CN1060024C - 油料籽仁蛋白质的提取 - Google Patents

Abstract

使用食品级盐溶液，通过浸提具有相当脂肪含量的油料籽仁粗粉，特别是canola粗粉，来促使油料籽仁粗粉中的蛋白质及脂肪发生溶解，形成蛋白质水溶液，所得到的蛋白质分离物具有高含量的蛋白质和低含量的残余脂肪，并且蛋白质基本上呈未变性的形式。除去蛋白质水溶液中脂肪的方法，是冷却蛋白质水溶液，然后除去分离出来的脂肪。当离子强度维持基本恒定时，提高了脱脂蛋白质溶液的中蛋白质浓度。对浓缩的蛋白质溶液采用进一步除去脂肪的操作，然后稀释到离子强度低于约0.2，促使在水相中形成以蛋白质微团形式存在的蛋白质颗粒。通过沉淀蛋白质微团，形成凝聚的蛋白质分离物团块，呈无定形的、粘胶质的、面筋样蛋白质微团团块，将其与上清液分开，干燥后得到蛋白质粉末。

Description

油料籽仁蛋白质的提取

发明领域

本发明涉及从油料籽仁和蛋白质粗粉中制备以及纯化出蛋白质类物质。

相关参考申请

本申请是1996年1月31日申请的共同未决的美国专利申请号08／549，909的部分继续申请。

发明背景

当前商用油料籽仁加工技术着重生产出明亮、高度脱胶的油，使胶类物质、皂料、褪色粘渣以及色素从油中除去，这些都是加工副产物，对它们的处理是将它们重新加到油料籽仁压榨除油后得到的粗粉中。

添加这类材料到油料籽仁粗粉中，会导致不能采用对环境敏感的分离技术，从这些粗粉中提取蛋白质分离物的局面，而这些蛋白质分离物含有90％以上的蛋白质。在传统加工技术中，商用粗粉里的脂肪通常导致脂肪与蛋白质的富集同时发生。

在传统加工技术中，蛋白质水平一般不会超过重量百分比70—75％，而且因为脂肪的干扰，它们在食物体系中的功能遭到破坏。除此之外，蛋白质干产物中的脂肪会引起酸败及其它与之相关的问题，包括低可溶性、结块等，并且因为加工过程中含油粗粉里色素的存在，还会导致它颜色失常。

在油料作物的栽培项目中的一个重点是提高种子的产油率，相对产油量高的canola(油菜籽)栽培种已经形成。但是，因为把精制油所生成的副产物加到油料籽仁粗粉里，这样增加油产量，会引起油料籽仁粗粉中脂肪比例升高。

虽然可能通过有机溶剂浸提的方法至少部分地将脂肪从油料籽仁粗粉里除去，可是因为采用了有机溶剂，特别是在升高温度的条件下，容易引起蛋白质变性，进而破坏产品的功能。此外，还会因引起环境问题而需要作出处理和回收。

本人为美国4，208，323号专利的发明人，该发明阐述了从不同原料中分离蛋白质的方法。用于该方法的蛋白质原料可以有许多种，包括油料籽仁。1980年在该专利获得批准之时，油料籽仁粗粉中脂肪污染水平并不像现在的油料籽仁粗粉这么严重，因而使用该早期专利的方法不能从现在的油料籽仁粗粉中生产出蛋白质含量高于90％的蛋白质类产品，而本专利所介绍的方法却可以生产出达到这样含量的蛋白质类物质。这必须对早先的方法作出重大修改，以便能从现在的油料籽仁粗粉，包括冷压榨粗粉，内获取这种蛋白质产品。

本人也是USP4，285，862的发明人，该发明讲述了基本上未变性的蛋白质分离物产品的制备和纯化，其中蛋白质重量百分含量达到至少约90％，其形式为无定形的蛋白质团块，是通过沉淀由均匀的两亲性蛋白质部分组成的分散于水相的蛋白质微团得到固体相而形成的，并且可取材于至少一种植物蛋白质原料。该产品被称为“蛋白质微团团块”或“PMM”，基本上不含液体成分，基本上不含赖氨酸—丙氨酸缩合物，基本上保持赖氨酸的含量与原料里的贮藏蛋白质中的相同，该材料是通过对该现有技术的方法进行调整后，从具有相当脂肪含量的油料籽仁饼粉中制备的。

发明概述

对于现在脂肪污染的油料籽仁粗粉，本发明提供一种制取高含量的纯化蛋白质分离物的方法，以便能够避免现有技术所引起的问题。

本发明提供了制备蛋白质分离物的方法，包括：(a)在pH为约5—6．8，温度为约15—75℃时，用离子强度至少为约0．2的食品级盐的水溶液浸提油料籽仁粗粉，粗粉中脂肪含量达重量百分比约10％，使油料籽仁粗粉内的蛋白质类物质以及一些脂肪溶解，形成蛋白质溶液；(b)将蛋白质溶液从油料籽仁粗粉残渣里分离开来，这一步骤可以在(c)步之前或之后进行；(c)除去蛋白质溶液中的脂肪，得到脱脂蛋白质溶液；(d)提高脱脂蛋白质溶液的浓度，同时维持其离子强度基本恒定，形成浓缩的脱脂蛋白质溶液；(e)稀释浓缩的脱脂蛋白质溶液，使离子强度至约0．2以下，引起在水相中分散的蛋白质颗粒形成，该颗粒在显微镜下呈高度凝聚的蛋白质微团状；(f)使蛋白质微团沉淀下来，形成蛋白质分离物团块，至少部分为无定形的粘胶质面筋样蛋白质微团团块；(g)将蛋白质分离物与上清液分开；(h)干燥蛋白质分离物，得到蛋白质干粉，基本上未变性，并且蛋白质重量百分含量为至少约90％。

在本发明中，脱脂步骤必须在产生蛋白质微团的稀释步骤之前进行，否则在微团形成步骤中，蛋白质将与脂肪共同析出，以致因为脂肪掺入蛋白质，不可能得到所需纯度的蛋白质分离物。

附图简述

图1是根据本发明的一个实施方案，应用于canola粗粉的蛋白质分离流程的示意图，当然也可通用于其它油料籽仁粗粉；

图2是根据本发明的另一个实施方案，应用于canola粗粉的蛋白质分离流程的示意图，同样也可以用于其它油料籽仁粗粉。

发明详述

本发明所用方法中包括的各个步骤均已列于工艺流程图1和2。

本发明所用方法的起始步骤包括从油料籽仁粗粉，尤其是canola粗粉中溶出蛋白质类物质，尽管该法也可用于其它油料籽仁粗粉如大豆粗粉和油菜籽粗粉。在这里，蛋白质类物质可以是天然存在于canola或其它油料籽仁内的蛋白质，也可以是经过遗传操作导入的，拥有典型的疏水和极性特性的蛋白质。canola粗粉可以是来自任何脱去canola油的并且含有不同量的未变性蛋白质的canola种子粗粉，例如经过了热己烷浸提或冷油挤压处理。如上所述，这些油料籽仁粗粉含有相当比例的脂肪，可以达到粗粉总重量的约10％。

蛋白质的溶出使用了食品级的盐溶液，这类食品级的盐通常是氯化钠，当然也可以用其它的盐类，例如氯化钾。这些食品级的盐溶液离子强度至少为约0．2，如此可以有效地浸提出相当含量的蛋白质。随着盐溶液的离子强度逐渐增加，从蛋白质原料中浸提出的蛋白质也一起增多直至达到最高值。接下来，无论怎样增高离子强度，将不再增加溶出蛋白质的量。使溶出蛋白质的量达到最大值时所需要的食品级盐溶液的离子强度，取决于所使用的盐的种类和蛋白质原料的类别。

考虑到随着离子强度的增高，在使蛋白质沉淀下来的过程中需要更大的稀释度，所以一般优选离子强度低于约0．8，更优选0．3—0．6。但也使用过高达5．0的离子强度。在图1和图2所示的实施方案里，使用0．5M的氯化钠溶液浸提canola粗粉来溶解该物质所含有的蛋白质。

用盐溶液溶解蛋白质时的温度宜控制在约5—35℃，优选同时采取搅拌措施，缩短溶解时间，一般耗时10—60分钟。优选溶解步骤从原料中基本上浸提出最大量的蛋白质。

确定约5℃作为的下限温度是因为低于该温度时溶解作用十分缓慢，不切实际，而确定约35℃作为上限温度是因为超过该温度时微生物繁殖太快，难以接受。

食品级盐水溶液及油料籽仁粗粉的自然pH介于约5—6．8之间，由此可以通过微团途径得到蛋白质分离物，这些将在后文详细介绍。获取最大量蛋白质分离物所需的最适pH取决于所采用的蛋白质原料。

当处于或者接近pH范围的极限时，通过微团途径只能部分生成蛋白质分离物，较之其它取值范围内的pH，其产率要低。因此，优选的pH值是约5．3—6．2。

在浸提步骤中，可使用任何方便的食品级酸，通常为盐酸，或者使用食品级碱，通常为氢氧化钠，将食品级盐溶液的pH调到约5—6．8范围内的任何想要的值。

在溶解步骤中，食品级盐溶液里的蛋白质原料的浓度可以在较大范围内变化。一般其浓度范围在约5—15％w／v(重量／体积)。

在蛋白质的盐溶液浸提步骤中，还有溶出canola粗粉中某些脂肪的附带作用，这将导致水相中出现脂肪。

一般而言，蛋白质溶液里蛋白质的浓度为约10—100克／升，优选约30—70克／升，同时还溶解有1—10克／升的脂肪。脂肪含量可以通过标准总脂测定法，取蛋白质溶液样品来进行分析。

如图1所示，在浸提步骤中，采用任何方便的方法，可以分离canola残渣，得到总水相溶液，例如采用气膜式压榨机，再离心除去粗粉残余物。分离出来的粗粉残渣可以先行干燥后再经处理。也可以如图2所示的实施方案，在经过第一步脱脂后分离除去粗粉残渣。

然后，对蛋白质溶液进行脱脂处理，至少除去一部分脂肪。脱脂操作是把蛋白质水溶液冷却至约15℃以下，优选约10℃以下，最好在约3—7℃范围内，一般不需要搅拌，可以通过任何方便的分离操作从水相中分离除去脂肪，例如倾析、离心和／或精滤，如可以使用5微米的GAF袋过滤器。采样分析冷却蛋白质溶液中脂肪的含量，以判断冷却方法除去的脂肪量。如实施方案所述，倾析除去溶液表面的脂肪，例如用泵抽取，初步脱脂的溶液再经精滤除去残余脂肪沉淀，见图1。此外如图2所示实施方案，也可以在冷却步骤之后，通过离心除去脱脂蛋白质溶液中的粗粉残渣。

脱脂操作一般可除去蛋白质水溶液中所含脂肪的约30—90％，优选约70—90％，由此可以对该脱脂蛋白质溶液进一步加工，得到蛋白质含量更高的蛋白质分离物。

而后脱脂蛋白质水溶液被浓缩，以增高蛋白质浓度，并且维持溶液的离子强度基本恒定。

浓缩步骤可以采用任何方便的选择性膜技术来进行，例如超滤或渗滤(diafiltration)。浓缩步骤具有提高蛋白质微团分离物产率的功效，因而提高整个蛋白质分离方法的效率。

可用“体积减少系数”来表示蛋白质溶液的浓缩程度。体积减少系数，用浓缩前的体积对浓缩后的体积比值来表示，因此随着蛋白质浓度从数值1．0开始增高，可收得产率也逐步增加，直至达到到最大值。

一旦达到最大可收得产率，进一步减少浓缩液体积所能带来的有益作用只是相对于随后蛋白质分离中稀释步骤所要求的体积而言。

达到最大可收得产率时的体积减少系数取决于所用蛋白质原料及蛋白质溶液的pH。优选体积减少系数为约3．0—10，因为常常在这一取值区间得到最大可收得产率。在此，一般采用的体积减少系数为至少约1．1，而且当体积减少系数非常高时，蛋白质溶液的粘度也相应地变得非常高，可能会因之导致处理困难，所以禁止采用更高的体积减少系数值。

浓缩操作可以在任何方便的温度条件下进行，通常为约20—45℃，以在一定时间内达到所需要的浓缩程度。温度以及其它条件在一定程度上取决于浓缩所用膜设备和溶液中蛋白质浓度。

按本步骤浓缩蛋白质溶液，不仅提高整个方法的产率，而且降低最终经过干燥后得到的蛋白质分离物的盐浓度。控制蛋白质分离物盐浓度的能力十分重要，因为在特定食品应用中，盐浓度的变化会影响其功能和感官特性。

众所周知，超滤和相似的选择膜技术允许低分子量的物质通过而阻止高分子量物质通过。低分子量物质不仅包括食品级盐的各种离子，而且还包括从原料中浸提出来的低分子量物质，例如，碳水化合物、色素分子等。通常选择好膜的截止分子量，以保证基本上保留溶液中所有的蛋白质。

浓缩步骤中除去浸提液里的低分子量物质，可以使得蛋白质浓度增高而不需要使用沉淀手段，大大超过了浸提步骤所能达到的最大浓度。

浓缩后的蛋白质溶液可能要经过降低蛋白质溶液温度的进一步脱脂步骤，温度低于约15℃，优选低于约10℃，最好在约3—7℃范围，由此可以使脂肪从蛋白质溶液水相分离出来而被除去。如前所述的第一个脱脂步骤中的任何脂肪分离方法，单独地或联合地，都可应用到这里，从而除去冷却的浓缩蛋白质溶液中的脂肪。通常情况下，进一步的脱脂处理导致残余脂肪去除率为约30—90％，优选达到约70—90％，此时浓缩蛋白质溶液里残余脂肪浓度为约1—10克／升。

通过对蛋白质溶液取样分析，测定脂肪浓度，可以确定冷却步骤除去的脂肪量。脂肪从溶液的表面被倾析除去，例如使用泵来抽取，脱脂溶液再通过精滤除去残余脂肪沉淀。

经过浓缩步骤和脱脂步骤所得到的浓缩蛋白质溶液，通常含蛋白质浓度为约40—200克／升，这将取决于初始蛋白质浓度和所用体积减少系数。然后将其稀释到离子强度小于约0．2，一般是把浓缩后的蛋白质溶液加到需要量的水主体里，达到所要降低的离子强度。

加入浓缩蛋白质溶液的水主体，其温度通常低于约25℃，优选约3—15℃，因为在较低的温度下可以提高蛋白质的产率。

降低离子强度，可以促使分散的蛋白质液滴里形成云块状高度凝聚的蛋白质分子团块，呈微团形态。蛋白质微团沉淀后可以形成凝聚的、致密无定形粘结的面筋样蛋白质分离物团块。沉淀过程可借助诸如离心的方法。该诱导沉淀的方法可以减少蛋白质分离物团块中的含水量，一般使总蛋白质分离物团块中含水量从重量百分比约70—90％降低到约50—80％。降低蛋白质分离物团块里的含水量的同时可以降低蛋白质分离物中被吸附的盐含量，从而降低了干燥蛋白质分离物的盐含量。

稀释浓缩蛋白质溶液到离子强度低于约0．2将影响到微团化效率，进而影响蛋白质分离物的产率。因此，通常稀释到离子强度值小于约0．15，优选小于约0．1。本发明中，在离子强度值范围为约0．1—0．2时就可以获得好的蛋白质分离物产率，这种能力与以上提到的现有技术形成鲜明的对照，其中，离子强度必须降低到低于0．1时，才能获得理想的产率。

稀释步骤优选达到离子强度为约0．06—0．12，因为该范围可以获得最佳产率，如果加入过量的水以使离子强度降低至约0．06以下，这将不再有更多的好处。对稀释蛋白质溶液达到的离子强度下限的确定，更大程度上是出于对溶液体积的实际经济角度的考虑，而非从工艺可操作性角度考虑。在附图说明的实施方案中，稀释比例为浓缩蛋白质溶液比水为1∶15。

沉淀下来的蛋白质分离物为呈无定形的、凝聚的、粘结的、胶质的、面筋样形态的蛋白质团块，被称为“蛋白质微团团块”，或简写为“PMM”，是从剩余水相里分离得到的，如倾析除去沉淀蛋白质团块外的水相。PMM可以在湿状态或干状态下应用，通过任何方便的技术，例如喷雾干燥，冷冻干燥或真空锅干燥，可以得到干品。这些干燥的PMM具有高蛋白质含量，通常超过约90％(用Kjeldahl的方法计算，氮×6．25)，基本上没有变性(通过差示扫描热量计分析)。这种从含脂肪的油料籽仁粗粉里分离得到的干燥PMM，同时只含有较低的脂肪残存量，可以低于约1％。

本发明所能达到的高的未变性蛋白质水平的能力是传统技术无法比拟的。通过应用本发明的方法，从现在含脂肪的油料籽仁粗粉中获得的不变性蛋白质的高水平可以与USP4，208，323的方法使用其中所述的原料所获得的水平相当。

按照本发明的方法，独特的脱脂操作可以保证在不变性的方式下从被脂肪污染的油料籽仁粗粉中获得高水平含量的蛋白质。依照本发明的操作程序可以产生一种改性蛋白质微团团块液体析出产物，在此被称为MPMMLE。

本发明通过如下实施例可以得到说明。

实施例1：

本实施例作为本发明的实施方案之一，说明如何从canola的油料籽仁粗粉里制备蛋白质分离物，工艺流程见图1。

市购canola粗粉50公斤加到500升用自来水兑制的氯化钠溶液中(0．5M)，放置在一个600升的容器里。混合物用桨式搅拌器在8℃搅拌4小时，搅拌速度为76．0rpm(转／分)。然后整个混合物进入压榨步骤，使用的是Wilmes型气膜式压榨机。收得的压榨液然后使用Westphalia型澄清机离心，得到盐／蛋白质粗浸提液，含蛋白质13克／毫升，最终体积为477升。

盐／蛋白质粗浸提液随后被冷却到6℃，保持16小时，即有一层脂肪浮出到溶液表面。用泵抽走上面一层，剩余的含蛋白质的溶液然后过滤，所用设备为孔径5微米的袋式过滤器，以便除去残存的籽壳和细胞壁以及脂肪残余颗粒。

滤清的蛋白质溶液再经过浓缩，使用的设备是截止分子量30，000的中空纤维超滤系统，最终浓缩到体积为50升，蛋白质浓度为约120毫克／毫升。所收得的50升浓缩液再被冷却到6℃，保持16小时，则在溶液表层又形成一薄层脂肪膜，该膜层将被撤出并丢弃。

这一高蛋白质含量的浸提液然后用自来水稀释15倍(6℃)。在稀释过程中，有白云状物质迅速出现。不再搅拌，这些蛋白质云状物(由canola粗粉蛋白质发生疏水结合引起蛋白质凝聚)在稀释容器里沉淀下来。上层稀释水用泵抽出，收集沉淀下来的粘性蛋白质团块状物，进行喷雾干燥。所得蛋白质分离物(蛋白质含量91％，同前)用差示扫描热量计分析，发现在不同食品用途中是具有高功能活性的天然物。最终蛋白质分离物中的脂肪含量为0．93％。

实施例2：

按照本发明又一实施方案，本实施例说明如何从溶剂提取过的油菜籽粗粉中制备蛋白质分离物，工艺流程如图2所示。

市购Polish油菜籽粗粉含蛋白质32．5％(同前)，脂肪10．1％，水分6．1％，按照重量／体积比为10％的比例，用重量百分比1．46％的盐溶液浸提。浸提系统在25℃搅拌2小时，用与实施例1相同的方法除去粗粉残渣，然后冷却到8℃，让它沉淀1小时。待沉淀过程结束，大约有200克液体表层脂肪被撤去，然后离心水溶液体系，除去颗粒物质。上清液渗滤后，用截止分子量30，000道尔顿的膜浓缩。整个膜浓缩步骤需要时间4．5小时，得到的蛋白质浸提液总固形物含量为4．1％(蛋白质含量占43．9％，干物质分析)。蛋白质浸提液用自来水(2℃)稀释15倍，发现迅速形成白色微团云块状凝聚蛋白质。让微团块状物在3℃沉淀14小时，倾去上层稀释水，收集底部的粘性蛋白质团块，经过干燥后形成最终蛋白质产品。

实施例3：

本实施例说明canola籽仁经冷压(挤出)制得的粗粉的应用。

完整的canola籽仁进料后被冷挤出机(Monforts型)压出，再将得到的塞状挤出物粉碎，压缩的种子碎粒(较少挤出的油)在标准磨粉机(Fitz型)里粉碎，达到与市售canola粗粉相似的细度。然后此原料依照与实施例2中蛋白质浸提和回收相同的方法加工。在稀释过程中形成典型的云状蛋白质微团，收集粘性蛋白质微团团块，经干燥得最终蛋白质产品。

实施例4：

本实施例说明如何按照本发明的方法来利用市售大豆粗粉。

通过冷粉碎设备得到的市售大豆粗粉(10公斤)，不经过有机溶剂萃取，蛋白质含量为46％，经过pH6．5，0．35M氯化钠溶液搅拌30分钟浸提。初始大豆粗粉含脂肪量为6．0％。整个工艺流程已经在图2中给出，用于此大豆材料的操作细节与实施例2相同，包括除去水相脂肪的冷却步骤，而稀释率则不然，此处调节为1∶3．5。稀释过程中，在高蛋白质含量溶液进入冷自来水时，立即形成白色的蛋白质云状物。蛋白质微团通过离心沉淀下来，在稀释容器底部收集到粘蛋白团块，经过干燥后得到最终蛋白质产品。

内容总结

综上所述，本发明提供了一种新颖的制备蛋白质分离物的方法，从含脂肪的油料籽仁粗粉中，用温和的、不发生变性的方法得到高蛋白质含量的蛋白质分离物，并且基本上除去脂肪。在本发明范围内还可能有一些修改形式。

Claims (25)

1．制备蛋白质分离物的方法，其特征在于：

(a)在温度约5—35℃时，用离子强度0．2至0．8，pH5—6．8的食品级盐溶液，浸提油料籽仁粗粉，粗粉中脂肪重量百分含量达约10％，使粗粉中的蛋白质和脂肪溶解，形成蛋白质水溶液，

(b)首先使蛋白质水溶液与油料籽仁粗粉残渣分离开，然后通过冷却蛋白质水溶液至15℃以下，使脂肪与水相分离，在从水相分离出脂肪之后，将脂肪从蛋白质水溶液中除去，以得到脱脂的蛋白质水溶液；或者

首先通过冷却蛋白质水溶液至15℃以下，使脂肪与水相分离，然后从水相分离出脂肪，再将脂肪从蛋白质水溶液中除去，以得到脱脂的蛋白质水溶液，然后再使蛋白质与油料籽仁粗粉残渣分离，

(c)提高脱脂蛋白质溶液中的蛋白质浓度，同时维持其离子强度基本恒定，得到浓缩的脱脂蛋白质溶液，

(d)稀释浓缩的脱脂蛋白质溶液达离子强度低于约0．2，使之在水相中形成分散的并在显微镜下呈高度凝聚的蛋白质微团状的蛋白质颗粒，

(e)使蛋白质微团沉淀下来，形成蛋白质分离物团块，至少部分为无定形的粘胶质面筋样蛋白质微团团块，

(f)将蛋白质分离物与上清液分开，

(g)干燥蛋白质分离物，得到蛋白质干粉，基本上未变性，并且蛋白质重量百分含量为至少约90％。

2．如权利要求1所述方法，其特征在于食品级盐溶液的离子强度为约0．3—0．6。

3．如权利要求1所述的方法，其特征在于浸提步骤进行10—60分钟。

4．如权利要求1所述的方法，其特征在于食品级盐溶液的pH为5．3—6．2。

5．如权利要求1—4任一项权利要求所述的方法，其特征在于蛋白质水溶液内蛋白质浓度为10—100克／升，溶解的脂肪浓度为1—10克／升。

6．如权利要求1所述的方法，其特征在于通过倾析、离心和／或精滤分离出脂肪。

7．如权利要求1所述的方法，其特征在于在步骤(b)中被冷却的蛋白质水溶液被冷却到温度15℃以下，以便除去此溶液中所含的脂肪的30—90％。

8．如权利要求7所述的方法，其特征在于该被冷却的蛋白质水溶液被冷却到3—7℃。

9．如权利要求7—8任一项权利要求所述的方法，其特征在于蛋白质水溶液的冷却步骤在从油料籽仁粗粉残渣中分离出之前，进行从水相分离出脂肪后再从蛋白质水溶液中分离出油料籽仁粗粉的残渣。

10．如权利要求7—8任一项权利要求所述的方法，其特征在于从油料籽仁粗粉残渣中分离出蛋白质水溶液后再进行蛋白质水溶液的冷却步骤。

11．如权利要求1—4和6—8任一项权利要求所述的方法，其特征在于除去了蛋白质水溶液中所含脂肪的70—90％。

12．如权利要求1—4和6—8的任一项权利要求所述的方法，其特征在于使用选择性膜技术，在保持离子强度的同时，浓缩脱脂蛋白质溶液。

13．如权利要求12所述的方法，其特征在于脱脂蛋白质溶液被浓缩到体积减少系数为3．0—10。

14．如权利要求13所述的方法，其特征在于浓缩在温度为20—45℃的条件下进行。

15．如权利要求1—4和6—8任一项权利要求所述的方法，其特征在于在稀释步骤之前，浓缩的脱脂蛋白质溶液再经过一次进一步的脱脂步骤。

16．如权利要求15所述的方法，其特征在于进一步脱脂步骤通过冷却浓缩的脱脂蛋白质溶液来进行，引起脂肪从水溶液里分离出来，然后可将脂肪与水相分开。

17．如权利要求16所述的方法，其特征在于通过倾析、离心和／或精滤分离出脂肪。

18．如权利要求16所述的方法，其特征在于蛋白质水溶液被冷却到低于15℃，以除去蛋白质水溶液中30—90％的脂肪。

19．如权利要求18所述的方法，其特征在于浓缩的脱脂蛋白质溶液被冷却到3—7℃。

20．如权利要求16—19的任一项权利要求所述的方法，其特征在于除去浓缩蛋白质溶液中所含脂肪的70—90％。

21．如权利要求1—4、6—8和16—19的任一项权利要求所述的方法，其特征在于稀释步骤在温度低于25℃的条件下进行。

22．如权利要求21所述的方法，其特征在于稀释步骤是把浓缩蛋白质溶液加到水主体中，水温度为3—15℃。

23．如权利要求22所述的方法，其特征在于在稀释步骤中将溶液稀释到离子强度为0．06—0．12。

24．如权利要求1—4、6—8和16—19的任一项权利要求所述的方法，其特征在于通过离心来沉淀蛋白质微团。

25．如权利要求1—4、6—8和16—19的任一项权利要求所述的方法，其特征在于油料籽仁粗粉是canola粗粉、油菜籽粗粉或大豆粗粉。

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