes)、除虫链霉菌(Streptomyces avermitilis)、天蓝链霉菌(Streptomyces coelicolor)、灰色链霉菌(Streptomyces griseus)、或浅青紫链霉菌(Streptomyces lividans)α-淀粉酶。
所述亲本可以是真菌α-淀粉酶。例如，所述亲本可以是酵母α-淀粉酶，如假丝酵母属(Candida)、克鲁维酵母属(Kluyveromyces)、毕赤酵母属(Pichia)、酵母属(Saccharomyces)、裂殖酵母(Schizosaccharomyces)或耶氏酵母属(Yarrowia)α-淀粉酶。例如，所述亲本可以是丝状真菌α-淀粉酶，如枝顶孢属(Acremonium)、伞菌属(Agaricus)、链格孢属(Alternaria)、曲霉属、短梗霉属(Aureobasidium)、葡萄座腔菌属(Botryospaeria)、拟蜡菌属(Ceriporiopsis)、毛喙壳属(Chaetomidium)、金孢子菌属(Chrysosporium)、麦角菌属(Claviceps)、旋孢腔菌属(Cochliobolus)、鬼伞属(Coprinopsis)、乳白蚁属(Coptotermes)、棒囊壳属(Corynascus)、隐丛赤壳菌属(Cryphonectria)、隐球菌属(Cryptococcus)、色二孢属(Diplodia)、黑耳属(Exidia)、线黑粉酵母属(Filibasidium)、镰孢属(Fusarium)、赤霉属(Gibberella)、全鞭毛虫属(Holomastigotoides)、腐质霉属(Humicola)、耙齿菌属(Irpex)、香菇属(Lentinula)、小腔球菌属(Leptospaeria)、梨孢菌属(Magnaporthe)、黑果菌属(Melanocarpus)、亚灰树花菌属、毛霉属(Mucor)、毁丝霉属(Myceliophthora)、新美鞭菌属(Neocallimastix)、链孢菌属(Neurospora)、拟青霉属(Paecilomyces)、青霉菌属、平革菌属(Phanerochaete)、瘤胃壶菌属(Piromyces)、Poitrasia、假黑盘菌属(Pseudoplectania)、假披发虫属(Pseudotrichonympha)、根毛霉属(Rhizomucor)、裂褶菌属(Schizophyllum)、柱顶孢属(Scytalidium)、篮状菌属(Talaromyces)、嗜热子囊菌属(Thermoascus)、梭孢壳霉属(Thielavia)、弯颈霉属(Tolypocladium)、木霉属(Trichoderma)、长毛盘菌属(Trichophaea)、轮枝孢属(Verticillium)、小包脚菇属(Volvariella)、或炭角菌属(Xylaria)α-淀粉酶。
在另一方面，所述亲本是卡氏酵母(Saccharomyces carlsbergensis)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、糖化酵母(Saccharomyces diastaticus)、道格拉氏酵母(Saccharomyces douglasii)、克鲁弗酵母(Saccharomyces kluyveri)、诺地酶母(Saccharomyces norbensis)、或卵形酵母(Saccharomyces oviformis)α-淀粉酶。
在另一方面，所述亲本是解纤维枝顶孢霉(Acremonium cellulolyticus)、棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus)、泡盛曲霉(Aspergillus awamori)、臭曲霉(Aspergillusfoetidus)、烟曲霉(Aspergillus fumigatus)、日本曲霉(Aspergillus japonicus)、构巢曲霉(Aspergillus nidulans)、黑曲霉(Aspergillus niger)、米曲霉(Aspergillusoryzae)、狭边金孢子菌(Chrysosporium inops)、嗜角质金孢子菌(Chrysosporiumkeratinophilum)、拉克淖金孢子菌(Chrysosporium lucknowense)、粪状金孢子菌(Chrysosporium merdarium)、毡金孢子菌(Chrysosporium pannicola)、昆士兰金孢子菌(Chrysosporium queenslandicum)、热带金孢子菌(Chrysosporium tropicum)、带纹金孢子菌(Chrysosporium zonatum)、杆孢状镰孢(Fusarium bactridioides)、禾谷镰孢(Fusarium cerealis)、库威镰孢(Fusarium crookwellense)、黄色镰孢菌(Fusariumculmorum)、禾谷镰孢菌(Fusarium graminearum)、禾赤镰孢(Fusarium graminum)、异孢镰孢(Fusarium heterosporum)、合欢木镰孢(Fusarium negundi)、尖孢镰孢菌(Fusariumoxysporum)、多枝镰孢(Fusarium reticulatum)、粉红镰孢菌(Fusarium roseum)、接骨木镰孢(Fusarium sambucinum)、肤色镰孢(Fusarium sarcochroum)、拟枝孢镰孢菌(Fusarium sporotrichioides)、硫色镰孢菌(Fusarium sulphureum)、圆镰孢(Fusariumtorulosum)、拟丝孢镰孢菌(Fusarium trichothecioides)、镶片镰孢菌(Fusariumvenenatum)、灰腐质霉(Humicola grisea)、特异腐质霉(Humicola insolens)、疏棉状腐质霉(Humicola lanuginosa)、白囊耙齿菌(Irpex lacteus)、米黑毛霉(Mucor miehei)、嗜热毁丝霉(Myceliophthora thermophila)、粗糙脉孢菌(Neurospora crassa)、绳状青霉菌(Penicillium funiculosum)、产紫青霉(Penicillium purpurogenum)、黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium)、无色梭孢壳(Thielavia achromatica)、成层梭孢壳菌(Thielavia albomyces)、白毛梭孢壳(Thielavia albopilosa)、澳洲梭孢壳(Thielaviaaustraleinsis)、粪梭孢壳(Thielavia fimeti)、小孢梭孢壳(Thielavia microspora)、卵孢梭孢壳(Thielavia ovispora)、秘鲁梭孢壳(Thielavia peruviana)、毛梭孢壳(Thielavia setosa)、瘤孢梭孢壳(Thielavia spededonium)、耐热梭孢壳(Thielaviasubthermophila)、土生梭孢壳(Thielavia terrestris)、哈茨木霉(Trichodermaharzianum)、康宁木霉(Trichoderma koningii)、长枝木霉(Trichodermalongibrachiatum)、里氏木霉(Trichoderma reesei)、或绿色木霉(Trichoderma viride)α-淀粉酶。
在另一方面，亲本是芽孢杆菌属物种α-淀粉酶，例如，SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQID NO:15、SEQ ID NO:16、SEQ ID NO:17的α-淀粉酶。
应理解的是，对于前述物种，本发明涵盖完全和不完全阶段(perfect andimperfect states)，和其他分类学等同物(equivalent)，例如无性型，而与它们已知的物种名无关。本领域的技术人员会容易地识别适当等同物的身份。
这些物种的菌株可以容易地在许多培养物保藏中心为公众所获得，这些培养物保藏中心如美国典型培养物保藏中心(ATCC)、德国微生物和细胞培养物保藏中心(DeutscheSammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH，DSM)、荷兰菌种保藏中心(Centraalbureau Voor Schimmelcultures，CBS)以及美国农业研究服务专利培养物保藏中心北方地区研究中心(NRRL)。
可以使用上述探针，从其他来源包括从自然界(例如，土壤、堆肥、水等)分离的微生物鉴定并获得所述亲本或从天然材料(例如，土壤、堆肥、水等)直接获得DNA样品。用于从天然生境中直接分离微生物和DNA的技术是本领域熟知的。随后可以通过类似地筛选另一种微生物的基因组或cDNA文库或混合DNA样品而得到编码亲本的多核苷酸。一旦已经用一种或多种探针检测到编码亲本的多核苷酸，则可通过利用对本领域的普通技术人员来说已知的技术来分离或克隆所述多核苷酸(参见例如，Sambrook等人，1989，同上)。
亲本可以是杂合多肽，其中一个多肽的一部分融合在另一个多肽的一部分的N末端或C末端处。
亲本还可为一种融合多肽或可切割的融合多肽，其中一个多肽融合在另一个多肽的N末端或C末端处。通过将编码一个多肽的多核苷酸融合至编码另一个多肽的多核苷酸而产生融合多肽。用于产生融合多肽的技术是本领域已知的，并包括连接编码多肽的编码序列，使得它们在阅读框中，并且使所述融合多肽的表达在相同的一个或多个启动子和终止子的控制下。还可使用内含肽技术构建融合多肽，其中在翻译后产生融合物(Cooper等人,1993,EMBO J.[欧洲分子生物学学会杂志]12:2575-2583；Dawson等人,1994,Science[科学]266:776-779)。
融合多肽可进一步包含两个多肽之间的切割位点。在融合蛋白分泌之时，位点被切割，从而释放出这两种多肽。切割位点的实例包括但不限于在以下文献中披露的位点：Martin等人,2003,J.Ind.Microbiol.Biotechnol.[工业微生物生物技术杂志]3:568-576；Svetina等人,2000,J.Biotechnol.[生物技术杂志]76:245-251；Rasmussen-Wilson等人,1997,Appl.Environ.Microbiol.[应用与环境微生物学]63:3488-3493；Ward等人,1995,Biotechnology[生物技术]13:498-503；和Contreras等人,1991,Biotechnology[生物技术]9:378-381；Eaton等人,1986,Biochemistry[生物化学]25:505-512；Collins-Racie等人,1995,Biotechnology[生物技术]13:982-987；Carter等人,1989,Proteins:Structure,Function,and Genetics[蛋白质：结构、功能以及遗传学]6:240-248；以及Stevens,2003,Drug Discovery World[药物发现世界]4:35-48。
多核苷酸
本发明还涉及编码本发明的变体的多核苷酸。因此，特别地，本发明涉及编码如下变体的多核苷酸，该变体包含在对应于以下位置的一个或多个位置处的修饰：H1、H2、G7、I9、Q11、N16、N19、N25、A37、W43、W48、N54、V56、Y58、G59、A60、L63、T81、E84、E86、R90、Q98、V104、G109、A111、F113、R116、Q118、Q125、R127、E130、S132、G133、T134、Y135、Q136、A139、G142、N144、G149、R158、Y160、D163、W167、Q169、S170、R171、Q172、L173、A174、N175、R176、Y178、R181、G182、A186、W187、N195、M202、Y203、A204、V206、D209、H210、E212、T227、L235、V238、M246、Q256、K259、V264、A265、E266、Y267、K269、N270、L272、G273、A274、L275、E276、W284、M286、V291、L293、Y295、Y298、Q299、N302、S303、S304、N306、R310、N311、N314、G315、L317、Q319、R320、S323、F328、G337、A339、Q345、D357、Q365、P377、D375、Q385、K391、Q395、R400、D406、W408、V410、S431、G435、W439、R444、Q445、R458、N465、Q466、W469、F473、G476和V481，使用SEQ ID NO:1进行编号。
如本文使用的术语“进行编码的多核苷酸”是指编码具有α-淀粉酶具有α-淀粉酶活性的多肽的多核苷酸。在一方面，多肽编码序列是SEQ ID NO:18中阐述的核苷酸序列。
在一个实施例中，编码根据本发明的变体的多核苷酸与SEQ ID NO:18的多核苷酸具有至少60％，如至少65％，如至少70％，如至少75％，如至少80％，如至少85％，如至少90％，如至少95％，如至少96％，如至少97％，如至少98％，如至少99％但小于100％的序列同一性。
核酸构建体
本发明还涉及包含编码本发明的变体的、可操作地连接至一个或多个控制序列上的多核苷酸的核酸构建体，该一个或多个控制序列在与控制序列相容的条件下指导编码序列在适合的宿主细胞中表达。因此，特别地，本发明涉及核酸构建体，其包含编码如下变体的多核苷酸，该变体在对应于以下位置的一个或多个位置处包含修饰：H1、H2、G7、I9、Q11、N16、N19、N25、A37、W43、W48、N54、V56、Y58、G59、A60、L63、T81、E84、E86、R90、Q98、V104、G109、A111、F113、R116、Q118、Q125、R127、E130、S132、G133、T134、Y135、Q136、A139、G142、N144、G149、R158、Y160、D163、W167、Q169、S170、R171、Q172、L173、A174、N175、R176、Y178、R181、G182、A186、W187、N195、M202、Y203、A204、V206、D209、H210、E212、T227、L235、V238、M246、Q256、K259、V264、A265、E266、Y267、K269、N270、L272、G273、A274、L275、E276、W284、M286、V291、L293、Y295、Y298、Q299、N302、S303、S304、N306、R310、N311、N314、G315、L317、Q319、R320、S323、F328、G337、A339、Q345、D357、Q365、P377、D375、Q385、K391、Q395、R400、D406、W408、V410、S431、G435、W439、R444、Q445、R458、N465、Q466、W469、F473、G476和V481A，使用SEQ ID NO:1进行编号。
如本文使用的术语“核酸构建体”是指单链或双链的核酸分子，该核酸分子是从天然存在的基因中分离的，或以本来不存在于自然界中的方式被修饰成含有核酸的区段，或是合成的，该核酸分子包含一个或多个控制序列。
如本文使用的术语“可操作地连接”是指如下构型，其中，控制序列相对于多核苷酸的编码序列安置在适当位置处，从而使得所述控制序列指导所述编码序列的表达。
可以按多种方式来操纵多核苷酸以提供变体的表达。取决于表达载体，在多核苷酸插入载体之前对其进行操纵可能是理想的或必需的。用于利用重组DNA方法修饰多核苷酸的技术是本领域熟知的。
控制序列可以是启动子，即多核苷酸，其由宿主细胞识别用于表达所述多核苷酸。启动子包括介导所述变体的表达的转录控制序列。启动子可以是在宿主细胞中显示转录活性的任何多核苷酸，包括突变型、截短型和杂合型启动子，并且可以获得自编码与宿主细胞同源或异源的细胞外或细胞内多肽的基因。
表达载体
本发明还涉及包含编码本发明的变体的多核苷酸、启动子、以及转录和翻译终止信号的重组表达载体。因此，本发明涉及表达载体，任选为重组的，其包含编码在对应于以下位置的一个或多个位置处包含修饰的变体的多核苷酸：H1、H2、G7、I9、Q11、N16、N19、N25、A37、W43、W48、N54、V56、Y58、G59、A60、L63、T81、E84、E86、R90、Q98、V104、G109、A111、F113、R116、Q118、Q125、R127、E130、S132、G133、T134、Y135、Q136、A139、G142、N144、G149、R158、Y160、D163、W167、Q169、S170、R171、Q172、L173、A174、N175、R176、Y178、R181、G182、A186、W187、N195、M202、Y203、A204、V206、D209、H210、E212、T227、L235、V238、M246、Q256、K259、V264、A265、E266、Y267、K269、N270、L272、G273、A274、L275、E276、W284、M286、V291、L293、Y295、Y298、Q299、N302、S303、S304、N306、R310、N311、N314、G315、L317、Q319、R320、S323、F328、G337、A339、Q345、D357、Q365、P377、D375、Q385、K391、Q395、R400、D406、W408、V410、S431、G435、W439、R444、Q445、R458、N465、Q466、W469、F473、G476和V481(使用SEQ ID NO:1进行编号)、启动子以及转录和翻译终止信号。
如本文使用的术语“表达载体”是指线性或环状DNA分子，该分子包含编码变体的多核苷酸并且可操作地连接至提供用于其表达的控制序列。
各种核苷酸和控制序列可以连接在一起以产生重组表达载体，该重组表达载体可以包括一个或多个合宜的限制位点以允许在此类位点处插入或取代编码变体的多核苷酸。可替代地，可以通过将多核苷酸或包含所述多核苷酸的核酸构建体插入用于表达的适当载体中而表达所述多核苷酸。在产生表达载体时，编码序列如此位于载体中，使得编码序列与用于表达的适当控制序列可操作地连接。
重组表达载体可以是可以方便地经受重组DNA程序并且可以引起多核苷酸表达的任何载体(例如，质粒或病毒)。载体的选择将典型地取决于载体与待引入载体的宿主细胞的相容性。载体可以是直链或闭合环状质粒。
载体可以是自主复制载体，即作为染色体外实体存在的载体，其复制独立于染色体复制，例如质粒、染色体外元件、微染色体或人工染色体。载体可以含有用于确保自我复制的任何手段。可替代地，载体可以是这样的载体，当它引入宿主细胞中时整合入基因组中并与其中已整合了它的一个或多个染色体一起复制。此外，可以使用单独的载体或质粒或两个或更多个载体或质粒，其共同含有待引入宿主细胞基因组的总DNA，或可以使用转座子。
载体优选地含有允许方便地选择转化细胞、转染细胞、转导细胞等细胞的一个或多个选择性标记。选择性标记是一种基因，其产物提供了杀生物剂抗性或病毒抗性、对重金属抗性、对营养缺陷型的原养型等。
本领域技术人员将知道哪种表达载体是最适用于特异性表达系统。因此，本发明不局限于任何特异性表达载体，但是包括编码根据本发明的变体的多核苷酸的任何表达载体被视为本发明的一部分。
宿主细胞
本发明还涉及重组宿主细胞，这些重组宿主细胞包含编码本发明的变体的、可操作地连接至一个或多个控制序列的多核苷酸，该一个或多个控制序列指导本发明的变体的产生。因此，本发明涉及宿主细胞，任选地为重组宿主细胞，其包含编码在对应于以下位置的一个或多个位置处包含修饰的变体的多核苷酸：H1、H2、G7、I9、Q11、N16、N19、N25、A37、W43、W48、N54、V56、Y58、G59、A60、L63、T81、E84、E86、R90、Q98、V104、G109、A111、F113、R116、Q118、Q125、R127、E130、S132、G133、T134、Y135、Q136、A139、G142、N144、G149、R158、Y160、D163、W167、Q169、S170、R171、Q172、L173、A174、N175、R176、Y178、R181、G182、A186、W187、N195、M202、Y203、A204、V206、D209、H210、E212、T227、L235、V238、M246、Q256、K259、V264、A265、E266、Y267、K269、N270、L272、G273、A274、L275、E276、W284、M286、V291、L293、Y295、Y298、Q299、N302、S303、S304、N306、R310、N311、N314、G315、L317、Q319、R320、S323、F328、G337、A339、Q345、D357、Q365、P377、D375、Q385、K391、Q395、R400、D406、W408、V410、S431、G435、W439、R444、Q445、R458、N465、Q466、W469、F473、G476和V481(使用SEQ ID NO:1进行编号)，该多核苷酸可操作地连接至引导所述变体产生的一个或多个控制序列。
如本文使用的术语“宿主细胞”是指对于用包含本发明的多核苷酸的核酸构建体或表达载体进行的转化、转染、转导等是易感的任何细胞类型。术语“宿主细胞”涵盖由于复制期间出现的突变而与亲本细胞不相同的任何亲本细胞子代。
将包含多核苷酸的构建体或载体引入宿主细胞中，这样使得所述构建体或载体作为染色体整合体或作为自主复制的染色体外载体维持，如较早前所述。宿主细胞的选择在很大程度上将取决于编码变体的基因及其来源。
宿主细胞可以是在变体的重组产生中有用的任何细胞，例如原核细胞或真核细胞。
原核宿主细胞可以是任何革兰氏阳性或革兰氏阴性细菌。革兰氏阳性细菌包括但不限于：芽孢杆菌属、梭菌属、肠球菌属、土芽孢杆菌属、乳杆菌属、乳球菌属、大洋芽孢杆菌属、葡萄球菌属、链球菌属以及链霉菌属。革兰氏阴性细菌包括但不限于：弯曲杆菌属(Campylobacter)、大肠杆菌、黄杆菌属(Flavobacterium)、梭杆菌属(Fusobacterium)、螺杆菌属(Helicobacter)、泥杆菌属(Ilyobacter)、奈瑟氏菌属(Neisseria)、假单胞菌属(Pseudomonas)、沙门氏菌属(Salmonella)、以及脲原体属(Ureaplasma)。
变体的制备
本发明还涉及用于获得具有α-淀粉酶活性的变体的方法，所述方法包括：(a)向SEQ ID NO:2的亲本α-淀粉酶中在对应于以下位置的一个或多个位置处引入修饰：H1、H2、G7、I9、Q11、N16、N19、N25、A37、W43、W48、N54、V56、Y58、G59、A60、L63、T81、E84、E86、R90、Q98、V104、G109、A111、F113、R116、Q118、Q125、R127、E130、S132、G133、T134、Y135、Q136、A139、G142、N144、G149、R158、Y160、D163、W167、Q169、S170、R171、Q172、L173、A174、N175、R176、Y178、R181、G182、A186、W187、N195、M202、Y203、A204、V206、D209、H210、E212、T227、L235、V238、M246、Q256、K259、V264、A265、E266、Y267、K269、N270、L272、G273、A274、L275、E276、W284、M286、V291、L293、Y295、Y298、Q299、N302、S303、S304、N306、R310、N311、N314、G315、L317、Q319、R320、S323、F328、G337、A339、Q345、D357、Q365、P377、D375、Q385、K391、Q395、R400、D406、W408、V410、S431、G435、W439、R444、Q445、R458、N465、Q466、W469、F473、G476和V481，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且所述变体具有α-淀粉酶活性；以及(b)回收所述变体。
本发明还涉及用于获得具有α-淀粉酶活性的变体的方法，所述方法包括：(a)向SEQ ID NO:2的亲本α-淀粉酶中在对应于以下位置的一个或多个位置处引入修饰：H1*；H2*，G7A；I9M；Q11H；N16E；N16H；N16Y；N19D；N25K；N25M；N25T；A37V；W43Y；W48Y；N54Q；N54S；V56I；V56T；Y58F；G59A；A60S；A60T；L63F；T81A；E84Q；E86L；R90H；R90N；R90Q；Q98N；V104A；G109A；A111T；F113A；F113G；F113N；F113Q；F113T；F113Y；R116C；R116D；R116F；R116H；R116K；R116N；R116S；R116Y；Q118N；Q118T；Q125G；Q125S；R127A；R127F；R127H；R127L；R127N；R127T；E130D；E130F；E130I；E130K；E130L；E130N；E130S；E130T；E130V；S132A；S132D；S132F；S132L；S132M；S132P；S132T；G133D；T134C；T134E；T134N；T134P；T134R；T134S；T134W；T134Y；T134A；Y135H；Q136D；Q136E；Q136G；Q136N；Q136R；Q136S；A139T；G142H；N144H；G149A；R158C；R158H；R158K；R158Q；R158S；Y160D；Y160F；Y160H；Y160N；D163H；W167*；Q169*；Q169E；Q169F；S170*；S170A；R171*；R171H；R171K；R171L；R171Y；Q172*；Q172K；Q172N；Q172S；L173*；L173K；A174*；A174N；A174S；N175*；N175S；R176*；R176A；Y178F；R181*；R181A；R181C；R181E；R181G；R181H；R181K；R181N；R181Q；G182*；G182T；A186D；A186E；A186H；A186K；A186N；A186T；W187M；N195D；N195F；N195H；N195Q；N195Y；M202L；Y203L；A204V；V206L；D209N；H210K；H210N；E212D；T227K；T227N；L235I；V238A；M246I；M246L；M246T；M246V；Q256H；Q256N；K259G；K259H；V264A；V246I；V264T；A265G；E266V；Y267F；Y267H；Y267L；K269M；K269Q；K269R；N270G；N270P；L272I；G273V；A274K；A274S；L275A；L275I；L275V；E276N；W284R；W284Y；M286L；V291A；V291I；V291T；L293I；L293V；Y295F；Y298E；Y298N；Q299N；Q299Y；N302A；N302H；N302K；N302Q；S303G；S304G；S304Q；N306H；N306K；N306Q；N306R；N306Y；R310N；R310S；R310Q；N311K；N311R；N314Q；G315N；L317V；Q319H；R320K；R320Q；R320S；S323T；H323K；F328L；G337D；G337E；A339S；Q345N；Q345R；L357F；Q365A；Q365C；Q365E；Q365H；Q365K；Q365M；Q365S；P377K；P377T；D375H；D375N；D375Y；Q385L；K391A；Q395K；R400S；D406H；W408H；V410I；S431F；G435C；W439R；W439T；R444T；Q445S；R458K；N465G；Q466S；W469N；W469Y；F473I；F473P；F473S；G476K；和V481，使用SEQ ID NO:1进行编号。
可以使用本领域已知的任何诱变程序来制备这些变体，如定点诱变、合成基因构建、半合成基因构建、随机诱变、改组等。
定点诱变是在编码所述亲本的多核苷酸中在一个或多个限定位点处创建一个或多个(若干个)修饰的技术。
通过涉及使用含有所希望的修饰的寡核苷酸引物的PCR可以体外实现定点诱变。也可以通过盒式诱变进行体外定点诱变，该盒式诱变涉及由限制酶在包含编码亲本的多核苷酸的质粒中的位点处切割并且随后将含有修饰的寡核苷酸连接在多核苷酸中。通常，消化质粒和寡核苷酸的限制性酶是相同的，允许质粒和插入物的粘性末端彼此连接。参见例如，Scherer和Davis,1979,Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美国国家科学院院刊]76:4949-4955；和Barton等人,1990,Nucleic Acids Res.[核酸研究]18:7349-4966。
还可以通过本领域中已知的方法在体内实现定点诱变。参见例如，美国专利申请公布号2004/0171154；Storici等人,2001,Nature Biotechnol.[自然生物技术]19:773-776；Kren等人,1998,Nat.Med.[自然医学]4:285-290；以及Calissano和Macino,1996,Fungal Genet.Newslett.[真菌遗传学时事通讯]43:15-16。
可以在本发明中使用任何定点诱变程序。存在可用于制备变体的许多可商购的试剂盒。
合成基因构建需要设计的多核苷酸分子的体外合成以编码感兴趣的多肽。基因合成可以利用多种技术来进行，如由Tian等人(2004,Nature[自然]432:1050-1054)所述的基于多路微芯片的技术、以及其中在光可编程的微流芯片上合成并组装寡核苷酸的类似技术。
使用已知的诱变、重组和/或改组方法，随后进行相关的筛选程序可以做出单或多氨基酸取代、缺失和/或插入并对其进行测试，该相关的筛选程序如由Reidhaar-Olson和Sauer,1988,Science[科学]241:53-57；Bowie和Sauer,1989,Proc.Natl.Acad.Sci.USA[美国国家科学院院刊]86:2152-2156；WO95/17413；或WO 95/22625披露的那些。其他可以使用的方法包括易错PCR、噬菌体展示(例如Lowman等人,1991,Biochemistry[生物化学]30:10832-10837；美国专利号5,223,409；WO 92/06204)以及区域定向诱变(Derbyshire等人,1986,Gene[基因]46:145；Ner等人,1988,DNA 7:127)。
诱变/改组方法可以与高通量、自动化的筛选方法组合以检测由宿主细胞表达的克隆的、诱变的多肽的活性(Ness等人,1999,Nature Biotechnology[自然生物技术]17:893-896)。可从宿主细胞回收编码活性多肽的诱变的DNA分子，并使用本领域的标准方法快速测序。这些方法允许快速确定多肽中各个氨基酸残基的重要性。
通过组合合成基因构建、和/或定点诱变、和/或随机诱变、和/或改组的多方面来实现半合成基因构建。半合成构建典型地是利用合成的多核苷酸片段的过程结合PCR技术。因此，基因的限定区域可以从头合成，而其他区域可以使用位点特异性诱变引物来扩增，而还有其他区域可以进行易错PCR或非易错PCR扩增。然后可以对多核苷酸子序列进行改组。
产生方法
本发明还涉及产生α-淀粉酶变体的方法，这些方法包括：(a)在适合所述变体的表达的条件下培养本发明的宿主细胞；以及(b)回收所述变体。
使用本领域已知的方法在适合于产生变体的营养介质中培养宿主细胞。例如，可以通过摇瓶培养，或者在一种适合的培养基中并在允许所述多肽表达和/或分离的条件下在实验室或工业发酵罐中进行小规模或大规模发酵(包括连续发酵、分批发酵、分批给料发酵或固态发酵)来培养所述细胞。使用本领域中已知的程序，培养发生在包含碳和氮来源及无机盐的适合的营养培养基中。适合的培养基可从商业供应商获得或可以根据公开的组成(例如，在美国典型培养物保藏中心(American Type Culture Collection)的目录中)制备。如果变体被分泌到营养介质中，则变体可以直接从培养基中回收。如果变体没有分泌，则它可以从细胞裂解液中回收。
可以使用本领域已知的对变体特异的方法检测所述变体。这些检测方法可包括特异性抗体的使用、酶产物的形成或酶底物的消失。例如，可以使用酶测定来确定变体的活性。
可以通过本领域已知的方法回收所述变体。例如，可以通过多种常规程序从营养介质中回收变体，这些常规程序包括但不限于收集、离心、过滤、提取、喷雾干燥、蒸发或沉淀。
可以通过本领域中已知的多种程序来纯化变体以获得基本上纯的变体，这些程序包括但不限于色谱法(例如，离子交换色谱、亲和色谱、疏水作用色谱、色谱聚焦、以及尺寸排阻色谱)、电泳程序(例如，制备型等电点聚焦)、差别溶解度(例如，硫酸铵沉淀)、SDS-PAGE或萃取(参见例如，Protein Purification[蛋白质纯化],J.-C.Janson和Lars Ryden编辑,VCH Publishers[VCH出版社],纽约,1989)。
可替代地，没有回收变体，而是将表达变体的本发明的宿主细胞用作变体的来源。
发酵液配制品或细胞组合物
本发明还涉及包含本发明的多肽的发酵液配制品或细胞组合物。因此，在一个实施例中，发酵液配制品或细胞组合物包含编码如下变体的多核苷酸，该变体在对应于如下位置的一个或多个位置处包含修饰：H1、H2、G7、I9、Q11、N16、N19、N25、A37、W43、W48、N54、V56、Y58、G59、A60、L63、T81、E84、E86、R90、Q98、V104、G109、A111、F113、R116、Q118、Q125、R127、E130、S132、G133、T134、Y135、Q136、A139、G142、N144、G149、R158、Y160、D163、W167、Q169、S170、R171、Q172、L173、A174、N175、R176、Y178、R181、G182、A186、W187、N195、M202、Y203、A204、V206、D209、H210、E212、T227、L235、V238、M246、Q256、K259、V264、A265、E266、Y267、K269、N270、L272、G273、A274、L275、E276、W284、M286、V291、L293、Y295、Y298、Q299、N302、S303、S304、N306、R310、N311、N314、G315、L317、Q319、R320、S323、F328、G337、A339、Q345、D357、Q365、P377、D375、Q385、K391、Q395、R400、D406、W408、V410、S431、G435、W439、R444、Q445、R458、N465、Q466、W469、F473、G476和V481，并且其中这些位置对应于SEQ IDNO:2中阐述的氨基酸序列中的氨基酸位置；编码如下变体的核酸构建体，该变体在对应于如下位置的一个或多个位置处包含修饰：H1、H2、G7、I9、Q11、N16、N19、N25、A37、W43、W48、N54、V56、Y58、G59、A60、L63、T81、E84、E86、R90、Q98、V104、G109、A111、F113、R116、Q118、Q125、R127、E130、S132、G133、T134、Y135、Q136、A139、G142、N144、G149、R158、Y160、D163、W167、Q169、S170、R171、Q172、L173、A174、N175、R176、Y178、R181、G182、A186、W187、N195、M202、Y203、A204、V206、D209、H210、E212、T227、L235、V238、M246、Q256、K259、V264、A265、E266、Y267、K269、N270、L272、G273、A274、L275、E276、W284、M286、V291、L293、Y295、Y298、Q299、N302、S303、S304、N306、R310、N311、N314、G315、L317、Q319、R320、S323、F328、G337、A339、Q345、D357、Q365、P377、D375、Q385、K391、Q395、R400、D406、W408、V410、S431、G435、W439、R444、Q445、R458、N465、Q466、W469、F473、G476和V481，并且其中这些位置对应于SEQID NO:2中阐述的氨基酸序列中的氨基酸位置；或编码如下变体的表达载体，该变体在对应于如下位置的一个或多个位置处包含修饰：H1、H2、G7、I9、Q11、N16、N19、N25、A37、W43、W48、N54、V56、Y58、G59、A60、L63、T81、E84、E86、R90、Q98、V104、G109、A111、F113、R116、Q118、Q125、R127、E130、S132、G133、T134、Y135、Q136、A139、G142、N144、G149、R158、Y160、D163、W167、Q169、S170、R171、Q172、L173、A174、N175、R176、Y178、R181、G182、A186、W187、N195、M202、Y203、A204、V206、D209、H210、E212、T227、L235、V238、M246、Q256、K259、V264、A265、E266、Y267、K269、N270、L272、G273、A274、L275、E276、W284、M286、V291、L293、Y295、Y298、Q299、N302、S303、S304、N306、R310、N311、N314、G315、L317、Q319、R320、S323、F328、G337、A339、Q345、D357、Q365、P377、D375、Q385、K391、Q395、R400、D406、W408、V410、S431、G435、W439、R444、Q445、R458、N465、Q466、W469、F473、G476和V481，并且其中这些位置对应于SEQID NO:2中阐述的氨基酸序列中的氨基酸位置。所述发酵液产物可以进一步包括用于发酵过程的另外的成分，例如像细胞(包括，包含用来产生感兴趣的多肽的编码本发明的多肽的基因的宿主细胞)、细胞碎片、生物质、发酵培养基和/或发酵产物。在一些实施例中，组合物是含有一种或多种有机酸、杀灭的细胞和/或细胞碎片以及培养基的细胞杀灭的全培养液。
如本文使用的术语“发酵液”是指由细胞发酵产生的、不经历或经历最少的回收和/或纯化的制剂。例如，当微生物培养物在允许蛋白质合成(例如，由宿主细胞表达酶)并且将蛋白质分泌到细胞培养基中的碳限制条件下孵育生长到饱和时，产生发酵液。所述发酵液可以含有在发酵结束时得到的发酵材料的未分级的或分级的内容物。典型地，所述发酵液是未分级的并且包含用过的培养基以及例如通过离心去除微生物细胞(例如，丝状真菌细胞)之后存在的细胞碎片。在一些实施例中，发酵液含有用过的细胞培养基、胞外酶以及有活力的和/或无活力的微生物细胞。
在一个实施例中，所述发酵液配制品和细胞组合物包括第一有机酸组分(包括至少一种1-5碳的有机酸和/或其盐)以及第二有机酸组分(包括至少一种6碳或更多碳的有机酸和/或其盐)。在特定的实施例中，所述第一有机酸组分是乙酸、甲酸、丙酸、其盐，或前述两种或更多种的混合物；并且所述第二有机酸组分是苯甲酸、环己烷羧酸、4-甲基戊酸、苯乙酸、其盐，或前述两种或更多种的混合物。
在一个实施例中，所述组合物包含一种或多种有机酸，并且任选地进一步包含杀灭的细胞和/或细胞碎片。在一个实施例中，从细胞杀灭的全培养液中去除这些杀灭的细胞和/或细胞碎片，以提供不含这些组分的组合物。
这些发酵液配制品或细胞组合物可以进一步包含防腐剂和/或抗微生物(例如，抑菌)剂，包括但不限于山梨醇、氯化钠、山梨酸钾、以及本领域已知的其他试剂。
所述细胞杀灭的全培养液或组合物可以包含在发酵结束时得到的发酵材料的未分级的内容物。典型地，所述细胞杀灭的全培养液或组合物包含用过的培养基以及在微生物细胞(例如，丝状真菌细胞)生长至饱和、在碳限制条件下孵育以允许蛋白合成之后存在的细胞碎片。在一些实施例中，细胞杀灭的全培养液或组合物包含用过的细胞培养基、胞外酶和杀灭的丝状真菌细胞。在一些实施例中，可以使用本领域已知的方法来使细胞杀灭的全培养液或组合物中存在的微生物细胞透性化和/或裂解。
如本文描述的全培养液或细胞组合物典型地是液体，但是可以包括不溶性组分，如杀灭的细胞、细胞碎片、培养基组分和/或一种或多种不溶性酶。在一些实施例中，可以去除不溶性组分以提供澄清的液体组合物。
本发明的全培养液配制品和细胞组合物可以通过WO 90/15861或WO 2010/096673中所述的方法来产生。
组合物
本发明还涉及包含本发明的变体的组合物。因此，本发明涉及组合物，其包含在对应于以下位置的一个或多个位置处具有修饰的变体：H1、H2、G7、I9、Q11、N16、N19、N25、A37、W43、W48、N54、V56、Y58、G59、A60、L63、T81、E84、E86、R90、Q98、V104、G109、A111、F113、R116、Q118、Q125、R127、E130、S132、G133、T134、Y135、Q136、A139、G142、N144、G149、R158、Y160、D163、W167、Q169、S170、R171、Q172、L173、A174、N175、R176、Y178、R181、G182、A186、W187、N195、M202、Y203、A204、V206、D209、H210、E212、T227、L235、V238、M246、Q256、K259、V264、A265、E266、Y267、K269、N270、L272、G273、A274、L275、E276、W284、M286、V291、L293、Y295、Y298、Q299、N302、S303、S304、N306、R310、N311、N314、G315、L317、Q319、R320、S323、F328、G337、A339、Q345、D357、Q365、P377、D375、Q385、K391、Q395、R400、D406、W408、V410、S431、G435、W439、R444、Q445、R458、N465、Q466、W469、F473、G476和V481，并且其中这些位置对应于SEQ ID NO:2中阐述的氨基酸序列中的氨基酸位置。
在一个实施例中，所述组合物包含如下变体，该变体包含
a)在对应于SEQ ID NO:2中阐述的氨基酸序列的位置R181、G182、D183和G184的两个或更多个位置处的缺失和/或取代，和
b)在对应于SEQ ID NO:2中阐述的氨基酸序列的以下位置的一个或多个位置处的修饰：H1、H2、G7、I9、Q11、N16、N19、N25、A37、W43、W48、N54、V56、Y58、G59、A60、L63、T81、E84、E86、R90、Q98、V104、G109、A111、F113、R116、Q118、Q125、R127、E130、S132、G133、T134、Y135、Q136、A139、G142、N144、G149、R158、Y160、D163、W167、Q169、S170、R171、Q172、L173、A174、N175、R176、Y178、R181、G182、A186、W187、N195、M202、Y203、A204、V206、D209、H210、E212、T227、L235、V238、M246、Q256、K259、V264、A265、E266、Y267、K269、N270、L272、G273、A274、L275、E276、W284、M286、V291、L293、Y295、Y298、Q299、N302、S303、S304、N306、R310、N311、N314、G315、L317、Q319、R320、S323、F328、G337、A339、Q345、D357、Q365、P377、D375、Q385、K391、Q395、R400、D406、W408、V410、S431、G435、W439、R444、Q445、R458、N465、Q466、W469、F473、G476和V481。
优选地，这些组合物富含此类变体。术语“富含”意指组合物的α-淀粉酶活性已经增加，例如，富集因子为1.1。
在一个实施例中，本发明涉及组合物，其包含与一种或多种另外的组分组合的本发明的变体。另外的组分的选择处于技术人员的能力范围内并且包括常规的成分，包括下文所阐述的示例性非限制性组分。
在一个实施例中，本发明涉及组合物，其包含选自下组的一种或多种另外的组分，该组由以下组成：一种或多种酶、氧化剂、漂白活化剂、漂白催化剂、螯合剂、填充剂、助洗剂、缓冲剂、结构剂、螯合剂、荧光增白剂、消泡剂、酶、香料、抗再沉积剂、皮肤调理剂、柔软剂、乳化剂、晶体生长抑制剂、金属护理剂、玻璃护理剂和着色剂。
在一个实施例中，本发明涉及组合物，其包含表面活性剂。
在一个实施例中，本发明涉及组合物，其中所述表面活性剂是选自下组的一种或多种表面活性剂，该组由以下组成：阴离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、非离子表面活性剂、兼性离子表面活性剂和两性表面活性剂或其任何混合物。
在一个实施例中，本发明涉及组合物，其中所述组合物是洗涤剂组合物。
在一个实施例中，所述组合物是液体洗衣或液体餐具洗涤组合物，如自动餐具洗涤(ADW)液体洗涤剂组合物，或粉末状衣物(如皂条)或粉末状餐具洗涤组合物，如ADW单位剂量洗涤剂组合物以及如手动餐具洗涤(HDW)洗涤剂组合物。
在一个实施例中，本发明涉及组合物，其中所述组合物包含一种或多种另外的酶。
所述组合物可以包含变体作为主要酶组分，例如单组分组合物。可替代地，所述组合物可包含多种酶活性，如蛋白酶、淀粉酶、磷酸脂肪酶、酯酶、脂肪酶、角质酶、纤维素酶、内切葡聚糖酶、木糖葡聚糖酶、木聚糖酶、果胶酶、半纤维素酶果胶裂解酶、黄原胶酶、过氧化物酶、角蛋白酶卤代过氧合酶、过氧化氢酶、甘露聚糖酶、乐亲酶(lechinase)、RNA酶、DNA酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、脂氧合酶、木质素酶、支链淀粉酶、鞣酸酶、戊聚糖酶、马拉纳酶、β-葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶及漆酶或其任何混合物。
所述一种或多种另外的酶可以通过例如属于以下属的微生物产生：芽孢杆菌属，例如地衣芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌；或曲霉属，例如棘孢曲霉、泡盛曲霉、臭曲霉、烟曲霉、日本曲霉、构巢曲霉、黑曲霉或米曲霉；镰孢属，例如杆孢状镰孢、禾谷镰孢、库威镰孢、大刀镰孢、禾本科镰孢、禾赤镰孢、异孢镰孢、合欢木镰孢、尖孢镰孢、多枝镰孢、粉红镰孢、接骨木镰孢、肤色镰孢、硫色镰孢、圆镰孢、拟丝孢镰孢或镶片镰孢；腐质霉属，例如特异腐质霉或疏棉状腐质霉；或木霉属，例如哈茨木霉、康宁木霉、长枝木霉、里氏木霉或绿色木霉；或本文所述的任何其他宿主细胞。
可以根据本领域中已知的方法来制备组合物，并且组合物可以处于液体或干组合物的形式。例如，组合物可以呈颗粒或微颗粒的形式。可以根据本领域中已知的方法将变体稳定化。
此类组合物包含清洁/洗涤剂组分，优选地是组分的混合物。典型地，清洁组分将以0.001wt％至99.9wt％，更典型地0.01wt％至80wt％的清洁组分的量存在于组合物中。
在另一个优选的方面，组合物包含一种或多种表面活性剂，所述一种或多种表面活性剂可为非离子的(包括半极性)和/或阴离子的和/或阳离子的和/或兼性离子的和/或两性的和/或半极性非离子的表面活性剂，和/或其混合物。表面活性剂典型地以组合物的按重量计0.1％至60％或0.5至50wt％或1至40wt％的水平存在。
在本发明的一个实施例中，可以将本发明的变体以对应于以下各项的量添加至洗涤剂组合物中：每升洗涤液体0.001-100mg的蛋白质，如0.01-100mg的蛋白质，优选是0.005-50mg的蛋白质，更优选是0.01-25mg的蛋白质，甚至更优选是0.05-10mg的蛋白质，最优选是0.05-5mg的蛋白质，并且甚至最优选是0.01-1mg的蛋白质。考虑了术语“蛋白质”在本文中应理解为包括根据本发明所述的变体。
用于在自动餐具洗涤(ADW)中使用的组合物例如可以包括按所述组合物的重量计0.0001％-50％，如0.001％-20％，如0.01％-10％，如0.05％-5％的酶蛋白。
用于在洗衣造粒中使用的组合物例如可以包括按所述组合物的重量计0.0001％-50％，如0.001％-20％，如0.01％-10％，如0.05％-5％的酶蛋白。
用于在洗衣液中使用的组合物例如可以包括按所述组合物的重量计0.0001％-10％，如0.001％-7％，如0.1％-5％的酶蛋白。
可以使用常规稳定剂稳定本发明的这些变体以及另外的活性组分，如另外的酶，这些常规稳定剂例如是多元醇(如丙二醇或甘油)、糖或糖醇、乳酸、硼酸或硼酸衍生物(例如芳香族硼酸酯)，或苯基硼酸衍生物(如4-甲酰苯基硼酸)，并且可以如在例如WO 92/19709和WO 92/19708中所述配制所述组合物。
在某些市场中，不同洗涤条件并且就其本身而言，使用不同类型的洗涤剂。这披露于例如EP 1 025 240中。例如，在亚洲(日本)使用低的洗涤剂浓度体系，而美国使用中等洗涤剂浓度体系，并且欧洲使用高的洗涤剂浓度体系。
低的洗涤剂浓度体系包含以下洗涤剂，其中在洗涤水中存在少于约800ppm的洗涤剂组分。日本洗涤剂典型地被认为是低的洗涤剂浓度体系，因为它们具有存在于洗涤水中的大约667ppm的洗涤剂组分。
中等洗涤剂浓度体系包含以下洗涤剂，其中在洗涤水中存在约800ppm与约2000ppm之间的洗涤剂组分。北美洗涤剂通常被认为是中等洗涤剂浓度体系，因为它们具有存在于洗涤水中的大约975ppm的洗涤剂组分。
高的洗涤剂浓度体系包含以下洗涤剂，其中在洗涤水中存在多于约2000ppm的洗涤剂组分。欧洲洗涤剂通常被认为是高的洗涤剂浓度体系，因为在洗涤水中它们具有大约4500-5000ppm的洗涤剂组分。
拉丁美洲洗涤剂通常是高泡沫磷酸盐助洗剂洗涤剂并且在拉丁美洲使用的洗涤剂的范围可以落入中等和高的洗涤剂浓度两者中，因为在洗涤水中它们的洗涤剂组分的范围是从1500ppm至6000ppm。此类洗涤剂组合物都是本发明的实施例。
本发明的变体还可以掺入WO 97/07202中所披露的洗涤剂配制品中，将该专利通过引用并入本文。
在此给出了本发明的组合物的优选用途的实例。组合物的剂量以及使用组合物的其他条件可以基于本领域中已知的方法进行确定。
特别地，根据本发明所述的组合物进一步包括螯合剂。
如本文使用的术语“螯合剂”，是指如下化学品，这些化学品与某些金属离子形成分子，钝化这些离子，从而使得它们不能与其他元件反应。因此，螯合剂可以被定义为结合剂，该结合剂通过形成螯合物抑制化学活性。螯合是在配体与单一中心原子之间形成或存在的两种或更多种单独的结合。配体可以是任何有机化合物、硅酸盐或磷酸盐。在本文上下文中，术语“螯合剂(chelating agent)”包括可与金属离子(如钙和镁)形成水溶性复合物的螯合剂(chelant)、螯合剂(chelating agent)、螯合剂(chelating agent)、络合剂(complexing agent)、或螯合剂(sequestering agent)。螯合作用描述螯合配体对金属离子的亲和力相对于类似的一组非螯合配体对相同金属的亲和力的增强。螯合剂具有与金属离子特别是钙(Ca2+)离子的结合能力，并广泛应用于洗涤剂，和一般用于洗涤如洗衣或餐具洗涤的组合物。然而，螯合剂显示其自身会抑制酶活性。在本申请中，术语螯合剂(chelating agent)与“络合剂(complexing agent)”或“螯合剂(chelating agent)”或“螯合剂(chelant)”互换使用。
由于大多数α-淀粉酶具有钙敏感性，螯合剂的存在可影响酶活性。α-淀粉酶的钙敏感性可通过将给定α-淀粉酶在强螯合剂的存在下孵育，并分析该孵育对所述α-淀粉酶的活性的影响来确定。钙敏感性α-淀粉酶会在孵育过程中丧失其活性的主要部分或全部。螯合剂可以按一定量存在于所述组合物中，该量为从0.0001wt％至20wt％，优选地从0.01wt％至10wt％，更优选地从0.1wt％至5wt％。
螯合剂的非限制性实例是：EDTA、DTMPA、HEDP和柠檬酸盐。因此，在一个实施例中，所述组合物包括根据本发明的变体和如下螯合剂，如EDTA、DTMPA、HEDP或柠檬酸盐。
如本文使用的术语“EDTA”是指乙二胺四乙酸，其落在“强螯合剂”的定义下。
如本文使用的术语“DTMPA”是指二亚乙基三胺五(亚甲基膦酸)。DTMPA可以抑制碳酸根、硫酸根和磷酸根的结垢。
如本文使用的术语“HEDP”是指羟基-乙烷二膦酸，其落在“强螯合剂”的定义下。
螯合作用(chelate effect或chelating effect)描述螯合配体对金属离子的亲和力相对于类似的一组非螯合配体对相同金属的亲和力的增强。然而，螯合作用的强度可通过多种类型的测定或测量方法确定，由此根据其螯合作用(或强度)对螯合剂进行区分和排位。
在一个测定中，螯合剂可以通过它们在pH 8.0下将游离钙离子(Ca2+)的浓度从2.0mM降低至0.10mM或更少的能力来表征，例如通过使用基于由M.K.Nagarajan等人，JAOCS,第61卷，第9期(1984年9月)，第1475-1478页描述的方法的测试。
供参考，一种螯合剂与以所述螯合剂相等浓度的EDTA在pH下具有将游离钙离子(Ca2+)浓度从2.0mM降低至0.10mM相同能力，则所述螯合剂被称为强螯合剂。
本发明的组合物可以处于任何合宜的形式，例如，棒，均质片剂，具有两个或更多个层的片剂，具有一个或多个隔室的小袋，常规或压型粉末，颗粒，糊剂，凝胶，或常规、压型或浓缩液体。存在多种洗涤剂配制品形式，如层(相同或不同相)、小袋、以及用于机器给药单位的形式。
袋可以被配置为单一室或多室。它可以具有适合保存所述组合物的任何形式、形状和材料，例如在与水接触之前，不允许所述组合物从袋中释放出来。袋由水溶性膜制成，它包含了一个内部体积。可以将所述内部体积分成袋的室。优选的膜是聚合物材料，优选地形成膜或薄片的聚合物。优选的聚合物、共聚物或其衍生物选自聚丙烯酸酯、和水溶性丙烯酸酯共聚物、甲基纤维素、羧甲基纤维素、糊精钠、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、麦芽糊精、聚甲基丙烯酸酯，最优选的是聚乙烯醇共聚物以及羟丙基甲基纤维素(HPMC)。优选地，聚合物在膜例如PVA中的水平是至少约60％。优选的平均分子量将典型地是约20,000至约150,000。膜还可以是共混物组合物，该共混物组合物包括可水解降解并且水可溶的聚合物共混物，如聚乳酸和聚乙烯醇(已知在商品参考号M8630下，如由美国印第安纳州盖里(Gary,Ind.,US)的克里斯克拉夫特工业产品公司(Chris Craft In.Prod.)销售)加增塑剂，像甘油、乙二醇、丙二醇、山梨醇及其混合物。袋可以包含固体洗衣清洁组合物或部分组分和/或液体清洁组合物或由水溶性膜分开的部分组分。用于液体组分的室在构成上可以与包含固体的室不同。参考：(US 2009/0011970 A1)。
可以由水可溶的袋中或片剂的不同层中的室来将洗涤剂成分物理地彼此分开。由此可以避免组分之间的负面的储存相互作用。在洗涤溶液中，每个室的不同溶解曲线还可以引起选择的组分的延迟溶解。
非单位剂量的液体或凝胶洗涤剂可以是水性的，典型地含有按重量计至少20％并且最高达95％的水，如高达约70％的水、高达约65％的水、高达约55％的水、高达约45％的水、高达约35％的水。包括但不限于链烷醇、胺、二醇、醚以及多元醇的其他类型的液体可以被包括在水性液体或凝胶中。水性液体或凝胶洗涤剂可以含有从0-30％的有机溶剂。液体或凝胶洗涤剂可以是非水性的。
另一种组合物形式是呈以下形式：皂条，如洗衣皂条，并且可以用于手动洗涤衣物、织物和/或纺织品。如本文使用的术语“皂条”是指包括衣物条、皂条、组合条(combobar)、合成条以及洗涤剂条。条的类型通常区别在于他们包含的表面活性剂的类型，并且术语洗衣皂条包括包含来自脂肪酸的皂和/或合成皂的那些。洗衣皂条具有在室温下为固体而非液体、凝胶或粉末的物理形式。如本文使用的术语“固体”是指不随时间显著变化的物理形式，即如果固体物体(如洗衣皂条)被放置在容器里，所述固体物体不会为了填充其被放置的容器而发生改变。条是固体时典型地是条的形式但也可能是其他的固体形状如圆形或椭圆。
所述皂条还可以包含络合剂像EDTA和HEDP，香料和/或不同类型的填充剂，表面活性剂例如阴离子型合成表面活性剂，助洗剂，聚合的污垢释放剂，洗涤剂螯合剂，稳定剂，填充剂，染料，着色剂，染料转移抑制剂，烷氧基化的聚碳酸酯，抑泡剂，结构剂，粘合剂，浸出剂，漂白活化剂，粘土去污剂，抗再沉积剂，聚合分散剂，增白剂，织物柔软剂，香料和/或本领域已知的其他化合物。
皂条可以在常规的洗衣皂条制造设备中进行加工，所述设备诸如但不限于：混合器、压条机(例如两级真空压条机)、挤出机、切割机、标识压模、冷却隧道以及包装机。本发明不局限于通过任何单一方法制备皂条。可以在过程的不同阶段向皂中添加本发明的预混料。例如，可以制备包括肥皂、酶、任选地一种或多种另外的酶、蛋白酶抑制剂、和一价阳离子和有机阴离子的盐的预混料并且然后将所述混合物出条。所述酶和任选的另外的酶可以作为酶抑制剂(例如蛋白酶抑制剂)例如以固体的形式同时添加。除了混合步骤和压条步骤以外，所述过程还可以进一步包含研磨、挤出、切割、压模、冷却和/或包装的步骤。
表面活性剂
洗涤剂组合物可以包含一种或多种表面活性剂，它们可以是阴离子型和/或阳离子型和/或非离子型和/或半极性型和/或兼性离子型、或其混合物。在特定的实施例中，洗涤剂组合物包括一种或多种非离子表面活性剂和一种或多种阴离子表面活性剂的混合物。所述一种或多种表面活性剂典型地以按重量计从约0.1％至60％(如约1％至约40％、或约3％至约20％、或约3％至约10％)的水平存在。基于所希望的清洁应用来选择所述一种或多种表面活性剂，并且所述表面活性剂包括本领域中已知的任何一种或多种常规表面活性剂。可以利用本领域中已知的用于在洗涤剂中使用的任何表面活性剂。
当包括在其中时，所述洗涤剂将通常含有按重量计从约1％至约40％(如从约5％至约30％，包括从约5％至约15％、或从约20％至约25％)的阴离子型表面活性剂。阴离子表面活性剂的非限制性实例包括硫酸盐和磺酸盐，特别是直链烷基苯磺酸盐(LAS)、LAS的异构体、支链烷基苯磺酸盐(BABS)、苯基链烷磺酸盐、α-烯烃磺酸盐(AOS)、烯烃磺酸盐、链烯烃磺酸盐、链烷-2,3-二基双(硫酸盐)、羟基链烷磺酸盐以及二磺酸盐、烷基硫酸盐(AS)(如十二烷基硫酸钠(SDS))、脂肪醇硫酸盐(FAS)、伯醇硫酸盐(PAS)、醇醚硫酸盐(AES或AEOS或FES，也被称为醇乙氧基硫酸盐或脂肪醇醚硫酸盐)、仲链烷磺酸盐(SAS)、石蜡烃磺酸盐(PS)、酯磺酸盐、磺化的脂肪酸甘油酯、α-磺酸基脂肪酸甲酯(α-SFMe或SES)(包括磺酸甲酯(MES))、烷基琥珀酸或烯基琥珀酸、十二烯基/十四烯基琥珀酸(DTSA)、氨基酸的脂肪酸衍生物、磺酸基琥珀酸或皂的二酯和单酯、及其组合。
当被包括在其中时，洗涤剂将通常包含按重量计从约0％至约40％的阳离子表面活性剂。阳离子型表面活性剂的非限制性实例包括烷基二甲基乙醇季胺(ADMEAQ)、十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、二甲基二硬脂酰氯化铵(DSDMAC)、以及烷基苄基二甲基铵、烷基季铵化合物、烷氧基化季铵(AQA)化合物及其组合。
当包括在其中时，所述洗涤剂将通常含有按重量计从约0.2％至约40％(例如从约0.5％至约30％，特别是从约1％至约20％、从约3％至约10％，如从约3％至约5％、或从约8％至约12％)的非离子型表面活性剂。非离子型表面活性剂的非限制性实例包括醇乙氧基化物(AE或AEO)、醇丙氧基化物、丙氧基化的脂肪醇(PFA)、环氧基封端的聚(烷氧基化)醇、烷氧基化的脂肪酸烷基酯(如乙氧基化的和/或丙氧基化的脂肪酸烷基酯)、烷基酚乙氧基化物(APE)、壬基酚乙氧基化物(NPE)、烷基多糖苷(APG)、烷氧基化胺、脂肪酸单乙醇酰胺(FAM)、脂肪酸二乙醇酰胺(FADA)、乙氧基化的脂肪酸单乙醇酰胺(EFAM)、丙氧基化的脂肪酸单乙醇酰胺(PFAM)、多羟基烷基脂肪酸酰胺、或葡糖胺的N-酰基N-烷基衍生物(葡糖酰胺(GA)、或脂肪酸葡糖酰胺(FAGA))、连同在SPAN和TWEEN商品名下可获得的产品、及其组合。
当被包括在其中时，洗涤剂将通常包括按重量计从约0％至约40％的半极性表面活性剂。半极性型表面活性剂的非限制性实例包括氧化胺(AO)(如烷基二甲基氧化胺)、N-(椰油基烷基)-N,N-二甲基氧化胺和N-(牛油-烷基)-N,N-双(2-羟乙基)氧化胺、脂肪酸链烷醇酰胺和乙氧基化的脂肪酸链烷醇酰胺及其组合。
当包括在其中时，洗涤剂通常将含有按重量计从约0％至约40％的兼性离子表面活性剂。兼性离子型表面活性剂的非限制性实例包括甜菜碱、烷基二甲基甜菜碱、磺基甜菜碱、及其组合。
本发明的洗涤剂组合物还包括如在US 20130072416或US 20130072415中所披露的类异戊二烯表面活性剂中的一个或多个。
水溶助剂
水溶助剂是如下化合物，该化合物在水溶液中溶解疏水化合物(或相反地，在非极性环境中溶解极性物质)。典型地，水溶助剂具有亲水和疏水两种特征(所谓的两亲特性，如由表面活性剂已知的)；然而，水溶助剂的分子结构一般不利于自发性自聚集，参见例如通过Hodgdon和Kaler(2007)，Current Opinion in Colloid&Interface Science[胶体和界面科学新见]12:121-128的综述。水溶助剂并不显示临界浓度，高于该浓度就会发生如对表面活性剂而言所发现的自聚集以及脂质形成胶束、薄层或其他明确定义的中间相。相反，许多水溶助剂显示连续类型的聚集过程，在该过程中聚集物的大小随着浓度增加而增长。然而，许多水溶助剂改变了含有极性和非极性特征的物质的系统(包括水、油、表面活性剂、和聚合物的混合物)的相行为、稳定性、和胶体特性。水溶助剂常规地在从药学、个人护理、食品到技术应用的各个产业中应用。水溶助剂在洗涤剂组合物中的使用允许例如更浓的表面活性剂配制品(如在通过去除水而压缩液体洗涤剂的过程中)而不引起不希望的现象，如相分离或高粘度。
所述洗涤剂可以含有按重量计0％-5％，如约0.5％至约5％、或约3％至约5％的水溶助剂。可以利用本领域中已知的用于在洗涤剂中使用的任何水溶助剂。水溶助剂的非限制性实例包括苯磺酸钠、对甲苯磺酸钠(STS)、二甲苯磺酸钠(SXS)、枯烯磺酸钠(SCS)、伞花烃磺酸钠、氧化胺、醇和聚乙二醇醚、羟基萘甲酸钠、羟基萘磺酸钠、乙基己基硫酸钠及其组合。
助洗剂和共助洗剂
洗涤剂组合物可以含有按重量计约0-65％(如约5％至约50％)的洗涤剂助洗剂或共助洗剂、或其混合物。在餐具洗涤洗涤剂中，助洗剂的水平典型地是40％-65％，特别是50％-65％。助洗剂和/或共助洗剂可以特别是与Ca和Mg形成水溶性络合物的螯合试剂。可以利用本领域已知的用于在衣物/ADW/硬表面清洁洗涤剂中使用的任何助洗剂和/或共助洗剂。助洗剂的非限制性实例包括沸石、二磷酸盐(焦磷酸盐)、三磷酸盐如三磷酸钠(STP或STPP)、碳酸盐如碳酸钠、可溶性硅酸盐如偏硅酸钠、层状硅酸盐(例如来自赫斯特公司(Hoechst)的SKS-6)、乙醇胺如2-氨基乙-1-醇(MEA)、二乙醇胺(DEA，也称为2,2’-亚氨基二乙-1-醇)、三乙醇胺(TEA，也称为2,2’,2”-次氮基三乙-1-醇)以及(羧甲基)菊粉(CMI)、及其组合。
洗涤剂组合物还可以含有按重量计0-50％，如约5％至约30％的洗涤剂共助洗剂。洗涤剂组合物可以包括单独的共助洗剂，或与助洗剂(例如沸石助洗剂)组合。共助洗剂的非限制性实例包括聚丙烯酸酯的均聚物或其共聚物，如聚(丙烯酸)(PAA)或共聚(丙烯酸/马来酸)(PAA/PMA)。另外的非限制性实例包括柠檬酸盐、螯合剂(如氨基羧酸盐、氨基多羧酸盐和膦酸盐)、以及烷基琥珀酸或烯基琥珀酸。另外的具体实例包括2,2’,2”-次氨基三乙酸(NTA)、乙二胺四乙酸(EDTA)、二亚乙基三胺五乙酸(DTPA)、亚氨基二丁二酸(IDS)、乙二胺-N,N’-二丁二酸(EDDS)、甲基甘氨酸二乙酸(MGDA)、谷氨酸-N,N-二乙酸(GLDA)、1-羟基乙烷-1,1-二膦酸(HEDP)、乙二胺四(亚甲基膦酸)(EDTMPA)、二亚乙基三胺五(亚甲基膦酸)(DTMPA或DTPMPA)、N-(2-羟乙基)亚氨基二乙酸(EDG)、天冬氨酸-N-单乙酸(ASMA)、天冬氨酸-N,N-二乙酸(ASDA)、天冬氨酸-N-单丙酸(ASMP)、亚氨基二琥珀酸(iminodisuccinicacid)(IDA)、N-(2-磺甲基)-天冬氨酸(SMAS)、N-(2-磺乙基)-天冬氨酸(SEAS)、N-(2-磺甲基)-谷氨酸(SMGL)、N-(2-磺乙基)-谷氨酸(SEGL)、N-甲基亚氨基二乙酸(MIDA)、α-丙氨酸-N,N-二乙酸(α-ALDA)、丝氨酸-N,N-二乙酸(SEDA)、异丝氨酸-N,N-二乙酸(ISDA)、苯丙氨酸-N,N-二乙酸(PHDA)、邻氨基苯甲酸-N,N-二乙酸(ANDA)、磺胺酸-N,N-二乙酸(SLDA)、牛磺酸-N,N-二乙酸(TUDA)以及磺甲基-N,N-二乙酸(SMDA)、N-(2-羟乙基)-亚乙基二胺-N,N’,N”-三乙酸盐(HEDTA)、二乙醇甘氨酸(DEG)、二亚乙基三胺五(亚甲基膦酸)(DTPMP)、氨基三(亚甲基膦酸)(ATMP)及其组合和盐。另外的示例性助洗剂和/或共助洗剂描述于例如WO 09/102854、US 5977053中
漂白系统
洗涤剂可以含有按重量计0-30％，如约1％至约20％的漂白系统。可以利用本领域已知的用于在衣物/ADW/硬表面清洁洗涤剂中使用的任何漂白系统。合适的漂白系统组分包括漂白催化剂、光漂白剂、漂白活化剂、过氧化氢源如过碳酸钠、过硼酸钠和过氧化氢―脲(1:1)、预成型过酸及其混合物。合适的预成型过酸包括但不限于过氧羧酸及盐、二过氧二羧酸、过亚氨酸(perimidic acid)及盐、过氧单硫酸及盐(例如过硫酸氢钾(Oxone(R))及其混合物。漂白系统的非限制性实例包括与过酸形成漂白活化剂组合的基于过氧化物的漂白系统，其可以包含例如无机盐，包括碱金属盐如过硼酸盐的钠盐(通常为单或四水合物)、过碳酸盐、过硫酸盐、过磷酸盐、过硅酸盐。术语漂白活化剂本文意指与过氧化氢反应以经由过水解反应形成过酸的化合物。以此方式形成的过酸构成活化的漂白剂。本文有待使用的适合的漂白活化剂包括属于酯、酰胺、酰亚胺或酸酐类别的那些。合适的实例是四乙酰乙二胺(TAED)，酰化三嗪衍生物，特别是1,5-二乙酰基-2,4-二氧代六氢-1,3,5-三嗪(DADHT)，酰化甘脲，特别是四乙酰甘脲(TAGU))，N-丙烯酰胺，特别是N-壬酰基琥珀酰亚胺(NOSI)、4-[(3,5,5-三甲基己酰基)氧基]苯-1-磺酸钠(ISONOBS)、4-(十二酰基氧基)苯-1-磺酸盐(LOBS)、4-(癸酰基氧基)苯-1-磺酸盐、4-(癸酰基氧基)苯甲酸盐(DOBS或DOBA)、4-(壬酰氧基)苯-1-磺酸盐(NOBS)和/或披露于WO 98/17767中的那些。感兴趣的漂白活化剂的具体家族披露于EP 624154中并且该家族中特别优选的是乙酰柠檬酸三乙酯(ATC)。ATC或短链甘油三酸酯(像三醋汀)具有以下优点，它是环境友好的。此外，乙酰柠檬酸三乙酯和三醋汀在存储时在产品中具有良好的水解稳定性，并且是一种有效的漂白活化剂。最后，ATC是多功能的，因为在过水解反应中释放的柠檬酸盐可以作为助洗剂起作用。可替代地，漂白系统可以包含例如酰胺、酰亚胺或砜类型的过氧酸。漂白系统还可以包含过酸，如6-(苯二甲酰亚氨基)过己酸(PAP)。漂白系统还可以包含漂白催化剂，例如三氮杂环壬烷锰，草酸锰，联吡啶基胺Co、Cu、Mn和Fe，以及五胺乙酸钴(III)。在一些实施例中，漂白组分可以是选自下组的有机催化剂，该组由以下组成：具有下式的有机催化剂：
Figure BDA0003204290000003521
(iii)及其混合物；
其中每个R1独立地是含有从9至24个碳的支链烷基基团或含有从11至24个碳的直链烷基基团，优选地每个R1独立地是含有从9至18个碳的支链烷基基团或含有从11至18个碳的直链烷基基团，更优选地每个R1独立地选自下组，该组由以下组成：2-丙基庚基、2-丁基辛基、2-戊基壬基、2-己基癸基、十二烷基、十四烷基、十六烷基、十八烷基、异壬基、异癸基、异十三烷基以及异十五烷基。其他示例性漂白系统描述于例如WO 2007/087258、WO2007/087244、WO 2007/087259、EP 1867708(维生素K)以及WO 2007/087242中。合适的光漂白剂可以例如是磺化的酞菁锌或酞菁铝。
优选地，除了漂白催化剂，特别是有机漂白催化剂以外，漂白组分还包含过酸源。过酸源可以选自(a)预形成的过酸；(b)过碳酸盐、过硼酸盐或过硫酸盐(过氧化氢源)，优选与漂白活化剂组合；和(c)过水解酶以及酯，用于在纺织品或硬表面处理步骤中在水的存在下原位形成过酸。
聚合物
洗涤剂可以含有按重量计0-10％(如0.5％-5％、2％-5％、0.5％-2％或0.2％-1％)的聚合物。可以利用本领域中已知的用于在洗涤剂中使用的任何聚合物。所述聚合物可以作为如上文提到的共助洗剂起作用，或可以提供抗再沉积、纤维保护、污垢释放、染料转移抑制、油脂清洁和/或防沫特性。一些聚合物可以具有多于一种的上文提到的特性和/或多于一种的下文提到的基序。示例性聚合物包括(羧甲基)纤维素(CMC)、聚(乙烯醇)(PVA)、聚(乙烯吡咯烷酮)(PVP)、聚(乙二醇)或聚(环氧乙烷)(PEG)、乙氧基化的聚(亚乙基亚胺)、羧甲基菊粉(CMI)、和聚羧酸酯(如PAA、PAA/PMA、聚-天冬氨酸、和甲基丙烯酸月桂酯/丙烯酸共聚物)、疏水修饰的CMC(HM-CMC)和硅酮、对苯二甲酸和低聚乙二醇的共聚物、聚(对苯二甲酸乙二酯)和聚(氧乙烯对苯二甲酸酯)的共聚物(PET-POET)、PVP、聚(乙烯基咪唑)(PVI)、聚(乙烯吡啶-N-氧化物)(PVPO或PVPNO)以及聚乙烯吡咯烷酮-乙烯基咪唑(PVPVI)。另外的示例性聚合物包括磺化的聚羧酸酯、聚环氧乙烷和聚环氧丙烷(PEO-PPO)以及乙氧基硫酸二季铵盐。其他示例性聚合物披露于例如WO 2006/130575中。还考虑了以上提到的聚合物的盐。
织物调色剂
本发明的洗涤剂组合物还可以包括织物调色剂，如染料或颜料，当配制在洗涤剂组合物中时，当所述织物与洗涤液接触时织物调色剂可以沉积在织物上，该洗涤液包含所述洗涤剂组合物，并且因此通过可见光的吸收/反射改变所述织物的色彩。荧光增白剂发射至少一些可见光。相比之下，当织物调色剂吸收至少部分可见光谱时，它们改变表面的色彩。适合的织物调色剂包括染料和染料-粘土轭合物，并且还可以包括颜料。合适的染料包括小分子染料和聚合物染料。合适的小分子染料包括选自下组的小分子染料，该组由落入颜色索引(Colour Index)(C.I.)分类的以下染料组成：直接蓝、直接红、直接紫、酸性蓝、酸性红、酸性紫、碱性蓝、碱性紫和碱性红、或其混合物，例如描述于WO 2005/03274、WO 2005/03275、WO 2005/03276和EP 1876226中(通过引用并入本文)。洗涤剂组合物优选地包含从约0.00003wt％至约0.2wt％、从约0.00008wt％至约0.05wt％、或甚至从约0.0001wt％至约0.04wt％的织物调色剂。所述组合物可以包含从0.0001wt％至0.2wt％的织物调色剂，当所述组合物处于单位剂量袋的形式时，这可以是尤其优选的。合适的调色剂还披露于例如WO2007/087257和WO2007/087243中。
辅料
还可以利用本领域中已知的用于在衣物、ADW或硬表面清洁洗涤剂中使用的任何洗涤剂组分。其他任选的洗涤剂组分包括防腐蚀剂、防缩剂、抗污垢再沉积剂、抗皱剂、杀细菌剂、粘合剂、腐蚀抑制剂、金属护理剂、玻璃护理剂、崩解剂(disintegrant)/崩解试剂(disintegration agent)、染料、酶稳定剂(包括硼酸、硼酸盐、CMC和/或多元醇，如丙二醇)、织物调理剂(包括粘土)、填充剂/加工助剂、荧光增白剂/光学增亮剂、增泡剂、泡沫(泡)调节剂、香料、污垢悬浮剂、柔软剂、抑泡剂、晦暗抑制剂以及芯吸剂，单独或组合使用。可以利用本领域中已知的用于在衣物、ADW或硬表面清洁洗涤剂中使用的任何成分。此类成分的选择完全在技术人员的技术范围内。
分散剂
本发明的洗涤剂组合物还可以包含分散剂。特别地，粉末洗涤剂可以包含分散剂。合适的水溶性有机材料包括均聚合或共聚合的酸或其盐，其中聚羧酸包含被不多于两个碳原子彼此分开的至少两个羧基。合适的分散剂例如描述于Powdered Detergents[粉状洗涤剂],Surfactant science series[表面活性剂科学系列],第71卷,马塞尔德克尔公司中。
染料转移抑制剂
本发明的洗涤剂组合物还可以包括一种或多种染料转移抑制剂。合适的聚合物染料转移抑制剂包括但不局限于聚乙烯吡咯烷酮聚合物、多胺N-氧化物聚合物、N-乙烯吡咯烷酮和N-乙烯基咪唑的共聚物、聚乙烯噁唑烷酮和聚乙烯咪唑或其混合物。当在主题组合物中存在时，染料转移抑制剂可以按所述组合物的重量计以从约0.0001％至约10％、从约0.01％至约5％或甚至从约0.1％至约3％的水平存在。
荧光增白剂
本发明的洗涤剂组合物将优选地还包含另外的组分，这些组分可以给正在清洁的物品着色，如荧光增白剂或光学增亮剂。当存在时，所述增亮剂优选地以约0.01％至约0.5％的水平存在。在本发明的组合物中可以使用合适用于在衣物洗涤剂组合物中使用的任何荧光增白剂。最常用的荧光增白剂是属于以下类别的那些：二氨基芪-磺酸衍生物、二芳基吡唑啉衍生物和二苯基-联苯乙烯基衍生物。荧光增白剂的二氨基芪-磺酸衍生物型的实例包括以下的钠盐：4,4'-双-(2-二乙醇氨基-4-苯胺-s-三嗪-6-基氨基)芪-2,2'-二磺酸盐、4,4'-双-(2,4-二苯胺基-s-三嗪-6-基氨基)芪-2.2'-二磺酸盐、4,4'-双-(2-苯胺基-4-(N-甲基-N-2-羟基-乙基氨基)-s-三嗪-6-基氨基)芪-2,2'-二磺酸盐、4,4'-双-(4-苯基-1,2,3-三唑-2-基)芪-2,2'-二磺酸盐以及5-(2H-萘并[1,2-d][1,2,3]三唑-2-基)-2-[(E)-2-苯基乙烯基]苯磺酸钠。优选的荧光增白剂是可从汽巴–嘉基股份有限公司(Ciba-Geigy AG)(巴塞尔，瑞士)获得的天来宝(Tinopal)DMS和天来宝CBS。天来宝DMS是4,4'-双-(2-吗啉代-4-苯胺基-s-三嗪-6-基氨基)芪-2,2'-二磺酸盐的二钠盐。天来宝CBS是2,2'-双-(苯基-苯乙烯基)-二磺酸盐的二钠盐。还优选的是荧光增白剂是可商购的Parawhite KX，由印度孟买的派拉蒙矿物与化学品公司(Paramount Minerals andChemicals)供应。合适用于本发明中使用的其他荧光剂包括1-3-二芳基吡唑啉和7-氨烷基香豆素。
合适的荧光增亮剂水平包括从约0.01wt％、从0.05wt％、从约0.1wt％或甚至从约0.2wt％的较低水平至0.5wt％或甚至0.75wt％的较高水平。
污垢释放聚合物
本发明的洗涤剂组合物还可以包括一种或多种污垢释放聚合物，这些聚合物帮助从织物(如棉和基于聚酯的织物)去除污垢，特别是从基于聚酯的织物去除疏水性污垢。污垢释放聚合物可以例如是非离子型或阴离子型对苯二甲酸基的聚合物、聚乙烯基己内酰胺和相关共聚物、乙烯基接枝共聚物、聚酯聚酰胺，参见例如Powdered Detergents[粉末洗涤剂],Surfactant science series[表面活性剂科学系列],第71卷,第7章,马塞尔德克尔公司。另一种类型的污垢释放聚合物是包含核芯结构和附接至该核芯结构的多个烷氧基化基团的两亲性烷氧基化油污清洁聚合物。核心结构可以包含聚烷基亚胺结构或聚烷醇胺结构，如在WO 2009/087523中详细描述的(通过引用并入本文)。此外，随机接枝共聚物是合适的污垢释放聚合物。适合的接枝共聚物更详细地描述于WO 2007/138054、WO 2006/108856以及WO 2006/113314中(通过引用并入本文)。其他污垢释放聚合物是取代的多糖结构，尤其是取代的纤维素结构，如修饰的纤维素衍生物，如EP 1867808或WO 2003/040279中所描述的那些(将二者都通过引用并入本文)。合适的纤维素聚合物包括纤维素、纤维素醚、纤维素酯、纤维素酰胺及其混合物。合适的纤维素聚合物包括阴离子修饰的纤维素、非离子修饰的纤维素、阳离子修饰的纤维素、兼性离子修饰的纤维素及其混合物。合适的纤维素聚合物包括甲基纤维素、羧甲基纤维素、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、酯羧甲基纤维素及其混合物。
抗再沉积剂
本发明的洗涤剂组合物还可以包括一种或多种抗再沉积剂，如羧甲基纤维素(CMC)、聚乙烯醇(PVA)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、聚氧乙烯和/或聚乙二醇(PEG)、丙烯酸的均聚物、丙烯酸和马来酸的共聚物、和乙氧基化的聚乙亚胺。以上在污垢释放聚合物下所描述的基于纤维素的聚合物还可以作为抗再沉积剂起作用。
流变改性剂
本发明的洗涤剂组合物还可以包括一种或多种流变改性剂、结构剂或增稠剂，不同于降粘剂。流变改性剂选自下组，该组由以下组成：非聚合物结晶、羟基功能材料、聚合物流变改性剂，它们为液体洗涤剂组合物的水性液相基质赋予剪切稀化特征。可以通过本领域已知的方法修饰和调整洗涤剂的流变学和粘度，例如，如在EP 2169040中所示。
其他合适的辅料包括但不限于防缩剂、抗皱剂、杀细菌剂、粘合剂、载体、染料、酶稳定剂、织物柔软剂、填充剂、泡沫调节剂、水溶助剂、香料、颜料、抑泡剂、溶剂以及用于液体洗涤剂的结构剂和/或结构弹性剂。
酶
在一个实施例中，根据本发明的组合物包含一种或多种进一步的酶，如至少两种酶，更优选的至少三种、四种或五种酶。优选地，洗涤剂组合物的酶具有不同的底物特异性，例如蛋白质分解活性、淀粉分解活性、脂质分解活性、纤维素分解活性、溶半纤维活性、氧化活性、RNA酶活性、DNA酶活性或溶果胶活性。
根据本发明的组合物可以包含选自以下的一种或多种另外的酶：蛋白酶、第二淀粉酶、脂肪酶、角质酶、纤维素酶、内切葡聚糖酶、乐亲酶、木葡聚糖酶、果胶酶、果胶裂解酶、黄原胶酶、过氧化物酶、卤代过氧合酶、过氧化氢酶、甘露聚糖酶、或其任何混合物。其他合适的酶包括碳水化合物活性酶，像碳水化合物酶、阿拉伯糖酶、半乳聚糖酶、木聚糖酶；或氧化酶，例如漆酶和/或过氧化物酶。
一般而言，所选的一种或多种酶的特性应与所选的洗涤剂兼容(即，最适pH、与其他酶和非酶成分的兼容性等)，并且所述一种或多种酶应以有效量存在。
纤维素酶
合适的纤维素酶包括细菌或真菌来源的那些。包括化学修饰的突变体或蛋白质工程化的突变体。合适的纤维素酶包括来自芽孢杆菌属、假单胞菌属、腐质霉属、镰孢属、梭孢壳菌属、枝顶孢属的纤维素酶，例如披露于US 4,435,307、US 5,648,263、US 5,691,178、US5,776,757以及WO 89/09259中的由特异腐质霉、嗜热毁丝霉和尖孢镰孢产生的真菌纤维素酶。
尤其合适的纤维素酶是具有颜色护理益处的碱性或中性纤维素酶。此类纤维素酶的实例是描述于EP 0 495 257、EP 0 531 372、WO 96/11262、WO 96/29397、WO 98/08940中的纤维素酶。其他实例诸如描述于WO 94/07998、EP 0 531 315、US 5,457,046、US 5,686,593、US 5,763,254、WO 95/24471、WO 98/12307以及WO 99/001544中的那些纤维素酶变体。
其他纤维素酶是具有以下序列的内切-β-1,4-葡聚糖酶，所述序列与WO 2002/099091的SEQ ID NO:2的位置1至位置773的氨基酸序列具有至少97％同一性，或具有以下序列的家族44木葡聚糖酶，所述序列与WO 2001/062903的SEQ ID NO:2的位置40-559具有至少60％同一性。
可商购的纤维素酶包括CelluzymeTM和CarezymeTM(诺维信公司)、CarezymePremiumTM(诺维信公司)、CellucleanTM(诺维信公司)、Celluclean ClassicTM(诺维信公司)、CellusoftTM(诺维信公司)、WhitezymeTM(诺维信公司)、ClazinaseTM和Puradax HATM(杰能科国际有限公司(Genencor International Inc.))以及KAC-500(B)TM(花王株式会社(Kao Corporation))。
甘露聚糖酶
合适的甘露聚糖酶包括细菌或真菌来源的那些。包括化学或遗传修饰的突变体。甘露聚糖酶可以是家族5或26的碱性甘露聚糖酶。它可以是来自芽孢杆菌属或腐质霉属的野生型，特别是粘琼脂芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、嗜碱芽孢杆菌(B.halodurans)、克劳氏芽孢杆菌或特异腐质霉。合适的甘露聚糖酶描述于WO 1999/064619中。可商购的甘露聚糖酶是Mannaway(诺维信公司)。
过氧化物酶/氧化酶：
根据本发明的过氧化物酶是由酶分类EC 1.11.1.7囊括的由国际生物化学和分子生物学联盟命名委员会(IUBMB)规定的酶，或来源于其中的展示出过氧化物酶活性的任何片段。
合适的过氧化物酶包括植物、细菌或真菌来源的那些。包括化学修饰的突变体或蛋白质工程化的突变体。有用的过氧化物酶的实例包括来自拟鬼伞属(Coprinopsis)，例如来自灰盖拟鬼伞(C.cinerea)的过氧化物酶(EP 179,486)，及其变体，如在WO 93/24618、WO95/10602以及WO 98/15257中所描述的那些。可商购的过氧化物酶包括GuardzymeTM(诺维信公司)。
根据本发明的过氧化物酶还包括卤代过氧化物酶，如氯过氧化物酶、溴过氧化物酶以及展示出氯过氧化物酶或溴过氧化物酶活性的化合物。根据其对卤素离子的特异性将卤代过氧化物酶进行分类。氯过氧化物酶(E.C.1.11.1.10)催化从氯离子形成次氯酸盐。
在实施例中，本发明的卤代过氧化物酶是氯过氧化物酶。优选地，卤代过氧化物酶是钒卤代过氧化物酶，即含钒酸盐的卤代过氧化物酶。在本发明的优选的方法中，将含钒酸盐的卤代过氧化物酶与氯离子来源组合。
已从许多不同真菌，特别是从暗色丝孢菌(dematiaceous hyphomycete)真菌组中分离出了卤代过氧化物酶，如卡尔黑霉属(Caldariomyces)(例如，煤卡尔黑霉(C.fumago))、链格孢属、弯孢属(例如，疣枝弯孢(C.verruculosa)和不等弯孢(C.inaequalis))、内脐蠕孢属、细基格孢属以及葡萄孢属。
还已从细菌如假单胞菌属(例如吡咯假单胞菌(P.pyrrocinia))和链霉菌属(例如，金色链霉菌(S.aureofaciens))中分离出了卤代过氧化物酶。
在优选的实施例中，卤代过氧化物酶可来源于弯孢属，特别是疣枝弯孢或不等弯孢，如描述于WO 95/27046中的不等弯孢CBS 102.42；或如描述于WO 97/04102中的疣枝弯孢CBS 147.63或疣枝弯孢CBS 444.70；或来源于如描述于WO 01/79459中的Drechslerahartlebii、如描述于WO 01/79458中的盐沼小树状霉(Dendryphiella salina)、如描述于WO 01/79461中的Phaeotrichoconis crotalarie、或如描述于WO 01/79460中的Geniculosporium属物种。
根据本发明的氧化酶特别包括由酶分类EC 1.10.3.2囊括的任何漆酶或来源于其中的展示出漆酶活性的片段、或展示出类似活性的化合物，如儿茶酚氧化酶(EC1.10.3.1)、邻氨基苯酚氧化酶(EC 1.10.3.4)或胆红素氧化酶(EC 1.3.3.5)。
优选的漆酶是微生物来源的酶。这些酶可以来源于植物、细菌或真菌(包括丝状真菌和酵母)。
来自真菌的合适实例包括可来源于以下的菌株的漆酶：曲霉属，脉孢菌属(例如，粗糙脉孢菌)，柄孢壳菌属，葡萄孢属，金钱菌属(Collybia)，层孔菌属(Fomes)，香菇属，侧耳属，栓菌属(例如，长绒毛栓菌和变色栓菌)，丝核菌属(例如，立枯丝核菌(R.solani))，拟鬼伞属(例如，灰盖拟鬼伞、毛头拟鬼伞(C.comatus)、弗瑞氏拟鬼伞(C.friesii)及C.plicatilis)，小脆柄菇属(Psathyrella)(例如，白黄小脆柄菇(P.condelleana))，斑褶菇属(例如，蝶形斑褶菇(P.papilionaceus))，毁丝霉属(例如，嗜热毁丝霉)，Schytalidium(例如，S.thermophilum)，多孔菌属(例如，P.pinsitus)，射脉菌属(例如，射脉侧菌(P.radiata))(WO 92/01046)或革盖菌属(例如，毛革盖菌(C.hirsutus))(JP 2238885)。
来自细菌的合适的实例包括可来源于芽孢杆菌属的菌株的漆酶。
优选的是来源于拟鬼伞属或毁丝霉属的漆酶；特别是来源于灰盖拟鬼伞的漆酶，如披露于WO 97/08325中；或来源于嗜热毁丝霉，如披露于WO 95/33836中。
蛋白酶
合适的蛋白酶包括细菌、真菌、植物、病毒或动物来源的那些，例如植物或微生物来源。优选微生物来源。包括化学修饰的突变体或蛋白质工程化的突变体。它可以是碱性蛋白酶，如丝氨酸蛋白酶或金属蛋白酶。丝氨酸蛋白酶可以例如属于S1家族(如胰蛋白酶)或S8家族(如枯草杆菌蛋白酶)。金属蛋白酶蛋白酶可以例如是来自例如M4家族的嗜热菌蛋白酶或其他金属蛋白酶，如来自M5、M7或M8家族的那些。
术语“枯草杆菌酶”是指根据Siezen等人,Protein Engng.[蛋白质工程]4(1991)719-737和Siezen等人,Protein Science[蛋白质科学]6(1997)501-523的丝氨酸蛋白酶亚组。丝氨酸蛋白酶是特征为在活性位点具有与底物形成共价加合物的丝氨酸的蛋白酶的亚组。枯草杆菌酶可以被划分为6个亚类，即，枯草杆菌蛋白酶家族、嗜热蛋白酶家族、蛋白酶K家族、羊毛硫氨酸抗生素肽酶家族、Kexin家族和Pyrolysin家族。
枯草杆菌酶的实例是来源于芽孢杆菌属的那些，诸如US 7262042和WO 09/021867中所述的迟缓芽孢杆菌(Bacillus lentus)、嗜碱芽孢杆菌(Bacillus alkalophilus)、枯草芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)、短小芽孢杆菌(Bacilluspumilus)和吉氏芽孢杆菌(Bacillus gibsonii)，和枯草杆菌蛋白酶lentus、枯草杆菌蛋白酶Novo、枯草杆菌蛋白酶Carlsberg、地衣芽孢杆菌、枯草杆菌蛋白酶BPN’、枯草杆菌蛋白酶309、枯草杆菌蛋白酶147和枯草杆菌蛋白酶168以及例如描述于(WO 93/18140)中的蛋白酶PD138。其他有用的蛋白酶可以是描述于WO 01/016285和WO 02/016547中的那些。胰蛋白酶样蛋白酶的实例是胰蛋白酶(例如猪或牛来源的)和镰孢属蛋白酶(描述于WO 94/25583和WO 05/040372中)，以及来源于纤维单胞菌(Cellumonas)的胰凝乳蛋白酶(描述于WO 05/052161和WO 05/052146中)。
进一步优选的蛋白酶是来自迟缓芽孢杆菌DSM 5483的碱性蛋白酶(如在例如WO95/23221中所述)、及其变体(在WO 92/21760、WO 95/23221、EP 1921147以及EP 1921148中描述的)。
金属蛋白酶的实例是如描述于WO 07/044993(宝洁公司(Procter&Gamble)/杰能科国际有限公司(Genencor Int.))中的中性金属蛋白酶，如来源于解淀粉芽孢杆菌的那些。
有用的蛋白酶的实例是描述于以下中的变体：WO 89/06279、WO 92/19729、WO 96/034946、WO 98/20115、WO 98/20116、WO 99/011768、WO 01/44452、WO 03/006602、WO 04/03186、WO 04/041979、WO 07/006305、WO 11/036263、WO 11/036264，尤其是在以下位置的一个或多个处具有取代的变体：3、4、9、15、24、27、42、55、59、60、66、74、85、96、97、98、99、100、101、102、104、116、118、121、126、127、128、154、156、157、158、161、164、176、179、182、185、188、189、193、198、199、200、203、206、211、212、216、218、226、229、230、239、246、255、256、268和269，其中这些位置对应于WO 2016/001449的SEQ ID NO 1中示出的迟缓芽孢杆菌蛋白酶的位置。更优选的蛋白酶变体可以包含选自下组的一种或多种突变，该组由以下组成：S3T、V4I、S9R、S9E、A15T、S24G、S24R、K27R、N42R、S55P、G59E、G59D、N60D、N60E、V66A、N74D、S85R、A96S、S97G、S97D、S97A、S99E、S99D、S99G、S99M、S99N、S99R、S99H、S101A、V102I、V102Y、V102N、S104A、G116V、G116R、H118D、H118N、A120S、S126L、P127Q、S128A、S154D、A156E、G157D、G157P、S158E、Y161A、R164S、Q176E、N179E、S182E、Q185N、A188P、G189E、V193M、N198D、V199I、Y203W、S206G、L211Q、L211D、N212D、N212S、M216S、A226V、K229L、Q230H、Q239R、N246K、N255W、N255D、N255E、L256E、L256D、T268A和R269H。这些蛋白酶变体优选地是在WO 2016/001449的SEQ ID NO 1中示出的迟缓芽孢杆菌蛋白酶的变体、在WO2016/001449的SEQ ID NO 2中示出的解淀粉芽孢杆菌蛋白酶(BPN’)的变体。这些蛋白酶变体与WO 2016/001449的SEQ ID NO 1或SEQ ID NO 2优选地具有至少80％序列同一性。
在以下一个或多个位置(对应于WO 2004/067737的SEQ ID NO:1的位置171、173、175、179或180)处包含取代的蛋白酶变体，其中所述蛋白酶变体与WO 2004/067737的SEQID NO:1具有至少75％但小于100％的序列同一性。
在一个实施例中，蛋白酶是包含突变S99D的、SEQ ID NO:19的多肽的变体，其中位置编号对应于SEQ ID NO:20的多肽的位置，例如是与SEQ ID NO:19具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％或至少98％序列同一性的变体。在一个实施例中，蛋白酶包含具有突变S99D的、SEQ ID NO:19的多肽，或由其组成。
在一个实施例中，蛋白酶是包含突变S99E的、SEQ ID NO:19的多肽的变体，其中位置编号对应于SEQ ID NO:20的多肽的位置，例如是与SEQ ID NO:19具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％或至少98％序列同一性的变体。在一个实施例中，蛋白酶包含具有突变S99E的、SEQ ID NO:19的多肽，或由其组成。
在一个实施例中，蛋白酶是包含突变Y167A+R170S+A194P的、SEQ ID NO:19的多肽的变体，其中位置编号对应于SEQ ID NO:20的多肽的位置，例如是与SEQ ID NO:19具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％或至少98％序列同一性的变体。在一个实施例中，蛋白酶包含具有突变Y167A+R170S+A194P的、SEQ ID NO:19的多肽，或由其组成。
在一个实施例中，蛋白酶是包含突变S9E+N43R+N76D+V205I+Q206L+Y209W+S259D+N261W+L262E的、SEQ ID NO:19的多肽的变体，其中位置编号对应于SEQ ID NO:20的多肽的位置，例如是与SEQ ID NO:19具有至少80％、至少85％、至少90％或至少95％序列同一性的变体。在一个实施例中，蛋白酶包含具有突变S9E+N43R+N76D+V205I+Q206L+Y209W+S259D+N261W+L262E的、SEQ ID NO:19的多肽，或由其组成。
在一个实施例中，蛋白酶是包含突变S3T+V4I+S99D+S101R+S103A+V104I+G160S+V199M+V205I+L217D的、SEQ ID NO:19的多肽的变体，其中位置编号对应于SEQ ID NO:20的多肽的位置，例如是与SEQ ID NO:19具有至少80％、至少85％、至少90％或至少95％序列同一性的变体。在一个实施例中，蛋白酶包含具有突变S3T+V4I+S99D+S101R+S103A+V104I+G160S+V199M+V205I+L217D的、SEQ ID NO:19的多肽，或由其组成。
在一个实施例中，蛋白酶是包含突变S3T+V4I+S99D+S101E+S103A+V104I+G160S+V205I的、SEQ ID NO:19的多肽的变体，其中位置编号对应于SEQ ID NO:20的多肽的位置，例如是与SEQ ID NO:19具有至少80％、至少85％、至少90％或至少95％序列同一性的变体。在一个实施例中，蛋白酶包含具有突变S3T+V4I+S99D+S101E+S103A+V104I+G160S+V205I的、SEQ ID NO:19的多肽，或由其组成。
在一个实施例中，蛋白酶是包含突变S99D+S101E+S103A+V104I+G160S的、SEQ IDNO:19的多肽的变体，其中位置编号对应于SEQ ID NO:20的多肽的位置，例如是与SEQ IDNO:19具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少96％序列同一性的变体。在一个实施例中，蛋白酶包含具有突变S99D+S101E+S103A+V104I+G160S的、SEQ ID NO:19的多肽，或由其组成。
在一个实施例中，蛋白酶是包含突变S99D+S101E+S103A+V104I+S156D+G160S+L262E的、SEQ ID NO:19的多肽的变体，其中位置编号对应于SEQ ID NO:20的多肽的位置，例如是与SEQ ID NO:19具有至少80％、至少85％、至少90％或至少95％序列同一性的变体。在一个实施例中，蛋白酶包含具有突变S99D+S101E+S103A+V104I+S156D+G160S+L262E的、SEQ ID NO:19的多肽，或由其组成。
在一个实施例中，蛋白酶是包含突变S87N+S101G+V104N的、SEQ ID NO:19的多肽的变体，其中位置编号对应于SEQ ID NO:20的多肽的位置，例如是与SEQ ID NO:19具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％或至少98％序列同一性的变体。在一个实施例中，蛋白酶包含具有突变S87N+S101G+V104N的、SEQ ID NO:19的多肽，或由其组成。
在一个实施例中，蛋白酶包含SEQ ID NO:20的多肽，或由其组成。
在一个实施例中，蛋白酶是包含突变Y217L的、SEQ ID NO:20的多肽的变体，例如是与SEQ ID NO:20具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％或至少98％序列同一性的变体。在一个实施例中，蛋白酶包含具有突变Y217L的、SEQ ID NO:20的多肽，或由其组成。
在一个实施例中，蛋白酶是包含突变S24G+S53G+S78N+S101N+G128S+Y217Q的、SEQID NO:20的多肽的变体，例如是与SEQ ID NO:20具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少96％序列同一性的变体。在一个实施例中，蛋白酶包含具有突变S24G+S53G+S78N+S101N+G128S+Y217Q的、SEQ ID NO:20的多肽，或由其组成。
在一个实施例中，蛋白酶是包含突变S24G+S53G+S78N+S101N+G128A+Y217Q的、SEQID NO:20的多肽的变体，例如是与SEQ ID NO:20具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或至少96％序列同一性的变体。在一个实施例中，蛋白酶包含具有突变S24G+S53G+S78N+S101N+G128A+Y217Q的、SEQ ID NO:20的多肽，或由其组成。
在一个实施例中，蛋白酶包含SEQ ID NO:21的多肽，或由其组成。
在一个实施例中，蛋白酶是SEQ ID NO:21的多肽的变体，与SEQ ID NO:21具有至少80％、至少85％、至少90％或至少95％的序列同一性。蛋白酶可以是例如包含选自下组的一个或多个突变的SEQ ID NO:21的多肽的变体，该组由以下组成：S27K、N109K、S111E、S171E、S173P、G174K、S175P、F180Y、G182A、L184F、Q198E、N199K和T297P，例如，包含所述突变中的1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12个或全部。
在一个实施例中，蛋白酶是包含突变S27K+N109K+S111E+S171E+S173P+G174K+S175P+F180Y+G182A+L184F+Q198E+N199K+T297P的、SEQ ID NO:21的多肽的变体，例如是与SEQ ID NO:21具有至少80％、至少85％、至少90％或至少95％序列同一性的变体。在一个实施例中，蛋白酶包含具有突变S27K+N109K+S111E+S171E+S173P+G174K+S175P+F180Y+G182A+L184F+Q198E+N199K+T297P的、SEQ ID NO:21的多肽，或由其组成。
合适的可商购蛋白酶包括以下列商品名出售的那些：
Figure BDA0003204290000003631
DuralaseTm、DurazymTm、
Figure BDA0003204290000003632
Ultra、
Figure BDA0003204290000003633
Ultra、
Figure BDA0003204290000003634
Ultra、
Figure BDA0003204290000003641
Ultra、
Figure BDA0003204290000003642
Blaze
Figure BDA0003204290000003643
100T、Blaze
Figure BDA0003204290000003644
125T、Blaze
Figure BDA0003204290000003645
150T、
Figure BDA0003204290000003646
Figure BDA0003204290000003647
Novozymes
Figure BDA0003204290000003648
Uno和Novozymes
Figure BDA0003204290000003649
Excel(诺维信公司)，以下列商品名出售的那些：
Figure BDA00032042900000036410
Figure BDA00032042900000036411
Purafect
Figure BDA00032042900000036412
Purafect
Figure BDA00032042900000036413
Figure BDA00032042900000036414
Excellenz P1000TM、Excellenz P1250TM、
Figure BDA00032042900000036415
Preferenz P100TM、Purafect
Figure BDA00032042900000036416
Preferenz P110TM、Effectenz P1000TM、
Figure BDA00032042900000036417
Effectenz P1050TM、Purafect
Figure BDA00032042900000036418
Effectenz P2000TM、
Figure BDA00032042900000036419
和
Figure BDA00032042900000036420
(丹斯尼克公司(Danisco)/杜邦公司(DuPont))、AxapemTM(吉斯特布罗卡德斯公司(Gist-Brocases N.V.))、BLAP(在US 5352604的图29中显示的序列)及其变体(汉高公司(HenkelAG))和来自花王株式会社(Kao)的KAP(嗜碱芽孢杆菌枯草杆菌蛋白酶)。
核酸酶
合适的核酸酶包括脱氧核糖核酸酶(DNA酶)和核糖核酸酶(RNA酶)，它们是分别催化DNA或RNA主链中磷酸二酯键的水解切割从而降解DNA和RNA的任何酶。根据活性的位点有两种主要的分类。外切核酸酶从末端消化核酸。内切核酸酶作用于靶分子中间的区域。核酸酶优选为DNA酶，其优选可得自微生物，优选真菌或细菌。特别地，可获自芽孢杆菌属的物种的DNA酶是优选的；特别地，可获自食物芽孢杆菌(Bacillus cibi)、枯草芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌的DNA酶是优选的。这些DNA酶的实例在WO 2011/098579、WO 2014/087011和WO2017/060475中描述。还特别优选的是可获自曲霉属(Aspergillus)物种的DNA酶；特别是可获自米曲霉(Aspergillus oryzae)的DNA酶，如WO 2015/155350中所述的DNA酶。所述一种或多种洗涤剂酶可以通过添加包含一种或多种酶的单独的添加剂，或通过添加包括所有这些酶的组合添加剂而被包括于洗涤剂组合物中。本发明的洗涤剂添加剂，即单独的或组合的添加剂，可以配制成例如颗粒、液体、浆液等，优选的洗涤剂添加剂剂型为颗粒，特别是如上所述的无粉尘颗粒；液体，特别是稳定化液体；或者浆液。
脂肪酶和角质酶：
合适的脂肪酶和角质酶包括细菌或真菌来源的那些。包括化学修饰的突变体酶或蛋白质工程化的突变体酶。实例包括来自嗜热真菌属的脂肪酶，例如，如描述于EP 258068和EP 305216中的来自疏绵状嗜热丝孢菌(早先命名为疏棉状腐质霉)；来自腐质霉属的角质酶，例如特异腐质霉(WO 96/13580)；来自假单胞菌属的菌株的脂肪酶(这些中的一些现在改名为伯克霍尔德菌属)，例如产碱假单胞菌或类产碱假单胞菌(EP 218272)、洋葱假单胞菌(EP 331376)、假单胞菌属菌株SD705(WO 95/06720和WO 96/27002)、威斯康星假单胞菌(P.wisconsinensis)(WO 96/12012)；GDSL-型链霉菌属脂肪酶(WO 10/065455)；来自稻瘟病菌的角质酶(WO 10/107560)；来自门多萨假单胞菌的角质酶(US 5,389,536)；来自褐色嗜热裂孢菌(Thermobifida fusca)的脂肪酶(WO 11/084412)；嗜热脂肪土芽孢杆菌脂肪酶(WO 11/084417)；来自枯草芽孢杆菌的脂肪酶(WO 11/084599)；以及来自灰色链霉菌(WO11/150157)和始旋链霉菌(S.pristinaespiralis)的脂肪酶(WO 12/137147)。
其他实例是脂肪酶变体，诸如EP 407225、WO 92/05249、WO 94/01541、WO 94/25578、WO 95/14783、WO 95/30744、WO 95/35381、WO 95/22615、WO 96/00292、WO 97/04079、WO 97/07202、WO 00/34450、WO 00/60063、WO 01/92502、WO 07/87508以及WO 09/109500中所述的那些。
优选的商业化脂肪酶产品包括LipolaseTM、LipexTM；LipolexTM和LipocleanTM(诺维信公司)，Lumafast(来自杰能科公司(Genencor))以及Lipomax(来自吉斯特布罗卡德斯公司(Gist-Brocades))。
仍其他实例是有时称为酰基转移酶或过水解酶的脂肪酶，例如与南极假丝酵母(Candida antarctica)脂肪酶A具有同源性的酰基转移酶(WO 10/111143)、来自耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis)的酰基转移酶(WO 05/56782)、来自CE 7家族的过水解酶(WO 09/67279)以及耻垢分枝杆菌过水解酶的变体(特别是来自亨斯迈纺织品染化有限公司(Huntsman Textile Effects Pte Ltd)的商业产品Gentle Power Bleach中所用的S54V变体)(WO 10/100028)。
淀粉酶：
能与本发明的组合物一起使用的合适的淀粉酶可以是α淀粉酶或葡糖淀粉酶并且可以是细菌来源的或真菌来源的。包括化学修饰的突变体或蛋白质工程化的突变体。淀粉酶包括例如从芽孢杆菌属、例如地衣芽孢杆菌的特定菌株(更详细地描述于GB 1,296,839中)获得的α-淀粉酶。
适合的淀粉酶包括具有WO 95/10603中的SEQ ID NO:2的淀粉酶或其与SEQ IDNO:3具有90％序列同一性的变体。优选的变体描述于WO 94/02597、WO 94/18314、WO 97/43424中以及WO 99/019467的SEQ ID NO 4中，如在以下位置的一个或多个处具有取代的变体：15、23、105、106、124、128、133、154、156、178、179、181、188、190、197、201、202、207、208、209、211、243、264、304、305、391、408和444。
不同的合适的淀粉酶包括具有WO 02/010355中的SEQ ID NO 6的淀粉酶或其与SEQ ID NO:6具有90％序列同一性的变体。SEQ ID NO:6的优选的变体是在位置181和182中具有缺失并且在位置193中具有取代的那些。
其他合适的淀粉酶是包含示于WO 2006/066594的SEQ ID NO:6中的来源于解淀粉芽孢杆菌的α-淀粉酶的残基1-33和示于WO 2006/066594的SEQ ID NO:4中的地衣芽孢杆菌α-淀粉酶的残基36-483的杂合α-淀粉酶或其具有90％序列同一性的变体。此杂合α-淀粉酶的优选的变体是在以下位置的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些：G48、T49、G107、H156、A181、N190、M197、I201、A209和Q264。包含示于WO 2006/066594的SEQ ID NO:6中的来源于解淀粉芽孢杆菌的α-淀粉酶的残基1-33和SEQ ID NO:4的残基36-483的杂合α-淀粉酶的最优选的变体是具有以下取代的那些：
M197T；
H156Y+A181T+N190F+A209V+Q264S；或
G48A+T49I+G107A+H156Y+A181T+N190F+I201F+A209V+Q264S。
另外的合适的淀粉酶是具有WO 99/019467中的SEQ ID NO:6的淀粉酶或其与SEQID NO:6具有90％序列同一性的变体。SEQ ID NO:6的优选的变体是在以下位置的一个或多个处具有取代、缺失或插入的那些：R181、G182、H183、G184、N195、I206、E212、E216和K269。特别优选的淀粉酶是在位置R181和G182、或位置H183和G184中具有缺失的那些。
可以使用的另外的淀粉酶是具有WO 96/023873的SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3、SEQID NO:2或SEQ ID NO:7的那些或其与SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ IDNO:7具有90％序列同一性的变体。SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:7的优选的变体是在以下位置的一个或多个处具有取代、缺失或插入的那些：140、181、182、183、184、195、206、212、243、260、269、304和476，使用WO 96/023873的SEQ ID 2进行编号。更优选的变体是在选自181、182、183和184的两个位置(如181和182、182和183、或位置183和184)中具有缺失的那些。SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:7的最优选的淀粉酶变体是在位置183和184中具有缺失并且在位置140、195、206、243、260、304和476中的一个或多个中具有取代的那些。
可以使用的其他淀粉酶是具有WO 08/153815的SEQ ID NO:2、WO 01/66712中的SEQ ID NO:10的淀粉酶或其与WO 08/153815的SEQ ID NO:2具有90％序列同一性或与WO01/66712中的SEQ ID NO:10具有90％序列同一性的变体。WO 01/66712中的SEQ ID NO:10的优选的变体是在以下位置的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些：176、177、178、179、190、201、207、211和264。
另外的合适的淀粉酶是具有WO 09/061380的SEQ ID NO:2的淀粉酶或其与SEQ IDNO:2具有90％序列同一性的变体。SEQ ID NO:2的优选的变体是在以下位置的一个或多个处具有C-末端截短和/或取代、缺失或插入的那些：Q87、Q98、S125、N128、T131、T165、K178、R180、S181、T182、G183、M201、F202、N225、S243、N272、N282、Y305、R309、D319、Q320、Q359、K444和G475。SEQ ID NO:2的更优选的变体是在以下位置的一个或多个处具有取代的那些：Q87E,R、Q98R、S125A、N128C、T131I、T165I、K178L、T182G、M201L、F202Y、N225E,R、N272E,R、S243Q,A,E,D、Y305R、R309A、Q320R、Q359E、K444E以及G475K，和/或在位置R180和/或S181或T182和/或G183处具有缺失的那些。SEQ ID NO:2的最优选的淀粉酶变体是具有以下取代的那些：
N128C+K178L+T182G+Y305R+G475K；
N128C+K178L+T182G+F202Y+Y305R+D319T+G475K；
S125A+N128C+K178L+T182G+Y305R+G475K；或
S125A+N128C+T131I+T165I+K178L+T182G+Y305R+G475K，其中这些变体是C-末端截短的，并且任选地进一步包含在位置243处的取代和/或在位置180和/或位置181处的缺失。
另外的合适的淀粉酶是具有WO 13184577的SEQ ID NO:1的淀粉酶或其与SEQ IDNO:1具有90％序列同一性的变体。SEQ ID NO:1的优选的变体是在以下位置的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些：K176、R178、G179、T180、G181、E187、N192、M199、I203、S241、R458、T459、D460、G476和G477。SEQ ID NO:1的更优选的变体是在以下位置的一个或多个中具有取代的那些：K176L、E187P、N192FYH、M199L、I203YF、S241QADN、R458N、T459S、D460T、G476K、以及G477K，和/或在位置R178和/或S179或T180和/或G181中具有缺失的那些。SEQ ID NO:1的最优选的淀粉酶变体是具有以下取代的那些：
E187P+I203Y+G476K
E187P+I203Y+R458N+T459S+D460T+G476K
其中所述变体任选地进一步包含在位置241处的取代和/或在位置178和/或位置179处的缺失。
另外的合适的淀粉酶是具有WO 10104675的SEQ ID NO:1的淀粉酶或其与SEQ IDNO:1具有90％序列同一性的变体。SEQ ID NO:1的优选的变体是在以下位置的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些：N21、D97、V128、K177、R179、S180、I181、G182、M200、L204、E242、G477和G478。SEQ ID NO:1的更优选的变体是在以下位置的一个或多个中具有取代的那些：N21D、D97N、V128I、K177L、M200L、L204YF、E242QA、G477K、以及G478K，和/或在位置R179和/或S180或I181和/或G182中具有缺失的那些。SEQ ID NO:1的最优选的淀粉酶变体是具有以下取代的那些：
N21D+D97N+V128I
其中变体任选地进一步包含在位置200处的取代和/或在位置180和/或位置181处的缺失。
其他合适的淀粉酶是具有WO 01/66712中的SEQ ID NO:12的α-淀粉酶或与SEQ IDNO:12具有至少90％序列同一性的变体。优选的淀粉酶变体是在WO 01/66712中的SEQ IDNO:12的以下位置的一个或多个中具有取代、缺失或插入的那些：R28、R118、N174；R181、G182、D183、G184、G186、W189、N195、M202、Y298、N299、K302、S303、N306、R310、N314；R320、H324、E345、Y396、R400、W439、R444、N445、K446、Q449、R458、N471、N484。特别优选的淀粉酶包括具有D183和G184的缺失并且具有取代R118K、N195F、R320K和R458K的变体，以及另外在一个或多个选自下组的位置处具有取代的变体：M9、G149、G182、G186、M202、T257、Y295、N299、M323、E345和A339，最优选的是另外在所有这些位置处具有取代的变体。
其他实例是淀粉酶变体，如在WO 2011/098531、WO 2013/001078和WO 2013/001087中描述的那些。
可商购的淀粉酶是Amplify PrimeTM、AtlanticTM、ArcticTM、EverestTM、DuramylTM、TermamylTM、FungamylTM、Stainzyme TM、Stainzyme PlusTM、NatalaseTM、Liquozyme X andBANTM(来自诺维信公司)，和RapidaseTM、PurastarTM/EffectenzTM、Powerase、PreferenzS1000、Preferenz S100和Preferenz S110(来自杰能科国际有限公司/杜邦公司(DuPont))。
所述一种或多种洗涤剂酶可以通过添加包含一种或多种酶的单独的添加剂，或通过添加包含所有这些酶的组合添加剂而被包括在根据本发明的洗涤剂组合物中。洗涤剂添加剂，即单独的或组合的添加剂，可以配制成例如颗粒、液体、浆液等。优选的洗涤剂添加剂配制品为颗粒，特别是非尘化颗粒；液体，特别是稳定化液体；或者浆液。
非尘化的颗粒可以例如如在US 4,106,991和US 4,661,452中所披露而产生，并且可以任选地通过本领域已知的方法进行包衣。蜡状包衣材料的实例是平均分子量为1000至20000的聚(环氧乙烷)产品(聚乙二醇，PEG)；具有16至50个环氧乙烷单元的乙氧基化壬基酚；乙氧基化脂肪醇，其中所述醇含有12至20个碳原子，并且其中存在15至80个环氧乙烷单元；脂肪醇；脂肪酸；以及脂肪酸的甘油单酯、和甘油二酯、和甘油三酯。适合用于通过流化床技术应用的成膜包衣材料的实例在GB 1483591中给出。液体酶制剂可以例如通过根据已确立的方法添加多元醇(如丙二醇)、糖或糖醇、乳酸或硼酸而稳定化。受保护的酶可以根据EP 238,216中披露的方法来制备。
微生物
所述洗涤剂添加剂以及洗涤剂组合物还可以包含一种或多种微生物，如一种或多种真菌、酵母、或细菌。
在实施例中，一种或多种微生物是脱水(例如通过冻干)的细菌或酵母，如乳酸杆菌菌株。
在另一个实施例中，微生物是一种或多种微生物孢子(与营养细胞相对)，如细菌孢子；或真菌孢子、分生孢子、菌丝。优选地，所述一种或多种孢子/芽孢是芽孢杆菌芽孢；甚至更优选地，所述一种或多种孢子/芽孢是枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、或巨大芽孢杆菌的芽孢。
微生物可以按与酶相同的方式包含在洗涤剂组合物或添加剂中(见上文)。
目前期望在洗涤剂组合物中加入任何酶，特别是本发明的α淀粉酶多肽，添加量相当于每升洗涤液添加0.01mg-100mg酶蛋白，优选每升洗涤液加0.05mg-5mg酶蛋白，特别优选每升洗涤液加0.1mg-1mg酶蛋白。
另外，本发明的α淀粉酶多肽可以掺入WO 2006/002643(将其通过引用并入本文)中所披露的洗涤剂配制品中。
洗涤剂产品的配制
本发明的洗涤剂组合物可以处于任何常规形式，例如条，均匀的片剂，具有两层或更多层的片剂，具有一个或多个室的袋，规则的或压缩的粉末，颗粒，糊剂，凝胶，或规则的、压缩的或浓缩的液体。
根据本发明的洗涤剂组合物可以配制为(例如)手洗或机洗衣物洗涤剂组合物，包括适用于预处理带有污渍的织物的洗衣添加剂组合物，和冲洗添加的织物柔软剂组合物，或配制为用于一般家用硬表面清洁操作的洗涤剂组合物，或配制用于手洗或机洗餐具洗涤操作。
因此，在一个实施例中，根据本发明的洗涤剂组合物是液体衣物洗涤剂组合物、粉末衣物洗涤剂组合物、液体餐具洗涤洗涤剂组合物或粉末餐具洗涤洗涤剂组合物。在实施例中，所述组合物是液体或粉末自动餐具洗涤(ADW)洗涤剂组合物；或液体手动餐具洗涤剂组合物。
袋可以被配置为单一室或多室。它可以具有适合用于容持所述组合物的任何形式、形状和材料，例如在与水接触之前，不允许所述组合物从袋中释放出来。袋由水溶性膜制成，它包含了一个内部体积。可以将所述内部体积分成袋的室。优选的膜是聚合物材料，优选地形成膜或薄片的聚合物。优选的聚合物、共聚物或其衍生物选自聚丙烯酸酯、和水溶性丙烯酸酯共聚物、甲基纤维素、羧甲基纤维素、糊精钠、乙基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基甲基纤维素、麦芽糊精、聚甲基丙烯酸酯，最优选地是聚乙烯醇共聚物以及羟丙基甲基纤维素(HPMC)。优选地，聚合物在膜例如PVA中的水平是至少约60％。优选的平均分子量将典型地是约20,000至约150,000。膜还可以是共混组合物，这些共混组合物包含可水解降解并且可水溶的聚合物共混物，如聚乳酸和聚乙烯醇(已知在贸易参考号M8630下，如由美国印第安纳州的MonoSol有限责任公司(MonoSol LLC)销售)加增塑剂，像甘油、乙二醇、丙二醇、山梨醇及其混合物。袋可以包含固体洗衣清洁组合物或部分组分和/或液体清洁组合物或由水溶性膜分开的部分组分。可用于液体组分的室在组成上可以与含有固体的室不同：US2009/0011970 A1。
可以由水溶性袋中的或片剂的不同层中的室来将洗涤剂成分彼此物理分开。因此，可以避免组分间的不良的储存相互作用。在洗涤溶液中，每个室的不同溶解曲线还可以引起选择的组分的延迟溶解。
非单位剂量的液体或凝胶洗涤剂可以是水性的，典型地含有按重量计至少20％并且最高达95％的水，如高达约70％的水、高达约65％的水、高达约55％的水、高达约45％的水、高达约35％的水。包括但不限于链烷醇、胺、二醇、醚以及多元醇的其他类型的液体可以被包括在水性液体或凝胶中。水性液体或凝胶洗涤剂可以含有从0-30％的有机溶剂。
液体或凝胶洗涤剂可以是非水性的。
颗粒洗涤剂配制品
可以如描述于WO 09/092699、EP 1705241、EP 1382668、WO 07/001262、US6472364、WO 04/074419或WO 09/102854中的配制颗粒洗涤剂。其他有用的洗涤剂配制品描述于以下中：WO 09/124162、WO 09/124163、WO 09/117340、WO 09/117341、WO 09/117342、WO 09/072069、WO 09/063355、WO 09/132870、WO 09/121757、WO 09/112296、WO 09/112298、WO 09/103822、WO 09/087033、WO 09/050026、WO 09/047125、WO 09/047126、WO09/047127、WO 09/047128、WO 09/021784、WO 09/010375、WO 09/000605、WO 09/122125、WO09/095645、WO 09/040544、WO 09/040545、WO 09/024780、WO 09/004295、WO 09/004294、WO09/121725、WO 09/115391、WO 09/115392、WO 09/074398、WO 09/074403、WO 09/068501、WO09/065770、WO 09/021813、WO 09/030632以及WO 09/015951。
WO 2011025615、WO 2011016958、WO 2011005803、WO 2011005623、WO2011005730、WO 2011005844、WO 2011005904、WO 2011005630、WO 2011005830、WO2011005912、WO 2011005905、WO 2011005910、WO 2011005813、WO 2010135238、WO2010120863、WO 2010108002、WO 2010111365、WO 2010108000、WO 2010107635、WO2010090915、WO 2010033976、WO 2010033746、WO 2010033747、WO 2010033897、WO2010033979、WO 2010030540、WO 2010030541、WO 2010030539、WO 2010024467、WO2010024469、WO 2010024470、WO 2010025161、WO 2010014395、WO 2010044905、
WO 2010145887、WO 2010142503、WO 2010122051、WO 2010102861、WO2010099997、WO 2010084039、WO 2010076292、WO 2010069742、WO 2010069718、WO2010069957、WO 2010057784、WO 2010054986、WO 2010018043、WO 2010003783、WO2010003792、
WO 2011023716、WO 2010142539、WO 2010118959、WO 2010115813、WO2010105942、WO 2010105961、WO 2010105962、WO 2010094356、WO 2010084203、WO2010078979、WO 2010072456、WO 2010069905、WO 2010076165、WO 2010072603、WO2010066486、WO 2010066631、WO 2010066632、WO 2010063689、WO 2010060821、WO2010049187、WO 2010031607、WO 2010000636。
共颗粒中酶的配制品
本发明的酶可以被配制为颗粒，例如，配制为结合一种或多种酶的共颗粒。然后，每种酶将存在于多种颗粒中，这些颗粒确保酶在洗涤剂中的分布更均匀。这还减少了由于不同的粒度，不同酶的物理隔离。用于生产针对洗涤剂工业的多酶共颗粒的方法披露于IP.com披露内容IPCOM000200739D中。
通过使用共颗粒的酶的配制品的另一个实例披露于WO 2013/188331中，其涉及包含以下的洗涤剂组合物：(a)多酶共颗粒；(b)少于10wt沸石(无水的基础上)；和(c)少于10wt磷酸盐(无水的基础上)，其中所述酶共颗粒包含从10wt％至98wt％的水分汇组分(sink component)，并且所述组合物另外还包含从20wt％至80wt％的洗涤剂水分汇组分。
WO 2013/188331还涉及处理和/或清洁表面(优选地织物表面)的方法，所述方法包括以下步骤：(i)使所述表面在含水洗涤液中与如在本文要求保护的并且描述的洗涤剂组合物接触，(ii)漂洗和/或干燥所述表面。
所述多酶共颗粒可以包含本发明的酶和(a)一种或多种选自下组的酶，该组由以下组成：脂肪酶、纤维素酶、木葡聚糖酶、过水解酶、过氧化物酶、脂氧合酶、漆酶、半纤维素酶、蛋白酶、纤维二糖脱氢酶、木聚糖酶、磷脂酶、酯酶、角质酶、果胶酶、甘露聚糖酶、果胶裂解酶、角蛋白酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、木质素酶、支链淀粉酶、鞣酸酶、戊聚糖酶、地衣多糖酶、葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶、第二淀粉酶及其混合物。
用途
本发明还涉及用于使用α-淀粉酶变体的方法。本发明的α-淀粉酶变体可用于洗涤剂组合物、衣物洗涤、餐具洗涤和/或清洁过程。
在一个实施例中，本发明涉及本发明的变体在洗涤剂组合物中用于在清洁硬表面中使用(如餐具洗涤)，或在洗衣中或用于污渍去除的用途。在另一个实施例中，本发明涉及根据本发明的α-淀粉酶变体在清洁过程(如洗衣或硬表面清洁，包括但不限于餐具洗涤和工业清洁)中的用途。因此，在一个实施例中，本发明涉及如下变体在清洁过程(如洗衣或硬表面清洁，包括但不限于餐具洗涤和工业清洁)中的用途，所述变体在对应于SEQ ID NO:2的如下位置的一个或多个位置处包含修饰：H1、H2、G7、I9、Q11、N16、N19、N25、A37、W43、W48、N54、V56、Y58、G59、A60、L63、T81、E84、E86、R90、Q98、V104、G109、A111、F113、R116、Q118、Q125、R127、E130、S132、G133、T134、Y135、Q136、A139、G142、N144、G149、R158、Y160、D163、W167、Q169、S170、R171、Q172、L173、A174、N175、R176、Y178、R181、G182、A186、W187、N195、M202、Y203、A204、V206、D209、H210、E212、T227、L235、V238、M246、Q256、K259、V264、A265、E266、Y267、K269、N270、L272、G273、A274、L275、E276、W284、M286、V291、L293、Y295、Y298、Q299、N302、S303、S304、N306、R310、N311、N314、G315、L317、Q319、R320、S323、F328、G337、A339、Q345、D357、Q365、P377、D375、Q385、K391、Q395、R400、D406、W408、V410、S431、G435、W439、R444、Q445、R458、N465、Q466、W469、F473、G476和V481。
在特定的实施例中，本发明涉及如下变体在清洁过程(如洗衣或硬表面清洁，包括餐具洗涤和工业清洁)中的用途，所述变体包含a)在亲本α-淀粉酶中的两个或更多个位置处的取代和/或缺失，所述位置对应于SEQ ID NO:2的多肽的位置R181、G182、D183和G184；以及
b)在对应于SEQ ID NO:2的如下位置的一个或多个位置处的修饰：H1、H2、G7、I9、Q11、N16、N19、N25、A37、W43、W48、N54、V56、Y58、G59、A60、L63、T81、E84、E86、R90、Q98、V104、G109、A111、F113、R116、Q118、Q125、R127、E130、S132、G133、T134、Y135、Q136、A139、G142、N144、G149、R158、Y160、D163、W167、Q169、S170、R171、Q172、L173、A174、N175、R176、Y178、R181、G182、A186、W187、N195、M202、Y203、A204、V206、D209、H210、E212、T227、L235、V238、M246、Q256、K259、V264、A265、E266、Y267、K269、N270、L272、G273、A274、L275、E276、W284、M286、V291、L293、Y295、Y298、Q299、N302、S303、S304、N306、R310、N311、N314、G315、L317、Q319、R320、S323、F328、G337、A339、Q345、D357、Q365、P377、D375、Q385、K391、Q395、R400、D406、W408、V410、S431、G435、W439、R444、Q445、R458、N465、Q466、W469、F473、G476和V481。
对于清洁而言重要的污物和污渍由许多不同物质构成，并且已经开发全都具有不同底物特异性的一系列不同的酶用于在涉及衣物和硬表面清洁(如餐具洗涤)两者中使用。这些酶被认为提供酶洗涤益处，因为与不具有酶的同一过程相比，它们在其应用的清洁过程中特异性地改良污渍去除。本领域已知的污渍去除酶包括以下酶，如蛋白酶、第二淀粉酶、脂肪酶、角质酶、纤维素酶、内切葡聚糖酶、木葡聚糖酶、果胶酶、果胶裂解酶、黄原胶酶、过氧化物酶、卤代过氧酶、过氧化氢酶以及甘露聚糖酶。
在一方面，本发明涉及如本文所述的变体的用途，或涉及包含所述变体的组合物在家庭或工业清洁过程中的用途。
在一方面，本发明涉及如本文所述的变体的用途，或涉及包含所述变体的组合物用于织物清洁(例如洗衣)的用途。
在一方面，本发明涉及如本文所述的变体的用途，或涉及包含所述变体的组合物用于陶瓷、塑料或玻璃材料清洁(例如餐具洗涤)的用途。
在一方面，本发明涉及洗衣方法，所述方法可用于家用洗衣以及工业洗衣。此外，本发明涉及用于洗涤纺织品(例如织物、服装(garment)、衣服(cloth)等)的方法，其中所述方法包括用洗涤溶液处理所述纺织品，所述洗涤溶液包含本发明的洗涤剂组合物。可以使用家用或工业洗衣机进行洗衣或可以使用本发明的洗涤剂组合物手动地进行洗衣。
在一方面，本发明涉及餐具洗涤方法，所述餐具洗涤方法包括ADW；或硬表面清洁，该方法可用于家庭清洁以及工业清洁。此外，本发明涉及用于餐具洗涤或硬表面清洁的方法，其中所述方法包括用含有本发明的洗涤剂组合物的洗涤溶液处理餐具或硬表面。例如，可以使用本发明的洗涤剂组合物用家用餐具洗涤机或用手进行餐具洗涤或硬表面清洁。
使用方法
本发明提供了洗涤剂组合物在家庭或工业清洁过程中的用途。清洁过程可以例如是餐具洗涤过程，如自动餐具洗涤；洗衣过程；或硬表面(如浴室瓷砖、地板、桌面、排水管、水槽以及脸盆)清洁。
餐具洗涤
自动餐具洗涤过程可以包含以下步骤：
a.将餐具暴露于包含洗涤剂组合物的水性洗涤液中；
b.完成至少一个洗涤循环；以及
c.任选地冲洗和干燥所述餐具。
因此，本发明提供了一种使用如在本文所述的洗涤剂组合物在自动餐具洗涤机中进行餐具洗涤的方法，所述方法包括以下步骤：将所述洗涤剂组合物添加至所述自动餐具洗涤机中的洗涤剂组合物室内，并且在主洗涤循环期间释放所述洗涤剂组合物。
组合物可以在洗涤液中以从约1000ppm-8000ppm(如在洗涤液中以2000ppm-6000ppm)的浓度采用。洗涤液的硬度可以是3-30°dH。洗涤液的pH可以是3-11，如7-11。
当使用时，洗涤液的温度可以在10℃-70℃的范围内。例如，洗涤液的温度可以在15℃-60℃的范围内、在20℃-50℃的范围内、在25℃-50℃的范围内、在30℃-45°的范围内、在35℃-40℃的范围内，在35℃-55℃的范围内，或在40℃-50℃的范围内。
整个洗涤程序的温度可能会变化。一种酶可以在一个活性温度范围内活化，且其他酶可以在不同于第一种酶的活性温度范围的另一个活性温度范围内活化。例如，一个或多个洗涤循环可以在32℃-38℃的温度下进行，且其他洗涤循环可以在45℃-55℃的温度下进行。其优点是允许单一酶在其最佳温度下起作用。洗涤剂组合物的酶的最佳温度可以变化，但典型地，对于蛋白酶来说在65℃-70℃的范围内，且对于淀粉酶来说在55℃-65℃的范围内。最佳温度可以通过不同的测定来确定，如对在不同温度下在缓冲溶液中在15min时间段内的活性进行比较。
在洗涤循环完成期间或之后，可以用水或包含冲洗助剂的水冲洗餐具。如果使用酸性冲洗助剂，可以进一步改良清洁的有效性。在冲洗步骤的至少一段时间内，冲洗助剂应该能够将pH降低到4以下。所述pH甚至可以进一步降低，例如降低至低于pH 3.5，如低于pH3、低于pH 2.5或低于pH 2。降低pH的时间段可以是至少1分钟，如至少2分钟、至少3分钟、至少4分钟、至少5分钟、至少6分钟或至少7分钟。降低pH的时间段甚至可以与全冲洗步骤的时间一样长。
在冲洗步骤期间降低pH的能力是由于缓冲剂。应选择在低pH值(从4和以下的pH)下具有强缓冲能力的缓冲液。缓冲能力应对应于用15ml 4M HCL/冲洗循环进行pH下降的相同作用。在冲洗步骤期间降低pH的能力是由于选自下组的缓冲剂造成的，该组由以下组成：柠檬酸、乙酸、磷酸二氢钾、硼酸、二乙基巴比妥酸、卡莫第缓冲溶液(Carmody buffer)和Britton-Robinson缓冲液。
通过在洗涤循环期间冲洗掉从餐具释放的任何污垢，冲洗助剂可以进一步改良餐具的清洁。另外，酸性冲洗助剂可防止钙在餐具上沉淀。
洗衣
洗衣过程可以例如是家用洗衣，但是它也可以是工业洗衣。用于洗涤织物和/或服装的过程可以是如下的一个过程，该过程包括用含有如本文所述的洗涤剂组合物的洗涤溶液来处理织物。例如，可以在机器洗涤过程中或者在手动洗涤过程中进行清洁过程或纺织品保养过程。
经过洗涤、清洁或者纺织品保养过程的织物和/或服装可以是常规的可洗涤的衣物，例如家庭衣物。优选地，洗衣的主要部分是服装和织物，包括针织品、机织物、牛仔布、非机织物、毡、纱线、以及毛巾布。这些织物可以是基于纤维素的，如天然纤维素，包括棉布、亚麻、亚麻布、黄麻、苎麻、剑麻或椰壳纤维；或者人造纤维素(例如，来源于木浆)，包括纤维胶/人造丝、苎麻、醋酸纤维素纤维(三胞)、莱赛尔纤维(lyocell)或其共混物。这些织物还可以是基于非纤维素的，如天然聚酰胺，包括羊毛、骆驼毛、羊绒、马海毛、兔毛或丝，或者合成聚合物，如尼龙、芳香族聚酰胺、聚酯、丙烯酸、聚丙烯以及斯潘德克斯弹性纤维(spandex)/弹性纤维，或其共混物以及基于纤维素和基于非纤维素的纤维的共混物。
因此，在一方面，本发明涉及一种使用如本文所述的洗涤剂组合物在自动洗衣机中进行洗衣的方法，所述方法包括以下步骤：将所述洗涤剂组合物添加至所述自动洗衣机中的洗涤剂组合物室内，并且在主洗涤循环期间释放所述洗涤剂组合物。在另一方面，本发明涉及本发明还涉及一种洗衣方法，所述洗衣方法包括用如本文所述的洗涤剂组合物，优选地在50℃或更低的温度下，或更优选地在45℃或更低的温度下，或甚至更优选地在40℃或更低的温度下，甚至更优选地在35℃或更低的温度下，或甚至更优选地在30℃或更低的温度下，甚至更优选地在25℃或更低的温度下，或甚至更优选地在20℃或更低的温度下洗涤服装。
这些方法包括用于洗涤织物的方法。所述方法包括将有待洗涤的织物与包含洗涤剂组合物的清洁洗衣溶液进行接触的步骤。所述织物可以包括在正常消费者使用条件下能够被洗涤的任何织物。所述溶液优选地具有从约5.5至约11.5的pH。可以在溶液中按以下浓度使用组合物：从约100ppm，优选地500ppm至约15,000ppm。水温的范围典型地是从约5℃至约95℃，包括约10℃、约15℃、约20℃、约25℃、约30℃、约35℃、约40℃、约45℃、约50℃、约55℃、约60℃、约65℃、约70℃、约75℃、约80℃、约85℃以及约90℃。水与织物比率典型地是从约1:1至约30:1。
在特定的实施例中，洗涤方法在约0°dH至约30°dH的硬度下进行。在典型欧洲洗涤条件下，硬度是约16°dH，在典型美国洗涤条件下，是约6°dH，并且在典型亚洲洗涤条件下，是约3°dH。
本发明的α-淀粉酶变体具有允许各种其他工业应用的宝贵特性。例如，本发明的α-淀粉酶多肽可以用于淀粉过程，特别是淀粉转化，尤其是淀粉的液化(参见，例如US 3,912,590、欧洲专利申请号252 730和63 909、WO 99/19467、和WO 96/28567，所有参考文献通过引用并入本文)。还涵盖用于淀粉转化目的组合物，除了本发明的变体以外，这些组合物还可包含葡糖淀粉酶、支链淀粉酶以及其他α-淀粉酶。
此外，本发明α-淀粉酶变体也特别适用于从淀粉或全谷粒中生产甜味剂以及乙醇(参见，例如，美国专利号5,231,017，通过引用并入本文)，如燃料乙醇、饮用乙醇以及工业乙醇。
本发明的α-淀粉酶变体还用于纺织品、织物和服装的退浆(参见，例如WO 95/21247、美国专利4,643,736、EP 119,920，通过引用并入本文)、啤酒制造或酿造、纸浆和纸张生产。
淀粉转化
常规的淀粉转化过程(如液化和糖化过程)例如在美国专利3,912,590和欧洲专利公开号252,730和63,909中进行了描述，通过引用并入本文。
在一个实施例中，淀粉转化过程将淀粉降解为较低分子量的碳水化合物成分，如糖或脂肪替代物，所述方法包括脱支步骤。
当将淀粉转化为糖时，淀粉被解聚。这类解聚过程可以由例如预处理步骤以及两个或三个连续过程步骤组成，即，液化过程、糖化过程并且取决于所需最终产物，任选地异构化过程。
(i)天然淀粉的预处理
天然淀粉由室温下不溶于水的微观颗粒组成。加热水性淀粉浆料时，颗粒膨胀并且最后破裂，将淀粉分子分散至溶液中。在此“糊化”过程中，粘度有显著地增加。由于典型工业过程中的固体水平为30％-40％，因此不得不稀释或“液化”淀粉以使其能够被操作。如今主要是通过酶降解而获得粘度的降低。
(ii)液化
在液化步骤中，α-淀粉酶将长链淀粉降解为支链以及直链的较短单元(麦芽糊精)。液化过程在105℃-110℃进行5至10分钟，随后在95℃进行1-2小时。pH值在5.5和6.2之间。为了确保在这些条件下最佳的酶稳定性，添加1mM钙(40ppm游离的钙离子)。在这个处理之后，液化的淀粉将具有10-15的“右旋糖当量”(DE)。
(iii)糖化
在液化过程之后，通过添加葡糖淀粉酶(例如AMG)和脱支酶(如异淀粉酶(美国专利号4,335,208)或支链淀粉酶(例如PromozymeTM)美国专利号4,560,651)将麦芽糖糊精转化为右旋糖。在该步骤之前，将pH降低至低于4.5的值，维持高温(高于95℃)以使液化α-淀粉酶失活以减少称为“潘糖前体”的短寡糖的形成，该短寡糖不能被脱支酶适当地水解酶。
将温度降至60℃，并添加葡糖淀粉酶和脱支酶。糖化过程进行24-72小时。
通常，在液化步骤后使α-淀粉酶变性时，约0.2％-0.5％的糖化产物是不能被支链淀粉酶降解的支化三糖6<2>-α-葡糖基麦芽糖(潘糖)。如果在糖化过程中存在来自液化步骤的活性淀粉酶(即未变性)，则该水平可以高达1％-2％，这是高度不希望的，因为它显著降低了糖化产率。
(iv)异构化
当所希望的最终糖产物是例如高果糖糖浆时，右旋糖糖浆可被转化为果糖。糖化过程之后，将pH值增加至6-8范围内的值，优选地pH 7.5，并且通过离子交换去除钙。然后，使用例如固定化葡糖异构酶(如Sweetzyme<TM>IT)将右旋糖糖浆转化成高果糖糖浆。
乙醇生产
总体上，从全谷粒来生产醇(乙醇)可分成4个主要步骤
-研磨
-液化
-糖化
-发酵
(i)研磨
谷粒经过研磨以便打开结构并且允许进一步处理。所使用的两个过程是湿式或干式研磨。在干式研磨中，将完整谷粒研磨并且用于所述过程的其余部分中。湿式研磨可很好地分离胚芽(germ)和粗粉(淀粉颗粒和蛋白质)，除少数情况外湿式研磨在平行生产糖浆时的多个位置使用。
(ii)液化
在液化过程中，淀粉颗粒通过水解来溶解成DP大部分高于4的麦芽糊精。水解可通过酸处理来执行或由α-淀粉酶来酶法执行。酸水解有限地使用。原材料可以是研磨的全谷粒或来自淀粉处理的侧流。
酶法液化典型地以三步热浆液过程进行。浆液加热至60℃-95℃(优选地，80℃-85℃)之间，并且添加一种或多种酶。然后将浆液在95℃-140℃(优选地，105℃-125℃)之间喷射蒸煮、冷却至60℃-95℃并且添加更多酶以获得最终水解。液化过程在pH 4.5-6.5、典型地在5与6之间的pH进行。研磨并且液化的谷粒又称为醪液(mash)。
(iii)糖化
为了生产可被酵母代谢的低分子糖DP1-3，液化过程中的麦芽糖糊精必须进一步水解。典型地通过葡糖淀粉酶进行酶水解，可替代地，可以使用α-葡糖苷酶或酸性α-淀粉酶。全糖化步骤可以持续72小时，然而，通常只进行典型的40-90分钟的预糖化，并且然后在发酵期间完成糖化(SSF)。糖化典型地在从30℃-65℃、典型地约60℃的温度下并在pH 4.5下进行。
(iv)发酵
将典型地来自酵母属的酵母添加至醪液中并且发酵持续24-96小时，如典型地35-60小时。温度在26℃-34℃之间，典型地在约32℃，并且pH是从pH 3-6，优选地，约pH 4-5。
请注意，最广泛使用的过程是同步糖化和发酵(SSF)过程，其中没有糖化的持续阶段，这意味着酵母和酶添加在一起。在进行SSF时，通常在发酵之前在高于50℃的温度下引入预糖化步骤。
(v)蒸馏
发酵后，将醪液蒸馏以提取乙醇。
根据本发明的过程获得的乙醇可以用作例如燃料乙醇；饮用乙醇，即中性饮用酒精；或工业乙醇。
(vi)副产品
来自发酵的剩余物是酒糟，它典型地用于液体或干燥形式的动物饲料。
关于如何完成液化、糖化、发酵、蒸馏以及回收乙醇的进一步细节是本领域技术人员熟知的。
根据本发明的过程，糖化以及发酵可同时或单独地执行。
纸浆以及纸张生产
本发明的碱性α-淀粉酶多肽还可用于从淀粉增强废纸以及纸板来生产木质纤维素材料如纸浆、纸张以及纸板，尤其当再浆化在高于7的pH下发生以及当淀粉酶经由增强淀粉的降解来促进废弃材料的分解时。本发明的α-淀粉酶尤其适用于从淀粉包衣的印刷纸来生产造纸纸浆的过程。所述过程可如WO 95/14807描述来执行，包括以下步骤：
a)使纸张分解以产生纸浆，
b)在步骤a)之前、期间或之后用淀粉降解酶进行处理，并且
c)在步骤a)和b)之后，从纸浆中分离油墨颗粒。
本发明的α-淀粉酶还可非常适用于对淀粉进行改性，其中酶改性的淀粉与碱性填充剂如碳酸钙、高岭土以及粘土一起用于造纸。用本发明的碱性α-淀粉酶有可能在填充剂存在下将淀粉改性，从而允许一种更简单的整合过程。
纺织品、织物以及服装的退浆
本发明的α-淀粉酶在纺织品、织物或服装脱浆中也非常有用。在纺织品加工工业中，传统上使用α-淀粉酶作为脱浆过程中的助剂，以促进在织造过程中作为纬纱上的保护涂层的含淀粉胶料的去除。织造之后彻底去除胶料涂层对于确保后续过程(其中所述织物被擦洗、漂白和染色)中的最佳效果是至关重要的。酶法淀粉分解是优选的，因为它不对纤维材料产生任何有害的作用。为了减少加工成本并增加研磨机处理量，有时将脱浆过程与擦洗和漂白步骤结合。在这类情况下，非酶助剂如碱或氧化剂典型用于分解淀粉，因为传统α-淀粉酶并不与高pH水平以及漂白剂非常相容。由于使用具有相当腐蚀性的化学品，因此淀粉胶料的非酶分解导致一些纤维损伤。因此，希望使用本发明的α-淀粉酶，因为它们在碱性溶液中具有改良的性能。在使含纤维素的织物或纺织品脱浆时，α-淀粉酶可单独或与纤维素酶组合使用。
退浆以及漂白过程在本领域中是熟知的。例如，这类过程描述于例如WO 95/21247、美国专利4,643,736、EP 119,920(通过引用并入本文)中。
用于退浆的可商购的产品包括
Figure BDA0003204290000003811
和
Figure BDA0003204290000003812
ULTRA(来自诺维信公司(Novozymes A/S))。
啤酒制造
本发明的α-淀粉酶在啤酒制造过程中也可以是非常有用的；在醪液形成(mashing)过程期间，典型地添加α-淀粉酶。
在以下段落中进一步描述本发明。
1.一种亲本α-淀粉酶的α-淀粉酶变体，所述变体在对应于以下位置的一个或多个位置处包含修饰：1、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号；并且其中各修饰独立地为取代、插入或缺失，并且其中所述变体与SEQ ID NO:1-17的多肽具有至少59％，例如至少60％，例如至少65％，例如至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性。
2.根据段落1所述的α-淀粉酶变体，其中亲本α-淀粉酶的所述变体在对应于以下位置的一个或多个位置处包含修饰：1、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号；并且其中各修饰独立地为取代、插入或缺失，并且其中所述变体与SEQ ID NO:1的多肽具有至少59％，例如至少60％，例如至少65％，例如至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性。
3.根据段落1所述的α-淀粉酶变体，其中亲本α-淀粉酶的所述变体在对应于以下位置的一个或多个位置处包含修饰：1、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号；并且其中各修饰独立地为取代、插入或缺失，并且其中所述变体与SEQ ID NO:2的多肽具有至少59％，例如至少60％，例如至少65％，例如至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性。
4.根据段落1所述的α-淀粉酶变体，其中亲本α-淀粉酶的所述变体在对应于以下位置的一个或多个位置处包含修饰：1、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号；并且其中各修饰独立地为取代、插入或缺失，并且其中所述变体与SEQ ID NO:3的多肽具有至少59％，例如至少60％，例如至少65％，例如至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性。
5.根据段落1所述的α-淀粉酶变体，其中亲本α-淀粉酶的所述变体在对应于以下位置的一个或多个位置处包含修饰：1、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号；并且其中各修饰独立地为取代、插入或缺失，并且其中所述变体与SEQ ID NO:4的多肽具有至少59％，例如至少60％，例如至少65％，例如至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性。
6.根据段落1所述的α-淀粉酶变体，其中亲本α-淀粉酶的所述变体在对应于以下位置的一个或多个位置处包含修饰：1、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号；并且其中各修饰独立地为取代、插入或缺失，并且其中所述变体与SEQ ID NO:5的多肽具有至少59％，例如至少60％，例如至少65％，例如至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性。
7.根据段落1所述的α-淀粉酶变体，其中亲本α-淀粉酶的所述变体在对应于以下位置的一个或多个位置处包含修饰：1、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号；并且其中各修饰独立地为取代、插入或缺失，并且其中所述变体与SEQ ID NO:6的多肽具有至少59％，例如至少60％，例如至少65％，例如至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性。
8.根据段落1所述的α-淀粉酶变体，其中亲本α-淀粉酶的所述变体在对应于以下位置的一个或多个位置处包含修饰：1、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号；并且其中各修饰独立地为取代、插入或缺失，并且其中所述变体与SEQ ID NO:7的多肽具有至少59％，例如至少60％，例如至少65％，例如至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性。
9.根据段落1所述的α-淀粉酶变体，其中亲本α-淀粉酶的所述变体在对应于以下位置的一个或多个位置处包含修饰：1、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号；并且其中各修饰独立地为取代、插入或缺失，并且其中所述变体与SEQ ID NO:8的多肽具有至少59％，例如至少60％，例如至少65％，例如至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性。
10.根据段落1所述的α-淀粉酶变体，其中亲本α-淀粉酶的所述变体在对应于以下位置的一个或多个位置处包含修饰：1、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号；并且其中各修饰独立地为取代、插入或缺失，并且其中所述变体与SEQ ID NO:9的多肽具有至少59％，例如至少60％，例如至少65％，例如至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性。
11.根据段落1所述的α-淀粉酶变体，其中亲本α-淀粉酶的所述变体在对应于以下位置的一个或多个位置处包含修饰：1、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号；并且其中各修饰独立地为取代、插入或缺失，并且其中所述变体与SEQ ID NO:10的多肽具有至少59％，例如至少60％，例如至少65％，例如至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性。
12.根据段落1所述的α-淀粉酶变体，其中亲本α-淀粉酶的所述变体在对应于以下位置的一个或多个位置处包含修饰：1、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号；并且其中各修饰独立地为取代、插入或缺失，并且其中所述变体与SEQ ID NO:11的多肽具有至少59％，例如至少60％，例如至少65％，例如至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性。
13.根据段落1所述的α-淀粉酶变体，其中亲本α-淀粉酶的所述变体在对应于以下位置的一个或多个位置处包含修饰：1、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号；并且其中各修饰独立地为取代、插入或缺失，并且其中所述变体与SEQ ID NO:12的多肽具有至少59％，例如至少60％，例如至少65％，例如至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性。
14.根据段落1所述的α-淀粉酶变体，其中亲本α-淀粉酶的所述变体在对应于以下位置的一个或多个位置处包含修饰：1、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号；并且其中各修饰独立地为取代、插入或缺失，并且其中所述变体与SEQ ID NO:13的多肽具有至少59％，例如至少60％，例如至少65％，例如至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性。
15.根据段落1所述的α-淀粉酶变体，其中亲本α-淀粉酶的所述变体在对应于以下位置的一个或多个位置处包含修饰：1、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号；并且其中各修饰独立地为取代、插入或缺失，并且其中所述变体与SEQ ID NO:14的多肽具有至少59％，例如至少60％，例如至少65％，例如至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性。
16.根据段落1所述的α-淀粉酶变体，其中亲本α-淀粉酶的所述变体在对应于以下位置的一个或多个位置处包含修饰：1、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号；并且其中各修饰独立地为取代、插入或缺失，并且其中所述变体与SEQ ID NO:15的多肽具有至少59％，例如至少60％，例如至少65％，例如至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性。
17.根据段落1所述的α-淀粉酶变体，其中亲本α-淀粉酶的所述变体在对应于以下位置的一个或多个位置处包含修饰：1、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号；并且其中各修饰独立地为取代、插入或缺失，并且其中所述变体与SEQ ID NO:16的多肽具有至少59％，例如至少60％，例如至少65％，例如至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性。
18.根据段落1所述的α-淀粉酶变体，其中亲本α-淀粉酶的所述变体在对应于以下位置的一个或多个位置处包含修饰：1、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号；并且其中各修饰独立地为取代、插入或缺失，并且其中所述变体与SEQ ID NO:17的多肽具有至少59％，例如至少60％，例如至少65％，例如至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性。
19.根据前述段落中任一项所述的α-淀粉酶变体，其中亲本α-淀粉酶的所述变体在对应于以下位置的一个或多个位置处包含修饰：1、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号；并且其中各修饰独立地为取代、插入或缺失，并且其中所述变体与SEQ ID NO:1-17的多肽具有至少59％，例如至少60％，例如至少65％，例如至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性，并且其中在与如SEQ IDNO:1或SEQ ID NO:2所示的具有α-淀粉酶活性的所述亲本多肽相比时，关于洗涤性能的测量，所述变体的改良因子(IF)>1.0。
20.根据前述段落中任一项所述的α-淀粉酶变体，其中所述修饰在对应于以下位置的一个或多个位置处：H1、G7、I9、Q11、N16、N19、N25、A37、W43、W48、N54、V56、Y58、G59、A60、L63、T81、E84、E86、R90、Q98、V104、G109、A111、F113、R116、Q118、Q125、R127、E130、S132、G133、T134、Y135、Q136、A139、G142、N144、G149、R158、Y160、D163、W167、Q169、S170、R171、Q172、L173、A174、N175、R176、Y178、R181、G182、A186、W187、N195、M202、Y203、A204、V206、D209、H210、E212、T227、L235、V238、M246、Q256、K259、V264、A265、E266、Y267、K269、N270、L272、G273、A274、L275、E276、W284、M286、V291、L293、Y295、Y298、Q299、N302、S303、S304、N306、R310、N311、N314、G315、L317、Q319、R320、S323、F328、G337、A339、Q345、D357、Q365、P377、D375、Q385、K391、Q395、R400、D406、W408、V410、S431、G435、W439、R444、Q445、R458、N465、Q466、W469、F473、G476和V481，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中各修饰独立地为取代、插入或缺失，并且其中所述变体与SEQ ID NO:1-17的多肽具有至少59％，例如至少60％，例如至少65％，例如至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性，并且其中在与如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的所述亲本α-淀粉酶相比时，关于洗涤性能的测量，所述变体的改良因子(IF)>1.0。
21.根据前述段落中任一项所述的变体，其中取代和/或缺失的数目是1至20个，例如1至10个和1至5个，如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个取代和/或缺失。
22.根据前述段落中任一项所述的变体，其中所述变体在对应于位置R181、G182、D183和G184的两个或更多个位置处包含缺失，使用SEQ ID NO:1进行编号。
23.根据段落22所述的变体，其中所述变体在对应于位置R181+G182的位置处包含缺失：R181+D183；R181+G184；G182+D183；G182+G184；或D183+G184，使用SEQ ID NO:1进行编号。
24.根据前述段落中任一项所述的变体，其中在与如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的所述亲本α-淀粉酶相比时，关于洗涤性能的测量，所述变体具有至少1.1、至少1.2、至少1.3、至少1.4、至少1.5、至少1.6、至少1.7、至少1.8、至少1.9、至少2.0、至少2.2、至少2.4、至少2.6、至少2.8、至少3.0、至少3.2、至少3.4、至少3.6、至少3.8或至少4.0的改良因子(IF)。
25.根据前述段落中任一项所述的变体，其中关于洗涤性能的测量，在与如SEQ IDNO:1或SEQ ID NO:2所示的所述亲本α-淀粉酶相比时，在标准A洗涤剂组合物中，所述变体具有至少1.1、至少1.2、至少1.3、至少1.4、至少1.5、至少1.6、至少1.7、至少1.8、至少1.9、至少2.0、至少2.2、至少2.4、至少2.6、至少2.8、至少3.0、至少3.2、至少3.4、至少3.6、至少3.8或至少4.0的改良因子(IF)。
26.根据前述段落中任一项所述的变体，其中关于洗涤性能的测量，在与如SEQ IDNO:1或SEQ ID NO:2所示的所述亲本α-淀粉酶相比时，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少1.1、至少1.2、至少1.3、至少1.4、至少1.5、至少1.6、至少1.7、至少1.8、至少1.9、至少2.0、至少2.2、至少2.4、至少2.6、至少2.8、至少3.0、至少3.2、至少3.4、至少3.6、至少3.8或至少4.0的改良因子(IF)。
27.根据前述段落中任一项所述的变体，其中关于洗涤性能的测量，在与如SEQ IDNO:1或SEQ ID NO:2所示的所述亲本α-淀粉酶相比时，在标准A洗涤剂组合物和/或具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少1.1、至少1.2、至少1.3、至少1.4、至少1.5、至少1.6、至少1.7、至少1.8、至少1.9、至少2.0、至少2.2、至少2.4、至少2.6、至少2.8、至少3.0、至少3.2、至少3.4、至少3.6、至少3.8或至少4.0的改良因子(IF)。
28.根据前述段落中任一项所述的变体，其中使用自动机械应力测定(AMSA)评估，关于洗涤性能的测量，在与如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的所述亲本α-淀粉酶相比时，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少1.1、至少1.2、至少1.3、至少1.4、至少1.5、至少1.6、至少1.7、至少1.8、至少1.9、至少2.0、至少2.2、至少2.4、至少2.6、至少2.8、至少3.0、至少3.2、至少3.4、至少3.6、至少3.8或至少4.0的改良因子(IF)。
29.根据前述段落中任一项所述的变体，其中使用全规模自动餐具洗涤(ADW)评估，关于洗涤性能的测量，在与如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的具有α-淀粉酶活性的所述亲本相比时，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少1.1、至少1.2、至少1.3、至少1.4、至少1.5、至少1.6、至少1.7、至少1.8、至少1.9、至少2.0、至少2.2、至少2.4、至少2.6、至少2.8、至少3.0、至少3.2、至少3.4、至少3.6、至少3.8或至少4.0的改良因子(IF)。
30.根据前述段落中任一项所述的α-淀粉酶变体，其中所述亲本多肽与SEQ IDNO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ ID NO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:17的多肽具有至少59％，例如至少60％，例如至少62％、至少63％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％或100％序列同一性。
31.根据段落11所述的α-淀粉酶变体，其中所述亲本多肽包含SEQ ID NO:1、SEQID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ IDNO:8、SEQ ID NO:9、SEQ ID NO:10、SEQ ID NO:11、SEQ ID NO:12、SEQ ID NO:13、SEQ IDNO:14、SEQ ID NO:15、SEQ ID NO:16或SEQ ID NO:17的多肽，或由其组成。
32.根据前述段落中任一项所述的α-淀粉酶变体，所述变体与所述亲本多肽的氨基酸序列具有至少60％，例如至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％同一性、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性。
33.根据前述段落中任一项所述的α-淀粉酶变体，其中所述变体包含a)在对应于位置R181、G182、D183和G184的两个或更多个位置处的缺失和/或取代，使用SEQ ID NO:1进行编号，和b)在对应于如下位置的一个或多个位置处的修饰：H1、G7、I9、Q11、N16、N19、N25、A37、W43、W48、N54、V56、Y58、G59、A60、L63、T81、E84、E86、R90、Q98、V104、G109、A111、F113、R116、Q118、Q125、R127、E130、S132、G133、T134、Y135、Q136、A139、G142、N144、G149、R158、Y160、D163、W167、Q169、S170、R171、Q172、L173、A174、N175、R176、Y178、R181、G182、A186、W187、N195、M202、Y203、A204、V206、D209、H210、E212、T227、L235、V238、M246、Q256、K259、V264、A265、E266、Y267、K269、N270、L272、G273、A274、L275、E276、W284、M286、V291、L293、Y295、Y298、Q299、N302、S303、S304、N306、R310、N311、N314、G315、L317、Q319、R320、S323、F328、G337、A339、Q345、D357、Q365、P377、D375、Q385、K391、Q395、R400、D406、W408、V410、S431、G435、W439、R444、Q445、R458、N465、Q466、W469、F473、G476和V481，使用SEQ ID NO:1进行编号。
34.根据前述段落中任一项所述的α-淀粉酶变体，其中所述变体包含一个或多个以下修饰：H1*；G7A；I9M；Q11H；N16E；N16H；N16Y；N19D；N25K；N25M；N25T；A37V；W43Y；W48Y；N54Q；N54S；V56I；V56T；Y58F；G59A；A60S；A60T；L63F；T81A；E84Q；E86L；R90H；R90N；R90Q；Q98N；V104A；G109A；A111T；F113A；F113G；F113N；F113Q；F113T；F113Y；R116C；R116D；R116F；R116H；R116K；R116N；R116S；R116Y；Q118N；Q118T；Q125G；Q125S；R127A；R127F；R127H；R127L；R127N；R127T；E130D；E130F；E130I；E130K；E130L；E130N；E130S；E130T；E130V；S132A；S132D；S132F；S132L；S132M；S132P；S132T；G133D；T134C；T134E；T134N；T134P；T134R；T134S；T134W；T134Y；T134A；Y135H；Q136D；Q136E；Q136G；Q136N；Q136R；Q136S；A139T；G142H；N144H；G149A；R158C；R158H；R158K；R158Q；R158S；Y160D；Y160F；T160H；Y160N；D163H；W167*；Q169*；Q169E；Q169F；S170*；S170A；R171*；R171H；R171K；R171L；R171Y；Q172*；Q172K；Q172N；Q172S；L173*；L173K；A174*；A174N；A174S；N175*；N175S；R176*；R176A；Y178F；R181*；R181A；R181C；R181E；R181G；R181H；R181K；R181N；R181Q；G182*；G182T；A186D；A186E；A186H；A186K；A186N；A186T；W187M；N195D；N195F；N195H；N195Q；N195Y；M202L；Y203L；A204V；V206L；D209N；H210K；H210N；E212D；T227K；T227N；L235I；V238A；M246I；M246L；M246T；M246V；Q256H；Q256N；K259G；K259H；V264A；V246I；V264T；A265G；E266V；Y267F；Y267H；Y267L；K269M；K269Q；K269R；N270G；N270P；L272I；G273V；A274K；A274S；L275A；L275I；L275V；E276N；W284R；W284Y；M286L；V291A；V291I；V291T；L293I；L293V；Y295F；Y298E；Y298N；Q299N；Q299Y；N302A；N302H；N302K；N302Q；S303G；S304G；S304Q；N306H；N306K；N306Q；N306R；N306Y；R310N；R310S；R310Q；N311K；N311R；N314Q；G315N；L317V；Q319H；R320K；R320Q；R320S；S323T；H323K；F328L；G337D；G337E；A339S；Q345N；Q345R；L357F；Q365A；Q365C；Q365E；Q365H；Q365K；Q365M；Q365S；P377K；P377T；D375H；D375N；D375Y；Q386L；K391A；Q395K；R400S；D406H；W408H；V410I；S431F；G435C；W439R；W439T；R444T；Q445S；R458K；N465G；Q466S；W469N；W469Y；F473I；F473P；F473S；G476K；和V481A，使用SEQ ID NO:1进行编号。
34.根据前述段落中任一项所述的变体，其中所述变体选自下组，该组由以下组成：
A60T、
Y135H、
Q169E、
W48Y、
A174*、
M246L、
R90Q、
Y203L+V206L、
Q169F+S170A、
S132D+G133D、
N195F+Q365C、
N195F+Q365S、
N195F+Q365M、
R127L+Q365S、
R127N+Q365S、
R127L+Q365C、
N195F+Q365K、
I9M+N195F、
R171H+Q365C、
Y267F+Q365S、
F328L+Q365S、
R171L+Q365S、
N195F+M286L、
T134P+N195F、
S170*+R171*+A174*、
V264I+A265G+Y267F、
Q169*+S170*+A174*、
M246L+L275V+Q365S、
V264I+V291I+Q365S、
V264I+V291T+Q365K、
V264I+F328L+Q365C、
I9M+N195F+Q365C、
Q11H+Y267F+Q365C、
I9M+N195F+Q365S、
V264I+Y267F+Q365K、
R127L+M246V+Q365S、
A60S+R171Y+Q365S、
R127N+M246T+L275V、
V104A+N195F+Q365S、
V264I+F328L+Q365S、
R171H+N302H+Q365S、
V264I+Y267F+Q365S、
A174*+N175*+Y178F、
V264I+A265G+Q365C、
R171L+N302H+Q365C、
R171L+M246V+Q365C、
R171Y+M246L+Q365S、
V264T+Y267F+Q365S、
I9M+Y160H+N195F+Q365S、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
R127H+L235I+Q365S+G435C、
I9M+R171H+N195F+Q365S、
I9M+A186H+N195F+Q365S、
I9M+R171L+N195F+Q365S、
Q169*+S170*+R171*+A174*、
M246L+L275V+Q365S+D406H、
I9M+G184K+N195F+Q365S、
R127N+M246L+L275V+Q365S、
R171H+M246L+L275V+Q365S、
R127H+M246I+Q365C+V481A、
Y267F+V291A+F328L+Q365C、
I9M+A186E+N195F+Q365S、
E86L+R171L+N306R+Q365S、
V264I+Y267F+F328L+Q365S、
I9M+N195F+V291A+Q365S、
R127L+L235I+M246I+Q365C、
Y267F+V291A+F328L+Q365S、
V264I+Y267F+F328L+Q365K、
Q11H+V264I+A265G+Q365C、
W187M+N195F+H210K+Q365S、
R127H+M246T+L275A+Q365S、
I9M+A111T+N195F+Q365S、
I9M+Y58F+N195F+Q365S、
V264T+V291A+F328L+Q365S、
V264I+A265G+V291A+Q365C、
V264I+A265G+Y267F+Q365C、
V264I+Y267F+V291A+F328L+Q365S、
R127N+R171H+M246L+L275V+Q365S、
V264I+A265G+V291A+F328L+Q365S、
R127N+M246I+A265G+Y267H+Q365S、
E130I+T134A+R181N+N195F+Q365S、
R127N+M246L+L275V+N306R+Q365S、
I9M+N195F+V206L+D209N+Q365S、
R116S+S132F+R181N+N195F+Q365S、
E130T+T134Y+A186K+N195F+Q365S、
A37V+V264I+Y267F+F328L+Q365C、
Q11H+V264I+Y267F+F328L+Q365C、
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S、
Q169*+R171*+Q172*+L173*+A174*、
R116Y+S132P+Q136N+N195F+Q365S、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377Y、
V264I+A265G+Y267F+F328L+Q365S、
I9M+N195F+K269Q+A274K+Q365S、
E130D+T134Y+R181H+N195F+Q365S、
R116N+S132M+Q136R+N195F+Q365S、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377N、
R127N+R171L+M246L+L275V+Q365S、
N195F+G337E+Q365S+P375K+D377N、
Q11H+V264I+A265G+Y267F+Q365C、
R158Q+Y160N+W187M+N195F+Q365S、
V264I+Y267F+Q365K+W408H+V410I、
R127N+R171Y+M246L+L275V+Q365S、
N54Q+F113T+R171H+N302A+Q365C、
V264A+Y267F+V291T+F328L+Q365C、
Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*、
R116K+S132L+Q136R+R181C+N195F+Q365S、
V264T+A265G+Y267F+V291A+F328L+Q365C、
E130N+T134S+R181N+A186K+N195F+Q365S、
E130V+T134N+R181Y+A186K+N195F+Q365S、
E130D+T134W+R181KA186E+N195F+Q365S、
R116N+S132A+Q136D+R181K+N195F+Q365S、
E130S+T134E+R181S+A186T+N195F+Q365S、
R116C+S132A+Q136S+R181A+N195F+Q365S、
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+Q365S、
R127H+R171H+M246L+L275V+N306R+Q365S、
E130L+T134N+R181W+A186T+N195F+Q365S、
R116C+S132M+Q136S+R181Q+N195F+Q365S、
R116S+Y135H+Q136G+R181T+N195F+Q365S、
R116S+S132L+Q136E+R181G+N195F+Q365S、
N16E+N195F+G337E+Q365S+P375T+D377H、
V264I+A265G+Y267F+V291I+F328L+Q365S、
N16E+N195F+G337D+Q365S+P375K+D377N、
V264I+A265G+Y267F+F328L+Q365S+Q395K、
E130N+T134C+R181Q+A186N+N195F+Q365S、
V264I+A265G+Y267F+V291A+F328L+Q365C、
W167*+Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*、
W167*+Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*+N175*、
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+A204V+Q365S、
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S、
E130K+S132T+T134Y+R181T+A186K+N195F+Q365S、
E130Y+S132T+T134S+R181E+A186D+N195F+Q365S、
A139T+R158S+Y160D+W187M+N195F+H210N+Q365S、
I9M+R171L+N195F+M246L+K269M+W284R+Y298N+Q365S、
H1*+N54S+V56T+G109A+R171H+N195F+V206L+K391A、
W167*+Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*+N175*+R176*、
H1*+G59A+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+Y58F+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L293I+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+D209N+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195D+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195H+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+M246L+K391A、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L275I+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+G337E+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N25K+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127T+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+D209N+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127N+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+L63F+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L275V+K391A、
H1*+N19D+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
A60S+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+R171L+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+G337D+K391A、
H1*+N25M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+T81A+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N25T+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+R90N+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
E86L+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+R158C+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L293V+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L272I+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R158H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+G109A+K391A+N16Y+N54S+V56T+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L、
H1*+N54S+V56T+G109A+R158S+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
R127N+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+A274S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+A186E+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+R90H+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
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Y160H+Q172S+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+G184H+N195F+V206L+K391A、
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H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q299N+K391A、
Y160H+E212D+L275V+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306Q+K391A、
H1*+W43Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N311R+K391A、
Y160H+E212D+M246L+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+E84Q+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
A139T+R158S+Y160D+W187M+N195F+H210N+Q365S、
A186D+N195F、
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E130D+T134W+R181K+A186E+N195F+Q365S、
E130D+T134Y+R181H+N195F+Q365S、
E130D+T134W+R181K+A186E+N195F+Q365S、
E130F+T134R+R181S+A186D+N195F+Q365S、
E130I+T134A+R181N+N195F+Q365S、
E130I+T134A+R181N+N195F+Q365S、
E130L+T134N+R181W+A186T+N195F+Q365S、
E130N+T134C+R181Q+A186N+N195F+Q365S、
E130S+T134E+R181S+A186T+N195F+Q365S、
E130T+T134Y+A186K+N195F+Q365S、
E130V+T134N+R181Y+A186K+N195F+Q365S、
E130Y+S132T+T134S+R181E+A186D+N195F+Q365S、
E130Y+S132T+T134S+R181E+A186D+N195F+Q365S、
E86L+R171L+N306R+Q365S、
E86L+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
E86L+R171L+N306R+Q365S、
F113Q+R116H、
F113T+R171K+G273V、
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G7A+F113N+R116N+E276N+S304G+R320S+Q345N+W439R+N465G+Q466S+W469Y、
H1*+I9M+N16Y+N54S+V56T+G109A+R116Y+Q118T+Q125S+Q136E+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+R181H+N195F+M202L+V206L+R310N+R320Q+Q365S+K391A+R400S+W408H+R444T+Q445S+Q466S、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+F113G+R116H+D163H+Q169E+R171H+Q172K+A174S+G182T+N195F+M202L+V206L+M246L+L275V+A288V+L317V+Q319H+H324K+Q365S+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
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H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+W284Y+K391A、
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H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V20+6L+Q385L+K391A、
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56I+G109A+R127A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q385L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+F113A+R116D+Q118T+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+G142H+N144H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q125G+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+G184K+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+G184K+N195F+V206L+T227N+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+R320S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+D377H+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+G315N+Q385L+K391A、
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H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+M246L+K391A、
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H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306R+Q385L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N311K+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365H+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+T227K+K269R+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+V238A+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Y298E+N302K+S303G+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172N+A174*+N175S+N195F+V206L+K391A+S431F、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172N+L173K+A174*+N175S+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q172S+L173K+A174S+N175*+R176A+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R116D+Q118T+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R116H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N314Q+Q385L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127F+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R158K+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R171H+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+R90Q+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+E266V+Q385L+K391A、
H1*+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
I9M+A186E+N195F+Q365S、
I9M+A186H+N195F+Q365S、
I9M+G184K+N195F+Q365S、
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I9M+R127N+N195F+Q365S
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I9M+R171L+N195F+M246L+K269M+W284R+Y298N+Q365S、
I9M+R171L+N195F+Q365S、
I9M+Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
I9M+Y160H+N195F+Q365S、
I9M+A186E+N195F+Q365S、
I9M+A186H+N195F+Q365S、
I9M+G184K+N195F+Q365S、
I9M+N16Y+N54S+V56T+G109A+R116Y+Q118T+Q125S+Q136E+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+R181H+N195F+M202L+V206L+R310N+R320Q+Q365S+K391A+R400S+W408H+R444T+Q445S+Q466S、
I9M+N195F+Q365C、
I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
I9M+R171H+N195F+Q365S、
I9M+R171L+N195F+M246L+K269M+W284R+Y298N+Q365S、
I9M+R171L+N195F+Q365S、
I9M+Y160H+N195F+Q365S、
M202L、
M246L+L275V+Q365S+D406H、
M246L、
M246L+L275V+Q365S、
M246L+L275V+Q365S+D406H、
N16E+N195F+G337D+Q365S+P375K+D377N、
N16E+N195F+G337E+Q365S+P375T+D377H、
N16E+N195F+G337E+Q365S+P375T+D377H、
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S、
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377N、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377Y、
N195F+G337E+Q365S+P375K+D377N、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377Y、
N195F+G337E+Q365S+P375K+D377N、
N195F+Q365S、
N54Q+F113T+R171H+N302A+Q365C、
N54S+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Q11H+V264I+A265G+Q365C、
Q11H+V264I+A265G+Y267F+Q365C、
Q11H+V264I+Y267F+F328L+Q365C、
Q11H+Y267F+Q365C、
Q11H+V264I+A265G+Q365C、
Q169*+S170*+A174*、
Q169*+S170*+R171*+A174*、
Q98N+F113Y+R158Q+Y160F+S304Q+R320S+W439R+F473P、
R116K+S132L+Q136R+R181C+N195F+Q365S、
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+A204V+Q365S、
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+A204V+Q365S、
R116N+S132A+Q136D+R181K+N195F+Q365S、
R116N+S132M+Q136R+N195F+Q365S、
R116N+S132A+Q136D+R181K+N195F+Q365S、
R116S+S132F+R181N+N195F+Q365S、
R116S+Y135H+Q136G+R181T+N195F+Q365S、
R116Y+S132P+Q136N+N195F+Q365S、
R127H+L235I+Q365S+G435C、
R127L+M246V+Q365S、
R127L+Q365C、
R127L+Q365S、
R127L、
R127N+M246L+L275V+Q365S、
R127N+Q365S、
R127N+R171L+M246L+L275V+Q365S、
R127N+R171H+M246L+L275V+Q365S、
R171H+Q365C、
R171H+M246L+L275V+Q365S、
R171H+N302H+Q365S、
R171H、
R171H+Q365C、
R171L+N302H+Q365C、
R171L+Q365S、
R171Y++M246L+Q365S、
R171Y+N306K、
R181S+G184S、
V104A+N195F+Q365S、
V264A+Y267F+V291T+F328L+Q365C、
V264I+A265G+V291A+F328L+Q365S、
V264I+A265G+V291A+Q365C、
V264I+A265G+Y267F+F328L+Q365S+Q395K、
V264I+A265G+Y267F+F328L+Q365S、
V264I+A265G+Y267F+V291I+F328L+Q365S、
V264I+A265G+Y267F、
V264I+F328L+Q365C、
V264I+F328L+Q365S、
V264I+L357F、
V264I+Q365C、
V264I+V291I+Q365S、
V264I+V291T+Q365K、
V264I+Y267F+F328L+Q365C、
V264I+Y267F+F328L+Q365K、
V264I+Y267F+F328L+Q365S、
V264I+Y267F+Q365K+W408H+V410I、
V264I+Y267F+Q365K、
V264I+Y267F+Q365S、
V264I+Y267F+V291A+F328L+Q365C、
V264I+Y267F+V291A+F328L+Q365S、
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S、
V264I+A265G+Y267F、
V264I+F328L+Q365C、
V264I+Y267F+F328L+Q365K、
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S、
V264T+A265G+Y267F+V291A+F328L+Q365C、
V264T+A265G+Y267L+F328L+Q365C、
V264T+V291A+F328L+Q365S、
V264T+Y267F+Q365S、
V264T+Y267L+F328L+Q365C、
V56T+Y160H+A174N+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
V56T+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
W187M+N195F+H210K+Q365S、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473I+G476K、
Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+A174S+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+N306R+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+N306Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+S304G+N306R+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+S304G+N306Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+E212D+K259G+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+E212D+Q256H+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+E212D+Q256H+K259H+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+E212D+Q256N+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473I+G476K、
Y160H+N195F+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+N195Q+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+N195Y+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+Q169E+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+R171Y+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y267F+Q365S、
Y267F+V291A+F328L+Q365C、
Y267F+V291A+F328L+Q365S、
Y267F+Q365S、
Y267F+V291A+F328L+Q365S、
Y295F，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中关于洗涤性能的测量，在标准A洗涤剂组合物和/或具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥1.1的改良因子(IF)。
35.根据前述段落中任一项所述的变体，其中所述变体选自下组，该组由以下组成：
A60T、
Y135H、
Q169E、
W48Y、
A174*、
M246L、
R90Q、
Y203L+V206L、
Q169F+S170A、
S132D+G133D、
N195F+Q365C、
N195F+Q365S、
N195F+Q365M、
N195F+Q365K、
R127L+Q365S、
R127N+Q365S、
R127L+Q365C、
R171L+Q365S、
R171H+Q365C、
Y267F+Q365S、
F328L+Q365S、
I9M+N195F、
N195F+M286L、
T134P+N195F、
S170*+R171*+A174*、
V264I+A265G+Y267F、
Q169*+S170*+A174*、
M246L+L275V+Q365S、
V264I+V291I+Q365S、
V264I+V291T+Q365K、
V264I+F328L+Q365C、
I9M+N195F+Q365C、
Q11H+Y267F+Q365C、
I9M+N195F+Q365S、
V264I+Y267F+Q365K、
R127L+M246V+Q365S、
A60S+R171Y+Q365S、
R127N+M246T+L275V、
V104A+N195F+Q365S、
V264I+F328L+Q365S、
R171H+N302H+Q365S、
V264I+Y267F+Q365S、
A174*+N175*+Y178F、
V264I+A265G+Q365C、
R171L+N302H+Q365C、
R171L+M246V+Q365C、
R171Y+M246L+Q365S、
V264T+Y267F+Q365S、
I9M+Y160H+N195F+Q365S、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
R127H+L235I+Q365S+G435C、
I9M+R171H+N195F+Q365S、
I9M+A186H+N195F+Q365S、
I9M+R171L+N195F+Q365S、
Q169*+S170*+R171*+A174*、
M246L+L275V+Q365S+D406H、
I9M+G184K+N195F+Q365S、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
R127N+M246L+L275V+Q365S、
R171H+M246L+L275V+Q365S、
R127H+M246I+Q365C+V481A、
R127N+M246L+L275V+Q365S、
Y267F+V291A+F328L+Q365C、
I9M+A186E+N195F+Q365S、
E86L+R171L+N306R+Q365S、
V264I+Y267F+F328L+Q365S、
I9M+N195F+V291A+Q365S、
R127L+L235I+M246I+Q365C、
Y267F+V291A+F328L+Q365S、
V264I+Y267F+F328L+Q365K、
Q11H+V264I+A265G+Q365C、
I9M+R171H+N195F+Q365S、
W187M+N195F+H210K+Q365S、
R127H+M246T+L275A+Q365S、
I9M+A111T+N195F+Q365S、
I9M+Y58F+N195F+Q365S、
V264T+V291A+F328L+Q365S、
V264I+A265G+V291A+Q365C、
V264I+A265G+Y267F+Q365C、
V264I+Y267F+V291A+F328L+Q365S、
R127N+R171H+M246L+L275V+Q365S、
V264I+A265G+V291A+F328L+Q365S、
R127N+M246I+A265G+Y267H+Q365S、
E130I+T134A+R181N+N195F+Q365S、
R127N+M246L+L275V+N306R+Q365S、
I9M+N195F+V206L+D209N+Q365S、
R116S+S132F+R181N+N195F+Q365S、
E130T+T134Y+A186K+N195F+Q365S、
A37V+V264I+Y267F+F328L+Q365C、
Q11H+V264I+Y267F+F328L+Q365C、
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S、
Q169*+R171*+Q172*+L173*+A174*、
R116Y+S132P+Q136N+N195F+Q365S、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377Y、
V264I+A265G+Y267F+F328L+Q365S、
I9M+N195F+K269Q+A274K+Q365S、
E130D+T134Y+R181H+N195F+Q365S、
R116N+S132M+Q136R+N195F+Q365S、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377N、
R127N+R171L+M246L+L275V+Q365S、
N195F+G337E+Q365S+P375K+D377N、
Q11H+V264I+A265G+Y267F+Q365C、
R158Q+Y160N+W187M+N195F+Q365S、
V264I+Y267F+Q365K+W408H+V410I、
R127N+R171Y+M246L+L275V+Q365S、
N54Q+F113T+R171H+N302A+Q365C、
V264A+Y267F+V291T+F328L+Q365C、
Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*、
R116K+S132L+Q136R+R181C+N195F+Q365S、
V264T+A265G+Y267F+V291A+F328L+Q365C、
E130N+T134S+R181N+A186K+N195F+Q365S、
E130V+T134N+R181Y+A186K+N195F+Q365S、
E130D+T134W+R181KA186E+N195F+Q365S、
R116N+S132A+Q136D+R181K+N195F+Q365S、
E130S+T134E+R181S+A186T+N195F+Q365S、
R116C+S132A+Q136S+R181A+N195F+Q365S、
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+Q365S、
R127H+R171H+M246L+L275V+N306R+Q365S、
E130L+T134N+R181W+A186T+N195F+Q365S、
R116C+S132M+Q136S+R181Q+N195F+Q365S、
R116S+Y135H+Q136G+R181T+N195F+Q365S、
R116S+S132L+Q136E+R181G+N195F+Q365S、
N16E+N195F+G337E+Q365S+P375T+D377H、
V264I+A265G+Y267F+V291I+F328L+Q365S、
N16E+N195F+G337D+Q365S+P375K+D377N、
V264I+A265G+Y267F+F328L+Q365S+Q395K、
E130N+T134C+R181Q+A186N+N195F+Q365S、
V264I+A265G+Y267F+V291A+F328L+Q365C、
W167*+Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*、
W167*+Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*+N175*、
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+A204V+Q365S、
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S、
E130K+S132T+T134Y+R181T+A186K+N195F+Q365S、
E130Y+S132T+T134S+R181E+A186D+N195F+Q365S、
A139T+R158S+Y160D+W187M+N195F+H210N+Q365S、
I9M+R171L+N195F+M246L+K269M+W284R+Y298N+Q365S、
H1*+N54S+V56T+G109A+R171H+N195F+V206L+K391A、
W167*+Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*+N175*+R176*、
H1*+G59A+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+Y58F+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L293I+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+D209N+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195D+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195H+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+M246L+K391A、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L275I+K391A、
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H1*+N54S+V56T+G109A+R116F+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306R+K391A、
Y160H+R171L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+G109A+K391A+N54S+V56T+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q118N+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
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H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365A+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q299N+K391A、
Y160H+E212D+L275V+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306Q+K391A、
H1*+W43Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127L+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L275V+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N311R+K391A、
Y160H+E212D+M246L+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+E84Q+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306H+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R158K+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127N+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
V56T+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
N54S+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+E86L+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
Y160H+E212D+Q256H+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q125G+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306R+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N311K+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K269M+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+G184K+N195F+V206L+K391A、
Y160H+E212D+K259G+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+A174S+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+N195Y+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+Q169E+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
E86L+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+N306Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
G7A+F113N+R116N+E276N+S304G+R320S+Q345N+W439R+N465G+Q466S+W469Y、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+D377H+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+V238A+K391A、
Y160H+N195F+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+E212D+Q256N+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365H+K391A、
Y160H+N195Q+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+R171Y+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
G109A+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+N306R+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127F+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172N+L173K+A174*+N175S+N195F+V206L+K391A、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+S304G+N306R+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+G142H+N144H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N302Q+Q385L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306R+Q385L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+G184K+N195F+V206L+T227N+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+T227K+K269R+K391A、
H1*+N54S+V56I+G109A+R127A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q385L+K391A、
Y160H+E212D+Q256H+K259H+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+G315N+Q385L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172N+A174*+N175S+N195F+V206L+K391A+S431F、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+S304G+N306Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L235I+V238A+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q172S+L173K+A174S+N175*+R176A+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R116D+Q118T+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
V56T+Y160H+A174N+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+R90Q+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+E266V+Q385L+K391A、
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V20+6L+Q385L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+F113A+R116D+Q118T+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Y298E+N302K+S303G+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R116H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N314Q+Q385L+K391A、
H1*+I9M+N16Y+N54S+V56T+G109A+R116Y+Q118T+Q125S+Q136E+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+R181H+N195F+M202L+V206L+R310N+R320Q+Q365S+K391A+R400S+W408H+R444T+Q445S+Q466S，使用SEQ ID NO:1进行编号并且其中关于洗涤性能的测量，与SEQ ID NO:2的亲本α-淀粉酶相比，在标准A洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥1.1的改良的相对比活性。
36.根据前述段落中任一项所述的变体，其中所述变体选自下组，该组由以下组成：
M246L、
N195F+Q365C、
N195F+Q365S、
N195F+Q365M、
N195F+Q365K、
R127L+Q365S、
R127N+Q365S、
R127L+Q365C、
R171H+Q365C、
Y267F+Q365S、
F328L+Q365S、
I9M+N195F、
S170*+R171*+A174*、
V264I+A265G+Y267F、
Q169*+S170*+A174*、
M246L+L275V+Q365S、
V264I+V291I+Q365S、
V264I+V291T+Q365K、
V264I+F328L+Q365C、
I9M+N195F+Q365C、
Q11H+Y267F+Q365C、
I9M+N195F+Q365S、
V264I+Y267F+Q365K、
R127L+M246V+Q365S、
I9M+Y160H+N195F+Q365S、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
R127H+L235I+Q365S+G435C、
I9M+R171H+N195F+Q365S、
I9M+A186H+N195F+Q365S、
I9M+R171L+N195F+Q365S、
Q169*+S170*+R171*+A174*、
M246L+L275V+Q365S+D406H、
I9M+G184K+N195F+Q365S、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
R127N+M246L+L275V+Q365S、
R171H+M246L+L275V+Q365S、
R127H+M246I+Q365C+V481A、
R127N+M246L+L275V+Q365S、
Y267F+V291A+F328L+Q365C、
I9M+A186E+N195F+Q365S、
E86L+R171L+N306R+Q365S、
V264I+Y267F+F328L+Q365S、
I9M+N195F+V291A+Q365S、
R127L+L235I+M246I+Q365C、
Y267F+V291A+F328L+Q365S、
V264I+Y267F+F328L+Q365K、
Q11H+V264I+A265G+Q365C、
V264I+Y267F+V291A+F328L+Q365S、
V264I+A265G+V291A+F328L+Q365S、
R127N+M246I+A265G+Y267H+Q365S、
E130I+T134A+R181N+N195F+Q365S、
R127N+M246L+L275V+N306R+Q365S、
I9M+N195F+V206L+D209N+Q365S、
R116S+S132F+R181N+N195F+Q365S、
E130T+T134Y+A186K+N195F+Q365S、
A37V+V264I+Y267F+F328L+Q365C、
Q11H+V264I+Y267F+F328L+Q365C、
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S、
Q169*+R171*+Q172*+L173*+A174*、
R116Y+S132P+Q136N+N195F+Q365S、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377Y、
V264I+A265G+Y267F+F328L+Q365S、
I9M+N195F+K269Q+A274K+Q365S、
E130D+T134Y+R181H+N195F+Q365S、
R116N+S132M+Q136R+N195F+Q365S、
Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*、
R116K+S132L+Q136R+R181C+N195F+Q365S、
V264T+A265G+Y267F+V291A+F328L+Q365C、
E130N+T134S+R181N+A186K+N195F+Q365S、
E130V+T134N+R181Y+A186K+N195F+Q365S、
E130D+T134W+R181KA186E+N195F+Q365S、
R116N+S132A+Q136D+R181K+N195F+Q365S、
E130S+T134E+R181S+A186T+N195F+Q365S、
R116C+S132A+Q136S+R181A+N195F+Q365S、
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+Q365S、
R127H+R171H+M246L+L275V+N306R+Q365S、
E130L+T134N+R181W+A186T+N195F+Q365S、
R116C+S132M+Q136S+R181Q+N195F+Q365S、
R116S+Y135H+Q136G+R181T+N195F+Q365S、
R116S+S132L+Q136E+R181G+N195F+Q365S、
N16E+N195F+G337E+Q365S+P375T+D377H、
W167*+Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*、
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+A204V+Q365S、
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S、
E130K+S132T+T134Y+R181T+A186K+N195F+Q365S、
E130Y+S132T+T134S+R181E+A186D+N195F+Q365S、
I9M+R171L+N195F+M246L+K269M+W284R+Y298N+Q365S、
W167*+Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*+N175*+R176*、
H1*+G59A+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L293I+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+D209N+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195D+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+M246L+K391A、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L275I+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+G337E+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N25K+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127T+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+D209N+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127N+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+L63F+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L275V+K391A、
H1*+N19D+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
A60S+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+R171L+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+G337D+K391A、
H1*+N25M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+T81A+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N25T+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+R90N+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+R171L+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
E86L+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+R158C+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L293V+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L272I+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R158H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+G109A+K391A+N16Y+N54S+V56T+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L、
H1*+N54S+V56T+G109A+R158S+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
R127N+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+A274S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+A186E+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+R90H+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
I9M+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+Q172S+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+G184H+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+A60S+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365C+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R116N+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306H+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N302H+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+R171Y+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365E+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+A186H+N195F+V206L+K391A、
A60S+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+A60S+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+R181S+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172S+A174*+N175S+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L275V+K391A、
H1*+N54S+V56T+E86L+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N302K+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127L+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+R171Y+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+V291A+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R116F+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306R+K391A、
Y160H+R171L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+G109A+K391A+N54S+V56T+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q118N+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+T134P+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*N195F+V206L+Q299Y+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306K+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365A+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q299N+K391A、
Y160H+E212D+L275V+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306Q+K391A、
H1*+W43Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127L+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L275V+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N311R+K391A、
Y160H+E212D+M246L+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+E84Q+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306H+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R158K+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127N+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
V56T+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
N54S+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+E86L+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
Y160H+E212D+Q256H+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172N+L173K+A174*+N175S+N195F+V206L+K391A、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+S304G+N306R+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+G142H+N144H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N302Q+Q385L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306R+Q385L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+G184K+N195F+V206L+T227N+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+T227K+K269R+K391A、
H1*+N54S+V56I+G109A+R127A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q385L+K391A、
Y160H+E212D+Q256H+K259H+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+G315N+Q385L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172N+A174*+N175S+N195F+V206L+K391A+S431F、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+S304G+N306Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+R90Q+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+E266V+Q385L+K391A、
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V20+6L+Q385L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+F113A+R116D+Q118T+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Y298E+N302K+S303G+K391A，使用SEQ ID NO:1进行编号并且其中关于洗涤性能的测量，与SEQ ID NO:2的亲本α-淀粉酶相比，在标准A洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥1.5的改良的相对比活性。
37.根据前述段落中任一项所述的变体，其中所述变体选自下组，该组由以下组成：
N195F+Q365C、
N195F+Q365S、
N195F+Q365M、
R127L+Q365S、
R127N+Q365S、
S170*+R171*+A174*、
V264I+A265G+Y267F、
Q169*+S170*+A174*、
V264I+V291I+Q365S、
V264I+V291T+Q365K、
V264I+F328L+Q365C、
I9M+Y160H+N195F+Q365S、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
R127H+L235I+Q365S+G435C、
I9M+R171H+N195F+Q365S、
I9M+A186H+N195F+Q365S、
I9M+R171L+N195F+Q365S、
Q169*+S170*+R171*+A174*、
M246L+L275V+Q365S+D406H、
I9M+G184K+N195F+Q365S、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
R127N+M246L+L275V+Q365S、
R171H+M246L+L275V+Q365S、
R127H+M246I+Q365C+V481A、
R127N+M246L+L275V+Q365S、
Y267F+V291A+F328L+Q365C、
V264I+Y267F+V291A+F328L+Q365S、
V264I+A265G+V291A+F328L+Q365S、
R127N+M246I+A265G+Y267H+Q365S、
E130I+T134A+R181N+N195F+Q365S、
R127N+M246L+L275V+N306R+Q365S、
I9M+N195F+V206L+D209N+Q365S、
Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*、
R116K+S132L+Q136R+R181C+N195F+Q365S、
V264T+A265G+Y267F+V291A+F328L+Q365C、
E130N+T134S+R181N+A186K+N195F+Q365S、
E130V+T134N+R181Y+A186K+N195F+Q365S、
W167*+Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*、
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+A204V+Q365S、
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S、
E130K+S132T+T134Y+R181T+A186K+N195F+Q365S、
E130Y+S132T+T134S+R181E+A186D+N195F+Q365S、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+M246L+K391A、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L275I+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+G337E+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N25K+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127T+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+D209N+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127N+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+L63F+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L275V+K391A、
H1*+N19D+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
A60S+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+R171L+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+G337D+K391A、
H1*+N25M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+T81A+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N25T+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+R90N+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+R171L+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172N+L173K+A174*+N175S+N195F+V206L+K391A、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+S304G+N306R+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+G142H+N144H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+R90Q+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+E266V+Q385L+K391A、
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V20+6L+Q385L+K391A，使用SEQ ID NO:1进行编号并且其中关于洗涤性能的测量，与SEQ ID NO:2的亲本α-淀粉酶相比，在标准A洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥2.0的改良的相对比活性。
38.根据前述段落中任一项所述的变体，其中所述变体选自下组，该组由以下组成：
N195F+Q365C、
S170*+R171*+A174*、
I9M+Y160H+N195F+Q365S、
R127H+L235I+Q365S+G435C、
I9M+R171H+N195F+Q365S、
V264I+Y267F+V291A+F328L+Q365S、
Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*、
W167*+Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*、
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+A204V+Q365S、
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S、
E130K+S132T+T134Y+R181T+A186K+N195F+Q365S、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+M246L+K391A、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K，使用SEQ ID NO:1进行编号并且其中关于洗涤性能的测量，与SEQ ID NO:2的亲本α-淀粉酶相比，在标准A洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥2.5的改良的相对比活性。
39.根据前述段落中任一项所述的变体，其中所述变体选自下组，该组由以下组成：
Y295F、
M246L、
M202L、
R181S+G184S、
F113Q+R116H、
V264I+L357F、
Y267F+Q365S、
R171H、
R171Y+N306K、
R171H+Q365C、
R171L+Q365S、
R171H+N302H+Q365S、
R171L+N302H+Q365C、
R171Y++M246L+Q365S、
F328L+Q365S、
R127L、
R127N+Q365S、
R127L+Q365C、
R127L+Q365S、
R127L+M246V+Q365S、
A186D+N195F、
V264I+Q365C、
I9M+N195F+Q365C、
V264I+A265G+Y267F、
V264I+V291T+Q365K、
A60S+R171Y+Q365S、
V264I+Y267F+Q365K、
V264I+F328L+Q365C、
M246L+L275V+Q365S、
V264T+Y267F+Q365S、
V264I+F328L+Q365S、
Q11H+Y267F+Q365C、
V104A+N195F+Q365S、
V264I+V291I+Q365S、
V264I+Y267F+Q365S、
F113T+R171K+G273V、
Q169*+S170*+A174*、
I9M+R171H+N195F+Q365S、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
E86L+R171L+N306R+Q365S、
I9M+A186E+N195F+Q365S、
I9M+Y160H+N195F+Q365S、
I9M+A186H+N195F+Q365S、
R171H+M246L+L275V+Q365S、
I9M+N195F+V291A+Q365S、
I9M+G184K+N195F+Q365S、
M246L+L275V+Q365S+D406H、
Y267F+V291A+F328L+Q365S、
Y267F+V291A+F328L+Q365C、
V264I+Y267F+F328L+Q365K、
I9M+R171L+N195F+Q365S、
Q11H+V264I+A265G+Q365C、
V264T+V291A+F328L+Q365S、
V264I+Y267F+F328L+Q365S、
R127N+M246L+L275V+Q365S、
I9M+N195F+N270G+Q365S、
I9M+N195F+N270P+Q365S、
V264T+Y267L+F328L+Q365C、
V264I+A265G+V291A+Q365C、
W187M+N195F+H210K+Q365S、
V264I+Y267F+F328L+Q365C、
Q169*+S170*+R171*+A174*、
I9M+N195F+V206L+D209N+Q365S、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377N、
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S、
N195F+G337E+Q365S+P375K+D377N、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377Y、
V264I+A265G+V291A+F328L+Q365S、
I9M+N195F+K269Q+A274K+Q365S、
V264I+Y267F+Q365K+W408H+V410I、
E130D+T134Y+R181H+N195F+Q365S、
V264I+Y267F+V291A+F328L+Q365S、
E130I+T134A+R181N+N195F+Q365S、
R116Y+S132P+Q136N+N195F+Q365S、
R116N+S132M+Q136R+N195F+Q365S、
V264I+A265G+Y267F+F328L+Q365S、
Q11H+V264I+Y267F+F328L+Q365C、
Q11H+V264I+A265G+Y267F+Q365C、
E130T+T134Y+A186K+N195F+Q365S、
R116S+S132F+R181N+N195F+Q365S、
V264A+Y267F+V291T+F328L+Q365C、
N54Q+F113T+R171H+N302A+Q365C、
R127N+R171L+M246L+L275V+Q365S、
V264T+A265G+Y267L+F328L+Q365C、
V264I+Y267F+V291A+F328L+Q365C、
N16E+N195F+G337E+Q365S+P375T+D377H、
E130D+T134W+R181K+A186E+N195F+Q365S、
E130F+T134R+R181S+A186D+N195F+Q365S、
V264T+A265G+Y267F+V291A+F328L+Q365C、
E130V+T134N+R181Y+A186K+N195F+Q365S、
R116N+S132A+Q136D+R181K+N195F+Q365S、
E130L+T134N+R181W+A186T+N195F+Q365S、
V264I+A265G+Y267F+F328L+Q365S+Q395K、
N16E+N195F+G337D+Q365S+P375K+D377N、
E130N+T134C+R181Q+A186N+N195F+Q365S、
R116S+Y135H+Q136G+R181T+N195F+Q365S、
R116K+S132L+Q136R+R181C+N195F+Q365S、
V264I+A265G+Y267F+V291I+F328L+Q365S、
E130S+T134E+R181S+A186T+N195F+Q365S、
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S、
A139T+R158S+Y160D+W187M+N195F+H210N+Q365S、
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+A204V+Q365S、
E130Y+S132T+T134S+R181E+A186D+N195F+Q365S、
I9M+R171L+N195F+M246L+K269M+W284R+Y298N+Q365S、
Q98N+F113Y+R158Q+Y160F+S304Q+R320S+W439R+F473P、
H1*+N54S+V56T+G109A+R171H+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473I+G476K、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
E86L+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306R+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+R320S+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
I9M+Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+W284Y+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+F113G+R116H+D163H+Q169E+R171H+Q172K+A174S+G182T+N195F+M202L+V206L+M246L+L275V+A288V+L317V+Q319H+H324K+Q365S+K391A、
H1*+I9M+N16Y+N54S+V56T+G109A+R116Y+Q118T+Q125S+Q136E+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+R181H+N195F+M202L+V206L+R310N+R320Q+Q365S+K391A+R400S+W408H+R444T+Q445S+Q466S，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中使用AMSA评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥1.1的改良因子(IF)。
40.根据前述段落中任一项所述的变体，其中所述变体选自下组，该组由以下组成：
Y295F、
M246L、
M202L、
R181S+G184S、
F113Q+R116H、
Y267F+Q365S、
R171H、
R171H+Q365C、
R171L+Q365S、
R171H+N302H+Q365S、
R171L+N302H+Q365C、
R171Y++M246L+Q365S、
F328L+Q365S、
I9M+N195F+Q365C、
V264I+A265G+Y267F、
V264I+V291T+Q365K、
A60S+R171Y+Q365S、
V264I+Y267F+Q365K、
V264I+F328L+Q365C、
M246L+L275V+Q365S、
V264T+Y267F+Q365S、
V264I+F328L+Q365S、
Q11H+Y267F+Q365C、
I9M+R171H+N195F+Q365S、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
E86L+R171L+N306R+Q365S、
I9M+A186E+N195F+Q365S、
I9M+Y160H+N195F+Q365S、
I9M+A186H+N195F+Q365S、
I9M+N195F+V291A+Q365S、
I9M+G184K+N195F+Q365S、
M246L+L275V+Q365S+D406H、
Y267F+V291A+F328L+Q365S、
Y267F+V291A+F328L+Q365C、
V264I+Y267F+F328L+Q365K、
I9M+R171L+N195F+Q365S、
Q11H+V264I+A265G+Q365C、
I9M+N195F+V206L+D209N+Q365S、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377N、
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S、
N195F+G337E+Q365S+P375K+D377N、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377Y、
V264I+A265G+V291A+F328L+Q365S、
I9M+N195F+K269Q+A274K+Q365S、
V264I+Y267F+Q365K+W408H+V410I、
E130D+T134Y+R181H+N195F+Q365S、
V264I+Y267F+V291A+F328L+Q365S、
E130I+T134A+R181N+N195F+Q365S、
R116Y+S132P+Q136N+N195F+Q365S、
R116N+S132M+Q136R+N195F+Q365S、
N16E+N195F+G337E+Q365S+P375T+D377H、
E130D+T134W+R181K+A186E+N195F+Q365S、
E130F+T134R+R181S+A186D+N195F+Q365S、
V264T+A265G+Y267F+V291A+F328L+Q365C、
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S、
I9M+R171L+N195F+M246L+K269M+W284R+Y298N+Q365S、
Q98N+F113Y+R158Q+Y160F+S304Q+R320S+W439R+F473P、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+R320S+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K、
H1*+I9M+N16Y+N54S+V56T+G109A+R116Y+Q118T+Q125S+Q136E+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+R181H+N195F+M202L+V206L+R310N+R320Q+Q365S+K391A+R400S+W408H+R444T+Q445S+Q466S，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中使用AMSA评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥1.5的改良因子(IF)。
41.根据前述段落中任一项所述的变体，其中所述变体选自下组，该组由以下组成：
M202L、
R171H+Q365C、
R171L+Q365S、
R171H+N302H+Q365S、
R171L+N302H+Q365C、
I9M+N195F+Q365C、
V264I+A265G+Y267F、
E86L+R171L+N306R+Q365S、
I9M+A186E+N195F+Q365S、
I9M+Y160H+N195F+Q365S、
I9M+A186H+N195F+Q365S、
I9M+N195F+V206L+D209N+Q365S、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377N、
I9M+R171L+N195F+M246L+K269M+W284R+Y298N+Q365S、
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+R320S+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K、
H1*+I9M+N16Y+N54S+V56T+G109A+R116Y+Q118T+Q125S+Q136E+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+R181H+N195F+M202L+V206L+R310N+R320Q+Q365S+K391A+R400S+W408H+R444T+Q445S+Q466S，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中使用AMSA评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥2.0的改良因子(IF)。
42.根据前述段落中任一项所述的变体，其中所述变体选自下组，该组由以下组成：
M202L、
R171H+Q365C、
I9M+N195F+Q365C、
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中使用AMSA评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥2.5的改良因子(IF)。
43.根据前述段落中任一项所述的变体，其中所述变体选自下组，该组由以下组成：
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中使用AMSA评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥2.5的改良因子(IF)。
44.根据前述段落中任一项所述的变体，其中所述变体选自下组，该组由以下组成：
V264I+A265G+Y267F、
R171L+Q365S、
Y267F+Q365S、
R127L+Q365S、
V264I+F328L+Q365C、
M246L+L275V+Q365S+D406H、
Q11H+V264I+A265G+Q365C、
R127N+R171H+M246L+L275V+Q365S、
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S、
Y267F+V291A+F328L+Q365S、
V264I+Y267F+F328L+Q365K、
R127H+L235I+Q365S+G435C、
N195F+Q365S、
I9M+N195F+Q365C、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
I9M+Y160H+N195F+Q365S、
I9M+A186E+N195F+Q365S、
I9M+R171H+N195F+Q365S、
I9M+A186H+N195F+Q365S、
I9M+G184K+N195F+Q365S、
N195F+G337E+Q365S+P375K+D377N、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377Y、
E130I+T134A+R181N+N195F+Q365S、
R116N+S132A+Q136D+R181K+N195F+Q365S、
N16E+N195F+G337E+Q365S+P375T+D377H、
E130D+T134W+R181K+A186E+N195F+Q365S、
E130Y+S132T+T134S+R181E+A186D+N195F+Q365S、
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+A204V+Q365S、
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S、
I9M+R171L+N195F+M246L+K269M+W284R+Y298N+Q365S、
Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473I+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+M246L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+G184K+N195F+V206L+T227N+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206LK+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+R320S+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K、
I9M+N16Y+N54S+V56T+G109A+R116Y+Q118T+Q125S+Q136E+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+R181H+N195F+M202L+V206L+R310N+R320Q+Q365S+K391A+R400S+W408H+R444T+Q445S+Q466S、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在40℃下使用全规模自动餐具洗涤(ADW)评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥1.1的改良因子(IF)。
45.根据前述段落中任一项所述的变体，其中所述变体选自下组，该组由以下组成：
V264I+A265G+Y267F、
R127N+R171H+M246L+L275V+Q365S、
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S、
I9M+N195F+Q365C、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
I9M+Y160H+N195F+Q365S、
I9M+A186E+N195F+Q365S、
N195F+G337E+Q365S+P375K+D377N、
N16E+N195F+G337E+Q365S+P375T+D377H、
E130D+T134W+R181K+A186E+N195F+Q365S、
E130Y+S132T+T134S+R181E+A186D+N195F+Q365S、
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+A204V+Q365S、
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206LK+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+R320S+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K、
I9M+N16Y+N54S+V56T+G109A+R116Y+Q118T+Q125S+Q136E+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+R181H+N195F+M202L+V206L+R310N+R320Q+Q365S+K391A+R400S+W408H+R444T+Q445S+Q466S、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在40℃下使用全规模自动餐具洗涤(ADW)评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥1.5的改良因子(IF)。
46.根据前述段落中任一项所述的变体，其中所述变体选自下组，该组由以下组成：
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206LK+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+R320S+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K、
I9M+N16Y+N54S+V56T+G109A+R116Y+Q118T+Q125S+Q136E+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+R181H+N195F+M202L+V206L+R310N+R320Q+Q365S+K391A+R400S+W408H+R444T+Q445S+Q466S、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在40℃下使用全规模自动餐具洗涤(ADW)评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥2.0的改良因子(IF)。
47.根据前述段落中任一项所述的变体，其中所述变体选自下组，该组由以下组成：
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206LK+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+R320S+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在40℃下使用全规模自动餐具洗涤(ADW)评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥2.5的改良因子(IF)。
48.根据前述段落中任一项所述的变体，其中所述变体选自下组，该组由以下组成：
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206LK+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+R320S+K391A、
I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在40℃下使用全规模自动餐具洗涤(ADW)评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥3.0的改良因子(IF)。
48.根据前述段落中任一项所述的变体，其中所述变体选自下组，该组由以下组成：
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在40℃下使用全规模自动餐具洗涤(ADW)评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥3.5的改良因子(IF)。
49.根据前述段落中任一项所述的变体，其中所述变体选自下组，该组由以下组成：
Y295F、
M246L、
N195F+Q365S、
R171H+Q365C、
V264I+A265G+Y267F、
E86L+R171L+N306R+Q365S、
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
I9M+R171L+N195F+Q365S、
N195F+G337E+Q365S+P375K+D377N、
H1*+N54S+V56T+G109A+R171H+N195F+V206L+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在45℃下使用全规模自动餐具洗涤(ADW)评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥1.1的改良因子(IF)。
50.根据前述段落中任一项所述的变体，其中所述变体选自下组，该组由以下组成：
V264I+A265G+Y267F、
E86L+R171L+N306R+Q365S、
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
N195F+Q365S、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
I9M+R171L+N195F+Q365S、
N195F+G337E+Q365S+P375K+D377N、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在45℃下使用全规模自动餐具洗涤(ADW)评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥1.2的改良因子(IF)。
51.根据前述段落中任一项所述的变体，其中所述变体选自下组，该组由以下组成：
N195F+Q365S、
V264I+A265G+Y267F、
E86L+R171L+N306R+Q365S、
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
I9M+R171L+N195F+Q365S、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在45℃下使用全规模自动餐具洗涤(ADW)评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥1.3的改良因子(IF)。
52.根据前述段落中任一项所述的变体，其中所述变体选自下组，该组由以下组成：V264I+A265G+Y267F
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S
I9M+R171L+N195F+Q365S
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在45℃下使用全规模自动餐具洗涤(ADW)评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥1.5的改良因子(IF)。
53.根据前述段落中任一项所述的变体，其中所述变体选自下组，该组由以下组成：
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在45℃下使用全规模自动餐具洗涤(ADW)评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥2.0的改良因子(IF)。
54.根据前述段落中任一项所述的变体，其中所述变体选自下组，该组由以下组成：
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在45℃下使用全规模自动餐具洗涤(ADW)评估，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体具有至少≥3.0的改良因子(IF)。
55.一种多核苷酸，该多核苷酸编码根据段落1至54中任一项所述的变体。
56.一种核酸构建体，该核酸构建体包含根据段落55的所述多核苷酸。
57.一种表达载体，该表达载体包含根据段落55的所述多核苷酸。
58.一种宿主细胞，该宿主细胞包括根据段落55的所述多核苷酸、根据段落56的所述核酸构建体、或根据段落57的所述表达载体。
59.一种产生α-淀粉酶变体的方法，该方法包括：在适合于表达所述变体的条件下培养根据段落58的所述宿主细胞；以及(b)回收所述变体。
60.一种组合物，所述组合物包含根据段落1至54中任一项所述的变体和至少一种另外的活性组分。
61.根据段落60所述的组合物，其中一种或多种另外的活性组分选自下组，该组由以下组成：一种或多种酶、氧化剂、漂白活化剂、漂白催化剂、螯合剂、填充剂、助洗剂、缓冲剂、结构剂、螯合剂、荧光增白剂、消泡剂、酶、香料、抗再沉积剂、晶体生长抑制剂、金属护理剂、玻璃护理剂、皮肤调理剂、柔软剂、乳化剂和着色剂。
62.根据段落60-61所述的组合物，其中所述另外的酶选自下组，该组由以下组成：蛋白酶、淀粉酶、磷酸脂肪酶、酯酶、脂肪酶、角质酶、纤维素酶、内切葡聚糖酶、木糖葡聚糖酶、木聚糖酶、果胶酶、半纤维素酶果胶裂解酶、黄原胶酶、过氧化物酶、角蛋白酶卤代过氧合酶、过氧化氢酶、甘露聚糖酶、乐亲酶、RNA酶、DNA酶、还原酶、氧化酶、酚氧化酶、脂氧合酶、木质素酶、支链淀粉酶、鞣酸酶、戊聚糖酶、马拉纳酶、β-葡聚糖酶、阿拉伯糖苷酶、透明质酸酶、软骨素酶及漆酶或其任何混合物。
63.根据段落60-62所述的组合物，所述组合物还包含表面活性剂，其中所述表面活性剂是选自下组的一种或多种表面活性剂，该组由以下组成：阴离子表面活性剂、阳离子表面活性剂、非离子表面活性剂、兼性离子表面活性剂和两性表面活性剂或其任何混合物。
64.根据段落60-63中任一项所述的组合物，其中所述组合物是洗涤剂组合物。
65.根据段落60-64所述的组合物，其中所述洗涤剂组合物是液体衣物洗涤剂组合物、粉末衣物洗涤剂组合物、液体餐具洗涤洗涤剂组合物、或粉末餐具洗涤洗涤剂组合物。
66.根据段落60-65所述的组合物，其中所述组合物是液体或粉末衣物洗涤剂组合物。
67.根据段落60-66所述的组合物，其中所述组合物是液体或粉末自动餐具洗涤(ADW)洗涤剂组合物。
68.根据段落60-67中任一项所述的组合物，其中所述组合物是液体手动餐具洗涤剂组合物。
69.根据段落1至54中任一项所述的变体、或根据段落60-68中任一项所述的组合物在家庭或工业清洁过程中的用途。
70.根据段落69所述的用途，用于织物清洁，例如洗衣。
71.根据段落70所述的用途，用于硬表面清洁，陶瓷、金属、塑料或玻璃材料清洁，例如餐具洗涤。
72.一种用于从织物或硬表面去除污垢的方法，所述方法包括使被污垢污染的织物或硬表面与根据段落60-68中任一项所述的组合物接触。
73.根据段落72所述的方法，用于织物清洁，例如洗衣。
74.根据段落72所述的方法，用于硬表面清洁，例如餐具洗涤。
75.根据段落74所述的方法，其中所述方法使用自动餐具洗涤机来进行。
76.一种使用根据段落60-68中任一项所述的组合物在自动餐具洗涤机中进行餐具洗涤的方法，所述方法包括以下步骤：将所述洗涤剂组合物添加在所述自动餐具洗涤机中的洗涤剂组合物室内，并且在主洗涤循环期间释放所述洗涤剂组合物。
77.一种使用根据段落60-68中任一项所述的组合物在自动洗衣机中进行洗衣的方法，所述方法包括以下步骤：将所述洗涤剂组合物添加至所述自动洗衣机中的洗涤剂组合物室内，并且在主洗涤循环期间释放所述洗涤剂组合物。
78.一种改良具有SEQ ID NO:2或与其具有至少59％序列同一性的氨基酸序列的亲本α-淀粉酶的性能如洗涤性能的方法，所述方法包括以下步骤：a)在对应于位置R181、G182、D183和G184的两个或更多个位置处引入取代和/或缺失，使用SEQ ID NO:1进行编号；和b)在选自下组的一个或多个位置处引入缺失和/或取代，该组由以下组成：1、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和/或481，使用SEQ ID NO:1；所述方法由此提供所述亲本α-淀粉酶的α-淀粉酶变体，其中所述变体与如在SEQ ID NO:1-17中阐述的氨基酸序列具有至少59％，如至少60％，如至少65％，如至少70％，如至少75％，如至少80％，如至少85％，如至少90％，如至少95％，如至少97％，如至少99％但小于100％的序列同一性，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性和与如SEQ ID NO:2所示的具有α-淀粉酶活性的所述亲本α-淀粉酶相比改良的性能。
通过以下实例进一步描述本发明，这些实例不应理解为对本发明的范围进行限制。
材料和方法
菌株
编码GH13_5α-淀粉酶的DNA分离自从丹麦收集的污垢样品中分离的芽孢杆菌物种并如WO 2000/060058中所述测序。
用作缓冲液和底物的化学品是至少试剂级的商业产品。
CS-28小块布样-DM-277(双玷污混合淀粉)购自试验材料BV中心，Stoomloggerweg11，3133KT，弗拉尔丁恩，荷兰。
α-淀粉酶活性的测定
1.PNP-G7测定
通过采用pNP-G7底物(PNP-G7是4,6-亚乙基(G7)-对硝基苯基(G1)-α,D-麦芽庚糖苷的缩写，为一种可以由内切淀粉酶如α-淀粉酶切割的嵌段寡糖)来确定α-淀粉酶活性。
将抗体稀释于磷酸盐缓冲的盐水(PBS)(0.010M磷酸盐缓冲液pH 7.4，0.0027MKCl，0.14M NaCl)缓冲液至10μg/ml的浓度。通过添加100μl稀释的抗体(10μg/ml)至每个孔，使maxisorp微量滴定板被抗体涂覆并在室温(RT)下孵育1h和在800rpm混合。在孵育之后，用3x 200μl磷酸盐缓冲盐水和0.05％吐温(PBST)(0.010M磷酸盐缓冲液pH 7.4，0.0027M KCl，0.14M NaCl，0.05％吐温20)缓冲液，将微量滴定板进行洗涤(使用Bio-TekELx405 ELISA洗涤机)。
将具有α-淀粉酶变体培养液的微量滴定板进行旋转离心并将上清液转移到新的微量滴定板中，并在PBST缓冲液中稀释4x。将100μl稀释的上清液转移至抗体涂覆的maxisorp微量滴定板中并且在RT下孵育1h以及在800rpm下混合。在孵育后，将微量滴定板在PBST缓冲液(3x 200μl，ELISA洗涤机)中洗涤。
在pNP-G7底物的切割之后，将在使用的试剂盒中所包括的α-葡萄糖苷酶进行消化并且经水解的底物释放出游离pNP分子，该分子具有黄颜色并且因而可通过可见分光光度法在Abs＝405nm(400-420nm)下测量。包含pNP-G7底物和α-葡糖苷酶的试剂盒由罗氏/日立公司(Roche/Hitachi)制造(目录号11876473)。将100μl pNP-G7底物添加到所有孔中，并在405nm处测量吸光度之前混合1分钟。确定斜率(每分钟的吸光度)并仅使用曲线的线性范围。
在一组给定条件下，时间相关吸收曲线的斜率与所讨论的α-淀粉酶的活性成正比例。
也可以通过其他活性测定来确定所述特异性α-淀粉酶活性，如amylazyme活性测定、Phadebas活性测定、或如下所述的降低糖活性测定。
2.Amylazyme活性测定
Amylazyme活性测定(来自麦格酶公司(Megazyme)，爱尔兰(Ireland))：Amylazyme片剂包括互联直链淀粉聚合物，这些聚合物呈不溶于水的球状微球形式。将蓝色染料共价结合至这些微球。微球中的互联直链淀粉聚合物以与α-淀粉酶活性成比例的速度降解。当α-淀粉酶降解了直链淀粉聚合物时，释放的蓝色染料是可溶于水的并且染料浓度可通过在650nm下测量吸光度来确定。蓝色的浓度与样品中的α-淀粉酶活性成比例。
将有待分析的淀粉酶样品稀释于具有所希望pH的活性缓冲液中。将一个底物片剂悬浮于5mL活性缓冲液中并在磁力搅拌器上混合。在混合底物期间，将150μl转移至微量滴定板(MTP)。将30μl稀释的淀粉酶样品添加至150μl底物并混合。在37℃孵育15分钟。通过添加30μl 1M NaOH并且混合来停止反应。在4000xg离心MTP 5分钟。将100μl转移至新的MTP并且测量620nm的吸光度。
淀粉酶样品应稀释成使得650nm下的吸光度在0与2.2之间，并且在活性测定的线性范围内。
3.Phadebas测定
Phadebas片剂(例如来自麦戈尔生命科学公司(Magle Life Sciences)，隆德，瑞典)包括互联淀粉聚合物，这些聚合物呈不溶于水的球状微球形式。将蓝色染料共价结合至这些微球。微球中的互联淀粉聚合物以与α-淀粉酶活性成比例的速度降解。当α-淀粉酶降解了淀粉聚合物时，释放的蓝色染料是可溶于水的并且染料浓度可通过在650nm下测量吸光度来确定。蓝色的浓度与样品中的α-淀粉酶活性成比例。
将有待分析的淀粉酶样品稀释于具有所希望pH的活性缓冲液中。将一个底物片剂悬浮于5mL活性缓冲液中并在磁力搅拌器上混合。在混合底物期间，将150μl转移至微量滴定板(MTP)。将30μl稀释的淀粉酶样品添加至150μl底物并混合。在37℃孵育15分钟。通过添加30μl 1M NaOH并且混合来停止反应。在4000xg离心MTP 5分钟。将100μl转移至新的MTP并且测量620nm的吸光度。
在给定组的条件下，所测量的吸光度与α-淀粉酶的比活性(纯的α-淀粉酶蛋白的每毫克活性)成正比。
4.还原糖活性测定
通过与对羟基苯甲酸酰肼(PHBAH)反应来确定用α-淀粉酶水解淀粉中的α-1,4-糖苷键所形成的还原端的数目。在与PHBAH反应之后，可以通过在405nm处的吸光度来测量还原端的数目并且还原端的浓度与样品中的α-淀粉酶活性成比例。
通过在milliQ水中蒸煮5分钟来溶解玉米淀粉底物(3mg/ml)并且在测定之前冷却。关于终止液，制备Ka-Na-酒石酸盐/NaOH溶液(K-Na-酒石酸盐(Merck 8087)50g/l，NaOH20g/l)并且通过将对羟基苯甲酸酰肼(PHBAH，Sigma H9882)添加至Ka-Na-酒石酸盐/NaOH溶液中至15mg/ml来新鲜制备终止液。
在PCR-MTP中，将50μl活性缓冲液与50μl底物混合。添加50μl稀释的酶并混合。在PCR机器中在所希望的温度下孵育5分钟。通过添加75μl终止液(Ka-Na-酒石酸盐/NaOH/PHBAH)来停止反应。在PCR仪中在95℃下孵育10分钟。将150μl转移至新MTP中并测量405nm下的吸光度。
在给定组的条件下，所测量的吸光度与α-淀粉酶的比活性(纯的α-淀粉酶蛋白的每毫克活性)成正比。
实例
实例1：SEQ ID NO:2中阐述的亲本多肽的构建
具有SEQ ID NO:2中阐述的氨基酸序列的多肽(亲本多肽)的构建。所述多肽是经修饰的α-淀粉酶(EC 3.2.1.1)，该α-淀粉酶属于糖苷水解酶GH13家族，亚家族5。
实例2：变体的产生
使用具有SEQ ID NO:2中阐述的氨基酸序列的亲本α-淀粉酶，构建本发明的变体。所述变体通过标准程序制备，简而言之就是：通过定点诱变将SEQ ID NO:2中的氨基酸取代引入所述基因中，用突变的基因转化枯草芽孢杆菌宿主细胞，发酵转化的细胞(例如，如WO2004/111220的实例1中所述)，并纯化来自发酵液的变体。具有SEQ ID NO:2中阐述的氨基酸序列的参考淀粉酶，即亲本α-淀粉酶，以相似的方式重组地产生于枯草芽孢杆菌中。
产生变体的文库，其中在以下位置进行修饰的不同组合：H1、H2、G7、I9、Q11、N16、N19、N25、A37、W43、W48、N54、V56、Y58、G59、A60、L63、T81、E84、E86、R90、Q98、V104、G109、A111、F113、R116、Q118、Q125、R127、E130、S132、G133、T134、Y135、Q136、A139、G142、N144、G149、R158、Y160、D163、W167、Q169、S170、R171、Q172、L173、A174、N175、R176、Y178、R181、G182、A186、W187、N195、M202、Y203、A204、V206、D209、H210、E212、T227、L235、V238、M246、Q256、K259、V264、A265、E266、Y267、K269、N270、L272、G273、A274、L275、E276、W284、M286、V291、L293、Y295、Y298、Q299、N302、S303、S304、N306、R310、N311、N314、G315、L317、Q319、R320、S323、F328、G337、A339、Q345、D357、Q365、P377、D375、Q385、K391、Q395、R400、D406、W408、V410、S431、G435、W439、R444、Q445、R458、N465、Q466、W469、F473、G476和V481，使用SEQ ID NO:1进行编号。
产生的变体列于以下实例中。
实例3：用CS-28小块布样进行淀粉酶活性测定
纯化的淀粉酶变体最初稀释为0.1mg/ml(基于280nm的吸光度的浓度)，含0.01％Triton X-100、1mM CaCl2。进一步的酶稀释是在0.01％Triton X-100中进行。
在96孔的每孔中含有CS-28大米淀粉底物小块布样的微量滴定板中，将50μl的稀释淀粉酶(孔中的最终浓度为0.04、0.02和0.01ppm)与150μl标准A洗涤溶液(孔中的最终浓度为3.45g/l标准A洗涤剂，21°dH水硬度(摩尔比Ca:Mg:HCO3＝4:1:10)))混合。在室温下伴随搅拌孵育10-15分钟后，将20μl上清液转移到另一个96孔微量滴定板中以确定淀粉片段的溶解量。为了将淀粉片段水解为葡萄糖，添加10μl 0.5mg/ml葡糖淀粉酶，并在室温下伴随搅拌将板孵育10分钟。然后添加140μl GOD-Perid试剂(0.1M磷酸钾，pH 7，0.6g/l葡萄糖氧化酶(Sigma G6125)、20mg/l过氧化物酶(Sigma P8125)、1g/l ABTS(Roche 102946))，假设在孵育15分钟后，假设葡萄糖浓度与读板器中420nm下的吸光度读数成比例。对于每个样品，测试3个浓度(0.04、0.02和0.01ppm)的重复。在所有板上包括参考样品(SEQ ID NO:2)。将每个样品的剂量反应曲线(最小二乘法)拟合为4参数逻辑表达式：
A420＝A420min+(A420max-A420min)/(1+(C/C50)^斜率)
其中A420是测量到的吸光度，A420min是最小吸光度，A420max是最大吸光度，C是淀粉酶浓度，C50是给出吸光度0.5*(A420min+A420max)的淀粉酶浓度，并且斜率是陡度参数。假设对于板上的所有样品A420min、A420max和斜率都是相同的，而针对每个样品拟合C50。样品的剂量改良因子(剂量IF)计算为：
剂量IF(样品)＝C50(参考)/C50(样品)
表1：标准A洗涤剂(以w/w给出百分比)
Figure BDA0003204290000004681
通过上述方法获得的根据本发明的变体的剂量IF示于下表2中。测试结果清楚地证明这些变体对参考淀粉酶即亲本α-淀粉酶的相对改良活性。
表2：变体的相对比活性
Figure BDA0003204290000004682
Figure BDA0003204290000004691
Figure BDA0003204290000004701
Figure BDA0003204290000004711
Figure BDA0003204290000004721
Figure BDA0003204290000004731
Figure BDA0003204290000004741
Figure BDA0003204290000004751
Figure BDA0003204290000004761
Figure BDA0003204290000004771
Figure BDA0003204290000004781
Figure BDA0003204290000004791
实例4：使用自动机械应力测定(AMSA)针对自动餐具洗涤评估α-淀粉酶变体的洗涤性能
进行洗涤实验，以便评估所选α-淀粉酶变体在餐具洗涤洗涤剂组合物中的洗涤性能。可以使用自动机械应力测定(AMSA)测试本申请的α-淀粉酶变体。使用AMSA，可以检査许多小体积酶洗涤剂溶液的洗涤性能。AMSA板具有许多用于测试溶液的槽，以及将待洗涤的餐具洗涤监测器对槽开口强力挤压的盖子。在洗涤过程中，板、测试溶液、餐具洗涤监测器和盖子剧烈振摇从而使测试溶液与玷污的餐具洗涤监测器接触并以规则、周期性摆动方式施加机械应力。关于进一步描述，参见WO 02/42740，尤其是第23-24页的“具体方法实施例”段落。
可以在根据下表3指定的实验条件下进行实验：
表3：实验条件
Figure BDA0003204290000004792
Figure BDA0003204290000004801
通过将CaCl2、MgCl2、和NaHCO3(Ca2+:Mg2+:HCO3 -＝4:1:10)添加到Milli-Q水中而将水硬度调整到21°dH。
将洗涤性能测量为餐具洗涤监测器颜色的亮度。也可以将亮度表示为当用白光照射样品时从样品反射的光的强度。当样品带有污渍时，反射光的强度低于干净样品的反射光的强度。因此，反射光的强度可以用来衡量洗涤性能。
用专业平板扫描仪进行颜色测量，该扫描仪用于捕获所洗涤纺织品的图像。为了从扫描的图像中提取光强度的值，将来自图像的24-位像素值转化为红色、绿色以及蓝色(RGB)的值。通过将RGB值作为向量进行加和并且然后取所得向量的长度来计算强度值(Int)：
Figure BDA0003204290000004802
洗涤性能总体描述
制备测试溶液，该测试溶液包含水硬度调整水(21°dH，比率Ca:Mg:HCO3＝4:1:10)、3.94g/L如下所述的洗涤剂以及本发明的酶(例如浓度为0.35mg酶蛋白/升)。将用作餐具洗涤机监测器的带有淀粉(例如DM-277(双玷污混合淀粉))(来自BV测试材料中心，邮政信箱120，3133KT，弗拉尔丁恩，荷兰)污渍的三聚氰胺瓷砖添加到AMSA板中，并在45℃下洗涤20分钟。在冷流动自来水下彻底漂洗并且在黑暗中干燥之后，随后使用专业平板扫描仪(Kodak iQsmart，柯达(Kodak)，Midtager 29，DK-2605
Figure BDA0003204290000004803
丹麦)测量带有污渍的瓷砖的光强度作为洗涤性能的量度。
将洗涤性能与亲本α-淀粉酶的情况进行比较，亲本α-淀粉酶的性能结果分配了1.0的值，并且将变体的结果与该值进行比较(改良因子(IF)值)。
通过AMSA获得的根据本发明的变体的洗涤性能如下；
表4：AMSA性能改良因子(IF)数据集I
Figure BDA0003204290000004811
Figure BDA0003204290000004821
Figure BDA0003204290000004831
Figure BDA0003204290000004841
Figure BDA0003204290000004851
实例5：使用自动餐具洗涤(ADW)评估α-淀粉酶变体的洗涤性能
为了评估本发明的α-淀粉酶变体在洗涤剂基础组合物中的洗涤性能，可以使用全规模自动餐具洗涤(ADW)进行洗涤实验。全规模ADW装备用于测试模拟常规消费者装备的测试条件下多肽的洗涤性能。
在本研究中，使用40℃和45℃洗涤程序，使用Miele GSL2餐具洗涤机。
洗涤性能总体描述。
按照如下说明，将带有淀粉(DM-277)(来自BV测试材料中心，邮政信箱120，3133KT，弗拉尔丁恩，荷兰)污渍的三聚氰胺瓷砖用作测试材料，并使用21°dH水、在50g的IKW压载物污垢存在下、在“R40℃/8min/Kl55℃”和“R45℃/8min/Kl55℃”程序下洗涤(参见表5和6)。将每种污渍类型的两块瓷砖添加到每个自动餐具洗涤机中。进行四次重复，并计算每个测试条件的平均值。
在运行机器程序(当打开洗涤剂分配器时)约2分钟后，添加洗涤剂和本发明的淀粉酶多肽。全规模洗涤性能实验在下面指定的实验条件下进行：
表5：实验条件
Figure BDA0003204290000004861
表6：ADW标准洗涤剂(具有漂白剂)(以w/w给出百分比)
Figure BDA0003204290000004862
Figure BDA0003204290000004871
将洗涤性能作为三聚氰胺瓷砖的反射的差异来测量。使用用于获取光谱和进行反射差和/或色差计算的Color-Eye 7000(CE7000)进行反射值测量。在460nm处(发光体中没有UV光)测量反射值。
将本实验的术语“改良的洗涤性能”定义为显示改变，这种改变是指本发明的变体的洗涤性能相对于具有SEQ ID NO:2中阐述的氨基酸序列的多肽的洗涤性能的改变。所述改变可以例如被视为增加的污渍去除。如上所述确定改良的洗涤性能。如果改良因子(IF)在以上列出的一种或多种条件(即40C/8/Kl55C或45C/8/Kl55C)下为至少1.1，优选地为至少1.2，则洗涤性能被认为得到了改良。
通过全规模洗涤获得的根据本发明的变体的洗涤性能如下；
表7：FSW数据集I(40℃/8/Kl55C-每次洗涤1.5mg蛋白质)
Figure BDA0003204290000004872
Figure BDA0003204290000004881
Figure BDA0003204290000004891
表8：FSW数据集II(45℃/8/Kl55C-每次洗涤0.9mg蛋白质)
Figure BDA0003204290000004892
Figure BDA0003204290000004901
本文描述和要求保护的本发明不限于本文披露的具体方面的范围，因为这些方面旨在作为本发明几方面的说明。任何等同方面旨在处于本发明的范围之内。实际上，除了本文所示和描述的那些之外，本发明的各种修改因前述说明而对本领域的技术人员变得清楚。此类修改也旨在落入所附权利要求的范围内。在冲突的情况下，以包括定义的本披露为准。
序列表
<110> 诺维信公司（Novozymes A/S）
<120> α-淀粉酶变体以及对其进行编码的多核苷酸
<130> 14660-WO-PCT
<160> 21
<170> PatentIn 3.5版
<210> 1
<211> 485
<212> PRT
<213> 芽孢杆菌属物种
<400> 1
His His Asp Gly Thr Asn Gly Thr Ile Met Gln Tyr Phe Glu Trp Asn
1 5 10 15
Val Pro Asn Asp Gly Gln His Trp Asn Arg Leu His Asn Asn Ala Gln
20 25 30
Asn Leu Lys Asn Ala Gly Ile Thr Ala Ile Trp Ile Pro Pro Ala Trp
35 40 45
Lys Gly Thr Ser Gln Asn Asp Val Gly Tyr Gly Ala Tyr Asp Leu Tyr
50 55 60
Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Val Arg Thr Lys Tyr Gly
65 70 75 80
Thr Lys Ala Glu Leu Glu Arg Ala Ile Arg Ser Leu Lys Ala Asn Gly
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Gln Glu Val Ser Gly Thr Tyr Gln Ile Glu Ala Trp Thr Gly Phe Asn
130 135 140
Phe Pro Gly Arg Gly Asn Gln His Ser Ser Phe Lys Trp Arg Trp Tyr
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His Phe Asp Gly Thr Asp Trp Asp Gln Ser Arg Gln Leu Ala Asn Arg
165 170 175
Ile Tyr Lys Phe Arg Gly Asp Gly Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp
180 185 190
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225 230 235 240
Ile Lys Phe Ser Phe Met Arg Asp Trp Leu Gly His Val Arg Gly Gln
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Gln Ile Asp Pro Leu Leu Lys Ala Arg Gln Gln Tyr Ala Tyr Gly Arg
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Gly Pro Gly Gly Ser Lys Trp Met Tyr Val Gly Arg Gln Lys Ala Gly
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450 455 460
Asn Gln Asp Gly Trp Gly His Phe Phe Val Asn Gly Gly Ser Val Ser
465 470 475 480
Val Trp Val Lys Arg
485
<210> 2
<211> 483
<212> PRT
<213> 芽孢杆菌属物种
<400> 2
His His Asp Gly Thr Asn Gly Thr Ile Met Gln Tyr Phe Glu Trp Asn
1 5 10 15
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65 70 75 80
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245 250 255
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275 280 285
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325 330 335
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355 360 365
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<212> PRT
<213> 盐敏芽孢杆菌（Bacillus halmapalus）
<400> 3
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<211> 485
<212> PRT
<213> 盐敏芽孢杆菌
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<211> 485
<212> PRT
<213> 盐敏芽孢杆菌
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485
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<211> 485
<212> PRT
<213> 芽孢杆菌属物种
<400> 6
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Ile Tyr Lys Phe Arg Gly Asp Gly Lys Gly Trp Asp Trp Glu Val Asp
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485
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<211> 484
<212> PRT
<213> 芽孢杆菌属物种
<400> 7
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Gly Lys Asn Leu Phe Ala Val Gly Glu Phe Trp Ser Tyr Asp Val Asn
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Lys Leu His Asn Tyr Ile Thr Lys Thr Asn Gly Ser Met Ser Leu Phe
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Asp Ala Pro Leu His Asn Asn Phe Tyr Thr Ala Ser Lys Ser Ser Gly
290 295 300
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165 170 175
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180 185 190
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195 200 205
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225 230 235 240
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245 250 255
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260 265 270
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275 280 285
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290 295 300
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325 330 335
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355 360 365
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<212> PRT
<213> 芽孢杆菌属物种
<400> 9
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<213> 芽孢杆菌属物种
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195 200 205
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290 295 300
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355 360 365
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<210> 17
<211> 483
<212> PRT
<213> 枯草芽孢杆菌
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Leu Pro Asn Asp Gly Asn His Trp Asn Arg Leu Arg Ser Asp Ala Ser
20 25 30
Asn Leu Lys Asp Lys Gly Ile Ser Ala Val Trp Ile Pro Pro Ala Trp
35 40 45
Lys Gly Ala Ser Gln Asn Asp Val Gly Tyr Gly Ala Tyr Asp Leu Tyr
50 55 60
Asp Leu Gly Glu Phe Asn Gln Lys Gly Thr Ile Arg Thr Lys Tyr Gly
65 70 75 80
Thr Arg Asn Gln Leu Gln Ala Ala Val Asn Ala Leu Lys Ser Asn Gly
85 90 95
Ile Gln Val Tyr Gly Asp Val Val Met Asn His Lys Gly Gly Ala Asp
100 105 110
Ala Thr Glu Met Val Lys Ala Val Glu Val Asn Pro Asn Asn Arg Asn
115 120 125
Gln Glu Val Ser Gly Glu Tyr Thr Ile Glu Ala Trp Thr Lys Phe Asp
130 135 140
Phe Pro Gly Arg Ala Asn Thr His Ser Asn Phe Lys Trp Arg Trp Tyr
145 150 155 160
His Phe Asp Gly Val Asp Trp Asp Gln Ser Arg Lys Leu Asn Asn Arg
165 170 175
Ile Tyr Lys Phe Arg Thr Lys Ala Trp Asp Trp Glu Val Asp Thr Glu
180 185 190
Phe Gly Asn Tyr Asp Tyr Leu Leu Tyr Ala Asp Ile Asp Met Asp His
195 200 205
Pro Glu Val Val Asn Glu Leu Arg Asn Trp Gly Val Trp Tyr Thr Asn
210 215 220
Thr Leu Gly Leu Asp Gly Phe Arg Ile Asp Ala Val Lys His Ile Lys
225 230 235 240
Tyr Ser Phe Thr Arg Asp Trp Ile Asn His Val Arg Ser Ala Ile Gly
245 250 255
Lys Asn Met Phe Ala Val Ala Glu Phe Trp Lys Asn Asp Leu Gly Ala
260 265 270
Ile Glu Asn Tyr Leu Asn Lys Thr Asn Trp Asn His Ser Val Phe Asp
275 280 285
Val Pro Leu His Phe Asn Leu Tyr Tyr Ala Ser Lys Ser Gly Gly Asn
290 295 300
Tyr Asp Met Arg Gln Ile Phe Asn Gly Thr Val Val Gln Lys His Pro
305 310 315 320
Thr His Ala Val Thr Phe Val Asp Asn His Asp Ser Gln Pro Glu Glu
325 330 335
Ser Leu Glu Ser Phe Val Arg Glu Trp Phe Lys Pro Leu Ala Tyr Ala
340 345 350
Leu Thr Leu Thr Arg Glu Gln Gly Tyr Pro Ser Val Phe Tyr Gly Asp
355 360 365
Tyr Tyr Gly Ile Pro Thr His Gly Val Pro Ala Met Lys Ser Lys Ile
370 375 380
Asp Pro Ile Leu Glu Ala Arg Gln Lys Tyr Ala Tyr Gly Arg Gln Asn
385 390 395 400
Asp Tyr Leu Asp His His Asn Ile Ile Gly Trp Thr Arg Glu Gly Asn
405 410 415
Thr Ala His Pro Asn Ser Gly Leu Ala Thr Ile Met Ser Asp Gly Ala
420 425 430
Gly Gly Asn Lys Trp Met Phe Val Gly Arg Asn Lys Ala Gly Gln Val
435 440 445
Trp Thr Asp Ile Thr Gly Asn Lys Ala Gly Thr Val Thr Ile Asn Ala
450 455 460
Asp Gly Trp Gly Asn Phe Ser Val Asn Gly Gly Ser Val Ser Ile Trp
465 470 475 480
Val Asn Lys
<210> 18
<211> 1458
<212> DNA
<213> 芽孢杆菌属物种
<400> 18
catcacgatg ggacgaacgg aacgattatg cagtattttg aatggaacgt tccgaatgat 60
ggacaacatt ggaaccgctt acacaacaac gctcaaaatt taaaaaatgc cggaattaca 120
gcaatctgga ttccacctgc gtggaaagga acgagccaaa atgatgtagg ctacggtgcg 180
tatgaccttt atgaccttgg tgaatttaac caaaaaggaa cggtccgtac gaaatatgga 240
acaaaagcag aattagaacg agcgattcgt tcgttaaagg cgaacgggat tcaagtgtat 300
ggcgatgttg ttatgaacca taaaggcgga gctgatttca ccgagcgtgt tcaagcggtt 360
gaagtgaacc cgcaaaaccg aaaccaagaa gtgtctggca cttatcaaat cgaagcatgg 420
acagggttca attttcctgg acgtggcaat caacattctt cgtttaaatg gcgctggtat 480
catttcgatg ggacggattg ggaccagtct cgccaactcg caaatcgtat ttataagttt 540
agaggagacg gaaaagcatg ggactgggaa gttgacactg aaaatgggaa ctatgattac 600
ttaatgtatg cagacgttga catggatcat ccagaagtga ttaacgaact aaaccgttgg 660
ggcgtctggt acgcgaatac ccttaattta gacggcttcc gactggatgc agtgaaacat 720
attaaattta gcttcatgcg tgattggtta gggcatgttc gcgggcaaac gggcaagaat 780
ctttttgccg ttgcagagta ttggaagaat gacctagggg ctttagaaaa ttatttaagc 840
aaaacaaatt ggacgatgag cgcctttgat gttccgcttc attacaacct ttatcaagcg 900
tcaaatagta gcggaaatta cgacatgaga aacttgttaa atggaacact cgttcaacgt 960
catccgagcc atgcggttac gtttgtcgat aaccacgaca cacagcctgg agaagccctc 1020
gaatcgttcg ttcaaggctg gtttaaacca ctagcttatg caacgattct tacgagagag 1080
caaggctacc cacaagtgtt ttacggcgat tattatggca tcccaagtga cggtgttcca 1140
agctaccgtc aacagatcga cccactttta aaagctcgtc aacaatatgc ttatggtaga 1200
cagcacgatt actttgatca ttgggatgta attggctgga cacgtgaagg aaacgcatct 1260
cacccgaact caggacttgc aaccattatg tctgatggtc caggtggatc aaaatggatg 1320
tatgttggcc gtcagaaagc tggcgaagtg tggcatgaca tgactggaaa ccgcagtggc 1380
actgtgacaa ttaatcaaga cggctgggga cacttttttg tcaacggcgg ctctgtctcc 1440
gtatgggtga aacgataa 1458
<210> 19
<211> 269
<212> PRT
<213> 芽孢杆菌属物种
<400> 19
Ala Gln Ser Val Pro Trp Gly Ile Arg Arg Val Gln Ala Pro Thr Ala
1 5 10 15
His Asn Arg Gly Leu Thr Gly Ser Gly Val Lys Val Ala Val Leu Asp
20 25 30
Thr Gly Ile Ser Thr His Pro Asp Leu Asn Ile Arg Gly Gly Ala Ser
35 40 45
Phe Val Pro Gly Glu Pro Ser Thr Gln Asp Glu Asn Gly His Gly Thr
50 55 60
His Ala Ala Gly Thr Ile Ala Ala Leu Asp Asn Ser Ile Gly Val Leu
65 70 75 80
Gly Val Ala Pro Ser Ala Glu Leu Tyr Ala Val Lys Val Leu Gly Ala
85 90 95
Gly Gly Ser Gly Ser Val Ser Ser Ile Ala Gln Gly Leu Glu Trp Ala
100 105 110
Gly Asn Asn Gly Met His Val Ala Asn Leu Ser Leu Gly Ser Pro Ser
115 120 125
Pro Ser Ala Thr Leu Glu Gln Ala Val Asn Ser Ala Thr Ser Arg Gly
130 135 140
Val Leu Val Val Ala Ala Ser Gly Asn Ser Gly Ala Gly Ser Ile Ser
145 150 155 160
Tyr Pro Ala Arg Tyr Ala Asn Ala Met Ala Val Gly Ala Thr Asp Gln
165 170 175
Asn Asn Asn Arg Ala Ser Phe Ser Gln Tyr Gly Ala Gly Leu Asp Ile
180 185 190
Val Ala Pro Gly Val Asn Val Gln Ser Thr Tyr Pro Gly Ser Thr Tyr
195 200 205
Ala Ser Leu Asp Gly Thr Ser Met Ala Thr Pro His Val Ala Gly Ala
210 215 220
Ala Ala Leu Val Lys Gln Lys Asn Pro Ser Trp Ser Asn Val Arg Ile
225 230 235 240
Arg Asn His Leu Lys Asn Thr Ala Thr Ser Leu Gly Ser Thr Asn Leu
245 250 255
Tyr Gly Ser Gly Leu Val Asn Ala Glu Ala Ala Thr Arg
260 265
<210> 20
<211> 269
<212> PRT
<213> 芽孢杆菌属物种
<400> 20
Ala Gln Ser Val Pro Trp Gly Ile Ser Arg Val Gln Ala Pro Ala Ala
1 5 10 15
His Asn Arg Gly Leu Thr Gly Ser Gly Val Lys Val Ala Val Leu Asp
20 25 30
Thr Gly Ile Ser Thr His Pro Asp Leu Asn Ile Arg Gly Gly Ala Ser
35 40 45
Phe Val Pro Gly Glu Pro Ser Thr Gln Asp Gly Asn Gly His Gly Thr
50 55 60
His Val Ala Gly Thr Ile Ala Ala Leu Asn Asn Ser Ile Gly Val Leu
65 70 75 80
Gly Val Ala Pro Asn Ala Glu Leu Tyr Ala Val Lys Val Leu Gly Ala
85 90 95
Ser Gly Ser Gly Ser Val Ser Ser Ile Ala Gln Gly Leu Glu Trp Ala
100 105 110
Gly Asn Asn Val Met His Val Ala Asn Leu Ser Leu Gly Leu Gln Ala
115 120 125
Pro Ser Ala Thr Leu Glu Gln Ala Val Asn Ser Ala Thr Ser Arg Gly
130 135 140
Val Leu Val Val Ala Ala Ser Gly Asn Ser Gly Ala Gly Ser Ile Ser
145 150 155 160
Tyr Pro Ala Arg Tyr Ala Asn Ala Met Ala Val Gly Ala Thr Asp Gln
165 170 175
Asn Asn Asn Arg Ala Ser Phe Ser Gln Tyr Gly Ala Gly Leu Asp Ile
180 185 190
Val Ala Pro Gly Val Asn Val Gln Ser Thr Tyr Pro Gly Ser Thr Tyr
195 200 205
Ala Ser Leu Asn Gly Thr Ser Met Ala Thr Pro His Val Ala Gly Ala
210 215 220
Ala Ala Leu Val Lys Gln Lys Asn Pro Ser Trp Ser Asn Val Gln Ile
225 230 235 240
Arg Asn His Leu Lys Asn Thr Ala Thr Ser Leu Gly Ser Thr Asn Leu
245 250 255
Tyr Gly Ser Gly Leu Val Asn Ala Glu Ala Ala Thr Arg
260 265
<210> 21
<211> 269
<212> PRT
<213> 芽孢杆菌属
<400> 21
Ala Gln Ser Val Pro Trp Gly Ile Glu Arg Val Gln Ala Pro Ala Ala
1 5 10 15
His Asn Arg Gly Leu Thr Gly Ser Gly Val Lys Val Ala Val Leu Asp
20 25 30
Thr Gly Ile Ser Thr His Pro Asp Leu Arg Ile Arg Gly Gly Ala Ser
35 40 45
Phe Val Pro Gly Glu Pro Ser Thr Gln Asp Gly Asn Gly His Gly Thr
50 55 60
His Val Ala Gly Thr Ile Ala Ala Leu Asp Asn Ser Ile Gly Val Leu
65 70 75 80
Gly Val Ala Pro Ser Ala Glu Leu Tyr Ala Val Lys Val Leu Gly Ala
85 90 95
Ser Gly Ser Gly Ser Val Ser Ser Ile Ala Gln Gly Leu Glu Trp Ala
100 105 110
Gly Asn Asn Gly Met His Val Ala Asn Leu Ser Leu Gly Ser Pro Ser
115 120 125
Pro Ser Ala Thr Leu Glu Gln Ala Val Asn Ser Ala Thr Ser Arg Gly
130 135 140
Val Leu Val Val Ala Ala Ser Gly Asn Ser Gly Ala Gly Ser Ile Ser
145 150 155 160
Tyr Pro Ala Arg Tyr Ala Asn Ala Met Ala Val Gly Ala Thr Asp Gln
165 170 175
Asn Asn Asn Arg Ala Ser Phe Ser Gln Tyr Gly Ala Gly Leu Asp Ile
180 185 190
Val Ala Pro Gly Val Asn Ile Leu Ser Thr Trp Pro Gly Ser Thr Tyr
195 200 205
Ala Ser Leu Asn Gly Thr Ser Met Ala Thr Pro His Val Ala Gly Ala
210 215 220
Ala Ala Leu Val Lys Gln Lys Asn Pro Ser Trp Ser Asn Val Gln Ile
225 230 235 240
Arg Asn His Leu Lys Asn Thr Ala Thr Ser Leu Gly Asp Thr Trp Glu
245 250 255
Tyr Gly Ser Gly Leu Val Asn Ala Glu Ala Ala Thr Arg
260 265

Claims (15)

1.一种亲本α-淀粉酶多肽的α-淀粉酶变体，所述变体在对应于以下位置的一个或多个位置处包含修饰：1、2、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和481，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中各修饰独立地为取代、插入或缺失，并且其中所述变体与SEQ ID NO:1-17的多肽具有至少59％，例如至少60％，例如至少65％，例如至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性。
2.根据权利要求1所述的α-淀粉酶变体，其中所述一个或多个位置处的修饰对应于以下：H1、H2、G7、I9、Q11、N16、N19、N25、A37、W43、W48、N54、V56、Y58、G59、A60、L63、T81、E84、E86、R90、Q98、V104、G109、A111、F113、R116、Q118、Q125、R127、E130、S132、G133、T134、Y135、Q136、A139、G142、N144、G149、R158、Y160、D163、W167、Q169、S170、R171、Q172、L173、A174、N175、R176、Y178、R181、G182、A186、W187、N195、M202、Y203、A204、V206、D209、H210、E212、T227、L235、V238、M246、Q256、K259、V264、A265、E266、Y267、K269、N270、L272、G273、A274、L275、E276、W284、M286、V291、L293、Y295、Y298、Q299、N302、S303、S304、N306、R310、N311、N314、G315、L317、Q319、R320、S323、F328、G337、A339、Q345、D357、Q365、P377、D375、Q385、K391、Q395、R400、D406、W408、V410、S431、G435、W439、R444、Q445、R458、N465、Q466、W469、F473、G476和V481，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中各修饰独立地为取代、插入或缺失，并且其中所述变体与SEQ ID NO:1-17的多肽具有至少59％，例如至少60％，例如至少65％，例如至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％但小于100％的序列同一性，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性，并且其中在与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2的具有α-淀粉酶活性的所述亲本多肽相比时，关于洗涤性能的测量，所述变体的改良因子(IF)为>1.0。
3.根据权利要求1-2所述的α-淀粉酶变体，其中所述变体在对应于位置R181、G182、D183和G184的两个或更多个位置处包含缺失，使用SEQ ID NO:1进行编号。
4.根据前述权利要求中任一项所述的α-淀粉酶变体，其中所述变体包含一个或多个以下修饰：H1*；H2*，G7A；I9M；Q11H；N16E；N16H；N16Y；N19D；N25K；N25M；N25T；A37V；W43Y；W48Y；N54Q；N54S；V56I；V56T；Y58F；G59A；A60S；A60T；L63F；T81A；E84Q；E86L；R90H；R90N；R90Q；Q98N；V104A；G109A；A111T；F113A；F113G；F113N；F113Q；F113T；F113Y；R116C；R116D；R116F；R116H；R116K；R116N；R116S；R116Y；Q118N；Q118T；Q125G；Q125S；R127A；R127F；R127H；R127L；R127N；R127T；E130D；E130F；E130I；E130K；E130L；E130N；E130S；E130T；E130V；S132A；S132D；S132F；S132L；S132M；S132P；S132T；G133D；T134C；T134E；T134N；T134P；T134R；T134S；T134W；T134Y；T134A；Y135H；Q136D；Q136E；Q136G；Q136N；Q136R；Q136S；A139T；G142H；N144H；G149A；R158C；R158H；R158K；R158Q；R158S；Y160D；Y160F；T160H；Y160N；D163H；W167*；Q169*；Q169E；Q169F；S170*；S170A；R171*；R171H；R171K；R171L；R171Y；Q172*；Q172K；Q172N；Q172S；L173*；L173K；A174*；A174N；A174S；N175*；N175S；R176*；R176A；Y178F；R181*；R181A；R181C；R181E；R181G；R181H；R181K；R181N；R181Q；G182*；G182T；A186D；A186E；A186H；A186K；A186N；A186T；W187M；N195D；N195F；N195H；N195Q；N195Y；M202L；Y203L；A204V；V206L；D209N；H210K；H210N；E212D；T227K；T227N；L235I；V238A；M246I；M246L；M246T；M246V；Q256H；Q256N；K259G；K259H；V264A；V246I；V264T；A265G；E266V；Y267F；Y267H；Y267L；K269M；K269Q；K269R；N270G；N270P；L272I；G273V；A274K；A274S；L275A；L275I；L275V；E276N；W284R；W284Y；M286L；V291A；V291I；V291T；L293I；L293V；Y295F；Y298E；Y298N；Q299N；Q299Y；N302A；N302H；N302K；N302Q；S303G；S304G；S304Q；N306H；N306K；N306Q；N306R；N306Y；R310N；R310S；R310Q；N311K；N311R；N314Q；G315N；L317V；Q319H；R320K；R320Q；R320S；S323T；H323K；F328L；G337D；G337E；A339S；Q345N；Q345R；L357F；Q365A；Q365C；Q365E；Q365H；Q365K；Q365M；Q365S；P377K；P377T；D375H；D375N；D375Y；Q386L；K391A；Q395K；R400S；D406H；W408H；V410I；S431F；G435C；W439R；W439T；R444T；Q445S；R458K；N465G；Q466S；W469N；W469Y；F473I；F473P；F473S；G476K；和V481A，使用SEQ ID NO:1进行编号。
5.根据前述权利要求中任一项所述的变体，其中所述变体选自下组，该组由以下组成：
A60T、
Y135H、
Q169E、
W48Y、
A174*、
M246L、
R90Q、
Y203L+V206L、
Q169F+S170A、
S132D+G133D、
N195F+Q365C、
N195F+Q365S、
N195F+Q365M、
R127L+Q365S、
R127N+Q365S、
R127L+Q365C、
N195F+Q365K、
I9M+N195F、
R171H+Q365C、
Y267F+Q365S、
F328L+Q365S、
R171L+Q365S、
N195F+M286L、
T134P+N195F、
S170*+R171*+A174*、
V264I+A265G+Y267F、
Q169*+S170*+A174*、
M246L+L275V+Q365S、
V264I+V291I+Q365S、
V264I+V291T+Q365K、
V264I+F328L+Q365C、
I9M+N195F+Q365C、
Q11H+Y267F+Q365C、
I9M+N195F+Q365S、
V264I+Y267F+Q365K、
R127L+M246V+Q365S、
A60S+R171Y+Q365S、
R127N+M246T+L275V、
V104A+N195F+Q365S、
V264I+F328L+Q365S、
R171H+N302H+Q365S、
V264I+Y267F+Q365S、
A174*+N175*+Y178F、
V264I+A265G+Q365C、
R171L+N302H+Q365C、
R171L+M246V+Q365C、
R171Y+M246L+Q365S、
V264T+Y267F+Q365S、
I9M+Y160H+N195F+Q365S、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
R127H+L235I+Q365S+G435C、
I9M+R171H+N195F+Q365S、
I9M+A186H+N195F+Q365S、
I9M+R171L+N195F+Q365S、
Q169*+S170*+R171*+A174*、
M246L+L275V+Q365S+D406H、
I9M+G184K+N195F+Q365S、
R127N+M246L+L275V+Q365S、
R171H+M246L+L275V+Q365S、
R127H+M246I+Q365C+V481A、
Y267F+V291A+F328L+Q365C、
I9M+A186E+N195F+Q365S、
E86L+R171L+N306R+Q365S、
V264I+Y267F+F328L+Q365S、
I9M+N195F+V291A+Q365S、
R127L+L235I+M246I+Q365C、
Y267F+V291A+F328L+Q365S、
V264I+Y267F+F328L+Q365K、
Q11H+V264I+A265G+Q365C、
W187M+N195F+H210K+Q365S、
R127H+M246T+L275A+Q365S、
I9M+A111T+N195F+Q365S、
I9M+Y58F+N195F+Q365S、
V264T+V291A+F328L+Q365S、
V264I+A265G+V291A+Q365C、
V264I+A265G+Y267F+Q365C、
V264I+Y267F+V291A+F328L+Q365S、
R127N+R171H+M246L+L275V+Q365S、
V264I+A265G+V291A+F328L+Q365S、
R127N+M246I+A265G+Y267H+Q365S、
E130I+T134A+R181N+N195F+Q365S、
R127N+M246L+L275V+N306R+Q365S、
I9M+N195F+V206L+D209N+Q365S、
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E86L+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
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H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L272I+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R158H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
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H1*+N54S+V56T+G109A+R158S+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
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H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+A186E+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+R90H+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
I9M+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+Q172S+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+G184H+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+A60S+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365C+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R116N+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306H+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N302H+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+R171Y+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365E+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+A186H+N195F+V206L+K391A、
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H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+R181S+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172S+A174*+N175S+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+E86L+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N302K+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127L+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+R171Y+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+V291A+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R116F+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
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Y160H+R171L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+G109A+K391A+N54S+V56T+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q118N+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
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H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*N195F+V206L+Q299Y+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306K+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365A+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q299N+K391A、
Y160H+E212D+L275V+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306Q+K391A、
H1*+W43Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N311R+K391A、
Y160H+E212D+M246L+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+E84Q+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
A139T+R158S+Y160D+W187M+N195F+H210N+Q365S、
A186D+N195F、
A60S+R171Y+Q365S、
E130D+T134W+R181K+A186E+N195F+Q365S、
E130D+T134Y+R181H+N195F+Q365S、
E130D+T134W+R181K+A186E+N195F+Q365S、
E130F+T134R+R181S+A186D+N195F+Q365S、
E130I+T134A+R181N+N195F+Q365S、
E130I+T134A+R181N+N195F+Q365S、
E130L+T134N+R181W+A186T+N195F+Q365S、
E130N+T134C+R181Q+A186N+N195F+Q365S、
E130S+T134E+R181S+A186T+N195F+Q365S、
E130T+T134Y+A186K+N195F+Q365S、
E130V+T134N+R181Y+A186K+N195F+Q365S、
E130Y+S132T+T134S+R181E+A186D+N195F+Q365S、
E130Y+S132T+T134S+R181E+A186D+N195F+Q365S、
E86L+R171L+N306R+Q365S、
E86L+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
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H1*+I9M+N16Y+N54S+V56T+G109A+R116Y+Q118T+Q125S+Q136E+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+R181H+N195F+M202L+V206L+R310N+R320Q+Q365S+K391A+R400S+W408H+R444T+Q445S+Q466S、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+F113G+R116H+D163H+Q169E+R171H+Q172K+A174S+G182T+N195F+M202L+V206L+M246L+L275V+A288V+L317V+Q319H+H324K+Q365S+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
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H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
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H1*+N54S+V56T+G109A+Q125G+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
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H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A、
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H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+T227K+K269R+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+V238A+K391A、
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H1*+N54S+V56T+G109A+Q172S+L173K+A174S+N175*+R176A+N195F+V206L+K391A、
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H1*+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
I9M+A186E+N195F+Q365S、
I9M+A186H+N195F+Q365S、
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I9M+N195F+N270G+Q365S、
I9M+N195F+N270P+Q365S、
I9M+N195F+Q365C、
I9M+N195F+V206L+D209N+Q365S、
I9M+N195F+V291A+Q365S、
I9M+R127N+N195F+Q365S
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I9M+R171L+N195F+M246L+K269M+W284R+Y298N+Q365S、
I9M+R171L+N195F+Q365S、
I9M+Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
I9M+Y160H+N195F+Q365S、
I9M+A186E+N195F+Q365S、
I9M+A186H+N195F+Q365S、
I9M+G184K+N195F+Q365S、
I9M+N16Y+N54S+V56T+G109A+R116Y+Q118T+Q125S+Q136E+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+R181H+N195F+M202L+V206L+R310N+R320Q+Q365S+K391A+R400S+W408H+R444T+Q445S+Q466S、
I9M+N195F+Q365C、
I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
I9M+R171H+N195F+Q365S、
I9M+R171L+N195F+M246L+K269M+W284R+Y298N+Q365S、
I9M+R171L+N195F+Q365S、
I9M+Y160H+N195F+Q365S、
M202L、
M246L+L275V+Q365S+D406H、
M246L、
M246L+L275V+Q365S、
M246L+L275V+Q365S+D406H、
N16E+N195F+G337D+Q365S+P375K+D377N、
N16E+N195F+G337E+Q365S+P375T+D377H、
N16E+N195F+G337E+Q365S+P375T+D377H、
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S、
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377N、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377Y、
N195F+G337E+Q365S+P375K+D377N、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377Y、
N195F+G337E+Q365S+P375K+D377N、
N195F+Q365S、
N54Q+F113T+R171H+N302A+Q365C、
N54S+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Q11H+V264I+A265G+Q365C、
Q11H+V264I+A265G+Y267F+Q365C、
Q11H+V264I+Y267F+F328L+Q365C、
Q11H+Y267F+Q365C、
Q11H+V264I+A265G+Q365C、
Q169*+S170*+A174*、
Q169*+S170*+R171*+A174*、
Q98N+F113Y+R158Q+Y160F+S304Q+R320S+W439R+F473P、
R116K+S132L+Q136R+R181C+N195F+Q365S、
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+A204V+Q365S、
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+A204V+Q365S、
R116N+S132A+Q136D+R181K+N195F+Q365S、
R116N+S132M+Q136R+N195F+Q365S、
R116N+S132A+Q136D+R181K+N195F+Q365S、
R116S+S132F+R181N+N195F+Q365S、
R116S+Y135H+Q136G+R181T+N195F+Q365S、
R116Y+S132P+Q136N+N195F+Q365S、
R127H+L235I+Q365S+G435C、
R127L+M246V+Q365S、
R127L+Q365C、
R127L+Q365S、
R127L、
R127N+M246L+L275V+Q365S、
R127N+Q365S、
R127N+R171L+M246L+L275V+Q365S、
R127N+R171H+M246L+L275V+Q365S、
R171H+Q365C、
R171H+M246L+L275V+Q365S、
R171H+N302H+Q365S、
R171H、
R171H+Q365C、
R171L+N302H+Q365C、
R171L+Q365S、
R171Y++M246L+Q365S、
R171Y+N306K、
R181S+G184S、
V104A+N195F+Q365S、
V264A+Y267F+V291T+F328L+Q365C、
V264I+A265G+V291A+F328L+Q365S、
V264I+A265G+V291A+Q365C、
V264I+A265G+Y267F+F328L+Q365S+Q395K、
V264I+A265G+Y267F+F328L+Q365S、
V264I+A265G+Y267F+V291I+F328L+Q365S、
V264I+A265G+Y267F、
V264I+F328L+Q365C、
V264I+F328L+Q365S、
V264I+L357F、
V264I+Q365C、
V264I+V291I+Q365S、
V264I+V291T+Q365K、
V264I+Y267F+F328L+Q365C、
V264I+Y267F+F328L+Q365K、
V264I+Y267F+F328L+Q365S、
V264I+Y267F+Q365K+W408H+V410I、
V264I+Y267F+Q365K、
V264I+Y267F+Q365S、
V264I+Y267F+V291A+F328L+Q365C、
V264I+Y267F+V291A+F328L+Q365S、
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S、
V264I+A265G+Y267F、
V264I+F328L+Q365C、
V264I+Y267F+F328L+Q365K、
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S、
V264T+A265G+Y267F+V291A+F328L+Q365C、
V264T+A265G+Y267L+F328L+Q365C、
V264T+V291A+F328L+Q365S、
V264T+Y267F+Q365S、
V264T+Y267L+F328L+Q365C、
V56T+Y160H+A174N+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
V56T+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
W187M+N195F+H210K+Q365S、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473I+G476K、
Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+A174S+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+N306R+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+N306Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
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Y160H+E212D+Q256H+K259H+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+E212D+Q256N+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473I+G476K、
Y160H+N195F+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+N195Q+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+N195Y+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+Q169E+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+R171Y+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y267F+Q365S、
Y267F+V291A+F328L+Q365C、
Y267F+V291A+F328L+Q365S、
Y267F+Q365S、
Y267F+V291A+F328L+Q365S、
Y295F，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在与所述亲本α-淀粉酶相比时，在标准A洗涤剂组合物和/或具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体的改良因子(IF)为至少1.1，优选至少1.2，如至少1.3，如至少1.4，如至少1.5，如至少1.6，如至少1.7，如至少1.8，如至少1.9，如至少2.0，如至少2.2，如至少2.4，如至少2.6，如至少2.8，如至少3.0，如至少3.2，如至少3.4，如至少3.6，如至少3.8，或如至少4.0，并且其中所述亲本α-淀粉酶具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。
6.根据前述权利要求中任一项所述的变体，其中所述变体选自下组，该组由以下组成：
A60T、
Y135H、
Q169E、
W48Y、
A174*、
M246L、
R90Q、
Y203L+V206L、
Q169F+S170A、
S132D+G133D、
N195F+Q365C、
N195F+Q365S、
N195F+Q365M、
R127L+Q365S、
R127N+Q365S、
R127L+Q365C、
N195F+Q365K、
I9M+N195F、
R171H+Q365C、
Y267F+Q365S、
F328L+Q365S、
R171L+Q365S、
N195F+M286L、
T134P+N195F、
S170*+R171*+A174*、
V264I+A265G+Y267F、
Q169*+S170*+A174*、
M246L+L275V+Q365S、
V264I+V291I+Q365S、
V264I+V291T+Q365K、
V264I+F328L+Q365C、
I9M+N195F+Q365C、
Q11H+Y267F+Q365C、
I9M+N195F+Q365S、
V264I+Y267F+Q365K、
R127L+M246V+Q365S、
A60S+R171Y+Q365S、
R127N+M246T+L275V、
V104A+N195F+Q365S、
V264I+F328L+Q365S、
R171H+N302H+Q365S、
V264I+Y267F+Q365S、
A174*+N175*+Y178F、
V264I+A265G+Q365C、
R171L+N302H+Q365C、
R171L+M246V+Q365C、
R171Y+M246L+Q365S、
V264T+Y267F+Q365S、
I9M+Y160H+N195F+Q365S、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
R127H+L235I+Q365S+G435C、
I9M+R171H+N195F+Q365S、
I9M+A186H+N195F+Q365S、
I9M+R171L+N195F+Q365S、
Q169*+S170*+R171*+A174*、
M246L+L275V+Q365S+D406H、
I9M+G184K+N195F+Q365S、
R127N+M246L+L275V+Q365S、
R171H+M246L+L275V+Q365S、
R127H+M246I+Q365C+V481A、
Y267F+V291A+F328L+Q365C、
I9M+A186E+N195F+Q365S、
E86L+R171L+N306R+Q365S、
V264I+Y267F+F328L+Q365S、
I9M+N195F+V291A+Q365S、
R127L+L235I+M246I+Q365C、
Y267F+V291A+F328L+Q365S、
V264I+Y267F+F328L+Q365K、
Q11H+V264I+A265G+Q365C、
W187M+N195F+H210K+Q365S、
R127H+M246T+L275A+Q365S、
I9M+A111T+N195F+Q365S
I9M+Y58F+N195F+Q365S、
V264T+V291A+F328L+Q365S、
V264I+A265G+V291A+Q365C、
V264I+A265G+Y267F+Q365C、
V264I+Y267F+V291A+F328L+Q365S、
R127N+R171H+M246L+L275V+Q365S、
V264I+A265G+V291A+F328L+Q365S、
R127N+M246I+A265G+Y267H+Q365S、
E130I+T134A+R181N+N195F+Q365S、
R127N+M246L+L275V+N306R+Q365S、
I9M+N195F+V206L+D209N+Q365S、
R116S+S132F+R181N+N195F+Q365S、
E130T+T134Y+A186K+N195F+Q365S、
A37V+V264I+Y267F+F328L+Q365C、
Q11H+V264I+Y267F+F328L+Q365C、
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S、
Q169*+R171*+Q172*+L173*+A174*、
R116Y+S132P+Q136N+N195F+Q365S、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377Y、
V264I+A265G+Y267F+F328L+Q365S、
I9M+N195F+K269Q+A274K+Q365S、
E130D+T134Y+R181H+N195F+Q365S、
R116N+S132M+Q136R+N195F+Q365S、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377N、
R127N+R171L+M246L+L275V+Q365S、
N195F+G337E+Q365S+P375K+D377N、
Q11H+V264I+A265G+Y267F+Q365C、
R158Q+Y160N+W187M+N195F+Q365S、
V264I+Y267F+Q365K+W408H+V410I、
R127N+R171Y+M246L+L275V+Q365S、
N54Q+F113T+R171H+N302A+Q365C、
V264A+Y267F+V291T+F328L+Q365C、
Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*、
R116K+S132L+Q136R+R181C+N195F+Q365S、
V264T+A265G+Y267F+V291A+F328L+Q365C、
E130N+T134S+R181N+A186K+N195F+Q365S、
E130V+T134N+R181Y+A186K+N195F+Q365S、
E130D+T134W+R181KA186E+N195F+Q365S、
R116N+S132A+Q136D+R181K+N195F+Q365S、
E130S+T134E+R181S+A186T+N195F+Q365S、
R116C+S132A+Q136S+R181A+N195F+Q365S、
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+Q365S、
R127H+R171H+M246L+L275V+N306R+Q365S、
E130L+T134N+R181W+A186T+N195F+Q365S、
R116C+S132M+Q136S+R181Q+N195F+Q365S、
R116S+Y135H+Q136G+R181T+N195F+Q365S、
R116S+S132L+Q136E+R181G+N195F+Q365S、
N16E+N195F+G337E+Q365S+P375T+D377H、
V264I+A265G+Y267F+V291I+F328L+Q365S、
N16E+N195F+G337D+Q365S+P375K+D377N、
V264I+A265G+Y267F+F328L+Q365S+Q395K、
E130N+T134C+R181Q+A186N+N195F+Q365S、
V264I+A265G+Y267F+V291A+F328L+Q365C、
W167*+Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*、
W167*+Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*+N175*、
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+A204V+Q365S、
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S、
E130K+S132T+T134Y+R181T+A186K+N195F+Q365S、
E130Y+S132T+T134S+R181E+A186D+N195F+Q365S、
A139T+R158S+Y160D+W187M+N195F+H210N+Q365S、
I9M+R171L+N195F+M246L+K269M+W284R+Y298N+Q365S、
H1*+N54S+V56T+G109A+R171H+N195F+V206L+K391A、
W167*+Q169*+S170*+R171*+Q172*+L173*+A174*+N175*+R176*、
H1*+G59A+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+Y58F+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L293I+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+D209N+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195D+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195H+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+M246L+K391A、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L275I+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+G337E+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N25K+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127T+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+D209N+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127N+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+L63F+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L275V+K391A、
H1*+N19D+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
A60S+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+R171L+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+G337D+K391A、
H1*+N25M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+T81A+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N25T+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+R90N+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
E86L+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+R158C+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L293V+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L272I+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R158H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+G109A+K391A+N16Y+N54S+V56T+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L、
H1*+N54S+V56T+G109A+R158S+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
R127N+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+A274S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+A186E+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+R90H+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
I9M+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+Q172S+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+G184H+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+A60S+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365C+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R116N+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306H+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N302H+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+R171Y+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365E+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+A186H+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+A60S+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+R181S+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172S+A174*+N175S+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+E86L+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N302K+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127L+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+R171Y+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+V291A+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R116F+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306R+K391A、
Y160H+R171L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+G109A+K391A+N54S+V56T+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q118N+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+T134P+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*N195F+V206L+Q299Y+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306K+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365A+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q299N+K391A、
Y160H+E212D+L275V+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306Q+K391A、
H1*+W43Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N311R+K391A、
Y160H+E212D+M246L+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+E84Q+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R158K+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
V56T+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
N54S+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+E212D+Q256H+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q125G+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N311K+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K269M+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+G184K+N195F+V206L+K391A、
Y160H+E212D+K259G+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+A174S+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+N195Y+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+Q169E+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+N306Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
G7A+F113N+R116N+E276N+S304G+R320S+Q345N+W439R+N465G+Q466S+W469Y、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+D377H+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+V238A+K391A、
Y160H+N195F+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+E212D+Q256N+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365H+K391A、
Y160H+N195Q+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+R171Y+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
G109A+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+N306R+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+R127F+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172N+L173K+A174*+N175S+N195F+V206L+K391A、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+S304G+N306R+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+G142H+N144H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N302Q+Q385L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306R+Q385L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+G184K+N195F+V206L+T227N+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+T227K+K269R+K391A、
H1*+N54S+V56I+G109A+R127A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q385L+K391A、
Y160H+E212D+Q256H+K259H+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+G315N+Q385L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172N+A174*+N175S+N195F+V206L+K391A+S431F、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+S304G+N306Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+L235I+V238A+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q172S+L173K+A174S+N175*+R176A+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R116D+Q118T+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
V56T+Y160H+A174N+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
H1*+N54S+V56T+R90Q+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+E266V+Q385L+K391A、
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V20+6L+Q385L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+F113A+R116D+Q118T+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Y298E+N302K+S303G+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R116H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N314Q+Q385L+K391A、
H1*+I9M+N16Y+N54S+V56T+G109A+R116Y+Q118T+Q125S+Q136E+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+R181H+N195F+M202L+V206L+R310N+R320Q+Q365S+K391A+R400S+W408H+R444T+Q445S+Q466S，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在与所述亲本α-淀粉酶相比时，在标准A洗涤剂组合物中，所述变体的改良因子(IF)为至少1.1，优选至少1.2，如至少1.3，如至少1.4，如至少1.5，如至少1.6，如至少1.7，如至少1.8，如至少1.9，如至少2.0，如至少2.2，如至少2.4，如至少2.6，如至少2.8，如至少3.0，如至少3.2，如至少3.4，如至少3.6，如至少3.8，或如至少4.0，并且其中所述亲本α-淀粉酶具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。
7.根据前述权利要求中任一项所述的变体，其中所述变体选自下组，该组由以下组成：
A139T+R158S+Y160D+W187M+N195F+H210N+Q365S、
A186D+N195F、
A60S+R171Y+Q365S、
E130D+T134W+R181K+A186E+N195F+Q365S、
E130D+T134Y+R181H+N195F+Q365S、
E130D+T134W+R181K+A186E+N195F+Q365S、
E130F+T134R+R181S+A186D+N195F+Q365S、
E130I+T134A+R181N+N195F+Q365S、
E130I+T134A+R181N+N195F+Q365S、
E130L+T134N+R181W+A186T+N195F+Q365S、
E130N+T134C+R181Q+A186N+N195F+Q365S、
E130S+T134E+R181S+A186T+N195F+Q365S、
E130T+T134Y+A186K+N195F+Q365S、
E130V+T134N+R181Y+A186K+N195F+Q365S、
E130Y+S132T+T134S+R181E+A186D+N195F+Q365S、
E130Y+S132T+T134S+R181E+A186D+N195F+Q365S、
E86L+R171L+N306R+Q365S、
E86L+Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
E86L+R171L+N306R+Q365S、
F113Q+R116H、
F113T+R171K+G273V、
F328L+Q365S、
H1*+I9M+N16Y+N54S+V56T+G109A+R116Y+Q118T+Q125S+Q136E+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+R181H+N195F+M202L+V206L+R310N+R320Q+Q365S+K391A+R400S+W408H+R444T+Q445S+Q466S、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+F113G+R116H+D163H+Q169E+R171H+Q172K+A174S+G182T+N195F+M202L+V206L+M246L+L275V+A288V+L317V+Q319H+H324K+Q365S+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+R320S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+W284Y+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+N306R+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R171H+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+I9M+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N16H+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N16Y+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+G184K+N195F+V206L+T227N+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+R320S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+M246L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+Q365S+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+R171H+N195F+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+M202L+V206L+K391A、
H1*+N54S+V56T+G109A+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+N195F+V206L+K391A、
I9M+A186E+N195F+Q365S、
I9M+A186H+N195F+Q365S、
I9M+G184K+N195F+Q365S、
I9M+N195F+K269Q+A274K+Q365S、
I9M+N195F+N270G+Q365S、
I9M+N195F+N270P+Q365S、
I9M+N195F+Q365C、
I9M+N195F+V206L+D209N+Q365S、
I9M+N195F+V291A+Q365S、
I9M+R127N+N195F+Q365S
I9M+R171H+N195F+Q365S、
I9M+R171L+N195F+M246L+K269M+W284R+Y298N+Q365S、
I9M+R171L+N195F+Q365S、
I9M+Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
I9M+Y160H+N195F+Q365S、
I9M+A186E+N195F+Q365S、
I9M+A186H+N195F+Q365S、
I9M+G184K+N195F+Q365S、
I9M+N16Y+N54S+V56T+G109A+R116Y+Q118T+Q125S+Q136E+Y160H+Q169E+Q172K+A174*+R181H+N195F+M202L+V206L+R310N+R320Q+Q365S+K391A+R400S+W408H+R444T+Q445S+Q466S、
I9M+N195F+Q365C、
I9M+N54S+V56T+G109A+G149A+Q169E+Q172K+A174*+G182T+N195F+M202L+V206L+Y295F+Q299Y+R320K+S323T+A339S+Q345R+Q365S+K391A+R458K、
I9M+R127N+N195F+Q365S、
I9M+R171H+N195F+Q365S、
I9M+R171L+N195F+M246L+K269M+W284R+Y298N+Q365S、
I9M+R171L+N195F+Q365S、
I9M+Y160H+N195F+Q365S、
M202L、
M246L、
M246L+L275V+Q365S+D406H、
M246L+L275V+Q365S、
M246L+L275V+Q365S+D406H、
N16E+N195F+G337D+Q365S+P375K+D377N、
N16E+N195F+G337E+Q365S+P375T+D377H、
N16E+N195F+G337E+Q365S+P375T+D377H、
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S、
N16Y+Y160H+N195F+L275I+S304G+G337E+Q365S、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377N、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377Y、
N195F+G337E+Q365S+P375K+D377N、
N195F+G337D+Q365S+P375K+D377Y、
N195F+G337E+Q365S+P375K+D377N、
N195F+Q365S、
N54Q+F113T+R171H+N302A+Q365C、
Q11H+V264I+A265G+Q365C、
Q11H+V264I+A265G+Y267F+Q365C、
Q11H+V264I+Y267F+F328L+Q365C、
Q11H+Y267F+Q365C、
Q11H+V264I+A265G+Q365C、
Q169*+S170*+A174*、
Q169*+S170*+R171*+A174*、
Q98N+F113Y+R158Q+Y160F+S304Q+R320S+W439R+F473P、
R116K+S132L+Q136R+R181C+N195F+Q365S、
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+A204V+Q365S、
R116K+S132P+Q136D+R181Q+N195F+A204V+Q365S、
R116N+S132A+Q136D+R181K+N195F+Q365S、
R116N+S132M+Q136R+N195F+Q365S、
R116N+S132A+Q136D+R181K+N195F+Q365S、
R116S+S132F+R181N+N195F+Q365S、
R116S+Y135H+Q136G+R181T+N195F+Q365S、
R116Y+S132P+Q136N+N195F+Q365S、
R127H+L235I+Q365S+G435C、
R127L、
R127L+M246V+Q365S、
R127L+Q365C、
R127L+Q365S、
R127N+M246L+L275V+Q365S、
R127N+Q365S、
R127N+R171L+M246L+L275V+Q365S、
R127N+R171H+M246L+L275V+Q365S、
R171H、
R171H+Q365C、
R171H+M246L+L275V+Q365S、
R171H+N302H+Q365S、
R171H+Q365C、
R171L+N302H+Q365C、
R171L+Q365S、
R171Y++M246L+Q365S、
R171Y+N306K、
R181S+G184S、
V104A+N195F+Q365S、
V264A+Y267F+V291T+F328L+Q365C、
V264I+A265G+V291A+F328L+Q365S、
V264I+A265G+V291A+Q365C、
V264I+A265G+Y267F、
V264I+A265G+Y267F+F328L+Q365S、
V264I+A265G+Y267F+F328L+Q365S+Q395K、
V264I+A265G+Y267F+V291I+F328L+Q365S、
V264I+F328L+Q365C、
V264I+F328L+Q365S、
V264I+L357F、
V264I+Q365C、
V264I+V291I+Q365S、
V264I+V291T+Q365K、
V264I+Y267F+F328L+Q365C、
V264I+Y267F+F328L+Q365K、
V264I+Y267F+F328L+Q365S、
V264I+Y267F+Q365K、
V264I+Y267F+Q365K+W408H+V410I、
V264I+Y267F+Q365S、
V264I+Y267F+V291A+F328L+Q365C、
V264I+Y267F+V291A+F328L+Q365S、
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S、
V264I+A265G+Y267F、
V264I+F328L+Q365C、
V264I+Y267F+F328L+Q365K、
V264I+Y267F+V291T+F328L+Q365S、
V264T+A265G+Y267F+V291A+F328L+Q365C、
V264T+A265G+Y267L+F328L+Q365C、
V264T+V291A+F328L+Q365S、
V264T+Y267F+Q365S、
V264T+Y267L+F328L+Q365C、
W187M+N195F+H210K+Q365S、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473I+G476K、
Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+E212D+E276N+W284Y+R320S+Q365S+W408H+W439T+W469N+F473S+G476K、
Y160H+M202L+E212D+E276N+W284Y+R320S+W408H+W439T+W469N+F473I+G476K、
Y267F+Q365S、
Y267F+V291A+F328L+Q365C、
Y267F+V291A+F328L+Q365S、
Y267F+Q365S、
Y267F+V291A+F328L+Q365S、
Y295F，使用SEQ ID NO:1进行编号，并且其中在与所述亲本α-淀粉酶相比时，在具有漂白剂的ADW洗涤剂组合物中，所述变体的改良因子(IF)为至少1.1，优选至少1.2，如至少1.3，如至少1.4，如至少1.5，如至少1.6，如至少1.7，如至少1.8，如至少1.9，如至少2.0，如至少2.2，如至少2.4，如至少2.6，如至少2.8，如至少3.0，如至少3.2，如至少3.4，如至少3.6，如至少3.8，或如至少4.0，并且其中所述亲本α-淀粉酶具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列。
8.一种组合物，其包含根据权利要求1至7中任一项所述的变体和至少一种另外的活性组分。
9.根据权利要求8所述的组合物，其中所述组合物是洗涤剂，并且其中所述洗涤剂组合物是液体衣物洗涤剂组合物、粉末衣物洗涤剂组合物、液体餐具洗涤洗涤剂组合物、或粉末餐具洗涤洗涤剂组合物。
10.根据权利要求8-9所述的组合物，其中所述组合物是液体或粉末自动餐具洗涤(ADW)洗涤剂组合物。
11.根据权利要求1至7中任一项所述的变体、或根据权利要求8-10中任一项所述的组合物在家庭或工业清洁过程中的用途。
12.一种用于从织物或硬表面去除污垢的方法，所述方法包括使被污垢污染的织物或硬表面与根据权利要求8-10中任一项所述的组合物接触。
13.一种使用根据权利要求8-10中任一项所述的组合物在自动餐具洗涤机中进行餐具洗涤的方法，所述方法包括以下步骤：将所述洗涤剂组合物添加在所述自动餐具洗涤机中的洗涤剂组合物室内，并且在主洗涤循环期间释放所述洗涤剂组合物。
14.一种使用根据权利要求8-10中任一项所述的组合物在自动洗衣机中进行洗衣的方法，所述方法包括以下步骤：将所述洗涤剂组合物添加在所述自动洗衣机中的洗涤剂组合物室内，并且在主洗涤循环期间释放所述洗涤剂组合物。
15.一种改良具有SEQ ID NO:2或与其具有至少59％序列同一性的氨基酸序列的亲本α-淀粉酶的性能如洗涤性能的方法，所述方法包括以下步骤：a)在对应于位置R181、G182、D183和G184的两个或更多个位置处引入取代和/或缺失，使用SEQ ID NO:1进行编号；和b)在选自下组的一个或多个位置处引入缺失和/或取代，该组由以下组成：1、7、9、11、16、19、25、37、43、48、54、56、58、59、60、63、81、84、86、90、98、104、109、111、113、116、118、125、127、130、132、133、134、135、136、139、142、144、149、158、160、163、167、169、170、171、172、173、174、175、176、178、181、182、186、187、195、202、203、204、206、209、210、212、T227、235、238、246、256、259、264、265、266、267、269、270、272、273、274、275、276、284、286、291、293、295、298、299、302、303、304、306、310、311、314、315、317、319、320、323、328、337、339、345、357、365、377、375、385、391、395、400、406、408、410、431、435、439、444、445、458、465、466、469、473、476和/或481；使用SEQ ID NO:1进行编号，并且所述方法由此提供所述亲本α-淀粉酶的α-淀粉酶变体，其中所述变体与如在SEQ ID NO:1-17中阐述的氨基酸序列具有至少59％，如至少60％，如至少65％，如至少70％，如至少75％，如至少80％，如至少85％，如至少90％，如至少95％，如至少97％，如至少99％但小于100％的序列同一性，并且其中所述变体具有α-淀粉酶活性和与所述亲本α-淀粉酶相比改良的性能。
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