CN103396378B - 非布司他结晶 - Google Patents

Abstract

本发明涉及稳定的非布司他结晶。具体地说，本发明涉及下式所示非布司他化合物：其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在约9.42°和约12.54°处有衍射峰。本发明新颖的非布司他结晶显示具有良好的药学性质。

Description

非布司他结晶

技术领域

本发明涉及医药技术领域，涉及一种黄嘌呤氧化酶抑制剂非布司他，特别是涉及非布司他的稳定结晶，还涉及由该非布司他结晶制备的药物组合物，以及该该非布司他结晶的制备方法。本发明提供的非布司他结果具有优良的药学性质。

背景技术

高尿酸血症是由于尿酸产生增多和/或肾尿酸分泌减少所致，它是诱发痛风的最危险的因素。使用药物降低血内尿酸浓度是预防痛风发生的常用方法之一，这类药物包括可以阻断肾小管腔膜对尿酸吸收的促尿酸尿药和黄嘌呤氧化酶/黄嘌呤脱氢酶抑制剂。但是，促尿酸尿药禁用于肾功能障碍病人，而具有正常肾功能的病人用此类药物则会导致尿碱化；别嘌醇则是目前唯一上市的黄嘌呤氧化酶/黄嘌呤脱氢酶抑制剂，但它仅用于下列3种病人：促尿酸药不能使其血内尿酸浓度低于70mg/L的病人、对促尿酸药不能耐受的病人及由于尿酸产生增多导致痛风同时伴有肾功能障碍的病人，而且别嘌醇有明显的不良反应，如肝炎、肾病和过敏反应等。

鉴于对黄嘌呤氧化酶的抑制是预防痛风发生的机制，因而研究人员已把目光瞄准较别嘌醇更为安全有效的药物开发。回顾近两年痛风治疗药物市场，不难看出在这一领域很难见到新品上市，市场依然以别嘌呤醇和苯溴马隆为主。这两种药都是缓解期用药，前者以抑制尿酸生成为主，后者以促进排泄为主。

非布司他(febuxostat)，亦称非布索坦，化学名：2-[3-氰基-4-(2-甲基丙氧基)苯基]-4-甲基噻唑-5-甲酸，英文名：2-[3-cyano-4-(2-methylpropoxy)phenyl]-4-methylthiazole-5-carboxylic acid，其分子式为：C₁₆H₁₆N₂O₃S，分子量为316.38，化学结构式为：

非布司他是帝人(Teijin)公司合成的新一代抗痛风药物，显示出极好的活性，它是一种选择性黄嘌呤氧化酶/黄嘌呤脱氢酶抑制剂，具有良好的应用前景。帝人公司于2004年4月在日本递交了非布司他片20～40mg剂量的申请，非布司他化合物已被特许给了欧洲的Ipsen公司及韩国的SK Chemical公司开发。2008年5月欧盟批准Ipsen公司的非布司他(Adenuric)上市，用于治疗痛风的慢性高尿酸血症。2009年2月FDA批准TAKEDA公司的非布司他(ULORIC)在美国上市，规格40mg、80mg。

抗痛风药目前品种不多，临床治疗主要以秋水仙碱、非甾体类抗炎药、激素、促进尿酸排泄药(如丙磺舒、磺吡酮及苯溴马隆)和抑制尿酸合成药(别嘌呤醇)为主。这些药物在治疗上都有缺陷。疗效差、副作用大成为其临床应用的瓶颈。而非布司他的有效性和特异性均强于目前治疗痛风的标准药物别嘌醇，是40年来首个治疗高尿酸血症的新药。

非布司他是一个非嘌呤类黄嘌呤氧化酶抑制剂，它的基本作用机制与别嘌醇相仿。然而，别嘌醇伴随明显的过敏反应，非布司他却没有显示与别嘌醇具有交叉反应。而且，非布司他用于肾衰患者具有较高安全性。关于有效性方面，非布司他80mg/d显示对于尿酸的降低优于别嘌醇300mg/d。

一项多中心、双盲、随机临床研究评价了非布司他的安全性和对痛风的疗效。总共有136名男性和17名女性痛风病人随机接受安慰剂或本品(40、80或120mg/d)，4周后检测发现，本品各剂量组病人血清尿酸(sUA)浓度较治疗前均显著降低，按剂量由低至高各组分别平均降低37％、44％和59％，而安慰剂组病人sUA浓度仅降低了2％；且安慰剂组及由低至高各剂量组中sUA浓度降到60mg/L以下的病人分别占0％、56％、76％和94％；绝大多数病人坚持完成了试验，非布司他和安慰剂组不良反应发生率相近，分别为54％和50％，并且这些不良反应大多轻微，具有自限性。

与别嘌醇一样，非布司他可阻断尿酸的形成，而尿酸结晶沉积在痛风病人的关节处，引起疼痛性肿胀。但是，别嘌醇会抑制一系列参与尿酸通路的酶，非布司他则仅抑制黄嘌呤氧化酶，因而其作用更具特异性。TAP公司的MacDonald博士认为，这种作用差异在理论上使得非布司他要比别嘌醇更为安全。别嘌醇可致大约1％～2％的病人出现副作用，其中25％甚至是致命的。尤其是，本品主要在肝脏代谢，可能更适用于肾衰病人，而别嘌醇是经由肾排泄。

非布司他是一种不吸潮的白色结晶粉易，溶于二甲基甲酰胺，溶于二甲基亚砜；微溶于乙醇；略微溶于甲醇和乙腈，基本不溶于水。熔点范围205℃至208℃。非布司他存在多种晶型，并且各晶型之间存在转晶的可能。

例如CN1275126A(CN99801366.8-帝人)及CN102020617A(CN201010562692.0-帝人)公开了一种通过在由温度和所用混合溶剂的甲醇与水之比所限定的特定条件下结晶、选择性制备2-(3-氰基-4-异丁氧基苯基)-4-甲基-5-噻唑甲酸的各种多晶型体的方法，以及由此方法制得的2-(3-氰基-4-异丁氧基苯基)-4-甲基-5-噻唑甲酸的每种多晶型体；还提供了通过加热和真空干燥上述酸的特定多晶型体由此制得上述酸的其它多晶型体或其无定形体的方法，以及按此方法制得的所述酸的多晶型体或无定形体；据说发明记载的数种晶型之间就可能在某种条件下转化成其它晶型，晶型的转化对于药剂性质例如药物制剂的溶出度或稳定性等存在替在的影响。特别地，该发明记载了一种称之为A晶型的结晶，其X射线粉末衍射图在反射角2θ约为6.62，7.18，12.80，13.26，16.48，19.58，21.92，22.68，25.84，26.70，29.16和36.70°处具有特征峰。

CN1970547A(CN200610095263.0，重庆医工)公开了一种2-(3-氰基-4-异丁氧基)苯基-4-甲基-5-噻唑甲酸(非布司他)的3种新晶型H、I、J及其制备方法，进一步提供了此3种晶型的X－ray射线粉末衍射特征吸收峰和红外吸收峰；特别地，公开的晶型I的X射线粉末衍射图的反射角2θ在约为3.28，6.58，12.70，13.34，19.97，24.26和25.43°处有特征吸收峰。

CN101684107A(CN200810200565.9,上海优拓)公开了2-(3-氰基-4-异丁氧基)苯基-4-甲基-5-噻唑甲酸(简称“非布索坦”，式I)的新晶型X、Y和Z及其制备方法，并通过熔点和粉末X衍射图确证,对该方法制备得到的非布索坦对温度、光照和湿度极其稳定，利于长期存放，所使用溶剂安全并易于去除，操作简单宜于工业化生产，并且适用直接用于制剂生产。其中记载的多晶型Y的X-射线粉末衍射图在2θ为：6.60，7.18，11.68，12.8，13.26，14.4，16.1，16.46，17.46，18.98，19.58，20.96，21.92，22.68，23.76，24.69，25.16，25.83，26.65，27.88，36.70处有特征吸收峰。

非布司他的其它晶型例如有：晶型A、B、C、D、G、无定形(它们的制备例如记载于CN1275126A)，晶型H、I、J(它们的制备例如记载于CN1970547A)，晶型K、L(它们的制备例如记载于CN101759656A)，晶型M(它们的制备例如记载于CN101891702A)，晶型N(它们的制备例如记载于CN101891703A)，晶型P(它们的制备例如记载于CN101824006A)，晶型Q(它们的制备例如记载于CN101824005A)，晶型R、S、T(它们的制备例如记载于CN101928260A)，晶型X、Y、Z(它们的制备例如记载于CN101684107A)。

众所周知的，各种晶型本身存在不稳定的情形，例如在长期保存过程中可能会发生转晶的现象。然而另一种不可忽略的问题是，不同晶型制备的药剂特别是因体药物制剂例如片剂，它们在长期贮藏过程中可能会由于晶型的不稳定而影响片剂的性能，例如影响片剂的溶出性能，由此引发的后果是制剂生物利用度改变，这是临床上不允许发生的。

因此，本领域技术人员期待有一种新的方法来制备具有良好药学特征的非布司他例如具有稳定特征的非布司他结晶。

发明内容

本发明的目的在于为临床提供一种新颖的非布司他结晶，期待结晶具有良好的稳定性，例如晶型本身稳定，和/或由该晶型制备成的片剂具有良好的稳定性。本发明人发现具有特定晶型的非布司他不但本身具有稳定性，而且由其制备的片剂同样具有良好的稳定性能。本发明基于此发现而得以完成。

为此，本发明第一方面提供了下式化合物：

其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在约9.42°和约12.54°处有衍射峰。

根据本发明第一方面的化合物，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在约9.42°、约12.54°、约19.12°、和约19.94°处有衍射峰。

根据本发明第一方面的化合物，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在约6.64°、约7.18°、约9.42°、约12.54°、约12.81°、约16.39°、约19.12°、和约19.94°处有衍射峰。

根据本发明第一方面的化合物，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在约6.64°、约7.18°、约9.42°、约12.54°、约12.81°、约16.39°、约19.12°、约19.60°、约19.94°、约20.86°、约21.25°、约23.82°、约25.30°、约25.88°、约26.71°处有衍射峰。

根据本发明第一方面的化合物，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在9.42°和12.54°各角度处的±0.20°、±0.10°或±0.05°的范围有衍射峰。在一个实施方案中，所述化合物使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在9.42°±0.10°和12.54°±0.10°处有衍射峰。

根据本发明第一方面的化合物，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在9.42°、12.54°、19.12°、和19.94°各角度处的±0.20°、±0.10°或±0.05°的范围有衍射峰。在一个实施方案中，所述化合物使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在9.42°±0.10°、12.54°±0.10°、19.12°±0.10°、和19.94°±0.10°处有衍射峰。

根据本发明第一方面的化合物，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在6.64°、7.18°、9.42°、12.54°、12.81°、16.39°、19.12°、和19.94°各角度处的±0.20°、±0.10°或±0.05°的范围有衍射峰。在一个实施方案中，所述化合物使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在6.64°±0.10°、7.18°±0.10°、9.42°±0.10°、12.54°±0.10°、12.81°±0.10°、16.39°±0.10°、19.12°±0.10°、和19.94°±0.10°处有衍射峰。

根据本发明第一方面的化合物，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在6.64°、7.18°、9.42°、12.54°、12.81°、16.39°、19.12°、19.60°、19.94°、20.86°、21.25°、23.82°、25.30°、25.88°、26.71°各角度处的±0.20°、±0.10°或±0.05°的范围有衍射峰。在一个实施方案中，所述化合物使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在6.64°±0.10°、7.18°±0.10°、9.42°±0.10°、12.54°±0.10°、12.81°±0.10°、16.39°±0.10°、19.12°±0.10°、19.60°±0.10°、19.94°±0.10°、20.86°±0.10°、21.25°±0.10°、23.82°±0.10°、25.30°±0.10°、25.88°±0.10°、26.71°±0.10°处有衍射峰。

根据本发明第一方面的化合物，其使用Cu-Kα辐射，具有基本上如图1所示的粉末X-射线衍射图谱。

本领域技术人员公知，在表示衍射峰的强度时，均可以用衍射相对强度或相对强度(其缩写为I/Io)表示，并且通常将最强峰的I/Io表示为100，其它衍射峰的强度与最强峰的强度的比值乘以100可算得其它衍射峰的相对强度。或者，对于某一衍射图谱，针对其中的某一较强的衍射峰定义其相对强度I/Io值为100，其它衍射峰的强度与最峰的强度的比值乘以100可算得其它衍射峰的相对强度。

根据本发明第一方面的化合物，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在约19.94°处有衍射峰，并且该衍射峰的I/Io值以100计，2θ约12.81°处的衍射峰的I/Io值大于65，优选大于70，例如在70～120之间，例如在70～110之间，例如在70～100之间。

根据本发明第一方面的化合物，其是基本上具有本发明所述衍射特征的非布司他结晶。

进一步地，本发明第二方面提供了制备本发明非布司他结晶的方法，其包括如下步骤：将非布司他加至正丁醇和乙腈的混合溶液中，搅拌下加热至回流并使溶解，在搅拌下向混合溶液中滴加冰乙酸，接着缓缓冷却至约5℃(可以在此温度下静置5-8小时)以析出沉淀，滤出沉淀，用正丁醇洗涤，40℃真空干燥，即得。

根据本发明第二方面的方法，其中所述正丁醇和乙腈二者的体积比为100：(30～50)，优选的体积比为100：(35～45)。

根据本发明第二方面的方法，其中所述冰乙酸的滴加量是：使其在溶液中的浓度达到2～5％(v/v)的量。

根据本发明第二方面的方法，其中正丁醇和乙腈的混合溶液的量是以使药物溶解的最低量，例如每100ml正丁醇使用量可用于处理5～15g活性药物。

进一步地，本发明第三方面提供了一种药物组合物，其中包含上文所述非布司他结晶和药学可接受的载体。

根据本发明第三方面的药物组合物，其是口服制剂或者注射制剂。

根据本发明第三方面的药物组合物，其是片剂、胶囊剂、颗粒剂、注射剂(包括注射液和冷冻干燥粉针剂)、混悬剂、丸剂。

根据本发明第三方面的药物组合物，其是片剂，其中包含本发明第一方面任一实施方案所述非布司他结晶，以及乳糖一水合物、微晶纤维素、羟基丙基纤维素、交联羧甲基纤维素钠、二氧化硅和硬脂酸镁。

根据本发明第三方面的药物组合物，其是片剂，其中包含本发明第一方面任一实施方案所述非布司他结晶40重量份，以及乳糖一水合物20～60重量份、微晶纤维素20～60重量份、羟丙基纤维素3-30重量份、交联羧甲基纤维素钠2-15重量份、二氧化硅0.5-2重量份、和硬脂酸镁0.5-2重量份。

根据本发明第三方面的药物组合物，其是片剂，其中包含本发明第一方面任一实施方案所述非布司他结晶，以及微晶纤维素、预胶化淀粉、羧甲淀粉钠、聚维酮K30、硬脂酸镁。

根据本发明第三方面的药物组合物，其是片剂，其中包含本发明第一方面任一实施方案所述非布司他结晶40重量份，以及微晶纤维素60～120重量份、预胶化淀粉30～50重量份、羧甲淀粉钠5～15重量份、2～6重量份的聚维酮K30、硬脂酸镁0.5～2重量份。

根据本发明第三方面的药物组合物，其是片剂，并且其进一步被包衣。示例性的包衣材料例如购自卡乐康公司的Opadry II。衣层重可以是大约占片剂总重的1-4％。

由于上述辅料本身在测试X-射线衍射时不会显示典型的衍射峰，而当这些辅料与具有典型衍射峰的活性成分例如本发明的非布司他混合、制备片剂时，如果在制备过程中活性成分的晶型能够保持稳定，则压成的片剂大体上仍然具有与原料药相当的衍射谱，特别是包括原料药的典型衍射峰。

本发明的任一方面的任一实施方案，可以与其它实施方案进行组合，只要它们不会出现矛盾。此外，在本发明任一方面的任一实施方案中，任一技术特征可以适用于其它实施方案中的该技术特征，只要它们不会出现矛盾。

在本发明中，“％”的含义可根据具体使用环境而定，特别是其具有如2010年版中国药典二部凡例中“计量”项下第二十八条(4)款所述含义。

在本发明中，确定各种物料(例如各种晶型的原料药、药物组合物等)中非布司他或者其它杂质的含量时，以及确定这些物料中的色谱纯度时，可以采用下面的一些方法进行测定，例如下面的“含量测定法”、“有关物质检查法”、“溶出度测定法”、“粉末X射线衍射分析方法”，在本发明后文的实施例部分，如需要测定某些物料的含量、有关物质、溶出度、粉末X射线衍射，如未另外说明，均是照如下方法进行。

含量测定法(本法可用于测定原料药、药物组合物中非布司他的含量、溶出度等)：

采用高效液相色谱法(中国药典2010年版二部附录VD)测定：

色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-磷酸盐缓冲溶液(取无水磷酸氢二钠5.8g，加水溶解，加入16.7g柠檬酸，并稀释至1000ml，调节pH至3.0)＝36:64为流动相；检测波长为284nm。理论板数按峰非布索坦计算应不小于4000；

对照品溶液的制备：取非布司他对照品约40mg，精密称定，置200ml量瓶中，加乙腈：水(36：64)适量，超声使溶解后稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml置100ml量瓶中，加乙腈：水(36：64)稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

供试品溶液制备：取约相当于非布司他40mg的待测试样，精密称定，置200ml量瓶中，加乙腈：水(36：64)适量，超声使溶解后稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml置100ml量瓶中，加乙腈：水(36：64)稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液；溶出度试样可在过滤后直接用上述溶剂稀释至相当浓度后测定；

测定法：精密量取对照品溶液和供试品溶液各50ul。分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得。

有关物质检查法(本法可用于测定原料药或组合物中单一杂质或总杂质的含量)：

取样品适量，加乙腈-水(36：64)制成每1ml中含0.2mg(以含非布索坦计)的溶液，作为供试品溶液；

再取供试品溶液适量，用乙腈-水(36：64)稀释成2μg/ml的溶液，作为对照溶液；

采用高效液相色谱法(中国药典2010年版二部附录VD)测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-磷酸盐缓冲溶液(取无水磷酸氢二钠5.8g，加水溶解，加入16.7g柠檬酸，并稀释至1000ml，调节pH至3.0)为流动相，采用线性梯度洗脱，0至7分钟，乙腈比例为5％，7至20分钟，乙腈从5％升至20％，维持5分钟，20至30分钟，乙腈比例从20％升至30％；检测波长为284nm，流速：0.5ml/min，进样量：20μl，理论板数(n)按非布索坦色谱峰计算应不低于3000；

柱温为40℃的色谱条件下，取对照溶液20μl注入高效液相色谱仪，记录色谱图；调整仪器灵敏度，使主成分峰高约为满量程的15～20％，再取供试品溶液20μl注入液相色谱仪，记录色谱图之主成分峰保留时间的4倍；

计算供试品溶液色谱图中各杂质的峰面积；按本领域技术人员公知的方法，通过各杂质峰的峰面积与对照溶液色谱图中主峰面积比较计算供试品中该杂质的含量；例如对照溶液色谱图中主峰面积为1000(其相当于供试品溶液浓度的1％)，如果在供试品溶液色谱图中某杂质的峰面积为500则该杂质在供试品中的含量为0.5％，如果在供试品溶液色谱图中某杂质的峰面积为2000则该杂质在供试品中的含量为2％；这些计算可以得到该供试品中的最大单一杂质的含量；全部杂质的含量加和可以得到总杂质含量。以上在测定有关物质时，对于包含药用辅料的药物组合物，在计算时扣除色谱图中辅料的色谱峰。

粉末X射线衍射分析方法：

仪器型号：粉末X衍射仪，Rigaku Dmax/2400

实验条件：CuKα辐射，石墨单色器，40KV，100MA，2θ扫描范围：0.0-50°，扫描速度4°/分，步长：0.01°

扫描方式：连续扫描

狭缝设置:出射slit DS：1/2°防散射slit：SS 1/2°；RS:0.3mm。

本发明药物组合物中使用的“药学可接受的载体”可以是药物制剂领域中任何常规的载体。特定载体的选择将取决于用于治疗特定患者的给药方式或疾病类型和状态。用于特定给药模式的合适药物组合物的制备方法完全在药物领域技术人员的知识范围内。例如，可以作为药学可接受的载体包括药学领域常规的稀释剂、载体、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体和润滑剂等。必要时，还可以在药物组合物中加入香味剂、防腐剂和甜味剂等。

本发明的药物组合物可以制成片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液、膏剂、霜剂、注射乳剂(注射用无菌粉针)等多种形式。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。

再进一步地，本发明提供了本发明所述非布司他结晶在制备用于痛风及其并发症例如高尿酸血症的药物中的用途。

现已上市销售的非布司他药剂(例如片剂等)，其可用于治疗痛风及其并发症例如高尿酸血症。本发明提供一种新的非布司他结晶，其在溶解性能以及口服后的体内行为方面具有优良的特点，因此本发明新的非布司他结晶同样可用于治疗痛风及其并发症例如高尿酸血症。

本文所用的术语“基峰”，是指某一X射线衍射图中强度最大的峰，其相对强度(I/Io)为100，其它峰可通过衍射仪直接计算出其I/Io值。

在本文中，描述2θ角度的具体值时，以“约”引出的具体角度值表示允许在该角度处的±0.20°、±0.10°或±0.05°的范围内。在本发明其它情况下，以术语“约”修饰某一数值时，例如在用于修饰某一数值或数值范围时，是指包括该数值或数值范围以及该数值或数值范围的本领域技术人员可接受的误差范围，例如该误差范围为±10％、±5％、±2％、±1％、±0.5％等。

附图说明

图1：本发明实施例制备的非布司他结晶的粉末X射线衍射图，图中横坐标为2θ，以度(°)为单位，纵坐标为峰的强度(cps)，图中各峰标示的是其2θ角，例如2θ角为19.94°的峰为最强峰(可称为基峰)。

具体实施方式

通过下面的实施例可以对本发明进行进一步的描述，然而，本发明的范围并不限于下述实施例。本领域的专业人员能够理解，在不背离本发明的精神和范围的前提下，可以对本发明进行各种变化和修饰。本发明对试验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但是本发明仍然在此作尽可能详细描述。

在制备本发明晶型时使用到的非布司他原料药可以参照现有技术方法获得，例如参照WO92/90279中描述的方法制备。它们经粉末X-射线衍射测定，在约6.64°、约7.18°、约9.42°、约12.54°、约12.81°、约16.39°、约19.12°、和约19.94°处均未显示有类似于本发明的特征衍射峰。

实施例1：制备非布司他结晶

将非布司他原料(下文也用同一批)10g加至100ml正丁醇和40ml乙腈的混合溶液中，搅拌下加热至回流并使溶解，在搅拌下向混合溶液中滴加冰乙酸(加入量是：使冰乙酸在溶液中的浓度达到4％(v/v)的量)，接着缓缓冷却至约5℃(静置6小时)以析出沉淀，滤出沉淀，用正丁醇洗涤，40℃真空干燥，即得，收率95.7％。

分别照上文所述测定含量方法以及有关物质检测法测定含量和杂质。

含量为99.7％(HPLC)，其中总杂质0.176％，最大单一杂质0.033％。

测定粉末X射线衍射，结果如图1。

粉末X射线衍射结果显示，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在约9.42°和约12.54°处有衍射峰；特别地，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，该结晶在约9.42°、约12.54°、约19.12°、和约19.94°处有衍射峰；特别地，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，该结晶在约6.64°、约7.18°、约9.42°、约12.54°、约12.81°、约16.39°、约19.12°、和约19.94°处有衍射峰；特别地，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，该结晶在约6.64°、约7.18°、约9.42°、约12.54°、约12.81°、约16.39°、约19.12°、约19.60°、约19.94°、约20.86°、约21.25°、约23.82°、约25.30°、约25.88°、约26.71°处有衍射峰。

另外，粉末X射线衍射结果还显示，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在在约6.64°、约7.18°、约9.42°、约12.54°、约12.81°、约16.39°、约19.12°、和约19.94°处有衍射峰；以约19.94°处衍射峰的相对强度(I/Io值)为100计，约12.81°处衍射峰的I/Io值大于65，优选大于70，例如在70～120之间，例如在70～110之间，例如在70～100之间。

图1中约12.81°处衍射峰的I/Io值约为86。另外，将该实施例1样品在另外三台不同品牌粉末X射线衍射仪上测定衍射图，结果约12.81°处衍射峰的I/Io值在79～91范围内。

实施例2：制备非布司他结晶

将非布司他原料10g加至100ml正丁醇和35ml乙腈的混合溶液中，搅拌下加热至回流并使溶解，在搅拌下向混合溶液中滴加冰乙酸(加入量是：使冰乙酸在溶液中的浓度达到5％(v/v)的量)，接着缓缓冷却至约5℃(静置8小时)以析出沉淀，滤出沉淀，用正丁醇洗涤，40℃真空干燥，即得，收率95.1％。

含量为99.7％(HPLC)，其中总杂质0.182％，最大单一杂质0.037％。

测定粉末X射线衍射，结果基本上与图1一致，具体地说：与图1中15个峰的2θ值基本一致，各峰与图1相应峰的2θ值相差均在±0.10°的范围内。

总共在四台不同品牌粉末X射线衍射仪上测定衍射图，以约19.94°处衍射峰的相对强度(I/Io值)为100计，约12.81°处衍射峰的I/Io值在71～83之间。

实施例3：制备非布司他结晶

将非布司他原料14g加至100ml正丁醇和45ml乙腈的混合溶液中，搅拌下加热至回流并使溶解，在搅拌下向混合溶液中滴加冰乙酸(加入量是：使冰乙酸在溶液中的浓度达到2％(v/v)的量)，接着缓缓冷却至约5℃(静置5小时)以析出沉淀，滤出沉淀，用正丁醇洗涤，40℃真空干燥，即得，收率94.6％。

含量为99.7％(HPLC)，其中总杂质0.221％，最大单一杂质0.034％。

测定粉末X射线衍射，结果基本上与图1一致，具体地说：与图1中15个峰的2θ值基本一致，各峰与图1相应峰的2θ值相差均在±0.10°的范围内。

总共在四台不同品牌粉末X射线衍射仪上测定衍射图，以约19.94°处衍射峰的相对强度(I/Io值)为100计，约12.81°处衍射峰的I/Io值在89～98之间。

实施例4：制备非布司他结晶

将非布司他原料6g加至100ml正丁醇和40ml乙腈的混合溶液中，搅拌下加热至回流并使溶解，在搅拌下向混合溶液中滴加冰乙酸(加入量是：使冰乙酸在溶液中的浓度达到3％(v/v)的量)，接着缓缓冷却至约5℃(静置7小时)以析出沉淀，滤出沉淀，用正丁醇洗涤，40℃真空干燥，即得，收率96.3％。

含量为99.5％(HPLC)，其中总杂质0.331％，最大单一杂质0.031％。

测定粉末X射线衍射，结果基本上与图1一致，具体地说：与图1中15个峰的2θ值基本一致，各峰与图1相应峰的2θ值相差均在±0.10°的范围内。

总共在四台不同品牌粉末X射线衍射仪上测定衍射图，以约19.94°处衍射峰的相对强度(I/Io值)为100计，约12.81°处衍射峰的I/Io值在97～108之间。

对照例1：制备非布司他结晶

参考实施例1的方法，但是不使用冰乙酸。结果在约9.42°处、约12.54°处、约19.12°处、约19.94°处均未显示如本发明的典型衍射峰。

对照例2：制备非布司他结晶

参考实施例1的方法，但是冰乙酸的加入量是：使冰乙酸在溶液中的浓度达到1％(v/v)的量。结果在约9.42°处、约12.54°处、约19.12°处均未显示如本发明的典型衍射峰，以约19.94°处衍射峰的相对强度(I/Io值)为100计，约12.81°处衍射峰的I/Io值达420。在补充试验中，参考实施例1的方法，但是冰乙酸的加入量是：使冰乙酸在溶液中的浓度达到10％(v/v)或者20％的量，结果收率分别降到70％以下和50％以下。

对照例3：制备非布司他结晶

照CN102020617A(CN201010562692.0-帝人)实施例1的方法进行，得到A晶型，经X射线衍射分析显示与CN102020617A中的图2和[0014]段相同的图谱和数据，例如在约9.42°、约12.54°、约19.12°等处无衍射峰。

含量为99.6％(HPLC)，其中总杂质0.263％，最大单一杂质0.027％。

对照例4：制备非布司他结晶

照CN1970547A(CN200610095263.0，重庆医工)实施例2的方法进行，得到I晶型，经X射线衍射分析显示与CN1970547A中的图3和权利要求3相同的图谱和数据，例如在约7.18°、约9.42°、约12.54°、约19.12°等处无衍射峰。

含量为99.4％(HPLC)，其中总杂质0.334％，最大单一杂质0.023％。

对照例5：制备非布司他结晶

照CN101684107A(CN200810200565.9,上海优拓)实施例3的方法进行，得到Y晶型，经X射线衍射分析显示与CN101684107A中的图2和权利要求3相同的图谱和数据，例如在约7.18°、约9.42°、约12.54°、约19.94°等处无衍射峰。

含量为99.6％(HPLC)，其中总杂质0.312％，最大单一杂质0.039％。

下面各组合物例中提供了制备包含非布司他组合物特别是片剂的方法，批量投料量为10000片/批，表示处方时以每片量计。以下各制备片剂的实例中，如未另外说明，片剂均用同一型号的压片机进行压制。并且各种片剂在压制时，将片剂的硬度均控制在5-6kgf(即49～59N)的范围内(使用同一型号的片剂硬度测试仪测定片剂硬度)。

组合物例1：制备非布司他片剂

使用上文实施例1制备得到的非布司他结晶为原料药。

配方：非布司他40mg、乳糖一水合物45mg、微晶纤维素45mg、羟丙基纤维素20mg、交联羧甲基纤维素钠10mg、二氧化硅1mg、和硬脂酸镁1mg；使用50％乙醇为润湿剂以常规湿法制粒方法制备片剂。

组合物例2：制备非布司他片剂

使用上文实施例2制备得到的非布司他结晶为原料药。

配方：非布司他40mg、乳糖一水合物60mg、微晶纤维素20mg、羟丙基纤维素3mg、交联羧甲基纤维素钠15mg、二氧化硅2mg、和硬脂酸镁0.5mg；使用水为润湿剂以常规湿法制粒方法制备片剂。

组合物例3：制备非布司他片剂

使用上文实施例3制备得到的非布司他结晶为原料药。

配方：非布司他40mg、乳糖一水合物20mg、微晶纤维素60mg、羟丙基纤维素30mg、交联羧甲基纤维素钠2mg、二氧化硅0.5mg、和硬脂酸镁2mg；使用常规的干法制粒方法制备片剂。

组合物例4：制备非布司他片剂

使用上文实施例1制备得到的非布司他结晶为原料药。配方：非布司他40mg、微晶纤维素85mg、预胶化淀粉40mg、羧甲淀粉钠10mg、4mg聚维酮K30、硬脂酸镁1mg；使用PVP配制的水溶液为粘合剂以常规湿法制粒方法制备片剂。使用购自卡乐康公司的Opadry II包薄膜衣，包层重大约占片剂总重的3％。

组合物例5：制备非布司他片剂

使用上文实施例2制备得到的非布司他结晶为原料药。配方：非布司他40mg、微晶纤维素60mg、预胶化淀粉50mg、羧甲淀粉钠15mg、2mg聚维酮K30、硬脂酸镁2mg；使用PVP配制的50％乙醇溶液为粘合剂以常规湿法制粒方法制备片剂。使用购自卡乐康公司的欧巴代85G62756包薄膜衣，包层重大约占片剂总重的3％。

组合物例6：制备非布司他片剂

使用上文实施例3制备得到的非布司他结晶为原料药。配方：微晶纤维素120mg、预胶化淀粉30mg、羧甲淀粉钠5mg、6mg聚维酮K30、硬脂酸镁0.5mg；使用常规的干法制粒方法制备片剂。

组合物例7：制备非布司他片剂

使用上文实施例4制备得到的非布司他结晶为原料药。照上文组合物例1的配方和方法制备片剂。

组合物例8：制备非布司他片剂

使用上文对照例1制备得到的非布司他结晶为原料药。照上文组合物例3的配方和方法制备片剂。

组合物例9：制备非布司他片剂

使用上文对照例2制备得到的非布司他结晶为原料药。照上文组合物例3的配方和方法制备片剂。

组合物例10：制备非布司他片剂

使用上文对照例3制备得到的非布司他结晶为原料药。照上文组合物例3的配方和方法制备片剂。

组合物例11：制备非布司他片剂

使用上文对照例4制备得到的非布司他结晶为原料药。照上文组合物例3的配方和方法制备片剂。

组合物例12：制备非布司他片剂

使用上文对照例5制备得到的非布司他结晶为原料药。照上文组合物例3的配方和方法制备片剂。

测试以上组合物例1至组合物例12片剂的X射线衍射图，结果显示它们均分别与其所用非布司他原料的晶型相同的衍射图谱，表明这些不同的结晶，经历不同的制片工艺后，并未显示晶型的改变。

试验例1：稳定性试验

将以上各实施例1～实施例4、对照例1～对照例5所得非布司他结晶，以上组合物例1～组合物例12所得片剂共21个样品作为试样，进行稳定性考察。

将上述各原料药或片剂分别用铝箔袋密封包装，置于45℃恒温箱中放置5月，测定各试样在0月(即放样前)和5月时活性成分的含量以及有关物质含量(以最大单一杂质和总杂质表示)。

对于每一试样，以5月活性成分含量除以0月活性成分含量所得的百分值，作为高温处置5月后的活性成分相对含量(％)，即计算式如下：

活性成分相对含量(％)＝(5月含量÷0月含量)×100％

此外，对于每一试样，以5月的最大单一杂质含量除以0月时该的最大单一杂质含量所得的百分值，作为高温处置5月后最大单一杂质的相对含量(％)，即计算式如下：

最大单一杂质相对含量(％)＝

(5月最大单一杂质含量÷0月最大单一杂质含量)×100％

此外，对于每一试样，以5月的总杂质含量除以0月时总杂质含量所得的百分值，作为高温处置5月后总杂质的相对含量(％)，即计算式如下：

总杂质相对含量(％)＝(5月总杂质含量÷0月总杂质含量)×100％

出人意料地发现，本发明非布司他结晶及其所制备的片剂药物组合物具有良好的稳定性，活性成分的含量变化小，而且杂质变化亦较小，高温处置5月后具体结果如表1所示。

表1：

	活性成分相对含量	最大单一杂质相对含量	总杂质相对含量
				实施例1结晶	99.1％	132.5％	153.3％
实施例2结晶	99.3％	126.4％	161.6％
				实施例3结晶	99.5％	128.2％	158.5％
实施例4结晶	99.2％	126.3％	154.8％
				对照例1结晶	96.4％	183.4％	232.3％
对照例2结晶	95.5％	203.6％	251.5％
				对照例3结晶	97.2％	194.6％	244.8％
对照例4结晶	97.7％	205.6％	264.2％
				对照例5结晶	96.8％	189.9％	257.8％
组合物例1	98.5％	153.3％	197.6％
				组合物例2	98.3％	148.6％	179.2％
组合物例3	98.5％	149.4％	202.7％
				组合物例4	98.6％	144.5％	183.5％
组合物例5	98.4％	137.8％	179.8％

组合物例6	99.1％	151.2％	189.4％
				组合物例7	98.3％	140.2％	181.2％
组合物例8	89.3％	253.5％	293.4％
				组合物例9	91.2％	241.2％	311.3％
组合物例10	93.4％	188.4％	273.5％
				组合物例11	94.3％	198.5％	331.5％
组合物例12	92.7％	213.7％	306.8％

从表中结果可见，本发明结晶在原料药或者制剂状态下均具有比之于现有技术制备的结果更好的化学稳定性。

试验例2：片剂溶出度的测定方法

取上文各组合物例制备的片剂(均取未包衣的素片)测定溶出度，照溶出度测定法(中华人民共和国药典2010年版二部附录XC第二法)，0.25％十二烷基硫酸钠溶液900ml为溶出介质，转速为每分钟50转，依法操作，经45分钟时，取溶液适量，滤过，精密量取续滤液适量，用溶出介质定量稀释，用HPLC法测定。结果表明，组合物例1～组合物例12各片剂的溶出度均达到87～95％的范围，例如组合物例1的片剂在45分钟时的溶出度为91.2％。其中，非布司他的溶出量采用张晓燕等的文献(非布司他片有关物质测定方法的建立，中国新药杂志，2011年第22期)方法进行测定。可见，各种片剂均显示具有良好的溶出度。

将上述组合物例1～组合物例12各片剂分别用铝箔袋密封包装，置于45℃恒温箱中放置5月，测定各试样在0月(即高温处置前)和5月时(即高温处置后)的溶出度。对于同一片剂，以下式计算其经高温处置前、后的溶出度变化百分数(％)：

溶出度变化百分数＝[(0月溶出度-5月溶出度)÷0月溶出度]×100％

该溶出度变化百分数(％)越接近于0％则以溶出度表征的片剂稳定性越好。

结果显示，组合物例1～组合物例7片剂的溶出度变化百分数均在-4％至5％范围内，例如组合物例3片剂的溶出度变化百分数为2.2％，表明这些片剂在经模拟制剂长期留样的过程中以溶出度表征的片剂稳定性令人满意；但是出人意料的是，组合物例8～组合物例12片剂的溶出度变化百分数均在24％至35％范围内，例如组合物例8片剂的溶出度变化百分数为31.2％，表明这些片剂在经模拟制剂长期留样的过程中以溶出度表征的片剂稳定性不能令人接受。

试验例3：本发明非布司他结晶及其药物组合物的结晶稳定性

测定本发明以上实施例1～实施例4所得非布司他结晶，以及以上组合物例1～组合物例7所得片剂各样品的粉末X-射线衍射图(作为0月图谱)。接着使这些试样分别用铝箔袋密封包装，置于45℃恒温箱中放置5月，测定各试样在5月时(即高温处置后)的粉末X-射线衍射图(作为5月图谱)。对于同一试样，比较其经高温处置前、后的粉末X-射线衍射图。

结果显示，这些试样在高温处置前、后显示均具有相同的粉末X-射线衍射图谱，特别是，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在约9.42°和约12.54°的±0.10°处有衍射峰；特别地，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，该结晶在约9.42°、约12.54°、约19.12°、和约19.94°的±0.10°处有衍射峰；特别地，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，该结晶在约6.64°、约7.18°、约9.42°、约12.54°、约12.81°、约16.39°、约19.12°、和约19.94°的±0.10°处有衍射峰；特别地，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，该结晶在约6.64°、约7.18°、约9.42°、约12.54°、约12.81°、约16.39°、约19.12°、约19.60°、约19.94°、约20.86°、约21.25°、约23.82°、约25.30°、约25.88°、约26.71°的±0.10°处有衍射峰。

另外，粉末X射线衍射结果还显示，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，这些0月和5月图谱均在约6.64°、约7.18°、约9.42°、约12.54°、约12.81°、约16.39°、约19.12°、和约19.94°的±0.10°处有衍射峰；以约19.94°处衍射峰的相对强度(I/Io值)为100计，约12.81°处衍射峰的I/Io值均在72～108之间。

以上所揭露的仅为本发明的较佳实施例而已，当然不能以此来限定本发明的权利范围，因此依本发明申请专利范围所作的等同变化，仍属本发明所涵盖的范围。

Claims (13)

1.下式所示非布司他化合物的结晶：

，

其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在6.64°、7.18°、9.42°、12.54°、12.81°、16.39°、19.12°、19.60°、19.94°、20.86°、21.25°、23.82°、25.30°、25.88°、26.71°各角度处的±0.10°的范围有衍射峰。

2.根据权利要求1的结晶，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在6.64°、7.18°、9.42°、12.54°、12.81°、16.39°、19.12°、19.60°、19.94°、20.86°、21.25°、23.82°、25.30°、25.88°、26.71°各角度处的±0.05°的范围有衍射峰。

3.根据权利要求1的结晶，其使用Cu-Kα辐射，在以2θ角度表示的粉末X-射线衍射图谱中，在19.94°处有衍射峰，并且该衍射峰的I/Io值以100计，2θ在12.81°处的衍射峰的I/Io值大于65。

4.根据权利要求1的结晶，其使用Cu-Kα辐射，具有如图1所示的粉末X-射线衍射图谱。

5.制备权利要求1-4任一项结晶的方法，其包括如下步骤：将非布司他加至正丁醇和乙腈的混合溶液中，搅拌下加热至回流并使溶解，在搅拌下向混合溶液中滴加冰乙酸，接着缓缓冷却至5°C以析出沉淀，滤出沉淀，用正丁醇洗涤，40°C真空干燥，即得；所述冰乙酸的滴加量是：使其在溶液中的体积百分浓度达到2~5%的量。

6.根据权利要求5的方法，其中在缓缓冷却至5°C后，在此温度下静置5-8小时。

7.一种药物组合物，其中包含权利要求1-4任一项的结晶和药学可接受的载体。

8.根据权利要求7的药物组合物，其是片剂，其中包含非布司他结晶，以及乳糖一水合物、微晶纤维素、羟基丙基纤维素、交联羧甲基纤维素钠、二氧化硅和硬脂酸镁。

9.根据权利要求8的药物组合物，其中包含非布司他结晶40重量份，以及乳糖一水合物20~60重量份、微晶纤维素20~60重量份、羟丙基纤维素3-30重量份、交联羧甲基纤维素钠2-15重量份、二氧化硅0.5-2重量份、和硬脂酸镁0.5-2重量份。

10.根据权利要求7的药物组合物，其是片剂，其中包含非布司他结晶，以及微晶纤维素、预胶化淀粉、羧甲淀粉钠、聚维酮K30、硬脂酸镁。

11.根据权利要求10的药物组合物，其中包含非布司他结晶40重量份，以及微晶纤维素60~120重量份、预胶化淀粉30~50重量份、羧甲淀粉钠5~15重量份、2~6重量份的聚维酮K30、硬脂酸镁0.5~2重量份。

12.权利要求1-4任一项所述结晶在制备用于痛风及其并发症的药物中的用途。

13.根据权利要求12的用途，其中所述并发症是高尿酸血症。